Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Перекисная модификация гемоглобина и нарушение свойств мембран эритроцитов

ВАК РФ 03.00.02, Биофизика

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Петренко, Юрий Михайлович

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1 , ЭРИТРОЦИТЫ: СТРУКТУРНО - ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА.

1.1. Эритроциты — клетки, которые наиболее подвержены поражению активными формами кислорода.

1.1.1. Окислительная деструкция гемоглобина — как возможное ключевое звено гемолиза эритроцитов в условиях in vivo.

1.2. Представления об основных механизмах окисления гемоглобина под действием различных факторов.

1.2.1. Краткие сведения о строении гемоглобина и механизме его функционирования.

1.2.2. Активные формы кислорода — ключевое звено окислительной деструкции гемоглобина в аэробных условиях.

1.3. Антиокислительные системы эритроцитов.

1.3.1. Ферментные антиоксиданты.

1.3.1.1. Глутатионпероксидаза и глутатионредуктаза. Методы определения функциональной активности глутатионпероксидазы.

1.3.1.2. Каталаза: локализация, структура, механизм действия. Методы исследования функциональной эффективности каталазы.

1.3.1.3. Супероксиддисмутаза: локализация, структура, механизм действия. Методики определения функциональной эффективности СОД.

1.3.1.4.Метгемоглобин как пероксидаза.

1.3.2.Неферментативные антиоксиданты. Аскорбат.

1.3.2.1 Общефизиологическое значение.

1.3.2.2 Роль аскорбата в эритроцитах.

1.3.2.3. Окислительно-восстановительные свойства аскорбата.

1.3.2.4. Метаболизм аскорбата.

1.3.2.5. Аскорбат как пероксидазный субстрат.

ГЛАВА 2. ТРАНСПОРТ АСКОРБАТА В ОРГАНИЗМЕ. АСКОРБАТТРАНСПОРТНАЯ ФУНКЦИЯ ЭРИТРОЦИТОВ.

2.1. Роль аскорбата в организме. Современный взгляд на его физиологическое действие и метаболизм в организме.

2.2. Поступление аскорбата в организм человека. Всасывание в же луд очно кишечном тракте.

2.3. Транспорт аскорбата к органам и тканям.

2.3.1 Роль аскорбата в плазме.

2.3.2 Усвоение окисленной и восстановленной формы аскорбата из кровяного русла клетками органов и тканей.

2.3.2.1 Различие в проницаемости биомембран для окисленной и восстановленной формы аскорбата. Гипотезы.

2.3.2.2 Восстановление дегидроаскорбата в клетках высших организмов.Физиологическая значимость процесса.

2.3.2.3. Различие в усвоении окисленной и восстановленной форм аскорбата тканями синтезирующих и несинтезирующих аскорбат животных.

2.3.3. Метаболизм аскорбата в организме.

2.3.3.1 Факторы, оказывающие влияние на усвоение аскорбата клетками и время жизни его в организме.

2.3.3.2 Закономерности выведения аскорбата и его метаболитов из организма.

2.3.3.3 Цинга: Клинические проявления. Предполагаемый патогенез.

2.3.3.4 Роль крови, в частности эритроцитов, в поддержании целостности пула аскорбата.

ГЛАВА 3 „ СВЕДЕНИЯ О РЕАКЦИИ ФЕНТОНА.

ГЛАВА 4«МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.82 с

4.1 .Препаративные методы.

4.1.1. Приготовление растворов и сред.

4.1.2. Методика выделения эритроцитов.

4.1.3. Получение чистого гемоглобина.

4.2. Аналитические методы.

4.2.1. Перманганатометрический метод определения концентрации Н2О2.

4.2.2. Методика облучения ультрафиолетовым светом. Облучение биообъектов светом видимого диапазона.

4.2.3. Методика проведения экспериментов в анаэробной среде.

4.2.4. Метод динамической калориметрии.

4.2.5. Спектрофотометрические исследования.

4.2.5.1.Спектрофотометрические исследования окисления гемоглобина.

4.2.5.2. Динамическая спектрофотометрия.

4.2.5.3. Спектрофотометрические исследования окисления аскорбата.

4.2.6. Определение концентраций закисного и окисного железа.

4.2.7. Флуориметрические измерения.

4.2.8. Хемилюминесцентные исследования.

4.2.9. Метод электронного парамагнитного реяяшя Регистрация спектров ЭПР.

4.2.10. Метод электрической импедансометрии.

4.2.11. Метод электронной сканирующей микроскопии

4.3. Статистическая обработка данных.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

ГЛАВА

ПЕРЕКИСЬ

ЗАВИСИМЫЕ

ПРОЦЕССЫ

МЕТГЕМОГЛОБИНООБРАЗОВАНИЯ В ЭРИТРОЦИТАХ.

5.1 .Цепной перекисный механизм окисления гемоглобина (ЦПОГ).

5.1.1 Феномен цепного перекисного окисления гемоглобина, его механизм.

5.1.2. Применение ЦПОГ в аналитических целях.

5.2.Источники и метаболизм перекиси водорода в эритроцитах.

5.2.1.Тепловые эффекты при разложении перекиси водорода в различных путях ее деструкции.

5.2.1.1. Каталазный путь деструкции перекиси водорода.

5.2.1.2.Пероксидазный путь деструкции перекиси водорода.

5.2.1.3. Деструкция перекиси водорода по Фентоновскому пути.

5.2.2.Главный метаболический путь деструкции перекиси водорода в эритроцитах.

5.2.3.Источникиобразования перекиси водорода.

ГЛАВА 6. ПЕРЕКИСЬ - ЗАВИСИМЫЕ МЕХАНИЗМЫ МЕТГЕМОГЛОБИНООБРАЗОВАНИЯ.

6.1.Механизм метгемоглобинообразования в эритроцитах при действии нитрит ионов.

6.2.Метгемоглобинообразование, индуцированное гидроксиламином.

6.3.Фототетрациклиновая индукция метгемоглобинообразования в эритроцитах.

ГЛАВА 7, НАРУШЕНИЕ СВОЙСТВ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ.

РОЛЬ ГЕМОГЛОБИНА В СОХРАНЕНИИ СТРУКТУРЫ ЭРИТРОЦИТОВ.

7.1. Осмоустойчивость эритроцитов как параметр механической прочности их мембран.

7.1.1. Механические напряжения в мембранах сферических клеток.

7.1.2. Изменение размеров эритроцитов при набухании в гипоосмотических средах.

7.2. Влияние условий среды, затрагивающей состояние гемоглобина в эритроцитах,на механическую прочность их мембран.

ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

ПОЛ — перекисное окисление липидов. 1 - '

Г-6-ФД — глюкозо - 6- фосфат дегидрогенаэа.

Нв — дезоксигемоглобин г ;

Нв02 — оксигемоглобин

МШв, Нв+ — метгемоглобин

ГДА ~ глутаральдегид

СЗЗН-рХ - глутатионпероксидаэа

ОБН - восстановленный глутатион

08 Б О - окисленный глугатион

СОБ — супероксиддисмутаза

АН2 — аскорбиновая кислота

АН (АН ) — семндегидроаскорбат радикал

А — дегидроаскорбат

Рх — пероксидаэа хрена

ГК— гексокиназа

ГФИ — гексозофосфатизомераза

ФФК—фосфофруктокиназа

ТФИ — триозофосфатизомераза

ГАФД — глицеральдегидфосфатдегидрогеназа

ФГК— фосфоглицераткиназа

МФГМ — монофосфоглицератмутаза

ДФГМ — дифосфоглицератмутаза

ДФГФ — дифосфоглицератфосфатаза

ПК — пиру ватки наза

ЛДГ — лактатдегидрогеназа

Г-6-ФД — глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа

6-ФГД — 6-фосфоглюконатдегидрогеназа

ГлР — глутатионредуктаза

ГлП — глутатионпероксидаза

ТК — транскетолаза

ТА — трансальдолаза

ФРИ — фосфорибозоизомераза

ФРМ — фосфорибомутаза

НФ — нуклеотидфосфатаза

ГЦС-у - глутамилцистеинсинтетаза

НСГА — несфероцитарная гемолитическая анемия

ГМШ (ПФП) — гексозомонофосфатный шунт, пентозофосфатный путь

6-ФГ — 6-фосфоглюконат Г-б-Ф — гтокозо-6-фосфат ф-6-Ф — фруктозо-6-фосфат ФДФ — фруктозо-1,6-дифосфат ГАФ — глицеральдегидфосфат ДАФ — диоксиацетонфосфат ГА — глицеральдегид ДА — диоксиацетон 1,3 ДФГ — 1,3-дифосфоглицерат 2,3 ДФГ — 2,3-дифосфоглицерат ФЕП — фосфоенолпируват GSH — глутатион восстановленный GSSG—глутатион окисленный АТР — аденозинтрифосфат ADP — аденозиндифосфат AMP — аденозинмонофосфат

NAD+ — никотинамид адеи индинуклеотид окисленный NAD-H— никотинамид адениндинуклеотид восстановленный NADP+ — никотинамид адениндинуклеотидфосфат окисленный NADP-H—никотинамид адениндинуклеотидфосфат восстановленный

Введение Диссертация по биологии, на тему "Перекисная модификация гемоглобина и нарушение свойств мембран эритроцитов"

Среди форменных элементов крови эритроциты по численности занимают первое место. Рассматриваемые раньше как простейшие клетки, предназначенные для выполнения сугубо специфической роли в организме, осуществления транспорта кислорода и двуокиси углерода, эти клетки в меньшей степени чем другие клетки привлекали интерес исследователей разных специальностей. Чтобы образно подчеркнуть их простоту в структурном отношении, в литературе даже использовалось выражение "мешок с гемоглобином". Именно на такой основе представлений об эритроцитах многие теоретики строили свои умозрительные теоретические конструкции, в частности, моделируя и объясняя наличие у них специфической дискоидной формы, присущей только нормальным эритроцитам, называемых дискоцитами. Однако такие теоретические конструкции даже удовлетворительно не объясняли многообразие встречаемых форм эритроцитов, феномен их легкой трансформации, происходящей под действием самых разнообразных факторов. Это свидетельствует об отсутствии в литературе ясной картины в вопросе формообразования для эритроцитов. Так как анализ формы эритроцитов давно используется в медицинских целях в качестве диагностического теста для выявления различных патологий, то более точное знание, чем же все - таки определяется специфическая дискоидная форма эритроцитов и какие механизмы приводят к ее трансформации, представляется важным не только в фундаментальном, но и прикладном плане. Поскольку эритроциты легко деформируются и обладают упругим формоизменением то кровь, в целом, должна обладать какими то следами упругости. Это должно как-то проявляться в реологических свойствах цельной крови. Так что понимание природы формообразования связано и с проблемами реологических свойств цельной крови. Заметим, что клиническая реология крови привлекает к себе пристальное внимание медиков, если судить по огромному числу публикаций, посвященных этой проблеме. Ясности же в литературе по этим вопросам также нет. Эритроциты эффективно потребляют кислород для своего внутреннего энергопотребления, правда, в существенно меньшей степени, чем это делают другие клетки. Скорость потребления кислорода эритроцитами в энергетических целях в 50 раз меньше чем у клеток миокарда и в 160 раз меньше чем у клеток коры головного мозга. Тем не менее, это слишком большое энергопотребление для клеток, представляемых просто в виде объема, заполненного гемоглобином. Далее в процессах оксигенации / дезоксигенации гемоглобина происходит постоянное его окисление, за сутки в норме окисляется до 3% всего гемоглобина в организме. Почему и в силу каких причин это происходит, какое значение и какую роль может играть это обстоятельство в организме, в литературе ясности и полного понимания также нет. А именно с этим может быть связана еще одна проблема - эритроцитопатии, наследственные и индуцированные действием 9 различных экзогенных факторов. Они стали довольно часто встречаемым явлением, распространенным, по всей видимости, из-за наличия неблагоприятных экологических условий для проживания населения. Какое значение в них имеет окислительное превращение гемоглобина в метгемоглобин не изучено. Диагностика эритроцитопатий является проблемой далекой от разрешения. Средства и способы их эффективного лечения также не разработаны, очевидно, по причине, отсутствия достоверных представлений о природе и механизмах их появления и развития. Отсутствует ясность и в вопросе о причинно- следственных связях в цепи событий, вызывающих обострение патологических состояний в организме. Можно отметить, что гемолитические анемии, возникающие спонтанно или появляющиеся в результате действия лекарственных или различных химических веществ, в силу их распространенности стали уже проблемой и медицински и социально значимой. Патогенез их остается до конца не понятым и эта проблема исследователей остро интересует. Наличие эритроцитарной составляющей в тромбе свидетельствует об участии этих клеток и в тромбогенезе. Причем нельзя исключить, что индуктором при образовании тромба могут выступать непосредственно и сами эритроциты. Такие представления в литературе имеют место. Опять таки посредством каких механизмов и в силу каких обстоятельств это происходит остается не ясным. Что касается транспортной функции эритроцитов, то в последнее время появились данные, что помимо кислород транспортной функции, эритроциты выполняют в организме и функцию транспорта половых гормонов. Наш анализ литературы показывает, что эритроциты в организме, по всей видимости, выполняют и аскорбат-транспортную функцию.

Из отмеченного становится ясно, что в науке об эритроците имеется много белых пятен, т.е. много нерешенного и много неясного. И в целом можно утверждать, что в настоящее время взгляд на структуру, функцию эритроцитов и на их роль в организме кардинальным образом пересматривается. Приходит понимание, что эритроцит- сложнейшее структурно-функциональное образование с большим числом функциональных особенностей, изучить которые еще предстоит науке об эритроците.

Так представляется, конечно, в самых общих чертах весь тот комплекс вопросов, которые относятся к эритроцитарной тематике к важнешим ее проблемам как фундаментального, так и прикладного характера. Ниже в разделе "Общая характеристика работы" они будут обозначены более предметно и конкретно. Будут сформулированы цели и задачи данной работы, выдвинуты положения и обоснования, определяющие актуальность, важность, значимость и необходимость исследований, проведенных в данной работе, принципиальную новизну, полученных результатов.

10

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы диссертации

Гемолитические кризы, возникающие как спонтанно, так и спровоцированные действием лекарственных средств и химических веществ, в силу их широкой распространенности являются социально и медицински значимой проблемой. Список агентов, их провоцирующих, довольно обширен. В то же время вопрос о причинно-следственных связях в цепи событий, приводящих к гемолитическим анемиям, остается дискуссионным [Бойтлер, 1981]. Исследования, проведенные в последние годы, свидетельствуют о том, что гемолитические кризы, спровоцированные и развивающиеся в организме, происходят из-за массированного гемолиза эритроцитов как в силу нарушений их внутренних свойств (окисления гемоглобина, изменения активности ферментов и свойств мембраны), так и в результате действия внешних факторов. Так, вследствие перманентно протекающих в эритроцитах процессов оксигенации-дезоксигенации гемоглобина может происходить окислительное разрушение этого белка и сопряженное с ним образование радикалов диоксида. Из-за присутствия в эритроцитах СОД диоксиды должны дисмутироваться в перекись водорода, которая способна окислять гемоглобин и другие физиологически важные макромолекулы [Yamaguchi et al., 1983; Takahashi et al., 1983]. Данные литературы в отношении перекиси водорода как возможного фактора нарушения функции эритроцитов и индуктора их гемолиза носят фрагментарный характер. По-видимому, это многоплановая проблема, имеющая ряд аспектов. Один из них касается вопроса взаимодействия гемоглобина с перекисью водорода и изменения его состояния, причем как изолированного, так и находящегося в своей естественной среде, то есть непосредственно в эритроцитах. При инкубации гемоглобина с перекисью водорода в растворе показано образование гидроксильных радикалов [Gutteridge, 1986] в результате взаимодействия перекиси водорода с ионами железа (реакция Фентона), освобождающимися из гемоглобина под действием Н2О2 [Puppo and Halliwell,1988], Но эти данные получены в модельных экспериментах в условиях применения больших концентраций перекиси водорода по отношению к гемоглобину. In vivo, как правило, не бывает столь высоких концентраций окислителей, включая и перекись водорода, поэтому непонятно, имеют ли какое-нибудь отношение эти данные к механизмам, по которым развиваются гемолитические кризы. В связи с отмеченным представляется актуальным и значимым изучение этой проблемы в плане выяснения особенностей взаимодействия гемоглобина с перекисью водорода в субфизиологических ее концентрациях. Другой важный круг вопросов касается возможных источников перекиси водорода и их наличия как непосредственно в эритроцитах, так и за их пределами. Помимо указанного выше процесса оксигенации/дезокснгенации гемоглобина источниками перекиси водорода в эритроцитах могут быть и многие соединения, известные как потенциальные

11 индукторы гемолиза, которые обладают свойством спонтанно генерировать перекись водорода и, как следствие, вызывать метгемоглобинообразованне. Например, адреналин при спонтанном автоокислении генерирует диоксиды (Misra, 1987; Черемисина и др., 1994], которые в присутствии СОД каталитически дисмутируются в перекись водорода. Обладают ли таким свойством другие соединения -потенциальные гемолитики, неясно. Актуально также изучение других возможных источников перекиси водорода в эритроцитах.

Для выяснения роли перекиси водорода как возможного индуктора гемолиза эритроцитов также важно знать, как это соединение метаболнзируется в клетках. В принципе перекись водорода в эритроцитах может метаболизировать в реакциях с каталазой, глутатион-пероксидазой и в реакции Фентона. Вопрос о том, какой из этих путей в эритроцитах основной н насколько он надежен, не является решенным, вероятно, из-за отсутствия адекватных методических подходов [Cohen et al., 1963; Aebi et al., 1971]. Поэтому разработка новых методических подходов к анализу процессов метаболизма перекиси водорода представляется актуальной и значимой задачей.

Пока остается окончательно невыясненным, каким образом перекись водорода вызывает гемолиз эритроцитов. Одна из возможностей заключается в индукции этим соединением перекисного окисления липидов в мембранах эритроцитов, из-за чего нарушается их барьерная функция и механическая прочность - важные составляющие целостности эритроцитов. Другая возможность связана с образованием метгемоглобина, что влечет за собой деструкцию мембраны [Misra et al., 1972; Yamaguchi et al., 1983]. Перекисная деструкция гемоглобина непосредственно может являться составной частью большинства гемолитических процессов, а в ряде случаев играет в них ведущую роль [Cohen et al., 1964; Morse, 1988]. Определенную роль в них может играть уменьшение гибкости мембраны в присутствии метгемоглобина [Bessis et al, 1975]. Вообще уже известно довольно много фактов, свидетельствующих, что метгемоглобин не балласт в клетке, а является активным соединением, роль и значение которого науке об эритроците предстоит еще выяснить [Bun and Drysdale, 1971; Andreeva et al, 1977]. Из сказанного ясно, что исследования по пояснению роли и значения метгемоглобина для эритроцитов и возможности индукции им гемолиза являются актуальными и перспективными.

В русле решения этой проблемы находится и вопрос о причинах и механизмах трансформации эритроцитов. Ему в литературе уделяется большое внимание. В ряде теоретических работ механизмы поддержания дискоидной формы эритроцитов, как и механизмы трансформации, объясняются только физико-химическими свойствами (и их изменениями) самой эритроцитарной мембраны [Evans, Skalak,1982; Маркин, 1980]. В то же время имеются экспериментальные данные, что форма эритроцитов может определяться и состоянием гемоглобина в них [Токарев и др., 1983]. Поэтому решение проблемы возможного участия гемоглобина в структурной организации

12 эритроцитарных мембран и изменении их свойств в зависимости от состояния гемоглобина в эритроцитах представляется важным и актуальным. Констатируя все вышеизложенное, можно в целом полагать, что вопросы о механизмах взаимодействия гемоглобина с Н202, способах его защиты от окислительной деструкции, источниках и метаболизме перекиси водорода в эритроцитах, механизмах меггемоглобинообразования в них, а также выяснения роли и значения состояния гемоглобина в нарушении свойств мембран эритроцитов представляется актуальной темой исследования, как с точки зрения фундаментальной науки, так и в практическом плане в свете возможности раскрытия механизмов гемолиза эритроцитов при гемолитических анемиях.

Связь работы с крупными научными программами и темами

Работа выполнялась в рамках научно-исследовательских проектов, которые финансировались Министерством здравоохранения России и Российской академией медицинских наук: гранты РФФИ 98-04-49132 "Изучение образования свободных радикалов в клетках и митохондриях методом активированной хемилюминесценции и спиновых ловушек"; 04-97-49410 "Изучение свободно-радикальных механизмов в биологических системах: исследование механизма действия низкоинтенсивного лазерного излучения на нитрозильные комплексы гемоглобина и других биологически важных соединений" и 99-04-48255 "Роль свободно-радикальных процессов в патогенезе атеросклероза".

Цель и задачи исследования ^Л'- • - V ■: ,

Цель данной работы - установление механизмов метгемоглобинообразования в эритроцитах, происходящего в результате окислительной деструкции гемоглобина под действием различных факторов и условий, и выяснению роли и значения этого процесса в нарушении свойств эритроцитарных мембран.

В работе ставились и решались следующие задачи:

1. Исследовать возможность цепного перекисного окисления гемоглобина, индуцированного действием субфизиологических концентраций перекиси водорода и изучить механизм и условия, при которых этот процесс реализуется;

2. Изучить источники и метаболизм перекиси водорода в эритроцитах и определить роль и значение различных факторов при индукции цепного перекисного окисления гемоглобина (ЦПОГ);

3. Изучить механизмы метгемоглобинообразования непосредственно в эритроцитах, в том числе под действием некоторых соединений, известных как потенциальные индукторы их гемолиза, и выяснить возможность эритроцитарного пути метаболических превращений биологически важных соединений, осуществляемых метгемоглобином;

4. Исследовать влияние состояния гемоглобина на механическую прочность мембран эритроцитов и их структуру. ; ' /

13

Объект и предмет исследования Х/5', ; 7 f /

Объектами исследования служили гемоглобин, антиокислительные ферменты, эритроциты человека и животных. Предметом исследования являлся процесс окисления гемоглобина и свойства эритроцитов.

Методология и методы проведенного исследования , / , , ,,

В работе использовались методы гельфильтрации; динамическои калориметрии; спектрофотометрии; динамической фотометрии; флуориметрин; полярографии; сканирующего электронного микроскопирования; турбидиметрии; микроэлектрофореза; ЭПР (Varían; Jeol); электрической импедансометрии.

Научная новизна и значимость полученных результатов

Научная новизна полученных результатов заключается в обосновании и разработке концепции о том, что превращение гемоглобина в метгемоглобин может происходить по механизму цепного перекисного Н202-индуцируемого процесса, а метгемоглобинообразование в эритроцитах вызывает их повреждение или нарушение функциональных свойств. При обосновании данной концепции открыто явление протекания цепного перекисного окисления гемоглобина с превращением его в метгемоглобин, индуцируемое перекисью водорода в субфизиологических концентрациях. Результат индукции таков, что количество окисленного гемоглобина более чем на порядок превышает количество перекиси, вызывающей такую модификацию гемоглобина. Выяснен механизм этого явления. Показано, что данный процесс происходит только в аэробных условиях, причем индуктором и медиатором его является перекись водорода, возможно, образующаяся постоянно de novo. Показано, что в эритроцитах и их гемолизатах гемоглобин в аэробных условиях также способен подвергаться цепному процессу окисления до метгемоглобнна, индуктором и медиатором которого, как и в случае с изолированным гемоглобином, является перекись водорода.

С помощью разработанного калориметрического метода впервые экспериментально определены тепловые эффекты каталазного, пероксидазного и свободнорадикального (по типу реакции Фентона) процессов разложения перекиси водорода. Определенные величины теплового эффекта указанных процессов равны, соответственно, 20,81; 259,25 и 58,5 ккал в расчете на 1 моль разрушенной перекиси. Из этого также следует, что тепловой эффект разложения Н202 зависит от пути ее метаболизма.

Полученные в работе данные по тепловому эффекту разрушения перекиси водорода эритроцитами, сопоставленные с результатами проведенного ингибиторного анализа, показывают, что главным метаболическим путем утилизации этого соединения в эритроцитах является каталазный. С помощью метода калориметрии впервые установлено, что пероксидазное окисление аскорбата, вопреки утвердившимся в литературе схемам [Yamazaki, 1957], реализуется по механизму, включающему две

14 стадии: ферментативную и неферментативную. Вклад последней увеличивается с ростом рН среды, вследствие чего стехиометрическое соотношение между разрушенной перекисью и окисленным аскорбатом также возрастает с увеличением рН. Показано, что метгемоглобин способен катализировать окисление перекисью водорода аскорбата и некоторых других веществ, как обычная гемовая пероксидаза с тем же тепловым эффектом; какого-либо влияния на этот процесс антирадикальные препараты не оказывают.

При исследовании способности некоторых известных хелаторов блокировать радикальные реакции по типу Фентона впервые установлено, что тетрациклины при связывании ими закисного железа в условиях, близких к физиологическим, эффективно катализируют его окисление до окисной формы с генерацией при этом активных форм кислорода. В присутствии аскорбата тетрациклины в комплексе с ионами железа создают непрерывно действующие радикал-генернрующие центры. На основе полученных данных в работе сформулирован новый взгляд на механизм антибактериального и токсического действия антибиотиков тетрациклинового ряда. Установлено, что аналогичными свойствами обладает и салициловая кислота, что может иметь значение для понимания биологического действия этого соединения и аспирина в организме. Для о-фенантролина установлено, что он может блокировать реакцию Фентона за счет связывания ионов закисного железа только в определенном стехиометрическом соотношении (3:1).

Обнаружено, что под действием видимого света тетрациклины вызывают метгемоглобинообразование в эритроцитах, инактивируя при этом эритроцитарную каталазу. Установлено, что метаболиты тетрациклине в, получаемые в результате их окислительных превращений, в том числе под действием излучения видимого диапазона, эффективно индуцируют метгемоглобинообразование в эритроцитах.

Показано, что действие гидроксиламина на эритроциты, вызывающее в них метгемоглобинообразование, может быть обусловлено процессом цепного перекнсного окисления гемоглобина, индуцированного этим соединением. Показано, что ускоренное метгемоглобинообразование в эритроцитах, индуцированное нитрит-ионами сопряжено с процессом их пероксидазного окисления, катализируемого метгемоглобином.

Новым в работе является проведенный анализ по расчету в мембранах клеток механических напряжений и выяснение их влияния на свойства мембран. Исходя из данных о механических напряжениях в мембранах клеток выведено уравнение, описывающее изменение размеров клеток при их нахождении в гипотонических средах. Выполненные по нему расчеты показали, что осмоустойчивость эритроцитов только при определенных условиях можно рассматривать в качестве параметра механической прочности их мембран. По данным об изменении механической прочности эритроцитарных мембран, их везикуляризации и фрагментации при вариации условий окружающей среды, влияющей на состояние гемоглобина в

15 эритроцитах, сформулировано представление о существовании примембранного белково-гемоглобинового слоя внутри эритроцитов, который можно рассматривать как важный структурно-функциональный компонент эритроцитарной мембраны.

Показана возможность эритроцитарного пути метаболических превращений половых гормонов, а также других физиологически значимых веществ эндогенной и экзогенной природы в пероксидазных реакциях, катализируемых метгемоглобином. Это позволяет рассматривать эритроциты как метаболический орган, "рассредоточенный" в организменном пространстве.

Практическая значимость полученных результатов

Настоящая работа относится преимущественно к области фундаментальных исследований и содержит ряд аспектов научно-практической значимости. Обнаруженное в работе явление индуцированного перекисью водорода цепного перекисного окисления гемоглобина, по-видимому, может быть ключевым звеном в ряде гемолитических процессов. Факт, что в эритроцитах при определенных условиях можно запустить данный процесс цепного перекисного окисления гемоглобина и сравнительно просто его регистрировать, позволяет предложить этот подход для оценки устойчивости гемоглобина к окислительным превращениям и использовать его для определения степени предрасположенности к гемолитическим кризам. Подход может быть применен в диагностических целях для тестирования свойств гемоглобина, например, гликолизированного, при сахарном диабете и других патологиях.

Результаты работы по окислительным превращениям гемоглобина в метгемоглобин и данные по инактивации других гемсодержащих белков, в частности, каталазы тетрациклинам и при действии на них видимого света могут иметь важное значение для разработки методов фототетрациклиновой терапии, возможно и опухолей.

Научно-практическое значение имеют результаты работы о возможности метаболических превращений биологически важных веществ по эритроцитарному пути, что должно учитываться в фармакокинетике, например, при применении стероидной терапии.

Полученные в работе данные о способности тетрациклинов и салицилатов образовывать радикал-генерирующие центры могут иметь практическое значение для разработки приемов и способов минимизации токсических эффектов от их применения. Эти данные также могут иметь научно-практическое значение при разработке новых форм антибиотиков тетрациклинового ряда и усиления юс антибактериального действия.

Данные работы по блокированию каталазы нитрит-ионами, гидроксиламином и азидом натрия могут быть положены в основу метода количественного определения этих веществ, что имеет практическое значение.

16

В работе также предложены и обоснованы методы, имеющие непосредственное практическое значение: метод приготовления эритроцитов для оптического и электронного микроскопирования, обеспечивающий щадящую трансформацию их исходной формы; метод определения микроколичеств перекиси водорода в биообъектах; калориметрический метод определения каталитической эффективности каталазы и различных пероксидаз непосредственно в биообъектах.Установленный в работе факт, что гидроксиламин, аскорбиновая кислота и тетрациклины генерируют диоксиды, которые при определенных условиях вызывают хемилюминесценцию, позволяет использовать эти соединения в хемилюминесцентных тест-методах определения СОД-активности.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Открыто явление цепного перекисного окисления гемоглобина, индуцированного микро количествам и перекиси водорода, и обоснован его механизм.

2. Обоснована возможность использования гемоглобина и регистрации процесса его цепного перекисного окисления для количественного определения перекиси водорода в биообъектах. Предлагается использовать цепное перекиспое окисление гемоглобина для тестирования его свойств в эритроцитах при патологиях различной природы, например, свойств гликолизированного гемоглобина при сахарном диабете.

3. Разработан новый методический подход на основе калориметрии для определения убыли перекиси водорода в биообъектах по различным путям ее деструкции. По данным ингибиторного анализа и полученным значениям тепловой эффективности различных реакций определен основной путь разрушения перекиси водорода непосредственно в эритроцитах.

4. Показано, что метаболические превращения некоторых биологически важных соединений (аскорбат, стероидные половые гормоны, тетрациклины, серотонин, нитриты) в пероксидазных реакциях, катализируемых как пероксидазой хрена, так и метгемоглобином и сопряженных с разрушением перекиси водорода, происходят по одним и тем же механизмам.

5. Определены источники перекиси водорода в эритроцитах, появляющиеся, в частности, в результате СОД-катализируемой дисмутации диоксидов, генерировать которые способны некоторые соединения, в том числе, и потенциальные индукторы метгемоглобинообразования. В целом развиты новые представления об источниках и путях метаболизма перекиси водорода в эритроцитах.

6. Определены механизмы метгемоглобинообразования непосредственно в эритроцитах, в том числе под действием некоторых соединений, известных как потенциальные индукторы их гемолиза, и выяснена возможность эритроцитарного пути метаболических превращений биологически важных соединений, осуществляемых метгемоглобином.

17

7. Показано влияние состояния гемоглобина на механическую прочность мембран эритроцитов и их структуру.

Личный вклад соискателя л ^ ^

Выбор и обоснование научной концепции исследования, постановка экспериментов, анализ полученных результатов и их интерпретация сделаны автором самостоятельно. Все основные научные результаты, представленные в диссертации, получены лично автором. Апробация результатов диссертации

Материалы диссертации докладывались на Всесоюзном совещании "Биоантиоксиданты" (Черноголовка, 1983); Итоговой конференции НИИ МЧ АМН СССР "Актуальные проблемы современной гистопатологии" (Москва, 1983); 2-й Всесоюзной конференции по теоретическим и прикладным вопросам криобиологии (Харьков, 1984); Всесоюзном совещании "Применение миллиметрового излучения низкой интенсивности в биологии и медицине" (Звенигород, 1986); Итоговой конференции 2-го МОЛГМИ им. Н.И.Пирогова МЗ РСФСР (Москва, 1989); Заседании МОИП (Москва, 30 марта 1990); Constituent Congress Inteernational Society for Pathophysiology (Москва, 1991); 2-й Всероссийской конференции "Влияние антропогенных факторов на структурные преобразования органов, тканей, клеток человека и животных" (Саратов, 1993); совместной конференции кафедры биофизики медико-биологического факультета РГМУ и отдела биофизики НИИФХМ (Москва, 1993); 2-м Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1995); 9-ой Конференции "Магнитный резонанс в химии и биологии" (Москва-Звенигород, 1996); Международной научнометодической конференции "Медико-биологические проблемы экологической безопасности агропромышленного комплекса" (Сергиев Посад, 1996);

Международной научной конференции "Медико-биологические проблемы экологической безопасности АПК" (Сергиев Посад, 1999); 2-ом съезде биофизиков России (Москва, 1999).

Опубликованность результатов

По материалам диссертации всего опубликовано 100 работ, из них 48 непосредственно связаны с главными ее результатами, в том числе 36 статей в научных журналах и 12 тезисов докладов. Общее количество опубликованных страниц - 281.

Структура и объем диссертации Диссертация состоит из введения, общей характеристики работы, обзора литературы (3 главы), методов исследования (1 глава), результатов исследования и их обсуждения (3 главы), заключения, выводов, и списка использованной литературы (357 источников). Она изложена на 314 страницах машинописного текста и содержит 11

Заключение Диссертация по теме "Биофизика", Петренко, Юрий Михайлович

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В работе экспериментально обоснована концепция возможности протекания цепного перекисного окисления гемоглобина в эритроцитах, индуцируемого действием субфизиологических концентраций перекиси водорода, изучен механизм и условия, при которых этот процесс реализуется. Механизм ЦПОГ можно представить в виде следующей сетки реакций:

НЬ02

НЬ02*Н202 НЬ02*Н202 НЬ02*Н202 МШЬ

МШЬ*Н202 мдаь*н2о2 ньо2°°

МШЬ*Н202 н2о2 н2о2 ньсь

К1) -> (К-1) ->

К2) -> (Кб) -> (КЗ) ^ (К-3) ^ (К4) -> (К5) (К7) ньо2* Н202 ньо2 + Н202 мшь + н2о2 мшь

МШЬ* Н202 МШЬ + Н202 мшь + нъо2° мшь

МШЬ где: НЬ02, НЬ02°°, НЬ02* Н202, МШЬ, МШЬ*Н202 - последовательно: оксигемоглобин, окисленная форма оксигемоглобина, гемоглобин-перекисный комплекс, метгемоглобнн, феррилгемоглобин или метгемоглобин-перекисный комплекс. Рассматривая механизм процесса ЦПОГ в виде приведенной сетки химических реакций по аналогии с процессами перекисного окисления липидов в мембранных структурах клеток, эти реакции можно группировать на функционально значимые блоки. Блок из первых трех реакций для процесса ЦПОГ формирует цепной характер процесса ЦПОГ, его можно определить как блок продолжения цепи. Второй, составленный из оставшихся реакций, есть блок обрыва цепи, устраняющий цепной характер процесса. В работе предложена схема, объясняющая каким образом может функционировать первый блок реакций, определяющих цепной характер всего процесса.

Другой важный тип механизма перекисной модификации гемоглобина, изученный в работе, связан со свойствами метгемоглобина, в частности, с его способностью эффективно катализировать пероксидазные реакции. Показано, что такой механизм реализуется и выраженно проявляется в процессах нитрит - индуцированного метгемоглобинообразования. Можно полагать, что эти два важных механизма разной степени выраженности присутствуют во многих процессах метгемоглобинообразования, возникающих по разным причинам. Последнее обстоятельство важно, так как может стать теоретической основой для поиска принципиально новых эффективных средств по купированию и разработке терапевтических приемов лечения гемолитических анемий. В целом в работе

291 обосновывается положение, что перекисная модификация гемоглобина, в случае ее возникновения, приводит к нарушению свойств мембран эритроцитов, сопровождающемуся, в конечном счете, спонтанным разрушением этих клеток.

На основании полученных результатов можно сделать следующие выводы:

1.Обнаружено явление, цепной перекисный процесс окисления гемоглобина (ЦПОГ), заключающееся в том, что перекись водорода в малых концентрациях (10~6 - 10"7 М) способна в присутствии кислорода окислять в больших количествах гемоглобин. Установленные в работе кинетические и стехиометрические закономерности процесса и характер их изменения при вариации условий окружающей среды позволяют утверждать о действительно новом явлении, ранее не описанном в литературе. Предложен механизм цепного перекисного окисления гемоглобина в виде специальной сетки химических реакций. Методом математического моделирования на количественном уровне теоретически воспроизведены главные кинетические и стехиометрические закономерности цепного перекисного процесса окисления гемоглобина. Цепной перекисный процесс окисления гемоглобина наблюдается как в растворе изолированного гемоглобина, так и в эритроцитах и их гемолизатах, однако только при условии, что в них полностью ингибируется азидом натрия каталаза. Обнаруженный и изученный в работе феномен ЦПОГ, ключевая роль в котором принадлежит перекиси водорода и каталазе, может иметь непосредственное отношение к возникновению анемий различной этиологии, т. е. данный процесс может быть важным звеном в развитии метгемоглобинемий и гемолитических анемий in vivo [38, 39, 44,46, 49, 51, 66, 77].

2. Впервые экспериментально методом динамической калориметрии измерены тепловые эффекты процессов разложения перекиси водорода по каталазному, пероксидазному и фентоновскому механизмам, причем в случае пероксидазной реакции показано, что величина теплового эффекта не зависит от природы окисляемого перекисью водорода субстрата. Установлено, что метгемоглобин является эффективной гемовой пероксидазой, окисляющей пероксидазные субстраты с тем же тепловым эффектом, что и пероксидаза хрена. Показано, что эстрогены, тетрациклины, серотонин, аскорбиновая кислота и ряд других физиологически значимых веществ способны метаболизироваться в пероксидазных реакциях, катализируемых метгемоглобином. Установлено, что аскорбиновая кислота при физиологических значениях рН может эффективно окисляться перекисью водорода как ферментативно, так и не ферментативно с одним и тем же тепловым эффектом [32, 33, 44, 45, 47,49, 55,71, 76].

3. Показано, что ряд веществ, потенциально способных провоцировать гемолитические анемии, обладает свойством при определенных условиях инактивировать каталазу [20, 41, 47,52, 57, 70, 74, 79,316].

292

4. Показано калориметрическим методом, что о-фенантролиновые комплексы с закисным железом в стехиометрическом соотношении 3:1 не разлагают перекись водорода по схеме Фентона [20, 31,37, 40,49,77].

5. Показано, на основании калориметрических исследований и ингибиторного анализа, что главный метаболический путь деструкции перекиси водорода в эритроцитах это катал азный [44,51, 71].

6. Установлена способность ряда биологически активных веществ генерировать радикалы диоксида, дисмутация которых приводит к образованию перекиси водорода. Эти вещества могут быть дополнительными источниками перекиси водорода в эритроцитах и способны индуцировать в них метгемоглобинообразование по механизму ЦПОГ.

Установлено, что тетрациклины и салициловая кислота, связывая ионы закисного железа, индуцируют его окисление молекулярным кислородом. С помощью люцигенин-активируемой хемилюминесценции и методом ЭПР с применением спиновых ловушек зарегистрирована генерация активных форм кислорода в процессе катализируемого этими соединениями окисления закнсного железа молекулярным кислородом. За счет этого может реализовываться антибактериальное действие и токсические эффекты тетрациклинов и салициловой кислоты, образующейся при гидролизе аспирина в организме [20, 31,32,33, 38,40, 41,46].

7. Показано, что тетрациклины в водной фазе спонтанно генерируют радикалы диоксида, из которых затем образуется перекись водорода, причем имеет место эффективная фотостимуляция этого процесса. Установлено, что тетрациклины при облучении их излучением видимого диапазона обладают фототоксическим действием на биообъекты: в присутствии гемоглобина вызывают метгемоглобинообразование, а в присутствии каталазы его инактивацию. Тетрациклины проникают в эритроциты и под действием излучения видимого диапазона инактивируют в них каталазу и вызывают превращение гемоглобина в метгемоглобин, что сопровождается их гемолизом [20,31,50,52,53,].

8. На основе полученных экспериментальных данных предложены схемы, объясняющие механизмы метгемоглобинообразования в эритроцитах, индуцируемые нитрит-ионами, гидроксиламином, фототетрациклиновым действием [33-37, 54, 84,85,268].

9. Обнаружен ряд новых гемоглобин -зависимых эффектов касательно характера гемолиза эритроцитов, вызываемого действием на них различных факторов внешней среды, в частности при термогемолизе обнаружен феномен, терминологически определенный в работе как "послегемолиз". Разработана научная концепция о роли гемоглобина и его состояния в системе причинно-следственных связей в цепи событий, приводящих эритроциты к гемолизу. Показано, что под действием факторов, влияющих на состояние гемоглобина в эритроцитах, изменяются

293 механические свойства их мембран и форма клеток [20, 28,31, 40- 42, 47,50,52,53, 69, 70,72, 74, 79, 316,].

10. Предложен метод определения Н2О2 с чувствительностью до 10~7 М, основанный на запуске перекисью водорода цепного окисления гемоглобина. Данный метод не подвержен артефактам, свойственным существующим хемилюминесцентным и флуоресцентным методам из-за влияния на них содержащихся в биообъектах аскорбата, глутатиона и других реакционно активных соединений. С помощью предложенного метода было установление, что при УФ облучении ряда физиологически важных веществ, в частности, некоторых антиоксидантов, образуется перекись водорода [44, 49, 51,77].

294

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Петренко, Юрий Михайлович, Москва

1. Андреюк Г.М., Киселев П.А. Инициирование перекисного окисления липидов в результате превращения гемоглобина в гемихром под действием свободных жирных кислот // Биохимия,- 1988,- Т.53, №6,- С. 1017-1024.

2. Артемчик В.Д., Кучеренко В.П., Метелица Д.И. Пероксидазная активность сукцинилированной каталазы //Биохимия.- 1985,-Т.50, №7,-С. 1183-1188.

3. Артемчик В.Д., Кучеренко В.П., Метелица Д.И. Пероксидазная активность каталазы по отношению к ароматическим аминам // Биохимия,- 1985,- Т.50, №5. С. 826-832.

4. Аджимолаев Т.А. Биологические мембраны и мембрано-активные соединения,- Ташкент.: 1985,- С. 144-146.

5. Абрамов М.Г. Гематологический атлас,- М.:1979,- 280с.

6. Альберт А. Избирательная токсичность т.2.- М.: Медицина, 1989,- С. 187188.

7. Бабиджаев М.А., Деев А.И., Владимиров Ю.А., Деева И.Б. Разложение Н202 катарактальными хрусталиками человека // Бюлл. Экспер. Биол. Мед.-1986,- Т.СП, №8,-С. 158-160.

8. Бойтлер Э. Нарушения метаболизма эритроцитов и гемолитическая анемия. -М: Медицина, 1981,- 255 с.

9. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах,- М.: Наука, 1972.- 252с.

10. Гитинов Г.Г., Вильявин Г.Д., Маршак А.М. Тетрациклиновая флуоресценция в диагностике рака желудка // Хирургия.- 1972.- № 5. С. 44-49.

11. Грубан 3., Рехцигл М. Микротельца и родственные им структуры. Морфология, биохимия, физиология. Перевод Цоглиной И.В. Ред. Залкинд С .Я. М.: Мир, 1972,- 310с.

12. Зубкова С.М., Бах А.Н. Количественное определение активности каталазы крови. В кн."Руководство к лабораторным занятиям по биологической химии" Ред.Березов Т.Т.- М.: Медицина, 1976.- С.81-83.

13. Зенгбуш П. Молекулярная и клеточная биология,- М.: Мир, 1982, т. 2.-267с.

14. Ивенс И., Скейлан Р. Механика и термодинамика биологических мембран,-М.: Мир, 1982,-213с.

15. Иост X.Физиология клетки.// М., Медицина, 1975.-345с.

16. Каган В.Е., Монович О., Рибаров С.Р. Индукция перекисного окисления липидов в эритроцитах в ходе окисления холестерина, катализируемого холестериноксидазой // Бюлл. Экспер. Биол. Мед.-1985,- Т. 100, №8,- С. 179-181.

17. Кантор Ч.,Шиммел П.Р. Биофизическая химия. Пер.с анг.- М.:1985, Т.З.111с.

18. Качанова Ж.П. Взаимодействие супероксидного радикала с кислотами в водных растворах // Журнал физической химии,- 1987,- Т.61, №7,- С. 1837-1843.295

19. Козлов А.Б., Егоров Д.Ю., Владимиров Ю.А., Азизова O.A. Образование комплексов железа с аскорбиновой кислотой в физиологических условиях in vitro и в ткани in vivo/ //Биофизика.-1990,- Т.35, С.513-516.

20. Ламри Р.,Билтонен Р. Структура и стабильность биологических макромолекул,-М.: 1973,- 127с.

21. Ленинджер А. Биохимия,- М.: Мир, 1974,- 958с.

22. Левин С.В. Структурные изменения клеточных мембран,- Л.: 1967,- С. IS1. SO.

23. Малер Г., Кордес Ю. Основы биологической химии. М.:Мир, 1970,- 567с.

24. Мищенко К.П., Роевдель A.A. Краткий справочник физико-химических величин,-Л.: Химия, 1974.

25. Маркин B.C. Организация мембран в плоскости слоя и форма клеток. Статистический подход // Биофизика,- 1980,- Т. 25, № 5- С. 941-946.

26. Маркин B.C. Организация мембран в плоскости слоя и форма клеток. Биологические следствия теории // Биофизика,- 1981,- Т.26, №1- С. 158-163.

27. Матюшин А.И., Петренко Ю.М. Водорастворимая форма эстрадиола, обладающая эстрогенной и кардиотропной активностью // Бюлл. экспер. биол. медицины.- 1995.-Т. 119,№ 1.-С. 51-53.

28. Навашин С.С., Сазыкин Ю.О. Фундаментальные основы создания новых антибиотиков // Антибиотики и химиотерапия,-1992,- N 4,- С.5-11.

29. Пеленицын А.Б., Рощупкин Д.И., Владимиров Ю.А. Действие ультрафиолетового света на эритроциты // Биологическое действие ультрафиолетового излучения / М.,1975,- С.73-76.

30. Петренко Ю.М. Новый взгляд на механизм действия антибиотиков тетрациклинового ряда. Тетрациклины как компонент радикал-генерирующей системы// Антибиотики и химиотерапия,- 1994,- Т. 39, № 7.-С. 10-14.

31. Петренко Ю.М., Ананьев В.А., Константинова Л.А., Владимиров Ю.А. Сдвиги антиоксидантной активности в мембранных структурах клеток, зараженных вирусом // Вопросы вирусол,- 1985,- № 6,- С. 34-39.

32. Петренко Ю.М., Ананьев В.А., Константинова Л.А., Владимиров Ю.А. Влияние антиоксидантов на процесс инфицирования клеток HeLa в культуре // Вопросы вирусол,- 1986,- № 2,- С. 18-24.

33. Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. Роль поверхностных зарядов в поддержании осмотической резистентности эритроцитов // Гематол. и трансфузиол,-1987.-№ 10.-С. 15-20.296

34. Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. Изменение размеров эритроцитов при набухании в гипоосмотических средах // Биофизика.- 1987,- Т. 32, № З.-С. 448-453.

35. Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. Агрегация гемоглобина в эритроцитах как фактор нарушения их структурно-функциональной целостности // Гематол. и трансфузиол,- 1987,- № 10,- С. 54-61.

36. Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. Механические напряжения в мембранах сферических клеток // Биофизика,- 1990,- Т. 35, № 6,- С. 28-32.

37. Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. Определение механизма действия антиоксидантов в липидных системах по параметрам хемилюминесценции в присутствии закисного железа // Биофизика.-1976.-Т. 21, №3.-С. 3-7.

38. Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. К вопросу об антиоксидантной активности в мембранных структурах клеток кишечника человека и животных // Биофизика,- 1984,- Т. 34, № 3.- С. 17-24.

39. Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. Новое свойство аспирина и других салицилатов. Их способность к генерации радикалов за счет хелатирующе -окисляющего действия на катионы железа // Эксперим. и клинич. фармакология. -1998,- 1. 61, №1,- С. 44-50.

40. Петренко Ю.М., Матюшин А.И., Титов В. Ю. Окислительная деструкция эстрадиола под действием перекиси водорода, катализируемая пероксидазой хрена и метгемоглобином // Биофизика.- 1999.- Т. 44,- Вып. 2,- С. 236 243

41. Петренко Ю.М., Титов В.Ю. Калориметрический метод определения эффективности функционирования каталазы в биообъектах // Вопросы мед. химии.-1989,-Т. 35, №6,-С. 143-148.

42. Петренко Ю.М., Матюшин А.И., Титов В.Ю. Новый взгляд на биотрансформацию эстрадиола в организме. Метаболизм эстрадиола в эритроцитах путем пероксидазной реакции // Эсперим. клин. фармакол.-1994,- Т. 57, № 4,- С. 4549.

43. Петренко Ю.М., Рощупкин Д. И., Владимиров Ю.А. Кинетика взаимодействия закисного железа с окисленными липидами и возможность хемилюминесцентного определения гидроперекисей // Биофизика,- 1975,- Т. 20, № З.-С. 4-8.297

44. Петренко Ю.М., Титов В.Ю., Владимиров Ю.А. Метаболические превращения антибиотиков тетрациклинового ряда в пероксидазных реакциях // Антибиотики и химиотерапия,- 1994,- Т. 39, № 11,- С. 3-10.

45. Петренко Ю.М., Титов В.Ю., Владимиров Ю.А. Генерация активных форм кислорода антибиотиками тетрациклинового ряда при катализируемом ими окислении закисного железа // Антибиотики и химиотерапия,- 1995,- Т. 40, № 2,- С. 38.

46. Петренко Ю.М., Титов В.Ю., Петров В.А., Владимиров Ю.А. Механизм окисления оксигемоглобина, индуцированного перекисью водорода // Бюлл. экспер. биол. медицины,- 1989,- № 7,- С. 46-49.

47. Петренко Ю.М., Титов В.Ю., Владимиров Ю.А. Свойство тетраци клинов вызывать метгемоглобинообразование в эритроцитах и инактивировать каталазу под действием излучения видимого диапазона // Антибиотики и химиотерапия,- 1995,- Т. 40, №6,-С. 10-18.

48. Петренко Ю.М., Титов В.Ю., Владимиров Ю.А. Метаболиты тетрациклина, полученные при его облучении видимым светом или пероксидазном окислении. Их токсические свойства в отношении гемоглобина // Антибиотики и химиотерапия.-1995.-Т. 40, №7,-С. 43-50

49. Петренко Ю.М., Зайферт М., Владимиров Ю.А. Сдвиги ионизационного равновесия суспензии эритроцитов при тепловом воздействии. Факторы, обуславливающие их появление // Гематол. и трансфузиол.-1985,- № 4,- С. 36-42.

50. Петренко Ю.М., Цибулевский А.Ю., Титов В.Ю. Изменение некоторых свойств тонкой кишки при ваготомии // Патол. физиол. и экспер. терапия.- 1992,- Т. 35,- Вып. 3,- С. 44-46.

51. Петренко Ю.М., Титов В.Ю., Петров В.А. Калориметрическое исследование окисления аскорбиновой кислоты пероксидазой хрена // Биофизика. -1992.-Т. 35.-Вып. 1.-С. 37-41.

52. Петренко Ю.М. О возможности повреждений клеток при энергетических перегрузках// Биофизика,- 1981,- Т.26,- Вып.1,- С. 151-152.

53. Путвинский A.B., Попов С.А.,Пучкова Т.В. Электрический пробой мембран эритроцитов за счет диффузионной разности потенциалов // Биофизика,- 1983,- Т.28, №3,- С.505-506.

54. Рыскулова С.Т., Верболович В.П., Петренко Е.П., Цветкова Т.В., Балахчи Т.А. Системы антирадикальной защиты плазматических мембран в облученном организме // Радиобиология,- 1983,- Т.23, №5, С.648-650.

55. Саундерс Б.К. В сб. Неорганическая биохимия. Ред. Г.Эйхгорн. Перевод Левитина И.Я., Ред. Вольпин М.Е., Яцимирский К.Б.- М.: Мир, 1978,- Т.2.-С.434-470.

56. Скорчеллети В.В. Теоретическая электрохимия,- JL: Химия, 1974,- 304с.

57. Сидоренко С.В.Теоретические и практические аспекты проблемы антибиотикорезистентности // Антибиотики и химиотерапия,- 1992,- Т.37, № 9,-С.44-51.

58. Смолин Ю.Н.,Сарбаш В.И.,Команов А.В.,Рымарчук В.И. Влияние ионной силы среды на осмотические свойства эритроцитов // Биофизика,- 1980,- Т.25, вып.2,-С.343-344.

59. Сороковой В.П., Петренко Ю.М., Владимиров ЮА. Гидролиз фосфолипидов и индуцированная закисным железом хемилюминесценция митохондрий печени крыс в ходе переживания // Бюлл. экспер. биол. медицины,-1983,-№ 12,-С. 113-116.

60. Тимошенко С.П., Гудьер Дж. Теория упругости,- М.: Наука, 1979- 397с.

61. Титов В.Ю., Марголина A.A., Петренко Ю.М. Ингибирование нитритами каталазы важный элемент их токсичности. Возможностьиспользования каталазы как детектора на нитриты // Агрохимич. вестник.- 1997,- № 1,- С. 8-12.

62. Титов В.Ю., Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. Изучение реакции каталазы с перекисью водорода калориметрическим методом // Биофизика,- 1988,- Т. 33, № 1,-С. 162-165.

63. Титов В.Ю, Петренко Ю.М. Нитрит-индуцированная метгемоглобинемия: механизм развития, пути предотвращения и профилактики // II Съезд биофизиков России: Тез. докл., Москва., 23-27 августа 1999 г. / РАН, МГУ,- Москва., 1999,- Т.1.-С. 79-81.

64. Титов В. Ю, Петренко Ю. М., Марголина А. А. Взаимодействие нитритов с антиокислительными ферментами важнейший элемент их токсичности. Физиологические механизмы защиты // Сельскохоз. биология,- 1999,- № 6,- С. 1022.

65. Титов В.Ю., Петренко Ю.М., Петров В.А., Владимиров Ю.А. Механизм окисления оксигемоглобина, индуцированного перекисью водорода // Бюлл. экспер. биол. медицины,- 1991,- Т. 112, № 7,- С. 46-50.

66. Титов В.Ю., Петренко Ю.М., Петров В.А. Калориметрическое исследование окисления аскорбиновой кислоты пероксидазой хрена // Биофизика.-1992.-Т. 37, № 1.-С. 17-23.

67. Титов В.Ю., Петренко Ю.М., Петров В.А., Владимиров Ю.А. Механизм окисления оксигемоглобина, индуцированного перекисью водорода // Бюлл. экспер. биол. медицины.- 1991.- Т. 112, № 7,- С. 46-50.

68. Титов В. К)., Марголина А. А., Петренко Ю. М. Ингибирование каталазы нитритом и гидроксиламнном в присутствии галоид ионов. Механизм и физиологическая значимость // Сельскохоз. биология,-1998.-№4.-С. 24-32.

69. Токарев Ю.Н. Наследственные анемии и гемоглобинопатии.-М,:Медицина, 1983,- 332 с.

70. Ханке Т., Эберт Б. Исследование методом ЭПР свободных радикалов при окислении производных бензидина при помощи пероксидазы и перекиси водорода // Биофизика,- 1987,- Т.32, №4, С.569-572.

71. Цибулевский А.Ю., Титов В.Ю., Петренко Ю.М. Изменение некоторых свойств каталазы тонкой кишки крыс при ваготомии // Патол. физиол. и экспер. терапия,- 1992,- № 3,- С. 44-49.300

72. Цокова Т.Н., Петренко Ю.М. Расчет геометрического профиля эритроцита но данным растровой электронной микроскопии. Рос. гос. мед.универс,- М., 1994,-17С.- Деп. в ВИНИТИ 20.04.94, №177.

73. Цокова Т.Н., Петренко Ю.М. Построение геометрического профиля осесимметричных клеток но данным растровой электронной микросколии. Рос. гос. мед. универс,- М., 1994.-14С,- Деп. в ВИНИТИ 12.05.94, №178.

74. Черемисина З.П., Суслова Т.Б., Коркина Л.Г. Хемилюминесцентное определение активности супероксидцисмутазы // Клинич. лаб. диагностика.- 1994,-№1,- С. 27-28.

75. Черницкий Е.А., Воробей А.В. Структура и функции эритроцитарных мембран,- Минск.: Наука и техника, 1981,-215с.

76. Черницкий Е.А., Ямайкина И.В. Термогемолиз эритроцитов // Биофизика.-1988,- Т.ЗЗ, вып.2,- С. 319-322.

77. Ямайкина И.В., Черницкий Е.А. Денатурация гемоглобина первая стадия термогемолиза эритроцитов // Биофизика,- 1989,- Т.34, вып.4.- С. 656-659.

78. Aebi Н., Suter Н. Acatalasemia. / Advances in Human Genetics v.2; ed. H.Harris, K.Hirschhorn.-New-York-London.: Plenum Press,. 1971,- P. 143-199.

79. Altomare R.E., Kohler J., Greenfield P.F., Kittrell J.R. Deactivation of immobilized beef liver catalase by hydrogen peroxide. // Biotechnol and Bioeng.- 1974,-v.16, N12,- P. 1659-1673.

80. Andreeva A.P., Dmitrieva M.G, Levina A.A. et al. Molecular bases for disioder in functional properties of hemoglobin in patients with enzymopenic methemoglobinemia // Dokl. Akad. Nauk SSSR.- 1977,- V.235, N6,- P. 1441-1445.

81. Arduini A., Mancinelli G., Radatti L.G., Hochstein P. Possible mechanisme of inhibition of nitrite-induced oxidation of oxyhemoglobin by ergothioneine and uric acid.// Arch. Biochem. Biophys.- 1992,- V. 294, №2,- P. 398-402.

82. Baker E.M., Hodges R.E., Hood J., Sauberlich H.E., March S.C., Canham J.E. Metabolism of 14C- and 3H- labeled L- ascorbic acid in human scurvy. // Am. J. Clin. Nutr.- 1971.- V. 24, N 4,- P. 444-454.

83. Baker E.M., Saart J.C., Tolbert B.M. Askorbic Acid. Metabolism in Man. // Am. J. Clin. Nutr.- 1966,- V.19, N6,- P.371-378.

84. Banerjee S., Deb Ch., Belavady B. Effect of scurvy on glutathione and dehydroascorbic acid in guinea pig tissues. // J. Biol. Chem.- 1952,- V. 195, N 1,- P. 271276.

85. Barb W.G., Baxendale I.H., George P., Hargrave K.R. Reaction of Ferrous and Ferric Ions with Hydrogen Peroxide. Part I -The Ferrous Ion Reaction. // Trans. Faraday Soc.- 1951,- V.47, N5(341).- P.462-500.

86. Barber A.A., Bernheim F. Lipid peroxidation: its measurement occurence, and significance in animal tissues. // Advan. Gerontol. Res.- 1967.- V.2.- P. 12.301

87. Barnes M.J., Function of Ascorbic Acid in Collagen Metabolism. // Ann. N. Y. Acad. Sci. USA.- 1975,- V.258.- P.264-276.

88. Basu S., Som S., Deb S., Mukherjee D., Chatteijee I.B. Dehydroascorbic Acid Reduection in Human Erythrocytes. // Biochim. Biophys. Res. Commun.- 1979,- V. 90, N 4,- P.1335-1340.

89. Bazylinski P.A., Arkowitz R.A., Hollocher T.C. Decomposition of Hydroxylamine by Haemoglobin. // Arch. Biochem. Biophys.- 1987,- V.259, N2,- P.520-526.

90. Beckman J.S., Chen j., Ischiropoulas H., Crow. Oxidative chemistiy of peroxinitrite. // Methods in Enzimology.- 1994,- V.233.- P.229-240.

91. Beers R.F., Sizer I.W. A spectrophotometric method for measuring the breakdown of hydrogen peroxide by catalase. // J. Biol. Chem.- 1952,- V. 195, N1.- P. 133140.

92. Benatti U., Morelli A., Guida L., De Flora A. The Production of Activated Oxygen Species by an Interaction of Methemoglobin with Ascorbate. // Biophys. Biochem. Res. Comm.- 1983,- V.l 11, N3,- P.980-987.

93. Beres L., Sturtevant I.M. Calorimetric Studies of the Activation of Chymotrypsinogen A. // Biochemistry.- 1971,- V.10, N11,- P.2120-2126.

94. Bessis M., Mohondas N. Red cell deformamility, impotance of its measurement in clinical medicine // Schweiz Med. Wochenschr.- 1975,- V.105, N47,- P. 1568-1570.

95. Bianchi J., Rose R.C. Na+ independent dehydro-Lascorbic acid uptake in renal brash-border membrane vesicles. // B.B.A.- 1985,- V. 819, N 1,- P. 75-82.

96. Bianchi J., Rose R.C. Transport of L-ascorbic acid across renal cortical basolateral membrane vesicles. // B.B.A.- 1985,- V. 820, N 2,- P. 265-273.

97. Bianchi I., Rose R.C. Glucose- Independent Transport of dehydroascorbic Acid in Human Erythrocytes. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med.- 1986,- V. 181, N 3,- P. 333 337.

98. Bianchi J., Wilson F.A., Rose R. Dehydroascorbic acid and ascorbic acid transport systems in the guinea pig ileum. // Am. J. Physiol.- 1986,- V. 250, N 4,- Pt. 1/-P. J461-J468.

99. Bielski B.H.J. Chemistry of Ascorbic Acid Radikals. / Ascorbic Acid: Chemistry, Metabolism and Uses; Eds. Seib P.A., Tolbert B.M.: Amer. Chem. Soc. Washington D.C., 1982,- P.81-100.

100. Bielski B.H.J, and Richter H.W. Some Properties of the Ascorbate Free Radikals. // Ann. N. Y. Acad. Sci. USA. 1975.- V.258.- P.231-237.

101. Bigley R.H., Stankova L. Uptake and Reduction of Oxidized and Reduced Ascorbate by Human Leukocytes. // J. Exp. Med.- 1974,- V. 139, N 5,- P. 1084-1092.

102. Bigley R., Stankova L., Roos D., Loos J. Glutathione Dependent Dehydroascorbate Reduction : a Determinant of Dehydroascorbate Uptake by Human Polymorphonuclear Leukocytes. // Enzyme.- 1980,- V. 25, N 3,- P. 200-204.302

103. Bjelleru P.M., Ljunggren B. Photohemolytic potency of tetracyclines. // J. Invest. Derm.- 1985,- Vol. 84, N. 4,- P. 262-264.

104. Blaug S.M., Hajratwala B. Kinetics of Aerobic Oxidation of Ascorbic Acid. // J. Pharm. Sci.- 1972,- V. 61, N 4,- P. 562.

105. Bodannes R.S. and Chan Ph.C. Ascorbic Acid as a Scavenger of Oxygen. // FEBS Letters 1979,- V.105, N2,- P. 195-197.

106. Borsook H., Davenport H.W., Cecil E.P., Warner J., Warner R. The Oxidation of Ascorbic Acid and Its Reduction in Vitro and in Vivo. // J. Biol. Chem.- 1937,- V. 117, N 1,- P. 237-279.

107. Brown W.D., Mebine L.B. Autooxidation of Oxymyoglobins. // J. Biol. Chem.-1969.- V.244, N24.- P.6696-6701.

108. Buettner G.R. Ascorbate autoxidation in the presence of iron and copper chelates. // Free Rad. Res. Comms.- 1986,- V. 1, N 6,- P. 349-353.

109. Bunn H.F., Drysdale J.W. The separation of partially oxided hemoglobins // Biochim. Biophys. Acta.- 1971.- V.229,N1.- P.51-57.

110. Carlbery I., Mamerwick B. Purification and characterization of the Flavoenzyme Glutatione Reductase from Rat Liver. // J. Biol. Chem. 1975,- V.250, N14,- P.5475-5480.

111. CarrellR.W., Winterbourn C.C., Rachmilewitz E.A. Activated Oxygen and Haemolysis. // British Journal of Haematology.- 1975,- V.30, N3,- P.259-264.

112. Chance B., Herbert D. The Enzyme Substrat Compounds of Bacterial Catalase and Peroxidase. // Biochem. J. 1950,- V.46.- P.402-414.

113. Chatteijee I.B., Banerjee A. Estimation of Dehydroascorbic Acid in Blood of Diabetic Patients. // Analytical Biochemistry.- 1979,- V. 98, N 2.- P. 368-374.

114. Chaudiere J., Wilhelmsem E.C., Tappel A.L. Mechanism of Selenium -Glytatione peroxidase and its Inhibition by Mercaptocar-boxylic Acid and other Mercaptans //J.Biol.Chem. -1984.-V.259,N2.-P. 1043-1050.

115. Cheah K.S. Cheah A.M. Mitochondrial calcium, erythrocyte fragility and porcine malignant hypertermia. /7 FEBS Lett.-1979.-V. 107,N 2,- P.265-268.

116. Chiodi H., Mohler J.G. Nonautocatalytic Methemoglobin Formation by Sodium Nitrite under Aerobic and Anaerobic Conditions. // Environ. Res.- 1987,- V.44, N1,- P.45-55.

117. Christine L., Thompson G., Iggo B., Brownie A., Stewart C.P. The Reduction of Dehydroascorbic Acid by Human Erythrocytes. // Clin. Chim. Acta.- 1956,- V.l, N 6,-P. 557- 569.

118. Cohen G., Martiner M., Hochstein P. Generation of Hydrogen Peroxide During the Reaction of Nitrite with Oxyhaemoglobin. // Biochemistry.- 1964,- V.3, N7,- P. 901903.

119. Coleman M.D., Coleman N.A. Drug-induced methemoglobinemia. Treatment issues.// Drad. Saf.- 1996,- V.14, №6,- P. 394-405.303

120. Cox B.D., Whichelow M.J. The Measurement of Dehydroascorbic Acid and Diketogulonic Acid in Normal and Diabetic Plasma. // Biochemical Medicine.- 1975,- V. 12, N2,-P. 183-193.

121. Crowder A.L., Swenson Ch.A., Barker R. Calorimetric Studies of the Binding of Ligands to Aldolase. // Biochemistry.- 1973,- V.12, N15,- P. 2852-2855.

122. Csuros Z., Petro J. Autoxidation of ascorbic acid as a function of pH values. // Acta Chim. Acad. Sci. Hung.- 1955.- V. 7, N 1-2,- P. 199-222.

123. Dalziel K., O Brien J.R.P. Spectrokinetic studies of the reaction of hydrogen peroxide with haemoglobin in dithionite solutions. // Biochem. J.- 1957,- V.67, N1.- P. 124136.

124. Dar S.K., Nain R.C. Superoxide dismutase, glytatione peroxidase, catalase and lipid peroxidation of normal and sickled erythrocytes. // British J. of Haematology.- 1980,-V.44, Nl.-P. 87-92.

125. Doyle M.P., Herman J.S., Dykstra.L. Autocatalytic oxydation of haemoglobin induced by nitrite: activation and chemical inhibition. // J. Free Radic. Biol. Med.- 1985.-V.l, N2,- P.145-153.

126. Errera Maurice. Mechanism of Biological Action of Ultraviolet and Visible Radiations. Progress in Biophysics and biophysical chemistry.-1953.- V. 3.- P. 88-130.

127. Evans R.M., Currie L., Campbell A. The distribution of ascorbic acid between varicus cellular components of blood, in normal individuals, and its relation to the plasma concentration. // Brit. J. Nutr.- 1982,- V. 47, N 3,- P. 473-482.

128. Evans M.G., Hush N.S., Uri N. The Energetics of Reactions Involving Hydrogen Peroxide, Its Radicals and Its Ions. // Quarterly Reviews.- 1952,- V.6, N2,- P. 186196.

129. Eyer P., Hertle H., Kiesse M., Klein G. Kinetics of ferrihaemoglobin formation by some reducing agents, and role of hydrogen peroxide. // Mol. Pharmacol.- 1975,- V. 11, N3.-P. 326-334.

130. Finkelstein E., Rosen G., Raauckman E. Spin Trapping. Kinetics of the Reaction Superoxide and Hydroxyl Radicals with Nitrones // J. Am. Chem. Soc.- 1980,- V. 102,15,- P. 4994-4999.

131. Fletcher M.P., Seligmann B.E., Gallin J.I. Correlation of Human Neutrophil Secretion, Enchanced Functional Capacity. // J. Immunol. 1982,- V.128, N2,- P. 941-948.

132. Flohe L., Gunzler W.A. Assays of glutation peroxidase. // Methodes in Enzymology.- 1984,- V.105.- P. 114-121.

133. Frei B., England L., Ames B.N. Ascorbate is an Outstanding Antioxidant in Human Blood Plasma. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1989,- V.86, N16,- P. 6377-6381.

134. Fridowich I. Superoxide Dismutases. // Ann. Rev. Biochem.-1975,- V.44.- P. 147-159.

135. Fridowich I. Biological effects of the superoxide radical // Arch. Biochem. Biophys.- 1986,- V.247, N1,- P. 1-11.304

136. Gaetani G.F., Galiano S., Canepa L., Ferraris A.M., Kirkmann H.N. Catalase and glutatione Peroxidase Are Equally Active in Detoxification of Hydrogen Peroxide in Human Erythrocytes. // Blood. -1989,- V.73, N1.- P. 334-339.

137. Galaris D., Cadenas E., Hochstein P. Redox Cycling of Myoglobin and Ascorbate: A Potential Protective Mechanism against Oxidative Reperfusion Injury in Muscle. // Arch. Biochem. Biophys.- 1989,- V.273, N2,- P. 497-504.

138. Gaetani G., Kirman H.N., Mangerini r., Ferraris A.M. Impotance of catalase in the disposal of hydrogen peroxide within human erythrocytes. // Blood.- 1994,- V.84, №3,-P. 325-330.

139. Gang H., Cederbaum A.I., Rubin E. Stereospecifity of ethanol oxidation. // Biochem. Biophys. Res. Communs.- 1973,- V.54, N1.- P. 264-269.

140. Garel M.C., Domenget Ch., Caburi-Martin J., Prehu C., Galouteros F., Beuzard Y. Covalent binding of glutatione to haemoglobin. 1. Inhibition of haemoglobin S polymerization. // J. Biol. Chem.- 1986,- V.261, N31,- P. 14704-14709.

141. George P., Irvine D.H. The reaction between metmyoglobin and hydrogen peroxide. //Biochem. J.- 1952,- V.52, N3,- P. 511-517.

142. Geraci G., Parkhurst L.J., Gibson G.H. Preparation and properties of -and -chains from human hemoglobin. // J. Biol. Chem.- 1969,- V.244, N17,- P. 464-466.

143. Goldberg B., Stern A. The generation of 02,- by the interaction of the hemolytic agent, phenylhydrazine, with human haemoglobin. // J. of Biological Chemistry.- 1975,-V.250, N6,- P. 2401-2403.

144. Goldberg B., Stern A., Peisach J. The mechanism of superoxide anion generation by the interaction of phenylhydrazine with haemoglobin. // J. of Biological Chemistry .- 1976,- V.251, N10,- P. 3045-3051.

145. Ganther H., Kraus R. Oxidation of Glutatione Peroxidase. // Methods in Enzymology.- 1984,- V.107.- P. 593-602.

146. Grimble R.F., Hughes R.E. A Dehydroascorbic Acid Reductase Factor in Guinea-Pig Tissues. // Experientia.- 1967/- V. 23, N 5,- P. 362.

147. Grochmalicka J. Trwalosc kwasu 1-askorbinowego w roztworach wodnych. // Zesz. Probl. Postepow. Nauk. Poln.- 1965,- Z. 53,- C. 57-63.

148. Guillochon D., Esclade L., Thomas D. Effect of glutaraldehyde on haemoglobin :oxidation -reduction potentials and stability.// Biochem. Pharmacol.- 1986,- V.35, N2,- P. 317-323.

149. Gulevsky A.K., Sakharov B.V.,Volkov V.Ya.// Role of dehydrationin changing the permeabilityog erythrocyte plasma membranes by freeze-thawing // Biochem.et biophys. Acta.- 1983,- V. 728,№3,- P. 371-376.

150. Gutteridge J., Richmond R., Halliwell B. Oxygen free-radicals and lipid peroxidation. Inhibition by protein caeruloplasmin. // FEBS Letters.- 1980,- V.112, N2,- P. 269-272.305

151. Gutteridge J.M.C. Iron promoters of the Fenton reaction and lipid peroxidation can be released from haemologlobin by peroxides. // FEBS letters.- 1986,- V. 201, № 2.- P. 291-295.

152. Haber F., Weiss I. The Catalytic Decomposition of Hydrogen Peroxide by Iron Salts. // Proc. Ray. Soc. Ser. A.- 1934,- V.147, N861,- P. 332-351.

153. Hall A.H., Kulig K.W., Rumak B.H. Drug and chemical-induced methemoglobinemia. Clinical features and management.// Med. Toxicol.- 1986,- V. 1, №4,-P. 253-260.

154. Halliwell В., Gutteridge J.M.C. / Free Radicals in Biology and Medicine. Ed. Halliwell В., Gutteridge J.- Oxford: Science Publications, Clarendon Press, 1986,- P. 100106.

155. Нага Т., Minakami S. On the functional rde of cytochrome Ь5 II NADH linked ascorbate radical reductase activity in microcomes. // J. Biol. Chem.- 1971,- V. 69,- P. 325.

156. Hardwick T.J. The Rate Constant of the Reaction Between Ferrous Ions and Hydrogen Peroxide in Acid Solution. // Can. J. Chem.- 1957,- V.35, N5,- P. 428-436

157. Harris J.R. Furtser studies on the proteins released from haemoglobin-free erythrocytes dhost at low ionic strendht. //Biochim. biophys. Acta.-1971.-V.229,- P. 761770.

158. Harvey A.E., Smart J.A., Amis E.S. Simultaneous Spectrophotometric Determination of Iron (II) and Total Iron with 1,10 Phenanthroline // Anal. Chem.- 1955,-V. 27, № l.-P. 26-29.

159. Hasan P., Kochevar I.J., Daniel J., et al. Mechanismof tetracycline phototoxity. // J. Invest. Derm.- 1984,- V. 83,- P. 179-183.

160. Herzog V., Fochimi H. The effect of glutaraldehyde on catalase.Biochemical and cytochemical stydies with beef liver catalase and rat liver peroxisomes. // J. Cell. Biol.-1974,-V.60, Nl.-P. 303-311.

161. Hoigne R. Penicillins, Cephalosporins and Tetracyclines, Side Effects of Drugs. / Ed. by M.N.G Dukes.- Amsterdam: Excepra Medica, 1975. Vol. 8 Found.- P. 571-601.

162. Hornig D., Weber F., Wiss O. Uptake and Release of ( 1-14C ) Ascorbic Acid and ( 1-14C ) Dehydroascorbic Acid by Erythrocytes of Guinea Pigs. // Clin. Chim. Acta.1971.-V.31,N l.-P. 25-35.

163. Hornig D., Weber F., Wiss O. Autoradiographic Distribution of ( 1-14C ) Ascorbic Acid in Male Guinea Pigs after Intravenous Injection. // Internal J. Vit. Nutr. Res.1972,- V. 42, N 2,- P. 223-241.

164. Hornig D., Weber F., Wiss O. Studies on the Distribution of ( 1-14C ) Ascorbic Acid and ( 1-14C ) Dehydroascorbic Acid in Guinea Pigs after Oral Application. // Internal J. Vit. Nutr. Res.- 1974,- V.44, N 2.- P. 217-229.

165. Hornig D., Weiser H., Weber F., Wiss O. Effect of Massive Doses of Ascorbic Acid on its Catabolism in Guinea igs. // Internat. J. Vit. Nutr. Res.- 1973,- V. 43, N 1,- P. 28-33.

166. Hughes D.E., Maton S.C. The Passage of Vitamine C across the Erythrocyte Membrane. // Brit. J. Haematol.- 1968,- V.14, N3,- P. 247-253.

167. Hughes D.E. Irreversible Reaction Kinetics of the Aerobic Oxidation of Ascorbic Acid. // Anal. Chem.- 1985,- V. 57, N 2,- P. 555-558.

168. Hughes R.E. Reduction of Dehydroascorbic Acid by Animal Tissues. // Nature.-1964.- V. 203, N 4949,- P. 1068- 1069.

169. Hughes R., Kilpatrick G.S. The Reduction of Dehydroascorbic Acid by Haemolysates of Pernicious Anaemia Erythrosates. // Clin. Chim. Acta.- 1964,- V.9, N 3,-P. 241-244.

170. Hulsmann T.H.J. Studies on the heterogeneity of haemoglobin XI. Chromatographic studies of intermediate forms of oxy-and ferrihaemoglobin. // Arch. Biochem. Biophys.- 1966,- V.113, N2,- P. 427-434.

171. Irwin M.I., Hutchins B.K. A conspectus of reseach on vitamin C requirements of man. // J. Nutr.- 1976,- V. 106, N 6,- P. 821-880.

172. Irving H., Mellor D.H. The Stability of Metal Complexes of 1,10-Phenanthroline and its Anallogues. Part 1. 1,10-Phenanthroline and 2,2 Bipyridyl // J. Chem. Soc.- 1962.12,- P. 5225-5237.

173. Jones P., Sugget A. The Catalase -Hydrogen Peroxide Sustem. A theoretical appraisal of the mechanism of catalase action. // Biochem. J. -1968,- V. 110, N4,- P.621-629.

174. Jones P. Dissociation of catalase. // Biochem. J.- 1970,- V.180, N2,- P.319-321.

175. Jones P. Catalases and Iron-Porphyrin Model Systems: Rols of the Coordination Environment of Iron in Catalytic Mechanisms. // Proc. NATO/ Adv. Study Inst. Edmonton. 1981, Aug. 23-Sept. 4, Ed. Dunford H.B.- Dordrecht P.A., 1982,- P. 427-438.

176. Kanai Y., Sugimura J., Matsushima J., Kawamura A. Studies on in vivo degradation of rat hepatic catalase with or without modification by 3 amino-1,2,4 triazole // J. Biol. Chem.- 1974,- V.249, N20,- P. 6505-6511.

177. Kapeghian J.C., Verlangieri A. The Effects of Glucose on Ascorbic Acid Uptake in Heart Endothelial Cells: Possible Pathogenesis of Diabetic Angiopathies // Life Sciences.-1984,- V. 34, N 6,- P. 577-584.

178. Kaul Rajinder K.,Kohler Heinz // Interactionof hemoglobin with bond 3: a review // Klin. Wochenschr.-1983.- V.61, №17,- P.831-837.307

179. Keilin D., Hartree E.F. The Combination between Methaemoglobin and Peroxides: Hydrogen Peroxide and Ethyl Hydroperoxide. // Proc. Proy. Soc. B.- 1935.-V. 117, N B802.- P. 1-15.

180. Keilin D., Hartree E. Properties of azide -catalase // Biochem. J.- 1945,- V.39, N2,-P. 148-157.

181. Keilin D., Hartree E. Coupled oxidation of alcohol. // Proc. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci.- 1936,- V.119, N1,- P.141-155.

182. Keilin D., Nicholls P., Reactions of catalase with hydrogen peroxide and hydrogen donors.// Biochim. Biophys. Acta.- 1958,- V.29, №2,- P. 302-307

183. Kikugawa K., Sasahara T., Sasaki T., Kurechi T. Factors influencing the autoxidation of haemoglobin A. // Chem. Pharm. Bull.- 1981.- V.29, N5,- P. 1382-1389.

184. Kirkman H.N., Gaetani G.F. Catalase:A tetrameric enzyme with four tightly bound molecules of NADPH. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1984,- V.81, N14,- P. 43434347.

185. Kirkman H.N., Galian S., Gaetani G.F. The function of catalasebound NaDPH. // J. Biol. Chem.- 1987,- V.262, N2,- P. 660-666.

186. Kniewald I., Kniewald Z., Mildner P. New Approach to the Study of HormoneProtein Interaction Using the Microcalorimetric Method. // Steroids.- 1975.- V.25, N4,- P. 477-485.

187. Knutton S., Finean J.B., Coleman R., Limbrick A.R. Low angle x-ray diffraction and alectronmicriscope studies of isolated erythrocyte membranes // J. cell Sci.-1970.-V.7.- P. 357-371.

188. Kolthoff I.M., Leussing D.L., Lee T.S. Reaction of Ferrous Monophenanthroline Complex and the Colorimetric Determination of Phenanthroline // J. Am. Chem. Soc.-1950,- V.72, № 5,- P. 2137-2177.

189. Kono Y., Fridowich I. Superoxide radical inhibits catalase // J. Biol. Chem.-1982,- V.257, N10,- P. 5751-5754.

190. Koren H., Alth G., Shenk G., Jndra R.H. Photodynamic therapy an alternative pathway in the treatment of recurrent breast cancer // Inst. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys.-1994,- V. 15, N.28.- P. 463-466.

191. Kosaka H., Tyuma I. Mechanism of autocatalytic oxidation of oxyhemoglobin by nitrite // Environ. Health Perspect.- 1987,- V.73.- P. 147-151.

192. Kosaka H., Uozumi M. Inhibition by amines indicates involvement of nitrogen dioxide in autocatalytic oxidation of oxyhemoglobin by nitrite // Biochim Biophys Acta.-1986,-V.12, №871(1).-P. 14-18.

193. Kosaka H., Uozumi M., Tyuma I. The interaction between nitrogen oxides and V hemoglobin and endothelium-derived relaxing factor // Free Radio Biol. Med.-1989, v.7.-№6,-P. 653-658.308

194. Kosaka H., Imaizumi K., Tyuma I. Mechanism of autocatalytic oxidation of V oxyhemoglobin by nitrite. An intermediate detected by electron spin resonance // Biochim. Biophys. Acta.- 1982,- V.702, №2,- P. 237-241.

195. Kraus R.J., Prohaska J.R. Gauther H.E. Oxidized forms of ovine erythrocyte glutatione peroxidase.Cyanide inhibition of a 4- glutatione : 4-selenoenzyme // Biochim. Biophys. Acta.- 1980.- V.615, N1,- P. 19-26.

196. Kremer M.L., Baer S. Stable intermediates in kinetic model of catalase action. // J. Phys. Chem.- 1974,- V.78, N19,- P. 1919-1922.

197. Lovstad R.A. Copper Catalyzed Oxidation of Ascorbate (Vitamin C). Inhibitory Effect of Catalase, Superoxide Dismutase ,Serum Proteins (Ceruloplasmin, Albumin, Apotransferrin) and Amino Acides // Int. J. Biochem.- 1987,- V.19, N4,- P. 309-313.

198. Le Hir M. Ultramicroassay of hydrogen peroxide-producing oxidases // Anal. Biochem.- 1980,- V.102, N1,- P. 233-236.

199. Lee T.S., Kolthoff I.M., Leussing D.L. Reaction of Ferrous and Ferric Iron with 1,10-Phenanthroline. I Dissociation Constants of Ferrous and Ferric Phenanthroline. // J. Am. Chem. Soc.- 1948,- V.70, N7,- P. 2348-2352.

200. Lee W., Davis K.A., Rettmer R., Labbe R.F. Ascorbic acid status: biochemical and clinical considerations // Am. J.Clin. Nutr.- 1988,- V.48,N2.- P. 286-290.

201. Leffler A.J. A Study of the Hydrolysis of Iron (III) Ion by Sodium Bicarbonate Using an Inert NMR Probe Technique // Inorganic Chemistry.- 1979,- V.18,№ 9.- p. 25292532.

202. Legge J.W., Lemberg R. Coupled oxidation of ascorbic acid and haemoglobin. 4.The "labile iron " in blood and its increase during choleglobin formation // Biochem. J.-1941,- V.35, N3,- P.353-362.

203. Lemberg R., Legge J.W., Lockwood W.H. Coupled oxidation of ascorbic acid and haemoglobin. 3. Quantative studies on choleglobin formation estimation of haemoglobin ascorbic acid oxidation. // Biochem. J.- 1941,- V.35,N3.- P. 339-352.

204. Lemberg R., Phil D. The chemical mechanism of bile pigment formation // Rev. Pure Appl. Chem.- 1956,- V.6, N1,- P. 1-23.

205. Ljones T., Skotland T. Evidence from Acceleration of Cytochrome C Reduction for the Formation of Ascorbate Free Radical by Dopamine -Monooxygenase // Febs Letters.- 1979,- V.108, N1,- P. 25-27.309

206. Macey R.I., Adorante J.S., Orme F.W. Erythrocyte membrane potentials determined by hydrogen ion distribution // Biochim. biophys. Acta.- 1978,- V.512, N2.- P. 284-295.

207. Maickel R.P. A Rapid Procedure for the Determination of Adrenal Ascorbic Acid.Application of the Sullivan and Clarke Method to Tissues // Anal. Biochem.- 1960,-V.1,N6.-P. 498-501.

208. Maeda Nobuji, Kon Kazunori, Imaizumi Kazuhiko, Sekiya Misuzu, ShigaTakeshi. Alteration of rheological properties of human erythrocytes by crosslinking of membrane proteins // Biochem.et biophys. Acta.- 1983,- V.735, №1,- P. 104-112.

209. Mann G., Newton P. The Membrane Transport of Ascorbic Acid // Ann. N. Y. Acad. Sci.- 1975,- V. 258,- P. 243- 252.

210. Mansouri A. Oxidation of human haemoglobin by sodium nitrite effect of B-93 thiol groups // Bioch. Bioph. Res. Comm.- 1979,- V.89,N2.- P. 441-447.

211. Mansouri A., Winterhalter K.H. Nonequivalence of chains in haemoglobin oxidation // Biochemistry.- 1973,- V.12,N24.- P. 4946-4949.

212. Maral J., Puget K., Michelson M. Comparative study of superoxide dismutase, catalase and glutation peroxidase levels in erythrocytes of different animals // Biochem. Bioph. Res. Commun.- 1977,- V.77,N4.- P. 1525-1535.

213. Mills G.G. Glutation peroxidase as erythrocyte enzime which protected hemoglobin from oxidative breakdown // J.Biol. Chem.- 1957,- V.229,N1.- P. 189-197.

214. Martin G.R., Mecca Ch.E. Studies on the Distribution of Ascorbic Acid in Rat // Arch. Biochem. Biophys.- 1961,- V.93,N1.- P. 110-114.

215. Martin J.P., Colina K., Logsdon N. Role ofoxygen radicals in the phototoxity of tetracyclines toward Echerichia Coli B // J. Bacteriol.- 1987,- V.169,N.6.- P. 2516-2522.

216. Mas O. J., Williams A., Nayler W. G. Two orientations of isolated cardiac sarcolemmal vesicles separated by affinity chromatography/ // Anal. Biochem.- 1980,-V.103.-P. 222-228.

217. Mbemba F., Houbion A., Raes M., Remucle J. Subcellular localization and modification with ageing of glutatione, glutatione peroxidase and glutatione reductase activities inhuman fibroblasts // Biochim. Biophys. Acta.- 1985,- V.838,N2.- P.211-220.

218. McCord G.M., Fridowich I. Superoxide dismutase. An enzy-mic function for erythrocuprein (haemocuprein) // J. Biol. Chem.-1969.- V.244,N22.- P. 6049-6055.

219. Meerhof L.J., Roos D. An Easy, Specific and Sensetive Assay for the Determination of the Catalase Activity of Human Blood Cell // J. Reticuloendothelial. Society.- 1980,- V.28,N5.- P. 419-425.310

220. Mehlhorn H., Leiadais M., Korth H.G., Foyer C.H. Ascorbate is the natural substrate for plant peroxidases // FEBS Letters.- 1996,- V.378, №3,- P. 203-206.

221. Minotti G., Aust S.D. The Requirement for Iron (III) in the Initiation of Lipid Peroxidation by Iron (II) and Hydrogen Peroxide // J. Biol. Chem.- 1987,- V.262,№ 3,- P. 1098-1104.

222. Misra H.P. The role of superoxide anion in peroxidase- catalyzed chemiluminescence of luminol // Arch. Biochem. Biophys.- 1982,- V.215,N1.- P. 59-65.

223. Misra HP., Fridowich I. The generation of superoxide radical during the autoxidation of haemoglobin // J. Biol. Chem.-1972.- V.247, N21,- P. 6960-6962.

224. Misra H.P., Fridowich I. Inhibition of superoxide dismutases by azide // Arch.Biochem. Biophys.- 1978,- V.189, N2.- P. 317-322.

225. Morse M.D. Toxic effects of drugs on erythrocytes // Ann. Clin. Lab. Sci.-1988,- V.18, N1,- P.13-18.

226. Mory Y., Murakama S., Sagae T.at al. Inhibition of catalase activity in vitro by diesel exault particles // J. Toxicol. Envir.Health.- V.47,N2.- P125-134.

227. Murphy T. Inactivation of tobacco mosaic virus ribonucleic acid by near- and middle- ultraviolet light sensitization by sulfanilamide and chlorotetracycline // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1975,- V.65.- P. 1107-1114.

228. Murthy S.N., Kaul., Kohler H. Hemoglobin binds to the amino-terminal 23-resudue fragment of human erythrocyte band 3 protein // Hoppe Seyler Z. Physiol. Chem.-1984,-V.365, Nl.-P. 9-17.

229. Nakatani M. Studies on Histidine Residues in Haemoproteins Related to Their Activities. Photooxidation of Peroxidase in the Presence of Methylene Blue // J. Biochem. I960.- V.48. N5,- P.640-644.

230. Nicholls P. Activity of catalase in the red cell // Biochim. Biophys. Acta.- 1965,-V.99, N2,- P. 286-297.

231. Nishikimi M. L-Gulono- Lactone Oxidase (Rat and Gost Idvor) // Methods Enzymol.- 1979,- V.62.- P. 24-30.

232. Nishikimi M. Oxidation of Ascorbic Acid with Superoxide Anicn Generated by the Xanthine Xanthine Oxidase System // Biochim. Biophys. Res. Commun.- 1975,-V.63,N 2,- P. 463-468.

233. Norihide Shimiru, Kazuo Kobayashi and Koichiro Hayashi. The Reaction of Superoxide Radical with Catalase. Mechanism of inhibition of catalase by superoxide radical // J.Biol. Chem.- 1984,- V.259,№ 7,- P. 4414-4418.

234. Navashin S.S., Beliavskaya I.V., Sazykin Y.O., Gryaznova N.S // International Simposium on Antibiotic Resistance, 2nd /Eds. S. Mitsuhashi et all.-Smolenice.-1975,- P. 227-230.311

235. Nilsson R., Swanbect G., Wennersten T. Primary mechanism of erythrocyte photolysis induced by biological sensitisers and phototoxic drugs // Photochem. Photobiol.-1975,-V. 22.- P. 183-186.

236. Nilsson R. On the role of free radicals and hydrogen peroxide in some biological oxidation.-Stockholm.- Roy. Univ., 1969,- 312 p.

237. Novo E., Esparza S. Tetracycline-mediated photodinamic inactivation of animal viruses // J. Gen. Virol- 1979,- V.45.- P. 323-330.

238. Okamura M. An Improved Method for Determination of L-Ascorbic Acid and L-Dehydroascorbic Acid in Blood Plasma // Clin. Chim. Acta.- 1980,- V.103,N3.- P.259-268.

239. Okamura M. Uptake of L-Ascorbic Acid and L-Dehydroascorbic Acid by Human Erytrocytes and Hela Cells // J. Nutr. Sci. Vitaminol.- 1979,- V.25, N4,- P. 269-279.

240. Orringer E.P., Roer M.E.S. An Ascorbate Mediated Transmembrane -Reducing System of the Human Erytrocyte // J. Clin. Invest.- 1979,- V.63,N1.- P. 53-58.

241. Osaki Sh., Johnson D., Frieden E. The Possible Significance of the Ferrous Oxidase Activity of Ceruloplasmin in Normal Human Serum // J. Biol. Chem.- 1966,-V.241,N12.- P. 2746-2751.

242. Osaki Sh., Walter Ch., Frieden E. The Ascorbate Oxidase Activity of Chelex Treated Ceruloplasmin. // Biochim. Biophys. Res. Commun.- 1963,- V.12,N1.- P. 1-7.

243. Ovi C. Studies of Ascorbic Acid Factors Influencing the Ascorbate -Mediated Inhibitions of Catalase // Biochemistry.- 1967,- V.6, N10,- P. 2995-2999.

244. Palcic M., Dundford H.B. The reaction of human erythrocyte catalase with hydroperoxides to form Compound I. // J. Biol. Chem.- 1980,- V.255, N13.- P. 6128-6132.

245. Paniker N.V., Iyer G.Y.N. Erythrocyte catalase and detoxication of hydrogen peroxide // Canadian J. of Biochemistry.- 1965,- V.43,N7.- P.1029-1039.

246. Pass H.J. Photodynamic therapy in oncology mechanisms and clinical use // J. Nat. Cancer. Inst.- 1993,- V.85,N6.- P. 443-446.

247. Pauling L. Nature of the Iron -oxygen bound in oxyhaemoglobin // Nature.-1964.- V.203,N4941.- P.182-183.

248. Peisach G., Blumberg W.E., Prachmilewitz E.A. The demonstration of ferrihaemochrome intermediates in Heinz body formation following the reduction of oxyhaemoglobin A by acetyl-phenyUiydrazine // Bioch. Bioph. Acta.- 1975,- V.393, N2,- P. 404-418.

249. Penney J.R., Zilva S.S. The Chemical Behavior of Dehydro-L-Ascorbic Acid in Vitro and in Vivo // Biochem. J.- 1943,- V.37,N3.- P. 403-417.

250. Perutz M.F. Structure and function of haemoglobin. 1. A tentative atomic model of horse oxyhaemoglobin//J. Mol. Biol.- 1965,- V.13, N3,- P. 646-668.312

251. Perutz M.F., Kendrew J.C., Watson H.C. Structure and function of haemoglobin. II. Some relations between polypeptide chain configuration and amino acid sequence. // J. Mol. Biol. 1965, v. 13, N3, p.669-678.

252. Petrenko Yu. M., Vladimirov Yu.A. Mechanical stress in biomembranes originated from pressure difference across the membrane // Studia biophysica.- 1990 V. 137,-P. 3-14.

253. Pirie A. Glutatione Peroxidase in Lens and a Source of Hydrogen Peroxide in Aqueous Humor // Biochem. J.- 1965,- V.96, N1,- P. 244-253.

254. Politzer P. A charge-transfer interpretation of the interactions of haemoglobin with oxygen and carbon monoxide // Biochimica et biophysica acta.- 1968,- V.153, N4,- P. 799-803.

255. Prohaska J.R., Oh S.H., Hoekstra W.G., Ganter H.E. Glutatione peroxidase: Inhibition by cyanide and realase of selenium // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1977,-v.74, N1,- p.64-71.

256. Puppo A., Halliwell B. Formation of Hydroxyl Radicals from Hydrogen Peroxide in the presens of Iron.Is Haemoglobin a biological Fenton reagent // Biochem. J.-1988,-V.249,N1.-P. 185-190.

257. Rao B.S.N. Radiolysis of Ascorbic Acid in Aqueous Solution by Gamma Radiation//Radiat. Res.- 1962,- V.17,N5.- P. 683-693.

258. Ribarov S., Bochev P. Lead-hemoglobin interaction as a possible source of reactive oxygen species -a chemiluminescent study // Arch. Bichem. Biophys.- 1982,-V.213, N1.- P. 288-292.

259. Ribarov S.R.,Benchev LC.,Sfrashimirov D.D.Binding oh haemoglobin to the red cell membrane in the presence of copper chloride // J. Biochem.- 1984,- V.219.- P. 317-320

260. Rifkind J.M. The autoxidation of horse haemoglobin :The effect of glutathione // Biochim. Biophys. Acta.- 1972,- V.273, N1,- P. 30-39.

261. Rifkind J.M. Copper and the autoxidation of haemoglobin // Biochemistry.-1974,-V. 13, N12,-P. 2475-2481

262. Roeser H.P. The Role of Ascorbic Acid in the Turnover of Storage Iron // Seminars in Hematology.- 1983,- V. 20, N 2,- P. 91-100.313

263. Root R.K., Metcalf J., Oshino N., Chance B. H2O2 Release from Human Granulocytes during Phagocytosis. 1. Documentation, Quantitation and some regulating factors // J. Clin. Invest.- 1975,- V. 55, № 5,- P. 945-955.

264. Rose R.C. Solubility properties of reduced and oxidized ascorbate as determinants of membrane permeation // Biochim. Biophys. Acta.- 1987,- V.924,N1.- P. 254-256.

265. Rose R.C. Transport of ascorbic acid and other water-soluble vitamins // B.B.A.- 1988,- V.947,N2.- P. 335-366.

266. Rose R., Choi J.-L., Koch M.J. Intestinal transport and of oxidized ascorbic acid ( dehydroascorbic acid ) // Am. J. Physiol.- 1988,- V.264, N6 (Pt 1).- P. G824-G828.

267. Rush J.D., Bielski D.H.J. Pulse Radiolytic Studies of Reactions of HO20 with

268. Fe (II)/Fe (III) Ions. The Reactivity of HO20 with Ferric Ions and Implication on the Occurence of the Haber-Weiss Reaction // J. Phys. Chem.- 1985,- V.89, № 23,- P. 50625066.

269. Saez G., Thornalley P., Hill H.A.O., Hems R., Bannister J.V. The Production of Free Radicals During the Autoxidation of Cysteine and their Effect on Isolated Rat Hepatocytes. // B. B. A.- 1982,- V. 719, N 1,- P. 24-31.

270. Salvati A.M., Ambrogioni M.T., Tentori L. The autoxidation of haemoglobin. Effect of copper // Italian. J. Biochem.- 1969,- V.18, N1,- P. 1-18.

271. Samojima T., Yang J. Reconstitution of Acid denaturated Catalase // J. Biol. Chem.- 1963,- V.238, N10,- P.3256-3261.

272. Sarcar S., Thach R. Chemistry Ingibition of formylmethionyl-tansfer RNA binding to ribosomes by tetracycline //Proc.Natr.Acad.Sci.USA.-1968.- V.60.- P. 14791483.

273. Schacter L.P. Generation of superoxide anion and hydrogen peroxide by erythrocytes from individuals with sickle trait or normal haemoglobin // Eur. J. Clin. Invest.-1986,- V.16, N3.-P. 204-210.

274. Schroeder W.A., Schelton J.R. Aminoacid sequence of bovine liver catalase // Arch. Biochem. Biophys.- 1969,- V.431.-P. 652-658.

275. Schuberth J. Oxidation and reduction of hemoproteins by ultraviolet irradiation //Ark. Kem.- I960,- V.15, N2,- P. 97-130.

276. Schuler R.H. Oxidation of Ascorbate Anione by Electrone Transfer to Phenoxyl Radicals // Radiat. Res.- 1977,- V.69, N3,- P.417-433.

277. Scotland T., Ljones T. Direct Spectrophotometric Detec-tion of Ascorbate Free Radical Formed by Dopamine -monooxygenase and by Ascorbate Oxidase // B. B. A.-1980,- V.30, Nl.-P. 30-35.

278. Scott E.M., McGraw J.C. Purification and Properties of Diphosphopyridine Nucleotide Diaphorase of Human Erythrocytes // J. Biol. Chem.- 1962,- V.237, N1,- P. 249252.314

279. Scott E.M., Duncan I.W., Ekstrand V. Purification and Properties of Gluthione Reductase of Human Erythrocytes // J. Biol. Chem.- 1963,- V.238, N12/- P. 3928-3933.

280. Seeger W., Roka L., Moser U. Detection of organic hydroperoxides in rabbit lung lavage fluid, but not in lung tissue homogenate using GSH peroxidase and GSH reductase // J. Clin. Chem.Clin.Biochem.- 1984,- V.2, N11.- P. 711-715.

281. Shapira E., Ben-Yoseph Y., Aebi H. Nature of residual erythrocyte catalase activity in Swise-type acatalasemia// Enzyme.- 1974,- V.17, N5,- P. 307-318.

282. Sheela Ch.P., Vijayan E., Ranmaioch A. Spectrofluori-metric Determination of Ascorbic Acid // Anal. Chim. Acta.- 1983,- V.151, N1,- P. 251-254.

283. Shigeoka Sh., Nakano Y., Kitaoka Sh., The Biosynthetic Pathway of L-Ascorbic Acid in Euglena Gracilis z // J. Nutr. Sci. Vitaminal.- 1979,- V.25,N4.- P. 299-307.

284. Shimiru N., Kobayashi K., Hayashi K. The Reaction of Superoxide Radical with Catalase. Mechanism of inhibition of Catalase by Superoxide Radical // J.Biol.Chem-1984,- V.250, N7,- P. 4414-4418.

285. Simpson J.B., Ye Y., Rosen H.;, Beckman J.S. Myeloperoxidase and horseradish peroxidase catalyze tyrosine nitration in proteins from nitrite and hydrogen peroxide // Arch Biochem Biophys.- 1998,- V. 15; № 356(2).- P. 207-213.

286. Snyder L.M., Garver F., Liu S.C. at al. Demonstration of haemoglobin asociated with isolated, purified spectrin from senescent human red cells // Br. J. Haematol.- 1985,-V.61, N3,- P. 415-419.

287. Spector A., Gamer W.H. Hydrogen Peroxide and Human Cataract // Exp. Eye. Res.- 1981,- V.33,N6.- P. 673-681.

288. Stankova L., Rigas D.A., Bigley R.H. Dehydroascorbate Uptake and Reduction by Human Blood Neutrophils, Erythrocytes and Lymphacytes // Ann. N. Y. Acad. Sci.-1975,- V.258.- P.238-242.

289. Stankova L., Riddle M., Larned J., Burry K., Menashe D., Hart J., Bigley R. Plasma Ascorbate Concentrations and Blood Cell Dehydroascorbate Transport in Patients with Diabetes Mellitus // Metabolism.- 1984,- V.33,N4.- P. 347-353.

290. Stevenson N.R., Brush .K. Existence and Characteristics of Na+ -Dependent Active Transport of Ascorbic Acid in Guinea Pig // Am. J. Clin. Nutr.- 1969,- V.22, N 3,-P. 318-326.

291. Stevenson N.R. Active Transport of L-Ascorbic Acid in the Human Ileum // Gastroenterology.- 1974,- V.67, N 5,- P. 952-956.

292. Stocks J., Dormandy J.L. The autoxidation of human red cell lipids induced by hydrogen peroxide // British J. Haematology.- 1971,- V.20, N1,- P. 95-111.

293. Sullivan S.G., Stern A. Interdependence of haemoglobin, catalase and the hexose monophosphate shunt in red blood cells exposed to oxidative agents // Biochemical Pharmacology.- 1980,- V.29, N17,- P. 2351-2359.

294. Sullivan S.G., Stem A. Effect of Ascorbate on Methemoglobin Reduction in Intact Red Cells // Arch. Biochem. Biophys.- 1982,- V.213,N2.- P.590-594.315

295. Takahashi M.A., Asada К. Superoxide Anion Permeability of Phospholipid Membranes and Chloroplast Thylakoids // Arch. Biochem. Biophys.- 1983,- V.226, N2.-P. 558-566.

296. Takita Т., Muraoka Y., Nakatani T. et all Chemistry of bleomycin.XXI. Metal-complex of bleomycin and its implication for the mtchanism of bleomycin action //J. Antibiot.-1978.- V.31.- P. 1073-1078.

297. Thompson R.Q. Peroxidase Based Colorimetric Determination of Ascorbic Acid//Anal. Chem.- 1987,- V.59,N8.- P. 1119-1121.

298. Tolbert В.М., М. Downing, R.W. Carlson, М.К. Knight and Е.М. Baker. Chemistry and Metabolism of Ascorbic Acid and Ascorbate Sulfate // Ann. N. Y. Acad. Sci. USA.- 1975,- V.258.- P.48-63.

299. Tomoda A., Tsuji A., Matsukawa Sh., Takeshita M., Yoneyama Yo. Mechanism of Methemoglobin Reduction by Ascorbic Acid under Anaerobic Conditions // J. Biol. Chem.- 1978,- V.263,N20.- P. 7420-7423.316

300. Tomoda A., Tsuji A., Yoneyama Y. Involvement of superoxide anion in the reaction mechanism of haemoglobin oxidation by nitrite // Biochem. J.- 1981,- V. 193, №1,-P. 169-179.

301. Tomoda A., Tsuji A., Yoneyama Y. Mechanism of hemoglobin oxidation by erricytochrome c and nitrite // Acta Biol. Med. Germ.- 1981,- V.40,№7.- P. 943-954.

302. Torre D., Ferrario G., Speranza F., Orani A., Fiori G.P.,ZeroIi C. Serum concentrations of nitrite in patients with HIV-1 infection // J. Clin. Pathol.- 1996,-V.49,№7.- P. 574-576.

303. Tran-Minh C., Vallin D. Enzyme -Bound Thermistor as an Enthalpimetric Sensor// Anal. Chem.- 1978,- V.50, N13,- P. 1874-1878.

304. Van der Vliet A, Eiserich J.P., O'Neill C.A., Halliwell B., Cross C.E. Tyrosine modification by reactive nitrogen species: a closer look // Arch Biochem Biophys.- 1995.-V.319, № 2,- P. 341-349.

305. Walaas E., Walaas O., Lovstad R. The Interaction of Ceruloplasmin with Catecholamines. // In Biochemystry of Copper. Eds by Peisach J., Aisen Ph., Blumberg W.-N. Y., London.- Acad. Press, 1966,- P. 537-544.

306. Wallace W.J., Houtchens R.A., Maxwell J.C., Caughey W.S. Mechanism of autoxidation for hemoglobins and myoglobins. Promo-tion of superoxide production by protons and anions // J. Biol. Chem.- 1982,- V.257, N9,- P. 4966-4977.

307. Wang R., GhaharyA., Shen Y.J., Scott P.G., Tredget E.E. Human dermal fibroblasts produce nitric oxide and express both constitutive and inducible nitric oxide synthase isoforms // J Invest. Dermatol.- 1996,- V.106, №3,- P. 419-427.

308. Waschko Ph., Rotrosen D., Levine M. Ascorbic Acid Transport and Accumulation in Human Neutrophils // J. Biol. Chem.- 1989,- V. 264,N 32,- P. 1899619002.

309. Waugh R., Evans E. A. Thermoelasticity of red blood cell membrane // Biophys. J.- 1979,-V. 26.-P. 115-119.

310. Weinstein J., Bielski B.H.J. Kinetiks of the Interaction of HO20 and O20" Radicals with Hydrogen Peroxide. The Haber-Weiss Reaction // J. Am. Chem. Soc.- 1979.-V.101, № i.-p. 58-62.

311. Weiss S.J. Neutrophil mediated Methemoglobin Formation in the Erythrocyte. The role of Superoxide and hydrogen Peroxide // J. Biol. Chem.- 1982,- V.257, N6,- P. 2947-2953.317

312. Whitburn K.D. The interaction of hydrogen peroxide with oxymyoglobin. / Oxygen Radicals in Chemistry and Biology, eds. Bors W., Saran M., Tait D., Walter de Grayter.- Berlin, New York, 1984,- P. 447-451.

313. White J., Cantor C Role of magnesium in the binding of tetracycline to Escherichia coli ribosome // J. Molek. Biol.- 1971,- V.58.- P. 397-401.

314. White-Stevens R.H. Interference by Ascorbic Acid in Test Systems Involving Peroxidase 1 Reversible Indicators and the Effects of Copper, Iron and Mercury // Clin. Chem.- 1982,- V.28, N4,- P. 578-588.

315. White-Stevens R.H., Stover L.R. Interference by Ascorbic Acid in Test Systems Involving Peroxidase 2 Redox-Coupled Idicator Systems // Clin. Chem.- 1982,- V.28, N4,-P. 589-595.

316. Wilson C.W.M. Clinical Pharmacological Aspects of Ascor-bic Acid // Ann. N. Y. Acad. Sci. USA.- 1975,- V.258.- P. 355-375.

317. Winkler B.S. In Vitro Oxidation of Ascorbic Acid and Its Prevention by GSH. // B. B. A.- 1987,- V.925, N3,- P. 258-264.

318. Winterbourn Ch.C. Comparison of Superoxid with Other Reducing Agents in the Biological Production of Hydroxyl Radicals // Biochem. J.- 1979,- V.182.- P. 625-628.

319. Winterbourn C.C., Carrell R.W. Studies of haemoglobin denaturation and Heinz body formation in the unstable haemoglobins // J. Clin. Invest.- 1974,- V.54, N3.- P. 678689.

320. Winterbourn C.C., McGrath B., Carrell R.W. Reactions involving superoxide and normal and unstable haemoglobins // Biochem. J.- 1976.- V. 155, N3,- P. 493-502.

321. Winterbourn CH.C., Stern A. Human Red Cells Scavenge Extracellular Hydrogen Peroxide and Inhibit Formation of Hypochlo-rous Acid and Hydroxyl Radical // J. Clin. Invest.- 1987,- V.80, N5,- P. 1486-1491.

322. Wunderling M., Paul H.H., Lohmann W. Evaluation of a Direct Spectrophotometric Method for the Rapid Determination of Ascorbate and Dehydroascorbate in Blood Using Ascorbate Oxidase // Biol. Chem. Hoppe-Seyler.J.-1986,- V.367, N10,- P. 1047-1054.

323. Yamaguchi T. Activation with catalase of mutagenicity of hyperoxides of some fatty acids and hydrocarbons // Agr. Biol. Chem.- 1980,- V.44, N8,- P. 1989-1991.

324. Yamaguchi T., Fujita Y., Kuroki S., Ohtsuka K., Kimoto E. A study on the reaction of human erythrocytes with hydrogen peroxide // J. Biochem.- 1983,- V.94, N2,- P. 379-386.318

325. Yamazaki I. The Oxidoreductive Feature of Intermediates Formed in the Reaction of Peroxidase // Proc. Intern. Symp. Enzyme Chem.Tokyo-Kyoto.- 1957,- V.2.- P. 224-229.

326. Yamazaki I., Piette L.H. The Mechanism of Aerobic Oxidase Reaction Catalyzed by Peroxidase // B. B. A.- 1963,- V.77, N1,- P. 47-64.

327. Yamazaki I., Mason H.S., Piette L. Identification by Electron Paramagnetic Resonance Spectroscopy of Free Radicals Generated from Substrates by Peroxidase // J. Biol. Chem.- I960,- V.235, N8,- P. 2444-2449.

328. Yamazaki I., Piette L.H. Mechanism of Free Radical Formation and Disapperance During the Ascorbic Acid Oxidase and Peroxidase Raection // B. B. A.-1961,- V.50, N1.- P. 62-69.

329. Yusa K., Shikama K. Oxidation of Oxymyoglobin to Metmyoglobin with Hydrogen Peroxide: Involvement of Ferryl Intermediate // Biochemistry.- 1987,- V.26, N27,- P. 6684-6688.

330. Zannoni V.G. Effects Ascorbic Acid on Microsomal Drug Metabolism // Ann. N. Y. Acad. Sci. USA.- 1975,- V.258.- P. 119-130.

331. Zeidler R.B., Kim H.D. Effect of low electrolyte media on salt loss and hemolysis of mammalian red blood cell // J. Cell. Physiol.- 1979,- V.100,N3.- P. 551-661.

332. Zidoni E., Kremer M.L. Kinetics and mechanism of catalase action. Formation of the intermediate complex// Arch. Biochem. Biophys.- 1974,- V.161,N2.- P. 658-664.

333. Zwaal F. F., Roelofsen B., Colley C. M. Localisation of red cell membrane constituents //Biochim. Biophys. Acta.- 1973,- V. 300,- P. 159.