Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

ОЦЕНКА САМОПЛОДНОСТИ СОРТОВ И СИЛЫ РОСТА ПОДВОЕВ ЯБЛОНИ ПО ЭНДОГЕННЫМ ФАКТОРАМ

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "ОЦЕНКА САМОПЛОДНОСТИ СОРТОВ И СИЛЫ РОСТА ПОДВОЕВ ЯБЛОНИ ПО ЭНДОГЕННЫМ ФАКТОРАМ"



На правах рукописи

ПАЛФИТОВ Виктор Федорович

ОЦЕНКА САМОПЛОДНОСТИ СОРТОВ И СИЛЫ РОСТА ПОДВОЕВ ЯБЛОНИ ПО ЭНДОГЕННЫМ ФАКТОРАМ

Специальность 06.01.07 - плодоводство, виноградарство;

06.01.05-селекция и семеноводство

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук

Мичуринск - 2003

Работа выполнена в Мичуринском государственном аграрном университете в 1974 - 2003 гг.

Научный консультант: доктор сельскохозяйственных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ

ПОТАПОВ Виктор Алскся вдров н ч Официальные оппонепты:

доктор сельскохозяйственных наук, профессор СЕДЫШЕВА Галина Алексеевна; доктор сельскохозяйственных наук, профессор УСОВА Галина Северышовна; доктор биологических наук ПОНОМАРЕВКО Владимир Васильевич

Ведущая оргализацня - Всероссийский научно - исследовательский институт садоводства имени И.В. Мичурина (ВНИИС)

Защита диссертации состоится 30 октября 2003 в 13 м ч. на заседании диссертационного совета Д 220.041.01 при Мичуринском государственном аграрном университете по адресу: 393760, Тамбовской оби. г. Мичуринск, ул. Интернациональная, 101.

С диссертацией можно ознакомиться и библиотеке МнчГАУ

Автореферат разослан «//» сентября 2003 г.

ОТЗЫВЫ НА АВТОРЕФЕРАТ В ДВУХ ЭКЗЕМЛЯРАХ, ЗАВЕРЕННЫЕ И СКРЕПЛЕННЫЕ ГЕРБОВОЙ ПЕЧАТЬЮ, ПРОСИМ НАПРАВЛЯТЬ УЧЕНОМУ СЕКРЕТАРЮ ДИССЕРТАЦИОННОГО СОВЕТА.

Факс: 8-07545-5-26-35

Ученый секретарь диссертационного совета Д 220.041.01, кандидат сельскохозяйственных наук, старший научный (»тру.

Н. В. Андреева.

Актуальность темы. Самоплодносгь сортов яблони, т.е. образование плодов при самоопылении, является ценным селекционным и технологическим признаком. Перспективы этого явления для решения проблем садоводства отмечают в своих работах, Л,М. Ро (1929); Ф,Д. Лихонос (1936); В.К. Заец (1939); Ф. Кобель (1936, 1957); Е.Н. Седов (1989); М. Фауст (2001). В селекции склонность к самошгодности является основой для создания новых стабильно урожайных сортов, В производстве самоплодные сорта представляют интерес дня 'формирования одкооортных насаждений. Такие насаждения, по сравнению с разносортными садами, проще обеспечить посадочным материалом и легче обрабатывать. Производство плодов в односортных садах может быть более рентабельным.

Однако самоплодность является редким признаком для сортов яблони и ей определение не всегда легко осуществляется. Одни и те же сорта при самоопылении в течение ряда лет часто могут дать не согласующиеся между собой результаты (Ро, 1929). Поэтому кроме полевых методов важно найти дополнительные пути скорой и ранней оценки склонности сортов к самошодвости при уменьшении общей трудоемкости и стоимости селекционного процесса. Практический и научный интерес представляет оценка этого свойства' не путем самоопыления, а по эндогенным факторам пыльцы и пестиков, находящихся в состоянии готовности к опылению. С плодовыми культурами таких исследований не проводилось. Сведения о генеративных процессах у полевых культур, отмеченные в работах Р. Моетлтк (1950), С.И. Пашкаря (1974), В.Г. Минаевой (1978), позволяют предположить, что эндогенными факторами оценки - самошюдности цветковых растений могут быть фенольные вещества в их пыльце и пестиках; В связи с этим является актуальным изучение особенностей содержания веществ фенольной природы в генеративной сфере сортов яблони, различающихся склонностью к самошюдности. ......______

Основное фенольное соединение яблоня - флоризин, является ингибитором ростовых процессов (Сарапуу, 1971) Поэтому исследование уровня содержания флоризина в тканях яблони актуально также для решения проблемы ранней оценки сипы росла при селекции новых подвоев яблони. В данной работе в этом направлении впервые доказывается, что путем количественного анализа флоризяна в корневой шейке 1 -2-летних селекционных растений можно определить их силу роста и этим самым значительно сократить длительность селекционного процессе слаборослых кленовых подвоев яблони.

Оценка самопяодности сортов и силы роста подвоев яблони по эндогенным веществам требует разработки новых, технологически простых, но эффективных способов их количественного определения. Для развития знаний о роли эндогенных фенояьных веществ яблони имеет значение и разработка методик выделения и применения ее флавоноида флоризина.

Отсутствие сведений о возможности оценки самогоюдносги сортов и сипы роста подвоев по эндогенным веществам генеративной сферы и вегетативных органов яблони явилось основанием дня выполнения настоящей диссертационной работы.

Цель и задачи исследований. Цель исследований - оценка самогоюдносги сортов и силы роста подвоев яблони с использованием эндогенных факторов генеративной сферы и вегетативных органов.

5 программу исследований входило решение следующих основных задач; определение биохимической природы веществ пыльцы и пестиков яблони, связанных с проявлением самоплодности у сортов яблони; разработка способа определения количественного содержания водорастворимых веществ в пыльце растений как фактора оценки склонности сортов яблони к самогоюдносги; определение количественного содержания водорастворимых веществ в пыльце различных сортов яблони, контрастных по склонности к самошюдности, разработки способа определения ко-

личественного содержания флоризина в пестиках и других тканях яблони как фактора оценки самоплодности сортов яблони и ингибиторе ростовых процессов; определение особенности количественного содержания и локализации флоризина в пестиках сортов яблони, контрастных по склонности к самоплодности; исследование влияния подвоев и зрелости бутонов на содержание в пыльце водорастворимых веществ и флоризина в пестиках; исследование влияния флоризина на прорастание пыльцы и рост пыльцевых трубок яблони на искусственной питательной среде, а также влияния опьшения на содержание флоризина в пестиках яблони; выявлен« роли соотношения водорастворимых веществ пыльцы и флоризина пестиков в механизме роста пыльцевых трубок in vivo и в проявлении склонности яблоня к самошюдкосга; определение особенностей количественного содержания флоризина в надземных органах в структурных частях корневой системы подвоев яблони в ювенилышй период развития растений; получение в условиях in vitro из меристем сортов и подвоев яблони хорнесобственных растений различной силы роста, выявление в их частях особенностей содержания флоризина; разработка способа ранней диагностики подвоев яблони на салу роста; разработка способа препаративного выделения флоризина из коры побегов яблони; исследование влияния флоризина ва укоренение зеленых черенков различных форм яблони.

Научная новизна исследований. Впервые показана возможность оценки склонности сортов яблони к самоплодности по соотношению содержаний растворимых веществ в пыльце и флоризина в пестиках. Обосновывается, что причиной недорастания пыльцевых трубок до завязей, обуславливающего самобесплодность сортов яблони, является недостаточное содержание водорастворимых флавонолов в пыльце и избыточное содержание флоризина в пестиках.

Выявлено, что флоризин в большей мере локализован в коре зоны перехода корней в стебель (корневой шейки). Впервые показано, что по

удельному содержанию флоризина в коре корневой шейки 1 - 2-летних растений подвоев яблони можно оценить их сипу роста. Карликовые растения в этой части содержат 23-25 % флоризина от сухой массы ткани, полукарликовые - 19-23 %, среднерослые - 17 - 19 %, сильнорослые - 9 - 14 %.

Разработаны новые способы: количественного определения водорастворимых веществ в пыльце; флоризина в тканях растений (Шт. Хв 2115291 Ей, 1998); препаративного выделения флоризина из побегов яблони (Пат. №13099539 Яи, 1993); укоренения зелвных черенков яблони в лабораторных условиях.

Получены резного возраста (в том числе и плодоносящие) корнессб-ственные растения яблони сортов Жигулёвское, Пепин шафранный, Мелба, Уз леи, Мартовское.

Теоретическая значимость. Установленная связь самоплодности сортов яблони с содержанием в их генеративной сфере флавоноидов (в пыльце флавонолов и флоризина в пестиках) может быть применена для обоснования причин самобеспяодаости сортов яблони, а также в качестве теоретической основы диагностики самоплодности других плодовых культур. Проведенные исследования способствуют дальнейшему развитию существующих научных представлений о роли и функциях природных фенолькых веществ в механизмах генеративных процессов и роста растений.

Выявленная связь силы роста подвоев яблони с уровнем содержания флоризина в зоне перехода корней в стебель может быть теоретической предпосылкой исследований силы роста других пород растений.

Научная н практическая значимость работы. Установлена возможность и предложена методика оценки склонности сортов и селекционных форм яблони к самоплодности путем определения количественного содержания водорастворимых веществ в пыльце и флоризина в пестиках.

Разработана методика ранней диагностики силы роста «лекционных форм подвоев яблони, путем определения содержания флоризина в зоне перехода корней в стебель. Новые методики позволяют существенно сократить во времени селекционный процесс.

Предложенный автором способ количественного определения флоризина б тканях яблони может быть использован также для исследования уровня созревания плодов, устойчивости яблони к воздействию низких температур, аллелопатии и почвоутомления, способности черенков к корнеобраэованию и т. д.

Автором предложены новые способы, позволяющие с малыми затратами выделять из побегов яблони дорогостоящее вещество - флори-зин, а также получать корнесобственные растения сортов яблони.

Апробация работы. Исследования автора использованы кафедрой плодоводства Мичуринского ГАУ при разработке программы ускорения и повышения эффективности селекционного процесса новых слаборослых клоновых подвоев яблоки, а также проблемы «Сырьевые и декоративные насаждения в плодоводстве» (1999).

Результаты исследований обсуждались на областных (Мичуринск, 1985, 1988, 1994, 1996, 1998) и международных - (Кишенбв, 1997; Мичуринск, 1999; 2002; Воронеж, 1995; Пенза, 2000; Барнаул, 2003, Орвл, 2003) научно-практических конференциях, защищены авторским свидетельством и тремя патентами на изобретения.

Публнкяишя результатов исследования. Основные положения диссертации опубликованы в 47 научных работах, в том числе 3 патента и авторское свидетельство на изобретения, 7 статей в цетрольных журналах, 8 публикаций на международных конференциях и монография.

Объем я структура диссертации. Диссертация изложена на 276 страницах машинописного текста, содержит введение, 6 глав, включающих 51 таблицу и 40 рисунков, выводы, рекомендации для селекции и

производства. Список использованной литературы включает 384 источника, в том числе 142 на иностранных языках.

Объекты исследования. Объектами исследований являлись склонные к самоплодности и самобесплодные сорта, а также различной силы роста подвои яблони, произраставшие в производственных и научно-производственных насаждениях учхоза - «Комсомолец», ОПХ 8НИИС им. И,В, Мичурина и ВНИИГ и СПР им. И.В. Мичурина. Для сопоставления исследовались растения других плодовых культур. Изучалось влияние мутаций и тяжелых металлов на рост и продуктивность плодовых и овощных культур.

Методы исследован на. В работе использовались лабораторные методы анализа, стационарные опыты и насаждения. Получение экспериментального материала в маточниках клоповых подвоев, питомнике и садах проводили с применением положений, изложенных в протрамно* методических рекомендациях Всероссийского НИИ садоводства им. И. В. Мичурина (1973, 1980) и Всероссийского НИИ генетики и селекции плодовых растений им. И, В. Мичурина (1975); "Программы и методики сорго изучения плодовых, ягодных и орехоплодных культур" (Орел, Изд-во ВНИИСПК, под ред. академика РАСХН Е. Н. Седова, доктора ох наук Оголъцовой Т. П., 1999). Выявление и определение эндогенных факторов проводилось методиками, разработанными автором, в соответствии с основными положениями аналитической химии (Крешхов, 1970). Они описываются в процессе изложения исследований и сопоставляются с ранее известными методами анализов. Статистическая обработка результатов измерений проводилась в соответствии с общепринятыми принципами и методами, рекомендованными Б. А. Доспеховым (1985) и К. Доерфелем (1969).

Условия проведении исследований. Лабораторные исследования проводились с 1974 г по 2002 тд в лаборатории кафедры химии Мичуринского государственного аграрного университета. Использовались воз-

можяости и друтт подразделений университета, таких как: проблемная лаборатория кафедры плодоводства, кафедра ботаники и селекции плодовых культур, лаборатория по определению качества сельскохозяйственной продукции и лаборатория биохимии.

Экспериментальный материал для исследования заготавливался в стационарных условиях садов и питомников. Агротехника возделывания изучаемых сортов и подвоев яблони являлась общепринятой дня средней зоны плодоводства в соответствии с климатическими условиями Мичуринского района Тамбовской области.

На запшту выносятся следующие основные положенно.

1. Оценка самоплодности сортов яблони по соотношению факторов пыльцы и пестиков.

2. Водорастворимые вещества пыльцы как фактор, активирующий са-мопяодностъ яблони.

3. Флоризин пестиков как фактор, ограничивающий самоплодность яблони.

4. Оценка силы роста растений яблони по эндогенному содержанию флоризина.

5. Способы анализа и получения природного флоризина. Их экономическая эффективность.

Результат*! исследований Результаты исследований изложены в 3, 4, 5 и 6 главах диссертации.

Глава Э, Оценка самоплодности сортов яблони. В разделе 3.1.

определяется роль пыльцы в оценке самоплодности сортов яблони. Гаплоидные микроспоры мужского гаметофига, то есть генеративные генетически мужские двух - или трёхклеточные стр^тстуры растений, отделяющиеся от них в период цветения, принято называть пыльцой, пыльцевыми зёрнами. Основным свойством пыльцы является способность

прорастать в ткани пестиков. Важнейшим фактором прорастания пыльцы являются ее собственные растворимые в воде вещества. Пыльцевые зерна винограда, промытые чистой водой и в результате этого лишенные таких веществ, не прорастают не только на искусственных питательных средах, но и на рыльцах пестиков (Branscheidt, 1930). Способность к прорастанию у пыльцы теряется и вследствие продолжительных моросящих дождей, также из-за вымывания из пыльцевых зерен содержащихся в них активных веществ (Алешин, 1936). Чем больше в питательную среду из пыльцы гладиолусов диффундирует веществ, тем она лучше прорастает (Heslop - Harrison, 1975). Явление выхода веществ из оболочки пыльцевых зерен, перед их прорастанием связывают с реакциями распознавания при совместимых и несовместимых скрещиваниях (Нокс, 1985).

Природа и количество веществ, извлекаемых водой из пыльцы яблони, нами исследовались спекгрофотометрическим методом. УФ • спектры в диапазоне 220 - 380 нм растворов от пыльцы разных сортов яблони полностью совпадают (рис, I). Полное сходство формы спектров

Рис. 1 Ультрафиолетовые спектры поглощения водных экстрактов из пыльцы следующих сортов яблони: / -Лобо, 2 - Народное, 3-Антоновка обыкновенная, 4 - Северянка, 5 - Мелба, 6 - Пепин шафранный, 7 - Десертное Исаева, 8 - Северный синап, 9 — Зоренька, 10 —Папироека, 11 — Боровинка, 12 - Коричное новое, 13 —Коричное полосатое, 14—Славянка, 15- Китайка ранняя, 16- Бессемянка мичуринская, 17— Ужи.

свидетельствует о том, что пыльца разных сортов яблони содержит вещества одинаковой химической природы и в одинаковых пропорциях.

I <

<yl-...-——...,................

1М ли IM JM ЫSW W 30 Дм

Методам колоночной хроматографии на анионите AB - 16ГС, под действием элюируюгцего растаора 0,1 н. HCl, из водорастворимых веществ пыльцы яблони выделены две фракции.

Первая, многократно меньшая в количественном отношении, по форме спектра поглощения с максимумом 260 им может быть отнесена к производным никотиновой кислоты. Никотиновая кислота является необходимой частью живых клеток для синтеза никотина ми дных кофер-ментов - шштшамидадениндинуклеотида (НАД) и никопнгамндаденин-дкнуклеогидфосфата (НАДФ). Они функционируют как коферменгы де-гидрогеназ на начальных этапах биологического окисления углеводов, аминокислот, жирных кислот и др. веществ, а также участвуют в реакциях дыхания растительных клеток, обеспечивающих ей энергией.

Другая, преобладающая, составляющая водных экстрактов из пыльцы яблони, имеющая \тт = 270 нм, по характеру спектра погаощения может быть отнесена к флаванолам (Запрометов, 1974). Флавонолы являются постоянной компонентой пыльцы растений (Wierroaitn, 1968), а

Рис.2. Ультрафиолетовые спектры поглощения водными экстрактами пыльцы: ¡•груши, 2-яблони, З-вишни, 4-айт, 5-ишпо*ника, 6-рябины, 7-боярыиишка.

в пыльце семейства Яозасеае, к которому относится яблоня, основным фл а во полом является изорамнетик. Поэтому водные экстракты из пыльцы груши, боярышника, айвы, вишни, шиповника, рябины имеют УФ -

—Ид ■ ÜÖ—Jtb—503—SiZ—TSS-Ш^кн

спектры поглощения (рис. 2) аналогичные спектрам экстрактов го пыльцы яблони.

Флавонолы - это самые окисленные соединения в ряду флавонои-дов. В присутствии кислорода они мало стабильны и отличаются способностью образовывать политдроксидированные и поли-метаксилированные соединения. Такие свойства флавонолов пыльцы считаются важными дня формирования ею пыльцевых трубок (Минаева, 1978). Для прорастания пыльцы в пестиках яблоня, по-видимому, ценным является также способность флавонолов активировать окисление других, наиболее восстановленных флавоноидов, таких как дигидрохал-кон-флоризин (Сарапуу, 1971).

Процессы, приведшие к росту пыльцевой трубки, регулируются концентрацией ништинамидных коферментов (НАД и НАДФ), а также концентрацией субстратов (Молер, Кордес, 1970), чем, вероятно, и являются выходящие из оболочек пыльцевых зврен производные флавонолов на начальной стадии роста пыльцевой трубка Поэтому одной из причин самоплодности у сортов яблони может быть повышенное содержание в еб пыльце водорастворимых производных никотиновой кислоты и изо-рамнетива, по сравнению с их содержанием в пыльце самобесшюдных сортов.

Качественные реакции с нингидрином показали, что в состав экстрактов из пыльцы яблони входит также небольшое количество аминокислот и белков. Они необходимы для осуществления ферментативных процессов при прорастании пыльцы.

Таким образом, основная физиологическая роль всего комплекса водных экстрактов пыльцы состоит в том, чтобы обеспечить прорастание пыльцевых трубок в пестиках. Весь комплекс водорастворимых веществ пыльцы может быть одним из эндогенных факторов оценки самоплодности сортов яблони.

Исследование спектрофотометрических свойств водорастворимых веществ пыльцы растений позволило разработать методику их количественного определения (Палфшов, 2003). В соответствии с ней массовая лоля водорастворимых веществ в пыльце (п %) рассчитывается по со-

£хКх100%

ставленной для этого формуле: п%« —---—* где:

К А

Е - оптическая плотность водных экстрактов из пыльцы в целевом растворе (измеряется на спектрофотометре); V - объём водных экстрактов, мл; А - навеска пыльцы подвергающаяся экстракции водой, мг, фа - пропорциональное отношение оптической шготности (Е) к концентрация экстрактов из пыльцы (С мг/мл).

1.Оптические плотности стандартных растворов водорастворимых веществ пыльцы яблони

Е 0,13 0,15 0,26 0,30 0^5 0,61 1,09 1,21

с= 0,025 0,029 0,050 0,058 0,104 0,116 0,207 0,232

Рис. 3. Зависимость оптической плотности (Е) при Х = 270 им от концентрация водорастворимых веществ пыльцы яблони (С мг/мл)

Тангенс о определяется экспериментально по калибровочному графику (ряс. 3), построенному по растворам с известной концентрацией экстрактивных веществ и соответствующих им значений Е (табл. 1). Tali

кие растворы получают из специально приготовленных препаратов экстрактов из пыльцы сортов яблони. Из графика 1£а =Е/С = 1,09/0,208 =

5,26, следовательно п % = При использовании мерных колб объ-

5,26хЛ

емом 25 мл формула расчетов приобретает вид: и % = = 475х —.

дх5,2б А

Если объём, примененных колб будет больше, чем 25 мл, то результат расчета необходимо увеличить на отношение У/25.

Количественное содержание водорастворимых веществ было исследовано в пыльце 12 сортов яблоки, произраставших в сходных ггочвенно-климатических условиях (табл. 2). Половина этих сортов относятся к склонным к самоплодности, а остальные известны как самобесшюдные (Седов, Серова, 1980; Попов, 1986; Кондрашова, 1989).

2. Содержание водорастворимых веществ в пыльце исследованных сортов яблони, привитых на подвое 54-118

№ п/п Самоплодные сорта яблони Содержание водорастворимых веществ в пьыьце % № п/п Самобес плодные сорта яблони Содержание водорастворимых веществ в пыльце %

1984 г. 2001 г. 1984 г. 2001 г.

1 Народное 46 47 7 Панировка 46 48

2 Мелба 61 50 8 Боровинка 39 42

3 Пепик шафр. 42 46 9 Коричное новое 40 38

4 Зоренька 50 45 10 Антоновка обык. 45 47

5 "Умей 40 38 11 Десертное Исаева 32 33

6 Северн. Стал 51 49 12 Бесешкка мнч. 33 31

Приведенные в данном исследовании склонные х самошюдностн сорта яблони по содержанию водорастворимых веществ в пыльце превосходят самобесшюдные в среднем на 20 % (табл. 2). В отдельных случаях, например, пыльца Мелбы превосходит пыльцу Бессемянки мичуринской по содержанию растворимых в воде веществ в 1,5-1,8 раза.

Исходя из физиологической рола водных экстрактов пыльцы следует принять, что склонность к самоплодности выше у тех сортов яблони, в пыльце которых больше водорастворимых веществ. Это означает; что

количественное содержание водорастворимых веществ в пыльце может быть использовано в качестве одного из показателей при диагностике сортов и селекционных фор»! яблони на самопяодность.

По величине содержания водорастворимых веществ в пыльце, а следовательно, и по склонности к самоплодности исследованные сорта можно расположить вред оценки амшпщноетя п» пыльце:

номере ряду 1 1 3 4 5 6

Сорт яблони Мепба Сееерныв синап Зоренька Народное Пепин шафранный Антоновка

7 К У 10 К 12

Панировка Коричное новое Боровинка Уэлси Десертное Исаева Бессемянка Мичуринск.

Наибольшая самоплодностъ по пыльце у Мелбы, наименьшая у Бессемянки мичуринской. С увеличением порядкового номера самоплод-ность сортов уменьшается.

В разделе 3.2. приводятся опытные данные о том, что от сортов шиповника, имеющих в пыльце минимальное содержание водорастворимых веществ, наблюдается также минимальное или полное отсутствие завязывания плодов. Показано, что УФ-спектры водных растворов веществ пыльцы ветроопыляемых пород существенно отличаются от спектров веществ пыльцы розоцветных кулыур.

В разделе 3.3, рассматривается роль пестиков в оценке самоплодности сортов яблони. Пестик - это генеративная часть растения (спорофита) яблони, расположенная в центре его репродуктивного органа -цветка, и служащая для приема и прорастания пыльцы. Пестик состоит из нижней, полой, расширенной части - завязи, тонкого цилиндрического столбика со стилодиями (ветвями столбиков) и рылец, венчающих столбик (стилодии) (Эсау, 1%9), Наблюдения за процессом прорастания пыльцы в ткани пестика позволили многим авторам прийти к выводам, что направление прорастания пыльцы и роста пыльцевых трубок определяются химической природой ткани столбиков, при этом рост пыльце-

и

вых трубок происходит с потреблением веществ столбика (Банникова, Хведынич, 1982). Вместе с этим установлено (Кобель, 1934, 1957), что основным видом несовместимости у яблони является замедление ' или полная остановка роста пыльцевых трубок в тканях пестиков. Однако причины этого практически не выяснены. Недостаточно известно, равнозначны ли по качеству ткани столбиков на всей протяженности от рыльца до завязи?

Мы исследовали ткани по длине столбиков цветков яблони на содержание водо- и спирторастворимых веществ. Пестики для анализа выбирались из тех же бутонов, что и пыльце. Столбика длиной около 12 -15 мм с помощью лезвия разделяли на 5 - б равных частей. Более короткие столбики разделяли на 4 или две равные чести. Для сопоставления между собой от разных частей столбиков одного сорта на аналитических весах брали равные навески (по 20 мг), которые растирали в ступке, а затем смешивали с 25 мл дистиллированной воды. Взвеси отделяли, а у водных экстрактов на спектрофотометре СФ - 26 в диапазоне 230 - 360 нм снимали ультрафиолетовые спектры поглощения. На рис. 4. видно, что все спектры поглощения водорастворимыми веществами от разных частей столбиков яблони сорта Боровинка имеют аналогичный вид и одинаковые параметры; ^пк-285 им и Х^ь, - 255 нм, но существенно различаются величиной оптической плотности (£). Из этого следует, что пестики яблони по всей их длине содержат вещества, однотипной химической природы, но содержание их увеличивается от рыльца к основанию столбика. Аналогичными ультрафиолетовыми спектрами поглощения характеризуются пестики Антоновки, Народного, Зореньки, Пепина шафранного и др. сортов яблони.

Хроматографией на полиамидных адсорбентах доказано, что УФ-спектры водных экстрактов из тканей пестиков яблони обусловлены присутствием в них фдоризина. Это фенольное соединение специфично для видов Malus (Сарапуу, 1971). В листьях яблони его содержание coït

Рве, 4. Ультрафиолетовые спектры поглощения водными экстрактами, из различных частей столбиков яблони сорта Боровинка

сгавляет 4-8%; в коре побегов 8-12%, в коре корней до 26 % от сухой массы тканей. Исследованием количественного содержания флори-зига (Шт. №2115294 1Ш, 1998) в разных участках по длине пестиков

Части Содержшгаа Условные Расстояние условных

стол- флориаяна а центры центров от основания

бика частях частой столбика, (X ми)

столбика. столбика

I

основание столбика

Рис. 5. Схема определения координатных точек для частей столбиков цветка яблони сорта Антоновка обыкновенная.

установлено, что в столбиках сортов яблони имеется градиент распределения флоризина, то есть его удельное содержанке по длине столбика увеличивается от рыльца к завязи (табл. 3, рис. 5-6). Закономерность распределения флоризина по длине столбиков соответст-

„ „ (А-х)х(С,-С_)

вует уравнению: Сх =Ср+-1-—, где: С* - содержание

Н

флоризина в тканях столбиков на расстоянии * от их основания, т.е. от завязей, %; А-полная длина столбиков, мм\ х - расстояние от анализируемых частей столбиков, в которых определялся флоризин, до завязей, мм; С0 - содержание флоризина в основаниях столбиков, на границе их с завязью, %; Ср - содержание флоризина в рыльцах столбиков, %.

3, Содержание флоризина в тканях столбиков цветков на различном расстоянии от основания

Расстояние центров частей столби- Содержанке флорюшш в частях столбиков семобосшюдых сортов яблоки, % от сухой массы тканей С, Расстояние центров частей столбиков Содержание флортнна в частях столбиков самоплодных сортов яблони, % от сухой массы тканей С,

ка от основания х, мм Антоновка обыкн овеивая Боровинка Бессемянка мнчур. римская. от основания х, мм Народное Мелба

13,8 5,0 7,0 — 13,3 7,0 —

п,з 11,0 12,0 — 10,5 10,0 -

8,8 15,0 16,0 — 8.2 8,0

6,3 20,5 22,5 - 7,5 11,0 —

4,0 -- 20,0 4,5 14,0 —

3,8 25,0 26,5 — 2,8 — 13,0

1,3 30,0 30,5 — 1,8 17,5 —

и - - 28,0 ■ - - -

Удельное содержание флоризина в рыльцах (Ср) и основаниях столбиков (С0) может быть определено путем построения на миллиметровой бумаге по опытным данным С, (табл. 3) графиков распределения флоризина по длине столбиков, как это показано на рис.6.

Аналогичные графики были построены и для сортов — Пепин шафранный, Уэлси, Северный синап, Папировка, Коричное новое, Десертное Исаева. По ним также были определены Ср и С„ (табл. 4).

Рис. 6. Графическое распределение содержания флоризина ш длине столбиков

сортов яблони.

Самоплодные сорта практически не отличаются от большинства самобесплодных по содержанию флоризина в рыльцах пестиков, в завязи и цветоножках (табл. 4). Ббльшим содержанием флоризина в рыльцах отличаются лишь Десертное Исаева и особенно Бессемянка мичуринская. Но все исследованные самобесплодные сорта значительно превосходет самоплодные по среднему содержанию флоризина в целых столбиках и особенно в их основаниях.

У самобесплодных сортов содержание флоризина в основаниях столбиков, перед завязью, составляет 28-32 %, а у самоплодных 14-20 % от сухой массы тканей.

Из графиков на рис. 6 видно, что градиентное распределение флоризина по длине столбиков у самобесплодных сортов (Антоновка обыкновенная, Боровинка, Бессемянка мичуринская) наблюдается в области больших содержаний флоризина, чем у самоплодных (Мелба, Народное).

4. Содержание флорюияа в элементах цветков сортов яблони

» п'г сорта яблони Содержание флоризина, % от сухой массы

рыльца столбиков Ср среднее, целые столбики основания столбиков Со завязь цвето ножка

1984 2001 1984 2001 1984 2001 1984

1 Народное 5 4 И 13 18 22 8 5

2 Мелба 4 3 9 10 16 15 7 5

3 Пепин шафранный 2 3 12 11 17 16 8 6

4 Зоренька 2 3 14 15 17 18 9 5

5 Уэлси 3 2 11 12 14 15 - -

6 Северный синап 1 1 10 12 15 17 - -

7 Панировка 4 5 16 19 28 30 -

Боровинка 4 б 18 18 32 29 - ™

9 Коричное новое 2 4 18 20 30 32 8 7

10 Антоновка обыкновенная 2 3 20 19 32 31 9 6

11 Десертное Исаева 7 8 21 23 26 28 - 10 7

12 Бессемянка мичуринская 17 8 23 19 31 29 7 6

Высокое содержание флоризина в столбиках, особенно в их основании, т.е. в участках прилегающим к завязям, может быть объяснением недора-стания пыльцевых трубок до завязи, так как фдоризнн является эндогенным ингибитором ростовых процессов, особенно, если он накапливается тканями в больших количествах (Сарапуу, 1971).

Полученные экспериментальные данные позволяют считать количественное содержание флоризина в столбиках в качестве другого эндогенного фактора самоплодности сортов, но принадлежащего пестикам. По 20

скольку физиологически к самоплодности более склонен сорт, у которого меньшее содержание флоризина в основаниях столбиков, то исследованные сорта яблони можно расположить в ряд оценки склонности к самоплодности по пестикам:

Номер в ряду 1 2 3 4 5 6

Сорт яблони Уэлси Мелба Север' ный си-пап Пепин шафранный Зоренька Народ ное

7 8 9 10 11 12

Дессертное Исаева Цапиров-ка Коричное новое Антоновка обыкновенная бессемянка мичуринская Ь'оро-винка

Наибольшую склонность к самоплодности по пестикам имеет Уэлси, наименьшую - Боровинка. С увеличением порядкового номера в ряду склонность сортов к самоплодности уменьшается.

В разделе 3.4. даны принципы оценки самоплодности сортов яблони путем учета соотношений факторов пыльцы н пестиков. Из табл.5 видно, что сорта яблони, имеющие пыльцу с относительно высоким содержанием водорастворимых веществ и столбики с относительно малым содержанием флоризина, характеризуются большей завязываем остью плодов.

Физиологическая роль флоризина в пестиках яблони может быть понята на основании опытов, проведенных Л. П. Сарапуу (1971)- Исследуя роль флавоноидов при вегетации яблони, он установил, что под действием ферментов протоплазмы тканей яблони основной реакцией превращения флоризина в аэробных условиях является реакция окисления. Но окисление флоризина может активировать флавонол кверцетин, если он присутствует в протоплазме в каталитических количествах. Это означает, что на одру молекулу флоризина должно быть не менее одной молекулы кверцетнна. В результате ферментного окисления, активируемого флавошлом кверцетином, флоризин последовательно превращается в полимерные вещества, люминесц ируютцие в ультра фиолетовом изяуче-

яии (Сарапуу.197!) аналогично пыльцевым трубкам (Подцубная - Арнольда, 1982). Эта упрощенная схема позволяет понять также значение повышенного содержания водорастворимых веществ в пыльце яблони, в состав которых входят флавонолы.

В пыльце практически всех растений преимущественно содержатся такие флавонолы как: кемпферол, кверцетин или его метиловый эфир изорамнетин. В пыльце семейства Козасеае, к которому относится яблоня, основным компонентом является изорамнетин (УЛептпп,1968). На основании этих сведений мы предполагаем, что водорастворимые вещества пыльцы яблони, благодаря содержащимся в них производным фла-вонола кюрамиетина, играют роль активатора окисления флоризииа пестиков. При этом флоризин пестиков, вероятнее всего, расходуется на синтез пыльцевых трубок при их росте. Мы определили, что после опыления содержание флоризииа в пестиках яблони существенно уменьшается. Рост пыльцевых трубок, очевидно, будет успешным до тех пор, пока вместе с ними в ткани пестиков от пыльцевых зерен, богатых водорастворимыми веществами, будут поступать производные флавоно-лов, в количестве достаточном для активации окисления флоризииа, находящегося на пути роста трубок. В случае недостаточного поступления флавонолов от пыльцевых зерен, мало их содержащих, рост пыльцевых трубок может остановиться не доходя до завязи, из-за избытка на пути трубок флоризииа. Избыток флоризииа в пестиках приводит к разбуханию концевых частей пыльцевых трубок, растущих по направлению к завязи, и прекращению их роста.

В результате можно црийти к выводу, что причинами самобесплодности у яблони, связанной с недора ста кием пыльцевых трубок до завязи, может быть высокое содержание флоризииа в тканях столбиков цветков и недостаточное содержание флавонолов в ев пыльце. По совместному влиянию этих факторов исследованные сорта яблони можно расположить

5. Содержание водорастворимых веществ в пыльце, флоризина в столбиках цветков и завязываемость плодов при самоопылении _разными по самоплодности сортами яблони_

Содержание Содержание флоризина, %- от Завя-

водораство- сухой ткани зывав

Jfe п/п Сорт яблони римых веществ в пыльце (%). среднее, целые столбики основание столбиков мость ПЛОДОВ

1984 2001 1984 2001 1984 2001 %

самоплодные (лиг.)

1 Народное 46 47 11 13 18 22 8-19

2 Мелба 61 50 9 10 16 15 4-9

3 Пепин шафранный 42 46 12 11 17 16 4-10

4 Зоренька 50 45 14 15 17 18 >3

5 Уэлси 40 38 И 12 14 15 >3

б Северный синап 51 49 10 12 15 17 >5

самобесплодные

7 Папировка 46 48 16 19 28 30 1,0

8 Боровинка 39 42 18 18 32 29 1,0

9 Коричное новое 40 38 18 20 30 32 0,4

10 Антоновка обыкновенная 45 47 20 19 32 31 0-2.8

11 Десертное Исаева 32 33 21 23 26 28 0

12 Бессемянка мичуринская 33 31 19 23 31 29 0,1

в новый, основной ряд оценки самоплодности. Чем меньше сумма поряд-

ковых номеров сорта в рядах оценки самоплодности по пыльце и по пестикам, тем более самоплодным является сорт. Основной ряд оценки самоплодаоств исследованных сортов выглядит так:

Ряд по пыльце 1 2 3 5 4 10

Рад по пестикам 2 3 5 4 6 1

Сумма номеров 3 5 8 9 10 11

Сорт яблони Мелба Северный синап Зоренька Пепин шафранный Народное Уэлси

7 6 8 11 9 12

8 10 9 7 12 П

15 16 17 18 21 23

Панировка Антоновка обыкновенная Коричное новое Десертное Исаева Боровинке Бессемянка мичуринская

В этом ряду наиболее самоплодной является Мелба, а наименее самоплодной - Бессемянка мичуринская. Предыдущий сорт более склонен к самоплодностй, чем последующий.

Диагностику самоплодностй у отдельных сортов или селекционных форм яблоня следует проводить путем определения количественного содержания водорастворимых веществ в пыльце и содержания флорюина в пестиках, а затем сопоставлением полученных показателей с аналогичными показателями известных самоплодных сортов, взятых в качестве стандарта самоплодностй. Бели содержание водорастворимых веществ в пыльце исследуемого сорта равно или превышает стандарты, а содержание флоризина в пестиках равно или меньше, чем у стандартов, то такой «орт следует считать самоплодным.

Существуют сорта, склонные к самоплодностй, но имеющие сравнительно невысокое содержание водорастворимых веществ в пыльце. Примером этому может служить сорт Уэлси. Вместе с тем, у него имеется и невысокое содержание флоризина в пестиках, но отношение содержания водорастворимых веществ к содержанию флоризина в пестиках будет примерно таким же, как и у других сортов, склонных к самоплодностй. Поэтому более объективными показателями склонности сортов яблони к самошюдности следует считать отношения V =• — и

С%

, где: V - отношение процентного содержания (пИ) водорастворн-

С0%

мых веществ в пыльце данного сорта к среднему процентному содержанию флоризина в сухих столбиках того же сорта (С%); И — отношение процентного содержания (п%) водорастворимых веществ в пыльце данного сорта к процентному содержанию флоризина в основаниях сухих

столбишв того же сорта (С0%). Например, расчет средних значений этих показателей по данным двух лег (табл,6) для сорта Народное выглядит

так- = 39- 11=1> =«±^ = 13

2е 11+13 и+22

6. Показатели склонности сортов яблони к самоплодаости

№ и/п Сорта яблони (самоплодные) Показатели № п/п Сорта яблони (самобесплодные) Показатели

V я V к

1 Мелба 5,8 3,6 7 Панировка 2.7 1,7

2 Северный синап 4,5 3,1 8 Антоновка обыкновенная 2,4 и

3 Пепин шафранный 3,8 2,7 9 Боровинка 2.3 1,3

4 Уэлси 3,4 2,7 10 Коричное новое 2,0 1.5

5 Народное 3,9 2,3 И Дессергное Исаева 1.5 1,2

6 Зоренька 3,3 2,7 12 Бессемянка мичуринская 1.5 1.1

Рассчитанные таким образом отношения V склонных к самоплод-ности сортов находятся в пределах 3,3 - 5.8, что более чем в два раза превосходит аналогичный показатель для самобесплодных сортов (1,5 - 1,7) (табл.б).

Показатель Я для склонных к самоплодности сортов находится в пределах 2,3-3,6, тоща как у самобесплодных сортов 1,1 - 1,6. Найденные пределы V = 3,3 - 5,8 к Я = 2,3 - 3,6 в качестве стандартных показателей склонности сортов яблоня к самоплодности могут быть использованы при диагностике новых сортов яблони на самоплодность. Дня этого нужно у диагностируем ых сортов экспериментально определить значение V и Е. Если показатель V будет выше 3,3, а И выше 2,3, то такой сорт следует считать склонным к самоплодности.

Пример (2002 г). Проводим диагностику на самоплодность сор* тов Коричное полосатое, С партан и Антоновка новая. По разработанным

методикам (Пат, 2115291 1Ш, 1 9 9 8; Палфтов, 2001) определяем содержание водорастворимых веществ в пыльце этих сортов и содержание флоризина в сухих столбиках и их основаниях. Для экономии времени содержание флоризина в основаниях столбиков определяем путем анализа его нижнего участка, высотой около 0,5 мм, а построение графика распределения флоризина по длине всего столбика, как на рис. б не проводим.

7. Диагностика сортов яблони на склонность к самоплодносги

№ п/п Сорт яблоки п, % с, % Со, % V Я Склонность X самоплодносги

1 Спартан 46 12 15 3,8 3,0 склонен

2 Коричное полосатое 41 20 28 2,0 1,5 не склонен

3 Антоновка новая 43 22 30 2,0 1,4 не склонен

Из результатов определения (табл.7) видно, что сорт Спартан склонен к самоплодносги, так как у него V = 3,8, т.е. превышает 3,3, а К =3,0, т.е. больше, чем 2,3, Сорта Коричное полосатое и Антоновка новая не склонны к самоплодносги, так как их V и Я не входят в пределы стандартных показателей. Оценка самоплодносги этих сортов по эндогенным факторам пыльцы и пестиков совпадает с данными полевых опытов другик авторов (Боев, 1974; Кондрашова, 1989),

В разделе 3.5. приводятся результаты спектрофотометрического изучения пестиков вишни Ширпотреб черная. Из них следует, что по длине пестиков вишни состав растворимых веществ меняется не только количественно, но и качественно. Это осложняет их характер итстику,

Глава 4. Определение содержания, выделение и биологическое применение флорязвва. В разделе 4.1. изложен разработанный автором способ количественного определения флоризина в тканях растений (Пат. №2115291 яи, 1998). Этот способ необходим для оценки подвоев да слаборосл ость, а сортов яблони на самоплодносп», Кроме этого кшшче-

ственное определение флавоноидиого пповэзида флордаина имеет важное значение при изучении ростовых процессов у яблони (Сарапуу, 1971) при исследованиях уровня созревания плодов (Рункова, 1972), устойчиво-

Рис 7, Установка для фнксшщи растительных тканей в вакууме:

/ — эксикатор; 2 — стеклянные краны; 3 — соединительные шланги; 4-1}-образный манометр; 5 — промежуточная ёмкость; 6— «акуумнът насос; 7—электродвигатель.

сти яблони к воздействию низких температур (Гошлева, 1972; Коломиец, Тешшцкая, 1974), формирования плодов и стратификации семян (Лобанова, Острейю, 1972), аллелопатии и почвоутомления в садах (РаЙс, 1978).

Результаты анализа будут более воспроизводимыми, если расчет содержания флоризина проводить ш единицу абсолютно сухой массы тканей. Поэтому отобранный для анализа материал: листья, почки, кора, корни, бутоны цветов, пестики и т. д. - для фиксации и высушивания помещают в вакуумный эксикатор, содержащий осушители - СаС1з, Р2О5, КОН или селгосагель (рис.7), создают в нем остаточное давление менее 1мм рт.ст. и при комнатной температуре (18-20йС) выдерживают их до постоянного веса (3-5 дней). В вакууме уменьшается потере флоризина за счет исключения окисления кислородом и увеличивается скорость высушивания образцов. Растительные образцы, в палевых условиях до внесения в эксикатор, следует хранить не более 5 часов в полиэтиленовом

пакете или в закрытых пробирках, помещенных б затемненные условия, не допуская их завядання.

В разделе 4.2, показан способ препаративного получения природного флоризина (Пат, № 1309539 RU, 1993). Флорнзин откосится к типу таких соединений, которые могут применяться в качестве антимикробных И аншшухолевых средств. Они подавляют развитие стафилококка (Зепеу, Uri.1954) и оказывают дегенеративное влияние на опухоли разнообразной этиологии (Kotobuki,I963; Верменичев, Кабиев, 1970; Gard étal,, 1976), Флориэин применяется в постановке модельных опытов над животными и человеком при разработке методов лечения от сахарного диабета (Brazy, Dennis, 1978). В плодоводстве выявлено, что флорнзин способствует улучшению корнеобразова ния у зеленых черенков клоновых подвоев (Поликарпова, 1985) и михролобегов плодовых и ягодных культур (Упады-шев, Дроздовский, 2003). Флавояоиды, типа флоризина, способны образовывать с ионами некоторых переходных металлов окрашенные комплексные соединения, благодаря чему они употребляются в количественном определении урана, циркония, олова, тнтана и Других металлов (Jungiekel, Klenger, 1963; Старн, 1966). Однако применение флоризина ограничено 'из-за недостаточной изученности его свойств, малой доступности дня исследований и высокой стоимости. По каталогу фирмы SIGMA 2002 - 2003 г. 10 граммов зарубежного флоризина стоит 417 Евро, что соответствует по курсу 2003 года 13344 рублям. Отечественная промышленность не производит флорнзин, но его можно выделять из тканей яблони.

Дешёвым и практически неограниченным источником сырья дня препаративного выделения флоризина является кора побегов яблони, отделяющихся при обрезке плодоносящих садов. Содержание флоризина в сухой коре побегов и корней яблони может составлять $ -20 % от сухой массы ткани Расчетом показано, что из побегов от обрезки одного гектара сада можно получить около 3,6 кг флоризина, стоимость которого 2!

по европейским ценам около 4,8 млн. рублей. Рентабельность получения природного флоризина может составить более 300%.

Более полное извлечение флоризина из коры яблони достигается при экстракции 80 % - ным этанолом (табл. 8). Но более чистый препарат флоризина получается при экстракции 96% • ным этанолом. Так как его температура плавления и угол удельного вращения плоскости поляризации светового луча [af£ соответствует флоризину производства итальянской фирмы Carlo ERBA - №=51 - 53 (W=108 - 109 °С), Ультрафиолетовые спектры поглощения спиртовых растворов выделенного из яблони соединения и дишдрвта флоризина итальянской фирмы Carlo ERBA также идентичны.

8. Выход флоризина из сухой коры яблони при экстракции водным этанолом с различной объемной концентрацией

Сорт яблоки Жигулевское Уэлси

Концентрация этанола. % ( об.) 96 80 70 60 50 40 85 75 65 45

Выход флоризина, % (масс.) 2,8 4,4 3,4 1,8 2,0 0,0 3,6 4,0 3,0 2,6

t" плавления препарата, "С 108109 107108 104105 103105 103104 - 107108 107108 _ 102103

препарата 5053 4953 - - - - 49" 53 4953 -- -

В разделе 4.3. описано влияние флоризина на укоренение зеленых черенков подвоев и сортов яблони. Корвесобственные деревья сортов имеют важные преимущества над привитыми. В случае вымерзания, повреждения грызунами или огнем дерево можно восстановить за счет корневой поросли. Кроме этого корневая система корнесобственных деревьев располагается более поверхностно и это позволяет выращивать яблоню на участках с более высоким залеганием грунтовых вод, чем допускается для привитых деревьев. Корнесобственные деревья полностью сохраняют свойства и признаки материнского дерева от которого взяты черенки, тогда как у привитых возможно варьирование свойств

под влиянием подвоев. Получают непривитые плодовые деревья из различных вегетативных частей материнского дерева: корневой поросли, отводков, корневых черенков, стеблевых черенков и меристем. У яблони трудно укореняется любая вегетативная часть. Поэтому для стимулирования корнеобразовання их подвергают обработке растворами с оптимальными концентрациями ауксинов (Поликарпова, 1985). Более высокое качество корней отмечается после обработки черенков смесью индолил-масляной кислоты (ИМК) и флоризина.

Полученный из побегов яблони флоризин был испытан в качестве активатора образования корней у зеленых черенков полукарликового клопового подвоя 54-118. При этом особенности корнеобразовання сопоставлялись с уровнем поглощения черенками флоризина и стимуляторов корнеобразовання индолилмасляной (ИМК) и индолнлуксусной (ИУК) кислот. Уровень поглощения стимуляторов корнеобразовання черенками определяли с помощью спектрофотометра СФ - 26.

Измерение оптической плотности растворов флоризина, стимуляторов и их смесей до и после выдерживания в них зелёных черенков Подвоя 54-118 показало, что абсолютное и относительное поглощение флоризина повышается при увеличении его концентрации в растворе. Флоризин является родственным веществом яблони и поэтому хорошо поглощается зелеными черенками ее подвоев. Изотерма поглощения флоризина зелеными черенками подвоя яблони имеет вид, характерный для процессов хемосорбции. Например, как при хемоссрбики фтороле-фкнов активированным углем (Кузин, Палфигов, Лоскутов, 1975). ИУК н ИМК лучше погаощались черенками, если они находились в смеси с флоризином.

Флоризин стимулировал корнеобрезование незначительно (около 5%). Обработка черенков смесями флоризин + ИУК привела к укоренению 90 - 95 % черенков, против 50 %, обработанных только ИУК. Наиболее высокий уровень укоренения 95 - 100 % и с лучшим качеством

корневой системы был достигнут после обработки черенков смесями флоризин + ИМК. От обработки черенков раствором только ИМК укоренилось около 80 % черенков. Совместное влияние фпоризина и ауксинов на коркеобраэованис положительно сказалось при укоренении зеленых черенков сортов яблони.

В связи с ограниченной возможностью проводить опыты по укоренению в теплице с тума необразованней укоренение зеленых черенков сортов яблони было проведено в специально изготовленных переносных мнкротешшчках-корнеобразователях (рис. 8). В них высокая влажность почвенного слоя (субстрата) и воздуха поддерживалась за счет испарения воды, постоянно находящейся ва поддоне под почвенным слоем. Субстрат почвенного слоя (5-6 см) состоял из крупного песка (3 -5 мм). На 10 литров песка добавляли 0,5 литра торфа. Торф использовали из сфагнового мха. Субстрат постоянно подпиливался водой из поддона по комкам мха сфагнума. Мох не позволял распространяться в воде гнилостным бактериям. Высокая влажность воздуха в микротепличках обеспечивала необходимый тургор у листьев черенков. Для уменьшения вероятности перегрева черенков и почвенного слоя, внутри полиэтиленового навеса было предусмотрено экранирование их белой тканью, а также клапана для периодического проветривания. Черенки в опытах были высажены по схеме: (5 *5) см. В одной микротегошчке размещалось около 50 черенков. Закладку опыта проводили в конце мая 1986 года, в соответствии с правилами зеленого черенкования (Поликарпова, 1981). Укоренению подвергали черенки сортов Жигулевское, Мелба, Пепин шафранный. Из нижней части побега черенки были деревянистыми, а из верхней травянистые, Деревянистые и травянистые черенки обрабатывались одинаковыми стимулирующими корнеобраэование растворами, но высаживались раздельно. Обработку всех черенков проводили водным раствором смеси (флоризин + ИМК) с концентрацией 0,3 + 0,05 г/л, аналогично тому

как это делалось с черенками подвоя 54 - 118, Заполненные черенками кор-необразователи ставили под солнечное освещение. У деревянистых черен-

Рис.8, Установка для укоренения зеленых черенков (корнеобразователь): I - деревянный ящик; 2 - полиэтиленовая пленка; 3 - вода; 4- мох «сфагнум»; 5 - сетка; 6 - субстрат (крупный речной песок); 7 - проволочный каркас покрытый пачиэтилеиовой пленкой; 8 - проволочный каркас покрытый белой тканью.

ков на 21- Й день после высадки наблюдалось корнеобразованне. Вместе с этим происходила и гибель части черенков от гниении. Погибли все травянистые, а также все контрольные черенки, которые перед высадкой выдерживались 24 часа базальной частью в дистиллированной воде. Из деревянистых черенков, обработанных раствором ИМК + флоризик, 25% регенерировали корневую систему удовлетворительного качества.

В результате было получено 39 корнесобственных растений сортов Жигулевское, Мелба, Пепин шафранный. Часть из них произрастает и плодоносит по настоящее время Результаты этого опыта показали воз-

можвость укоренения зеленых черенков сортов яблони 8 атмосфере насыщаемой влагой естественным испарением воды.

Глава 5. Оценка силы роста подвоев яблони. В разделе 5.1. отмечено вредоносное для роста растений влияние рентгеновского облучения и тяжелых металлов.

В разделе 5.2. приводится обоснование того, что эндогенным фактором оценки силы роста подвоев яблони является количественное содержание флоризина в коре зоны перехода корней в стебель. Изучением содержания флоризина в различных органах и частях растений яблони, привитых на различные по силе роста подвои, а также в корневой системе растений первого поля питомника, полученных отводками от карликовых хлоновых подвоев таких как: парадизка Будаговского (ПБ); М-26; 62-396;70-20-21;64-154;76-8-1; тлукарликовых подвоев: 54-118; 64-174; М-3; средаерослых: 57-490; 70 - 20 - 20; в корневой системе высокорослого кленового подвоя яблони (ВКЯ) и сеянцев Антоновки, Северного синапа, Уэлси, Мартов««« показано, что подвои яблони, отличающиеся большей слаборослостью, имеют повышенное содержание флоризина в корневой системе. Флоризнн по корневой системе распределяется неравномерно. У придаточных корней первого порядка ветвления содержание флоризина в 2,5 - 3,0 раза выше, чем у корней второго порядка, В коре корней флоризина в 7 — 8 раз больше, чем в древесине, В коре по длине корня наблюдается градиент распределения флоризина. Так у основания корней, в коре места примыкания их к главному корню, содержание флоризина выше, чем в периферийной части корня. Корневые волоски флоризина не содержат.

Установлено, что у растений любых форм подвоев яблони наибольшее удельное содержание флоризина имеется в коре перехода корневой системы в стебель. Морфологически зга зона имеет особенности, которые являются промежуточными по сравнению с чертами присущими стеблю и корню. Это наиболее зрелая часть растений. Ее легко опреде-

лить анатомически. Из табл.9 видно, как изменяется содержание флори-зина в коре участков, соседних с местом перехода корней в стебель. Место перехода корней в стебель - технологически рациональный и физиологически эффективный участок растений яблони доя их сопоставления по удельному содержанию флоризина при диагностике и селекции на сипу роста.

Показало, что на уровень содержания флоризина в корневой системе яблони помимо генетического фактора влияют условия получения корнесобственных растений и сезон отбора проб для анализа.

9. Содержание флоризина в месте переходе корень — стебель (октябрьХ данные за 1994, 1995 гг.

Форма подвоя Содержание флоризина, % от сухой массы

в коре, 2 см вверх от перехода корень - стебель в коре, перехода корень - стебель в коре 2 см ниже от.перехода корень -стебель

54 -118 12 20 18

64 - 396 14 22 23

П Б 13 23 22

Сеянцы Антоновки обыкновенной 8 12 11

В разделе 5.3. дано описание способа оценки силы роста подвоев яблони (Пат. №2192118 1Ш-2002), разработанного на основании исследования особенностей распределения флоризина ш корневой системе. Оценку силы роста лодвоев по процентному содержанию флоризина в сухой коре зоны перехода корней в стебель следует проводить в периода вхождения растений в вынужденный покой и нахождения в нем, когда февольные соединения в наибольшей мере скапливаются в корневой системе. О силе роста судят по результатам сравнения содержания флоризина у испытуемого подвоя яблони и стандартных (табл. 10). Испытуемый подвой относят по силе роста к той группе, от стандарта которой он в меньшей мере отличается по величине содержания флоризина. Испытуемые и стандартные растения следует выращивать в одинаковых

почвенно-кляматических условиях. В качестве стандарта используют растения подвоев с известной силой роста.

Из табл. 10 видно, что содержание флоризина в коре места перехода корней в стебель у подвоев 62-396; 64-154; 76-8-1 в большейоте-

10. Сила роста подвоев яблони н содержание флоризина в сукой коре зоны перехода корней в стебель, данные за 1994,1995 гг

Стандартный подвой Сила роота стандартного подвоя Содержание флорнзн-на в -reliar вес Испытуемый подвой Содержание флоризина в испыт. подвое в %-вес Сила роста испытуемого подвоя Ora, ошибка в

П. Б. М-26 карликовый карликовый 23-25 23-25 64-154 76-8-1 ""23-26 23-24 25,0 карликовый карликовый карликовый 1-2

54-118 полухарли-ковый 19-23 ' 60-ГО" М-3 20-23 полукарликовый 1-2

57-490 среднерослый 17-19 70-20-20 17-18 среднерослый 1-2

сеянцы Антоновки обык-но-вевиой сильнорослый 10-14 сеянцы Северный синап Уэлси Мартовское ВКЯ 9-10 10-12 10-11 11-12 сильнорослый сильнорослый сильнорос- льш сильнорослый 1-2 1-2

пени приближается к таковому у карликовых подвоев ПБ и М.26. Следовательно, подвои 62-396; 64- 154; 76-8-1-тоже карликовые. Согласно проведенному сравнению подвои 60 - 174, М — 3 - полукардико-вые; 70 - 20 - 20 - среднерослый, сеянцы Северного синапа, Уэлси, Мартовского и ВКЯ - силыюросдые.

Эффективность оценки силы роста подвоев по уровню содержания флоризина в зоне корень - стебель подтверждается сопоставлением с показателями оценки силы рост других известных способов, например, способа, связанною с учетом длины корневых волосков (Муромцев, 1969), и способа, основанного на определении соотношения цораЛ древесина (ВеакЬапе, ТЬошзоп, 1974) (табл. 11). Упомянутыми способами-быш проведены измерения показателей силы роста у двухлетних растений от

12 фор* трех групп подвоев: карликов, полукарликов и сильнорослых. Растения выращивались в одинаковых почвенно - климатических условиях. Для каждой формы подвоя проводилась серия измерений показателей от 4 - х растений. У каждой серии измерений, в соответствии с правилами статистической обработки результатов наблюдений, определилось среднее значение показателей - признаков силы роста.

Между содержанием флоризина в сухой коре зоны корневой шейки и длиной корневых волосков наблюдается обратная корреляционная связь (г = -0,69), то есть увеличению длины корневых волосков соответствует уменьшение содержания флсршина. При величине выборки п = 12 эта связь существенна при 5%-ном уровне значимости, так как рассчитанный коэффициент существенности корреляции превышает стандартное значение критерия 1 (критерия Стьюдента), т.е. Ц = 3,04 > = 2,2,

11.Сопоставление различных показателей силы роста подвоев яблони

Подвои Длина корневых волосков, мкм Отношение кора/древесина в срезе корня Содержание флоризина в сухой коре корня, %

карлики

62-396 ПБ 57-491 70-20-21 73 ± 5 86 ± 5 90 ± 5 82 ± 5 1,86 ± 0,05 1,66 ± 0,05 1,70 ± 0,05 1,34 ±0,05 23 ± 1 23 ± 1 19 ± 1 21 ± 1

полукарлики

54-118 57-490 71-3-195 60-174 97 ± 5 104 ± 5 116± 5 99 ± 5 1,04 ± 0,05 1,09 ± 0,05 1,21 ± 0,05 1,51 ± 0,05 18 ± 1 18 ± 1 17 ± I 17 ± 1

сально рослые

70-20-20 А2 сеянцы Антоновки обыкн. сеянцы Чуланов-ки 116 ± 5 124 ± 5 245 ± 5 195 ± 5 0,96 ± 0,05 0,70 ± 0,05 0,56 ± 0,05 0,60 ± 0,05 15 ± 1 12 ± 1 14 ± 1 13 ± 1

Коррелящюнная взаимозависимость между содержанием флоризина в юре зоны корневой шейки и отношением в корнях мэра/древесина является прямой и более тесной, т. к. рассчитанный коэффициент корреляции равен г = 0,81. Коэффициент существенности корреляции при вели-

чине выборки п = 12 превышает стандартное значение критерия t, соответствующее 1%-ному уровню значимости, т.е. Ц = 4,25 > toi = 3,2. В основе механизма корреляции между биохимическими и разными анатомическими признаками сипы роста, по нашему мнению лежит ингиби-рующее действие флоризина. При увеличении его концентрации в коре корней ингибирующее действие на рост корневых волосков и образование древесины усаливается. Из этих сопоставлений следует, что эндогенное содержание флоризина в коре корневой системы может быть достаточно доказательным признаком для классификации подвоев яблони при. селекции на силу роста.

Проведено исследование содержания флоризина в коре зоны корневой шейки 37-и 2-летних гибридных сеянцев подвоев яблони, имеющих различную высоту. Вычисленный по результатам измерений коэффициент корреляции между высотой растений и содержанием флоризина в коре перехода корней в стебель превышает величину 0,7, но с обратным знаком (г = - 0,78). Это означает; что между рассмотренными признаками существует тесная обратная корреляционная связь. По результатам определения из 37-и сеянцев выделены три растения наиболее перспективных в отношении сдержанного роста.

Глава 6. Экономическая эффективность содержания, определения я выделения флоризина. В разделе 6.1. отмечена повышенная производственная эффективность садов на подвоях с высоким содержанием флоризина.

В разделе 6.2. путем расчета затрат на реатешы, стеклопосуду, оборудование, электроэнергию, оплату труда показано, что стоимость анализа растительных тканей на содержание флоризина методом автора по прямым затратам на 55% дешевле, а по скорости выполнения в 30 раз быстрее ранее известных.

В разделе 6.3. расчетом себестоимости из затрат на реактивы, стеклопосуду, оборудование, электроэнергию и оплату труда для выделе-

ния 500 г природного флоризива из ш€еп>в яблони я сопоставлением ее со стоимостью реализации флоризива по ценам каталога-справочника 2002 - 2003 SIGMA «Реактивы для биохимии и исследования в области естественных наук» стр. 1617 определено, что уровень рентабельности получения природного флоризина может составить более 300%.

Выводы

1, Жизнедеятельность генеративных структур яблони, формирование признака самоплодности ее сортов и силы роста ее подвоев связаны с уровнем содержания водорастворимых веществ в пыльце, флоризина в пестиках и корневой системе.

2. Оценка склонности сортов яблони к самоплодности физиологически основана на определении массовых долей водорастворимых веществ в пыльце и флоризина в пестиках. У склонных к самоплодности сортов яблони 46 - 55 % массы пыльцевых зерен приходится на водорастворимые вещества. Пьшьш самобесплодных сортов таких веществ содержит 37 - 40%. Столбики сортов яблони, склонных к самоплодности, содержат 9 -14% флоризина от сухой массы, самобесгогодных 16-23%. В основаниях сухих столбиков цветков самоплодных сортов яблони содержание флоризина составляет 14-20%, самобестодных 26-32%.

3. Обобщающими показателями склонности сортов яблони к самоплодности являются отношения: 1.) массовой доли водорастворимых веществ

пыльцы к массовой доле флоризина в сухих столбиках-V = 2.) мае-

совой доли водорастворимых веществ пыльцы к массовой доле флоризина в основаниях сухих столбиков - R=—. У сортов склонных к само-

Cq

плодности, эти отношения находятся в пределах: V=3,3 - 5,8; R=2,3 - 3,6; у самобесплодных сортов: V=],5 -1,7; R=l,l -1,6.

4, Для оценки склонности сортов яблони к самоплодности разработав способ определения содержания водорастворимых веществ в пыльце рас-

тений, основанный на спектрофотометричесиам анализе растворов и

применении формулы ■(*> составленной для расчета массовой

fga* А

доли растворимых веществ пыльцы.

5. Водорастворимые вещества пыльцы яблони, погаощающие ультрафиолетовое излучение в пределах 240 - 360 нм с = 270 нм, определены как смесь производных никотиновой кислоты и флавонола изоремнетина.

Производные никотиновой кислоты являются обязательной компонентой живых клеток. Они играют роль шферментов реакций, обеспечивающих клетки энергией.

Производные флавонола изорамнетина являются специфическими компонентами состава пыльцы, Им присуща роль субстрата для начального прорастания пыльцевых зерен, а также роль активаторов окисления флавоноидов, содержащихся в пестиках, чем обеспечивается дальнейшее прорастание пыльцевых трубок в пестиках до завязи. У яблони производные флавонола иэорамнетина, содержащиеся в пыльце, активируют окисление флоризина, содержащегося в пестиках. Активирование окисления флоризина происходит при высоком содержании флавонола, т.е. когда в месте роста пыльцевых трубок на одну молекулу флоризина имеется не менее одной молекулы флавонола. В этом случае под действием ферментов пыльцы и пестиков происходит образование полимерных продуктов для роста пыльцевых трубок. При избытке молекул флоризина, под его действием, происходит ипгибирование деятельности ферментов, полимерных продуктов не образуется и рост пыльцевых трубок прекра* щается.

6. Для оценки силы роста подвоев и склонности сортов яблони к само-плодности, разработан способ (Пат. 2115291 RU, 1998) ускоренного количественного определения флоризина, который выполняется в 30 раз быстрее ранее известных.

7. Впертые установлено, что содержание флоризина, основного феноль-нош вещества яблони, по длине пестиков яблони увеличивается от рыльца к основанию в соответствии с закономерностью:

8. Экзогенный флоризин на искусственной питательной среде при коп-

иях яблони, угнетает прорастание пыльцы и разрушает ее. Это свидетельствует о существовании особых физиологических свойств у свободного флоризина по сравнетпо со связанным в живых растительных тканях.

9. Флоризин из водных растворов активно хемосорбируется базальной частью зеленых черенков. При совместном содержании в растворах флоризин способствует поглощению базальной частью зеленых черенков индол илуксусной и индолилмасляной кислот. Применяющийся в смеси с индол илухсусной и индолилмасляной кислотами флоризин улучшает корнеобр&зо ванне у зеленых черенков полукарликового подвоя 54 - 118 и сортов яблони Жигулевское, Мелба, Пепин шафранный. При использовании стимулирующего влияния флоризина получены корнесобственные растения сортов яблони: Жигулевское, Мелба, Пепин шафранный. Укоренение их зеленых черенков проведено на разработанной для этой дели установке, создающей высокую влажность атмосферы естественным испарением воды.

10. Оценка силы роста подвоев яблони заключается в измерении содержания флоризина в коре зоны перехода корней в стебель диагностируемых растений и сопоставлении их по этому показателю с растениями того же возраста стандартных подвоев. Анализируемый подвой относят по силе роста к той группе стандартов, от которой он в меньшей мере отличается по величине содержания флоризина (Пат. Хз 2192118 РШ,

центрациях в 10* - 105 раз меньших, чем удельное содержание его в тха-

2002).

Кора яблони имеет наибольшее удельное содержание флоризина в зоне перехода корней в стебель (корневая шейка). Карликовые формы подвоев в ювенильном возрасте в этой зоне имеют 23 - 25 % флоризина, полукерликовые - 19 - 23 %; среднерослые 17 — 19 %; и силыюрос-лые подвои содержат 10-14 % флоризина от массы сухой коры.

11. Выявленные эндогенные факторы генеративных структур и корневой системы яблони позволяют определить перспективы новых исследований по диагностике самоплодности и силы роста других плодовых культур, а также перекрестной совместимости между их сортами и видами.

12. Разработай способ препаративного выделения флоризина из коры яблони (Пат, Ха 1309539 1Ш, 1993). Расчетный уровень рентабельности получения флоризина из коры побегов яблони составляет более 300%.

Рекомендации для селекции н производства

Рекомендуется проводить предварительную оценку самоплодности сортов яблони определением массовых долей водорастворимых веществ в пыльце (п), флоризина в столбиках (Се) и их основаниях (С„). Склонными к самоплодности следует считать сорта, имеющие отношения

V И К ~~рг в пределах У=3,3 - 5,8; 11=2,3 - 3,6. Такой анализ позволит биохимически обосновать возможность проявления склонности данного сорта в данных условиях к самоплодности.

При закладке промышленных садов, для обеспечения стабильно высокой завязываемости плодов, следует использовать сорта с малым содержанием флоризина в столбиках (17 % от сухой массы и менее) и высоким содержанием водорастворимых веществ в пыльце (46 % и более).

Селекцию подвоев и сортов яблони на силу роста рекомендуется проводить путем определения количественного содержания флоризина в коре зоны перехода корней в стебель. Этот показатель сопоставляют с

аналогичным показателем стандартных растений с известной силой роста. Анализируемые подвои и сорта по силе роста относят к той группе стандартных растений, показатели которых им наиболее близки.

Однолетние побеги, отделённые от деревьев яблони при их обрезке, могут быть использованы для получения дорогостоящего природного фешльного глюкозида флоризина.

Список опубликованных работ

1. Палфигов В.Ф,, Лоскутов АН, КузинИ.А., КоттВ.Н, О возможности применения фторсодержащих углеродных адсорбентов для хроматографии. //Коллоидный журнал, 1974 -том XXXVI, № 4, с.802 -803 (0,15),

2. Жуков О.С., Палфигов В.Ф. Перспективные использования микроэлементов в разработке вопросов генетики и селекции плодовых растений. Спектральное определение микроэлементов в почве и кормах и биологических объектах. //Сб, (Тезисы докладов) 1-оЙ Тамбовской областной конференции 30-31. X. Тамбов 1975- с. 21-22 (0,15),

3. Кузин И.А., Палфигов В.Ф., Лоскутов А.И. Исследования повышения гядрофобности углеродных адсорбентов путем химической модификации их фторолефинами. //Сб. Углеродные адсорбенты и их применение в промышленности № 4. Пермь 1975- с, 13-22 (0,56).

4. Лоскутов А.И,, Битюгов А.Ю., Палфигов В.Ф. Поглощение паров воды углеродными адсорбентами модифицированными теграфторэтиле-ном. //Журнал прикладной химии. 1978- Ла 11. 2605 - 2608 (0,25).

5. Жуков О.С., Палфигов В.Ф., Осипова Л .В. Содержание пигментов в листьях радиомугантов алычи и вишни. //Бюллетень науч. Инф. ЦГЛ им. И. В. Мичурина. 1976 - вып. 27. С. 10 - Н (0,25).

6. Курсаков Г.А., Палфигов В.Ф., Курсакова Л.Е., Абрамова И.В. Содержание пигментов в листьях спонтанных почковых мутаций вишнечерешневых гибридов. //Бюл. научн, инф, ЦГЛ им. ИВ.Мичурина 1976 -вып. 27. С. 15- 18 (0,20).

7. Палфитов В.Ф. Спектрофотометрический аналдо экстрактов пыльцы и пестиков яблони. //Тез. докл. обл. науч. конференции Мичуринск 1983 - с. 52 (0,06).

8. Палфитов В.Ф. О содержании флоризина в пестиках цветков яблони. //Тез. докл. Тамб. обл. науч. конференции. Мичуринск, 1985 -с. 16 (0,06).

9. Палфитов В.Ф. Способ выделения флоризина из коры побегов яблони, Авт. евид-во № 1309539 от 18.04. 85. (0,25).

10. Палфитов В.Ф. О влиянии флоризина и стимуляторов роста на укоренение зеленых черенков яблони, //Достижения с.-х. науки развитию агропромышленного комплекса. Тез. докл. к обл. науч. конференции 24. VII. Мичуринск 1988-0. 35-37 (0,15).

11. Палфитов В.Ф., Баранова А.И. Влияние флоризина на прорастание пыльцы в искусственных условиях. //Достижения с.-х. науки развитию агропромышленного комплекса. Тез. докл. к обл. науч. конференции 24, УЛ. Мичуринск 1988 - с. 33-35 (0,15).

12. Палфитов В.Ф, Патент РФ Ха 1309539 на изобретение способ получения флоризина из коры побегов яблони 1993 (0,25).

13. Палфитов Б.Ф., Бородина О.М., Баранова АН. О накоплении хрома в томатах. //Повышение э ффегтивности сельскохозяйственного производства: опыты и проблемы. Тез. докл. обл. н. п. к. ноябрь Мичуринск, 1993 -с. 60 - 62 (0,12).

14. Палфитов В.Ф., Бородина О.М., Баранова ЛИ. О концентрации хрома в плодах томатов. //Вопросы региональной экологии. 1. - обл. и. т. к. Тамбов, 1993-с. 28 (0,06).

15. Потапов В.А., Палфитов В.Ф., Тарасов А.М. Флсризин и сила роста подвоев яблони. //Науч. обеспеч. агропром-ого комплекса в условиях перехода к рыночным отношениям Тез. докл. науч. хонф. проф.-преаод. состава, научныхсотруд. иаспиреиотов 12-15апреля Мичуринск, 1994-с. 91(0,6).

16. Палфитов В.Ф., Баранова А.И., Минаева Л.М., ФирсоваТ. М„ Сма-гива В.Ф. Инкорпорация хрома, никеля и свинца растениями томатов.

//Научная обеспечение агромпром. комплекса в условиях перехода к рыночным отношениям. Тез. докл. и. к, профпреп. состава науч. сотр. и аспирантов. Мичуринск, 1994 - с. 115-116 (0,12).

17. Палфигов В,Ф., Баранова А.И., Минаева JI.M,, ФирсоваТ. М., Сма-гива В.Н. Инкорпорация хрома, никеля и свинца растениями огурца. //Научная обеспечение атромпром. комплекса в условиях перехода к рыночным отношениям. Тез. докл. н. к. проф,- преп. состава науч. сотр. и аспирантов. Мичуринск, 1994 - с. 118-119 (0,12).

18. Тарасов A.M., Палфигов В.Ф., Потапов В.А. Содержание флоризина в корнях подвоев яблони разной силы рскпа. //Повышения эфек-ги аг-ропром. производства в условиях современных форм хозяйствования. Тез. докл. международной науч. - практич. конф.. молодых ученных и специалистов. Часть II Воронеж, 1995-с. 31-32 (0,12).

19. Палфигов В.Ф., Баранова А.И., Минаева JI.M., Фирсова Т.М., Оси-пова Т.А., Смагина В.Н. Усвоение хрома, никеля, свинца из почв томатами. Вопросы региональной экологии. //Тез. докл. обл. н.т.к. Мичуринск, 1995-35-36 (0,12)

20. Палфигов В.Ф., Тарасов A.M. О флоризине. Сельскохозяйств. производство . н высшая школа на переломном этапе реформирования. //Материалы обл. науч. практ. конф. 21-22. марта Сб. 2 Плодоводство часть I Мичуринск 1996-с. 48-49 (0,12),

21. Тарасов A.M. Палфигов В.Ф. Распределение флоризина в корнях клоновых подвоев яблони. //Сельскохозяйств. производство и высшая школа на переломном этапе реформирования. Материалы обл, науч. практ. конф. 21 - 22. марта Сб. 2 Плодоводство часть I Мичуринск, 1996-с. 50-51 (0,12).

22. Палфигов В.Ф., Бадина JI.E. Влияние хрома (III) на рост зеленого пера из лука - репки, //Сельскохозяйств. производство и высшая школа на переломном этапе реформирования. Материалы обл. науч. практ. конф. 21-22. марта Сб. 3 Овощеводство Мичуринск, 1996-с.58-59 (0,12)

23. Палфитов В.Ф., Тарасов А.М. Методика количественного определения флоризина. //Пути повышения эффективности произв., хран. и пере-раб, растеневод. продукции. Сб. науч. трудов к 85-летию гос. агроуни-версигета (ВГАУ). Воронеж, 1997-с. 117-118 (0,12).

24. Тарасов А.М. Палфитов В.Ф. Диагностика подвоев яблони на силу роста. //Слаборос. клон, подвои в садоводстве. Сб. научных трудов Мичуринск, 1997- с. 58-59 (0,12).

25. Палфитов В.Ф„ Тарасов А.М. Ускоренный метод определения флоризина. //Слаборос. клон, подвои в садоводстве. Сб. научных трудов Мичуринск 1997-с. 59-60 (0,12),

26. Палфитов В.Ф. Препаративное выделение флоризина из коры побегов яблони, Слаборос. клон, подвои в садоводстве. Сб. научных трудов Мичуринск 1997- с. 60-61 (0,13).

27. Палфитов В.Ф., Тарасов А.М. Количественное определение флоризина в тканях растений //Progresul tehnicostüntifíc in pomicultura materí-alele simposiunulni tintific intemational Dedicot membrutoi - correspondent al academici de stunte al republicii Moldova Gherasim rndi - 90 de la mastere 1-5 montie 1997. Chisman, 1997-c. 41 (0,06).

28. Палфитов В.Ф., Потапов BA., Тарасов А.М. Способ количественного определения флоризина. Патент РФ № 2115291 1998 (0,70).

29. Палфитов В.Ф., Потапов В.А, Тарасов АМ Способ количественного определения флоризина, //Бюл. Открытия, изобретения, промышленные образцы, товарные знаки, 1998 -Хе 20 (0,11)

30. Палфитов В.Ф., Тарасов А.М. Содержание флоризина н отбор слаборослых растений яблони. //Высшая школа и проблемы науч. обеспеч. агропром. комплекса. Материалы конференции МГСХА Часть 1 Мичуринск 1998 с. 41-42 (0,13)

31. Палфитов В.Ф. Слаборослость подвоев яблони и содержание флоризина в зоне перехода корней в стебель. //Слаборослое садоводство.

Сб. докл. международной науч. прекгич. конф, МГАУ 23 - 24. VI. Часть II Мичуринск, 1999-с. 26-28 (0,12).

32. Тарасов А.М., Палфитов В.Ф. Сопоставление признаков силы роста подвоев яблони. //Интенсивное сад-во. Материалы междунар. н.-п. конф. молодых уч-ых. поев. 145-летию со дня рожд. И. В, Мичурина и 90-летию проф. В, И, Будаговскоп» 6-8. IX. Часть I Мичуринск, 2000 - с. 42-43 (0,13).

33. Тарасов А.М, Верзилин A.B., Палфитов В.Ф. Особенности строения корневой системы подвоев яблони различной силы роста. //Проблемы сельскохоз. произв. в изменяющихся эконом, и экологических условиях XXI в веке. //Международная науч практ. конф. Сб. материалов Пенза, 2000-е. 12-14 (0,12>

34. Палфитов В.Ф. Биохимическая диагностика репродуктивных и вегетативных особенностей яблони. //Вестник МячГАУ том 1 № 1 серия: плодоводство, цветоводство, овощеводство Мичуринск, 2001- с, 115 -123 (0,50).

35. Палфитов В.Ф., Потапов В.А., Тарасов A.M. Способ диагностики силы роста подвоев яблони. Патент РФ на изобретение №2192118 2002 (0,40).

36. Палфитов В.Ф., Потапов В.А. Тарасов А.М Способ диагностики силы роста подвоев яблони. //Бюл. Открытия, изобретения, промышленные образцы, товарные знаки.-2002-№31 (Пч.) с. 288-289 (0,1).

37. Палфитов В.Ф. Количественное определение флорнзина. //Актуальные проблемы современной науки. Изд. «Компания Спутник +» - 2003 - № 3 с. 215-219 (0,50).

38. Палфитов В. Ф. Особенности пестиков самоплодных и самобесплодных сортов яблони. //Актуальные проблемы современной науки. Изд. «Компания Спутник +» - 2003 - № 3 с. 225-229 (0,50).

39. Палфитов В, Ф. Определение содержания водорастворимых веществ в пыльце яблони. //Актуальные проблемы современной науки. Изд.

«Компания Спутник +» - 2003 - № 3 с. 220-224 (0,50), «

40. Палфитов В. Ф. Препаративное получение флоризина. //Естественные технические науки. Изд. «Компания Спутник +» - 2003 -№3 о 41-42(0,50).

41. Палфитов В. Ф. Способ определения силы роста подвоев яблони. //Садоводство и виноградарство - 2003 - Jfe 3 с. 12-13 (0,40).

42. Палфитов В. Ф. Опыт получения корнесобственкых деревьев яблони. //Садоводство и виноградарство - 2003 - №4 с......... (0,40).

43. Палфитов В. Ф. Склонность сортов яблони к самоплодности. //Аграрная наужа - 2003 - Jfe 4 с. 28-29 (0,35).

44. Палфитов В. Ф. Оценка самоплодности яблони по эндогенным факторам. //Сб. матер- Международ, ваучно-методич. конф. "Роль сортов и новых технологий в интенсивном садоводстве" - Орел, 2003 - с. 255-257 (0,20).

45. Палфитов В.Ф., Потапов ВА. Тарасов AM. Оценка силы роста подвоев яблони. //Международ научно-методич. конф. "Роль сортов и новых технологий в интенсивном садоводстве" - Орвл, 2003- с. 258-266 (0,20).

46. Палфитов В.Ф. Факторы оценки самоплодности яблони. //Международ, научно-методич. конф. «Проблемы устойчивого развития садоводства Сибири» - Барнаул, 2003 - с, (0,30).

47. Палфитов. В. Ф. Диагностика самоплодности сортов и силы роста подвоев яблони: Монотрафия. Мичуринск: Изд. МГАУ, 2003.- 198 с (11,5).

Отпечатано в типографии МичГАУ Лицензия ПЛД № 73- 30 от 24 сентября 1998 года Подписано в печать 22.07.03. г. Формат 60x84 '/ к. Бумага офсетная № 1, Усл.печ.л. 2 Тираж 100 экз. Ризограф Заказа 10614

Мичуринский государственный аграрный университет 393760, Тамбовская обл., г. Мичуринск, ул. Интернациональная, 101, тел. +7 (07545) 5-26-35 E-mail: mpaufifornichru

о/Ч-

■H 4 О 5 9