Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Обнаружение и изучение физикохимических свойств протеолитических ферментов гриба Eremothecum Ashbyii

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Цветков, Валери Цветков

- 139 -6. ВЫВОДЫ

1. Впервые изучена протеолитическая система флавиногенного гриба E.-ashbyii . Показано существование четырех оптимумов протеолитической активности.в экстрактах из мицелия гриба при рН 4,0; 7,5; 9*5 и Щ5. В „культуральной жидкости, обнаружена протеолитическая активность с оптимумами рН 4,0 и 7,5.

2. Изучено изменение активности обнаруженных протеиназ в процессе роста гриба. Установлено, что активность этих ферментов по-разному изменяется в процессе развития культуры. Наиболее высокая активность кислой.и нейтральной протеиназ отмечена в 48-часовом мицелии, а активность.щелочных протеиназ - в 120-часовом мицелии. Уровень активности кислой протеиназы в культуральной жидкости не изменялся в процессе культивирования гриба, а активности нейтральной и щелочных, протеиназ в среде были наиболее высокими в 120-часовой культуре.

- 3.Показано,, что.при использ.о.вании. казеина.в, качестве. единственного, источника.азота.происходит.индукция.биосинтеза протеиназ с оптимумами.рН 4,0. и. 7,3. Прибавление.ионов аммония, ингибирует оинтез этих ферментов, что.свидетельствует об участии механизма азотной катаболитной репрессии.в регуляции.их образования. Ингибитор. транскрипции. 8-оксихинолин предотвращает индукцию кислой протеиназы казеином.

4. Разработана процедура очистки комплекса внутриклеточных нейтральных протеиназ/ включающая фракционирование, белков сульфатом, аммония, их температурную обработку, хроматографию на сефадексе G-75 и ионообменную хроматографию на ДЭАЭ-целлюлозе, в результате чего были выделены три фермента мицелия гриба е. ash.

- 120 -byii « протеиназы E, F и G.

5. Ингибитор сериновых протеиназ фенилметилсульфонилфторид о

С ФМСФ ) в концентрации а также п- Хлормеркуробензоат

С п-ХМБ ) в концентрации Ю^М угнетают активность протеиназ Е, Р и s. ЭДТА в концентрации 10"*% не влияет на активность протеиназы Е, активирует протеиназу F и ингибирует протеиназу ff. б. Получен выоокоочищенный препарат оериновой протеиназы Е. Определены свойства этого фермента. Оптимум рН находится в пределах 6,0 -8,5 без четко выраженного максимума,.Наиболее высокую активность протеиназа Е обнаруживает.при 60°* Фермент относительно стабилен в. интервале рН 6,0 - 9,0 ( в .течение 24 ч при . комнатной температуре сохраняет более 50$ от исходной активности). Из исследованных белковых, оубстратов С казеин,' гемоглобин, азо-казеин; азоальбумин, .альбумин сыворотки крови человека, бычий, сывороточный.альбумин ) .протеиназа. Е наиболее эффективно гидро-лизует.азоказеин. .Фермент, не расщепляет -бензоил-. i - арги-н.ин-п-нитроанилид,- следовательно он лишен амидазной. активности. Однако, протеиназа. Е.расщепляет ^-N - бензоил-аргинин метиловый эфир, выявляя эстеразную активность . .Фермент полностью ингибируетоя. ионами. не44- иСдд14* в концентрации. 10"*%. Ионы .,. Ms4",

Са"14", Со"14" и Zn"1"1".„активируют.протеиназу. Е. Особенно сильное .активирование наблюдается в присутствии .ионов Mg"1"1" С больше,, чем в.Л раза ). Молекулярная масса.протеиназы Е определена методом гель-фильтрации на сефадексе G-75 и составляет 51000 Да.

7. „Выявлен и. частично, очищен при. помощи гель-фильтрации, на сефадексе G-7.5 термостабильный, внутриклеточный ингибитор протеиназы Е; по-видимому, белковой природы. Препарат ингибитора угнетал активность протеиназы Е, а также трипсина при рН 7,5;

8. Впервые обнаружена полная инактивация ферментов флавиногене за ГТР-циклогидролазы и рибофлавинкиназы дрожжей Picbia gra.1-liermondii при инкубации этих ферментов in vitro с протеиназой Е.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Цветков, Валери Цветков, Львов

1.Kolzer H.,,Betz H. and Ebner E.-Intracellular proteinases in microorganisms • Curr. (Гор.Cell. Regul. ,3975»v.9»P« ID3-I46. fi.Sw±fez€srtR»Ii»-The inactivation of: microbial enzymes in vivo.An-mu Rev, Microbiol.*39771*. 3I*p. 135-157.

2. Ъ Андеркофлер A, В кн. : Производство, и применение ферментных препаратов в пищевой промышленности. М.: Пищепромиздат, 1963, с. 48.

3. Бабакина.В/Г/ г- Применение ферментов в производстве кожи. Мл Ростехиздат, 1962. . ?• Диканская З.М, Образование рибофлавина микроскопическим грибом, Eremotheciumi ashbyii . - Тр. Ин-та микробиологии, 1954,3.

4. Hartley В.С. -Proteolytic enzymes. Annu.Rev»Biochem.;»i960, v»29 » ръ45-72.

5. Kovaleva»G.G. .Shimanskaya M-P. and Stepanov WM.-The site of diazoacetil inhibitor attachment to acid proteinase of Aspergillus awamorl-an analog of penicillopepsin and pepsin. Biochee* Biopbys.Hes.Commmi.,1972, v.A9 tp. Io75-I03l.

6. ХО.Ь1игСЛ>. »and Hatano H.-An asparfcic acid residue at the active site of Rhodotorula gltrfcinus acid protease.FEBS Lett» ,1974-, v.42»p* 352-354.

7. Arch.Micrabiol. ,1980,v»32^,p*269-274.

8. TsuJita T. t and Endo A.—iDitr acellular localization of two mo-lecnl ar forms of membrane acid protease in Aspergilltts oryzae* J*. Biochem^/Iobyo/ , l980,v»88,p.H3-I20.

9. Tapia G.»Curotto E., O'Reilly В»,and Gonzales G»-Izolation and partial characterization of an extracellular protease from Spo-TOtricham dimorphocportm^FEBS Lett, ,!98Ifv»I30tpw:"205 -207.

10. Rickert W»S»,and McBride P. A.-Structural and functional determinants of Mucor miehei protease. IH^Is olation and composition, of the carbohydrate moiety•.Biochim. Biophys . Act a»,197^, v.336,p* 437-444,

11. Murao S*.,Morita H* ,ramamoto X.,and Oda K.-Partial structure of glycopeptide obtained from Scytalidium lignicolim acid protease A»Agric«.Biol»Chem» , 378»v»42 ,p»3343—1349»

12. Tsujita T»,and Endo A»-Chemical properties of the polysaccha-idea associated with, acid protease of Aspergillus oryzae grown onsolid bran media. J. Biochem»/Tokyo/,1977,v»8X,p. 1063-1070.

13. Haumard JV,and Raymond М.ГГ»-Further characterization of the Penicillium: roqueforti acid protease.Biochimie,I979*v»6I,p. :979-982.

14. Martin P„,Raymond H.K»,Bricas E.,ahd Ribadeau Dumas B.-Kinetic studies of the action of Mucor pusillas ,Mucor miehei acid proteases chymosins A and В on a synthetic chromopfaocric hexapeptide. Biochinu Biophys.Acta. , I980,v.6l2 , pw4I0-420.

15. Hwang J.,„and Hseu Т.Н.-Specificity of the acid protease from Monascus kaoliang towards the ft -chain of oxidized insulin. Bioc-im. Biophys-Acta,1980, v. 614 ,p. &607-6I2 .

16. Kimura Mayumi,Takeuchi M. ,Hayashi K^,andl Xchishima E.-Substrate specificity of carboxyl proteinase of Aspergillus so-5ae.Cxarr.Mcrobiol» ,3979»v»3 ,p. 153—156.

17. Lenoir J. ,Auberger B. ,and Gripon J.C.-Les caracteres du sis-teme; proteoOLytique de Penicillium caseieolxm. Ill.Caracterization &гтше protease acide.bait, 1979* v.59244-268.

18. Robinson ГГ.С. ,Neurath H. ,and Walsh K. A.-Preparation and characterization. of guani&inated trypsinogen. and £ -guarttd inated trypsin. Biochemistry, 1973* v. 32 ,pv4I4-420.

19. Davidson R.,Gertler A.»an& Hofmann T.-Aspergillus oryzae acid proteinase .Pacification and properties ,and formation of 7T»chy-motrypsiru Biochem. J. ,1975I47»P. 45-53.

20. Sharma S.K.rand Hopkins T.R.-Activation of bovine chymotrypsinogen A. Isolation. ■ and characterization of Jul and OJ -chymotryp-sin. Biochemistry ,1979, v. I8,p.I008-I0I3.

21. Gripon J.C. ,Rhee S.H. ,and Hofmann T.-N-terminal amino acid sequeces of acid proteases from; Penicillium roqueforti and Rhi-zopus chinensis and alignment with penicillopepsin and mammalian proteases. Can. JVBiochem. ,1977*v»55»p. 504-506.

22. Tickle I.J.,and Bluhndell T.L.-Homology among acid proteases:оcomparison of crystal structures at 3 A resolution of acid proteases from Rhizopus chinensis and Endotbia p arasitica. Proc. Natl. Acad.Sci.IT.S.A. ,1977,v.74,p. 556-559.

23. Tang J.,James M.N.G.,Hsu I.N.,Jenkins J.A.,and Blundell T.L.-Structural evidence for gen duplication, in the- evolution of the acid proteases. Nature /London/, 1978,v.271,p.618-621.

24. Tang J.-Evolution in the structure and function of carboxyl proteases. Mol. Cell. Biochem. ,I$79 26, p. 93—109.

25. Isolation.Amino acid sequences of tryptic peptides.Bioorg.Khim.1.8Q,,v.6,p. 1765-1777.

26. Cohen В.L.-Transport and trtiT ization of proteins by fungi, 1980, p.411-430. In J.V. Payne /ed. /. Microorganisms and nitrogen sources. John Wiley&Sons Ltd. Chichester.

27. Matsushima K. ,Hayakawa M., Ito M.^amd Whimada K.-Features of the proteolytic enzyme system of hyperacid productive and non-acid - productive fungi. J.Gen. Appl.Microbiol., T98I„v.27,p.423 -426.

28. J. Bacterid. ,1974,v. 117,p. 1035-1042.

29. Govind. N.S.,Merta. B. „Charma M. ,and Modi V.V.-Protease and ca-rcrtenogenesis in B1 akeslea trispora. Phytochem. ,I98I,v. II, p.24832485.

30. Jonsson A.G»-Purification and some properties of a.protease from Alternaria tenuissimia.Arch.Biochem.Biophys. ,l969,v. 129,p.62.67.

31. Tomoda K. rMiJita K.*Maepima К» .Дакашпга M. ,Ktmo M. ,and Isono M.-Production,purification and general properties of fusariuro alkaline protease. JVTakeda Res -Lab. ,;l979,v. 38,p. 33-43.

32. Ebeling W.,Hennrich N. ,KLockov M.,Me.tz- H.,Qrth H.3V„and bang H.-Proteinase К fro® Eritiracbium album Limber. Eur. J. Biochem. , 19 74, v. 47 »p. 91-97.

33. Kominami E. ,HoffschuLte H.,Leuschel L-,Maier K.,andHolzer H.-{Ehee substrate specificity of proteinase В from baker 's yeast. Biochim. Biophys. Acta, I981rv»661 „p. 136-141.

34. Lindberg R.A.,Eirich L.D.,Price J.S.r¥olfinbarger L. ,and Druc-ker H.-Alkaline protease from Neurospora crass a. Purification and partial ciharacteriz:ation. J. Biol. Chem. ,l98I,v.256„p. 8II-8I4.

35. Martin. S.H., Johnson A.G.-An extracellular protease from Aspergillus ftimigatus. Can. J. Bioxxhem.^l965rv. 43, p. 1745-1753.

36. Шатаева. Л^К., Орлиевская O.Bv, Лишковокая Г/В^, Самсонов Т;В. ~ Энзиматическая активность террилитина. Биохимия, 1973, т.: 38,с. 1169 1174.

37. Nordwig A. ,Bretschneider G.-Nonspecific colagenolytic activi-vity.Дус1г olysis; of native colagen by a. mold protease. Biochim. Biophys .Acta, 3971» v. 250,p.408-415.

38. Gertler A. ,ffayashi K.-Esterolytic,elastase-1 ike activity of purified alkaline proteinase from Aspergillus so^ae. Biochim. Biophys . Act a ,1971» v. 235 »P. 378-380.

39. Morihara K. ,Oka T.„Tsuzuki H»-Comparative study of various serine alkaline proteinases from microorganisms .Esterase activity against N-acylated peptide ester substrates.Arch. Biochem. Biophys .,1974„v.165,p.72-79.

40. Turkova J. ,Mikes O. -Specificity of alkaline proteinase of

41. Aspergillus flavus • Biochim. Biophys . Acta, 1970, v. I98,p. 386-388,

42. Ушакова В.И.у Далько.Л.'Е., Егоров Н;С.-Изучение протеазного комплекса, синтезируемого A.kanagawaensis. , в.связи с его.фибринолитической активностью*-Биол.науки,1974, т. 17, с. 93 97.

43. Morihara К. ,Oka Т. ,Tsuzuki Н.-Comparative; study of various serine alkaline proteinases from; microorganisms .Specificity with oligopeptides. Arch. Biochem. Biophys., 1971, v. 14-6 ,p. 297-305.

44. Xochimura S.-Proteinase from Penicillium chryzogenitna. Mem. Ну o-gо Univ. Agr-., 1962 ,N13 ,,p. 42/Chem'. abstr. ,1963 ,:v. 59,ref.42ll g/

45. Singh K. ^Martin S.M.-Purification and properties of a protease from Penicillium; cyaneo-fuivum. Can. J. Biochem* ,I960,v. 38yp. 969-980.

46. Martin S^M. ,Singh K. ,Ankel H. ,and Khan A. H. -The specificity of a protease from Penicillium cyaneo-fuivum. Can. J.3iochem. ,.I962,; v. 40,p.237-246.

47. Arai M.,;and Murao S.-Purification and some properties of two alkaline proteinases from Penicillium lilacinum N2093»Agr. Biol. Chem* »1977,p . 2293-2294.

48. Belev M*,Porath J.-Extracellular proteinase from Penicillium; notatum. 3h Methods in Enzymology ,N.X.: AcaduPress . ,1970,v. 19 ,p. 576-581.

49. Kishida T.,Yoshimura S.-Mode: of action of Aspergillus ochrace-us; proteinase on oxidized insulin. J.Biochem»»3964*v.55*Р»95-101.

50. Danno G.f^atake M.-Substrate specificity of alkaline proteinases from Aspergillus sydowi and Aspergillus sulphurens. Agr. Biol► Chem. ,Д973, v. 37,p. I493-I496.

51. Dhar S.C. ,Bose S.M.-Studies on the specif icity of crystaline protease of Aspergillus parasiticus on j& -chain of oxidized insu*-line? and bovine serum albumin. Enzymologia ,1964,,v. 28"rp. 89-99 .

52. Nordwig A. ,Jahn W.F.-A colagenol^tic enzyme from Aspergillus oryzae.Purification and properties.Eur. J.Biochem. ,1968,v.3»P.519

53. Gripon J.С.,Auberger В.,and Lnoir J.-Metalloproteinases from Penicillium caseicolum and Penicillium roquefortii:comparison specificity and chemical characteris ation. lot. J. Biochem»,11980, v. 32,p.451-455.

54. Nakadai T. ,Fasuno S,and Ijguchi N.-Purification and properties off neutral proteinase I from Aspergillus oryzae.Agr.Biol.Chem., 1973 *v.37*p. 2695-2701.

55. Roberts F.F. ,and Doetsh R.N.-Purification of a highly active protease-from a Microsporum species.Antonie van beeuwenhoek. J. Microbiol.Serol.,1967, v. 33»p.145-153.

56. Kandu A.K. ,and Manna S.-Purification and characterization of extracellular proteinases of Aspergillus oryzae.Appl.Microbiol.3375rv.30,p.£07-5l3. : ::

57. Kandu A. K., Manna S. ,and Pal N.-Purification and properties of a new extracellular colagenase of Aspergillus sclerotionum. Indian J.Exp.Biol. ,1974,v.32,p.441-443.

58. Lenney j.f., and Dalbec j.m.-Purification and propertes of a two proteinases from Saccharomyces cerevisiae.Arch.Biochem. Biophys. , I967,v. 320, p.42-48.

59. Hata Т. ,Hayashi R. ,and Doi E.-Purification of yeast proteim-ses. I.Fractionation and some properties of the. proteinases. Agr. Biol. Chem. ,1967, v-31,P. 150-158.

60. Hayashi R. ,Aibara S.,and Hata T.-A unique сarboxypeptidase activity of yeast proteinase C. Biochim. Biophys.Acta,1970,v. 232, P.359-361. :

61. Katsumxma T. ,Schtt E.,Elsasser S.,and Holzer H.-Purification and properties of tryptophan-synthase inactivating enzymes from Xeast. Eur.J.Biochem. ,3372,v.27,p.520-526.

62. Cabib E.,and Ulane R.-Chitin synthetase activating factor from; Xeast,A protease. Biochem. Biophys.Ress ,Commun. ,1973,v. 50,p. 186-391.

63. Jtisic M.,Hinze H. ,and Holzer H.-Deactivation of Xeast enzymes by proteinases A and В and carboxypeptidase X from Xeast. Hoppe Seyler*s Z.Ehysiol.Chem.,1976,v.357,p.735-740. 3

64. Ulane R*E.,and Cabib E.-The activating system of chitin synthetase from Saccharomycfs cereyisiae.Purification and properties of the activating factor. J.Biol.Chem. ,1976,v.25X,p. 33673374. : ( ::

65. Saheki T.,Matsuda X. ,and Holzer H.-Purification and characterization of maeromolecular inhibitors of proteinase A from Xeast. Eur. J. Biochem. ,3974, v. 47,p. 325—332.

66. Nunez de Castro I.,and Holzer H.-Studies on the proteinase A Inhibitor 13 from Xeast.Hoppe-Seiler'sZ.Physiol.Chem. ,3976,•357»p.727-734.

67. Bttnning P. .Meussdoerffer- F.,an& Holzeir H.-Proteinase A-Inhibitors from Yeast and their application for- affinity chromatography of proteinase A. Hoppe-Seiler rs Z.Physiol. Chem. „1977,v. 358,p.II86-II87.

68. Beta, H.»Hinze H. ,and Holzer" H.-Isolation and properties of two inhibitors of proteinase В from; Yeast. J. Biol .Chem.,3974 , v. 249» PV45I5-452I.

69. Ulane R.E*,and Cabib Ei-The activating sistem of chiton synthe>-tase from Saccharomyces cerevisiae. J.Biol.Chem., 1974-249,p. 3410-3422.

70. Bfinning P.,and Hblzer H.-Naturale^ occurence aid chemical modification of proteinase В Inhibitors from Yeast. J.Biol.Chem. , 1977>тг.252,р.5316-5323.

71. Kuhn R.W.,Kenneth A.W. ,and Neurath H.-Isolation and partial characterization of an acid, сarboxypept i&ase from Yeast. Biochem, New. York„I974,v. 13,p.3871-3877.

72. TOI.Hayashi R. ,Moore S. ,and Stein W.H.-Carboxypeptidase from Yeast.large scale preparation and the application to COOH-termi-nal analysis of peptides and proteins. J. Biol .Chem. ,1973 »jr. 248, p.2296-2302.

73. Hay as hi R.-Carboxypeptidase Y. Methods Enzymol. ,I976,45B„p. 568-587.

74. Aibara B.S.,Hayashi R. ,and Hata Ф.-Physical and chemical properties of Yeast proteinase C. Agr. Biol.Chem. ,ЗЭ71,v.35»P.658-666.

75. Kuhn R.W.,Kenneth A.W»,and Neurath H.-Reaction of Yeast car-boxypeptidase C1 with group-specific reagents. Biochemistry,New York,I976,v. 15 ,p.4881-4885.

76. Hay as hi R. »Bai X. ,and Hata T.-Evidence for an essential his-tidine in carboxypeptidase Y.Reaction with the chloromethyl ketone derivate of benzyloxy с arbonyl-I»-phenylalariin. J. Biol .Chem. , 3975»*". 250, p. 5221-5226.

77. O.VoIf D.H.-Control of metabolism in Xeast and other lower eu-karyotes through action of proteinases. Adv.Micrоb.Physiol., 1980, v.2I„p. 267-338. :::■•-:

78. UI.Masuda T. ,Hayashi R. ,and Hata T.- Aminopeptidases in the acidic fractions of the Xeast autolysate. Agr. Biol.Chem. ,3975,v. 39, p.499-505. о :и

79. Frey J. , and Rohm K-H. -Subcellular localization and levels of aminopeptidas es and dipeptidase in Saccharomyces cerevisiae. Bio-c hint. Biophys . Acta ,1978, v • 527,p.31-41.

80. H3.Mairi.le Ph. ,Wiemken A. ,and Guyer W.-A lysosomal aminopeptidase isozyme in diferentiating Xeast cells and protoplasts. Planta,3971» v. 96 $ p •43-53• :

81. Frey J.,and Rohm K.H.-Peptidase of XeastrSubcellular localization and behaviour during the growth cycle. Hoppe-Seiler's Z. PhysioI.Chem. ,3977»^.358,p.3202-3203.

82. H?.benney J. F.-Three Teast proteins which inhibit three Yeast proteases. Fed. Proc.,1973» vv32,p.£59 .

83. S.Lenney J.F. ,Matile Ph. ,Fiemifcen A. ,SchelIenberg M.,and Meyer J.

84. Activities and cellular localization of Teast proteases and theirinhibitors. Biochem. Biophys .Hess . Commun.,l974,v. 60 , p. 1378-1383.n

85. H9.Hasilik A. ,Muller H. ,and Holzer H.-Compartmentation of the tryptophan-synthase -proteolyzing system in Saccharomyces cerevi-slae. Etrr. J. Biochem. ,1974,v.48,p.III-117.

86. Hainbow C.-Ih "The Yeasts" /A.H.Rose and J.S.Harrison,eds/, Ac ad. Press . ,London,Ifew York,1970, v. 3p . 147-224.

87. Metz G. „and Rohm K.H.-Yeast aminopeptidase I.Chemical composition and catalytic properties. Biochim.Biophys.Acta,1976,v.429, p.933-949.

88. Kaehn K. „and Kula M.R.-Demonstration of specific aminopeptidas e inhibitors in Neurospora crassa. PEBS Lett., 1977»v.79,p.85-90.

89. Heiniger U. ,and Mathile P.-Protease secretion in Neurospora crassa. Biochem. Biophys »Ress. Common. ,1974,^.60,p. 1425-1432.

90. Correal J. U. ,Rodrigues V.,and Lodi W.R.-In "Limited proteolysis in Microorganisms" /G.N.Cohen and E.holzer,eds/, 1979,P* 327

91. U.S.Government Printing office,Washington D.C.ti

92. Hoffman W. ,and Hutterman.-Aminopeptidases of Physarum. poly-cephalum. Activity, isoenzyme, pattern, and synthesis during differentiation. J. Biol.Chem., 1975,T. 250, p.7420-7427.и

93. Levins ohn S* ,;and Ar onsen A. I.-Regulation of extracellular proteases production in Bacillus cereus. J.Васteriol.,196793, p.1023-1030.

94. Lindherg R.A. „Rhodes W.G. ,Eirich L.D. ,and Drucker H.-Extra-cellular acid proteases from Neurospora crass a. J. Bacteriol. , 1982,v. 150,p. 3ZQ3-H08.

95. Eft*.Жакоб Моно Ж,: Регуляторные механизмы клетки. М.: "Мир", ДЭ64, pi 273. ;. : :

96. Mandelstarn J.-In"Regulation of Nucleic Acid and Protein synthesis , 1967, Amsterdam , p. 35 J.

97. Егоров H.C.-, Лория 1.К., Брюкнер В.Б. Регуляция синтеза.внеклеточных протеолитических ферментов у микроорганизмов. Успех, микроб иол. у 1977, ъх.Щ.ог 59-79.

98. Юркевич В.В.уШурыгина Н.Н.1 Механизм влияния крахмала „на биосинтез.^-амилазы Aspergillus oryzae . - Прикл. биохим. микробиол^; 1972, т. .8, с. 5X5. «519.

99. Емцева ТЙВ;,, Коновалов С.А. * Щелочные протеазы микробиологического происхождения. Прикл* биохим;1 микробиол.^ 1978, т. 14,с. 661 — 676. . , . . .

100. Коновалов J3.АХ-биосинтез ферментов микроорганизмами. 1973, М;: Пищевая пром-ть, е.; 191.

101. Конев Л.Д. Кооперативные переходы белков в клетке. 1970, Минску 17. .

102. Hblzer ff.,and Heinrich P.C.-Control of proteolysis. Annu. Rev. Biochem. ,1980,v. 49 ,p. 63-91.

103. Drucker H.-Regulation of exocellular proteases in Neurospo-ra crassajRole of Neurospora proteases in induction. J.Bacteriol.1973• v. 116, р. 593-599.

104. Hansen R. J. ,Switzer R.L.,Hinze H. „and Holzer H.—Effects of glucose and nitrogen source of the levels of proteinases,peptidases, and proteinase inhibitors of Yeast. Biochim.Biophys.Acta, 1977,496, p. I03-II4.

105. Holzer H.-Catabolite inactivation in Yeast. Trends Biochem. Sci.,l976„v. I,p.I78-I8I.

106. Neef J.„Nagele E. „Nauhaus J. „Heer U. „and Mecke: X).-Evidence for catabolite? degradation in the glucose dependent in activation of Yeast cytoplasmic malat dehydrogenase* Eur. J.Biochem. ,1978, v. 87„F* 489-495 •n

107. Prey J. „and Rohm K.H.-The glucose-induced inactivation of aminopeptidase I in Saccharomyces; cerevisiae. FEBS Lett. ,1979* лг. 100,p. 261-264.

108. Cohen B.L.,Morris J.E.,and Drucker H.-Regulation of two ex-, tracelular proteases of Neurospora crassa by induction and by carbon-nitrogen and sulfur metabolite repression. Arch.Biochem. Biophys ., 1975, v. 169 ,P. 324-330.

109. Wolf D.H. „Ehmann C. ,and Beck I.-an"Biological Function of Proteinases" /H.Holzer and H.Tschesche,eds/, 1979,P.52-72.Springer verlag, Berlin,Heidelberg and New York.

110. Lenney J.F.-Three. Yeast proteins that specifically inhibit Yeast proteases A„B and C. J.Bacteriol. ,I975,v.I22,p.I265-I273.

111. Holzer H.-Chemistry and biology of micromolecular inhibitors from Yeast acting on proteinases A and B,and carboxypeptidase Y.

112. Mv.Ehz.Kegul.,.1975» v. 13 »р. 125-134.

113. Pong S.S. ,Nuss D.L. ,and Koch G. -Inhibition of initiation of protein synthesis in mammalian tissue culture cells by L-I-tosyl-amido-2-pheylethyl chloromethyl ketone. J. Biol .Chem. ,1975, v. 250,p. 2 240-245.

114. Rossman T. ,Norris G.,and Troll W.-Inhibition of macromolecu-lar synthesis in Echerichia coli by protease inhibitors.Specific reversal by glutathion of the effects of chloromethyl ketones. J. Biol .Chem. ,1974, v. 249 ,p. 3412-3417.

115. Betz: H.-Loss of sportdation ability in a. Yeast mutant with low proteinase A levels. FEBS Lett. ,,1979,v. 100,p.I7X-I74.

116. Mechler B. «and Wolf D.H.-Analysis of proteinase A function in Yeast. Eur. J. Biochem., l98I,v.I2I,p.A7-52.

117. Wolf D.H.,and Ehmann C.-Isolation of Yeast mutants lacking proteinase В activity. FEBS Lett. ,l978,v.92,p.I2I-I24.

118. Jones E.W.-Proteinase mutants of Saccharomyces cerevisiae. Genetics , 197785 ,p. 23-33.154,Wolf D.H.,and Ehmann C.-Carboxypeptidase S-and carboxypeptidase Y-deficient mutants of Saccharomyces cerevisiae. J.Bacterid., I981,v. I47»p.A3B-426.

119. Achstetter T.,Emter 0.,Ehman C. , and Wolf D.H.-New proteinases: in Yeast:Studies on regulation and purification. Hoppe-Sei-ler»s Z. Physiol. Chem. ,1982 Bd,v. 363, p. 976.

120. Suarez Rendueles M.P. ,Schzencke J. ,Garsia Alvarez N. »and Gascon S.-A new X-prolyl-dipeptidyl aminopeptidase from Yeast associated with a particulate fraction. FEBS Lett., I98I,v.I3I,p.296-300.

121. Beck I. ^Fink G.R.,Wolf D.H.-The intracellular proteinases and their inhibitors in Yeast. A mutant with altered regulation of proteinase A inhibitor activity. J. Biol. Chem. ,1980, v. 255 *P> 4821-4828.

122. Simms P.С,,and Ogrydziak D.M.-Structural gene for the alkaline extracellular protease of Saccharomyces lipolytics. J.Bacterid. ,I98I,v.I45*p.404-409.

123. Stewart T.W.,Sherman F.,Shipman N.A.,and Jackson M.-Identification and mutational relocation of the AUG Codon initiating translation of Iso-I-cytochrom С in Yeast. J.Biol.Chem. ,1971» v. 246,p.7429-7445.

124. HLobel G.,and Dobberstein B.-Transfer of proteins across membranes. Presence of proteolytically processed and unprocessed nascent immunoglobin light chains on membrane-boundjribosomes of murine mieloma. J. Cell. Biol., 1975, v. 67»P • 835-851.

125. Schatz G.,and Mason T.L.-The biosynthesisof mitochondrial proteins. Annu.Rev.Biochem.,1974,v.43,p.51-79- :

126. Poyton O.R. ,and McKemmie E.-In"Limited proteolysis in microorganisms "./G.N.Cohen and Holzer H. ,eds/, 1979,p. 145-149. U.S.Government Printing Off ice, Washington D.C. r

127. Duntze W. ,and Manney T.R.-Tvwo mechanisms of allelic complementation among Tryptophan synthetase mutants of Saccharomyces cerevisiae. J.Bacteriol. ,1968,v.96,p.2085-2093.

128. Wolf D.H. ,and Hoffmann M.-Tryptophan synthase from Yeast. Purification by affinity chromatography,physical properties. Eur.

129. J.Biochem., 1974,v.45,p.268-276.

130. Matchett W.H.and De Moss J. A.-The subinit structure of tryptophan synthase from Neurospora crassa. J.Biol.Chem. „1975,v.250, p*2941-2946.

131. Giles N.H.,Case M.E.,Partridge C.W.H.,and Ahmed S.I.-A gene cluster in Neurospora crassa coding for an aggregate of five aromatic synthetic enzymes. Proc.Natl. AcacUSci.XT.S.A., 1967,v.58,p. 1455-1460.

132. Gaertner F.H.-Purification of two multienzyme complexes; in t~ he aromatic/Erypthophan pathway of Neurospora crassa. Arch. Biochem. Biophys. „1972,v. 151, p. 277-284.

133. I.Gaertner F.H.,and Cole K.W.-The protease problem in Neurospora, Structur al modification of the arom multienzyme system during Its extraction and isolation. Arch.Biochem.Biophys.„3976„v. 177»P. 566-573.

134. Duran A* „Bowres B. „and Cabib E.-Chitin synthetase zymogen is attached to the Yeast plasma membrane; Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. , 1975,v.72,p.3952-3955.

135. RuiZf-herrera J.,Romero E.L. „and Bartnicki-Garcia S.-Properties of chitin synthetase in isolated chitosomes from Yeast cells of Mucor rouxii. J.Biol.Chem. ,1977,v.252,p.3338-3343.

136. Cellini-Вгагт P. „and Calderon R.A.-Chitin synthetase in Candida albicans:comparison of Yeast and Hyphal forms. J.Bacteriol., 1978,^r. 133,P. 1472-1477.

137. Zubenko G.S„Mitchell A.P»,and Jones E.W.-In "limited proteolysis in Microorganisms" /G.H.Cohen and H.Holzer,eds/, 1979,p.49-53. U.S.Government Printing Office,Washington,D.C.

138. Matern H. ,,and Holzer H.-Catabolite inactivation of the Galactose uptake; system in Yeast. J.Biol. Chem1977,v.252,p.6399-6402.

139. Witt I. ,Kronau R. ,;and Holzer H.-Repression von alkobole-dehi-drogenas e, mal atdehydrogenase,isocitr at lyase; und malat synthase in hefe durch glycose. Biochim. Biophys. Acta, 1965,v. 118, p. 552-537.

140. Gancedo C.-Inactivation of fructose-I,6-diphosphatase by glucose in Yeast. J.Bacteriol. ,3371»V.I07,p.401-405. '

141. Haarasilta S. ,and Oura E.-Qn the activity and regulation of anaplerotic and glucmeogenetic enzymes during the growth process of Baker's Yeast.The biphasic growth. Eur.J.Biochem., 197552„p. 1-7.

142. Gancedo C. ,and Schwerzmann N. In activation by glucose of phosphoenolpiruvate с arboxy kinase from Saccharomyces cerevisiae. Arch. Microbiol., 1976, v. 109 „Р* 221-225.

143. Molano) J.,and: Gancedo C.-Specific deactivation of fructoso-1,6-biphosphatase from Saccharomyces cerevisiae by a Yeast protease. Ешг. J, Biochem*, ЗЭ74, v. 44,p* 233-217.

144. Waif D.H. „and Ehman C.E.-Studies on a proteinase В mutant of Yeast. Eur.J.Biochem.,ЗЭ79»v.98,p»375-384.l93.Sussman A.J.„and Gilvarg G.-Peptide transport and metabolism in bacteria. Annu.Rev. Biochem. „1971, v. 40, p. 397-408'.

145. Goldberg A.L.,and St.John A.C.-IntraceIluiILar protein degradation in mammalian and bacterial cells. Part II. Annu. Re v. Biochem. , ЗЭ76, v. 45 ,p •747-803•

146. Hopper A.K»,Magee P.T. ,Welch S.K.,Friedman M. „and Hall B.D.-Macromolecule synthesis and breakdown in relation to sporulation and meiosis in Yeast. J,Bacterial.,1974*v. H9,p.619-628.

147. Wolf D.H.,and Ehmann G.-Carboxypeptidase S from Yeast:regula-tion of its activity during vegetative growth and differentiation. FEBS Lett. ,3978 ,v. 91,P. 59-62.

148. Correa J.U. ,Iiemos E.M. ,and Lodi W.R.-Inhibition of sporulation in the water mold Blastocladiella emersonii by antipain. Dev.Biol. 1978»v.66,p.470-479.

149. ОЗ.Билай В.И. -Основы общей микологии: Учеб. пособие для вузов. Киев: Вшца. школа,. 1980.' — .

150. Лобарева Л.С., .Степанов В.;М.:, Карбоксильные протеиназы.плесневых, грибов. В кн.: Успехи биол. химии, М.: Наука, 1978,т. 39, с. 83-105. : :

151. Data for biochemical research.Oxford.At the clarendon press. Ed.by Dawson R.M.C.,Elliott D.C.,Elliott W.H.,and Jones K.M.I969.

152. Lowry 0. H. ,Rosebrough H.J. ,Farr A. L., and Randall R.J.-Protein measurement with the folin phenol reagent. J,Biol.Chem, ,1951»v. 393, p. 265-275. : ;

153. Laemmli U.K.-Cleavage of structure proteins during assembly of the head of bacteriophage T4. Nature „London, I970„v. 69„p.646-651.

154. Besses O.A. ,Lowry O.H.,Love R.G.H.-The fluorometric measurement of the nucleotides of . riboflavin and their concentration in tissues. J. Biol .Chem. „1949 »v. I80„p. 755.

155. Whitaker J.R. -Determination of molecular weights of proteins by gel filttration on Sephadex.-Anal.Chem* „1963 »v. 35 ,p. 1950-1953•

156. Coben В.Ь.-The proteases of Aspergilli,1977»p. 281-293. 3n J.eI^ i

157. Smith, and J.A.Pateman /eds/,Genetics and physiology of Aspergilli.us. Academic.press,Iiic.,New York. , . ,

158. Колтун Л^ВЦ; Шавловокий Кащенко В*-Е;у. Трач В.М* Изменение активнооти некоторых ферментов флавиногенеза в процессе культивирования гриба Eremothecium ashbyii . Микробиология^ 1984, т. 53, о. 43 ~ 46.

159. Burgum A. A. „and Prescot J.М.-Isolation and characterization of fungal endopeptidase. Arch.Biochem. Biophys•, 1965 » v. Ill,p. 39139®.

160. Danno G.,and Yoshimura S.-Studies on an alkaline proteinases of Aspergillus sydowi.Part I.Purif ication and. some properties of proteinase. Agr.Biol.Chem. ,vl967»,v.3I*P.H5l-H5S.

161. Gaucher G.M.,and Stevenson K. J.-Thermomycolin. In methods in enzymology ,N. Y.: Acad. Press ,1979»T. 45 »P • 415-433.

162. Viccardo J. R . -Pur if ic at ion * cry s t al lyz ation and composition of an alkaline proteinase from Cephalosparium sp. 30. Diss.Abstr. Int. „ser . BfJI969 »v. 29 ,p. 3420.

163. Morihara K. ,and Tsuzuki H—Specificity of proteinase К from Tritirachium album Limber for synthetic peptides. Agr.Biol.Chem. 3975,>v.39,p.IW-I492.

164. Hay as hi K. ,Fukushima D. , and Modi K.-Alkaline proteinase of Aspergillus sо3ae. Phys icochemical properties „amino acid composition and; molecular conformation. Agr. Biol.Chem. ,,I967»v.3I„p.642-643.

165. Докл.; АН. СССР, 1976,- т. 230, с.1485 1487.

166. Караваева Н.Н.^,. Закиров М.З. , Мухиддинова Н.Г. Частичная очистка и некоторые свойства протеазы гриба Torula thermophila Биохимия,- 1975, т. .40, с. .909 - .914.

167. Тривен. M.iИммобилизованные ферменты. Вводный курс и применение в биотехнологии. М.: "Мир", 1983. <£ .