Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Оптимизация технологии микроклонального размножения вишни и оценка влияния ионов тяжелых металлов в культуре IN VITRO

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Фролова, Людмила Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ МЕТОДОВ МИКРОКЛОНАЛЬНОГО РАЗМНОЖЕНИЯ В СЕЛЕКЦИИ ВИШНИ

1.1. Выращивание верхушечных меристем в культуре in vitro;.

1.1 а. Стерилизация.

1.1 б. Введение эксшантов в культуру in vitro.

1.1 в. Пролиферация или собственно размножение.

1.1 г. Ризогенез.

1.1 д. Адаптация растений вишни к условиям in vivo.

1.2. Влияние ионов тяжелых металлов (ТМ) на развитие растений;.

1.2 а. Фитотоксичностъ ионов цинка (Zn);.

1.2 б. Фитотоксичностъ ионов кобальта (Со);.

1.2 в. Фитотоксичностъ ионов свинца (РЪ).

ГЛАВА 2. ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ, УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ, ОБЪЕКТЫ, МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Цель и задачи исследований;.

2.2. Объекты исследований, исходный материал;.

2.3. Методы исследований;.

2.4. Условия проведения исследований.

ГЛАВА 3. ОПТИМИЗАЦИЯ ТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ ВИШНИ В КУЛЬТУРЕ IN VITRO

3.1. Этап стерилизации исходного материала;.

3.2. Сроки введения эксплантов вишни в культуру in vitro;.

3.3. Подбор питательных сред на этапах пролиферации и ризогенеза вишни в культуре in vitro;.

3.3 а. Модификация питательной среды Мурасиге и Скуга для культивирования эксплантов вишни;.

3.3 б. Изучение влияния состава питательных сред Шенка, Гамборга (В-5) и Блейдза на микрорастения вишни.

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ИОНОВ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ (ТМ) НА ЭКСПЛАНТЫ ВИШНИ.

4.1. Влияние Zn на рост и развитие микрорастений вишни в культуре in vitro;.

4.1 а. Влияние Zn на приживаемость (жизнеспособность) микрорастений вишни в культуре in vitro;.

4.1 б. Влияние Zn на рост и развитие микрорастений вишни в культуре in vitro.

4.2. Влияние Со на рост и развитие микрорастений вишни в культуре in vitro;.

4.2а. Влияние Со на приживаемость (жизнеспособность) микрорастений вишни в культуре in vitro;.

4.2 б. Влияние Со на рост и развитие микрорастений вишни в культуре in vitro.

4.3. Влияние Pb на рост и развитие микрорастений вишни в культуре in vitro;.

4.4. Химический анализ микрорастений вишни, выращенных на селективных питательных средах с ионами тяжелых металлов.

ГЛАВА 5. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ОЦЕНКИ ВЛИЯНИЯ ИОНОВ

ТМ НА ЗЕЛЕНЫЕ ЧЕРЕНКИ ВИШНИ.

5.1. Влияние ионов Zn на состояние зеленых черенков сортов вишни;.

5.2. Влияние ионов Со на состояние зеленых черенков сортов вишни;.

5.3. Влияние ионов РЬ на состояние зеленых черенков сортов вишни;.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Оптимизация технологии микроклонального размножения вишни и оценка влияния ионов тяжелых металлов в культуре IN VITRO"

Вишня — широко распространенная косточковая плодовая культура. При правильном подборе сортов с учетом их биологических особенностей и соблюдении требований агротехники она рентабельна и экономически выгодна. Вишня всегда пользовалась большой популярностью у населения за раннее созревание, хорошие вкусовые качества и урожайность. Основные регионы выращивания вишни в СНГ - Украина, Белоруссия, Молдова, Краснодарский край, Поволжье, Центральная и Центрально-черноземная зоны России.

Однако в последние годы произошло значительное снижение урожайности и сокращение площадей, занимаемых этой культурой. Основные причины этого - недостаточное количество сортов, способных к вегетативному размножению, снижение всхожести семян из-за грибной и бактериальной инфекции (Жуков, Желтотрубова, Степанова, Чмир,1988; Кашин, Борисова, Павлова, 1998; Колесникова, Джигадло, 1998).

Для восстановления культуры необходимо провести ряд мероприятий: иметь сорта и подвои устойчивые к грибной и бактериальной инфекции, а также экономически эффективную технологию производства посадочного материала с использованием микроклонального размножения, позволяющую производить в достаточном количестве растения для научных и производственных целей (Колесникова, Колесников, Муханин, 1986; Джигадло, Джигадло, Голяева,1988; Колесникова, Джигадло, 1998; Мотылева, Сосни-наД998). В связи с тем, что в сортименте вишни нет устойчивых к вирусной и микоплазменной инфекции сортов и подвоев, их необходимо создать селективным путем на новой генетической основе. Микроклональное разможе-ние косточковых культур имеет ряд трудностей из-за их склонности к клонированию, что делает актуальным оптимизацию методики на каждом этапе культивирования. Для успешного выращивания растений вишни в культуре in vitro необходимо оптимизировать существующие методики микрокло-нального размножения. При микроклональном размножении необходимо учитывать генетические особенности сортов. Очень важно подобрать оптимальный состав питательной среды, на которой можно успешно выращивать экспланты вишни в зависимости от их происхождения. Перспективность метода микроклонального размножения растений в системе производства оздоровленного посадочного материала высших категорий качества не вызывает сомнений (Высоцкий, 1998; Джигадло, 1988; Вовк, 2000). Микроклональное разможение косточковых культур имеет ряд трудностей из-за их склонности к клонированию, что делает актуальным оптимизацию методики на каждом этапе культивирования.

Наряду с этим, надо учитывать нарастающее техногенное загрязнение окружающей среды тяжелыми металлами (ртуть, свинец, кадмий, мышьяк, цинк, медь, никель). Соединения тяжелых металлов длительное время сохраняют высокую подвижность и токсичность. Это ведет к загрязнению сельскохозяйственной продукции и делает ее опасной для потребления. Соединения ТМ оказывают отрицательное влияние на их генотип и состояние.

Определение степени и характера влияния ионов тяжелых металлов на рост и развитие плодовых растений представляет большой научный и производственный интерес. Особое значение приобретает подбор сортов, устойчивых к наличию тяжелых металлов в почве.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Фролова, Людмила Владимировна

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Проводить этап стерилизации эксплантов вишни по усовершенствованной схеме (стерилизация 70% этанолом в экспозиции 3-4 с, промывка исходного материала 4 мин автоклавированной бидистиллированной водой, обработка сулемой 4 мин, промывка автоклавированной бидистиллированной водой дважды по 2 минуты), в результате чего снижаются затраты времени с 50-60 минут до 12 минут (в 4-5 раз). При этом процент инфицирования питательной среды приближен к нулю. Вводить экспланты вишни в культуру in vitro лучше в весенний, допустимо в зимний и летний периоды. Микрочеренкование на этапе введения в культуру in vitro можно успешно применять в весенний и летний периоды.

2. Для микроклонального размножения на этапе пролиферации лучше использовать среду Гамборга (В-5).

3. Для получения выровненных по длине микропобегов до перевода их на среду укоренения следует использовать среду Блейдза. По своему составу она более экономична.

4. Среда Шенка наиболее благоприятна для микроклонального размножения сортов вишне-черешни с доминированием признаков черешни.

5. На почвах с повышенной концентрацией Zn+2 лучше выращивать сорта -Шоколадница, Тургеневка; с повышенной концентрацией Со+2 - Гриот Остгеймский, Тургеневка, Ровесница, Шоколадница.

6. Для массовой оценки устойчивости сортов и гибридных сеянцев к ионам ТМ в качестве ориентировочного можно использовать экспресс-метод — оценку вести по зеленым черенкам в период активного роста побегов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата сельскохозяйственных наук, Фролова, Людмила Владимировна, Орел

1. Алексеев Ю.В. Тяжелые металлы в почвах и растениях. Л.: Агропромиздат, 1987. 143 с.

2. Алексеенко Л.В., Высоцкий В.А. Подбор питательных сред для клонального размножения нейтральнодневных и ремонтантных сортов земляники // Плодоводство и ягодоводство России. М., 1997. - Том IV. - С. 77-82.

3. Андроникашвили ЭЛ., Есипова Н.Г. Роль металлов в развитии некоторых опухолевых процессов // Биофизика. 1982. - Т. XXVII. - Вып. 6.-С. 10221025.

4. Барабаш Т.Н., Радиолова Л.Д., Бленда В.Ф. Термотерапия при микроклональном размножении // Современные проблемы. Самохваловичи, 1995.-С. 34-36.

5. Барабаш Н.А., Малишевская М.Ф., Третьяк К.Д. Косточковые культуры. -Киев: Урожай, 1986. С. 3-128.

6. Баринова К.Е., Иванова В.Ф. Мониторинг тяжелых металлов во Владимирской области // Химия в сельском хозяйстве. 1995. - № 4. - С. 3638.

7. Бартиш И.В., Меркулов С.М., Корховой В.И., Копань В.П. Микроклональное размножение груши (Pyrus communis L.) in vitro // Физиология и биохимия культурных растений. 1994. - Т-26. - № 1. - С.84-90.

8. Бартиш И.В., Корховой В.И. Состав культуральной среды и эффективность образования побегов in vitro из листовых эксплантов яблони // Физиология растений. 1997. - Т. 44. - № 3. - С. 440-444.

9. Беляев В., Младенова О. Коренообразуване и адаптация на микроразмножените издънки от арония // Растен. Науки. 1992. - Т.29. - № 3/6. - С.79-83.

10. Биотехнология сельскохозяйственных растений. М.: Агропромиздат, 1987.-270 с.

11. Бленда В.Ф., Радиолова Л.Д. Клональное микроразмножение косточковых культур // Садоводство и виноградарство. 1991. - № 3. С. 1112.

12. Бугара А.М., Бугаенко Л.А. Культура изолированных зародышей как метод получения межвидовых гибридов шалфея // Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации. М. - 1998. С. 25-27.

13. Бутенко Р.Г. Индукция морфогенеза в культуре тканей растений // Гормональная регуляция онтогенеза растений. М.: Наука. - 1984. - С. 42-54.

14. Бутник А.С., Ищенко Г.С. Фитотоксическое действие ТМ и 137Cs на сельскохозяйственные растения // Третья всесоюзная конф. по с.-х. радиологии. Обнинск, 1990. - T.I. С. 31-34.

15. Буфатин О.Н., Паращуков Н.П., Фомкина Н.Д. Действие U, Со, Cd на рис // Третья всесоюзная конф. по с.-х. радиологии. Обнинск, 1990. -T.I. - С. 3537.

16. Велчев В., Младенова О. Микроразмножаване на арония // Растен. Науки. 1992. -Г.29. № 1/2. - С.85-89.

17. Вовк В.В. Оптимизация селекционного процесса и ускоренное размножение межвидовых ремонтантных форм малины методом in vitro: Автореферат дисс. . канд.с.-х.наук. Брянск, 2000. - 20с.

18. Высоцкий В.А. Клональное микроразмножение растений // Культура клеток растений и биотехнология. М.: Наука. - 1986. - С. 91-102.

19. Высоцкий В.А. Клональное микроразмножение плодовых растений и декоративных кустарников // Микроразмножение и оздоровление растений в промышленном плодоводстве и цветоводстве. Мичуринск, 1989. - С.3-8.

20. Высоцкий В.А. Биотехнологические методы в садоводстве // Современные проблемы плодоводства. Самохваловичи, 1995. - С. 16.

21. Высоцкий В.А. Биотехнологические методы в системе производства оздоровленного посадочного материала и селекции плодовых и ягодных растений: Автореферат дисс. .д.с.-х.н. -М., 1998. 44 с.

22. Высоцкий В.А. Использование биотехнологических приемов для создания новых форм косточковых растений // Совершенствование сортимента и технологии возделывания косточковых культур. Орел: ВНИИСПК, 1998. - С. 31-32.

23. Высоцкий В.А., Упадышев М.Т. Морфозы при клональном микроразмножении Rubus occidentalis и Rubus fruticosus (Rosaceae) // Ботан. журн. 1992.- Т.77. № 7. - С.85-91.

24. Вяйзенен Г.Н., Токарь А.И., Шуклина А.Ю. Мониторинг тяжелых металлов в воде, почве и растительности // Вестник Рос. акад. с.-х. наук. -1998. -№ 1.-С. 40-48.

25. Геринг X. Преодоление нитрификации и улучшение акклиматизации растений при клональном микроразмножении // Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. М.: Наука, 1991. - С. 197-200.

26. Губарь С.И., Гулько Т.П., Кунах В.А. Рост и накопление гликозидов в каллусной культуре тканей женьшеня при длительном воздействии экзогенных фитогормонов.

27. Деменко В.И. Микроклональное размножение плодовых и ягодных культур // Методические указания к практич. занятиям по плодоводству. М.: МСХА, 1997.-35 с.

28. Джигалло М.И. Некоторые вопросы микроклонального размножения плодовых и ягодных культур // Пути интенсификации садоводства и селекция плодовых и ягодных культур. Тула: Приок. кн. изд-во, 1989. - С. 129-134.

29. Джигадло Е.Н., Джигадло М.И. Размножении вишни методом верхушечных меристем // Улучшение сортимента, и прогрессивные приемы возделывания плодовых и ягодных культур. Тула: Приок. кн. изд-во, 1988. -С.52-56.

30. Джигадло М.И., Джигадло Е.Н. Применение когерентного излучения при микроклональном размножении вишни // Радиобиол. съезд: Пущино, 1993. -Т. 4.1. С.309-310.

31. Доклад о состоянии окружающей среды Орловской области в 1999 году. -Орел, 2000. С. 7-89.

32. Долгих Ю.И. Актуальные проблемы биотехнологии в растениеводстве // Физиология растений. 1997. - Т. 44. - №4. - С. 630-633.

33. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. М.: Агропромиздат, 1985. -352 с.

34. Дубовицкая J1.A., Расторгуев C.JI. Культура изолированных зародышей в связи с отдаленной гибридизацией косточковых плодовых растений // Генетические основы и практические результаты отдаленной гибридизации плодовых растений. Мичуринск, 1984. - С. 74-81.

35. Еремин Г.В. Алыча. М.: Агропромиздат, 1989. - С. 3-113.

36. Еремин Г.В., Подорожный В.Н. Особенности клонального микроразмножения подвоя JI-2 и его гибридных сеянцев // ВИР. 1992. - Т. 148.-С. 115-118.

37. Еремин Г.В., Подорожный В.Н. Производство оздоровленного посадочного материала алычи и подвоев косточковых культур // Садоводство и виноградарство. 1992. - № 8. - С.11-12.

38. Здоренко Н.Г., Самородова-Бианки Г.Б., Ростова Н.С. Взаимоотношение видов и сортов рода Prunus в связи с особенностями состава фенольных соединений плодов // Перспективы отеч. садоводства. Киев, 1991. - С. 104105.

39. Здруйковская-Рихтер А.И. Получение сортов плодовых растений in vitro методом культуры изолированных зародышей // Докл. АН СССР. -1985. Т. 283.-№1.-С. 246-249.

40. Здруйковская-Рихтер А.И., Шоферистов Е.П., Лесникова Н.П. Получение in vitro исходного материала для селекции нектарина раннего и ультрараннего сроков созревания // Биол. наука. 1992. - № 8. - С.66-76.

41. Здруйковская-Рихтер А.И., Орехова В.П., Тарасюк Т.М. Итоги селекции черешни с использованием эмбриокультуры in vitro // Бюл. Гл. бот. сада. -1997.-Вып. 175.-С. 173.

42. Ильин В.Б. Загрязнение тяжелыми металлами огородных почв и культур в городах Кузбаса // Агрохимия. -1991. № 7. - С. 67-77.

43. Ильин В.Б., Степанова М.Д. // О фоновом содержании тяжелых металлов в растениях. СО АН СССР. Сер. Биология. - 1981. - Вып.1. - С. 26-32.

44. Индукция морфогенеза и тканевая селекция плодовых и ягодных культур (Методические рекомендации). Мичуринск, 1996. - С. 59-60.

45. Кабата-Пендиас А., Пендиас X. Микроэлементы в почвах и растениях. -М.: Мир, 1989.-439 с.

46. Калинин Ф.Л., Сарнацкая В.В., Полищук B.C. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений. М.: 1981. - С. 118-130.

47. Калинин Ф.Л., Кушнир Г.П., Сарнацкая В.В. Технология микроклонального размножения растений. Киев: Наукова думка, 1992. - 232 с.

48. Катаева Н.В., Александрова И.Г., Драгавцева Е.В. Значение гормонов в формировании витрифицированных побегов яблони при микроразмножении

49. Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. М.: Наука, 1991.-С. 189-192.

50. Кефели В.И. Природные ингибиторы роста // Физиология растений. -1997. Т. 44. - № з. с. 471-480.

51. Кирпичников Н.А., Черных Н.А., Черных И.Н. Влияние антропогенных факторов на распределение тяжелых металлов в почвах ландшафтов юга Московской области // Агрохимия. 1993. - № 2. - С. 93.

52. Киселева Н.С. Культура изолированных зародышей как способ получения полноценных растений в селекции чая // Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации растений и отдаленной гибридизации. М., 1998. С. 42-43.

53. Ковальчук И.Ю. Размножение косточковых культур in vitro // Ускорение научно-технического прогресса в плодоводстве и виноградарстве и задачи молодых ученых. Алма-Ата, 1987. - С. 23-25.

54. Ковальчук И.Ю. Совершенствование методов термотерапии косточковых культур // Ускорение научно-технического прогресса в плодоводстве и виноградарстве и задачи молодых ученых. Алма-Ата, 1987. - С. 25-27.

55. Ковальчук И.Ю., Боровикова О.В. Клональное микроразмножение вишни и сливы // Ускоренное размножение посадочного материала плодово-ягодных культур с использованием биотехнологических методов. Алма-Ата, 1991. -С. 14-21.

56. Ковальчук И.Ю., Чуканова Н.И. Получение раннеспелых сортов плодовых культур методом доращивания недозрелых зародышей in vitro. -Кайнар, 1997.-С. 18-19.

57. Колесникова А.Ф., Колесников А.И., Муханин В.Г. Вишня. М.: Агропромиздат, 1986. - С. 3-212.

58. Колесникова А.Ф., Джигадло Е.Н. Селекция и сорторазведение садовых культур // Результаты селекции вишни за 40 лет. Орел, 1995. - С.168-179.

59. Колесникова А.Ф., Джигадло Е.Н., Хабаров Ю.И. Селекция и сорторазведение садовых культур // Результаты селекции сливы за 40 лет. -Орел, 1995.-С. 180-185.

60. Колесникова А.Ф., Фролова JI.B., Джигадло М.И. Влияние ионов тяжелых металлов на рост эксплантов вишни // Достижения аграрной науки в решении экологических проблем Центральной России. Орёл, 1999. - С. 8788.

61. Колконос Н.П. Получение безвирусных клонов ягодных культур // Садоводство и виноградарство. 1994. - № 4. - С.13-14.

62. Колтунов Н.М., Волков С.Н. О необходимости мониторинга качества сельскохозяйственной продукции // Мониторинг природной среды: экология, экономика- практика. -М., 1995. С. 84-86.

63. Корнацкий С.А. Особенности клонального микроразмножения сливы в системе производства оздоровленного посадочного материала: Автореферат дисс. . канд.с.-х.наук. М., 1991. - 23 с.

64. Корнова К. Введение в культуру in vitro и мультипликация сортов персика // Ускоренное размножение посадочного материала плодово-ягодныхкультур с использованием биотехнологических методов. Алма-Ата, КАСХН, 1991.- 152 с.

65. Крамаренко JI. А. Развитие абрикоса, размноженных in vitro, в открытом грунте // Бюлл. ГБС. М.: Наука, 1993. - Вып. 168. - С. 15-24.

66. Крамаренко Л.А., Катаева Н.В. Клональное микроразмножение некоторых представителей косточковых плодовых // III Всесоюзная конференция молодых ученых по физиологии растительной клетки. Петрозаводск, 1988. С. 140-141.

67. Крамаренко Л.А., Катаева Н.В., Скворцов А.К. Клональное микроразмножение Armeniace vulgaris // Биология культивируемых клеток и биотехнология. - Новосибирск, 1988. - С. 321-323.

68. Кузнецов М.Н. Об агроэкологических последствиях техногенного загрязнения // Достижения аграрной науки в решении экологических проблем Центральной России. Орел: ОГСХА, 1999. - С. 113-114.

69. Кульков О.П., Климкина Н.П. Использование культуры in vitro в садоводстве // Биотехнология в садоводстве и виноградарстве. Ташкент, 1988.-С. 57-67.

70. Курсаков Г.А. Отдаленная гибридизация плодовых растений // Всесоюзн. акад. с.-х. наук им. В.И. Ленина. М.: Агропромиздат, 1986. - 112 с.

71. Кухарчик Н.В. Адаптация в нестерильных условиях регенерантов косточковых культур, выращенных in vitro // Совершенствование сортимента и технологии возделывания косточковых культур. Орел: ВНИИСПК, 1998. -С. 114-116.

72. Кухарчик Н.В. Культура зародышей in vitro в селекции Cerasus на раннеспелость // Плодоводство. Минск, 1994 (1995). - Т. 9. - Ч. 1. - С. 56-63.

73. Левгерова Н.С., Джигадло М.И. Размножение стевии in vitro и технологические качества некоторых плодовоягодных культур припереработке с ней // Селекция и сорторазведение садовых культур. Орел: ВНИИСПК, 1998. - С. 259-266.

74. Лопачев Н.А., Наумкин В.П., Басов Ю.В. Тяжелые металлы в агросистемах // Достижения аграрной науки в решении экологических проблем Центральной России. Орел: ОГСХА, 1999. - С. 142-145.

75. Матушкина О.В. Особенности микроклонального размножения перспективных клоновых подвоев яблони на этапе пролиферации // Новые сорта и технологии возделывания плодовых и ягодных культур для садов интенсивного типа. Орел: ВНИИСПК, 2000. - С. 141-142.

76. Методические рекомендации по применению искусственной культуры тканей и органов в генетико-селекционных работах с плодовыми. -Мичуринск, 1987. 60 с.

77. Микроклональное размножение плодовых и ягодных культур: Методические указания к практическим занятиям по плодоводству // Моск. с.-х. академия им. К.А. Тимирязева. М., 1997. - 20 с.

78. Микроклональное размножение сортов и подвоев косточковых культур (Методические указания). М.: Агропромиздат, 1987. 20 с.

79. Михальчик Л.С., Деменко В.И. Размножение яблони и вишни методом in vitro // ТСХА. 1988. - № 14/66 - ВС - 89. - С. 649-657.

80. Михеев Д.М., Ревякина Н.Т. Косточковые культуры в средней полосе РСФСР. М.: Россельхозиздат, 1985. - С. 3-111.

81. Мотылева С.М., Соснина М.В. Накопление никеля некоторыми плодово-ягодными культурами // Селекция и сорторазведение садовых культур. -Орел: ВНИИСПК, 1996. С. 46-48.

82. Мотылева С.М., Соснина М.В. Накопление свинца плодами некоторых плодово-ягодных культур, выращиваемых во ВНИИСПК // Селекция и сорторазведение плодовых культур. Орел, 1998. - С. 267-275.

83. Мотылева С.М., Соснина М.В. Особенности накопления некоторых тяжелых металлов плодами вишни // Совершенствование сортимента и технологии возделывания косточковых к-р. 1998. - Орел: ВНИИСПК. - С. 152-153.

84. Мотылева С.М., Соснина М.В. Изменение химического состава атмосферных осадков, выпадающих на территории ВНИИСПК // Новые сорта и технологии возделывания плодовых и ягодных к-р для садов интенсивного типа. Орел: ВНИИСПК, 2000. - С. 35-38.

85. Муратова С.А., Фирсов А.П., Долгов С.В. Разработка методов регенерации и генетической трансформации сливы домашней // Молодые ученые садоводству Рссии. - М., 1995. - С. 30-32.

86. Оларь Г.М., Чернец A.M. Введение в культуру и микроразмножение сортов и подвоев абрикоса // Материалы научной конференции «Ускорение научно-технического прогресса в плодоводстве и виноградарстве и задачи молодых ученых». Алма-Ата, 1987. - С. 33-34.

87. Олешко Е.В. Особенности клонального микроразмножения подвоев и сортов вишни. Автореферат дисс. . канд.б.наук. М., 1985. 24 с.

88. Олешко Е.В. Особенности размножения вишни in vitro // Культура клеток растений и биотехнология. 1986. - С. 117-120.

89. Олешко Е.В., Трушечкин В.Г., Высоцкий В.А. Размножение клоновых подвоев вишни // Садоводство. 1983. - № 3. - С. 20-21.

90. Основы сельскохозяйственной биотехнологии. М.: Агропромиздат, 1990.-С.175.

91. Острейко С.А., Дроздовский Э.М. О генетической и фенотипической стабильности при культуре растений in vitro // Плодоовощное хозяйство. -1987.-№ 12.-С. 30-31.

92. Павловская Н.Е., Дегтярева С.И., Голышкин JI.B. Мониторинг состояния загрязнения тяжелыми металлами растительности Орловской области // Физиология растений — основа рационального землепользования. М., 1999. -С. 16-18.

93. Пересыпкин В.Ф. Сельскохозяйственная фитопатология. 4-е изд., перераб. и доп. - М.: Агропромиздат, 1989. - С. 389-401.

94. Перечень ПДК и ориентировочно допустимых количеств (ОДК) химических веществ в почве. -М., 1991. 20 с.

95. Плаксина Т.В. Культура изолированных зародышей как один из методов селекции вишни на Алтае // Адаптивный подход в земледелии, селекции и семеноводстве с.-х. культур в Сибири. Новосибирск, 1996. - С. 75-76.

96. Плаксина Т.В. Методы биотехнологии в селекции вишни на Алтае // Состоян. и пробл. садоводства России. Новосибирск, 1997. - Ч. 1. - С. 170172.

97. Подорожный В.Н. Производство оздоровленного посадочного материала алычи и клоновых подвоев косточковых плодовых культур с использованием биотехнологических методов. Автореферат дисс. . кснд.с/х.наук. -Краснодар, 1996. 22 с.

98. Полевой В.В. Физиология растений: учеб. для биол. спец. вузов. М.: Высш. шк, 1989. - С. 358-450.

99. Попеско И.Г. Влияние загрязнения свинцом на землянику // Плодоводство и ягодоводство России. М., 1997. - Том IV. - С. 186-192.

100. Попеско И.Г., Соловьев И.С., Привезенцев В.И. Фитотоксичность кадмия на землянике, черной смородине, вишне и влияние цеолизации почвы на ее снижение // Плодоводство и ягодоводство России. М., 1994. - С. 95-106.

101. Попов Ю.Г. Оздоровление и размножение плодовых и ягодных растений методом культуры меристематических верхушек (Методические указания). -М., 1979.-25 с.

102. Попов Стаменб, Корнова Кръстина Растежни и репродуктивни прояви на оливовия сорт Стенлей, произведен ин витро // Растени-евьд. науки.- 1995.Т. 32. № 5. - С. 247-249.

103. Попович Е.А., Филипеня B.JI. Влияние экзогенного цитокинина на жизнеспособность эксплантов голубики высокой in vitro // Физиология растений. -1997. Т.44. - № 1. - С. 104-107.

104. Приходько Ю.Н., Минин А.И., Солдаткин С.Ю. Культура изолированных зародышей сливы // Плодоводство в Нечерноземье. М., 1993. - С. 76-87.

105. Программа и методика селекции плодовых, ягодных и орехоплодных культур. Орел: ВНИИСПК, 1995. - С.120-124.

106. Радиолова Л.Д., Барабаш Т.Н. Микроклональное размножение вишни методом верхушечных меристем // Современные проблемы плодоводства. -Самохваловичи, 1995. С. 37-39.

107. Ружникова Т.Н., Зарубинская Л.Г., Колесникова Т.В. Аккумуляция свинца растениями, выращенными на почвах с различным его содержанием // Акад. АМН. М., 1987. - С. 34-39.

108. Свитайло A.M. Размножение in vitro сортов вишни Метеор и Норд Стар // Садоводство. 1989. - № 34. - С.57-58.

109. Смык А.В., Лукин С.В., Акулов П.Г. Нормирование содержания свинца, цинка и кадмия в черноземе типичном // Достижения аграрной науки в решении экологических проблем Центральной России. Орел: ОГСХА, 1999. - С. 225-226.

110. Степанюк Г.Я. Размножение тропических и субтропических растений in vitro в сибирском ботанич. Саду // Проблемы интродукции растений и отдаленной гибридизации. Москва, 1988. - С. 46-49.

111. Тканевые и клеточные культуры в селекции растений. М.: Колос, 1979. -176 с.

112. Трушечкин В.Г., Высоцкий В.А. Клональное микроразмножение плодовых и ягодных культур // Плодоовощное хозяйство. 1985. - № 1. - С. 43-46.

113. Трушечкин В.Г., Высоцкий В.А., Корнацкий С.А. Клональное микроразмножение косточковых культур в системе производства оздоровленного посадочного материала // Биология культивируемых клеток и биотехнология. Новосибирск, 1988. - С. 319-320.

114. Туровская Н.И., Стрыгина О.В. Формирование адвентивных почек на эксплантах малины // Сортоизучение и селекция плодовых и ягодных культур. Мичуринск, 1992. - С.82-84.

115. Тюленев В.М., Осипова Л.В., Расторгуев C.JL, Соловых Н.В. Применение биотехнологических методов в плодоводстве // Современные проблемы плодоводства. Самохваловичи, 1995. - С. 17-18.

116. Упадышев М.Т. Клональное микроразмножение некоторых нетрадиционных культур рода Rubus // Ягодоводство в Нечерноземье. М., 1993. - С. 10-18.

117. Упадышев М.Т. Оптимизация состава питательной среды на основании листовой диагностики // Плодоводство и ягодоводство России. М., 1994. - С. 65-71.

118. Упадышев М.Т. Проблемы оздоровления и размножения in vitro растений рябины обыкновенной // Плодоводство и ягодоводство России. М., 1994. -С. 72-77.

119. Упадышев М.Т. Клональное микроразмножение плодовых и ягодных культур на безагаровой питательной среде // Плодоводство и ягодоводство России. -М., 1997. -Т. IV. С. 69-74.

120. Упадышев М.Т., Медведев В.А. Адаптация пробирочных растений: новые подходы к решению проблемы // Вестник Российской академии с/х наук. -1993. № 3. - С.27-28.

121. Фрадзинова И.М. Питательная среда для микроклонального размножения косточковых культур: Пат. 2045891 Россия, МКИ 3/00 / Фардзинова И.М.; МПО Горное. № 50464 84/14; Заявл. 08.06.92; Опубл. 20.10.95., Бюлл. № 29.

122. Феник С.И., Трофимяк Т.Б., Блюм Я.Б. Получение CsCl-толераитных каллусных линий Nicotiana plumbaginifolia и характеристика их роста в присутствии бутионинсульфоксимина // Математика, естествознание, техн. науки. 1993. - №12. - С.148-151.

123. Фомина Е.Г., Жук Н.Г. Клональное микроразмножение районированных в Беларуси сортов Cerasus // Плодоводство. Минск, 1994. - Т.9. - 4.1. - С. 6474.

124. Фролова Л.В., Джигадло М.И., Джигадло Е.Н., Колесникова А.Ф. Микроклональное размножение вишни и сливы // Природные ресурсы -основа экономической стратегии Орловской области. Орел, 2002. - С. 246249.

125. Фролова Л.В., Колесникова А.Ф., Джигадло М.И., Джигадло Е.Н. Рост и развитие эксплантов вишни в зависимости от концентрации ионов ТМ на селективных средах. Липецк, 2002. - Т.П. - С. 202-204.

126. Хвостова И.В., Курочка Т.Н. Способ культвирования изолированных зародышей яблонии груши // Современные проблемы плодоводства. -Самохваловичи, 1995. С. 39-43.

127. Хрусталева М.А. Тяжелые металлы в окружающей среде. М.: МГУ, 1980. - С. 73-75.

128. Чеботарева М.С. Культура зародышей in vitro рода Cerasus Mill, в селекции на устойчивость к коккомикозу // Научно-техн. бюл. ВИР. 1990. -Вып. 204. - С. 26-30.

129. Чернец A.M. Получение безвирусных клонов косточковых пород. // ВНИИС им. И.В. Мичурина. Мичуринск, 1989. - С. 21-22.

130. Чернец A.M., Богуш Л.Ю. Инактивация илар-вирусов косточковых пород при повышенных температурах. // Ускорение научно-технического прогресса в плодоводстве и виноградарстве и задачи молодых ученых. Алма-Ата, 1987.-С.32-33.

131. Чернец A.M., Богуш Л.Ю., Стаканова Р.В. Термотерапия плодовых пород в культуре in vitro. // Проблемы интенсификации садоводства. Мичуринск, 1989. - С. 202-203.

132. Швагждис С., Антанайтис А. Тчжелые металлы в плодах в промышленном регионе Литвы. // Современные проблемы плодоводства. -Самохваловичи, 1995. С. 39-42.

133. Шелифост А.Е., Костышин С.С., Волков Р.А. Микроклональное размножение видов рода Prunus // Биотехнология. 1993. - № 5. - С.19-21.

134. Щеглов Н.И. Культура зародышей in vitro как метод селекции плодовых растений: Автореферат дис. . канд.биол.наук. -М., 1973. 20 с.

135. Эмбриокультура голоплодного персика (нектарина) in vitro с целью получения раносозревающих и ультраранних форм и сортов: Метод, рекомендации // Гос. Никит, бот. сад. М., 1993. - 42с.

136. Arena M.E, Caso O.H., Perelman P.E. Enraizamiento in vitro de los portainjentos de ciruelo Mariana GF8/1, Mirabolano В у San Julian GF655/2 // A.rgi Sciencia (Cordova). 1994.-11. - P.61-67.

137. Arce Tudance P., Lopez Corzana B. Effect of the use of drop (thidiazuron), of GA3 and of maltose in the in vitro multiplication of Capsicum annuum and Capsicum baccatum from cotyledons // Capsicum Eggplant Newsletter. -Turin, 1994. -№13. P.68-71.

138. Biotechnologische und physiologische Aspekte der pflanz-lichen Zeil- und Gewebekultur // Wiss. Ztshr. Humboldt-Univ. Berlin. R. Math.-Naturwiss. 1992. - Bd 41. - № 3. - P.3-127.

139. Block R. Massnahmen zur Verbesserung der in-vitro Kul-tivierbarkeit ausgewahlter Genotypen der Gaining Malus: Inaug. - Diss. - Bonn, 1993. — IV. -122 P.

140. Borcowska B. Moglichreiten der in vitro Vermehrung der Sauerkirshen -Erwerbsobstbau, 1984. - 26, 8: - P. 201-202.

141. Borkowska B. Micropropagation of sour cherry cultivar.-Schattenmorelle.-Fruit Sc. Rep. Skiernlewice, 1983.- 10, 2. P. 59-66.

142. Borkowska В., Litwinczuk W. Activity of thidiazuron in in vitro shoot cultures of Prunus sp. and Morus alba // Biol. Plantarum. 1993. - Vol.35.- № 1. -P. 63-67.

143. Broyer T.C., Sohnson C.N., Paull R.E. Same acpects of lead in plant nutrition soil. 1982. - № 36. - P. 301-303.

144. Brummer G.W. Heavy metals species, mobility and availability in soils, in: The inportance of Chemical Sheciation in Enviromental Process, bernhard M.,

145. Binckman F. Т., Sadler P.J., Eds., Dahlem Konferenzen, Springer Verlag, Berlin, Hedlberg. - 1986. - P. 169.

146. Burgos L., Ledbetter C.A. Improved efficiency in apricot breeding: effects of emryo development and nutrient media on in vitro germination and seedling establishment // Plant Cell Tissue Organ Cult. 1993. - Vol. 35. - № 3. - P.217-222.

147. Christopher Т., Raj am M.V. In vitro clonal propagation of Capsicum spp. // Plant Cell Tissue Organ Cult. 1994. - Vol.38. - № 1. - P.25-29.

148. Cossio F. Moltiplicarione «in vitro» di quattro cultival di ciliegio addo.-Frutticoltura, 1981. 43,10/11. - P. 19-24.

149. Druart Philippe. Plant regeneration from root callus of different prunus species. "Sci. hort" (Neth.), 1980. 12. - № 4. - P. 339-342.

150. Emershad R.L., Ramming D.W. Effects of media on embryo enlargement, germination and plant development in early-ripening genotypes of Prunus grown in vitro // Plant Cell Tissue Organ Cult. 1994. - Vol.37. - № 1. - P.55-59.

151. Franc P. The effect of auxins and their cofactors in vitro // Zahradnictvi. -1998.-R. 25.-S. 41-46.

152. Gamborg O.L., Eveleighd E. Culture methods and detection of glucanases in cultures of wheat and barley. Can. J. Biochem. 1968. - Vol.46.- № 5.-P. 417-421.

153. Gillissen LJ.W., Staveren MJ. Zinc resistant cell lines of Haplopappus gracilis // Plant. Physiol. - 1986. - 125. - P. 95-103.

154. Hammatt N. Promotion by phloroglucinol of adventitious root formation in micropropagated shoots of adult wild cherry (Prunus avium L.) // Plant Growth

155. Regulat. 1994. - VoU4. - Ж - Р.127-Ш.

156. Hammerschlag F.A., Bauchan G., Scorza R. Regeneration of peach plants from inmmature embryos // Theoret. and Applied Genetics. 1985. - V. 70. - №3. -P. 248-251.

157. Hanke V., Fischer M. Biotechnologie eine chance far die Obstzuchtung // Erwerbsobstbau. - 1994. - Bd 36. - № 2. - S. 32-36.

158. Henny R.J. In vitro germination of Maranta leuconeura embryos. Hort Science, 1980. 15. - № 2.-P. 198-199.

159. Hoshika E., Pasqual M., Chalron N.NJ. Efeito de diferentes concentracoes de acido indol butirico e agar sobre о enraizamento "in vitro" do porta enxerto de macieira "M7" // Cienc. Prat. 1992.- Vol.16. - № 3. - P.363-367.

160. Huetteman C.A., Preece J.E. Thidiazuron: a potent cytoki-nin for woody plant tissue culture // Plant Cell Tissue Organ Cult. 1993. - Vol.33. № 2. - P. 105-119.

161. James D. Micropropogation of red raspberry and the influence of phloroglucino // Sc. Hortic. 1980. - № 12. - P. 313-319.

162. Janeckova M., Mysliveckova J., Capkova D. Organogeneze vyhonku podnoze pro tresne z listovych disku in vitro // Zahradnictvi. 1995. - Vol.22. - № 1. - P.15-16.

163. Karsal I., Bedo Z., Kovacs G., Barnabas B. The effect of in vivo and in vitro aluminium treatment on anther culture response of triticale x wheat hybrids // J. Genet. Breedg. 1994. - Vol.48. - № 4. - P. 353-357.

164. Kataeva N.V., Popowich E.A. Maturation and Rejuvenation of Coriandrum sativum Shoot Ciones during Micropropagation // Plant Cell, Tis., Org. Culture. -1993.-Vol. 34.-P. 141-148.

165. Kelly A. Observation on the Role of Cytokinins in Micropropagation and Juvenility // Combined Proc. Int. Plant Propagators' Soc. 1989. - Vol.38.- P. 266269.

166. Kirby K. Biochem. 1975. - Vol. 66. - P. 495-497.

167. Messequer J., Mele E. In vitro Propagation of Adult Material and Seedlings of Corilus avellana L. // Acta Hort. 1987. Vol. 212. - P. 499-503.

168. Mezzetti B. Le biotechnologie applicate ane colture «in vitro» per il miglioramento genetico e la propagazione // Riv. Fruttic. Ortofloric. 1992. -Vol.54.-№ 1. - P.81-83.

169. Mokra A. Meristemova kultura a mikrorozmnozovanie egre-sov // Zahradnictvi. 1994. - Vol.21. - № 2. - P.83-92. - P. 91-92.

170. Monnier M. Croissance et development des embrions globulaires de capsella Bursa-pastoris cultivares in vitro dans un mineral // Bull. Soc. Bot. France, Mem., Coll. Morphol. 1973. - P. 179-194.

171. Murashige Т., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bio-assays with tobacco tissue cultures // Physiol. Plant. 1962. - Vol. 15. - № 95. - P. 473497.

172. Nemeth G. Induction of rooting // Biotechnology in Agriculture and Forestry., Vol. 1. Trees 1, chapter IV. Springer Verlag Berlin - Heidelberg, 1986. - P. 4964.

173. Noe N., Eccher T. Influence of irradiance on in vitro growth and proliferation of Vaccinium corymbosum (highbush blue-berry) and subsequent rooting in vivo // Physiol. Plantarum. 994. - Vol.91, iss.2. - P.273-275.

174. Norrish К. The geochemistry and mineralogy of tace elements, in: Trace Elements in Soil-Plant-Animal Sistem, Nicholas D.J.D., Egan F.R., Eds., Academic Press. New York. - 1975. - P. 55.

175. Paul L, Feucht W. Bewurzelung von Edelsorten uns Klonen von Sussund Sauerkirschen in vitro. Mitt. Klosterneuburg Rebe Wein Obstbau, Frucht.everwertung. 1985. - 35. 2. - 69-74.

176. Phenol induced browning and establishment of shoot-tip ex-plants of "Fuji" appe and "Jinhua" pear cultured in vitro / Qiaochun Wang, Haoro Tang, Yin Quan, Guangrong Zhou // J. hortic. Sci. 1994. - Vol.69. - № 5.- P.833-839.

177. Poniedziaiek W., Malodovry M., Lech W. Rozmnazanie wisni odrniany Kelleres 16 (Morellenfeuer) w kulturach sterylnych. Ogrod-nictwo Krakow, -1987. 16.-P. 231-238.

178. Quoirin M., Lepoivre P. Groupe de Travailypour 1 etude du Cerisier et de la Qualite des Fruits. // Symposium on tissue culture for horticultural porposes. Ghent, Belgium, 1977. P. 437-442.

179. Ruzic D. In vitro rooting and subsequent growth of black chokeberry Aronia melanocarpa) plants ex vitro. J. Fruit and ornamental plant research. Skierniewice, Poland.-1993.-№l.-C.l-8.

180. Ruzic Durdina Effect of paclobutrazol on in vitro rootin of sour cherri cv. Sumadinka (Prunis cerasus L.). Journal of fruit and ornamental plant research. Skierniewice. Poland. 1996. - № 1. - C.l 1-20.

181. Satoh Tokao Hokkaido ringyo shikenjo kenkyu hokoku // Bull. Hokkaido Torest. Res. Inst.- 1994. № 31. - P. 77-86.

182. Sciutti R., Morini S. Water loss and photosynthesis of plum plantlets is influenced by relative humidity during rooting in vitro // J. hortic. Sci. 1995. -Vol.70.-№ 2.-P.221-228.

183. Sciutti R., Morini S.Effect of relative humidity in in vitro culture on same growth characteristics of a plum rootstocks during shoot proliferation and rooting and on plantles survival // Advances in Horfc. Sci. 1993. - 7. - № 4. - P. 153-156.

184. Sissoef J., Crisvard J., Guille E. C. r. Acad. Sci. 1975. - Vol. D280. - P. 2389.

185. Svircev A.M., Biggs A.R., Miles N.W. Peach regeneration from callus derived from embryos of selected cultivars // Fruit Varieties J. 1993. - Vol.47. -№1.-P.13-18.

186. Theiler-Hedtrich C., Theiler-Hedtrich R. Influence of TDZ and BA on Adventitions Shoot Regeneration from Apple Leaves // Acta Hort. 1990. -Vol.280.-P. 195-199.

187. Tiffin L.O. The form and distribution of metals in plants: and of Energy, Symposium Series, Washington, D.C. 1977. - P. 315/

188. Tukey H.B. Artifical culture of sweet cherry embryos // J. Heredity. 1933. -Vol. 24.-№1.-P. 7-12.

189. Tyler G. Leaching rates of heavy metal ions in forest soil // Water, Air, Soil Pollut.,- 1978.-T. 9.-P. 137.

190. Vasar V. IBA control end rooting of sour cherry (Prunus cerasus) micropropagated shoots // Siuolaikines sodininkystes pasielcimai ir pletros Kryptys. -Babtai, 1997. - S. 48-53.

191. Villegas A., Mazuelos C., Cantos M., Troncoso A. Influencia del nitrogeno sobre el desarrollo in vitro del por-tainjerto de vid 161-49 // Suelo Planta. 1992. Vol.2. № 4. - P.529-539.

192. Ying-Jin Yuan, Tsung-Ting Hu, Yu-Min Yang. Effects of auxins and cytokinins on formation of Catharanthus roseus G. Don multiple shoots // Plant Cell Tissue Organ Cult. 1994. - Vol.37, - № 2. - P. 193-196.

193. Zhong Z., Smith H.G., Thomas Т.Н. In vitro culture of petioles and intaciteaves orsugar beet (Beta vulgans) // Plant Growth Regulat. 1993. - Vol.12, № 1/2. - P.59-66.

194. Zimmerman R.H. Tissue culture of fruit trees and other fruit plants // Comb. Proc. / Int. Plant Propagators Soc. 1978. - Vol. 28. - P. 539-546.