Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Отдаленные последствия пренатального воздействия свинца на головной мозг крым и влияние на них препаратов с антиоксидантными свойствами

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Отдаленные последствия пренатального воздействия свинца на головной мозг крым и влияние на них препаратов с антиоксидантными свойствами"

На правах рукописи

БЕЛОЛЮБСКАЯ Дария Степановна

ОТДАЛЕННЫЕ ПОСЛЕДСТВИЯ ПРЕНАТАЛЬНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ СВИНЦА НА ГОЛОВНОЙ МОЗГ КРЫС И ВЛИЯНИЕ НА НИХ ПРЕПАРАТОВ С АНТИОКСИДАНТНЫМИ СВОЙСТВАМИ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

□□3 1667-58

Владивосток 2008

Работа выполнена на кафедре гистологии и в Центральной научно-исследовательской лаборатории ГОУ ВПО «Дальневосточный государственный медицинский университет Росздрава»

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Рыжавский Борис Яковлевич

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Черток Виктор Михайлович доктор медицинских наук, профессор Радивоз Михаил Иванович

Ведущее организация: Хабаровский филиал Дальневосточного

научного центра Физиологии и патологии дыхания СО РАМН - НИИ Охраны материнства и детства

Защита диссертации состоится «_»_2008 года

на заседании диссертационного совета Д 208.007.01 при ГОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет Росздрава» по адресу: 690002, г. Владивосток, пр. Острякова, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Владивостокского государственного медицинского университета

Автореферат разослан « »_2008 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор

Г.В. Рева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Эмбриогенез представляет собой важный период развития, когда формирующийся головной мозг особо подвержен воздействиям внешних агентов, среди которых заметная роль отводится влиянию неблагоприятных факторов окружающей среды (А H Ильинов и др, 1997, А А Быков, Б А Ревич, 2001, П Ю Горобец и др , 2005, H Ни et al, 2006) Среди загрязнителей среды обитания свинец признается одним из важнейших (L M Chiodo et al, 2004, W G Wang et al, 2005, Э X Ахметзянова, A Б Бакиров, 2006, J Gasana et al, 2006, R Ronchetti et al, 2006) Известна возможность проникновения токсических концентраций этого элемента в формирующийся организм через плаценту и грудное молоко (S Ettinger Adrienne et al, 2004, J Lafond et al, 2004), приводящая к развитию нейропсихических нарушений умственного развития у детей, подвергнутых действию токсиканта (R L Canfield et al, 2004, Г M Бодиен-кова и др , 2007)

Установлено, что важным механизмом нейротоксического действия свинца является развитие окислительного стресса (ИМ Гнидой, 2000, ИМ Трахтенберг и др, 2002, A Heydan et al, 2006, D J Hoffman et al, 2006) Отмечаемые при этом морфологические, морфометрические и поведенческие сдвиги, зачастую не сопоставляются с метаболическими изменениями в нейронах В то же время, механизмы формирования отдаленных последствий в головном мозге после пренатального воздействия свинца в литературе не освящены, хотя и представляют большой интерес Так, не установлено являются ли изменения морфологии и метаболизма нейронов следствием прямого действия токсиканта в остром периоде воздействия или же - следствием программирующего эффекта свинца на цито- и биохимический статус нейронов и глиальных клеток

Вопрос о возможности предупреждения/минимизирования последствий влияния свинца на развивающийся мозг детей остается актуальным В ряде экспериментальных работ подтверждена эффективность применения препаратов с антиоксидантными свойствами, при воздействии различных доз соедине-

ний свинца (Н Esterbauer et al, 1992, В Frei, J M Gaziano, 1993, N D Vaziri, Y Ding, 2001) Изучение эффективности действия препаратов «Триовит», «Гисто-хром» и «Эпиталон», обладающих антиоксидантными свойствами (А В Лебедев и др , 1999, Э Б Арушанян и др , 2001, В X Хавинсон, 2001, С В Анисимов и др, 2004, В 3 Ланкин и др, 2004), на развитие мозга, нарушенного под влиянием пренатального воздействия свинца, может послужить стимулом для дальнейшего выяснения перспектив использования их при различных токсических воздействиях

Цель исследования: изучить отдаленные последствия введения свинца беременным крысам на показатели гистофизиологии нейронов, процессы сво-боднорадикального окисления в разных отделах головного мозга их потомства, а также - возможность минимизации последствий влияния свинца препаратами с антиоксидантными свойствами («Триовит», «Гистохром» и «Эпиталон»)

Задачи исследования:

1 Изучить морфологические, морфометрические, биохимические и физиологические показатели состояния головного мозга 40-дневных крыс - потомства самок, которым во время беременности был введен нитрат свинца

2 Изучить влияние препарата «Триовит», содержащего витамины С, Е, провитамин А и селен, на выраженность отдаленных последствий воздействия свинца на головной мозг

3 Изучить влияние препарата «Гистохром», биоантиоксиданта из группы полигидроксинафтахинонов, на выраженность отдаленных последствий воздействия свинца на головной мозг

4 Изучить влияние препарата «Эпиталон», синтетического тетрапептида, на выраженность отдаленных последствий воздействия свинца на головной мозг

Научная новизна исследования:

1 Описаны морфометрические, гистохимические, биохимические и физиологические особенности развития головного мозга неполовозрелых животных, подвергнутых в пренатальном периоде воздействию свинца

2 Получены данные о влиянии препарата «Триовит» на морфометриче-ские, гистохимические, биохимические и физиологические показатели развития головного мозга 40-дневных крыс, подвергнутых пренатальному воздействию нитрата свинца

3 Получены данные о влиянии препарата «Гистохром» на морфометриче-ские, гистохимические, биохимические и физиологические показатели развития головного мозга 40-дневных крыс, подвергнутых пренатальному воздействию нитрата свинца

4 Получены данные о влиянии препарата «Эпиталон» на морфометриче-ские, гистохимические, биохимические и физиологические показатели развития головного мозга 40-дневных крыс, подвергнутых пренатальному воздействию нитрата свинца

Научная и практическая значимость работы. В диссертации описаны отдаленные последствия введения в пренатальном периоде нитрата свинца на морфометрические, гистохимические, биохимические и физиологические показатели развития головного мозга крыс, а также возможности рационального воздействия на отклонения развития головного мозга, формирующиеся на ранних этапах онтогенеза под влиянием токсических агентов Эти данные могут быть использованы как базовые в экспериментальных исследованиях головного мозга Сведения о влиянии препаратов «Триовит», «Гистохром» и «Эпиталон» представляют интерес для гистологов, неонатологов, акушеров-гинекологов, педиатров, фармакологов, разрабатывающих методы коррекции дефектов развития головного мозга, индуцированных влиянием различных повреждающих агентов, в том числе свинца

Основные положения, выносимые на защиту:

1 40-дневное потомство самок, получивших во время беременности нитрат свинца, характеризуются достоверным уменьшением числа нейронов в поле зрения II и V слоев неокортекса, увеличением количества патологически измененных/гибнущих нейронов в неокортексе, формированием кист, пролиферацией глиоцитов, выраженной активацией процессов СРО в коре, белом веществе

полушарий и стволе мозга, снижением активности N АБН-дегидрогеназы в нейронах V слоя и активности ЫАБРН-дегидрогеназы в гиппокампе и в V слое неокортекса Поведение подопытных крыс характеризуется увеличением двигательной активности крыс в ПКЛ

2 Выявленные морфологические, гисто- и биохимические особенности мозга крыс, подвергнутых пренатальному воздействию свинца, могут объясняться как его действием в период введения, так и механизмами программирования или биохимического импринтинга

3 Исследованные препараты («Триовит», «Гистохром», «Эпиталон»), обладающие антиоксидантыми свойствами, уменьшают выраженность изменений головного мозга потомства самок, получавших свинец, но не предотвращают их полностью

Апробация материалов диссертации. Материалы работы докладывались на Всероссийской научной конференции с международным участием «Структурно-функциональные и нейрохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга - 2006» (Государственный научно-исследовательский Институт Мозга РАМН, г Москва, 2006), X краевом конкурсе молодых ученых и аспирантов (ДВГМУ, г Хабаровск, 2008)

Публикации: по теме диссертации опубликованы 4 печатные работы, в том числе 3 в журналах, входящих в Перечень ведущих научных журналов и изданий ВАК

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы и 5 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы Работа изложена на 170 страницах машинописного текста и содержит 19 таблиц, 26 рисунков Список литературы представлен работами 142 отечественных и 106 иностранных авторов

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материалы и методы исследования. В работе исследовался головной мозг 147 беспородных белых крыс из 20 пометов в возрасте 40 дней Все животные были получены от спаривания 4-6 месячных самцов и самок Животные были разделены на 5 групп 1-я (п=39) - потомство 6 интактных самок, 2-я (п=60) - потомство 7 самок, которым на 17-18 день беременности через желудочный зонд вводили однократно 0,9-1,1 мл 4% раствора нитрата свинца (200 мг/кг массы тела) В 3-й группе (п=10) изучалось потомство 2 самок крыс, которые были затравлены нитратом свинца тем же способом и получали с пищей «Триовит» (ТШОУ1Т, КК.КА, БЬуета) Препарат в течение II половины беременности (с 10 дня после зачатия, ежедневно) и всего лактационного периода (30 дней) давали с пищей, для чего к 2 г мясного фарша добавлялась 1/10 капсулы «Триовита», содержавшей 1 мг (3-каротина, 4 мг токоферола ацетата, 10 мг аскорбиновой кислоты и 5 мкг селена 4-я группа (п=26) включала потомство 3 самок крыс, получавших 1% раствор «Гистохрома» (О^осЬгот), содержащий в 1 мл 0,01 г эхинохрома (2,3,5,7,8-пентагидрокси-6-этилнафталиндион-1,4) и 0,045 г натрия углекислого Препарат, разведенный 1 50 физраствором, в дозе 0,1 мг/кг дважды вводился беременным самкам внутрибрюшинно за день до введения нитрата свинца, осуществлявшегося на 17-18 сутки беременности, и на следующий день после затравки 5-я группа (п=12) - потомство 2 самок, получивших раствор «Эпиталона» по 100 мкг в 1 мл, который применялся в разведении физраствором 1 50 в количестве 0,1 мл разведенного раствора внутримышечно (0,1 мг/кг) двукратно, в те же сроки до и после введения нитрата свинца Дозы нитрата свинца, а также исследованных препаратов подобраны исходя из имеющихся данных (А А Королев, Б П Суханов, 1996, Г Г Коновалова и др, 2003, А Ш Бышевский и др , 2005, В П Дерягина и др, 2005, Э Б Арушанян, К С Эльбекьян, 2006) Все животные, потомство которых изучалось, содержались до спаривания и в дальнейшем, после рождения потомства, в условиях одного вивария, кормление и воду получали аё ЫлОш Забой контрольных и экспериментальных животных проводили одновременно, декапита-

цией, на 40 день жизни, в утренние часы Во всех группах определяли гравиметрические показатели массу тела, головного мозга, полушария

Кора и белое вещество левого полушария и ствол мозга 40-дневных крыс использовали для биохимических исследований свободнорадикального окисления (СРО) методом хемилюминесценции (XMJI) Правое полушарие разрезалось во фронтальной плоскости, строго перпендикулярно длиннику и верхней поверхности на равные доли Лобную часть фиксировали в жидкости Карнуа в течение 1 часа и затем заливали в парафин для изготовления срезов переднете-менной доли (ПТД) толщиной 7 мкм, которые окрашивали 1% метиленовым синим и на нуклеиновые кислоты (НК) галлоцианином по Эйнарсону (Д Кисели, 1962) В пирамидных нейронах собственно теменной доли (СТД) (V слой) и I поля гиппокампа определяли активность NADH- и NADPH-дегидрогеназ (3 Лойда и др, 1982)

Регистрацию показателей ХМЛ в гомогенатах коры, белого вещества левого полушария и ствола мозга осуществляли на люминесцентном спектрометре LS 50В «PERKIN ELMER» Стандартизацию сигнала и математическую обработку кривых ХМЛ выполняли с помощью встроенной программы «Finlab» Спонтанную и индуцированную Fe2+ ХМЛ исследовали по методу (Ю А Владимиров и др., 1991) Определяли светосумму за 1 мин спонтанной ХМЛ (Scn), величина которой коррелирует с интенсивностью свободнорадикальных процессов, максимум «быстрой» вспышки (h) индуцированной ХМЛ, свидетельствующий о содержании гидроперекисей липидов, светосумму (S„HJI 1) за 4 мин после «быстрой» вспышки, отражающую скорость образования перекисных радикалов липидной природы Кинетику ХМЛ, инициированную Н202 в присутствии люминола, анализировали по двум параметрам максимуму свечения (Н), указывающему на потенциальную способность биологического объекта к пере-кисному окислению, и светосумме за 2 мин ХМЛ (S„„a2), величина которой свидетельствует об активности антиоксидантной и антирадикальной защиты Интенсивность ХМЛ, измеренную в милливольтах, рассчитывали на 1 г влажной ткани и выражали в относительных единицах

Морфологическое исследование проводилось на препаратах с сериями из 3-4 срезов ПТД головного мозга, окрашенных метиленовым синим, при увеличении объектива х8 и х40 (окуляр хЮ) Качественную оценку изменений нейронов проводили на основе сравнительного анализа их морфологии Используя описание патологической морфологии нейронов (ЮМ Жаботинский, 1965, М В Войно-Ясенецкий, Ю М Жаботинский, 1970), были выделены дегенерирующие «темные» нейроны с явлениями карио- и цитопикноза, дистрофические кальцинированные клетки и апоптозные тельца Количественный анализ гибнущих/патологически измененных нейронов осуществлялся при помощи окуляра хЮ, объектива х20, в 10 стандартных полях зрения наружных (II-III) и глубоких (V-VI) слоев неокортекса соответственно

Морфометрическое исследование препаратов ПТД, окрашенных галло-цианином по Эйнарсону включало

1 Определение толщины коры головного мозга и ее I слоя Для этого в каждом случае измерение проводилось в 3 участках, относящихся к ПТД, при помощи окуляр-микрометра МОВ-15, при увеличении объектива хЗ,7

2 Определение плотности расположения нейронов во II и V слоях неокортекса Для этого производили подсчет количества клеток в 5 полях зрения каждого слоя при помощи окуляра хЮ, при увеличении объектива х40 Площадь стандартного поля зрения равна 10 ООО мкм2

3 Измерение площади сечения ядрышек, ядер и цитоплазмы нейронов II и V слоев проводили с помощью морфометрического аппарата «МЕКОС» (Медицинские компьютерные системы) Для этого в каждом случае измеряли не менее 25 клеток в каждом слое неокортекса

Гистохимические исследования включали

1 Определение концентрации НК в ядрышке, ядре и цитоплазме нейронов II и V слоев неокортекса ПТД Для этого измерялась оптическая плотность этих структур в зеленом спектре (Ä.=550 нм) на препаратах, окрашенных гаплоциа-нином, при помощи морфометрического аппарата «МЕКОС»

2 Определение активности NADH- и NADPH-дегидрогеназ тетразолие-вым методом по Lojda (3 Лойда и др , 1982) в нейронах V слоя неокортекса и гиппокампа Реакции проводились в строго стандартизированных условиях на криостатных срезах (20 мкм) СТД правого полушария Результат оценивали измерением средней оптической плотности в зеленом спектре (Х=550 нм) на аппарате «МЕКОС» Исследовалось не менее 25 клеток в каждой области

Показатели ВНД оценивались в приподнятом крестообразном лабиринте (ПКЛ), на основании регистрации в течение 3 мин времени и числа «элементарных» актов поведения (стойки, свешивания, принюхивания, пребывание в открытых и закрытых рукавах, грумминг) крысят в 30-дневном возрасте с регистрацией в оригинальной компьютерной программе Rat Test Version 1 0 (Ю А Сапожников и др , 2002) Статистическую обработку экспериментального материала проводили с помощью программы Statistica 6 0, различия считали достоверными при Р</= 0,05

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Влияние введения нитрата свинца самкам крыс во время беременности на головной мозг их потомства

В первой части исследования нами были установлены отличия показателей головного мозга 40-дневных крыс - потомства самок, которым во время беременности был введен нитрат свинца, от таковой у интактных крыс того же возраста

Анализ показателей ХМЛ гомогенатов коры, белого вещества полушария и ствола мозга выявил, что в коре величина Scn, отражающая интенсивность СРО, возросла в 3,2 раза Зарегистрированы также повышение концентрации гидроперекисей липидов в 4 раза и ускорение образования перекисных радикалов в 3,4 раза При этом наблюдалось ослабление антиоксидантной антирадикальной защиты и снижение резистентности к перекисному окислению величины S„„„ 2 и Н возросли в 3,2 и 2,8 раза соответственно Изучение показателей ХМЛ гомогенатов белого вещества показало увеличение Scn в 2,8 раза, h - в

3,5 раза, 8ИНД1 - в 2,7 раза, Н и Бияа2 - в 2,2 раза В гомогенатах ствола мозга показатели увеличились в 2,9-, 3,6-, 2,8-, 2,4-, 2,3 раза соответственно (табл 1) Резкая активация процессов СРО спустя значительный срок после пренатально-го воздействия нитрата свинца в отделах головного мозга крыс препубертатно-го возраста установлена нами впервые Полученные результаты позволяют полагать, что выявленные метаболические изменения относятся к запечатленным в эмбриогенезе проявлениям биохимического импринтинга

Гистохимическое исследование выявило, что активность ЫАБН-дегидрогеназы достоверно снизилась в нейронах неокортекса, а активность ИАОРН-дегидрогеназы - в нейронах неокортекса и гиппокампа (табл 1) Угнетение ЫАОН-дегидрогеназы отражает снижение интенсивности преимущественно митохондриальных окислительных процессов. Данные литературы свидетельствуют, что митохондрии обладают высокой чувствительностью к свинцу (М J Неупеп е1 а1, 1987) Под влиянием усиления процессов ПОЛ возникают структурные и функциональные сдвиги в митохондриальных мембранах (Л С Козина, 2007), приводящие к развитию митохондриальной недостаточности (А В Кудрин, О А Громова, 2006) Снизившаяся активность ЫАОРН-дегидро-геназы, суммарного показателя внемитохондриальных ЫАОРН-зависимых де-гидрогеназ, связанных с функцией эндоплазматической сети, отражает изменения интенсивности преимущественно внемитохондриальных окислительных процессов (Г Б Ковальский, 1990) Определение концентрации НК показало достоверное ее увеличение в ядрышках, ядрах и цитоплазме нейронов II слоя неокортекса и ядрышках и цитоплазме нейронов V слоя (табл 1)

Морфометрическое изучение показало достоверное уменьшение числа нейронов в поле зрения во II и V слоях неокортекса и увеличение количества гибнущих/патологически измененных нейронов в поле зрения во И-Ш слоях и У-УТ слоях неокортекса соответственно (табл 1) Среди клеток неокортекса выделяются большое количество гиперхромофильных нейронов с признаками карио- и цитопикноза, единичные кальцинированные нейроны и апоптозные тельца Выявлено образование в мозге крыс участков разреженности располо-

жения нейронов с очагами пролиферации глиоцитов и кистами Известно, что клеточная гибель нейронов через апоптоз или некроз зачастую индуцируется продуктами обмена кислорода и результирующего окислительного стресса (И М Трахтенберг и др , 2002) Есть данные, что апоптоз нейронов вызывается оксидативным повреждением митохондрий клеток (С Репег et а1, 2005) Увеличение числа гибнущих/патологически измененных нейронов отражает продолжающуюся гибель нейронов, в том числе и по механизмам апоптоза, спустя большой срок после воздействия свинца, индуцированную остающейся повышенной активностью процессов СРО в мозге Снижение числа нейронов в поле зрения вероятно является следствием массовой гибели нейронов под влиянием токсических концентраций свинца, воздействующих непосредственно после введения токсиканта и приводящих к пролиферации глии на месте элиминации погибших нейронов, а также - к формированию кист

Показатели ВИД у пренатально затравленных животных отличались увеличением времени и числа движений, выходов в открытые и закрытые рукава, а также свешиваний, то есть увеличением уровня их двигательной активности (табл 2), что согласуется с данными, свидетельствующими о частом вьивлении у школьников, проживающих в экологически неблагоприятных по свинцу условиях, симптомов двигательной расторможенности, неусидчивости, невнимательности, беспричинной раздражительности (В Л Стародумов и др, 1999, ГМ Бодиенкова и др, 2007)

Таким образом, спустя значительный срок после пренатального воздействия свинца наблюдались отклонения метаболизма, морфологии коры головного мозга и поведения животных Выявленные повреждения мозга предполагают 2 возможных механизма развития, не исключающие друг друга 1) обусловленный прямым токсическим действием свинца, сохранившимся в повышенной концентрации в ткани мозга и/или 2) явлением эмбрионального программирования (В Б Розен, 1996) или биохимического импринтинга (С И Колесников, 1999) как результат пренатального воздействия токсиканта на развивающийся мозг

Таблица 1

Показатели ХМЛ, морфометрическая и гистохимическая характеристика головного мозга крыс - потомства самок, получивших нитрат свинца во _ время беременности _

~~ —------ Группа Показатель ——_____ 1 группа (контроль) 2 группа (введение PbNCM

Интенсивность ХМЛ, уел ед, "Sen Кора больших полушарий

0,083±0,005 0,264±0,009*

-h 0,654±0,028 2,647±0,091*

~5ццд 1 0,787±0,040 2,723±0,121*

-н 1,275±0,043 4,087±0,119*

2,437±0,085 6,847±0,292*

Белое вещество полушарий

"Sen 0,108±0,006 0,306*0,008*

-h 0,667±0,036 2,328±0,053*

0,987±0,062 2,695±0,079*

-н 1,587±0,043 3,507±0,092*

2 2,944±0,090 6,520±0,223*

Ствол головного мозга

"Sen 0,093±0,005 0,275±0,009*

-h 0,751±0,037 2,726±0,087*

"S|IHH 1 1,229±0,067 3,513±0,091*

-н 1,394±0,043 3,405±0,069*

2,654±0,083 6,191±0,270*

Толщина коры, мкм 1536±25,9 1477±15,7

-I слоя, мкм 133±2,7 126±2,8

Число нейронов в поле зр -II слоя 18,5±0,3 16,5±0,29*

-V слоя 10,8±0,3 8,9±0,23*

Число гибнущих/патологически измененных нейронов неокортекса в поле зр -в II-III слоях 0,49±0,106 0,81±0Д12*

-в V-VI слоях 0,75±0,113 1,36±0Д55*

Активность NADHd в нейронах гиппокампа 0,693±0,041 0,617±0,029

неокортекса 0,655±0,033 0,571±0,025*

Активность NADPHd в нейронах гиппокампа 0,860±0,024 0,783±0,023*

неокортекса 0,750±0,029 0,666±0,025*

Концентрация НК, уел ед, II слой неокортекса

-в ядрышках нейронов 0,577±0,028 0,701+0,022*

-в ядрах нейронов 0,320±0,026 0,426+0,022*

-в цитоплазме нейронов 0,364±0,026 0,481+0,022*

V слой неокортекса

-в ядрышках нейронов 0,662±0,023 0,747±0,025*

-в ядрах нейронов 0,365±0,022 0,418+0,022

-в цитоплазме нейронов 0,439±0,026 0,516+0,025*

* - отличия статистически достоверны по сравнению с 1 группой (Р<0,05)

Таблица 2

Показатели поведения в ПКЛ 30-дневного потомства самок, получивших нитрат свинца во время беременности

"--Группа 1 группа 2 группа

Показатель —___ (контроль) (введение РЫЧОз)

Время, сек, бездействия 8,1+0,98 9+0,96

свешиваний 2,4±0,4 5,4±0,76*

стоек 8,4+1,1 7,9±0,7

груминга 14,8+1,97 11,5±1,16

принюхиваний 157+1,99 159,4+1,66

движения 69,7±4,13 84±4,1*

в открытом рукаве 22,2±2,8 41,9+4,4*

в закрытом рукаве 155,6+2,77 135,9+4,5*

Число свешиваний 2,4+0,39 5,3±0,6*

стоек 7,1+0,73 7,7+0,55

груминга 4,2+0,35 3,9+0,37

принюхиваний 5+0,35 5+0,37

движений 8,9±0,54 11,7±0,61*

выходов в открытый рукав 1,7±0,19 2,5±0,24*

заходов в закрытый рукав 2,5±0Д9 3,2±0,24*

* - отличия статистически достоверны по сравнению с 1 группой (Р<0,05)

2. Влияние препаратов «Триовит», «Гистохром» и «Эпиталон» на головной мозг крыс, подвергшихся пренатальному воздействию свинца

Изучение влияния препаратов «Триовит», «Гистохром» и «Эпиталон» на изменения показателей головного мозга под действием нитрата свинца, составившее вторую часть нашей работы, показало целесообразность применения препаратов с антиоксидантными свойствами при подобных токсических воздействиях Мы получили ожидаемые результаты в виде подавления активности процессов СРО в соответствии с литературными данными (В Frei, J M Gaziano, 1993, N D Vaziri, Y Ding, 2001, N Serbecic, S С Beutelspacher, 2005, L Patrick et al, 2006, С Wang et al, 2007)

Введение «Триовита» привело к достоверному снижению S„Hfl 1 во всех областях головного мозга в коре на 23 %, в белом веществе полушария на 23% и в стволе мозга на 31% В гомогенатах коры и ствола мозга также достоверно снизился максимум быстрой вспышки (h) индуцированной ХМЛ - на 21% и 18% соответственно, а максимум свечения (Н) уменьшился в белом веществе на 14% и в

стволе мозга на 11% В то же время, показатели ХМЛ были ближе к таковым в мозге пренатально затравленных свинцом крыс, чем у интакгных животных

Анализ данных ХМЛ гомогенатов мозга крыс, получавших препарат «Гис-тохром» и нитрат свинца, показал, что препарат подавляет активацию СРО во всех отделах мозга, но не предотвращает полностью его развитие В гомогена-тах коры мозга отмечается значительное снижение всех исследуемых показателей Scn - в 2,8 раза, h - в 2 раза, S„ra 1 - в 2 раза, Н - на 48% и S„Ha2 - на 49% В гомогенатах белого вещества полушарий Scn уменьшилась на 38,5%, h снизилась в 2 раза, показатель SMlm 1 уменьшился на 35,7%, Н - на 17,4% и величина S„w2 - на 22,6% В стволе мозга достоверно снизились Scn - на 31,3%, h - на 44,3%, S„TO 1 - на 27,1%, Н - на 9,9% и S„„a2 -на 17,1%

Анализ показателей ХМЛ крыс, получавших препарат «Эпиталон» и нитрат свинца, показал достоверную тенденцию к снижению показателей во всех изучаемых отделах мозга В гомогенатах коры головного мозга сравнительно с данными пренатально затравленных крыс показатель Scn уменьшился в 2,1 раза, h - на 29,7%, S,„w 1 - на 27,5%, Н - на 34% и показатель S„ra 2 - на 30% В гомогенатах белого вещества полушарий мозга отмечается достоверное уменьшение Sc„ - на 33%, h - на 27%, S„Hfl 1 - на 27%, Н - на 16% и S„ra2 - на 21% В гомогенатах ствола мозга имеется снижение значений Son - на 27%, h - на 28%, S„,„ 1 -на 20%, Н - на 11% и S„H„2 - на 16%

Гистохимическое исследование показало, что в группе, получавшей препарат «Триовит», активность NADH-дегидрогеназы в V слое неокортекса осталась уменьшенной по сравнению с таковой у интактных крыс (на 20%) Показатели активности NADPH-дегидрогеназы достигли уровня интактных животных, а в V слое неокортекса - значение показателя достоверно превысило норму (на 15,7%) Концентрация НК во II слое не изменилась по сравнению с таковыми пренатально затравленных животных, а в V слое - даже превысила их (табл 3) Активность NADH-дегидрогеназы в группе, получавшей «Гистохром» и нитрат свинца, сохранилась на уровне таковой у интактных крыс Активность NADPH-дегидрогеназы в нейронах гиппокампа не отличалась от данных интактных жи-

вотных, однако в V слое неокортекса показатель был меньше нормы (на 14,3%) Содержание НК под влиянием «Гистохрома» снизилось в ядрах и цитоплазме нейронов II слоя неокортекса (табл 3)

Под действием препарата «Эпиталон» активность NADH-дегидрогеназы увеличилась в клетках гиппокампа (на 26%), а в нейронах V слоя коры возросла до значений нормы Активность NADPH-дегидрогеназы в нейронах гиппокампа восстановилась до уровня таковой интактных крыс, а в V слое неокортекса осталась сниженной (на 21%) Действие «Эпиталона» проявилось достоверным снижением ДНК и РНК в ядрах нейронов II слоя неокортекса (табл 3)

Влияние препарата «Триовит» на морфометрические изменения, которые развиваются под действием нитрата свинца, характеризовалось снижением числа гибнущих/патологически измененных нейронов в поле зрения II-III и V-VI слоев неокортекса до значений, имевшихся у интактных крыс, при сохраняющемся уменьшении числа нейронов в поле зрения II и V слоев на 8,6% и 16,6% соответственно (табл 3)

В группе, получившей препарат «Гистохром» и нитрат свинца, количество гибнущих/патологически измененных нейронов в стандартном поле зрения в II-III слоях не отличалось от показателя интактных крыс, в V-VI слоях - достоверно уменьшилось от такового пренатально затравленных крыс (на 31,6%) Уменьшение числа нейронов в стандартном поле зрения не изменилось во II слое показатель был снижен на 10,8% и в V слое - на 22,2% по сравнению с таковыми интактных животных (табл 3) Влияние препарата «Эпиталон» проявляется снижением количества гибнущих/патологически измененных нейронов в наружных слоях неокортекса до значений нормы, тогда как в V-VI слоях неокортекса показатель значительно превышал таковой у интактных животных (на 86%) Число нейронов в поле зрения осталось сниженным по сравнению с нормой во II слое - на 9,7%, в V слое - на 24,5% (табл 3)

Изменения ВНД животных во всех группах, получавших исследованные препараты, имели однонаправленные отклонения от нормы, характеризующие потомство затравленных нитратом свинца самок

Таблица 3

Морфометрическая и гистохимическая характеристика головного мозга

крыс — потомства самок, получивших во время беременности нитрат _свинца в сочетании с исследованными препаратами_

Группа Показ атель~\ 1 группа (контроль) 2 группа (введение PbN03) 3 группа (PbN03+ Триовит) 4 группа (PbN03+ Гистохром) 5 группа (PbN03+ Эпитапон)

Толщина, мкм -коры 1536+25,9 1477±15,7 1531+35,2 1576+13,5** 1542±21,5**

-I слоя 133±2,7 126±2,8 121±5,1* 129±2,9 112±5,0* **

Число нейронов в поле зр -II слоя 18,5±0,3 16,5±0,29* 16,9+0,72* 16,5+0,19* 16,7+0,36*

-V слоя 10,8±0,3 8,9±0,23* 9+0,69* 8,4+0,16* 8,15+0,29* **

Число гибнущих/ патологически из мененных нейро( в поле зр в II-III слоях 0,49±0,106 0,81±0,112* 0,59±0,124 0,55+0,087 0,54±0,107

-в V-VI слоях 0,75+0,113 1,36+0,155* 0,79±0Д49** 0,93+0,129** 1,40+0,184*

Активность NADHd в нейронах -гиппокампа 0,693+0,041 0,617±0,029 0,629±0,053 0,696±0,036 0,875±0,030* **

-неокортекса 0,655+0,033 0,571+0,025* 0,523±0,049* 0,606±0,035 0,648+0,049

Активность NADPHdв нейронах -гиппокампа 0,860+0,024 0,783±0,023* 0,830±0,050 0,837±0,031 0,827+0,036

-неокортекса 0,750±0,029 0,666+0,025* 0,868+0,075** 0,643±0,024* 0,593+0,025* **

Концентрация НК, уел ед, II слой неокортекса

-в ядрышках нейронов 0,577+0,028 0,701±0,022* 0,661+0,047 0,634+0,029 0,678±0,038*

-в ядрах нейронов 0,320±0,026 0,426+0,022* 0,390+0,053 0,348+0,021** ),337+0,038**

-в цитоплазме нейронов 0,364+0,026 0,481+0,022* 0,434±0,045 0,415+0,022** 0,419+0,043

V слой неокортекса

-в ядрышках нейронов 0,662+0,023 0,747±0,025* 0,848+0,025 * ** 0,71010,034 0,719+0,038

-в ядрах нейронов 0,365+0,022 0,418+0,022 0,518+0,033 * ** 0,362+0,025 0,376±0,042

-в цитоплазме нейронов 0,439±0,026 0,516+0,025* 0,615±0,032 * ** 0,492+0,028 0,521±0,042

* - отличия статистически достоверны по сравнению с 1 группой (Р<0,05), ** - отличия статистически достоверны по сравнению со 2 группой (Р<0,05)

У потомства самок, получивших нитрат свинца на фоне приема препарата «Триовит», достоверно уменьшились показатели времени бездействия, времени и числа стоек, а также увеличилось время принюхиваний По сравнению с показателями интактных крыс остались достоверно повышенными показатели времени и числа свешиваний, времени принюхиваний, выходов в открытый рукав Время, проведенное в закрытом рукаве, достоверно уменьшилось В группе, получившей нитрат свинца в сочетании с препаратом «Гистохром» наблюдались достоверное увеличение показателей времени и числа свешиваний, времени принюхиваний и движений, достоверное уменьшение времени бездействия По сравнению с таковыми интактных крыс уменьшились время бездействия, время и число груминга, увеличилось время принюхиваний, движений, время, проведенное в открытом рукаве, а также число движений, выходов в открытый/закрытый рукава У потомства самок, получивших нитрат свинца в сочетании с препаратом «Эпиталон», достоверно уменьшилось время бездействия Время принюхиваний, число и время движений остались достоверно большими по сравнению с таковыми интактных крыс)

Таким образом, действие всех трех исследованных препаратов на развивающийся мозг животных в условиях пренатального введения нитрата свинца основано по-видимому на подавлении активации процессов СРО Наиболее выраженное влияние на развитие повреждений, вызванных свинцом, по нашим данным оказывает препарат «Гистохром» Тем не менее, его протективное действие не нивелирует полностью отдаленные негативные последствия пренатального воздействия токсиканта, что может быть обусловлено примененной схемой и дозировкой введения препарата и/или возможными иными, помимо активации СРО, путями реализации токсического действия свинца Применение препаратов с антиоксидантными свойствами, уменьшающих проявления окси-дативного стресса в головном мозге, при пренатальных токсических воздействиях является обоснованным и требует дальнейшей работы по разработке эффективных способов профилактики развития отдаленных последствий влияния свинца на мозг

выводы

1 Введение беременным крысам нитрата свинца приводит к формированию стойких изменений морфологических, гистохимических, биохимических показателей развития головного мозга, а также высшей нервной деятельности у их потомства

2 Метаболические изменения в мозге потомства самок, получивших нитрат свинца во время беременности, характеризуются резкой активацией процессов свободнорадикального окисления в разных отделах мозга (кора и белое вещество полушарий, ствол мозга), достоверным снижением активности МАБН-дегидрогеназы в нейронах неокортекса и N АОРН-дегидрогеназы в нейронах неокортекса и гиппокампа

3 Головной мозг потомства самок, затравленных во время беременности нитратом свинца, в препубертатном возрасте характеризуется уменьшенным числом нейронов в стандартном поле зрения неокортекса, увеличенным количеством гибнущих/патологически измененных нейронов, формированием очагов пролиферации глиоцитов и кист

4 Исследованные препараты («Триовит», «Гистохром» и «Эпиталон»), обладающие антиоксидантными свойствами, снижают уровень свободнорадикального окисления в коре, белом веществе полушарий и стволе головного мозга у потомства самок, которым во время беременности введен нитрат свинца, но полностью не нормализуют его В поставленных экспериментах наиболее выраженную способность снижать свободнорадикальное окисление в мозге проявил препарат «Гистохром»

5 Действие всех исследованных препаратов на морфологические изменения, развивающиеся после пренатального воздействия нитрата свинца, выражалось уменьшением количества гибнущих/ патологически измененных нейронов в неокортексе

6 В условиях пренатального воздействия нитрата свинца препарат «Триовит» предотвращал снижение активности ЫАОРН-дегидрогеназы в нейронах

неокортекса и гиппокампа, введение препаратов «Гистохром» и «Эпиталон» сопровождалось нормализацией активности ИАВН-дегидрогеназы в нейронах неокортекса и ЫАБРН-дегидргеназы - в нейронах гиппокампа

7 Показатели высшей нервной деятельности крыс, потомства самок, получивших во время беременности нитрат свинца, отличаются увеличением общей двигательной активности в приподнятом крестообразном лабиринте Эта особенность высшей нервной деятельности сохраняется и у животных, получавших препараты «Триовит», «Гистохром», «Эпиталон»

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Белолюбская, Д С Влияние введения свинца беременным крысам на головной мозг их потомства отдаленные последствия [Текст] / Д С Белолюбская, О А Лебедько, Б Я Рыжавский [и др ] // Структурно-функциональные и нейрохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга материалы Всерос конф с междунар участием - М, 2006 - С 264-268

2 Белолюбская, Д С Влияние введения свинца беременным крысам на головной мозг их потомства отдаленные последствия [Текст] / Д С Белолюбская, Б Я Рыжавский, О А Лебедько [и др ] // Морфология - 2007 - № 1 -С 27-30

3. Белолюбская, Д С Влияние препарата «Триовит» на выраженность отдаленных последствий пренатального воздействия нитрата свинца в головном мозге крыс [Текст] / Д С Белолюбская, О А Лебедько, Б Я Рыжавский // Дальневосточный медицинский журнал -2007 -№4 -С 60-62

4 Белолюбская, Д С Влияние введения нитрата свинца беременным крысам на биогенез активных кислородных метаболитов в головном мозге, легких и почках их потомства [Текст] / Д С Белолюбская, О А Лебедько, Б Я Рыжавский [и др ] // Дальневосточный медицинский журнал - 2008 - № 1 - С 50-52

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВНД - высшая нервная деятельность,

НК - нуклеиновые кислоты,

ПКЛ - приподнятый крестообразный лабиринт,

ПОЛ - перекисное окисление липидов,

ПТД - переднетеменная доля,

СРО — свободнорадикальное окисление,

СТД - собственно теменная доля,

ХМЛ - хемилюминесценция

Белолюбская Дария Степановна

ОТДАЛЕННЫЕ ПОСЛЕДСТВИЯ ПРЕНАТАЛЬНОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ СВИНЦА НА ГОЛОВНОЙ МОЗГ КРЫС И ВЛИЯНИЕ НА НИХ ПРЕПАРАТОВ С АНТИОКСИДАНТНЫМИ СВОЙСТВАМИ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 25.03.2008 формат 60x90 1/16 Тираж 100 экз. Заказ 19

Отпечатано участком оперативной полиграфии редакционно-издательсксго отдела ГОУ ВПО ВГМУ 690002, г. Владивосток, пр. Острякова, 4

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Белолюбская, Дария Степановна

Список используемых сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Свинец и механизмы его токсичности.

1.1.1. Действие свинца на перекисное окисление.

1.1.1. Действие свинца на интенсивность гибели клеток.

1.1.2. Действие свинца на ферментные системы.

1.2. Проявления свинцовой интоксикации на ультраструктурном уровне.

1.3. Влияние свинца на нервную систему.

1.4. Действие свинца на развивающийся организм.

1.4.1. Токсиканты и развитие мозга.

1.5. Влияние препаратов с антиоксидантными свойствами на развитие патологических изменений, индуцированных введением свинца.

1.6. Характеристика исследованных препаратов.

1.6.1. Триовит.41'

1.6.2. Гистохром.

1.6.3. Эпиталон.

1.7. Резюме.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Методы морфологического и морфометрического исследования головного мозга.

2.2. Методы гистохимического и биохимического исследования головного мозга.

2.3. Метод исследования показателей ВНД.

Глава 3. Влияние пренатального воздействия нитрата свинца на головной мозг 40-дневных крыс.

3.1. Гравиметрические и морфометрические показатели.

3.2. Морфологическая характеристика нейронов коры переднетеменной доли головного мозга.

3.3. Гистохимические показатели.

3.4. Показатели хемилюминесценции гомогенатов головного мозга.

3.4.1. Кора больших полушарий.

3.4.2. Белое вещество полушарий мозга.

3.4.3. Ствол головного мозга.

3.5. Показатели ВНД крысят в ГЖЛ.

3.6. Резюме.

Глава 4. Влияние введения беременным самкам крыс препарата «Триовит» и нитрата свинца на головной мозг их 40-дневного потомства.

4.1. Гравиметрические и морфометрические показатели.

4.2. Морфологическая характеристика нейронов коры переднетеменной доли-головного мозга.

4.3. Гистохимические показатели.

4.4. Показатели хемилюминесценции гомогенатов головного мозга.

4.4.1. Кора больших полушарий.

4.4.2. Белое вещество полушарий мозга.

4.4.3. Ствол головного мозга.

4.5. Показатели ВНД крысят в ГЖЛ.

4.6. Резюме.

Глава 5. Влияние введения беременным самкам крыс препарата «Гистохром» и нитрата свинца на головной мозг их 40-дневного потомства.

5.1. Гравиметрические и морфометрические показатели.

5.2. Морфологическая характеристика нейронов коры переднетеменной доли головного мозга.101'

5.3. Гистохимические показатели.

5.4. Показатели хемилюминесценции гомогенатов головного мозга.

5.4.1. Кора больших полушарий.

5.4.2. Белое вещество полушарий мозга.

5.4.3. Ствол головного мозга.

5.5. Показатели ВНД крысят в ПКЛ.

5.6. Резюме.

Глава 6. Влияние введения беременным самкам крыс препарата

Эпиталон» и нитрата свинца на головной мозг их 40-дневного потомства.

6.1. Гравиметрические и морфометрические показатели.

6.2. Морфологическая характеристика нейронов коры переднетеменной доли головного мозга.

6.3. Гистохимические показатели.

6.4. Показатели хемилюминесценции гомогенатов головного мозга.

6.4.1. Кора больших полушарий.

6.4.2. Белое вещество полушарий мозга.

6.4.3. Ствол головного мозга.

6.5. Показатели ВНД крысят в ПКЛ.

6.6. Резюме.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Отдаленные последствия пренатального воздействия свинца на головной мозг крым и влияние на них препаратов с антиоксидантными свойствами"

Актуальность проблемы. Период эмбриогенеза представляет собой важный период развития, когда формирующийся головной мозг особо подвержен воздействиям различных внешних агентов. Немаловажная роль среди последних отводится влиянию факторов неблагоприятного экологического состояния окружающей среды, являющихся результатом техногенной деятельности человека (А.Н. Ильинов и др., 1997; А.А. Быков, Б.А. Ревич, 2001; О.Л. Малых, 2002; Б.Я. Рыжавский, 2002; П.Ю. Горобец и др., 2005; Н. Ни et al., 2006). Среди главных загрязнителей среды обитания свинец признается одним из важнейших (L.M. Chiodo et al., 2004; Р.В. Stretesky, M.J. Lynch, 2004; W.G. Wang et al., 2005; Э.Х. Ахметзянова, А.Б. Бакиров, 2006; J. Gasana et al., 2006; S.G. Gilbert, B. Weiss, 2006; G.C. Lalor et al., 2006; R. Ronchetti et al., 2006). В Российской Федерации существование этой проблемы отражается в работах многих исследователей, и прежде всего это касается изучения воздействия низких доз токсиканта на умственное и нейропсихическое развитие детей (B.JI. Стародумов и др., 1999; И. Бёккельман, Э. Пфистер, 2001; А.И. Корбакова и др., 2001; Л.И. Привалова и др., 2002; И.М. Трахтенберг и др., 1991-2003; Г.М. Бодиенкова и др., 2007). Основными источниками загрязнения окружающей среды свинцом являются промышленные предприятия и использующий этилированный бензин автотранспорт (А.Я. Полякова, К.П. Петруничева, 2007).

Среди многочисленных исследований по изучению токсического влияния свинца на организм человека значительная часть работ посвящена воздействию на нервную систему. Известна возможность проникновения токсических концентраций свинца в формирующийся организм через плаценту и грудное молоко (S. Ettinger Adrienne et al., 2004; J. Lafond et al., 2004), приводящая к развитию нейропсихических нарушений и снижению коэффициента умственного развития у детей, подвергнутых действию токсиканта (R.L. Canfield et al., 2004; Г.М. Бодиенкова и др., 2007).

Установлено, что важным механизмом нейротоксического действия свинца является развитие окислительного стресса (И.М. Гнидой, 2000; И.М. Трахтенберг и др., 2002; A. Heydari et al., 2006; D.J. Hoffinan et al., 2006). Кроме того, есть данные, что обусловленный свинцом окислительный стресс в мозге может принимать затяжную форму с сохранением признаков нарушения баланса между образованием и гашением свободных радикалов после прекращения введения свинца (М. Correa et al., 1999). Отмечаемые при этом морфологические, морфометрические и поведенческие сдвиги, зачастую не сопоставляются с метаболическими изменениями в нейронах. В ТО'же время, механизмы формирования отдаленных последствий в головном мозге после пренатального воздействия свинца в литературе не освящены, хотя и представляют большой интерес. Так, не установлено являются ли изменения морфологии и метаболизма нейронов следствием прямого действия токсиканта^ в остром периоде воздействия или же - следствием программирующего эффекта свинца на цито- и биохимический статус нейронов и глиальных клеток.

Вопрос о возможности предупреждения/минимизирования последствий влияния свинца на развивающийся мозг детей остается актуальным. В последнее десятилетие появились данные о антиоксидантных свойствах недавно синтезированных препаратов - «Эпиталона» и «Гистохрома». Препараты из группы антиоксидантов являются средствами патогенетической терапии больных с хронической свинцовой интоксикацией (Я.О. Лысенко, 2000). В ряде экспериментальных работ подтверждена эффективность применения препаратов с антиоксидантными свойствами, при воздействии различных доз соединений свинца (Н. Esterbauer et al., 1992; В. Frei, J.M. Gaziano, 1993; K.L. Retsky et al., 1993; Y. Ding et al., 2000; N.D. Vaziri, Y. Ding, 2001).

Изучение эффективности действия препаратов «Триовит», «Гистохром» и «Эпиталон», обладающих антиоксидантными антирадикальными свойствами (А.В. Лебедев и др., 1999; В.А. Марков и др.,

1999; Э.Б. Арушанян и др., 2001; В.Х. Хавинсон, 2001; С.В. Анисимов и др.,

2004; В.З. Ланкин и- др., 2004), на развитие мозга, нарушенного пренатальным воздействием свинца, может помочь выяснению перспектив использования их при различных токсических поражениях.

Цель работы изучить отдаленные последствия введения свинца беременным крысам на показатели гистофизиологии нейронов, процессы свободнорадикального окисления в разных отделах головного мозга их потомства, а также - возможность минимизации последствий влияния свинца препаратами с антиоксидантными свойствами («Триовит», «Гистохром» и

Эпиталон»).

Задачи исследования:

1. Изучить морфологические, морфометрические, биохимические и физиологические показатели состояния головного мозга 40-дневных крыс - потомства самок, которым во время беременности был введен нитрат свинца.

2. Изучить влияние препарата «Триовит», содержащего витамины С, Е, провитамин А и селен, на выраженность отдаленных последствий воздействия свинца на головной мозг.

3. Изучить влияние препарата «Гистохром», биоантиоксиданта из группы полигидроксинафтахинонов, на выраженность отдаленных последствий воздействия свинца на головной мозг.

4. Изучить влияние препарата «Эпиталон», синтетического тетрапептида, на выраженность отдаленных последствий воздействия- свинца на головной мозг.

Научная новизна исследования:

1. Описаны морфометрические, гистохимические, биохимические и физиологические особенности развития головного мозга неполовозрелых животных, подвергнутых в пренатальном периоде воздействию свинца.

2. Получены данные о влиянии препарата «Триовит» на морфометрические, гистохимические, биохимические и физиологические показатели развития головного мозга 40-дневных крыс, подвергнутых пренатальному воздействию нитрата свинца.

3. Получены данные о влиянии препарата «Гистохром» на морфометрические, гистохимические, биохимические и физиологические показатели развития головного мозга 40-дневных крыс, подвергнутых пренатальному воздействию нитрата свинца.

4. Получены данные о влиянии препарата «Эпиталон» на морфометрические, гистохимические, биохимические и физиологические показатели развития головного мозга 40-дневных крыс, подвергнутых пренатальному воздействию нитрата1 свинца.

Научно-практическая значимость работы состоит в том, что в ней описаны отдаленные последствия введения в пренатальном периоде нитрата свинца на морфометрические, гистохимические, биохимические и физиологические показатели развития* головного мозга крыс, а также возможности рационального воздействия на отклонения развития головного1 мозга, формирующиеся на ранних этапах онтогенеза под влиянием токсических агентов. Эти* данные могут быть использованы как базовые в экспериментальных исследованиях головного мозга. Сведения о влиянии препаратов. «Триовит», «Гистохром» и «Эпиталон» представляют интерес для гистологов, неонатологов, акушеров-гинекологов, педиатров, фармакологов, разрабатывающих методы коррекции дефектов развития головного мозга, индуцированных влиянием различных повреждающих агентов, в том числе свинца. Основные положения, выносимые на1 защиту:

1. 40-дневное потомство самок, получивших во время t беременности нитрат свинца, характеризуются достоверным уменьшением числа нейронов в поле зрения II и V слоев неокортекса, увеличением количества патологически измененных/гибнущих нейронов в неокортексе, формированием кист, пролиферацией глиоцитов, выраженной активацией, процессов> СРО в коре, белом веществе полушарий и стволе мозга,. снижением активности NADH-дегидрогеназы в нейронах V слоя и активности NADPH-дегидрогеназы в гиппокампе и в V слое неокортекса. Поведение подопытных крыс характеризуется увеличением двигательной активности крыс в ПКЛ.

2. Выявленные морфологические, гисто- и биохимические особенности мозга крыс, подвергнутых пренатальному воздействию свинца, могут объясняться как его действием в период введения, так и механизмами программирования или биохимического импринтинга.

3. Исследованные препараты («Триовит», «Гистохром», «Эпиталон»), обладающие антиоксидантыми свойствами, уменьшают выраженность изменений головного мозга потомства самок, получавших свинец, но не предотвращают их полностью.

Апробация диссертации. Публикации. По теме диссертации опубликованы 4 печатные работы. Материалы работы докладывались на Всероссийской научной конференции с международным участием «Структурно-функциональные и нейрохимические закономерности асимметрии и пластичности мозга — 2006» (2006, Государственный научно-исследовательский Институт Мозга РАМН, г. Москва), X краевом конкурсе молодых ученых и аспирантов (2008, ДВГМУ, г. Хабаровск).

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы и 5 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы. Работа изложена на 170 страницах машинописного текста и содержит 19 таблиц, 26 рисунков. Список литературы представлен работами 142 отечественных и 106 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Белолюбская, Дария Степановна

Выводы

1. Введение беременным крысам нитрата свинца приводит к формированию стойких изменений морфологических, гистохимических, биохимических показателей развития головного мозга, а также высшей нервной деятельности у их потомства.

2. Метаболические изменения в мозге потомства самок, получивших нитрат свинца во время беременности, характеризуются резкой активацией процессов свободнорадикального окисления в разных отделах мозга (кора и белое вещество полушарий, ствол мозга), достоверным снижением активности NADH-дегидрогеназы в нейронах неокортекса и NADPH-дегидрогеназы в нейронах неокортекса и гиппокампа.

3. Головной мозг потомства самок, затравленных во время беременности нитратом свинца, в препубертатном возрасте характеризуется уменьшенным числом нейронов в стандартном поле зрения неокортекса, увеличенным количеством гибнущих/патологически измененных нейронов, формированием очагов пролиферации глиоцитов и кист.

4. Исследованные препараты («Триовит», «Гистохром» и «Эпиталон»), обладающие антиоксидантными свойствами, снижают уровень свободнорадикального окисления в коре, белом веществе полушарий и стволе головного мозга у потомства самок, которым во время беременности введен нитрат свинца, но полностью не нормализуют его. В поставленных экспериментах наиболее выраженную способность снижать свободнорадикальное окисление в мозге проявил препарат «Гистохром».

5. Действие всех исследованных препаратов на морфологические изменения, развивающиеся после пренатального воздействия нитрата свинца, выражалось уменьшением количества гибнущих/ патологически измененных нейронов в неокортексе.

6. В условиях пренаталыюго воздействия нитрата свинца препарат «Триовит» предотвращал снижение активности NADPH-дегидрогеназы в нейронах неокортекса и гиппокампа; введение препаратов «Гистохром» и «Эпиталон» сопровождалось нормализацией активности NADH-дегидрогеназы в нейронах неокортекса и NADPH-дегидргеназы - в нейронах гиппокампа.

7. Показатели высшей нервной деятельности крыс, потомства самок, получивших во время беременности нитрат свинца, отличаются увеличением общей двигательной активности в приподнятом крестообразном лабиринте. Эта особенность высшей нервной деятельности сохраняется и у животных, получавших препараты «Триовит», «Гистохром», «Эпиталон».

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Белолюбская, Дария Степановна, Владивосток

1. Аксенова, М. Г. Роль генетических факторов в дезадаптивном поведении подростков Текст. / М. Г. Аксенова, А. А. Демин, Е. Н. Сотникова [и др.] // Гигиена и санитария. 2006. — № 5. - С. 76-77.

2. Анисимов, В. Н. Влияние пептида эпифиза на показатели биологического возраста и продолжительность жизни мышей Текст. / В. Н. Анисимов, В. X. Хавинсон, Н. Ю. Заварзина [и др.] // Рос. физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 2001. - Т. 87, № 1. - С. 125-135.

3. Анисимов, С. В. Влияние мелатонина и тетрапептида на экспрессию генов в головном мозге мышей Текст. / С. В. Анисимов, В. X. Хавинсон, В. Н. Анисимов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2004. - Т. 138, № 11. -С. 570-576.

4. Анохин, П. К. Системные механизмы высшей нервной деятельности Текст. : избр. труды / П. К. Анохин. М. : Наука, 1979. - 453 с.

5. Арушанян, Э. Б. Гормон эпифиза мелатонин и его лечебные возможности Текст. / Э. Б. Арушанян // Русский медицинский журнал. 2005. - Т. 13, №26.-С. 1755-1760.

6. Арушанян, Э. Б. Физиологические и фармакологические особенности эпифизарных нейропептидов Текст. / Э. Б. Арушанян, JI. Г. Арушанян, И. А. Симонов // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2001. -Т. 64, № 4. - С. 73-79.

7. Арушанян, Э. Б. Иммунотоксичность солей металлов и защитная роль эпифизарных факторов Текст. / Э. Б. Арушанян, К. С. Эльбекьян // Биомедицинская химия. 2006. - Т. 52, № 6. - С. 547-555.

8. Атчабаров, Б. А. К вопросу о механизме общетоксичекого действия химических веществ Текст. / Б. А. Атчабаров // Медицина труда и промышленная экология. — 1998. — № 8. — С. 21-25.

9. Ахметзянова, Э. X. Роль свинца в формировании артериальной гипертензии (обзор литературы) Текст. / Э. X. Ахметзянова, А. Б. Бакиров // Медицина труда и промышленная экология. 2006. — № 5. -С. 17-22.

10. Бабенкова, И. В. Антиоксидантная активность «Гистохрома» и некоторых лекарственных препаратов, применяемых в офтальмологии Текст. / И. В. Бабенкова // Вестник офтальмологии. 1999. - № 4. — С. 22-24.

11. М.Баряева, О. Е. Факторы риска задержки внутриутробного развития плода в условиях промышленного города Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук / О. Е. Баряева. Иркутск, 2005. - 27 с.

12. Бёккельман, И. Нейротоксические эффекты многолетней экспозиции свинцом Текст. / И. Бёккельман, Э. Пфистер // Медицина труда и промышленная экология. — 2001. — № 5. С. 22-25.

13. Битюцкая, JI. Г. Антиоксиданты при экспериментальной гипергликемии : автореф. дис. . канд. мед. наук / Л. Г. Битюцкая. Владивосток, 2005. -22 с.

14. Бодиенкова, Г. М. Роль загрязнения окружающей среды свинцом в формировании здоровья детского населения Текст. / Г. М. Бодиенкова, В. Б. Дорогова, В. Бурмаа [и др.] // Медицина труда и промышленная экология. 2007. - № 6. - С. 41-42.

15. Болдырев, А. А. Роль активных форм кислорода в жизнедеятельности нейрона Текст. / А. А. Болдырев // Успехи физиол. наук. 2003. - Т. 34, № 3. - С. 21-34.

16. Быков, А. А. Оценка риска загрязнения окружающей среды свинцом для здоровья детей в России Текст. / А. А. Быков, Б. А. Ревич // Медицина труда и промышленная токсикология. 2001. - № 5. - С. 6-10.

17. Вербовой, А. Ф. Показатели костного метаболизма и минеральной плотности костной ткани у рабочих металлургического завода Текст. / А. Ф. Вербовой // Казанский медицинский журнал. — 2000. Т. LXXXI, № 6. -С. 482-484.

18. Винокуров, А. А. Влияние антиоксидантного препарата Гистохром на сократительную функцию и метаболизм изолированного сердца крысы в условиях «кальциевого парадокса», ишемии и реперфузии Текст. / А. А.

19. Винокуров, В. В. Алабовский, В. С. Шульженко и др. // Вопросы медицинской химии. 2001. - Т. 47, № 5. - С. 483-490.

20. Владимиров, Ю. А. Свободные радикалы в живых системах Текст. / Ю. А. Владимиров, О. А. Азизова, А. И. Деев [и др.] // Итоги науки и техники. ВИНИТИ. М., 1991. - Т. 29. - 147 с. - (серия Биофизика).

21. Владимиров, Ю. А. Свободные радикалы и антиоксиданты Текст. / Ю. А. Владимиров // Вопросы медицинской химии. — 1998. № 1. — С. 43-51.

22. Войно-Ясенецкий, М. В. Источники ошибок при морфологических исследованиях Текст. / М. В. Войно-Ясенецкий, Ю. М. Жаботинский. -М. : Медицина, 1970. 320 с.

23. Воскобойников, А. Е. Биохимическая оценка действия апикомпозиций при экспериментальной интоксикации соединениями свинца Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук / А. Е. Воскобойников. Рязань, 2003. -24 с.

24. Вылегжанина, Т. А. Симпатическая иннервация некоторых эндокринных органов при хроническом действии ацетата свинца Текст. / Т. А. Вылегжанина, О. А. Манеева, Е. JI. Рыжковская // Морфология. — 1998. -№ 1.-С. 82-86.

25. О.Герасимова, И. А. Влияние пренатального стресса на свободнорадикальное окисление липидов головного мозга крыс в постнатальном онтогенезе Текст. / И. А. Герасимова, М. А. Флёров, А. В. Вьюшина // Нейрохимия. 2005. - Т. 22, № 2. - С. 102-106.

26. Герштейн, JI. М. Морфохимические осбенности нейронов гиппокампа у крыс, различающихся по поведению Текст. / Л. М. Герштейн, И. М. Корнева, В. И. Рахманова // Бюл. эксперим. биологии и медицины. — 2007. -Т. 144, №12.-С. 696-698.

27. Гладышев, Ю. В. Влияние активации ПОЛ на структуру внезародышевых органов и печени крыс в различные периоды онтогенеза Текст. / Ю. В. Гладышев, С. И. Колесников, А. В. Семенюк [и др.] // Цитология. 1994. -Т. 36, № 1.-С. 98-103.

28. Гнидой, И. М. Состояние ПОЛ и тиол-дисульфидной системы у детей при воздействии свинца в низких дозах Текст. / И. М. Гнидой // Токсикологический вестник. 2000. - № 3. - С.27-29.

29. Голиков, С. Н. Общие механизмы токсического действия Текст. / С. Н. Голиков, И. В. Саноцкий, Л. А. Тиунов. М. : Медицина, 1986. - 280 с.

30. Гусева, М. Р. Применение антиоксидантного препарата "Гистохром" в комплексном лечении внутриглазных кровоизлияний у детей разного возраста Текст. / М. Р. Гусева, И. М. Чиненов, М. В. Ширшов [и др.] // Вестник офтальмологии. — 2005. № 2. — С. 24-28.

31. Дерягина, В. П. Действие природного антиоксиданта эхинохрома на рост подкожно перевитой аденокарциномы Эрлиха Текст. / В. П. Дерягина, Н. И. Рыжова, А. П. Ильницкий [и др.] // Российский онкологический журнал. 2005. -№3.- С. 32-35.

32. Диже, Г. П. Тиреоидные гормоны и мелатонин как средства антиоксидантной терапии Текст. / Г. П. Диже, Р. В. Дятлов, А. А. Диже [и др.] // Анестезиология и реаниматология. 2001. - № 4. - С. 43-46.

33. Динерман, А. А. Роль загрязнителей окружающей среды в нарушении эмбрионального развития Текст. / А. А. Динерман. М. : Медицина, 1980.- 192 с.

34. Дягтерева, Т. Д. Использование биологически активных веществ в профилактике токсического действия некоторых тяжелых металлов Текст. / Т. Д. Дягтярева, Б. А. Кацнельсон, JL И. Привалова [и др.] // Гигиена и санитария. -2001. -№ 5. С. 71-73.

35. Егоров, И. В. Влияние мелатонина на активность антиоксидантной системы и процессов перекисного окисления липидов при травматическом шоке Текст. / И. В. Егоров, В. Д. Слепушкин // Вестник интенсивной терапии. 1999. - № 2. - С. 57-59.

36. Егорова, Н. Н. Критериальная оценка окислительных-антиокислительных процессов биосред организма в гигиенической диагностике химических факторов Текст. / Н. Н. Егорова // Гигиена и санитария. 2006. - № 5. -С. 81-83.

37. Елаева, Н. JI. Влияние экотоксикантов на нуклеазную активность крови Текст. / Н. JI. Елаева, Е. В. Семенов, Т. М. Иванова [и др.] // Токсикологический вестник. 2005. - № 1. - С. 27-32.

38. Ермоленко, А. Е. Новые гигиенические требования при работе со свинцом Текст. / А. Е. Ермоленко, Н. А. Хелковский-Сергеев, О. К. Кравченко // Медицина труда и промышленная экология. 2001. - № 5. - С. 29-34.

39. Иванов, С. Д. Влияние возраста, пола и курения на содержание свинца и марганца в крови человека Текст. / С. Д. Иванов, Е. В. Семенов, В. А. Ямшанов [и др.] // Токсикологический вестник. 2005. - № 1. - С. 21-27.

40. Иванова, Ю. В. Нейрофизиологическая и гистологическая оценка комбинированного действия полихлорированных бифенилов и тяжелых металлов на самцов белых крыс в хроническом эксперименте Текст. / Ю.

41. B. Иванова, С. П. Рыбалкин, О. А. Руднева и др. // Токсикологический вестник. 2004. - № 6. - С. 6-11.

42. Игнатова, М. С. Нефропатии в регионе, загрязненном солями тяжелых металлов, и возможности лечебно-профилактических мероприятий Текст. / М. С. Игнатова, Е. А. Харина, В. В. Длин [и др.] // Терапевтический архив. 1996.-№ 8.-С. 31-35.

43. Ильинов, А. Н. Кислотные эритрограммы мышей при отравлениях цинком, кадмием и свинцом Текст. / А. Н. Ильинов, И. А. Рязанов, А. Н. Осипов // Токсикологический вестник. — 1997. № 4. - С. 10-14.

44. Калуев А. В. Уринация и поведение / А. В. Калуев. Киев : КСФ, 2001. -138 с.

45. Касохов, А. Б. Нарушение иммунобиологической реактивности в условиях загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами Текст. / А. Б. Касохов // Рос. вестн. перинатологии и педиатрии. 1999. — Т. 44, № 5.1. C. 37-41.

46. Ковальский, Г. Б. Структурно-энзиматические изменения овариальных клеток крыс при старении / Г. Б. Ковальский // Метаболические и морфологически аспекты повреждения клетки : сборник науч. трудов. -Хабаровск, 1990. С. 60-65.

47. B. В. Иванов, А. В. Семенюк и др.. Новосибирск : Наука, 1986. — 158 с.

48. Колесников, С. И. Импринтинг действия токсикантов в эмбриогенезе /

49. C. И. Колесников, А. В. Семенюк, С. В. Грачев; под ред. С. И. Колесникова. М. : Медицинское информационное агенство, 1999. -263 с.: ил.

50. Корбакова, А. И. Свинец и его действия на организм Текст. / А. И. Корбакова, Н. С. Соркина, Н. Н. Молодкина [и др.] // Медицина труда и промышленная экология. 2001. - № 5. - С. 29-34.

51. Королев, А. А. Влияние алиментарного кальция на уровень адаптации организма в условиях нагрузки цезием-137 и свинцом Текст. / А. А. Королев, Б. П. Суханов // Вопросы питания. 1996. - № 3. - С. 34-37.

52. Краснюк, Е. П. Клинические стадии интоксикации свинцом Текст. / Е. П. Краснюк, И. С. Отвага // Врачебное дело. 2002. - № 7. - С. 117-120.

53. Куанова, JI. Б. Функциональное поражение ЦНС у детей при действии свинца и хлорорганических пестицидов Текст. / JI. Б. Куанова // Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И. И. Мечникова. 2002. - № 3. - С. 141-143.

54. Кудрин, А. В. Роль микроэлементов в регуляции апоптоза Текст. / А. В. Кудрин, А. А. Жавороноков // Усп. совр. биологии. 1998. - Т. 118, № 5. -С. 623-629.

55. Кудрин, А. В. Микроэлементы в неврологии (обучающие программы ЮНЕСКО) Текст. / А. В. Кудрин, О. А. Громова. М. : ГЭОТАР-Медиа, 2006.-304 с. :ил.

56. Кузник, Б. И. Влияние эпиталона на иммунитет и гемостаз у гипофизэктомированных цыплят и старых кур Текст. / Б. И. Кузник, А. В. Патеюк, В. X. Хавинсон [и др.] // Успехи геронтологии. 2004. - № 13. -С. 90-93.

57. Кухарчук, В. В. Основные результаты научно-исследовательских работ по направлению «атеросклероз» Текст. / В. В. Кухарчук, Э. М. Тарарак, В. Ю. Брюховецкий // Вестн. РАМН. 1998. - № 7. - С. 19-23.

58. Ланкин, В. 3. Экспериментальная и клиническая оценка антиокислительной эффективности многокомпонентного антиоксидантного препарата Текст. / В. 3. Ланкин, А. К. Тихазе, Г. Г. Коновалова [и др.] // Терапевтический архив. 2004. - № 8. - С. 10-15.

59. Лебедев, А. В. Кислотные свойства и взаимодействие с супероксид анион-радикалом эхинохрома А и его структурных аналогов Текст. / А. В. Лебедев, М. В. Иванова, Н. И. Красновид [и др.] // Вопросы медицинской химии. 1999. - Т. 45, № 2. - С. 123-130.

60. Лебедько, О. А. Влияние введения нитрата свинца беременным крысам на легкие их потомства Текст. / О. А. Лебедько, Б. Я. Рыжавский // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2005. - № 6. - С. 621-623.

61. Ллойда, 3. Гистохимия ферментов / 3. Лойда, Р. Госсрау, Т. Шиблер. М. : Мир, 1982.-270 с.

62. Лысенко, В. О. Роль свободнорадикального окисления липидов в развитии преждевременного старения у рабочих, подвергающихся промышленному воздействию свинца Текст. / В. О. Лысенко, Е. В. Кирсанкина, В. Ю. Суровцева // Клин, геронт. 2003. - № 9. - С. 166.

63. Лысенко, Я. О. ПОЛ у рабочих в условиях промышленного воздействия свинца и больных хронической свинцовой интоксикацией : автореф. дис. . канд. мед. наук / Я. О. Лысенко. Новосибирск, 2000. - 26 с.

64. Любченко, П. Н. Интоксикационные заболевания органов пищеварения Текст. / П. Н. Любченко. Воронеж : Изд-во ВГУ, 1990. - 184 с.

65. Ляшенко, О. В. Клинико-гигиенический анализ влияния свинцового загрязнения окружающей среды на интеллектуальное развитие детей Текст. : автореф. дис. . док. мед. наук / О. В. Ляшенко. Иркутск, 2004. -33 с.

66. Магомедова, 3. С. Патофизиологические аспекты изменений в иммунной системе при воздействии солей свинца, пестицидов, нитратов и нитритов Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук / 3. С. Магомедова. Ростов н/Д, 1999.-20 с.

67. Макашев, К. К. Обменные процессы при сатурнизме Текст. Алма-Ата : [б.и.], 1976.-128 с.

68. Малых, О. Л. Оценка риска свинцовой экспозиции для здоровья детей, проживающих в зоне выбросов промышленных предприятий Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук / О. Л. Малых. Екатеринбург, 2002. -24 с.

69. Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология Текст. / А. П. Авцын, А. А. Жаворонков, М. А. Риш [и др.]. М. : Медицина, 1991. - 496 с.

70. Мотавкин, П. А. Введение в нейробиологию Текст. / П. А. Мотавкин. -Владивосток: Медицина ДВ, 2003. 251 с.

71. Мудрый, И. В. Тяжелые металлы в окружающей среде и их влияние на организм Текст. / И. В. Мудрый, Т. К. Короленко // Врачебное дело. — 2002,-№5.-С. 6-10.

72. Павловская, Н. А. Клинико-лабораторные аспекты раннего выявления свинцовой интоксикации Текст. / Н. А. Павловская, Н. И. Данилова // Медицина труда и промышленная экология. 2001. — № 5. - С. 18-22.

73. Патулин, В. Н. Особенности репродуктивной функции у женщин, контактирующих со свинцом в условиях производства Текст. / В. Н. Патулин, Д. Ф. Костючек // Журнал акушерства и женских болезней. -2001. -№ 2. -С. 47-49.

74. Пашкевич, И. А. Анализ ядрышкового аппарата клеток костного мозга при свинцовой интоксикации Текст. / И. А. Пашкевич, Ю. А. Успенская, В. В. Нефедова [и др.] // Гигиена и санитария. 2002. - № 4. - С. 58-59.

75. Поварова, О. В. Антиоксиданты как нейропротекторы при ишемическом инсульте Текст. / О. В. Поварова, Е. И. Каленикова, Е. И. Городецкая [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 2003.-Т. 66, № 3. С. 69-73.

76. Полунин, Г. С. Эффективность антиоксидантного препарата «Гистохром» в лечении гемофтальмов при гипертонической болезни и сахарном диабете. Текст. / Г. С. Полунин, И. А. Макаров, Ю. К. Ширшиков [и др.] // Вестник офтальмологии. 2000. — № 2. - С. 19-20.

77. Поляков, А. Я. Оценка морфофункциональных показателей здоровья детского населения на территориях с разным уровнем техногенного загрязнения окружающей среды Текст. / А. Я. Поляков, К. П. Петруничева // Гигиена и санитария. 2007. - № 3. - С. 9-10.

78. Привалова, JI. И. Роль загрязнения среды обитания свинцом в задержке психологического развития детей дошкольного возраста Текст. / JI. И. Привалова, С. В. Кузьмин, О. JL Малых [и др.] // Вестник Российской академии наук. 2002. - № 11. - С. 50-53.

79. Пшеничнов, Р. А. Выявление и первичная характеристика антидотов солей тяжелых металлов микробиолюминесцентным способом Текст. / Р. А. Пшеничнов, Н. М. Никитина, И. JI. Масленникова // Токсикологический вестник. 2004. - № 6. - С. 11-13.

80. Ракин, А. О. Хроническое действие тяжелых естественных радионуклеотидов и металлов на генетическую структуру популяций дрозофилы Текст. : дис. . канд. биол. наук / А. О. Ракин. Сыктывкар, 1990.- 146 с.

81. Ревич, Б. А. Об особенностях эколого-эпидемиологического изучения специфических экологически обусловленных изменений состояния здоровья человека Текст. / Б. А. Ревич // Гигиена и санитария. — 2001. — №5.-С. 49-53.

82. Розен, В. Б. Основы эндокринологии Текст. / В. Б. Розен. М. : Изд-во Московского ун-та, 1994. - 383 с.

83. Русаков, Н. В. Геохимические провинции страны и здоровье населения Текст. / Н. В. Русаков, Т. Ю. Завистяева // Гигиена и санитария. 2006. -№5.-С. 100-102.

84. Русаков, Н. В. Оценка опасности промышленных отходов, содержащих тяжелые металлы Текст. / Н. В. Русаков, JI. X. Мухамбетова, Н. В. Пиртахия [и др.] // Гигиена и санитария. 1998. - № 4. - С. 27-29.

85. Рыжавский, Б. Я. Развитие головного мозга: отдаленные последствия влияния некомфортных условий Текст. / Б. Я. Рыжавский. Хабаровск : Изд-во Дальневосточного государственного медицинского ун-та, 2002. -162 с.

86. Саноцкий, И. В. Отдаленные последствия влияния химических соединений на организм / И. В. Саноцкий, В. Н. Фоменко; АМН СССР. -М. : Медицина, 1979. 195 с.

87. Сапожников, Ю. А. Математический и экспериментальный анализ возможности оптимизации оценки высшей нервной деятельности (поведения) крыс Текст. / Ю. А. Сапожников, Ю. И. Фельдшеров, Б. Я. Рыжавский // Дальневост. мед. журн. 2002. - № 4. -С. 25-28.

88. Сетко, Н. П. Кинетика металлов в системе мать-плод-новорожденный при техногенном воздействии Текст. / Н. П. Сетко, Е. А. Захарова // Гигиена и санитария. 2005. - № 6. - С. 65-67.

89. Соколова, Т. В. Морфологические изменения головного мозга, надпочечников и гонад потомства крыс, перенесших эмоциональный стресс Текст. : дис. . канд. мед. наук / Т. В. Соколова. Владивосток, 2003.- 171 с.

90. Стародумов, В. JI. Нервно-психический статус у детей в условиях загрязнения окружающей среды Текст. / В. JI. Стародумов, А. Н. Полякова, Н. Б. Денисова // Гигиена и санитария. 1999. - № 6. — С. 52-53.

91. Степанова, Н. В. Оценка химической безопасности пищевых продуктов Текст. / Н. В. Степанова, Б. М. Смирнов, Р. Я. Хамитова // Казанский медицинский журнал. 2005. - Т. LXXXVI, № 5. с. 419-422.

92. Травкин, А. Г. Сравнительная оценка оксидантной и антиоксидантной системы крови у кроликов с щелочными ожогами глаз при лечении антиоксидантами Текст. / А. Г. Травкин, Н. А. Шульгина // Вестник офтальмологии. 2004. - № 5. - С. 26-28.

93. Трахтенберг, И. М. Влияние свинца на развитие окислительного стресса Текст. / И. М. Трахтенберг, Н. А. Утко, Т. К. Короленко [и др.] // Токсикологический вестник. — 2002. № 3. - С. 22-26.

94. Трахтенберг, И. М. Влияние тяжелых металлов на старение Текст. / И. М. Трахтенберг, Н. А. Утко, Т. К. Короленко [и др.] // Токсикологический вестник. 2003. - № 3. - С. 9-14.

95. Трахтенберг, И. М. Тяжелые металлы во внешней среде: современные гигиенические и токсикологические аспекты Текст. / И. М. Трахтенберг, В. С. Колесников, В. П. Луковенко. Минск : Навука i тэхшка, 1994. -185 с.

96. Трахтенберг, И. М. Тяжелые металлы и клеточные мембраны (обзор литературы) Текст. / И. М. Трахтенберг, JI. А. Иванова // Медицина труда и промышленная экология. 1999. - № 11. — С. 28-32.

97. Узбеков, М. Г. Влияние пренатального воздействия свинца на активность супероксиддисмутазы мозга и печени плодов крыс Текст. / М. Г. Узбеков, Н. И. Бубнова, Г. В. Куликова // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2007. - Т. 144, № 12. - С. 632-634.

98. Ушкалова, В. Н. Контроль перекисного окисления липидов Текст. / В. Н. Ушкалова, Н. В. Иоанидис, Г. Д. Кадочникова, 3. М. Деева. -Новосибирск : Изд-во Новосибирского ун-та, 1993. — 182 с.

99. Федорова, Т. Н. Применение хемилюминесцентного анализа для сравнительной оценки антиоксидантной активности некоторых фармакологических средств Текст. / Т. Н. Федоров // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2003. - Т. 66, № 5. — С. 56-58.

100. Филиппов, С. В. Возрастная патология печени Текст. / С. В. Филиппов, И. Ю. Ряднова, И. М. Кветной // Медицинский академический журнал. 2003. - Т. 3, № 3. - С. 12-21.

101. Хавинсон, В. X. Механизмы геропротекторного действия пептидов Текст. / В. X. Хавинсон, В. В. Малинин // Бюл. эксперим. биологии и медицины.-2002.-Т. 133, № 1.-С. 4-10.

102. Хавинсон, В. X. Пептидные биорегуляторы ингибируют апоптоз Текст. / В. X. Хавинсон, И. М. Кветной // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 2000. - Т. 130, № 12. - С. 657-658.

103. Хавинсон, В. X. Пептидная регуляция старения Текст. / В. X. Хавинсон // Вестн. РАМН. 2001. - № 12. - С. 16-20.

104. Харченко, Т. Н. Гонадотоксическое действие ацетата свинца в эксперименте на белых крысах Текст. / Т. Н. Харченко // Доклад АН УССР.- 1987.-Т. 6, №5.-81 с.

105. Хотимченко, С. А. Влияние свинца на обмен витаминов группы В при алиментарной недостоточности железа у крыс Текст. / С. А. Хотимченко, В. М. Коденцова, И. А. Алексеева [и др.] // Вопросы медицинской химии. 1997. - Т. 43, № 3. - С. 158-164.

106. Чубирко, М. И. Среда обитания и общественное здоровье населения Текст. / М. И. Чубирко // Здравоохранение Российской Федерации. -1998. -№ 1.-С. 45-46.

107. Чухловина, М. JI. Свинец и нервная система Текст. / М. J1. Чухловина // Гигиена и санитария. 1997. - № 5. - С. 39-42.

108. Швилкин, А. В. Влияние эхинохрома на экспериментальное реперфузионное повреждение миокарда Текст. / А. В. Швилкин, Н. И. Афонская, Н. М. Черпаченко [и др.] // Кардиология. 1991. - Т. 31, № 11. -С. 79-82.

109. Штабский, Б. М. О ПДК свинца и проблеме малых доз в токсикологии ксенобиотиков Текст. / Б. М. Штабский // Токсикологический вестник. -1998.-№2.-С. 23-31.

110. Шубина, О. С. Морфологические проявления адаптации гемато-плацентарного барьера при интоксикации свинцом Текст. / О. С. Шубина, JI. В. Грызлова // Фундам. Исслед. 2004. - № 1. - С. 131.

111. Эльбекьян, К. С. Коррекция мелатонином нарушений иммунного статуса, вызываемых солями тяжелых металлов Текст. / К. С. Эльбекьян // Токсикологический вестник. 2005. - № 1. - С. 38-41.

112. Юнева, М. О. Биохимическая характеристика мозга мышей линии SAM, характеризующейся генетически ускоренным процессом старения Текст. / М. О. Юнева, Е. Р. Булыгина, С. С. Стволинский [и др.] // Нейрохимия. 1998. - Т. 15, № 3. - С. 276-279.

113. Adonaylo, V. N. Lead intoxication: antioxidant defenses and oxidative damage in rat brain Text. / V. N. Adonaylo, P. I. Oteiza // Toxicology. — 1999. -Vol. 135, №2-3.-P. 77-85.

114. Ahamed, M. Delta-aminolevulinic acid dehydratase inhibition and oxidative stress in relation to blood lead among urban adolescents Text. / M. Ahamed, S. Verma, A. Kumar [et al.] // Hum. Exp. Toxicol. 2006. - Vol. 25, № 9. -P. 547-553.

115. Apostoli, P. Lead and cardiopathy Text. / P. Apostoli, A. Corulli, M. Metra [et al.] // Med. Lav. 2004. - Vol. 95, № 2. - P. 124-132.

116. Aykin-Burns, N. Effects of N-acetylcysteine on lead-exposed PC-12 cells Text. / N. Aykin-Burns, E. A. Franklin, N. Ercal // Arch. Environ. Contain. Toxicol. 2005. - Vol. 49, № 1. - P. 119-123.

117. Bann, T. L. Exposure to lead during critical windows of embryonic development: differential immunotoxic outcome based on stage of exposure and gender Text. / T. L. Bunn, P. J. Parsons, E. Kao [et al.] // Toxicol. Sci. -2001.-Vol. 64, № l.-P. 57-66.

118. Batuman, V. Lead nephropathy, gout, and hypertension Text. / V. Batuman // Am. J. Med. Sci. 1993. - Vol. 305, № 4. - P. 241-247.

119. Beattie, A. D. Role of chronic low-level lead exposure in the aetiology of mental retardation Text. / A. D. Beattie, M. R. Moore, M. J. Finlayson [et al.] //Lancet. 1975.-Vol. 15, № l.-P. 589-592.

120. Bressler, J. P. Mechanisms of lead neurotoxicity Text. / J. P. Bressler, G. W. Goldstein // Biochem. Pharmacol. 1991. - № 41 (4). - P. 479-484.

121. Brewster, U. C. A review of chronic lead intoxication: an unrecognized cause of chronic kidney disease Text. / U. C. Brewster, M. A. Perazella // Am. J. Med. Sci. 2004. - № 6. - P. 341-347.

122. Campbell, J. R. The association between environmental lead exposure and bone dentisy in children Text. / J. R. Campbell, R. N. Rosier, L. Novotny [et al.] // Environ. Health Perspect. 2004. - № 112. - P. 1200-1203.

123. Canfield, R. L. Impaired neuropsychological functioning in lead exposed children Text. / R. L. Canfield, M. H. Gendle, D. A. Cory-Slechta // Dev. Neuropsychol. - 2004. - № 26 (1). - P. 513-540.

124. Chertow, B. Advances in diabetes for the millennium: vitamins and oxidant stress in diabetes and its complications Text. / B. Chertow // Med. Gen. Med. -2004. -№ 6.-P. 34.

125. Chiodo, L. M. Neurodevelopmental effects of postnatal lead exposure at very low levels Text. / L. M. Chiodo, S. W. Jacobson, J. L. Jacobson // Neurotoxic^. Teratol. 2004. - № 26 (3). - P. 359-371.

126. Chow, К. M. Lead nephropathy: early leads from descriptive studies Text. / К. M. Chow, Z. C. Liu, С. C. Szeto // Intern. Med. J. 2006. - № 10. - P. 678682.

127. Corpas, I. Lead intoxication in gestational and lactation periods alters the development of male reproductive organs Text. / I. Corpas, M. Castillo, D. Marquina [et al.] // Ecotoxicol. Environ. Saf. 2002. - Vol. 53, № 2. - P. 259266.

128. Correa, M. Effects of chronic lead administration on ethanol-induced locomotor and brain catalase activity Text. / M. Correa, M. Miquel, C. Sanchis-Segura [et al.] // Alcohol. 1999. - № 1. - P. 43-49.

129. Daggett, D. A. Effect of lead on rat kidney and liver GST expression and oxidative stress Text. / D. A. Daggett, T. D. Oberley, S. A. Nelson // Toxicology. 1998. - Vol. 128. - P.191-206.

130. Delwille, Y. Early lead exposure alters social communication and aggression Text. / Y. Delwille // Abstr. 13th World meeting of the International Society for Research on Aggression. Mahwah N. J. 1999. - № 1. - P. 94-101.

131. Devi, С. B. Developmental lead exposure alters mitochondrial monoamine oxidase and synaptosomal catecholamine levels in rat brain Text. / С. B. Devi, G. H. Reddy, R. P. Prasanthi [et al.] // Int. J. Dev. Neurosci. 2005. - № 23 (4). -P. 375-381.

132. Dietert, R. R. Developmental immunotoxicology of lead Text. / R. R. Dietert, J. E. Lee, I. Hussain [et al.] // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2004. -№ 198 (2).-P. 86-94.

133. Dietrich, K. N. Effect of chelation therapy on the neuropsychological and behavioral development of lead-exposed children after school entry Text. / K. N. Dietrich, J. H. Ware, M. Salganik // Pediatrics. 2004. - № 114 (1). - P. 1926.

134. Ding, Y. Lead promoted hydroxil radical generation and lipid peroxidation in cultured aortic endothelial cells Text. / Y. Ding, H. C. Gonick, N. D. Vasizi // Am. J. Hypertens. 2000. - Vol. 13. - P. 552-555.

135. Ekong, E. B. Lead-related nephrotoxicity: a review of the epidemiologic evidence Text. / E. B. Ekong, B. G. Jaar, V. M. Weaver // Kidney Int. 2006. - № 70 (12). - P. 2074-2084.

136. El-Missiry, M. A. Prophylactic effect of melatonin on lead-induced inhibition of heme biosynthesis and deterioration of antioxidant systems in male rats Text. / M. A. El-Missiry // J. Biochem. Mol. Toxicol. 2000. - Vol. 14. -P. 57-62.

137. El-Sokkary, G. H. Melatonin protects against lead-induced hepatic and renal toxicity in male rats Text. / G. H. El-Sokkary, G. H. Abdel-Rahman, E. S. Kamel // Toxicology. 2005. - Vol. 213, № 1-2. - P. 25-33.

138. Ercal, N. N-acetylcysteine protects Chinese hamster ovary (CHO) cells from lead-induced oxidative stress / N. Ercal, P. Treeratphan, P. Lutz et al. // Toxicology. 1996. - № 108 (1-2). - P. 57-64.

139. Esterbauer, H. The role of lipid peroxidation and antioxidants in oxidative modification of LDL Text. / H. Esterbauer, J. Gebicki, H. Puhl [et al.] // Free Radic. Biol. Med. 1992. — № 13. — P. 341-390.

140. Ettinger, A. S. Effect of breast milk lead on infant blood lead levels at 1 month of age Text. / A. S. Ettinger, M. M. Tellez-Rojo, C. Amarasiriwardena [et al.]//Environ. Health Perspect. 2004. - Vol. 112.-№ 14.-P. 1381-1385.

141. Ferm, V. H. Developmental malformations resulting from the administration of lead salts Text. / V. H. Ferm, S. J. Carpenter // Exp. Mol. Pathol. 1967. -№7 (2).-P. 208-213.

142. Fischbein, A. Lead intoxication among demolition workers: the effect of lead on the hepatic cytochrome P-450 system in humans Text. / A. Fischbein, A. P. Alvares, К. E. Anderson [et al.] // J. Toxicol. Environ. Health. — 1977. -№ 3. P. 431-437.

143. Flora, G. J. Alterations in some membrane properties in rat brain following exposure to lead Text. / G. J. Flora, P. K. Seth // Cytobios. 2000. - № 103 (403).-P. 103-109.

144. Garza, A. Cellular mechanisms of lead neurotoxicity Text. / A. Garza, R. Vega, E. Soto//Med. Sci. Monit. 2006.-№ 12(3).-P. 57-65.

145. Gasana, J. Blood lead levels in children and environmental lead contamination in Miami inner city, Florida Text. / J. Gasana, W. M. Shlaing, K. A. Siegel [et al.] // Int. J. Environ. Res. Public health. 2006. - № 3. -P. 228-234.

146. Gilbert, S. G. A rationale for lowering the blood lead action level from 10 to 2 microg/dL Text. / S. G. Gilbert, B. Weiss // Neurotoxicology. — 2006. -№27 (5).-P. 693-701.

147. Graziano, J. A prospective study of prenatal and childhood lead exposure and erythropoietin production Text. / J. Graziano, V. Slavkovich, X. Liu [et al.] // J. Occup. Environ. Med. 2004. - № 46 (9). - P. 924-929.

148. Gurer, H. Can antioxidants be beneficial in the treatment of lead poisoning? Text. / H. Gurer, N. Ercal // Free Radic. Biol. Med. 2000. - № 29 (10). -P. 927-945.

149. Hackley, B. Lead poisoning in pregnancy: a case study with implications for mid wives Text. / B. Hackley, A. Katz-Jacobson // J. Midwifery Womens Health.-2003. -№ 1.-P. 30-38.

150. Harville, E. W. Factor influencing the difference between maternal and cord blood lead Text. / E. W. Harville, I. Hertz-Picciotto, M. Schramm [et al.] // Occup. And Environ. Med. 2005. - Vol. 62, № 4. - P. 263-269.

151. Hermes-Lima, M. Are free radicals involved in lead poisoning? Text. / M. Hermes-Lima, B. Pereira, E. Bechara // Xenobiotica. 1991. - Vol. 21. — P. 519.

152. Heydari, A. Effects of short-term and subchronic lead poisoning on nitric oxide metabolites and vascular responsiveness in rat Text. / A. Heydari, A. Norouzzadeh, A. Khoshbaten [et al.] // Toxicol. Lett. 2006. - № 166 (1). -P. 88-94.

153. Heynen, M. J. Effect of Acute Lead Intoxication on the Ultrastructure of rat erythroblast and Reticulocytes Text. / M. J. Heynen, Z. Zaman, R. L. Verwilghen // Haematologia. 1987. - Vol. 20, № 3. - P. 131-153.

154. Hoffman, D. J. Phosphorus amendment reduces hepatic and renal oxidative stress in mallards ingesting lead-contaminated sediments Text. / D. J. Hoffman, G. H. Heinz, D. J. Audet // J. Toxicol. Environ. Health A. 2006. -№ 11.-P. 1039-1053.

155. Holtzman, P. Lead toxicity in primary cultured cerebral astrocytes and cerebellar granular neurons Text. / P. Holtzman, J. E. Olson, C. De Vries [et al.] // Toxicol. And Appl. Pharmacol. 1987. - Vol. 89, № 2. - P. 781-786.

156. Ни, Н. Fetal lead exposure at each stage of pregnancy as a predictor of infant mental development Text. / PL Ни, M. M. Tellez-Rojo, D. Bellinger // Environ. Health Perspect. 2006. - № 114 (11). - P. 1730-1735.

157. Jacquet, P. Early embryonic development in lead-intoxicated mice Text. / P. Jacquet // Arch. Pathol. Lab. Med. 1977. - № 101 (12). - P. 641-643.

158. Jaya Prasanthi, R. P. Zinc and calcium reduce lead induced perturbations in the aminergic system of developing brain Text. / R. P. Jaya Prasanthi, G. Hariprasad Reddy, C. Bhuvaneswari Devi [et al.] // Biometals. 2005. — № 6. — P. 615-626.

159. Kasperczyk, S. Function of heart muscle in people chronically exposed to lead Text. / S. Kasperczyk, B. Przywara-Chowaniec, A. Kasperczyk [et al.] // Ann. Agric. Environ. Med. 2005. -№ 12 (2). - P. 207-210.

160. Kimmel, C. A. Behavioral teratology: overview Text. / C. A. Kimmel // Environ. Health Perspect. 1976. -№ 18. - P. 73.

161. Lafond, J. Low environmental contamination by lead in pregnant women: effect on calcium transfer in human placental syncytiotrophoblasts Text. / J. Lafond, A. Hamel, L. Takser [et al.] // J. Toxicol. Environ. Health A. 2004. -№67 (14).-P. 1069-1079.

162. Lalor, G. C. Acute lead poisoning associated with backyard lead smelting in Jamaica Text. / G. C. Lalor, M. K. Vutchkov, S. T. Bryan [et al.] // West Indian Med. J. 2006. - № 55 (6). - P. 394-398.

163. Lebedev, A. V. Echinochrome, a naturally occurring iron chelator and free radical scavenger in artificial and natural membrane systems Text. / A. V. Lebedev, M. V. Ivanova, D. O. Levitsky // Life Sci. 2005. - № 76 (8). - P. 863-875.

164. Lidsky, Т. I. Lead neurotoxicity in children: basic mechanisms and clinical correlates / Т. I. Lidsky, J. S. Schneider // Brain. 2003. - Vol. 126, № 1. -P. 5-19.

165. Lima, E. S. Vitamin A and lipid peroxidation in patients with different forms of leprosy Text. / E. S. Lima, I. D. Roland, M. D. Maroja [et al.] // Rev. Inst. Med. Trop. Sao. Paulo. 2007. - № 49 (4). - P. 211-214.

166. Lin, J. L. Low-level environmental exposure to lead and progressive chronic kidney disease Text. / J. L. Lin, D. T. Lin-Tan, Y. J. Li [et al.] // Am. J. Med. 2006. - № 119 (8). - P. 707.

167. Marchetti, C. Molecular targets of lead in brain neurotoxicity Text. / C. Marchetti // Neurotox. Res. 2003. - № 5 (3). - P. 221-236.

168. Maxwell, K. Effect of inorganic lead on some functions of the cerebral microvessel endothelium Text. / K. Maxwell, H. V. Vinters, J. A. Berliner // Toxicol. And Appl. Pharmacol. 1986. - Vol. 84, № 2. - P. 567-572.

169. Miller, R. K. From the pages of Teratology Text. / R. K. Miller // Teratology. 1992. -№ 45 (4). - P. 341-343.

170. Miranda, M. L. The Relationship between Early Childhood Blood Lead Levels and Performance on End-of-Grade Tests Text. / M. L. Miranda, D. Kim, M. A. Galeano [et al.] // Environ. Health Perspect. 2007. - № 115 (8). -P. 1242-1247.

171. Mocchegiani, E. Metallothioneins (I+II) and thyroid-thymus axis efficiency in old mice: role of corticosterone and zinc supply Text. / E. Mocchegiani, R. Giacconi, C. Cipriano [et al.] // Mech. Ageing. Dev. 2002. - № 123 (6). -P. 675-694.

172. Moreira, E. G. Developmental lead exposure: behavioral alterations in the short and long term Text. / E. G. Moreira, I. Vassilieff, V. S. Vassilieff // Neurotoxicol. Teratol. 2001. - № 23 (5). - P. 489-495.

173. Opler Mark, G. A. Prenatal lead exposure, S-aminolevulinic acid, and schizophrenia Text. / G. A. Opler Mark, S. Brown Alan, J. Graziano [et al.] // Environ. Health Perspect. 2004. - № 5. - P. 548-552.

174. Palmisano, P. Untaxed whiskey and fetal lead exposure Text. / P. A. Palmisano, R. C. Sneed, G. Cassady // J. Pediatr. 1969. - № 75 (5). p. 869872.

175. Patra, R. C. Antioxidant effects of alpha tocopherol, ascorbic acid and L-methionine on lead induced oxidative stress to the liver, kidney and brain in rats Text. / R. C. Patra, D. Swarup, S. K. Dwivedi // Toxicology. 2001. - № 162 (2).-P. 81-88.

176. Patrick, L. Lead toxicity part II: the role of free radical damage and the use of antioxidants in the pathology and treatment of lead toxicity Text. / L. Patrick // Altern. Med. Rev. 2006. - № 11 (2). - P. 114-127.

177. Perier, C. Complex I Deficiency primes Bax-dependent neuronal apoptosis through mitochondrial oxidative damage Text. / C. Perier, K. Tieu, C. Guegan // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. - Vol. 102, №52.-P. 19126-19131.

178. Qian, Y. GRP78 compartmentalized redistribution in Pb-treated glia: role of GRP78 in lead-induced oxidative stress / Y. Qian, Y. Zheng, K. S. Ramos et al. // Neurotoxicology. 2005. - Vol. 26, № 2. - P. 267-275.

179. Qin, F. Antioxidant vitamins prevent cardiomyocyte apoptosis produced by norepinephrine infusion in ferrets Text. / F. Qin, N. K. Rounds, W. Mao [et al.] // Cardiovasc. Res. 2001. - № 51 (4). - P. 736-748.

180. Rahman, S. Chemopreventive activity of glycyrrhizin on lead acetate mediated hepatic oxidative stress and its hyperproliferative activity in Wistar rats Text. / S. Rahman, S. Sultana // Chem. Biol. Interact. 2006. - № 160 (1). -P. 61-69.

181. Retsky, К. L. Ascorbic acid oxidation product(s) protect human low-density lipoprotein against atherogenic modification Text. / K. L. Retsky, M. W. Freeman, B. Frei // J. Biol. Chem. — 1993. — № 268. — P. 1304-1309.

182. Rodgers, R. J. The elevated plus-maze: pharmacology, methoidology and ethology Text. / R. J. Rodgers, J. C. Cole // Ethology and Pharmacology. -1994.-№9.-P. 44.

183. Ronchetti, R. Lead neurotoxicity in children: Is prenatal exposure more important than postnatal exposure? Text. / R. Ronchetti, P. Van Den Hazel, G. Schoeters [et al.] // Acta. Paediatr. 2006. - № 95. - P. 45-49.

184. Rorgers, R. J. Influence of prior maze experience on behaviour and responce to diazepam in the elevated plus maze and light/dark tests of anxiety in mice Text. / R. J. Rorgers, J. K. Shepherd // Psychopharmacol. 1993. - Vol. 113. -P. 237-242.

185. Rozman, B. Stability of vitamins С and E in topical microemulsions for combined antioxidant therapy Text. / B. Rozman, M. Gasperlin // Drug Deliv. 2007.-№ 14 (4). - P. 235-245.

186. Salford, L. G. Nerve Cell Damage in Mammalian Brain after Exposure to Microwaves from GSM Mobile Phones Text. / L. G. Salford, A. E. Brun, J. L. Eberhardt [et al.] // Environmental Health Perspectives. 2003. - Vol. Ill, №7.-P. 76-79.

187. Sandhir, R. Effect of lead on lipid peroxidation in liver of rats Text. / R. Sandhir, K. L. Gill // Biol. Trace Elem. Res. 1995. - Vol. 48. - P. 91-97.

188. Schock, В. C. Antioxidants and oxidative stress in BAL fluid of atopic asthmatic children Text. / В. C. Schock, I. S. Young, V. Brown [et al.] // Pediatr. Res. 2003. - № 53 (3). - P. 375-381.

189. Scoppa, P. Hepatic Drug Metabolizing Activity in Lead Poisoned Rats Text. / P. Scoppa, M. Romengous, W. Penning // Experimentia. 1973. -Vol. 29, №8.-P. 32-35.

190. Serbecic, N. Vitamins inhibit oxidant-induced apoptosis of corneal endothelial cells Text. / N. Serbecic, S. C. Beutelspacher // Jpn. J. Ophthalmol. 2005. - № 49 (5). - P. 355-362.

191. Sorensen, E. M. Intravenous administration mode for lead inclusion development in mouse tissues Text. / E. M. Sorensen, M. H. Bhattacharyya // Toxicol. Lett. 1988. - № 41 (1). - P. 31-38.

192. Srianujata, S. Lead-the toxic metal to stay with human Text. / S. Srianujata // J. Toxicol. Sci. 1998. - № 2. - P. 237-240.

193. Stewart, W. F. Past adult lead exposure is linked to neurodegeneration measured by brain MRI Text. / W. F. Stewart, B. S. Schwartz, C. Davatzikos [et al.] // Neurology. 2006. - № 66 (10). - P. 1476-1484.

194. Stowe, H. Reproductive ability and progeny of F1 lead-toxic rats Text. / H. D. Stowe, R. A. Goyer // Fertil. Steril. 1971. - № 22 (11). - P. 755-760.

195. Stretesky, P. B. The relationship between lead and crime Text. / P. B. Stretesky, M. J. Lynch // J. Health Soc. Behav. 2004. - № 45 (2). - P. 214229.

196. Toews, A. D. Effect of inorganic lead exposure on myelination in the rat Text. / A. D. Toews, M. R. Krigman, D. J. Thomas [et al.] // Neurochem. Res. 1980.-№ 5 (6).-P. 605-616.

197. Toscano, C. D. Lead neurotoxicity: from exposure to molecular effects Text. / C. D. Toscano, T. R. Guilarte // Brain Res. Rev. 2005. - № 49 (3). -P. 529-554.

198. Troesken, W. Lead exposure and eclampsia in Britain, 1883-1934 Text. / W. Troesken//Environ. Res. 2006. -№ 101 (3). - P. 395-400.

199. Vaziri, N. D. Compensatory up-regulation of nitric-oxide synthase isoforms in lead-induced hypertension; reversal by a superoxide dismutase-mimetic drug Text. / N. D. Vaziri, Y. Ding, Z. Ni // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2001. - Vol. 298.-P. 679-685.

200. Vaziri, N. D. Effect of lead on nitric oxide synthase expression in coronary endothelial cells: role of superoxide Text. / N. D. Vaziri, Y. Ding // Hypertension. 2001. - Vol. 37. - P. 223-226.

201. Vigeh, M. Lead and other trace metals in preeclampsia: a case-control study in Tehran, Iran Text. / M. Vigeh, K. Yokoyama, F. Ramezanzadeh [et al.] // Environ. Res. 2006. - № 2. - P. 268-275.

202. Villeda-Hernandez, J. Enhanced brain regional lipid peroxidation in developing rats exposed to low level lead acetate Text. / J. Villeda-Hernandez, R. Barroso-Moguel, M. Mendez-Armenta [et al.] // Brain Res. Bull. 2001. -№55 (2).-P. 247-251.

203. Wang, C. Effect of ascorbic Acid and thiamine supplementation at different concentrations on lead toxicity in liver Text. / C. Wang, J. Liang, C. Zhang [et al.] // Ann. Occup. Hyg. 2007. - № 51 (6). - P. 563-569.

204. Wang, W. G. Effect of plumbism on auditory brainstem response of children Text. / W. G. Wang, Y. M. Wang, L. D. Feng // Zhonghua Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za Zhi. 2005. -№ 12. - P. 896-898.

205. Wilson, M. A. Neonatal lead exposure impairs development of rodent barrel field cortex Text. / M. A. Wilson, M. V. Johnston, G. W. Goldstein [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2000. № 97 (10). - P. 5540-5545.

206. Winder, C. The genotoxicity of lead Text. / C. Winder, T. Bonin // Mutat. Res. 1993. - № 285 (1). - P. 117-124.

207. Zawadzki, M. Mechanisms and toxic effects of lead on the cardiovascular system Text. / M. Zawadzki, R. Poreba, P. Gac // Med. Pr. 2006. - № 57 (6). -P. 543-549.

208. Zhang, J. The effects of meso-2,3-dimercaptosuccinic acid and oligomeric procyanidins on acute lead neurotoxicity in rat hippocampus Text. / J. Zhang, X. F. Wang, Z. B. Lu [et al.] // Free Radic. Biol. Med. 2004. - № 37 (7). -P. 1037-1050.

209. Zhong, C. Distribution of lead in renal Proximal Convoluted Tubules of lead-Poisoned rats Text. / C. Zhong, Y. Ling, Z. Wu // J. Electron. Microsc. Techn. 1987. - Vol. 7, № 2. - P. 56-59.