Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

РИЗОМАНИЯ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ (РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ И ВРЕДОНОСНОСТЬ В КИРГИЗСКОЙ ССР, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПАТОГЕНА)

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "РИЗОМАНИЯ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ (РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ И ВРЕДОНОСНОСТЬ В КИРГИЗСКОЙ ССР, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПАТОГЕНА)"

/»-28Є03

ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИ Я ИНСТИТУТ ЗАЩИТЫ РАСТЕНИИ

На правах рукописи

РУЖЕНЦОВА Евгения Алексеевна

УДК взя.вз: 632.38 /575.2/

РИЗОМАНИЯ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ (распространенность и вредоносность в Киргизской ССР, идентификация патогена)

06.01.lt — Защита растений от вредителей н болезней

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ленинград — Пушкин

1987

- /-¿¿ґ ¿с.

Работа выполнена в лаборатории вирусных и микоплазменных болезней Всесоюзного ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательского института защиты растений.

Научный руководитель — доктор биологических наук, профессор Ю. И. Власов.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Ю. И, Помазков; кандидат биологических наук Е. С. Лантас.

Ведущая организация — НПО «Сахарная свекла».

Защита диссертации состоятся * » ¿•"¿"¿Я 1987 г,

часов на заседании Специализированного совета, шифр Д—020.01.01 при Всесоюзном научно-исследовательском институте защиты растений по адресу:" 188620, . г, Ленинград—Пущкин-6, шоссе Подбельского, д. 3, ВИЗР.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всесоюзного орде* на Трудового Красного Знамени научно-исследовательского института защиты растений.

Автореферат разослан « М » 1937 г.

Ученый секретарь Специализированного совета ВИЗР

Г. А. Наседкина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В КиргизскоА ССР сахарная свекла возде лывается при искусственном орошении в благоприятных для нее природно-климатических условиях и до 1930 года на ее долю приходилось около 3/4 всей товарной продукции республики. В I9QO году посевные площади под эту культуру были сокращены вдвое. В результате катастрофического падения урожайности и резкого снижения сахаристости вопрос о дальнейшем выращивании фабричной свеклы в Ейской долине Киргизки остается открытым.Снижение урожая я сахаристости корнеплодов было обусловлено развитием комплекса болезней культуры: корнеед* корневые гнили, гетерогероз и новое заболевание, получившее название "кочковатость корней"* Этиология этого заболевания долгое время: .оставалась невыясненной; проводились попыткиобъяснения природы с точки зрения микологии к фитонематологми. •

Заболевание с аналогичными симптомами известно под названием "ризомания" во многих странах мира - Италик, Франции, ФРГ, Югославии/ Японии и других^ Доказано* что возбудителем является-вирус некротического пожелтения жилок свеклы /ВНПЖС/ - beet necrotic yellow veln virua /BNYW/ ■ » примыкающий к , группе тобамовирусов. Некоторые исследователя /shtrako¿ Вгакт. ke , I984¡Brunt, Ehikata, 19Э6/ считают целесообразным отнести ВНПЖС наряду с другими палочковидными вирусами, передаваемыми грибами, в.новую группу фуровирусов.В природе-инфекция распространяется посредством Гриба Polymyxa betae, Xeskln. •

Цель я задачи исследования. 11еяы> настоящей работы являлось: выяснить этиологию заболевания сахарной свеклы "мочко-ватость корней*, В задачи наших исследований входило:.

- изучение распространения-и вредоносности заболевания в Чуйской долине Киргизской ССР; . ;

А-2&Ф9

KmpUtBftH Піучаи Шлх.тгиа ИосїоескоЯ ордена Леоим (шкікмісім, мчмія

ни. Ц. А. Ікн8раг*п

- выявление патогена;

- идентификация возбудителя о использованием современных методов диагностики.

. Научная нопия^а, рраудштатов ¡исследований. Впервые коккре-тезирована этиология "мочковатости корней" и идентифицирован возбудитель - вирус некротического пожелтения жилок свеклы- " /ВШС/. Ери атом определена распространенность и вредоносность заболевания в ЧуНекой долине Кяргиэской ССР. Изучены основные, свойства вируса. Проверены новые методические разработки /предложено несколько модификаций методов повышения инфекционнооти инокулгма для заражения тест-растений, изучены растения-индикаторы для быстрой и точной диагностики вируса/.

Практическая пестреть. Установлена'.'этиология и высокая вредоносность. заболевания сахарной свеклы, получившего эгш^итотий- ' ное развитие в Киргизской ССР; выделен и научен его возбудитель, ранее неизвестный в СССР. Перечисленное открывает перспективы для разработки практических мероприятий. *

Атпюбаиия пис^ртугационноИ работы. Результаты диссертационной работы доложены на Всесоюзной совещании по сахарной свекле /Алма-Ата, 1984/, на курсах повышения квалификации Ленинградского .сельскохозяйственного института /Ленинград-Пушкин, 1985/.

Публикадня пеаулугптов иссдрпований. По результатам исследований опубликовано четыре печатных работы.

йб^ем и структура диссертации. Диссертация изложена на 104 страницах машинописного текста и состоит, из введения, пяти глав, обсуждения результатов, выводов и методических рекомендаций. Список использованной литературы включает 116 названий, в том числе 91 иностранных. Работа иллюстрирована 9 таблицами и 17 рисунками.

KPATJÎOE СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Во введении показана актуальность проблемы и ее научная новизна.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРУ -

Цриведен анализ зарубежной литературыпо воцроедм распространения и вредоносности ризоканик. Подробно проанализированы результаты о публикованных исследований по характеристике возбудителя ризоманин — вируса некротического пожелтения жилок свеклы, /ШЕьС/ я описания его перейосчика - гриба Polyœyxa betae. Изложены условия, сгособствушие развитии. заболевания я основные направления борьбы с ризоманией.

Глава П. КАТШ1АЛЫ К МЕТОДЫ

Экспериментальные исследования по теме диссертационной работы проводила в лаборатории вирусных к микошгазменных болезней ВЙЗР в течение I9C2-I985 гг.

С келью выявления распространения ризомании ежегодно во время уборки сахарноЗ свеклы проводили обследования свеклосеших хозяйств Чуйской долины Киргизской ССР согласно "Методическим указаниям по выявление, учету в прогнозу развития болезней сахарной свеклы и сигнализации сроков борьбы с Ш1ми"/Н,, 1977/. Для выявления возможности развития симптомов заболевания на ш- ' стьях проводили обследования в'период вегетации /фаза развиткя 4-5 листьев/ согласно "Методическим указаниям по диагностике вирусные болезней сельскохозяйственных культур" /и,, 1973/. 1

Вредоносность заболевания определяли_сравнением веса корне-плодре и содержания ■ сахара 50 здоровых и 50 больнкх растений. Цифровой материал математически обработал методом дисперсионного анализа /Б.А.Доспехов, 1973/. . .

Для идентификации возбудителя использовал» комплекс приемов; установление ивфекштонНости, метод растений-индикаторов, электронная микроскопия, определение физических свойств вируса, серологический анализ, анатомо-цитологический метод и люминесцентный анализ. __ • '

Установление ин^екционности заболевания проводили в условиях теплицы методом полива растений сахарной свеклы /стадия 2-3 лис-стьев/ дод корень соком зараженных корнеплодов.

S качестве тест-растений использовала: Chenopodium qutooa,

Wllld, Ch.aaaraoticolor Costa et; Деуп, Ch.murale Beta vulgaris' t. сорта Киргизская.односемянная,25 и Казахский гибрид Б, Beta maorooarpa Gusa*, В(pareunia, В.orlentalla, Splnacea. olerácea L. сорт Garant, Tetragonía expaasa Uurr*, .Goapitrena . _globosa L., Nlootlana glutlnoaa L., M.glauca L», H.ruatica L., N.dcbneyl L.

На растения-индькаторн ЫШКС Ctui веренсен механически иноку-лидией сока из корнеплодов сахарной свеклы о типичными признаками ризомании», ' '

' Для повышения концентрации вирионов в инокулиге проводили предварительную очистку вируса иа сока кортеплодов больной сахарной свеклы. Процедура очистки включала измельчение коряеплодов на размельчителе тканей PT-I при ШЩ об/мин с добавлением 0,2М боратного буфера píl 9,0 в соотношении 2;1/вес/объе^. Гомогенат фильтровала через 2 слоя марля, затем добавляли хлороформ в соотношении 1:1 и центрифугировали в течение 20 минут : " при 6000 об/мин. Сувернатент отделяли от хлороформе и центрифугировали на ультрацеятрк^уге 2 часа при 30ООО об/мии. Получен-■ ный после ультрацектрМуги&овашш плотшЛ! осадок ресуспендкро-вали в буферном растворе» используемой для - «aparenta растений. ' Соотношение объема получаемого полуо чищенного. препарата, испо- -льэуемого в качестве внокулима, и веса исходного - материала корнеплодов составляло 1:70-100« ._.'.■■■.'

• Для повышения инерционности иискулюма /ери заражении из корнеплодов/ исьольгоьали фосфатный буфер по Серенсену 0,06М рН 7,0 с добавлением 1$ меркаптоэтанола или 0 ,0£М боратный буфер рН 9,0 Ори применении вышеуказанного фосфатного úyfepa с меркаптоотало-лоч хистья после инокуляции немедленно обмывали водопроводной водой» Ори использовании в качестве инокулша сока иа зараженных ШШС растенвЯ-ищшнаторов растврали листья в стерильной ступке или с одним из вышеуказанных буферов или с 0,01М фосфатккм буфером рН 7,2 е добавлением 0,5,* тиосульфата*натww. Перед заражением растений-индикаторов к гомогенату или'частично очищенному препарату с буферным раствором добавляли активированный уголь* Инокулюм наносили.ватньм тампоном на поверхность листьев растений-индикаторов, опудреншх карборундом., 2'г:

• Препараты для электронной микроскопии готовили'методом погружения во Брандесу / Brándea, 1957/ в негативного контрастнрова-

€ , ' ■ : ■■ ■ -У .. '

mw/HUhchtpra, Hills , 1965/ в модификации Г.М. Рва вязки ко Я ■ Г.П.Поляковой /1968/, В качестве исходного материала использовали корнеплоды больных растений ИЛИ зараженные растения-индикаторы.

, Научение физических свойств вируса проводили по методикам, одобренным специалистами стран-членов СЭВ /Власов, 1363/.

Аятнсыворотка к БНШС была льбезно предоставлена доктором Ч.Путцем /Франция/ я Э.ПочаЙ /Венгрия/. Серодиагностика ВНПС была проведена преимущественно методом двойной диффузии в геле» Кроме того,был использовал метод иммуносорбентной электронной низфоскошш /ИС&М/ до Деррику /berrifc , 1973/.

Изучение изменения анатомического строения корнеплода при поражения ризоманией проводили просмотром поперечных срезов корней больной и здоровой свеклы в микроскопе 1£Ш-6.* • . Для проведения люминесцентного анализа срезы корнеплодов и водные вытяжки аз зараженных в здоровых корнеплодов просматривала в ультрафиолетовом свете. .

РЕЗУЛЬТАТУ-ИССЛЕДОВАНИЙ РАСПРОСТРАНЕНИЕ И ВРЕДОНОСНОСТЬ РИЗОМАНИИ CAJAPKOÜ : СВЕКЛЫ В ЧУЙСКОЙ ДОЛИНЕ КИРГИЗСКОД ССР

Посевы сахарной свеклы в Киргизии сосредоточены в Чуйсхой ' долине» Районы свеклосеяния отличаются континентальностьв: высока«« температурами и резко вкражечным недостатком атмосферных осадков в вегетационный период. Возделывание сахарной свеклы здесь возможно только в условиях орошения. Продолжительный вегетационный период, oösume тепла х света позволяют при постоянном обеспечении влагой и питанием получать ежегодно высокие урожаи с довольно высокой сахаристостью,' Однако природно-климатические условия Чуйской долины, столь благоприятные для возделывания сахарной свеклы, являются также благоприятными для развития х распространения риэомании. Обилие тепла, частые го- • ливы ввиду отсутствия атмосферных осадков, наличие близкого залегания грунтовых вод способствуют повышению активности переноо-чхка возбудителя риэошянн - гриба Polyoyxa betae.

Чтобы установить ареал заболевания на территории Киргизии, •в течение ряда лет обследовали посевы этой культуры в колхозах к'совхоз ах республики. .

Проведенные исследования показали, что ризомаяяя широко р&с-

прострелена на фабричной сахарное свекле. Практически наш на било обнаружено ни одного похя, свободного от этого заболевания. В хозяйствах на отдельных полях наблюдали различную картину развития болезни. Большее количество пораженных корнеплодов иахсдаали на тех полях, на которых вмект место нарушения агротехники. Развитие ризомашш на поле зачастую лоспт очаговый характер. Очаги приурочены в основном к пониженный местам, где застаивается, влага во вреде полива. Это объясняется созданием здесь благоприятных условий для развития переносчика вируса.

Четкой зависимости развития заболевания на поле от предшественника нами не выявлено. '

Установлено, что наиболее точно определить процент пораженных растений можно в период уборки корнеплодов свеклы /до их отбраковки/.

Вредоносность риаомании выражается в резком снижении урожая н падении содержания сахара. Ори сравнении веса корнеплода здорового я пораженного растения,отмечено, что в среднем разница в весе составляет 207,2 г. Здесь следует заметить, что эта гофра усредненная. Вес пораженного корнеплода колебался в широких пределах /от 612 до 172 г/ в зависимости от степени развития основного симптома заболевания — "бороды*. Иногда встречали на поле растения, практически непригодные для переработки.

Содержание сахара в корнях, пораженных риэоманией, в средней составляло 9,0^. Среди учетных растений мы находили корнеплоды, сахаристость которых достигала лишь 7,3-7,51. Содержание сахара у внешне здоровых растения в год проведения анализов было также низким и в среднем составляло 11,1;?.

_ Рнзомания, имешая широкое распространение на полях фабричной сахарной свеклы, представляет серьезную опасность и для безвысадочной семенной сахарной свеклы, возделыванием которой Киргизская ССР занимается в последние годы. В перспективе /к 1990 году/ по Киргизской ССР планируется довести поставку в общесоюзный фонд семян сахарной свеклы до 15 тыс.тонн /Основные направления экономического и социального развития СССР на 1966-1990 годы и. на период до 2000 года/. Поэтому разработанные нами методы диагностики ВНПКС должны найти применение"« в системе семеноводства сахарной свеклы. Их использование позволит оценить степень распространенности ризоыанхи на семенной безвысадочной сахарной свекле и будет способствовать разработке

профилактических мероприятий.

КДШХШИКАШ1Я ВИРУСА НЕКРОТИЧЕСКОГО ПОЖЕЛТЕНИЯ ВШОК СВЕКЛЬ! - ВОЗЬУЛИТЕДЯ РКЗСИАНШ

Основные и постоянные признаки поражения риэоманией разваваг-ются'на корнях сахарной свеклы. Первые симптомы были отмечены на растениях в фазе 2-3 листьев. На корне образуется большое количество вторичных корешков. Наиболее яркие симптомы видны на развитых корввплодах /в фазе развития 10-15 листьев/ и особенно во время уборки. Наряду с ярко выраженное задержкой роста корнеплода, по всей окружности нижней его части появляется отчетливая "бородатость", вызванная ненормально сильным образованием боковых корней. Эта "бородатость" охватывала иногда половину стертая корнеплода или даже весь корень. Мы встречали растения, иммзщце хорошо развитый корень, "борода" которого залипала лишь незначительную часть. Вероятно, вто зависело от времени поражения растения. Отмечена положительная корреляция между развитием "бороды" и степенью потемнения сосудистых пучков главного корня. .

В условиях Киргизской ССР на свекловичных полях, сильно зараженных ризоманией, мы не отмечали каких-либо характерных симптомов на листьях, специфичных именно для данного заболевания. Экологические условия республики /жаркий климат/ не способствуют проявлению ризомании на листьях. Об ?том свидетельствуют * я данные в зарубежной литературе /Кгелнег, .1381/. Не: исключено, что развитие признаков болезни на листьях зависит также от штамма вируса я сортовых особенностей .сахарной свеклы.

В тепличных условиях нам удалось экспериментально воспроизвести симптомы ризокании при заражении сахарной свеклы инфекционным материалом, содержащим БНПЖС. ■

Визуальные наблюдения за реакцией испытуемых растений-индж-каторов на В1Ш2С показали следующие результаты. Растения сем. Solanacea /Nicotiana glutinosa, N.glauca, Н.rustica, H.debneji/ на реагировали на инокуляцию BHH3LC. Локальные поражения развивались на Chanopodiun quinoа, Ch.emarantlcolor, Tetragonía expansa, Beta vulgaris сорт Киргизская односемянная 25, Казахский Гибрид 5, Beta macrocarpa, B.perennis, В.orientails. Развитие системной инфекции отмечено У Chenopodlum murale, Spinасеа ole?ao«a сорт Garant.

Ниже приводам описание развития симптомов на различных видах тест-растенвВ /в динамике развития патогенеза/«

ChenopodtuB quia о а - через 7-Ю дней на инокудировшных листьях появляются диффузные пятна диаметром I мм, через 13 дней пятна достигает размера 3-5 мы, развивеются некрозы диаметром X мм, через 20 дней хлоротачные пятна расплываются вдоль жилок, некрозы увеличиваются в диаметр« до 3 мм, через 30 дней некрозы разрастаются до 10-12 им, вся шшеткнка листа приобретает желтув окраску. Изолят Р-ВЗ вызывал также пожелтение жилок инокулироваяных листьев*.

сь. amar ant lo оior — через 6 дней на инокулированных листьях образуются четкие светло-зеленые многочисленные,пятка диаыет-ром около I им, через 13.дней пятна приобретают ярко-желтый цвет, диаметр их увеличивается до 2 мм, отдельные пятна некро-, тизируются, диаметр некрозов 0,5-1 мм.

Тоtragón1а ежрапза - через 7-13 дней на инокулированных листьях возникают светло-зеленые, переходящие в ярко-желтые пятна диаметром 3 мм, через 30 дней пятна увеличиваются в диаметре до 6 мм,.на их фоне позднее образуются некрозы диаметром 1-й им.

Beta vulgaris сорт Киргизская односемянная 25 - на 8 день на ияокулировшших листьях появляется светло-зеленые точечные, пятна, которые через 2-3 дня становятся хлоротичннш и достигают диаметра 2 мм* Через 17 дней пятна в центре начинают кекро-тизироваться, приобретая ореол и растекаясь по жилхам* . Beta vulgaris - Казахский гибрид 5 — на 10 день на ив окулированных листьях образуются хлоротичные пятна диаметром 2 мм, ' х 23 дню приобретают ореол, сливаются* растекаясь вдоль жилок, и некротизируются, диаыатр некрозов от 2 до 5 мм*

В. тпа о roo arpa - на 17 день на в араженкых листьях возникают желтые пятна до 2 мм диаметром, на 23 день у пятен диаметром 3 юс появляется ореол,

S.perennis - на 8-Ю день иа семядольных листьях появляются сливающиеся друг с другой некрозы с пергаментным центром, на ннокулнрованвых настоящих листьях зарегистрированы светло-желтые многочисленные пятна диаметром I мм,

• В*oriental1а - на 8-10 день на ннокулированных листьях образуются многочисленные светло-желтые пятна, . t -

Chenopodlum múrale - на инокулированных листьях на 10-13

день появляется единичные светло-зеленые расплывчатые или точечные пятяа диаметром 1-2 ми, через 27-30 дней отмечали первые признака системной реакции в виде пузырчатых вздутий на молодых листьях поветов из пазух зараженных листьев* На ияокулированных листьях пятна растекаются вдоль жилок до 20 мм длила, возникает векроэы до Ю мм в диаметре. Системная реакция проявляется постепенно на всех побегахі молодые листья искривляется, на них образуются вздутия, некрозы, иногда мозаичная расцветка, часть листовой пластинки'желтеет и отмирает.

Splawsea о1вгайва сорт Garant — через 18 дней на ИНОКУЛИ-рованных листьях появляется светло-зеленый дубовидный рисунок, через 25 дней найлидали признаки системной реакции: на листьях средних ярусов вдоль центральной жилки образуется светло-зеленый расплывчатый узор. На 35-38 день системная реакция распространяется на листья верхних яру сов » на хоторых развивается желтая мозаика.

Qonphrena gioboaa — является латентным носителем вируса. В редких случаях системная реакция замечена в.виде слабой деформации молодых листочков /иэолят Р-83/. Изолят Р—84 не вызывал появления ни местной, ни системной реакции*

Данными электронной микроскопии подтверждена ответственность ШПХС sa проявление системной или местной реакций растений-индикаторов.

ВНП1С, выделенный нами из растений сахарной свеклы из Шуйской долины Киргизской ССР,' представлен частицами палочковидной формы различной длины. Наиболее часто встречаются вириоиы размерами 75,JÛ0-I25,. 250-275 и 37&-40Û нм. Распределение частиц по длинам; отражено на рисунке I.

Точка температурной инактивации ШПХС лежит в интервале 7072°С, предельное разведение составляет Ю-3. ...

Серологическая реакция с французской и венгерской антисыворотками к ЕЩШС показала, что изолят из Киргизии этого вируса реагирует только со специфическими антисыворотками. Серологические реакции отсутствовали с контрольными препаратами, приготовленными из здоровых растений.

Изучение гистопатологии пораженных корнеплодов показало отличия в строении проводящих пучков колец прироста. Проводящие пучки пораженных корней'на поперечных срезах расположены значительно ближе друг te другу. Такие пучки, как правило, состоят из

10-15 крупны* сосудов со спиральными вторичными утолшенвяиж стенок и большого числа мелких сосудов, плотно прилегающих друг в другу, образуя 9ону ксилемы, состоящую В ОСНОВНОМ КЗ трахеальных элементов,- ■ —

а

(V <а

115 -

100

п.

75

5СЕ -

25

У_

зоа

100 200 Рис.1. • Частицу ВНГШС

Длина частиц, нм

Тати образом, при заболевании ризоыаяией у -сахарной свеклы . мы наблюдали усиленную пролиферацию проводящих элементов ксилемы и связанное с steh повышенное содержание одревесневевшис тканей в корнеплодах,

Под люминесцентным микроскопом на поперечных и продольных срезах корней обнаруживается усиленное свечение одревесневев- . пшх элементов, о которых ш речь выше, со сравнению со здоровыми образцами.

Сод .ультрафиолетовым излучением вытяжки из зараженных корнеплодов обладали голубым св&ченпем, в то время как вытяжки"вз здоровых растений такого свечения не имели. •

. Для сравнения полученных нами данных о описанием вируса некротического пожелтения жилок свехлы, имеющем место в зарубежной литературе, мы составили сводную таблицу I. Из данных таблицы видно, что выделенный нами из корнеплодов сахарной свеклы, пораженных "мочковатоетыо корней", возбудитель следует идентифицировать как вирус некротического пожелтения жалок свеклы. Следовательно, "мочковатость корней" идентично .заболеванию "ризо-мандл" сахарной свеклы, широко распространенному за рубежом. По своим биологическим п физическим свойствам наш иэолят ВНШС ближе стоит к Европейским изолятам и изоляту из Японии, чем изоляту из США. Имеющиеся отличия лежат в пределах различий между нэолятами, выделенными в разных странах.

' ■ ОЕСКЕКЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

В итоге исследований, выполненных нами в лаборатории вирусных в микоплаэменных болезней ШЗР, впервые в СССР иденткфиот-рован вирус некротического пожелтения жалок свеклы - возбуди- : таль рмзоманди. видимо, заболевание в Киргизии было известно много лет, однако симптомы "кочковатости корней" не связывали , до наших исследований с вирусом. Были лишь предположения, что болезнь, возможно, сходна с риэоманкей. '

Для четкой идентификации возбудителя потребовалось провести комплекс диагностических исследований. Особенно следует обратить внимание на данные электронной микроскопии. Они совпадали с материалами зарубежных авторов о морфологии ШЯШЗ. Кроме того, електронноминроскопи че скяе исследования и изучение реакции на растениях-индикаторах позволили констатировать в анализируемом материале отсутствие сметанной инфекции. Мы обращаем внимание

* - Таблица I

Идентификация вируса некротического пожелтения . жилок свеклы /ВНПЖС/

Изоляты Изолят ■ Изолят Яэолята Показатели из из иэ из

3ранний ■ США Япония Киргизии

Реакция растений-индикаторов Chenopodlum quinoa

Chenopodlun a вагantic olor -

Chenopodiom nurale

Beta

vulgaris , Beta

maoroearpa

Tetragonla erp&naa

Spinas ea oleraeea ■ '

Морфология частиц, нм

Температура J инактивации, С

Конечное разведение

LiLLH, ChlSp LtDlfM £ill»DieLe

LtLLH LlLLH

LllLN LtLLH

LiLLN

LtLLS LiLIJt

LtLLS

LlLLH

1)Ш

LtLLH

LlLLH

LUIB SiPiaLe

LtLLH StCixlM

LlLLH

LtLLH Styll

SHr^' IkM' J

370-390

75 . 70-72 65-70 . lor3 Ю-З-Ю"5 кг3

LtLLH L)VC

LlLLH

LlLLH StLeDie, Let), jLe

LlLLH

LlLLH

LtLLH

LtLLH SiyM

75, 100-125,.

250-275,

375-400

70-72 I0-3

Условные обозначения; сы* - хлоротичный, ОН - диффузный, ' Ыв _ деформация, Ь- местная реакция, ы. - местные повреждения,

1в - лист, М - мозаика, в- некроз, Б- системная реакция, бр-пятнистость, ТС- посветление жилок, у - желтый

тэтот ф&кггоодлчгопо некоторым зарубежным данным,из растения сахарной свеклы, пораженных риэоманкей, выделялся вирус некроза табака, вирус кустистой карликовости томата или ВТЦ.В на» тем материале данные патогены не обнаружены.'полученные нами , данные об особенностях симптоматологичесяого проявления заболевания н& сахарной свекле в Киргизии,' представляемые методики приготовления препаратов для электронной микроскопии и использования наиболее аффективных растенвй-индикаторов будут способствовать более эффективному установлению ареала рваомашш в различныхэколого-географических зонах страны.

Хотелось бы обратить внимание на факт экспериментального воовроизведения симптомов ризомания в тепличных условиях при заражении сахарной свеклы инфекционным материалом, содержащим ' вирус некротического пожелтения жилок свеклы.

. При изучении реакции растеннй-индикаторов на инокуляцию вируса - возбудителя ризжанш мы получили данные, сходные в пе--лом, с литературными.-Некоторые различия в реакции разных изо-лятов ВНШС на отдельных видах тест-растений, возможно, объясняется наличием у патогена нескольких штаммов. Вопрос о пггам-.мах БЕЩХС чрезвычайно вакен для селекционеров, занимающихся выведением сортов сахарной свеклы, устойчивых к рязомаюш. Он требует целенаправленных исследований о анализом большого числа изолятов вируса. Мы надеемся, что наш предварительные дан- : ныв о возможности распространения вируса в виде различных, штаммов будут продолжены в дальнейшейспециалыт выполненной работе в этом направлении. Проведение такой работы необходимо во всех районах страны,, где можег'быть'обн&ружено поражение свеяли ризоманией*-. ' . *;.*'.

В наших исследованиях при идентификации вируса мы применяли я серологический метод с использованием антисывороток, подученных лабораторией^вирускых и микоплазмеюпас болезней ШЗР из Франции и Венгрии".. ■

В нестоящее время на основе изучения свойств вируса некротического-" пожелтения жилок свеклы, подбора соответствующих рас-теяий-нако'питалей на очереди - получение алтисыворотки собственного производства. Эта работа проводится в ВИЗРе, :

ВЫВОДЫ '

1. Заболевание сахарной свеклы "мочковатость корней", pao-: прострапенное в Киргизии, имеет вирусную этиологию и идентифицировано как ризомания, описанное в ряде страя Европейского кон- -тинента, Японии, Китае, СМ.

2. Обследованиями 5375 га посадок сахарной свеклы в Киргизской ССР в 1982-84 гг. установлено, что риэомання распространена во всех районах возделывания этой культуры. Число пораженных . растений колебалось m годам и районам от $,46 до 27,0и в среднем за 3 года составило 16,¡££.

3. Вредоносность ризоманин выражается в потерях урожая корнеплодов в среднем до 124,32 к/га и снижении содержания сахара в хорнях до 9/С.

' 4. Вогбулитель ризоманвя идентифицирован комплексом методов /электронной микроскопией, растений-индикаторов,, серологией/ с вирусом некротического пожелтения жилок свеклы - ШПЯС /beet necrotic jellow vein virus /, описанным в Японии^ Италии» Франции, США.

5. Вирионы ВНШС имеют палочковидную форму различной длины. Наиболее часто встречаются частицы размерами 75 км, 100-125 нм, 250-275 нм, 37&-400 нм.

6. Вгашс поражает растения, главным образом сем. chenopodla-ceae /Beta vulgaris L*( В.пшсгсюахра Guaa . , В. pareim Is,В. oí leutalle, Cheno;>txii.unqulnoa Chenopodluu cunar aatloolor Costa et Heyn, Chenopodium murale L,, Splnaaea oleracea/, сем. Alzoa--eeae /Tetragonía вхрапэа/ , сем, Amaraathao eae /Ctomphreaa clobesa/.

7. Растения сем. Chenopodiaeeae , за исключением Ch.múralo л зр1юааеи oler&oea, реагируют локальными поражениями в виде светло-желтых пятен, нередко с последующей их векротизацией. а. Установлено, что сь.murale системно поражается НШС вз \ Киргизии, в то время как взоляты ШПЖС из Франция, 'США*;-Японии вызывают только местные поражения на этом индикаторе.

В условиях Киргизии из корнеплодов сахарной свеклы, пораженных ризомаиией, выделено 2 изояята ВНШС /Р-83, Р-84/» обличающихся некоторыми биологическими свойствами, в частности, ответной реакцией Goaphrena globosa. Изолят Р-83 вызывает на ~

этом тест-растении либо латентное носительство вируса, либо слабую системную реакцию в виде деформации молодых листочков. Изолят Р-84 не заражает Gotnphrana globosa.

10. Киргизский изолят Р-83 КЩЖС имеет температуру икактива- . ции 70-72°С, предельное разведение Ю~3.

' .II. Ыетодом двойной ди$4узии в теле показана четкая серологическая реакция между Киргизским изолят ом ШЕЕС и антссыворот-ками х ВНШС из Франции и ВНР,

ШГЮдаЧБСКИЕ. РШШЗДАЦИИ

I. При установлении ареала ризоманий в посевах сахарной свеклы следует проводить учеты, главным образом, по пораженнос-ти корнеплодов во время копки сахарной свеклы до отбраковки. • Для учета поражевностп корнеплодов отбираются по 20 корнеплодов из 20 различных мест убранной партии свеклы.

Кроме того, рекомендуем проводить обследование в период.вегетации, в фазу развития 4-5 листьев, с целью выявления .возможности развития симптомов заболевания на листьях сахарной свеклы в различных эколого-географических гонах страны.'В случае 'выявления на листьях симптомов, характерных для ризоманки, рекомендуется выкопка единичных наиболее типичных образцов для обследования корнеплодов.

2* Для диагностики ВНПЖС рекомендуем использовать наиболее эффективные растения-индикаторы Ciwnopoülum qulnoa, Ch,amaran-tico lor, Ch,múrale, Tetragónla ехр&пєа.

3. С целью повышения концентрации вирионов к.ин$екционности инокулюыа рекомендуем предварительную очистку вируса из сока корнеплодов больной сахарной свеклы и ресуспеддирование втого препарата или в фоофатном буфере по Серенсеку О,Ü6M рН 7,0 с добавлением 1%меркаптоэтанола или в 0,0211 боратном буфере рН 9,0.

Бо материалам диссертации опубликованы следующие работы

I. Власов Ю.М., Альховская Т.Ф., Саысоиова Л.Н., руженцо-sa Е.А. Вирусные болезни.сахарной свеклы в Киргизии. Журнал "Сельское хозяйство Киргизии", 1983, й4, с;24.

2. Руженцова Е.А. О природе, заболевания сахарной свеклы:в КлргизЕи - мочковатость корней* Тезисы докладов УШ Всесоюзного совещания "Теория и фактика использования иммунитета сельскохозяйственных культур к вирусннм болезням", Вильнво, 1984, с«190-191.

: 3* Власов Ю.И., Ларина Э.И», Высоцкая Р.И,, Руженцова Б.Л., Власов Д.О. Методические указания во диагностике вирусного заболевания сахарной свеклы — ризомания. Ленннград-Цушкин» 1985, 14 стр. ' .

. 4* Власов О.К., Ларина Э.й., Высоцкая Р.И., Руженцова Е.А. Идентификация вируса н е крот кче с когопожод тения жилок свеклы -- возбудителя рязомшти алл.ШЗР, 1985, *62, с.38-43.