Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Применение микроводорослей для оценки качества морской воды и действия детергентов

ВАК РФ 03.00.18, Гидробиология

Автореферат диссертации по теме "Применение микроводорослей для оценки качества морской воды и действия детергентов"

На правах рукописи

МАРКИНА Жанна Васильевна

ПРИМЕНЕНИЕ МИКРОВОДОРОСЛЕЙ ДЛЯ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА МОРСКОЙ ВОДЫ И ДЕЙСТВИЯ ДЕТЕРГЕНТОВ

03 00 18 - гидробиология 03 00 16 - экология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

□и344В004

Владивосток - 2008

003446994

Работа выполнена в Лаборатории физиологии Института биологии моря им А В Жирмунского ДВО РАН

Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент Айздайчер

Нина Александровна

Официальные оппоненты доктор биологических наук, профессор

Бузолева Любовь Степановна

доктор биологических наук, старший научный сотрудник Латыпов Юрий Яковлевич

Ведущая организация Московский государственный университет им

М В Ломоносова

Защита состоится $ октября 2008 г в 1Д часов на заседании диссертационного совета Д 005 008 02 при Институте биологии моря им А В Жирмунского ДВО РАН по адресу

690041, г Владивосток, ул Пальчевского, 17, факс (4232) 310900 Электронный адрес inmarbio@mail primorye ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института биологии моря им А В Жирмунского ДВО РАН

Автореферат разослан "¡0' сентября 2008 г

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук

■ye-itc^r-ai—

Костина Е Е

Актуальность работы

Одноклеточные водоросли - важный компонент морских экосистем Они одни из первых страдают от воздействия токсических веществ, что приводит к нарушению функционирования всей экосистемы (Патин, 1979, Эколого-токсикологические ,1985, Blasco et al, 2003) В морскую среду попадают различные токсиканты, в том числе детергенты и их основной компонент -поверхностно-активные вещества (ПАВ) Действие этих веществ на микроводоросли является многофакторным, что выражается в изменении функционирования клеток и их гибели С другой стороны, наличие в составе детергентов фосфорных компонентов способствует евтрофикации, последствия которой ведут к увеличению числа клеток отдельных видов водорослей при одновременном снижении видового разнообразия (Lewis, Hamm, 1986, Брагинский и др , 1987, Паршикова, Негруцкий, 1988, Belanger et al, 2002, Lizotte et al, 2002, Wong et al, 2003)

В настоящее время в исследованиях с микроводорослями оценивается только влияние ПАВ, а не детергентов в целом (Aidar et al, 1997, Utsunomia et al, 1997a,b, Hampel et al, 2001, Morreno-Garrido et al, 2001, Sun et al, 2004 и др ) В связи с этим, наряду с изучением воздействия отдельных ПАВ необходимо оценивать воздействие детергентов (Патин, 1979, Lewis, 1992, Жмур, 1997, Pettersson et al, 2000, Остроумов, 2001) При этом важно исследовать действие токсических агентов как на рост, так и на физиологическое состояние одноклеточных водорослей

Среди огромного разнообразия микроводорослей наиболее часто для оценки действия веществ применяются обитающие в планктоне водоросли отдела Chlorophyta, в то время как представители других отделов остаются малоизученными (Lewis et al, 1990а, Hampel et al, 2001), что особенно касается бентосных микроводорослей (Morreno-Garrido et al, 2003а,b)

Загрязнение морской воды является комплексным и, следовательно, оценку его характера и действия можно провести только с помощью биотестирования, которое средством получения принципиально новой информации о загрязнении (Флеров, 1983, Крайнюкова, 1988, Жмур, 1997, Черкашин, 2001, Терехова, 2003) Одноклеточные водоросли, вследствие круглогодичной доступности и высокой

чувствительности, широко применяются в качестве тест-объектов при биотестировании (Walsh, Games, 1983, Крайнюкова, 1988, Lewis, 1995, Жмур, 1997, Руководство, 2002) В то же время микроводоросли для биотестирования вод зал Петра Великого Японского моря до настоящего времени не использовали

В связи с вышеизложенным очевидна актуальность исследования влияния ПАВ и детергентов на микроводоросли, а также возможность применения данных организмов в качестве тест-объектов для биотестирования прибрежных морских вод

Цель работы заключалась в изучении действия детергентов и прибрежных вод зал Петра Великого Японского моря на микроводоросли разных систематических групп

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи

1 Исследовать чувствительность микроводорослей Dunahella salina Teod

(Chlorophyta), Plagioselmis prolonga Butch (Ciyptophyta), Attheya ussurensis Stonik, Orlova & Crawford (Bacillanophyta) к модельному токсиканту бихромату калия

2 Выявить, используя в качестве модельного объекта D salina,

оптимальные условия опыта (возраст, численность клеток, время введения токсиканта) для изучения влияния ПАВ и детергентов и оценки качества вод

3 Исследовать действие поверхностно-активного вещества и детергентов на

динамику численности клеток, скорость их роста, изменение рН культуральной среды, содержание хлорофилла а и каротиноидов и кислородную продуктивность микроводорослей D salina, А ussurensis, Р prolonga

4 Исследовать действие поверхностно-активного вещества и детергентов на

подвижность клеток Р prolonga и скорость их движения

5 Показать возможность биотестирования прибрежных вод зал Петра

Великого с помощью микроводорослей D salina и Р prolonga

Личное участие в получении научных результатов. Личное участие заключается в планировании и проведении экспериментальной работы

Самостоятельно осуществляла микроскопические и химические методы исследования, интерпретацию полученных данных и формулирование научных выводов Все заимствованные данные, использованные в работе, имеют ссылки на их источники

Научная новизна: впервые оценена степень чувствительности микроводорослей D salina, Р prolonga и A ussurensis по их реакции на модельный токсикант бихромат калия Исследовано применение новых тест-объектов микроводорослей Р prolonga и A ussurensis при изучении дейтсвия ПАВ и детергентов, а также качества морских вод на примере зал Петра Великого Японского моря Установлено, что подвижность клеток Р prolonga - наиболее чувствительный показатель к действию ПАВ и детергентов, который может быть использован для тестирования морской воды

Практическая значимость полученные сведения пополняют знания о действии ПАВ и детергентов на микроводоросли Эти данные могут быть использованы при разработке систем оценки действия ПАВ и детергентов Данные, полученные в ходе биотестирования прибрежных вод зал Петра Великого с помощью микроводорослей, дают дополнительную информацию о свойствах загрязнения прибрежных вод залива и их действия на морскую биоту Они могут быть использованы при проведении мониторинга качества морских вод и при оценке среды в районах развития марикультурных хозяйств Разработанные методики по определению действия ПАВ и детергентов применяли на практических работах в курсе "Большой практикум" для студентов-экологов

Защищаемые положения

1 ПАВ и детергенты оказывают влияние на D salina, A ussurensis и Р prolonga в концентрациях 0 1, 1 и 10 мг/л Воздействие токсикантов усиливается с возрастанием их концентраций

2 Наиболее чувствительным показателем действия ПАВ и детергентов является подвижность клеток Р prolonga, что позволяет использовать ее для оценки качества морских вод

Апробация работы. Результаты и основные положения работы докладывались на V, VI, VII Региональных конференциях по актуальным проблемам морской биологии, экологии и биотехнологии (Владивосток, 2002,

2003, 2004), VII и IX международной Пущинской школе-конференции молодых ученых (Пущино, 2004, 2005), Международной конференции "Bridges of science between north America and the Russian Far East past, present and future" (Владивосток, 2004), IX и X дальневосточных молодежных школах-конференциях по актуальным проблемам химии и биологии (Владивосток, 2005, 2006), II Международной конференции "Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов" (Петрозаводск, 2007) и ежегодных конференциях ИБМ ДВО РАН (2003,2004, 2005, 2006,2007,2008)

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 19 научных работ Работа выполнена при финансовой поддержке гранта Фонда содействия отечественной науке (2007, 2008 гт)

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 122 страницах и состоит из введения, четырех глав, выводов и списка литературы (191 источник, из них 87 иностранных) Работа включает 6 таблиц и 23 рисунка

Благодарности. Автор выражает глубокую признательность научному руководителю к б н НА Айздайчер за помощь на всех этапах планирования и выполнения работы Особую признательность выражаю доценту Е В Журавель за интерес к работе и участие в обсуждении результатов исследования, д б н В П Челомину, к б н JIТ Ковековдовой и к б н Г М Каменеву за критические замечания и ценные советы

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Обобщены литературные сведения о составе детергентов, рассмотрена классификация ПАВ Представлены сведения об источниках и объемах содержания ПАВ в морских водах Проанализированы данные о микроводорослях как объектах экотоксикологических исследований Рассмотрено влияние анионных ПАВ и детергентов на динамику численности, физиологическое состояние и биохимический состав микроводорослей

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Объекты исследования н условия эксперимента

Оценку действия ПАВ и детергентов проводили на D salina (Chlorophyta), Р prolonga (Ciyptophyta) и A ussurensis (Bacillanophyta)

D salina - планктонная подвижная водоросль Выбор в качестве объекта исследования обусловлен широким применением ее для оценки токсичности веществ и качества вод Р prolonga также планктонный активно подвижный вид Преимуществом этой водоросли является способность оставаться подвижной при пересеве в свежую среду в отличие от D salina, которая кратковременно утрачивает подвижность в данных условиях Необходимость исследования Р prolonga связана с широким распространением криптофитовых в прибрежных водах дальневосточных морей, ее подвижностью, значительной ролью в экосистемах, способностью вызывать "красные приливы", в том числе и в Амурском заливе Японского моря (Коновалова, 1999, Бегун, 2006) A ussurensis является бентосным видом, обитающим в зал Петра Великого (Stomk et al, 2006), необходимость исследования данной водоросли связана, прежде всего с тем, что количество работ по бентосным микроводорослям ограничено Сходство исследованных водорослей заключается в наличии основного пигмента -хлорофилла а Кроме того, все виды микроводорослей соответствуют одному из важных требований к тест-объектам - они легко и в течение длительного времени поддерживаются в лабораторной культуре

Тест-объектами для биотестирования вод зал Петра Великого служили D salina как часто применяемая для данных целей водоросль (Стом и др, 1984, Балаян, Стом, 1988, Рудик и др, 1995) и Р prolonga - организм, предложенный нами в качестве нового тест-объекта, дающий оперативный отклик на загрязнение и обладающий чувствительным показателем - подвижностью клеток (Айздайчер, Маркина, 2006, Маркина, 2008)

Альгологически чистую культуру микроводоросли D salina выращивали на среде Гольдберга (Кабанова, 1961), Р prolonga и A ussurensis - на среде/(Guillard, Ryther, 1962) Водоросли культивировали при температуре 20°±2°С и свето-темновом периоде 12 ч свет 12 ч темнота

Для проверки чувствительности культур микроводорослей оценивали действие модельного токсиканта бихромата калия производства фирмы "Sigma" в

концентрациях 1 до 10 мг/л (Руководство , 2002) Среднюю эффективную концентрацию (ЭК50) для бихромата калия устанавливали графическим способом, применяя пробит-анализ (Руководство, 2002)

В опытах исследовали влияние додецилсульфата натрия (ДСН) производства фирмы "Serva" (Германия) и используемых в быту детергентов "Обычный порошок" (Байкальская косметика) и "Anel" (Procter & Gamble) в концентрациях 01, 1 и 10 мг/л Уровень содержания 0 1 мг/л ПАВ соответствует ГЩК для рыбохозяйственных водоемов в России (Перечень , 1995) Концентрации до 1 мг/л токсикантов отмечены в морских водах (Остроумов, 2001), а в некоторых случаях уровень их содержания может достигать до 97 мг/л (Наумов, 2006), поэтому нами также исследована концентрация 10 мг/л токсикантов

Продолжительность опытов - 4 сут при выяснении действия модельного токсиканта (бихромата калия), 14 сут при оценке влияния ПАВ и детергентов на микроводоросли, для биотестирования морской воды - 7 сут (Руководство , 2002)

Для оценки действия загрязняющих агентов использовали численность клеток, скорость их роста - показатели часто применяемые для оценки токсического действия Как указывает Брагинский с соавторами (1987), содержание фотосинтетических пигментов и кислородная продуктивность - также интегральные показатели действия токсикантов на микроводоросль, отражающие изменение всей совокупности метаболических процессов организма

Подсчет численности клеток. В настоящей работе для определения интенсивности роста культур водорослей использовали подсчет численности клеток В связи с этим термин "рост" означает увеличение численности клеток в единице объема Численность клеток D salina и Р prolonga считали в камере Горяева, клетки A ussurensis - в счетной камере типа Ножотта объемом 0 044 мл под микроскопом "Jenamed 2" на 1,2, 3,4, 7,10 и 14 сут экспериментов (Методы ,1975, Методические ,1998)

Скорость роста рассчитывали в начале и в конце экспоненциальной фазы (на 1 и 4 сут эксперимента) по стандартной формуле (Guillard, Ryther, 1962)

Измерение pH культуралыюй среды проводили с помощью рН-метра HI 8314 фирмы "Hanna" с точностью до 0 01 через 1, 2, 3,4, 7,10 и 14 сут опытов

Определение содержания хлорофилла а и суммарной концентрации каротинондов у микроводорослей проводили по стандартной методике (Lorenzen, 1967; Jeffrey, Humphrey, 1975; Вода, 1990). Отбор проб для определения концентрации фотосинтетических пигментов производили на 2, 4, 7, 10 и 14 сут опытов.

Кислородную продуктивность микроводорослей определяли йодометрическим методом (Методы..., 1975) на 2, 4, 7, 10 и 14-е сут.

Определение скорости движения клеток производили в счетной камере Горяева путем подсчета количества клеток, проходящих через заданную поверхность за 60 сек, и вычисляли скорость движения клеток, используя формулу (Ojakian, Katz, 1973)

Краткая характеристика района работ. Тестируемая вода отбиралась из акваторий с разной степенью антропогенной нагрузки: Амурский залив, на берегах которого расположен крупный город-порт Владивосток, зал. Восток, испытывающий сезонное влияние отдыхающих, и юго-западной части зал. Петра Великого вблизи устья р. Туманной, поставляющей широкий спектр загрязняющих веществ (Ващенко, 2000; Наумов, 2006). Воду для биотестирования отбирали на 10 станциях в августе - сентябре 2003 и 2006 гг. (глубина отбора воды 0.5 - 1 м) (рис.

Все эксперименты, представленные в работе, проведены в трех повторностях. На графиках средние арифметические значения и стандартные отклонения рассчитаны с помощью программы Excel. Всего обработано 1473 пробы.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Оценка токсичности веществ и качества среды с помощью лабораторных тест-объектов предполагает не только точное следование методике и условиям, при которых проводится биотестирование, но и проверку тест-функций самих культур Использование бихромата калия наиболее подходит для этих целей (Жмур, 1997, Петросян, 2000, Руководство , 2002) Нами показано, что D salina оказалась гораздо устойчивее к действию бихромата калия по сравнению с остальными микроводорослями, в то время как Р prolonga и A ussurensis незначительно отличались друг от друга по чувствительности (см таблицу)

ЭК50 96 бихромата калия (мг/л) для микроводорослей

Микроводоросль Dunaliella salina Plagioselmis prolonga Attheya ussurensis

ЭК50% бихромата калия (мг/л) > 10 63 28

Следовательно, A ussurensis и Р prolonga являются потенциальными тест-объектами, так как они чувствительны к бихромату калия

Действие любого загрязняющего агента на микроводоросли зависит не только от уровня его содержания и условий, при которых проводится биотестирование, но и от самой культуры микроводорослей (возраста маточной культуры, начальной концентрации клеток и времени введения токсиканта) В связи с этим нами были проведены исследования по выяснению действия ПАВ на модельный объект D salina в зависимости от этих условий Наши исследования показали, что культура D salina, выращенная из маточной в экспоненциальной фазе роста, оказалась наиболее чувствительной к воздействию ДСН Это, вероятно, связано с тем, что на разных стадиях роста культуры клетки отличаются особенностями ультраструктуры и функциональной активностью органоидов (Селях и др, 1984, Walsh, 1988) В результате экспериментов показано, что культура с меньшей исходной плотностью клеток чувствительнее к влиянию токсиканта, чем с большей Это, вероятно, связано с тем, что в растворах с одинаковым содержанием токсиканта при более высокой начальной концентрации

клеток на каждую особь приходиться меньшее содержание токсиканта, вследствие этого такая популяция устойчивее, чем с меньшим количеством клеток Реакция водорослей на токсикант зависит также от времени его внесения в среду Возможно, что более слабый отклик микроводоросли на внесение токсиканта не в самом начале опыта, а через несколько дней, связан с тем, что популяция к этому времени является уже сформированной (Fogg, 1966), и ее устойчивость к действию токсикантов повышается в 10 - 100 раз и не происходит массовой гибели клеток, как в молодой культуре (Corre et al, 1996, Гапочка, Шавырина, 1999)

Таким образом, наиболее чувствительной к действию ДСН оказалась культура, отобранная из маточной в экспоненциальной фазе роста При исходном количестве клеток 4 х 104 кл/мл восстановление культуры при токсическом действии происходит быстрее, чем при 12 х 104 кл/мл Добавление ДСН в день постановки опыта вызывало большее угнетение роста популяции микроводоросли, что не отмечено при внесении токсиканта на 4-е сут опыта

Dunaliella salina

ДСН в концентрации 0 1 мг/л оказал слабое стимулирующее действие на динамику численности (рис 2а) и физиологические процессы D salina (синтез хлорофилла а и каротиноидов и кислородную продуктивность), рН культуральной среды также возрастала Внесение 1 мг/л токсиканта приводило к небольшому ингибированию роста, уменьшению содержания хлорофилла а и каротиноидов, снижению кислородной продуктивности Увеличение содержания вещества в среде до 10 мг/л вызывало подавление роста и физиологических процессов водоросли, однако они восстанавливались до контрольного уровня

О 2 4 б 8 10 12 14 0 2 4 6 8 10 12 14 0 2 4 6 8 10 12 14

Сутки

Рис 2 Действие додецилсульфата натрия (а), детергентов "Обычный порошок" (б) и "Ariel" (в) на динамику численности клеток Dunaliella salina

При добавлении детергентов "Обычный порошок и "Ariel" во всех концентрациях численность клеток (рис 26,в), рН культуральной среды, содержание фотосинтетических пигментов и содержание кислорода в среде снижались в начале опыта, однако все показатели восстанавливались до уровня контроля к его завершению Степень изменений возрастала с увеличением уровня содержания загрязняющего агента Attheya ussurensis

ДСН в концентрациях 0 1 и 1 мг/л вызывал снижение числа клеток (рис За) и подавление физиологических процессов, особенно выраженных к концу опыта Добавление 10 мг/л вещества приводило к ингибированию роста, снижению рН культуральной среды, синтеза пигментов, процессов выработки кислорода уже на вторые сутки опыта, с увеличением экспозиции все процессы восстанавливались, однако не достигали контрольного уровня

Рис 3 Действие додецилсульфата натрия (а), детергентов "Обычный порошок" (б) и "Ariel" (в) на динамику численности клеток Attheya ussurensis

Детергенты "Обычный порошок" и "Ariel" в концентрациях 0 1 и 1 мг/л вызывали сходные изменения числа клеток (рис 36,в), рН культуральной среды, содержания фотосинтетических пигментов и кислородной продуктивности А ussurensis в начале опыта происходило снижение числа клеток, замедление физиологических процессов, но к 14-м сут они восстанавливались В тоже время содержание кислорода в среде при данных концентрациях детергента "Обычный порошок" на всем протяжении экспозиции превышало таковое в контроле, а в опыте с детергентом "Ariel" незначительно отличалось от контрольного Увеличение концентрации детергентов до 10 мг/л приводило к более существенным нарушениям В целом, детергент "Ariel" оказал более негативное

-I—[""У I—1—I—I—I 0 -|—-РЧ>——ф—г-1i О 2 4 б 8 10 12 14 0 2 4 б 8 10 12 14 Сутки

О 2 4 б 8 10 12 14

воздействие на микроводоросль: даже к завершению эксперимента ее популяция не восстанавливалась.

Plagioselmis prolonga

Концентрации 0.1 и 1 мг/л ДСН вызывали увеличение численности клеток Р. prolonga (рис. 4а), особенно на десятые сутки экспозиции, остальные показатели отличались менее значительно от таковых в контроле.

100

(в)

0 2 4 б 8 10 1214

0 2 4 6 8 10 12 14 Сутки

Т ¥ I Ф

0 2 4 б 8 1012 14

Рис. порошок"

4. Действие додецилсульфата натрия (а), детергентов "Обычный (б) и "Ariel" (в) на динамику численности клеток Plagioselmis prolonga.

°i" ,, Рис. 5. Процент

подвижных клеток Plagioselmis prolonga при добавлении поверхностно-активного вещества додецилсульфата

натрия (мг/л): (I) - неподвижные клетки, (II) - подвижные клетки.

ill III

трццниюксцкаща

Через 2 - 6 ч при данных концентрациях отмечено появление неподвижных клеток, изменение скорости движения происходили уже через 0.1 ч (рис. 5). Содержание 10 мг/л вещества вызывало гибель популяции через сутки опыта, потеря подвижности всеми клетками отмечена через 0.1 ч эксперимента.

Под воздействием 0.1 и 1 мг/л детергентов "Обычный порошок" и "Ariel" численность клеток (рис. 46,в) и показатели физиологического состояния Р. prolonga в начале эксперимента снижались, а к его завершению не отличались от контрольных, кроме содержания каротиноидов, которое достоверно превышало таковое в контроле. Добавление 10 мг/л детергентов ингибировало рост и

физиологические процессы водоросли, особенно к концу опыта. Детергент "Обычный порошок" в концентрациях 0.1 и 1 мг/л не оказал влияния на подвижность клеток микроводоросли, а при внесении 10 мг/л токсиканта все клетки обездвиживались через 0.1 ч (рис. 6.).

Рис. 6. Процент подвижных клеток Plagioselmis prolonga при добавлении детергента "Обычный порошок" (мг/л): (1) - неподвижные клетки, (II) - подвижные клетки.

При этом детергент "Ariel" оказал более негативное воздействие на Р. prolonga, чем "Обычный порошок". Кроме того, детергент "Ariel" оказал существенное отрицательное воздействие и на подвижность клеток и скорость их движения: утрату подвижности у клеток наблюдали при всех уровнях содержания токсиканта через 0.1 ч опыта (рис. 7), количество неподвижных клеток возрастало с увеличением уровня содержания токсиканта в среде.

Рис. 7. Процент подвижных клеток Plagioselmis prolonga при добавлении детергента "Ariel" (мг/л): (I) - неподвижные клетки, (II) — подвижные клетки.

В наших экспериментах показано, что действие детергентов на водоросли носит незакономерный, фазный характер, такое же явление наблюдал и Л.П. Брагинский с соавторами (1987) в своих исследованиях.

Таким образом, наиболее чувствительными к действию ПАВ и детергентов оказались Р. prolonga и A. ussurensis, наименее - D. salina. Такие эксперименты являются модельными, позволяющими выявить отклик организма на исследуемый

загрязняющий агент. Однако в реальных условиях в морской воде содержится огромное количество токсикантов. На основе полученных данных мы предположили, что микроводоросли, проявив чувствительность к отдельным токсическим агентам, могут дать отклик и на комплекс загрязняющих веществ, содержащихся в морской воде. С этой целью мы предприняли попытку биотестирования морской воды из районов зал. Петра Великого с разной антропогенной нагрузкой: восточной части Амурского залива, где расположен крупный город-порт Владивосток; зал. Восток, испытывающего сезонное влияние отдыхающих, и юго-западной части зал. Петра Великого, куда впадает р. Туманная, поставляющая широкий спектр загрязняющих веществ. Необходимо отметить, при биотестировании отклонение от контроля как в сторону уменьшения численности клеток, так и в сторону увеличения несет негативное последствие для экосистем и сигнализирует о неблагополучном состоянии среды.

Ранее сотрудники ТИНРО-Центра для биотестирования вод Амурского залива и зал. Находка использовали мизид и предличинок анчоуса (Черкашин и др., 2004; Черкашин, Щеглов, 2004; Черкашин, Вейдеман, 2005), а данные по биотестированию вод с помощью микроводорослей отсутствуют.

В 2003 году качество вод из зал. Петра Великого оценивали с помощью D. salina. Показано, что в течение трех суток опыта численность клеток в воде, отобранной в акватории Амурского залива, была значительно выше такового в

Рис. 8. Динамика численности клеток Dunaliella salina (% к контролю) в воде из зал. Петра Великого в 2003 г. (а) - Амурский залив, (б) - зал. Восток, (в) - юго-западная часть зал. Петра Великого. Номера станций соответствуют приведенным на рис. 1.

С увеличением экспозиции происходило существенное отставание роста культуры микроводоросли в тестируемой воде по сравнению с контрольной, особенно ярко выраженное к концу опыта.

В воде со всех станций зал. Восток (4 - 6) число клеток в течение опыта было ниже такового в контроле (рис. 86).

Численность клеток в воде со всех станций юго-западной части зал. Петра Великого (станции 7 - 10) в течение 2-х сут была выше контрольной (рис. 8в). К концу опыта увеличение числа клеток становилось менее интенсивным, и их количество в воде со станций 8 и 10 сравнялось с таковым в контроле, а в воде со станций 7 и 9 отмечено отставание в росте.

Рис. 9. Динамика численности клеток Dunaliella salina (% к контролю) в воде из зал. Петра Великого в 2006 г. (а) -Амурский залив, (б) - зал. Восток, (в) -юго-западная часть зал. Петра Великого. Номера станций соответствуют приведенным на рис. 1.

В 2006 году проводили биотестирование воды из зал. Петра Великого с применением D. salina и Р. prolonga. В воде со всех станций в Амурском заливе через сутки после начала опыта наблюдали существенное увеличение количества клеток D. salina (рис. 9а), а на станциях 1 и 3 численность клеток практически не отличалась от контрольной на протяжении экспозиции. Иную картину наблюдали в воде со станции 2: через двое суток после начала эксперимента отмечено ингибирование роста D .salina и только к концу экспозиции численность клеток достигала контрольной.

В воде со всех станций из зал. Восток отмечено выраженное увеличение количества клеток микроводоросли в первые сутки опыта (рис. 96). В

последующие дни эксперимента численность клеток снижалась, и к концу опыта стабилизировалась, достоверно не отличаясь от контрольной.

В воде со всех станций в юго-западной части зал. Петра Великого через сутки отмечали стимуляцию роста D. salina (рис. 9в) также как при тестировании воды из Амурского залива и зал. Восток. Со второго дня экспозиции интенсивность роста микроводоросли снижалась. Однако начиная с 7-х сут численность клеток во всех вариантах опыта не значительно отличалась от контрольной.

Число клеток Р. prolonga снижалось уже в первые сутки в воде со всех станций в Амурском заливе по сравнению с таковым в контроле (рис. 10).

Динамика численности популяций была одинаковой в воде со станций 1 и 3 в течение четырех суток опыта, к 7-м сут в воде со станции 3 количество клеток восстанавливалось, но не достигало такового в контроле. В воде со станции 2 рост популяции был самым слабым и концу опыта число клеток составляло 0.6% от контроля. Тестируемая вода оказывала выраженное отрицательное воздействие также и на подвижность клеток Р.рго1оп%а\ обездвиженные клетки обнаруживались уже после 0.1 ч опыта. С увеличением экспозиции их процент возрастал и через 24 ч все клетки обездвиживались. Скорость движения клеток в воде со всех станций через 0.1 ч не отличалась от таковой в контроле, но уже через 2 ч скорость движения клеток снижалась. К концу опыта клетки в воде со всех станций были неподвижными.

Таким образом, проведенное биотестирование с применением микроводорослей подтверждает сведения о значительном загрязнении воды из районов зал. Петра Великого с разной антропогенной нагрузкой (Ващенко, 2000; Христофорова и др., 2002; Бабич, Бузолева, 2006; Лукьянова, 2006). Обращает на

Рис. 10. Динамика численности клеток Plagioselmis prolonga (% к контролю) в воде из Амурского залива. Номера станций

соответствуют приведенным на рис. 1.

себя внимание, что отклик Р prolonga и D salina на тестируемую воду был

неодинаков, что согласуется с полученными данными при определении степени

чувствительности организмов с применением бихромата калия

ВЫВОДЫ

1 Показано, что по убыванию чувствительности к бихромату калия исследованные одноклеточные водоросли можно расположить в следующий ряд Attheya ussurensis>Plagioselmis prolonga>Dunaliella salina

2 Установлено, что проведение оценки токсичности ПАВ и детергентов должно проводиться с использованием маточной культуры водоросли в экспоненциальной фазе роста в засевной концентрации клеток 4 х 104 кл/мл, с введением токсиканта в день постановки опыта

3 Наиболее негативное воздействие ПАВ и детергенты в опытах с D salina и Р prolonga оказывают на содержание хлорофилла а и каротиноидов и кислородную продуктивность, наименее - на изменение рН культуральной среды, численность клеток и скорость роста популяции Подвижность клеток Р prolonga и скорость их движения под действием токсикантов изменялась уже в начале опыта

4 Наиболее отрицательное воздействие ПАВ и детергенты в опытах с А ussurensis оказывают на численность клеток, скорость их роста и кислородную продуктивность микроводоросли, наименее - на изменение рН культуральной среды и содержание фотосинтетических пигментов

5 ПАВ и детергенты оказывают влияние на D salina, A ussurensis и Р prolonga при всех исследованных концентрациях Воздействие токсикантов усиливается с увеличением уровня их содержания в среде

6 Тестируемая вода из зал Петра Великого во всех случаях вызывала отклонение числа клеток D salina от контрольного, что подтверждает факт неблагополучного состояния акваторий залива

7 В воде из Амурского залива наблюдали выраженное ингибирование

популяции Р prolonga Подвижность клеток - наиболее чувствительна к действию

тестируемой воды Р prolonga является перспективным тест-объектом для оценки качества среды

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Статьи, опубликованные в ведущих рецензируемых научных журналах

Маркина Ж В, Айздайчер H A Dunaliella sahna (Chlorophyta) как тест-объект для оценки загрязнения морской среды детергентами // Биология моря 2005 Т 31, №4 С С 274-279

Айздайчер H А, Маркина Ж В Токсическое действие детергентов на водоросль Plagioselmis prolonga (Cryptophyta) // Биология моря 2006 Т 32, № 1 С 50-54

Журавель Е В , Маркина Ж В , Христофорова H К, Айздайчер H А Использование микроводоросли Dunaliella salma, эмбрионов и личинок плоского морского ежа Scaphechinus mirabilis как тест-организмов для оценки качества воды в заливе Петра Великого Японского моря // Биология моря 2006 Т 32, №3 С 188 - 196

Маркина Ж В, Айздайчер H А Влияние детергентов на динамику численности и физиологическое состояние бентосной микроводоросли Attheya ussurensis (Bacillanophyta) в лабораторной культуре // Биология моря 2007 Т 33, №6 С 432-439

Маркина Ж В Использование микроводоросли Plagioselmis prolonga для оценки качества воды из Амурского залива и залива Находка (Японское море) // Биология моря 2008 Т 34, № 1 С 35-41

Маркина Ж В, Айздайчер H А Биотестирование воды из зал Петра Великого (Японское море) с помощью микроводоросли Dunaliella salina II Экология 2008 №3 С 196-200

Работы, опубликованные в .материалах региональных, всероссийских и международных конференций

Воробьева Ж В , Айздайчер H А , Журавель Е В Зависимость действия детергента на микроводоросль Dunaliella sahna Teod (Chlorophyta) от возраста маточной культуры // V Региональная конференция по актуальным проблемам морской биологии и экологии студентов, аспирантов и молодых ученых Дальнего

Востока России (г Владивосток, 21-24 ноября 2002 г) Тез докл Владивосток Изд-во ДВГУ 2002 С 28-29

Воробьева Ж В Влияние додецилсульфата натрия на кислородную продуктивность микроводоросли Dunaliella salina Teod (Chlorophyta) // Тез докл 7-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых (г Пущино, 14-18 апреля 2003 г ) "Биология - наука XXI века" Пущино Пущинский научный центр РАН 2003 С 160-161

Маркина Ж В Анализ влияния детергента на различные виды микроводорослей // VII Дальневосточная молодежная школа-конференция по актуальным проблемам химии и биологии (МЭС ТИБОХ, 15-22 сентября 2003 г) Тез докл Владивосток ДВОРАН 2003 С 35-36

Маркина Ж В Действие додецилсульфата натрия на микроводоросли Dunaliella salina (Chlorophyta) и Gymnodmium kovalevskn (Dinophyta) // Тез докл VI Региональной конференции по актуальным проблемам морской биологии и экологии студентов, аспирантов и молодых ученых Дальнего Востока России (г Владивосток, 20-22 ноября 2003 г) Владивосток Изд-во ДВГУ 2003 С 61-62

Маркина Ж В Влияние синтетического моющего средства "Ariel" на рост микроводоросли Dunaliella salina II Тез докл Биология наука XXI века 8-я международная Пущинская школа-конференция молодых ученых (г Пущино, 1721 мая2004г) Пущино Пущинский научный центр РАН 2004 С 214

Маркина Ж В Влияние прибрежных вод г Владивостока на микроводоросль Dunaliella salina (Chlorophyta) // Научные труды международного биотехнологического центра МГУ тез докл 2-ой международной научной конференции "Биотехнология - охране окружающей среды" и 3-ей школы-конференции молодых ученых и студентов "Сохранение биоразнообразия и рациональное использование биологических ресурсов" (г Москва, 25-27 мая 2004 г) М Спорт и культура 2004 С 125

Markina Zh V Evaluation of water quality from the south-west part of Peter the Great Bay (Near The Tumen nver mouth using Dinahella salina Teod (Chlorophyta) // "Bridges of science between north America and the Russian Far East past, present and future" Proceedings of an international conference on the Arctic and North Pacific (Vladivostok, 14(h-16th September of2004) Vladivostok Dalnauka, 2004 P 54

Маркина Ж В Оценка влияния синтетического моющего средства "Ariel" на микроводоросль Plagioselmis prolonga (Cryptophyta) // Тез докл VII Региональной конференции по актуальным проблемам морской биологии и экологии студентов, аспирантов, молодых преподавателей и сотрудников ВУЗов и научных организаций Дальнего Востока России (г Владивосток, 18-20 ноября 2004) г Владивосток Изд-воДВГУ 2004 С 83-84

Маркина Ж В Оценка подвижности клеток микроводоросли как экспресс-метод определения степени токсического воздействия // Тез докл IX Молодежной школы-конференции по актуальным проблемам химии и биологии (МЭС ТИБОХ, 16-23 сентября 2005 г) Владивосток ДВОРАН 2005 С 37

Маркина Ж В Воздействие детергента «Ariel» на бентосную морскую микроводоросль Altheya usssurenis (Bacillanophyta) // X Международная молодежная Школа-конференция по актуальным проблемам химии и биологии, (МЭС ТИБОХ, 12-19 сентября 2006 г) Тез докл Владивосток ДВОРАН 2006 С 29

Маркина Ж В, Журавель Е В Биотестирование вод залива Находка (Японское море) // "Экологические проблемы использования прибрежных морских акваторий" Материалы междунар научно-практич конференции (г Владивосток, 26 - 28 октября 2006 г) Владивосток Изд-во Дальневост ун-та, 2006 С 136-139

Маркина Ж В Влияние детергента на физиологическое состояние планктонной и бентосной микроводорослей // "Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов" Материалы 2-ой научной конференции с участием стран СНГ (г Петрозаводск, 11-14 сентября 2007 г) Петрозаводск Карельский научный центр РАН, 2007 С 87-88

Маркина Ж В , Айздайчер Н А, Журавель Е В Биотестирование воды из Амурского залива с помощью культуры микроводоросли Phaeodactylum tricornutum Bohlin (Bacillanophyta) // Материалы междунар научно-практич конференции "Морская экология-2007" (г Владивосток, 2007, 3-5 октября 2007) Владивосток МГУ им Невельского 2007 С 152-156

МАРКИНА Жанна Васильевна

ПРИМЕНЕНИЕ МИКРОВОДОРОСЛЕЙ ДЛЯ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА МОРСКОЙ ВОДЫ И ДЕЙСТВИЯ ДЕТЕРГЕНТОВ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Зак № 93п Формат 60x84'/,6 Уел п л 1,0 Тираж 100 экз Подписано в печать 26 08 2008 г Печать офсетная с оригинала заказчика

Отпечатано в типографии ОАО «Дальприбор» 690105, г Владивосток, ул Бородинская, 46/50, тел 32-70-49 E-mail press-dpr@rambler ru

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Маркина, Жанна Васильевна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1 Состав детергентов, классификация поверхностно-активных веществ.

1.2 Источники и объемы поступления детергентов в водную среду.

1.3 Содержание поверхностно-активных веществ в морских водах.

1.4 Микроводоросли как объекты экотоксикологических исследований.

1.5 Влияние анионных ПАВ и детергентов на динамику численности микроводорослей в экспериментах.

1.6 Физиологические и биохимические реакции микроводорослей на действие анионных ПАВ и детергентов.

Глава 2. Материалы и методы.

Глава 3. Результаты.

3.1 Оценка чувствительности микроводорослей с помощью бихромата калия.

3.2 Токсичность додецилсульфата натрия для Dunaliella salina в зависимости от начальных показателей культуры микроводоросли.

3.3 Влияние поверхностно-активного вещества додецилсульфата натрия на Dunaliella salina.

3.4 Влияние детергентов на Dunaliella salina.

3.5 Влияние поверхностно-активного вещества додецилсульфата натрия на Attheya ussurensis.

3.6 Влияние детергентов на Attheya ussurensis.

3.7 Влияние поверхностно-активного вещества додецилсульфата натрия на Plagioselmis prolonga.

3.8 Влияние детергентов на Plagioselmis prolonga.

3.9 Оценка качества прибрежных морских вод залива Петра Великого с помощью микроводорослей Dunaliella salina и Plagioselmis prolonga.

Глава 4. Обсуждение.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Применение микроводорослей для оценки качества морской воды и действия детергентов"

Одноклеточные водоросли - важный компонент морских экосистем. Они одни из первых страдают от воздействия токсических веществ, что приводит к нарушению функционирования всей экосистемы (Патин, 1979; Эколого-токсикологические.,1985; Blasco et al., 2003). В морскую среду попадают различные токсиканты, в том числе детергенты и их основной компонент — поверхностно-активные вещества (ПАВ). Действие этих веществ на микроводоросли является многофакторным, что выражается в изменении функционирования клеток и их гибели. С другой стороны, наличие в составе детергентов фосфорных компонентов способствует евтрофикации, последствия которой ведут к увеличению числа клеток отдельных видов водорослей при одновременном снижении видового разнообразия (Lewis, Hamm, 1986; Брагинский и др., 1987; Паршикова, Негруцкий, 1988; Belanger et al., 2002; Lizotte et al., 2002; Wong et al., 2003).

В настоящее время в исследованиях с микроводорослями оценивается только влияние ПАВ, а не детергентов в целом (Aidar et al., 1997; Utsunomia et al., 1997a,b; Hampel et al., 2001; Morreno-Garrido et al., 2001; Sun et al., 2004 и др.). В связи с этим, наряду с изучением воздействия отдельных ПАВ необходимо оценивать воздействие детергентов (Патин, 1979; Lewis, 1992; Жмур, 1997; Pettersson et al., 2000; Остроумов, 2001). При этом важно исследовать действие токсических агентов как на рост, так и на физиологическое состояние одноклеточных водорослей.

Среди огромного разнообразия микроводорослей наиболее часто для оценки действия веществ применяются обитающие в планктоне водоросли отдела Chlorophyta, в то время как представители других отделов остаются малоизученными (Lewis et al., 1990а, Hampel et al., 2001), что особенно касается бентосных микроводорослей (Morreno-Garrido et al., 2003а,b).

Загрязнение морской воды является комплексным и, следовательно, оценку его характера и действия можно провести только с помощью биотестирования, которое средством получения принципиально новой информации о загрязнении (Флеров, 1983; Крайнюкова, 1988; Жмур, 1997; Черкашин, 2001; Терехова, 2003). Одноклеточные водоросли, вследствие круглогодичной доступности и высокой чувствительности, широко применяются в качестве тест-объектов при биотестировании (Walsh, Games, 1983; Крайнюкова, 1988; Lewis, 1995; Жмур, 1997; Руководство, 2002). В то же время микроводоросли для биотестирования вод зал. Петра Великого Японского моря до настоящего времени не использовали.

В связи с вышеизложенным очевидна актуальность исследования влияния ПАВ и детергентов на микроводоросли, а также возможность применения данных организмов в качестве тест-объектов для биотестирования прибрежных морских вод.

Цель работы заключалась в изучении действия детергентов и прибрежных вод зал. Петра Великого Японского моря на микроводоросли разных систематических групп.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

1. Исследовать чувствительность микроводорослей Dunaliella salina

Teod. (Chlorophyta), Plagioselmis prolonga Butch. (Cryptophyta), Attheya ussurensis Stonik, Orlova & Crawford (Bacillariophyta) к модельному токсиканту бихромату калия.

2. Выявить, используя в качестве модельного объекта D. salina, оптимальные условия опыта (возраст, численность клеток, время введения токсиканта) для изучения влияния ПАВ и детергентов и оценки качества вод.

3. Исследовать действие поверхностно-активного вещества и детергентов на динамику численности клеток, скорость их роста, изменение рН культуральной среды, содержание хлорофилла а и каротиноидов и кислородную продуктивность микроводорослей D. salina, A. ussurensis, Р. prolonga.

4. Исследовать действие поверхностно-активного вещества и детергентов на подвижность клеток Р. prolonga и скорость их движения.

5. Показать возможность биотестирования прибрежных вод зал. Петра

Великого с помощью микроводорослей D. salina и Р. prolonga.

Личное участие в получении научных результатов. Личное участие заключалось в планировании опытов. Самостоятельно проводила экспериментальные работы, интерпретировала полученные данные и формулировала научные выводы. Все заимствованные данные, использованные в работе, имеют ссылки на их источники.

Научная новизна: впервые оценена степень чувствительности микроводорослей D. salina, Р. prolonga и A. ussurensis по их реакции на модельный токсикант бихромат калия. Исследовано применение новых тест-объектов: микроводорослей Р. prolonga и A. ussurensis при изучении действия ПАВ и детергентов, а также качества морских вод на примере зал. Петра Великого Японского моря. Установлено, что подвижность клеток Р. prolonga - наиболее чувствительный показатель к действию ПАВ и детергентов, который может быть использован для тестирования морской воды.

Практическая значимость: полученные сведения пополняют знания о действии ПАВ и детергентов на микроводоросли. Эти данные могут быть использованы при разработке систем оценки действия ПАВ и детергентов. Данные, полученные в ходе биотестирования прибрежных вод зал. Петра Великого с помощью микроводорослей, дают дополнительную информацию о свойствах загрязнения прибрежных вод залива и их действия на морскую биоту. Они могут быть использованы при проведении мониторинга качества морских вод и при оценке среды в районах развития марикультурных хозяйств. Разработанные методики по определению действия ПАВ и детергентов применяли на практических работах в курсе "Большой практикум" для студентов-экологов.

Защищаемые положения:

1. ПАВ и детергенты оказывают влияние на D. salina, A. ussurensis и Р. prolonga в концентрациях 0.1, 1 и 10 мг/л. Воздействие токсикантов усиливается с возрастанием их концентраций.

2. Наиболее чувствительным показателем действия ПАВ и детергентов является подвижность клеток Р. prolonga, что позволяет использовать ее для оценки качества морских вод.

Апробация работы. Результаты и основные положения работы докладывались на V, VI, VII Региональных конференциях по актуальным проблемам морской биологии, экологии и биотехнологии (Владивосток, 2002; 2003; 2004), VII и IX международной Пущинской школе-конференции молодых ученых (Пущино, 2004, 2005), Международной конференции "Bridges of science between north America and the Russian Far East: past, present and future" (Владивосток, 2004), IX и X дальневосточных молодежных школах-конференциях по актуальным проблемам химии и биологии (Владивосток, 2005; 2006), II Международной конференции "Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов" (Петрозаводск, 2007) и ежегодных конференциях ИБМ ДВО РАН (2003; 2004; 2005; 2006; 2007; 2008).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 19 научных работ.

Работа выполнена при финансовой поддержке гранта Фонда содействия отечественной науке (2007; 2008 гг.).

Структура и объем работы. Диссертационная работа изложена на 122 страницах и состоит из введения, четырех глав, выводов и списка литературы (191 источник, из них 87 иностранных). Работа включает 6 таблиц и 23 рисунка.

Заключение Диссертация по теме "Гидробиология", Маркина, Жанна Васильевна

Выводы

1. Показано, что по убыванию чувствительности к бихромату калия исследованные одноклеточные водоросли можно расположить в следующий ряд Attheya ussurensis>Plagioselmis prolonga>Dunaliella salina.

2. Установлено, что проведение оценки токсичности ПАВ и . детергентов должно проводиться с использованием маточной культуры водоросли в экспоненциальной фазе роста в засевной концентрацию клеток 4 х 104 кл/мл; с введением токсиканта в день постановки опыта.

3. Наиболее негативное воздействие ПАВ и детергенты в опытах с D. salina и Р. prolonga оказывают на содержание хлорофилла а и каротиноидов и кислородную продуктивность, наименее — на изменение рН культуральной среды, численность клеток и скорость роста популяции. Подвижность клеток Р. prolonga и скорость их движения под действием токсикантов изменялась уже в начале опыта.

4. Наиболее отрицательное воздействие ПАВ и детергенты в опытах с A. ussurensis оказывают на численность клеток, скорость их роста и кислородную продуктивность микроводоросли, наименее - на изменение рН культуральной среды и содержание фотосинтетических пигментов.

5. ПАВ и детергенты оказывают влияние на D. salina, A. ussurensis и Р. prolonga при всех исследованных концентрациях. Воздействие токсикантов усиливается с увеличением уровня их содержания в среде.

6. Тестируемая вода из зал. Петра Великого во всех случаях вызывала отклонение числа клеток D. salina от контрольного, что подтверждает факт неблагополучного состояния акваторий залива.

7. В воде из Амурского залива наблюдали выраженное ингибирование популяции Р. prolonga. Подвижность клеток — наиболее чувствительна к действию тестируемой воды. Р. prolonga является перспективным тест-объектом для оценки качества среды.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Маркина, Жанна Васильевна, Владивосток

1. Айздайчер Н.А. Влияние детергентов и совместное действие детергентов и опреснения на Pseudonitzshia pungens (Grun.) Hasle (Bacillariophyta) // Альгология. 2000. Т. 10, № 2. С. 139 145.

2. Айздайчер Н.А., Малынова С.И., Христофорова Н.К. Влияние детергентов на рост микроводорослей // Биол. моря. 1999. Т. 25, № 3. С. 234— 238.

3. Айздайчер Н.А., Маркина Ж.В. Токсическое действие детергентов на водоросль Plagioselmis prolonga (Cryptophyta) // Биол. моря. 2006. Т. 32, № 1. С. 50-54.

4. Айздайчер Н.А., Реунова Ю.А. Влияние детергентов на рост диатомовой водоросли Thalassiosira pseudonarta в культуре // Биол. моря. 2002. Т. 28, № 5. С. 362 365

5. Акимова Т. И., Капустина А. А. Практическое использование химических веществ и материалов. Владивосток: Изд-во Дальневосточного государственного университета. 1998. С. 92— 105.

6. Апашева Л.М., Буджиашвили Д.М., Мурза Л.И., Найдич В.И., Богданов Г.Н., Эмануэль Н.М. Изменения парамагнитных свойств хлореллы подвлиянием токсичных химических соединений // Докл. АН СССР. 1976. Т. 228, №3. С. 723-725.

7. Артюхова В.И., Дмитриева А.Г., Филенко О.Ф., Изцюнь Ч. Влияние бихромата калия на динамику роста культуры и размеры клеток Scenedesmus quadricauda (Тиф.) Bréb. в различные сезоны года // Альгология 1996. Т. 6., № 1.С. 26-34.

8. Артюхова В.И., Дмитриева А.Г., Филенко О.Ф., Изцюнь Ч. Последствие действия бихромата калия на культуру Scenedesmus quadricauda (Тиф.) Bréb. (Chlorophyta) при изменениях токсической нагрузки // Альгология. 1996. Т. 6., № 2. С. 142 149.

9. Артюхова В.И., Дмитриева А.Г., Филенко О.Ф., Изцюнь Ч. Изменения динамики роста культуры и размеров клеток культуру Scenedesmus quadricauda (Тиф.) Breb. при действии бихромата калия // Изв. Ан. Сер. Биол. 1997, № 3. С. 280 286.

10. Бегун А.А. Состав, количественные характеристики и сезонная динамика микроводорослей планктона и перифитона в зал. Петра Великого (Японское море). Дисс.канд. биол. наук. Владивосток, 2006 24 с.

11. Бекова Н.В., Журавель. Е.В., Христофорова Н.К. Влияние опреснения и детергента додецилсульфата натрия на раннее развитие плоского морского ежа Scaphechinus mirabilis //Биол. моря. 2004. Т. 30, № 3. С. 208 214.

12. Балаян А.Е., Стом Д.И. Метод биотестирования по обездвиживанию клеток водорослей дуналиеллы // Методы биотестирования вод. Черноголовка. 1988. С. 26 30.

13. Божков А.И. Ограничения в использовании водорослей как объектов биохимических исследований и экотоксикологического тестирования // Альгология. 1999. Т. 9, № 2. С. 18.

14. Брагинский Л.П., Величко И.М., Щербань Э.П. Пресноводный планктон в токсической среде. Киев: Наукова думка. 1987. 180 с.

15. Вастернак К., Остроумов С.А. Воздействие загрязнения водной среды CMC "Био-С" на эвглену // Гидробиол. журн. 1990. Т. 26, № 6. С. 78 79.

16. Владимиров A.M., Ляхин Ю. И., Матвеев Л. Т., Орлов В. Г. Охрана окружающей среды. Л.: Гидрометеоиздат. 1991. 423 с.

17. Ващенко М.А. Влияние дисперсантов на эмбриональное развитие морского ежа Strongylocentrotus nudus II Биол. моря. 1978. № 5. С. 56 62.

18. Ващенко М.А. Загрязнение залива Петра Великого Японского моря и его биологические последствия // Биол. моря. 2000. Т. 26, № 3. С. 149 — 159.

19. Вода. Методика спектрофотометрического определения хлорофилла а // Гос. стандарт СССР. Гос. ком. СССР по охране природы. М.: Изд-во стандартов. 1990. 15 с.

20. Волошко Л.Н., Титова H.H., Громов Б.В. Влияние ионов тяжелых металлов на движение клеток Ochromonas ovalis Dolf. (Chrysophyta) II Альгология. 1996. Т. 6, № 3. С. 242-248.

21. Волощенко О.И., Мудрый И.В. Гигиеническое значение поверхностно-активных веществ. Киев: Здоров'я. 1991. 173 с.

22. Тапочка Л.Д. Об адаптации водорослей. М.: МГУ. 1981. 80 с.

23. Гапочка Л.Д., Веселаго И.А., Левина М.З. Адаптивные реакции популяций водорослей на воздействие токсических веществ // Биол. науки. 1987. №3. С. 74-80

24. Гапочка Л.Д., Шавырина О.Б. Популяционные аспекты устойчивости микроводорослей к токсическим воздействиям // Альгология. 1999. Т. 9, № 2. С. 31.

25. Государственный доклад "О состоянии окружающей природной среды Российской Федерации в 1998 году". М.: Государственный комитет РФ по охране окружающей среды. 1999. С 44 50.

26. Губанов В. И., Крутько О. Ф., Монина Л. Т., Рябинин А. И., Шибаева С.А. Состояние загрязнения и гидрохимические условия вод взморья у реки Дунай // Метеорология и гидрология. 1996. № 2. С. 78-85.

27. Долговременная программа охраны природы и рационального использования природных ресурсов Приморского края до 2005 г. Экологическая программа. Часть 2. Владивосток: Дальнаука. 1992. 276 с.

28. Дятлов С.Е., Петросян А.Г. Норма реакции лабораторной культуры Phaeodactylum tricornutum Bohl. на абиотические факторы. 1.чувствительность к стандартному токсиканту бихромату калия // Альгология.2000. Т. 10, № 1.С. 32-35.

29. Григорьева Н.И., Мощенко А.В., Пропп Л.Н., Фельдман K.JL Изучение водного переноса и гидрохимических условий северной части акватории, прилегающей к устью реки Туманной // Изв. ТИНРО. 1998. Т. 123. С. 423 -430.

30. Григорьева Н.И., Христофорова Н.К. Эколого-гидрологические черты западной части залива Петра Великого // Проблемы региональной экологии.2001. №5. С. 49-58.

31. Ежегодник качества морских вод по гидрохимическим показателям (Японское море) за 1985 год. Владивосток. 1986. 106 с.

32. Ежегодник качества морских вод по гидрохимическим показателям (Японское море) за 1987 год. Владивосток. 1988. 162 с.

33. Ежегодник качества морских вод по гидрохимическим показателям (Японское море) за 1988 год. Владивосток. 1989. 48 с.

34. Жмур Н.С. Государственный и производственный контроль токсичности вод методами биотестирования в России. М.: Международный дом сотрудничества. 1997. 117 с.

35. Зимина Л.М, Сазыкина Т.Г. Выделение экзометаболитов микроводорослями как механизм регуляции плотности популяции // Гидробиол. журн. 1987. Т. 23, № 4. С. 50-55.

36. Иващенко Э.А. Циркуляция вод залива Петра Великого // География исследования шельфа Дальневосточных морей. Владивосток: Изд-во Дальневосточного Государственного университета. 1993. С. 31 61.

37. Кабанова Ю.Г. О культивировании в лабораторных условиях морских планктонных диатомовых и перидиниевых водорослей // Тр. ИО АН СССР. 1961. Т. 47. С. 203-216.

38. Капков В.И. Метод определения хронической токсичности сточных вод с использованием зеленых водорослей // Методы биотестирования вод. Черноголовка. 1988. С. 89-94.

39. Капустина A.A., Акимова Т.И. Практическое использование химических веществ и материалов. Владивосток: Изд-во Дальневосточного государственного университета. 1998. С. 92- 105.

40. Кашенко В.П. Биологическая станция Восток // Биологические исследования зал. Восток. Владивосток: ДВНЦ АН СССР. 1976. № 5. С. 5 -11.

41. Ковековдова Л.Т., Симоконь М.Н. Тенденции изменения химико-экологической ситуации в прибрежных акваториях Приморья. Токсичные элементы в донных отложениях и гидробионтах // Известия ТИНРО. 2004. Т. 137. С. 310-320.

42. Коновалова Г.В., Орлова Т.Ю., Паутова Л.А. Атлас фитопланктона Японского моря. Л.: Наука, 1989. 160 с.

43. Коновалова Г.В. "Красные приливы" и "цветение" воды в дальневосточных морях России и прилегающих акваториях // Биол. моря. 1999. Т. 25, № 4. С. 263 273.

44. Кравченко М.Е., Тапочка JI. Д. О токсическом действии детергентов на культуру Synechocystis aquatilis II Вестн. МГУ. Сер. биол. 1976. № 4. С.73-77.

45. Крайнюкова А.Н. Биотестирование в охране вод от загрязнения // Методы биотестирования вод. Черноголовка. 1988. С. 4 — 21.

46. Кузьминова Н.С. Исследования токсического действия фунгицида купороксата на Platymonas viridis Rouch. (Chlorophyta) II Альгология. 2004. Т. 14, №2. С. 127-136.

47. Куликова В.А., Омельяненко В.А., Тарасов В.Г. Меропланктон бухты Гайдамак (зал. Восток, Японское море) в условиях загрязнения // Экология. 2004. №2. С. 113-120.

48. Ленова Л.И., Ставская С.С., Ратушная М.Я. Влияние додецилсульфата натрия на одноклеточные зеленые водоросли рода Chlorella II Гидробиол. журн. 1980. Т. 16, № 3. С. 83-87.

49. Липницкая Г.П., Паршикова Т.В., Топалова Е.К. Влияние хлорного додецилсульфата натрия на рост хлореллы и макроцистиса в культуре // Гидробиол. журн. 1989. Т. 25, № 2. С. 63-66.

50. Лоция северо-западного берега Японского моря от реки Туманная до мыса Белкина. М.: ГУНиО. 1984. 316 с.

51. Лукьянова О.Н. Молекулярные биомаркеры энергетического метаболизма мидий при антропогенном загрязнении зал. Петра Великого Японского моря // Экология. 2006. № 3. С. 227 231.

52. Лучин В.А., Тихомирова Е.А., Круц A.A. Океанографический режим вод залива Петра Великого (Японское море) // Известия ТИНРО. 2005. Т. 140. С. 130-169.

53. Маркина Ж.В. Использование микроводоросли Plagioselmis prolonga для оценки качества воды из Амурского залива и залива Находка (Японское море) // Биол. моря. 2008. Т. 34, № 1. С. 35 41.

54. Маркина Ж.В., Айздайчер H.A. Dunaliella salina как тест-объект для оценки загрязнения морской среды детергентами // Биол. моря. 2005. Т. 31, №4. С. 274-279.

55. Маркина Ж.В., Айздайчер H.A. // Влияние детергентов на динамику численности и физиологическое состояние бентосной микроводоросли Attheya ussurensis (Bacillariophyta) в лабораторной культуре IIБиол. моря. 2007. Т. 33. № 6. С. 432 439

56. Масюк Н.П. Морфология, систематика, экология, географическое распространение рода Dunaliella Teod. Киев: Наукова думка. 1973. 241 с.

57. Масюк Н.П., Посудин Ю.И. Влияние pH среды на параметры фотодвижения Dunaliella salina Teod. (Chlorophyta) II Альгология. 2007. Т. 17, № l.C. 14-20.

58. Медянкина M.B. Экотоксикологическая оценка донных отложений загрязняемых водных объектов. Автореферат дисс. канд. биол. наук. Москва. 2007. 25 с.

59. Метелев В.В., Канаев А.И., Джасохова Н.Г. Водная токсикология. М.: Колос. 1971.247 с.

60. Методические указания по установлению эколого-рыбохозяйственных нормативов (ПДК и ОБУВ), загрязняющих веществ для воды, водных объектов, имеющих рыбохозяйственное значение. М.: ВНИРО. 1998. 148 с.

61. Методы физиолого-биохимического исследования водорослей в гидробиологической практике. Под ред. А. В. Топачевского. Киев: Наукова думка. 1975. 247 с.

62. Михайлов В.И. Поверхностно-активные вещества на границе океан-атмосфера // Тр. ГОИН. Вып. 203. М.: Гидрометеоиздат. 1992. С. 33 39.

63. Мудрый И.В. Охрана источников водоснабжения от синтетических поверхностно-активных веществ (обзор) // Гигиена и санитария. 1996. № 4. С. 6-8.

64. Наумов Ю.А., Найденко Т.Х. Экологическое состояние залива Находка // Известия ТИНРО. 1997. Т. 122. С. 524 537.

65. Наумов Ю.А. Антропогенез и экологическое состояние геосистемы прибрежно-шельфовой зоны залива Петра Великого Японского моря. Владивосток: Дальнаука. 2006. 300 с.

66. Нестерова P.A. Рост Dunaliella tertiolecta Teod. (Chlorophyta) в среде с аскорбиновой кислотой и бихроматом калия // Альгология. 1996. Т. 6, № 4. С. 361-367.

67. Никифоров М.В. Оценка воздействия кадмия, цинка, всинца на выживаемость предличинок длиннорылой камбалы и японского анчоуса и перспективы их использования как тест-объектов. Автореф. дис. . канд. биол. наук. Владивосток. 2005. 19 с.

68. Огородникова A.A., Вейдеман E.JI. Силина Э.И., Нигматулина JI.B. Оценка влияния антропогенной нагрузки на биоресурсы Амурского залива // Водные ресурсы. 1997а. Т. 24, № 5. С. 624 629.

69. Огородникова A.A., Вейдеман E.J1. Силина Э.И., Нигматулина JI.B. Воздействие береговых источников загрязнения на биоресурсы залива Петра Великого (Японское море) // Известия ТИНРО. 19976. Т. 122. С. 430 450.

70. Олейник Е.В., Мощенко A.B., Тишавская Т.С. Влияние загрязнения донных отложений на видовой состав и обилие двустворчатых моллюсков в заливе Петра Великого Японского моря // Биол. моря. 2004. Т. 30, № 1. С. 39 -45.

71. Остроумов С.А. Биологические эффекты при воздействии поверхностно-активных веществ на организмы. М.: МАКС Пресс. 2001. 344 с.

72. Остроумов С.А., Борисова Е.В., Ленова Л.И., Максимов В.Н. Воздействие сульфонола на культуру водоросли Dunaliella asymmetrica и на проростки Fagopyrum esculentum II Гидробиол. журн. 1990. Т. 26, № 2. С. 96 — 98.

73. Остроумов С.А., Вастернак К. Реагирование фотоорганотрофно растущих зеленых жгутиковых на загрязнение водной среды CMC "Кристалл" // Вестник МГУ. Сер. биол. 1991. № 2. С. 67 69.

74. Остроумов С.А., Галяма Д., Блажей А., Леготский И., Слугень Д. Синтетические моющие средства (CMC) "Кристалл" и "Лотос-Автомат" // Токсикологический вестник. 1998. № 5. С. 29 — 30.

75. Остроумов С.А., Колотилова H.H. Синтетическое моющее средство "ОМО" // Токсикологический вестник. 2000. № 5. С. 43 44.

76. Отчет по проекту "Комплексная экологическая оценка влияния стока реки Туманной на прибрежные акватории Российской Федерации" (по результатам морских- экспедиционных работ в 1997 г.). Владивосток: ИБМ ДВОРАН. 1997. 133 с.

77. Паршикова Т.В. Участие поверхностно-активных веществ в регулировании развития микроскопических водорослей // Гидробиол. журн. 2003. Т. 39, № 1.С. 64-70.

78. Паршикова Т.В. Веселовский В.В., Веселова Т.В., Дмитриева А.Г. Влияние поверхностно-активных веществ на функционирование фотосинтетического аппарата хлореллы // Альгология. 1994. Т. 4, № 1. С. 3846.

79. Паршикова Т.В., Негруцкий С.Ф. Влияние поверхностно-активных веществ на водоросли (обзор) // Гидробиол. журнал. 1988. Т. 24, № 6. С. 46 -58.

80. Подорванова Н.Ф., Ивашинникова Т.С., Петренко B.C., Хомичук Л.С. Основные черты гидрохимии залива Петра Великого (Японское море). Владивосток: ДВГУ проблемная лаборатория по изучению и освоению шельфа Дальневосточных морей. 1989. С. 5 114.

81. Патин С.А. Влияние загрязнения на биологические ресурсы и продуктивность Мирового океана. М.: Пищевая пром-ть. 1979. 303 с.

82. Перечень предельно допустимых концентраций и ориентировочно безопасных уровней воздействия вредных веществ для воды рыбохозяйственных водоемов. М.: Роскомрыболовство, Мединор. 1995. 220 с.

83. Петросян А.Г. Биотестирование морской воды и донных отложений северо-западной части Черного моря. Автореферат дисс. канд. биол. наук. Севастополь. 2000. 20 с.

84. Плеханов С.Е., Чемерис Ю.К. Ранние эффекты токсического действия цинка, кобальта на фотосинтическую активность водоросли Chlorella pyrenoidosa Chick S-39 // Известия АН. Сер. биол. 2003. №5.С.610-616.

85. Равзиева Г.М. Ранжирование опасности осадков сточных вод для организмов различного уровня организации. Автореферат дисс. канд. биол. наук. Казань. 2003. 19 с.

86. Реунова Ю.А., Айздайчер H.A. Влияние детергента на содержание хлорофилла а и динамику численности у микроводоросли Chroomonas salina (Wils.) Butch. (Cryptophyta) // Альгология. 2004. Т. 14, № 1. С. 32 38.

87. Рудик В.Ф., Грамма С.Б., Гуля А.П. Влияние координационных соединений металлов на продуктивность и биохимический состав Dunaliella salina Teod.// Альгология. 1995. Т. 5, № 1. С. 95-101.

88. Руководство по методам химического анализа морских вод. JL: Гидрометеоиздат. 1977. 208 с.

89. Руководство по определению методом биотестирования токсичности вод, донных отложений, загрязняющих веществ и буровых растворов. М: РЭФИА, НИА Природа. 2002. 118 с.

90. Сакевич А.И., Хамар И.С. Изменчивость функциональной активности и состава внеклеточных карбоновых кислот некоторых видов водорослей // Альгология. 1997. Т. 7, № 2. С. 115-125

91. Самойлова Т.А. Отдаленные эфффекты токсичного загрязнения среды на солоноводных беспозвоночных в культуре. Автореферат дисс. канд. биол. наук. Москва. 2006. 23 с.

92. Саркисова С.А., Скрипник И.А. Моделирование влияния загрязняющих веществ на продуцирование органического вещества фитопланктоном в опытах in situ // Океанология. 1987. Т. 27. Вып. 2. С. 234 237.

93. Селях И.О., Минеева JI.A., Гусев М.В. Особенности ультраструктуры клеток Cyanidium caldarium на разных стадиях роста переодической культуры // Сер. биол. 1984. № 1. С. 74 81.

94. Ставская С. С. Биологическое разрушения анионных ПАВ. Киев: Наукова думка. 1981. 226 с.

95. Степанов В. В. Характеристика температуры и солености вод зал. Восток Японского моря // Биологические исследования залива Восток. Владивосток: ДВНЦ АН СССР. 1976. № 5. С. 12 22.

96. Стом Д.И., Балаян А.Э., Кобжицкая Н.З., Кожова О.М. Обездвиживание клеток Dunaliella salina как критерий токсического действия // Гидробиол. жури. 1984. Т. 20, № 5. С. 46 49.

97. Стоник И.В. Фитопланктон Амурского залива (Японское море) в условиях евтрофирования. Автореф. дис. . канд. биол. наук. Владивосток. 1999.26 с.

98. Стоник И.В., Селина М.С. Фитопланктон как показатель трофности вод залива Петра Великого Японского моря // Биол. моря. 1995. Т. 21, № 6. С. 403 -406.

99. Стоник И.В., Орлова Т.Ю. Летне-осенний фитопланктон в Амурском заливе Японского моря // Биол. моря. 1998. Т. 24, № 4. С. 205 -211.

100. Терехова В.А. Биотестирование как метод определения класса опасности отходов // Экология и промышленность России. 2003. Декабрь. С. 27-29.

101. Ткалин A.B. Фоновый уровень содержания некоторых органических загрязняющих веществ в водах Тихого Океана // Океанология. 1988. Т. 28. Вып. 6. С. 958.

102. Ткаченко Ф.П., Куцын Е.Б. Влияние детергентов на аминокислотный состав белка зеленой водоросли Cladophora vagabunda (L.) Hoek // Гидробиол. журн. 2002. Т. 38, № 3. С. 94 98.

103. Тюрин А.Н., Христофорова Н.К. Оценка пригодности хитона Lepidozona albrechti как биотеста загрязнения морской воды тяжелыми металлами и детергентами // Биол. моря. 1993. № 3. С. 97 105.

104. Тюрин А. Н. Морской заказник "Залив Восток" // Биол. моря. 1996. Т. 22, № 1. С. 58-63.

105. Федулова А.Н., Хромов В.М., Максимов В.Н. Влияние некоторых детергентов, применяемых для борьбы с нефтяным загрязнением, на протококковые водоросли // Науч. докл. высш. шк. 1976. № 5. С. 90 95.

106. Флеров Б.А. Биотестирование: терминология, задачи, перспективы // Теоретические вопросы биотестирования. Волгоград: АН СССР Институт биологии внутренних вод. 1983. С. 13 -20.

107. Хасанова Л.А., Иванов А.Ю., Маркелия Л.Ю., Хасанова З.М. Сравнительное изучение чувствительности представителей Cyanophyta и Rhodophyta к действию анионного детергента // Альгология. 1999. Т. 9, № 2. С. 149.

108. Химическая энциклопедия: в 5 т. Т. 4./ Редколл.: Кнунянц И. Л. (гл. ред.) и др. М.: Сов. энцикл. 1994. С. 353 355.

109. Химия океана. Под ред. Монина А. С. М.: Наука. 1979. Т. 1. 390 с.

110. Хит О. Фотосинтез (физиологические аспекты). М.:Мир. 1972. 314 с.

111. Хоботьев В.Г., Король K.M. Изменение активной реакции (pH) среды как показатель состояния водорослей при токсическом действии на них химических веществ // Методики биол. исслед. по водн. токсикологии. М.: Наука. 1971. С. 106- 107.

112. Христофорова Н.К., Айздайчер H.A., Березовская О.Ю. Действие ионов меди и детергента на зеленые микроводоросли Dunaliella tertiolecta и Platymonas sp. II Биол. моря. 1996. Т. 22, № 2. С. 114 119.

113. Христофорова Н.К., Журавель Е.В., Миронова Ю.А. Рекреационное воздействие на залив Восток (Японское море) // Биол. моря. 2002. Т. 28, № 4. С. 300-303.

114. Черкашин С.А. Биотестирование: терминология, задачи, основные требования и применение в рыбохозяйственной токсикологии // Известия ТИНРО. 2001. Т. 128. С. 1020- 1035.

115. Черкашин С.А., Вейдеман E.JI. Экотоксикологический анализ состояния прибрежных экосистем залива Петра Великого (Японское море) // Вопросы рыболовства. 2005. Т. 6, № 4. С. 637 652.

116. Черняев А.П., Лукьянова О.Н.,Черкашин С.А. Распределение нефтяных углеводородов и оценка состояния биоты в Амурском заливе (Японское море) // Экологическая химия. 2006. Т. 15, № 1. С. 28 38.

117. Шадрина JI.A. Экотоксикологическое картирование морских прибрежных вод методом биотестирования // Гидробиол. журн. 1997. Т. 33, №6. С. 50-55.

118. Шапоренко С.И. Загрязнение прибрежных морских вод России // Водные ресурсы. 1997. Т. 24, № 3. С. 320 327.

119. Шляхтер Т.А. Реакция клеток мерцательного эпителия мидий на действие различных химических агентов // Цитология. 1967. Т. 9, № 4. С. 425 -431.

120. Шулькин В.М. Оценка загрязнения металлами реки Туманной и прилегающих морских вод // Экологическое состояние и биота юго-западной части залива Петра Великого и устья реки Туманной. Т. 1. Владивосток: Дальнаука. 2000. С. 76-85.

121. Эколого-токсикологические аспекты загрязнения морской среды. Под ред. Патина С. А. Д.: Гидрометеоиздат. 1985. 116 с.

122. Юркова И.Н. Влияние ПАВ на гетерокоагуляцию и биосорбцию микроводоросли Chlorella vulgaris Beijer. JIapr-3 (Chlorophyta) с золями и ионами тяжелых металлов // Альгология. 1999. Т. 9, № 2. С. 167 168.

123. Aidar Е., Sigaud-Kuther T.C.S., Nishihara L., Schinke K.P., Braga M.C.C., Farah R.E., Kuther M.B.B. -Marine phytoplankton assays: effect of detergents // Mar. Envir. Res. 1997. Vol. 43. No. 1 2. P. 55 - 68.

124. Belan T.A. Benthos abundance pattern and species composition in conditions of pollution in Amursky bay (the Peter the Great Bay, the Sea of Japan) //Mar. Pollut. Bull. 2003. Vol. 46. P. 1111 1119.

125. Belan T.A. Polychaete taxocenes variability associated with sediment pollution loading in the Peter the Great Bay (the Eas Sea/Japan Sea) // Ocean Science Journal. 2005. Vol. 40, No. P. 1 10.

126. Bester K., Theobald N., Schroder H. Fr. Nonylphenols, nonylphenol-ethoxylates, linear alkylbenzenesulfonates (LAS) and bis (4-chlorphenyl)-sulfone in the German Bight of the North Sea 11 Chemosphere. 2001. Vol. 45. P. 817 826.

127. Blasco J., Hampel M., Moreno-Garrido I. Toxicity of surfactants for aquatic life // Analysis and Fate of Surfactants in the Aquatic Environments. Amsterdam, The Netherlands: Elsevier, 2003. Eds. T. P. Knepper, D. Barcelo, P. de Voogt. P. 827 867.

128. Butcher R.W. An introductory account of the smaller algae of British Coastal Waters. Part IV: Cryptophyceae // Fishery Inverstigat, Ser. IV. London. 1967. P. 18-36.

129. Cain J.R., Costello R. Algal assay and chemical analysis: comparative study of water quality assessment techniques in a polluted river // Envir. Pollut. 1979. Vol. 19. P. 215-224.

130. Canton J.H., Sloof W. Substitutes for phosphate containing washing products: their toxicity and biodegradability in the aquatic environment // Chemosphere. 1982. Vol. 11, No. 9. P. 891 907.

131. Chawla G., Viswanathan P.N., Devi S. Biochemical studies on the toxicity of linear alkylbenzene sulphonate to Scenedesmus quadricauda in culture // Envir. Exp. Botany. 1987. Vol. 27, No. 3. P. 311 323.

132. Cosovic B., Giglenecki I. Surface active substances in the Eastern Mediterranean // Croat. Chem. Acta. 1997. Vol. 70, No.-1. P. 361 371.

133. Corre G., Templier J., Largeau C. Influence of cell wall composition on the resistance of two Chlorella species (Chlorophyta) to detergents // J. Phycol. 1996. Vol. 32. P. 584 590.

134. Davis E.M., Gloyna E.F. The role of algae in degrading detergent surface active agents // J. WPCF. 1969. Vol. 41, No. 8. P. 1494 1504.

135. Dieguez-Rojo E., Gonzalez L. Effects of allelochemical 2-benzoxazolinone on growth, pigment content and cell appearance of Tetraselmis suecica (Kylin) Butch. // Thalassas. 2003. Vol. 19. P. 13 22.

136. Dhaliwal A.S., Campione A., Smaga S. Effect of linear alkylbenzene sulfonate (11.2 LAS) on the morphology and physiology of Plectonema boryanum and Chlamydomonas reinhardi II J. Phycol. 1977. Vol. 13 (Suppl.) P. 18.

137. Doemel W.N., Brooks A.E. Detergent phosphorus and algal growth. Wat. Res. 1975. Vol. 9. P. 713-719.

138. Dorn P.B., Rodgers J.H., Jop K.M., Raia J.C., Dickson K.L. Hexavalent chromium as a reference toxicant in effluent toxicity tests // Envir. Toxicol. Chem. 1987. Vol. 6. P. 435-444.

139. Eichhorn P., Flavier M.F., Paje M.L., Knepper T.P. Occurrence and fate of linear and branched alkylbenzenesulfonates and their metabolietes in surface waters in the Philippines // The Sci.of Tot. Envir. 2001. Vol. 269. P. 175 185.

140. Ernst R. Surface active betaines as protective agents against denaturation of an ezyme by alkyl sulfate detergents // JAOCS. 1980. Vol. 57. P. 93 98.

141. Ernst R., Gonzales C.J., Arditti J. Biological effects of surfactants: part 6 — effects of anionic, non-ionic and amphoteric surfactants on a green alga (Chlamydomonas) // Envir. Pollut (Series A.). 1983. Vol. 31. P. 159 175.

142. Ferris J.J., Kobayashi S. Clesceri N. Growth of Selenastrum capricornutum in natural waters augmented with detergent products in wastewaters // Wat. Res. 1974. Vol. 8. P. 1013- 1020.

143. Fogg G. E. Algal cultures and phytoplankton ecology. Madison: Univ. Wisconsin Press.-1966. 104 p.

144. Franklin N.M., Stauber J.L., Apte S.C., Lim R.P. Effect of initial cell density on the bioavailability and toxicity of copper in microalgal bioassays // Envir. Toxicol. Chem. 2002. Vol. 21, No. 4. P. 742 751.

145. Gledhill W.E., Saeger V.W., Trehy M.L. An aquatic environmental safety assessment of linear alkylbenzene // Envir. Toxicol. Chem. 1991. Vol. 10. P. 169 — 178.

146. Gonzales-Mazo E., Forja J.M., Gomez-Parra A. Fate and distribution of linear alkylbenzene sulfonates in the littoral environment // Envir. Sci. Technol. 1998. Vol. 32. P. 1636-1641.

147. Guillard R.R.L. Ryther J.H. Studies of marine planktonic diatoms. I. Cyclotella nana Hustedt. and Detonula confervacea (Cleve) Gran // Can. J. Microbiol. 1962. Vol. 8. P. 229-239.

148. Halliwell D.J., McKelvie J.D., Hart B.T., Dunhill R.H. Hydrolysis of triphosphate from detergents in a rural waste water system // Wat. Res. 2001. Vol. 35, No. 2. P. 448-454.

149. Hampel M., Moreno-Garrido I., Sorbino C., Lubian L.M., Blasco J. Acute toxicity of LAS homologues in marine microalgae: esterase activity and inhibition growth as endpoints of toxicity // Ecotoxicol. Envir. Safety. 2001. Vol. 48. P. 287 292.

150. Hand W.G., Collard P.A., Davenport D. The effects of tempereture and salinity change on swimming rate in the dinoflagellates, Conyaulax and Gyrodinium //Biol. Bull. 1965. Vol. 128. P. 90 101.

151. Hon-Nami H., Hanya T. Linear alkylbenzene sulfonates in river, estuary and bay water// Wat. Res. 1980. Vol. 14. P. 1251 1256.

152. Hornstrom E. Toxicity test with algae a discussion on the Batch Method // Ecotox. Envir. Safety. 1990. Vol. 20. P. 343 - 353.

153. Jeffrey S.W., Humphrey G.F. New spectrophotometric equations for determining chlorophylls a, b, cl and c2 in higher plant, algae and natural phytoplankton // Biochem. Physiol. Pflanzen. 1975. Bd 167. S. 191-194.

154. Kantin R., Baumgarten M.G.Z., Cabeda M., Beumord A.C., De Almeida T.L. Concentration of anionic detergents in Rio Grande water (South Brazil) // Mar. Pollut. Bull. 1981. Vol. 12. P. 50 53.

155. De Kuhn R.M., Streb C., Breiter R., Richter P., Neepee T., Hader D.-P. Screening for unicellural algae as possible bioassay organisms for monitoring marine water samples // Wat. Res. 2006. Vol. 40. P. 2695 2703.

156. Macias-Zamora J. V., Ramirez-Alvarez N. Tracing sewage pollution using linear alkylbenzenes (LABs in surface sediments at the south end of the Southern California Bight // Envir. Pollut. 2004. Vol. 130. P. 229 238.

157. Madsen T., Boyd H., Nylen D., Pedersen A.R., Petersen G.I., Simonsen F. Environmental and health assessement of substanses in hosehold detergents and cosmetic detergent products. Milj0styrelsen: Milj0 og Energiministeriet, 2001. 201 P

158. Marcomini A., Pojana G., Sfriso A., Alonso J.M.Q. Behavior of anionic and nonionic surfactants and their persistent metabolites in the Venice Lagoon, Italy // Envir. Toxicol. Chem. 2000. Vol. 19, No. 8. P. 2000 2007.

159. Matthijs E., Holt M.S., Kiewiet A., Rus BJ. Environmental monitoring for linear alkylbenzene sulfonate, alcohol ethoxylate, alcohol ethoxy sulfate, alkocol sulfate, and soap // Envir. Toxicol. Chem. 1999. Vol. 18, No. 11. P. 2634 2644.

160. Moreno-Garrido I., Hampel M., Lubian L.M., Blasco J. Marine microalgae toxicity test for linear alkylbenzene sulfonate (LAS) and alkylphenol ethoxylate (APEO) // Fresenius J. Anal. Chem. 2001. Vol. 371. P. 474 478.

161. Moreno-Garrido I., Lubian L.M., Blasco J. Marine sediment toxicity testing using benthic microalgae // SETAC Globe. 2003b. Vol. 4, No. 5. P. 43-44.

162. Murray A.P., Gibbs C.F. Linear alkyl benzenes (LABs) in sediments of Port Phillip Bay (Australia) // Mar. Envir. Res. 1987. Vol. 23. P. 65 76.

163. Miiller M., Zehnder A.J.B., Escher B.I. Membrane toxicity of linear alcohol ethoxylates //Envir. Toxicol. Chem. 1999. Vol. 18, No. 12. P. 2767-2774.

164. Nyberg H. Growth of Selenastrum capricornutum in the presence of synthetic surfactants // Wat. Res. 1988. Vol. 22, No. 2. P. 217 233.

165. Nyberg H., Koskimies-Soininen K. The phospholipid fatty acids of porphyridium purpureum cultured in the presence of triton X-100 and sodium desoxycholate // Phytochemistry. 1984. Vol. 23, No. 11. P. 2489 2495.

166. Ojakian G.K., Katz D.F. A simple technique for the measurements of swimming speed of Chlamydomonas // Exptl. Cell. Res. 1973. V. 81. P. 487 491.

167. Ortiz M.C., Saenz J.R. Detergents and ortophosphates inputs from urban discharges to Chetumal Bay, Quintana Roo, Mexico // Bull. Envir. Contam. Toxicol. 1997. Vol. 59. P. 486 491.

168. Pettersson A., Adamsson M., Dave G. Toxicity and detoxification of Swedish detergents and softener products // Chemosphere. 2000. Vol. 41. P. 1611 -1620.

169. Pilemand C. Surfactants. Their abilities and important physico-chemical properties. Kabenhavn: Arbejdsmilj0instituttet. 2002. 54 pp.

170. Raymundo C.C., Preston M.R. The distribution of linear alkylbenzenes in coastal and estuarine sediments of the Western North Sea // Mar. Pollut. Bull. 1992. Vol. 24, No. 3. P. 138 146.

171. Roberts M.H., Warinner J.E., Tsai C., Wright D., Cronin L.E. Comparison of estuarine species sensitivities to three toxicants // Arch. Environ. Contam Toxicol. 1982. Vol. 11. P. 681 692.

172. Rôderer G. Toxic effects of tetraethyl lead and its derivatives on the chrysophyte Poterioochromonas malhamensis. VIII. Comparative studies with surfactants // Arch. Environ. Contam Toxicol. 1987. Vol. 16. P. 291 301.

173. Saez M., Gomez-Parra A., Gonzales-Mazo E. Bioconcentration of linear alkylbenzene sulfonates and their degradation intermediates in marine life // Fresenius J. Anal. Chem. 2001. Vol. 371. P. 486-490.

174. Sirisattha S., Momose Y., Kitagawa E., Iwahasi H. Toxicity of anionic detergents determined by Saccharomyces cerevisiae microarray analysis // Wat. Res. 2004. Vol. 38. P. 61 70.

175. Scott M.J., Jones M.N. The biodégradation of surfactants in the environment // Biochim. et Biophys. Acta. 2000. Vol. 1508. P. 235 251.

176. Stallwitz E., Hàder D.-P. Motility and phototactic orientation of the flagellate Euglena gracilis impared by heavy metal ions // J. Photochem. Photobiol. B: Biol. 1993. Vol. 18. P. 67 74.

177. Stallwitz E., Hàder D.-P. Effects of heavy metals on motility and gravistatic orientation of the Flagellate, Euglena gracilis II Europ. J. Protistol. 1994. Vol. 30. P. 18-24.

178. Stonik I.V., Orlova T.Yu., Crawford R.M. Attheya ussurensis sp. nov. (Bacillariophyta) a new marine diatom from the coastal waters of the sea of Japan and a reappraisal of the genus // Phycologia. 2006. Vol. 45, No. 2. P. 141— 147.

179. Sun X., Han K., Choi J., Kim E. Screening of surfactants for harmful algal blooms mitigation // Mar. Poll. Bulletin. 2004. Vol. 48. P. 937 945.

180. Thayer A.M. Soaps & detergents // Chem. Eng. News. 1993. Vol. 71. P. 26

181. Tkalin A.V. Chemical pollution of the Northwest Pacific // Mar. Pollut. Bull. 1991. Vol. 22, No. 9. P. 455-457.

182. Tkalin A. V., Belan T. A., Shapovalov E. N. The State of the Marine Environment near Vladivostok, Russia // Mar. Pollut. Bull. 1993. Vol. 26, No. 8. P. 418 422.

183. Tkalin A. V., Shapovalov E. N. Influence of Typhoon Judy on chemistry and pollution of Japan Sea Coastal waters near the Tumangan river mouth // Ocean Research. 1991. Vol. 13, No. 2. P. 95 101.

184. Tomas C.R. Oscisthodiscus lutheus (Chrysophyceae) I. Effects of salinity and temperature on growth, motility and survival // J. Phycol. 1978. Vol. 14. P. 309-313.

185. Ukeles R. Inhibition of unicellular algae by synthetic surface-active agents // J. Phycol. 1965. Vol. 1. P. 102- 110.

186. Utsunomiya A., Watanuki T., Matsushita K., Tomita I. Toxic effects of linear alkylbenzene sulfonate and quarternary alkylammonium chloride on Dunaliella sp. as measured by 'H-NMR analysis of glycerol // Chemosphere. 1997b. Vol. 35, No. 6. P. 1215 1226.

187. Van de Plassche E., de Bruijn J., Feijtel T. Risk assessment of four major surfactant groups in the Netherlands. Application of monitoring data // Tenside Surfactant Deterg. 1997. Vol. 34. P. 242 249.

188. Versteeg D.J., Rawlings J.M. Bioconcentration and toxicity of dodecylbenzene sulfonate (C.2 LAS) to aquatic organisms exposed in experimental streams // Arch. Environ. Contam. Toxicol. 2003 .Vol. 44. P. 237 246.

189. Walsh G.E. Principles of toxicity testing with marine unicellular algae // Envir. Toxicol. Chem. 1988. Vol. 7. P. 979 987.

190. Walsh G.E., Garnas R.L. Determination of bioactivity of chemical fractions of liquid wastes usuing freshwater and saltwater algae and crustaceans // Envir. Sci. Technol. 1983. Vol. 17. P. 180 182.

191. Wong C.K.C., Cheung R.Y.H., Wong M.H. Toxicological assessment of coastal sediments in Hong Kong using a flagellate, Dunaliella tertiolecta // Environmental Pollution. 1999. Vol. 105. P. 175 183.

192. Wong D.C.L., Whitthe D., Maltby L., Warren P. Multivariate analyses of invertebrate community responses to a C12-15 AE-3S anionic surfactant in stream mesocosms // Aquat.Toxicol. 2003. Vol. 62. P. 105 117.

193. Yamane A.N., Okada M., Sudo R. The growth inhibition of planktonic algae due to surfactants used in washing agents // Wat. Res. 1984. Vol. 18, No. 9. P. 1101-1105.

194. Yan G.A., Jiang J.W. Wu G., Yan X. Disappearance of linear alkylbenzene sulfonate from different cultures with Abaena sp. HB 1017 // Bull. Envir. Comtam. Toxicol. 1998. Vol. 60. P. 329 334.

195. Zeng E.Y., Khan A.R. Tran K. Organic pollutants in the coastal marine environment off San Diego, California. 3. Using linear alkylbenzenes to trace sewage-derived organic materials // Envir. Toxicol. Chem. 1997. Vol. 16, No. 2. P. 196-201.