Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Оценка эффективности методик отбора устойчивых к прорастанию на корню форм озимой тритикале

ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Оценка эффективности методик отбора устойчивых к прорастанию на корню форм озимой тритикале"

На правах рукописи

БАЖЕНОВ МИХАИЛ СЕРГЕЕВИЧ

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ МЕТОДИК ОТБОРА УСТОЙЧИВЫХ К ПРОРАСТАНИЮ НА КОРНЮ ФОРМ ОЗИМОЙ ТРИТИКАЛЕ

Специальность 06.01.05 - селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений

- 8 НОЯ 2012

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 2012

005054527

Работа выполнена на кафедре селекции и семеноводства полевых культур и в научно-образовательном центре молекулярной биотехнологии Российского государственного аграрного университета - МСХА имени К. А. Тимирязева

Научный руководитель:

доктор биологических наук Пыльнев Владимир Валентинович Официальные оппоненты:

Медведев Анатолий Михайлович доктор сельскохозяйственных наук, член-корреспондент РАСХН, профессор, Российская академия сельскохозяйственных наук, отделение растениеводства, академик-секретарь

Соловьёв Александр Александрович доктор биологических наук, профессор, Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К. А. Тимирязева, кафедра генетики и биотехнологии, заведующий кафедрой

Ведущая организация:

ГНУ Московский НИИСХ «Немчиновка» Российской академии сельскохозяйственных наук

Защита состоится «14» ноября 2012 г. в 14 час. 30 мин. на заседании диссертационного совета Д 220.043.10 при Российском государственном аграрном университете - МСХА имени К. А. Тимирязева по адресу: 127550, г. Москва, ул. Тимирязевская, д. 49. Факс (499) 976-24-92, e-mail: genetics@timacad.ru

С диссертацией можно ознакомиться в Центральной научной библиотеке имени Н.И. Железнова РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева

Автореферат разослан « 12 » октября 2012 г. и размещён на сайте университета wwYv.timacad.ru

Ученый секретарь

диссертационного совета

JI.C. Большакова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследований. Основными направлениями использования тритикале являются производство фуражного зерна и зелёной массы. Мука из зерна тритикале может быть использована для производства хлебобулочных изделий, а также диетического питания - хлебцев, хлопьев. Низкое качество изделий, получаемых из чистой муки тритикале, часто объясняется слабой клейковиной, плохой набухаемостью крахмала и повышенной активностью гидролитических ферментов. Отчасти это является следствием предуборочного прорастания зерна в колосе, которому подвержены многие современные сорта почти во всех регионах возделывания этой культуры. Предуборочное прорастание в колосе также сокращает долговечность семян при хранении. Таким образом, создание сортов тритикале, устойчивых к предуборочному прорастанию зерна в колосе, является актуальной задачей селекции.

Степень разработанности проблемы. Чаще всего отбор на устойчивость к предуборочному прорастанию зерна ведут путём оценки образцов с помощью различных методик искусственной провокации прорастания (Беркутова, 1982; Flamme, 1991; Нгуен, 2011; Bizova, 2011). Отбор из генетически полиморфных популяций по отдельным растениям, колосьям и зерну используется реже, но также является эффективным (Hucl, 1995).

В связи с низкой наследуемостью устойчивости к прорастанию зерна в колосе и трудоёмкостью её оценки считается перспективным поиск молекулярных маркеров данного свойства. У гексаплоидной тритикале молекулярному маркированию устойчивости к прорастанию зерна в колосе посвящено мало работ. Известно о связи данного свойства с R/D-хромосомными замещениями, состоянием гена Vp-1B, микросателлитным маркером XgwmlSS (Rybka, 2003; Майер, 2011).

Прорастание зерна в колосе тритикале сильно зависит от погодных условий (Нгуен, 2011). Однако специальных исследований влияния погодных условий на покой семян у данной сельскохозяйственной культуры не проводилось.

Цель и задачи исследований. Целью работы является изучение генетического и средового контроля покоя семян как показателя устойчивости к предуборочному прорастанию зерна в колосе гексаплоидной озимой тритикале, а также оценка эффективности отбора с помощью молекулярных маркеров в сравнении с отбором по фенотипу на устойчивость к предуборочному прорастанию.

В задачи исследования входило:

1. Определение влияния температуры, осадков, полива и азотной подкормки на покой семян тритикале по данным полевых и вегетационных экспериментов.

2. Скрининг коллекции озимой тритикале кафедры селекции и семеноводства полевых культур по 2Я/20-замещению и аллельному состоянию гена ШИ (ЯЫ-В1).

3. Оценка влияния 2Ш2Б-хромосомного замещения на покой семян, элементы зерновой продуктивности и морфологические параметры растений тритикале.

4. Оценка влияния гена Ш1 {Ш-В1) на покой семян, элементы зерновой продуктивности и морфологические параметры растений тритикале.

5. Определение наследуемости уровня покоя семян по годам.

6. Оценка связи некоторых пшеничных микросателлитных маркеров устойчивости к предуборочному прорастанию с индексом прорастания у озимой тритикале.

7. Поиск морфологических маркеров устойчивости к прорастанию зерна в колосе.

8. Определение эффективности отбора с помощью маркеров. Научная новизна исследований. В результате работы впервые

показан характер влияния температуры воздуха и увлажнения почвы в период от цветения до созревания зерна на покой семян тритикале.

Впервые показана распространённость аллеля низкостебельности ЯЫ-В1Ъ и 2КУ2Б-замещения среди образцов гексаплоидной озимой тритикале различных регионов происхождения.

С помощью молекулярных маркеров на рекомбинантных линиях изучено влияние 2Ы/2В-замещения и аллелей гена ЯЫ-В1 на покой семян, высоту растений и элементы зерновой продуктивности озимой тритикале.

Впервые на тритикале установлена связь устойчивости к мучнистой росе с микросателлитным маркером Хтл>тс104.

Положения диссертации, выносимые иа защиту:

1. Влияния температуры, осадков, полива и азотной подкормки на покой семян тритикале, наследуемость индекса прорастания зерна по годам.

2. Влияния 2Ш20-хромосомного замещения и гена ЯЫ-В1 на покой семян, элементы зерновой продуктивности и морфологические параметры растений тритикале.

3. Связь покоя семян с выполненностью зерна тритикале.

4. Распространённость аллелей гена КИиВ1 и 211/2В-замещения среди

сортообразцов гексаплоидной озимой тритикале.

Практическая значимость. С помощью ПЦР-маркеров проведён

анализ 134 образцов гексаплоидной озимой тритикале кафедры селекции и семеноводства полевых культур РГАУ-МСХА на наличие 2К/20-замещения и аллелельное состояние гена низкостебельности (аллели а и Ь).

Показано влияние гена ЮгиВ1 и 2К/2Е)-замещения на продуктивность колоса и её элементы, высоту растений, устойчивость к полеганию, выполненность зерна и покой семян, как фактор устойчивости к прорастанию зерна в колосе. Полученные результаты могут быть использованы для планирования селекционной работы (создания модели сорта на генетической основе, подбора пар для гибридизации). Показана связь устойчивости к мучнистой росе тритикале с микросателлитным маркером Хм>тс104.

Достоверность результатов. Эксперименты проведены в соответствии с общепринятыми методическими принципами. Достоверность выводов основывается на статистической обработке данных.

Апробация работы. Результаты исследований были доложены на XI молодёжной научной конференции «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» в ГНУ ВНИИСБ Россельхозакадемии (Москва, 2011 г.), конференции молодых учёных и специалистов в РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева (Москва, 2011 г.), П международной школе-конференции молодых учёных «Генетика и селекция растений, основанная на современных генетических знаниях и технологиях» (Звенигород, 2011 г.), международной летней школе "Биотехнологии в сельском хозяйстве (АдгоВюТесЬ-12)" в РГАУ-МСХА имени К.А. Тимирязева (Москва, 2012 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 печатных работ, из них две - в изданиях, рекомендуемых ВАК.

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 140 страницах и состоит из введения, 3 глав, выводов, рекомендаций производству, списка литературы и приложения. Она содержит 37 таблиц и 8 рисунков. Список использованной литературы включает 197 наименований, в том числе 161 - на иностранных языках.

УСЛОВИЯ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Для оценки связи покоя семян с молекулярными ББИ-маркерами, 2К/20-замещением и аллельным состоянием гена КЫ-В1 использовались

растения F2 (около 70-и на комбинацию) и семьи растений F3 - F4 (40...50 на комбинацию) гибридных комбинаций 21759/97 X Александр, 21759/97 X Fidelio и Александр х Ставропольский 2.

В вегетационном опыте по изучению влияния климатических факторов на покой семян озимой тритикале и некорневой подкормки мочевиной использовали самоопылённые линии 313 (отобрана из сортообразца 21759/97) и 435 (отобрана из сорта Fidelio).

Из четырёх лет исследования 2009-ый год по температуре воздуха был наиболее близок к климатической норме. Период вегетации 2010-го года характеризуется повышенной температурой (на 5...8°С выше среднемноголетних значений) и засухой, создавшейся во время налива и созревания зерна. Температура воздуха в 2011 году была на 3...5°С выше, чем в среднем за много лет наблюдений, а дефицит влаги в этот год приходился на время выхода в трубку и начало цветения растений. Температурные условия 2012 года близки к таковым в 2011 году. В то же время, в 2012 году выпало достаточное количество осадков.

Поиск внутрисортового полиморфизма устойчивости к прорастанию зерна в колосе проводился на пяти сортообразцах: Fidelio, Александр, Ставропольский 2, 21759/97 и №2. Из каждого образца в течение 2008-2009 гг. было получено по 20 линий путём индивидуального отбора. Отобранные устойчивые и неустойчивые к прорастанию зерна в колосе линии испытывались в 2011 г. на делянках площадью 1 м2 в трёхкратной повторности при размещении на поле методом рендомизированных повторений. Степень внутрисортового полиморфизма изучаемых сортообразцов также оценивалась по электрофоретическим спектрам спирторастворимых запасных белков зерна (глиадинов) по методикам Singh (1991) и Шишкиной (2009). Использовалось по 100 зёрен каждого сортообразца.

Изучение гибридных популяций. Гибридизация образцов тритикале проводилась в 2008 году с использованием механической кастрации и ограниченно-свободного опыления. Гибриды F, выращивались в течение 2008-2009 гг. с изоляцией индивидуальных колосьев. В 2010 г. в F2 после колошения на каждой делянке отмечалось по 70 растений с отбором листовой ткани для выделения ДНК. После пожелтения колосья срезались для дозревания в условиях лаборатории. Отмечались морфологические признаки колоса, учитывались элементы его продуктивности, визуально оценивалась выполненность зерна, определялся индекс прорастания (20...25 зёрен с каждого растения).

Осенью 2010 года семена, полученные в результате самоопыления растений F2, были посеяны семьями на однорядковых делянках длиной 1 м с междурядьем 30 см. Учёт большинства параметров в дальнейшем производился по каждой семье в целом. Визуально определялся процент перезимовки, отмечались даты наступления фаз развития растений. Уборка растений (с корнями) в 2011 году производилась после пожелтения колосьев. В снопе проводился подсчёт числа растений и продуктивных стеблей, измерялась высота 10-и случайно выбранных растений. В главных колосьях подсчитывалось число колосков, и измерялась длина колосового стержня, определялась продуктивность колоса, масса 1000 зёрен, выполненность зерна. Две пробы по 100 зёрен использовались для изучения динамики прорастания зерна в чашках Петри.

Исследования в 2012 году проводились по той же схеме, как и в 2011 г. Оценка устойчивости к полеганию проводилась в предуборочный период с использованием шкалы, рекомендованной для государственного сортоиспытания. Оценка устойчивости к мучнистой росе проводилась через неделю после колошения путём визуальной оценки процента поражённой площади поверхности листьев.

Уровень покоя семян оценивался по динамике их прорастания в чашках Петри в течение 14 дней с последующим расчётом индекса прорастания по формуле: ИЛ = (Uxnl + 13xn1+...+lxntt)/(DxN), где щ, п2, ... и/4 - число вновь проросших зерен за первые, вторые и последующие сутки; N - общее число жизнеспособных зерен; D - общее число дней испытания; 14, 13, ..., 1 - веса, данные числам проросших зерен в первый, второй и последующие дни соответственно (Walker-Simmons, 1988). Индекс прорастания варьирует в пределах от 0 до 1, при этом, чем более глубокий покой имеют семена, тем ниже значение данного индекса.

Устойчивость к прорастанию зерна в колосе оценивалась путем подсчета доли проросших зерен в колосьях во влажной камере на 8-ые сутки по методике, предложенной Нгуен T.T.JL (2011). Использовалось по 10 колосьев с каждой делянки опыта.

Исследование влияния климатических факторов на покой семян тритикале проводилось в оранжереях и климатических камерах. В качестве одного из факторов опыта выступал режим полива с вариантами: 1) до 70% полезной влагоёмкости (ПВ) 3...4 раза в неделю, 2) до 40% ПВ 2...3 раза в неделю. В качестве другого фактора - температурный режим в период от цветения до полной спелости с вариантами в 2011 году: 1) +25°С днём, +15°С ночью, 2) +15°С днём, +13°С ночью; в 2012 году - 1) +26°С днём, +19°С

ночью, 2) +18°С днём, +11°С ночью. Освещение - 18 часов в сутки. Проращивание зерна в данном опыте в 2011 году проводилось при +20°С, а в 2012 году - при +25°С. В 2011 году повторность была четырёхкратная, в 2012 году - семикратная.

Исследование влияния некорневой подкормки мочевиной на покой семян тритикале. Использовались линии 313 и 435, выращенные в оранжерее в сосудах. Опрыскивание растений 10%-ным водным раствором мочевины проводилось через 5 и 20 дней после середины цветения. Контрольный вариант опрыскивался водой. Повторность опыта пятикратная.

Выделение ДНК проводилось по методике Bernatzky и Tanksley (1986) с некоторыми модификациями.

Полимеразная цепная реакция (IMP"). Для аллелей гена Rht-Bl использовались праймеры, разработанные Ellis (2002). Дня детекции 2R-хромосомы использовали праймеры к гену Sec2, разработанные Lee (1994). Для амплификации микросаталлитных последовательностей использовались праймеры, найденные в базе данных GrainGenes 2.0 (http://wheat.pw.usda.gov/GG2/index.shtinD. ПЦР проводили на Tetrad 2 Peltier Thermal Cycler (Bio-Rad, США) при условиях, рекомендуемых авторами праймеров. Продукты амплификации разделялись электрофорезом в горизонтальных пластинках 2%-ного агарозного геля с трис-боратным (TBE) буферным раствором с добавлением бромистого этидия при напряжённости электрического поля 6 В/см. В качестве маркера размеров использовали «100 bp Ladder» («Fermentas», Литва). Визуализация результатов электрофореза производилась в ультрафиолетовом свете.

Статистический анализ данных. Наличие связи количественных признаков с молекулярными маркерами устанавливалось методом дисперсионного анализа. Для расчётов использовались данные только гомозиготных по маркеру растений. Связь качественных признаков и признаков, оцениваемых в баллах, с молекулярными маркерами устанавливалась на основе точного теста Фишера. Связь количественных признаков между собой оценивалась методом корреляционного анализа. Использовались пакеты программ Statistica 7, MS Excel 2000, AGROS 2.11 и программы интернет-сайта in-silico.net.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Влияние факторов среды на покой семян тритикале

Эксперимент в климатических камерах проводился в течение двух лет (2011-2012 гг.). В оба года исследования оказалось значимым

взаимодействие факторов «генотип» и «температурный режим выращивания», что указывает на неодинаковую реакцию покоя семян различных генотипов на одинаковые изменения температуры воздуха. Покой семян линии 313 в меньшей степени колеблется под действием внешних условий, чем покой семян линии 435.

В 2011 году эффект генотипа линии тритикале в среднем оказался несущественным (табл. 1). В 2012 году линия 313 в среднем показала меньший индекс прорастания зерна (т.е. более глубокий покой семян), чем линия 435 (табл. 2). В обоих экспериментах многофакторный дисперсионный анализ выявил существенное влияние фактора температуры на покой семян тритикале. Зерно, созревшее при более низкой температуре, обладало более глубоким покоем, чем зерно, созревшее при высокой температуре. Данный результат согласуется с результатами работ, проведённых на пшенице (Б1ес1с1у, 1985).

Таблица 1

Влияние температуры и влажности почвы во время созревания на индекс __прорастания зерна тритикале, 2011 г._

Линия тритикале (генотип) (А) Среднесуточная температура в период созревания зерна, °С (В) Максимальная влажность почвы, % от полезной влагоёмкости (С) Индекс прорастания при 20 °С

313 14,5 70 0,49

40 0,72

22,5 70 0,69

40 0,61

435 14,5 70 0,46

40 0,46

22,5 70 0,84

40 0,80

НСР05 для факторов А, В, С 0,09

НСР05 для взаимодействий А*В, А*С, В*С 0,12

НСР05 для взаимодействия А*В*С 0,17

Таблица 2

Влияние температуры и влажности почвы во время созревания на индекс __прорастания зерна тритикале, 2012 г. _

Линия тритикале (генотип) (А) Среднесуточная температура в период созревания зерна, °С (ВЇ Максимальная влажность почвы, % от полезной влагоёмкости (С) Индекс прорастания при 25 °С

313 16 70 0,10

40 0,14

24 70 0,37

40 0,21

435 16 70 0,23

40 0,25

24 70 0,56

40 0,54

НСРп< для факторов А, В, С 0,05

НСР05 для взаимодействий А*В, А*С, В*С 0,07

НСР05 для взаимодействия А*В*С 0,10

Исследования показали, что влажность почвы во время созревания зерна слегка модифицирует действие температуры на покой семян тритикале. При этом восприимчивость к влажности почвы зависит от генотипа растения. У линии 313 в условиях имитации почвенной засухи высокие температуры в период созревания зерна не так сильно ослабляют покой семян, как при достаточном увлажнении почвы. Для линии 435 влажность почвы в период созревания зерна почти не влияет на индекс прорастания после уборки.

Эффект некорневой подкормки мочевиной, изученный в отдельном эксперименте, оказался несущественным (табл. 3).

Таблица 3

Влияние некорневой подкормки мочевиной на покой семян тритикале, 2012г.

Линия Вариант обработки Индекс прорастания, 25°С

313 Контроль (вода) 0.36

Мочевина через 5 дней* 0,36

Мочевина через 20 дней* 0,24

435 Контроль (вода) 0,71

Мочевина через 5 дней* 0,74

Мочевина через 20 дней* 0,73

НСР05 (линия) 0,07

НСРпч (вариант обработки) 0.09

НСР05 (взаимодействие) 0,12

* - дней после цветения

Нами определено существенное различие в чувствительности зародышей зерна, не прошедшего период послеуборочного дозревания, к абсцизовой кислоте (АБК) у линий 313 и 435. У линии 313 на растворе АБК (5 мкМ) зародыши прорастали существенно медленнее, чем на дистиллированной воде. Некорневая подкормка мочевиной не оказала существенного влияния на чувствительность к АБК зародышей линии 435. Для линии 313 отмечено существенное снижение чувствительности зародышей к АБК под действием подкормки через 5 дней после цветения.

В течение 2009-2012 гг. нами проводилась оценка уровня покоя семян сортообразцов озимой тритикале, участвовавших в исследованиях по изучению внутрисортового полиморфизма и послуживших материалом для гибридологического анализа устойчивости к прорастанию зерна в колосе. Из них относительно глубоким покоем семян обладали образцы Александр, 21759/97 и №2. Образцы Ставропольский 2 и Fidelio отличались слабым покоем семян (табл. 4).

Характеристика сортообразцов по индексу прорастания

Таблица 4

Сортообразцы 2009 г. 2010 г. 2011 г. 2012 г. Средние

21759/97 0,58 0,36 0,75 0,81 0,61

№2 0,69 0,30 0,82 0,85 0,65

Fidelio 0,76 0,44 0,79 0,79 0,68

Александр 0,50 0,35 0,81 0,82 0,60

Ставропольский 2 0,70 0,56 0,77 0,85 0,71

Средние 0,65 0,40 0,79 0,83 0,65

Условия среды имеют решающее значение в определении уровня покоя семян (табл. 4). Двухфакторный дисперсионный анализ выявил существенность взаимодействия генотип х год, что указывает на неодинаковость реакции различных сортообразцов на изменение погодных условий.

Использование 211/20-замещения в селекции гексаплоидной озимой тритикале

В результате скрининга коллекции озимой тритикале с помощью ПЦР-маркеров 2Я- и 2Б-хромосом (Ху/тс111 и 8ес2) было обнаружено 9 образцов, предположительно имеющих 2К/20-замещение: 21759/97, АДК-13591, Каприз, Полукарлик 1 х ЕМ1, ПРАГ-344, ПРАГ-341, Саргау, ТИП и Эллада. У образца 21759/97 с помощью специфичных для 20-хромосомы микросателлитных маркеров - ХЬагс228, ХЬагс1143, Х^т539, Х^т301,

Xgwml02, Xgwml57, XbarcI68, Xgwm484, Xwmclll, Xgwm261 -подтверждено наличие целой хромосомы 2D. Одновременно у растений этого образца отсутствовала хромосома 2R, о чем говорит отсутствие амплификации STS-маркера гена Sec2. Наличие других хромосом D-генома у растений образца 21759/97 с помощью SSR-маркеров не было выявлено. Кроме того, положительные результаты при ПНР-анализе дали маркеры Seel (на первую хромосому ржи) и RYE (маркер, позволяющий находить интрогрессии ржаной ДНК в геном пшеницы).

Все обнаруженные нами образцы коллекции с 211/20-замещением имеют происхождение из южных регионов России или Украины. Три из них (ТИ17, Саргау и Каприз) занесены в Гос. реестр селекционных достижений, допущенных к использованию на территории РФ (2012).

С помощью маркеров Sec2 и Xwmclll в 2010 году в F2 комбинации 21759/97 X Александр было обнаружено 28 гомозиготных растений по 2К/2Б-замещению, 31 растение без 2Б-хромосомы и 11 гемизигот, несущих 2R и 2Б-хромосому одновременно. В 2011-2012 гг. в F3 и F4 данной гибридной комбинации изучалось 15 семей с 2Я/20-замещением и 24 семьи без замещения. В F2 гибридной комбинации 21759/97 х Fidelio было получено 17 растений, гомозиготных по 21*/20-замещеншо, 20 гемизиготных растений и 33 растения без 20-хромосомы в геноме. В F3 и F4 данной гибридной комбинации в расчётах принимали участие 8 семей с 2D/2R-замещением и 33 семьи без замещения. Гемизиготные растения в F2 и семьи растений F3 и F4, расщепляющиеся по 2Я/2Б-замещению, в расчетах не учитывались.

Высота растений. В гибридной комбинации 21759/97 X Александр было отмечено существенное снижение высоты растений под действием

Таблица 5

Влияние 2К/2Р-замещения на высоту растений _

Гибридная комбинация Год У растений с 2R/2D-замещением У растений с полным ржаным геномом Уровень значимости различий (р)

Высота растения, см

21759/97 X Александр 2011 75 92 <0,001***

2012 108 133 <0,001***

21759/97 X Fidelio 2011 68 75 0,067

2012 107 127 <0,001***

Здесь и далее для оценки уровня значимости различий использовался критерий Р-Фишера.

2К/2Б-замещения (в среднем на 17 см в 2011 году и на 25 см в 2012 году.) (табл. 5). В гибридной комбинации 21759/97 X Fidelio снижение высоты растений под действием 2Ш20-замещения было слабо существенным в 2011 году (в среднем на 7 см) и существенным в 2012 году (на 20 см).

Элементы структуры урожая. В 2011 году в гибридных комбинациях 21759/97 X Александр и 21759/97 X Fidelio 2Ы/20-замещение снизило продуктивность колоса растений примерно в 2 раза, а в 2012 году - в 1,5 раза (табл. 6). Снижение продуктивности колоса произошло за счёт уменьшения числа колосков в колосе и озернённости колоска. В гибридной комбинации 21759/97 X Александр в 2011 году линии с 2К/2Б-замещением имели достоверно большую массу 1000 зёрен, чем линии с полным ржаным

Таблица 6

Влияние 2Я/2Р-замещения на элементы структуры урожая_

Гибридная комбинация Год У растений с 2{?/20-замещением У растений с полным ржаным геномом Уровень значимости (Р)

Масса зерна в колосе, г

21759/97 X Александр 2011 1,0 1,9 <0,001***

2012 1,7 2,7 <0,001***

21759/97 X Fidelio 2011 0,7 1,8 <0,001***

2012 1,9 2,6 <0,001***

Число колосков в колосе

21759/97 х Александр 2010 22 29 <0,001***

2011 19 25 <0,001***

2012 22 28 <0,001***

21759/97 X Fidelio 2010 20 28 <0,001***

2011 18 25 <0,001***

2012 22 27 <0,001***

Озернённость колоска

21759/97 X Александр 2010 1,2 1,5 0,148

2011 0,9 1,5 0,004**

2012 1,2 1,4 <0,001***

21759/97 X Fidelio 2010 1,3 1,5 0,188

2011 0,9 1,4 0,009**

2012 1,4 1,5 0,690

Масса 1000 зёрен, г

21759/97 X Александр 2011 58 52 0,035*

2012 бб 66 0,932

21759/97 X Fidelio 2011 46 48 0,273

2012 62 63 0,290

геномом. В гибридной комбинации 21759/97 X Fidelio у растений с 2R/2D-замещением наблюдалась слабая тенденция к снижению продуктивной кустистости (в 2011 году) и зимостойкости. В гибридной комбинации 21759/97 X Александр 2К/20-замещённые линии обладали несколько меньшей полевой всхожестью, чем линии с полным ржаным геномом.

Устойчивость к полеганию. В благоприятных для оценки образцов на устойчивость к полеганию условиях 2012 г. в гибридной комбинации 21759/97 X Александр было обнаружено достоверное (р=0,009 по результату точного теста Фишера) положительное влияние 2Б1/20-замещения на устойчивость. При этом у всех линий с данным замещением полегания не наблюдалось (15 линий), а среди линий без 20-хромосомы насчитывалось 14 полностью устойчивых линий, 9 линий со слабым отклонением стеблей и 1 линия со средней степенью полегания (отклонение стеблей на 45°). В гибридной комбинации 21759/97 X Fidelio влияние 2К/2Б-замещения на устойчивость к полеганию статистически недостоверно (р=0,14). Среди восьми 2Ш20-замещённых линий были только полностью устойчивые к полеганию, в то время как среди линий без замещения насчитывалось 21 полностью устойчивая линия, 10 линий со слабым отклонением стеблей и 2 линии с отклонением стеблей на 45° от вертикали.

Покой семян. Значимая связь 211/20-замещения с индексом прорастания была отмечена в гибридной комбинации 21759/97 X Fidelio в 2010- и 2011-ом годах (табл. 7). При этом наличие 2К/2Е)-замещения снижало индекс прорастания зерна. В комбинации 21759/97 X Александр и в комбинации с участием сорта Fidelio в 2012 году достоверной связи индекса прорастания с 211/20-замещением не было обнаружено. Двухфакторный дисперсионный анализ индекса прорастания показал существенное влияние

Таблица 7

Связь индекса прорастания с 2К72Р-замещением_

Гибридная комбинация Год У растений с 2R/2D-замещением У растений с полным ржаным геномом Уровень значимости различий (р)

Индекс прорастания

21759/97 X Александр 2010 0,416 0,455 0,535

2011 0,774 0,775 0,767

2012 0,797 0,777 0,083

21759/97 X Fidelio 2010 0,193 0,352 0,004**

2011 0,737 0,773 0,043*

2012 0,760 0,788 0,112

условий года в обеих гибридных комбинациях и существенное взаимодействие генотип X год только в комбинации 21759/97 X Fidelio.

Качество зерна. Визуальная оценка качества зерна, выраженная в баллах, является интегральным показателем выполненности зерна и гладкости его поверхности. В комбинации 21759/97 X Александр в оба года исследования и в комбинации 21759/97 X Fidelio в 2012 году 2R/2D-замещение значительно снизило выполненность зерна (табл. 8).

Таблица 8

Влияние 2К/2Р-замещения на качество зерна _

Гибридная комбинация Год У растений с 2R/2D-замещением У растений с полным ржаным геномом Уровень значимост и различий (Р)

Выполненность зерна, балл'

21759/97 X Александр 2010 3 5 0,005**

2011 2 и 3 4 <0,001***

2012 3 5 <0,001***

21759/97 X Fidelio 2010 4 5 0,744

2011 3 4 0,053

2012 4 5 0,002**

Для определения значимости различий использовался точный тест Фишера.

5 - отличная, 4 - хорошая, 3 - удовлетворительная, 2 - плохая.

Сроки наступления фенологических фаз. В 2010 году в комбинации 21759/97 X Fidelio растения, гомозиготные по 2К/20-замещению, созревали на 1...2 дня раньше растений без данного замещения (уровень значимости р<0,05). В комбинации 21759/97 X Александр существенной связи между наличием замещения хромосомы 2R на хромосому 2D и сроком созревания зерна нами не было обнаружено. В 2011-2012 годах в обеих комбинациях 2И/20-замещение не повлияло существенно на наступление фаз выхода в трубку и восковой спелости зерна, но существенно ускорило наступление фаз колошения (на 2...5 дней, р<0,05) и цветения (на 2...4 дня, р<0,001). 2R/2D-замещение сократило период от выхода в трубку до колошения, но при этом несколько удлинило период от колошения до цветения.

Влияние аллельного состояния гена Rht-Bl на высоту, продуктивность растений и покой семян озимой тритикале

Для определения наличия аллеля низкостебельности Rht-Blb и аллеля дикого типа Rht-Bla нами были использованы доминантные STS-маркеры, позволяющие выявить точковую мутацию, состовляющую различие аллелей Rht-Bla и Rht-Blb. Для определения генотипа растения требуется проведение

13

двух ГТТТР - с парой праймеров BF-MR1 для обнаружения аллеля карликовости и с парой праймеров BF-WR1 для обнаружения аллеля дикого типа (Ellis, 2002). При наличии соответствующего аллеля, с матричной ДНК растения амплифицируется фрагмент размером 237 пар нуклеотидов.

В изучаемой нами коллекции был обнаружен 51 образец, обладающий аллелем низкостебельности Rht-Blb и 53 образца, не обладающих таковым. Общая доля образцов с аллелем Rht-Blb, таким образом, составила 49%. Однофакторный дисперсионный анализ показал достоверную связь аллельного состояния гена Rht-Bl с высотой растений (р=0,001 **). В среднем высота растений с аллелем низкостебельности Rht-Blb составила 110±5 см, а с аллелем дикого типа Rht-Bla - 125±7 см.

В числе сортообразцов, несущих аллель низкостебельности Rht-Blb: 21406/96, 21759/97, AD Boreas, AD-Modus, Alamo, Bolero, Fidelio, Kitaro, KS-88T, Marho, Monica, Prado, Presto, Purdy, RAH 121/94, Tewo, TF30TL1, Августе, АД-252, Адась, АДМ 7, Амфидиплоидная 45, Антей, Виктор, Водолей, Гармония, Гермес, Дон, Дубрава, Идея, Каприз, Кастусь, Кишиневский АД4, Корнет, Л-71, JI-96, Мара, Микола, Михась, Модуль, ПРАГ 152, ПРАГ 441, ПРАГ 488, ПРАГ 489, Простор, Рунь, Славянка, Тарасовский 1, Тарасовский юбилейный, ТИ-17, Фламинго.

В числе сортообразцов, несущих аллель дикого типа Rht-Bla: 2-237783, В 322-1, Colina, Е-590, КН-88-109Т40-46, № 205, № 222, №154, №257, Pinokio, Salvo, АД 157/1931, АД 285, АД 41, АД 43, АД 751, АД-285, АД-44, АД-4996, АДЕ 567, АДМ-9, АДП 256, Аллегро, В-176 х АД206, Валентин 90, Гренадер, Двуручка 77, Доктрина 110, Е-775, Закарпатская многозерная, Зерновой гигант, Кентавр, JI-19, JI-9, Линия 14, Никлап, Полесский 10, Полукарлик 1хЕМ-1, ПРАГ-1-230/3, ПРАГ-344, ПРАГ-Д 242/2, ПРАГ-Д 246/2, ПРАГ-С-230/3, Пушкинский 111/2, Рондо, Саргау, Стрельна 11, Талисман, Таловский 1, Тальва 100, Торнадо, НИ-17-79, Эллада.

Аллель низкостебельности Rht-Blb наиболее распространён среди образцов из Белоруссии и Польши, а в России - среди образцов из Ростовской области. У образцов тритикале из Ставропольского края аллель Rht-Blb отсутствовал. Можно считать, что высокая доля встречаемости аллеля в том или ином регионе указывает на большую адаптивность образцов, им обладающих, к местным почвенно-климатическим условиям.

Аллель низкостебельности Rht-Blb наиболее часто встречается у сортов, выведенных в зоне достаточного увлажнения и реже - в зоне недостаточного увлажнения. Достоверной связи между обеспеченностью

территории теплом и долей сортов тритикале с аллелем Ш-В1Ь нами не обнаружено.

Кроме того, нами была дана оценка влияния гена ШиВ1 (с аллелями ЯЫ-В1а и ЯЫ-В1Ь) на параметры структуры урожая, высоту растений и покой семян озимой тритикале на материале гибридов и сестринских линий комбинации 21759/97 X Александр.

Высота растений. Растения, гомозиготные по аллелю Юхї-ВІЬ, примерно на 10 см ниже растений, гомозиготных по аллелю Шіг-ВІа (табл. 9).

Устойчивость к полеганию. Нами не было обнаружено существенной связи между состоянием генаЯ/іі-В1 и степенью полегания растений.

Таблица 9

Влияние ЮіиВІ-теш на высоту растений _

Гибридная комбинация Год У растений с аллелем ЯИі-ВІЬ низкостебель-ности У растений с аллелем И.Ы-В1а дикого типа Уровень значимости различий (Р)

Высота растения, см

21759/97 X Александр 2011 78 89 0,013*

2012 114 124 0,008**

Уровень значимости: * -р<0,05, ** -р<0,01. Таблица 10 Влияние ЯИ1-В1-тена на элементы структуры урожая

Гибридная комбинация Год У растений с аллелем ЮіиВІЬ низкостебель-ности У растений с аллелем Ш-В1а дикого типа Уровень значимости различий (р)

Масса зерна в колосе, г

21759/97 X Александр 2011 1,4 1,6 0,265

2012 2,2 2,1 0,458

Число колосков в колосе

21759/97 X Александр 2010 26 25 0,101

2011 23 21 0,017*

2012 25 24 0,297

Озернённость колоска

21759/97 X Александр 2010 1,4 1,3 0,352

2011 1,1 1,3 0,481

2012 1,3 1,2 0,392

Масса 1000 зёрен, г

21759/97 X 2011 52 58 0,033*

Александр 2012 66 68 0,204

Элементы структуры урожая. В большинстве случаев, различий по элементам структуры продуктивности между растениями с аллелями ЯЫ-В1а и ЯЫ-В1Ь не обнаружено (табл. 10).

Сроки наступления фенологических фаз. В 2010-2011 гг. аллельное состояние Юй-В1 гена не было значимо связано со сроком созревания зерна. У растений с аллелем ЯЫ-В1Ъ (в сравнении с гомозиготами по аллелю В.Ы-В1а) позже наступили фазы выхода в трубку (на 3 дня, р<0,001), колошения (на 5 дней при отсутствии 2К/2Б-замещения, р<0,001), цветения (на 2 дня, р<0,01). В 2012 году у растений, гомозиготных по аллелю В.Ы-В1Ъ, наблюдалась задержка развития на 2...4 дня в течение всей вегетации по сравнению с растениями, гомозиготными по аллелю дикого типа. Подобный эффект можно объяснить замедлением ростовых процессов.

Таблица 11

Связь индекса прорастания с аллельным состоянием гена ЯЫ-В1

Гибридная комбинация Год У растений с аллелем ЯЫ-В1Ъ низкостебель-ности У растений с аллелем т-В1а дикого типа Уровень значимости различий (р)

Индекс прорастания

21759/97 X Александр 2010 0,421 0,450 0,645

2011 0,763 0,786 0,206

2012 0,794 0,806 0,351

Покой семян. Связь индекса прорастания с аллельным состоянием гена Шг-В1 оказалась несущественной (табл. 11). Это согласуется с результатами исследований влияния данного гена на покой семян пшеницы.

Качество зерна. Присутствие аллеля КЫ-В1Ь способствовало меньшей морщинистости зерна у растений гибридной комбинации 21759/97 X Александр в течение всех трёх лет испытания (табл. 12).

Таблица 12

Влияние Шг1-В1-теш на качество зерна _

Гибридная комбинация Год У растений с аллелем ВкиВІЬ низкостебель-ности У растений с аллелем ЯЫ-В1а дикого типа Уровень значимости различий (р)

Выполненность зерна, балл1

21759/97 х Александр 2010 5 3 0,004**

2011 4 2 0,016*

2012 4 3 0,007**

Для определения значимости различий использовался точный тест Фишера. 1 5 - отличная, 4 - хорошая, 3 - удовлетворительная, 2 - плохая.

Ми кроса і ел л и ти ые маркеры устойчивости к прорастанию зерна в колосе и мучнистой росе у тритикале

В изучаемых гибридных комбинациях нами была проведена оценка связи индекса прорастания и состояния полиморфных микросателлитных локусов, перечисленных в таблице 13.

Таблица 13

Полиморфные маркеры в гибридных комбинациях_

21759/97 X Александр 21759/97 X Fidelio Александр X Ставропольский 2

Xwmc 104

Xbarc55 Xbarc55 Xbarc55

Xgwml55 Xgwml55

По результатам дисперсионного анализа ни один из вышеуказанных маркеров не имел достоверной связи с индексом прорастания.

В 2012 году сложились благоприятные условия для мучнистой росы тритикале (Erysiphe graminis). Из использованных нами микросателлитных маркеров только Xwmcl04 в гибридной комбинации 21759/97 X Fidelio показал достоверную связь со степенью поражения растений (р<0,001). Линии, несущие микросателлитный фрагмент малой молекулярной массы, принадлежащий родительскому сорту Fidelio, почти не поражались мучнистой росой (рис. 1). По литературным данным, локус Xwmcl04-1A сцеплен с пшеничным геном устойчивости к мучнистой росе РтЗ, локализованном на 1А-хромосоме (http://www.china-papers.com/?p=70366).

Рис. 1. Продукты амплификации микросателлита Xwmc 104 с использованием ДНК растений F2 комбинации 21759/97 х Fidelio. Образцы 4, 7, 9, 11,15, 16, 18 устойчивы к мучнистой росе.

Морфологические маркеры устойчивости к прорастанию зерна в колосе

у тритикале

Одним из маркерных признаков устойчивости к прорастанию зерна в колосе исключительно для тритикале предлагалась морщинистость зерна (Сергеев, 1989). Для каждого года в отдельности нами была рассчитана связь индекса прорастания и балла морщинистости зерна (табл. 14). Как можно заметить, достоверная связь индекса прорастания с морщинистостью зерна проявляется, главным образом, в 2010-ом году. Однако в данный год погодные условия сильно отклоняются от климатической нормы и менее способствуют прорастанию зерна в колосе, чем в 2011 и 2012 гг. Таким образом, традиционно используемый в селекции пшеницы и тритикале визуальный отбор по выполненности зерна может повысить устойчивость к прорастанию зерна в колосе, но не в любых погодно-климатических условиях.

Таблица 14

Связь индекса прорастания с выполненностью зерна, __корреляционное отношение _

Год 21759/97 X Александр 21759/97 X Fidelio Александр X Ставропольский 2

2010 0,516*** 0,481*** 0,660***

2011 0,250 0,156 0,344

2012 0,510** 0,025 0,276

** - уровень значимости р<0,01; *** - р<0,001.

Дисперсионный анализ индекса прорастания в 2010 году не показал существенных отличий между группами растений с различной степенью остистости, опушения, воскового налёта и плёнчатости. Однако в 2012 году в комбинациях 21759/97 х Александр и Александр X Ставропольский 2 у инбредных линий, в которых преобладали растения с практически безостыми колосьями, наблюдался существенно меньший индекс прорастания зерна, чем у линий с остистыми колосьями. Так как 2012-ый год был наиболее благоприятным для прорастания зерна в колосе, можно считать, что безостость является хорошим кандидатом в маркерные признаки для отбора на устойчивость к прорастанию зерна в колосе тритикале.

Эффективность маркер-опосредованной селекции в сравнении с традиционным отбором

Lande и Thompson (1990) предлагали проводить одновременное фенотипирование и генотипирование растений по множеству маркеров, плотно покрывающих всю рекомбинационную карту вида для повышения

18

эффективности однократного отбора за счёт уточнения селекционной ценности особей по их генотипу. При отборе по маркерам полностью устраняется влияние микроусловий среды на количественный признак, мешающее вести эффективный отбор по фенотипу. Достаточное повышение эффективности отбора, однако, наблюдается только при очень низких коэффициентах наследуемости (Ь2<0,25).

Индекс прорастания, используемый нами как показатель устойчивости к прорастанию зерна в колосе, при анализе однолетних данных по повторениям полевого опыта показывает весьма высокий коэффициент наследуемости (табл. 15). Таким образом, покой семян мало варьирует под действием пестроты почвенного плодородия, и отбор по молекулярным маркерам или косвенным признакам с использованием селекционных индексов не имеет смысла. Генотипы в пределах одного года хорошо различимы по индексу прорастания.

Таблица 15

Коэффициенты наследуемости индекса прорастания сортообразцов и линий

2009 г. 2010 г. 2011 г. 2012 г.

0,90 0,79 0,89 0,87

Если рассматривать коэффициент наследуемости индекса прорастания по годам, то его значение незначимо отличается от нуля. Таким образом, любой молекулярный маркер или морфологический признак, показавший достоверную связь с индексом прорастания в среднем за несколько лет, может существенно повысить эффективность отбора. Однако, в связи с низкой генотипической дисперсией признака и наличием взаимодействия генотип-среда, ни один из изученных нами молекулярных маркеров или морфологических признаков не показал существенной связи с индексом прорастания. При вычленении эффекта года и взаимодействия генотип-год, достоверную связь с индексом прорастания получает только 2R/2D-замещение в гибридной комбинации 21759/97 X Fidelio.

Изучение внутрисортового полиморфизма озимой тритикале по устойчивости к прорастанию зерна в колосе

Известно, что у тритикале весьма распространённым способом получения новых сортов является внутрисортовой отбор.

Результаты испытания отобранных по доле проросших зёрен в колосе во влажной камере самоопылённых линий из полиморфных сортов тритикале представлены в таблице 16. Существенные различия между линиями по

19

индексу прорастания в пределах одного сортообразца наблюдаются почти во всех случаях, кроме сорта Александр в 2011 и образца 21759/97 в 2012 году. Наиболее существенные различия между линиями наблюдались у сортов Ставропольский 2 и Fidelio. Линия 512, полученная из сорта Ставропольский 2, проявляет наиболее глубокий покой семян по сравнению с другими линиями, и может быть использована в качестве источника устойчивости к прорастанию зерна в колосе. В 2012 год по индексу прорастания выделилась линия 449 сорта Fidelio. Существенные различия по урожайности были отмечены только лишь между линиями сорта Fidelio. Таким образом, можно утверждать, что внутрисортовое разнообразие по устойчивости к прорастанию зерна в колосе у тритикале существует и отбор из популяции сорта может быть эффективным.

Таблица 16

Урожайность и устойчивость к прорастанию зерна в колосе линий тритикале, полиморфность исходных сортообразцов по электрофоретическим спектрам

проламинов

Исходный образец (Р-полиморфность; Я и ц В £ 14 § ° з 2 * 2 я 8 § § Индекс прорастания сÍ Я м u х 3

Но-ожидаемая гетерозиготность) £ Ш g О i" Зерн продуктов: рядка, г 2011г. 2012 г. в 1 2 Г

Александр (Р=0,05; Н„=0,004) 205 0,01 76 0,80 0,82 46

212 0,01 69 0,82 0,80 48

219 0,12 45 0,81 0,80 51

21759/97 (Р=0,08; Н„=0,01) 328 0,08 44 0,72 0,80 54

338 0,00 82 0,74 0,80 49

342 0,02 64 0,76 0,79 48

Fidelio (Р=0,33:^=0,12) 426 0,20 72 0,82 0,86 43

436 0,02 79 0,80 0,82 47

449 0,08 106 0,77 0,78 37

Ставропольский 2 (Р=0,16;Но=0,04) 512 0,04 51 0,65 0,78 28

528 0,64 39 0,80 0,85 27

533 0,20 67 0,69 0,83 29

Образец №2 (Р=0,09; Но=0,02) 603 0,02 81 0,80 0,85 32

627 0,27 97 0,82 0,87 39

643 0,02 108 0,79 0,85 32

HCPos - - 0,03 0,02 10

Чтобы понять» в каком случае такой отбор эффективен, нами был проведён анализ полиморфизма проламинов пяти исходных образцов

ЖІЙГ Й®

ЩЩ: Ж

Ш-- щщ- !Ш и

щ Ш

1 2 1 2

А Б

f

:

«Щ

К

1 2 3 4 5 6

Г

Piic. 2. Одномерный электрофорез спирторастворішьш белков зерна в потиакршамвдном геле в присутствии додевдшеулъфата натрім. (А) Сорт Александр. Частота встречаемости проламиновых биотипов: 1 - 96%; 2 - 4%. Полиморфных проламинов - 1. (Б) Образец 21759/97. Биотипы: 1 - 91%: 2 -9%. Полиморфных проламинов - 1. (В) Сорт Fidelio. Биотипы (не показаны из-за многочисленности): 1 - 24%; 2 - 15%; 3 - 6%; 4 и 5 - по 5%; 6 -4%; 7. 8, 9. 10, 11 и 12 - по 3%; 13 - 16 - по 2%. 17-31 - по 1%. Полиморфных проламинов - 9. (Г) Сорт Ставропольский 2. Биотипы: 1 - 60%, 2 - 27%, 3 -2%. 4 - 1%. 5 - 9%. 6 - 1%. Полиморфных проламинов - 3. (Д) Образец Ks2. Биотипы: 1 - 78%. 2 -14%. 3 - б%. 4 - 2%. Полиморфных проламинов - 2.

21

тиритикале методом электрофореза в полиакриламидном геле. Результаты данного анализа представлены на рисунке 2 и в таблице 16 в графе с названиями образцов. Наибольшим числом разнообразных белковых спектров обладал в нашем исследовании сорт Fidelio (31 тип спектра). Наименьшим числом биотипов среди изученных образцов обладали линия 21759/97 и сорт Александр (рис. 2 А, Б).

Как можно заметить, эффективность отбора из популяции сорта по урожайности и индексу прорастания заметно выше в том случае, если данная популяция обладает достаточно высоким генетически обусловленным разнообразием (оцененным нами по электрофоретическим спектрам проламинов).

Таким образом, наличие внутрипопуляционного разнообразия проламиновых спектров может косвенно указывать на неоднородность сорта по хозяйственно-значимым свойствам растений и, соответственно, на эффективность внутрисортового отбора. Отбор из сортов по показателям устойчивости к прорастанию в колосе может быть эффективным, однако требует испытания самоопылённых линий в течение нескольких лет.

ВЫВОДЫ

1. В период от цветения до созревания зерна низкая температура воздуха делает покой семян более глубоким. Увлажнение почвы при высокой температуре (22...25°С) ослабляет, а при низкой (15...16°С) -усиливает покой семян. Некорневая подкормка мочевиной после цветения не влияет на покой семян озимой тритикале.

2. Анализ коллекции гексаплоидной озимой тритикале (134 образца) с помощью молекулярных маркеров показал, что аллель Rht-Blb (Rhtl) встречается примерно у 50%, а 2К/20-замещение — у 9% сортообразцов. Аллель Rht-Blb характерен для образцов из Белоруссии, Польши, Ростовской области. Аллель Rht-Bla характерен для образцов из Ставропольского края. 2К/20-замещение встречается преимущественно у сортообразцов из южных регионов России.

3. Ген Rht-Bl не оказывает существенного влияния на покой семян озимой тритикале и продуктивность растений. Аллель низкостебельности Rht-Blb существенно снижает морщинистость зерна и сокращает длину стебля на 10.. .15 см по сравнению с аллелем дикого типа Rht-Bla.

4. 211/2П-замещение повышает устойчивость к полеганию, к прорастанию зерна в колосе, но снижает продуктивность растений. Связь 2R/2D-

замещения с покоем семян зависит от генотипа скрещиваемых родительских форм и погодных условий.

5. У тритикале молекулярный маркер Xwmcl04 сцеплен с геном устойчивости к мучнистой росе.

6. Линии тритикале с гладким зерном и безостым колосом в отдельные годы проявляют более глубокий покой семян, чем линии с морщинистым зерном и остистым колосом.

7. Обнаружена сортоспецифичная реакции уровня покоя семян на изменение условий выращивания.

8. Сортообразцы тритикале Ставропольский 2 и Fidelio популятивны по устойчивости к прорастанию зерна в колосе.

Рекомендации производству

1. Испытание селекционных образцов тритикале на устойчивость к предуборочному прорастанию зерна в колосе при выращивании растений в поле следует проводить в течение ряда лет.

2. Многолетние испытания можно заменить однолетними при использовании установок искусственного климата (фитотронов, климатических камер) для выращивания растений. При этом следует подбирать температуру воздуха и полив в соответствии со среднемноголетними погодными условиями местности.

3. 2R/2D хромосомное замещение может быть использовано в селекции гексаплоидной тритикале на устойчивость к полеганию и к прорастанию зерна в колосе в умеренном климатическом поясе.

4. Аллель низкостебельности Rht-Blb может быть использован для создания низкорослых сортов тритикале и улучшения технологических свойств зерна за счёт снижения его морщинистости.

5. Выявленные сортообразцы озимой тритикале с аллелем Rht-Blb и 2ЯУ2Б-замещением, могут быть использованы в качестве доноров.

6. Для повышения устойчивости к прорастанию зерна в колосе при отборе следует отдавать предпочтение образцам с гладким зерном и безостыми колосьями.

7. Отбор с помощью молекулярных маркеров на устойчивость к прорастанию зерна в колосе можно применять только в гибридных комбинациях, для которых доказана их эффективность.

8. Сорт Fidelio можно использовать в качестве донора устойчивости к мучнистой росе, ведя при этом отбор по микросателлитному маркеру Xwmcl04.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Баженов, М. С. Изучение образцов озимой тритикале на наличие хромосомных замещений и их связь с устойчивостью к прорастанию на корню / М. С. Баженов, М. Г. Дивашук, В. В. Пыльнев, Г. И. Карлов, В. С. Рубец // Известия ТСХА. - 2011. - № 2. - С. 20-26.

2. Баженов, М. С. Влияние факторов окружающей среды на покой семян и прорастание зерна в колосе озимой тритикале / М. С. Баженов, В. В. Пыльнев, И. Г. Тараканов II Известия ТСХА. — 2011. — № 6. — С. 30-38.

3. Баженов, М. С. Поиск молекулярных мареров устойчивости к прорастанию в колосе у гексаплоидной озимой тритикале // XI молодёжная научная конференция «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии». - М.: ВНИИСБ РАСХН, 2011. - С. 810.

4. Баженов, М. С. Отбор на устойчивость к прорастанию зерна в колосе у тритикале с помощью молекулярных и морфологических маркеров // II Международная школа-конференция молодых учёных «Генетика и селекция растений, основанная на современных генетических знаниях и технологиях». - Звенигород: Цифровичок, 2011. - С. 18.

5. Баженов М. С. Изучение внутрисортового полиморфизма озимой тритикале по устойчивости к прорастанию зерна в колосе // Тритикале: Материалы международной научно-практической конференции «Тритикале и его роль в условиях нарастания аридности климата» и секции тритикале отделения растениеводства РАСХН. -Ростов-на-Дону, 2012. - С. 16-20.

Отпечатано с готового оригииач -макета

Формат 60х84'/,6 Усл.печ.л. 1,4. Тираж 100 экз. Заказ 445.

Издательство РГАУ-МСХА 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 44 Тел.: (499) 977-00-12, 977-26-90, 977-40-64

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Баженов, Михаил Сергеевич

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Общие сведения о культуре.

1.2. Предуборочное прорастание зерна в колосе, методы оценки устойчивости

1.2.1. Методы, основанные на учёте доли проросших зёрен и степени прорастания зерна по визуальной оценке.

1.2.1.1. Методы, основанные на проращивании вымолоченного зерна.

1.2.1.2. Методы, основанные на проращивании зерна в колосьях.

1.2.2. Биохимические методы оценки начала прорастания зерна.

1.2.3. Технологические методы оценки повреждения зерна предуборочным прорастанием.

1.3. Физиология устойчивости к прорастанию зерна в колосе.

1.3.1. Морфология колоса, препятствующая увлажнению зерна.

1.3.2. Покой семян.

1.3.2.1. Внутренние механизмы физиологического покоя семян.

1.3.2.2. Влияние факторов окружающей среды на покой семян пшеницы и тритикале.

1.4. Генетика устойчивости к порастанию на корню.

1.4.1. Гены красной окраски зерна (R).

1.4.2. Viviparous - гены ( Vp).

1.4.3. Гены низкостебельности и устойчивость к прорастанию зерна в колосе

1.4.4. Хромосомные R/D-замещения у гексаплоидной тритикале и устойчивость к прорастанию зерна в колосе.

1.4.5. Хромосомные регионы, связанные с предуборочным прорастанием

1.4.6. Цнтоплазматическая наследственность.

1.5. Методы селекции на устойчивость к прорастанию в колосе.

1.6. Генная инженерия.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ, МЕТОДЫ, ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИ

2.1. Цель и задачи исследования.

2.2. Растительный материал.

2.3. Метеорологические условия.

2.4. Методы исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Влияние факторов среды на покой семян тритикале.

3.1.1. Результаты вегетационного опыта.

3.1.2. Результаты полевых исследований.

3.2. Использование 2К/2В-замещення в селекции гексаплондной озимой тритикале.

3.3. Влияние аллельного состояния гена КМ-В1 на высоту, продуктивность растений и покой семян озимой тритикале.

3.4. Микросателлитные маркеры устойчивости к прорастанию зерна в колосе и мучнистой росе тритикале.

3.5. Морфологические маркеры устойчивости к прорастанию зерна в колосе у тритикале.

3.6. Эффективность маркер-опосредованной селекции в сравнении с традиционным отбором.

3.7. Изучение внутрнсортового полиморфизма озимой тритикале по устойчивости к прорастанию зерна в колосе.

ВЫВОДЫ.

Рекомендации производству.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Оценка эффективности методик отбора устойчивых к прорастанию на корню форм озимой тритикале"

Тритикале - род аллополиплоидных растений, созданных человеком путём отдалённой гибридизации пшеницы с рожыо с целью объединения их лучших свойств в одной сельскохозяйственной культуре. В настоящее время наибольшее распространение получила гексаплоидная тритикале. Основными направлениями её использования являются производство фуражного зерна и зелёной массы. Мука из зерна тритикале может быть использована для производства хлебобулочных изделий, а также диетического питания - хлебцев, хлопьев и т.д. Как правило, тритикалевая мука используется в смеси с пшеничной мукой. Низкое качество изделий, получаемых из чистой тритикалевой муки, часто объясняется слабой клейковиной, плохой набухаемостыо крахмала и повышенной активностью гидролитических ферментов. Отчасти это является следствием предуборочного прорастания зерна в колосе, которому подвержены многие современные сорта почти во всех регионах возделывания этой культуры. Прорастание в колосе также сокращает долговечность семян при хранении.

Таким образом, создание сортов, устойчивых к предуборочному прорастанию зерна в колосе, является актуальной задачей селекции. Чаще всего отбор на данное свойство ведут путём оценки образцов в селекционных питомниках и сортоиспытаниях с помощью различных методик искусственной провокации прорастания. Отбор из генетически полиморфных популяций по отдельным растениям, колосьям и зёрнам используется реже, но также является эффективным. В связи с низкой наследуемостью устойчивости к прорастанию зерна в колосе и трудоёмкостью её оценки считается перспективным поиск молекулярных маркеров данного свойства. Практически на всех хромосомах у пшеницы были обнаружены локусы количественного признака (С>ТЬ) устойчивости к предуборочному прорастанию зерна. Также известен ген Ур-1В, связанный с данным свойством у белозёрных пшениц. Была показана связь повреждения зерна гидролитическими ферментами при прорастании с аллельным состоянием генов гиббереллин-нечувствительной низкостебельности ЯШ1 и Ш12.

У гексаплоидной тритикале молекулярному маркированию устойчивости к прорастанию зерна в колосе посвящено мало работ. Известно о связи данного свойства с 11Д)-хромосомными замещениями, состоянием гена Ур-1В, микросателлитным маркеромХ^т 155 [15, 171].

Прорастание зерна в колосе тритикале сильно зависит от погодных условий. Однако специальных исследований влияния погодных факторов на покой семян у данной сельскохозяйственной культуры не проводилось.

Заключение Диссертация по теме "Селекция и семеноводство", Баженов, Михаил Сергеевич

выводы

1. В период от цветения до созревания зерна низкая температура воздуха делает покой семян более глубоким. Увлажнение почвы при высокой температуре (22.25°С) ослабляет, а при низкой (15.16°С) - усиливает покой семян. Некорневая подкормка мочевиной после цветения не влияет на покой семян озимой тритикале.

2. Анализ коллекции гексаплоидной озимой тритикале (134 образца) с помощью молекулярных маркеров показал, что аллель ЯЫ-В1Ь (ЯЫ1) встречается примерно у 50%, а 2Я/20-замещение - у 9% сортообразцов. Аллель ЯЫ-ЫЪ характерен для образцов из Белоруссии, Польши, Ростовской области. Аллель ЯЫ-Ыа характерен для образцов из Ставропольского края. 2К/20-замещение встречается преимущественно у сортообразцов из южных регионов России.

3. Ген ЯЫ-В1 не оказывает существенного влияния на покой семян озимой тритикале и продуктивность растений. Аллель низкостебельности ЯЫ-В1Ь существенно снижает морщинистость зерна и сокращает длину стебля на 10. 15 см по сравнению с аллелем дикого типа ЯЫ-В1а.

4. 2Ы/20-замещение повышает устойчивость к полеганию, к прорастанию зерна в колосе, но снижает продуктивность растений. Связь 211/20-замещения с покоем семян зависит от генотипа скрещиваемых родительских форм и погодных условий.

5. У тритикале молекулярный маркер Хм>тс104 сцеплен с геном устойчивости к мучнистой росе.

6. Линии тритикале с гладким зерном и безостым колосом в отдельные годы проявляют более глубокий покой семян, чем линии с морщинистым зерном и остистым колосом.

7. Обнаружена сортоспецифичная реакции уровня покоя семян на изменение условий выращивания.

8. Сортообразцы тритикале Ставропольский 2 и Fidelio популятивны по устойчивости к прорастанию зерна в колосе.

Рекомендации производству

1. Испытание селекционных образцов тритикале на устойчивость к предуборочному прорастанию зерна в колосе при выращивании растений в поле следует проводить в течение ряда лет.

2. Многолетние испытания можно заменить однолетними при использовании установок искусственного климата (фитотронов, климатических камер) для выращивания растений. При этом следует подбирать температуру воздуха и полив в соответствии со средпемноголетними погодными условиями местности.

3. 2R/2D хромосомное замещение может быть использовано в селекции гексаплоидной тритикале на устойчивость к полеганию и к прорастанию зерна в колосе в умеренном климатическом поясе.

4. Аллель низкостебельности Rht-Blb может быть использован для создания низкорослых сортов тритикале и улучшения технологических свойств зерна за счёт снижения его морщинистости.

5. Выявленные сортообразцы озимой тритикале с аллелем Rht-Blb и 2R/2D-замещением, могут быть использованы в качестве доноров.

6. Для повышения устойчивости к прорастанию зерна в колосе при отборе следует отдавать предпочтение образцам с гладким зерном и безостыми колосьями.

7. Отбор с помощью молекулярных маркеров на устойчивость к прорастанию зерна в колосе можно применять только в гибридных комбинациях, для которых доказана их эффективность.

8. Сорт Fidelio можно использовать в качестве донора устойчивости к мучнистой росе, ведя при этом отбор по микросателлитному маркеру Xwmcl04.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Баженов, Михаил Сергеевич, Москва

1. Беркутова, Н. С. Оценка и отбор зерновых культур на устойчивость к прорастанию в колосе : Обзор / II. С. Беркутова, О. А. Буко. —- М., 1982. — 59 с. Деп. в Центр информации и технико-экономических исследований АПК.

2. Василевская, Г. А. Биохимическая характеристика белкового комплекса зерна озимой ржи в связи с устойчивостью к предуборочному прорастанию : автореф. дис. . канд. биол. наук / Василевская Галина Антоновна. Минск, 1985.- 19 с.

3. ГОСКОМИССИЯ РФ Государственный РЕЕСТР селекционных достижений Электронный ресурс. — Режим доступа: http://www.gossort.com/reecont.html (дата обращения: 10.03.2012).

4. ГОСКОМИССИЯ РФ Методики испытаний на ООС Электронный ресурс. — Режим доступа: http://www.gossort.com/mtddus.html (дата обращения: 11.12.2011).

5. Данилкин, Н. М. Генетический анализ признаков продуктивности и устойчивости к прорастанию на корню у яровой тритикале (X ТгШсояесаЫавтореф. дис. канд. биол. наук : 03.00.15, 06.01.05. / Данилкин

6. Николай Михайлович. — М.: РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева, 2009. 18 с.

7. Идентификация генов короткостебельности ЛЫ2 и ЯЫ8 у образцов гексаплоидного тритикале с помощью ДНК маркеров / К. У. Куркиев, Л. Г. Тырышкин, М. А. Колесова, У. К. Куркиев // Вестник ВОГиС. — 2008. — Т. 12, №3.

8. Изучение образцов озимой тритикале на наличие хромосомных замещений и их связь с устойчивостью к прорастанию на корню / М. С. Баженов, М. Г. Дивашук, В. В. Пыльнев, Г. И. Карлов, В. С. Рубец // Известия ТСХА. — 2011. —№2. —С. 20-26.

9. Картирование генома ржи {8еса1е сегеа1е Ь.) с помощью молекулярных маркеров / С. В. Малышев, А. В. Войлоков, В. II. Корзун, А. Бёрнер, Н. А. Картель // Вестник ВОГиС. — 2005. — Т. 9, № 4. — С. 473^180.

10. Княгиничев, М. И. Биохимия пшеницы. — Москва-Ленинград : Сельхозгиз, 1951. —216с.

11. Куркиев, К.У. Генетические аспекты селекции короткостебельных гексаплоидныхтритикале : автореф. дис. . докт. биол. наук : 03.00.15, 06.01.05 / Куркиев Киштили Уллубиевич. — М., 2009. 36 с.

12. Майер, Н. К. Применение молекулярно-генетических маркеров на устойчивость к прорастанию зерна на корню у тритикале : автореф. дис. . канд. биол. наук / Майер Николай Константинович. — М., РГАУ-МСХА им. К. А. Тимирязева, 2011. 18 с.

13. Мартынов, С. П. Пакет программ статистического и биометрико-генетического анализа в растениеводстве и селекции AGROS Электронный ресурс. / С. П. Мартынов, Н. Н. Мусин, Т. В. Кулагина. М. : РАСХН, 1993.

14. Методика государственного сортоиспытания сельскохозяйственных культур : Выпуск первый : Общая часть. — М. : Государственная комиссия по сортоиспытанию сельскохозяйственных культур при министерстве сельского хозяйства СССР, 1985. — 263 с.

15. Мокроусов, В. В. Генетический полиморфизм краснодарских сортов озимой пшеницы по генам Rht: автореф. дис. . канд. с.-х. наук. / Мокроусов Вадим Викторович. —Краснодар : Северо-Кубанская СХОС, 2010. -25 с.

16. Нгуен, Т. Т. Л. Разработка системы оценок устойчивости к прорастанию на корню озимой тритикале : дис. . канд. сельскохоз. наук : 06.01.05. / Нгуен Тхи Тху Линь. — М.: РГАУ МСХА имени К. А. Тимирязева, 2011. - 206 с.

17. Оценка устойчивости образцов коллекции озимой тритикале к прорастанию на корню / Т. Т. Л. Нгуен, О. В. Митрошина, В. В. Пыльнев, В. С. Рубец // Известия ТСХА. — 2011. — № 1. — С. 71-84.

18. Полевой, В. В. Физиология роста и развития растений / В. В. Полевой, Т. С. Саламатова. — Ленинград : ЛГУ, 1991. — 240 с.

19. Пома, Н. Г. Наследование гибридами Fl и F2 озимого тритикале устойчивости к прорастанию зерна на корню / Н. Г. Пома, Г. Н. Гончаров. — Немчиновка : НИИСХЦРНЗ, 1996. 5 с. - деп. во ВНИИТЭИагропром1809.96, № 184 ВС-96.

20. Сергеев, А. В. Селекция, семеноводство и возделывание тритикале. — М., 1989. 64 с. - Деп. в Центр информации и технико-экономических исследований АПК.

21. Частная селекция полевых культур / В. В. Пыльнев, Ю. Б. Коновалов, Т. И. Хупацария, О. А. Буко, Е. В. Пыльнева, JI. И. Долгодворова, П. М. Конорев, В. С. Рубец, В. М. Пыльнев, А. Н. Березкин, JL J1. Березкина. — М. : КолосС, 2005, —552 с.

22. Чеботарь, С. В. Аллельная характеристика генов короткостебельности в генетическом пуле сортов озимой мягкой пшеницы Украины // Генетичш ресурси рослин. — 2008. — № 6. — С. 96-103.

23. Шашко, Д. И. Агроклиматическое районирование СССР. — М. : Колос, 1967. — 335 с.

24. Шевченко, В. Е. Тритикале / В. Е. Шевченко, Т. Павлюк, В. В. Верзилин. — Воронеж : Воронежский государственный аграрный университет имени К.Д. Глинки, 1997. —281 с.

25. Шишкина, А. А. Выявление хромосомных перестроек и их эффектов у яровой тритикале : дис. канд. биол. наук : 03.00.15. / Шишкина Александра Александровна. — М.: РГАУ МСХА им. К. А. Тимирязева, 2009. - 127 с.

26. Шишлов, М. П. Лабораторная климатическая установка для оценки форм тритикале на устойчивость к прорастанию в колосе / М. П. Шишлов, Н. П. Шишлова // Селекция и семеноводство. — 1994. — № 2. — Р. 26-29.

27. Шишлова, II. П. Сортовая специфика прорастания семян озимого тритикале при различных световых и температурных режимах / П. П. Шишлова, М. П. Шишлов, С. И. Гриб // Физиология и биохимия культурных растений. — 1993. —Vol. 25, N 1, —Р. 44-51.

28. A new PCR-based marker on chromosome 4AL for resistance to pre-harvest sprouting in wheat (Triticum aestivum L.) / X.-Q. Zhang, C. Li, A. Tay, R. Lance,

29. D. Mares, J. Cheong, M. Cakir, J. Ma, R. Appels // Molecular Breeding. — 2008. — Vol. 22, N 2. — P. 227-236.

30. Allelic series of four powdery mildew resistance genes at the PmS locus in hexaploid bread wheat / P. Srichumpa, S. Brunner, B. Keller, N. Yahiaoui // Plant physiology. — 2005. — Vol. 139, N 2. — P. 885-895.

31. Aluminum tolerance in triticale, wheat, and rye / B. Y. Kim, A. C. Baier, D. J. Somers, J. P. Gustafson // Euphytica. — 2001. — Vol. 120, N 3. — P. 329-337.

32. Anderson, J. A. RFLP analysis of genomic regions associated with resistance to preharvest sprouting in wheat / James A. Anderson, Mark E. Sorrells, Steven D. Tanksley // Crop Science. — 1993. — Vol. 33. — P. 453-459.

33. Anderson, J. D. Metabolic changes in partially dormant wheat seeds during storage // Plant Physiology. — 1970. — Vol. 46, N 4. — P. 605.

34. Banaszak, Z. Breeding of triticale in DANKO // Tagung der Vereinigung der Pflanzenzüchter und Saatgutkaufleute Österreichs. — Gumpenstein : Lehr- und Forschungszentrum für Landwirtschaft Raumberg-Gumpenstein, 2010. — Vol. 61. -P. 65-68.

35. Barbeau, W. E. Evidence that minor sprout damage can lead to significant reductions in gluten strength of winter wheats / W. E. Barbeau, C. A. Griffey, Z. Yan // Cereal Chemistry. — 2006. — Vol. 83, N 3. — P. 306-310.

36. Bassoi, M. C. Analysis of preharvest sprouting in three Brazilian wheat populations / M. C. Bassoi, J. Flintham, C. R. Riede // Pesquisa Agropecuäria Brasileira. — 2006. — Vol. 41, N 4. — P. 583-590.

37. Benech-Arnold, R. L. Hypoxia interferes with ABA metabolism and increases ABA sensitivity in embryos of dormant barley grains // Journal of Experimental Botany. —2006, —Vol. 57, N6. —P. 1423-1430.

38. Bernatzky, R. Genetics of actin-related sequences in tomato / R. Bernatzky, S. D. Tanksley // Theoretical and Applied Genetics. — 1986. — Vol. 72. — P. 314-321.

39. Bethke, P. C. Nitric oxide reduces seed dormancy in Arabidopsis / P. C. Bethke, I. G. L. Libourel, R. L. Jones // Journal of Experimental Botany. — 2006. — Vol. 57, N3. —P. 517-526.

40. Bojovic, B. The effects of temperature, length of storage and plant growth regulators on germination of wheat (Triticwn aestivum L.) and triticale seeds // Biotechnology & Biotechnological Equipment. — 2010. — Vol. 24, N 2. — P. 1849-1853.

41. Broman, K. W. A guide to QTL mapping with R/qtl / K. W. Broman, S. Sen. — New York : Springer, 2009. 412 p.

42. Budzianowski, G. The effect of single D-genome chromosomes on aluminum tolerance of triticale / G. Budzianowski, H. Wos // Euphytica. — 2004. — Vol. 137, N2. —P. 165-172.

43. Cairns, A. L. P. The effect of molybdenum on seed dormancy in wheat / A. L. P. Cairns, J. H. Kritzinger // Plant and Soil. — 1992. — Vol. 145, N 2. — P. 295297.

44. Ceseviciene, J. The effects of nitrogen fertilizer and harvesting time on Hagberg-Perten falling number of winter wheat / J. Ceseviciene, A. Masauskiene // Zemes ukio Mokslai. — 2007. — Vol. 14, N2. —P. 11-17.

45. Characteristics of a -amylase induced in distal half-grains of wheat / Albert Hader, Kazuhide Rikiishi, Ahmed Nisar, Kazuhiko Noda // Breeding Science. — 2003. — Vol. 53. —P. 119-124.

46. Chen, С.-Х. A major QTL controlling seed dormancy and pre-harvest sprouting resistance on chromosome 4A in a Chinese wheat landrace / С.-Х. Chen, S.-B. Cai, G.-H. Bai // Molecular Breeding. — 2008. — Vol. 21, N 3. — P. 351-358.

47. Comparison of different methods for phenotyping preharvest sprouting in white-grained wheat / R. Singh, M. Matus-Cadiz, M. Baga, P. Hucl, R. N. Chibbar // Cereal Chemistry. — 2008. — Vol. 85, N 2. — P. 238-242.

48. Demiate, I. M. Characterization of chestnut (Castanea sativa Mill) starch for industrial utilization /1. M. Demiate, M. Oetterer, G. Wosiacki // Brazilian Archives of Biology and Technology. — 2001. — Vol. 44, N 1. — P. 69-78.

49. DePauw, R. Recombining dormancy and white seed color in a spring wheat cross / R. De Pauw, T. N. McCaig // Canadian Journal of Plant Science. — 1983. — Vol. 63, N3, — P. 581-589.

50. Dissection of genetic components of preharvest sprouting resistance in white wheat / S. Liu, G. Bai, S. Cai, C. Chen // Molecular Breeding. — 2010. — Vol. 27, N 4.1. P. 511-523.

51. Divashuk, M. G. The effect of selection for phenotypical characters on the chromosome constitution in spring triticale / M. G. Divashuk, A. A. Soloviev, G. I. Karlov // Russian Journal of Genetics. — 2010. — Vol. 46, N 3. — P. 340-344.

52. Dormancy in white-grain mutants of Chinese spring wheat (Triticum aestivum L.) / R. L Warner, D. A. Kudrna, S. C. Spaeth, S. S. Jones // Seed Science Research. — 2000. —Vol. 10. —P. 51-60.

53. Dormancy in white-grained wheat: Progress towards identification of genes and molecular markers / D. Mares, K. Mrva, M. K. Tan, P. Sharp // Euphytica. — 2002. —Vol. 126, N 1. — P. 47-53.

54. Drought and high temperature increases preharvest sprouting tolerance in a genotype without grain dormancy / T. B. Biddulph, D. J. Mares, J. A. Plummer, T. L. Setter // Euphytica. — 2005. — Vol. 143, N 3. — P. 277-283.

55. Effect of chromosomes of the wheat D genome on traits of hexaploid substitution triticale / W. Sodkiewicz, B. Apolinarska, T. Sodkiewicz, H. Wisniewska // Cereal Research Communications. — 2011. — Vol. 39, N 3. — P. 445-452.

56. Effect of grain colour gene (.R) on grain dormancy and sensitivity of the embryo to abscisic acid (ABA) in wheat / E. Himi, D. J. Mares, A. Yanagisawa, K. Noda // Journal of Experimental Botany. — 2002. — Vol. 53, N374. —P. 1569-1574.

57. Ellis, M. H. A 192bp allele at the Xgwm261 locus is not always associated with the Rht8 dwarfing gene in wheat (Triticum aestivum L.) / M. H. Ellis, D. G. Bonnett,

58. G. J. Rebetzke // Euphytica. — 2007. — Vol. 157, N 1-2. — P. 209-214.

59. Exploiting the diversity of Viviparous-1 gene associated with pre-harvest sprouting tolerance in European wheat varieties / L. Q. Xia, M. W. Ganal, P. R. Shewry, Z.

60. H. He, Y. Yang, M. S. Rôder // Euphytica. — 2008. — Vol. 159, N 3. — P. 411417.

61. Falling Number instruments, applications and method description : Perten Instruments Электронный ресурс. — Режим доступа:http://www.perten.com/Products/Falling-Number/ (дата обращения: 22.09.2012).

62. Finch-Savage, W. Е. Seed dormancy and the control of germination / W. E. Finch-Savage, G. Leubner-Metzger // New Phytologist. — 2006. — Vol. 171. —P. 501523.

63. Flintham, J. E. Different genetic components control coat-imposed and embryo-imposed dormancy in wheat // Seed Science Research. — 2000. — Vol. 10, N 1. — P. 43-50.

64. Flintham, J. E. Dormancy gene maps in homoeologous cereal genomes / J. E. Flintham, M. D. Gale // Pre-harvest sprouting in cereals. — Tokyo : Center for Academic Societies, 1996. —P. 143-149.

65. Flintham, J. E. The Tom Thumb dwarfing gene, Rht3 in wheat, I. Reduced pre-harvest damage to breadmaking quality / J. E. Flintham, M. D. Gale // Theoretical and Applied Genetics. — 1982. — Vol. 62, N2. —P. 121-126.

66. Gale, M. D. Cereal comparative genetics and preharvest sprouting / M. D. Gale, J. E. Flintham, K. M. Devos // Euphytica. — 2002. — Vol. 126, N 1. — P. 21-25.

67. Gene networks in hexaploid wheat: interacting quantitative trait loci for grain protein content / P. Kulwal, N. Kumar, A. Kumar, R. K. Gupta, H. S. Balyan, P. K. Gupta // Functional & Integrative Genomics. — 2005. — Vol. 5, N 4. — P. 254259.

68. Genetic analysis of pre-harvest sprouting in a durum wheat cross / R. E. Knox, F. R. Clarke, J. M. Clarke, S. L. Fox // Euphytica. — 2005. — Vol. 143, N 3. — P. 261-264.

69. Genetic analysis of pre-harvest sprouting resistance in a wheat X spelt cross / S. Zanetti, M. Winzeler, M. Keller, B. Keller, M. Messmer // Crop Science. — 2000. — Vol. 40, N5. —P. 1406-1417.

70. Genetic analysis of preharvest sprouting tolerance in three wheat crosses / W. R. Lawson, I. D. Godwin, M. Cooper, P. S. Brennan // Australian Journal of Agricultural Research. — 1997. — Vol. 48, N 2. — P. 215-222.

71. Genetic basis of pre-harvest sprouting tolerance using single-locus and two-locus QTL analyses in bread wheat / P. L. Kulwal, R. Singh, H. S. Balyan, P. K. Gupta // Functional & Integrative Genomics. — 2004. — Vol. 4, N 2. — P. 94-101.

72. Genetic map locations for orthologous Vpl genes in wheat and rice / P. C. Bailey, R. S. McKibbin, J. R. Lenton, M. J. Holdsworth, J. E. Flintham, M. D. Gale // Theoretical and Applied Genetics. — 1999. — Vol. 98, N 2. — P. 281-284.

73. Genetics of grain dormancy in a white wheat / M.-K. Tan, P. J. Sharp, M.-Q. Lu, N. Howes // Australian Journal of Agricultural Research. — 2006. — Vol. 57, N 11. —P. 1157-1165.

74. Genetics of late maturity a-amylase in a doubled haploid wheat population / M. K. Tan, A. P. Verbyla, B. R. Cullis, P. Martin, A. W. Milgate, J. R. Oliver // Crop and Pasture Science. — 2010. — Vol. 61, N 2. — P. 153.

75. Genome-wide QTL analysis for pre-harvest sprouting tolerance in bread wheat / A. Mohan, P. Kulwal, R. Singh, V. Kumar, R. R. Mir, J. Kumar, M. Prasad, H. S. Balyan, P. K. Gupta // Euphytica. — 2009. — Vol. 168, N 3. — P. 319-329.

76. Germination and growth inhibitors from wheat (Triticum aestivwn L.) husks / T. Kato, N. Saito, K. Kashimura, M. Shinohara, T. Kurahashi, K. Taniguchi // Journal of agricultural and food chemistiy. — 2002. — Vol. 50, N 22. — P. 6307-6312.

77. GrainGenes 2.0 Электронный ресурс. — Режим доступа: http://wheat.pw.usda.gov/GG2/index.shtml (дата обращения: 30.11.2011).

78. Gualano, N. A. The effect of water and nitrogen availability during grain filling on the timing of dormancy release in malting barley crops / N. A. Gualano, R. L. Benech-Arnold // Euphytica. — 2009. — Vol. 168, N 3. — P. 291-301.

79. Gubler, F. Dormancy release, ABA and pre-harvest sprouting / F. Gubler, A. A. Millar, J. V. Jacobsen // Current Opinion in Plant Biology. — 2005. — Vol. 8, N 2. — P. 183-187.

80. Hagberg, S. A rapid method for determining alpha-amylase activity // Cereal Chemistry. — 1960. — Vol. 37. — P. 218-222.

81. Plagemann M. G. Environmental X genotype effects on seed dormancy and after-ripening in wheat / M. G. Hagemann, A. J. Ciha // Agronomy Journal. — 1987. — Vol. 79. —P. 192-196.

82. Hatcher, D. W. Influence of sprout damage on oriental noodle appearance as assessed by image analysis / D. W. Hatcher, S. J. Symons // Cereal Chemistry. — 2000. — Vol. 77, N 3. — P. 380-387.

83. Henry, R. J. Re-evaluation of fluorescein dibutyrate staining as a method for assessment of pre-harvest sprouting in wheat and barley / R. J. Henry, B. T. McLean // Journal of Cereal Science. — 1986. — Vol. 4. —P. 51-56.

84. Himi, E. Colour genes (R and Rc) for grain and coleoptile upregulate flavonoid biosynthesis genes in wheat / E. Himi, A. Nisar, K. Noda // Genome. — 2005. — Vol. 48, N4. —P. 747-754.

85. Himi, E. Red grain colour gene (R) of wheat is a Myb-type transcription factor / E. Himi, K. Noda // Euphytica. — 2005. — Vol. 143, N 3. — P. 239-242.

86. Hucl, P. Divergent selection for sprouting resistance in spring wheat // Plant Breeding.— 1995. —Vol. 114, N3. — P. 199-204.

87. Humphreys, D. G. Methods for characterization of preharvest sprouting resistance in a wheat breeding program / D. G. Humphreys, J. Noll // Euphytica. — 2002. — Vol. 126. —P. 61-65.

88. Identification of a microsatellite on chromosomes 6B and a STS on 7D of bread wheat showing an association with preharvest sprouting tolerance / J. K. Roy, M. Prasad, R. K. Varshney, H. S. Balyan, T. K. Blake, H. S. Dhaliwal, K. J. Edwards,

89. P. K. Gupta // Theoretical and Applied Genetics. — 1999. — Vol. 99, N 1. — P. 336-340.

90. Identification of L-tryptophan as an endogenous inhibitor of embryo germination in white wheat / C. F. Morris, D. D. Mueller, J. M. Faubion, G. M. Paulsen // Plant physiology. — 1988. —Vol. 88, N2. —P. 435-440.

91. Increased grain dormancy in white-grained wheat by introgression of preharvest sprouting tolerance QTLs / N. S. Kottearachchi, N. Uchino, K. Kato, H. Miura // Euphytica. — 2006. — Vol. 152, N 3. — P. 421-428.

92. Introduction of short straw genes in Romanian triticale germplasm / G. Ittu, N. N. Saulescu, M. Ittu, P. Mustatea // Romanian Agricultural Research. — 2007. — N 24. —P. 7-10.

93. Isolation and characterization of Viviparous-1 genes in wheat cultivars with distinct ABA sensitivity and pre-harvest sprouting tolerance / Y. Yang, Y. Z. Ma, Z. S. Xu,

94. X. M. Chen, Z. H. He, Z. Yu, M. Wilkinson, H. D. Jones, P. R. Shewry, L. Q. Xia // Journal of Experimental Botany. — 2007. — Vol. 58, N 11. — P. 2863-2871.

95. Jensen, S. A. An improved method for the determination of pregerminated grains in barley / S. A. Jensen, F. Heltved // Carlsberg Research Communications. —1983. — Vol. 48, N 1. — P. 1-8.

96. Joosse, S. In-silico : Project support for life sciences Электронный ресурс. / S. Joosse, J. Hannemann. — Hamburg. Режим доступа: http://in-silico.net/tools/statistics/fisherexacttest (дата обращения: 26.09.2012).

97. Jouve, N. Triticale genomic and chromosomes' history / N. Jouve, C. Soler // Triticale: today and tomorrow. — Dordrecht: Kluwer Academic Publishers, 1996.1. P. 91-118.

98. King, R. W. Epicuticular waxes and regulation of ear wetting and pre-harvest sprouting in barley and wheat / King R. W., Wettstein-Knowles P. // Euphytica. — 2000. — Vol. 112, N 2. — P. 157-166.

99. King, R. W. Manipulation of grain dormancy in wheat // Journal of Experimental Botany. — 1993. —Vol. 44, N6.—P. 1059-1066.

100. King, R. Water uptake in relation to pre-harvest sprouting damage in wheat: ear characteristics / R. King, R. Richards // Australian Journal of Agricultural Research. — 1984. — Vol. 35, N 3. — P. 327-336.

101. King, R. Water uptake in relation to pre-harvest sprouting damage in wheat: grain characteristics // Australian Journal of Agricultural Research. — 1984. — Vol. 35, N3.—P. 337.

102. Lande, R. Efficiency of marker-assisted selection in the improvement of quantitative traits / R. Lande, R. Thompson // Genetics. — 1990. — Vol. 124, N 3.1. P. 743-756.

103. Lee, J.-H. Detection of rye chromosome 2R using the polymerase chain reaction and sequence-specific DNA primers // Genome. — 1994. — Vol. 37, N 1. — P. 19-22.

104. Liatukas, Z. Coleoptile length and plant height of modern tall and semi-dwarf European winter wheat varieties / Z. Liatukas, V. Ruzgas // Acta Societatis Botanicorum Poloniae. — 2011. — Vol. 80, N 3. P. 197-203.

105. Location of Wheat Powdery Mildew Resistance Genes with Molecular Marker and Marker-Assisted Selection | China Papers Электронный ресурс. — Режим доступа: http://www.china-papers.com/?p=70366 (дата обращения: 05.06.2012).

106. Lohwasser, U. QTL mapping of the domestication traits pre-harvest sprouting and dormancy in wheat (Triticwn aestivum L.) / U. Lohwasser, M. S. Rôder, A. Borner // Euphytica. — 2005. — Vol. 143, N 3. — P. 247-249.

107. Low and high alpha-amylase activity in rye and triticale criteria for sprouting damage and processing / W. Flamme, В. Stôlken, P. Dill, E.-E. Kruper // Vortr. Pflanzenziichtg. — 1991. — Vol. 20. — P. 293-302.

108. Mapping genes for resistance to sprouting damage in wheat / J. Flintham, R. Adlam, M. Bassoi, M. Holdsworth, M. Gale // Euphytica. — 2002. — Vol. 126, N 1. —P. 39-45.

109. Mapping QTLs for grain dormancy on wheat chromosome ЗА and the group 4 chromosomes, and their combined effect / M. Mori, N. Uchino, M. Chono, K. Kato, H. Miura // Theoretical and Applied Genetics. — 2005. — Vol. 110, N 7. — P. 1315-1323.

110. Mapping QTLs for pre-harvest sprouting tolerance on chromosome 2D in a synthetic hexaploid wheat X common wheat cross / R. Xiao-bo, L. Xiu-jin, L. Deng-cai, W. Jia-li, Z. You-liang // Journal of applied genetics. — 2008. — Vol. 49, N4. —P. 333-341.

111. Mapping QTLs for pre-harvest sprouting traits in the spring wheat cross 'RL4452/AC Domain' / G. Rasul, D. G. Humphreys, A. Brûlé-Babel, С. A. McCartney, R. E. Knox, R. M. DePauw, D. J. Somers // Euphytica. — 2009. — Vol. 168,N3. — P. 363-378.

112. Mapping QTLs for seed dormancy and the Vpl homologue on chromosome 3A in wheat / M. Osa, K. Kato, M. Mori, C. Shindo, A. Torada, H. Miura // Theoretical and Applied Genetics. —2003. —Vol. 106, N 8. — P. 1491-1496.

113. Mapping quantitative trait loci for preharvest sprouting resistance in white wheat / J. D. Munkvold, J. Tanaka, D. Benscher, M. E. Sorrells // Theoretical and Applied Genetics. —2009.—Vol. 119, N 7. — P. 1223-1235.

114. Mares, D. J. Mapping quantitative trait loci associared with variation in grain dormancy in Australian wheat / D. J. Mares, K. Marva // Australian Journal of Agricultural Research. — 2001. — Vol. 52. —P. 1257-1265.

115. Mares, D. J. Temperature dependence of germinability of wheat (Triticum aestivum L.) grain in relation to pre-harvest sprouting // Aust. J. Agric. Res. — 1984. — Vol. 35, —P. 115-128.

116. Marker-assisted selection for pre-harvest sprouting tolerance and leaf rust resistance in bread wheat / J. Kumar, R. R. Mir, N. Kumar, A. Kumar, A. Mohan, K. V. Prabhu, H. S. Balyan, P. K. Gupta // Plant Breeding. — 2010. — Vol. 129, N 6. —P. 617-621.

117. Marva, K. Quantitative trait locus analysis of late maturity a -amylase in wheat using doubled haploid population Cranbrook X Halberd / K. Marva, D. J. Mares // Australian Journal of Agricultural Research. — 2001. — Vol. 52. — P. 12671273.

118. Masi, P. Effects of preharvest sprouting on the genetic structure of durum wheat «landraces» / P. Masi, P. L. Spagnoletti Zeuli // Plant Breeding. — 1999. — Vol. 118. —P. 307-311.

119. Masojc, P. Mapping QTLs for alpha-amylase activity in rye grain / P. Masojc, P. Milczarski // Journal of Applied Genetics. — 2005. — Vol. 46, N 2. —- P. 115123.

120. Miyamoto, T. Biochemical and physiological studies of wheat seed pigmentation / Takao Miyamoto, E. H. Everson // Agronomy Journal. — 1958. — Vol. 50. — P. 733-734.

121. Miyamoto, T. Germination inhibitors related to dormancy in wheat seeds / T. Miyamoto, N. E. Tolbert, E. H. Everson // Plant Physiology. — 1961. — Vol. 36, N6. —P. 739.

122. Molecular aspects of seed dormancy / R. Finkelstein, W. Reeves, T. Ariizumi, C. Steber // Annual review of plant biology. — 2008. — Vol. 59. — P. 387-415.

123. Molecular cloning and expression of abscisic acid-responsive genes in embryos of dormant wheat seeds / C. F. Morris, R. J. Anderberg, P. J. Goldmark, M. K. Walker-Simmons//Plant Physiology. — 1991. —Vol. 95. —P. 814-821.

124. Morris, C. F. Preharvest sprouting of hard winter wheat as affected by nitrogen nutrition / C. F. Morris, G. M. Paulsen // Crop Science. — 1985. — Vol. 25, N 6. — P. 1028-1031.

125. Mos, M. Changes in the germinability and vigour of winter triticale seeds with sprouting damage // Plant, Soil and Environment. — 2003. — Vol. 49. — P. 126— 130.

126. Mrva, K. a-Amylase and programmed cell death in aleurone of ripening wheat grains / K. Mrva, M. Wall work, D. J. Mares // Journal of Experimental Botany. — 2006. — Vol. 57, N 4. — P. 877-885.

127. Nakamura, S. Mapping diploid wheat homologues of Arabidopsis seed ABA signaling genes and QTLs for seed dormancy / S. Nakamura, T. Komatsuda, H. Miura // Theoretical and Applied Genetics. — 2007. — Vol. 114, N 7. — P. 11291139.

128. Noda, K. Fluorescent staining technique for evaluating embryo sensitivity to abscisic acid of sprouting-resistant wheat cultivars / Kazuhiko Noda, Ken Kanzaki //Japanese journal of breeding. — 1988. — Vol. 38. — P. 301-308.

129. Occurrence of three dwarfing Rht genes in German winter wheat varieties / C. Knopf, H. Becker, E. Ebmeyer, V. Korzun // Cereal Research Communications. — 2008. — Vol. 36, N 4. — P. 553-560.

130. Olered, R. Development of alpha-amylase and falling number in wheat and rye during ripening : Vaextodling. Plant husbandry, no. 23. Uppsala, 1967. - 106 p.

131. Perten, H. Application of the falling number method for evaluating alpha-amylase activity // Cereal Chemistry. — 1964. — Vol. 41, N 3. — P. 127-140.

132. Properties and application of starch-converting enzymes of the a-amylase family / Marc J.E.C. van der Maarel, Bart van der Veen, Joost C. M. Uitdehaag, Hans Leemhuis, L. Dijkhuizen // Journal of Biotechnology. — 2002. — Vol. 94. — P. 137-155.

133. QTLs for resistance to preharvest sprouting in rye (Secale cereale L.) / P. Masojc, A. Banek-Tabor, P. Milczarski, M. Twardowska // Journal of Applied Genetics. — 2007. — Vol. 48, N 3. — P. 211-217.

134. Quantifying the sensitivity of barley seed germination to oxygen, abscisic acid, and gibberellin using a population-based threshold model / K. J. Bradford, R. L.

135. Benech-Arnold, D. Come, F. Corbineau // Journal of Experimental Botany. — 2008. — Vol. 59, N 2. — P. 335-347.

136. Ranal, M. A. How and why to measure the germination process? / M. A. Ranal, D. G. De Santana // Revista Brasileira de Botanica. — 2006. — Vol. 29, N 1. — P. 111.

137. Reddy, L. V. Effect of temperature on seed dormancy of wheat / L. V. Reddy, R. J. Metzger, T. M. Ching // Crop Science. — 1985. — Vol. 25, N 3. — P. 455^158.

138. Reddy, V. R. K. Rye chromosome composition and kernel characters in hexaploid triticales / V. R. K. Reddy, Zereena Viji // Crop Research. — 1999. — Vol. 17, N 1. —P. 75-79.

139. Relationships between height and yield in near-isogenic spring wheats that contrast for major reduced height genes / S. C. Chapman, K. L. Mathews, R. M. Trethowan, R. P. Singh // Euphytica. — 2006. — Vol. 157, N 3. — P. 391-397.

140. Robbins, A. M. Dwarfing genes in spring wheat: an agronomic comparison oiRht-B1, Rht-Dl, and Rht8 : thesis . master of science : plant science / Amber Marie Robbins. — Montana State University, 2009. 74 p.

141. Robertson, D. S. The genetics of vivipary in maize // Genetics. — 1955. — Vol. 40, N 5. — P. 745-760.

142. Royo, C. Differential adaptation of complete and substituted triticale / C. Royo, A. Rodriguez, I. Romagosa // Plant Breeding. — 1993. — Vol. 111, N 2. — P. 113119.

143. Rybka K. An approach to identification of rye chromosomes affecting the pre-harvest sprouting in triticale // Journal of Applied Genetics. — 2003. — Vol. 44, N 4. —P. 491-496.

144. Salmon, D. F. Preharvest and postharvest dormancy in spring triticale / D. F. Salmon, J. H. Helm // Agronomy Journal. — Vol. 77. — P. 649-652.

145. Sandhya, T. Meta-analysis of QTLs involved in pre-harvest sprouting tolerance and dormancy in bread wheat / Tyagi Sandhya, Gupta Pushpendra Kumar // Triticeae Genomics and Genetics. — 2012. Vol. 3, N 2. - P. 9-24.

146. Seed germination of two Everglades species, Cladium jamaicense and Typha dominigensis / B. Lorenzen, H. Brix, K. L. McKee, I. A. Mendelssohn, S. L. Miao // Aquatic Botany. — 2000. — Vol. 66. — P. 169-180.

147. Singh, N. K. A simplified SDS—PAGE procedure for separating LMW subunits of glutenin / N. K. Singh, K. W. Shepherd, G. B. Cornish // Journal of Cereal Science.1991. —Vol. 14, N3. —P. 203-208.

148. Singh, R. Identification and validation of genomic regions associated with pre-harvest sprouting resistance in white-grained wheat (Triticum aestivum L.) : A Thesis . Doctor of Philosophy / Rajender Singh — University of Saskatchewan, 2008.- 150 p.

149. Skerritt, J. H. A five-minute field test for on-farm detection of pre-harvest sprouting in wheat / J. H. Skerritt, R. H. Heywood // Crop Science. — 2000. — Vol. 40, N3.—P. 742.

150. Skinnes, H. Effects of post maturity seed moisture level on seed dormancy in wheat / H. Skinnes, M. E. Sorrells // Acta Agric. Scand. — 1990. — Vol. 40. — P. 341-348.

151. Skovmand, B. Triticale in commercial agriculture: progress and promise / B. Skovmand, P. N. Fox, R. L. Villareal // Advances in Agronomy. Academic Press, 1984.-Vol. 37. —P. 1-45.

152. Sodkiewicz, W. Sprouting resistance and Falling Number values in introgressive Triticale! T. monococcum lines // Biologia Plantarum. — 1999. — Vol. 42, N 4. — P. 533-539.

153. Steinbach, H. S. Hormonal regulation of dormancy in developing sorghum seeds / H. S. Steinbach, R. L. Benech-Arnold, R. A. Sanchez // Plant Physiology. — 1997.

154. Vol. 113,N 1. —P. 149-154.

155. Stoy, V. Effects of growth regulating substances in cereal seed germination / V. Stoy, K. Sundin // Cereal Research Communications. — 1976. — Vol. 4, N 2. — P. 157-163.

156. Study of the relationship between pre-harvest sprouting and grain color by quantitative trait loci analysis in a white X red grain bread-wheat cross / C. Groos,

157. G. Gay, M. R. Perretant, L. Gervais, M. Bernard, F. Dedryver, G. Charmet // Theoretical and Applied Genetics. — 2002. — Vol. 104, N 1. — P. 39-47.

158. Takahashi, N. Inhibitory effect of oxygen on seed germination as a specific trait of japonica rice, Oryza sativa L. / Norindo Takahashi, Kazumitsu Miyoshi 11 Japanese journal of breeding. — 1985. — Vol. 35. — P. 383-389.

159. Temperature effects on seed germination and expression of seed dormancy in wheat / J. M. Nyachiro, F. R. Clarke, R. M. DePauw, R. E. Knox, K. C. Armstrong //Euphytica. — 2002. — Vol. 126, N 1. —P. 123-127.

160. Tenhola-Roininen, T. Tagging the dwarfing gene Ddwl in a rye population derived from doubled haploid parents / T. Tenhola-Roininen, P. Tanhuanpaa // Euphytica. — 2009. — Vol. 172, N 3. — P. 303-312.

161. Torada, A. Mapping and validation of PCR-based markers associated with a major QTL for seed dormancy in wheat / A. Torada, S. Ikeguchi, M. Koike // Euphytica.2005. —Vol. 143, N 3. — P. 251-255.

162. Triticale improvement and production / M. Mergoum. — Rome : Food and Agriculture Organization of the United Nations, 2004. 157 p.

163. Triticale: A "New" Crop with Old Challenges / M. Mergoum, P. K. Singh, R. J. Peña, A. J. Lozano-del Río, K. V. Cooper, D. F. Salmon, H. Gómez Macpherson // Cereals. — New York : Springer, 2009. — P. 1-21.

164. Varma, P. K. Secondary dormancy in Indian and exotic varieties of wheat {Triticum species) induced by high temperature / P. K. Varma, A. N. Mishra, K. N. Ruwali // Indian Journal of Agricultural Sciences. — 1991. — Vol. 61, N 12. — P. 992-994.

165. Walker-Simmons, M. ABA levels and sensitivity in developing wheat embryos of sprouting resistant and susceptible cultivars // Plant Physiol. — 1987. — Vol. 84.1. P. 61-66.

166. Walker-Simmons, M. Enhancement of ABA responsiveness in wheat embryos by high temperature // Plant, Cell and Environment. — 1988. — Vol. 11. — P. 769775.

167. Watanabe, N. The effects of homoeologous group 3 chromosomes on grain colour dependent seed dormancy and brittle rachis in tetraploid wheat / N. Watanabe, N. Ikebata//Euphytica. — 2000. — Vol. 115, N 3. — P. 215-220.138