Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Противомикробная активность и биологические эффекты новых металлоорганических соединений

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Противомикробная активность и биологические эффекты новых металлоорганических соединений"



М1Н1СТЕРСГВ0 ОХОРОНИ ЗДОРОВ'Я УКРА2НИ

я4

,ХАРК1ВСЬКИИ НАУКОВО-ДОСЛ1ДНЩ 1НСТИТУТ М1КРОБЮЛОГП.

ТА 1МУНОЛОГП 1м.'I. I.ME4HÍKOBA

На правах рукоглсу

БОДЦАРЕНКО ВОЛОДИМИР МИХАИЛОВИЧ

УДК 615.28f579.842.1/2-097

ПРОТОН КРОЕНА АКПШШСТЬ ТА Б10Л0ПЧН1 БФЕКТИ НОВИХ МЕТАЛООРГАН1ЧНИХ СПОЛУК

Ig'Wût

Д4.0Д.05 - и1кроб!олог1я

АВТОРЕФЕРАТ

дисертац11 нз здобуття вченэго ступеал кандвдзтэ ыедечних наук

К Ь'

Харк1в - 1995

ДисертаШею е рухопис Робота виконана у'Харк1всъкому науково-досл!дному 1нститут1 М1кро0!олог11 та 1мунолог11 !м.1.1.Мечн1кова

НАУКОВИИ КЕР1ВНИК

заслуженна д1яч науки I техн1ю! Укратни, доктор медичних наук, професор Е.Л.Волянсъкяй

0Ф1ШИШ ОПОНЕНГИ:

доктор медичних наук, професор 1.1,Сидорчук доктор медичних наук,. професор л. А. Коссбуцьккй

ПРОБIДНА 0РГАН13АЦ1Я:

Ки!вський науково-досл1дний 1нстатут еп!дем1олог11 та 1нфекц1йних хвороб 1м.Л.в.Громашевського

Захист в1дбудетъся

„ 27 „ кв!ткя

1995 р. о 12 годин!:

на зао!даш! спец1ал1зовано! вчено! ради К 088.07.01 при Харк1вському науково-досл1дному' 1нститут1 ШкробЮлогП та 1мунолог11 1м. Г.1.Ыечн1кова за адресов 310057, м.Харк!в, вул. Пуак1нська,14 ■ " ■

3 дасертащею можна сзнайомитись ■ у <Нбл1отец1 1нстатуту.

Автореферат розI слано

„ 23 „ березня

1995 р.

Вченяй секретар спец1ал!зовано! вчено! ради, кандидат сНолоПч-них наук

ч

С.I.Чупринсеа

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА Р0В01Я

Актуальн!сть теми. Тенденц1я до зС1льшення р1зномзн!тних гнойно-запальнюс захворювань, що спостер1гаеться в останне десятьр1ччя, а також циркуляц!я серед хворих штам!в зСудни-к!в, пол!реэистентних до х1м!отерапевтичних препарзт!в I ак-тиб!отик!в, що вживаються, знову звврнули увагу досл!дник1в до розроСки та удосконалення препарат!в, як! одержують на основ! важких метал!в (Ьику еЬ аХ.,1975; Лошак Я.Я.,1978; РгаЗБва.,. 19Э1).

Була розшифрована життево ваклива роль Гон!в 3-х валентного хрому, ванад1ю, Фтора, кремн!», н1кели, м!ш'яку, кад-м1ю, ртут1, Яоду,м1д1, селену, олова та цинку, забезпечення орган!зму якими зд!йснюеться т!льки алягом ?х доступу !з зовн!шнього середовиаа (ЗсЬгоеЛег, 1965: ЭсЬгаиг.ег, 1979).

В1дом! протим!кробн! властивост!.-також у препарат!в йоду, ср!бла, в1 смуту, цинку, золота, мот'яку, олова та рту-т! (Ваников'А.И., 1982; Мзшковский М.Д..1935).,

Вияьлено сполуки мол Г <1 деку, зал ¡за. н!д(, свинцю, н!ке-лю, платини, цинку, селена, золота, кобальту, як! проявляюсь Гмуномодуляторну д!ю, а також прот:«пухлинну та антамутагенну активн!сть (ГЫпзГогй, 1981, Бабвто Г.Ф.,1983, Алекперов У.К.Л984).

Встановлено антибактер!алъку активнЮть водорозчкнних б!сульф!дшк та'он!евих пох1дних ферроцену (ВолянскиЯ Ю.Л., Боев 8.И. и др.,1933).

В останн! роки зд!Яснювалися спроби синтезу ! пошуку нових клзс!в металлоорган!чних егтелук 1 металоцен!в, що м'с-тять атоми хрому, молЮдену, зал!за, слова, ртут!, титаму, гэфн1ю, даркоШю, кремн5ю, -герман !ю та 1шшх метал1в 1 маять р!зн! вида б!ологично! актквкостI; протизапально!, актив!-

4 .

pycHoi, протианем1чно!, протвд1абегично!, .антиатеросклеро-тачно!, протицухлинно! (Майкова Т.Г., Рзаев З.М. и др.,1990; Saner, 1992; Tonew, 1984; Машковский М.Д, 1983).

Однак широких комплексних досл!джень металоорган!чних сполук бзгатьох клас1в на наявн!сть у них.претим!крсбно1 ак-тавцост! , еи6 Iрковост 1. дИ та селективних влаотивоотей' у в1днош8нн! до грамнегятивних Оактер[й та 1нших м(кроорган!з-м!в в осташ! роки не проводилось.

Мета! задач! досл!дження. Мета робота полягае в пошуку. но-вих антибактер!альних та антигрибкових засоб!в серед мэтало-орган1чша сполук хрому, олова, ртут1, зал!за, мол!бдеяу, вольфраму, рутен!ю, рен!ю, маргашю, кобальту та платини. Для досягнення ц1е! мети необх!дно вир!шити так! задач!:

1.Вивчити антиШкробну активн!сть t селективн1 ефекта ориг1нальних металоорган!чних сполук (тут 1 надал! МОС), сштезованих сп!вроб!тниками 1нституту елементоорган!чних сполук РАН (IHE0C, м.Москва). .

2.В1д!брати наЯ0!льш активя1 в антж!крсбному в!днсх9н-н! сполуки ( ехбчйти ix 0!олог!чн! ефекти на моде л! ггрокар!-отичяих та еукар!отичних шИтан. •

3.Визнэчити частоту ! ивидк1сть формування мутант.'в, резистентних до в1дЮрэно! перспективно? претим!кробно! сполуки.

4.На моделях експериментальних !нфзкц!й, викликэюсе кэпсульними ентеробактер1яш I псевдомонадакы, внвчити х.1-м!отерзпевтичну активн!сть перспективно! МОС.

б.Визнэчити гостру токсичн!сть препарату ! мсгжв-лп ьк-хан!зм його протим!кробно! дп.

Науковз новизна. В робот! вперве проведено комплекса! дс-сл'даення протим!кробно! активное?!, токсичност! 1 ссЛ-jktke-

них ефекПв 90 ориПнальних МОС р!знл7. кязс!в, як! к!с?ять зв'язок метал-вуглець. На п!дстчб! прозедених досл'дкень еи-явленс зв'язок м!ж х!м!чною структурою та проявлениям анти-м!кробних ! токсичних властивостей в рядах вивчених НОС. Встановлено яаявн1сть селективно! проткм!кробно1 дИ у ряд! пох!дних хрому, олова та ртут! при 1х мал1й чи пом1рн!й ток-сичност!. Вперзе показано, що МОС одновалентного хрому -б!с(хлорбензол)хромЕодид, МОС-3 - в!дзначаеться вкб!рковою бактерицидною д!ев у в!дношенн! грамнегативних бактер!й ро-дини кишкових, в!бр1он1в, аеромонад та псевдомонад, в тому числ! у в!дношенн! пол!резис?энтних итзм}в. Показана вшЯр-кова д1я 1то1 металоорган!чно! пох!дноТ нульваленнюго хрому - мезитиленхроад!карбонглалея!л-три4йн!лфосфон1Й-борфта-риду (МОС-28) ~ на грампозктавн! о'актер!! та гриби. На моделях гострого клебс1ельозного сепсису у милей встановлено ви-соку х!м1отерапевтичну еф8ктивн!сть МОС-3 в пор1внянн! з де-якнми азтиб!отикани.

Практична ц!нн!сть та впровадження в практику. Проведений лоПко-струхтурний анал1з зв'язку м1к х!м!чною структурою, протим!кробнов актива!стю та токсичн1стю нових МОС дозволяв нам1тити шляхи ц1лёспрямованого синтезу протш!кробних засоси з заданими властивостями, тобто виключити "сл1пий скри-в1нг".

Використання модиф!кованих наш метод!в скрин1нгу х!-м!чша сполук на протим!кробну актквн!сть шляхом прямого нз-несення кристал!в (або крааель) препарату на зас!яний гест-культурами агар, а для визначення м!н!мальних затримуючш концентрац!й (надал! скор. МЗЯ) - методу наШвлогарифыЛчних сер1йних розведень з використаняям штампа-решПкатора дозволяв в 6-10 раз!в зб!льшитк продуктивность лабораторно! прад!

! зменшита еконсм(чя! витрати на поиук новик протиШкробних сполук. Ка модиф1кован! методики досл1джекня одержано 5 га-лузёвих рац1онал!заторських пропозицШ.

Спос!б синтезу нових С1олог1чно~активних МОС захадено авторсьгам се!доцтвом за Ж320212 в!д 25.09.85р.

Розроблено селективне середовище ЕСГФК для виШлення киажових 1ерсин1й, яке захищено . авторсъким св1доцтвом Ж208807А "ДСК" з приоритетом в!д 07.06.1984 р.

Штам У. ргеис1о 1иЬегса1о81з X свровару № 623 КГ 9/2, ЯКИЯ використовуеться для вдготовлення цротективного антигену, ■ депоновэно в колекцИ музею, живих культур Д1СК 1м.Л.А.Тара-севича МЗ РФ (дов!дка -11/12 в!д Об.04.1987р.). Алро0ац1я...роботи. Основн! результата роботи допов1дались на Пленум! г1г!ен1ст1в, еп!дем!олог1в та м1кро01ологГв Казахстану (м.Щучинськ, 1979р.), III з'1зд1 м1кроб!олог1в та 1н-фекц!он!ст1в Казахстану (м. Алма-Ата, 1980р.), V ВсеросШ-ському з'1зд! м1кроб{олог!в та еп!дем!олог1в (м.Краснодар, 1985р.), а також на цор1чнжс п!дсумкових наукових коиферен-ц1ях Новокузнэцького 1нституту удосконалення л!кар1в (1982-1987рр.), на зас!данн1 секцп м1кроб1олог1в,еп1дем1олог1в та паразитолог!в м.Новокузнецька (1984-1987рр.), - Всесоюзному сем1нар! "Фактори патогенност! бактерШ" (м.Москва, 1991р.), на зас1данн! вчено! ради ХНД1 м!кросИологИ та Ему но лог!! 1м.1.1.Мечн1кова (м.Харк!в, 1994р.).

Публ!кац!Т. За темою дисертацП опубл!ковано 13 наукових ро- . • 01т, одержано 5 св1доцтв на рац!онал1заторськ1 пропозвд!I та 3 авторських св!доцтва на винах1д.

Структура.та' обсяг дисертацП. Дисертац!я викладена на стор1нках машинописного тексту . 1 складаеться !з вступу, огляду л!тератури, 5 глав власних досл!джень, заключения.

bhchobkIb, списку л!тератури (273 даервла, з ягазх 108 в1т-чизняних I 165 tHosemmx) та додатку. Робота ¡дюетрована малинками та 35 таблицями.

Натер1али та методи. Скрин1нгу на антим1кро0ну акяшн!сзъ Шдлягало 90 нових аренових, карбон1льних, ал'льних, Фен!ль~ них, п1ридинових, б!п1рштових, циклопентад*ев1льшх та адзмантилових МОС xpot.iy, зал!за, кобальту, марганщз, руте-н'.ю, рен1ю, олова, ртут!, кол!бдену, вольфраму та платшш pfsi-гих crynsHiB окисления 1 з р1зними радикалами в структур! молекули. Указан! сполуки синтезовано сп1вроС1танками IHEOCy РАН д.х.н. Д.Н.Кравцовш I проф. Гйб!нською M.I. та х!м1чно-го факультету Мооковоъкого.дер*ун1вврситету 1м.М.В.Ломоносова к.х.н. Мелешонковою H.H.

Досл1даен! сполуки являать собою кристал1чн! речовини р1зного забарвлення, б!льи!сть з яхих нерозчинн! або погано розчкш-il у вод1, добре розчинн1 в диметилсульфоксид! та !н-щих органЗчних розчинниках.

Кайб!лъш активними у протим!кробному в!дношенн! 1з числа вивчеяих МОС були речовини, то мають так! структура! фор-

му ли:

сн3

CI \

(МОС-бЗ)

<P> г

(M.OC-70) (MQC-59)

KpiM вказаних виде MOC для пор!вняння як еталояи були використая! антиб!отики та антибактер1альн! засоби (карбен!-цил1н, гейтам1цин, стрептомЩин, пол1м!ксин, хлорамфен!кол, цепорин, тетращшИн, д!оксидин, фурадон!н та !н.), антисеп-' тики, р!зн1 барвинки, сол! важких металtB та tml х1м!чн1 сподуки з в1домкм механ1змом протда!кробно! д11 (всього 66 еполук). -

Для первинного скрин1нгу сдалук'на протим[кробну актив-н1сть використано мэтод визначення протим!кробних властиво-стей на щ1льному середовщд! по затримц! росту шести еталон-них тест-культур м!кроб!в (кишково! та синегнойнот палкчок, золотистого стаф!лококу, ентерококу, спороносних. бацил 1 гриб!в роду кандида). шляхом нанесення кристал1в випробуваних речовин на зас!яний суц1дытам газоном агар.

Перспективн! в антим!кробному в!дношенн! препарати дал1 випробували на-22 видах тест-м1кроб!в р!зних таксоном!чних груп методом нап!влогаряфл!чнях сер!йних розведень в агар! з bhcJbom випробуваних штам!в штамлом-решикатором. Використа-н1 в робот! штамп м!кроорган!зм1в вид!лено в!д хворнх, час-тину культур одержано з. музе!в кнвих культур Д1СК !м.Л.А.Та-расевича та НД1ЕМ !м.М.Ф.Гамале1 РАМН; Усього в робот! використано 651 штам бактерШ Í 169 штам!в гриб!в. Бактер!! в!д-нойшшся ДО род!в: Escherichia, Shigella, Salmonella, Citrobacter, Yersinia, Edwai-dsiella, Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Rettgerella, Providencia, Pseudomonas, Vibrio, Aeromonas, Staphylococcus, .Mio--

rococcus, Streptococcus, Bacillus (всього 53 вида). Is гри-01в вичористано: Hucor, Aspergillus, PenicililuT., Trichoder-ma, C3adosporium, Stemphylium, Fusarium, Trichophyton, Candida, Schiaosaccharomycfes (10 род!в).

Генерал1зован1 форми синегнойно! та клебс!ельозно! !н~ фекц1й на мишах 1 вивчення х!м!отерапевтично! ефектквност1 нових протим!кробних сполук проводили за методикою Greisnan et al.,1975. Для моделювання сепсису використано в!рулентн! штами К.pneumoniae Kg 5055, К. pneumoniae К^ 640, P.aeruginosa W-85, P.aeruginosa 165. Як препарата пор!эняння при л!-куванн! експериментального сепсису у мишей використовувались гентам1цин, стрептом1цин, карбен1цил!н, дюксидан.

Гостру токсичн1сть МОС та !нших препарат!в вивчали ви-б!рково в досл!дах на 3 видах лаборатории тварин (мишах, морських свинках та щурах), при цьому визначали максимально переносим! дози, а на мишах ще Я Д%0. Розрахунок параметра токсичност! (дов!рч! меж! лeraльнах доз) проводили граф1чним методом проб!т-анал!зу (Litchfield, Wlcoxon, 1947). Досл1да по вивченню гостро! токсичност! препарат!в та 1х х!м1отера-певтично! активное?! проведено в лабораторП в1рулентност1 бактер!й ЮПНИ Ш.Ы.Ф.ГаыщлеТ 1 в Харк!вському НД1М1 !м.Г.1.Мечн!кова.

Цитотоксичн!сть ново! протим1кробно! сполуки МОС-3 у в!дношенн! перещеплюваних кл!тинних л!н!й Heia 1 НЕр-2, Ii вплив на макромолекулярний синтез ДНК, РКК та б1лку в кл!тинах прокарют (клебс!ел,-псевдомонад та ешерих1й) 1 еукар!от (кл!тинна л!н1я Heia) вивчали з використанням рад1о1зотопних метод!в. В основу методики проведения рад!о!зотопних метод!в покладено прискорен1 метода Weinstein et al., 1975 ! Brown et al.,1980).

Бизначення р!вня включения м!тки було зд!йснено на сщпттиляц 1 йпому л!чильнику IS-230 ф!рми "Весшап" (США).

Вивчопня частота 1 швидкост! формування мутант1в, ре-оистонтшпс до протим1кробш>1 Д11 б i с (хлорбонз о л) хромйодиду (МОС-3), проводили на штамах К. pneumoniae, S.typhlmurium, E.ooli 1 P.aeruginosa методом прямо! селакцИ на середовищах з! зб!льшуваними концентрац!ями'препарату (У.Хейс, 1965). Як препарата пор!вняння ьикористовували хлорамфен!кол, карбен!-цил1н, пол!м1ксин, гентам!цин,•декаметоксин та хлорофШпт.

Мутагенну д!ю МОС хрому,, олова 1 ртут!,. неорган!чних солей'3-х та 6-валентного хрому вивчали на Ш1азм!дних штамах s.typhimurium ГА-юо 1 ТА-98 тест-системи ЕЯмса в як!сних спот-тестах та к!льк1сними сусданз!Йними ' методами зг!дно вказ!вок "Методические рекомендации по проверке мутагенных свойств'новых лекарственных препаратов. ГО СССР,1981". Стандарта • мутагени, використан! як позитивн! контрол! (4-н1трох!нол!н-оксид ф!рми Daiiohi Pure Chemioals Co.,Ltd. 1 ГТ-меТИЛ-N'- н1тро-и-н1трозогуак!дйн ф!рмы Aldrich Chemicals Co.) буди надан! нам с.н.с. I.В.Андреевой (лаб.генетики бак-тер!й ВД1ЕМ 1м. М.Ф.ГамэлеТ РАШ).'Генетичн! ефекти неорга-н1чних сполук хрому в пор1внянн! з д!ею в!домих мутаген!в швчали в чашкових спот-тестах на реверс!I на триптофан-охре зуксотрофному мутант1 E.ooli а2 trpoc. а також у тестах эл!м!нац!Т плазм!д на штаммах E.ooli 195Р (Hly+), E.ooli GA 121 (P'lac+), E.ooli к12 вЕ1 (colE1+j та на модел! культур E.ooli HfrC х J62 Р", схрещуваних зг!дно з загальнов!домаи методами генеткчштх досл!даень. (Миллер Д,, 1976).

Для виявлення б!олог!чно активно! конформац!! 1он!в хрому, як! взасмод!ють з ДНК-проте1новими структурами, еико-ристзно стаф!лококовий бактер!офаг Зс при р!зких р!внях рН

середовшца у фаговому буфер!.'

Селективн! ефекта M0G, ряду tramx внтга/Лкробних та х!-

м!чних препарат!в у в!дношенн! ентеробактер(й вивчали за до-

помогою розробленого нами методу локальних селектавних зон

на щ!льному живильному середовищ!.

РЕЗУЛЬТАТИ ТА ОБГОВОРЕННЯ'

1. Пошук npoTTOlKpodmoc i препарат i в серед MOO р!зних. клас!в.

Суц1льному скрин!нгу на протим1кробну активн!сть методом

безпосереднього' нанесения кристал!в випробуваних рачовин на

агар в чашках, зас!яних газоном тест-культур (E.ooit, ?.ае-

. ruginosa, S. aureus, S.íaecalis, вакцинний штам В. an trade.

СТИ, Candida albicans) п!длягало 90 МОС р!зних клас1в. На

другому етап! скрин!нгу сполуки, що не дали зон гальмування

росту культур, було викличено з надальшлх досл!джень, а реш-

ту (56 сполук) вивчено методом сер!йних розведень в агар! з

вкс f вом 22 тест-культур за допомогою штампа-репл!катора. Для

вивчення спектра 1 р!вня протим!кробно1 активност! при цьому

бут вюсористан! ешерихН, шигели, сальмонели, !ерсин!1,

клеос!ели, ентеробактери, га$н!1, серрацП, проте!, ггров1-

денцП, в1бр!они, псевдомонада, м!крококи, стаф!лококи, енот

терококи, бацили, канд1ди, трихоф!,тони та пенЩили.

Результата досл!джень показали, що сполуки, як! дали на першому етап1 зони гальмування росту навколо кристал!в мен. ш1, н1ж 10 мм, мали дуже слабк! протим1кробн! властивост! (МЗК > 1000 мкг/мл) 1 буш неперспективн! як антим!кробн! речовини. Дуже нест!йк! НОС хрому та рен1ю (МОС-64-67), як1 дали широк! зони гальмування на першому етап1, ц!лком вгрэ-чали антим1кробн1 властивост1 на другому етап1 завдяки шрчд-кому руйнуванн» п!д час внесения в агар. Лте & в!дносно ст1йких сполук, що дали иирок! зони затримки росту на першо-

му етап! скрйн!нгу (>20мм), мали виразну протим1кробну ак-тивн1сть 1 при внесенн! в агар (МЗК у межах 100-1 мкг/мл). Серед них були сполуки, що м [ стили. атоми одновалентного (МОС-3) та нульвалентного (МОС-28) хрому, чотирьохвалентного олова (МОС-59,76), двохвалентно! ртут! (М0С-60,62,63), а та- ' кож атом хрому, ковалентно зв'язаний з атомом ртут! (МОС-31). • •

Кеобх!дао в!дзначити, що ■ протим1кробн1 сполуки чотирьохвалентного олова (МОС-59,76) I нульвалентного хрому (МОС-28) за спектром д!I були аналог1чними ! проявили виб!р- . ков!сть у в!дновенн1 грампозитивних бактер!Я та гриб!в (МЗК 1-10 мкг/мл), але б^ли неефективними у в!дношенн! грамнега-тивно! флори (МЗК > 33^ мк^/мл). Сполуки двохвалентноI ртут! (М0с-60,62,63), навпакц, 1|в в|дзкачалися виб!рковостю д!1 ! Мали широкий.спектр активност1 у в!дношенн! як грампозитивних, так I грамнегативких бактер!й ! гриб!в (МЗК 0,1-33 • мкг/мл).

Оловоорган!чна сполука МОС-76 (г!дроксид три$ен!лоло-ва), що мае прост!шу будову, н!к МОС-69 (2,4-дахлорфенолят трифен!лолова) 1 МОС-28 (мезцтилеюсромдикарбон!яэлен!л-три-фен!лфосфон!й-борфторид), при аналог!чному спектр1 протим!к-робно! активност! виПдно в!др!знявться в!д останн!х прост.!-зою технологию синтезу !, в!дпов!дно, б!льшою економ!чц!стю II виробництва. Аналог!чно ! ртутьорган!чна сполука МОС-бО (ацетат фен!лртут!> за протим!кробною д!е» була в 10-100 ра-з!в активн!иою пор!вняно з II складнозбудованими аналогами (МОС-63,-2,4-дихлор-6-йод$енолят фэн!лртут!) як! не в!др1з-няд!ся в!д не! за спектром та специф!чн!стю д!1 на м!крофло-

Ру-

Найб!льший !нтерес являли поиуки протим!кробних сполук.

ефективних при захворюЕаннях, викликаних численними пред-ставниками грамнегативно! м!крофлори, як! зэймають в даний момент перше м!сце по частот!. Виражену активн!сть у в!дно-шенн! вказаних м!кроорган1зм1в проявив б1с(хлор<5«нзол)хрск-йодид (МОС-3), що Еимагало детальн!шого його досл1дження. Було показано, що МЗК МОС-3 в агар! для бакт&р!й кишкобо! групи (13 вид1в), в!бр1он1в .та псевдомонад складяе 1-3,3 мкг/мл. МОС-3 мет активна у в!дношенн! грампозитиьких м!к-роб!в та гриб1в (МЗК в агар! 100-200 мкг/мл ! б!льше). МОС-3 ефективно. пригн!чуе р!ст ентеропагогенних ешерих!й, шигел, сальмонел, кишкових ! псевдотуберкульозних 1ерсин1й, клебс!-ел, ентероСактер!в, гафн!й, серраЩй, пров!деяц!Й, галоф!ль-них в!бр1он!в, аеромонад та синегнойних паличок. М!н1мальн! бактерицида! концентрацИ МОС-3 буж в 2-3 рази вщими, н!ж в!дпов!дн1 МЗК в агар!. В пор1внянн1 з препаратами широкого вкитку в медачн1й практиц! - Сорною кислотой, розчином йоду, етазолом; ентеросептолом, !нтестопаном. риванолом, фурздон!-ном, фурацил!ном, фуразол!доном, х!ноксидином, д1оксидином та еритром1цином, МЗК яких для грамнегативних 0актер1й дося-гають 100-1000 мкг/мл 1 б!льше, - в досл1дах in vitro МОС-3 проявила вищий р!вень антибактерIально 1 активост!, наФмжую-чись до таких антиб!отик!в, як гентам1цин, неом!цин, рйфам-п1цин, л!вом!цетин, тетрацикл!н, пол!м'ксин, нев!грамон, ем-п!цил!н, карбен!цил!н, цепорин та цефамезин (МЗК яких були б межах 0,1-10 мкг/мл).

0дн1ею з важливих вимог до нових ггрот,м!кробних препа-рат!в е наявн!сть у них досить високо! яктивност! у в!дко-шенн! штам!в патогенних м1кроорган!гм!в, ст1йких до антибго-тик!в, антисептик1в та дез!нфектант!в.

Експерименти, проведен! на 38 штамах ентероб?ктер!й та

псевдомонад (24 р1зних вида), що характеризовались хромосомною та плазм!дною резистентн!стю до одного або дек1лькох ан-тиб!отик!в, протим!кробних препарат!в, солей важких метал!в та барвник!в, показали, що вивчен! МОС хрому (МОС-3) ! ртут! (М0с-60,62,63) ефективно пригн!чують р!ст б!льшост! включе-них у досл!д резистен/гних штам!в. При цьому МОС-3 у концект-рацИ 1-3,3. мкг/мл була ефективною. у в1дношенн! штам!в, ст1йких до амп!цил!ну, карбен!цил1ну, цефалоспорину, цефаме-зину, пол 1 м!кскну,. стрвятом!цину, моном 1 цину, гентам{цину, неом!цину, тетрацикл!ну, хлорамфзн1колу, рифамп1цину, нал!-д!ксово1 кислота, еритромЩину, фурацил!ну, фурадон1ну, фу-разол 1 дону, иноксидину,' д!оксидину, ентеросептолу, 1нтесто-паку, а такох у в1дношекн! штам!в, ст!йких до барвник!в (генцианв1олету, кристалв!олету, брильянтового зеленого) I солей вакких метал!в (телуриту та 1он!в ср!бла). Сл!д в!д-значити виралсену активн!сть МОС-3 такок у в!дношенн! м!ра-б!льних проте!в та синегнойних паличок, ст!йких до ртутьор-ган!чних сполук.

Результата проведених досл!джень дозволяють зробити ви-сновок, що б!с(бензол)хромйодид та ртутьорган!чн! сполуки однаково ефективно пригн!чують р!ст як чутливих, так 1 пол!-антибЮтккорезистентких штам!в р!зних ьид!в, ентеробак.тер!й, псевдомонад, аеромонад та в!0р!он!в, Однак серед культур вульгарних 1 м!раб!льних- проте!в та псевдомонад, взятих для досд'ду, зустр1чались штэми з природною ст!йк!стю до МОС-3. Це явилось п!дставою для вивчення частота стр!чання серед кл!н!чких культур грамнегативних бактер!й штам!в з природною ст!йк!стю до МОС-3.

Бизвачення чутляьост! до МОС-3 методом паперових даск!в (10 мкг/диск) 360 культур ентеробак?ер!й та псевдомскад (12

род!в I 22 вида), вид1лених при гн!йно-запальних ураженнях, сепсис! та д1аре1, показало високу чутлив!сть до препарату абсолютно! СЯльшост! (93,6$) штам!в. Лише 6,4$ мали природну ст!йк!сть до МОС-3. Ст!йк! до МОС-З штами зустр1чались серед кл!н!чних 1золят!в Pro t'eus 1 Pseuüomonas. 2.Вивчення гостро! токсичност!, цитотоксичност! та деяких CTopiH механизму антш1кробно? д!1 МОС. Вивчення гостро! токсичност! ЫОС-3 показало, що II р!вн! ДД50 для б!лих мишей коливалися в залежноот! в!д способу введения речовини в!д 40 мкг/г маси (при внутр(шньовенному введены!) до 315 мкг/г (при введенн! в шлунок) ! були пор!вняно близькими до р!вня ЛДзд гвнтам1цину (250-500 мкг/г). Абсолютно зносим! макси-мальн! дози МОС-3 при одноразовому введенн! для б!лих мишэй, щур! в I морських свинок були в межах 31-100 мкг/г маси. Сл!д в!дзначитн, гто р1вн! токсичност! МОС-3 на 1,5-2 порядки вищ! р!вня II концентрац!й, як! е$вктивно пригн!чують р!ст грам-негативних бактер!й, що св!дчить про достатн!й ступ!нь ви-б!рковост! д!! ц!е! речовини на м!кробну кл!тину._

Що стосуеться гостро! токсичност! МОС олова (МОС-59,76) ! ртут! (М0с-60,62,63), то вона, як ! токсичн!сть МОС-З, мо-же бути охарактеризована як пом!рна. Це в!дкривае перспективу розроСки на !х основ! антисептикtв для зоен!шнього вико-ристанчя í навах протим¡кробяих засоб!в.

Дал! нами було вивчено цитотоксичн!сть протим!кробно! сполуки МОС-3 на модел! iuiíthhhhx л!н!й НЕр-2 t Hela, як! культивувалн кз середовищ! JS199. ЦТЯ50 МОС-3 для. культур тканин дор!внювала 150-200 мкг/мл, що на 1,5-2 порядки вище доз, як! ефективно пригн!чують р1ст грамнегаттаних бактер!й.

В досл!дкеннях. з використанням м!чених попередник!в (С14-лейцину, Рр-арг'кину, 014-уридину, Н-*-тим!дику ) показа-

îe

но, що МОС-3 в бактерицида!» концентрац!ï (20 мкг/мл) вже через 10 хвилик з!д початку д11 р!зко Inri буе макромолеку-лярний синтез ДНК, ШК та б!лку в кл! тинах клебс!ел ! псевдомонад, але не впливае на синтез макромолекул в кл!тинах Hela у межах терм1ну сгостереження (1Б0хв.). З.Анал1з зв'язку м!ж х!м!чною будовою, антим!пробною актиь-н!стю I токсичн!стю в рядах вивчених МОС. .Сл!д п!дкреслити, що МОС-3, на в!дм!ну в!д Iohîb 3-х та ' 6-валентного хрому, характеризуемся виб!рков i стю д!1 на грамнегативну микрофлору, а за р!внем протим1кробно! активност! перевицуе 1х на З 1 2 порядки в!дпэв1дно. De св!дчить про важливу роль орга-H14HOI частини в структур! молекули МОС-3 у прояв! селективном! та протиы1кробно! активност1. 3 1ншого боку, н! власно хлорбензол, н! Юни негативно одновалентного йоду, ан! !они трьохвалентного хрому, то утворюються в процес! розпаду МОС-3 у водному сере довит 1, пом!тно! протим!кробно1 активност! не мають. Отже для прояви протим!кробно1 д11 МОС-3 важливе значения мае взаемозв'язок та взаемовшшв атомних груп, що входять до його складу. При дьому важливе значения мають заряд атома хрому Î, мокливо, рухом!сть атома хлору в хлорбен-зольному ядр! МОС-3.

Анал1з залежност! "х!м1чна будова - антим!кробна актив-н!сть - токсичн1сть" в рядах вивчених МОС показав, ио токсо-форним центром (в1дпов!дальним за бактерицидау д!ю) у проти-м!кробних слолук одновалентного хрому, 4-х валентного олова ! двохвалентно! ртут! е нестаб!льн! атоми уеталу (з ваканс!-ями у внутр!шн!й координац!йн!й сфер!, доступними для ураку-ваних б!ох!м1чних м!шеней м1кробних кл1тин), в той час як гаптофорними групами (в1даов1дальними за зъ'азувашзя препа-. рату з м!кробною кл!тиною та за спецкф!чн!сть д■.')" е орга-

Ht4Ht радикаля. Показано, що введения до бензольних та цик-лопентанових ядер ряду МОС як бокових радинал!в ф!з!олог!чно прианятн1шюс структур (гетероцикли !м!дазолу та бенз!м!дазо-лу) значно зменшуе токсичн!сть МОС. На п!дстав! проведеного лог1ко-структурного анал!зу нам!чено шляхи рац{онального синтезу б!льш активних I менш токсичних аналог!в. 4. Х1м!отерапевтична ефективн!сть б!с(хлорбензол)хромйодиду при експериментальних грамнегативних !кфекц!ях та частота 1 швидк!сть формування МОС-З-резистентних мутант!в в популяц!-ях грамнегативних бактер!й. Як показали досл1ди на мишах, МОС-3 проявляв б!льщу ефективн!сть при л!куванн! гострого .клебс!ельозного та синегнойного сепсису в пор!внянн! з стрептом!цином як контролем. При одноразовому введенн! внут-р!пшьом'язово МОС-3 :в дрзах 30, 20 1 10 мкг/г ваги тварин процент заходту прр генерал!зоран!й синегнойн1й 1нфекцП Сув у межах 50-бр, при клебс!ельозн!й - 50-80; сумарна трива-л!агь жрття груп 1з 10 досл!дних тварин досягала 62-72 та 89-84 мише-дн!в, а середня тривал!сть життя одн!е! тварини складала 2,5-3,2 та, 4,5-15 дн!в в!дпов!дно. В той же час процент летальное^1! при л!куванн! стрептом!цином 1 гентам1-цино^ у jjosax 5,10 1 30 мкг/мл ваги на обох моделях досягав 50-30, сумарна тривал!сть життя одн1е! твэрини коливалась у метах 1,3-3 дн!. Натом!сть карбен!цил!н у дозах 100-400 мкг/г ваги при одноразовому внутр1шньом'язовому введенн! зовс!м не проявляв х!м!озахисно! д!1 - вс1 1нф!кован! тварини гинули, а тривал1сть життя б!опроби складала 24-30 годин при сумари!й тривалост! життя групи 12-18 дн!в (що не в!д-р!знялсся в!д аналог!чних даних в контролънШ нел!кован!й груп!: 28-48 годин ! 16-20 днЛв в!дпов!дно, I при значному обсем!ненн! внутр!шн!х орган!в та кров! збудниками. 0да!ею з

важлиних характеристик hoboîo протим!кробвого прбпарату е частота 1 швидк1сть формування ст!йких до нього мутант1в в популяШях збудник ! в, що важливо для розробки тактики його застосування. Б наших доел!жжениях частота 1 швидк1сть формування мутант!в, резистентних до МОС-3, у еталонних штам!в клебс1ел, ешерих1й, сальмонел 1 псевдомонад була практично аналогична т!й, що сгостер!галась у в!дношенн! гентам!цина, пол1м1ксина та хлорамфен1кола 1 досягала р1вня в1д 1 до 8380 на 10 млрд. вих1дних батьк!вських нл!.тин при р!вн! ст!йкост! клон!в аж до 100-333 мкг/мл' препарату МОС-3. Це св1дчить про одаоступ!нчатий характер мутац1й за "стрептом1дановим" типом. При цьому îctothIx зм1н морфолог!чних, культуральних, б!ох!м!чних та антигенних властивостей, виникнення перехрес-но1 ст!йкост! до ряда антиб1отик!в (стрептом!цин, гентам!-цин, рифамп!цин,■ тетрацикл!н, нал1д!ксова кислота, цефаме-зин, кар0ен1цил!н, амп!цил!н, хлорамфен!кол, д!оксидин, н!т-роксал!н, ер1тром!цин) у Ъдерканих-резистентних до МОС-3 мутант! в не виявлено.

5. Досл1дження мутагенно! активност! протим!кробних МОС хрому, олова 1 ртут!. Як показали наш! досл!дження, пряму мута-генну активн!сть в тестах Еймса на штамах сальмонел ТА-100 1 ТА-98 не вдаеться виявити у вивчених МОС з протим1кробною активн1стю (МОС-3,28,59,76,60,62,63, 31). Сл!д в1дзначити, що у МОС-3 мутагенно1 активност! не вдалося виявити н! opl-ентировочними чашковими спот-тестами на реверсII,'. н1 к!лъ-к1снимй суспенз1йними методами (в концентрац!! 0,01-10 мкг/мл, н! в досл!дах з метас>ол1чною активахИею в орган 1зм!-посередаику (б!лих мишах). В той же час стандарте! мутагени р!зко п!двищували частоту г!стидиннезалежнкх муаант!в у тест-культур в суспенз!Йних методах, а в спот-тестаг. на чаш-

ках з селективними середовищами давали потужн! к!лъця прото-трофшх ревертант!в (4-н!трох1нол!ноксвд - на штамах TÄ-100 i ТА-98, а н-метил-N' -н1тро-11-н1трозогуан1дин - на ттам1 ТА-100).

В спот-тестах на штамах ГА-100 I ТА-98 не виявлено му-тагенно1 д!1 у !он!в трьохвалентного хрому (у форм! хлориду та сульфату хрому, хромово-кал!евого галуну та хромового дубителя), як! можуть утворюватись як к!нцев! продукта розпаду МОС-3 у водному середовшц!. Всупереч оч!куванням, не виявлено мутагенно! дП ! у !он!в шестивалентного хрому (у форм1 хромат!в кал1ю, натр!ю та б!хромат!в кал!ю 1 амон!ю) на штамах ТА-100.1 ТА-98. В концентрац!ях 0,0001-1,0 М хромат-!они при pH 5,0-9,0, на в!дм!ну в!д перманганат-!он!в та г!дропе-риту, не викликали ушкоджень ДНК-проте1нових структур в!ль-них фзгових корпускул стаф!лофага Зс, тод! як !они трьохвалентного хрому необоротно ушкодяали стаф!лофаг лише в кислому -середовищ! (pfti6,0).

Отже, б1олог!чн! та генетичн! ефекти ¡аестивалентного хрому спосереджувться через метабол!зм м!кробно1 кл1тини, в той час як для прояву б!олог!чно! активное?! 1он1в трьохвалентного хрому важливе значения мае pH середовища. На модел! E.eoli показано вирзкену х!м!опротективну; активн!сть природ-шк антиоксадант!в (цистегну та диг!дроаскорб!ново! кислоти) проти летального ушкоджеяня кл!тин хромат-1онами.

Таким четном, в результат! проведения досл!джень на р!з-номан!тних моделях, на в!дм!ну в!д !он!в шестивалентного хрому, не вдалося виявити мутагенно! активност! у сполук хрому нуль-, одно- та трьохвалентно! форм, а також у МОС олова i ртут1.

6. Селективн! властивост! мэталоорган!чних та 1ншх х!м!чних сполук. Значний 1нтерес вшшшало вивчення селективних властивостей ЫОС-3, 1нших МОС (19 препарат!в) 1 р1зних х!м!чних речовин (390 препарат!в) з метою визначення можливост! ix застосування як селективно! добавки до кивильних середовищ, що використовуються для вид!лення патогенних м!кроб!в. Вивчення селективних властивостей р!зних сполук у в!дношекн1 ентеробактер!й методом локальних селективних зон на щ!льному середовищ! з застосуванням сум1шей бактер1й Y.pseudotubercu-losis, Y.eriterooolltioa з м!кробними асоц1ац!ями (E.coli, Р.aeruginosa, Р.vulgaris, F.morganii, E.aerogenes) показало, що вивчен! ЫОС мають пом1рн! селективн! властивост1 обмеже-ного спектра (стримують р!ст 2 !з Б асоц1ант!ь). Однак в процес! вивчення селективних властивостей 1нших антим!кроб-них препарат1в, барвник1в, поверхнево-активних речовин 1 детергент^ нами буш знайден! селективн! аген.ти 1 розроблено нове селективне середовице, означене ЕСГФК (за назвою компонент^, що входять до його складу: середовище Ендо, сахароза, генц!анв1олет, фурадон!н, карбен!цил1н), яка характери-зуеться селективними властиьостями у ь!дношенн! Y.enteroeo-litioa. Середовище ЕСГФК було створено у процес! практично! реал!зац1т принцип1в 1 метод!ь пошуку х!м!чних речовин," селективних для бактер!й, як! були в1дярацьован! нами на rpynl МОС. Б1льш того, при зам!н! одного з компонентIв середовища ЕСГФК на препарат М0С-31, що м1сгить у своему склад1 атоми хрому 1 ртут!, вдаеться забезпечити с-.-лектавне вид!лення Y.pseudotuberoulosis 1з Ix асоц!ац!й з ешерих!ями та морга-нелами. При роботt з MX 1 генц!анв!олетом, ст!йк!сть м!к-робних кл1тин до яких зумовлена зм!неним синтезом б!лк!в. зовн1шьо! мембрани, було одержано атенуйоъакий мутант

Y.pseudotuberculosis 01 N 623 9/2 KV, що продукуе крупномо-лекулярку б!лк'ову фракц1ю, яка характеризуемся вираженою протективною активн!стю. Мутант для детального, вивчення б!о-лоПчних та генетичких властивостей було передано до НД1ЕМ (м.М.Ф.Гамале! (м.Москва) та ДД1Ш !м.1.Пастера (м.Санкт-Петербург), а п!сля п!дтвердження протективних властивостей депоновано в Д1СК Im.JT.A.Тарасовича МЗ РФ 1 захицегЮ автор-ським св!доцтвом.

висновки

1.Серед 90 вивчених МОС р!зних клас!в' виявлено 8 високоак-тивних протим!кробних сполук одно- 1 нульвалентного хрому, 4-х валентного та двохвалентно! ртут!.

2.Встановлено зв'язок м!к х!м1чною структурою, протим!кроб-ной активн!стю, токсичн!ст» та спецкф1чн!стю д!1 в рядах вивчених МОС, що дозволило нам!тити шляхи ц!леспрямованого синтезу аныюг!в з заданими властивостями.

3.3а спектром активност! МОС-хрому, олова ! ртут! перевищу-ють в!дом! фармакопейн! препарата,. TaKt як етазол, ентеро-септол, !нтестопан, н!трофурани, х!ноксидин та д!оксин 1 мають властив!сть пригн!чувати р!ст пол!резистентних культур мIкробfв, що викликають р{зн! гн!йно-септичн{ захворю-вання.

4.На моделях грамнегативного сепсису показано б!льш високий х!м1отерапевтичний ефект у б 1с(хлорбензол)хромйодиду (МОС-3) при парентеральному введенн! у пор!внянн! з гентам!ци-ном, карбен!цил!ном та стрептом!цином. Препарат характеризувться пом!ркою токсичн1стю t за данями бактер!ально! тест-системи ЕЯмса не мае мутагенно! активност!.

5.Формування cTlftKocTt до M0G-3 в популяц!ях ентеробактер!й та поевдомонад в!дбуваеться одноступнево за "стрептсм1ци-

новим" типом з частотою 107-108, при цьому пе^ехресно! ст1йкост1 до ряду антиб!отик!в з р1зним механ!змом д!1 не виникае.

6.Рад1о1зотопниш досл1дженнями показано, що МОС-З в Секте-рицидних дозах виб!рково пригн!чуе макромолекулярн! синтеза (ДНК, РНК, С1лку> в кл!тинах грамнегативних бактерШ, але не, д1е на"синтез макромолекул в кл!тинах еукар!от.

7.Б процес! вивчення спектру антим1кробно! активност! р!зних х1м!чних сполук розроблено селективне середовице ЕСГФК для вид1лення Yersinia enterooolitioa 1 селекц!оновано атену-ЙОВЭНИЙ штам Yersinia pseudotuberculosis 62Э 9/2 KV, перс-пективний як вакцинний.

8.Розроблений новий спосЮ синтезу нових б!олог1чно активних МОС - а-ферроцен!лал1льних солей &зол!в - захищено автор-СЬКИМ СВ{Д0ЦТВ0М 1320212 (51) 40 07 У 17/02.

СПИСОК ОПУБЛ1КОВАНИХ НАУКОШХ ПРАЦЬ

1. Бондаренко В.А., Стродубоба А.Т., Фадеева /.if. -и др. О влиянии солей трех- и шестивалентного хрома на плесневые и. дрожхеподобше грибы.//Тезисы 2-й научно-практической конференции гигиенистов,' эпидемиологов и паразитологов Кокчетавской области. -МЗ Каз.ССР, Алма-Ата, 1981, том "ДСП". - С.89-90.

2. Бонваренко В.К., Стародубова А.Т. Морфологические и культуральные изменения бактерий под влиянием солей хрома. //Журнал микробиологии, эпидемиологи и кммунобиоло- . ГИИ. - 1981, N 4.- С.99 - 100.

3. Бонбаренно B.U., Сшгродубоба А.Т. Нитотоксическое действие солей шестивалентного хрома в клеточных культурах ■ человека и jmbothhx. // Журнал "Гигиена и санитария". -1981,N 7, С.84-86.

А. Бондарешо B.U. Влияние соединений хрома на процесс передачи и наследования хромосомных маркеров у E.coli при конъюгации. // В сб. "Актуальные вопросы медицины в Кузбассе". Новокузнецк, 1584. - С.218-221.

5. Бондаренко В.¡f., Болянский D.A., Вондаренко Л.Г. ГГерс-. пективы совершенствования бактериологической диагностики

лерсиниозов. // Тез. докл. 5-го Всерос. съезда микроби-ол. и эпидемиол. M., 1985-- С. 164-166.

6. Бондаренко В.П., Крабцоб Д.ff-, Юрьеба Л.П. и др. Антимикробная активность новых металлооргзнических соединений и перспективы их применения для лечения экспериментального сепсиса.// В сб.: "Зпидемиол. и микробиол. раневых инфекций".- М.,1936.- С.57-58.

. 7. Бондаренко В.if., Тилофеева И.Т., Бондаренко В.М. и др. .. О значимости вксеваемости клебсиелл, энтеробактер, цит-робактер и кишечных иерсиний при бактериологических исследованиях // Журн. микробиол., - 1987, Х> б. - С.74-78.

S. Бондаренко В.3., Чубуков 3.$., БонОаренко В.M. Микроэле-

• менты и инфекция. // Журн. микробиол. - 1937, JS 11. -С. 113-126

9. Бондаренко S.U., ЯибарСипа H.H., Слелянская И.В. и др. Всгшака гнойно-септической инфекции среди детей с патологией центральной нервной системы (ЦНС). // В сб. "Актуальные вопросы микробиологии, эпидемиологии и иммунологии инфекционных бол'езней. Программа и тез. докл. науч.-практич. конф., 8-10 июня 1993г.", - Харьков, ХНСТШ им. 1Î.И.Мечникова, 1993. - С.53 10. Вышивкина Н.8., Бондаренно В.П., Литвин B.D. Опыт сравнительной оценки питательных сред, используемых при выделении кишечных иерсиний." // В сб. "Микробиология и

иммунология иерсиниозов".- Рязань, 1985, Т.84.- С.67-69.

11. Вышвкима ff.В., Бондаренно B.U., Руднев (i.A. Перспективы использования новой селективной среда для выделения иер-синий. / В сб.: "Эгадемиол. и микробиол. раневых инфекций". М.,1986,- С.51-53.

12. Стародубова А.Т., Bohßaj&HKO B.U. К вопросу о влиянии соединений хрома на микроорганизмы. // Вопросы гигиены труда и профзаболеванйй рабочих химической промышленности. Межвузовский тематический сборник. -Актюбинск, 1974. - С.67-69-

13. Отроду боба Л. Т., Бондаренно Б. У. О влиянии солей хрома на микромицеты. // Журнал "Гигиена и санитария". - 19^1, Я 9, С.68-71.

14. Бондаренно Б.М., ВолияагЛ P.A., Бондаренно B.U. Питательная селективная среда ЗСГФК для выделения кишечных иерсиний. //A.c. Ü 1208807А (ДСП) от .01.10.85. - 23с.

15. Попова A.B., Кочетова ff.С., Боев В. II., Ыатерихова Р.Б., Бзбия В.Е., Бондаренно _ B.V. Способ получения Ir-ферроценилалкильных солей азолов. // А.с.1320212 (51 )4С 07Р 17/02. Заявка * 3955957/31 - 04(22) от 25.09.а?.' -Р.Ж.Хим. 23094П. от 25."09.85. - Б.И., 1937, Jt 24, 7с..

16. Ценеба Т.Я., Бондаренно B.W., Воскресенская S.A., Бондаренно В.И. Штамм бактерий Yersinia pseudotuberculosis I серовара, используемый для изготовления протектив-ного антигена. A.c. Х> 1796675 МКИ5 с 12 к 1/100 от 08.10.1992г. Заявка Jf 49-32-193, с приоритетом от 19.02.91г.

Bondarenko 7.14. Antimicrobic activity and biological effects of new organometallics.

Thesis for" a degree of candidate of medical science in the speciality 14.02.05 - microbiology, Kharkov Slechnikov Scientific Research Institute of Utcroblology and Tmwnology, Kharkov, 1995.

It is being maintained the manuscript, which Includes 13 scientific work and 3 authcr*3 certificates for inventions, containing experimental research of antimicrobic activity and selectivity of 90 near organcraetallics (C!i) cf chrcnuua-,, tin. iron, mercury, -manganese, cobalt, molybdenum, tiingsten, ruthenium, rhenium, platinum.

It has been established that among OH cf chromium, tin and mercury thera are any compounds possessing expressed antimicrobial activity of individual spectrum. It has been sty-died a sharp toxicity, mutagenics activity and cheniotherape-utiaal effectivity in a In-vitro and in-vivo experinents of any O'J's with expressed antimicrobic activity. It has been discovered the correction between the chonlcal structure, antitlcrobio activity and toxicity in series of studied CH's, that reveals th* perspective for directed synthesis cf OM'3 with desired properties.

During these investigations, it has been created a ne-v selective nutrient medium for isolation cf Yersinia entcroco-litica. It has been worked out the way of synthesis of nev bijl-j^i-'al active CM's (o.-ferrccenylalkylic salt3 of icv le-?), and it has been selected vaccine stxn i.psendotup«;*-culosis,' maintained accordingly with 3 author's certLficat" for invwatlcn.-J. St.aj.-a Y.pseudotuberculosis, serovar "¡6.?" EV ?'2, using for producing protective anrtlgen, has bv-vn

deposited in the museum of alive cultures and nicrccrganisms of the Tarasevieh State Institute of Standartisation and Control oi liedical and Biological Preparations. This st-ашп is ured in the St.Petersburg Pasteur Scientific Research Institute of ' Epidemiology and Microbiology for produsinj nr^-t.rctive antigen.

Бонларевко В.М. Цротивсягакробная активность и бяолсп?ч«скиг эффекте новые ыеталлоорганяческих соединений. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.02.05 - микробиология. Харьковский НИИ микробиологии и иммунологии им.И.И.Иечнккс::^. Харьков, 1995.

Ззпщшзется рукопись диссертации, в которую вкл.'.'ч-ны 13 ti.iv". нут. работ и 3 авторски свидетельства h:i изосрет-: lu-.:'., сох-;*1-зкащэя экспериментальные исследования протиьомикробноЯ ькткг. ■ ности и селективности 90 новых мэт&ллооргаяиче-екк>_ соедин- -няй (МОС) хрсяез, олова, ртути, железа, марганца, кобальта, молибдена, вольфрама, рутения, рения и плагины. Установлено, что среди МОС хрзма, олова и ртути тытси 'соединения с выраженной протиЕомжробноЯ активности различного спектра действия. Изучена острая токсичность, кутггеюдо активность и хЕкиотерапевтическая эффективность в ommx in-vivo и in-vitro ряда таких ЫОС.

Ескркта связь между химической структурой, анттжргбк-.«?. активностью.и токсичности в рядах изучена».?: М0С-, что otj-xue-; • ет персяекетву целенаправленного синтеза КОС с гздаишма свойствами.

Б процессе шполненля исследований сконструирована 2;>Ь:.я плотная среда для выделения у.c&terawl ш га, рчгро'ота.н способ получения . новых биологически активных

(а-ферроценилалкилышх солей азолов) и селекционирован вакцинный штамм псевдотуберкулезного микроба, завиденные 3 авт. свидетельствами на изобретение. Штамм Y.pseudotuberculosis, 1 серовара, N623 кт 9/2, используемый для изготовления про-тективного антигена, депонирован в музее живых культур ГИСК им. Л.А.Тарасевича и используется в НИИЗМ имЛ.Паствра для получения протектинного антигена.

Ключов1 слова: м1кроорган1зми, металоорган1чн! сполуки, ток-сичн1сть, протим!кробна активн!сть, селективн! агента, моде-

л1 1нфекцИ, 1ерсин!ози,.селективн! середовища, вакцини. ■ $

Шдосано друну 20.Q3.S5, формат 60x84 1/16,-naniD для розмнояувалъних anapaTtB, друк офсетнцй, ротапринт, ЗД ХОУС, зам. 498, тираяДЮ щшм1рш1к1в, и.XapKiB-310002. вул.маршала Бажановз, .?28