Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Повышение эффективности искусственного осеменения кобыл путём применения новых препаратов для санации спермы жеребцов

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Повышение эффективности искусственного осеменения кобыл путём применения новых препаратов для санации спермы жеребцов"

На правах рукописи

АТРОЩЕНКО Михаил Михайлович

ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ КОБЫЛ ПУТЁМ ПРИМЕНЕНИЯ НОВЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ САНАЦИИ СПЕРМЫ ЖЕРЕ БЦОВ

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук

Рязань - 2006

Работа выполнена в Государственном научном учреждении Всероссийском научно-исследовательском институте коневодства РАСХН

Научный руководитель: кандидат биологических наук, доцент

Науменкова Валентина Алексеевна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Сергиенко Галина Фёдоровна

кандидат биологических наук, доцент Перегудова Валентина Фёдоровна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Московская

государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»

Защит а состоится 13 апреля 2006 года в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 220.057.01 при Рязанской государственной сельскохозяйственной академии им. профессора П. Л. Костычева (390044, г. Рязань, ул. Костычева, 1).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Рязанской государственной сельскохозяйственной академии им. профессора П.А. Костычева.

Автореферат разослан 1 О марта 2006 года

Учёный секретарь л л

диссертационного совета, Ь-Ц^иЛ^ 1/ профессор Н.И. Морозова

мет-

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследований. Метод искусственного осеменения сельскохозяйственных животных, разработанный отечественными учёными, широко применяется в нашей стране во всех отраслях животноводства.

Основоположник метода И.И. Иванов видел в искусственном осеменении основной метод размножения сельскохозяйственных животных, дающий возможность наиболее рационально использовать ценных племенных производителей.

В настоящее время искусственное осеменение применяется как основной метод для получения большого количества приплода от высокоценных племенных производителей. Широкое использование лучших племенных производителей с целью скорейшего совершенствования пород является важной проблемой в зоотехнии.

Метод искусственного осеменения быстро распространился во всех странах мира, благодаря высокой экономической эффективности, которая обусловлена не только количеством доз спермы из одного эякулята, но и возможностью сохранения спермы вне организма при комнатной температуре, температуре О °С и в замороженном состоянии.

Искусственное осеменение решает задачи массового улучшения качеств животных и является ветеринарно-санитарным мероприятием, способствуя оздоровлению животноводческих хозяйств от заразных заболеваний, передающихся при естественном спаривании животных.

В коневодстве при искусственном осеменении лошадей для санации спермы в течение некоторого периода времени применяли препарат спермосан-3. В настоящее время этот препарат снят с производства, как не отвечающий современным требованиям по снижению роста и уничтожению микроорганизмов в сперме. Проблема санации спермы при искусственном осеменении лошадей в настоящее время очень актуальна. Кроме того, известно, что постепенно снижается чувствительность микроорганизмов к антимикробным препаратам. Образуются устойчивые к антибиотикам штаммы микроорганизмов.

Поэтому изыскание более надёжных препаратов, которые не снижали бы выживаемость сперматозоидов и задерживали рост бактериальной микрофлоры, имеет важное практическое значение.

Представленная к защите диссертационная работа «Повышение эффективности искусственного осеменения кобыл пут£м применения новых препаратов для санации спермы жеребцов» входит в

тематический план ГНУ ВНИИ коневодст^ардагущодзд^ьеддедеения

БИБЛИОТЕКА СЛяячЬпХАх Ч,

О» Щ ш^Л/ /у

зоотехнии Россельхозакадемии «Разработать научные основы эффективного использования и дальнейшего повышения генетического потенциала сельскохозяйственных животных и на основе современных достижений науки создать ресурсосберегающие технологии производства высококачественной продукции для хозяйств с разной формой собственности по регионам страны» (тема 03.01, номер государственной регистрации 01.200.114185).

Цель и задачи исследований. Повышение эффективности искусственного осеменения кобыл за счёт увеличения оплодотворяемостн при осеменении санированной спермой, с применением препаратов, ранее не используемых для санации спермы жеребцов.

Дня достижения цели были поставлены следующие задачи:

1.Изучение видового состава микроорганизмов спермы жеребцов.

2.Установление оптимальных дозировок антимикробных препаратов для санации спермы жеребцов (ампициллина, гентамицина, левомицегина, линкомицина, оксациллина, полигена, цефазолина, иефтриаксона, ципрофлоксацина, эритромицина), не оказывающих тоскического действия на спермии.

3.Определение санирующих свойств антимикробных препаратов в дозировках, не снижающих качественных показателей спермы.

4.Сравнение эффективности испытанных препаратов в оптимальных дозировках.

5.Изучение влияния введения антибактериальных препаратов на различных технологических этапах подготовки спермы к з амораживанию.

6.Установление оплодотворяющей способности криоконсервировачной спермы жеребцов, санированной полигеном.

Научная новизна. Впервые испытаны новые препараты для санации спермы жеребцов. Отработаны оптимальные дозировки введения этих препаратов в сперму жеребцов.

Установлено, что для санации спермы жеребцов достаточно вводить антимикробные препараты в дозировках в 5 раз ниже, чем для спермы других видов животных.

Выявлены различные результаты санации спермы, проведенной на различных технологических этапах подготовки её к замораживанию.

Рекомендован для применения препарат «Полотен» производства ЗАО «Мосагроген».

Теоретическая и практическая значимость. Применение новых антимикробных препаратов, оказывающих бактериостатическое и

бактерицидное действие на микроорганизмы, содержащиеся в сперме жеребцов, приведёт к повышению эффективности искусстве иного осеменения за счет повышения выживаемости спермы. Вследствие этого, повысится процент огаюдотворяемости при искусственном осеменении.

В результате выполненной работы на современном этапе был изучен видовой и количественный состав микрофлоры спермы жеребцов. Определена чувствительность выделенных микроорганизмов к антибиотикам. Исследованы различные препараты для санации спермы жеребцов.

Впервые применён для санации спермы жеребцов препарат по.тиген. При осеменении кобыл спермой, санированной по пш еном, существенно повысилась оплодотворяемость кобыл.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на координационных совещаниях и научных конференциях во ВНИИ í, коневодства (2004-2005г.г.), научной конференции профессорско-

преподавательского состава и аспирантов С.-Пб. ГАУ, в 2005 г. По материалам диссертации опубликовано 9 статей.

Положения, выносимые на защиту:

1. Видовой состав микроорганизмов спермы жеребцов.

2. Влияние различных препаратов на микробную загрязнённость и

качество спермы при замораживании-оттаивании.

3. Влияние полигена на выживаемость спермиев при различных способах хранения семени жеребцов.

4. Экономическая эффективность приме нения пол игена для спермы жеребцов.

Структура и объём работы. Диссертация состоит из введения, четырёх глав (обзора литературы, материала и методики, результатов собственных исследований и их обсуждения), выводов и практических предложений. Общий объём работы 134 страницы компьютерного текста. Результаты исследований приведены в 18 таблицах. Список литературы содержит 278 литературных источников, в том числе 78 на 1 иностранных языках.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.

Экспериментальная часть работ по теме диссертации проведена в лаборатории физиологии размножения ВНИИ конезодства, в лаборатории микробиологии Рязанской сельскохозяйственной академии им. П.А. Костычева, в лаборатории микробиологии MV3 «Диагностический центр» г. Рязани, Рязанской областной ветеринар! го

бактериологической лаборатории в период с 2003 по 2005 г.г.

В опытах была использована сперма от 16 жеребцов-производителей различных пород. Кормление и содержание жеребцов-производителей соответствовагго установленным нормам и требованиям к выращиванию племенных лошадей.

Сперму от жеребцов брали два раза в неделю, на искусственную вагину, в соответствии с «Инструкцией по искусственному осеменению кобыл» (1969). Для разбавления спермы использовали лактозо-хелато-цитрато-желточную среду (ЛХЦЖ), в соотношении объёмов 1:3.

Проводили микробиологическое исследование нативной, свежеполученной разбавленной, замороженно - оттаянной спермы и разбавителя. Определяли общее количество бактерий, коли-титр, видовой состав микроорганизмов, наличие грибов.

Видовой состав микроорганизмов, выделенных из спермы жеребцов, определяли по методике: выделение чистой культуры, идентификация микроорганизмов путём пересевов на различные питательные среды, изучение морфологических, тинкториальных, биохимических, патогенных свойств.

Антибиотикэчувствительность микроорганизмов определяли путём посева выделенной культуры на среду АГВ диско - диффузионным методом.

Патогенност ь микроорганизмов определяли по гемолитическим, плазмокоагулируюгцим свойствам.

Влияние антибиотиков на выживаемость спермиев и микробную загрязнённость спермы определяли в эякулятах от 5 жеребцов. Препараты (полиген, гентамицин, ампициллин, линкомицин, оксациллин, лгвомицетин, эритромицин, цефазолин, ципрофлоксацин, цефтриаксон) вводили в среду до разбавления спермы в возрастающих концентрация?:. В растворенном состоянии от 0,1 до 3,0 мл (3, 4, 5% р-ра) с разницей в дозировках в 0,1 мл, или в пересчете на сухое вещество от 1 до 30 мг, с разницей в дозировках в 5 мг. Оптимальные дозировки препаратов вводили: 1) в лактозо-хелато-цитрато-желточную среду перед разбавлением спермы, 2) после эквилибрации (перед замораживанием) спермы, 3) после её оттаивания.

После установления оптимальной концентрации санирующего препарата определяли его влияние на оплодотворяемость кобыл. Осеменяли кобыл на экспериментальной конюшне ВНИИК свежеразбавленной и оттаянной спермой, санированной и без санирующий препаратов. Сперму вводили мано-цервикальным способом в дозе 18 - 20 мл с предварительным контролем стадии развития фолликула за 12-16 часов до овуляции. Результат

оплодотворяемости учитывали по количеству вымываемых эмбрионов или по факту жерёбости на 35-60 день после овуляции.

Замораживание спермы проводили по технологии ВНИИ коневодства в алюминиевых тубах по 18 - 20 мл. Хранили замороженную сперму в жидком азоте при температуре - 196 °С.

Биометрическую обработку полученных данных проводили по Плохинскому H.A. (1961).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Характеристика бактериальной загрязнённости спермы жеребцов.

Мы определили степень чистоты спермы жеребцов, вгятой согласно существующей технологии её получения. Данные по микробной загрязнённости спермы приведены в таблице 1

Таблица 1.

Общая микробная загрязнённость спермы жеребцов._

№ Клички Число Количество микробов в

п/п жеребцов эякулятов сперме, тыс. КОЕ/мл

в среднем колебания

1 Нарцисс 27 32,4 12,0-69,0

2 Гарант 18 4,2 1,2-12,4

3 Чуткий 9 7,4 5,7-10 2

4 Тагай 12 35,7 16,4-43,0

5 Эгеюс 3 70,7 34,8-115,0

6 Каюр 4 4,5 3,2-5,6

7 Акбелек 4 18,4 15,8-21,3

8 Жрец 12 64,3 44,2-98,0

9 Другие жеребцы (8 голов) 21 38,9 2,1-300,0

В среднем по 110 эякулятам 30,2 1,2-300,0

Из таблицы 1 видно, что сперма, взятая согласно с ушествующей инструкции (1969), содержит большое число микроорганизмов. Из 1 мл такой спермы выделено в среднем 30,2 тыс. микробов. С колебаниями в пределах от 1,2 до 300 тыс. При коли-титре: от отрицательного (97,3% проб) до 0,1 (2,7% проб). При этом в 1,8% случаев сперма контаминирована грибами.

От общего числа эякулятов только 18 (16,4%) соответствуют установленным санитарным требованиям. Следовательно,

существующий комплекс санитарных мероприятий не обеспечивает получения спермы с минимальной бактериальной загрязнённостью.

Были проведены исследования по определению видового состава микроорганизмов, выделенных из 23 эякулятов, взятых от 16 жеребцов. Из спермы были выделены следующие микроорганизмы: Aerococcus viridans, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolitycus, Staphylococcus saprophyticus, Esherishia coli, Proteus vulgaris, Micrococcus sp., Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Burlcholderia cepacia, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, Enterobacter aerogenes, Citrobacter diversus, грибы рода Candida.

Кроме ввдового состава микрофлоры, мы определили, представители каких родов и семейств микроорганизмов наиболее часто встречаются в сперме жеребцов. Процентное содержание частоты высева и количественный диапазон встречаемых культур представлены в таблице 2.

Таблица 2.

Состав микрофлоры спермы жеребцов.__

Микроорганизмы Частота высева, в % Содержание в 1 мл обсеменённых образцов, тыс. КОЕ/мл

минимальное максимальное

Общее количество микроорганизмов 100 1,2 300,0

Стафилококки 36 0,4 100,0

Стрептококки 26 0,3 100,0

Микрококки 6 21,0 40,0

Энтеробактерии 24 0,6 100,0

Псевдомонады 4 0,4 1,0

Дрожжеподобиые грибы рода Кандида 4 0,3 1,0

Стафилококки обнаружены в сперме у 12 жеребцов. При определении патогенных свойств стафилококков установлено, что гецитиназная активность проявляется у 37% штаммов, гемолитическая активность у 57% штаммов, плазмокоагулируюгцая активность у 37% штаммов стафилококков.

Представители семейства ЕЩегоЬаЛепасеае обнаружены в 24% проб, в сперме у половины исследованных производителей.

Стрептококки выделили из эякулятов у 50% жеребцов. Гемолитических штаммов стрептококков - 79% от общего количества. Штаммов с ß-гемолизом с потенциально высокой степенью патогенности - 29%. Эти данные свидетельствуют о присутствии в сперме большого количества условно-патогенных стрептококков с гемолитическими свойствами.

Псевдомонады выделены в 4% исследуемых проб. Из них один штамм Pseudomonas aeruginosa обладал гемолитическими свойствами. Дрожжеподобные грибы рода Candida выделены из эякулятов у двух жеребцов, в ассоциации с микроорганизмами. Микрококки были выделены в трёх эякулятах.

Выделенные из эякулятов микроорганизмы чаще всего встречаются в ассоциациях (91,3%), чем в монокультурах (8,7%).

Из 74% эякулятов выделены штаммы с гемолитической активностью.

При получении в один день спермы от разных жеребцов с интервалом в 10-15 минут, видовой состав микроорганизмов в большинстве случаев был не идентичен. Это может свидетельствовать о присутствии в сперме каждого жеребца «собственной» микрофлоры, т.е. микроорганизмов, которые заселяют препуциальную полость и являются обычными представителями микробиоцинога препуциальной полости данного жеребца.

После определения видового состава микроорганизмов спермы жеребцов мы установили чувствительность данных бактерий к антибиотикам. Выбор антибиотиков обосновывался, исходя из многолетней практики работы специалистов бастериологической лаборатории по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам.

Все выделенные грамположительные микроорганизмы чувствительны к гентамицину. Большинство микроорганизмов чувствительно к оксациллину (92%), эритромицину (87%), ампициллину (71%), тетрациклину (71%), линкомицину (69%). Наиболее резистентны грамположительные мшсроорганизмы к пенициллину - 69% штаммов.

Все выделенные грамотрицательные бактерии чувствительны к гентамицину, ципрофлоксацину, цефтриаксону. Большинство штаммов чувствительно к полимиксину (77%) и левомицетину (77%).

Грамотрицательные микроорганизмы наиболее резистентны к пенициллину - 93% штаммов и ампициллину - 74% штаммов. Относительно устойчивы микроорганизмы к цефазолину (40%), левомицетину (33%).

Влияние антимикробных препаратов на сперму жеребцов.

Для определения влияния антибиотиков на выживаемость спермы и ей микробную загрязнённость, по результатам предыдущих исследований, мы выбрали десять антимикробных препаратов. Провели опыты по изучению влияния различных концентраций этих препаратов на выживаемость спермиев при хранении спермы при температуре от 0 до +4°С.

Препараты вводили в разбавитель в возрастающих концентрациях от 5 до 15 мг сухого вещества на 100 мл ЛХЦЖ среды, с интервалом 3-5 мг в зависимости от исходной концентрации раствора антибиотика. Определили концентрации препаратов, которые не снижают выживаемость спермы по сравнению с контролем - несанированной спермой. Результаты определения оптимальных концентраций препарата прецставлены в таблице 3.

Таблица 3.

Влияние различных антибиотиков на качество спермы жеребцов в процессе хранения спермы при температуре 0+4°С. (п=10)

Название препарата Количество Выживаемость % к

препарата мг/100 мл среды в часах контролю

Контроль 0 122 ± 10 100

Ампициллин 10 130 ±10 106

Гентамицин 8 136 ±12 112

Левомицетин 10 140 ±13 115

Линкомицин 10 140 ±12 115

Оксациллин ю 135 ±11 110

Полиген 6 140 ±13 115

Цефазолин 10 128 ±11 105

Цефтриаксон 15 123 ±9 101

Ципрофлоксацин 5 121 ±10 99

Эритромицин 10 138 ±13 114

Лучшими претаратамч по влиянию на выживаемость спермы (табл. 3) оказались: полиген, гентамицин, линкомицин, оксациллин, эритромицин, левомицетин.

Оптимальные дозы этих препаратов не оказали токсического влияния на спермин, повысив выживаемость спермы вне организма на 10-15 %.

Таблица 4.

Результаты микробиологического исследования спермы жеребцов, санированной различными антибиотиками при хранении спермы при

Название препарата Количество Загрязненность % к

препарата мг/100 мл среды спермы, КОЕ/мл контролю

Контроль 0 2470±18б 100

Ампициллин 10 80±6,4*" 3,2

Гентамицин 8 65±5,7*** 2,6

Левомицетин 10 720±69*** 29,1

Линкомицин 10 540±46*** 21,9

Оксациллин 10 1020±89*** 41,3

Полиген 6 50±4,2*** 2,0

Цефазолин 10 590±52*** 23,9

Цефтриаксон 15 670±56*** 27,1

Ципрофлоксацин 5 810±74*** 32,8

Эритромицин 10 570±48*** 23,1

*** РХ),999

Максимальный санирующий эффект в оптимальных дозировках оказали препараты: полиген, гентамицин и ампициллин (табл. 4). Причём самое лучшее влияние на сперму оказал препарат полиген. Микробная загрязнённость проб спермы, санированных другими препаратами, оказалась значительно выше; разница по микробной загрязнённости, в сравнении с контролем, высокодостоверна (Р>0,999). В дальнейшем опыты проводили с комплексным препаратом полиген, в состав которого входят антибиотики гентамицин и полимиксин.

Таблица 5.

Выживаемость сперматозоидов после санации спермы полигеном при

хранении е8 при комнатной температуре. (п=10)

№ п/п Кол-во полигена, в МЛ Выживаемость в часах % к контролю Показатель абс выживаемости % к контролю

1 Контроль 60±5,6 100 71,4±6,7 100

2 1,0 26,4±2,5*** 44 44,6±4,1*** 62,3

3 0,8 29,4±2,8*** 49 46,6±4,3*** 65,3

4 0,6 33,6±3,1**"^ 56 49,3±4,8*** 69

5 0,5 67,2±6,5 112 75,3±7,4 105,5

6 0,4 69,6±6,4* 116 80,4±7,9* 112,6

7 0,3 69,6±6,4» 116 83,5±8,2** 116,9

8 0,2 64,8±6,3 108 79,6±7,8* 111,5

9 0,1 62,4±6,1 ]04 78,4±7,7 109,8

*** Р>0,999, ** РХ),99, * РХ),95

Показатель выживаемости сперматозоидов в часах в концентрациях от 0,1 мл до 0,5 мл 3%-ного раствора полигена на 100 мл ЛХЦЖ среды выше, чем в контроле (табл. 5). Эти концентрации препарата превышают выживаемость сперматозоидов, по сравнению с контролем на 4-16%; разница недостоверна (Р<0,95). Концентрации полигена от 0,6 до 1,0 мл резко снижают выживаемость сперматозоидов; разница высокодостоверна (Р>0,999).

Показатель абсолютной выживаемости выше в сравнении с контролем в концентрациях от 0,1 до 0,5 мл. Концентрации препарата от 0,1 до 0,5 мл повышают показатель абсолютной выживаемости от 5,5 до 16,9 %, по сравнению с контролем.

Таблица 6.

Выжи ааемость сперматозоидов после санации спермы полигеном при хранении её при температуре 0 +4°С. (п=10)

№ п/п Кол-во полигена, В МГ[ Выживаемость в часах % к контролю Показатель абс. выживаемости % к контролю

1 Контроль 148,8±13,9 100 214,2±19,8 100

2 1,0 64,8±6,4*** 43,5 88,3±7,7*** 41,2

3 0,8 76,8±6,9*** 51,6 102,1±9,9*** 47,7

4 0,6 84±8,3*** 56,5 115,6±10,5*** 53,9

5 0',5 96±8,9*** 64,5 139,1±11,9*** 64,9

6 С,4 115,2±10,6*** 77,4 167,4±13,8*** 78,2

7 0,3 136,8±11,8* 91,9 202±18,8 94,3

8 0,2 160,8±14,4* 108,1 245,6±21,6** 114,7

9 0,1 163,2±14,9* 109,7 251,6±22,8** 117,5

*»» Р>0,')99, ** Р>0,99, * РХ>,95

При хранении спермы при температуре от 0 до +4° С (табл. 6) выживаемость в часах спермы, санированной полигеном в концентрациях 0,1 и 0,2 мл выше в среднем на 12,0 и 14,4 часов, и соответс"гвенно на 8,1 и 9,7 % по сравнению с контролем; разница достоверна (Р>0,95).

Введение полигена в концентрациях 0,1 и 0,2 мл повышает показате ть абсолютной выживаемости на 14,7 и 17,5 % по сравнению с контролем; разница достоверна (Р>0,99).

Таблица 7.

Выживаемость сперматозоидов после санации спермы полигеном при _ хранении её в жидком азоте. (п=10)___

№ К-во Выживаемость % к Показатель % к

п/п полигена, в часах контролю абс. ]ГОНТрОЛЮ

в мл выживаемости

1 Контроль 84±7,9 100 80,8±7,6 100

2 1,0 31,2±2,8*** 37,1 35,2±2,8*** 43,6

3 0,8 36,2±2,9*** 43,1 39,1±3,4*** 48,4

4 0,6 45,б±3,9*** 54,3 43±3,8*** 53,2

5 0,5 52,8±4,8*** 62,9 46,1±4,0*** 57,1

6 0,4 62,4±6,1*** 74,2 51,7±4,7*** 63,9

7 0,3 81,6±7,9 97,1 74,7±7,1 92,5

8 0,2 91,2±8,7 108,6 92,4±8,8* 114,4

9 0,1 93,6±8,9* 111,4 93,8±8,9* 116,1

*** Р>0,999, **Р>0,99, *РХ),95

Показатель выживаемости в часах спермы, санированной полигеном в концентрациях 0,1 и 0,2 мл выше в среднем на 7,2 и 9,6 часов по сравнению с контролем (табл.7). Введение полигена в концентрациях 0,1 и 0,2 мл повышает показатель абсолютной выживаемости па 14,4 и 16,1 %, по сравнению с контролем; разница достоверна (Р>0,95).

Таблица 8.

Бактериальная загрязнённость санированной полигеном спермы, при

№ п/п Сперма Бактериапьная загрязненность спермы, КОЕ / мл

1 Нативная 15560± 11280

2 Разбавленная, без полигена 3320±289***

3 Разбавленная с полигеном 1,0 мл/100мл ЛХЦЖ среды О**"1

4 -«»- 0,9 мл 3±0,2***

5 -«»- 0,8 мл 6±0,5***

6 -«»- 0,7 мл 8±0,74**

7 -«»- 0,6 мл 14±1,3 ***

8 -«»- 0,5 мл гбгЫ^^'11

9 -«»- 0,4 мл 21±2,0"**

10 -«»- 0,3 мл 26±2,5'***

11 -«»- 0,2 мл 39±3,7'и**

12 -«»- 0,1 мл 56±4,9"-**

*** РХ),999

Полиген, введённый в состав лактозо-хелато-цитратно-желточного разбавителя, в концентрациях от 0,1 до 1,0 мл на 100 мл разбавителя счижает микробную загрязнённость в 59 - 3320 раз (табл.8), разница высокодостоверна (Р>0,999).

Концентрации полигена 0,1-0,5 мл/100 мл ЛХЦЖ среды, оптимально влияющие на выживаемость спермы при хранении её при комнатной температуре, снижают микробную загрязнённость семени в 59 - 208 раз по сравнению со сзежеполученной разбавленной ЛХЦЖ средой счермой. При введении полигена в концентрациях 0,1 - 0,5 мл/100 мл ЛХЦЖ среды общая микробная загрязнённость разбавленной спермы ниже допустимого санитарного уровня в 8,9 - 31 раз.

Оптимальные концентрации полигена 0,1 и 0,2 мл при хранении стермы при температуре от 0 до +4°С, которые повышают выживаемость сперматозоидов и показатель абсолютной выживаемости, по сравнению с несанированной спермой, снижают микробную загрязнённость в 59 - 85 раз по сравнению с контролем. Показатели общей микробной загрязнённости при этом, ниже допустимого санитарного уровня в 8,9 - 12,8 раз.

Таблица 9.

Бактериальная загрязнённость спермы, санированной полигеном при хранении её в жидком азоте при температуре -196°С. (п=10)_

Сперма Бактериальная

п/п загрязненность спермы, КОЕ / мл

1 Замороженно полигена - оттаянная без 1412±138

2 Замороженно - оттаянная с полигеном 1,0 мл/100мл ЛХЦЖ среды 0***

3 0,9 мл 0***

4 0,8 мл 0***

5 0,7 мл о***

6 0,6 мл 0***

7 0,5 мл 0***

8 0,4 мл 1±0,1***

9 0,3 мл 3±0,2***

10 0,2 мл 10±0,9***

И 0,1 мл 24±2,3***

**' Р>0,999

Замораживание и последующее хранение спермы в жидком азоте при температуре -196 °С не с нижает общую микробную загрязнённость

спермы до установленных санитарных норм (табл. 9). Введение полигена в концентрациях 0,5 - 1,0 мл на 100 мл ЛХЦЖ среды обеспечивает стерильность криоконсервированной спермы. Оптимальные по выживаемости сперматозоидов конце ятрации 0,1 и 0,2 мл полигена снижают микробную загрязнённость по сравнению с несанированной замороженно - оттаянной спермой в 58,8 - 141 раз. Показатели общей микробной загрязнённости спермы (при применении этих концентраций полигена) ниже допустимого санитарного уровня в 24 - 50 раз, разница высокодостоверна (Р>0,999).

После определения оптимальных концентраций полигена мы изучили влияние введения препарата на различных этапах подготовки спермы к замораживанию и при её последующем оттаивании. Это необходимо для того, чтобы выяснить влияние продолжительн ости контакта антибиотика со спермой на выживаемость сперматозоидов. Данные по этим исследованиям представлены в таблице 10.

Таблица 10.

Изменение выживаемости спермиев при введении полигена на различных этапах подготовки спермы к замораживанию и при её последующем оттаивании. (п=10)

№ п/п 3%-ного р-ра полигена Выжива емость, час % к контролю Показатель абсолютной выживаемости % К контролю

Введение полигена при разбавлении, далее замораживание спермы, хранение ей после оттаивания при температуре от 0 до +4'С

Контроль 0 87,1±6,9 100 84,2±7,1 100

1 0,3 84,9±7,8 97,4 78,4±7,4 93,1

2 0,2 94,2±8,6 108,2 95,3±8,9 113,2

3 0,1 95,7±9,1 109,9 96,9±9,2 115,1

Введение полигена перед замораживанием, далее замораживание спермы, хранение её после оттаивания при температуре от 0 до +4'С

1 0,3 85,2±7,9 97,8 79,6±7,2 94,5

2 0,2 95,8±8,4 110,0 96,7±8,7 114,8

3 0,1 98,2±8,9 112,7 98,3±9,3 116,7

Введение полигена после оттаивания, хранение спермы при температуре отОдо+4'С

1 0,3 87,4±8,1 100,3 84,8±7,3 100,7

2 0,2 99,6±8,8 114,4 99,6±8,9 118,3

3 0,1 102,4±9,9 117,6 103,8±9,7 123,3

Из таблицы 10 видно, что чем меньше контакт антибиотика со спермой, тем выше её выживаемость. Выживаемость спермы,

санированной полигеном, выше при введении его перед замораживанием, и ещё выше при добавлении его в сперму после оттаиванил. Введение в оттаянную сперму полигена в концентрации 0,3 мл не (. нижает её выживаемости, по сравнению с контролем.

Однако введение антибиотика перед замораживанием спермы, а тем более после её оттаивания, усложняет технологический процесс за счет дополнительного расчёта препарата по количеству использованного разбавителя и введения его в сперму в очень малых дозировках. Поэтому оптимально вводить антибиотик в среду для разбавления спермы при её приготовлении. Способ санации спермы путём введения антибиотика после оттаивания будет эффективен для снижения микробной загрязнённости спермы, замороженной ранее без санирующих препаратов.

По результатам исследований микробной загрязнённости спермы на различных этапах подготовки её к замораживанию мы установили, что во время I гроцесса технологической подготовки спермы к замораживанию наблюдается постепенное снижение микробной загрязнённости эякулята. Приёмы подготовки спермы к длительному хранению - разбавление и замораживание - значительно снижают бактериальную загрязнённость, но не приводят её к установленным санитарным требованиям, предъявляемым к сперме жеребцов. При эквилибрации спермы в течение двух часов при температуре от 0 до +4°С не происходит значительного увеличения микробных клеток в сперме за счёт их размножения. Этому способствует воздействие низких температур и короткий временной отрезок эквилибрации. Санация спермы полигеном в оптимальных концентрациях после её оттаивания приводит к получению стерильной спермы в 42,8% проб.

Определение оплодотворяющей способности санированной спермы.

В опытг по установлению оплодотворяющей способности спермы жеребцов санированной полигеном, установили, что результат оплодотворяемости кобыл повысился относительно несанированной спермы. Из 10 опытных кобыл, осемененных свежеразбавленной спермой с полигеном, эмбрионы были вымыты у 5-и, и одна кобыла оказалась жерёбой по данным ректального исследования. В контрольной группе из 10 осемененных кобыл эмбрионы были вымыта у 3-х.

В опыте по осеменению кобыл криоконсервированной спермой, содержап .ей полиген, из 5 кобыл эмбрионы вымыты у 2-х.

В контрольной группе не было вымыто эмбрионов ни у одной кобылы. Применение полигена повышает оплодотворяемость кобыл по сравнению с контролем (осеменением несанированной спермой). Осеменение кобыл санированной спермой увеличило оплодотворяемость в среднем в два раза.

Расчёт экономической эффективности применения поли гена для санации спермы жеребца.

Использование санации спермы жеребцов полигеном исключает выбраковку эякулятов по санитарным требованиям. Санации спермы полигеном увеличивает более чем в пять раз выход конечного продукта - доз замороженной спермы. При средней стоимости 1 замороженной дозы спермы жеребца - 711 руб. (по данным о наличии i спермы в биохранилище ВНИИК на июнь 2005 г.), и выбраковке 83,6%

эякулятов с повышенной микробной загрязнённостью, экономическая эффективность от санации в среднем на 100 доз спермы, при исключении выбраковки эякулятов по санитарным нормам, составляет 59440 руб.

ВЫВОДЫ

1 .Сперма большинства исследованных жеребцов, полученная с соблюдением санитарных требований, содержит микроорганизмы в количествах выше санитарных норм.

2.Из испытанных антимикробных препаратов для санации спермы жеребцов в настоящее время наибольшей эффективностью обладают такие препараты, как полиген, гентамицин, ампициллин. Лучшее влияние на сперму оказывает полиген, максимально сн ижающий микробную загрязнённость спермы до установленных санитарных г норм.

3.Оптимальными при хранении спермы жеребцов при комнатной температуре являются дозировки 0,3-0,4 мл полигена на 100 мл ЛХЦЖ среды.

4.При хранении спермы жеребца при температуре от 0 до +4°С и при хранении спермы в жидком азоте оптимальными являются позировки 0,1-0,2 мл полигена на 100 мл ЛХЦЖ среды.

5.При хранении несанированной спермы в жидком азоте оптимальными для санации спермы после оттаивания являются дозировки полигена 0,1-0,3 мл на 100 мл ЛХЦЖ среды.

6.Санация спермы возможна на любом этапе подготовке её к замораживанию и после её оттаивания.

7.Применение полигена повышает оплодотворяемость кобыл по сравнению с осеменением несанированной спермой в среднем в два раза.

8.Применение полигена для санации спермы жеребцов экономически целесообразно.

Практические предложения

1 Для санации спермы при хранении её при комнатной температуре применять дозировку 3%-ного раствора полигена 0,3-0,4 мл на 100 мл ЛХЦЖ среды.

2.При хранении спермы жеребца при температуре от 0 до +4°С и при хранении спермы в жидком азоте применять для санации семени дозировки 0,1-0,2 мл полигена на 100 мл ЛХЦЖ среды.

3.Для снижения бактериальной загрязнённости несанированной замороженной в жидком азоте спермы, после оттаивания вводить в сперму полиген в дозе 0,1-0,3 мл на 100 мл ЛХЦЖ среды с перерасчётом на количество разбавителя в дозе спермы.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 .Атрощенко М.М. Необходимость оценки семени керебцов-производителей// Коневодство и конный спорт,- 2004.- №2.- С.28.

2.Науменкова В.А., Атрощенко М.М. Применение полигена для санации спермы жеребцов//Искусственное осеменение лошадей -истоки биотехнологии в животноводстве. - Дивово, 2004.-С.2Я-32.

3.Атрощенко М.М. Микробная контаминация спермы жеребцов// Наука о коневодстве на рубеже веков/ Сб. науч. трудов ВНИИК.-Дивово, 2005.- С.413-420.

4.Атрощенко М.М. Снижение микробной контаминации спермы жеребцов-производителей// Сб. научн. трудов Рязанской ГСХА. -Рязань, 2005.- С.480 - 484.

5.Атрощенко М.М. Влияние препарата полиген на выживаемость спермиев при хранении спермы жеребцов// Зоотехния.- 2005.- №7.-С.29-30.

6.Атрощенко М.М., Науменкова В.А. Снижение микробной контаминации семени жеребцов при различных способах его хранения//Наука о коневодстве на рубеже веков/Сб. науч. трудов ВНИИК- Дивово, 2005.- С.404-413.

7.Атрощенко М.М., Науменкова В.А. Влияние антибактериального препарата «Полиген» на качество и оплодотворяющую способность спермы жеребцов// Современные технологические и селекционные аспекты развития животноводства России. - Дубровицы, 2005.-Т.2.-Вып,- 63.-С.255-256.

8.Науменкова В.А., Атрощенко М.М. Изучение эффективности использования полигена для санации спермы жеребцов//Повышение племенных и продуктивных качеств сельскохозяйственных животных. - С.-Пб., 2005,- С.57-59.

9.Науменкова В. А., Атрощенко М.М. Влияние санирующего препарата «Полиген» на выживаемость сперматозоидов и общую микробную загрязнённость при различных способах хранени я спермы жеребцов// Доклады РАСХН. - 2005,- №4,- С.31 -34

Подписано в печать 09.03.2006. Формат 60x84 1/16 Печ. л. 1.2. Тираж 100 экз. Заказ №18.

Участок печати ГНУ ВНИИ коневодства Рыбновский район, Рязанская область

D 7

-5167

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Атрощенко, Михаил Михайлович

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1.Основные источники внесения микрофлоры в сперму жеребцов.

1.2. Влияние условно патогенной микрофлоры на сперму.

1.3. Пути снижения бактериальной загрязнённости спермы.

1.4. Характеристика микрофлоры, выделяемой из спермы производителей.

1.5. Чувствительность и устойчивость микроорганизмов к антибиотикам.

1.6. Влияние условно патогенной микрофлоры на половую систему самок.

1.7. Воздействие условно патогенной микрофлоры на половую систему производителей.

1.8. Санация спермы.

Глава II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Методика получения, оценки, разбавления и подготовки спермы к замораживанию.

2.2. Определение видового и количественного состава микроорганизмов, выделенных из спермы.

2.3. Определение патогенности выделенных микроорганизмов.

2.4. Изучение влияния антибиотиков на выживаемость сперматозоидов и общую микробную загрязнённость.

2.5. Определение оплодотворяющей способности санированной спермы.

Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Определение общей микробной загрязнённости спермы жеребцов.

3.2. Изучение видового состава микроорганизмов спермы жеребцов.

3.3. Определение влияния различных антимикробных препаратов на качество спермы и микробную загрязнённость в процессе замораживания-оттаивания.

3.4. Влияние полигена на выживаемость спермиев при различных способах хранения спермы.

3.5. Влияние санации спермы полигеном на её общую микробную загрязнённость.

3.6. Введение полигена на различных этапах подготовки спермы к замораживанию.

3.7. Определение оплодотворяющей способности санированной спермы.

3.8. Расчёт экономической эффективности применения полигена для санации спермы жеребца.

Глава IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Повышение эффективности искусственного осеменения кобыл путём применения новых препаратов для санации спермы жеребцов"

Метод искусственного осеменения сельскохозяйственных животных, разработанный отечественными учёными, широко применяется в нашей стране во всех отраслях животноводства.

Основоположник искусственного осеменения И.И. Иванов видел в нём основной метод размножения сельскохозяйственных животных, дающий возможность наиболее рационально использовать ценных племенных производителей.

В настоящее время искусственное осеменение применяется как основной метод для получения большого количества приплода от высокоценных племенных производителей. Широкое использование лучших племенных производителей с целью скорейшего совершенствования пород является важной проблемой в зоотехнии.

Метод искусственного осеменения быстро распространился во всех странах мира, благодаря высокой экономической эффективности, которая обусловлена не только количеством доз спермы из одного эякулята, но и возможностью сохранения спермы вне организма при комнатной температуре, температуре О °С и в замороженном состоянии.

Искусственное осеменение решает задачи массового улучшения качеств животных и является ветеринарно-санитарным мероприятием, которое способствует оздоровлению животноводческих хозяйств от заразных заболеваний, передающихся при естественном спаривании животных.

Актуальность исследований:

В коневодстве при искусственном осеменении лошадей для санации спермы в течение некоторого периода времени применяли препарат спермосан-3. В настоящее время этот препарат снят с производства, как не отвечающий современным требованиям по снижению роста и уничтожению микроорганизмов в сперме. Проблема санации спермы при искусственном осеменении лошадей в настоящее время очень актуальна.

Кроме того, известно, что постепенно снижается чувствительность микроорганизмов к антимикробным препаратам. Образуются устойчивые к антибиотикам штаммы микроорганизмов.

Поэтому изыскание более надёжных препаратов, которые не снижали бы выживаемость сперматозоидов и задерживали рост бактериальной микрофлоры, имеет важное практическое значение.

Цель и задачи: повышение эффективности искусственного осеменения кобыл за счёт увеличения оплодотворяемости при осеменении санированной спермой, с применением препаратов ранее не используемых для санации спермы жеребцов.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи: 1 .Установление оптимальных дозировок антимикробных препаратов для санации спермы жеребцов (ампициллина, гентамицина, левомицетина, линкомицина, оксациллина, полигена, цефазолина, цефтриаксона, ципрофлоксацина, эритромицина), не оказывающих тоскического действия на спермии.

2.0пределение санирующих свойств антимикробных препаратов в дозировках, не снижающих качественных показателей спермы. 3.Сравнение эффективности испытанных препаратов в оптимальных дозировках.

4.Изучение влияния введения антибактериальных препаратов на различных технологических этапах подготовки спермы к замораживанию.

5.Установление оплодотворяющей способности криоконсервированной спермы жеребцов, санированной полигеном.

Научная новизна:

Испытаны новые препараты для санации спермы жеребцов. Отработаны оптимальные дозировки введения этих препаратов в сперму жеребцов.

Установлено, что для санации спермы жеребцов достаточно вводить антимикробные препараты в дозировках в 5 раз ниже, чем для спермы других видов животных.

Выявлены различные результаты санации спермы, проведенной на различных технологических этапах подготовки её к замораживанию. Рекомендован для применения препарат «Полиген» производства ЗАО «Мосагроген».

Теоретическая и практическая ценность работы.

Применение новых антимикробных препаратов, оказывающих бактериостатическое и бактерицидное действие на микроорганизмы, содержащиеся в сперме жеребцов, приводит к повышению эффективности искусственного осеменения за счет повышения выживаемости спермы. Вследствие этого, повышается процент оплодотворяемости при искусственном осеменении.

В результате выполненной работы был изучен видовой и количественный состав микрофлоры спермы жеребцов. Определена чувствительность выделенных микроорганизмов к антибиотикам. Исследованы различные препараты для санации спермы жеребцов.

Впервые применён для санации спермы жеребцов препарат полиген. При осеменении кобыл спермой, санированной полигеном, существенно повысилась оплодотворяемость кобыл.

Апробация работы.

Материалы диссертации изложены на координационных совещаниях и научных конференциях во ВНИИ коневодства (2004-2005г.г.), научной конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов С.-Пб. ГАУ (2005 г.). По материалам диссертации опубликовано 9 статей.

Положения, выносимые на защиту:

1. Видовой состав микроорганизмов спермы жеребцов.

2. Влияние различных препаратов на микробную загрязнённость и качество спермы при замораживании-оттаивании.

3. Влияние полигена на выживаемость спермиев при различных способах хранения семени жеребцов.

4. Экономическая эффективность применения полигена для спермы жеребцов.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Атрощенко, Михаил Михайлович

ВЫВОДЫ:

1.Сперма большинства исследованных жеребцов, полученная с соблюдением санитарных требований, содержит микроорганизмы в количествах выше санитарных норм.

2.Из испытанных антимикробных препаратов для санации спермы жеребцов в настоящее время наибольшей эффективностью обладают такие препараты, как полиген, гентамицин, ампициллин. Лучшее влияние на сперму оказывает полиген.

3.Оптимальными, при хранении спермы жеребцов при комнатной температуре являются дозировки 0,3-0,4 мл полигена на 100 мл ЛХЦЖ среды.

4.При хранении спермы жеребца при температуре от 0 до +4°С и при хранении спермы в жидком азоте оптимальными являются дозировки 0,1-0,2 мл полигена на 100 мл ЛХЦЖ среды.

5.При хранении несанированной спермы в жидком азоте, оптимальными для санации спермы после оттаивания являются дозировки полигена 0,1-0,3 мл на 100 мл ЛХЦЖ среды

6.Применение оптимальных дозировок полигена снижает микробную загрязнённость спермы до установленных санитарных норм и ниже.

7.Введение полигена в ЛХЦЖ среду при её приготовлении является оптимальным.

Б.Применение полигена повышает оплодотворяемость кобыл по сравнению с осеменением несанированной спермой в среднем в два раза.

9.Применение полигена для санации спермы жеребцов экономически целесообразно.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.

1 .Для санации спермы при хранении её при комнатной температуре применять дозировку 3%-ного раствора полигена 0,3-0,4 мл на 100 мл ЛХЦЖ среды.

2.При хранении спермы жеребца при температуре от 0 до +4°С и при хранении спермы в жидком азоте применять для санации семени дозировки 0,1-0,2 мл полигена на 100 мл ЛХЦЖ среды.

3.Для снижения бактериальной загрязнённости несанированной замороженной в жидком азоте спермы, после оттаивания вводить в сперму полиген в дозе 0,1-0,3 мл на 100 мл ЛХЦЖ среды с перерасчётом на количество разбавителя в дозе спермы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Атрощенко, Михаил Михайлович, Дивово

1. Алиев, Н.Я. Защита спермы баранов от загрязнения патогенными микроорганизмами // Ветеринария.-1973.- №2.- С.84-85.

2. Алиев, Н.Я. Санация спермы баранов/ Алиев Н.Я., Алферов В.В., Пулатов Т. // Сб. работ НИВИ Узбек. ССР.- Ташкент, 1973.-Вып. 21.-С. 238-240.

3. Алиев, Н.Я. Микробная загрязнённость спермы и оплодотворяемость / Алиев Н.Я., Тараненко А.И. //Ветеринария. -1976. №7. - С.81-84.

4. Афанасьев, И. Микрофлора и патогистологические изменения в эндометрии у бесплодных коров // Диагностика, лечение и профилактика болезней сельскохозяйственных животных. /Труды Латв. СХИ.- Елагва,1972. Вып. 58. - С. 101-106.

5. Афанасьев, И. Микрофлора слизистой оболочки матки бесплодных коров/ Афанасьев И., Бренце А. //Диагностика, лечение и профилактика болезней сельскохозяйственных животных. /Труды Латв. СХИ,- Елагва,1970.- Вып. 14.- С. 177-182.

6. Бабушкин, И.Г. Меры борьбы с бактериальной загрязнённостью семени быков // Уральские нивы.- 1976.- №4.- С.54.

7. Балашов, Н.Г. Ветеринарный контроль при искусственном осеменении животных. -М., 1980.-272 с.

8. Балашов, Н.Г. К вопросу микробной контаминации и деконтаминации спермы животных// Гинекологические заболевания и яловость с.-х. животных.- М.,1974.-С.75-78.

9. Балашов, Н.Г. Нужно ли применять антибиотики в средах для хранения спермы//Мол. и мяс. скотоводство.- 1969.- №9.- С.36-38.

10. Балашов, Н.Г. О ветеринарно санитарной оценке спермы//Ветеринария.- 1965.-№8.-С.86-88.

11. Балашов, Н.Г. Санитарные показатели спермы быков /Балашов Н.Г., Бутаков А.К., Евченко Л.В. // Ветеринария.- 1977.-№8.- С.83-84.

12. Балашов, Н.Г. Контроль, стандартизация и санитарные показатели спермы быков при международном обмене / Балашов Н.Г., Бутаков А.К., Родина В.Н. // 23 Всемирный ветеринарный конгресс.- М.,1979.-Т.7.-С.З-4.

13. Балашов, Н.Г. и др. Контроль за качеством спермы при международном обмене//Животноводство.- 1982.- №1.- С.49-50.

14. Балашов, Н.Г. Устойчивость к санирующим средствам микроорганизмов, выделенных из замороженной спермы быков//Животноводство.-1978.-№ 1 .-С.51-52.

15. Безбородин, В.В. Изучение бактериальной контаминации и гистоморфолоических изменений гениталиев у коров после родов//Тез. докл. научн. техн. конф.- Душанбе, 1980.- С.87-89.

16. Беликов, А.А. Микробная контаминация спермы хряков// Повышение эффективности ведения свиноводства. Быково, 1999.-С.200-203.

17. Белокрысенко, С.С. Случай длительного носительства Pseudomonas aeruginosa на коже рук медицинской сестры отделения реанимации новорожденных//Клиническая лабораторная диагностика. 2003,- №7.- С.52-53.

18. Белоножкин, В.П. и др. Санация спермы быков, контаминированой синегнойной палочкой//Животноводство.-1982.-№7.-С.51-52.

19. Битюков, В.А. Источники бактериальной загрязнённости молока и глубокозамороженной спермы быков производителей на молочно - товарных фермах//Труды Кубанского СХИ.-Краснодар,1977. - Вып. 140.- С.41-52.

20. Бочаров, И.А. Источники микробного загрязнения спермы быков//Сб. работ Ленингр. вет. ин-та. 1964.- Вып.26.-С.143-149.

21. Бугров, А.Д. Метод замораживания и санации спермы быков/ Бугров А.Д., Скляров П.Н. //Зоотехния.-2000.-№3.-С.29-30.

22. Бугров, А.Д. Разработка способа санации спермы быков/ Бугров А.Д., Скляров П.Н. //Роль и значение метода искусственного осеменения с.-х. животных в прогрессе животноводства XX и XXI веков.- Дубровицы, 2004.-С. 92-95.

23. Бутаков, A.K. Семинар по организации микробиологического контроля спермы (быков) производителей на племенных предприятиях//Животноводство.-1982.-№11 .-С.30.

24. Бутаков, А.К., Балашов Н.Г. О влиянии некоторых дезинфектантов на сперму быка/ Бутаков А.К., Балашов Н.Г.//Труды ВГНКИ. -1978.-Т.27.- С. 122-128.

25. Бутаков, А.К. Выделение микробов из спермы быков/ Бутаков А.К., Балашов Н.Г., Евченко Л.В. //Ветеринария.- 1979.-№3.-С.59-60.

26. Быстрое, A.A. К вопросу о влиянии глубокого замораживания на микрофлору семени быков//Сб. научн. тр. Куйб. НИВС.-Куйбышев, 1968.-Вып. 5.- С.236-240.

27. Варганов, А.И. Биологический метод санации матки у коров при искусственном осеменении// Профилактика и лечение болезней с.-х. животных. Пермь, 1982.-С.З0-33.

28. Варганов, А.И. Дифференцированное осеменение коров//Ветеринария.-1993 .-№8.-С.41 -43.

29. Варнавский, А.Н. Бактериологический контроль спермы быков-производителей//Ветеринария.-1968.-№2.-С.107.

30. Варнавский, А.Н. Методы асептического взятия семени от производителей сельскохозяйственных животных. М., 1964.- 8 с.

31. Варнавский, А.Н. Микробное загрязнение семени сельскохозяйственных животных и меры его устранения//Животноводство.-1963 .-№ 10.-С.66-68.

32. Варнавский, А.Н. Настольный бокс-термостат для асептической обработки семени / Варнавский А.Н., Турбин В.Ф. //Технология искусственного осеменения и биотехнология воспроизводства с.-х. животных,- М., 1972.-124 с.

33. Величко, И.М. Влияние антибиотиков на V. fetus при глубоком замораживании спермы/ Величко И.М., Принцевский С.Д. //Ветеринария.-1970.-№ 10.-С. 107-109.

34. Войтов, Б.В. Бактерионосительство у быков производителей/ Войтов Б.В., Накашидзе Н.В. //Тр. Днепропетр. СХИ. -Днепропетровск, 1979.-Т.42.-С. 125-126.

35. Володин, В.А. Бактериальная загрязнённость спермы быков и её оплодотворяющая способность// Профилактика болезней с.-х. животных / Тр. Горьк. с.-х. ин-та -1976.- Т.101.-С.28-32.

36. Волосков, П.А. Борьба с бесплодием сельскохозяйственных животных//Бюллетень ВИЭВ.- 1974.-Вып. 19.-С.12-18.

37. Воронин, В.В. Профилактика послеродовых осложнений у коров/ Воронин В.В., Кувшинова З.Я., Малышко Т.М. //Ветеринария.-1973 .-№3.-С.57-59.

38. Воханка, К. О специфических стойловых инфекциях полового аппарата коров//Сельское хозяйство за рубежом. 1972.-№4.-С.38-39.

39. Временное наставление по применению комбиспермосана -ЛАП для санации спермы быков //Ветеринария.- 1989.-№4.-С.73-74.

40. Гавриков, A.M. О микробной загрязнённости семени быков/ Гавриков A.M., Шевченко A.A., Филиппов A.C. //Животноводство.-1971 .-№ 10.-С.84-85.

41. Голубева, Е.Д. Количественный и качественный состав микрофлоры спермы быков Горецкой госплемстанции // Труды Белорусской СХА,- Минск, 1965.- Т. 39.-С.53-55.

42. Голубева, Е.Д. Применение пенициллина и стрептомицина при бактериальной загрязнённости спермы и влияние их на переживаемость спермиев// Труды Белорус. СХА.- Минск, 1965.-Т. 39.-С.49-52.

43. Горохов, JI.H. Методы предотвращения микробной загрязнённости семени быков-производителей и половых путей коров/ Горохов JI.H., Варнавский А.Н //Технология искусственного осеменения и биология воспроизведения с.-х. животных. М., 1972.-С.68-75.

44. Гречухин, А.Н. Чувствительность микроорганизмов, выделяемых из спермы быков-производителей, к антимикробным препаратам//Проблемы профилактики и терапии заразных заболеваний с.-х. животных и птиц. М.Д986.-С.35-38.

45. Гриценко, В.А. и др. Механизмы уропатогенности бактерий//Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1998,- №6.- С.93-98.

46. Гуревич, JI.B. К вопросу о санации спермы хряков на станции искусственного осеменения свиней/ Гуревич Л.В., Шнур В.И., Гречухин А.Н. //Бюллетень ВНИИРиГЖ.-Л.,1982.- Вып. 60.-С.40.

47. Дорожилов, А.Е. Как мы готовим асептическую сперму//Ветеринария.-1974.-№ 10.-С.95-97.

48. Дупенко, O.A. Влияние пенициллина и белого стрептоцида на продолжительность жизни живчиков семени барана // Вопросы физиологии, биохимии, зоологии и паразитологии. М., 1967.- Вып. 2.- С.50-52.

49. Емельянов, A.B. Причины выбраковки быков производителей //Ветеринария.-1973.-№7.-С.76-78.

50. Ерохин, A.C. Снижение бактериальной загрязнённости спермы быков производителей// Биология воспроизведения и технология искусственного осеменения с.-х. жив. - М., 1986.-148 с.

51. Железнов, A.B. Влияние некоторых факторов на загрязнённость микрофлорой эякулятов быков//Животноводство.-1972.-№9.-С.79.

52. Железнов, А.В. Микрофлора семени быков производителей // Вестник с.-х. науки. - 1966.- №8.- С.44-47.

53. Жилов, В. Асептику на станции по искусственному осеменению/ Жилов В., Горбунов А. //Молочн. и мясн. скотоводство .- 1969.-№1.- С.35-36.

54. Зайцев, А.Ф. и др. Безвредность полимиксина М для спермиев быков//Контроль и стандартизация ветеринарных препаратов для диагностики и лечения болезней животных. М.Д980.-С.125-129.

55. Зайцев, Е.А. Лечение быков-производителей, больных баланопоститом / Зайцев Е.А., Зайцева Г.А., Плахотин М.В. // Ветеринария. 1985.- №10.- С.51-52.

56. Зверева, Г.В. Влияние стрептомицина, пенициллина и белого стрептоцида на дыхание спермиев быка/ Зверева Г.В., Яблонский

57. B.А. // Науч. тр. Львовск. Вет. ин-та. Львов, 1961.-Т.11.- С. 109-111.

58. Зудилин, В.А. Патоморфологические изменения при псевдомонозе быков//Ветеринария.-1984.-№5.-С.51.

59. Зюбин, И.И. Микрофлора гениталий коров/ Зюбин И.И., Зюбина М.Ф. // Ветеринария.- 1982.-№9.-С.50-52.

60. Зюбина, М.Ф. О влиянии условно патогенной микрофлоры на воспроизводительную функцию коров // Сибирский вестник с.-х. науки. 1979.- №6,- С.97-99.

61. Иванов, B.C. Совершенствование способа асептического взятия и обработки спермы хряков: Автореф. дисс. . канд. ветер, наук.-Воронеж,1982.- 24 с.

62. Иванов, И.И. Влияние алкоголя на сперматозоиды млекопитающих // Известия СПб. биологической лаборатории. -1913.- Т. 13, вып.1.- С.70-74.

63. Иванов, Ю.Б. Факторы персистенции микрофлоры репродуктивного тракта мужчин в норме и при патологии: Автореф. дисс. . канд. мед. наук.- Оренбург, 1991.- 18 с.

64. Ильин, И.И. Негонококковые уретриты у мужчин. М., 1991. -72 с.

65. Касумов, Ф.М. Действие некоторых антибактериальных веществ на микрофлору, живучесть и оплодотворяющую способность семени быков//Животноводство.-1965.-№5.-С.88-89.

66. Касумов, Ф.М. Изучение процесса воспроизведения при искусственном осеменении коров в связи с видовым составом микрофлоры семени: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. -Кировобад,1966.- 16 с.

67. Касумов, Ф.М. Микрофлора семени быков-производителей и методы борьбы с загрязнением эякулятов микроорганизмами // Животноводство.-1963.-№4.-С.63-66.

68. Ким, P.E. Вопросы санитарии при осеменении овцематок // Ветеринария.-1972.-№9.-С.46-48.

69. Ключников, М.Т. Пути повышения оплодотворяемости коров // Наука сельскому хозяйству. - 1966.-С.137-142.

70. Кобыленков, Н.М. Действие некоторых лекарственных средств при профилактике и лечении эндометритов у коров/ Кобыленков Н.М., Сазонова Л.В., Миронский В.Е. /Технологические аспекты содержания и выращивания животных.- Кишинёв, 1986.-С. 100-103.

71. Косарев, С.Р. Биологические показатели разбавленной санированной спермы хряков при хранении // Контроль, стандартизация и применение химиотерапевтических и биологически активных препаратов, кормовых добавок и премиксов. -М., 1985.- С.41-44.

72. Кошевой, В.П. Экспериментальные данные по изучению возможных источников проникновения микробов в плод коровы // Меры борьбы с болезнями с.-х. животных. /Сб. науч. тр. Харьк. СХИ. -1979.-Т.261.-С.54-58.

73. Кошевой, В.П. Этиологическая роль микрофлоры в возникновении воспалительных процессов в гениталиях у тёлок// Меры борьбы с болезнями с.-х. животных. /Сб. науч. тр. Харьк. СХИ.- 1978.- Т.249.-С.48-52.

74. Кремлёв, Е.П. Бактериальные аборты у коров// Ветеринария,-1974.-№1.-С.79-82.

75. Кремлёв, Е.П. Способы повышения санитарного качества спермы быков//Профилактика и лечение болезней животных. -Калининград, 1982.-С.28-33.

76. Кремлёв, Е.П. Влияние бактериальной загрязнённости спермы на производство стада/ Кремлёв Е.П., Банакова Л.А. //Животноводство.-1974.-№6.-С.60-62.

77. Кремлёв, Е.П. Гетас при псевдомонозе быков/ Кремлёв Е.П., Силаева М.В., Бутаков А.К. //Ветеринария.-1985.- №10.- С.49.

78. Кружкова, Е.С. Хранение семени жеребца при комнатной температуре//Коневодство и кон. спорт. 1962.- №1,- С. 19.

79. Кувшинова, З.Я. Влияние обработок препуциальной полости быков производителей растворами антисептиков на бактериальную загрязнённость их спермы//Сб. науч. тр. Куйбыш. НИВС. - Куйбышев, 1977.-Вып. 7.-С.64-66.

80. Кувшинова, З.Я. Сравнительное изучение чувствительности микробов, выделенных из препуция быков, к антибактериальным препаратам// Там же. С.67-69.

81. Кувшинова, З.Я. Профилактика инфекционного бесплодия коров и тёлок при искусственном осеменении/ Кувшинова З.Я., Парусов В.П. // Сб. науч. тр. Куйбыш. НИВС. Куйбышев, 1974.-Вып. 6.-С.82-84.

82. Кузьмин, М.Д. и др. Роль персистирующей микрофлоры в формировании патоспермии // Урология и нефрология.- 1998.- №2,-С.46-48.

83. Куклин, А.Д. Изучение контаминации микроорганизмами спермы жеребцов при замораживании: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Харьков, 1973.-24с.

84. Куклин, А.Д. Предупреждение бактериального загрязнения спермы жеребцов // Ветеринария.-1973.-№3.-С.87-88.

85. Куклин, А.Д. Применение спермосана-3 при осеменении кобыл / Куклин А.Д., Родина В.Н. // Ветеринария.- 1976.-№10.-С.64-65.

86. Курбатов, А. Предупреждение микробной контаминации при искусственном осеменении кур//Птицеводство.-1976.-№9.-С.48-49.

87. Курбатова, Р. Опыт асептического получения, разбавления и технологической обработки спермы быков-производителей // Молочн. и мясн. скотоводство.- 1973.- №3.- С.26-28.

88. Листунов, А.Д. и др. Использование спермы быков, контаминированной условно патогенными микроорганизмами // Зоотехния.-1990.-№9.-С.62-64.

89. Логвинов, Д.Д. Асептическое взятие спермы у быков // Ветеринария.-1972.-№5.-С.86-89.

90. Логвинов, Д.Д. О чувствительности микрофлоры спермы к антибиотикам // Молоч. и мясн. скотоводство. 1968.- №11.- С.26-27.

91. Логвинов, Д.Д. Асептическое получение спермы от хряков/ Логвинов Д.Д., Кошевой В.П., Харенко Н.И. // Ветеринария.-1976.-№2.-С.74-76.

92. Максимов, A.A. Бактериальное загрязнение спермы кроликов и пути его предотвращения при искусственном осеменении: Автореф. дисс. канд. вет. наук. М.,1975.- 18 с.

93. Манасян, А.О. К вопросу о получении асептической спермы // Науч. тр. Ставроп. СХИ. Ставрополь, 1973.- Т.5, вып. 36.-С.31-33.

94. Маркелов, О.В. Чувствительность к лещиннику и антибиотикам бактерий и грибов, выделенных при эндометритах у коров // Молодые учёные АПК / Материалы обл. межвузов, конференции. - Ульяновск, 2002.- 4.1.- С.99-100.

95. Мартыненко, H.A. Эмбриональная смертность с.-х. животных и её предупреждение. Киев, 1979.- 329 с.

96. Марчук, О.И. Влияние различных антибиотиков на переживаемость спермы хряков // Бюллетень ВНИИРиГЖ. Л., 1985.- Вып. 85.- С.7-11.

97. Машковский, М.Д. Лекарственные средства. М., 1987.- 4.2, 276 с.

98. Мегеря, В.Б. Биологический контроль спермы на предприятиях // Животноводство. 1984.- №7.- С.57-58.

99. Методические указания по лабораторному исследованию спермы производителей, а также препаратов и инструментов,применяемых при искусственном осеменении животных, на бактериальную загрязнённость. М., 1970.-16 с.

100. Милованов, В.К. Причины эмбриональной смертности и новые возможности улучшения воспроизводства стад/ Милованов В.К., Соколовская И.И. // Животноводство.-1964. №6.-С.75-83.

101. Михайлов, H.H. Профилактика малоплодия и бесплодия свиноматок. М., 1967.-240 с.

102. Михайлов, H.H. К изучению псевдомоноза животных/ Михайлов H.H., Зудилин В.А // Ветеринария.-1975.-№6.-С.88-90.

103. Михайлов, H.H. К методике терапии быков при псевдомонозе / Михайлов H.H., Зудилин В.А. //Ветеринария.-1975.-№12.-С.85-86.

104. Михайлов, H.H. Санация препуциальной полости у хряков/ Михайлов H.H., Кондрахина К.И., Чистяков И.Я. // Ветеринария.-1964.-№9.-С.92-93.

105. Михайлов, H.H. Лечение послеродовых эндометритов у коров/ Михайлов H.H., Муртазин Б. //Ветеринария.-1971.-№12.-С.83-87.

106. Михайлов, H.H. Результаты инфицирования гениталий у овец / Михайлов H.H., Чистяков И.Я., Зудилин В.А. // Ветеринария.-1972.-№9.-С.48-50.

107. Михайлов, H.H. Условно-патогенная микрофлора и воспроизводительные функции самок/ Михайлов H.H., Чистяков И.Я., Муртазин Б. // Ветеринария.-1970.-№2.-С.74-75.

108. Мороз, Г.И. Обработка спермы хряков гентамицином / Мороз Г.И., Макуха И.И. // Ветеринария.-1986.-№4.-С.58-59.

109. Москалик, P.C. Микрофлора спермы и половых органов клинически здоровых племенных быков // Технологические аспекты содержания и выращивания животных. М., 1984.-С.103-109.

110. Муртазин, Б. Сравнительная оценка степени инфицированности половых органов коров // Бюллетень ВИЭВ.-М,1971.-Вып. 11.-С.41-43.

111. Муртазин, Б. Условно патогенная микрофлора при эндометритах // Ветеринария.-1971 .-№8.-С.83-85.

112. Муртазин, Б. Эмбриональная смертность у крупного рогатого скота/ Муртазин Б., Пулатов Г. // Ветеринария.-1994.-№8.-С.43-45.

113. Мююрсепп, И.Я. Метод повышения оплодотворяемости повторно осеменяемых коров // Ветеринария. 1966.- №10.- С.71.

114. Нарижный, А.Г. Санация спермы хряков перед криоконсервированием // Актуальные проблемы биологии в животноводстве. Боровск, 2000.-С.414-415.

115. Науменков, А.И. Влияние спермосана на живучесть спермы жеребца при разной температуре её хранения/ Науменков А.И., Романькова Н.К. //Интенсификация коневодства. 1985.-С.65-70.

116. Hyp Эль Дин Абдель Рахман Али Приёмы асептического взятия семени у буйволов производителей // Животноводство.-1962.-№8.-С.65-67.

117. Осетров, A.A. О микробной загрязнённости влагалища коров при искусственном осеменении // Ветеринария.-1966.-№3.-С.94-95.

118. Осташко, Ф.И. Методические рекомендации по харьковской технологии асептического получения и криоконсервации спермы производителей для госплемстанции и племпредприятий // НИИ жив-ва Лесостепи и Полесья УССР. Харьков, 1978.- 34 с.

119. Осташко, Ф.И. Технология асептического получения и консервирования спермы быков/ Осташко Ф.И., Шинкаренко В.А., Величко И.М. М., 1973.- 7 с.

120. Осташко, Ф. Устройство для асептического разбавления спермы производителей / Осташко Ф., Шинкаренко В., Павленко М. // Молочн. и мяс. скотоводство. 1973.- №7.- С.36-37.

121. Палий, Г.К. К изучению псевдомоноза на племенных станциях // Ветеринария.-1976.-№12.-С.64-67.

122. Палий, Г.К. Чувствительность синегнойной палочки к антимикробным препаратам // Ветеринария.-1975.-№3.-С.80-82.

123. Пантюхова, О.И. Влияние антибиотиков на переживаемость спермиев и развитие микрофлоры в семени быков // Резервы увеличения продукции животноводства. Киев, 1964.- С.119-122.

124. Пантюхова, О.И. Влияние бактериостатических веществ на оплодотворяющую способность спермиев // Молочно мясн. скотоводство. - 1969.-Вып.14.-С.61-64.

125. Пантюхова, О.И. Влияние микроорганизмов и бактериостатических веществ на переживаемость и оплодотворяющую способность спермиев: Автореф. дисс. . канд. биол. наук.- Киев, 1967.- 18 с.

126. Пантюхова, О.И. Влияние обработки препуциев баранов-производителей на бактериальную загрязнённость семени // Науч. тр. Киев. опыт, станции животноводства. Киев, 1962.- Т.8. - С.54-57.

127. Пантюхова, О.И. Микрофлора семени племенных производителей // Науч. тр. Киев. опыт, станции животноводства. -Киев, 1971.- Т.7. С.95-97.

128. Пантюхова, О.И. Обработка препуциев быков-производителей дезинфицирующими растворами как средство снижения бактериальной загрязнённости семени // Резервы увеличения продукции животноводства. Киев, 1964.- 184 с.

129. Парусов, В.П. Бактериальная загрязнённость спермы быков -производителей Куйбышевской станции по искусственному осеменению// Сб. науч. тр. Куйб. НИИВС. Куйбышев, 1974.-Вып.6.-С.72-77.

130. Парусов, В.П. Влияние синегнойной палочки на воспроизводственные функции крупного рогатого скота // Там же. -С.78-81.

131. Парусов, В.П. Микрофлора половых органов коров // Ветеринария.-1974.-№9.-С.80-82.

132. Парусов, В.П. Обеззараживание спермы быков от синегнойной палочки // Ветеринария.-1973.-№11.-С.77-78.

133. Парусов, В.П. Изучение причин яловости и бесплодия коров в хозяйствах Куйбышевской области/ Парусов В.П., Воронин В.В. // Сб. науч. тр. Куйб. НИИВС. Куйбышев, 1974.-Вып.6.-С.69-71.

134. Парусов, В.П. Профилактика микробной загрязнённости спермы быков/ Парусов В.П., Кувшинова З.Я. //Молоч. и мяс. скотоводство. 1973.- №3.- С.29-30.

135. Парусов, В.П. Санитарное качество спермы быков-производителей/ Парусов В.П., Кувшинова З.Я. // Ветеринария.-1972.-№9.-С.50-51.

136. Парусов, В.П. Действие антибиотиков на спермии при глубоком охлаждении / Парусов В.П., Кузнечиков Л. А. // Ветеринария.-1969.-№ 12.-С.72-73.

137. Паршутин, Г.В. Влияние микробов на сперму жеребцов // Труды ВНИИ коневодства. М., 1961.-Т.23.-С.107-118.

138. Петрянкин, Ф.П. Условно патогенные бактерии и их роль в нарушении репродуктивной функции животных: Автореф. дисс. . канд. вет. наук. -М., 1977.- 16 с.

139. Петрянкин, Ф.П. Бактериальная контаминация спермы быков/ Петрянкин Ф.П., Зудилин В.А. // Ветеринария.-1976.-№7.-С.84-85.

140. Петрянкин, Ф.П. Степень бактериальной контаминации спермы быков-производителей Чувашской АССР/ Петрянкин Ф.П., Степанова Г.Г., Ботникова Н.М. // Сб. работ Чувашской респ. вет. лаб. 1976.- Вып.5.-С.87-92.

141. Плишко, Н. Противомикробные и стабилизирующие свойства Na2 ЭДТА // Свиноводство.- 1975.-№1.-С.226-27.

142. Плишко, Н. Хранение спермы при различных температурах/ Плишко Н., Смирнов И., Фам Тхе Ке // Свиноводство.-1976.-№7,-С.27-28.

143. Полянцев, H.H. Эффективное санирующее средство для спермы быков/ Полянцев H.H., Силаева М.В., Середин В.А. // Зоотехния.-1989.-№5.-С.63-64.

144. Поспелов, А.И. Микрофлора спермы быков, сохраняемой в гранулах в жидком азоте/ Поспелов А.И., Артемьев В.И., Сефершаев М.А. // Сб. работ Ленингр. вет ин-та. Л., 1973.- Вып. 34.-С. 109-111.

145. Поставная, В.И. Действие бактериостатических веществ на интенсивность фруктолиза в семени быков//Научн. тр. Киевской опытной станции животноводства. Киев, 1963.- Т.9.- С.53-56.

146. Прокопцев, В.М. Новый препарат для санации спермы хряков Антибакс 2 // Бюллетень ВНИИ РГЖ. - Л., 1989.-Вып.116.-С.20-21.

147. Радченков, В.П. Иммунодефицит и контаминация спермы синегнойной палочкой // Вестник с.-х. науки. 1990.- №2.- С.97-99.

148. Радченков, В.П. Оценка этиологической роли синегнойной палочки в пренатальных потерях у крупного рогатого скота // С.-х. биология. 1987.- №1.-С.91-96.

149. Радченков, В.П. Влияние условно патогенной микрофлоры на воспроизводительную функцию животных/ Радченков В.П., Радкевич С.А., Мороз А.Ф. // Зоотехния.-1988.-№11.-С.55-57.

150. Радченков, В.П. Условно-патогенная микрофлора в сперме быков/ Радченков В.П., Радкевич С.А., Стоянов В.К. // Зоотехния.-1993.-№9.- С.25-26.

151. Репко, А.Н. Грибковая загрязнённость спермы быков// Автореф. дисс. . канд. вет. наук. Львов, 1968.- 17 с.

152. Родин, И.И. Гигиена проведения искусственного и естественного осеменения / Родин И.И., Стрелков В.Н. М., 1978.54 с.

153. Родина, В.Н. Сравнительное изучение бактерицидных свойств и безвредности препаратов при санации спермы животных /Родина

154. B.Н., Балашов Н.Г., Зайцев А.Ф. // Труды ВГНКИ. М., 1978.-Т.27.1. C.127-134.

155. Родина, В.Н. и др. Некоторые микробиологические и биологические показатели неразбавленной спермы петухов/ЛСонтроль и стандартизация ветеринарных препаратов для профилактики, диагностики и лечении болезней животных. М., 1980, С.105-109.

156. Романькова, Н.К. Санация спермы жеребцов/ Романькова Н.К., Науменков А.И. // Воспроизводство и улучшение племенных качеств конского поголовья. Дивово, 1979,- С.63-68.

157. Рустамов, А.Р. Влияние антибиотиков на сперму быков // Бюлл. ВНИИРиГЖ. Л., 1989.-Вып. 116.-С. 10-13.

158. Сагалов, A.B. Амбулаторно-поликлиническая андрология. -Н.-Новгород, 2003.- 234 с.

159. Сагалов, A.B. Влияние санации хронических воспалительных процессов уретры и простатовезикулярного комплекса на нарушение половой функции у мужчин/ Сагалов A.B., Бавильский В.Ф. //Тезисы конф. ПАА. М., 2001.- С.57.

160. Садовский, Н.В. Топографическая анатомия домашних животных. М., I960.- С.260-261.

161. Самгуров, A.M. Эффективность санации матки при искусственном осеменении и вольной случке/ Самгуров A.M., Шамба В.Г., Середин В.А. // Вестник ветеринарии. 1997.- №5.-С.25-27.

162. Сахно, В.Ф. Предупреждение бактериальной загрязнённости семени хряка/ Сахно В.Ф., Синяева A.A. // Животноводство.-1962,-№3.-С.79-80.

163. Сеглинь, А.К. Микрофлора матки коров в послеродовом периоде // Ветеринария. 1971.- №9.- С. 107-109.

164. Семёнов, С.Л. Бактериальное загрязнение спермы жеребцов и пути его устранения // Тр. Кишин. СХИ. Кишинёв, 1955.-Т.5.-С.157-164.

165. Семёнов, С.JI. Микрофлора и методы санации спермы сельскохозяйственных животных: Автореф. дисс. . канд. вет. наук. Кишинёв, 1950.- 7 с.

166. Семёнов, С.Л. Микрофлора и методы санации спермы сельскохозяйственных животных // Тр. Кишинёв. СХИ. Кишинёв, 1955.-Т.5.-С. 147-156.

167. Сергиенко, А.И. Новый санирующий препарат для спермы быков производителей // Материалы Всеросс. науч. и учебно-методич. конференции по акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных. - Воронеж, 1994.-С.191-192.

168. Середин, В.А. Синдром стад с субклинической патологией гениталий // Морфофункциональные показатели продуктивных животных. Ставрополь, 1992.- С.63-73.

169. Сидоренко, C.B. Антибиотикограмма: дискодиффузионный метод. Интерпретация результатов/ Сидоренко C.B., Колупаев В.Е. -М., 2002.-84 с.

170. Сильченко, И.Г. Заболевание половой системы жеребцов и влияние их на холостение и аборты кобыл // Вет. зоотех. бюлл.-1948.-№1-2.- С.17-24.

171. Скляров, П.Н. Использование комплекса гентамицина и ампициллина для санации спермы и эмбрионов/ Скляров П.Н., Бугров А.Д., Тихона Г.С. // Використання трансплантацп ембрюшв в селекцп i вщтворепш сшьськогоспадарських тварин. Киев, 1997.-С.78-79.

172. Спиваков, A.C. Влияние бактериостатических веществ на переживаемость спермиев быков // Материалы Всесоюз. конференции по биохимии с.-х. животных. 1961.- Вып.2.- С.92.

173. Спиридонов, Б.С. Влияние бактериальной загрязнённости на качество спермы хряков // Сб. науч. трудов Витеб. СХИ. Витебск, 1992.- Т.29,- С.113-116.

174. Солсбери, Г.У. Теория и практика искусственного осеменения в США/ Солсбери Г.У., Ван-Демарк Н.Л. М., 1966.- 420 с.

175. Старовойтов, Н.С. Обнаружение возбудителей в сперме сельскохозяйственных животных // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии. Покров, 1992.- 4.2. - С.253-254.

176. Триленко, В.А. Коли-микробная флора у пчёл//Болезни с.х. животных и птиц, их профилактика и лечение / Сб. работ Ленинград, вет. ин-та.-Л., 1973.- Вып. 34.- С.126-135.

177. Троицкий, А. Заболевание тестикул и порочность спермы у жеребцов // Коневодство.-1938.-№12.-С.38-40.

178. Филоненко, В.Ф. Влияние добавок антибиотиков на переживаемость спермиев быка // Бюлл. научно-технич. информации НИИСХ. ЦЧ полосы. 1958.- №4.- С.44-45.

179. Фрорип, Г. О результатах лечения быков-производителей, в сперме которых установлено наличие синегнойной палочки/ Фрорип Г., Юхкам А., Райд Л. // Гинекологические заболевания и яловость с.-х. животных. Рига, 1974.- С. 124 - 136.

180. Харенко, Н.И. Микробная контаминация спермы хряков // Ветеринария,-1975.-№3.-С.82-85.

181. Харенко, Н.И. Микрофлора спермы хряков и её свойства // Труды Харьк. СХИ. Харьков, 1978.- Т.249.- С.45-48.

182. Харенко, Н.И. Микрофлора спермы хряков и оплодотворяемость свиноматок // Труды Харьк. СХИ. Харьков, 1979.- Т.261.- С.51-54.

183. Храброва, JI.A. Бактериальная загрязнённость спермы жеребцов // Новое в технологии коневодства и коннозаводства. -Дивово, 1990.-С.75-79.

184. Храброва, JI.A. Бактериальные эндометриты у кобыл // Проблемы племенной работы и экологически чистых технологий в коневодстве. Дивово, 1994.- С.334-344.

185. Храброва, JI.A. Микробная загрязнённость спермы жеребцов при длительном хранении/ Храброва JI.A., Фомина E.JI. // Новые селекционные, физиологические, биотехнологические методы в коневодстве. Дивово, 1999,- С.217-222.

186. Чистяков, И.Я. Санитарные условия содержания баранов-производителей//Труды ВИЭВ.-М., 1964.- Т. 30.- С. 134-139.

187. Чураков, A.A. К вопросу о лабораторной диагностике хламидиоза // Клиническая лабораторная диагностика. 2005.- №2-С.43-47.

188. Шаталов, В.Ф. Чувствительность к препаратам бактерий из половых органов животных/ Шаталов В.Ф., Нехаев Е.Е, Храпковская Л.Т. // Ветеринария. 1985.- №9.- С.46-47.

189. Шипицин, А.Г. Бактериальная контаминация спермы быков-производителей/ Шипицин А.Г., Зудиллин В.А. //Ветеринария.-1978.- №11.- С.82-83.

190. Шнур, А.И. Контаминация микроорганизмами спермы индюков // Ветеринария.- 1976.-№1.-С.76-77.

191. Юсов, Е.Н. и др. Влияние спермосана-ППК на выживаемость спермиев жеребцов до и после замораживания // Применение химиотерапевтических препаратов в ветеринарии и разработка методов их контроля. Москва, 1989,- С. 125-131.

192. Юцковская, Я.А. Клинико-эпидемиологические аспекты и роль ассоциаций возбудителей при инфекциях мочеполового тракта в условиях Приморского края: Автореф. дисс. . д-ра мед. наук. -М., 2003.- 48 с.

193. Яковлев, Т.Е. Влияние антибиотиков на качество спермы быков и хряков // Ветеринария. 1970.- №4- С. 103.

194. Albihn, A. Uterine microbiology and antimicrobial susceptibility in isolated bacteria from mares with fertility problems/ Albihn A., Baverud V., Magnusson U. // Acta veterinaria Scandinavica.-2003.-Vol.44, №3-4.-P. 121-129.

195. Allen, W.E. Aspect of genital infection and swabbing techniques in the mare / Allen W.E., Nevcombe J.R // Vet. Res.-1979. Vol.17. -P.228-231.

196. Almquist, J.O. Fertility of bovine semen in milk diluent containing combinations of penicilinum-neomycin and lincomicin-spectinomycin/ Almquist J.O., Zaugg N.L. // J. Dairy Sci.-1974.-Vol. 57, №10.-P. 12111213.

197. Bain, M.A. The pole infection in infertility in the Thoroughbred mare// Vet. Rec.-1966.-Vol.78,№5.-P. 168-173.

198. Batellier, F. Advances in cooled semen Technologies / Batellier F., Vidament M., Duchamp G. // 3 rd International Symposium on Stallion Reproduction Jan 10, 12 2001.

199. Bennette, D.Y. Diagnosis and treatment of equine bacterial endometritis // Equine Vet .Sc.-1987.-Vol.7, №6.-P.345-352.

200. Boryczko, Z. Proba zmiejszenia zaniecryzczen bakteryjnych nasienia mrozonego buhajow// Med. Wet -1978.- Vol. 34, №6. P. 331333.

201. Boryczko, Z. Der Eingluss von Pseudomonos aeruginsza, Esherichia coli uhd Staphylococcus aureus auf die metabolischen prozesse und die Vitalitat von bullenspermien // Zuchthygiene.-1982.-Bd. 17, №1. S. 13-18.

202. Boryczko, Z. Auswircungen von Bakterien in Bullensperma auf die Motilität der Spermien sowie ihren Gehalt an ATP und ADP/ Boryczko Z., Kahn W., Velez G. // Zuchthygiene.-1985.-Bd. 20, №5.- S. 234-239.

203. Boryczko, Z. Wplyn penicyliny i zywotnose nasienia buhajow/ Ossowicka-Stepinska J., Udala J., Lasota B. // Med. Wet.-1981.- Vol. 37, №8.- P. 491-495.

204. Brown, V.G. Microbiology of bovine semen and artificial breeding practices under New-Zealand conditions/ Brown V.G., Scholium L.M., Jarvis B.D.V. // N.Z.J, agric. Res.-1974.-Vol.17, № 4.-P. 431-432.

205. Burci, F. Infection of the reproductive treat of equines // Proc. 9 Int. Symp. W.A.V.M.I. Venue, Italia. 1986.-P. 111-116.

206. Danall, G.J. Bacterial contamination of boar semen/ Danall G.J.R., Jones J.E.T. // Proc. of the congr. On anim. Hygiene. Hannover, 1985.-Vol. 1-P. 411-416.

207. Danowski, K.M. Qualitative und qualitative Untersuchung zum Keimgehalt von Ebersperma und Zur Antibiotikaempfindlichkeitdesuberwiegenden Keimspektrums (unter dem Aspekt einer möglichen Samenkonservierung): Diss. .-Hannover, 1989.- 123 s.

208. Dion, W.M. The origin and species of yeasts in commercial preparations of boreins semen // Canad J. comp. Med.-1979. Vol. 43, № 1,-P. 16-21.

209. Dowsett, K.F. Reproductive Evalnation of the Stallion// Equine Practice. 1988. - Vol.10, №2. - P. 18-24.

210. Dubiel, A. Flora bakteryjna ejakulatow/ Dubiel A., Stanoczyk J.F., Kpolinski E.A. //Med. Wet. 1981. - Vol.37, №8.-P. 486-489.

211. Edmondson, J.E. Study of bacteria in bovine semen and their effect on livability of spermatozoa/ Edmondson J.E., Tallman K.L., Herman H.A. // Missouri Agr., Expt. Sta.-1949.-B. 444. P. 12.

212. Jovicin, M. Uticaj kontaminacije zamrznutog semena bika na koncerpciju osemenjenih kravah/ Jovicin M., Olujic M., Pupavac V. // Vet. Glosnik. 1991. - Vol. 45, №11/12. - P. 779-782.

213. Garcia, P. Estudio de la raza White Leghorn en condiciones de produccion/ Garcia P., Martinez A.E., Capote M. // Rev. Cub. Cienc. avic.- 1991. -Vol. 18, №2.-P. 117-121.

214. Getty, S.M. The experimental use of bull semen contaminated with Pseudomonas aeruginosa organism/ Getty S.M., Ellis D.J. // J. Amer. Veterin. Med. Assoc. 1967. - Vol.151, №12. - 2688-2691.

215. Gracryk, S. Wpkyw penicyliny i streptomycyny produkcji krajowej na eras przezywonia plemnikow krolika/ Gracryk S., Dubiel A. //Med. Wet. 1978. - Vol. 34, №3. -P.149-150.

216. Gunsalus, I.C. The bacteriology of bull semen/ Gunsalus I.C., Salisbury G.W., Willett E.L. // J. Dairy Sei. 1941. - Vol. 24. - P. 911919.

217. Hillers, J.K. Economic comparison of breeding dairy cows artificially versus naturally / Hillers J.K., Thonney S.C., Gaskins C.T.// J. Dairy Sci. 1982. - Vol. 65, № 5. - P. 861-865.

218. Hancock, J.L. Corynebacterium pyogenes in bull semen/ Hancock J.L., Kelly W.R. // Veterinary Record. 1948.- Vol. 60, № 51. - P. 669670.

219. Holzmann, I.A. Tiamulin, a new antibiotic for eliminating mycoplasmas from bovine serum/ Holzmann I.A., Laber G., Gumhold G. // Theriogenology. 1984. - Vol. 22, № 3. - p. 237-240.

220. Hovorka, J. Nektere zkusenosti s pouzitium antibiotik v redidle pro konzervacisemena plemennych kancu // Veterinarstvi.- 1985.- Vol. 35, № 6.-S. 257-260.

221. Hughes, J.P. Endometritic in the mare/ Hughes J.P., Couto M.A // Proc. Inter. Congr. Anim. Reprod. Art. Insem. Dublin, 1988. - P.91-99.

222. Hughes, J.P. The relation of infection to infertility in the mare and stallion/ Hughes J.P., Lou R.C. // Uquine Vet. J. 1975.- Vol.7.-P. 155159.

223. Йорданов, С. Получвания върху бактерум пиоционеум при говядато в Руански окръ. // Жив. вет. дело. 1958.- V.12, №10. -С.23-28.

224. Kenney, R.M. Clinical fertility evaluation of the stallion // Proc. 21 Ann. Conven. Am. Assoc. Equine Prac. 1975. - P. 336-355.

225. Klug, E. Infections agents in equine semen / Klug E., Sieme H. // Acta Vet. Scand. Supp.l. Uppsala, 1992.- № 88.- P. 73-81.

226. Козарев, А. Бактериально затърсяване на семенна течност от бици-производители // Вет. Сбирка.-1981.- Г. 79, № 2.- С. 26-27.

227. Корр, С.Е. Freeing equine semen for use in artificial insemination // VI cong. Inter. Reprod. Anim. Insem. Paris, 1962.-S.2.

228. Klug, E. Sameniibertragung und Embryotransfer biem Pferd // Der praktische Tierarzt. Hannover. 1987. - №1. - S. 21-25.

229. Коруджийски, H. Проучване на микрофлората на семенна течност от бици, съхранявана при ниски температури // Вет.-мед. науки .- 1979.- Г. 16,№ 9.- С. 33-34.

230. Kenney, R.M. Clinical fertility evaluation of the stallion // Proc. 21 Ann. Conven. Am. Assoc. Equine Prac. 1975. - P. 336-355.

231. Korlowska, L. Przydatnosc antybiotykow producji krajowej do konserwacji nasienia buhajow/ Korlowska L., Hoffman-Wozniak K., Jaskowski L. // Med. Wet. 1976,-Vol. 32, № 9.- P. 546-550.

232. Krastavcevic, L. Bacterijska flora sperme bikova, na utenzilijama za rad i u spedini za proizvodnju/ Krastavcevic L., Petrovic S., Vikovic D. // Vet. Glasnik. 1981. - Vol. 35., № 11.-P. 1169-1176.

233. Krolinski, J. Analiza skutecznosci arialania wybranych preparatow zastosowanych celem popravy jakosci nasienia buhajow // Weterynaria. -Wroclow, 1981. № 38.- P. 193-208.

234. Kvpata, V. Mikrobiologiska kontaminace tekuteho dusiko v kontejnerech s konzervovanym spermatem byku/ Kvpata V., Krpatova J. // Veterinarstvi.- 1976.- Vol. 26, № 11.- P. 4887-488.

235. Mac Pherson, S.W, The survival of Pathogenic Bacteria in Bovine semen preserved by Freezing/ Mac Pherson S.W., Fish W.A. // Am. J. Vet. Res. 1954.- P. 548-550.

236. Malmgren, L. et al. Aerobic bacterial flora of semen and stallion reproductive tract and it"s relation to fertility under field conditions // Acta veter. Scand. 1998.- Vol. 39, № 2.- P. 173-182.

237. Маринов, П. Асептично получаване и изпользоване на семенна течност от коч. // Животновъдство.- 1980.- Г. 34, № 4.- С. 46-48.

238. Маринов, П. Възпроизводственият процес и микробиологичният статус на спермата, получавана и исползавана у нас. // Вет. сб.- 1988.- Г. 86, № 6.- С. 46-47.

239. Mazurova, J. Vliv modifîcovane metody odberu spermatu na snizeni hladiny bakterialni kontominace ejakulatu byka/ Mazurova J., Rysanek M., Forjstek M. // Veterinarstvi. 1973. - Vol. 23, № 8. - P.367-368.

240. Mercier, P. Jnteret d"unt prophylakie sanitaire au cours des operations d"insemination artificielle cher la lapine// Ciniculture.- 1990.-№4.- P. 237-241.

241. Mesaros, P. On the problem of bacteriological and mycological conta mination on the ram semen/ Mesaros P., Gamcik P., Schvarz F., Feyes J. // Folia vet. Kosice, 1984. - T. 26, № 1. - P. 105-114.

242. Meyer, M. Untersuchunder uber die samenschadigende Wirkung der Stoffwechselproducte von Staphylococcus aureus: Diss. . -Hannover, 1979. S. 49-65.

243. Mohanty, P.K. Bacterial load of frozen bovine semen/ Mohanty P.K., Mohanty B.N, Ray S.K.H.E.A. // Ind. Vet. J. 1988. - Vol. 65, №6.- P. 516-518.

244. Naidi, K.S. Note on antibiotic sensetivity of bacterial isolates from semen/ Naidi K.S, Rao A.R, Muytry K.G. // Indian. J. anim. Sci. -1981.- Vol. 51, № 3. P.362-363.

245. Naglic, T. et al. Occurence of bacteria and mycoplasma in stallion semen // Vet. Arf. 1980. - P. 195-202.

246. Nicolic, P. Bakterijska flora nativnog i razredenog semena nerasta/ Nicolic P, Kristic V, Cerne F. // Vet. Glasnik.- 1976. Vol. 30, № 12. -P. 1019-1025.

247. Николов, И. Нокои антибиотици и качеството на семенната течность от бици/ Николов И., Събев М., Миков Ц., Челебибски С. // Животновъдство. 1985. - Г. 47, № 2. - С. 8-9.

248. Nowakowski, W. Flora bacteryina nierozciencronego nasienia buhaja / Nowakowski W., Wierzbowski S. // Med. Wet. 1981. - Vol. 37, № 12.-P. 751-753.

249. Nowakowski, W. Ocena bacteriologiczna produkcji nasienia buhajow w kilku szacjach hodowli i unasieniania zwierzat / Nowakowski W., Wierzbowski S. // Med. Wet. -1981. Vol. 34, № 8. - P.488-490.

250. Oregovic, L. Prilog poznavanju mikoflore sjemena bika/ Oregovic L., Turalic F. // Veterinaria. Sarajevo, 1982. - Vol. 31, № Vi. - P. 53-60.

251. Piasecka-Serafin, M. Oslona chroniaca napletek buhaja przed zakazeniem w czasie wspiecia przypobieraniu nasienia // Med. Wet. -1974. Vol. 30, № 9. - P. 554-556.

252. Piasecka-Serafin, M. Niektore metody ochrony przed zakazeniem napletka i nasienia buhajow // Med. Wet. 1974.- Vol. 30, № 10. - P. 623-626.

253. Piasecka-Serafin, M. Zanieczyszcrenia bacteryjne napletka i nacienia byhajow w crasie pobierania nasienia do sztucznej pochowy // Med. Wet. 1973. - Vol. 29, № 6 .- P. 261-263.

254. Ricketts, S.W. Bacteriologicalexamination of the mare"s cervex: Techniques and interpretation of results // Vet. Res. 1981. - Vol. 108, № 3.-P. 46-51.

255. Scott, P. The aerobic bacterial flora of the reproductive tract of the mare//Vet. Res. 1971. -Vol. 88. - P. 58-61.

256. Семков, M. Изпитване влиянието на пастъоризанията на сперморазредителя и на антибиоците върху абсолютната преживаемост и микробното числа на сперма от бик след дълбоко замразявоне // Вет. мед. науки,- 1974. № 6. - С. 54-59.

257. Sevinc, A. Dedisik antibiyotikler katilarak dondurulmus boga sperma larindan elde edilen dolverimi / Sevinc A., Yurdaydin N., Tekin N. e.a. // Ankara Univ. Vet. Fak. Derg. 1984. - Vol. 31, № 3. - P. 491497.

258. Simpson, R.B. Michoflora in Stallion semen and their control with a semen extender // Proc. 21 st. Ann Conven. Am. Assoc. Equin Prac.-1975.- P. 255-261.

259. Singh, E.L. The potential of semen embryos for introducing pathogens into the uterus // Aroc. 11 Inter. Congr. Anum. Reprod. And Avt. Insem. Dublin, 1988. P. 71-79.

260. Sone, M. Effects of various antibiotics on the control of bacteria in boar semen/ Sone M., Ohmura K., Bamba K. // Vet. Rec. 1982. - Vol. 111, № l.-P. 11-17.

261. Стоянов, Т. Ретроспективен анализ на микробната концентрация на проба семенна течность от говежди расплодници // Вет. сб. 1985. - Г. 83, № 5. - С. 12-16.

262. Stewart, А.В. Effects of Gram-positive bacterial pathogens in ewes : Peptidoglycon as a potential mediator of interruption of early pregnancy/ Stewart A.B., Inskeep E.K., Townsend E.C., Dailey R.A. // Reproduction .- 2003.- Vol.25, № 2. P. 295-299.

263. Streeramulu, P. A note on the study of bacterial load of preputial washings and semen // Livestock Adviser. 1988. - Vol. 13. - P. 33-34.

264. Sutka, P. A melyhutott bikaondo elo aerov bakteriumtartalmanak meghatarozasa// Magyar allatoyv. Lapja. 1980. - Vol. 35, № 6.- P. 397399.

265. Tillmann, H.B. et al, Genitalinfektion bein pferd // Tierartzliche Praxic.- 1982.-№ 10.- P. 91-114.

266. Tishner, M. Techniques for collections and storage of stallion semen with minimal secondary contamination / M. Tishner., K. Kosiniak // Acta Vet. Scand. 1982. - Suppl.88.- P. 83-90.

267. Turecek, K. Zjednodusenie laboratorneho vysetrovania poctu mikrobialnych zarodkov v inseminacnych davkach hovadrieho dobytka/ Turecek K., Klindova F. // Veterinarstvi.- 1988.- Vol. 38, № 10. P. 468470.

268. Wierzbowski, S. Wistepowanie i znaczenie warunkowo-patogenych bakterii w nasieniu buhajow // Med. Wet. 1982. - Vol. 38, № 1-3.-P. 66-71.

269. Wierzbowski, S. Relacje miedzy poziomen antibiotykow a zanieczyszczeniami bakteryjnymi mrozonego nasienia buhajow// Wierzbowski S., Nowacowski W., Wayda E., Kuzniak S. // Med. Wet. -1984. Vol. 40, № 5. - P. 284-287.

270. Zaugg, N.L. Motility of spermatozoa and control of bacteria in bovine semen diluents containing penicillin and neomycin or epicillin / Zaugg N.L., Almquist J.O. // J. Dairy Sci. 1973. - Vol. 56, № 2. - P. 202-206.

271. Zawia, Z. Zroda Zakazenia na sienia produkowanego w PZUZ i metody zapobiegania // Przegl. Hadowl. 1973. - Vol. 43, № 17/18. - P. 38.