Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Особенности фагов и лизогении клубеньковых бактерий сои (Rhizobium japonicum)

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Андреева, Ирина Николаевна

I. ВВЕДЕНИЕ.

П. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. Фаги клубеньковых бактерий.

- специфичность

- морфология вирионов

- нуклеиновые кислоты

- негативные колонии

- серологические свойства

- взаимодействие с клетками

Глава 2.- Лизогения клубеньковых бактерий

- распространенность лизогении

- дефектная лизогения

- лизогенная конверсия

- трансдукция

Глава 3. Экология фагов клубеньковых бактерий

- распространение ризобиофагов

- влияние на бобово-ризобиальный симбиоз

Глава 4. Фаги R.japonicum

Ш. ЭКСПЕРШЖТАЛБНАЯ ЧАСТЬ

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Глава I. Морфология фагов R.japonicum

Глава 2. Лизогения R.japonicum

- особенности лизогении у природных и экспериментально полученных лизогенных культур

- сравнительное изучение фагов, выделяемых лизогенизированными культурами

Глава 3. Влияние лизогенизации на свойства клубеньковых бактерий сои

- фагочувствительность культур R.japonicum

- лизогенизация и симбиотические свойства культур R.japonicum

- освобождение фагов культурами R.japonicum в условиях вегетационных опытов

Глава 4. Серологическое изучение фагов R.japonicum

Глава 5. Некоторые свойства ДНК фагов R. japonicum

ЗУ. ОБСУЖДЕНИЕ.ПО

Введение Диссертация по биологии, на тему "Особенности фагов и лизогении клубеньковых бактерий сои (Rhizobium japonicum)"

Актуальность проблемы. Азот-важнейший биогенный элемент, от обеспеченности которым во многом зависит продуктивность земледелия. Значительное количество азота выносится из почвы с урожаем. Восполнение выноса азота осуществляется двумя путями: внесением в почву азотных удобрений и биологической фиксацией азота из атмосферы. Применение минеральных азотных удобрений постоянно растет, однако затраты на их производство высоки. К тому же, внесение больших доз минеральных удобрений экономически невыгодно и экологически небезопасно. Наиболее рациональный путь восполнения выноса азота из почвы состоит в сочетании црименения минеральных удобрений с созданием условий для максимально активной биологической фиксации азота.

Бактерии рода Rhizobium образуют азотфиксирунлций симбиоз с бобовыми растениями и, таким образом, участвуют в восполнении выноса азота с урожаем.

Сельскохозяйственные бобовые растения имеют важное значение как источник полноценного белка, прежде всего, - для животноводства. Их ценность повышается способностью в значительной степени покрывать потребность в азотном питании благодаря сим-биотической азотфиксации. Бобово-ризобиальный симбиоз обогащает почву азотом, тем самым улучшая условия произрастания последующих культур. Инокуляция бобовых клубеньковыми бактериями повышает их урожай даже по сравнению с полным обеспечением минеральным азотом. В связи с этим экономически выгодно применение бактериальных удобрений.

Ведущее место среди зернобобовых занимает соя. Ценность сои обусловлена высоким содержанием белка в зернё и зеленой массе и его полноценным аминокислотным составом, высоким содержанием витаминов и жиров. Белок сои, равноценный по качеству животному, может частично восполнить его недостаток в питании людей.

В последние годы у нас в стране и за рубежом расширяют посевы сои. В СССР около 20% посевов сои приходится на Дальний Восток. Намечено расширить их в Европейской части страны, Казахстане и Средней Азии. На большинстве этих территорий соответствующие клубеньковые бактерии отсутствуют и без высоких доз азотных удобрений соя не растет. Бактеризация сои оказывается решающим условием получения высоких урожаев.

Интерес к изучению клубеньковых бактерий сои повышается наличием у многих штаммов этого вида системы рециклизации Hg, увеличивающей эффективность азотфиксации. Кроме того, культуры R. japonicum в определенных условиях способны к фиксации в чистой культуре, что важно при изучении механизма симбиотичес-кой азотфиксации.

Все это определяет особый интерес к изучению клубеньковых бактерий сои.

Характеристика бактерий не будет полной без сведений об их фагах и особенностях лизогении. Фаги, к тому же, давно стали важным инструментом изучения и изменения бактерий. Кроме того, фаги клубеньковых бактерий представляют собой важный экологический фактор, влияющий на урожай бобовых растений. Сведения о фагах и лизогении клубеньковых бактерий необходимы цри подборе штаммов для инокуляции, оптимизации процесса приготовления и использования бактериальных удобрений.

Фаги и лизогению клубеньковых бактерий изучают давно, но не у всех видов одинаково интенсивно. Достаточно подробно изучены фаги и лизогения вццов R.meliloti,R.trifolii, менее -R.legumi -nosarum, R.phaseoli . Клубеньковые бактерии сои в этом отношении практически не изучены.

Особый интерес представляет изучение лизогении клубеньковых бактерий в связи с их симбиотическими свойствами. Однако, в настоящее время этому уделяется недостаточное внимание; недооценивается сложность влияния фагов на клубеньковые бактерии в природных популяциях; практически не изучается поведение лизогенных культур в почве и в условиях симбиоза.

Актуальность изучения фагов R.japonicum определяется, таким образом, их связью с практически важным видом бактерий, влиянием, в конечном счете, на урожай сои - ценной сельскохозяйственной культуры, а также малой изученностью этой группы бактериофагов.

Цель и задачи исследования. Цель работы состояла в изучении свойств фагов и лизогении R.japonicum . В связи с этим были поставлены следующие задачи:

- изучить морфологические свойства группы фагов R.japonicum (морфологию вирионов и негативных колоний);

- исследовать физико-химические характеристики ДНК фагов, выделенных в препаративных количествах;

- исследовать особенности лизогенного состояния клубеньковых бактерий сои, влияние экспериментальной лизогенизации на их симбиотические свойства (в вегетационных опытах).

Научная новизна. Данная работа - одна из первых работ, посвященных изучению фагов и лизогении клубеньковых бактерий сои.

В работе приведены сведения о морфологии вирионов и негативных колоний 25 фагов R.japonicum . Впервые изучены некоторые физико-химические свойства ДНК четырех фагов. Экспериментально получены лизогенные культуры R.japonicum ; впервые исследованы особенности лизогенного состояния клубеньковых бактерий сои. Впервые проведено изучение влияния лизогенизации культур этого вида на их симбиотические свойства.

Практическая ценность. Сведения о фагах важны для изучения как генетики клубеньковых бактерий, так и механизма симбиотической азотфиксации. Изучение фагов и лизогении клубеньковых бактерий представляет большое значение и для разработки оптимальных условий производства и использования бактериальных удобрений.

Апробация. Материалы диссертации были представлены на Всесоюзной конференции "Научные основы производства и применения нитрагина (Москва, 20-21 января 1981).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 работы.

Объём и структура -работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 145 страницах машинописного текста, содержат II рисунков, 13 таблиц. Список литературы включает 68 работ отечественных и 148 работ зарубежных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Андреева, Ирина Николаевна

У. ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Проведено изучение ряда свойств фагов R.japonicum Двадцать пять изученных фагов по морфологии вирионов относятся к двум морфологическим группам (Ш и 17 по классификации"Тихоненко). Выявлено три типа негативных колоний. Фаги, сходные по морфологии вирионов, но различающиеся по морфологии негативных колоний и спектру литического действия, серологически не родственны.

2. Впервые выделены и исследованы нуклеиновые кислоты фагов R.japonicum . Четыре изученные фага содержат двуспиральную ДНК слабовыраженного ГЦ-типа (56,5-58,4 тл.%). ДНК трех из них характеризуется квазислучайным распределением нуклеотидных пар по молекуле ДНК; ДНК четвертого фага свойственна неоднородность в распределении нуклеотидов.

3. Проверены на лизогению 8 культур R. japonicum Лизогенное состояние этих культур в лабораторных условиях выявить не удалось.

4. Показана возможность экспериментальной лизогенизации культур R.japonicum . Лизогенные варианты трех культур, полученные под действием семи фагов, различаются по особенностям лизоген-ного состояния, что обнаруживается по характеру и уровню индукции фаговых частиц. Лизогенное состояние некоторых изученных вариантов культур R.japonicum по-разному проявляется в лабораторных условиях и в условиях симбиоза с соей.

5. Обнаружено, что культура r. japonicum 623а - лизогенна и содержит не менее двух профагов, один из которых ответственен за образование фага 623 v, другой - дефектного фага, выявляемого электронно-микроскопически. Суперлизогенизация культуры 623а некоторыми фагами способствует их индукции. В условиях симбиоза культура 623а и ее лизогенизированные варианты освобождают фаг 623v .

Фаг 623v генетически родственен двум фагам, ранее выделенным из почвы.

6. Впервые изучено влияние лизогенизации.на свойства клубеньковых бактерий сои.

Показано, что в результате лизогенизации культуры приобрели резистентность не только к гомологичным, но и к ряду других фагов.

7. Лизогенизация двух культур R.japonicum пятью фагами не привела к утрате способности фиксировать азот в симбиозе с растениями сои. В отдельных случаях отмечается даже некоторое увеличение урожая цри инокуляции растений лизогенизированными вариантами по сравнению с исходной культурой.

Автор выражает глубокую благодарность заслуженному деятелю науки, доктору биологических наук, профессору Я.И.Раутенштейну и старшему научному сотруднику, кандидату биологических наук Л.Н.Москаленко за ценную помощь и консультации при выполнении данной работы.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Андреева, Ирина Николаевна, Москва

1. Адаме М. Бактериофаги М., 1961.

2. Бойко Л.А. Лизогения клубеньковых бактерий донника. Бул. Акад.Штиинце РСС Молд., Изд.АН Молд.ССР, сер.биол.и хим.н., 1976, № 5, с 88-90.

3. Бойко Л.А. Выделение фагов клубеньковых бактерий и их характеристика. Бул.Акад.Штиинце РСС Молд., Изд.АН Молд.ССР, сер. биол.и хим.н., 1976, № 6, с 60-65.

4. Бойко Л.А. Особенности лизогении клубеньковых бактерий кормовых бобов. Бул.Акад.Штиинце РСС Молд., Изд.АН Молд.ССР, сер.биол.и. хим.н., 1978, № 2, с 88-90.

5. Бонарцева Г.А., Шемаханова Н.М. Нитрогеназная активность Ehizobium meliloti И Rhizobium vigna в культуре корневой ткани бобовых и небобовых растений. Михфобиология, 1978, т.47, вып.5, с 848-853.

6. Динчев Д. Разпространение на бактериофага на лвдерновите грудкови бактерии в почвите на България. Известия на научно-изследовательския институт по почвознание и агротехника "Никола Пушкаров", 1962, том 1У, с 187-194.

7. Доросинский Л.М. Клубеньковые бактерии и нитрагин. Л., изд-во "Колос", 1970.

8. Доросинский Л.М., Афанасьева Л.М., Рубинштейн Г.В. Симбио-тическая фиксация атмосферного азота инокулированной соей. Агрохимия, 1973, & 8, с 84-88.

9. Иванов Н.Н. Методы физиологии и биохимии растений. Огиз. Сельхозгиз, М-Л, 1946.

10. Израильский В.П. К вопросу о расах клубеньковых бактерий. Дневник Всесоюзного съезда ботаников. Л., изд-во Рус.ботан. общ-ва, 1928, с 202-203.

11. Израильский В.П. Полиморфизм клубеньковых бактерий. Тр. Всес.н-и ин-та с-х микробиол., 1933, № 5, с 67-81.

12. Израильский В.П., Рунов Е.В., Бернард В.В. Клубеньковые бактерии и нитрагин. М., 1933.

13. Калниньш А.Д. Бактериофаг клубеньковых бактерий и его влияние на эффективность симбиоза клубеньковых бактерий с бобовым растением. Тр.ин-та микробиологии АН Лат.ССР, 1952, вып.1, с 47-84.

14. Калниньш А.Д. Распространение фага клубеньковых бактерий клевера в почвах Латвийской ССР. Тр.ин-та микробиологии АН Лат.ССР, 1956, вып.4, с 3-39.

15. Калниньш А.Д., Лаузне Э.Я. Бактериофагия. В сб."Микроорганизмы и среда", АН Лат.ССР, 1962, с 137-143.

16. Карайгушева Д., Алибекова Ш. Значение нитрагинизации для повышения урожайности сои в условиях Казахстана. Вестн.АН Каз.ССР, 1978, № 4, с 60-62.

17. Карягин Ю.Г. Эффективность бактеризации растений сои активными расами клубеньковых бактерий. Микробиология, 1980,т.48, № I, с I4I-I46.

18. Князева Т.И. Специфичность некоторых бактериофагов клубеньковых бактерий клевера. В кн."Использование микроорганизмов для повышения урожая сельскохозяйственных культур", Л., "Колос", 1966, с 136-140.

19. Князева В.Л., Загорье И.В. Выявление лизогенного состояния у бактерий Ehizobium japonicum Бюл.ВНИИ сельхоз.микробиологии, 1979, № 31, с 22-24.

20. Ковда В.А. Современное состояние круговорота азота в биосфере. В сб."Круговорот и баланс азота в системе почва-удобрение-растение-вода", М., "Наука", 1979, с 5-8.

21. Колешко О.И. Азотфиксирувдие бактерии, Минск, изд-во ЕГУ имени В.И.Ленина, 1981.

22. Колешко О.И., Тевелева М.К. Действие бактериофага на вирулентность и азотфиксирувдую способность клубеньковых бактерий гороха. ДАН БССР, 1967, т.II, № 3, с 268-270.

23. Кудеяров В.Н. "Об интенсификации вовлечения азота в его биогеохимический цикл". В сб.Круговорот и баланс азота в системе почва-удобрение-растение-вода. М., "Наука", 1979,с 280-284.

24. Лаузне Э.Я. Влияние бактериофага на эффективность симбиоза клубеттьковых бактерий и гороха". В сб.Микроорганизмы и растения Ш, Рига "Зинантне", 1967, с 85-87.

25. Лаузне Э.Я. Литическое действие бактериофагов Rhizobium legu -mino'sarum на клубеньковые бактерии, выделенные из разных бобовых растений. В сбЛЛикроорганизмы и растения" 1У, Рига, "Зинантне", 1970, с 35-41.

26. Лопатина Г.В. К вопросу отбора активных и фагоустойчивых культур клубеньковых бактерий для производства нитрагина. Тр.ВНИИ с-х микробиологии, I960, № 16, с 146-158.

27. Лупашку З.А., Коробко В.А., Новикова А.Т. Особенности симбиотических взаимоотношений различных сортов сои с клубеньковыми бактериями. В сб."Вирусы и микробы в жизни растений" Кишинев, УШтиинце", 1981, с 27-44.

28. Лурия С., Дарнелл Дж.,Балтимор Д., Кэмпбелл Э. Общая вирусология, М., Мир, 1981.

29. Маранц Л.А. Лизогения Rhizobium meliloti (люцерны И ДОННИка) И Rhizobium leguminosarum (кормовых бобов) И особенности их бактериофагов. Автореферат канд.дисс., Л, 1973.

30. Маранц Л.А., Москаленко Л.Н.,. Раутенштейн Я.И. Лизогения среди клубеньковых бактерий лщерны ( Rh.meliloti) Изв. АН СССР, сер.биол., 1973, № 5, с 720-728.

31. Маранц Л.А., Москаленко Л.Н., Ратейнштейн Я.И. Некоторые биологические свойства фагов Rhizobium meliloti (лщерны). Микробиология, 1973, т.42, вып.6, с 1088-1094.

32. Миллер Дж.Эксперименты в молекулярной генетике. М., Мир, 1976.

33. Мишустин Е.Н. Круговорот азота и его соединений в природе.

34. В кн.Роль микроорганизмов в круговороте газов в природе, М., 1979, с 68-91.

35. Мишустин Е.Н., Шильникова В.К. Клубеньковые бактерии и ино-куляционный процесс. М., "Наука", 1976.

36. Мишустин Е.Н., Черепкова Н.И. Биологический азот как источник белка и удобрений. Изв.АН СССР сер.биол., 1979, № 5,с 656-678.

37. Мишустин Е.Н., Черепкова Н.И. Роль бобовых культур и свободно-живущих азотфиксирущих микроорганизмов в азотном балансе земледелия. В сб."Круговорот и баланс азота в системе почва-удобрение-растение-вода" М., "Наука", 1979, с 9-18.

38. Москаленко JI.H. Бактериофагия клубеньковых бактерий. Автореферат канд.дисс., М., 1970.

39. Москаленко Л.Н., Раутенштейн Я.И. Лизогения клубеньковых бактерий фасоли ( Rh.phaseoli ). Микробиология, 1969, т.38, с 340-346.

40. Москаленко Л.Н., Раутенштейн Я.И. Электронномикроскопическое изучение бактериофагов полилизогенных культур Bhizobium pha -aeoli Микробиология, 1969, т.38, вып.З, с 489-491.

41. Москаленко Л.Н., Раутенштейн Я.И., Князева В.Л., Загорье И.В. О лизогении yRhizobium japonicum и чувствительность этих культур к фагам, выделенным из почв. Микробиология, 1979,т.38, вып.2, с 329-335.

42. Негру М.О., Волоскова М.М. Ефективндсть н трапну в умовах Молдавськой РСР. Микроб! ол.ж., 1977, т.39, № 5, с 645.

43. Нзитабакузе Жан Боско, Москаленко Л.Н., Раутенштейн Я.И., Шильникова В.К. Лизогения клубеньковых бактерий фасоли, выделенных из почв Руанды и СССР. Изв.ТСХА, 1977, вып.З, с 15-20.

44. Нзитабакузе $ан Боско Лизогения у клубеньковых бактерий фасоли. Некоторые данные о происхождении одного фага Rhizo-bium phaseoli Докл.Моск.с-х акад.имени К.А.Тимирязьева, 1978, № 238, с 64-67.

45. Никитишен В.И., Никитишена И.А., Шабкова Н.И. Вымывание нитратов и потери азота в условиях интенсивного применения удобрений. В сб. "Круговорот и баланс азота в системе почва-удобрение-растение-вода", М., "Наука", 1979, с 288-294.

46. Новикова А.Т., Доросинский Л.М., Загорье И.В., Афанасьев Л.М. Эффективность нитрагинизации по данным научных учреждений географической сети опытов. Тр.ВНИИ с-х микробиол., 1980,50, с 60-75.

47. Проблемы фиксации азота (неорганическая и физическая химия, биохимия) под ред.Харди Р., Боттомли Ф., Берне P.M., М., Мир, 1982.

48. Раутенштейн Я.И. Лизогения и её биологическое значение. Успехи микробиологии, М., "Наука", 1971, с 223-239.

49. Раутенштейн Я.И., Москаленко Л.Н. Дефектная лизогения среди клубеньковых бактерий люцерны ( Rhizobium meliloti) Микробиология, 1970, т.39, вып.З, с 507-511.

50. Раутенштейн Я.И., Москаленко Л.Н., Маранц Л.А., Блохина Т.П. Индукция вирулентных мутантов умеренных фагов индикаторных культур как причина возможных ошибочных заключений. Микробиология, 1974, т.43, вып.4, с 732-734.

51. Россвал Т. Микробиологические процессы и глобальный круговорот азота. Изв.АН СССР, сер.биол., 1979, № 6, с 818-827.

52. Сабельникова В.И. Симбиотическая азотофиксация и её физиолого--биохимические основы. Бул. Акад. Штиинце РСС Молд.Изв.АН Молд. ССР, сер.биол.и хим.н., 1979, вып.6, с 12-20.

53. Сабельникова В.И., Волоскова М.М., Жижин А.С. , Потека Г.П., Терскова Я.Л. Эффективность Rhizobium japonicum в почвах Молдавии. В сб.Акт.пробл.с-х микробиол., Л., 1974, с 36-40.

54. Стент Г., Кэлиндар Р.,Молекулярная генетика, М., Мир, 1981.

55. Стефанович Л., Самцэв1ч С.А., Магдлявец Н.У. Ушпизазотных угнаенняу на мзкрафлору глебы. Весщ АН БССР, серия б!яла-Г1чных навук, 1977, № 6, с 44-48.

56. Тевелева М.К. Влияние бактериофагов на активность некоторых дыхательных ферментов клубеньковых бактерий. В сб.Проблемы совр.биологии. Минск, 1967, с 155-156.

57. Тевелева М.К. Лизогения у клубеньковых бактерий. В сб.Физиология и биохимия микроорганизмов", Минск, изд-во "Наука и техника", 1970, с 182-186.

58. Тевелева М.К. Влияние фаговой инфекции на эффективность симбиоза клубеньковых бактерий с бобовыми растениями. Тезисы 1У научн.конференции молодых ученых по совр.проблемам биол. Минск, 1970, с I49-151.

59. Тихоненко А.С. Ультраструктура вирусов бактерий, М., "Наука", 1968.

60. Хаджи-Мурат Л.Н., Смирнова Е.И., Раутенштейн Я.И. Электронно-микроскопическое изучение некоторых бактериофагов клубеньковых бактерий. Микробиология, 1967, т.36, вып.1, с 140-143.

61. Хмельницкий М.И., Злотников К.М., Баев А.А. Генетический анализ у Rhizobium japonicum ДАН СССР, 1981, т.256, № I, с 191195.

62. Чиканова В.М. Сравнительный эффект применения различных доз минерального азота и нитрагина под бобовые культуры. Бюлл. ВНИИ с-х микробиол., 1978, вып.2, № 19, с 21-24.

63. Чундерова А.И. О взаимоотношениях клубеньковых бактерий с растением-хозяином и перспективах повышения эффективности симбиоза. Труды ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии, 1980, т.50, с 7-29.

64. Чундерова А.И., Иванова А.И. Эффективность нитрагина под клевер и последействие биологического азота в севообороте.

65. В сб.Актуальные проблемы сельскохозяйственной микробиологии, Л., 1976, с 11-26.

66. Чундерова А.И., Куприянова Н.П. Экономическая эффективность применения нитрагина в СССР на основных бобовых культурах. В сб.Вопросы экологии и физиологии микроорганизмов, используемых в сельском хозяйстве., Л., 1976, с 39-43.

67. Шильникова В.К., Нзитабакузе Ж.Б., Москаленко Л.Н. Влияние фагов клубеньковых бактерий фасоли на бобово-ризобиальный симбиоз. Изв.ТСХА, 1978, вып.1, с 18-22.

68. Шугалий А.В., Франк-Каменецкий М.Д., Лазуркин Ю.С. Вискози-метрическое исследование блочной гетерогенности ДНК. Молекулярная биологи, 1970, т.4, вып.2, с 275-283.

69. Ackerman H.W.,Brochi.Particular bacteriocins.In Handbook of Microbiology,1973,V 1, pp 629-632

70. Adams M., Park B.An enzyme produced by a phagehost cell-system. II The properties of the polysaccharide depolymerase . Virology, 1956, v 2, no 3 PP 719-739.

71. Allen E.,Allen 0.Biochemical and symbiotic properties of the Rhizobia. TV Rhizobiophage.Bacterid.Rev. 1950, v 14, no 3 ,1. PP 273-330

72. Barnet I.M. Properties of Rhizobium trifolii isolates surviving exposure to specific bacteriophage.Can.J.Microbiol. , 1979,v 25 no.9 PP 979-986.

73. Barnet I.M. Vincent J.M.Lysogenic conversion of Rhizobium tri -folii. J Gen.Microbiol.,1970, v 61, pt 3 PP 319-325.

74. Bernheimer H.P.,Tiraby J.G.Inhibition of Phage infection by Pneumococcus capsule.Virology,1976, v 73, no.l pp 308-309

75. Bradley D,E.Ultrastructure of bacteriophages and bacteriocins Bacteriol.Reviews,1976,v 3, no.4 pp 230-314

76. Broughton W.J.Control of Specifity in Legume-Rhizobium associa -tion.J.Appl.Bacteriol.,1975,v 45, no. 2 pp 165-194.

77. Bruch С.,Allen D. Description of two bacteriophages active against Lotus rhizobia.Soil.Sci.Soc.America Proc.l955,v 19, Ко.2, pp 175-179

78. Buchanan-Wollaston V.Generalized transduction in Rhizobium le -guminosarum. J.gen.microbiol.,1979, v 112, no 1, pp 207-210.

79. Carter K.R. Jennings N.T.Hanus J.,Evans H.J.Hyrogen evolution and. uptake by modules of soybeans moculated with different strains of Rhizobium japonicum.Can.J.Microbiol,1978,v 24,no.3 PP 307-311.

80. Cassity T.R,Kolodzieg B.J.Partial characterization of a new Basillus megaterium bacteriophage and inhibition of bacteriophage adsorbtion by B.megaterium capsula.FEMS Microb Lett., 1979,v 5, no. 1, pp 61-63.

81. Conn H,Bottcher E.,Randall C.The value bacteriophage in classifying certain Soil bacteria.J.Bacteriol,1945, v 49,no.2 pp 359-373.

82. Cook P.,Watson D.,Allen 0.Growth characteristics of bacteriophages active against related soil microorganisms.Soc.Amer.Вас -teriol.49 th General meeting.Abstr.of papers,1949,pp 59-60.

83. Corral E.,Montoya E.,01ivares I.Sensitivity to phages in Rhi--zobium meliloti as,a plasmid consequence.Microbios Letters, 1978, v 5, pp 77-80.

84. Dadarwal K.P.Host bacterium factors involved in legume symbio -sis.Ind.J.Microbiol.,1980,v 20, no 3, pp 245-252.

85. Dandekar A.M.,Modi V.7.Interaction between Rhizobium japonicum phage M-l and its receptor.Can.J.Microbiol,1978,v 24,no.6,pp 685-688.

86. De Ley J.,Cattoir H.,Reynaerts A.The quantitative measurement of ША hybridization from tenaturation rates Eur.J.Biochem, 1970, v 12, no 1, pp 133-142.

87. Demolon A.,Dunes A., Efonvelles observations sur le bacterio -et la fatique des sols cultivs en luzerne.Ann.Agron.,1936, v 6, no 1, pp 1-21.94» Desai S.,.Studies on bacteriophages of.the.root nodule orga -nisms.Ind•J.Agric.Sci,1932,v 2, pp 138-156.

88. Dhar В.,Singh B.D.,Singh B.B.,Singh R.M.,Singh V.P.,Srivastava J.S.Isolation and characterization of a virus(PL1) infective on Rhizobium leguminosarum.Arch.Microbiol,1978, v 119, no 3, PP 263-267.

89. Dhar В., Singh B.D.Occurance and distribution of rhizobiopha-ges in Indian soils.Acta Microbiol.Polonica.1979, v 28,no.4 PP 319-325.

90. Dixon R.A.,Cannon P.C.Recent advances in the genetics of nitrogen, fixation in "Symbiotic nitrogen fixation in plants. 7(ed. P.S.Hutman). Cambridge Univ.Press.,1976, pp 3-24

91. Doctor P.H.,Modi V.V.Genetic transformation in Rhizobium japo-nicum.I.in "Symbiotic nitrogen fixation in plantH(ed.P.S.Hut -man ),Cambridge Univ.Press.New-York Melburne, pp 69-76.

92. Dube J.N.Yield responses of soybean,chickpea,pea and lentil to inoculation with legume inoculants in "Symbiotic nitrogen fixation in plants,7 (ed.P.S.Hutman) Cambridge Univ.Press.,1976, pp 203-207

93. Dykhuzen D.,Campbell J.H.,Rolf B.G.The influence of a pro -phage on.the growth rate of Escherichia coil.Microbios,1979,v 23, no. 92, pp 99-113.

94. Edin G.,Lin L.,Bitner R.Reproductive fitness of P1,P2 and Mu lysogenes of Escherichia coli.J.Virol.1977,vol 16,no. 2 ,pp 560-564.i

95. Eklund C.,Wyss 0.Enzyme associated with bacteriophage infection. J.Bacterid. 1962,v 84, no.6, pp 1209-1215.

96. Evans J.,Barnet I.M.,Vincent J.M.Effect of a bacteriophage on the colonisation and nodulation of clover roots by a strain of Rhizobium trifolii.Can.J.Microbiol.,1979,v 25,no. 9 pp 968' 973.

97. Evans J.Barnet I.M.,Vincent J.M.Effect of a bacteriophage on the colonisation and nodulation of clover roots by paired strains of Rhizobium trifolii.Can.J.Microbiol.,1979, v 25,no. 9 pp 974-978.

98. Prank-Kamenetskii M.D,,Lazurkin Yu.5.Conformation changes in ША.molecules.Ann.Rev.Biophys.Bioengineering,1974, v 3, PP 127-150.

99. Gerretsen P.,Grijns A.,Sack J.,Sonhgen N.Das vorkommen.eines Bacteriophagen in den Wurselknollichen der Legumino sen.Zentr. Bakt.Parasitenk.Infekt,1923,v 11,no.60, pp 311-316.

100. Gillis M., De Ley J.,De Cleene M.The determination of molecular weight of bacterial genome ША from renaturation rates. Eur.J.Biochem.,1970,v 12, no. 1, pp 143-153.

101. Gissman L.,Lotz W.Isolation and characterisation of a rod -shaped bacteriocin from a strain of Rhizobium.J.Gen.Virol.,1975, v 27,pt 3 PP 379-383.

102. Golebiowska J.,Sawiska A.,Sypniewska N.Occurence and characteristics of rhizobiophage in lucerne fields.Pol.J.Soil Sci.1971 v IV, no. 2, pp 131-133.

103. Golebiowska J.,Sawiska A.,Swiatek J.The occurence of rhizobio-phages in various lucerne plantations.Acta Microbiol Polon.,1976, t.25, N0.2, pp 161-163.

104. Gratia J.P.Bacteries lysogenes a haute production sponta -nee de particules.Ann.Virol.,1980,1311,no. 3,PP 365-368.

105. Gross D.C.,Vidaver A.K.Bacteriocin like substances produced by Rhizobium japonicum and other slow-growing.rhizobia. Appl.Environ.Microbiol.,1978,v 36,no 6,pp 936-943.

106. Hamdi Y.A.Field and greenhouse experiments of the response of legumes in Egypt to inoculation and fertiliser,? (ed.P.S.Nut-man ) pp 289-298.

107. Higashi S.,Abe M.Phage induced depolymerase for exopolysaccha-ride of Rhizobiaceac.J.Gen.Appl.Microbiol.,1978, v 24, no.3pp 143-155.

108. Kalo G.,Maruyama Y.,Nacamura M.Role of bacterial polysacchari -des in the adsorption process of the Rhizobium-pea symbiosis. Agric.Biol.Chem.1980,v 44, no 2, pp 2843-2855.

109. Kleczkowska J.A study of phage-resistant mutants of Rhizobium trifolii.J.Gen.Microbiol., 1950, v 4,no 3,pp 298-ЗЮ.

110. Kleczkowska J.A study of the distribution and the effects of bacteriophages of root nodule bacteria in the soil.Can.J.Micro -biol.,1957,v 3, no 1, pp 171-189.

111. Kowalski M.Prophage substitution in Rhizobium meliloti stra -ins.Microb genetics Bulletin,1965, no 22, p 19.125» Kowalski M.Lysogeny in Rhizobium meliloti.Acta microbiol.po-lon.,1966, v 15, no 2, pp 119-128.

112. Kowalski M.Transduction in Rhizobium meliloti.Acta microbiol polon.,1967, v 16, no 1, pp 7-12.

113. Kowalski M.Transduction of streptomycin resistance by Rhizobium meliloti phages.Microb.Genetics Bull.,1968,no 29,p 16.

114. Kowalski M.Transductions in Rhizobium meliloti.Genetica polo-nica.,1969, v 10,no 3-4,p 24.

115. Kowalski M.,Genetic analysis by transduction of Rhizobium me -leloti mutants with changed symbiotic activity.Acta micro -biol.polon.ser.A, 1970, v 2(19) no 3, PP 115-122.

116. Kowalski M.,Transduction tests in Rhizobium meliloti with changed symbiotic activity.Genetica polonica,1971, v 12,no 3, pp 201-204.

117. Kowalski M.,Transduction of effectiveness in Rhizobium meli -loti.In Uutman P.S(ed) Symbiotic nitrogen fixation in plants Cambridge Univ.Press.,New-York Melburne,1976,pp 63 -67.

118. Kowalski M.,Ham G.E.Frederic L.R.,Andersen Y.C.Relation between strains of Rhizobium japonicum and their phages from soil and nodules of field-growth soybeans.Bacterid.Proc., 1967, p 4, A-20.

119. Kowalski M.,Denarie J.Transduction d'un gene controlant 1'expression de la fixation de 1'azote chez Rhizobium meliloti.

120. Kowalski M.,Ham G.E.,Frederic L.R.,Andersen Y.C.Relation between strains of Rhizobium japonicum and their phages from soil and nodules.of fiel-growth soybeans.Soil.,1974,v 118, no 3, PP 221-228.

121. Ьеро J.E.,Hickok R.E.,Cantrell M.A.,Russel S.A.,Evans H.J. Revertible hydrogen uptake-deficient mutants of Rhizobium japonicum.J.Bacteriol.,1981, v 146, no 2, pp 614-620,

122. Lesley S.M.A bacteriophage typing system for Rhizobium meli-loti.Can.J.Microbiol.,1982, v 28, no 2, pp 180-185.

123. Ley A.M.,Warner H.R.,KahnF.Virulent bacteriophage infection of Rhizobium leguminosarum.Can.J.Microbiol.,1972,v 18,no 4, PP 375-384.

124. Lim S.T.Determination of hydrogenase in free-living cultures of Rhizobium japonicum and energy effeciency of soybean nodules.Plant Physiol,1978, v 62, no 4, p 609.

125. Ljunggren H.,Fahrafus G.Effect of Rhizobium polysaccharide on the formation of polygalacturonase in lucerne and clover.Natu -re,1959, v 184, PP 1578-1579.

126. Loev 0.,Azok.0n changes of availability of nitrogen in soil II Bull.Coll.Agr.Tokyo Imp.Univ.,1908,7, PP 567-574.

127. Lonis M.N,,Child J.J.Nitrogen fixation and hydrogen metabo -lism by Rhizobium leguminosarum isolates in pea root nodules Can. J.Microbiol.,1981, v 27,no 10, pp 1028-1034.

128. Lorkiewies Z.,Russo R.,Urbanic T.Nitrogen fixation by Rhizobium in pure cultures.Acta microbiol.polon.,1978,v 27,no 1, PP 5-9.

129. Lotz W.,Mayer F.Electron microscopical characterization of a newly isolated Rhizobium lupini bacteriophage.Can.J.Micro -biol.1972, v 18, no 8, pp 1271-1274.

130. Lotz W.,Pfister H.,Attachment of a long tailed Rhizobium. bacteriophage to the Pili of its Host.J.Virol.,1975,v 16, no 3, pp 725-728.

131. Lotz W.,Acker G.,Schmidt R.Bacteriophage 7-7-1 Absorbs to the complex flagella of Rhizobium lupini J.Gen.Virol., 1977, v 34, no 1, pp 9-17.

132. Lurs R.,Mayer P.,Lotz W.Electron microscopic characterization of Rhizobium bacteriophages 16-6-12 and Isolates ША. Arch.Microbiol.,1975, v 104, no 2 , pp 171-178.

133. Manninger E.Virulent Rhizobiophages in Hungarian soil Acta microbiol.Acad.Sci.hung.,1978, t 25,f 2, с 149.

134. Mare I.J.,Smit J.A. A capsule-depolymerazing enzyme from Al-caligenes faecalis infected with bacteriophage A6.J.Gen.Viro -logy,1969,v 5,pt 3, pp 551-552.

135. Marek W.Relation between phage sensitivity and symbiotic pro -perties of auxotrophic mutants of Rhizobium meliloti.Acta microbiol.polon.,1974,A-6,no 3, pp 225-229.

136. Marmur J.,Doty P.Determination of base composition of deoxy -ribe-nucleic acid from its thermal denaturation temperature J.Mol.Biol.,1962, v 5, no 1, pp 109-118.

137. Mayer P.,Lotz W.,Lang D.Electron microscopic study and partial denaturation of Rhizobium bacteriophage DM.J.Virol, 1973, v 11,no 6, pp 946-952.

138. Mink M.,0rosz L.Sik T.Specialized and generalized trunsdu -cing rhizobiophage 16-3 and 11 are closely related.PEMS Mic -robiol.Lett.,1982,v 13, no 4, pp 383-387.

139. Mishra B.,Srivastava L.Studies on nodulation,IT-fixation and rhizosphere effect of some soubean(Glycine Max.,L) varieties Ind. J.microbiol.,1978, v 18, no 2, pp 131-132.

140. Mort 0.J.,Bauer W.D.Composition of capsular and extracellular polysaccharides of Rhizobium Japonicum.Plant.Physiol., 1980, v 66, no l,pp 158-165

141. Napoli C.,Alberchein P.Rhizobium leguminosarum mutants incapable of normal extracellular polysaccharide production. J.Bacterid.,1980, v 141, no 2, pp 664-670.

142. Nutman P.S. IBP field experiments on nitrogen fixation by no -dulated legumes in "Symb nitrogen fixation in plants,7(ed. P.S.Nutman), Cambridge Univ.Press.,1976, pp 211-237.

143. Newbould P.Lysis of Rhizobium meliloti in agar films by bacteriophage.Nature,1952, v 169,no 4298, p 457.

144. Srosz L.,Sik T.Genetic mapping of.Rhizobiophage 16-3.Acta microbiol.Acad.Sci.hung,1970,t 17.,f.2,c 185-194.

145. Palomares A.,Montoya E.,01ivares Y.Quality and rate of extracellular polysaccharides produced by Rhizobium meliloti and their inducing effect from the presence of extrachromoso -mal DNA.Microbios,1978 v 22, no 87, PP 7-13.

146. Parker D.,Allen 0.Characteristics of four Rhizobiophages ac -tive against Rhizobium meliloti.Can.J.Microbiol.,1957,v 3, no 4, pp 651-668.

147. Patel J.J.Morphology and host range of virulent phages of lo -tus rhizobia.Can.J.Microbiol,1976,v 22, no 2,pp 204-212.

148. Pfister H.,Lodderstaedt G.Adsorbtion of a phage tail-like bac -teriocin to isolated lypopolysaccharide of Rhizobium.J.Gen . Virol.,1977, v 37,pt 2, pp 337-347.

149. Plescia O.J.,Palozuk U.C.,Cora-Figweros E.,Mukherjee A.,Braun W.Production of antibodies to soluble RITA(SRUA) .Proс.Tatl. Acad.Sci.USA,1965,v 54,no 4,PP 1281-1285.

150. Pugashettu B.K.,Angle J.S.,Wagner G.H.Soil microorganisms an -tagonistic towards Rhizobium japonicum.Soil Biol.Biochem. , 1982, v 14, no 1, pp 45-49.

151. Rain A.N.Symbiotic properties of antibiotic-resistant and auxotrophic mutants of Rhizobium leguminosarum.J.Appl.Bacterid 1979, v 47, no 1, pp 53-64.

152. Rasmussen A.Nutries comparison of fresh and field-dried green seeded soybean.J.Amer.Diet.Assoc.,1978,no 6, pp 604-608.

153. Roslysky E.,Allen 0.,Nic Coy E.Phages for agrobacterium radio -bacter with reference to host range.Ca.J.Microbid.,1962,v 8, no 1, pp 71-78.

154. Roslysky E.Bacteriocin production in the Rhizobia bacterian Can J.Microbiol.,1967, v 13,no 4,pp 431-432.

155. Roughley R.J.The production of high quality inoculants and their contribution to legume yield in "Symbiotic nitrogen fixation in plants,7(ed.P.S.Nutman),Cambridge Univ.Press.,1976, pp 125-136.

156. Ruis-Arguese T.,Hanus J.,Evans H.J.Hydrogen production and up -take by pea nodules as affected by strains of Rhizobium legu -minosarum.Arch.Microbiol.,1978,v 116,no 2, pp 113-118.

157. Ruis-Arguese T.,Maier R.J.Evans H.J.Hydrogen evolution from alfalfa and clover nodules and Hydrogen uptake by free-li -ving Rhizobium meliloti Appl.Environ.Microbiol.,1979,v 37t no 3, PP 582-587.

158. Sawiska A.,Golebiowska J. II Effects of phages on the Rhizo -bium meliloti,strains during passing them throughout plant.Ac -ta microbiol.polon.,1976, v 25, no 2, pp 129-131.

159. Schubert K.P.,Evans H.J.Hydrogen evolution : A major factor affecting the efficiency of nitrogen fixation in nodulation symbionts.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1976, v 73, no 4,pp 1207 -1211.

160. Schwinghamer E.Host-controlled modification of Rhizobium bacteriophage,Austr. J.Biol.Sci.,1965, v 18,no 2,с 333-343.

161. Schwinghamer E.Antagonism between strains of Rhizobium trifo. -lii in culture.Soil Biol.Brochem.,1971,v 3, no 4,pp 353-363.

162. Schwinghamer E.,Pankhurst C.E.Whitfild P.R.A phage-like bac -teriocin of Rhizobium trifolii.Can.J.Microbiol.,1973,v 19, no 3, PP 359-368.

163. Schwinghamer E.,Reinhardt D.J.Lysogeny in Rhizobium legumino -sarum and Rhizobium trifolii.Austr.J.Biol.Sci.1963, v 16,no 3, PP 597-605.

164. Schwinghamer E.,Brockwell J.Competitive advantage of bacterio -cin and phage-producing strains of Rhizobium trifolii in mi -xed culture.Soil.Biol.Biochem.,1978,v 10,no 5,PP 383-387.

165. Shah K.,de Sause S.,Modi 7.V.Studies on transducing phage M-l for Rhizobium japonicum D211.Arch.Microbiol.,1981,v 130,no 3, pp 262-266.

166. Shanmugam K.T.,0'Lara P.,Andersen K.,Valentine R.C.Biological nitrogen fixation Ann.Rev.Plant Physiol.1978, v 29,pp 263-276

167. Sik T.,(3ross L.Chemistry and genetics of rhyzobiophage 16-3 Plant Soil.Spec.vol.,1971, pp 57-62.

168. Sik T.,Harvath J.,Challerjee S.,Generalized transduction in Rhizobium meliloti Mol.Gen.Genet.,1980,178(3),pp 511-516.

169. Sik T.,Horwath J.The bacteriophage of Rhizobium meliloti per -forming generalized transduction.193* Sistachs E.Inoculation and nitrogen fertiliser experiments on soybean in Cuba in "Symb.nitrogen fixation in plants,7 (ed.P.S.Nutman) pp 281-288.

170. Staniewski R.Typing of Rhizobium by phages.Can.J.Microbiol., 1970., v 16, no 10, pp 1003-1009.195» Staniewski R.,Kowalski M.,Gogacz E.,Sokolowska F.Suspectibi-lity of Rhizobium strains to phages.Acta microb.polon.,1962, v 11, no 3, pp 245-254.

171. Staniewski R.,Kowalski M.,Lomanska I.Neutralization of Rhizobium phages by antiphage sera.Acta microbiol polon.,1962,v 11 no 3, PP 245-254.

172. Staniewski R.,Kowalski M.,Yorzkowska I.The rate of phage adsorption on Rhizobium cells.Acta microbiol.polon.,1963,v 12, no 3, PP 184-187.

173. Stirm S.Escherichia coil К bacteriophage.I Isolation and introductory characterization of five Escherichia coil К bacteriophages. J.virology, 1968, v 2,no 4, pp 1107-1114.

174. Stirm S.,Bessler F.,Fehmel F.,Freund-Molbert E.Thurow H.Isola -tion of spike formed particles from bacteriophage lysates Virology,1971, v 45, no 1, pp 303-308.

175. Subba Rao IT.S.Field response of legumes in India to inocula -tion and fertiliser application in"Symb.nitrogen fixation.in plants,7 (ed.P.S.Nutman) Cambridge Univ.Press,1976,pp 255-268.

176. Sutherland I.V/.,Wilkinson J.F.Depolimerases for bacterial exo-polysaccharides obtained from phage-infected bacteria.J.Gen . microbiol.1965,v 39,no 4,PP 373-383.

177. Svab Z.,Kondorosy A.,0rosz L.Specialized transduction of a cys -tein marker by Rhizobium meliloti phage 16-3.J.Gen.Microbiol., 1978, v 106,pt 2, pp 321-327.

178. Szabo Sciicz J.Phage infection of vitamin B12producing Rhizo -bium culture.Acta microb.Acad.Sci.hung,1972,t 18,f 2, с 81-86.

179. Szende K.Qrdogh P.Die Lysogenie von Rhizobium meliloti.Na-turwissenschaften,1960,47,h. 17, 404-405.

180. Takahashi I.,Quadling C.Lysogeny in Rhizobium trifolii.Can. J.Microbiol.,1961, v 7, no 4, pp 455-465.

181. Truchet G.,Denarie J. Ultrastructure et activite reductrice d1acetylene des nodoaites de luzerne(Medicago sativa L) in-duites par des souches de Rhizobium meliloti auxotrophes pour la leucine C.r.Acad.Sci.Paris.1973,Ser D,v 277,no 9 , pp 925-928.

182. Tsien H.C.,Schmidt E.L.Localization and partical characterization of soybean lectin-binding polysaccharide of Rhizobium japonicum.J.Bacteriol., 1980,v 145, no 5, PP 1063-1074.

183. Vaida B.P.Concentration and purification of viruses and bacteriophages with polyethylene glycol.Polia microbiol.,1978, v 23, no 1, pp 88-96.

184. Vandekavey S.C.,Katznelson H.,Bacteriophage as related to the root nodule bacteria of alfa-alfa.J.Bacteriol.,1936,v 31,no 5, PP 465-677.

185. Vincent J.H.,Hutman P.S.,Skinner P.A.The identification and classification of Rhizobium in Identif.Meth.Microbiol.(eds. Skinner P.A.,Lovelock D.W.).London e.a.,1979,pp 46-69.

186. Werquin M.,Tahar ben Brahim Mohamed,Krsmanovic-Simic D.Etude des bacteriophages de Rhizobium meliloti. C.r.acad.Sci., 1977 D284, no 18, pp 1851-1854.

187. Yamamoto K.R.,Alberts В.,Ben Zinger R.,Rawhorne R.,Preiber G. Rapid bacteriophage sedimenlation in the presence of poly -ethylene its application to large scale virus purification Virology,1970, v 40, no 3, PP 734-744.

188. Tablotowicz R.M.,Ruswell S.A.,Evans H.J. Effects of the hyd-rogenase system in Rhizobium japonicum on the nitrogen fixation and growth of soybeans at different stages of deve -lopment Agron.J.1980, v 72,no 3, PP 555-559.

189. Zajac E.,Russa R.,Lorkiewicz Z.Studies on phage lp recep -tors in Rhizobium trifolii and Rhizobium leguminosarum.Acta microbiol.polon.,Ser A.,1975, v 7(24), no 4,pp 181-188

190. Zajac E.,Russa R.,Lorkiewicz Z.Lipopolysaccharide as Receptor for Rhizobium phage 1 p.J.Gen.Microbiol,,1975,v 90,no 2, pp 365-367.

191. Zelazna-Kowalska J.,Kowalski M.Restoration of effectivenessof Rhizobium meliloti ineffective mutants by transduction of high level streptomicin resistance.Acta microbiol.polon. Ser A, 1978, v 10(27), no 4, pp 339-345.