Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Ранние биохимические сдвиги при наследственной дегенерации сетчатки

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Чусова, Галина Германовна

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

Раздел I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. КРАТКИЕ СВЕДЕНИЯ О СТРУКТУРЕ СЕТЧАТКИ, ЕЕ ЗОТОРЕ-ЦЕПТОРБЫХ КЛЕТКАХ И НАСЛЕДСТВЕННОЙ ДЕГЕНЕРАЦИИ ЭТОЙ ТКАНИ.

1.1. Краткие сведения о структуре фоторецептор-ных клеток

1.2. Краткие сведения о наследственной дегенерации сетчатки

Глава 2. БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В СЕТЧАТКЕ ПРИ РАЗВИТИИ

НАСЛЕДСТВЕННОЙ ДЕГЕНЕРАЦИИ ТКАНИ

Глава 3. ГИПОТЕЗЫ О ПРИЧИНАХ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ДЕГЕНЕРАЦИИ

СЕТЧАТКИ

Глава 4. ИЗМЕНЕНИЯ В КРОВИ И СОСУДИСТОЙ СИСТЕМЕ ПРИ РАЗВИТИИ НАС ЛИДС ТВЕННОЙ ДЕГЕНЕРАЩ1И СЕТЧАТКИ.

Раздел П. ЭКСПЕРШЛШТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 5. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

5.1. Штерн алы исследования.

5.2. Определение родопсина

5.3. Электрофорез водорастворимых белков в поли-авфиламидном геле

5.4. Электрофорез мембранных белков (с додецил-сульфатом натрия)

5.5. Определение фосфодиэстеразной активности методом окраски в гелях

5.6. Определение малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты

5.7. Определение активности изучаемых ферментов

5.8. Прочие определения.

5.9. Статистическая обработка.'

5.10. Использованные реактивы и приборы

Раздел Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 6. ЭЛЕКТРОШРЕТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ БЕЖОВ СЕТЧАТКИ И ПИГМЕНТНОГО ЭПИТЕЛИЯ; ВЫЯВЛЕНИЕ ФОСФОДИЭСТЕРАЗНОЙ АКТИВНОСТИ МЕТОДОМ ОКРАСКИ В ГЕЛЯХ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ОПСИНА В ПРОЦЕССЕ ПОСТНАТАЛШОГО РАЗВИТИЯ ЖИВОТНЫХ

6.1. Электрофоретическое изучение белков сетчатки и пигментного эпителия.

6.2. Электрофоретическое изучение мембранных белков сетчатки и пигментного эпителия; идентификация опсина.

6.3. Выявление фосфодиэстеразнои активности методом окраски в гелях

Глава 7. ФОСФОДИЭСТЕРАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ СЕТЧАТКИ В НОРМЕ И ПРИ ДЕГЕНЕРАЦИИ ТКАНИ В ТЕЧЕНИЕ ПОСТНАТАЛШОГО

РАЗВИТИЯ.

Глава 8. НЕКОТОРЫЕ ФЕРМЕНТЫ ПРЕВРАЩЕНИЯ НУШЮТИДОВ В СЕТЧАТКЕ И ДРУГИХ ТКАНЯХ В НОРМЕ И ПРИ РАЗВИТИИ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ДЕГЕНЕРАЦИИ В ТЕЧЕНИЕ ПОСТНАТАЛЬ-НОЙ ЖИЗНИ

8.1. 5'-нуклеотидазная активность

8.2. Аденозиндезаминазная активность

Глава 9. КОНЕЧНЫЕ ПРОДУКТЫ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ

И ОЦЕНКА СТЕПЕНИ ЖИДКОСТНОСТИ МЕМБРАН

Глава 10. СОДЕРЖАНИЕ МОЧЕВОЙ КИСЛОТЫ В КРОВИ, МОЧЕ И ДРУГИХ ТКАНЯХ ПРИ РАЗВИТИИ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ДЕГЕНЕРА

ЦИИ СЕТЧАТКИ У КРЫС; СОДЕРЖАНИЕ ШЧЕВОЙ КИСЛОТЫ В КРОВИ

ЛЮДЕЙ БОЛЬНЫХ ПИГМЕНТНЫГЛ РЕТИНИТОМ.

ОБСУЖДЕНИЕ вывода . Ю

Введение Диссертация по биологии, на тему "Ранние биохимические сдвиги при наследственной дегенерации сетчатки"

Актуальность теш. Талеторетинальная дегенерация и, в частности, пигментный ретинит - одна из основных цричин сла-бовидения и слепоты у людей. Болезнь выражается в постепенной деструкции фоторецепторного слоя сетчатки, именно, исчезают наружные сегменты - первичные акцепторы фотонов, что и обуславливает потерю зрения. Существенное значение в процессе развития болезни имеет нарушение метаболических взаимоотношений между сетчаткой и ПЭ.

До настоящего времени нет радикальных мер лечения этой тяжелой болезни. Единственным пока средством, не излечивающим, но стабилизирующим в ряде случаев развитие патологического процесса является советский препарат Энкад, представляющий собой гидролизат РНК, содержащий набор различных нуклео-тидов (фукс и др., 1969).

В связи с этими данными особый интерес представляет изучение активностей ряда ферментов нуклеотидного пула в сетчатке, а также в других тканях в процессе развития этой болезни.

Заболевание подобное болезни людей имеется и у многих животных, в частности, выведена чистая линия крыс Campbell , у которых описана наследственная дегенерация сетчатки (Bourne et ai., 1938). Животные рождаются зрячими, но постепенно слепнут за счет деструкции фоторецепторного слоя сетчатки. В какой мере заболевание животных по своим биохимическим признакам подобно болезни людей, неизвестно. Анализ этого вопроса серьезно затрудняет недостаток аутопсического материала -сетчаток больных людей на разных стадиях развития заболевания. В то же время в литературе пока нет материалов по сравнительной биохимической характеристике крови пораженных животных и страдающих пигментным ретинитом людей, у которых эта ткань является одним из немногих доступных для изучения объектов исследования.

Патогенез заболевания неизвестен. Имеется несколько гипотез о причинах его возникновения у животных. Многие исследователи полагают, что решающее значение в процессе развития болезни имеют ранние изменения активности ФДЭ в НСП сетчатки; вследствие чего изменяется содержание цГШ, что и обуславливает деструкцию фоторецепторного слоя сетчатки ( Farber , Lolley , 1973; Schmidt ,Lolley , 1973; Farber , Lolley , 1974; Dewar et al 1975; Lolley , Farber , 1975). Однако, не все имеющиеся факты укладываются в эту гипотезу, кроме того, мало известно и об изменениях других ферментов нуклео-тидного пула Ъ сетчатке и НСП при развитии данной болезни.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлось провести систематическое изучение активности отдельных ферментов обмена пуриновых нуклеотидов в сетчатке и других тканях, а также определить содержание конечного продукта обмена пуриновых нуклеотидов в крови и моче в динамике развития наследственной дегенерации сетчатки у крыс. В соответствии с основной целью были поставлены следующие задачи:

I. Определить в разные сроки постнатальной жизни у больных и для контроля у здоровых щ)ыс активности ФДЭ в сетчатке, сопоставляя эти данные с содержанием родопсина - маркера фо-торецепторных мембран, в которых этот фермент преимущественно локализован. Одновременно полагали провести подробный электрофоретический анализ белков сетчатки и ПЭ с целью выявления ФДЭ и опсина в гелях.

2. Изучить динамику активностей 5'-нуклеотидазы, адено-зиндезаминазы, АТФаз в сетчатке, ПЭ и в ряде случаев в других тканях (мозг, печень, почка), у больных крыс, начиная с ранних сроков жизни. При наличии изменений ферментативных активностей попытаться проанализировать их возможные причины.

3. Провести определение содержания конечного продукта обмена пуриновых нуклеотидов, мочевой кислоты в крови и моче у крыс при развитии болезни. При обнаружении изменений провести соответствующее исследование в 1фови больных людей на базе Московского Института глазных болезней им. Гельмгольца и сравнить полученные данные при обследовании людей с материалами, полученными на крысах.

4. При обнаружении изменений в содержании мочевой кислоты в сыворотке щюви у больных людей предложить дополнительный биохимический тест для диагностики заболевания в клинике.

Научная новизна работы. Пересмотрено имеющееся в литературе представление о решающем значении ранних изменений активности ФДЭ в сетчатке при развитии наследственной дегенерации ткани у крыс. В связи с полученными результатами, оптически оценена гипотеза о первичной роли ранних изменений активности ФДЭ в НСП сетчатки в качестве .-основной причины заболевания. Проведено систематическое исследование не изученных ранее активностей некоторых ферментов (5'-нуклеотидазы, аде-нозиндезаминазы, АТФаз) нуклеотидного пула в сетчатке и в некоторых других тканях у больных животных. Впервые выявлены изменения 5'-нуклеотидазной активности в нефоторецепторных слоях сетчатки в ранние сроки жизни у крыс линии Campbell. Эти изменения настолько характерны, что могут быть использованы для оценки степени развития болезни у крыс на ранних стадиях ее проявления. Проанализированы возможные причины изменения 5'-нуклеотидазной активности, в частности, показаны относительно ранние изменения состояния липидов - изменение их перекисного окисления, изменения степени жидкостности мембран сетчатки.

В ранние сроки постнатальной жизни установлено увеличение содержания (примерно на 50%) мочевой кислоты в сыворотке крови (позднее и в моче) у больных животных по сравнению со здоровыми. Подобные изменения выявлены и в сыворотке крови у людей, больных пигментным ретинитом. Таким образом, впервые установлено определенное подобие биохимических изменений в 1фови у людей, больных пигментным ретинитом, и пораженных наследственной дегенерацией сетчатки животных.

Практическое значение работы. На основании полученных данных сформулировано положение, что наследственную дегенерацию сетчатки у крыс следует рассматривать как заболевание, связанное с нарушением различных, но не только фоторецептор-ных мембран сетчатки. Выявленное впервые увеличение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови больных людей и животных позволило установить определенное подобие биохимических сдвигов у них, что важно для использования результатов, полученных на животных, в частности, крысах, в клинике. Впервые предложен биохимический тест (определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови) для дополнительной диагностики пигментного ретинита у людей. В целом полученные результаты важны в теоретическом отношении для проблемы патохимии мембран, а также для дальнейшего развития исследований по изучению патогенеза наследственной дегенерации сетчатки. Уже сейчас полученные данные могут быть непосредственно использованы и клиницистами-офтальмологами.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Чусова, Галина Германовна

выводы

1. Методом электрофореза в полиакри лами дном геле установлено, что ФДЭ циклических нуклеотидов (не = 0,20) в процессе развития наследственной дегенерации сетчатки у крыс исчезала к 60 дню жизни животного. Исчезновение ФДЭ соответствовало по времени исчезновению мембранного белка опсина (Rf = 0,60) маркера фоторецепторных мембран. В ранние сроки развития болезни в сетчатке крыс выявлено относительное уменьшение водорастворимого белка с Rf = 0,37 и мембранного белка с Rf =0,29. Эти белки пока не идентифицированы.

Изменения белкового набора водорастворимых и мембранных белков пигментного эпителия выявлены у больных животных на поздних стадиях развития заболевания.

2. Показано, что изменения ФДЭ активности в сетчатке при развитии наследственной дегенерации ткани существенно зависит от способа расчета ферментативной активности. При расчете ФДЭ активности на I сетчатку подтверждены литературные данные о характере изменения активности этого фермента при развитии патологического процесса. При расчете ферментативной активности на моль родопсина изменений в активности ФДЭ в сетчатке больных животных по сравнению со здоровыми на ранних этапах развития болезни не выявлено. Сделано заключение, что изменения ФДЭ активности сетчатки носят вторичный характер, поскольку они обусловлены изменением количества тех структур, в которых сосредоточена основная масса фермента.

3. Показано существенное уменьшение 5'-нуклеотидазной активности (на 35%) в сетчатке больных животных по сравнению со здоровыми начиная с 10 дня жизни животного. Определение активности 5'-нуклеотидазы в сетчатке крыс линии Campbell (в возрасте от 8-ми до 20-ти дней жизни) можно использовать как биохимический тест для ранней диагностики наследственной дегенерации сетчатки у крыс.

4. Активности N'a+, К*-АТФазы и аденозиндезаминазы в сетчатке больных и здоровых крыс на протяжении 2-х месяцев жизни были одинаковыми.

5. С 8-го дня жизни у больных животных показано увеличение концентрации (на 50%) мочевой кислоты в сыворотке крови по сравнению с нормой; в моче подобные изменения проявлялись только у 2-х месячных животных.

6. У людей, страдающих пигментным ретинитом, концентрация мочевой кислоты в сыворотке крови была повышена по сравнению со здоровыми людьми в среднем на 50%. Предложен простой биохимический тест (определение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови) для дополнительной диагностики пигментного ретинита в клинике.

7. Сделано заключение, что наследственная дегенерация сетчатки у крыс линии Campbell связана с нарушением мембран различных слоев сетчатки.

8. По одногду из биохимических показателей (увеличение содержания мочевой кислоты в сыворотке крови) пигментный ретинит людей подобен заболеванию крыс.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Чусова, Галина Германовна, Ленинград

1. Авцын А.П., фукс Б.Б., Шабанова М.Е., Терещенко О.Д. 1977. Наследственные дистрофии сетчатки у человека и животных в связи с результатами их патогенетической терапии. Вестник АМН СССР, JS I, стр.71-79.

2. Бондарева Г.С. 1969. Значение биохимических тестов в диагностике дегенераций сетчатки. Офтальмологический журнал, $ I, стр.18-21.

3. Бондарева Г.С. 1970. Клинико-биохимическое исследование при дистрофии сетчатой оболочки глаза. Автореф.канд. дисс., Киев.

4. Говардовский В.И., Остапенко И. А., Шабанова М.Е., фукс Б.Б., Этингоф Р.Н. 1977. Измерения электроретинограм-мы и содержания родопсина крыс линии Hunter при развитии наследственной дегенерации сетчатки. Нейрофизиология, т.9, В 5, cip.527-531.

5. Деев А.И., Еремина Т.В., Спиричев В.Б. 1978. Влияние ретинола на перекисное окисление в фосфолипидных мембранах. Вопросы медицинской химии, т.24, )£ 6, стр.795-798.

6. Дмитриенко Н.П. 1981. Ферменты превращения внеклеточных адениннуклеотидов. Украинский биохимический журнал, т.53, J6 I, стр.114-123.

7. Донцов А.Е., Сакина Н.Л., Островский М.А. 1980. Сравнительное исследование перекисного окисления липидов в пигментном эпителии глаза пигментированных животных и альбиносов. Биохимия, т.45, № 5, стр.923-928.

8. Каган В.Е. 1977. Структурная организация липидной фазы и реакции перекисного окисления в мембранах фоторецепторов. Кн.:Механизмы сенсорной рецепции, Л., стр.66-70.

9. Каган В.Е. 1979. Ферментные и неферментные системы защиты мембран фоторецепторов от активных форм кислорода и перекисей липидов. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, т.88, J£ 8, стр. 164-166.

10. Карпова О.Б., Аврова Н.Ф., Остапенко И.А. 1979. Содержание и состав ганглиозидов сетчатки при наследственной дегенерации сетчатки у крыс. Библиографический указатель ВИНИТИ "Депонированные рукописи", IS 12, стр.73.

11. Кацнельсон Л.А., Трутнева К.В., Пантелеева О.А. и др. 1977. Основные факторы, влияющие на экспрессивность и пенетрантность генов при тапето-ретинальных абиотрофиях. Вестник офтальмологии, $ 6, стр.63-64.

12. Крепе Е.М. 1982. Об участии липидов (сульфоцеребро-зидов) в рецепции некоторых нейропептидов. Журнал эволюционной биохимии и физиологии, т.18, № 3, стр.221-228.

13. Маурер Г. 1971. Диск-электрофорез. Теория и практика электрофореза в полиакриламидном геле. "Мир", М., стр. 13134.

14. Ойзерман М.В. 1976. Биохимические, гистологические и электрофизиологические исследования сетчатки животных при наследственной дегенерации ткани. Успехи современной биологии, т.81, $ 3, стр.365-378.

15. Остапенко И.А., Берман А.Л., Этингоф Р.Н. 1969. Об определении родопсина и его ресинтеза в гомогенатах сетчатки. Биохимия, т.34, № 5, стр.1028-1033.

16. Пантелеева О.А. 1968. Некоторые биохимические показатели при наследственных тапеторетинальных дегенерациях. Кн.: Вопросы морфологии, микробиологии, физиологии, биохимии, авиационной медицины. М., стр.97-98.

17. Рокицкий П.Ф. Основы вариационной статистики для биологов. Минск, стр.79-104.

18. Смирнова С.П. 1965. Результаты исследования фракционного состава белков и липопротеидов сыворотки крови больных пигментным ретинитом. Вестник офтальмологии, № 6, стр.60-62.

19. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. 1977. Определение малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты. Кн.: Современные методы в биохимии, под ред. Ореховича В.Н., "Медицина", М., стр.66-68.

20. Стукалов С.Б., Писаренко С.Л. 1980. Этиология, патогенез, патологическая анатомия пигментной дистрофии сетчатки. Кн.: Пигментная дистрофия сетчатой оболочки, Воронеж, стр.5-21.

21. Сулло К.М. 1974. Определение мочевой кислоты в сыворотке крови модифицированным методом Брауна. Лабораторное дело, J& 6, стр.374.

22. Усова А.А., Остапенко И.А., Этингоф Р.Н. 1978. Белковый ингибитор фосфодиэстеразы циклических нуклеотидов в сетчатке при ее наследственной дегенерации. Вопросы медицинской химии, т.24, № 2, стр.227-232.

23. Фукс Б.Б., Шершевская С.Ф., Попова Л.М., Шнапер А.Л. 1969.Заместительный лечебный эффект рибонуклеотидов при некоторых болезнях. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, т.68, № 9, стр.23-29.

24. Фукс Б.Б. 1978. Материалы к анализу патогенеза наследственных дистрофий сетчатки. Вестник АМН СССР, $ 10, стр.29-35.

25. Шабанова М.Е., Терещенко О.Д., Остапенко И.А. 1978. Ресинтез родопсина у крыс с наследственной дистрофией сетчатки. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины,т.85, № 2, стр.167-170.

26. Шабанова М.Е., Терещенко О.Д., Остапенко И.А. 1978. Исследование ресинтеза родопсина на животных моделях дистрофии сетчатки. Вестник АМН СССР, й 10, стр.21-29.

27. Этингоф Р.Н. 1978. Ферменты наружных сегментов палочек сетчатки: проблема локализации и сопряженности с родопсином. Цитология, т.20, № I, стр.5-16.

28. Этингоф Р.Н. 1981. Новые аспекты в изучении циклических нуклеотидов (исследования на сетчатке). Успехи современной биологии, т.92, В 5, стр.198-211.

29. Этингоф Р.Н., Думлер И.Л. 1981. Фосфодиэстераза циклических нуклеотидов. У*фаинский биохимический журнал, т.53, В 2, стр.28-43.

30. Эфроимсон В.П. 1968. Краткое описание и генетическая характеристика некоторых наследственных болезней. Кн.: Введение в медицинскую генетику. М., стр.355.

31. Agnisola C.,Foti L.,Genoino I.I.1980.Influence of the age on 5'-nucleotidase in plasma membranes isolated from rat liver.Mechan.Agein.Devel.,v.13,p.227-229.

32. Akhtar M.,Blosse P.,Dewhurst P.1968.Studies on vision.Thenature of the retinal-opsin linkage.Biochem.J.,v.110, N 4,p.693-702.

33. Akhar M.,Hirtenstein M.1969.Chemistry of the activi site ofrhodopsin.Biochem.J.,v.115,N 3,p.607-608.

34. Anderson D.,Fischer S.,Erickson P. ,Fabor G.1980.Rod and conedisc shedding in the rhesus monkey retina:A.Quatitati-tive study.Exp.Eye Res.,v.30,N 5,p.559-574.

35. Ansell P.,Marshall J.1974.The disribution of extra -cellularacid phosphatase in the retinas of retinits pigmentosa rats.Exp.Eye Res.,v. 19,N 3>P*273-279.

36. Aquirre G.,Faber D.,Lolley R.,Fletcher R.,Chader G.1978.Rodcone dysplasia in irish setters:A defect in cyclic GMP metabolism in visual cells.Science,v.201,N 4361,p.1133-1134.

37. Aquirre G.,Farber D.,Lolley R.,O'Brien P.,Alligood J.Fletcher

38. R.1982.Retinal degenerations in the dog:III.Abnormal cyclic nucleotide metabolism in rod-cone dysplasia. Exp.Eye Res.,v.35,N 6,p.625-642.

39. Batelle B.,LaYail M.1980.Protein synthesis in retinas of ratwith interited retinal dystrophy.Exp.Eye Res.,v.31, N 3,p.251-269.

40. Beaconsfield P.,Reading H.1964.Pathways of glucose metabolismand nuceic acid synthesis.Nature,v.202,N 4931»p.464-466.

41. Berman E.,Segal N.,Protion S.,Rothmon H.,Freeney-Burns L.1981.1.terited retinal dystrophy in RCS rats:a dificiency- 108 in vitamin A esterfication in pigments epithelium. Nature, v. 294, N 5829,p.217-220*

42. Berson E.L.1973.Experimental and therapeutic aspects of photicdamage to the retina.Invest.Ophthalm.,v.12,N 1,p. 35-44.

43. Bitensky M.,Gorman R.,Miller W.1971»Adenyl cyclase as a linkbetween photon capture and changes in membrane permeability of frog photoreceptors.Proc.Nat.Acad.Sci. USA, v.68,p.561-562

44. Bok D.,Hall M.1971.The role of the pigment epithelium in theetiology of inherited retinal dystrophy in the rat. J.Cell Biol.,v.49,N 3,p.664-682.

45. Bonavita V.1965.Molecular and kinetic properties of NAD-and

46. NADP-1inked dehydrogenases in the developing retina .in:Bio chemistry of the retina.London,p.5-13.

47. Bonavita V. ,Guarneri R. ,Ponte F. 1967.Neurochemical studies onthe interited retinal degeneration of the rat.He-xokinase,phosphofructokinase and ATPase in the developing retina.Vision Res.,v.7,N 1,p.51-58.

48. Bonting A.,Caravaggio L.,Canady M.1964.Studies on sodum-potassium -activates adenosine triphosphatase.Occurrence in retinal rods and relation to rhodopsin.Exp.v.35,N 1,p.47-51.

49. Bourne M.,Campbell D.,Fansley K.1958.Hereditary degenerationof the rat retina.Brit.J.Ophthaiiiii.,v»22,N 11,p.613-623.

50. Burden E.,Jates C.,Reading H.,Bitensky L.,Chayen J.1971.Investigation into the structural integrity of lysosomes in the normal and dystrophic rat retina.Exp.Eye Res., v.12,N 2,p.159-165.

51. Buyukmihci N.,Aguirre G.,Marshall j,1980.Retinal degenerationsin the dog.Development of the retina in rod-cone dysplasia. Exp. Eye Res.,v,30,N 5,p.575-591.

52. Caravaggio L.,Bonting S.1963.The rhodopsin cycle in the developing vertebrate retina.Correlative study in noirnal mice and in mice with hereditary retinal degeneration. Exp.EyeRes.,v.2,N 1,p.12-19.

53. Chader G.1982.Cyclic nucleotide metabolism in inherited retinopathy in collies.A biochemical and histochemical study.Exp.EyeRes. , v. 34,N 5,p.703-714.

54. GO Chader G.,Johnson M.,Fletcher R. ,Bensinger R. 1974.Cyclicnucleotide phosphodiesterase of the bovine retina: activity,subcellular distribution and kinetic papa-meters: J. Neurochem. ,v.22,N 1,p.93-99.

55. Chader G.,Lin G.,O'Brien P.,Fletcher R.,Krishna G. ,Aquirre G.,

56. Farber D.,Lolley R. 1980.Cyclic GMP phosphodiesterase activator: involvement in a hereditary retinal degeneration. Neurochem. ,v.1, p. 441-4-58.

57. Chaitin M. ,Williams F. 1977.Bleaching characteristics of rhodopsin from normal and dystrophic rats.Exp.Eye Res., v.24,N 6,p.553-558.

58. Chaney A.,Marback E.1962.Adenosine deaminase.In:Methods ofenzymatic analysis.v. 2, pt. 2, p. 1092-1099.

59. Cheung W. 1969.Cyclic 3»,5«-nucleotide phosphodiest-ernase:preparation of a partially inactive enzyme and its subsequent stimulation by snake venom.Biochim.biophys. acta,v.191»N 2,p.303-315

60. Cogan D.1950.Lipogensis by cells of the cornea.Trans.Amer.

61. Acad.Ophthalm.and Otoloring.,v.54,N 6,p.629-637.

62. Coulombre A.1979.Roles of the retinal pigment epithelium inthe development of ocular tissues.In:The retinal pigment epithelium.London,p.53-57.

63. Crouch R.,Chambers J.1982.Absence of abnormal erythrocyte superoxide dismutase,copper,or sine levels in patients with retinal pigmentosa.Brit.J.Ophthal.,v.66, N 7,P.417-421.

64. Daemen 3?. ,Lion F.,Bonting S.1970.Na-K activated adenosinetriphosphatase in retinae of rats with and without inherited retinal destrophy.Vision Res.,v.10,N 5,p.455-458.

65. Deaton E.1959.The contribution of the orientated photosensitive and other molecules to the absorption of whole retina. Proc. Roy.Soc.,v.150,N 1,p.78-94.

66. Dewar A.,Barron G.,Richmond J.1975.Retinal cyclic-AMP phosphodiesterase activity in two strains of dystrophic rats.Exp.EyeRes.,v.21,N 5»P.299-506.

67. Dewar A.,Barron G.,Jates C.1975.The effect of light deprivation on the progress of retinal degeneration in two strains of dystrophic rat.Exp.Eye Res.,v.21,N 6,p. 507-514.

68. Dipple J.1982.Developmental,changes in the form of the Arrhenius plots of rat liver plasma membrane adenylat cyclase and 5'-nucleotidase activities.Biochem.biophys. res.comm.,v.105,N 1,p.259-264.

69. Dowling <1.,Wald G.1960.Chemistry of visual adaptation in therat.Nature,v.188,N 4745,p.114-118.

70. Dowling J.,Sigman R. 1962.Inheritea retinal dystrophy in therat.J.cell biol.,v.14,N 1,p.73-110.

71. Dowling J.,Wald G.1958.Nutritional night blindness.Ann.N.Y.

72. Acad.Sci., v.74,N 2,p.256-265.

73. Edwards R.,Szamier R.1977.Defective phagocytosis of isolatedrod outer segments by RCS rat retinal pigment epithelium in culture.Science,v. 197,N 4307,p.1001-1003.

74. Eible H.,Lands W.1969.A new sessitiol determination of phosphat e.Analyt.Bio chem., v. 30,p.51-5 7.

75. Essner B. ,Pino R. ,Greiwski R. 1979.Permeability of retinal capillaries in rats with inherited retinal degeneration. Invest.Ophthal.,v. 18,N 8,p.859-863.

76. Essner B.,Pind R.,Greiwski R.1980.Breakdown of blood retinalbarrier in RCS rats with inherited retinal degeneration. Labo rat. Invest ig. ,v.43;N 5,p.418-426.

77. Farber D.,Loiley R. 1974.!Cyclic guanosine monophosphate: elevation in degenerating photoreceptor cells of the C3H mouse retina.Science,v.186,N 4162,p.449-451.

78. Farber D.,Loiley R. 1976.'Calcium and magnesium content of redentphotoreceptor cells as inferred from studies of retinal degeneration.Exp.Eye Res.,v.22,N 3,p»2l9-228.

79. Farber D.,Loiley R.1977.Light-induced reduction in cyclic AMPof retinal photoreceptor cells in vivo:abnormalities in the degenerative deseases of RCS rats and rd-mice.

80. J J.Neurochem. ,v.28,N 5,р.1089-Ю95.

81. Farber D. ,Souza D.,Chase D.,Lolley R. 1981.Cyclic nucleotides • of cone-dominant retinas.Reduction of cyclic AMP levels by light and by cone degeneration.Invest. Ophthalm.,v.20,N 1,p.24-31.

82. Feeney L.,Mixon R.1976.An in vitro model of phagocytosis inbovite and human retinal pigment epithelium.Exp. Eye Res.,v.22,N 5»P«533-548.

83. Ferrendelli J.,Cohen A.1976.The effects of light and dark adoptation on the levels of cyclic nucleotides in retinas of mice heterozygous for a gene for photoreceptor dystrophy.Biochem.Biophys.Res.Comm.,v.73, N 4,p.421-427.

84. Franceshetti A.1965.A special form of tapetoretinal degeneration:fundus flavimaculatus.l'rans.M.Acad. Ophthal. Otolaring.,v.69,N б,p.1048-1053.

85. Francois J.1958.The differential diagnosis of tapetoretinaldegenerations .Arch.Ophthal.,v.59 »N 1,p.88-120.

86. Fukami I. ,Fukami G.1969.Reaction between retinal and phospholipid components of outer segments of rods from cattle retina.Nature,v.2235201tp.63-64.

87. Futteiman S.,Downer J.,Hendrickson A.1971.Effect of essentialfatty acid deficiency on the fatty acid composition,morphology, and electroretinographic response of the retina.In vest.Ophthalm.,v.10,N 2,p.151-156.

88. Goldberg N. ,0'Dea R.,Haddon M.1973-Increased cyclic GMP and

89. Ophthal.,v.13»N 10,p.798-801.

90. Goldberg N. ,0'Dea R.,Haddon M.1973.Increased cyclic GMP anddecreased cyclic AMP levels in the hyperplastic,abnormally differentiated epidermis of psoriasis.Life Sci.,v.13»N 6,p.639-633.

91. Goldman A.,O'Brien P.1978.Phagocytosis in the retinal pigmentepithelium of the RCS rat.Science,v.201,N 4360,p.10231025.

92. Graymore G. 1964.Metabolism of the developing retina.Lacticdehydrogenase isoenzyme in the normal and degenerating retina.A preliminary communication.Exp.Due Res., v.3,N 1,p.5-8.

93. Gray-more C.1965. "Nothing" dehydrogenase in the retina.Nature,v.206,N 4991»P.1360-1361.

94. Graymore C.,Power J.,Kissum R.1974.Go enzyme dependency of alcohol dehydrogenase in the retina of the rat.Effect of light- and dark adaptation on the redox state of the pyridine nucleotides.Exp.Eye Res.,v.19»N 2,p. 163-166.

95. Graymore C.,Tansley K.,Kerly M.1959.Metabolism of the developing retina.The effect of an inherited retinal dege-. neration on the development of glycolysis in the •tat retina.Biochem.J. ,v.72,N 3»P.459-461.

96. Greymore C. ,Towlson M. 1965.Oxidized and reduced pyridinenucleotides,and oxidation of the carbon-1 and carbon-6 of glucose in the developing retina.Nature,v.206, N 4991,P.1361-1362.

97. Hagins W.1972.The visual process:Excitatory mechanisms in theprimary receptor cells.Ann.Rev.Biophys.Bioeng.,v.1, N 1»P.131-158.

98. Hall M.1978.Phagocytosis of light- and dark- adapted rodouter segments by cultured pigment epithelium.Science, v.202,N 4367,P.526-528.

99. Hayasaka S.,Hara S.,Mizuno K. 1975.Degradation of rod outersegment proteins by cathepsin D.J.Biochem.,v.78,N 6, p.1365-1367.

100. Hayasaka S.,Takahashi J.,Mizuno K.1977.Lysosomal behavior inthe retina and choroid of spontaneously dystrophic rats.Exp.Eye Res.,v.24,N 4,p.399-407.

101. Hayes K.,Carey R.1975.Retinal degeneration associated withtaurine deficiency in the cat.Science,v.188,N 4191, P.949-951.

102. Heller J.1968.Structure of visual pigments.Purification,molecular weight,composition of bovine visual pigment 500.Biochem.,v.7,N 8,p.2906-2913.

103. Hendricks T.,De Pont J.,Daemen F.,Bonting S.1973.Biochemicalaspects of the visual process.Biochem.biophys.acta, v.330,N 1,p.156-166.

104. Herron W.,Riegel -b.,Rubin M.1971.Outer segment production andremonal in the degenerating retina of the dystropic rat.Inve st.Ophthalm.,v.10,N 1,p.54-63.

105. Hrapchak R.,Rasmussen H.1972.Characterization of two forms ofbeet heart cyclic nucleotide phosphodiesterase.Vision Res.,v.11,N 24,p.4458-4465.

106. Hubbard R.1954. The molecular eright of rhodopsin and thenature of the rhodopsin-digitonin complex.J.Gen. Physiol.,v.37,N 3,p.381-399.

107. Jansen P.,Daemen P.1981.Retinal reductase activity in ratswith and without inherited retinal dystrophy.Exp. Eye Res.,v.33,W 4,p.459-462.

108. Kaitz M., Auerbach E.1978.Effect of ealy and late light exposure on the u inherited retinal degeneration in r rats.Exp.Eye Res.,v.26,N 6 ,p.699-70®.

109. Kaitz M.,Auerbach E.1979.Retinal degeneration in KCS ratsraised unaer ambient light levels.Vision Res.,v. 19,N 1,p. 79-81.

110. Kaitz M.,Auerbacii E.1979.Action spectrum for light-inducedretinal degeneration in dystrophic rats.Vision Res. V.19,N 9,P.1041-1044.

111. LaVail M.1980. Degenerate retinal disorders.Interaction, ofenviromental light and eye pigmentation with inherited retinal degenerations.Vision Res.,v .20,1? 12, P.1173-1177.

112. LaVail M.,Battelle B.1975.Influence of eye pigmentation andlight deprivation on inherited retinal dystrophy in the rat.Exp.Eye Res.,v.21,N 2,p.167-192.

113. Lavail M.,Mullen R.1976.Role of the pigment epithelium ininherited retinal degeneration analyzed withexperimental mouse chimeras.Exp.Eye Res.,v.23,N 2,p.167-192.exerimental mouse chimeras.Exp.Bye.Res.,v.23,N 2, p.167-192.

114. Lolley R.,Parber D.1975.Cyclic nucleotide phosphodiesterasesin dystrophic rat retinas:guanosine 3»,5'-cyclic monophosphate anomalies during photoreceptor cell degeneration. Exp. Eye Res.,v.20,N 6,p.585-597.

115. Lolley R.1973.RNA and DNA in developing retinae.Comparason ofa normal with the degenerating retinal of С H mice. J.Neurochem.,v.20,N 1,p.175-182

116. LolleyR. ,Parber D.1976.A proposed link between debris accumulation, guano sine 3',5'-cycle monophosphate changes and photoreceptor cell degeneration in retina of RCS rats.Exp.Eye Res.,v.22,N 5,p.477-486.

117. Lolley R,Parber D.,Rayborn M.,Hollyfield J.1977.Cyclic GMPaccumulation causes degeneration of photoreceptor cells:simulation of an inherrted disease.Science,v.196 N 4290,p.664-666.

118. Lolley R.,Racz E.1972. Changes in levels of ATPase activityin developing retinae of noimal(DBA7 and mutant(C3H? mice.Vision Res.,v.12,N 4,p.567-571.

119. Marmor M.1975.The retinal pigment epithelium and ocular disease. Intern.Ophthal.Clin.,v.15,N 1,p.131-146.

120. Marmor M.,Nelson J.,Levin A. 1978.Copper metabolism in american retinitis pigmentosa patients.Brit.J.Ophthal., v.62,N 3,p.168-171.

121. Mason J.,Barnett K. ,Blakemore W. 1973.Some biochemical observations on a primary retinal degeneration inn sheep. Езф.Eye Res.,v.15,N 1,p.51-60.

122. Massoud W.,Brid A.,Perkins E.1975.Plasma vitamin A and betacarotese in retinits pigmentosa.Brit.J,Ophthal.,v. 59,N 4,p.200-204.

123. Noell W*1965.Aspect of experimental and hereditary retinaldegeneration.In:Biochemistry of the retina,ed.C. Graymore,London,p.51-72.

124. Organisciak D.,Noell W. 1976.Hereditary retinal dystrophy inthe rattlipid composition of debris.Exp.Eye Res., v.22,N 2,p.101-113.

125. Orr H.,Cohen A.,Carter J.1976.The levels of free taurine,- 119 glutamate, glycine and -amino butyric acid during the postnatal development of the normal and dystrophic retina of the mouse.Exp.Eye Res.,v.23,N 4,p. 377-384.

126. Periman I. 1978.Kinetics of bleaching and regeneration ofrhodopsin in abdominal RGS and normal albino rats in vivo.j.'Physyol.,v.278,N.1,p.141-159.

127. Reading H.1964.Activity of the hexose monophosphate shunt inthe normal and distrophic retina.Nature,v.203,H 4944,p.491-492.

128. Reading ti.1965.Protein biosynthesis and the hexosemonophsphate shunt in the developing normal and dysrophic retina. In: Biochemistry of the retina,ed.C.Graymore, London,p.155-163.

129. Reading H.1966.Retinal and retinol metabolism in hereditarydegeneration of the retina.Biochem.J.,v.100,N 2 , p.601-611.

130. Reading H.1970.Biochemistry of retinal dystrophy.J.med.genet.,v.7»N 3,p.277-284

131. Reading H. 1980.Biochemistry of retinal degeneration in ratsand mice: a short review.Neurochem.Internat.,v.1 2,p.477-485*

132. Reading H.,Sorby A.1966.Alcohol-dekydrogenase activity ofthe retina in the normal and dystrophic rat.Biochem. <T.,v.99,N 1,p.259-261.

133. Regan G., Grip W.,Daemen J.,Bonting S. 1980.Degradation ofrhadopsin by a lysosomal fraction of retinal pigment epithelium biochemical aspects of the visual process. Exp.Bue Res.,v.30,N 2,p.183-192.

134. Reich -d«Almeida F.,Hockley D.1975.In situ reactivity of theretinal pigment epitJaelium. Phagocytosis in the normal rat.Exp.Eye Res.,v.21,W 4,p.333-345.retinal pigment epithelium.Phagocytosis in the normal rat.Exp.Eye Res.,v.21,N 4,p.333-345.

135. Reich-d'Almeict© P.,Hockley D. 1975.In situ reactivity of theretinal pigment epithelium.Phagocytosis in the dysroph hie rat„Ехр„Е!уe Res„,v.21,N 4,p.347-357.

136. Reiser A., 1975.The use of coomassie brillant blue G-250 perchloric acid solution for staning in elecrophoresms Analyt.Biochem.,v.64,N 5,p.509-516.

137. Richard M„,Robb M. 1979.betters to the editor.Cyclic nucleotide phosphodiesterase activity in normal mice and mice with retinal degeneration.Investig.Ophthal., v„18,N 10,p. 1097-1Ф00.

138. Robb P. 1978„Histochemical demonstration of cyclic quanosine 3♦,5'-monophosphate phosphodiesterase activity in retinal photoreceptor outer segment.Invest.Ophthal., v.17, N 5,p.476-480.

139. Schmidt S.,Lolley R.1973.Cyclic-nucleotide phosphodiesterasa

140. An early defect in inherited retinal degeneration of of С H mice. «Г. Cell.Biol. ,v.57,H 1,p.117-123.

141. Shichi H.,Lewis M.,Irreverre P.,Stone A. 1969.Biochemistry ofvisual pigments.Gurification and properties of bovine rhodopsin.jr.Biol.Chem., v.244,N 3»P.529-536.

142. Shichi H.,Somers R.1980.Distribution of enzymes involved innucleotide metabolism in the disk and other rod membranes.Photochem.Photobiol. ,v.32,N 3»Р»491-495.

143. Sjоstrand P. 196в. Electron microscopy of the retina. In:

144. The structure of the eye, ed.G.Smelser,London,p.,142-154.

145. Stramm L.,Pautler E.1980.Glucose uptake by normal and dystrophic rat retinas and ciliary bodies.Exp.Eye Res., v.30,N 6,p.709-718.

146. Sweasey D.,Patterson D.,Terlecki S.1971.Lactate dehydrogenaseisoen in the retina of the sheep and changes associated with progressive retinal degeneration.Exp.Eye Res.,v.12,N 1,p.60-69.

147. Szamier R.,Berson E.1977.Retinal ultrastructure in advancedretinitis pigmentosa.Invest.Ophthal.,v.16,N 10,p. 947-962.

148. Fabor G. ,Fisher S.,Anderson D.1980.Rod and cone disc sheddinging in light-Entrained tree squirrels.Exp E§ce Res., v.30,N 5»P.545-557.

149. Voaden M.,Hussain A.,Chan J.1982.Studies on retinitis pigmentosa in man.Taurine and blood platelets.Brit.J. Ophthal., v. 66,К 12,p.771-775*

150. Wald G., Brown P.,Gibbons J.1963.The problem of visual excitation. J .Ophthal,Soс.Am.,v.531,p.20-35.

151. Walters P.1959.Anaerobic glucolysis in rats affected withretinitis pigmentosa,Its significance in relation t to various forms of primary pigmentary degeneration of the retina.Brit.J.Ophthal.,v.43,N 11,p.686-696.

152. Weber K. ,0sbom И.1969. The reliability of molecular weightdeterminations by dadecyl sulfate-polyacrj:lamide gel elecrophoresis.J.Biol.Chem.,v.244,U 16,p.4406-4412.

153. Yates C.,Dewar A.,Wilson H, ,Winterburn A.tReading H.1974.

154. Historical and biochemical studies on "the retina of a new strain of dystrophic rat.Exp.Eye Res.,v.18,N 2,p.119-133*

155. Yates C.,Reading H.,Bitensky L.,Chayen J.1976.Activity of thehexose monophosphate shunt in the outer segments of normal and dystrophic rat retinae.Exp.Eye Res.,v.23, N p.403-408.

156. Young R.1978.Visual cells,daily phythms,and vision research.

157. Vision Res.,v.18,N 5,p.573-578.

158. Young R.,Bok P. 1969.Participation of the retinal pigmentepithelium in the rod outer segment renewal process. J.Cell.Biol.,v.42,N 2,p.392-403.

159. Zimmerman W. ,Daemen P. ,Bonting S. 1976.Distribution of enzymeactivities in subcellular fractions of bovine retina.J.biol.chem. ,v.251 15,p.4700-4705.