Патохимические особенности и факторы повреждения сердца при сочетании сахарного диабета с хронической интоксикацией алкоголем

Индутный, Антон Васильевич

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Патохимические особенности и факторы повреждения сердца при сочетании сахарного диабета с хронической интоксикацией алкоголем
ВАК РФ 03.01.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Патохимические особенности и факторы повреждения сердца при сочетании сахарного диабета с хронической интоксикацией алкоголем"

□ □3493 136

На правах рукописи

ИНДУТНЫЙ Антон Васильевич

ПАТОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И ФАКТОРЫ ПОВРЕЖДЕНИЯ СЕРДЦА ПРИ СОЧЕТАНИИ САХАРНОГО ДИАБЕТА С ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИЕЙ АЛКОГОЛЕМ

03.01.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

1 1 МАР 2010

Челябинск - 2010

003493136

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Омская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научный консультант: Заслуженный работник высшей школы РФ,

доктор медицинских наук, профессор Высокогорский Валерий Евгеньевич

Официальные оппоненты: член-корреспондент РАМН,

доктор медицинских наук, профессор Терентьев Александр Александрович

Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Камнлов Феликс Хусаинович

доктор медицинских наук, профессор Львовская Елена Ивановна

Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение

высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов»

Защита состоится «0?« 2010 г. в часов на заседании диссерта-

ционного совета Д 208.117^02 при ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (454092, г. Челябинск, ул. Воровского, 64).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Челябинской государственной медицинской академии

Автореферат разослан

"Ж 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

Н.В. Тишевская

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования

Медико-социальная значимость исследуемой проблемы во многом обусловлена значительным уровнем инвалидности и смертности вследствие развития поздних осложнений сахарного диабета 2 типа, которым страдает в пределах 3% населения Российской Федерации (А. Г. Обрезан, 2008). Сердечнососудистая патология лидирует среди осложнений сахарного диабета 2 типа практически во всех странах мира (D. J. Betteridge, 2001). Характерные для сахарного диабета нарушения липопротеинового спектра крови в комплексе с провоспалительной иммунологической перестройкой способствуют атерогене-зу в коронарных сосудах и последующему развитию ишемических поражений (И. И. Дедов, 2004). Некоронарогенный механизм повреждения миокарда при сахарном диабете 2 типа связан с явлениями глюкозотоксичности и липоток-сичности, а также с развитием окислительного стресса на фоне дефицита энергии и антиокислительной защиты сердца (М. Aragno, 2006). Инактивация оксида азота вследствие образования пероксинитрита при гиперпродукции активных форм кислорода приводит к дефициту вазодилятации (J. Е. Wright, 2006), способствует ишемии миокарда и является важным звеном механизма повреждения сердца при сахарном диабете (Y. Xia, 2007).

У пациентов с сахарным диабетом 2 типа нередко имеются другие заболевания, также способствующие поражению сердечно-сосудистой системы (Т. Melchior, 2000), что является фактором прогредиентности кардиальных осложнений и увеличивает риск развития сосудистых катастроф. С высокой частотой в формировании широкого круга подобной коморбидной патологии принимают участие различные аддиктивные состояния, среди которых по распространенности лидирует злоупотребление алкоголем (В. Я. Семке, 2008). Хроническая алкогольная интоксикация сопутствует сахарному диабету 2 типа, по крайней мере, у 8,3% больных (П. И. Сидоров, 2002). Это сочетание повышает вероятность возникновения и способствует прогрессированию сосудистых осложнений сахарного диабета, а при длительном употреблении высоких доз алкоголя - ассоциировано с увеличением смертности вследствие сердечнососудистых нарушений (P. Diem, 2003). Наряду с прямыми повреждающими

эффектами алкоголя, процессы и продукты его биотрансформации способствуют развитию окислительного стресса в кардиомиоцитах (V. R. Preedy, 1999) с реализацией цитоксического действия на уровне модификации биомолекул, мембранотропных эффектов и вмешательства в работу сигнальных механизмов, включая NO-зависимые каскады (X. Deng, 2007).

Биохимические аспекты развития структурных нарушений при алкогольном и диабетическом поражении сердца, как следует из анализа литературных данных, имеют некоторые общие черты. Тем не менее, не определены молекулярные механизмы и последствия влияния на сердце хронической алкогольной интоксикации при сахарном диабете 2 типа.

Цель исследования

Установить патохимические механизмы формирования повреждения сердца при сочетании сахарного диабета 2 типа с хронической алкогольной интоксикацией.

Задачи исследования

1. Охарактеризовать патохимические признаки повреждения сердца при сочетании сахарного диабета 2 типа и хронической интоксикации алкоголем.

2. Проанализировать уровень белков острофазового ответа, как возможных показателей активности течения кардиальной патологии при сахарном диабете 2 типа в сочетании с хронической алкогольной интоксикацией.

3. Исследовать воздействие хронической алкогольной интоксикации на качество гликемического контроля при сахарном диабете 2 типа.

4. Изучить влияние хронической алкогольной интоксикации на антирадикальную и антиперекисную защиту в сердце при сахарном диабете 2 типа.

5. Определить интенсивность свободнорадикальных процессов как факторов повреждения миокарда при сахарном диабете 2 типа на фоне хронической алкогольной интоксикации.

6. Исследовать значение оксида азота (II) в развитии миокардиодеструкции при сочетании сахарного диабета 2 типа с хронической интоксикацией алкоголем.

7. Выяснить роль процессов апоптоза и некроза в формировании повреждения сердца при сочетании сахарного диабета 2 типа с хронической алкогольной интоксикацией.

8. Оценить наличие особенностей патохимических проявлений и последствий кардиотропного влияния хронической алкогольной интоксикации на различных этапах развития сахарного диабета.

Научная новизна

В результате проведенных исследований, впервые, на основе применения современных методов анализа получены сведения о характере патохимических нарушений в сердце и системных метаболических сдвигах при сочетании сахарного диабета 2 типа и хронической алкогольной интоксикации.

Установлено влияние хронической алкогольной интоксикации при сахарном диабете 2 типа на комплекс биохимических характеристик, отражающих механизмы развития кардиальных повреждений, включающий: биомаркеры повреждения миокарда и острофазовой реакции, показатели состояния углеводного, липидного и белкового обмена; параметры интенсивности свободноради-кальных процессов, антиокислительной защиты и активности апоптоза в сердце; уровень оксида азота (II). Получено клинико-экспериментальное биомаркерное подтверждение развития деструкции кардиомиоцитов при сочетании сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией. Выявлено, что при сахарном диабете под влиянием хронической алкогольной интоксикации ухудшается качество гликемического контроля. Обнаружено выраженное повышение содержания продуктов свободнорадикального окисления в крови и сердце при сочетании сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией. Определено, что в условиях сахарного диабета, под влиянием алкогольной интоксикации формируется существенный дефицит активности супероксиддис-мутазы и каталазы в сердце. Идентифицированы проапоптотически направленные изменения в сердце в виде значительного увеличения активности каспазы-3 при сочетании сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией. Установлено повышенное содержание конечных стабильных производных оксида азота (II) в плазме крови и сердце при сочетании хронической алкогольной интоксикации и сахарного диабета. Представлена интегральная характеристика

уровня пероксид-зависимой инициации свободнорадикальных процессов в плазме крови и сердце при сочетании сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации. Выяснено, что в зависимости от этапа развития сахарного диабета отмечаются особенности патохимических последствий влияния хронической алкогольной интоксикации и различная выраженность кардиаль-ных повреждений.

Теоретическая и практическая значимость

Результаты проведенного исследования представляют новые знания о патохимических механизмах развития повреждения сердца при сочетании сахарного диабета 2 типа с хронической алкогольной интоксикацией и создают теоретические предпосылки для создания соответствующих методов профилактики, диагностики и терапии.

Практический интерес представляют полученные данные о некротическом характере развивающегося поражения миокарда при сахарном диабете 2 типа и хронической алкогольной интоксикации. Это свидетельствуют о целесообразности активного выявления хронического злоупотребления алкоголем среди больных сахарным диабетом 2 типа, с последующим скрининговым биомаркерным обследованием, направленным на обеспечение дальнейшей адекватной лечебно-диагностической тактики. Сведения о неблагоприятном влиянии хронической интоксикации алкоголем при сахарном диабете 2 типа на качество гликемического контроля и интенсивность свободнорадикальных процессов, представленные в настоящем исследовании, могут быть учтены при разработке способов патогенетически обоснованной профилактики и коррекции миокар-диодеструкции у таких пациентов. Данные об отличиях в выраженности мио-кардиального повреждения при воздействии алкоголя на различных этапах развития сахарного диабета и о сопряжении этих различий с установленными па-тохимическими особенностями, могут иметь перспективное прогностическое и диагностическое значение. Фактически обоснованные выводы о взаимосвязи развивающегося повреждения сердца с гиперпродукцией оксида азота ставят вопрос о необходимости оценки возможности безопасного использования ряда лекарственных препаратов - доноров оксида азота (II) - у больных сахарным диабетом 2 типа, хронически злоупотребляющих алкоголем.

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедре клинической биохимии и лабораторной диагностики Ижевской государственной медицинской академии; на кафедрах Омской государственной медицинской академии: биохимии и лабораторной медицины; госпитальной терапии; психиатрии, наркологии и клинической психологии.

Апробация работы

Материалы исследования представлены на межрегиональной научной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья (Оренбург, 2003), на V межрегиональной научной конференции «Актуальные вопросы наркологии» (Омск, 2003), на III конференции молодых ученых России «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004), на межрегиональной научной конференции, посвященной 85-летию Самарского государственного медицинского университета (Самара, 2005), на научной сессии, посвященной 85-летию ОмГМА (Омск, 2006), на заседании Омского отделения общества биохимиков и молекулярных биологов РАН (Омск, 2007), на IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов РАН (Новосибирск, 2008), на заседании Омского отделения научного общества специалистов клинической лабораторной диагностики РФ (Омск, 2009), на межрегиональной научной конференции, посвященной памяти профессора Р. И. Лифшица (Челябинск, 2009), на совместном заседании кафедры биохимии и лабораторной медицины с курсом клинической лабораторной диагностики ПДО; кафедры психиатрии, наркологии и клинической психологии; кафедры общей и биоорганической химии ОмГМА (Протокол №1 от 12.01.2010 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Хроническая алкогольная интоксикация при сахарном диабете 2 типа способствует развитию некротического и апоптотического повреждения кар-диомиоцитов в течение алкоголизации и в послеалкоголизационном периоде.

торами повреждения кардиомиоцитов при сочетании сахарного диабета 2 типа с хронической алкогольной интоксикацией.

3. Высокое содержание оксида азота (II) и нитритивный стресс выступают ключевым звеном некротического повреждения миокарда при сочетании сахарного диабета 2 типа и хронического злоупотребления алкоголем.

4. Выраженность повреждения и патохимических нарушений в сердце, развивающихся при сахарном диабете 2 типа под влиянием хронической алкогольной интоксикации, достигает максимального уровня в условиях постинтоксикационного состояния, а в период алкоголизации - становится более значительной с увеличением продолжительности воздействия этанола.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 26 печатных работ, из них 13 - в рецензируемых периодических изданиях по перечню ВАК.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 205 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов. Работа содержит 34 таблицы, 14 рисунков и 1 схему. Список цитированной литературы включает 338 источников, в том числе 51 - на русском языке.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

В соответствии с целью и задачами, исследование было выполнено как простое, одномоментное контролируемое. В разделе работы, сопряженном с изучением клинического биоматериала, объектами исследования стали образцы плазмы венозной крови мужчин в возрасте от 40 до 60 лет из числа пациентов, находившихся на лечении в специализированных эндокринологических отделениях (Омской областной клинической больницы, городской больницы №2, больницы скорой медицинской помощи №2) и в 3-ем наркологическом отделении областного наркологического диспансера г. Омска в период с 2002 г. по 2003 г. Аналогичный биоматериал от клинически и лабораторно здоровых доноров данной возрастной группы, полученный в Омском областном центре

крови, использовали для анализа контрольного уровня исследуемых показателей. Взятие венозной крови производили в условиях процедурного кабинета, утром, натощак, после 12-часового голодания. При получении плазмы крови в качестве антикоагулянта использовали 5 М раствор натриевой соли этилендиа-минтетрауксусной кислоты (ЭДТА), который добавляли в количестве 0,1 мл на каждые 5 мл цельной крови.

Исследование, в котором приняло участие 92 человека, было одобрено локальным этическим комитетом Государственного образовательного учреждения «Омская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (протокол №25 от 16.09.2009 г). От обследуемых лиц получено информированное согласие на их участие в проведении исследования.

Диагноз сахарного диабета 2 типа был установлен эндокринологом на основании общепринятых принципов диагностики (МКБ-10: Е.11.0 - Е.11.9). Для формирования выборки больных сахарным диабетом были разработаны критерии включения (информированное согласие пациента на участие в исследовании; установленный диагноз сахарного диабета 2 типа; мужской пол; возраст от 40 до 60 лет) и исключения (отказ пациента от участия в исследовании; терапия сахарного диабета препаратами, которые не относятся к группе II генерации производных сульфонилмочевины; приём лекарственных препаратов, отсутствующих в стандартах лечения сахарного диабета, фармакологически и фарма-кокинетически способных оказывать свое действие в период обследования; наличие других тяжелых хронических заболеваний, эндокринопатий, наследственных форм дислипопротеинемии, декомпенсации сахарного диабета с явлениями кетоацидоза на момент обследования; употребление спиртных напитков в течение ближайших 14 дней перед взятием крови). Применение указанных критериев в сочетании с оценкой признаков злоупотребления алкоголем методом П. П. Огурцова и соавт. (1997) по результатам физикального обследования и анкетирования (совместно с врачами-эндокринологами) 115 пациентов с сахарным диабетом 2 типа позволило выделить для дальнейшего участия в исследовании 48 человек, которые составили следующие выборочные группы: СД - пациенты с сахарным диабетом 2 типа без признаков злоупотребления алко-

голем (25 человек); СД+АЛК - пациенты с сахарным диабетом 2 типа и признаками хронического злоупотребления алкоголем (23 человека).

Сведения о состоянии здоровья доноров, вошедших в группу контроля (ГК, 20 человек), получены из результатов диспансерного медицинского осмотра и лабораторного обследования. Группа сформирована после применения заданных отборочных критериев включения (информированное согласие на участие в исследовании; отсутствие клинических и лабораторных проявлений патологии; мужской пол; возраст от 40 до 60 лет) и исключения (отказ от участия в исследовании; наличие признаков хронического злоупотребления алкоголем; приём лекарственных препаратов, фармакологически и фармакокинети-чески способных оказывать свое действие в период обследования; употребление спиртных напитков в течение ближайших 14 дней перед взятием крови).

Диагноз хронического алкоголизма у лиц, составивших группу сравнения (АЛК, 24 человека), был установлен наркологами Омского областного наркологического диспансера на основании отраслевых стандартов. Для формирования выборки больных хроническим алкоголизмом, после предварительно проведенной простой рандомизации, были использованы следующие критерии включения: информированное согласие пациента на участие в исследовании; установленный диагноз хронического алкоголизма 2 стадии, с синдромом активной зависимости (Р 10. 302, Р 10. 242; МКБ-10), мужской пол; возраст от 40 до 60 лет. Критериями исключения из числа обследуемых явились: отказ пациента от участия в исследовании; приём лекарственных препаратов, отсутствующих в стандартах лечения хронического алкоголизма, фармакологически и фармакокинетически способных оказывать свое действие в период обследования; наличие других тяжелых хронических заболеваний, эндокринопатий, наследственных форм дислипопротеинемии; употребление спиртных напитков в течение ближайших 14 дней перед взятием крови.

Объекты экспериментальной части исследования были представлены образцами плазмы крови и гомогенатов сердца половозрелых белых крыс-самцов породы W¡star массой 220-240 г. Животных, выращенных в виварии ОмГМА, содержали в условиях постоянной температуры и влажности при 12-ти часовом

цикле день/ночь и использовали для исследования в соответсвии с требованиями приказов №1179 МЗ СССР от 10.10.1983 г., №267 МЗ РФ от 19.06.2003 г., а также - с положениями регламента Европейской Конвенции (Страсбург, 1986) по содержанию, кормлению и уходу за подопытными животными и выводу их из эксперимента. Лабораторных животных содержали на сухом твердом корме. Стандартный сухой твердый корм включал 60% углеводов, 22% белков, 10% жиров (преимущественно растительных), 8% пищевых волокон и других ингредиентов. Сухой рацион с высоким содержанием жиров включал 50% углеводов, 13% белков, 30% жиров (преимущественно зоостеро-лов), 7% пищевых волокон и энергетически балластных веществ. Питание и жидкость были доступны ad libitum.

Экспериментальный сахарный диабет, эквивалентный сахарному диабету 2 типа, моделировали по методике предложенной F. Zhang et al. (2003). Согласно рекомендациям авторов метода, на фоне вызванной алиментарным ожирением инсулинорезистентности производили однократное внутривенное введение стрептозотоцина (15 мг/кг массы тела) в боковую вену хвоста. Регулярный динамический контроль за развитием сахарного диабета проводили, определяя уровень глюкозы крови при помощи глюкометра OneTouch® Ultra™ (Johnson&Johnson, США), а также - регистрируя глюкозурию и кетонурию с использованием индикаторных полосок БИОСКАН™. Для формирования хронической алкогольной интоксикации крысам предоставляли свободный доступ к этанолу в качестве единственного источника жидкости С. Cascales (1983) в течение 2-х, а в пролонгированном варианте - 4-х месяцев. Суточное потребление составляло 5,35 ±0,27 мл-кг"1 абсолютного этанола в составе водного раствора концентрации 15 об.%.

Учитывая зависимость течения сахарного диабета от формы потребления алкоголя, экспериментально были смоделированы основные варианты сочетания сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации наиболее приближенные к ситуациям, встречающимся в клинической практике. Для оценки возможного влияния алкогольной интоксикации на этапе возникновения сахарного диабета были созданы экспериментальные условия, при которых алкоголизацию крыс осуществляли в 2-х месячном периоде развития инсулино-

резистентности и прекращали после введения стрептозотоцина. С целью выяснения характера воздействия алкоголя на изучаемые процессы при уже сформированном сахарном диабете моделировали 2-х месячную интоксикацию этанолом со вторых суток после введения стрептозотоцина. Эффекты сочетания воздействия алкоголя на этапе развития инсулинорезистентности с его влиянием при уже сформированном сахарном диабете оценивали, производя хроническую интоксикацию этанолом в течение всех 4-х месяцев экспериментального моделирования сахарного диабета. Таким образом, в соответствии с поставленными задачами нами были образованы группы лабораторных животных, сведения о которых представлены в таблице 1. Лабораторных крыс выводили из эксперимента с соблюдением правил эвтаназии. При получении плазмы крови в качестве антикоагулянта использовали натриевую соль ЭДТА. Гомогенаты сердца готовили на 0,15 М растворе KCl в соотношении 1:5 (масса ткани/объем среды выделения), центрифугировали (4000 g, 10 мин) и полученный супернатант использовали для определения исследуемых биохимических параметров. Все процедуры выделения биоматериала проводили при температуре +4С°. Пробы плазмы крови и гомогенатов сердца помещали в пластиковые контейнеры и хранили в жидком азоте до момента исследования.

Уровень кардиального тропонина I в экспериментальном разделе исследования определяли иммуноферментным методом (тест-система "Rat Cardiac Tn-I ELISA", Life Diagnostics, West Chester, PA) с детекцией результатов анализа на планшетном фотометре "Multiscan EX" (Финляндия). В клиническом биоматериале оценку уровня данного кардиоспецифичного тропонина проводили с помощью иммунохроматографической системы «BIOCARD TROPONIN I» (ANI BIOTECH OY) полуколичественным методом. Положительными считали значения, равные или превосходящие 1,5 нг/мл, что соответствует лабораторно-диагностическому критерию миокардиального некроза. Определение содержания общего холестерина, холестерина ЛПВП, холестерина ЛПНП и триглице-ридов сыворотки крови проводили с использованием тест-систем фирмы «HOSPITEX DIAGNOSTICS». Концентрацию общего белка в плазме крови определяли при помощи коммерческого набора "Протеин-НОВО" (ЗАО ВЕКТОР-БЕСТ, г. Новосибирск). Определение фруктозаминов в плазме крови проводили при помощи тест-системы «FRUCTOSAMINE (Modified NBT Method)» фирмы «HOSPITEX DIAGNOSTICS». Содержание тиобарбитурат-реактивных соеди-

нений (ТБК-РС) оценивали колориметрическим методом (Н. О. Стальная и соавт., 1977). Содержание ТБК-РС выражали в мкмоль-л"1 плазмы крови и в мкмоль-мг"1 белка ткани.

Спектрофотометрическим методом, предложенным Е. Е. Дубининой (1995), оценивали содержание окисленных белковых производных, которое выражали в нмоль-мг'1 белка гомогената сердца и в мкмоль-л'1 плазмы крови. Концентрацию конечных производных оксида азота изучали по методу, предложенному L.C. Green et al. (1982) в модификации П.П. Голикова (2004).

Таблица 1

Характеристика экспериментальных групп

Наименование группы Количество наблюдений Сокращённое обозначение

I. Группа контроля (интактные особи) 24 ГК

2. Алкогольная интоксикация в течение 2-х месяцев с последующей 2-х месячной отменой алкоголя 21 А2-ОА2

3. Алкогольная интоксикация в течение 2-х месяцев 24 А2

4. Алкогольная интоксикация в течение 4-х месяцев 27 A4

5. Сахарный диабет 29 сд

6. Алкогольная интоксикация в течение 2-х месяцев до возникновения сахарного диабета 21 А2-СД

7. Алкогольная интоксикация в течение 2-х месяцев после возникновения сахарного диабета 22 СД+А2

8. Алкогольная интоксикация в течение 2-х месяцев до возникновения сахарного диабета и продолжающаяся в последующие 2 месяца после начала заболевания 25 А2-СД+А2

Содержание свободных жирных кислот определяли энзиматическим методом в микропланшетном формате с помощью набора реактивов «Free Fatty Acid Quantification Kit» фирмы «BIOVISION» и выражали в мг-эквивалентах пальмитиновой кислоты на литр плазмы крови. Уровень С-реактивного белка изучали с использованием иммуноферментных систем высокочувствительного

анализа: «C-reactive protein» производства «ALPCO Immunoassays» (клиническая часть) и «Rat C-reactive protein» компании «Immunology Consultants Laboratory» (экспериментальная часть). Альфа-1-кислый гликопротеин в клиническом биоматериале определяли иммунотурбидиметрически при помощи набора фирмы «Sentinel» (Италия), а в экспериментальном - иммуноферментной тест-системой «Rat Alpha-1-Acid Glycoprotein EIA Kit» производства «Alpco Diagnostic». Концентрацию фибронектина изучали иммуноферментным методом с использованием коммерческих наборов: «Human Fibronectin EIA Kit» компании «American Diagnostica» (клинический биоматериал) и «Rat Fibronectin» фирмы «Immunology Consultants Laboratory» (экспериментальный биоматериал).

Измерение активности супероксиддисмутазы проводили по методике, предложенной Т. В. Сирота (1999), основанной на ингибировании реакции ау-тоокисления адреналина в присутствии супероксиддисмутазы. За единицу активности СОД принимали уровень 50%-го ингибирования реакции окисления адреналина и выражали в данных принятых условных единицах на 1 мг белка. Об активности каталазы судили по убыли перекиси водорода при Х=230 нм (R.F. Beers, 1952), которую оценивали в международных единицах.

Активность каспазы-3 в гомогенатах сердца определяли колориметрическим методом с помощью набора реактивов «Caspase-3/CPP32» фирмы «BIOVISION» и выражали в рекомендованных разработчиками условных единицах изменения оптической плотности. Активность МВ-фракции креатинки-назы определяли в условиях иммуноингибирования других изоферментов с помощью коммерческой тест-системы фирмы «Human» и представляли в международных единицах.

С целью определения уровня антиперекисной защиты проводили анализ пероксид-зависимой хемилюминесценции изучаемых объектов. Н202-индуцированную хемилюминесценцию плазмы крови и гомогенатов сердца регистрировали по предложенной методике (А. К. Журавлев и соавт., 1985) и оценивали по величине светосуммы за 1 мин (S) в расчёте на 1 мл плазмы крови или гомогената сердца (имп- 103-мин'1-мл"1).

Иммунохимический и колориметрический анализ с детекцией результатов на планшетном фотометре "Multiscan EX" (Финляндия), проводили в центральной научно-исследовательской лаборатории Омской государственной медицинской академии (зав. лабораторией - доктор мед. наук, профессор Т. И. Долгих).

Спектрофотометрические, колориметрические, иммунотурбидиметриче-ские и хемилюминесцентные исследования выполняли в лаборатории кафедры биохимии и лабораторной медицины ОмГМА с использованием хемилюмино-метра БХЛ-06 и спектрофотометра «UNICO 2802S UV/VIS».

При анализе результатов исследования использованы методы описательной и вариационной статистики с применением корреляционного анализа. Данные представлены как min- LQ-Me-HQ-max, где min - наименьшее значение, LQ - нижний (25-й) квантиль, Me - медиана, HQ - верхний (75-й) квантиль, max - наибольшее значение. Численность выборок обозначена п. Различия между значениями показателей в сравниваемых группах оценивали с помощью непараметрического {/-критерия Манна-Уитни и х-квадрат теста. Нулевой считали гипотезу о совпадении медианных значений двух независимых выборок. Критическим уровнем значимости при проверке статистических гипотез принимали pU=0,05. При корреляционном анализе использовали определение коэффициента ранговой корреляции Спирмена.

Статистическую обработку полученных данных осуществляли с применением пакета статистических программ SPSS 11.5 (SPSS Inc., США).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В проведенном исследовании получено биомаркерное свидетельство более высокой степени выраженности деструкции кардиомиоцитов у больных сахарным диабетом 2 типа, имеющих признаки хронического злоупотребления алкоголем. От умеренного повышения проницаемости кардиомиоцитарных биомембран, отмеченного при диабете у лиц без признаков хронической алкогольной интоксикации (табл. 2), почти у половины пациентов, злоупотребляющих алкоголем, процесс достиг уровня некротического поражения, что отражают сведения о распространенности позитивных результатов определения содержания кардиального тропонина I (сТп1) в плазме крови таких больных (табл. 3). сТпЬманифестное повреждение кардиомиоцитов, в соответствии с полученными результатами, происходит на фоне выраженного острофазового ответа, что характеризуется увеличением концентрации С-реактивного белка (С-РБ) в 2,03 раза (р<0,001) и а,-кислого гликопротеина (агКГП) - в 1,7 раза (р=0,001).

Таблица 2

Активность МВ-изофермента креатинфосфокиназы в плазме крови больных сахарным диабетом 2 типа, имеющих признаки хронического злоупотребления алкоголем (МЕ л"1)

Группы обследованных и пйп Ме щ тах ри

ГК 21 4,00 5,45' 10,00 16,10 19,00 -

АЛК 14 4,80 6,75 9,20 13,00 20,00 Ригк=0,813

сд 15 12,20 13,20 17,40 22,80 24,20 ригк=0,002

СД+АЛК 12 5,00 15,18 18,35 32,20 47,80 ригк=0,002 ридлк=0,002 рисд=0,221

Примечание: п - численность выборки, ри - статистический уровень значимости отличий по отношению к соответствующей группе, указанной нижним индексом (и-тест Манна-Уитни).

Обнаруженная напряженность острофазовых механизмов может являться дополнительным аргументом в пользу некротического генеза наблюдаемой биомаркерной реакции. Вместе с тем, известно, что повышение уровня С-РБ непосредственно способствует поражению сердца, потенцирует увеличение некротической зоны, активируя каскады системы комплемента. А отмеченный рост концентрации а(-КГП характерен для увеличения степени тяжести диабета и, в свою очередь, может быть проявлением декомпенсации заболевания при его сочетании со злоупотреблением алкоголем.

Кроме того, повышение уровня арКГП может быть обусловлено прямым влиянием хронической алкогольной интоксикации на процессы синтеза сиали-рованных белков. Важен и тот факт, что с активацией провоспалительных гуморальных механизмов связано углубление инсулинорезистентности, что также можно рассматривать в ряду причин обнаруженного более выраженного повреждения кардиомиоцитов.

Таблица 3

Доля значений концентрации кардиального тропонина I в крови, превосходящих диагностический порог миокардиального некроза, у больных сахарным диабетом 2 типа и признаками хронического злоупотребления алкоголем

Показатели Группы обследованных

ГК АЛК СД СД+АЛК

Численность группы 20 24 25 23

Доля значений, превышающих 1,5 нг/мл 0 0 0 0,48 *

Примечание. Общее количество наблюдений в группе принято за 1,0 * - статистический уровень значимости отличий при р<0,05 (/-квадрат тест) по отношению к группам: ГК, АЛК, СД.

Таким образом, при сахарном диабете 2 типа под влиянием хронической алкогольной интоксикации формируются агрессивные в отношении миокарда тенденции со стороны гуморальных механизмов неспецифической резистентности.

Хроническое злоупотребление алкоголем оказывает, согласно полученным нами данным, определенное влияние на ключевые характеристики компенсации углеводного обмена при сахарном диабете 2 типа. Выявленные сдвиги по отношению к лицам, отрицающим злоупотребление алкоголем, касаются уровня глюкозы крови натощак (рис. 1). Это заключается в более значительной гипергликемии, отражающей углубление нарушений препрандиального гликеми-ческого контроля. Данное обстоятельство повышает вероятность гиперактивации процессов гликирования, что способствует образованию большого количества поперечных сшивок между макромолекулами межклеточного матрикса, нарушает внутриматриксные и матрикс-клеточные взаимоотношения и повышает чувствительность миокарда к неблагоприятным воздействиям. Известно, что аутоокисление возросших количеств неиспользуемой глюкозы при сахарном диабете сопровождается гиперпродукцией активных форм кислорода и развитием окислительного стресса, имеющего прямое отношение к цитодест-

рукции. Кроме того, к числу возможных последствий более высокой гипергликемии можно отнести подавление вазодилятационного эффекта N0 продуктами гликирования, значительно повышающее риск развития ишемии миокарда.

ГК АПК ОД СД+АЛК ГК АЛК СД СД+АЛК

Рисунок 1. Содержание глюкозы и фруктозаминов в плазме крови больных сахарным диабетом 2 типа с признаками хронического злоупотребления алкоголем. Примечание. Статистически значимые отличия по сравнению с контрольной группой обозначены: "**" - р<0,01; "***" - р<0,001; по сравнению с группой СД: "#" - р<0,05 (и - тест Манна-Уитни).

В рамках метаболического синдрома имеется устойчивая связь между нарушением углеводного обмена и развитием атерогенных вариантов дислипо-протеинемий. Однако наши результаты не обнаружили неблагоприятного влияния хронической алкогольной интоксикации на липидный состав крови при сахарном диабете 2 типа. Известно, что дислипопротеинемия не является основным патогенетическим фактором развития диабетической кардиомиопатии. Вместе с тем, отмеченное нами повышение уровня С-РБ может оказывать про-атерогенное действие, независимое от нарушений липидного спектра крови. Этот факт, несмотря на условия нормолипидемии, предполагает существование возможности влияния коронарогенных механизмов на развитие зарегистрированного повреждения миокарда.

Нарушение качества гликемического контроля патохимически сопряжено с развитием окислительного стресса и свободнорадикальным повреждением

сердечной мышцы. В дополнительную интенсификацию свободнорадикальных процессов у больных сахарным диабетом 2 типа, злоупотребляющих алкоголем, могут вносить свой вклад и прооксидантные эффекты, обусловленные биотрансформацией этанола. Однако при хемилюминесцентном анализе нами показано, что возникающее при диабете нарушение баланса между уровнем катализаторов плазмы крови, разлагающих перекись водорода по радикальному и нерадикальному путям, в сторону преобладания радикал-генерирующих процессов не подвержено влиянию хронической алкогольной интоксикации (табл. 4).

Таблица 4

Светосумма НгОг-индуцированной хемилюминесценции плазмы крови у больных сахарным диабетом 2 типа с признаками хронического злоупотребления алкоголем (имп- 103-мин-мл"')_

Группы обследованных п тт ¿е Ме щ тах Ри

ГК 11 1,38 1,85 2,42 6,22 6,40 -

АЛК 12 2,22 2,87 3,73 5,05 11,09 Ригк=0,569

СД 11 3,46 6,81 7,39 11,44 11,95 ригк=0,012

СД+АЛК 4 18 3,92 5,51 7,44 9,65 13,75 риГк=0,010 Р^дж=0,050 риСп=0,809

Это характерно и в отношении обусловленного диабетом роста концентрации продуктов свободнорадикального окисления, на который практически не влияет фактор хронического злоупотребления алкоголем (ТБК-РС, рис. 2). Вероятно, данные сдвиги находятся, в большей степени, в причинно-следственных взаимоотношениях с наличием диабета, что не позволяет отнести их к числу ключевых причин формирования выявленного повреждения сердца у больных сахарным диабетом 2 типа, злоупотребляющих алкоголем.

Особенностью сочетания сахарного диабета 2 типа и хронического злоупотребления алкоголем стало более выраженное накопление в крови окисленных белковых производных (ОБП, рис. 2), чего не наблюдалось у пациентов без признаков хронической алкоголизации. Отсутствие соответствующих сдвигов в антиперекисной защите плазмы (по данным хемилюминесцентного анализа)

позволяет предполагать наличие абсолютного или относительного дефицита антирадикальной активности. С учетом этого, к вероятным причинам роста концентрации ОБП в плазме крови можно отнести как избыточную генерацию активных форм кислорода, так и снижение антиокислительных резервов.

СД СД*АЛК

СД СД+АЛК

Рисунок 2. Уровень тиобарбитурат-реактивных соединений (ТБК-РС) и окисленных белковых производных (ОБП) в плазме крови больных сахарным диабетом 2 типа с признаками хронического злоупотребления алкоголем Примечание: обозначения - см. рис. 1.

Истощение антиоксидантной системы и генерация свободных радикалов при хронической алкоголизации могут быть следствием индукции минорных путей детоксикации этанола и, в частности, цитохром-Р450-зависимой окислительной системы. Вероятно, по этой причине, при близкой к значениям в группе СД концентрации ТБК-РС и сходном уровне нарушения антиперекисной защиты (светосумма Н2О2-ХЛ), у данных пациентов более интенсивно протекает окислительное повреждение белков плазмы крови.

Полученные результаты позволяют считать актуальной гипотезу о важной роли свободнорадикальной агрессии в развитии повреждения миокарда у больных сахарным диабетом 2 типа под влиянием злоупотребления алкоголем. Потенцирование окислительного стресса может быть обусловлено непосредственными эффектами алкогольной интоксикации, а также может находиться во взаимосвязи с обнаруженным нами более значительным нарушением качества гликемического контроля. Последнее происходит, вероятно, при участии выяв-

ленного напряжения гуморальных механизмов неспецифической резистентности, способствующего углублению дефицита эффектов инсулина.

Известно, что неблагоприятные явления в сердце при хронической алкогольной интоксикации связаны не только с процессами катаболизма этанола, они регистрируются и в постинтоксикационном периоде, сопровождая течение синдрома отмены алкоголя (B.C. Моисеев, 2009). Возникновение таких состояний на фоне сахарного диабета может повлечь за собой резкое снижение энергоподдержки миокарда в условиях диабетогенного повышения его чувствительности к ишемии и быть другой возможной причиной выявленного нами повреждения кардиомиоцитов. Учитывая зависимость течения сахарного диабета от формы потребления алкоголя, в экспериментальном разделе нами проведено изучение влияния алкогольной интоксикации на этапе возникновения сахарного диабета и проанализированы патохимические особенности его течения в условиях постинтоксикационного состояния. Также, охарактеризовано воздействие алкоголя на изучаемые процессы при уже сформированном сахарном диабете и эффекты сочетания воздействия алкоголя на этапе развития инсулиноре-зистентности с его влиянием при уже сформированном сахарном диабете. Распространение исследования на уровень соответствующих биохимических процессов в сердце позволило провести оценку характера локальных патохимиче-ских нарушений и их возможной роли в развитии повреждения миокарда.

Хроническая интоксикация этанолом при сформированном вне алкоголизации экспериментальном сахарном диабете (группа СД+А2), согласно полученным нами данным, характеризуется резким проявлением нарушения целостности кардиомиоцитов. Уровень cTnl в плазме крови таких особей в 19,7 раза (риСд=0,008) превышает соответствующее значение при диабете вне алкоголизации (рис. 3). О наличии реактивного процесса свидетельствует выраженный острофазовый ответ (рис. 4): содержание С-РБ и арКГП в плазме крови становится повышенным по сравнению с течением диабета без воздействия алкоголя. При этом обнаруженное умеренное снижение уровня фибронектина может отражать его усиленное потребление при развитии тканевой деструкции. Острофазовый ответ при данном варианте сочетания сахарного диабета и алкогольной интоксикации может иметь патобиологическое значение в контексте усиления инсулинорезистентности под влиянием провоспалительных цитоки-нов, способствующей декомпенсации заболевания.

Действительно, биохимические проявления деструктивных процессов в сердце наблюдаются в условиях углубления патологии контроля гликемии, о чем свидетельствовала более высокая концентрация фруктозаминов в плазме крови (рис. 5).

Это может отражать потенцирование дефицита эффектов инсулина

вследствие воздействия алкоголя. Вместе с тем, по концентрации свободных жирных кислот (СЖК) в крови сделать такое заключение не представляется возможным, поскольку уровень данного показателя был снижен при сочетании сахарного диабета с хронической

алкогольной интоксикацией (табл. 5). Такой эффект может быть следствием фермент-зависимого формирования этиловых эфиров жирных кислот при неокислительном катаболизме этанола.

Данные производные из крови поступают в ткани и оказывают мембра-нопатологическое действие, способствуя развитию повреждения, что сопровождается снижением плазменного уровня СЖК. Кроме того, снижение содержания СЖК в плазме крови может быть самостоятельным фактором углубления нарушений энергетического обмена в кардиомиоцитах, учитывая невозможность адекватного использования углеводных субстратов при дефиците эффектов инсулина.

ГК А2-ОА2 А2 А4 СД А2-СД СД+А2 А2-СД+А2

Рисунок 3. Уровень кардиоспецифичного тропо-нина I в плазме крови при сочетании экспериментального сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией.

Примечание. Статистически значимые отличия по сравнению с контрольной группой обозначены: "*" — р<0,05; "**" - р<0,01; "***" - р<0,001; по сравнению с группой СД: "#" - р<0,05; "№" - р<0,01; "###" -р<0,001 (Ц-тест Манна-Уитни).

ГК А2-ОА2 А2 А4 СД А2-СД СД+А2 А2-СД+А2

Рисунок 4. Медианы уровня С-реактивного белка (С-РБ, мг-л"1), аг кислого гликопротеина (АКГП, мг-л"1), фибронектина (ФН, мг-л"') и общего белка (ОБ, г л"1) в плазме крови при сочетании экспериментального сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией. Примечание: обозначения - см. пис. 3.

В связи с этим, наблюдаемое уменьшение содержания СЖК, вероятно, не вполне пропорционально и адекватно отражает степень инсулинорезистентно-сти при хронической интоксикации этанолом. Но, с другой стороны, обнаруженное различие может быть косвенной характеристикой работы одного из звеньев механизма реализации наблюдаемого нами повреждения сердца. Нарушение сопряжения процессов окисления и фосфорилирования в митохондриях под влиянием высоких концентраций этиловых эфиров жирных кислот в условиях энергетического коллапса может способствовать гиперпродукции активных форм кислорода и развитию окислительного стресса в кардиомиоцитах.

Результаты нашего исследования показали, что при сформированном сахарном диабете хроническая алкогольная интоксикация оказывает своё неблагоприятное воздействие непосредственно в сердце, блокируя диабетогенную компенсаторную активацию антиперекисной защиты, и не влияет на антипере-кисную защиту плазмы крови (рис. 6). Кроме того, подобные сдвиги зафиксированы и в отношении содержания продуктов свободнорадикального окисления в сердце и крови особей данной экспериментальной группы: концентрация

ТБК-РС возрастала в сердце и сохранялась на прежнем уровне в плазме крови (рис. 7). Хроническое потребление алкоголя, как показано D. S. Jay а, (1993) и S. М. Bailey (2001), вызывает дефицит антиокислительных резервов тканей, что проявляется снижением активности глутатионпероксидазы и содержания восстановленного глутатиона, а также уменьшением активности каталазы в сердце. С учетом этого, обнаруженные нами сдвиги могут отражать связь гиперактивации свободнорадикальных процессов в сердце при хронической алкогольной интоксикации на фоне сформированного сахарного диабета с блокирующим действием алкоголя в отношении реактивной активации системы антирадикальных и антиперекисных факторов защиты.

1К А2 0А2 А2 А4 ОД Й2-СД СД»А2 ВДА2 Рисунок 5. Медианы уровня глюкозы (ГЛ, ммоль-л') и фруктозаминов (ФА, мкмоль-л') в плазме крови при сочетании экспериментального сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией

Примечание: обозначения - см. рис. 3.

Рисунок 6. Светосумма Нг02-индуцированной хемилюминесценции плазмы крови (ПК) и гомогенатов сердца (ГС) при сочетании экспериментального сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации

Примечание: обозначения - см. рис. 3.

Таблица 5

Содержание свободных жирных кислот в плазме крови при сочетании экспериментального сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации (мг-л"1) _________ __

Группы экспериментальных животных п пип щ Ме Щ шах Ри

ГК 12 25,38 64,79 124,73 186,23 266,55 -

А2-ОА2 11 23,69 51,91 127,93 176,57 248,78 ригк=0,712 риА2<0,001 риА4<0,001

А2 20 12,72 ¡5,69 24,68 29,34 77,58 ригк<0,001 риА4=0,329

А4 20 12,08 14,91 23,44 27,87 73,70 ригк<0,001

сд 15 60,51 118,77 217,05 241,89 531,12 Ригк=0,031

А2-СД 12 26,01 35,76 60,38 75,14 128,37 Ригк=0,021 риА2 ОА2=0,064 рисд<0,001 риСд+А2=0,090 ридг СД+А2=0,023

СД+А2 18 37,68 59,27 88,04 92,31 115,74 ригк=0,050 риА2<0,001 рисд<0,001 рЦи сд+А2=0,481

А2-СД+А2 20 49,00 69,03 89,85 103,10 103,10 ригк=0,060 риА4<0,001 рисд<0,001

Примечание: Обозначения и пояснения указаны в табл. 4.

Выполненное нами исследование активности супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы (КАТ) в гомогенатах сердца показало справедливость такого предположения. Обнаруженное повышение активности СОД и КАТ при сахарном диабете, в аспекте полученных нами данных об интенсификации свободно-радикальных процессов, можно рассматривать как отражение компенсаторно-приспособительной реакции антиокислительной направленности. Однако если при изолированном течении экспериментального сахарного диабета активность ферментов повышалась, то с присоединением к нему алкогольной интоксикации этого увеличения не происходило, или оно происходило, но в значительно меньшей степени (рис. 8).

Таким образом, нами показано, что хроническая алкогольная интоксикация при сформированном сахарном диабете ингибирует важные ферментативные звенья антиокислительной защиты сердца.

Другой деструктивный фактор свободнорадикального генеза, способный находиться среди причин обнаруженного повреждения миокарда, -окислительная модификация белков. При хронической алкогольной интоксикации на фоне сформированного в отсутствии алкоголизации сахарного диабета повышение уровня окисленных белковых производных происходит па-

ПК

а о

гс

□г

а V

3 §

Рисунок 7. Содержание тиобарбитурат-рективных соединений в плазме крови (ПК) и го-могенатах сердца (ГС) при сочетании экспериментального сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации.

Примечание: обозначения - см. рис. 3.

раплельно: в плазме крови и сердце (рис. 9) при практически равном уровне белка в исследуемом биологическом материале. Это указывает на более активную продукцию свободных радикалов и/или более выраженное снижение антирадикальной устойчивости белковых молекул. Окислительная структурная модификация тканевых и плазменных белков приводит к нарушению их функции, а накопление окисленных белков в миокарде является инициатором апоптоза, что определяет потенциальное патогенетическое значение выявленных сдвигов.

В условиях обнаруженного ингибирования адаптационных антиокислительных процессов и нарастания явлений оксидативного стресса при хроническом воздействии алкоголя на фоне развившегося сахарного диабета нами показан рост концентрации конечных стабильных производных оксида азота (Ж)х) в сердце и плазме крови (рис. 10).

СИ сод I I КАТ

Уровень МОх в сердце данных особей на 25,8% превысил значение при сахарном диабете вне алкоголизации (р=0,015). Это создает предпосылки к усиленному образованию токсичных продуктов взаимодействия оксида азота с активными формами кислорода. С другой стороны, это может отражать активацию синтеза N0 в ответ на дефицит биологического действия, обусловленный его потреблением в данных реакциях, что вызывает повышение активности ЫО-синтазы и гиперпродукцию N0.

Цитотоксический эффект N0, как правило, регистрируется при его повышенном уровне

и обусловлен свободнорадикальной природой данного соединения. Известно, что N0 ингибирует окислительное фосфорилирование в митохондриях, связываясь с цитохромоксидазой. При гиперпродукции супероксида и образовании высоких концентраций продукта его взаимодействия с N0 - пероксинитрита -угнетаются ферменты дыхательной цепи. В совокупности с нашими данными о содержании ЫОх, это позволяет предположить определенную роль нитритивно-го стресса в возникновении повреждения миокарда при хроническом воздействии алкоголя в течение сформированного сахарного диабета. Повреждающие эффекты пероксинитрита связаны с реализацией некротического и апоптотиче-ского путей клеточной смерти.

Данные об активности каспазы-3 свидетельствуют о том, что под влиянием хронической алкогольной интоксикации в условиях сформированного сахарного диабета повышается активность апоптотического процесса

Рисунок 8. Активность супероксиддисму-тазы (СОД) и каталазы (КАТ) в гомогенатах сердца при сочетании экспериментального сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации.

Примечание: обозначения - см. рис. 3.

в сердце (табл. 6). В то время как, при развитии и течении сахарного диабета вне алкоголизации такие изменения отсутствуют. Возможно, что рост активности фермента обусловлен суммацией и взаимным потенцированием про-апоптотических влияний, характерных для сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации в отдельности, поскольку отсутствует статистически значимое повышение активности каспа-зы-3 по сравнению изолированным течением сахарного диабета. Активация программы апоптоза и утрата определенной части миокарда уменьшает его функциональные возможности, что может предопределить и его высокую чувствительность к ишемическому повреждению.

Рисунок 9. Уровень окисленных белковых производных в плазме крови (ПК) и гомогенатах сердца (ГС) при сочетании экспериментального сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации. Примечание: обозначения - см. рис. 3.

Обобщение установленных нами фактов позволяет следующим образом представить патохимические звенья механизма развития миокардиодеструк-ции при хронической алкогольной интоксикации на фоне сформированного сахарного диабета (схема 1):

• углубление нарушений гликемического контроля;

• блокирование компенсаторных антирадикальных и антиперекисных реакций;

• гиперактивация свободнорадикальных процессов с окислительным повреждением белков и реализацией некротических эффектов производных N0;

• относительный дефицит кардиопротекторного биологического действия N0 вследствие его инактивации;

• активация апоптоза, способствующего гиперфункции сохранной части миокарда и развитию несоответствия между его потребностью и существующей возможностью энергетического обеспечения;

• миокардиопатогенное действие этиловых эфиров свободных жирных кислот, образующихся при алкогольной интоксикации;

• реакция со стороны острофазовых белков, потенцирующая инсулинорези-стентность и повреждение кардиомиоцитов.

Схема 1. Патохимические факторы миокардиодеструкции при сочетании сахарного диабета 2 типа с хронической алкогольной интоксикацией

В случае хронического воздействия этанола, начинающегося в период моделирования инсулинорезистентности и продолжающегося в течение развившегося экспериментального сахарного диабета (группа А2-СД+А2) биомаркерное проявление повреждения миокарда и свидетельство напряжения острофазовых

механизмов были аналогичны и статистически не отличались от отмеченных при действии этанола, ограниченном этапом уже сформированного диабета (группа СД+А2). На фоне выраженной острофазовой реакции со стороны белковых реактантов (рис. 4) уровень сТп1 в плазме крови (рис. 3) был многократно повышен (в 29 раз, рисд<0,001) по сравнению с соответствующим значением при диабете вне алкоголизации.

Отмеченная аналогич- ных продуктов N0 в плазме крови (ПК) и гомоге-

ность проявлений деструктив- "атах сеРдЧа (ГС) при сочетании экспериментального сахарного диабета и хронической алко-ных и реактивных изменений гоЛьной интоксикации.

позволяет полагать, ЧТО при Примечание: обозначения-см. рис. 3. таких различных вариантах сочетания сахарного диабета и алкогольной интоксикации (СД+А2 и А2-СД+А2) неблагоприятное кардиотропное воздействие имеет общий генез и определяется, в большей степени, эффектами происходящей биотрансформации алкоголя, чем отдаленными последствиями алкоголизации. Это также относится и к обнаруженному характеру нарушений гликеми-ческого контроля (рис. 5), снижению уровня свободных жирных кислот в плазме крови (табл. 5) и к хемилюминесцентным проявлениям ингибирования диа-бетогенной компенсаторной активации антиперекисной защиты в сердце при отсутствии влияния на антиперекисную защиту плазмы крови (рис. 6).

Однако обнаруженные сдвиги в отношении выраженности окислительного стресса и уровня снижения активности антиокислительных ферментов сердца у особей данной экспериментальной группы были выражены в большей степени. Так, концентрация ТБК-РС возрастала не только в сердце, но и в плаз-

ме крови (рис. 7), отмечалась некоторая тенденция роста содержания окисленных белковых производных в сердце (рис. 9), а значения активности суперок-сидцисмутазы и каталазы в сердце были существенно более низкими (соответственно, р=0,001 и р=0,004; рис. 8) при А2-СД+А2 по сравнению с воздействием алкоголя, ограниченным этапом уже сформированного диабета (СД+А2).

Таблица 6

Активность каспазы-3 в гомогенатах сердца при сочетании экспериментального сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации

(усл.сд.'мг"1 белка)

Группы экспериментальных животных п пйп Ьй Ме Щ тах Ри

ГК 12 0,47 0,36 1,26 2,76 3,91 -

А2-ОА2 19 1,59 1,59 2,04 3,70 5,79 Ригк=0,059 риА2=0,383 риА4=0,113

А2 10 1,65 1,59 2,87 5,08 6,99 ригк=0,032 риА4=0,624

А4 22 1,55 1,91 3,70 4,85 7,09 ригк=0,005

сд 11 0,30 0,63 2,04 4,73 6,07 Ригк=0,255

А2-СД 16 1,50 2,41 4,00 4,12 6,52 ригк=0,001 риА2ОА2=0,005 рисд=0,166 Рисд+А2=0,812 риА2 сл+А2=0,476

СД+А2 13 1,48 2,30 3,59 5,30 6,54 риге=о,ооз РиА2=0,474 Рисд=0,155 риАг СД+А2=0,607

А2-СД+А2 22 1,40 1,59 2,97 6,22 6,22 ригк=0,007 риА4=0,814 рисл=0,084

Примечание: Обозначения указаны в табл. 4.

Следовательно, длительная алкогольная интоксикация, захватывающая начальный этап развития сахарного диабета и продолжающаяся в течение сформированного заболевания характеризуется более выраженным ингибированием

ферментативных звеньев антиокислительной защиты сердца и более значительным усилением свободнорадикальных путей повреждения биомолекул, чем воздействие алкоголя только в периоде развившегося заболевания. На этом фоне, в условиях также более значительно возросшего содержания ЫОх увеличивается риск избыточной продукции пероксинитрита и других продуктов взаимодействия N0 с активными формами кислорода, обладающих миокардиопато-генными свойствами. Вместе с тем, активность каспазы-3 в сердце (табл. 6) превышает величину в контрольной группе, но остается на уровне значений, зафиксированных при развитии и течении диабета вне алкоголизации (группа СД).

Сравнительный анализ выявленных биохимических нарушений показывает, что повреждение миокарда при хронической интоксикации этанолом, начинающейся в «преддиабетическом» периоде и продолжающейся в течение сахарного диабета характеризуется патохимическим механизмом, аналогичным описанному для воздействия алкоголя, ограниченного периодом уже сформированного заболевания. Однако дополнительное воздействие алкоголя на этапе формирования инсулинорезистентности характеризуются появлением особенностей биохимических сдвигов, которые заключаются в более значительном влиянии в отношении: ингибирования компенсаторных антирадикальных и ан-типерекисных защитных реакций; интенсификации свободнорадикальных процессов с окислительным повреждением белков, гиперпродукции N0 и реализации цитотоксических эффектов производных оксида азота; возможности развития дефицита кардиопротекторного биологического действия N0 вследствие его инактивации супероксидом.

Селективное воздействие алкоголя на этапе развития инсулинорезистентности (группа А2-СД), как следует из результатов нашей работы, характеризуется крайне выраженным повреждающим влиянием на сердце, которое обнаруживается после возникновения сахарного диабета. При этом деструкция кар-диомиоцитов, оцениваемая по концентрации сТп1, достигает максимального зарегистрированного в нашем исследовании уровня. Содержание данного маркера статистически значимо превышает величины, отмеченные для других исследуемых вариантов сочетания сахарного диабета и хронической алкогольной

интоксикации: в 2,6 раза - по сравнению с группой А2 СД+А и 3,9 раза - по сравнению с группой СД+А (р<0,001), в 75,8 раза увеличиваясь по сравнению уровнем, характерным для диабета вне алкоголизации (рис. 3). Это сопровождалось острофазовой реакцией со стороны белкового состава крови, не отличающейся существенно от других вариантов сочетания сахарного диабета и воздействия алкоголя (рис. 4).

Просматривается определенный парадокс в представленных результатах: при воздействии алкоголя только на этапе формирования инсулинорезистент-ностн манифестация миокардиального некроза была многократно выше, чем при интоксикации этанолом на всем протяжении экспериментального моделирования сахарного диабета. Таким образом, при меньшей продолжительности воздействия алкоголя отмечается более выраженный патогенный эффект. Следовательно, кардиотропное неблагоприятное влияние реализуется не только во время поступления и биотрансформации алкоголя, но и формирует высокую подверженность диабетогенному повреждению в отдаленном периоде после прекращения алкоголизации. В связи с этим и согласно нашим данным, крайне опасными в отношении развития повреждения миокарда при сочетании сахарного диабета и хронического воздействия алкоголя являются постинтоксикационные и абстинентные периоды. Причинами миокардиодеструкции, в данном случае, может быть развитие более тяжелой формы сахарного диабета вследствие алкоголизации на стадии «предболезни». Анализ результатов оценки качества гликемического контроля показывает правомочность такого предположения (рис. 5), поскольку у животных данной группы наблюдается наибольшая выраженность гипергликемии среди всех изучаемых вариантов сочетания сахарного диабета и хронической интоксикации алкоголем. Высокий уровень повреждения миокарда может быть обусловлен и повышением чувствительности клеток к неблагоприятным диабетогенным воздействиям вследствие развития постинтоксикационного состояния, сопровождающегося выраженными нарушениями метаболических процессов и биоэнергетики. Отмеченное нами снижение плазменного уровня СЖК в условиях диабета, когда они являются практически безальтернативным источником энергии, может способствовать про-грессированию нарушений метаболических процессов в миокарде (табл. 5).

Воздействие алкоголя, перенесенное на этапе развития инсулинорези-стентности, не влияет на выраженность обусловленной сахарным диабетом активации свободнорадикальных процессов в сердце, но характеризуется возрастанием уровня тиобарбитурат-реактивных соединений в плазме крови особей данной экспериментальной группы (рис. 7, 9) по сравнению с группой СД. На уровне антиокислительной защиты плазмы крови и сердца, рассматриваемые послеалкоголизационные эффекты проявляются принципиально аналогично формирующимся в течение интоксикации при сахарном диабете (рис. 6). Однако, по сравнению с другими вариантами сочетания воздействия алкоголя и сахарного диабета, при анализируемой ситуации в сердце преобладают нарушения антиперекисной защиты. Это характеризуется наиболее низкой активностью каталазы при отсутствии сдвигов со стороны супероксиддисмутазы по отношению к группе с экспериментальным сахарным диабетом вне воздействия алкоголя (рис. 8). Обнаруженное нарушение элиминации Н202 при неизменной активности СОД может способствовать генерации гидроксильного радикала, который способен вызывать разрывы связей в ДНК, что является одним из инициаторов реализации механизмов клеточной смерти.

В данной группе, в условиях неэффективности антиперекисной защиты, нами выявлен наивысший рост концентрации >Юх в сердце и плазме крови (рис. 10). Высокая концентрация оксида азота при наличии окислительного стресса способствует резкому увеличению продукции пероксинитрита. Цито-токсическое действие избыточного уровня N0 крови на р-клетки поджелудочной железы может выступать причиной обнаруженного нами ухудшения качества гликемического контроля при сочетании сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации, а декомпенсация диабета нередко сопряжена с миокардиодеструкцией. Следовательно, один из потенциальных путей наблюдаемого снижения эффектов действия инсулина и повреждения сердца под влиянием интоксикации алкоголем может иметь МО-зависимое происхождение.

Известно, что резко повышенные концентрации пероксинитрита обладают некротическим действием (Ь. Virag е! а1., 2003). Показано, что в сердце перок-синитрит инактивирует аконитазу, что угнетает цитратный цикл и способствует углублению дефицита интрацеллюлярного пула НАД+ и АТФ, наблюдающего-

ся вследствие диабета. Повреждение ДНК пероксинитритом способствует активации в миокарде поли(АДФ)-рибозилирования, что сопровождается дополнительными затратами энергии и в условиях изначально низкого уровня АТФ, влечет за собой развитие некроза (Р. Pacher et al., 2002). С этих позиций, мощный рост содержания NOx, наблюдаемый в сердце и плазме крови, можно расценивать как патохимический фактор развития обнаруженного нами ярко выраженного некротического процесса в миокарде при сахарном диабете, возникшем в периоде после прекращения хронической алкогольной интоксикации.

Данные об активности каспазы-3 свидетельствуют о том, что перенесенная в периоде формирования инсулинорезистентности хроническая алкогольная интоксикация оказывает свое проапоптотическое влияние в сердце в виде некоторого патохимического следа, который в дальнейшем сопровождает течение сахарного диабета (табл. 6).

Таким образом, зарегистрированные нами наивысшие проявления некротического процесса в миокарде при сахарном диабете, возникшем в периоде после прекращения хронической алкогольной интоксикации, сочетаются с определенными особенностями нарушений биохимических процессов. Среди таких отличительных сдвигов: преимущественное ингибирование антиперекис-ных защитных механизмов, многократное увеличение содержания NОх в сердце и наиболее значительный рост концентрации продуктов свободнорадикаль-ного окисления в плазме крови.

Полученные результаты показывают, что различные варианты сочетания экспериментального сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией сопровождаются повреждением миокарда и характеризуются наличием общих закономерностей метаболических нарушений, а также их особенностями, отражающими степень повреждения кардиомиоцитов и отличительные черты его механизма.

выводы

1. Хроническая алкогольная интоксикация на фоне сахарного диабета способствует деструкции кардиомиоцитов, что получило клинико-экспериментальное биомаркерное подтверждение в форме повышения уровня кардиоспецифичного тропонина I.

2. При сочетании сахарного диабета и хронической интоксикации алкоголем развивается острофазовая реакция со стороны белков плазмы крови, способствующая инсулинорезистентности и повреждению кардиомиоцитов.

3. Под влиянием хронической алкогольной интоксикации при сахарном диабете углубляются нарушения качества гликемического контроля.

4. В условиях сахарного диабета, под влиянием алкогольной интоксикации формируется существенный дефицит антирадикальной и антиперекисной защиты, во многом обусловленный снижением активности ферментативного звена (супероксиддисмутазы и каталазы) в сердце.

5. При сочетании сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией в сердце и крови интенсифицируются свободнорадикальные процессы.

6. Степень ингибирования ферментативных звеньев антиокислительной защиты сердца и активность свободнорадикальных механизмов повреждения биомолекул увеличиваются с возрастанием продолжительности хронической алкогольной интоксикации при сахарном диабете.

7. Выраженность биомаркерного проявления некротического процесса в миокарде при сочетании сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации сопряжена с ростом концентрации стабильных конечных производных оксида азота (II) в сердце (г=0,765; р<0,01) и плазме крови (г=0,598; р<0,01).

8. Хроническая алкогольная интоксикация при сахарном диабете способствует проапоптотически направленным изменениям в сердце, проявляющимся в виде значительного увеличения активности каспазы-3.

9. В зависимости от этапа развития сахарного диабета, отмечаются особенности патохимических проявлений влияния хронической алкогольной интоксикации на формирование повреждения сердца, заключающиеся в различной степени выраженности обнаруженных биохимических нарушений и биомаркерной манифестации миокардиодеструкции.

10. Наиболее значительные биохимические признаки миокардиодеструкции характерны для сахарного диабета, возникшего в периоде после прекращения хронического воздействия этанолом, что указывает на высокую подверженность повреждению миокарда при алкогольном постинтоксикационном состоянии в условиях сахарного диабета.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи, опубликованные в изданиях, рекомендованных ВАК

1. Высокогорский, В.Е. Патохимические аспекты алкоголизации / В.Е. Высокогорский, A.B. Индутный // Омский научный вестник. - 2001. - № 16. -С. 25-27.

2. Колбина, Н.В. Клинико-лабораторные показатели, характеризующие ин-сулинорезистентность при ишемической болезни сердца, сахарном диабете 2 типа и абдоминальном ожирении / Н.В. Колбина, Д.А. Поташов, В.Е. Высокогорский, A.B. Индутный, А.В.Казакова // Омский научный вестник. - 2002. -№21.-С. 98-101.

3. Индутный, A.B. Интенсивность свободнорадикальных процессов в печени при алкоголизации в условиях действия различных стресс-факторов / A.B. Индутный, В.Е. Высокогорский // Омский научный вестник. - 2002. - № 21. -С. 129-131.

4. Индутный, A.B. Активность алкоголь-метаболизирующих энзимов печени и содержание половых стероидов в плазме крови при интоксикации этанолом в условиях эмоционально-болевого стресса A.B. Индутный, В.Е. Высокогорский, Г.А. Лопухов // Омский научный вестник. - 2002. - № 21. - С. 131-134.

5. Индутный, A.B. Метаболические механизмы алкогольной интоксикации / A.B. Индутный, В.Е. Высокогорский, Э.Ю. Рыжковская, Н.Л. Самусева // Сибирский вестник психиатрии и наркологии. - 2002. - № 3 (25). - С. 13-18.

6. Индутный, A.B. Уровень некоторых предикторов сердечно-сосудистой патологии в сыворотке крови больных сахарным диабетом, злоупотребляющих алкоголем / Л.Н. Индутная, Т.В. Притыкина, A.B. Аксенов, A.B. Индутный // Медицинский академический журнал. - 2003. - №3 (Приложение 4). - С. 26-27.

7. Индутный, А.В. Характеристика проявлений окислительного стресса у больных сахарным диабетом типа 2, злоупотребляющих алкоголем / А.В. Индутный, В.Е. Высокогорский, Л.Н. Индутная // Биомедицинская химия. - 2004. -№1(30). -С. 100-103.

8. Индутный, А.В. Особенности метаболических нарушений у больных сахарным диабетом при злоупотреблении алкоголем / А.В. Индутный, В.Е. Высокогорский, Д.Е. Быков, Т.В. Притыкина, А.В. Аксёнов // Сибирский медицинский журнал. -2005. - № 1 (20). - С. 41-45.

9. Индутный, А.В. Сигнальные функции свободных радикалов / А.В. Индутный, В.Е. Высокогорский, Д.Е. Быков // Омский научный вестник. - 2006. -№ 3. - С. 37-39.

10. Индутный, А.В. Биохимические факторы и критерии повреждения миокарда у больных сахарным диабетом, злоупотребляющих алкоголем / А.В. Индутный, Д.Е. Быков // Омский научный вестник. - 2006. - № 3. - С. 39-42.

11. Индутный, А.В. Патохимические проявления кардинальных осложнений у больных сахарным диабетом, злоупотребляющих алкоголем / А.В. Индутный, Л.Ф. Панченко, В.Е. Высокогорский, Д.Е. Быков // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2008. - № 3. - С. 42-45.

12. Индутный, А.В. Манифестация и патохимические предпосылки повреждения миокарда при сочетании хронической интоксикации алкоголем и сахарного диабета / А.В. Индутный, В.Е. Высокогорский, Д.Е. Быков // Наркология. -2009.-№2.-С. 57-61.

13. Indutny, A.V. The level of free radical oxidation products in heart and blood plasma in diabetes mellitus combined with chronic alcohol intoxication / A.V. Indutny, D.E. Bykov, V.E. Vysokogorsky II Biochemistry (Moscow) Supplemental Sériés B: Biomédical Chemistry. - 2009. - Vol. 3, № 4. - P. 372-376.

Статьи, опубликованные в других изданиях

14. Высокогорский, В.Е. Биохимические механизмы взаимодействия алкоголя и стресса / В.Е. Высокогорский, А.В. Индутный, О. Г. Фонякова, Э.Ю. Рыж-ковская // Актуальные вопросы прикладной биохимии и биотехнологии : мат. конф. биохимиков Урала и Зап. Сибири. - Уфа, 1998. - С. 31-32.

15. Высокогорский, В.Е. Стресс и алкоголь: молекулярно-биологические основы / В.Е. Высокогорский, A.B. Индутный // Омский научный вестник. -1998,-№2.-С. 76-78.

16. Высокогорский, В.Е. Алкоголизация - реальная угроза безопасности здоровью населения / В.Е. Высокогорский, Э.Ю. Рыжковская, A.B. Индутный // Стратегические направления регионального развития Российской Федерации: мат. Всероссийской научно-практ. конф. - Омск: ИА "Курьер", 1999. - С. 53-54.

17. Высокогорский, В.Е. Морфо-метаболические корреляции в печени при алкоголизации / В.Е. Высокогорский, 0.3. Мкртчан, Е.И. Антонова, A.B. Индутный // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии. - Челябинск, 1999.- С. 33-35.

18. Высокогорский, В.Е. Метаболические аспекты алкоголизации / В.Е. Высокогорский, 0.3. Мкртчан, A.B. Индутный, О.Г. Фонякова // Актуальные вопросы теоретической и клинической медицины. - Омск, 1999. - С. 10-13.

19. Высокогорский, В.Е. Биохимические механизмы интолерантности к алкоголю в условиях стресса / В.Е. Высокогорский, A.B. Индутный //Второй российский конгресс по патофизиологии : сб. научн. тр. - Москва, 2000. - С. 208.

20. Индутный, A.B. Метаболические факторы повышения токсичности алкоголя в условиях стресса / A.B. Индутный, В.Е. Высокогорский, Г.А. Лопухов // Актуальные вопросы общественного здоровья и здравоохранения в Омской области : сб. научн. тр. - Омск, 2000. - С. 116-117.

21. Высокогорский, В.Е. Нарушение активности ферментов метаболизма глутатиона в печени пренатально алкоголизированных крыс / В.Е. Высокогорский, Н.Л. Самусева, Н.М. Курч, A.B. Индутный //Труды Всероссийской конференции "Проблемы медицинской энзимологии". - Москва, 2002. - С. 56-57.

22. Индутный, A.B. Метаболические факторы интолерантности к алкоголю в условиях термального стресса / A.B. Индутный, В.Е. Высокогорский // Современные проблемы биологической психиатрии и наркологии : сб. научн. тр. -Томск, 2003. - С. 95-98.

23. Притыкина, Т.В. Уровень компонентов межклеточного матрикса в сыворотке крови больных сахарным диабетом при злоупотреблении алкоголем / Т.В. Притыкина, В.Е. Высокогорский, A.B. Аксёнов, A.B. Индутный // Материалы межрегиональной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья. - Оренбург, 2003. - С. 71-74.

24. Индутная, J1.H. Активность свободнорадикальных процессов у больных сахарным диабетом типа 2, злоупотребляющих алкоголем / Л.Н. Индутная, Д.Е. Быков, A.B. Индутный, Е.С. Ефременко, А.К. Качур // Актуальные вопросы наркологии: сборник трудов V межрегиональной научно-практической конференции. - Омск, 2004. - С. 38-39.

25. Высокогорский, В.Е. Алкоголь-индуцированное изменение андрогенного статуса у мужчин / В.Е. Высокогорский, A.B. Аксёнов, A.B. Казакова, А.В Индутный //Межрегиональная научно-практическая конференция «Новая идеология в единстве фундаментальной и клинической медицины» : сб. научн. тр. -Самара, 2005. - С. 77-80.

26. Индутный, A.B. Клинико-экспериментальная оценка биохимических особенностей повреждения миокарда при сочетании хронической интоксикации алкоголем и сахарного диабета / A.B. Индутный // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии. - Челябинск, 2009. - С. 119-120.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

СОД - супероксиддисмутаза

ТБК-РС - тиобарбитурат-реактивные соединения

ОБП - окисленные белковые производные

КК-МВ - МВ-изофермент креатинкиназы

сТп1 - кардиоспецифичный тропонин I

С-РБ - С-реактивный белок

гхгКГП - а!-кислый гликопротеин

ФН - фибронектин

ФА - фруктозамины

СЖК - свободные жирные кислоты

Н2О2-ХЛ - Н202-индуцированная хемилюминесценция

КАТ - каталаза

>10х - конечные стабильные производные оксида азота (II)

На правах рукописи

ИНДУТНЫИ Антон Васильевич

НАТОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И ФАКТОРЫ ПОВРЕЖДЕНИЯ СЕРДЦА ПРИ СОЧЕТАНИИ САХАРНОГО ДИАБЕТА С ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИЕЙ АЛКОГОЛЕМ

03.01.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Челябинск-2010

Подписано в печать 12.01.2010 Формат 60x84 7|б Бумага офсетная П. л. 2,0 Способ печати - оперативный Тираж 100 экз.

Издательско-полиграфический центр ОмГМА 644043, г. Омск, ул. Ленина, 12.; тел. 23-05-98

Содержание диссертации, доктора медицинских наук, Индутный, Антон Васильевич

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Патохимические аспекты формирования повреждения сердца при сахарном диабете 2 типа.>.

1.2. Кардиотропные метаболические эффекты хронической алкогольной интоксикации.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объект и дизайн клинического раздела исследования.

2.1.1. Формирование групп обследуемых.

2.1.2. Сведения о группе клинически здоровых лиц.

2.1.3. Сведения о группах больных сахарным диабетом 2 типа.

2.1.4. Сведения о группе больных хроническим алкоголизмом.

2.2. Экспериментальные объекты и модели.

2.2.1. Моделирование экспериментального сахарного диабета.

2.2.2. Моделирование хронической алкогольной интоксикации, сочетания сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией. Характеристика экспериментальных групп.

2.2.3. Протокол взятия экспериментального биоматериала.

2.3. Методы исследования.

2.3Л. Метод выявления признаков злоупотребления алкоголем.

2.3.2. Методы биохимического исследования.

2.3.2.1. Методы определения содержания метаболитов.

2.3.2.2. Методы определения активности ферментов.

2.3.3. Хемилюминесцентный анализ.

2.3.4. Методы статистического анализа.

КЛИНИЧЕСКИЙ РАЗДЕЛ.

ГЛАВА 3. БИОХИМИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ И ПОКАЗАТЕЛИ АКТИВНОСТИ ПОВРЕЖДЕНИЯ МИОКАРДА У БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА, ИМЕЮЩИХ ПРИЗНАКИ ХРОНИЧЕСКОГО ЗЛОУПОТРЕБЛЕНИЯ АЛКОГОЛЕМ.

ГЛАВА 4. КАЧЕСТВО ГЛИКЕМИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ И ЛИПИДНЫЙ СПЕКТР ПЛАЗМЫ КРОВИ ПРИ САХАРНОМ ДИАБЕТЕ 2 ТИПА У ПАЦИЕНТОВ С СИМПТОМАМИ ХРОНИЧЕСКОГО ЗЛОУПОТРЕБЛЕНИЯ АЛКОГОЛЕМ.

ГЛАВА 5. ИНТЕНСИВНОСТЬ ПРОЦЕССОВ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ У БОЛЬНЫХ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА, ИМЕЮЩИХ ПРИЗНАКИ ХРОНИЧЕСКОГО ЗЛОУПОТРЕБЛЕНИЯ АЛКОГОЛЕМ.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ РАЗДЕЛ.

ГЛАВА 6. УРОВЕНЬ МАРКЕРОВ МИОКАРДИОДЕСТРУКЦИИ И ОСТРОФАЗОВОГО ОТВЕТА ПРИ СОЧЕТАНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО САХАРНОГО ДИАБЕТА И ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИИ АЛКОГОЛЕМ.

ГЛАВА 7. ХАРАКТЕРИСТИКА ГЛИКЕМИИ И СОДЕРЖАНИЯ СВОБОДНЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ В ПЛАЗМЕ КРОВИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО САХАРНОГО ДИАБЕТА.

ГЛАВА 8. АКТИВНОСТЬ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ И АНТИОКИСЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ ПРИ СОЧЕТАНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО САХАРНОГО ДИАБЕТА С ХРОНИЧЕСКОЙ ИНТОКСИКАЦИЕЙ ЭТАНОЛОМ.

ГЛАВА 9. АНАЛИЗ СОДЕРЖАНИЯ КОНЕЧНЫХ СТАБИЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ОКСИДА АЗОТА (II) И АКТИВНОСТИ КАСПАЗЫ-З В СЕРДЦЕ ПРИ СОЧЕТАНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО САХАРНОГО ДИАБЕТА И ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИ.

ГЛАВА 10. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.

10.1. Биохимическая характеристика формирования повреждения миокарда у больных сахарным диабетом 2 типа с признаками хронического злоупотребления алкоголем.

10.2. Молекулярные аспекты реализации деструктивных процессов в сердце при сочетании экспериментального сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Патохимические особенности и факторы повреждения сердца при сочетании сахарного диабета с хронической интоксикацией алкоголем"

Актуальность проблемы. Медико-социальная значимость исследуемой проблемы во многом обусловлена значительным уровнем инвалидности и смертности вследствие развития поздних осложнений сахарного диабета, которым страдает в пределах 3% населения Российской Федерации [14, 37]. Подавляющее число случаев сахарного диабета, около 90-95%, приходится на сахарный диабет 2 типа, а поражение сердечно-сосудистой системы выступает в качестве ведущей причины снижения качества жизни и высокой летальности этих больных [14, 146]. Сердечно-сосудистая патология лидирует среди осложнений сахарного диабета 2 типа практически во всех странах мира [60, 77]. На уровне подверженности сахарному диабету и сердечно-сосудистым заболеваниям также существует достаточно устойчивое сопряжение. В частности, установлено, что при сахарном диабете 2 типа в 2-4 раза повышена вероятность развития кардиоваскулярной патологии [37]. С другой стороны, более чем в 30% случаев у больных с хронической сердечной недостаточностью имеется сахарный диабет 2 типа [7].

В формирование повреждения миокарда при сахарном диабете вовлечены коронарогенные и некоронарогенные механизмы [44]. Патология ли-попротеинового спектра крови в комплексе с провоспалительной иммунологической перестройкой при сахарном диабете способствуют атерогенезу в коронарных сосудах и последующему развитию ишемических поражений. Среди некоронарогенных кардиотропных воздействий метаболической природы ключевое значение имеет феномен глюкозотоксичности, обусловленный, в частности, аутоокислением глюкозы и гликированием белков. На фоне дефицита механизмов антиокислительной защиты и снижения энергоподдержки миокарда данные процессы способствуют развитию оксидатив-ного стресса, составляя наиболее значимый механизм повреждения миокарда при сахарном диабете 2 типа [62, 213, 282]. Инактивация оксида азота вследствие образования пероксинитрита при гиперпродукции активных форм кислорода приводит к дефициту вазодилятации [322], способствует ишемии миокарда и является важным фактором повреждения сердца при сахарном диабете [324].

Сахарный диабет 2 типа нередко сочетается с другими заболеваниями, также способствующими поражению сердечно-сосудистой системы [221], что является фактором прогредиентности кардиальных осложнений и увеличивает риск развития сосудистых катастроф. С высокой частотой в формировании широкого круга подобной коморбидной патологии принимают участие различные аддиктивные состояния, среди которых по распространенности лидирует злоупотребление алкоголем [51]. Алкогольные висцеро-патии, включая кардиомиопатию, далеко не всегда сопровождаются клиническими проявлениями алкоголизма со снижением интеллекта и социальной дезадаптацией, что создает серьезные препятствия для выявления этиопато-генеза и адекватной коррекции данной патологии [34]. Известно, что при длительном употреблении алкоголя у представителей различных возрастных групп значительно повышается риск смерти от сердечно-сосудистых заболеваний [252, 138]. Считается, что дилятационная кардиомиопатия имеет алкогольный генез в 1/3 случаев [34].

Хроническая алкогольная интоксикация сопутствует сахарному диабету, по крайней мере, у 8,3% больных [42, 167]. Данная когорта, главным образом, представлена лицами старших возрастных групп, у которых преобладает сахарный диабет 2 типа. [14, 42, 51]. Это сочетание повышает вероятность возникновения [112, 190, 228] и способствует прогрессировать сосудистых осложнений сахарного диабета [268, 314, 328], а при длительном употреблении высоких доз алкоголя - ассоциировано с увеличением смертности вследствие сердечно-сосудистых нарушений [123].

Характерно, что при интоксикации алкоголем и сахарном диабете повреждающее действие на миокард в определенной части обусловлено свободнорадикальными механизмами. Наряду с прямыми токсическими эффектами [198, 199], процессы и продукты биотрансформации этанола способствуют интенсивной генерации свободнорадикальных частиц, угнетению мощности антиокислительной системы в сердце [257] и развитию окислительного стресса [238]. Цитоксическое действие окислительного стресса при хронической алкогольной интоксикации реализуется в кардиомиоцитах на уровне модификации биомолекул, мембранотропных эффектов и вмешательства в работу сигнальных механизмов, включая МО-зависимые каскады [161].

Таким образом, видоизменение и углубление нарушений обмена веществ, обусловленное хронической алкогольной интоксикацией может выступать в роли пускового фактора развития некротических и/или апоптоти-ческих событий в сердце. Однако патохимические механизмы, особенности и результаты влияния на сердце хронической алкогольной интоксикации при сахарном диабете не установлены.

Цель исследования

Задачи исследования

Научная новизна

В результате проведенных исследований, впервые, на основе применения современных методов анализа, получены сведения о характере патохимических нарушений в сердце и системных метаболических сдвигах при сочетании сахарного диабета 2 типа и хронической алкогольной интоксикации.

Получено клинико-экспериментальное биомаркерное подтверждение развития деструкции кардиомиоцитов при сочетании сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией.

Выявлено, что при сахарном диабете под влиянием хронической алкогольной интоксикации ухудшается качество гликемического контроля. Обнаружено выраженное повышение содержания продуктов свободноради-кального окисления в крови и сердце при сочетании сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией.

Определено, что в условиях сахарного диабета, под влиянием алкогольной интоксикации формируется существенный дефицит активности су-пероксиддисмутазы и каталазы в сердце.

Идентифицированы проапоптотически направленные изменения в сердце в виде значительного увеличения активности каспазы-3 при сочетании сахарного диабета с хронической алкогольной интоксикацией.

Установлено повышенное содержание конечных стабильных производных оксида азота (II) в плазме крови и сердце при сочетании хронической алкогольной интоксикации и сахарного диабета.

Представлена интегральная характеристика уровня пероксид-зависимой инициации свободнорадикальных процессов в плазме крови и сердце при сочетании сахарного диабета и хронической алкогольной интоксикации.

Выяснено, что в зависимости от этапа развития сахарного диабета отмечаются особенности патохимических последствий влияния хронической алкогольной интоксикации и различная выраженность кардиальных повреждений.

Теоретическая и практическая значимость

Практический интерес представляют полученные данные о некротическом характере развивающегося поражения миокарда при сахарном диабете 2 типа и хронической алкогольной интоксикации. Это свидетельствуют о целесообразности активного выявления хронического злоупотребления алкоголем среди больных сахарным диабетом 2 типа, с последующим скри-нинговым биомаркерным обследованием, направленным на обеспечение дальнейшей адекватной лечебно-диагностической тактики. Сведения о неблагоприятном влиянии хронической интоксикации алкоголем при сахарном диабете 2 типа на качество гликемического контроля и интенсивность свободнорадикальных процессов, полученные в настоящем исследовании, могут быть учтены при разработке способов патогенетически обоснованной профилактики и коррекции миокардиодеструкции у таких пациентов. Данные об отличиях в выраженности миокардиального повреждения при воздействии алкоголя на различных этапах развития сахарного диабета и о сопряжении этих различий с установленными патохимическими особенностями, могут иметь перспективное прогностическое и диагностическое значение. Фактически обоснованные выводы о взаимосвязи развивающегося повреждения сердца с гиперпродукцией оксида азота ставят вопрос о необходимости оценки возможности безопасного использования ряда лекарственных препаратов - доноров оксида азота (II) - у больных сахарным диабетом 2 типа, хронически злоупотребяющих алкоголем.

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедре клинической биохимии и лабораторной диагностики Ижевской государственной медицинской академии; на кафедрах ОмГМА: биохимии и лабораторной медицины; госпитальной терапии; психиатрии, наркологии и клинической психологии.

Апробация работы

Материалы исследования представлены на межрегиональной научной конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья (Оренбург,

2003), на V межрегиональной научной конференции «Актуальные вопросы наркологии» (Омск, 2003), на III конференции молодых ученых России «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва,

2004), на межрегиональной научной конференции, посвященной 85-летию Самарского государственного медицинского университета (Самара, 2005), на юбилейной научной сессии, посвященной 85-летию ОмГМА (Омск, 2006), на заседании Омского отделения общества биохимиков и молекулярных биологов РАН (Омск, 2007), на IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов СО РАН (Новосибирск, 2008), на заседании Омского отделения научного общества специалистов клинической лабораторной диагностики России (Омск, 2009), на межрегиональной научной конференции, посвященной памяти профессора Р. И. Лифшица (Челябинск, 2009), на совместном заседании кафедры биохимии и лабораторной медицины с курсом клинической лабораторной диагностики ПДО; кафедры психиатрии, наркологии и клинической психологии, кафедры общей и биоорганической химии ОмГМА (Протокол №1 от 12.01.2010 г.).

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Хроническая алкогольная интоксикация при сахарном диабете типа 2 способствует развитию некротического и апоптотического повреждения кардиомиоцитов в течение алкоголизации и в послеалкоголизационном периоде.

2. Углубление нарушений качества гликемического контроля, снижение обеспечения миокарда свободными жирными кислотами, окислительный стресс и активация каспазы-3 в сердце являются важными патохимиче-скими факторами повреждения кардиомиоцитов при сочетании сахарного диабета 2 типа с хронической алкогольной интоксикацией.

3. Нитрозативный стресс выступает ключевым звеном некротического повреждения миокарда при сочетании сахарного диабета 2 типа и хронического злоупотребления алкоголем.

4. Выраженность повреждения и патохимических нарушений в сердце, развивающихся при сахарном диабете под влиянием хронической алкогольной интоксикации, достигает максимального уровня в условиях постинтоксикационного состояния, а в период алкоголизации - становится более значительной с увеличением продолжительности воздействия этанола.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 26 печатных работ, Из них 13 печатных работ - в периодических изданиях, рекомендованных ВАК для публикации результатов диссертаций на соискание учёной степени доктора наук.

Объем и структура диссертации

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Индутный, Антон Васильевич

выводы

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ сТп1 - кардиоспецифичный тропонин I

1ЧОх - конечные стабильные производные оксида азота (II) агКГП - а]-кислый гликопротеин

КАТ - катал аза

КК-МВ - МВ-изофермент креатинкиназы

Н2О2-ХЛ - Н202-индуцированная хемилюминесценция

ОБП - окисленные белковые производные

СД2 - сахарный диабет 2 типа

СЖК - свободные жирные кислоты

СОД - супероксиддисмутаза

С-РБ - С-реактивный белок

ТБК-РС - тиобарбитурат-реактивные соединения

ФА - фруктозамины

ФН - фибронектин

Библиография Диссертация по биологии, доктора медицинских наук, Индутный, Антон Васильевич, Челябинск

1. Антоненков, В.Д. Патогенез алкогольной кардиомиопатии / В.Д. Ан-тоненков // Вопр. наркологии. 1992. - № 1. - С. 79-85.

2. Арутюнов, Г.Л. Сахарный диабет и атеросклероз: Какова оптимальная стратегия сдерживания атеросклеротического процесса? // Сердце. — 2004. Т. 3, № 1.-С. 36-38.

3. Балаболкин, М.И. Лечение сахарного диабета и его осложнений / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская. М., 2005. -274 с.

4. Балаболкин, М. И. Современные возможности профилактики сахарного диабета 2 типа / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская // Русский медицинский журнал. 2007. - Т. 15, № 11.

5. Балаболкин, М.И. Современные возможности профилактики сахарного диабета 2 типа / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская // Рус. мед. журнал. -2007. -№11. -С. 6-10.

6. Балаболкин, М.И. Диабетология / М.И. Балаболкин. М., 2000. -672 с.

7. Бейтуганов, A.A. Встречаемости СД 2 типа у больных ХСН / A.A. Бей-туганов, А.К. Рылова // Сердечная недостаточность. 2005. - № 6 (3). -С. 114-116.

8. Беляков, H.A. Метаболический синдром у женщин / H.A. Беляков, Г.Б. Сеидова, С.Ю. Чубриева, Н.В. Глухов СПб., 2005. - 439 с.

9. Богова О.Т. Инфаркт миокарда. Воспаление и прогноз / О.Т. Богова, И.И. Чукаева // Российский кардиологический журнал 2003. - №4. -С. 95-98.

10. Бокарев, И.Н. Сахарный диабет / И.Н. Бокарев, Б.К. Беликов, О.И. Шубина М., 2006. - 400 с.

11. Гуревич, М.А. Особенности патогенеза и лечения ишемической болезни сердца, сердечной недостаточности и артериальной гипертонии у больных сахарным диабетом / М.А. Гуревич // Клинич. медицина. -2005.-№ 1.-С. 49.

12. Давыдов, А.Л. Особенности гисто- и ультраструктурной организации миокарда и стенки сосудов у больных сахарным диабетом типа 2 / А.Л. Давыдов, Л.Ю. Баранова // Пробл. эндокринол. 2005. - Т. 51, № 3. -С. 38.

13. Дедов, И.И. Сахарный диабет и сердечно-сосудистые заболевания: состояние проблемы / И.И. Дедов, М.В. Шестакова // Сахарный диабет. -2002.- №4. -С. 2-6.

14. Дедов, И.И. Диабет как фактор риска сердечно-сосудистых заболеваний / И.И. Дедов // Сердечная недостаточность. 2003. - № 1. -С. 12-15.

15. Дедов, И.И. Сахарный диабет в Российской Федерации: проблемы и пути решения / И.И. Дедов // Сахарный диабет. 1998. - № 1. -С. 7-18.

16. Дедов, И.И Диабетическое сердце: Causa Magna // Сердце. 2004. - Т. 3, № 1. — С. 5-8.

17. Дедов, И.И. Диабетическое сердце: основные закономерности / М. : ЭНЦРАМН, 2004. - 153 с.

18. Дедов, И.И. Факторы риска ишемической болезни сердца у больных сахарным диабетом типа 2: роль гиперсимпатикотонии и возможности ее коррекции / И.И. Дедов, A.A. Александров // Качество жизни: Медицина. 2003. - С. 16-21.

19. Дедов, И.И. Сахарный диабет / И.И.Дедов, М.В. Шестакова М., 2003. - 364 с.

20. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод её определения / Е.Е. Дубинина, С.О. Бурмистров, Д.А. Ходов, И.Г. Поротов // Вопр. мед. химии. 1995. - № 41. -С. 24-26.

21. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков / Е.Е. Дубинина, И.В. Шугалей//Успехи соврем, биологии. 1993.- Т.113, № 1. -С. 71-81.

22. Журавлев, А.К. Метод регистрации хемилюминесценции плазмы крови / А.К.Журавлев, М.П. Шерстнев // Лаб. дело. 1985. - № 10. -С. 586-587.

23. Заславская, P.M. Сосудистые осложнения у больных сахарным диабетом (альтернативные методы диагностики и лечения) / P.M. Заславская, Е.У. Тулемисов, Л.В. Смирнова, Б.А Айтмагамбетова. М., 2006.-220 с.

24. Комиссарова, И.А. Молекулярные механизмы действия эндогенного и экзогенного этанола / И.А. Комиссарова, А.Ю. Магалиф, Ю.С. Ротен-берг, Ю.В. Гудкова // Извест. Академии Наук СССР. Серия: Биологическая. 1983. - № 2. - С. 260-267.

25. Кулинский, В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // Успехи соврем, биологии. 1993.-Т. 113, № 1.-С. 107-122.

26. Кулинский, В.И. Система глутатиона. II. Другие ферменты, тиол-дисульфидный обмен, воспаление иммунитет, функции / В.И. Кулинский, JI.C. Колесниченко // Биомедицинская химия. 2009. - № 4. — С. 365-379.

27. Кулинский, В.И. Система глутатиона. I. Синтез, транспорт, глутатион-трансферазы, глутатионпероксидазы / В.И. Кулинский, JI.C. Колесниченко // Биомедицинская химия. 2009. - № 3. - С. 255-277.

28. Левина, Л.И. Сахарный диабет и ишемическая болезнь сердца / Л.И. Левина, А.Б. Шаповалова // Врачеб. ведомости. 2005. - № 3. -С. 33-37.

29. Маеда, X. Оксид азота и кислородные радикалы при инфекции, воспалении и раке / Х.Маеда, Т. Акаике // Биохимия. 1998. - Т. 63, № 7. -С. 1007-1119.

30. Меерсон, Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемиче-ских повреждений сердца / Ф.З. Меерсон. М. : Медицина, 1984. -272 с.

31. Моисеев, B.C. Алкогольная кардиомиопатия (возможность кофакторов ее развития, чувствительность к алкоголю и генетические аспекты) / B.C. Моисеев // Кардиология. 2003. - № 10. - С. 4-9.

32. Моисеев, B.C. Алкоголь и болезни сердца: руководство / B.C. Моисеев, A.A. Шелепин. М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 168 с.

33. Насонов, Е.Л. Иммунологические маркеры атеросклероза / Е.Л. Насонов // Тер. Архив. 2002. - № 5. - С. 80-85

34. О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных формработы с использованием экспериментальных животных : приказ МИНЗДРАВА СССР от 12.08.1977 №755.

35. Обрезан, А.Г. Структура сердечно-сосудистых заболеваний у больных сахарным диабетом 2 типа, диабетическая кардиомиопатия как особое состояние миокарда / А.Г. Обрезан, P.M. Бицадзе // Вестник Санкт-Петербургского университета. 2008. - № 2. - С. 47-53.

36. Огурцов, П.П. Экспресс-диагностика состояния хронической алкогольной интоксикации у пациентов соматического стационара / П.П. Огурцов, А.Б. Покровский, В.П. Нужный // Вопросы наркологии. -1997. №1. - С.52-58. 1

37. Панченко, Е.П. Ишемическая болезнь сердца и сахарный диабет коварный тандем / Е.П. Панченко // Сердце. - 2004. - Т. 3, № 1 (13). -С. 9-12.

38. Платонов, А. Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы / А.Е. Платонов. М. : РАМН, 2000. - 52 с.

39. Ройтберг, Г.Е. Метаболический синдром / Г.Е. Ройтберг М. : МЕД-пресс-информ, 2007. - 233 с.

40. Сидоров, П.И. Форма потребления алкоголя и течение сахарного диабета / П.И. Сидоров, А.Г. Соловьев, И.А. Новикова // Наркология. -2002.-№5.-С. 28-33.

41. Сирота, Т.В. Новый подход к исследованиям аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмута-зы / Т.В. Сирота // Вопр. мед. хим. 1999. - № 3. - С. 36-42.

42. Соколов, Е.И. Диабетическое сердце / Е.И. Соколов М. : Медицина, 2002.-416 с.

43. Стальная, Н.О. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / Н.О. Стальная, Т.Г. Гарнишвили //

44. Современные методы в биохимии; под ред. В. Н. Орехович. М., 1977. -С. 66-68.

45. Токмакова, А.Ю. Современные методы ранней диагностики диабетической макроангиопатии / А.Ю. Токмакова, Д.Н. Староверова // Пробл. эндокринол. 2005. - Т. 51, № 3. - С. 39-40.

46. Хавинсон, В.Х Свободнорадикальное окисление и старение / В.Х. Ха-винсон, В.А. Баринов, В.А. Арутюнян, В.В. Малинин. СПб. : Наука, 2003.-327 с.

47. Чазова, Т.Е. Сахарный диабет и сердечно-сосудистые заболевания: факторы риска, клинические особенности, диагностика / Т.Е. Чазова, Ю.Б. Катхурия // Мед. помощь. 2001. - № 5. - С. 28-32.

48. Шевченко, О.П. Метаболический синдром / О.П. Шевченко, Е.А. Пра-скурничий, А.О.Шевченко М., 2004. - С. 142.

49. Шерстнев, М.П. Оценка антиокислительной и антирадикальной активности веществ и биологических объектов / М.П. Шерстнев, Ю.А. Владимиров, Т.К. Азимбаев // Биофизика. 1992. - Т. 37. - С. 1041-1047.

50. Шорин, В.В. Алкоголизм при коморбидной соматической патологии (клинико-динамические, социально-психологические и реабилитационные аспекты) / В.В! Шорин, В.Я. Семке, O.K. Галактионов. Владивосток : Агентство "Время, ЛТД", 1999. - 264 с.

51. Adachi, J. Cholesterol hydroperoxides in erythrocyte membranes of alcoholic patients / J. Adachi, M. Asano, T. Naito, Y. Ueno, H. Imamichi, Y. Tatsuno // Alcohol. Clin. Exp. Res. 1999. - Vol. 23. - P. 96-100.

52. Adachi, J. Identification of 7-hydroperoxycholesterol in human liver by liquid chromatography-mass spectrometry / J. Adachi, M. Asano, Y. Ueno, T. Naito // Alcohol. Clin. Exp. Res. 2000. - Vol. 24. - P. 21-25.

53. Adachi, J. Heart 7-hydroperoxycholesterol and oxysterols are elevated in chronically ethanol-fed rats / J. Adachi, R. Kudo, Y. Ueno, R. Hunter, R. Rajendram, E. Want, V. Preedy // J. Nutr. 2001. - Vol. 131, № 11. - P. 2916-2920.

54. Akbay, E. The relationship between levels of alphal-acid glycoprotein and metabolic parameters of diabetes mellitus Diabetes Nutr Metab / E. Akbay, I. Yetkin, R. Ersoy, S. Kulaksizoglu, F. Toriiner, M. Arslan. 2004 -№17(6).-P. 331-335.

55. Albano, E. Alcohol, oxidative stress and free radical damage / E. Albano // Proc. Nutr. Soc. 2006. - Vol. 65, № 3. - P. 278-290.

56. Altura, B.M. Microvascular and vascular smooth muscle actions of alcohol, acetaldehyde and acetate / B.M. Altura, B.T. Altura // Fed. Proc. 1982. -№41.-P. 2447-2451.

57. An, D. Role of changes in cardiac metabolism in development of diabetic cardiomyopathy / D. An, B. Rodrigues // Am. J. Physiol. Heart Circ Physiol. 2006. - Vol. 291. - P. 1489-1150.

58. Aronson, D. Hyperglycemia and the pathobiology of diabetic complications / D. Aronson // Adv Cardiol. 2008. - Vol. 45. - P. 1-16.

59. Asai H. Microsomal ethanol oxidizing system activity by human hepatic cytochrome P450s / H. Asai, S. Imaoka, T. Kuroki // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1996. - Vol. 277, № 2. - P. 1004-1009.

60. Austin, J. Further studies of the mixed acetals of nucleosides / J. Austin, M. Dosanjh, H. Fraenkel-Conrat // Biochimie. 1993. - Vol. 75, № 7. -P. 511-515.

61. Avogaro, A. Myocardial metabolism in insulin-deficient diabetic humans without coronary artery disease / A. Avogaro, R. Nosadini, A. Doria // Am. J. Physiol. 1990. - Vol. 258, - P. 606-618.

62. Avogaro, A. Glucose tolerance during moderate alcohol intake: Insights on insulin action from glucose/lactate dynamics / A. Avogaro, R. Watanabe, L. Gottardo // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2002. - Vol. 87. - P. 1233-1238.

63. Ay din, S. N-acetylcysteine reduced the effect of ethanol on antioxidant system in rat plasma and brain tissue / S. Aydin, R. Ozaras, H. Uzum, A. Belce, V. Tahan, T. Altug // Tohoku J. Exp. Med. 2002. - № 198. -P. 71-77.

64. Bailey, S.M. Ethanol stimulates the production of reactive oxygen species at mitochondrial complexes I and III / S.M. Bailey, E.C. Pietsch, C.C. Cunningham // Free Radic. Biol. Med. 1999. - № (7-8). - P. 891-900.

65. Balkau, B. Insulin resistance: an independent risk factor for cardiovascular disease? / B. Balkau, E. Eschwege // Diabetes Obesity. Metab. 1999. -Suppl. l.-P. 23-31.

66. Barrett, T.D. C-reactive-protein-associated increase in myocardial infarct size after ischemia/reperfusion / T.D. Barrett, J.K. Herman, R.M. Marks, B.R. Lucchesi // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2002. - № 303. - P. 1007-1013.

67. Beers, R.F.Jr. A spectrophotometric method for measuring the breakdown of hydrogen peroxide by catalase / R.F.Jr. Beers, I.W. Sizer // J. Biol. Chem. -1952. -Vol. 195, № l.-P. 133-140.

68. Belke, D.D. Glucose and fatty acid metabolism in the isolated working mouse heart / D.D. Belke, T.S. Larsen, G.D. Lopaschuk, D.L. Severson //

69. Am. J. Physiol. 1999. - Vol. 277, № 4. - P. 1210-1217.

70. Betteridge, D.J. Epidemiology of the Cardiac Complications of Type 2 Diabetes Mellitus / D.J. Betteridge // Medicographia. 2001. - Vol. 23. -P. 95-99.

71. Biegelsen, E. Endotehelial function and atherosclerosis / E. Biegelsen, J. Loscalzo // Coron. Artery Dis. 1999. - Vol. 10, № 4. - P. 241-256.

72. Blache, D. Pro-oxidant effects of 7-hydroperoxycholest-5-en-3-beta-ol on the copper-initiated oxidation of low density lipoprotein / D. Blache, C. Rodriguez, J. Davignon // FEBS Lett. 1995. - Vol. 357. - P. 135-139.

73. Bondy, S.C. Effect of ethanol treatment on indices of cumulative oxidative stress / S.C. Bondy, S.X. Guo // Eur. J. Pharmacol. 1994. - Vol. 270, № 4. -P. 349-355.

74. Bonnefont-Rousselot, D., Bastard J. P., Jaudon M. C., Delattre J. Consequences of the diabetic status on the oxidant/antioxidant balance // Diabetes & Metabolism. 2000. - Vol. 26, № 3. - P. 163-176.

75. Borutaite, V. Nitric oxide donors, nitrosothiols and mitochondrial respiration inhibitors induce caspase activation by different mechanisms / V. Borutaite, R. Morkuniene, G. Brown // FEBS Lett. 2000. - Vol. 467, № (2-3). -P. 155-159.

76. Boudina, S. Mitochondrial uncoupling: a key contributor to reduced cardiac efficiency in diabetes / S. Boudina, E. Abel // Physiology (Bethesda). -2006.-Vol. 21.-P. 250-258.

77. Boudina, S. Reduced mitochondrial oxidative capacity and increased mitochondrial uncoupling impair myocardial energetics in obesity / S. Boudina, S. Sena, B. O'Neill , P. Tathireddy, M.Young, E. Abel // Circulation. -2005. Vol. 112. - P. 2686-2695.

78. Bradford, B.U. Peroxisomes are involved in the swift increase in alcohol metabolism / B.U. Bradford, N. Enomoto, K. Ikejima, M.L. Rose, H.K. Bojes, D.T. Forman, R.G. Thurman // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1999. - Vol. 288.-P. 254-259.

79. Brown, L. The biological responses to resveratrol and other polyphenols from alcoholic beverages / L. Brown, P. Kroon, D. Das, S. Das, A. Tosaki, V. Chan, M. Singer, P. Feick // Alcohol Clin. Exp. Res. 2009. - Vol. 33. -P. 1513-1523.

80. Brownlee, M. Advanced protein glycosylation in diabetes and aging / M. Brownlee // Annu. Rev. Med. 1995. - Vol. 46. - P. 223-234.

81. Brownlee, M. Biochemistry and molecular cell biology of diabetic complications / M. Brownlee // Nature. 2001. - Vol. 414, № 6865. - P. 813-820.

82. Brownlee, M. The Pathobiology of Diabetic Complications / M. Brownlee // A Unifying Mechanism Diabetes. 2005. - Vol. 54, № 6. -P. 1615-1625.

83. Bucala, R. AGEs quench nitric oxide and mediate defective endothelium-dependent vasodilation in experimental diabetes / R. Bucala, K. Tracey, A. Cerami // J. Clin. Invest. 1991. - Vol. 87. - P. 432-438.

84. Bush, B. Screening for alcohol abuse using the CAGE questionnaire / B. Bush // Am. J. Med. 1987. - № 82(2). - P. 231-235.

85. Cai, L. Suppression of nitrative damage by metallothionein in diabetic heart contributes to the prevention of cardiomyopathy / L. Cai, B. Bush, S. Shaw, P. Cleary, T. Delbanco, M. Aronson // Free Radie. Biol. Med. -2006.-Vol. 41.-P. 851-861.

86. Camargo, C.A. Prospective study of moderate alcohol consumption and mortality in US male physicians / C.A. Camargo, C.H. Hennekens, J.M. Gaziano // Arch. Intern. Med. 1997. - Vol. 157. - P. 79-85.

87. Campbell, I.W. Need for intencive, early glycemic control in patient with type 2 diabetes / I.W. Campbell // Br. J. Cardiol. P. 2000. - № 7. -P. 625-631.

88. Cascales, C. The effect of chronic ethanol administration on lipogenesis in liver and adipose tissue in the rat / C.Cascales, M. Benito, M. Cascales, T. Caldes, A. Santos-Ruiz // Br. J. Nutr. 1983. - Vol. 3. - P. 549-553. '

89. Caulfield, J.B. Myocardial connective tissue alterations / J.B. Caulfield, P.E. Wolkowic // Toxicol. Pathol. 1990. - Vol. 18. - P. 488-496.

90. Chase, K. The role of nonenzymatic glycosylation, transition metals, and free radicals in the formation of collagen aggregates / K. Chase, R. Caru-belli, R. Nordquist // Arch. Biochem. Biophys. 1991. - Vol. 288. -P. 473-480.

91. Chatham, J.C. Relationship between cardiac function and substrate oxidation in hearts of diabetic rats / J.C. Chatham, J.R. Forder // Am. J. Physiol. -1997.-№273(1).-P. 52-58.

92. Chatham, J.C. A 13C-NMR study of glucose oxidation in the intact functioning rat heart following diabetes-induced cardiomyopathy / J.C. Chatham, J.R. Forder // JMol. Cell. Cardiol. 1993. - № 25(10). -P. 1203-1213.

93. Chen, V. The effects of acute diabetes on myocardial metabolism in rats // V. Chen, D. Ianuzzo, B. Fong, J. Spitzer // Metabolism. 1984. - № 33.1. P. 1078-1084.

94. Cheung, P.Y. Thiols protect the inhibition of myocard peroxynitrite / P. Cheung, H. Danial, J. Jong, R. Schulz // Arch. Biochem. Biophys. 1998. -Vol. 350.-P. 104-108. ~ ~

95. Chrostek, L. Relationship between serum sialic acid and sialylated glycoproteins in alcoholics / L. Chrostelc, B. Cylwik, A. Krawiec, W. Korcz, M. Szmitkowski // Alcohol Alcohol. 2007. - № 42(6). - P. 588-592.

96. Cleland, S J. Insulin action is associated with endothelial function in hypertension and type 2 diabetes / S. Cleland, J.Petrie, M. Small // Hypertension. 2000. - Vol. 35. - P. 507-511.

97. Clements, R.S. Anti-glycated albumin therapy ameliorates early retinal microvascular pathology in db/db mice / R.S. Clements, W.G. Robison, M.P.' Cohen // J. Diabetes Complications. 1998. - Vol. 12. - P. 28-33: - —

98. Conigrave, K.M. A prospective study of drinking patterns in relation to risk of type 2 diabetes among men / K.M.Conigrave, B.F. Hu, C.A. Camargo, M.J. Stampfer, W.C. Willett, E.B. Rimm // Diabetes. 2001. - Vol. 50. -P. 2390-2395.

99. Cooper, M.E. Importance of advanced glycation end products in diabetes-associated cardiovascular and renal disease / M.E. Cooper // Am. J. Hyper-tens. 2004. - Vol. 17.-P. 31-38.

100. Corrao, G. Alcohol and coronary heart disease: a meta analysis / G. Corrao, L. Rubbiati, V. Bagnardi, A. Zambon, K. Poikolainen // Addiction. 2000. -Vol. 95.-P. 1505-1523.

101. Corrao, G. A meta-analysis of alcohol consumption and the risk of 15 diseases / G. Corrao, V. Bagnardi, A. Zambon // Prevent. Med. 2004. - Vol. 38.-P. 613-619.

102. Coudray, C. Zinc deficiency, ethanol, and myocardial ischemia affect lipoperoxidation in rats / C. Coudray, F. Boucher, M. Richard, J. Arnaud, J. De Leiris, A. Favier // Biol. Trace. Elem. Res. 1991. - Vol. 30. - P. 103-118.

103. Dalle-Donne, I. Protein carbonylation in human diseases / I. Dalle-Donne,

104. D. Giustarini, R. Colombo, R. Rossi, A. Milzani // Trends Mol. Med. -2003.-№9.-P. 169-176.

105. De Beer, F. Measurement of serum C-reactive protein concentration in myocardial ischemia and infarction / F. de Beer, C. Hind, K. Fox, R. Allan,

106. A. Maseri, M. Pepys // Br. Heart J. - 1982 - № 47. - P. 239-243. ~ —

107. De Leiris, J. Ethanol and cardiac function / J. de Leiris, M. de Lorgeril, F. Boucher // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2006. - Vol. 291, № 3. -P. 1027-1028.

108. Definition and diagnosis of diabetes mellitus and intermediate hyperglycemia: report of a WHO/IDF consultation. Geneva : World Health Org, 2006.-46 p.

109. Deng, X. Ethanol Metabolism and Effects: Nitric Oxide and its Interaction / X. Deng, R. Deitrich // Curr. Clin. Pharmacol. 2007. - № 2(2). - P. 145153.

110. Diehl, A.M. Mitochondrial uncoupling: role of uncoupling protein anion carriers and relationship to thermogenesis and weight control: "the benefits of losing control / A.M. Diehl, J.B. Hoek // J. Bioenerg Biomembr. 1999. -Vol. 31.-P. 493-506.

111. Diem, P. Effects of alcohol consumption on mortality in patients with Type 2 diabetes mellitus / P. Diem, M. Deplazes, R. Fajfr, A. Bearth, B. Mtiller,

112. E. Christ, A. Teuscher // Diabetologia. 2003. - Vol. 46, № 11. -P. 1581-1585.

113. Doll, R. Mortality in relation to consumption of alcohol: 13 years' observations on male British doctors/ R .Doll, R. Peto, E. Hall, K. Wheatley, R. Gray // BMJ. 1994.- Vol. 309. - P. 911 -918.

114. Edenberg, H.J. The genetics of alcohol metabolism: role of alcohol dehydrogenase and aldehyde dehydrogenase variants / H.J. Edenberg // Alcohol Res. Health. 2007. - Vol. 30, № 1. - P. 5-13.

115. Edés, I. Myocardial lipid peroxidation in rats after chronic alcohol ingestion and the effects of different antioxidants /1. Edés, A. Toszegi, M. Csanady, B. Bozoky // Cardiovasc. Res. 1986. - Vol. 20. - P. 542-548.

116. El Khoury, J. Macrophages adhere to glucose-modified basement membrane via their scavenger receptors / J. el Khoury, C. Thomas, J. Loike, S. Hickmann, L. Cao, S. Silverstein // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269. -P. 10197-10200.

117. Ewing, D. Do OH scavendger secondary radicals protect by competing with oxygen for cellular sites? / D. Ewing, H. Walton // Radiat. Res. Vol. 128, №11.- P. 29-36.

118. Fagrell, B. The effects of light to moderate drinking on cardiovascular diseases / B. Fagrell, U. de Faire, S. Bondy. // J. Intern. Med. 1999. - Vol. 246.-P. 331-340.

119. Fang, Z.Y. Diabetic cardiomyopathy: Evidence, mechanisms, and therapeutic implications / Z.Y. Fang, J.B. Prins, T.H. Marwick // Endoc. Rev. -2004. Vol. 25. - P. 543-567.

120. Ford, E.S. Risks for all-cause mortality, cardiovascular disease, and diabetes associated with the metabolic syndrome: a summary of the evidence / E.S. Ford // Diabetes Care. 2005. - Vol. 28, № 7. - P. 1769-1778.

121. Fox, K. British Cardiac Society Working Group on the definition of myocardial infarction / K. Fox, J. Birkhead, R. Wilcox, C. Knight, J. Barth // Heart. 2004. - Vol. 90. - P. 603-609.

122. Frustaci, A. Myocardial cell death in human diabetes / A. Frustaci, J. Kajstura, C. Chimenti // Circ. Res. 2000. - № 87. - P. 1123-1132.

123. Galderisi, M. Ehocardiographic evidence for existence of a distinct diabetic cardiomyopathy (the Framingham Heart Study) / M. Galderisi, K. Anderson, R. Wilson, D. Levy // Am. J. Cardiol. -1991. Vol. 68. - P. 85-89.

124. Gavazzi, A. Alcohol abuse and dilated cardiomyopathy in men // A. Ga-vazzi, R. de Maria, M. Parolini, M. Porcu // Am. J. Cardiol. 2000. - № 85(9).-P. 1114-1118.

125. Gomes, A. The Effect of 30 Minutes of Passive Stretch of the Rat Soleus Muscle on the Myogenic Differentiation, Myostatin, and Atrogin-1 Gene Expressions / A. Gomes // Arch. Phys. Med. Rehab. 2006. - Vol. 87,- P. 241-245.

126. Gomes, M.D. Atrogin-1, a musclespecific F-box protein highly expressed during muscle atrophy / M.D.Gomes, S.H. Lecker // PNAS. 2001. -Vol. 98(25). - 14440-14445.

127. Green, L. Analysis of nitrate, nitrite and 15N.nitrate in biological fluids / L. Green, D. Wagner, J. Glogowski, P. Skipper, J. Wishnok, S. Tannenbaum // Anal. Biochem.-1982.-Vol. 126.-P. 138131-138286.

128. Greer, J.J. Myocardial infarction and heart failure in the db/db diabetic mouse / JJ. Greer, D.P. Ware, D.J. Lefer // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol.-2006.-Vol. 290.-P. 146-153.

129. Griselli, M. C-reactive protein and complement are important mediators of tissue damage in acute myocardial infarction / M. Griselli, J. Herbert, W. Hutchinson, K. Taylor, M. Sohail, T. Krausz, M. Pepys // J. Exper. Med. -1999.-Vol. 190.-P. 1733-1740.

130. Grundy, S.M. Diabetes and cardiovascular disease. A statement for healthcare professionals from the American Heart Association / S.M. Grundy, I.J. Benjamin, G.L. Burke // Circulation. 1999. - Vol. 100. - P. 1134-1146.

131. Grune, T. Degradation of oxidized proteins in mammalian cells / T. Grune,

132. T. Reinheckel, IC. Davies // The FASEB J. 1997. - Vol. 11. - P. 526-534.

133. Gvozdjakova, A. The effect of alcohol on the mitochondrial respiratory chain in the cardiac muscle / A. Gvozdjakova, J. Kucharska, E. Miklovi-cova, P. Bozek, J. Gvozdjak // Vnitr. Lek. 1991. - Vol. 37, № 6. -P. 541-547.

134. Ha, H.C. Poly(ADP-ribose) polymerase is a mediator of necrotic cell death by ATP depletion / H.C. Ha, S.H. Snyder / Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1999. Vol. 96. - P. 13978-13982.

135. Hail, J. Impaired pyruvate oxidation but not glucose uptake in diabetic pig heart during dobutamine stress / J. Hail, W. Stanley, D. Lopaschuk / Am. J. Physiol. 1996. - Vol. 271. - P. 2320-2329.

136. Haitoglou, C. Altered cellular interactions between endothelial cells and nonenzymatically glycosylated laminin/type IV collagen / C. Haitoglou, E. Tsilbary, M. Brownlee, A. Charonis // J. Biol. Chem. 1992. - Vol. 267. -P. 12404—12407.

137. Hajnoczky, G. Alcohol Alcohol and mitochondria in cardiac apoptosis: mechanisms and visualization / G. Hajnoczky, C. Buzas, P. Pacher, J. Hoelc // Clin. Exp. Res. -2005. Vol. 29, № 5. - P. 693-701.

138. Hamada, Y. Role of polyol pathway in nonenzymatic glycation / Y. Hama-da, N. Araki, S. Horiuchi, N. Hotta // Nephrol. Dial. Transplant. 1996. -Vol. ll(Suppl. 5).-P. 95-98.

139. Handler, J. Catalase-dependent ethanol metabolism in vivo in deermice lacking alcohol dehydrogenase / J. Handler, B. Bradford, E. Glassman // Biochem. Pharmacol. 1986. - Vol. 35, № 24. - P. 4487-4492.

140. Harcombe, A. Circulating antibodies to cardiac protein-acetaldehyde ad-ducts in alcoholic heart muscle disease / A.Harcombe, L. Ramsay, J. Kenna // Clin. Sci. 1995. - V. 88, № 3. - P. 263-268.

141. Hare, J.M. NO/redox disequilibrium in the failing heart and cardiovascular system / J.M. Hare, J.S. Stamler // The Journal of Clinical Investigation. -Vol. 115, № 3. 2005. - P. 509-517.

142. Hatake, K. Increased endothelium-dependent vascular relaxation in ethanol-fed rats / K. Hatake, I. Walcabayashi, T. Taniguchi, S. Hishida // Alcohol Clin. Exp. Res. 1994. Vol. 8. - P. 1018-1023.

143. Haunstetter, A. Apoptosis: basic mechanisms and implications for cardiovascular disease / A. Haunstetter, S. Izumo // Circ. Res. 1998. - № 82(11). VP. 1111-1129.

144. Haynes, V. Mitochondrial nitric-oxide synthase: role in pathophysiology / V. Haynes, S. Elfering, R. Squires // IUBMB Life. 2003. - Vol.55, № (10-11).-P. 599-603.

145. Higuchi, H. The mitochondrial permeability transition contributes to acute ethanol-induced apoptosis in rat hepatocytes / H. Higuchi, M. Adachi, S. Miura, G. Gores, H. Ishii // Hepatology. 2001. - Vol. 34. - P. 320-328.

146. Hoshida, S. Cholesterol feeding exacerbates myocardial injury in Zucker diabetic fatty rats / S. Hoshida, N. Yamashita, K. Otsu, T. Kuzuya, M. Hori // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2000. - Vol. 278. - P. 256-262.

147. Howard, A. Effect of alcohol consumption on diabetes mellitus / A.A. Howard, J.H. Arnsten, M.N. Gourevitch // Ann. Intern. Med. 2004. -Vol. 140.-P. 211-219.

148. Howarth, F .Cardiac microtubules are more resistant to chemical depolymerisation in streptozotocin-induced diabetes in the rat / F. Howarth, M. Qureshi, E. White, S. Calaghan // Pflugers Arch. 2002. - Vol. 444. - P. 432-437.

149. Hudson, B. Glycation and diabetes: the RAGE connection / B. Hudson, M. Hofmann, L. Bucciarelli, T. Wendt, B. Moser, Y. Lu, W. Qu, D. Stern, V. D'Agati, S. Yan, S. Yan, P. Grant, A. Schmidt // Curr. Sci. 2002. - Vol. 83.-P. 1515-1521.

150. Hunt, J.V. Autoxidative glycosylation and possible involvement of peroxides and free radicals in LDL modifications / J.V. Hunt, C.T. Smith, S.P. Wolff// Diabetes. 1990. - Vol. 39. - P. 1420-1424.

151. Husain, K. Dose response of alcohol-induced changes in BP, nitric oxide and antioxidants in rat plasma / K. Husain, J. Mejia, J. Lalla, S. Kazim / Pharmacol. Res. 2005. - Vol. 51.-P. 337-343.

152. Husain, K. Response of cardiac antioxidant system to alcohol and exercise training in the rat / K. Husain, S. Somani // Alcohol. 1997. - Vol. 14, № 3. -P. 301-307.

153. Ingelman-Sundberg, M. Ethanol-inducible cytochrome P4502E1: regulation, enzymology and molecular biology / M. Ingelman-Sundberg, M. Ro-nis, K. Lindros, E. Eliasson, A. Zhukov // Alcohol Alcohol. Suppl. 1994. - № 2. -P. 131-139.

154. Israel, Y. Liver hypermetabolic state after chronic ethanol consumption: hormonal interrelations and pathogenic implications / Y. Israel, L. Videla, J. Bernstein // Federation Proc. 1975. - Vol. 34. - P. 2052-2059.

155. Jaatinen, P. Effects of lifelong ethanol consumption on the ultrastructure and lipopigmentation of rat heart / P. Jaatinen, P. Saukko, M. Sarviharju, K. Kiianmaa, A. Hervonen // Alcohol Alcohol. 1994. - № 29(3). -P. 269-282

156. Jakus, V. Advanced glycation end-products and the progress of diabetic complications / V. Jakus, N. Rietbrock // Physiol. Rev. 2004. - Vol. 53. -P. 131-142.

157. Jandeleit-Dahm, K. The role of AGEs in cardiovascular disease / K. Jande-leit-Dahm, M. Cooper // Curr. Pharm. Des. 2008. - Vol. 14, № 10. -P. 979-986.

158. Jaya, D. Role of lipid peroxides, glutathione and antiperoxidative enzymes in alcohol and drug toxicity / D. Jaya, J. Augstine, V. Menon // Indian J. Exp. Biol. 1993. - Vol. 31, № 5. - P. 453-459.

159. Jiang, Z.Y. Hydrogen peroxide production during experimental protein gly-" cation / Z.Y. Jiang," A.C. Woolard, S.P. Wolff // FEBS Lett. 1990. - Vol.268. -P.69-71.

160. Kakarla, P. Exercise training with ageing protects against ethanol induced myocardial glutathione homeostasis / P. Kakarla, S. Kesireddy, L. Chris-tiaan // Free Radic. Res. 2008. -№ 42(5). - P. 428-434.

161. Kannan, M. Myocardial oxidative stress and toxicity induced by acute ethanol exposure in mice / M. Kannan, L. Wang, Y. Kang // Exp. Biol. Med. -2004. Vol. 229. - P. 553-559.

162. Kanters, S. Plasma levels of cellular fibronectin in diabetes / S. Kanters, J. Banga, A. Algra, R. Frijns, J. Beutler, R. Fijnheer // Diabetes Care. 2001.- № 24(2). P. 323-327.

163. Kass, D.A. Getting better without AGE: new insights into the diabetic heart / D.A. Kass // Circ. Res. 2003. - Vol. 92. - P. 704-706.

164. Keddad, K. Alterations in erythrocyte membrane fluidity and fatty acid composition in glycogen storage disease / K. Keddad, P. Therond, C. Motta, C. Baussan, A. Legrand // Biochim. Biophys. Acta. 1996. - Vol. 1315. -P. 61-65.

165. Kern, P. Adipose tissue tumor necrosis factor and interleukin-6 expression in human obesity and insulin resistance / P. Kern, S. Ranganathan, C. Li // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2001. - Vol. 280. - P. 745-751.

166. Kinnally, K. A tale of two mitochondrial channels, MAC and PTP, in apop-tosis / K. Kinnally, B. Antonsson // Apoptosis. 2007. - Vol. 12, № 5. -P. 857-868.

167. Klatsky, A.L. Risk of cardiovascular mortality in alcohol drinkers, ex-drinkers and nondrinker / A.L. Klatsky, M.A. Armstrong, G.D. Friedman // Am. J. Cardiol. 1990. - Vol. 66. - P. 1237-1242.

168. Knych, E. Tolerance to alcohol-induced contractions of vascular smooth muscle: role of endothelium / E. Knych, C. Guimaraes, S. Boivin / Life Sei.- 1984.-Vol. 35.-P. 611-617.

169. Knych, E.T. Endothelium-dependent tolerance to ethanol-induced contraction of rat aorta: effect of inhibition of EDRF action and nitric oxide synthesis / E.T Knych // Alcohol Clin. Exp. Res. 1992. - Vol. 16. - P. 58-63.

170. Korshunov, S. High protonic potential actuates a mechanism of production of reactive oxygen species in mitochondria / S. Korshunov, V. Skulachev, A. Starkov // FEBS Lett. 1999. - Vol. 416. - P. 15-18.

171. Kuhlmann, C. Dose-dependent activation of Ca2+-activated K+ channels byethanol contributes to improved endothelial cell functions / C. Kuhlmann, F. Li, D. Ludders // Alcohol Clin. Exp. Res. 2004. - Vol. 28. - P. 1005-1011.

172. Kupari, M. Left ventricular filling impairment in asymptomatic chronic alcoholics // M. Kupari, P. Koslcinen, A. Suokas, M. Ventila // Am. J. Cardiol. 1990. -№ 66(20). - P. 1473-1477.

173. Laposata, M. Fatty acid ethyl esters: Ethanol metabolites which mediate ethanol-induced organ damage and serve as markers of ethanol intake / M. Laposata // Progress in Lipid Research. 1998. - Vol. 37. - P. 307-316.

174. Laposata, M. Fatty acid ethyl esters: nonoxidative metabolites of ethanol / M. Laposata // Addict. Biol. 1998. - № 3. - P. 5-14.

175. Lashin, O. Hyperglycemia does not alter state 3 respiration in cardiac mitochondria from type-I diabetic rats / O.Lashin, A. Romani // Mol. Cell Bio-chem. 2004. - Vol. 267. - P. 31 -37.

176. Lazarevic, A. Early changes in left ventricular function in chronic asymptomatic alcoholics: relation to the duration of heavy drinking / A. Lazareviyatake, M. Bojic, A. Popovic // J. Am. Coll. Cardiol. 200Q. - № 35(6). -P. 1599-1606.

177. LeGo, P.M. Role of chronic alcoholism in industrial accidents / P.M. LeGo // Rev. Infirm. 1971. - № 21(9). - P. 889-891.

178. Li, P. Oxidative phenotype protects myofibers from pathological insults induced by chronic heart failure in mice / P. Li, R. Waters, S. Redfern, M. Zhang, L. Mao, B. Annex, Z. Yan // Am. J. Pathol. 2007. - Vol. 170, № 2. -P. 599-608.

179. Libby, P. Inflammation and atherosclerosis / P. Libby, P. Ridker, A. Maseri // Circulation. 2002. - Vol. 105.- 1135-1143.

180. Lieber, C.S. Mechanism of ethanol induced hepatic injury / C.S. Lieber // Pharmac. Ther. 1990. - Vol. 46. - P. 1-41.

181. Lieber, C.S. Metabolic consequences of ethanol / C.S. Lieber / Endocrinologist. 1994. - Vol. 4, № 2. - P. 127-139.

182. Lieber, C.S. Metabolism of alcohol and its implications for the pathogenesis of disease / C.S. Lieber //Alcohol and the Gastrointestinal Tract. 1996. -P. 19-29.

183. Longnus, S.L. Regulation of myocardial fatty acid oxidation by substrate supply / S.L. Longnus, R.B. Wambolt, R.L. Barr, G.D. Lopaschuk, M.F. Allard // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2001. - Vol. 281, № 4. -P. 1561-1567.

184. Lopaschuk, D. Advantages and limitations of experimental techniques used to measure cardiac energy metabolism / D. Lopaschuk // J. Nucl. Cardiol. -1997.-Vol. 4.-P. 316-328.

185. Loren, E. Oxidative stress and stress signaling: menace of diabetic cardiomyopathy / E. Loren, A. Wold, J. Ceylan-Isilc // Acta Pharmacologica Sinica. 2005. - № 8. - P. 908-917.

186. Lowry, O.H. Protein measurement with the folin phenol reagent / O.H. Lo-wry, N.J. Rosebrough, A.L. Farr, R.J. Randall // J. Biol. Chem. 1951. -Vol. 193, № 1. - P. 265-275.

187. Lucchesi, B.R. Therapeutic potential of complement inhibitors in myocardial ischemia / B.R. Lucchesi, E.J. Tanhehco // Expert Opin. Investig. Drugs. 2000. - Vol. 9. - P. 975-991.

188. MacDonald, J. Ethyl nitrite. The in vivo synthesis of a mutagenic substance from tobacco smoke and ethanol / J. MacDonald, A. Jonsson // Acta. Chem. Scand. B. 1981. - Vol. 35. - P. 485-487.

189. Martinez-Caballero, S. Assembly of the mitochondrial apoptosis-induced channel, MAC / S. Martinez-Caballero, L. Dejean, M. Kinnally, K. Oh, C. Mannella, K. Kinnally // J. Biol. Chem. 2009. - № 284(18).1. P. 12235-12245.

190. Matsuo, S. Effect of red wine and ethanol on production of nitric oxide in healthy subjects / S. Matsuo, Y. Nalcamura, M. Takahashi // Am. J. Cardiol. -2001.-Vol. 87.-P. 1029-1031.

191. McDonough, K.H. Antioxidant nutrients and alcohol / K.H. McDonough // Toxicology. 2003. - Vol. 189. - P. 89-97.

192. McDonough, K.H. The role of alcohol in the oxidant-antioxidant balance in heart / K.H. McDonough // Front Biosci. 1999. - № 4. - P. 601-606.

193. Mikami, K. Acute effects of ethanol on cultured myocardial cells: an ultrastructural study / K. Mikami, S. Sato, T. Watanabe // Alcohol. 1990. -Vol. 25.-P. 651-660.

194. Mira, L. Evidence for free radical generation due to NADH oxida-tion by aldehyde oxidase during ethanol metabolism / L. Mira, L. Maia, L. Barreira, C. Manso // Arch. Biochem. Biophys. 1995. - Vol. 318, № 1. - P. 53-58.

195. Mokhtar, N. Physical training reverses defect in myocardial energy production in heart of cronically diabetic rats / N. Mokhtar, J-P. Lavoie, S. Rous-seau-Migneron, A. Nadeau // Diabetes. 1993. - Vol. 42. - P. 686-687.

196. Morgan, P.E. Inactivation of cellular enzymes by carbonyls and protein-bound glycation/glycoxidation products / P.E. Morgan, R.T. Dean, M.J. Davies // Arch. Biochem. Biophys. 2002. - Vol. 403. - P. 259-269.

197. Mosher, D.F. Plasma Fibronectin Concentration: A Risk Factor for Arterial Thrombosis? / D.F. Mosher / Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2006. -Vol. 26.-P. 1193-1195.

198. Moss, S. The association of alcohol consumption with the incidence and progression of diabetic retinopathy / S. Moss, R. Klein, B. Klein // Ophthalmology. 1994. - Vol. 101.-P. 1962-1968.

199. Nanji, A.A. Nitric oxide production in experimental alcoholic liver disease in the rat: role in protection from injury / A.A. Nanji, S.S. Greenberg, S.R. Tahan // Gastroenterology. 1995. - Vol. 109. - P. 899-907.

200. Nayeem, M.A. Ethanol induced delayed cellular protection in mouse cardiac myocytes: role of inducible nitric oxide synthase / M.A. Nayeem // Pol. J. Pharmacol. 2003. - Vol. 55. - P. 595-602.

201. Nichols, G.A. Congestive heart failure in type 2 diabetes: prevalence, incidence, and risk factor / G.A. Nichols, T.A. Hillier, J.R. Erbey, J.B. Brown // Diabetes. Care. 2001. -№ 24. - P. 1614-1619.

202. Niedowicz, D.M. The role of oxidative stress in diabetic complications / D.M. Niedowicz, DX. Daleke // Cell. Biochem. Biophys. 2005. - Vol. 43, №2.-P. 289-330.

203. Nishio, Y. Regulation and role of the mitochondrial transcription factor in the diabetic rat heart / Y. Nishio, A. Kanazawa, Y. Nagai, H. Inagaki, A. Kashiwagi // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2004. - Vol. 1011. - P. 78-85.

204. Norby, F. IGF-I attenuates diabetes-induced cardiac contractile dysfunction in ventricular myocytes / F. Norby, L. Wold, J. Duan, K. Hintz, J. Ren // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2002. - № 283(4). - P. 658-666.

205. Nordmann, R. Ethanol-induced lipid peroxidation and oxidative stress in extrahepatic tissues / R. Nordmann, C. Ribière, H. Rouach / Alcohol Alcohol. 1990. - Vol. 25, № (2-3). - P. 231-237.

206. Oekonomaki, E. Binge drinking and nitric oxide metabolites in chronic liver disease / E. Oekonomaki, G. Notas, I. Mouzas // Alcohol Alcohol. 2004. -Vol. 39.-P. 106-109.

207. Ohgami, N. CD36 serves as a receptor for AGEs / N. Ohgami, R. Nagai, M. Ikemoto, H. Arai, A. Miyazaki, H. Hakamaata, S. Horiuchi, H. Nakayama // J. Diabetes Complications. 2002. - Vol. 16. - P. 56-59.

208. Okubo, Y. Alcohol consumption and blood pressure change: 5 year follow-up study of the association in normotensive workers / Y. Okubo, Y. Suwa-zono, E. Kobayashi // J. Hum. Hypertens. 2001. - Vol. 15. - P. 367-372.

209. Opie, L.H. Cardiac metabolism-emergence, decline and resurgence. Part 1 / L.H. Opie // Cardiovasc. Res. 1992. - Vol. 26. P. 721-733.

210. Otis, J.S. Effect of HIV-1-related protein expression on cardiac and skeletal " muscles~from transgenic rats / J.S. Otis, Y.I. Ashikhmin, L.A. Brown7D.M.

211. Guidot // AIDS Res. Ther. 2008. № 5. - P. 8.

212. Otis, J.S. Oxidant-induced atrogin-1 and transforming growth factor-betal precede alcohol-related myopathy in rats / J.S. Otis, L.A. Brown, D.M. Guidot // Muscle Nerve. 2007. - Vol. 36, № 6. - P. 842-848.

213. Pace, B. Alcohol Use and Heart Disease / B. Pace // JAMA: Journal of the American Medical Association. 2001. - Vol. 285, № 15. - P. 2040.

214. Pacher, P. Nitric oxide and peroxynitrite in health and disease / P. Pacher, J. Beckman, L. Liaudet // Physiol. Rev. 2007. - № 87(1). - P. 315-424.

215. Pacher, P. Mitochondrial Ca(2+) signaling and cardiac apoptosis / P. Pacher, G. Csordas, G. Hajnoczky // Biol. Signals Recept. 2001. - Vol. 10, № (3-4).-P. 200-223.

216. Page, R.A. The importance of alcohol dehydrogenase in regulation of ethanol metabolism in rat liver cells / R.A. Page, K.E. Kitson, M.J. Hardman // Biochem. J. 1991. - Vol. 278 (Pt. 3). - P. 659-665.

217. Pepys, M.B. C-reactive protein: a critical update / M.B. Pepys, G.M. Hir-schfield // J. Clin. Invest.-2003.-Vol. 11 l.-P. 1805-1812.

218. Piano, M.R. The cardiovascular effects of alcohol: the good and the bad. How low-risk drinking differs from high-risk drinking / M.R. Piano // AJN. -2005.-Vol. 105.-P. 87-91.

219. Ponnappa, B. Modeling alcohol's effects on organs in animal models / B. Ponnappa, E. Rubin / Alcohol Res. Health. 2000. - № 24(2). - P. 93-104.

220. Porasuphatana, S. The generation of free radicals by nitric oxide synthase / S. Porasuphatana, P. Tsai, G. Rosen // Comp. Biochem. Physiol. Toxicol. Pharmacol. 2003. - Vol. 134, № 3. - P. 281-289.

221. Preedy, V. Oxidants, antioxidants and alcohol: implications for skeletal and cardiac muscle / V. Preedy, V. Patel, M .Reilly, P. Richardson, G. Falkous, D. Mantle // Front. Biosci. 1999. - № 4. - P. 58-66.

222. Pryor, W.A. The chemistry of peroxynitrite: a product from the reaction of nitric oxide with superoxide / W.A. Pryor, G.L. Squadrito // Am. J. Physiol. 1995. - Vol. 268, № 5. - P. 699-722.

223. Puddey, I.B. Alcohol and endothelial function: a brief review / I.B. Puddey, R.R. Zillcens, K.D. Croft, L.J. Beilin / Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. -2001. Vol. 28. -P. 1020-1024.

224. Ramasamy, R. Aldose reductase inhibition protects diabetic and nondiabetic rat hearts from ischemic injury / R. Ramasamy, P. Oates, S. Schaefer / Diabetes. 1997. - № 46(2). - P. 292-300.

225. Rask-Madsen, C. Insulin therapy improves insulin-stimulated endothelial function in patients with type 2 diabetes and ischemic heart disease / C. Rask-Madsen, N. Ihlemann, T. Krarup / Diabetes. 2001. - Vol. 50. -P. 2611-2618.

226. Reinke, L.A. Reactive free radical generation in vivo in heart and liver of ethanol-fed rats: correlation with radical formation in vitro / L.A. Reinke, E.K. Lai, C.M. DuBose, P.B. McCay // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. -Vol. 84.-P. 9223-9227.

227. Ren, J. Altered cardiac excitation-contraction coupling in ventricular myocytes from spontaneously diabetic BB rats / J. Ren, A. Bode // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2000. - № 279(1). - P. 238-244.

228. Ribiere, C. Effects of chronic ethanol administration on free radical defence in rat myocardium / C. Ribiere, I. Hininger, H. Rouach, R. Nordmann // Biochem. Pharmacol. 1992. - № 44(8). - P. 1495-1500.

229. Rimm, E. Prospective study of cigarette smoking, alcohol use, and the risk of diabetes in men / E. Rimm, J. Chan, M. Stampfer, G. Colditz, W. Willett //BMJ. 1995.-Vol. 310.-P. 555-559.

230. Rimm, E. Moderate alcohol intake and lower risk of coronary heart disease: Meta-analysis of effects on lipids and haemostatic factors / E. Rimm, P. Williams, K. Fosher//BMJ. 1999. - Vol. 319. - P. 1523-1528.

231. Rivera, C. Role of endotoxin in the hypermetabolic state after acute ethanol exposure / C. Rivera, B. Bradford, V. Seabra, R. Thurman // Am. J. Physiol. 1998. - Vol. 275. - P. 1252-1258.

232. Romelsjo, A. Association between alcohol consumption and mortality, myocardial infarction, and stroke in 25 year follow up of 49618 young Swedish men / A. Romelsjo, A. Leifman // BMJ. 1999. - Vol. 85. -P. 821-822.

233. Saravanan, R. Impact of ursolic acid on chronic ethanol-induced oxidative stress in the rat heart / R. Saravanan, V. Pugalendi // Pharmacol. Rep. -2006. Vol. 58, № 1. - P. 41-77.

234. Sato, M. Ann Cardioprotection with alcohol: role of both alcohol and poly-phenolic antioxidants / M. Sato, N. Maulik, D. Das // NY Acad. Sci. 2002. -Vol.957.-P. 122-135. " "

235. Seo, D., Rivier C. Interaction between alcohol and nitric oxide on ACTH release in the rat / D. Seo, C. Rivier / Alcohol Clin. Exp. Res. 2003. -Vol.27. -P. 989-996.

236. Severson, D.L. Diabetic cardiomyopathy: Recent evidence from mouse models of type 1 and type 2 diabetes / D.L. Severson // Can. J. Physiol. Pharmacol.-2004.-Vol. 82.-P. 813-823.

237. Shaw, S. Ethanol-induced iron mobilization: Role of acetaldehyde-aldehyde oxidase generated superoxide / S. Shaw, E. Jayatilleke // Free Radical Biol, and Med.- 1990.-Vol. 9,№ l.-P. 11-17.

238. Shen, X. Protection of cardiac mitochondria by overexpression of MnSOD reduces diabetic cardiomyopathy // X. Shen, S. Zheng, N. Metreveli, P. Epstein // Diabetes. 2006. - Vol. 55. - P. 798-805.

239. Shen, X. Cardiac mitochondrial damage and biogenesis in a chronic model of type 1 diabetes / X. Shen, S. Zheng, V. Thongboonkerd, M. Xu, W. Pierce, J. Klein, P. Epstein // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2004. -Vol. 287.-P. 896-905.

240. Shimada, T. Correlation between metabolic and histopathological changes in the myocardium of the KK mouse. Effect of diltiazem on the diabeticheart / T. Shimada // Jpn. Heart J. 1993. - Vol. 34. - P. 617-626.

241. Siddiq, T. Ethanol-induced inhibition of ventricular protein synthesis in vivo and the possible role of acetaldehyde / T. Siddiq, P. Richardson, W. Mitchell, J. Teare, V. Preedy // Cell. Biochem. Funct. 1993. - Vol. 11. -P. 45-54.

242. Siddiq, T. Synthesis of ventricular mitochondrial proteins in vivo: effect of acute ethanol toxicity / T. Siddiq, J. Salisbury, P. Richardson, V. Preedy // Alcohol Clin. Exp. Res. 1993. - Vol. 17. - P. 894-899.

243. Sidell, R.J. Thiazolidinedione treatment normalizes insulin resistance and ischemic injury in the Zucker fatty rat heart / R.J. Sidell, M.A. Cole, N.J. Draper, M. Desrois, R.E. Buckingham, K. Clarke // Diabetes. 2002. - Vol. 51.-P. 1110-1117.

244. Silberbauer, K. Noninvasive assessment of left ventricular diastolic function by pulsed Doppler echocardiography in young alcoholics / K. Silberbauer, M. Juhasz, G. Ohrenberger, C. Hess // Cardiology. 1988. - № 75(6). -P. 431-439.

245. Smit, A.J. The clinical relevance of advanced glycation endproducts (AGE) and recent developments in pharmaceutics to reduce AGE accumulation / A.J. Smit, H.L. Lutgers // Curr. Med. Chem. 2004. - № 11. -P. 2767-2784.

246. Somani, S.M. Exercise training and tissue specific antioxidant enzymes / S.M. Somani // Pharmacology in Exercise and Sports. Ed. 1996. -P. 96-97.

247. Sorrel, M.F. The functional implications of acetaldehyde binding to cell constituents / M.F. Sorrel, D.J. Tuma // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1987. -Vol. 492. - P. 50-62.

248. Stampfer, M. Why heart disease mortality is low in France. Commentary: alcohol and other dietary factors may be important / M. Stampfer, E. Rimm // BMJ. 1999. - № 318. - P. 1476-1477.

249. Steinberg, D. Beyond cholesterol. Modifications of low-density lipoprotein that increase its atherogenicity / D. Steinberg, S. Parthasarathy, T. Carew, J. Khoo, J. Witztum // N. Engl. J. Med. 1989. - Vol. 320, № 14. -P. 915-924.

250. Stockklauser-Fârber, K. Influence of diabetes on cardiac nitric oxide synthase expression and activity / K. Stockklauser-Fàrber, T. Ballhausen, A. Laufer, P. Rosen // Biochim. Biophys. Acta. 2000. - № 1. - P. 10-20.

251. Sunni, S. Diabetic cardiomyopathy. A morphological study of intramyocar-dial arteries / S. Sunni, S. Bishop, S. Kent, J. Geer // Arch. Pathol. Lab. Med. 1986. - Vol. 110. - P. 375-381.

252. Tanaka, S. Glycation induces expansion of the molecular packing of collagen / S. Tanaka, G. Avigad, B. Brodsky, E. Eikenberry // J. Mol. Biol. -1988. Vol. 203. - P. 495-505.

253. Taylor, A.A. Pathophysiology of hypertension and endothelial dysfunction in patients with diabetes mellitus / A.A. Taylor // Endocrinol. Metab. Clin. N. Am. 2001. - Vol. 30. - P. 983-997.

254. Thompson, E.W. Quantitative analysis of myocardial structure in insulin-dependent diabetes mellitus: effects of immediate and delayed insulin replacement / E.W. Thompson // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1994. - Vol. 205.-P. 294-305.

255. Thompson, E.W. Structural manifestations of diabetic cardiomyopathy in the rat and its reversal by insulin treatment / E.W. Thompson // Am. J. Anat. 1988.-Vol. 182.-P. 270-282.

256. Thornalley, P.J. Advanced glycation and development of diabetic complications: Unifying the involvement of glucose, methylglyoxal and oxidative stress / P.J. Thornalley // Endocrinol. Metab. 1996. - Vol. 3. - P. 149-166.

257. Timmis, A.D. Diabetic heart disease: clinical considerations / A.D. Timmis // Heart. 2001. - Vol. 85. - 463-469.

258. Torp-Pedersen, C. Diabetes mellitus and cardiovascular risk: just another risk factor? / C. Torp-Pedersen, C. Rask-Madsen // Eur. Heart J. Suppl. -2003.-Vol. 5.-P. 26-32.

259. Tuma, D. Acetaldehyde and malondialdehyde react together to generate distinct protein adducts in the liver during long-term ethanol administration / D. Tuma, G. Thiele, D. Xu // Hepatology. 1996. - Vol. 23, № 4. - P. 872880.

260. Turlco, I. Quantitative protein profiling in heart mitochondria from diabetic rats / I. Turko, F. Murad // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278. -P. 35844-35849.

261. Vasdev, S. Beneficial Effect of Low Ethanol Intake on the Cardiovascular System: Possible Biochemical Mechanisms / S.Vasdev, V. Gill, K. Pawan // Singal Vase. Health Risk Manag. 2006. - Vol. 2, № 3. - P. 263-276.

262. Venkov, C.D. Ethanol increases endothelial nitric oxide production throughmodulation of nitric oxide synthase expression / C.D. Venkov, P.R. Myers, M.A. Tanner // Thromb. Haemost. 1999. - Vol. 81. - P. 638-642.

263. Videla, L. Glutathione and alcohol / L. Videla, C. Guerri // Glutathione: Metab. and Physiol. Functions. 1990. - P. 58-67.

264. Virag, L., Szabo E., Gergely P., Szabo C. Peroxynitrite-induced cytotoxicity: mechanism andopportunities for intervention / L. Virag, E. Szabo, P. Gergely, C. Szabo // Toxicol. Lett. 2003. - № (140-141). - P. 113-124.

265. Vlassara, H. Galectin-3 as a high affinity binding protein for AGE: a new member of the AGE-receptor complex / H. Vlassara, Y. Li, F. Imani, D. Wojciechowicz, Z. Yang, F. Liu, A. Cerami // Mol. Med. 1995. - № 1. -P. 634-646.

266. Wakabayashi, I. Relation of drinking alcohol to atherosclerotic risk in type 2 diabetes / I.Wakabayashi, R. Kobaba-Wakabayashi, H. Masuda // Diabetes Care. 2002. - Vol. 25, № 7. -P. 1223-1228.

267. Wall, S. Glucose oxidation rates in fatty acid-perfused isolated working hearts from diabetic rats / S. Wall, D. Lopaschuk // Biochem. Biophys. Acta. 1989. - Vol. 1006. - P. 97-103.

268. Wautier, J.L. Protein glycation: a firm link to endothelial cell dysfunction / J.L. Wautier, A.M. Schmidt // Circ. Res. 2004. - Vol. 95, № 3. -P. 233-238.

269. Wautier, M. Activation of NADPH oxidase by AGE links oxidant stress to altered gene expression via RAGE / M. Wautier, O. Chappey, S. Corda, D. Stern, A. Schmidt, J. Wautier // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2001. -Vol. 280.-P. 685-694.

270. Wells-Knecht, M. Pathways of formation of glycoxidation products during glycation of collagen / M. Wells-Knecht, S. Thorpe, J. Baynes // Biochemistry. 1995. -Vol. 34.-P. 15134-15141.

271. Wiseman, A. Dietary alkyl thiol free radicals (RSS) can be as toxic as reactive oxygen species (ROS) / A.Wiseman // Hypotheses. 2004. - Vol. 63. -№ 4. - P. 667-670.

272. World Health Organization: Definition, Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus and its Complications. Report of a WHO Consultation. Part 1: Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus. Geneva : World Health Org. - 1999.-59 p.

273. Wright, R.E. Oxidative stress in type 2 diabetes: the role of fasting and postprandial glycaemia / R.E. Wright, J.L. Scism-Bacon, L.C. Glass // Int. J. Clin. Pract. 2006. - № 3. - P. 308-314.

274. Wu, T.C. Mitochondrial proteins that regulate apoptosis and necrosis are induced in mouse fatty liver / T.C. Wu, C.C. Huang, C.H. Chen, H.Z. Lin, S.Q. Yang, F.Y. Lee, A.M. Diehl // Hepatology. 1999. - Vol. 29. -P. 1131-1138.

275. Xia, Z. Antioxidant N-acetylcysteine restores myocardial Mn-SOD activity and attenuates myocardial dysfunction in diabetic rats / Z. Xia, Z. Guo, P. Nagareddy, V. Yuen, E. Yeung, J. McNeill // Eur. J. Pharmacol. 2006. -Vol. 544, №(1-3).-P. 118-125.

276. Yan, S. The receptor for advanced glycation endproducts (RAGE) and cardiovascular disease / S. Yan, R. Ramasamy, A. Schmidt // Expert Rev. Mol. Med. 2009. - Vol. 11. - P. 9-14.

277. Ye, G. Catalase protects cardiomyocyte function in models of type 1 and type 2 diabetes / G. Ye, N. Metreveli, R. Donthi, S. Xia, M. Xu, E. Carlson, P. Epstein // Diabetes. 2004. - Vol. 53. - P. 1336-1343.

278. Young, R.J. Alcohol: another risk factor for diabetic retinopathy? / R.J. Young, D.K. McCulloch, R.J. Prescott, B.F. Clarke // Br. Med. J. 1984. -Vol. 288.-P. 1035-1037.

279. Yu, Z. Fiber type-specific nitric oxide protects oxidative myofibers against cachectic stimuli / Z. Yu, P. Li, M. Zhang, M. Hannink, J. Stamler, Z. Yan // PLoS One. 2008. - Vol. 3, № 5. - P. 2086.

280. Zhang, F. The Rat Model of Type 2 Diabetic Mellitus and Its Glycometabo-lism Characters / F. Zhang, G. Li, W. Ding // Exp. Anim. 2003. - № 5. -P. 401-407.

281. Zhou, Y. Lipotoxic heart disease in obese rats: implications for human obesity / Y. Zhou, P. Grayburn, A. Karim // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.2000. Vol. 97. - P. 1794-1789.

282. Zhou, Z. Cellular and subcellular localization of catalase in the heart of transgenic mice / Z. Zhou, Y. Kang // J. Histochem. Cytochem. 2000. -Vol. 48.-P. 585-594.

283. Zhu, Y. Identification of the 37-kd rat liver protein that forms an acetalde-hyde adduct in vivo as delta-4-3-ketosteroid 5-beta-reductase / Y. Zhu, M. Fillenwarth, D. Crabb // Hepatology. 1996. - Vol. 23, № 1. - P.l 15-122.

284. Zipes, D. Epidemiology and mechanisms of sudden cardiac death / D. Zipes // Can. J. Cardiol. 2005. - Suppl. A. - P. 37-40.

285. Zorov, D. Mitochondrial ROS-induced ROS release: an update and review / D. Zorov, M. Juhaszova, S. Sollott // Biochim. Biophys. Acta. 2006. -Vol. 1757, № (5-6). - P. 509-517.

Информация о работе

Индутный, Антон Васильевич
доктора медицинских наук
Челябинск, 2010
ВАК 03.01.04

Диссертация

Патохимические особенности и факторы повреждения сердца при сочетании сахарного диабета с хронической интоксикацией алкоголем - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Патохимические особенности и факторы повреждения сердца при сочетании сахарного диабета с хронической интоксикацией алкоголем - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы