Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Показатели неспецифической защиты поросят при введении иммуномодуляторов полисахаридной и пептидо-полисахаридной природы

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Показатели неспецифической защиты поросят при введении иммуномодуляторов полисахаридной и пептидо-полисахаридной природы"

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ СССР

ЛЕНИНГРАДСКИИ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ИНСТИТУТ

На правах рукописи

ГУЩИНА Эльвира Васильевна

УДК 619:577.1:612.017.11:615.35/37:636.4

ПОКАЗАТЕЛИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ЗАЩИТЫ ПОРОСЯТ ПРИ ВВЕДЕНИИ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ ПОЛИСАХАРИДНОЙ И ПЕПТИДО-ПОЛИСАХАРИДНОЙ ПРИРОДЫ

Специальность: 03.00.04 — Биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

ЛЕНИНГРАД 1991

Работа выполнена на кафедре биохимии Ленинградского ветеринарного института.

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Рудаков В. В.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Хованских А. Е.; доктор биологических наук, старший научный сотрудник Колабская Л. С.

Ведущая организация •— Московская ордена Трудового Красного Знамени ветеринарная академия им. К- И. Скрябина.

Защита диссертации состоится » ¿Ййа1991 г.

в 13 час. на заседании Специализированного совета К/120.20.01 в Ленинградском ветеринарном институте по адресу: 196084 Ленинград, Московский пр., 112.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ленинградского ветеринарного института.

Автореферат разослан

Ученый секретарь Специализированного совета, доцент

Эйсымонт Т. А.

I. ОКШ ХАРАКТВРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Увеличеиие прсизэадства животноводческой ироду имя в настоящее время возможно лишь на пути расширенного воспроизводства поголовья животных а повишеиая ях продуктивности. При этом важную роль играет не только количество приплода, но и получение здоровых, жизнеспособных животных.

Необходимость развития исследований в области проблем вмму-номодуляции в ветеринарии объясняется тем, что при интенсивной системе ведения животноводства ряд производственных ситуаций приводят к ослаблению адаптационных механизмов животных в результате снижения иммунологической реактивности и естественной, резистентности. Вследствие этого у них создаются предпосылки для возникновения как незаразных, так и' инфекционных болезней, а также снижается их про'дуктивность (Маслянко Р. Л., 1979; Коромыслов Г.Ф. и соавт., 1983; 1983; Карпуть И.М. я соавт., 1989; Могялен-ко А.Ф., 1990). В связи с этим поиск путей повышения защитных сил организма животных имеет важное научное и практическое значение.

Одной яз наиболее рентабельных отраслей, животноводства является свиноводство. Известно однако, что отход подсосных поросят достигает 30-40/2 от всех народившихся (Снитянский В.В. ,1987; Федоров Ю.Н., 1988; Алтухов Н.М., 1989), более ЪО% всех потерь молодняка приходятся на период до 10-15-дневного возраста (Алтухов Н.М., 1989; Карпуть Й.М. я соавт., 1989; Урбан В.П. и соавт., 1989). Поэтому наиболее актуальным является аспект рехуларования естественных защитных сил и иммунного ответа организма животных в ранний период.

В настоящее время создано целое научное направление, призванное объединить накопленные данные о факторах неспецифической стимуляции и в определенной степени объяснить механизмы их действия. Ряд из них, такие, как левамизол, пирогенал, продигиозан, нуклеат натрия, тямоген я др. £ 1986;

сЬ?ЯГ 1988; Лютинский С.И., Хавинсон В.Х., 1989; Скрипняк Э.П., 1989; Карпенко Л.¡0., 1990; Могиленко А.Ф., 1990) нашли широкое применение в ветеринарной практике.

В последние годы для повышения естественной резистентности организма животных начали применяться стимуляторы неспецифичес-

кой ьацигы лшшсйхарвдной л лептидо-полнсыхаридной природы. Орала лих такие, как хитозан и лептидоглякан.. Дшшие о влиянии &iüx , щкишратов на основные факторы неспеш^ичаской защити подучень ь основном на мышах, а впоследствии зти реэуяьта-ги били гю.цгьер.кде~ Hii и исследованиях tn. i\t%o с использованием клоток человека. Имеются немногочисленные данные о применении хитозана и пеитидо-гликана в ветеринарной практике (Лохкана Г.Г., I'jöS; 1иейбак A.B. и соавт., £909; Урбан В.П. и соавт., I98-J; Буянов A.A. и соавт.,' laal).

Однако биохимические аспекты проблемы в этих работах не нашли достаточного отражения. Выяснение характера изменений биохимических и иммунологических показателей естественной резистентности животных под влиянием данных имкуномодуляторое представляется весьма важным. У поросят подсосного периода этот вопрос практически не изучен, что я послужило основанием для постановки наших исследований.

Цель и задачи исследования. Целью наших исследований явилось научение биохимических показателей естественной резистентности для обоснования возможности коррекции возрастных иммунодефицитных • состояний подсосных поросят препаратами полисахаридной (хитозан) а пептидо-лолисахародной (пелтидогликан) природа.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- определить биохимические и иммунологические показатели.наиболее полно отражающие состояние резистентности организма контрольных животных и при введении иммуномодуляторов:' содержание общего белка сыворотки крови, комплекса белков, адсорбирующихся на эиыозане, иммуноглобулинов класса G, бактерицидной активности сыворотки крови, лизоцимной активности сыворотки крови, витамина А, пероксидазкой активности лейкоцитов крови, Т- и В-лш$оцитов; '

- изучить изменение данных показателей в разные сроки посла • введения препаратов;

- определить влияние введения хитозана и пептидогликана на производственные показатели - среднесуточные привесы и сохранность молодняка свиней;

- провести сравнительную оценку влияния хитозана и пептидо-гликана на некоторые показатели йеспецифичеокой защити поросят я. производственные показатели;

- исследовать корреляционную зависимость показателей нееде-

пяфлчоскпй защити поросят в разиие сроки после введения uotnea-харпдных имчунокодуляторов. '

Научная новизна. В результате проведенных исследований впервые изучено влияние хятозана я пептидог.'^кана на такие покизато-ли неспеп,прической зашиты поросят, как концентрация комплекса белков, адсорбирующихся на зимозане, иммуноглобулинов класса G, витамина А сыворотки крови, бактерицидная и лизоцпмная активность сыворотки крови, пероксидазная активность лейкоцитов, содержание Г- и B-лимфоцитов в крови поросят.

На основании биохимических и производственных показателей (сохранность поголовья и среднесуточные привеси) обоснована возможность и целесообразность коррекции иммунодефицита поросят с помощью применения указанных препаратов.

Практическая ценность работы. Проведенные исследования раскрывают особенности изменения естественной резистентности организма поросят под воздействием иммуномодулируюцпх препаратов хи-тозана и пептидогликана и обосновывают целесообразность включения данных препаратов в комплекс лечебно-профилактических мероприятий на свиноводческих комплексах.

Внедрение. Результаты' исследований внедрены в совхозе "Восточный" Тосненского района Ленинградской области 'i в учебный процесс при чтений лекций на кафедре биохимии Ленинградского ветеринарного института.

Апробация -работ». Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на II межвузовской научно-практической конференции "Новые фармакологические средства в ветеринарии", Ленинград (1990), на III научной конференции молодых ученых Ленинградского ветеринарного института (1989), на научной конференции профессорско-преподавательского состава Кировского сельскохозяйственного института (1990), на научной конференции профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников и аспирантов ЛБЙ "Актуальные проблемы ветеринарии" (1991). ■ 1

Публикации. Основные материалы диссертации изложены в 5 научных работах.

Структура и объем диссертации. Материал изложен на 143 страницах машинописного текста, содержит 20 таблиц, 10 рисунков. Диссертационная работа состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материал и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение, лчподн и практические предложе-

tiiaя, описок литературы, приложение. Список литературы включает >'46 источников, в том числе 75 на иностранных языках.

Вопросы, выносимые на защиту:

1. Влияние хитоэана на пиказатдлм естественной рвЗИСТеШГНй-оТЙ поросят.

2. Влияние пептидоглпкана на показателя естественной резистентности поросят.'

3. Сравнительная оценка влияния изученных препаратов ка ос-' ионные показатели естественной резистентности поросят.

П. СОБСТВЕННЫЙ 1Ш1КДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований

Исследования проводились в свинокомплексе "Восточный" Тос-ненского района Ленинградской области, а также на базе кафедры биохимии Ленинградского ветеринарного института и на ¿азе лаборатории иммунологии Военно-медицинской академии им.С.(¿.Кирова.

Комплекс "Восточный" является хозяйством с замкнутым производственным циклом. Предназначен для круглосуточного безвыгульного содержания животных. Породный состав поголовья - ландрас,крупная белая я их гибрида. Технология производства предусматривает отъем поросят в возрасте 26 суток.

Всем втапам исследований предшествовал подбор животных по принципу аналогов .(порода, возраст, живая масса, общее развитиё).

. Перед введением препаратов и перед каадым взятием крови проводили осмотр животных и термометрию. В опыты брали только клинически вдоровых поро.сят. •

Для изучения влияния хитозана и пептидогликана на биохимические показатели естественной резистентности были сформированы ; 3 группы- животных но 10 поросят: I группа - контрольная, 2 груд-па - подопытная (вводили хятозан), 3 группа г подопытная (вводили пептидогликан).

Пептидогликан состоит из повторяющихся дисахаридных звеньев, в которых л/ -ацетил-глшозаыин связан р -/1-4/-гликозидноЙ связью с У-ацетилмурамовой кислотой. Сшивку гликановых цепей осуществляют короткие пептиды из дикарбоновых кислот.

Нами использован пет.-идогликян' с молекулярной массой 10 кД. Препарат изготовлен и предоставлен нам ВНИИ особо чистых биопрепаратов (г.Ленинград). Введение препарата осуществляли трехкрат-5 но внутримышечно по следующая схема: 1-е введение - в день .фор-

маропаиия бокса (1-2 сутки); 2-о вреденио - ч^рея 40 часо»; 3-» пведешие - на 7-8 сутки в дозе по 1Ш мкг/кг живоИ (,;ассн.

Хлтоэлн - гомоцоллсахорид, построен)!!-.!1, из мономеров глы*оэ-омина. Препарат изготовлен и предоставлен лабораторией ш.луноло-гли В,;едА им.ü.M.Кирова. вводили препарат однократно внутрижбоч-ио в день формировании бокса (1-2 сутки) в дозе 1,5 мг/кг живой массы.

Оптимальные доз« и схема введения установлены на лабораторных животных, а также в опытах на поросятах в условиях примышленного свиноводства в совместных исследованиях кафедры эпизоотологии JIBÍI, а также БН;Ш особо чистых биопрепаратов и лаборатории иммунологии БМедА им.С.М.Кирова.

Кровь животных каждой группы, исследовали: в I-2-днопноч возрасте (перед введением препаратов); в IÜ-днешом возрасте (на 8-9 сутки после введения хитозана, на 2-3 сутки после последнего введения пептндогллканл); н 20-дневном воз рвоте (на '10-19 сутки после введения хитозана, на 12-13 сутки после последнего введения пептидогликана); в 26-дневном возрасте (на 24-25 сутки посла введения хитозана, на 19-20 сутки после последнего введения пептидогликана).

Исследования на протяжении всего периода наблюдения проведены на одних и-тек же животных.

Кровь для исследования брали утром перед кормлением аз венозного синуса глзза по методу Дж.Понда (1943).

Для оценки неспецитЕ'ической резистентности определяли: содержание обиего белка сыворотки крови поросят биуреговой реакцией (Кондрахин И.П., 1985); концентрацию комплекса белков, адсорбирующихся на энмозане по методу Ногребняка Л.Л. в модификации Гетце (1977); содержание иммуноглобулинов класса G по методу /Па*иеИ<п.< Ir ei.af (1965); лизоцимную активность сыворотки крови поросят по методу Доропейчук В.Г. (1968); бактерицидную активность "сыворотки по методу Смирновой О.В. и Кузьминой Т.П. (1979); содержание витамина А по методу Бессея в модификации Анисовой A.A. (1979); пероксицазную активность лейкоцитов по методу

Jl- (1967); содержание Т-лимьоцдтов (Е-РОК) методом спонтанного розеткообразояания с эритроцитами барана ^cric¿a.¿/¿/., 1972); содержание В-лим1 оцитоп (iiAC-РОК) методом розеткообразо-вания с эритроцитами барана, обработанными антителами с комплементом {íñt(r>i-ec ¿?. , 1970).

и

Лаборатории« исследования нроледодш на Оо лшиотных, Всего ьицолнеии ¿¿^ биохимических и иммунологических анализов. Оиатно-нри.'.шшдешшн ироьеркн проведена на Х9Ь;> га ватных. ¿зучеии слоду-клше экономические показатели: средцеоу1-ошшД правое и сохран-нооть поросят в контрольно;'! и подопытных группах. ¡1-д основа этих данных рассчитан экономачиский от ириме»'«пин хитоаана и

иептлдогликана ь хогшлокоа кероариягяй по профилактике заболеваний молодняка свиной.

Цифровой материал ооработш статистически по общепринятым методикам (каков И.О., Жаков В.»1., 1Уйо). Коэффициенты корреляции рассчитывались на ЭЬ.',1 ,Мскра"-СК-^.6.

ш. РЬЗУЛЬТА'Ш '¡¡ССЛйдОЬЛНаИ

3.1. Гуморальные показатели неспещф1ческой защити норослт при воздействии хитоаана

3.1.1. Влияние хлтозана на содержание общего болка, комплекса белков, адсорбирущлхся на зймоэане и иммуноглобулинов класса в- в сыворотке крови поросят

В результате проведенных исследовании установлено, что у поросят в возрасте 1-2 дней до введения хитоаана достоверных различий в содержании изученных белков в сыворотке крови подопытных и контрольных поросят не наблюдалось.

У поросят 1-2-гДневного. возраста выявлено довольно высокое ' .содержание общего белка сыворотки крови - от 59,97-1,01 г/л до 62,40-2,92 г/л в различных группах. Концентрация комплекса белков, адсорбирующихся на зимозане, составила от □¿524^0,040 г/л до 0,579*0,045 г/л. В 1-2-дневном возрасте обнаружено максимальное значение иммуноглобулинов класса & за весь исследованный пе- ' риод - от 34,52^4,44 г/л до 28,24^4,89 г/л, что составило 61$ -от содержания общего белка сыворотки крови.

Высокое содержание изученных нами белков в 1-2-дневном возрасте подтверждает 4акт, что процесс наибольшего всасывания белков молозива в желудочно-кишечном тракте поросят происходит ]в'" первые 24 часа жизни и продолжается до 96 часов.

К 10-дневному возрасту, .при общей тенденции к некоторому снижению, наолюдлются достоверные различия концентрации общего белка в сыворотке крови улеотних подопытной.и контрольной групп. Значении'показателя у поросят подопытной группы на 1&% выше (Р^0,05), чем у контрольных животных.

В эт"« к'з возг<«отд ияблпччето« г/лксшнльш.-й о'Иокт порлшл-

ПИЯ СОДСР'ЛНИН КОМПЮКСЛ бйЛКОН» одоорбирукидчхся ['.'I 3RM0-J4II« после введения хптозапа в подошино!' группе по сравнению с контрольной - 21,22 (1- у- 0,05).

Содержание иммуноглобулинев класса 0 в сыворотке крови подопытных поросят в Iü-дневном возрасте на 40,9¿ выше (Р<0,05), чем у контрольных.

В возрасте 20 дней достоверных различий в концентрации общего белка в скворотке крови животных обеих групп нет. рязнша в содержании комплекса белков, адсорбирующихся на s.w.oaaiw у подопытных животных по сравнению с контрольным,! составляет Ь,Ь/, (Р > 0,05). К отъему животных (86 дней) такие не наблюдается достоверных различий в концентрации общего белка и комплекса белков, адсорбирующихся на зямозане-в сыворотке крови подопытных и контрольных животных.

К 20-дневному возрасту разница в содержании иммуноглобулинов класса С в сыворотке крови подопытных я контрольных поросят возрастает до 81,12 (Р ¿ 0,02), а к 26-дневному возрасту снова сокращается до 46,4$ (Р с 0,05).

3.1.2. Влияние хитозача на лизопш.луы и бjr.vc;':шидную активность сыворотки крови поросят ü

Полученные данные о бактерицида о ti и лизоцйшюй активности сыворотки крови поросят подопытной в контрольной групп показывают, что хлтоэан оказывает стимулирующее действие на эти показатели неспецифяческоН зашиты организуя.

Если до введения препарата на не наблюдали достоверных различий в уровне атмх показателей у поросят подопытной и контрольной групп, то в 10-дновном возрасте отмечается значительное повышение. лизоцикной активности сыворотки кроЕи у поросят подопытной группы по сравнению.с контрольной - 50$ (Р ¿ 0,05).

Ь 20 и 26-дневном возрасте активность лизоцима в сыворотке • крови подопытных животвых была соответственно на 55,4$ (Р^ 0,01) и на 45,8% (р с 0,01) выше, чем у контрольных.

В целом отмечается отчетливая тенденция к увеличению лизо-цимной активности сыворотки крови поросят с возрастом как в подопытной, так и в контрольной группах. За период с I-2-дневного до 26-дневного возраста лизоцимная активность возрастала в 2,5 раза в контрольной группе и в 3,9 раза в подопытной.

Бактерицидная активность сыпохотки крови у подопытных живот-

них упкжи бьла ыпьв, чаи у контрольных а Хи-днввном возрасте на 14, b.!i (i'^- o,üö), и £0-дневном ъийрастй - иа 49,(r.i (Р <■ 0,01), в ¿б-дпеаком возраста - на 16,4$ IP-й. 0.0b).

И«к Пйььшеная оакиеривддноЯ актлыости сисорогки в пидояит-ниР группе отмечается в ¡¿О-дн^ином воараств (ни 0-9 сутки посла гтчценмя -xitTOcrtü'i).

3.1.3. Влипни« хптоэаиа на концентрации вич'амени А а сини-ротке КрОИИ поросят

/.нчле.з подученных данных покачивает, что хитизан окн-лиьнат пиюуцтельное вчпшше на содержание витамина А в кропи иодош^тних пороснт.

Начиная с 10-даешого возраста отаьчаытся довольно существенные различия в величине данного показателя у поросят подопытной и контрольной трупа, У подопытных поросят содержание витамина А составляет 25,9öil,70 мкгД, что на 27,1% выше (P^0,G5), чем у контрольных. В 20-дневном возрасте эта разница сохраняется и даже немного увеличивается до 28,0,2 (Р < 0,05).

Тенденция к увеличению содержания витамина А у подопытных поросят сохраняется и к 26-Дневному возрасту.

3.2. Клеточные показателя наспецнфической защиты поросят при воздействии хитозана

Введение иммуномодулирующего препарата хитоэана оказывает существенное влияние, на пероксидаэную активность лейкоцитов крови поросят.

Если в контрольной группе уровень пероксидазной активности ни протяжении верго изучаемого периода изменяется незначительно, то в подопытной группе в 10-дневном возрасте наблюдается пик активности ферментов. Активность перокоидаз лейкоцитов в этом воз- ; расте у подопытных животных на 72,5$ выше (Р-£ 0,01), чем у контрольных.

Далее к объему поросят перокендазная активность лейкоцитов •крови в подопытной группе снижается. Ее разница у подопытных и контрольных животных составляет 52,7)5 (Р 0,01) в 20-дневном ' возрасте и 33,3,? (Р-^ 0,02) в 26-дневном возрасте.

Установлено такие, что хитоэан повышает содержание розетко-обрззущях Т- а В-лим1оцитоа. Надо бте.етить, что начиная с 10-дневного возраста, отмечается на очень значителыюэ, но довольно . устойчивое повышение содержания как Т-, так и В-лша(.оцитов в крови подопытных животных на ö-Ш (Р< 0,05). Характеризуя влияние

хитозана ни содержание В-лим| оштв, моыш нацелить нес-начп-к- <н. -' ний ПИК. Так В 10-ДНеВНОМ ВОЬрЯСТй У ПОДОПЫТНЫХ ПОрОСЯ'Г СОдер-л.1-ваа В-лим|пиитов на 1о,3,2 вине (Р 0,05), чем у контрольны;-:.

К отъему поросят о дней) содержание В-лш.н-опитип н контрольной группе с 1-2-дневного возраста увеличилось м 2,2 р-чзг,, а н подопытной - в 2,4 раза. За этот же период содержание Т-лиг.'Хопи-тов в контрольной группе возросло в 1,6 разя, а в подопытной -- п 1,9 раза. Таким образом нарастание содержания роэегкоадр&аушвх Б-лимфоцитое.идет быстрее, чем Г-лимфмштов в обеих группах.

3.3. Гуморальные показателя наспецафпческой защити поросят

при воздействии пептидогликана 3.3.1. Влияние пептидогликана на содержание общего балка, комплекса белков, адсорбирующихся на эимозане и иммуноглобулина п класса 3- в сыворотке кропи поросят Результаты провиденных исследований показали, что до введения препарата нет достоверных различий в содержании изученных белков в сыворотке кроЕИ поросят обеих групп.

Наибольшее повышение содержания общего белка в подопытной группе по сравнению с контрольной наблюдается в 10-дневном возрасте (на 2-3 сутки после последнего введения препарата) и составляет 14,2/5 (Р<£ 0,05). В остальные исследованные возраста эта раз' шща недостоверна и составляет- около Ъ%.

Концентрация комплекса бедкоз, адсорбирующихся на эимозане в сыворотке крови также достоверно выше в подопытной группе лишь в возрасте 10 дней и составляет 26,?/$ (Р < 0,05). В 20 и 26-дневном возрасте разница недостоверна - от Ы до 11%, .

Для иммуноглобулинов класса С пик повышения их содержания в сыворотке крови подопытных животных по сравнению с контрольными отмечается в 20-дневном возрасте (па 12-13 сутки после последнего введения препарата) и составляет 45,9;? (Р< 0,02). В 10-дке-вдом возрасте разница в величине показателя составляла 26,6л (Р 0,05), а к отъему поросят снизилась до 22,9,2 (Р ^ 0,05).

■ 3.3.2. Влияние пептидогликана на лизоцимную и бактерицид-V ную активность сыворотки крови поросят Лиэоцимиан активность сыворотки крови поросят под влиянием пептидогликана изменяется довольно-значительно.

К 10-днеппому возрасту этот показатель у поросят подопытной группы бил на '\UJji выше (Р«£ 0,01), чем контрольной. При. дальнейшем анализе данных надо отмстить постоянное увеличение лпзоцим-

Iii

н и'.' актщ'ноот» сыворотки крои а у поросят подомптной группы ко ср'итоня» с контрольноü. Так к 2шдн<шюму возрасту эта раънппа составляет 73, f;* (Р <~ 0,ÜI), а к /Л-дпоЕНому возрасту показатель почти в 2 роза вини у ьодошшшх поросят, чем у контрольных.

Ь п;;лим наблюдается постоянный рост лизошшнол активности сньормки крови в обеих группах на протяжен.!'.! всего изученного пир.'.одч. Однако с момента первого введения пептидогликана (1-2 (•утки) до периода огьома поросят лизоадмноя акгяяиозгь сыворотки крови у подопытных животных возросла в 5,1 раза, а у контрольных всего в 2,5 раза.

Анализ бактерицидной активности сыворотки крови показал,что к IO-дневному возрасту она на 18,2,2 нише (Р 0,05) у подопытных животных," чем у контрольных. В 20-дневном возрасте эта разница становится еще более значительной и составляет 53,6$ (Р<;0,01). К отьску поросят бактерицидная активность сыворотки крова у под-опитных и контрольных животных довольно значительно сокращается, но и ь этом возрасте у подопытных поросят она выше, чем у контрольных на 24,3,» (Р ^ 0,0о).

3.3.3. Влияние'пептидогликана на содержание витамина А

в сыворотке крови поросят Анализ полученных данных дает основание сделать вывод о'положительном влияния пептидогликана на содержание витамина А в сыворотке крови поросят. Уже в IQ-дяевном возрасте отмечается достоверное увеличение данного показателя в подопытной группе по сравнению с контрольной на 25,2/S (Р < 0,05).

К 20-дневному возрасту, несмотря на общее снижение содержания .витамина А в обеих группах по сравнению с периодом новорож-денностя, в подопытной группе данный показатель остается на 20,4> выше (Р«^ 0,05), чем в контрольной.

Тенденция к снижению содержания витамина А в сыворотке крова поросят сохраняется и к 26-дневному возрасту. В этом возрасте разница в содержании витамина h в сыворотке крови подопытных и контрольных животных составляет I7,4;!i (Р > 0,05).

3,4. Клеточные показатели неспецифической защиты поросят

при воздействии пептидогликана Пероксидазная активность лейкоцитов крови поросят возрастает при введении пептидогликана. Так к IO-дневному возрасту активность ферментов у подопытных поросят была на 63,5$ выше (Р<0,01), чек у контрольных.

о

и

Далео МроСЛОЖИи.-т'СЯ ШЦЫННЫ СЫ»еНШ1 разшщп Л юМНШЬ« ' показателя в подопытной и контрольной группах. Однако и ¿О-дн^в-ном и к '¿б-дневному возрасту эу.1 рознице вчв локально аначн'м.'и-.-на и составляет 40,1:.,4 (Р-г. 0,01) и 26,3.; (Р4 0,0б) псьтздгсъ-ынии.

[.¡аксиу.альное повыкенле актинчости цогментон ьнблйдаетон на '¿-Л сутки после последнего рыдания препарата.

Характеризуя шшянле пептндоглякана на Х-систему лшОшиусь, мо:гно отметить, что до введения препарата в обеих группах достоверных различий в количестве розпткообразующих'Т-лнь'.стштов не на&чидлетоя. С Ю-днорного возраста у подопытных животных наблю дается повышение содержания Т-лим£оиитов, которое сохрс.няется до отъема поросят и состямлег 10-12% (Р< 0,05).

Под действием пелтлдогликяна происходят изменения и в В-сн-стеке лимфоцитов, К 10-дневному возрасту отмечается повышение показателя на 1'?%а{ (Р<с 0,05). Это самая высокая разница в содержании В-лимфоцитов п подопытной и контрольной группах за изученный период. Далее наоладяотся тенденция к уменьшению числа розег-. косбразукнцпх В-лимфоцитов в крови подопытных поросят.-К отгему содержание В-ликфоцигов лишь на 8,0^ виде (Р > 0,05) у подопытных животных, чем у контрольных.

Анализ динамики показателя в исследованные возраста показывает, что увеличение количества В-лимФоцигов идет бист-ее, чен Г-лимфопитов. Так с 1-2-дневноуо возраста к отъему поросят количество розеткообразующих ^-лимфоцитов в крови подопытных поросят увеличилось в 1,8 раза, а количество В-л1хфоздтов - в 2,о раза.

3.5. Сравнительная оценка влияния хитозана и пептидоглака-' - на на основные показатели естественной резистентности _ поросят

Исследования действия иммуномодулягорсв проводились параллельно. Контроль был общим.

■ Установлено, что для таких показателей как содержание общего белка сыворотки крови, комплекса белков, адсорбирующихся на эимозане, бактерицидной активности сыворотки крови, содержания Т- и В-лимфоцитов, нет значительных различий при действии обоих препаратов'. Они оказывают определенное стимулирущее воздействии на даннке показатели, которое проявляется в увеличении их значений в подопытных группах по сравнению с контрольной.

Дня концентрации общего белка, комплекса белков, лдои^'ыру»)--щихся на зимпзанп в сыворотка крови поросят, а также содержания

Ь-Л'И-.'.илигиБ нлцбольаде различия к величине показателей нодопнт-ня.ч п контрольной групп наблюдаются в Ю-дпвваом возрасте (на 6-У с;,"] ни после предания хитозана и па 2-3 сутки после последнего введет'я неитидоглидана).

У'.чя бактерицидной активности сыворотки крови эта разница является максимальной в 20-дневном возрасте (на 16-19 сутки после шипения хитозана и на 12-13 сутки после последнего введения пеп-т!11',оглакана.

Дчя содержания Г-лимфоцитов нельзя выделить определенного на-1;з. ДашшН показатель в подопигних группах с 10-дневного возраста до отъема на 8-12^ вше (Р < О,об), чем в контрольно"!.

При анализе данных о.влиянии пептндогликана и хитозана на со-деряашю витамина А в сыворотке крови поросят необходимо отметить, что оба препарата оказывают заметное влияние на данный показатель кесп'лшрической резистентности. Гак в 10-дневном возрасте концентрация витамина А у подопытных животных была выше на 25,2% (Р^ 0,05) после введения пептидоглг.кана и на 27,1;? 0,05) после внеде.ния хитозана, чем у контрольных. В 20-дневном возрасте эта разница-составляет соответственно 20,4$ и 28,С$ (Р< 0,05). К отъему поросят разница в обеих подопытных группах недостоверна и сос-танляег 13-17$.

Наибольшее повышение пероксидазной активности лейкоцитов крова подопытных поросят по сравнению с контрольными животными отмечается в обеих подопытных группах в возрасте 10 дней (на 8-9 сутки после введения хитозана и на 2-3 сутки после последнего введения пептндогликана). Однако после -введения хитозана эта разница несколько выше_(72,5$; ? 0,01), чем после введения пептидогля-кана (63,5$; ? ■С 0,01). К отъему поросят сохраняется достоверно более высокая активность пероксидаз лейкоцитов крови подопытных животных по сравнению с контрольными и составляет 36,3$ после введения хитозана и 28,3% после введения пептндогликана.

Наиболее существенные отличия влияния пептндогликана и хитозана отмечаются в отношении иммуноглобулинов класса б.

'Хитозан в большей степени, чем пептидогликан, влияет на концентрацию иммуноглобулинов класса 0 в сыворотке крови поросят. Так в 10-дневном возрасте концентрация иммуноглобулинов б в подопытной группе после введения хитозана была на 46,9$ выше (Р ^ 0,05), чем в контрольной, а после ввецения пептндогликана - лишь

ьа 26,8;* (Р 0,05).

К 20-дневному возрасту разница показателя в подопытных груп пах после введения хитозана в пептидогликана возрастает и наорется максимальной - 81,15? (Р^ 0,01) я 45,9;£ (Р ^ 0,02) соответственно по сравнению с контролем. К отъему поросят (26 дней) эта разниыа снова сокращается я составляет 46,4^ после введения хнтозана и 22,9;? после введения пептидогликана.

Более значительное повышение содержания иммуноглобулинов класса С по сравнению с содержанием Т- а В-лимфоцитов, по всей вероятности, можно объяснить активизацией под действием иммуио-модуляторов механизма синтеза иммуноглобулинов класса 0. О тесной связи содержания Т- и В-лимфоцитов и концентрации иммуноглобулинов С говорят данные о корреляционной зависимости показателей несдецифмческой заздгы поросят в контрольной группе я после введения препаратов. Так в подопытной группе выявлена сильная прямая зависимость между Т-лимфоцатами и иммуноглобулинами.С (% = 0,648; Р 0,01) на 8-9 сутки после введения хитозана я между иммуноглобулинами класса 6 я В-лшфоцатаыи (г = 0,746; Р^0,001) на 18-19 сутки, а также на 24-25 сутки ( г = 0,552; Р < 0,02) после введения этого препарата.

Отмечается также прямая корреляционная зависимость между Ти В-лиыфоцатами ( г = 0,746; ? < 0,001) на 2-3 сутки после последнего введения пептидогликана у подопытных поросят. В контрольной группе такой закономерности не наблюдается.

Обращает на себя внимание и такой показатель, как лизоцим-ная активность сыворотки крови. Она- возрастает о 1-2-дневного возраота на протяженна всего изучаемого периода к 26-дневному возрасту в подопытной группе после введения пептидогликана в 5,1 раза,' после введения хитозана - в 3,9 раза, в контрольной группе - лишь в 2,5 раза.

■ 3.6. Фактический экономический эффект в расчете на одно аи-вотное от применения хитозана составил 2,68 руб., от применения пептидогликана - 1,55 руб.

выводи

I. Применение хитозана и пептидогликана .с 1-2-дневного возраста поросят в условиях свиноводческого комплекса ведет к увеличению основных биохимических показателей неспецифической защити

сфг'шятп хам тих и способствует повкзошт их сохранности а про-д>г.тлгж'<пч. Это позволяет считать целосообразнод 5:сппльзо?аип9 л-шшк нитратов для профилактика возрастных имкуноло}«шшшх СССТОЯНРИ подсосных поросят.

2. Наибольшее влияние хитозана на основные, показатели нсспе-т«| .;чоск«:й защити поросят проявляется на 8-1У сутки после введения препарата. Так на 8-9 сутки отмечается достоверное повкрение "одержания общего белка сыворотки крови на 16;?, комплекса белков, :1Лсо[бируюи1ихсл на зимозане на 21,2%', пероксидазной активности лейкоцитов крови на 72,55? у подопытных поросят по сравнению с контрольными. На 18-19 сутки после введения хитозана отмечается достоверное повышение содержания иммуноглобулинов класса С на 81,1$, ляз'оцимной активности сыворотки на 55,4$, бактерицидной активности сыворотки на концентрации витамина на 2Ь%,

3. Наибольшее влияние лепгидоглякана на основные показатели неспеци'Х'Ической защиты поросят проявляется на 2-13 сутки после последнего введения препарата. Гак на 2-3 сутки отмечается достоверное повышение содержания общего белка сыворотки крови на 14,2,?, комплекса белков, адсорбирующихся'на зимозане на 26,7$, витамина

Л сыворотки крови на 25,2$, пероксидазной активности лейкоцитов крови подопытных поросят по сравнению с контрольными на 63, На 12-13 сутки после последнего введения препарата отмечается достоверное повышение у подопытных животных содержания иммуноглобулинов класса Б на 45,9$, лизоцямной активности сыворотки на бактерицидной активности сыворотки крови на 53,6$.'

4. Установлено, что при общем однонаправленном влиянии обоих препаратов на основные гуморальные и клеточные показатели естественной резистентности, хятозан оказывает большее влияние- на содержание иммуноглобулинов класса в и пероксидэзную активность лейкоцитов крови, а пептидогликан - на лизоцимную активность сыворотки крови поросят.

5. Применение хитозана и пептидогликана в предложенных дозах способствует повышению сохранности и среднесуточных привесов поросят. •

К отъему поросят после введения хитозана сохранность повысилась на 4,9%, среднесуточные провесы- на 16 г. Введение пептидогликана позволяет повысить сохранность поросят на 4,3?, а среднесуточные привесы - на 25 г.

ИолучзшшЙ экономаческий э^вкт в расчете на одно iiuib.aii.i-. ■систавил: от применения хитозана - 2,6 руб., пептпдигликана -1,55 руб.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРДДЛОлЙ 1ИЯ

1. Проведенные на молодняке свиней экспериментальна и производственные испытания препаратов хитозана и пспти'доглакана с учетом данних биохимических и иммунологических исследований позволяют считать обоснованным и целесообразным применение нрепаря -тон для профилактики заболеваний молодняка свиней.

2. Материалы диссертации могут быть использовани в учебнсм процессе при чтении лекций и проведении лабораторпо-практпчзскнх занятий по биохимии и другим дисциплинам в ветеринарных а зооветеринарных институтах.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ. ПО ТЕЖ ДЦйСШлЩМ

1. Рутина Э.В. Влияние хитозана на концентрацию комплекса белков,адсорбирующихся на зимозане л витамина в сыворотке крови поросят// Сб.научн.тр./ Лешшгр.вет.ин-т. - 1990. - Bun.LI. - С. 28-31.

2. Гуадна Э.В. Влияние хитозана на пероксидазную активность лейкоцитов крови поросят// Сб.научн.тр./ Леяингр.вет.ш-т. -I9SO. - Вып.106. - С.76-79.

3. Гущина Э.В. Влияние иммуноыодулятора пептидогликана(ПЛГ) на бактерицидную и лизоцимную активность,сыворотки крови поросят //Научя.ко»|ер.проф.-препод.состава, научн.сотр.и аспирантов Ж*! "Актуальные проблемы ветеринарии": Тез.докл. - Л.ДЭСО. - С.27-28.

-1. Гущина З.В., Прокопьев A.A., Шейбак В.В. Влияние пептпцо-гликана (ППГ) а хитозана (ХИТ) на кяеточине факторы естественной резистентности поросят// 2-я межвуз.ноучко-практ.кон1ер."Ноьие Фармакологические средства л ветеринарии": Тез.докл.-Л., 1990.-С.34-35.

5, Рудаков В.В".,Карпенко 1.Ю. ,Гудина Э.В.Влияние иш/уномоду-лятороа различной химичеокой структуры на некоторые биохимические показатели естественной резистентности свиней// 2-я мажвуз.науч-но-практ.кон-Тер, "Новые фармакологические средства ветеринарии": Тез.докл. - Л., 1990. - С.60-81.