Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Оптимизация биотехнологии получения минорных моносахаридов и разработка лечебно-профилактических препаратов на их основе

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Денисова, Евгения Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

1. АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ ВОПРОСА 8 1Л. Распространение и значение минорных моносахаридов

1.2. Полисахариды как резервы энергии

1.3. Растительные полисахариды

1.3.1. Водоросли, как биотехнологическое сырье

1.3.1.1. Углеводы водорослей

1.3.1.2. Водоросли в медицине

1.3.1.3. Фукоидан водорослей рода Fucus

1.3.2. Камеденосные виды

1.4. Внеклеточные полисахариды микроорганизмов

2. ОРГАНИЗАЦИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТОВ

И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Организация работы и методы планирования эксперимента

2.2. Выделение фукоидана

2.3. Определение содержания глюкозы

2.4. Определение содержания белка

2.5. Определение сорбционной емкости

2.6. Определение величины десорбции

2.7. Идентификация L-фукозы 42 2.7.1. Химическое строение углеводной части

2.8. Газохроматографическое определение углеводов

3. ПОЛУЧЕНИЕ ФУКОЗЫ ИЗ РАСТИТЕЛЬНЫХ ОБЪЕКТОВ

3.1. Оптимизация условий экстрагирования фукоидана

3.2. Оптимизация условий гидролиза фукоидана

4. ПОЛУЧЕНИЕ ГАЛАКТОЗЫ 54 4.1. Оптимизация условий кислотного гидролиза лактозы 54 4.1.1. Объекты и методы исследований

4.1.2. Требования к качеству исходного сырья для гидролиза лактозы в творожной сыворотке

4.1.3. Исследование процесса кислотного гидролиза лактозы творожной сыворотки

4.2. Оптимизация условий ферментативного гидролиза лактозы

4.2.1. Требования к качеству исходного сырья

4.2.2. Исследование процесса осветления творожной сыворотки природными адсорбентами

4.2.3. Исследование процесса гидролиза лактозы иммобилизованной (З-галактозидазой

5. ПОЛУЧЕНИЕ ФУКОЗЫ СОВМЕЩЕННЫМ

ОРГАНИЧЕСКИМ СИНТЕЗОМ

5.1. Биотрансформация глюкозо-галактозного сиропа

5.2. Биотрансформация О-галактозы

6. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ФУКОЗНОГО СИРОПА В

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ

6.1. Получение углеводного биокорректора «Казецелл»

6.1.1. Требования к исходному сырью

6.1.2. Схема получения углеводного биокорректора «Казецелл»

6.2. Получение антибактериального ранозаживляющего средства «Фумагол»

Введение Диссертация по биологии, на тему "Оптимизация биотехнологии получения минорных моносахаридов и разработка лечебно-профилактических препаратов на их основе"

Актуальность темы. В условиях современной экологической ситуации и эмоционального напряжения в обществе происходит ослабление иммунной системы, нарушение обмена веществ и снижение естественной резистентности организма человека. Это приводит к росту заболеваний. Важным условием поддержания здоровья, работоспособности и долголетия человека является полноценное и регулярное снабжение организма всеми необходимыми компонентами: липидами, белками, углеводами и микроэлементами.

Социально-экономическое положение большинства населения привело к значительному сокращению ассортимента потребляемых продуктов [74]. Удаление «балластных» веществ с использованием современных технологий переработки приводит в ряде случаев к потере минорных компонентов. Если липиды поступают в организм человека в достаточном количестве, проблемы белкового питания также решаются с использованием генной инженерии, то однообразный углеводный состав (исключительно глюкоза, реже фруктоза), не обеспечивает снабжение организма минорными моносахаридами, в частности фукозой, маннозой, галактозой.

Ранее проводились систематические исследования углеводных компонентов биополимеров (Барашков Г.К., 1972; Берман C.JL, 1963; Видершайн Г.Я., 1976; Степаненко Б.Н., 1978). Но научные данные по биохимии и биотехнологии получения и переработки углеводсодержащих биополимеров в большей части устарели. Кроме того, современный уровень аналитической и биотехнологической техники позволяет полнее изучить этот вопрос и провести аналитические исследования по изысканию объектов, содержащих минорные моносахариды, и методам получения углеводов.

Таким образом, оптимизация биотехнологий получения и использования минорных моносахаридов является необходимым в современных условиях, что позволит расширить использование биологически активных веществ в медицинской, косметической, пищевой промышленности, создать экономичное производство минорных моносахаридов.

Работа выполнялась по координационному плану Министерства образования РФ в рамках Грантов «Исследования в области разработки методов получения перспективных биосорбентов с регулируемыми свойствами» и «Разработка биотехнологии продуктов для геродиетического питания».

Цель и задачи исследований. Цель данной работы - оптимизация биотехнологии получения минорных моносахаридов, разработка пищевых добавок на их основе для коррекции нарушений углеводного обмена. Поставленная цель достигается решением следующих задач:

- Оценить влияние природы экстрагентов на степень извлечения фукоидана.

- Разработать технологическую схему и оптимизировать параметры экстракции и гидролиза фукоидана.

- Изучить технологические возможности кислотного и ферментативного гидролиза лактозы сыворотки на примере молочной кислоты и иммобилизованных ферментных препаратов отечественного производства «Галактосил» и фирмы «Валио» (Финляндия).

- Разработать технологическую схему иммобилизации фукозного сиропа на белковые лиганды и полисахаридные носители.

- Разработать технологические аспекты конструирования углеводного биокорректора на основе фукозного сиропа и животных белков, иммобилизованных на природных полисахаридах.

Научная новизна. Исследовано влияние природы экстрагентов, рН на получение препарата фукозы. На основании экспериментальных данных и анализа математических моделей определены области оптимальных значений параметров технологических процессов производства фукозы.

Предложен новый способ получения фукозы методами совмещенного органического синтеза, который позволяет сократить продолжительность процесса получения, оптимизировать технологическую схему, снизить затраты на производство.

Предложена и экспериментально испытана рациональная технология получения пищевой добавки на основе фукозного сиропа. Доказана целесообразность использования фукозы в качестве биологически активного нутриента.

Экспериментально установлен стимулирующий эффект углеводной добавки на микрофлору. Доказана целесообразность использования в питательных средах фукозного сиропа.

Практическая ценность. Предложены способы получения гидролизата фукоидана, фукозы, разработана биологически активная пищевая добавка «Казецелл».

Фукозный сироп получил положительное заключение Ставропольского научно-исследовательского противочумного института при испытании питательных сред. Пищевая добавка «Казецелл» прошла испытания в Научно-образовательном Центре «Технологии живых систем» Ставропольского государственного университета.

Разработан и утвержден пакет нормативно - технической документации на пищевую добавку «Казецелл» (ТУ 9229-007-02080718-02) и фукозный сироп (ТУ 9325-008-02080718-02), заявки на выдачу патентов «Способ получения биосорбентов» (положительное решение №2002105544 от 7 марта 2002 г) и «Способ получения антибактериального ранозаживляющего средства «Фумагол» (положительное решение №2002105543 от 7 марта 2002 г).

В рамках I Международного салона инвестиций и инноваций проведена экспертиза и получены золотая медаль и диплом первой степени.

Апробация работы. Основные положения и результаты исследований доложены и обсуждены на Всероссийских конференциях «Биотехнология XXI века» (Ставрополь, 1999), «Катализ в биотехнологии, химии и химических технологиях» (Тверь, 2000), Международных конференциях «Успехи в химии и химической технологии» (Москва, 1999), «Новые информационные технологии в медицине и экологии» (Гурзуф, 2000), «Химическое образование и развитие общества» (Москва, 2000), «Экологическая безопасность и устойчивое развитие» (Москва, 2001), Международном семинаре-презентации «Биотехнологии-2000» (Пущино, 2000), I и II Международных салонах инвестиций и инноваций (Москва, ВВЦ, 2001,2002).

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, 6 глав, выводов, списка литературы, включающего 210 наименования, в том числе 78 зарубежных авторов, приложений. Основное содержание работы изложено на 142 страницах машинописного текста. Содержит 18 таблиц и 47 рисунка.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Денисова, Евгения Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Оптимизирована методика экстракции фукоидана: при концентрации соляной кислоты 0,1-0,15 моль/л выход целевого продукта составляет 2+2,2%; хлорида кальция 2 % по массе - выход составляет 5+5,2%. Применение фосфатных и карбонатных систем позволяет получить фукоидан с выходом 7+9% от массы водоросли (при остаточной влажности сырья - 5%).

2. Показано, что при гидролизе препарата фукоидана оптимальная концентрация соляной кислоты 2 моль/л. Хроматографический анализ полученного фукозного сиропа через 6 часов гидролиза и при дополнительной очистке подтверждает получение препарата с содержанием фукозы 99,3 %.

3. Установлено, что при кислотном гидролизе лактозы молочной кислотой оптимальной является температура 90+95°С; концентрация кислоты 2+8 % (по массе); продолжительность процесса гидролиза: 7+8 часов без бентонита и 15+16 часов при введении 2-5% бентонита.

4. Установлены технологические параметры процесса осветления сыворотки бентонитом: продолжительность процесса осветления 10-И 5 мин при соотношении бентонит : сыворотка 1+5.

5. Определены оптимальные технологические параметры ферментативного процесса гидролиза лактозы: температура 42+50°С, концентрация фермента 2+5%, концентрация субстрата 4+20%; установлено, что при этих режимах отечественный ферментный препарат «Галактосил» обеспечивает в 1,5+3 раза большую скорость гидролиза по сравнению с аналогичным препаратом фирмы «Валио» (Финляндия).

6. Оптимизирован метод получения препаратов Ь- и Б-фукозы на основе Э-галактозы, полученной из глюкозо-галактозного сиропа.

121

Хроматографический анализ подтверждает получение препаратов с содержанием фукозы 99,9%.

7. Впервые разработан углеводный биокорректор на основе фукозного сиропа и животных белков, иммобилизованных на природных полисахаридах. Оптимизация биотехнологии биокорректора заключалась в модификации сорбционной поверхности неорганическим газообразователем, в результате которой удалось увеличить сорбционную емкость препарата в 2,8^-3,2 раза.

8. Определена безопасность и эффективность препарата «Казецелл» в условиях подострого эксперимента при 3-х недельном внутриже луд очном введении препарата у крыс в дозе 5 г/кг; токсичного действия и гибели животных не обнаружено.

9. Разработан и утвержден пакет нормативно - технической документации на пищевую добавку «Казецелл» (ТУ 9229-00702080718-02) и фукозный сироп (ТУ 9325-008-02080718-02).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Недостаток минорных моносахаридов в продуктах питания современного уровня очистки с одной стороны и нарушение обмена веществ в организме человека с другой стороны обусловливает необходимость проведения оптимизации получения минорных моносахаридов и введения их в функциональное питание и лечебно-профилактические средства.

Нами проведена систематизация данных о содержании минорных моносахаридов в растительных и животных объектах. Так как в свободном виде этот класс углеводов не встречается, в объектах животного происхождения они связаны с белками и липидами, то целесообразно получать минорные сахара из растительных объектов, в частности бурых водорослей рода Fucus, либо при переработке побочных продуктов молочного производства.

Была впервые разработана методика экстракции фукоидана системами неорганических экстрагентов. Технологический процесс включал экстрагирование фукоидана, очистку фугата от сопутствующих веществ, фильтрацию экстракта, осаждение полисахарида и сушку.

Исследованы условия экстрагирования: природа экстрагента и рН. Экстракция проводилась при атмосферном давлении и температуре 70+80°С в трехкратной последовательности, продолжительность каждой экстракции 3 ч. Осаждение проводилось 96% этанолом, сушка осуществлялась под вакуумом. Эффективность процесса оценивали по выходу сухих веществ.

Предварительными исследованиями установлено, что выход фукоидана зависит от количества введенной в экстрагирующую среду кислоты для обеспечения необходимого рН. При анализе эффективности большинства исследованных режимов обработки фукуса выявлено, что количество экстрагированных сухих веществ увеличивается при увеличении рН экстрагента. Однако существует предельное значение рН, когда при увеличении рН выход сухих веществ начинает снижаться вследствие химической деструкции первичной структуры полисахарида.

Для установления возможности увеличения выхода фукоидана из фукуса интервал дозировок кислоты в экстрагирующую среду был расширен. Увеличение количества кислоты в экстрагирующей среде способствует увеличению выхода полисахарида. Однако дальнейшее повышение концентрации экстрагента в исследуемом интервале значений отрицательно сказывается на выходе сухих веществ. Тем не менее, очевидна возможность варьирования систем экстрагентов, существенно увеличивающих выход сухих продуктов.

Удалось значительно увеличить выход полисахарида, исключая химическую деструкцию. Данный вид извлечения позволяет провести комплексную переработку шрота водоросли с использованием фракций в медицине, пищевой и фармацевтической промышленности.

Оптимизирован процесс гидролиза фукоидана. В кислотных гидролизатах выделенных полисахаридных препаратов определен моносахаридный состав методом тонкослойной хроматографии на пластинах «Силуфол». Проявленные фракции имели соответствующую окраску и определенный для данного углевода В гидролизате фукоидана выявлено только одно пятно, соответствующее Ь-фукозе.

Полученный фукозный сироп целесообразно использовать в качестве добавки в питательные среды для культивирования молочнокислых микроорганизмов, а также в функциональном питании.

На следующем этапе проведена биотрансформация лактозы в Ь-фукозу. Для этого оптимизированы кислотный и ферментативный методы гидролиза лактозы для получения глюкозо-галактозного сиропа с последующим превращением Б-галактозы в Ь-фукозу.

Кислотный метод, используемый для гидролиза лактозы, прост и не требует использования дорогостоящего ферментативного препарата. Он характеризуется жесткими условиями: низкими значениями рН (1-2) и высокой температурой (80-И50°С). Кислотный гидролиз проводят либо в растворе, содержащем свободную кислоту, либо с использованием кислой катионообменной смолы. Перед проведением гидролиза из сыворотки удаляют белок и проводят деминерализацию. Но этот тип гидролиза характеризуется возникновением побочных продуктов (олигосахаридов).

Для удаления из гидролизованной сыворотки продуктов разложения Сахаров можно использовать доступные недорогие природные адсорбенты, разрешенные к употреблению в пищевой промышленности, например, бентонит.

С увеличением продолжительности гидролиза творожной сыворотки более 8 часов степень гидролиза лактозы продолжает возрастать. Однако накопление в гидролизованной сыворотке продуктов деструкции Сахаров, ее цвет и запах делают дальнейшее увеличение продолжительности гидролиза нецелесообразным

Для количественной оценки степени потемнения сыворотки в процессе гидролиза на анализаторе живых систем ВТБ-ЗЮ измеряли оптическую плотность гидролизованной сыворотки.

С увеличением продолжительности гидролиза оптическая плотность сыворотки существенно возрастает. Однако в присутствии бентонита при одинаковой продолжительности гидролиза оптическая плотность исследуемого продукта меньше, что и позволяет увеличить время гидролиза при примерно одинаковой степени потемнения продукта.

Изучено влияние различных технологических параметров: силы кислоты, продолжительности гидролиза, присутствия адсорбента на процесс кислотного гидролиза лактозы творожной сыворотки в аппарате периодического действия с механическим перемешиванием.

Установлены оптимальные технологические режимы процесса гидролиза: температура, продолжительность, концентрация молочной кислоты.

Получены данные по аномерному составу Сахаров молочной сыворотки в процессе кислотного гидролиза лактозы в присутствии молочной кислоты и адсорбента - бентонита. Установлено влияние бентонита на степень гидролиза лактозы сыворотки.

Для гидролиза лактозы иммобилизованной [З-галактозидазой использовались отечественный препарат марки Галактосил и финский с носителем на основе фенолформальдегидной смолы. Оба этих фермента могут длительно устойчиво работать только при практически полном удалении белка из субстрата сыворотки. Поскольку белок сыворотки адсорбируется на зернах носителя фермента и блокирует перемещение в порах зерен субстрата и продуктов реакции гидролиза.

Нами для очистки творожной сыворотки от белка были использованы природные адсорбенты бентонит и цеолит. С увеличением длительности процесса осветления и концентрации адсорбента в смеси содержание белка в сыворотке и мутность осветленной сыворотки резко уменьшаются. При внесении бентонита в творожную сыворотку помимо связывания белка наблюдается в результате ионного обмена сыворотки и адсорбента заметное снижение титруемой кислотности сыворотки.

Гидролиз проводили на термостатируемой лабораторной установке периодического действия. Осуществляли вибрационное перемешивание смеси. Определяли содержание глюкозы, образовавшейся в результате гидролиза лактозы в зависимости от концентрации фермента и температуры гидролиза. В результате проведенных исследований изучено влияние различных технологических параметров: температуры, продолжительности процесса, концентрации фермента и субстрата, вида фермента на процесс ферментативного гидролиза лактозы творожной сыворотки и растворов

119 лактозы иммобилизованной (3-галактозидазой в аппарате с псевдоожиженным слоем фермента.

Определены технологические режимы процесса осветления творожной сыворотки бентонитом. Установлены продолжительность процесса осветления, зависимость содержания остаточного белка в осветленной сыворотке от количества, внесенного в сыворотку бентонита.

Была поставлена задача оптимизировать процесс получения фукозы из галактозы. В результате удалось достигнуть сокращения числа стадий получения фукозы, упрощения процесса, использования более дешевых реагентов и хорошего выхода.

На основе полученных препаратов впервые разработана пищевая добавка «Казецелл» из микрокристаллической целлюлозы с нанесенными фракциями молочного белка - казеина и фукозного сиропа.

Проведена физическая сорбция казеина и гидролизата фукоидана на микрокристаллической целлюлозе. Модификация проведена неорганическим газообразователем для увеличения сорбирующей поверхности без химического преобразования материала. Сорбирующая емкость существенно увеличилась.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Денисова, Евгения Владимировна, Ставрополь

1. Амина Н.М. Новый подход к получению лечебно-профилактической продукции // Эколого-гигиенические проблемы питания населения: Материалы республиканской научной конференции. -Киев: Наукова думка, 1992.-С. 143.

2. Ананьев Е.П., Яскович Г.А., Елькин Г.Э. Ферменты микроорганизмов и деградация биополимеров. -М.: ВНИИСЭНТИб, 1990. С.85-93.

3. Артяева И.В., Денисова Е.В. Углеводный биокорректор // В сб. «Проблемы развития биологии и химии на Северном Кавказе». Материалы научной конференции посвященной 70-ти летию БХФ 3-24 апреля 2001 г. Ставрополь, 2001. С.6-7.

4. Афанасьев В.А., Занков Т.Е. Углеводы сырье, энергия, пища, жизнь. -М.: Знание, 1981.-64 с.

5. Бабаев Т.А. Химическая природа биологического действия гликопротеинов. -Ташкент, 1988. 154 с.

6. Барашков Т.К. Сравнительная биохимия водорослей. М.: Пищевая промышленность, 1972. - 336 с.

7. Барашков Г.К. Химия водорослей. -М.: Изд-во АН СССР, 1963. 143 с.

8. Басс-Шадхан Х.Ф. Использование полисахаридов при злокачественных новообразованиях // Результаты и перспективы научных исследований микробных полисахаридов. Тезисы докладов Всесоюзной научной конференции. -Л., 1978. С.33-34.

9. Басс-Шадхан Х.Ф., Зейдака A.A. Изучение взаимосвязи химической структуры и биологической активности полисахаридов дрожжевой оболочки // Тезисы докладов VI Всесоюзной конференции по химии и биохимии углеводов. -М.: Наука, 1977. С. 23.

10. Безбородков А.М. Биотехнология продуктов микробного синтеза (ферментативный катализ, как альтернатива органическому синтезу). —М.: Агропромиздат, 1991.-С. 51-70.

11. Бейер Е.М., Видершайн Г.Я. Фукоизидазы человека и животных // Успехи биологической химии, 1982, Т.23. С. 102

12. Бейли Дж., Оллис Д. Основы биохимической инженерии. -М.: Мир, 1989. Tl.-206 с.

13. Берман С. JI. Углеводы молока. -М.: Труды ВМИ, 1963, вып. 48. -С.25-47.

14. Биологически активные вещества гидробионтов новый источник лекарств. -Кишинев: Штиинца, 1979. - С. 102-124.

15. Биомембраны: структура, функции, методы исследования. / М.Е. Бекер, Г.Я. Дубур. -Рига: Зинатне, 1977. 284 с.

16. Биосинтетические и физиологические свойства микроорганизмов. -Рига: Зинатне, 1975.

17. Биотехнология микробных ферментов. -Минск, 1989. -340 с.

18. Биотехнология: принципы и применение. / И. Хиггинс, Д. Бест, Дж. Джонс. -М.: Мир, 1988. 510 с.

19. Бочков А.Ф., Афанасьев В.А., Заиков Г.Е. Углеводы. М.: Наука, 1980. - 238с.

20. Бробст K.M. Методы исследования углеводов. -М.: Мир, 1975. 348 с.

21. Булдаков A.A. Пищевые добавки. Справочник. -СПб: «Ut», 1996. 240 с.

22. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика: практический курс. -М.: Гранд, 1999.-715 с.

23. Варфоломеев С.Д., Калюжный С.В. Биотехнология. Кинетические основы микробиологических процессов. -М.: Высшая школа, 1990. 304 с.

24. Векслер И.Г. Биологически активные полисахариды, как неспецифические стимуляторы резистентности организма // Микробиология, эпидемиология и клиника инфекционных болезней, 1981, Т.З, №4. С.27-28.

25. Ветров Ю.В., Дмитроченко А.П., Браудо Е.Е. Тез. Всесоюз. конф. «Химия пищевых веществ. Свойства и использование биополимеров в пищевых продуктах». Могилев, 1990. - С.220.

26. Вишняков С.И. Межклеточный обмен в организме животных. —М.: Высшая школа, 1988. -237 с.

27. Видершайн Т.Я. Биохимические основы гликозидозов. -М.: Наука, 1980.

28. Видершайн Г.Я. Углеводсодержащие соединения, их биосинтез и роль в животной клетке // Молекулярная биология, 1976, Т. 10, Вып.5. С.957-980.

29. Виестур У.Э., Шмите И.А., Жилевич A.B. Биотехнология. -Рига: Зинатне, 1987.-456 с.

30. Волкова О.В., Луцик А.Д., Детюк Е.С. Углеводные детерминанты органов репродуктивной системы мыши по данным использования лектинов различной специфичности // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии, 1987, Т.92, №1. С.62-69.

31. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений. Новосибирск: Наука, 1990. - 340 с.

32. Гланц С. Медико-биологическая статистика. -М.: Практика, 1999. 500 с.

33. Гликозилированные протеины. -Новосибирск: Наука, 1989. -264 с.

34. Гулый М.Ф., Ремесло В.Н. О биологическом значении постоянного обновления составных компонентов живых организмов. -Киев: Наукова думка, 1979.- 191 с.

35. Турин И.С., Ажгихин И.С. Биологически активные вещества гидробионтов источник новых лекарств и препаратов. -М.: Наука, 1981. -136 с.

36. Даффус К., Даффус Дж. Углеводный обмен растений. -М.: Наука, 1987. -237с.

37. Денисова Е.В. Фукоза в метаболизме человека // Тезисы Международной конференции «Химическое образование и развитие общества», 11-13 октября 2000, Москва. Секция «Химическое образование и продовольственная проблема». Россия, Москва, 2000. - С.55.

38. Денисова Е.В., Кунижев С.М., Боровлев И.В., Аксенов A.B. Схема превращения D-галактозы в L-фукозу // Успехи в химии и химической технологии. Выпуск XIII: Тезисы докладов. Часть 1/РХТУ им. Д.И.Менделеева. - М.: РХТУ, 1999. - С.80-81.

39. Држевецкая И.А. Основы физиологии обмена веществ и эндокринной системы. -М.: Высшая школа, 1994. 256 с.

40. Жданов Ю.А., Алексеев Ю.Е. Межфазный катализ новый этап углеводного синтеза // ЖВХО им. Д.И.Менделеева, 1986, Т.31, №2.

41. Жданов Ю.А., Дорофеенко Г.Н. Химические превращения углеродного скелета углеводов. -М.: ВШ, 1962.

42. Жильцов Н.З., Ажгихин И.С., Гандель В.Г. Морские организмы как источник биологически активных веществ // Фармация, 1978, №2. С.74-79.

43. Зайцев В.П., Ажгихин И.С., Гандель В.Г. Комплексное использование морских организмов. -М.: Пищевая промышленность. 1980. 238 с.

44. Закенфельд Г.К. Иммунологический механизм действия полисахаридов дрожжевых клеток. -Рига: Зинатне, 1990. 152 с.

45. Захарова И.Я. Углеводсодержащие биополимеры мембран бактерий. -Киев: Наука, 1983.-318 с.

46. Захарова И .Я., Косенко JI.B. Методы изучения микробных полисахаридов. -Киев: Наука, 1982. 276 с.

47. Заявка 2002105543 (РФ) Способ получения антибактериального ранозаживляющего средства «Фумагол» / Кунижев С.М., Аполохова С.Ф., Тимошова И.В., Денисова Е.В. Положительное решение от 7 марта 2002. 7 с.

48. Заявка 2002105544 (РФ) Способ получения / Кунижев С.М., Серов A.B., Денисова Е.В., Аполохова С.Ф., Воробьева О.В., Анисенко О.В. Положительное решение от 7 марта 2002. 7 с.

49. Зимина JI.C., Подкорытова A.B., Юденко Г.С. Химический состав отходов альгинатного производства // Исследования по технологии рыб, беспозвоночных и водорослей Дальневосточных морей. -Владивосток: ТИНРО, 1982. С.107-114.

50. Блинов Н.П. Химия микробных полисахаридов. -М.: Высшая школа, 1984. 148 с.

51. Блинов Н.П. Химическая микробиология. -М.: Мир, 1989. 361 с.

52. Иммуноглобулины. /Г.Литмен, Р.Гуд. -М.: Мир, 1981. 328 с.

53. Исследования по изысканию лекарственных средств природного происхождения. Тез.докл. Всесоюзной научной конференции. -Л., 1981. — 163 с.

54. Казьмин В.Д. Морские водоросли. -М.: Пищевая промышленность, 1972. 133 с.

55. Камнев А.Н. Структура и функции бурых водорослей. -М.: Изд-во МГУ, 1989.-200 с.

56. Кизеветтер И.В. Биохимия сырья водного происхождения. -М.: Пищевая промышленность, 1973. 424 с.

57. Кизеветтер И.В. Исследование биологических ресурсов Мирового океана. -М.: Пищевая промышленность, 1980. 220 с.

58. Кизеветтер И.В., Грюнер В.О., Евтушенко В.А. Переработка морских водорослей и других промысловых водных растений. -М.: Пищевая промышленность, 1967. 340 с.

59. Кизеветтер И.В., Суховеева М.В., Шмелькова Л.П. Промысловые морские водоросли и травы дальневосточных морей. -М.: Легкая и пищевая промышленность, 1981.

60. Коннова С.А., Скворцов И.М., Макарова O.E., Игнатов В.В. Свойства полисахаридных комплексов, продуцируемых Azospirillum brasilense, и получаемых из них полисахаридов // Микробиология, 1994, Т.63, Вып.6. -С.1020-1030.

61. Конышев В.А. Питание и регулирующие системы организма. -М.: Медицина, 1985. 222 с.

62. Коршак В.В., Штильман М.И. Полимеры в процессах иммобилизации и модификации природных соединений. -М.: Наука, 1984. 264 с.

63. Кочетков Н.К., Свиридов А.Ф., Ермоленко М.С., Миунский Д.В., Чижов О.С. Углеводы в синтезе природных соединений. -М.: Наука, 1984. 288 с.

64. Красильникова Е.А., Николаев В.Г. Углеводы и углеводный обмен. -Казань: КХТИ, 1984. 200 с.

65. Кунижев С.М., Аполохова С.Ф. Информационный листок «Антибактериальное ранозаживляющее средство «Фумагол». -Ставрополь: Изд-во СГУ, 2002. 2 с.

66. Кунижев С.М., Денисова Е.В. Информационный листок «Биофильтры нового поколения». -Ставрополь: Изд-во СГУ, 2001. 2 с.

67. Кунижев С.М., Денисова E.B. Информационный листок «Способ получения пищевой добавки «Казецелл». Ставрополь: Изд-во СГУ, 2002. - 2с.

68. Кунижев С.М., Денисова Е.В. Фукоза: состав, свойства, способы получения и применение // Всероссийская электронная конференция «Биотехнология XXI века», 21-22 сентября 1999 г, Ставрополь. Секция 5. Пищевая биотехнология, http://www.stavsu.ru

69. Кунижев С.М., Денисова Е.В., Анисенко О.В. Информационный листок «Продукты комплексной переработки бурой водоросли Fucus vesiculosus и их использование» -Ставрополь: Изд-во СГУ, 2002. 2 с.

70. Кунижев С.М., Ермолова JI.C., Серов A.B., Денисова Е.В. Синтез D-фукозы на основе продуктов энзиматического гидролиза лактозы // VIII

71. Международная конференция и дискуссионный научный клуб «Новые информационные технологии в медицине и экологии», Крым, Гурзуф, 110 июня 2000 г. Секция А. Экспериментальная биология и клиническая медицина в третьем тысячелетии. Гурзуф, 2000. - С.41-42.

72. Латов В.К., Бабаян Т.Л., Гордиенко C.B. Комплексная переработка дрожжевой биомассы // Биотехнология, 1990, №3. С. 14-18.

73. Лукнер М. Вторичный метаболизм у микроорганизмов, растений и животных. -М.: Мир, 1979. С. 128-129.

74. Любченко П.Н. Клиническая лабораторная диагностика. 1994. С.6-7.

75. Максимов В.И. Углеводные стимуляторы бифидобактерий // Биотехнология, 1991, №6. С.3-7.

76. Медведовская И.И., Тихомирова C.B., Красавина Т.Д., Губкина Л.Н. Сравнение результатов хроматографической идентификации сложных смесей органических соединений // Вестник Омского университета, 1997, Вып. 4. -С.34-36.

77. Методы оптимизации технологии пищевых производств: технологические процессы пищевой промышленности. -Кишинев: Штиинца, 1977.-224 с.

78. Методы физиолого-биохимического исследования водорослей в гидробиологической практике. АН СССР, Институт гидробиологии. -Киев: Наукова думка, 1975. 212 с.

79. Микробная конверсия: Фундаментальные и прикладные аспекты. -Рига: Зинатне, 1990.-247 с.

80. Митрука Б. Применение газовой хроматографии в микробиологии и медицине. -М.: Наука, 1978.

81. Моисеев П.А. Биологические ресурсы Мирового океана. -М.: Наука, 1989.-364 с.

82. Молочников В.В. Проблемы организации безотходной переработки молочного сырья // Пищевая и перерабатывающая промышленность, 1987, №11.-С. 4-6.

83. Нечаев А.П., Кочетков A.A., Зайцев А.Н. Пищевые добавки. -М.: Пищевая промышленность, 1997. 170 с.

84. Определение безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище: Методические указания. -М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 1999. 87 с.

85. Питание и здоровье: биологически активные добавки к пище. / С.В.Орлова, П.В. Дружинин, A.A. Мирзоян и др. М.:, 1996. - 192 с.

86. Пол У. Иммунология. М.: Мир, 1987, T.l. -С.93-96.

87. Применение пищевых добавок. / A.A. Кочетков. -СПб.: АО Гиорд, 1997. 164 с.

88. Прист Ф. Внеклеточные ферменты микроорганизмов. -М.: Мир, 1987.

89. Проблемы производства продукции из красных и бурых водорослей: Тезисы докладов Всесоюзного семинара. -Владивосток: ТИНРО, 1987. -С.33-35.

90. Проблемы химии и технологии органических веществ и биотехнологии: Тез.докл. I науч. конф. молодых ученых (1-5 апреля 1991 г). -JL: Издательство ЛГУ, 1991. 138 с.

91. Рахимов K.P. Механизм усвоения лактозы в онтогенезе человека и животных. -Ташкент, 1991. 381 с.

92. Рубцов М.В., Байчиков А.Г. Синтетические химико-фармацевтические препараты. -М.: Медицина, 1971. 240 с.

93. Сакодынский К.И., Бражников B.B. Аналитическая хроматография. -М.: Химия, 1993. С.214-225.

94. Саламатова Т.С., Зауралов O.A. Физиология выделения веществ растениями.-Л., 1991.

95. СанПиН 2.3.2.560-96 «Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов». М., 1997.

96. СанПиН 42-123-4940-88. «Микробиологические нормативы и методы анализа продуктов детского, лечебного и диетического питания и их компонентов». М., 1989. - С.71-73.

97. Саут Р., Уиттик А. Основы альгологии. -М.: Мир, 1990.

98. Серов A.B., Денисова Е.В. Обоснование функциональных свойств фукозы, как пищевой добавки // Сборник научных трудов. Серия «Продовольствие». Выпуск 3. - Ставрополь: Изд-во СевКавГТУ, 2000. -С.43-45.

99. Силкин В. А., Золотухина Е.Ю., Бур дин К.С. Биотехнология морских водорослей. -М.: Издательство МГУ, 1992. 152 с.

100. Сиренко JI.A., Козицкая В.Н. Биологически активные вещества водорослей и качество воды. -Киев: Наукова думка, 1988. 256 с.

101. Скурихин И.М., Нечаев А.П. Все о пище с точки зрения химика. -М.: Высшая школа, 1991. 220 с.

102. Скрябин Г.К., Головлева JI.A. Использование микроорганизмов в органическом синтезе. -М.: Наука, 1976. 336 с.

103. Стаддарт Дж. Стереохимия углеводов. -М.: Мир, 1975. 304 с.

104. Степаненко Б.Н. Современные проблемы биохимии углеводов. -М.: Наука, 1979.

105. Степаненко Б.Н. Химия и биология углеводов. -М.: Химия, Т.1, 1978. -208 с.

106. Тамбовцева В.И. Биохимия материнского молока. -М.: Знание, 1990. -85 с.

107. Таникава И. Продукты морского промысла Японии. -М.: Пищепром, 1975.-352 с.

108. Теоретические и клинические аспекты науки о питании. / М.Н. Волгарев. -М., 1987, Т.8. 210 с.

109. Тесаржик К., Комарек К. Капиллярные колонки в газовой хроматографии. -М.: Мир, 1987. 222 с.

110. Технология получения продуктов микробиологического синтеза. -Алма-Ата: , 1988.

111. Трунова О.Н., Гринталь А.Р. Исследование антибиотической активности морских водорослей Мурмана. Труды ВНИРО, 1977, Т. 124. - С.61-64.

112. Тутельян В.А. Биологически активные добавки к пище: прошлое, настоящее, будущее // Тезисы второго Международного симпозиума. Питание и здоровье. Биологически активные добавки к пище. -М., 1996. -С.164-166.

113. Уголев А.М., Радбиль О.С. Гормоны пищеварительной системы: физиология, патология. -М.: Наука, 1995. 326 с.

114. Уоткинс В.М. Гликопротеины. -М.: Мир, 1969, Т.2. 415 с.

115. Управляемый микробный синтез. -Рига: Зинатне, 1973. 265 с.

116. Усов А.И., Смирнова Г.П., Билан М.И., Шашков А.С. Полисахариды водорослей. 53. Бурая водоросль Laminaria saccharina как источник фукоидана // Биоорганическая химия, 1998, Т.24, №6. С.437-445.

117. Усов А.И., Чижов О.С. Химические исследования водорослей. -М.: Наука, 1988.-250 с.

118. Файтельберг Р.С. Всасывание в желудочно-кишечном тракте. -М.: Медицина, 1976. 264 с.

119. Функциональная роль углеводов в клетке в норме и при патологии. Материалы международного симпозиума. -Лондон, 1998. С.28-35.

120. Химия и биотехнология физиологически активных соединений и их полупродуктов. -М.: МХТИ, 1987. С.60-65.

121. Химия пищевых вещества. Свойства и использование биополимеров в пищевых продуктах: Тезисы докладов Всесоюзной конференции. -Могилев, 1990.-С.210.

122. Хмелевский Ю.В., Усатенко O.K. Основные биохимические константы человека в норме и при патологии. -Киев: Здоровья, 1987. 160 с.

123. Храмцов А.Г. Молочный сахар. М.: Пищепромиздат, 1987. - 280 с.

124. Храмцов А.Г. Молочная сыворотка. М.: Пищевая промышленность, 1979.-272с.

125. Хьюз Р. Гликопротеины. М.: Мир, 1985. - 334 с.

126. Шеллард Э. Количественная хроматография на бумаге и в тонком слое. М., Мир, 1971.- 192 с.

127. Элварс Т.Е. Дрожжевые полисахариды. Методы химии углеводов. М.: Мир, 1967. - С.382-385.

128. Ярцева И.А., Возжинская В.Б., Соловьева O.A. Физиологическая характеристика некоторых фукоидов Белого и Японского морей // Труды ВНИРО, М. 1977, №124. - С.57.

129. Berger, V. Dietary specific sugar for serum protein enzymatic glycosylation in man // Metabolism, 1998, V.47, №12. P.1499-1503.

130. Bousfield, G.R., Baker, V.L., Russell-Gotschall, R., Butnev, V.Y., Butnev, V.Y. Carbohydrate Analysis of Glycoprotein Hormones // Methods: A Companion to Methods in Ensymology, 2000, V.21, №1. P. 15-39.

131. Bush, A., Martin-Pastor, M. Structure and conformation of complex carbohydrates of glycoproteins, glycolipids, and bacterial polysaccharides C // Annu. Rev. Biophys. Biomol. Struct., 1999, V.28. P.269-293.

132. Church, F.C. Antithrombin Activity of Fucoidan // The Journal of Biological Chemistry, 1989, V.264, №6. P.3618-3623.

133. Colliec S. Anticoagulant properties of a fucoidan fraction // Thromb. res., 1991, №64, P. 142.

134. Collins, J. Monosaccharides: Their Chemistry and Their Roles in Natural Products. John Wiley & Sons, Chichester, England, 1995. P.97-106.

135. Doco, T., Fournet, B., Carcano, D., Ramos, P., Loones, A., Piot, J.-M., Guillochon, D. Polysaccharide, application comme agent epaississant etcomme agent anti-tumoral // Demande de brevet europeen. EUR 331 564, 06.09.1989.

136. Doco, T., Wieruszeski, J.-M., Fournet, B., Carcano, D., Ramos, P., Loones, A. Structure of an exocellular polysaccharide produced by Streptococcus thermophilus // Carbohydrate Research, 1990, V.198. P.313-321.

137. Durig, J., Bruhn, T., Zurborn, K.H. Anticoagulant fucoidan fractions from Fucus vesiculosus induce platelet activation in vitro // Thromb. Research, 1997, V.85.P. 479-491.

138. Duverger, E., Carpentier, V., Roche, A.-C., Monsigny, M. Sugar-Dependent Nuclear Import of Glycoconjugates from the Cytosol // Experimental Cell Research, 1993, V.207, №1. P. 197-201.

139. Faye, L., Gomord, V., Fitchettelaine, A.C., Chrispeels, M.J. Affinity Purification of Antibodies Specific for Asn-Linked Glycans Containing al-»3Fucose or pi-*2Xylose // Analytical Biochemistry, 1993, V.209, №1. P. 104-108.

140. Ferreiros, C.M., Criado, M.T. Purification and partial characterization of a Fucus vesiculosus agglutinin // Rev.Esp.Fisiol., 1983, V.39. P.51-59.

141. Hirschberg, C.B., Robbins, P.W., Abeijon, C. Transporters of nucleotide sugars, ATP, and nucleotide sulfate in the endoplasmic reticulum and Golgi apparatus // Annu. Rev. Biochem, 1998, V.67. P.49-69.

142. Hodgson, J. Carbohydrate-based therapeutics // Biotechnology, 1991, V.9. P.609-613.

143. Hopfer, U. Membrane transport mechanisms for hexoses and amino acids // L.R. Johnson, 1987, V.2. P. 1499-1526.

144. Huang, T.T.F., Ohzu, E., Yamagimachi, R. Evidence suggesting that L-fucose is part of a recognition signal for sperm-zona pellucida attachment in mammals // Gamete Research, 1982, V.5. P.355-361.

145. Hughes, R.C. Mac-2: A versatile galactose-binding protein of mammalian tissues // Glycobiology, 1994, V.4. P.5-12.

146. Inoue, M., Fujii, H., Kaseyama, H., Yamashina, I., Nakada, H. Stimulation of macrophages by mucins through a macrophage scavenger receptor // Biochemical and Biophysical Research Communications, 1999, V.264, №1. P.276-280.

147. John, N.M., Zea, M.E.R., Kawano, T., Omata, Y., Saito, A., Toyoda, Y., Mikami, T. Identification of carbohydrates on Eimeria stiedai sporozoites and their role in the invasion of cultured cells in vitro // Veter.Parasitol., 1999, V.81, №2. P.99-105.

148. Karlsson, K.-A. Animal glycosphingolipids as membrane attachment sites for bacteria // Annual Review of Biochemistry, 1989, V.58. P.309-350.

149. Kitamura, K. Fucoidan from brown seaweed Laminaria angustata var. longissima // Agricultural and Biological Chemistry, 1991, V.55, №2. P.615-616.

150. Kumar, V., Ramakrishnan, S., Teerit, T., Knowles, J.K.S., Hartley, B.S. Saccharomyces cerevisiae cells secreting and Aspergillus niger P-galactosidase grow on whey permeate // Biotechnology, 1992, №10. P.82-85.

151. Kunigev, S.M., Denisova, E.V., Shuvaev, V.A. Study of requirements of an enzymatic hydrolysis of lactose // Proceeding of UNESCO medikal center «Unona», -Essentuki, 2001, V.5. P. 198-200.

152. Larripa, I.B., Mudry De Pargament, M., Label De Vinuesa, M., Mayer, M.S. Biological activity in Macrocystis pyrifera from Argentina: sodium alginate, fucoidan and laminaran. II. Genotoxicity // Hydrobiologia, 1987, V. 151/152. P.491-496.

153. Larsen, B. Sulphated polysaccharides in brown algae // Acta Chemica Scandinavica, 1970, V.24, №9. P.3339-3352.

154. London, G.B. Natural Products with antibacterial activity and surface active properties on the increase // Manufacturing chemistry, 1986, V.57, №5. P. 30.

155. Mattila, P., Rábiná, J., Hortling, S., Helin, J., Renkonen, R. Functional expression of Escherichia coli enzymes synthesizing GDP-L-fucose frominherent GDP-D-mannose in Saccharomyces cerevisiae II Glycobiology, 2000, V.10, №10. P.1041-1047.

156. Nakajima, H., Hirota, T, Toba, T., Itoh, T., Adachi, S. Structure of the extracellular polysaccharide from slime-forming Lactococcus lactis subsp. cremoris SBT 0495 // Carbohydrate Research, 1992, V.224. P.245-253.

157. Nardella, A. Anticoagulant low molecular weight fucans produced by radical process and ion exchange chromatography of high molecular weight fucans extracted from the brown seaweed Ascophyllum nodosum // Carbohyd. Res., 1996, V.289. P.201-208.

158. Nishino, T. Isolation, Purification, and Characterization of Fucose Containing Sulfated Polysaccharides from the Brown Seaweed Ecklonia kurome And Their Blood-Anticoagulant Activities // Carbohydrate Research, 1989, V.186,№l.P.l 19-129.

159. Nishino, T. The Relationship Between the Molecular Weight and the Anticoagulant Activity of Two Types of Fucan Sulfates from the Brown Seaweed Ecklonia kurome // Agr. Biol. Chem., 1991, V.55. P.791-798.

160. Oda, M., Hasegawa, H., Komatsu, S., Kambe, M., Tsuchiya, F. Anti-tumor polysaccharide from Lactobacillus sp II Agricultural and Biological Chemistry, 1983, V.47. P.1623-1625.

161. Pappenheimer, J.R. On the coupling of membrane digestion with intestinal adsorption of sugars and amino acids // Amer. J. Physiol., 1993, V.265. P.409-417.

162. Pappenheimer, J.R., Reiss, K.Z. Adsorption of nutrients by solvent drag // J. Membr. Biol., 1987, V.100. P. 432-436/

163. Patankar, M.S., Oehninger, S., Barnett, T. A revised structure for fucoidan may explain some of its biological activities // J. Biol.Chem., 1993, V.268. P.21770-21776.

164. Pavi, D.E., Robinson, M.P. Handbook of enzyme biotechnology // Nutr. Metabol., 1976, V.20. P.351-363.

165. Revah, I., Gadella, B.M., Flesch, F.M., Colenbrander, B., Suarez, S.S. Physiological state of bull sperm affects fucose- and mannose-binding properties //Biol.Reprod., 2000, V.62, №4. P. 1010-1015.

166. Revah, I., Gadella, B.M., Flesch, F.M., Colenbrander, B., Suarez, S.S. Physiological state of bull sperm affects fucose- and mannose-binding properties // Biol.Reprod., 2000, V.62, №4. P. 1010-1015.

167. Rowe, A., Berendt, A.R., Marsh, K., Newbold, C.I. Plasmodium falciparum: a family of sulfated glycoconjugates disrupts erythrocyte rosettes // Experimental Parasitology, 1994, V.79, №4. P.506-516.

168. Rudd, P.M., Leatherbarrow, R.J., Rademacher, T.W., Dwek, R.A. Diversification of the IgG molecule by oligosaccharides // Mol. Immunol., 1991, V.28. P.1369-1378.

169. Russell, L., Waring, P.f, Beaver, J.P. Increased cell surface exposure of fucose residues is a late event in apoptosis // Biochemical and Biophysical Research Communications, 1998, Y.250, №2. P.449-453.

170. Saitoh, A., Aoyagi, Y., Asakura, H. Structural analysis on the sugar chains of human arantitrypsin: presence of fucosylated biantennary glycan in hepatocellular carcinoma // Archives of Biochemistry and Biophysics, 1993, V.303, №2. P.281-287.

171. Schaeffer, D.J., Krylov, V.S. Anti-HIV Activity of Extracts and Compounds from Algae and Cyanobacteria // Ecotoxicology and Environmental Safety, 2000, V.45, №3. P. 208-227.

172. Severian, D. Polysaccharides in medicinal chemistry. Marcel Dekker Inc. 1996. P. 545-574.

173. Shalgi, F., Matityahu, A., Nebel, L. The role of carbohydrates in sperm-egg interaction in rats // Biol.Reprod., 1986, №34. P.446-452.

174. Soeda, S., Sakaguchi, S., Shimeno, H., Nagamatsu, A. Fibrinolytic and anticoagulant activities of highly sulfated fucoidan // Biochem. Pharmacol., 1992, V.43. P.1853-1858.

175. Soeda, S., Sakaguchi, S., Shimeno, H., Nagamatsu, A. Inhibitory effect of oversulfated fucoidan on invasion through reconstituted basement membrane by murine Lewis lung carcinoma // Jpn. J. Cancer. Res., 1994, V.85. P. 11441150.

176. Soisson, S.M., MacDougall-Shackleton, B., Schleif, R., Wolberger, C. The 1.6 A Crystal Structure of the AraC sugar-binding and dimerization domain complexed with D-fucose // Journal of Molecular Biology, 1997, V.273, №1. P.226-237.

177. Springer G.F. Isolation of anticoagulant fractions from crude fucoidin // Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1957, №94. P. 404-409.

178. Til, H.P., Feron, V.J., Immel, H.R. Chronic (89-week) feeding study with hydroxypropyl distarch phosphate, starch acetate, lactose and sodium alginate in mice // Food Chem. Toxicol., 1986, V.24. P.825-834.

179. Topfer-Petersen, E., Friess, A.E., Nguten, H., Schill, W.-B. Evidence for a fucose-binding protein in boar spermatozoa. // Histochem., 1985, №83. P. 139145.

180. USPat 4,923,809. Otsuji. Polysaccharide and process for preparing the same. 1990.

181. USPat, 5,508,033. Briand, Xavier. Utilization of algae extract for the preparation of pharmaceutical, cosmetic, food or agricultural compositions. 1996.

182. USPat, No.64 28299. Fan et al. Sulfated polysaccharide, pharmaceutically acceptable salt thereof, process for preparing same and medicament containing same as effective component. 1994.

183. Yokoi, H. Isolation and Characterization of Polysaccharide-Producing Bacteria from Kefir Grains // Journal of Dairy Science. 1990, V.73, №7. P.1684-1689.

184. Yoshida, Y., Nakano, Y., Nezu, T., Yamashita, Y., Koga, T. A novel NDP-6-deoxyhexosyl-4-ulose reductase in the pathway for the synthesis of142thymidine diphosphate-D-fucose // Journal of Biological Chemistry, 1999, V.274. P.16933-16939.

185. Zara, J., Naz, K.R. The role of carbohydrates in mammalian sperm-egg interactions: how important are carbohydrate epitopes // Frontiers in Bioscience, 1998, V.3. P.1028-1038.