Диссертации » Биологические науки » Генетика

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Полиморфизм генов цитокинов и его клиническое значение у больных хроническим гломерулонефритом
ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Полиморфизм генов цитокинов и его клиническое значение у больных хроническим гломерулонефритом"

На правах рукописи

00305Т531

НЕКИПЕЛОВА ЕЛЕНА ВАСИЛЬЕВНА

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ И ЕГО КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТОМ

03.00.15 - генетика

АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва-2007

003057531

Работа выполнена на кафедре медико-биологических дисциплин медицинского факультета Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Белгородский государственный университет»

Научный руководитель

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты

доктор медицинских наук, профессор

кандидат медицинских наук, доцент

Чурносов Михаил Иванович

Щипков Валерий Петрович Прытков Александр Николаевич

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет»

Защита диссертации состоится » 2007 г в <^^>Гчасов на

заседании диссертационного совета Д 212 203 05 при ГОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» по адресу 117198, г Москва, ул Миклухо-Маклая, д 8

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского университета дружбы народов по адресу 117198, г Москва, ул Миклухо-Маклая, д 6

Автореферат разослан »¿^^¿¿Зг^*1 ^ 2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент О Б Гигани

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы В ряду паренхиматозных заболеваний почек гло-мерулонефрит занимает доминирующее место Среди нефрологических заболеваний хронический гломерулонефрит (ХГН) составляет более 35% [Ку-тырина, 2002, Syrjanen et al, 2002, Картамышева и др , 2003] Очевидно, что это самый частый вид патологического процесса, который является одной из распространенных причин хронической почечной недостаточности, для лечения которой необходимы гемодиализ и пересадка почки [Мухин и др , 2002, Narita et al, 2003, Картамышева и др , 2003, Игнатова, 2004] Распространенность и заболеваемость терминальными стадиями хронической болезни почек неуклонно увеличивается в разных регионах мира [Nickolas et al, 2004] Если в США в конце XX века более 340 000 человек были включены в программы диализа или трансплантации почки, то уже к 2010 году ожидается значительное увеличение числа таких пациентов, которое может достигнуть 560 000 человек [Verhave et al, 2004]

По мнению Шулутко Б И (2002), гломерулонефрит это генетически обусловленное иммуноопосредованное воспаление с преимущественным поражением клубочков и вовлечением в патологический процесс всех почечных структур, клинически проявляющееся почечными и внепочечными симптомами Изучению генетических основ гломерулонефрита посвящено ряд работ [Patrakka et al, 2002, Goumenos et al, 2002, Кутырина, 2002, Nisko-las et al, 2004] Однако, следует отметить, что большинство исследований по выявлению генов предрасположенности к гломерулонефриту проведены за рубежом [Syqanen et al, 2002, Narita et al, 2003, Matsuzaki et al, 2004] В России генетические факторы развития ХГН изучались лишь в популяции г Москвы [Камышова, 2004, Калиев и др, 2004, Петросян, 2006, Шестаков, 2006, Шарнова, 2006]

Согласно экспериментальным и клиническим данным, важную роль в развитии ХГН играют цитокины и факторы роста [Вашурина и др ,2002, Гейниц и др , 2004] В ряде работ показаны ассоциации полиморфных маркеров генов цитокинов и факторов роста с хроническим гломерулонефритом и факторами риска заболевания [Jiang et al, 2003, Narita et al, 2003, Шестаков, 2006] Однако полученные результаты разными группами исследователей по этим взаимосвязям противоречивы и не дают однозначного ответа на вопрос о патогенетической роли отдельных полиморфизмов генов цитокинов В работах недостаточно изучены взаимосвязи полиморфных маркеров генов цитокинов с клиническими особенностями дебюта и течения хронического гломерулонефрита, характером его прогрессирования, эффективностью лечения

Клинико-генетические работы, посвященные молекулярно-генетическим аспектам ХГН, в России немногочисленны и затрагивают в основном спектр генов вазоактивных гормонов [Камышова, 2004, Калиев, 2004], интегральных мембранных белков и интерлейкинов [Шестаков, 2006] Исследования роли полиморфных маркеров генов факторов некроза опухоли,

их рецептора и трансформирующего фактора роста в отношении ХГН в нашей стране до сих пор не проведены

Цель и задачи исследования Изучить полиморфизм генов цитокинов и рассмотреть его влияние на клинические особенности течения и эффективность лечения хронического гломерулонефрита

В соответствии с поставленной целью были сформулированы следующие задачи

1 Изучить распределение полиморфизмов генов фактора некроза опухоли а (ТГчТа-308), лимфотоксина а (1ла-250), рецептора фактора некроза опухоли

1 типа (ТХПИ-Зб), трансформирующего фактора роста (31 (Тврр 1-869) у больных ХГН и популяционной выборке

2 Проанализировать влияние генетических полиморфизмов на дебют ХГН

3 Рассмотреть взаимосвязи полиморфизмов генов цитокинов с особенностями клинического течения ХГН

4 Исследовать роль генетических маркеров в характере прогрессирования ХГН

5 Провести анализ генетических и средовых факторов, влияющих на почечную выживаемость

6 Оценить эффективность лечения ХГН в зависимости от изучаемых полиморфизмов генов

Научная новизна работы Впервые комплексно изучен полиморфизм генов фактора некроза опухоли а (ТХРа-ЗОЗ), лимфотоксина а (ЬШ-250), рецептора фактора некроза опухоли (ТКИИ-Зб), трансформирующего фактора роста Р1 (ТвБр 1-869) у больных хроническим гломерулонефритом русской национальности, являющихся уроженцами Центрального Черноземья РФ Установлено их важное клиническое значение

Впервые показано, что аллели с провоспалительным и фибропластиче-ским эффектами генов Т1\тРа-308, Ыа-250, ТКИИ-Зб и ТвРр 1-869 обусловливают более острый и тяжелый дебют ХГН и выраженные клинические проявления при течении заболевания

Впервые установлены генетические факторы риска (аллели с провос-палительными эффектами), которые определяют высокую скорость прогрессирования ХГН, приводя к раннему развитию терминальной хронической почечной недостаточности

Впервые выявлены взаимосвязи между полиморфизмом генов цитокинов и эффективностью лечения ХГН

Научно-практическое значение Полученные результаты позволяют рекомендовать в целях определения группы пациентов с неблагоприятным прогнозом течения хронического гломерулонефрита проведение молекулярно-генетических исследований в нефрологических стационарах для выявления носителей аллелей с провоспалительным и фибропластическим эффектами генов ТКРсс-308, Ыа-250, ТКТРШ-36 и ТСРР1-869

Выделены генетические факторы риска развития тяжелой артериальной гипертензии (аллель А гена TNFR1), гематурии (аллель 1 гена 1Ла), уме-

ренной протеинурии (аллель 2 гена TNFa и аллель 1 гена Lta) и выраженной протеинурии (аллель А гена TNFR1 и аллель С гена TGFßl)

Установлены неблагоприятные прогностические факторы, снижающие почечную выживаемость - аллель С гена TGFßl, комбинация аллеля 1 гена Lta и аллеля А гена TNFR1, наличие артериальной гипертензии в дебюте и течении заболевания При этом проведение терапии ингибиторами ангиотен-зин-конвертирующего фермента улучшает почечную выживаемость

Показана необходимость генетического тестирования больных ХГН по генам TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36, TGFßl-869 с целью выбора эффективной стратегии терапии заболевания монотерапия глюкокортикоидами или цитостатиками при генотипах Lta*2/ Lta*2 и TNFR1*G/ TNFR1*G и соче-танная терапия при аллелях с провоспалительным и фибропластическим эффектами

Положения, выносимые на защиту

1 Полиморфизм генов цитокинов ассоциирован с острым и тяжелым дебютом ХГН

2 Выраженные клинические проявления ХГН при его обострении взаимосвязаны с определенными генетическими маркерами

3 Скорость развития терминальной хронической почечной недостаточности на 5-21% определяется генетическими полиморфизмами TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36

4 Полифакторность и разнонаправленность генетической и средовой детерминации почечной выживаемости

5 Стратегия терапии ХГН зависит от носительства определенных аллелей генов цитокинов

Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены и обсуждены на Годичной научной конференции сотрудников Белгородского госуниверситета (Белгород, 2005, 2006), Российской научной конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифактори-альной патологии» (Курск, 2006), Международной конференции «Генетика в России и мире», посвященной 40-летию Института общей генетики им Н И Вавилова РАН (Москва, 2006), Всероссийской научной конференции с международным участием «Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии» (Белгород, 2006), П-й интернет-конференции морфологов «Морфогенез и регенерация» (Белгород, 2006), 71-й и 72-ой на->чных конференциях КГМУ и сессии Центрально-Черноземного научного центра РАМН (Курск, 2006, 2007)

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ Структура и объем диссертации Диссертация состоит из следующих разделов введение, обзор литературы, описание использованных материалов и методов, результаты и их обсуждение, а также выводы, практические рекомендации и список литературы Материалы диссертации изложены на 148 страницах машинописного текста и содержат 31 таблицу и 29 рисунков Библиографический указатель содержит 221 наименование, из которых 118 иностранных

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Клиническая характеристика исследованных больных Группу исследования составили 370 человек 202 больных хроническим гломерулонефритом и 168 человек популяционного контроля В выборки больных и популяционного контроля включались индивидуумы русской национальности, являющиеся уроженцами Белгородской области и не имеющие родства между собой

Клинико-лабораторное обследование и формирование выборки больных проводилось на базе отделения нефрологии областной клинической больницы Среди 202 больных ХГН детально изучены клинические особенности хронического гломерулонефрита в дебюте и течении заболевания, оценен характер прогрессирования ХГН и эффективность его терапии

Всем больным ХГН и индивидуумам популяционного контроля проводилось типирование четырех молекулярно-генетических маркеров диал-лельные локусы генов фактора некроза опухоли а (ЮТчх-ЗОЗ), лимфотоксина а (1ла-250), рецептора фактора некроза опухоли 1 типа (ЮТИ 1-36) и трансформирующего фактора роста Р1 (ТвРр 1-869) Генотипирование осуществлялось в лаборатории «Молекулярной генетики человека» медицинского факультета Белгородского государственного университета Молекулярно-генетические методы Материалом для исследования послужила венозная кровь в объеме 8-9 мл, взятая из локтевой вены пробанда Забор венозной крови производили в пробирки с консервантом, содержащим 0,5М раствор ЭДТА (рН=8 0)

Выделение геномной ДНК из периферической крови проведено методом фенольно-хлороформной экстракции [МаЛеи-, 1984]

Анализ всех локусов осуществлялся методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) синтеза ДНК ПЦР проводилась на амплификаторе «Терцик-МС4» производства компании "ДНК-технология" с использованием ДНК-полимеразы ТЬегтш адиаЦсиь производства фирмы "Силекс-М" и олигонук-леотидных праймеров, синтезированных фирмой «Синтол»

Генотипирование ДНК-маркеров производилось методом анализа полиморфизма длины рестрикционных фрагментов (ПДРФ) продуктов ПЦР-амплификации специфических участков генома с использованием соответствующих ферментов рестрикции производства ООО "Сибэнзим" (Новосибирск)

Статистические методы Формирование базы данных и статистические расчеты осуществлялись с использованием программы «БТАПЗПСА 6 0» Определение фенотипиче-ских и генных частот проводили стандартными методами [Животовский, 1983] Для оценки соответствия наблюдаемого распределения генотипов ожидаемому, исходя из равновесия Харди-Вайнберга, использован критерий X2 [Вейр, 1995]

Ассоциации аллелей и генотипов изученных ДНК-маркеров с предрасположенностью к хроническому гломерулонефриту, а также с качественными признаками, характеризующими его клинические особенности, оценивали с помощью анализа таблиц сопряженности 2x2 с расчетом критерия с поправкой Йетса на непрерывность и отношения шансов (OR) с 95% доверительными интервалами (CI) [Schlesselman, 1982, Реброва, 2003] Взаимосвязи между количественными патогенетически значимыми признаками ХГН и полиморфизмами генов цитокинов изучали с помощью однофакгорного и двухфакгорного дисперсионного анализа [Лакин, 1990] В данном иследова-нии в силу малочисленности групп гомозигот по редким аллелям их объединяли с гетерозиготами Анализ ассоциаций почечной выживаемости с полиморфными генетическими маркерами проведен методом множительных оценок Каплан-Майера [Камышова, 2003] Влияние генетических и средовых факторов на почечную выживаемость изучали с применением регрессионной модели Кокса [Бикбов, 2004]

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Анализ роли полиморфизма генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36 и TGFpi-869 в возникновении и клиническом течении ХГН

При изучении распределения частот генотипов рассматриваемых полиморфных генетических систем среди больных ХГН и в популяционном контроле (табл 1) показано, что для большинства из них выполняется равновесие Харди-Вайнберга Выявлена значительная вариабельность аллельного разнообразия по исследованным локусам среди населения Белгородской области показатель наблюдаемой гетерозиготности варьировал от Но=0,19-0,21 (для TNFa-308) до Но=0,45-0,52 (для TGFpi-869), что соответствует литературным данным по другим популяциям [Futrakul et al, 2000, Shu et al, 2000, Иванов и др , 2004]

Сравнительный анализ частот генов и генотипов полиморфных локу-сов фактора некроза опухоли а, лимфотоксин а, рецептора фактора некроза опухоли 1 типа, трансформирующего фактора роста pi между больными ХГН и популяционным контролем не выявил достоверных различий (табл 1) Эти данные могут свидетельствовать о том, что рассмотренные нами цито-кины не являются этиологическими факторами хронического гломерулонеф-рита, что полностью согласуется с современными представлениями о функциональной роли данных цитокинов Они, являясь медиаторами межклеточных коммуникаций при иммунном ответе, развитии воспалительных реакций и фибропластических процессах, эффекторами некоторых реакций иммунитета [Фрейдлин, 2000, Насонов, 2001] априорно в соответствии с медико-биологической логикой, а также согласно литературным материалам [Syr-janen et al, 2002, Симбирцев, 2002, Паунова, 2003] будут играть важное значение не в этиологии, а в патогенезе хронического гломерулонефрита

Детальный анализ взаимосвязей полиморфных маркеров генов цитокинов с патогенетически значимыми качественными и количественными при-

< < <6 I

знаками, характеризующими не только определенные клинические особенности заболевания, но и его динамику течения, проведенный нами на следующем этапе работы, подтвердил данное предположение

Таблица 1

Распределение полиморфных маркеров генов цитокинов среди больных _ ХГН и в популяционном контроле (%) _

Локус, полиморфизм Аллели, генотипы, генетическое разнообразие Популяционный контроль (11=168) Больные ХГН (п=202) Критерии различий ФУ ОЩ95%С1)

% %

TNFa-308 TNF*1 88,36 83,75 0,37 (р>0,05)

TNF*2 11,64 16,25

TNF1/TNF1 78,61 (125) 73,00 (146) 0,76 (0,38-1,53)

TNF1/TNF2 19,50 (31) 21,50 (43) 1,13 (0,54-2,35)

TNF2/TNF2 1,89 (3) 5,50(11) 3,13 (0,5523,00)

Но 0,19 0,21

Не 0,21 0,27

Lta-250 Lt*l 30,95 27,92 0,09 (р>0,05)

Lt*2 69,05 72,08

Ltl/Ltl 8,93 (15) 9,14(18) 1,00 (0,35-2,90)

Ltl/Lt2 44,05 (74) 37,56 (74) 0,78 (0,43-1,43)

Lt2/Lt2 47,02 (79) 53,30 (105) 1,27 (0,70-2,30)

Ho 0,44 0,38

He 0,43 0,40

TNFR1 А 45,52 54,29 1,28 (р>0,05)

G 54,48 45,71

AA 22,76 (33) 35,35 (70)* 1,80 (0,93-3,52)

AG 45,52 (66) 37,88 (75) 0,72 (0,39-1,31)

GG 31,72(46) 26,77 (53) 0,79 (0,41-1,51)

Ho 0,46 0,38

He 0,49 0,49

TGFßl-869 T 61,66 57,04 0,33 (р>0,05)

С 38,34 42,96

TT 35,58 (58) 34,17(68) 0,92 (0,48-1,71)

TC 52,15 (85) 45,73 (91) 1,18 (0,65-2,14)

cc 12,27 (20) 20,10(40) 1,83 (0,79-4,29)

Ho 0,52 0,45

He 0,47 0,49

Примечание: Но и Не - наблюдаемая и ожидаемая гетерозиготность, в скобках указаны объемы выборок, * - отклонение от равновесия Харди-Вайнберга среди больных ХГН (р<0,01)

Установлено, что полиморфные генетические маркеры TNFa-308, Ltrx-250, TNFRI-36, TGFp 1-869 ассоциированы с клиническими особенностями хронического г л о м ерул онефр ига как в дебюте, так и в течении заболевания. Наличие в генотипе аллелей с провоспалительным (TNFa*2, Lta+1, TNFR1*A) и фибропластическим (TGFp 1 *С) эффектами обусловливает более острое и тяжелое начало ХГН (остронефритический синдром и его сочетание с нефрогическим синдромом наблюдается у 31-41% пациентов против 16-23% больных без этих аллелей, р<0,05-0,001) (рис.1) и определяет более выраженные клинические проявления заболевания при его течении (смешанный клинический вариант выявлялся у 42-60% больных с этими аллелями против 11-30% пациентов без этих аллелей, р<0,05-0,001) (рис.2). Следует отметить, что при сочетании в генотипе этих аллелей их эффекты усиливаются - хронический гломерулонефрит имеет в 2,5 чаще острый и тяжелый дебют (у 55,5% пациентов) и в 1,5 раза чаще выраженные клинические проявления при его обострении (у 37,4% больных), чем при их отсутствии (20% и 25%, соответственно, р<0,05-0,01).

Генотип TNF1/TNF1 Генотипы TNF1ITNF2,

тагалт

А Б

Рис. X. Частота (в %) клинических синдромов в дебюте ХГН в зависимости от генотипов полиморфных маркеров генов ТОТа-308 (А) и ТСРр1-

869 (Б) :

| - мочевой синдром | - нефротический синдром

| - остро нефритический и его сочетание с нефротическим синдромом

Выявлена ассоциация между полиморфными маркерами гена рецептора фактора некроза опухоли I типа (TNFRl-36) и развитием синдрома артериальной гипертензии у больных ХГН. У пациентов с тяжелой артериальной гипертензией (уровень АД>160/100) частоты аллеля А (58,54%) и генотипа

о

Генотип ТТ Генотипы TChCC

4

4

АА (41,46%) гена ТНРЮ-Зб являются максимальными и статистически достоверно превышают аналогичные показатели популяциоиного контроля (для аллеля А - 45,52%, СЖ=1,28, 95ФС1 1,02-1,70, р=0,05; для генотипа АА -22,76%, <Ж=1,82, 95%С1 1,16-2,91, р=0,007).

Генотип ТММЛМ=1 Генотипы TNF1frNF2.TfFafTNF3

^ - нефритический тип - латентный тип

- гипертонический тин ^ - смешанный тип ЦЩ - гематурнческнй тип

Рис.2 Частота (в %) клинических форм при об о «рении ХГН б зависимости от генотипов полиморфного маркера гена ТИГа-ЗОК

Сравнительный анализ распределения частот генов и генотипов изучаемых генетических систем в группах больных с разным уровнем протеи-нурии (незначительная протеинурия-до 1 г/сут, умеренная - 1-3 г/сут, выраженная - более 3 г/сут) выявил, что пациенты с умеренной протеинурией (13 г/сут) характеризуются наибольшими частотами аллеля TNF*2 (27,78%) и его генотипов (TNF2/TNF2, TNF1/TNF2) (44,44%) гена фактора некроза опухоли а (TNFa-308) и аллеля Lt*l (41,67%) и его генотипов (Ltl/Ltl, Ltl/Lt2) (55,56%) лимфотоксина а по сравнению с больными с незначительной протеинурией (для TNFa-308 - 14,29% и 19,04%, соответственно, р<0,01-0,00); для Lta-250 - 19,05% и 33,33%, соответственно, р<0,001). При этом больные С выраженной протеинурией (более 3 г/сут) имеют максимальную распространённость как аллеля TNFR1*A (63,89%) и его генотипов (АА, AG) (83,33%) гена рецептора фактора некроза опухоли 1 типа, так и аллеля TGFßl*C гена трансформирующего фактора роста ßl (47,22%) в сравнении с больными с незначительной протеинурией (для TNFRl-47,50% и 60,00%, соответственно, р<0.05-0,001, для TGFß 1-869 - 32,50%, р<0,05). Наши данные согласуются с результатами работы Goumenos D.S. et al. (2002), которые показали, что экскреция TGFßl с мочой у больных ХГН с массивной протеину-

рией была выше по сравнению с пациентами без выраженной протеинурии и здоровыми лицами

При проведении двухфакторного дисперсионного анализа влияния парных комбинаций исследуемых полиморфных генетических маркеров на уровень протеинурии установлено, что полиморфизм гена TGFP1-869 в сочетании с каким-либо из полиморфизмов генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36 достоверно ассоциированы с уровнем протеинурии у больных ХГН (р=0,001-0,04) Коэффициент детерминации (h ), количественно характеризующий данные ассоциации, составляет 14-30%

Выявлено увеличение частот аллеля Lta*l и генотипа Ltal/Ltal гена лимфотоксина а у больных ХГН, имеющих гематурию (46,00% и 17,14%, соответственно) по сравнению как с контрольной группой (30,95% и 5,93%, соответственно, р<0,05), так и с больными ХГН без гематурии (13,64% и 3,85%, соответственно, р<0,001)

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что рассмотренные полиморфные маркеры генов цитокинов играют важное значение в формировании особенностей клинического проявления хронического гломерулонефрита Аллели с провоспалительным и фибропластическим эффектами генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36 и TGFpi-869 взаимосвязаны с острым и тяжелым дебютом ХГН, выраженными клиническими проявлениями заболевания при его течении, ассоциированы с отдельными патогенетически значимыми клиническими признаками ХГН (наличие тяжелой артериальной гипертензии, гематурии, умеренной и выраженной протеинурии)

2.Анализ ассоциации полиморфных маркеров генов TNFa-308, Lta -250, TNFR1 и TGFpi-869 со скоростью прогрессирования ХГН

Ассоциация полиморфных маркеров генов TNFa-308, Lta -250, TNFR1-36 и TGFpi с прогрессированием ХГН исследована в двух различных группах больных В первую группу (п=64) были включены пациенты, достигшие терминальной стадии почечной недостаточности (ТХПН), получающие заместительную почечную терапию Во вторую группу вошло 138 больных ХГН Из них у 34 больных в качестве конечной точки наблюдения рассматривали удвоение исходного уровня креатинина (ХПН) В этой группе изучали влияние различных факторов на скорость прогрессирования почечной недостаточности

Установлено, что аллели с провоспалительным эффектом (TNFa*2, Lta*l, TNFR1*A) взаимосвязаны с более высокой скоростью прогрессирования заболевания, приводя к ражему развитию ТХПН (табл 2) При их наличии в генотипе ТХПН развивается через 5,17-6,55 лет, а при отсутствии - через 8,16-10,43 лет (р<0,05-0,01)

Коэффициент детерминации (h2), показывающий какая доля изменчивости показателя, характеризующего скорость прогрессирования ХГН - длительность заболевания до развития ТХПН, обусловлена влиянием генотипов рассматриваемых генов, варьирует по отдельным генам от 4,70% до 10,10%, составляя в среднем 7,86% При проведении двухфакторного дисперсионно-

го анализа влияния парных комбинаций исследуемых генетических полиморфизмов на время развития ТХПН от начала ХГН выявлены значимые ассоциации со скоростью прогрессирования ХГН полиморфизмов TNFa-308 и TNFR1-36 (h2=16,01%, р=0,03), Lta -250 и TNFR1-36 (h2 =21,13%, р=0,005)

Таблица 2

Время развития ТХПН от начала ХГН (лет) в зависимости от полиморфных маркеров генов Т№а-308, Иа-250, Т№Ш-36 и ТвГ[И-8б9

Полиморфизм Длительность заболевания до развития ТХПН (лет) (п=63)

Гены Генотипы

оо TNF1/TNF1 8,16 ±0,76 (48)

сл TNF1/TNF2 TNF2/TNF2 5,17 ±1,04 (15)

Н Р 0,05

h2, % 4,70

Ltal/Ltal Ltal/Lta2 5,80+0,73 (32)

1Л> о) Lta2/Lta2 9,31 +1,01 (31)

В P 0,006

Д h2, % 10,10

AA, AG 6,55 ±0,56 (49)

ё g GG 10,43 +1,97 (14)

P 0,01

н h2, % 8,78

TT 6,57 +0,73 (20)

со. о\ TC, cc 7,98 ±0,87 (43)

Ц_ vo a 00 p 0,75

н h2, % -

Примечание h - коэффициент детерминации (%)

в скобках указаны объемы выборок

Следует отметить, что сочетание в генотипе комбинации из аллелей с провоспалительным эффектом всех трех рассматриваемых генов цитокинов (TNFa-308, Lta -250, TNFR1-36) обусловливает развитие ТХПН через 3,65±0,63 лет, тогда как при их отсутствии ТХПН формируется лишь через 13,00+3,38 лег (р<0,01)

Аналогичной направленности взаимосвязи между изучаемыми полиморфизмами генов цитокинов и скоростью развития хронической почечной недостаточности обнаружены нами и в другой рассматриваемой группе пациентов - с удвоением исходного уровня креатинина (ХПН), что свидетельствует об их надежности Выявлено, что у больных ХГН, имеющих сочетание аллелей Lta*l и TNFR1*A генов лимфотоксина а и рецептора фактора некроза опухоли 1 типа почечная выживаемость достоверно ниже по сравне-

нию с больными без этих аллелей (генотипы Lta2/Lta2 и GG) (х2=3,13, р-0,02) (рис.3).

Рис. 3,Почечная выживаемость у больных ХГН в зависимости от комбинации генотипов генов Lta-250 и TNFR1 (построена методом множительных оценок Каплан-Майера)

С помощью монофакторного анализа почечной выживаемости (регрессионная модель Кокса) были выделены факторы, обладающие неблагоприятным прогностическим значением. Ими оказались - носительство комбинации аллелей Lta* 1 + TN FR ] *А генов лимфотоксина a и рецептора фактора некроза опухоли 1 типа, наличие артериальной гипертензии на протяжении ХГН. Проведение терапии ингибиторами ангиотензин-превращающего фермента (АПФ) улучшает почечную выживаемость (табл.3)

Учитывая возможную взаимосвязь факторов, влияющих на почечную выживаемость, был проведен многофакторный регрессионный анализ, который показал, что неблагоприятными прогностическими факторами являются: носительство комбинации аллелей Lt*l+ TNFR1*A генов лимфотоксина a и рецептора фактора некроза опухоли 1 типа (р=0,05), наличие артериальной гипертензии в дебюте заболевания (р=0,04) и в течении ХГН (р=0,05), наличие аллеля С гена трансформирующего фактора роста ßl (p-0,0í).

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о значимых взаимосвязях полиморфных маркеров генов цитокинов с развитием нефроск-лероза. Полиморфизмы генов Lta-250 и TNFR1-36 (аллели с провоспали-телъным эффектом) являются как независимым фактором риска прогресси-рования ХГН, так и в сочетании с аллелем С (имеет фибропластический эффект) гена TGFß 1-869, наличием артериальной гипертензии в дебюте и течении ХГН ассоциированы с ускоренным падением функции почек.

Наши результаты согласуются с данными исследований Завьялова В.П. (1993) и Коряковой H.H. (2005), выявивших повышенный уровень провоспа-лительных цитокинов - рецептора факгора некроза опухоли 1 типа и фактора

1,0

J — Больные с аллелями * Lt*1 и TNFRvA

— Больные с генотипами

----•-*-'-—- Lt'2/Lt'2 и

20 40 и so 100 120 140 160 TTgFRr&TNFFtrG Длительность ХГН, месяцы

4

12 ♦

некроза опухоли а, соответственно, в сыворотке крови пациентов с хронической почечной недостаточностью Взаимосвязи полиморфных маркеров генов TNFa-308 и TGFpi-869 со скоростью прогрессирования поражения почек установлены и в других исследованиях [Yamamoto et al, 1996, Schiller et al, 1997]

Таблица 3

Монофакторный анализ влияния генетических и клинических факторов на почечную выживаемость у больных ХГН (регрессионная модель Кокса)

Факторы Влияние фактора на выживаемость, (Р)

Наличие аллеля Т№*2 гена ТЫРа-308 0

Наличие аллеля 1л*1 гена 1ла-250 0

Наличие аллеля А гена ТЫПИ-Зб 0

Наличие аллеля С гена ТИ^Р 1-869 0

Наличие комбинации аллелей У:*1+ "ШРШ*А ¿0,02

Мужской пол 0

Наличие АГ на время первого обследования 0

Снижение функции почек на момент первого обследования 0

Наличие нефротического синдрома на момент первого обследования 0

Наличие АГ на протяжении ХГН |0,03

Остронефритический синдром в сочетании с неф-ротическим синдромом в дебюте заболевания 0

Проведение терапии ингибиторами АПФ |0,02

0-показатель не влияет на выживаемость,], -показатель ухудшает выживаемость, Т-показатель улучшает выживаемость

3. Изучение ассоциации полиморфных маркеров генов ТОТа-308, Ыа-250, Т№Ш-36 И ТСРр1-869 с эффективностью терапии хронического гломерулонефрита

Проведено исследование взаимосвязей полиморфизмов генов цитоки-нов с эффективностью лечения больных ХГН в трех различных группах пациенты, лечившиеся только глюкокортикоидами (п=42), лечившиеся только цитостатиками (п=28), получавшие сочетанную терапию - глюкокортикоиды и цитостатики (п=36) В данном исследовании мы оценивали ответную реакцию на лечение (есть положительный эффект от терапии или его нет) групп индивидуумов с разными генотипами пациенты, имеющие аллели с провос-

палительным эффектом (гомозиготы и гетерозиготы) и больные без этих аллелей

Установлено, что, во-первых, эффективность монотерапии как глюко-кортикоидами, так и цитостатиками ассоциирована с полиморфными маркерами генов Lta-250 и TNFR1-36 Во-вторых, у больных ХГН с аллелями Lta*l и TNFR1*A (имеют провоспалительный эффект) монотерапия как глюкокортикоидами, так и цитостатиками недостаточно эффективна - сте-роидочувствительными являются 33-53% этих пациентов и положительный эффект от лечения цитостатиками наблюдается у 40-50% больных У пациентов без этих аллелей (генотипы Lta*2/Lta*2 и GG) эффективность как гормональной терапии, так и терапии цитостатиками максимальна - стероидо-чувствительный нефротический синдром наблюдается у 73-90% пациентов (р<0,01-0,001), а эффект от монотерапии цитостатиками регистрируется у 6685% пациентов (р<0,05-0,01) В-третьих, у больных с аллелями, обладающими провоспалительным (TNFa*2, TNFR1 *А) и фибропластическим (TGFßl*C) эффектами наиболее эффективна сочетанная терапия глюкокортикоидами и цитостатиками - положительные эффекты от сочетанного лечения наблюдаются у 58-83% больных ХГН с данными аллелями, тогда как отсутствие эффекта отмечается лишь у 17-42% (р<0,01-0,001)

Таким образом, пониженные уровни цитокинов характерные, как свидетельствуют литературные данные [Wilson et al, 1997], для индивидуумов с «дикими» аллелями генов цитокинов, у пациентов с ХГН достаточно эффективно купируются назначением лишь или глкжокортикоидов или цитостати-ков Однако, при повышенной концентрации цитокинов, наблюдаемой у индивидуумов с мутантными аллелями (имеют провоспалительные эффекты), монотерапия для купирования ХГН недостаточна и для получения положительного ответа на лечение требуется одновременное назначение и глкжокортикоидов и цитостатиков (сочетанная терапия)

ВЫВОДЫ

1 Полиморфизмы генов фактора некроза опухоли a (TNFa-308), лим-фотоксина a (Lta-250), рецептора фактора некроза опухоли 1 типа (TNFR1-36) и трансформирующего фактора роста ßl (TGFß 1-869) ассоциированы с клиническими особенностями дебюта и течения хронического гломеруло-нефрита, характером его прогрессирования и эффективностью терапии

2 Наличие в генотипе аллелей с провоспалительным и фибропластическим эффектами обусловливает острый и тяжелый дебют хронического гломерулонефрита в 2,5 раза чаще, а выраженные клинические проявления при его обострении в 1,5 раза чаще, чем при их отсутствии

3 Развитие тяжелой артериальной гипертензии при хроническом гло-мерулонефрите ассоциировано с аллелем TNFa*2, наличие гематурии - с ал-лелем Lta*l, умеренной протеинурии - с аллелями TNFa*2 и Lta* 1, выраженной протеинурии - с аллелями TNFR1*A и TGFßl*C.

4 Неблагоприятными прогностическими факторами, снижающими почечную выживаемость, являются носительство аллеля ТСРР1*С, комбинации аллелей 1ла*1 и ТКРК.1*А, наличие артериальной гипертензии в дебюте и в течении заболевания

5 Аллели с провоспалительными эффектами на 5-21% определяют более раннее развитие терминальной хронической почечной недостаточности Их эффекты при сочетании в генотипе усиливаются терминальная хроническая почечная недостаточность развивается в 3 раза быстрее - через 3,65 лет от начала заболевания, против 13 лет при их отсутствии

6 Монотерапия хронического гломерулонефрита глюкокортикоидами или цитостатиками наиболее эффективна \ больных с генотипами

Шх*2/Шх*2 и ТХП11 *0/ТХТ11 1 У пациентов, имеющих аллели с про-воспалительным и фибропластическим эффектами, наибольший положительный результат от лечения наблюдается при сочетанной терапии (глюкокортикоидами и цитостатиками)

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1 В нефрологических стационарах необходимо выявлять группы пациентов с неблагоприятным прогнозом течения хронического гломерулонефрита на основе молекулярно-генетического тестирования генов фактора некроза опухоли ос, лимфотоксина ос, рецептора фактора некроза опухоли 1 типа, трансформирующего фактора роста р1

2 При обследовании больных с ХГН в качестве маркера развития тяжелой артериальной гипертензии рекомендуется использовать аллель ТХРа*2, гематурии - Ьюе*1, умеренной протеинурии - ТХРа*2 и Ыа*1, выраженной протеинурии - ТКРЯ1*А и ТСРР1*С

3 В качестве маркеров ускоренного развития терминальной хронической почечной недостаточности рекомендуется определять аллели с провоспалительными эффектами генов фактора некроза опухоли а, лимфотоксина а, рецептора фактора некроза опухоли 1 типа

4 Для определения прогноза почечной выживаемости рекомендуется учитывать в качестве неблагоприятных факторов носительство аллелей с фибропластическим и провоспалительным эффектами, наличие артериальной гипертензии в дебюте и течении заболевания, а проведение терапии ингибиторами ангиотензин-конвертирующего фермента рассматривать как фактор улучшающий почечную выживаемость

5 Пациентам с генотипами Ыа*2/ Ыа*2 и ТКНУТО/ ТКРЯ1*С рекомендуется назначать монотерапию глюкокортикоидами или цитостатиками У больных с аллелями ТКРа*2, ТНРШ*А и ТСРр1*С для получения положительного эффекта от терапии рекомендуется назначать сочетанное лечение (глюкокортикоидами и цитостатиками)

СПИСОК" СОКРАЩЕНИЙ

АПФ - ангиотензин-превращающий фермент

АД - артериальное давление

1ла - лимфотоксин а

ТТчТа - фактор некроза опухоли а

ТТСН11 - рецептор фактора некроза опухоли 1 типа

ТСрр1 - трансформирующий фактор роста Р1

ТХПН - терминальная хроническая почечная недостаточность

ХГН - хронический гломерулонефрит

ХПН - хроническая почечная недостаточность

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Калмыкова, Е В Анализ полиморфизма генов хемокинов у больных хроническим гломерулонефритом/ Е В Калмыкова, Е В Некипелова, М И Чурносов // Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии материалы рос науч конф с междунар участием В 2-х т - Т П -Курск КГМУ, 2006 -С 7-10

2 Распределение частот аллелей и генотипов фактора некроза опухоли и его рецептора у больных хроническим гломерулонефритом /ЕВ Калмыкова, Е В Некипелова, И В Абрамова, А С Анопченко, Д В Хвостова// Молодежная наука и современность сб тр 71-ой итоговой межвузов науч конф студентов и молодых ученых -Курск КГМУ, 2006 - Ч 1 - С 198-199

3 Калмыкова, Е В Анализ распределения частот аллелей и генотипов у больных хроническим гломерулонефритом /Е В Калмыкова, Е В Некипелова, М И Чурносов // Университетская наука Взгляд в будущее сб тр 71-й научной конференции КГМУ и сессии Центрально-Черноземного Научного центра РАМН В 2-х т - Курск КГМУ, 2006 - Т 1 - С 149

4 Использование различных типов генетических маркеров для описания популяционной структуры населения / И К Аристова, Е В Балановская, В С Ващилин, М С Жерлицына, Е В Калмыкова, И Н Лепендина, Е В Некипелова, В Ю Песик, Н А Рудых, И Н Сорокина, Л А Цапкова, М И Чурносов // Вестник новых медицинских технологий - 2006 - т 13, №2 - С 173-176

5 Некипелова, Е В Анализ ассоциации полиморфных маркеров генов ТКРа-308, 1ла-250, ТХШ1, ТОРР1-869 со скоростью прогрессирования хронического гломерулонефрита/Е В Некипелова // Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии материалы науч конф -Белгород, 2006 - С 199-120

6 Некипелова, Е В Клиническое и молекулярно-генетическое исследование больных с хроническим гломерулонефритом / ЕВ Некипелова, Е В Калмыкова, М И Чурносов //Вестник новых медицинских технологий -2006 - Т 13, Л'«4 - С 170-173

7 Калмыкова, Е В Анализ распределения частот аллелей и генотипов генов цитокинов у больных хроническим гломерулонефритом/ Е В Калмыкова, Е В Некипелова // Генетика в России и мире материалы международной конф , посвященной 40-летию института общей генетики им Н И Вавилова РАН - Москва, 2006 - С 80

8 Некипелова, Е В Анализ ассоциации полиморфных маркеров генов Т№а-308, ЬКх-250 и ТХРШ со скоростью прогрессирования хронического гломерулонефрита /ЕВ Некипелова // Морфогенез и регенерация материалы II интернет-конференции морфологов - Белгород, 2006 - С 27-28

9 Некипелова, Е В Особенности клинического течения хронического гломерулонефрита в зависимости от генотипов полиморфных маркеров генов П\Та-308, Ыа-250, ТКНИ И ТСрр 1-869 / ЕВ Некипелова // I Всероссийская конференция молодых ученых, организованная Воронежской государственной медицинской академией им Н Н Бурденко и Курским государственным медицинским университетом сб науч тр в 2-х т - Воронеж, 2007 -Т1-С 75-79

10 Некипелова, Е В Прогрессирование хронического гломерулонефрита почечная выживаемость в зависимости от полиморфных маркеров генов ЮТа-ЗОв, Ыа-250, ТКНИ И ТвРр 1-869 / Е В Некипелова // Университетская наука Взгляд в будущее сб тр 72-й научной конференции КГМУ и сессии Центрально-Черноземного Научного центра РАМН в 2-х т . - Курск КГМУ, 2007 - Т.П - С 20-22

Некипелова Елена Васильевна (Россия) Полиморфизм генов цитокинов и его клиническое значение у больных хроническим гломерулонефритом

Изучено распределение полиморфизмов генов фактора некроза опухоли а, лимфотоксина а, рецептора фактора некроза опухоли 1 типа, трансформирующего фактора роста pi у больных хроническим гломерулонефритом (ХГН) и в популяционной выборке, оценены их взаимосвязи с особенностями дебюта и клинического течения хронического гломерулонефрита, характером прогрессирования и эффективностью терапии Установлено, что наличие в генотипе провоспалительных и фибропластического аллелей анализируемых генов цитокинов обусловливает острый и тяжелый дебют ХГН и выраженные клинические проявления при его обострении Доказаны ассоциации полиморфизма изученных генов цитокинов с развитием тяжелой артериальной гипертензии, гематурии, протеинурии Установлены неблагоприятные прогностические факторы, снижающие почечную выживаемость - но-сительство фибропластического аллеля гена трансформирующего фактора роста pi, комбинации провоспалительных аллелей генов лимфотоксина а и рецептора фактора некроза опухоли, наличие артериальной гипертензии в дебюте и в течении заболевания Определена терапевтическая тактика в отношении ХГН в зависимости от полиморфизма генов цитокинов

Nekipelova Yelena Vasilyevna (Russia) Polymorphism of cytokine genes and its clinical significance of sick of chronic

glomerulonephritis

Distribution of polymorphism of genes tumor necrosis factor a, limphotoxin a, receptor tumor necrosis factor of the 1 st type, transforming growth factor pi of sick of chronic glomerulonephritis (CGN), and in popular selection has been investigated, their correlation with peculiarities of debut and clinical course of chronic glomerulonephntis are valued, the character of progress and effect of therapy The existence m genotype of inflammation and fibroplastic alleles of analysing cytokine genes reflects the acute and hard debut of CGN and significant clinic display within its intensification Examples of polymorphism of investigated cytokine genes with development of hard arterial hypertensia, bloodunne, albumenune are proved Unfavourable prognosis factor, lhmmating of kidney survival - existence of fibroplastic allele of genes transforming growth factor pi, combination of inflammation alleles of genes limphotoxin a and receptor factor of tumor necrosis, the existence of arterial superpressure in debut and m the flow of disease is stated Defined, that thérapie treatment of CGN depends on polymorphism of cytokine genes

Подписано в печать 2 04 07 г Тираж 100 экз Условных печатных листов 1 1А , бумага офсетная 60x84

Белгород 2007

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Некипелова, Елена Васильевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1 Современные направления исследований генетики мультифакториальных заболеваний.

1.2 Молекулярные основы этиологии и патогенеза хронического гломерулонефрита.

1.3 Генетические исследования хронического гломерулонефрита

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования.

2.1 Характеристика обследованных групп.

2.2 Клиническая характеристика больных.

2.3 Молекулярно-генетические методы.

2.4 Биометрические и генетико-статистические методы.

ГЛАВА 3. Анализ роли полиморфизма генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1 И TGFpi-869 в возникновении и клиническом течении

3.1 Изучение ассоциаций полиморфных маркеров генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1 и TGF(31-869 с развитием хронического гломерулонефрита.

3.2 Характеристика клинических особенностей дебюта ХГН в зависимости от полиморфных маркеров генов TNFa-308, Lta-250 , TNFR1 hTGF(31

3.3 Исследование особенностей клинического течения ХГН в зависимости от генотипов полиморфных маркеров генов

TNFa-308, Lta-250, TNFR1 и TGF|31

ГЛАВА 4. Анализ ассоциации полиморфных маркеров генов TNFa-308, Lta -250, TNFR1 и TGFpi-869 со скоростью прогрессирования ХГН.

4.1.Распределение полиморфных маркеров генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1 и TGF|31-869 у больных ХГН с ТХПН и их влияние на время развития ТХПН.

4.2,Оценка почечной выживаемости в зависимости от генотипов полиморфных маркеров генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1 и

TGFp 1

ГЛАВА 5. Изучение ассоциации полиморфных маркеров генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1 И TGFpi-869 с эффективностью терапии хронического гломерулонефрита.

5.1. Оценка эффективности терапии глюкокортикоидами в зависимости от генотипов полиморфных маркеров генов

TNFa-308, Lta-250, TNFR1 и TGFf31

5.2. Оценка эффективности терапии цитостатиками в зависимости от генотипов полиморфных маркеров генов

TNFa-308, Lta-250, TNFR1 и TGF01

5.3. Оценка эффективности сочетанной терапии в зависимости от генотипов полиморфных маркеров генов

TNFa-308, Lta-250, TNFR1 и TGF01

5.4. Оценка эффективности терапии ингибиторами АПФ в зависимости от генотипов полиморфных маркеров генов

TNFa-308, Lta-250, TNFR1 и TGF01

ОБСУЖДЕНИЕ. Ill

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Полиморфизм генов цитокинов и его клиническое значение у больных хроническим гломерулонефритом"

Актуальность темы. В ряду паренхиматозных заболеваний почек гломерулонефрит занимает доминирующее место. Среди нефрологических заболеваний хронический гломерулонефрит (ХГН) составляет более 35% [Кутырина, 2002; Syrjanen et al., 2002; Картамышева и др., 2003]. Очевидно, что это самый частый вид патологического процесса, который является одной из распространенных причин хронической почечной недостаточности, для лечения которой необходимы гемодиализ и пересадка почки [Мухин и др., 2002; Narita et al., 2003; Картамышева и др., 2003; Игнатова, 2004]. Распространенность и заболеваемость терминальными стадиями хронической болезни почек неуклонно увеличивается в разных регионах мира [Nickolas et al., 2004]. Если в США в конце XX века более 340 000 человек были включены в программы диализа или трансплантации почки, то уже к 2010 году ожидается значительное увеличение числа таких пациентов, которое может достигнуть 560 000 человек [Verhave et al., 2004].

По мнению Шулутко Б.И. (2002), гломерулонефрит это генетически обусловленное иммуноопосредованное воспаление с преимущественным поражением клубочков и вовлечением в патологический процесс всех почечных структур, клинически проявляющееся почечными и внепочечными симптомами. Изучению генетических основ гломерулонефрита посвящен ряд работ [Patrakka et al., 2002; Goumenos et al., 2002; Кутырина, 2002; Niskolas et al., 2004]. Однако, следует отметить, что большинство исследований по выявлению генов предрасположенности к гломерулонефриту проведены зарубежом [Syrjanen et al., 2002; Narita et al., 2003; Matsuzaki et al., 2004]. В России генетические факторы развития ХГН изучались лишь в популяции г. Москвы [Камышова, 2004; Калиев и др., 2004; Петросян, 2006; Шестаков, 2006; Шарнова, 2006].

Согласно экспериментальным и клиническим данным, важную роль в развитии ХГН играют цитокины и факторы роста [Батурина и др., 2002; Гейниц и др., 2004]. В ряде работ показаны ассоциации полиморфных маркеров генов цитокинов и факторов роста с хроническим гломерулонефритом и факторами риска заболевания [Jiang et al., 2003; Narita et al., 2003; Шестаков, 2006]. Однако полученные результаты разными группами исследователей по этим взаимосвязям противоречивы и не дают однозначного ответа на вопрос о патогенетической роли отдельных полиморфизмов генов цитокинов. В работах недостаточно изучены взаимосвязи полиморфных маркеров генов цитокинов с клиническими особенностями дебюта и течения хронического гломерулонефрита, характером его прогрессирования, эффективностью лечения.

Клинико-генетические работы, посвященные молекулярно-генетическим аспектам ХГН, в России немногочисленны и затрагивают в основном спектр генов вазоактивных гормонов [Камышова, 2004; Калиев, 2004], интегральных мембранных белков и интерлейкинов [Шестаков, 2006]. Исследования роли полиморфных маркеров генов факторов некроза опухоли, их рецептора и трансформирующего фактора роста в отношении ХГН в нашей стране до сих пор не проведены.

В связи с этим, целью исследования явилось:

Изучить полиморфизм генов цитокинов и рассмотреть его влияние на клинические особенности течения и эффективность лечения хронического гломерулонефрита.

Задачи исследования: 1. Изучить распределение полиморфизмов генов фактора некроза опухоли a (TNFa-308), лимфотоксина a (Lta-250), рецептора фактора некроза опухоли 1 типа (TNFR1-36), трансформирующего фактора роста [31 (TGFP1-869) у больных ХГН и популяционной выборке.

2. Проанализировать влияние генетических полиморфизмов на дебют ХГН.

3. Рассмотреть взаимосвязи полиморфизмов генов цитокинов с особенностями клинического течения ХГН.

4. Исследовать роль генетических маркеров в характере прогрессирования ХГН.

5. Провести анализ генетических и средовых факторов, влияющих на почечную выживаемость.

6. Оценить эффективность лечения ХГН в зависимости от изучаемых полиморфизмов генов.

Научная новизна. Впервые комплексно изучен полиморфизм генов фактора некроза опухоли a (TNFa-308), лимфотоксина a (Lta-250), рецептора фактора некроза опухоли 1 типа (TNFR1-36), трансформирующего фактора роста (31 (TGFp 1-869) у больных хроническим гломерулонефритом русской национальности, являющихся уроженцами Центрального Черноземья РФ. Установлено их важное клиническое значение.

Впервые показано, что аллели с провоспалительным и фибропластическим эффектами генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36 и TGFp 1-869 обусловливают более острый и тяжелый дебют ХГН и выраженные клинические проявления при течении заболевания.

Впервые установлены генетические факторы риска (аллели с провоспалительными эффектами), которые определяют высокую скорость прогрессирования ХГН, приводя к раннему развитию терминальной хронической почечной недостаточности.

Впервые выявлены взаимосвязи между полиморфизмом генов цитокинов и эффективностью лечения ХГН.

Научно-практическое значение. Полученные результаты позволяют рекомендовать в целях определения группы пациентов с неблагоприятным прогнозом течения хронического гломерулонефрита проведение молекулярно-генетических исследований в нефрологических стационарах для выявления носителей аллелей с провоспалительным и фибропластическим эффектами генов TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36 и TGF(31-869.

Выделены генетические факторы риска развития тяжелой артериальной гипертензии (аллель А гена TNFR1), гематурии (аллель 1 гена Lta), умеренной протеинурии (аллель 2 гена TNFa и аллель 1 гена Lta) и выраженной протеинурии (аллель А гена TNFR1 и аллель С гена TGFJ31).

Установлены неблагоприятные прогностические факторы, снижающие почечную выживаемость - аллель С гена TGFJ31, комбинация аллеля 1 гена Lta и аллеля А гена TNFR1, наличие артериальной гипертензии в дебюте и течении заболевания. При этом проведение терапии ингибиторами ангиотензин-конвертирующего фермента улучшает почечную выживаемость.

Показана необходимость генетического тестирования больных ХГН по генам TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36, TGF(31-869 с целью выбора эффективной стратегии терапии заболевания: монотерапия глюкокортикоидами или цитостатиками при генотипах Lta*2/ Lta*2 и TNFR1*G/ TNFR1*G и сочетанная терапия при аллелях с провоспалительным и фибропластическим эффектами.

Положения, выносимые на защиту:

1. Полиморфизм генов цитокинов ассоциирован с острым и тяжелым дебютом ХГН.

2. Выраженные клинические проявления ХГН при его обострении взаимосвязаны с определенными генетическими маркерами.

3. Скорость развития терминальной хронической почечной недостаточности на 5-21% определяется генетическими полиморфизмами TNFa-308, Lta-250, TNFR1-36.

4. Полифакторность и разнонаправленность генетической и средовой детерминации почечной выживаемости.

5. Стратегия терапии ХГН зависит от носительства определенных аллелей генов цитокинов.

Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены и обсуждены на: Годичной научной конференции сотрудников Белгородского госуниверситета (Белгород, 2005, 2006), Российской научной конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск, 2006), Международной конференции «Генетика в России и мире», посвященной 40-летию Института общей генетики им. Н.И.Вавилова РАН (Москва, 2006), Всероссийской научной конференции с международным участием «Актуальные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии» (Белгород, 2006), И-й конференции морфологов «Морфогенез и регенерация» (Белгород, 2006), 71-й и 72-ой научных конференциях КГМУ и сессии Центрально-Черноземного научного центра РАМН (Курск, 2006, 2007).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 10 печатных работ.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Некипелова, Елена Васильевна

ВЫВОДЫ

1. Полиморфизмы генов фактора некроза опухоли a (TNFa-308), лимфотоксина a (Lta-250), рецептора фактора некроза опухоли 1 типа (TNFR1-36) и трансформирующего фактора роста (31 (TGFP1-869) ассоциированы с клиническими особенностями дебюта и течения хронического гломерулонефрита, характером его прогрессирования и эффективностью терапии.

2. Наличие в генотипе аллелей с провоспалительным и фибропластиче-ским эффектами обусловливает острый и тяжелый дебют хронического гломерулонефрита в 2,5 раза чаще, а выраженные клинические проявления при его обострении в 1,5 раза чаще, чем при их отсутствии.

3. Развитие тяжелой артериальной гипертензии при хроническом гло-мерулонефрите ассоциировано с аллелем TNFa*2, наличие гематурии - с ал-лелем Lta*l, умеренной протеинурии - с аллелями TNFa*2 и Lta*l, выраженной протеинурии - с аллелями TNFR1*A и TGF|31*C.

4. Неблагоприятными прогностическими факторами, снижающими почечную выживаемость, являются носительство аллеля TGFpi*C, комбинации аллелей Lta*l и TNFR1*A, наличие артериальной гипертензии в дебюте и в течении заболевания.

5. Аллели с провоспалительными эффектами на 5-21% определяют более раннее развитие терминальной хронической почечной недостаточности. Их эффекты при сочетании в генотипе усиливаются: терминальная хроническая почечная недостаточность развивается в 3 раза быстрее - через 3,65 лет от начала заболевания, против 13 лет при их отсутствии.

6. Монотерапия хронического гломерулонефрита глюкокортикоидами или цитостатиками наиболее эффективна у больных с генотипами Lta*2/Lta*2 и TNFR1 *G/TNFR1 *G. У пациентов, имеющих аллели с провоспалительным и фибропластическим эффектами, наибольший положительный результат от лечения наблюдается при сочетанной терапии (глюкокортикоидами и цитостатиками).

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В нефрологических стационарах необходимо выявлять группы пациентов с неблагоприятным прогнозом течения хронического гломерулонефрита на основе молекулярно-генетического тестирования генов фактора некроза опухоли а, лимфотоксина а, рецептора фактора некроза опухоли 1 типа, трансформирующего фактора роста Р1.

2. При обследовании больных с ХГН в качестве маркера развития тяжелой артериальной гипертензии рекомендуется использовать аллель TNFa*2, гематурии - Lta*l, умеренной протеинурии - TNFa*2 и Lta*l, выраженной протеинурии - TNFR1 *А и TGFpi*С.

3. В качестве маркеров ускоренного развития терминальной хронической почечной недостаточности рекомендуется определять аллели с провос-палительными эффектами генов фактора некроза опухоли а, лимфотоксина а, рецептора фактора некроза опухоли 1 типа.

4. Для определения прогноза почечной выживаемости рекомендуется учитывать в качестве неблагоприятных факторов носительство аллелей с фибропластическим и провоспалительным эффектами, наличие артериальной гипертензии в дебюте и течении заболевания, а проведение терапии ингибиторами ангиотензин-конвертирующего фермента рассматривать как фактор улучшающий почечную выживаемость.

5. Пациентам с генотипами Lta*2/ Lta*2 и TNFR1*G/ TNFR1*G рекомендуется назначать монотерапию глюкокортикоидами или цитостатиками. У больных с аллелями TNFa*2, TNFR1*A и TGFpi*C для получения положительного эффекта от терапии рекомендуется назначать сочетанное лечение (глюкокортикоидами и цитостатиками).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Некипелова, Елена Васильевна, Москва

1. Абрамова Т.В. Нейтрофилы при гломерулонефрите // Нефрология.2005.-т.2,Х°9.-С. 30-39.

2. Алиев Р.А. Роль этиологических и других факторов в развитии хронической почечной недостаточности // Нефрология и диализ.-2001.-t.3,X°3.-C. 358-364.

3. Альбини Б., Брентьенс Я.Р., Андрее Д.А. Иммунопатология почки.-М.: Медицина, 1982.- 264 с.

4. Аткинс Р.К. Гломерулонефриты // Нефрология и диализ.-2000.-№2.-С. 225-229.

5. Богомазов С.Ю., Гладских О.П., Иванов А.А. и др. Цитокины и внеклеточный матрикс при экспериментальных гломерулопатиях // Арх. патологии.-1997.-Т.59.-С.45-50.

6. Боровиков В. Statistica. Искусство анализа данных на компьютере //Изд. «Питер»,- 2003.-502 с.

7. Бочков Н.П. Клиническая генетика.-М.:ГЭОТАР-МЕД, 2004.-480 с.

8. Батурина Т.В., Сергеева Т.В. Цитокины и адгезивные молекулы в патогенезе хронического гломерулонефрита //Нефрология и диализ.-2002.-№4.-С.232-239.

9. П.Гейниц О.А., Калюжин В.В., Пак Ю.Д. Цитокиновый статус у пациентов с хронической почечной недостаточностью //Сборник трудов XII ежегодного Санкт-Петербургского нефрологического семинара.-Санкт-Петербург, 2004.- С.ЗЗ.

10. Гинтер Е.К. Медицинская генетика.-М.:Медицина, 2003.-448 с.

11. Гинтер Е.К. Эволюция представлений о генетической природе мультифакториальных заболеваний // Мед. генетика.- 2003.-т.2,№4.-С. 146-156.

12. Демьянов А.В., Котов А.Ю., Симбирцев А.С. Цитокины // Цитокины ивоспаление.-2003.- №2.- С. 20-35.

13. Джаналиев Б.Р., Пальцева Е.М., Варшавский В.А. и др. Экспрессия некоторых цитокинов и фактора роста при гломерулопатиях // Нефрология и диализ.- 2003.-№ 3.-С. 211-215.

14. Ермоленко В.М. Хроническая почечная недостаточность. В кн.: Нефрология: руководство. Под ред. И.Е. Тареевой//М.: Медицина, 2000.-С. 596-657.

15. Животовский J1.A. Статистические методы анализа частот генов в природных популяциях. Итоги науки и техники. Общая генетика.- М., ВИНИТИ.- 1983.- С. 76-104.

16. Завьялов В.П. Цитокины и их роль в межклеточных взаимодействиях //Вестн. Рос. АМН.-1995.-№2.- С.8-10.

17. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Основы общей патологии //ЭЛБИ-СПб: СПб, 1999.-С. 297-302.

18. Иванов А.А., Пальцев М.А., Серов В.В. и др. Еще раз о морфологической классификации гломерулонефрита//Арх. пат.-1997.-№1.-С. 18-22.

19. Иванов В.П., Полоников А.В. Полиморфизм гена NAT 2 при инфекционно-аллергической бронхиальной астме и его связь с возрастом манифестации и степенью тяжести заболевания //Мед. генетика.- 2004.-т.З,№4.-С. 480-483.

20. Игнатова М.С. Материалы 34 конгресса европейской ассоциации детских нефрологов // Нефрология и диализ.-2000.-т.З,№4.- С. 221223.

21. Игнатова М.С. Роль генетических исследований в развитии нефрологии

22. Тер архив.-2003 .-№6.- С.66-71.

23. Игнатова М.С., Вельтищев Ю.Е. Детская нефрология -М.:Медицина,1989.-С.304-333.

24. Игнатова М.С. Патология органов мочевой системы у детей (современные аспекты) // Нефрология и диализ.-2004.-т.6,№2.-С. 127131.

25. Игнатова М.С. Проблема прогрессирования болезней почек у детей и современные возможности ренопротекции // Нефрология и диализ.-2005.-т.7,№4.-С. 428-434.

26. Калиев P.P., Будайчиева А.Б., Алдашев А.А. и др. Полиморфизм гена ангиотензин-превращающего фермента у больных хроническим гломерулонефритом // Нефрология и диализ.-2004.-т.6,№4.-С. 311-314.

27. Камышова Е.С., Кутырина И.М., Носиков В.В., Швецов М.Ю. Значениеполиморфных маркеров генов вазоактивных гормонов в оценке клинических особенностей хронического гломерулонефрита //Тер. архив.-2005.-№6.-С. 16-20.

28. Камышова Е.С. Клиническое значение полиморфных маркеров гена ангиотензинпревращающего фермента, гена синтетазы альдостерона и гена эндотелиальной синтетазы оксида азота при хроническом гломерулонефрите. Автореферат дисс. к.м.н. -2004.- 35с.

29. Картамышева Н.Н., Чумакова О.В. Некоторые механизмы формирования тубулоинтерстициального компонента при хронических заболеваниях почек // Нефрология и диализ.-2001 .-т3,№3.-С. 314-317.

30. Картамышева Н.Н., Чумакова О.В., Кучеренко А.Г., Сергеева Т.В. Прогрессирование хронического гломерулонефрита: клинико-морфологические взаимосвязи // Нефрология и диализ.-2003.-т.5,№4.-С. 395-398.

31. Картамышева Н.Н., Чумакова О.В., Кучеренко А.Г. Факторы прогрессирования хронического пиелонефрита и хронического интерстициального нефрита //Педиатрия.- 2004.- №5.- С. 50-54.

32. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., Воробьев А.А. Эндогенные модуляторы.-СПб.: Гиппократ, 1992.-256 с.

33. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Цитокины мононуклеарных фагоцитов в регуляции реакции воспаления и иммунитета // Иммунология.-1995 .-№3 .-С.30-44.

34. Константинова Н.А. Иммунные комплексы и повреждение тканей.-М.:Медицина, 1996.-256 с.

35. Корякова Н.Н. Патогенетические особенности различных клинико-морфологических вариантов хронического гломерулонефрита //Нефрология.- 2005.- т.7,№ 1.-С. 58-62.

36. Краснова Т.Н. Особенности течения и лечения нефротического синдрома у больных гломерулонефритом.- M.:Novartis, 2003.- 39 с.

37. Кутырина И.М. Лечение артериальной гипертонии при хронических заболеваниях почек //Российский медицинский журнал.-1997.-т.23,№5.- С. 1535-1540.

38. Кутырина И.М., Тареева И.Е., Носиков В.В. и соавт. Изучение полиморфизма гена ангиотензин-превращающего фермента при хроническом гломерулонефрите //Тер. архив.-1999.-№6.-С. 30-34.

39. Кутырина И.М. Применение ингибитора ангиотензин-превращающего фермента при первичных поражениях почек и диабетической нефропатии //Consilium Medicum.-2002.-T.7,№4.-C. 331-333.

40. Ли Ч. Введение в популяционную генетику. -М.: Мир, 1995.- 555 с.

41. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высш. шк., 1990. - 352 с.

42. Лопаткин Н.А., Кучинский И.Н. О классификации хронической почечной недостаточности //Урология и нефрология 1975.- №4.- С. 21-23

43. Мустафина О.Е., Тхаркахова З.Н., Бикмеева A.M. Полиморфизм гена ангиотензин-превращающего фермента и риск мультифакториальных заболеваний//Мед. генетика.-2002.-т.5,№1.-С. 212-220.

44. Мухин Н.И., Тареева И.Е., Шилов Г.Л. Диагностика и лечение болезней почек.-М.:ТЕОТАР-МЕД, 2002.-383 с.

45. Назаров П.Г. Цитокины и адгезивные молекулы. В кн.: Межклеточныевзаимодействия. Глава 1.-М.:Наука, 1995.-С. 15-27.

46. Насонов E.JI. Иммунные комплексы при ревматических заболеваниях //Иммунология заболеваний соединительной ткани. -М., 1999.- С. 104158.

47. Насонов E.JL, Сура В.В. Современные подходы к иммунологической диагностике аутоиммунных и иммунокомплексных болезней //Тер. архив.-1998.-№6.-С. 144-150.

48. Насонов E.J1. Современные направления иммунологических исследований при хронических воспалительных и аутоиммунных заболеваниях человека // Тер. архив.-2001 .-№8.-С. 43-46.

49. Николаев Ю.Я. Хроническая почечная недостаточность: клиника, диагностика и лечение //Российский Медицинский Журнал.-2000.-№3.-С. 138-142.

50. Пальцев М.А., Иванов А.А. Возможные механизмы развития гломерулосклероза при нефропатиях различного генеза // Арх. патологии.-1994.-Т.56. -№6. -С.13-16

51. Пальцев МА., Иванов А.А. Межклеточные взаимодействия.-М.:Медицина, 1995 г. -С. 324.

52. Пальцев М.А. Цитокины и их роль в межклеточных взаимодействиях // Арх. патологии.-1996.-№6.-С. 3-7

53. Пальцев М.А. Цитокины. От теории к практике //Вест. РАН.-1996.-№12.-С. 1079-1084.

54. Папаян А.В., Савенкова Н.Д. Клиническая нефрология детского возраста.-СПб.-1999.- С. 529-546.

55. Паунова С.С., Кучеренко А.Г., Марков Х.М. Роль цитокинов в развитиинефропатий у детей // Нефрология и диализ.- 1999.-Т.1,№2-3.- С. 141142.

56. Паунова С.С., Кучеренко А.Г., Марков Х.М. и др. Цитокины в патогенезе нефропатий у детей //Российский педиатрический журнал.-2000.- №5.- С. 72-73.

57. Паунова С.С. Ангиотензин II современное представление о патогенезе нефросклероза // Нефрология и диализ.-2003.-№4.-С. 353356.

58. Паунова С.С. Патогенетические основы нефросклероза //Нефрология и диализ.-2005.-т.7,№2.-С. 130-135.

59. Петросян Э.К., Цыгин А.Н., Ильенко Л.И. и др. Полиморфный маркер

60. R229Q гена подоцина у детей с нефротическим синдромом // Нефрология и диализ.-2006.-т.8,№3.-С. 268-271.

61. Полоников А.В. Полиморфизм Ser31 ICys в 9 экзоне гена парооксаназы2 ассоциирован с подверженностью к гипертонической болезни у женщин //Мед. генетика.- 2006.- т.5,№12.- С. 589-592.

62. Пузырев В.П., Степанов В.А. Патологическая анатомия генома человека.- Новосибирск, 1997.-224 с.

63. Пузырев В.П. Геномная медицина настоящее и будущее // Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике.-Новосибирск, 2003.-Вып.3.-С. 3-26

64. Пузырев В.П. Генетика мультифакториальных заболеваний: между прошлым и будущим //Мед. генетика.- 2003.-т.2,№12.- С. 498-508.

65. Ратнер М.Я. Современные представления о значении медиаторов в патогенезе фиброза почечного интерстиция // Тер. архив.-1997.-№ 12.-С.87-88.

66. Ратнер М.Я., Стенина И.И., Федорова Н.Д. Значение клинического и морфологического типов хронического гломерулонефрита и тубулоинтерстициальных изменений для прогноза прогрессирования заболевания //Клин, мед.- 1999.- №1.- С. 30-33

67. Ратнер М.Я., Стенина И.И., Федорова Н.Д. Прогнозирование ускоренного прогрессирования хронического гломерулонефрита на основании клинических и гистоморфологических данных // Тер. архив.- 1999.- №6.- С. 27-30.

68. Ройт А. Основы иммунологии.- М.: Мир, 1991.- 328 с.

69. Сергеева Т.В., Вознесенская Т.С., Клочков С.А. Клинические провления мезангиопролиферативного гломерулонефрита у детей // Рос. педиатр.журнал.-1999.-№1 .-С.7-10

70. Сергеева Т. В., Цыгин А.Н., Чумакова О. А. и др. Факторы прогрессирования гломерулонефрита у детей // Рос. педиатр.журнал. -2000.-№5.-С.20-22.

71. Серов В.В., Варшавский В.А. Что называть гломерулонефритом: спорные вопросы классификации //Арх. патологии.-1987.-№1.- С. 6775.

72. Симбирцев А.С. Цитокины новая система регуляции защитных реакций организма // Цитокины и воспаление.- 2002.- №1 .-С. 2-5.

73. Соловьев А.А. Клинико-иммунологические и морфологические особенности ХГН у детей // Автореферат дисс. к.м.н. -М., 1998.- 45с.

74. Студеникин М.Я., Наумова ВП., Гнатюк А.И. и др. Классификация гломерулонефрита у детей // Педиатрия.-1977. -№2. -С.3-8

75. Тареева И.Е. Механизмы прогрессирования гломерулонефрита //Тер. архив.-1998.- №6.-С. 3-7.

76. Тареева И.Е., Кутырина И.М., Николаев А.Ю., Лифшиц Н.Л., Швецов М.Ю. Пути торможения развития хронической почечной недостаточности // Тер. архив.-2000.-№6.-С. 9-14.

77. Тареева И.Е. Нефрология.-М.:Медицина, 2000.-454 с .

78. Тареева И.Е., Шилов Е.М., Краснова Т.Н. Лечение гломерулонефритов.-M.:Novartis, 2000.-70 с.

79. Титов В.Н. Роль макрофагов в становлении воспаления, интерлейкина-1, интерлейкина-6 и активность гипоталамо-гипофизарной системы //Клин. лаб. диагностика.- 2003.- №12.- С. 3-10.

80. Фрейдлин И.С. Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой регуляторной сети // Иммунология. -1995. -№3. -С. 44-48

81. Фрейдлин И.С. Иммунорегуляторные и иммунопатогенетические эффекты цитокинов. Заключительный отчет.- 2000.-12 с.

82. Фрейдин М.С., Пузырев В.П., Огородова Л.М. и др. Полиморфизм генов интерлейкинов и их рецепторов: популяционная распространенность и связь с атопической бронхиальной астмой //Генетика.-2002.-т.З8,№ 12.- С. 1-9.

83. Фрейдин М.С., Огородова Л.М., Пузырев В.П. Вклад полиморфизма генов интерлейкинов в изменчивость количественных факторов риска атопической бронхиальной астмы //Мед. генетика.- 2003.- т.2,№3.- С. 130-135.

84. Хиллис Г.С., Маклеод A.M. Роль интегриновых рецепторов адгезии при заболеваниях почек // Нефрология.-1997. -т.1,№1. -С. 11-26

85. Цыгин А.Н. Патогенетические основы первичного нефротического синдрома и лечения его стероидрезистентных вариантов у детей // Автореферат дисс. д.м.н. -М., 1996- 42 с.

86. Цыгин А.Н., Сенцова Т.Б., Сергеева Т.В. и др. Уровень растворимого рецептора к интерлейкину-2 и фактора некроза опухоли-а в сыворотке крови детей с нефротическим синдромом // Педиатрия. -1997. -№2.1. С .53-56.

87. Цыгин А.Н., Сергеева Т.В. Лечение гломерулонефрита у детей // Рос.мед. журнал. -1998. -Т.6. -№9. -С.580-585.

88. Чеботарева Н.В., Бобкова И.Н., Козловская JI.B. Молекулярные механизмы интерстициального фиброза при прогрессирующих заболеваниях почек // Нефрология и диализ.-2006.-т.8,№1.- 26-36.

89. Шарнова Ж.П., Цыгин А.Н., Тихомиров Е.Е. и др. I/D- полиморфизм гена АПФ и Т174М полиморфизм гена ангиотензиногена при нефротическом синдроме у детей // Нефрология и диализ.-2006.-т.8,№3.- 64-68.

90. Шарнова Ж.П., Цыгин А.Н., Тихомиров Е.Е. Полиморфизм генов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы при нефротическом синдроме у детей //Нефрология и диализ.-2006.-т.8,№3.- 216-224.

91. Шилов Е.М., Краснова Т.Н. Иммунодепрессивная терапия гломерулонефрита //Materia Medica.-1995.-№2.- С. 21-38.

92. Шилов Е.М. Иммунопатология болезней почек. В. кн. Нефрология: (Руководство для врачей).-М.:Медицина, 2000,- С. 132-144.

93. Шилов Е.М., Тареева И.Е., Иванов А.А. и др. Первичный фокально-сегментарный гломерулосклероз: клинические и морфологические факторы прогноза // Тер. архив. -2000.-№6.- С.21-25.

94. Шестаков А.Е. Исследование ассоциации ряда генов-кандидатов с хроническим гломерулонефритом //Автореферат дисс.к.м.н.-М., 2006.-25 с.

95. Шубин М.Г., Авдеева М.Г., Вакуленко А.Д. Адгезивные межклеточные взаимодействия //Арх. патологии. -1997. -т.59. -№6. -С.3-9.

96. Шулудко Б.И. Почки и гипертензия // Тер. архив. -1997.-№8.- С. 26-29.

97. Шулудко Б.И. Внутренняя медицина: Руководство для врачей.- СПб.: Левша. Санкт-Петербург, 1999.- т.2.- 488 с.

98. Шулудко Б.И. Артериальная гипертензия.-СПб., РЕНКОР.-2001.-С.98-108.

99. Шулудко Б.И. Нефрология (современное состояние проблемы).-СПб.:Ренкор, 2002.-780 с.

100. Шулудко Б.И. Нефропатия как сосудистая патология // Нефрология.-2003.- т.7,№4.- С, 21-28

101. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и при патологии // Иммунология. -1997. -№5. -С.7-14.

102. Akutsu Y. Study of correlation between urinary IL-6 level and mesangial lesion in childhood onset IgA nephropathy // Hokkaido. Igaku. Zasshi. -1994. -Vol.69. -№4. -P.686-696.

103. Altmuller J., Palmer L.J., Fischer G. et al. Genomewide scans of complexhuman diseases: true linkage is hard to find // Am. J. Hum. Genet.-2001.1. Vol.69.- P. 936-950.

104. Altshuler D., Brooks L.D., Chakravarti A. et al. A haplotype map of thehuman genom // Nature.- 2005.- Vol. 437.-P. 1299-1320.

105. Anderson G.G., Cookson W.O. Resent advances in the genetics of allergyand asthma//Mol. Med. Todoy.- 1999.- Vol. 5.- P.264-273.

106. Baba Y., Akagi H., Fukushima K. et al. Quantitative analysis of interleukin 6 (IL-6) in patients with IgA nephropathy after tonsillectomy // Auris. Nasus. Larynx. -1999. -Vol.26. -№22. -P. 177-180.

107. Bagga A., Vasudev A.S., Moudgil A., Srivastava R.N. Peripheral blood lymphocyte subsets in idiopathic nephrotic syndrome of childhood // Indian. J. Med. Res. -1998.-Vol.104. -P.292-295.

108. Bai L.Q., Chen X.M., Mao J. Effects of methyiprednisolone pulse therapy on TNF alpha levels in chronic nephritis // Chung. Hua. Nei. Ко. Isa. Chih. 1994. -VoI.33.-P.827-829.

109. Ballardie F.W., Gordon M.T., Sharpe P.T. et al. Intrarenal cytokine mRNA expression and location in normal and IgA nephropathy tissue: TGF-alpha, TGF-beta, IGF-1, IL-4 and IL-6 // Nephrol. Dial. Transplant. -1999. -Vol.9.-№211.-P. 1545-1552.

110. Baricos W.H., Cortez S.L., Deboisbianc M. et al. Transforming growth factor-beta is a potent inhibitor of extracellular matrix degradation by cultured human mesangial cells //J. Am. Soc. Nephrol. -1999. -Vol.l0.-№4. -P. 790-795.

111. Baskin В., Pettersson E., Rekola S. et al. Studies of the molecular basis of IgA production, subclass regulation and class-switch recombination in IgA nephropathy patients // Clin. Exp. Immunol. -1996. -Vol.106. -P.509-517.

112. Battistini В., Chailler P., D'Orleans-Juste P. et al. Growth regulatory propertis of endothelins // Peptides -1998. -Vol. 14. -P.385-399.

113. Baud L., Fouqueray В., Belloqo A. Switching off renal inflammation by anti- inflammatory mediators: The facts, the promise and the hope // Kidney Int. -1998. -Vol.53. -P. 1118-1126.

114. Border W.A., Noble N.A., Yamamoto T. et al. Natural inhibitor of TGF-beta protects against scarring in experimental kidney disease // Nature. -1998.-Vol.360. -P. 361-364.

115. Border W.A., Okuda S., Languino L.K. et al. Supression of experimental glomerulonephritis by antiserum against TGF-beta // Nature. -1999. -Vol.346. -P.371-374.

116. Border W.A., Noble N.A. Transforming growth factor-beta in tissue fibrosis //J. Med.-1998.-P. 1286-1292.

117. Bottinger E.P., Bitzer M. TGF-0 signaling in renal disease // J. Am. Soc. Nephrol.-2002.-Vol 13.-P. 2600-2610.

118. Botstein D., White R.L., Skolnick M. et al. Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms //Am. J. Hum. Genet.-1990.-Vol.-32.- P. 314-331.

119. Boucher D., Gogusev J., Droz D. Expression of 1L6 and TNF-alpha in normal and pathological kidney // C. R. Seances. Soc. Biol. Fil. 1993. -Vol.7.-№24.-P.425-433.

120. Carlson C.S., Eberle M.A., Kruglyak L. et al. Mapping complex disease loci in whole genome association studies //Nature.-2004.- Vol. 249.-P. 446-452.

121. Chen A., Chen W.P., Sheu L.F., Lin C.Y. Pathogenesis of IgA nephropathy: in vitro activation of human mesangial cells by IgA immune complex leads to cytokine secretion // J. Pathol. 2004.-Vol.173.- P.l 19-126.

122. Cockroft D.W., Gault M.N. Prediction of creatinine clearance from serum creatinine //Nephron.-1976.- №16.- P. 31.

123. Coleeman D.L., Ruef C. Interleukin-6: an autocrine regulator of mesangial cell growth // Kidney Int. -1999. -Vol.41. -P. 604-606.

124. Couser WG. Pathogenesis of glomerular damage in glomerulonephritis //Nephrol. Dial. Transplant.-1998.-Vol.l3.-P.10-15.

125. Daniel V., Trautmann Y., Konrad M. et al. T-lymphocyte populations, cytokines and other growth factors in serum and urine of children with idiopathic nephrotic syndrome // Clin. Nephrol. -1997. -Vol.47. — N5. -P. 289-297.

126. Diamond J.R., Pesck I. Glomerular tumor necrosis factor and interleukin 1 during acute phase aminonucleoside nephrosis. An immunohistochemical study // Lab. Invest. -1991.-Vol.64.-P. 21-28.

127. Donovan K.L., Coles G.A., Williams J.D. Tumor necrosis factor-alpha augments the pro-inflammatory interaction between PMN and GBM via a CD18 dependent mechanism // Kidney Int.-1997.-Vol.48.-N23.-P.698-704.

128. Doyonnas R., Kersbaw D.B., Dubme G. et al. Anuria, omphalocele, and perinatal lethality in mice lacking the CD34-related protein podocalyxin //J. Epx. Med.- 2001.- Vol.194.- P. 13-27.

129. Douthwaite J.A., Johnson T.S., Haylor J.L. et al. Effects of transforming growth factor-beta 1 on renal extracellular matrix components and their regulating proteins // J. Am. Soc. Nephrol. -1999. -Vol.10. P. 2109-2119.

130. Ershler W.B., Sun W.H., Binkley N. et al. Lymphokine // Cytokine Res.-1993.-№12.-P. 225-230.

131. Floege J., Feebally J. IgA-nephropathy: resent development //J. Am. Soc. Nephrol.-2000.- Vol. 11.- P. 2395-2403.

132. Futrakul N., Butthep P., Patumraj S. et al. Enhanced tumor necrosis factor in the serum and renal hypoperfusion in nephrosis associated with focal segmental glomeruiosclerosis //Ren. Fail.-2000.-Vol.22.-№22.-P.213-217.

133. Garin E.H. Circulating mediators of proteinuria in idiopathic minimal lesion nephrotic syndrome // Pediatr. Nephrol. -2000. -Vol.14. N289. -P.872-878.

134. Gharaee-Kermani M., Denhoim E.M., Phan S.H. Costimulation of fibroblast collagen and transforming growth factor-beta 1 gene expression by monocyte chemoattractant protein-i via specific receptors // J. Biol. Chem. -1996. Vol.271. -P. 17779-17784.

135. Gomez Guerrero C., Lopez Armada MJ., Gonzalez E. et al. Soluble IgA and IgG aggregates are catabolized by cultured rat mesangial cells andinduce production of TNF-alpha and 1L-6, and proliferation 11 J. Immunol.-1994.- Vol. 153 .-N211.-P.5247-5255.

136. Gordon L.R., Bell J.I. Association study designs for complex diseases //Nat. Rev. Genet.-2001.- Vol.2.- P. 91-99.

137. Goumenos D.S., Tsakas S., Nabas A.M.E. et al. Transforming growth factor-(31 in the kidney and urine of patients with glomerular disease and proteinuria//Nephrol Dial Transplant.- 2002.- Vol. 17.- P.2145-2152.

138. Ha H., Lee H.B. Oxidative stress in diabetic nephropathy: basic and clinical information // Curr. Diab. Rep.-2001.- Vol.3.- P.282-287.

139. Harada A., Sekido N., Akahoshi T. et al. Essential involvement of interleukin-8 in acute inflammation //J. Leukocyte Biol.- 1999.-Vol.56.-P. 559-564.

140. Hattori Т., Fujitsuka N., Kurogi A., Shindo S. Effects of neutralizing antibodies on cytokine treatment for anti-GBM nephritis in mouse // Nippon. Jinzo. Gakkai. Shi.-1996.-Vol.38.-P.563-570.

141. Henderson B. Therapeutic modulation of cytokines // Annals Rheumatic. Disease -1995. -Vol.54. -№6. -P. 519-523.

142. Hirschhorm J.N., Daly M.J. Genome wide association studies for common diseases and complex traits //Nat. Rev. Genet.- 2005.-Vol. 6.- P. 95-108.

143. Honkanen E., Teppo A.M., Tornroth T. et al. Urinary transforming growth factor-betta in membranous glomerulonephritis // Nephrol. Dial. Transplant.-1997.-Vol.l2.-N212.-P.2562-2568.

144. Inaba S., Takahashi Т., Ishihara S. et al. Serum tumor necrosis factor in mesangial IgA glomerulonephritis with macroscopic hematuria in children // Nephron.-1996.-Vol.72.-№24.-P.518-522.

145. Isaka Y., Fuijiwara Y., Ueda N. et al. Glomerulosclerosis induced by in vivo transfection of TGF-beta or platelet derived growth factor gene into the rat kidney // J. Clin. Invest. -1993. -Vol.92. -P. 2597-2601.

146. Isha N., Cashman S.J., Hay H. et al. Modulation of antibody mediated gomerular injury in vivo by bacterial lipopolysaccharide, tumor necrosis factor and II-1 //J. Immunol.- 1999.- Vol. 142.- P. 3080-3090.

147. Jiang Z., Seo J.Y., Ha H. et al. Reactive oxygen species mediate TGF-betal -induced plasminogen activator inhibitor -1 upregulation in mesangial cells // Biochem. Biophys. Res. Commun.-2003.- Vol.309.- P. 961-966.

148. Jian-Kan Guo, Menke A.L., Marie-Claire et al. WT1 is a key regulator of podocyte function: reduced expression levels cause crescentic glomerulonephritis and Mesangial sclerosis //Human Molecular Genetics.-2002.-Vol.ll.- P. 651-659.

149. Jones D.B. Glomeruionephritis // Am. J. Pathol. -1953. -Vol.29. -P.33-43

150. Johnson R., Klebanoff S.G., Couser W.G. Cellular mediators of immune injury // Immunologic Renal Diseases, Lippincott-Raven.- Philadelphia, 1997.-P. 547-560.

151. Johnson G.C., Esposito L., Barratt B.J. et all. Haplotype tagging for the identification of common disease genes //Nat. Genet.-2001.- Vol. 29.-P. 233-237.

152. Kacprzyk F., Chrzanowski W. Tumor necrosis factor (TNF) and interleukin6 (IL-6) in patients with glomerulonephritis // Pol. Arch. Med. Wewn.- 1996.- Vol.96.-P.224-233.

153. Kanai H., Mitushashi N., Ono R. et al. Increased excretion of urinary transforming growth factor-beta in patients with focal glomerular sclerosis // Nephron. -1994. -Vol.66. -P.391-395.

154. Karplus T.M., Jeronimo S.M., Chang H. et al. Association between the tumor necrosis factor locus and the Elinical outcome of leishmania chagasi infection//Infection and immunity.-2002.-Vol.70, №12.- P. 6919-6925.

155. Ketteler M., Noble N.A., Border W.A. Transforming growth factor-beta and angiotensin II: the missing link from glomerular hyperfiltration to glomerulosclerosis // Ann. Rev. Physiol. -1995. -Vol. 57. -P. 279-295.

156. Kestila M., Lenkkeri U., Mannikko M. et al. Positionally cloned gene for a novel glomerular protein-nephrin-is mutated in congenital nephritic syndrome//Mol Cell.- 1998.-Vol. l.-P. 575-582.

157. Kim J.M., Wu H., Green G. et al. CD2-associated protein haploinsufficiency is linked to glomerular disease susceptibility // Science.-2003.- Vol. 300.-P.1298-1300.

158. Kitamura M., Burton S., English J. et al. Transfer of a mutated gene encoding active transforming growth factor-beta 1 suppresses mitogenesis and IL-1 response in the glomerulus // Kidney mt. -1995. -Vol.48.1. P. 1747-1757.

159. Kitamura M., Suto T.S. TGF-beta and glomerulonephritis: antiinflammatory versus proscierotic actions // Nephrol. Dial. Transplant.-1997. -Vol.12.-Vol.24. P. 669-679.

160. Lai K.N., Ho R.T., Li P.K. Transforming growth factor-beta mRNA expression in CD4+ T cells from patients with primary glomerulonephritidis // Scand. J. Urol. Nephrol. -1996. -Vol.30. -N3. -P. 223-226.

161. Lander E.S., Schork N.J. Genetic dissection of complex traits // Science.-1994.- Vol. 265.- P. 2037-2047.

162. Le Hir M., Haas C., Marino M., Ryffel B. Prevention of crescentic glomerulonephritis induced by anti-glomerular membrane antibody in tumor necrosis factor-deficient mice // Lab. Invest.-1998.-Vol.78.-N12.-P.1625-1631.

163. Lee W., Ahn J.H., Park J.K. et al. Tumor necrosis factor alpha from peripheral blood mononuclear cells of IgA nephropathy and mesangial cell proliferation// Korean. J. Intern. Med.- 1998.-Vol.9.-N2l.-P. 1-8.

164. Lemay S., Mao C., Singh A.K. Genes cytokine of model MRL/lpr lupus nephritis //Nephron.- 1996,- Vol.50.- P. 85-93.

165. Locatelli F., Valderrabano F., Hoenich N. et al. Hrjgress in dialysis technology: membrane selection and patient outcome. Nephrol. Dial. Transplant.- 2000.- Vol. 15.- P. 1133-1139/

166. Maeda H., Kuwahara H., Ichimura Y. et al. TGF-f3 enchances macrophage ability to produce IL-6 in normal and tumor-bearing mice // J. Immunol. — 1995. -Vol.155.-P. 4926-4932.

167. Maksic D., Spasic P., Dimitrijevic J. et al. Significance of inflammatory cytokines in the pathogenesis of IgA nephropathy // Vojnosanit. Pregi. 1998.-Vol.55.-№ 2.-P.141-149.

168. Marre M., Bernadet P., Gallois Y. et al. Relationships between angiotensin 1 converting enzyme gene polymorphism, plasma levels, and diabetic retinal and renal complication // Diabetes.- 1994.- Vol.43.-P.384-388.

169. Matsuda M., Shikata K., Makino H. et al. Glomerular expression of macrophage colony-stimulating factor and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in patients with various forms of glomerulonephritis //Lab Invest.- 1999.- Vol.75.- P. 403-412.

170. Matsumoto K. Spontaneous and LPS-stimulated release of tumor necrosis factor-alpha by peripheral blood monocytes in patients with focal glomerular sclerosis //Nephron.-1995.-Vol.70.-N21.-P.l 18-119.

171. Matsumoto K., Atkins R.C. Glomerular cells and macrophages in the progression of experimental focal and segmental glomerulosclerosis // Am. J. Pathol. -1989. -Vol.134. -P. 933-945.

172. Matsuzaki H., Loi H., Dong S. et al. Parallel genotyping of over 10,000 sNPs using a one-primer assay on a hing-desity oligonucleotide array //Genome Res.- 2004.- Vol. 14.- P. 414-425.

173. Mozes M.M., Bottinger E.P., Jacot T.A. et al. Renal expression of fibrotic matrix proteins and of transforming growth factor-beta isoforms in TGFbeta transgenic mice //J. Am. Soc. Nephrol. -1999. -Vol.10. -N22. -P271-280.

174. Nabel E.G., Shum L., Pompili V.J. et al. Direct transfer transforming growth factor-beta 1 gene into arteries stimulates of fibrocellular hyperplasia//Proc. Nat. Acad. Sc. USA. -1993. -Vol.90. -P.10759-10769.

175. Nakamura Т., Miller D., Ruoslahti E. et al. Production of extracellular matrix by glomerular epithelial cells is regulated by transforming growth factor-betal //Kidney. -1992. Vol.41. -P. 1213-1221.

176. Navis G., Van Der Kleij F.G. Angiotensin-Converting enzyme gene polymorphism has no influence on the circulating-renin-angiotensin -aldosterone system or blood pressure in normotensive subjects //Circulation.- 1995.- Vol.91.- P. 2933-2942.

177. Narita I., Goto S., Saito N. et al. Genetic polymorphism of NPHS1 Modifies the Clinical Manifestations of IgA nepgropathy //Lab Inv.- 2003.-Vol.83 .-P. 1193-1200.

178. Nissenson A.R., Pereira B.J., Collins A.J. et al. Prevalence and characteristics of individuals with chronic kidney disease in a large health maintenance organization. Am. J. Kidney Dis.- 2001.- Vol. 37.- P. 11771183.

179. Niskolas T.L. Awareness of kidney disease in the US population: findings from the National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES) 1999 to 2000. Am. J. Kidney Dis. -2004.- Vol.44.- P. 185-197.

180. Noris M., Remuzzi G. New insights into circulating cell-endothelium interaction and their significance for glomerular pathophysiology //Am. J. Kidney Dis.-1995.- Vol.26.- P. 541-548.

181. Noronha I.L., Niemir Z., Stein H. et al. Cytokines and growth factors in renal disease // Nephrol. Dial. Transplant. 1995. -Vol.10. -N26. -P. 775786.

182. Okuda S., Languino L.R., Ruoslahti E. et al. Elevated expression of TGF beta and proteoglycan production in experimental glomerulonephritis // J. Clin. Invest. -1997.-Vol.68. -P.453-462.

183. Ooi B.S., Cohen D.J., Veis J.H. Biology of the mesangial cell in glomerulonephritis role of cytokines // Proc. Soc. Exp. Biol. Med.-1996.-Vol.213 .- P.230-237.

184. Obrador G.T., Pereira B.J., Kausz A.T. Chronic kidney disease in the United States: an underrecognized problem. Semin. Nephrol. -2002.-Vol.22.- P.-441-448

185. Ozen S., Alikasifoglu M., Saatci U. et al. Implications of certain genetic polymorphisms in scarring in vesicoureteric reflux: importance of ACE gene polymorphism //AJKD.- 1999.- Vol. 301.- P. 13-23.

186. Pai R., Bassa В., Kirschenbaum M.A. et al. TNF-alpha stimulates monocyte adhesion to glomerular mesangial cells. The role of intercellular adhesion molecule-1 gene expression and protein kinasesi // J. Immunol.-1996.-Vol.156.- P.2571-2579.

187. Patrakka J., Labdenkari A.T., Koskimies O. et al. The number of podocyte slit diaphragms is decreased in minimal change nephritic syndrome //Pediatr. Res.- 2002.- Vol.52.- P. 349-355.

188. Peichl P., Ceska M., Broell H. et al. Human neutrophil activating peptide/interleukin 8 acts as an autoantigen in rheumatoid arthritis //Annals Rheum Dis.-1992.-Vol. 51.- P. 19-22.

189. Rigat В., Hubert C. An insertion deletion polymorphism in the angiotensin I-coverting enzyme gene accounting for half the variance of serum enzyme levels // J. Clin. Invest.- 1996.- Vol.86.- P. 1343-1346.

190. Rovin B.H., Dickerson J.A., Tan L.C. Activation of nuclear factor-kappa betta correlates with MCP- 1 expression by human mesangial cells // Kidney. -1995. -Vol.48. -P. 1263-1271.

191. Verhave J.C. et al. an elevated urinary albumin excretion predicts de novo development of renal function impairment in the general population. Kidney Int. 2004.- Vol.66.- P. 18-21.

192. Sachidanandam R., Weissman D., Schmidt S.C. et all. A map of human genome sequence variation containing 1,42 million single nucleotide polymorphisms // Nature.- 2001.- Vol. 409.- P. 928-933.

193. Saleem S., Dai Z., Coelho S.N. et al. IL-4 is endogenous inhibitor of neutrophil influx and subsequent pathology in acute antibody-mediated inflammation //J Immunol.- 1998.- Vol. 160.- P. 979-984.

194. Saltis J., Agrotis A., Bobil A. Regulation and interactions of transforming growth factor-beta with cardiovascular cells: Implications for development and disease // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. -1996. -Vol.23. -P. 193-200.

195. Savin V.J., Sharma R., Sharma M. et al. Circulating factor associated with increased glomerular permeability to albumin in recurrent focal segmental glomerulosclerosis //N. Engl. J. Med. -1996. -Vol.334. -P. 878-883.

196. Schankland S.J., Johnson R.J. TGF-beta in glomerular disease // Miner. Electrolyte Metab. -1998. -Vol.24. -P. 168-173.

197. Schiller В., Moran J. Focal glomerulosclerosis in the remnant kidney model an inflammatory disease mediated by cytokines.// Nephrol. Dial. Transplant. -1997. -Vol.12. -N23. -P.430-437.

198. Schlesselman J. Case control studies. Design, conduct, analisis.- New York: Oxford University Dress., 1982.-P. 58-96.

199. Schneider A., Panzer U., Zahner G. et al. Monocyte chemoattractant protein-i mediates collagen deposition in experimental glomerulonephritis by transforming growth factor-beta // Kidney. -1999. -Vol.56. -P. 135-144.

200. Schork N.J. Genetics of complex disease //Am. J. Respir. Grit. Care Med.-1997.-Vol. 156.-№4.- P. 103-109.

201. Segerer S., Nelson P.J., Schlondorff P. Chemokines, Chemocine Receptors, and Renal disease: From Basis Science to pathophysiologic and terapeutic studies //J. Am. Soc. Nephrol.-2000.-Vol.l 1.-N21.-P. 152-176.

202. Sheerin N.S., Springall Т., Carrol M. et al. Protection against anti-glomerular basement membrane (gbm)- mediated nephritis in C3- and C4-deficient mice // J.Clin. Exp. Immunol.- 2003.-Vol. 133.- P. 326-333.

203. Shu K.H., Lee SH., Cheng CH. et al. Impact of interleukin-1 receptor antagonist and tumor necrosis factor-alpha gene polymorphism on IgA nephropathy // Kidney. Int.-2000.-Vol.58.-N22.-P.783-789.

204. Soma I., Saito Т., Ootaka T. et al. Differences in glomerular leukocyte infiltration between IgA nephropathy and membranoproliferative glomerulonephritis.//Nephrol. Dial. Transplant.-1998.-Vol. 13,- P.608-616.

205. Suranyi M.G., Guasch A., Hall B.M., Myers B.D. Elevated levels of tumor necrosis factor alfa in the nephrotic syndrome in humans // Am. J. Kidney Dis. -1993. -Vol.21. -P.251-259.

206. Suthanthiran M., Khanna A., Cukran D. et al. Transforming growth factor-beta 1 hyperexpression in African-American end-stage renal disease patients // Kidney. -1999. -Vol.53. N3. -P. 639-644.

207. Suzuki J., Tomizawa S., Arai H. et al. Purification of two types of TNF inhibitors in the urine of the patient with chronic glomerulonephritis // Nephron.-1998.-Vol.66.-N24.-P.3 86-390.

208. Syrjanen J., Hurme M., Lehtimaki T. et al. Polymorphisms genes cytokine and IgA-nephropatie //Nephron Int.- 2002.-Vol.61,- P. 1079-1085.

209. Thompson G. Mapping disease genes: family- based association studies // Am. J. Hum. Genet.-1995.- Vol. 57.- 487-498.

210. Thompson G., Esposito M.S. The genetics of complex disease //Trends Cell Biol., Trends Biochem Sci., Trends Genet.- 1999.-Millenium Is.-P. 17-20.

211. Weissman S.M. Genetic bases of common polygenic diseases //Proc. Natl. Acad. Scl. USA.- 1995.-Vol.92.-P. 8543-8544.

212. Wilson H.M., Minto A.W., Brown P.A. et al. Transforming growth factor-beta isoforms and glomerular injury in nephrotoxic nephritis // Kidney Int. -2000. -Vol.57. -N26. -P. 2434-2444.

213. Wilson A.G., Symons J.А., Ш Dowell Jt.L. et al. Effects of a polymorphism in the human tumor necrosis factor alpha promoter on transcriptional activation //Proc. Natl. Acad. USA.-1997.-Vol.94.- P.3195.

214. Wolf G., Schneider A., Wenzel U. et al. Regulation of glomerular TGF beta expression in the contralateral kidney of two-kidney, one-clip hypertensive rats // J. Am. Soc. Nephrol. -1998. -Vol.9. -N25. -P 763-772.

215. Wu Т.Н., Tsai C.Y., Yang W.C. Excessive expression of the tumor necrosis factor-alpha gene in the kidneys of patients with membranous glomerulonephritis // Chung. Hua. I. Hsueh. Tsa. Chih. Taipei.-1998.-Vol.61.- P.524-530.

216. Wu X., Helfrich M.N., Sherry В et al. Chemokines are expressed in a myeloid cell-dependent fashion and mediate distinct functions in immune complex glomerulonephritis in rat //J Immunol.- 1997.- Vol. 158.- P. 38173924.

217. Yamamoto Т., Noble N.A., Coben A.N. et al. Expression of transforming growth factor (3 isoforms in human glomerular diseases //Kidney Int.-1996.-№49.-P.461-469.

Информация о работе
  • Некипелова, Елена Васильевна
  • кандидата биологических наук
  • Москва, 2007
  • ВАК 03.00.15
Диссертация
Полиморфизм генов цитокинов и его клиническое значение у больных хроническим гломерулонефритом - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно
Автореферат
Полиморфизм генов цитокинов и его клиническое значение у больных хроническим гломерулонефритом - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации
Похожие работы