Некоторые закономерности изменений функционального состояния клеток крови и липидного метаболизма при эндогенной интоксикации

Сальникова, Елена Николаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Некоторые закономерности изменений функционального состояния клеток крови и липидного метаболизма при эндогенной интоксикации
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Некоторые закономерности изменений функционального состояния клеток крови и липидного метаболизма при эндогенной интоксикации"

На правах рукописи

САЛЬНИКОВА Елена Николаевна

НЕКОТОРЫЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ИЗМЕНЕНИЙ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ КЛЕТОК КРОВИ И ЛИПИДНОГО МЕТАБОЛИЗМА ПРИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

03.00.13. - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ульяновск - 2006

Работа выполнена на кафедрах генетики и факультетской хирургии Мордовского госуниверситета им. Н.П. Огарева, Республиканском липидном центре Республики Мордовия

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Трофимов Владимир Александрович Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Ситдиков Фарит Габдулхакович;

доктор биологических наук, профессор Гайнутдинов Хал ил Латыпович

Ведущая организация: Ульяновский государственный университет

Защита состоится «_» _2006 года в_часов на заседании

диссертационного совета ДМ 212.276.01 при ГОУВПО Ульяновского государственного педагогического университета им. И.Н. Ульянова (432980, г. Ульяновск, пл. 100-летия со дня рождения В.И. Ленина, д.4)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ульяновского государственного педагогического университета им. И.Н. Ульянова.

Автореферат разослан «_»_2006 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук, доцент

О.Н. Валкина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Ч£>

«с*

Достижением современной биологии является разработка концепции эндотоксикоза (Кузин, Дадвани, Ветшев, 2000; Гринев, Громов, Комраков, 2001; Wang, Iguchi, Ohshio, 1996; Dominion et al., 1997). Эндотоксикоз рассматривается как сложный, многофакторный молекулярно-патологический процесс, поликазуальный в начальной фазе своего развития, но приобретающий универсальный характер, зависящий от системной гипоксии тканей со всеми ее сложными метаболическими последствиями (Уткин, 1996; Федоровский, Сергиенко, Шилов, 1997; Гринев, Громов, Комраков, 2001; Wang, Iguchi, Ohshio, 1996; Dominion et al., 1997).

В последние годы многочисленными исследованиями доказана роль процессов лерекисного окисления липидов в патогенезе воспалительных заболеваний, в том числе и хирургической патологии (Cuzzocrea et al., 1999; Fukuhara et al., 1999; Tokyay et al., 1999). Доказано, что интенсификация свободно-радикальных процессов способствует появлению мембранодеструктивных нарушений, а при прогрессирующем развитии приводит к развитию эндогенной интоксикации (Васильев, 1995; Кузин, Дадвани, Ветшев, 2000; Гринев, Гггппп Комраков. 2001: Wang, Iguchi, Ohshio, 1996; Dominion et al., 1модификация липидов один из основных ф m ni|iiiiii 1111 Mil 111111 и?? ' • Î&'''1 йзодстренный и количественный состав липидов клеток и тканей. При jftjM Лерекисное окисление липидов может стимулировать фосфолипазную активность. Фосфолипазы расщепляют мембранные фосфолипиды и поэтому при их высокой активности развиваются мембранодеструктивные процессы.

Очевидно, что при эндогенной интоксикации создаются условия для модификации липидного компонента клеток и ткани. Однако в научной литературе сведения о состоянии спектра мембранных липидов при эндогенной интоксикации недостаточны, а имеющиеся разноречивы. Поэтому проведение исследования морфофункционального состояния форменных элементов крови в связи с перестройками липидного метаболизма при эндогенной интоксикации являются весьма актуальными.

Цель работы: исследовать некоторые особенности функционального состояния форменных элементов крови и их липидного метаболизма при эндогенной интоксикации.

Задачи:

1. Изучить некоторые функциональные особенности эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов в динамике эндогенной интоксикации на модели острого перитонита.

2. Исследовать качественный и количественный состав липидов форменных элементов крови в динамике острого перитонита.

3. Определить при эндогенной интоксикации состояние основных процессов, регулирующих целостность липидного бислоя мембран

- интенсивность перекисного окисления липидов и активность фосфолипаз. 4. Установить выраженность хромосомных аберраций в лимфоцитах и влияние на них антиоксидантов карнозина и маннитола.

Научная новизна:

На модели острого перитонита в динамике эндогенной интоксикации изучен качественный и количественный состав липидов эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, показаны изменения их некоторых функциональных показателей.

Установлено, что при эндотоксикозе липидная дисфункция сопровождается выраженными качественными и количественными нарушениями спектра липидов, увеличивается неспецифическая проницаемость мембран и ухудшается деформабельность эритроцитов, повышается агрегационная активность тромбоцитов, происходит угнетение связывающей функции альбумина. Клеточные дисфункции находятся во взаимосвязи с интенсификацией процессов перекисного окисления липидов, активизацией фосфолипазы Аг.

Показано, что морфофункциональные изменения форменных элементов крови при эндогенной интоксикации сопровождаются хромосомными нарушениями, уровень которых уменьшается при использовании антиоксидантов in vitro.

Положения, выносимые на защиту.

Нарушения функциональной активности форменных элементов крови при остром перитоните находятся в корреляционной зависимости со степенью эндогенной интоксикации по гидрофильному и гидрофобному компонентам.

Нарушения липидного метаболизма в эритроцитах, тромбоцитах, лейкоцитах коррелируют с выраженностью эндотоксемии и функциональными отклонениями.

Липидные нарушения в форменных элементах крови сопровождаются интенсификацией свободно-радикальных реакций перекисного окисления липидов и активизацией фосфолипазы А2 как плазмы, так и клеток крови.

При эндогенной интоксикации появляется риск возникновения хромосомных аберраций.

Апробация работы

Основные результаты работы доложены и обсуждены на Огаревских чтениях - научно-практической конференции Мордовского госуниверситета (Саранск 2003 - 2006), на III Российском конгрессе по патофизиологии (М., 2004), на Всероссийской научно-практической конференции «Абдоминальная хирургическая инфекция: перитонит» (М., 2005), научной конференции молодых ученых Мордовского госуниверситета (Саранск, 20032005).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 121 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы (1 глава), материала и методов исследования (2 глава), результатов собственных исследований (3, 4, 5 главы), заключение, выводов и списка литературы, который включает 138 отечественных и 43 иностранных источника. Работа содержит 14 рисунков и 19 таблиц.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования. В основу работы положены данные клинических наблюдений, проведенных на базе больницы скорой медицинской помощи г. Саранска. Наблюдению подлежали больные, госпитализированные в хирургическое отделение больницы с диагнозом острый аппендицит, осложненный острым перитонитом. Был проведен анализ 100 историй болезней больных острым перитонитом аппендикулярного происхождения. Всем больным в течение 2 ч с момента госпитализации в стационар и установления диагноза была выполнена аппендэктомия, санация и дренирование брюшной полости.

Для решения поставленных задач всем у больных с момента госпитализации их в стационар и на протяжении всего периода наблюдения исследованы показатели, с помощь которых было бы возможно изучить состояние эндогенной интоксикации, функциональное состояние форменных элементов крови, спектральный состав липидов, интенсивность перекисного окисления липидов и активность фосфолипазы А2 в них и плазме крови. В установленные сроки (1, 3 и 5 сутки после операции) у всех наблюдаемых больных производили забор венозной крови и последующее его изучение.

Для получения данных, позволяющих судить о выраженности эндотоксикоза, выявить нарушения в спектральном составе липидов и процессах их переокисления в форменных элементах и плазме крови, а также показателей функционального состояния клеток крови, были предварительно изучены вышеперечисленные показатели у 20 здоровых добровольцев обоего пола, в возрасте от 25 до 55 лет. Полученные данные нами были приняты за норму.

В работе использованы следующие методы исследования.

1) Определение общей и эффективной концентрации альбумина (Грызунов, Добрецов, 1994). Для характеристики физико-химических свойств альбумина определяли общую (ОКА) и эффективную (ЭКА) концентрацию альбумина в сыворотке крови флуоресцентным методом на специализированном анализаторе AKJI - 01 "Зонд".

2) Определение диеновых и триеновых коньюгатов (Ганстон, 1986). Липиды из тканей и плазмы крови экстрагировали хлороформ - метанольной смесью. Спектр поглощения липидов в гексане регистрировали при длинах

волн 190 - 275 нм на спектрофотометре СФ - 56 (Россия). Содержание диеновых и триеновых коньюгатов выражали в усл.ед./мг липидов.

3) Определение малонового диальдегида и Fe2+ индуцированного малонового диальдегида (Егоров, Козлов, 1987). Концентрацию ТБК -реактивных продуктов выражали в нмоль/г белка.

4) Определение активности фосфолипазы А2 потенциометрическим методом. Активность фосфолипазы А2 оценивали в среде, содержащей 10 ммоль трис-НС1-буфер (рН8,0), 150 ммоль тритон Х-100, 10 ммоль СаСЬ и 1,2 ммоль фосфатидилхолин. Расчет проводили по калибровочной кривой, построенной по пальмитиновой кислоте и выражали в мкмоль/с/г белка.

5) Экстракция липидов крови (Bligh, Dyer, 1959).

6) Хроматографические методы анализа (тонкослойная хроматография). Липиды фракционировали методом тонкослойной хроматографии на силикагелевых пластинах. Фосфолипиды выявляли с помощью универсального реагента (Vaskovsky et al„ 1975).

7) Количественное определение липидов. Количественное определение липидов проводили непосредственно на хроматограммах денситометрическим методом после их проявления 5 % фосфорнованилиновой кислотой в этаноле. Молекулярный анализ проводили на денситометре Model GS - 670 (BIO - RAD, США) с соответствующим программным обеспечением (Phosphor Analyst/ PS Sowtware).

8) Хемилюминесцентный метод определения перекисного окисления липидов. Измерение проводили на приборе (Биохемилюменометр БХЛ - 06 М). Графическую запись ХЛ проводили в течение 40 - 60 сек.

9) Выделение эритроцитов методом дробного центрифугирование.

10) Выделение лимфоцитов. Выделение клеток проводили из гепаринизированной крови ( из расчета 25 ЕД'мл крови) в градиенте плотности Ficoll-Pague (плотность 1,077 г/л).

11) Оптический метод регистрации агрегации тромбоцитов. Агрегационную активность тромбоцитов изучали в обогащенной тромбоцитами плазме (ОТП). Кинетику агрегации тромбоцитов регистрировали оптическим методом с помощью двулучевого агрегометра THROMLITE 1006 производства СП "БиоХим - Мак" (Москва), с подключенным самописцем.

12) Кариотипирование лимфоцитов периферической крови человека по методу Moorhed с соавторами. Препараты хромосом окрашивали по методу Гимза.

13) Определение деформабельности эритроцитов (Федорова, 1989).

14) Определение неспецифической проницаемости эритроцитов (Тогайбаев и др., 1988).

Полученные данные обрабатывали методом вариационной статистики, с использованием критерия t Стьюдента. Вычисления и построения

диаграмм, отражающих динамику изученных показателей, производили с помощью программы Microsoft Excel ХР. Использован текстовый процессор Microsoft Word ХР.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование функционального состояния тромбоцитов при эндотоксикозе выявило высокий уровень их агрегационной активности, что подтверждается данными литературы (Billing et al., 1992). На этом фоне добавление 20 мкмоль АДФ увеличивало скорость и степень агрегации на 76,0 - 88,4 % (р<0,05) и 53,6 - 66,1 % (р<0,05) соответственно. При действии АДФ в концентрации 5 мкмоль скорость и степень агрегации тромбоцитов были еще более высокими - выше нормы в 2 и 2,5 раза (рис. 1).

О АДФ (20 мкмоль) В АДФ (5 мкмоль) ПФАТ

Рис. 1. Показатели агрегационной активности тромбоцитов при использовании АДФ в концентрации 20 мкмоль, 5 мкмоль и ФАТ (данные нормы приняты за 100 %)

Повышенная агрегация тромбоцитов в наших условиях могла быть обусловлена повреждением сосудов в условиях эндогенной интоксикации, так как в этом случае в избытке из поврежденной сосудистой стенки, эритроцитов и тромбоцитов в зоне гемостаза выделяются агрегирующие факторы - АДФ, адреналин, тромбин и другие (Мачабели, 1981 ; Лычев, 1993; Скипетров В.П., 1999; Сидорова И.С. и др., 2005; Sechi L.A. et al. 1989). Действие ФАТ наиболее сильно из всех используемых средств индукции оказало влияние на скорость агрегации, увеличив ее в 3 - 3,5 раза, в то время как на степень агрегации тромбоцитов он оказывал наименьшее влияние, повысив ее всего на 20 — 27 % (р<0,05). Время агрегации при индукции испытуемыми факторами укорачивалось незначительно.

Особенностью агрегации, характеризующей функциональный статус тромбоцитов, является то, что, несмотря на резкий рост степени и скорости агрегации, время ее имело только тенденцию к укорачиванию, статистически значимо не меняясь. Дисфункция тромбоцитов, проявляющаяся повышенной агрегационной активностью, при эндотоксикозе может быть обусловлена различными причинами, среди которых важную роль могут играть как химические изменения в крови, так и изменения в спектре липидов биомембран клеточных структур (Баркаган З.С. Момот А.П., 2001; Лоуренс Д.Р. и др., 2002; Шмаков Р.Г. и др., 2003; Макацария А.Д., 2004; Сидорова И.С. и др., 2005; Bauer К.A. e.al., 1990). Повышенная агрегация тромбоцитов приводит к усилению выброса тромбоцитарного тромбопластина, который является необходимым фактором превращения фибриногена в фибрин и возникновения уже необратимой агрегации не только тромбоцитов, но и эритроцитов и (Баркаган З.С. Момот А.П., 2001; Bauer К.А. et. al., 1990). На этом фоне возникающие гипоксия и расстройства микроциркуляции приводят к накоплению вазоактивных веществ, что способствует расширению прекапилляров, наступает замедление кровотока и стаз в системе кровообращения, повышается вязкость крови, что совместно с циркулирующим в крови тромбопластином, создает условия для тромбинемии и первичного тромбообразования (Лычев В.Г., 1993; Скипетров В.П., 1999; Баркаган З.С. Момот А.П., 2001; Vinazzer Н„ 1989). Прогрессирование вышеуказанных изменений при дальнейшем развитии патологического процесса приводят к возникновению синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (Мачабели М.С., 1981; Балуда В.П., 1984; Лычев В.Г., 1993; Sechi L.A. et al., 1989; Vinazzer H., 1989).

Лимфоциты в нашей работе были использованы в качестве модели для изучения генетических аномалий при различных заболеваниях в силу ряда их генетических особенностей. При эндотоксикозе и гиперактивации процессов липопереокисления образуется широкий спектр химических соединений, обладающих высокой цитогенетической активностью (диеновые коньюгаты, гидроперекиси липидов, эпоксиды, перкислоты, перэфиры, диацилпероксиды, d-гидроксилгидропероксиды и др.) (Панасенко О.М., Арнхольд Ю., 1996; Бурлакова Е.Б. и др., 1998; Шутенко Ж.И., и др., 1998; Егоров И.В., Слепушкин В.Д., 1999; Власов А.П. и др., 2000; Barclay L.R.C. et al., 1990). Очевидно, что создаются реальные предпосылки для повреждения ДНК. В наших исследованиях изучались хромосомные мутации в лимфоцитах при эндотоксикозе в результате аппендикулярного перитонита, а в опытах in vitro еще и влияние на этот процесс про- и антиоксидантов.

При эндотоксикозе наблюдается существенное увеличение частоты аберрантных метафаз, парных фрагментов. Обнаружено увеличение числа хромосом у одного индивида, а так же беспорядочное расположение хромосом, которое носит название мозаицизма. Среди больных

эндотоксикозом мозаичные формы составили 0,82 на 100 клеток, фрагментов хромосомного типа - 0,43, обменов хромосомного типа не выявлено.

Полученные нами результаты цитогенетического исследования лимфоцитов подтверждают литературные данные о влиянии активных форм кислорода на некоторые аминокислоты, что нарушает функции тех белков, в состав которых они входят, в результате чего повреждаются молекулы ДНК, РНК, а также возникают хромосомные аберрации, повреждения ядерного матрикса с появлением и накоплением мутаций, нарушается синтеза белка (Дудник Л.Б., 1998; Любицкий О.Б. и др., 1998; Лахин P.E., и др., 1999; Рябов Г.А., и др., 2000; Halliwell В., 1996), что реализуется в нарушении структурно-функционального состояния клетки (Малышев В.Д. и др., 1993).

Развитие эндотоксикоза приводит к нарушению функционального состояния мембран эритроцитов. Подтверждением этому служит снижение осмотической резистентности и эластичности эритроцитов, что подтверждается снижением индекса деформабельности эритроцитов на 26,8 - 39,7 % (р<0,05) и повышением проницаемости мембраны эритроцитов на 27,9 - 43,9 % (р<0,05). Обнаруженное повреждение клеточных структур экзотоксинами в результате воздействия биологически активных веществ затрудняет развитие адекватных компенсаторных адаптационных механизмов и значительно ограничивает механизмы естественной детоксикации, что в свою очередь способствует дальнейшему прогрессированию эндогенной интоксикации (Попов А.Н., Миннебаев М.М., 1997; Царапкин И.М., Бессмельцев С.С., 1997). В итоге многими исследователями отмечается формирование «порочного круга», ведущего к дезорганизации функций жизненно-важных органов и организма как целого (Кузнецов H.H. и др., 1996; Белявский А.Д. и др., 1998; Di Filippo А. et al., 1994). Подобное можно объяснить тем, что эритроциты подвержены кислородному повреждению и токсическому действию свободных радикалов кислорода и продуктов ПОЛ плазмы (Novelli G.P., 1992, Максина А.Г. и др., 1996). Они являются чрезвычайно чувствительными к окислительному стрессу благодаря повышенному содержанию полиненасыщенных жирных кислот (субстрата для ПОЛ) в их мембранах, высокой концентрации кислорода в клетке, гемоглобина и железа, катализирующих окислительные реакции, а также в связи с невозможностью ресинтсзировать поврежденные структуры (Балашова Т.С. и др., 1996). В наших исследованиях было установлено, что в первый день послеоперационного периода индекс деформабельности эритроцитов был снижен на 26,8 % (р<0,05). Через трое суток после операции и начала лечения регистрировали постепенное повышение индекса деформабельности эритроцитов, который все же оставался сниженным на 39,7 % (р<0,05). На конечном этапе наблюдения (5-е сутки) индекс деформабельности эритроцитов был ниже нормы на 19,7 % (р<0,05).

Неспецифическая проницаемость эритроцитов на всех этапах наблюдения за больными была достоверно выше установленной нормы. Через сутки после проведения оперативного вмешательства проницаемость мембраны эритроцитов была повышена на 27,9 % (р<0,05), через трое суток -выше нормы на 43,9 % (р<0,05), на пятые сутки - выше на 20,7 % (р<0,05). Указанные изменения могли быть следствием чрезмерной активации ПОЛ в эритроцитах с образованием повреждающих мембрану продуктов.

В эритроцитах в силу особенностей их структурной организации, метаболизма и специфических функций имеются все предпосылки для ферментативной и неферментативной генерации в большом объеме АФК (Збровская И.А., Банникова М.В., 1995). В образовании АФК в эритроцитах участвуют НАДФ- и ФАД- зависимые дегидрогеназы и оксидазы. Так, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа и фосфоглюконатдегидрогеназа, содержащие НАДФ, восстанавливаются за счет аэробного пентозного окисления глюкозы. А в присутствии НАДФН - оксидазы этот восстановленный кофермент подвергается дегидрированию, в результате чего образуются супероксидный радикал, НАДФ и Н* (Rossi F. et al.,1986). Аналогичным образом функционируют ферментные пары, участвующие в гидрировании и дегидрировании кофермента ФАД. Супероксид - анион в эритроцитах генерируется еще и при участии кофермента сукцинатдегидрогеназы, при чем одновременно образуется перекись водорода (Сторожук П.Г., Сторожук А.П., 1998).

Давно замечено, что при эндогенной интоксикации молекула альбумина претерпевает изменения, и структура связывающих центров меняется, в связи с чем молекула альбумина становится неспособной к адсорбции и транспорту токсических веществ. И чем более выражен эндотоксикоз, тем больше изменены молекулы альбумина, в результате чего происходит прогрессирующее накопление токсинов в крови (Родоман Г.В. и др., 1999; Li W. et al., 1997; Guler О. et al., 1999). Исследование гидрофильного компонента эндотоксикоза в нашей работе показало, что общая концентрация альбумина в плазме крови уменьшалась на 26 — 32 % (р<0,05), более чем на 40 - 60 % (р<0,05) была снижена эффективная концентрация альбумина, а резерв его связывающей способности был меньше на 25 - 30 % (р<0,05). Это в свою очередь обусловило повышение индекса токсичности плазмы крови в 2,5 - 3,5 раза.

Многочисленными исследованиями доказано, что при эндотоксикозе нарушается способность альбумина связывать токсические вещества за счет нарушения ее конформационной структуры. При этом определена прямая зависимость между выраженностью эндотоксикоза, активностью молекулы альбумина и токсичностью плазмы в крови (Петросян Э.А. и др., 1998; Федоровский Н.М. и др., 1998; Родоман Г.В. и др., 1999; Ivleva V. V. et al., 1995; Pacelli F. et al., 1996; Li W. et al., 1997; Guler O. et al., 1999).

Низкуая функциональная активность альбумина по связыванию токсических веществ подтверждалась снижением его эффективной концентрации. На всех сроках наблюдения за больными резерв связывания альбумина был достоверно ниже нормы. Через сутки после операции резерв связывания альбумина был ниже нормы на 16,0 %, к третьим суткам лечения резервная способность альбумина продолжала уменьшаться и была ниже нормы на 29,6 % (р<0,05), к пятым суткам РСА был ниже нормы на 13,6 % (р<0,05) (табл. 1).

Таблица 1

Некоторые показатели эндогенной интоксикации при остром перитоните

(Mim)

Показатель Норма Послеоперационный период

1-е сутки 3-й сутки 5-е сутки

Общая концентрация альбумина, г/л 52,20±0,77 35,40±1,21* 38,31±1,12* 44,91±2,47*

Эффективная концентрация альбумина, г/л 42,30±1,19 23,60±1,35* 26,90±1,53* 31,14±1,77*

Резерв связывания альбумина, усл. ед. 0,81±0,04 0,68±0,03* 0,57±0,03* 0,70±0,03*

Индекс токсичности плазмы крови, усл. ед. 0,23±0,01 0,55±0,03* 0,89±0,05* 0,62±0,04*

Примечание * - достоверность отличия по отношению к исходным данным (р<0,05)

Снижение устойчивости плазмы крови к эндогенной интоксикации сопровождалось увеличением показателя индекса токсичности. На первые сутки послеоперационного наблюдения индекс токсичности плазмы был увеличен на 139,1 % (р<0,05). Максимальное увеличение индекса токсичности плазмы наблюдали на третьи сутки после операции и санации брюшной полости - выше нормы на 287,0 % (р<0,05). К пятым суткам наблюдения уровень токсичности стал снижаться, однако оставался выше нормы на 169,6 % (р<0,05).

Развитие острого перитонита аппендикулярного генеза приводило к нарушению спектрального состава липидов, как плазмы крови, так и форменных элементов. В плазме крови регистрировали снижение удельного веса фосфатидилсерина - на 56,2 - 63,3 % (р<0,05), фосфатидилинозита - на 52,0 — 74,3 (р<0,05). В то же время отмечали повышение фракции лизофосфатидилхолина в 8,5 - 10 раз, фосфатидилэтаноламина -на 40,7 - 53,8 % (р<0,05), свободных жирных кислот - на 20,9 - 38,9 % (р<0,05), сфингомиелина - на 22,7 - 19,3 % (р<0,05).

Наиболее характерными липидными изменениями в эритроцитах было повышение содержания эфиров холестерола на 53 - 84 %, лизофосфатидилхолина в 12,5 раз, сфингомиелина на 27 - 34 %, фосфатвдилсерина на 30 - 32 %, а также уменьшение уровня фосфатидилэтаноламина на 26 - 31 % и фосфатидилинозита на 66 - 76 % (рис. 2).

Нарушение липидного спектра в тромбоцитах было выявлено в виде повышения содержания фракции холестерола на 23 - 31 %, эфиров холестерола на 44 - 63 %, свободных жирных кислот на 60 - 66 %, лизофосфатидилхолина в 4,5 - 6,5 раз, уменьшения удельного веса фосфатидилинозита на 32 - 42 %, фосфатидилсерина на 39 - 47 %, суммарных фосфолипидов на 26 - 28 %.

Q Норма ■ 1-е сутки □ 3-й сутки □ 5-е сутки

Рис. 2. Содержание некоторых фосфолипидов в эритроцитах крови при остром перитоните (данные нормы приняты за 100 %)

В лимфоцитах было обнаружено увеличение фракции триглицеридов на 92 - 110 %, свободных жирных кислот на 21 - 36 %, лизофосфатидилхолина в 8 - 8,5 раз, фосфатидилинозита на 97 - 103 %, фосфатидилсерина на 54 - 72 %, снижение уровня фосфатидилэтаноламина -на 60 - 75 % (рис. 3).

В последние годы появились данные, свидетельствующие о существенной роли липидного обмена в развитии многих патологических процессов (Дубикайтис А.Ю. и др., 1994; Тимушева Ю.Т. и др., 1998; Трофимов В.А., 1999; Власов А.П. и др., 2000; Кацадзе М.А., 2001; Luo Z.Y. et al., 1992). Состав мембранных липидов под действием фосфолипаз может изменяться в широких пределах (Genu В., Cockcroft S., 1992; Rack М. et al., 1992; Wakelam M„ 1992; Zidovetzki R. et al., 1992). B.A. Трофимовым (1999) показано повышение фракции свободных жирных кислот и лизофосфадитилхолина, уменьшение удельного веса фракции свободного холестерина, триацилглицеринов и суммарных фосфолипидов при остром

перитоните в эксперименте. Костин Я.В. с соавт. (1998), Тарасова Т.В. (1998) считают, что активизация фосфолипазы А2 и интенсификация ПОЛ являются взаимообусловленными в патогенезе острого перитонита и коррелируют со степенью выраженности воспалительного процесса.

|п Норма я 1-е сутки □ 3-й сутки □ 5-е сутки ]

Рис. 3. Содержание некоторых фосфолипидов в лимфоцитах крови при остром перитоните (данные нормы приняты за 100 %)

Исследуя интенсивность процессов ПОЛ и активность фосфолипазы А2 в плазме и форменных элементах крови больных, было выявлено, что на протяжении всего периода наблюдения и те и другие показатели были достоверно высокими. Так, в плазме крови содержание диеновых и триеновых коньюгатов было повышено в 2 - 2,5 раза, малонового диальдегида - в 1,5-2 раза, Fe-индуцированного малонового диальдегида -на 30 - 50 % ( р<0,05). Активность каталазы была выше нормы на 48 - 54 % (р<0,05), фосфолипазы А2 - более чем в 4 - 6 раз.

Нами была изучена активность процессов перекисного окисления липидов в плазме крови по данным хемилюминесценции (табл. 2).

Обнаружено, что интенсификация свободно-радикальных процессов переокисления сопровождается увеличением хемилюминесценции плазмы крови, что проявляется повышением светосуммы более чем в 2,5 раза, значение максимальной интенсивности сигнала превышало норму на 75 - 87 % (р<0,05). Светосумма до момента максимальной интенсивности сигнала была повышена почти в 2 раза. Тангенс угла максимального нарастания сигнала до достижения значения максимальной интенсивности был увеличен на 67 - 71 % ( р<0,05), тангенс угла максимального убывания сигнала после достижения значения максимальной интенсивности был достоверно повышенным на первые сутки наблюдения - выше нормы на 22,4 % (р<0,05).

Таблица 2

Активность ПОЛ в плазме крови по данным хемилюминесценции (М±т)

Показатель Норма Послеоперационный период

1-е сутки 3-й сутки 5-е сутки

S 3,68±0,20 10,56±0,58* 9,12±0,50* 7,05±0,39*

Imax 1,23±0,07 2,30±0,13« 2,16±0,12* 1,96±0,11*

ST max 0,94±0,04 1,84±0,08* 1,79±0,08* 1,53±0,07*

tgl 2,01±0,12 3,44±0,20* 3,36±0,20* 2,90±0,17*

tg2 0,49±0,03 0,60±0,03* 0,54±0,03 0,52±0,03

Примечание' * - достоверность отличия по отношению к исходным данным (р<0,05), S - светосумма, I max - значение максимальной интенсивности сигнала, ST max -светосумма до момента достижения максимальной интенсивности,tg 1 - тангенс угла максимального нарастания сигнала до достижения значения максимальной интенсивности, tg 2 - тангенс угла максимального убывания сигнала после достижения значения максимальной интенсивности

Обнаружено, что в эритроцитах процессы липопереокисления происходили наиболее интенсивно. Более чем в 2,5 раза была повышена концентрация диеновых и триеновых коньюгатов, содержание малонового диальдегида превышало норму более чем в 2 раза, Fe-индуцированного МДА - на 33 - 43 % ( р<0,05) (рис. 4).

| В Норма Исутки □ 3-* сутки □ сутки [

Рис. 4. Показатели интенсивности процессов ПОЛ в эритроцитах крови больных ошрым перитонитом (данные нормы приняты за 100 %)

Известно, что при остром перитоните идет образование избыточного количества активных форм кислорода, оказывающих повреждающее действие на ткани на различном уровне (Збровская И.А., Банникова М.В., 1995; Рябов Г.А., и др., 2000; Ytrehus К., Hegstad A.C., 1991), при этом инициация свободно-радикального окисления происходит во всех мембранных структурах клетки, что приводит к образованию перекисных соединений липидов (Кубатиев A.A. и др., 1994; Дудник Л.Б., 1998; Любицкий О.Б. и др., 1998; Лахин P.E., и др., 1999; Halliwell В., 1996).

При этом образуются первичные продукты липопереокисления, являющимися нестойкими, которые претерпевают дальнейшие превращения с образованием вторичных продуктов ПОЛ, основным представителем которых является малоновый диальдегид (Дубикайтис А.Ю. и др., 1994; Жаров В.Н. и др., 1994). В результате действия продуктов ПОЛ и активных форм кислорода происходит накопление ионов Са2+ в цитоплазме клеток и активации фосфолипазы А2 (Евстигнеева Р.П. и др., 1998; Тимушева Ю.Т. и др., 1998).

Токсическому действию активных форм кислорода и продуктов ПОЛ наиболее подвержены эритроциты, являющиеся более чувствительными к окислительному стрессу за счет повышенного содержания полиненасыщенных жирных кислот, наличия гемоглобина и железа, катализирующих окислительные реакции (Балашова Т.С. и др., 1996; Максина А.Г. и др., 1996; Novelli G.P., 1992).

Обнаружено усиление процессов ПОЛ в тромбоцитах: концентрация диеновых и триеновых коньюгатов превышала норму в 1,5 - 2 раза, содержание малонового диальдегида было повышено на 70 - 97 % ( р<0,05), Fe-ичдуцированного МДА - на 60 - 78 % ( р<0,05). В 2,5 - 3 раза была выше нормы активность фосфолипазы А2, активность каталазы была наоборот снижена на 15 - 20 % ( р<0,05) (рис. 5).

р^чросфо липаза

Рис. 5. Активность фосфолипазы А: и каталазы в тромбоцитах крови при остром перитоните (данные нормы приняты за 100 %)

Выявлено, что содержание диеновых коньюгатов в лимфоцитах, по сравнению с другими исследуемыми форменными элементами, было повышено меньше всего - выше нормы на 29 - 45 % ( р<0,05). Однако количество триеновых коньюгатов превышало норму более чем в 2 раза. Из всех исследуемых клеток крови содержание малонового диальдегида было наиболее высоким - выше нормы в 3 раза. Концентрация Ре-МДА была повышена на 48 - 69 % (р<0,05). Более чем в 2,5 раза выше нормы была активность фосфолипазы А2.

Таким образом, при эндотоксикозе липидная дисфункция как форменных элементов так и плазмы крови сопровождается выраженными качественными и количественными нарушениями спектра липидов. Липидные нарушения форменных элементов крови коррелируют с выраженностью эндотоксемии и функциональными отклонениями. Кроме этого увеличивается неспецифическая проницаемость и ухудшается деформабельность •

эритроцитов, повышается агрегационная активность тромбоцитов. Выраженность этих изменений находится в корреляционной зависимости со степенью эндогенной интоксикации по гидрофильному и гидрофобному компонентам. Повреждения мембран клеток крови при эндогенной '

интоксикации сопровождается интенсификацией свободно-радикальных реакций перекисного окисления липидов и активизацией фосфолипазы А2 как плазмы крови, так и самих клеточных образований. Важно отметить, что морфофункциональные изменения форменных элементов крови при эндотоксикозе сопровождаются хромосомными нарушениями. На примере лимфоцитов это выражается в увеличении частоты аберрантных метафаз, парных фрагментов. При использовании карнозина и маннитола in vitro хромосомные нарушения существенно уменьшаются.

ВЫВОДЫ

1. При эндогенной интоксикации увеличивается неспецифическая проницаемость и ухудшается деформабельность эритроцитов, повышается агрегационная активность тромбоцитов. Выраженность этих изменений зависит от степени эндогенной интоксикации по гидрофильному и гидрофобному компонентам.

2. Развитие клеточных дисфункций при эндогенной интоксикации происходит на фоне изменений в качественном и количественном составе липидов эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов и плазмы крови. Липидные нарушения в форменных элементах и плазме крови коррелируют с выраженностью эндотоксемии и функциональными отклонениями. »

на 60 - 66 %, лизофосфатидилхолина в 4,5 - 6,5 раз, уменьшения удельного веса фосфатидилинозита на 32 - 42 %, фосфатидилсерина на 39 - 47 %, суммарных фосфолипидов на 26 - 28 %. В лейкоцитах - в увеличении фракции триглицеридов на 92 - 110 %, свободных жирных кислот на

21-36 %, лизофосфатидилхолина в несколько раз, фосфатидилинозита на 97 - 103 %, фосфатидилсерина на 54 - 72 %, снижении - уровня фосфатидилэтаноламина на 60 - 75 %.

4. Повреждения биомембран форменных элементов крови при эндогенной интоксикации обусловлены интенсификацией свободно-

.1 радикальных реакций перекисного окисления липидов и активизацией

фосфолипазы Аг как плазмы, так и клеток крови.

5. В лимфоцитах при эндогенной интоксикации возрастает выход хромосомных нарушений. Увеличение частоты аберрантных метафаз и

' парных фрагментов связано с усилением свободно-радикальных процессов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Власов А.П., Трофимов В.А., Гераськина И.И., Гуляев И.И., Сальникова E.H., Исаева О.В., Татаринова О.Н. Антиоксиданты в коррекции функционального состояния печени при перитоните // Современные методы диагностики и лечения в медицине: проблемы, перспективы: Сборник научных трудов. -Саранск: Региональный научно-исследовательский информационный центр, 2004. Вып. III. - С. 64-66.

2. Власов А.П., Трофимов В.А., Крылов В.Г., Сальникова E.H., Исаева О.В., Степаева И.П. Возможности коррекции системного липидного дистресс-синдрома // Эфферентная, иммунокорригирующая и интенсивная терапия в клинической практике: Тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Ижевск: Ижевская госакадемия, 2004. - С. 125-127.

3. Власов А.П., Трофимов В.А., Исаева О.В., Лобанов В.Н., Вишняков С.С., Сальникова E.H. Некоторые патофизиологические параллели нарушений липидного метаболизма и эндогенной интоксикации // Дизрегуляционная патология органов и систем (экспериментальная и клиническая патофизиология): Тезисы докладов III Российского Конгресса по патофизиологии. - М., 2004. - С. 85-86.

) 4. Кудряшова В.И., Сальникова E.H., Матяев В.М., Мадонова Ю.Б.

Хромосомные аберрации при эндотоксикозе //Проблемы региональной генетики: Научные труды, посвященные 40-летию кафедры генетики МГУ им. Н. П. Огарева. - Саранск: Изд-во Мордов. ун-та, 2003. - С . 41-46.

' 5. Сальникова E.H., Дудко A.A., Умняшкина Н.И. Особенность

липидных компонентов эритроцитов у больных с наследственной гиперхолестеринемией //Материалы научной конф. Естественные и технические науки XXXII Огаревские чтения. - Саранск: Изд-во Мордов. унта, 2004.-С. 10-11.

6. Трофимов В. А., Матяев В. М, Сальникова E.H. Роль липидов в генетических процессах // Проблемы региональной генетики: Научные

труды, посвященные 40-летию кафедры генетики МГУ им. Н. П. Огарева. -Саранск: Изд-во Мордов. ун-та, 2003. - С. 41-46.

7. Трофимов В. А., Мишарин И.В., Хурцев К.В. Изменение функционального состояния клеток крови и липидного метаболизма //Инфекции в хирургии. Приложение к журналу. Сборник тезисов IV Всероссийской научно-практической конференции «Абдоминальная хирургическая инфекция: перитонит». 2005. - С. 72.

8. Власов А.П., Тарасова Т.В., Мишанин И.В., Хурцев К.В., Сальникова Е. Н., Аширов P.P. Системный липидный дистресс-синдром при перитоните И Инфекции в хирургии. Приложение к журналу. Сборник тезисов IV Всероссийской научно-практической конференции «Абдоминальная хирургическая инфекция: перитонит». 2005. - С. 23-24.

9. Власов А.П., Султанова Н.М., Горшенина Е.И., Сальникова E.H. Сравнительная характеристика эффективности применения антиоксидантов в коррекции функционального состояния эритроцитов при эндотоксикозе // Естественно-научные исследования: теория, методы, практика: Межвузовский сборник научных трудов. Саранск: Ковылк. Тип, 2006. Вып. 4. -С. 144-146.

САЛЬНИКОВА Елена Николаевна

Автореферат диссертации на соискание ученой степени < кандидата биологических наук

Подписано к печати 29.05.06. Формат 60x84 '/ie. Бумага офс. № 1. Печать офсетная. Усл. печ. л. 0,93. Уч-изд. л. 1,02. Заказ №2544. Тираж 100 экз.

Отпечатано в полном соответствии с качеством предоставленных оригиналов в ГУП РМ «Республиканская типография «Красный Октябрь» 430000, Мордовия, г. Саранск, ул. Советская, 55а.

Aooeí

#15 815

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Сальникова, Елена Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Современные представления о синдроме эндогенной интоксикации.

1.2. Состояние липидного обмена при эндогенной интоксикации.

1.3. Состояние некоторых форменных элементов крови при эндогенной интоксикации.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материал исследования.

2.2. Методы исследования.

ГЛАВА III. НЕКОТОРЫЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПАРАМЕТРЫ КЛЕТОК

КРОВИ И ПОКАЗАТЕЛИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ В ДИНАМИКЕ ОСТРОГО ПЕРИТОНИТА.

3.1. Функциональное состояние клеток крови в динамике острого перитонита.

3.2. Показатели эндогенной интоксикации в динамике острого перитонита.

ГЛАВА IV. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ СОСТАВ

ЛИПИДОВ ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ И ПЛАЗМЫ КРОВИ В ДИНАМИКЕ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ.

4.1. Качественные и количественные характеристики липидов плазмы крови при эндотоксикозе.

4.2. Качественные и количественные характеристики липидов форменных элементов крови при эндотоксикозе.

ГЛАВА V. СОСТОЯНИЕ ПОЛ И АКТИВНОСТИ ФОСФОЛИПАЗЫ А2 В ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТАХ И ПЛАЗМЕ КРОВИ В ДИНАМИКЕ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ.

5.1. Состояние ПОЛ и активности фосфолипазы А2 в плазме крови в динамике эндогенной интоксикации.

5.2. Состояние ПОЛ и активности фосфолипазы А2 в форменных элементах крови в динамике эндогенной интоксикации.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Некоторые закономерности изменений функционального состояния клеток крови и липидного метаболизма при эндогенной интоксикации"

Достижением современной биологии является разработка концепции эндотоксикоза (Кузин, Дадвани, Ветшев, 2000; Гринев, Громов, Комраков, 2001; Wang, Iguchi, Ohshio, 1996; Dominion et al., 1997). Эндотоксикоз рассматривается как сложный, многофакторный молекулярно -патологический процесс, весьма поликазуальный в начальной фазе своего развития и постепенно приобретающий все более универсальный характер, зависящий от системной гипоксии тканей со всеми ее сложными метаболическими последствиями (Уткин, 1996; Федоровский, Сергиенко, Шилов, 1997; Гринев, Громов, Комраков, 2001; Wang, Iguchi, Ohshio, 1996; Dominion et al., 1997).

В последние годы многочисленными исследованиями доказана роль процессов перекисного окисления липидов, как одного из основных звеньев патогенеза большинства воспалительных заболеваний, в том числе и хирургической патологии (Cuzzocrea et al., 1999; Fukuhara et al., 1999; Tokyay et al., 1999). Интенсификация свободно - радикальных процессов сопровождается мембранодеструктивными нарушениями и при прогрессирующем развитии приводит к развитию эндогенной интоксикации (Васильев, 1995; Кузин, Дадвани, Ветшев, 2000; Гринев, Громов, Комраков, 2001; Wang, Iguchi, Ohshio, 1996; Dominion et al., 1997). Свободно -радикальная модификация липидов один из основных факторов, влияющих на качественный и количественный состав липидов клеток и тканей. При этом перекисное окисление липидов может стимулировать фосфолипазную активность. Фосфолипазы расщепляют мембранные фосфолипиды и поэтому при их высокой активности развиваются мембранодеструктивные процессы. Очевидно, что при эндогенной интоксикации создаются условия для модификации липидного компонента клеток и ткани. Однако в доступной научной литературе нет достаточно материала о состоянии спектра мембранных липидов при эндогенной интоксикации, а имеющиеся сведения разноречивы. Поэтому проведение исследования морфофункционального состояния форменных элементов крови в связи с перестройками липидного метаболизма при эндогенной интоксикации являются весьма актуальными.

Задачи:

3. Определить при эндогенной интоксикации состояние основных процессов, регулирующих целостность липидного бислоя мембран - интенсивность перекисного окисления липидов и активность фосфолипаз.

4. Установить выраженность хромосомных аберраций в лимфоцитах и влияния на них антиоксидантов карнозина и маннитола.

Научная новизна:

При остром перитоните на фоне традиционной терапии в динамике эндогенной интоксикации изучены качественный и количественный состав липидов эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, показано изменения их некоторых функциональных показателей.

Выяснено, что указанные изменения находятся во взаимосвязи с интенсификацией процессов перекисного окисления липидов, активизацией фосфолипазы А2.

Положения, выносимые на защиту.

Нарушения функциональной активности форменных элементов крови при перитоните находится в корреляционной зависимости со степенью эндогенной интоксикации по гидрофильному и гидрофобному компонентам.

При перитоните в эритроцитах, тромбоцитах, лейкоцитах нарушается липидный метаболизм. Липидные перестройки коррелируют с выраженностью эндотоксемии и функциональными отклонениями.

Липидные нарушения в форменных элементах крови сопровождаются интенсификацией свободно - радикальных реакций перекисного окисления липидов и активизацией фосфолипазы А2 как плазмы так и клеток крови.

При эндогенной интоксикации появляется риск возникновения хромосомных аберраций (мутаций).

Апробация работы.

Основные результаты работы доложены и обсуждены на Огаревских чтениях - научно - практической конференции Мордовского госуниверситета (Саранск 2003 - 2006), на III Российском конгрессе по патофизиологии (М., 2004), на Всероссийской научно - практической конференции «Абдоминальная хирургическая инфекция: перитонит» (М., 2005), научной конференции молодых ученых Мордовского госуниверситета (Саранск, 2003 - 2005).

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Сальникова, Елена Николаевна

ВЫВОДЫ

3. Наиболее четкие липидные изменения в эритроцитах определились в виде повышения содержания эфиров холестерола на 53 - 84 %, лизофосфатидилхолина в несколько раз, сфингомиелина на 27 - 34 %, фосфатидилсерина на 30 - 32 %, в уменьшении уровня фосфатидилэтаноламина на 26 - 31 %, фосфатидилинозита на 66 - 76 %. В тромбоцитах в виде повышения содержания фракции холестерола на 23-31 %, эфиров холестерола на 44 - 63 %, свободных жирных кислот на 60 - 66 %, лизофосфатидилхолина в 4,5 - 6,5 раз, уменьшения удельного веса фосфатидилинозита на 32 - 42 %, фосфатидилсерина на 39 - 47 %, суммарных фосфолипидов на 26 - 28 %. В лейкоцитах - в увеличении фракции триглицеридов на 92 - 110 %, свободных жирных кислот на 21 - 36 %, лизофосфатидилхолина в несколько раз, фосфатидилинозита на 97 - 103 %, фосфатидилсерина на 54 - 72 %, снижении - уровня фосфатидилэтаноламина на 60 - 75 %.

4. Повреждения биомембран форменных элементов крови при эндогенной интоксикации обусловлены интенсификацией свободно-радикальных реакций перекисного окисления липидов и активизацией фосфолипазы А2 как плазмы, так и клеток крови.

5. В лимфоцитах при эндогенной интоксикации возрастает выход хромосомных нарушений. Увеличение частоты аберрантных метафаз и парных фрагментов связано с усилением свободно-радикальных процессов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Одними из ведущих механизмов эндогенной интоксикации выступают мембранодеструктивные процессы, обусловленные гиперактивацией перекисного окисления липидов (Кузин и др., 2000; Гринев, Громов, Комраков, 2001; Wang, Igucti, Ohshio, 1996; Dominion et al., 1997). Как следует из многочисленных исследований (Дубикайтис и др., 1994; Васильев, 1995; Азизова, 2002; Goode et al., 1994; Fukuhara et al., 1999), чрезмерная активизация процессов липопереокисления, может являться одной из причин функциональных расстройств, возникающих в клетках.

Известно, что синдром эндогенной интоксикации развивается при патологических состояниях, сопровождающихся деструкцией тканей, нарушением обмена веществ, снижением функциональной активности систем естественной детоксикации (Кузнецов и др., 1996; Уткин, 1996; Словентантор, 1996; Попов, Миннебаев, 1997; Буянов, Родоман, Лаберко, 1998; Миронов, Руднов, 1999; Малков и др., 2000).

В настоящее время имеется не достаточно исследований о морфологическом и функциональном состоянии форменных элементов крови при синдроме эндогенной интоксикации, малоизучен спектральный состав липидов их мембран, а имеющиеся сведения разноречивы. Поэтому исследования морфофункционгльного состояния форменных элементов крови являются весьма актуальными.

Давно замечено, что при эндогенной интоксикации молекула альбумина претерпевает изменения, и структура связывающих центров меняется, в связи с чем, молекула альбумина становится неспособной к адсорбции и транспорту токсических веществ. И чем более выражен эндотоксикоз, тем больше изменены молекулы альбумина, в результате чего происходит прогрессирующее накопление токсинов в крови (Родоман и др., 1999; Li, Li, Gu, 1997; Guler et al., 1999). Исследование гидрофильного компонента эндотоксикоза в нашей работе показало, что общая концентрация альбумина в плазме крови уменьшалась, была снижена эффективная концентрация альбумина, и отмечено снижение резерва его связывающей способности. Это, в свою очередь, обусловило повышение индекса токсичности плазмы крови в 2,5 - 3,5 раза.

Многочисленными исследованиями доказано, что при эндотоксикозе нарушается способность альбумина связывать токсические вещества за счет нарушения ее конформационной структуры. При этом определена прямая зависимость между выраженностью эндотоксикоза, активностью молекулы альбумина и токсичностью плазмы в крови (Петросян и др., 1998; Федоровский, Каперская, Куренков, 1998; Родоман и др., 1999; Ivleva, Zaks, Dutikova, 1995; Pacelli, Doglietto, Alfieri, 1996; Li, Li, Gu, 1997; Guleretal., 1999).

Низкая функциональная активность альбумина по связыванию токсических веществ подтверждалась снижением его эффективной концентрации. На всех сроках наблюдения за больными резерв связывания альбумина был достоверно ниже нормы. Через сутки после операции резерв связывания альбумина был ниже нормы, к третьим суткам лечения резервная способность альбумина продолжала уменьшаться, к пятым суткам РСА оставался достоверно ниже исходного уровня.

Снижение устойчивости плазмы крови к эндогенной интоксикации, сопровождалось увеличением показателя индекса токсичности. На первые сутки послеоперационного наблюдения индекс токсичности плазмы был увеличен. Максимальное увеличение индекса токсичности плазмы наблюдали на третьи сутки после операции и санации брюшной полости. К пятым суткам наблюдения уровень токсичности стал снижаться, однако оставался выше нормы.

Развитие эндогенной интоксикации приводило к нарушению спектрального состава липидов как плазмы крови, так и форменных элементов. В плазме крови регистрировали снижение удельного веса фосфатидилсерина, фосфатидилинозита. В то же время отмечали повышение фракции лизофосфатидилхолина в 8,5 - 10 раз, фосфатидилэтаноламина, свободных жирных кислот, сфингомиелина.

В последние годы появились данные, свидетельствующие о существенной роли липидного обмена в развитии многих патологических процессов (Дубикайтис и др., 1994; Тимушева и др., 1998; Трофимов, 1999; Власов и др., 2000; Кацадзе, 2001; Luo et al., 1992). Состав мембранных липидов под действием фосфолипаз может изменяться в широких пределах (Genu, Cockcroft, 1992; Rack, Xhonneyx, Stieve, 1992; Wakelam, 1992; Zidovetzki, Laptalo, Crawford, 1992). B.A. Трофимовым (1999) показано повышение фракции свободных жирных кислот и лизофосфадитилхолина, уменьшение удельного веса фракции свободного холестерина, триацилглицеринов и суммарных фосфолипидов при остром перитоните в эксперименте. Костин Я.В. с соавт. (1998), Тарасова Т.В. (1998) считают, что активизация фосфолипазы А2 и интенсификация ПОЛ являются взаимообусловленными в патогенезе острого перитонита и коррелируют со степенью выраженности воспалительного процесса.

Исследуя интенсивность процессов ПОЛ и активность фосфолипазы А2 в плазме и форменных элементах крови больных, было выявлено, что на протяжении всего периода наблюдения те и другие показатели были достоверно высокими. Так, в плазме крови содержание диеновых и триеновых коньюгатов было повышено в 2 - 2,5 раза, малонового диальдегида — в 1,5 - 2 раза, Fe-индуцированного малонового диальдегида в 1,5 раза. Активность фосфолипазы А2 была повышена по отношению к норме в 4 - 6 раз.

Нами была изучена активность процессов перекисного окисления липидов в плазме крови по данным хемилюминисценции. Обнаружено, что интенсификация свободно - радикальных процессов переокисления сопровождается увеличением хемилюминисценции плазмы крови.

Развитие эндотоксикоза приводит к нарушению функционального состояния мембран эритроцитов. Подтверждением этому служит снижение осмотической резистентности и эластичности, что подтверждается снижением индекса деформабельности эритроцитов и повышением проницаемости мембраны эритроцитов. Обнаруженное повреждение клеточных структур экзотоксинами в результате воздействия биологически активных веществ, затрудняет развитие адекватных компенсаторных адаптационных механизмов и значительно ограничивает механизмы естественной детоксикации, что в свою очередь способствует дальнейшему прогрессированию эндогенной интоксикации (Попов, Миннебаев, 1997; Царапкин, Бессмельцев, 1997). В итоге многими исследователями отмечается формирование «порочного круга», ведущего к дезорганизации функций жизненно-важных органов и организма как целого (Кузнецов и др., 1996; Белявский и др., 1998; Di Filippo et al., 1994). Подобное можно объяснить тем, что эритроциты подвержены кислородному повреждению и токсическому действию свободных радикалов кислорода и продуктов ПОЛ плазмы (Novelli, 1992, Максина и др., 1996). Они являются чрезвычайно чувствительными к окислительному стрессу, благодаря повышенному содержанию полиненасыщенных жирных кислот (субстрата для ПОЛ) в их мембранах, высокой концентрации кислорода в клетке, гемоглобина и железа, катализирующих окислительные реакции, а также в связи с невозможностью ресинтезировать поврежденные структуры (Балашова и др., 1996). В наших исследованиях было установлено, что в первый день послеоперационного периода индекс деформабельности эритроцитов был снижен. Через трое суток после операции и начала лечения регистрировали постепенное повышение индекса деформабельности эритроцитов, который все же оставался сниженным. На конечном этапе наблюдения (5 сутки) индекс деформабельности эритроцитов был ниже нормы.

Неспецифическая проницаемость эритроцитов на всех этапах наблюдения за больными была достоверно выше установленной нормы. Через сутки после проведения оперативного вмешательства проницаемость мембраны эритроцитов была повышена, достигая своего максимального значения через трое суток, на пятые сутки проницаемость незначительно снизилась, но так и не достигла значения нормы. Указанные изменения могли быть следствием чрезмерной активации ПОЛ в эритроцитах с образованием повреждающих мембрану продуктов.

В эритроцитах, в силу особенностей их структурной организации, метаболизма и специфических функций, имеются все предпосылки для ферментативной и неферментативной генерации в большом объеме АФК (Збровская, Банникова, 1995). В образовании АФК в эритроцитах участвуют НАДФ - и ФАД - зависимые дегидрогеназы и оксидазы. Так, глюкозо - 6 - фосфатдегидрогеназа и фосфоглюконатдегидрогеназа, содержащие НАДФ, восстанавливаются за счет аэробного пентозного окисления глюкозы. А в присутствии НАДФН - оксидазы этот восстановленный кофермент подвергается дегидрированию, в результате чего образуются супероксидный радикал, НАДФ и Н* (Rossi et al.,1986). Аналогичным образом функционируют ферментные пары, участвующие в гидрировании и дегидрировании кофермента ФАД. Супероксид - анион в эритроцитах генерируется еще и при участии кофермента сукцинатдегидрогеназы, при чем одновременно образуется перекись водорода (Сторожук, Сторожук, 1998).

Наиболее характерными липидными изменениями в эритроцитах, были повышение содержания эфиров холестерола, лизофосфатидилхолина в 12,5 раз, сфингомиелина, фосфатидилсерина, а также уменьшение уровня фосфатидилэтаноламина и фосфатидилинозита.

Обнаружено, что в эритроцитах процессы липопереокисления происходили наиболее интенсивно. Более чем в 2,5 раза была повышена концентрация диеновых и триеновых коньюгатов, содержание малонового диальдегида превышало норму более чем в 2 раза, повышение Fe - индуцированного МДА незначительно, активность фосфолипазы А2 была увеличена в 4,5 - 5,5 раз.

Известно, что при остром перитоните идет образование избыточного количества активных форм кислорода, оказывающих повреждающее действие на ткани на различном уровне (Збровская, Банникова, 1995; Рябов, и др., 2000; Ytrehus, Hegstad, 1991), при этом инициация свободно-радикального окисления происходит во всех мембранных структурах клетки, что приводит к образованию перекисных соединений липидов (Кубатиев и др., 1994; Дудник, 1998; Любицкий и др., 1998; Лахин и др., 1999; Halliwell, 1996).

При этом образуются первичные продукты липопереокисления, которые претерпевают дальнейшие превращения с образованием вторичных продуктов ПОЛ, основным представителем которых является малоновый диальдегид (Дубикайтис и др., 1994; Жаров и др., 1994). В результате действия продуктов ПОЛ и активных форм кислорода происходит л I накопление ионов Са в цитоплазме клеток и активации фосфолипазы А2 (Евстигнеева, Волков, Чудинова, 1998; Тимушева и др., 1998).

Токсическому действию активных форм кислорода и продуктов ПОЛ наиболее подвержены эритроциты, являющиеся более чувствительными к окислительному стрессу, за счет повышенного содержания полиненасыщенных жирных кислот, наличия гемоглобина и железа, катализирующих окислительные реакции (Балашова и др., 1996; Максина и др., 1996; Novelli, 1992).

Исследование функционального состояния тромбоцитов при эндотоксикозе, выявило высокий уровень их агрегационной активности, что подтверждается данными литературы (Billing et al., 1992). Добавление 20 мкмоль АДФ увеличивало скорость и степень агрегации. При действии АДФ в концентрации 5 мкмоль скорость и степень агрегации тромбоцитов были еще более высокими - выше нормы в 2 и 2,5 раза. Повышенная агрегация тромбоцитов в изучаемых условиях могла быть обусловлена повреждением сосудов в условиях эндогенной интоксикации, так как в этом случае в избытке из поврежденной сосудистой стенки, эритроцитов и тромбоцитов в зоне гемостаза выделяются агрегирующие факторы - АДФ, адреналин, тромбин и другие (Мачабели, 1981; Лычев, 1993; Скипетров, Власов, Голышенков, 1999; Сидорова, Овсянникова, Шешукова, 2005; Sechi et al. 1989). Действие ФАТ наиболее сильно из всех используемых средств индукции оказало влияние на скорость агрегации, увеличив ее в 3 — 3,5 раза, в то время как на степень агрегации тромбоцитов он оказывал наименьшее влияние. Время агрегации при индукции испытуемыми факторами укорачивалось незначительно.

Bauer et. al., 1990). На этом фоне возникающие гипоксия и расстройства микроциркуляции, приводят к накоплению вазоактивных веществ, что способствует расширению прекапилляров, наступает замедление кровотока и стаз в системе кровообращения, повышается вязкость крови, что совместно с циркулирующим в крови тромбопластином, создает условия для тромбинемии и первичного тромбообразования (Лычев, 1993; Скипетров, 1999; Баркаган, Момот, 2001; Vinazzer, 1989). Прогрессирование вышеуказанных изменений при дальнейшем развитии патологического процесса, приводят к возникновению синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания крови (Мачабели, 1981; Балуда, 1984; Лычев, 1993; Sechi et al., 1989; Vinazzer, 1989).

Нарушение липидного спектра в тромбоцитах было выявлено в виде повышения содержания фракции холестерола, эфиров холестерола, свободных жирных кислот, лизофосфатидилхолина в 4,5 - 6,5 раз, уменьшения удельного веса фосфатидилинозита, фосфатидилсерина, суммарных фосфолипидов.

Обнаружено усиление процессов ПОЛ в тромбоцитах: концентрация диеновых и триеновых коньюгатов превышала норму в 1,5 - 2 раза, содержание малонового диальдегида и Fe-индуцированного МДА было повышено. В 2,5 - 3 раза была выше нормы активность фосфолипазы А2.

Лимфоциты в нашей работе были использованы в качестве модели для изучения генетических аномалий при различных заболеваниях в силу ряда их генетических особенностей. При эндотоксикозе и гиперактивации процессов липопереокисления образуется широкий спектр химических соединений, обладающих высокой цитотоксической активностью (диеновые коньюгаты, гидроперекиси липидов, эпоксиды, перкислоты, перэфиры, диацилпероксиды, d - гидроксилгидропероксиды и др.) (Панасенко, Арнхольд, 1996; Бурлакова, Крашаков, Чрапова, 1998; Шутенко и др., 1998; Егоров, Слепушкин, 1999; Власов и др., 2000; Barclay et al., 1990). Таким образом, создаются реальные предпосылки для повреждения ДНК. В наших исследованиях изучались хромосомные мутации в лимфоцитах при эндотоксикозе, а в опытах in vitro еще и влияние на этот процесс про - и антиоксидантов.

Полученные нами результаты цитогенетического исследования лимфоцитов, подтверждают литературные данные о влиянии активных форм кислорода на некоторые аминокислоты, что нарушает функции тех белков, в состав которых они входят, в результате чего повреждаются молекулы ДНК, РНК, а также возникают хромосомные аберрации, повреждения ядерного матрикса с появлением и накоплением мутаций, нарушается синтез белка (Дудник, 1998; Любицкий и др., 1998; Лахин и др., 1999; Рябов и др., 2000; Halliwell, 1996), что реализуется в нарушении структурно-функционального состояния клетки (Малышев и др., 1993).

В лимфоцитах было обнаружено увеличение фракции триглицеридов, свободных жирных кислот, лизофосфатидилхолина в 8 - 8,5 раз, фосфатидилинозита на, фосфатидилсерина, снижение уровня фосфатидилэтаноламина.

Выявлено, что содержание диеновых коньюгатов в лимфоцитах, по сравнению с другими исследуемыми форменными элементами, было повышено незначительно по отношению к норме. Однако количество триеновых коньюгатов превышало норму более чем в 2 раза. Из всех исследуемых клеток крови содержание малонового диальдегида было наиболее высоким - выше нормы в 3 раза. Концентрация Fe - МДА была повышена. Более чем в 2,5 раза выше нормы была активность фосфолипазы

Таким образом, при эидотоксикозе липидная дисфункция, как форменных элементов, так и плазмы крови сопровождается выраженными качественными и количественными нарушениями спектра липидов. Липидные нарушения форменных элементов крови коррелируют с выраженностью эндотоксемии и функциональными отклонениями. Кроме этого увеличивается неспецифическая проницаемость и ухудшается деформабельность эритроцитов, повышается агрегационная активность тромбоцитов. Выраженность этих изменений находится в корреляционной зависимости со степенью эндогенной интоксикации по гидрофильному и гидрофобному компонентам. Повреждения мембран клеток крови при эндогенной интоксикации, сопровождается интенсификацией свободно-радикальных реакций перекисного окисления липидов и активизацией фосфолипазы Ai как плазмы крови, так и самих клеточных образований.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Сальникова, Елена Николаевна, Ульяновск

1. Азизова О.А. Роль свободнорадикальных процессов в развитии атеросклероза // Биол. мемб. 2002. - Т. 19. - № 6. - С. 451-471.

2. Азизова О.А. Влияние окисленных липопротеидов низкой плотности на гемолитическую резистентность эритроцитов / Азизова О.А., Пиря-дев А.П., Никитина Н.А. и др. // Бюллетень экспер. биол. и мед. 2002. - № 8. - С. 160-163.

3. Ахундов И.Т. Влияние эндолимфатической лимфостимуляции на дренажную и транспортную функции лимфатической системы при экспериментальном перитоните // Анестез. и реаним. 1998. - № 3. - С. 61 -64.

4. Балашова Т.С. Гемолитико-уремический синдром как клиническое проявление оксидантного стресса / Т.С. Балашова, Н.И. Багирова, Д.В. Зверев и др. // Вестн. РАМН. 1996. - № 9. - С. 20-23.

5. Балуда В.П. Характеристика синдрома внутрисосудистого свертывания крови при ожоговой болезни // Пат. физиол. 1984. - № 2. - С. 19-23.

6. Баркаган З.С. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. / З.С. Баркаган, А.П. Момот. Изд. 2-е доп. М.: "Ньюдиамед", 2001.-296 с.

7. Белоусова Е.А. Медиаторы воспаления при язвенном колите и болезни Крона / Е.А. Белоусова, А.Р. Златкина // Междунар. мед. обзоры. -1994. Т. 1. - № 5. - С. 378 - 386.

8. Бессмельцев С.С. Новый способ оценки реологических свойств эритроцитов у хирургических больных с эндогенной интоксикацией. / С.С. Бессмельцев, И.М. Царапкин, З.Д. Фёдорова // Вестн. хир. 1997. - Т. 156.-№ 4.-С. 32-36.

9. Ю.Бобырева JI.E. Антиоксиданты в комплексной терапии диабетических ангиопатий // Эксп. и клин, фармакол. 1998. - № 1. - С. 74 - 82.

10. Бурлакова Е.Б. Роль токоферолов в пероксидном окислении липидов биомембран / Е.Б. Бурлакова, С.А. Крашаков, Н.Г. Храпова // Биол. мемб. — 1998. Т. 15.-№2.-С. 137-167.

11. Буянов В.М. Хирургический перитонит. От единой классификации к единой тактике лечения / В.М. Буянов, Г.В. Родоман, JI.A. Лаберко // Росс. мед. жур. 1998. - № 4. - С. 3 - 10.

12. Н.Бышевский А.Ш. Биохимия для врача. / А.Ш. Бышевский, О.А. Теринов. Екатеринбург., 1994. - С. 384.

13. Васильев И.Т. Механизм развития эндотоксикоза при острых гнойных заболеваниях органов брюшной полости // Хирургия. 1995. - № 2. -С. 54-58.

14. Владимиров Ю.А. Нарушение барьерных свойств внутренней и наружной мембран митохондрий, некроз и апоптоз // Биол. мемб. 2002. - Т. 19-№5.-С. 356-377.

15. П.Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник РАМН. 1998. - № 7. - С. 43 - 51.

16. Власов А.П. Заживление ран при комплексной терапии / А.П. Власов, О.В. Конышева, С.А. Опарин и др. // Сб. матер. Междунар. конфер. по клин, фармакол. М., 1998. - С. 16-16.

17. Власов А.П. Роль нарушений липидного гомеостаза в патогенезе перитонита / А.П. Власов, В.А. Трофимов, Р.З. Аширов. Саранск: Изд-во Мордов. ун-та, 2000. - С. 208.

18. Власов А.П. Системный липидный дистресс-синдром при панкреатите: / А.П. Власов, В.А. Трофимов, Т.В. Тарасова. Саранск: Тип. «Крас. Окт.», 2004. - С. 316.

19. Власов А.П. О влиянии антиоксидантов на выраженность эндотоксико-за при экспериментальном перитоните / А.П. Власов, Т.В. Тарасова, Г.Ю. Судакова и др. // Эксперим. и клинич. фармак. 2000. - Т. 63. - № 6.-С. 58-61.

20. В л асов А.П. Структурно-функциональное состояние кишечника при перитоните на фоне аэроионотерапии / А.П. Власов, Р.З. Аширов // Сибирский журнал гастроэнтерологии и гепатологии. 2000. - № 10. — С. 18-19.

21. Гаврилов В.Б. Оценка интоксикации организма по нарушению баланса между накоплением и связыванием токсинов в плазме крови / В.Б. Гав-рилов, М.М. Бидула, Д.А. Фурманчук и др. // Клин.-лабор. диагн. -1992.-№2.-С. 13-17.

22. Гавриленко Г.А. Применение комплекса антиоксидантов для лечения эндотоксикоза при реконструктивных операциях на артериях нижних конечностей / Г.А. Гавриленко, В.В. Дёмин // Вестн. хирургии. 1998. - № 2. - С. 60-63.

23. Гаврилов В.Б. Обоснование сорбции красителя как индикатора повреждения мембраны и предгемолитического состояния эритроцитов / В.Б. Гаврилов, О.Н. Кравченко, С.В. Конев // Бюлл. эксперим. биол. и медицины. 2000. - Т. 129. - №3. - С. 358 - 360.

24. Гамазнов О.А. Физиологически активные пептиды. М. 1996. - 190 с.

25. Глумов В.Я. Перитонеальный эндотоксикоз, морфология и морфогенез поражений биосистем экспериментальных животных / В.Я. Глумов, Н.А. Кирьянов, E.JI. Баженов и др. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. -1994.-№ 12.-С. 636-639

26. Глумов В.Я. Острый перитонит: органопатология, пато и танатогенез / В.Я. Глумов, Н.А. Кирьянов, E.J1. Баженов. - Ижевск. - 1993. - 254 с.

27. Гнеушев Е.Т. Связывание лекарственных средств с эритроцитами / Е.Т. Гнеушев, И.А. Гнеушева // Эксперим. и клин, фармакол. 1996. - Т. 53. -№5.-С. 71-75.

28. Голиков П.П. Оксид азота и перекисное окисление липидов как факторы эндогенной интоксикации при неотложных состояниях / П.П. Голиков, Н.Ю. Николаева, И.А. Гавриленко и др. // Пат. физиол. и эксперим. терапия. 2000. - № 2. - С. 6 - 9.

29. Горелышева В.А. Показатели перекисного окисления липидов и активность антиоксидантных ферментов в лимфоцитах периферической крови в дебюте ИЗСД / В.А. Горелышева, О.М. Смирнова, И.И. Дедов //Медико-фармац. вестник. 1996. -№ 4-5. - С. 47 - 54.

30. Гринев М.В. Хирургический сепсис / М.В. Гринев, М.И. Громов, В.Е. Комраков. СПб, 2001. - С. 315.

31. Гуща A.JI. Антиоксидантная терапия холестатической гепатодепрессии у больных сахарным диабетом / A.JI. Гуща, С.В. Тарасенко, А.В. Федосеев и др. // Анест. и реаниматол. 1996. -N 1. - С. 13-16.

32. Дорохин К.М. Патофизиологические аспекты синдрома эндогенной интоксикации. / К.М. Дорохин, В.В. Спас. // Анестез. и реаним. 1994. -№ 1.-С. 56-60.

33. Дубинина Е.Е. Некоторые особенности функционирования ферментной антиоксидантной защиты плазмы крови человека // Биохимия. 1993. — Т. 58. - Вып. 3. - С. 268 - 273.

34. Дудник Л.Б. Интенсификация пероксидного окисления липидов сыворотки крови как биохимический признак сопутствующего панкреатита при осложненных формах желчнокаменной болезни // Вопр. мед. химии. 1998. - Т. 44. - № 6. - С. 571 - 575.

35. Евстигнеева Р.П. Витамин Е как универсальный антиоксидант и стабилизатор биологических мембран / Р.П. Евстигнеева, И.М. Волков, В.В. Чудинова // Биол. мембраны. 1998. - Т. 15. - № 2. - С. 119 - 136.

36. Егоров И.В. Влияние мелатонина на активность антиоксидантной системы и процессы перекисного окисления липидов при травматическом шоке \ И.В. Егоров, В.Д. Слепушкин // Вестн. интенсивной терапии. -1999.-№2.-С. 57-59.

37. Ефуни С.Н. Гипоксические состояния и их классификация / С.Н. Ефу-ни, В.А. Шпектор //Анест. и реаним. 1991. - № 1. - С. 3 - 12.

38. Жаров В.Н. Динамика показателей ПОЛ в эритроцитах при лечении детей с приобретённой тяжёлой апластической анемией. / В.Н. Жаров,

39. Исмайлов И.С. Коррекция нарушений гомеостаза в послеоперационном периоде у больных с распространенным гнойным перитонитом // Хирургия. 1997. - С. 260-261.

40. Клебанов Г.И. Антиоксидантная активность сыворотки крови / Г.И. Клебанов, Ю.О. Теселкин, И.В. Бабенкова и др. // Вестник РАМН. -1999.-№ 2.-С. 15-22.

41. Коган А.Х. Фагоцитзависимые кислородные свободно-радикальные механизмы аутоагрессии в патогенезе внутренних болезней // Вестник РАМН. 1999. - № 2. - С. 3 - 10.

42. Конюхова С.Г. Влияние плазмафереза на активность процессов пере-кисного окисления липидов при перитоните. / С.Г. Конюхова, А.Ю. Дубикайтис, JI.B. Шабуневич и др. // Анест. и реаниматол. 1993. - №. 3. - С. 62-65.

43. Костин Я.В. Фармакокоррекция липидного обмена кишки при патологии / Я.В. Костин, А.П. Власов, Р.З. Аширов и др. // Матер. Всеросс. науч.-практич. конф. СПб., 1998. - С. 80 - 80.

44. Кубатиев А.А. Влияние диализных мембран на ПОЛ в эритроцитах больных терминальной почечной недостаточностью. / А.А. Кубатиев, И.А. Рудько, Т.С. Балашова и др. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. -1994. -№ 11.-С. 460-462.

45. Кузин М.И. Синдром системного ответа на воспаление // Хирургия. -2000.-№2.-С. 54-59.

46. Кузин Н.М. Лапароскопическая и традиционная холецистэктомия: сравнение непосредственных результатов. / Н.М. Кузин, С.С. Дадвани, П.С. Ветшев и др. // Хирургия. 2000. - № 2. - С. 25 - 27.

47. Кузнецов Н.Н. Синдром эндогенной интоксикации при критических состояниях у детей раннего возраста. Новые диагностические и прогностические возможности / Н.Н. Кузнецов, Е.В. Девайкин, В.М. Егоров и др. // Анест. и реаним. 1996. - № 6. - С. 21 - 24.

48. Кузьменко Д.И. Оценка резерва липидов сыворотки крови для пере-кисного окисления в динамике окислительного стресса у крыс / Д.И. Кузьменко, Б.И. Лаптев // Вопр. мед. химии. 1999. - Т. 45. - № 5. - С. 384-388.

49. Кузьмин А.Н. Использование мексидола в комплексной терапии перитонита: Автореф. дисс. канд. мед. наук. Саранск, 2003. - С.20.

50. Курек В.В. Состояние углеводно-энергетического метаболизма и гемодинамики у детей с разлитым гнойным перитонитом в раннем послеоперационном периоде // Анестез. и реаним. 1998. - № 1. - С. 36 - 38.

51. Лабзина Л.Я. Метаболизм белков, углеводов и липидов в норме и при патологии. / Л.Я. Лабзина, Э.П. Санаева, Т.Ф. Атянина. Под ред. Л.Я. Лабзиной. Саранск: Ковылкинская тип. Мин. печати и инф. РФ, 2000.-С. 174.

52. Лахин Р.Е. Изменение активности оксидантно-антиоксидантной системы под влиянием гипербарической оксигенации и актопротекторов у больных с печеночной недостаточностью / Р.Е. Лахин, Л.А. Белозерова,

53. B.А. Максимец и др. // Анест. и реаним. 1999. - № 2. - С. 55 - 58.

54. Ленинджер А.Л. Биохимия / Пер. с англ. Изд-во Мир. Москва, 1976.1. C. 958.

55. Лиходед В.Г. Роль эндотоксина грамотрицательных бактерий в инфекционной и неинфекционной патологии. / В.Г. Лиходед, Н.Д. Ющук, М.Ю. Яковлев. // Арх. пат. 1996. - Т. 58. - № 2. - С. 8 - 13.

56. Лоуренс Д.Р. Клиническая фармакология. Под ред. Д.Р. Лоуренса и др. М., - 2002.

57. Лынев С.Н. Влияние анестезии на перекисное окисление липидов, ан-тиоксидантную систему и липидный обмен при кесаревом сечении у рожениц с тяжелыми формами позднего гестоза / С.Н. Лынев, Г.С. Кенгерли // Анестез. и реанимат. 2000. - № 2. - С. 17 - 20.

58. Лычев В.Г. Диагностика и лечение диссеминированного внутрисосуди-стого свертывания крови. М.: Медицина, 1993. - С. 160.

59. Макарова Н.П. Синдром эндогенной интоксикации при сепсисе / Н.П. Макарова, И.Н. Коничева // Анестез. и реанимат. 1995. - № 6. -С. 4 - 8.

60. Макацария А.Д. // Акуш. и гинек. / Макацария А.Д. Мищенко А.Л. -1997.№ 1.-С. 38-41.

61. Максина А.Г. Структурное состояние мембран эритроцитов крови детей, больных инсулинзависимым сахарным диабетом. Исследование методом спинового зонда / А.Г. Максина, Б.А. Дайняк, Л.Л. Вахрушева и др. // Вестн. РАМН. 1996. - № 9. - С. 34 - 35.

62. Маленкова Т.С. Применение димефосфона у больных облитерирую-щими заболеваниями сосудов нижних конечностей в послеоперационном периоде. / Т.С. Маленкова, М.И. Нейман, И.Б. Сидоренко // Анестез. и реаним. 1994. - № 3. - С. 47 - 50.

63. Малков И.С. Критерии оценки синдрома эндогенной интоксикации при перитоните / И.С. Мал ков, Р.Ш. Шаймарданов, В.Н. Коробков и др. // Казанский мед. журнал. 2000. - № 3. - С. 198 - 199.

64. Малышев В.Д. Гемогидродинамический мониторинг при интенсивном лечении больных с тяжелым течением перитонита. / В.Д. Малышев,

65. И.М. Андрюхин, B.C. Бакушин и др. // Анестез. и реаним. 1997. -№ з.-С. 68-72.

66. Малышев В.Д. Оценка состояния ПОЛ у хирургических больных методом хемилюминисценции / В.Д. Малышев, Г.И. Сторожаков, А.Ф. Потапов и др. // Анестез. и реанимат. 1993. - № 1. - С. 6 - 9.

67. Марри Р. Биохимия человека. / Р. Мари, Д. Греннер, В. Родуэлл. -М.: Мир.-1993.-Т. 1.-384 с.

68. Мачабели М.С. Тромбогеморрагический синдром // Проблемы гематологии. 1981.- № 1. - С. 48 - 54.

69. Микаелян Н.П. Структурная организация мембран эритроцитов при гестозах / Н.П. Микаелян, Ю.А. Князев, А.Г. Максина и др. .7 Вестн. РАМН. 1997. - № 7. - С. 54 - 56.

70. Миронов П.И. Проблемы и перспективные направления коррекции медиаторного ответа при сепсисе. / П.И. Миронов, В.А. Руднов. // Анестез. и реанимат. 1999. - № 5. - С. 54-59.

71. Михайлович В.А. Проницаемость эритроцитарных мембран и сорб-ционная способность эритроцитов оптимальные критерии тяжести эндогенной интоксикации / В.А. Михайлович, В.Е. Марусанов, А.Б. Бичун и др. // Анестез. и реанимат. - 1993. - № 5. - С. 66 - 69.

72. Мищук И.И. Нарушение деформируемости эритроцитов / И.И. Мищук, З.Б. Березовская, А.Б. Оссовская и др. // Анестез. и реанимат. 1993. -№ 2. - С. 72-78.

73. Нелаева А.А. Состояние перекисного окисления липидов в мембранах тромбоцитов у больных ИЗСД при кетоацидозе и коррекция витамина-ми-антиоксидантами / Нелаева А.А., Трошина И.А. // Рос. журн. гастроэнтерол. 2004. - № 2. - С. 29 - 34.

74. Осипов В.И. Пролонгированный гидроперитонеум в комплексной профилактике послеоперационного спайкообразования // Клин. Хирургия. 1995. - № 4 - 6. - С. 70-72.

75. Панасенко O.M. Механизм гипохлорит-индуцированного перекисного окиления липидного фосфолипидных липосом / О.М. Панасенко, Арнхольд Ю. // Биол. мембр. 1996. - Т. 13. - № 1. - С. 89 - 99.

76. Парфенов A.JI. Эндогенная интоксикация и ее лечение с применением гипохлорита натрия у нейрореанимационных больных / A.J1. Парфенов, В.Г. Амчеславский, М.А. Демчук и др. // Анест. и реанимат. 1997. -№3.-С. 62-65.

77. Петросян Э.А. Окислительные методы в комбинированном лечении желчного перитонита. / Э.А. Петросян, В.И. Оноприев, О.В. Дубинкин и др. // Вестник интенсивной терапии. 1998. - № 4. - С. 63-64.

78. Петров В.Н. Интубация тонкой кишки при лечении больных с перитонитом и кишечной непроходимостью / В.Н. Петров, И.В. Кузнецов, А.А. Домникова // Хирургия. 1999. - № 5. - С. 41 - 44.

79. Попов А.Н. Эндотоксемия при экспериментальной ахолии. /

80. A.Н. Попов, М.М. Миннебаев. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1997. - № 1. - С. 101-102.

81. Прокопьева В.Д. Исследование роли липидного матрикса и белков2+ + мембранного каркаса в регуляции Са -активируемых К -каналовэритроцитов у больных алкоголизмом и сахарным диабетом II типа. /

82. B.Д. Прокопьева, И.В. Петрова, А.В. Ситожевский и др. // Бюл. эксп. биол. и медицины. 2002. - Т. 134. - № 10. - С. 401-404.

83. Ратнер Г.Л. Четкая классификация эффективное лечение // Московский международный конгресс хирургов. 1-й: Материалы. М. 1995.1. C. 5-6.

84. Ремизова И.И. Перекисное окисление липидов при ожоговом шоке и его инфузионной коррекции в эксперименте / И.И. Ремизова, Н.И. Кочетыгов, А.Б. Манеев и др. // VIII науч. конф. по проблеме "Ожоги": Тез. докл. СПб, 1995. - С. 146 - 147.

85. Родоман Г.В. Концентрация и свойства альбумина в сыворотке крови и выпоте брюшной полости у больных с перитонитом / Г.В. Родоман, Т.И. Шалаева, Г.Е. Добрецов и др. // Вопр. мед. химии. 1999. - Т. 45. -№ 5.-С. 407-415.

86. Рябов А.Г. Окислительная модификация белков плазмы крови у больных в критических состояниях / А.Г. Рябов, Ю.М. Азизов, С.И. Дорохов и др. // Анест. и реаним. 2000. - № 2. - С. 72 - 74.

87. Рязанцева Н.В. Изменения липидной фазы мембраны эритроцитов при параноидной шизофрении. / Н.В. Рязанцева, В.В. Новицкий, М.М. Кублинская. // Бюл. эксп. биол. и медицины. 2002. - Т. 133. - № 1. -С. 98-101.

88. Семенов В.Н. Современные возможности профилактики и лечения синдрома эндогенной интоксикации // Тез. X Всеросс. пленума правления о-ва и федерации анест. и реаним. Н. Новгород, 1995. - С. 154.

89. Сидорова И.С. Лечение и профилактика нарушений в системе гемостаза в акушерско-гинекологической практике / Сидорова И.С., Овсянникова Т.В., Шешукова Н.А. // Гинекология. 2005. - Т. 7. - № 2.

90. Сирота Т.В. Новый подход в исследовании процесса аутоокисления адреналина и использование его для измерения активности супероксиддисмутазы // Вопр. мед. химии. 1999. - Т. 45. - № 3. -С. 263 - 272.

91. Скипетров В.П. Коагуляционно-литическая система тканей и тромбо-геморрагический синдром в хирургии. / В.П. Скипетров, А.П. Власов, С.П. Голышенков. Под ред. В.П. Скипетова. Саранск: Крас. Окт. -1999.-С. 232.

92. Словентантор В.Ю. Динамика содержания продуктов перекисного окисления липидов и миоглобина в плазме крови больных злокачественными опухолями в раннем послеоперационном периоде /

93. B.Ю. Словентантор, М.В. Полуэктова, Я.М. Хмелевский и др. // Вестник РАМН. 1996. - № 12. - С. 32 - 34.

94. Смирнов А.В. Антигипоксанты в неотложной медицине / А.В. Смирнов, Б.И. Криворучко // Анестез. и реанимат. 1998. - № 2.1. C. 50-55.

95. Смирнов А.В. Гипоксия и ее фармокологическая коррекция одна из ключевых проблем анестезиологии и интенсивной терапии / А.В. Смирнов, Б.И. Криворучко // Анестез. и реанимат. - 1997. - № 3. -С. 72 - 75.

96. Смурова Е.А. Действие фосфолипазы А2 на связывание специфического блокатора хинуклидинилбензилата с М-холинорецепторами мембран коры мозга крыс / Е.А. Смурова, JI.A. Нестерова, Б.Н. Манухин // Биол. мембр. 1996.-Т. 13.-С. 244-251.

97. Соболева М.К. Жирные кислоты липидной фракции эритроцитарных мембран и интенсивность реакций ПОЛ при дефиците железа / М.К. Соболева, В.И. Шарапов, О.Р. Грек // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1994. - № 6. - С. 600 - 602.

98. Спас В.В. Оценка тяжести эндотоксикоза и эффективности детокси-кационной терапии / В.В. Спас, С.А. Павлович, К.М. Дорохин // Клип. лаб. диагн. 1994. - № 4. - С. 7 - 9.

99. Сторожок С.А. Молекулярные дефекты белков мембраны эритроцита / С.А. Сторожок, А.Г. Санников // Вопр. мед. химии. 1996. - Т. 42. -№2.-С. 103-110.

100. Сторожук П.Г. Клиническое значение определения активности СОД в эритроцитах при анестезиологическом обеспечении оперируемых гастроэнтерологических больных / П.Г. Сторожук, А.П. Сторожук // Вестн. интенс. терапии. 1998. -№ 4. - С. 15 - 17.

101. Тарасова Т.В. Влияние витамина Е, димефосфона и ксимедона на активность фосфолипазы А2 и перекисное окисление липидов кишечника, печени и плазмы крови при экспериментальном перитоните: Автореф. дис. канд. мед. наук. Саранск, 1998. С. 16.

102. Ташев Х.Р. Детоксикационная терапия при остром разлитом перитоните. / Х.Р. Ташев, И.Н. Благов // Хирургия. 1999. - № 3. - С. 37 - 39.

103. Теплова В.В. Генерация супероксид аниона и индукция неспецифической проницаемости в митохондриях под действием дегидролипоевой кислоты / В.В. Теплова, А.Г. Круглов, С. Маркунайте и др. // Биол. мемб. 2002. - Т. 19. - № 4. - С. 279 - 302.

104. Теселкин Ю.О. Ингибирование сывороточными антиоксидантами окисления люминола в присутствии гемоглобина и пероксида водорода / Ю.О. Теселкин, И.В. Бабенкова, О.Б. Любицкий и др. // Вопр. мед. химии. 1997. - Т. 43. - № 2. - С. 87 - 93.

105. Тимушева Ю.Т. Роль структуры мембран в активации митохондри-альных фосфолипаз / Ю.Т. Тимушева, О.А. Маренинова, О.Н. Вагина и др.//Биол. мемб.-1998.-Т. 15.-№ 1.-С. 36-41.

106. Титов В.Н. Нарушение транспорта в клетки насыщенных жирных кислот в патогенезе эссенциальной гипертонии // Вопр. мед. химии. -1999.- №6.

107. Титов В.Н. Сложные липиды кровотока: функциональная роль и диагностическое значение // Клин. лаб. диагн. — 1997. № 2. - С. 3 — 10.

108. Толкач А.Б. Нарушения метаболизма пуринов у больных перитонитом, осложнившимся сепсисом / А.Б. Толкач, Б.А. Рейс, В.Т. Долгих и др. // Анест. и реаним. 2000. - № 3. - С. 3 8 - 41.

109. Трофимов В.А. Роль нарушений липидного обмена в патогенезе острого перитонита в эксперименте: Автореф. дисс. д-ра. биол. наук. М., 1999.-С. 32.

110. Уткин М.М. Интоксикация и детоксикационная терапия // Российский медицинский журнал. 1996. № 6 с. 30-33.

111. Федоровский Н.М. Связывающая способность альбумина в оценке эндотоксимии. / Н.М. Федоровский, К.С. Каперская, Д.В. Куренков. // Вестник интенсивной терапии. 1998. - № 4. - С. 21-23.

112. Федоровский Н.М. Динамика перекисного окисления липидов у больных с эндотоксикозом при детоксикации гипохлоритом натрия. / Н.М. Федоровский, И.И. Сергиенко, В.Н. Шилов и др. // Анестез. и реаним. 1997. - № 4. - С. 38 - 41.

113. Федосеев А.В. Новый метод детоксикации лимфы у больных с холе-статическим эндотоксикозом / А.В. Федосеев, A.JI. Гуща, С.В. Тара-сенко и др. // Вестн. хирургии. 1999. - Т. 158. - № 6. - С. 76 - 78.

114. Ханевич М.Д. Применение лейкоцитной взвеси при лечении разлитого перитонита / М.Д. Ханевич, С.Д. Волкова, А.В. Маринин // Вестн. хирургии. 2000. - № 6. - С. 31 - 35.

115. Хафизьянова Р.Х. Влияние димефосфона и фосфатбензида на развитие токсического отёка мозга животных // Актуальные вопр. экспер. и клин, фармакол.: Сб. науч. работ. Смоленск, 1994. - С. 128 - 129.

116. Царапкин И.М. Изменения реологических свойств крови при патологии желудочно-кишечного тракта и органов гепатодуоденальной зоны на фоне эндогенной интоксикации / И.М. Царапкин, С.С. Бессмельцев // Казанский мед. журнал. 1997. - № 2. - С. 81 - 86.

117. Цветковская Г.А. Динамика ПОЛ при коррекции приобретённых пороков сердца в условиях бесперфузионной гипотермии / Г.А. Цветковская, Л.Г. Князькова, С.Е. Науменко и др. // Анест. и реаним. 1997. -№ 1.-С. 39-41.

118. Чернов В.Н. Выбор хирургической тактики и методов дезинтоксикации при острой непроходимости кишечника. / В.Н. Чернов, Б.М. Велик. // Хирургия. 1999. - № 5. - С. 45 - 48.

119. Шано В.П. Сепсис и синдром воспалительного ответа / В.П. Шано, А.Н. Нестеренко, Ф.И. Гюльмамедов, П.Ф. Гюльмамедов // Анест. и реаним. 1998. - № 4. - С. 60 - 64.

120. Шмаков Р.Г. Сравнительная оценка адаптационных изменений системы гемостаза и морфофункциональных характеристик тромбоцитов во время беременности. / Р.Г. Шмаков, А.В. Савушкин, В.М. Сидель-никова//Акуш. и гин. -2003. -№ 3. С. 17-21.

121. Шепелев А.И Роль процессов свободнорадикального окисления в патогенезе инфекционных болезней / А.И. Шепелев, И.В. Корниенко,

122. А.В. Шестопалов и др. // Вопр. мед. химии. 2000. - Т. 46. - № 2. -С. 110-116.

123. Щуковский В.В. Влияние режимов гипероксии на состояние ПОЛ и гемостаз у больных с поражениями ЦНС /В.В. Щуковский, Г.Г. Жданов, О.Н. Воскресенская и др. // Анест. и реаним. 1994. - № 5. -С. 52-55.

124. Barclay L.R.C. Cholesterol: free radical peroxidation and transfer in to prospholipid membranes / L.R.C. Barclay, R.C. Cameron, B.J. Forrest et al. // Biochem. et Biophys. Act. Lipid and Lipid Metab. 1990. - V. 1047. - N. 3.-P. 255-263.

125. Bauer R.A. Factor IXa is activated in vivo by the tissue factor mechanism. / K.A. Bauer, B.L. Kass, H. ten Cate et al. // Blood. 1990. - Vol. 76. - N 4. -P. 731 -736.

126. Billing A. Peritonitisbehandlung mit der Etappenlavage (EL): Prognosek-riterien und Behandlungsverlauf. / A. Billing, D. Frohlich, O. Mialkowskyj et al. // Langenbecks. Arch. Chir. 1992. - Vol. 377. - N 5. - P. 305 - 313

127. Camejo G. Proteoglycans and lipoproteins / G. Camejo, E. Hurt-Camejo, U. Olsson et al. // Curr. Opin. Lipidol. 1993. - Vol. 4. - P. 385 - 391.

128. Cealdi C.M. Comparison of continuous single layer polypropylene anastomosis with double layer and stapled anastomoses in ekective colon resections / C.M. Cealdi, E.B. Rypins, M. Monahan et al. // Am-Surd. 1993. -Mar. 59 (3).-P. 168-71.

129. Chen J.W. Effect of hydroxyl radical on Na+, K+-ATP-ase activity of the brain microsomal membranes / J.W. Chen, L. Zhang, X. Lian et al. // Cell. Biol. Int. Rep. 1993. - N. 9. - P. 927 - 936.

130. Cuzzocrea S. Protective effect of N-acetylcysteine on multiple organ failure induced by zumosan in the rat. / S. Cuzzocrea, G. Costantino, E. Mazzon et al. // Crit. Care Med. 1999. - Vol. 27. - N. 8. - P. 1524 - 1532.

131. Dhar A. Tyrosine kinases in platelet signaling / A. Dhar, S. Shukla // Brit. J. Haematol.-1993.-Vol. 84.-N. l.-P. 1-7.

132. Denizot Y. PAF-acether and acetylhydrolase in stood of patients with Crohn's disease / Y. Denizot, S. Chaussade, N. Nathan et al. // Dig. Dis. Sci. 1992. - Vol. 37. - N. 2. - P. 432 - 437.

133. Di Filippo A. L'etano espirato come marcer non invasivo della MODS sperimentale / A. Di Filippo, S. Scardi, M. Consalvo et al. // Min. Anest. -1994.-V. 60.-P. 295-303.

134. Dominion L. / Infected pancreatic necrosis complicated by multiple organ failure / L. Dominion, A. Chiappa, V. Bianchi et al. // Hepatogastoenterol-ogy. 1997. - N. 44. - P. 968 - 974.

135. Edwards M.S. Pentoxifilline inhibits interleukin-2-induced leukosyte-endothelial adherence and reduces systemic toxicity / M.S. Edwards, D.L. Abney, E.N. Miller//Surgery.-1991.-V. 110.-N. 2.-P. 199-204.

136. Fukuhara K. The degree of hepatic regeneration after partial hepatectomy in rats with peritonitis and role of lipid peroxidation. / K. Fukuhara, V. Suzuki, M. Unpo et al. // Free Radic. Biol. Med. 1999. - Vol. 26. - N. 7-8. -P. 881 -886.

137. Genu B. Synergistik activation of phospholipase D by protein kinase C-and G-protein-mediated pathways in streptoly 1992. - Vol. 284. - N. 2. -P. 531 -538.

138. Goode H.F. Decreased antioxidant status and increased lipid piroxides in patients with septic shock and secondary organ dysfunction / H.F. Goode,

139. H.C. Cowlei, В.Е. Walker et al. // Crit. Care. Med. 1995. - V. 23. - P. 646 -651.

140. Gousset Karine. Evidence for a physiological role for membrane rafts in human platelets / Gousset Karine, Wolkers Willem F., Tsvetkova Nelly M. et al. // J. Cell. Physiol. 2002. V. 190. -N. 1. S. 117 - 128.

141. Greagh T.A. Oxygen free radicals and acute pancreatitis: fact of fiction. / T.A. Greagh, A.L. Leachy, D.J. Bouchier-Hayes. // In. J. Med. Sci. 1993. -Vol. 162.-№ 12.-P. 497-498.

142. Guler O. The effeckt of limphatic blockade on the amount of endotoxin in portal circulation, nitric oxide syntesis, and the liver in dogs with peritonitis. / O. Guler, S. Ugras, M. Audin et al. // Surg. Today. 1999. - Vol. 29. - N. 8.-P. 735-740.

143. Hakkiluoto A. Open management with mesh and zipper of patients with intra-abdominal abscesses or diffuse peritonitis / A. Hakkiluoto, J. Hannu-kainen // Eur. J. Surg. 1992. - Vol. 158. -N. 8. - P. 403 - 405.

144. Halliwell B. Antioxidants in human health and disease // Ann. Rev. Nutr. -1996.-V. 16.-P. 33-50.

145. Hauakawa M., Kuzuya F. // Nippon Ronen Igakkai Zasshi. 1990. - Vol. 27.-N. 2.-P. 149-154.

146. Hou H.J. Plasme MDA, erythrocyte MDA and SOD in uremic patients / H.J. Hou, D.P. Zhai // Kidney Int. 1992. - V. 42. - N. 2. - P. 495 - 496.

147. Iouchette N. Cloning of the PAF receptor: Not just for asthma anymore. // J. NTH Res. 1991. - Vol. 3. - N. 4. - P. 78 - 80.

148. Ivleva V.V. Pulmonary metabolik function in patient in critical states. / V.V. Ivleva, I.O. Zaks, E.F. Dutikova. // intensive care Med. 1995. - V. 21. -P. l.-P. 46.

149. Jennings P.E., Mclaren M. et al. // Diabetic Med. 1991. - Vol. 8. - N. 9. -P. 860-865.

150. Kondo N. Antioxidant enzyme systems in skeietal muscle atrophied by immobilization / N. Kondo, M. Miura, Y. Itokawa // Pflugers Arch. 1993.- V. 422. N. 4. - P. 404 - 406.

151. Li W. Molecular mechanism and therapy of hypoalbuminemia in peritoneal infection. / W. Li, J. Li, J. Gu // Chung. Hua Wai Ко Tsa Chih. 1997. -Vol. 35.-N. 2.-P. 100-103.

152. Luo Z.Y. Protective effect of anisadamine on Cultured bovine pulmonary endothelial cell injury induced by oxygen-free radicals / Z.Y. Luo, Y. Tang, J.L. You et al. // Arch. Surg. 1992. -Vol. 122.-N. 10.-P. 1204-1209.

153. Novelli G.P. Oxygen radicals in experimental shock:effects of spinn-trapping nitrones in ameliorating shock pathophysiology // Crit. Care. Med.- 1992. Vol. 20. - P. 499 - 507.

154. Paakkonen M. Piperacillin compared with cefuroxime plus metronidazole in diffuse peritonitis / M. Paakkonen, E.M. Alhava, R. Huttunen et al. // Eur. J. Surg. 1991. - Sep. 157 (9). - P. 535 - 537.

155. Pacelli F. Prognosis in intraabdominal infections: Multivariate analysis on 604 patiens. / F. Pacelli, G.B. Doglietto, S. Alfieri // Arch. Surg. 1996. -Vol. 131.-N. 6.-P. 641-645.

156. Poret H.A. Analysis of septic morbidity following gunshot wounds to the colon: the missile is an adjuvant for abscess. / H.A. Poret, T.C. Fabian, M.A. Croce et al. // J. Trauma. 1991. - V. 31. -N. 5. - P. 1088 - 1094

157. Redl H. Involvement of oxygen radicals in shock related cell injury / H. Redl, H. Gasser, G. Schlag et al. // Brit. Med. Bull. 1993. - Vol. 49. - N 3. -P. 556-565.

158. Sechi L.A. Coagulazione intravascolare disseminate e necrozi epatica acuta a termine di gravidanza. / L.A. Sechi, A. Marigliano, A. Melis et al. // Minervamed.- 1989.-Vol. 80.-N. 12.-P. 1367-1372

159. Singh S. Nitric oxide, the biological mediator of the decade: fact or fiction. / S. Singh, T.W. Evans // Eur. Respir. J. 1997. - V. 10. - P. 699 - 707.

160. Tokyay R. Prostaglandin synthetase ingibition reduced earli liver oxidant stress / R. Tokyay, E. Kaya, E.S. Gur et al. // Surg. Today. 1999. - Vol. 29. - N. l.-P. 42-46.

161. Vinazzer H. Therapeutic use of antithrombin III in shock and disseminated intravascular coagulation // Seminars Thrombos. Hemostas. 1989. - Vol. 15.-N.3.-P. 347-352.

162. Wahl Wakelam M. Stimulation of phospholipase activity by mitogens: Abstr. 18-th Meet. Eur. Study, Group Cell Proliferat., Budapest, 6-9 May, 1992 // Cell Proliferat. 1992. - Vol. 25. - N. 5. - P. 481.

163. Wang Z.H. Increased pancreatic metallothionein and glutathione levels: protecting against cerulein and taurocholate-induced acute pancreatitis in rats / Z.H. Wang, H. Iguchi, G. Ohshio // Pancreas. 1996. -N. 13. - P. 173 -183.

164. Ytrehus K. Lipid peroxidation and membrane damage of the heart / K. Ytrehus, A.C. Hegstad // Acta Physiol. Scand. 1991. - V. 142. - Suppl. 599.-P. 81 -91.

165. Zidovetzki R. Effect of diacylglycerols on the activity of cobra venom, bee venom, and pig pancreatic phospholipA2 / R. Zidovetzki, L. Laptalo, J. Crawford // Biochemistry. 1992. - Vol. 31. - N. 33. - P. 7683 - 1691.

Информация о работе

Сальникова, Елена Николаевна
кандидата биологических наук
Ульяновск, 2006
ВАК 03.00.13

Диссертация

Некоторые закономерности изменений функционального состояния клеток крови и липидного метаболизма при эндогенной интоксикации - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Некоторые закономерности изменений функционального состояния клеток крови и липидного метаболизма при эндогенной интоксикации - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы