Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Механизмы эндогенной интоксикации и детоксикации организма в норме и при морфо-функциональных изменениях в коже

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Механизмы эндогенной интоксикации и детоксикации организма в норме и при морфо-функциональных изменениях в коже"

На правах рукописи

ииЛ158 128

КОПЫТОВА Татьяна Викторовна

МЕХАНИЗМЫ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ И ДЕТОКСИКАЦИИ ОРГАНИЗМА В НОРМЕ И ПРИ МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ИЗМЕНЕНИЯХ В КОЖЕ

03 00 04 - биохимия 03 00 13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Нижний Новгород 2007

003058128

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Нижегородский научно-исследовательский кожно-венерологический институт федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Научные консультанты

член-корреспондент РАЕН, доктор медицинских наук, профессор Наталия Аркадьевна Добротина доктор медицинских наук, профессор Николай Константинович Никулин

Официальные оппоненты

доктор биологических наук,

профессор Клавдия Николаевна Конторщикова

доктор медицинских наук Юрий Викторович Зимин

доктор медицинских наук Наталия Владиславовна Фриго

Ведущая организация:

ГОУВПО «Мордовский государственный университет им Н П Огарева»

Защита состоится « _2007 г в 15 часов на заседании

диссертационного совета Д21216615 Нижегородского государственного университета им Н И Лобачевского по адресу 603950, Нижний Новгород, пр Гагарина, д 23, корп 1, биологический факультет Факс (8312)65-82-92

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Нижегородского государственного университета им Н И Лобачевского

Автореферат разослан « »

2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

Корягин А.С.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

В настоящее время одной из важных проблем биологии человека является опасность загрязнения токсическими веществами и их метаболитами сосудистого русла, внесосудистых тканей, рецепторного аппарата клеток и других систем организма (УататоЮ Б , 1999, Громов М И , 2003, Константинов А П , 2003) Это может быть результатом антропогенных, экзогенных влияний и повреждений (Корюкина И П, 1998, Лашкина Н С , 2004), а также эндогенных проявлений различной природы (Рпшпег Б В, 1991, \Vianny Б, 2000, Спирин А С, 2002)

Экзогенную интоксикацию и нарушение физиологических процессов организма способны вызвать многие вещества (экзогенные токсические вещества), относящиеся как к отдельным химическим элементам (например, тяжелые металлы, галогены, мышьяк, бериллий, селен), так и к различным классам химических соединений, а также бактериальные токсины, пищевая токсикоинфек-ция, кислородное голодание и др Токсические вещества поступают в организм через дыхательные пути, пищеварительный тракт, кожу и слизистые оболочки или путем парентерального введения Причиной интоксикации может быть и не само попавшее в организм вещество, а продукты его превращения, оказывающие токсическое действие

Если токсины образуются в организме, то они называются эндотоксинами, а само состояние - эндогенной интоксикацией (ЭИ)1 Она характеризуется появлением в тканях и биологических жидкостях организма избытка метаболитов нормального или измененного обмена веществ, продуктов жизнедеятельности бактерий и др ЭИ может быть результатом большой антигенной нагрузки, специфических и неспецифических биохимических реакций, нарушения физиологических процессов анаболизма и катаболизма и др , что в совокупности с клиническими проявлениями формирует эндотоксикационный синдром (Габриэлян Н И , 1983, Марусанов В Е , 1995, Малахова М Я , 2000) В норме (у здоровых лиц) он, как правило, может компенсироваться, а при различных нарушениях -в значительной степени определять, обострять и усугублять течение основного заболевания (Малахова М Я , 2006)

Имеются публикации о развитии хронической эндогенной интоксикации при продолжительном воздействии на организм даже малыми дозами токсикантов (Малахова МЯ, 1998, Ливанов ГА, 2003) При этом хроническая ЭИ, сопровождая самые разные виды нарушений, одновременно может выступать как самодовлеющий, самостоятельный и определяющий фактор (Шубина О С , 1999, Бессемельцев Б А , 2002, Зуева ТВ , 2005) Имеются данные о том, что циркулирующие в крови эндотоксины способны блокировать рецепторный аппарат клетки и приводить к фармакорезистентности (Сиделышкова В И , 1998) Этим, возможно, определяется фармакоустойчивость заболеваний (и дерматозов в частности), которая обнаруживается в последнее время Обсуждаются также вопросы взаимосвязи уровня ЭИ и степени функциональной активности

Полный список сокращений приведен в конце автореферата

\

детоксицирующих систем организма в норме и в различных возрастных группах (Шевченко Ю Л, 2002, Зубаткина И С , 2002, Афанасьева А Н, 2004) В связи с этим, должны быть актуальны исследования по подбору лекарственных препаратов и физико-химических способов для выведения эндотоксинов

Следует отметить, что вопросы диагностики и терапевтической коррекции эндогенной интоксикации разрабатываются преимущественно в нашей стране, и в основном при тех состояниях, когда наблюдается острое развитие процесса (нефрология, хирургия острых состояний, медицина катастроф и т д) Разработаны общие подходы к выявлению ЭИ, выделены классы эндотоксинов, показана их мембрано - деструктивная и иммуномодулирующая роль (Чаленко В В , 1990, Дубикайтис А Ю , 1995, Ковалев К И, 1995, Баддинов О В , 2003, Киселева Р Е , 2002,2006) Иностранные авторы эффекты эндогенной интоксикации усматривают только в развитии синдрома системного воспалительного ответа (Simms Н, 1994, Small N, 1995, Bone RS, 1995,1996) Существенно меньшее внимание уделяется разработке способов выявления скрытых, транзи-торных токсемий, которые оказывают усугубляющее действие на течение основного патологического процесса В то же время своевременное выявление ЭИ и ее адекватная коррекция позволили бы предупредить развитие системного синдрома и избежать многих его негативных последствий

Основные биохимические и физиологические реакции организма осуществляются на уровне околоклеточная среда - клетка, клеточные рецепторы мембран органов (печень, почки) и систем (нервная, иммунная, соединительная ткань, кожа и др) При этом, изменения в коже, которая является полифункциональной системой, приобретают особенно важное значение В результате повреждения, когда нарушаются барьерная, защитная и регуляторная функции кожи, последняя становится очагом формирования токсических метаболитов Преодолевая межклеточные и межтканевые барьеры и включаясь в нормальный метаболизм организма, эндотоксины приводят к разбалансированности го-меостатических процессов и способствуют усугублению негативных изменений в организме (Беляков Н А , 1998, Корякина Е В , 2004)

С медицинской точки зрения, хронические распространенные дерматозы в настоящее время принято относить к сложным мультифакториальным, полигенным заболеваниям (Скрипкин Ю С , 1999) В последние годы возросла их встречаемость в регионах с неблагоприятной экологической обстановкой (Хим-кина, JIH, 1994, Балаболкин ИИ, 1998, Жуматова Г Г, 2002, Лашкина НС, 2004) Параллельно с этим значительно увеличилась частота дисбиозов, ухудшилось нервно-психическое здоровье (стресс, депрессия, синдром хронической усталости), увеличилось число регистрируемых функциональных иммунодефи-цитов (Китаева И И , 2003, Барабанов А П , 2005, Воронина Я Ю , 2006)

Проведенные ранее исследования (Добротина НА ,1998, Копытова ТВ , 2001, Химкина Л Н , 2003) показали, что при хронических дерматозах образование токсинов не имеет лавинообразного характера и основные признаки ЭИ менее выражены по сравнению с острыми процессами (хирургические, сепсис, гепатиты и др ), маскируясь различными проявлениями измененной кожи Это требует поиска/разработки новых критериев для характеристики ЭИ при про-

цессах, связанных с изменениями в коже, с помощью как клинико-лабораторных корреляций, так и комплексных подходов на основе обобщения данных о различных биохимических и иммунологических параметрах Результатом определения таких критериев может быть более адекватное понимание, с одной стороны, механизмов, лежащих в основе формирования ЭИ, а с другой -ее роли и участия в развитии конкретного дерматоза

Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования является изучение механизмов формирования эндогенной интоксикации для выявления ее роли и значения при морфо-функциональных изменениях в коже (дерматозах) и обоснования необходимости детоксикации

Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи

1 Изучить состояние эндогенной интоксикации при морфо-функциональных изменениях в коже (дерматозы) по результатам количественного и качественного анализа уровня молекул средней массы (МСМ) и характерных особенностей их спектров в различных биологических средах Провести сопоставление полученных данных с показателями «нормы реакции»

2 Разработать функционально-диагностический комплекс лабораторных показателей для характеристики эндогенной интоксикации при дерматозах

3 Выявить взаимосвязь маркеров эндогенной интоксикации с биохимическими и иммунологическими показателями гомеостаза на основе анализа корреляционных отношений

4 Изучить токсичность МСМ, выделенных из плазмы крови и измененной кожи больных дерматозами, оценить степень ее влияния на формирование эндогенной интоксикации

5 Выявить особенности систем биотрансформации и биотранспорта эндотоксинов при дерматозах и определить степень их участия в процессах детоксикации

6 Исследовать показатели эндогенной интоксикации в динамике применения различных видов лекарственного воздействия, обосновать преимущества использования энтеросорбентов

Научная новизна

Впервые комплексно изучены механизмы эндогенной интоксикации при морфо-функциональных изменениях в коже различного вида Выделены и описаны типы эндотоксикационного синдрома гуморальный, тканевой, смешанный, характеризующие тяжесть нарушений в организме

Установлено взаимовлияние эндотоксинов и биохимических показателей гомеостаза при различных дерматозах, что позволит прогнозировать течение заболевания и корректировать лекарственное воздействие

Впервые выявлены и охарактеризованы варианты метаболического ответа на эндогенную интоксикацию, проявляющиеся различием в качественном составе общего пула молекул средней массы в плазме крови

Впервые установлено нарушение транспортировки эндотоксинов альбумином при различных дерматозах, что свидетельствует о нарушении процессов детоксикации организма

Впервые найдены токсические метаболиты (МСМ, олигопептиды и др ) в измененном эпидермисе, что подтверждает тесную взаимосвязь процессов эндогенной интоксикации в организме с биохимическими и структурными нарушениями в коже

Впервые обнаружено дозированное влияние МСМ из плазмы крови и измененного эпидермиса на сорбционную емкость эритроцитов в эксперименте, что является доказательством снижения функциональной активности клеток под действием эндотоксинов

На основании полученных результатов исследования и литературных данных сформулирована концепция, согласно которой развитие дерматозов обусловлено стереотипными реакциями, как местного, так и общеорганизмен-ного характера и связано с формированием и персистированием процесса ЭИ Выявлена специфика этих реакций, для конкретных видов изменений в коже

Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные данные о нарушениях биохимического и иммунологического гомеостаза, вызванных эндогенной интоксикацией, расширяют современные представления о механизмах формирования различных дерматозов

Фундаментальное значение для оценки реактивности организма на эндогенную интоксикацию имеют выявленные варианты метаболического ответа

Предложенный комплексный подход к функциональной диагностике эндогенной интоксикации по совокупности биохимических и иммунологических показателей, закономерно изменяющихся при различных дерматозах, может быть использован для решения прикладных задач по разработке эффективных методов детоксикации

Полученные данные показали необходимость и результативность использования энтеросорбентов для своевременного выведения эндотоксинов и повышения чувствительности клеточных рецепторов к лекарственным препаратам

Результаты исследования составили основу практических рекомендаций для лечения больных с морфо - функциональными изменениями в коже

Основные положения, выносимые на защиту

1. При дерматозах различного происхождения (гиперпролиферативные, аллергические, аутоиммунные) развивается эндогенная интоксикация, которая проявляется существенным повышением в крови уровня молекул средней массы и олигопептидов при одновременном снижении эффективной концентрации и резервной связывающей способности альбумина и угнетении активности ферментов биотрансформации по сравнению с нормой

2. Выделен комплекс наиболее информативных биохимических показателей, дополняющих характеристику эндогенной интоксикации при различных дерматозах

- при гиперпролиферативных дерматозах (псориаз) наблюдается повышение уровня мелкодисперсных циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), моче-

вой кислоты, усиление ПОЛ,

- при аллергодерматозах (атопический дерматит, микробная экзема) выявляются повышение ЦИК средних размеров, избыточное количество пула регу-ляторных пептидов, умеренное активирование ПОЛ, существенная недостаточность ингибиторов протеолиза,

- при аутоиммунных дерматозах (пузырчатка) характерны умеренно активированные протеолитические процессы и ПОЛ

4. Расчеты нелинейных корреляционных зависимостей между метаболическими показателями гомеостаза на основе математического ожидания позволили выявить общие и специфические механизмы формирования эндогенной интоксикации при различных дерматозах

5. Спектр МСМ, выделенных из измененного эпидермиса и пузырной жидкости от больных дерматозами, отличается от спектра МСМ плазмы крови преимущественным содержанием продуктов нуклеопротеидного обмена

6. Энтеросорбенты уменьшают токсическое влияние от применения цито-статических препаратов, снижая уровень эндотоксемии в организме

Апробация работы. Основные положения работы были доложены на Международном симпозиуме « Биоантиоксидант» (Томск, 1997), 3 конгрессе педиатров России (Москва, 1998), VIII съезде дерматовенерологов (Москва 2001), V симпозиуме «Химия протеолитических ферментов» РАН, Москва, (2002), научно-практической конференции «Актуальные вопросы терапии инфекций, передаваемых половым путем и хронических дерматозов» (Екатеринбург, 2002), научно-практической конференции «Современные вопросы дерматологии и венерологии» (РГМУ, Москва, 2002), научно-практическом симпозиуме «Рациональное применение лабораторных тестов в диагностике» (Москва, 2002), 1 Российском конгрессе дерматовенерологов (Санкт-Петербург, 2003), Всероссийской конференции дерматовенерологов (Н Новгород, 2004), 9 Всероссийском съезде дерматовенерологов (Москва, 2005), 8 Всероссийском популяци-онном семинаре «Популяции в пространстве и времени» (Н Новгород, 2005), 7 Всероссийском съезде инфекционистов (Н Новгород, 2006)

Публикации. Всего по теме диссертации опубликованы 34 работы в центральной печати, из них 13 - в журналах, рекомендованных ВАК, 3 -учебно-методических пособия, 1 - новая медицинская технология, получено 2 патента на изобретение

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 337 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, списка литературы, включающего 398 источников, из которых 92 - иностранных, приложения, содержит 89 таблиц и 48 рисунков

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Проведено исследование различных биологических субстратов плазмы и эритроцитов крови, мочи, пузырной жидкости, измененного эпидермиса, полученных от 344 больных с различными видами морфо-функциональных изменений в коже (дерматозов) По характеру морфо-функциональных изменений в коже и патофизиологическим механизмам развития заболеваний было выделено три группы обследованных 1 группа (гиперпролиферативные заболевания) включила больных псориазом и псориатической эритродермией 2 группа (аллергодерматозы) состояла из больных атопическим дерматитом и микробной экземой 3 группа (аутоиммунные заболевания) была представлена больными пузырчаткой

В исследование вошли 147 мужчин, 137 женщин, 60 детей Возраст взрослых больных дерматозами составил от 18 до 79 лет, при этом старше 60 лет было 16% обследованных Средний возраст детей - 11,5 ± 0,51 лет Возраст обследованных контрольной группы был сопоставим с возрастом больных до 60 лет Нормативы для группы детей были предоставлены Нижегородским НИИ детской гастроэнтерологии

Обследовано 124 больных псориазом, 79 - атопическим дерматитом, 47 -микробной экземой, 50 - эритродермиями различного генеза, 44 - пузырчаткой Все они находились на лечении в клинике научно-исследовательского кожно-венерологического института г Н Новгорода Диагноз заболевания ставился на основании общепринятых клинических критериев Контрольную группу составили 85 практически здоровых лиц без признаков кожной патологии В ряде методов в качестве контроля использовались образцы донорской крови, полученные на Нижегородской станции переливания крови Всего выполнено более 4500 биохимических анализов

Наличие эндогенной интоксикации оценивалось путем определения общего уровня молекул средней массы (£МСМ), их отдельных составляющих и олигопептидов в плазме, эритроцитах крови, моче, патологическом эпидермисе Суммарное количество МСМ, регистрируемое в супернатантах, полученных после осаждения крупномолекулярных белков, по УФ-поглощению в интервале длин волн 242 - 298 нм оценивалось по методу МЯ Малаховой (1995) При этом в общем спектре МСМ на длинах волн 242 - 258 нм выделялся катаболи-ческий пул, а 259 - 298 нм - анаболический Олигопептиды в составе МСМ определялись колориметрическим методом Лоури

Коэффициент степени эндогенной интоксикации (КСЭИ) рассчитывался по формуле

КСЭИ = (£МСМплазмы + £МСМ эритроцитов) / £МСМ мочи Коэффициент элиминации (КЭ) рассчитывался по формуле КЭ = (ХМСМплазмы)/ £МСМ мочи

Комплекс показателей для характеристики метаболического статуса больных дерматозами включал

- содержание белковых фракций и иммуноглобулинов в сыворотке крови для оценки состояния протеиновой системы,

- количество циркулирующих иммунных комплексов разного размера для характеристики гуморального иммунитета (Гриневич Ю А , Алферов А Н , 1981),

- интенсивность процессов перекисного окисления липидов по уровню в плазме и эритроцитах крови первичных продуктов - диеновых коньюгатов (Гаврилов В Б , 1983, Орехович В А , 1977) и вторичных продуктов - малонового диаль-дегида (Гаврилов В Б , 1987, Гончаренко М С , 1985),

- состояние антиоксидантной защиты по активности эритроцитарных фракций ферментов глутатионпероксидазы (Pinto RE, 1969) и супероксиддисмутазы (Чевари С, 1985), а также по количеству полифункционального медьсодержащего белка — церулоплазмина (Колб В Г , 1982),

- активность катаболических процессов по уровню в сыворотке крови продуктов белкового катаболизма - мочевой кислоты и комплекса креатин + креати-нин (КолбВ Г, 1982),

- интенсивность протеолитических процессов по уровню универсального ингибитора протеолиза - а2-макроглобулина (диагностические наборы фирмы Sentinel),

- уровень в крови регуляторных белков по гистамин - лексическому индексу, отражающему способность альбумина связывать биогенные амины (Тодоров И, 1982),

- метаболизм липидов по результатам анализа липидных фракций, идентифицированных методом тонкослойной хроматографии, при этом определялись нейтральные липиды, фосфолипиды, неэтерифицированные жирные кислоты (Творогова М Г , 1998),

- биотрансформация эндотоксинов оценивалась по активности глутатионтранс-феразы в плазме и эритроцитах крови (Карпищенко А И , 2002),

- состояние систем биотранспорта определялось по сорбционной емкости мембран эритроцитов (Тогайбаев А А, 1988), связывающей способности альбумина (Карпищенко А И, 2002), липидному спектру липопротеидов высокой плотности (Творогова М Г с соавт ,1998)

Все показатели изучались в динамике обследования. Применялось два вида лекарственного воздействия

• традиционный комплекс,

• комплекс с использованием энтеросорбентов

Экспериментальная часть работы включала в себя

- выделение и анализ МСМ из измененного эпидермиса и пузырной жидкости,

- изучение сорбционной емкости мембран эритроцитов (СЕЭ), процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) и активности фермента глутатионтрансфе-разы (ГТФ) в эритроцитах после инкубации отмытых клеток с фракцией молекул средней массы, полученной из различных биологических субстратов

1 МСМ из плазмы крови больных получали после депротеинизации 15% трихлоруксусной кислотой и 0,2М хлорной кислотой,

2 МСМ измененного эпидермиса выделяли из растертого с кварцевым песком до однородной порошкообразной массы биологического материала с последующей депротеинизацией 0,2М хлорной кислотой,

3 МСМ из пузырной жидкости выделяли также как из плазмы крови, с использованием 0,2М хлорной кислоты

Для устранения кислотности супернатант нейтрализовали раствором К2СО3 и инкубировали на холоде для более полного осаждения примесей В таком виде МСМ в соотношении 1 10 добавлялись к эритроцитам здоровых лиц и больных дерматозами После инкубации в течение 30 минут «нагруженные» эритроциты исследовались на содержание продуктов ПОЛ, СЕЭ и активность ГТФ

Статистическая обработка полученных данных проводилась на компьютере Pentium-366 с использованием электронных таблиц Excel и пакета программ STATISTICA 5,0 Определялась форма распределения в выборках исследуемых показателей Вычислялись средние квадратичные отклонения (о), ошибки средних величин (ш), коэффициенты достоверности (р) по критерию Стьюдента (t) и коэффициенты корреляции (г) При оценке статистической достоверности различий для малых выборок и выборок с ненормальным распределением применялись непараметрические критерии Уилкоксона и Смирнова Расчет криволинейных корреляционных зависимостей между парами признаков с расчетом коэффициентов (г|) проводился по рекомендациям Л 3 Румшицкого (1971) Различия между выборками считались статистически значимыми при р<0,05

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Показатели эндогенной интоксикации в условиях нормы

По классификации В В Чаленко (1990) к медиаторам ЭИ можно отнести активированные ферменты, некоторые факторы воспаления, биологически активные вещества, продукты перекисного окисления липидов, неоднородные по составу метаболиты нежизнеспособных тканей, агрессивные компоненты комплемента и др При этом особое значение имеет содержание в крови веществ средней молекулярной массы (МСМ), которые обладают высоким патогенным потенциалом в силу своей реакционоспособности В состав данной группы веществ входят как низкомолекулярные метаболиты (мочевая кислота, мочевина, креатинин, производные нуклеотидов), так и белковые молекулы размером до 5000Д При различных заболеваниях МСМ обнаружены и в других биологических жидкостях моче, ликворе, лимфе, слюне Это дало основание считать их универсальным маркером эндогенной интоксикации Тем не менее, и в крови и моче практически здоровых лиц также регистрируется определенный уровень этих соединений Они появляются в результате физиологического протеолиза, связанного с утилизацией поступающих в организм белков, нормального катаболизма, обмена нуклеопротеидов Многие из таких веществ, традиционно относящихся к эндотоксинам, являются регуляторными пептидами, активно участвующими в гомеостазе То есть продукция веществ, с эндотоксическими свойствами и их детоксикация являются неотъемлемыми составляющими нормальных физиологических процессов организма

Повышение уровня таких веществ, которое может приводить к явным проявлениям эндогенной интоксикации, происходит как вследствие экзогенного поступления, так и нарушений метаболизма в организме На начальных стадиях ЭИ это приводит к незначительным сдвигам физиологических и биохимических процессов (в пределах «нормы реакций» и/или субъективно хорошего самочувствия) В далеко зашедших стадиях появляется выраженная интоксикация с выходом функционирования организма за пределы «нормы реакций» из-за токсического нарушения/поражения работы многих органов и систем Пользуясь аналогией течения ЭИ и инфекционных процессов, по модели Г И Марчука и Э П Бербенцовой (1989) возможно три исхода этих состояний Первый - наиболее благоприятный - полное и быстрое восстановление биосистемы Существенно менее благоприятные исходы сводятся к хронизации процесса (адаптации к этому состоянию) или гибели организма

Эти общие положения и результаты наших предшествующих работ позволили допустить, что эндогенная интоксикация значительно влияет на состояния, связанные с морфо-функциональными изменениями в коже (дерматозами), и дали основание для проведения комплексных исследований этой проблемы

О 4-^-,-,-.—-,-,-,-,-,-,---,-1-,-

242 246 250 254 258 262 266 270 274 278 282 236 290 294 293 __Длины ВОЛН, нм

Рис 1 Типичные спектрограммы МСМ здорового человека

На рисунке 1 представлены типичные спектрограммы МСМ плазмы, эритроцитов и мочи в норме Начальная часть спектра, отграниченная пунктирной линией - катаболический пул МСМ

Нами изучено состояние ЭИ в плазме и эритроцитах крови у 65 практически здоровых взрослых лиц и 20 детей, без признаков кожных заболеваний, проживающих в г Н Новгороде и Нижегородской области (см таблицу 1)

Для групп относительно здоровых мужчин и женщин не было выявлено значимых различий в среднем уровне £МСМ в плазме и эритроцитах крови При этом, однако, у женщин относительный уровень катаболического пула МСМ плазмы крови был достоверно выше, чем у мужчин (соответственно, 22,0 ± 1,27% и 14,8 ± 0,85%, р <0,01) Очевидно, подобные различия связаны с неодинаковой нейрогуморальной регуляцией физиологических и биохимических процессов у мужчин и женщин У женщин более выражена активность глюко-

кортикоидов и гормонов щитовидной железы Эти гормоны связаны с интенсивностью катаболических процессов в организме (Литвицкий П Ф , 2002)

Таблица 1

Показатели эндогенной интоксикации крови практически здоровых лиц (М±т)

Показатели Взрослые п =65 Мужчины п=42 Женщины п=23 Дети п =20

£МСМ плазмы (уел ед) 10,03 ±0,28 10,1 ±0,28 9,96 ± 0,46 7,13 ±0,14**

X МСМ эритроцитов (уел ед) 19,26± 0,46 20,0 ± 0,72 18,4 ±0,64 20,85 ± 0,31

Катаболический пул плазмы (%) 17,6 ± 1,2 14,8 ±0,85 22,0± 1,27* 31,2 ± 1,48**

Катаболический пул эритроцитов(%) 37,7 ± 0,45 37,3 ± 0,70 38,2 ± 0,60 50,2± 1,18**

Примечания * - достоверность различий между мужчинами и женщинами

(р <0,01), ** - достоверность различий между взрослыми и детьми (р <0,01)

Средние показатели У МСМ в плазме и эритроцитах детей составили соответственно 7,13±0,14 уел ед и 20,85±0,31 уел ед , что для плазмы крови существенно ниже, чем у взрослых При этом достоверно (р<0,01) отличаются и показатели относительного уровня катаболического пула МСМ Данный факт также находит объяснение в отличном от взрослых лиц типе обмена веществ и несовершенстве механизмов детоксикации в детском возрасте

Особенности эндогенной интоксикации при различных морфо-функциональных изменениях в коже (дерматозах)

Как следует из представленных в таблице 2 данных, при всех изученных дерматозах - псориазе, атопическом дерматите, эритродермиях различного происхождения, пузырчатке - имеет место статистически значимое повышение уровня £МСМ в плазме и эритроцитах крови больных по сравнению с контрольной группой практически здоровых лиц (<0,05)

Наибольший уровень £МСМ плазмы среди общих групп больных отмечен при псориазе (ПС) Он составил 15,4 ± 0,61 уел ед против 10,03 ± 0,28 уел ед в контроле Наименьший уровень £МСМ плазмы получен при пузырчатке и он составил 13,4 ± 0,72 уел ед При этом, значительное увеличение количества МСМ (больше, чем М+ст контрольной группы) наблюдалось в среднем у 61,0% всех больных Эти больные вошли в группы с выраженной ЭИ При сравнении данных групп максимальное повышение количества £МСМ плазмы крови относительно контроля зарегистрировано при эритродермиях (18,7 ± 0,69 уел ед) Поскольку уровень £МСМ считается универсальным маркером наличия эн-дотоксемии, можно утверждать, что при дерматозах в период обострения заболевания (при поступлении больного в стационар) наблюдается развитие ЭИ, различной степени выраженности

Таблица 2

Уровень веществ средней молекулярной массы в плазме крови, эритроцитах _и моче больных различными видами дерматозов (М±т)_

Показатели Группы п 2 МСМ плазмы 2 МСМ эритроцитов 2 МСМ мочи

Контроль 65 10,03 ± 0,28 19,26 ±0,46 14,6 ± 1 34

Псориаз 1 группа - 62 2 группа- 42 15,4 ± 0,61* 16,6 ±0,45 21,9 ± 0,88* 27,2 ±0,23** 19,2 ± 1,35* 20,78 ± 1,5

Атопичский дерматит 1 группа - 63 2 группа - 42 14.2 ± 0,70* 17.3 ±0,65** 21,4 ± 0,62* 27,6 ± 1,46** 20,9 ± 1,40* 21,8 ± 1,67

Эритродермии 1 группа - 48 2 группа - 29 14.6 ± 0,87* 18.7 ±0,69** 23,3 ±0,78* 27,0 ±0,26** 20,3 ±1,70* 21,3 ±2,35

Пузырчатка 1 группа - 34 2 группа - 15 13,4 ± 0,72* 17,6 ±0,8** 21,6 ±0,58* 25,8 ±0,58 18,5 ± 1,55* 17,08 ±1,52

Примечания 2МСМ - суммарное количество веществ низкой и средней молекулярной массы в уел ед , п - число обследованных в группе, * - достовер-

ность различий с контролем, **- достоверность различий между группами,

1 группа - все обследованные больные с данным заболеванием, 2 группа -больные с выраженной эндогенной интоксикацией в 1 группе

Общий спектр МСМ по характеру вошедших в него веществ, условно делится на две части катаболическую и анаболическую Согласно M Я Малаховой (1998), наибольшую информативную значимость в оценке уровня ЭИ имеет ка-таболическая часть - диапазон от 242 до 258 нм Она включает продукты катаболизма белковых молекул и такие низкомолекулярные метаболиты как мочевина, креатин, креатинин, мочевая кислота, продукты пуринового обмена и др, а также нуклеотиды и их производные — метаболиты обмена нуклеопротеидов Преимущественное повышение количества катаболических продуктов является одной из стадий развития ЭИ Анаболическая часть спектра МСМ регистрируется в диапазоне длин волн 258 - 298 нм и включает, в основном, фрагменты белковых молекул, содержащие ароматические аминокислоты, пуриновые и пиримидиновые основания и их производные, метаболиты орнитинового цикла и др Нами обнаружено повышение катаболических МСМ во всех группах в среднем в 2,5 раза То есть, при изучаемых дерматозах наблюдается общебиологическая реакция организма на совершенно разные виды воздействий, которые связаны с различными морфо-функциональными изменениями в коже

Повышение уровня £МСМ эритроцитов отмечено у 34,0% обследованных (от 25,4% при атопическом дерматите (АД) до 38,0% - при пузырчатке) В общих группах увеличение составило в среднем 1,2 раза и 1,4 раза - в группах при выявленной ЭИ

В моче больных дерматозами степень повышения £МСМ была также как и в эритроцитах, значительно ниже, чем в плазме крови Так, в общих группах обследованных максимальное увеличение уровня £МСМ мочи было при АД (в 1,4 раза), а минимальное - при пузырчатке (в 1,2 раза) Определение содержания токсических продуктов в моче больных может опосредованно отражать

уровень ЭИ в организме и является очень важным индикатором работы его де-токсицирующих систем (Цикуниб А Д, 2001) Значительное количество £МСМ в плазме крови при сниженном их содержании в моче может свидетельствовать о нарушениях в работе органов выделительной системы По-видимому, наши данные подтверждают эти общие положения в отношении начальных нарушений работы почек при дерматозах

Выраженность ЭИ при поступлении больных на лечение оценивалась нами по расчетам коэффициента КСЭИ Анализ показал, что от 24,1% до 35,5% всех больных находилось на 1-ой стадии ЭИ - стадии компенсации, при которой биологические барьеры и системы детоксикации состоятельны (КСЭИ от 0,5 до 1,5) 2-я стадия - стадия субкомпенсации, или накопления токсинов выявлена у 46,5% больных ПС, 35,4% больных АД, 20,0% больных ЭД и 41,3% - пузырчаткой (КСЭИ 1,51 до 2,5) 3-ю стадию (нарушение функционирования органов естественной детоксикации) имели 29,4% больных ПС, 30,6% больных АД, 44,5% - ЭД и 24,0% - пузырчаткой (КСЭИ более 2,51) Таким образом, большая часть больных поступает в стационар при выраженной ЭИ и наметившейся тенденции к нарушению функционирования систем детоксикации

При анализе спектров МСМ мочи в наших исследованиях было выявлено, что при ПС и АД одинаково достоверно повышены как катаболическая, так и анаболическая составляющие В тоже время при эритродермии (ЭД) и пузырчатке в моче больных в большей степени повышено содержание продуктов протеолиза («анаболическая» составляющая), в то время как суммарное количество МСМ в моче этих больных не отличалось от контрольной группы В противоположность показателям плазмы крови, в моче доля катаболической составляющей ниже, чем в контроле

По нашим данным в плазме крови больных ПС уровень МСМ повышен в среднем на 60%, а в моче - на 30% При АД эти показатели составили 44% и 32%, соответственно, при ЭД - 48% и 40%, а при пузырчатке 36% и 26% То есть, МСМ больше всего задерживаются в организме больных псориазом, а при ЭД не наблюдается нарушений в процессе выведения эндотоксинов с мочой

Расчет пептидно-катаболического коэффициента (ПКК), который является отношением величин МСМ, регистрируемых при 282 нм и 242 нм, и в плазме и моче выявил следующее При развитии ЭИ из организма выводится, в основном, катаболическая составляющая общего спектра МСМ, а продукты нарушенного протеолиза остаются Так, ПКК при ПС в плазме крови составил 2,57± 0,25 против 5,08± 0,36 в контрольной группе (р <0,02), а в моче -1,13± 0,13 против 0,9 ± 0,08 в контроле (р>0,05), при АД, соответственно, 2,80 ± 0,28 (р<0,02) и 1,0± 0,08 (р>0,05), при ЭД - 3,04±0,32 (р<0,02) и 1,07 ±0,09 (р>0,05) и при пузырчатке - 2,5 ± 0,43 (р<0,02) и 1,1 ± 0,11(р>0,05) Преобладание в составе общего пула МСМ мочи преимущественно фрагментов белковых молекул является очень важным регуляторным процессом, так как продукты пептидной природы несут более выраженный для организма повреждающий потенциал и механизмы гомеостаза предполагают их выведение В свете этих данных, можно думать о том, что при ПС, АД и пузырчатке гомеостаз больного претерпевает более глубокие изменения, чем при ЭД

Одним из факторов, закономерно изменяющих гомеостаз, является длительность течения заболевания Однако это условие имеет специфику, зависящую от вида дерматоза У больных ПС и АД уровень ЭИ по показателям £МСМ плазмы крови в начале формирования процесса (регистрация клинических проявлений в течение первых трех лет) был выше, чем при длительном процессе (до 20 лет и больше) Это свидетельствует о формировании в организме нового уровня адаптационных реакций, обусловленного персистированием ЭИ В то же время при ЭД длительность заболевания не сказывалась на уровне £МСМ, а при пузырчатке наблюдалась обратная тенденция При этом анализ КСЭИ в этих группах выявил статистически значимое ухудшение выведения токсинов с мочой при длительном патологическом процессе Можно предположить, что отсутствие различий в показателях £МСМ плазмы у больных ЭД является следствием того, что все больные находились в стадии наивысшей остроты патологического процесса В тоже время тенденция к накоплению МСМ в плазме и достоверное увеличение МСМ в эритроцитах при пузырчатке при существенном снижении выделения их с мочой может свидетельствовать о значительно более выраженной ЭИ и ее усугублении с течением времени

Анализируя характер спектрограмм £МСМ в крови и моче больных дерматозами мы обнаружили несколько принципиально отличающихся вариантов метаболического ответа организма на эндогенную интоксикацию (рис 1,2)

1-й вариант спектрограмм является классическим, соответствующим типичному характеру метаболического ответа на ЭИ Для плазмы крови характерно одно повышение - на 282 нм, для мочи - два (на 242 и 282 нм) (см рис 1)

Второй вариант метаболического ответа можно определить как «тотальное» повышение уровня МСМ плазмы крови по всему спектру Он характеризуется практически полным совпадением спектрограмм плазмы крови и мочи лишь с различным уровнем МСМ на 242 нм (см рис 2)

-2 вариант -3 вариант -4 вариант

242 246 250 254 258 262 266 270 274 278 282 286 290 294

Длины волн, нм

Рис 2 Спектры МСМ плазмы крови по вариантам метаболического ответа

Третий вариант определяется двугорбой кривой Характеры кривых в плазме и мочи аналогичны При этом наблюдается одинаково высокий уровень МСМ на 242нм как в плазме, так и в моче и более низкие значения МСМ мочи, регистрируемые на 282нм

Для четвертого варианта характерно смещение основного максимума в сторону катаболической составляющей спектра Вариант может быть обозначен как «катаболический ответ по нуклеопротеидному типу» При этом имеется значительная разница в показателях МСМ, регистрируемых на 242 и 282 нм в моче они выше, чем в плазме В то же время уровень МСМ, регистрируемый в диапазоне 254-258 нм в плазме выше, чем в моче Кривые плазмы и мочи аналогичны лишь после волны 282нм

Принципиально важным оказался тот факт, что такие виды спектров регистрировались как при низких, так и при высоких значениях £МСМ в плазме крови обследованных Очевидно, в организме существуют определенные биохимические и физиологические механизмы, связанные с индивидуальным типом метаболизма, которые и определяют характер реакции на эндогенные изменения

Обобщая полученные данные, можно заключить, что для здоровых лиц и основной части больных дерматозами (62,0%) характерен первый вариант метаболического ответа на ЭИ, который определяется процессами физиологического протеолиза и нормального катаболизма Нарушение этих процессов обуславливает появление различных вариантов развития ЭИ (38% наших обследованных) При гиперпролиферативных (псориаз) и аутоиммунных состояниях (пузырчатка) чаще наблюдается второй вариант метаболического ответа При аллергической альтерации (атопический дерматит, микробная экзема) значительно чаще выявляется четвертый вариант метаболического ответа У больных с тяжелыми, тотальными морфо-функциональными изменениями в коже (эритродермии) практически с одинаковой частотой встречаются все варианты

Эндотоксические реакции при дерматозах. Констелляции биохимических и клинических признаков

При дерматозах эндогенная интоксикация объективно выявляется лабора-торно-функциональными методами, т к воспалительные изменения кожи маскируют ее клинические проявления (сухость, изменение окраски кожи и др )

Одним из подходов в комплексной характеристике гомеостаза является ти-пирование различных биохимических и иммунологических изменений Так, общепризнано типирование гиперлипопротеидемий, диспротеинемий, адекватности иммунного ответа Очевидно, что определение типа эндотоксикационно-го синдрома по комплексу биохимических показателей также даст дополнительную информацию для клинико-лабораторных исследований

Для комплексной оценки состояния эндогенной интоксикации нами проведено обобщение данных о содержании в крови больных дерматозами биохимических маркеров, характеризующих некоторые звенья метаболизма и основных

показателей ЭИ Результаты этих исследований в группах больных дерматозами при выраженной эндогенной интоксикации представлены в таблице 3

Таблица 3

Метаболические показатели плазмы крови больных дерматозами при выраженной эндогенной интоксикации по уровню МСМ (М±т)_

Показатели Группы

Контроль Псориаз Атопичес-кий дерматит Эритродер-мии Пузырчатка

Альбумин, % п 59,0 ±0,42 40 55,5± 0,81* 31 56,9± 0,77* 34 55,3± 0,72* 20 56,0± 1,54 8

А2-глобулин,% п 7,47± 0,19 40 9,43± 0,40* 31 8,86± 0,36* 34 9,20± 0,41* 20 8,70±0,44* 8

БИК, у е п 37,2± 5,4 17 44,9± 5,24* 20 55,6 ±7,0* 17 54,7 ±7,05* 23 50,4 ±5,4* 16

МИК, у е п 143±12,2 17 236± 26,6* 20 227 ±21,7* 17 226 ±21,7* 23 248±30,5* 16

ДК, нмоль/мл п 6,25± 0,33 48 8,03± 0,40* 42 8,20± 0,45* 30 8,80 ±0,77* 24 7,37± 0,47 28

МДА, нмоль/мл п 3,0 ±0,11 48 3,43± 0,10* 42 3,74± 0,24* 30 4,42 ± 0,54* 24 3,70±0,22* 28

ОП, мг/л п 18,7± 1,14 30 32,3± 2,95* 35 33,1±4,01* 23 24,9 ± 2,05* 18 30,9±4,42* 18

Мочевая к-та, ммоль/л п 0,20± 0,06 20 0,26±0,02* 10 0,24±0,02* 13 0,27± 0,01* 11 0,27±0,02* 12

Креатинин и креатин, мкмоль/л п 175,0±7,8 15 197,7± 21,0 11 173,0± 19,1 27 184,2 ± 17,5 16 202,3±19,9 12

ГПИ (%) п 6,77± 0,44 15 7,01 ± 1,3 13 3,5 6± 0,75* 15 3,28± 0,97* 11 6,85 ± 1,4 9

А2-МГ, мг/л п 41,44±3,9 22 25,0 ±5,1* 38 34,1 ±4,94 34 — 35,2 ±7,08 23

Примечания БИК — большие иммунные комплексы, МИК - малые иммунные комплексы, ДК - диеновые коньюгаты, МДА - малоновый диальдегид, ОП - олигопептиды, ГПИ — гистаминпексический индекс, а2-МГ - альфа 2 макроглобулин, п - число обследованных, * - достоверность различий с контролем (Р<0,05)

Проведенный анализ позволил нам заключить, что ЭИ при дерматозах в значительной степени является результатом специфических нарушений обменных, биохимических и физиологических процессов

При псориазе эндогенная интоксикация выражается в повышении суммарного уровня МСМ плазмы и эритроцитов крови за счет катаболической составляющей их спектра При этом достоверно увеличена а2-фракция глобулинов

как характеристика островоспалительного процесса, повышено количество олигопептидов в составе МСМ, усилено образование ЦИК, особенно, мелкодисперсных, активировано перекисное окисление липидов и несколько снижена активность АОС, повышена активность протеолитических систем за счет недостаточности ингибиторов протеолиза (а2-макроглобулина), при этом протео-лиз идет с образованием крупных фрагментов белковых молекул, катаболиче-ская составляющая МСМ повышена в основном за счет увеличения уровня креатинина, мочевой кислоты Одновременно выявлено повышение количества фосфолипидов — ЛФХ и ФЭА, моно- и диглицеридов

Эндогенная интоксикация при атопическом дерматите проявляется в статистически значимом повышении суммарного количества МСМ в плазме и эритроцитах крови за счет преимущественно анаболической составляющей При этом увеличено количество а2-глобулинов при снижении количества альбуминов, повышено содержание олигопептидов в составе МСМ и ЦИК, преимущественно, средних размеров, активность протеолитических процессов существенна при недостаточной активности их ингибиторов, при этом образуются ре-гуляторные пептиды, играющие протективную роль в аллергизации больных, процесс ПОЛ активирован умеренно, а активность АОС имеет лишь тенденцию к снижению

Эндогенная интоксикация при эритродермиях и экземе по уровню МСМ в плазме и эритроцитах наиболее высокая При этом одинаково увеличены и ка-таболическая и анаболическая составляющие Выявлено высокое содержание а2- глобулинов и сниженное количество альбуминов, увеличение олигопептидов в составе МСМ, преимущественно за счет образования низкомолекулярных пептидов, зарегистрировано высокое количество ЦИК обоих типов, достоверно повышен уровень мочевой кислоты, процессы ПОЛ также значительно активированы, особенно в плазме, но при этом наблюдается и интенсификация АОС Одновременно обнаружено повышение общего количества фосфолипидов и снижение содержания нейтральных липидов

При пузырных дерматозах увеличение МСМ в плазме выражено менее, чем на эритроцитах Достоверно повышено содержание а2 - глобулинов, увеличено количество олигопептидов в составе МСМ, умеренно активированы протеоли-тические процессы и ПОЛ при одновременном усилении антиоксидантной защиты, более значительно, чем при других дерматозах повышен уровень продуктов катаболизма белков и медиаторов пуринового обмена (мочевой кислоты и креатинина), уровень обоих типов ЦИК не превышает контрольных значений С учетом этих данных нами выявлено несколько типов эндотоксикационного синдрома при дерматозах

Первый тип наблюдается при эритродермиях Он характеризуется накоплением МСМ преимущественно в плазме крови и обозначен нами как гуморальный Второй тип имеет место при пузырчатке Ему свойственно повышение количества МСМ преимущественно в эритроцитах (тканевой тип ЭИ) Промежуточный или гуморально-тканевой тип характерен для псориаза и атопического дерматита Внутри этих типов объективно могут быть выделены варианты, классифицируемые в зависимости от преобладания того или иного пула МСМ,

а также от соотношения и взаимосвязи МСМ с другими биохимическими показателями Мы считаем, что в общем спектре МСМ необходимо выделять не только катаболическую и анаболическую составляющую, но и так называемый "нуклеопротеидный пул", так как доказано, что появление в крови продуктов нуклеопротеидной природы способствует развитию адаптационных реакций в организме и имеет иммуно-модулирующее значение (Спирин А С , 2002) Исходя из вида спектров МСМ у больных различными дерматозами, сидром эндогенной интоксикации при псориазе может быть обозначен как гуморально-тканевой (смешанный) тип с накоплением в крови продуктов катаболической природы и нарушенного протеолиза Атопический дерматит — гуморально-тканевой (смешанный) тип с преобладанием в крови продуктов протеолиза белков и нуклеопротеидно! о метаболизма Пузырчатка - тканевой тип с накоплением продуктов катаболизма и протеолиза белков Эритродермии - гуморальный тип за счет продуктов катаболизма и нуклеопротеидного метаболизма

Анализ полученных данных позволил нам предложить комплекс показателей, характеризующих ЭИ при дерматозах Он включает определение как общих маркеров уровня и качественного состава МСМ в плазме и эритроцитах крови, содержания олигопептидов и ингибиторов протеолиза для оценки про-теолитической активности, интенсивности процессов ПОЛ, белков острой фазы, так и специфические тесты К последним при псориазе можно отнести определение содержания мочевой кислоты, состава липидов и уровня мелкодисперсных ЦИК При аллергических дерматозах это - уровень регуляторных белков, активность АОС и количество ЦИК средних размеров При пузырчатке -содержание продуктов белкового катаболизма, пуринового обмена и активность АОС

Следует также отметить, что наибольшее практическое значение, особенно в тех случаях, когда уровень МСМ плазмы не превышает показателей контроля, имеют расчеты коэффициентов интоксикации (КСЭИ и КЭ), а также коэффициента соотношения количества олигопептидов и ингибиторов протеолиза С помощью этих показателей ЭИ выявляется с точностью до 80%

Сопоставление изменений комплекса изученных метаболитов и характера клинических проявлений позволяют предположить различные механизмы формирования эндотоксикационного синдрома при разных морфо-функциональ-ных изменениях в коже С этой целью были рассчитаны коэффициенты корреляционных отношений (т|) между стандартными показателями межуточного обмена и основным маркером ЭИ - МСМ, как в условиях нормы, так и при патологии Анализ криволинейных корреляционных зависимостей более информативен по сравнению с расчетом обычных коэффициентов г, так как позволяет выявить аргументно - функциональные связи между показателями, особенно в тех случаях, когда их средние значения не превышают уровня контрольной группы На основании проведенных расчетов нами была определена степень участия изучаемых показателей в цепи обменных процессов (см рис 3).

Наибольшее значение МСМ как аргументного фактора по отношению к изученным метаболическим показателям отмечается при эритродермиях (в 3 парах признаков из 6, МСМ имеют ведущее значение и в двух - равнозначное) Оче-

видно, здесь преобладает воздействие ксенобиотиков, микробных агентов и значительная степень повреждения кожного покрова, в результате чего в организме формируется высокий уровень эндогенной интоксикации

ЦИК,«-ЦИК, КОНТРОЛЬ

А-1-ГЛОБ-» МСМпл > А-2-ГЛ0Б

У \

ДК -» МДА

ПСОРИАЗ

ЦИК! «-цикг

\ &

А-1-ГЛОБ <- МСМпл -» А-2-ГЛОЕ

/_\

ДК -^ МДА

АТОПИЧЕСКИИ -ДЕРМАТИТ

А-1-ГЛОБ-> МСМпл > А-2-ГЛОБ

/ \

ДК -» МДА

цик, 4_цикг ЭРИТРОДЕРМИЯ

^ /

А-1-ГЛОБ ё * МСМпл -» А-2-ГЛ0Б.

^ \

ДК -^ МДА

ЦИК1 4-цикг ПУЗЫРЧАТКА

\ /

А-1-ГЛОБ <- МСМпл -> А-2-ГЛОБ

/_\

ДК -» МДА

Рис 3 Аргументно - функциональные зависимости метаболических показателей при различных дерматозах

Одиночная стрелка указывает достоверно преобладающее влияние на показатель, при двойной стрелке влияние взаимное без четкого преобладания

При псориазе МСМ одинаково часто с другими метаболическими показателями выступают в роли ведущего признака При АД содержание МСМ зависит от уровня белков острой фазы и продуктов ПОЛ В этих группах выявлен средний уровень ЭИ

При пузырчатке чаще, чем при других дерматозах, МСМ определяют повышение показателей межуточного обмена (в 4 парах они выступают как ведущий признак). Тем не менее, количество МСМ в плазме крови при пузырчатке ниже, чем при других дерматозах. Отсутствие корреляции между уровнем МСМ и тяжестью такого заболевания, каким является пузырчатка, очевидно можно объяснить тем, что в данном случае процесс интоксикации отличается особенностями и МСМ не являются его характерным маркером. Возможно, здесь имеют место другие проявления ЭИ, выявление которых требует дальнейшего поиска и анализа.

Характеристика процессов детоксикации лри дерматозах

Процессы детоксикации изучались нами в двух аспектах: биотранспорт эндотоксинов к органам естественной детоксикации и их биотрансформация .

Для дерматозов в стадии обострения морф о-функциональных изменений в коже характерно достоверное снижение эффективной концентрации альбумина и, вследствие этого, резервов его связывающей способности {рис. 4), В то же время, по группам дерматозов достоверных отличий в показателях ЭКА и РСА пег, что свидетельствует об однотипности метаболических реакций и универсальности изменений в молекуле альбумина.

Рис. 4. Показатели связывающей способности альбумина у больных различными дерматозами. I - контроль; 2 — псориаз; 3 - атонический дерматит; 4 -микробная экзема; 5-пузырчатка, * -достоверные различия с контролем.

По данным А.Л.Коротаева (2001) уровень ЭКА 20 г/л является критическим для формирования тяжелого эндотоксикоза. Близкие К «критическому» уровню показатели ЭКА от 20,0 г/л до 35,0 г/л были определены нами у 50,0% больных пузырчаткой и атоническим дерматитом, у 38,0% больных псориазом и 16,0% больных микробной экземой. Данное распределение может свидетельствовать о значительных нарушениях в функциональной активности альбумина при аутоиммунных и аллергических процессах в организме.

Немаловажная роль в транспортировке продуктов метаболизма в организме принадлежит липопротеидам, второй по величине транспортной системе кровеносного русла. Ее основная функция - перенос эндо- и экзогенных липидов по кровотоку. Согласно В.В Чалснко (1990) в классификации эндогенных токсинов определенное место принадлежит метаболитам липидного обмена. Это,

прежде всего, продукты ПОЛ, НЭЖК, ОХС и его эфиры Большинство авторов исследуют эти показатели в сыворотке крови и мембранах эритроцитов Поскольку липиды играют немаловажную роль в патогенезе дерматозов (Хышит-куев Б С., 2004, Шмелькова ЕС, 2001 и др), мы изучили липидный спектр МСМ и одного из классов ЛП - ЛПВП, которые транспортируют липиды по кровеносному руслу к печени Для оценки степени перераспределения липидов между различными субстратами организма были сопоставлены соотношения фракций липидов в плазме крови, в составе МСМ плазмы крови, в составе МСМ измененного эпидермиса и ЛПВП у больных псориазом (табл 4)

Таблица 4

Содержание фракций липидов в составе различных биологических субстратов при псориазе по результатам тонкослойной хроматографии в % _от общего количества липидов (М±т)_

Фракции липидов Субстрат

МСМ из измененного эпидермиса МСМ из плазмы крови Плазма крови ЛПВП из плазмы крови

1 2 3 4

ОФЛ Контроль Псориаз 7,25± 1,21 (п=10) 23,3 ± 1,5 (п=14) 18,0 ±0,65* (п=17) р2-3 >0,05 р2-4 <0,01 25,8 ±0,62 (п=20) 19,8± 0,53* (п=20) рЗ-2 >0,05 рЗ-4<0,01 36,04 ± 0,65 (п=35) 30,19±0,65* (п=48) р4-2 <0,01 р4-3<0,01

ОГЛ Контроль Псориаз 26,45± 2,3 26,17 ±0,86 34,26±0,83* р2-4 <0,01 рЗ-2<0,01 22,96 ±0,74 24,97±0,71* рЗ-4>0,05 рЗ-2<0,01 24,74 ±0,49 25,74 ±0,49 р4-2 <0,01 р4-3>0,05

ОХС Контроль Псориаз 49,8±2,83 36,8 ± 0,8 35,5 ± 0,45 р2-3<0,01 р2-4>0,05 30,53 ± 0,46 28,71± 0,79 рЗ-4<0,01 рЗ-2<0,01 33,51 ±0,57 34,07±0,57 р4-2>0,05 р4-3<0,01

НЭЖК Контроль Псориаз 19,3±1,8 12,2 ±0,5 12,36 ±0,55 р2-3<0,01 р2-4<0,01 21,0 ±0,6 26,7 ± 0,4* рЗ-4<0,01 р4-3<0,01 6,00 ± 0,33 9,78± 0,49* р4-2<0,01 р4-3<0,01

Примечания ОФЛ - общие фосфолипиды ОГЛ - общие глицеролипиды ОХС - общий холестерин НЭЖК - неэтерифицированные жирные кислоты,

п - число обследованных, * - различия с контролем достоверны р - достоверность различий показателей в субстратах 2-4

Как видно из таблицы, имеются некоторые особенности в липидных спектрах различных биологических субстратов В плазме крови и измененном эпидермисе больше, чем в других субстратах, находится неэтерифицированных

жирных кислот В МСМ из плазмы крови больше всего глицеролипидов, а в ЛПВП - фосфолипидов Можно предположить, что основная масса НЭЖК находится в плазме крови, так как их довольно мало как в составе МСМ, так и в составе ЛПВП Глицеролипидов больше всего в составе МСМ и, возможно, они участвуют в формировании эндогенной интоксикации при псориазе Фосфоли-пиды составляют основную часть ЛПВП и обуславливают нарушения липид-транспортной системы В МСМ из измененного эпидермиса определяется наименьшее содержание общих фосфо- и глицеролипидов В тоже время в них идентифицируется максимальное количество холестерина Это согласуется с данными литературы о значении ОХС в нарушениях процессов кератинизации при псориазе (Фертинская Е С 1996, Прохоренков В И, 2002 и др)

Среди механизмов биотранспорта эндотоксинов немаловажное значение имеет сорбирование метаболитов эритроцитами и перенос нагруженных эритроцитов по кровяному руслу к органам естественной детоксикации Как правило, выявляется повышение сорбционной емкости эритроцитов (СЕЭ) как компенсаторного механизма для перераспределения эндотоксинов между плазмой и эритроцитами (Тойгобаев А А., 1988, Малахова МЯ, 2000, Гончар -Зайкина Г М, 2001) Но имеются и другие сообщения Например, о том, что патологические МСМ могут блокировать рецепторный аппарат клеток (Сидель-никова В И , 1998), тем самым снижая их электрофоретическую подвижность (Аладиашвили Н 3, 2005) и препятствуя физиологическому процессу биотранспорта метаболитов ЭИ к органам естественной детоксикации В своих исследованиях мы выявили разнонаправленные изменения СЕЭ при различных дерматозах

Наиболее высокие значения СЕЭ были получены при псориазе (56,2+ 2,1%), что достоверно превышало величины контроля (48,8±2,1%, р<0,05) При атопи-ческом дерматите СЕЭ не отличалась от контроля (48,0 ± 3,2%) При экземе она была несколько снижена (42,9±3,8%), а при пузырчатке - достоверно ниже контроля (34,1±4,0%, р<0,05) Очевидно, эти данные отражают различное функциональное состояние клеточных мембран, свойственное дерматозам разного происхождения Тенденция к снижению СЕЭ при АД и экземе скорее всего связана с неспособностью эритроцитов быстро справиться с большим количеством МСМ В тоже время значительно сниженные показатели СЕЭ у больных пузырчаткой при умеренно повышенном в крови уровне МСМ свидетельствуют об изменении сорбционных свойств мембран, что, возможно, связанно с дисфункцией рецепторного аппарата

Известно, что соотношение фракций фосфолипидов в липидном бислое мембраны является фактором, регулирующим доступность мембраны для проникновения в клетку различных метаболитов Например, отношение СМ/ФХ является показателем так называемой «текучести» мембран, которая определяет стабильность их липидного бислоя и проницаемость При снижении этого коэффициента текучесть липидов повышается, усиливая проницаемость мембран Нами выявлены разнонаправленные изменения фосфолипидного состава мембран эритроцитов при различных дерматозах Значения коэффициента СМ/ФХ составили 0,79±0,05 - в контроле, 0,64±0,045 - при псориазе, 0,68±0,06 - при

экземе и 0,82 ±0,06 - при пузырчатке Статистически значимые различия (р<0,05) только между больными псориазом и контрольной группой, а также между больными пузырчаткой и больными псориазом и экземой (р<0,01)

Обобщая полученные данные, можно заключить, что при псориазе СЕЭ достоверно повышено, а соотношение СМ/ФХ - статистически значимо снижено по отношению к контролю При микробной экземе как СЕЭ, так и СМ/ФХ находятся в пределах контрольных значений При пузырчатке - сниженная сорб-ционная способность не сопровождается изменением соотношения СМ/ФХ Поэтому при псориазе и экземе отмечается как увеличение текучести липидной фазы, изменение СЕЭ так и проницаемости мембран эритроцитов А при пузырчатке, очевидно, нарушение СЕЭ и повышенная текучесть мембран обусловлены другими причинами, возможно нарушением белок - белковых взаимодействий или блокированием рецепторного аппарата мембран, которые тормозят проникновение различных веществ в клетку

Процессы биотрансформации эндотоксинов нами были рассмотрены при изучении активности фермента глутатионтрансферазы (ГТФ) в плазме и эритроцитах крови Данные представлены в таблице 5

При всех изученных дерматозах выявлено статистически значимое снижение активности ГТФ в плазме и тенденция к снижению ее в эритроцитах крови, относительно контроля Наименьшая активность фермента наблюдается при пузырчатке При индивидуальном сопоставлении активности ГТФ и уровня МСМ в тех же средах и при данных заболеваниях, было четко выявлено снижение активности фермента при увеличении уровня МСМ Более выражено это выглядело при сопоставлении уровня МСМ в плазме и ГТФ в эритроцитах То есть при дерматозах имеет место недостаточная активность ферментов биотрансформации, вырабатываемых печенью, что может явиться причиной замедленной утилизации эндотоксинов и накопления их в крови

Таблица 5

Показатели активности глутатионтрансферазы (ммоль/мин) и ХМСМ (уел ед)

Показатели п Контроль 25 Псориаз 33 Микробная экзема 15 Пузырчатка 21

ГТФ ил 10,35±0,47 7,03± 0,61* 6,78±0,95* 5,75±0,66*

ГТФ эр 3,27±0,15 3,19 ± 0,31 2,67 ±0,39 2,60 ± 0,68

ЕМСМпл 10,03±0,28 15,4± 0,61* 15,4 ± 1,3* 13,4±0,74*

ХМСМэр 19,26±0,46 21,9± 0,88* 25,0± 0,86* 21,6± 0,58*

Примечания п — число обследованных в группах * - достоверность различий с показателями контроля

С целью выяснения взаимосвязи между степенью накопления и интенсивностью выведения эндотоксинов при хронических дерматозах были рассчитаны и проанализированы коэффициенты корреляционных отношений (г)) между показателями систем биотрансформации и биотранспорта и уровнем МСМ

В группе больных псориазом выявлена значимая средней степени тесноты

взаимосвязь между активностью ГТФ и уровнем МСМ Она выражалась в следующих величинах г) в парах МСМпл-ГТФпл - 0,48-0,65, МСМэр-ГТФэр -0,54-0,26, МСМпл-ГТФэр - 0,59-0,43 при ведущем значении, в основном, МСМ Руководствуясь экспериментальными данными В А Дадали (2003) и полученными нами значениями г|, можно утверждать, что токсины действуют непосредственно на ферментную систему, инактивируя ее, что и приводит к нарушениям процессов биотрансформации

Значимая связь выявлена также между уровнем МСМ плазмы крови, их анаболической и катаболической составляющими, а также олигопептидами, с одной стороны, и связывающей способностью молекул альбумина в виде РСА и ЭКА, с другой Наиболее высокая степень взаимозависимости была обнаружена при атопическом дерматите (г] от 0,56 до 0,94), наименьшая - при псориазе (г) от 0,3 до 0,49) Анализ коэффициентов г| позволил полагать следующее

- при гиперпролиферативных процессах в коже для развития ЭИ одинаковое значение имеют как накопление в крови МСМ, так и нарушение связывающей способности альбумина (аргументных признаков нет),

- при аутоиммунных изменениях формирование ЭИ в большей степени связано с нарушением функциональных свойств молекул альбумина, чем с накоплением МСМ (РСА и ЭКА чаще выступают в роли ведущего показателя),

- при микробной экземе по сравнению с другими дерматозами самый высокий уровень ЭИ определяется показателями МСМ и их катаболической составляющей при менее выраженном снижении РСА (ведущий признак - МСМ),

- в развитие ЭИ при аллергической альтерации, также как и при гиперпролиферативных процессах одинаковый вклад вносит и накопление МСМ, и нарушение функциональных свойств молекул альбумина, эти процессы тесно взаимосвязаны, но формирование ЭИ в первом случае идет в основном за счет продуктов протеолиза, а во втором - за счет катаболических процессов

Детоксикация в комплексной терапии дерматозов

Исследование показателей эндогенной интоксикации в крови больных дерматозами в динамике традиционной терапии, включенной в соответствующие стандарты, выявило, что далеко не всегда происходит их нормализация Так, в результате лечения 35 больных ПС и 58 больных АД обычными, традиционными методами не снижалось ни общее количество МСМ, ни его катаболическая составляющая Показатели £МСМ составили до лечения при ПС - 13,5±0,9 услед, при АД - 14,2±0,70 услед, а после лечения - 14,2±0,70 и 13,9±0,87 уел ед, соответственно (р>0,05) Количество катаболических продуктов в плазме крови до лечения при ПС было 3,5±0,38 уел ед , а при АД - 3,37±0,16 уел ед После лечения этот показатель практически не изменился и составил 3,45±0,34 уел ед при ПС и 4,16±0,39 уел ед при АД (р >0,05) Некоторое снижение показателей ЭС отмечено лишь у больных ЭД До лечения величина £МСМ равнялась 16,2±1,28 уел ед , а катаболического пула - 4,02±0,50 уел ед , после лечения они составили 12,0 ±1,38 уел ед и 3,4 ± 0,76 уел ед (р<0,05)

Важным оказался тот факт, что стандартное лечение тяжелых форм дермато-

зов сильнодействующими препаратами способствует усугублению эндотокси-кационных процессов В наших исследованиях обнаружено, что применение метотрексата для подавления гиперпролиферативных изменений в коже привело к нарастанию в крови уровня основного маркера ЭИ - веществ средней молекулярной массы у 40% пациентов и в 90% случаев имело место увеличение другого показателя - олигопептидов (см табл 6)

При лечении пузырных дерматозов большими дозами кортикостероидов, которые также входят в стандартную терапию, уровни £МСМ и их катаболиче-ского пула составили 12,9±0,89 уел ед и 3,38±0,3 уел ед , соответственно, против 13,4±0,72 уел ед и 3,73±0,24 уел ед , до лечения р>0,05 Количество олигопептидов - 27,4±6,5мг/л против 31,9±4,30 мг/л до лечения, р>0,05

В известной нам литературе ранее не ставился вопрос о необходимости включения энтеросорбентов (ЭС) при назначении таких сильнодействующих лекарственных препаратов, как метотрексат и кортикостероиды Наши исследования показали, что применение ЭС у больных ПС при лечении цитостати-ками, позволило снизить степень эндоинтоксикации организма (табл 6)

Таблица 6

Значения основных маркеров ЭИ в плазме крови больных псориазом

в зависимости от вида лечения (М±т)

Показатели Группы £МСМ, уел ед Катаболический пул МСМ, уел ед Олигопептиды, мг/л

до лечения (п =67) после лечения 1 (п=28) после лечения 2 (п=39) 15.2 ±0,8 15.3 ± 1,08 12,8 ±0,53* 3,28 ± 0,24 3,38 ±0,37 2,60 ±0,16* 32,3 ± 2,95 48,3 ±6,28* 31,8 ±2,6

Примечания * - различия с показателями до лечения достоверны Лечение 1 - терапия метотрексатом, лечение 2 - терапия метотрексатом в комплексе с эн-теросорбентами

Включение энтеросорбентов в комплекс традиционных схем лечения оказало положительное влияние на биохимические показатели и при других дерматозах Так, уровень £ МСМ у больных АД снизился с 14,2 ± 0,7усл ед до лечения до 10,1±0,53 уел ед после лечения, а у больных ЭД - с 16,2±1,28 уел ед до 12,0±0,55 уел ед ( р <0,02) При этом достоверно уменьшилось и количество ка-таболических продуктов в плазме крови- с 3,37±0,16 уел ед до 2,36±0,22 уел ед при АД и с 4,02±0,50 уел ед до 2,76±0,28 уел ед при ЭД (р<0,02)

Таким образом, наши данные доказывают, что использование лекарственных препаратов с детоксицирующими свойствами в комплексной терапии больных дерматозами является необходимой составляющей эффективного лечения Кроме нормализации показателей ЭИ в крови наблюдается и более быстрое прекращение изнуряющего больных кожного зуда, и удлинение сроков ремиссии заболевания Все это отражено в разработанных нами новых медицинских технологиях «Эндоинтоксикационный синдром в клинике, патогенезе хронических дерматозов, методы коррекции» (2000) и «Методы коррекции эндотоксе-мии при лечении больных псориазом метотрексатом» (2006)

Свойства молекул средней массы различных биологических

субстратов

Как известно, дерматозы манифестируются специфическими морфо-функ-циональными изменениями кожных покровов. При псориазе - это измененный эпидермис - следствие гиперпролиферации клеток и нарушения процессов ке-ратинизации. При токсикодермиях, пузырчатке и ряде других дерматозов на коже и слизистых образуются пузыри из-за нарушения связей между зпителио-цитами в шиповатом слое кожи и проникновения жидкости в эпидермис. Образуются акантолитические клетки, с минимальным метаболизмом и небольшой способностью к синтезу ДНК. При пузырчатке наблюдается первичный аканто-лнз, который является результатом иммунной реакции с антителами против структур клеточной мембраны. При токсикодермиях и микробной экземе пузыри возникают вследствие первичной воспалительной реакции.

Мы предположили, что указанные особенности изменений тканевого метаболизма имеют свое отражение в спектре МСМ. Для проверки гипотезы сопоставлены спектры МСМ, экстрагированные из измененных участков кожи, и спектры МСМ плазмы крови. Полученные данные подтвердили наличие сдвигов, специфичных для вида морфо-функциональных изменений.

На рис. 5 представлены спектрограммы МСМ, экстрагированных из эпидермиса и плазмы крови больного псориазом,

Длины ВОЛН, ИМ

Рис. 5. Спектры МСМ плазмы крови и эпидермиса при гиперпролифератив-ном процессе в коже (больной Г.).

Как видно из рисунка, спектрограмма плазмы крови представляет собой типичную кривую с двумя подъемами: первый - на длинах волн от 214 до 242 нм и второй - на 278-282 нм. В МСМ из измененного эпидермиса значительное количество веществ также зарегистрировано при 210-238 нм, практически нет повышения на 278-286 нм и выраженный пик - на длинах волн 254-266 нм.

I |

lía рис. ó представлены сяекгры МСМ, экстрагированных нз пузырных жидкостей, полученных от больной Ж. с дерматитом Дюринга (1), больного В. с токсикодермией (2) и больной М. с врожденной пузырчаткой (3).

3

Рис. 6. Спектры МСМ из плазмы крови и пузырной жидкости: 1- больной Ж. (синдром Дюринга); 2 - больной В, (токе и к одер ми а); 3 - больная М. (врожденная пузырчатка).

При всех дерматозах первый пик в МСМ из пузырных жидкостей определяется на длинах волн 210-238 нм Второе повышение отмечено при таксидермии на 266-270 нм и при врожденной пузырчатке на 254-258 нм, а при дерматите Дюринга - такого повышения нет

Таким образом, спектры МСМ биологических субстратов при разных дерматозах имеют как общие, так и специфические черты Общие заключаются в том, что во всех случаях имеется значительное количество продуктов катаболизма (регистрируется при 210-238 нм) Специфические особенности зависят от видов морфо-функциональных изменений в коже и сдвигов метаболизма

При пузырчатке в составе МСМ пузырной жидкости и при псориазе в составе МСМ измененного эпидермиса наблюдается увеличение количества продуктов клеточного распада В то же время при токсикодермиях превалируют продукты протеолиза, что свидетельствует о более выраженных изменениях межуточного обмена в коже этих больных Можно предположить, что образующиеся в патологическом эпидермисе несвойственные здоровому организму МСМ (в виде коротких пептидов), проникают в кровь и в дальнейшем провоцируют метаболические нарушения за счет встраивания в биомолекулы или блокирования клеточных рецепторов

Влияние МСМ на мембранные процессы в эксперименте in vitro

Влияние МСМ на мембранные процессы m vitro изучалось нами на эритроцитах здоровых лиц и больных дерматозами Эритроциты являются удобной и адекватной моделью клеточных мембран, так как это безъядерные клетки и процедура их получения достаточно проста (Н В Рязанцева, 2004) Нами были исследованы сорбционная емкость (СЕЭ) и уровень диеновых коньюгатов мембран эритроцитов после инкубации отмытых физиологическим раствором клеток с МСМ, выделенными из плазмы крови и измененного эпидермиса от больных дерматозами Через 30 минут «нагруженные» эритроциты исследовались на содержание продуктов ПОЛ и СЕЭ

Изучение СЕЭ было проведено у 26 здоровых лиц и 36 больных дерматозами Среднее значение СЕЭ у здоровых составило 45,9±5,1%, после добавления МСМ - 56,7±5,34% Такое повышение (в среднем на 46,8%) наблюдалось в 70% случаев Его можно объяснить естественным физиологическим процессом участия клеток в биотранспорте токсинов У больных выявлены несколько другие эффекты Среднее значение СЕЭ до назначения лечения составило 54,6±2,4% После инкубации с МСМ было выявлено достоверное снижение уровня СЕЭ в среднем до 41,4±3,1% (р< 0,05), это наблюдалось в 78% опытов

В 22% произошло повышение СЕЭ Анализ этих случаев показал, что у больных показатели СЕЭ до лечения были в пределах контрольных Поэтому наблюдался такой же эффект взаимодействия с МСМ как и в случае эритроцитов практически здоровых лиц Нагрузка эритроцитов здоровых лиц МСМ, имеющих токсическую природу, стимулирует в организме процессы, направленные на выведение токсинов Если эритроциты нагружены своими, патоло-

гическими МСМ, то дополнительное их количество уже не может связаться с трансмембранными белками Наблюдается эффект «насыщения» рецепторов и СЕЭ снижается

Среднее значение СЕЭ в 20 образцах суспензий эритроцитов, полученных от больных, прошедших курс лечения, составила 49,3±2,8% В 15 образцах после добавления к эритроцитам МСМ, СЕЭ увеличилась достоверно в среднем до 6б,6±3,9% (р <0,05) Этим больным в курс лечения были включены энтеросор-бенты В оставшихся 5 опытах СЕЭ не изменилась Оказалось, что эти эритроциты были получены от больных, прошедших курс лечения только метотрекса-том без подключения энтеросорбентов Учитывая известный мембранно-токсический эффект метотрексата и полученные нами данные об его участии в формировании эндотоксичности, можно заключить, что нами еще раз, но уже экспериментально, была подтверждена необходимость включения детоксици-рующих препаратов в комплексное лечение больных с эндогенной интоксикацией, особенно, при использовании цитостатических средств

Уровень первичных продуктов пероксидации (ДК), характеризующих процессы ПОЛ, в 16 образцах эритроцитов здоровых лиц составил в среднем 1,34± 0,12 мкмоль/л После инкубации эритроцитов с МСМ, полученных от больных дерматозами, уровень ДК в них статистически значимо повысился до 2,30±0,3 мкмоль/л (р <0,05 ) Такое повышение было в 71% случаев То есть, МСМ обладают свойством инициировать процессы ПОЛ в мембранах эритроцитов здоровых лиц

Количество ДК в 45 образцах эритроцитов больных дерматозами составил в среднем 4,88±0,64 мкмоль/л При этом у 20 больных (44% обследованных) этот показатель не превысил уровня контрольной группы После инкубации клеток с МСМ среднее количество ДК в эритроцитах достоверно не повысилось и составило 4,96±0,61 мкмоль/л Увеличение количества ДК наблюдалась в 46% случаев, в 21,6% образцов показатели не изменились, а в 32,4% - наблюдалось их снижение Раздельный анализ процессов при нормальных и повышенных значениях первоначального уровня ДК выявил некоторые особенности метаболических реакций При уровне ДК, не отличающемся от контроля, в 47,7% случаев после инкубации эритроцитов с МСМ наблюдалось увеличение их количества, в 23,8% случаев имело место снижение и в 28,5% - показатели не изменились При изначально высоком уровне ДК, который имел место у 25 больных (56% обследованных), увеличение их количества отмечено в 40% случаев, снижение в 46,6% и не изменились показатели ДК в 13,4%

Таким образом, при нормальном уровне ДК в эритроцитах, как здоровых, так и больных лиц, нагрузка МСМ вызывает однотипные реакции В тоже время, добавление МСМ к эритроцитам с высоким уровнем ДК приводило к снижению их количества Это может быть объяснено нарушением функциональных свойств мембран под действием МСМ при патологии, что очевидно обусловлено измененным соотношением в них фосфолипидов

Различий в эффектах МСМ, выделенных из плазмы крови больных и измененного эпидермиса не обнаружено

В следующей серии экспериментов нами было изучено изменение под влиянием МСМ, выделенных из плазмы крови и измененного эпидермиса, активности фермента второй фазы биотрансформации - глутатионтрансферазы С этой целью были исследованы 34 образца суспензий эритроцитов и 30 образцов плазмы крови здоровых лиц В результате добавления патологических МСМ к плазме и эритроцитам крови здоровых лиц наблюдается тенденция к снижению активности фермента глутатионтрансферазы Изначально уровень ГТФ плазмы составил 7,12±0,56 ммоль/мин л, ГТФ эритроцитов - 3,52±0,27 ммоль/мин л После инкубации образцов с МСМ эти показатели составили для ГТФ плазмы 6,22 ± 0,47 ммоль/мин л и для ГТФ эритроцитов-2,91 ±0,198 ммоль/мин л Однако, в обоих случаях различия в активности фермента до и после инкубации с МСМ недостоверны (р>0,05) Это оказалось связано с тем, что в 20,5% случаев имело место повышение активности ГТФ в эритроцитах в среднем на 22,5% и в 31% случаев - активность фермента не изменилась В плазме крови активность фермента в результате влияния МСМ повысилась также в 20,5% случаев, но, в среднем, на 45,4%, и в 12,% не изменилась Однако и снижение активности фермента было достаточно выраженным и составило в среднем 31,0% (от 15,0 до 81%) в эритроцитах и 32,6% (от 8,0 до 70,0%) в плазме крови При этом повышение активности фермента чаще наблюдалось при инкубации эритроцитов и плазмы крови с МСМ, выделенных из плазмы крови, а при добавлении МСМ, выделенных из измененного эпидермиса в 100% случаев имело место угнетение активности ГТФ

Проведенные нами серии экспериментов подтверждают данные клинико-лабораторных исследований и позволяют заключить, что при дерматозах развиваются процессы эндогенной интоксикации с формированием пула веществ низкой и средней молекулярной массы «Дерматологические» МСМ имеют общебиологические свойства, характерные для МСМ, образующихся при других патологических состояниях (уремических, ожоговых, ишемических, септических и др), но, включаясь в каскад реакций межуточного обмена, специфически влияют на изменение гомеостаза организма Возможные механизмы развития эндогенной интоксикации при дерматозах приведены на рис 7

При оценке участия ЭИ в развитии гиперпролиферативных заболеваний мы исходили из представления о том, что слущивание эпидермиса является одним из компенсаторных процессов избавления организма от эндотоксинов (Короткий Н Г, 2005) По нашему мнению, такой процесс может быть одним из нескольких гомеостатических механизмов поддержания концентрации эндотоксинов в крови, функционирующим по механизму обратной отрицательной связи (см схему А на рис 7) Мы предположили, что на определенном этапе жизнедеятельности в организме становится больше эндотоксинов, чем может нормально удалиться (см схему Б на рис 7) Следствием этого является нарушение внутриклеточного обмена в эпидермисе, стимулируется биосинтетическая активность фибробластов, увеличение проницаемости лизосомальных мембран и повреждение клеточных мембран Активизация внутриклеточных протеолити-ческих процессов, среди которых усиление синтеза в кератиноцитах урокиназы

- основного регулятора внеклеточного протеолиза, приводит к высвобождению этого фермента из клеток

а Физиологические условия

б Патологические условия

Метаболизм организма

[

©,_

—^ Эндотоксины крови (МСМ ядр)

Д иффуз ия

©

©

Метаботам организма

нормальный измененный

болезнью

1 1

|Бо1езнь|

Почки Печень Кишечник Кожа

Т

Физиологическая регуляция клеточного метаботазча

Слущивание эпидермиса

Основная элиминация эндотоксинов

Дополнительная элиминация эндотоксинов

t Эндотоксины крови (МСМ ЕДР)

Почки Печень

1ффуз Кишечник [| Кожа

-©-

т

Нарушение виутриктеточного метаболизма

Тканевая I проницаемость

Основная элиминация эндотоксинов

Нар}шение физиологически! процессов в коже миграция, протиферация слущивание клеток идр

Выход в кровь]

I

I

+ Метаботизи 1 птоминогена и др

Клинические проявтения нарушение кератинизации, воспалительные проявления, зуд, жжение

Дополнительная этаминация эндотоксинов

Рис 7 Схема базового механизма участия эндотоксинов в формировании эндогенной интоксикации А - в норме, Б - при патологии кожи Обозначения для обратной связи '+' - положительная, '-' - отрицательная

Установлено, что в здоровой коже нет рецепторов к урокиназе, а при псориазе они выявляются и в эндотелии, и в лейкоцитах (Курдина М И, 2002) Продукция тканевой урокиназы запускает каскад реакций в том числе по механизмам обратной положительной связи, которые являются основой для прогресси-рования и хронизации болезней (Литвицкий П Ф , 2002, Кузин В Б и др , 2002) Каскад включает активизацию образования плазмина из плазминогена в крови и тканях, что увеличивает пул эндотоксинов, высвобождение факторов роста,

регулирующих миграцию и пролиферацию клеток и т п

Клинически это проявляется пролиферацией эпидермиса Известно, что индуцирование пролиферации происходит посредством протеинкиназного фос-форилирования белков (Janet F , 2002) Эти сведения совпадают с нашими данными в составе МСМ из измененного эпидермиса нами определено большое количество продуктов, зарегистрированных на длинах волн 220-230 нм Этому диапазону соответствуют низкомолекулярные белковые фрагменты, содержащие тимин, цитозин, гистидин, лизин Среди них могут быть и фрагменты уро-киназы, остатки урокиназного рецептора, плазмин и плазминоген, активированные ими факторы роста (Montuory N, 2005) Кроме этого урокиназа увеличивает тканевую проницаемость для многих субстратов Среди них находятся и эндотоксины В результате их концентрация становится выше по сравнению с ожидаемой (то есть, если бы проницаемость была в норме)

В условиях дополнительных экстремальных воздействий (стресс, нервно-психические перегрузки, переохлаждение, инфицирование и др ) происходит инициация характерных физиологических и биохимических реакций Одна из них - нарушение гемодинамики с ухудшением кровоснабжения кожи за счет того, что изменяется циркуляция крови через капилляры с возникновением тканевой гипоксии (Костянова Е Н , 2005, Загрдинова Р М , 2006) Гипоксия приводит к активации ПОЛ, воспалительным реакция;«, к выработке регуляторных пептидов и т д Все это создает условия для появления замкнутых патофизиологических циклов с обратной положительной связью, которые поддерживают персистирование деструктивных процессов (Киселева Р Е , 2006) Так, продукты липопероксидации оказывают повреждающее действие на белки, тиоловые соединения, ДНК, нуклеотиддифосфаты Фрагменты клеточных рецепторов и продукты распада мембранных белков стимулируют аутоиммунные реакции с образованием средне- и низкомолекулярных токсических ЦИК Взаимодействие иммунных комплексов с липидным бислоем клеточных мембран, в свою очередь, способствует новой активации ПОЛ с образованием свободных радикалов, стимулирующих синтез аутоантигенов и т д Таким образом, цикл замыкается и воспроизводится вновь и вновь

ДругихМ механизмом может быть недостаток энергообеспечения организма, что показано при псориазе и других дерматозах (Пухова ИВ , 1991, Довжан-ский С И , 1992, Тихонов Ю В , 1998) Следствием этого является накопление недоокисленных продуктов метаболизма Происходит стимуляция гликолиза, дополнительный распад депонированного гликогена, истощение углеводного резерва клеток и, как следствие, снижение активности детоксицирующих ферментов Это приводит к накоплению в крови продуктов катаболизма и протео-лиза, а, следовательно, к развитию ЭИ

Активный процесс гуморального перемещения токсических веществ (продуктов измененных кератиноцитов и фибробластов) из местного очага с током крови и лимфы по всему организму может приводить к дистанционному поражению органов и тканей, стимулировать дальнейшие нарушения обменных процессов Накопление в интерстициальной жидкости продуктов белкового распада может вызывать аутосенсибилизацию Способность МСМ к сенсибили-

зации клеток показана нами в эксперименте по их влиянию на СЕЭ Если не удалять эндотоксины в процессе лечения, то аутосенсибилизация способствует рецидивированию заболевания

При аллергических заболеваниях кожи участие ЭИ в развитии заболевания может быть связано с формирующейся в детском возрасте дисфункцией проте-олитических систем В ответ на поступление с пищей определенных ксенобиотиков не происходит адекватной утилизации продуктов обмена Они накапливаются в организме и провоцируют цепь других биохимических процессов образование биогенных аминов, активацию ПОЛ с угнетением систем антирадикальной и антиоксидантной защиты, иммунный ответ в виде выработки ИГ-Е, островоспалительные реакции При аллергических заболеваниях выявлены ге-мокоагуляционные изменения, в основе которых лежит гиперкоагуляция (То-ропова Н П, 1993) Несвоевременное удаление эндотоксинов и отсутствие нормализации протеолитических реакций приводят к сенсибилизации организма и рецидивированию заболевания

При дерматозах, связанных с микробным поражением, ЭИ развивается как результат поступления в организм продуктов жизнедеятельности патологических микроорганизмов (микробная экзема) или нормальной микрофлоры (ток-сикодермии) В результате проникновения в клетки эпидермиса или кишечника микробной флоры происходит нарушение обменных процессов, вызванное появлением в них эндотоксина - липополисахарида (ЛПС) А это вызывает другой стереотип, включающий следующую цепь реакций активация протеолитических систем, нарушение проницаемости лизосомальных и клеточных мембран, проникновение в лимфу и кровь продуктов патологического метаболизма, среди которых - регуляторные пептиды (биогенные амины), фрагменты ЛПС, рецепторы к нему, липиды и белки мембран и др Поскольку для того, чтобы произошел полом физиологической реактивности организма, микробное заражение должно быть массированным, то можно предположить, что и количество эндогенных продуктов обмена с патологическими свойствами образуется много За счет этого в крови больных токсикодермиями и микробной экземой регистрируется самый высокий уровень МСМ, выше, чем при других дерматозах и активность ПОЛ, более выражены островоспалительные процессы Если не проведена полная санация организма и не восстановлена работа протеолитических систем, то рецидив заболевания становится закономерным

При аутоиммунных дерматозах (пузырчатка) участие ЭИ в патогенезе заболевания очевидно связано с формированием аутоиммунных реакций на продукты патологического протеолиза Работами сотрудников нашего института показано (Г А Пантелеева и соавт, 2001), что уровень МСМ в крови больных с впервые диагностированной пузырчаткой и длительно болеющих пациентов достоверно не различается Это означает, что патологический процесс формируется на фоне циркуляции в крови продуктов нарушенного обмена - МСМ В данной работе мы установили, что повреждение клеточных мембран при пузырчатке играет более важную роль, чем при других дерматозах Поэтому можно предположить, что среди первых причин формирования заболевания может быть нарушение целостности клеточных мембран (клеточный акантолиз), в ре-

зультате которого в кровотоке оказывается большое количество фрагментов мембранных рецепторов и мембранных белков Они, в свою очередь, стимулируют аутоиммунные реакции с образованием средне- и низкомолекулярных токсических ЦИК (по нашим данным коэффициент МИК/БИК при пузырчатке выше, чем при других дерматозах)

Однако трудно объяснить факт того, что при пузырчатке мы регистрировали иной уровень ЭИ, чем при других дерматозах Возможно, что здесь имеет место развитие особенных метаболических реакций, например, направленных против усиленного протеолиза То есть, чтобы предохранить организм от усиленного протеолиза, связанного с акантолизом клеток эпидермиса, организм вырабатывает больше ингибиторов протеолиза (по нашим данным содержание в крови а2-макроглобулина при пузырчатке такое же, как у здоровых лиц, а при других дерматозах - достоверно меньше)

Таким образом, наши исследования установили ряд принципиально новых фактов о биохимических и физиологических механизмах влияния эндотоксинов в нормальных условиях и их отклонениях при ряде морфо-функциональных изменений в коже Эти данные позволили придти к заключению о том, что формирование различных дерматозов обусловлено стереотипными реакциями, как местного, так и общеорганизменного характера, связанными с развитием и персистированием процесса эндогенной интоксикации В тоже время при конкретных видах морфо-функциональных изменений в коже выявлена и специфика этих реакций Прикладное значение полученных знаний заключается как в улучшении диагностики заболеваний, так и в обосновании использования энте-росорбентов при проведении лечебных мероприятий

ВЫВОДЫ

1 Дана интегративная характеристика эндогенной интоксикации при морфо-функциональных изменениях в коже (дерматозы), которая включает определение уровня МСМ в крови и моче, содержания олигопептидов, ингибиторов про-теолиза, интенсивности процессов ПОЛ, количества белков острой фазы При этом наибольшее практическое значение имеет анализ коэффициентов интоксикации (КСЭИ и КЭ), а также коэффициента соотношения количества олигопептидов и ингибиторов протеолиза

2 Установлено, что при морфо-функциональных изменениях кожи в организме выявляется высокий уровень молекул средней массы, которые являются маркерами развития эндогенной интоксикации

На основании анализа характерных особенностей спектров МСМ определено четыре варианта метаболических изменений

для практически здоровых лиц и основной части больных (62,0%) ЭИ обусловливается адаптационно-физиологическими процессами (норма реакции), что рассматривается как первый вариант метаболического ответа,

при гиперпролиферативных процессах в коже на основе обменных нарушений (псориаз, эритродермии) и изменениях аутоиммунной природы (пузырчатка) ЭИ проявляется тотальным увеличением в плазме крови всех составляющих спектра МСМ (второй вариант метаболического ответа),

- при экозависимых дерматозах аллергического характера (атопический дерматит, микробная экзема) в составе МСМ значительно чаще выявляются продукты нарушенного метаболизма нуклеопротеидов (четвертый вариант метаболического ответа),

- при всех видах морфофункциональных изменениях в коже с одинаковой частотой встречается третий вариант метаболического ответа

3 Анализ корреляционных взаимоотношений (г|) между уровнем МСМ и биохимическими показателями гомеостаза на основании математического ожидания позволил предположить общие и специфические механизмы формирования эндогенной интоксикации при различных дерматозах

Общим является то, что при всех видах дерматозов определяется значимая (г) > 0,5) аргументно-функциональная взаимозависимость между исследованными метаболическими показателями и уровнем МСМ плазмы крови, что свидетельствует о закономерном влиянии МСМ на формирование гомеостатиче-ских реакций

Специфические механизмы заключаются в том, что

- при гиперпролиферативных изменениях в коже МСМ одинаково часто с другими метаболическими показателями выступают в роли ведущего признака,

- при аллергических процессах содержание МСМ зависит от уровня белков острой фазы, продуктов ПОЛ, циркулирующих иммунных комплексов,

- при эритродермиях в 50% корреляционных взаимозависимостей МСМ имеют ведущее значение и одна треть связей - равнозначна,

- при аутоиммунных изменениях МСМ определяют повышение показателей межуточного обмена в 75% корреляционных взаимозависимостей

4 Установлено снижение активности глутатионтрансферазы (фермента второй стадии биотрансформации) как в крови больных дерматозами, так и в эксперименте на эритроцитах m vitro Этот факт и выявление определяющего влияния МСМ на активность ГТФ при расчете корреляционных взаимоотношений доказывает возможность непосредственного воздействия эндотоксинов на процессы биотрансформации

5 Доказано, что эндогенная интоксикация при морфо-функциональных изменениях в коже является результатом дисбаланса между накоплением эндотоксинов и их выведением Об этом свидетельствует снижение эффективной концентрации альбумина, его резервной связывающей способности, а также нарушение функциональной активности липид-транспортной системы

6 Обнаружено, что спектр молекул средней массы, экстрагированных из измененного эпидермиса, отличается от спектра МСМ плазмы крови преимущественным содержанием продуктов нуклеопротеидного обмена Это отражает процессы неспецифического протеолиза в очаге повреждения и создает условия для накопления в организме определенных олигопептидов токсического характера

7 В эксперименте m vitro установлены механизмы токсического влияния МСМ, выделенных из измененной кожи и плазмы крови больных дерматозами Они заключаются в том, что при добавлении МСМ к эритроцитам у здоровых лиц инициируются процессы ПОЛ и увеличивается сорбционная емкость эритроцитов, а у больных - ПОЛ угнетается и сорбционная емкость снижается

8 Установлено, что традиционная терапия дерматозов не приводит к нормализации уровня эндотоксемии, а применение цитостатических препаратов, подавляющих гиперпролиферацию в эпидермисе (метотрексат), усугубляет процессы эндогенной интоксикации ,

9 Доказано, что применение энтеросорбентов достоверно снижает эндогенную интоксикацию организма, уменьшает токсическое влияние цитотоксиче-ских лекарственных препаратов, способствует клиническому выздоровлению и улучшает качество жизни больных

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Копытова, Т В Патогенетическое значение свободнорадикальных процессов в гомеостазе человека /НА Добротина, JIН Химкина, Т В Копытова // Материалы Международного симпозиума «Биоантиоксидант» в рамках международной выставки «Медицина и охрана здоровья Медтехника и Аптека» -Томск, 1997-С 234 -235 1

2 Копытова, Т В Медико-биологическое обоснование патоморфоза дерматозов у детей и коррекция терапии / JI Н Химкина, Н А Добротина, Т В Копытова // Материалы 3-го конгресса педиатров России «Экологические и гигиенические проблемы педиатрии» - Москва, 1998 - С 165-166

3 Копытова, ТВ Методы коррекции эндотоксемии при аллергодермагозах и псориазе у детей /Л Н Химкина и др Пособие для врачей - Н.Новгород, 1999 -11 с

4 Копытова, Т В Эндоинтоксикационный синдром в клинике, патогенезе хронических дерматозов, методы коррекции / Л Н Химкина, Г А Пантелеева, Т В Копытова Пособие для врачей - Н Новгород, 2000 - 11 с

5 Копытова, Т В Детоксикация организма как важнейшая стратегия современной комплексной терапии /НА Добротина, Л Н Химкина, Т В Копытова, Г П Григорюк // Вестник Нижегородского отделения Российской академии естественных наук -2000-С 71-73

6 Копытова, Т В Лабораторная диагностика эндоинтоксикации при хронических дерматозах /ТВ Копытова, Добротина Н А, Л Н Химкина, Т Н Ларина //Клиническая лабораторная диагностика - 2000 - №1 - С 14-17

7 Копытова, Т В Эндоинтоксикационный синдром у больных пузырчаткой / Г А Пантелеева, Т В Копытова, М А Пронова // Российский журнал кожных и венерических болезней - 2001 - №5 - С 38-41

8 Копытова, Т В Значение эндогенной интоксикации при хронических дерматозах Методы коррекции / Л Н Химкина Л Н , Н А Добротина, Т В Копытова // Вестник дерматологии и венерологии - 2001 - №5 - С 40-43

9 Копытова, Т В Детоксикации как стратегия комплексной терапии распространенных хронических дерматозов / Л Н Химкина, Н А Добротина, Г А Пантелеева, Т В Копытова, Е А Горбунов // Тезисы научных работ VIII съезда дерматовенерологов, часть 1 - Москва, 2001 - С 165

10 Копытова, Т В Патогенетическое значение среднемолекулярных пептидов крови как маркера протеолиза при системных заболеваниях кожи / Н А Добротина, Л Н Химкина, Т В Копытова // Тезисы докладов V симпозиума «Химия протеолитических ферментов» РАН - Москва, 2002 - С 126

11 Копытова, Т В Изучение спектра липидов как способ оценки эффективности лечения больных псориазом / И А Клеменова, Т В Копытова, Е П Абалихина // Клиническая лабораторная диагностика - 2002 - №10 - С 36

12 Копытова, ТВ Энтеросорбент микроцел в комплексной терапии больных распространенными дерматозами / Л Н Химкина, Г А Пантелеева, Т В Копытова // Тезисы науч работ научно-практической конференции «Актуальные вопросы терапии инфекций, передаваемых половым путем и хронических дерматозов» - Екатеринбург, 2002 - С 213

13 Копытова, Т В Состояние липидтранспортной системы у больных псориазом / Г Ю Курников, Т В Копытова, Е П Абалихина //Нижегородский мед журнал - 2002 - №3 - С 26-29

14 Копытова, ТВ Определение липидного состава липопротеинов высокой плотности в диагностике нарушений липидного обмена у больных псориазом / Материалы научно-практического симпозиума «Рациональное применение лабораторных тестов в диагностике, мониторировании распространенных форм патологии / Е П Абалихина и др // Клиническая лабораторная диагностика -

2002 -№10-С 35

15 Копытова, Т В Совершенствование методов патогенетической терапии псориаза / ЛНХимкина, ТВ Копытова, Г А Пантелеева // Материалы 1-го Российского конгресса дерматовенерологов, Санкт-Петербург - 2003 - Том 1 -С 136

16 Копытова, Т В Фосфолипиды мембран эритроцитов больных пузырчаткой /ГА Пантелеева, Т В Копытова // Материалы 1-го Российского конгресса дерматовенерологов, Санкт-Петербург - 2003 - Том 1 - С 90-91

17 Копытова, ТВ Способ прогнозирования рецидива акантолитической пузырчатки патент на изобретение 2199127 от 20 02 2003 / Г А Пантелеева, ТВ Копытова, И А Дубкова // Бюлл «Изобретения Полож модели» - №5, часть 3 - С 502

18 Копытова, Т В Энтеросорбент микроцел в комплексной терапии распространенных дерматозов / Л Н Химкина и др // Эффер Терапия - 2003 - №4 - С 46-50

19 Копытова, ТВ Липидный состав липопротеинов высокой плотности при псориазе / Г Ю Курников и др // Клиническая лабораторная диагностика -

2003 -№11-С 16-19

20 Копытова, Т В Значение эндоинтоксикации в патогенезе тяжелых дерматозов /ТВ Копытова, Л Н Химкина, Н К Никулин, Г А Пантелеева // Тезисы научных работ Всероссийской конференции дерматовенерологов «Современные направления диагностики лечения и профилактики ИППП и дерматозов», Н Новгород - 2004 - С 21

21 Копытова, ТВ Фосфолипидные компоненты сыворотки крови и мембран эритроцитов у больных микробной экземой / Г Ю Курников и др // Тезисы научных работ Всероссийской конференции дерматовенерологов «Современные направления диагностики лечения и профилактики ИППП и дерматозов», Н Новгород - 2004 - С 25

22 Копытова, Т В Способ лечения больных псориазом Патент на изобретение N2224515 от 27 02 2004 /ГЮ Курников и др //Бюлл «Изобретения Полож модели» - №6 , часть 3 - С 618

23 Копытова, Т В Эндоинтоксикация организма человека методологические и методические аспекты /НА Добротина, Т В Копытова Учебное пособие -Н Новгород,2005 -64 с

24 Копытова, Т В Диагностика и механизмы формирования эндоинтоксикаци-онного синдрома при хронических дерматозах /ТВ Копытова, Л Н Химкина,

Н К Никулин // Тез научных работ 9-го Всероссийского съезда дерматовенерологов - Москва, 2005 - С 15

25 Копытова, Т В Механизмы формирования и диагностика эндоинтоксикаци-онного синдрома в субпопуляции, подверженной зкотокснческим заболеваниям в Нижегородской области /ТВ Копытова, А Б Анненкова, Л Н Химкина // Сборник материалов докладов 8 Всероссийского популяционного семинара «Популяции в пространстве и времени» - Н Новгород, 2005 - С 162-164

26 Копытова, Т В Коррекция эндоинтоксикационного синдрома при дерматозах / Л Н Химкина, Г А Пантелеева, Т В Копытова // Эксп и клиническая дер-матокосметология - 2005 - №6 - С 61-64

27 Копытова, Т В Методические и методологические подходы к оценке эндоинтоксикационного синдрома в норме и при некоторых видах патологии /НА Добротина, А Б Анненкова, Т В Копытова, Л Н Химкина // Вестник Нижегородского Государственного университета - 2005 -вып 2 (10)-С 247-252

28 Копытова, Т В О механизмах развития эндоинтоксикации при псориазе и методах ее коррекции / Н К Никулин, Л Н Химкина, Т В Копытова, Г А Пантелеева//Нижегородский мед журнал - 2006 - №1 - С 60-64

29 Копытова, Т В Исследование сорбционной емкости мембран эритроцитов для оценки характера эндогенной интоксикации при дерматозах / Т В Копытова // Клиническая лабораторная диагностика - 2006 - №1 -С 18-19

30 Копытова, Т В Проницаемость мембран эритроцитов как механизм формирования эндогенной интоксикации в патогенезе хронических дерматозов / Н А Добротина, Т В Копытова, А Б Анненкова // Нижегородский мед журнал -2006-№3-С 125-127

31 Копытова, ТВ Связывающая способность альбумина в оценке степени эндогенной интоксикации при хронических дерматозах /ТВ Копытова, А Б Анненкова, НА Добротина // Нижегородский мед журнал - 2006 - №3 - С 128130

32 Копытова, Т В Молекулы средней массы как субстрат эндогенной интоксикации при тяжелых дерматозах /ТВ Копытова //Успехи соврем естествознания-2006-№9 -С 7-10

33 Копытова, Т В Синдром эндогенной интоксикации при дерматозах, осложненных инфекцией /НА Добротина, Л Н Химкина, Т В Копытова, А Б Анненкова //Тез 7 российского съезда инфекционистов «Новые технологии в диагностике и лечении инфекционных болезней», Н Новгород, 2006 - С 246

34 Копытова, Т В Методы коррекции эндотоксемии при лечении больных псориазом метотрексатом /Л Н Химкина, Т В Копытова, Г А Пантелеева // Новая медицинская технология - Н Новгород, 2007 - 12 с

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АД атопический дерматит

АОС антиоксидантная система

БИК(ЦИК1) большие иммунные комплексы

ГТФ глутатионтрансфераза

ДК диеновые коньюгаты

КСЭИ коэффициент степени эндогенной интоксикации

КЭ коэффициент элиминации

ЛПВП липопротеиды высокой плотности

ЛФХ лизофосфатидилхолин

МДА малоновый диальдегид

МИК(ЦИК2) малые иммунные комплексы

мсм молекулы средней массы

НЭЖК неэтерифицированные жирные кислоты

оп олигопептиды

охс общий холестерин

ПС псориаз

ПКК пептидно-катаболический коэффициент

РСА резерв связывания альбумина

см сфингомиелин

СЕЭ сорбционная емкость эритроцитов

тг триглицериды

УК урокиназа

ФЭА фосфатидилэтаноламин

ФХ фосфатидилхолин

ЦИК циркулирующие иммунные комплексы

ЭД эритродермии

ЭКА эффективная концентрация альбумина

ЭИ эндогенная интоксикация

ЭС энтеросорбенты

I

Подписано к печати 28 03 07 Формат 60х84'Лб Бумага писчая Печать офсетная Гарнитура «Тайме» Уел печ л 2 Тираж 100 экз Заказ 58

Полиграфический участок НГМА 603005, Н Новгород, ул Алексеевская, 1

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Копытова, Татьяна Викторовна

Страницы

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Эндогенная интоксикация организма человека. Современные взгляды, нерешенные вопросы.

1.1.1. Механизмы формирования эндогенной интоксикации

1.1.2. Современные методы диагностики эндогенной интоксикации

1.2. Биохимические критерии эндогенной интоксикации.

1.2.1 .Среднемолекулярные пептиды.

1.2.2. Продукты перекисного окисления липидов.

1.2.3. Протеолитическая активность и протеолиз.

1.2.4. Эндоинтоксикация и иммунный статус организма.

1.2.5. Системный воспалительный процесс (бактериальные эндотоксины)

1.3. Детоксикация организма человека.

1.3.1. Биотрансформация.

1.3.2. Транспортная и связывающая способность белков плазмы крови.

1.3.3. Значение функционального состояния мембран в реализации процессов детоксикации организма.

1.3.4. Органы детоксикации.

1.4. Эндогенная интоксикация при дерматозах.

1.4.1. Значение морфо-функциональных изменений в коже для развития эндогенной интоксикации.

1.4.2. Проблема эндогенной интоксикации и особенности ее диагностики при дерматозах.

1.5. Детоксикационная терапия.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Механизмы эндогенной интоксикации и детоксикации организма в норме и при морфо-функциональных изменениях в коже"

В настоящее время одной из важных проблем биологии человека является опасность загрязнения токсическими веществами и их метаболитами сосудистого русла, внесосудистых тканей, рецепторного аппарата клеток и других систем организма [70,132, 397]. Это может быть результатом антропогенных, экзогенных влияний и повреждений [142,161], а также эндогенных проявлений различной природы [243,369,395].

Экзогенную интоксикацию и нарушение физиологических процессов организма способны вызвать многие вещества (экзогенные токсические вещества), относящиеся как к отдельным химическим элементам (например, тяжелые металлы, галогены, мышьяк, бериллий, селен), так и к различным классам химических соединений, а также бактериальные токсины, пищевая токсикоинфекция, кислородное голодание и др. Токсические вещества поступают в организм через дыхательные пути, пищеварительный тракт, кожу и слизистые оболочки или путем парентерального введения. Причиной интоксикации может быть и не само попавшее в организм вещество, а продукты его превращения, оказывающие токсическое действие.

Если токсины образуются в организме, то они называются эндотоксинами, а само состояние - эндогенной интоксикацией (ЭИ). Она характеризуется появлением в тканях и биологических жидкостях организма избытка метаболитов нормального или измененного обмена веществ, продуктов жизнедеятельности бактерий и др. ЭИ может быть результатом большой антигенной нагрузки, специфических и неспецифических биохимических реакций, нарушения физиологических процессов анаболизма и катаболизма и др., что в совокупности с клиническими проявлениями формирует эндотоксикационный синдром [48, 176, 179]. В норме (у здоровых лиц) он, как правило, может компенсироваться, а при различных нарушениях - в значительной степени определять, обострять и усугублять течение основного заболевания [177].

Имеются публикации о развитии хронической эндогенной интоксикации при продолжительном воздействии на организм даже малыми дозами токси6 кантов [163,175]. При этом хроническая ЭИ, сопровождая самые разные виды нарушений, одновременно может выступать как самодовлеющий, самостоятельный и определяющий фактор [24,105,300]. Имеются данные о том, что циркулирующие в крови эндотоксины способны блокировать рецепторный аппарат клетки и приводить к фармакорезистентности [234]. Этим, возможно, определяется фармакоустойчивость заболеваний (и дерматозов в частности). Обсуждаются также вопросы уровня ЭИ в норме и в различных возрастных группах; взаимосвязь ЭИ и степени функциональной активности деток-сицирующих систем организма [11,104,293] и др. В связи с этим, актуальны исследования по подбору лекарственных препаратов и способов для выведения эндотоксинов.

Следует отметить, что вопросы диагностики и терапевтической коррекции эндогенной интоксикации разрабатываются преимущественно в нашей стране, и в основном в клинических дисциплинах, в которых наблюдается острое развитие процесса (нефрология, хирургия острых состояний, медицина катастроф и т.д.). Разработаны общие подходы к выявлению ЭИ, выделены классы эндотоксинов, показана их мембрано-деструктивная и иммуно-модулирующая роль [14,88,114,115,120,283]. Иностранные авторы эффекты эндогенной интоксикации усматривают только в развитии синдрома системного воспалительного ответа [317,318,380,383]. Существенно меньшее внимание уделяется разработке способов выявления скрытых, транзиторных ток-семий, которые оказывают усугубляющее действие на течение основного патологического процесса. В то же время своевременное выявление ЭИ и ее адекватная коррекция позволили бы предупредить развитие системного синдрома и избежать многих его негативных последствий.

Основные биохимические и физиологические реакции организма осуществляются на уровне околоклеточная среда - клетка, клеточные рецепторы мембран органов (печень, почки) и систем (нервная, иммунная, соединительная ткань, кожа и др.). При этом, изменения в коже, которая является полифункциональной системой, приобретают особенно важное значение. В результате повреждения, когда нарушаются барьерная, защитная и регулятор-ная функции кожи, последняя становится очагом формирования токсических метаболитов. Преодолевая межклеточные и межтканевые барьеры и включаясь в нормальный метаболизм организма, эндотоксины приводят к разбалан-сированности гомеостатических процессов и способствуют усугублению негативных изменений в организме [23,144].

С медицинской точки зрения, хронические распространенные дерматозы относят к сложным мультифакториальным, полигенным заболеваниям [125]. В последние годы возросла их встречаемость в регионах с неблагоприятной экологической обстановкой [15,97,161,274]. Параллельно с этим значительно увеличилась частота дисбиозов, ухудшилось нервно-психическое здоровье (стресс, депрессия и др.), увеличилось число функциональных иммунодефи-цитов [19,47,116].

Проведенные ранее исследования [81,203,275,276] показали, что при хронических дерматозах образование токсинов не имеет лавинообразного характера и основные признаки ЭИ менее выражены по сравнению с острыми процессами (хирургические, сепсис, гепатиты и др.), маскируясь разными проявлениями измененной кожи. Это требует поиска/разработки новых критериев для характеристики ЭИ при процессах, связанных с изменениями в коже, с помощью как клинико-лабораторных корреляций, так и комплексных подходов на основе обобщения данных о различных биохимических и иммунологических параметрах. Результатом определения таких критериев может быть более адекватное понимание, с одной стороны, механизмов, лежащих в основе формирования ЭИ, а с другой - ее роли и участия в развитии конкретного дерматоза.

Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования является изучение механизмов формирования эндогенной интоксикации для выявления ее роли и значения при морфо-функциональных изменениях в коже (дерматозах) и обоснования необходимости детоксикации.

Для реализации этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить состояние эндогенной интоксикации при морфо-функциональных изменениях в коже (дерматозы) по результатам количественного и качественного анализа уровня молекул средней массы (МСМ) и характерных особенностей их спектров в различных биологических средах. Провести сопоставление полученных данных с показателями «нормы реакции».

2. Разработать функционально-диагностический комплекс лабораторных показателей для характеристики эндогенной интоксикации при дерматозах.

3. Выявить взаимосвязь маркеров эндогенной интоксикации с биохимическими и иммунологическими показателями гомеостаза на основе анализа корреляционных отношений.

4. Изучить токсичность МСМ, выделенных из плазмы крови и измененной кожи больных дерматозами, оценить степень ее влияния на формирование эндогенной интоксикации.

5. Выявить особенности систем биотрансформации и биотранспорта эндотоксинов при дерматозах и определить степень их участия в процессах детоксикации.

6. Исследовать показатели эндогенной интоксикации в динамике применения различных видов лекарственного воздействия; обосновать преимущества использования энтеросорбентов.

Научная новизна

Впервые комплексно изучены механизмы эндогенной интоксикации при морфо-функциональных изменениях в коже различного вида. Выделены и описаны типы эндотоксикационного синдрома: гуморальный, тканевой, смешанный, характеризующие тяжесть нарушений в организме.

Установлено взаимовлияние эндотоксинов и биохимических показателей гомеостаза при различных дерматозах, что позволит прогнозировать течение заболевания и корректировать лекарственное воздействие.

Впервые выявлены и охарактеризованы варианты метаболического ответа на эндогенную интоксикацию, проявляющиеся различием в качественном составе общего пула молекул средней массы в плазме крови.

Впервые установлено нарушение транспортировки эндотоксинов альбумином при различных дерматозах, что свидетельствует о нарушении процессов детоксикации организма.

Впервые найдены токсические метаболиты (МСМ, олигопептиды и др.) в измененном эпидермисе, что подтверждает тесную взаимосвязь процессов эндогенной интоксикации в организме с биохимическими и структурными нарушениями в коже.

Впервые обнаружено дозированное влияние МСМ из плазмы крови и измененного эпидермиса на сорбционную емкость эритроцитов в эксперименте, что является доказательством снижения функциональной активности клеток под действием эндотоксинов.

На основании полученных результатов исследования и литературных данных сформулирована концепция, по которой развитие дерматозов обусловлено стереотипными реакциями, как местного, так и общеорганизменно-го характера и связано с формированием и персистированием процесса ЭИ. Выявлена специфика этих реакций для конкретных видов изменений в коже.

Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные данные о нарушениях биохимического и иммунологического гомеостаза, вызванных эндогенной интоксикацией, расширяют современные представления о механизмах формирования различных дерматозов.

Фундаментальное значение для оценки реактивности организма на эндогенную интоксикацию имеют выявленные варианты метаболического ответа.

Предложенный комплексный подход к функциональной диагностике эндогенной интоксикации по совокупности биохимических и иммунологических показателей, закономерно изменяющихся при различных дерматозах, может быть использован для решения прикладных задач по разработке эффективных методов детоксикации.

Полученные данные показали необходимость и результативность использования энтеросорбентов для выведения эндотоксинов и повышения чувствительности клеточных рецепторов к лекарственным препаратам.

Результаты исследования составили основу практических рекомендаций для лечения больных с морфофункциональными изменениями в коже.

Основные положения, выносимые на защиту

1. При дерматозах различного происхождения (гиперпролиферативные, аллергические, аутоиммунные) развивается эндогенная интоксикация, которая проявляется существенным повышением в крови уровня молекул средней массы и олигопептидов при одновременном снижении эффективной концентрации и резервной связывающей способности альбумина и угнетении активности ферментов биотрансформации по сравнению с нормой.

2. Выделен комплекс наиболее информативных биохимических показателей, дополняющих характеристику эндогенной интоксикации при различных дерматозах:

- при гиперпролиферативных дерматозах (псориаз) наблюдается повышение уровня мелкодисперсных циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), мочевой кислоты, усиление ПОЛ;

- при аллергодерматозах (атопический дерматит, микробная экзема) выявляются: повышение ЦИК средних размеров, избыточное количество пула регуляторных пептидов, умеренное активирование ПОЛ, существенная недостаточность ингибиторов протеолиза;

- при аутоиммунных дерматозах (пузырчатка) характерны умеренно активированные протеолитические процессы и ПОЛ.

4. Расчеты нелинейных корреляционных зависимостей между метаболическими показателями гомеостаза на основе математического ожидания позволили выявить общие и специфические механизмы формирования эндогенной интоксикации при различных дерматозах.

5. Спектр МСМ, выделенных из измененного эпидермиса и пузырной жидкости от больных дерматозами, отличается от спектра МСМ плазмы крови преимущественным содержанием продуктов нуклеопротеидного обмена.

6. Энтеросорбенты уменьшают токсическое влияние от применения цито-статических препаратов, снижая уровень эндотоксемии в организме.

Апробация работы. Основные положения работы доложены на Международном симпозиуме «Биоантиоксидант» (Томск, 1997); 3 конгрессе педиатров России (Москва, 1998); VIII съезде дерматовенерологов (Москва 2001); V симпозиуме «Химия протеолитических ферментов» РАН (Москва, 2002); конференции «Актуальные вопросы терапии инфекций, передаваемых половым путем и дерматозов» (Екатеринбург, 2002); конференции «Современные вопросы дерматологии и венерологии» (РГМУ, Москва, 2002), симпозиуме «Рациональное применение лабораторных тестов в диагностике» (Москва, 2002); 1 Российском конгрессе дерматовенерологов (Санкт-Петербург, 2003); Всероссийской конференции дерматовенерологов (Н.Новгород, 2004); 9 Всероссийском съезде дерматовенерологов (Москва, 2005); 8 Всероссийском семинаре «Популяции в пространстве и времени» (Н.Новгород, 2005), 7 Всероссийском съезде инфекционистов (Н.Новгород, 2006).

Публикации. По теме диссертации опубликованы 34 работы в центральной печати (13 - в журналах, рекомендованных ВАК); 3 - учебно-методических пособия, 1 - новая медицинская технология; получено 2 - патента на изобретение.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 337 страницах машинописного текста; состоит из введения; обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов; выводов, списка литературы, включающего 398 источников (92 - иностранных), приложения; содержит 89 таблиц и 48 рисунков.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Копытова, Татьяна Викторовна

выводы

1. Дана интегратнвная характеристика эндогенной интоксикации при морфо-функциональных изменениях в коже (дерматозы), которая включает определение уровня МСМ в крови и моче, содержания олигопептидов, ингибиторов протеолиза, интенсивности процессов ПОЛ, количества белков острой фазы. При этом наибольшее практическое значение имеет анализ коэффициентов интоксикации (КСЭИ и КЭ), а также коэффициента соотношения количества олигопептидов и ингибиторов протеолиза.

2. Установлено, что при морфо-функциональных изменениях кожи в организме выявляется высокий уровень молекул средней массы, которые являются маркерами развития эндогенной интоксикации.

На основании анализа характерных особенностей спектров МСМ определено четыре варианта метаболических изменений:

- для практически здоровых лиц и основной части больных (62,0%) ЭИ обусловливается адаптационно-физиологическими процессами (норма реакции), что рассматривается как первый вариант метаболического ответа; при гиперпролиферативных процессах в коже на основе обменных нарушений (псориаз, эритродермии) и изменениях аутоиммунной природы (пузырчатка) ЭИ проявляется тотальным увеличением в плазме крови всех составляющих спектра МСМ (второй вариант метаболического ответа);

- при экозависимых дерматозах аллергического характера (атопический дерматит, микробная экзема) в составе МСМ значительно чаще выявляются продукты нарушенного метаболизма нуклеопротеидов (четвертый вариант метаболического ответа);

- при всех видах морфо-функциональных изменений в коже с одинаковой частотой встречается третий вариант метаболического ответа.

3. Анализ корреляционных взаимоотношений (г|) между уровнем МСМ и биохимическими показателями гомеостаза на основании математического ожидания позволил предположить общие и специфические механизмы формирования эндогенной интоксикации при различных дерматозах.

Общим является то, что при всех видах дерматозов определяется значимая (т| > 0,5) аргументно - функциональная взаимозависимость между исследованными метаболическими показателями и уровнем МСМ плазмы крови, что свидетельствует о закономерном влиянии МСМ на формирование гомеостатических реакций.

Специфические механизмы заключаются в том, что:

- при гиперпролиферативных изменениях в коже МСМ одинаково часто с другими метаболическими показателями выступают в роли ведущего признака;

- при аллергических процессах содержание МСМ зависит от уровня белков острой фазы, продуктов ПОЛ, циркулирующих иммунных комплексов;

- при эритродермиях в 50% корреляционных взаимозависимостей МСМ имеют ведущее значение и одна треть связей - равнозначна;

- при аутоиммунных изменениях МСМ определяют повышение показателей межуточного обмена в 75% корреляционных взаимозависимостей.

4. Установлено снижение активности глутатионтрансферазы (фермента второй стадии биотрансформации) как в крови больных дерматозами, так и в эксперименте на эритроцитах in vitro. Этот факт и выявление определяющего влияния МСМ на активность ГТФ при расчете корреляционных взаимоотношений доказывает возможность непосредственного воздействия эндотоксинов на процессы биотрансформации.

5. Доказано, что эндогенная интоксикация при морфо-функциональных изменениях в коже является результатом дисбаланса между накоплением эндотоксинов и их выведением. Об этом свидетельствует снижение эффективной концентрации альбумина, его резервной связывающей способности, а также нарушение функциональной активности липид-транспортной системы.

6. Обнаружено, что спектр молекул средней массы, экстрагированных из измененного эпидермиса, отличается от спектра МСМ плазмы крови преимущественным содержанием продуктов нуклеопротеидного обмена. Это отражает процессы неспецифического протеолиза в очаге повреждения и создает условия для накопления в организме определенных олигопептидов токсического характера.

7. В эксперименте in vitro установлены механизмы токсического влияния МСМ, выделенных из измененной кожи и плазмы крови больных дерматозами. Они заключаются в том, что при добавлении МСМ к эритроцитам у здоровых лиц инициируются процессы ПОЛ и увеличивается сорбционная емкость эритроцитов, а у больных - ПОЛ угнетается и сорбционная емкость снижается.

8. Установлено, что традиционная терапия дерматозов не приводит к нормализации уровня эндотоксемии, а применение цитостатических препаратов, подавляющих гиперпролиферацию в эпидермисе (метотрексат), усугубляет процессы эндогенной интоксикации.

9. Доказано, что применение энтеросорбентов достоверно снижает эндогенную интоксикацию организма, уменьшает токсическое влияние цитотоксических лекарственных препаратов, способствует клиническому выздоровлению и улучшает качество жизни больных.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ

Обобщая приведенные в настоящем обзоре сведения, можно заключить, что проблема эндогенной интоксикации организма человека в норме, при изменяющихся условиях существования, связанных с антропогенными воздействиями, и при развитии патологии является одной из наиболее обсуждаемых в настоящее время. Начиная с 1994 года, когда был проведен Международный симпозиум в г.Санкт-Перербурге, эндогенная интоксикация получила официальный статус. За это время данное направление стало одним из ведущих в области количественного и качественного определения эндотоксинов, с помощью которого выявляются химические и биологические соединения различной природы, обладающие мембранотропным действием.

Несмотря на то, что этой проблеме уделяется недостаточно внимания в зарубежной литературе, продолжающиеся исследования отечественных авторов дополняют уже сложившуюся картину новыми фактами. В последние годы открыты гены детоксикации человека, новые механизмы ступенчатого протеолиза и биотрансформации, белки кожи, обладающие противомикроб-ным действием, суперантигены и др.

Изучаются субстраты, маркеры, компоненты, стадии развития эндоин-токсикации при этиологически различных заболеваниях. Выявляются механизмы повреждающего действия молекул средней массы. Обсуждаются вопросы об участии эндогенной интоксикации в патогенезе целого ряда заболеваний. Современный этап исследования - это расширение списка потенциальных эндотоксинов и изучение их специфических эффектов при самых разных заболеваниях. Особый интерес представляет изучение эндогенной интоксикации при состояниях, не являющихся угрозой существованию, но значительно ухудшающих качество жизни больного. Потому, что в данных ситуациях, за видимым благополучием скрывается возможность длительной хронизации патологического процесса. Это ставит задачи разработки и внедрения современных, высокоэффективных методов детоксикации и нейтрализации побочных воздействий на организм сильно действующих лекарственных средств.

В последние годы проявляется большая заинтересованность и в изучении процессов эндогенной интоксикации при дерматозах. Однако проведенные к настоящему времени исследования в целом однонаправленны и лишь свидетельствуют о наличии эндотоксемии разной степени выраженности при различных видах кожной патологии. При этом, в комплекс показателей, определяющих развитие ЭИ, включаются продукты ПОЛ, нарушения гуморального иммунитета, активация протеолитических систем, приводящая к структурным нарушениям клеточных мембран, и ряд других показателей. На наш взгляд, появилась необходимость на основе этих исследований выявить общебиологические закономерности и особенности развития ЭИ при дерматозах разного генеза, установить возможные связи между показателями эндотоксемии и межуточного обмена с выяснением возможных механизмов их взаимодействия. В доступной нам литературе мы не встретили исследований по комплексной оценке состояния систем биотрансформации и биотранспорта эндотоксинов при хронических, торпидно протекающих дерматозах, а это важно для оценки эффективности проводимой терапии. Представляется важным изучение «токсического» потенциала МСМ, выделенных из поврежденной кожи и плазмы крови больных дерматозами, и оценка степени его влияния на формирование эндогенной интоксикации. Учитывая известные побочные эффекты цитостатиков и кортикостероидов, широко применяемых в лечении больных дерматозами, может оказаться важным исследование их вклада в развитие ЭИ. И, наконец, необходимо сформулировать представление о месте и роли эндогенной интоксикации в патогенезе различных дерматозов, для того, чтобы использовать его при разработке адекватных и необходимых методов их лечения. Поставленные вопросы были предметом изучения в настоящей работе.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект исследования

С целью выявления особенностей формирования эндогенной интоксикации (ЭИ) организма при заболеваниях, сопровождающихся морфо-функциональными нарушениями в коже, развитием воспаления кожных покровов и, вследствие этого, появлением измененного эпидермиса, нами было проведено системное изучение некоторых показателей ЭИ и ряда биохимических маркеров гуморального гомеостаза, меняющихся при дерматозах.

Изучены различные биологические субстраты: плазма и эритроциты крови, моча, пузырная жидкость, измененный эпидермис. Кровь для исследования была получена от больных различными видами дерматозов и практически здоровых лиц. По патогенетическим механизмам развития нами выделено три группы дерматозов: 1 группа - гиперпролиферативные заболевания, включила больных псориазом и эритродермиями; 2 группа - аллергоде-матозы, включила больных атопическим дерматитом и микробной экземой; 3 группа - аутоиммунные заболевания - больные пузырчаткой.

Всего обследовано 344 больных, из них 124 - с псориазом, 79 - с атопическим дерматитом, 50 - с эритродермиями различного генеза, 44 - с пузырчаткой, 47 - с микробной экземой. Выбор данных заболеваний был обусловлен наличием как общих физиологических и патофизиологических механизмов формирования болезни (воспаление), так и специфических особенностей (аутоиммунные нарушения при пузырчатке, аллергический компонент при атопическом дерматите, иммунокомплексные и обменные процессы при псориазе, микробное заражение при экземе). Обследованные больные находились на стационарном лечении в клинике научно-исследовательского кожно-венерологического института г. Н.Новгорода. Диагноз заболевания ставился на основании общепринятых клинических критериев [125], верифицирован высококвалифицированными дерматологами отделения общей дерматологии д.м.н. Химкина JI.H., к.м.н. Пантелеева Г.А.), согласован профессором Никулиным Н.К., подтвержден гистохимически.

Псориаз - это мультифакториальный дерматоз, характеризующийся гиперпролиферацией эпидермальных клеток, нарушением кератинизации, воспалительной реакцией в дерме и выраженными нарушениями обменных процессов [85,125].

Атопический дерматит - экозависимый воспалительный дерматоз; относится к многофакторным заболеваниям с полигенной предрасположенностью; имеет хроническое рецидивирующее течение; в патогенезе большое значение имеет антигенная стимуляция [260].

Эритродермии - универсальное поражение кожных покровов, причиной которого могут быть различные кожные заболевания: псориаз, экземы, лим-фомы кожи, токсикодермии и др. [4].

Микробная экзема - хронический рецидивирующий аллергодерматоз, характеризующийся сенсибилизацией к бактериальным антигенам; возникает на фоне соматической патологии, нейроэндокринных, сосудистых и иммунных нарушений [197].

Пузырчатка представляет собой, как правило, тяжелое аутоиммунное заболевание с образованием аутоантител против межклеточной субстанции эпидермиса [261].

Контрольную группу составили 95 практически здоровых лиц без признаков кожной патологии. В ряде методов в качестве контроля использовались образцы донорской крови, полученные на Нижегородской областной станции переливания крови.

В исследованную группу больных вошли 147 мужчин, 137 женщин, 60 детей. Возраст взрослых больных дерматозами составил от 18 до 79 лет. При этом, старше 60 лет было 16% обследованных. Биохимические показатели этих больных оценивались с учетом возрастной нормы, представленной в диагностических справочниках. Средний возраст детей составил 11,5±0,51 лет.

Возраст обследованных контрольной группы сопоставим с возрастом основной группы взрослых больных (до 60 лет). Нормативы для группы детей были предоставлены Нижегородским НИИ детской гастроэнтерологии [294].

2.2. Методы исследования

Методы биохимических исследований, использованные в работе, и количество проведенных анализов представлены в таблице 2 приложения.

Наличие эндогенной интоксикации оценивалось путем определения общего уровня молекул средней массы (МСМ), их отдельных составляющих и олигопептидов в плазме, эритроцитах крови, моче, измененном эпидермисе, пузырной жидкости. Олигопептиды в составе МСМ определялись колориметрическим методом Лоури.

Комплекс показателей для характеристики метаболического статуса больных дерматозами включал:

- содержание белковых фракций и иммуноглобулинов в сыворотке крови для оценки состояния протеиновой системы;

- количество циркулирующих иммунных комплексов разной дисперсности для характеристики напряженности гуморального иммунитета;

- интенсивность процессов перекисного окисления липидов по уровню в плазме и эритроцитах крови первичных продуктов (диеновых коньюга-тов) и вторичных продуктов (малонового диальдегида);

- состояние антиоксидантной защиты по активности эритроцитарных фракций ферментов глутатионпероксидазы и супероксиддисмутазы, а также по количеству медь-содержащего белка - церулоплазмина;

- напряженность катаболических процессов по уровню в сыворотке крови продуктов белкового катаболизма - мочевой кислоты и креатинина;

- интенсивность протеолитических процессов по уровню универсального ингибитора протеолиза - а2-макроглобулина;

- уровень в крови регуляторного пептида гистамина по гистамин-пексическому индексу, отражающему способность альбумина связывать биогенные амины;

- метаболизм липидов при анализе липидных фракций, идентифицированных методом тонкослойной хроматографии; определялись нейтральные липиды, фосфолипиды, неэтерифицированные жирные кислоты.

Оценка состояния систем биотрансформации эндотоксинов проводилась по результатам изучения активности одного из ключевых ферментов - глутати-онтрансферазы в плазме и эритроцитах крови, сорбционной емкости мембран эритроцитов и связывающей способности альбумина.

Определение общего уровня молекул средней массы и их отдельных составляющих

В настоящее время содержание в крови молекул средней массы считается основным и адекватным тестом определения степени эндотоксикоза организма. Рядом авторов предложено включение его в комплекс показателей, определяющих «уровень» здоровья [161,177]. Это связано с тем, что в состав МСМ входит большое количество веществ - маркеров физиологического и измененного метаболизма. Качественная и количественная оценка спектра этих соединений в разных биологических средах позволяет определять не только степень разбалансированности биохимического гомеостаза, но и состояние систем естественной детоксикации, нарушения нейрорегуляторных и гормональных функций организма, определять механизмы развития заболевания.

В нашей работе были использованы два подхода к выделению фракции МСМ из биологических субстратов.

1. Метод М.Я.Малаховой [174], который основан на способности 15% раствора трихлоруксусной кислоты осаждать крупно-молекулярные белки сыворотки крови (размер молекул более 5000Д). Кислота изменяет третичную и четвертичную структуру белка, в результате чего он денатурирует и выпадает в осадок. В надосадочной жидкости остаются вещества низкой и средней молекулярной массы с размером молекул от 300 до 5000Д. На спектрофотометре измеряется величина светопоглощения супернатанта в ультрафиолетовом диапазоне длин волн 238 - 298 нм. Схема анализа - см. приложение (1). Расчет конечного результата производят путем интегрального измерения площади фигуры, образованной полученными значениями экстинкций, путем умножения суммы полученных значений на шаг длины волны - 4 нм: IMCM = (Е238 + Е242 + Е246 +.+ Е298) * 4 (усл.ед) В общем спектре (см. рис. 5) МСМ различают два пула: катаболический пул - сумма экстинкций Е238 - Е258 нм, анаболический пул - сумма экстинкций Е262 - Е298 нм.

Е 242 282

0,8 Л\ 258

0,7 1 моча \/ ' X jr

0,6 0,5 1 / эритроциты \ Рис. 5. Спектрограммы плазмы

0,4 крови, эритроцитов и мочи в норме

0,3 0,2 J j ,282 1 при осаждении крупномолекулярных белков 15,0% раствором ТХУ

0,1 о

238 258 282 X (нм)

Для получения более полной информации предлагается дополнительный расчет диагностических коэффициентов:

Коэффициент распределения эндогенной интоксикации

КРЭИ = ХМСМпл/ХМСМэр характеризует степень перераспределения эндотоксинов между плазмой и эритроцитами крови;

Коэффициент степени эндогенной интоксикации

КСЭИ = ХМСМпл + ЕМСМэр / ЦМСМмочи характеризует уровень накопления и выведения эндотоксинов в организме;

Коэффициент соотношения пулов МСМ = (Е238 + .+ Е258) / (Е262 Е298) характеризует степень взаимовлияния процессов катаболизма и протеолиза.

2. Метод В.В.Николайчика с соавт. [195] основан на использовании в качестве осадителя крупномолекулярных белков 0,2М хлорной кислоты (ХК). ХК позволяет более полно идентифицировать фракцию МСМ, содержащую катаболические продукты общего пула этих веществ (ВНСММ). Это утверждение базируется на том факте, что ТХУ значительно больше поглощает свет в области 220-238 нм, чем хлорная кислота и поэтому не дает возможности полной оценки состава МСМ. Схема проведения анализа и конечные расчеты количества МСМ и их пулов аналогичны первому методу.

Нами проведено сравнение суммарных количеств МСМ, выделенных с использованием двух кислот в одних и тех же образцах плазмы и эритроцитов крови. Данные представлены в таблице и на рисунках 6 и 7.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Копытова, Татьяна Викторовна, Нижний Новгород

1. Авдеева, М.Г. Интерлейкины и факторы роста / М.Г.Авдеева, В.В.Лебедев, М.Г.Шубич . Краснодар, 1995. - 126 с.

2. Авдеева, М.Г. Патогенетичееские механизмы синдрома системного воспалительного ответа / М.Г.Авдеева, М.Г.Шубич // Клин. лаб. диагностика. 2003. - N6. - С.3-10.

3. Агаджанян, Н.А. Экология человека и концепция выживания / Н.А.Агаджанян, А.И.Воложин, Е.В.Ефстафьева. 2001. -М.: ГОУВУНМЦМЗРФ. -240 с.

4. Адаскевич, В.П. Клиническая характеристика эритродермий / В.П.Адаскевич //VIII Всерос. съезд дерматовенерологов: тез. науч. работ. М., 2001.-С.67.

5. Аладиашвили, Н.З. Электрофоретическая подвижность эритроцитов периферической крови у детей с неспецифическими воспалительными заболеваниями / Н.З.Аладиашвили, О.В.Попова, Т.Г.Сарычева // Клин. лаб. диагн. 2005. -№10.-С. 52-54.

6. Алферов, В.П. Интоксикация у детей, больных бронхиальной астмой / В.П.Алферов, М.Я.Малахова // Вестник новых медицинских технологий. 2001. -№1.-С.53-56.

7. Арифов, С.С. Состояние синдрома эндоинтоксикации у больных вульгарными угрями / С.САрифов., Д.Б.Шадиев., Ш.МКабулов // VIII Всерос. Съезд дерматовенерологов: Тез. науч. работ. М., 2001.- Часть 1.- С. 157.

8. Аронскинд, Е.В. Оптимизация клинико-лабораторных критериев диагностики полиорганной недостаточности у новорожденных детей: Автореф. дис. . канд. мед. наук / Е.В .Аронскинд. Екатеринбург, 2000. - 23 с.

9. Артеменко, А.Г. Оптимизация методики индикации токсемии / А.Г.Ар-теменко, О.Г Кузьмина, С.И. Карпова // Нижег. Мед. Журнал. 2000.- №2. - С. 6869.

10. Асташова, Т.А. Хромато-масс-спектрофотометрический анализ продуктов ПОЛ в органах и тканях в условиях модели токсикоза / Т.ААсташова, В.В. Асташов, С.В.Морозов // Вопр. биол. мед.и фарм. химии. 1998. - №4. - С.52 - 55.

11. Афанасьева, А.Н. Сравнительная оценка уровня эндогенной интоксикации у лиц разных возрастных групп / А.Н.Афанасьева // Клин. лаб. диагн. -2004.-№6.-С. 11-12.

12. Афанасьева, А.Н. Эндогенная интоксикация у больных раком желудка в раннем послеоперационном периоде / А.Н.Афанасьева, В.А.Евтушенко. //Клин, лаб. диагн. 2005. - №2. - С. 18 - 21.

13. Ачикова, Е.Ю. Роль альфа-2-макроглобулина в диагностике при кардио-хирургических вмешательствах в условиях искусственного кровообращения /Е.Ю. Ачикова., П.А.Дубикайтис., А.Ю.Дубикайтис //Эфф. Тер. 1997. - №4. - С. 27 - 31.

14. Баддинов, О.В. Современные представления о патогенезе эндотоксикоза постравматического генеза/ О.В.Баддинов., В.Д.Лукьянчук., Л.В.Савченкова //Соучастш проблеми токсикологи. 2003. - №4. - С. 25 - 30.

15. Балаболкин, И.И. Экология и аллергические болезни /И.И.Балаболкин //111 Конгресс педиатров России: тез.докл. М, 1998. - С. 59 - 60.

16. Балтабаев, M.K. Функция печени и применение билигнина в комплексной терапии псориаза /М.К.Балтабаев, К.Д.Джалалов //Эффер.тер. -1996.-№3.- С.48-53.

17. Балтабаев, М.К. Псориаз и метаболизм желчных кислот / М.К.Балтабаев, Ш.А.Хамидов, У.А.Валиханов // Вестник дерм, и венерол. -2005. №4. - С.25 - 28.

18. Барабанов, А.П. Иммунные и метаболические нарушения в патогенезе экземы /А.П.Барабанов, В.Г.Панкратов // IX Всерос. съезд дерматовенерологов: тез. науч. работ. М., 2005. -Т 1. - С 5.

19. Баранов, B.C. Геном человека и гены "предрасположенности" / В.С.Баранов, Е.В.Баранова, Т.Э.Иващенко, М.В.Асеев // Введение в предиктивную медицину. 2000. - СПб. - 272 с.

20. Беляков, Н.А. Верификация эндотоксикоза у больных с разлитым перитонитом /Н.А.Беляков, А.Г.Мирошниченко // Эфф. тер. 1995. - №2. - С. 14 - 20.

21. Беляков, Н.А. Энтеросорбция механизмы лечебного действия /Н.А.Беляков, А.В.Соломенников, И.Н.Журавлева // Эфф. тер. - 1997. - №2. - 20 - 26.

22. Беляков, Н.А. Эндогенные интоксикации и лимфатическая система / Н.А. Беляков //Эфф. тер. 1998. - N2. - С. 10 - 17.

23. Бессемельцев, Б.А. Токсемический синдром при злокачественных заболеваниях системы крови и методы борьбы с ним / Б.А,Бессемельцев., Т.Г.Абдул-кадыров // Эфф. тер. 2002. - №1. - С. 2 - 13.

24. Болотников, И.А Биохимические аспекты иммунологических реакций / И.А.Болотников, Н.А.Добротина, С.Н.Лызлова. Петразоводск, 1989.-98 с.

25. Бондарь, С.А. Значение эндогенной интоксикации в патогенезе экземы и ее коррекция комплексной терапией с включением сорбента / С.А.Бондарь, И.Н.Ляшенко, Н.В. Луцюк // Вестн. дерм, и венерол. 1992. - №8. - С. 49 - 52.

26. Бурмистров, С.О. Значение определения средних молекул в моче при нормальной и осложненной беременности и у новорожденных с гипоксией / С.О. Бурмистров, К.А.Габелова, А.А.Андреева //Клин. лаб. диагн,- 2001.- №5.- С.10-13.

27. Васильев, И.Т. Механизм развития эндотоксикоза при острых гнойных заболеваниях органов брюшной полости / И.Т.Васильев. // Хирургия. 1995.- №2. -С. 54-58.

28. Васильева Л.А Определение тяжести эндогенной интоксикации по уровню средне-молекулярных пептидов / Л.А Васильева, О.Н.Лопаткин, Ю.Е Морозов // Суд. мед. экспертиза. 2004. - №4. - С. 18 - 21.

29. Величковский, Б.Т. Свободно-радикальное окисление как звено срочной и долговременной адаптации организма к факторам окружающей среды / Б.Т Величковский //Вестн. Акад. мед. наук. 2001. - N9. - С. 45 - 52.

30. Величковский, Б.Т. О патогенетическом направлении изучения влияния факторов окружающей среды на здоровье населения / Б.Т.Величковский // Вестник Академии мед наук.- 2003. №3. - С. 3 - 8.

31. Вельдман, Б.М. Средне-молекулярные пептиды крови как эндогенные регуляторы перекисного окисления липидов в норме и при термических ожогах / Б.М. Вельдман//Вопр. мед. химии. -1991. №1. - С. 23-26.

32. Венгеровский, А.И. Влияние легалона и лохеина на эффекты преднизо-лона при экспериментальном токсическом гепатите / А.И.Венгеровский, М.Ю.Коваленко // Хим. фарм. журнал. 1998. - №9. - С. 12 -14.

33. Венгеровский, А.И. Терапевтическая эффективность энтеросорбентов при экспериментальном токсическом гепатите / А.И.Венгеровский, Е.Л.Головина, В.С.Чучалин // Эфф. тер. 2000. - №1. - С. 47 - 49.

34. Вербенко, Е.В. Изучение перекисного окисления липидов у больных псориазом / Е.В.Вербенко, М.Н.Ежова // 7 Российский съезд дерматологов и венерологов: тез. докл. Часть 1. Казань, 1996.-С. 165 - 166.

35. Веременко, К.Н. Протеолиз в норме и при патологии / К.НВеременко, О.П.Белобородько, А.Н.Глушин. Киев. - 1998. - 120 с.

36. Ветров, В.В. Этиология гестоза с позиций учения о синдроме эндогенной интоксикации / В.В. Ветров //Эфф. тер. 2004. - №2. - С. 5 - 10.

37. Викторов, А.В. Связывание липополисахарида и комплексов липополи-сахарида с сывороточными липопротеинами низкой плотности с макрофагами печени /А.В.Викторов, В.А.Юркис // Биомед. химия. 2006. - Вып. 1. - С. 36 - 44.

38. Владимиров, В.В. Современные представления о псориазе и методы его лечения / В.В.Владимиров, Л.В.Меньшикова // Рос. мед. ж. 1998.-Т.20.- С. 8 - 13.

39. Владимиров, Ю.А. Свободно-радикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран / Ю. А .Владимиров // Биофизика. 1987. - №4. - С. 489-501.

40. Владимиров, Ю.А. Свбодные радикалы в биологических системах / Ю.АБладимиров // Соросовский образов, журнал. 2000. - №12. - С. 13 -19.

41. Владыка, А.С. Средние молекулы и проблема эндогенной интоксикации при критических состояниях различной этиологии / А.С. Владыка, Э.Р.Левицкий, Л.П.Поддубная // Анестезиология и реаниматология. 1987. - N2. - С. 3 - 9.

42. Воеводин, ДА. Роль дисбакгериоза в формировании хронической неинфекционной патологии у детей / Д.А. Воеводин, Г.Н.Розанова, М.А.Стенина // Журнал микробиологии. 2001. - №5. - С. 88 - 93.

43. Волик, А.П. Синдром эндоинтоксикации и возможность его терапевтической коррекции при хронических дерматозах / А.П.Волик, Н.И.Рассказов, В.Н.Бучин // VIII Всерос. съезд дерматовенерологов: тез. науч. работ; часть 1. -М., 2001.-С. 198.

44. Волчегорский, И.А.О патогенетическом значении антиоксидантных свойств средне-молекулярных пептидов при термических ожогах / И.А.Волчегор-ский, Б.М.Вальдман, Н.А.Скобелева // Вопр. мед химии. -1991. №2.- С. 28 - 32.

45. Воронина Я.Ю. Комплексная терапия больных псориазом с применением селективных ингибиторов обратного захвата серотонина: Автореф. дис. канд. мед. наук /Я.Ю.Воронина. М, 2006.- 20 с.

46. Габриелян, Н.И. Гипотеза средних молекул в практике клинической нефрологии / Н.И.Габриелян, Э.Р.Левицкий, О.И.Щербакова // Терапевт, арх. -1983.-N6.-С. 76-78.

47. Гаврилов, В.Б. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови / В.Б. Гаврилов, М.И.Мищкорудная //Лабдело.- 1983,-№3,- С. 33-35.

48. Гаврилов, В.Б. Способ определения малонового диальдегида в сыворотке крови по реакции с тиобарбитуровой кислотой // В.Б.Гаврилов, А.Р.Гаврилова, A.M. Мажуль//Вопросы мед. химии. 1987. - №1. - С. 118-121.

49. Гаврилов, В.Б Оценка интоксикации организма по нарушению баланса между накоплением и связыванием токсинов в плазме крови / В.Б.Гаврилов, М.М. Бидула, Д.А.Фурманчук, С.В.Конев //Клин. лаб. диагн.- 1999. №.2.- С. 13-17.

50. Гаврилов, В.Б. Определение тирозин и триптофан содержащих пептидов в плазме крови по поглощения в УФ-области спектра / В.Б.Гаврилов, Н.Ф.Лобко, С.В.Конев // Клин, лаб диагн. 2004. - №3. - С. 12 -16.

51. Галактионов, С.Г. Бластолизин как протектор клеточных мембран от модификации, вызываемых пептидами группы средних молекул. / С.Г.Галактионов, Л.М.Михеева, В.М.Юрин //Бюлл. эксп. биол. и мед. 1986. - № 3.-С. 381-383.

52. Галебская, Л.В. Биохимия барьерной функции кератиноцита /Л.В.Галеб-ская //Вопр. биол. мед. и фарм. химии.- 2003.- №4. С. 21 - 27.

53. Гараева, З.И. Использование энтеросорбентов и пробиотиков в терапии псориаза / З.И.Гараева, О.Д.Зинкевич //Тез. науч. работ научно-практич. конф. "Актуальные проблемы дерматовенерологии, XXI век". Казань, 2003.- С. 18 -19.

54. Гараева, З.И. Результаты мониторинга показателей эндогенной интоксикации и антиэндотоксинового иммунитета у больных псориазом в процессе их лечения // Всерос. конф. дерматовенерологов: тез. науч. работ. Н.Новгород, 2004.-С. 8.

55. Геннис, Р. Биомембраны. Молекулярная структура и функции: пер. с англ. /Р.Геннис.- М: Мир, 1997. 624 с.

56. Гетлинг, З.М. Ультраструктурные изменения нервных волокон кожи при псориазе. / З.М.Гетлинг, В.И.Альбанова, В.Н.Мордовцев //Вестник дерматологии и венерологии. 1990. - №12. - С. 7 - 11.

57. Гланц, С. Медико-биологическая статистика /С.Гланц.- М., 1999. 459 с.

58. Гончаренко, М.С. Состояние и роль свободно-радикальных процессов у больных псориазом /М.С.Гончаренко // Вестник дерматологии. 1983.- №6.- С. 7 -И.

59. Гончаренко, М.С. Метод оценки перекисного окисления липидов / М.С. Гончаренко //Лаб. дело. 1985. - №1. - С. 60 - 61.

60. Гончар-Зайкина, Г.М. К оценке лабораторной диагностики эндотоксико-за /Гончар-Зайкина Г.М., Гончар-Зайкин А.П. //Мой врачебный журнал.-2001. (цитировано с сайта http://esculapus. hl.ru.).

61. Гончарова, Е.И. Белки цитоскелета эритроцитов / Е.И.Гончарова, Г.Л. Пинаев //Цитология. 1988. - №1. - С. 5 -18.

62. Гостищев, В.К. Перитонит / В.К.Гостищев, В.П.Сажин, А.П.Авдовенко.-М., 1992.- 150 с.

63. Григорюк, Г.П. Пектины из коры лиственницы сибирской /Г.А.Грюгорюк, Т.Э.Еремеева, М.С.Бессонова //Всесоюз. конф. «Химическиепревращения пищевых полимеров»: тез.докл. Святогорск, 1991. - С. 165.

64. Грибанов, Г.А. Особенности структуры и биологическая роль лизофос-фолипидов / Г.А.Грибанов //Вопр. мед. химии. -1991. №4. - С. 2 -10.

65. Гриневич, Ю.А. Определение иммунных комплексов в крови онкологических больных / Ю.А.Гриневич, А.Н.Алферов // Лаб. дело.- 1981.- 8.- С. 493 -495.

66. Гришкин, В.А. Эндогенная интоксикация и нарушения метаболического гомеостаза при пероральном дерматите / В.А.Гришкин // 1 Всероссийский конгресс дерматовенерологов: тез. науч. работ: т.1.- СПб, 2003. С. 33.

67. Громов, М.И. Коррекция расстройств гомеостаза современными технологиями лечения /М.И.Громов // Усп. соврем, естеств. 2003. - №4. - С. 36 - 37.

68. Грызунов, Ю.А. Альбумин сыворотки крови в клинической медицине / Ю.А.Грызунов, Г.Е.Добрецов. М.: ГОЭТАР, 1998. - 442 с.

69. Дадали, В.А. Структурные аспекты активирующего действия ароматических дисульфидов на глутатионтрансферазную систему эритроцитов крыс. Часть 1 /В.А.Дадали, М.Н.Смертина // Вопр. биол., мед. и фармац. химии. 2002. - №3. -С. 20-24.

70. Дадали, В.А. Структурные аспекты активирующего действия ароматических дисульфидов на глутатионтрансферазную систему эритроцитов крыс. Часть 2 / В.А.Дадали, М.Н.Смертина // Вопр. биол., мед. и фармац. химии. 2003. - №1. -С. 17-21.

71. Денисова, О.В. Общая и эффективная концентрация альбумина как метод оценки эндогенной интоксикации / О.В.Денисова, И.АВолкова. // Клин. лаб. диагн. 1999. - №9. - С. 18-22.

72. Джуртубаева, Д.И. Содержание средне-молекулярных пептидов плазмы крови у больных острым вирусным гепатитом В+С / Д.И.Джуртубаева //Усп. соврем. естеств. 2003. - №6. - С. 47.

73. Диагностическая ценность оценки проницаемости мембран эритроцитов в качестве критерия интоксикационного синдрома./ Петросян Э.А. и др. // Клин, лаб. диагн. 2001. - №8.- С. 5 - 8.

74. Дикова, О.В. Роль свободных радикалов и состояния эндотоксикоза в патогенезе экземы / О.В .Дикова, С.В.Селиванова // VIII Всерос. съезд дерматовенерологов: тез. науч. работ: часть1.- М., 2001. С. 125.

75. Дикова, О.В. Эмоксипин в комплексной стандартной терапии псориаза и экземы / О.В.Дикова, В.В.Бойтаков, Г.Э.Чачанидзе // IX Всерос. съезд дерматовенерологов: тез. науч. работ: т. 1. М, 2005.- С 11.

76. Добротина, Н.А Протеиновая система сыворотки крови, ее значение в оценке патогенеза дерматозов и реактивности организма: Дис. . докт. мед. наук / Н.А.Добротина. М. 1974. - 380 с.

77. Добротина, Н.А. Современное течение дерматозов у детей как экотоксической патологии /Н.А.Добротина, Л.Н.Химкина, Г.Н.Нефедьева // Экология человека. 1996. - №2. - С. 48 - 49.

78. Добротина, Н.А. Биотехнология современной диагностики эндоинтокси-кации организма человека /Н.А. Добротина, Л.Н.Химкина, А.А.Черников // Вестник Верхне-Волжского отд. Акад. технол. наук Росс. Федерации. 1997. - №4. - С. 39-43.

79. Добротина, Н.А Биология человека, экология и здоровье / Н.А Добротина. Н.Новгород, 1999. - 247 с.

80. Добротина,Н.А. Здоровое питание и качество жизни / Н.А. Добротина, Т.А.Ускова. Н.Новгород, 2003.-333 с.

81. Добротина Н.А. Эндоинтоксикация организма человека. Методические и методологические аспекты /Н.А.Добротина, Т.В.Копытова.- Н.Новгород, 2004.70 с.

82. Довжанский, С.И. Псориаз или псориатическая болезнь. Часть 1 /С.И.Довжанский, С.Р.Утц. Саратов, 1992. - 173 с.

83. Долгушин, И.И. Иммунология травмы / И.И.Долгушин, ЛЛ.Эберт, Р.И.Лифшиц. Свердловск. - 1989. - 269 с.

84. Дорохин, К.М. Патофизиологические аспекты эндогенной интоксикации / К.М.Дорохин, В.В.Спас // Анастез. и реаним. 1994. - №1. - С. 56 - 60.

85. Дубикайтис, А.Ю. Роль процессов перекисного окисления липидов в течении синдрома эндогенной интоксикации / А.Ю.Дубикайтис, С.Г.Конюхова, М.В.Белоцерковский // Эфф. тер. 1995. - №1. - С. 31 - 35.

86. Дубинина, Е.Е. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод ее определения / Е.Е.Дубинина, С.О.Бурмистров, Д.А.Ходов, И.Г Портов //Вопр. мед. химии. 1995. - № 5. - С. 24 - 26.

87. Дубровин, С.М. Альфа-2-макроглобулин: современное состояние вопроса (обзор литературы) / С.М.Дубровин, А.В.Муромцев, Л.И.Новикова // Клин, лаб. диагн. 2000. - №6. - С. 3 - 7.

88. Ерохин Н.А. Эндотоксикоз как проблема клинической хирургии / Н.А.Ерохин, О.С.Насонкин // Вестн. хирургии. 1989. - N3. - С. 3 - 7.

89. Еськов А.П. Скрининг токичности биологических жидкостей / А.П.Есь-ков, Р.И. Каюмов, А.Е. Соколов //Клин. лаб. диагн. 2002. - №5. - С. 45 - 47.

90. Ефременко, Ю.Р. Протеолитические ферменты в клинической лабораторной диагностике / Ю.Р.Ефременко, К.Н.Конторщикова //Учебное пособие. -Н.Новгород,2003. 23 с.

91. Жибурт, Е.Б. Иммуномодулирующий эффект ультрафиолетового облучения крови при экспериментальной эндотоксемии / Е.Б. Жибурт, Н.Б.Серебря-ная, Е.Н.Рождественская //цитировано с сайта www.biomed.spb.ru/cgi-bin/sort.plses.- 1997.

92. Жолдакова, З.И. Прогноз опасности веществ по зависимости структура-биотрансформация-активность /З.И.Жолдакова, Н.В.Харчевникова // Ж. рос. об-ва им. Д.И.Менделеева. 2004. - №2. - С. 16 - 24.

93. Жлоба, А.А. Изучение свойств и выявление экспрессиии рецептора активированного альфа-2-макроглобулиначеловека/ А.А. Жлоба, С.Ю.Иванова// Клин. лаб. диагн. 2002. - №4. с. 7 -11.

94. Загртдинова, P.M. Патогенетическая роль нарушений общих и тканевых регуляторных механизмов при псориазе и возможности их терапевтической коррекции: Автореф. дис. . докт. мед. наук. /Р.М.Загртдинова.- М., 2006.-42 с.

95. Зверькова, Ф.А. Роль эндогенной интоксикации в патогенезе атопического дерматита у детей / Ф.А. Зверькова, A.M. Левина // Атопический дерматит у детей: тез. докл. конф.- Екатеринбург, 1994. С. 12 -13.

96. Зильбер, А.П. Этюды критической медицины. Кн. 1. Общие проблемы. Медицина критических состояний / А.П. Зильбер. Петрозаводск, 1995. - 360 с.

97. Змушко, Е.И. Клиническая иммунология /Е.И.Змушко, Е.С.Белозеров, Ю.А.Митин. СПб, 2000. - 320 с.

98. Змушко, Е.И. Медикаментозные осложнения / Е.И.Змушко, Е.С.Белозеров. СПб., 2001. - 448 с.

99. Зорин, Н.А Универсальный регулятор альфа-2-макроглобулин (обзор литературы) / Н.АЗорин, В.Н.Зорина, Р.М.Зорина // Клин. лаб. диагн. - 2004. -№11.-С. 18-22.

100. Зубаткина, О.В. Критерии метаболической стабильности / О.В.Зубатки-на, МЛ. Малахова // Эфф. тер. 2002. - №4, С. 55 - 60.

101. Зуева, Т.В., Диагностика синдрома эндогенной интоксикации при хронической почечной недостаточности / Т.В.Зуева, В.А. Шалаев, А.В.Назаров, Т.В. Жданова // Нижег. мед. журнал. 2005. - №3. - С. 104 - 108.

102. Иванова, И.Л. Исследования биологических жидкостей у детей с заболеваниями респираторной системы / И.Л.Иванова, В.Н.Лучанинова, Л.Г.Гнеденкова // Клин. лаб. диагн. 1992. - №7 - 8.- С. 45 - 47.

103. Иващенко, Т.Э. Генетические факторы предрасположенности к бронхиальной астме / Т.Э.Иващенко, О.Г.Сиделева, М.А.Петрова // Генетика. 2001. -Т.37.-С. 107-111.

104. Исаков, С.А.Активность супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпе-роксидазы у больных атопическим дерматитом и хронической экземой как показатель свободно-радикального статуса крови / С.А.Исаков //Вестн.дерм. и венер.-2005. №4. - С. 37 - 40.

105. Карелин, А.А. Эндогенная протеолитическая деградация гемоглобина и образование биологически активных пептидов /А.А.Карелин, М.М.Филиппова, В.Т.Иванов // IV симпозиум «Химия протеолитических ферментов»: тез.докл. -М, 1997.-С.21.

106. Каркищенко, Н.Н. Лекарственная профилактика в повышении популя-ционной резистентности к биологическим факторам / Каркищенко Н.Н // Вестник Академии мед. наук. 2002. - №11. - С. 19 - 24.

107. Кешилева З.Б. Различные типы липопротеидемий у больных псориазом / З.Б.Кешилева, А.Б.Косухин, Л.Г.Полевая, Ж.А.Нусупова // Вестник дерм, и венерол. 1990. - №2. - С. 7 - И.

108. Киселева, Р.Е. Биохимические аспекты эндотоксикоза / Р.Е.Киселева, Н.В.Альба, Л.В.Кузьмичева, Д.Л.Альба. Саранск, 2002. - 104 с.

109. Киселева, Р.Е. Современные аспекты эндотоксикоза / Р.Е.Киселева //

110. Усп. соврем, естеств. 2006.- №6.- С. 74.

111. Китаева, И.И. Психоневрологические синдромы у больных псориазом / И.И.Китаева: Автореф. дисканд. мед. наук. Н.Новгород, 2003.- 26 с.

112. Кишкун, А.А. Значение средних молекул в оценке уровня эндогенной интоксикации: обзор литературы / АА.Кишкун, А.С.Кудинова, А.Д.Офитова // Военно-мед. журнал. 1990. - №2. - С. 41 - 44.

113. Ким, Л.Б. Диагностическое и прогностическое значение сывороточного церулоплазмина / Л.Б.Ким, Е.Ю. Калмыкова //Клин.лаб.диагн.-2006.-№5.-С.13-19.

114. Ковалев, И.В. Биохимические основы иммунитета к низкомолекулярным соединениям / И.В.Ковалев, О.Ю.Полевая. М, 1985. - 305 с.

115. Ковалев, Г.И. Взаимосвязь эндогенной интоксикации и иммунодепрес-сии в патогенезе черепно-мозговой травмы / Г.И.Ковалев, А.М.Томников, Г.Г.Музлаев //Журн. неврол. психиатр, им. С.С.Корсакова. 1995.- Т.95, №6. - С. 4-5.

116. Ковалишин Я.Ф. Исследование средних молекул плазмы крови больных с уремией с помощью жидкостной хроматографией высокого давления и тонкослойной хроматографии /Я.Ф.Ковалишин, В.Г.Николаев, ЕЛБаран //Вопр. мед. химии. 1988. -Т. 34, Вып. 6. - С. 23 - 26.

117. Ковтунова, М.Е. Церулоплазмин и среднемолекулярные пептиды как критерии течения острого миелобластного лейкоза / М.Е.Ковтунова, В.Н.Паньков, Н.И.Привалова // Лечащий врач. 1999. - №6. - С. 28 - 30.

118. Кожа /под ред.А.М.Чернуха, Е.П.Фролова. 1982. - М.: Медицина. -225 с.

119. Кожевников, А.Д. Способ обнаружения и метод количественного определения модифицированного и / или денатурированного сывороточного альбумина человека / А.Д.Кожевников, Е.В.Лешенкова, Г.И.Сазонец // Клин. лаб. диагн.-2004.-№2.-С. 39-42.

120. Кожные и венерические болезни. Руководство для врачей в 4-х томах /под ред Ю.К.Скрипкина. М.: Медицина, 1995.- Т.2. - 348 с.

121. Комаров, Ф.И. Желчные кислоты: физиологическая роль, клиническое значение / Ф.И.Комаров, А.И.Иванов //Терапевтический архив. 1992. - №3. - С. 10-15.

122. Колб, В.Г. Справочник по клинической химии / Колб В.Г., Камышников B.C.-Минск, 1982.-366 с.

123. Колисниченко, Л.С. Глутатионтрансферазы / Л.С.Колисниченко, В.И. Кулинский // Успехи соврем, биол. 1989. - №2. - С. 179 - 194.

124. Коллинс, Ф. Не так все просто / Ф. Коллинс (Получено 20.04.06 с сайта http //www provisor/ com/ u a /activ/2003/№8/frt 30 htm).

125. Комченко, E.C. Изменение уровня молекул средней массы при внутриутробном инфицировании плода / Е.С.Комченко, А.В.Михайлов, Н.П.Чеснокова // Усп. соврем, естеств. -2003. №11. - С. 58.

126. Коничева, И.Н. Особенности течения синдрома эндогенной интоксикации при абдоминальном сепсисе / И.Н.Коничева: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Екатеринбург, 2000. - 24 с.

127. Константинов, А.П. Экология и здоровье /А.П.Константинов //Усп. соврем. естеств.- 2003.- №6,- С.60-62.

128. Копытова, Т.В. Значение среднемолекулярных пептидов сыворотки крови при острых формах ишемической болезни сердца. / Т.В.Копытова, Н.А. Добротина, Н.Н. Боровков //Лаб. дело.-1991. №10. - С. 18 - 21.

129. Коржов, В.И. К вопросу о механизме действия некоторых противотуберкулезных препаратов на глутатионзависимую систему детоксикации эритроцитов / В.И. Коржов, В.И. Жодан, М.В. Коржов // Украинский химиотерапевтич. журнал. 2000. - №1.- С. 20 - 22.

130. Коротаев, А.Л. Лабораторная диагностика: Современные методы оценки тяжести эндогенной интоксикации в раннем послеоперационном периоде /

131. A.Л.Коротаев, Н.Л. Калинин //Журнал медицинский алфавит. 2001 (цитиров. с сайта http//www.med alfavit.ru/med text/ med alfavit.files/journals/10/02/1 htm.)

132. Коротеев, А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология / А.И.Коротеев, С.А.Бабичев. СПб, 1998. - 276 с.

133. Короткий, Н.Г. Иммунохимический статус больных псориазом, леченных гемосорбцией / Н.Г.Короткий, Д.Д.Петрунин // Вестн. дерматол. 1983. - №6. -С. 11-13.

134. Короткий Н.Г. Реамбирин в комплексной терапии атопического дерматита у детей старшего возраста / Н.Г.Короткий // VIII Всерос. съезд дерматовенерологов: тез. науч. работ; часть1. М., 2001.- С. 117.

135. Короткий, Н.Г. Псориаз как следствие включения p-стрептококков в микробиоценоз кишечника с повышенной проницаемостью (концепция патогенеза) / Н.Г.Короткий, М.Ю.Песляк // Вестник дерм, и венерол. 2005. - №1. - С. 9 -18.

136. Корочкин И.М. Определение содержания средне-молекулярных пептидов в крови больных острым инфарктом миокарда /И.М.Корочкин, И.И.Чукаева, С.Н.Литвинов, Б.Л.Лурье // Лаб. дело. 1988. - №9. - С. 15 - 18.

137. Корюкина, И.П. Сочетанное применение энтеросорбента карбактин с пектином в лечении атопического дерматита / И.П.Корюкина, А.А.Акатова, С.А.Лазарева // 3-й конгресс педиатров России: тез. докладов.- М., 1998. С. 102 -103.

138. Корюкина, И.П. Взаимосвязь аллергодерматозов и экологии / И.П.Корюкина, А.А.Акатова, В.В.Балакирева, Н.П.Коробейников // 3-й конгресс педиатров России: тез. докладов.- М., 1998. С. 104.

139. Корякина, Е.В. Особенности патогенетических механизмов эндогенной интоксикации у больных ревматоидным артритом / Е.В Корякина, С.В.Белова // Научно-практич. ревматология. 2001. - №1. - С. 3 -15.

140. Корякина, Е.В. Молекулы средней массы как интегральный показатель метаболических нарушений (обзор литературы) / Е.В.Корякина, С.В.Белова //Клин. лаб. диагн. 2004. - №2. - С. 3 - 8.

141. Корякина, Л.А. Продукты перекисного окисления липидов как критерии эффективности лазеротерапии у больных псориазом / Л.А.Корякина,

142. B.А.Пиртинская, С.И. Гусева // Актуальные проблемы дерматовенерологии: материалы научно-практ. конф. Самара, 2001. - С. 40 - 41.

143. Костюченко, А.Л. Стадийность течения острых инфекционных деструк-ций легких с позиций использования методов эфферентной терапии / А.Л.Костюченко, А.И.Бельских, Д.Н.Сизов // Эфф. тер. 1995. - №4. - С. 29 - 33.

144. Костюченко, А.Л. Терапевтическое использование растворов альбумина. Мифы и реальность /А.Л.Костюченко, К.Я.Гуревич //Эфф. тер. 1997. - №3.1. С. 9-15.

145. Костюченко, A.J1. Повышение активности защитных механизмов детоксикации при эндотоксикозе / А.Л.Костюченко, К.Я.Гуревич, Н.А.Беляков // Эфф. тер. 2002. - №3. - С. 3 - 9.

146. Костюченко, А.Л. Применение антиоксидантов повышение эффективности биотрансформации / А.Л.Костюченко, К.Я.Гуревич, Н.А.Беляков // Эфф. тер.- 2002. - №4. - С. 9 - 12.

147. Костянова, Е.Н. Роль гипоксических изменений и эндогенной интоксикации в патогенезе псориаза и их коррекция реамбирином / Е.Н. Костянова.- Ав-тореф. дис. канд. мед. наук. -М., 2005. 19 с.

148. Кошелева И.В. Показатели перекисного окисления липидов у больных экземой и влияние на них озонотерапии / И.В.Кошелева, О.Л.Иванов, А.Г.Куликов // Росс, журнал кожных и венер. болезней. 2001. - №6. - С. 34 - 37.

149. Кравченя, С.С. Об иммунном механизме эндотоксикоза при псориазе / С.С.Кравченя, А.Л.Бакулев, А.А.Свистунов // Тез. науч. работ Всероссийской конф. Дерматовенерологов. Н.Новгород, 2004. - С. 8.

150. Кржечковская, В.В. Состояние системы цитохром-Р450 печени при развитии экспериментальной пищевой анафилаксии и под влиянием гипоаллер-генных воздействий: Автореф. дис. . канд. мед. наук // В.В.Кржечковская. М., 1986.- 16 с.

151. Кузин, В.Б. Ввведение в теорию фармакологии. Учебное пособие /В.Б.Кузин, В.И.Борисов, Н.К.Прозорова, А.А.Шалунов. Н.Новгород, 2002.158 с.

152. Кулибаба, Д.М. Токсикосептический шок при перитоните: Автореф. дис. д-ра мед наук / Д.М.Кулибаба. СПб, 1998.-43 с.

153. Куликова О.Д. Реамберин как средство терапии атопических дерматитов. Информационное письмо для врачей / О.Д.Куликова, Н.Г.Короткий. М., 2004. - 12 с.

154. Курдина, М.И. Экспрессия урокиназы и ее рецептора в коже больных псориазом / М.И.Курдина, Ю.Г.Антропова, О.Л.Ильинская, Д.Ю.Песков // Вестн. дерм, и венер. 2002. - №1. - С. 9 -12.

155. Курников, Г.Ю. Гепатотропный препарат гепатосан в терапии псориаза / Г.Ю.Курников, Т.В.Копытова, Е.П.Абалихина //Нижегородс. мед. журнал. -2003. №3-4. - С. 171-174.

156. Ланкин В.З. Ферментативное перекисное окисление липидов / В.З.Ланкин //Укр. биохим. журнал. 1984. - №3. - С. 317 - 331.

157. Лашкина, Н.С. Возможность донозологической диагностики состояния кожи // Эксп. и клинич. дерматокосметология. 2004. - №3. - С. 14 -16.

158. Лезвинская, Е.М. Исследование состояния эритроцитов у больных эритродермиями в процессе лечения ингибиторами протеолиза / Е.М.Лезвинская, Л.И.Юновидова, Р.Х.Чилингаров, Е.В.Николаева // Росс, журнал кожн. и венер. болезней. 1998. - №3. - С. 26 - 29.

159. Лим, В.Г. Влияние СС14 на ПОЛ и показатели системы иммунитета /

160. B.Г. Лим, П.Ф.Забродский, В.В.Васильев / Рук. депонирована во ВИНИТИ №1708-В2004.

161. Литвицкий П.Ф. Патофизиология: Учебник в 2 т. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002.-Т. 1. — 752 с.

162. Лифшиц, P.M. Роль среднемолекулярных пептидов крови в развитии кардиодепрессии при термических ожогах / P.M. Лифшиц, Б.М. Вальдман, И.А.Волчегорский //Бюл. эксп. биол. мед.- 1986.- № 2.- С.280.

163. Локшина, Л.А. Протеиназы плазматмческой мембраны лимфоидных клеток и их биологические функции / Л.А Локшина /ЛY Симпозиум «Химия про-теолитических ферментов»:тез.докл .-М, 1997 .-С.23.

164. Локшина, Л.А. Протеолитические ферменты в лейкозных лимфоидных клетках человека / Л.А Локшина Т.А.Гуреева, Ю.Е.Елисеева //Биохимия.-1999.-вып.4.-С.533 542.

165. Лопухин, Ю.И. Эфферентная терапия и проблема долголетия /Ю.И. Лопухин //Эфферентная терапия.- 1996.- №1.-С.З 10.

166. Лукиенко, П.И. Последствия индукции цитохромов Р450 /П.И.Лукиенко Л.Б. Заводник, М.И. Бушма //Экспер. И клин.фармак.-1995.-№1.1. C.68-71.

167. Львова, Л.В. Эхо Чернобыля. Новый взгляд на старые проблемы / Л. В. Львова //Журнал Провизор.- 2001.- выпуск № 10 http://www.provisor.com.ua/archive /2001 /N10 /art.10.htm.

168. Мавлянов, Б.Р. Изучение показателей эндогенной интоксикации при некоторых кожных и грибковых заболеваниях / Б.Р. Мавлянов, М.Р.Махсудов, Ю.О Супиева // 1 Всероссийский конгресс дерматовенерологов: тез. научных, работ." СПб,2003.-т.1.- С.68-69.

169. Макарова, Н.П. Синдром эндогенной интоксикации при сепсисе / Н.П. Макарова, И.Н. Коничева //Анест. и реаним.- 1995.- №2.- С.4-8.

170. Малахова, М.Я. Методы биохимической регистрации эндогенной интоксикации. Сообщение первое / МЛ.Малахова // Эффер. терапия. 1995.- №1. -С.60-65.

171. Малахова, М.Я. Оценка эндогенной интоксикации у населения, проживающего в различных экологических условиях Севера и Северо-запада России /М.Я.Малахова О.В. Зубаткина, С.Л.Совершаева//Эфф.терапия.- 1998.- №2.-С.50-56.

172. Малахова, М.Я. Эндогенная интоксикация как отражение компенсаторной перестройки обменных процессов в организме / М.Я.Малахова //Эффер.терапия.- 2000.- №4.-С.З 14.

173. Малахова, М.Я. Методы верификации донозологических состояний организма / М.Я.Малахова, О.В .Зубаткина // Эффер.терапия.-2006.-№1.-С.43-50.

174. Мари, Р. Биохимия человека /Мари Р., Гарднер Д, Мейс П., Родуэл В. -1993.- М.Мир.- 2Т.-.256с.

175. Марусанов, В.Е. Характеристика стадий эндогенной интоксикации / В.Е. Марусанов, В.А. Михайлович, И.А. Деманчская // Эффер.терапия.- 1995.2.- с.26-30.

176. Марчук, Г.И. Острые пневмонии: иммунология, оценка тяжести клиника, лечение/Г.И.Марчук, Э.Л.Бербенцова.- 1989.-М.Наука.-303 с.

177. Маршалл В.Дж. Клиническая биохимия / В.Дж.Маршалл .- 2000.-С.П6.-368с.

178. Матвеев, С.Б. Критерии оценки эндогенной интоксикации при ожоговой травме / С.Б. Матвеев, Т.Г.Спиридонова //Клин.лаб.диагн.- 2003.- №10.- С.З-7.

179. Медицинские лабораторные технологии. Справочник /под. ред.А.И.Карпищенко.-т.2.- С.Петербург, 2002.- 400с.

180. Микунис, Р.И. Содержание в крови средне-молекулярных пептидов при сердечно-сосудистых заболеваниях / Р.И.Микунис, М.И. Векслер //Клинич. Медицина.- 1990.- №5.- С. 124 126.

181. Миронов, П.И. Метаболические критерии тяжести эндотоксемии при хирургических инфекциях у детей /П.И.Миронов, Р.Ш.Хасанов, А.А.Гумеров //Эффер. тер.- 1997.- №2.- С. 31 34.

182. Мирошниченко, А.Г. Интракорпоральная детоксикация у больных острым разлитым перитонитом: Автореф. дис. . докт. мед. наук /А.Г.Мирошниченко. СПб, 1994.- 32 с.

183. Мордовцев, В.Н. Псориаз / В.Н. Мордовцев, Г.В. Мушет, В.И. Альба-нова. Кишинев: Штиинца,1991.- 185 с.

184. Моржакова, М.Ю. Показатели синдрома эндоинтоксикации у больных сальмонелезом / М.Ю.Моржакова, Б.С. Нагоев //Эффер.тер.- 2004.- №2.- С.43-48.

185. Моррисон, А.В. Изменение показателей перекисного окисления липидов при атопическом дерматите / А.В. Моррисон //У 111 Всероссийс. съезд дерматовенерологов: тез.науч. работ.- М.,2001.- часть1.-С.30.

186. Нагоев, Б.С. Некоторые аспекты оценки эндоинтоксикации у пациентов с острой дезинтерией /Б.С.Нагоев, М.Ю.Маршукова //Тер.архив.- 2002.- №11.-С.16-18.

187. Назарова, О.А.Эффективная концентрация альбумина критерий эндогенной интоксикации при бронхиальной астме у детей / О.А. Назарова/Агитировано с сайта http//ns.vsma/ac/ru/-smu/DOC/SB 2004/nazar/htm.

188. Некоторые диагностические и прогностические возможности оценки эндотоксикоза у детей при инфекционной патологии /Альба Д.Л. и др. //в сб. Проблемы адап-тации в эксперименте и клинике.- Саранск:Мордовск.гос.универ.-1999.-С.97-102.

189. Николаев, В.Г. Современные энтеросорбенты и механизмы их действия / В.Г. Николаев, С.В. Михаловский, Н.М. Турина //Эффер терапия.- 2005.-№4.-С. 3-17.

190. Николайчик, В.В. Способ определения «средних молекул» / В.В. Нико-лайчик, В.М.Моин, Л.И. Кирковский // Лаб. дело.-1991.- №4. С. 13 18.

191. Никулин, Н.К. Роль иммунных нарушений в патогенезе псориатического артрита и методы иммунокоррекции в комплексном лечении больных: Ав-тореф. Дис. докт. мед. наук/Никулин Н.К.-М., 1989.-40 с.

192. Никулин, Н.К. Экзема: патогенетическая терапия / Н.К.Никулин, Г.А.Пантелеева, К.В. Дмитренко //Вестник дерматологии и венерологии.- 2000.-№4.- С.48 -49.

193. Никулин Н.К.О механизмах развития эндоинтоксикации при псориазе и методах ее коррекции / Никулин Н.К., Химкина Л.Н., Копытова Т.В., Пантелеева Г.А. //Нижегородский мед.журнал.- 2006.1.-С.60 64.

194. Оболенский, С.В. Диагностика стадий эндогенной интоксикации и дифференцированное применение методов эфферентной терапии / С.В. Оболенский //Вестник хирургии.-1991.- №3,- С.95 100.

195. Осадчая, О.И. Эффективность препарата Энтеросгель у больных с эндогенной ожоговой интоксикацией / О. И. Осадчая, А. М. Боярская, А. А.

196. Жернов, Б. С. Шейман, // Мистецство лжування .-2005.- №6,- С.22 -25.

197. Остапенко, В.А. Механизмы лечебного действия гемосорбции / В.А.Остапенко //Эффер.тер.-1995.-№2.- С.20-25.

198. Павлюченко, И.И. Интегральные показатели эндогенной интоксикации и окислительного стресса у больных с почечной недостаточностью / И.И. Павлюченко, Ю.В. Дынько, А.А. Басов, С.Р. Федотов //Нефрология и диализ.- 2003.-№1, приложение.- С.28-32.

199. Пантелеева, Г.А. Эндоинтоксикационный синдром у больных пузырчаткой / Г.А.Пантелеева, Т.В. Копытова, М.А. Пронова // Российский журнал кожных и венерических болезней .- 2001.-№5.- С.38 -41.

200. Парахонский, А.П. Неиммунные механизимы в патогенезе атопических заболеваний / А.П. Парахонский //Успехи совр.естеств.-2005.-№12.-С. 49.

201. Патология кожи /под ред В.Н. Мордовцева и Г.М.Цветковой.-М.Медицина, 1993.- т.2,-382 с.

202. Пегано, Дж. Лечение псориаза естественный путь / Дж.Пегано.-М.,.2001,- 275с.

203. Переслегина, И.А. Роль детоксицирующих ферментов в регуляции иммунного статуса детей с атопическим дерматитом /И.А.Переслегина, М.Л. Юдина, И.В. Майянская //Эффер.терапия.-1996.-№2.-С.55-59.

204. Петров, В.И. Основы клинической фармакологии и фармакотерапии /

205. B.И.Петров, М.Д. Гаевый, П.А.Галенко.- М.: «Альянс В».- 2002.- 815с.

206. Плазмоферез в дерматологической практике /Н.С. Потекаев и др. //Клин.мед.-1991.-№11.-С.84-86.

207. Показатели состояния иммунитета у больных псориазом /М.М.Левин и др.//Вестн.дерматол.-1996.-№4.-С.36-38.

208. Попов, П.А. Анализ структурно-функциональных свойств эритроцитов в условиях эндогенной ин токсикации /П.А.Попов, А.А.Лаврентьев, М.А.Струков //цитировано с сайта www. vsma.ac.ru.-2004.

209. Природный энтеросорбент микроцел /Н.А.Беляков и и др..-2000.-№3.1. C.56-61.

210. Промыслов, М.Ш. Роль липидов фракции средних молекул в характеристике патологического процесса /Л.И.Левченко, М.Л.Демчук, Н.И.Габриэлян //Вопр. мед. Химии.-1988.-№4.-С. 105-107.

211. Прохоренков, В.И. Структурно функциональное состояние мембранэритроцитов у детей, страдающих атопическим дерматитом / В.И Прохоренков, Е.И. Прохин, С.Ю. Терещенко //Вестн. дерм и венер.-1998.- №4.- С.4-7.

212. Прохоренков, В.И. Некоторые особенности иммунного статуса и метаболического состояния иммунокомпетентных клеток у детей с атопическим дерматитом / В.И. Прохоренков, A.M. Куртасова, А.А.Савченко, А.Б.Чесноков //Вестн.дерм, и венерол.-2000.-№3.-С.20-23.

213. Прохоров, Д.В. Комплексная терапия больных микробной экземой с учетом синдрома эндогенной интоксикации / Д.В. Прохоров, О.А.Притуло //Украине, журнал, дермат., венерол., косметол.- 2002.- №3.-С.32-34.

214. Пухова И.В. Совершенствование методов терапии детей, больных псориазом на основании изучения патогенетической роли нарушений углеводного обмена. Автореф. дис. канд. мед. наук /И.В.Пухова. М., 1991. - 22 с.

215. Рассказов, Н.И. Перспективы использования эндоэкологической реабилитации в дерматологии / Н.И.Рассказов,В.Н.Бучин, А.П.Волик //Вестн.дерм. и венерол.- 2002.- №1.- С.20-22.

216. Рейс, Б.А. Выделение токсичного полипептида средней молекулярной массы при экспериментальном разлитом перитоните / Б.А. Рейс, Л.В.Полуэктов // Бюл. эксп. биол. мед.- 1983.- № 7.- 128-130.

217. Римарчук, К.В. Современные принципы эфферентной терапии заболеваний органов пищеварения /К.В. Римарчук, Н.И.Урусова, С.И. Полякова ,О.В. Домникова .//111 Конгресс педиатров Росссии: тез.докл.- Москва,1998,- С.46-48.

218. Робинсон, М.В. Дипептидилпептидаза 1У фермент и лейкоцитарный антиген CD-26 / М.В.Робинсон,В.А.Труфакин //Иммунология.-1997.-№2.-С.13-16.

219. Ромаданов, А.Л. Черепно-мозговая травма и иммунореактивность организма/ А.Л. Ромаданов, И.И. Лисяный.- Киев, 1991.- 310с.

220. Румшицкий, Л.З. Математическая обработка результатов эксперимента. Справочное пособие / Л.З. Румшицкий.- М.:Наука, 1971.-С. 108-124.

221. Румянцев, А.Ш. Особенности обмена белков у больных с хроническим гломерулонефритом / А.Ш.Румянцев // Нефрология.- 2001.- №1.- С.7-18.

222. Рябинин, В.Е. Влияние термической травмы и средне-молекулярных пептидов на хемолюминисценцию плазмы крови./ В.Е.Рябинин, А.Г. Палимов, Р.И. Лифшиц // Вопр. Мед. химии.- 1988.- т. 43.- вып. 6.- 60-64.

223. Рябых, О.В. Сопоставление показателей эндогенной интоксикации новорожденных и их матерей при гестозе различной степени тяжести /О.В. Рябых, М.Я. Малахова, Г.С. Шеремет //Эффер. терапия. 1999. - № 1. - С. 41 - 45.

224. Рязанцева, Н.В. Типовые нарушения молекулярной организации мембраны эритроцита при соматической и психической патологии /Н.В.Рязанцева, В.В.Новицкий //Успехи физиологических наук,.- N1.- С.53-65.

225. Саломатин, В.В. Связывающая способность сывороточного альбумина при термических ожогах /В.В.Саломатин, Р.И.Лифшиц // Вопр. мед. химии.-1987.-№ 2.-С. 73-77.

226. Свердлов, А.Д. Гипертермическая перфузия полости брюшины для лечения и профилактики перитонита /А.Д.Свердлов, Ф.В. Баллюзек, В.Н. Макота //Эффер.тер.-1996.-.,№1.- С.41-45.

227. Свиршевская, Е.В. Идентификация нового антигена из нормального эпидермиса, ассоциированного с дерматозами различного происхождения / Е.В. Свиршевская, Е.В. Матушевская, О.Д. Коцарева //Вестн. дерм.и венерол.- 2001.-№2 .-С.4-8.

228. Семко, Г.А. Взаимосвязь между поверхностными свойствами и некоторыми структурно-функциональными характеристиками клеток крови при псориазе /Г.А. Семко // У111 Всеросс.съезд дерматовенерологов: тез.науч.работ.-М.,2001.- Ч.1.- С.225.

229. Сердюкова, Е.А. Роль вегетативной нервной системы в патогенезе псо-риатической болезни /Е.А.Сердюкова, А.Ю. Родин //"Актуальные проблемы дерматовенерологии": материалы научно-практ.конф.- Самара,2001.- С.66-68.

230. Сидельникова, В.И. Эндогенная интоксикация как одна из причин фармакорезистентности. Новые подходы лабораторной диагности-ки/В.И.Сидельникова, В.М.Лифшиц //Клин, лаб диагн.-1998.- №8.- С.37.

231. Сидорин, Г.И. Адаптация как основа защиты организма от вредного действия химических веществ /Г.И. Сидорин, Л.В. Луковникова, А.Д. Фролова .//Рос.хим.журнал.- 2004.- №2.- С.44 50.

232. Сим, Э. Биохимия мембран / Э.Сим.- М.:Мир,1985.- 58с.

233. Симбирцев, С.А. Патофизиологические аспекты эндогенной интоксикации / С.А.Симбирцев, Н.А.Беляков в кн : Эндогенные интоксикации: тезисы межд. Симпозиума.- СПб, 1994.- С.5-9.

234. Современные методы в биохимии /под ред. Ореховича В.А.-М. Медицина, 1977.

235. Соловьева, А.Г. Активность альдегиддегидрогеназы печени и эритроцитов крыс в норме и при ожоговой токсемии: Автореф. дис. . канд. биол. наук / А.Г. Соловьева. Н.Новгород, 2005. - 24 с.

236. Соскжин А.Е. Соотношение экзо- и эндотоксикоза при острых отравлениях карбофосом / А.Е.Сосюкин, А.Н. Вельских, В.В.Зуев //Актуальные вопросы военно-полевой терапии: тез. докладов научно-практической конференции.-СПб.,1997.-С.163.

237. Спирин, А.С. Фундаментальная наука и проблемы биологической безопасности /А.С.Спирин //Вестник Акад.мед.наук.-2002.-№11 .-С.12 14.

238. Стенина, М.А. Роль нарушений барьерной функции кишечника в патогенезе псориаза у детей /М.А. Стенина, В.И.Кулагин, Ж.В. Рудковская, Д.А. Воеводин //Росс.журнал кож. и венерич. Болезней,- 2003,- №2.- С.20-23.

239. Страчунский, JI.C., Глюкокортикоидные препараты / Л.С.Страчунский, С.Н.Козлов.- 1997.- 64с.

240. Субботина, Т.Н. Перекисное ОЛ и проницаемость мембран эритроцитов у детей и подростков с сахарным диабетом /Т.Н. Субботина ,Н.М.Титова, А.А. Савченко, В.Н.Панфилова//Клин.лаб.диагн.- 2004.- №5.- С.20-35.

241. Судаков, К.В. Функциональные системы организма в динамике патологических состояний / К.В.Судаков //Клин.медицина.- 1997.- №10.- С.4-11.

242. Суханова, Г.А. Антиоксиданты и ингибиторы протеолиза в оценке состояния здоровья человека / Г.А. Суханова //Клин.лаб.диагн.- 2001.- №11.- С.8-11.

243. Творогова, М.Г. Определение липидного состава липопротеидов высокой плотности методом тонкослойной храмотографии на селикагеле / М.Г. Творогова, Е.А.Исаева, Н.В.Проказова //Клин. лаб. диагн.- 1998.- N. 4,- С 10-14.

244. Трахтенберг, И.М. Применение пектинсодержащих энтеросорбентов при воздействии радионуклидов и тяжелых металлов /И.М. Трахтенберг, В.А. Литенко, И.Б. Деревяго // Врач, дело.— 1992.— № 5.— С. 29—33.

245. Титов, В .Н. Альбумин, транспорт насыщенных жирных кислот и метаболический стресс синдром / В.Н.Титов //Клин.лаб.диагн.- 1989.- №4.- С.3-10.

246. Титов, В.Н. Роль макрофагов в становлении воспаления /В.Н. Титов.// Клин.лаб.диагн.- 2003,- N12.- С.З 10.

247. Титов, В.Н. Экзогенные и эндогенные патологические факторы (патогенны) как причина воспаления / В.Н.Титов //Клин.лаб.диагн.- 2004.- №5.- С.3-10.

248. Титов, В.Н. Регуляция перекисного окисления in vivo как этапа воспаления. Олеиновая кислота, захватчики активных форм кислорода и антиоксиданты /В.Н. Титов Д.М.Лисицын//Клин.лаб.диагн.-2005.- №6.- С.3-12.

249. Титов, В.Н. Липополисахариды грамотрицательных бактерий как экзогенные патогены. Транслокации бактерий in vivo; воспаление и патогенез сердечно-сосудистой системы /В.Н. Титов, С.Ф. Дугин, К.Л. Коткин //Клин.лаб.диагн.-2005.-№8.-С.23-37.

250. Тиунов Л.Н. Механизмы естественной детоксикации и антиоксидант-ной защиты / Л.Н.Тиунов //Вестник АМН.- 1995.-№3.-С.9- 13 .

251. Тихонов, Ю.В. Метаболизм пуриновых соединений при псориазе /Ю.В. Тихонов, Л.И. Маркушева, Р.Т. Тогузов //Клин. лаб. диагн.-1998.- №3.- С.3-7.

252. Тойгабаев, А.А. Способ диагностики эндогенной интоксикации /

253. A.А.Тойгабаев, А.В. Кургузкин, И.В. Рикун //Лаб.дело.- 1988.- N. 9.- С. 22 24.

254. Толкачева, Н.В. Транспорт жирных кислот и продуктов их перекисного окисления сывороточным альбумином при ишемическом и некоронарогенном повреждении сердечной мышцы /Н.В.Толкачева, М.М. Левачев, Ф.А. Медведев // Вопр. мед. химии.—1992—№ 2.—С. 89-92.

255. Торопова, Н.П. Экзема и нейродермит у детей /Н.П.Торопова, О.А. Синявская. Екатеринбург. -1993. - 447с.

256. Торсуев, Н.А. Буллезные дерматозы /Н.А. Торсуев, Н.Д. Щеклаков,

257. B.Н. Романенко,- М.: Медицина.- 1979.- 293с.

258. Троицкий, Г.В. Степень модификации сывороточного альбумина как токсикологический тест / Г.В.Троицкий, Г.А.Касымова, С.Н. Борисенко // Вопросы медицинской химии. 1987. - т. 33. - №2. - С. 38 -41.

259. Трофимова, И.Б. Новое в патогенезе и лечении атопического дерматита

260. И.Б. Трофимова, Л.А.Мишурис, B.C. Гевондян, В.В.Лебедев //Вестн.дерм. и ве-нерол.- 2001.-№2.-С.9-13.

261. Тугушева, Ф.А. Процессы перекисного окисления липидов и защитная роль антиоксидантной системы в норме и у больных хроническим гломерулонеф-ритом. Часть 1 /Ф.А. Тугушева//Нефрология.- 2001.- №1.-С. 19-27.

262. Туликова, З.А. Среднемолекулярные уремические токсины (обзор литературы) /З.А.Тупикова // Вопр. мед. химии. 1983. - N1. - С. 2-10.

263. Туликова, З.А. Антиоксидантная активность различных фракций средних молекул и их элиминация при гемосорбции у обожженных /З.А.Тупикова //Вопросы мед. химии.-1997.-№1.-С.53-56.

264. Тутельян, В.А. Пища и безопасность / В.А.Тутельян //Вестн. Акад. мед. наук. -2002.- №11.- С. 14-19.

265. Уменьшение токсического повреждения миокарда при лечении синдрома эндогенной интоксикации /П.А.Еремин и др. //Вестник интенсивной те-рапии».-2005.- №6. -С.30-32.

266. Ухина, Т.В. Перекисное окисление липидов в нормальной и патологически измененной коже/Т.В.Ухина, А.А.Кубанова, Г.Ж.Калмангаметова, Б.Е.Сергеев //Вестн.дерматол.-1994.-№3.-С.9-11.

267. Федоровский, И.М. Непрямая электрохимическая детоксикация /И.М.Федоровский //Анест. И реаним.- 1995.- №6.- С.46-51.

268. Фок, М.В. К вопросу об изменении неспецифической проницаемости цитоплазматической мембраны эритроцитов и мышечных клеток /М.В. Фок, Г.А Зарицкая //Краткие сообщения по физике.-2001.- №5.- С.24-35.

269. Фрейдин, М.Б. Полиморфизм генов глутатионтрансферазы у больных с атопической бронхиальной астмой в западно-сибирском регионе /М.Б.Фрейдин, Е.Ю.Брагина, Л.М. Огородова, В.П. Пузырев //Молек.биол.- 2002.- №4.- С.1 5.

270. Химкина, Л.Н. Дифференцированные методы терапии детей, больных псориазом, с учетом клинико-патогенетического полиморфизма: Автореф. дис. . докт. мед. наук / Л.Н.Химкина. М., 1991. - 40 с.

271. Химкина, Л.Н. Современное течение дерматозов у детей как экотокси-ческой патологии /Л.Н.Химкина,Н.А.Добротина,Е.А.Закомерная, Е.А.Горбунов //»Экология детства: социальные и медицинские проблемы»:материалы. Все-рос.научн.конф.-СПб, 1994.- С. 160-161.

272. Химкина, Л.Н. Эндоинтоксикационный синдром в клинике, патогенезе хронических дерматозов, методы коррекции. Пособие для врачей /Л.Н.Химкина, Г.А.Пантелеева, Т.В. Копытова.- Н.Новгород, 2000.- 11 с.

273. Химкина, Л.Н. Значение эндогенной интоксикации при хронических дерматозах. Методы коррекции /Л.Н. Химкина, Н.А. Добротина, Т.В. Копытова //Вестник дерматологии и венерологии.- 2001.- №5.- С.40 43.

274. Хотимченко, Ю.С. Применение энтеросорбентов в медицине /Ю.С.Хотимченко, А.В.Кропотов //Тихоокеанский медицинский журнал.- 1999.-№2.- С. 84-89.

275. Хотимченко, Ю.С. Фармакологические свойства пектинов /Ю.С.Хотимченко, А.В.Кропотов //Эфф.терапия.-2001.-№4.-С.22-25.

276. Хышиктуев, Б.С. Закономерности сдвигов параметров липидного обмена в различных биологических /Б.С. Хышиктуев, Е.В.Фолько //Вестн.дерм. и ве-нерол.- 2005.-№6.- С.40-43.

277. Цикуниб, А.Д. Определение эндогенной интоксикации по токсикурии с использованием Tetra chimera pyriformus / Цикуниб А.Д //Клин. лаб. диагн,-2001.- №6.- С.50-52.

278. Циркулирующие иммунные комплексы в диагностике аллергических реакций иммунокомплексного типа /Т.Н. Лебедева и и др. //Клин.лаб.диагн.-2004.-№11.- С.11-13.

279. Цвиренко, СБ. Полиморфизм генов, кодирующих глутатион трансфе-разы Ml т Т1 у детей с острым лимфобластным лейкозом /С.В.Цвиренко, ГА.Цаур //Клин. лаб. диагн.- 2006.- №2.- С.23-27.

280. Чаленко, В.В. Эндогенная интоксикация в хирургии / В.В.Чаленко, В.Х Кутушев // Вестник хирургии им. Н.И.Грекова.- 1990.- № 4.- С.3-8.

281. Чевари, С. Роль СОД в окислительных процессах клетки и метод определения ее в биологических мембранах / С.Чевари, И.Чаба, И. Секей //Лаб. Дело.-1985.-№ 11.-С. 678-681.

282. Черний, В.И. Применение эфферентных методов терапии при критических состояниях /В.И. Черний, Р.И. Новикова, В.С.Костенко //Методич. Рекомендации.- Донецк,2003.- 25с.

283. Чиркин, А.А. Молекулярные механизмы повреждения печени / А.А.Чиркин //Журнал неврологии и психиатрии,- 2000.- №7.- С. 14-17.

284. Шамов, Б.А. Патогенетическое значение показателей эндотоксина и антибактериального иммунитета при атопическом дерматите у детей / Шамов Б.А. Шамова А.Г.// У111 Всероссийс.съезд дерматовенерологов: тез. науч. работ.-М., 2001.- часть 1.- С.238.

285. Шамов, Б.А. Показатели эндотоксина при атопическом дерматите у детей /Б.А. Шамов // 1 Всероссийский конгресс дерматовенерологов : тез.научн.работ.- СПб,2003.- т.1.- С.215.

286. Шано, В.П. Сепсис и синдром системного воспалительного ответа. /В.П. Шано, А.Н.Нестеренко , Ф.И. Гюльмамедов // Анест.и реаним. 1998. - N 4. -С. 60-65.

287. Шарапова, Г.Я. Уровень средних молекул при гемосорбции у больных псориазом ГГ.Я. Шарапова, Н.И.Габриэлян, Н.Г.Короткий //Сов.мед.-1985.-№4.-С.38-41.

288. Шарапова, Г.Я. Псориаз /Г.Я. Шарапова, Н.Г.Короткий, М.Н.Молоденков.- М:Медицина,1989,- 222с.

289. Шаршунова, М. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии / М.Шаршунова, В.Шварц, Ч.Михалец.- М.: Мир, 1980.- т.2.-С.536 541.

290. Шевченко, Ю.Л. Экология человека: вызовы цивилизации, долг общества, ответсвенность здравоохранения / Ю.Л. Шевченко //Вестник Академии мед.наук.- 2002.- №10.-С.З-6.

291. Шабунина, Е.И. Справочник по лаборпторной диагностике в педиатрии / Е.И. Шабунина, Комарова Л.Г., Коркоташвили Л.В.-Н.Новгород,2004.-95с.

292. Шейнкман В.Л. Иммунологическая характеристика больных псориазом при традиционном лечении: .Автореф. дис. . канд. мед. наук /В.Л.Шейнкман.-М., 2000.-23 с.

293. Шилина, Т.А. Влияние эндогенной интоксикации на течение псориати-ческого процесса / Т.А. Шилина // 1 Всероссийский конгресс дерматовенерологов: тез.научн.работ.- СПб,2003.- т1.- С.52.

294. Шилов, В.И. Окислительный стресс кератиноцитов этиопатогенетиче-ский фактор псориаза /В.И. Шилов, В.И.Сергиенко //Бюлл. эксп. биол. и медици-НЫ.-2000.- №4.-С.364 - 369.

295. Шлейкин, А.Г. Активность монооксидазы крови и проницаемость эрит-роцитарных мембран у больных с аллергодерматозами / А.Г. Шлейкин, Г.Н. Бу-рыкина //Вестн.дерм. и венерол.-1986- №10.- С.56-58.

296. Шмелькова, Е.С. Комплексное лечение больных атопическим дерматитом с учетом нарушений перекисного окисления липидов, антиоксидантной системы и липидного обмена: Автореф. дис. . канд. мед. наук /Е.С.Шмелькова. -Харьков, 2001.-24 с.

297. Шубина, О.С. Морфофункциональные изменения гематоплацентарного барьера при экзо- и эндогенной интоксикации: Автореф. дис. докт. биол. наук / О.С.Шубина. Саранск, 1999. - 38 с.

298. Шугаев, Л.И. Эндогенная интоксикация при остром панкреатите: Автореф. дис. докт. мед. наук /Л.И.Шугаев.-Л., 1989. 33 с.

299. Шутов, A.M. Оценка детоксикационной функции почек по клиренсу средних молекул / А.М.Шутов, П.А. Прокаева, С.В. Железнякова // Клин. лаб. Диагностика.- 1996.- № 6.- 28-30.

300. Щербаха, Н.А. Состояние ферментативных систем миокарда в условиях эндогенной интоксикации: Автореф. дис. . канд. мед. наук /Н.А.ГЦербаха. -СПб, 1997.-24 с.

301. Юдина, М.Л. Уровень эндогенной интоксикации у детей с атопическим дерматитом / М.Л.Юдина, И.А. Переслегина.//Эфф.тер.-1996.- №1.-С.48-50.

302. Atanasiu, R.L. Direct evidence of caeruloplasmin antioxidant properties / R.L.Atanasiu, D.Stea, M.A.Mateescu, C.Vergely //Mol. Cell. Biochem. 1998 Dec. -Vol. 189, № 1-2.-P. 127- 135.

303. Abiko, T. Mean-molecular uremic toxins / T.Abiko, M.Kumikawa // Biochem. a. Biophys. Res. Communs. 1983. - Vol.87, N.2. - P. 707 - 715.

304. Adams, J. C. Expression of pi, РЗ, P4 and p5 integrins by human epidermal keratinocytes and non-differentiating keratinocytes / J.C.Adams, F.M.Watt // J. Cell Biol.-1991-Vol. 115.-P. 829-841.

305. Advances in drug metabolism in man /Ed G.U.Pacifici, G.N.Fraccia. Brussels, Luxemburg: Europ. Comis, 1995. - 834 p.

306. Arenberger, P. Increase of endothelemia in psoriasis / P.Arenberger, L. Budtova, J.Hiadovec // Acta Dermato-Venerologia. 1993.- Vol. 73, N1. - P. 35 -36.

307. Astashkin, A.V. Esteem measurements with time resolved detection of theentire ESE signal shape / A.V.Astashkin, W.Koslyuk, A.M.Raitsimring // J. Magn. Reson. 2000. - N2. - P. 357 - 363.

308. Badd, A.L. Diagnostic value of determining middle sized moleculas / A.L.Badd, R.R.Provich // Clin. chim. -1971. Vol. 8. - P. 23 - 30.

309. Badd, A. Hypothesis of medium sized molecules / A.Badd, B.Scribner // Trans. Am. Soc.Artific. Intern. Organs.- 1981.-Vol. 18,N2.-P. 98- 105.

310. Beutler, B. Cahectin: More than a tumor necrosis factor / B.Beutler, A.Gerami // N. Engl. J. Med. 1987. - N 316. - P. 379 - 386.

311. Beutner E.H. Autoimmunity in psoriasis. Florida: CRC Press Inc Boca Raton 1982-.-313 p.

312. Bone, R.S. Sepsis, sepsis syndrome and the systemic inflammatory response syndrome / R.S. Bone //(SIRS). JAMA. 1995. - №2. - P. 155 - 156.

313. Bone, R.S. Toward a theory regarding the pathogenesis of the systemic inflammatory response syndrome: what we do and not know about cytokine regulation / R.S. Bone // Crit. Care. Med. 1996. - №1. - P. 163 - 72.

314. Bovermann, J Isolation, structure elucidation and synthesis of a hexapeptide from the hemodialysate of uremic patients / J.Bovermann, H. Rautenstrauch, G. Sey-bold, G. Jung // Hoppe Seylers Z Physiol Chem. 1982. - №10.- P. 1187-202.

315. Buselmeier, T.S. Remission of psoriasis during hemodilisis / T.S.Buselmeier, S.S.Cauteri //Br. Med. J.- 1978.-№1.-P. 11-39.

316. Chen, W. In research of "psoriasis factor(s)": a new approach to extracorporeal treatment / W.Chen, C.H.Hu, J.R.E.Schiltz, S.Nucamoro // Artif. Organs. 1978. -№2.-P. 201 -205.

317. Circulating interleukin-1 and tumor necrosis factor in septic shock and experimental endotoxin fever / J.G.Cannon, Et al. // J. Infect. Dis. 1990 Jan. - №1. -P. 79 - 84.

318. Circulating T cells of patients with active psoriasis respond to streptococcal M-peptides sharing sequences with human epidermal keratins / H.Sigmundsdottir et al. // Scand. J. Immunol. 1997 Jun. - №6. - P. 688 - 697.

319. Crevat, A. Uremic middle molecules glucose metabolism / A.Crevat, M.Has-sid, N.Fournier // Kidney Jntern. 1982. - №1. - P. 122.

320. Dinarello, C.A. Cytokines as mediators in the pathogenesis of septic shock / C.A.Dinarello // Curr. Top. Microbiol. Immunol. 1996. - №216. - P. 133 - 165.

321. Epel, B. Electron-mediating Cu(A) centres in proteins: a comparative high field. HEndor study / B.Epel, C.S.Slutter, F.Neese // J. Magn. Reson. 2002. - Vol. 156. - №1. - P. 113-121.

322. Foster, J.T. . Some aspects of the structure and conformational properties of serum albumin // Albumin structure, function and use / Eds. V.M.Rosenour et al. -Oxford, 1992.-P. 53 -87.

323. Four distinct cyclin-dependent kinases phosphorylate histone HI at all of its growth-related phosphorylation sites / R.A.Swank et al. // Biochemistry. 1997 Nov. -№45.-P. 13761 - 13768

324. Fujishima, S. Neutrophil-mediated tissue injury and its modulation

325. S.Fujishima, N.Aikava // Intens. Care Med. 1995. - №3, P. 277 - 285.

326. Galle, J. Oxidative stress and vascular injury-relevant for atherogenesis in uremic patients / J.Galle, C.Warner // Nephrology Dialisis Transplantation -1997. -Vol. 12, №1.-P. 1 -9.

327. Gallice, PM. Links Identification of an ascorbic acid metabolite among "uremic middle molecules" / P.M.Gallice, J.P.Monti, D.L.Braguer, H.M.Monti //.Clin. Chem. 1990 Jul. - №7. - P. 1369 - 1372.

328. Gallice, P. In vivo accumulation of sodium pump inhibitor by normal and uremic erythrocytes / P.Gallice, E.Lai, P.Brunet // Int. J. Artif. Organs. 1993. - №3. -P. 120- 122.

329. Ganz, T. Defensins and other antimicrobial peptides: a historical perspective and an update / T.Ganz. // Comb. Chem. High. Throughput Screen.- 2005 May.- №3.-P. 209-217.

330. Glinski, W. Peritoneal dialysis and leukophoresis in psoriasis: indications and contraindications / W.Glinski, S.Jabionska, J.Imiela, J.Daszynski // Hautarzi. -1985.-№36.-P. 16-19.

331. Guengerich, F.P. Enzymatic oxidation of xenobiotic chemicals / F.P.Guengerich // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. 1990. - Vol. 25. - P. 97 - 153.

332. Guilhou, J.J. New concepts in the patogenesis of psoriasis. / J.J.Guilhou, J.Meynadier, J.Clot // Br. J. Dermatol. 1978. - №5. - P. 585 - 592.

333. Haglung, U. Toxic factors in shock / U.Haglung // Z. Med. Laborator. Diag. -1985.-№4.-P. 183 187.

334. Harris, B.H. The immune response to trauma / B.H.Harris, J.A.Gelfand // Semin. Pediatr. Surg. 1995. - №2. - P. 77 - 82.

335. Hoffman, J.N. Antitrombine reduces leucocyte adhesion during chronic endotoxemia by modulation of the cyclooxygenase pathway / J.N.Hoffman, B.Volimar, D.Inthorn // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000. - Vol. 97. - Issue 17. - P. 9789-9798.

336. Horikoshi, T. Isoforms of cathepsin В and human epidermal differentiation / T.Horikoshi, L.Arany, S.Rajaraman // Biochime. 1998. - Vol.80. - P. 605 -612.

337. Horikoshi, T. Role of endogenous cathepsin-like and chymotrypsin-like proteolysis in human epidermal desquamation / T.Horikoshi, S.Igarashi, H. Uchiwa // Br. J. Dermatol. 1999. - Vol. 141. - P. 453 - 459.

338. Human defensins / JJ.Schneider et al. // J. Mol. Med. 2005 Aug. - №8. -P. 587-595.

339. Shekhawat, P. Human placenta metabolizes fatty acids: implications for fetal fatty acid oxidation disorders and maternal liver diseases / P.Shekhawat // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 2003 Jun. - №6. - P. 1098 - 1105.

340. Hurwitz, CU. Calcium channel blockers / C.U.Hurwitz // CRNA.- 1996 Feb. №1. - P. 29-32.

341. Inflammatory eye, skin, and bowel disease in spondylarthritis: genetic, phe-notypic, and environmental factors / Brophy S. et al. // J. Rheumatol. 2001 Dec. -№12.-P. 2667-2673.

342. International Psoriasis Symposium 6-th. Chicago, 1994. - 355p.

343. Janet, A. Epidermal kinetics and regulation of cell proliferation / The biology of the Skin / A.Janet Fairley and Deniel Zivony. New York - London: 2002. - P.201 -206.

344. Janeway, Ch.A. Immunology: The immune system in health and disease / Ch. A. Jane way, P.Travers. NY, L: Jarloud Publishing Inc., 1994. - 280p.

345. Jappe, U. Superantigens and their association with dermatological inflammatory diseases: facts and hypotheses. / UJappe // Acta. Derm. Venereol. 2000 Sep-Oct. -№5.-P. 321 -328.

346. Killian, C.S. Mitogenic response of osteoblast cells to antigen suggest an activation of proteolytic modification of cell adhesion receptor /C.S.Killian,

347. D.A.Corral, E.Kavinski // Biohem. a. Biophys. Research. 1993. - Vol.21. -P. 940-947.

348. Klein, A. Middle-sized ninhydrin-positive molecules in uraemic patients treated by repeated haemodialysis. II. Chief peptide constituents of the faction/A.Klein, M.Sarnecka-Keller, Z.Hanicki // Clin. Chim. Acta. 1978 Nov.-№1.-P.7- 11.

349. Kramer, P. Dialisis treatment and psoriasis in Europe / P.Kramer, F.P.Brun-ner, H.Bunger, C.Chanter // Clin. Nephrol. 1982.- №18. - P. 62 - 68.

350. Krogstad, A.L. Nerve-induced histamine release is of little importance in psoriatic skin / A.L.Krogstad, P.Lonnroth, G.Larson, B.G.Wallin // Br. J. Dermatol. -1998 Sep. №3. - P. 403-409.

351. Levin, J. Detection of endotoxin in human blood and demonstration of end inhibitor / Levin, J„ P.Tomosulo, R.Oser // Lab. Clin. Med. 1989. - №75. - P. 903-911.

352. Mabuchi, H. Medium-sized peptides in the blood of patients with uremia. / H.Mabuchi, H.Nakahashi //Nephrol. 1983. - №4. - P. 232 - 237.

353. Malahova, MJa. Clinical markers of severity of endogeneous toxic syndrome during acute pulmonary tuberculosis. / M.Ja.Malahova, К.J.Tyarasova // European Rup. S. Abst. ERS Annual Congress. Stockholm, 1996. - P. 203.

354. Masunaga, T. Desmoyokin: AHNAK proteins localizes to the non-desmosomal keratinocyte cell surface of human epidermis / T.Masunaga, H.Shimizu, A.Ishiko // J. Invest. Dermatol. 1995. - Vol. 104. - P. 941-945.

355. Menyhart, J. Many hitherto unknown peptides are principal constituents of uremic "middle molecules" / J.Menyhart, J.Grof// Clin. Chem. 1981 Oct. - №10. -1712-1716.

356. Meraviglia, MV. Autoantibodies against oxidatively modified lipoproteins and progression of carotid restenosis after carotid endarterectomy / V.V.Meraviglia,

357. E.Maggi, G.Bellomo // Stroke. 2002 Apr. - №4. - P. 1139 - 1141.

358. Microscopic inflammatory changes in colon of patients with both active psoriasis and psoriatic arthritis without bowel symptoms. / Scarpa R et al. // J. Rheumatol. 2000 May. - №5. - P. 1241 - 1246.

359. Mommas-Kienhius, M.A., Grauso S., Wisman M. et al. Low density-lipoproteirol receptor expression on keratinocytes in normal and psoriatic epidermis // J. Invest. Dermatol. Vol. 89. - P. 513 - 617.

360. Montuori, N. Soluble and cleaved forms of urocinase receptor: degradationproducts or active molecules / N.Montuori, V.Viscounter, G.Ross, P.Rango // Tromb. Homeost. 2005. - N2. - P. 190 - 192.

361. Muston, H.L. Remission of psoriasis during hemodilisis / H.L.Muston, S.Conceicao // Br. Med. J. 1978. - №1. - P. 480 - 481.

362. Nesterenko, V.B. Reducing the 137Cs-load in the organism of «Chernobyl» children with apple-pectin / V.B .Nesterenko, A.V.Nesterenko, V.L.Babenko // Swiss. Med. Wkly. — 2004. — №1-2. — P. 24 27.

363. Pinto, R.E., Bartley V.G. The effect of age and sex on glutation reductase and glutation perocsidase activities and on ascorbic glutation oxidation in rat liver Homogenats // J. Biochem. 1969.- Vol. 112. - №3ю - P. 109 - 115.

364. Plasma tumor necrosis factor in patients with septic shock. Mortality rate, incidence of adult respiratory distress syndrome, and effects of methylprednisolone administration / J.D.Marks {et al. // Am. Rev. Respir. Dis. 1990 Jan. - №1. - P. 94 - 97.

365. Prusiner, SB. Prion biology and diseases / S.B.Prusiner // Harvey Lect. -1991. №87. - P. 85-114.

366. Psoriasis / edited by H.A.Roenigk, jr., H.I.Maibach. NY, 1991.-960 p.

367. Pucsok, J., Kovacs L., Zalka A. et al. Separation of lipids by new thin-layer chromatography and overpressured thin-layer chromatography methods // Clin. Biochem. -1988. V.21. - P. 81 - 85.

368. Salacci, P. Oxidative stress as the triggering event for vascular remodelling / P.Salacci Hayoz // Nefrology Dialisis Transplantation. 1998. - №6. - P. 1343 - 1346.

369. Schlag, G. Mediators in trauma / G.Schlag, H. Redl // Acta Anaesthesiol. Belg.- 1987.- №4.-P.281 -291.

370. Schlag, G. Mediators of injury and inflammation / G.Schlag, H.Redl // World J. Surg., 1996. №4. - P. 406 - 410.

371. Schmid, E. Antioxidant and neutrohil-inhibiting properties of new 2-0 me-thil-6-(alkylthio) ascorbic acid derivatives / E.Schmid, V.Figala, D.Roth // J. Med. Chem. 1993. - №36. - P. 4021 - 4029.

372. Schoots, A. Uremic toxins and the elusive middle molecules /A.Schoots, F.Mikkers, C.Cramers //Nephron. 1984. - №1. - P. 1 - 8.

373. Schroder, JM. Innate antimicrobial peptides in the skin / J.M.Schroder, J.Harder // Med. Sci. (Paris). 2006 Feb. - №2. - P. 153 - 157.

374. Schwartzman, R. Selective modulation of cell adhesion molecules on lymphocytes by proteolytic enzymes / R. Schwartzman, J.Cidlowski // Endocr. Rev. -1993.-Vol. 14.-P. 133 136.

375. Simms, H.H. Polymorphonuclear leukocyte dysregulation during the systemic inflammatory response syndrome / H.H.Simms, R.D'Amico // Blood. 1994. - № 5.-P. 1398- 1407.

376. Skov, L. Bacterial superantigens and inflammatory skin diseases / L.Skov,

377. O.Baadsgaard // Clin. Exp. Dermatol. 2000 Jan. - № 1. - P. 57 - 61.

378. Small, N. Role of systemic inflammatory response syndrome and infection in the occurrence of early multiple organ dysfunction syndrome following severe trauma / N.Small, A.Messiah, A.Edouard // Intens. Care. Med. 1995. -№10. - P. 813 - 816.

379. Spurdele, A.B. Polimorphism at the glutation-S-transferase GSTM1, GSTT1,GSTP1 loci: risk of ovartin cancer by histological subtype / A.B.Spurdele, P.M.Webb, D.M.Purdie // Cancerogenesis. 2001. - №22. - P. 67 - 72.

380. Steinhoff, H.J. Methods for study of protein dynamics and protein-protein interaction in protein ubiquitination by electron paramagnetic resonance spectroscopy / H.J.Steinhoff// Front Bio-sci. - 2002. -Vol. 1, №7. - P. 97 -110.

381. Tracey, K.G. Physiological responses to cachectin. / K.G. Tracey, S.F. Lowry, A. Cerami // Ciba Found Symp. 1987. - №131. - P. 88 - 108.

382. Tracey, K.G. Cachetin/TNF-alpha in septic shock and septic adult respiratory distress syndrome. /K.G.Tracey, S.F.Lowry, A.Cerami //Am. Rev. Respir. Dis. 1988 Dec.-№6.-P. 1377 - 1379.

383. Trumbeckaite, S. Different sensitivity of rabbit heart and skeletal muscle to endotoxin-induced impairment of mitochondrial function / S.Trumbeckaite, J.R.Opalka, C.Neuhof // Eur. J. Biochem. 2001 Mar. - №5. - P. 1422 - 1429.

384. Turk, Z. A. Soluble LDL-immune complexes in type 2 diabetes and vascular disease / Z.Turk, M.Sesto // Horm. Metab. Res. 2002 Apr. - №4. - P. 196 - 201.

385. Valdimarsson, H. Psoriasis a disease of abnormal keratinocyte proliferation induced by T- lymfocytes / B.S.Baker, I.Jonsdottir, L.Fry // Immunol. Today. 1986. -N7. - P. 257 - 259.

386. Valdimarsson, H. Is psoriasis induced by streptococcal superantigens and maintained by M-protein-spesific T-cells that cross react with keratin / H.Valdimarsson, H.Sigmundsdottir // Clin.Exp.Immunol. 1997. - Vol.107, Suppl. 1. - P. 21 - 24.

387. Werdan, K. Supplemental immune globulins in sepsis: a critical appraisal. / K.Werdan, G.Pilz // Clin. Exp. Immunol. 1996. - №104, Suppl. 1. - P. 83 - 90.

388. Wertz, P.W. Covalently bound lipids of human stratum corneum / P.W.Wertz, D.C. Swartzendruber, K.C. Madison, D.T. Downing // J. Invest. Dermarol. 1987-Vol. 89.-P. 419-425.

389. Wianny, F. Specific interference with gene function by double-stranded RNA in early mouse development / F.Wianny, M.Zernicka-Goetz // Nat. Cell Biol. -2000 Feb. №2. - P. 70 - 75.

390. Weber, W.W. Acetilation / W.W.Weber, G.N.Levy, D.W.Hein // Conjugation reaction in drug metabolism / Ed.G.L.Mulder. London: Nailor and Frencis, 1990. -P. 213.

391. Williams, M.L. Lipid content and metabolism of human keratinocyte cultures grown at the air-medium interface / M.L.Williams, B.E.Brown, D.J.Monger // J. Cell. Physiol. 1988. - Vol. 136. - P. 103 -110.

392. Yamamoto, S. Adverse effects of vidiq display terminals on health / S.Yamamoto //Asian. Med. J. 1999. -№6. - P. 245 - 252.

393. Zimmerman, H. The clinical importance of the medium-sized molecules in the pathogenesis of nephrogenic anemia / H.Zimmerman, P.Furst, H.Bergstrom // Clin. Nephrol. 1980.-Vol. 14, №1.-P. 107- 1111