Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Разработка методов индукции андрогенеза у различных видов капусты

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Домблидес, Елена Алексеевна

ВВЕДЕНИЕ

I ОБЗОР ЖТЕРАТУРЫ

1.1. Использование гаплоидов в селекции-~

1.2. Генетическое улучшение растений на основе метода культуры пыльников и микроспор

1.3. Культура пыльников и микроспор

1.4. Роль соматических тканей пыльника

1.5. Пыльцевой диморфизм

1.6. Спорофитные пути развития в культуре in vitro

1.7. Эмбриогенные стадии микроспор

1.8. Факторы влияющие на эмбриогенез

1.8.1. Генетический фактор

1.8.2. Средовые факторы

1.8.2.1. Условия вырашцвайш раз13енМ'- !доноров

1.8.2.2. Температурная обработка

1.8.2.3. Центрифугирование

1.8.2.4. Химические реагенты

1.8.2.5. Состав питательной среды

П МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Ш ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1. Развитие пыльников капусты in vivo и в культуре in vitro

3.1.1. Строение стенки пыльника брокколи in vivo

3.1.2. Развитие мужского гаметофита капусты in vivo

3.1.3. Изменения тканей стенки пыльника в культуре in vitro

3.1.4. Процесс микроспорогенеза при культивировании in vitro

3.2. Влияние питательной среды

3.3. Влияние генотипа донорного растения

3.4. Влияние предобработок соцветий на микроспорогенез

3.4.1. Влияние температурной предобработки соцветий на микроспорогенез -.

3.4.2. Предварительная оценка эффективности использования регуляторов роста для индукции андрогенеза

3.4.3. Изменение тканей пыльника под воздействием температуры и предобработки БАП

3.5. Культура микроспор

3.6. Действие центрифугирования на индукцию спорофитного развития микроспор капусты

3.7. Спорофитные пути развития микроспор и пыльцы в культуре in vitro— -.„

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Разработка методов индукции андрогенеза у различных видов капусты"

Во второй половине 20 века в селекции овощных культур сформировалось и заняло главенствующее положение новое направление, которое отличается тем, что в результате селекционного процесса выводят не сорта в обьпшом понимании, а Р] гибриды, отличаюпщеся гетерозисом по урожайности и высокой выравненности растений по срокам созревания, размерам и качеству используемых органов, что значительно повышает товарность выращиваемого продукта и обеспечивает возможность интенсивного ведения овощеводства с эффективным применением машин, как в процесс выращивания, так и в уборке урожая, затраты на которую при использовании ручного труда достигают 70% от общих затрат (Крючков, 1990).

Преимущество селекции на гетерозис состоит также в возможности при наличии большого числа перспективных родительских линий быстро реагировать на нужды народного хозяйства внедрением в производство р1 гибридов требуемого качества. Недостатком этого направления является значительная сложность селекционного процесса по выведению родительских линий и невозможность размножения Р] гибридов, что, однако, дает возможность эффективно охранять авторские права селекционера.

Селекционный процесс по выведению р1 гибридов резко отличается от классического селекционного процесса и практически сводится к выведению родительских линий, скрещиванием которых получают Р] гибридные семена и передают их производству. Непрерывность производства р1 гибридных семян обеспечивается размножением родительских линий.

Основным требованием, предъявляемым к родительским линиям, является то, что они должны быть гомозиготны по большинству генов. При селекции родительских линий капусты, как и других перекрестноопыляемых растений, гомозиготность достигается применением инбридинга во всех поколениях. У капусты, как и у большинства представителей семейства Капустных, широко распространено явление самонесовместимости спорофитная система самонесовместимости), что делает процесс производства константных линий достаточно трудоемким, малопроизводительным и занимающим довольно длительное время. Так, например, для получения гомозиготных линий белокочанной капусты методом инбридинга требуется не менее 10-12 лет.

Крючковым A.B. была предложена схема выведения четырехлинейных гибридов капусты на основе самонесовместимости (Крючков, 1990), но и она является достаточно трудоемкой и предполагает очень высокую стоимость семян исходных линий, при том, что она не дает возможности получить полностью гомозиготные растения.

Еще одним перспективным методом, теоретически позволяющим значительно ускорить селекционный процесс, является метод производства гаплоидных растений с помощью культуры пыльников и микроспор — метод андрогенеза in vitro. «Удваивая» гаплоиды можно быстро получить гомозиготные растения, которые используются при селекции новых сортов культурных растений с заданными свойствами, что особенно важно при работе с озимыми, двулетними и многолетними культурами (Baenziger et al., 1984).

К преимуществам этого метода относятся:

1) быстрое по времени получение гаплоидных растений, которые служат исходным материалом для получения гомозиготных линий;

2) позволяет получить растения гомозиготные практически по всем генам;

В литературе имеется несколько сообщений об индукции пыльцевого эмбриогенеза в культуре пыльников и микроспор капусты. Однако, полученные результаты не позволяют широко использовать этот метод в селекционной практике, так как высокоэффективных технологий получения гаплоидных растений в культуре пьшьников и микроспор капусты еще не создано.

Цель и задачи исследований

Целью данной работы являлась разработка эффективных методов индукции андрогенеза у различных видов капусты. Для достижения поставленной цели решались следуюпще задачи:

1. Изучить процессы, происходшцие с соматическими и репродуктивными тканями при развитии пыльников капусты in vivo и в культуре in vitro;

2. Определить взаимосвязь между морфологическими показателями бутона и процессом микроспорогенеза у различных видов капусты для оптимального отбора необходимых эксплантов в культуру;

3. Исследовать влияние различных индуцирующих факторов на интенсивность пьшьцевого эмбриогенеза в культуре in vitro и разработать элементы технологии индукции андрогенеза у различных видов капусты;

4. Определить влияние факторов генотипа и питательной среды на индукцию образования морфогенной пыльцы;

5. Изучить цитоэмбрио логические основы прямого эмбриогенеза в культуре in vitro; пути и особенности развития пыльцы и микроспор в культуре.

6. Сравнить два способа культивирования по уровню индукции образования андрогенных структур: культура пыльников и культура микроспор.

Научная новизна

В работе выделены факторы, эффективно влияющие на индукцию андрогенеза, исследованы цитоэмбриологические особенности культуры пыльников и микроспор. Установлено, что в культуре пыльников наблюдается переход с гаметофитного на спорофитный путь развития через равный тип деления микроспоры, а в культуре микроспор преобладает второй путь развития за счет делений вегетативной клетки. Впервые показано, что в культуре пыльников преобладает соматический эмбриогенез из слабодифференцированных клеток эндотеция и паренхимных клеток связника. Процесс индукции андрогенеза в культуре микроспор является более эффективным по отношению к культуре изолированных пыльников и может

Превышать его почти в 10 раз.

Практическая значимость

Среди различных видов капусты выявлены генотипы, обладающие способностью к андрогенезу. Показано, что линейный размер бутона может быть использован для отбора необходимых эксплантов нужными стадиями развития мужского гаметофита у различных видов капусты. Для подбора эффективных индупдрующих андрогенез факторов можно рекомендовать использовать их предварительную оценку по обработке соцветий in vivo. Цитологически подтверждено, что при культивировании пыльников капусты происходит соматический эмбриогенез, в связи с чем метод культуры микроспор является более надежным. Для культуры микроспор наиболее продуктивной оказалось использование среды NLN.

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Селекция и семеноводство", Домблидес, Елена Алексеевна

ВЫВОДЫ

1. процесс индукции андрогенеза в культуре in vitro генетически детерминирован. Среди 45 исследованных генотипов способность к индукции андрогенеза выявлена у 6 генотипов брокколи (Тонус, Аркадия Pi, Лазер Fi, Emerald Fi, Green Valiant, Бр-21), 2 генотипов цветной капусты (ЦВ-1, ЦВ-4), 2 генотипов белокочанной капусты (К-124-0, К-221-9) и у китайской капусты сорта Ласточка. Вьшвлены большие различия по андрогенной способности между индивидуальными растениями одного сорта.

2. На период оптимальной стадии развития мужского гаметофита для индукции андрогенеза, соматические ткани слабодифференцированы. При культивировании таких пыльников возможно образование соматических эмбриоидов из слабодифференцированных клеток эндотеция и паренхимных клеток связника.

3. Установлено, что в культуре пыльников капусты наблюдается переход с гаметофитного пути на спорофитный через равный тип деления микроспор, а в культуре микроспор преобладает второй путь развития, за счет деления вегетативной клетки.

4. Высокоэффективный андрогенез у генотипов, способных к андрогенному развитию лимитирован стадией развития мужского гаметофита.

5. Между стадиями развития мужского гаметофита и линейными размерами бутона наблюдалась высокая корреляция у всех изученных видов капусты ( г от 0,85 до 0,94). Использование этого показателя позволяет упростить отбор эксплантов капусты с оптимальной стадией развития мужского гаметофита.

6. Оптимальными для индукции андрогенеза в культуре in vitro будут бутоны: у брокколи размером от 4,4 до 4,8мм; у цветной капусты размером от 4,0 до 4,5мм; у белокочанной капусты от 5,0 до 6,0мм; у китайской капусты от 2,5 до 2,8мм.

7. Показано, что предварительная оценка эффективности воздействия повьппенных температур, регуляторов роста на соцветия капусты in vivo позволяет ускорить процесс подбора оптимальных условий культивирования пыльников.

8. Процесс индукции андрогенеза в культуре микроспор капусты является более эффективным по отношению к культуре изолированных пьшьников и может превышать его в 10 раз.

9. Использование питательной среды NLN для Бсультивирования микроспор является наиболее эффективным для индукции андрогенеза.

Заключение:

В результате нашей работы были изучены процессы происходяпще с соматическими и репродуктивными тканями при развитии Цыльников различных видов капусты как in vivo, так и в культуре in vitro. В своих исследованиях мы рассматривали пьшьник как целостную систему, где развитие всех тканей происходит опосредованно. Проанализировав процессы, происходяище при культивирований пьшьников, бьша показана зависимость их от этапа формирования пьшьников и от содержания регуляторов роста. Направление развития мужского гаметофита в культуре in vitro — мржроспорогенез, деградация или эмбриогенез — определялось стадией развития пьшъника. Было выявлено, что андрогенез у капусты in vitro осуществляется на основе «переключения» компетентных микроспор с гаметофигного на спорофитный путь развития. Установлено, что при андрогенезе в культуре пыльников капусты наблюдается образование эмбриоидов за счет деления микроспор на две равных клетки. В культуре микроспор наблюдается и преобладает второй путь развития, когда формирование эмбриоида начинается за счет деления вегетативной клетки. Это два основных пути спорофитного развития микроспор капусты, которые были цитологически нами выявлены при иззЛчении процесса индукции андрогенеза у различных видов капусты.

Морфологическое и цитологическое изучение развития бутонов у различных видов капусты и стадий развития мужского гаметофита позволили выявить морфологические показатели для отбора необходимых эксплантов в культуру in vitro. Так между стадиями развития мужского гаметофита и линейными размерами бутона наблюдалась высокая корреляция у всех изученных видов капусты ( г от 0,85 до 0,94). Полученные результаты позволяют нам предложить для использования такой показатель как размер бутона для первоначального отбора растительных эксплантов в культуру. Оптимальными для индукции андрогенеза в культуре in vitro среди изученных генотипов будут бутоны: у брокколи размером от 4,4 до 4,8мм; у цветной капусты размером от 4,0 до 4,5мм; у белокочанной капусты от 5,0 до 6,0 мм; у китайской капусты от 2,5 до 2,8мм. Бутоны этих размеров мы можем рекомендовать для введения в культуру для индукции андрогенного развития.

Поведение соматических тканей при культивировании также очень сильно зависело от физиологического состояния пыльника. Цитологический анализ срезов пыльников показал, что на период оптимальной стадии развития мужского гаметофита для индукции андрогенеза, соматические ткани слабодифференцированы, и при культивировании таких пыльников возможно образование соматических эмбриоидов из слабодифференцированных клеток эндотеция и паренхимных клеток связника. Более того, результаты наших исследований привели нас к заключению, что соматические ткани пыльника ингибируют дальнейшее развитие образуюпщхся при культивировании андрогенных структур, в связи с чем использование метода культуры микроспор является более надежным и перспективным.

Процесс индукции андрогенеза в культуре in vitro генетически детерминирован. Среди исследованных генотипов способность к индукции андрогенеза вьмвлена у шести генотипов броккош! (Тонус, Аркадия Fi, Лазер Fi, Emerald Fi, Green Valiant, Бр-21), у двух генотипов цветной капусты (ЦВ-1, ЦВ-4), у двух генотипов белокочанной капусты (К-124-0, К-221-9) и у китайской капусты сорта Ласточка. Кроме этого, были выявлены существенные различия по андрогенной способности между индивидуальными растениями одного сорта.

В нашей работе мы попытались изучить влияние разнообразных индуцируюпщх факторов (индукционные питательные среды, температурные обработки, влияние регуляторов роста, влияние центрифугирования, способа культивирования) на процесс андрогенного развития. Проведенная математическая обработка полученных результатов позволила нам дать статистическую оценку изучаемых явлений. Изучение действия различных обработок соцветий in vivo привело нас к заключению, что использование предобработок соцветий in vivo позволяет более дифференцировано подбирать для каждого индивидуального генотипа условия дж воздействия на культивируемые in vitro пьшьники.

Процесс индукции андрогенеза в культуре микроспор капусты является более эффективным по отношению к культуре изолированных пьшьников и может превышать его в 10 раз. Именно в культуре микроспор нам удалось вызвать наибольшую индукцию спорофитного развития - до 57% индуцированных морфогенных структур. Это очень высокий показатель, особенно если учесть что в одном пьшьнике капусты содержится до 59.000 микроспор. Причем важную роль при культивировании изолированных микроспор оказывает используемая питательная среда. Из четырех испытанных сред для всех генотипов брокколи наиболее эффективной для индукции андрогенеза в культуре микроспор оказалась среда NLN.

Обобщая результаты экспериментальных данных еще раз отметим, что при культивировании пыльников и микроспор происходят сложные и разнообразные морфогенетические процессы. Индукция эмбриогенеза, наблюдаемая при культивировании пьшьников капусты на оптимальных для андрогенеза стадиях развития, показывает компетентность репродуктивных клеток капусты к андрогенному эмбриогенезу. Однако формирование гаплоидных растений является сложным, не однофазным процессом, требуюпщм различных условий для осуществления каждой последовательной стадии. При этом в условиях in vitro проявляются такие закономерности, как многовариантность, дискретность, этапность в протекании процессов морфогенеза, характернью и для растительных организмов in vivo.

Степень реализации андрогенетических потенций в культуре in vitro будет определяться связанными между собой генетическими особенностями объекта и комплексов микроусловий культивирования. На наш взгляд более перспективным в дальнейшем будет являться отработка и усовершенствование технологии получения андрогенных растений капусты в культуре микроспор.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ Разработанные методы индукции андрогенеза могут быть использованы при создании технологии ускоренного получения гомозиготных дигаплоидных линий для гетерозисных гибридов капусты.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата сельскохозяйственных наук, Домблидес, Елена Алексеевна, Москва

1. Алов И. А. Цитофизиология и патология митоза. // «Медицина» 1972.

2. Атанас А. Биотехнология в растениеводстве. // Новосибирск 1993241с.

3. Батьнина Т.Б. Хлебное зерно. // Ленинград 1987.

4. Батыгина Т.Б., Васильева В.А., Маметьева Т,Б. Проблемы морфогененза in vivo и in vitro. Эмбриоидогенез у покрытосеменных растений. // Бот.Журн -1978-63 №1.

5. Бутенко Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе. // МГУ, Москва 1999.

6. Данвелл Д.М. Культура гаплоидных клеток // Биотехнология растений:культура клеток /Пер. с анг. Под ред. Р.Г. Бутенко.// М. : Агропромиздат 1989 - С. 33-51.

7. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. // М.: Агропромиздат 1985351с.

8. Дьячук Т.П., Дьячук П.А. Культура пыльников злаков: современное состояние, проблемы, перспективы. // Сельскохозяйственная биотехнология -1989-№5-С. 3-9.

9. Ермаков И.П., Матвеева М.П. Диморфизм пыльцы и андрогенез в культуре пыльников. // Биология. №3 - 1986.

10. Ермишин A.n. Генетические основы селекции картофеля на гетерозис. //Минск, «Техналог1я» 1998.

11. Крючков A.B. Селекция Pi гибридов кочанной капусты на основе спорофитной самонесовместимости. Автореф. д. с/х. н. М. - 1990.

12. Маруненко И.М. Условия способствуюпще развитию микроспоры по спорофитному пути, и получение гаплоидов в культуре пыльников картофеля. // Автореф. дне. канд. биол. наук М. - 1986 - 22с.

13. Муромцев Г.С., Бутенко P.P., Тихоненко Т.П., Прокофьев HU. Основы сельскохозяйственной биотехнологии. // М. ВО «Агропромиздат»1990.

14. Никифоров Ю.Л., Феофилова Г.Ф. Анализ пыльцы видов и сортов рода Canna., Ботанический журнал., т. 67, 3, 1982.

15. Носова О.Н. Использование раствора 2,4-Д для повышения эффективности получения гаплоидов в культуре пыльников тритикале., Пущино, 1993.

16. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений. // «Колос» М.1970.17. плохинскийн.а. Биометрия (2-е изд.). //М.: Изд. МГУ -1970.

17. Поддубная Арнольди В.А. Цитоэмбриология покрытосеменных растений. //М. - 1976.

18. Размологов В.Н. Культура пыльников пиона in vitro. // Бюл. ГБС: вып. 125 1982.

19. Рахимбаев И.Р., Тивари Ж., Бишимбаева Н.К., Кушнаренко СВ., Азимова Е.Д. Биотехнология зерновых культур. // Алма-ата: Гылым 1992.

20. Резникова С.А. Цитология и физиология развивающегося пыльника. //М.: Наука- 1984-272с.

21. Семова Н.Ю. Разработка лабораторной технологии получения андрогенных растений белокочанной капусты с использованием культуры пыльников. //Автореф. дне. канд. б. и. М. - 1992.

22. Симонова О.Н. Особенности развития пыльцы ячменя в условиях почвенной засухи в период формирования микроспор. // Растительный и животный мир Дальнего Востока.: Хабаровск 1975.

23. Тюкавин Г.Б., Шмыкова Н.А. Эмбриогенез в культуре пыльников моркови in vitro. // Физиология растений -1999 Т. 46 - № 6 - С. 876-883.

24. Тырнов B.C., Завалишина А.Н. Возможности использования гаплоидов для решения селекционных биотехнологических и эвалюционных проблем. // Достижен. биотехнол. Агропром. комплексу: Тез. докл. - Черновцы -1991-Т. 1-е. 59.

25. Хохлов ce, Тырнов B.C., Гршшша E.B. и др. Гаплоидия и селекция. //М.- 1976.

26. Чеботарь A.A., Челак В.Р., Мошкович , Архипенко М.Г. Эмбриология зерновых, бобовых и овоще бахчевых возделываемых растений. // Кищинев, «Штиинца» - 1987 - 225с.

27. Чайлахян М.Х. Регуляция цветения выспщх растений. М. - 1988.

28. Abo El-Nffl М.М., Hildebrandt A.G. Origin of androgenetic callus and haploid Geranimn plants. // Can.J.Bot. 1973 - 51 - № 11 - P. 2107-2109.

29. Ancora G., Ramuly K.S., Devreux M. Ь vitro culture of anthers and stem intemodes of Lucopersicon peravianum: Nuclear DNA determination of callus and cytological anahsis of regenerated plants. // Ztschr. Pflanzenphysiologie 1977 - 82 -№5-P. 377-388.

30. Amison PG, Keller WA. A survey of the anther culture response of Brassica olerasea L. cultivars grovm under field conditions. Plant Breeding, 1990, 104,125-133.

31. Amison PG, Keller WA. The influence of various physical parameters on anther culture of broccoh (Brassica oleracea var. Itahca) // Plant Cell Tissue and Organ Culture 1990 - 20 - P.147-155.

32. Amison PG., Donaldson P., Jackson A., Semple C, KeUer W. Genotype — specific response of cultured broccoli (Brassica oleracea var. Italica) // Plant Cell Tissue and Organ Culture 1990 - 20 - P. 217-222.

33. Aslam P., Mac Donald M., Loudan P., Ingram D. Rapid cycling Brassica species: inbreeding and selection of anther culhire abuity and an assessment of its potential for microspore culture // Annals of Botany - 1990 - 66 - №3 - P. 331-339.

34. Baenziger PS, Kudirka DT,Schaeffer GW, Lazer MD. The significance of apubled haploid variations. 16*"^ Stadler Genetic Symp. On Gene Manipulation in Plant hnprovement, 1984, 384-414.

35. Bajaj Y.P.S. Induction of repeatet cell division in isolated pollen mother cells of Atropa belladonna. // Plant Sei Lett. 1974 - 3 - № 5 - P. 309- 312.

36. Benert M. W., Hughes W. G. Additional mitosis in whet pollen induced by etherel // Nature -1972 240 - P. 566-568.

37. Bidington N., Robinson H. Variations in response to high temperature treatments in anther culture of Brussels sprouts. ) // Plant Cell Tissue md Organ Culture 1990 - 22 - P. 48-54.

38. Binarova P, Straatman K, Hause B, Hause G. Nuclear DNA synthesis during the induction of embryogenesis in cultured microspores and pollen of Brassica napus L. // Theor Appl Genet 1993 - 87 - P. 9-16.

39. Binding H. Nuclear and cell division in isolated polen of Petunia hybrida in agar suspension cultures. Nature (London) - 1972 - 237 - P. 283-285.

40. Bishop CJ,Mc Gowan LI. The role ofthe vegetative nucleus in pollen tube growth and in the division of the generative nucleus in Tradescantia paludosa. // Amer.IBot- 1953- 40 P. 653-659.

41. Bouharmont J/ Cytology of microspores and calh after anther culture in Hordeum vulgare // Cariologia -1977 36 - P. 351-360.

42. Bourgin J.P., Nitsch J.P. Obtention de Nicotiana haploi'des a partir d etamines cultivees in vitro. // Ann., physiol. veg. 1967 - 9 - №4 - P. 377-382.

43. Bullock W.P. et al. Anther culture of wheat (Triticum aestivum) Pi and their recipracal crosses. Theor. and Appl. Genet. - 1982 - 62 - №2 -P. 155-159.

44. Cardy B. Production of anther-derived double haploids for breeding oilseed rape Brassica napus L. Ph. D. Thesis, University of Guelph, Guelph, Canada. - 1986.

45. Chaleff R.S. Isolation of agronomically useful mutants from plant cell cultiires. // Science 1983 - 219 - P. 676-682.

46. Chame D., Beversdorf W. Improving microspore culture as a rapseed breeding tool: the use of auxins and cytokinins in an induction medium. // Can. J. Bot. -1 988-P. 66.

47. Chauvin J.E., Yang Q., B. Le Jeune, Herve Y. Obtention d'embryons par culture d antheres chez le chou-fleur et le brocoli et evaluation des potentialites du materiel obtenu pour la creation varietale // Agronomie 1993 - 13 - P. 579-590.

48. Chen ce, Howarth M.J., Peterson R.L., Kasha K.J. Ultrastructure of androgenic microspores of barley durin the early stage of anther culture // Can. J. Genet. Cytol. 1984 - 26 -P. 475 - 483.

49. Chiang M.S., Chong C, Crete R., Prechette S. Anther culture - derived 2x-Plants in Cabbage (br. Oleracea L. Ssp. CAitata L.) // Cytologia - 1989 - 54 - P. 597-603.

50. Chi-Chang Chen, Hsin- Sheng Tsay, Chien-Rong Huang. Rice (Oryza sativa L.): factors affecting androgenesis. Biotechnology in agriculture and forestry. // Berlin.-1986-2AP. 123-138.

51. Chuong P.V., Beversdorf W.D. High frequency embryogenesis through isolated microspore culture in Brassica napus L. And Brassica carinata // Braun. Plant Sei.- 1985-39-P. 219-226.

52. Chuong P. V., Deslauriers C, Kott L. S., Beversdorf W.D. Effect of donor genotype and bud sampling on microspore culture of Brassica napus. Can. J. Bot. -1988-66-P. 1653-1657.

53. Clapham D. In vitro development of callus from the pollen LoHum and Hordeum. //Z/Pflanzenzucht. 1971 -65 - P. 285.

54. Clapham D. Haploid Hordeum plants from anthers in vifro. Ztschr. Pflanzenzycht. - 1973 - 69 - P. 142-155.

55. Conger B.V., Carabia J.V. Callus induction and plantlet regeneration in Orchid grass // Crop. Sei. 1978 -18 - P. 157-159.

56. Coumans care, Zlong Danni. Doubled haploid sunflowes (Hehanthus annwros) plant production by androgenesis: fact or artifact? Plant Cell Tissue and organ culture.- 1995 41 - P. 203-209.

57. Ousters J.B.M., Cordewener J.H.G., Dons H.J.M. Nollen Y., Van Lookeren Campagne M.M. Temperature control both gametophytic and sporophytic development in microspore cultures Brassica napus. // Plant Cell Rep. -1994 13 - P. 267-327.

58. Deimling S. Was kann die Zell und GewAebe der pflanzenzuchtung. //

59. Mais. -1994 22 - №1 - P. 10-15.

60. Deslauriers C, Powell A.D., Fuchs K., Pauls K.P. Flow cytometric characterisation and sorting of cultured Brassica napus microspores. // Biochim. Biophys. Acta 1991 - 1091 - P. 165-172.

61. Dore, Boulidard L & C. Prodactions de plantes androgenetiques de chou a choucroute par culture d antheres in vitro: comportement des llignees haploides doublees et leur interet comme d hubrides F i . // Agronomic.-1988- 8 P. 851-862.

62. DunweU J.M. Embriogenesis from pollen in vitro. Biotechnology in plant science. Relevance to agriculture in the eighties. // Acad. Press. 1985 - P. 44-49.

63. DunweU JM. Influence of genotype and environment on growth of barley embryos in vitro. //Ann. Bot. 1981 - 38 - P. 535-542.

64. Engvud K.C., Linde-Laursen J., Lundquist A. Anther culture of Datura innoxia: Flower bud stage and embryoid level of ploidy. // Hereditas 1972 - 72 - №2 -P. 331-332.

65. Fabijanski S.F., Altosaar I., Amison P.G. Heat shock response during anther culture of of broccoh (Brassica oleracea var. Italica) // Plant Cell Tissue and Organ Culture 1991 - 26 - P . 203-212.

66. Fan Z., Armstrong K. C., Keller W. A. Development of microspores in vivo and in vitro in Br. Napus L. // Protoplasma 1988 - 147 - P. 191 - 199.

67. Poroughi-Wehr B., Friedt W. Agronomic perfomance of androgenic doubled haploid lines of Hordeum vulgare. // In: Plant Tissue Cult., Tokio and lake Yamanaka, July 11-16, 1982 Tokyo - 1982 - P. 557-558.

68. Gamborg O.L., Miller R.A., Ojima L. Nutrient requirements of suspension cultures of soubean root cells. //Exp. Cell Res. 1968 - 5 0-P. 151-158.

69. Gaul et al. Pollen grain development of Hordeum Vulgare // Ztschr. Pflanzenzucht.- 1976 76 - № i. p. 77-80.

70. George L, Rao PS. In vifro induction of pollen embtyos and plantiets in Brassica juncea through anther culture. // Plant Sei Lett. 1982 - 26 - P. 111-116.

71. Gland A., Lichter R., Schweiger H.-G. Genetic and exogenous factorsaffecting embryogenesis in isolated microspores of Br. Napus L. // J. Plant Physiol -1988-132-P. 613-617.

72. Grant L, Beversdorf W.D>, Peterson R.L. A comparative light and electron microscope study of microspore and tAetal development in male fertile and cytoplasmic male sterile oilseed rape (Brassica napus). // Can. J. Bot. 1986 - 64 - P. 1055-1068.

73. Guha S, Maheshvari SC. In vitro production of embryos from anthers in Dature. // Nature 1964 - 204 - P. 497.

74. Guha S-, Maheshwari S.C. Cell Division and differentiation of embryos in the pollen grains of Datura in vitro. // Nature (London) 1966 - 212 - №5057 - P. 9798.

75. He D.-G., Quyang J.W. Callus and plantlet formation from cultured wheat anthere at different developmental stages // Plant Sci Lett. 1984 - 33 - №1 - P. 7178.

76. Heberle-Bors E. Genotypic control of pollen plant formation in Nicotiana tabacum L. // Theor. Appl. Genet. 1984 - 68 - P. 475-479.

77. Heberle-Bors E. In vitro haploid formation from pollen: a critical review.// Theor Appl. Genet, 1985, 71:361-374.

78. Heberle-Bors E. In vitro pollen embryogenesis in Nicotiana tabacum L. And its relation to pollen sterility, sex balance, and floral induction of the pollen donor plants. //Planta- 1982a- 156-P. 396-401.

79. Heberle-Bors E. On the time of embryogenie pollen grain induction during sexual development of Nicotiana tabacum L. Plants. // Planta 1982b -156 - P. 402406.

80. Heberle-Bors E. Induction of embryogenie pollen grains in situ and subsequent in vifro pollen embriogenesis in Nicotiana tabacum by treatment of the pollen donor plants with feminising agents. // Physiol. Plant. 1983 - 59 - P. 67-72.

81. Heberle-Bors E. Interaction of activated charcoal and iron chelates in anther cultures of Nicotiana and Afropa belladoima. // Z. Pflanzenphtsiol 1980 - 99 - P.339.347.

82. Heberle-Bors E., Odeobach W. In vitro pollen embryogenesis and cytoplasmic male sterility in Triticum aestivum. // Z. Pflanzenzucht. 1985 - 95 - P. 14-22.

83. Heberle-Bors E., Reinert J. Androgenesis in isolated pollen cultures of Nicotiana Tabacum: dependence upon pollen development. // Protoplasma 1979 -99-P. 237-245.

84. Heberle-Bors E., Reinert J. Isolated pollen cultures and pollen dimorphism. // Naturwissenschaften 1980 - 67 - P. 311 -312.

85. Henry Y., De Buyser J. Effect on the 18/lR translocation on anther culture ability in wheat (Triticum aestivum L.). // Plant Cell Reports 1985 - 4 - P. 307-310.

86. Hidaka T. Effects of sucrose concentration, ph of media, and culture temperature on anther culture of Citrus. // Jap.J.Breed. 1984 - 34 - P. 416-422.

87. Hlasnikova A. Androgenesis in vitro evaluted from the aspects of genetics. Ztschr. Pflanzenzycht. -1977 - 78 - №1 - P. 44-56.

88. Homer M., Mott R. L. The frequency of embryogenie pollen grains is not increased by in vifro anther culture in Nicotiana tabacum L. // Planta 1979 - 147 - P. 156-158.

89. Hu C, Huang S.C., Ho CP. et al. On the inductive condition of rice pollen plantlets in anther culture // Proc. Symp. Plant Tissue Culture, Peking: Science Press. -1978-P. 87-95.

90. Huang B., Bird S., Kemble R., Simmonds D., Keller W., Mici B. Effects of culture density, conditioned medium and feeder cultures on microspore embryogenesis in Br. Napus L. Cv. Topas // Plants Cell Reports 1990 - 8 - №10 - P. 594-597.

91. Iyer R.D., Raina S.K. The early ontogent of embryoids and callus frompollen and subsequent organogenesis in anther cultures of Datura metel and rice. // Planta- 1972 104 - № 2 - P . 146-156.

92. Johanson L., Anderson B., Ericson T. Lnprovenment of anther culture technique: activated charcoal bound in agar medium in combination with liquid medium and elevated CO 2 concertration. // Physiol. Plant. 1982 - 54 - P. 24-30.

93. Johansson L. Effects of activated charcoal in anther cultures. // Physiol. Plant.-1983-59-P. 397-403.

94. Keller WA , Armstrong KC. Embryogenesis and plant regeneration in Brassica napus anther culture. // Canad. J. Bot- 1977 55 - P. 1383-1388.

95. Keller WA, Armstrong KC. High Frequency production of microspore -derived plants from Brassica napus anther culture. // Z. Planzenzucht. 1978 - 80 - P. 100-108.

96. Keller WA. Anther culthure of Brassica. // Cell culture and somatic cell genetics of plants., vol. 1. Vasil Ik. (ed.). New York. Academic Press. 1984 - P. 302-310.

97. Keller WA., Armstrong KC Stimulation of embiyogenesis and haploid production in Br. Campestris anther culture by elevated temperature freatments // Theor. Appl. Genet. 1979 - 55 - P. 65 - 67.

98. Keller WA., Armstrong K C. Prodaction of anther derived dihaploid plants in autotetroploid marrowstem kale (Brassica oleracea var. asephala). // Can J Genet Cytol., 1981,23:259-265.

99. Keller WA., Armstrong KC. Prodaction of haploids via anther culture in Brassica olerasea var. Italica.// Euphytica.- 1983 32 - P. 151-159.

100. Keller WA., Rajhathy T., Lacarpa J. In vitro Production of plants from pollen in Brassica campestris. // Can. J. Genet. Cytol. 1975 - 17 - P. 655-666.

101. Kohlenbach H.W.Regulation embryogenesis in vifro. // Eds. Schutte H.R., GrossD. Regulation of Developmental processes in plants. Jena: Gustav Fischer. -1977-P. 236-251.

102. Kohlenbach H.W., Wernicke W. Investigation on the inhibitory effect ofagar and the fimction of active carbon in anther culture. // Z. Pflanzenphysiol. 1978 -86-P. 397-403.

103. Konar R.N. A haploid tissue from the polen of Ephedra foliata Boiss.// Phytomorphology 1963 - 13 - P. 170.

104. Kott L.S., Polsoni L., Beversdorf W.D. Cytological aspects of isolated microspore culture of Brassica napus. // Can. J. Bot. -1988 66 - P. 1653-1657.

105. Kuginuki Y., Nacamura K., Hida K L, Yosicawa H. Varietal differences in embryogenie and regenerative ability in microspore culture of Chinese cabbage (Br. Campestris spp. Pekinesis ) //Breeding Scince - 1997 - 47 - P. 341-346.

106. Kyo M., Harada H. Studies on conditions for ceU division and embryogenesis in isolated pollen culture of Nicotiana rustica. // Plant Physiol. 1985 - P . 90-94.

107. Lazar M.D., Schaeffer G.W., Baenzieger P.S. Cultivar and cultivarenviroimient effects on the development of callus and polyhaploid plants from anther cultures of wheat. // Theor. Appl. Genet. 1984 - 67 - P. 273-277.

108. Lazarte J. E., Sasser C.C. Asexual embryogenesis and plantlet development in anther culture of Cucumis sativas

109. Lee P.M., Chen C.C. Nuclear fiision in cultured microspores of barley // Plant CeU Repts. 1987 - 6 - P. 191-193.

110. Lelu M.-A., BoUon N. Obtention d haploids par culture d anthers de Brassica oleracea L. Var capitata et var. Gemi fera. // CR. Acad. Sei. Paris. Ser. 3 -1985-300-P. 71-76.

111. Lichter R. Induction of Haploid plants from isolated poUen of Brassica napus // Z. Pflanzenphysiol Bd. -1982 -105 P. 427-434.

112. Lichter R. Anther culture of Brassica napus in liquid culture medium // Z. Pflanzenphysiol. -1981. 103. - P. 229-237.

113. Lichter R. Efficient Yield of embryoids by culture ofisolated microspores of different Brassicacea species // Plant Breeding 1989 - 103. -P. 119-123.

114. Lilo C, Hansen M. Anther culture of cabbage. Influence of growth temperature of donor plants and media composition on embryo yield and plant regeneration. //Norvegian J. Agric. Sci. 1987 - 1 - P. 105-109.

115. Lyons J.M. Chilling injiry in plants. // Annu. Rev. Plant. Physiol. 1973 -24 -P. 445-466.

116. Macheshvari P. Embryology of angiosperme. N.Y.: McQraw Hill 1950453 p.

117. Macheshvari S. C, Rashid A., Tyagi A. K. Haploids fi-om pollen grains -retrospects and prospects. // Am.J.Bot. 1982 - 69 - P. 865-879.

118. Miah M. A., Earle E. D., Khush G. S. Inheritence of callus formation ability in anther cultures of rice, Orysa sativa L. // Theor. Appl. Genet. 1985 - 70 - №2 - P. 113-116.

119. Mii M. Effects of pollen degeneration on the pollen embryogenesis in anther culture ofNicotianatabacum L. // Z. Pflanzenphusiol. 1980 - 99 P. 349-355.

120. Mii M. Relationship between anther browing and planflet formation in anther culture of of Nicotiana tabacum L. // Z. Pflanzenphusiol. 1976 - 80 - 3 - P. 206-214.

121. Misoo S., Matsubayashi M. Effect of genome constitution, ploidy levels and cytoplasm on the embryogenie response of pollen grains in Nicotiana anther culture. In: Plant Tissue Cult, Tokio and lake Yamanaka, July 11-16, 1982 Tokyo -1982-P. 535-536.

122. Murashige 7., Scoog I. Ai revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue culture. //Physiol. Plant -1962. -15. -N 13. -P. 473-497.

123. Nabors M.W., Heyser J.W., Dykes T. A., Demott K.J. Long duration? high frequency plant regeneration from cereal tissue cultures // Planta 1983 - 157 - P. 385-391.

124. Nakata K., Tanaka M. Differentiation of embryoids from developing germ cells in anther culture oftobacco. // Jap. J. Genet. 1968 - 43 - №1 - P. 65-71.

125. Niizeki M., Hayashi H., Saito K.I. Production of disomic haploids by anther cultures of a series of trisomie plants in Nicotiana sylvestris. Jap. J. Breed. -1984-34-№l-P. 1-8.

126. Nitsch C. La culture de pollen isole sur milieu synthetique. // C. R. Acad. Sci. D. -1974. -278. -N 8. -P. 1031-1034.

127. Nitsch C. Production of isogenic lines: Basic technical aspects of androgenesis. In : Thorpe TA (ed) plant tissue culture: Methods and apphcations in agriculture. // Academic Press, London. New York.-1981 P. 241-252.

128. Nitsch C., Nitsch J.P. The induction of flowering in vitro in stem segments of Plumbago indica L. 1. The production of vegetative buds. // Planta 1967 -72-P. 355-370.

129. Nitsch C, Norreel B. Effect d' un choc thermique sur le pouvoir embryogene du pollen de Datura innoxia cultive dans l'anthere ou isole de Panthere. // Comp. Rend. Acad. Sci. Paris. -1973. -276. -P. 303-3Q6.

130. Nitsch J. P. Experimental androgenesis In Nicotiana. //Ph ytomorphology. -1969. -19. -P. 389-404.

131. Nitsch J. P., Nitsch C. Haploid plants from poUen grains. //Science.-1969.-163.-N3862.-P.85-87.

132. Nitsch J.P., Nitsch C. Obtantion de plantes haploides a partir de pollen. -Bull. Soc. Bot. Prance - 1970 - 117 - P. 339-360.

133. Nitsch W. Pollen culture A new technique for mass production of haploid and homolozygous plants. //Haploids in Higher Plants - Advances and Potential., Kasha K. J. (Ed.)Guelph. Univ. Guelph. 1974. -P. 123-135.

134. Nitsche W., Wenzel G. Haploids in plant breeding. Berlin. Hamburg - P. Parey - 1977 - 94 P.

135. Ockendon D. J. Anther culture in Brussels Sprout (Brassica oleracea var. gemmifera). 2. Effects of genotype on embryo yields.//Ann.Appl.Biol.-1985.-107.1. P.101-104.

136. Ockendon D. J. Anther culture in Brussels Sprouts (Brassica oleracea var. gemmifera). 1. Embryo yields and plant regeneration. // ANN. Appl.Biol-1984. -105. -N2.-P. 285-291.

137. Ockendon D. J. Ths ploldy of plants obtained from anther culture of cauliflowers (B. oleracea var. botrytis). //Ann. Appl. Biol. -1988. -113. -N2. -P. 312325.

138. Ockendon D. J., Sunderland R.A. Genetic and non-genetic Pactors affecting anther culture of Bmssels sprouts (Brassica oleracea var. gemmiffera). // Theor. Appl. Genet. 1987 - P. 566-570.

139. Oono K. Production of haploid plantiets of rice (Oryza sativa ) by anther culture and their use for breeding. // Bull. Nat. Inst. Agrie. Sci. 1975 - Series D.2 6-P. 139-222.

140. Orr W., Johnson Flanagan A.M., Keller W.A., Singh J. Induction on Freezing Tolerance in microspore - derived embryos of winter Br. Napus. // Plant Cell Reports - 1990 -8 - № 10 - P. 579-581.

141. Orton T. J., Brewers M. A. Segregation of genetic markers among plants regenerated from cultured anthers of broccoli (Brassica oleracea var. Italica) // Theor. Appl. Genet. 1985 - 69 - P. 637 - 643.

142. Osolnik B., Bohanec B., Jelaska S. Stimulation of androgenesis in white cabbage (Br. Oleracea var. Capitata) // Plant Cell Tissue and Organ Culture 19933 2-P. 241-246.

143. Pechan P. M., Keller W.A. Identification of potentially embryogenie microspores in Brassica napus. //Physiol. Plant. -1988. -74. -P. 577-584.

144. Pelletier G., Henry Y. Cold pretreating on flow buds of Nicotiana tabacum. Haploid Information Service - 1974 - 10 - P. 5-8.

145. Pelletier G., flami M. Les facteurs de 1 androgenese in vitro chez Nicotiana tabacum. // Ztschr. Pflanzenzucht. 1972 - 68 - № 2 - P. 97-114.

146. Phippen C. Ockendon D. J. Genotype, plant, bud size and mediafactors affecting anther culture of cauliflowers (B. oleracea var. botrytis). // Theor.Appi. Genet. -1990. -79. -N 1. -P.33 38.

147. Polsoni L., Kott L.S., Beversdorf W.D. Lage-scale microspore culture technique for mutation selection studies in Brassica napus. // Can. J. Bot. -1988 66 -P. 1681-1687.

148. Rajasekaran K., MuUins M.G. Influence of genotipe and sex-expression on formation of plantiets by cultured anther grapevines. // Agronomic 1983 - 3 - P. 2333-238.

149. Raghavan U. Role of the generative ceU in androgenesis in henbane. // Science. -1976. -191. -P. 588-589.

150. Raghavan U. Origin and development of poUen embryoids and pollen calluses in cultured anthers segments of Hyoscyamys niger (henbane). //Amer. J. Bot. -1978. -65. -P. 884-1002.

151. Raghavan U. Embryogenesis in angiosperms. A developmental and experimental study. Cambridge etc.: Cambridge univ. press. 1986. -13,SOSE.

152. Raina S.K., Iyer R.D. Honey — induced embryogenesis in anther cultures of Daujra metel //Experentia- 1982. -38 -№3. -P. 358-359.

153. Rajasecaran K., Mulins M.G. Influence genotype and sex-expression on formation of plantiets bt cultured anther grapevines. // Agronomic 1983 - 3 - P. 233-238.

154. Ramuly K.S. et al. Chimerism in Lucopersicon peruvianum plants regenerated fi-om in vitro cultures of anthers and stem intemodes. Ztschr. Pflanzenzycht. - 1976 - 76 - №4 - P. 299-319.

155. Raquin C. Genetic control of embryo production and embryo quality in anther cultiire ofPetunia. Theor. Appl. Genet. - 1982 - 63 - №2 - P. 151-154.

156. Raquin C. Utilization of different sugare as carbon sources for in vitro anther culture ofPetunia //Ztschr. Pflanzenphysiol 1983 - 111 -№ 5 -P. 453 -457.

157. Rashid A., Street H.E. The development of haploid embryoids from anther cultijre of Atropa belladonna. Planta - 1973 - 113 - №3 - P. 263-270.

158. Reinert J. Untersuchungen uber die morfogenese en Gewebekultum // Ber. Dtsck Ges. 1958 - 71 - R 15.

159. Reinert J, Basas YPS, Heberle E. Induction of haploid tobacco plants from issolated pollen. Protoplasma., 1975, 84: 191-196.

160. Reinert J. Bajaj. Y. P. S. Anther culture: haploid production and its significance. // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. Reinert J., Bajaj Y. P. S. (Eds.). Narosa Publishing House, 1988.-P.251 -267.

161. Rives M., Picard E. A case of genetic assimilation selection through androgenesis or partenogenesis of gaploid producing systems (a hypotesis). Ann. Amdio. Plant. - 1977 - 27 - №4 - P. 489-491.

162. Roulund N, Andersen SB, Perestveit B. Optimal consefration of sucrose for head cabbage (Br. Olerasea L. convar. Capitata (L) Alef) anther culture. Euphutica ., 1991, 52: 125-129.

163. Sangwan R. S., Sungwan Norrel B.S. Biochemical and structural aspects of induction and development of poUen-embryos in Datura. // BuU. Soc. Bot. Prance. Actual. Bot. - 1980 - 127 - 3-4 - P. 109-122.

164. Sangwan-Norreel B. Androgenetic stimulation factors in the anther and isolated pollen culture of Datura innoxia. //J. Exp. Bot. -1977. -28. -P. 845-852.

165. Sato T., Nischio T., Hirai M. Plant regeneration from isolated microspore cultures of Chinese cabbage (Br. Campestris spp. Pekinesis ) // Plant Cell Reports -1989a-8-№8-P. 486-488.

166. Sato T., Nischio T., Hirai M. Varietal differences in embriogenic ability in anther culture of Chinese cabbage (Br. Campestris spp. Pekinesis ) // Japan. J. Breed. 1989b - 39 - 149-157.

167. Sax K. Effect of variations in temperature on nuclear and cell division in Tradescantia//Amer.J.Bot. -1937. -24. P. 218-225.

168. Schmid J., Keller E.R. Haploid production by anther culture in Triticum spelta inveroment of the q/Q factor? // In: Plant Tissue Cult, Tokio and lake Yamanaka, July 11-16, 1982 - Tokyo - 1982 - P. 535-536.

169. Schmid J., Keller E.R. Improved androgenetic response in wheat (Triticum aestivum L.) as a result of gametocide application to anther donor plants. // Abstr. 4 Int. Congr. Plant Tissue Culture, University of Minnesota. 1986 - P. 146.

170. Schulze D., Pauls P.K. Plow cytometric characterization of embriogenic and Gametophytic development in Brassica napus Microspore cultures. // Plant Cell Physiol. 1998 - 39 - P. 226-234.

171. Sharp W.R., Dougal D .K., Paddock E.F. Haploid plantlets and callus from immature pollen grains of Nicotiana and Lucopersicon. Bull. Torrey Bot. Club. -1971 -98 - №4-R 219-222.

172. Shimada T., Makino T. In vitro culture of wheat. HI. Anther culture of wheat genome aneuploids in comon wheat. Theor. Appl. Genet. - 1975 - 46 - №8 -P. 407 410.

173. Simon P.W., Pelaquin S.J. The influence of parental species on the origin of callus in anther cultures of Solanum hybrids. Theor. Appl. Genet. - 1977 - 50 -№1 P. 53-56.

174. Sitbon M. Production haploid Gerbera jamesonii plants by in vitro culture unfertilized ovules // Agronomic -1981 -1 №9 - P. 807-812.

175. Sopory S.K. Macheshwari S. C. Development, of poUen embryoids in anther culture of Datura innoxla. 1. General observations and effects of physical factors. // J. Exp. Bot. //1976. -27. P. 49-57.

176. Sopory S.K. Effect of sucrose, hormones and metabolic inhibitors on the development of polen embryoids in anther cultures dihaploid Solanumtuberosum. // Can J. Bot. 1979 - 57 - P. 2691-2694.

177. Sorvari S. Production of haploids from anther culture in agriculturally valuable Brassica campestris L. cultivars. //Ahm. Agric. FenniaA. -1985. -24. -N 74. -P. 149-160.

178. Sorvari S. The effect of starch gelatinized nutrient media // Ann. Agric. Penn.- 1 986-25-R 135-138.

179. Stow I. Experimental studies on the formation of the embryosac-like giantpollen grains in anther of Hyacinthus orientalis. // Citologia 1970 - 1 - P. 417-439.

180. Sun C, Wang C, Chu C. Cell division and differentiation of pollen grains in Triticale anthers cultured in vitro. // Scientia Sinica. -1974. -17. -P, 47-54.

181. Sunderland N. Anther culture : a progress report. //Scl. Progr.-1971. -59. -P. 527-549,

182. Sunderland N. Anther culture as a means of haploid production. //Kasha K. J. (Ed.) Haploids in high plants: Advances and potential. University of Guelph Press. Guelph, 1974. P. 91-222.

183. Sunderland N. Strategic on the iffiprovement of yields in anther culture. //Proc. Sym. Plant Tissue Culture. Science Press, Pekin. -1978. P. 65-86.

184. Sunderland N. The consept of morfogenic competence with reference to anther and pollen culture. // Plant Cell Culture Crop. Proc. Int. Symp.,Caicutta, 6-10 Dec, 1981. N.Y.; L.P. 1983 - P. 125-139.

185. Sunderland N., Dunwell J.M. Pathways in pollen embryogenesis. // Tissue culture and plant science N. Y. 1974 - P. 141-167.

186. Sunderland N., Collins G. B., Dunwell J. M. The role ofnuclear fiision in pollen embryogenesis ofDatura innoxia Mill. //Planta. -1974. -117. P. 227-241.

187. Sunderland N., Evans L.J. Multicellular poUen formation in cultured barley anthers. 2. The A, B and C pathways. //J. Exp. Bot. -1980. -31. P. 501-514.

188. Sunderland N., Roberts M. Cold-pretreatment of excised flower buds in float, culture of tobacco anthers. //Ann. Bot. 1979.- 43.- P.405-414.

189. Sunderland N., Roberts M. New approach to pollen culture. // Nature. -1977.-270-R 236-238.

190. Sunderland N., Roberts M., Evans L. J., Nlldon D. C. Multicellular pollen formation In cultured barley anthers. 1, Indepdendet division of the generative and vegetative cells. // J.Expt. Bot. -1973. -30. -P. 1133-1144.

191. Sunderland N., Wicks P. M. Cultivation of haploid plants from tobacco pollen. //Nature. -1969. -224. -P. 1227-1229.

192. Sunderland N., Wicks P. M. Embryoid formation in pollen grains of

193. Nicotianatabacum: i. Iii. Exp. Bot. -1971. -22. -P. 13-226.

194. Sunderland N., Xu Z.H. Shed pollen culture in Hordeum Vulgare. J. Exp. Bot. - 1982 - 33 - №136 - P. 1082 - 1095.

195. Sunderland N. Wildon D. J.A. A note on the pretreatment of excised flower buds in float culture ofHyoscyamus anthers, //Plant. Sei. Lett. -1979. -15. -P. 169-175.

196. Sylvie B., Charmet G. Improvement ofhaploid production through in vitro anther culture in hexaplold triticale. //Senet. and Breed. Tritlcale Proc. 3 rd. EUCARPIA Meet. Cereal Sec. Triticale, Clermont-Perrand, 2-5 Jull., 1984, Paris, 1985.-P. 305-306.

197. Taguchi T., Mii M. Effects of chilling, anther preculture and growth regulators on embryogenesis in isolated pollen cultures of Nicotiana rustica L. //Jpn. J. Breed. -1982. -32. -P. 303-310.

198. Takachata Y. Keller W.A. High fi-equency embryogenesis and plant regeneration in isolated microspore culture of Brassica oleracea L. // Plant Sei. 1991 -74-P. 235-242.

199. Tehner C, Simmonds D., Newcomb W. Determination of developmental stage to obtain high fi-equencies of embryogenie microspores in Br. Napus // Physiol. Plant. 1992 - 83 - P. 417-424.

200. Thomas E., Hoffinann P., Wenzel G. Haploid plantiets fi-om microspores of rue // Ztschr. Pflanzenzucht. 1975 - 75 - №2 - P. 106-113.

201. Thomas E., Wenzel G. Embriogenesis from microspores of Brassica napus. //Z. Pflanzenzucht. -1975. -74. -P. 77-81.

202. Thurling N., Chay P.M. The influence of donor plant genotype and enviroment on production of multicellural microspores cultured anthers of Brassica napuss ssp. oMfera. //Ann. Bott. (London) 1984 - 54 - P. 681- 693.

203. Touraev A., Dharn A., Vicente O., Heberle-Bors E. Stress induced microspore embryogenesis in tobacco: an optimized system for molecular studies. // Plant Cell Rep. 1996 - 15 -P. 561-565.

204. Tsunewaki K., Mukay Y., Yamamory M. The Sabnon method of haploid production in wheat, //hit. Symp. Gene Manipulation Crops Beijing, China 1984 -P. 21.

205. Tulecke W. A tissue derived from the pollen of Ginkgo biloba //Science.-1953.-117.-P.599-600.

206. Tulecke W. Sehgal N. Cell prohferation from the pollen cf Torreya nucifera. // Confr. Boyce Thompson Inst. -1963. -22.- P. 153-163.

207. Tulecke W. The pollen cultures of CD. La Rue: a tissue from the pollen of Taxus. //Bull. Torrey Bot. Club. -1959. 86.-P.283-289

208. Tulekce W. The pollen of Ginkgo biloba: in vitro culture and tissue fomation. //Amer.I Bot. -1957. 44, - P. 602-608.

209. Tyagi AK., Rachid A., Maheshwari SC. High frequency production of embryos in Datura innoxia from isolated pollen grains by combined cold treatment and serial culture of anthers in hquid medium. // Protoplasma. 1979. - 99 - P. 11-17.

210. Vagera T., Havranek P. Regulation of androgenesis in Nicotiana tabacum cv. White Burley and Datura innoxia. Effect of bivalent and trivalent Ferrum and chelating substances. Biol. Plant. -1983 - 25 - №1 - P. 5 -14.

211. Vagera T., Havranek P., Opatmy Z. Regulation of in vitro androgenesis of tobacco: relationship between concertration of iron ions and kinetin. Biohem U. Physiol. Pflanzen. - 1979 - 174 - №9 - P. 752-760.

212. VasH I., Nitsch C. Experimental production of pollen haploids and their uses. Ztschr. Pflanzenphysiol. - 1975 - 76 - №3 - P. 191-212.

213. Wang Y.Y., Sun C.S., Wang C C , Chien N.F. The iuduction of poUen plantiets of Triticale and Capsicum annuum from anther culture. // Sci Sinica 1973 -16-№1 - P. 147-151.

214. Wenzel G., Uhrig H. Breeding for nematode and virus resistence in potato via antiier culture. Theor. Appl. Genet. - 1981 - 59 - P. 333.

215. Wilson H.M. Mix G., Poroughi-Wehr B. Early microspore division and subsequent formation of microspore calluses at high frequency in anthers of Hordeumvulgare L. // J. Exp. Bot. 1978 - 29 - P. 227-238.

216. Yang Q., Chauvin J-E., Herve Y. Obtention d embryons androgenetiques par culture in vitro de boutons floraus chez le brocoli (Br. Oleracea, var. Italica) // C. R. Acad. Sei. Paris 1992 - 314 - Sere 3 - P. 147-152.

217. Zagorska N.A., Abadjieva M., Georgiev C, Georgieva R. Morfogenesis and plant differentiation in anther cultures of the genus Lucopersicon Mill. Plant Tissue Cult., Tokio and lake Yamanaka, July 11-16, 1982 - Tokyo - 1982 - P. 539540.

218. Zaki M. A., Dickinson H. G. Structural changes during the first division of embryos resulting from anther and free microspores culture Brassica napus. // Protoplasma 1990 -156 P. 149-162.

219. Zamir D., Jones R.A., Kedar N. Anther culture of male-sterile tomato (Lucopersicon esculentum) mutants. Plant Sei. Lett.- 1980 - 17 - №3 - P. 353-361.

220. Zamir D., Tanksley S.D., Jones R.A. Genetic analysis of the origin of plant regenerated from anther tissues of Lucopersicon esculentum. // Plant Sei. Lett. -1981 21 № 3 -P. 223-227.

221. Zhou J.Y. Pollen dimorphism and its relation to the formation of pollen embryos in anther culture of wheat (Triticum aestrvum). // Acta Bot. Sinica 1980 -22-№2-P. 117-121.

222. Zhao J., Simmons D.H., Newcomb W. Induction embryogenesis with colchicine instead of heat in microspores of brassica napus L. // Planta 1996 - 198 -P. 433-439.