Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Распределение и утилизация экзогенного и эндогенного α-токоферилхинона в организме поросят

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Жарова, Татьяна Владимировна

Введение.

1. Обзор литературы

1.1. Характеристика и биологическая функция витаминов группы Е.

1.2. Характеристика и биологическая функция а-токофе-рилхинона.

1.2.1. Метаболизм.

1.2.2. Физиологическая роль.

1.3. Цели и задачи исследований.

2. Собственные исследования

2.1. Условия проведения опытов.

2.1. Методы биохимических исследований.

3. Результаты исследований и их обсуждение

3.1. Влияние добавок а-токоферилхинона и а-токоферил-ацетата на рост поросят.

3.2. Влияние добавок а-токоферилхинона и а-токоферил-ацетата на реакцию крови

3.2.1. Стойкость эритроцитов к гемолизу.

3.2.2. Форменные элементы крови.

3.3. Влияние добавок а-токоферилхинона и а-токоферил-ацетата на всасывательную функцию стенки тонкого кишечника

3.3.1. Гидролиз а-токоферилацетата в желудочно-кишечном тракте.

3.3.2. Связывание а-токоферола.

3.3.3. Связывание а-токоферилхинона.

3.3.4. Связывание ретинола.

3.4. Влияние добавок а-токоферилхинона и а-токоферил-ацетата на статус а-токоферола, а-токоферилхинона и ретинола в печени

3.4.1. Субклеточное распределение.

3.4.2. Внутрипеченочное распределение.

3.4.3. Метаболизм а-токоферилхинона.

3.5. Распределение а-токоферола и а-токоферилхинона в организме поросят в связи с добавками а-токоферил-ацетата и а-токоферилхинона

3.5.1. Эндокринные железы.

3.5.2. Выделительная система

3.5.2.1. Желудочно-кишечный тракт.

3.5.2.2. Почки.

3.5.3. Селезенка.

3.5.4. Мышечная ткань.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Распределение и утилизация экзогенного и эндогенного α-токоферилхинона в организме поросят"

Актуальность темы. Альфа-токоферилхинон, являясь естественным метаболитом а-токоферола в организме животных и человека, всегда в той или иной степени интересовал исследователей как вещество, способное внести ясность в понимание механизма биологического действия витамина Е. С момента первого упоминания об этом соединении, в связи с его биологической активностью (O.N. Emerson е.а., 1939), дискуссия о роли и эффективности а-токоферил-хинона в организме животных продолжает существовать в литературе. В последнее время исследовательский интерес к этому метаболиту а-токоферола возрос в связи с сообщением об открытии у него свойства мощного ингибитора агрегации тромбоцитов (Е.А. Сох е.а., 1980). В этом аспекте он рассматривается как перспективный препарат для лечения тромбоцитарных болезней. Есть сведения, что а-токоферилхинон может синтезироваться в тканях минуя стадию образований а-токоферола (Р.Е. Hughes е.а., 1980) и восстанавливаться в дыхательной цепи (A. Bindoli е.а., 1985). Это соединение играет роль в осуществлении А-Е межвитаминных взаимодействий, возможно, за счет самостоятельного участия в обменных процессах, в том числе в реализации иммунной активности, приписываемой а-токоферолу. При этом мало что известно об обмене а-токоферил-хинона в организме сельскохозяйственных животных. Отсутствует достаточное биологическое обоснование его практического использования в животноводстве.

Задачи исследований. Задачи данной диссертационной работы (в рамках выбранного направления исследований) состояли в:

1) изучении накопления в тканях свиней свободного а-токоферил-хинона и его дальнейшей метаболизации в печени в связи с включением в рацион экзогенного аутентичного продукта или повышенной дозы а-токоферилацетата;

2) выявлении действия внутримышечного введения а-токоферил-хинона на концентрацию а-токоферола и а-токоферилхинона в печени, почках и мышцах;

3) исследовании влияния добавок а-токоферилхинона или а-токо-ферилацетата на всасывание ретинола в тонком кишечнике и накопление его в печени;

4) определении степени гидролиза а-токоферилацетата в тонком кишечнике свиней и изучении взаимосвязи между концентрациями а-токоферилхинона и убихинона в различных участках стенки тонкого кишечника.

Научная новизна. В работе впервые поднят вопрос об а-токофероле, как поставщике а-токоферилхинона в организме животных. Получены доказательства в пользу разделения функции а-токо-ферола и а-токоферилхинона. Дана характеристика стадий гидролиза а-токоферилацетата в желудочно-кишечном тракте свиней. Определено влияние добавок а-токоферилацетата или экзогенного а-токоферилхинона на локализацию максимумов связывания ретинола стенкой тонкого кишечника. Обнаружено преимущественное накопление экзогенного а-токоферилхинона щитовидной железой. Впервые описана кривая связывания а-токоферилхинона стенкой тонкого кишечника.

Практическое значение. В работе получены данные, которые могут быть использованы при выборе пути введения а-токоферил-хинота в организм свиней в практических целях. Разработан простой тест степени участия а-токоферола в стабилизации мембран эритроцитов.

Положения, выносимые на защиту:

1. Альфа-токоферол является лучшим поставщиком эндогенного а-токоферилхинона в организм животных, по сравнению с экзогенным его препаратом.

2. Функция витамина Е подразделяется на зависимую от а-токоферола стабилизацию мембран и контролируемую а-токоферил-хиноном регуляцию роста животных.

3. Надпочечниковая железа преимущественно накапливает а-токофе-рол без заметного окисления его в а-токоферилхинон, щитовидная - экзогенный а-токоферилхинон.

4. Гидролиз а-токоферилацетата протекает в просвете тонкого кишечника менее активно, чем в слизистой кишечника.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Жарова, Татьяна Владимировна

выводы

1. Добавки в корм синтетического а-токоферилхинона, в отличие от добавок а-токоферилацетата, не влияют на интенсивность спонтанного гемолиза эритроцитов поросят, при ее обратной связи с концентрацией а-токоферилхинона в эритроцитах (г = -0,74). Факт окисления а-токоферола в а-токоферилхинон является главной причиной стабилизации мембран эритроцитов.

2. Альфа-токоферилацетат гидролизуется неполностью в желудочно-кишечном тракте поросят. Около 30% от общего количества а-токоферилацетата кала содержится в виде исходного соединения. В стенке тонкого кишечника содержится только свободный а-токо-ферол и лишь следы а-токоферилацетата, как следствие превалирующего гидролиза эфира в клетках слизистой тонкого кишечника, по сравнению с гидролизом в просвете кишечника поросят.

3. Добавки в корм экзогенного а-токоферилхинона, как и супер дозирование а-токоферилацетатом, приводят к единообразной по характеру изменений кривой связывания а-токоферилхинона и а-токоферола с максимумами в верхней и нижней третях стенки тонкого кишечника. Кривая связывания а-токоферилхинона стенкой тонкого кишечника поросят, не получавших добавки а-токоферил-хинона, деформируется с образованием размытого максимума в нижней половине, где интенсивно протекает окисление а-токоферола в а-токоферилхинон при добавлении в рацион а-токоферилацетата.

4. Добавки в корм поросят синтетического а-токоферилхинона приводят к сдвигу максимума связывания ретинола стенкой тонкого кишечника в дистальном, а добавки а-токоферилацетата - в проксимальном направлении. Сдвиг максимума связывания в проксимальном направлении увеличивает поступление ретинола в печень, в то время, как сдвиг в дистальном направлении изменяет внутрипеченочное распределение ретинола, не влияя на среднюю его концентрацию в печени.

5. Альфа-токоферилацетат является лучшим поставщиком а-токо-ферилхинона в организме поросят в примененных дозах(а-токоферилхинон - 50 мг, а-токоферилацетат - 277 мг на 1 кг корма), вследствие более отлаженной доставки в органы мишени этого метаболита в форме а-токоферола.

6. При достаточно эффективном усвоении в желудочно-кишечном тракте поросят (41%) экзогенного а-токоферилхинона не обнаруживается сколько-нибудь существенное различие с контролем по его концентрации в органах и тканях, по синтезу в печени и утилизации с калом в форме конъюгатов.

7. Добавки синтетического препарата а-токоферилхинона в корм или внутримышечное его введение в организм поросят оказывают ро-стдепрессирующее действие, специфичное для а-токоферилхинона в рамках его функции, как регулятора роста животных.

8. По сравнению с оральным применением, внутримышечное введение экзогенного а-токоферилхинона поросятам наиболее эффективно, поскольку обеспечивает в тканях гораздо более высокое отношение а-токоферилхинона к а-токоферолу.

Практическое предложение.

Для тестирования обеспеченности поросят а-токоферолом рекомендуется проводить определение концентрации а-токоферилхицо-на в эритроцитах с помощью разработанного нами простого метода, основанного на определении разности УФ-спектра общих липидов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последние годы в мировой научной литературе оживились исследования по выяснению биологической роли а-токоферил-хинона, являющегося, как известно, продуктом окисления а-токо-ферола in vivo. Достаточно давно уже были проведены тесты на Е-витаминную активность а-токоферилхинона. Однако, как оказалось, если таковая активность существует, то она очень незначительна. В то же время, появились доказательства отличия а-токоферилхинона от а-токоферола по функциональному действию. В первую очередь это касается агрегации тромбоцитов, на которую а-токоферилхинон оказывает на порядок более высокое влияние (Е.А. Сох е.а.,1980). В настоящее время предложены возможные механизмы участия а-токоферилхинона в свертывании крови (Р. Dowd е.а., 1995). Стало известно, что а-токоферилхинон может быть более эффективным, чем а-токоферол, антиоксидантом, благодаря способности восстанавливаться в дыхательной цепи, составляя окислительно-восстановительную пару со своим гидрохиноном. В то же время пока неизвестны пути транспорта а-токоферилхинона в организме. Ничего не известно также о внутриклеточном транспорте а-токоферилхинона. Белки-переносчики а-токоферола, как правило, не связывают а-токоферилхинон. Для этих белков важно наличие свободного фенольного гид-роксила. У а-токоферилацетата он закрыт, а у а-токоферилхинона вообще отсутствует. В своих исследованиях мы проводили изучение субклеточного распределения а-токоферилхинона. Добавки экзогенного продукта, в отличие от включения в рацион а-токоферилацетата, приводили к уменьшению концентрации а-токоферилхинона в митохондриях и ядрах, что, скорее всего, свидетельствует об отсутствии внутриклеточных переносчиков этого вещества. Поэтому вряд ли возможно попадание а-токоферилхинона в митохондрии иначе, как за счет а-токоферола. Для а-токоферилхинона транспорт от кишечника может протекать, по-видимому, за счет липопротеиновой системы организма. По этой причине на первом этапе необходимо было выяснить интенсивность поступления экзогенного а-токоферил-хинона в органы и ткани и сравнить его уровень с содержанием эндогенного а-токоферилхинона, поставляемого препаратом витамина Е за счет его окисления в а-токоферилхинон непосредственно в тканях. Из литературы известно о тесном взаимодействии между витаминами А и Е (Т. Moore 1957, 1967). Одно из важнейших предположений состоит в том, что в основе этого механизма лежит а-токоферилхинон. Ретинол способствует повышенному окислению а-токоферола в просвете тонкого кишечника, понижая таким образом его количество. Однако, по-видимому, все обстоит гораздо сложнее, ибо по данным нашей лаборатории а-токоферилхинон способен тормозить всасывание а-токоферола, и в этой связи действие витамина А по уменьшению всасывания а-токоферола оказывается опосредованным через а-токоферилхинон.

В качестве препарата витамина Е обычно используют а-токо-ферилацетат. Он отличается от природного тем, что последний имеет свободный гидроксил, и, следовательно свободный а-токоферол является поставщиком а-токоферилхинона в организм. В наших исследованиях установлено, что в стенке тонкого кишечника, при включении в рацион поросят а-токоферилацетата, обнаруживается почти исключительно свободный а-токоферол и лишь следы а-токоферилацетата (рис. 19), причем в кале около 30% общего количества а-токоферола представлено в виде а-токоферилацетата (рис. 20). Это говорит о том, что гидролиз а-токоферилацетата, протекающий в просвете тонкого кишечника, является начальной стадией. Завершается он в слизистой тонкого кишечника с такой интенсивностью, что внутри организма присутствует только свободный а-токоферол. Это первое обстоятельство, свидетельствующее о том, что а-токоферол может служить поставщиком а-токоферилхинона. При этом нельзя отрицать роли самого факта окисления а-токоферола в а-токоферилхинон, несмотря на то, что известен путь синтеза а-токоферилхинона у животных (P.E. Hughes е.а., 1980), который не включает стадию образования а-токоферола. Во-первых, потому, что природный а-токоферол присутствует в окружающей среде в больших количествах, особенно в зеленых растениях, являющихся основным кормом для животных; во-вторых, для а-токоферола существует строгая система транспорта в организме и внутри клеток. Здесь нельзя отрицать роль а-токоферола как биологического антиоксиданта, хотя легкая окисляемость хорошо характеризует его и как поставщика а-токоферилхинона в тканях. Одной из таких функций а-токоферола как такового может быть торможение им спонтанного гемолиза эритроцитов. При этом интересно, что чем сильнее гемолиз эритроцитов, тем ниже концентрация а-токоферилхинона в эритроцитах (рис. 17). Это обстоятельство еще раз подтверждает, что в основе предотвращения спонтанного гемолиза эритроцитов лежит сам факт окисления а-токоферола в а-токоферилхинон. Несмотря на очевидность этого факта, нельзя пока исключить и роль а-токоферилхинона в этом процессе. Мы получили пока единственное подтверждение тому, что предотвращение гемолиза эритроцитов специфично только для а-токоферола и состоит в его окислении. Это подтверждение заключается в том, что введение в корм экзогенного атокоферилхинона не оказывает влияния на интенсивность гемолиза (рис. 15). В то же время полная уверенность в этом блокируется тем, что а-токоферол является более эффективным поставщиком а-токоферилхинона в эритроциты, чем добавки в корм самого вещества, которое, по всей видимости, не имеет активной системы транспорта в эритроциты.

Для ессенциальных компонентов питания в стенке тонкого кишечника присутствуют специфические связывающие белки-накопители, количество которых меняется в проксимально-дистальном направлении кишечника. В этой связи мы прибегли к исследованию фрагментов стенки тонкого кишечника, применяя термин «связывание вещества» стенкой тонкого кишечника, имея ввиду присутствие в этих фрагментах специфических связывающих белков-накопителей, которые хорошо известны для ретинола и а-токоферола и которые определяют дальнейшую судьбу этих веществ в организме. Как оказалось, для ретинола максимальные количества кишечной формы ре-тинолсвязывающего бежа сосредоточены в верхней трети стенки тонкого кишечника. Добавки в корм поросят а-токоферилацетата и а-токо-ферилхинона влияют на содержание ретинолсвязывающего белка в стенке тонкого кишечника, изменяя локализацию его максимума. Альфа-токоферилацетат смещает его в проксимальном направлении, а а-токоферилхинон - в дистальном (рис. 26). Пока неизвестно, в какой мере на содержание в стенке тонкого кишечника связывающих белков влияет мицеллообразование в просвете кишечника, однако, из-за большой скорости продвижения химуса по тонкому кишечнику, вряд ли можно предполагать, что мицеллообразование играет первичную роль. Здесь, скорее всего, аккумуляция связывающих белков регламентируется со стороны организма, в соответствии с его потребностью в витаминах и физико-химической ситуацией в просвете кишечника. Интересно, что увеличение и сдвиг максимума в дисталь-ном направлении под влиянием а-токоферилхинона, а также уменьшение и сдвиг максимума в проксимальном направлении под влиянием а-токоферилацетата отразилось на содержании ретинола в печени не очень существенно (рис. 38). Добавки а-токоферилацетата несколько его увеличили. В то же время добавки а-токоферилхинона резко изменили внутрипеченочное распределение ретинола по абдоминальному краю среза левой медиальной доли органа (рис. 37), увеличивая концентрацию в нижней части печени. Этот факт оказался не связанным с внутрипеченочным распределением самого а-токоферилхинона (рис. 33). Возможно, что основную роль здесь играет косвенное действие а-токоферилхинона.

Что касается взаимосвязи между концентрацией ретинола в стенке тонкого кишечника и в печени, то во всех группах она положительна (рис. 36). Причем она хорошо согласуется с концентрацией ретинола в печени (рис. 38). В этом случае результаты по сдвигу максимума связывания стенкой тонкого кишечника добавками а-токоферилацетата или а-токоферилхинона свидетельствуют об усилении скорости поступления ретинола в печень, а уровень положительной корреляции может быть мерой интенсивности транспорта веществ от кишечника в печень. Обратная же зависимость, наоборот, может отражать поток из печени в стенку тонкого кишечника. В случае ретинола, имеющего в организме мощный механизм депонирования за счет создания большого градиента концентрации путем эсте-рификации - гидролиза, такая интерпретация полученных данных вполне закономерна и ее можно перенести и на другие соединения.

Связывание а-токоферола стенкой тонкого кишечника довольно подробно исследовалось в нашей лаборатории. Было показано, что свободный а-токоферол имеет максимум связывания в нижней трети стенки тонкого кишечника (В.И. Дудин, 19916, в), тогда как в верхней части стенки наблюдается максимум связывания а-токоферола из а-токоферилацетата. Эти эффекты явственно обычно наблюдаются только при супердозировании витамином Е, в то время, как при обычных дозах наличие 2-х пиков наблюдается не всегда. Мы не наблюдали двойного пика также в случае супердозирования при очень высокой эффективности связывания а-токоферола стенкой тонкого кишечника у свиней на откорме (опыт 3). По нашим же сведениям добавки а-токоферилхинона не оказали влияния по сравнению с контролем на эффективность связывания а-токоферола стенкой тонкого кишечника поросят. Судя по взаимосвязи между а-токо-феролом стенки тонкого кишечника и печени, у поросят контроля поток а-токоферола направлен в сторону поступления в печень, у поросят с добавкой а-токоферилацетата а-токоферол находится в равновесии между тканями. У животных, с добавками а-токоферилхинона, поток а-токоферола был направлен из печени в кишечник. Этот обнаруженный нами факт подтверждается фактическими исследованиями нашей лаборатории (C.B. Гршцук, 1995), когда внутримышечные инъекции а-токоферилхинона резко уменьшали содержание а-токоферола в стенке тонкого кишечника. Существование подобного антагонизма между а-токоферилхиноном и а-токоферолом может характеризовать последний, как поставщика а-токоферилхинона, что является важной функцией витамина Е. По характеру изменений внутрипеченочное распределение а-токоферола у поросят, получавших а-токоферилацетат, не отличалось от контроля (рис. 30). В то же время добавки а-токоферилхинона в нижней части среза вызывали изменения концентрации ретинола, только не такие контрастные (рис. 33).

Свободный а-токоферилхинон, как правило, обнаруживается в тканях в небольших количествах и возможно, что это сумма а-токоферилхинона и а-токоферилгидрохинона. Потому, что последний чрезвычайно легко окисляется в процессе выделения. По нашим данным, в стенке тонкого кишечника концентрация а-токоферилхинона в проксимально-дистальном направлении изменялась, подобно а-токоферолу, имея характер двухмаксимумной кривой (рис. 25). Особенно это заметно в группе, получавшей экзогенный а-токоферилхинон. В группах, контрольной и получавшей а-токоферилацетат, кривая связывания имеет деформированный вид и размытый максимум в нижней половине стенки тонкого кишечника. Именно в этой части стенки проявилось влияние добавок а-токоферилацетата, приводящее к некоторому увеличению концентрации а-токоферилхинона. В опыте 3, где мы из-за высоких уровней а-токоферола в стенке не обнаружили дистального максимума, концентрация а-токоферилхинона в проксимально-дистальном направлении изменялась по кривой, имеющей двухмаксимумный вид с акцентом в верхней половине стенки тонкого кишечника (рис. 24). На рисунке видно, что в этой части кишечника у кривой, построенной по концентрации а-токоферилхинона в процентах от а-токоферола, обозначился острый максимум. Это позволяет предположить, что отсутствие второго максимума связывания а-токоферола было связано с его окислением в стенке тонкого кишечника. В этом опыте мы обнаружили прямую связь концентрации а-токоферилхинона с концентрацией убихинона (г = 0,61) в стенке тонкого кишечника. Известно, что стенка тонкого кишечника удовлетворяет свои энергетические потребности: в основном за счет гликолиза. Вполне возможно, что а-токоферилхинон участвует в регуляции соотношения гликолиза и дыхания, эффективность которой зависит от работы дыхательной цепи, где а-токо-ферилхинон может восстанавливаться (А. ВтёоН е.а., 1985). В восстановленном виде он легко покидает митохондрии, проникая в ци-тозоль, где может выполнять окислительно-восстановительную функцию. Это связано с сохранением целостности мембран, особенно у лизосом, которые наиболее чувствительны к лактатацидозу, который, как правило, сопутствует активно протекающему гликолизу.

На основании взаимосвязи концентрации а-токоферилхинона в стенке тонкого кишечника и печени (рис. 32) можно сделать вывод, что при обычном Е-витаминном питании существует равновесие между тканями по концентрации а-токоферилхинона. Добавки а-токоферилацетата приводят к положительной корреляции, что может свидетельствовать о поставках а-токоферилхинона в печень за счет окисления а-токоферола в стенке тонкого кишечника. В то же время добавки экзогенного а-токоферилхинона порождают тенденции к оттоку этого вещества в сторону тонкого кишечника, скорее всего за счет механизма гепатоэнтеральной циркуляции. В нашей лаборатории установлено, что связывание стенкой тонкого кишечника меченого тритием а-токоферилхинона от времени экспозиции очень точно соответствует синтезу его конъюгатов в печени, но никак не изменениям концентрации а-токоферилхинона в печени. В связи с этими и нашими данными можно полагать, что всасывание а-токоферилхинона в тонком кишечнике регламентируется продуктами его дальнейшей метаболизации, в том числе конъюгатами. Действие этих регулирующих стимулов может распространяться и на всасывание а-токоферола.

Внутрипеченочное распределение а-токоферилхинона по абдоминальному краю среза левой медиальной доли органа по направленности изменений больших различий не имело (рис. 32). Такие изменения получены в нашей лаборатории при применении специальных условий эксперимента (А-гиповитаминоз, время бодрствования, пол животных). Наши данные, полученные на животных с нормальным А-витаминным питанием в момент бодрствования, вполне в этом плане соответствуют полученным в нашей лаборатории (В.И. Дудин, 1998, неопубликованные данные). Что касается среднего содержания а-токоферилхинона в печени (рис. 33), то, как и ожидалось, добавки а-токоферилацетата явились лучшими поставщиками а-токоферилхинона, чем добавки экзогенного препарата последнего. В то же время, добавки экзогенного а-токоферилхинона приводили к усилению в печени дальнейшей метаболизации, которая была заметно выше, чем при добавлении в корм а-токоферилацетата. Здесь можно отметить различную судьбу экзогенного и эндогенного а-токоферилхинона, что объясняется неодинаковыми путями их транспорта. Один переносится в форме а-токоферола, другой - в аутентичной форме.

Судя по экскреции связанного а-токоферилхинона с калом, общий метаболизм этого соединения в организме отличается от синтеза связанного а-токоферилхинона в печени. В кале поросят, получавших добавки а-токоферилацетата, концентрация конъюгатов а-токоферилхинона была существенно выше, чем в кале животных с добавками экзогенного а-токоферилхинона. Здесь возможен определенный вклад микрофлоры желудочно-кишечного тракта. Добавки а-токоферилхинона могли изменить состояние микрофлоры таким образом, что гидролиз конъюгатов был выше, чем в других группах. Однако, скорее всего, сс-токоферол окисляется в а-токоферилхинон более интенсивно, а отсюда и больше а-токоферилхинона выделяется с калом в форме водорастворимых конъюгатов.

Изучение распределения а-токоферола и а-токоферилхинона между тканями указало на некоторые различия. Надпочечная железа у крыс считается органом, который накапливает а-токоферол в неограниченных количествах. Ни в нашей лаборатории, ни в наших исследованиях этот факт не подтвердился. Возможно, что здесь существуют различия между видами животных. В то же время, по нашим данным, железа хорошо отвечает на повышение Е-витаминной обеспеченности поросят (табл. 7). Добавки а-токоферилхинона в рацион весьма незначительно увеличивали концентрацию а-токоферола в надпочечниках. Вместе с тем, мы не обнаружили существенных различий между группами животных в железе по концентрации а-токоферилхинона.

В нашей лаборатории много внимания уделено взаимосвязи функции витамина Е и щитовидной железы. Вполне возможно, что гормоны щитовидной железы активно влияют на метаболизм а-токоферола в печени. В самой щитовидной железе накопление а-токоферола весьма ограниченно и зависит от ее массы (В.И. Дудин, неопубликованные данные). По нашим исследованиям, добавки экзогенного а-токоферилхинона заметно уменьшают концентрацию а-токоферола в щитовидной железе (табл. 7), мало сказываясь на концентрациях продуктов его окисления. Здесь очевидно, что влияние добавок а-токоферилхинона на концентрацию а-токоферола в щитовидной железе является опосредованным. Важно, что щитовидная железа специфично аккумулирует экзогенный а-токоферилхинон, что свидетельствует о тесной связи между функциями щитовидной железы и а-токоферилхинона.

В других органах (почки, селезенка) добавки а-токоферилацетата всегда приводили к повышению концентрации а-токоферола и а-токоферилхинона. В то же время, добавки а-токоферилхинона проявили эффект некоторого уменьшения (почки) или увеличения (селезенка) концентрации а-токоферола в тканях, мало влияя на концентрацию а-токоферилхинона, особенно в селезенке. В мышечной ткани мы подтвердили известный факт уменьшения концентрации а-токо-ферола при повышенной обеспеченности рациона витамином Е. Одновременно наши исследования показали, что это происходит за счет более высокого окисления а-токоферола в а-токоферилхинон.

В своих исследованиях мы применяли также внутримышечное введение а-токоферилхинона подсосным поросятам, изучая соотношение а-токоферилхинона к а-токоферолу. При одних и тех же тенденциях орального и внутримышечного применения, инъекции резко увеличивали степень окисленности а-токоферола в почках и мышечной ткани. Это может свидетельствовать о том, что парентеральное введение для а-токоферилхинона более эффективно. В этом смысле наши данные подтверждают уже известные сведения (D.W. Woolley, 1945).

Представленные в диссертации данные о концентрации а-токоферола, а-токоферилхинона, использовании а-токоферилацетата организмом животных, а также его метаболизации по пути образования конъюгатов свидетельствуют о том, а-токоферилацетат в примененных дозах является лучшим поставщиком а-токоферилхинона в организм, чем экзогенный препарат последнего. Добавки в корм а-токоферилхинона, по сравнению с контролем, не вызывали заметных сдвигов всех изученных характеристик при достаточно высоком усвоении из корма. Это наводит на мысль о существовании неизвестного пока пути метаболизации а-токоферилхинона в организме животных. К сожалению в литературе представлены лишь некоторые фрагменты этого пути. Факт ростдепрессирующего действия добавок а-токоферилхинона, также не может быть объяснен с позиций результатов исследования известных путей метаболизма а-токоферилхинона, в полной мере изученных в настоящей диссертационной работе. Из работ проведенных в нашей лаборатории особый интерес представляют исследовании на дефицитных по витамину Е цыплятах (В.И. Дудин, JI.M. Двинская, 1976), когда выявилась роль а-токоферола как регулятора роста (рис. 46). Было обнаружено, что дефицит витамина Е ведет к нарушениям закономерностей роста, характеризующимся усилением его относительной скорости с возрастом. Добавки а-токоферола нормализуют процессы роста. Из наших данных вытекает, что ростовые эффекты витамина Е зависят от а-токоферилхинона. В этой связи следует интерпретировать полученные нами эффекты а-токоферилхинона, как рострегулирующие.

0,120,1 -0,080,060,040,02 -0

Рис. 46 Относительная скорость роста цыплят в период 0-2 (а) и 2-4 (б) недельного возраста в связи с дефицитом витамина Е (1) и с добавлением а-токоферилацетата в количестве 50 (2) и 150 (3) мг/кг корма (4 - коммерческий рацион) (у - (тк - шн)/тн). б а : : .J,,.!. ■п 2

12 3 4

-95В целом работа позволяет сделать заключение о функциональных различиях между а-токоферолом и а-токоферилхиноном. Первый участвует в стабилизации мембран, последний - в регуляции роста животных. Торможение роста а-токоферолом при его повышенных дозах, применяемых в целях повышения иммунной активности, в рационе животных ставит проблему увязывания ростовых эффектов а-токоферилхинона, гораздо более выраженных у него по сравнению с а-токоферолом, с повышением иммунной активности животных. Эта тема выходит за рамки данной диссертационной работы, ибо в ней впервые это направление выдвинуто, как первоочередное, для достижения прогресса в области поиска самостоятельных функций а-токоферилхинона в организме животных.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Жарова, Татьяна Владимировна, Боровск

1. Березовский В.М. Хромановые витамины: токоферолы (витамины группы Е) // Химия витаминов, М., Пищепромиздат, 1953, с.295-315

2. Витамин Е // Экспериментальная витаминология // П/р Ю.М. Островского. Минск: Наука и техника, 1979, с. 18-57

3. Воробьева А.И. Руководство по гематологии в 2-х т., М., Медицина, 1985

4. Грищук C.B. Метаболизм альфа-токоферола у поросят раннего возраста // Дисс. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук, Боровск, 1995, 130 с.

5. Дудин В.И., Двинская Л.М.// Труды ВНИИФБиП, 1976.

6. Двинская Л.М. Биологическое действие и эффективность использования а-токоферола и синтетических антиоксидантов в кормлении кур // Дисс. на соиск. уч. степ. докт. биол. наук, Боровск, ВНИИФБиП, 1976, 419 с.

7. Двинская Л.М., Решетова Л.В., Сорокин М.В., Рябых Т.Е. и др. Рекомендации витаминного питания с/х животных // М., ВО Агро-промиздат, 1989, 91 с.

8. Донченко Г.В. Биохимия убихинона //Киев, Наукова думка, 1988,240 с.

9. Донченко Г.В., Коваленко В.Н., Золоташко О.М. и др. Е-витаминная активность некоторых производных а-токоферола и влияние их на содержание убихинона в печени крыс // Прикл. биохимия и микробиология, 1979,15 (1): 18-23

10. Ю.Дудин В,И. Влияние антиоксидантов на метаболизм и использование витамина Е цыплятами раннего возраста // Дисс. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук, Боровск, ВНИИФБиП, 1982, 140 с.

11. П.Дудин В.И., Пьянкова Е.В. Взаимосвязь витамина Е в печени и селезенке цыплят-бройлеров в связи с возрастом. Проблемы физиологии, биохимии, биотехнологии и питания с/х животных // Отчет ВНИИФБиП, Боровск, 1990-1991, с.203-4

12. Душейко А А, Витамин А. Обмен и функции // Киев; Наукова думка, 1989,288 с.

13. Коваленко В.Н., Донченко Г.В., Маковецкий В.П., Свищук A.A. Е-витаминная активность производных витамина Е при экспериментальной энцефаломаляции у цыплят // Укр. биох. ж., 1979, 51 (6): 665-8

14. Колотилова А.И., Глушаков Е.П. Витамины (химия, биохимия и физиологическая роль) // Л., 1976.

15. Кудряшов Б.А. Биологические основы учения о витаминах // М., Советская наука,, 1948у с.338-87

16. Марри Р., Гренйер Д., Родуэлл В. Биохимия человека в 2-хЧ., М: Мир, 1993

17. Надиров Н.К. Токоферолы и их использование в медицине и сельском хозяйстве // М., Наука, 1991,336 с.

18. Пархомец В.П., Донченко Г.В. Метаболизм арахидоновой кислоты и витамина Е //Укр. биох. ж., 1992,64(6): 3-11

19. Плецитный К.Д. Витамины и иммунитет: витамин Е // Вопросы питания, 1997,4: 9-12

20. Сайфутдинов Р.Г. Влияние а-токоферола на концентрацию а-токо-ферилхинона в липидах крови людей // Бюлл. эксп. биологии и медицины, 1985, 9: 296-7

21. Спрьппкова H.A., Серебряков Н.Г., Спрышкова P.A. и др. Депонирующая роль пищеварительного тракта в обмене 0-1-метил-3Н.-токоферола при: бластомогенезе в мозжечке крыс // актуальные проблемы витаминологии: Тез. докл. научн. конф. Тарту, 1980, с. 39-41

22. Строжо И.К., Вевере JI.K. Изменения количества витамина Е в крови и тканях цыплят в зависимости от содержания его в рационе // Биохимия и физиология питания животных. Рига: Зинатне, 1972, с. 83-90

23. Сушинский М.М. Роль липопротеинов во всасывании и распределении витамина Е в организме поросят раннего отъема // Дисс. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук, Боровск, ВНИИФБиП, 1997, 114 с.

24. Труфанов A.B. Биохимия витаминов и антивитаминов // М., Колос, 1972.

25. Уильямс Б., Уилсон К. Методы практической биохимии. Пер. с англ. // М., Мир, 1978.

26. Физиология лейкоцитов человека, Л., Наука, 1979,232с.

27. Халмурадов А.Г., Тоцкий В.Н., Чаговец Р.В. Транспорт жирорастворимых витаминов // Киев: Наукова думка, 1980,216 с.

28. Чаговец Р.В., Кузнецова Л.Н., Лахно Е.В., Рыбина А.А. Некоторые проблемы обмена витаминов при избыточном их поступлении в организм // Витамины в эксперименте и клинике. М: Медицина, 1970, вып. 2

29. Чернухина Л.А., Донченко Г.В., Коваленко В.Н. Содержание и распределение убихинона и убихроменола в неомыляемой фракции субклеточных структур печени нормальных и Е-авитаминозных крыс // Укр. биох. ж., 1974, 46(4): 514-8

30. Шатерников В.А. Витамин Е. В кн.: Витамины. П/р М.И. Смирнова. М., Медицина, 1974, с.125-150

31. Arita М., Sato Y., Arai F., Inove К: Binding of alpha-tocopherylquinon, an oxidized form of alpha-tocopherol to glutatione-S-transferase in the liver cytosol // FEBS Lett., 1998, 436(3): 424-6

32. Bennet J.D. Use of a-tocopherylquinone in the treatment of ulcerative colitis // Gut, 1986,27 (6): 695-7

33. Bernheim F. Biochemical implications of prooxidants and antioxidants //Radiat. Res., Suppl., 1963, 3: 17-32

34. Bettger W.J., Olson R.E. Effect a-tocopherol and a-tocopherolquinone on vitamin K-depend carboxylation in the rat // Fed. Proc., 1982, 41: 344

35. Bieri J.G., Poukka R.K.H. In vitro hemolisis as related to erythrocyte content of a-tocopherol and polyunsaturated fatty acid // Fed. Proc., 1970, 29: 693

36. Bieri J.G., Tolliver T.J. On the occurrence of a-tocopherylquinone in rat tissue // J. Lipids, 1981,16 (10): 777-9

37. Biädoli A., Valente M., Cavalini L. Inhibition of lipids peroxidation by a-tocopherolquinon and a-tocopherolhydroquinone // Biochem. Int., 1985,10 (5): 735-61

38. Bjorneboe A., Bjorneboe G.A., Bodd E. et. at. Transport and distribution of a-tocopherol in lymph serum and liver cell in rats // Biochim. et biophys. acta: Mol. Cell Res., 1986, 889 (3): 31-5

39. Boguth W., Sernetz M. Uber die schildrusefunction der ratte nach verfuttern einer tocopherol und ubichinon mangeldiet. 2. Aufnahme von 131 J und morphokinese der rattenschidderuse // Intern. J. Vit. Nutr. Res., 1967,37(4): 412-5

40. Bonetti E., Novello F. Distribution of H3-tocopherol in rat tissues and subcellular particles // Int. J. Vitam. And Nutr. Res., 1976,46(2): 244-7

41. Boscoboinik D., Ozer N.K., Moser U., Azzi A. Tocopherols and 6-hydroxy-chroman-2-carbonitrile derivatives inhibit vascular smooth muscle cell proliferation by a nonantioxidant mechanism // Arch. Biochem. Biophys., 1995,318 (1): 241-6

42. Bouman J., Slater E.C. Tocopherol content of heart-muscle preparations //Nature, 1956, 177(4520): 1181-2

43. Boyer P.D. The preparation of a reversible oxidation product of a-tocopherol, a-tocopheroxide, and related oxides // J. Amer. Chem. Soc., 1951, 73: 733-40

44. Bubjan J., Mettale D., Green J. The vitamin E activity of a-tocopheryl-quinone and a-tocopherylhydroquinone in the rat // Brit. J. Nutr., 1963, 17 (3): 392-8

45. Bucke C., Leech R.M., Halloway M., Morton R.A. The taxonomic distribution of plastoquinone and tocopherolquinone and their intracellular distribution in leaves of vicia faba // Biochim. Biophys. Acta, 1966, 112:19-34

46. Canguly J. Absorption, transport and storage of vitamin A // Vit. and horm., 1960, 18: 387-402

47. Cardner H.K., Vang V.J., Niavis R.D. Removal of a-tocopherol from blood and its comparison with other lipids // Fed. Proc., 1986, 45(4): 841

48. Catigani G.L. An a-tocopherol binding protein in rat liver cytoplasm // Biochem. Biophys. Res. Commun., 1975,67(1): 66-72

49. Chernick S.S., Moe J.G., Rodnan G.P., Schwarz K. A metabolic lesion in dietary necrotic liver degeneration // J. Biol. Chem., 1955, 217(2): 829-53

50. Chow C.K., Draper H.H., Csallany A.S., Chiv M. The metabolism of14 14

51. C -a-tocopherylquinone and C -a-tocopherylhydroquinone // Lipids, 1967, 2 (5): 390-6- 53.Cox E.A., Rao G.H.R., Gerrard J.M., White J.G. The influence of vitamin E quinon on platelet structure, function, and biochemistry // Blood, 1980, 55 (6): 907-14

52. Csallany A.S., Draper H.H., Sheh S.W. Conversion of d-a-tocopherol14

53. C to tocopheryl-p-quinone in vivo // Arch. Biochem. Biophys., 1962, 98(1): 142-5

54. Csallany A.S., Ha Y.L. Alpha-tocopherol oxidation mediated by syper-oxide anion (C>2~)- Reactions in aprotic and protic conditions // Lipids, 1992,27:195-200

55. Cunningham J.J., Soarea J.H. Erythrocyte ghost tocopherol levels in chicks deficient or sufficient in vitamin E // Nutr. Rep. Intern., 1981, 23(2): 305-11

56. Dasilva E.J., Jensen A. Content of a-tocopherol in some blue-green algae //Biocim. Biophys. Acta, 1971,239:345-7

57. Diplock AT. In: Fat-soluble vitamins: their biochemistry \nd applications I I Heineman: London, 1985, pp. 154-224

58. Donaldson K.O., Nason A., Garrett R.N. The role of lipids in electron transport. 4. Tocopherol as a specific cofactor of mammalian cytochrome C reductase //J. Biol. Chem., 1958,233: 572-9

59. Dowd P., Zheng Z.B. On the mechanism of the anticlotting action of vitamin E quinone // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1995, 92(18): 8171-5

60. Draper H.H., Csallany A.S. Metabolism and function of vitamin E // Fed. Proc., 1969, 281(5): 1690

61. Eden E., Sellers K.C. The absorption of vitamin A in ruminants and rats // Biochem. J., 1949, 44(3): 204-67

62. Eldamhougy S., Elhelw Z., Yamaman G. e.a. The vitamin E status among glucose-6-phosphate dehydrogenase deficient patients and effectiveness^ of oral vitamin E // Int. J. Vitamin and Nutrition Research, 1988,58(2): 184-8

63. Emerson O.N., Emerson G.A., Evans H.M. The vitamin E activity of a-tocoquinone //J. Biol. Chem., 1939,131(2): 409-12

64. Evans H.M. The pioneer history of vitamin E. Vitamins and applications //Symposium on vitamin E and metabolism in honor of professor H.M. Evans / AP N.Y., London, 1962,2: 379-87

65. Evans H.M., Emerson O.H., Emerson G.A. The isolation from wheat germ oil of an alcohol a-tocopherol // J. Biol. Chem., 1936,113:319

66. Fong J.S.C. Alpha-tocopherol: its inhibition on human platelet aggregation II Experienta, 1976, 32: 639-43

67. Fragata M., Bellamare F. Model of singlet oxygen scavenging by a-tocopherol in biomembranes // Chem. and Phys. Lipids , 1980, 27(2): 93-9

68. Fukuzawa K., Gebiski. Oxidation of a-tocopherol in micelles and liposomes by the hydroxyl perhydroxyl, and superoxide free radicals //Arch. Biochem. Biophys., 1983,226: 242-51

69. Gallo-Torres H.E., Miller O.N., Hamilton J.G., Tratnyck C. Distribution and metabolism of two orally administered esters of tocopherol // Lipids, 19716,6(5): 318-25

70. Gallo-Torres H.E., Weber F., Wiss O. The effect of different dietary on the lymphatic appearance of vitamin E // Int. J. Vitam. Nutr. Res., 1971a, 41: 504-15

71. Ganguly J. Absorption, transport and storage of vitamin A // Vit. and horm., 1960,18: 387-402

72. Gavino V.C., Miller J.S., Ikharebha S.O., Milo G.E., Cornwell D.G. Effect of polyunsaturated fatty acids and antioxidants on lipid peroxidation in tissue cultures // J. Lipid Res., 1981,22 (5): 761-9

73. Gisinnger C., Watanabe J., Colwell J.A. Vitamin E and platelet eicosa-noids in diabetes mellitus // Prostaglandins Leucotrienes and Essential Fatty Acids, 1990,40:169-76

74. Gloor U., Wiss O. Resorption, retention und Verteilung von Phyllochinon, menachinon und a-tocopherolchinon im vergleich zum a-tocopherol bei ratte // Helv. Chim. Acta, 1966,49(8): 2590-4

75. Gorman A.A., Hamblett J., Standen M.C. The mechanism of reaction of singlet oxygen with vitamin E // Primary Poto. Proc. Biol. Med. Proc. Nato. Adv. Study Inat. Bressanone, 16-28 Sept., 1984, London, 1985, 4: 201-3

76. Gorwin L.M. Studies on peroxidation in vitamin E-deflcient rat liver homogenates //Arch. Biochem. Biophys., 1962, 97: 51-8

77. Granot E., Tamirl., Deckelbaum J. Neutral lipid transfer proteiS does not regulate alpha-tocopherol transfer between human plasma lipoproteins//Lipids, 1988, 23(1): 17-21

78. Green J., Diplock A.T., Bunjan J. Ubiquionone (coenzyme Q) and the function of vitamin E//Nature, 1961, 190(4773): 318-25

79. Green J., Prise S.A., Gare L. Tocopherols in microorganisms // Nature, 1959,184:1339

80. Guggenheim K. The biological value of carotene from various sources and the effect of vitamin E on utilization of carotene and of vitamin A // Biochem. J., 1944,38(1): 260-70

81. Guthy E. Use of a-tocopherylquinone in ulcerative colitis // Gut, 1986, 27(11): 1400

82. Gwebu E.T., Trewyl R.W., Cornwell D.G., Panganamala R.V. Vitamin E and the inhibition of platelet lipoxygenase // Res. Comm. Chem. Pathol. Pharmacol., 1980, 28: 361-76

83. Ha Y.L., Csallany A.S. Alpha-tocopherol oxidation mediated by superoxide anion(02~). 2.Identification of the stable a-tocopherol oxidation products // Lipids, 1992,27: 201-5

84. Hamelin S.S., Chan A. Modulation of platelet tromboxane and malon-dialdehyde by dietary vitamin E and linoleate // Lipids, 1983,18: 267

85. Harrison W.H., Gender J.E., Blakely E.R., Boyer P.D. Interconversions of alpha-tocopherol and its oxidation products // Biochim. et Biophys. Acta, 1956,21: 150

86. Hayashi T., Kanetoshi A., Nakamura M. e.a. Reduction of a-tocopherolquinone to a-tocopherolhydroquinone in rat hepatocytes // Biochem. Pharmacol., 1992,44(3): 489-93

87. Horwitt M.K. Vitamin E and lipid metabolism in man // Arner. J. Clin. Nutr., 1960, 8:451-4

88. Hughes P.E., Hunter W.I., Tove S.B. BiohySrogenetion of unsaturated fatty acids //J. Biol. Chem., 19826,257(7): 3643-9

89. Hughes P.E., Tove S.B. Identification of deoxy-a-tocopherylquinol as another endogenous electron donor for biohydrogenation // J. Biol. Chem., 1980, 255(24): 11802-6

90. Hughes P.E., Tove S.B. Occurrence of a-tocopherolquinone and a-toco-pherolquinol in microorganism // J. Bacteriology, 1982a, 15(3) : 1397-402

91. Hughes P.E., Tove S.B. Synthesis and mitochondrial reduction // Nutr. Rev., 1981,39:285-7

92. Hughes P.E., Tove S.B. Synthesis of a-tocopherolquinone by the rat and reduction by mitochondria // J. Biol. Chem., 1980,255(15): 7095-7

93. Hughes P.E.,Tove S.B. Occurrence of alpha-tocopherolquinone and al-~ pha-tocopherolquinol in microorganism // J.Bacteriology, 1982a, 15(3):1397-402

94. Jensen M. Vitamin E and the growing pig // Uppsala: Swed. Univ. Agr. Sci., 1989,150 c. (91-576-3710-5)

95. Kaiser S.,.Mascio P.Di., Murhy M.E., Sies H. Physical and chemical scavenging of singlet molecular oxygen by tocopherols // Arch. Bio-chem. Biophys., 1990,277: 101-8

96. Karpen C., Cataland S., O' Dorisio T., Paranamala R. Interrelation of platelet vitamin E and tromboxane synthesis in type I diabetes mellitus //Diabets, 1984,33:239

97. Karpen C., Pritchard K., Arnold J. e.a. Restoration of prostacyclin tromboxane A2 balance in the diabetic rat. Influence of dietary vitamin E//Diabets, 1982, 31:947

98. Karpen C.W?, Melora A.J., Thewyn R.W. e.a. Modulation^ of platelet tromboxane A2 and arterial prostacyclin by dietary vitamin E // Prostaglandins, 1981, 22: 651-4

99. Karrer P., Geiger A. Uber alfa-tocopherolchinon // Helv. Chim. Acta, 1940,23(3) : 455-9

100. Kohar I, Baca M, Suarna C e.a. Is a-tocopherol a reservoir for a-tocopherylhydroquinone? / / Free Radic Biol. Med. 1995, 19(2): 197207

101. Kruk J. Physicochemical properties of charge-transfer complexes of plastoquinone and alpha-tocopherol quinone, and their possible role in vivo//Biophys. Chem., 1988,32(1): 51-6

102. Kruk J., Schmid K., Strzalka K. Antioxidant properties of plasto-quinol and other biological prenylquinols in liposomes and solution // Free RadicallResearch, 1994,21: 409-16

103. Kruk J., Strzalka K. Occurrence and function of a-tocopherol quinone in plants // J. Plant Physiol., 1995, 145(4): 405-9

104. Kurakawa I., Kimura T., Nagai T., Mitsuo K. The effect of vitamin E on the adenine diphosphate induced platelet aggregation // Vitaminology, 1971,17:181

105. Lack L., Weiner I.M. Bile salt transport system. In the bile acids, vol. 2. Physiology and metabolism, pp. 33-54. N. Y., plenum press.

106. Lichtenthaler H.K. Verbreitung und relative konzentration der lipo-philen plastidenchinine in grunen pflanzen // Planta, 1968, 81: 140-52

107. Lichtenthaler H.K., Prenzei U., Douce R., Joyard J. Localization of prenylquinones in the envelope of spinach chloroplasts // Biochim. Biophys. Acta, 1981, 641: 99-105

108. Liepkalns V.A., Icard-Éiepkalns C., Cornwell D.G. Regulation of 1 cell division in a human glioma cell clone by arachidonic acid and a-tocopherolquinone // Cancer Lett., 1982,15(2): 173-8

109. Lindsey J.A., Zhang H., Kaseki H. et.at. Fatty acid metabolism and cell proliferation. 7. Antioxidant effects of tocopherols and their qui-nones//Lipids, 1985, 20(3): 151-7

110. Lowe J.S., Morton R.A. Some aspects of vitamin A metabolism // Vit. andhorm., 1956, 14: 97-139

111. Lucy J.A., Dingle J.T. Fat-soluble vitamins and biological membranes//Nature, 1964, 204:156-7

112. Machlin L., Filipski R., Willis A. e.a. Influence of vitamin E on platelet aggregation and trombocythemia in the rat // Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1975, 149: 275-9

113. Mackenzie J.B., Rosenkrants H., Ulick S., Milchorad A.T. The biological activity of a-tocopherylhydroquinone and a-tocopherylquinone II J. Biol. Chem., 1950,183(2): 655-62

114. Margmard R. The influence of temperature and photoperiod on fat content, batty acid composition, and tocopherols of rapeseed (Brassica napya) and mustard species (Sinapis alba, Brassica júncea and Brassica nigra) II Agrochemica, 1985,29(2): 145-53

115. Martius C., Eilingsteld H. Die oxidation von monoa therm methy-sub-stituierter hydrochinone und von alfa-tocopherol mic eisensalsen // Libbig Ann. Chem., 1957,607:159-68

116. Mc.Carthy J.F., Aherne F.X., Okai D.B. Use of HCL insoluble as an index material for determining apparent digestibility with pigs // Can. J. Anim. Sci., 1974, 54: 107-9

117. Mellhorn D.K., Gross S., Lake G.A., Leu J.H. The hydrogen peroxide fragility test and of various etiologies // Blood, 1971,37: 438-44

118. Mellors A., Barnes M.Mc.C. The distribution and metabolism of a-tocopherol in the rat // Brit. J. Nutr., 1966, 20(1): 69-77

119. Mezes M. Effect of thyrotropin (TSH) on vitamin treatment on the vitamin A and E and lipid-peroxide status of domestic fowl // Acta Vet. Hung., 1984, 32(3-4): 175-80

120. Mezes M. Ingibitory effect of thyrotropin (TSH) on vitamin E utilization in domestic fowl // Acta Vet. Hung., 1987, 35(3): 307-11

121. Miller J.S., Gavino V.C., Ackerman G.A. et.at. Triglycerides, lipid droplets, and lysosomes in aorta smooth muscle cells during the control of cell proliferation with polyunsaturated fatty acids and vitamin E // Lab. Invest., 1980, 42: 495-506

122. Moore A.N., Ingold K.U. Alpha-tocopheryl quinone is converted into vitamin E in man // Free Radic Biol. Med., 1997,22(5): 931-4

123. Moore T. Effects of vitamin A deficiency in animals // The vitamins/ Eds: Sebrel J.S, Harris R. S. // N.Y.; London: Acad. Press., 1967, 1: 245-66

124. Moore T. Vitamin A // N.Y.: Elsevier, 1957, 560 p.

125. Morton R.A., Phillips W.E. Unsaponifable constituent of liver, kidney and heart tissues from vitamin E deficient rats compared with a-tocopherol supplemented rats // Biochem. J., 1959, 73 : 427

126. Muller D.P.R., Manning J.A., Mathios P.M., Harries J.T. Studies on the intestinal hydrolysis of tocopherol esters // Int. J. Vitam. Nutr. Res., 1976,2 :207-10

127. Niskimi M., Yamada H., Yagi K. Oxidation by superoxide of tocopherols dispersed in aqueous media with deoxycholate // Biochim. Biophys. Acta, 1980, 627: 101-8

128. Olson J. A. Some aspects of vitamin A metabolism // Vit. and horm., 1968,26: 1-64

129. Omamta T, Murata N. Cytochromes and prenylquinones in preparation of cytoplasmic and thylakoid membranes from the cyanobacterium //Biochim. Biophys. Acta, 1984,766: 395-402

130. Oxman M.A., Cohen L.A. Reductive cyclisation of a-tocopherylquinone//Biocim. Biophys. Acta, 1966,113(2): 412-3

131. Park Dong Ki, Torao Junji, Matsashita Seturo. Influence of inter-esterification on the antioxidative stability of vegetable oils // Agr. and Biol. Chem., 1983, 47 (1): 121-23

132. Patil G.S., Cornwell D.G. Interfacial oxidation of a-tocopherol and the surface properties of its oxidation products // J. Lipid Res., 1978, 19: 416-22

133. Patnaik R.N., Nair P.P. Studies on the binding of d-a-tocopherol to rat liver nuclei//Arch. Biochem. Biophys., 1977, 178(2): 333-41

134. Plack P. A., Bieri J.G. Metabolic products of a-tocopherol in the livers of rats given intraperitonicus injections of 14C-a-tocopherol // J. Biochim. et Biophys. Acta, 1964, 84: 129-38

135. Rajaram O.V., Fatterpaker P., Sreenivasan A. Occurrence of a-tocopherol binding protein in rat liver cell sap. // Biochem. Biophys. Res. Communs, 1973, 52(2): 459-65

136. Rao G.H.R., Cox C.A., Gerrard J.M., White J.G. Alpha-tocopherolquinone (a-TQ): a potent inhibitor of platelet function // Progress in Lipid Research, 1981, 20: 549-52

137. Rao G.H.R., Keich T.P., White J.G. Preparation, separation and characterization of vitamin E quinone // J. Chromat., 1980, 196: 506-11

138. Reed L.J. Biochemistry of lipoic acid // Vitamins hormones, N.Y.:Acad. Press, 1962, 20: 1-38

139. Rousseau B., Dostal L., Rosazza J.P.N. Biotransformations of tocopherols by Streptomyces catenulae // Lipids, 1997, 32(1): 79-84

140. Schwarz K. The cellular mechanisms of vitamin E action: direct and indirect effects of a-tocopherol on mitochondrial respiration // Ann. N.Y., Acad. Sci., 1972, 203: 45-52

141. Scott M.L. Studies on vitamin E and related factors in nutrition and metabolism // In: Fat soluble vitamins. Vinsconsin : Vinscinsine Univ. Press., 1970, p. 355-68

142. Scudi J.V., Bush R.P. Determination of the tocopherols and the to-copherylquinones by the calorimetric oxidation reduction method // J. Biol. Chem 1942, 146(1): 1-6

143. Sherman B.S. 3H-vitamin A and rat skin: Autoradiographic observations //J. Vitaminol., 1970, 16: 259-62

144. Simon E.J., Gross C.S., Milhorat A.T. The metabolism of vitamin E. 1. The absorption and excretion of d-a-tocopheryl-5-methyl-14C-succinate//J. Biol. Chem., 1956,221(2): 797-805

145. Skinner W.A., Parkhurat R.M. Reaction products of tocopherols // Lipids, 1971, 6(4): 240-4

146. Sklan D., Donoghue S. Vitamin E response to high dietary vitamin A in the chick // The J. of Nutr., 1982, 112(4): 759-63

147. Steiner M. Effect of a-tocopherol administration on platelet function in man// Thromb. Haemostas, 1983, 49: 73-5

148. Stocker R., Hunt N.H., Weideman M.J., Clark I. A. Protection of vitamin E from oxidation by increased ascorbic acid content within Plasmodium vinckei-infected erythrocytes // Biochim. Biophys. Acta (L), 1986, 876(2): 294-9

149. Thanney Ml., Palhof B.A., De Carlo M.R. etat. Sources of variation of dry matter digestibility measured by the acid insoluble as marker //Animal Sci., 1985, 68(3): 661-8

150. Thorton D.E., Jones K.H., Jiang Z. et.at. Antioxidant and cytotoxic tocopherylquinones in normal and cancer cells // Free Radic Biol. Med., 1995, 18(6): 963-76

151. Tohgi H., Abe T., Sakehi M., Yamazaki K.5 Tahashi S. Alpha-tocopherol quinone level is remarkably low in the cerebrospinal fluid of patients with sporadic amyotropic lateral sclerosis // Neur. Lett., 1996, 207(1): 5-8

152. Traber M.G., Ingold K.U., Burton G.W., Kaygen H.J. Absorption and transport of deuterium-substituted 2 R,4'R,8'R-alpha-tocopherol in human lipoprotein // Lipids, 1988, 23: 791-8

153. Ullrey D.E. Vitamin E for swine // J.of Animal Science, 1981, 53(4): 1039-56

154. Uotila L. In: Current advances in vitamin К research // Amsterdam, 1988, pp. 59-64

155. Vatassery G.T. Oxidation of vitamin E in red cell membranes by fatty acids, hydroperoxides and selected oxidants // Lipids, 1989, 24(4): 299-304

156. Weber F., Barnes M.Mc.C Studies on the absorption, distribution and metabolism of L-a-tocopherol // Biochem. Biophys. Res. Communs, 1964,14(1): 189-92

157. Weber F., Gloor U., Wuersch J., Wiss O. Studies on the absorption, distribution and metabolism of L-a-tocopherol // Biochem. Biophys. Res. Communs, 1964, 14(1): 189-92

158. Weber F., Weiser H., Wiss O. Bedarf on vitamin E in athangigkeit von der zufuhr an linosaure // Z. Ernahrungswiss, 1964, 4(2): 245-52

159. Weiser H., Vecehi M. Stereoisomers of a-tocopheryl acetate. Characterization of the sample by physicochemical methods and determination of biological activities in the rat resorption-gesteition test // Int. J. Yit. Nutr. Res., 1981, 51 (2): 100-13

160. Whistance G.R., Dillon J.F., Threlfall D.R. The nature, intergeneric description and biosynthesis of isoprenoid quinones and phenols in gramnegativebacteria//Biochem. J., 1969, 111: 461-72

161. Wiseman J. Жиры в питании c/x животных. Пер. с англ. // М., Агропромиздат, 1987, 406 с.

162. Woolley D.W. Some biological effects produced by a-tocopherol quinone//J. Biol. Chem., 1945,159(1): 59-66

163. Yamanaka N. In: Biomedical and Clinical Aspects of coenzyme Q // Amsterdam, 1980,2:213-24

164. Yang N.Y.L., Desai I.D. Effect of high levels of dietary vitamin E on hematological indices and biochemical parameters in rats // J. Nutr., 1977,107: 1410-7