Роль генов "внешней среды" в патогенезе и лечении эндометриоза

Швед, Наталья Юрьевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Роль генов "внешней среды" в патогенезе и лечении эндометриоза
ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Роль генов "внешней среды" в патогенезе и лечении эндометриоза"

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

Швед Наталья Юрьевна

Роль генов « внешней среды » в патогенезе и лечении эндометриоза.

Специальность: 03.0015 - генетика

АВТОРЕФЕРАТ диссертации

на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Санкт-Петербург - 2006-

Работа выполнена в Лаборатории пренатальной диагностики наследственных и врожденных болезней человека ГУ Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О.Огга РАМН.

Научные руководители:

доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник Татьяна Эдуардовна Иващеяко

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Виктория Николаевна Горбунова .. . доктор биологических наук, профессор Валерий Вячеславович Носиков

Ведущее учреждение: НИИ молекулярной медицины ММА им. И.М. Сеченова

Защита состоится $ 2006 г. в ^^часов на заседании Диссертационного совета

Д.212.232.12 по защите диссертавдйна соискание ученой степени доктора биологических наук при Санкт-Петербургском Государственном университете по адресу: 199034 Санкт-Петербург, Университетская наб. 7/9, СПбГУ, биолого-почвенный факультет, кафедра генетики и селекции, аудитория 1.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке им. М. Горького Санкт-Петербургского государственного университета.

Автореферат разослан ¿¿ОсЯ^/уЯ 2006 г.

Ученый секретарь Диссертационного совета кандидат биологических наук

Л. А. Мамон

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Эндометриоз является одной из самых загадочных и нерешенных проблем в современной гинекологии, по частоте занимая третье место после воспалительных заболеваний женских гениталий и миомы матки в структуре гинекологической патологии. В настоящее время эндометриоз принято рассматривать не только как специфическое местное гинекологическое заболевание, но и как патологический процесс ("эндометриоидная болезнь"), в который вовлечены как смежные, так и отдаленные органы, и целые системы организма. Несмотря на многочисленные исследования, этиология и патогенез заболевания продолжают оставаться предметом научных дискуссий. Согласно современным представлениям, эндометриоз - это дисгормональное, иммунозависимое и генетически обусловленное заболевание, характеризующееся доброкачественным разрастанием ткани, сходной по морфологическому строению и функции с эндометрием, но находящейся за пределами полости матки (Баскаков и др., 2002). Частота эндометриоза по разным данным варьирует от 7 до 65%.

В настоящее время эндометриоз представляет собой не только медицинскую, но и социальную проблему. Заболевание, приводящее к нарушению репродуктивной функции и инвалидизации, внушает также ощущение неполноценности, нанося физический и моральный ущерб женщинам в возрасте 20-40 лет.

Недостаточное понимание основных механизмов развития эндометриоза не позволяет добиться эффективности его лечения. Хирургическое лечение зачастую не способствует восстановлению специфических функций женского организма и не исключает рецидивов заболевания. Более чем 25-летний опыт гормональной терапии, направленной на подавление активности эндометриоидных очагов, развеял надежды на полное выздоровление и вызвал разочарование в связи с рецидивами и резистентностью многих клинических форм, не говоря уже о серьезных побочных эффектах лечения.

Причины возникновения, диагностика и лечение этого заболевания остаются предметом споров от момента описания и до настоящего времени. Однако нет сомнений в том, что эндометриоз является типичным представителем мультифакториальных заболеваний. Генная сеть этого заболевания сложна и разнообразна. Она включает гены метаболизма (детоксикации), гены, ответственные за иммунный статус, эндокринные функции, гены межклеточных взаимодействий. Патологические эффекты "мутантаых" аллелей этих генов в значительной степени провоцируются действием неблагоприятных факторов внешней среды. Отмечающийся в последние десятилетия рост заболевания, наряду с прогрессирующим ухудшением экологической и токсикологической обстановки, а также возможность экспериментальной индукции эндометриоза у обезьян (А.СЛЬош, 1993) свидетельствуют об участии генов метаболизма (детоксикации) в патогенезе эндометриоза.

Цель и задачи исследования. Целью работы являлось изучить ассоциацию аллельных вариантов генов, кодирующих ферменты 1-ой и 2-ой фазы системы детоксикации ксенобиотиков с развитием эндометриоза, а также определить их роль в эффективности медикаментозной терапии заболевания. Достижение этой цели предусматривало решение следующих задач:

1.Проанализировать частоты аллельных вариантов генов 1-й и 2-й фаз системы детоксикации (CYP1A1, CYP2E1, mEPXHl, CYP19, GSTM1, GSTT1, NAT2) у больных эндометриозом и в контрольной группе.

2.Провести комплексный анализ ассоциации аллельных вариантов генов 1-й и 2-й фаз системы детоксикации у больных эндометриозом с учетом степени тяжести заболевания.

3.Проанализировать частоты полиморфных аллелей генов 1-й и 2-й фаз системы детоксикации у больных с различным эффектом медикаментозной терапии.

4.Провести суммарный анализ ассоциации аллельных вариантов генов 1-й и 2-й фаз системы детоксикации у больных с различным эффектом медикаментозной терапии. •5.0ценить вклад генов детоксикации в развитие эндометриоза и чувствительность к медикаментозной терапии заболевания.

Научная новизна работы. Впервые изучены особенности аллельного полиморфизма 3-х генов фазы 1 CYP1A1 (A2455G(Ile462Val)), CYP2E1 (C9896G), CYP19 ((ТТТА)п повтор и del(TCT» и 4-х генов фазы 2 GSTM1 (Del), GSTTÎ (Del), ?

NAT2 (С481Т, G590A, G857A), mEPHXl (T337C(Tyrll3His) - 3-й экзон, 1

A415G(Hisl39Arg) - 4-й экзон) при эндометриозе, а также проанализирована корреляция полиморфных вариантов изученных генов с тяжестью течения заболевания. Впервые - показаны неслучайные ассоциации между развитием эндометриоза, степенью тяжести заболевания и полиморфизмом генов mEPHXl и GSTT1 . у больных эндометриозом Северо-Западного региона России. Впервые проведен ретроспективный анализ результатов медикаментозного лечения эндометриоза в зависимости от паттерна аллелей генов CYP1A1, CYP2E1, CYP19, GSTM1, GSTTI, NAT2 и- mEPHXl. Впервые показано, что носительство аллеля D гена CYP19 и делеции (0/0) гена GSTM1 увеличивает риск резистентности к медикаментозному лечению у больных с эндометриозом Северо-Западного региона России. Впервые показан синергический (аддитивный) эффект сочетаний изученных J

«функционально неполноценных» ^генотипов по генам 2-й фазы системы детоксикации при развитии и прогрессировали! эндометриоза. Впервые при комплексном анализе полиморфизма генов, кодирующих ферменты фазы 2 детоксикации в группах пациентов с различными результатами медикаментозной Чг

терапии, выявлен синергический эффект «функционально неполноценных» генотипов, проявляющийся при лечении больных с эндометриозом. Практическая значимость. Анализ генетического полиморфизма генов CYP19 ((ТТТА)п повтор в интроне 4 и del(TCT) в интроне 4), mEPHXl (T337C(Tyrl 13His) -3-й экзон, A415G(Hisl39Arg) - 4-й экзон), GSTM1 (Del), GSTTI (Del) можно рекомендовать в качестве прогностического теста для оценки риска развития и «эффективности лечения эндометриоза у женпщн репродуктивного возраста. • Материалы диссертационной работы вошли в методические рекомендации "Генетические аспекты профилактики и лечения эндометриоза" для врачей акушеров-гинекологов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1."Функционально ослабленные" генотипы GSTT1 0/0 и mEPHXl S, а также сочетания "функционально ослабленных" генотипов по генам фазы 2 системы детоксикации (GSTM1 0/0, GSTT1 0/0, NAT2 S/S, mEPHXl S) ассоциированы с

развитием наружного генитального эндометриоза. • .

2. Наличие определенных генотипов по генам CYP2E1 (аллель M (9896G)), CYP19 (del(TCT) в интроне 4), GSTM1 (GSTM1 0/0), а также наличие сочетанных "функционально ослабленных" генотипов GSTM1 0/0, GSTT1 0/0, NAT2 S/S, mEPHXl S ассоциировано с различной эффективностью медикаментозного лечения эндометриоза.

3. Носительство сочетанного генотипа GSTM1 0/0 + CYP19 D/- или GSTT1 0/0 + CYP19 D/- или GSTM1 0/0 + (ТТТА)7(ПТА)н увеличивает риск развития резистентности к медикаментозному лечению. <

4. Выявленная ассоциация "функционально ослабленных" генотипов генов 1 и 2 фазы детоксикации с эндометриозом подтверждает роль неблагоприятных экзогенных факторов в развитии заболевания.

Апробация работы. Результаты работы представлены на 2-ом съезде ВОГИС (Санкт-Петербург, 2000), на 2-ом (4-ом) Российском съезде медицинских генетиков (Курск, 2000), П-ой международной конференции "Молекулярная медицина и биобезопасность" (Москва, 2005), Международном конгрессе по предиктивной медицине (Франция, 2001), на Европейских конгрессах по генетике человека в 2003г. (Бирмингем, Великобритания), в 2004г. (Мюнхен, Германия), на Международном конгрессе по геному человека HGM2000 (Китай, 2002). '• '

Диссертация апробирована на научных семинарах Лаборатории пренатальной диагностики наследственных и врожденных болезней человека ГУ Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О.Отта. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 14 работ. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 149 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (результаты и методы), описания результатов и их обсуждения, выводов и списка Цитируемой литературы, включающего 228 ссылок. Диссертация иллюстрирована 39 таблицами и 1Т рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

В настоящей работе представлены результаты обследования 122 женщин Санкт-Петербурга в возрасте от 18 до 41 года с наружным генитальным эндометриозом (НГЭ) различной степени распространенности процесса, проходивших лечение в НИИ АГ им. Д.О. Отта РАМН). Диагноз НГЭ у пациенток установлен на основании гистологического исследования биоптатов эндометриоидных гетеротопий, взятых в процессе лапароскопии. Группа больных с эндометриозом была разделена дополнительно на 2 подгруппы в зависимости от распространенности процесса. В подгруппу с легкой степенью включйли пациентов с эндометриозом I и II стадии. В подгруппу с тяжелой степенью включили пациентов с эндометриозом Ш и IV стадии. Контрольную группу составили 90 женщин репродуктивного возраста (18-45 лет), проживающие на территории Санкт-Петербурга, не имеющие клинических проявлений эндометриоза на момент сбора материала.

В группу больных эндометриозом с успешным лечением вошли 51 женщины, которые хорошо переносили терапию агонистами гонадотропин-ршшзинг-гормонов (ГнРГ), а после окончания курса медикаментозной терапии, у этих пациенток не

было отмечено рецидива заболевания, наступила беременность. В группу больных с эндометриозом со слабо выраженным эффектом от проводимой медикаментозной терапии вошли 71 женщина с длительным (более 2-х лет) рецидивирующим течением .заболевания и возобновлением клинических симптомов эндометриоза после отмены лекарственных препаратов, а также наличием выраженных побочных эффектов на фоне применения агонистов ГнРГ.

Выделение ДНК из ядер лимфоцитов проводилось в соответствии с методикой приведенной в руководстве Самбрук и др. (Sambrook et al., 1989).

Изучены особенности генетического полиморфизма 3-х генов фазы 1 системы детоксикации (CKPL47(A2455G(Ile462Val)), CYP2E1 (C9S96G), CYP19((T[TA)n повтор и del(TCT)) и 4-х генов фазы 2 (GSTM1 (Del)rGST77 (Del), NAT2 (С481Т, G590A, G857A), mEPHXl (T337C(Tyrll3His) - 3-й экзон, A415G(Hisl39Arg) - 4-й экзон)). Характеристика изученных полиморфных вариантов представлена в таблице 1.

Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) проводили по стандартной схеме (Saiki, 1989) при помощи программируемого термоциклера МС-2 с использованием термофильной ДНК-полимеразы и специфических олигопраймеров. Определение полиморфных вариантов генов GSTMJ, GSTT1 проводили методом ПЦР. Определение полиморфных вариантов генов NAT2, CYP1A1, CYP2E1, CYP19, mEPHXl проводили методом ПЦР с последующим рестрикционным анализом.

Продукты амплификации фрагментов и полноту гидролиза оценивали по результатам электрофореза в 7,5 % полиакриламидном геле.

Таблица 1. Характеристика исследованных генов и их полиморфных вариантов.

ФАЗА 1

ГЕН Химическая реакция Полиморфизм

CYP1A1 Метаболизм ПДУ, диоксина, гидроксилирование эстрадиола Экзон 7, Hinc П полиморфизм (A2455G (Ile462Val)), F(462Val)- «быстрый» аллель

CYP2E1 Метаболизм этанола, изониазида, пиридина, нитрозосоединений, биотрансформация лейкотриена В4, стероидных гормонов Интрон 7, Tag I полиморфизм (C9896G) М (9896G) - «медленный» аллель

CYP19 Биосинтез эстрогенов Интрон 4 (ТТТА)п повтор и del(TCT)

ФАЗА 2

mEPHXl Гидролиз эпоксидпроизводных ПАУ додиолов Экзон 3 Т337С (Tyrll3His), S(113His)- «медленный» аллель

Экзон 4 A415G (Hisl39Arg), F (13 9Arg) - «быстрый» аллель

GST Ml Конъюгация ксенобиотиков с восстановленным глутатионом катализирует детоксикацию кислородпроизводных ПАУ Del/del (0/0)

GSTT1 Конъюгация ксенобиотиков с восстановленным глутатионом, изомеризация некоторых стероидов и простагландинов Del/del (0/0)

NAT2 Ацетилирование ароматических и гетероциклических аминов F-лбыстрый» (не мутантный) аллель S1(C481T), S2(G590A), S3(G857A) -«медленные аллели»

Определение соответствия частот генотипов в популяциях равновесию Харди-Вайнберга проводили методом %2 (Животовский, 1991). Определение достоверности различий популяционных частот производили с помощью точного двустороннего критерия Фишера по стандартной формуле с учетом поправки Йетса для парных сравнений с контрольной группой и с помощью критерия хи-квардрат (х2) по стандартной формуле с учетом поправки Йетса для парных сравнений и поправки Бонферрони для множественных сравнений с контрольной группой (Гланц, 1999; Реброва, 2003). В случае достоверных отличий между сравниваемыми признаками в исследуемых группах, также использовали коэффициент соотношения шансов (odds ratio - OR). При сравнении результатов использовали пакеты программ "GraphPad InStat" (США) и STATISTICA 5.5 (США).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Важная роль генетического полиморфизма генов, системы детоксикации уже установлена для многих онкологических и неонкологических заболеваний (Баранов и др. 2000; Артамонов и др. 2004). Принимая во внимание участие экзогенных факторов в развитии эндометриоза, мы предположили, что именно полиморфизмом генов системы детоксикации можно объяснить очевидные индивидуальные различия в отношении происхождения, течения и лечения эндометриоза.

Нами были изучены особенности генетического полиморфизма 3-х генов фазы 1 системы детоксикации (CJTL4/(A2455G(Ile462Val)), CYP2E1(C9S96G), CYP19 ((TTTA)n повтор и del(TCT)) и 4-х генов фазы 2 (GSTM1 (Del), GSTT1 (Del), NAT2 (С481Т, G590A, G857A), mEPHXl (T337C(Tyrll3His) - 3-й экзон, A415G(Hisl39Arg) -4-йэкзон).

Выбор такого спектра генов определялся их широким диапазоном действия, активным вовлечением их продуктов в детоксикацию многих промышленных поллютантов и сельскохозяйственных ядов. Загрязнение окружающей среды вредными побочными продуктами промышленного и сельскохозяйственного производства вносит свой вклад в неблагоприятную экологическую обстановку и является одной из причин возникновения эндометриоза. В частности, с помощью одного из них - диоксина (1,2,3,7,8-тетрахлородибензо-3-диоксина), который входит в состав многих пестицидов и сельскохозяйственных ядов, в условиях эксперимента на животных удалось получить типичный эндометриоз.

Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов CYPJA1(A2455G (Ile462Val)), CYP2E1 (C9S96G), CYP19((TTTA)n повтор и del(TCT)), NAT2 (С481Т, G590A, G857A) в выборках больных эндометриозом и контроле, а также в подгруппах больных не выявил статистически значимых различий.

При изучении двух полиморфных вариантов гена mEPHXl (Т337С(Туг113His) -3-й экзон, A415G(Hisl39Arg) - 4-й экзон) в группе больных с эндометриозом и в контрольной группе были выявлены статистически значимые различия в частотах аллелей и генотипов для полиморфизма Т337С (Tyrl 13His) в 3 экзоне.

Частоты аллелей S (337С(113His)) и N (337Т(113Туг)) составили: 24.4% и 75.6% - в контроле, 37.7% и 62.3% - в группе больных (р=0.0038, ^=8,36, df 1). Частоты генотипов S/S , S/N и N/N по гену mEPHXl составили: 8.9%, 31.1% и 60.0% - в контрольной группе, 11.5%, 52.5% и 36.1% - в группе больных (р=0.0023,

^=12,19, ёГ 2). Частота носительства Б аллеля в группе больных превысила таковую в контроле более чем в 1,5 раза (63.9% против 40%, соответственно). Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов носительство аллеля Б (ПЗШэ) увеличивает риск развития эндометриоза (<Ж = 1.87; С1 95% 1.22 - 2.86) (рис. 1).

При анализе частот аллелей и генотипов ТугНЗШв полиморфизма гена тЕРНХ! в подгруппах больных с эндометриозом с различной тяжестью течения заболевания были получены следующие результаты: частоты аллелей Б (337С (113Шз)) и N (337Т(113Туг)) составили 41.2% и 58.8% для легкой степени, 33.3% и 66.7% для тяжелой .

■ эндометоиоз □ контроль

Cyp2E1 W-

N=122 N=90

Рис. 1. Распределение «функционально ослабленных» генотипов у больных эндометриозом и в контроле

степени заболевания, 24.4% и 75.6% для контроля; частоты генотипов S/S, S/N и N/N в подгруппах составили: 13.2%, 55.9% и 30.9% - для легкой степени, 9.3%, 48.1% и 42.6% - для тяжелой степени, 8.9%, 31.1% и 60.0% - для контроля.

Высоко достоверные отличия выявлены при сравнении частот генотипов и аллелей между подгруппой легкой степени эндометриоза и контрольной группой (р<0.001, X2—31,05 df 2 и р=0,0015 10,02 df Л), тогда как различия между контролем и подгруппой тяжелой степени статистически не достоверны (р>0.05). . При сравнении частот аллелей и генотипов в подгруппах с различным течением заболевания между собой достоверных различий выявлено не было (р>0.05) (рис. 2).

Сур1А1 ■

Сур2Е1

Рис. 2. Распределение «функционально ослабленных» генотипов при эндометриозе сур19 разной степени тяжести.

□ Тяжелая степень Г1 Легкая степень

. Достоверных различий в распределении частот генотипов и аллелей второго полиморфного варианта гена тЕРНХ! А415С (ЬПз139Аг£) в группе больных с эндометриозом и в контрольной группе, а также в подгруппах больных выявлено не

было.

Эпоксидгидролазы осуществляют промежуточный этап детоксикации, присоединяя воду к образованным цитохромом Р-450 эпоксидам, превращающимся в трансгидродиолы и далее, под действием других ферментов, в конъюгаты с глюкуроновой кислотой и глутатионом (Артамонов и др., 2004; Кукес, 2004). Различный уровень ферментативной активности обусловлен однонуклеотидными заменами в 3-м экзоне (мутация Т337С (Tyrll3His), «медленная форма», генотип S/S) и в 4-м экзоне (мутация A415G (Hisl39Arg), «быстрая форма», генотип F/F). Отмечается ассоциация некоторых полиморфизмов гена эпоксидгидролазы с различными нарушениями в репродуктивной системе (преэклампсии, спонтанные аборты) и онкологическими заболеваниями (рак легких, яичников) (Wong et al., 2000; Zusterzeel et al., 2001; Baxter et al., 2001; Laasanen et al., 2002). Вместе с тем, исследований полиморфизма гена mEPHXl при эндометриозе до настоящего времени не проводилось. . ^

Можно предположить, что наличие «медленного варианта» гена микросомальной эпоксидгидролазы приводит к накоплению промежуточных электрофильных метаболитов, способствует возникновению оксидативного стресса и, как следствие, развитию заболевания. Однако, полученная нами ассоциация «медленного аллеля» mEPHXl с легким течением заболевания свидетельствует о том, что к возникновению более тяжелого патологического процесса приводят дополнительные изменения в геноме пациента, либо существуют различные формы заболевания, обусловленные различной генетической предрасположенностью.

Проведенный нами сравнительный анализ частоты делеции (0/0) гена GSTT1 между выборками больных эндометриозом и контролем позволил : выявить статистически значимые различия (р=0.01, %2=б.6). Носительство генотипа GSTT10/0 увеличивает риск развития эндометриоза (OR =2,34; CI 95% 1.22 — 4.48), а также играет существенную роль в тяжести патологического процесса (рис.1s и рис.2). Наивысшая частота генотипа GSTT10/0 (38,9%) отмечена у больных с тяжелой степенью заболевания. Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов носительство генотипа GSTT10/0 увеличивает риск развития тяжелой степени эндометриоза (OR=2,94; CI 95% 1.38-6.25) (рис.2).

Вместе с тем, анализ частоты делеции (0/0) гена GSTM1 между выборками больных с эндометриозом и контролем, а также между подгруппами больных эндометриозом Северо-Западного региона России не выявил статистически значимых различий.

Глутатион-8-трансферазы (GSTs) принадлежат к семейству изоферментов, контролирующих конъюгацию различных электрофильных соединений, включая канцерогены и цитотоксические лекарства, с восстановленным глутатионом. Данная биохимическая реакция играет ключевую роль в обеспечении резистентности клеток к перекисному окислению липидов (ПОЛ), алкилированию белков .и другим процессам с участием свободных радикалов (Артамонов и др., 2004). Эти ферменты способны к прямому связыванию с гидрофобными соединениями, такими как гем, билирубин, стероидные гормоны, что позволяет им участвовать во внутриклеточном накоплении и обеспечивать транспорт биологических веществ с ограниченной водорастворимостью. Глутатион-Б-трансфераза Ml катализирует

детоксикацию высокореактивных кислородпроизводных полуциклических ароматических углеводородов (ПАУ). Также отмечена важная роль GSTT1 в утилизации продуктов свободно-радикального окисления, т.е. он является частью защиты легких от повреждения свободными радикалами и развития оксидативного стресса. Данный фермент также может влиять на уровень эйкозаноидов (гормонов-медиаторов), метаболитов арахидоновой кислоты, через модуляцию уровня свободных радикалов (Fryer, 2000). Многочисленные исследования указывают на ассоциацию генотипа GSTM1 0/0 . и GSTT1 0/0 с заболеваниями мультифакториальной природы, особенно с онкологической патологией (Hatagima, 2002).

Как известно, эффективная работа всей системы детоксикации обеспечивается слаженной работой ферментов 1-й и 2-й фаз. Десинхронизация процесса детоксикации может наступить вследствие одновременного действия разных ксенобиотиков или в результате неблагоприятного сочетания в организме разных по своей активности изоформ ферментов детоксикации. • Особенно неблагоприятно сочетание высокой активности ферментов фазы 1 и низкой активности ферментов фазы 2. Именно в такой ситуации может возникать повышенная чувствительность организма к различным ксенобиотикам, в том числе к лекарственным препаратам, и существовать предрасположенность к некоторым мультиф акториальным заболеваниям.

Полученные нами результаты, свидетельствуют о важной роли "функционально неполноценных" аллелей некоторых генов (mEPHXl и GSTT1), кодирующих ферменты 2 фазы детоксикации, в возникновении и тяжести течения эндометриоза.

Согласно современным представлениям индивидуальные реакции на внешние агенты, инфекции, особенности диеты, токсины, лекарственные препараты и эффективность их действия генетически обусловлены (Кулинский, 1999; Кукес, 2004). В настоящее время терапия эндометриоза является комбинированной и предусматривает как хирургическое вмешательство, так и медикаментозное лечение. Для гормонального лечения эндометриоза широко применяются антагонисты (связываются с рецепторами и блокируют, действие эндогенных гормонов) и агонисты (синтетические аналоги эндогенных гормонов) гонадотропин-рилизинг-гормонов (ГнРГ), прогестагены (Баскаков и др., 2002).

Гены C.YP1A1, CYP2E1, CYP19, GSTM1, GSTT1, NAT2 и mEPHXl относятся к группе генов, кодирующих ферменты системы детоксикации (биотрансформации) ксенобиотиков, к которым относятся и лекарственные вещества. В работе проведен ретроспективный анализ результатов медикаментозного лечения эндометриоза в зависимости от паттерна аллелей изучаемых генов.

Не выявлено достоверных отличий в частотах генотипов и аллелей генов CYP1A1 (A2455G(Ile462Val)), т£РШ7(Т337С(Туг113His) - 3-й экзон, A415G(Hisl39Arg) -4-й экзон), NAT2 (С481Т, G590A, G857A), между выборками больных эндометриозом с различным эффектом от проводимого медикаментозного лечения.

Сравнительный анализ частот аллелей гена CYP2E1 показал, что частота аллеля М (9896G) в группе 1 достоверно превышала таковую в группе 2 (р=0.028; 4,81, df 1). Интересно отметить, что носительство М аллеля в группе пациенток,

резистентных к лекарственной терапии, более чем в 2 раза снижено по сравнению с группой больных, чувствительных к проводимому лечению (4.9% против 12.7%, соответственно). Изофермент цитохрома Р-450 (CYP2E1) является ключевым ферментом микросомальной этанолокисляющей системы и экспрессируется, главным образом, в эндоплазматическом ретикулуме гепатоцитов, клеток бронхиального эпителия и макрофагов, вовлечен в активацию многих проканцерогенов, проявляя индивидуальную вариабельность (el-Вауошпу, 1992; Lewis et al., 1999; Dey et al., 2006; Yang et al., 2002; Кукес и др., 2001). Цитохром CYP2E1 осуществляет биотрансформацию одного из медиаторов воспаления лейкотриена (LTB4), а также реализует цитохромный путь метаболизма производных арахидоновой кислоты (Сибиряков и др., 2003). Продукты этой реакции угнетают экспрессию молекул адгезии, снижают активацию транскрипционного фактора NFkB (главного активатора провоспалительных цитокинов) (Rifkind et al., 1995). Существуют данные об участии изофермента CYP2E1 в метаболизме стероидных гормонов (Haas et al., 2006; Пальцев, 2004). •

Вероятнее всего наличие аллеля M (9896G) приводит к появлению фермента с измененной активностью, положительно влияющего на скорость метаболизма антиэстрогенных гормональных препаратов (агонисты ГнРГ), применяемых при лечении эндометриоза.

Достоверные различия выявлены также при анализе двух полиморфных вариантов гена CYP19 в группах больных эндометриозом с различной эффективностью лечения.

При сравнительном анализе полиморфного варианта гена CYP19 (del(TCT)) между группами 1 и 2 больных эндометриозом были выявлены статистически значимые различия в частотах аллелей и генотипов. Частоты аллелей D (del(TCT)) и I (ТСТ) составили: 18.6% и 81.4% - в группе 1, 32.4% и 67.6% - в группе 2 (р=0.016, Х2=5.75, df 1). Частоты генотипов D/D, D/1 и Ш составили: 5.9%, 25.5% и 68.6% - в группе 1, 8.5%, 47.9% и 43.7% - в группе 2 больных с эндометриозом (р=0.022, X -7.54, df 2). Хотелось бы отметить, что частота носительства del(TCT) гена CYP19 в группе 2 почти в 2 раза превышала таковую в группе 1 (рис. 3).

■ rsvnna n_7i Сур1А1 ■ rovnna „„si

70. И к0ктроли п=90

Рис. 3. Распределение функционально ослабленных генотипов в группах больных с разной эффективностью гормональной терапии (1р.1-эффективное лечение; гр.2- не эффективное лечение).

GSTM10/0 p=0,05 0R=2,2

Распределение генотипов по гену СУР19 ((ТТТА)п полиморфизм) также статистически значимо отличалась в двух группах пациентов (р=0,043, х2= 21,52, df

12). Согласно полученным данным частота генотипа (ТТТА)7(ТТТА)и в группе 1 была в 3 раза ниже, чем в группе 2 (13.7% и 40.8%, соответственно), тогда как, генотип (ТТТА)п(ТТТА)и встречался в 3 раза чаще в группе 1 по сравнению с группой 2 (17.6% и 4.2%, соответственно). Таким образом, согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов у пациентов, имеющих генотип (ТТТА)7(ТТТА)и, риск резистентности к медикаментозному лечению возрастает в 4 раза (OR=4,34; CI 95% 1,79- 10,55), тогда как наличие генотипа (ТТТА)п(ТТТА)п оказывает протективное действие (OR= 0,21; CI 95% 0, 72- 0,06).

Ген CYP19, кодирующий ароматазу, экспрессируется в клетках Лейдига семенников, в яичниках, плаценте, в различных участках мозга, костях, жировой и некоторых других тканях, кроме ткани эндометрия (Bulun et al., 2001, 2002). Фермент катализирует биосинтез эстрогенов из андрогенов, а также принимает участие в ароматизации эстрогенов (Healey et al., 2000; Кукес, 2004). Как показали многочисленные исследования, повышенная экспрессия гена CYP19 играет основную роль в возникновении эндометриоза (Yang et al., 2002; Meinhardt, Mullis 2002; Yang et al., 2001, 2002). Предполагается, что полиморфизм (TTTA)n влияет на сплайсинг первичного транскрипта гена CYP19, в результате чего появляется изоформа фермента с повышенной активностью (Kristensen et al., 1998). Выявленные популяционные различия при изучении ассоциации полиморфизма этого гена с развитием заболевания могут свидетельствовать о том, что существует сцепление конкретного аллеля с неким пока не идентифицированным генетическим маркером, влияющим на функциональную активность фермента.

При сравнении частоты делеции (0/0) гена GSTM1 в группах больных эндометриозом с различным эффектом от проводимой терапии нами были выявлены достоверные различия (р=0.05). В группе со слабым эффектом от проводимой медикаментозной терапии (2-я группа) частота «функционально ослабленного» генотипа GSTM10/0 достоверно превышала таковую в контрольной группе (р=0.014, X2=:6,0 df 1). Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов наличие генотипа GSTM10/0 у пациентов с эндометриозом увеличивает риск возникновения резистентности к медикаментозному лечению (OR =2,02; CI 95% 1.01—4.13).

В тоже время анализ частоты делеции (0/0) гена GSTT1 достоверных различий не показал. Однако, следует отметить, что в группе 2, резистентной к лечению гормонами, частота «функционально ослабленного» генотипа GSTT1 0/0 была несколько повышена по сравнению с группой 1 и достоверно превышала таковую в контрольной группе (р=0.0022,5^=9,37 df 1). Согласно рассчитанному коэффициенту соотношения шансов носительство генотипа GSTT10/0 увеличивает риск резистентности к проводимой медикаментозной терапии (OR =3,01; CI 95% 1.49 — 6.10).

Исходя из полученных нами результатов, можно предполагать, что на эффективность медикаментозного лечения в большей степени влияют "функционально ослабленные" гены 1-й фазы при непосредственном участии генов 2-й, участвующих в транспорте стероидных гормонов. В то же время, в возникновении и развитии заболевания первостепенную роль играет низкая активность ферментов 2-й фазы. >

Поскольку в развитие мультифакториальных заболеваний вовлечены в большей

степени не единичные гены, а целые группы, мы провели анализ сочетаний «функционально неблагоприятных» генотипов в контрольной группе, в группе и подгруппах больных эндометриозом, а также в группах с различным эффектом от проводимой медикаментозной терапии.

Как было отмечено ранее, наиболее четкая ассоциация с. эндометриозом прослеживается для «функционально ослабленных генотипов по генам фазы 2 системы детоксикации. Нам были получены достоверные различия при сравнении частот следующих сочетанных генотипов: GSTM1 0/0 + GSTT1 0/0, GSTT10/0 + NAT2 S/S, mEPHXl S + GSTM1 0/0 (табл.2). Носительство хотя бы одного из этих генотипов увеличивает риск развития эндометриоза. Причем, при наличии у индивидуума сочетания GSTM1 0/0 + GSTT1 0/0 риск увеличивается почти в 5 раз.

Так же были проанализированы сочетания трех и четырех «функционально ослабленных» генотипов изученных генов. Показано, что при наличии сочетанного генотипа GSTM10/0+GSTT10/0+NAT2 S/S риск развития заболевания увеличивается в 10 раз. В связи с полученными данными интересно отметить, что анализ полиморфных вариантов генов GSTM1 и NAT2 по отдельности не показал ассоциации между «функционально ослабленными» генотипами (GSTM1 0/0 и NAT2 S/S) и развитием эндометриоза.

Таблица 2. Распределение частот сочетаний генотипов у больных эндометриозом и в контроле.

Генотипы Контроль in=90ï Эндометриоэ fn=1221 P OR

n % n %

GSTM1 0/0+GSTT1 0/0 4 4.4' 23 18.9* 0,0025 OR =4.99; CI95% 1.81-13.76

GSTT1 0/0+NAT2 S/S 5 5.6V 22 18.0" 0,0071 OR =3.74; CI95%1.63- 8.59

mEPHXl S+GSTM1 0/0 11 12.2* 29 23.8* 0,034 OR «2.24; CI95%1.06 — 4.71

GSTM1 0/0 +GSTT1 0/0+ NAT2 S/S 1 1.1* 13 10.7* 0,006 OR =10.61; CI95% 1.99-56.61

GSTM1 0/0+GSTTl 0/0 + mEPHXl S 2 2.2* 11 9.0* 0,041 OR =4.36; CI95%1.58-17.97

GSTT 1 0/0+mEPHXl S + NAT2 S/S 1 1.1* 8 6.6* 0,05 OR =6.2; Л95% 1.01-38.13

GSTM1 0/0+GSTTl 0/0 + NAT2 S/S+mEPHXl 0 0.0* 5 4.1* 0,05 OR=6.2; CI95% 1.01 -38.13

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о синергическом (аддитивном) эффекте сочетаний изученных нами «функционально неполноценных» генотипов по генам системы детоксикации при возникновении эндометриоза. При этом, однако, четкой корреляции сочетаний генотипов с тяжестью заболевания не прослеживается. Вероятно, патологический процесс не претерпевает постепенный

переход от легких степеней заболевания (I и II стадии с единичными гетеротопиями) к более тяжелым (III и IV стадии), а сразу начинается как одновременный рост многочисленных эндометриоидных имплантантов на различных органах и тканях. Обширные поражения внутренних органов эндометриоидными клетками (по типу метастазирования) происходят на фоне гормональных нарушений и истощения резервных возможностей иммунной системы, усиливающихся в случае тяжелого течения заболевания. Вместе с тем, необходимо отметить, что у больных с тяжелыми формами эндометриоидной болезни наблюдается тенденция к увеличению частот некоторых генотипов, например GSTM1 0/0 + GSTT1 0/0 и GSTT1 0/0 + NAT2 S/S (табл.3).

Таблица 3. Распределение частот некоторых сочётанных генотипов в подгруппах с легким и тяжелым течением эндометриоза и в контроле. _

Генотипы Контроль (ii=90) Легкая степень (п=68) Тяжелая степень (п=54)

п % п % OR . п % OR

GSTM1 0/0 + GSTT1 0/0 4 4.4* 10 14.7* OR=i3.7 CI: 1.18-11.62 13 24.1* OR *=6.8 CI 95% 2.35-19.77

GSTM1 0/0 +NAT2 S/S 17 18.9** 22 32.4** OR =2.9 CI: 1.01 -8.67 14 25.9

GSTT1 0/0 +NAT2 S/S 5 5.6* 10 14.7 12 22.2* OR =4.9 CI 95% 1.73-13.64

Можно предположить, что сниженная активность или отсутствие некоторых ферментов фазы 2 детоксикации влияют на процессы метаболизма эндогенных и экзогенных субстратов, способствуют более длительному сохранению в организме промежуточных продуктов биотрансформации ксенобиотиков, которые могут провоцировать развитие патологических процессов, связанных с эндометриозом.

Различный эффект от проводимой медикаментозной терапии у пациентов можно объяснить индивидуальными особенностями метаболизма ксенобиотиков (лекарственных препаратов), применяемых при лечении эндометриоза. Комплексный анализ полиморфизма генов, кодирующих ферменты фазы 2 детоксикации, в группах пациентов с различными результатами гормональной терапии, выявил синергический эффект «функционально неполноценных» ферментов, проявляющийся при лечении больных эндометриозом. (Рис. 4).

Рис. 4. Коэффициент соотношения шансов

эффективности медикаментозного лечения при = некоторых сочётанных генотипах

(гр.1-эффективное лечение; гр.2- не эффективное лечение).

шЕРНХ! S+GSTM10/0 + GSTTl 0/0+NAT2 S/S

. GSTM10/0 + CYP19 D/- GSTT1 ®Л>+CYP19 D/- GSTM10/0+

CYP19(TTTA)i(TTTA)ii

Как показали наши исследования, полиморфные варианты генов, кодирующие

ферменты семейства глутатион-Б-трансфераз, ассоциированы с эффективностью действия лекарственных веществ (в частности агонистов гонадотропин-рилизинг-гормонов (ГнРГ)), используемых при лечении эндометриоза. В тоже время, нами была выявлена неслучайная связь некоторых полиморфизмов гена СУР19, участвующего в синтезе эстрогенов, с лечением эндометриоза.

Следует отметить, что одной из функций ферментов семейства глутатион-Б-трансфераз, помимо детоксикации ксенобиотиков, является связывание и транспорт стероидных гормонов, в то время как СУР 19 (ароматаза) участвует в синтезе эстрогенов и, как предполагают, играет ключевую роль в генезе эндометриоза. Поскольку нами были выявлены неслучайные ассоциации определенных генотипов <_г5ТМ/, ¿£777 и СУР 19 генов с развитием и лечением, эндометриоза, мы провели сравнительный анализ частот сочетаний полиморфных вариантов этих генов у больных эндометриозом и в группах с различным эффектом от проводимой, медикаментозной терапии. Согласно полученным данным, наличие сочетанного генотипа СБТШ 0/0 + СУР 19 Т>1- или ОБГЛ 0/0 + СУР 19 Б/- увеличивает риск развития резистентности к медикаментозному лечению (ОК=4.28; С195% 1.27-14.49 и (Ж =3.4; С195% 1.38 — 8.44, соответственно), не играя заметной роли при возникновении заболевания.

Анализ частот сочетанных генотипов 08ТМ10/0+(ТТТА)7(ТТТА)|1 и СЗТТ10/0+(ТТТА)7(ТТТА) 11 показал достоверные различия как между группами больных эндометриозом и контролем, так и между группами с различным эффектом от проводимой лекарственной терапии. Носцтельство генотипа вБТМ 10/0+(ТТТА)7(ТТТА) 11 увеличивает риск возникновения резистентности к лечению гормонами (СЖ=6.56; С1: 1.72-24.98), в тоже время наличие генотипа С8ТТ1 0/0+(ТТТА)7(ТТТА)ц может способствовать развитию эндометриоза, а также увеличивать риск появления . резистентности к гормонотерапии (<Ж=5.7; С1: 1.47-22.08 и (Ж=4.98; С1 95% 1.21-20.59, соответственно). Сочетание «функционально ослабленных» генотипов по СБТМ!, 05ТТ1 и СУР 19 генам в организме может приводить к локальному увеличению уровня эстрогенов и способствовать развитию заболевания. В тоже время, у индивидуумов, имеющих «функционально неполноценные» генотипы по генам глутатион-8-трансфераз на фоне повышенной экспрессии ароматазы (СУР 19), не происходит нормальное связывание и транспорт гормонов, используемых при медикаментозной терапии, что и является причиной повышенной резистентности таких больных к лечению.

Наши наблюдения показывают, что сочетание определенных генотипов по генам метаболизма (детоксикации) могут не только провоцировать возникновение эндометриоза, но и существенным образом влиять на эффективность медикаментозной терапии этого заболевания. .

Результаты проведенных исследований свидетельствуют о наличии зависимости возникновения эндометриоза, тяжести течения заболевания и даже эффективности лечения от функционального состояния ряда генов системы детоксикации. Наличие этой связи, безусловно, указывает на роль неблагоприятных экзогенных факторов (промышленные загрязнения) в возникновении и прогрессировании такого мультифактериального заболевания, как эндометриоз.

выводы.

1 .«Функционально ослабленные» генотипы по генам GSTT1 и mEPHXl ассоциированы с развитием наружного генитального эндометриоза, риск которого у женщин с генотипом GSTT1 0/0 увеличен в 2,3 раза, а при «медленной» форме mEPHXl в 2,1 раза.

2. Сочетания «функционально ослабленных» генотипов по генам 2-й фазы системы детоксикации GSTM1 0/0, GSTT1 0/0, NAT2 S/S, mEPHXl S обнаруживают ассоциацию с развитием эндометриоза, риск которого при наличии определенного генотипа увеличивается от 3 до 10 раз.

3. Генотипы GSTM1 0/0 + GSTT1 0/0 и GSTT1 0/0 +NAT2 S/S достоверно чаще встречаются у женщин с тяжелыми формами эндометриоза.-

4. Наличие определенных генотипов по генам CYP2E1, CYP19 и GSTM1 ассоциировано с различной эффективностью медикаментозного лечения эндометриоза. -

5. Наличие у пациенток сочетаний «функционально ослабленных» генотипов GSTM1 0/0, GSTT1 0/0, NAT2 S/S, mEPHXl S ассоциировано с низкой эффективностью медикаментозного лечения эндометриоза. Сочетание нулевых вариантов генов GSTT1 или GSTM1 с генотипами D/- или (ТТТА)7(ТТТА)п по гену CYP19 увеличивают риск низкой эффективности гормонотерапии от 3,5 до 7 раз.

: Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Baranov V., T.Ivaschenko, N.Schved, MAseev, H.Baranova, MJarmolinskaya, S.Selkov, E.Albuisson, G.Savitsky. Feasible predictive test for the treatment efficiency response in endometriosis patients.// BalkJ.Hum.Genet. -1999.-V.2(2).- P.29-34.

2. Ivaschenko Т.Е., Golubeva О. B, Shved N.Y., Aseev M.B. Association of the CYP19 gene polymorphisms with risk of adenomyosis in North-West of Russia.// European Congress of Human Genetics Conference. Munich, Germany.- 2004. P290.

3. Ivaschenko Т.Е. , Shved N.Y., Aseev M.B., Baranov V.S. Analysis of functionally impaired genotypes of metabolic genes in endometriosis patientsУ/ HGM2000.-China.- . 2002.-P146. .

4. Ivaschenko Т.Е., Shved N.Y., Kramerova N.L., Baranov V.S. Analysis of environmental genes polymorphisms • as predictive genetic test for the treatment efficiency response in endometriosis patients //European Journal of Human Genetics.- 2001.-V.9, Suppl 1.- P.303-6. . ,

5. Shved N.Y. , Aseev M.B., Ivaschenko Т.Е.,Baranov V.S Analysis of the CYP19 gene polymorphisms in endometriosis patients from the North- West of Russia.// European Congress of Human Genetics Conference. Munich, Germany.- 2004.- P296.

6. Shved N.Y. .Ivaschenko Т.Е., AseeV M.B., Baranov V.S. Analysis of metabolic genes polymorphisms in endometriosis patients.// European Congress of Human Genetics Conference. Birmingham, England.-2003. P786.

7. Асеев M.B., Иващенко Т.Э., Швед Н.Ю., Зазерская И.Е., Котова С.М., Ярмолинская М.И., Сельков С.А., Баранов B.C. Анализ аллельного полиморфизма генов предрасположенности •■., в популяциях и у больных с некоторыми мультифакториальными заболеваниями // 2-ой (4-ый) Росс, съезд мед. генетиков. Курск.-2000 . Тезисы докл.-ч.2 - с.21-22.

8. Баранов B.C., Иващенко Т.Э.ДИвед Н.Ю., Ярмолинская М.И., Сельков А.С., Горбушин С.М., Савицкий Г.А., Малет П., Канис М., Брюа М., Баранова Е.В., Асеев М.В. Генетические факторы предрасположенности и терапии эндометриоза. // Генетика.- 1998, 34, N11, стр.1-6.

9. Баранов B.C., Иващенко Т.Э., Швед Н.Ю., Крамарева Н.Л. Генетические аспекты профилактики и лечения эндометриоза / "Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике"/ Под ред. А.Б. Масленникова. Вып.5 .- Новосибирск.: Альфа Виста. - 2004. - С.136-156.

10. Баранов ВС, Иващенко ТЭ, Швед НЮ, Крамарева HJI, Айламазян ЭК Генетические аспекты профилактики и лечения эндометриоза //Методические рекомендации Изд-во "Научная Литература" *"

СПб 2004,24с., 6 ил. (Ex Iibris "Журнал акушерства и женских болезней").

11. Иващенко Т.Э., Швед Н.Ю., Крамарева Н.Л., Айламазян Э.К., Баранов B.C. Анализ полиморфных аллелей генов, кодирующих ферменты 1 и 2 фазы детоксикации у больных эндометриозом // Генетика. - 2003, 39(4), стр.525-9.

12. НЮ.Швед, Н.Л. Крамарева, Т.Э.Иващенко, М.В. Асеев, B.C. Баранов. Анализ аллельных вариантов генов метаболизма ксенобиотиков при различной эффективности гормономоделирующей терапии у больных эндометриозом.// II международная конференция Молекулярная медицина и биобезопасность. - 2005. сборник тезисов, С287.

13. Швед Н.Ю., Иващенко Т.Э., Асеев М.В., Ярмолинская М.И., Сельков С.А., Баранов B.C. Генетические факторы предрасположенности и терапии эндометриоза // 2-ой съезд ВОГИС. 1-5 февраля 2000 г. СПб. Тезисы докл., т.2, с.281-282.

14. Швед Н.Ю., Иващенко Т.Э., Крамарева Н.Л., Асеев М.В., Баранов B.C. Ассоциация аллельных вариантов некоторых генов детоксикации с результатами лечения больных эндометриозом // Мед. Генетика.- 2002.- №5.- С5-13.

Подписано в печать 03.11.06. Формат 60x84 1/16.

Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл. печ. листов 0,93. Тираж 80 экз. Заказ № 26

ЦОП типографии Издательства СПбГУ 199061, С-Петербург, Средний пр., д.41.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Швед, Наталья Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. ЭТИОЛОГИЯ ЭНДОМЕТРИОЗА

1. 2. Клинические формы и клиническая картина эндометриоза.

1.3. Экзогенные факторы развития эндометриоза.

1.4. Эндогенные факторы развития эндометриоза.

1.4.1. Роль генетических факторов в развитии эндометриоза.

1.4.2.Роль гормональных факторов в развития эндометриоза.

1.4.3. Роль иммунологических факторов в развитии эндометриоза.

1.4.4. Роль оксидативного стресса в развитии эндометриоза.

1.5. Система детоксикации ксенобиотиков.

1.5.1.Гены и ферменты 1 фазы детоксикации ксенобиотиков.

1.5.1.1. Цитохромы Р-450.

1.5.1.1.1. Цитохром Р-450 1А1 (СYP1А1).

1.5.1.1.2. Цитохром Р-450 2E1(CYP2E1).

1.5.1.1.3. Цитохром Р-450 19 (CYP19).

1.5.2. Гены и ферменты 2 фазы детоксикации ксенобиотиков

1.5.2.1. Глютатион-Б-трансферазы (GSTs).

1.5.2.1.1. Глутатион-Б-трансфераза класса М.

1.5.2.1.2. Глутатион-Б-трансфераза класса Т.

1.5.2.2. Ацетилирование (ариламин-М-ацетилтрансфераза (NAT).

1.5.2.2.1. Ариламин-И-ацетилтрансфераза 2 (NAT2).

1.5.2.3. Эпоксидгидролазы.

1.5.2.3.1 .Микросомальная эпоксидгидролаза mEPHXl.

1.6. Ассоциация полиморфизма генов «внешней среды» с эндометриозом.

1.7. Проблемы лечения эндометриоза.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2. 1. Обследуемые группы.

2.2. Реактивы, ферменты, биопрепараты, оборудование.

2.3. Исследуемые гены и их полиморфизмы.

2.4.Методы

2.4.1. Экстракция геномной ДНК из периферической крови.

2.4.2. Полимеразная цепная реакция.

2.4.3. Гидролиз ДНК ферментами рестрикции.

2.4.5.Электрофорез в полиакриламидном геле и визуализация результатов.

2.5. Математические методы анализа.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1 Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов у больных с эндометриозом и в контроле.

3.1.1 Анализ соответствия распределений закону Харди-Вайнберга.

3.1.2 Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов Фазы 1 системы детоксикации ксенобиотиков.

3.1.3 Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов

Фазы 2 системы детоксикации ксенобиотиков.

3.2. Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов у больных с эндометриозом с различным эффектом от проводимой медикаментозной терапии.

3.2.1. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов Фазы 1 системы детоксикации ксенобиотиков у больных с эндометриозом с различным эффектом от проводимой медикаментозной терапии.

3.2.2 Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей генов Фазы 2 системы детоксикации ксенобиотиков у больных с эндометриозом с различным эффектом от проводимой медикаментозной терапии.

3.3. Анализ сочетаний генотипов по генам системы детоксикации ксенобиотиков у больных с эндометриозом и в контроле.

3.3.1. Анализ сочетаний «функционально ослабленных» генотипов у больных с эндометриозом и в контроле.

3.3.2. Анализ сочетаний «функционально ослабленных» генотипов в подгруппах больных с эндометриозом и в контроле.

3.3.3. Анализ сочетаний «функционально ослабленных» генотипов в группах больных с эндометриозом с различным эффектом от проводимой медикаментозной терапии.

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

5. ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Роль генов "внешней среды" в патогенезе и лечении эндометриоза"

Актуальность проблемы

Эндометриоз является одной из самых загадочных и нерешенных проблем в современной гинекологии, по частоте занимая 3 место после воспалительных заболеваний женских гениталий и миомы матки в структуре гинекологических заболеваний. В настоящее время эндометриоз принято рассматривать не только как специфическое местное гинекологическое заболевание, но и как патологический процесс («эндометриоидная болезнь»), в который вовлечены как смежные, так и отдаленные органы, и целые системы организма. Несмотря на многочисленные исследования, этиология и патогенез заболевания продолжают оставаться предметом научных дискуссий. Согласно современным представлениям, эндометриоз - это дисгормональное, иммунозависимое и генетически обусловленное заболевание, характеризующееся доброкачественным разрастанием ткани, сходной по морфологическому строению и функции с эндометрием, но находящейся за пределами полости матки (Баскаков и др., 2002).

По выражению М. R. Cohen, "Эндометриоз является почти эпидемией XX века от менархе до менопаузы" (Cohen, 1982). Частота эндометриоза по разным данным варьирует от 7 до 65%.

Большинство больных эндометриозом страдает от выраженного синдрома тазовых болей, 50 - 80% пациенток бесплодны, у многих женщин имеются нарушения эндокринного и иммунного статусов.

В настоящее время эндометриоз не только медицинская, но и социальная проблема. Заболевание, приводящее к нарушению репродуктивной функции и инвалидизации, приводит также к ощущению неполноценности, нанося физический и моральный ущерб женщинам в возрасте 20-40 лет.

Недостаточное понимание основных механизмов развития эндометриоза не позволяет добиться эффективности его лечения. Хирургическое лечение зачастую не способствует восстановлению специфических функций женского организма и не исключает рецидивов заболевания. Более чем 25-летний опыт гормональной терапии, направленной на подавление активности эндометриоидных очагов, развеял надежды на полное выздоровление и вызвал разочарование в связи с рецидивами и резистентностью многих клинических форм заболевания, не говоря уже о серьезных побочных эффектах лечения.

Причины возникновения, диагностика и лечение эндометриоза остаются предметом споров от момента описания и до настоящего времени. Однако нет сомнений в том, что эндометриоз является типичным представителем мультифакториальных заболеваний. Это означает, что в генезе патологического процесса важная роль принадлежит не одному, а многим генам. Несомненно, генная сеть этого заболевания сложна и разнообразна. Она включает различные гены метаболизма (детоксикации), гены, ответственные за иммунный статус, эндокринные функции, гены межклеточных взаимодействий. Патологические эффекты «мутантных» вариантов (аллелей) этих генов в значительной степени провоцируются действием неблагоприятных факторов внешней среды. Отмечающийся в последние десятилетия рост заболевания, наряду с прогрессирующим ухудшением экологической и токсикологической обстановки, а также возможность экспериментальной индукции эндомертиоза у обезьян (A.Gibbons, 1993) свидетельствуют об участии генов системы детоксикации ксенобиотиков (генов «внешней среды» - environmental genes) в патогенезе эндометриоза.

4.Провести суммарный анализ ассоциации аллельных вариантов генов 1-й и 2-й фаз системы детоксикации у больных с различным эффектом медикаментозной терапии.

5.0ценить вклад генов детоксикации в развитие эндометриоза и чувствительность к медикаментозной терапии заболевания. Научная новизна работы. Впервые изучены особенности аллельного полиморфизма генов CYP1A1 (A2455G(Ile462Val)), CYP2E1 (C9896G), CYP19 ((ТТТА)п повтор и del(TCT)) и 4-х генов фазы 2 GSTMI (Del), GSTT1 (Del), NAT2 (С481Т , G590A G857A), mEPHXl (T337C(Tyrll3His) - 3-й экзон, A415G (Hisl39Arg) - 4-й экзон) при эндометриозе, а также проанализирована корреляция полиморфных вариантов изученных генов с тяжестью течения заболевания. Впервые показаны неслучайные ассоциации между развитием эндометриоза, степенью тяжести заболевания и полиморфизмом генов mEPHXl и GSTT1 у больных эндометриозом Северо-Западного региона

России. Впервые проведен ретроспективный анализ результатов медикаментозного лечения эндометриоза в зависимости от паттерна аллелей генов CYP1A1, CYP2E1, CYP19, GSTM1, GSTT1, NAT2 и mEPHXl. Впервые показано, что носительство аллеля D гена CYP19 и делеции (0/0) гена GSTM1 увеличивает риск резистентности к медикаментозному лечению у больных эндометриозом Северо-Западного региона России. Впервые показан синергический (аддитивный) эффект сочетаний изученных «функционально неполноценных» генотипов по генам 2-й фазы системы детоксикации при развитии и прогрессировании эндометриоза. Впервые при комплексном анализе полиморфизма генов, кодирующих ферменты фазы 2 детоксикации в группах пациентов с различными результатами медикаментозной терапии, выявлен синергический эффект «функционально неполноценных» ферментов, оказываемый на лечение больных эндометриозом.

Практическая значимость. Анализ генетического полиморфизма генов CYP19 ((ТТТА)п повтор в интроне 4 и del(TCT) в интроне 4), т£РШ7(Т337С (Tyrll3His) - 3-й экзон, A415G (Hisl39Arg) - 4-й экзон), GSTM1 (0/0), GSTT1 (0/0) можно рекомендовать в качестве прогностического теста для оценки риска развития и эффективности лечения эндометриоза у женщин репродуктивного возраста. Материалы диссертационной работы вошли в методические рекомендации «Генетические аспекты профилактики и лечения эндометриоза» для врачей акушеров-гинекологов. Основные положения, выносимые на защиту.

1.Функционально ослабленные генотипы GSTT1 0/0 и mEPHXl S, а также сочетания функционально ослабленных генотипов по генам фазы 2 системы детоксикации (GSTM1 0/0, GSTT1 0/0, NAT2 S/S, mEPHXl S) ассоциированы с развитием наружного генитального эндометриоза.

2. Наличие определенных генотипов по генам CYP2E1 (аллель M (9896G)), CYP19 (del(TCT) в интроне 4), GSTM1{GSTM1 0/0), а также наличие сочетанных «функционально ослабленных» генотипов GSTM1 0/0, GSTT1 0/0, NAT2 S/S, mEPHXl S ассоциировано с различной эффективностью медикаментозного лечения эндометриоза.

3. Носительство сочетанного генотипа GSTM1 0/0 + CYP19 D/- или GSTT1 0/0 + CYP19 D/- или GSTM1 0/0 + (ТТТА)7(ТТТА)ц увеличивает риск развития резистентности к медикаментозному лечению.

4. Выявленная ассоциация функционально ослабленных генотипов генов 1 и 2 фаз детоксикации с эндометриозом подтверждает роль неблагоприятных экзогенных факторов в развитии заболевания.

Апробация работы. Результаты работы представлены на 2-ом съезде ВОГИС (Санкт-Петербург, 2000), на 2-ом (4-ом) Российском съезде медицинских генетиков (Курск, 2000), И-ой международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (Москва, 2005), Международном конгрессе по предиктивной медицине (Франция, 2001), на Европейских конгрессах по генетике человека в 2003г. (Бирмингем, Великобритания), в 2004г. (Мюнхен, Германия), на Международном конгрессе по геному человека HGM2000 (Китай,2002).

Диссертация апробирована на научных семинарах Лаборатории пренатальной диагностики наследственных и врожденных болезней человека ГУ Научно-исследовательский институт акушерства и гинекологии им. Д.О.Отта. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 14 работ. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 149 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (результаты и методы), описания результатов и их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы, включающего 226 ссылок. Диссертация иллюстрирована 39 таблицами и 18 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Швед, Наталья Юрьевна

ВЫВОДЫ.

1 .«Функционально ослабленные» генотипы по генам GSTT1 и mEPHXl ассоциированы с развитием наружного генитального эндометриоза, риск которого у женщин с генотипом GSTT1 0/0 увеличен в 2,3 раза, а при "медленной" форме mEPHXl в 2,1 раза.

3. Генотипы GSTM1 0/0 + GSTT1 0/0 и GSTT1 0/0 +NAT2 S/S достоверно чаще встречаются у женщин с тяжелыми формами эндометриоза.

4. Наличие определенных генотипов по генам CYP2E1, CYP19 и GSTM1 ассоциировано с различной эффективностью медикаментозного лечения эндометриоза.

5. Наличие у пациенток сочетаний «функционально ослабленных» генотипов GSTM1 0/0, GSTT1 0/0, NAT2 S/S, mEPHXl S ассоциировано с низкой эффективностью медикаментозного лечения эндометриоза. Сочетание нулевых вариантов генов GSTT1 или GSTM1 с генотипами D/-или (ТТТА)7(ТТТА)ц по гену CYP19 увеличивают риск низной эффективности гормонотерапии от 3,5 до 9 раз.

118

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Швед, Наталья Юрьевна, Санкт-Петербург

1. Адамян J1. В., Андреева Е. Н. Геннтальный эндометрноз: клиника, диагностика, лечение : Метод. Рекомендации // Рос. Акад. Мед. наук и др. ;-М. :Б. И.-1997.-31 е.: ил.; 21 см.

2. Адамян Л.В., Кулаков В.И. Эндометриозы: Руководство для врачей // М.: медицина.-1998.-320 е., ил.

3. Айламазян Э. К. Репродуктивное здоровье женщины как критерий биоэкологической диагностики и контроля окружающей среды // Журнал акушерства и женских болезней. 1997. - № 1. - С. 610.

4. Айламазян Э. К., Беляева Т. В., Виноградова Е. Г. Влияние экологической обстановки на репродуктивное здоровье женщины. Новый взгляд на проблему // Вестник Российск. ассоц. Акуш.-гин.-1996.-№2.-С. 13-16.

5. Баранов В. С., Иващенко Т. Э., Швед Н. Ю. и др. Генетические факты предрасположенности и терапии эндометриоза // Генетика. -1999.-Т. 35, N2.-С. 243-248.

6. Баранов B.C., Баранова Е.В., Иващенко Т.Э., Асеев М.В. Геном человека и гены "предрасположенности " (Введение в предиктивную медицину) // СПб, "Интермедика".- 2000-272 с.

7. Баскаков В. П. Эндометриоз на современном этапе // Журнал акушерства и женских болезней,- 1998.- Выпуск 1. С.70-76.

8. Баскаков В.П., Цвелев Ю.В., Кира Е.Ф. Эндометриоидная болезнь // СПб.ЮОО "Издательство H-JT.-2002.-452 е., цв.ил-8 с.

9. Беспалова О.Н., Аржанова О.Н., Иващенко Т.Э., Асеев М.В., Баранов B.C., Айламазян Э.К. Генетические факторы предрасположенности к привычному невынашиванию беременности ранних сроков // Журнал акушерства и женских болезней.-2001.-T.XLX- №2.-С.8-13.

10. Викторова Т.В., Корытина Г.Ф., Янбаева Д.Г. Взаимодействие генетических и внешнесредовых факторов в процессе развития хронических обструктивных болезней легких // Медицинская генетика.-2003 .-Т.2-№2 .-С. 50-59.

11. Владимиров Ю.А., Азизова O.A., Деев А.И., Козлов A.B., Осипов А.Н., Рощупкин Д.И. Свободные радикалы в живых системах // Итоги науки и техники. Серия биофизика.-М.: ВИНИТИ.- 1991.-29:251.

12. Гинтер Е.К. Популяционная генетика и медицина // Вестник РАМН.-2001. № 10.-С. 25-31.

13. Гланц С. Медико-биологическая статистика // М.: Практика.-1999.-459 с.

14. Демин Г.С., Малышева О.В. Изучение роли гена микросомальнойэпоксидгидролазы в связи с развитием гестозов у беременных женщин // Человек и его здоровье. Шестая Всероссийская медико-биологическая конференция молодых исследователей. СПб.- 2003. -С. 49-50.

15. Железнов Б.И., Стрижаков А.Н. Генитальный эндометриоз // М.: Медицина.-1985.-146 с.

16. Животовский JI.A. Популяционная биометрия // М.: Наука.- 1991. -272 с.

17. Иващенко Т.Э., Сиделева О.Г, Петрова М.А., Гембицкая Т.Е., Орлов A.B., Баранов B.C. Генетические факторы предрасположенности к бронхиальной астме // Генетика. 2001. - Т. 37, №1 - С. 107-111.

18. Кольман Я., Рем К.-Г. Наглядная биохимия: Пер. с нем. // М.: Мир.-2000.-469 е., ил.

19. Крамарева H.JI. Значение компонентов иммунной системы и генетических факторов в патогенезе и терапии наружного генитального эндометриоза: Автореф. дис. канд. мед. наук. // СПб.- 2002.-24 с.

20. Кукес В.Г. Метаболизм лекарственных средств: клинико-фармакологические аспекты // М.: И. "Реафарм".- 2004.- 144 с.

21. Кулинский В.И. Обезвреживание ксенобиотиков // Соросовский Образовательный журнал.- 1999.- №1- С. 8-12.

22. Лесков В. П. Изменения иммунной системы при внутреннем эндометриозе // Пробл. Репродукции. 1998. - Т. 4.- N 4. - С. 26-30.

23. Минина JI.C., Волков Н.И., Новиков Е.А., Алексеева M.JI. Эстроген- и пргесерон-рецепторные системы в эндометрии больных с «малыми» формами эпдометриоза //Акуш. И гин.- 1989.-№2.-С71-73.

24. Михнина Е. А. Гормональная функция яичников и рецепция эстрадиола и прогестерона эндометрием у женщин с невынашиванием беременности ранних сроков : Автореф. дис.канд. мед. наук. // СПб. -1995.-С. 20.

25. Пальцев М.А. Введение в молекулярную медицину // М.: ОАО "Издательство" Медицина".- 2004.-496 е.: ил.

26. Посисеева JI.B., Герасимов A.M., Шор A.JI. Иммунный статус перитонеалыюй жидкости у женщин с наружным эндометриозом, страдающим бесплодием // Акуш. и гинекол.- 2000,- №6.-С.27-30.

27. Посисеева JI.B., Назарова А.О., Назаров С.Б. Значение оксида азота в патогенезе бесплодия при наружном генитальном эндометриозе // Акушерство и гинекология.-1999.- №6.-С. 37-40.

28. Райе Р.Х., Гуляева Л.Ф. Биологические эффекты токсических соединений // Курс лекций Новосибирск,- 2003.-203 с.

29. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA // М.: МедиаСфера.- 2003. 312 с.

30. Саприн А.Н., Калинина Е.В. Окислительный стресс и его роль в механизмах апоптоза и развития патологических процессов // Успехи биол. и химии.- 1999.- Т. 39.- С. 289-326.

31. Середенин С.Б. Лекции по фармакогенетике // М., Медицинское информационное агентство.- 2004.-303 е.: ил.

32. Сибиряк C.B., Вахитов В.А., Курчатова H.H. Цитохром Р450 и иммунная система: факты, гипотезы, перспективы// Уфа: Гилем.-2003.-211 с.

33. Сиделева О.Г. Полиморфные аллели генов, ассоциированные с патогенезом атопической формы бронхиальной астмы у жителей Северо-запада России: Автореф. дис. канд. биол. наук. // СПб.- 2002.19 с.

34. Сиделева О.Г., Иващенко Т.Э., Орлов A.B., Петрова М.А., Гембицкая Т.Е., Останкова Ю.В., Баранов B.C. Гены GSTM1, GSTT1, СУР 1 Al, CFTR у больных бронхиальной астмой // Материалы 11 национального конгресса по болезням органов дыхания. М.- 2001.20 с.

35. Сотникова Н. Ю., Анциферова Ю. С., Посисеева JI. В. Параметры функционального состояния лимфоцитов перитонеальной жидкости у женщин с наружным генитальным эндометриозом // Иммунология. -2000. -N3. С. 53-56

36. Старцева Н. В. Дифференцированная терапия больных эндометриозом с учетом клинико- гормонально-иммунологических аспектов // Автореф. дис. д-ра мед. наук. СПб. - 1994.

37. Старцева Н. В. Эндометриоз как новая болезнь цивилизации (вопросы патогенеза, диагностики и лечения) // Пермь.- 1997.-179 с.

38. Старцева H.B. Иммунные механизмы возникновения и развития генитального эндометриоза //Акуш. И гин.-1983.- №12.-С.44-46.

39. Стрижаков А. Н. , Давыдов А. А. Новые подходы к патогенезу, диагностике и лечению различных форм генитального эндометриоза // Пути развития совр. гинекологии: Тез. Докл., М. 1995. - С. 149.

40. Стрижаков А. Н., Давыдов А.И. Эндометриоз. Клинические и теоретические аспекты // М.: Медицина.- 1996.-184 с.

41. Супрун Л. Я. Иммунотерапия при эндометриозе // Здравоохр. Белоруссии. 1983. - №3. - С. 64-66.

42. Супрун Л.Я. Эндометриоз: патогенез, лечение // Минск: Беларусь.- 1987.-125 с.

43. Фогель Ф., Мотульски А. Генетика человека // М.: "Мир".-1989.-т. 1.-308с.

44. Худолей В.В. Канцерогены: характеристики, закономерности, механизмы действия // СПб.: НИИ Химии СПбГУ.- 1999. 419с.

45. Цвелев Ю.В., Пазычев A.A. Перекисное окисление липидов в патогенезе эндометриоза яичников // Вестник Росс. асс. акуш.-гинек.-1998.- №2.-С.26-31.

46. Чучалин А.Г. Генетические аспекты бронхиальной астмы // Пульмонология.- 1999. Т.9.- №4. - С. 3-10.

47. Ярмолинская М. И. Роль антипролиферативных компонентов иммунной системы в патогенезе и выборе терапии наружного генитального эндометриоза: Автореф. дис. канд. мед. наук. // СПб.-1997,-21с.

48. Acosta АА, Buttram VC Jr, Besch PK, Malinak LR, Franklin RR,

49. Vanderheyden JD. A proposed classification of pelvic endometriosis // Obstet Gynecol.- 1973V.42( 1 )-P. 19-25.

50. Arvanitis DA, Goumenou AG, Matalliotakis IM, Koumantakis EE, Spandidos DA. Low-penetrance genes are associated with increased susceptibility to endometriosis // Fertil Steril.- 2001.- V.76(6)-P. 1202-6.

51. Arvanitis DA, Koumantakis GE, Goumenou AG, Matalliotakis IM, Koumantakis EE, Spandidos DA. CYP1A1, CYP19, and GSTM1 polymorphisms increase the risk of endometriosis // Fertil Steril.- 2003.-V.79.-P.702-9.

52. Attar E, Bulun SE. Aromatase and other steroidogenic genes in endometriosis: translational aspects // Hum Reprod Update.-2006.-V.12(l).-P.49-56.

53. Autrup H. Genetic polymorphisms in human xenobiotica metabolizing enzymes as susceptibility factors in toxic response // Mutat Res. -2000-V.3.-№464(1 )-P.65-76.

54. Babu KA, Rao KL, Reddy NG, Kanakavalli MK, Zondervan KT, Deenadayal M, Singh A, Shivaji S, Kennedy S. N-acetyl transferase 2 polymorphism and advanced stages of endometriosis in South Indian women // Reprod Biomed Online.- 2004.-V.9(5)-P.533-40.

55. Babu KA, Reddy NG, Deendayal M, Kennedy S, Shivaji S. GSTM1, GSTT1 and CYP1A1 detoxification gene polymorphisms and their relationship with advanced stages of endometriosis in South Indian women//

56. Pharmacogenet Genomics.- 2005.-V.15(3)-P. 167-72.

57. Badawi AF, Cavalieri EL, Rogan EG. Role of human cytochrome P450 1A1, 1A2, 1B1, and 3A4 in the 2-, 4-, and 16alpha-hydroxylation of 17beta-estradiol // Metabolism.- 2001.- V.50(9)-P. 1001 -3.

58. Bartosik D, Jacobs SL, Kelly LJ. Endometrial tissue in peritoneal fluid // Fertil Steril.- 1986.-V.46(5)-P.796-800.

59. Bartsch H, Nair U, Risch A, Rojas M, Wikman H, Alexandrov K. Genetic polymorphism of CYP genes, alone or in combination, as a riskmodifier of tobacco-related cancers // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.-2000.-V.9(l)-P.3-28.

60. Baxter SW, Thomas EJ, Campbell IG. GSTM1 null polymorphism and susceptibility to endometriosis and ovarian cancer // Carcinogenesis.- 2001.-V.22(l)-P.63-5.

61. Bauer M, Herbarth 0, Aust G, Graebsch C. Molecular cloning and expression of novel alternatively spliced cytochrome P450 2E1 mRNAs in humans // Mol Cell Biochem.- 2005.- V.280(l-2)-P.201-7.

62. Benoit L, Arnould L, Cheynel N, Diane B, Causeret S, Machado A, Collin F, Fraisse J, Cuisenier J. Malignant extraovarian endometriosis: A review// Eur J Surg Oncol.- 2006.- V.32(l)-P.6-11.

63. Berchuck A, Boyd J. Molecular basis of endometrial cancer // Cancer.-1995.-V. 15-P.2034-40.

64. Berstein LM, Imyanitov EN, Suspitsin EN, Grigoriev MY, Sokolov EP, Togo A, Hanson KP, Poroshina TE, Vasiljev DA, Kovalevskij AY, Gamajunova VB. CYP19 gene polymorphism in endometrial cancer patients//J Cancer Res Clin Oncol.- 2001.- V.127(2)-P. 135-8.

65. Board PG, Suzuki T, Shaw DC. Human muscle glutathione S-transferase (GST-4) shows close homology to human liver GST-1// Biochim Biophys Acta.- 1988.-V.14-P.214-7.

66. Bois FY, Eskenazi B. Possible risk of endometriosis for Seveso, Italy, residents: an assessment of exposure to dioxin // Environ Health Perspect.-1994.-V. 102(5)-P.476-7.

67. Boyd JA, Barrett JC. Role of tumor suppressor genes in a multistep model of carcinogenesis // Basic Life Sci.- 1991 .-V.57-P. 183-96.

68. Braun DP, Dmowski WP. Endometriosis: abnormal endometrium anddysfunctional immune response // Curr Opin Obstet Gynecol.-1998.- V.10-P.365-9.

69. Brockmoller J, Kaiser R, Kerb R, Cascorbi I, Jaeger V, Roots I. Polymorphic enzymes of xenobiotic metabolism as modulators of acquired P53 mutations in bladder cancer // Pharmacogenetics.- 1996.-V.6-P.535-45.

70. Bruhat MA, Canis M, Pouly JL. Endometriosis 1986-future research// Contrib Gynecol Obstet.- 1987.-V.16-P.374-81.

71. Bruner-Tran KL, Rier SE, Eisenberg E, Osteen KG The potential role of environmental toxins in the pathophysiology of endometriosis // Gynecol Obstet Invest.- 1999.-V.48-P.45-56.

72. Bulun SE, Cheng YH, Yin P, Imir G, Utsunomiya H, Attar E, Innes J, Julie Kim J. Progesterone resistance in endometriosis: link to failure to metabolize estradiol // Mol Cell Endocrinol.- 2006.-V.27-P.94-103.

73. Bulun SE, Fang Z, Imir G, Gurates B, Tamura M, Yilmaz B, Langoi D, Amin S, Yang S, Deb S. Aromatase and endometriosis // Semin Reprod Med.-2004.-V.22(l)-P.45-50.

74. Bulun SE, Gurates B, Fang Z, Tamura M, Sebastian S, Zhou J, Amin S, Yang S. Mechanisms of excessive estrogen formation in endometriosis // J Reprod Immunol.- 2002.-V.55(l-2)-P.21-33.

75. Bulun SE, Imir G, Utsunomiya H, Thung S, Gurates B, Tamura M, Lin Z. Aromatase in endometriosis and uterine leiomyomata // J Steroid Biochem

76. Mol Biol.-2005.-V.95(l-5)-P.57-62.

77. Bulun SE, Yang S, Fang Z, Gurates B, Tamura M, Sebastian S. Estrogen production and metabolism in endometriosis // Ann N Y Acad Sci.-2002.-V.955-P.75-88.

78. Bulun SE, Yang S, Fang Z, Gurates B, Tamura M, Zhou J, Sebastian S. Role of aromatase in endometrial disease // J Steroid Biochem Mol Biol.-200.-V.79( 1 -5)-P. 19-25.

79. Bulun SE, Zeitoun K, Takayama K, Noble L, Michael D, Simpson E, Johns A, Putman M, Sasano H. Estrogen production in endometriosis and use of aromatase inhibitors to treat endometriosis // Endocr Relat Cancer.-199.-V.6(2)-P.293-301.

80. Bulun SE, Zeitoun KM, Kilic G. Expression of dioxin-related transactivating factors and target genes in human eutopic endometrial and endometriotic tissues //Am J Obstet Gynecol.- 2000.-V.182(4)-P.767-75.

81. Bulun SE, Zeitoun KM, Takayama K, Simpson E, Sasano H. Aromatase as a therapeutic target in endometriosis // Trends Endocrinol Metab.- 2000.- V.l l(l)-P.22-7.

82. Carriere V, Berthou F, Baird S, Belloc C, Beaune P, de Waziers I. Human cytochrome P450 2E1 (CYP2E1): from genotype to phenotype// Pharmacogenetics.-1996.-V.6(3)-P.203-11.

83. Cascorbi I, Brockmoller J, Mrozikiewicz PM, Muller A, Roots I.

84. Arylamine N-acetyltransferase activity in man // Drug Metab Rev.-1999.-V.31(2)-P.489-502.

85. Cerutti PA. Oxy-radicals and cancer // Lancet.-1994.-V. 24;344(8926)-P.862-3.

86. Cohen M. R. Laparoscopy in the diagnosis and management of endometriosis // J Reprod Med.- 1982.-V.27(5)-P.240-2.

87. Cramer DW, Wilson E, Stillman RJ, Berger MJ, Belisle S, Schiff I, Albrecht B, Gibson M, Stadel BV, Schoenbaum SC. The relation of endometriosis to menstrual characteristics, smoking, and exercise // JAMA.- 1986.-V.1 l;255(14)-P.1904-8.

88. Cunningham DS, Hansen KA, Coddington CC. Changes in T-cell regulation of responses to self antigens in women with pelvic endometriosis. Fertil Steril. 1992 Jul;58(l):l 14-9.

89. Cunningham DS, Hansen KA, Coddington CC. Changes in T-cell regulation of responses to self antigens in women with pelvic endometriosis// Fertil Steril.-1992.-V.58(l)-P.l 14-9.

90. Curtis P, Jackson A, Bernard A, Shaw RW. Pretreatment with gonadotrophin releasing hormone (GnRH) analogue prior to in vitro fertilisation for patients with endometriosis // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol.-1993.-V. 30;52(3)-P.211-6.

91. Daly AK. Molecular basis of polymorphic drug metabolism // J Mol Med.- 1995.-V.73(1 l)-P.539-53.

92. Deguchi M, Yoshida S, Kennedy S, Ohara N, Motoyama S, Maruo T. Lack of association between endometriosis and N-acetyl transferase 1 (NAT1) and 2 (NAT2) polymorphisms in a Japanese population // J Soc Gynecol Investig.-2005.- V.12(3)-P.208-13.

93. Dey A, Kessova IG, Cederbaum AI. Decreased protein and mRNA expression of ER stress proteins GRP78 and GRP94 in HepG2 cells over-expressing CYP2E1. Arch Biochem Biophys. 2006 Mar 15;447(2): 155-66.

94. DiZerega C.S., Barber D.L., Hodgen G.D. Endometriosis: Role of ovarian steroids ininitiation, maintenance, andsuppression // Fertil. Steril.-1980.-V.35.-P.521-525.

95. Ding Y, Chen ZF, Lin RY, Wang XF, Ding JB, Ai XZ, Wen H. Relationship between endometriosis and glutathione S-transferase Ml, T1 genes of the Uygurs and Hans in Xinjiang // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi.-2004.-V.39(2).-P. 101-4.

96. Dinulescu DM,Ince TA,Quade BJ, Shafer SA, Crowley D, Jacks T. Role of K-ras and Pten in the development of mouse models of endometriosis and endometrioid ovarian cancer // Nat. Med.-2005.-V.l 1(1).-P. 63-70.

97. Dmowski WP, Steele RW, Baker GF. Deficient cellular immunity in endometriosis // Am J Obstet Gynecol.- 1981 .-V. 15; 141 (4)-P.377-83.

98. Dmowski WP. Endometriosis and spontaneous abortion // Obstet Gynecol.- 1981 .-V.58(6)-P.763-4.

99. Ebert AD, Bartley J, David M, Schweppe KW. Aromatase inhibitors-theoretical concept and present experiences in the treatment of endometriosis//Zentralbl Gynakol.- 2003.-V.125(7-8)-P.247-51.

100. Evers JL, Dunselman GA, Van der Linden PJ. Markers for endometriosis // Baillieres Clin Obstet Gynaecol.-1993.-V.7(4)-P.715-39.

101. Evers JL. Ovarian stimulation and granulosa-cell tumour // Lancet.-1993.-V. 22;341(8856)-P. 1345-6.

102. Fang Z, Yang S, Gurates B, Tamura M, Simpson E, Evans D, Bulun SE. Genetic or enzymatic disruption of aromatase inhibits the growth of ectopic uterine tissue // J Clin Endocrinol Metab.-2002.-V.87(7)-P.3460-6.

103. Fogelman I. Gonadotropin-releasing hormone agonists and the skeleton // Fertil. Steril.-1992.-V. 57-P.715-724.

104. Foster WG, Agarwal SK. Environmental contaminants and dietary factors in endometriosis // AnnN Y Acad Sci.-2002.-V.955.-P.213-232.

105. Fryer A.A., Bianco A., Hepple M., Jones P.W., Strange R.C., Spiteri M.A. Polymorphism at the glutathione S-transferase. A new marker for bronchial hyperresponsiveness and asthma // Am. J. Respir. Crit. Care Med.2000.-V. 161.- P. 1437-1442.

106. Garcia-Velasco JA, Quea G. Medical treatment of endometriosis// Minerva Ginecol.-2005.-V.57(3)-P.249-55.

107. Garte S., Gaspari L., Alexandrie A. Metabolic gene polymorphism frequencies in control populations // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev.2001,-V.10.- P.1239 1248.

108. Georgiou I, Syrrou M, Bouba I, Dalkalitsis N, Paschopoulos M, Navrozoglou I, Lolis D. Association of estrogen receptor gene polymorphisms with endometriosis // Fertil Steril.- 1999.-V.72(1)-P.164-6.

109. Gerhard I, Becker T, Eggert-Kruse W, Klinga K, Runnebaum B. Thyroid and ovarian function in infertile women // Hum Reprod.-1991.-V.6(3)-P.338-45.

110. Gibbons A. Dioxin tied to endometriosis // Science.-1993.-P.262-2.

111. Guo SW. The association of endometriosis risk and genetic polymorphisms involving dioxin detoxification enzymes: a systematic review // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol.-2006.-v. 1; 124(2)-P. 134-43

112. Gurates B, Sebastian S, Yang S, Zhou J, Tamura M, Fang Z, Suzuki T, Sasano H, Bulun SE. WT1 and DAX-1 inhibit aromatase P450 expression in human endometrial and endometriotic stromal cells // J Clin Endocrinol Metab.- 2002.-V.87(9)-P.4369-77.

113. Harada T., Enatsu A., Mitsunari M., Nagano Y., Ito M., Tsudo T., Taniguchi F., Iwabe T., Tanikawa M, Terakawa N. Role of cytokines in progression of endometriosis // Gynecol Obstet Invest.-1999.-V.47(1 )-P.34-40.

114. Harada T., Yoshioka H., Yoshida S., Iwabe T., Onohara Y. Increased interleukin-6 levels in peritoneal fluid of infertile patients with active endometriosis //Am-J-Obstet-Gynecol.-1997.-V.l 76(3 )-P.593-597.

115. Hatagima A. Genetic polymorphisms and metabolism of endocrine disruptors in cancer susceptibility // Cad. Saude Publica. 2002. - V. 18.1. P. 357-377.

116. Hayashi S, Watanabe J, Kawajiri K. High susceptibility to lung cancer analyzed in terms of combined genotypes of P450IA1 and Mu-class glutathione S-transferase genes // Jpn J Cancer Res.-1992.-V.83(8)-P.866-70.

117. Hayes J.D., Pulford D.J. The glutathione S-transferase supergene family: regulation of GST and the contribution of the isoenzymes to cancer chemoprotection and drug resistance // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. -1995.-V. 30.-P. 445-600.

118. Healey CS, Dunning AM, Durocher F, Teare D, Pharoah PD, Luben RN, Easton DF, Ponder BA. Polymorphisms in the human aromatase cytochrome P450 gene (CYP19) and breast cancer risk // Carcinogenesis.-2000.-V.21(2)-P. 189-93.

119. Hein DW, Doll MA, Fretland AJ, Leff MA, Webb SJ, Xiao GH, Devanaboyina US, Nangju NA, Feng Y. Molecular genetics and epidemiology of the NAT1 and NAT2 acetylation polymorphisms // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.-2000.-V.9(l)-P.29-42.

120. Hein DW. N-Acetyltransferase genetics and their role in predisposition to aromatic and heterocyclic amine-induced carcinogenesis // Toxicol Lett.-2000.-V.15;l 12-113-P.349-56.

121. Hengstler JG, Arand M, Herrero ME, Oesch F. Polymorphisms of N-acetyltransferases, glutathione S-transferases, microsomal epoxide hydrolase and sulfotransferases: influence on cancer susceptibility // Recent Results Cancer Res.-1998.-V. 154.-P.47-85.

122. Hoang CD, Boettcher AK, Jessurun J, Pambuccian SE, Bullard KM. An unusual rectosigmoid mass: endometrioid adenocarcinoma arising in colonic endometriosis: case report and literature review // Am Surg.-2005.1. V.71(8).-P.694-7.

123. Hsieh YY, Chang CC, Tsai FJ, Hsu CM, Lin CC, Tsai CH. Angiotensin I-eonverting enzyme ACE 2350*G and ACE-240*T-related genotypes and alleles are associated with higher susceptibility to endometriosis//Mol Hum Reprod.-2005.-V.l l(l)-P.l 1-4.

124. Hsieh YY, Chang CC, Tsai FJ, Lin CC, Chen JM, Tsai CH. Glutathione S-transferase Ml*null genotype but not myeloperoxidase promoter G-463A polymorphism is associated with higher susceptibility to endometriosis // Mol Hum Reprod.-2004.-V.10(10)-P.713-7.

125. Hsieh YY, Chang CC, Tsai FJ, Lin CC, Tsai CH. Cytochrome P450cl7alpha 5'-untranslated region *T/C polymorphism in endometriosis// J Genet.-2004.-V.83(2)-P. 189-92.

126. Hsieh YY, Chang CC, Tsai FJ, Lin CC, Tsai CH. Estrogen receptor alpha dinucleotide repeat and cytochrome P450cl7alpha gene polymorphisms are associated with susceptibility to endometriosis // Fertil Steril.-2005.-V.83(3)-P.567-72.

127. Hsieh YY, Chang CC, Tsai FJ, Peng CT, Yeh LS, Lin CC. Polymorphism for transforming growth factor beta 1-509 (TGF-B1-509): association with endometriosis // Biochem Genet.-2005.-V.43(5-6)-P.203-10.

128. Hur SE, Lee JY, Moon HS, Chung HW. Polymorphisms of the genes encoding the GSTM1, GSTT1 and GSTP1 in Korean women: no association with endometriosis //Mol Hum Reprod.- 2005.-V.1 l(l)-P.15-9.

129. Joos L., Pare P., Sanford A. Genetic risk factors for chronic obstructive pulmonary disease // Swiss med. Wkly. -2002,- V.132.-P.27-37.

130. Juo SH, Wang TN, Lee JN, Wu MT, Long CY, Tsai EM. CYP17, CYP1A1 and COMT polymorphisms and the risk of adenomyosis and endometriosis in Taiwanese women // Hum Reprod.-2006.-V.21(6)-P.1498-1502.

131. Juronen E., Tasa G., Uuskula M., Pooga M., Mikelsaar A.V. Purification, characterization and tissue distribution of human class theta glutathione S-transferase Tl-1 // Biochem. Mol. Biol. Int. 1996. - V. 39. -P. 21-29.

132. Kennedy S, Bennett S, Weeks DE. Affected sib-pair analysis in endometriosis // Hum Reprod Update.-2001 .-V.7(4)-P.411-8.

133. Kennedy S. The genetics of endometriosis // J Reprod Med.-1998.-V.43(3)-P.263-8.

134. Kennedy S.H, Mardon H.J.,Barlow D.H. Familial endometriosis // J.Assist.Reprod.Genet.-1995.-№72.-P.32-34.

135. Kikuchi Y, Ishikawa N, Hirata J, Imaizumi E, Sasa H, Nagata I. Changes of peripheral blood lymphocyte subsets before and after operation of patients with endometriosis // Acta Obstet Gynecol Scand.-1993.-V.72(3)-P.157-61.

136. King RJ, Townsend PT, Siddle N, Whitehead MI, Taylor RW.

137. Regulation of estrogen and progesterone receptor levels in epithelium and stroma from pre- and postmenopausal endometria // J Steroid Biochem.-1982.-V.16(l)-P.21-9.

138. Kitawaki J, Kado N, Ishihara H, Koshiba H, Kitaoka Y, Honjo H. Endometriosis: the pathophysiology as an estrogen-dependent disease // J Steroid Biochem Mol Biol.- 2002.-V.83(l-5)-P.149-55.

139. Knobil E, Plant TM, Wildt L, Belchetz PE, Marshall G. Control of the rhesus monkey menstrual cycle: permissive role of hypothalamic gonadotropin-releasing hormone// Science.-1980.-V.21 ;207(4437)-P. 1371-3.

140. Knobil E. The neuroendocrine control of the menstrual cycle // Recent Prog Horm Res.-1980.-V.36.-P.53-88.

141. Koninchx P.R. Is mild endometriosis a disease? Is mild endometriosis a condition occurring intermittently in all women? // Hum.Reprod.-1994.-№ 9.-P.2202-2205.

142. Koninckx P. D., Ide P., Vandenbroucke W., Brosens I. A. New aspects of the pathophysiology of endometryosis and associated infertility // J. Reprod. Med. 1989.- Vol. 24. - P. 257-260.

143. Koninckx PR, Braet P, Kennedy SH, Barlow DH. Dioxin pollution and endometriosis in Belgium // Hum Reprod.- 1994.-V.9(6)-P.1001-2.

144. Koninckx PR, Kennedy SH, Barlow DH. Pathogenesis of endometriosis: the role of peritoneal fluid // Gynecol Obstet Invest.- 1999.-V.47(l).-P.23-33

145. Kristensen VN, Andersen TI, Lindblom A, Erikstein B, Magnus P, Borresen-Dale AL.A rare CYP19 (aromatase) variant may increase the risk of breast cancer // Pharmacogenetics.-1998.-V.8(l)-P.43-8.

146. Laasanen J, Romppanen EL, Hiltunen M, Helisalmi S, Mannermaa A,

147. Punnonen K, Heinonen S. Two exonic single nucleotide polymorphisms in the microsomal epoxide hydrolase gene are jointly associated with preeclampsia // Eur J Hum Genet.-2002.-V.10(9)-P.569-73.

148. Laisney V., Gross M.S., Frezal J. Human genes for glutation-S-transferases // Hum. Genet. 1984. - V. 68. - P.221-227.

149. Lamb K, Nichols TR. Endometriosis: a comparison of associated disease histories // Am J Prev Med.-1986.-V.2(6)-P.324-9.

150. Lau J., Ioannidis J.P., Schmid C.H. Quantitative synthesis in systematic reviews // Ann. Intern. Med. 1997. - V. 127.- №9. - P. 820-826.

151. Laurenzana EM, Hassett C, Omiecinski CJ. Post-transcriptional regulation of human microsomal epoxide hydrolase // Pharmacogenetics.-1998.-V.8(2)-P. 157-67.

152. Lewis DF, Dickins M, Eddershaw PJ, Tarbit MH, Goldfarb PS. Cytochrome P450 substrate specificities, substrate structural templates and enzyme active site geometries // Drug Metabol Drug Interact.-1999.-V. 15(1 )-P. 1-49.

153. Lewis DF. Homology modelling of human cytochromes P450 involved in xenobiotic metabolism and rationalization of substrate selectivity // Exp Toxicol Pathol.-1999.-V.51(4-5)-P.369-74.

154. Macnee W, Rahman I. Oxidants and antioxidants as therapeutic targets in chronic obstructive pulmonary disease // Am J Respir Crit Care Med.-1999.-V.160-P.58-65.

155. Martucci CP, Fishman J. P450 enzymes of estrogen metabolism // Pharmacol Ther.-1993.- V.57(2-3)-P.237-57

156. McLaren J. Vascular endothelial growth factor and endometriotic angiogenesis // Hum Reprod Update.- 2000.-V. 6(l)-P.45-55.

157. Medical Statistics at a Glance // Blackwell Science.- 2000.- 140 p.

158. Meinhardt U, Mullis PE. The aromatase cytochrome P-450 and its clinical impact // Horm Res.- 2002.-v.57(5-6)-P. 145-52.

159. Meinhardt U, Mullis PE. The essential role of the aromatase/p450arom// Semin Reprod Med.- 2002.-V.20(3)-P.277-84.

160. Melioli G., Semino C., Semino A., Venturini P.L., Ragni N. Recombinant interleukin-2 corrects in vitro the immunological defect of endometriosis//Am J Reprod Immunol.- 1993.-V.30(4)-P.218-227.

161. Meyer DJ, Coles B, Pemble SE, Gilmore KS, Fraser GM, Ketterer B. Theta, a new class of glutathione transferases purified from rat and man// Biochem J.-1991 .-V. 1 ;274(2)-P.409-14.

162. Meyer UA, Zanger UM. Molecular mechanisms of genetic polymorphisms of drug metabolism //Annu Rev Pharmacol Toxicol.- 1997.-V.37.-P.269-96.

163. Morizane M, Yoshida S, Nakago S, Hamana S, Maruo T, Kennedy S. No association of endometriosis with glutathione S-transferase Ml and T1null mutations in a Japanese population // J Soc Gynecol Investig.-2004.-V.ll(2)-P. 118-21.

164. Murphy A.A. Clinical aspects of endometriosis // Ann N Y Acad Sci.-2002.-V.955-P.1-10.

165. Murphy A. A., Santanam N.,Morales A.J., Parthasarathy S. Lysophosphatidyl choline, a chemotactic factor for monocytes/ T-lymphocytes is elevated in endometriosis //J.Clin. Endocrin.a. Matab.-l 998.-V.83(6).-P.2110-3.

166. Nakago S, Hadfield RM, Zondervan KT, Mardon H, Manek S, Weeks DE, Barlow D, Kennedy S. Association between endometriosis and N-acetyl transferase 2 polymorphisms in a UK population // Mol Hum Reprod.-2001 .-V.7(l 1)-P. 1079-83.

167. Nebert D.W. Polymorphisms in drug metabolising enzymes :what is their clinical relevance and why do they exist?// A.J.Hum.Genet.-1997.-V.60.-P.265-271.

168. Nebert D.W., Carvan M.J. 3rd. Ecogenetics: from ecology to health // Toxicol. Ind. Health. 1997. - V. 13. - P. 163-192.

169. Noble LS, Takayama K, Zeitoun KM, Putman JM, Johns DA, Hinshelwood MM, Agarwal VR, Zhao Y, Carr BR, Bulun SE. Prostaglandin E2 stimulates aromatase expression in endometriosis-derived stromal cells // J Clin Endocrinol Metab.-1997.-V82(2)-P.600-6.

170. Kato S. Modulation of oestrogen receptor signalling by association with the activated dioxin receptor // Nature.-2003.-V.29;423 (6939)-P.545-50.

171. Oosterlynck D. J., Lacquet F. A., Waer M., Koninckx P. R. Lymphokine-activated killer activity in women with endometriosis // Gynecol. Obstet. Invest.- 1994.-V.37(3)-P. 185-190

172. Oosterlynck D.J., Meuleman C., Waer M., Koninckx P.R., Vandeputte M. Immunosuppressive activity of peritoneal fluid in women with endometriosis // Obstetr. Gynecol. 1993.-№82.-P.206-212.

173. Peng DX, He YL, Qiu LW, Yang F, Lin JM. Association between gene mutation of cytochrome P450 1A1 in exon 7 A4889G locus and susceptibility to endometriosis // Zhonghua Yi Xue Yi Chuan Xue Za Zhi.-2003.-V.20(4)-P.284-6.

174. Peng DX, He YL, Qiu LW, Yang F, Lin JM. Association between glutathione S-transferase Ml gene deletion and genetic susceptibility to endometriosis // Di Yi Jun Yi Da Xue Xue Bao.- 2003.-V.23(5)-P.458-462.

175. Rahman I., MacNee W. Lung glutation and oxidative stress: implications in cigarette smoke-induced airway disease // Am. J. Physiol. -1999.-V. 277.-P. 1067-1088.

176. Report W. Levels of PCBs, PCDDs, and PCDFs in breast milk: Result of WHO-coordinated interlaboratory, quality-control studies and analytical field studies // World Health Organzation, Environmental Series.- 1989.

177. Rier SE, Martin DC, Bowman RE, Becker JL. Immunoresponsiveness in endometriosis: implications of estrogenic toxicants // Environ Health Perspect.-1995.-V. 103(1 7)-P. 151-6.

178. Rier SE, Turner WE, Martin DC, Morris R, Lucier GW, Clark GC.

179. Serum levels of TCDD and dioxin-like chemicals in Rhesus monkeys chronically exposed to dioxin: correlation of increased serum PCB levels with endometriosis // Toxicol Sci.- 2001 .-V.59( 1 )-P. 147-59.

180. Rier SE, Yeaman GR. Immune aspects of endometriosis: relevance of the uterine mucosal immune system // Semin Reprod Endocrinol.- 1997.-V.15(3)-V.209-20.

181. Rier SE. The potential role of exposure to environmental toxicants in the pathophysiology of endometriosis.// Ann N Y Acad Sci. 2002 Mar;955:201-12; discussion 230-2, 396-406.

182. Rier S, Foster WG. Environmental dioxins and endometriosis // Semin Reprod Med.- 2003V.21 (2)-P. 145-54.

183. Roberts-Thomson IC, Ryan P, Khoo KK, Hart WJ, McMichael A J, Butler RN Diet, acetylator phenotype, and risk of colorectal neoplasia// Lancet.-1996.-V. 18; 347(9012)-P. 1372-4.

184. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular Cloning. A laboratory manual.-2-ed. // Cold Spring Harbor Laboratory Press-1989.-1885 p.

185. Schwartz JL, Antoniades DZ, Zhao S. Molecular and biochemical reprogramming of oncogenesis through the activity of prooxidants and antioxidants // Ann N Y Acad Sci.-1993.-V.28(686)-P.262-279.

186. Schweppe KW. Endometriosis market research: an overview of findings in Europe and the United States // Drugs Today (Barc).-2005.-V.41( A)-P.l-4.

187. Schweppe KW. Guidelines for the use of GnRH-analogues in the treatment of endometriosis // Zentralbl Gynakol.-2005.- V.127(5)-P.308-13.

188. Schweppe KW. Significance of progestins in treatment of endometriosis //Zentralbl Gynakol.-1997.-V.l 19(1 2)-P.64-9.

189. Seidegard J, Dahlstrom K, Kullberg A. Effect of grapefruit juice on urinary 6 beta-hydroxycortisol/cortisol excretion // Clin Exp Pharmacol Physiol.-1998.-v.25 (5)-P.379-81.

190. Simpson JL, Bischoff FZ, Kamat A, Buster JE, Carson SA. Genetics of endometriosis. //Obstet Gynecol Clin North Am.- 2003.-V.30 (l)-P.21-40.

191. Shaw R.F. Endometriosis // Current Under.& Manag. Qr. Brit.- 1995.-P.302.

192. Smith G, Stanley LA, Sim E, Strange RC, Wolf CR. Metabolic polymorphisms and cancer susceptibility // Cancer Surv.-1995.-V.25.-P.27-65.

193. Sun Y. Free radicals, antioxidant enzymes, and carcinogenesis // Free Radic Biol Med.-1990.-V.8(6)-P.583-99.

194. Tempfer CB, Schneeberger C, Huber JC. Applications of polymorphisms and pharmacogenomics in obstetrics and gynecology // Pharmacogenomics.-2004.-V.5 (l)-P.57-65.

195. Waller KG, Lindsay P, Curtis P, Shaw RW. The prevalence of endometriosis in women with infertile partners // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol.-1993.-V.48(2)-P. 135-9.

196. Waller KG, Shaw RW. Gonadotropin-releasing hormone analogues for the treatment of endometriosis: long-term follow-up // Fertil Steril.-1993.-V.59(3)-P.511-5.

197. Wieser F, Schneeberger C, Tong D, Tempfer C, Huber JC, Wenzl R. PROGINS receptor gene polymorphism is associated with endometriosis // Fertil Steril.-2002.-V.77(2)-P.309-12.

198. Wong NA, Rae F, Bathgate A, Smith CA, Harrison DJ.

199. Polymorphisms of the gene for microsomal epoxide hydrolase and susceptibility to alcoholic liver disease and hepatocellular carcinoma in a Caucasian population //Toxicol Lett.-2000.-V.10;l 15(1 )-P. 17-22.

200. Yager J.D., Liehr J.G. Molecular mechanisms of estrogen carcinogenesis //Annu Rev Pharmacol Toxicol.-1996.-V.36-P.203-32.

201. Yang M, Coles BF, Delongchamp R, Lang NP, Kadlubar FF. Effects of the ADH3, CYP2E1, and GSTP1 genetic polymorphisms on their expressions in Caucasian lung tissue // Lung Cancer.-2002.-V.38(l)-P. 15-21.

202. Zeitoun KM, Bulun SE. Aromatase: a key molecule in the pathophysiology of endometriosis and a therapeutic target // Fertil Steril.-1999.- V.72(6)-P.961-9.

203. Zondervan KT, Cardon LR, Kennedy SH What makes a good case-control study? Design issues for complex traits such as endometriosis // Hum Reprod.-2002.-V. 17(6)-P. 1415-23

204. Zondervan KT, Cardon LR, Kennedy SH. The genetic basis of endometriosis//Curr Opin Obstet Gynecol. 2001 Jun;13(3):309-14.

205. Zondervan KT, Weeks DE, Colman R, Cardon LR, Hadfield R, Schleffler J, Trainor AG, Coe CL, Kemnitz JW, Kennedy SH. Familial aggregation of endometriosis in a large pedigree of rhesus macaques // Hum Reprod.-2004.-V.19(2)-P.448-55.

206. Zusterzeel PL, Peters WH, Visser W, Hermsen KJ, Roelofs HM, Steegers EA. A polymorphism in the gene for microsomal epoxide hydrolase is associated with pre-eclampsia //J Med Genet.-2001.-V.38 (4)-P.234-7.

Информация о работе

Швед, Наталья Юрьевна
кандидата биологических наук
Санкт-Петербург, 2006
ВАК 03.00.15

Диссертация

Роль генов "внешней среды" в патогенезе и лечении эндометриоза - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы