Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Разработка химических основ рационального использования отходов культивирования гриба вешенка обыкновенная

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Раевских, Вера Михайловна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ХИМИЯ ХИТИНА И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ. ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ТЕХНОЛОГИЙ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ИСПОЛЬЗОВАНИЯ.

1.1. Химическая структура и принципы получения хитина и его производных.

1.2. Физико-химические свойства и практическое использование хитина и его производных.

1.3. Состояние вопроса о сырьевых источниках хитина.

ГЛАВА 2 . МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Определение степени дезацетилирования (СД).

2.2. Определение характеристической вязкости растворов хитозана.

2.3. Определение зольности.

2.4. Определение белка.

2.5. Исследование ИК-спектров хитина и хитозана.

2.6. Определение концентрации ионов металлов Си , Zn , Cd , Pb , Мп в воде.

2.7. Методика исследования антибактериальных свойств хитозана.

2.8. Методика калориметрических измерений.

2.8.1. Конструкция калориметра.

2.8.2. Методика проведения калориметрического опыта.

2.9. Статистический анализ.

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА МЕТОДА ПОЛУЧЕНИЯ ХИТИНА И ХИТОЗАНА ИЗ ГРИБА ВЕШЕНКА ОБЫКНОВЕННАЯ.

ГЛАВА 4. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ХИТОЗАНА, ПОЛУЧЕННОГО ИЗ ГРИБА ВЕШЕНКА ОБЫКНОВЕННАЯ.

ГЛАВА 5. ТЕПЛОЕМКОСТЬ И ТЕРМОДИНАМИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ХИТИНА И ХИТОЗАНА. ТЕРМОДИНАМИКА ПРОЦЕССА СИНТЕЗА ХИТОЗАНА ИЗ ХИТИНА.

ГЛАВА 6. ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ИЗВЛЕЧЕНИЯ ИЗ ВОДЫ НЕКОТОРЫХ ПРИМЕСЕЙ ХИТОЗАНОМ ИЗ ВЕШЕНКИ ОБЫКНОВЕННОЙ

6.1. Исследование адсорбции ионов тяжелых металлов хитозаном из вешенки обыкновенной.

6.2. Исследование антибактериальной активности хитозана из вешенки обыкновенной.

ГЛАВА 7. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Разработка химических основ рационального использования отходов культивирования гриба вешенка обыкновенная"

Актуальность темы. Согласно современным экологическим принципам хозяйственная деятельность человека должна быть направлена на уменьшение антропогенного воздействия на природные экосистемы и улучшение состояния окружающей среды (Вронский В.А.,1996). В связи с этим неотложного решения требует проблема загрязнения биосферы отходами производства и продуктами деградации все более широко используемых полимерных материалов (Neel 1.Д965). Несомненно, что наиболее перспективным путем решения данной проблемы является создание природных полимеров, которые в отличие от синтетических аналогов быстро распадаются под действием микрофлоры с образованием биоутилизируемых веществ (Феофилова Е.П. и др., 1999). Одним из таких биополимеров является хитин и его производные, которые вследствие относительно низкой стоимости получения в больших объемах, уникальности свойств и простоте их химической модификации нашли применение более чем в 70-ти направлениях (Быков В.П., 1977) пищевой, медицинской, косметической промышленности, а также сельского хозяйства и биотехнологии (Mattioli-Belmonte М. et al., 1977; Lorito М., 1977). Примечательно, что одним из интенсивно развивающихся направлений использования этих полисахаридов является комплексная очистка воды от минеральных и органических экотоксинов (Быков В.П., 1999). Наиболее масштабным сырьевым источником для получения хитина являются панцири ракообразных (крабы, креветки, раки и др.) (Красавцев В.Е., 1999; Broussiqnas Р.,1968; Seduin G., 1968; Sen D. et al., 1975; Austin P.R. et al., 1981). Однако показано, что это сырье имеет ряд недостатков, среди которых особую обеспокоенность вызывает загрязненность панцирей тяжелыми металлами, ядохимикатами и другими ядовитыми отходами производств. Кроме того, получение хитина из ракообразных может быть рентабельным при трудно выполнимом по ряду причин условии одновременного получения всех полезных веществ, которые содержатся в панцире (каротиноид астаксантин, белки артроподин и склеротин и др.).

В то же время, отдельными и немногочисленными исследованиями установлено, что хитин из грибов, в частности, из гриба вешенка обыкновенная (Pleurotus ostreatus) (сем. Трихоломовые, или Рядовковые (Tricholomataceae), порядок Пластинчатые, или Агариковые (Aqaricales), класс Базидиомицеты (Basidiomycetes), отдел Грибы (Mycota)), сходен по своим физико-химическим свойствам с хитином ракообразных (Феофилова Е.П. и др., 1980). Следовательно, вешенка обыкновенная вполне может служить сырьем для получения хитина и его производных. Преимуществом этого сырья, по сравнению с традиционным, является возможность искусственного круглогодичного выращивания вешенки при относительно низкой себестоимости. Это во многом обусловлено высокой скоростью роста гриба на разнообразных целлюлозосодержащих субстратах из растительных отходов сельского хозяйства и лесоперерабатывающей промышленности (Бисько Н.А., Дудка И.А., 1987). В настоящее время около 30% собираемого урожая грибов (обломки шляпок, обрезки ножек) не утилизируется. Поэтому нам представлялась весьма привлекательной возможность разработки экологически чистой многоцелевой биотехнологии получения хитина и его производных из отходов легко выращиваемого в теплицах гриба вешенка обыкновенная.

Цель и задачи работы. Цель работы - разработка методики получения хитина и хитозана из отходов промышленного производства вешенки обыкновенной, а также изучение возможности использования полученных биополимеров в некоторых направлениях биотехнологии наравне с хитином и хитозаном из традиционных сырьевых источников.

Задачи работы:

1. Разработать методику получения хитина и хитозана из отходов промышленного производства вешенки обыкновенной.

2. Исследовать органолептические свойства препарата хитозана из вешенки обыкновенной, идентифицировать его по элементному составу и поглощению света в инфракрасной области спектра.

3. В целях прогнозирования оптимальных условий промышленного получения хитозана исследовать основные термодинамические свойства хитина и хитозана, на основе которых рассчитать термодинамические параметры процесса синтеза хитозана из хитина.

4. Для оценки возможности использования хитозана из вешенки обыкновенной при очистке питьевой воды из подземных источников и открытых водоемов исследовать его антибактериальную активность, а также и адсорбцию ионов тяжелых металлов.

Научная новизна. Впервые разработана технологическая схема получения соответствующих стандартам качества хитина и хитозана из отходов промышленного производства гриба вешенка обыкновенная. Изучены термодинамические характеристики хитина и хитозана, а также рассчитаны термодинамические параметры синтеза хитозана. Изучены антибактериальная активность и адсорбционные свойства в отношении ионов тяжелых металлов хитозаном из вешенки обыкновенной. На основе экспериментальных данных предлагается схема рационального использования отходов промышленного производства вешенки обыкновенной для синтеза экологически безопасных широко применяемых биополимеров.

Практическая значимость. Разработанный способ получения хитозана из грибов вешенка может быть положен в основу его промышленного производства. Термодинамические особенности хитина могут быть использованы для оптимизации технологии промышленного получения хитозана. Представленный в работе экспериментальный материал указывает на возможность промышленного использования хитозана, получаемого из отходов культивирования гриба вешенка обыкновенная, наравне с этим полисахаридом из панцирей морских ракообразных. Результаты работы позволяют, в частности, прогнозировать высокую эффективность использования полученного хитозана для очистки питьевой воды от ионов тяжелых металлов и микроорганизмов. Предлагаемая в работе схема рационального природопользования может позволить сохранить ресурсы морских ракообразных, получать безопасные для окружающей среды биополимеры, не загрязненные вредными для организма человека веществами.

Положения, выносимые на защиту.

1. Для синтеза высокополимеризованного хитозана с высокой степенью дезацетилирования, соответствующего общепринятым стандартам качества, оптимальной является схема: депигментирование сырья 3% перекисью водорода —» удаление белков гидролизом 0,1 н гидроксидом натрия —» деминерализация 0,6 н соляной кислотой —» экстракция липидных компонентов 96,5% этанолом —» дезацетилирование хитина 50% гидроксидом натрия при 393-403 К в течение 2 часов —» экстракция липидных компонентов 96,5% этанолом. Изменение температуры на стадии дезацетилирования хитина в пределах от 403 К до 393 К ведет к образованию хитозана с различной степенью полимеризации и дезацетилирования.

2. Процесс получения хитозана из хитина при 101,325 кПа в интервале температур от 0 до 450 К термодинамически разрешен и равновесие сдвинуто в сторону образования хитозана.

3. Хитозан из вешенки обыкновенной сходен с хитозаном из морских ракообразных по элементному составу и структуре, обладает высокой сорбционной способностью в отношении катионов цинка, свинца, марганца, меди и кадмия, а также высокой антибактериальной активностью по отношению к Staphylococcus epidermidis и Escherichia coli.

Апробация работы. Основные результаты работы были доложены на Международной конференции «Природные вещества для здоровья и красоты» (Рига, 1997 г.); VI Международной конференции по химии и физикохимии олигомеров (Казань-Черноголовка, 1997 г.); VII Международной конференции «Проблемы сольватации и комплексообразования в растворах» (Иваново, 1998 г.); V конференции «Новые перспективы в исследовании хитозана» (Москва-Щелково, 1999 г.); XII Международной конференции «Реактив-99» (Уфа-Москва, 1999 г.); Международной конференции «Фармация в XXI веке: инновации и традиции» (Санкт-Петербург, 1999 г.); Международной научно-практической конференции «Хозяйственно-питьевая и сточные воды: проблемы очистки и использования» (Пенза, 2000 г.); Восьмой международной научно-практической конференции «Природные и интеллектуальные ресурсы Сибири» (Кемерово, 2002 г.); XV Международной конференции «Реактив-2002» (Уфа, 2002 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, получен патент на изобретение № 2185387 "Способ получения карбоксиметилхитозана" от 20.06.2000 г. и положительное решение на выдачу патента № 2002109798 "Способ получения хитозана" от 15.04.2002 г.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, четырех глав результатов собственных исследований, главы обсуждения результатов, выводов, приложения и библиографического списка. Работа изложена на 111 страницах, содержит 13 таблиц и 17 рисунков. Список использованной литературы включает 208 источников, из них 78 на иностранных языках.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Раевских, Вера Михайловна

выводы

1. Разработана методика получения хитина и хитозана из отходов промышленного производства вешенки обыкновенной. Для синтеза высокополимеризованного хитозана с высокой степенью дезацетилирования, соответствующего общепринятым стандартам качества, оптимальной является схема: депигментирование сырья 3% перекисью водорода —> удаление белков гидролизом 0,1 н гидроксидом натрия -» деминерализация 0,6 н соляной кислотой -» экстракция липидных компонентов 96,5% этанолом —» дезацетилирование хитина 50% гидроксидом натрия при 393-403 К в течение 2 часов —» экстракция липидных компонентов 96,5% этанолом.

2. При целенаправленной модификации условий дезацетилирования разработанная методика позволяет получать хитозан с различными характеристиками. Установлено, что при уменьшении температуры на стадии дезацетилирования с 403 К до 393 К в получаемом хитозане повышается степень полимеризации и снижается степень дезацетилирования.

3. По элементному составу и спектру поглощения в инфракрасной области хитозан из вешенки обыкновенной сходен с хитозаном из морских ракообразных.

4. Впервые для хитина и хитозана определены энтальпии сгорания при 298 К, их теплоемкость в широкой области температур, рассчитаны их термодинамические функции и стандартная энтальпия образования. Рассчитаны термодинамические параметры процесса получения хитозана из хитина и показано, что указанные процессы термодинамически разрешены в широкой области температур.

5. Хитозан, полученный из вешенки обыкновенной, обладает высокой сорбционной способностью в отношении катионов цинка, свинца, марганца, меди и кадмия, а также высокой антибактериальной активностью по отношению к Staphylococcus epidermidis и Escherichia coli. Это позволяет прогнозировать его эффективное использование наряду с хитозаном из традиционного сырья для очистки воды из подземных источников и открытых водоемов.

6. Полученные в работе данные создают основу для технологии рационального использования возобновимых ресурсов - отходов культивирования вешенки обыкновенной, в производстве безопасных для окружающей среды биополимеров.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Раевских, Вера Михайловна, Барнаул

1. Авторское свидетельство 730693 СССР, МКИ5 С 08 В 37/08. Способ получения хитозана. /Гамзазаде А.И., Ажигирова Н.А., Давидович Ю.А., Рогожин С.В., 1980.

2. Авторское свидетельство СССР 319607, МКИ5 С 08 В 19/14. Способ выделения олигосахаридов фрагментов хитозана.- 1983.

3. Акопова Т.А., Роговина С.З. Вихарева Г.А., Зеленицкий С.Н., Гальбрайх JI.C., Ениколопян Н.С. Образование хитозана их хитина в условиях сдвиговых деформаций // ВМС,- 1991. -Т.21, № 5.- С. 13051307.

4. Албулов А.И., Симонова Л.В., Фролова М.А., Пилипейко Е.А., Фоменко А.С. Перспективы применения хитозана в косметике //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл.- Москва-Щелково,-1999.- С.117.

5. Албулов А.И., Комаров Б.А., Самуйленко А.Я., Фоменко А.С., Шинкарев С.И. Разработка технологии получения натриевой соли сукцината хитозана //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл. -Москва-Щелково, 1999.- С.7.

6. Арнетт Э.М. Количественное сравнение слабых органических оснований //Современные проблемы физической органической химии. Сборник обзоров. М: Мир, 1967.- С. 195.

7. Артеменко С.Е., Роот Л.В., Чечулин Д.В., Устинов М.Ю., Овчинникова Т.П., Устинова Т.П. Хитозан. Возможность использования в полимерных композициях //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл,- Москва-Щелково,-1999,- С.9.

8. Аширов А. Ионообменная очистка сточных вод, растворов и газов.-Л.:Химия, -1983.-295 с.

9. Бао Чи-Мин. Химические волокна, I960.- N.3 .- С.39.

10. Бисько Н.А., Дудка И.А. Биология и культивирование съедобных грибов рода Вешенка. Киев: Наукова думка,- 1987. 113 с.

11. Бисько Н.А., Косман Е.Г. Рост штаммов вешенки обыкновенной Pleurotus ostreatus на средах с различными источниками углерода и азота //Микология и фитопатология.-1987.- С.70-75.

12. Богданов В.Д., Голованец В.А., Цысь С.Ф. Влияние хитозана на водостойкость гранул рыбного корма // Рыб.хоз-во.-1982,- № 4.- С.47-49.

13. Быков В.П. Перспективы использования хитина и хитозана // Рыб.хоз-во.-1977.-№11.- С.94-95.

14. Вронский В.А. Прикладная экология //Издательство «Феникс». Ростов-на-Дону,-1996.-509 с.

15. Вукалович М.П., Ривкин C.JL, Александров А.А. Таблицы теплофизических свойств воды и водяного пара. Изд. Стандартов, 1980,- 410 с.

16. Гальбрайх JI.C. Хитин и хитозан: строение, свойства, применение //Соросовский Образовательный журнал. Химия.- 2001.

17. Гамзазаде А.И., Ажигирова Н.А., Давидович Ю.А., Рогожин С.В. Способ получения хитозана // ВМС.- 1980.

18. Гамзазаде А.И., Скляр А.И., Рогожин С.В. Некоторые особенности получения хитозана // ВМС. -1985. -Т.27, N.6.- С.2812-2816.

19. Гамзазаде А.И., Скляр А.И., Рогожин С.В. Некоторые особенности получения хитозана // Высокомолек. соед. Сер.А.- 1980.- Т.22, №6.-С.1179-1184.

20. Гартман О.Р. Способ и термодинамика получения хитина и хитозана. Дис.канд.хим.наук. Барнаул,- 1998.- 115 с.

21. Гончарук Е.И., Сидоренко Г.И. Гигиеническое нормирование химических веществ в почве. Руководство. М., 1986.-320 с.

22. Горбачева И.И., Вихарева Т.А., Гальбрайх А.С. Исследование зависимости вязкостных характеристик и фракционного состава хитозана от условий его получения // Ред. журн. прикл. химия. JL-1981.- 11 с.

23. Горяйнов Г.И., Михайлов Г.М., Сапронов Н.С., Денисенко П.П. Некоторые аспекты использования хитина и его производных в медицине и технике //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл.- Москва-Щелково,-1999.- С. 137.

24. Данилов С.Н., Плиско Е.А. Действие на хитин кислот и щелочей // Журн. общей химии,- 1954,- Т.24, №10.- С. 1761-1768.

25. Ермаченко JI.A. Атомно-абсорбционный анализ в санитарно-гигиеническом исследовании.- М.- 1997.- 206 с.

26. Заявка 3703760 ФРГ, МКИ С 08 В 37/08, А 61 К 7/50 /Косметические средства на основе N-гидроксибутилхитозана.

27. Заявка 3723911 ФРГ, МКИ С 08 В 37/08 / Лак для ногтей на основе О-бензил-ГчГ-гидроксилалкилхитозана.

28. Заявка 63-156726 Япония, МКИ А 61 К 31/73 /Препараты для лечения заболевания костей (содержащие хитин, хитозан или их производные).

29. Заявка 1-281102 Япония, МКИ5 С08 В 37/08 /Получение низкомолекулярного хитозана.

30. Заявка 2-11601 Япония, МКИ5 С 08 В 37/08 /Способ получения хитозана.

31. Заявка 2-22301 Япония, МКИ5 С08 В 37/08 /Способ получения водорастворимого хитозана.

32. Заявка 2597335 Франция, МКИ А 61 К 7/06 /Косметические препараты с хитозаном.

33. Заявка 2650282 Франция, МКИ5 С08 В 37/08 /Способ получения хитозана дезацетилированием хитина.

34. Заявка 3537333 ФРГ, МКИ А 61 К 7/043 /Лак для ногтей на основе алкиловых эфиров хитина.

35. Заявка 3715576 ФРГ, МКИ С 08 В 37/08, А 62 К 7/00 /Новые производные хитозана для ухода за волосами и кожей на основе нового производного хитозана.

36. Заявка 53-127824 Япония, МКИ 30F 2, A 01N 9/00 /Удобрения, содержащие хитозан или производные хитина.

37. Заявка 53-59027 Япония, МКИ 30F 371.211,A 01N 9/20 /Сельскохозяйственное противовирусное средство, содержащее хитозан.

38. Заявка 54-41326 Япония, МКИ 30F 371.211, A 01N 9/20 /Препараты на основе хитозана для борьбы с вирусами растений.

39. Заявка 60-186504 Япония, МКИ5 С 08 В 37/08 /Способ получения хитозана.

40. Заявка 60-186505 Япония, МКИ5 С 08 В 37/08 /Способ получения хитозана.

41. Заявка 61-151112 Япония, МКИ А 61 К 7/16 /Препараты, содержащие хитин (или хитозан) и, подавляющие образование налета на зубах.

42. Заявка 61-211357 Япония, МКИ С 08 L 29/04, С 08 К 5/07 /Водостойкая композиция (с добавкой хитозана).

43. Заявка 61-254517 Япония, МКИ А 61 К 7/48 /Защитные косметические препараты для ухода за кожей на основе хитозана.

44. Заявка 62-138418 Япония, МКИ А 61 К 7/075, С 11D 3/384.

45. Заявка 62-198604 Япония, МКИ А 01 n 43/16 /Средство для борьбы с черной пятнистостью груш (содержит хитозан).

46. Заявка 62-221615 Япония, МКИ А 61 К 7/06, А 62 К 7/08 /Средства для ухода за волосами с добавками хитина, хитозана.

47. Заявка 63-139102 Япония, МКИ A 01N 61/00, А 01 С 1/06 /Средство для покрытия семян.

48. Заявка 63-165307 Япония, МКИ А 61 К 7/06, А 61 К 7/08.

49. Заявка 63-190821 Япония, МКИ А 61 К 9/06 /Способ получения мази (ранозаживляющего действия, содержащей хитин из панцирей ракообразных).

50. Заявка 63-33310 Япония, МКИ A 01N 63/00 /Стимулятор роста растений (содержит хитин из панциря крабов и креветок).

51. Заявка 63-4541 Япония, МКИ С 08 J 7/18, С 12 N 5/00 /Биосовместимый материал для получения искусственных кровеносных сосудов, кожи и «подушки» для выращивания клеток.

52. Иванов А.В. Термохимия растворов частично кристаллических полимеров. Дис. . докт. хим.наук, Барнаул, -1996. С.222.

53. Идзумэ М. Применение хитина и хитиновой кислоты в косметике и мыловарении //Био индасутори. Bio industry.-1989.-Vol. 6, № 7. P. 557-565.

54. Ильина A.B., Татаринова Н.Ю, Варламов В.П., Албулов А.И Низкомолекулярный водорастворимый хитозан //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл.- Москва-Щелково,-1999,- С.270.

55. Кайминь И.Ф., Озолиня Г.А. Температурные характеристики хитозана и его комплексов //I Всесоюз. конф. по производству и использованию хитина и хитозана из панциря криля и других ракообразных. Тез. докл.- Владимир, -1983. С.59.

56. Кайминып И.Ф. Физико-химические свойства хитозана и возможности его практического использования //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл.- Москва-Щелково,-1999.-С.230.

57. Карякин Н.В. Термодинамика ароматических поликонденсационных полимеров, процессов их синтеза и исходных веществ. Дис. . д-ра хим.наук, Горький, 1983.-516 с.

58. Коикэ X. Ингибитор биосинтеза хитина насекомых //Сёкубуцу боэки.-1978.-Т.32, № 11,- С.497-454.

59. Коновалова И.Н., Степанова Н.В., Реут К.В. Применение коллоидно-химических методов для защиты гидросферы от загрязнений различной природы //Научно-техническая конференция МГТУ: Тез.докл,- Москва, -2000,- С.ЗЗ.

60. Контроль производства химических волокон /Под ред. Пакшвера А.Б., Конкина А. А. М: Химия,- 1967. 608 с.

61. Краками Г. Современные тенденции в исследовании хитозан // ИСЭН. -№27,-С. 19-25.

62. Красавцев В.Е. Криль как сырьевая основа хитинового производства //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл.- Москва-Щелково,-1999.- С. 35.

63. Крафт Л.А., Гартман О.Р., Костюченко А.Г., Раевских В.М., Иванов А.В. Изучение антимикробной активности гидрогеля, содержащего карбоксиметилхитозан //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл.- Москва-Щелково,-1999.- С.154.

64. Лебедев Б.В., Литягов В.Я. Установка для измерения теплоемкости веществ в области 5-330 К //Термодинамика органич.соединений: Межвузовский сб. Горьк.гос.ун-т. -1976.-№5.- С.89-105.

65. Ленинджер А. Биохимия. -М.: Мир, 1976. -910 с.

66. Лившиц B.C. Полимерные покрытия на раны ожоги //Химико-фармацевтический журнал.- 1988. -№7.- С.790-798.

67. Милушева Р.Ю., Рашидова С.Ш., Рубан И.Н., Воропаева Н.Л. Исследование и применение хитина и его производных // Ред. Узб. хим. ж.- Ташкент.- 1991.- С.23.

68. Морозов А.И., Тимофеев А.А. Разведение грибов. Мицелий. М.-2001.-43 с.

69. Мочалов А.Н., Хлюстова Т.Б., Урьяш В.Ф., Новоселова Н.В. //Тез.докл. 8-й Всесоюзной конференции по калориметрии и химической термодинамике.- Иваново, -1979.- С.112.

70. Николаева Н.Е. Химический состав и промышленное использование креветок // Изв.вузов. Пищев.технология.- 1968.-№5. С.56-58

71. Новиков В.Ю., Орлов Т.Н. Многократное использование раствора гидроокиси натрия для дезацетилирования хитина //Рыбное хозяйство,-1988.- №12,- С.76-78.

72. Новый метод определения белка, ассоциированного с хитином ракообразных. // Takiguchi Y., Yamashita Н., Ohkocchi К., Shmahara К. //Hunnon ногей кагаку кайси. J. Agr. Chem. Soc. Jap.- 1987.- Vol.61, №4.- P.437-431.

73. Нудьга JI.A. Получение хитозана, его производных и исследование их свойств. Автореф. дис. . канд. хим.наук.- Л.- 1979. 21 с.

74. Нудьга Л.А., Баклагина Ю.Г., Петропавловский Г.А., Горяйнов Г.И., Михайлов Г.М., Копытченко Л.А. Надмолекулярная организация и физико-механические свойства волокна из хитина с низкой степенью дезацетилирования //ВМС.-1985,-т.ЗЗ, N.l 1.- С.864-868.

75. Нудьга Л.А., Баклагина Ю.Г., Петропавловский Г.А., Горяйнов Г.И., Михайлов Г.М., Копытченко Л.А. Надмолекулярная организация и физико-механические свойства волокна из хитина с низкой степенью дезацетилирования //ВМС. -1985.-Т.ЗЗ, №11. С.864-868.

76. Нудьга Л.А., Плиско Е.А., Данилов С.И. Получение хитозана и изучение его фракционного состава // Журн. общ. химии.-1971.- Т.43.-С.2555-2558.

77. Нудьга Л.А., Плиско Е.А., Данилов С.Н. Получение хитозана и изучение его фракционного состава // Журн. общей химии. -1971. -Т.41, №11.- С.2555-2558.

78. Обзор конъюктуры мирового рынка на хитин, хитозан, коллагеназу. М.: МНТКБ «Внешбио», 1988,- С.37.

79. Одиноков С.Е., Машковский А.А. Синтез хитоформа //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». Тез.докл.-Москва-Щелково,-1999.- С.56.

80. Патент №2065477 RU С 08В 37/08. Способ получения хитозана. / Голицын В.П., Цветков В.Г., Иванов А.В., Гартман О.Р.-1996,- С. 164

81. Патент США, МКИ 167-55 /Способ получения антацидного состава (для снижения кислотности желудочного сока, лечения язвы желудка и др.), содержащего хитозан.

82. Патент 3903268 США, МКИ 424-180, А 61 К 27/00 /Хитин и производные хитина (из панциря ракообразных) как стимуляторы заживления ран.

83. Патент 86/06082 С08 В 37/08 /Способ извлечения хитина из материалов, содержащих хитин, смешанный или связанный с белковыми веществами.

84. Патент PTZ №.90/04608 С 08 В 37/08 /Chemials Limited.

85. Патент PTZ №90/04609 С 08 В 37/08 /Chemials Limited.

86. Патент RU № 2116733 /Способ получения хитозана из ракообразных. A23L 1/33

87. Патент RU № 2117673 С 08В 37/08 /Способ получения хитозана. Иванов А.В., Гартман О.Р., Цветкова А.В., Полторацкая Е.Б.99. Патент USA 4.282.351100. Патент USA 4.368.322

88. Патент W 086/04586, ЕГО, МКИ С 07G 7/00 / Комплекс хитин-белок с нематодной активностью (из раковин ракообразных, моллюсков, криля).

89. Патент Бельгия, МКИ А 61 /Состав, способствующий заживлению ран (содержит хитин или его производные).

90. Патент США № 20 40879(1936); С 31 А 3600(1937) /Способ получения хитозана.

91. Патент США, МКИ 167-55 /Способ получения антацидного состава (для снижения кислотности желудочного сока, лечения язвы желудка) содержащего хитозан.

92. Патент Франция, МКИ С 02 В 1/00, С 08 В 19/00 / Процесс обработки воды с помощью хитозана и производных хитина для снятия загрязнений.

93. Патент Япония. МКИ5 С 08 В 37/08 59-1982. Водорастворимый частично деацетилированный хитозан. Способ его получения /Адзиномото К.К.

94. Пинече-Ковас К., Нието Х.М., Гарсиа-Алонсо И. Влияние некоторых параметров приготовления хитозана на его характеристики // Биоорг. химия. -1984.- Т.10, N.9.- С.1248.

95. Пинече-Ковас К., Нието Х.М., Гарсиа-Алонсо И. Влияние некоторых параметров приготовления хитозана и изучение его фракционного состава //Журн. Общей химии. -1971. -Т.43.- С.2555.

96. Попов М.М., Термометрия и калориметрия.- 2-е изд., перераб. и доп. М.,- 1954,- 942 с.

97. Прилуцкий А.И., Земсков B.C., Горовой Л.Ф., Бурдюкова Л.И. Антимикробные свойства нового хитинового препарата микотон //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл.- Москва-Щелково, -1999. С. 186.

98. Раптунович Е.С., Федоров Н.И. Искусственное выращивание съедобных грибов.- Минск, -1994,- 206 с.

99. Рогожин С.В., Гамзазаде А.И., Членов М.А. и др. Частичный кислотный гидролиз хитозана //Высокомолек. соед.-1988.- Т.ЗО, №3.-С.610-616.

100. Самонин В.В., Амелина И.Ю., Ведерников Ю.Н., Доильницын В.А. Сорбционные свойства хитозана и возможности его применения для очистки жидких сред // Журнал физическая химия.- 1999.- т.73, № 5.-С. 880-883.

101. Пб.Самонин В.В., Амелина И.Ю., Савельева А.А., Доильницын В.А., Ведерников Ю.Н. Сорбционные свойства активированных хитина и хитозана // Журнал физическая химия,- 1999.- т.73, № 9,- С. 1619-1622.

102. Седельников Л.И. Переработка полимерных отходов рециклинг, биодеградация // Экол.пром. пр-ва.-1993.-№2.- С.27-31.

103. Симараха Кэндзо. Новые способы получения хитина и хитозана // Сэн'и гаккайси.- 1990.- № 12.- С.1547-1552.

104. Скляр A.M., Гамзазаде А.И., Роговина JI.3., Титкова JI.B., Павлова С.А., Рогожин С.В., Слонимский Г.Л. Исследование реологических свойств разбавленных растворов хитозана //Высокомолек. соединения. Сер.А. -1981,- А23, №6,- С.1396-1403.

105. Скуратов С.М., Колесов В.П., Воробьев А.Ф. Термохимия. М.: Изд.МГУ,- 1966,- Ч.П.- 434 с.

106. Стадников В.Л. Хитин и хитозан. Обзор. Депонирован в Камчатском отдел. Морской биологии и биотехнологии Тихоокеан. Океаналогич. Института Дальневосточн. Отд. РАН.- 1993.- С.310.

107. Стрелков И.И. Теплоемкость и энтропия уксуснокислого натрия //Укр.химический журнал.-1955.- т.21, №5.- С.551-553.

108. Тюпенко Г.И., Орловский А.Ф., Кирпотин Д.Б. Полиэлектролитные композиции из агара и хитозана для электрофореза лекарств в стоматологии //Интерполимерные комплексы: Тез.докл. 2 Всесоюзной конференции.- Рига,- 1989.-С.387-388.

109. Тютерев С.Л., Якубчик М.С. Хитозан- биологически активное экологически безопасное средство, повышающее устойчивость растений к болезням. Санкт-Петербург: ВИЗР,- 1994. -38 с.

110. Ураками Г. Современные тенденции в исследовании хитина и хитозана //Исэн.-1987.-№52,- С.19-25.

111. Урьяш В.Ф., Мочалов А.Н., Покровский В.А. Установка для дифференциального термического анализа //Термодинамика органич.соединений: Межвузовский сб. Горьк.гос.ун-т. -1993-.№7. -С.88-92.

112. Феофилова Е.П., Терешина В.М. Перспективные источники получения хитина из природных объектов //V конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана»: Тез.докл. -Москва-Щелково, 1999.-С.76.

113. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Иванова Н.И. и др. Физико-химические свойства хитина крабов и некоторых микроскопических грибов //Прикл.биохимия и микробиология.- 1980.- Т.16.№3.- С.377-382.

114. Феофилова Е.П., Марьин А.П., Ушанова А.Е., Синько Н.И., Гопенгауз Ф.Л. Сорбционные свойства и термическая деструкция хитинов и хитозанов, полученных из беспозвоночных и грибов. Изв. АН СССР. Сер.биол.- 1982,- вып.З.- С.361-369.

115. Хирано С. Химия хитина и хитозана // Кагаку Chemistry (Jap.).- 1988.-Vol.43, №3,- P.155-160.

116. Austin P.R., Brine C.J., Castle J.E., Zikakis J.P. Chitin: new fakets of research //Science.-1981.- Vol.212, №4496,-P.749-753.

117. Bade M.L.,Wick R. Protecting crops and wildlife with chitin and chitosan //Abstr.Pap. 194 ACS Nat.Meet. (Amer.Chem.Soc.), New Orleans, La,Aug.30-Sept.4,1987.-Washington.-1987,- P.82-83.

118. Berkeley R.C.W. Chitin, chitosan and their degradatur enzymes //Mikrob. Polysaccharides and polysaccharases. London ets.- 1979.- P.205-236.

119. Berkeley R.C.W. Biotechnology to find cosmetic applications //Genet.Eng. and Biotechnol. Monet. -1986.-№ 17,- P.38-39.

120. Braconnot H. Sur la nature des champiqnons.- Ann. Chi. Phys.-1811.-P.265-304.

121. Broussiqnas P. Un haut polymer natureles peu cjnni dans rindustrie. Le Chitosane // Chim.etind.-Gen.chim.-1968.-Vol.99, №9.P.-1241-1247.

122. Bubel A., Stepfens R.M., Fenn R.H., Fieth P. An electron microscopi, X-ray diffraction and amino acid analysis of crab chell // Сотр. Biochem. and Physiol.- 1983. -Vol.74, N.4. P.837-850.

123. Cabib E. The synthesis and degradation of chitin // Adv.Enzymol. and Relat.Areas.Mol.Biol.vol.59. New York. E.a.-1984.- P.59-101.

124. Cardner K.H., Blackwell J. The substructure of crystalline cellulose and chitin microfibrils // J. Polum. Sci. -1971. Vol. C., №36.- P.327-340.

125. Chanzu H. Cellose and chitin: similarities and contrasts // 33 rd IUPAC. Int. Sump. Macromol., Montreal. Iyly 8-13, 1990: Book ABStr-Montreal.- 1990,- P.249.

126. Chen R., Toribara T.Y., Warner H. Microdetermination of phosphorus.-Anal. Chem.-1956.- P.1756-1758.

127. Darmon S.E., Rudall K.M. Disk. Faraday Soc. -1950,- V.9. P.51.

128. Deshpande M.V. Enzymatik degradation of chitin and its biological applications // J. Sci. and Ind. Res. -1986.-Vol.45, №6. -P.273-280.

129. Deshpande M.V. Enzymatik degradation of chitin and its biological applications // J. Sci. and Ind. Res.- 1986. -Vol. 45, № 6. P.273-280.

130. Eiden C., Jewell C., Wightman J.P. Interaction of lead and chromium with chitin and chitosan // J.Appl.Polym.Sci.-1980.-Vol.25, № 8.- P.1587-1599.

131. Fukuda H., Kikuchi Y. Polyelectrolite complexes of sodium dextran sulfate with chitosan // Macromol.Chem.-1977.-Vol. 178, № 10,- P.2895-2899.

132. Fukuda H., Kikuchi Y. Polyeslectrolyte complex of chitosan with sodium carboxymetildextran // Bull.Chem.Soc.Jap.-1978.- Vol.151, №4. P.1142-1144.

133. Foster А. В., Webber M. Chitin.- Adv.Carbohyd.Chem.- I960,- P.371-390.

134. Gilson E. Ber.- 1895. -№ 28. -P.821.

135. Golat A. Conformation and ultrastructural organization on chitin isolated from crayfish Austacus Austacus // Bull. Acad. Pol. Sci. Ser. sci. boil. -1979.-T.27, № 12. -P.987-991.

136. Hackett C.J., Chen Kuo-Chun. Quantitative isolation of native chitin from resistant structure of Sordaria and Ascaris species.- Anal.Biochem.-1978.-P.487-500.

137. Hackman R.H., Goldberg M. Lightscattering and infraged -spectrophotometrik studies of chitin and chitin derivatives // Carbohuds. Res.-1974.- Vol.38.-P.35-45.

138. Helander IM., Nurmiaho Lassila EL., Ahvenainen R., Rhoades J., Roller S. Chitosan disrupts the barrier properties of the outer membrane of gramnegative bacteria // Int. J. Food Microbiol. 2001. - № 12, Vol. 71.- P. 235.

139. Hirano S., Kondo Y., Tobelto K., Yamashita A. Linkages of chitin to peptides in the membranous layer crab shell // Glycoconjugates Proc.6 Int. Symp. Tokeo.-1981. P.244-245.

140. Hirano S., Tanaka Y.,Hosegava M. Effects of sulfated derivatives of chitosan on some blood coagulant factors // Carbohydr.Res.-1985.-Vol.137.- P.205-215.

141. Hirano Sh.,Nashiki Y.,Kinugava J. Chitin and chitosan for use as a novel biomedical material // Polym.Mater.Sci. and Eng.:Proc. ACS Div. Vol.53. Fall Meet., Chicago, 1985,-Washigton.- 1985. P.649-653.

142. Hirano Sh.,Ohe Y. Chitosan gels: a novel molecular aggregation of chitosan in acidic solutions on a facile acylation // Agr. and Biol.Chem.-1975. -Vol.3, №6. P.1337-1338.

143. Hisamatsu M., Yamada T. Partially deacetylated chitin as an acid-stable support for enzyme immobilization // J.Ferment. and Bioeng.-1988.-Vol.67,№ 3.- P.219-220.

144. Hong Z., Wu P., Liu К. Использование хитозана для повыгшения качества упаковочной бумаги // Нанъцзин линое дасюэ сюэбао. J.Nanjing Forest. Univ.-1987,- № 2,- Р.52-57.

145. Hoppe-Seiler F. Ucber Chitin und Zellulose.- Ber. Dt. Chem.Ges.-1984.-P.3329-3331.

146. Horst M. The biosynthesis of crustacean chitin. Isolation and characterization polyprenol-linked intermediates from brine shrimp microsomes // Arch. Biochem.and Biophys.-1983.-Vol.233, №1.- P.254-263.

147. Horton D., Just E.K. Preparation from chitin of (l-4)-2-amino-2 deoxy-(3-D-glucopyranuran and its 2-sulfoamino analog having blood-anticoagulant properties // Carbohydr.Res.-1973. -Vol.29, №1- P. 173-179.

148. Knorr D. Use of chitinous polymers in food // Food Technol.-1984-Vol.38, №1.- P.85-89,92-97.

149. Knorr D., Daly M. Mechanisms and diffusional changes observed in multilayer chitosan (alginate coacervate capsules) // Process Biochem.-1988.-Vol.23.,№2.- P.48-50.

150. Kramer K.J., Koga D. Insect chitin. Physical state, synthesis, degradation and metabolic regulation // Insect Biochem.-1986.-Vol. 16, № 6.- P.851-877.

151. Krishnan G. Some less krawn aspects of the structure and composition of chitin and protein of the arthroped cuticle // J. Sci. and Ind. Res.- 1974.-Vol.33, № 5.- P.258-265.

152. Kurita К., Sannan Т., Iwakura Y. Studies on chitin. 3 Preparation of pure chitin, poly (N-acetil- D- qlukoseamine), from the water soluble chitin // Macromol. Chem.-1977. -Vol.178, №9.- P.2593-2602.

153. Lorito M. Chitin in agriculture // Carbohydrates in Europe.-1977.-P. 19,24-29.

154. March L.E., Giaugue W.F. Capacity natrium qidroxid // J.Phys.Chem.-1962,- V.66., N.10.- P.2052-2056.

155. March L.E., Giauque W.F. Capacity natrium gidroxid // J.Phys. Chem.-1962,- V.66, №10,- P.2052-2056.

156. Maruca R., Suoler B.J., Wightman J.P. Interaction of heavy metals with chitin and chitosan. Chromium // J. Appl.Polym.Sci.-1982.-Vol.27, № 12.-P.4827-4837.

157. Mattioli-Belmonte M., Muzzarelli В., and Muzzarelli R. Chitin and chitosan in wound healing and other biomedical applications // Carbohydrates in Europe.-1977.- P.19,30-36.

158. Mitchell R. Addition of fungal cellwall compounds to soil for biological disease control // Phytopathology.- 1963.- P. 1068-1071.

159. Muzzarelli R.A.A. Chitin // Oxford, ect. Rergamon press.-1977.-125 p.

160. Muzzarelli R.A.A., Tanfani F., Emanuel M. Chelating derivatives of chitosan obtained by reaction with ascorbic acid // Carbohydr. Polym.-1984.-Vol.4, № 2.- P.137-151.

161. Muzzarelli R.A.A., Tanfani F., Scarpini G., Muzzarelli M.G. ESR characterization of chitin and chitosan // Biochev. and biophis. Res. Commun.- 1979,- Vol.89, №2. P.706-712.

162. Nair K.G., Ramachandran , Madhavan P. Chitosan for removal of mercury from water // Fish.Technol.-1984.-Vol.21, № 2.-P.109-112.

163. Natural products to prevent flavor deterioration in foods // Bioprocess.Technol.-l988.-Vol. 11, № 11.- P.2.

164. Neel I. Exposes de chimie macromoleculaire. Structure chimique des polyosides.- Paris.- 1965.- 165p.

165. Neville A.S., Parry D.A.D., Woodhead-Galloway J. The chitin crystallite in arthropad cuticle // J.Cell. Shi.-1976. -Vol.21, № i. P.73-82.

166. Pelletker A., Lemire I., Sygusch J., Chronet F., Overend R.P. Chitin / chitosan transformation by thermo-mechno-Chemical treatment including characterization by enzumatic depolumeristion // Biotechnol and Bidend.-1990.- N.3. P.310-315.

167. Pervais S.M., Abdul H.M. Studies on the structure of (3-chitin // Z. Naturforsch.-1975.- Bd.30 C, № 9,10.- P.571-574.

168. Rhoades J., Roller S. Antimicrobial actions of degraded and native chitosan against spoilage organisms in laboratory media and foods // Appl. Environ. Microbiol. 2000. - № 1, Vol. 66. - P. 80-86.

169. Sannan Т., Kurita K., Iwakura Y. Studies on chitin. Solubility chande by alkaline treatment and film Casting // Macromol.Chem.-1975.-Vol. 1976, №4.- P.1191-1195.

170. Sano H., Shibasaki R., Takaesu Y., Matsukubo T. Comparison of the activity of four chitosan derivatives in reducing initial adherence of oral bacteria onto tooth surfaces // Bull.Tokyo Dent.Coll. 2001. - № 11, Vol. 42. - P. 243-249.

171. Seduin G. Contribution oi Г etude biochimigue de Praunus flexuonus(Muller) // Deep-Sea Res.-1968.-Vol.l5,№4.- P/491-492.

172. Sen D.P., Mathew G. Fish by products and processing of miscellaneous marine fauna // Sump.Fich Process.Ind.India. Mysore,- 1975.- P.33-36.

173. Sievers D.M. Rapid maxing influences on chemical coagulation of manures // Biol.Wastes.-1989.- Vol.28, № 2,- P.103-114.

174. Sikakis J.P. A biotechnological system for the utilization of waste products of the seafood and cheese manufacturing industries //Ocean"88 Proc.:Partnership Mar. Interests, Baltimore, Md. Oct.31-Nov.2, 1988.- New York.- 1988.-Vol.4.- P.1608.

175. Sinqer R. The Aqaricales in Modern Taxonomy // Vaduz: Cramer.-1975.-912 p.

176. Srikantaian W., Mohankumar K.C. Isolation and characterization of chitin degrading bacteria // Indian J. Microbiol.- 1980. -Vol.2, №3.- P.216-219.

177. Stanley W.L., Watters G.G., Kelly S.H. Immobilization of glucose isomerase on chitin with glutaraldehyde and by simple adsorption // Biotechnol.and Bioeng.-1976.-Vol.l 8, № 3,- P.439-443.

178. Takeda M., Schimonoseki I. // Univ. Fisch. 1966. Vol.14. N.3. P. 173.

179. Takeda M., Schimonoseki I. // Univ. Fisch. -1976. -Vol. 10, №3.- P. 13.

180. Tom R.A., Carroad P.A. Effect of reaction conditions on hydrolysis of chitin by Serratia marcescens QMB 1466 chitinase // J.Food Shi.- 1981.-Vol.46.

181. Vaidya M.V., Bulusu K.R. Chitosan as coagulant and coagulant aid // J.Inst. Eng. (India). Environ. Eng. Div.- 1984,- Vol.64, №2. P.43-47.

182. Vermeulen C.A., Wessels J.G.N. Chitin biosynthesis by a fungal membrane preparation. Evidence for a transient noncrystalline state of chitin // Eur. J. Biochem.- 1986. -V.158,№2. P.411-415.

183. Welindes B.S. The crustacean cuticle. I .Studies on the composition of the cuticle // Сотр. Biochem. and Phusiol. A.- 1974. -Vol. 74, №2,- P.779-787.

184. Weltrowski M., Patry J., Bourget M., Reactive filter for textile dyes adsorption // 1st International conference of the European Chitin Society. Abstracts book. Brest-France. September 11-13, 1995. - P.39.

185. Wieckowcka E. Oznaczanie chityny na podstawi zanartosci glukozaminu // Chem.analiti. (Polska) -1968. -T.13, №6-P.1311-1317.

186. Woycicki W., Kreglewski A. Thermodinamic excess function of the binary systems of trifluoroacetic anhydride // Bull acad. Polon. Sci. Ser. Chim.-1964.- V.12.- P.263-266.

187. Wung W.,Qin W.,Li S., Bo S. Молекулярный вес хитина // Иньюн хуасюэ-CHIN. J.Appl. Chem.-1991.- № 6,- P.85-87.

188. Xavier M.T., Soares V.F., Freire D.G. a-amylase and glucosamylase immobilized on chitin and ceramic supports // Biomass.-1987.-Vol.l3,№l.- P.25-32.