Перинатально значимые вирусы в этиологии врожденных пороков развития при фетоинфантильных потерях

Ивахнишина, Наталья Михайловна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Перинатально значимые вирусы в этиологии врожденных пороков развития при фетоинфантильных потерях
ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Автореферат диссертации по теме "Перинатально значимые вирусы в этиологии врожденных пороков развития при фетоинфантильных потерях"

На правах рукописи

Ивахнишина Наталья Михайловна

Перинатально значимые вирусы в этиологии врожденных пороков развития при фегоинфантильных потерях

03.00.06 - вирусология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва-2009

003481363

Работа выполнена в Хабаровском филиале Государственного учреждения Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте охраны материнства и детства

Научный руководитель:

Доктор медицинских наук, профессор Когут Елена Павловна Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук Королев Михаил Борисович Доктор медицинских нау к, профессор Нисевич Лия Львовна

Ведущая организация:

Федеральное государственное учреждение науки «Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича» Роспротребкадзора

Защита диссертации состоится /(2009 г. в 71/ ~ часов на заседании Диссертационного Совета Д. 001.026.01 при Институте полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН (142782, Московская область).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного учреждения Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов имени М.П. Чумакова РАМН

Автореферат диссертации разослан

Ученый секретарь диссертационного совеп кандидат биологических наук

/%.к. Медн<

1едкина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. В настоящее время, как в нашей стране, так и за рубежом врожденные пороки развития (ВПР) приобретают все больший удельный вес в структуре детской заболеваемости и смертности (О. В. Антонов, 2005; В. И. Кулаков, 2005; Н. С. Демикова, 2005; А. В, Патрушев, 2006; Н. В. Зарецкая, 2007; М М. Adams, 2001). По данным ВОЗ частота врожденных пороков развития колеблется в различных странах от 2,7 до 16,3 %. Пятилетний мониторинг врожденных пороков развитая в России (1999-2003 гг.), в котором участвовало 35 субъектов Российской федерации, показал, что частота ВПР среди мертворожденных составляет 2,18%о, что более, чем в 12 раз выше, чем у живорожденных (0,18%о). Отмечены значительные колебания частот ВПР по регионам - от 7,3%о до 40,0%о, при среднем показателе -16,6 на 1000 рождений (Н.С. Демикова, 2005). Врожденные пороки развитая (ВПР) являются одной из главных причин смерти детей в перинатальном (29%) и младенческом периоде (23%) в Дальневосточном федеральном округе (В.К Козлов, 2004).

Известно, что формирование ВПР у детей происходит в значительной степени под воздействием генетических и средовых факторов, а также имеет мультафакториальную природу (В.А. Цинзерлинг, 2002; Н.П. Шабалов, Ю.В. Цвелев, 2004), при этом более 60,0% случаев с ВПР остаются нерасшифрованными (А.Ю. Мощинецкий, 1998). Для разработки методов их эффективной профилактики особую важность приобретает выявление причин и механизмов возникновения раннего нарушения эмбриогенеза, а также совершенствование предгравидарной подготовки женщин с целью выявления групп риска по реализации внутриутробной инфекции. Выяснение роли микроорганизмов в этиологии врожденных пороков и аномалий не теряет своей актуальности, так как может быть основанием для разработки этиотропного лечения жизнеспособных детей с ВПР и внутриутробной инфекцией (ВУИ).

Внедрение современных чувствительных и специфичных методов исследований позволяет более глубоко изучить роль инфекционных возбудителей как одну из основных причин врожденной патологии плода.

Цель исследования: Изучить роль вирусов в этиологии врожденных пороков развития и при инфекционно-воспалительных процессах у погибших плодов и детей в г. Хабаровске.

Задачи: '

1. Провести анализ частоты и структуры врожденных пороков и аномалий развития при антенатальной и перинатальной смертности в г. Хабаровске.

2. Усовершенствовать метод выявления инфекционных агентов при посмертном исследовании плодов и новорожденных с врожденными пороками развития и внутриутробной инфекцией.

3. ■ Изучить частоту и структуру инфекционных агентов в

патологоанатомическом материале при фетоинфантильных потерях, обусловленных врожденными пороками развития и внутриутробной инфекцией. '

4. Определить группы риска по формированию врожденных аномалий плодов у женщин с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом в зависимости от наличия маркеров вирусных инфекций.

Положения, выносимые на защиту:

1. Частота рождения детей с ВПР в г. Хабаровске имеет тенденцию к нарастанию.

2. Основной причиной фетоинфантильных потерь в г. Хабаровске является вирусная или вирусно-бактериальная инфекция.

3. Основными этиологическими агентами при ВПР и ВУИ являются вирусы простого герпеса, цитомегалии, вирус краснухи и энтеровирусы.

4. Вирусная инфекция у детей с врожденными пороками и аномалиями развития протекает как генерализованная: геномы вирусов обнаруживаются как в пораженном органе, так и в других органах и системах при сопутствующих воспалительно-дегенеративных изменениях.

5. У женщин с отягощенным акушерским гинекологическим анамнезом во время беременности происходит активизация хронической цитомегаловирусной и герпетической инфекции.

Научная новизна.

Впервые изучена частота и структура ВПР при антенатальной и перинатальной смертности в г. Хабаровске. Выявлена тенденция к нарастанию относительных показателей частоты ВПР при фетоинфантильных потерях за период с 1993 по 2006 год с 14,6% до 29,2%, при относительно стабильных (от 1,4 до 3,5%) показателях уровня ВПР, связанных с геномными и хромосомными аномалиями.

Впервые использован усовершенствованный нами способ для подготовки . патологоанатомического материала, что позволило повысить эффективность выделения нуклеиновых кислот вирусов.

Впервые на основании исследования содержания ДНК и РНК в патологоанатомическом материале изучена частота и структура широкого спектра патогенов вирусной природы в этиологии фетоинфантильных потерь при ВУИ и ВПР. Установлена ведущая роль вирусной инфекции в формировании системных и множественных ВПР.

Впервые выявлено сходство структуры антенатальной инфекции у детей и плодов с ВУИ и ВПР.

Впервые изучена роль вирусов Эпштейна-Барр, герпеса человека 6 типа и парвовируса В-19 в этиологии врожденных пороков и аномалий развития в г. Хабаровске.

Практическая значимость работы:

1. Установлено, что около половины детей с врожденными пороками и аномалиями развития погибают в возрасте от 28 дней до 1-го года жизни. Полученные данные о текущей генерализованной инфекции у детей с ВУИ и ВПР указывают на необходимость раннего проведения вирусологического обследования живорожденных детей с симптомами ВПР и ВУИ с последующим назначением противовирусного лечения, начиная с первых д ней жизни.

2. Выявление ведущего значения генерализованной вирусной инфекции как причины смерти детей дают основание рекомендовать вирусологическое исследование постморталыюго материала для уточнения этиологии нарушения антенатального развития плода и новорожденного с целью разработки программы подготовки женщины к последующей беременности.

3. Анализ анамнестических данных об исходном состоянии женщины необходим для прогноза степени риска развития ВПР и ВУИ у будущего ребенка.

4. Полученные в ходе исследования доказательства активизации хронической герпетической и другой инфекции уже в первом триместре беременности являются основанием рекомендовать вирусолого-серологическое обследование женщин групп риска с первых недель гестации для разработай в дальнейшем оптимальной программы наблюдения во время беременности.

5. Полученные доказательства эффективности генодиагностики вирусов и бактерий в ПЦР и повышения чувствительности метода обнаружения как ДНК, так и РНК при ранней обработке постмортального материала с применением дополнительного лизиса, позволяют рекомендовать его в лабораторной практике для скрининга на широкий спекгр патогенов.

Формы внедрения:

- Патент на изобретение №2292551 от 27.01.2007г. «Способ ранней диагностики внутриутробных инфекций у новорожденных».

- Информационно-методическое письмо «Клинический материал для диагностики вирусных и бактериальных инфекций, условия забора и транспортировки» г. Хабаровск, 2004. - 18с.

Апробация материалов диссертации:

Материалы диссертации представлены на конференции с международным участием «Комплексная оценка состояния здоровья детей и подростков в Дальневосточном регионе» (Хабаровск, 2004); на конференции по генодиагностике (Новосибирск, 2005); на научно-практической конференции «Актуальные проблемы охраны здоровья женшин и детей на современном этапе» (Хабаровск, 2006); на научно-практической конференции «Клинические и фундаментальные аспеюы состояния здоровья коренного и пришлого населения в Дальневосточном федеральном округе» (Хабаровск, 2007); на научно-практической конференции с международным участием «Роль вирусной и бактериальной инфекции в формировании перинатальной и соматической патологии у детей» (Хабаровск 2008).

Публикации^

По материалам диссертации опубликовано 16 работ, из них 4 работы - в журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объём диссертации.

иллюстрирована 32-я таблицами и 5-ю рисунками. Библиографический указатель включает 282 источника, из которых-191 - российский и 92-иностранных. Работа выполнена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований, грант 04-04-97006 «Оценка роли инфекционных факторов в формировании перинатальной смертности». «Приамурье - 2004», 2004-2005 гг. Г.Р. 0120.0-500685 и в соответствии с темой ИОМиД НИР 014 «Усовершенствование дородовой диагностики внутриутробных инфекций», выполненной в Хабаровском филиале Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН - НИИ охраны материнства и детства.

Материалы и методы исследования

Для определения частоты и структуры ВПР при фетоинфантильных потерях ретроспективно изучено 3762 протокола вскрытия погибших плодов с массой тела выше 500г и умерших новорожденных, проживших от нескольких минут до 7 дней за период с 1993 по 2006 годы. У 714 погибших детей с установленными врожденными пороками развития был проведен углубленный анализ причин перинатальной смерти. Для синдромологического анализа постмортального фенотипа в группе системных и множественных пороков развития использовали компьютерные базы данных «БупсНар) (Минск) и «ОМБ-иЮБ» (Лондон).

С целью определения частоты и структуры вирусной инфекции при фетоинфатильных потерях обусловленных ВПР и ВУИ методом ПОР исследован * секционный материал от 147 умерших плодов и новорожденных (1253 препарата •внутренних органов - головной мозг, сердце, легкое, печень, почка, селезенка, тнмус, плацента). Группу сравнения составил секционный материал (88 проб) от 11 плодов, полученных при прерывании беременности на 20-23 неделях гесгации по социальным показаниям и эмбриональный абортный материал от 70 случаев добровольного прерывания беременности на 5-12 неделях.

Для выбора оптимального метода выявления инфекционных агентов в патологоанатомическом материале проведено сравнение эффективности трех методов исследования: культурального метода (КМ), реакции иммунофлюоресценции (РИФ), полимеразной цепной реакции (ПЦР). В качестве модели индикаторов эффективности использованы эталонные вирусы: вирус простого герпеса 1 типа (штамм Л-2) и цитомегаловирус (штамм АД 169). Для накопления вирусов использована клеточная культура ФЭЧ (фибробласлы эмбриона человека), культуральные среды производства ГУЛ ИПВЭ им. М.П.Чумакова, РАМН, г. Москва.

Фрагменты органов от 15 погибших детей с подтвержденной в ПЦР вирусной инфекцией были параллельно исследованы методами РИФ, РНИФ мазковчппечатков и быстрым культуральным методом (БКМ). Для выявления антигенов вирусов в мазках-отпечатках и в клеточной культуре использовали тест-системы, разработанные в НИИ гриппа РАМН (ООО «Предприяте по производству диагностических препаратов», Санкт-Петербург). Для детекции антигенов СМУ использовали моноклональные анптгела против сверхраннего белка р72 СМУ, набор «ЦигомегаФлюоСкрин» (НИАРМЕДИК ПЛЮС, Москва).

Для оптимизации выделения нуклеиновых кислот (НК) из секционного материала 149 , фрагментов органов были исследованы с помощью 3-х вариантов подготовки гроб с применением диагностических наборов, разработанных разными фирмами: 1. Фенольно-

хлороформная экшракция с применением наборов «ВекгоДНК - экстракция», производства ЗАО «Вектор - Бесг», пос. Кольцово Новосибирской обл. Метод был нами модифицирован: фрагметы органов предварительно измельчались и обрабатывались лизирующим раствором (0,1% раствора саркозила, 0,5% DSN, l^MNaCl, 03 М NaOH, при t=+4°C в течение 16-18 ч). Способ был использован нами доя изучения этиологической струюуры фетоинфаншльных потерь (получен патент), 2. Фенольно-хлороформная обработка «ДНК/РНК экстракция», производства НПФ «Лигех», г. Москва, 3. Сорбционный метод, производство ООО «Изоген», г. Москва.

Для ПЦР использованы тест-системы АмплиСенс, производства ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, г. Москва с целью выявления ДНК или РЖ следующих возбудителей: Herpes simplex virus 1,2 (HSV), Cytomegalovirus (CMV), Epstein-Barr virus (EBV), Human herpes virus 6 type (HHV6), Human Influenza virus A(InfVA), Human Influenza virus B(InfVB), Human Respiratory Syncytial virus (HRSV), Enteroviruses (EVs), Parvovirus В19, Rubella virus (RuV), Chlamydia trachomatis (Ctr), Mycoplasma hominis (Mho), Mycoplasma genitalium (Mge), Ureaplasma urealyticum (Uur), Toxoplasma gondii (Tgo). Результаты ПЦР учитывали методом электрофореза в агарозном геле.

Для определения факторов риска у женщин с отягощенным акушерским анамнезом (ОАГА) проанализированы ретроспективно анамнестические данные 57 женщин с ОАГА (группа наблюдения) и 100 здоровых женщин.

Методом ПЦР исследованы эпителиоциты цервикального канала 165 беременных и небеременных женщин с ОАГА и 223 здоровых женщин на наличие ДНК вирусов герпеса 1,2 типов, цитомегаловируса, хламидий, микоплазм.

Для ПЦР Использовались тест-системы АмплиСенс, производства ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, г. Москва.

Сыворотки крови 462 беременных и небеременных женщин с ОАГА, а также здоровых женщин группы контроля исследованы иммуноферментным методом (ИФА) на присутствие антител классов Ig М и IgG к HSV, CMV, Rub, антител IglEM и IglEG к сверхранним белкам CMV, низкоавидных IgG к HSV-2, CMV и Rub, IgM, IgA, IgG к возбудителю хламидиоза - Chi. trachomatis, IgG, IgA к возбудителям M.hominis и Ur. urealyticum, IgM и IgG к возбудителю токсоплазмоза - Toxoplasma gondii (тест-системы производства ЗАО «Вектор-Бест» пос. Кольцово Новосибирской обл.

Анализ патологоанатомических данных проведен совместно с заведующей патологоанатомическим отделением ДККБ г. Хабаровска, врачом высшей категории Т.М. Бутко. Генетические исследования выполнены совместно с заведующим медико-генетической консультацией ГУЗ Перинатального центра, врачом высшей категории С.А.Гончаром.

Статистическая обработка полученных показателей проводилась с использованием методов вариационной статистики с расчетом относительных показателей и их ошибок, с оценкой достоверности различий по t-критерию Стьюдента. Обработка материала проводилась на ПК с применением пакета прикладных программ MicrosoftOffiisXP, «Statistica, версия 6,0».

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Частота и структура врожденных аномалий у погибших плодов и детей.

1. Динамика выявления врожденных дефектов при фетоинфан тильных потерях в 1993 - 2006 годах. Частота выявления ВПР при перинатальной и младенческой смертности в г.Хабаровске в 1993-2006 гг. увеличилась в 2 раза от 11,8 % - 14,8 % в 19931994 гг. до 29,2 % в 2006 году. Вместе с тем, частота ВПР, обусловленных генными и хромосомными синдромами, в указанные годы была практически на

одном уровне, составляя от 1,4 %до 3,5 % (рис.1).

Рис.1. Динамика выявления врожденных дефектов при фетоинфантильных потерях с 1993 по 2006 гг. (%). ВПР - врожденные пороки развития Это согласуется с данными В. А. Генетецкой (2003), указывающими на то, что уровень хромосомных аномалий у новорожденных не превышает 4% - 5% и с теорией Г. Меллера о постоянном «грузе наследственности» (Н.П.Дубинин, 1994). В группе с синдромом гаметопатии (таблица 1.) нарушения в результате

Таблица 1

Структура врожденных дефектов развития при фетоинфантильных потерях

N Количество

п/п Синдромы случаев

Абс. %±ш

1. Гаметопатии, в том числе: 108 15,1 ± 1,3

- хромосомные синдромы 49 6,8 ±2,4

- моногенные синдромы 32 4,5 ±1,9

-синдромы с неуточненным типом наследования 27 3,8 ± 1,8

2. Бласто - и эмбриопатии, в том числе: 421 58.9 ± 1,8

- изолированные и системные ВПР 234 32,7 ± 2,2

- неклассифицированные комплексы МВПР 187 26,2 ±2,1

3. Фетопатии 185 25,9 ± 1,6

4. Всего 714 100-0,6

хромосомных аббераций и аномалий диагностированы как синдром Дауна (39), синдром Патау (5), синдром Эдвардса (4), синдром Тернера (1). Синдром Дауна среди 714 умерших детей выявлен с частотой 5,5±0,9%, в то время как среди живых детей по данным литературы этот синдром встречается в 0,14 % (ЕДЧерствый, 1996).

Генные нарушения, передающиеся по аутосомно-рецессивному типам наследования и с неуточненным типом наследования, составили 4,5±1,9 % и 3,8±1,8 % соответственно. Среди них наиболее часто встречались муковисцидоз (8), синдром Ди Джоржи (7), голопрозэнцефалия (4). Бласто- и эмбриопатии выявлены в 58,9 ±1,8 % случаев от общего количества обследованных умерших плодов и детей. ВПР были как системными (32,7 ±2,2 %), так и множественными (26,2 ± 2,1%). У 185 умерших детей (25,9±1,6%) диагностированы дисплазии внутренних органов.

Диспластические процессы выявлялись также в 40,7±4,7% случаев у детей в группе с гаметопатиями, в 55,6±3,2% случаев в группе детей с изолированными и в 100% случаев в группе детей с множественными пороками развития.

Изолированные и системные ВПР центральной нервной системы (анэнцефалия, спинномозговая грыжа, гидроцефалия и др.) обнаружены в 11,2±1,2% случаев из 714 обследованных. Практически с той же частотой (10,I±I,I%) выявлялись пороки развития сердца и сосудов: дефект межжелудочковой перегородки как изолированный, так и сочетающийся с патологией аорты и других сосудов. Полученные данные согласуются с исследованиями, проведенными в г. Хабаровске в 1998г. А. Ю. Мощинецким, в которых пороки ЦНС (20,2%) и ВПС (15,9%) среди умерших и жизнеспособных детей с ВПР были преобладающими. (А.Ю.Мощинецкий, 1998). Мониторинг врожденных пороков в других регионах России также показывает, что пороки ЦНС и ССС занимают ведущее место во врожденной патологии (Павлова Н.Г., 2008; Панкова Е.Е., 2008).

ВПР органов пищеварения (пищевода, различных отделов кишечника, печени и поджелудочной железы), органов дыхания и почек выявлены в 4,9±0,8%, 3,5±0,7% и 3,1±0,7% соответственно.

Множественные пороки развитая обнаружены в 26,2 ±2,1% случаев. Чаще всего обнаруживали сочетанные врожденные пороки ЦНС и органов чувств (41 Д±3,5%), а также эндокринной (41,7±4,6%) и мочевыделтельной (30,5±33%) систем.

При патоморфологическом исследовании внутренних органов 606 детей с бласто-, эмбрио-, и фетопатиями обнаружены генерализованные воспалительные гнойно-некротические, продуктивные, гранулематозные изменения одновременно в нескольких органах, миелоз. Эти данные свидетельствуют о возможной инфекционной природе ВПР у умерших детей.

2. Сравнение методов выявления вирусов в секционном материале.

Для выбора оптимального метода обследования патолого-анатомического материала проведено исследование эффективности выявления инфекционных агентов различными методами диагностики (рис. 2,3).

12 3-4 дни

Рис.2. Выявление вируса простого герпеса различными методами.

ПЦР - полимеразная цепная реакция; РИФ - реакция иммунофлюоресценции; КМ -

культуральный метод В культурах клеток ФЭЧ, зараженных вирусом простого герпеса ДНК вируса в ПЦР выявлялась в I день исследования в 50% зараженных пробирок, на 3-й день во всех, в то время как цитопатогенный эффект и положительная реакция иммунофлюоресценции появились на 2-3 день. При заражении культуры ФЭЧ цитомегаловирусом ДНК в культуральной жидкости диагностировали на 2-й - 3-й день после заражения в 10 - 70% пробирок, а на четвертый день ПЦР была положительна во всех зараженных культурах. Антиген СМУ методом РИФ обнаруживали на 3-й - 5-й день - в 20 - 90% пробирок, на 6-й день - во всех пробирках. ЦПД СМУ выявляли на 4 день, на 7-й день ЦПД вируса наблюдали во всех пробирках.

1 2 3 4 5 6 7 дни

Рис.3. Выявление цитомегаловируса различными методами.

ПЦР - полимеразная цепная реакция; РИФ - реакция иммунофлюоресценции; КМ -

культуральный метод Следует учесть, что в данном эксперименте нами использованы эталонные штаммы с высокой концентрацией вируса. Если заражать культуру клеток нативным клиническим материалом, содержащем вирус в более низком титре, то момент появления цитопатогенного эффекта и положительной реакции флюоресценции может наступить значительно позже.

Таким образом, выявление эталонных штаммов HSV и CMV установлено всеми 3-я методами. Самым быстрым и эффективным был метод ПЦР.

Первичная обработка инфекционного материала, особенно патологоанатомического, является решающим звеном в получении ДНК и РНК для проведения ПЦР (А. Р. Мавзютов, Бондаренко В.М., 2003; Ребргасов и соавт., 2009). Для выделения нуклеиновых кислот из секционного материала нами был разработан эффективный метод получения очищенных препаратов ДНК или РНК, использованный в дальнейшем для ранней диагностики внутриутробных инфекций у новорожденных (патент № 2292551 от 27 января 2007г. «Способ ранней диагностики внутриутробных инфекций у новорожденных»). Он заключается в применении предварительного лизиса раствором (0,1% раствора сарко -зила, 0,5% DSN, 1,5 М NaCl, 03 М NaOH, при t=+4°С в течение 16-18 ч) измельченного фрагмента органа с последующей фенольно-хлороформной обработкой. Эффективность метода была изучена путем сравнения 3 вариантов подготовки проб, предложенных различными фирмами -производителями/таблица 2).

Таблица 2

Эффективность различных способов выделения ДНК вируса простого герпеса I и 2 типов и цитомегаловируса из секционного материала (%±ш)

Предварительный лизис Фенольная экстрак Сорбционный

+ фенольная экстракция ция «ДНК/РНК- метод

Органы «Векто РНК- экстракция» «Gene Рак™

(п = 59) экстракция» RNA PCR test»

1 2 3 4 5 6

HSV CMV HSV CMV HSV CMV

Тимус 3,4±2,3 1,7±1,6 3,4±2,3 1,7±1,6 0 0

Мозг 6,8±3,2 3,4±2,3 6,8±3,2 0 3,4±2,3 0

Сердце 1,7±1,6 0 0 0 0 0

Легкое 5,0±2,8 5,0±2,8 0 1,7±1,6 1,7±1,6 0

Почка 6,8±3,2 3,4±2,3 3,4±2,3 1,7±1,6 0 0

Печень 6,8±3,2 3,4±2,3 3,4±2,3 3,4±2,3 1,7±1,6 1,7±1,6

Селезенка 3,4±2,3 1,7±1,6 0 1,7±1,6 0 0

Плацента 1,7±1,6 0 0 0 0 0

Всего 35,6±6,2*" 18,6±5,1 17,0±4,9 10,2±3,9 6,8±3,3 1,7±1,6

Примечание: * - р < 0,05 - между 1 и 3; " - р < 0,01 - между 1 и 5

Критерием эффективности считали частоту выявления фрагментов генома вирусов. При использовании модифицированного нами метода подготовки проб секционного материала частота выявления ДНК- содержащих вирусов (вируса простого герпеса и цитомегаловируса) достоверно повышалась (р < 0,05; р < 0,01).

При сравнении различных способов подготовки проб секционного материала с целью выделения РНК- содержащих вирусов были использованы тест-системы тех же фирм - производителей (таблица 3.). В результате проведенного анализа установлено, что РНК энтеровирусов выявляли достоверно чаще с помощью предложенного нами модифицированного способа обработай материала, чем остальными методами (р< 0,01). РНК вируса краснухи также выявляли в 1,5 - 3 раза чаще первым методом, чем вторым и третьим.

Таблица 3

Эффективность различных способов выделения РНК энтеровирусов и вируса краснухи из секционного материала (%±т)

Предварительный Фенольная экстрак Сорбционный

лизис +фенольная ция «ДНК/РНК- метод «Gene Рак™

Органы экстракция «Векто экстракция» RNA PCR test»

(п = 60) РНК- экстракция»

I 2 3 4 5 6

E/v Rub. E/v Rub. E/v Rub.

Мозг l,7±l,6 I,7±l,6 l,7±l,6 1,7±1,6 0 0

Сердце 5,0±2,8 0 0 0 0 0

Легкое 0 0 l,7±l,6 0 0 0

Почка 6,7±3,0 l,7±l,6 3,3±2,3 l,7±l,6 l,7±l,6 0

Печень 3,3±2,3 0 0 0 0 0

Селезенка 6,7±3,0_ l,7±l,6 0 0 0 l,7±l,6

Всего 28,4±5,8* 5,1±2,8 5,l±2,8 3,3±2,3 l,7±l,7 1,7±1,7

Примечание: * - р < 0,01 - между 1 и 3, 1 и 5.

Известно, что РНК быстро разрушается вследствие воздействия РНК-каз, присутствующих во всех тканях.. С целью устранения возможных потерь РНК, нами применена ранняя обработка секционного материала - не более, чем через 4 часа после аутопсии без предварительного замораживания материала. РНК энтеровирусов выявляли в 2,4 раза чаще, РНК вируса краснухи выявляли только при раннем способе обработки по сравнению с материалом, хранившемся 3-5 суток при -20°С (Рис.4).

18 16 14 12, 10 8 6 4 2 О

Рис.4 выявление РНК вирусов при ранней обработке.

Таким образом, разработанный нами технически простой метод первичной обработки секционного материала (предварительный лизис и фенольно-хлороформная обработка с последующей преципитацией этанолом) необходим для успешного лизиса клеток, денатурации белков, нейтрализации и удаления примесей. В результате повышается эффективность выявления как ДНК -, так и РНК-геномных вирусов.

Выявление внутриутробной инфекции у погибших плодов и ( новорожденных методом ПЦР.

Результаты изучения частоты и структуры выделенных геномов инфекционных агентов представлены в таблице 4.

Таблица 4

Частота выявления ДНК и РНК инфекционных агентов в секционном материале при ВПР и признаках ВУИ (абс. % ± ш) методом ПЦР

ДНК/РНК ВПР ВУИ Эмбриональная

инфекционных (n=77) (n=70) ткань (n=70)

возбудителей 1 2 3

HSV 15,6±4,1* 21,4 ±4,9** 4,29 ±2,4

CMV 16,9±4,3* 17,4 ±4,5** 2,85 ±2,0

HHV6 6,5±2,8 5,7 ±2,4 0

EBV 1,3±1,3 0 0

EVs 15,6±4,1* 27,1±5,3** 2,85 ±2,0

RuV 12,9±3,8* 12,9 ±4,0** 4,29 ±2,4

B-19 1,3±1,3 0 0

InfVA 1,3±1,3 0 0

InfVB 0 1,4 ±1,4 0

HRSV, 3,9±2,2 1,4 ±1,4 0 + 5,4

Ctr (n = 30) 13,3±6,2 13,3 ±6,2 12,86 ±4,4

Mge (n = 30) 3,3±3,3 0 0

Mho (n = 30) 3,3±3,3 13,3 ±6,2 5,71 ±2,8

Uur (n = 30) 20,0±7,3 16,7 ±6,8 1,43 ± 1,4

TOXO (n = 30) 3,3±3,3 0 0

Примечание: * - р < 0,05 между 1 и 3 группой; ** - р < 0,05 между 2 и 3 группой

При исследовании секционного материала от плодов и новорожденных с ВПР чаще всего выявляли вирусы, входящие в семейство Негрезушёае. Они были представлены вирусами ЦМВ (16,9±4^ %), ВПГ (15,6±4,1 %), ВГЧ 4-го и 6-гю типов - 7,8±3,1 %. На втором месте по частоте было обнаружение РНК энтеровирусов (15,6±4,1 %). Вирус краснухи выявлен в 12,9±3,8 % случаев от погибших детей и плодов с ВПР.

У детей и плодов с ВУИ, не сопровождавшейся формированием пороков и аномалий развития тех или иных органов, вирусы семейства НегреБуШае выявляли также чаще всего - в 44,5±6,0% случаев. Энтеровирусную РНК в секционном материале детей с ВУИ обнаруживали .несколько чаще, чем при установленных пороках (27,1±5,3%). Вирус краснухи обнаруживали с той же частотой (12,9 ±4,0%).

При обследовании 88 проб органов от 11 плодов в возрасте от 20 до 23 недель, полученных при прерывании беременности по социальным показаниям вирусные ДНК и РНК не выявлены.

При изучении абортного материала геномы вирусов, относящиеся к семейству Herpesviridae обнаружены статистически значимо реже, чем в секционном материале от детей с ВПР и ВУИ. РНК вирусов гриппа и RS-вирусов выявлены только в органах детей с ВПР и ВУИ (табл.4), матери которых перенесли ОРВИ в эпидемический период.

Таким образом, ДНК и РНК вирусов в секционном материале первой и второй групп наблюдения выявляли с одинаковой частотой. При фетоинфантильных потерях, обусловленных ВПР и ВУИ вирусная инфекция сходна по своей структуре. Чаще всего она обусловлена вирусами семейства Heipesviridae (ВПГ, ЦМВ, ВГЧ 4-го и 6-го типов), а также энтеровирусами и вирусом краснухи.

Тропизм отдельных вирусов к каким-либо определенным тканям не выявлен. В то же время в тканях сердца обеих групп наблюдения чаще выявляли вирус краснухи и энгеровирусы. В головном мозге чаще выявляли вирус герпеса и цитомегаловирус, что соответствует данным об их тропности к нервной ткани (О. А. Малышева, 2001, Ф. С. ' Харламова, 2006). В ткани печени почек, селезенки обнаруживали РНК этеровирусов и . ДНК цитомегаловируса и вирусов простого герпеса 1 и 2 типов. Чаще всего фрагменты геномов вирусов при ВПР обнаруживали в тканях почек (36,4±5,5%), головном мозге (27,3±5,3%), печени (20,8±4,6%), легком (19,5±4,5%), селезенке (18Д±4,3%). Показатель выявления НК в тимусе (6,5£2,8%), плаценте (5,2±2,5%), сердце (3,9±2,2%) и амнионе (1,3±1,3%) был несколько ниже. При ВУИ наиболее высокий показатель детекции вирусов был в почках (31,4±5,5%), головном мозге (24,4±5,1%), в печени (22,8±5,0%), затем в легком (18,6±4,7%) и селезенке (14,3±4,2%). Показатели выявления инфекционных агентов в тимусе (8,5±3,3 %) и плаценте (8,5±3,3%) были несколько ниже. В сердце фрагмент геномов вирусов обнаруживали реже всего (2,9±2,0%).

Фрагменты генома бактериальных возбудителей хламидий, микоплазмы и уреаплазмы в основном обнаруживали при патологии плаценты. При морфологическом исследовании наблюдали аномалии развития плаценты: частичное плотное прикрепление плаценты, краевое прикрепление пуповины с очаговым варикозом, и признаки воспалительных процессов: кровоизлияния, гематомы, плацентит (виллузит, децидуит, мембранит), фуникулит, хориоамни-онит. Бактериальную инфекцию в группе детей с ВПР выявляли преимущест- венно как смешанную бактериально-вирусную и бактериально-бактериальную.

ДНК Toxoplasma gondii была обнаружена в тимусе одного плода. Одновременно у него же выявлена РНК EVs, ДНК Ctr и Uur. У этого ребенка выявляли порок развития плаценты и генерализованную внутриутробную инфекцию (продуктивный эпиренит, интерстициальный гепатит, панкреатит, лейкоцитарный плацентит с абсцедированием, кровоизлияния, гематомы).

При сравнении полученных результатов выявлено, что ДНК и РНК CMV.HSV, EVs, RuV достоверно чаще обнаруживали у детей, включенных в группы с ВПР и ВУИ ' по сравнению с контрольной группой.

При патологоанатомическом исследовании материала от плодов и детей с врожденными аномалиями развития в подавляющем большинстве случаев обнаруживали тканевые дисплазии такие, как глиомагоз, нарушение цитоархитекгоники

головного мозга, гипоплазии, дисплазии легких, почек, очаги эмбриональной тка-ни в легких, почках, миелоз печени, почек, гиперплазия, кисты в органах, липо-матоз тимуса, фиброматоз слюнных желез. В надпочечниках отмечали незидиодиспла-зию, аденоматоз, незрелость, примитивную или истощенную кору, вакуолизацию, аденомагоз. Выявлены признаки недостаточности иммунных органов: тимоме-галию, кисты в тимусе, дисплазию, гиперплазию коркового слоя, некроз тимуса с обызвест-влением телец Гассаля, замена функциональных структур соединительной тканью.

Выявление инфекционных агентов в аутопсийном материале обеих групп наблюдения сопровождалось характерными морфологическими изменениями клеток. Выявлены ДНК- или РНК-вирусные клетки. ДНК-вирусные клетки увеличены до гигантских размеров с крупными гиперхромными ядрами. Иногда ядра неправильной формы с явлениями глыбчатого или мелкоглыбчатого их распада. Как правило, рядом с этими клетками выявляли очаги скопления лимфоцитов и очаги некроза РНК - вирусные клетки - это крупные светлые клетки со светлым крупными ядрами и мелкозернистой цитоплазмой. В этих же отделах отмечали отек, лимфоидную инфильтрацию и очаги некроза, иногда с кальцификатами. Данные, полученные при патогистологическом исследовании внутренних органов согласуются с результатами выявления инфекционных агентов.

Проведено комплексное исследование фрагментов органов от 15 плодов с помощью ПЦР,'БКМ и РИФ (табл. 5). Вирусная инфекция подтверждена всеми тремя методами у 11 из 15 плодов (73,3%). Результаты выявления вирусных агентов практически совпадали по частоте выявления (ПЦР - 36,1%±5,3; БКМ - 28,9%±5,0; РИФ - 27,7%±4,9) и по виду возбудителей. Вирусы (БКМ), их антигены (РИФ) и их геномы (ПЦР) выявляли не только в одном , и том же органе, но и одновременно в разных органах и системах (№№ 1; 2; 3; 5; 6; 8; 9; 12; 13; 14; 15). Смешанная инфекция была обнаружена в 2 случаях, в одном из которых наличие вируса герпеса было подтверждено 3 методами исследования, энтеровирусов - методом ПЦР и быстрым культуральным, а РНК вируса краснухи была обнаружена только в ПЦР-исследовании (№3, №12). В 4 случаях вирусные агенты были выявлены лишь одним или двумя способами исследования. В двух случаях РНК энтеровируса и ДНК вируса герпеса выявлены только методом ПЦР (№ 7, № 11). В одном случае (№ 4) ДНК вируса герпеса выявлена в ПЦР и результаты подтверждены быстрым культуральным методом. В случае № 10 результаты выявления РНК энтеровируса в ПЦР исследовании подтверждены с помощью прямой иммунофлюоресценции.

Таким образом, в нашем исследовании выявление НК вирусов в секционном материале методом ПЦР согласуется с результатами выявления антигенов методами прямой и непрямой иммунофлюоресценции и вируса культуральным методом. Проведенное исследование показывает возможность применения любого из предложенных методов с учетом определенной доли погрешности каждого. Одновременное применение нескольких способов исследования позволяет более эффективно выяснить причину неблагоприятного исхода беременности. При использовании ПЦР в наиболее короткие сроки обнаруживается широкий спектр возбудителей из минимального количества материала. Это позволяет рекомендовать ПЦР в качестве скрининга при лабораторных исследованиях.

Таблица 5

Результаты комплексного исследования патологоанатомического материала от детей и плодов с ВПР и ВУИ.

N Морфологическое описание случая Органы ПЦР БКМ РИФ

1 ВПР - врожденная гидроцефалия, тимомегалия, декомпенсированная комбинированная плацентарная недостаточность, порок развития ворсин, лимфо-лейкоцитарный плацентит Мозг ШУ ШУ

Сердце

Легкое

Почка ШУ ШУ ШУ

Печень ШУ

Селезенка

2 ВПР — гидроцефалия, порэнцефалия, па тологическая задержка созревания ткани легких. ВУИ - пневмония. Сероз но-лимфоцитарный менингоэнцефалит, миокардит, эпиренит, иммунная реак ция тимуса незрелого типа. Серозно-лимфоцитарный плацентит с ДНК-вирусными клетками. Мозг

Сердце

Легкое СМУ

Почка СМУ

Печень

Селезенка СМУ СМУ

3 ВПР врожденная патология глаз и сердца, простая мультикистозная дисплазия почек, дисхрония, гипоплазия головного мозга и легких, фиброкистоз околоушных слюнных желез, гипоплазия и кальцификация долек тимуса Мозг

Сердце ЕУв

Легкое

Н/почечник ЯиУ ШУ ШУ

Почка ЕУв.ШУ ЕУ^ШУ ШУ

Печень

Селезенка

4 Болезнь гиалиновых мембран, отек вещества головного мозга, ФПН Мозг

Сердце

Легкое ШУ

Почка ШУ

Печень ШУ

5 ВПР - грыжа пуповины с эвентрацией петель кишечника, патологическая незрелость почек и легких, дисплазия тимуса ВУИ—легкие железистого строения, отек, десквамация. Мозг

Легкое

Н/почечник ЕУв

Почка ЕУв ЕУв

Печень

6 МВПР - гидроцефалия, анасарка, гидроторакс, гипоплазия легких ВУИ -плацентит, пневмония, гепатит, двусторонний эпиренит, энтерит Мозг ШУ

Сердце

Легкое

Почка ШУ ШУ ШУ

Печень ШУ ШУ

7 МВПР - нарушение цитоархитектоники головного мозга, гипоплазия респира торного отдела и сосудистая дисплазия легких, полимикронефрония, криптор хизм, тимомегалия и ареактивность тимуса, гипотелоризм, ложные узлы на пуповине, маловодие, препортальная гипотрофия Мозг ШУ

Сердце

Легкое

Почка ШУ

Печень ШУ

Селезенка

8 МВПР - порэнцефалия (кисты гол.м.), Мозг

гипоплазия легких, легкая форма муковисцидоза, олигомикронефрония, порок плаценты Сердце

Легкое

Почка ЕУэ ЕУБ

Печень ЕУз

Трахея

9 МВПР - ВПС, дсшихоцефалическая де формация голрвы, голопрозэнцефалия, микрогения, лимфан гиома шеи, пгаопла зля ребер, левого легкого, аплазия левого надпочечника, грыжа пуповины. Плацен та - лейкоцитарный хориоамнионит и базальный децидуит, лимфоцитарное вое паление в децидуа с ДНК-вирусными клетками Мозг ШУ

Сердце

Легкое ШУ ШУ

Почка НБУ ШУ

Печень ШУ ШУ ШУ

Селезенка ШУ

10 МВПР -кисты голов но го мозга, гипоплазия легких, олиго микро нефрония, порок плаценты. ВУИ -продуктивно-некроти ческий хориоам нионит, сероз но-десква мативная пневмония, сероз ный гепатит и миокардит, РНК-вирус ные изменения в плаценте (симпласты в децидуа) 20зг

Сердце

Легкое

Почка ЕУБ

Печень ЕУэ

11 ВУИ - плацентит,виллузит, хориоамнионит,пневмония, микробные эмболы, тромбоз мелких сосудов, септицемия, бобовидная плацента Мозг ЕУв

Сердце

Легкое

Н/почечник

Почка

12 ВУИ - фиброэластоз, врожденный кардит, пневмония, перинатальная энцефалопатия, врожденная гипотрофия. -Мозг

Сердце ЕУб

Легкое ЕУэ ШУ

Почка ШУ ШУ, ЕУэ ЕУБ

Печень

13 ВУИ - генерализованная форма-серозно-лимфрцитарные менингознцефалит, интерстициально-десквамативная пневмония, гепатит, энтероколит, гломерулонефрит. Мозг ШУ ШУ

Сердце ШУ

Легкое ШУ

Почка ШУ ШУ

Печень ШУ ШУ

Селезенка ШУ

14 ВУИ - острая плацентарная недостаточ ность, интервиллезные кровоизлияния, парез сосудов, лимоцитарный плацентит, хориоамнионит, децидуит, виллузит. Мозг ЕУэ

Сердце ЕУв

Легкое

Почка ЕУз ЕУэ ЕУэ

Печень ЕУб ЕУз

15 ВУИ - болезнь гиалиновых мембран, в легких — очаговый ателектаз, крупноочаговые кровоизлияния, полнокровие, броноспазм, диффузные гиалиновые мембраны вдоль стенок альвеол. Мозг

Сердце

Легкое ШУ

Почка ШУ ШУ

Печень №У шу

всего 83 30 36,1±5,3 24 28,9±5,0 23 27,7±4,9

Комплексные данные о выделении инфекционных агентов у детей и плодов с ВПР и ВУИ представлены в таблице 6.

Таблица 6

Выявление ДНК и РНК вирусов в секционном материале методом ПЦР

N Исследуемые группы Количество исследован ных (абс.) Инфицирова но Абс. %±ш Достоверность различий с группой сравнения 4

1 Врожденные пороки развития в том числе: 77 51 66,2 ± 5,4* р <0,001

1.1 Изолированные и системные врожден ные пороки 23 15 65,2 ± 9,9* р< 0,05

1.2 МВПР 20 15 75,0 ± 9,7* р< 0,001

1.3 Диспластические пороки развития 19 12 63,1 ±11,1* р < 0,001

1.4 Пороки плаценты 15 9 60,0 ± 12,6* р < 0,05

2 Генерализованная ВУИ 70 52 74,3 ± 5,2* р< 0,001

3 Материал от индуци рованных родов без аномалий развития и ВУИ 11 0

4 Абортный материал от здоровых женщин 70 22 31,42 ±5,5

В результате вирусологического исследования патологоанатомического материала установлена ведущая роль ЦМВ, ВПГ, знтеровирусов и вируса краснухи в этиологии врожденных пороков развития и дисплазий, гибели , плодов и новорожденных с внутриутробной вирусной инфекцией. Обнаружению геномов вирусов и других инфекционных агентов в исследуемом ' материале соответствовали результаты гистологического исследования. В органах и тканях погибших плодов выявлены диспластические тканевые процессы, признаки иммунодефицитных состояний, гигантоклеточный метаморфоз.

Выявление факторов риска у женщин с отягощенным акушерским

анамнезом.

Ретроспективный анализ анамнестических данных 57 женщин, родивших детей с ВПР и ВУИ и 100 женщин, родивших здоровых детей, не выявил достоверных различий в паритете беременностей, частоте гинекологической и экстрагенишльной патологии. У

женщин основной группы достоверно чаще отмечались самопроизвольные выкидыши, фетоплацешарная недостаточность, задержка внутриутробного развитая, гипоксия плода (р < 0,01), угроза невынашивания (р < 0,05). Также чаще выявлялись мертворождения, рождения детей с ВПР, замершая беременность, прерывание беременности вследствие диагностированных по УЗИ пороков плода. -

При исследовании эпителиоцитов цервикального канала у женщин с отягощенным акушерским гинекологическим анамнезом (ОАГА) во время беременности вирусы семейства герпеса обнаруживали достоверно чаще (13,0±3,6 %), чем у женщин группы контроля (4,0±1,8 %) (р < 0,05). У небеременных женщин с ОАГА в целом в 2 - 3 раза чаще обнаруживали геномы вирусов семейства герпеса, чем у небеременных контрольной группы (таблица 7).

Таблица 7

Выявление ДНК ВПГ и ЦМВ в цервикальном канале женщин с ОАГА в ПЦР

(%± ш)

Возбудители Небеременные Беременные

ОАГА (п = 81) здоровые (п = 125) ОАГА (п = 84) здоровые (п =125)

Вирусы герпеса в том числе: 11,1±3,5 4,8±1,9 13,0±3,6* 4,0±1,8

ЖУ 4,9±2,4 1,6±1,1 7,1 ±2,8 2,4±1,3

СМУ 6,2±2,7 3,2±1,6 5,9±2,5 1,6±1,1

Примечание:* - р < 0,05 по сравнению с контрольными группами здоровых небеременных и беременных женщин

При сравнении частоты выявления ДНК хламидий и микоплазм статистически достоверных отличий между исследуемыми группами женщин установлено не было. Сведения, полученные при изучении цервикального канала здоровых женщин и женщин с ОАГА согласуются с результатами серологического исследования (таблица 8).

Таблица 8

Выявление специфических антител к вирусам у женщин с отягощенным

акушерским гинекологическим анамнезом (%± т) методом ИФА

Возбудители / Небеременные Беременные

антитела ОАГА здоровые ОАГА здоровые

(п = 80) (п = 95) (п = 72) (п =100)

ШУ 1рМ 6,3±2,7 1,1±1,0 8,3±3,2* 1,0±1,0

Ч о 95,0±2,4 100 98,6±1,4 98,0±1,4

СМУ 5,0±2,4 2,Ш,5 6,9±2,9** 1,0±1,0

93,8±2,7 98,9±1,1 97,2±1,9 96,0±2,0

СМУ (1Е) 1рМ 0 0 0 0

(п = 20) 0 0 5,0±2,6 0

^м 0 0 0 0

ЯиУ 95,0±2,4 96,8±1,0 97,2± 1,94 91,0±2,9

Примечание: * - р < 0,05 по сравнению со здоровыми беременными и небеременными женщинами; ** - р < 0,05 по сравнению с группой здоровых беременных

женщин

Антитела класса G к вирусам ВПГ, ЦМВ и краснухи, являющиеся косвенным показателем инфицированности, были выявлены во всех группах обследованных женщин с высокой частотой (от 93,8±2,7% до 100-4.0%). Маркеры активизации IgM к CMV и HSV достоверно чаще выявлялись у беременных женщин с ОАГА по сравнению со здоровыми. Первичная герпетическая инфекция (IgM+, IgG-) не установлена ни в одном случае. В 1-м случае (5,0%) из 20 обследованных беременных женщин с ОАГА были выявлены ранние антитела класса G к цитомегаловирусу при отсутствии антител других классов (IgM IE -, IgG IE + -, IgM-, IgG-), что свидетельствует о первичной инфекции.

Антитела класса G к вирусу краснухи у женщин основной и контрольной групп выявляли с одинаковой частотой: в высоком титре >1:100, IgM не обнаружены ни в одном случае.

Обследование женщин во время и вне беременности выявило, что группа риска ' среди женщин с ОАГА в целом составила 11,8±2,6 % (к HSV - 3,3±1,4 %, к CMV -, 4,6±1,7 %, RuV - 3,9±1,6 %). Среди здоровых женщин г. Хабаровска риск гибели плода в антенатальном или посгнатальном периоде составил 10,2±2,2 %, из них: к HSV -2,0±1,0 %, к CMV - 2,6±1,2 %, к RuV - 5,6±1,б % (табл.7).

Антитела к вирусам герпеса 6 типа (HHV6) и вирусу Эпштейна - Барр (VEB) среди доноров г. Хабаровска в возрасте от 18 до 20 лет были выявлены нами в 82,3±4,6% и в 19,1 ±4,7% соответственно. Низкая частота выявления IgG к вирусу Эпштейна-Барр свидетельствует о незначительной циркуляции этого возбудителя среди населения г. Хабаровска в настоящее время. Маркеры активизации инфекционного процесса (IgM +, IgG +) обнаружены в 1,4±1,4% случаев к VEB.

Проведенное исследование уровня авидности IgG к RuV, CMV и HSV2 у здоровых женщин показало высокую частоту выявления высокоавидных IgG к перечисленным вирусам. В 93,6±3,5% у исследуемых женщин выявлены высокоавидные IgG к вирусу краснухи, что указывает на наличие иммунитета к этой инфекции. У 6,4±3,6 % женщин выявлены низкоавидные IgG к этому вирусу, свидетельствующие либо о текущем остром инфекционном процессе, либо о недавно перенесенной инфекции (1-1,5 месяца назад).

Высокоавидные IgG к CMV, также выявлены нами в большинстве случаев (95,7±3,0%), что подтверждает наши данные о высоком уровне серопозитивности к данному вирусу. Низкоавидные антитела к цитомегаловирусу обнаружены у двух женщин (4,3±3,0%).

Антитела класса G к ВПГ2 обнаружены лишь в 12 случаях. Из них в 10 случаях (21,3±6,0%) индекс авидности был выше 40%. У двух женщин ' (4,3±3,0%) выявлены низкоавидные IgG к ВПГ2. Все женщины с • низкоавидными IgG к вирусам краснухи, цитомегаловируса и герпеса 2 типа, составляют группу риска при беременности.

Проведенное серологическое исследование выявило широкую циркуляцию вирусов семейства Herpesviridae и вируса краснухи среди женщин г. Хабаровска. Распространенность цотомегаловирусной и герпетической инфекции сходна с показателями инфицированности в развивающихся странах. В странах Европы только

50% женщин детородного возраста серопозитивны к CMV и HSV (А. Гриноу и со авт., 2000). Полученные результаты свидетельствуют о том, что в г. Хабаровске риском для плода является активизация латентной хронической инфекции матери. Наличие серонегативных лиц среди женщин детородного возраста к CMV, HSV и RuV доказывает существование группы риска по формированию аномалий плода в случае первичной инфекции во время беременности.

Острый хламидийный процесс (IgM+, IgG+) был выявлен нами лишь у беременных женщин основной и контрольной групп без достоверных различий. Маркеры течения латентной инфекции (IgA +) в 2,8 раза чаще обнаруживали у женщин основной группы с текущей беременностью (7,1 ±3,0%) по сравнению со здоровыми беременными. В этой же группе достоверно чаще (р<0,05) обнаруживали IgG к Chlamydia trachomatis (48,6±5,8%). У небеременных женщин с ОАГА частота выявления IgG была также выше, чем в контрольной группе (30,0±5,1%, 18,9±4,0%).

Антитела класса G и А к M.hominis и Ur.urealyticum во всех исследуемых группах выявляли практически с одинаковой частотой.

Антитела расса М к токсоплазме не выявлены ни в одной из исследуемых групп женщин. Антитела класса G у беременных и небеременных с ОАГА выявили в 37,5±5,7% и в 23,7±4,7% случаев соответственно.

Таким образом, в периоде беременности в результате физиологического снижения иммунитета у беременных происходит реактивация персистирующих инфекций, которые могут оказывать неблагоприятное действие на формирование плаценты и плода как в ранние, так и в более поздние сроки гестации. Так как у некоторых беременных отсутствуют антитела класса G к Ruv, HSV, CMV, ТОХО, не исключена вероятность возникновения у них инфекционного процесса при заражении.

В результат^ проведенных исследований нами установлено, что тенденция к увеличению частоты мертворождений и смерти детей с ВПР и ВУИ, наблюдаемая в последние годы (от 14,6% в 1993г. до 29,2% в 2006), связана с вирусной инфекцией. Среди инфекционных агентов, участвующих в нарушении эмбриогенеза, ведущее значение имеют вирусы семейства Herpesviridae, которые постоянно циркулируют среди населения, а также вирус краснухи и энтеровирусы. Генерализованная инфекция, вероятно, продолжается в течение всего антенатального периода. Патоморфологические изменения происходят не только в одном или двух органах с пороком развития, но и в других органах и системах. В связи с этим необходимо проводить скрининговое обследование методом ПЦР всех живорожденных детей с ВПР и аномалиями развития внутренних органов для выявления этиологии и разработки схемы противовирусного лечения в постнатальном периоде.

Выводы:

1. Вирусная инфекция у детей с врожденными пороками развития установлена в 66,2±5,4%, у детей с признаками внутриутробной инфекции - в 74,3±5,2% случаев. Выявлено сходство в структуре обнаруженных вирусов у детей с ВПР и ВУИ. Цитомегаловирус обнаружен у 16,9±4,3% и 17,4± 4,5% соответственно, вирус простого герпеса у 15,6±4,1% и 21,4 ± 4,9%, энтеровирусы у 15,6±4,1% и 27,1±5,3% и вирус краснухи - в 12,9±3,8% и 12,9±3,8% соответственно. Вирусы гриппа А и В выявлены у умерших детей в 2,7±1,3%, RS-вирус - в 5,3±1,8% случаев.

2. Впервые в г. Хабаровске в секционном материале детей с ВПР выявлен вирус Эпштейна-Барр (1,3±1,3%), вирус герпеса 6 типа в 6,5±2,8% при ВПР и в 5,7 ±2,4% - при ВУИ, парвовирус человека В-19 (1,3±1,3%) - при ВПР.

3. Вирусная инфекция у детей с врожденными пороками и аномалиями развития протекает как генерализованная: геномы вирусов обнаруживаются как в пораженном органе, так и в других органах и системах при сопутствующих воспалительно-дегенеративных изменениях.

4. Применение ПЦР целесообразно во всех случаях обследования умерших детей в качестве скринингового метода. Разработанный способ обработки постмортального материала повышает эффективность выделения ДНК и РНК вирусов в 2 и более раз.

5. При анализе причин мертворождаемости и гибели детей в антенатальном и постнатальном периоде установлено двукратное увеличение частоты ВПР от 14,6±2,0% в 1993 до 29,2±3,3% - в 2006 гг. и преобладание инфекционной природы врожденных пороков и аномалий развития.

6. Выявлена широкая циркуляция вирусов семейства Herpesviridae и вируса краснухи среди женщин г. Хабаровска. У беременных с отягощенным акушерским гинекологическим анамнезом достоверно чаще, чем у здоровых в цервикальном канале обнаружены ДНК вирусов семейства герпеса (13,0±3,6%, р< 0,005). В сыворотках крови достоверно чаще выявлялись маркеры активизации вирусной инфекции: Ig М к HSV 1 и 2 типов (8,3±3,2%), Ig М к CMV (6,9±2,9%), что свидетельствует об активизации хронической инфекции во время беременности.

7. Установлено, что 11,8±2,6% женщин с ОАГА и 10,2±2,2% здоровых составили группу риска по отношению к вирусам семейства Herpesviridae и краснухи.

Практические рекомендации:

1.Одной из основных причин фетоинфантильных потерь является вирусная инфекция. Целесообразно в случаях неблагоприятного исхода беременности направлять постмортальный материал от плода или новорожденного и плаценту на вирусологическое исследование с целью выяснения причин гибели плода и верификации инфекционного патогена.

2.Следует рекомендовать обследование методом ПЦР и ИФА жизнеспособных новорожденных с диагнозом ВПР и / или ВУИ на широкий спектр вирусов (краснухи, простого герпеса, цитомегаловируса, энтеровирусов и др.) для выявления текущего инфекционного процесса и назначения противовирусной терапии.

3. Обследование цервикального канала и сывороток крови методом ПЦР и ИФА может быть рекомендовано для скрининга женщин при под готовке к беременности.

4. Для выявления степени риска осложненного течения беременности рекомендовать обследование сывороток крови женщин на содержание IgM к вирусам HSV,CMV, RuV, низкоавидных IgG к вирусам HSV.CMV, RuV и антител классов М и G к предранним белкам CMV, RuV.

Список опубликованных научных работ по теме диссертации

1. Власова, М.А. Инфицированостъ генитального тракта девочек инфекциями, передающимися половым путем / М. А. Власова, Е. Б. Наговицына, Н. М. Ивахнишцна // Пути повышения эффективной медицинской помощи детям: сб. матер. X съезда педиатров России. - М., 2005. - С. 93.

2. Выявление возбудителей внутриутробных инфекций при синдроме потери плода / Е. Б. Наговицына, О. В. Островская, Н. М. Пуховская, Н. М. Ивахнишина, Т. М. Бутко, М. А. Власова, О. И.. Морозова // Актуальные проблемы охраны здоровья женщин и детей на современном этапе: матер. науч..-практич, конф. с междунар. участием. - Хабаровск, 2006. - С. 90 - 95.

3. Выявление инфекций TORCH-комплекса у женщин с отягощенным акушерским гинекологическим анамнезом / Н. М. Ивахнишина, Е. П. Когут, Т. М. Бутко, М. Г. Иванова, М. А. Власова, Е. Б. Наговицына // Клинические и фундаментальные аспекты состояния здоровья коренного и пришлого населения в Дальневосточном федеральном округе: мат. науч.-практич. конф. с междунар. участием. - Хабаровск, 2007. - С. 73 - 75.

4. Диагностика вирусных инфекций в аутопсийном материале от погибших плодов и новорожденных / ИМ. Ивахнишина, О. В. Островская, Е. Б. Наговицына, М. А. Власова, Т. М. Бутко, О. В. Кожарская // матер, областной врачебной науч.-практич. конф., посвященной 50-летию со дня образования Детской областной больницы. - Биробиджан, 2003. - С. 91 - 93.

5. Ивахнишина, Н. М. Структура врожденных пороков развития при перинатальной и младенческой смертности / Н. М. Ивахнишина, Т. М. Бутко, О. В. Островская // Комплексная оценка состояния здоровья детей и

подростков в Дальневосточном регионе: матер, науч.-практич. конф. -Хабаровск, 2004 - С. 75-76.

6. Ивахнишина, Н. М. Оптимальный метод выделения нуклеиновых кислот вирусов в секциионном материале / Н. М. Ивахнишина, Е. П. Когуг, О. В. Островская // Дальневосточный медицинский журнал. - 2008. - №4. - С. 105 -106.

7. Ивахнишина, Н. М., Врожденные пороки развития среди причин гибели при фетоинфантильных потерях / Н. М. Ивахнишина, О. В. Островская, Т. М. Бутко // Пути повышения эффективности медицинской помощи детям: матер. Х-го съезда педиатров России. - М., 2005. - С. 196.

8. Иммуноструктура женщин г. Хабаровска к ТОЯСН-инфекциям / Е. Б. Наговицына, О. В. Островская, М. А. Власова, О. И. Морозова, Н. М. Ивахнишина, Т. В. Комиссарова, Н. Г. Бессмертная // Клинические и фундаментальные аспекты состояния здоровья коренного и пришлого населения в Дальневосточном федеральном округе: матер, науч.-практич. конф. с междунар.участием. - Хабаровск, 2007. - С. 100 - 105.

9. Инфекционные факторы при перинатальной смертности / О. В. Островская, Н. М. Ивахнишина, Е. Б. Наговицына, Т. М. Бутко, М. А. Власова, О. И. Морозова, О. В. Кожарская, Н. М. Пуховская, Н. С. Мусатов // Дальневосточный медицинский журнал. - 2006. - №3. - С. 5-8.

Ю.Прогностическая ценность маркеров активизации внутриутробной инфекции (ВУИ) / О.В. Островская, Т.В. Комиссарова, Е. В. Ваганова, К. В. Ваганов, Л. В. Марущак, М. А. Дейнега, Е. Б. Наговицына, Н. М. Ивахнишина, М. А. Власова, О. И. Морозова, Т. Ю. Пестрикова // Дальневосточный медицинский журнал. - 2007. - №1. - С. 50 -53.

11.Распространенность герпес-вирусных инфекций / О. В. Островская, М. А. Власова, Е. Б. Наговицына, Н. М. Ивахнишина // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2004. - №3. - С. 87 - 88.

12. Структура и частота встречаемости врожденных дефектов при фетоинфантильных потерях / О. В. Островская, Н. М. Ивахнишина, Т. М. Бутко, С. А. Гончар, Е. Б. Наговицына И Дальневосточный медицинский журнал. - 2006. - №1. - С. 19-23.

13.Участие вирусных инфекций в формировании врожденных пороков развития / Н. М. Ивахнишина, О. В. Островская, Т. М. Бутко, Е. Б. Наговицына, М. А. Власова // Современные технологии в педиатрии и детской хирургии: матер. 3-го Российского конгресса, 26-28 окт. - М., 2004. - С. 376 - 377.

М.Эндогенные инфекции матери как биологический тератогенный фактор / О. В. Островская, Н. М. Ивахнишина, Т. М. Бутко, Е. Б. Наговицына, М. А. Власова, О. И. Морозова, О. В. Кожарская, М. Г. Иванова // Бюлл. физиологии и патологии дыхания СО РАМН ДНЦ ФПД - Благовещенск, 2007,- Вып.24. -С.10 - 15. 15.Эндогенные инфекции материи при фетоинфантильных потерях / О. В. Островская, Н. М. Ивахнишина, Е. Б. Наговицына, М. А. Власова, О. И.

Морозова, Т. М. Бутко, Н. М. Пуховская // Инфекция в акушерстве и перинатологии: матер. 1-го междунар. семинара. - М., 2007. - С. 121. 16.Revealing of activators of intra-uterine infectionsin a material from spontanaus abortions and not developing pregnancy / E. Nagovitsyna, O. Ostrovskaja, N. Ivahnishina, M. Vlasova // JRME NIIGATA 04 The Eleveth International Symposium of the Japan. - Russia medical Exchange. - Niigata, 2004. - C. 350.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

БКМ - быстрый культуральный метод ВПР - врожденные пороки развития ВУИ - внутриутробная инфекция КМ - культуральный метод

МВПР — множественные врожденные пороки развития НК - нуклеиновая кислота

ОАГА - отягощенный акушерский гинекологический анамнез

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РИФ - реакция иммунофлюресценции

РНИФ - реакция непрямой иммунофлюоресценции

В-19 - парвовирус В-19

CMV - цитомегаловирус

Ctr - Chlamydia trachomatis - хламидии

EBV- вирус Эпштейна-Барр

EVs - энтеровирус

HSV - вирус простого герпеса

HHV6 - вирус герпеса человека 6 типа

HRSV - респираторно-синцитиальный вирус

InfVA - вирус гриппа А

InfVB - вирус гриппа В

Mho- Mycoplasma hominis - микоплазма человека

Mge - микоплазма гениталиум

RuV - вирус краснухи

Tgo - Toxoplasma gondii токсоплазма

Uur - Ureaplasma urealyticum уреаплазма

Формат 60x84/16. Бумага писчая. Тираж 110 экз. Заказ № 39 Ичдатгньский центр ГОУ ВПО ДВГМУ. 680000, г. Хабаровск, ул. Муравьева-Амурского, 35.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Ивахнишина, Наталья Михайловна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Врожденные дефекты развития на современном этапе.

1.2 Участие вирусов в формировании ВПР.

1.3 Полимеразная цепная реакция — современный, перспективный метод выявления вирусных агентов.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Характеристика и объем исследованного материала.

2.2 Методы выделения ДНК и РНК из патологоанатомического материала

2.3 Методы детекции вирусов.

2.4. Методы серологического исследования.

2.5. Статистические методы.

ГЛАВА 3. ЧАСТОТА И СТРУКТУРА ВРОЖДЕННЫХ ПОРОКОВ

РАЗВИТИЯ У ПОГИБШИХ ПЛОДОВ И ДЕТЕЙ.

3.1 Динамика выявления врожденных дефектов при фетоинфантильных потерях в 1993 - 2006 годах в г. Хабаровске.

3.2 Структура врожденных дефектов развития.

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА ОПТИМАЛЬНОГО МЕТОДА ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСНЫХ АГЕНТОВ В СЕКЦИОННОМ МАТЕРИАЛЕ.

4.1 Выявление вирусов методом ПЦР, быстрым культуральным методом и методом иммунофлюоресценции.

4.2 Выделение нуклеиновых кислот из патологоанатомического материала

ГЛАВА 5. СТРУКТУРА ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ ПРИ

ФЕТОИНФАНТИЛЬНЫХ ПОТЕРЯХ.

ГЛАВА 6. ВЫЯВЛЕНИЕ ГРУПП РИСКА ПО ФОРМИРОВАНИЮ ВРОЖДЕННЫХ АНОМАЛИЙ ПЛОДА У ЖЕНЩИН С ОТЯГОЩЕННЫМ АКУШЕРСКИМ ГИНЕКОЛОГИЧЕСКИМ

АНАМНЕЗОМ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ НАЛИЧИЯ МАРКЕРОВ

ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Перинатально значимые вирусы в этиологии врожденных пороков развития при фетоинфантильных потерях"

В настоящее время, как в нашей стране, так и за рубежом, в структуре детской заболеваемости и смертности увеличивается удельный вес врожденных пороков развития (ВПР), ежегодно в мире рождается от 10 до 20 млн. детей с ВПР (В.И. Кулаков, В.Н.Серов, 2007). Частота пренатально выявленых ВПР составляет 55,0% (Е.В. Юдина, 2006).

Пятилетний мониторинг пороков развития в России (1999-2003гг.), в котором участвовало 35 субъектов Российской федерации, показал, что частота ВПР среди мертворожденных составляет 21,8%, что более, чем в 12 раз чаще, чем у живорожденных (1,8%). Отмечены значительные колебания частот ВПР по регионам - от 7,3%о до 40,0%о, при среднем показателе — 16,6 на 1000 рождений (Н.С. Демикова и соавт., 2005).

ВПР являются одной из главных причин смерти детей в перинатальном (29,0%) и младенческом периоде (23,0%) в Дальневосточном федеральном округе (А.Ю. Мощинецкий, 1998; В.К. Козлов, 2003; В.К. Козлов, 2004).

Известно, что формирование врожденных пороков развития у детей происходит в значительной степени под воздействием генетических, средо-вых факторов, а также имеет мультифакториальную природу (Н.П. Бочков, Г.И. Лазюк, 1991; Г.И.Лазкж, 1991; А.И. Никитин, 1995). Во время беременности более 60,0% случаев ВПР остаются нерасшифрованными при ультразвуковом исследовании (А.Ю.Мощинецкий, 1998). Для разработки методов их эффективной профилактики особую важность приобретает выявление причин и механизмов возникновения раннего нарушения эмбриогенеза, а также совершенствование предгравидарной подготовки женщин с целью выявления групп риска по реализации внутриутробной инфекции.

Мониторинг ВПР занимает немаловажное место среди программ профилактической направленности. Главными его задачами являются определение частоты ВПР, проведение эпидемиологических исследований, изучение этиологии ВПР, выявление новых тератогенных факторов внешней среды (Н.С. Демикова, 2001; Н.С. Демикова и соавт., 2005; Н.В.Зарецкая, 2007).

Выяснение роли микроорганизмов в этиологии врожденных пороков и аномалий развития не теряет своей актуальности, так как может быть основанием для разработки этиотропного лечения жизнеспособных детей с ВПР и внутриутробной инфекцией (ВУИ).

Наиболее изучен вирус краснухи, в результате тератогенного действия которого возникают эмбрио- и фетопатии (Г.И. Лазюк, 1991; Н.И. Брико и соавт., 2000; В.А. Цинзерлинг, В.Ф. Мельникова, 2002). Частота врожденной краснухи, как причины ВПС составляет по разным данным от 1,3 до 2,4 % (В.Ф. Учайкин, 1998). В настоящее время в России вакцинация против краснухи введена в календарь прививок. Тем не менее, циркуляция вируса краснухи среди населения продолжается, также как продолжают регистрироваться заболевания, особенно среди подростков и молодых лиц фертильного возраста, поэтому роль вируса краснухи в этиологии ВПР и ВУИ в условиях массовой вакцинации детей и подростков требует дальнейшего изучения.

Многочисленными исследованиями, выполненными под руководством JI.C. Лозовской в 80-х - 90-х годах доказано, что энтеровирусная инфекция является одной из причин ВПР и ВУИ (Л.С. Лозовская и соавт., 1989; Е.П. Когут и соавт., 2001). Методом иммунофлюоресценции антигены вирусов Коксаки были обнаружены в 90 % случаев при посмертном обследовании плодов и новорожденных с ВУИ. Описаны случаи ВПР при врожденной цитоме-галовирусной (ЦМВ) и герпетической (ВПГ) инфекции (И.С. Сидорова, 1998; Г.Б. Безпощенко и соавт., 2003; Н.В. Скрипченко и соавт., 2003). Тератогенной активностью обладают также вирусы респираторной группы (О.В. Миронюк, 1997; Н.А.Геппе и соавт., 1999; Л.Л. Нисевич и соавт., 1999; 2002).

Однако вопрос о роли вирусной инфекции, ее структуре при множественных врожденных пороках развития и дисплазиях остается актуальным. При этом на различных территориях значимость тех или иных инфекционных возбудителей, как тератогенных агентов может существенно варьировать. Вопросы профилактики ВПР и дисплазий, а также внутриутробных инфекций у ребенка остаются нерешенными. Внедрение современных чувствительных и специфичных методов исследований позволяет более глубоко изучить роль инфекционных возбудителей как одну из основных причин врожденной патологии плода, что и явилось целью наших исследований.

В процессе выполнения работы решались следующие задачи;

3. Изучить частоту и структуру инфекционных агентов в патологоанато-мическом материале при фетоинфантильных потерях, обусловленных врожденными пороками развития и внутриутробной инфекцией.

Научная новизна.

Впервые использован усовершенствованный нами способ для подготовки патологоанатомического материала, что позволило повысить эффективность выделения нуклеиновых кислот вирусов.

Впервые на основании исследования содержания ДНК и РЫК в патолого-анатомическом материале изучена частота и структура широкого спектра патогенов вирусной природы в этиологии фетоинфантильных потерь при ВУИ и ВПР. Установлена ведущая роль вирусной инфекции в формировании системных и множественных ВПР.

Впервые выявлено сходство структуры антенатальной инфекции у детей и плодов с ВУИ и ВПР.

Практическая значимость работы:

1. Установлено, что около половины детей с врожденными пороками и аномалиями развития погибают в возрасте от 28 дней до 1-го года жизни. Полученные данные о текущей генерализованной инфекции у детей с ВУИ и ВПР указывают на необходимость проведения вирусологического обследования живорожденных детей с симптомами ВПР и ВУИ с последующим назначением противовирусного лечения, начиная с первых дней жизни.

2. Выявление ведущего' значения генерализованной вирусной инфекции как причины смерти детей дают основание рекомендовать вирусологическое исследование постмортального материала для уточнения этиологии нарушения антенатального развития плода и новорожденного с целью разработки программы подготовки женщины к последующей беременности.

4. Полученные в ходе исследования доказательства активизации хронической герпетической и другой инфекции уже в первом триместре беременности являются основанием рекомендовать вирусолого-серологическое обследование женщин групп риска с первых недель гестации для разработки в дальнейшем оптимальной программы наблюдения во время беременности.

Формы внедрения:

Апробация материалов диссертации:

Материалы диссертации представлены на конференции с международным участием «Комплексная оценка состояния здоровья детей и подростков в Дальневосточном регионе» (Хабаровск, 2004); на конференции по генодиагностике (Новосибирск, 2005); на научно-практической конференции «Актуальные проблемы охраны здоровья женщин и детей на современном этапе» (Хабаровск, 2006); на научно-практической конференции «Клинические и фундаментальные аспекты состояния здоровья коренного и пришлого населения в Дальневосточном федеральном округе» (Хабаровск, 2007); на научно-практической конференции с международным участием «Роль вирусной и бактериальной инфекции в формировании перинатальной и соматической патологии у детей» (Хабаровск 2008).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 16 работ, из них 4 работы -в журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объём диссертации.

Работа состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы исследования», 4-х глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций. Диссертация изложена на 150-и листах машинописного текста, иллюстрирована 32-я таблицами и 5-ю рисунками. Библиографический указатель включает 282 источника, из которых — 191 -российский и 92 - иностранных.

Заключение Диссертация по теме "Вирусология", Ивахнишина, Наталья Михайловна

выводы

1. Вирусная инфекция у детей с врожденными пороками развития установлена в 66,2±5,4% случаях, у детей с признаками внутриутробной инфекции - в 74,3±5,2% случаев. Выявлено сходство в структуре обнаруженных вирусов у детей с ВПР и ВУИ. Цитомегаловирус обнаружен у 16,9±4,3% и 17,4±4,5% соответственно, вирус простого герпеса у 15,6±4,1% и 21,4±4,9%, энтеровирусы у 15,6±4,1% и 27,1±5,3% и вирус краснухи - в 12,9±3,8% и 12,9±3,8%. Вирусы гриппа А и В выявлены у умерших детей в 2,7±1,3% , RS-вирус - в 5,3±1,8% случаев.

2. Впервые в г. Хабаровске в секционном материале детей с ВПР выявлен вирус Эпштейна-Барр (1,3%), вирус герпеса 6 типа выявлен при ВПР в 6,5% случаев и при ВУИ - в 5,7% случаев, парвовирус человека В-19 выявлен при ВПР в 1,3% случаев.

5. Установлено двукратное увеличение частоты ВПР с 14,6% в 1993 г. до 29,2% в 2006 г. при анализе причин мертворождаемости и гибели детей в антенатальном и постнатальном периоде. Установлено преобладание инфекционной природы врожденных пороков и аномалий развития.

6. Выявлена широкая циркуляция вирусов семейства Herpesviridae и вируса краснухи среди женщин г. Хабаровска. У беременных с отягощенным акушерским гинекологическим анамнезом достоверно чаще, чем у здоровых в цервикальном канале обнаружены ДНК вирусов семейства герпеса (13,0±3,6% и 4,0±1,8%), в сыворотках крови достоверно чаще выявлялись маркеры активизации вирусной инфекции Ig М к HSV 1 и 2 типов в 8,3±3,2 %, Ig М к CMV - в 6,9±2,9 %, что свидетельствует об активизации хронической инфекции во время беременности.

7. Установлено, что 11,8% женщин с ОАГА и 10,2% здоровых составили группу риска по отношению к вирусам семейства Herpesviridae и краснухи.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1 .Одной из основных причин фетоинфантильных потерь является вирусная инфекция. Целесообразно в случаях неблагоприятного исхода беременности направлять постмортальный материал от плода или новорожденного и плаценту на вирусологическое исследование с целью выяснения причин гибели плода и верификации инфекционного патогена.

2.Следует рекомендовать обследование методом ПЦР и ИФА жизнеспособных новорожденных с диагнозом ВГТР и / или ВУИ на широкий спектр вирусов (краснухи, простого герпеса, цитомегаловируса, энтеровирусов и др.) для выявления текущего инфекционного процесса и назначения противовирусной терапии.

4. Для выявления степени риска осложненного течения беременности рекомендовать обследование сывороток крови женщин на содержание IgM к вирусам HSV,CMV, RuV, низкоавидных IgG к вирусам HSV,CMV, RuV и антител классов М и G к предранним белкам HSV,CMV, RuV.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Ивахнишина, Наталья Михайловна, Хабаровск

1. Айламазян, Э. К. Антенатальная диагностика и коррекция нарушений развития плода Текст. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1999. -№ 3. - С. 7-13.

2. Александровский, А. В. Клинические особенности герпесвирусной инфекции у новорожденных детей Текст. / А. В. Александровский, Н. И. Кудашов, Л. В. Ванько // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1999. -№ 5.-С. 15-22.

3. Анкирская, А. С. Условно аптогенные микроорганизмы - возбудители внутриутробной инфекции плода и новорожденного Текст. : дис. .д-ра мед. наук. - М., 1985. - 396 с.

4. Антонов, О. В. Фактор возраста родителей и рождение детей с синдромом Дауна Текст. // Вопросы современной педиатрии. 2006. — Т. 5, № 1. - С. 29.

5. Антонов, О. В. Внутриутробные инфекции и врожденные пороки развития плода и новорожденных детей Текст. / О. В. Антонов, И. В. Антонова, О. В. Добаш // Детские инфекции. 2005. - № 2. - С.64 - 66.

6. Антропова, Н. Е. Состояние иммунного гомеостаза у женщин с бесплодием при урогенитальных инфекциях Текст. // Всероссийская научн.-практ. конф. «Генодиагностика инфекционных болезней», 19-21 окт. 2004 г. М., 2004. - Т. 1. - С. 6 - 7.

7. Асратян, А. А. Герпесвирусная инфекция Текст. /А. А. Асратян // Частная эпидемиология : руководство для врачей / под ред. Б. JI. Черкасского . М., 2002. - Т. 1. - С. 25-34.

8. Атаянц, О. К. Состояние верхних отделов пищеварительного тракта у детей с врожденными пороками и аномалиями развития сердца Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук. — М., 2005. 28 с.

9. Барановская, Е. И. Герпесвирусная инфекция в патологии плода и новорожденного Электронный ресурс. / Е. И. Барановская, С. В. Жаворонок, А. Н. Воронецкий. — Режим доступа: http: // www, med. by/dmn/book.php?book=02-19-6. 09.08.2006.

10. Баткаев, Э. А. Инфекции передаваемые половым путем и репродуктивное здоровье населения Текст. / Э. А. Баткаев, Э. А. Галлямова. Г. М. Енгоянц // Российский журнал кожных и венерических болезней. — 2003.-№6.-С. 39-42.

11. Бахмут, Е. В. Внутриутробное инфицирование вирусом краснухи Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук-М., 1990. 22 с.

12. Безнощенко, Г. Б. Внутриутробные инфекции (вопросы диагностики и врачебной тактики) Текст. / Г. Б. Бензощенко, Т. И. Долгих, Г. В. Кривчук. М. : Медицинская книга; Н.- Новгород : Изд-во НГМА, 2003. - 88 с.

13. Беляев, Е. Н. Роль санитарно-эпидемиологической службы в обеспечении санитарно-эпидемиологического благополучия населения Российской Федерации Текст. М., 1996. — 416 с.

14. Березов, Т. Т. Биологическая химия Текст. / Т. Т. Березов, Б. Ф. Ко-ровкин. М. : Медицина, 1990. - 544 с.

15. Болезни плода новорожденного и ребенка: нозология, диагностика, патологическая анатомия Текст. : справочное пособие / Е. Д. Черствый, Г. И. Кравцова, Г. И. Лазюк [и др.]. Минск, 1996.- С. 512.

16. Бочков, Н.П. Вклад генетических факторов в перинатальную патологию и детскую смертность Текст. / Н.П. Бочков, Лазюк Г.И. // Вестник АМН №5,- 1991.-С. 11-13

17. Бочков, Н.П. Мониторинг врожденных пороков развития Текст. / Н.П. Бочков, Н.А. Жученко, Е.А. Кириллова, И.К. Волков, Г.Л. Васильева, Л.Д. Попова // Российский вестник перинатологии и педиатрии 1996. №2. — С. 20-24

18. Быков, А. С. Парамиксовирусы (семейство Paramyxoviridae) Текст. / А. С. Быков, Н. Г. Ожерельева // Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / под ред. А. А. Воробьева. — М. : МИА, 2004. -С. 565 570.

19. Бюллетень ВОЗ. Профилактика герпес вирусных болезней и борьба с ними Текст. 1985,-№2. -С. 1-16.

20. Вартанян, Р. В. Проблемы цитомегаловирусной инфекции Текст. // Природа. 2003. - № 4. - С 54 - 59.

21. Вертикальный путь передачи — один из способов сохранения энтеровирусов в семьях с больными вторичными кардиопатиями Текст. / Е. П. Когут, Е. Б. Наговицына, В. В. Онихимовская, Г. А. Воронцова //

22. Материалы всесоюзной конференции «Энтеровирусы. Общетеоретические и медицинские аспекты», Киев, март 1991г. — Киев, 1991. — С. 58— 59.

23. Вирусы семейства герпеса и иммунитет Текст. /Ф. С. Харламова, Н. Ю. Егорова, Н. А. Гусева [и др.] // Детские инфекции. 2006. - № 3. — С. 3 — 9.

24. Внутриутробные респираторные вирусные инфекции у детей Текст. / С. Ю. Захарова, Г. А. Черданцев, А. М. Литвинова, Н. Р. Щабунина // Актуальные проблемы репродукции семьи. — Екатеринбург, 1997. — С. 94—110.

25. Володин, Н.Н., Дегтярев Д.Н. Диагностика и лечение внутриутробных инфекций Текст. / Н.Н. Володин, Д.Н. Дегтярев // Методические рекомендации для врачей-иеонатологов / Под ред. Н.Н.Володина, Д.Н. Дегтярева,- М. 1998. - 25 с.

26. Врожденные вирусные инфекции и маловесные дети Текст. / Л.Л. Ни-севич, А.Г. Талалаев, Л.Н. Каск и соавт. // Вопр. современной педиатрии. 2002. - том 1. - №4. - С.9 -13.

27. Выявление маркеров вирусов простого герпеса и цитомегалии у новорожденных и детей раннего возраста Текст. / М. Г. Меджидова, С. М. Адуева, М. Е. Федорова [и др.] // Журнал микробиологии. 2005. - № 5.-С. 74- 80.

28. Выявление сперматозоидов, инфицированных вирусом простого герпеса Текст. / Е. Е. Брагина, Р. А. Абдумаликов, J1. Ф. Курило [и др.] // Вестник дерматологии и венерологии. — 2000. — № 5. — С. 18—22.

29. Герпесвирусные инфекции Текст. / Н. П. Глинских, Т. С. Некрасова, А. П. Порываева [и др.]. — Екатеринбург: Екатеринбург. НИИ вирусных инфекций ; Изд во АМБ, 2001. - 64 с.

30. Герпетическая инфекция в акушерстве. В помощь практическому врачу Текст. / В. И. Кулаков, В. Н. Серов, Б. J1. Гуртовой [и др.]. М. : ГЭОТАР-Мед, 2001. - 30 с.

31. Гимадеев, М. М. Влияние факторов окружающей среды на репродуктивную функцию женщин и па здоровье новорожденных Текст. / М. М. Гимадеев, Ю. И. Бородин, Ю. В. Орлов // Казанский медицинский журнал. 1998. -№ 2. -С. 126- 131.

32. Гинзбург, Б. Г. Врожденные пороки развития на территориях, загрязненных радионуклидами после аварии на Чернобыльской АЭС Текст. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1998. - №2. - С. 34 - 36.

33. Глинских, Н. П. Перинатальные вирусные инфекции (этиопатогенез, диагностика, лечение и профилактика) Текст. / Н. П. Глинских, Н. В. Пацук. Екатеринбург : ЕНИИВИ ; Изд - во АМБ, 2001. - 128 с.

34. Гриноу, А. Врождённые, перинатальные и неонатальные инфекции Текст. / пер. с англ. ; под ред. А. Гриноу, Дж. Осборна, Ш. Сазерленд. М. : Медицина, 2000. - 288 с.

35. Гришаев, М. П. Цитомегаловирусная инфекция и ее лабораторная диагностика Текст. // Новости «Вектор Бест». - 1996. - № 2. - С. 6 - 8.

36. Гришаева, О. Н. Применение метода полимеразной цепной реакции при диагностике и терапии внутриутробных инфекций у новорожденных Текст. / НОВОСТИ «Вектор Бест». - 1998. - № 9. - С. 5 - 7.

37. Данилюк, Н.К. Вирус Эпштейна Барр и серодиагностика связанных с ним заболеваний Текст. / Н.К. Данилюк // Новости «Вектор-Бест». — 2000. — №4. - С.10-13.

38. Демикова, Н.С. Мониторинг врожденных пороков развития Текст. // Вестник РАМН, №11. -1999.- 29-32

39. Демикова Н.С. Программы мониторинга в системе профилактики врожденных пороков развития // Сборник научных трудов «Актуальные вопросы современной клинической генетики; М. 2001. - С. 200-205

40. Диагностика и лечение внутриутробных инфекций Текст. // Методические рекомендации для врачей неонатологов / под ред. Н. Н. Володина, Д. Н. Дегтярева. - М., 1998. - 25 с.

41. Дубинин, Н. П. Некоторые проблемы современной генетики Текст. -М. : Наука, 1994,- 124 с.

42. Естественный иммунитет и герпетическая инфекция Текст. / В. Ф. Лавров, Л. В. Ковальчук, Л. В. Ганковская [и др.] // Вопросы вирусологии. 2006. - Т. 51, № 3. - С. - 4 - 8.

43. Желнина, Т. П. Мониторинг внутриутробных конъюнктивитов Текст. // Материалы IX всероссийского научно практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, 26-27 апр. 2007 г. ; Т. 2. -М. : Санэпидмедиа, 2007. С. 31 - 32.

44. Заводнова, О. С. Врожденный токсоплазмоз Текст. / О. С. Заводнова, С. М. Безроднова, В. С. Боташева [и др.] // Российский педиатрический журнал. 2005.-№ 1.-С. 13- 16.

45. Зайдиева, З.С. Состояние фето-плацентарного комплекса при герпетической инфекции у беременных Текст. / З.С. Зайдиева // Вестник Рос.ассоциации акушеров-гинекологов. — 1999. №2. — С.27 -30.

46. Зарецкая, Н. В. Врожденные пороки развития плода Электронный ресурс. : http://www.9months.ru/press. 11.08.2007

47. Землянский, О. А. Эпидемиология внутриутробных инфекций плодов и новорожденных и оптимизация системы слежения за ними Текст.: ав-тореф. дис. . д- ра мед. наук. — М., 2004. 46 с.

48. Зворыгин, С. А. Патоморфология и морфогенез поражений мягких мозговых оболочек головного мозга при внутриутробном хламидиозе Текст. / С. А. Зворыгин, В. Я. Глумов, Е. JI Баженов // Тихоокеанский медицинский журнал. — 2000. №4. — С. 66-67.

49. Значение вертикальной передачи энтеровирусов группы Коксаки В в этиологии врожденных иммунодефицитных состояний Текст. / J1. С. Лозовская, С. М. Осипов, И. В. Зубкова [и др.] // Вопросы вирусологии. 1997. - №4.-С. 174- 179.

50. Значение различных вирусных инфекций в мертворождении, перинатальной и младенческой смертности Текст. / Л. Л. Нисевич [и др.] // Педиатрия. 1999. - № 1. - С. 4 - 10.

51. Значение ранней диагностики врожденной наследственной патологии плода в снижении перинатальной смертности Текст. / Г. М. Савельева, J1. Г. Сичинава, О. Б. Панина [и др.] // Российский вестник перипатоло-гии и педиатрии. 1997. - № 4. - С. 5 - 8.

52. Зуев, В. А. Медленные вирусные инфекции человека и животных Текст. М. : Медицина, 1988. - 256 с.

53. Индукция вирусом гриппа A/H1N1 (серовариант HswlNl) и его глико-протеидами врожденной патологии у мышей Текст. / В. К. Чувакова, Ю. С. Измайлова, Э. В. Ким [и др.] // Вопросы вирусологии. 1993. -[Б.н.] - С. 2-6.

54. К вопросу о лабораторной диагностике урогенитального хламидиоза Текст. / А. А. Чураков, А. Н. Куличенко, Е. С. Казаченко [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика. 2005. - № 2. — С. 43 - 46.

55. К вопросу о роли микоплазм в урогенитальной патологии Текст. / В. Н. Прилепская, В. И. Кисина, Е. В. Соколовский [и др.] // Гинекология. -2007.-№ 1.-С. 31 -38.

56. Кириллова, Е. И. Мониторинг врожденных пороков развития у новорожденных Текст. / Е. И. Кириллова, О. К. Никифорова, Н. А. Жучен-ко, Н. М. Побединский, Д. Г. Красников // Российский вестник пери-натологии и педиатрии. 2000.-№1. —С. 18 — 21.

57. Кирющепков, А. П. Влияние лекарственных веществ на плод Текст. /

58. A. П. Кирющенков, М. Л. Тараховский. М., 1990. - 272 с.

59. Киселев, В. И. Полимеразная цепная реакция в качестве критерия изле-ченности урогенитального хламидиоза Текст. / В. И. Киселев, М. Ф. Латыпова, Г. А. Дмитриев [и др.] // Вестник дерматологии и венерологии.-2001,- №4.-С. 4-5.

60. Кистенева, Л. Б. Цитомегаловирусная инфекция как проблема перинатальной патологии: этиология, патогенез, диагностика Текст. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 2004. - № 4. - С. 55 - 58.

61. Кицак, В. Я. Роль вирусных инфекций в патологии беременных, плода и новорожденных и механизмы реализации Текст. / В.Я. Кицак // Вестник последипломного медицинского образования. 1997. - №1. — С.44.-47.

62. Кицак, В. Я. Вирусные инфекции беременных: патология плода и новорожденных Текст. — Кольцово : ЗАО «Вектор-Бест», 2004. — 84 с.

63. Клинико-иммунологические критерии диагностики герпесвирусной инфекции новорожденных Текст. / Н. И. Кудашов, В. Г. Помелова, В.

64. B. Зубков и др. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. -1998.-№5.-С. 12-18.

65. Клинико-морфологические особенности первого триместра беременности на фоне хронического урогенитального хламидиоза Текст. / С. ТО. Юрьев, Л. Р. Мустафина, С. А. Кротов, С. С. Антонова [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. 2006. - № 1. - С. 81- 86.

66. Кобринский, Б. А. Принципы организации мониторинга врожденных пороков развития и его реализация в Российской федерации Текст. / Б. А. Кобринский, Н. С. Демикова // Рос. вестник перинатологии и педиатрии. 2001. - № 4. - С. 56 - 60.

67. Когут, Е.П. Роль энтеровирусов в патологии эмбриона, плода и новорожденных. В кн. Региональные аспекты перинатальной медицины, под ред. В.К. Козлова Текст. / Е.П. Когут, Е.Б. Наговицына. Хабаровск. [б.и.] - 1993.-С.110 -158.

68. Когут, Е. П. Значение вертикальной передачи кардиотропных энтеровирусов м хронической формы Коксаки — вирусной инфекции в этиологии ревмокардита и неревматического кордита Текст. : автореф. дис. . д ра мед. наук. - М., 1998. - 31с.

69. Козлов, В. К. Врожденные пороки развития среди причин перинатальной и младенческой смертности и возможности их профилактики Текст. / В. К. Козлов, А. Ю. Мощинецкий, С. А. Гончар // Дальневосточный медицинский журнал. — 1996. № 1. - С. 40 - 43.

70. Козлов, В.К. Клинические аспекты перинатальной медицины Дальнего Востока Текст. / В.К. Козлов. Хабаровск: изд-во Краевой психиатрической больницы. - 2003. - 266с.

71. Королькова, Е. JI. Роль преднатальной Coxsackievirus инфекции в этиологии врожденных сердечных дефектов в детях Текст. / Е. Л. Королькова, Л. С. Лозовская // Кардиология. 1989. - № 1. - С. 68-71.

72. Крикунова, Н. И. Медико-генетический мониторинг врожденных пороков развития у детей Томской области / Н. И. Крикунова, Л. П. Наза-ренко, В. П. Пузырев, Е. В. Тихомирова // Российский вестник пери-натологии и педиатрии. — 1998. №2. - С.29 - 33.

73. Количественные лабораторные методы для диагностики цитомегалови-русной инфекции у недоношенных новорожденных детей Текст. / Н. Е. Федорова, М. Г. Меджидова, О. Н. Воронцова Д. Н. Дегтярев [и др.] // Вопросы вирусологии. — 2005. №3. - С. 9 - 14.

74. Краснуха и ее диагностика Текст. / М. А. Смердова, М. П. Гришаев, В. С. Петров [и др.] // Сибирский консилиум . — 2002. № 2 (26). - С. 52 - 56.

75. Кузнецов, М. И. Краснуха во время беременности; первый опыт прена-тальной диагностики и сохранения беременности Текст. // Пренаталь-ная диагностика . 2002. - Т. 1, № 4. - С. 291 - 293 .

76. Кузьмин, В. Н. Вирусные инфекции и беременность Текст. / В. Н. Кузьмин, Л. В. Адамян. М. : Дипак, 2005. - 176 с.

77. Кузьмин, В. Н. Цитомегаловирусная инфекция у беременных и новорожденных Текст. // Лечащий врач. 2001.- № 10. - С.55-58

78. Кускова, Т. К. Семейство герпес-вирусов на современном этапе Текст. / Т. К. Кускова, Е. Г. Белова // Лечащий врач. 2004. - № 5. - С. 6 - 11.

79. Лабораторная диагностика герпесвирусной инфекции человека Текст. / Н. Д. Львов, А.В. Мельниченко, Д.Н. Львов, А.А.Никитина // Вопросы вирусологии. 2000. - №2. - С. 4-13.

80. Лабораторная диагностика краснухи Текст. // Краснуха. Синдром врожденной краснухи. Инфекционный сборник / Р. Г. Десятскова, С. Л. Ведунова, Н. Н. Мальцева, М. С. Рахимова. 2-е изд. — М. : [б. и.] -1998.-64 с.

81. Лаврова, Д. Б. Этиология и показатели высокого риска внутриутробного инфицирования плода Текст. / Д. Б. Лавров, Г. А. Самсыгина, А. В. Михайлов // Педиатрия. 1997. - № 3. - С. 94 - 99.

82. Лильин, Е. Т. Генетика для врачей Текст. / Е. Т. Лильин [и др.]. М. : Медицина, 1990. -255 с.

83. Лобзин , Ю. В. Токсоплазмоз у беременных: клинические проявления, терапия и медикаментозная профилактика врожденного токсоплазмоза Текст. / Ю. В. Лобзип, В. В. Васильев // Российский медицинский журнал. 2001. - № 5. - С. 40 - 41.

84. Лозовская, Л. С. Патология матери, ребенка и плода, связанная с вирусами, передающимися вертикально Текст. / Л. С. Лозовская, Т. Н. Ко-ноплева, Э. А. Хелленов [и др.] // Педиатрия. — 1998. №4. - С. 11-16.

85. Львов, Н.Д. Вирусы герпеса человека 6, 7 и 8 типов — новые патогены семейства Herpesviridae Текст. / Н.Д. Львов, А.В. Мельниченко // Вопр. вирусологии. 1999. - №3. - С. 105 -111.

86. Лысенко, К. А. Перинатальные аспекты микоплазменной инфекции Текст. / К. А. Лысенко, В. Л. Тютюник // Акушерство и гинекология. 2007. - № 4. - С. 8 - 11.

87. Мавзютов, А. Р. Ингибиторы полимеразной цепной реакции Текст. / А. Р. Мавзютов, В. М. Бондаренко, А. Т. Латкин // Журнал микробио логии, эпидемиологии и иммунологии. 2003. - № 3. — С. 93 -98.

88. Малаховский, Ю. Е. К вопросу о классификации цитомегаловирусной и других перинатальных инфекций у детей Текст. // Педиатрия. — 2000. -№ 1.-С. 83-87.

89. Марков, И.С. Диагностика и лечение герпетических инфекций и токсо-плазмоза Текст. // К.: Артэ. 2002. - 192с.

90. Медико-генетический мониторинг врожденных пороков развития у детей в Томской области Текст. / Н. И. Крикунова, Л. П. Назаренко, В.

91. П. Пузырев, Е. В. Тихомирова // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1998. - № 2. - С. 29-30.

92. Методологические аспекты лабораторной диагностики внутриутробных инфекций у детей Текст. / Н. Н. Володин, Д. Н. Дектярев // Клиническая лабораторная диагностика. /2005/. - Т. 46, № 4. — С. 335343.

93. Миронюк, О. В. Этиологии и патоморфология вирусных болезней у новорожденных Текст. // Перинатология сегодня. — 1997. № 3. — С. 16 — 17.

94. Мирчинк, Е. П. Медленная гриппозная инфекция, развивающаяся у потомства мышей в результате заражения самок в период беременности Текст. / Е. П. Мирчинк, В. А. Зуев, Е. К. Мирошина // Вопросы вирусологии. 1984. - № 1. - С. 32 - 35.

95. Мирчинк, Е. П. Грипп и врожденная патология Текст. / Е. П. Мирчинк,

96. B. А. Зуев // Вопросы вирусологии. 1992. - № 5 - 6. - С. 226 - 229.

97. Момыналиев, К. Т. Перспективы применения методов ДНК-диагностики в лабораторной службе Текст. / К. Т. Момыналиев, В. М. Говорун // Клиническая лабораторная диагностика. — 2000. №4. - С. 25-31.

98. Момыналиев, К. Т. Перспективы применения методов ДНК -диагностики в лабораторной службе Текст. / К. Т. Момыналиев, В. М. Говорун // Клиническая лабораторная диагностика . — 2000. № 5.1. C. 25-32.

99. Мощинецкий, А. Ю. Врожденные пороки развития и наследственные заболевания у детей в Хабаровском крае Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук. 1998. - 26 с.

100. Наговицына, Е. Б. Значение внутриутробной вирусной инфекции в этиологии врожденных пороков сердца и других кардиопатий у новорожденных детей Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук. Владивосток, 2001.-25 с.

101. Никитин, А. И. Проблемы периконцептологии и репродуктивная функция человека (роль нарушений ранних этапов репродуктивного процесса в патологии эмбрионов и плода) Текст. // Проблемы репродукции. 1995. - № 1. - С. 14-19.

102. Никольский, М. А. Инфекция, вызванная вирусом герпеса человека 6 типа, у детей: современное состояние проблемы Текст. // Рос. вестник перинатологии и педиатрии. 2008. - № 2. - С. 93 - 97.

103. Обухов, И. Л. Молекулярно-генетический подход в диагностике хла-мидиозов животных и птиц на основе полимеразной цепной реакции Текст. : обзор / И. Л. Обухов, Г. А. Шипулин, К. Н. Груздев // Сельскохозяйственная биология. 1996. - № 4. - С. 23 — 25.

104. Оптимизация основанного на полимеразной цепной реакции метода детекции хламидий в материале от больных Текст. / А. А. Чураков, А. Н. Куличенко, Ю. А. Попов [и др.] // Вестник дерматологии и венерологии. 1998.- №3.-С. 17- 19.

105. Орехов, К. В. Внутриутробные инфекции и патология новорожденных Текст. Ставрополь : Изд - во СтГМА. - 2006. - 308 с.

106. Орджоникидзе, Н. В. Цитомегаловирусная инфекция и беременность Текст. / Н. В. Орджоникидзе, В. Л. Тютюник // Вопросы вирусологии. -2002. -№ 4.-С. 59-63.

107. Охотникова, И. М. Значение внутриутробной вирусной инфекции в органной патологии детей грудного возраста Текст. / И. М. Охотникова, В. А. Агейкин, Л. С. Лозовская // Медицинский научный и учебно-методический журнал. 2001. - № 5. - С. 81 - 87.

108. Панкова, Е. Е. Мониторинг пороков развития в Краснодарском крае Текст. / Е. Е. Панкова, С. А. Матулевич, В. И. Голубцов // Материалы 2 регионального научного форума «Мать и дитя» (Сочи, 28 -30 апреля 2008г.). Сочи : [Б. и.], 2008. - С. 250 - 251.

109. Попов, В. Ф. Проблема профилактики краснухи в России Текст. / В. Ф. Попов // Краснуха. Синдром врожденной краснухи. Инфекционный сборник : 2-е издание. М., 1998. - С. 32 - 35.

110. Попова, Е. Д. Особенности врожденной цитомегаловирусной инфекции в Пермском регионе Текст. // Педиатрия. 1999. - № 4. - С. 58 - 60.

111. Пороки развития ЦНС у новорожденных с внутриутробной инфекцией Текст. / Н. А. Геппе, О. С. Нестеренко, Н. С. Нагибина [и др.] // Педиатрия. 1999. - № 5. - С. 42-^45.

112. Поражение нервной системы при врожденных инфекциях: методические рекомендации Текст. / Н. В. Скрипченко, А. П. Скромец, М. Н. Сорокина, Н. В. Скрипченко. СПб., 2003. - 48 с.

113. Пренатальная диагностика хромосомных заболеваний: новые направления и методы Текст. / B.C. Горин, В. Н. Серов, С. Г. Жабин [и др.] // Акушерство и гинекология. 2001. - №1. - С. 5-8.

114. Распространенность урогенитальных микоплазм среди лиц, обратившихся в венерологический кабинет и особенности эпидемическогопроцесса микоуреаплазмоза Текст. / В. И. Сергевнин [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 2004. №5. — С. 49 - 52.

115. Реброва, О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных данных программ STATISTICA Текст. М. : Медиа Сфера, 2006. - 305 с.

116. Ритова, В. В. Роль вирусологии в перинатальной и постнатальной патологии человека Текст. М., 1976. - С. 60 - 65.

117. Роль внутриутробной инфекции в механизмах формирования врожденных пороков развития Текст. / К. Е. Скляр, Е. М. Малкова, Н. В. Рязанцева [и др.] // Бюллетень Сибирской Медицины. — 2005. № 1. - С. 10-14.

118. Савенкова, М. С. Врожденный хламидиоз; клиника и катамнестическое наблюдение Текст. / М. С. Савенкова, Т. М. Парамонова, Л. Ю. Неиж-ко // Педиатрия, 2004. № 1. - С. 42 - 46.

119. Семенов, В. М. Клинико-эпидемиологическая характеристика хлами-диозов Текст. // Российский медицинский журнал. 2000. - № 1. - С. 48 - 52.

120. Семенов, Б.Ф. Краснуха. Синдром врожденной краснухи. Информ. сборник Текст. / Б.Ф. Семенов, Д.И. Зеленская.- М.: Пастер-Мерье-Коннот. 1998.- 53 с.

121. Сенчук, А.Я. Перинатальные инфекции Текст. / А.Я. Сенчук, Ю.А. Дубоссарская, О.В. Голяновский и соавт. М.: МИА. - 2005. - 318с.

122. Сергиенко, В. И. Математическая статистика в клинических исследованиях Текст. / В. И. Сергиенко, И. Б. Бондарева. М. : Изд. дом «ГЭОТАР - Мед», 2001. - 256 с.

123. Серов В.И., Кулаков В.И. Руководство по безопасному материнству / М.: Триада-Х. 2000. - 531с.

124. Серов, В. И. Перинатальные исходы у беременных с инфекционными заболеваниями и плацентарной недостаточностью Текст. / В. И. Серов, В. Д. Тютюник, В. В. Зубков, 3. С. Зайдиева // Акушерство и гинекология. 2002. - № 3. - С. 16 - 21.

125. Сидорова, И. С. Внутриутробные инфекции: хламидиоз, микоплазмоз, герпес, цитомегалия Текст. // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1998. - № 3. - С. 7 - 13.

126. Симпсон, Дж. Л. Генетика в акушерстве и гинекологии Текст.: пер. с англ. /- М.: Медицина, 1985. 352 с.

127. Система мониторинга врожденных пороков развития в Российской Федерации Текст. / Н. С. Демикова, А. С. Лапина, А. Е. Фельдман, И. Б.

128. Тестер // Информационные технологии в здравоохранении. — 2002. № 8.-С. 8-10

129. Скворцов, В. В. Цитомегаловирусная инфекция в клинике внутренних болезней Текст. / В. В. Скворцов, Р. Г. Мязип, Д. Н. Емельянов // Лечащий врач. 2004. - № 9. - С. 8 - 11.

130. Состояние вегетативной нервной и иммунной систем у инфицированных вирусом простого герпеса Текст. / О. А. Малышева [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2001, - № 3. - С. - 37 - 40.

131. Состояние и последующее развитие новорожденных детей от матери с цитомегаловирусной инфекцией Текст. / Г. Н. Веденеева, Б. А. Фоменко, И. И. Евсюкова [и др.] // Российский вестник перинатологии и педиатрии. 1997. - № 3. - С. 25-29.

132. Сравнение эффективности лабораторных методов выявления цитоме-галовируса в аутопсийном материале Текст. / А. А. Меджидова, Л. Л. Нисевич, Н. Е. Федорова [и др.] // Журнал микробиологии и эпидемиологии. 2002. - № 2. - С. 63 - 69.

133. Тенденция развития эпидемического процесса краснухи, кори и паротита в Москве Текст. / Н. И. Брико, И. Н. Лыткина, Г. Г. Чистякова [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2000. - № 12. — С. 11-14.

134. Тератология человека Текст. : руководство для врачей / И. А. Кириллова, Г. И. Кравцов, Г. В. Кручинский [и др.] ; под ред. Г. И. Лазюка. -М. : Медицина, 1991. 480 с.

135. Тютюник, В. Л. Течение беременности и перинатальные исходы при хронической плацентарной недостаточности и инфекции Текст. // Проблемы беременности. 2000. - № 2. - С. 46 - 50.

136. Учайкин, В.Ф. Краснуха. Протоколы лечения и проблемы профилактики. В кн.: Краснуха. Синдром врожденной краснухи. Инфекционный сборник, 2-е издание Текст. / В.Ф. Учайкин, Л.Д. Слученкова, О.В. Шамшева. -М: [б.и.]. 1998. - 64с.

137. Устьянцев, В. П. Цитопатология экспериментальных панкрефтитов и гепатитов, вызываемых вирусами Коксаки группы В Текст. //Автореф. дис. . канд. мед. наук. Свердловск, 1971. - 18 с.

138. Фарбер, П. А. Клинико-морфологические особенности сочетанного течения цитомегалии с другими вирусными инфекциями Текст. / Н. А. Фарбер, И. О. Харит, Т. Я. Лярская // Смешанные и хронические вирусные инфекции. М., 1975. - С. 237 - 244.

139. Федина, Е.Д. Заболевания передающиеся половым путем / Е.Д. Федина, Н.А. Зигангирова Электронный ресурс. http://www.vector.nsc.ru/ 14.11.2006

140. Фисенко, Ю. Ю. Краснуха: клинико-иммунологический аспект Текст. / Ю. Ю. Фисенко, В. А. Фисенко, Н. Т. Тихонова // Педиатрия. — 2000. -№ 6. С. 91 - 95.

141. Фогель, Ф. Генетика человека Текст. : в 3 т. / Ф. Фогель, А. Мотуль-ски. М. : Мир, 1990.- 378с.

142. Фризе Г., Кахель В. Инфекционные заболевания беременных и новорожденных «Мдиципа» 2003. Пер. с нем. М. 422с.

143. Хелленов, Э.А. Врожденные вирусные инфекции (факторы риска, клинические проявления, терапия и профилактика) Текст.: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 1993.- 42с.

144. Хламидиоз у женщин: сопоставление разных методов диагностики, факторы риска и клинические проявления Текст. / А. А. Хранин, О. В. Решетников, Н. А. Кривенчук [и др.] // Вестник дерматологии и венерологии. 2006. - № 2. - С. 40-43.

145. Хорошко, Н. В. Ортомиксовирусы (вирусы гриппа) Текст. / Н. В. Хо-рошко, Н. Г. Ожерельева // Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / под ред. А. А. Воробьева. М. : МИА, 2004. - С. 560 - 565.

146. Цинзерлинг, А. В. Современные инфекции. Патологическая анатомия и вопросы патогенеза Текст. / А. В. Цинзерлинг. — СПб: Сотис, 1993. — 363с.

147. Цинзерлинг, В. А. Перинатальные инфекции (вопросы патогенеза, морфологической диагностики и клинико-морфологических сопоставлений) Текст. : руководство для врачей / В.А. Цинзерлинг, В.Ф. Мельникова. СПб. : Сотис, 2002. - 352с.

148. Цитогенетические исследования в перинатальной диагностике Текст. / Е. Н. Генетецкая, О. JI. Мальмберг, О. Б. Панина, Е. Н. Лукаш // Акушерство и гинекология. — 2003. №2. - С. 9 — 13.

149. Цитомегаловирусная инфекция у детей раннего возраста (клиника, диагностика, современные возможности терапии) Текст. : руководство для врачей / А. Коровина, А. Л. Заплатникова, А. В. Чебуркин, И. Н. Захарова. -М. : Медпрактика, 2001. — 64 с.

150. Цитомегаловирусная инфекция у пациенток с привычным невынашиванием беременности Текст. / В. М. Сидельникова, Г. Т. Сухих, Л. В. Ванько, Л. Г. Дадльян // Акушерство и гинекология. 1996. -№ 4. - С. 21 - 24.

151. Шабалов, Н.П. Проблемы классификации внутриутробных инфекций Текст. / Н. П. Шабалов А. А. Асратян // Педиатрия. 2000. - №1. - С.87-91.

152. Шабалов, Н.П. Основы перинатологии: Учебник Текст. / Н.П. Шабалов, Ю.В. Цвелёв. -М.: МЕДпрессинформ. -2004. 633 с.

153. Шахова, НИ. Инфекции и беременность / Н.И. Шахова, В.В.Шестакова Электронный ресурс. http://www.mama.ru/club/hr/ 18.09.2006

154. Эпидемиология врожденных пороков развития в Тульской области Текст. / А. Э. Ломовцев, В. С. Гелынтейн, Ж. В. Филимонова [и др.] // Здравоохранение Российской федерации. 2002. - № 5. - С. — 36 — 37.

155. Юдина, Е.В. Внутриутробные инфекции: как поставить диагноз плоду? Текст. //Пренатальная диагностика. — 2006. том 3. - С. 172-183.

156. Adler, M. W. Sexually Transmitted Disease Sevices Atlanta Text. // Sex. Transm. Inf. 2003. - Vol. 79. - P. 160 - 184.

157. Subclinical rubella reinfection during pregnancy followed by transmission of virus to the fetus Text. / Y. Adoudy, A. Fogel, B. Bamea [et al.] // J. Infect. 1997. - Vol. 34. - P. 273 - 276.

158. Alford, S.A. Congenital perinatal cytomegalovirus infections Text. / S. A. Al-ford, S. Stagno, W. J. Britt // Rev. Infect. Dis. 1991. - N. 12 . - P. 745 - 743.

159. Ando, Y. HHV 6 infection during pregnancy and spotaneous abortion Текст. / Y. Ando, K. Kakimoto, Y. Ekuni et al. // Ibid. - 1992. - Vol.340. -P. 1289 -1290.

160. Axelsson, C. Coxsackie D virus infection in women with miscarriage Text. / C. Axelsson, K. Bondestam//J. Med. Virol. 1993. - V. 39. - P. 282 - 285.

161. Fetal infection after manernal reinfection with rubella: criteria for defining reinfection Text. / J. M. Best, J. E. Banatvala, P. Morgan- Carner, E. Miller // Br. Med. J. 1989. - Vol. 299. - P. 773 - 775.

162. Best, J. M. Rubella reinfectionen. Current medical literature // Virology. -1996.-Vol. 2. -P. 35-40.

163. Improved silica-guanilin DNA isolation procedure based on selective binding of bovine alpha-casein tu silica particles Text. / Boom, R. Sol C. Beld M. Weet J., Goudsmit J. and Wertheim-van-Dillen P. // J. of CI 1999. -Vol.37. -№3. - P. 615-619.

164. Bowles, N.E. The detection if cardiopatropic viruses in the myocardium of patients with arrythmogenic right verticular dysplasia/ cardiomyopathy Текст. / N.E. Bowles, J. Ni, F. Marcus, J.A. Tombin // J. Am. Coll. Cardiol. 2002. - Vol.39. - P.892 -895.

165. Brown, G. C. Relationship of congenital anomalies and maternal infection with selected enteroviruses Text. / G. C. Brown, R. S. Karunas // Am. J. Epidemiol. 1972. - V. 95. - P. 207 - 217.

166. Bufler, С. Б.Н. / C. Bufler, C. Dewsnap, G. Evangelou // Sex. Transmit. Infect. 2003. - Vol. 79. - P. 349.

167. Busby, A. Eye anomalies: seasonal variation and maternal viral infections Text. / A. Busby, H. Dolk, B. Armstrong // Epidemiology. 2005, May. -Vol. 16(3).-P. 317-322.

168. Congenital malformations in 100 000 consecutive births in Emilia Romanga Region Northen Italy: comparison with the EUROCAT data Text. / E. Cal-zolari [et al.] // Eur. J. Epidemiol. 1987. - N 3. - P. 423 - 430.

169. Camier, J.M. Influenza and the pregnant women Текст. / J.M. Carnier // Arch. Pediatr. 2000. - Vol.7. - P.489 -491.

170. Neonatal screening for congenital cytomegalovirus infections Текст. / A. Casteels, A. Naessens, F. Gordts, et al. // J. Perinat. Med. -1999. Vol.27. -P.116- 121.

171. Chakravarti, A. Rubella prevalence and its transmission in children Text. / A. Chakravarti, M. Jain // Indian J. Pathol. Microbiol. 2006, Jan. -Vol. 49(1).-P. 54 - 56.

172. Chandy, K. G. Coxsackie В antibodies in rheumatic valvular heart disease. Text. / K. G. Chandy, T. D. John, P. Vukidai // Lancet. 1979. - Vol. 1. -P. 381 - 385.

173. Cherry, J.D. Enterovirusses. In: Remington J.S., Klein J.O. eds . Infectionus diseases of the fetus and newborn infant Текст. / J.D. Cherry Philadelphia. - 2001.-P.477-518.

174. Correlates of placental infection with cytomegalovirus, parvovirus B19 or human herpes virus 7 Текст. / S.S. Chow, M.E. Craig, C.F. Jacques et al. // J. Med. Virol. 2006. - Vol.78. - P.747-756.

175. Rosolia congenital: Descrizione di un caso a manifestazione cutanea insolita Текст. / P. Coppo, R. Salomone, G. Becchis, M. Pippione // G. Ital. Dermatol. e Venereol. 1999. - Vol.6 - P.587-590.

176. Cradock Watson, J.E., Delection of rubella virus in fetal and placental tissue and the throtats of neonatales after serolodically confirmed rubella in pregnancy Текст. / J.E. Cradock — Watson, E. Miller // Prenat. Diagn. — 1989,- Vol.9.-P.91-96.

177. Human cytomegalovirus infection and abortion: an immunohistochemical study / Spano L. Cruz, Pereira F E Lima et al. // Med. Sci Monit. 2002, Jun.-N. 8(6).-P. 230 -235.

178. Guideline for surveillance of congenital rubella syndrome and rubella Text. / F. T. Cutts, J. Best, M. M. Sdiquiira [et al.] // Department of Vaccines and Biologicals. Geneva : World Health Organization, 1999.

179. The first newborn with congenital rubella syndrome during the rubella epidemic in The Netherlands in 2004 2005 Текст. / А.С. De Mol, S. Vrancken, A.J. Eggink et al. // Ned. Tijdschr. Geneeskd. - 2006. - Vol.150. -P.741 746.

180. DiMichele, L. J. Rapid, species-specific detection of lactic acid bacteria from beer using the polymerase chain reaction. Text. / L. J. DiMichele, M. E. Lewis // J. Am. Brew. Chem. Soc. 1993. - Vol. 51. - P. 63 - 66.

181. Dommerques, M. Fetal enteroviral infection with cerebral ventriculomegaly and cardiomyopathy. Text. / M. Dommerques, J. Petitjean [et al.] // Fetal. Diagn. Ther. 1994. - V. 9. - P. 77 - 78.

182. Eskild, A. Epstein-Barr virus infection during pregnancy and the risk of adverse pregnancy outcome Текст. / A. Eskild, A.L. Bruu, B. Stray-Pedersen, P. Jenum // BJOG. 2005 . - Vol. 112. - P. 1620-1624.

183. EUROCAT registry description 1979-1990. Edd. H.Dolk, S.Goyens, M.F. Lechat. — Brussels. 1991.

184. Fluit, A. C. Detection of Salmonella species in fecal samples by immu-nomagnetig separation and PCR. Text. / A. C. Fluit , M. N. Widjojoat-modjo, J. Verhoef// J. Clin.Microbiol. 1995. - Vol. 33. - P. 1046 - 1047.

185. Fraencel, С. H. Reconstitution of active tobacco mosaic virus from its inactive protein and nucleic components Text. / С. H. Fraencel, R. C. Williams // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S. 1955. - Vol. 41. - P. 690-698.

186. Diagnosis and treatment of cytomegalovirus (CMV) infection: in the fetus and the newborn. Text. /G. Gramia, R. Freddara, E. Ruffini [et al.] // G. Ital Chemiother. 1993. - Vol. 38, N.l -3.-P. 51-53.

187. Carnier, J. M. Influenza and the pregnant women Text. // Arch. Pediatr. -2000. N. 7 (suppl. 3). - P. 489 -491.

188. Gibbs, R. S. The origins of stillbirth: infectious diseases Text. // Semin Perinatol. 2002, Feb.-Vol. 26(1).-P. 75 - 8.

189. Griffits, P. D. Strategies to prevent CMV infection in the neonatale. Text. // Semin Neonatol. 2002. - Vol. 7, N 4. - P. 293 - 299.

190. Coxackievirus genome in myocardium of patients with arrythmogenic right ventricular dysplasia/ cardiomyopathy Текст. / I.M. Grumbach, A. Heim, S. Vonhof et al. // Cardiology. -1998. Vol.89. - P.241 -245.

191. Raine syndrome associated with cytomegalovirus infectionText. / T. Gunes, S. Kurtoglu, N. Cetin [et al.] // Turk. J. Pediatr. 2005, Jan-Mar. - Vol. 47(1). - P.89 - 91.

192. Hakosalo, J. Influenza epidemic and congenital defects Text. / J. Hakosalo, L. Saxen//Lancet. 1971. - V. 2. - P. 1346 - 1347.

193. Hoppen, T. Intrauterine herpes simplex virus infection Text. / T. Hoppen, A. M. Eis-Hubinger, R. L. Schild [et al.] // Klin Padiatr. 2001, Mar -Apr. -Vol. 213(2). P. 63 -68.

194. Intrauterine herpes simplex virus infections Text. / C. Ilutto, A. Arvin, R. Jacobs [et al.] // J. Pediatr. 1987, Jan. - Vol. 110(1). - P. 97 -101.

195. Il'inskikh N. N. Age sensitivity characteristics of the human and mouse chromosome apparatus in exposure to viral infection Text. / N. N. Il'inskikh //Tsitologiia. 1981, May. - Vol. 23(5). - P. 564 - 569.

196. Influenza virus infection In the second and third trimesters of pregnancy: a clinical and seroepidemiological study Text. / W. L. Irving, D. K. James, T. Stephenson [et al.] // В JOG .-2000. -Vol. 107(10).-P. 1282- 1289.

197. Epidimiolgical characteristics of zytomegalovirus infection in mothers and their infants Text. / M. D. Yow, D. W. Williamson. L. J. Leeds [et al.] // Am J Obst Gynecol. 1988.-Vol. 158.- 1189- 1195.

198. A case report of Kabuki make-up syndrome with cytomegalovirus infection Text. / Y. Kashiwagi, H. Numabe, H. Kawashima [et al.] // J. Infect. -2004, Apr. Vol. 48(3). P. 278 - 282.

199. Comparison of methods for extraction of nucleic acids from hemolytig serum for PCR amplification of hepatitis В virus DNA sequences. Text. / A. Klein, R. Barsuk, S. Dagan [et al.] // J. Clin. Microbiol. 1997. - Vol. 35. -P. 1897 - 1899.

200. The role of prenatal Coxsackievirus infection in the etiology of congenital heart defects in children Текст. / E.L. Korolkova, L.S. Losovskaia, L.I. Tadtaeva, E.A. Khellenov // Kardiologiia. 1989. - Vol.29. - P.68 -71.

201. Neonatal aortic arch thrombosis as a result of congenital cytomegalovirus infection Text. / M. Lanari, T. Lazzarotto, I. Papa [et al.] // Pediatrics. -2001, Dec.-Vol. 108(6).-P. 114.

202. Lansdown, A. B. Histological observations on thymic development in fetal and newborn mammals subject to intrauterine growth retardation Text. // Biol. Neonate. 1977. - Vol. 31 (5-6). - P. 252 - 259.

203. Human herpesvirus 6 infection of the female genital tract Текст. / C.T. Leach, E.R. Newton, S. Mc Parlin et al // J. Infect.Dis. 1994. - Vol.169. -P.1281 -1283.

204. Leek, I. Record, and the epidemiology of malformations Text. // Paediatr. Perinat. Epidemiol. 1996, Jan.-Vol. 10(1).-P. 2 - 16.

205. Lindqvist, R. A rapid sample prep-aration method for detection of food pathogens based on buoyant density centrifugation Text. / R. A. Lindqvist, B. Norling, S. T. Lambertz // Appl. Microbiol. 1997. - Vol. 24. - P. 306 -310.

206. Li, RY.Growth retardation and microcephaly induced in mice by placental infection with murine cytomegalovirus Text. / RY Li, Y. Tsutsui // Teratology. 2000, Aug. - Vol. 62(2). - P. 79 - 85.

207. Characteristic of human herpesvirus 6 Текст. / С. Lopez, P. Pellett, J. Stewart et al. // J. Infekt. Dis. 1998. - Vol.157. - P. 1271-1273.

208. Miller, E. Consequences of confirmed maternal Rubella at Successive Stage of Pregnancy Text. / E. Miller, J. E. Gradock-Watson, Т. M. Pollok // Lancet. 1982.-Vol. 2.-P. 781 -784.

209. Mulvihill, J. J. Perspectives in mutation epidemiology: 6 A 1983 view on sentinel phenotypes ICPEMC Working Paper 5/6. Text. / J. J. Mulvihill, A. Czeizel // Biol Zbl . 1985. - Vol. 104. - P. 457 - 470.

210. Obara, Y. Distribution of herpes simplex virus type 1 and 2 genomes in the human spinal ganglia Text. / Y. Obara // Hokkaido Igaku Zasshi. 1994. -Vol.69.-P.l 132- 1139.

211. Olcen, P. Rapid diagnosis of bacterial meningitis by a seminetsted PCR strategy Text. / P. Olcen, P. G. Lantz, P. Radstrom // Scand. J. Infect. Dis. 1995.-Vol. 27.-P. 537 - 539.

212. Pass, R. F. Comentari: Is there a role for prenatal diagnosis of congenital cytomegalovirus infections Text. // Pediatr. Infect. Dis. 1992. - N. 11. - P. 608 - 609.

213. Peckham, C.S. Cytomegalovirus in the neonate Текст. / C.S. Peckham // J. Antimicrob. Chemotherapy. 1989. - Vol.23. - P. 17 -21.

214. Peckham, C.S. Cytomegalovirus infection in pregnancy Текст. / C.S. Peckham // J. Obstet. Cynecol. 1988. - Vol.8. - P.269 -273.

215. Peckham, C.S. Cytomegalovirus infection: congenital and neonatal disease Текст. / C.S. Peckham // Scand. J. Infec. Diseases. 1991. - Vol.80. - P.82 -87.

216. Detection of parvovirus В19, cytomegalovirus and enterovirus infections in cases of intrauterine fetal death Текст. / К. Petersson, О. Norbeck, M. Westgren, K. Broliden // J. Perinat. Med. 2004. - Vol.32. - P.516-521.

217. Plotkin, S. A. The eradication of rubella Text. / S. A. Plotkin, M. Katz, J. R. Cordero // JAMA. 1999. - Vol. 281. - P. 561- 562.

218. Plotkin S.A. The history of rubella and rubella vaccination leading to elimination Текст. / S.A. Plotkin. W.A.Orenstein, // Clin. Infect. Dis. 2006. -Vol.43. - P. 164-168.

219. Maternal cytomegalovirus excretion and perinatal infection Text. / D. W. Reynold, S. Stagno, T. S. Hosty [et al] //N. Engl. J. Med. 1980. - Vol. 289. - P. 1- 5.

220. Placental candidiasis: report of four cases, one with villitis Text. / F. Rivasi, B. Gasser, A. Bani [et al.] // APMIS. 1998. - Vol. 106, № 12. - P. 1 165- 1169.

221. Prevention of congenital rubella syndrome — what makes sense in 2006 Text. / J.L. Robinson, B.E. Lee, J.K. Preiksaitis et al. // Epidemiol. Rev. -2006.-Vol.28. -P.81 -87.

222. Rosenberg, H.S. Cardiovascutor effects of congenital infections. // Am. J. Cardiovascutor Pathol. 1987; 1(2): 147-156.148 {

223. Saiki, R.K. , Sharf S., Faloona F. Enzymatic amplification ofb-globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia Text. / Clin. Obstet. Cynaecol. 1985. - Vol.86. - № 3. - P. 281 -284.

224. Isolation of a new virus, HBLV, in patients with lymphoproliferative disorders Текст. / S.Z. Salahuddin, D.V. Ablash, P.D. Markham et al. // Science. 1986. - Vol .234. -P.596-601.

225. Schust D.J. Herpes simplex virus blocks intracellular transport of HLA — G in placentally derived human cells Текст. / D.J. Schust, A.B. Hill, H.L. Ploegh // J. Immunol. 1996. Vol.157. - P.3375- 3380.

226. Fetal hepatic calcifications: prenatal diagnosis and outcome. Text. / M.J. Simchen, A. Toi, M. Bona et al. // Am. J. Obstet. Gynecol. 2002. -Vol.187.-P.1617-1622.

227. Human cytomegalovirus infection and abortion; an immunohistochemical study Текст. / L.C. Spano, L. Pereira, G. Basso, P.R. Vargas // Med.Sci. Monit. 2002. - Vol.8. - P.230 -235.

228. Stagno S. Herpes infection in the neonate and children Text. / S.Stagno, R. Witley. Ed.K.Holmse, 1990. -P.863 - 888.

229. Maternal cytomegalovirus infection and perinatal transmissionText. / Stagno S. A., Pass R. F., Dworsky M. E., Alfred C. A. // Clin. Obstet. Cynaecol. 1982.- Vol.86. -№ 2. - P. 284 -285.i

230. Possible associaton of influenza A with fetal loss; investigation of a cluster of spontaneous abortions and stillbirthsText./ Stanwell — Smith R., Parker A. M., Chakraverty P. et al. // Commun. Dis. Rep. CDR Rev. 1994. Vol. 4(3). - P 28 - 32.

231. Influenza A virus infection and cardic arrhythmia during the neonatal period Text./ Steininger C., Holsmann H., Zwiaur K.F. et al. // Scand. J. Infect. Dis. 2002. - Vol.34(10). - P. 782 -784.

232. Чернобыльская авария: Аномалии щитовидной железы у детей, врожденные аномалии и другая связанная с радиацией информация. Первые десять лет / Takeichi Nubuo изд-во Hirosima-Nagasaki Peace Foundation. - Япония, 1996 - 25 с.

233. Intrauterine herpes simplex infection Text. / G. T. Vasileiadis , H. W. Roukema , W. Romano, J. C. Walton , R. Gagnon // Am. J. Perinatol. -2003, Feb. Vol. 20(2). - P. 55 - 58.

234. Cytomegalovirus infection in pregnancy Text. / L. Z. Wen, W. Xing, L.Q. Liu [et al.] // Int. J. Gynaecol Obstet. 2002. - Vol. 79, N. 2. - P. 111 - 116.

235. Identification of human herpervirus 6 as a causal agent for exanthema subitum Текст. / К. Yamanishi, Т. Okuno, К. Shiraki et al. // Lancet. — 1988. -Vol.1 -P.1065 -1067.

236. Zhadan, I. A. Comparative analysis of the frequency and type of chromosomal aberrations in somatic cells in maternal-fetal infections Text. // Tsi-tol Genet. 2004, Mar-Apr. - Vol.3 8(2). - P. 60-64.

237. Case report: primary human herpesvirus — 6 associated with an afebrile seizure in a 3 week-old infant Text. / D.M. Zerr, L.C. Yeung, R.M. Obrigewitch et al. // J. Med. Virol. - 2002. - Vol.3.- P.384 -387.

Информация о работе

Ивахнишина, Наталья Михайловна
кандидата биологических наук
Хабаровск, 2009
ВАК 03.00.06

Диссертация

Перинатально значимые вирусы в этиологии врожденных пороков развития при фетоинфантильных потерях - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы