Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Органные культуры в изучении тканевых противогрипозных ингибиторов

ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Даулбаева, Светлана Файзиевна

ВВЕДЕНИЕ.4

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.9

Глава I. ИММУНИТЕТ К ВИРУСУ ГРИППА. 9

1.1. Факторы неспецифичесного иммунитета.9

1.2. Ингибиторы тканей и секретов.24

1.3. Секреторные антитела класса .28

Глава П. ПРИМЕНЕНИЕ ОРГАННЫХ КУЛЬТУР ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ

ГНШПОЗНОЙ ИНФЕКЦИЙ. 32

2.1. Методы получения органных культур.32

2.2. Чувствительность органных культур различного происхождения к вирусам гриппа. . 37

2.3. Гистоморфология гриппозной инфекции в органных культурах человека и животных . . . 42

2.4. Изучение противогриппозного иммунитета с использованием органных культур.44

ЧАСТЬ П. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава Ш. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.48

Глава 1У. ИЗУЧЕНИЕ ПР0ТЙВ0ГШПП03НЫХ ТКАНЕВЫХ

ИНГИБИТОРОВ В ТКАНЯХ РАЗЛИЧНЫХ ОРГАНОВ ДО И В ПРОЦЕССЕ ИХ ЭКСПЛАНТАЦИИ.60

4.1. Определение противогриппозных ингибиторов е тканях плода человека и цыплят к различным штаммам вируса гриппа.60

4.2. Изучение влияния физико-химических факторов на тканевые противогриппозные ингибиторы. . . 68

4.3. Характеристика тканевых противогриппозных ингибиторов методом гельфильтрации и электрофореза в полиакриламидном геле. . . 76

4.4. Радиоиммунологическое исследование механизма взаимодействия тканевых ингибиторов с гемагглютинином вируса гриппа. 81

Глава У. ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОГШППОЗНЫХ ТКАНЕВЫХ

ИНгаШТОРС© В ПРОЦЕССЕ ЭКСПЛАНТАЦИИ ЗАРАЖЕННЫХ ОРГАННЫХ КУЛЬТУР. . 95

5.1. Динамика синтеза противогриппозных тканевых ингибиторов в процессе эксплантации зараженных вирусами гриппа органных культур тканей плода человека и цыплят. . . . . 96

5.2. Изучение влияния физико-химических факторов на противогриппозную активность куль-туральных жидкостей зараженных вирусами гриппа органных культур. . . . I0I-I

5.3. Изучение противогриппозной активности культуральных жидкостей зараженных тканей. ; с помощью те льфильтрации. .105

Глава У1. ИЗУЧЕНИЕ ШАШКИ РАЗМНОЖЕНИЯ ВИРУСОВ

• ГШША И ГИСТШАТОЛОШ ГРИППОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ " В ОРГАННЫХ КУЛЬТУРАХ В СОПОСТАВЛЕНИИ С УРОВНЕМ ТКАНЕВЫХ ИНГИШТОРШ. IIO-I

6.1. Изучение динамики репродукции вируса гриппа в органных„культурах. . . . . 110

6.2. Изучение гистопатологии гриппозной инфекции на органных культурах легких морских свинок. . . II8-I

6.3. Изучение гистопатологии гриппозной инфекциина органных культурах почек морских свинок. 127

ОБСУЖДЕНИЕ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ., . . . . . . ------------ . . . J39-I

ВЫВОДЫ. I5I-I

Введение Диссертация по биологии, на тему "Органные культуры в изучении тканевых противогрипозных ингибиторов"

В настоящее время ни у кого не вызывает сомнения тот факт, что термолабильные вируснейтрализующие бета-ингибиторы сыворотки и секретов носовой полости играют определенную защитную роль при ряде вирусных инфекций (И.Х.Щуратов и др.,1967; Т.Я.Лузяни-на и др.,1969; Г.Н.Неведомская и др.,1972; А.С.Шадрин и др., 1972).

Что касается роли сывороточных термостабильных вируснейтра-лизующих гамма-ингибиторов в защите от гриппа, то, по мнению А.А.Смородинцева (1975), она значительно менее существенна.

Отделяемое слизистой носа, трахеи, бронхов, слюнных желез также проявляют антигемагглютинирующую и вируснейтрализующую активность против многих вирусов. Противовирусное действие секретов характеризуется выраженной термостабильностью (П.Н.Косяков, З.И.Ровнова, 1972; А.А.Смородинцев и др.,1975) и отсутствием корреляции между подавляющим гемаЕгглютинацию и нейтрализацию вируса свойствами (R.Eossen et al ,1965; Г.Н.Неведомская и др., 1972).

Тем не менее, некоторые исследователи отмечают зависимость резистентности человека и животных к гриппу от наличия ингибиторов в отделяемом верхних дыхательных путей и слюны (М.С.Берлинских, П.Н.Косяков, 1958; В.П.Мищенко, А.С.Горбунова, 1963; S.Baron et al ,1963).

Позднее выяснилось, что защитные свойства секретов слизистой носовой полости носят комбинированный характер: наряду с неспецифическими ингибиторами в секретах содержатся специфические секреторные иммуноглобулины A/sigA/. Молекула elg А отличается большим содержанием нейраминовой кислоты,что позволило предподожить наличие у elg А не только специфической, но и неспецифической активности (R.Rossen et al ,1966; R.H.Alford et al 1967; И.Х.Щуратов, 1976).

Ингибирующие субстанции обнаружены и в экстрактах тканей легких, слюнных желез, почек мышей, белых и хлопковых крыс (Т.Я.Лузянина, 1961; М.И.Бисенова, 1963; M.boboaziiislca,O.Krizanova 1966; Л.И.Шахворостова и др.,1982). Показано отсутствие корреляции между титрами ингибиторов в сыворотках: и экстрактах тканей животных (М.А.Яхно, 1961; М.И.Бисенова, 1963).

О роли тканевых .ингибиторов в развитии гриппозной инфекции конкретных, четких данных нет. Имеются лишь единичные сообщения.

Н.А.Максимович и др.,(1969) показали,что ингибиторочувст-вительные штаммы вируса гриппа А/Н21Г2/ с низкой элюирующей активностью у мышей вызывали более выраженные изменения эпителия дыхательных путей, чем ингибиторорезистентные штаммы с высокой элюирующей активностью. Изучение процесса проникновения вируса гриппа А/Гонконг/1/68 /Н3№2/ в бронхиальной, альвеолярный эпителий мышей показало,что в течение первых 12 минут вирусы обнаруживаются в тесной связи с клетками бронхиального эпителия, продуцирующими слизь. В этих же клетках обнаружено максимальное проникновение вирусов (G.Lemeroier,R.Fontang«*I974).

Противогриппозные ингибиторы сывороток и секретов достаточно полно охарактеризованы в отношении физико-химических и биологических свойств, динамики образования и содержания, а также влияния на указанные процессы гриппозной инфекции. Эти данные обобщены в обзорах и монографиях (П.Н.Косяков, З.И.Ровнова, 1972; А.А.Смородинцев и др.,1975; П.Н.Косяков, 1982).

Имеющиеся сведения о противогриппозных тканевых ингибиторах касаются в основном только констатации наличия ингибирующей активности в экстрактах тканей. Такое положение по-видимому обусловлено отсутствием подходящей модели для изучения тканевых ингибиторов. В качестве такой модели наше внимание привлек метод органных культур тканей, разработанный С.Д.Иржановым (1971) и обеспечивающий тканеспецифические функции морфологических структур. Применение органных культур дает исследователю своеобразный инструмент определения реакции органо- и тканеспецифических морфологических структур на самые разнообразные внешние воздействия. Эта модель широко используется вирусологами в изучении ответа ткани на вирусную инфекцию, когда желательно в максимально приближенных к структуре органа условиях исключить воздействие не%)огуморальных и физиологических воспалительных реакций организма, а также возможность вторичного бактериального заражения. Преимущества органных культур проявились особенно ярко пра изучении деталей патогенеза респираторных вирусных инфекций (С.Д.Иржанов и Я.Е.Хесин, 1977; А.С.Новохатский, 1979; В.М.Жданов и С.Я.Гайдамович, 1982),

Цель работы. Все вышеуказанное послужило основанием для проведения настоящего экспериментального исследования, посвященного характеристике тканевых неспецифических противогриппозных ингибиторов в органных культурах различных тканей плода человека, цыплят и морских свинок.

В соответствии с основной целью задачами наших исследований являлись:

I. Определение наличия, изучение биологических и физико-химических свойств тканевых ингибиторов различных органов плода человека, цыплят, белых крыс и морских свинок до и в процессе эксплантации.

2. Изучение динамики образования, биологических и физико-химических свойств ингибиторов в процессе эксплантации зараженных вирусами гриппа органных культур тканей плода человека и цыплят.

3. Изучение динамики репродукции вирусов гриппа и гистопатологии гриппозной инфекции в органных культурах в сопоставлении с уровнем тканевых ингибиторов.

Научная новизна работы. Впервые определен и обоснован научный подход к изучению тканевых противогриппозных ингибиторов на модели органных культур, максимально сохраняющих структурные и функциональные особенности органа, в то же время исключающих влияние нейрогуморальных и общих физиологических факторов,имеющих место в целом организме.

Выявлены и изучены противогриппозные ингибирующие субстанции в экстрактах широкого круга тканей человеческого и животного происхождения.

Впервые изучена динамика накопления тканевых ингибиторов пра эксплантации органных культур до и после заражения вирусами гриппа. Дана гельхроматографическая и физико-химическая характеристика свойств тканевых противогриппозных ингибиторов. Впервые предпринята попытка изучения роли тканевых ингибиторов в гриппозной поражении органных культур путем сопоставления данамики репродукции вируса гриппа и патоморфологических изменений с уровнем ингибирующих субстанций в органных культурах тканей.

Научно-практическая ценность работы. Разработана модель,пригодная для изучения тканевых противогриппозных ингибиторов. Она может быть использована для изучения роли названных ингибиторов в патогенезе гриппа и других вирусных инфекций. Кроме того,модель органных культур, по-видимому, может обеспечить изучение влияния различных химиопрепаратов на патогенез вирусных инфекций. Данные репродукции вирусов гриппа и патоморфологических изменений в органных культурах тканей легких, почек и мозга, свидетельствуют о возможности осложнений со стороны указанных органов при гриппозной инфекции. X

X X

Считаю своим приятным долгом выразить искреннюю благодарность моим научным руководителям докторам медицинских наук И.Х.Щуратову и С.Д.Иржанову за предоставленную возможность и постоянную научно-методическую помощь при выполнении настоящей работы.

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Вирусология", Даулбаева, Светлана Файзиевна

ВЫВОДЫ

1. Разработан новый методический подход к изучению тканевых противогриппозных ингибиторов на модели органных культур тканей человеческого и животного происхождения.

2. Показано наличие в экстрактах тканей органов различного происхождения термолабильных и термостабильных неспецифических противогриппозных антигемагглютининов. Высокое содержание ингибиторов было характерно для тканей мозга, почек, печени (1:158-1:779), тогда как в тканях трахеи легких, миндалин, поджелудочной железы, селезенки, тимуса, надпочечников и кишечника уровень ингибиторов был низким (1:9,8-1:97).

3. В опытах гельфильтрации и электрофореза в полиакриламидном геле установлена неоднородность тканевых ингибиторных субстанций. Они выявлены в составе как 19 S , так и 4S фракций.По данным диск-электрофореза в полиакриламидном геле молекулярная масса полипептидов I9s и 4s типов колебалась в пределах 23 кД-120 кД.

4. По данным прямого и конкурентного радиоиммунологического анализа показано,что тканевые ингибиторы взаимодействуют с гемаг-глютинирующими центрами вируса гриппа, не влияют на его антигенные детерминанты, не препятствуют взаимодействию последних со специфическими антителами.

5. Выявлена четкая динамика накопления ингибиторов в культуральной жидкости незараженных органных культур, которая заключалась в постепенном увеличении титра активности с достижением р максимальных показателей на 5 сутки эксплантации тканей. При эксплантации зараженных вирусом гриппа органных культур тканей наибольшее размножение вируса наблюдается на 3-5

- 152 сутки. Максимальное накопление антигемагглютининов наблюдается на 7е сутки.

6. Установлено,что зараженные вирусом гриппа органные культуры синтезируют специфические антитела. Об этом свидетельствуют данные о появлении вируснейтрализующей активности и антигемагглютининов 7S типа в культуральной жидкости зараженных органных культур.

7. Б условиях органного культивирования при одинаково низком содержании тканевых ингибиторов (1:19,7-1:49) клетки тканей трахеи плода человека и цыплят являются более чувствительными (6,0-7,0 lg ЭИД50у0 2 мл) к вирусам гриппа А/Сингапур/1/57 и А/Алма-Ата/173/77, чем клетки легких названных видов,а также трахеи и легких морских свинок (5,0 lg ЭИД^дуд g мл). Органные культуры тканей почек плода человека, цыплят и морских свинок с высоким уровнем ингибиторов (1:194-1:779) также чувствительны к использованным вирусам гриппа (6,0-6,5 lg

3l%0/0v2 MJ1)'

8. Морфологические изменения в органных культурах легких и почек морских свинок, инфицированных вирусами гриппа, характеризуются дегенерацией различных клеточных элементов с формированием в них базофильных, РНК-содержащих цитоплазматических включений. Вирусы гриппа вызывали более выраженные гистоморфологи-ческие изменения в органных культурах почек с высоким уровнем тканевых ингибиторов, чем в эксплантатах легких с низким содержанием ингибирующих субстанций.

ОБСУЖДЕНИЕ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время наличие в сыворотке крови человека и животных трех типов противогриппозных - и X -) ингибиторов является твердо установленным фактом (П.Н.Косяков, З.И.Ровнова, 1973; А.А.Смородинцев и др.,1975). Известно также, что некоторые из них, особенно термолабильные бета-ингибиторы оказывают вирус-нейтрали зующее действие на широкий круг ДНК- и РНК-содержащих вирусов (Т.Я.Лузянина, 1980). Предполагается, что названные неспецифические противовирусные субстанции, особенно бета-и термостабильные гамма-ингибиторы, обладающие вируснейтрализующим действием, как защитные факторы организма играют определенную роль в патогенезе вирусных инфекций.

Так, на модели вирусов гриппа А/НШ/, А/НЗ&2/, В, парагриппа, вируса осповакцины четко показана прямая зависимость тяжести клинического течения инфекций от уровня бета-ингибиторов в сыворотке людей и животных (И.Х.Щуратов и др.,1967; Т.Я.Лузянина и др.,1969; Г.Н.Неведомская,1972; А.С.Шадрин и др.,1972; В.К.Кудрявцева и др.,1973; В.П.Мирный, 1973).

Отделяемое слизистой носа, трахеи, бронхов, слюнных желез и экстракты различных тканей (легких, печени,почек,мозга и т.д.) человека и животных также проявляли антигемаггщютинирующую и ви-руснейтрализующую активность против вирусов гриппа, парагриппа, паротита, болезни Ньюкасла, полиомиелита, герпеса, оспы,клещевого энцефалита (П.Н.Косяков, З.И.Ровнова,1972; А.А.Смородинцев и др., 1975). В ряде работ показано отсутствие корреляции между антиге-магллютинирующей и вируснейтрализующей активностью секретов слизистой респираторного тракта и экстрактов тканей (П.Н.Косяков,

- 140

М.С.Берлинских, I96I;R«D*Rossen et al ,1965; Г.Н.Неведомская и др.,1972). Показатели интенсивности вируснейтрализующего действия секретов определялись не только свойствами применяемых тест-вирусов, но и способами получения отделяемого секретов.При чем последние не всегда исключали пропотевание сывороточных белков на слизистую дыхательных путей в результате раздражения стенок сосудов в процессе стимуляции секретоотделения (А.А.Смо-родинцев и др.,1975). Кроме того нельзя исключать также наличие или возможность случайного нанесения микротравм на слизистую в момент получения секретов. Отмечено также отсутствие корреляции между титрами ингибиторов в сыворотках и ткани легких некоторых лабораторных животных к вирусу гриппа (М.А.Яхно,1961). Антигемаг-глютинирующая активность секретов характеризовалась выраженной термостабильностью (В.Н.Казакова, П.Н.Косяков, 1967; П.Н.Косяков, З.И.Ровнова, 1972).

В то же время, рядом авторов была отмечена зависимость между восприимчивостью человека и животных к гриппу и наличием ингибиторов в отделяемом верхних дыхательных путей, слюне и экстрактах тканей М.С.Бердинских, П.Н.Косяков, 1958; В.П.Митченко, А.С.Горбунова, 1963; s.Baron et al»I963; П.Н.Косяков, З.И.Ровнова, 1972).

В последние годы выяснилось,что защитные свойства секретов носят комбинированный характер. Наряду с неспецифическими ингибиторами в секретах слизистой содержатся специфические секреторные иммуноглобулины А ( sig А). Молекула slg А отличается большим содержанием нейраминовой кислоты, что позволило предположить наличие у slg А не только специфической,но и неспецифической активности fcUD.Bossen et al ,1966;R.H.Alford et al ,1967).

Как видно из приведенных данных, присутствие в секретах дыхательных путей,кроме неспецифических ингибиторов, специфических

- 141 секреторных антител, а иногда и некоторых сывороточных белков не позволяет с твердой уверенностью говорить о защитной роли секреторных ингибиторов в патогенезе гриппозной инфекции.

В настоящее время не также единого мнения о роли сывороточных термостабильных гамма-ингибиторов как защитных факторов противогриппозного иммунитета у человека. На основании убедительных фактов о резком увеличении удельного веса в циркуляции среди населения ингибиторочувствительных вариантов вируса гриппа А/Н2&2/ в последующие годы после его появления в 1957г. А.А.Смородинцев (1975) высказал предположение о том,что гамма-ингибиторы являются значительно менее существенным фактором защиты, чем термолабильные бета-ингибиторы.

Изучение процесса проникновения вируса гриппа А/Гонконг/1/68 /НЗ&2/ в бронхиальный, альвеолярный эпителий м ышей ВАьВ/с показало, что уже через 2-3 мин после инфекции начиналась адсорбция вируса на ворсинках и ресничках бронхиального эпителия. На 7-12-й мин процесс адсорбции достигал наивысших показателей. В это время вирионы обнаруживались также в тесной связи с клетками бронхиального эпителия, продуцирующими слизь, и с альвеолярными клетками. С этого момента начинался процесс проникновения вируса внутрь эпителиальных клеток. Максимальное проникновение отмечено в клетках, продуцирующих бронхиальный секрет, а также в пневмо-цитах (GULemercier et al,I974).

Таким образом, имеющиеся данные литературы о защитной роли неспецифических ингибирующих субстанций секретов и тканей организма при гриппозной инфекции in vivo малочисленны и противоречивы. Имеющиеся данные о тканевых ингибиторах касаются в основном установления факта их наличия в экстрактах тканей различных органов. Физико-химические и биологические свойства их изучены не

- 142 достаточно, а сведений о динамике образования противогриппозных ингибиторов клетками зараженных и незараженных тканей в доступной литературе мы не обнаружили. Для изучения тканевых противогриппозных ингибиторов мы привлекли метод органных культур тканей, разработанный С. Д.Иржановнм (1971). Преимущества органного культивирования тканей заключаются в том, что при этом поддерживаются функционально и морфологически все или почти все типы клеток данной ткани или органа, в отличие от метода клеточных,, при котором происходит размножение и накопление одного доминирующего типа клеток (С. Д.Иржанов, и Я.Е.Хесин, 1977; В.А.Зуев, 1979).

С другой стороны, метод органного культивирования тканей исключает влияние на результаты опытов нейрогуморальных и общефизиологических факторов, обычно действующих в организме.

Все вышеуказанное послужило основанием для проведения настоящего экспериментального исследования, посвященного изучению тканевых неспецифических противогриппозных ингибиторов в органных культурах различных тканей плода человека, цыплят и морских свинок.

Прежде чем приступить к изучению тканевых ингибиторов в органных культурах нами изучено содержание ингибирующих субстанций в экстрактах тканей нормальных органов плода человека,цыплят, белых крыс и морских свинок (гл.Ш.). Нашими исследованиями установлено наличие противогриппозных неспецифических ингибиторов гемагглютинации в экстрактах взятых в опыт тканей органов исследуемых видов. Однако содержание их в различных тканях варьировало в широких пределах и зависело от видового происхождения тканей, от типа последних и от штаммов вируса гриппа А, исполь

- 143 зованных для определения ингибиторов. Так, наименьшая антигемаг-глютинирующая активность была характерна для экстрактов тканей белых крыс (среднегеометрические титры ингибиторов в различных тканях колебались от 1:4 до 1:49). В экстрактах тканей мозга и почек цыплят, плода человека и морских свинок выявлялись наиболее высокие титры неспецифических антигемагглютининов (1:3881:779) по сравнению с активностью экстрактов легких и трахеи (1:19,7-1:79).

Ингибиторочувствительный (ИЧ) штамм вируса гриппа А/Сингапур/1/57 /Н2и2/ проявлял более выраженную (от 1,5 до 4 раз) чувствительность к ингибиторам экстрактов исследуемых тканей,чем штамм вируса гриппа А/Алма-Ата/179/77 /НИЛ/. Эти данные позволяют высказать предположение о том,что в экстрактах тканей содержатся как термостабильные, так и термолабильные ингибиторы, к действию которых избирательно чувствительны вирусы гриппа А/Н2&2/ и А/НйгI/ соответственно (Т.Я.Лузянина, 1980).

Для последующих исследований мы использовали ткани мозга и почек, как органов с высоким содержанием тканевых ингибиторов и легких и трахеи - с меньшим уровнем последних. Культивируя кусочки названных тканей плода человека, цыплят и морских свинок в условиях органной эксплантации изучали возможность выявления и динамику содержания антигемагглютининов в культуральной жидкости. Исследованиями установлено наличие в культуральной жидкости органных культур антигемагглютинирующей активности, выявляемой вирусами гриппа А/Сингапур/1/57 и А/Алма-Ата/179/77 уже через сутки после эксплантации, в пределах 1:2,0-1:9,8. Постепенно повышаясь исследуемая активность достигала максимальных показателей к 5-м суткам (до 1:315). Затем происходило снижение ее к 10 сут

- 144 нам. Эти данные, по-видимому, свидетельствуют о синтезе клетками эксплантатов ингибиторов и секреции их во внешнюю среду. Образование и выделение в культуральную жидкость противогриппозных ингибиторов нормальными лимфоцитами морских свинок было отмечено также И.Х.Шуратовым и др. (1978).

На 5-е сутки в культуральной жидкости тканей мозга и почек исследуемых видов содержание противогриппозных ингибиторов было значительно выше (1:16-1:315), чем при эксплантации легких и трахеи (1:9,8-П12,1). Наиболее высокие титры ингибирующих субстанций выявлялись с ИЧ вариантом вируса гриппа А/Сингапур/1/57 (1:315).

Таким образом, и в условиях органной эксплантации тканей наблюдалась аналогичная картина в антигемагглютинирующей активности ингибиторов, что было отмечено нами выше при изучении экстрактов тканей.

Следующим этапом наших исследований являлось изучение влия.-ния различных физико-химических ингибитордеструктирующих воздействий на антигемагглютинирующую активность -экстрактов тканей и культуральной жидкости на 5-е сутки эксплантации тканей. Неспецифические антигемагглютинины отнесены как к термолабильным,так и к термостабильным субстанциям по характеру действия на их-активность использованных воздействий (прогревание при 56°,75°, 100° обработка, KIO4, трипсином, который заключался в следующем:

I. Прогревание при различных температурах и обработка трипсином исследуемых образцов сопровождалось резким снижением титра антигемагглютининов к вирусу гриппа А/Алма-Ата/179/77. Воздействие периодатом калия не влияло на титры ингибиторов, выявляемых данным вирусом гриппа.

- 145

2. С вирусом гриппа А/Сингапур/1/57 ингибирующая активность экстрактов тканей и культуральной жидкости их эксплантатов после прогревания снижалась незначительно, либо оставалась без изменения. В некоторых случаях даже повышалась. Аналогичное действие оказывала обработка трипсином. Только воздействие периодатом калия приводило к заметному падению титра ингибиторов в большинстве исследуемых образцов. Следует отметить,что культу-ральная жидкость тканей легких и почек плода человека, цыплят, несмотря на выраженную антигемагглютинирующую активность (1:12,41:158) с вирусами гриппа А/Алма-Ата/179/77 и А/Сингапур/1/57 не обладала вируснейтрализующим действием.

При разделении белков экстрактов тканей в опытах гелв$ильтра-ции ингибиторы к использованным вирусам гриппа обнаружены в 19S и 4S фракциях. Антигемагглютинирующая активность в 7s фракциях нормальных экстрактов отсутствовала.

По данным электрофореза в полиак рилами дном геле для I9S фракций были характерны полипептиды с молекулярной массой 98кД-120 кД и выше. Белки 4s фракции характеризовались более низкой молекулярной массой 72 кД-23 кД и ниже.

Исследованиями противогриппозных ингибиторов сыворотки человека и различных животных было показано,что ингибирующая активность связана с - макроглобулинами -липопротеидами, igM stj - глобулинами, з -глобулинами, трансферрином и альбумином (O.Krizanova-Lauoikova et al ,I96I;p#Biddle et al ,1965;A.Krik-szens ,1967; P.Я.Поляк, А.А.Смородинцев, 1968; R.Calio,I972; И.Х.Щуратов, П.H.Косяков, 1975; М.Х.Саятов, Р.У.Бейсембаева, 1982). Ряд авторов высказывает предположение о том,что активный компонент ингибиторов низкомолекулярен. Однако, в сыворотке он существует в комплексе с инертным носителем белковой природы,что

- 146 обусловливает высокий молекулярный вес (F.Biddle et ai,I965; А, Krikszens ,1967; А.А.Смородинцев и др.,1975). Показано также, что с увеличением размера молекулы вирусингибирующая активность (как антигемагглютинирующая, так и вируснейтрализующая) глико-протеидов значительно возрастает (G*Springer ,1969, 1970). В наших исследованиях основная масса полипептидов 19 S и 4s фракций, обладающих антигемагглютинирующей активностью располагается по молекулярной массе в пределах 23000-98000. Эти данные наряду с отсутствием заметной вируснейтрализующей активности у тканевых ингибиторов свидетельствуют о некоторых отличиях их от ингибиторов сыворотки.

Далее нами е опытах прямого и конкурентного радиоиммунологического. анализа изучен характер взаимодействия тканевых ингибиторов с гемагглютинином вируса гриппа. В этих опытах четко показано, что тканевые ингибиторы связываются с гемагглютинирующим центром, но не с антигенными детерминантами молекулы гемагглюти-нина и стерически не перекрывают их. Как нам кажется, эти данные являются косвенным подтверждением незначительности молекулярных параметров тканевых ингибиторов.

В следующей серии экспериментов тог-изучали-противогриппозные тканевые ингибиторы в процессе эксплаотшдаи-зараженных трган-ных культур. При этом в динамике накоплениятшгибирующих субстанций в культуральной жидкости тканей плода'челсгаекау тдептщт и морских свинок выявлены значительные сдвиги"в сторону удлинения сроков. Так, максимальные показатели антигемагглютининов наблюдались на 7-е сутки, тогда как в контролях (незараженнне ткани) наибольшая активность приходилась на 5-е сутки. Резкое снижение уровня ингибиторов в культурах некоторых тканей и в организме после за

- 147 ражения вирусом отмечено и другими исследователями (П.Н.Косяков, З.И.Ровнова, 1972; А.А.Смородинцев и др.,1975; Н.Л.Черетенко и др.,1981), которое затем сменялось повышением до исходного уровня, иногда и выше. По-видимому, снижение уровня ингибиторов после заражения вирусом можно объяснить, во-первых,тем,что свободные молекулы ингибиторов вступают во взаимодействие с вирусными частицами, во-вторых, в момент максимальной репродукции, возможно, происходит замедление собственных синтетических процессов клетки. Последующее за этим повышение активности ингибиторов, может быть связано с выходом молекул ингибиторов при разрушений клеток вирусом; нельзя исключить также образование к этому сроку и специфических факторов, а также и накопление ингибиторов в культуральной среде.

Примечательно, что культуральная жидкость зараженных тканей, в отличие от незараженных (контроль), обладала противогриппозной активностью не только в РТГА, но и в РН, нейтрализуя 10-100 lg ЭИД50/0 2 мл гомологичного вируса гриппа.

Б опытах гельфильтрации противогриппозные антигемагглютинины обнаруживались не только в 19S и 4S фракциях, но,в отличие от контролей, и в 7s фракциях культуральной жидкости зараженных тканей. Антигемагглютинины типа 7s обладали выраженной специфичностью в отношении гомологичного штамма. Эти результаты наряду с данными вируснейтрализующей активности культуральной жидкости зараженных тканей позволяют,с большей долей вероятности,отнести 7s антигемагглютинины к специфическим антителам. Наличие специфических бляшконейтрализующих антител в культуральной среде зараженных вирусом болезни Ньюкасла органных культур трахеи цыплят было продемонстрировано W.Heuschele и B.Easterday (1970).

- 148

В заключительной серии опытов основная задача наших исследований касалась изучения тканевых ингибиторов в развитии гриппозной инфекции в органных культурах тканей путем сопоставления ингибиторпродуцирующей активности последних со степенью репродукции в них вируса гриппа и соответствующими гистоморфологическими изменениями.

Е предварительных исследованиях была опробирована методика культивироЕания ОК, обеспечивающая структурную целостность тканей и максимальную репродукцию вируса гриппа. Этим требованиям отвечала методика, предложенная С.Я.Иржановым и Н.Н.Соколовой (1976) .

Изучали динамику репродукции вирусов гриппа А/Сингапур/1/57 и А/Алма-Ата/179/77 в ОК тканей, отличающихся содержанием тканевых неспецифических противогриппозных антигемагглютининов. Использовали органные культуры тканей легких, трахей (с низким уровнем тканевых ингибиторов), мозга и почек (с высоким содержанием тканевых ингибиторов) плода человека, цыплят и морских свинок.Результаты наших опытов показали,что при одинаково низком содержании тканевых ингибиторов в ОК трахеи плода человека, цыплят и морских свинок репродукция вирусов гриппа несколько отличалась. Так, в клетках трахеи плода человека и цыплят, традиционно чувствительных к миксовирусам, репродукция вирусов гриппа достигала высоких показателей (6,0-7,0 1еЭИД5дур g мл). В аналогичных опытах в тканях трахеи морских свинок, нечувствительных к миксовирусам она была на 1,0-2,0 leSHUgQ^Q 2 мл ниже. Следеет отметить,что при таком же низком уровне тканевых ингибиторов в ОК легких взятых в опыт трех видов (плода человека, цыплят и морских свинок) размножение вирусов гриппа было одинаковым (до 5,0-5,5 1вЭИД^д 2 мл).

Е то же время в ОК из тканей с высоким содержанием тканевых антигемагглютининов почек плода человека, цыплят и морских свинок размножение вирусов гриппа было одинаково высоким (6,0-6,5 lg ЭИД50/,0 2 мл), а в ОК мозга - одинаково низким (3,0-3,5 эи%0/0,2 мл)

Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о том, что в условиях органного культивирования при одинаково низком содержании тканевых ингибиторов клетки тканей трахеи плода человека и цыплят являются более чувствительными к вирусам гриппа, чем клетки тканей легких этих же видов, а также трахеи и легких морских свинок. Клетки тканей почек не только плода человека и цыплят, но и морских свинок, содержащие высокий уровень тканевых ингибиторов, оказались также чувствительными к вирусам гриппа.Не исключено,что в данном случае тканевые ингибиторы играют роль рецепторов клеток почечной ткани, обеспечивающих адсорбцию вирионов к клеточной мембране.

Дальнейшие исследования посвящены изучению гистоморфологи-ческих изменений в ОК тканей с высоким и низким уровнем тканевых ингибиторов в процессе репродукции вирусов гриппа. При этом установлено, что гистоморфологические изменения в ОК легких и почек морских свинок,вызванные вирусами гриппа А/Алма-Ата/179/77 и А/Сингапур/1/57 характеризуются дегенерацией различных клеточных элементов с формированием в них базофильных, РНК-содержащих включений. Эпителиальные клетки эксплантатов раньше и интенсивнее дегенерировали,чем соединительнотканные структуры. Аналогичные изменения клеток наблюдали и другие авторы при изучении экспериментальной гриппозной инфекдаи в культурах тканей и на лабораторных животных (Е.Е.Пигаревский, 1964; В.П.Соловьев и др.,1979 и т.д.), а также в органах люде&, умерших от гриппа (Т.Е.Ивановская

-150и А.Б.Цинзерлинг, 1976; А.И.Струков, В.В.Серов, 1979 и другие).

Следует отметить,что в наших исследованиях вирусц гриппа вызывали более выраженные дегенеративные изменения в ОК почек с высоким уровнем тканевых ингибиторов (1:184,2), чем в эксплантатах легких с низким содержанием ингибирующих субстанций (I: 42,3). Причем поражение почек и легких, зараженных ингибиторо-чувствительним вирусом А/Сингапур/1/57 /Н2н2/ представляется заметно выраженным, чем при инфицировании вирусом А/Алма-Ата/179/77 /НШ/.

По-видимому, это различие объясняется тем,что ингибиторо-чувствительный штамм А/Сингапур/1/57 обладает низкой элюирующей способностью тогда как ингибиторорезистентный штамм А/Алма-Ата/ 179/77 характеризуется высокой элюирующей активностью. Последнее согласуется с данными Н.А.Максимович и др., (1969), которые показали, что штаммы вируса гриппа А/Н2н2/ с низкой элюирующей способностью у мышей вызывали более выраженные изменения эпителия дыхательных путей, чем штаммы с высокой элюирующей активностью.

Таким образом, результаты наших опытов свидетельствуют о соответствии степени дегенеративных изменений зараженных клеток исследуемых тканей с интенсивностью репродукции в них вирусов гриппа.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Даулбаева, Светлана Файзиевна, Алма-Ата

1. АГРАНОВСКАЯ Е.Н. .ИВАНОВА Е.Т., ГРИГОРЬЕВА С.К.,ЮЖНА Т.М. Уровень и динамика секреторных антител и иммуноглобулинов в верхних и нижних отделах дыхательных путей.- В кн.: Острые респираторные заболевания и острые пневмонии у взрослых. Л.,1975,с.44-45.

2. АРТАМОНОВА Е.А. Выделение из карциномы Шоупа белковой фракции, с о держа щей ингибиторы вируса кроличьей папилломы. Вопр.виру-сол.,1962, 3, с.302-303.

3. БЕРЛИНСКИХ М.С.,КОСЯКОВ П.Н. Действие ингибиторов слюны на гемагглютинины вируса эпидемического паротита. Вопр.вирусол., 1958, 5, с.287.

4. БЕРЛИНСКИХ М.С. Действие ингибиторов слюны на вирус эпидемического паротита и значение их в иммунитете.Дис.канд.",М.,1958.

5. БИСЕНОВА М.И. Ингибиторы к вирусу гриппа в тканях и крови разных видов животных. Тез.докл.5-й итоговой научно-практ.конф. КазИЭМГ, А-Ата, 1963, с.13.

6. ВАРДОСАНИДЗЕ Э.Ш. Изучение гемагглютинирующих свойств некоторых нейротропных вирусов. Автореф. дисс.канд.,М.,1954.

7. ВАСИЛЕНКО В.А.,КОСЯКОВ П.Н. Существует ли зависимость", между врожденными и приобретенными иммунными реакциями организма на вирусную инфекцию? Вопр.вирусол.,1964,1, с.78-82.

8. ГАЙДАМОВИЧ С.Я.,ХАЛТАЕВА Г.Г.МЕКЛЕР Л.Б. Некоторые свойства ингибиторов гемагглютинации арбовирусов, содержащихся в сыворотке- 154 крови человека. Вопр.вирусол.,1968, 4, с.469-504.

9. ГАЙЛОНСКАЯ И.Н. Слюна фактор естественного иммунитета при гриппе. Дисс.канд. ,М.,1956.

10. ГАМБУРГ В.П. Итоги исследования сывороточного ингибитора вируса гриппа типа А2 в свете контроля активности лечебной противогриппозной сыворотки. Тезисы докл.научн.конф. памяти Л.А. Тарасевича, М.,1960, с.33.

11. ГАМБУРГ В.П. Изучение сывороточного ингибитора вируса гриппа А2 (азиатского) в связи с определением активности противогриппозных сывороток. Дисс. канд. ,М.,1961.

12. ГАМБУРГ В.П. Изучение сывороточного ингибитора гемагглюти-нации и фактора, нейтрализующего инфекционность вируса гриппа А2. Acta virol. ,I96Ia, 5, с.317-324.

13. ГОРБУНОВА А.С.,ГН0Ш30ВА В.М.,ЛОЖКИНА А.Н.,СЛЕПУШКИНА В.Г., П1АХМАЛИЕВА З.М. Не специфические ингибиторы и их значение для лабораторной .диагностики гриппа.- В кн.: Проблемы гриппа,Киев, 1955, с.42.

14. ГОРБУНОВА А.С. Вопросы изменчивости вируса гриппа в связи с развитием пандемии 1957г. Вопр.вирусол.,1958, 4,с.195.

15. ГОРБУНОВА А.С.,СОКОЛОВ М.И. Руководство по лабораторной диагностике гриппа, парагриппозных и аденовирусных заболеваний. М.,Медицина, I960.- 167 с.

16. ГРИГОРЬЕВА С.К.,АНГЕЛОВА Л.А.,СТАРШОВ П.Д.,ИСАКОВ В.А., ПУГОЛОВКЙНА И.И.,МАЛЬЦЕВА А.И. Иммуноглобулины в сыворотках- 155 крови и секретах дыхательных путей больных гриппом A/HIHI/.C6. тр.ВНИИ гриппа, 1979, 23,с.81-84.

17. ГУРБИЧ А.Е.,НЕЗЛИН Р.С. Номенклатура иммуно-глобулинов человека. Биохимия, 1965, 30, 2, 443 с.

18. ГУШАН Н.Р. Изучение термолабильных сывороточных ингибиторов у различных линий мышей.- В кн.: Проблемы общей вирусологии, М.,1966, с.176-178.

19. ДАУДЛ В.Р.,ПИЛЕ Г.С. Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала.- В кн.: Вирусы грипПа и грипп, М.,1978,с.281-308.

20. ДЕЙЧМАН Г.И. Динамика размножения вируса £-полиомы в мышиной эмбриональной культуре в зависимости от величины заражающей дозы. Роль неспецифических термостабильных ингибиторов в маскировке вирусных гемагглютининов. Aota virol.,1962, 6, с.I.

21. ДОБРОВОЛЬСКАЯ Н.Г.,ШГЕШ Т.Л. Изучение противогриппозных антител разного молекулярного веса.1. К методике дифференциации противогриппозных антител разного молекулярного веса.- В кн.: Респират^вир.инфекции, Л.,1969, с.107-113.

22. ДОКЛАДЫ комитета экспертов ВОЗ. Использование иммуноглобу-. -линов человека. Медицина, М.,1968.

23. ДОКЛАДЫ комитета экспертов ВОЗ. Расширение номенклатуры иммуноглобулинов. Бюллетень ВОЗ, 1969, 41,6, 953 с.- 156

24. ЖДАНОВ В.М. Итоги дальнейших исследований по проблеме гриппа. Вопр.мед.вирусол.,1958, 5,1, с.З.

25. ЖДАНОВ В.М. ,ГАЙДАМШИЧ С.Я. Общая и частная вирусология. М., "Медицина", 1982 г.

26. ЖЕЛЕЗНИКОВА Г. Ф. ДЕЛУ НОВ В.И., АКСЕНОВ 0.А.,ОГУРЦОВ Р.П. Противовирусная и иммуномодифицирующая активность экстракта мышиной селезенки. Ред. я."Иммунология" АМН СССР.М.,1982,10,с.16. Рукопись депонирована в ВИНТИ.

27. ЖИЛОВА Г.П.,ОРЛОВ В.А.,ГЕФТ Р.А.,ЕРМОЛАЕВА О.М. Биологические свойства вируса гриппа А2, пассируемого в органных культурах трахеи эмбриона человека.- В кн.: Грипп и ОРЗ, Л.,1967, с.216-218,

28. ЖИЛОВА Г.П.,ОРЛОВ В.А.,ПАРУСОВ В.Н. Оценка вирулентности- 157 вируса гриппа А2 Гонконг на модели органной культуры человека. Еопр.мед.вирусол.,1971,2, с.249-250.

29. ЗАКСТЕЛЬСКАЯ Л.Я. Проблема специфической профилактики гриппа в свете экспериментального изучения патогенеза и иммунитета гриппозной инфекции.Автореф. дисс.докт.Д.,1957.

30. ЗАКСТЕЛЬСКАЯ Л.Я.,ЯХН0 М.А. Чувствительность различных штаммов вируса гриппа А2 к действию ингибиторов,содержащихся в сыворотках животных.- В кн.: Вопросы мед.вирусол.Д.,1958,5,1, с.71-73.

31. ЗИЛЬБЕР Л.А.,АРТАМОНОВА В.А. О так называемой маскировке опухолеродных вирусов. ДАН СССР, 1954, 96, 1057 с.

32. ЗЛЫДНИКОВ Д.М. Острые вирусные пневмонии. Клин.мед.,1974, 12,с.56-61.

33. ЗУЕВ В.А. Лабораторная диагностика латентных,хронических и медленных вирусных инфекций. М. /Медицина", 1979.

34. ИВАНОВСКАЯ Т.Е. ,ЩНЗЕРЛИНГ А. Е. Пат о логическая анатомия. М.,"Медицина", 1976.

35. ИР1АН0В С.Д. Респираторно-вирусные инфекции при пневмониях у детей Казахстана и использование органных культур для их изучения в эксперименте. Дисс. докт.,1971.

36. ИРЕАНОВ С.Д.,СОКОЛОВА Н.Н. Органное культивирование тканей человека и животных. Методические рекомендации. Алма-Ата,1976.

37. ИРЖАНОВ С.Д.,ХЕСИН Я.Е. Органные культуры в вирусологических исследованиях. М.,1977.

38. ИР1АНШ С.Д.,БАЙЖОМАРТОВ М.С.,ПРОЗОРОВСКИЙ С.В. Применение органных культур трахеи цыплят для выделения респираторных вирусов и M.pneumoniae от больных. Методические рекомендации.1. Алма-Ата, 1979.

39. КАЗАКОВА В.Н.,КОСЯКОВ П.Н. Вирусингибирующая активность крови и секретов. Вопр.вирусол.,1967, 6,с.702-705.

40. КАРАГУЛОВА К.А. Применение органных культур в изучении моно- и сочетанных вируснобактериальных респираторных инфекций. Дисс.канд.,1980.

41. КОСЯКОВ П.Н.,ГРУЗДЕВА Н.М.,БЕРЛИНСКИХ М.С. К механизму лечебного действия иммунных сывороток и ингибиторов при вирусных инфекциях. Физиология и генетика вирусов. Противовирусный иммунитет. М.,1961, 76 с.

42. КОСЯКОВ П.Н.,ВАСИЛЕНКО В.А. Ингибиторы вирусов в слюне здоровых людей и больных гриппом. Вопр.вирусол.,1965,2,с.204-209.

43. КОСЯКОВ П.Н.,РСВН0ВА З.И. Влияние антител и ингибиторов на раннюю стадию взаимодействия вируса и клетки. Вопр.вирусол., 1966, I, с.38.

44. КОСЯКОВ П.Н. ,РСВНША З.И. Противовирусный иммунитет.М., 1972.

45. КОСЯКОВ П.Н. В кн.: Общая и частная вирусология. М.,Медицина, 1982, с.363-407.

46. КРЮКОВА И.Н. Попытка демаскировки вируса Рауса в тканях млекопитающих. Вопр.вирусол.,1961, 3,с.313.

47. КУДРЯВЦЕВА В.К.,ГУЛЯЕВА В.Н.,ПОПОВА Т.Л. Заболеваемость людей гриппом в эпидемию 1969 года в зависимости от факторов специфического и неспецифического гуморального иммунитета.В сб. ВНИИ гриппа "Проблемы гриппа и ОРЗ", Л.,1973, 6, с.66-71.

48. ЛУЗЯНИНА Т.Я. Природа гуморальных неспецифических факторов противовирусного иммунитета. Аянот.научн.работ АМН СССР за 1956 год.М.,1958, I, с.403.- 159

49. ЛУЗЯНИНА Т.Я. Корреляция между патогенностью штаммов вируса гриппа для мышей и их способностью разрушать ингибиторы легочной ткани. Этиология, иммунология и клиника азиатского гриппа, сб. тр.ИЭМ АМН СССР,Л.,1961.в, с.28.

50. ЛУЗЯНИНА Т.Я. Классификация сывороточных ингибиторов и сравнительные особенности их взаимодействия с вирусом гриппа и другими вирусами. В кн.: Проблемы гриппа, Л.,1961, с.58.

51. ЛУЗЯНИНА Т.Я. Особенности взаимодействия термолабильных сывороточных ингибиторов с различными вирусами. Acta virdL, 1962,6, 6,с.498-507.

52. ЛУЗЯНИНА Т.Я.,ПОЛЯК Р.Я.,ПИКУЛЬ А.П.,КУДРЯВЦЕВА В.К. Условия реактивации вируса гриппа из нейтрального комплекса с ингибиторами. Aota virol. ,1964 , 8,2, с. 172-178.

53. ЛУЗЯНИНА Т.Н.,СМОРОДЙНЦЕВ А.А. Реакция нейтрализации с вирусом паротита на культуре ткани куриных фибробластов. 1965, 9,с.160.

54. ЛУЗЯНИНА Т.Я. Термолабильные ингибиторы крови и их защитная роль в противовирусном иммунитете.Дисс.докт.,Л.,1966.

55. ЛУЗЯНИНА Т.Я.,ПОЛЯКР.Я.,СМОРОДИНЦЕВ А.А. Термолабильные сывороточные ингибиторы как фактор неспецифического противовирусного иммунитета. В сб. Проблемы патогенеза и иммунол.респират. вир.инфекций. Л.,1969, с.35-42.

56. ЛУЗЯНИНА Т.Я. Гуморальные факторы неспецифической резистентности. В кн.: "Проблемы гриппа" (научный обзор). В НИИМИ,М.,1971, с.30-48.

57. ЛУЗЯНИНА Т.Я.,КУДРЯВЦЕВА В.К.,СМ0Р0ДИНЦЕВ А.А. Материалы к механизму взаимодействия вируса гриппа с термолабильными ингибиторами.- В кн.: Механизмы противогриппозного иммунитета. Л.,1972, с.77.

58. ЛУЗЯНИНА Т.Я. Вируснейтрализующие ингибиторы как фактор неспецифической гуморальной защиты при вирусных инфекциях.-В кн.: Факторы неспецифической резистености, при вирусных инфекциях. Л.,1980, с.64-78.

59. ЛУРИЯ Е.А.,НИКОЛАЕВА А.И., ГУРВИЧ А.Е.,ФРИЛЕНШГЕЙН А.Я. Индукция синтеза антител в органных культурах лимфатических узлов. Бюлл.эксперим.биологии и медицины, М.,1967, 7,с.73-76.

60. МАКСИМОВИЧ Н.А.,БОЦМАН Н.Е.,ЭМАЙКИНА В.П. Патоморфологичес-кие изменения при гриппе и цитологическая диагностика.Киев, Здоровье,1965.

61. МАКСИМОВИЧ Н.А.,АБЕНОВА У.А. .ВИНОГРАДОВА В.Х. Морфологические изменения в дыхательных путях лабораторных животных при заражении их штаммами вируса гриппа А2 с различной элюирующей активностью. Вопр.вирусол.,1969,3,с.342-348.

62. МАКСИМОВИЧ Н.А.,Г0ШН В.И. Патологическая анатомия.острых респираторных заболеваний и их значение в детской летальности. Арх.патол.,1980, 7,с.20-24.

63. МАЛЬХАНОВ В.Б. Применение органных культур эмбриональных тканей человека в диагностике и изучении патогенеза некоторых вирусных инфекций. Дисс.канд. ,М.,1973.

64. МИРНЫЙ В.П. Защитная роль и природа вируснейтрализующих ингибиторов сывороток человека. Матер.конф. "Актуальные вопросы вирусных инфекций". А-Ата,1973, с.24-26.

65. НЕВЕДОМСКАЯ Г.Н. Биологические свойства и природа термолабильных ингибиторов вируса гриппа в сыворотках детей. В кн.: Проблемы патогенеза и иммунологии респираторных вирусных инфекций. Л. ,1969,т.I, с.62-66.

66. НЕВЕДОМСКАЯ Г.Н. Влияние сывороточных Jb -ингибиторов на прививочную активность живой гриппозной вакцины. Труды ТКИ (контрольный институт мед.биол.препаратов), 1971, I,с.69-70.

67. НЕВЕДОМСКАЯ Г.Н. Уровень активности бета-ингибиторов в сыворотках животных в зависимости от различных факторов.- В кн.: Механизмы противогриппозного иммунитета. Д.,1972,с.96.

68. НЕЗЛИН Р.С.,КУЛЬПИНА Л.М. Разделение сывороточных белков по молекулярному весу с помощью декстран0Е0Г0 геля Сефадекс G -200.Вопр.мед.хим.,1964, 10,5, с.543-545.

69. НЕЗЛИН Р.С. Дополнения к номенклатуре иммуноглобулинов (предложения Всемирной организации здравоохранения). Мол.биол., 19706, 4,5,с.790.

70. НОВОХАТСКИЙ А.С. Тканевые и клеточные культуры в вирусологии и молекулярной биологии.- В кн.: Итоги науки и техники (серия вирусология). М.,1979, 8,с.3-134.

71. ОРЛОВ В.А.,ШЛ0ВА Г.П. Изменение реактогенных и иммуно-генных свойств вируса гриппа А2 после пассажей в органной культуре человека. В кн.: Иммунол. и специф.профил.гриппа у детей. Л.,I97I,c.208-2I8.- 162

72. ПАРУСОВ В.Н., ОРЛОВ В.А. Изучение гриппозной инфекции в органных культурах трахеи эмбриона человека.,1Вопр.вирусол., 1972, 1,0.88-92.

73. ПАРУСОЕ В.Н. Патологическая анатомия, патогенез и экспериментальная терапия тяжелых форм гриппа. Л., "Медицина", 1981.

74. ПИГАРЕВСКИЙ В.Е. Гистопатология и вопросы патогенеза гриппа. М.,"Медицина", 1964.

75. ПОЛЯК Р.Я. Биохимическая природа и свойства термолабильных вируснейтрализующих веществ нормальной сыворотки различных животных. Дисс.канд. Л. ,1960.

76. ПОЛЯК Р.Я. Биохимическая природа термолабильных и термостабильных ингибиторов, активных против миксовирусов.Тезисы докл. на межинстит.конф. по гриппу АМН СССР.Л.,1961,с.60.

77. ПОЛЯК Р.Я.,СМОРОДИНЦЕВ А.А. Электрофоретическое изучение термостабильных ингибиторов-, вируса гриппа типа А2 в сыворотках нормальных животных. Acta Tirol* ,1961, 5,с.1-6.

78. ПОЛЯК Р.Я.,ЛУЗЯНИНА Т.Я.,КУДРЯВЦЕВА В.К. Биохимические и иммунологические отличия высокоактивных ингибиторов вируса гриппа, содержащихся в сыворотках различных видов животных. Грипп.Материалы научн.симпозиума", М.,1966, с.93.

79. ПОЛЯК Р.Я.,ЛУЗЯНИНА Т.Я. Факторы неспецифической резистентности при вирусных инфекциях. Л.,1980.

80. P0BHQBA З.И.,КОСЯКОВ П.Н.,КЛИМЕНКО С.М.,ГЕТЛИНГ З.М. Действие антител и ингибиторов на систему вирус-клетка. Вопр. вирусол., 1963, 2,с.150.

81. POBHGBA З.И.,КОСЯКОВ П.Н. Ингибиторы и антитела в процессе иммунизации животных вирусными препаратами. Aota virol., 1967а, II,с.69.- 163

82. РОВНША 3.И.,КОСЯКОВ П.Н. Ингибиторы и антитела в процессе экспериментальной гриппозной инфекции. Вопросы ейрусол. ,19676, 6,с.697-702.

83. РОВНОВА З.И. Специфические и неспецифические гуморальные факторы протиЕОЕирусного иммунитета. Дисс.докт.,М.,1967.

84. САЯТОВ М.X.,БЕЙСЕМБАЕВА Р.У. Препаративное выделение -макроглобулина, трансферрина, альбумина и изучение их неспецифической -ингибиторной активности.- Вопр.вирусол.,1976, 4,с.461-464.

85. СОЛОВЬЕВ В.Л.АЛЕКСЕЕВА А.К. Изучение противовирусного иммунитета методом тканевых культур. I. Восприимчивость и резистентность эксплантатов ткани легких к вирусу гриппа у предварительно иммунизированных животных. Acta virol.,I960, 4,3,с.129-135.

86. СОЛОВЬЕВ В.Д.,ХЕШИ Я.Е.,БЫКОВСКИЙ А.Ф. Очерки по ЕИрусной цитопатологии. М. "Медицина", 1979.

87. СМОРОШЦЕВ А. А.,ШИШКИНА О.И. Действие нормальных сывороток лабораторных животных на вирус гриппа. ЖМЭИ,1951 (6), с.16.

88. СМОРОШНЦЕВ А.А. Особенности защитных механизмов при противовирусном иммунитете.Вопр.патоген, и патолог.анатомии инфекц.болезней. Л. ,1957, с.77.

89. СМОРОШНЦЕВ А.А.,КОРОВИН А.А.Грипп. Медицина, Л.,1961.

90. СТАХАНОВА В.М. Неспецифические ингибиторы гемагглютинации в сыворотках человека и животных и их значение для .диагностики гриппа. Автореф.дисс.канд.,М.,1957.

91. СТАХАНОВА В.М. Неспецифические ингибиторы вируса гриппа в сыворотках лихорадящих больных. Вопр.вирусол.,1957, 6,с.367.

92. СТЕФАНИ Д.В. Иммуноглобулины человека и их роль в инфекционной патологии. ЖМЭИ,1971, 6,с.126-131.

93. СТГУКОВ А.И.,СЕРОВ В.В. Патологическая анатомия.М./'Медицина", 1979.- 164

94. ФРИДМАН Э.А. Простой метод инактивирования неспецифических ингибиторов вирусной гемагглютинации ЖМЭИ,1954, 2,с.69.

95. ФРИДМАН Э.А. Неспецифическая нейтрализация вируса гриппа и методы ее устранения. Дисс.канд.,Л.,1955.

96. ФРИДМАН Э.А. Методика и результаты изучения иммунологии гриппа в коллективах здоровых и переболевших лиц.- В кн.: Проблема гриппа,Л.,1961, с.ИЗ.

97. ЦИНЗЕРЛИНГ А.В. Современная и инфекционная патология у детей. Арх.патол.,1980, 7,с.10-15.

98. ЧЕБУРКИН А.В.,СТЕФАНИ В.Д.,ЛЕБЕДЕВА Н.Н.,ЕСИЛЕНК0 Н.В., ИЛЬЧЕНКО Т.П. Иммуноглобулины в носовом секрете у детей раннего возраста. Вопр.ШД, 1973, 3,с.53-57.

99. ЧЕРЕТЕНКО Н. Л. ,ЕИСЕН0ВА М.И. ,ШУРАТШ И.Х. Феномен чередования активности факторов противогриппозного иммунитета у человека и животных. Изв. АН КазССР, 1981,5,с.48-51.

100. ЧЕРНОХВОСТОВА Е.В. Биологические особенности антител,принадлежащих к разным классам иммуноглобулинов.Успехи соврем.биологии, 1972, 73,3,0.444-457.

101. ШАДРИН А.С.,ЯКУБЕНКО А.А.МАЛЫШЕВА А.М.,НАЙХИН А.Н.ГРОМОВА М.И. ,РУМЕЛЬ Н.В.,СМОРОДИНЦЕВ А.А. Влияние сывороточных противовирусных ингибиторов на резистентность к гриппу и ОРЗ. Вопр. вирусол.,1972, 5,с.582-586.

102. ШАХВОРОСТОВА Л.И.,САЯГОВ М.Х.,АБЯШЕВА Ф.Ж. Особенности анти-гемагглютинирующего действия тканевых и сывороточных ингибиторов активных в отношении вируса гриппа. "Труды ин-та микроб, и вирусологии АН КазССР", 1982, 28, с.150-154.

103. ШВАРЦМАН Я.С.,КУДРЯВЦЕВА В.К.,МАШКОВ Б. А. ,ИСПОЛАТША А.В., ЛУЗЯНИНА Т.Я. Иммуноглобулины при вирусных инфекциях.- В кн.:- 165

104. Проблемы патогенеза и иммунологии респир.вир.инфекций. Д., 1969,0.67-75.

105. ШВА ИЩИ Я.С. ДАЗЕНСОН Л.Б. Местный иммунитет. Л. ,1978.

106. ШГЕРЕНГАРЦ Б.П.,СТЕФАНИ Д.В.,ЛАЗАРЕВ В.Н.,МАНИК В.П., ГРЩШЕВА Р.В.,МАКАРОВА З.С. Уровни иммуноглобулинов в слюне и носовом секрете у детей в возрасте от I года до 16 лет. ШЭИ, 1977, I, с.37-40.

107. ИЗУРАТОВ И.Х. Влияние уровня нейтрализующих ингибиторов на размножение вируса осповакцины, введенного внутривенно.- Веб.: "I научная конф.молодых ученых мединститутов; Л.,1966,с.20.

108. ШУРАТСВ И.Х. Участие вируснейтрализующих ингибиторов и кофактора в патогенезе вирусной инфекции (на модели осповакцины). Дисс.канд.,Л.,1967.

109. ШУРАТОВ И.Х. Противогриппозные специфические иммуноглобулины, неспецифические ингибиторы и кофактор в онтогенезе у человека. Автореф. дисс.докт.,1975.

110. ШУРАТОВ И.Х. Изучение биохимической природы и особенности синтеза неспецифических факторов противогриппозного иммунитета в онтогенезе у человека.- В кн.: Актуальные вопросы вирусных инфекций. Алма-Ата, 1976, 12, с.30-34.

111. ХЕСИН Я.Е.ИР1АН0В С.Д. Гриппозная инфекция в органной культуре легких морских свинок и мышей. Вестник АМН СССР. 1971, 10,с.81-87.- 166

112. ЯХНО М.А. Разновидности вируса гриппа А2/57 и их роль в патогенезе и иммунитете. Дисс.канд. ,М.,1961.

113. ЯХНО М.А. Влияние ингибитородеструктирующих обработок на антитела к вирусу гриппа.Вопр.вирусол.,1961, 3,с.334.

114. Aokerman W.W., Dinka S. 0 природе вируснейтрализующей активности бычьей сыворотки. Aota virol., 1965, 9, 6, 526-533.

115. Albanese M., Romano N. Effects of rubella virus on tracheal organ cultures. Riv. 1st. Sieroterap. ital., 1967, 42, 5, 2X7.

116. Albrecht p., Krizanova о. Определение локализации ингибитора гемагглютинации вируса гриппа. Acta virol., 1961, 5, 232-234.

117. Alford R.H., Rossen R.D., Butler W.T., Kasel J.A. Neutralizing and hemagglutination inhibiting activity of nasal secretions following experimental human infection with A2 influenza virus. J.Immunol., 1967, 98, 724.

118. Anderson S.G. Hemagglutination by animal viruses. In: P.M. Burnet and W.M.Stanley (ed).

119. The viruses", 1959, Academio Press Inc., New-York London, 21-49.

120. Bang P.B., Niven J.S. A study of infection in organized tissue cultures* Brit. J.Exptl. path., 1958, 39, 3, 3I#

121. Baron S., Friedman R.M., Buckler C.E. Properties of poliovi-rus inhibitor from monkey brain. Proc. Soc. exp. Biol. Med., 1963, 113, 107.

122. Bartell P., Klein M., Neutralizing antibody to viruses of poliomyelitis in sera of domestic animds. Proc. Soc. exp. Biol. Med., 1955, 90, 597.

123. Basarab 0., Smith H. Growtj patterns of influenza virus in cultures of ferret organs. Brit. J. exp. Path., 1970, 51, I, 1-6.

124. Beard C.W., Easterday B.C. The influenoe of the route of administration of Newcastle disease virus on host responoe. III. Im-munofluoresoent and histopathological studies. I.Infect. Bis., 1967, 117, 66 -70.

125. Belyavin G. The meohanism of influenza virus haemagglutinati-on as a model of specific reoeptor adsorption. J.Gen. Microbiol., 1963, 32, I, 15 17.

126. Best J.M., Banatvala J.E., Moore B.M. Growth of rubella virus in human embryonic organ cultures. J.Hyg;, 1968, 66, 3, 5, 407.

127. Biddle F., Belyavin G. The haemagglutination inhibitor in edible bird-nest its biological and physical properties. J.Gen. Microbiol., 1963, 31, X, 31.

128. Blaskovic P., Phodes A.S., Doane F.W., Labzoffsky N.A. Infection of chick embryo tracheal organ cultures with influenza A2 (Hong Kong) virus. Arch. ges. Virusforsch., 1972, 38, 2/3, 250266.

129. Bogach S. Interaction of viruses with native brain substances. Neurology, I960, 10, 439.

130. Boreoky I»*, Eathova V., Kociskova Б. Опыт воздействия на уровень сывороточных ингибиторов к миксовирусам II Влияние введения этионина на размножение вируса.

131. Acta virol., 1962, 6, 2, 97-104.

132. Boreoky Ь., Eathova V., Kociskova В. Nonspecific resistance of the organism and myxovirus inhibitors comparison of some antibacterial and antiviral mechanisms. Folia Microbiol., 1963, 8, 3, 137 146.

133. Booth D.A. Lipophilic sialic acid derivates in human erythrocytes. Biochim. et biophis. acta, 1963, 70, 4, 486-487.

134. Brand C.M., Skehel J.J., Cristalline antigen from the influenza virus envelop. Nature new biol., 1972, 238, 145-147•

135. Burnet P.M. Mucoproteins in relation to virus action. Physiol. Eev., 1951a, 31, I3I-I50.- 169

136. Casal I., Rubenstein D., Votava M., Tyrrell D.A.I. Organ cultures of human fallopican tubes for the propagation of viruses. Arch. ges. Vlrusforsch., 1970, 31, 3-4, 196-199.

137. Campbell R.S., Thomepson H., beighton E., Fenny W. Pathogenesis of bovine parainfluenza 3 virus infection in organ cultures. J.Camp. Pathol., 1967, 79, 3, 347.

138. Chanook R.M., Sabin A.B. The hemagglutination of St.Lowis encephalitic virus. III. Properties of normal inhibitors and specif io antibody: Use of hemagglutination inhibition for diagnosis of infection. J.Immunol., 1953, 70, 302*

139. Chanock R.M., Sabin A.B. She hemagglutinin of Western equine enc encephalitis virus, recovery, properties and use for diagnosis. J.Immunol., 1954, 73, 338.

140. Charley B. Looal immunity in the respiratory tract. I. Cellular and humoral immune responces following swine influenza infection. Ann. Microbiol., 1977, В 128, I, 95-107.

141. Chen Т.Ш. The cultivation in fluid medium of organized liver, pancreas and other tissues on foetal rats. Exper. Cell. Res., 1954, 7, 2, 518.

142. Cherry J.D., Taylor-Robinson 3). Large quantity production of chicken embryo trucheal organ cultures and use in virus and mycoplasma studies. Appl. Microbiol., 1970, 19, 4, 658-662.

143. Choppin P.W., lamm I. Studies of two kinds of virus particles which comprese influenza A2 strains. II;. Reactivity with virus inhibitors in normal sera. I. exp. lied., I960, 112, 921.

144. Choppin P.W., Тагап I. Studies of two kinds of virus particles which comprise influenza A2 virus strains. I* exp. Med., I960» 112, 895.

145. Coons A.H., Kaplan M.H. Localization of antigen in tissue cells. II. Improvements in a method for the detection of antigen Ъу means of fluonescent antibody. J« exp. med., 1950, 91, 1-3.

146. Cohen A., Belyavin G., Newland S.E. Analysis of the horse serum inhibitor of A2 influenza virus haemagglutination and infeo-tivity. Congr. Inlerh. Microbil., Montreal, 1962, 95.

147. Cohen A., tfewland S., Biddle F. Inhibition of influez^sa virus haemagglutination* A difference of behaviour in sera from a single species. Virology, 1963, 20, 518-529.

148. Cohen A., Dorman J. Неспецифические ингибиторы вируса гриппа А2 в человеческой сыворотке. Acta virolog., 1965, 9, 6, 519-525.

149. Cohen S«, Milstein C. Structure and biological properties of immunoglobulins. Advanc. Immunol., 1967, 7, I.

150. Craighead I.E. Growth of Myxovirus parainfluenza type 3 in organ cultures of guinea pig tissue. I.Bacterid., 1966, 92, 3, 751.

151. Craighead J.E., Brennan B.J. Cytopathlc effects of parainfluenza virus type 3 in organ cultures of human respiratory tract tissue. Amer. I. Path., 1968, 52, 2, 287-300.

152. Бе Sousa S.P., Bal А. Чувствительность А2/Тонконг и пред-1968 штаммов вируса гриппа А2 к ингибиторам нормальной сыворотки

153. Acta virologiea, 1971, 15, 5, 367-373.

154. Determan G. Гель-хроматография, щ., 1970.

155. Edney M.) Isaacs A. Interferonce between inactive and active influenza viruses in the chick embryo. 3. Inhibitor of virus hemagglutination in the chorioallantoic membrane. Aust. J. exp. Biol, med. Sci., 1950, 28, 6, 603.

156. Pastier L.B. The inhibition of GD 7 virus hemagglutination by normal tissue extracts. J. Immunol., 1951a, 66, I, 87.

157. Pastier L.B. Factors involved in hemagglutination by GD 7 strain of murine encephalomyelitis virus. J. Immunol., 1951b, 66f 165.

158. Fazekas de St., Groth S. Studies in experimental immunology of influenza: I. The state of virus receptors and inhibitors in the respiratory tract. Aust. J. exp. Biol* med. Sci. 1950, 28, I, 15-29.

159. Fell H.B., Bobinson R. The growth development and phosphatase activity of embryonic avian femure and limb bud cultivated in vitro. Biochem. J., 1929, 23, 767.

160. Finkelstein E.A., Allen В., Sulkln S.E. Properdin sensitivity of herpes simplex virus. Virology, 1958, 5, 567.

161. Flanagan Th.D., Barron A.L., ffitebsky E. The growth of mumps virus in organ cultures of rhesus thyroid gland. I. Immunol., 1968, 100 , 2, 4U.

162. Flodin P., Killander J. Fractionation of human serum proteins by gel filtration. Biochem. biophys. Acta (Amst.) 1962, 63, 403410.

163. Gamboa E.T., Harter D.H., Wolf A., Benitez H.H., Takaha If., Duffy Ph.E., Hsu K.C. Beplication of neurotropic influenza virus in organotypic cultures of embryonio mouse hypothalamus. J.ITeuro-pathol. and exp. Neurol., 1974, 33, 5, 571-581.- 172 r

164. Gottschalk A., Fazekas de St., Groth S. On the relationship between the indioator profile and prositietio group of mucopro-teins inhibitory for influenza virus haemnagglutinin. J. gen. Microbiol., I960, 22, 690-697.

165. Gottschalk A, The moleoulax structure of ovine submaxillart gland glycoprotein. In/ "Salivary glands and their secretions", ed by Srecbny L.M., Meyer J., Proceed* Inter. Conference at Seattle. Fashington Pergamon. ITew-York, 1964, 351-364.

166. Greenwood F.C., Hunter W.M., Glover J.S. She preparation of I3Ij labelled human growth hormone of high specific activity. Biochem., 1963, 89, II4-I23.

167. Haber S. Immunochemistry. Alto. Rev. Biochem., 1968, 37, 497. Hammon W.M., Mack W.H., Boeves W.C. The significance of protection test with the serum of man and other animals against the lansing strain of polyomielitis virus, J. Immunol., 1947, 57, 285.

168. Hana L., styk в. Биохимические особенности ингибитора.изсыворотки крыс, тормозящего гемагглютацаю, вызванную вирусомгриппа С. Aotaa virol., 1959, 3(Supplem), 85.

169. Hana L«, styk в. Влияние удаления липоидов на антигемагглю-тинирующую активность ингибиторов крысиной сыворотки в отношениивирусов гриппа типа С.

170. Acta virol., I960, 4, 392-393.

171. Hana L., &tyk В., Kosikova D. Изучение распределения и свойств ингибиторов "авидных" штаммов вируса.гриппа типа А2 в.белковых фракциях сывороток морских свинок и лошадей с помощью электрофореза на бумаге.

172. Acta virol., I960, 4, 356-364.

173. Hana ь., Styk в. Липоиды как подавители ингибиторов гемаг-глютионной активности "авидных" штаммов гриппа А2.

174. Acta virol., 1961, 5, 3, 190-192.

175. Hana b., Style в. Опыт дифференциации бета-ингибитора и кофактора из бычьей сыворотки. Acta virol., 1962, 6, I, 77-83.

176. Harknes В.В. Structure and function of immunologlobulins. J. appl. Med., 1970, 48, 64.

177. Heuschele W.P., Easterday B.C. Local immunity and persistence of virus in the tracheae of chickens following infection with Newcastle disease virus. II. Immunofluorescent and histopathologic studies. J. Infect. Dis., 1970, 121, 497-504.

178. Higgins P.C. The isolation of viruses from acute respiratory infections. Part V. The use of organ cultures of human embryonic nasal and epithelium. Men. Bull. Minist. Hlth., 1966, 25, 283.

179. Higgins P.6., Ellis E.M., Wolley Б.А. A comparative study of standard methods and organ culture for the Isolation of respiratory viruses. J. Med. Microbiol., 1969> 2, 2, 109.

180. Hirst C.K. The qualitative determination of influenza virus and antibodies by means of red cell agglutination. J. exp. Med., 1942, 75, I, 49-64.

181. Holland J.J., Mc Laren L.C. The mammalian oell-virus relationship* II. Adsorption, reception and eclipse of poliovirus by Hela cells. J. exp. Med., 1959, 109, 487.

182. Hoom B. Eespiratory viruses in model experiments. Acta Oto Laringol., 1964, Suppl. 188, 138.

183. Hoorn В., Tyrrell D.A.I. On the growth of certain "newer" respiratory viruses on organ cultures. Brit. J. Exptl. Pathol., 1965, 46, 2, 109.

184. Hoarn В., Tyrrell E.A.I. A new virus cultivated only in or- 174 gan cultures of human oiliated epithelium. Arch. Ces. Virusforsch., 1966, 18, 2, 210.

185. Hoorn В., Tyrrell D.A.I. Effeots of some viruses on oiliated cells. Amer. Rev. Bespirat. Dis., 1966, 93, 3> part 2, 156.

186. Hoom B. Organ cultures of ciliated epithelium for the study of respiratory viruses. Acta pathol. et microbiol. Scand., 1966, 66, Suppl. 183, 37.

187. Huang J.S., Bang I*.B. The susceptibility of chick embryo skin organ cultures to influenza virus following excess vitamin A. J. Exptl. Med., 1964, 120, 2, 129.

188. Hunter W.M. Chapter 17. In: "Handbook of experimental immunology" (Weir D.W. ed.) Black well Scientific, flew York, 1973» 4, 1-36.

189. Jandasek L., Volakova JT; Некоторые свойства ингибитора Ш нормальных сывороток морских свинок, тормозящего гемагглютина-цйю, вызванную вирусом гриппа А2. Acta virol., I960, 4, 7.

190. Johnson К.М., Bloom Н.Н., Rosen L., Mufson M.A., Chanock R. M. Haemagglutination by Сое Virus. Virology, 1961, 13, 373.

191. Kantoch M., Kuczkowska B. A new method for cultivating vaccinia and variola viruses in organ cultures of rabbit corneae. Arch, immunol., et therap. exptl., 1964, 12, 6, 709 .

192. Eingsman S.M., Toms G.L., Smith H. The localization of influenza virus in the respiratory tract of ferrets: the different175 susceptibilities of fresh and maintained organ oultures. J. gen* Virol., 1977, 37, 2, 249t258.

193. Klein M. The significance of human antiviral neutralizing substances in animals sera. Ann. N.T. Aoad.Soi., 1958, 70, 362.

194. Klenk E.j Uhlenbruok G. Uber neuzaminsauzehaltige Muooide aus Menschenerythrocytenstroma, ein Bertag zur Chemis der Agglutinogens. Z. Physiol. Chem., I960, 319, I5I-I60.

195. Kistler C.S., Best J.M., Banatvala J.E., Tondury G. Elek-troneumikroskopisohe Untersuchungen an Eotelninfizierten men-schuchen Organkulturen. Schweiz. med. Wschr., 1967, 7, 42, 1377.

196. Koscielak J., Hakamori S., Jeanloz E.W. Glycolipid antigen and its antibody. Immunoohemistry, 1968, 5, 5» 441-455.

197. Krizanova-Laucikova 0., Szanto J., Koeiskova D. Выделение и некоторые свойства термостабильного ингибитора анидных штаммов вируса гриппа типа А2 из сыворотки лошадей. Acta virol., 1961, 5, I, 4 II.

198. Krizanova-Laucikova 0., Szanto J., Kooiskova D., Euttkay-Hedecky G., Sokol P. Отличия в свойствах двух ингибиторов авид-ного штамма вируса гриппа А2, выделенных из лошадиной сыворотки.

199. Acta virol., 1961b, 5, I, 12-18.

200. Krizanova 0., Eathova V., Koeiskova D., Szanto J. Cisteine a niektore vlastnas ti beta inhibitora z hovadsieho sera. Bra— tisl'. Lek. Listy., 1963, 43, 22.

201. Krizanova 0., Sokol P. Озистка с помощью хроматографии бета-ингибитора, выделенного из бычьей сыворотки, и его взаимодействия с вирусом гриппа AI. Acta virol., 1966, 10, 35.

202. Mann J.J., Waldman H.B., Togo I., Heiner G.G., Dawkins A.T., Kasel J.A. Antibody response in respiratory secretion of volun-terrs given live and dead influenza virus. J. Immunol., 1968, 100, 726.

203. Mandel В., Hacker E. Inhibition of Theiler*s encephalomyelitis virus (GD strain) of mice by an intestinal mucopolysaoohazi-de. I. Biological properties and mechanism of action. J. exp. Med., 1953a, 98, 399*

204. Mandel B., Backer E. Inhibition of Theiler'a encephalomyelitis virus (GD VII) of mice by an intestinal mucopolysaccharide. II. Purification and properties of the myoopolysacoharide. J. exp. Med., 1953b., 98, 417.

205. Marmion В.Р., Curtain C.C., Pye J. The effect of human bronchial secretions (sputam) on the haemagglutinin and infeotivi-ty of influenza virus. Aust. J* exp. Biol. med. Sol. 1953, 31, 50?;

206. Metzger H. Structure and funotion of ^M macroglobulin. Adv. Immunol., 1970, 12, 57.

207. Miller Metzger H. Characterization of a human macroglobu-lins. I. The molecular weight of its subunits. J. Biol. Chem., 1965, 240, 8, 3325.

208. Miller P. Glyoopeptides of human immunoglobulins. I. Preparation and oarbohydrate composition. Immunochemistry, 1970, 7, 5, 423.г 178

209. Mc Intosh K., Bees J.H., Becker W.R., Xapikjan A.Z., Chanock R.M. Recovery in tracheal organ cultures of novel viruses from patients with respiratory diseases., Proc. nat. Aced. Sci. USA, 1967, 57, 4, 933.

210. Mc Gowan T.R*, Bang P. Organ cultures of human fetal skin for the study of skin diseases. Bull. Johns.Hopkins Hospital^ I960, 107, 2, 63.1.akai H., Mori H., Nozima Т. Экстракция рецепторов к вирусу японского энцефалита из экстраневральной ткани мышей.

211. Acta virol., 1965, 9, 4, 289.

212. Norberg R. Carbohydrate content of normal I9S gammaglobulin. Clin. Chim. Acta., 1964, 9, I, 89.

213. Uorrild В., Pedersen В., Moller-Andersen S. Herpes simplex virus specific secretory IGA in lacrimal fluid during herpes keratitis. "Scand. J. Clin, and Lab. Invest.," 1982, 42, Suppl., 161, 29-33.

214. Novotny I., Skvarel F. Isolation and immunochemical characterization on products of peptic digestion of human G-immunoglobu— lin. Collect. Greohosl. Chem. Communs., 1970, 35, B, 2472.

215. Ohta G., Yanagawa R., Kida H. Growth of avian and human influenza viruses in organ cultures of duck and clicken colons. Arch, virol., 1981, 70, 2, 137-145.- 179

216. Ока М.| Matsuda X., Yoshida I. Properties оf antibody in tracheal mucus of chickens inoculated with Newcastle disease vaocines. Nat. Inst. Anim. Hlth. Quart., 1973, 13, 163.

217. Oxford J.S.i Sohild C.C. The evaluation of antiviral compounds for rubella virus using organ oultures. Ar. oh. ges. Virusfo-raoh., 1967, 22, 34, 349.

218. Parry S.H., Aitken I.D. Immunoglobulin A in the respiratory tract of the chicken following exposure to Newcastle disease virus; Vet. Bee., 1973, 93, 258.

219. Pontecorvo M., Lombard! D. Studio della immunita localedopo vaccinazione con virus vivo ed ucciso. Bivist. Sieroter. Ital., 1966, 41, 264*

220. Quersin-Thiry ъ. Взаимодействие между клеточными экстрактами и вирусами животных. I. Изучение кинетики и замечания по специфичаости взаимодействия.

221. Acta virol., 1961, 5, 3, I4I-I52.

222. Quersin-Thiry L., Nihoul E. Interaction between cellular ertraots and animal viruses. II. Evidence for the presence of different in activators corresponding to different viruses. Aota virol., 1961, 5, 5, 283-293.

223. Balus M., Jenson A.В., Babin E.B., Melnick I.L. Marmoset liver organ culture infected with herpes virus. Exptl. a. Molec. Pathol., 1968, 8, 3, 388.

224. Bapola I., Saxen L., Vainio:. Viral susceptibility and embryonic differentiation. 6. Cytochemioal studies on normal and polyoma infected foetal kidney in vitro. Acta pathol. et miorobiol. Scand., 1965, 63, 2, 249.

225. EeecL S.E. Persistent respiratory virus infection in tracheal organ cultures. Brit. J. Exptl. Pathol., 1969, 50, 4, 378.

226. Reed S.E. The interaction of micoplasmal and influenza viruses in tracheal organ cultures. J. Infect. Dis., 1971, 124» I, 18-25.

227. Reeve P., Pibermann M., Gerendas B. Studies With some influenza В viruses in cell cultures, hamsters and hamster tracheal organ cultures. Med. Microbiol, and Immunol., 1981, 169, 3, 179-186.

228. Rossen R.D., Butler W.T., Cate T.R., Szwed С .P., Couch R. B. Protein composition of nasal secretion during respiratory virus infection. proo> Soc# Exp# Biol> ^ Med#> I965> II9>1.69-1176.

229. Rossen R.D., Alford R.H., Butler W.T., Wannier W.E. The separation and characterization of proteins intrinsic to nasal secretion. J. Immunol., 1966, 97, 369.

230. Rosenberg A., Howe C«, Chargaff E. Inhibition of influenza virus haemagglutination by a braian lipid fraction. Nature, 1956, 177, 234.

231. Rosztoczy I., Sweet C., Toms G.L., Smith H. Replication of influenza virus in organ cultures of human and simian urogenital tissues and human foetal tissues. Brit. J; exp. Path., 1975, 56, 4, 322-328.

232. Rubenstein В., Tyrrell D.A.I., Growth of viruses in organ cultures of intestine. Brit. J. Exp. path., 1970, 51, 2, 210.

233. Rychlik J. Verfahren und Beispiele fur die Bestimmung der Enzymakfcivitlft. Bestimmung der Trypsin und Chymotrypsinakti- 181 vitSt. In: Laboratoratum strechnik fur Biochemicker. (Keil В., Sormova L. u.a.). Acad. Verlw Ges., Leipzig, 1965, 733,- 736*

234. Sabin А.В., Buesoher E.L. umique physico-ohemical properties of Japanese В encephalitis virus hemagglutination* Proc• Soc. exp. Biol. Med., 1950, 74, 222.

235. Sabin A.B., Fields-tell A.H. Nature of spontaneusly occuring neutralizing substances for three types of poliomyelitis virus in bovine sera. 6th Int. Gong. Miorob., 1953, 2, 373.

236. Schiff L.J. Studies on the mechanisms of influenza virus infection in hamster trachea organ culture. Aroh. ges. Virusforsoh., 1974, 44, 3, 105-204.

237. Schmidt If .J., Dennis J., Hagens S.J., Lexmette E.H. Studies on hemagglutination and hemagglutination inhibition test for identification of ECHO virus. Amer. J. Hyg., 1962, 75, 74.

238. Schmidt R.C., Maassab H.J1., Davenport Р.ТЙ. Infection by influenza A viruses of tracheal organ cultures derived from homologous and heterologous hosts. J. infect, dis., 1974, 129, I, 28-36.

239. Schrader A. Zur Klinik primarer Yiruserk rankungen des ZN3. Therapieewoche, 1980, 30, 28, 4771-4775.

240. Shaffer B. The culture of organs from'the embryonic chick on celluloseaoetate fabric. Exp. Cell. Research., 1956, II, 244.

241. Shroyer E.L., Easterday B.C. Gtowth of infections"bovine rhinotracheitis virus in organ cultures. Amer. J. Veterin. Res., 1968, 29, 7, 1355.

242. Smorodintsev A.A. The production and effect of interferon in organ oultures of calf trachea. Brit. J. Exptl. Pathol., 1968, 49, 5, 511.

243. Springer G.F. Microbes and higher plants. Their relation to blood group substances. Proc. Xth Congr. Intern. Soc. Blood Transf., Stockholm, 1964, Karger, Basel, New York,, 1965, 465475.

244. Springer G.F. Mammalian erythrocyte receptors: their nature and their signifioanoe in immunopathology. In: "Current problems in immunology", ed. by Westphal 0., Bock H.E*, Grandmann E., Springer Verlag, Berlin, Heidelberg, New-York, 1969, 47-62.

245. Springer G.F? Importance of human red cell surface structures in reactions between man and microbes. In "Blood and tissue antigens", ed. by D.Aminoff, Acad. Press, New York, London, 1970, 265-286'.

246. Sweet С., Toms G.L., Smith Н. The pregnant ferret as a model for studying the congenital effects of influenza virus infection in utero: infection of foetal tissues in organ culture and in vivo. Brit. J. exp. Path., 1977, 58, 2, II3-I23.

247. Szanto I., Krizanova 0., Link F. Взаимодействие гамма-ингибитора с вирусом гриппа А2. Aota virol., 1962, 6, 6, 524-530.- 183

248. Sugiura A. Studies on the hemagglutination inhibitor against Asian Influenza virus. J. Virol. (Kyoto), 1959, 9, 252.

249. Takatsy GY., Barb K. New inhibitor and erythrocyte receptor-substances for certain Asian strains of influenza virus. Nature, 1959, 193, 52.

250. Tamm I., Eggers H.J. Selective inhibition of viral reproduction, p. 305*338. In P.L.Horsfall and I.Tamm (ed) virol and ricketsial infections of man. 4 th ed, J.B.Lippinoott Co., Phi-lodelphia, 1965.

251. Tomasi T.B., Bienenstock J. Secretory immunoglobulins. Advan. Immunol., 1968, 9, I.

252. Traczewski W., Goch J.H., Czarnecki M., Kowalozyki L. Zachowanle sie immunoglobulin IgG, IgA, IgM surowioy w wlruso-wym zapaleniu miesnia serca о przebiegu prze wleklym. wPrz. lek.,n 1980, 37, 8, 615-618.

253. Turner M.W., Bennioh H.H., Natweg J.B. Simple method of subtyping human G-myeloma proteins based on sensitivity to papain digestion. Nature, 1970, 225, 5235, 853.

254. Trowell О.А. A modified technique for organ culture in vitro. Exper. Cell. Res., 1954, 6, 246.

255. Tyrrell B.A.I., Hoora B. The growth of some myxoviruses in organ cultures. Brit. J. Exptl. Pathol., 1965, 46, 5, 514.

256. Tyrrell D.A.I., Almeida J.D. Direct electron microscopy of organ cultures for the detection and characterization of viruses. Arch. ges. Virusforsoh., 1967, 22, 3-4, 417-425.

257. Tyrrell D.A.I., Blamire C.J. Improvements in a method of growing respiratory viruses in organ cultures. Brit. J. Exptl. Pathol., 1967, 48, 2, 217.- 184

258. Tyrrell D.A.I., Bynoe M.L*, Hoorn B. Cultivation of difficult viruses from patiens with common colds. Brit. Ued. J., 1968, I, 5592, 606*

259. Uhlenbruck G., Heggen M. Uber den Glykoproteingehalt von Neugeborennenerythrooyten sowine einen Widerapruch im Anti A np - "Blutgruppensystem". 2. Kinderheilk., 1969, 106, 4, 260-263.

260. Van Furth R. The formation of immunoglobulins by human tissues in vitro* II* Guantitative studies. Immunology, 1966, IISI3-I8*

261. Van Furth R., Schuit H.R.E., Hijmans W. The formation of imvmunoglobulins by human tissues in vitro* I* The methods and their specificity* Immunology, 1966, II, I-II*

262. Van Furth R*, Schuit H.R.E*, Hijmans W. The formation of immunoglobulins by human tissues in vitro. III. Spleen, lymph nodes, bone marrow and thymus. Immunology, 1966, II, 19-40*

263. Vlasenkova U.K., Kitsak V.V., Al stein A.D., Zhdanov V*M> Ra*-dioimnunoassay of type D oncovirus from continuous G-96 cells* Acta virol., 1978, 22, 257-262*

264. Volakova N., Jandasek L* Термостабильный ингибитор ваовь выделенных штаммов вируса гриппа в сыворотке морских свинок.

265. Acta virol., 1959, 3, 109*

266. Waldman R.H., Wigley F*M*, Small P*A* Specifioity of respiratory secretion antibody against influenza virus* J. Immunol., 1970, 105, 6, 1477-1482.

267. Waldman R.H», Jurgensen P.F., Olsen G.N., Ganguly R«, Johnson J.E. Immune response of the human respiratory tract* III. Immunolglobulin levels and influenza virus vaccine antibody res-ponce. J. Immunol., 1973, III, I, 38-41.- 185 ?

268. Wartiovaara I., Saken L., Vainio T. Viral susceptibility and embryonic differentiation. 5. Localization of virus like particles in mouse kindney rudiment infected with polyoma virus. Acta Pathologiba, et microbiol. Scand., 1965» 63, I» 72.

269. Westerberg S.C., Smith Ch. В., Wiley B.B., Jansen C.G. Pathogenesis of influenza virus infection in mouse tracheal organ cultures. Proc. Soc. Exp. Biol, and Med., 1972, 140, 3, 846-851.

270. Woodruff JtiP. Viral mycorditis. Amer. J. Pathol., 1980, ICE, 2, 427-463.

271. Wolff E., Haffen K. Sur la differenciation sexuelle des go-nades embryonnaires de l'embryon de poulet en culture in vitro. Ann. endocrinol., 1952, 13, 345.

272. Wolff E., Haffen K. Sur une methode de culture d*organes embryonnaires "in vitro". Texas Eep. Biol. a. Med., 1952, 10, 463«

273. Yoshida I., Oka M., Shlmizu P., Yuasa N., Tsubahara H. Neutralizing antibody in the respiratory tract of chickens inoculated with Newcastle disease vaccines. Nat. Inst. Anim. Hlth. Quart., I971, II, 75.