Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Показатели нейро-иммунного статуса организма в этиопатогенезе шизофрении

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Показатели нейро-иммунного статуса организма в этиопатогенезе шизофрении"

с ^

яизииэиъь зиъптзпмззиъ ЧЬЗЛГШППЛЛРЬ изчизьъ импыгьи рт-ъьивзиьь иыиъ цьъииектьизь мл^зпге

иизыэиъ иипььь пиъьць

сХд&Ь бЛи-С ЛО€>!

оп^иъьйаь ъьеппыггнъиеьъ чиозичьеичь

ЗГивиЪЬСЪЬПО СЬЙПЛПЬЪЬЦЗЬ 1;©ЬП^Ц0ПОЬЪЬ2ГШ

CV.00.04 ЧЫшшвГифии 1Гши1лисф1лп1[3'1Ш1/р ЦЬЬишриЛшЦшЬ фттг^тЛЛЛрЬ [»Ы|11ш&пф сф1лш1|шЬ шиифбшЪЬ1ии)д1Гш11 шшЫни^лигиииЖ

иьаииаьп

ьпь^иъ- 2000

НАЦИОНАЛЬНАЯ АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ АРМЕНИЯ ИНСТИТУТ БИОХИМИИ ИМЕНИ Г. БУНЯТЯНА

МАИЛЯН КАРИНЕ РАФИКОВНА

ПОКАЗАТЕЛИ НЕЙРО-ИММУННОГО СТАТУСА ОРГАНИЗМА В ЭТИОПАТОГЕНЕЗЕ ШИЗОФРЕНИИ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.04 - Биохимия

ЕРЕВАН - 2000

UinhSuifununLpjiuü pbdwQ haiuuimim{b[ t OUU Un[bl|ni[UJjfiti IjbGutupuiGrußjujG hOuunhtnniinh ctfiuiujljiuQ tunphprpiuS:

tyiimutjUiG rtbt|uii]uipübp' l|büu. qfiin. qnliuinp U.U. Pnjui£juiG

Ijbüu. qtiin. ryil)innn, щрпф. U.U. Ubi|ip-®UJ2U1JU1G

11ш2шп0ш1)ш0 QGrpvIiöuitiimjDbp' qfiin. rjnl)innp, щрп}>. d.h. Huilinpjujü

l|bGu. qjm ryiljmnfi 4.P. liuiquipjuiG

Umuguiinuip ^qömljbpu^nipjniG' flPQU ^nqbljiuG UnnrisrapitJuG

flai^imijUjGnipjniGp l|ujjiuGuj|nL1 2000p. i}hl|inbtipbph tf. /3 -bG

<U1U PniGhuißjUiG)i шйЦмО ijbGuujg(iü|mjjfi hGuin|iinmmfiG tjfig 042 йшийшч^шшдЦщй (unphpufi Otiuuiniü (375014, fcpluuG, ^luiprujp ULant^ 5/1):

UtnbGujfununLpjuiOc Ijuipbifi t ¿ruiünpujGuii fiQuLnpinniirti qpujrvujpujGiUi]:

Ubqöiut^pp шпшр^иий t Dnjbüpbph 2000p.

UajuQwqtimujgiluJÖ funphpTji qfiuiujljmü guipmnuiuip

ЦЬСа. фл. Qnijtnnp, щрпф._/¿fih'Y"^_U.U. UhdnGjuiG

Тема диссертации утверждена на заседании Ученного совета Института Молекулярной биологии HAH РА,

Научные руководители: доктор биол. наук. A.C. Бояджян

доктор биол. наук., нроф. М.А. Мелик-Пашаяи

Официальные оппоненты: доктор биол. наук., проф. Ж.И. Акобян

доктор биол. наук. К.Б. Назарян

Ведущая организация: НЦ Психического Здоровья РАМН

Защита состоится декабря 2000г. в № ч. на заседании специализированного совета 042 при Институте биохимии им. Г. Буготша HAH РА (375014, Ереван, ул. Паруйра Севака 5/1).

С диссертацией можно ознохомиться в библиотеке Института биохимии. Автореферат разослан ноября 2000г.

Ученый секретарь специализированного совета,

доктор биол. наук., проф. л .„¿в/ A.A. Симонян

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Шизофрения это психическое заболевание с характерным расстройством умственной деятельности н эмоциональной сферы личности (Дмитриева, 1999), за наследование которого ответственней определенный комплекс аллельных И мутантных вариантов генов fhttp://www.ncb!.nIm.njh.gov/Omim/soarchomim.htnU).

Согласно современным представлениям при шизофрении наблюдаются взаимосвязанные структурно-функциональные изменения яейротрансмиггерных систем мозга и иммунного статуса организма.

В частности, одной из причин развития шизофрении является гиперахтивация дофаминергической трансмиссии в центральной нервной системе, как результат пшерактивации D2 рецепторов дофамина (Bracha & Kleinman, 1986; Оке and Adams, 1987; Оке et ai, 1988; Neylan, 1996). Одно из центральных мест в таперахтивации дофаминовой трансмиссии при шизофрении отводится понижению активности фермента дофамин-|3-монооксигеназы (ДБМ, КФ 1.14.17.1), катализирующего биосинтез норадреналииа из дофамина. Однако, до вастоящего времени отсутствуют четкие представления о путях, приводящих к понижению активности ДБМ при шизофрении. Ряд экспериментальных данных позволяет предположить, что низкая активность фермента ассоциирует с положительной семейной историей шизофрении (Wei et al, 1996; Wei et al,1998). Однако, не меньшее количество данных опровергает это предположение (Meszaxos et al, 1996; Williams et al., 1999). Более того, некоторые исследования вообще опровергают тог факт, что у больных шизофренией уровень активности фермента ниже, чем у здоровых лиц (Meltzer et al, 1980; Markianos et al, 1983).

На сегодняшний день нет сомнений о серьезном нарушении иммунного статуса организма при шизофрении и вовлечении в патогенез этого заболевания аутоиммунных реакций на уровне ЦНС. Предполагают, что аутоиммунные процессы могут развиваться в структурах дофаминовой системы головного мозга на уровне блокирования ДБМ или/и образования антирецепторных антител со стимулирующим или блокирующим рецептор действием. До настоящего времени, однако, не ясно, являются ли аутоиммунные реакции этиологическим фактором шизофрении, поскольку экспериментальные данные в отмеченном направлении весьма противоречивы (Zamani et al, 1994; Nimgaonkar et al, 1995; Blackwood et al, 1996; Nimgaonkar et al, 1997; Sasaki et al, 1999; Arinami et al, 1S98; Jacobsen et al, 1998; Jonsson et al, 1998; Hawi et al, 1999).

Таким образом, несмотря на огромное количество клинических и экспериментальных данных, полученных при исследовании этиопатогенеза шизофрении, молекулярные патомеханизмы генерации и развития данного заболевания до настоящего времени не ясны. Большинство данных в отмеченном направлении противоречивы. В результате этого на сегодняшний день отсутствуют четкие и объективные критерии диагностирования и прогнозирования шизофрении.

Среди ряда факторов, лимитирующих прогресс в отмеченном направлении, следует указать следующие:

■S большинство исследований проводится на фоне побочных эффектов нейролептиков и других антипс ихотичес ких препаратов, используемых при лечении шизофрении; V имеются определенные различия в этаопатогенетике шизофрении, в зависимости от подтипа данного заболевания, а также расовой, этнической и национальной принадлежности пациентов (Lander, 1988; Coffey, 1998; McGuffm et al, 1999, Kirov & Murray, 1999);

S большинство исследований проводится при обследовании пациентов с так называемой "случайной" или спорадической формой шизофрении — когда отсутствует информация относительно генеолопш данного пациента; в ряде случаев сам пациент или его родные просто не желают давать подобную информацию;

если даже удается установить, что пациент имеет положительную семейную историю шизофрении, то по ряду объективных либо субъективных причин проведение комплексного исследования, включающего обследование его родных I или II степени близости, не представляется возможным.

В связи с вышеизложенным очевидно, что определение ряда биохимических и иммунологических параметров - показателей нейро-иммутшого статуса организма, в нескольких поколениях семей с положительной наследственной историей шизофрении представлятется очень важным для понимания молекулярных основ этиопатогенеза этого заболевания, а также для разработки методов и подходов по его прогнозированию и диагностированию.

Цель настоящего исследования заключалась в выявлении этиологических и патогенетических критериев шизофрении на уровне ряда биохимических и иммунологических параметров, характеризующих нейро-иммунный статуса организма.

Достижение отмеченной цели определялось решением следующих исследовательских задач:

установить является ли уровень активности дофамин-р-монооксигеназы в крови специфичным этиологическим или/и патогенетическим критерием при шизофрении;

^ установить является ли наблюдаемое при шизофрении нарушение иммунного статуса организма специфическим этиологическим критерием этого заболевания, основываясь на таких индикаторах развития аутоиммунных процессов как содержание в крови циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), антигенный состав этих комплексов, а также содержание в крови антимозговых антител.

Проведение экспериментов в рамках отмеченных цели и задач осуществлялось при финансовой поддержке Американского Университета Армении (исследовательский грант на конкурсной основе).

Научная новцзно и научно-практическая значимость уабсты. Получены неопровержимые доказательства в пользу того, что удельная активность ДБМ при шизофрении, по сравнению с нормой, понижена, что является подтверждением существенной роли этого фермента в патомеханизмах данного заболевания. Установлено, что низкий уровень активности ДБМ в крови яе ассоциирует с положительной наследственной историей шизофрении, а ливгь отражает патогенез данного заболевания. Показано, что наблюдаемые нами изменения удельной активности ДБМ при шизофрении достаточно специфичны, в связи с чем этот параметр может служить биохимическим критерием при диагностировании шизофрении и дифференциальной диагностике психозов трех различных этиологии.

Получено подтверждение существенной роли аутоиммунных процессов в патогенезе шизофрении и развитии этих процессов не только на периферии, но и на уровне ЦНС. В частности, показано, что для шизофрении характерны повышенные уровни мелких ЦИК и аутоантител к мозг-специфичным белкам в крови, и что отмеченные стриги не только отражают патогенез шизофрении, ко и ассоциируют с положительной наследственной историей этого заболевания. Последнее является весомым свидетельством в пользу аутоиммунной этиологии шизофрении.

Впервые определен антигенный состав крупных и мелких ЦИК при шизофрении. Показано, что этот параметр является достаточно специфичным критерием и может бьггь весьма успешно применен в целях диагностики и прогноза шизофрении.

Апробация работы. Основные результаты исследования были доложены и обсуждены на X Всемирном психиатрическом конгрессе (Мадрид, 1996), I конференции Армянской ассоциации международной: организации по исследованию мозга (IBRO, Ереван, 1996), в Американском Университете Армении (Ереван, 1996), Центре психического здоровья "Норк" МЗ РА (Ереван, 1997), на Юбилейной научной конференции, посвященной 65-летию ЕрГМУ им. М. Гераци (Ереван, 1997), заседании кафедры психиатрии и медицинской ' психологии ЕрГМУ им. М. Гераци (Ереван, 1998), V всемирном конгрессе "Инновации в психиатряе — 1998" (Лондон, 1998), Юбилейной научной конференции, посвященной 35-летию ЕрГИУВ-НИЗ МЗ РА (Ереван, 1998), XII общем собрании Европейского нейрохимического общества (Санкт-Петербур, 1998), II Армяно-Швейцарском симпозиуме по актуальным проблемам психиатрии (Ереван, 1999), VIII Международном конгрессе по психиатрической генетике (Версаль, 2000) н на заседании ученого совета Института молекулярной биологии HAH РА (Ереван, 2000).

Структура работы. Диссертация изложена на 102 страницах машинописного текста, иллюстрирована 12 таблицами и 13 рисунками, состоит из списка использованных сокращении и обозначений, введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения результатов собственных исследований и их обсуждения, заключении по двум главам результатов исследования и юс обсуждения, общих выводов и списка цитируемой литературы, содержащего 218 источника.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Субъектом исследования являлись: члены двух семей с положительной наследственной историей шизофрении, больные "случайной" формой шизофрении, больные органическими психозами, больные различными формами нарушения мозгового кровообращения с первичной гипертонией и психотическими явлениями, физически и психически здоровые лица, представляющие контрольную группу, которую добровольно составили доноры из НИИ переливания крови МЗ РА и научные сотрудники Института молекулярной биологии HAH РА

Объектом исследования являлась сыворотка крови вышеотмеченных лиц.

Клиничесхий материал был получен из Центра психического здоровья "Норк" и НИЦ "Ангионеврология" МЗ РА в период госпитализации вышеотмеченных больных.

Дяагностироваиие даднентов и их подбор в основном проводился на кафедре психиатрии и медицинской психологии ЕрГМУ им. М. Гераци, а также работниками вышеотмеченных лечебных учреждений, согласно Международной классификации болезней (МКБ-9). Все больные шизофренией страдали хронической параноидной формой этого заболевания и находились в состоянии психического дефекта личности. У всех больных органическими психозами наблюдался психоорганический синдром, выраженный в разной степени. В группу больных различными формами нарушения мозгового кровообращения с первичной гипертонией и психотическими явлениями вошли четыре формы указанной патологии (начальные и преходящие нарушения мозгового кровообращения, дисциркуляторная энцефалопатия и ишемический инсульт).

Определение активности АБМ проводили спектрофотометр ическим методом, предложенным Nagatsu & Udeniriend (1972). Удельную активность выражали в мкмолях продукта, образующегося за 1 минуту на 1 литр сыворотки (мкмоль/мин/л).

Очистку электрофоретически гомогенных препаратов иммуноглобулинов G из сыворотки крови проводили при использовании процедур фракционирования сульфатом аммония, ионнообменной хроматографии на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой (Sigma, США) и гель-фильтрации на колонке с сефарозой 6В (Pharmacia, Швеция).

Суммарный экстракт мозгоснедифических белков получали из головного мозга физически и психически здоровых лиц, погибших в результате несчастного случая. Этот материал любезно предоставлялся в каше распоряжение руководством кафедры патологической анатомии ЕрГМУ через 2 часа после официальной регистрации смерти погибших лиц. Полученный экстракт содержит как водорастворимые, так и слабо связанные с мембранами, экстрагируемые 1% NaCl белки мозга.

Общую концентрацию белка определяли методом Lowry et al (1951), при использовании человеческого сывороточного альбумина для построения стандартной кривой.

Двойную иммунодифкЬузию на агаре (Difco, США) проводили для определения содержания AT к моэгоспецифическим белкам в сыворотке крови и во фракции изолированных иммуноглобулинов G по методу Ouchteilony (1967).

Выделение крупных и мелких ЦИК из сыворотки крови и оценку их количественного содержания проводили по методу Digeon et al (1977). Концентрацию крупных и мелких ЦИК выражали в единицах оптической плотности при 280нм (А^о).

Для анализа белкового состава ЦИК использовали метод электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (ДС-Na; Weber & Osbom, 1969). Полученные осадки ЦИК растворяли в трис-HCl буфере, pH 8.5, до первоначального объема сыворотки, инкубировали в присутствии 4% ДС-Na (Sigma, США) с (и без) 10% ß-меркаптоэтанолом (БМЭ; Fluka, Швейцария) 2 часа при 38°С и далее подвергали ЭФ в ПААГ в присутствии ДС-Na. По окончания электрофореза определяли молекулярную массу основных белковых полос, обнаруживаемых в составе ЦИК, используя калибровочную кривую, построенную для стандартных белков с известными молекулярными массами (Sigma, США), обработанных идентично ЦИК.

Обработку экспериментальных данных проводили используя комппьютерные прог-раммы "SigmaPlot" и "t-EASE".

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ СЕМЬИ С НАСЛЦДСТВЕННОЙ ИСТОРИЕЙ ШИЗОФРЕНИИ

При использовании банка данных Центра психического здоровья "Норк" МЗ РА нами была получена информация относительно двух семей с положительной наследственной историей шизофрении. В четырех поколениях отмеченных семей наблюдались случаи этого заболевания. Все больные члены семей страдали параноидной формой шизофрении и состояли на учете в соответствующих клиниках. Большинство из них принимали нейролептики или другие препараты, обычно назначаемые при шизофрении, лишь в период госпитализации. Три последних поколения каждой из семей, включая как больных, так и здоровых лиц, оказались доступны д\я исследования. Диагнозы были вторично подтверждены психиатром на местах, перед забором крови. Больные шизофренией, как и их здоровые родственники, были предупреждены, что проводимые нами исследования могут иметь лишь научную значимость и не дадут прямого терапевтического эффекта. Все они согласились дать кровь для проведения исследований. Не были обследованы лишь лица не достигшие совершенолетия и те члены семей, которые находилась за пределами Армении.

На рисунке 1 и 2 представлены родословные исследованных нами семей (семья X) с положительной наследственной историей шизофрении. Родословная семьи X насчитывает около 40 человек в четырех поколениях, из них пятеро - больные параноидной формой шизофрении. Члены семьи X проживают в разных населенных

Рцсунок 1. Генеологическое древо семьи X.

Рисунок 2. Генеологнческое древо семьи У.

В и О - мужчины Ои® - женщины в и В - больные шизофренией • - исследованные 4" - скончавшиеся

пунктах одного региона Армении. То же относится ко второй семье (семья Y), родословная которой показана на рисунке 2. Родословная семьи У насчитывает 60 человек в четырех поколениях, из них шестеро - больные параноидной формой шизофрении. Забор крови для анализа был произведен у 12 членов из каждой обследованной семьи.

АКТИВНОСТЬ ДБМ КАК-СПЕЦИФИЧЕСКИЙ КРИТЕРИЙ ПАТОГЕНЕЗА ШИЗОФРЕНИИ

УДЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ДБМ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ У ЗДОРОВЫХ СУБЪЕКТОВ АРМЯНСКОЙ НАЦИОНАЛЬНОСТИ В ПОПУЛЯЦИИ АРМЕНИИ.

Как уже было отмечено, предполагают, что одной из причин, приводящих к гиперактивации дофаминовой трансмиссии при шизофрении, может являться низкая активность фермента ДБМ в ЦНС. Одвако, экспериментальные данные в отмеченном аспекте достаточно противоречивы. Последнее может являться результатом того, что отмеченный параметр в значительной степени варьирует в зависимости от возраста (Weins hi ¡boum and Axelrod, 1971; Freedman et al, 1972) и национальной принадлежности су&ьектов (Schanberg et al, 1974; Gutteberg et al, 1976; Halmy et al, 1982; Puzinski et al, 1983; Arato et al, 1983; Wei et al, 1992). В смешанной возрастной и национальной группе здоровых субъектов удельная активность фермента варьирует в пределах от 0 до 188 условных рдятщ (Nagatsu & Udenfriend, 1972; Weinsliilboum et al, 1975; Fujita et al, 1977).

Учитывая вышеотмечеяное, мы, в первую очередь, поставили перед собой задачу определить средний уровень активности ДБМ в популяции Армении. С этой целью активность фермента была определена в сыворотке крови физически и психически здоровых лиц (п=42) армянской национальности. Известно, что уровень активности ДБМ в крови отражает активность фермента в ЦНС (Goldstein & Cubeddu, 1976; Schamberg & Kirshner, 1976; Патон, 1982).

Как показали результаты наших исследований, средняя величина удельной активности ДБМ в сыворотке крови здоровых лиц в популяции Армении составляет 22.712.0 мкмоль/мин/л (М+т) (таблица 1). Для сравнения в таблице 1 представлены также средние величины удельной активности ДБМ в сыворотке крови субъектов других национальностей. Как следует из представленных данных, для армянской популяции в целом удельная активность ДБМ в сыворотке крови ниже, а диапазон ее

вариабельности уясе, чем в случае большинства других популяций со сходным возрастным составом.

Таблица /.

п Возраст (годы) (Mtm) Диапазон вариаций Популяция Источник

42 21-59 22.7±2.0 t.8-45.7 армянская настоящая работа

82 22-35 31.0±3.0 2-100 северно-американская Schanberg et al, 1974

114 21-50 35.0+* 0-105 норвежская Guttenberg et al, 1976

28 25-58 29.1±3.0 не указан восточноевропейская Halmy et al, 1982

31 23-65 28.013.9 не указан польская Puzinski et al, 1983

118 20-50 35.3+1.8 0-1Ю венгерская Arato et al, 1983

68 1-72 25.512.1 0-67.5 центрально-европейская Schoni et al, 1986

17 24-60 23.2±' не указан великобританская Wei et al, 1992

Средняя величина удельной активности ДБМ (мкмольУ мин/л) в сыворотке крови физически и психически здоровых лиц в зависимости от национальной пренадлежности субъектов.

Активность ДБМ определена спехтрофотонетрическим методом (Nagatsu & Vdeniricnd, 1S72/ 'значения т не приведены

Известно, что уровень активности ДБМ в крови генетически детерминирован полиморфным геном и подвержен значительным индивидуальным и популяциониым колебаниям (Wei et al, 1997b). Результаты настоящего исследования свидетельствуют, что для армянской популяции характерно наследование аллелей, обусловливающих низкий уровень активности фермоггга.

УДЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ДБМ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЛЕНОВ ДВУХ СЕМЕЙ С ПОЛОЖИТЕЛЬНОЙ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ИСТОРИЕЙ ШИЗОФРЕНИИ

Как следует из полученных нами данных, представленных в таблице 2, средняя величина удельной активности ДБМ в сыворотке крови здоровых лиц в пределах каждой семьи с положительной наследственной историей шизофрении соответствует норме. Это относится также и к средней величине удельной активности фермента, рассчитанной для каждой семьи с учетом всех ее членов. Для больных шизофренией средняя величина удельной активности ДБМ в сыворотке крови приблизительно в 2

(в случае семьи X) и в 2.5 раза (в случае семьи У) ниже, по сравнению с нормой и с данными, полученными для здоровых членов семей.

Таблица 2.

Семья X Семья У

Случай а М±т п М±т

Все субъекты 12 18.92±2.33 * 12 18.58+3.684

Здоровые субъекты 8 22.25+2.79 1 8 23.36±4.26'

Больные шизофренией 4 12.42±1.18 с 4 9.02±4.33 '

Результаты посемейного статистического анализа данных, полученных при определнии удельной активности ДБМ (мкмоль/мин/л) в сыворотке крови членов семей с положительной наследственной историей шизофрении.

•р<0.341, ¡=0.96, *р<0.922, 1=0.098, ср<0.123, ¡=1.57, "р<0.331, ¡=0.98, '¡КО.896, ¡=0.13, 'р<0.045, ¡=2.06 ¡по сравнению с нормой; 22.71 ±2.0; М±т).

Очевидно, что данные, полученные для семьи X, находятся в соответствии с данными, полученными для семьи У. Однако, исходя из малой выборки в каждом вариационном ряду, в том случае, когда мы рассматриваем каждую семью в отдельности, трудно говорить о статистической достоверности полученных данных.

Учитывая вышеизложенное, мы провели статистическую обработку полученных данных в пределах обеих семей взятых вместе. Результаты этой обработки, а также среднестатистические демографические данные исследованных субъектов приведены в таблице 3. Для наглядности в таблицу включены также результаты статистического анализа данных, полученных при определении средней величины удельной активности ДБМ в норме для армянской популяции.

Как следует из представленных данных, средняя величина удельной активное ги ДБМ в сыворотке крови здоровых членов семей с положительной наследственной историей шизофрении соответствует значению, полученному для нормы (р<0.981, 1=0.024). У больных шизофренией с положительной наследственной историей этого заболевании средняя величина удельной активности ДБМ в сыворотке крови приблизительно в 2.1 раза ниже, по сравнению как с их здоровыми родственниками (р<0.005, 1=3.15), так и нормой (р<0.013, 1=2.55). Полученные результаты согласно Ь критерию Стюдента "крайне достоверны".

Результаты вышеизложенных экспериментов свидетельствуют, что низкий уровень активности ДБМ в крови не ассоцирует с положительной наследственной историей шизофрении. С другой стороны, они демонстрируют, что для патогенеза

-1Э-

Таблица 3.

Члены семей с положительной

Параметр Здоровые наследственной историей шизофрении

доноры Все Больные Здоровые

субъекты шизофренией субъекты

Число субъектов 42 24 8 16

Средний возраст, годя 30 38 42 37

Максимальный возраст, годы 59 . 79 74 79

Минимальный возраст, годы 21 14 36 14

Средняя удельная активность ДБМ (М±т) 22.7 ± 2.0 18.8 ±2.1' 10.7+ 2.21''' 22.8 ± 2.5*

Максимальная удельная активность ДБМ 45.7 44.2 20.9 44.2

Минимальная удельная активность ДБМ 3.5 1.9 1.9 8.2

Результаты статистического анализа данных, полученных при определении удельной активности ДБМ (мкмоль/мин/л) в сыворотке крови членов семей с положительной наследственной историей шизофрении и здоровых доноров, а также среднестатистические демографические характеристики исследованных субъектов. °р<0.204, Г=128; ьр< 0.013, 1=2.55; ср<0.98/, ¡=0.024 (по сравнению с нормой); 'р<0.005, 1=3.152 (по сравнению со здоровыми членами семей с положительной наследственной историей шизофрении).

шизофрении характерен низкий уровень активности фермента в крови. Это подтверждается также результатами наших исследований, приведенных ниже, где удельная активность ДБМ определялась в сыворотке крови больных с так называемой "случайной" формой шизофрении.

УДЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ ДБМ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ СО "СЛУЧАЙНОЙ" ФОРМОЙ ПАРАНОИДНОЙ ШИЗОФРЕНИИ

Группа исследуемых субъектов [в ==47) включала лиц, зарегистрированных в к\инике как больные с отрицательной семейной историей шизофрении, либо с отсутствием информации о семейной истории этого заболевания. Согласно критерию Шовене (Кокунин, 1975) два значения из данных по группе больных "случайной" формой шизофрении были исключены.

Результаты наших экспериментов представлены в таблице 4. Как следует из представленых данных, у больных со "случайной" формой шизофрения средняя величина удельной активности ДБМ в сыворотке крова приблизительно в 2 раза ниже, чем у здоровых лиц (р<0.001; 1=5.8). Полученные результаты согласно I-критерию Стюдента "крайне достоверны".

-11 - Таблица 4

Параметр Больные параноидной •■ : формой шизофрении

Число лиц 45

Средний возраст, годы (М±т) 33 ± 1.4

Максимальный возраст, годы 66

Минимальный возраст, годы 19

Средняя давность заболевания (М±т) Средняя уделньпяя активность ДБМ (Mim) Максимальная удельная активность ДБМ Минимальная удельная активность ДБМ 9.3 + 1.0 10.5 ± 0.8 45.7 1.8

Результаты статистического анализа данных, полученных при определении удельной активности ДБМ (мкмоль/мин/л) в сыворотке крови больных "случайной" формой шизофрепии и среднестатистические демографические характеристики исследованных субъектов

Важно отметить, что средняя величина удельной активности ДБМ в сыворотке крови больных "случайной" формой шизофрении соответствует значению, полученному для больных с положительной наследственной историей этого заболевания. Соответственно, степень понижения удельной активности фермента, по сравнению с нормой, в группе больных "случайной" формой шизофрении идентична таковой для группы больных с положительной наследственной историей этого заболевания.

Абсолютные значения средних величин удельных активностей фермента в сыворотке крови у больных шизофренией и здоровых лиц в армянской популяции отличаются от соответствующих значений, приводимых в литературе для представителей других национальностей. Однако, степень понижения удельной активности ДБМ при шизофрении соответствует литературным данным (Arato et al, 1983; Maïkia-nos et al, 1990). Этот факт наглядным образом демонстрирует корректность полученных нами данных.

СПЕЦИФИЧНОСТЬ ПОНИЖЕНИЯ УРОВНЯ АКТИВНОСТИ ДБМ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ ПАРАНОИДНОЙ ФОРМОЙ ШИЗОФРЕНИИ

Для того чтобы установить насколько специфичным является наблюдаемое нами понижение или степень понижения уровня активности ДБМ в сыворотке крови больных шизофренией, мы провели определение уровней активности фермента в сыворотке кровн больных с органическими психозами и различными формами нарушения мозгового кровообращения с первичной гипертонией и психотическими явлениями.

При выборе патологий мы руководствовались тем, что именно эти вышеот-меченные группы больных чаще всего становятся жервами неверною диагноза. Психозы, наблюдаемые на определенных стадиях этих патологий, для каждой из них имеют различную этиологию, ио, в конечном итоге, являются результатом органических поражений центральной нервной системы. Клиническая картина органических психозов и психозов, обусловленных нарушением мозгового кровообращения, на определенных этапах развития этих заболеваний весьма схожа с таковой, наблюдаемой при шизофрении на стадии дефекта личности (Дмитриева, 1999; Варакин, 1999; Чуркин и Мартюшов, 2000) Сегодня, к сожалению, диагностирование шизофрении основано фактически на визуальном наблюдении и субъективной оценке симптоматики. Поэтому страдающих вышеотмеченными психозами часто диагностируют как больных шизофренией (Davison, 1983; Johnstone et al, 1987). При этом им назначают нейролептики в таких дозах, которые весьма отрицательно воздействуют на этих больных (Timmons & Hamilton, 1986; Губцкий и др., 1997).

Удельная активность ДБМ в сыворотке крови при органических психозах

Результаты наших экспериментов представлены в таблице 5. Как следует из представленных данных, средняя величина удельной активности ДБМ в сыворотке крови больных с органическими психозами (п=36) приблизительно в 4.7 раз ниже, чем у здоровых лиц (р< 0.0001, t= 8.0) и в 2.2 раз ниже, чем у больных шизофренией (р< 0.0001, 1=5.4). Полученные результаты согласно t-критерию Стюдента "крайне достоверны".

Хс&юца 5.

----- - Г-' — .— — —!——.—.'- ч..и ..... Параметр Вольные органическими психозами

Число лиц 36

Средний возраст, годы (М1т| 32 ± 2.3

Максимальный возраст, годы 72

Минимальный возраст, годы 16

Средни давность заболевания (М±т) Средняя уделньняя активность ДБМ (М±т) Максимальная удельная активность ДБМ Минимальная удельная активность ДБМ 8.8 ± 1.3 4.8 ± 0.5 11.8 0.0

Результаты статистического анализа данных, полученных при определении удельной активности ДБМ (мямоль/мни/л) в сыворотке крови больных органическими психозами и среднестатистические демографические характеристики исследованных субъектов.

Важным заключением этой части работы является то, что степень понижения уровня удельной активности ДБМ в крови у больных параноидной формой шизофрении отлична от таковой, наблюдаемой в случае органических психозов.

Удельная активность ДБМ в сыворотке крови при нарушении мозгового кровообращения

В таблице б даны результаты статистического анализа полученных данных. Как следует из полученных данных, удельная активность ДБМ в сыворотке крови больных различными формами нарушения мозгового кровообращения (п = 27) приблизительно в 1.34 раза выше, чем у здоровых лиц (р<0.019, 1=2.4) и 2.9 раза выше, чем у больных шизофренией (р<0.0001,1=8.8).

Этот показатель получен как среднее для всех четырех форм нарушения мозгового кровообращения, однако, в незначительной степени варьирует при рассмотрении каждой конкретной формы этой патологии в отдельности.

-17- Таблица 6.

Параметр : / ■ ;Боляме; нарушениям» мозгового кровообращея* !

Число лиц 27

Средний возраст, годы 1М±т) 56 ±3.1

Максимальный возраст, годы 73

Минимальный возраст, годы 45

Средняя давность заболевания (М+т) Средняя уделньняя активность ДБМ |№о) Максимальная удельная . активность ДБМ Минимальная удельная активность ДБМ 2.3 ±0.7 30.5 ± 2.6 60.3 16.5

Результаты статистического анализа данных, полученных при определении удельной активности ДБМ (мкмоль/шш/л) в сыворотке крови больных различными формами нарушения мозгового кровообращения

Результаты описанных экспериментов представляют неопровержимые доказательства в пользу того, что уровень активности ДБМ при шизофрении, по сравнению с нормой, понижен. Таким образом, очевидно, что этот фермент играет существенную роль в патомеханизмах развития данного заболевания. Очевидно также, что низкий уровень активности ДБМ в крови не ассоциирует с положительной наследственной историей шизофрении, а лишь отражает патогенез заболевания. Иными словами, этот параметр не определяет предрасположенность к шизофрении и не может быть использован при прогнозировании этого заболевания. Однако, он весьма успешно может быть использован в целях диагностики.

Рисунок 3 наглядным образом демонстрирует все вышеотмеченное. На рисунке сравнены средние значения удельных активностей ДБМ в сыворотке крови больных и здоровых субъектов с положительной и отрицательной семейной историей шизофрении. Как следует из представленных данных, средние величины удельной активности ДБМ в сыворотке крови больных с положительной н отрицательной семейной историей шизофрении примерно одинаковы (10.7+2.2 мкмоль/мин/л и 10.5Ю.8 мкмоль/мин/л, соответственно). Аналогичный вывод может бьггь сделан при сопоставлении данных, полученных для здоровых лиц с положительной и

2 20

Й 15

о о

§ 10

1

Рисунок 3. Сравнение средних величин удельных активностей ДБМ (мкмоль/мин/л) в сыворотке крови больных и здоровых субъектов с положительной и отрицательной семейной историей шизофрении. ■ Доноры

Больные с отрицательной историей шизофрении ЕЗ Здоровые члены семей с положительной историей шизофрении ■В Больные с положительной историей шизофрении

отрицательной семейной историей шизофрении. При этом средние величины удельной активности ДБМ в сыворотке крови составляют 22.8 ± 2.5 мкмоль/мин/л и 22.7 ± 2.0, мкмоль/мин/л соответственно.

На фоне сходной клинической симптоматики отдельных стадий параноидной формы шизофрении, органических психозов и психозов, связанных с нарушением мозгового кровообращения, а также того, что, как показали наши эксперименты, для всех трех патологий характерно наличие изменений в уровне активности ДБМ в крови, наблюдаемые нами сдвиги, при сравнении друг с другом, специфичны для каждой данной патологии. Этот факт имеет важное диагностическое значение, поскольку он позволяет проводить дифференциальную диагностику психозов трех различных этиологии и может быть использован как биохимический критерий при диагностировании шизофрении.

Для наглядности на рисунке 4 сравнены средние величины удельной активности ДБМ в сыворотке крови у больных различными формами нарушения мозговою кровообращения в целом, органическими психозами и "случайной" формой параноидной шизофрении. Так, средняя величина удельной активности ДБМ в сыворотке крови у больных "случайной" формой параноидной шизофренией в 2.2 раз выше, чем у больных органическими психозами и в 2.9 раз ниже, чем у больных различными формами нарушениями мозгового кровообращения.

40 ; 35 :

2

$ 30-

6

% 20-

< 10 -5 -0 -

Рисунок 4. Сравнение средних величин удельных активностей ДБМ

(мкмоль/мин/л) в сыворотке крови больных "случайной" формой шизофрении,

органическими психозами и различными формами нарушения мозгового кровообращения.

в Больные шизофренией

D Больные органическими психозами

0 Больные нарушениями мозгового кровообращения

ПАРАМЕТРЫ ИММУННОГО СТАТУСА ОРГАНИЗМА КАК КРИТЕРИИ ЭТИОПАТОГЕНЕЗА ШИЗОФРЕНИИ

Долгое время ЦНС считалась иммунологически привелегилированной областью. Однако, в последнее время постоянно растет объем информации, представляющей доказательства в пользу вовлечения аутоиммунных процессов в зтиопатогенез ряда таких заболеваний ЦНС как рассеянный склероз, болезнь Паркннсона, болезнь Адиссона, болезнь Альцгеймера, нарколепсия и некоторые другие (Carlandei el al, 1993; Kuhn et al, 1997; Singh, 1997; Vaidya et al, 2000; Henderson et al, 2000).

Хотя, как уже было ранее отмечено, вовлечение в патогенез шизофрении аутоиммунных реакций не оставляет сомнений, до настоящего времени не ясно, являются ли аутоиммунные реакции этиологическим фактором шизофрении.

Исходя из вышеотмеченного, в настоящем исследовании у членов семей с положительной наследственной историей шизофрении было также проведено определение ряда параметров, характеризующих иммунный статус организма как в целом (уровни ЦИК в крови и их основные аутоантигены), так и на уровне ЦНС (аутоантигены к мозг-специфичным белкам в крови).

-20-цик

Содержание ЦИК в сыворотке крови членов семей с положительной наследственной историей шизофрении

Образование иммунных комплексов рассматривается как нормальная физиологическая реакция организма. При избытке АГ или АТ генерируются мелкие или растворимые комплексы с преобладанием АГ, при эквимолярных соотношениях АГ и АТ формируются крупные или нерастворимые комплексы с преобладанием АТ. ЦИК способны х взаимодействию с системами и клеточного, и гуморального иммунитета, стимулируя, таким образом, развитие иммунного ответа организма. В норме эти комплексы быстро элиминируются из русла крови при помощи фагоцитоза. Крупные комплексы с большей легкостью элиминируются из крови, чем малые, поскольку имеют большее количество комплииент-свяэывающих участков. Повышенный уровень ЦИК в крови как результат длительного воздействия аутоаигигенов наблюдается при многих аутоиммунных патологиях. Длительная циркуляция в организме ЦИК даже при их незначительном повышении приводит к формированию их тканевых отложений, повреждению тканей и дальнейшему стимулированию развития аутоиммунных реакций в организме путем активации комплемента (Ыег1ш, 2000; Маскау е1 а1, 2000).

Определение концентрации крупных и мелких ЦИК в сыворотке крови обследуемых нами членов семей с положительной наследственной историей шизофрении показало, что для всех членов исследуемых семей, включая и больных, и здоровых субъектов, концентрация крупных ЦИК остается в пределах нормы, в то время как концентрация мелких ЦИК превышает предельный уровень нормы.

На рисунке 5 сравнены средние значения концентрации крупных и мелких ЦИК, рассчитанные с учетом всех членов (п=24), здоровых субъектов (п=16) и больных шизофренией (п=8) аз обеих семей с положительной историей шизофрении взятых вместе. Для наглядности отмечены также характерные для нормы величины. Как следует из представленных на рисунке данных, при всех трех выщеотмеченных вариантах рассчета среднее значение концентрации крупных ЦИК остается в пределах нормы, а д\я мелких ЦИК эта величина в среднем в 3 раза превышает предельный для нормы уровень. Статистическая обработка полученных данных свидетельствует об их "крайней" достоверности.

сг (8 о.

а &

№ О

0.8

0.6

■Норма . ИВсе члены □Больные . МЗдоровые .

"Крупные"

"Мелкие"

Рисунок 5. Сравнение средних величин концентрации крупных и мелких ЦИК в сыворотке крови здоровых, больных шизофренией и всех членов в обеих семьях с положительной наследственной историей шизофрении, взятых вместе, и в норме. а р< 0.332,1=982, ь р< 0.371, 1=0.93; с р< 0.578,1 = 0.564; л р< 0.00000007, 1=6.74; с р< 0.003, 1=3.65;' р< 0.0000001, 1 = 7.69

Аналогичное заключение следует при статистической обработке данных по каждой из исследуемых семей в отдельности. Как следует из результатов анализа, представленных в таблице 7, средняя величина концентрации крупных ЦИК в преде-

Таблица 7.

Случай Концентрация ЦИК, А^, (М±т)

Семья X Семья У

а Крупные ЦИК Мелкие ЦИК а Крупные ЦИК Мелкие ЦИК

Все субъекты 12 0.172+0.020" 0.88 Ш.086" 12 0.264±0.0219 0.574Ю.0551

Здоровые субъекты 8 0.150±0.019ъ 0.750+0.066' 8 0.276+0.032ь 0.600+0.059к

Больные шизофренией 4 0.211±0.05с 1.11010.189* 4 0.240М.0201 0.521Ю.1511

Результаты статистического анализа данных, полученных при определении концентрации крупных и мелких ЦИК в сыворотке крови членов семей с положительной наследственной историей шизофрении.

Характерная для нормы средняя концентрация ЦИК в сыворотке крови: 0.250 ■> Аш (й^деоп с! а!., 1977)

" р<0.00096, ¡=3.86 *р<0.0000004, ¡=7.34 9 р<0.530, (=0.64 1 р<0.000006, ¡=5.90 " р<0.0000004, 1=9.78 ' р<0.00000008, ¡=¡4.11 * р<0.428, (=0.82 к р<0.0001, 1=5.31 ср<0.471, ¡=0.77 Г р<0.004, (=4.54 ' р<0.502, ¡=0.714 ' р<0.044, ¡=2.54

лах каждой семьи с положительной наследственной историей шизофрении соответствует норме, независимо от того, проводилась ли статистическая обработка по группам здоровых, больных субъектов или всех членов семьи.

Что касается средней величины концентрации мелких ЦИК, то для больных членов обследуемых семей это значение приблизительно в 4.4 (в случае семьи X; р<0.004, t = 4.54) и в .2.1 раза (в случае семьи У; р<0.044, t = 2.54) превышает характерный для нормы уровень. В случае здоровых су&ьектов средняя величина концентрации крупных ЦИК в сыворотке кровн в 3 (для семьи X; р<0.00000008, t= 14.11) и 2.4 раза (для семьи У; р<0.0001, t = 5.31) ниже, по сравнению с нормой. Рассчеты, проведенные с учетом всех членов обследуемых семей с положительной наследственной историей шизофрении, показали, что для семьи X средняя величина концентрации мелких ЦИК в сыворотке крови в 3.5 (р<0.0000004, t = 7.34), а дня семьи У в 2.3 (р<0.000006, t = 5.90) раза выше характерного для нормы уровня. Несмотря на малую выборку в каждом вариационном ряду, полученные данные "крайне" достоверны.

Идентификация основных АГ белковой природы в составе ЦИК, изолированных из крови членов семей с положительной наследственной историей шизофрени

Сравнительный анализ белкового состава крупных и мелких ЦИК, выделенных из сыворотки крови членов исследуемых семей с положительной наследственной историей шизофрении и здоровых лиц контрольной группы добровольцев посредством ЭФ в ПААГ в присутствии ДС-Na, позволил выявить и у больных, и у здоровых членов семей наличие специфических белковых полос с молекулярной массой 51 КДа (в случае крупных комплексов) и 158 кДа (в случае мелких комплексов), отсутствующих в составе ЦИК, выделенных из крови субъектов группы здоровых добровольцев. Поскольку относительная подвижность отмеченных белковых полос не зависала от того, обрабатывала ли предварительно комплексы только ДС-Na либо ДС-Na с БМЭ, мы пришли к выводу, что каждый из идентифицированных АГ представляет собой белок, состоящий из одной полицептидной цепи.

Рисунки 6 и 7 наглядным образом демонстрируют результаты этой части исследования.

Старт

I I

1000

&

а

I II

I I

I

1111 I I «III 1111 1111

Финиш -►

г в б а

....... I------

0.2 0.4 0.6 0.8 Относительная подвижность

Рисунок 6. Сравнительный анализ белкового состава мелких ЦИК, выделенных и» сыворотки крови членов обеих семей с положительной наследственной историей шизофрении и здоровых лиц контрольной группы, посредством ЭФ в ПААГ (7%) в присутствии ДС-№.

А — диаграмма, полученная в результате среднестатистической обработки электрофоре грамм белков ЦИК, выделенных из сыворотки крови членов обеих семей (а,в; п = 23) и лиц контрольной группы (б,Г п = 10).

(в,г) - ЦИК предварительно инкубировали с ДС- (а,б) - ЦИК предварительно инкубировали с ДС- Ыа и БМЭ.

Б — определение молекулярной массы белковых полос, характерных для ЦИК, выделенных из сыворотки крови членов обеих семей. Для построения калибровочной кривой ЭФ в ПААГ (7%) в присутствии ДС-№ были подвергнуты стандартные белки с известными молекулярными массами, обработанные идентично ЦИК.

(1) — миозин, (2) — белок 158 кДа, (3) - (3-галактозидаза, (4) — фосфорилаза В, (5) — бычий сывороточный альбумин, (6) - яичный альбумин, (7) - карбоангидраза.

Старт

I II

I

I I I

100 ,--------

и в

т §

к а.

I

II I

I

I

I I I I I II

II

Финиш

-

г в б а

0.2 0.4 0.6 0.8 Относительная подвижность

А

Рисунок 7. Сравнительный анализ белкового состава крупных ЦИК, выделенных из сыворотки крови членов обеих семей с поло-жительной наследственной историей шизофрении и лиц контрольной группы, посредством ЭФ в ПААГ (11%) в присутствии ДС-№.

А — диаграмма, полученная в результате среднестатистической обработки электрофоре грамм белков ЦИК, выделенных из сыворотки крови членов обеих семей (а,в; п=23) и лиц контрольной группы (б,г; п= 10).

(в,г) - ЦИК предварительно инкубировали с ДС- Ыа; (а,б) - ЦИК предварительно инкубировали с ДС- Ь'а и БМЭ.

Б — определение молекулярной массы белковых полос, характерных дм ЦИК, выделенных из сыворотки крови членов обеих семей. Для построения калибровочной кривой ЭФ в ПААГ (7%) в присутствии ДС-№ были подвергнуты стандартные белки с известными молекулярными массами, обработанные идентично ЦИК.

(1) — бычий сывороточный альбумин, (2) - белок 51 кДа, (3) - яичный альбумин, (4) -лизоцим, (5) - трипсиноген, (6) - к-лактальбумин.

АУТОАНТИТЕЛА К СПЕЦИФИЧНЫМ ДЛЯ МОЗГА БЕЛКАМ В КРОВИ У ЧЛЕНОВ СЕМЕЙ С ПОЛОЖИТЕЛЬНОЙ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ИСТОРИЕЙ ШИЗОФРЕНИИ

Методом двойной иммунодиффузии на агаре при использовании суммарного экстракта водорастворимых и слабо связанных с мембраной белков головного мозга и фракции иммуноглобулинов G, выделенной из крови хаждого из членов обследуемых семей, исследовалась возможность наличия у них мозг-специфичных AT. В качестве контроля использовали фракцию иммуноглобулинов G, выделенную из крови группы здоровых добровольцев. Отметим, что определенный фоновый уровень аугоантител к мозг-специфичным белкам обнаруживался и во фракции иммуноглобулинов G, выделенной из крови группы здоровых добровольцев. Последнее находится в соответствии с результатами исследований последних лет, показавших, что в крови у здоровых лиц всегда имеется определенный процент аутоангител к ряду специфичных для мозга АГ. Предполагается, что эта аутоантитела формируют сигнальную систему организма: в случае развития патологических процессов, приводящих к нарушению структурно-функциональной целостности ГЭБ, наличие в периферической крови аутоангител к мозг-специфичным белкам позволяет повысить скорость и эффективность иммунного ответа, что является для организма сигналом к мобилизации его защитных, регуляторных и компенсаторных функций (Stewart, 1994; Levy-Soussan et al, 1996). Очень важно, что во фракции иммуноглобулинов G у всех исследуемых членов семей с положительной наследственной историей шизофрении был обнаружен высокий титр аугоантител к мозг-специфичным белкам, на два порядка превышающий титр отмеченных аугоантител в крови здоровых добровольцев.

Результаты вышеописанных экспериментов являются еще одним подтверждением существенной роли аутоиммунных процессов в патогенезе шизофрении и развития этих процессов не только на периферии, но и на уровне ЦНС. Следует отметить, что результаты, представленные в настоящей работе, были подтверждены недавно проведенными в нашей лаборатории экспериментами (Бояджян и др., 1999) по определению концентрации (п = 40) и антигенного состава крупных и мелких ЦИК (п= 10) в сыворотке крови больных с положительной наследственной историей шизофрении — пациентов Нубарашенской Республиканской психиатрической больницы МЗ РА

Очевидно, что повышенное содержание мелких ЦИК н аутоантител к мозг-специфичным белкам не только отражает патогенез шизофрении, но и ассоциируют с положительной наследственной историей этого заболевания. Последнее является весомым свидетельством в пользу аутоиммунной этиологии шизофрении.

К сожалению, вышеотмечешше параметры не могут быть использованы нн для диагностирования, ни для прогнозирования шизофрении, поскольку не являются специфичными для данной патологии. Однако, как показал сравнительный анализ литературных данных по антигенному составу ЦИК при ряде заболеваний (Maidment et al, 1981; Zhen et al, 1983; Chakrabarty, 1983; Maury & Teppo, 1984; Maury & Teppo, 1985; Baughn et al, 1986; Rodahl & Iversen, 1986; Melsom et al, 1987; Procaccia et al, 1988; Nerurkar et al, 1989; Coyle et al, 1990; Tereshchenko, 1991; Bartoloni et al. 1993; Lumanmaki, 1993; Wahren et al, 1994; Raja et al, 1995; Madan et al, 1997; Zeng et al, 1997; Bakunts et al, 1999; Mkitchyan et al, 2000; Аракелян и др., 2000), антигенный состав ЦИК в случае шизофрении является достаточно специфичным критерием и может быть весьма успешно применен в целях диагностики и прогноза.

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Для шизофрении характерен низкий уровень активности дофамин-Р-монооксигеназы в крови, в среднем в 2 раза ниже характерного для нормы значения. Низкий уровень активности фермента отражает патогенез шизофрении, но не ассоциирует с положительной наследственной историей этого заболевания.

2. Уровень активности дофамин-р-монооксигеназы в крови является эффективным критерием при диагностировании шизофрении и дифференциальной диагностике психозов трех различных этиологии (органические психозы, психозы, обусловленные нарушением мозгового кровообращения, психозы наблюдаемые при шизофрении).

3. Аутоиммунные реакции являются одним из этиологических факторов шизофрении:

S повышенный уровень мелких циркулирующих иммунных комплексов в крови при шизофрении, в среднем в 3 раза превышающий характерное для нормы значение, ассоциирует с положительной наследственной историей этого заболевания;

S для больных шизофренией и их здоровых родственников, по сравнению с нормой, характерен высокий титр аутоавтител к мозг-специфичным антигенам в сыворотке крови.

4. Антигенный состав циркулирующих в крови крупных и мелких иммунных комплексов может являться эффективным критерием при диагностировании и прогнозировании шизофрении:

S в составе крупных иммунных комплексов, циркулирующих в крови у больных шизофренией и их здоровых родственников обнаруживается специфичный антиген белковой природы с молекулярной массой 51 кДа, состоящий из одной полипептид ной цепи; V в составе мелких иммунных комплексов, циркулирующих в крови у больных шизофренией и их здоровых родственников, обнаруживается специфичный антиген белковой природы с молекулярной массой 158 кДа, состоящий из одной полипептидной цепи.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Маилян К.Р., Бояджяв АС., Мелик-Пашаян М.А, Айвазян В.А, Карагезян К.Г. О возможной роли дофамин-р-моноокснгеказы в патогенезе шизофрении. // Доклады Академии Наук (РАН РФ), 1995, Т.342, N6, С.833-834.

2. Boyajian AS., Maylian K.R., Aivazyan V.A, Melic-Pasbajian M.A, Ahababjan AA, Arakelyan K.A Changes in blood dopamine-p-monooxygenase activity under schizophrenia and organic psychosis. // Abstracts of the X Congress of Psychiatry, Madrid, 1996, V.2, P.108.

3. Melik-Pashayan M.A., Boyajian AS., Pogosyan AG., Aivazyan V.A, Maylian K.R., Petrosyan S.H., Ahababian A.A., Aiakelian K.A Comparative investigation of noradrenaline synthesizing enzyme activity under the different psychoneurological disorders. // Abstracts of the First Congress of International Brain Research Organization of Armenia. Yerevan, Armenia, 1996, P.46.

4. Маилян K.P. Дофамин-р-монооксигеназа при семейных формах шизофрении. // Материалы конференции, посвященной 30-летию со дня основания Института Молекулярной биологии НАН РА 1997, С.36.

5. Maylian K.R., Melik-Pashayan MA, Bakunts H.O., Aivazian V.A., Boyajian A.S., Pogossian AG., Abababiaa AA. Molecular mechanisms of catecholamine metabolism disturbances upon different neurological disorders. // Collected Scienffiic Articles of Yerevan State Medical University, 1997, V.l, P.128-131.

6. Аветисян Г.В., Аракеляя А.А., Маилян, K.P., Айвазян B.A., Бояджян AC. Исследования аутоиммунны* процессов при семейных формах шизофрении. // Тезисы докладов и сообщений юбилейной научной конференции, посвященной 35-летию ЕрГИУВ-НИЗ МЗ РА, 1998, С.33-34.

7. Boyajian A.S., Maylian K.R, Pogosyan AG., Avetisyan G.V., Sarkisyan E.M.,Aivazyan V.A. Autoimmune processes in schizophrenia. // 12-th General Meeting ol the European Society for Neurochemistry, St. Petersburg, Russia, 1998, J. Neurocbemistry, V.71, N.l, S23j.

8. Маилян K.P. Определение уровня активность дофамин-р-монооксигеназы в крови у больных с органическими поражениями головного мозга. // Сборник, статей молодых научных сотрудников НАН РА (Естественные науки), 1999, Т. 1, С. 108-111.

9. Melik-Pachaian М.А., Maelian К. L'etude comparative des niveaux dopamine-p-monooxygenases dans le serum du sang pendant la forme sporadique et l'histoire positive de famille de schizophrenia //II Symposium Armeno-Suisse, Erevan, 1999, P.37-38.

10.Mayilyan K., Aivazyan V., Avetisyan G., Poghosyan A, Boyajian A Families with positive history of schizophrenia: immunological and biochemical studies. // Abstracts of Presentations of 8" World Congress on Psychiatric Genetics, Versailles, France, 2000, American Journal of Medical Genetics, 2000, V.96, N.4, P237.

11. Маилян K.P., Бояджян AC., Мелик-Пашаян M.A, Айвазян В.А, Агабабян AA Активность дофамин-Р-конооксигеназы в крови у больных с органическими психозами. // Ж. Невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2000, Т.8, N100, С.51-52.

1ШЗ>ПФ1ШЬР

C(iqn$pbQ[iuuG úinuii(np qnpániQbmpjuiü L qquigi3niGeiuj|iü гцпртйЬргцй

рОпфш^рш1|шй fuuiûquipntùGbpml hr>cjhl|Uiû hMuiGiyiipjiuO t, npfi dujnujûqûujG haiúujp щштши^ишОштги t ui|_b[ujjfiü U ûniuiujGin qbûbpfi nprçujljfi huii[ujpujl|iuqd:

Quin dujijujCiujl|ujL|fig ujuiuiIjbpu]gni.úGbp[>, ^hQitpbClfiwjli dwöuuGujl| rtfitni{nnî Ьй opqiuG|iqú|i |ii5ruGiuj|iQ l)UipqœL|fi6ujt(fi Ь niqbrifi GbipninpiuGudfMbpujjfiG huiduit^ujpqhpli ItwrmigilujößuijfiQ U

QGuijiuô 2hqn$pbüf>uijti t^riujuipnqböhqh mumilOujulipnLpjuiOp фршрЬрЦпп piuqûuipiuGuil) t)l)iû|it|ujljujû U фпрйшпии^шС ии[)ш|.ОЬр[1й, Gbpljwjnitfij ujju hfii|ujürjnLp]UiG швш^шдйий Ii qiupquigiiuiû hfiiügniü qQI^uuô |Зп|.Ы)ПцичЬй ujujpnúhtiiujüfiqOúhpp rjbiiLu ицодшршОфиФ ¿bü: ^buiLujpuip, OfiO¿ uijuop ¿fiqn^phGhujjti IfuGtunpnjúuiG U ш^илпрпгйшй uuinijq m opjhl^wt11! ¿шфшОЬгйЬр qnjmpjtuG

И^иллшйрп Ьфрфи4 t гЬчгфрЬСфиц)! tpfininqhuilfUjQ U ujmpnqSCbinfil) ¿шфшй^йЬпЬ hujjmIjujpbpi5ujG|! quit cp^mTifiqilfi ühjpntiúriLOujjfiD l|Lupqujtlftüiijl|[i pürpnjnq úfi ¿шрр Ijb0uupfii5fnul|iu0 L hi3.nLÜr|nq^L|iuü gmguiQ|i2&tph:

1<ш1лшрфи0 niuniúüuiufipnipjujú mpninLÜßübpo i|l|iujniii Ьй, np ztiqnÍpbDhiujnil hfiilmOqübpji uipjujû r\n^ijj6(iü-3-i3nQnog'j|iqbCa!qt\ ujlfinfulnipjni.üQ uinnri?bbpti huii3bi3iuumpjuui5p ûi[ujqntij t, Ь rjuu шщшдтдпиЗ t ujjrj J>bpi5bÛLnfi tuJl)UJÜ rjhpQ Q^l^ujó hlniwtirynpjnjü muipnqbGbqnul SnLjg t трфиб, np rjn$ují5hú-P-únCnofio(K>hDuiq|i uiljUifiilmpjwG üilujqniÚQ aipjujö úbg 1|ujujijluô ¿t 2hQn$Pbühwjb rvfiujLjaJÜ рОтшОЫ)шО ujwindrupjujû hbin:

luuuiniumijiuô t 2^n$pbQ[iuijni4 hfvjuíGqGbp(i ujpjutG ryi3>u]übGß-t5nGnopu|iqbßuiq|) иий^йшй jnipuuhiuuilinipjnLÜQ: ^binLuipaip. uiju дтдшСфгС Iwnii t o<nnuiqflpdi(bt hü^ujbu ш(ишпрп213шй, ujjüiqbu ti bpbp imuppbp tp (ininq.fi iu niObgriq фи(1(ъпдйЬр(1

uituppbpuiljfií ш(ишпрп213шй hiuúuip:

итшдф^ bG илцшдпцдйЬр гЬчпфрЫф1-"!!1 tptinmujpnqbúfcqniú mruinntii5m.Quij|iQ uipngbuübpli twl|uiG rvbph фршрЬрцщ: UuiuGuii|npuiu(bu, gmjg t трфиб, np 2hqn3>pbG|iu))tiü pûnpnj t uipjujG úhj «фпрр» 2р2ш0шпп^ fiúniGuiifiG IjnüuiibpuOfcpfi U пщЬц^Ь jnipuihiuuinilj uuqfunujljnLgGbpf) GliiuinúiuOp hujIjwúuipúfiüGbpti pujpäp fumnipjniûn, U np гци uipuiuigniniú t n¿ úfKujG hhitmüqnipjuiti ujuipnqbGbqo, ищи 1|шиц|ш0 t гНпфрЗДшФ f)pujljujû püinaiübtjuiG ujiumdnipjuiG hbin: »-IbpçhCu hmûrjfiuu]Gni.i5 t 2hqn}>pbG[iiujti ujniLnn(ii3niGujjt)G tp{ininq|iuijtt tauGpuilßlui il4uijni.pjm.GQ:

flpnzilbi к 2jiqn$pbGtimj¡i г,рш^шй pûmuiGbliuiO muiuiúmpjniG niGbgnq qbprtiuumuiGübph Ii hh^JÜiv U ШПП115 шйгцийЬЬрЬ ujpjuiG zPEwGuinnri «йЬ6» U «ifinjp» (lünLOujjhü ljnúuj|hpuübpf) hwljujqbOiujfiQ L|tuqi5[i: flujnuJGujufipnLpjwú mpq;mfj£nLÚ gnLjg l трф[, np шju gniguiGfaß L|iiipnq t huignqnipjuúp 1)ьршг!ць[ hh^grjnlpjiug 1)шй(ипрп215шс utufumnpnjúuiü ощштшцоьрпц: