Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Обоснование морфофизиологической полноценности эритроцитов в зависимости от сроков хранения консервированной донорской крови

ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Обоснование морфофизиологической полноценности эритроцитов в зависимости от сроков хранения консервированной донорской крови"

На правах рукописи

БУНДОВ ИЛЬЯ ДМИТРИЕВИЧ

ОБОСНОВАНИЕ МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ ПОЛНОЦЕННОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СРОКОВ ХРАНЕНИЯ КОНСЕРВИРОВАННОЙ ДОНОРСКОЙ КРОВИ

03.03.01 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

004604956

Чебоксары 2010

004604956

Работа выполнена на кафедре физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Самарская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Ненашев Александр Андреевич

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Зайцев Владимир Владимирович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Малышев Игорь Иванович

доктор биологических наук, профессор Ситдиков Фарит Габдулханович

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Поволжская государственная социально-гуманитарная академия»

Защита диссертации состоится «18» июня 2010 г. в 1230 часов на заседании объединенного совета ДМ 212. 300. 03 при ГОУ ВПО «Чувашский государственный педагогический университет им. И. Я. Яковлева» (428000, г. Чебоксары, ул. К. Маркса, 38, ГОУ ВПО «ЧГПУ», http://www.chgpu.edu.ru).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «ЧГПУ им. И. Я. Яковлева»

Автореферат разослан «17» мая 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, докт. биол. наук, профессор

В. В. Алексеев

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. За исторически короткий промежуток времени переливание крови прошло путь от привлекательной, но сопряженной с риском и потому неординарной методики лечения до самостоятельной научной дисциплины трансфузиологии — науки об управлении функциями организма с помощью парентерального введения органических и неорганических трансфузион-ных сред (Б.Е. Мовшев, 2003).

В настоящее время, в трансфузиологии уделяется большое внимание обеспечению не только безопасности, но и лечебной эффективности трансфу-зионных сред. Ведь их качество в конечном итоге обеспечивает и качество лечения больных, позволяет сохранить жизни многим людям с тяжелыми, подчас неизлечимыми болезнями.

Как известно, в процессе хранения консервированных эритроцитов сродство гемоглобина к кислороду увеличивается, что предполагает снижение способности эритроцитов отдавать тканям организма кислород (B.C. Ярочкин, 1993). В связи с этим особо важное значение приобретает процесс естественного восстановления нарушенной при хранении кислородтранспортной функции донорских эритроцитов, что в значительной степени определяет лечебную эффективность консервированных эритроцитов при лечении острых гипоксиче-ских состояний (С.М. Виноградов, 1987).

Эритроциты как один из компонентов крови, отвечающий за ее кислород-транспортную функцию, широко используются в клинической практике. Одновременно с введением в практику трансфузий возникли проблемы консервирования (хранения) и контроля качества эритроцитов. Методы консервирования и контроля качества эритроцитов совершенствовались по мере развития фундаментальных представлений о биохимии и физиологии клеток вообще и эритроцитов в частности (Б.Е. Мовшев, 2003).

Разработка и изучение методов консервирования эритроцитов невозможны без адекватной оценки их качества (функциональной полноценности). В связи с этим очень важным представляется поиск способов и методов решения двух основных проблем переливания крови - проблемы консервирования (хранения) и контроля качества эритроцитов. Одной из задач консервирования крови является создания условий, препятствующих разрушению физико-химической структуры эритроцитов и способствующих поддержанию процессов обмена веществ, необходимых для жизнедеятельности красных клеток (Ю.К. Новодержкина, 2004). В настоящее время разработаны и внедрены в широкую практику консерванты крови и ее компонентов, позволяющие достаточно длительное время сохранять последние и переливать по мере необходимости.

Как известно, донорская кровь с первых секунд пребывания вне сосудистого русла подвергается сложным морфологическим, биохимическим, реологическим, иммунологическим, функциональным изменениям (Г.И. Козинец, 1997). Большое значение имеет также возможность оценки качества консервированных эритроцитов непосредственно перед трансфузией (Б.Е. Мовшев,

2003).

В результате представляется актуальным оценка пригодности донорской крови к переливанию с использованием метода исследования биомеханических и реологических свойств эритроцитов по А.А.Ненашеву и соавторам (1983, 2006). Большое значение имеет также возможность оценки качества консервированных эритроцитов непосредственно перед трансфузией.

Актуальность представленного исследования определяется недостаточностью сведений по затронутой проблеме на современном этапе развития физиологии и медицины.

Поэтому целью исследований явилась физиологическая оценка структурно-функциональной полноценности эритроцитов в различные сроки хранения консервированной донорской крови.

Исходя из обозначенной цели, для решения были поставлены следующие задачи исследований:

1. Изучить влияние вибровоздействия на количественный и качественный состав эритроцитов консервированной крови в различные сроки хранения.

2. Провести физиологическую оценку популяционного состава и механической резистентности эритроцитов капиллярной и венозной крови доноров.

3. Исследовать структурно-функциональную полноценность эритроцитов донорской крови в различные сроки хранения.

4. Изучить морфофизиологическую полноценность консервированной крови доноров, разделенных по половому признаку.

5. Составить научно-обоснованные рекомендации по профилактике отклонений при хранении донорской крови.

Научная новизна. Впервые научно обоснована морфофизиологическая полноценность эритроцитов консервированной донорской крови в различные сроки хранения с использованием метода исследования механической резистентности эритроцитов по A.A. Ненашеву и соавт.

Дана комплексная характеристика количественного и качественного состава венозной и капиллярной крови, позволяющая объективно оценить полноценность их эритроцитов.

Проведено морфофизиологическое сравнение популяционного состава и механической резистентности эритроцитов венозной крови доноров разного пола.

Разработаны научно-обоснованные рекомендации о физиологически-обоснованных сроках использования консервированной донорской крови.

Научная новизна полученных результатов исследований подтверждена патентом РФ на полезную модель № 63544.

Практическая значимость. Предложен оригинальный метод для оценки морфофизиологических, биохимических и биомеханических свойств эритроцитов консервированной донорской крови.

Разработаны практические предложения для станций переливания крови, позволяющие контролировать состояние эритроцитов хранящейся крови на предмет пригодности к переливанию.

Реализация результатов исследований. Материалы диссертации включены в правила работы с донорами на Самарской областной клинической станции переливания крови и используются при контроле сроков сдачи крови доноров на хранение и определении сроков выдачи консервированной крови в лечебные учреждения. Материалы диссертации используются при проведении лекционных и практических занятий на кафедре госпитальной терапии с курсом трансфузиологии ГОУ ВПО «СамГМУ» Росздрава и на кафедре биологической химии ГОУ ВПО «СамГУ». Также материалы диссертации внедрены в курс обучения по экологическим программам НОУ УЦ «Самара», а также используются в работе экоаналитической лаборатории при обследовании работающих в экологически небезопасных условиях.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: VII международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI» (Москва, 2006), V международной научно-практической конференции «Медицинская экология» (Пенза, 2006), V Международной научно-практической конференции «Новые медицинские технологии в охране здоровья здоровых, в диагностике, лечении и реабилитации больных» (Пенза, 2007), IX Всероссийской молодежной научной конференции с международным участием «Королевские чтения» (Самара, 2007).

Материалы и основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на расширенном заседании кафедры физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Самарская ГСХА» (Самара, 2010).

Научные положения, выносимые на защиту:

1. Имеется взаимосвязь между количественно-качественными характеристиками эритроцитов и методом определения их функциональной активности.

2. Выявлена причинно-следственная связь между сроками хранения консервированной крови и биомеханическими показателями исходной и капиллярной крови доноров.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 научных работ, в том числе 1 работа в издании, определенном ВАК России для докторских и кандидатских диссертаций, 1 патент РФ на полезную модель.

Структура и объем диссертации. Работа включает следующие разделы: введение (5 е.), обзор литературы (36), собственные исследования (54), обсуждение полученных результатов (7), выводы (1), практические рекомендации (1), список литературы (20), приложение (1).

Диссертация изложена на 127 страницах компьютерного исполнения, содержит 10 таблиц и 22 рисунка. Список литературы включает 205 источников, в том числе 86 зарубежных.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы исследований

Для решения поставленных задач были обследованы 115 доноров Самарской областной клинической станции переливания крови (схема опытов).

Исследование проводилось при закладке крови на хранения, в середине и в конце срока хранения. В качестве консерванта использовался «Глюгицир». Также проводилось исследование капиллярной крови из пальца, взятой у донора в день забора крови и стабилизированной гепарином.

СХЕМА ОПЫТОВ Объект изучения

Доноры крови

Мужчины Женщины

опыты

Сроки обследования

Закладка на хранение 7 сутки хранения 14 сутки хранения 21 сутки хранения

Венозная кровь Капиллярная кровь

Консервант «Глюгицир» Стабилизированная гепарином

Методы исследования

гематологические

статистические

Внедрение результатов научных исследований

учебный процесс производственная деятельность

кафедра госпитальной терапии с курсом трансфу-зиологии ГОУ ВПО «СамГМУ» кафедра биологической химии ГОУ ВПО «СамГУ» НОУ УЦ «Самара» Самарская областная клиническая станция переливания крови

Исследования проводили с применением следующих методов: 1) гематологические методы - метод определения механической резистентности эритроцитов.

Метод определения механической резистентности эритроцитов предло-

жен А. А. Ненашевым с соавт. еще в 1983 году [A.A. Ненашев, 1983]. В 1988г. А.А.Ненашев с соавторами получают второе авторское свидетельство, где расширяются возможности устройства данного метода. С тех пор метод непрерывно видоизменялся и совершенствовался, о чем свидетельствует полученный патент на полезную модель в 2007 году.

С целью изучения механической резистентности определяется число эритроцитов капиллярной крови до вибронагрузки и после нее. При включении возбудителя колебаний в пробе крови распространяются колебания заданной амплитуды и частоты, воздействующие на эритроциты, которые под действием нагрузки начинают видоизменяться по величине и количеству. При этом следует учитывать, что при вибронагрузке происходит не только гемолиз эритроцитов, преимущественно старых, но и фрагментация наиболее молодых, уплощенных эритроцитов, которые имеют достаточно большой объем клетки и высокую текучесть мембраны. При этом из одной клетки образуются 2-4 микро-цита, которые способны выполнять газотранспортную функцию и проходить через мельчайшие капилляры. Во время вибрации может происходить также агрегация (склеивание, слияние) эритроцитов и их дезагрегация, которая проявляется чаще.

Параметры вибровоздействия 250 Гц, 40 дБ в течение 3 минут. Подсчет эритроцитов производили с помощью кондуктометрического счетчика, позволяющего, помимо этого, построить дифференциальную цитометрическую кривую, распределив все эритроциты на ряд каналов (диапазонов) согласно объему клеток. Использовали счетчик частиц «Laborscale» венгерской фирмы MEDI-COR.

Чтобы получить более полное представление о популяционном составе клеток периферического звена системы эритрона и их механической устойчивости, интенсивности процессов агрегации, дезагрегации, фрагментации и гемолиза при озвучивании крови, мы разделили эритроциты не только на 3 стандартных фракции (микро-, нормо- и макроциты), но и еще на 9 субпопуляций более узкого объемного диапазона. Распределение эритроцитов на субпопуляции осуществлялось нами по их объему согласно следующим критериям: мик-роциты 1 - до 65 фл; микроциты 2 - 65-70 фл; микроциты 3 - 70-75 фл; нормо-циты 1 - 75-80 фл; нормоциты 2 - 80-85 фл; нормоциты 3 - 85-95 фл; макроциты 1 - 95-110 фл; макроциты 2-110-126 фл; макроциты 3 - свыше 126 фл.

В исходном состоянии определяли следующие параметры, характеризующие популяцию эритроцитов: общее их количество в крови, характер распределения по объему, средний объем эритроцитов, соотношение микроцитов, нормоцитов и макроцитов и их подфракций. После вибрационной нагрузки на пробу крови, кроме того, определяли общий условный процент гемолиза эритроцитов и гемолиз их по фракциям в зависимости от объема.

Для оценки изменений, происходящих с эритроцитами и их отдельными фракциями (субпопуляциями) при вибровоздействии вводится понятие условного гемолиза. Условный гемолиз соответствует уменьшению (по отношению к исходному) числа клеток при вибрации:

yrJRBCucx~RBCm6p) 100% RBCucx

RBC„cx - количество клеток той или иной субпопуляции до вибрации, КВСвибр - после вибрации.

При агрегации в ряде случаев наблюдается увеличение абсолютного числа макроцитов (ведь кондуктометрический счетчик воспринимает агрегат клеток как единое образование - макроцит), таким образом, в этой ситуации оказывается, что для макроцитов RBCB„6P > RBC„cx. Аналогично, при виброфрагментации может увеличиться число микроцитов, тогда для микроцитов RBCBH6p>RBC„cx. Поэтому условный гемолиз может принимать отрицательные значения (УГ < 0) (см. формулу). Изучение показателя условного гемолиза позволяет в большинстве случаев выявить достоверные отличия при сравнении различных групп испытуемых, больных и здоровых.

2) статистические методы.

Все количественные характеристики были подвергнуты математической обработке на IBM-совместимом компьютере с использованием стандартного (Microsoft Excel 2003, Statistica 6.0) и специально разработанного программного обеспечения (ERYTHRO). Рассчитывались среднее арифметическое и стандартное отклонение. Достоверность различия средних оценивалась при помощи критерия Стьюдента, а также при помощи непараметрического критерия Вил-коксона-Манна-Уитни.

2.2. Физиологическая оценка популяционного состава и механической резистентности эритроцитов капиллярной и венозной крови доноров

При сравнении динамики изменения гемолитической устойчивости эритроцитов донорской крови при хранении и эритроцитарных показателей капиллярной крови наблюдаются некоторые особенности.

Общее содержание эритроцитов всегда достоверно (р<0,05) больше в капиллярной крови.

Процентное содержание микроцитов всегда преобладает в венозной крови, при этом на 1 и 14 дни хранения это сравнение достоверно (р<0,05). Процентное содержание макроцитов всегда преобладает в капиллярной крови, причем достоверность (р<0,05) отличия наблюдается на 1, 14 и 21 дни хранения венозной крови. Ситуация с нормоцитами сложнее: преобладание венозной крови отмечено только на 21-ый день хранения, а в остальные дни наблюдается повышенное содержание нормоцитов в крови, взятой из пальца. Похожая ситуация наблюдается с показателем анизоцитоза. На первый день хранения, данный параметр больше в капиллярной крови, но в остальные дни анализа отмечено превышение в венозной крови.

Средний объем эритроцитов всегда преобладает в крови, взятой из пальца донора. Сравнение среднего объема эритроцитов достоверно (р<0,05) на 1, 14 и 21 дни хранения.

При сравнении гемолитической устойчивости отмечено больший прирост эритроцитов после вибровоздействия в венозной крови во все дни хранения, о чем свидетельствует сравнение условного гемолиза эритроцитов после вибрации. Данный параметр для всех случаев имеет отрицательное значение, и степень условного гемолиза эритроцитов больше в венозной крови.

Степень общего условного гемолиза микроцитов в капиллярной крови выше по сравнению с анализом венозной крови на 1-ый и 14-ый дни хранения (рис.1). Знак условного гемолиза микроцитов всегда отрицательный, что означает прирост количества эритроцитов малых объемов после вибровоздействия для всех анализов. При сравнении степени условного гемолиза микроцитов 2 и микроцитов 3 отмечается более значительное изменение количества самых малых объемов форменных элементов.

Нормоциты в венозной крови имеют прирост после вибровоздействия только на 1-ый день хранения, причем больший прирост по сравнению с кровью из пальца (рис.2).

В остальные дни анализа условный гемолиз нормоцитов в венозной крови имеет положительный знак, что указывает на уменьшение их количества. Такая же ситуация наблюдается после вибровоздействия на нормоциты 2 и 3. За исключением 1-ого дня хранения наблюдается уменьшение количества эритроцитов этих субпопуляций в венозной крови. Отличие заключается в положительном условном гемолизе данных субпопуляций в капиллярной крови. Для нормоцитов 1 значения условного гемолиза отрицательны в крови из пальца и в венозной крови на всех стадиях хранения.

При этом степень условного гемолиза больше для венозной крови в 1 -й и 7-й дни хранения. В остальные дни отмечается больший прирост после вибровоздействия на форменные элементы данной субпопуляции в капиллярной крови.

Особая ситуация сложилась при изменении общего количества макроци-тов (рис.3). Условный гемолиз положителен для всех случаев, и, начиная с 7 дня хранения, венозный показатель превышает капиллярный. В случае макро-цитов 2, условный гемолиз в капиллярной крови больше, чем в венозной в любой день хранения.

Отмечается большое различие в условном гемолизе этих субпопуляций в венозной крови на 1-й день хранения и в капиллярной крови. Для макроцитов 3 в венозной крови данный показатель имеет отрицательное значение (-15,32±9,79%), что свидетельствует о протекающем процессе агрегации. Для макроцитов 3 рассматриваемый показатель имеет хотя и положительное, но малое значение (0,32±3,18%), по сравнению с капиллярной кровью. В остальные дни хранения наблюдается большая степень условного гемолиза в венозной крови на 14 день.

Такая динамика изменения гемолитической устойчивости при вибронагрузке сходна с эритроцитами хранящейся венозной крови на всех сроках хранения. Основное различие наблюдается только в день закладки крови на хранение.

Микроциты 2 Микроциты 3

В Капиллярная кровь В Венозная кровь (1 день) □ Венозная кровь (7 день)

□ Венозная кровь (14 день) В Венозная кровь (21 день)

Рис.1. Условный гемолиз субпопуляций микроцитов в капиллярной и венозной крови доноров.

@ Капиллярная кровь В Венозная кровь (1 день) □ Венозная кровь (7 день)

□ Венозная кровь (14 день) В Венозная кровь (21 день)

Рис.2. Условный гемолиз субпопуляций нормоцитов в капиллярной и венозной крови доноров.

Макроциты 1 Макроциты 3

17,09 19,7 щи ЙЙЙ 19,72 21,45 13,53

11,45 10,87 I • 1 8,13

[ ¡Ц '■] ■ -

1

В Капиллярная кровь В Венозная кровь (1 день) □ Венозная кровь (7 день)

□ Венозная кровь (14 день) В Венозная кровь (21 день)

Рис.З. Условный гемолиз субпопуляций макроцитов в капиллярной и венозной крови доноров.

2.3. Физиологическая оценка популяционного состава и механической резистентности эритроцитов донорской крови в различные сроки

хранения

Не меньший интерес представляет сравнительный анализ биомеханических и реологических характеристик эритроцитов для венозной крови в различные сроки хранения. Это позволит проследить динамику изменений, происходящих в донорской крови на всем протяжении хранения. Основные показатели приведены в таблице 1.

В процессе хранения происходит увеличение содержания эритроцитов, наибольшее значение приходится на конец срока хранения, то есть на 21 день. Процентное соотношение форменных элементов не меняется с течением времени хранения. Наименьшее количество представляют макроциты, а наибольшее - нормоциты.

Также хранение эритроцитов сказывается на величине объема клеток, который возрастает от закладки на хранение до конца срока. Наряду с этим отмечается достоверное (р<0,05) увеличение показателя анизоцитоза к 21 дню хранения крови.

Общий условный гемолиз снижается в процессе хранения, что доказывается меньшим приростом эритроцитов после вибрации в конце срока хранения. Гемолитическая устойчивость различных субпопуляций форменных элементов также изменяется в процессе хранения.

При закладке на хранение наблюдаются процессы агрегации и фрагментации. Агрегация проявляется в увеличении числа самых крупных субпопуляций нормоцитов и макроцитов (нормоцитов 3 и макроцитов 3). Эта склонность эритроцитов к агрегации косвенным образом свидетельствует о достаточной активности метаболических процессов в них, о сохранении отрицательного электрического заряда. Таким образом, имеются достаточные функциональные возможности клеток красной крови. Прирост макроцитов 1, нормоцитов 2 и 3 также может быть вызван фрагментацией крупных молодых клеток, имеющих большой объем и достаточно текучую мембрану.

На ранних сроках хранения число таких клеток может быть значительное. Таким образом, возможно образование полноценных клеток, способных выполнять кислородтранспортную функцию, в процессе фрагментации. Кроме этого, о процессе фрагментации свидетельствует отрицательный условный гемолиз микроцитов 2 и 3 и нормоцитов 1.

По мере увеличения срока хранения крови наблюдается снижение процесса агрегации, на что указывает смена увеличения числа макроцитов их уменьшением. В хранящейся крови появляются «старые» клетки из-за невозможности смены эритроцитарной популяции в условиях хранения in vitro. Чем ближе к концу срока хранения, тем больше становится прирост количества микроцитов и снижение числа макроцитов.

Таблица 1

Показатели периферического звена системы эритрона в различные сроки хранения донорской крови

Показатель Венозная кровь 1 день Венозная кровь 7 день Венозная кровь 14 день Венозная кровь 21 день

Содержание эритроцитов, млн/мкл 4,13 ±0,06 4,14±0,06 4,19±0,06 4,20±0,0 5

Содержание микроцитов, % 38,41 ±1,52 (2, 4) 34,17±1,67 (1, 3) 39,08±1,88 (2, 4) 35,33±1,67 (1, 3)

Содержание нормоцитов, % 40,97±0,78 41,74±0,85 (3) 39,80±0,98 (2, 4) 42,53±0,98 (3)

Содержание макроцитов, % 20,62±1,09 (2) 24,09±1,20 (1, 3) 21,13±1,35 (2) 22,14±1,16

Условный гемолиз эритроцитов при вибрации, % -3,16*0,65 (4) -2,78±0,53 (4) -2,51 ±0,54 -1,55±0,56 (1,2)

Условный гемолиз микроцитов при вибрации, % -8,46±2,14 (2,3,4) -19,84±2,92 (1) -17,13±2,68 (1) -18,75 ±2,91 (1)

Условный гемолиз нормоцитов при вибрации, % -2,38±1,79 0,97±2,39 5,38±2,29 2,16±1,99

Условный гемолиз макроцитов при вибрации, % 4,05±2,19 (4) 7,67±2,21 7,72±2,96 9,19±2,61 (1)

Условный гемолиз микроцитов 2 при вибрации, % -10,74±2,86 (2,3,4) -23,20±4,01 (1) -21,94±3,49 (1) -24,65 ±4,09 (1)

Условный гемолиз микроцитов 3 при вибрации, % -4,8 2± 1,84 -8,12±2,13 -8,67±3,03 -8,16±1,81

Условный гемолиз нормоцитов 1 при вибрации, % -4,52±1,8б -4,63±2,40 -1,05±2,60 -2,12±1,86

Условный гемолиз нормоцитов 2 п ри вибрации, % -3,31±1,95 1,91 ±2,39 3,70±2,74 1,89±2,19

Условный гемолиз нормоцитов 3 при вибрации, % -1,96±2,49 3,03 ±2,95 7,87±2,73 4,01 ±2,57

Условный гемолиз макроцитов 1 при вибрации, % 0,32±3,18 10,87 ±3,27 17,09±3,34 (4) 8,13±3,40 (3)

Условный гемол из макроцитов 2 при вибрации, % 6,79±4,94 (3,4) 15,21±4,20 19,79±4,04 (1) 21,66±4,75 (1)

Условный гемолиз макроцитов 3 при вибрации, % -15,32±9,79 (3) 19,72±5,70 21,45±4,99 (1,4) 13,53 ±6,71 (3)

Средний объем эритроцитов, фл 85,76±0,93 (2,4) 89,90±1,3 0(1,3) 89,70±1,17 (2,4) 90,06±1,22 (1,3)

Показатель анизоцитоза, % 38,89±2,12 (4) 41,38±2,13 (4) 42,64±2,06 (4) 48,08±2,12 (1,2,3)

Примечание - 1,2,3,4,5 - достоверность (р<0,05) различий по сравнению с 1 -ой, 2 -ой, 3 -ей, 4 -ой, 5 -ой группой.

Пик наибольшего значения условного гемолиза самых крупных макроци-тов приходится на 14 день хранения. Это можно объяснить как дезагрегация спонтанно образованных конгломератов. В конце хранения наибольший спад имеет количество макроцитов 2. В этот период гемолизу подвергаются в первую очередь стареющие дефектные клетки, находящиеся на различных стадиях диск-сферотрансформации.

2.2. Физиологическая оценка популяционного состава и механической резистентности эритроцитов венозной крови доноров разного пола

Сравнение биомеханических и реологических показателей хранящейся консервированной крови доноров мужского и женского пола привело к интересным результатам.

Содержание эритроцитов в венозной крови в момент закладки достоверно (р<0,05) выше у мужчин (4,16±0,12 млн/мкл в мужской крови и 3,63±0,11 млн/мкл в женской). Степень общего условного гемолиза преобладает в мужской крови (-3,82±1,4% у мужчин и -2,84±1,21% у женщин), что означает формирование большего количества форменных элементов красной крови после вибровоздействия у мужчин, чем у женщин.

Обращает на себя внимание также изменение субпопуляций эритроцитов при вибрации (рис.4). Так, наблюдается явление фрагментации в обоих рассматриваемых случаях, о чем свидетельствует отрицательный гемолиз микро-цитов (-11,87±5,16% в мужской крови и -8,16±2,91% в женской). Однако в мужской крови это явление подчеркивается положительным условным гемолизом макроцитов (4,90±4,48%) и отрицательным нормоцитов (-2,8±3,6%), указывающим на уменьшение количества эритроцитов большой субпопуляции и увеличение количества эритроцитов средней субпопуляции. А у женщин наблюдается похожее явление - положительный условный гемолиз нормоцитов (0,07±2,68%) и макроцитов (0,61±3,99%).

После механического воздействия отмечается большие изменения в мужской крови в сторону увеличения форменных элементов субпопуляций микро-и нормоцитов. Это обуславливает более выраженный характер фрагментации в мужской крови, по сравнению с женской.

Таким образом, кровь женщин в начале хранения оказывается более устойчивой к механическому воздействию. Сравнение показателей условного гемолиза нормоцитов 3 указывает на уменьшение клеток данного размера у женщин (0,82±2,96%), то есть фрагментацию, и на их увеличение у мужчин (-2,46±5,33%), что означает агрегацию. При сравнении субпопуляций макроцитов выявлено преобладание макроцитов 1 в женской крови (4,94±3,17% у женщин, 4,37±4,77% у мужчин) и макроцитов 2 в крови мужчин (3,06±5,31% у женщин, 17,02±7,97%у мужчин). Условный гемолиз макроцитов 3 имеет отрицательное значение (-20,58± 11,11%) в крови мужчин и положительное в женской крови (9,06±6,76%), что указывает на процесс агрегации в первом случае и фрагментации во втором.

4 ВВЕЯТЯш!

Мужнины | Жениуны 1 -

В Микроциты 2 ■ Микроциты 3 □ Нормоциты 1 □ Нормоциты 2 О Нормоцигы 3 в Макроциты 1 В Макроциты 2 0 Макроциты 3

Рис.4. Профиль условного гемолиза субпопуляций эритроцитов в крови доноров разного пола на 1-ый день хранения.

При сравнении общего условного гемолиза на 7-ой день хранения заметно, что больший прирост форменных элементов красной крови наблюдается в мужской крови (-2,95±0,99% у мужчин, -2,23±0,92% у женщин). Степень условного гемолиза микроцитов достоверно преобладает в женской крови (-13,63±4,41% у мужчин, -18,96±5,3% у женщин), также как и степень разрушения макроцитов, о чем свидетельствует соответствующий показатель условного гемолиза (2,32±3,53% у мужчин, 11,7±3,41% у женщин). В случае нормоцитов в женской крови наблюдается уменьшение количества клеток (2,4±3,72%), а в мужской - увеличение (-1,88±2,81%).

Сравнивая субпопуляции эритроцитов, выделяются следующие закономерности (рис.5). Отмечается достоверно больший прирост форменных элементов самых малых размеров (микроцитов 2) в женской крови (-14,25±5,8% у мужчин, -25,33±7,48% у женщин). Степень условного гемолиза микроцитов 3 и нормоцитов 1 преобладает в мужской крови. Особый интерес вызывает тот факт, что в крови мужчин происходит увеличение числа нормоцитов 2 (-2,56±3,13%) и небольшое уменьшение нормоцитов 3 (0,38±3,22%). Это указывает на присутствие явления агрегации, наряду с фрагментацией эритроцитов. В то же время, в крови доноров-женщин наблюдается уменьшение нормоцитов 2 (2,59±3,98%) и 3 (6,57±4,35%), что означает менее выраженный процесс агрегации мелких форменных элементов красной крови. Данный вывод также подтверждается большим, по сравнению с мужской кровью, условным гемолизом макроцитов всех субпопуляций в женской крови. В крови доноров-мужчин явление фрагментации крупных эритроцитов компенсируется процессом агрегации мелких субпопуляций форменных элементов красной крови. Это и обуславливает меньший условный гемолиз макроцитов всех субпопуляций в крови мужчин, по сравнению с кровью женщин.

При сравнении структуры условного гемолиза на 14-ый день (рис.6) особенно выделяется значительное преобладание степени условного гемолиза

микроцитов 2 в женской крови (-14,95±5,42% - у мужчин, -23,57±5,2% - женщин).

Ш Микроциты 2 ■ Микроциты 3 □ Нормоциты 1 □ Нормоциты 2 ■ Нормоциты 3 19 Макроциты 1 ■ Макроциты 2 □ Макроциты 3

Рис.5. Профиль условного гемолиза субпопуляций эритроцитов в крови доноров разного пола на 7-ой день хранения.

-19 — -24

Б Микроциты 2 ■ Мжроциты 3 □ Нормоциты 1 □ Нормоциты 2 ■ Нормоциты 3 В) Макроциты 1 ■ Макроцигы 2 И Макроциты 3

Рис.6. Профиль условного гемолиза субпопуляций эритроцитов в крови доноров разного пола на 14-ый день хранения.

Это означает протекание ярко выраженного процесса фрагментации, что подтверждается и повышенным условным гемолизом нормоцитов 3 (2,98±2,81%-у мужчин, 11,40±4,96% - женщин), макроцитов 1 (8,04±4,64% - у мужчин, 19,48±6,78% - женщин) и макроцитов 2 (] 1,43±7,13% - у мужчин, -17,94±6,6% - женщин), по сравнению с мужской кровью.

В то же время, наблюдается более выраженное уменьшение количества макроцитов 3 в мужской крови (19,91±7,82% - у мужчин, 13,12±8,6% - женщин). В мужской крови также наблюдается процесс агрегации мелких клеток, что отражено в малой величине условного гемолиза нормоцитов 2 и 3

(0,04±2,47% - нормоциты 2, 2,98±2,81% - нормоциты 3). Агрегация практически полностью компенсирует фрагментацию нормоцитов этих субпопуляций.

Выявлено, что при вибровоздействии в конце срока хранения (21-ый день) количество микроцитов 2 у женщин-доноров увеличивается на 26,99±6,73%, что достоверно (р<0,05) выше степени увеличения количества (условного гемолиза) в мужской крови (-13,11±4,84%) (рис.7).

Для форменных элементов большого объема (макроцитов 2 и 3) также отмечается сильно выраженное снижение количества (36,22±6,93% - макроциты 2, 30,89±10,99% - макроциты 3), то есть фрагментация данных клеток.

В крови мужчин-доноров, наряду р фрагментацией, наблюдается процесс агрегации мелких форменных элементов красной крови, о чем свидетельствует отрицательный знак условного гемолиза нормоцитов 2 (-2.75±2,01%), нормоцитов 3 (-2,34±3,2%) и макроцитов 1 (-0,85±4,07%). Таким образом, достаточно сильная агрегация обуславливает меньшее значение условного гемолиза макроцитов 2 (12,16±5,63%) и макроцитов 3 (23,82±7,09%) и меньшее увеличение микроцитов 2 (-13,11 ±4,84%) и микроцитов 3 (-9,95±3,33%) по сравнению с женской кровью.

Таким образом, при закладке на хранение (1-ый день) в мужской крови наблюдается совокупность процессов агрегации и фрагментации, причем агрегация происходит очень интенсивно, что обусловлено большим приростом макроцитов 3. В женской крови процесс агрегации выражен намного меньше, так как условный гемолиз крупных субпопуляций макроцитов имеет положительный знак. Фрагментация заметно проявляется в обоих случаях, но судя по значениям «гемолиза» микроцитов 2 и 3, она более выражена в крови мужчин. Таким образом, кровь женщин в начале хранения оказывается более устойчивой к механическому воздействию.

В процессе хранения и в мужской и в женской крови после вибровоздействия преобладает процесс фрагментации. При этом он протекает немного по-

разному: в крови женщин-доноров фрагментации подвергаются более мелкие субпопуляции эритроцитов, по сравнению с мужской. Это видно из положительного условного гемолиза нормоцитов 2 в женской крови притом, что в мужской этот показатель имеет отрицательный знак.

В конце срока хранения в мужской крови опять начинает проявляться процесс агрегации, наряду с продолжающейся фрагментацией. В женской крови фрагментация достигает своего пика.

Средний объем эритроцитов больше в мужской крови, кроме анализа на 7 день хранения, когда преобладает объем эритроцитов женской крови. Показатель анизоцитоза всегда выше в крови женщин-доноров.

3. ВЫВОДЫ

1. Научно обоснована морфофизиологическая полноценность эритроцитов в зависимости от сроков хранения консервированной донорской крови.

2. Еженедельная физиологическая оценка популяционного состава и механической резистентности эритроцитов капиллярной и венозной крови позволяет обеспечить объективный контроль над структурно-функциональной полноценностью хранящейся крови.

3. Установлена определенная изменчивость структурно-функциональной полноценности эритроцитов донорской крови за недельный срок хранения; при этом возрастает фрагментация крупных клеток, а агрегация мелких субпопуляций снижается по сравнению с данными на момент закладки.

4. Через две недели хранения консервированной крови морфофизиологическая полноценность эритроцитов относительно стабилизируется, о чем свидетельствует более выраженная фрагментация клеток со средними и большими объемами, при одновременном снижении процесса агрегации.

5. На 21 день хранения консервированной крови наблюдается стабилизация морфофизиологической полноценности эритроцитов, что подтверждается усилением процессов дезагрегации и фрагментации.

6. Анализ морфофизиологической полноценности консервированной крови доноров, разделенных по половому признаку, показал, что у доноров-мужчин более выражен процесс агрегации эритроцитов, тогда как у доноров-женщин преобладает их фрагментация.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для станций переливания крови предложены научно-обоснованные рекомендации по контролю морфофизиологической полноценности донорской крови с использованием метода исследования биомеханических и реологических свойств эритроцитов по А.А.Ненашеву и соавторам (1983, 2006).

2. Научные положения, выводы и предложения диссертационных исследований используются при проведении лекционных и практических занятий на кафедре госпитальной терапии с курсом трансфузиологии ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» и на кафедре биологической химии «Самарский государственный университет».

5. СПИСОК ОПУБЛИКОВАНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Ненашев A.A. Функциональные состояния донорской крови / A.A. Ненашев, И.Д. Бундов, М.В. Потапова // Всерос. молод, науч. конф. с междунар. участием «VIII королевские чтения». Сб. тр. - Самара, 2005. - С. 288.

2. Ненашев A.A. Способ передачи данных со счетчика форменных элементов крови на компьютер. / A.A. Ненашев, И.Д. Бундов, М.В. Катайкин, М.Н. Батаев // Науч. тр. VII междунар. научно-практич. конф. «Здоровье и образование в XXI». - Москва, 2006. - С. 313-314.

3. Бундов И.Д. Новая вибрационная установка для исследований функциональной активности эритроцитов. / И.Д. Бундов, A.A. Ненашев, A.B. Селезнев A.B., М.В. Катайкин // Сб. стат. V междунар. научно-практич. конф. «Медицинская экология». - Пенза, 2006. - С. 103-105.

4. Бундов И.Д. Создание и введение в исследования определения функциональной активности эритроцитов новой конструкции вибратора / И.Д. Бундов, A.A. Ненашев, М.Н. Батаев, С.М. Ловцевич // Актуальные проблемы радиоэлектроники и телекоммуникации: мат. Междунар. научно-технич. конф. -Самара, 2006. - С. 72-75.

5. Ненашев A.A. Введение дополнительных тестов для выявления функциональной активности эритроцитов в процессе хранения консервированной крови и эритромассы. / A.A. Ненашев, М.В. Катайкин, С.М. Ловцевич, И.Д. Бундов // Актуальные проблемы радиоэлектроники и телекоммуникации: мат. Междунар. научно-технич. конф. - Самара, 2006. - С. 77-81.

6. Ненашев A.A. Оценка долголетия изобретения многогранностью применения в исследованиях. / A.A. Ненашев, С.М. Ловцевич, И.Д. Бундов, М.В. Катайкин, М.Н. Батаев // Актуальные проблемы радиоэлектроники и телекоммуникации: мат. Междунар. научно-технич. конф. - Самара, 2006. - С. 81-87.

7. Ненашев A.A. Анализ и перспективы метода исследования функциональной активности эритроцитов в норме и патологии. / A.A. Ненашев, И.Д. Бундов, М.Н. Батаев, М.В. Катайкин - Самара, 2006. - 58 с. - Деп. ВИНИТИ № 1323-В2006.

8. Ненашев A.A. Ответная реакция эритроцитарной системы на физическую нагрузку у детей. / A.A. Ненашев, И.Д. Бундов, М.Н. Батаев, М.В. Катайкин // Актуальные проблемы современного образования и медицины.: мат. Междунар. научно-практич. конф. - Самара, 2006. - С. 103-105.

9. Бундов И.Д. Предварительные исследования для моделирования мас-сопереноса кислорода у здоровых и страдающих гипоксией испытуемых. / И.Д. Бундов, A.A. Ненашев, М.В. Катайкин, С.М. Ловцевич // Всерос. молод, науч. конф. с междунар. участием «VIII королевские чтения». Сб. тр. - Самара, 2007. - С. 223.

10. Патент на полезную модель №63544 Российская Федерация*. Устройство для определения функциональной активности эритроцитов. / A.A. Ненашев, A.B. Селезнев A.B., М.В. Катайкин, И.Д. Бундов; заявитель и патентообладатель Ненашев A.A.; заявл. 19.06.06; зарег. 27.05.07. - 20 с.

11. Ненашев A.A. Исследование элементов красной крови у детей при выходе из состояния новорожденности и недоношенности. / A.A. Ненашев,

M.B. Катайкин, И.Д. Бундов, С.М. Ловцевич // V Междунар. научно-практич. конф. «Новые медицинские технологии в охране здоровья здоровых, в диагностике, лечении и реабилитации больных». Сб. тр. - Пенза, 2007.- С. 179-181.

12. Бундов И.Д. Роль функциональной активности эритроцитов в поддержании газового гомеокинеза при хронической коронарной недостаточности. / И.Д. Бундов, A.A. Ненашев, М.В. Катайкин, С.М. Ловцевич // V Междунар. научно-практич. конф. «Новые медицинские технологии в охране здоровья здоровых, в диагностике, лечении и реабилитации больных». Сб. тр. - Пенза, 2007. -С.181-182.

13. Бундов И.Д. Усовершенствование методики определения электрической прочности мембран эритроцитов. / И.Д. Бундов, A.A. Ненашев, М.В. Катайкин, С.М. Ловцевич // V Междунар. научно-практич. конф. «Новые медицинские технологии в охране здоровья здоровых, в диагностике, лечении и реабилитации больных». Сб. тр. - Пенза, 2007. - С. 215-218.

14. Ненашев A.A. От механической резистентности эритроцитов к их функциональной активности при различных состояниях крови. / A.A. Ненашев, И.Д. Бундов, М.В. Катайкин - Самара, 2008. - 130 с. - Деп. ВИНИТИ № 857-В2008.

15. Ненашев A.A. Роль консервантов и их влияние на функциональную активность эритроцитов / A.A. Ненашев, И.Д. Бундов, М.В. Катайкин // Вест. С-Петерб. гос. мед. академии им. И.И.Мечникова. - 2008. - №1 (26). - С. 99102*.

* - публикации в ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях, определенных ВАК России и патенты

Подписано к печати 17.05.2010 г. Бумага писчая. Печать оперативная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 3 б

Отдел оперативной полиграфии

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Бундов, Илья Дмитриевич

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Морфофизиологические, биохимические и биомеханические свойства эритроцитов периферической крови.

1.2 Физиологические аспекты трансфузий эритроцитарных компонентов

1.3 Физиологическое обоснование выбора метода определения механической резистентности эритроцитов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Материалы и методы исследования.

2.2 Физиологическая оценка популяционного состава и механической резистентности эритроцитов капиллярной и венозной крови доноров.

2.3 Физиологическая оценка популяционного состава и механической резистентности эритроцитов донорской крови в различные сроки хранения

2.4 Физиологическая оценка популяционного состава и механической резистентности эритроцитов венозной крови доноров разного пола.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Обоснование морфофизиологической полноценности эритроцитов в зависимости от сроков хранения консервированной донорской крови"

Актуальность темы. За исторически короткий промежуток времени переливание крови прошло путь от привлекательной, но сопряженной с риском и потому неординарной методики лечения до самостоятельной научной дисциплины трансфузиологии — науки об управлении функциями организма с помощью парентерального введения органических и неорганических трансфузионных сред (Б.Е. Мовшев, 2003).

В настоящее время, в трансфузиологии уделяется большое внимание обеспечению не только безопасности, но и лечебной эффективности трансфузионных сред. Ведь их качество в конечном итоге обеспечивает и качество лечения больных, позволяет сохранить жизни многим людям с тяжелыми, подчас неизлечимыми болезнями.

Как известно, в процессе хранения консервированных эритроцитов сродство гемоглобина к кислороду увеличивается, что предполагает снижение способности эритроцитов отдавать тканям организма кислород (B.C. Ярочкин, 1993). В связи с этим особо важное значение приобретает процесс естественного восстановления нарушенной при хранении кислородтранспортной функции донорских эритроцитов, что в значительной степени определяет лечебную эффективность консервированных эритроцитов при лечении острых гипоксических состояний (С.М. Виноградов, 1987).

Эритроциты как один из компонентов крови, отвечающий за ее кислородтранспортную функцию, широко используются в клинической практике. Одновременно с введением в практику трансфузий возникли проблемы консервирования (хранения) и контроля качества эритроцитов. Методы консервирования и контроля качества эритроцитов совершенствовались по мере развития фундаментальных представлений о биохимии и физиологии клеток вообще и эритроцитов в частности (Б.Е. Мовшев, 2003).

Разработка и изучение методов консервирования эритроцитов невозможны без адекватной оценки их качества (функциональной полноценности). В связи с этим очень важным представляется поиск способов и методов решения двух основных проблем переливания крови — проблемы консервирования (хранения) и контроля качества эритроцитов. Одной из задач консервирования крови является создания условий, препятствующих разрушению физико-химической структуры эритроцитов и способствующих поддержанию процессов обмена веществ, необходимых для жизнедеятельности красных клеток (Ю.К. Новодержкина, 2004). В настоящее время разработаны и внедрены в широкую практику консерванты крови и ее компонентов, позволяющие достаточно длительное время сохранять последние и переливать по мере необходимости.

Как известно, донорская кровь с первых секунд пребывания вне сосудистого русла подвергается сложным морфологическим, биохимическим, реологическим, иммунологическим, функциональным изменениям (Г.И. Козинец, 1997). Большое значение имеет также возможность оценки качества консервированных эритроцитов непосредственно перед трансфузией (Б.Е. Мовшев, 2003).

В результате представляется актуальным оценка пригодности донорской крови к переливанию с использованием метода исследования биомеханических и реологических свойств эритроцитов по А.А.Ненашеву и соавторам (1983, 2006). Большое значение имеет также возможность оценки качества консервированных эритроцитов непосредственно перед трансфузией.

Поэтому целью исследований явилась физиологическая оценка структурно-функциональной полноценности эритроцитов в различные сроки хранения консервированной донорской крови.

Исходя из обозначенной цели, для решения были поставлены следующие задачи исследований:

1. Изучить влияние вибровоздействия на количественный и качественный состав эритроцитов консервированной крови в различные сроки хранения.

2. Провести физиологическую оценку популяционного состава и механической резистентности эритроцитов капиллярной и венозной крови доноров.

3. Исследовать структурно-функциональную полноценность эритроцитов донорской крови в различные сроки хранения.

4. Изучить морфофизиологическую полноценность консервированной крови доноров, разделенных по половому признаку.

5. Составить научно-обоснованные рекомендации по профилактике отклонений при хранении донорской крови.

Научная новизна. Впервые научно обоснована морфофизиологическая полноценность эритроцитов консервированной донорской крови в различные сроки хранения с использованием метода исследования механической резистентности эритроцитов по А.А. Ненашеву и соавт.

Дана комплексная характеристика количественного и качественного состава венозной и капиллярной крови, позволяющая объективно оценить полноценность их эритроцитов.

Проведено морфофизиологическое сравнение популяционного состава и механической резистентности эритроцитов венозной крови доноров разного пола.

Разработаны научно-обоснованные рекомендации о физиологически-обоснованных сроках использования консервированной донорской крови.

Научная новизна полученных результатов исследований подтверждена патентом РФ на полезную модель № 63544.

Практическая значимость. Предложен оригинальный метод для оценки морфофизиологических, биохимических и биомеханических свойств эритроцитов консервированной донорской крови.

Разработаны практические предложения для станций переливания крови, позволяющие контролировать состояние эритроцитов хранящейся крови на предмет пригодности к переливанию.

Реализация результатов исследований. Материалы диссертации включены в правила работы с донорами на Самарской областной клинической станции переливания крови и используются при контроле сроков сдачи крови доноров на хранение и определении сроков выдачи консервированной крови в лечебные учреждения. Материалы диссертации используются при проведении лекционных и практических занятий на кафедре госпитальной терапии с курсом трансфузиологии ГОУ ВПО «СамГМУ» Росздрава и на кафедре биологической химии ГОУ ВПО «СамГУ». Также материалы диссертации внедрены в курс обучения по экологическим программам НОУ УЦ «Самара», а также используются в работе экоаналитической лаборатории при обследовании работающих в экологически небезопасных условиях.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: VII международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI» (Москва, 2006), V международной научно-практической конференции «Медицинская экология» (Пенза, 2006), V Международной научно-практической конференции «Новые медицинские технологии в охране здоровья здоровых, в диагностике, лечении и реабилитации больных» (Пенза, 2007), IX Всероссийской молодежной научной конференции с международным участием «Королевские чтения» (Самара, 2007).

Материалы и основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на расширенном заседании кафедры физиологии и биохимии сельскохозяйственных животных ФГОУ ВПО «Самарская ГСХА» (Самара 2010).

Научные положения, выносимые на защиту:

1. Имеется взаимосвязь между количественно-качественными характеристиками эритроцитов и методом определения их функциональной активности.

2. Выявлена причинно-следственная связь между сроками хранения консервированной крови и биомеханическими показателями венозной и капиллярной крови доноров.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 научных работ, в том числе 1 работа в издании, определенном ВАК России для докторских и кандидатских диссертаций, 1 патент РФ на полезную модель.

Структура и объем диссертации. Работа включает следующие разделы: введение (5 е.), обзор литературы (36), собственные исследования (54), обсуждение полученных результатов (7), выводы (1), практические рекомендации (1), список литературы (20), приложение (1).

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Бундов, Илья Дмитриевич

ВЫВОДЫ

1. Научно обоснована морфофнзиологнческая полноценность эритроцитов в зависимости от сроков хранения консервированной донорской крови.

2. Еженедельная физиологическая оценка популяционного состава и механической резистентности эритроцитов капиллярной и венозной крови позволяет обеспечить объективный контроль над структурно-функциональной полноценностью хранящейся крови.

3. Установлена определенная изменчивость структурно-функциональной полноценности эритроцитов донорской крови за недельный срок хранения; при этом возрастает фрагментация крупных клеток, а агрегация мелких субпопуляций снижается по сравнению с данными на момент закладки.

4. Через две недели хранения консервированной крови морфофизиологическая полноценность эритроцитов относительно • стабилизируется, о чем свидетельствует более выраженная фрагментация клеток со средними и большими объемами, при одновременном снижении процесса агрегации.

5. На 21 день хранения консервированной крови наблюдается стабилизация морфофизиологической полноценности эритроцитов, что подтверждается усилением процессов дезагрегации и фрагментации.

6. Анализ морфофизиологической полноценности консервированной крови доноров, разделенных по половому признаку, показал, что у доноров-мужчин более выражен процесс агрегации эритроцитов, тогда как у доноров-женщин преобладает их фрагментация.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для станций переливания крови предложены научно-обоснованные рекомендации по контролю морфофизиологической полноценности донорской крови с использованием метода исследования биомеханических и реологических свойств эритроцитов по А.А.Ненашеву и соавторам (1983, 2006).

2. Научные положения, выводы и предложения диссертационных исследований используются при проведении лекционных и практических занятий на кафедре госпитальной терапии с курсом трансфузиологии ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» и на кафедре биологической химии «Самарский государственный университет».

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Бундов, Илья Дмитриевич, Самара

1. А. с. 1012887 СССР. Способ исследования механической резистентности эритроцитов / Ненашев А. А. // Бюлл. изобр. 1983. - № 15.

2. А. с. 1377046 СССР. Устройство для изучения механической резистентности эритроцитов / Ненашев А. А. // Бюлл. изобр. 1988. - № 13.

3. Аграненко, В. А. Консервирование крови / В.А. Аграненко; Справочник по переливанию крови и кровезаменителей. М.: Медицина. - 1982. - С. 42-48.

4. Аграненко, В. А. Взгляд на гематологию / В.А. Аграненко, В. А. Маркова, И. А. Суворова и др. // Проблемы гематологии. 1982. - № 10. - С. 19-24.

5. Аграненко, В. А. Механическая прочность эритроцитов / В.А. Аграненко, Ю. С. Суханов // Гематология и трансфузиология. 1987. - № 10. - С. 10-14.

6. Аграненко, В. А., Замороженная кровь и ее клиническое применение / В.А. Аграненко, JL И. Федорова. М.: Медицина, 1983. - 96 с.

7. Адзерихо, Р. Д. Регуляция механической прочности эритроцитов иммуноглобулинами плазмы крови / Р. Д. Адзерихо, И. М. Окунь, С. JI. Аксенцев, С. В. Конев // Биофизика. 1988. - № 2. - С. 362-364.

8. Акопян, В. Б. Ультразвуковой метод определения резистентности эритроцитов доноров крови / В. Б.Акопян, Т. Н.Гарегинян, Р. Г. Маев и др. // Гематология и трансфузиология. 1990. - № 12. - С. 32-34.

9. Акопян, В. Б. Закономерности биологического действия ультразвука низких интенсивностей: автореф. дисс. . докт. биол. наук. / В. Б.Акопян. М., 1982.-32 с.

10. Ю.Алабова, С. М. Популяционный состав и функциональная особенность (механическая резистентность) эритроцитов у новорожденных детей: дисс. . канд. мед. наук. / С. М. Алабова. М., 1995. - 183 с.

11. П.Алексеев, Г. А. Анемии (патогенез, клиника и лечение) / Г. А. Алексеев. -М., 1953.-235 с.

12. Аулик, И. В. Определение физической работоспособности в клинике испорте / И. В. Аулик. М.: Медицина, 1979. - 195 с.

13. Ашкинази, И. Я. Эритроцит и внутреннее тромбопластинообразование / И. Я. Ашкинази. JL: Наука. - 1977. - 155с.

14. Борисюк, М. В. Методы исследования и клиническое значение деформируемости эритроцитов / М. В. Борисюк, В. В. Зинчук // Здравоохранение Белоруссии. 1989. - № 7. - С. 18-21.

15. Брагинская, Ф. И. Изучение ультразвукового гемолиза эритроцитов в норме и при патологии / Ф. И. Брагинская, Г. Г. Султанова, В. Б. Акопян и др. // Биофизика. 1982. - № 4. - С. 679-683.

16. Виноградов, А. В. Фильтруемость эритроцитов у больных острым инфарктом миокарда / А. В. Виноградов, Г.П.Арутюнов, А.Б. Косырев и др. // Кардиология. 1990 - Т. 30, № 4. - С. 41-43.

17. Виноградов, С.М. Проблема фильтруемости эритроцитов / С.М.Виноградов, B.C. Ярочкин// Пат. физиол. 1987. -№1. - С.81-84

18. Вишневский, В. И. Влияние ультразвуковых колебаний на пассивную проницаемость мембран эритроцитов к ионам калия / В. И. Вишневский, О. И. Гордиенко // Ультразвук в биологии и медицине: тез. докладов. Пущино, 1981.-С. 73-75.

19. Воробьев, А. И. Острая массивная кровопотеря / А. И.Воробьев, В. М. Городецкий, Е. М. Шулутко, С. А. Васильев. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001.

20. Воробьев, П. А. Анемический синдром в клинической практике / П. А. Воробьев. М.: Ньюдиамед, 2001.

21. Воробьев, П. А. Лабораторная и инструментальная диагностика. Спутник интерниста / П. А.Воробьев, Л. И.Дворецкий, В. В.Желнов, С.В. Яковлев. -М.: Ньюдиамед-АО, 1997. 212с.

22. Гаврилов, О. К. Клетки костного мозга и периферической крови / О. К.Гаврилов, Г. И.Козинец, Н. Б.Черняк. М.: Медицина, 1985. - 288с.

23. Гаврилов, О. К. Теория системной регуляции агрегатного состояния крови / О. К.Гаврилов // Терапевтический архив. 1982. - № 8. - С. 133-136.

24. Ганиткевич, А. Я. Методика определения механической резистентности эритроцитов / А. Я. Ганиткевич, Л. И. Черненко // Лабораторное дело. 1978. - № 2. - С. 116-117.

25. Гарегинян, Т. Н. Действие ультразвука низких интенсивностей на эритроциты в суспензии: автореф. дисс.канд. биол. наук. / Т.Н. Гарегинян. -Ереван, 1988.- 17 с.

26. Геллер, Л. И. Физиология и патология селезенки / Л. И. Геллер. М:: Медицина, 1964. - 162 с.

27. Германов, В. А. Эритроциты, тромбоциты, лейкоциты / В. А. Германов, О.Н. Пиксанов. Куйбышев, 1966. - 164с.

28. Гольдберг, Д. И. Диаметр эритроцитов в норме и патологии / Д.И.Гольдберг, Г. Д. Левина. Томск, 1969. - 116с.

29. Гордиенко, О. И. Барьерно-транспортная функция мембран эритроцитов при комбинированном воздействии низких температур и ультразвуковых колебаний: автореф. дисс. . канд. биол. наук. / О. И. Гордиенко. Харьков, 1983.-23с.

30. Городецкий, В.М. Трансфузиология перспективы развития / В.М. Городецкий // Бескровная хирургия - итоги и перспективы: Всероссийский науч.-практ. симпоз. с междун. участ. - М., 2002. - С. 56-57.

31. Дудаев, В.А. Механическая резистентность эритроцитов при гипертонической болезни / В.А. Дудаев, М. Аль-Мубарак // Советская медицина 1990. - №2. - С. 10-11

32. Ермолов, А. С. Трансфузионные аспекты "бескровной" хирургии / А.С. Ермолов, В. Б.Хватов, В. JI. Леменев и др. // Бескровная хирургия итоги, и перспективы: Всероссийский науч.-практ. симпоз. с междун. участ. - М., 2002. - С. 47-48.

33. Жибурт, Е.Б. Доказательная трансфузиология. Часть 1. О правилах назначения компонентов крови / Е.Б. Жибурт, Е.А. Шестаков // Здравоохранение. 2007. - №11. - С.31-37.

34. Жибурт, Е.Б., Шестаков Е.А. Доказательная трансфузиология. Часть 2. Аудит гемотрансфузий / Е.Б. Жибурт, Е.А. Шестаков // Здравоохранение. -2007. №12. - С.36-44

35. Жибурт, Е. Б. Трансфузиология. / Е.Б. Жибурт. СПб: Питер, 2002.

36. Заводник, И. Б. Механический лизис эритроцитов человека. Стабилизация мембран белками плазмы / И. Б. Заводник, Т. П.Пилецкая, И. И. Степуро // Украинский биохимический журнал. 1991. - № 6. - С. 72-78.

37. Захарова, М. Б. Методы изучения деформируемости эритроцитов. Обзор литературы / М. Б.Захарова, Н. И.Целик, М. JI. Клячкин // Лабораторное дело.- 1983.-№ 8.-С. 3-6.

38. Зильбер, А.П. Кровопотеря и гемотрансфузия / А.П.Зильбер Петрозаводск: ПетрГУ, 1999.

39. Игнатов, С. В. Система эритрона при ожогах / С. В. Игнатов // Гематология и трансфузиология. 1990. - № 3. - С. 22-26.

40. Ильина, В. Е. Механический гемолиз у больных с протезами митрального и аортального клапанов сердца / В. Е. Ильина, Д. С. Самуйлова, М. Б.

41. Сейсенбаев // Вестник хирургии им. И. И. Грекова. 1986. - Т. 136. - № 6. -С. 12-16.

42. Инглиш, В.А. Инфузионная терапия в предоперационном периоде / В.А.Инглиш, Р.Е.Инглиш, И. Г. Уилсон // Update in Anaestesia. 2006. - №12. - С.15-16.

43. Козинец, Г.И. Исследование системы крови в клинической практике / Г.И. Козинец, В.А. Макаров. М.: Триада-Х. - 1997. - 480с.

44. Истаманова, Т. С. Функциональная гематология / Т. С. Истаманова, В. А.Алмазов, С. В.Канаев. JL: Медицина, 1973. - 312с.

45. Карабанов, Г. Н. Деформируемость эритроцитов / Г. Н.Карабанов // Анестезиология и реаниматология. 1984. - № 1. - С. 71-73.

46. Кардаш, Б.Е. К вопросу о диерезе эритроцитов в организме при повреждении их мембраны / Б. Е. Кардаш, И. Я. Гейтман // Терапевтический архив. 1982. - № 8. - С. 95-97.

47. Каро, К. Механика кровообращения / К. Каро, Т.Педли, Р.Шротер, У.Сид -М.: Мир, 1981.-625с.

48. Кассирский, И. А. Клиническая гематология / И. А. Кассирский, Г.А.Алексеев. М. - 1970. - 799с.

49. Катюхин, JI. Н. Реологические свойства эритроцитов. Современные методы исследования / JI. Н. Катюхин // Физиологический журнал имени И. М. Сеченова. 1995. - № 6. - С. 122-129.

50. Климанский, В. А. Острая кровопотеря и принципы ее возмещения / В. А. Климанский // Сов. мед. 1977. - № 8. - С. 82-87.

51. Колосков, А. В. Болезни системы крови / А. В. Колосков // Внутренняя медицина: Руководство для врачей. СПб: Левша, Ренкор, 1999. -Т. 2.

52. Колосков, А.В. Современное представление о показаниях для трансфузии эритроцитарных компонентов крови / Колосков А.В. // Гематология и трансфузиология. 2004. - №6. - С. 38-42

53. Котовщикова, М. А. Индекс деформируемости эритроцитов при гемофилии и болезни Виллебранда / М. А.Котовщикова, С. С. Бессмельцев // Клиническая лабораторная диагностика. 1992. - № 2. - С. 25-27.

54. Кроль, А. Ю. Спонтанные колебания клеточной поверхности в частотном интервале 0,2-30 Гц / А. Ю. Кроль, М. Г.Гринфельдт, С. В. Левин // Цитология. 1989. - № 5. - С. 556-562.

55. Кроль, А. Ю. Быстрые локальные колебания поверхности эритроцита человека / А. Ю. Кроль, М. Г. Гринфельдт, А. Д. Смильгявичус, С. В. Левин // Цитология. 1989. - № 5. - С. 563-567.

56. Кроль, А. Ю. Характеристики спектров спонтанных колебаний поверхности эритроцитов и их теней / А. Ю. Кроль, М. Г. Гринфельдт, В. В.Малев // Биологические мембраны. 1992. - № 5. - С. 542-551.

57. Лакин, К. М. Лекарственное воздействие на эритроцитарный компонент гемостаза / К. М.Лакин, М. С.Овнатанова // Фармакология и токсикология. -1976.-№3.-С. 358-367.

58. Левин, Г. Я. Гепарин и агрегация эритроцитов / Г. Я. Левин, Ю. А. Шереметьев //Кардиология. 1978. - № 3. - С. 124-126.

59. Левтов, В. А. Реология крови. / В. А.Левтов, С. А.Регирер, Н. X. Шадрина. -М.: Медицина, 1982. 240 с.

60. Малыш, П.Н. Изучение уровня монооксида углерода в эритроцитахконсервированной донорской крови на этапах хранения при позитивных температурах / П.Н. Малыш, И.А.Комаревцева, М.В. Золотаревская // Укр. мед. альманах.- 2004.- № 6.- С. 100-102.

61. Мишуров, Э. А. Влияние структуры и состояния эритроцитов на сродство крови к кислороду / Э. А.Мишуров, Г. В.Дервиз // Вопросы медицинской химии. 1967. - Т. 13, № 5. - С. 578-574.

62. Мовшев, Б.Е. Трансфузионные среды: прикладные и фундаментальные аспекты. / Б.Е.Мовшев, В.М. Витвицкий и др. // Гематология и трансфузиология. 2003. - №3

63. Мороз, В.В. Острая кровопотеря. Взгляд на проблему / В.В.Мороз,

64. Д.А.Остапченко, Г.Н.Мещаряков, С.М. Радаев // Анастезиол. и реаниматол.2002. №6. - С. 4-9 i

65. Ненашев, А.А. Уникальность функциональных систем новорожденных / А.А.Ненашев, С.М.Алабова, А.А.Хакулова // Растущий организм: адаптация к физической нагрузке: тез. Всерос. Науч. конф. Казань, 1994. - С. 87-88.

66. Ненашев, А. А. Функциональная активность эритрона при гипоксических состояниях / А. А. Ненашев, Д. Д.Отарова, О. Х.Тегаева, М. И. Шамиль -Нальчик, 1993. 12 с. - Деп. ГЦНМБ № Д-23695.

67. Ненашев, А. А. Исследование структуры популяции эритроцитов кондуктометрическим методом с использованием счетчика микрочастиц «Picoscale PS-4» / А. А. Ненашев, И. М. Тищенко // Лабораторное дело. -1987.-№9.-С. 648-653.

68. Ненашев, А. А. О возможности шунтирования кислорода при снижении функциональной активности эритроцитов / А. А. Ненашев, И. М. Тищенко // Актуальные проблемы современной физиологии. Киев, 1986. - С. 216-217.

69. Ненашев, А. А. Определение функциональной активности популяции эритроцитов при различных гипоксических состояниях / А. А. Ненашев, И. М. Тищенко //Лабораторное дело. 1986. - № 3. - С. 134-136.

70. Ненашев, А. А. Тренировка к нагрузкам как модель для выявления изменений в системе красной крови / А. А. Ненашев, И. М. Тищенко, Т. Н. Шатских // Моделирование и прогнозирование заболеваний, процессов и объектов. Самара, 1998. - С. 136-139.

71. Ненашев, А. А. Механическая резистентность эритроцитов и массоперенос кислорода при гипоксических состояниях различного генеза / А. А. Ненашев, И. М. Тищенко, 3. А.Шидов // Физиологический журнал. 1985. -Т. 31, №6.-С. 650-657.

72. Нетяженко, В.З. Реологические свойства крови у больных инфарктом миокарда (обзор литературы) / В.З.Нетяженко, В.Н.Крамарева, Я.М.Ена, идр. // Врачебное дело. 1992. - №1. - С. 15-21.

73. Павлов, А.Д. Регуляция эритропоэза: физиологические и клинические аспекты / А.Д.Павлов, Е.Ф. Морщакова. М.: Медицина. - 1987. - 272с.

74. Петровский, Б. В. Руководство по обшей и клинической трансфузиологии / Б. В. Петровский. М.: Медицина, 1979.

75. Попов, М. П. Изменение агрегационных и физико-химических свойств крови при вибрационной болезни / М. П. Попов, Д. И.Зюбан, А. В.Сорокин,

76. B. Д. Реук // Гематология и трансфузиология. 1992. - № 11-12. - С. 28-30.

77. Румянцев, А.Г. Клиническая трансфузиология. / А.Г.Румянцев, В.А. Аграненко. М.: ГЭОТАР МЕД, 1997

78. Рябов, С.И. Основы физиологии и патологии эритропоэза. / С.И. Рябов. -Л.:Медицина. 1971. - 254с.

79. Рязанцева, Н.В. Характеристика периферического звена эритрона у больных с ограниченными поверхностными термическими ожогами / Н.В. Рязанцева, В.В.Новицкий, В.П.Рязанцев // Клиническая лабораторная диагностика. -2000. №6. - С. 23-34.

80. Савельев, B.C. Сравнительная эффективность плазмозаменителей при нормоволемической гемодилюции и коррекции острой кровопотери. / В.С.Савельев, Н.А. Кузнецов //Вестник хирургии. 2001. - №6. - С.127-132.

81. Селиванов, Е.А. Создание трансфузионных сред на основе эритроцитов и плазмозамещающих растворов / Е.А.Селиванов, В.Н. Мельникова // Гематология и трансфузиология. 1990. - №5.

82. Сигал, В. Л. Электрокинетический заряд эритроцитов и его роль вобеспечении структурных свойств крови / В. JI. Сигал // Гематология и трансфузиология. 1988. - № 4. - С. 40-44.

83. Сидоркевич, С.В. К вопросу о совершенствовании организации работы станций переливания крови / С.В.Сидоркевич С.П., Калеко, Е.Б. Жибурт // Трансфузиология.- 2000.- №1.- С.28-46

84. Стародуб, Н. С. Онтогенез красной кровяной клетки и гетерогенная система гемоглобина / Н. С. Стародуб // Успехи совр. биол. 1976. - Т. 81, № 2. - С. 244-257.

85. Терентьева, Э. И. Атлас ультраструктуры клеток кроветворной ткани / Э.И.Терентьева, 3. Г. Шишканова. М.: Медицина, 1972. - 135 с.

86. Тибилова, Н.Н. Метаболизм эритроцитов в процессе хранения и оптимизация методов консервирования: автореф. дис. д-ра биол. наук. / Н.Н. Тибилова. -М. 1991.

87. Тищенко, И. М. Роль функциональной активности популяции эритроцитов в поддержании газового гомеостаза при гипоксических состояниях разного генеза: дисс. . канд. мед. наук. / И. М.Тищенко. Нальчик, 1989. - 156 с.

88. Тодоров, И. Клинические лабораторные исследования в педиатрии / Й.Тодоров. София, 1963. - 876 с.

89. Ужанский, Я. Г. Физиологические механизмы регенерации крови / Я.Г.Ужанский М.: Медицина, 1968. - 264 с.

90. Фолков, Б. Кровообращение / Б. Фолков, Э.Нил. М.: Медицина, 1976. - 463 с.

91. Франклин, Банн X. Патофизиология анемий / Банн X. Франклин; под ред. Е. Браунвальда, К. Дж. Иссельбахера, Р.Г. Петерсдорфа и др. // Внутренние болезни. В 10 книгах. Книга 7: Пер. с англ. М.: Медицина. - 1996. - С. 572579.

92. Хуцишвили, Г. И. Оценка механической резистентности форменных элементов крови (тромбоцитов, эритроцитов) ультразвуковым методом при гемосорбции. Автореф. дисс. .канд. биол. наук/Г.И.Хуцишвили Тбилиси,1989.-25 с.

93. Цыпин, А. Б. Защита клеток крови при проведении вспомогательного кровообращения в режиме контрпульсации / А.Б. Цыпин, P.M. Куршнян, K.JL Мелузов, И.А. Бурыкина // Вопросы трансплантологии и искусственных органов. М., 1977. - С. 157-160.

94. Черницкий, Е. А. Структура и функции эритроцитарных мембран. / Е. А. Черницкий, А. В. Воробей. Минск, 1981. - 215с.

95. Чернух, А. М. Микроциркуляция. / А. М. Чернух, П. Н. Александров, О.

96. B. Алексеев. М.: Медицина. - 1984. - 432с.

97. Чижевский, A. J1. Структурный анализ движущейся крови. / A. J1. Чижевский. М.: Изд-во АН СССР. - 1959. - 474 с.

98. Чиркин, А. А. Действие ультразвука на метаболические реакции эритроцитов / А. А. Чиркин // Здравоохранение Белоруссии. 1979. - № 1.1. C. 21-23.

99. Шабалин, В.Н. Научно-практические аспекты рационального использования эритроцитов / В.Н.Шабалин, В.Н.Мельникова, К.Ю. Литманович, Ю.Н.Пахомов. // Гематология и трансфузиология. — 1987. №3. -С. 9-13.

100. Шабанов, В.А. Клиническое значение изучения нарушений реологических свойств крови у больных гипертонической болезнью / В.А.Шабанов, Н.Д.Китаева, Г.И.Левин и др. // Терапевтический архив.1990.-Т. 62,№5.-С. 89-94.

101. Шевченко, Ю.Л. Безопасное переливание крови / Ю.Л. Шевченко, Е.Б.Жибурт. СПб.: Издательство "Питер". - 2000.- 320 с.

102. Шевченко, Ю. Л. Руководство по общей и клинической трансфузиологии / Ю. Л.Шевченко, В. Н.Шабалин, М. Ф. Заривчацкий, Е. А. Селиванов. -СПб: Фолиант. 2003.

103. Ширяев, В. В. Изменения эритроцитов при физической нагрузке / В. В.Ширяев, Н. В.Ширяев // Физиология человека. 1994. - № 4. - С. 168-170.

104. Шиффман, Ф.Дж. Патофизиология крови. / Ф.Дж. Шиффман; Пер с англ.- М. СПб.: Изд-во БИНОМ. - Невский Диалект. - 2000. - 448с., ил.

105. Шмид-Шонбейн, Г. Клинические аспекты исследований реологических свойств крови / Г. Шмид-Шонбейн // Кардиология. 1982. - Т. 22, №3. - С. 82-85.

106. Шпигель, А. С. Особенности фармакодинамики тиролиберина при воздействии профессиональных вредностей. / А. С.Шпигель. Самара, 2000.- 172 с.

107. Шумаков, В. И. Влияние фенольных антиоксидантов на резистентность клеток крови при проведении вспомогательного кровообращения / В. И. Шумаков, А. Б.Цыпин, Р. М.Куршнян, К. Л.Мелузов // Кровообращение. -1977.-№2.-С. 55-57.

108. Щерба, М. Н. Физиология эритропоэза / М. Н. Щерба // Физиология системы крови. Л.: Наука, 1968. - С. 52-92.

109. Эльпинер, И. Е. Биофизика ультразвука. / И.Е.Эльпинер. М.: Наука. -1973.-384с.

110. Эльпинер, И.Е. Ультразвук. Физико-химическое и биологическое действие. / И.Е.Эльпинер. М.: Физматгиз. - 1963. - 420с.

111. Якубова, Р. Р. Способ оценки дестабилизации мембран эритроцитов / Р. Р.Якубова, А. В. Мурин // Лабораторное дело. 1990. - № 5. - С. 26-29.

112. Ярочкин, B.C. Консервированные эритроциты человека / B.C. Ярочкин, С.М.Виноградов // Гематол. и трансфузиол. 1991. - №6. - С.22-25

113. A Report by the American Society of Anesthesiologists Task Force on Blood Component Therapy, Practice Guidelines for Blood Component Therapy // Anesthesiology. 1996. - Vol. 84, N 3. - P. 732-747.

114. Allsop, P. Intrasplenic blood cell kinetics in man before and after brief maximal exercise / P.Allsop, A. M.Peters, R. N. Arnot et al. // Clin. Sci. (Colch). 1992. -Vol. 83, № l.-P. 47-54.

115. Banerjee, R. The diagnostic relevance of red cell rigidity / R.Banerjee, K.Nageshwari, R.R.Puniyani // Clin. Hemorheol. Microcic. 1988. - Vol. 19, № 1 -P. 21-24.

116. Beutler, E. Rheological factors in circulatory disorders / E.Beutler, C.West // J. Lab. clin. Med. -1983. Vol. 102, № 1. - P. 53-62.

117. Bludszuweit, C. Model for a general mechanical blood damage prediction / C.Bludszuweit // Artif. Organs. 1995. - Vol. 19, № 7. - P. 583-589.

118. Bohler, T. Mechanical fragility of erythrocyte membrane in neonates and adults / T.Bohler, A.Leo, A.Stadler, O.Linderkamp // Pediatr. Res. 1992. - Vol. 32, № l.-P. 92-96.

119. Boldt, J. Fluid management of patients undergoing abdominal surgery more questions than answers / J.Boldt // European Journal of Anaesthesiology. - 2006.

120. Brain, M. C. Microangiopathic haemolytic anemia / M. C. Brain // British Journal of Haematology. 1972. - Vol. 23, № 1. - P. 45-52.

121. Brandts, AT. A strategy to reduce inappropriate red blood cell transfusion / A.T.Brandts, B.Richards, A.Grent, S.Welttsteln // Med. J. Aust. 1994. - Vol. 160,N 11.-P. 721-722.

122. Braunstein, A. H. Transfusion of plasma components./ A. H.Braunstein, H. A. Oberman // Transfusion. №24. - 1984. - P. 289.

123. Bull, B. S. Red blood cell fragmentation in microangiopathic haemolytic anemia: in vitro studies / B. S.Bull, M. L.Rubenberg, J. V.Dacie, M. C.Brain // Lancet. 1967. - Vol. 2, № 7526. - P. 1122-1124.

124. Bunn, H. F. Hemoglobin function in stored blood / H. F.Bunn, M. H.May, W. F.Kocholaty, С. E. Shields // J. Clin. Investig. 1969. - Vol. 48, № 2. - P. 311321.

125. Caimi, G. Blood rheology in acute myocardial infarction / G.Caimi,

126. A.Rainery, A.Sarno // Acta cardiol. 1982. - Vol. 37, №6. - P. 401-409.

127. Casoni, I. Reduced hemoglobin concentration and red cell hemoglobinization in Italian marathon and ultramarathon runners / I.Casoni, C.Borsetto, A.Covicchi et al.// Int. J. Sports Med. 1985. - Vol. 6, № 3. - P. 176-181.

128. Chabanel, A. Evaluation of a method to assess red blood cell aggregation / A.Chabanel, M.Samama // Biorheology. 1989. - Vol. 26, №4. - P.785-797.

129. Chen, C. F. Rheologic determinant changes of erythrocytes in Binswanger's disease / C. F.Chen, H. Y.Jia, H. W. Ma et al. // Chung Hua I Hsueh Tsa Chih (Taipei). 1999. - Vol. 62, № 2. - P. 76-85.

130. Chien, S. Hemolysis during filtration through micropores: a scanning electron microscopic and hemorheologic correlation / S.Chien, S. A.Luse, C. A. Bryant // Microvasc. Res. 1971. - Vol. 3, № 2. - P. 183-203.

131. Chien, S. Hemorheologic correlation / S Chien. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. -1981. Vol. 41. - Suppl. 156. - P. 7-12.

132. Deitrick, R. W. Retrogression and the red blood cell / R.W.Deitrick, R.O. Ruhling, D. W. Deitrick // J. Sports Med. & Physical Fitness. 1980. - Vol. 20. -№ l.-P. 67-70.

133. Edwards, M. J. Electrolyte labile increase of oxygen affinity during in vivo aging of hemoglobin / M. J.Edwards, D. A.Rigas // J. Clin. Investig. 1967. - Vol. 46, № 10.- P. 1579-1588.

134. Faster, R. Biophysical behavior of red cells in suspensions / R. Faster // The Red Blood Cell. Washington, 1964. -P.827

135. Feo, C. The influence of suspension osmolarity and erythrocyte volume on cell deformability / C.Feo, W. M. Philips // Nouv. Rev. Tran. Hematol. 1982. - Vol. 24, №5.-P. 231-236.

136. Finch, C. A. Erythrocyte deformability a predictive factor in stroke patients / C. A. Finch // Vox Sang, - 1985. - Vol.48, №5, - P.319-322.

137. Freedman, M. L. Hemolytic anemia / M. L. Freedman // Blood Disorders in the Elderly. 1985.-P. 139-164.

138. Friedemann, H. Enzymes of the red cell, a critical catalogue / H.Friedemann, S. M.Rappoport // Cellular and molecular biology of erythrocytes Tokyo, 1974. - P. 181-259.

139. Froelich, J. W. Redistribution of visceral blood volume in upright exercise in healthy volunteers / J. W.Froelich, H. W.Strauss, R. H.Moore, K. A. McKusick // J. Nucl. Med. 1988. - Vol. 29, № 10. - P. 1714-1718.

140. Grasse-Brockhoff, F. Mechanical hemolysis in patients with valvular heart disease and valve prothesis / F.Grasse-Brockhoff, G.Gehrman // American Heart Journal. 1967. - Vol. 74. - P. 137-139.

141. Gurcan, N. Changes in blood haemorheological parameters after submaximal exercise in trained and untrained subjects / N.Gurcan, D.Erbas, E.Ergen et al. // Physiol. Res. 1998. - Vol. 47, № 1. - P. 23-27.

142. Haidas, S. 2,3-diphosphoglycerate content and oxygen affinity as a function of red cell age in normal individuals / S.Haidas, D.Labie, J. C. Kaplan // Blood. -1971. Vol. 38, № 4. - P. 463-467.

143. Hasley, P. B. The necessary and the unnecessary transfusion: a critical review of reported appropriateness rates and criteria for red cell transfusion / P. B.Hasley, J. R.Lave, W. N. Kapoor // Transfusion. 1994. - Vol. 34, № 2. - P. 110-115.

144. Heaton, A. Increase in erythrocyte disaggregation shear stress in hypertension / A.Heaton, T.Keegan, S.Holme // Brit. J. Haemat. 1989. - Vol. 71. № 1. - P.131-136.

145. Heaton, A. Hypertension / A.Heaton, L.Miripol, R.Aster et al. // Brit. J. Haemat. 1984 - Vol. 57. № 3. - P. 467-476.

146. Hogman, C.F. Mechanics of blood flow in the microcirculation / C.F. Hogman // VoxSang. 1985. -Vol.48. №2. - P. 126-127.

147. Humphrey, P. Changts in cerebral blood flow relating to haematocrit and viscosity / P.Humphrey // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1981. - Vol. 41. - Suppl. 156.- P. 209-214.

148. Johnston, D. G. Blood transfusion; use and abuse of blood components / D. G.

149. Johnston // West J. Med. 1978. - Vol. 128, № 2. - P. 390-398.

150. Katyukhin, L. N. Rheologic properties of mammalian erythrocytes: relationship to transport ATPases / L. N.Katyukhin, A. M.Kazennov, M. N.Maslova, Yu. A. Matskevich // Сотр. Biochem. Physiol. B. Biochem. Mol. Biol. 1998. - Vol. 120, № 3. - P. 493-498.

151. Knight, J. A. Microcirculation / J. A.Knight, D. A.Searles, R. C.Blaylock // Ann. Clin. Lab. Sci. 1993. - Vol. 23. - P 178-183.

152. Knight, J. A. Haematocrit / J. A.Knight, D. A.Searles, R. C.Blaylock // Ibid. -1992.-Vol. 22.-P. 294-301

153. Konrad, H. Die osmotische und mechanische Resistenz der Erythrozyten bei chronischen Lebererkrankungen / H.Konrad, B.Brust, G.Oldenburg // Z. Gesamt. Inn. Med. 1977. - Bd. 32, № 6. - S. 143-147.

154. Kreul, H. G. Die Bedeutung der mechanischen Resistenz von Erythrozyten in Hinblick auf die Implantierbarkeit kunstlicher Herzklappen / H.G.Kreul, J.Rastetter // Munch. Med. Wochenschr. 1977. - Vol. 119, № 37. - P. 1181-1182.

155. Lee, D. M. Refractory anemia / D. M. Lee // Biochem. biophys. Res. Commun. 1980. - Vol.95. - P. 1663-1672.

156. Letcher, R.L. Direct relationship between blood preassure abd blood viscosity in normal and hypertansive subjects / R.L.Letcher, S.Chien, T.Pickering et al. // Amer. J. Med. 1981.-Vol. 70, №6.-P. 1195-1202.

157. Lobo, D. N., Perioperative fluid and electrolyte management: a survey of consultant surgeons in the UK / D. N.Lobo, M. G.Dube, K. R Neal., S. P.Allison, B. J. Rowlands // Ann R Coil Surg Engl. 2002.

158. Maeda, N. Decreased deformability of red cells in refractory anemia and theabnormality of the membrane skeleton / N.Maeda, T.Nakajima, Y.Izumida et al. // Biorheology. 1994. - Vol. 31, № 4. - P. 395-405.

159. Marik, P. E. Handbook of Evidence-Based Critical Care / P. E.Marik New York, 2001. - P. 685.

160. Martin, D. J. Fresh frozen plasma supplement to massive red blood cell transfusion / D. J.Martin, et al. // Ann. Surg. 2005.

161. May, A. K. Rational use of blood products / A. K.May, R. D. Kauder // The Intensive Care Unit Manual. New York: Springer, 2001. - P. 181-192.

162. Mazen, B. Evaluation of the appropriateness of blood and blood product transfusion using preset criteria / B.Mazen, M.Epstein, I.Ben-Bassat et al. // Transfusion. 1989. - Vol. 29, № 6. - P. 473-476.

163. Moore, G.L. Blood preassure / G.L.Moore, M.E.Ledford, M. R. Brummel // Transfusion. 1981. - Vol. 21. № 6. - P. 723-731.

164. Moore, G.L. Deformability of red cells / G.L.Moore, C.C.Pack, P.R.Sohmer, T.F.Zuck // Transfusion. -1981. Vol. 21. №2. - P. 135-137.

165. Murphy, K. R. Erythrocyte 02 affinity: influence of cell density and in vitro changes in hemoglobin concentration / K.R.Murphy, M.Wengerd, R. W. Kellermeyer // J. Lab. Clin. Med. 1974. - Vol. 84, № 2. - P. 218-224.

166. Nash, G.B. Mehanical proprties oxygenated red blood cells in sickle cell (HbSS) disiase / G.B.Nash, C.S.Johnson, H.J. Meiselman // Blood. 1984. - Vol. 63, №1.-P. 73-82.

167. Nevaril, C. G. Erythrocyte damage and destruction induced by shearing stress /

168. C. G.Nevaril, L E. C.ynch, D. P. Alfrey et al. // Journal of Laboratory and Clinical Medicine. 1968. - Vol. 71. - P. 784-790.

169. Otterbein, L.E. Heme oxygenase: colors of defense against cellular stress / L.E.Otterbein, A.M.K. Choi // Am. J. Physiol. Lung. Cell. Mol. Physiol. 2000.-V. 279, №6.-P. 1029-1037.

170. Penney, D. Hematological alterations and response to acute hypobaric stress /

171. D.Penney, M.Thomas // J. Appl. Physiol. 1975. - Vol. 39, № 6. - P. 1034-1037.

172. Pereira, A. The economics of blood transfusion in the 21st century / A.Pereira // ISBT Science Series. 2007. - Vol.2, №1. - P. 184-188

173. Ponder, E. Red cell cytochemistry and architecture / E.Ponder // New York Acad. Sc. 1947.-P.557.

174. Proctor, H. Hemoglobin concentration / H.Proctor, I.Parker, G.Johnson // Ann. Surg. 1990. - Vol 173. - P. 357-362

175. Rossi, E. C. Red cell transfusion therapy in chronic anemia / E. C. Rossi // Hematol. Oncol. Clin. N. Am. 1994. - Vol. 8, №6. - P. 1045-1051.

176. Rossi, E. C. Principles of Transfusion Medicine / E. C.Rossi, T. L Simon, G. S. Moss //Baltimore: Williams & Wilkins. 1991.

177. Rubenberg, M. L. Microangiopathic haemolytic defibrination in vitro / M. L. Rubenberg, E.Regoeczi, B. S.Bull et al. // British Journal of Haematology. 1968. -Vol. 14.-P. 627-642.

178. Salem-Schatz, S. R. Influence of clinical knowledge, organizational context, and practice style on transfusion decision making / S. R.Salem-Schatz, J.Avorn, S. B.Soumerai // J. A. M. A. 1990. - Vol. 264, № 4. - P. 476-483.

179. Sazama, K. The impact of evidence-based decision making in transfusion practice and potential impact on litigation / K.Sazama // ISBT Science Series.-2007.- Vol. 2, №1.- P. 209-215.

180. Schrier, S. L. Human erythrocyte membrane enzymes: current status and clinical correlates / S. L. Schrier // Blood. 1977. - Vol. 50, № 2. - P. 227-237.

181. Schwandt, H. J. Influence of prolonged physical exercise on the erythropoietin concentration in blood / H. J.Schwandt, B.Heyduck, H. C.Gunga, L.Rocker// Eur. J. Appl. Physiol. Occup. Physiol. 1991. - Vol. 63, № 6. - P. 463-466.

182. Shen, S. Clinical observations on increased mechanical fragility of erythrocytes / S.Shen, W.Castle, R. M. Fleming // Science. 1944. - Vol. 100, № 3. - P. 387389.

183. Shiraki, K. Anaemia during physical training and physical performance / K.Shiraki, H.Yoshimura, T.Yamada // XX World Congress in Sports Medicine.

184. Melbourne, 1974. P. 405-405.

185. Simon, E. R. The Red Cell. / E. R. Simon New York, 1978. - P. 651-664.

186. Smith, J. A. Lactate/H+ uptake by red blood cells during exercise alters their physical properties / J.A.Smith, R. D.Telford, M.Kolbuch-Braddon, M. J. Weidemann // Eur. J. Appl. Physiol. Occup. Physiol. 1997. - Vol. 75, № 1. - P. 54-61.

187. Stehling, L. C. A survey of transfusion practices among anesthesiologists / L. C. Stehling, N.Ellison, R. J. Faust et al. // Vox Sang. 1987. - Vol. 52, № 1-2. - P. 60-62.

188. Stehling, L. C. The red blood cell transfusion trigger physiology and clinical studies / L. C. Stehling, T. L.Simon // Arch. Pathol. Lab. Med. 1994. - Vol. 118, N 4. - P. 429-434.

189. Strauss, D. Erythrocyte membrane / D.Strauss, B.Seidel // Folia haemat. -1985.-Vol. 112, № l.-P. 27-29.

190. Szygula, Z. Erythrocytic system under the influence of physical exercise and training / Z.Szygula // Sports Med. 1990. - Vol. 10, № 3. - P. 181-197.

191. Thompson, A. Blood component treatment: a retrospective audit in five major hospitals / A.Thompson, M.Contreras, S.Knowles // J. Clin. Pathol. 1991. - Vol. 44, № 9. - P. 734-737.

192. Turek, Z. Blood gases at several levels of oxygenation in rats with a left-shifted blood oxygen dissotiation curve / Z.Turek, F.Krenzer, E. M. Rignalda // Pfliig. Arch. 1978. - Vol. 376, № 1. - P. 7-13.

193. Tuvia, S. Oxygenation-deoxygenation cycle of erythrocytes modulates submicron cell membrane fluctuations / S.Tuvia, S.Levin, R.Korenstein // Biophys. J. 1992. - Vol. 63, № 2. - P. 599-602.

194. Undemann, R. Hematological changes in normal men during prolonged severe exercise / R.Undemann, E R.kanger, P.Opstad et al. // Amer. Corrective Therapy J. 1978. Vol. 32, № 4. - P. 107-112.

195. Vandewalle, H. Effects of clinostatism and orthostatism on blood viscosity /

196. H.Vandewalle, C.Lacombe, J. C.Lelievre, F.Coussement // Int. J. Sports Med. -1989. Vol. 10, № 2. - P. 135-138.

197. Vasku, J. Etiopathogenesis of hemolytic reactions in total artificial heart recipients / J.Vasku, P.Urbanek // Artif. Organs. 1997. - Vol. 21, № 12. - P. 1268-1276.

198. Venkatachalam, M. A. Microangiopathic haemolytic anemia in rats with malignant hypertension / M. A.Venkatachalam, D. B.Jones, D. A.Nelson // Blood. 1968.-Vol. 32.-P. 278-291.

199. Vogelaere, P. Variations hematologiques a l'exercice physique sous maximal de longue duree / P.Vogelaere, M.Brasseur, R.Leclercq, A.Quirion // Can. J. Sport. Sci. 1988. - Vol. 13, № 1. - P. 43-49.

200. Wagener, F.A. Heme is potent inducer of inflammation in mice and is counteracted by heme oxygenase / F.A.Wagener, A.Eggert, O.C.Boerman // Blood.-2001.-N 6.-P. 1802-1811.

201. Weight, L. M., Byrne M. J., Jacobs P. Haemolytic effects of exercise / L. M. Weight, M. J.Byrne, P.Jacobs // Clin. Sci. (Colch). 1991. - Vol. 81, № 2. - P. 147-152.

202. Zauder, H. L. Massive transfusion / H. L. Zauder // Int. Anesthesiol. Clin. -1982. Vol 20, № 4. - P. 157-170.27. Ц1. FOC-ШЙ ОЖAil ФВДШРАЩШШ

203. Н А 11ОЛ ЕЗ НУ К) М ОД ЕЛ Ь63544

204. УСТРОЙСТВО ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВi 1атентообладатель(ли): Ненашев Александр Андреевич (RU)

205. Автор(ы): Ненашев Александр Андреевич (RV), Катайкин Михаил Васильевич (RU), Селезнев Алексей Владимирович (RV'), Бундов Илья Дмитриевич (RU)1. Заявка №2006121954

206. Приоритет полезной модели 19 июня 2006 г. -V: ' Зарегистрировано в Государственном реестре полезных . моделей Российской Федерации 27 мая 2007 г.

207. Т- Срок действия патента истекает 19 июня 2011г.

208. Руководитель Федеральной службы по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам1. Б. П. СимоновШш ш ш ш и шш *ш т ш шш