Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Полиморфизм свиней по генам эстрогенового, пролактинового и рианодинового рецепторов

ВАК РФ 06.02.01, Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

Автореферат диссертации по теме "Полиморфизм свиней по генам эстрогенового, пролактинового и рианодинового рецепторов"

На правах рукописи

ЛАЛОМОВА ЕЛЕНА ВЛАДИМИРОВНА

Полиморфизм свиней по генам эстрогенового, пролактинового и рианодинового рецепторов

06 02 01 - Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

п Лесные Поляны Московской области 2007 г

Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте племенного дела (ВНИИплем)

Научный руководитель доктор биологических наук, профессор Калашникова Любовь Александровна

Официальные оппоненты доктор биологических наук, профессор

Фомичев Юрий Павлович

кандидат биологических наук Попов Вадим Васильевич

Ведущее учреждение Российский государственный аграрный

университет - МСХА им. К.А. Тимирязева.

Защита состоится 18 мая 2007 года в 11 часов на заседании диссертационного совета Д 220 017 01 при Всероссийском научно-исследовательском институте племенного дела 141212, Московская область, Пушкинский район, п Лесные Поляны, ВНИИплем, факс 515-95-57

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института племенного дела

Автореферат разослан 12 апреля 2007 года

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

Ерохин А С

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В сложных экономических условиях сегодняшнего дня свиноводство не может позволить себе отставание от передовых технологий В течение многих лет шло усовершенствование пород путем использования традиционных методов селекции Внедрение в традиционную селекцию новейших методов биотехнологии ведет к увеличению эффективности отрасли свиноводства Открытия в области молекулярной генетики позволяют выделять участки генома, которые влияют на продуктивные и воспроизводительные признаки Животные, имеющие ДНК-маркеры, могут быть отобраны для использования в программах маркерной селекции Этот подход оказался перспективным для признаков, имеющих низкую наследуемость и проявления, ограниченные полом, - таких, как репродуктивные признаки Многие исследования сфокусированы на изучении генов, влияющих на эти характеристики Гены эстрогенового (ЕБЯ) и пролактинового (РЯЬЯ) рецепторов признаны генами-кандидатами, влияющими на размер гнезда

Размер гнезда является одним из важнейших показателей в свиноводстве Увеличение количества поросят, получаемых от свиноматки, увеличивает эффективность отрасли Проявление этого признака ограничено полом, но использование ДНК-маркеров в программах селекции позволяет вести отбор не только маток, но и хряков

Ген - главный ген стресса, качества мяса и мясных кондиций

свиней Мутация в этом гене ведет к заболеванию - злокачественному гипертермическому синдрому и появлению животных с плохим качеством мяса Поэтому при создании новых типов и линий свиней необходим молекулярно-генетический контроль гена для снижения потерь мяса при его полу-

чении и обработке Повышенная чувствительность к стрессам негативно отражается на сохранности молодняка Улучшить качество мяса методами традиционной селекции трудно, так как большинство признаков качества мяса может быть оценено только после убоя Это требует от селекционеров использования новых методов генетической селекции, направленных на усовершенствование продуктивных признаков

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы - исследование полиморфизма генов КУШ, ЕБЯ и РЯГК с помощью ДНК-диагностики у свиней пород крупная белая, ландрас, йоркшир, дюрок и скороспелая мясная и определение влияния генотипов на хозяйственно-полезные признаки Для достижения цели были поставлены следующие задачи

1 Генотипировать животных по генам КУЯ], ЕБЯ, PR.bR с помощью ПЦР-диагностики

2 Определить частоту встречаемости аллелей и генотипов и охарактеризовать генетическую структуру популяций свиней по генам КУЮ, БЭЯ, PR.bR

3 Оценить воспроизводительные качества свиней различных генотипов по генам ЕБ^ PR.bR

4 Оценить влияние сочетания генотипов по генам ЕБЛ и РЯЬН, на воспроизводительные качества свиней Научная новизна. Получены новые данные о частоте встречаемости аллельных вариантов генов ЛУШ и ЕБЛ у разных пород свиней отечественной селекции и их влиянии на репродуктивные качества Впервые в стадах свиней крупной белой породы, ландрас, йоркшир и скороспелой мясной породы методом ПЦР-ПДРФ анализа ДНК изучен полиморфизм, определена частота встречаемости аллелей и генотипов по локусу гена РЛЬИ и их взаимосвязь с репродуктивными признаками свиней

Практическая значимость. Проведенные исследования позволяют определить продуктивные возможности свиней - носителей различных аллельных вариантов генов-кандидатов ЯУШ, ЕБЯ, PR.bR Результаты оценки влияния генотипов по данным генам на хозяйственно-полезные признаки необходимы для разработки селекционно-генетических методов совершенствования пород, направленных на повышение продуктивных показателей животных

Данные, характеризующие генетическую структуру пород и популяций, следует учитывать при формировании селекционных программ Информацию о генотипах конкретных животных можно эффективно использовать для отбора и подбора свиней с целью создания высокопродуктивных стад, свободных от груза злокачественного гипертермического синдрома. На защиту выносятся следующие положения:

- полиморфизм генов РКЕТ1, ЯУКЛ и генетическая структура популяций свиней разных пород

- зависимость частоты встречаемости аллелей и генотипов по генам ЕБЯ, РЯЬЛ, КУЯ! от половой принадлежности животных,

- взаимосвязь воспроизводительных качеств свиней с генотипами по генам ЕвЯ, РЫЛ,

- наличие влияния сочетания генотипов по генам ЕБК и РЯЕЯ на воспроизводительные качества свиней

Апробация работы. Результаты диссертационной работы обсуждены на заседаниях Ученого Совета ВНИИплем в 2003-2006 гг, на международной научной конференции ВИЖ «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», 2004 г , на международной научно-производственной конференции «Актуальные проблемы интенсификации производства продукции животноводства», Жодино, 2005 г , на конференции «Актуальные проблемы биологии в животноводстве», Боровск, 2006 г, на международной научной конференции ВИЖ «Современные достижения и " проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», 2006 г

Публикации результатов исследований. По результатам диссертационной работы опубликовано 5 научных работ

Структура и объем диссертации Диссертация изложена на 107 страницах, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов собственных исследований, выводов, практических предложений и списка литературы Диссертация содержит 30 таблиц и 11 рисунков Список ис-

пользованной литературы включает 125 источников в том числе 67 на иностранных языках

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа проводилась в соответствии с планом научно-исследовательских работ в лаборатории ДНК-технологий ВНИИплем с 2003 по 2007 г согласно представленной схеме

Объектом исследований являлись свиньи пяти пород, разводимые в РФ Пробы кожи уха взяты у 203 голов 155 животных из хозяйства ЗАО «Восточный» республики Удмуртия - 53 свиноматки и 38 хряков крупной белой породы (КБ), 23 хряка породы ландрас, 24 хряка породы йоркшир, 21 хряк породы дюрок и 48 животных (42 матки и 6 хряков) породы скороспелая мясная (СМ1) из ФГУП «Мордовиягосплем» республики Мордовия

ДНК из ткани выделяли общепринятыми методами При типировании свиней по генам ESR, PRLR и RYR1 были использованы следующие методы

- метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для амплификации фрагментов генов,

- метод полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ) для определения полиморфизма генов,

- метод горизонтального электрофореза с последующей визуализацией При амплификации фрагмента ESR-гена использовали метод Short с

соавторами (1997) Для ПЦР синтезировали два праймера

ESR1 5' - ССТ GTT ТТТ АСА GTG ACT ТТТ АСА GAG-3', ESR2 5'' - САС TTC GAG GGT CAG ТСС AAT TAG-3' При амплификации фрагмента PRLR-гена использовали методику Lm-villeRC (2001) Для ПЦР синтезировали праймеры.

PRLR1 5' - CGG CCG CAG ААТ ССТ GCT TGC - 3' PRLR2 5' - АСС ССА ССТ TGT ААС CCA ТСА ТСС - 3 При амплификации фрагмента RYRl-гена использовали методику Брэ-маГ иБренингаБ (1993) Для ПЦР синтезировали праймеры RYR 56 1 5' - GTGCTGGATGTCCTGTGTTCCCT-3/, RYR 56 2 5'- CTGGTGACATAGTTGATGAGGTTTG-3 Для проведения ПЦР в объеме 25 мкл 100 нг геномной ДНК смешивали с 2,5 мкл 10хбуфера (670 мМ трис- HCl, рН=8,8, 160мМ бисульфата натрия, 0,1% Tween 20, 25 мМ хлористого магния), 2 мМ dNTP (0,5 мМ каждого), 15. пМ праймеров, 2,5 ед активности Tag-полимеразы Пробирки с реакционной смесью помещали в термоциклер для проведения 30 циклов амплификации

Для амплификации фрагментов генов ESR и PRLR использовали режим "горячий старт"- 94° С - 5 мин, денатурация - 94° С -1 мин, отжиг -55° С - 1 мин, элонгация - 72° С- 1 мин, достройка матрично-праймерных комплексов проходила при 72 0 С - 8 мин

Для амплификации гена RYR1 использовали температуру отжига 60° С - 1 мин, достройка проходила при 72°С - 5 мин

н

Схема исследований

Продукты ПЦР гена ESR расщепляли рестриктазой Pvu II, гена PRLR -рестриктазой Alu I, гена RYR1 - рестриктазой Hm6I Специфичность ампли-фикатов оценивали электрофоретическим методом в 2% агарозном геле Фрагменты рестрикции разделяли в 4% агарозном геле Применяли два маркера длин фрагментов - 50 bp и 100 bp DNA Ladder Результаты фиксировали с помощью компьютерной видеосистемы

Из числа исследованных животных были сформированы опытные группы в соответствии с установленными генотипами и проведены научно-производственные исследования хозяйственно-полезных признаков Оценку продуктивных качеств свиней проводили по данным зоотехнического учета Для хряков учитывали следующие показатели общее количество рожденных и живорожденных поросят, % сохранности, % аварийных опоросов, % про-холостов Для свиноматок анализировали общее количество рожденных и живорожденных поросят, % сохранности, массу гнезда, массу 1 поросенка в 2 месяца, % аварийных опоросов, % агалактии

Статистическую обработку данных проводили общепринятыми методами (Меркурьева Е К и др , 1990), а также с применением компьютерных программ

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3,1 Полиморфизм свиней no i с ну ESR

Определены генотипы но гену ESR у 203 животных пяти пород: свиней крупной белой породы, йоркшир, ландрас и дюрок из ЗАО «Восточный», породы скороспелая мясная из Ф1 УП «Мордовиягосплем».

Методом ПЦР амплифицирован фрагмент гена ESR длиной 120 пар нуклеотидов (н.н,). Полученные пробы разрезаны эндонуййеазой Pvti II и разделены в агарочном геле. 11ри помощи маркера определены длины фра! -ментов рестрикции: одна полоса 120 п.н, представляет гомозиготный генотип АА, три полосы в 120 п.н., 65 и 55 п.н. соответствуют гетерозиготному генотипу АВ и две полосы 65 и 55 п.н. - гомозиготному генотипу ВВ {рис. I).

AB АА ВВ AB ВВ ВВ М

Рис. 1. Результаты рестрикционного анализа фрагмента гена ESR: дорожки №1 и №4 - AB генотип, дорожка №2 - АА генотип, дорожки №

3,5,6 - ВВ генотип, дорожка №7 - маркер 50 bp DNA Ladder.

В зависимости от породной принадлежности мы наблюдали различную частоту аллелей и генотипов (табл.1). В четырех породах - КБ. СМ!, йоркшир и дюрок были обнаружены два ал J шля - А и В, животные этих пород оказались полиморфными по гену ESR. В породе ландрас полиморфизма не выявлено, все свиньи являются носителями генотипа АА.

Наибольшая частота аллели А выявлена у свиней породы ландрас - ] ,0. Животные породы дюрок по этому показателю близки к породе ландрас -частота встречаемости аллеля А составляет у них 0,98. Частота ал дел я А в породе CMI составила 0,82, что почти в два раза выше, чем в породе КБ (0,44 - 0,46), Частота аллеля А у йоркширов составляет 0,75.

Частота встречаемости аллеля В оказалась наибольшей в породе КБ (0,54 - 0,56), отличающейся многоплодием. В породе ландрас аллель В выявлен не был. В породе дюрок доля аллеля В весьма мала - всего 0,02.

В четырех из пяти исследованных нами пород - ландрас, дюрок, СМ-1 и йоркшир - доля аллеля А (0,75 - I) значительно превышает долю аллеля В (0,00 - 0,25) и только в породе КБ доля аллеля В больше доли аллеля А и составляет более половины (0,54-0,56).

Значения частот генотипов также различаются в зависимости от породы. В целом из 203 генотййированных животных 109 голов имеет генотип

АА, 63 головы - генотип АВ и 31 голова - ВВ Наблюдается преобладание животных с генотипом АА - их почти в 3 раза больше, чем носителей генотипа ВВ и примерно в 2 раза больше, чем АВ Частота генотипа АА составляет 1 в породе ландрас, 0,95 в породе дюрок, примерно четверть в породе КБ, 0,67 - 0,69 в породе СМ1 и чуть более половины в породе йоркшир

Таблица 1

Генетическая структура пород свиней по гену ЕБЯ

Порода Пол Число Частота генотипов Частота аллелей

голов АА АВ ВВ А В

Крупная бе- _хряки 35 0,17 0,54 0,29 0,44 0,56

лая матки 52 0,27 0,38 0,35 0,46 0,54

Скороспелая хряки 6 0,67 0,33 0,00 0,83 0,17

мясная матки 42 0,69 0,26 0,05 0,82 0,18

Йоркшир хряки 24 0,54 0,42 0,04 0,75 0,25

Ландрас хряки 23 1,00 0,00 0,00 1,00 0,00

Дюрок хряки 21 0,95 0,05 0,00 0,98 0,02

Всего 203

У хряков пород дюрок, ландрас и СМ-1 генотип ВВ не был обнаружен Редко встречается генотип ВВ и среди хряков породы йоркшир - его частота составляет всего 0,04 Наибольшая частота встречаемости гомозиготного генотипа ВВ наблюдается в породе КБ - 0,29 (хряки) и 0,35 (матки)

Анализ частот аллелей гена Е8Я не выявил существенных межполовых различий Анализ частот генотипов показал, что в породе КБ у хряков доля гетерозиготного генотипа больше (0,54), чем у маток (0,38) Доля генотипа ВВ в породе КБ больше у маток (0,35), чем у хряков (0,29), доля генотипа АА у маток на 10% выше, чем у хряков (0,27 и 0,17 соответственно)

В породе СМ1 также наблюдается тенденция увеличения доли гетерозиготного генотипа у хряков (0,33) по сравнению с матками (0,26) Частота встречаемости генотипа ВВ в породе СМ-1 у маток составляет 0,05, среди хряков животных с генотипом ВВ выявлено не было

3.2 Воспроизводительные качества свиней с различными генотипами по

гену ЕвИ

Воспроизводительные качества свиноматок. Были проанализированы репродуктивные показатели свиноматок породы СМ-1 и КБ (табл 2) В породе СМ-1 выявлена разность между генотипами АА и ВВ по количеству рожденных (Р>0,95) и живорожденных поросят при первом опоросе Животные с генотипом ВВ превосходят животных с генотипом АА Гетерозиготы занимают промежуточное положение У маток с генотипами АВ и ВВ ниже % мертворожденных (6 - 8%), у гомозигот АА он достигает 14% Это согласуется с данными большинства исследователей и подтверждает положительное влияние аллеля В гена ЕБЯ на многоплодие

Разность в количестве поросят между матками с разными генотипами породы КБ при первом опоросе незначительна и недостоверна Процент мертворожденных во всех группах примерно одинаков

Таблица 2

Количество поросят у свиноматок с различными генотипами по гену Е8Л по первому опоросу

Порода Генотип ЕБЯ Ы, голов Кол-во поросят в среднем на одну свиноматку % мертворожденных

всего живых

СМ1 АА 13 10,31±0,57 8,85±0,78 14,16

АВ 3 10,67±0,33 10,00±0,58 6,28

ВВ 2 12,50±1,50* 11,50±0,50 8,00

Всего 18

КБ АА 14 11,00±0,93 10,43±0,85 5,18

АВ 20 10,90±0,50 10,25±0,57 5,96

ВВ 18 10,78±0,75 10,22±0,73 5,19

Всего 52

*Разность между АА и ВВ генотипами достоверна, Р>0 95

Мы проанализировали те же показатели у маток породы КБ по нескольким опоросам (табл 3) В среднем на одно животное приходится по 5,5 опоросов Матки с генотипом АА имеют превосходство по количеству рожденных поросят на 1 поросенка по сравнению с гетерозиготными матками (Р>0,95) и на 0,57 поросенка по сравнению с ВВ генотипом

Таблица 3

Количество поросят у свиноматок крупной белой породы с различными генотипами по гену ЕБЯ по всем опоросам

Порода Генотип N. N. Кол-во поросят в среднем % мертво-

ЕвЛ гол опоро- на одну свиноматку рожденных

сов всего живых

АА 13 77 12,83±0,44 12,11±0,3б 5,6

КБ АВ 18 103 11,82±0,31 11,13±0,25* 5,8

ВВ 16 78 12,26±0,53 11,29±0,43 7,9

Всего 47 258

*Разность между АА и АВ генотипами достоверна, Р>0 95

Наибольшая доля аварийных опоросов наблюдалась у маток с генотипом ВВ (табл 4) Этот показатель по первому опоросу достиг 16,7%, а за несколько опоросов составил 5,1%

Таблица 4

Количество аварийных опоросов у свиноматок крупной белой породы

Генотип БЭЛ По первому опоросу По всем опоросам

Ы,опоросов % N. опоросов %

АА 14 14,3 77 2,6

АВ 20 5,0 103 2,9

ВВ 18 16,7 78 5,1

Всего 52 258

Одним из важнейших показателей в свиноводстве наряду с плодовитостью является сохранность приплода В группе свиноматок породы КБ нами были выбраны все нормальные опоросы, случаи отсадки-подсадки поросят не учитывались (табл 5) По первому опоросу наибольший процент сохранности оказался в группе маток, гомозиготных по аллелю В (91,36%) Наименьший процент сохранности имели матки с генотипом АА (86,02%), гете-розиготы заняли промежуточное положение

Таблица 5

Сохранность поросят у свиноматок крупной белой породы

Генотип ЕБЯ N. голов Ы, опоросов Кол-во поросят в среднем на одну свиноматку % сохранности

всего | живых | в 2 месяца

По первому опоросу

АА 11 И 12,36±0,47 11,73±0,38 10,09±0,37 86,02

АВ 12 12 12,00±0,52 11,67±0,50 10,42±0,45 89,23

ВВ 12 12 11,92±0,61 11,58±0,56 10,58±0,26 91,36

Всего 35 35

По всем опоросам

АА 13 60 13,67±0,26 12,94±0,22 9,91 ±0,17 76,58

АВ 18 67 13,03±0,30 12,32±0,23 10,31±0,18 83,68

ВВ 16 57 13,40±0,41 12,52±0,29 10,01 ±0,22 79,95

Всего 47 184 |

Этот же показатель был проанализирован по нескольким опоросам На одну матку приходилось в среднем 3,9 опороса Наименьший процент сохранности, так же как и по первому опоросу, имели матки с генотипом АА (76,6%), наибольший - АВ (83,7%) Таким образом, матки с генотипом А А несколько уступают генотипам АВ и ВВ по показателю сохранности поросят По первому опоросу наименьшую массу гнезда в имели обладательницы генотипа АВ (табл 6), поросята из гнезд этих свиноматок к 2 месяцам имели меньшую среднюю массу Наибольшая масса гнезда как в 21 день, так и в 2 месяца наблюдалась у маток с генотипом ВВ, средняя масса поросят из их гнезд в 2 месяца также была больше

Таблица 6

Масса гнезда у свиноматок крупной белой породы

Генотип Е8Я N. голов N. опоросов Масса гнезда в 21 день в среднем Масса гнезда в 2 месяца в среднем Масса одного поросенка в 2 месяца в среднем

По первому опо росу

АА 11 11 60,55±2,98 188,7±11,09 18,6±0,75

АВ 12 12 56,67±2,70 166,4± 18,81 17,2+0,79

ВВ 12 12 61,83±1,61 197,0±6,91 18,8±0,53

Всего 35 35

По всем опоросам

АА 13 60 61,19±1,54 187,04±5,27 18,89±0,49

АВ 18 67 63,67±1,51 196,70+5,15 19,09+0,41

ВВ 16 57 62,97±1,55 195,32±4,81 19,55+0,42

Всего 47 184

По итогам нескольких опоросов большая масса гнезда как в 21 день, так и в 2 месяца наблюдалась у животных с генотипом АВ и ВВ Наименьшая масса гнезда оказалась у животных, гомозиготных по аллелю А Наибольшая средняя масса одного поросенка в 2 месяца была у потомства от свиноматок с генотипом ВВ, а наименьшая - у поросят от маток с АА генотипом

Воспроизводительные качества хряков с различными генотипами по гену ЕБЯ. В среднем на одного хряка породы КБ было проанализировано по 49 опоросов (табл 7) По общему количеству поросят, количеству живых поросят, доле мертворожденных, прохолостов и аварийных опоросов лучшие средние показатели были отмечены в группе гетерозиготных животных. Прослеживается тенденция положительного влияния аллеля В Разность между гетерозиготными и гомозиготными по аллелю А животными по количеству рожденных поросят близка к достоверной (Р>0,80) в пользу гетерозигот Следует отметить, что частота гетерозиготного генотипа у хряков-производителей породы КБ в 4 раза больше, чем генотипа АА и почти в 2 раза больше, чем генотипа ВВ

В породе йоркшир в среднем от одного хряка с АА генотипом было проанализировано 12,5 опоросов, от одного гетерозиготного хряка - 15,4 опороса, и от хряка, гомозиготного по аллелю В - 37 опоросов

В выборке хряков-производителей породы йоркшир, несмотря на низкую встречаемость ВВ генотипа по гену ЕБЯ, животное, обладающее этим генотипом, значительно превосходит хряков с другими генотипами по общему количеству поросят (+1,98 по сравнению с АА генотипом и +2,02 по сравнению с АВ генотипом) и количеству живых поросят на свиноматку (+2,01 по сравнению с АА генотипом и +1,93 по сравнению с АВ генотипом) Доля мертворожденных, прохолостов и аварийных опоросов у него наименьшая

Таблица 7

Репродуктивные показатели хряков с разными генотипами по гену ЕБЯ

Генотип ЕБЯ И, голов N. опоросов Кол-во поросят в среднем от одного хряка % мертво-рожд % прохо лостов % аварийных опоросов

всего живых

Крупная белая порода

АА 4 162 11,48±0,53 10,85±0,44 5,49 19,00 13,58

АВ 16 735 12,38±0,24 11,53±0,27 6,87 18,42 7,89

ВВ 9 522 12,10±0,33 11,10±0,29 8,26 18,44 9,20

Всего 29 1419

Ио экшир

АА 13 162 9,82±0,36 8,19±0,37 16,60 41,09 30,86

АВ 9 139 9,78±0,38 8,27±0,32 15,44 40,09 25,18

ВВ 1 37 11,8 10,2 13,56 17,78 10,81

Всего 23 338

Дюрок

АА 20 437 9,33±0,30 8,24±0,30 11,65 27,29 19,91

АВ 1 7 8,7 7,6 12,64 30,00 14,29

Всего 21 444

У маток, покрытых хряком с генотипом ВВ, процент аварийных опоросов в 3 раза ниже, чем у маток, покрытых хряками с генотипом АА и в 2,5 раза ниже, чем у маток, покрытых гетерозиготными хряками Процент про-холостов у хряка с ВВ генотипом составил 17,78, что более чем в 2 раза ниже, чем у животных АА и АВ генотипами

Лишь один хряк породы дюрок имел аллель В в составе гетерозиготного генотипа По количеству рожденных и живорожденных поросят он имел более низкие показатели, чем хряки с генотипом АА, доля аварийных опоросов в группе покрытых им маток была несколько ниже (14,29%) по сравнению с генотипом АА (19,91%)

3.3 Полиморфизм свиней по гену Р11Ы*

Определены генотипы у 181 животного четырех пород - КБ, йоркшир, ландрас и СМ1 Методом ПЦР амплифицирован фрагмент гена РИт длиной 170 пар нуклеотидов Полученные фрагменты разрезаны эндонуклеазой А1и1 и разделены в агарозном геле В зависимости от генотипа животного были получены следующие картины разделения фрагментов рестрикции две четкие полосы 170 п н и 127 п н соответствуют генотипу АА, две четкие полосы 92 п н и 35 п н (возможно наличие слабой полосы в 127 п н ) соответствуют генотипу ВВ, четыре полосы - 170 п н (слабая), 127 п н , 92 п н и 35 п н соответствуют гетерозиготному генотипу АВ (рис 2)

ll

АЛ В В АЛ ВВ АН ЛВ Л Л

Рис. 2, Результаты рестрикционного анализа фрагмента гена PR1.R: дорожки № 1,3.8 - А А генотип, дорожки №2,4 ВВ reno тип, дорожки № 5,6 - ЛВ генотип.

Во всех четырех породах были обнаружены два аллели :>того тема Л и В, а также три генотипа АЛ, ЛВ и ВВ (табл. 8). Наблюдалась различная частота аллелей в зависимости от породы. В породах Kt> и моркишр доля аллеля А почти в четыре раза больше, чем аллеля В, тогда как в породах СМ1 и ланд рае на долю аллеля А приходится менее половины.

Частоты генотипов также варьируют в зависимости oí породы. Наибольшая доля гомозиготных по аллелю А животных наблюдается в породе йоркшир 0,75. В породе КБ гомозигот АА более половины - 0,63 в группе хряков и 0.62 и группе маток. Наименьшая доля генотипа АЛ - в породе ландрас - 0.1 7. В породе СМ! доля АА генотипа также не велика - 0,24.

Таблица 8

Генетическая структура порол свиней по гену PRLR

Частота генотипов Частота алле-

Порода Пол Число лей

голов А А АВ ВВ А Б

Крупная бе- матки 53 0,62 0,28 0.10 0,76 ' 0,24 ,

[ лая хряки 38 0,63 0,37 0,00 0,82 , 0,18

СМ 1 матки 42 0,24 0,40 0,36 0,44 0,56

йоркшир хряки 24 0.75 0,21 0,04 0,85 0,15

Ландрас хряки 24 0,17 0,42 0,42 0,38 1 0,63

Всего 181

Доля гетерозиготного генотипа в изучаемых породах варьирует от 0,21 в породе йоркшир до 0,42 в породе ландрас, В породе СМ1 частота гетерозигот 0,40. а в породе КБ частота генотипа ЛВ колеблется от 0,28 у маток до 0.37 у хряков. Доли генотипа ВВ невелики в породах йоркшир - 0.04. КГ -0,09 в группе свиноматок и 0 в группе хряков. В породах СМ 1 и ландрас доля гомозигот ВВ 0,36 и 0,42 соответственно.

Таким образом, по частоте встречаемости различных генотипов по ло-кусу гена РКГК исследованные нами породы разделились на две группы: породы с очень низкой долей генотипа ВВ и высокой долей (более половины) генотипа АА и породы с небольшой долей (менее четверти) генотипа АА и

равномерным распределением частот генотипов АВ и ВВ К первой группе относятся породы КБ и йоркшир, ко второй - СМ1 и ландрас

3.4 Воспроизводительные качества свиней с различными генотипами по

гену PRLR

Воспроизводительные качества свиноматок. В породе СМ 1 матки с генотипом АА превосходят маток с другими генотипами по общему количеству рожденных и живорожденных поросят (табл 9) При этом разность по количеству рожденных живых поросят между свиноматками с генотипом АА и гетерозиготами близка к достоверной (Р>0,80) Процент мертворожденных был ниже у свиноматок с АА генотипом - 9,09% Худшие показатели по многоплодию принадлежат гетерозиготным маткам У гетерозигот наблюдался также и наивысший процент мертворожденных - 20,9, что в 2 раза выше, чем у гомозигот АА и ВВ Показатели многоплодия у маток с ВВ генотипом занимают промежуточное положение

Это согласуется с данными, полученными Vincent с соавторами (1998), которые подтверждают превосходство АА генотипа по количеству рожденных и количеству живорожденных в породе крупная белая (+0,66 поросенка у АА генотипа) и ландрас (+ более одного поросенка у АА генотипа)

Таблица 9

Количество поросят по первому опоросу у свиноматок породы СМ1 с различными генотипами по гену РЯЬК

Порода Генотип j N, PRLR | голов 5 Кол-во поросят в среднем на одну свиноматку % мертворожденных

всего живых

АА 4 11,00±0,41 10,00±0,41 9,09

СМ1 АВ 7 9,57±!,07 7,57±1,!7 20,90

ВВ 3 10,67±0,33 9,67±0,33 9,37

Всего 14

КБ АА 32 10,84±0,45 10,47±0,44 2,8

АВ LJ5 10,67±0,86 9,47±0,83 1 1! ,2

ВВ 5 11,00±1,84 10,80±1,71 ! 1,8

Всего 52 1

В породе КБ несколько лучшие показатели по многоплодию оказались у маток с ВВ генотипом (табл 9) Процент мертворожденных в этой подгруппе наименьший - 1,8% Гомозиготы АА незначительно уст>пают маткам с генотипом ВВ по многоплодию, процент мертворожденных у АА маток немного выше и составляет 2,8% Наихудшие показатели по многоплодию, так же, как и в группе свиноматок породы СМ1, обнаружены у гетерозигот Процент мертворожденных в группе гетерозигот наибольший - 11,2 %

Анализ по нескольким опоросам также показал преимущество животных с генотипом ВВ По общему количеству рожденных и живорожденных

поросят они превосходили гетерозигот на 1,2 и 0,69 поросенка Матки с генотипом АА по показателям многоплодия занимали промежуточное положение Результаты исследования по породе КБ согласуются с данными Ыег с соавторами (2001) о том, что в породах ландрас и КБ животные с генотипом ВВ имели больше эмбрионов в матке

Таблица 10

Количество поросят по всем опоросам у свиноматок породы КБ с различными генотипами по 1 ену РЯЬЯ

Генотип рли* Ч 1 N. голов | опо-1 росов Кол-во поросят в среднем ' % мер- ' на одну свиноматку | творож- | всего 1 живых ! денных |

АА 29 158 12,17±0,28 | 11,43±0,23 ¡6,08

АВ 14 77 12,06±0,46 | 11,37±0,44 ! 5,72 1

ВВ 5 33 13,26±1,11 | 12,06±0,82 ¡9,05 (

Всего 48 269 1 1 :

В породе КБ аварийные опоросы встречались у маток всех генотипов (табл 11) Гомозиготы АА имели в 2 раза меньше аварийных опоросов (9,4%), чем гетерозиготы и гомозиготы ВВ (20,0%) Агалактия была отмечена в группе животных с генотипами АА (12,5%) и АВ (6,5%)

Таблица 11

Аварийные опоросы и агалактия у свиноматок породы КБ с различными генотипами по гену РЛЬЯ

Генотип М, м, Аварийные Агалактия {

РШ-Н. голов опо- опоросы 1

росов % голов % | голов ;

По первому опоросу !

АА 32 32 9,4 -> -> 12,5 14 !

АВ 15 15 20,0 3 Л>5_ И _____!

ВВ 5 5 20,0 1 10,0 10 |

Всего 62 62 1 1 1 1

По всем опоросам !

АА 29 158 13.79 4 27,59 1 8 !

АВ 14 77 21,43 3 35,71 г 5 |

ВВ 5 33 20,00 1 80,00 14 1

Всего 48 269 1 1 1

По итогам нескольких опоросов в группе гомозигот ВВ агалактия отмечалась у 4 особей из 5 и достигла 80% У гетерозигот этот показатель составил 35,7% Меньше случаев агалактии оказалось в группе гомозигот АА -27,59 По показателю аварийных опоросов результаты по нескольким опоро-

сам близки к данным, полученным по первому опоросу - ¡3,79% у маток с генотипом АА, 21,43% у гетерозигот и 20,00% у ВВ маток

При расчете влияния генотипа РЯЬЯ на сохранность приплода мы исключили случаи отсадки-подсадки поросят (табл 12)

Матки с генотипом ВВ имели большее количество рожденных (+1,91 к АА, +1,77 к АВ) и живорожденных поросят (+1,85 к АА и +2,23 к АВ) и количество поросят в 2 мес (+0,81 к АА и +0,80 к АВ) в среднем на одну свиноматку Разность по количеству поросят в 2 месяца между матками АА и ВВ достоверна при Р>0,99 По количеству живорожденных поросят разность между ВВ генотипом и другими генотипами, а также разность по количеству поросят в 2 месяца между ВВ и АВ близка к достоверной (Р>0,80)

Таблица 12

Сохранность поросят у свиноматок крупной белой породы с разными генотипами РШ^Я

Генотип рят N. голов N. опоросов Кол-во поросят в среднем на одну свиноматку % сохранности

всего | живых в 2 месяца

По первому опоросу

АА 21 21 11,76±0,36 11,48+0,34 10,19+0,28 88,7

АВ 10 10 11,90±0,69 11,10±0,55 10,20+0,47 91,9

ВВ 3 3 13,67±1,45 13,33+1,20 11,00+0,00** 82,7

Всего 34 34

По всем опоросам

АА 29 116 13,32+0,19 12,61+0,16 9,94+0,14 78,83

АВ 14 52 13,00±0,39 12,32+0,32 10,15+0,17 82,39

ВВ 5 25 1 14,11+0,82 12,85+0,55 10,73+0,25* 83,50

Всего 48 193 | -

Разность между АА и ВВ генотипами достоверна, *Р>0,95, ** Р>0,99

Наибольший процент сохранности оказался у гетерозигот (91,9) Наименьший процент сохранности (82,7) имели матки с ВВ генотипом, матки с гомозиготным генотипом АА заняли промежуточное положение - 88,7%

В породе КБ по нескольким опоросам сохраняется превосходство генотипа ВВ по количеству рожденных (+0,79 к АА, +1,11 к АВ) и живорожденных поросят (+0,24 к АА, +0,53 к АВ), а также по количеству поросят в 2 мес (+0,79 к АА и +0,58 к АВ) Разность между матками с ВВ и АА генотипами по количеству поросят в 2 месяца статистически достоверна (Р>0,95)

Наибольший процент сохранности по нескольким опоросам наблюдался в группе ВВ - 83,5%, близкий показатель имели гетерозиготы - 82,39% и наименьший процент сохранности - 78,83% наблюдался в группе АА

По первому опоросу лучшими по молочности оказались гетерозиготные матки - 63,8 кг (+5,85 кг по сравнению с АА генотипом и +5,13 по сравнению с ВВ генотипом), разность между АВ и АА генотипами статистически

достоверна при Р>0,95 (табл 13), а разность между АВ и ВВ близка к статистически достоверной (АВ генотип предпочтительный)

Таблица 13

Масса гнезда у свиноматок крупной белой породы с разными генотипами по

гену РЛЬЯ

Генотип РКЬИ N. голов К опоросов Масса гнезда в 21 день в среднем Масса гнезда в 2 месяца в среднем Масса поросен- ! ка в 2 месяца в среднем

По первому опоросу

АА 21 21 57,95±2,06 183,38±7,86 18,00+0,53

АВ 10 10 63,80+2,01* 198,60+9,16 19,64+0,97

ВВ 3 3 58,67±2,03 182,00+11,53 16,33+1,20

Всего 34 34

По всем опо росам

АА 29 116 61,66±1,11 190,03+3,48 19,14+0,29

АВ 14 52 63,76±1,60 196,75+5,82 19,41+0,52

ВВ 5 25 65,88±2,54 204,59+9,28 19,08+0,78

Всего 48 193

* Разность между АА и АВ генотипами достоверна, Р>0,95

Масса гнезда в 2 мес была большей у гетерозигот Средняя масса одного поросенка в 2 мес была больше у поросят из гнезд гетерозиготных маток (+1,64 к АА и +3,31 к ВВ генотипом, разность близка к достоверной)

Таким образом, по первому опоросу гетерозиготные матки имели большую молочность, большую массу гнезда в 2 мес и большую среднюю массу одного поросенка в 2 мес по сравнению с обладательницами других генотипов Худшие показатели были отмечены у маток с генотипом АА

По итогам нескольких опоросов у маток с ВВ генотипом наблюдалась большая молочность (+4,22 кг к АА и +2,12 кг к АВ) и средняя масса гнезда в 2 мес (+14,56 кг к АА и +7,84 кг к АВ) Меньшей молочностью и массой гнезда в 2 мес отличались матки с генотипом АА В 2 мес поросята из гнезд гетерозиготных маток имеют несколько большую среднюю массу

Таким образом, матки породы КБ с АА генотипом имеют меньшую молочность и массу гнезда в 2 мес как по первому опоросу, так и по нескольким опоросам Свиноматки с гетерозиготным генотипом по этим показателям являются лучшими по первому опоросу, а матки с гомозиготным ВВ генотипом - лучшими при расчете этих показателей по нескольким опоросам, разность между ВВ и АА генотипами близка к достоверной

Воспроизводительные качества хряков с различными генотипами по гену РИЫ*. От одного хряка породы КБ с АА генотипом было в среднем получено 46,4 опороса, от одного гетерозиготного хряка -56,7 опоросов (табл 14) Гетерозиготные хряки имеют несколько большие показатели по количеству рожденных и живорожденных поросят (+0,2 и +0,26 поросенка)

У гезерозигот лучшие показатели по количеству прохолостов - 16,69% Доля аварийных опоросов у маток, покрытых гетерозиготными хряками, также меньше, чем у маток, покрытых хряками с АА генотипом

Таблица 14

Репродуктивные показатели хряков с разными генотипами по гену РЯЬЯ

Генотип N. N. Кол-во поросят в сред- % мер- % % ава-

PR.bR гол опо- нем на одного хряка тво- прохо- рийных

росов всего живых рожд лостов опоросов

Крупная белая порода

АА 21 975 12,05±0,20 11,16±0,18 7,39 19,29 9,13

АВ 11 624 12,25±0,36 11,42*0,37 8,78 16,69 7,85

Всего 32 1599

Йоркшир

АА 18 246 9,91±0,30 8,37±0,31 15,54 37,24 26,42

АВ 4 83 10,03±0,65 8,24±0,44 17,85 43,54 26,51

ВВ 1 9 9,00 7,40 17,78 30,77 22,22

Всего 23 338

Ландрас

АА 4 ¡201 11,00±0,26 10,25±0,27 6,82 28,98 11,94

АВ 9 222 11,03±0,15 10,46±0,23 5,17 27,92 13,96

ВВ 9 128 10,41 ±0,60 9,54±0,51 8,36 33,68 17,19

Всего 22 551 I

В породе йоркшир 75% хряков являются носителями генотипа АА, частота гетерозиготного генотипа - 21% и всего одно животное из 23 (4%) имело генотип ВВ От одного хряка с генотипом АА было проанализировано в среднем по 13,7 опоросов, от одного АВ хряка - 20,8 опоросов и от хряка ВВ - 9 опоросов (табл 14) От хряка ВВ было получено в среднем меньшее количество поросят (-0,91 и -0,97 по сравнению с АА хряками и -1,03 и -0,84 по сравнению с АВ хряками по количеству рожденных и живорожденных поросят) Наибольший процент прохолостов и аварийных опоросов был отмечен в группе гетерозиготных хряков, а наименьший - у ВВ хряка

В группе хряков породы ландрас частота генотипа ВВ выше, чем в породах КБ и йоркшир - 0,42 Частота генотипов АВ и АА - 0,42 и 0,17 соответственно От одного хряка с генотипом АА было проанализировано в среднем по 50,3 опороса, от одного гетерозиготного хряка - по 24,7 опоросов и от одного хряка с генотипом ВВ - по 14,2 опороса

Хряки, несущие аллель А в своем генотипе, имели более высокие показатели многоплодия Наибольшее количество поросят было получено от маток, покрытых гетерозиготными хряками Наименьшие показатели многоплодия имели матки, покрытые хряками с генотипом ВВ

Наибольший процент прохолостов и аварийных опоросов отмечался в группе хряков с генотипом ВВ Наименьший процент прохолостов оказался у

м

хряков с гетерозигоным генотипом, а наименьший процент аварийных опоросов - в группе представителей генотипа ДА.

3.5 Полиморфизм свиней по л оку су гена 1ЧУК1

Определены генотипы у 87 животных четырех пород: КЬ, йоркшир, ландрас и СМ]. Методом ПЦР амплифицирован фрагмент гена КУРЯ длиной 134 п.н. Полученные амплификаты были разрезаны эндонуклеазой Нт61. При помощи маркера были определены длины фрагментов рестрикции: две полосы 84 и 50 п.н. представляют генотип NN. три полосы в 134 п.н., 84 и 50 п.н. соответствуют гетерозиготному генотипу N11 (рис. 3). Ни одного животного с рецессивным гомозиготным генотипом пп не было обнаружено.

Рис. 3. Результаты рестрикционного анализа фрагмента гена КУИ1: дорожка №1 - N0 генотип, дорожки №2,3,4,5,6,7,8- NN генотип, дорожка № 5 - амплификат.

В породах КБ и йоркшир мутантный аллель выявлен не был (табл. 15). Среди хряков пород СМ1 и ландрас было обнаружено несколько особей, имеющих этот аллель в гетерозиготном состоянии. Скрытыми носителями мутации являлся ! хряк породы СМ1 и 3 хряка породы ландрас. Частота встречаемости аллеям п к породе СМ 1 составила 0,13, в породе ландрас 0,06.

Таблица )5

Генетическая структура пород свиней по гену КУК I

Порода Пол Число Частота генотипов Частота аллелей

голов NN N11 пп N п

Крупная бе- матки ! 9 100 0 0 1 0

лая

Скороспелая хряки 4 0,75 0,25 0,0 0,88 0,13

мясная матки 34 100 0 0 1 0

Йоркшир хряки 6 100 0 0 1 0

Ландрас Х|ЭЯКИ 24 0,88 0,13 0.00 0,94 0,06

Всего 87 1 1

Гетерозиготные хряки породы ландрас имеют некоторое преимущество по показателям многоплодия при более низкой доле мертворожденных поросят (табл. 16), однако доля прохолостов у покрытых ими маток существенно выше и достигает 43,3%.

Таблица 16

Репродуктивные показатели хряков породы ландрас с различными генотипами по гену ИЛИ

Генотип RYR1 N, голов N, опоросов Кол-во поросят в среднем на одного хряка % мер-творо-жден-ных % прохо-лостов % аварийных опоросов

всего живых

NN 19 534 10,71 ±0,29 9,93±0,26 7,28 29,18 14,04

Ып 3 17 11,17±0,44 10,77±0,63 3,58 43,33 11,76

Всего 22 551

От трех гетерозиготных хряков породы ландрас были получены 190 поросят, из которых половина унаследовала мутантный аллель, связанный с чувствительностью к стрессам и плохим качеством мяса

3.6 Встречаемость комплексных генотипов по генам ESR, PRLR

Исследованы сочетания генотипов ESR/PRLR у свиноматок породы КБ Обнаружено 8 комплексных генотипов Наиболее часто встречается генотип АВ/АА (23,4%) и ВВ/АА (21,3%) Менее часто встречаются генотипы АА/АА (17,2%), АА/АВ и АВ/АВ (10,6%) Редко встречаются генотипы АВ/ВВ и ВВ/АВ (6,38%), ВВ/ВВ (4,3%) Генотип АА/ВВ обнаружен не был

3.7 Влияние сочетания генотипов по генам ESR и PRLR на воспроизводительные качества свиноматок крупной белой породы

Наиболее благоприятными по количеству рожденных и живых поросят при рождении оказались сочетания АА/АА и ВВ/ВВ (табл 17)

Таблица 17

Репродуктивные показатели маток породы КБ с разными генотипами

ESR/PRLR

Генотип ESR/PRLR N, гол N, опоросов Кол-во поросят в среднем на одну свиноматку % мертворожденных

всего живых

АА/АА 8 48 13,00±0,44* 12,19±0,24** 6,25

АА/АВ 5 29 12,56±0,95 11,98±0,86 4,62

АВ/АА 11 57 11,30±0,40 10,69±0,35 5,39

АВ/АВ 5 26 12,12±0,44 11,40±050 5,94

АВ/ВВ 3 24 12,60±1,01 11,60±0,56 7,94

ВВ/АА 10 49 12,14±0,53 11,29±0,44 7,00

ВВ/АВ 3 16 10,80±1,27 9,97±1,01 7,72

ВВ/ВВ 2 9 14,25±2,75 12,75±2,25 10,53

Всего 47 258

*Разность АА/АА и АВ/АА достоверна, Р>0,95 **разностъ АА/АА и АВ/АА достоверна, Р>0,99

Разность между АА/АА и сочетаниями АВ/АА, AB/AB ВВ/АВ по общему количеству рожденных поросят близка к достоверной в пользу АА/АА По количеству живорожденных поросят разность между АА/АА и комплексными генотипами АВ/АА, AB/AB ВВ/АА, ВВ/АВ, а также между АА/АВ и АВ/АА, ВВ/АВ и АВ/ВВ близка к статистически достоверной

В данной группе свиноматок породы КБ прослеживается положительное влияние гомозиготного состояния АА/АА и ВВ/ВВ генов ESR и PRLR на количество рожденных и живорожденных поросят

ВЫВОДЫ

1 Породы свиней КБ, СМ1, йоркшир и дюрок являются полиморфными по гену ESR В породе ландрас полиморфизм по гену ESR не обнаружен, все животные являются носителями генотипа АА В четырех из пяти пород свиней - СМ1, йоркшир, ландрас и дюрок наблюдается преобладание аллеля А и генотипа АА В породе СМ1 частоты генотипов АА, AB и ВВ -0,67, 0,33 и 0,00 у хряков и 0,69, 0,26 и 0,05 у маток, частота аллеля В 0,170,18 В породе йоркшир частота генотипа АА - 0,54, AB - 0,42, ВВ - 0,04, частота аллеля В - 0,25 В породе дюрок частота генотипа АА - 0,95, AB - 0,05, частота аллеля В - 0,02 В породе КБ выявлено более равномерное распределение аллелей А (0,44-0,46) и В (0,56-0,54), частоты генотипов АА, AB и ВВ составили 0,17 0,54, 0,29 у хряков и 0,27, 0,38, 0,35 у маток

2 По первому опоросу свиноматки породы CMI с генотипом ВВ гена ESR имеют больше рожденных (Р>0,95) и живорожденных поросят по сравнению с обладательницами генотипа АА Гетерозиготы занимают промежуточное положение У маток с генотипами AB и ВВ ниже % мертворожденных (6 - 8%), у гомозигот АА он достигает 14%

Матки породы КБ с различными генотипами по гену ESR по первому опоросу не различаются по показателям многоплодия По итогам нескольких опоросов матки с генотипом АА имеют превосходство по количеству рожденных поросят на 1 поросенка по сравнению с гетерози готами (Р>0,95) и на 0,57 поросенка по сравнению с ВВ генотипом Матки с генотипом АА уступают маткам с генотипами AB и ВВ по показателям сохранности поросят, средней массе гнезда в 21 день на 2,48 кг и 1,78 кг, в 2 месяца на 9,66 и 8,28 кг, средней массе одного поросенка в 2 месяца на 0,2 и 0,66 кг

3 У хряков породы КБ лучшие показатели по общему количество поросят, количеству живых поросят, доле мертворожденных, прохолостов и аварийных опоросов отмечены в группе гетерозигот по гену ESR В породе йоркшир хряк с генотипом ВВ значительно превосходил хряков с другими генотипами по общему количеству поросят (+1,98 к АА и +2,02 к AB) и количеству живых поросят (+2,01 к АА и +1,93 к AB) на свиноматку и имел наименьшую долю прохолостов - 17,78% (41,09% у АА и 40,09% у AB) и аварийных опоросов 10 81% (30 86% у АА и 25,18% у AB)

4 Породы КБ, СМ1, йоркшир и ландрас являются полиморфными по локусу гена PRLR Частоты аллелей и генотипов варьируют в зависимости

от породы В породе йоркшир наибольшая доля животных с генотипом АА -0,75, частота АВ - 0,21, ВВ - 0,10, частота аллеля В -0,15 В породе КБ частота генотипа АА, АВ и ВВ у хряков 0,63, 0,37 и 0, у маток - 0,62, 0,28 и 0,10, частота аллеля В у хряков 0,18, у маток 0,24 В породе СМ1 частота генотипа АА - 0,24, АВ - 0,40, ВВ - 0,36, частота аллеля В - 0,56 Наименьшая доля АА генотипа в породе ландрас - 0,17, частота АВ - 0,42, ВВ - 0,41, частота аллеля наибольшая - 0,63

5 В породе СМ1 лучшие показатели по многоплодию имели матки с генотипом АА гена РИТЯ У гетерозигот наблюдались худшие показатели по многоплодию и наивысший процент мертворожденных - 20,9, что в 2 раза выше, чем у гомозигот В породе КБ лучшие показатели по многоплодию у маток с ВВ генотипом Наихудшие показатели по многоплодию, так же, как и в породе СМ1, обнаружены у гетерозигот Матки с генотипом АА имели меньший процент аварийных опоросов и случаев агалактии

6 В породе КБ у маток с генотипом ВВ гена РЯЬИ количество поросят в 2 месяца достоверно выше (Р>0,99) Матки с АА генотипом имеют меньшую молочность, меньшую массу гнезда в 2 мес как по первому опоросу, так и в среднем по нескольким опоросам Свиноматки с гетерозиготным генотипом по этим показателям являются лучшими по первому опоросу, а матки с гомозиготным ВВ генотипом - лучшими по нескольким опоросам

7 Гетерозиготные хряки породы КБ по гену РИГИ имеют лучшие показатели по количеству рожденных и живорожденных поросят, прохоло-стов и доле аварийных опоросов покрытых ими маток В породе йоркшир и ландрас лучшие показатели многоплодия отмечены в группах хряков, несущих аллель А гена РЯЬЯ Наибольший процент прохолостов и аварийных опоросов отмечался в группе хряков породы ландрас с генотипом ВВ

8 В двух породах - СМ1 и ландрас - обнаружены носители мутант-ного аллеля п гена КУШ в гетерозиготном состоянии Частота мутантного аллеля п у хряков породы СМ1 составила 0,13, ландрас - 0,06 Гетерозиготные хряки породы ландрас имели высокие показателям многоплодия при более низкой доле мертворожденных поросят, однако доля прохолостов у покрытых ими маток достигла 43,3%

9 У свиноматок породы КБ обнаружено 8 комплексных генотипов по генам ЕБЯ и РЯЬЯ Наиболее часто встречается генотип АВ/АА (23,4%) и ВВ/АА (21,3%) Лучшие показатели по многоплодию имели матки с сочетанием генотипов АА/АА и ВВ/ВВ, худшие - матки с генотипом ВВ/АВ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1 Рекомендуем использовать результаты ДНК-диагностики свиней по генам ЕБЯ и РИЛ в качестве дополнительных критериев отбора и подбора животных в селекционной работе с целью улучшения репродуктивных признаков

2 Следует контролировать наличие мутантного аллеля п гена ЛУШ в производящем составе пород СМ1 и ландрас с целью профилактики появления стрессчувствительных животных с плохим качеством мяса

Список опубликованных работ по материалам диссертации

1 Лаломова Е В , Калашникова Л А , Рыжова Н В Полиморфизм генов ЕБЛ, PR.bR и RYR1 у свиней пород скороспелая мясная и ландрас // В сб «Современные достижения и проблемы биотехнологии с -х животных», п Дубровицы, ВИЖ, 2004, с 67-68

2 Лаломова Е В , Калашникова Л А Полиморфизм гена пролакти-нового рецептора и его связь с воспроизводительными признаками свиней крупной белой породы // В сб «Актуальные проблемы интенсификации производства продукции животноводства», Жодино, 2005, с 25-26

3 Калашникова Л А , Лаломова Е В , Полиморфизм генов пролак-тинового и эстрогенового рецепторов у свиней крупной белой породы // В сб «Актуальные проблемы биологии в животноводстве», Боровск, 2006, с 249

4 Лаломова Е В , Калашникова Л А Полиморфизм гена PRLR у хряков пород крупная белая, йоркшир и ландрас // В сб «Современные достижения и проблемы биотехнологии с-х животных», п Дубровицы, ВИЖ, 2006, с 119-121

5 Калашникова Л А , Лаломова Е В Репродуктивные признаки свиней с различными генотипами пролактинового рецептора // Ж Доклады РАСХН, 2007, с

Заказ № 7_Объем 1.0 п.л._Тираж 60 экз.

Типография ВНИИплем

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Лаломова, Елена Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.

1 .ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 ДНК-МАРКЕРЫ И ГЕНЫ-КАНДИДАТЫ.

1.2 РОЛЬ ГЕНА ЭСТРОГЕНОВОГО РЕЦЕПТОРА (ЕвЯ) В ВОСПРОИЗВОДСТВЕ СВИНЕЙ.

1.3 РОЛЬ ГЕНА ПРОЛАКТИНОВОГО РЕЦЕПТОРА (РЛЬЯ) В ВОСПРОИЗВОДСТВЕ СВИНЕЙ.

1.4 КУШ-ГЕН И СТРЕССЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ СВИНЕЙ.

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1.1 Краткая характеристика хозяйств.

2.1.2 Метод выделения ДНК.

2.1.3 Метод полимеразной цепной реакции.

2.1.4 Метод полиморфизма длин рестрикционных фрагментов.

2.1.5 Метод горизонтального электрофореза.

2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2.1 Полиморфизм свиней по гену ЕБЯ.

2.2.2 Воспроизводительные качества свиней с различными генотипами по гену ЕБЯ.

2.2.3 Полиморфизм свиней по гену РШЛ1.

2.2.4 Воспроизводительные качества свиней с различными генотипами по гену РШЛ.

2.2.5 Полиморфизм свиней по гену КУШ.

2.2.6 Встречаемость комплексных генотипов по генам Е8Я, РШЛ.

2.2.7 Влияние сочетания генотипов по локусам генов Е8Я и РШ^Я на воспроизводительные качества свиноматок крупной белой породы.

3. ВЫВОДЫ.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Полиморфизм свиней по генам эстрогенового, пролактинового и рианодинового рецепторов"

Актуальность темы. В сложнейших коммерческих условиях сегодняшнего дня свиноводство не может позволить себе отставать от передовых технологий.

В течение многих лет шло усовершенствование пород домашнего скота путем использования традиционных методов селекции. Внедрение в традиционную селекцию новейших методов биотехнологии ведет к увеличению эффективности отрасли свиноводства. Новые открытия в молекулярной генетике позволяют выделять и изучать специальные участки генома, которые влияют на важные продуктивные и воспроизводительные признаки. Животные, имеющие эти маркерные участки, могут быть отобраны для использования в программах маркерной селекции. Этот подход оказался перспективным для признаков, имеющих низкую наследуемость и проявления, ограниченные полом - таких, как, например, репродуктивные признаки. Благодаря большой роли, которую играют репродуктивные признаки в эффективности животноводства, многие исследования сфокусированы на изучении генов, влияющих на эти характеристики. Гены эстрогенового (Е8Я) и пролактинового (РКЬЯ) рецепторов признаны генами-кандидатами, влияющими на размер гнезда.

Размер гнезда является одним из важнейших показателей в свиноводстве. Увеличение количества поросят, получаемых от свиноматки, повышает эффективность отрасли. Количество поросят на опорос зависит от породы и других факторов, в среднем оно составляет от 9 до 11 голов. Проявление этого признака ограничено полом, но использование ДНК-маркеров в программах селекции позволяет вести отбор не только маток, но и хряков.

Одним из основных направлений в свиноводстве сегодня является селекция на мясность. Отбор по данному признаку приводит к тому, что наряду со здоровыми животными с хорошими мясными кондициями из общей популяции отбираются животные с невысоким содержанием жира в туше, но страдающие наследственным заболеванием, вызванным мутацией в гене ИЛТИ. Ген ЯУЮ - главный ген стресса, качества мяса и мясных кондиций свиней. Мутация в этом гене ведет к заболеванию свиней -злокачественному гипертермическому синдрому и появлению животных с плохим качеством мяса - бледное, экссудативное, мягкое. Поэтому при создании новых типов и линий свиней необходим молекулярно-генетический контроль гена ЯУТ11 для снижения потерь мяса при его получении и обработки. Повышенная чувствительность к стрессам негативно отражается так же и на сохранности молодняка.

Качество свинины включает такие признаки как наличие внутримышечного жира, холестерин, кислотность, цвет, влагоудерживающую способность, нежность, потерю при приготовлении и вкусовые качества. Генетическая обусловленность играет ключевую роль в качестве мяса. Наследуемость для большинства признаков качества свинины составляет от 0.15 до 0.5. Улучшить качество мяса методами традиционной селекции трудно, так как большинство признаков качества мяса может быть оценено только после убоя.

Потребители и перерабатывающая промышленность нуждаются в улучшении качества мяса. Это требует от селекционеров использования новых методов генетической селекции, направленных на усовершенствование продуктивных признаков.

Цель исследования

Цель настоящей работы - исследование полиморфизма генов ИЛТИ, Е8Я и РЫЬЯ с помощью ДНК-диагностики у свиней пород крупная белая, ландрас, йоркшир, дюрок и скороспелая мясная и определение влияния генотипов на хозяйственно-полезные признаки.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

Генотипировать животных по генам ЯУЮ, Е8Я, Р11Ы1 с помощью ПЦР-диагностики.

Определить частоту встречаемости аллелей и генотипов и охарактеризовать генетическую структуру популяций свиней по генам ЛУШ, ЕБЯ, РЯ1Л1.

Оценить воспроизводительные качества свиней различных генотипов по генам Е8И., РИЖ.

Оценить влияние сочетания генотипов по генам ЕБЛ и Р11Ы1 на воспроизводительные качества свиней.

Научная новизна

Получены новые данные о частоте встречаемости аллельных вариантов генов ЯУЮ и Е8Я у разных пород свиней отечественной селекции и их влиянии на репродуктивные качества. Впервые в стадах свиней крупной белой породы, ландрас, йоркшир и скороспелой мясной породы методом ПЦР-ПДРФ анализа ДНК изучен полиморфизм, определена частота встречаемости аллелей и генотипов по локусу гена РШ^Я и их взаимосвязь с репродуктивными признаками свиней.

Практическая значимость

Проведённые исследования позволяют определить продуктивные возможности свиней - носителей различных аллельных вариантов генов-кандидатов ИУЮ, ЕБЯ, РЯЫ1. Результаты оценки влияния генотипов по данным генам на хозяйственно-полезные признаки необходимы для разработки селекционно-генетических методов совершенствования пород, направленных на повышение продуктивных показателей животных.

Данные, характеризующие генетическую структуру пород и популяций, следует учитывать при формировании селекционных программ. Информацию о генотипах конкретных животных можно эффективно использовать для отбора и подбора свиней с целью создания 4 высокопродуктивных стад, свободных от груза злокачественного гипертермического синдрома.

На защиту выносятся следующие результы:

- полиморфизм генов ЕБЯ, PR.bR, ЯУЮ и генетическая структура популяций свиней разных пород.

- зависимость частоты встречаемости аллелей и генотипов по генам Е8Я, РЯЬЯ, КУШ от половой принадлежности животных;

- взаимосвязь воспроизводительных качеств свиней с генотипами по генам ЕБЯ, РЯЬЯ;

- наличие влияния сочетания генотипов по генам Е8Я и РЯЬЯ на воспроизводительные качества свиней.

Апробация работы.

Результаты диссертационной работы обсуждены на заседаниях Учёного Совета ВНИИплем в 2003-2006 гг, на международной научной конференции ВИЖ «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», 2004 г.; на международной научно-производственной конференции «Актуальные проблемы интенсификации производства продукции животноводства», Жодино, 2005 г.; на конференции «Актуальные проблемы биологии в животноводстве», Боровск, 2006 г; на международной научной конференции ВИЖ «Современные достижения и проблемы биотехнологии сельскохозяйственных животных», 2006 г.

Публикации результатов исследований.

По результатам диссертационной работы опубликовано 5 научных работ.

1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Разведение, селекция, генетика и воспроизводство сельскохозяйственных животных", Лаломова, Елена Владимировна

3. выводы

1. Породы свиней КБ, СМ1, йоркшир и дюрок являются полиморфными по гену ЕБЯ. В породе ландрас полиморфизм по гену ЕБЯ не обнаружен, все животные являются носителями генотипа АА. В четырех из пяти пород свиней - СМ1, йоркшир, ландрас и дюрок наблюдается преобладание аллеля А и генотипа А А. В породе СМ1 частоты генотипов АА, АВ и ВВ - 0,67, 0,33 и 0,00 у хряков и 0,69, 0,26 и 0,05 у маток, частота аллеля В 0,17-0,18. В породе йоркшир частота генотипа АА ■ 0,54, АВ - 0,42, ВВ - 0,04, частота аллеля В - 0,25. В породе дюрок частота генотипа АА -0,95, АВ - 0,05, частота аллеля В - 0,02. В породе КБ выявлено более равномерное распределение аллелей А (0,44-0,46) и В (0,56-0,54), частоты генотипов АА, АВ и ВВ составили 0,17 0,54, 0,29 у хряков и 0,27, 0,38, 0,35 у маток.

2. По первому опоросу свиноматки породы СМ1 с генотипом ВВ гена Е8И. имеют больше рожденных (Р>0,95) и живорожденных поросят по сравнению с обладательницами генотипа АА. Гетерозиготы занимают промежуточное положение. У маток с генотипами АВ и ВВ ниже % мертворожденных (6 - 8%), у гомозигот АА он достигает 14%.

Матки породы КБ с различными генотипами по гену ЕБЯ по первому опоросу не различаются по показателям многоплодия. По итогам нескольких опоросов матки с генотипом АА имеют превосходство по количеству рожденных поросят на 1 поросенка по сравнению с гетерозиготами (Р>0,95) и на 0,57 поросенка по сравнению с ВВ генотипом. Матки с генотипом АА уступают маткам с генотипами АВ и ВВ по показателям сохранности поросят, средней массе гнезда в 21 день на 2,48 кг и 1,78 кг, в 2 месяца на 9,66 и 8,28 кг, средней массе одного поросенка в 2 месяца на 0,2 и 0,66 кг.

3. У хряков породы КБ лучшие показатели по общему количество поросят, количеству живых поросят, доле мертворожденных, прохолостов и аварийных опоросов отмечены в группе гетерозигот по гену ЕБЯ. В породе йоркшир хряк с генотипом ВВ значительно превосходил хряков с другими генотипами по общему количеству поросят (+1,98 к АА и +2,02 к АВ) и количеству живых поросят (+2,01 к АА и +1,93 к АВ) на свиноматку и имел наименьшую долю прохолостов - 17,78% (41,09% у АА и 40,09% у АВ) и аварийных опоросов 10,81% (30,86% у АА и 25,18% у АВ).

4. Породы КБ, СМ1, йоркшир и ландрас являются полиморфными по локусу гена РЯЬЯ. Частоты аллелей и генотипов варьируют в зависимости от породы. В породе йоркшир наибольшая доля животных с генотипом АА -0,75, частота АВ - 0,21, ВВ - 0,10, частота аллеля В - 0,15.В породе КБ частота генотипа АА, АВ и ВВ у хряков 0,63, 0,37 и 0, у маток - 0,62, 0,28 и 0,10, частота аллеля В у хряков 0,18, у маток 0,24. В породе СМ1 частота генотипа АА - 0,24, АВ - 0,40, ВВ - 0,36, частота аллеля В - 0,56. Наименьшая доля АА генотипа в породе ландрас - 0,17, частота АВ - 0,42, ВВ - 0,41, частота аллеля наибольшая - 0,63.

5. В породе СМ1 лучшие показатели по многоплодию имели матки с генотипом АА гена РЛЬЯ. У гетерозигот наблюдались худшие показатели по многоплодию и наивысший процент мертворожденных - 20,9, что в 2 раза выше, чем у гомозигот. В породе КБ лучшие показатели по многоплодию у маток с ВВ генотипом. Наихудшие показатели по многоплодию, так же, как и в породе СМ1, обнаружены у гетерозигот. Матки с генотипом АА имели меньший процент аварийных опоросов и случаев агалактии.

6. В породе КБ у маток с генотипом ВВ гена РЯЬЯ количество поросят в 2 месяца достоверно выше (Р>0,99). Матки с АА генотипом имеют меньшую молочность, меньшую массу гнезда в 2 мес. как по первому опоросу, так и в среднем по нескольким опоросам. Свиноматки с гетерозиготным генотипом по этим показателям являются лучшими по первому опоросу, а матки с гомозиготным ВВ генотипом - лучшими по нескольким опоросам.

7. Гетерозиготные хряки породы КБ по гену РЯЬК имеют лучшие показатели по количеству рожденных и живорожденных поросят, прохолостов и доле аварийных опоросов покрытых ими маток. В породе йоркшир и ландрас лучшие показатели многоплодия отмечены в группах хряков, несущих аллель А гена РЛЬЯ. Наибольший процент прохолостов и аварийных опоросов отмечался в группе хряков породы ландрас с генотипом ВВ.

8. В двух породах - СМ1 и ландрас - обнаружены носители мутантного аллеля п гена ИЛТИ в гетерозиготном состоянии. Частота мутантного аллеля п у хряков породы СМ1 составила 0,13, ландрас - 0,06. Гетерозиготные хряки породы ландрас имели высокие показателям многоплодия при более низкой доле мертворожденных поросят, однако доля прохолостов у покрытых ими маток достигла 43,3%.

9. У свиноматок породы КБ обнаружено 8 комплексных генотипов по генам Е8Я и РЯЬЯ. Наиболее часто встречается генотип АВ/АА (23,4%) и ВВ/АА (21,3%). Лучшие показатели по многоплодию имели матки с сочетанием генотипов АА/АА и ВВ/ВВ, худшие - матки с генотипом ВВ/АВ.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Рекомендуем использовать результаты ДНК-диагностики свиней по генам ЕБЯ и Р11Ы1 в качестве дополнительных критериев отбора и подбора животных в селекционной работе с целью улучшения репродуктивных признаков.

2. Следует контролировать наличие мутантного аллеля п гена ЯУЯ1 в производящем составе пород СМ1 и ландрас с целью профилактики появления стрессчувствительных животных с плохим качеством мяса.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Лаломова, Елена Владимировна, п. Лесные Поляны Московской обл.

1. Антипов Г.П., Лисицын А.П., Лавровский В.В. Генетика с биомертией II Ж, МСХА-1995.- 166 с.

2. Брем Г., Кройслих X., Штранцингер Г. Экспериментальная генетика в животноводстве // М., Россельхозакадемия 1996. - 326 с.

3. Брэм Г., Бренинг Б. Использование в селекции свиней молекулярной генной диагностики злокачественного гипертермического синдрома (MHS) // Генетика.- 1993.- т 29.- № 6.- С. 1009-1013.

4. Глазко В.И., Дунин И.М., Глазко Г.В. и др. Введение в ДНК-технологии //М., ФГНУ «Росинформагротех» 2001. - 436 с.

5. Дунин И.М., Калашникова Л.А., Глазко В.И., Голубина Е.П., Рыжова Н.В. ДНК-технологии оценки сельскохозяйственных животных // Изд. ВНИИплем, 1999.- 147 с.

6. Епишко Т.И., Курак О.П., Журина Н.В. и др. Использование маркерных генов в селекции свиней // Тезисы докладов XIII международной конференции «Пути интенсификации отрасли свиноводства в странах СНГ»,- Жодино.- 2006.- С.44-46.

7. Епишко Т.И., Курак О.П., Шейко Р.И. и др. Анализ генетической структуры пород свиней, разводимых в РУСП «СГЦ «Заднепровский», по локусу гена ИЛТИ // Сборник научных трудов «Зоотехническая наука Беларуси» -Жодино.- 2005.- т 40. С.51-56.

8. Епишко Т.И., Шейко И.П., Курак О.П. и др. Влияние гена ИЛТИ на качество мяса свиней // Сборник научных трудов «Зоотехническая наука Беларуси» -Жодино.- 2005.- т 41. С.42-48.

9. Епишко Т.И., Шейко И.П., Курак О.П. и др. Полиморфизм гена эстрогенового рецептора свиноматок различных пород, разводимых в

10. РУСП «СГЦ «Заднепровский» // Сборник научных трудов «Зоотехническая наука Беларуси» -Жодино.- 2005.- т 40. С.59-63.

11. Журина Н.В. Использование гена эстрогенового рецептора в качестве маркера размера гнезда свиноматок // Тезисы докладов XIII международной конференции «Пути интенсификации отрасли свиноводства в странах СНГ».- Жодино.- 2006.- С.49-50.

12. Журина Н.В. Полиморфизм гена ESR и его влияние на воспроизводительные качества хряков различных пород // Тезисы докладов XIII международной конференции «Пути интенсификации отрасли свиноводства в странах СНГ».- Жодино.- 2006.- С.51-52.

13. Зиновьева H.A. Введение в молекулярную диагностику сельскохозяйственных животных // Дубровицы 2002. - 112с.

14. Зиновьева H.A., Эрнст JT.K. Проблемы биотехнологии и селекции сельскохозяйственных животных // Дубровицы. ВИЖ,- 2004.-316 с.

15. Калашникова JI.A., Лаломова Е.В., Полиморфизм генов пролактинового и эстрогенового рецепторов у свиней крупной белой породы // Тезисы докладов конференции «Актуальные проблемы биологии в животноводстве», Боровск, 2006.- С. 249.

16. Калашникова Л.А., Рыжова Н.В., Гупалов Н.В. Генная диагностика стрессчувствительности свиней // Тезисы докладов 2-й Международной конференции "Молекулярно-генетические маркеры животных".- Киев.-1996.- С.10.

17. Князев С.П., Жучаев К.В., Гарт В.В., Хардге Т. Проблемы дискордантности и косегрегации экспрессии галотан-чувствительности свиней с мутацией 1843 С-Т в локусе RYR1 рецептора рианодина // Генетика 1998. - т.34. - № 12. - С. 1648-1654.

18. Лаломова Е.В., Калашникова JI.A. Полиморфизм гена PRLR у хряков пород крупная белая, йоркшир и ландрас // В сб.: «Современные достижения и проблемы биотехнологии с.-х. животных», п. Дубровицы, ВИЖ, 2006.- С.119-121.

19. Лаломова Е.В., Калашникова Л.А., Рыжова Н.В. Полиморфизм генов ESR, PRLR и RYR1 у свиней пород скороспелая мясная и ландрас // В сб.: «Современные достижения и проблемы биотехнологии с.-х. животных», п. Дубровицы, ВИЖ, 2004., С.67-68.

20. Левин К.Л. Физиология и патология воспроизводства свиней // М., Росагропромиздат 1990. - 255с.

21. Ли Ч. Ведение в популяционную генетику // М., Мир. 1978. - 556с.

22. Лобан H.A., Василюк О.Я. Влияние полиморфизма гена эстрогенового рецептора (ESR) на плодовитость свиней крупной белой породы // Вестн. Белорус, гос. с.-х. акад. 2004. - №3. - С.68-71.

23. Максимов Г.В. Качество мясной продукции и стрессчувствительность свиней в связи с селекцией на мясность // Сельскохозяйственная биология 1995. - №2. - С.13-35.

24. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование // М.: "Мир".- 1984.- 480 с.

25. Меркурьева Е.К., Абрамова З.В., Бакай A.B. и др. Генетика // М., ВО \/ «Агропромиздат» 1991. - 446 с.

26. Метлицкая Е.И., Ревенко А.И. Молекулярно-генетические аспекты совершенствования селекционной работы в свиноводстве // Тезисы докладов XIII международной конференции «Пути интенсификации отрасли свиноводства в странах СНГ».- Жодино.- 2006,- С.81-82.

27. Михайлова М.Е., Камыш H.A., Волчок Н.М. и др. Современные ДНК-технологии для интенсификации селекции в свиноводстве // Тезисы докладов XIII международной конференции «Пути интенсификации отрасли свиноводства в странах СНГ».- Жодино.- 2006.- С.85-88.

28. Михайлова М.Е., Тиханович Н.И., Камыш H.A. и др. Диагностика стрессчувствительности свиней, полученных при различных комбинациях скрещиваний по гену RYR1 // Сборник научных трудов «Зоотехническая наука Беларуси» -Жодино.- 2005.- т 40. С.93-97.

29. Мысик А.Т., Нетеса А.И. Свиноводство // М., Колос 1984.- 448 с.

30. Никитченко И.Н. Гетерозис в свиноводстве // JL- "Агропромиздат".-1987.-216 с.

31. Плященко С.И., Сидоров В.Т. Стрессы у сельскохозяйственных животных // М., Агропромиздат- 1987.- 192 с.

32. Рыжова H.B, Калашникова JI.A. ДНК-диагностика стрессчувствительности свиней скороспелой мясной породы // Вестник РАСХН.- 2000,- №1.- С.68-71.

33. Рыжова Н.В, Калашникова Л.А., Новиков A.A. Частота встречаемости мутантного аллеля RYR1 гена в популяциях свиней крупной белой породы // Доклады РАСХН.- №6.-2001.-С.31-34.

34. Рыжова Н.В., Калашникова Л.А. Ген RYR1 и продуктивность свиней мясных пород // Животноводство России 2003. - 9 - С.46-47.

35. Рыжова Н.В., Калашникова Л.А. Генотипирование свиней различных пород по локусу RYRl-гена // Тезисы докладов 3-й международной конференции «Проблемы биологии в животноводстве".- Боровск.- 2000.-С. 422-423.

36. Рыжова Н.В., Калашникова Л.А. ДНК-диагностика стрессчувствительности свиней // Тезисы докладов 7-ой международной конференции «Повышение эффективности ведения свиноводства».- Быково,- 1999.-С.176.

37. Рыжова Н.В., Калашникова Л.А. Продуктивные качества свиней различных генотипов по гену RYR1 // Тезисы докладов 8-ой международной конференции «Перспективы развития свиноводства в XXI веке».- Быково.- 2001.- С.111.

38. Рыжова Н.В., Калашникова Л.А. Скрининг RYR-гена свиней скороспелой мясной породы // Тезисы докладов 3-ей международной конференции «Молекулярно-генетические маркеры животных».- Киев.-1999.- С.21-22.

39. Рыжова Р.В., Калашникова JI.A. ДНК-диагностика стрессчувствительности свиней скороспелой мясной породы // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. -2000. №1. - С.68-71.

40. Селье Г. На уровне целого организма // М.: "Наука".-1972.-122 с.

41. Соколов Н.В., Ковалюк Н.В., Зелкова Н.В. и др. Перспективы использования генетических маркеров в селекции свиней // // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. -2004. №5. - С.59-61.

42. Утенкова Т.А. Свиноводство. Разведение и уход // М., Вече. 2001. -176 с.

43. Шейко И.П., Лобан Н.А., Василюк О.Я. Разработка методов молекулярной генной диагностики и их использование в свиноводстве Беларуси // Весщ Нац. акад. навук Беларусь 2005. - №1. - С.62-66.

44. Archibald A.L. Inherited halothane-induced malignant hypertermia in pigs // Briding for disease resistance in farm animals. GAB Intern. Wallingford, Oxon, UK. 1991. - P.449-466.

45. Blin N., Stafford D.W. A general method for isolation of high molecular weigh DNA from eukaryotes. // Nucl.Acids Res.- 1976. V.3.- P.2303-2308.

46. Bogdzinska M. Effect of the RYR1 gene polimorphism on selected reproductive traits of Polish Large White and Polish Landrace sows // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-Suppl. 3-P. 13-17.

47. Bogdzinska M. ESR gene polimorphism and selected reproductive traits of Polish Large White sows // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-Suppl. 3-P.7-11.

48. Brym P., Kaminski S., Wojcik E. Polimorphism within the bovine prolactin receptor gene (PRLR) // Anim. Sci. Papers and Reports-2005.-23-№l P.61-66.

49. Cassady J.P., Jonhson R.K., Pomp D., Rohrer G.A. et al. Identification of quantitative trait loci affecting reproduction in pigs // J. Anim Sci. 2001. - 79 №3 -P.623-633.

50. Drogemuller C., Hamann H., Distl O. Candidate gene markers for litter size in different German pig lines // J. Anim. Sci. 2001. - 79. - P.2565-2570.

51. Drogemuller C., Thieven U., Harlizius B. An Aval and a MspA 11 polymorphism at the porcine oestrogen receptor (ESR) gene // Animal Genetics 1997. - 28. - P.58-71.

52. Fujii J., Otsu K., Zorzato F. et.al. Identification of a mutation in porcine ryanodine receptor associated with malignant hyperthermia // Science.-1991.-№253.- P.448-451.

53. Gibson J.P., Jiang Z.H., Robinson J.A.B., Archibald A.L., Haley C.S. No detectable association of the ESR PvuII mutation with sow productivity in a MeishanxLarge White F2 population // Anim. Genet. 33 - 2002. - P.448-450.

54. Goliasova E., Dvorak J., The oestrogene receptor gene (ESR) PvuII polimorphism genotype and allele frequencies in Czech Large White and Landrace // Acta univ. Agric. et silvic. Mendel. Brun. 2005. - LIII №2. - P.33-38.

55. Haley C. S., DrAgaro E., Ellis M. Genetic components of growth and ultrasonic fat depth traits in Meishan and Large White pigs and their reciprocal crosses // Animal Production 1992. - 266 - P. 105.

56. Hammermeister A., Kapelanska J., Kapelanski W., Grajewska S. Meat quality in pigs as related to RYR1 genotype and pre-slaughter rest // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-Suppl. 3 P.31-37.

57. Isler B.J., Irvin K.M., Neal S.M., Moeller S.J., Davis N.E. Examination of the relationship between the estrogen receptor gene and reproductive traits in swine // J. Anim. Sci. 2002. - Vol. 80 - №9. - P. 2334-2339.

58. Kelly P., Dijane J., Postel-Vinay M., Edery M. The prolactin/growth hormone receptor family // Endocrinology Review. 1991. - 12. - P.235-251.101

59. Klocek C., Kalinowska B., Kapelanski W., Dybala J. Preliminary observations on behaviour of gestating sows differing in RYR1 genotype // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-Suppl. 3.-P.39-42.

60. Kmiec M., Terman A. Assotiations between the prolactin receptor gene polimorphisin and reproductive traits of boars // J. Appl. Genet. 2006. - 47 (2). -P. 139-141.

61. Kmiec M., Terman A. Polimorphisin the PRLR/AluI gene and its effect on litter size in Large White sows // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-№4-P.523-527.

62. Kmiec M., Terman A., Kulig H., Kowalewska I. Influence of RYR1 gene polimorphism on selected semen traits in pedigree boars kept AI stations // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-Suppl. 3 P.267-272.

63. Kmiec M., Terman A., Wojdak-Maksymiec K., Polasik D. Analysis of inflences in ESR/PvuII locus polimorphism on quantitative and qualitative traits of semen in boars // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-Suppl. 3 P.273-280.

64. Korach K. S. Insights from the study of animals lacking functional estrogen receptor // Science 1994. - 266 - P. 1524.

65. Korwin-Kossakowska A., Kamyczek M.,Cieslak D.,Kuril J. The polymorphism of the reproduction-linked genes in Line 990 sows // Science Papers and Reports 19(4) - 2001 - P.265-276.

66. Krzecio E., Antosik K., Kocwin Podsiadla M., Zybert A.,Sieczkowska H., Kuryl J., Lyczynski A. Quality and technological value of meat from porkers of six genetic groups as related to RYR1 gene // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-Suppl.3-P. 19-30.

67. Kuryl J., Krzecio E., Kocwin Podsiadla M., Monin G. The influence of CAST and RYR1 gene polimorphism and their interactions on selected meat quality paramétrés in four-breed fatteners // Anim. Sci. Papers and Reports-2004.-22-№4- P.479-488.

68. Lahucky R., Krska P., Demo P., Bahelka I. Meat quality of pigs with mutation and without mutation in ryanodine receptor (RYR1) gene // J. Farm. Fnim. Sci. 2001. - 34. - P.223-228.

69. Lai F.A., Meissner G. Structure of the calcium release channel of the skeletal muscle sarcoplasmic reticulum and its regulation by calcium // Advances in Experim. Medicine and Biology.-1990.-262.-P.16636-16643.

70. Leeds T.D., Irvin K.M., Moeller S.J. The association between the estrogen receptor locus and growth, carcass, and developmental traits in pigs // The Ohio State University Department of Animal Sciences. Research and Reviews. -2001. -P.87-91.

71. Lehrer S., Sanchez M., Song H. K., Dalton J., Levine F., Savoretti P., Thung S.N., Schachter B. Oestrogen receptor B-region polimorpism and spontaneous abortion in women with breast cancer // Lancet 1990. - 335 - P. 622.

72. Linvill R.C., Pomp D., Jonson R.K., Rothschild M.F. Candidate gene analysis for loci affecting litter size and ovulation rate in swine // J. Anim. Sci. -2001. 79. - P.60-67.

73. MacLennan D.H., Duff C., Zorzato F. et al. Ryanodine receptor gene is candidate for predisposition to malignant hypertermia // Nature 1990. - V 235. -P.448-451.

74. McLennan D.H., Phillips M.S. Malignant hyperthermia // Science.-256.-1992.- P.789-794.

75. Nelson T.E., Lin M., Volpe P. Evidence for intraluminal Ca2+ regulatory site defect in sarcoplasmic reticulum from malignant hyperthermia pig muscle // J. Pharm. Exp.Therap.- 1991.-256.-P.645-649.

76. Brien P.J. Etiopathogenic defect of malignant hyperthermia : Hipersensitive calcium- release channel of skeletal muscle sarcoplasmic reticulum // Vet. Res. Commun.-l 1.-1987.-P.527-559.

77. O7 Brien P.J. Microassay for malignant hyperthermia susceptibility: Hipersensitive ligand gating of the Ca channel in muscle sarcoplasmic reticulum causes increased amounts and rates of Ca - release // Molec. and Cell. Biochem.-93.-1990.-P.53-59.

78. Omelka R., Peskovicova D., Martiniakova M., Bauerova M. Effect of Aval and MspAI polymorphism in the Estrogene Receptor Gene (ESR) on litter sise in Large White and Landrace pigs // J. Anim. Sci.- 2005.- 38 P.35-40.

79. Putnova L. Molekularne geneticka variabilita v kandidatnich QTL pro reprodukci u prasat (Molecular and genetic variability in candidate QTL in reproduction of pigs) // Mendel University of Agriculture and Forestry Brno, -2002. 126 p.

80. Rathje T.A., Roher G.A., Johnson R.K. Evidence for quantative trait loci affecting ovulation rate in pigs // J. Anim. Sci. 1997. - 75. - P. 1486-1494.

81. Rothschild M. F., Jacobson C., Vaske D.A., Tuggle C.K. Discovery of a major gene for litter size in pigs // Iowa State Univ. Coop. Extens. Serv. 1995. - № 629.-P. 82-84.

82. Rothschild M.F. Advances in pig genomics functional gene discovery // Comp. Funct. Genom. 2003. - 4 - P. 266-270.

83. Rothschild M.F., Larson R.G., Jacobson C., Pearson P. PvuII polymorphisms at the porcine oestrogen receptor locus (ESR) // Anim. Genet. -1991.- 22(5) -P.448-449.

84. Rothschild M.F., Tuggle C.K., Jacobson C., Vaske D.A., Warner C. Similarity of human chromosome 6 and pig of a chromosome land 7 // Iowa State Univ. Coop. Extens. Serv. Swine Reseach Report 1995. - № 629. - P. 85-86.

85. Southwood O.I., Van der Steen H., Mileham A.J., Cuthbert-Heavens D. Evaluation of the estrogen receptor (ESR) gene in Meishan synthetic and Large White pigs // EAAP. Prague.- 1995.

86. Spelman R. J., Bovenhuis H. Moving from QTL experimental results to the utilization of QTL in breeding programmes // Anim. Genet. 1998. - 29 - P.78-84.

87. Stalder K.J., Christian L.L. Reproductive differences of cows of different porcine stress syndrome genotypes // Iowa State Univ. Coop. Extens. Serv. -1995.-№629.-P. 87.

88. Topel D., Laurenl C., Ball R.A. Porcine stress sindrome // In: Diseases in Swine.- 1975.- 4ed.- P.970-977.

89. Van Rens B.T.T.M. Physiologal aspects of two candidate genes for litter size in pigs. ESR and PRLR // Wageningen University dissertation 2001 - № 3040.

90. Van Rens B.T.T.M. Tte effect jf estrogen receptor genotype on litter size and placental traits at term in F2 crossbred gilts // J. Theriogenology 2002. -№57.-P. 1635-1649.

91. Vincent A.L., Tuggle C.K., Rothschild M.F. The prolactin receptor gene is associated with increased litter size in pigs // Iowa State Univ. Coop. Extens. Serv. 1998. - № 638. - P. 30-31.

92. Vincent A.L., Wang L., Tuggle C.K., Robic A., Rothschild M.F. Prolactin receptor maps to pig chromosome 16 // Mamm. Genome. 0ct;8(10) - 1997. -P.793-794.

93. Visscher P.M., Haley C.S. Strategies for marker-assisted selection in pig breeding programmes. // Proc. 6th Wld. Cong, on Genet. Appld. to Livest. Prod., Armidale, Australia. 1998-23 -P.503-510.

94. Webb J. New opportunities for genetic change in pigs // Advances in Pork Prouction 2000. - Vol. 11.- P.83-95.

95. Zhang R., Buczko E., Tsai-moris C.H,. Hu Z.Z., Dufau M.L. Isolation and characterization of two novel rat ovarion lactogenreceptor cDNA species // Biochemistry and Biophysics Reseach Communications. 1990. - 168. -P.415-422.

96. Желязков E., Дробхлав В., Методиев С., Бъчварова Г., Dvorak J. ДНК полиморфизъм по три локуса (HAL, СМ и ESR) при нерези // Животновъдни науки 2001. - 38. - 2. - Р.34-38.