Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Показатели роста прокариотных микроорганизмов в различных почвах

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Полянский, Алексей Михайлович

ВВЕДЕНИЕ.1

Глава 1. Методы оценки жизнеспособности микроорганизмов.6

Глава 2. Содержание микробной биомассы в почве.20

Глава 3. Почвы сухостепных ландшафтов Забайкалья.37

Глава 4. Объекты и методы исследования.52

4.1. Объекты исследования.52

4.2. Методика подготовки образцов почвы к микробиологическому анализу.56

4.3. Методика определения жизнеспособности прокариотных микроорганизмов.58

4.4. Методика исследования комплекса почвенных бактерий по посеву.

4.5. Определение общего углерода органических и неорганических веществ в почвах.60

Глава 5. Характеристика структуры микробного комплекса почв Забайкалья.63

Глава 6. Определение углерода органического вещества и расчет в нем доли углерода прокариотной и эукариотной биомасс в изученных почвах и их горизонтах.73

Глава 7. Показатели роста прокариотных микроорганизмов в различных почвах.85

Глава 8. Дифференциация различных почв по показателям роста прокариотных микроорганизмов.95

Глава 9. Изучение скоростей роста чистых культур бактерий, выделенных из различных горизонтов изученных почв.104

Глава 10. Рост прокариотных микроорганизмов в почвенных суспензиях разных горизонтов 108одного типа почв.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Показатели роста прокариотных микроорганизмов в различных почвах"

Актуальность проблемы. В рамках сезонной сукцессии в почве происходят постоянный рост и отмирание почвенных микроорганизмов. Сменяют друг друга доминирующие популяции, происходят существенные флуктуации общей численности микробов. Общий учет численности микроорганизмов в почве связан с большими методическими трудностями и преимущества различных подходов здесь до настоящего времени являются предметом дискуссии. Все еще достаточно популярны оценки общей численности микроорганизмов в почве с помощью посева на плотные питательные среды. При этом имеются огромные различия между данными, полученными с помощью посева и данными, полученными прямыми микроскопическими методами. Все больше исследователей склоняются к мнению о предпочтительности прямых микроскопических методов учета.

Изучение прямыми микроскопическими методами численности и биомассы микроорганизмов в почве и особенно динамики этих показателей по сезонам является актуальным направлением современной почвенной микробиологии. Однако, изучая динамику численности различных групп микроорганизмов, исследователь оказывается перед необходимостью оценивать соотношение живых и мертвых клеток. Необходимо знать, какая часть учитываемой микробной биомассы является жизнеспособной, а какая - только потенциальным субстратом в каждый данный момент времени.

Большое самостоятельное значение имеет вопрос о скорости реутилизации отмирающей микробной биомассы.

До настоящего времени не предложено надежного прямого метода дифференцированного учета живых и мертвых микроорганизмов в природных местообитаниях. Диапазон предлагающихся методов дифференциации живых и мертвых прокариотных микроорганизмов не так широк. В первую очередь используются различные методы окрашивания (Мейсель, Заварзина, 1947; Разумовская, Осипова, 1958; Babiuk, Paul, 1970; Coleman, 1980; Lubdgren, 1981; Kjoller, Struwe, 1982; Луста, Фихте, 1990; Полянская, Головченко, Звягинцев, 1998). Существуют также различные приемы оценки жизнеспособности прокариотных пропагул по критериям термотолерантности и устойчивости к ультразвуковому воздействию (Ефременкова и др., 1978; Полянская, 1979; Звягинцев и др., 1981, 1982). При изучении соответствующей литературы обращает на себя внимание огромный разброс в оценках соотношения в почве живой и мертвой биомассы прокариотных микроорганизмов (Kjoller, Struwe, 1982). Существующие среди исследователей разногласия свидетельствуют об актуальности дальнейшего совершенствования приемов учета живых *и мертвых прокариотных микроорганизмов в почве.

На основе метода прямого учета эукариотной микробной биомассы в различных почвенных местообитаниях (Полянская, 1996; Гшовченко, Полянская, 1996; Звягинцев и др., 1999; Павлова и др., 2000; Полянская,

Свешникова, 2001) был разработан метод дифференциации живой и мертвой грибной биомассы на основе роста грибных пропагул в почвенных суспензиях на препаратах для микроскопирования (Полянская, Головченко, Звягинцев, 1998; Головченко, Полянская, 2000). С помощью этого метода было установлено, что большая часть учитываемой с помощью микроскопии грибной биомассы в почвах жизнеспособна. Разные почвы различаются по соотношению численности живой и мертвой грибной биомассы, но особенно значимы различия по этому показателю между органогенными и минеральными горизонтами почв. Именно в минеральных горизонтах происходит накопление мертвой грибной биомассы, и ее доля здесь может достигать 50% от общего содержания грибов (Полянская, Звягинцев, 2005).

Целью настоящей работы было охарактеризовать прокариотные сообщества (на примере почв Забайкалья) на основании прямых микроскопических методов, как традиционных, так и новых, позволяющих оценить жизнеспособность бактерий в этих почвах.

В задачи исследования входило:

1. Определение численности и биомассы прокариотных микроорганизмов в исследуемых почвах Забайкальского региона.

2. Определение углерода органического вещества и расчет в нем доли углерода прокариотной и эукариотной биомасс в изученных почвах и их горизонтах.

3. Разработка комплекса методов определения жизнеспособности прокариотных микроорганизмов и изучение ростовых параметров бактерий на микроскопических препаратах в почвенной суспензии.

4. Апробация вновь разрабатываемых методов на широком спектре почв и их горизонтов.

5. Сравнение роста прокариотных микроорганизмов в почвенных образцах и в чистых культурах.

Научная новизна. Новизна в оценке жизнеспособности прокариот в почве состоит в переходе от макрометода культивирования на чашках Петри с образованием колоний (необходимы сотни генераций) к микрометодам, когда устанавливается способность дать хотя бы одну-две генерации. Основной новацией полученных результатов является оценка жизнеспособности прокариотных клеток по росту их на препаратах, предназначенных для микроскопического учета, что позволяет судить о доли жизнеспособных клеток в общей массе учитываемых микроорганизмов. Впервые дана оценка жизнеспособности прокариотных микроорганизмов по росту почвенных бактерий и увеличению длины мицелия актиномицетов непосредственно в микроскопических препаратах почвенной суспензии. Впервые на основании изучения динамики скорости роста микробных клеток на препаратах оценены различия в структуре комплексов прокариотных микроорганизмов в разных почтах и их горизонтах %

Практическая значимость. Наряду с традиционными показателями (определение численности и биомассы микроорганизмов прямыми методами), разработанные нами показатели, такие как характер роста численности прокариотных микроорганизмов, время удвоения и динамика роста численности бактерий и длины актиномицетного мицелия могут быть использованы для характеристики разных почв, их горизонтов и выявления жизнеспособности прокариотных микроорганизмов в них. На основании этих показателей можно более четко установить сходство и различие не только разных почв, но и их горизонтов, в том числе и погребенных.

Хочу искренне поблагодарить своих учителей д.б.н. Д.Г. Звягинцева и к.б.н. А.В. Головченко. Особую благодарность выражаю д.б.н. B.C. Гузеву, к.б.н. Т.Г. Добровольской и к.б.н. З.Н. Тюгай за практические советы и помощь в работе.

Автор признателен чл.-корр. РАН В.М. Корсунову и к.б.н. Г.Г. Гончикову (Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН) за сотрудничество и предоставление почвенных образцов.

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ № 04-0448640.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Полянский, Алексей Михайлович

ВЫВОДЫ

1. Численность прокариотных микроорганизмов в исследуемых почвах была больше подвержена вертикальной вариабельности, чем горизонтальной. Плотность бактериальных популяций закономерно убывала вниз по профилю, при этом численность бактерий и длина актиномицетного мицелия в различных горизонтах анализируемых почв различались не более чем в 1,5-3 раза.

2. Показано, что в изученных почвах катены содержание углерода органических веществ составляет от 10-30 мг/г почвы (или 1-3% в пересчете на 100 г почвы) в верхних горизонтах, снижаясь до 2-10 мг/г (0,2-1%) - в нижних горизонтах. В каштановой почве различных вариантов землепользования содержание С орг. в верхних горизонтах составляло 10-15 мг/г (1-1,5%), снижаясь в 2-10 раз с глубиной.

3. Доля углерода микробной биомассы в углероде органического вещества почв катены определяется типом почв и колеблется от 5-30% в гумусированных горизонтах до 2-10% в нижних (минеральных горизонтах). Распределение углерода микробной биомассы зависит в первую очередь от эукариотной составляющей, а на долю углерода прокариотной биомассы приходится 0,2-0,6% углерода органического вещества.

4. Впервые показано, что характер роста численности прокариотных микроорганизмов, время удвоения и динамика роста численности бактерий и длины актиномицетного мицелия могут быть использованы для дифференциации горизонтов, почв и выявления жизнеспособности прокариотных микроорганизмов в них. Среди почв, расположенных по катене, каштановая и каштаново-луговая почвы отличались от луговой почвы по большинству из проанализированных показателей. Дерново-лесная почва по одним показателям была близка к луговой почве, по другим - к каштановой и каштаново-луговой почвам и имела ряд показателей, отличных от всех других почв. В целинных и пахотных каштановых почвах выбранные нами показатели различались только в гумусовых горизонтах.

Показано, что в гумусированных горизонтах прорастают одновременно практически все клетки. В минеральных горизонтах, где рост клеток бактерий описывается линейной зависимостью, прорастает только часть клеток и, по-видимому, прорастают бактерии с разными скоростями роста.

Скорости роста прокариотных микроорганизмов в почвенных образцах и скорости роста чистых культур бактерий, выделенных из этих почв, характеризовались величинами одного порядка.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Наряду с традиционными показателями (определение численности и биомассы микроорганизмов прямыми методами), полученные нами при оценке скоростей роста прокариотных микроорганизмов параметры, такие, как: характер роста численности микроорганизмов, время удвоения численности бактерий, динамика роста численности бактерий и длины актиномицетного мицелия в различные промежутки времени, могут быть использованы для дифференциации почв, а также выявления жизнеспособности прокариотных микроорганизмов в них.

Среди почв, расположенных по катене, каштановая и каштаново-луговая почвы отличались от луговой почвы по большинству из проанализированных показателей. Дерново-лесная почва по одним показателям была близка к луговой почве, по другим - к каштановой и каштаново-луговой почвам и имела ряд показателей, отличных от всех других почв. В целинных и пахотных вариантах каштановой почвы выбранные нами показатели различались только в гумусовых горизонтах этих почв.

Установленные сходства или различия в скорости размножения бактерий и актиномицетного мицелия в исследуемых образцах, возможно, свидетельствуют о существовании или отсутствии разницы в таксономической структуре прокариотных микробных сообществ анализируемых почв. Скорости роста прокариотных микроорганизмов в почвенных образцах и чистых культурах бактерий, выделенных из этих почв, характеризовались величинами одного порядка.

На основании этих показателей можно различать не только почвы, но и их горизонты, в том числе и погребенные.

Изученные образцы озерно-аллювиальной почвы по традиционным показателям характеризовались одинаковой численностью бактерий и сходным распределением численности по профилю. Длина актиномицетного мицелия в гумусированных горизонтах увеличивалась от почвы, взятой на верхней части к почве, взятой на кромке террасы, а грибного мицелия наоборот: в почве верхней части террасы длина грибного мицелия была максимальной и снижалась на порядок в почве кромки. Наблюдаются четкие различия между гумусированными и минеральными горизонтами по численности всех групп микроорганизмов. Погребенные горизонты по этим показателям ближе к минеральным горизонтам изученных почв.

Однако такие показатели, как характер роста численности прокариотных микроорганизмов, время удвоения и динамика роста численности баетерий и длины актиномицетного мицелия могут лучше дифференцировать горизонты почв. По этим показателям погребенные горизонты наиболее близки к гумусированным горизонтам.

Рост и деление прокариотных микроорганизмов, выявленное нами при инкубировании почвенных препаратов во влажной камере, однозначно свидетельствует о жизнеспособности большой части бактериальных клеток в анализируемых почвах. Показано, что в гумусированных горизонтах, прорастают все клетки, что заставляет сделать предположение об однотипности пищевых и иных потребностей среди доминирующих групп микроорганизмов. Иная картина наблюдается в минеральных горизонтах с линейным характером роста бактерий, здесь в рост, по-видимому, вовлекаются разные группы микроорганизмов.

Если исходить из того, что значительная часть первоначально учитываемой биомассы прокариот жизнеспособна, то наблюдаемые нами даже минимальные скорости размножения следует признать весьма высокими, особенно в условиях острого дефицита ресурса.

Таким образом, было показано, что по ряду показателей, характеризующих рост прокариотных микроорганизмов, возможно проводить дифференциацию не только почв, но и их горизонтов. Нами была сделана попытка объяснить различия в росте прокариот разным таксономическим составом, однако, большую роль на развитие микроорганизмов может оказывать и содержание органического субстрата в разных почвах и их горизонтах. Важно также знать какую долю составляет микробная биомасса от общего содержания органики в местообитании.

На примере различных типов почв Забайкалья, в том числе и их различных горизонтов, изучено содержание органического углерода и углерода микробной биомассы. Показано, что в изученных почвах катены содержание органического углерода составляет от 10-30 мг/г почвы в верхних горизонтах, снижаясь в 3-5 раз в нижних горизонтах. В каштановой почве различных вариантов землепользования содержание С орг. в верхних горизонтах составляло 10-15 мг/г, снижаясь в 2-10 раз с глубиной. Доля углерода микробной биомассы в углероде органического вещества почв катены определяется типом почв и колеблется от 5-30% в гумусированных горизонтах до 2-10% в нижних (минеральных горизонтах). Распределение углерода микробной биомассы зависит в первую очередь от эукариотной составляющей, а на долю углерода прокариотной биомассы приходится от 0,2-0,6% углерода органического вещества, однако, учитывая некоторые литературные данные по объему бактериальной клетки, этот показатель можно в дальнейшем скорректировать. Установлена тесная положительная корреляция между С микроб, и С орг. практически во всех изученных почвах и отрицательная между С микроб, и Скарб., что, по-видимому, связано с отрицательным влиянием карбонатов на биомассу грибов.

Таким образом, традиционные показатели (определение численности и биомассы микроорганизмов прямыми методами) могут быть дополнены, разработанными нами показателями, такими, как характер роста численности прокариотных микроорганизмов, время удвоения и динамика роста численности бактерий и длины актиномицетного мицелия для характеристики разных почв, их горизонтов, и установления жизнеспособности прокариотных микроорганизмов в них. На основании этих показателей можно более четко установить сходство и различие не только почв, но и их горизонтов, в том числе и погребенных.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Полянский, Алексей Михайлович, Москва

1. Абашеева Н.Е. Агрохимия почв Забайкалья / Новосибирск: Наука. 1992,214 с.

2. Агроклиматический справочник по Бурятской АССР / JL: Гидрометеоиздат, 1960. 190 с.

3. Ананьева Н.Д., Полянская JI.M., Сусьян Е.А., Васенкина И.В. Сравнительная оценка микробной биомассы почвы, определяемой методами прямого микроскопирования и субстрат-индуцированного дыхания // Микробиология, 2006 (в печати).

4. Аристовская Т.В. Микробиология подзолистых почв. M.-JL: Наука,1965. 186с.

5. Аристовская Т.В. Теоретические аспекты проблемы численности, биомассы и продуктивности почвенных микроорганизмов // Сб.: Вопросы численности, биомассы и продуктивности почвенных микроорганизмов. JL: Наука, 1972, С. 7-20.

6. Аристовская Т.В. Микробиология процессов почвообразования. Л.: Наука, 1980. 187 с.

7. Аристовская Т.В., Паринкина О.М. Изучение микробных пейзажей почв Ленинградской области // Микробиология^. 1962. Т. 31, Вып. 3. С. 385-388.

8. Балабко П.Н. Развитие учения о пойменном почвообразовании и проблемы классификации ^пойменных почв // Почвоведение. 1990, № 9, С. 28-33.

9. Балабко П.Н. Микроморфология, диагностика и рациональное использование пойменных почв Восточно-Европейской и ЗападноСибирской равнины: Автореф. дис. .д-ра. биол. наук, М.: |У1ГУ, 1991.47 с.

10. Ю.Богоев В.М. Количественная оценка численности, биомассы ибиологической активности почвенных микроорганизмов: Автореф. дис. .канд. биол. наук. М.: Изд-во МГУ, 1981. 25 с.

11. П.Богоев В.М., Гильманов Т.Г. Численность и биомасса микроорганизмов в почвах некоторых зональных экосистем // Биологические науки. 1982. № 7. С. 80-83.

12. Булавко Г.И. Биомасса микроскопических грибов в почвах Сибири // Почвоведение. 1994. № 12. С. 65-69.

13. Виноградский С.Н. Микробиология почвы. М.: Изд-во АН СССР, 1952. 350 с.

14. Гейдебрехт В.В. Определение микроорганизмов по профилю разных типов почв: Дисс. канд. биол. наук М.: МГУ. 1999.136 с.

15. Голдяев Г.П. Численность и биомасса микроорганизмов лугово-бурых оподзоленных почв Приморья // Динамика микробиологических процессов в почве. Таллин. 1974. С. 88-92.

16. Голлербах М.М., Штина Э.А. Почвенные водоросли. Л.: Наука, 1969.

17. Головченко A.B., Полянская Л.М., Добровольская Т.Г., Васильева Л.В., Чернов И.Ю., Звягинцев Д.Г. Особенности пространственного распределения и структуры микробных комплексов болотно-лесных экосистем // Почвоведение. 1993. N 10. С.78-89.

18. Головченко A.B., Полянская Л.М. Сезонная динамика численности и биомассы микроорганизмов по профилю почвы // Почвоведение, 1996. N10. С. 1227-1233.

19. Головченко A.B., Полянская Л.М. Особенности годовых i1. С. 320-328.

20. Демкина Т.С., Мирч^нк Т.Г. Распределение биомассы грибов в некоторых почвенные типах. // Вестник Моск. ун-та. Се228 с.микроорганизмов в почвах Южной тайги // Почвоведение.почвоведение. 1983. № 4. С. 36-40.

21. Добровольская Т.Г. Структура бактериальных сообществ почв. М.: ИКЦ Академкнига, 2002,282 с.

22. Добровольская Т.Г., Полянская JI.M., Головченко A.B., Смагина М.В., Звягинцев Д.Г. Микробный пул в торфяных почвах // Почвоведение. 1991. № 7. с. 69-77.

23. Добровольский Г.В. К истории учения о генезисе и классификации аллювиальных почв / История методологии естественных наук, М.: МГУ, 1980, вып. XXIV, С. 79-104.

24. Домрачева Л.И., Лебедева O.A., Кожевин П.А. Особенности альгобактериального комплекса при "цветении" почвы // Вестн. Моск. ун-та. Сер. почвовед., 1986. N 3. С. 38-43.

25. Евдокимова Г.А., Мозгова Н.П. Микроорганизмы тундровых и лесных подзолов Кольского Севера. Апатиты, Изд. КНЦ РАН, 2001, 184 с.

26. Ефременкова Л.М., Кожевин П.А., Виноградова К.А., Звягинцев Д.Г. Изучение динамики популяции актиномицета в почве на примере Strepfomyces olivocinereus // Микробиология. 1978а. Т. 47, № 5. С. 871-875.

27. Ефременкова Л.М., Кожевин П.А., Звягинцев Д.Г. Применение непрямого метода иммунофлуоресценции для изучения почвенного актиномицета Streptomyces olivocinereus // Микробиология. 19786. Т .47, №6, С. 1122-1124

28. Звягинцев Д.Г. Подготовка почв с помощью ультразвука к количественному учету микроорганизмов // Вест. МГУ, сер. биол. почв., 1968. №3. С. 127-129.

29. Звягинцев Д.Г. Взаимодействие микроорганизмов с твердыми поверхностями. М.: МГУ, 1973.175 с.

30. Звягинцев Д.Г. Микробное разнообразие в наземных экосистемах /1. HI f

31. Тез. Всероссийской конференции «микробиология *апочв иземледелие», СПб., 1998, С. 52.31.3вягинцев Д.Г. Перспективы развития биологии почв / Труды Всероссийской конференции «Перспективы развития почвенной биологии», 2001. С. 10-21.

32. Звягинцев Д.Г., Дмитриев Е.А., Кожевин П.А. О люминесцентномикроскопическом изучении почвенныхмикроорганизмов//Микробиология. 1978. Т. 47, С. 1091-1096.

33. Звягинцев Д.Г., Зенова Г.М., Михайлов В.В. Динамика популяции Streptomyces lanatus в сероземе и дерново-подзолистой почве в зависимости от формы и плотности внесения // Биол. науки, 1981, № 6, С. 520-522.

34. Звягинцев Д.Г., Зенова Г.М., Михайлов В.В. Динамика численности и структуры видовых популяций актиномицетов-антагонистов в почве//Микробиология. 1982. Т. 51, № З.С. 520-522.

35. Звягинцев Д.Г., Полянская JI.M., Гончиков Г.Г., Корсунов В.М. Биомасса микроорганизмов в почвах Забайкалья // Почвоведение. 1999. №9. С. 1132-1140.

36. Имшенецкий A.A. Отношение к окраске у живых и мёртвых дрожжевьгк клеток // Микробиология. 1933. Т. 2, № 2. С. 162-173.

37. Князева И.Н., Полянская JI.M., Кожевин П.А., Звягинцев Д.Г. Учет почвенных микроорганизмов с помощью микроскопии при низкой численности объектов // Вестн. МГУ, сер. почвоведение. 1985. Т. 2. С. 62-70.

38. Ковда В.А. Биогеохимические циклы в природе и их нарушение человеком. М.: Наука, 1975. 72 с.

39. Кожевин П.А. Люминесцентномикроскопическое изучение комплекса микроорганизмов и отдельных микробных популяций j* почве: Автреф. дис.канд. биол. наук. М.: Изд-во МГУ, 1976. 24 с.

40. Кожевин П. А. Экология микроорганизмов: эксперименты в природе

41. Природа. 1985. № 7. С. 78-85.

42. Кожевин П. А. Микробные популяции в природе. М.: МГУ, 1989. 175 с.

43. Кожевин П.А., Полянская JI.M., Звягинцев Д.Г. Динамика развития различных микроорганизмов в почве // Микробиология. 1979. Т.48, №4. С.490-494.

44. Корсунов В.М., Цыбжитов Ц.Х. Почвенный покров бассейна оз. Байкал /Почвенные ресурсы Забайкалья, Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1989, С. 4-12.

45. Кочкина Г.А. Сукцессии почвенных микроорганизмов и место в них конкретных микробных популяций: Автореф. дис.канд. биол. наук, М.: Изд-во МГУ, 1981.24 с.

46. Лимарь Т.Е., Кожевин П.А., Звягинцев^ Д.Г. Сравнение количества микроорганизмов в почвах разных/типов, выявленного с помощью чашечного метода и люминесцентной микроскопии // Научн. докл. высш. школы. Сер. биол. науки. 1975. № 9. С. 134-138.

47. Луста К.А., Фихте Б.А. Методы определения жизнеспособности микроорганизмов / Ред. В.К. Ерошин. Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР. 1999/186 с.

48. Марфенина О. Е. Микологический мониторинг почв: возможности и перспективы//Почвоведение. 1994. № 1. С. 75-80.

49. Мейсель М.Н., Заварзина Н.Б. Флуоресцентно-микроскопические наблюдения над живыми клетками микроорганизмов // Микробиология. 1947. Т. 16, № 5. С. 394-402.

50. Методы почвенной микробиологии и биохимии / под ред. Д.Г. Звягинцева. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1991. 304 с.

51. Мехтиев С Я., Чернобровина P.M., Пресман JI.M. Сезонниц изменения численности микроорганизмов в почвах Молдавии // Динамика микробиологических процессов в почве. Таллин, 1974. С.92.98.

52. Мирчинк Т.Г. Почвенная микология. М.: МГУ, 1988. 224 с.

53. Мирчинк Т.Г., Паников Н.С. Современные подходы к оценке биомассы и продуктивности грибов и бактерий в почве // Успехи микробиологии. М.: Наука, 1985. Т. 20. С. 198-226.

54. Мишустин E.H. Численность и динамика микробного населения почвы // Динамика микробиологических процессов в почве. Таллин, 1974. С. 6-8.

55. Наумова Н.Б. Биомасса микроорганизмов в почвах естественных, сельскохозяйственных и техногенных экосистем Сибири: Автореф. дис. канд. с.-х. наук. Новосибирск, 1990. 17 с.

56. Наумова Н.Б. Биомасса микроорганизмов в ненарушенных почвах Сибири // Сибирский экологический журнал. 1994. № 3. С. 275-281.

57. Национальный атлас. Монгольская Народная Республика / М.: Улан-Батор: ГУГК СССР ГУГК МНР, 1990. 263 с.

58. Никитина З.И., Антоненко A.M. Бактериальная и мицелиальная биомасса в почвах таежных экосистем Прииртышья // Биологические науки. 1982. № 7. С. 70-76.

59. Никитина З.И., Барыкова Ю.Н. Численность и биомасса микроорганизмов в почвах поймы нижнего Иртыша // Почвоведение. 1982. №9. С. 109-115.

60. Орлов Д.С. Химия почв. М.: МГУ, 1992. 400 с.

61. Павлова О.С. Структура микробных сообществ почв Окскогозаповедника: Автореф. дис. канд. биол. наук. М.: МГУ.,1998. 22 с.

62. Павлова О.С., Полянская JI.M., Кочкина Г.А., Иванушкина Н.Е., Звягинцев Д.Г. Особенности микробной сукцессии в почвах Окского заповедника // Почвоведение. 2000. № 3. С. 320-328.

63. Паников Н.С. Кинетика роста микроорганизмов. М.: Наука, 1992. 310с.

64. Паников Н.С., Палеева М.В. Относительный вклад грибов в суммарную биомассу и активность сообщества почвенных микроорганизмов // Микология и фитопатология. 1986. № 6. С. 466473.

65. Петербургский A.B. Агрохимия и успехи современного земледелия / Пущино: ОНТИ НЦБИ АН СССР. 1989. 221 с.

66. Полянская JI.M. Популяция Streptomyces olivocenereus в почвах разных типов: Дисс. канд. биол. наук. М.: МГУ, 1978. 136 с.

67. Полянская JI.M. Прямой микроскопический подсчёт спор и мицелия грибов в почве // Тез. конф. Изучение грибов в биогеоценозах. Свердловск. 1988.С.30.

68. Полянская JI.M. Микробная сукцессия в почве: Автореф. дис. . докт. биол. наук. М.: МГУ,1996. 96с.

69. Полянская JI.M., Гейдебрехт В.В., Звягинцев Д.Г. Биомасса грибов в различных типах почв // Почвоведение. 1995а. № 5. С. 566-572.

70. Полянская JI.M., Гейдебрехт В.В., Степанов A.JL, Звягинцев Д.Г. Распределение численности и биомассы микроорганизмов по профилям зональных типов почв // Почвоведение. 19956. № 3. С. 322-328.

71. Полянская JI.M., Головченко A.B., Звягинцев Д.Г. Микробная биомасса в почвах // Доклады Академии наук. 1995в. Т. 344, № 6. С. 846-848.

72. Полянская JT.M., Лукин С.М., Звягинцев Д.Г Изменение состава микробной биомассы в почве при окультуривании // Почвоведение.1997. №2. С. 206-212.

73. Полянская Л.М., Головченко A.B., Звягинцев Д.Г. Определение жизнеспособности спор и мицелия грибов в почве // Микробиология.1998. Т. 67, С. 832-836.

74. Полянская Л.М., Звягинцев Д.Г. Содержание и структура микробной биомассы как показатель экологического состояния почв // Почвоведение. 2005: № 6. С. 706-714.

75. Полянская Л.М., Полянский М.Р., Гейдебрехт В.В. Современные представления о функционировании микробных сообществ в почвах // Труды Всероссийской конференции "Перспективы развития почвенной биологии". 2001. С. 171-177.

76. Разумовская З.Г., Осипова И.В. О соотношении числа живых и мёртвых бактерий в размножающейся культуре Acetobacter melanogenum //Микробиология. 1958. Т.27, № 6. С. 727-731.

77. Рещиков М.А. Степи Западного Забайкалья. М.: Изд-во АН СССР, 1961. Вып.1. С. 413-425.

78. Свешникова A.A., Полянская Л.М., Лукин С.М. Особенности почвенных микробоценозов различных угодий Владимирского ополья // Почвоведение. 2001. N 4. С. 461-468.

79. Свешникова A.A., Полянская Л.М., Лукин С.М. Влияние окультуривания и мезорельефа на структуру микробной биомассыдерново-подзолистой и серой лесной почв // Микробиология. 2001. Т. 70, №4., С. 558-566.

80. Старостина Н.Г., Луста К.А., Деменок Г.Ю., Фихте Б.А. Акриламидный тест для прямого микроскопического распознавания жизнеспособных и мертвых клеток в популяции грамотрицательных бактерий //Микробиология. 1982. Т.51, № 6. С. 1007-1010.

81. Сусьян Е.А. Активная микробная биомасса разных типов почв: Автореф. дис. .канд. биол. наук. М.: Изд-во МГУ, 2005. 25 с.

82. Титлянова A.A., Наумова Н.Б., Косых Н.П. Круговорот углерода в луговых экосистемах // Почвоведение. 1993. № 3. С. 32-39.

83. Титлянова A.A., Тесаржова М.Р. Режимы биологического круговорота. Н.: Наука. Сиб. отд-ние, 1991. 150 с.

84. Убугунова В.И., Убугунов JI.JI., Корсунов В.М., Балабко П.Н. Аллювиальные почвы речных долин бассейна Селенги / Улан-Удэ: Изд-во БНЦ, Ассоциированный член Издательство СО РАН, 1998. 250 с.

85. Уфимцева К.А. Степные и лесостепные почвы Бурятской АССР. М.: Изд-во АН СССР, 1960. 160 с.

86. Фадеева Н.Б. Селенгинское среднегорье. Улан-Удэ: Бурят, кн. изд-во, 1963. 170 с.

87. Широких A.A., Широких И.Г, Полянская JI.M. Профильное распределение численности и биомассы микроорганизмов в кислых почвах Кировской области // Почвоведение. 2001. № 7. С. 845-851.

88. Якутин М. В. Биомасса и активность микроорганизмов пойменных почв средней Оби // Почвоведение, Биология почв. 1994. № 12. С. 7076.

89. Anderson J.P., Domsch К. Quantities of plant nutrients in the microbial biomass of selected soils // Soil Sei. 1980. V. 130. P. 211-216.

90. Anderson Т.Н., Domsch K. Ratios of microbial biomass carbojj fa totalorganic carbon in arable soils // Soil Biol. Biochem. 1989. № 21. P.471-479.

91. Anderson J.P., Westmoreland D. Direct counts of soil organisms using a fluorescent brightener and a europium chelate // Soil Biol. Biochem. 1971. V. 3.P. 85-87.

92. Baath E., Soderstrom B. Fungal biomass and fungal immobilization of plant nutrients in Swedish coniferous forest soils // Rew. Ecol. Biol. 1979a. V. 16. P. 477-489.

93. Baath E., Soderstrom B. The significance of hyphal diameter in calculation of fungal biovolume //Oikos. 1979b. V. 33. P.l 1-14.

94. Baath E., Soderstrom B. Seasonal and spatial variation in fungal biomass in forest soil // Soil. Biol. Biochem. 1982. N 14. P. 353-358.

95. Babiuk L.A., Paul E.A. The use of fluorescein isothiocyanate in the determination of the bacterial biomass of grassland soil // Can. J. Microbiol. 1970. Vol. 16. P. 57-62.

96. Beare M.H., Neely C.L., Coleman D.C., Hargrove W.L. A substrate -induced respiration (SIR) method for measurement of fungal and bacterial biomass on plant residues // Soil Biol. Biochem. 1990. V. 22. P. 585-594.

97. Beyond the biomass. Compositional and Functional analysis of soil microbial communities / Ed. by Ritz K., Dighton J., Giller K. E. U K: John Wiley & Sons, 1994. 275 p.

98. Chet I. Perspectives in Microbial Ecology // F. Mergusar, M. Gantar, Eds. / Slovene Society for Microbiology. Ljubljana, Yugoslavia. 1986. P. 489-491.

99. Chrzanowski T.H., Crotty R.D., Hubbard J.G., Welch R.P. Applicability of the fluoresceindiacetate method of detecting active bacteria in freshwater//Microb. Ecol. 1984. Vol. 10. P. 179-185.

100. Coleman A. Enhanced detection of bacteria in natural environments by fluorochrome staining of DNA// Limnol. Oceanogr. 1980. Vol. 25. P. 948-951.

101. Coupland R.T., Wllard J. R., Ripley E.A. Summary of activities. 1967-1974. // Matador Project. Tech. Rep. 1974. № 69. P. 55-59.

102. Domsch K.H., Beck T., Anderson J.P., Soderstrom B., Parkinson D., Trolldenier G. A comparison of methods for soil microbial population and biomass studies // Z. Pflanzenernaehr. Bodenkd., 1979. V. 142. № 4. P. 520-533.

103. Elorsa M.V., Rico H., Sentandrey R. Calcofluor white alters the assembly of chitin fibrils in Saccharomyceigf cerevisiae and Candida albicans cells // J. Gen. Microbiol. 1983. Vol. 129. P. 217-223.

104. Faegri A., Lid-Torsvik V., Goksyr J. Bacterial and fungal activities in soil, separation of bacteria and fungi by rapid fractionated centrifiigatjon technique // Soil Biol. Biochem. 1977. V. 9. P. 105-112.

105. Frankland J.C. Importance of phase-contrast microscopy for estimation of total fungal biomass by the agar-film technique // Soil Biol. Biochem. 1974, Vol. 6. P. 409-410.

106. Frankland J.C. Estimation of live fungal biomass // Soil Biology and Biochemistry. 1975. V. 7. P. 339-340.

107. Fry J.C. Direct methods and biomass estimation // Methods in Microbiology / R. Grigorova and Y. K. Norris, Eds. Acad. Press. London. 1990. Vol. 22. P. 41-81.

108. Haas L.W. Improved epifluorescence microscopy for observing planktonic microorganisms // Ann. Inst. Oceanogr. Paris. 1982. VoJ. 58. P. 261-266.

109. Henrot J., Robertson G.P. Vegetation removal in two soils of the humid tropics: effect of microbial biomass // Soil. Biol. Biochem. 1994. V. 26. P. 111-116.

110. Herbert R.A. Methods for enumerating microorganisms and determining biomass in natural environments // Methods in Microbiology. Academic Press. London. 1990. Vol. 22. P. 2-35.

111. Hill H.R. Rapid detection and specific identification of infections due to group B streptococci by counterimmuno-electrophoresis // Microbiology. 1975. P. 84-88.

112. Hoppe H.G. Analysis of actively metabolizing bacterial populations with the autoradiographic method // Microbial Ecology of a Brackish Water Environment / G. Rheinheimer, Eds. / Springer Verlag. Heidelberg. 1977. P. 179-197.

113. Hunt G.A., Fogel R. Fungal hyphal dynamics in a western Oregon Douglas-fir stand // Soil Biol. Biochem. 1983. V. 15. P. 641-649.

114. Insam H., Parkinson D., Domsch K. H. Influence of macroclimate on soil microbial biomass // Soil Biol. Biochem. 1989. V. 21. P. 211-221.

115. Jenkinson D.S., Ladd J.N. Microbial biomass in soil: measurement and turnover / in: Paul E.A., Ladd J.N. (eds.). Soil Biochem. USA: Marcel Dekker, 1981. V. 5. P.100-105.

116. Karl D.M. Cellular nucleotide measurements and application in microbial ecology//Microbiol. Rev. 1980. V. 44. P.739-796.

117. Kjoller A., Struwe S. Microfungi in ecosystems: fungal occurrence and activity in litter and soil // Oikos. 1982. Vol. 39. P. 389-422.

118. Kjoller A., Struwe S. Analysis of fungal communities ondecomposing beech litter / in: Ritz K., Dighton J., Giller K. E. (eds.) Beyond the biomass. UK: John Wiley & Sons, 1994. P. 191-198.

119. Koch A.L. Death of bacteria in growing culture // J. Bacteriol. 1959. V. 77. №5. P. 623-629.

120. Kogure K., Simidu V., Taga N. A tentative direct microscopic methods for counting living marine bacteria // Can. J. Microbiol. 1979. V. 25. P. 415-420.

121. Kunc F. Methods for the analysis of soil microbial communities / in: Ritz K., Dighton J., Giller K. E. (eds.) Beyond the biomass. UK: John Wiley & Sons, 1994. P. 23-29.

122. List^ J. On the lactic fermentation and its bearings on pathology // Trans. Path. Soc., Lond. 1978. Vol. 29. P. 425-432.

123. Lundgren B. Fluorescein diacetate as a stain of metabolically active bacteria in soil // Oikos. 1981. Vol. 36. P. 17-22.

124. Macdonald R.M. Cytochemical demonstration of catabolism in soil micro-organisms // Soil Biol. Biochem. 1980. V. 12. P. 419-423.

125. Maki J.S., Remsen C.C. Comparison of two direct-count methods or determining metabolizing bacteria in freshwater // Appl. Environ. Microbiol. 1981. V. 41. P. 1132-1138.

126. Mao D.M., Min Y.W., Yu L.L., Martens R., Insam H. Effect of a forestation on microbial biomass and activity in soils of tropical China // Soil Biol. Biochem. 1992. V. 24. P. 865-872.

127. Maxwell R.A., Coleman D.C. Seasonal dynamics of Nematode andffmicrobial biomass in soils of Riparian-zone forests of the Sout^rn Appalachians // Soil Biol. Biochem. 1995. V. 27. P.79-83.

128. Millar W.N., Casida L.E. Microorganisms in soil as observed by staining with rhodamine labeled lysozyme // Can. J. Microbiol. 1970. V.16. P. 305-307. } .

129. Nagel de Boois H.M., Jaansen E. The growth of fungal mycelium inforest soil layers // Rev. Ecol. Biol. soil. 1971. V. 8. P. 509-520.

130. Nannipieri R., Grego S., Ceccanti B. Ecological significance of the biological activity in soil // In: Bollag J.M., Stotzky G. (eds.) Soil Biochemistry. V. 6. USA: Marcel Dekker, 1990. P. 75-80.

131. Neely C.L., Beare M.H., Hargrove W.L., Coleman D.C. Relationships between fungal and bacterial substrate induced respiration, biomass and plant residue decomposition // Soil Biol. Biochem. 1991. V. 23. P. 947-954.

132. Newell S.Y., Fallon R.D. Bacterial productivity in the water column and sediments of the Georgia (USA) coastal zone: Estimates via direct counting and parallel measurement of thymidine incorporation // Microb. Ecol. 1982. V. 8. P. 33-46.

133. Paton A.M., Jones S.M. The observation and enumeration of microorganisms in fluids using membrane filtration and incident fluorescence microscopy//J. Appl. Bacterid. 1975. Vol. 38. P. 199-200.

134. Polyanskaya L. M., Zvyagintsev D. G. Microbial succession in soil // Soviet scientist reviews. Harwood Academic Publ. Gmbh, 1994. № 1. P. 1-65.

135. P. 2889-2983. цитируется no Fry (1990).

136. Sodestrom B.E. Some problems in assessing the fluorescein diacetate-active fungal biomass in the soil // Soil Biol. Biochem. 1971. Vol. 11. P. 147-148.

137. Soderstrom В. E. Vital staining of fungi in pure culture and in soil with fluorescin diacetate // Soil Biology and Biochemistry. 1977. V. 9. P. 59-64.

138. Soderstrom B.E. Some problems in assessing the fluorescin diacetate active fungal biomass in the soil // Soil Biology and Biochemistry. 1979a. V. 11. P. 147-148.

139. Soderstrom B.E. Seasonal fluctuations of active fungal biomass in horizons of a podzolized pine-forest soil in central Sweden // Soil Biol. Biochem. 1979b. V. 11. P. 149-154.

140. Strugger S. Fluorescence microscope examination of bacteria in soil // Can. J. Res. Sect. 1949. V. 26. P. 188-193.

141. Tabor P.S., Neihof R.A. Improved microautoradiography method to determine individual microorganisms active in substrate uptake in natural waters //Appl. Environ. Microbiol. 1984. V. 44. P. 945-953.

142. Valentine R.C., Bradfield J.R.C. A new procedure for bacterial viability counts and its biophysical application // Nature. 1953. V. 171. № 4353. P. 878-893.

143. Valentine R.C., Bradfield J.R.C. The urea method for bacteria viability counts with the electron microscope and its relation to other viability counting methods // J. Gen. Microbiol. 1954. V. 11. P. 349-357.

144. Veen J.A., Paul E.A. Conversion of biovolume measurements of'fvsoil organisms, grown under various moisture tension, to biomass and their nutrient content // Appl. Environ. Microbiol. 37. P. 686692. ■'/

145. Visser S., Parkinson D. Fungal succession on aspen poplar leaflitter // Can. J. Bot. 1975. V. 53. P. 1640-1651.

146. Williamson R., Ward B. Benzylpenecillin-induced filament formation of Clostridium perfringens // J. Gen. Microbiol. 1982. V. 128. № 12. P. 3025-3035.

147. Zimmermann R., Iturriaga R., Becker-Birck J. Simultaneous de termination of the total number of aquatic bacteria and the number there of involved in respiration // Appl. Environ. Microbiol. 1978. V. 36. P. 926-935.