Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Особенности течения гепатита С у больных с хронической почечной недостаточностью

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Апарин, Игорь Сергеевич

Перечень условных обозначений, символов и терминов

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2 1 Изучение гуморального ответа к вирусу гепатита С и его отдельным белкам (core, NS3, NS4 и NS5)

2 2 Постановка полимеразной цепной реакции на присутствие РНК вируса гепатита С

2 3 Определение лактоферрина в плазме крови

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3 1 Особенности течения гепатита С у гемодиализных больных 69 3 2 Гуморальный иммунный ответ к вирусу гепатита С у больных, получающих гемодиализную терапию

3 3 Содержание лактоферрина в плазме крови у гемодиализных больных в процессе проведения гемодиализной терапии

3 4 HLA-фенотип DR5+ у анти-ВГС серопозитивных гемодиализных больных, содержащих и не содержащих в крови РНК ВГС

Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности течения гепатита С у больных с хронической почечной недостаточностью"

С открытием в 1989 г. вируса гепатита С (ВГС) группой американских исследователей под руководством Houghton М. [Choo Q.L., Kuo G., Weiner A.J., Overby L.R., Bradley D.W., Houghton M., 1989] и разработке методов лабораторной диагностики ВГС [см. Аксенов М.Ю., Гинцбург А.Л., 1993; Дубинина И.Г., 1996; Метод. Рекоменд. по провед. работ в диагност, лаб., использ. метода полимеразной цепной реакции, 1995; Некоторые теоретические основы полимеразной цепной реакции, 1998; Ястребова О.Н., 2000], началось детальное изучение этой вирусной инфекции многочисленными научными лабораториями во многих странах мира, которое, в связи с чрезвычайной актуальностью, продолжает интенсивно развиваться и в настоящее время.

Обозначаемый ранее как "гепатит ни А, ни В", передающийся парентерально, ВГС является основной причиной развития хронических диффузных заболеваний печени и гепатоцеллюлярной карциномы. Цирроз печени, обусловленный ВГС, занимает одно из основных мест в ряду показаний к трансплантации печени [Шерлок Ш., Дули Д., 1999].

Хроническая инфекция ВГС представляет серьезную проблему для здравоохранения во всем мире [Соринсон С.Н., 1996]. Считается, что на долю ВГС в среднем по России приходится около 9,4 % от общего числа случаев вирусных гепатитов (по данным 1997 г.), в настоящее время эта цифра значительно выше и постоянно растет [Коршунова Г.С., 1999]. ВГС в Российской Федерации в большинстве своем принадлежит к весьма неблагоприятному генотипу [Abdel-Wahab MF., Zakaria S., Kamel M. et al., 1994; Шерлок ILL, Дули Д., 1999]. Рост количества больных год от года связан еще и с тем, что в большинстве своем ВГС обладает, по сравнению с другими вирусными гепатитами, наиболее высоким хрониогенным потенциалом, т.е., год от года, идет постоянное увеличение количества больных ВГС.

Как подчеркивалось на IX Международном конгрессе по вирусным гепатитам и заболеваниям печени (Рим, 1996), частота выявления маркеров вирусных гепатитов, особенно ВГС, у людей с хронической патологией печени столь велика (до 75-5-80% в некоторых странах), что хроническими гепатитами, пожалуй, следует заниматься уже не только гастроэнтерологам и гепатологам, но и инфекционистам Чрезвычайно высока (от 17 до 90%) инфицированность больных отделений гемодиализа, гематологических стационаров, а также пациенюв после проведенных трансплантаций органов. Очень часто маркеры ВГС обнаруживаются при гепатоцеллюлярной карциноме (до 90% случаев).

Если обобщить наиболее известные клинические проявления ВГС, то можно выделип ряд характерных особенностей данного заболевания: • болезнь чаще возникает у лиц, перенесших переливание крови или её компонентов, реципиентов органов и тканей, наркоманов, ВИЧ-инфицированных;

• постепенность начала болезни, часто без четко выраженного преджелтушного периода;

• хотя заболевание протекает преимущественно в виде легких форм, тем не менее, в большинстве случаев оно приводит к хронизации (эта особенность послужила основанием для того, чтобы называть ВГС ласковым убийцей);

• на фоне кажущегося легкого течения у больных могут выявляться значительно увеличенные печень и селезёнка, не соответствующие по своим размерам и плотности ни тяжести течения, ни остроте процесса;

• ВГС-инфекция иногда распознается лишь тогда, когда у больного уже сформировался цирроз печени;

• заболевание нередко протекает с периодическими всплесками ферментативной активности, которые клинически часто не связывают с ВГС.

Предпринимаемые на протяжении последних лет многочисленные попытки ученых разных стран разработать вакцину против гепатита С пока не увенчались успехом. Неудачи сопряжены не только с отсутствием подходящих для роста вируса клеточных культур человека или приматов, но и с проблемами вариабельности вируса, недостаточно выраженного протективного иммунитета даже при реинфекции одним и тем же изолятом вируса

Известно, что у 85% больных развивается хроническая форма ВГС, в остальных случаях вирус исчезает из организма спонтанно До сих пор остается загадкой, почему в одном случае вирус покидает организм даже без лечения, а в другом - остается на долгие годы, приводя к возникновению хронических форм заболевания

В связи с вышеизложенным, изучение механизмов выведения из организма больных вируса имеет принципиальное значение как для систематизации и оптимизации терапевтических процедур, так и для разработки антивирусной вакцины Разработке этих вопросов посвящено настоящее исследование

Цель и задачи исследования

Цель работы. Поиск групп различных категорий иммунопозитивных к ВГС пациентов со сниженными показателями или с отсутствием ВГС-виремии и выяснение возможного механизма элиминации вируса из организма больного

Задачи исследования:

- сравнение клинико-лабораторных показателей виремии у иммунопозитивных к ВГС серийных амбулаторных больных и пациентов с ХПН, длительно находящихся на гемодиализе;

- анализ анти-ВГС специфического гуморального ответа на основные белки ВГС у больных с ХПН, находящихся на гемодиализе;

- определение содержщих IgM-антител к отдельным белкам ВГС у иммунокомпетентных больных;

- изучение процентного распределения больных с HLA-фенотипом DR5+ в двух группах гемодиализных пациентов с ВГС;

- анализ последствий гемодиализа на содержание лактоферрина в крови.

Научная новизна

Впервые была установлена и исследована категория серопозитивных по анти-ВГС больных, находящихся длительное время на гемодиализе по поводу ХПН, которая характеризуется сниженными титрами ВГС-виремии по сравнению с обычными пациентами с ВГС или даже отсутствием вируса в крови у значительного числа пациентов.

В сравнительном плане изучено состояние гуморального иммунитета к отдельным белкам ВГС у гемодиализных больных с наличием виремии или без нее. Анализ гуморального иммунного ответа к белкам core, NS3,

NS4 и NS5 ВГС у данных пациентов показал, что он не может рассматриваться в качестве патогенетического механизма исчезновения вируса из организма.

В качестве одного из возможных условий, способствующих выходу из организма ВГС, рассматривается фактор, ассоциированный с HLA-фенотипом DR5+.

Практическая значимость работы

1. Полученные при обследовании серопозитивных по анти-ВГС гемодиализных больных данные о наличии ВГС в плазме крови и уровне виремии являются основой правильного выбора противовирусного лечения ВГС у такой категории пациентов.

2. Состояние ВГС виремии может служить критерием оценки пригодности гемодиализных больных для последующей ренальной аллотрансплантации.

3. Выяснение общих уровней вирусной нагрузки и содержания лактоферрина в группе гемодиализных пациентов с ВГС-виремией должно рассматриваться в качестве критерия оценки функционального состояния печени и правильности выбора лечения.

Внедрение результатов работы

Результаты, полученные в настоящей работе, внедрены в практическую деятельность Научно-исследовательского института трансплантологии и искусственных органов Минздрава Российской Федерации, Центральной клинической больницы Медицинского центра Управления делами Президента Российской Федерации, Гематологического научного центра МЗ РФ.

Апробация работы

Материалы доложены на совместном заседании научной конференции отделений гемосорбции, трасплантации почки и вирусной диагностики Научно исследовательского института трансплантологии и искусственных органов Минздрава Российской Федерации НИИТ и ИО МЗ РФ), на совместном заседании научной конференции по апробации кандидатских диссертаций НИИТ и ИО МЗ РФ и Учебно-научного центра Объединенной больницы с поликлиникой Медицинского центра Управления делами Президента РФ.

Публикации

По материалам диссертации опубликованы 5 работ в отечественных научных журналах и сборниках научных трудов.

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка цитируемой литературы,

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Апарин, Игорь Сергеевич

ВЫВОДЫ

1. Установлено наличие категории серопозитивных по анти-вГС больных, находящихся длительное время на гемодиализе по поводу ХПН, которая характеризуется сниженными титрами ВГС-виремии или даже отсутствием вируса в крови у значительного большего процента больных, чем у обычных пациентов с ВГС.

2. Выявлена статистически более высокая частота присутствия в крови (р<0,05) анти ВГС ЮМ в группе анти ВГС серопозитивных иммунокомпетентных больных по сравнению с анти ВГС серопозитивными гемодиализными больными.

3. Гуморальный иммунный ответ к белкам core, NS3, NS4 и NS5 ВГС у гемодиализных больных с наличием виремии или без нее не может рассматриваться в качестве патогенетического механизма исчезновения вируса из организма.

4 Для подавляющего большинства анти-ВГС серопозитивных гемодиализных больных с отсутствием РНК ВГС характерно повышение лактоферрина в крови после очередной процедуры гемодиализа, что косвенно указывает на возможную протективную роль данного белка в очищении организма от вирусной инфекции.

5. Одним из условий, способствующих удалению вируса у анти-ВГС серопозитивных гемодиализных больных, является наличие фактора внутренней среды, ассоциированного с HLA-фенотипом DR5+.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Состояние ВГС виремии может служить критерием оценки пригодности гемодиализных больных для последующей ренальной аллотрансплантации.

2. Выяснение уровней вирусной нагрузки и содержания лактоферрина в группе гемодиализных пациентов с ВГС-виремией должно рассматриваться в качестве критерия оценки функционального состояния печени и правильности выбора лечения.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Апарин, Игорь Сергеевич, Москва

1. Аксенов М.Ю., Гинцбург A.JI. Диагностика инфекционных заболеваний с помощью метода полимеразной цепной реакции. Молекулярная генетика и вирусология. 1993. N. 4. С. 3-8.

2. Бароян О. В., Портер Д. Р. Международные и национальные аспекты современной эпидемиологии и микробиологии. М.: Медицина, 1975. -520 с.

3. Балаян М.С., Михайлов М.И. Энциклопедический словарь вирусные гепатиты. 1999 г., М.: Амипресс.

4. Бондаренко И.Г. Вирусные гепатиты. В кн. Медицинская лабораторная диагностика. Санкт-Петербург «Интермедика». 1997, с.113-125.

5. Ведяков A.M., Комолов И.С., Тоневицкий А.Г. Гуморальный иммунный ответ к белкам core, NS3, NS4 и NS5 вируса гепатита "С" у больных, получающих гемодиализную терапию. Аллергология и иммунология. 2000, Том 1 No 3 стр. 83- 84.

6. Дубинина И.Г. Использование метода полимеразной цепной реакции в клинико-диагностических лабораториях. Лаборатория. 1996. № 4.

7. Жданов В. М., Львов Д. К. Эволюция возбудителей инфекционных болезней. М.: Медицина, 1984. - 270 с.

8. Закон РФ от 19.04.91 г. "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".

9. Камышников B.C. Анализ, основывающийся на использовании полимеразной цепной реакции (ПЦР-технология) В кн. Справочник по клинико-биохимической лабораторной диагностике. Минск, Беларусь 2000, с. 77-79.

10. Клинические лабораторные исследования. В кн. "Руководство по медицине. Диагностика и терапия" М. Мир. 1997. Т. 2. С. 712-728.

11. Коршунова Г.С. В Сб.: "Гепатит В, С и D проблемы диагностики, лечения и профилактики"- M.:1999.-C.l 11-112.

12. Малышев B.C., А.Г. Тоневицкий, A.M. Ведяков, О.Е. Потехин, Н.А. Арефьева, Ю.В. Сергеев, В.Г. Лунин В.Г. Выявление РНК вируса гепатита С у доноров крови. Иммунопатология, -2000, -№ 2, -С-75-79.

13. Методические рекомендации по проведению работ в диагностических лабораториях, использующих метод полимеразной цепной реакции. Утверждены 22 июня 1995. Государственный комитет санитарно-эпидемиологического надзора РФ. Москва, 1995.

14. Микробиология и иммунология (под ред. А.А.Воробьева). М. Медицина, 1999.464 с.

15. Миронов А.Ю. Организация лабораторной микробиологической и иммунологической службы. В кн: Микробиология и иммунология (под ред. А.А.Воробьева). М. Медицина, 1999. С. 272-288.

16. Некоторые теоретические основы полимеразной цепной реакции. Информационно-методическое пособие. ДНК-технология. Москва, 1998.

17. Постановление Госстандарта России и Госкомсанэпиднадзора Российской Федерации от 09.01.93 № 1/2 "Об обеспечении безопасной работы медицинской лаборатории для здоровья человека".

18. Руководство по эпидемиологии инфекционных болезней. (Под ред. В.И. Покровского). Т. 1. 2.-М.: Медицина, 1993.

19. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты в клинической практике. Санкт-Петербург: Теза, 1996.- 300 с.

20. Сухарев А.Е., Николаев А.А., Васильев М.Ю. Уровень сывороточного лактоферрина в норме и при патологии. Вопросы медицинской химии. 1990 (а) №3, с. 81-83.

21. Терминология хронических гепатитов. Лжування та Д1агностика-1996.-№3,-С. 42-43.

22. Шерлок Ш., Дули Д. Вирус гепатита С. В кн. «Заболевания печени и желчных путей» . 1999, М., Изд. ГЭОТАР. С .329-335

23. Шибата Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекулярио-геиетический анализ биоптатов. В кн. Молекулярная клиническая диагностика. М. Мир., 1999. С. 395-506.

24. Ястребова О.Н. Гепатит С. Информационно-методическое пособие. Кольцове, 2000.

25. Abdel-Wahab MF, Zakaria S, Kamel M et al. High sero-prevalence of hepatitis С infection among risk groups in Egypt. Am. J. Trop. Med. Hyg. 1994; 51: 563.

26. Adinolfi LE, Utili R, Andreana A at al. Relationship between genotypes of hepatitis С virus and histopathological manifestations in chronic hepatitis С patients. J Gastroenterol Hepatol 2000 Mar;12(3):299-304

27. Aiyama T, Yoshioka K, Hirofuji H et al. Changes in serum hepatitis С virus RNA liter and response to interferon therapy in patients with chronic hepatitis C. Dig. Dis. Sci. 1994; 39: 2244.

28. Alberti A, Morsica G, Chemello L et al. Hepatitis С viraemia and liver disease in symptom- free individuals.// Lancet 1992; 340: 697- 98.

29. Alter H.J. The hepatitis С virus and its relationship to the clinical spectrum ofNANB hepatitis. J.Gastroenterol. Hepatol. 1990; (Suppl. 1): 78-94.

30. Alter MJ. Epidemiology of hepatitis С in the West, Semin. Liver. Dis. 1995; 15: 5.

31. Alter JH, Purcell RH, Shih JW et al. Detection of antibody to hepatitis Сvirus in prospectively followed transfusion recipients with acute non-A, non-B hepatitis. N. Engi. J. Med. 1989; 321:1494.

32. Angelico M, Morosetti M, Passalacqua S at al. Low levels of hepatitis С virus RNA in blood of infected patients under maintenance haemodialysis with high-biocompatibility, high-permeability n,„rs. Dig Liver Dis 2000 Nov;32(8):724-8.

33. Ausubel F.M., Brent R., Kingston R.E., Moore D. D., Seidmann J. G., Smith J.A & Struhl K. 1993. Current Protocols in Molecular Biology (Greene & Wiley, New YorK).

34. Bassett S., Thomas D., Brasky K., and Landford R. Viral Persistence, antibody to El and E2, and hypervariable region 1 sequence stability in hepatitis С virus-inoculated chimpanzees. J Virol 1999; 73:1118-26.

35. Bjero K, Freland SS, Yun Z et al. Hepatitis С infection in patients with primary hypogammaglobulinemia after treatment with contaminated immune globulin. N. Engi, J. Med. 1994; 331: 1607.

36. Blatt LM, Mutchnick MG, Tong MJ at al. Assessment of hepatitis С virus RNA and genotype from 6807 patients with chronic hepatitis С in the United States. J. Viral Hepat 2000 May;7(3):196-202

37. Borrow P. Mechanisms of viral clearance and persistence. J Viral Hepatitis 1997,4,216-224.

38. Botarelli P., Brunetto M.R., Minutello M.A. et al. T-lymphocyte response to hepatitis С virus in different clinical courses of infection. Gastroenterology 1993, 104, 58-67. (70)

39. Botarelli P., Brunetto M.R., Minutello M.A. et al. T-lymphocyte response to hepatitis С virus in different clinical courses of infection. Gastroenterology 1993,104, 58-67. (70)

40. Brillanti S., Foli M., Gaiani S. Et al., Persistent hepatitis С viraemia without liver disease. Lancet, 1993,341,464.

41. Bukh J, Purcell RH, Miller RH. At least 12 genotypes of hepatitis С virus predicted by sequence analysis of the putative El gene of isolates collected worldwide. Proc Natl Acad Sci USA 1993; 90: 8234- 8238.

42. Busch MP, Toblcr LH, Francis В et al. Reinstatement of donors who test false-positive in second-generation hepatitis С virus enzyme immunoassay should await availability of licensed third-generation tests. Transfusion 1994; 34: 278.

43. Choo Q.L., Kuo G., Weiner A.J., Overby L.R., Bradley D.W., Houghton M. Isolation of a cDNA clone derived from blood-borne non-A, non-B, viral hepatitis genome. Science 1989; 244:359.

44. Conry-Cantilena C, Van Raden M, Gibble J ct al. Routes of infection, viremia, and liver disease in blood donors found to have hepatitis С virus infection. N. Engl. J. Med. 1996,334: 1691.

45. Courouce A-M, Bouchardeau F, Girault A et al. Significance of NS3 and NS5 antigens in screening for HCV antibody. Lancet 1994; 343: 853.

46. Cramp ME, Carucci P, Underhill J, Naoumov NV, Williams R, Donaldson PT Association between HLA class II genotype and spontaneous clearance of hepatitis С viraemia. J Hepatol 1998 Aug;29(2):207-13.

47. Ctamp M.B., Catucci P., Rossol S.et al. Hepatitis С vims (HCV) specific immune response in anti-HCV positive patients without hepatitis С viraemia. Gut. 1999,44,424-429.(1)

48. Cuthbert JA. Hepatitis C: progress and problems.//Clin Microbiol Rev. 1994 Oct; 7( 4): 505- 32.

49. Cxonzales-Peralta R.P., Liu W.Z., Davis G.L. ct al. Modulation of hepatitis С virus quasispecies heterogeneity by interferon-alfa and ribavirin therapy. J. of Viral Hepatitis, 1997; 4:99-106.

50. De Medina M., Schiff E.R. Hepatitis C: diagnostic assay. Semin Liver Dis. 1995,15,33.

51. Djordjevic V., Stojanovic К., Stojanovic M., Stefanovic V. Prevention of nosocomial transmission of hepatitis С infection in a hemodialysis unit. A prospective study. Int J Artif Organs 2000 Mar;23(3):181-8

52. Esteban J.I., GenescaJ., Alter H.J. Hepatitis C: Molecular Biology, Pathogenesis, Epidemiology, Clinical Features, and Prevention. Progress in Liver Diseases, 1992; 10: 253-282.

53. Esteban Jl, Gornez J, Martell M et al. Transmission of hepatitis С virus by a cardiac surgeon. N. Engl. J. Med. 1996; 334: 555.4, Suppl 2, 1 997. 16- 24.

54. Estebahn JL, Genesca J, Alter HJ. Hepatitis C: Molecular biology, pathogenesis, epidemiology, clinical features and prevention./ Progress in Liver Diseases. Chapter 12. 1996, 253- 282.

55. Fabrizi F.,Martin P.,Dixit V.,et al. Biological dynamics of viral load in hemodialysis patients with hepatitis С virus. Am J Kidney Dis 2000 Jan;35(l):122-9.

56. Fanning LJ, Levis J, Kenny-Walsh E at al. Viral clearance in hepatitis С (lb) infection: relationship with human leukocyte antigen class II in a homogeneous population. Hepatology 2000 Jun;31(6):1334-7.

57. Fanning LJ, Levis J, Kenny-Walsh E at al. Viral clearance in hepatitis С (lb) infection: relationship with human leukocyte antigen class II in a homogeneous population. Hepatology 2000 Jun;31(6): 1334-7.

58. Frangeul L, Cresta P, Pen-in M at al. Pattern of HCV antibodies with special reference to NS5A reactivity in HCV-infected patients: relation to viral genotype, cryoglobulinemia and response to interferon.! Hepatol 1998 Apr;28(4):538-43

59. Gale M.Jr., Korth M.J., Katze M.G. Repression of the PKR protein kinase by the hepatitis С virus NS5A protein: a potential mechanism of interferon resistance. Clin.Diagn.Virol. 1998,10,157-162.

60. Gane EJ, Maertens G, Ducatteeuw A at al. Antibodies to hepatitis С virus envelope proteins correlate with hepatitis С viraemia after liver transplantation. Transplantation 1999 Jan 15;67(l):78-84

61. Gordon S.C. Extrahepatic Manifestations of Hepatitis C. Dig. Dis. 1996; 14: 157-168.

62. Grooteman MP, van Tellingen A, van Houte AJ at al. Hemodialysis-induced degranulation of polymorphonuclear cells: no correlation between membrane markers and degranulation products. Nephron 2000 Jul;85(3):267-74,

63. Hepatitis С protocols (ed Johnson Yiu-Nam Lau) Human Press, USA, 1998 621 p.

64. Hepatitis С (Ed T.J.Liang, J.H. Hoofiiagle) 2000, Acad. Press, USA, 493 p

65. Hijikata M, Kato N, Ootsuyama Y at al. Hypervariable regions in the putative glycoprotein of hepatitis С virus. Biochem Biophys Res Commun 1991; 175: 220-228.

66. Honda M., Kaneko S., Sakai A., et al. Degree of diversity of hepatitis С quasispecies and progression of liver disease. Hepatology 1994,20,1144.

67. Horl WH, Feinstein EI, Wanner С at al. Plasma levels of main granulocyte components during hemodialysis. Comparison of new and reused dialyzers. Am J Nephrol. 1990;10(l):53-7

68. Houghton M, Weiner A et al. Molecular biology of the hepatitis С viruses: implications for diagnosis and control. Hepatology 1996 ; 1 4: 38-88.

69. Hwang SJ, Luo JC, Lai CR at al. Clinical, virologic and pathologic significance of elevated serum gamma-glutamyl transpeptidase in patients with chronic hepatitis C. Chung Hua I Hsueh Tsa Chih (Taipei) 2000 Jul;63(7):527-35

70. Ikeda M, Nozaki A, Sugiyama К at al. Characterization of antiviral activity of lactoferrin against hepatitis С virus infection in human cultured cells. Virus Res 2000 Jan;66(l):51-63

71. Ikeda M, Sugiyama К, Tanaka T at al. Lactoferrin markedly inhibits hepatitis С virus infection in cultured human hepatocytes. Biochem Biophys Res Commun 1998 Apr 17;245(2):549-53

72. Juki N., Hayashi N., Moribe T. et al. Relation of Disease Activity During Chronic Hepatitis С Infection to Complexity of Hypervariable Region I Quasispecies. Hepatolo-gy 1997; 25:439-444.

73. Kage M., Shimamatu K., Nakashima E. et al. Long-Term Evolution of Fibrosis From Chronic Hepatitis to Cirrhosis in Patients with Hepatitis C: Morphometric Analysis of Repeated Biopsies. Hepatology 1997; 25; 1028-1031.

74. Kanazawa Y, Hayashi N, Mita E at al. Influence of viral quasispecies on effectiveness of interferon therapy in chronic hepatitis С patients. Hepatology 1994; 20: 1121 1130.

75. Kato N, Ootsuyama Y, Tanaka T, Nakagawa M, Nakazawa T.Muraiso K, Ohkoshi S, Hijikata M, Shimotohno K. Marked sequence diversity in the putative envelope proteins ofhepatitis С viruses. virus Res 1992; 22: 107- 123.

76. Kittl EM, Hofmann J, Hartmann G, Sebesta С at al. Serum protein 90K/Mac-2BP is an independent predictor of disease severity during hepatitis С virus infection. Clin Chem Lab Med 2000 Mar;38(3):20S-8

77. Klein RS, Freeman K, Taylor PE et al. Occupational risk for hepatitis С virus infection among New York City dentists. Lancet 1991; 338:1539.

78. Koths K, Taylor E, Halenbeck R, Casipit C, Wans A. Cloning and characterization of a human МАС-2-binding protein, a new member of thesuperfamily defined by the macrophage scavenger receptor cysteine-rich domain. J. Biol Chem. 1993;268:14245.

79. Kumar U, Monjardino J, Thomas HC. Hypervariable region of hepatitis С virus envelope glycoprotein (Е2/ NS1) in an agammaglobulinemic patient. Gastroenterology 1994; 106:1072- 1075.

80. Liang TJ, Rehermann B, Seeff LB, Hoofnagle JH. Pathogenesis, natural history, treatment, and prevention of hepatitis C. Ann Intern Med 2000 Feb 15;132(4):296-305

81. Lott W.B., Takyar S.S., Tuppen J.,m Crawford D.H.G., Harrison M., Sloots T.P., Gowans E.J. Vitamin B12 and hepatitis C: Molecular biology and human pathology. Proc. Natl. Acad, of Sci. USA, 2001, V.98,4916-4921.

82. Makris M, Preston FE, Triger DR et al. Hepatitis С antibody and chronic liver disease in haemophilia. Lancet 1990; 335: 1117.

83. Makris M, Preston FE. Chronic hepatitis haemophilia/ Blood rev. 1993; 7, 243.

84. Martinot-Peignoux M, Roudot-Thoraval F, Mendel I at al. Hepatitis С virus genotypes in France: relationship with epidemiology, pathogenicity and response to interferon therapy. The GEMHEP. J. Viral Hepat 1999 Nov;6(6):435-43

85. Martinot-Peignoux M, Marccllin P, Gournay J et al. Detection and quantitation of serum HCV-RNA by branched DNA amplification in anti-HCV positive blood donors. J. Hepatol. 1994; 20:676.

86. Mazzella G., Accogli E., Sottili S. et al. Alpha interferon treatment may prevent hepatocellular carcinoma in HCV-related liver cirrhosis. J. Hepatology 1996;24:141-147.

87. McHutchison J.G., Hoofhagle J.H., Therapy of chronic hepatitis. In: Hepatitis C. (edLiang T.J., Hoofhagle J.H.), Acad. Press. 2000,203-240..

88. Miller R.H, Purcell R.H. Hepatitis С virus shares ami-no acid sequence similarity with pestiviruses and flaviviruses as well as members of two plant virus supergroups. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1990; 87: 2057.

89. Minkyung Y.I., Shuichi Kaneko, Dae Yeul Yu, Seishi Murakami. Hepatitis С virus envelope proteins bind lactoferrin. J virology 1997, 71, №8, h.5997-6002.

90. Minuk G.Y., Weinstein S., Kaita K.D. Serum Cholesterol and Low- Density Lipoprotein Cholesterol Levels as Predictors of Response to Interferon Therapy for Chronic Hepatitis C. Annals of Internal Medicine 2000 Volume 132 • Number 9. P. 761-762.

91. M'tsui T, Iwano K, Masuko К et al. Hepatitis С virus infection in medical personnel after ncedlestick accident. Hepatology 1992; 16: 1109.

92. Monazahian M, Bohme I, Bonk S, Koch A, Scholz C, Grethe S, et al. Low density lipoprotein receptor as a candidate receptor for hepatitis С virus. J Med Virol. 1999; 57:223- 9.

93. Morikawa Т., Nakata К., Hamasaki К., et al. Prevalence and characterization of hepatitis С virus in hemodialysis patients. Comment in:

94. Naito M, Hayashi N, Hagiwara H at al. Serial quantitative analysis of serum hepatitis С virus RNA level in patients with acute and chronic hepatitis C. J Hepatol 1994 Jun;20(6):755-9.

95. Nakashima T, Sumida Y, Yoh T at al. Thioredoxin levels in the sera of untreated viral hepatitis patients and those treated with glycyrrhizin or ursodeoxycholic acid. Antioxid Redox Signal 2000 Winter;2(4):687-94.

96. Nelson D.R., Lau J.Y.N. Host Immune Response in Hepatitis С Virus Infection. Viral Hepatitis 1996; 1: 37-48.

97. Okuda K, Hayashi H, Yokozeki K, Irie Y.Destruction of hepatitis С virus particles by haemodialysis. Lancet 1996 Mar 30;347(9005):909-10

98. Ohno, Т., Mizokami M., Wu.R.R., Saleh et al. // New hepatitis С virus (HCV) genotyping system that allows for identification of HCV genotyps la, lb, 2a, 2b, 3a, 3b, 4, 5a, 6a. //J. Clin. Microbiol. 1997. 35. -P. 201-207.

99. Pape GR, Gerlach TJ, Diepolder HM, Gruner N, Jung M, Santantonio T Role of the specific T-cell response for clearance and control of hepatitis С virus. J Viral Hepat 1999 Jul;6 Suppl 1:36-404

100. Park GJ, Lin BP, Ngu MC, Jones DB, Katelaris PH. Aspartate aminotransferase: alanine aminotransferase ratio in chronic hepatitis С infection: is it a useful predictor of cirrhosis? J Gastroenterol Hepatol 2000 Apr; 15(4):386-390.

101. Peano G., Menardi G., Ponzetto A., Fenoglio L.M. HLA-DR5 antigen. A genetic factor influencing the outcome of hepatitis С virus infection? Arch Intern Med 1994 Dec 12-26;154(23):2733-6.

102. Peano G; Menardi G; Ponzetto A et al. HLA- DR5 antigen. A genetic factor influencing the outcome of hepatitis С infection?.// Arch Int Med. 1 994 Dec 1 2- 26,1 54( 23): 2733- 6.

103. Pontisso P, Bellati G, Brunetto M at al. Hepatitis С virus RNA profiles in chronically infected individuals: do they relate to disease activity? Hepatology 1999 Feb;29(2):585-9

104. Powell T, Schreck R, McCall M, et al. A tumor derived protein which provides T-cell co-stimulation through accessory-cell activation. J Immunother. 1995;17:209.

105. Roggendorf M et al. Antibodies to hepatitis С virus (Letter).// Lancet 1989; 2: 324- 25.

106. Sandres K., Dubois M., Pasquier et all. Genetic heterogeneity of hypervariable region 1 of the hepatitis С virus (HCV) genome and sensitivity of HCV to alpha interferon therapy. . Virol. 2000, 74: 661-668.

107. Sharara A.I., Hunt C.M., Hamilton .1.0. Hepatitis C. Ann.Intern.Med. 1996-. 125; 658-668

108. Shimizu YK, Fcinstonc SM, Kohara M et al. Hepatitis С virus: detection of intracellular virus particles by electron microscopy. Hepatology 1996; 23:305.

109. Sharara АЛ., Hunt C.M., Hamilton .1.0. Hepatitis C. Ann.Intern.Med. 1996-. 125; 658-668

110. Sherlock S., Dooley J. Diseases of the Liver and Biliary System. Tenth Edition Blackwell Science, 1997; p.289-296.

111. Sanchez-TapiasJ.M., BarreraJ., Costa J. etal. Hepatitis С virus infection in patients with nonalcoholic chronic liver disease. Ann. Intern. Med. 1990; 112: 921-924.

112. Sheth SG, Flamm SL, Gordon FD, Chopra S AST/ALT ratio predicts cirrhosis in patients with chronic hepatitis С virus infection. Am J Gastroenterol 1998 Jan;93(l):44-8

113. Shii K, Rosa D, Watanabe Y, Katayama T at al. High titers of antibodies inhibiting the binding of envelope to human cells correlate with natural resolution of chronic hepatitis C. Hepatology 1998 Oct;28(4):l 117-20

114. Sodeyama T, Kiyosawa K, Urushihara A et al. Detection of hepatitis С virus markers and hepatitis С virus genomic-RNA after needlestick accidents. Arch. Intern. Med. 1993; 153: 1565.

115. Sumida Y, Nakashima T, Yoh T at al. Serum thioredoxin levels as an indicator of oxidative stress in patients with hepatitis С virus infection. J Hepatol 2000 Oct;33(4):616-22.

116. Thomas HC. Chronic Hepatitis C. The role of interferons in chronic viral hepatitis.// Consultant Series 1995 (4); N2: 3 -2.

117. Tanaka К, Ikeda M, Nozaki A at al. Lactoferrin inhibits hepatitis С virus viremia in patients with chronic hepatitis C: a pilot study. Jpn J Cancer Res 1999 Apr;90(4):367-71

118. Tassopoulos NC, Papatheodoridis GV, Katsoulidou A at al. Factors associated with severity and disease progression in chronic hepatitis C. Hepatogastroenterology 1998 Sep-Oct;45(23): 1678-83

119. Tassopoulos NC, Papatheodoridis GV, Katsoulidou A at al. Factors associated with severity and disease progression in chronic hepatitis C. Hepatogastroenterology 1998 Sep-Oct;45(23): 1678-83

120. Tedder RS., Gilson RJS., Briggs M, et al. Hepatitis С virus: evidence of sexual transmission. Br Med J., 1991,302, 1299.

121. Thursz M, Yallop R, Goldin R, Trepo C, Thomas HC. Influence of MHC class II genotype on outcome of infection with hepatitis С virus. The HENCORE group. Hepatitis С European Network for Cooperative Research. Lancet 1999 Dec 18-25;354(9196):2119-24

122. Ullrich A, Sures I, D'Egidio M, et al. The secreted tumor-associated antigen 90K is a potent immune stimulator. J Biol Chem. 1994;269:18401.

123. Vejbaesya S, Songsivilai S, Tanwandee T at al. HLA association with hepatitis С virus infection. Hum Immunol 2000 Mar;61(3):348-53.

124. Vince A, Palmovic D, Kutera N at al. HCV genotypes in patients with chronic hepatitis С in Croatia. Infection 1998 May-Jun;26(3): 173-7.

125. Watson JP, Bevitt DJ, Spickett GP, Toms GL, Bassendine MF. Hepatitis С virus density heterogeneity and viral titre in acute and chronic infection: a comparison of immunodeficient and immunocompetent patients. J Hepatol. 1996; 25: 599-607.

126. Wawrzynowicz-Syczewska M, Underbill JA, Clare MA at al. HLA class И genotypes associated with chronic hepatitis С virus infection and response to alpha-interferon treatment in Poland. Liver 2000 Jun;20(3):234-9

127. Weiner AJ, Brauer MJ, Rosenblatt J at al. Variable and hypervariable domains are found in the regions of HCV corresponding to the flavivirus envelope and NS1 proteins and the pestivirus envelope glycoproteins. Virology 1991; 180: 842 -848.

128. Weiner A.J., Shyamala V., Hall J.E. et al. // Diagnosis of human viruses by polimerase chain reaction technology / Eds. Y.Becker, Berlin, 1992. -P.86-100.

129. Weiner AJ, Kuo G, Bradley DW et al. Detection of hepatitis С viral sequences in non-A, non-B hepatitis. Lancet 1990; 335:1.

130. Wonke B, HofTbrand AV, Brown D ct al. Antibody to hepatitis С virus in multiply transfused patients with thalas-semia major. J. Clin. Pathol. 1990; 43: 638.

131. Yao N., Hesson Т., Cable M., et al. Structure of the hepatitis С virus RNA helicase domain. NatureStruct.Biol. 1997,4 463-467. (40).

132. Yi M, Kaneko S, Yu DY, Murakami S Hepatitis С virus envelope proteins bind lactoferrin. J Virol 1997 Aug;71(8):5997-6002.

133. Zibert A, Meisel H, Kraas W, Schulz A, Jung G, Roggendorf M. Early antibody response against hypervariable region 1 is associated with acute self-limiting infections of hepatitis С virus. Hepatology 1997; 25: 1245- 1249.