Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Роль нонапептидных нейрогормонов гипоталамуса в осуществлении реакции щитовидной железы на кратковременный стресс

ВАК РФ 03.00.11, Эмбриология, гистология и цитология

Автореферат диссертации по теме "Роль нонапептидных нейрогормонов гипоталамуса в осуществлении реакции щитовидной железы на кратковременный стресс"

РГ6 од

На правах рукописи

ВОРОПАНОВА Людмила Серафимовна

УДК 612.43 - 089 - 02:(612.592:612.434)

РОЛЬ НОНАПЕПТИДНЫХ НЕЙРОГОРМОНОВ ГИПОТАЛАМУСА В ОСУЩЕСТВЛЕНИИ РЕАКЦИИ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ НА КРАТКОВРЕМЕННЫЙ СТРЕСС (МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

Специальность 03.00.11 - эмбриология, гистология, цитология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации па соискание ученой степени кандидата биологических наук

С.-Петербург 1995

Работа выполнена в лаборатории нейроэндокринологии Института эволюционной физиологии и биохимии им. И.М.Сеченова РАН

Научный руководитель - доктор биологических наук И.А.Красновская

Официальные оппоненты: доктор биологических наук М. 3. Аронова, : доктор медицинских наук И. И. Гркнцевич.

Ведущая организация - Санкт-Петербургская государственная медицинская Академия им. И. И. Мечникова.

Защита диссертации состоится « •О » июня 1995 г. в час. на заседании диссертационного Совета К 002.89.01 при Институте эволюционной физиологии и биохимии им. И.М.Сеченова РАН по адресу: 194223, С.-Петербург, пр. М.Тореза, 44.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института

Автореферат разослан ¡л^Я^ 1995 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета,

кандидат биологических наук Л. В. Зуева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Большое значение для функционирования организма в условиях постоянно меняющихся факторов внешней и внутренней среды имеют гормональные механизмы адаптации. Одним из наиболее важных моментов в изучении механизма адаптации является проблема регуляции функций желез внутренней секреции в условиях функционального напряжения организма. Как известно, одним из важнейших компонентов гормонального ответа организма на стрессорное воздействие является активация всех звеньев гипоталамо-гипофизарной нейросекреторной системы (ГГНС) (Поленов, 1968, 1993).

В настоящее время установлено, что наряду с наличием общих неспецифических гормональных и нейрогормональных изменений, характерных для любого вида стресса (Селье, 1960, Филаретов, 1987), существуют особенности проявления реакции эндокринной системы организма в зависимости от характера, длительности и интенсивности действия стрессорных агентов, позволяющие организму наиболее эффективно реагировать на меняющуюся внешнюю среду.

В нашей работе использован кратковременный иммобилизацион-ный стресс как один из видов эмоционально-болевого стресса. Анализ литературы, посвященной функционированию щитовидной железы (ЩЖ) в условиях иммобилизационного стресса, показал, что в ряде работ описано угнетение функции железы, другие исследователи отметили повышение ее активности. В данной работе сделана попытка выяснить причины такого расхождения мнений, а также исследовать нейрогормональные факторы, включающиеся в регуляцию ЩЖ в условиях кратковременного иммобилизационного стресса.

Многие стрессорные воздействия приводят к усиленному выведению в кровь нонапептидных нейрогормонов - окситоцина (ОТ) и вазопрессина (ВП), а также катехоламинов, в частности, адреналина храмаффинной системы - нейрогормона, который является обязательным компонентом стрессовой реакции.

Гипотеза о двойном нонапептидном и катехоламиновом нейрогор-мональном контроле периферических эндокринных желез при стрессе была выдвинута А.Л.Поленовым в 1979 году.

В литературе имеются сведения о характере взаимодействия нона-пептидов и катехоламинов в непосредственной регуляции ЩЖ, полученные в опытах in vitro (Дитятева и др., 1990), однако имеющееся при стрессе сочетанное влияние этих нейрогормонов на ЩЖ у животных с интактным и удаленным гипофизом оставалось неисследованным.

Для полного понимания значения ГГНС в регуляции функции ЩЖ необходимо исследование обратных связей между гипоталамо - гипо-физарно - тироидной системой и нонапептидными клетками нейросекреторных центров гипоталамуса. Данные о характере обратных связей, о взаимодействии катехоламинов и нонапептидов, необходимы для представления о патогенезе многих эндокринных заболеваний и для выбора правильной тактики их лечения.

Актуальность такого рода исследований обусловлена еще и тем фактом, что нонапептидные нейрогормоны все шире применяются в медицине, ветеринарии и животноводстве, хотя эффекты их на эндокринный аппарат организма в целом изучены еще недостаточно.

Цель исследования состояла в том, чтобы расширить представление о роли нонапептидных нейрогормонов гипоталамуса и катехоламинов хромаффинной системы в регуляции ЩЖ, осуществляемой прямым парааденогипофизарным путем в условиях кратковременного стресса, который не является специфическим для данной железы. Кроме того, предполагалось выяснить значение взаимодействия между этими не-йрогормонами для функционирования ЩЖ и тем самым получить данные об общем принципе нейрогормональной регуляции организма - взаимодействии нонапептидов гипоталамуса и катехоламинов хромаффинной системы (двойной нейрогормональный контроль, Поленов, 1979).

В работе были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать влияние разных доз вазопрессина и окситоцина на функциональное состояние ЩЖ у неоперированных крыс, так как в целостном организме при действии стресса концентрации данных нейрогормонов в крови могут возрастать многократно.

2. Изучить характер прямого влияния вазопрессина и окситоцина на функциональную активность ЩЖ гипофизэктомированных крыс, лишенных тропных гормонов аденогипофиза, в том числе и ТТГ.

3. Выявить характер сочетанного воздействия адреналина с вазоп-рессином на функцию ЩЖ у неоперированных и гипофизэктомированных крыс.

4. Изучить реакцию супраоптического (СОЯ) и паравентрикулярно-го (ПВЯ) ядер гипоталамуса на стрессорное воздействие у гипофизэктомированных крыс, тем самым получить представление о значении обратных связей для регуляции кратковременной стрессор-ной реакции этих нейросекреторных центров гипоталамуса.

Научная новизна результатов исследования. Впервые показано следующее:

1. Для активации ЩЖ крыс, лишенных гипофиза, необходимы более высокие дозы вазопрессина, чем для крыс с интактным гипофизом.

2. Адреналин как у неоперированных, так и у гипофизэктомированных крыс оказывает ингибирующее действие на функциональную активность ЩЖ.

3. При совместном введении ВП и адреналина у крыс с интактным гипофизом и у гипофизэктомированных животных тиростимулирую-щий эффект вазопрессина подавляется.

4. Реакция на иммобилизационный стресс ВП- и ОТ-ергических клеток ПВЯ и СОЯ у гипофизэктомированных и неоперированых крыс имеет одинаковый характер и не зависит от изменения содержания в крови гормонов аденогипофиза и периферических эндокринных желез.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. ВП в различных дозах может осуществлять парааденогипофизар-ным путем стимулирующее влияние на ЩЖ.

2. ВП и ОТ отличаются по своим эффектам на ЩЖ.

3. Адреналин, поступающий в общий кровоток, снижает функциональную активность ЩЖ и ингибирует тиростимулирующий эффект вазопрессина у крыс с интактным гипофизом и гипофизэктомированных животных.

4. Характер реакции ЩЖ на кратковременный иммобилизационный стресс определяется сочетанием действующих на нее нонапептидных и катехоламиновых нейрогормонов.

5. Регуляция нонапептидергических нейросекреторных клеток (НСК) гипоталамуса в условиях иммобилизационного стресса не зависит от наличия или отсутствия тропных гормонов аденогипофиза, а также от уровня в крови гормонов периферических эндокринных желез и осуществляется, вероятно, преимущественно нейропроводниковым путем.

Теоретическая и практическая значимость. Результаты работы вносят вклад в понимание процессов регуляции функций периферических эндокринных желез гипоталамическими нонапептидами

филогенетически древним путем - парааденогипофизарным. Результаты также показывают различное участие нонапептидных нейрогормонов гипоталамуса ВП и ОТ в процессе регуляции функциональной активности ЩЖ и демонстрируют возможность изменения функциональной активности ЩЖ гипоталамическими нонапептидами. Они могут быть полезны для понимания общебиологического значения парааденогипо-физарного механизма гипоталамической регуляции функций периферических эндокринных желез и существования в организме одновременно нескольких путей их нейрогормонального контроля. Данные об ингибирующем влиянии одного адреналина или в сочетании его с вазопрессином на ЩЖ неоперированных или гипофизэктомиро-ванных крыс вносят вклад в понимание механизмов регуляции стрессорного ответа ЩЖ и свидетельствуют о необходимости дальнейшего изучения вопроса о значении взаимодействия нонапептидных нейрогормонов и катехоламинов в регуляции функций периферических эндокринных желез.

Полученные в настоящей работе данные полезны и в практическом отношении, так как расширяют теоретическую базу, на основании которой гипоталамические нонапептиды могут быть полнее использованы в медицине, ветеринарии и животноводстве и других отраслях народного хозяйства.

Материалы настоящего исследования используются при чтении курсов лекций по сравнительной гистофизиологии эндокринной системы в С.-Петербургском Университете им.Герцена и в курсе физиологии человека в Вологодском педагогическом Университете.

Апробация работы. Основные результаты настоящего исследования доложены и обсуждены на научных конференциях молодых ученых г. С.-Петербурга (1991 и 1992); на городских семинарах по нейроэндок-ринологии г. С.-Петербурга (1992).

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов, результатов собственных исследований, обсуждения и выводов. Общий объем диссертации страниц с 24 рисунками и 8 таблицами. Список литературы включает 201 источник, из них 155 иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование проведено на молодых половозрелых самцах крыс линии Вистар массой 120-160 г. Животных содержали в стандартных условиях вивария. Чтобы обеспечить стабильный исходный гормо-

нальный фон, эксперименты выполнялись в осенне-зимний сезон, в утренние часы.

За 7 суток до проведения эксперимента часть крыс подвергали гипофизэктомии. Операция производилась под эфирным наркозом посредством транссфеноидального подхода (Углович, 1959). Полноту удаления гипофиза контролировали после декапитации визуально. Животных, у которых в области турецкого седла сохранялись фрагменты гипофиза, исключали из дальнейшего исследования.

Первая группа опытов (116 животных). Исследовалось функциональное состояние ЩЖ неоперированных и гипофизэктомированных крыс через 30 минут после введения внутрибрюшинно в 1,5 куб.см физраствора нонапептидных нейрогормонов :

1.Аргинин-вазопрессин («ImmunoNuclear Со», США) в дозах: 5; 50; 500 нг/100г массы тела;

2.0кситоцин («Gedeon Richter», Венгрия) в дозах: 15; 150; 1500 нг/МОг массы тела;

3. Адреналина гидрохлорид в дозе 0,6 пмоль/л;

4. Сочетание адреналина и вазопрессина в дозе 50нг/100г массы тела.

Контрольным животным вводили внутрибрюшинно 1,5 куб.см физиологического раствора.

Вторая группа опытов (30 животных). Исследовалось функциональное состояние ЩЖ и нонапептидергических гипоталамических центров неоперированных и гипофизэктомированных крыс после 20-минутного иммобилизационного стресса - крысы фиксировались в положении на спине марлевыми лигатурами за конечности.

Через 20 минут эксперимента одновременно декапитировали контрольных и подопытных крыс. Мозг и ЩЖ быстро извлекали для гистологического исследования, а кровь собирали для определения содержания тироидных гормонов.

Фиксация материала и гистологическая обработка. Гипоталами-ческую область мозга, гипофиз и ЩЖ фиксировали в смеси пикриновая кислота-формалин в соотношении 3:5 при 37*С в течение 7 дней (Choy et.al., 1977). Последующую заливку в парафин осуществляли обычным способом. Серийные срезы ЩЖ 6 мкм толщиной окрашивали азан по Генденгайну; срезы мозга толщиной 5 мкм обрабатывали по иммуногистохимической методике с использованием антисывороток к ВП и ОТ и ПАП (пероксидаза-антипероксидаза) комплекса, с применением диаминобензидина и последующей докраской гематоксилином Эрлиха (Sternberger,Joseph, 1979).

Морфометрический анализ материала. При оценке функционального состояния ЩЖ использовали высоту тироцитов - классический и наиболее чувствительный морфометрический показатель изменения ее активности (Быков, 1979). Морфометрию ЩЖ проводили на серединных срезах, используя окуляр-микрометр при увеличении окуляра х7, объектива - х90 с масляной иммерсией.

Функциональное состояние ВП- и ОТ-ергических центров СОЯ и ПВЯ оценивали по размерам ядрышек НСК, изменение объема которых является одним из наиболее чувствительных показателей интенсивности синтеза РНК, а, следовательно, и пептидов в клетке (Охонская, 1972; ВеБвопе, 1985). Измерение проводили фотографическим способом на аппарате для чтения микрофильмов при 16-кратном увеличении микронегативов (пленка «Микрат-300»), полученных при увеличении окуляра х10, объектива х60, таким образом, общее увеличение изображения составило 9600 раз. В каждом ядре измерено не менее 60-65 ядрышек клеток. Кроме того, определяли процент «поли-ядрышковых» и пикноморфных НСК, а также обращали внимание на содержание нейросекреторного вещества в перикарионах и отростках НСК как в пределах гипоталамуса, так и в нейрогемальных отделах.

Биохимические методы. Радиоиммунологическое определение содержания гормонов Т3 и Т4 проводили с использованием наборов Института биоорганической химии АН БССР, Минск.

Математическая обработка данных. Полученные данные обрабатывали статистически, все приведенные результаты представляют собой средние арифметические значения ± средняя квадратичная ошибка (М±Э); оценку достоверности различий проводили с помощью 1;-критерия Стьюдента и непараметрического 11-критерия Манна-Уитни-Вилкоксона (Урбах, 1963).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Влияние введения нонапептидных нейрогормонов на функциональную активность ЩЖ неоперированных и гипофизэктоми-рованных крыс.

Реакция ЩЖ при введении разных доз окситоцина. Ни одна из примененных доз ОТ (15нг/100г; 150 нг/100г; 1500нг/100г) через 30 минут после введения неоперированным крысам не вызвала достоверных изменений в состоянии ЩЖ по морфометрическим и биохимическим показателям. Состояние железы оставалось близким к контрольному: фолликулы овальной или округлой формы, коллоид светлый, резорбционные вакуоли отсутствуют, тироциты призматичес-

кой или кубической формы с округлым светлым ядром, гиперемия железы отсутствовала.Высота тироцитов не превышала значений показателя у контрольных животных (11,72±0,25 мкм), концентрации тироидных гормонов были несколько повышены в сравнении с неопе-рированным контролем, но различия не достигали уровня достоверности. Все это свидетельствует о том, что ЩЖ сохранялась в состоянии умеренной активности (Рис.1).

У гипофизэктомированных крыс только введение наибольшей дозы ОТ (1500 нг/100 г массы) вызвало достоверное увеличение уровня тироксина в крови до 18,71 нмоль/л, что составило 151,4% в сравнении с гипофизэктомированным контролем (Р<0,05); однако другие показатели состояния ЩЖ изменились незначительно. Высота тироцитов составила 4,17±0,22мкм (95,6%, Р>0,05), концентрация Т3 в крови -0,68±0,12 нмоль/л (93,2% ,Р>0,05).

Таким образом,реакция ЩЖ неоперированных и гипофизэктомированных крыс на введение различных доз ОТ оказалась различной: высокие концентрации ОТ способствуют выведению Т4 в кровь только

А Б

%

160 — 140 — 120 100 ■

80 -

60 -

40 -

20 -0

%

160 -140 -120 100

80 Ч 60 40 20 -

0

12 3 12 3

Концентрация Концентрация

Т,

123 123 123 123

Высота Концентрация Концентрация Высота

тироцитов _ _ тироцитов „

'3 4 '3 '4

Рис. 1. Функциональная активность щитовидной железы при введении разных доз окситоцина: 1 - 15нг/100г массы; 2 - 150нг/100 г массы; 3 - 1500нг/100г массы. А - неоперированные крысы; Б - гипофизэктомированные крысы. За 100% приняты показатели соответствующего контроля. •— Р < 0,05 в сравнении с гипофизэктомированным контролем.

у гипофизэктомированных животных, следовательно, характер действия ОТ на ЩЖ проявляется при отсутствии тропных гормонов аденогипофиза, и в этих условиях ОТ в высоких дозах, характерных для стресса, может являться одним из ведущих гормонов, активирующих ЩЖ.

Реакция ЩЖ на введение вазолрессина. При введении всех использованных доз ВП неоперированным крысам наблюдались все признаки активации железы : возникала гиперемия органа, коллоид на срезах неплотен,из-за множества резорбционных вакуолей выглядел пенистым, внутри тироцитов наблюдались интрацеллюлярные капли. Достоверно (Р<0,05) увеличивалась высота тироцитов, повышалась концентрация тироидных гормонов в крови (Рис.2). Степень активации не определялась одно-значно повышением концентрации введенного

%

180 — 160 — 140 -120 — 100 80 -60 -40 -20 -

0

А

200,8

%

180 • 160 140 120 100 80 60 40

20 -л 0

*

*

•к

* 375,5

*

А 508,1

*

123 123 123 123 123 123

Высота Концентрация Концентрация Высота Концентрация Концентрация

тироцитов _ _ тироцитов т _

*3 4 3

Рис.2. Функциональная активность щитовидной железы при введении разных доз вазопрессина: 1 - 5нг/100г массы; 2 - 50нг/100 г массы; 3 - 500нг/100г массы. А - неоперированные крысы; Б - гипофизэктомированные крысы. За 100% приняты показатели соответствующего контроля. •— Р < 0,05, ••— Р < 0,01в сравнении с неоперированым контролем. * — Р < 0,05, ** — Р < 0,01 в сравнении с гипофизэктомированным контролем.

нейрогормона, то есть дозозависимый эффект отсутствовал: введение наименьшей из использованных доз ВП (5нг/100г) вызвало повышение высоты тироцитов до 13,80±1,74мкм (117,7% ,Р<0,05), концентрация Т3 выросла до 1,97±0,50 нмоль/л ( 165,5%, Р<0,05); тогда как содержание тироксина увеличилось незначительно, до 31,36±3,51нмоль/л (105,6%, Р>0,05).

Введение вазопрессина в дозе 50нг/100г привело к отчетливым признакам активации железы: высота тироцитов составила 114,8% (Р<0,05), концентрации Т3 и Т4 увеличились соответственно до 200,8% (Р <0,05) и 123,0% (Р<0,05). Дальнейшее увеличение дозы нейрогормона не привело к соответственному росту показателей: высота тироцитов, хотя и осталась достоверно повышенной, но не в такой степени, как при использовании меньших доз (111,8% ,Р<0,05). Подъем уровней Т3 и Т4 в крови также оказался не столь высок, как в предыдущей группе животных: (Т3 -147,9%; Р<0,05; Т4 - 118,5%, Р<0,05).

У гипофизэктомированных крыс реакция ЩЖ на введение различных доз ВП оказалась другой: наименьшая из используемых доз (5 нг/100 г массы)вызвала только незначительное повышение показателей ее активности: высота тироцитов увеличилась до 111,9% (Р>0,05) по сравнению с гипофизэктомированным контролем, изменение концентраций тироидных гормонов также не достигло уровня достоверности. Очевидно, причиной отсутствия эффекта в данном случае является очень низкий уровень эндогенного ВП и такая доза не смогла создать в крови концентрацию гормона, необходимую для активации тироцитов.

Введение следующей дозы ВП (50 нг/100 г массы) не только привело к усилению функциональной активности железы, но увеличило уровень тироидных гормонов в крови в большей степени, чем отмечено при таком же виде воздействия у неоперированных крыс: концентрация Т3 поднялась до 379,5%, Р<0,01, а Т4 - до 508,1% (Р<0,01) в сравнении с гипофизэктомированным контролем. Это свидетельствует об усилении тиростимулирующего эффекта ВП в отсутствии тропных гормонов аденогипофиза.

Введение ВП в дозе 500 нг/100 г массы при достоверном повышении высоты тироцитов, что свидетельствует об усилении синтеза и выведения гормонов, не привело к достоверному повышению содержания тироидных гормонов в плазме крови, а концентрация Т3 достоверно понизилась до 65,8% в сравнении с гипофизэктомированным контролем (Р<0,05). Такие показатели указывают на усиление метаболизма

тироидных гормонов в тканях, так как данные гормоны имеют длительный период полужизни (Т3 - 24ч; Sterling et.al., 1977), и даже полное прекращение поступления Т3 в кровь не могло бы за 20 минут отразиться на его концентрации.

Таким образом, в отсутствии тропных гормонов аденогипофиза тиростимулирующий эффект ВП проявляется сильнее, но для его проявления необходимо введение больших доз ВП, чтобы создать в крови гипофизэктомированных крыс соответствующий его уровень.

Реакция ЩЖ на введение адреналина и его сочетания с вазопрес-сином. Повышение уровня адреналина в крови является неотъемлемым компонентом стрессорной реакции. Введение адреналина в количестве, позволяющем приблизительно в 2 раза повысить его уровень в крови, вероятно, дает толчок изменениям организма, характерным для развития стрессорной реакции.

Как у неоперированных, так и у гипофизэктомированных крыс характер реакции ЩЖ на введение адреналина сходен. После 30-минутного воздействия наблюдается снижение функциональной активности железы, которое проявляется в достоверном снижении высоты тироцитов в группе неоперированных крыс до 56,7%(Р<0,05), а в группе гипофизэктомированных животных - до 72,4% (Р<0,05). При этом концентрация в крови тироидных гормонов остается на контрольном уровне (Рис. 3.). Эти данные свидетельствуют о торможении процессов синтеза гормонов, однако, с учетом результатов in vitro,не выявивших прямого угнетающего действия адреналина на тироциты (Дитятева, Красновская, 1990), можно предположить, что адреналин оказывает на ЩЖ опосредованное влияние, модулируя действие других регуляторов активности железы. При введении адреналина гипофизэктомированным крысам отмечена активация К-клеток ЩЖ: в эпителии фолликулов на фоне уплощенной или кубической формы тироцитов отчетливо выявляются крупные светлые клетки или группы клеток, апикальные концы которых не достигают просвета фолликулов.

Для опытов с совместным введением адреналина и вазопрессина была выбрана такая доза ВП (50нг/100г массы), которая обеспечивала четко выраженную активацию ЩЖ как у неоперированных, так и у гипофизэктомированных крыс. У неоперированных крыс введение сочетания адреналина и вазопрессина привело к подавлению тирости-мулирующего эффекта вазопрессина: высота тироцитов достоверно понижена до 66,5% ,(Р<0,05), гиперемия железы отсутствовала, коллоид слабо вакуолизирован. Уровень Т3 в крови оставался в пределах

%

13012011010090 -80 -70 -60 -50 -

вазопресснн

• 200,8

вазопрессин+адреиалин

Б

%

13012011010090 — 80 — 70 —

вазопресснн

* А * 138,3 А 379,5* 508,1

г-, р, -

адреналин

вазопрессин+адреналин •к 187,3

[1

Рис. 3. Функциональная активность щитовидной железы при введении вазопрессина (50нг/100г массы), адреналина (0,6пмоль/л) и их сочетания.

А - неоперированные крысы, Б - гипофизэктомированные крысы. □ -изменение высоты тироцитов, Ц- изменение концентрации Т,,Н- изменение концентрации Т4. • — Р<0,05; I — Р<0,01 в сравнении с неоперированным контролем; *— Р<0,05; Р<0,01 в сравнении с гипофизэктомированным контролем.

контрольных значений, а концентрация Т4 достоверно понижалась до 70,7% ,Р<0,05. ЩЖ у гипофизэктомированных крыс реагировала более сложным образом: наряду с угнетением гормонообразования (так как высота тироцитов заметно уменьшилась до 80,9%, Р>0,05), наблюдалось увеличение содержания Т4 в крови до 187,3% (Р<0,05) при неизменном уровне Тг

Таким образом, у гипофизэктомированных крыс тиростимулирую-щий эффект ВП выражен ярче, и адреналин только снижает его, не подавляя полностью, что и сказывается в сохранении повышенного уровня Т4 в крови.

2. Функциональное состояние ЩЖ после иммобилизационного стресса

В морфофункциональном состоянии ЩЖ не выявлено заметных сдвигов. Тироидный эпителий не изменил своей формы, высота тироцитов осталась в пределах контрольных значений, в состоянии коллоида заметных изменений не отмечено, гиперемия железы отсутствовала. Такой же характер реакции ЩЖ наблюдался и в группе гипофизэктомированных животных, подвергнутых иммобилизации: тироциты оставались уплощенными, с ядрами, вытянутыми параллельно базаль-ной мембране, их высота существенно не менялась.

3. Роль нонапептидергических нейросекреторных центров в осуществлении реакции организма на кратковременый иммобилизационный стресс

20-минутная имобилизация вызвала следующие изменения в состоянии вазопрессинергических и окситоцинергических элементов в ПВЯ и СОЯ у неоперированных крыс: в окситоцинергических НСК обоих ядер наблюдалось торможение транспорта нейрогормона по аксонам без заметных изменений в интенсивности его синтеза, так как содержание нейросекреторного материала в волокнах увеличено, а размеры ядрышек практически остались неизменными (Рис.4). Принимая во внимание, что при кратковременной иммобилизации уровень ОТ в крови повышается (вШЬв е<;.а1. ,1986); можно предположить, что сильное напряжение вызывает, в первую очередь, выброс ОТ из нейрогемальных органов, где он накапливается, тогда как в СОЯ и ПВЯ происходит торможение его синтеза в клетках и транспорта по волокнам.

Для вазопрессинергических НСК обоих ядер характерно значительное уменьшение содержания нейросекреторного материала, размеры ядрышек этих клеток уменьшаются, а число «полиядрышковых» клеток растет. При этом достоверно изменения ядрышек выражены только в ПВЯ, хотя и в СОЯ отмечена та же тенденция. Одновременно

УСЛ. ЕД, 20 -18 -16 -14 12 10 8 6 4 2 0 -

Р < 0,05

Р < 0,05

пвя соя

контроль

ПВЯ соя

иммобилизация

пвя соя пвя соя

гипофизэктомия гипофизэктомия + иммобилизация

Рис. 4. Изменения объемов ядрышек нейросекреторных клеток □ окситоцинергические ИСК, Ш -- вазопрессинергические НСК

со

в серединном возвышении, в волокнах гипоталамо-гипофизарного тракта, где преобладают волокна из СОЯ, выявлено отчетливое уменьшение содержания ВП. Это свидетельствует об активации транспорта ВП по волокнам и усилении выведения его в кровь. Таким образом, у неоперированных крыс, подвергнутых иммобилизации, можно предположить отсутствие существенных изменений в интенсивности образования ОТ и торможение транспорта его по волокнам. В то же время, достоверно выражено снижение активности гормонообразова-ния в вазопрессинергических клетках ПВЯ, а транспорт и выведение ВП из клеток СОЯ, вероятно, активированы.

Реакция на иммобилизационный стресс клеток СОЯ и ПВЯ гипофи-зэктомированных крыс имеет тот же характер, что и у неоперированных животных. В вазопрессинергических клетках ПВЯ и СОЯ наблюдается уменьшение размеров ядрышек, причем достоверное снижение по сравнению с гипофизэктомированным контролем отмечено только в вазопрессинергических клетках ПВЯ.

Несмотря на то, что у гипофизэктомированных крыс при иммоби-лизационном стрессе в крови отсутствует подъем концентрации ВП, АКТГ и 11-ОКС (Красновская, Шейбак, 1990), характер реакции СОЯ и ПВЯ сохраняется таким же, как у неоперированных животных. Это дает основания считать, что реакция нейросекреторных центров на кратковременный неспецифический стресс не зависит от наличия или отсутствия гормонов передней доли гипофиза и связанного с этим изменения гормонального статуса организма, а именно: от исходно пониженного содержания гормонов периферических эндокринных желез и аденогипофиза, а также реакция НСК не зависит от отмеченного при стрессе у неоперированных животных повышения уровня АКТГ и кортикостероидов. Можно предполагать, что реакция нонапеп-тидных гипоталамических центров на кратковременное неспецифическое стрессорное воздействие регулируется многочисленными афферентными влияниями со стороны других структур ЦНС. В последнее время расширилось представление о значении афферентной иннервации нонапептидергических клеток (Луцик, 1993; Пруцкова и др., 1995). Наши данные свидетельствуют о ведущем значении нейроп-роводниковых влияний мозга в контроле различных сторон функционирования НСК (синтез, транспорт и выведение нейрогормо-нов) в условиях кратковременного стресса.

ВЫВОДЫ

1. Гипофизэктомия приводит к дегенеративным изменениям ОТ- и ВП-ергических нейросекреторных клеток ПВЯ и СОЯ гипоталамуса, количество пикноморфных клеток возрастает, размеры ядрышек в сохранившихся НСК уменьшены. Более отчетливо эти изменения выражены в вазопрессинергических клетках СОЯ.

2. При кратковременном иммобилизационном стрессе у неопериро-ванных крыс снижается функциональная активность вазопрессинергических клеток ПВЯ (уменьшаются размеры ядрышек, увеличивается количество «полиядрышковых» НСК). В окситоцинер-гических клетках ПВЯ и СОЯ, а также в вазопрессинергических клетках СОЯ достоверных изменений не выявлено.

3. У гипофизэктомированных крыс характер реакции нонапепти-дергических нейросекреторных центров на кратковременный иммобилизационный стресс сходен с таковым у неоперированных животных. У гипофизэктомированных крыс так же, как у неоперированных, отмечено достоверное уменьшение активности только для вазопрессинергических клеток ПВЯ. Это доказывает, что характер реакции ГГНС на кратковременный стресс не зависит от наличия аденогипофиза и гормонального фона в организме и позволяет предположить, что в регуляции кратковременной стрессорной реакции ГГНС ведущая роль принадлежит влиянию нервной системы.

4. Кратковременный иммобилизационный стресс у крыс как с интактным, так и с удаленным гипофизом, выраженных морфо-функциональных изменений щитовидной железы не вызывает.

5. Введение вазопрессина вызывает активацию ЩЖ: увеличение высоты тироцитов, возрастание уровней тироидных гормонов в крови как у неоперированных, так и у гипофизэктомированных крыс, что доказывает прямое стимулирующее влияние вазопрессина на тироци-ты. Для активирования ЩЖ у гипофизэктомированных крыс требуется более высокая минимальная доза вазопрессина.

6. Максимальная использованная доза вазопрессина (50нг/100г массы) активирует образование тироидных гормонов (так как возрастает высота тироцитов) и, вероятно, ускоряет их метаболизм в тканях-мишенях: уровень Т3 в крови снижается, что наиболее четко выражено у гипофизэктомированных животных.

7. Экзогенный вазопрессин и окситоцин отличаются по своему влиянию на ЩЖ. У неоперированных крыс окситоцин не влияет на функциональное состояние щитовидной железы.

8. Введение адреналина достоверно снижает высоту тироцитов как у неоперированных, так и у гипофизэктомированных животных, что указывает на его непосредственное тормозящее влияние на функцию

9. Введение адреналина одновременно с вазопрессином приводит к снижению тиростимулирующего эффекта вазопрессина у неоперированных и гипофизэктомированных крыс.

10. Реакция ЩЖ на кратковременный иммобилизационный стресс у крыс зависит от сочетания нонапептидных и катехоламиновых нейрогормонов, действующих на нее одновременно, что подтверждает гипотезу А.Л.Поленова о двойном нонапептидном и катехоламиновом нейрогормональном контроле периферических эндокринных желез.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО МАТЕРИАЛАМ ДИССЕРТАЦИИ

1.Воропанова Л.С., Красновская И.А. Иммуногистохимическое исследование нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной нейросекреторной системы крыс при иммобилизационном стрессе.// Труды Всероссийской конф. «Нейробиологические аспекты современной эндокринологии». -М., 1991. -С.16-17.

2. Красновская И.А., Воропанова Л.С., Поленов А.Л. Блокирующее влияние адреналина на тиростимулирующий эффект у крыс. //Бюлл. эксперим. биол. и мед., 1993, Т.115, N.2. -С.142-144.

3. Воропанова Л.С., Красновская И.А., Шейбак Т. В., Поленов А.Л. Значение обратных связей для осуществления реакции нонапептидер-гических центров гипоталамуса крыс на кратковременный иммобилизационный стресс. // Бюлл. эксперим. биол. и мед., 1993, Т. 115, N.2. -С. 128-130.

4. Гриневич В.В., Красновская И.А., Воропанова Л.С., Поленов А.Л. Реакция дополнительных нонапептидергических центров гипоталамуса на гипофизэктомию у крыс.// Бюлл. эксперим. биол. и мед., 1994, Т.117, N.6. -С.605-608.

ЩЖ.