Применение намивита и суперпротамина в период беременности как способ защиты организма в чрезвычайных экологических ситуациях

Баева, Юлия Игоревна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Применение намивита и суперпротамина в период беременности как способ защиты организма в чрезвычайных экологических ситуациях
ВАК РФ 03.02.08, Экология (по отраслям)

Автореферат диссертации по теме "Применение намивита и суперпротамина в период беременности как способ защиты организма в чрезвычайных экологических ситуациях"

400'

Баева Юлия Игоревна

ПРИМЕНЕНИЕ НАМИВИТА И СУИЕРПРОТАМИНА В ПЕРИОД БЕРЕМЕННОСТИ КАК СПОСОБ ЗАЩИТЫ ОРГАНИЗМА В ЧРЕЗВЫЧАЙНЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ СИТУАЦИЯХ

03.02.08 - экология (биология) 03.01.04 - биохимия

2 о о;;т 2011

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2011

4857740

Работа выполнена на кафедре экологии человека экологическо факультета Российского университета дружбы народов и в Институ теоретической и экспериментальной биофизики Российской Академии Наук

Научный руководитель: доктор биологических наук

Орлова Елена Владимировна

Научный консультант:

кандидат медицинских наук, доцент Родионова Ольга Михайловна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук

Котелевцев Сергей Васильевич

кандидат биологических наук Коваленко Наталья Аркадьевна

Ведущая организация:

Научно-исследовательский институт питания РАМН

Защита состоится <

ш>

час. на заседай:

диссертационного совета Д 501.001.55 при биологическом факульте Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова адресу: 119992, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, ком. 35 Биологический факультет МГУ.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Биологическо факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, с авторефератом - на сай' disser@mail.bio.msu.ru.

Автореферат разослан 2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Карташева Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Проблема неблагоприятного влияния факторов окружающей среды на состояние репродуктивного здоровья женщины с каждым годом приобретает все большую аиуальносгь. Ухудшение экологической обстановки является одним из лидирующих факторов в нарушении репродуктивной функции женщины и фактором риска для здоровья ребёнка (Айламазян, 2005; Сетко, 2005). Особое значение данный факт приобретает в связи с такой характерной особенностью современной эпохи, как урбанизация. А в настоящее время 62% населения нашей страны проживает именно в городах (Олдак, 1990; Целкович, Рогачева, 1998; Головко и др., 1999; Акимова, Хаскин, 2000; Протасов, 2000; Ревич, 2001; Рукавишников и соав., 2002; Эколого-экономические проблемы.., 2002; Мельник, 2003; Никитин 2008).

На фоне антропогенного загрязнения городской природной среды и изменения социально-экономических условий в последние годы стремительно растет число чрезвычайных ситуаций, как природного, так и техногенного характера, сопровождающихся поражениями и гибелью людей. Аномальные природные явления, стихийные бедствия, техногенные катастрофы и аварии, пожары и взрывы, массовые «вспышки» опасных инфекционных заболеваний и пищевые отравления в сочетании с общим ускорением темпа жизни, информационными перегрузками и хроническим психоэмоциональным стрессом приводят к различным патологическим состояниям человека, прямо или косвенно связанным с нарушением кислородного гомеостаза организма.

В условиях недостаточного для удовлетворения потребностей метаболизма снабжения тканей кислородом начинается цепь физиологических и биохимических изменений, цель которых обеспечить оптимальную функцию и по возможности интактное восстановление организма после окончания периода гипоксии. На уровне целого организма запускаются физиологические механизмы, которые нацелены на сохранение функции и жизнеспособности органов. На клеточном уровне такие изменения включают переход энергетических субстратов и прекращение синтетических процессов. При более тяжелом и более длительном дефиците кислорода поддержание достаточных уровней богатых энергией фосфатных соединений, особенно АТФ, оказывается невозможным, что ведет к более глубоким нарушениям клеточной функции, неспособности поддерживать ионное равновесие и в конечном итоге к гибели клетки (Каган, Архипенко, Козлов, 1983; Чеснокова, 2004; Бизенкова, 2008; Bannister, Bannister, 1984; Balaban, Guliaeva 2006; Vo, Palsson, 2007).

Сегодня у многих женщин беременность наступает уже в состоянии хронического гипоксического стресса, что в значительной степени определяет риск осложнений и невынашивания беременности, преждевременных родов, патологии плода и новорожденного, значительные отклонения нервно-психического и соматического развития детей в последующие годы жизни (Андреева, 1999; Евсеенко, Ещенко, 2002; Евсюкова, 2004; Ревич и др., 2004; Баряева и соав., 2005; Кравцова, Школьникова, Калинин, 2008; Никитин, 2008; Lesage, Del-Favero et al. 2004). Кроме того беременная женщина также не «застрахована» от разнообразных чрезвычайных ситуаций и психотравмирующих событий, вызывающих острое кислородное голодание. Что в свою очередь усугубляет хроническую гипоксию и увеличивает процент осложнений и негативных исходов беременности (Micco Jamie, 2009).

Данные обстоятельства акцентируют внимание специалистов на возможности наиболее эффективного воздействия на уже развившуюся хроническую кислородную недостаточность и предупреждение острой гипоксии при различных экстремальных состояниях во время беременности. В связи с этим очевидна значимость экспериментальных исследований, направленных на изучение антигипоксических эффектов как лекарственных, так и биологически активных препаратов с целью снижения

неблагоприятного воздействия факторов окружающей среды на организм в период беременности.

Несмотря на то, что сегодня антигипоксанты широко применяются в медицине, среди них практически отсутствуют препараты из дрожжей, а именно из $асскаготусе5 сегечшае, что особенно важно, так как обмен пекарских дрожжей генетически детерминирован типу питания человека и животных. Кроме того отсутствуют данные о влиянии данных препаратов на антиоксидантную систему организма во врек беременности. В этой связи представляет большой практический интерес изучение механизмов действия и реальная оценка перспективности клинического применен! препаратов, полученных из дрожжей ВассЬаготусез сегеу1$1ае, у женщин в перис гестации.

Цель исследования: изучение механизмов антигипоксического действия намивш и суперпротамина на беременных крыс \Vistar как одного из способов защиты оргашт от острой гипоксии в условиях неблагоприятной экологической ситуации.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить поведенческие реакции беременных животных при воздействии намиви: и суперпротамина в условиях острой гипоксии, вызванной негативны воздействием факторов окружающей среды;

2. Оценить реакцию симпато-адреналовой системы беременных крыс \Vistar I острую гипоксию в условиях действия биокорректоров;

3. Выявить антиоксидантное действие намивита и суперпротамина щ окислительном стрессе на модели гипоксии у беременных крыс \Vistar и оцени-воздействие этих препаратов на показатели перекисного окисления липидов;

4. Исследовать влияние намивита и суперпротамина на уровень тиолов и глутатжн в органах и тканях беременных крыс \Vistar при окислительном стрессе в условю острой гипоксии;

5. Оценить действие биокорректоров на содержание различных изофором Ж синтазы в органах и тканях беременных крыс \Vistar при гипоксическом стресс обусловленном экстремальными экологическими ситуациями.

Научная новизна. Впервые проведено сопоставление антигипоксическс эффективности намивита и суперпротамина и выявлена их роль в защите организ> беременных самок \Vistar от негативного воздействия недостатка кислорода в у слови загрязнения окружающей среды. На модели острой гипобарической гипока установлено, что используемые препараты:

• в значительной степени снижают выраженность ответной сгресс-реакщ организма матери во время беременности на гипоксию;

• оказывают достоверное антиоксидантное действие, предотвращая накоплен продуктов перекисного окисления липидов, реагирующих с 2-тиобарбитуров< кислотой;

• восстанавливают нарушенные системы супероксидперехватывающей активности восстановленного глутатиона;

• купируют изменение активности синтазы оксида азота, вызванное гипоксичесю стрессом.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты проведенш исследований позволяют утверждать, что намивиг и суперпротамин оказывш благоприятное влияние на организм матери во время беременности в экстремальш экологических ситуациях, сопровождающихся острой и хронической гипоксией, и, Т1 самым, существенно снижают риск развития негативных последствий для плода. Э расширяет возможности использования данных биокорректоров во время беременности целью повышения неспецифической резистентности организма к неблагоприятно! воздействию факторов окружающей среды.

Результаты диссертационного исследования могут быть использованы в системе подготовки, переподготовки и повышения квалификации специалистов в области экологии человека.

Положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Намивит и суперпротамин обладают антигипоксическим эффектом. При этом антигипоксический эффект намивита выражен в большей мере, чем суперпротамина.

2. Ключевой механизм антигипоксического действия биокорректоров заключается в нормализации уровня активности глутатион-связывающей системы организма. А более высокая эффективность намивита обусловлена его способностью активировать также Са2+-зависимую NO-синтазу и Са2+-мобилизующую систему.

3. Намивит способен купировать проявления гипоксического стресса в организме матери во время беременности, снижая содержание адреналина и норадреналина в крови беременных крыс Wistar. Суперпротамин не оказывает влияния на реакцию симпато-адреналовой системы беременных животных, подверженных острой гипоксии.

4. Намивит и суперпротамин обладают выраженным антиоксидантным эффектом, снижая интенсивность перекисного окисления липидов и восстанавливая активность системы ангиоксидантной защиты организма.

опубликованы в материалах следующих конгрессов и конференций: Международный конгресс экспериментальной биологии (Анахайм, США, 2010), II Студенческая международная научно-практическая конференция «Интеллектуальный потенциал XXI века: ступени познания» (Новосибирск, 2010); III Международная научно-практическая конференция «Наука и современность - 2010» (Новосибирск, 2010); I Международная научно-практическая конференция «Актуальные проблемы охраны природы, окружающей природной среды и рационального природопользования» (Чебоксары, 2010); II Заочная научная конференция «Теория и практика современной науки» (Москва, 2010); Всероссийская научно-практическая конференция «Экологическая дискуссия: окружающая среда - здоровье человека» (Волгоград, 2010); VIII Международная конференция «Биоантиоксидант» (Москва, 2010).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 3 статьи в журналах, входящих в перечень ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 141 странице машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы и приложений. Работа содержит 12 таблиц и 42 иллюстрации. Список литературы содержит 318 источников, в том числе 98 зарубежных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследования выполнены на беременных крысах линии \Vistar массой 180-200 содержащихся в стандартных условиях вивария, в соответствии с этическими нормам Женевской конвенции (1961) и «Международных рекомендаций по проведению медию биологических исследований с использованием животных» (1985), а также в соответстви с Приказом Минздравсоцразвития РФ от 23.08.2010 № 708н «Об утверждении Прав! лабораторной практики», «Санитарными правилами по устройству, оборудованию содержанию вивариев» №1045-73 от 06.04.1973 и Приказом Минздрава СССР < 12.08.1977 N 755 «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных фор работы с использованием экспериментальных животных».

В качестве исследуемых препаратов были использованы биокорректоры широко! спектра действия намивит (Регистрационное удостоверение Федеральной службы г надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека } 77.99.23.3.У.9412.8.05 от 16.08.2005) и суперпротамин (Регистрационное удостоверен! МЗ РФ № 001374.Р. 643.01.2000 от 17 января 2000г.), приготовленные на основе воднь экстрактов пекарских дрожжей (табл.1).

Таблица 1. Состав биокорректоров намивита и суперпротамина

Компоненты препаратов Намивит Суперпротамин

Нуклеотиды, нуклеозиды и нуклеиновые кислоты адениновые нуклеотиды, нуклеозиды

Аминокислоты, белки лизин, гистидин, аргинин, аспарагиновая кислота, треонин, серин, глутаминовая кислота, пролин, глицин, аланин, валин, метионин, изолейцин, лейцин, тирозин, фенилаланин, цистеин лизин, гистидин, аргини аспарагиновая кислота, треони серин, глутаминовая кислот пролин, глицин, аланин, тирози фенилаланин, низкомолекулярш белки

Витамины В| (тиамин), В2 (рибофлавин), В6 (пиридоксин), В12 (цианоко-баламин), ниацин (витамин РР) холин, пантотеновая кислота, фолиевая кислота, Н (биотин), К (филлохинон, пренилменахинон), Е (токоферол) В1 (тиамин), В2 (рибофлавин), (пиридоксин), ниацин (витам! РР), инозит, фолиевая кислота, (биотин)

Макро- и микроэлементы Фосфор, калий, натрий, кальций, магний, медь, кобальт, железо, марганец, цинк, никель, хром, молибден Натрий, калий, кальций, магни железо, марганец, кобальт

Жирные кислоты Миристиновая, миристолеиновая, петадекановая, пальмитиновая, пальмитолеиновая, маргариновая, гептадеценовая, стеариновая, олеиновая, линолевая, линоленовая, арахиновая, гадолеиновая, арахидоновая, бегеновая

Другие компоненты Стеарат кальция, ванилин полисахариды, пищевые волокна

Данные препараты используются для повышения иммунореактивности организма, сопротивляемости к неблагоприятным факторам окружающей среды, для коррекции метаболических нарушений и нормализации физиологических процессов при развитии ряда патологических состояний. Являются эффективными антиоксидантами, действие которых проявляется в нормализации уровня активности глутатион-зависимого звена, снижении уровня малонового диальдегида, ингибировании перекисного окисления липидов, снижении активности синтазы оксида азота. Препараты не обладают мутагенными, эмбриотоксическими, тератогенными, аллергизирующими свойствами и не влияют на репродуктивную функцию.

В экспериментах биокорректоры вводили в течение 14 дней (с первого по 14 день гестации) внутрижелудочно 1 раз в день в дозе 100 мг/кг массы. Выбор доз и способа введения препаратов основывался на описанных в литературе примерах их использования (Орлова, Римарева, 2006 Орлова, 2007; Орлова и соав., 2007).

В экспериментах использовали 60 беременных самок. Всех животных случайным образом разделили на шесть групп:

1 группа - беременные крысы (контроль) (п=10);

2 группа - беременные самки, получавшие намивит(п=10);

3 группа - беременные самки, получавшие суперпротамин (п=10);

4 группа - беременные самки, перенесшие гипоксию (п=10);

5 группа - беременные самки, перенесшие гипоксию и получавшие намивит (п=10);

6 группа - беременные самки, перенесшие гипоксию и получавшие суперпротамин

(п=10).

Предварительная адаптация животных к гипоксическому стрессу проводилась в условиях влияния мегаполиса на базе вивария РУДН с момента рождения до достижения самками годовалого возраста. При этом ведущим фактором воздействия города на крыс являлось аэрогенное (табл.2).

Таблица 2. Состояние атмосферного воздуха в ЮЗ АО г. Москвы в 2009 году по

Загрязняющее вещество, значение (в долях ПДК) Станция контроля

ул. Введенского, 1 (Бутлерова) ул. Большая Черемушкинская, 30 (Черемушки)

Диоксид азота 0,57 0,95

Оксид азота 0,53 0,48

Оксид углерода 0,17 0,18

Диоксид серы - 0,06

Значение ИЗА* 6,3 6,0

*ИЗА — комплексный индекс загрязнения атмосферы, учитывающий примеси и представляющий собой сумму концентраций выбранных загрязняющих веществ в долях ПДК.

Использовали модель острой сублетальной гипобарической гипоксии, создавая ее на 15 день беременности самок с 21-22-дневным циклом гестации (срок беременности определяли, считая со дня обнаружения спермиев в вагинальном мазке) в барокамере с регулируемым потоком воздуха. Давление снижали до конечного значения 169 мм.рт.ст., что соответствует условиям подъема на высоту 12000 м над уровнем моря. В таких условиях животных выдерживали до остановки дыхания, после чего возвращали в условия нормального давления, постепенно подавая в камеру атмосферный воздух. Сразу после гипоксического воздействия крыс декапитировали под эфирным наркозом.

Поведенческие реакции беременных крыс при остром гипоксическом воздействии оценивали с помощью следующих показателей: время потери позы (ВПП) - время до

перехода в боковое положение, время жизни (ВЖ) - время до начала атонального дыхания. При этом в данном эксперименте контрольной группой явились животные подверженные гипоксии, но не получавшие никаких препаратов.

Тяжесть окислительного стресса у крыс с гипоксией оценивали по следующим биохимическим показателям, характеризующим отдельные звенья данного патологического процесса: содержание адреналина и норадреналина, уровень SH-rpyim (общие, свободные (глутатиона) и белковые), супероксидперехватывающая активность, уровень ТБК - реактивных продуктов и активность различных изоформ NOS. Указанные показатели определяли в плазме крови, в тканях головного мозга, печени и в мышцах бедра подопытных животных (табл.3). Для этого ткани гомогенизировали в автоматическом гомогенизаторе Потгера и получали по методикам Forstermann et al (1991), Fandrey J., et al., (1990), Wenger RH et al., (1997), Wang J., et al., (1991) тканевые экстракты, на которых проводили указанные исследования.

Содержание катехоламинов в плазме крови определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с электрохимической детекцией на хроматографе «Миллихром». Обработку крови при этом проводили по методике Ларского Э.Г. (1990).

Содержание тиолов в органах, тканях и средах организма определяли по методу Hayes JD et al., (1999).

Продукты, реагирующие с 2-тиобарбитуровой кислотой, определяли в плазме п методу Ohkawa H. Et al., (1979), a в тканях - по методу Путилиной Ф.Е, (1982 осуществляя индукцию свободнорадикального окисления в системе: 2мкМ FeS04 / 15мк1 аскорбиновой кислоты.

Супероксидперехватывающую активность в мышцах, печени, мозге и плазме кров определяли по восстановлению нитросинего тетразолиевого в системе генераци супероксидного радикала феназинметасульфат-НАДН (Nishikimi M., 1972).

Определение активности NOS осуществляли радиометрически по образованию 3F цитруллина из 3Н-Ь-аргинина (Bredt and Snyder, 1994). Выявление различных изофор NOS проводили в трех параллельных пробах с использованием специфически ингибиторов центров связывания фермента: для каталитического центра связывания - N' монометил-Ь-аргинина (L-NMMA) (Sigma, США) 0.9цМ (nNOS) и 2.1цМ (iNOS), а так» для аллосгерического Са-связывающего центра NOS - трифлюоперазина (TFP) (Sigm США) (20цМ) и калмидазолиум хлорида (R24571) (Sigma, США) (20цМ).

Статистическую обработку всех полученных экспериментальных даннь: проводили с помощью пакета статистических программ "SPSS". Достоверное! полученных данных оценивалась с использованием непараметрических критериев Манн; Уитни, Краскала-Уоллиса, Дана. Результаты экспериментов представлены в ви; среднеарифметического и стандартного отклонения (M±SD) при критическом значени уровня значимости 5% (р<0,05).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние биокорректоров на поведенческие реакции и симпато-адреналовую систему беременных крыс \Vistar при гипоксии

В ходе эксперимента наблюдалась следующая поведенческая картина: вначале у самок отмечалось беспокойство, усиление двигательной активности. При дальнейшем снижении давления развивалась атаксия задних и передних конечностей и крысы падали на бок. Перманентные падения превращались в стойкое боковое положение животных, с потерей выпрямительных рефлексов. При этом их конечности были напряжены и вытянуты, пальцы растопырены и напряжены, дыхание частое, поверхностное, судорожное, хриплое.

Намивит достоверно (р<0,05) увеличивал в 1,5 раза время до потери позы (2,12±0,33 мин.) и время до появления атонального дыхания (3,11±0,12 мин.) по сравнению с контрольной группой, где значения данных показателей составили 1,39±0,18 мин. и 2,03±0,3 мин. соответственно. Под действием суперпротамина достоверное замедление времени перехода животных в боковое положение и появления у них первого атонального вдоха не отмечалось (рис. 1).

Рисунок 1. Влияние биокорректоров на время потери позы и на время эюизниу беременных крыс \Vistar при острой гипоксии (р<0,05)

Исследования реактивности адреноргетической системы беременных крыс \Vistar показали, что острая гипобарическая гипоксия сопровождается повышением концентрации адреналина и норадреналина в плазме крови в 2,3 ив 1,8 раза соответственно по сравнению с контрольной группой (рис.2). Такое повышение концентраций катехоламинов отражало состояние возбуждения симпатоадреналовой системы у животных, подверженных гипоксическому стрессу, и развитие стресс-реакции, направленной на повышение устойчивости организма в ответ на воздействие гипоксии. Более существенное увеличение концентрации адреналина по сравнению с норадреналином можно связать с характером стрессорного воздействия: усиленный синтез норадреналина как правило характерен для психо-эмоционального стресса (Тигранян, 1988; Зайчик, Чурилов, 2000; Пшеникова, 2001).

Рисунок 2. Содержание адреналина и норадреналина в плазме крови (нг/мл) при гипоксии

(р<0,05)

Использование намивита во время беременности вызывало достоверное снижение уровней катехоламинов в крови крыс по сравнению с их содержанием у животных, которым препарат не вводился. При этом снижение выраженности гиперадреналинемии наблюдалось как в группе, не подверженной гипоксическому воздействию (в 1,7 раза ниже, чем в контрольной группе), так и после моделирования острой гипобаричекой гипоксии (в 1,8 раза по сравнению с группой, не получавшей препарат). После применения намивита уровень адреналина в крови самок в условиях острой гипоксии достигал контрольных значений (р<0,05) (рис.3).

Следует отметить, что эффект намивита на стрессорное накопление адреналина у беременных крыс выражен в большей мере, чем на накопление норадреналина. После курса намивита у беременных самок при нормальных условиях уровень норадреналина в плазме крови практически не отличался от контрольного (р<0,05). Однако, в группе, подвергавшейся гипоксическому стрессу, его значения оказались в 1,5 раза ниже, чем у самок, не получавших препарат, и выше контрольных значений в 1,2 раза (рис.3).

норадреналина в плазме крови (нг/мл) беременных крыс 1¥{я1аг при нормальных условиях и вусловиях гипоксии (уровень значимости р<0,05)

Такое действие иамивита на реактивность симпато-адреналовой системы беременных крыс, по-видимому, объясняется следующим. Организм располагает рядом стресс-лимитирующих механизмов, препятствующих чрезмерной активации стресс-системы и соответственно реализации повреждающих эффектов избыточных концентраций стресс-гормонов (Меерсон, 1986). Интенсивность стресс-реакции как раз и определяется соотношением степени стимуляции стресс-реализующих механизмов при действии стрессора на организм и активации стресс-лимитирующих факторов - ГАМК-ергической, опиоидергической, дофаминергической, серотонинергической, простагландиновой, антиоксидангной, аденозинергической стресс-лимитирующих систем и др. В последние годы получены данные о том, что в регуляции стресс-реакции участвует также система N0 (Малышев, Манухина,1998; Полетаев и соав., 2002; Малахов и соав., 2008; Tomomi, Masataka, 2006; Osaka, 2011).

Намивиг, представляя собой комплексный нуклеотидный препарат, индуцирует Са2+-зависимую NOS, что приводит к увеличению синтеза оксида азота, который способен снижать выброс гипофизарных стресс-гормонов, а также блокировать выброс катехоламинов из надпочечников и симпатических нервных окончаний (Osaka, 2011). Это приводит к ограничению стресс-реакции организма и снижению выраженности ее симптомов.

После курса суперпротамина концентрации катехоламинов достоверно не отличались от исходных уровней как в группах, не подвергавшихся гипоксическому воздействию, так и у животных при гипоксии (рис.3). Отсутствие эффекта от применения суперпротамина вероятно обусловлено тем, что его способности опосредованно, через депонирование избытка NO, активировать NOS недостаточно, чтобы влиять на реактивность симпато-адреналовой системы и поведенческие реакции беременных животных при остром гипоксическом стрессе.

Влияние биокорректоров на интенсивность перекисного окисления липидов у беременных крыс \Vistar при острой гипоксии

Полученные в ходе исследования данные свидетельствуют о том, что острая гипобарическая гипоксия вызывает развитие окислительного стресса в организме беременных крыс - резко возрастет количество карбонильных продуктов, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой. При этом степень ПОЛ различается в зависимости от вида органа или ткани.

Рисунок 4. Влияние гипоксии на уровни ТБК-активных продуктов в различных органах и тканях беременных крыс Мя1аг (уровень значимостир<0,05)

Так, наиболее высокие уровни ТБК-активных продуктов отмечались в плазм крови и в печени животных - в 2,8 раза выше контрольной группы соответствен» (р<0,05). В головном мозге и бедренных мышцах такое превышение ТБКАП составило 1. и 1,4 раза соответственно (рис.4).

Применение намивита и суперпротамина сохраняло содержание ТБКАП пр гипоксии на более низком уровне, чем в группе, не принимавшей препараты. Так, плазме крови животных, прошедших 14-дневный курс биокорректоров, уровень ТБКА достоверно снизился в 1,8 раза под действием намивита и в 1,2 раза под действие суперпротамина по сравнению с самками, не принимавшими препараты; в головном M031 - в 1,2 раза после курса намивита и суперпротамина; в печени - в 1,7 и в 1,2 раза; бедренных мышцах - в 1,9 и 1,4 раза соответственно (рис.5).

Рисунок 5. Влияние намивита и суперпротамина на содержание ТБКАП в различных органах и тканях беременных крыс 1¥1я1аг (уровень значимости р<0,05)

Антиоксидантные эффекты суперпротамина выражены слабее, чем у намивита. Это объясняется тем, что данный препарат обладает прямой антирадикальной активностью, т.е. действует только на уже образовавшиеся свободные радикалы, непосредственно взаимодействует с активными формами кислорода и инактивирует их. Намивит же, наряду с прямым антирадикальным действием, усиливает энергопродукцию в клетках при гипоксии за счет адениннуклеотидов, которые выполняют субстратную роль, что задерживает образование свободных радикалов и препятствует угнетению антиоксидантных систем.

Влияние намивита и суперпротамина на активность системы антиоксидантной

защиты

Влияние на активность супеуоксиддисмутазы. Полученные в результате экспериментов данные показали, что под влиянием острой гипобарической гипоксии наблюдается нарушение систем перехвата и генерации супероксидных радикалов в исследуемых органах и тканях (табл.3). В плазме крови, тканях мозга и печени такие нарушения направлены в сторону увеличения генерации радикалов. При этом наиболее выраженное снижение супероксидперехватывающей активности отмечалось в сыворотке крови - в 2,1 раза (р<0,05). В головном мозге активность СОД снизилась в 1,5 раза; в печени - в 1,2 раза по сравнению с контрольной группой. В противоположность этому, в мышцах бедра животных с гипоксией было зарегистрировано достоверное увеличение супероксидперехватывающей активности в 1,1 раза. Полученные данные согласуются с литературными источниками (Зарубина, Шабанов, 2004).

Таблица 3. Влияние гипоксии на супероксидперехватывающую активность в различных _органах и тканях беременных крыс {У/Наг (уровень значимости р<0,05)_

Активность СОД, (у.е.)

Группы кровь головной мозг печень мышцы бедра

Контрольная группа 20,1 ±0,9 63,2±0,7 66±0,9 47,7±1,1

Группа с экспериментальной гипоксией 9,8±0,7 43,3±0,6 59,3±0,8 51,4±0,6

Использование намивита и суперпротамина усиливало антиоксидантную защиту: 14-дневный курс намивита достоверно (р<0,05) повышал супероксидперехватывающую активность в плазме крови как в группе при нормальных условиях (на 16,4% по сравнению с контрольной группой), так и в условиях экспериментального недостатка кислорода (на 86,7%). Супероксидперехватывающая активность головного мозга после приема намивита повышалась в нормальных условиях на 10,9%, при гипоксии - на 42,7%. Для печени характерно увеличение на 3,9% и 11,1% соответственно. В бедренных мышцах под воздействием намивита, наоборот, наблюдалось достоверное уменьшение активности СОД - в нормальных условиях на 5,2% и на 3,5% - при гипоксическом стрессе (рис.6).

Для суперпротамина также характерно повышение супероксидперехватывающей активности в плазме крови, тканях головного мозга и печени и снижение показателя в бедренных мышцах беременных крыс. Однако достоверно значимые отличия выявлены только для групп животных, подвегшимся гипоксическому стрессу. Так, в плазме крови активность СОД увеличилась на 70,4%, в головном мозге - на 16,9%, в печени - 3,7%. В мышцах супероксидперехватывающая активность снизилась на 2,9% (рис.6). В нормальных условиях между контрольной группой и животными, прошедшими курс препарата, достоверного различия не наблюдалось.

Механизм действия исследуемых препаратов на активность СОД обусловлен наличием в их составе свободных аминокислот и низкомолекулярных белков источников тиоловых групп. Согласно литературным данным, тиоловые соединения способны активировать СОД, воссгановливая ионы меди (Си24) в активном центре фермента (Sasaki, 2011). Кроме того, отмечено участие глугатиона в экспрессии гена, кодирующего медь-цинкзависимую изоформу (CuZnCOfl) (Зенков, Меньшикова, 2004). При этом показано, что только восстановленный глутатион (но не его окисленная форма) индуцирует экспрессию данного гена.

намивит суперпротамин

щшаыицашя мотая

дриычцшш ■] ггош

Вгигюс» ПшюкшНсуперпртгаш»]

Рисунок 6. Влияние намивита и суперпротамина на активность СОД в различных органах и тканях беременных крыс ¡¥1я1аг (уровень значимости р<0,05)

Влияние на уровни тиоловых групп. Под действием экспериментальной гипоксии наблюдается достоверное увеличение уровней общих и белковых БН-групп (табл.4): в плазме крови - в 1,9 и 6,6 раза соответственно; в головном мозге и печени - в 1,2 раза; в мышцах бедра - в 1,8 и 1,9 раза соответственно (критический уровень значимости р<0,05). Такое увеличение уровня белковых БН-групп, по-видимому, свидетельствует о структурных изменениях и инактивации белков в тканях и органах при недостатке кислорода.

Таблица 4. Влияние экспериментальной гипоксии на уровень ЭН-групп в крови и тканях

беременных крыс Wistar

Группы Уровень SH-групп (нмоль/мг белка)

SH-группы общие SH-группы глутатиона SH-группы белковые

плазма крови

Контрольная группа 36,1±0,3 10,02±0,15 1,04±0,16

Группа с экспериментальной гипоксией 67Д±0,1 0 6,83±0,19

головной мозг

Контрольная группа 163,4±0,7 3,58±0,12 157,6±0,8

Группа с экспериментальной гипоксией 179,2±0,8 0 177,9±0,6

печень

Контрольная группа 105,5±1,3 10±0,6 93,7±0,9

Группа с экспериментальной гипоксией 114,6±1,1 3,3±0,8 107,8±1,2

мышцы бедра

Контрольная группа 40,5±0,6 3,35±0,16 39,7±0,5

Группа с экспериментальной гипоксией 72,9±0,4 1,14±0,12 75,4±0,3

Гипоксический стресс приводит к резкому снижению, до полного исчезновения, свободных SH-групп (глутатиона) в плазме крови и головном мозге подопытных самок. В то же время экспериментальная гипоксия оказывала менее выраженное влияние на уровень SH-групп глутатиона в печени и мышцах бедра животных. Так, в печени уровень SH-групп глутатиона достоверно (р<0,05) снизился в 3 раза, а в мышцах - в 2,9 раза.

Полное исчезновение свободных тиоловых групп в крови и головном мозге крыс связано с тем, что в условиях острого гипоксического стресса организм в первую очередь стремится поддержать работоспособность основного жизненно важного органа головного мозга, «отключая» при этом другие системы и органы. Но под действие: гиперпродукции свободных радикалов «запас» глутатиона в плазме крови и в тканях мозга быстро истощается. Подобный характер изменений уровней SH-групп в тканях органах крыс при гипоксии согласуется с данными литературы (Биленко, 1989; Зарубина, Шабанов, 2004; Hernandez-Munoz et al., 1997; Zimniak et al., 1997; Townsend, 2007; Dalh Donne etc., 2009; Zweier etc., 2011).

Применение биокорректоров вызывало уменьшение содержания общих и белковы SH-групп, а также увеличение свободных SH-групп (глутатиона), тем самым значительн снижая негативное воздействие на организм беременных самок крыс оксидативног стресса, вызванного недостатком кислорода. Под действием намивита наблюдалос снижение уровней общих и белковых SH-групп в плазме крови в 1,5 и 1,7 раза; в головно мозге - в 1,2 раза; в печени - в 1,4 и 1,2 раза; в мышцах бедра - в 1,2 раза соответственн по сравнению с группой, подвергнутой экспериментальной гипоксии (рис.7).

г^г" _1- :

Г—^ : _____________

■-5—1 1 ■ ^ 1

р 1 , ^--- 1 _ ___

нормальные условия_[И

|абез препарата« ■ намивит

нормальные условия_гипс

10 без препаратов ■ намивит

5Н-группы белковые

бН-группы белковые

нормальные условия

| В без препаратов ■

нормальные условия

|вбез препаратов ■

нормальные условия_щп

□ без препаратов I намивит

БН-группы белковые

нормальные условия_тм

_| В без препаратов И намивит |

Рисунок 7. Влияние намивита на уровни общих и белковых §Н-групп в органах и тканях беременных крыс ]У1я1аг(уровень значимости р<0,05)

Содержание БН-групп глутатиона, наоборот, достоверно увеличилось: в плазме крови - до 5,36 нмоль/мг белка, в головном мозге - до 2,39 нмоль/мг белка, в печени - в 1,9 раза и в мышцах бедра - в 2,6 раза по сравнению с группой, подвергнутой экспериментальной гипоксии (табл.5)

Таблица 5. Влияние намивита на уровни свободных БН-групп в тканях и органах _беременных крыс \¥1з1аг_

Группы Уровень БН-групп глутатиона (нмоль/мг белка)

плазма крови головной мозг печень мышцы бедра

Контрольная группа 10,02±0,15 3,58±0,12 10±0,6 3,35+0,16

Намивит 13,11±0,17 4,97±0,11 11,2±0,5 3,58+0,17

Группа с экспериментальной гипоксией 0 0 3,3+0,8 1,14+0,12

Гипоксия+намивит 5,36±0,18 2,39±0,09 6,1 ±0,5 2,99+0,18

Аналогичные изменения уровней БН-групп в органах и тканях беременных самок выявлены после 14-дневного курса второго препарата, однако антиоксидантный эффект суперпротамина выражен слабее (табл.6).

Таблица б. Влияние суперпротамина на уровни ПН-групп в тканях и органах беременных _крыс \У1$1аг_

Группы Уровень ЭИ-групп (нмоль/мг белка)

ЭН-группы общие БН-группы глутатиона ЗН-группы белковые

плазма крови

Контрольная группа 36,1±0,3 10,02+0,15 1,04+0,16

Суперпротамин 33,5+0,4 11,05+0,16 0,91+0,15

Группа с экспериментальной гипоксией 67,2+0,1 0 6,83+0,19

Гипоксия+суперпротамин 59,9±0,2 1,78+0,19 5,87+0,18

головной мозг

Контрольная группа 163,4+0,7 3,58+0,12 157,6+0,8

Суперпротамин 161,5±0,7 4,01+0,13 153,1+0,9

Группа с экспериментальной гипоксией 179,2+0,8 0 177,9+0,6

Гипоксия+суперпротамин 173,3+0,8 0,76+0,11 172,8+0,9

печень

Контрольная группа 105,5+1,3 10+0,6 93,7+0,9

Суперпротамин 102,3±1,4 9,5+0,7 91,8+0,8

Группа с экспериментальной гипоксией 114,6±1,1 3,3+0,8 107,8+1,2

Гипоксия+суперпротамин 104,3±1,3 4,2+0,7 104,5+0,8

мышцы бедра

Контрольная группа 40,5+0,6 3,35+0,16 39,7+0,5

Суперпротамин 39,6+0,7 3,43+0,13 38,9+0,5

Группа с экспериментальной гипоксией 72,9±0,4 1,14+0,12 75,4+0,3

Гипоксия+суперпротамин 68,8+0,3 1,77+0,15 71,2+0,3

Под действием суперпротамииа наблюдалось снижение уровней общих и белковых ЗН-групи в плазме крови в 1,2 раза по сравнению с группой, подвергнутой экспериментальной гипоксии. Для свободных БН-групп глутатиона характерно следующее достоверное увеличение: в плазме крови - до 1,78 нмоль/мг белка, в головном мозге - до 0,76 нмоль/мг белка, в печени - в 1,3 раза и в мышцах бедра - в 1,6 раза по сравнению с группой, подвергнутой экспериментальной гипоксии (р<0,05).

Такой антиоксидантный эффект биокорректоров, выраженный в нормализации уровня активности глутатион-зависимого звена, вероятно, объясняется тем, что препараты содержат предшественники глутатиона как в виде свободных аминокислот (глутаминовая кислота, цистеин, метионин, глицин), так и в составе белков. Кроме того, входящие в состав витамины группы В и токоферол, непосредственно взаимодействуя с перекисными радикалами липидов и гидроксилрадикалами пептидов, активируют антиоксидантную систему.

Влияние биокорректоров на динамику активности различных изоформ РТО-синтазы у беременных крыс \Vistar в условиях гипоксии

Острая гипоксия оказывает существенное и весьма неоднозначное влияние на N0-синтазную активность в различных органах и тканях организма. Так в плазме крови и в головном мозге при гипоксическом стрессе активность синтазы оксида азота достоверно (р<0,05) снижается в 1,4 раза и 1,5 раза соответственно по отношению к контрольным значениям (рис. В).

о контроль ■ гипоксия

Рисунок 8. Активность NO-синтазы в плазме крови и головном мозге беременных крыс Wislar при гипоксии (уровень значимости р<0,05)

Эти данные согласуются с данными литературы о том, что тяжелая острая гипоксия угнетает продукцию оксида азота, принимающего активное участие в защите организма от окислительного стресса (McQuillan et al., 1994).

Острая гипоксия в целом привела к активации NO-синтазы в 1,3 раза в печени и в 2,1 раза в мышцах (табл.7). Однако, следует отметить, что на фоне повышения общей активности ферментного комплекса активность Са2+-зависимой (конститутивной) изоформы NOS падает, a iNOS (индуцибельной) возрастает (рис. 9).

Таблица 7. Влияние экспериментальной гипоксии на активность МО-синтазы в печени и в _бедренных мышцах беременных крыс ]У151аг_

Группы Активность NO-синтазы (пмоль цитруллина/ мин/мг белка)

печень мышцы бедра

Контрольная группа 0,651±0,037 0,673±0,031

Группа с экспериментальной гипоксией 0,822±0,055 1,434±0,057

печеиЦмщмлыия группа)

н^уцибвльная;

0,315 Л,---1

юнститтная;

печень (гипоксия)

шдуфбельная; Г

m L

общая; 0,822

гонсмутюная; 0,025

мышцы (контрольная группа)

ждуцибелькая; 0,219

конлупутУбкая^^НвВ!

0,423

Î ..

мышцы (гипоксия)

1,225

I общая; J 1.4Н

Рисунок 9. Соотношение активности различных изоформ NOS в печени и в мышцах бедра беременных крыс при острой гипоксии (пмоль цитруллина/мин/мг белка)

Это, вероятно, объясняется следующим. Дефицит кислорода при гипоксии является сигналом, который вызывает переход клеток на нитратно-нитритное дыхание с образованием N0, избыточное количество которого, подавляет активность зависимой NOS в клетках за счет взаимодействия с супероксидом и в результате десенситизации гуанилатциклазы, приводящей к снижению цГМФ в клетке и повышению внутриклеточного кальция (Bredt et al., 1991;Barnes, 1995). Наряду с этим, по данным Walter et al. (1994) воспалительные цитокины, сопровождающие оксидативный стресс, также могут действовать как триггеры, переключающие синтез N0 с конститутивного (Са2+-зависимой) на индуцибельный.

Использование намивита и суперпротамина во время беременности вызывало достоверное повышение активности фермента в плазме крови и головном мозге крыс (р<0,05) (табл.8). Активность NOS после 14-дневного приема намивита в условиях экпериментальной гипоксии увеличилась на 23% в плазме крови и на 39% в головном мозге, суперпротамина - на 6,5% и на 15% соответственно.

Таблица 8. Влияние намивита и суперпротамина на активность NO-синтазы в плазме

Группы Активность NO-синтазы (пмоль цитруллина/ мин/мг белка)

плазма крови головной мозг

Контрольная группа 29,3±0,6 46,4±3,1

Намивит 31,2±0,5 55,5±3,0

Суперпротамин 29,9±0,6 50,0±2,9

Группа с экспериментальной гипоксией 21,4±0,4 30,5±2,9

Гипоксия + намивит 26,3±0,5 42,5±2,5

Гипоксия + суперпротамин 22,8±0,3 35,1±1,6

Намивит и суперпротамин тормозят индукцию iNOS и способствуют возрастанию уровня Са2+- зависимой NOS в печени и мышцах бедра беременных самок (рис.10). Так, для намивита характерно повышение активности Са2+-зависимой NOS при гипоксическом стрессе в печени в 5,9 раза, а в мышцах - в 1,8 раза и снижение iNOS в 1,8 раза. Эффект суперпротамина выражен слабее: активность Са2+-зависимой NOS растет в 2,6 раза в печени и в 1,5 раза в мышцах, а активность iNOS падает в 1,2 раза.

ГИПОКСИЯ+

суперпротамин

Рисунок 10. Соотношение активности различных изоформ NOS в печени и мышцах бедра беременных крыс после 14-ти дневного курса намивита и суперпротамина при острой гипоксии (уровень значимости р<0,05)

Это можно объяснить следующим. Благодаря входящим в состав препаратов свободным аминокислотам и низкомолекулярным белкам, биокорректоры выступают в качестве источников SH-групп. Тиолы способны взаимодействовать с синтезируемым N0 с образованием нитрозотиолов - внутриклеточного физиологически активного депо N0 (Манухина и др., 2004; Chen etc., 2010; Sugiyama, Michel, 2010). Тем самым они препятствуют автоингибированию NO-синтазы N0 (будучи синтезированной в активном центре NO-синтазы, молекула N0 находится в устойчивом комплексе с железом гема, что приводит к обратимой инактивации фермента) (Недоспасов, 1998; Berka etc., 2004;). Кроме того, такое уменьшение количества свободного NO приводит к снижению его связывания с простетической группой гема гуанилатциклазы, что сопровождается снижением уровня цГМФ и последующим увеличением концентрации внутриклеточного Са2+, который активирует конститутивную изоформу NOS (Fôrstermann, Li, 2010; Neerhof etc., 2011; Olson, van der Vliet, 2011; Weerateerangkul etc., 2011).

Более выраженный эффект намивита обусловлен тем, что наряду с вышесказанным, данный препарат еще является специфическим индуктором Са2+-зависимой NOS. При этом из-за большого содержания никотинамида он подавляет активность iNOS, нормализуя таким образом синтез NO.

ВЫВОДЫ

1. Внутрижелудочное введение беременным крысам биокорректоров намивита и суперпротамина в дозе 100 мг/кг купирует проявления гипоксического стресса в организме матери во время беременности.

2. Намивит и суперпротамин неодинаково влияют на поведенческие реакции и содержание катехоламинов в крови беременных животных, подверженных острой гипоксии. Применение намивита достоверно увеличивало время сохранения позы и время жизни животных в 1,5 раза и снижало уровни адреналина и норадреналина в 1,8 раза и в 1,5 раза соответственно. Суперпротамин не вызывал достоверно значимого изменения данных показателей.

3. Применение намивита и суперпротамина препятствовало развитию оксидативного стресса в организме беременных крыс и усиливало его антиоксидантную запщту:

• предотвращалось накопление продуктов ПОЛ, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой;

• повышались супероксидперехватывающая активность и уровень свободных ЭИ-групп глутатиона, а также снижалось содержание общих и белковых 8Н-групп;

• восстанавливалась сниженная в результате развития гипоксического стресса активность Са2+-зависимой МО-синтазы и подавлялась индукция ¡N08.

4. Основной механизм защитного действия биокорректоров обусловлен наличием в их составе свободных аминокислот и низкомолекулярных белков и заключается в нормализации активности глутатион-связывающей системы организма. А более высокая эффективность намивита объясняется его способностью активировать также Са2+-зависимую ЫО-синтазу и Са2+-мобилизующую систему за счет содержания адениннуклеотидов.

5. Намивит и суперпротамин могут быть использованы во время беременности в качестве сопутствующей антигипоксической терапии с целью снижения риск развития негативных последствий экстремальных экологических ситуацш сопровождающихся острой и хронической гипоксией, как для матери, так и дл плода.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Баева, Ю.И. К вопросу о способах профилактики гипоксических повреждений в организме матери во время беременности / Ю.И. Баева // Актуальные проблемы гуманитарных и естественных наук. Материалы научно-практической конференции «Теория и практика современной науки». - Москва, 2010. - №7. - С. 380-382.

2. Баева, Ю.И. Влияние биологически активных препаратов на интенсивность перекисного окисления липидов у беременных крыс Wistar при гипоксии / Ю.И. Баева, Е.В. Орлова // Экологические системы и приборы. -2011.-№ 3. - С. 49-52

3. Баева, Ю.И. Влияние биологически активных препаратов на уровни тиоловых групп в тканях и органах беременных крыс Wistar при гипоксическом стрессе в условиях загрязнения / Ю.И. Баева, Е.В. Орлова // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия Экология и безопасность жизнедеятельности. - 2010. - №3. - С. 11-17.

4. Баева, Ю.И. Действие биологически активных препаратов на активность системы антиоксидантной защиты беременных крыс Wistar при гипоксическом стрессе / Ю.И. Баева, Е.В. Орлова // Биоантиоксидант: Тезисы докладов VIII Международной конференции. Москва, 2010г. - М.: РУДН, 2010. - С. 32-33.

5. Баева, Ю.И. К вопросу о влиянии антигипоксантов на организм во время беременности в условиях загрязнения окружающей среды / Ю.И. Баева, Е.В. Орлова // Современное российское общество: проблемы позиционирования н развития по материалам Всероссийской научно-практической конференции «Экологическая дискуссия: окружающая среда «-♦ здоровье человека» (Волгоград, 2010). - Москва, 2010. - С. 203-207.

6. Баева, Ю.И. Окружающая среда - гипоксия - беременность: защита организма от окислительного стресса / Ю.И. Баева, Е.В. Орлова // Сборник материалов III Международной научно-практической конференции «Наука и современность-2010». -Новосибирск: Изд-во НГТУ, 2010. - С. 9-13.

7. Баева, Ю.И. Оценка воздействия биологически активных препаратов на биохимические показатели гипоксического стресса у беременных крыс Wistar в условиях загрязнения окружающей среды / Ю.И. Баева, Е.В. Орлова, О.М. Родионова // Вестник Российского университета дружбы народов. Серия Экология и безопасность жизнедеятельности. - 2010. - №4. - С. 11-19.

8. Баева, Ю.И. Применение биологически активных препаратов-антигипоксантов во время беременности как способ защиты организма от негативного влияния факторов окружающей среды / Ю.И. Баева, Е.В. Орлова, О.М. Родионова // Материалы I Международной научно-практической заочной конференции «Актуальные проблемы охраны природы, окружающей природной среды и рационального природопользования»,-Чебоксары: «Новое время», 2010. - С.76-78.

9. Баева, Ю.И. Перспективы использования биологически активных препаратов-антигипоксантов во время беременности с целью повышения неспецифической резистентности организма к вредному влиянию факторов окружающей среды / Ю.И. Баева, Е.В. Орлова, О.М. Родионова, B.C. Орлова // Сборник материалов II Международной студенческой научно-практической конференции «Интеллектуальный потенциал XXI века: ступени познания». - Новосибирск: Изд-во НГТУ, 2010. - С. 11-14.

10. Orlova, E.V. Ca - signaling activation by complex nucleotide substance (PriMed) in mouse myoblast cells c2cl2 / E.V. Orlova, V.S. Orlova, J. I. Baeva, A. N. Shemyatovsky// International Congress of Experimental Biology. - Anaheim, California, USA, 2010.

11. Orlova, E.V. Ca - signaling activation by complex nucleotide substance (PriMed) in mouse myoblast cells c2cl2 / E.V. Orlova, V.S. Orlova, J. I. Baeva, A. N. Shemyatovsky// FASEB J. 2010.-24:699.6

СПИСОК СОКРАЩЕНИИ

окружающая среда СРО

перекисное окисление ТБКАП липидов

симпато-адреналовая ¿N08

система

- свободно-радикальное окисление

- карбонильные продукты ПОЛ, реагирующие с 2-тиобарбигуровой кислотой

- индуцибельная ЫО-синтаза

Баева Юлия Игоревна Россия

ПРИМЕНЕНИЕ НАМИВИТА И СУПЕРПРОТАМИНА В ПЕРИОД БЕРЕМЕННОСТИ КАК СПОСОБ ЗАЩИТЫ ОРГАНИЗМА В ЧРЕЗВЫЧАЙНЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ СИТУАЦИЯХ

Репродуктивная система весьма чувствительна к воздействию неблагоприятных факторов среды и отвечает на него формированием экологически зависимой патологии. Одним из самых эффективных и перспективных путей профилактики и терапии гипоксических повреждений матери и плода представляется применение антигипоксантов. Введение биологически активных препаратов с антигипоксическими свойствами вызывает выраженный антигипоксический эффект, купируя проявления гипоксического стресса в организме матери во время беременности.

Baeva Yulia

APPLICATION OF NAMIVIT AND SUPERPROTAMIN DURING PREGNANCY AS A WAY OF PROTECTING THE ORGANISM IN ENVIRONMENTAL EMERGENCIES

The reproductive system is rather sensitive to influence of adverse factors of environment and answers it with formation of ecologically dependent pathology. Anoxidants application is represented to one of the most effective and perspective ways of preventive maintenance and therapy of hypoxemic damages of mother and a germ. Introduction of biologically active compounds with antihypoxemic properties causes the expressed antihypoxemic effect, stopping displays of hypoxemic stress in an organism of mother during pregnancy.

Подписано в печать: 06.09.11

Объем: 1,5 усл.п.л. Тираж: 100 экз. Заказ № 783 Отпечатано в типографии «Реглет» 119526, г. Москва, пр-т Вернадского,39 (495) 363-78-90; www.reglet.ru

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Баева, Юлия Игоревна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ ГИПОКСИЧЕСКОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ КЛЕТКИ В УСЛОВИЯХ ЗАГРЯЗНЕНИЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ. ЗАЩИТА ОРГАНИЗМА ОТ КИСЛОРОДНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ (ОБЗОР

ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Понятие гипоксических состояний и их классификация.

1.21 Патогенетические аспекты гипоксических состояний.

1.3. Гипоксический стресс и репродуктивное здоровье женщины.

1.4: Защита организма от кислородной недостаточности.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1'. Экспериментальные животные и исследуемые препараты.

2.2: Экспериментальная модель гипоксического воздействия.44,

2.3. Методы исследования.

2.3.1. Определение адреналина/норадреналина.

2.3.2. Определение содержания тиолов.

2.3.3. Определение продуктов, реагирующих с

2-тиобарбитуровойкислотой.50

2.3.4,Определение активности супероксиддисмутазы.

2.3.5 Определение активности NOS.

214: Статистический анализ полученных данных.

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ БИОКОРРЕКТОРОВ НА ПОВЕДЕНЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ И СИМПАТО-АДРЕНАЛОВУЮ СИСТЕМУ

БЕРЕМЕННЫХ КРЫС WISTAR ПРИ ГИПОКСИИ.

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ БИОКОРРЕКТОРОВ НА ИНТЕНСИВНОСТЬ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ У БЕРЕМЕННЫХ

КРЫС WISTAR ПРИ ОСТРОЙ ГИПОКСИИ.

ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ НАМИВИТА И СУПЕРПРОТАМИНА НА АКТИВНОСТЬ СИСТЕМЫ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ.

5.1. Влияние биокорректоров на активность супероксиддисмутазы

5.2. Влияние намивита и суперпротамина на уровни тиоловых групп в тканях и органах беременных крыс \Vistar.

ГЛАВА 6. ВЛИЯНИЕ БИОКОРРЕКТОРОВ НА ДИНАМИКУ АКТИВНОСТИ РАЗЛИЧНЫХ ИЗОФОРМ ГЧО-СИНТАЗЫ У БЕРЕМЕННЫХ КРЫС \VISTAR В УСЛОВИЯХ ГИПОКСИИ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Применение намивита и суперпротамина в период беременности как способ защиты организма в чрезвычайных экологических ситуациях"

Актуальность темы. Проблема неблагоприятного влияния факторов окружающей среды на состояние репродуктивного здоровья женщины с каждым годом приобретает все большую актуальность. Ведь только здоровая мать может родить здорового ребенка, и только здоровый ребенок может впоследствии стать здоровым родителем.

Ухудшение: экологической обстановки является одним из лидирующих факторов в нарушении репродуктивной функции женщины и фактором риска дляг здоровья ребёнка (Айламазян, 2005; Сетко, 2005). Особое значение данный факт приобретает в связи- с такой характерной; особенностью; современной эпохи; как урбанизация:. Ведь город - это/ особая? урбанизированная среда, которая по многим параметрам не соответствует условиям нормальной жизнедеятельности человека; А в настоящее время 62% населения нашей страны проживает именно в городах (Олдак, 1990; Целкович, Рогачева, 1998; Головко и др., 1999; Акимова; Хаскин, 2000; Протасов, 2000; Ревич, 2001; Рукавишников и соав., 2002; Эколого-экономические проблемы., 2002; Мельник, 2003; Никитин 2008):

На; фоне антропогенного загрязнения городской природной среды и изменения социально-экономических условий в последние годы стремительно растет число чрезвычайных ситуаций; как природного, так и техногенного характера, сопровождающихся поражениями и гибелью людей. Аномальные природные явления, стихийные1 бедствия, техногенные катастрофы и аварии, пожары и взрывы, массовые «вспышки» опасных инфекционных заболеваний? и пищевые отравления в сочетании с общим ускорением темпа жизни; информационными перегрузками и хроническим психоэмоциональным стрессом приводят к различным; патологическим состояниям человека, прямо или косвенно связанным с нарушением кислородного гомеостаза организма.

В условиях недостаточного для удовлетворения потребностей метаболизма снабжения тканей кислородом начинается цепь физиологических и биохимических изменений, цель которых обеспечить оптимальную функцию и по возможности интактное восстановление организма после окончания периода гипоксии. На уровне целого организма запускаются физиологические механизмы, которые нацелены на сохранение функции и жизнеспособности органов. На клеточном уровне такие изменения включают переход энергетических субстратов и прекращение синтетических процессов. При более тяжелом и более длительном дефиците кислорода поддержание достаточных уровней богатых энергией фосфатных соединений, особенно АТФ, оказывается невозможным, что ведет к более глубоким нарушениям клеточной функции, неспособности поддерживать ионное равновесие и в конечном итоге к гибели клетки (Каган, Архипенко, Козлов, 1983; Чеснокова, 2004; Патологическая физиология и биохимия, 2005; Бизенкова, 2008; Bannister, Bannister, 1984; Balaban, Guliaeva 2006; Vo, Palsson, 2007).

Сегодня, у многих женщин беременность наступает уже в состоянии хронического гипоксического стресса, что в значительной степени определяет риск осложнений и невынашивания' беременности, преждевременных родов, патологии плода и новорожденного, значительные отклонения нервно-психического и соматического развития детей в последующие годы жизни (Андреева, 1999; Евсеенко, Ещенко, 2002; Евсюкова, 2004; Ревич и др., 2004; Баряева и соав., 2005; Кравцова, Школьникова, Калинин, 2008; Никитин, 2008; Lesage, Del-Favero et al. 2004). Кроме того беременная женщина также не «застрахована» от разнообразных чрезвычайных ситуаций и психотравмирующих событий - техногенных катастроф, природных бедствий, межнациональных конфликтов, террористических актов и т.п., вызывающих острое кислородное голодание. Что в свою очередь усугубляет хроническую гипоксию и увеличивает процент осложнений и негативных исходов беременности (Micco Jamie, 2009).

Данные обстоятельства акцентируют внимание специалистов на возможности наиболее эффективного воздействия на уже развившуюся хроническую кислородную недостаточность и предупреждение острой гипоксии при различных экстремальных состояниях во время беременности. В связи, с этим очевидна значимость экспериментальных исследований, направленных на изучение антигипоксических эффектов как лекарственных, так и- биологически активных препаратов' с целью снижения неблагоприятного-воздействия факторов окружающей среды на организм в период беременности.

Несмотря на то, что сегодня антигипоксанты широко применяются в медицине, среди них практически отсутствуют препараты из дрожжей, а именно из Saccharomyces cerevisiae, что особенно важно, так как обмен пекарских дрожжей генетически детерминирован типу питания человека и животных. Кроме того отсутствуют данные о влиянии данных препаратов на антиоксидантную систему организма во время беременности. В этой, связи представляет большой практический интерес изучение механизмов действия и реальная оценка перспективности клинического применения препаратов, полученных из дрожжей Saccharomyces cerevisiae, у женщин в период гестации.

Цель исследования: изучение механизмов антигипоксического действия намивита и суперпротамина на беременных крыс Wistar как одного из способов защиты организма от острой гипоксии в условиях неблагоприятной экологической ситуации.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи: 1. Изучить поведенческие реакции беременных животных при воздействии намивита и суперпротамина в условиях острой гипоксии, вызванной негативным воздействием факторов окружающей среды;

2. Оценить реакцию симпато-адреналовой системы беременных крыс на острую гипоксию в условиях действия биокорректоров;

3. Выявить антиоксидантное действие намивита и суперпротамина при окислительном стрессе на модели гипоксии у беременных крыс ^^аг и оценить воздействие этих препаратов на показатели перекисного окисления липидов;

4. Исследовать влияние намивита и суперпротамина на уровень тиолов и глутатиона в органах и тканях беременных крыс \Vistar при окислительном стрессе в условиях острой гипоксии;

5. Оценить действие биокорректоров на содержание различных изофором ТчГО-синтазы в органах и тканях беременных крыс Wistar. при гипоксическом стрессе, обусловленном экстремальными экологическими ситуациями.

Научная новизна. Впервые проведено сопоставление антигипоксической эффективности намивита и суперпротамина и выявлена их роль в защите организма беременных самок \Vistar от негативного воздействия недостатка кислорода в условиях загрязнения окружающей среды. На модели острой гипобарической гипоксии установлено, что используемые препараты:

• в значительной степени снижают выраженность ответной стресс-реакции организма матери во время беременности на гипоксию;

• оказывают достоверное антиоксидантное действие, предотвращая накопление продуктов перекисного окисления липидов, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой;

• восстанавливают нарушенные системы супероксидперехватывающей активности и восстановленного глутатиона;

• купируют изменение активности синтазы оксида азота, вызванное гипоксическим стрессом.

Теоретическая и практическая значимость работы. Результаты проведенных исследований позволяют утверждать, что намивит и суперпротамин оказывают благоприятное влияние на организм матери во время беременности в экстремальных экологических ситуациях, сопровождающихся острой и хронической гипоксией, и, тем самым, существенно снижают риск развития негативных последствий для плода. Это расширяет возможности использования данных биокорректоров во время беременности с целью повышения неспецифической резистентности организма к неблагоприятному воздействию факторов окружающей среды

Результаты диссертационного исследования-могут быть использованы в системе подготовки, переподготовки и повышения квалификации специалистов в области экологии человека.

Положения диссертации, выносимые на защиту:

2. Ключевой механизм антигипоксического действия биокорректоров заключается« в нормализации уровня активности глутатион-связывающей системы организма. А более высокая эффективность гу . намивита обусловлена его способностью активировать также Са у I зависимую ЫО-синтазу и Са -мобилизующую систему.

3. Намивит способен купировать проявления гипоксического стресса в организме матери во время беременности, снижая содержание адреналина и норадреналина в крови беременных крыс 'Ш51аг. Суперпротамин не оказывает влияния на реакцию симпато-адреналовой системы беременных животных, подверженных острой гипоксии.

4. Намивит и суперпротамин обладают выраженным антиоксидантным эффектом, снижая интенсивность перекисного окисления липидов и восстанавливая активность системы антиоксидантной защиты организма.

5. Результаты проведенных исследований позволяют рекомендовать намивит и суперпротамин в качестве сопутствующей антигипоксической терапии при беременности для коррекции и профилактики метаболических нарушений в организме матери в условиях неблагоприятной экологической ситуации. Апробация^ работы. Основные результаты работы были доложены, обсуждены и опубликованы в- материалах следующих конгрессов' и конференций: Международный конгресс экспериментальной биологии (Анахайм, США, 2010), II- Студенческая международная научно-практическая конференция- «Интеллектуальный потенциал XXI века: ступени познания» (Новосибирск, 2010); III Международная научно-практическая конференция «Наука и современность - 2010» (Новосибирск, 2010); I Международная научно-практическая конференция «Актуальные проблемы охраны природы, окружающей природной среды и рационального природопользования» (Чебоксары, 2010); II Заочная научная* конференция «Теория и практика современной науки» (Москва, 2010); Всероссийская научно-практическая конференция «Экологическая дискуссия: окружающая среда - здоровье человека» (Волгоград, 2010); VIII Международная конференция «Биоантиоксидант» (Москва, 2010).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 138 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы и приложений. Работа содержит 12 таблиц и 42 иллюстрации. Список литературы содержит 318 источников, в том числе 98 зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Экология (по отраслям)", Баева, Юлия Игоревна

выводы

2. Намивит и суперпротамин неодинаково влияют на поведенческие реакции и содержание катехоламинов в крови беременных животных, подверженных острой гипоксии. Применение намивита достоверно увеличивало время сохранения позы и < время» жизни животных в 1,5 раза-и снижало »уровни адреналина и-норадреналина в 1,8 раза-и в 1,5 раза соответственно. Суперпротамин не вызывал достоверно значимого изменения данных показателей.

3. Применение намивита и суперпротамина препятствовало развитию оксидативного стресса в организме беременных крыс и усиливало его антиоксидантную защиту:

• предотвращалось накопление продуктов ПОЛ, реагирующих с 2-тиобарбитуровой^кислотой;

• повышались супероксидперехватывающая активность и уровень свободных БН-групп глутатиона, а также снижалось содержание общих и белковых 8Н-групп;

• восстанавливалась сниженная в результате развития гипоксического стресса'активность Са -зависимой МО-синтазы и подавлялась индукция ПЧОЗ.

А I намивита объясняется его способностью активировать также Са -зависимую Ж)-синтазу и Са -мобилизующую систему за счет содержания адениннуклеотидов.

5. Намивит и суперпротамин могут быть использованы во время беременности в качестве сопутствующей антигипоксической терапии с целью снижения риска развития негативных последствий экстремальных экологических ситуаций, сопровождающихся острой и хронической гипоксией, как для матери, так и для плода.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Была проделана исследовательская работа в двух направлениях. С одной стороны, имела место количественная оценка изменения ряда биохимических показателей в органах и тканях беременных крыс под действием экспериментальной гипобарической гипоксии. Результаты данного исследования показали, что недостаток кислорода вызывает выраженную ответную стресс-реакцию организма беременных самок; крыс линии; Wistar, характеризующуюся повышением уровнешгормонов»мозгового/ вещества надпочечников.в плазме крови, а также: развитием: окислительного: стресса в различных органах и тканях.

У крыс, подвергнутых острой гипобарической; гипоксии, резко возрастает количество карбонильных продуктов, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой; снижается супероксидперехватывающая активность, увеличивается s количество; общих и белковых, SH-групп m резко снижается; вплоть до полного исчезновения; уровень; свободных SH-rpynn

Ou. глутатиона. Недостаток кислорода1 подавляет активность, Са -зависимой NOS и индуцирует iNOS.

При этом специфика биохимических изменений, характерных для, окислительного- стресса; зависит от вида исследуемых; органа или ткани -наиболее выраженные нарушения важнейших антиоксидантных систем отмечены в плазме крови и в ткани головного мозга,.наименее- выражены в печени и мышцах бедра животных.

С другой стороны, в настоящей работе показано^ что биокорректоры намивит и, суперпротамин обладают выраженными антигипоксическими свойствами: снижают уровни гормонов стресса в плазме крови, уменьшают негативные проявления окислительного стресса,, наблюдающиеся- при недостаточном обеспечении организма кислородом, нормализуя при этом нарушенные системы восстановленного глутатиона, супероксидперехватывающей активности и активности. Са2+-зависимой NOS.

Механизмы защитного действия исследуемых препаратов обусловлены наличием в их составе витаминов группы В, токоферола, свободных аминокислот и низкомолекулярных белков - источников тиоловых групп.

Являясь природными антиоксидантами, токоферол и витамины группы В могут непосредственно взаимодействовать с перекисными радикалами липидов и гидроксилрадикалами пептидов и тем самым активировать антиоксидантную систему организма (Зарубина, Шабанов, 2004; Townsend, 2007; Dalle-Donne etc., 2009; Zweier etc., 2011). Тиолы также способны непосредственно взаимодействовать с активными формами кислорода и инактивировать их; активировать СОД, восстанавливая ионы меди в активном центре фермента и участвуя в экспрессии кодирующего его гена; препятствовать автоингибированию NO-синтазы, посредством связывания избытка NO в нитрозотиолы (Зенков, Меныцикова, 2004; Манухина и др., 2004; Hernandez-Munoz et al., 1997; Zimniak et al., 1997; Chen etc., 2010;Sasaki, 2011).

Более выраженный* антигипоксический эффект намивита обусловлен тем, что наряду с белками, аминокислотами и витаминами, он содержит еще и адениннуклеотиды, которые выполняют субстратную роль в процессе тканевого дыхания, задерживая' образование свободных радикалов и препятствуя угнетению антиоксидантных систем. Из-за большого содержания никотинамида намивит подавляет активность iNOS и индуцирует Са -зависимую NOS, нормализуя, таким образом, синтез NO (Орлова, 2007). Оксид азота в свою очередь способен ограничивать выброс гипофизарных стресс-гормонов, что приводит к ограничению стресс-реакции организма и снижению выраженности ее симптомов^ Он также обладает прямыми антиоксидантными свойствами и способностью повышать активность антиоксидантных ферментов и усиливать экспрессию кодирующих их генов (Малышев, Манухина, 1998; Полетаев и соав., 2002; Малахов и соав., 2008; Tomomi, Masataka, 2006; Osaka, 2011).

Таким образом, полученные в ходе исследования данные позволяют рекомендовать намивит и суперпротамин в качестве потенциальных лекарственных средств-антигипоксантов, перспективных для сопутствующей терапии во время беременности, с целью повышения неспецифической резистентности организма в условиях гипоксического стресса мегаполиса.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Баева, Юлия Игоревна, Москва

1. Абель Т.Н. Воспаление. // Соровский образовательный журнал.-1996.-№ 10.-с. 29-33.

2. Агаджанян Н!А., Чижов А.Я. Гипоксические, гипокапнические и гиперкапнические состояния: Учебное пособие. М.: Медицина, 2003. - 96 с.

3. Айламазян Э.К. Акушерство: Учебник для медицинских вузов.- СПб.: Спец. Лит., 2003. 528 с.

4. Айламазян Э.К. Основные проблемы и прикладное значение экологической репродуктологии// Журн. акуш. жен. болезней — 2005. — T.LIV, №1'. С.7-13.

5. Айламазян Э.К., Беляева Т.В. Теория и практика общей экологической репродуктологии. // Журнал акушерства и женских болезней. 2000. - № 3. -С.8-10.

6. Айламазян Э.К., Беляева-Т.В., Виноградова Е.Г. Влияние экологической обстановки на репродуктивное здоровье женщины. Новый взгляд^ на проблему. // Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов. 1996. -№2.-С.13-16.

7. Акимова Т.А., Хаскин В.В. Экология. Человек — экономика — биота — среда. Учебник для вузов. М.: ЮНИТИ, 2000. - 435 с.

8. Анастасьева В.Г. Морфофункциональные нарушения фетоплацентарного комплекса при плацентарной недостаточности. Новосибирск, 1997. — 107с.

9. Андреева A.A. Продукция окиси азота и состояние центральной гемодинамики у новорожденных детей, здоровых и-перенесших гипоксию: Автореф. дисс. кан. мед. наук. -СПб, 1999.- 19 с.

10. Апчел В.Я., Ионова Л.А., Манойлов С.Е. К вопросу о роли цитохрома С в нормализации гипоксических состояний // Антигипоксанты и актопротекторы: итоги и перспективы /Мат. Рос, конф,- СПб., 1994.- Вып. 1.-С. 13.

11. Арбузов С.Я., Пастушенков JI.B. Фармакологические средства, повышающие устойчивость к гипоксии (обзор литературы).// Фармакол. и токсикол. -1969. №1.- С. 115—120.

12. Аржанова О.Н., Кошелева Н.Г., Ковалева Т.Г. Громыко Г.Л., Тышкевич О.В. Плацентарная недостаточность: диагностика и лечение. Учебное, пособие./Под ред. Э.К.Айламазяна. СПб: ИЗ ДА Г НОРМЕД, 2000. - 30 с.

13. Байбарина Е.Н Нарушения функций почек при критических состояниях у новорожденных детеш//Автореферат. . .д.мш; М^,1999г — 19'С;

14. Барабой В:А. Механизмы стресса и перекисного окисления? липидов.// Успехи совр. биол.- 1991,-Т. 111.- Вып. 6. С. 923-931.15; Баркаган З.С., Момот А;П: Основы диагностикишарушенишгемостаза; -М.:«Ныодиамед- АО», 1999; 224с.

15. Барсуков С.Ф:, Антонов:Е.И;, Барабаш ВШ; и др; Применение олифена в остром периоде цереброваскулярных заболеваний? //Антигипоксанты: и? актопротекторы: итоги и перспективы /Мат. Рос. конф.- СПб., 1994. Вып. 2с. 116. .•■•'.■ ■ '

16. Баряева O.E., Игнатьева Л.11., Флоренсов В:В. Плацентарная, недостаточность как индикатор эколого-гигиенического неблагополучия. //Сибирский медицинский журнал. 2005. - Т. 54.- №5.- С. 66-71.

17. Бельченко Л.А. Адаптация человека и животных к гипоксии« разного; происхождения;// Соросовскишобразовательный«журнал. — 2001г. — Т.7.- №7. -С. 33-39.

18. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник М.: Медицина, 1998. -704с.

19. Бизенкова М.Н. Общие закономерности метаболических расстройств при гипоксии различного генеза и патогенетическое обоснование принципов их медикаментозной коррекции: диссертация .к.м.н. Саратов, 2008. - 227 с.

20. Бизенкова М.Н., Романцов М.Г., Чеснокова Н.П. //Фундаментальные исследования 2006.- № 1- С. 17-21.

21. Биленко М.В. Ишемические и реперфузионные повреждения органов.-М:: Медицина, 1989. 368 с.

22. Биохимия мозга. /Под ред. И.П: Ашмарина и- др.- СПб.: Изд-во С.-Петербургского университета, 1999. 213 с.

23. Бобков ЮЛ7., Виноградов В.М., Катков В!Ф. и» др. фармакологическая коррекция утомления.- М. Медицина, 1984.- 208 с.

24. Бобков Ю.Г., Иванова И.А. Методологические подходы к поиску фармакологических средств, эффективных при гипоксии, и ишемии мозга" //Пат. физиол. и эксперим. терапия.- 1987.- №6. С. 13-19.

25. Боев В:М., Быстрых В.В. Антропогенное загрязнение атмосферного воздуха и здоровье населения // Комплексная, оценка качества* атмосферы промышленных городов Оренбургской области« Оренбург, 1999. — гл.6. -С.129-146

26. Болдырев A.A. Парадоксы окислительного метаболизма мозга // Биохимия. 1995.- Т.60, №9. - С. 1536 - 1542.

27. Бугров С.А., Лозинский П.А., Некрасов В.И. Антиоксидантная система и перекисное окисление липидов при моделировании острой гипоксии // Модельные системы в медико-биологических исследованиях.- Л., 1989. С. 56-59.

28. Бунин А.Т., Стрижаков А.Н., Медведев М.В Особенности мозгового кровообращения плода в норме и при синдроме задержки его развития // Вопр. охраны материнства — 1990. — № 2. ■— С. 43-47.

29. Бурбелло А.Т., Вшивцева В.В., Денисенко^ П'.П. и др. Ограничение катаболизма глюкозы, как фактор защиты- при гипоксии' //Эксперим. и> клинич. фармакол. -1995.- Т. 58.- №1.- С.,49-52.

30. Венедяпин A.A., Мамин P.F. Экологические проблемы мегаполисов и пути их решения. Информационно-аналитический обзор.- М., 1994. 234 с.

31. Виноградов В.М. Биохимические предпосылки к изысканию противогипоксических средств.// Фармакол. и токсикол. -1966. Т. 29: - №5.-С. 637.

32. Виноградов В.М. Некоторые итоги-.и перспективы изучения гутимина -одного из-первых антигипоксических средств 7/ Фармакология амидиновых соединений. Кишинев, 1972. - С. 106 - 114.

33. Виноградов В.М.,. Смирнов- A.B. Антигипоксанты — важный шаг на пути разработки фармакологии энергетического обмена //Антигипоксанты и актопротекгоры: итоги и перспективы /Мат. Рос, научн. конф.- СПб., 1994. -Вып. 1.- С. 23.

34. Виноградов В.М., Урюпов О.Ю. Гипоксия как фармакологическая проблема //Фармакол. и токсикол. 1985.- Т. 48. -№4. -С. 9-20.

35. Владимиров Ю.А. Механизмы оксидативного стресса // Соросовский Образовательный журнал. 2000.- №4.- С.45-51.

36. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах// Соросовский образовательный журнал. 2000.-Т 6.-№12. — С. 13-19.

37. Воронина Т.А., Смирнов Л.Д., Горяйнова И.И: Механизм действия и обоснование применения препарата мексидол в неврологии.- М., 2002. 14 с.

38. Воронина Т.А., Спасенников Б.А., Крайнева В;А. Изучение антигипоксических свойств феназепама и мексидола в- эксперименте и клинике7/Антигипоксанты и > актопротекторы: итоги-и перспективы / Мат. Рос. научш конф.- СПб., 1994. Вып. 2.- С. 122.

39. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б. Теория и практика адаптационных реакций //• Сравнительная эпидемиология и диагностика основных локализаций риска. -М., 1984. С.22 - 27.

40. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б. Роль адаптационных реакций в поддержании гомео стаза организма //Современные проблемы изучения' и сохранения биосферы. Т.П. - Живые системы под внешним воздействием. - Санкт-Петербург: Гидрометеоиздат, 1992. - С. 124 - 132.

41. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма. Ростов-на-Дону, 1990. - 223 с.

42. Гипоксия и окислительные процессы / Под ред. К.Н. Конторщиковой. — Н.Новгород, 1992. -с.39-44.

43. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М., Практика, 1998. - 459с.

44. Говорова JI.B., Александрова А.Е., Теплов С.И. Изменение АТФ-азной активности мозга и эритроцитов при гипоксии // Вопр. мед. химии. 1975. -Т. 21.-Вып. 1.- с. 23-26.

45. Голиков П.П., Голиков А.П. Роль оксида азота в патологии //Топ медицина. — 1999. — № 5. — С. 3-8.

46. Головко А.И., Куценко С.А., Ивницкий Ю.Ю. и др. Экотоксикология; -СПб.: НИИХВ СПбГУ, 1999. 124 с.

47. Горанчук В.В., Сапова Н.И., Иванов А.О. Гипокситерапия. — СПб.: ООО "Элби", 2003. — 536 с.54'. Горбачева С. М., Козиев М.П.Биохимические механизмы адаптации при геморрагическом шоке.// Сибирский медицинский журнал. 2006. - № 7. — С.5-7.

48. Граф A.B., Маслова М.В., Маклакова A.C., Соколова H.A., Крушинская

49. Грек О.Р. Влияние гипоксии и гипертермии на процессы перекисного окисления липидов печени крыс на фоне действия гутимина и ненасыщенных аминов //Фармакол. и токсикол.- 1978. Т. 41.- №1-2.- С. 101104.

50. Григорьев Н.Г., Воронцова Г.М:, Димитриев Д.А., Петров Н.М. Влияние экологических факторов на здоровье беременных женщин и новорожденных / // Экол. вестн. Чувашии. 1993. - № 2. - С. 99 - 102.

51. Гуревич: К.Г., Шимановский П.Л: // Вопр: биологии, медицины, и фармацевт; химиш—20001—№4.—СЛ6-—22.

52. Домарадская А.И; Ишемическая болезнь сердца: цитопротекция-миокарда //Клинич фармакол. и эксперим. терапия.- 1995; №4. С. 66-67.

53. Драпкина О. М!,. Задорожная О. О., Ивашкин В; Т. т др. Особенности синтеза оксида азота у. больных инфарктом миокарда // Клиническая, медицина: — 2000: — № 3. — С. 19-22.

54. Дубинина В .В, Шугалей И.В. Окислительная модификация белков /В:В. Дубинина, И.В. Шугалей // Успехи современной биологии- 1993. -Т.113, вып. 1 — с.71-81.

55. Дудченко А.М. Энергетический метаболизм и функциональная активность клеток при гипоксии // Гипоксия. Механизмы, адаптация, коррекция/Мат. Всерос. конф: М;, 19971-С. 37;

56. Дунаев В.В., Беленичев И.Ф., Коваленко С.И. и др. Антирадикальная и антиокислительная активность производных 1,2,4-триазола и хиназолина при ишемии головного мозга//Укр. биохим. журн.- 1996.- Т. 68.- №1.- С. 100-104.

57. Елисеев О. М. Триметазидин (предуктал). Новый подход: в борьбе с ишемией миокарда //Тёр. арх. 1996; - Т. 68.- №*8.- С. 57-63*.

58. Ещенко Н.Д., Вилкова В.А., Захарова- Л.И:, Путилина OdE. Реакции карбоксилированияи трансаминирования в головном мозге при гипоксии // Гипоксия в медицине/ Мат. 2-й междун. конф. М., 1996.- №3.- С. 34.

59. Жданов Г.Г., Нодель М.Л. Проблема гипоксии- у> реанимационных больных в свете свободнорадикальной теории// Анастезиология- и реаниматология.- 1994. -№1,- С.53-61.

60. Жиленко М.И. Беременность и роды у женщин, проживающих .в .районах различной степени- радиационного- загрязнения. Автореф. дисс. д.б.н. -Спб., 1993.-35 с.

61. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Основы общей патологии. Часть 2. / А.Ш. Зайчик, Л.П. Чурилов.' Основы, патохимии. - СПб.: ЭЛБИ, 2000. - 687с.

62. Замуруев О.Н. Содержание фосфолипидов и малонилдиальдегида-в'коре больших полушарий при ишемии мозга крыс // Нейрохимия.- 1985,- Т.4.-Вып. 2'.- С. 193-196.

63. Зарубина И.В:, Смирнов А.В:, Криворучко Б.И. Роль гликолиза» в реализации защитных эффектов атмизола при острой гипоксии-1 // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 2000. - Т. 86: - №4. - с.440-446.

64. Зарубина И.В. Молекулярные механизмы индивидуальной устойчивости к гипоксии.// Обз. клин, фармакол. и лек. тер.-2005.- Т.4, № 1.- С. 49-51.

65. Зарубина И.В., Шабанов П.Д. Молекулярная фармакология антигипоксантов. СПб.: ООО «Изд-во Н-Л», 2004. — 368 с.

66. Зенков, Н.К. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах / Н.К. Зенков, Е.Б. Мёныцикова // Успехи, современной биологии, 2004. -Т.113. -№1. —G.286-296.

67. Злобина Н;В;, Бардинова Ж.С. Пептидергические системы, фетоплацентарного комплекса- при- хронической внутриутробной гипоксии плода. // Известия ПГПУ. 2007.- №3(7).- G.273-276.

68. Иванов К.П. Транспорт кислородаs В1 тканях мозга в норме и при гипоксемии// Оксибиотические и аноксибиотические процессы при экспериментальной и клинической патологии.- Киев,1975. С. 94-95.

69. Ивлева В .В., Закс ИЩ. Прогностическое значение показателей гликолиза в критических состояниях различной этиологии//Пат. физиол: и эксперим. терапия: 1984.- № 6. - С. 37- 41.

70. Ивницкий Ю.Ю., Головко А.И., Софронов Г.А. и др.- Янтарная кислота в системе средств метаболической коррекции функционального состояния и резистентности организма. СПб., 1998.- 81 с.

71. Игнарро Л.Дж. Физиология и патофизиология- оксида, азота / Л . Дж. Игнарро //Актуальные проблемы анестезиологии и реаниматологии: Сб. науч. тр. Архангельск: Тромсе, 1997. - с.266-269.

72. Илинич М:И., Сарычева Н В., Собчук Б.А., Березовский* A.B. Влияние глюкозы на дыхание асцитных раковых клеток в присутствии флоридзина и оубаина//Химия и биохимия углеводов.- М., 1969. С. 286-288.

73. Ильина Л.Н. Использование цитофлавина и перфторана при субкомпенсированной и декомпенсированной фетоплацентарной недостаточности: Автореф. дис. канд. мед. наук. —Иваново, 2007. — 15 с.

74. Иргашев Ш.Б., Юлдашев Н.М. Некоторые внутриклеточные механизмы влияния цитохрома С на различные зоны миокарда в динамике развития-экспериментального инфаркта//Фармакол. и токсикол.- 1998. -Т. 51.- № 5.-С. 41-44.

75. Казначеев В.Н. Современные аспекты адаптации. Новосибирск: Наука, 1980. - 198 с.

76. Калуев А.В. К проблеме окислительных процессов в ишемическом¡мозге //Биохимия. 1996. - Т.6Г, вып.З. - С.939 - 941.

77. Каткова Н.Ю. Новый подход к лечению фетоплацентарной) недостаточности // Ремедиум-Приволжье. — 2006. — Спецвыпуск «Охрана здopoвьяvмaтepи и ребенка». — С. 28-30.

78. Качалина Т.С. Морфофункциональное обоснование целесообразности использования новых антигипоксантов в комплексной терапии фетоплацентарной недостаточности // Нижегородский мед. журн. — 2006. — №7. —С. 81-89.

79. Классификация перинатальных поражений нервной системы у новорожденных // Методические рекомендации РАСПМ. М.,1999.

80. Кобзарь А.И. Прикладная* математическая статистика. Для инженеров и научных работников. М.: ФИЗМАТЛИТ, 2006. - 816 с.

81. Коваленко Е. А. Современные проблемы патогенеза гипоксии // Актуальные проблемы гипоксии. Москва-Нальчик: изд. центр. Эльфа, 1995. -С. 12-19.

82. Коколина В.Ф. Фетоплацентарная недостаточность. — М.: Медпрактика, 2006. — 224 с.

83. Колчинская А.З. О классификации гипоксических состояний // Специальная и клиническая физиология гипоксических состояний. Киев: Наукова Думка, 1979.-4.1. - С. 11-16.

84. Колчинская А.З. Гипоксия: фундаментальные и прикладные исследования// Актуальные проблемы современной физиологии. Киев, 1986.-С. 186-188.

85. Колчинская- А.З: Анализ гипоксических состояний и метода их коррекции с позиции, теории систем // Гипоксия. Механизмы, адаптация, коррекция. Материалы Всероссийской конференции. М., 1997. - С. 59-60.

86. Колчинская А.З., Цыганова Т.Н., Остапенко JI.A. Нормобарическая интервальная гипоксическая тренировка в медицине и спорте. — М.: Медицина, 2003. — 408 с.

87. ЮЗ.Кораблев М.В., Лукиенко П.И. Противогипоксические средства,- Минск: Беларусь, 1976.- 128 с.

88. Коркушко О.В., Иванов Л. А. Современные представления о патогенетических факторах гипоксии в< пожилом и старческом возрасте // Вестн. АМН»СССР.1 1990. - № 1. - С. 41-45.

89. Королев П.М. Средства для стимуляции неспецифической резистентности организма // Стимуляция неспецифической резистентности в системе патогенетической терапии и в подготовке больных к операции.' -Гродно, 1984. С. 10-16.

90. Костюк В.А., Патапович А.И. Свободнорадикальное повреждение клетки и использование антирадикальных агентов в качестве защитных средств//Фармакологическая коррекция гипоксических состояний /Мат. конф. Гродно.-1991. -Ч. 3. С. 428-429.

91. Кравцова JI.A., Школьникова М.А., Калинин JI:A. Антигипоксанты' в практике детского кардиолога-аритмолога. М, 20081 - 24 с.

92. Криворучко Б.И., Слепнева Л.В. Механизм фармакологических эффектов цитохрома С //Антигипоксанты и актопротекторы: итоги иперспективы / Рос. научн. конф.- СПб., 1994.- Вып. 1.- С. 53.t

93. Ш.Кропотов A.B. Экспериментальный отек легких и его фармакопрофилактика антигипоксантами: дис. . д. м. н. Владивосток, 1996.-350 с.

94. Ларский Э.Г. Методы определения и метаболизм металлобелковых комплексов .//Итоги науки и техники. Сер. Биологическая химия. 1990: - Т. 41.

95. Ленинджер А. Биохимия. Молекулярные основы структуры и функции клетки. М.: «Мир», 1999. - С.390 - 422.

96. Литвицкий П.Ф. Патофизиология. М.: ГЕОТАР - МЕД, 2003. - Т.1.-752 с.

97. Логинов A.C., Матюшин Б.Н. Цитотоксическое действие активных форм кислорода и механизм развития хронического процесса в печени при ее патологии / A.C. Логинов, Б.Н. Матюшин // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1996. №4 - с. 3-6.

98. Лопухин Ю.М., Коган Э.М. Критерии жизнеспособности органов и тканей перед трансплантацией.- М., Медицина, 1975.- 282 с.

99. Лукьянова Л.Д. Фармакологическая коррекция кислород-зависимых патологических процессов. М., 1984. - 67 с.

100. Лукьянова Л.Д. Механизмы действия антигипоксантов. Антигипоксанты новый класс фармакологических веществ. // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. Сер. фармакология и химиотерапевтические средства. - М., 1991.Т. 27. - С. 5-26.

101. Лукьянова- Л.Д., Балмуханов Б.С., Уголева А.Т. Кислород-зависимые процессы в клетке и её функциональное состояние. М:: Наука, 1982. - 301. с:

102. Лукьянова Л:Д., Дудченко A.M., Белоусова В.В. Влияние различных концентраций^ кислорода на содержание АТФ в изолированных гепатоцитах. адаптированных и неадаптированных к гипоксии крыс//Бюл. эксперим. биол. и мед. 1994.- №1-2.- С. 576-580.

103. Малышев И:Ю., Манухина Е.Б. Стресс; адаптация и оксид азота // Биохимия. — 1998: — № 7. — С. 992-1006.

104. Малышев И. Ю., Монастырская. Е.А., Смири» Б.В. и др. Гипоксия и оксид азота // Вестник РАМН. — 2000. — № 9. — С. 44-49.

105. Манухина Е.Б., Лямина Н.П., Долотовская П.В. и др. Роль оксида азота и кислородных, радикалов в патогенезе артериальной гипертензии // Кардиология. — 2002: — № 1-1. — С. 73-84.

106. Манухина Е.Б., Малышев И.Ю. Стресслимитирующая система оксида азота// Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. — 2000. — Т. 86, № 10. — С. 1283-1292.

107. Мари Р., Греннер П., Мейерс П., Родуэлл В. Биохимия человека: в 2 томах. М.: Мир; БИНОМ. Лаборатория знаний, 2009. - Т.2. - 415с.

108. Меерсон Ф.З. Общий механизм адаптации и профилактики. М., Медицина, 1973.-360 с.

109. Меерсон Ф.З. Адаптация, дезадаптация и недостаточность сердца. М.: Медицина, 1978. - 344 с.

110. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. М.: Наука, 1981. -278с.

111. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и* ишемических повреждений сердца.- М.: Медицина, 1984.

112. Меерсон Ф.З. Адаптация к стрессорным ситуациям и стресс-лимитирующие системы // Физиология адаптационных процессов. М.: Наука, 1986.-С. 521 -630.

113. Меерсон Ф.З. Физиология адаптационных процессов. М., 1986. - 224с.

114. Меерсон Ф.З. Адаптационная медицина.- М.: Дело, 1995. 93 с.

115. Мельник Л.Г. Фундаментальные основы развития. Сумы: Университетская книга, 2003. — 234 с.

116. Меныцикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь И.А., Круговых Н.Ф., Труфакин В.А. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. М.: «Слово», 2006. - с. 576.

117. Миловский В.Е, Болдина И.Е Влияние антигипоксанта олифена на изменения в редокс-системах глутатиона //Антигипоксанты и актопротекторы: итоги и перспективы /Мат. Рос, научн. конф.- СПб., 1994.-Вып.1. С. 67.

118. Недоспасов А;. А. Биогенный. NO в конкурентных отношениях // Биохимия.- 1998.- Т. 63.- Вып. 7.- С. 881-904.

119. Никитин- А.И. Вредные факторы среды; и репродуктивная! система* человека (ответственность перед будущими поколениями). СПб.: «ЭЛБИ-СПб», 2008. - 240с.

120. Никонов В.В. Стресс. Современный? патофизиологический- подход? к; лечению: — М., 2002. — 314 с.

121. Никонов В:В., Павленко АЛО. Метаболическая терапия гипоксических состояний: Избранные лекции. Харьков, 2009. — 112 с.

122. Новиков В.Е., Катунина Н.Г1: Фармакология и биохимия-гипоксии:// Обз. клин: фармакол. и лек; тер.-2002.-Т.Г, № 21т С. 73-87.

123. Новиков Д.А., Новочадов В:В. Статистические методы в медико-биологическом эксперименте (типовые случаи). Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2005: — 84 с:

124. Оковитый С.В. Клиническая^ фармакология антиоксидантов // ФАРМйндекс-Практик 2003: - №5.-С; 85-1 ia.148:Оковитый С.В. Клиническая фармакология, антигипоксантов // ФАРМиндекс-Практик. 2004:-№6.-С. 30-39К

125. Оковитый С.В., Иванова О.В., Шабанов П.Д:, Гепатопротекторный эффект бемитила у больных алкогольными . поражениями: печени //Наркология.- 2002.- №3.- С. 19-24.

126. Окороков А.И. Лечение болезней внутренних органов: Лечение болезней сердца и сосудов: Mi: Мед., лит., 2002 - 464 с.

127. Олдак П.Г. Колокол тревоги: пределы бесконтрольности и судьбы цивилизации.-М.: Политиздат,. 1990L-173 с.

128. Орлова E.B. Разработка и экспериментальное обоснование клинического применения комплексного нуклеотидного препарата из дрожжей Saccharomyces cerevisiae: диссертация. д.б.н.- М., 2007. 233 с.

129. Орлова Е.В., Римарева Л.В: Эффект селективного апоптоза, вызываемый Суперпротамином и его производными^ // В, сб. «Микробные биокатализаторы для перерабатывающих отраслей. АПК» под редакцией Полякова В.А., Римаревой Л.В. М-., ВНИИПБТ, 2006, G.175-183.

130. Орлова Е.В., Римарева Л.В., Орлова B.C. Исследование антиоксидантных свойств препарата, полученного на основе регулируемого ферментативного гидролиза биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae Хранение и переработка сельхозсырья; 2007, т. 11, с. 47-54.

131. Основы физиологии человека: Учебное пособие. — М.: Изд-во РУДН, 2000.-408 с.

132. Островский О.В., Спасов A.A., Гаева Л.М., Дрозд В.В. и др. Противогипоксические эффекты антиоксидантных веществ // Антигипоксанты и актопротекторы: итоги и перспективы /Мат. рос. научн. конф.- СПб., 1994.- Вып. 1.- С. 75.

133. Перепеч Н.Б., Михайлова И.Е, Недошивин А.О. и др. Олифен в терапии ишемической болезни сердца первые результаты и перспективы клинического применения // Междун. мед. обз. - 1993. - Т. 1.- № 4.- С. 328333.

134. Петрушова O.IL Активность пептид-гидролаз в плаценте в норме и при патологии. Автореф. дис. .канд. биол. наук.-Пенза, 2005. — 21 с.

135. Плужников H.H., Софронов ГА. Антигипоксанты. как усилители-естественных защитно-адаптационных реакций организма на гипоксию* // Антигипоксанты и актопротекторы: итоги- и перспективы. Мат. Рос. науч. конф.- СПб., 1994.- с. 79.

136. Погорелый В .Е. Цереброваскулярные реакции как показатели антиоксидантной защиты головного мозга при-его ишемии-производными 3-оксипиридина1 // Биоантиоксидант /Мат. междун. симпоз.- Тюмень: Изд-во ТюмГУ, 1997.- С. 180-181.

137. Полетаев А.Б., Морозов С.Г., Ковалев И.Е. Регуляторная метасистема. Иммунонейроэндокринная регуляция гомеостаза.- М.: Медицина, 2002.-168с.

138. Прахов A.B., Гапоненко В.А., Игнашина Е.Г. Болезни сердца плодами новорожденного ребенка. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2001*.г.- 1>88с:

139. Принципы ведения новорожденных с респираторным дистресс-синдромом (РДС) // Методические рекомендации РАСПМ.- М.,-2007.

140. Протасов В1Ф. Экология, здоровье и, охрана окружающей среды в России: Учебное и справочное пособие. М.: Финансы и статистика,2000. — 672 с. .

141. Путилина Ф.Е. Определение содержания восстановленного глутатиона в тканях. Методы биохим. исслед. Л.: Изд-во ЛГУ, 1982.- с. 183-186.

142. Пшеникова Р.Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии / Р.Г. Пшеникова // Патол. физиология и эксперим. терапия. — 2001.—№ 1. —С. 26-23.

143. Пшеничникова М.Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии.// Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2000: — №2, 3, 4. — 2002. — №1, 2, 3.

144. Радзинский В.Е., Смалько П:Я. Биохимия плацентарной недостаточности. — М.: Изд-во РУДН, 2001. — 273 е.

145. Раевский К.С. Оксид азота новый физиологический мессенджер: возможная роль при патологии центральной нервной системы. //Бюл. ЭБиМ. -1997: - Т. 123. -№5. - с. 484-490.

146. Ревич Б.А. Загрязнение окружающей; среды и? здоровье населения. Введение; в экологическую эпидемиологию. Учебное пособие. М.: Изд-во МНЭПУ, 2001.-264 с.

147. Ревич Б.А., Авалиани С.Л!, Тихонова Г .И. Экологическая эпидемиология: Учебник для вузов: / Под ред: Б.А. Ревича. — М1: Издательскийщентр «Академия»;;20041— 384?с.

148. Рукавишников В.С., Лещенко Я:А., Маторова Н.И. и др. Экологические и социальные проблемы репродуктивного здоровья населения' Иркутской области // Мед.труда и промыш. экология. 2002. — № 4. — С.14-18.

149. Рябов Г.А. Синдромы критических состояний. — М.: Медицина. 1994. -с.89-107. :

150. Рябов Г.А., Азизов Ю.М. Роль оксида азота как регулятора клеточных процессов; при формировании' полиорганной недостаточности;// Анестезиология и реаниматология: 2001. -№ 1. - С. 8-13.

151. Салей А.П., Редкий M. И. Роль оксида азота в формировании мотивационного поведения и обучения // Вестник ВГУ. — 2003. — № 1. — С. 75-80.

152. Сато А. Симпатическая регуляция функции мозгового слоя надпочечников при старении // Физиол. журн. 1990. - 36, №'5. - С. 94-99.

153. Сергеева С.С. Мембранные и субклеточные механизмы, действия амтизола и гутимина на нервные клетки //Антигипоксанты и актопротекторы: итоги и перспективы. /Мат. конф. СПб., 1994.- Вып. 2.- с. 89:

154. Серов B.ffi, Кожин A.A. Акушерство и гинекология. -1988:- № 8. С. ,12-15».

155. Сетко А. Г. Оценка« последствий для здоровья населения, проживающего на.территориисразвитой* промышленностьюУ/ Вестн: ©ГУ. 2005. - № 5. — 101-103;

156. Сичинава Л.Г. Перинатальные, гипоксические поражения, центральной нервной системы плода и новорожденного: Автореф. дис. д-ра мед. наук. — Mí, 1993. — 38 с.

157. Скулачев В .П. Явления запрограммированной, смерти. Митохондрии,, клетки и: органы:" роль активных форм кислорода. // Соросовский образовательный журнал.- 2001.-Т 7.- №6. С.4-10.

158. Смирнов A.B., Криворучко Б.И. Гипоксия* И' ее фармакологическая коррекция одна из ключевых проблем анестезиологии интенсивной терапии //Анестезиол. и реаниматол. -1997.- №3. - С. 97-98.

159. Смирнов A.B., Криворучко Б.И. Антигипоксанты в неотложной медицине //Анестезиол. и реаниматол. -1998:- №2!- С. 50-55.

160. Соколовский В.В: Тиолдисульфидное соотношение крови как показатель состояния неспецифической резистентности организма. СПб., 1996. - с. 30.

161. Стволинский С.Л., Федорова1 Т.Н., Юнева М.О., Болдырев A.A. Защита Cu/Zn СОД карнозином при нарушениях окислительного метаболизма в мозге in vivo. // MI Бюл. эксперим. биол. мед. - 2003. - Т.135, №2. - с.151-154.

162. Стокле Ж.-К., Мюле Б., Андрианцитохайна Р., Клещев А. Гиперпродукция оксида азота в патофизиологии кровеносных сосудов. //Биохимия. 1998. - Том. 63. - Вып. 7. - с. 976-983.

163. Студеникин М.Я.,Халлман Н. Гипоксия плода и новорожденного,- М.: Медицина, 1984. 240 с.

164. Татарчук Т.Ф. Стресс и репродуктивная функция женщины. // Международный эндокринологический журнал. 2006. - №3.

165. Тигранян P.A. Стресс и его значение для организма / PiA. Тигранян. — М., 1988; —176 с.

166. Типовые патологические процессы / Н.П. Чеснокова: Учебное пособие / Издательство Саратовского медицинского,университета. 2004.-е. 132-136.

167. Узбеков М.Г., Карпачевская И.К. Действие глутатиона на энергетический обмен мозга при антенатальной гипоксии // Патол. физиол. и эксперим'. терапия.-1991.- № 5> С. 11-12.

168. Фролькис В.В. Стресс возраст - синдром // Физиол. журн. - 1991'. - 37, № 3. - С. 3-11.199." Физиология адаптационных- процессов: Руководство по физиологии / Под ред. Ф. 3. Меерсона. М.: Наука, 1989. - 632 с.

169. Халецкая О.В., Козлова Е.М., Шунькина Г.Л., Булдынская Л.И., Шкалова Л.В. Полиорганность повреждения у новорожденных при тяжелой гипоксии. // Медицинский альманах,- 2007. №1. - С.84-86.

170. Хватова Е.М., Сидоркина А.Н., Миронова Е.Т., Шуматова E.H. Макроергические фосфаты как показатель оценки степени тяжести гипоксии мозга // Моделирование, патогенез и терапия гипоксических состояний.-Горький, 1989.- С. 4-10.

171. Хорст А. Молекулярные основы патогенеза болезней.- М.: Медицина, 1982.- с. 231-240.

172. Храпова Н.Г. Токоферолы регуляторы интенсивности перекисного окисления липидов биомембран //Биоантиоксидант /Мат междун. симпоз,-Тюмень: Изд-во ТюмГу, 1997. - С. 24-25.

173. Чеснокова Н.П. Типовые патологические процессы: Монография — Изд-во Саратовского медицинского университета, 2004. 400 с.

174. Чеснокова Н.П., Афанасьева Г.А., Понукалина Е.В., Киричук В.Ф. Липопероксидация!и антиоксидантная система крови в динамике чумной^ и холерной интоксикации. Патологическая^ физиология5 и экспериментальная терапия. 2001. -№3.- с. 17-18.

175. Чеснокова Н.П., Понукалина Е.В., Бизенкова М.Н. Источники образования свободных радикалов и их значение в биологических системах в условиях нормы.// Современные наукоемкие технологии. — 2006.- №6. — С.28-34.

176. Чеснокова Н.П., Понукалина Е.В., Бизенкова М.Н. Молекулярноклеточные механизмы цитотоксического действиягипоксии. Патогенезгипоксического некробиоза.// Современные наукоемкие технологии: 2006. -№7. - С.31-38.

177. Шашков BiCl, Ратнер ЕЮ., Коваленко Е.А. Иротивогипоксические средства (обзор литературы) // Фармакол. итоксикол. 1977.- Т. 40. - № 4.- С. 504-509;

178. Alberti K.G.M.M. Biochemical consequenses of hypoxia // J. Clin. Path. 1977. Vol.3. Suppl. 11. P. 14.

179. Araki R. Nashito I. Multicomponent analysis of near-infrared spectra of rat heard //Adv. Exp. Med. and Biol. 1989. Vol. 248. P. 11—20.

180. Barnes P.J. Nitric oxide and airway disease // Ann. Med. 1995. -Vol.27, N3. - P.389-393.

181. Bellomo G. Cell damage by oxygen free radicals //Cytotechnology. 1991. Vol. 1'. P 7 1—73.

182. Benjamin N., Vallance P. Plasma nitrite as a marker, of nitric oxide production-// Lancet. — 1994. — Vol. 344. — P.960.

183. Berka V., Yeh H.C., Gao D., Kiran* F., Tsai A.L. Redox, function of tetrahydrobiopterin- and effect of L-arginine on oxygen binding in endothelial.nitric oxide synthase. //Biochemistry. 2004 Oct 19;43(41): 13137-48.

184. Biology and chemistry of active oxyden / Eds Bannister J. V., Bannister

185. N.Y.: ElseverPubl. Co. 1984: - P.262.

186. Bredt D.S., Hwang P.M., Glatt C.E. et al. Cloned and expressed nitric oxide synthase structurally resembles cytochrome P-450 reductase // Nature. 199h -Vol.351.-P.714-718.

187. Bredt D.S., Snyder S.H. Isolation and charachterisation of nitric oxide synthases. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1994.- v. 93.- p. 682-685.

188. Bredt D.S., Snyder S.H. //Ann. Rev. Biochem. — 1994. — V. 63. — P. 175—195.

189. Brody T.B. Nitric oxide synthase. //The interactive fly, 1996, part 1 /4| part 2 /4| part 3 /4| part 4 /4| (http.://sdb.bio.purdue.edu/fly/ dbzhnsky/nitrox 2.htm).

190. Chen C.A., Wang T.Y., Varadharaj S, Reyes L.A., Hemann C, Talukder M.A., Chen Y.R., Druhan L.J., Zweier J.L. S-glutathionylation uncouples eNOS and regulates its cellular and vascular function.// Nature. 2010 Dec 23;468(7327):1115-8.

191. Dunwiddie T.V., Fredholm B.B. Adenosine neuromodulation, in Purinergic Approaches in ExperiMental'Therapeutics /Ed. By K.A. Jacobson, M.F. Jarvis. New York: Wiley-Lisa, mc, 1997. P. 359-382.

192. Erecinska M., Nelson D., Silver I.A. Metabolic and; energetic properties of isolated nerve ending particles (synaptosomes). // Biochim. Biophys. Acta. 1996.- v.1277- p. 13-34.

193. Esler M.D., Thompson J.M.,. Kaye D.M. et al. Effects of aging on the responsiveness of the human cardiac sympathetic nerves to stressors // Circulation.1995b. — 91, № 2. — P. 351-358.

194. Fandrey J; Seydel FP, Siegers CP, Jelkman W. Role of cytochrome P450 in the control of the production of erythropoietin. Life Sci, 1990, v.47, p.127-134.

195. Ferrary R. The role of free radicals in the ishemic myocardium//Bratisi. Lek. Listy. 1991. Vol. 92.N2.P. 108-1 12.

196. Ferrary R. Tossicita dei radicali liberi //Cron. Farm. 1991. Vol. 34. N. l.P. 14—16.

197. Forman H.J., Fisher A.B. Antioxidant defenses // Oxigen and living processes: an interdisciplinary approach /Ed. D. L. Gilbert. New York: Springer-Verlag, 1981. P. 235-249.

198. Forstermann U., Schmidt H.H., Polloc J.S., Sheng H., Mitchell J.A., Warner T.D., Nacane M., Murad F. Isoforms of nitric oxide synthase. Characterization-and purification from different air types. Biochem. Pharmacol; 1991, v. 42, p. 18491857.

199. Forstermann U., Li H. Therapeutic effect of enhancing endothelial nitric oxide synthase (eNOS) expression and preventing eNOS uncoupling. // Br J Pharmacol.-2010 Dec 30. doi: 10.rHl/j.l476-5381.2010.0M96.x.

200. Fredholm B.B. Dunwiddie T.V. How does adenosine inhibit transmitter release?//TIPS. 1988. Vol.9.P 130-134.248". Frolkis.V.V. Stressage syndrome // Mech. Ageing Dev. 1993. - 69. - PI 93107.

201. Fukuda H., Yasuda H., Shimokawa S. Et. Al. The oxygen Dependence of the energy state of cardiac tissue //Adv. Exp. Med. and Biol,. 1989. Vol. 248i P. 567573.

202. Fukuda M., Fukuda K., ShiMizu T., Moller H. Hum. Reprod. 1998, v. 13, p. 2321-2322.

203. Ghosh D.K., Stuehr D.I. Macrophage NO synthase: characterisation- of isolated' oxigenase and reductase domains reveals a head-to-head subunit interaction. //Biochemistry, 1995, v. 34, p.801-807.

204. Gido G., Kristian T., Siesjo B.K. Extracellular potassium in a neocortical core area after transient focal ischemia. // Stroke. 1997.- v. 28. -p.206-210.

205. Gilbert H.E. Glutathione Centennial Molecular Perspectives and Clinical Implications (Ed. A. Meister.) San Diego: Acad. Press, 1989. — P.73-87.

206. Halliwell B. and Gutteridge, J.M.C. Free radicals in biology and medicine. -1999. -85 lp.

207. Hare J.M. and Stamler J. S. NO/redox disequilibrium in the failing heart and cardiovascular system. The Journal of Clinical Investigation 2005, v. 115 p.509-517.

208. Hayes J.D;. McLellan L.I. Glutathione and glutathione-dependent enzymes represent;a coordinately regulated defense against oxidative stress. Free Radic Res, 1999, v. 31,p.273-300:

209. Heron A., Lasbennes F., Seylaz J. Adenosine modulation of aminoacid'release in rat hippocampus during ischemia and veratridine depolarization//Brain Res. 1993. Vol1. 608. P. 27-32.

210. Hochachka PI W. Living without oxygen: Closed and open systems in hypoxia tolerace.- Massachusetts, London, 1980. -178 p.

211. Kelm M'., Schrader J. Nitric Oxide from L-arginine: a Bioregulatory System // Eds.S.Moncada, E.A.Higs. Amsterdam: Excerpta medica,1990. p.47-53.

212. Kitagawa H., Mori A., Shimada J; et al. Intracerebral-adenosine infusion improves neurological1 outcome1 after trasient focal ishemia' in rats //Neuroll Res. 2002. Vol. 24. N 3.317—323.

213. Knowles R.G., Moncada S. Nitric oxide synthases in mammals. //Biochem. J.,1994, v. 298, p.249-258.

214. Lewin G., Popov I. The antioxidant system of the organism. Theoretical basis and practical conseguences // Med. Hypotheses.- 1994; Vol. 42. N4. P. 269-279.

215. Lipton P. Ischemic cell death in brain neurons. // Physiol Rev. 1999.- v.79 -p. 1431-1568.

216. Eopaschuk G;D:, Stanley W.G. Glucose metabolism; in; the: ischemic- Heart //Circulation; 1997.VoU95. P: 313-315.

217. Lowenstein Gi-,. Glatt, G.S;, Bredt D.S., Snyder S.H.Cloned andi expressed? macrophage nitric; oxide synthase; contrasts with? the- brain enzyme.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1992, v. 89, p. 6711-6715. .

218. Matsuda S, Umeda M, Uchida H, Kato FI, Araki T. Alterations of oxidative stress; markers andi apoptosis markers, in the striatum after transient focal cerebral ischemia in rats. //J. Neural Transm. 2009. - v. 116, N4. - p.395-404.

219. McQuillan L.P., Leung G.K., Marsden P.A. et al. Hypoxia inhibits exptession of NOS via transcriptional and posttranscriptional mechanisms // Amer. J. Physiol. 1994. - 267, № 5 (pr. 2). - P. 1921-1927.

220. Mela L. Mitochondrial function in cerebral ischemia and hypoxia: comparison of inhibitory and adaptive responses. //Neurol. Res. 1979. Vol. 1. P. 51-63.

221. Micco Jamie A. et al. Anxiety and depressive disorders in offspring at high risk for anxiety: a meta-analysis. Journal of anxiety disorders 2009; 23 (8): 115864.

222. Mies G., Paschen W., Hossmann K.-A. Cerebral blood« How, glucose utilization, regional glucose, and ATP content during the maturation period- of delayed! ischemic injury in gerbil brain. // J. Cereb. Blood Flow Metab. 1990.v.10. p.638-645.

223. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Biothynthesis of nitric oxide from L-arginine: a pathway for the regulation of cell function and communication. //Biochem. pharmacol.,1989. v. 38. - p. 1709-1715.

224. Munday R., Winterboume C.C. Reduced*, glutathione in combination? with superoxide dismutase as an- important- biological* antioxidant defense mechanism//Biochem. Pharmacol. 1989. - Vol. 38. - p. 4349-4352.

225. Nedergaard M. and Hansen A.J. Characterization^ of cortical depolarizations evoked m focal'cerebral ischemia. // J. Cereb. Blood Flow Metab. 1993. -v. 13.-p.568-574.

226. Neerhof M.G., Synowiec S., Khan S., Thaete L.G. Pathophysiology of chronic nitric oxide synthase inhibition-induced fetal growth restriction, in the rat. // Hypertens Pregnancy.- 201 l';30(l):28-36.

227. Osaka T. Hypoxia-induced hypothermia mediated by noradrenaline and nitric oxide in the rostromedial preoptic area:// Neuroscience. 2011.

228. Pompella A,; Visvikis? A, Paolicchii A, De Tata V, Casini AF. The changing faces of glutathione, a cellular protagonist//Biochcm Pharmacol.- 2003.- №66(8).-p. 1499-503. ,

229. Pornin M. Acute effects of trimetazidine on systemic hemodynamics in patients; with coronary: artery disease: a piacebo-controlled study //J Mol. Cell. Cardiol. 1990. Vol.22. P. 150(abst).

230. Riechcr-Rossler A., Steiner M. Perinatal Stress, Mood and Anxiety Disorders. 2005; 199.

231. Schmidt H.H.H.W., Lohmann S.M., Walter U. The nitric oxide and cGMP signal transduction system: regulation and mechanism of action.//BBA, 1993, v. 1178, p.153-175

232. Schmidt H.H.H.W., Pollock J.S., Nakane M., Gorsky, Murad, F.No-syntases are homodimers.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1991, v. 88, p. 365-369.

233. Schubert P., Kreutzberg G.W. Cerebral protection by adenosine // Acta Neurochir. 1993. Vol: 57. P. 80-88:

234. Selye H., Tuchweber B. Stress and'ageing // Society, stress and disease. -V.5. Old'Age-/ Ed. L. Levi; -Oxford: Oxford Univ. Press, 1987. — P: 163-167.

235. Stanley. W.C., Lopaschuk G.D., Hall J.L., McCormack J.G. Regulation of myocardial carbohydrate metabolism under normal, and, ischemic conditions: potential ror pharmacological interventions // Cardiovasc. Res. 1997. Vol: 331 P. 243-257.

236. Sugiyama T., Michel T. Thiol-metabolizing proteins and, endothelial redox state: differential, modulation of eNOS and biopterin pathways.// Am, J* Physiol Heart Girc Physiol. -2010 Jan;298(l):H194-201.

237. Tak Y.A., Chang M.D:, Wu C.M., Chang H.T. Molecular and cellular tesponces to oxidative stress and changes in oxidation- reduction balance. Am: J. Clin. Nutr., 2002, v. 99, p. 308-315.

238. Thomas, J. A., Poland B., and Honzatko R. Protein sulphydryls and their role in the antioxidant function of protein S-thiolation. Arch. Biochem. Biophys. 1995, v.319, p. 1-9.

239. Tomomi G., Masataka M. Nitric oxide and endoplasmic reticulum stress// Arteriosclerotic, Thrombosis and Vascular Biology.- 2006.-26.-P. 1439.

240. Townsend D.M. S-glutathionylation: indicator of cell stress and regulator of the unfolded protein response. //Mol Interv. 2007 Dec;7(6):313-24.

241. Tretter L., Szabados C., Ando A., Hervath L. Alterations of mitochondrial proteins during HADPH dependent lipid peroxidation // Acta biochim. Et biophys. Acad: Sci. Hung. 1984. Vol. 19. N 1-2. P. 146.

242. Walter R., Schaffner A., and Schoedon G. Biochem. and'Biophys. Res. Commun. -1994.- Vol.202. P. 450-455.

243. Wang J., Shin W.S., Kawaguchi H., Kato M. Contribution of sustained Ca- -elevation for NO production in endothelial? cells and subsequent modulation? of1. OA

244. Ga levels in vascular«smooth muscle cells in coculture. J.B.C.,1991, v.238; p?197-210.

245. Wang J., Stuehr D.I., Ikeda-Saito.m., Roussen D.L. Heme Coordination and Structure of the Catalitic site' in* Nitric Oxide Synthase: //J.B.G., 1993,v.268, p.22255-22258

246. Weerateerangkul P., Chattipakorn S., Chattipakorn N. Roles of the nitric oxide- signaling pathway in cardiac ischemic preconditioning against myocardial ischemia-reperfiision injury. //Med Sci Monit. 2011 Feb l;17(2):RA44-52.

247. Wenger RH, Gassmann M. Oxygen(es) and the hypoxia-inducible factor-1. Biol Chem, 1997, v.378, p.609-616.

248. Witting LA. Vitamin E and lipid antioxidants in free-radical initiated reactions //Free radicals in biology. Volume IV /Ed. W.A. Pryor. New York: Academic Press, 1980. P. 295-319.

249. Xue Q, Zhang L. Prenatal hypoxia causes a sex-dependent increase in heart susceptibility to isehemia and reperfusion injury in adult male offspring: role of proteinkinase C epsilon. // J. Pharmacol Exp Ther. -2009. v.330, N2.- p.24-32.

250. Zweier J., Chen C.A., Druhan L.J.S-glutathionylation reshapes our understanding of eNOS Uncoupling and NO/ROS-mediated signaling. //Antioxid Redox Signal. -2011.

Информация о работе

Баева, Юлия Игоревна
кандидата биологических наук
Москва, 2011
ВАК 03.02.08

Диссертация

Применение намивита и суперпротамина в период беременности как способ защиты организма в чрезвычайных экологических ситуациях - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Применение намивита и суперпротамина в период беременности как способ защиты организма в чрезвычайных экологических ситуациях - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы