Научное обоснование и приёмы создания исходного материала для гетерозисной селекции сахарной свёклы (Beta vulgaris L.)

Богомолов, Михаил Алексеевич

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Научное обоснование и приёмы создания исходного материала для гетерозисной селекции сахарной свёклы (Beta vulgaris L.)
ВАК РФ 06.01.05, Селекция и семеноводство

Автореферат диссертации по теме "Научное обоснование и приёмы создания исходного материала для гетерозисной селекции сахарной свёклы (Beta vulgaris L.)"

На правах рукописи

УДК 633 63 575.631 52

БОГОМОЛОВ МИХАИЛ АЛЕКСЕЕВИЧ

НАУЧНОЕ ОБОСНОВАНИЕ И ПРИЁМЫ СОЗДАНИЯ ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ГЕТЕРОЗИСНОЙ СЕЛЕКЦИИ САХАРНОЙ СВЁКЛЫ (BETA VULGARIS L.)

Специальность 06.01 05 - селекция и семеноводство

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук

003160351

Москва-2007

Диссертационная работа выполнена в Государственном научном учреждении «Всероссийский научно-исследовательский институт сахарной свеклы и сахара имени А Л Мазлумова» Россельхозакадемии в 1983-2006 годах.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Буторина Анастасия Константиновна

доктор сельскохозяйственных наук, профессор Буренин Валентин Иванович

доктор сельскохозяйственных наук, профессор Тимин Николай Иванович

Ведущая организация - ГНУ «Северо-Кавказский научно-исследовательский институт сахарной свеклы и сахара»

Защита диссертации состоится «7/ 2007 г. в часов на

заседании диссертационного совета Д. 220 019 01 Государственного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский институт селекции и семеноводства овощных культур» по адресу 143080, Московская область, Одинцовский район, п/о Лесной городок, пос ВНИИССОК

Факс (495) 599-22-77 E-mail: vniissok(a),mail.ru

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного научного учреждения « Всероссийский научно-исследовательский институт селекции и семеноводства овощных культур»

Автореферат диссертации разослан «.Луу г.

Учёный секретарь

диссертационного совета Д 220 019 01 доктор сельскохозяйственных наук, ^ /

старший научный сотрудник О Н Пышная

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одной из важных проблем в селекции полевых культур является создание новых сортов и гибридов, обладающих комплексом хозяйственно полезных признаков и ценных биологических свойств Приоритетным направлением при этом по-прежнему остается сокращение сроков их создания

Известно, что в основе селекционного улучшения растений лежит исходное генетическое разнообразие и методы генетической реконструкции полезных признаков (Железное, 2000)

Н И Вавилов (1966) был первым, кто в полной мере оценил значение исходного материала для создания новых сортов Его идея о мобилизации мировых естественных ресурсов видов растений в настоящее время получила новое звучание

На современном этапе прогресс в селекции растений невозможен без использования новых методов и технологических решений, позволяющих ускоренно создавать разнообразные генотипы, которые могут служить в качестве исходного материала с новыми признаками и свойствами

Для создания нового исходного материала перспективно использование различных методов и приёмов радиационного мутагенеза

Одним из таких эффективных приемов, используемых в работе с разными культурами, является опыление облученной пыльцой (Жужжалова, 1999, Жученко, 2003), которое обеспечивает возможность усиления формообразовательного процесса, преодоления нескрещиваемости при отдаленной гибридизации, самонесовместимости, стимуляции апомиксиса, индукции трансформации, способствуя, таким образом, наиболее быстрому созданию гомозигот, резкому сокращению объема работ при отборе и повышению его эффективности (Дрягина, 1985, 8ешап, 1983, Петров, Сухарева, 1985, Андрейченко, Гродзинский, 1986, Мохно, Братухина, 2003, Давыдова, 2003, Литвинова, Давыдова, 2003)

Однако реализации потенциальных возможностей индуцированного мутагенеза у сахарной свёклы препятствует отсутствие общей методологии использования данного явления, а также простых и надёжных способов ускоренного массового получения гомозиготных линий и их идентификации

В последние годы селекция сахарной свеклы направлена на сочетание адаптивного потенциала сортов и гибридов с их высокой продуктивностью Эта, несомненно, трудная задача может быть решена на основе нового исходного материала, так как генетический пул современных сортов и гибридов в большинстве случаев весьма ограничен (Жученко, 1988, 1990)

В связи с этим большую актуальность приобретает проблема разработки новых подходов и совершенствование методов создания исходного материала сахарной свёклы, совмещающего высокую урожайность с другими хозяйственно ценными признаками и свойствами и направлений его селекционного использования

Все это определяет важность и необходимость проведения данной работы

Цель исследований заключалась в разработке теоретических и прикладных основ создания нового исходного материала с использованием индуцированного апомиксиса, а также формирования на его основе высокопродуктивных гибридов сахарной свеклы

Для реализации данной проблемы было предусмотрено решение следующих задач:

1 Исследовать влияние различных доз гамма-облучения пыльцы донора на процесс оплодотворения и формирования семян у сахарной свеклы

2 Изучить особенности формирования матроморфного и андрогенного потомства при проведении индуцированных опылений

3 Разработать эффективный способ создания гомозиготных гамма-линий с использованием облученной пыльцы и генетического маркирования, сформировать на его основе гомозиготные гамма-линии, и провести их гене-тико-селекционное изучение

4 Установить характер изменчивости и наследования признака раз-дельноплодности у гамма-индуцированных линий сахарной свёклы

5 Исследовать особенности проявления признака ЦМС у гамма-линий сахарной свёклы

6 Разработать технологию эффективного использования апомиктич-ных гамма-линий в селекционном процессе сахарной свеклы

Научная новизна исследований. Теоретически разработаны и практически реализованы селекционно-генетические аспекты создания нового исходного материала сахарной свёклы на основе индуцированных опылений облучённой пыльцой Для сахарной свёклы установлено, что гамма-облучение избирательно повреждает хромосомный аппарат пыльцы донора, в результате чего стимулирует псевдооплодотворение и вызывает появление растений, наследующих признаки материнского родителя

Впервые теоретически обоснованы оптимальные дозы для маркированного тестера культурной свёклы - Red tester в 1000 — 1500 Гр, для диких видов свеклы Beta corolhflora Z и Beta tngyna W et К — 1500 — 2000 Гр, послужившие принципиальной основой для разработки способа ускоренного получения гомозиготных линий (Ас № 1708210), позволившего создать новый исходный материал, отличающийся ценными селекционно-генетическими характеристиками

Молекулярно - генетическим анализом показано, что опыление пыльцой дикой свёклы В corolhflora Z обеспечивает передачу генетического материала из мужских гамет в женские по типу «трансформации», в результате чего возникают матроморфные растения с изменениями лишь по некоторым признакам, что послужило основанием для создания гомозиготного материала сахарной свёклы

У гамма-линий сахарной свеклы выявлены эмбриологические особенности проявления диплоспории, что выражается в нарушении или отсутствии процесса мейоза в мегаспороците и формировании диплоспорических заро-

дышевых мешков Получены оригинальные данные по сходству и различию эмбриологического развития апомиктичных растений в сравнении с амфи-миктичными Эмбриологически подтверждено у сахарной свеклы наличие агамоспермного пути образования семян наряду с нормальным циклом полового размножения, проявляющегося в виде гаметофитного апомиксиса и адвентивной эмбрионии

Впервые установлены закономерности проявления признаков стерильности и закрепительной способности у апомиктичных самостерильных и са-мофертильных форм сахарной свеклы. Это позволило на принципиально новой основе проводить ускоренное создание гомозиготных раздельноплодных линий О - типа

Экспериментально показано, что признак раздельноплодности у гамма-индуцированных линий передается по материнской линии Это расширяет и углубляет теоретические представления о природе данного признака, и имеет важное значение в практической селекции при проведении скрещиваний и отборе ценных генотипов с высокой степенью его проявления

Разработана методология генетико-селекционного использования апомиктичных гамма-линий сахарной свеклы Экспериментально доказано, что атомистический способ семярепродукции в сочетании с гибридизацией, отбором, молекулярным маркированием является эффективным средством ускоренного выведения новых гибридов, создания исходного материала в селекции на высокую продуктивность и другие ценные признаки

Впервые предложена оригинальная технологическая схема использования апомиктичных гамма-линий в селекционном процессе сахарной свеклы, позволившая создать гибридные комбинации, проявляющие гетерозис в ряду поколений

Практическая ценность и реализация результатов исследований.

Наиболее перспективные, маркированные по изоферментному составу гамма-МС-линии и гамма-линии-опылители закрепители стерильности О-типа зарегистрированы в селекцентре ВНИИСС в качестве нового исходного материала и используются как компоненты создаваемых гибридов

Выявленные цитоэмбриологические особенности апомиктичных растений сахарной свеклы могут быть использованы в качестве маркерных признаков при отборе апомиктичных форм и представляют практический интерес для совершенствования селекционной работы

Селекционная ценность апомиктичных гамма-линий заключается в возможности использования их при разработке новых селекционных программ, основанных на применении элементов апомиктичного размножения Апомиктичные гамма - линии рекомендуется использовать в селекционном процессе сахарной свеклы для получения гибридов разных направлений продуктивности

Создан и включён в Государственный реестр селекционных достижений России перспективный гибрид РМС — 90, (А с № 31185) с использованием маркированной по изоферментному составу гамма-линии у - РФ - 2113, превышающий стандарт по урожайности корнеплодов на 18,6 % и сбору са-

хара на 17,3 % Получены патенты на селекционное достижение РФ на 7 линий сахарной свёклы №№ 2708, 2709, 2710, 2711, 2712, 2713, 2785, являющихся исходными формами создаваемых перспективных гибридов По данным экологического сортоиспытания предложены для передачи в ГС И два апомиктичных гибрида, сохраняющих гетерозис в поколении Р[ и Р2

Внедрение предлагаемых нами научно-обоснованных технологий создания, поддержания и размножения исходного линейного материала в практическую селекцию позволит ускоренно получать гомозиготные генетически стабильные линии и сократить продолжительность селекционного процесса при создании гибридов в 2 — 3 раза

Разработанные в процессе исследований методические подходы апробированы и могут быть использованы в учебных программах по биологии, цитологии, генетике, селекции и семеноводству в высших и средних учебных заведениях Полученный в работе новый исходный материал сахарной свеклы также может использоваться в дальнейших фундаментальных и прикладных исследованиях.

Положения, выносимые на защиту:

* экспериментальное обоснование использования облученной гамма-радиацией пыльцы для стимуляции неоплодотворённой яйцеклетки и индуцирования диплоидного матроморфного потомства у сахарной свеклы,

* эффективный способ получения гомозиготных линий сахарной свёклы, основанный на использовании облученной пыльцы и генетическом маркировании,

* созданные гамма - линии, обладающие высокой раздельноплодно-стью, способностью закреплять ЦМС и склонностью к апомиктическому размножению,

* технологическая схема создания гибридов сахарной свёклы, основанная на использовании в селекционном процессе индуцированного апомикси-са

Апробация работы. Результаты исследований ежегодно докладывались на заседаниях ученого Совета ВНИИСС (1983 - 2006 гг), Всесоюзной конференции по физиолого-генетическим проблемам интенсификации селекционного процесса (Саратов, 1983), Третьей Всесоюзной конференции по экологической генетике растений и животных (Кишинёв, 1987), Втором Российском симпозиуме по новым методам биотехнологии растений (Пущино, 1993), Международной конференции по молекулярно-генетическим маркерам и селекции растений (Киев, 1994), Международном симпозиуме по апо-миксису растений (Саратов, 1994), Всероссийском выставочном центре «Наука-АПК» (Москва, 1995), Российской выставке «Фермер - 1995» (Москва, 1995), Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 100-летию со дня рождения АЛ Мазлумова (Рамонь, 1996), II (X) съезде Русского ботанического общества (Санкт-Петербург, 1998), II съезде Вави-ловского общества генетиков и селекционеров (Санкт-Петербург, 2000), IV Международном симпозиуме «Новые и нетрадиционные растения и перепек-

тивы их использования» (Пущино, 2001), Международной научно-практической конференции, посвященной 80-летию ВНИИСС, «Научное обеспечение устойчивости свекловодства в России» (Воронеж, 2003), Международной научно-практической конференции «Факторы экспериментальной эволюции организмов» (Киев, 2003), Международной научно-практической конференции «Приоритетные направления в селекции и семеноводстве сельскохозяйственных растений в XXI веке» (Москва, 2003), Ist Joint IIRB - ASSBT Congress (San-Antomo, 2003), III Съезде Всероссийского общества генетиков и селекционеров «Генетика в XXI веке современное состояние и перспективы развития» (Москва, 2004), XIII Международном симпозиуме «Нетрадиционное растениеводство Эниология Экология и здоровье» (Алушта, 2004), IV Московском международном конгрессе «Биотехнология состояние проблемы и перспективы развития» (Москва, 2007), Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 120-летию со дня рождения Н.И Вавилова и Н А Успенского «Селекция и семеноводство полевых культур в XXI веке» (Воронеж, 2007) Экспериментально созданный материал демонстрировался во Всероссийском Выставочном Центре (ВВЦ) и отмечен медалью «лауреат ВВЦ» (1996)

Экспериментальные данные получены автором самостоятельно или при его непосредственном участии, которое выразилось в подборе, создании, оценке исходного материала и гибридов сахарной свёклы на его основе, выборе методов и техники проведения исследований, обработке результатов, интерпретации экспериментальных данных, и формулировании выводов

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 37 работ, 8 из которых в списке изданий, рекомендованным ВАК РФ, 1 монография, 1 авторское свидетельство на изобретение, 11 рационализаторских предложений по работам в области селекции сахарной свёклы, 1 авторское свидетельство на гибрид сахарной свеклы РМС - 90, 7 патентов на селекционные достижения РФ

Структура и объём диссертации Диссертационная работа состоит из введения, 6 глав, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 461 источник, в том числе 128 на иностранных языках и приложения Работа изложена на 313 страницах компьютерного текста, содержит 78 таблиц, 55 рисунков, 5 приложений, включающих таблицы, свидетельства на линии, авторское свидетельство на изобретение, авторское свидетельство на гибрид сахарной свеклы и патенты РФ на селекционное достижение

Автор выражает глубокую и искреннюю признательность за оказание консультативной помощи при выполнении данной работы доктору с -х наук, член-корр РАСХН Корниенко А В , доктору биологических наук Жужжало-вой Т П , доктору с.-х наук Ошевневу В.П , кандидату биологических наук Агафонову Н С , кандидату с -х наук Мазепину М Г , доктору биологических наук Федуловой Т П, кандидату биологических наук Фоменко Н Р , а также всем сотрудникам отдела биотехнологии ВНИИСС, принимавшим участие в подготовке и выполнении данной работы

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Методы создания исходного материала сахарной свеклы

Обобщены литературные данные, отражающие основные представления об особенностях создания исходного материала сахарной свёклы традиционным методом инбридинга и с использованием радиационного мутагенеза Подробно обсуждаются вопросы индуцирования апомиксиса и его роли в ускорении селекционного процесса сахарной свёклы Представлен анализ состояния селекции сахарной свеклы на гетерозис на современном этапе, отмечены нерешенные проблемы и определена актуальность проведения настоящего исследования

ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ, МЕТОДИКА И УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальная работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте сахарной свёклы и сахара им А Л Мазлумова, начиная с 1983 по 2006 годы, по проблеме О Ц036 "Создание и хозяйственное освоение высокопродуктивных сортов и гибридов сахарной свёклы", задание 01 (СЭВ), проблеме 0.51 104 "Разработать генетические и физиолого-биохимические принципы селекции на гетерозис, создать новые исходные материалы", проблеме 5 11. КПНТП - стран-членов СЭВ и СФРЮ, и в рамках Государственной научно-технической программы "Сахар и его заменители", а затем Республиканской целевой научно-технической программы "Сахароносные растения и сахар" и тематического плана ВНИИСС (раздел 01 01 HI. "Изучить роль генотипа и влияние факторов регуляции генома на систему размножения сахарной свеклы" и раздел 01 02 "Разработать метод экспериментального создания форм свёклы с апомиктическим размножением")

Для исследований в качестве исходного материнского компонента были использованы пыльцестерильные формы различного происхождения с высокой раздельноплодностью, отличающиеся наличием рецессивного признака зеленой окраски гипокотиля, представленные образцами из Льговской ОСС, ВНИИСС, Германии, Швеции, США, Англии, Дании, любезно предоставленные селекционерами ВНИИСС (Ошевнев В П , Мазепин М Г ), а также материалами, выделенными автором во время работы в лаборатории гетеро-зисной селекции (1975-1980 гг) и лаборатории генетики и цитологии (19801984 гг)

В качестве отцовского компонента привлекались материалы коллекции ВИР (г Санкт-Петербург) дикие виды свеклы Beta corolhflora Z (2n=36), Beta trigyna Wet К (2n=54) с элементами апомиксиса, а также культурные виды Carters long red (K-243) и Lange schwarzrote (K-36) с маркированными доминантными признаками окраски вегетативных органов (RR), предоставленные доктором с -х наук, профессором Бурениным В И

За сутки до проведения опылений пыльцу опылителя подвергали воздействию различных доз гамма-радиации от 1000 до 3500 Гр на установке РХМ-у-20, с источником 60Со (лаборатория биофизики ЦГЛ им И В Мичурина, г Мичуринск Тамбовской области и НПО "Энергия", г Воронеж) при мощности дозы облучения 12,5 Гр/мин и 30 Гр/мин

На каждом из отобранных по раздельноплодности, стерильности МС-растений, маркированных по маркерному гену Ме-1, проводили принудительные опыления пыльцой, обработанной всей серией доз (от 1 - 500 Грей до 1000 - 3500 Грей), в том числе контрольное опыление необлученной пыльцой и самоопыление

Биохимический анализ изоферментного состава линий сахарной свеклы проводили по маркерным генам Ме-1, Mdh-1, Adh-1, Gdh-1, контролирующим ферменты малатдегидрогеназу НАДФ - зависимую, НАД - зависимую, алкогольдегидрогеназу, глутаматдегидрогеназу (Левитес, 1986)

Фертильность пыльцевых зерен определяли методом окрашивания 2 %-ным раствором ацетокармина с последующим осветлением препаратов в жидкости Гойера (Юрцев, Пухальский, 1968) Фиксацию пестиков и окрашивание временных препаратов для выявления активности роста пыльцевых трубок проводили флуоресцентным методом (F W Martin, 1959), модифицированным для сахарной свеклы, используя в качестве красителя спирторас-творимый анилиновый синий (Вайсман, Жужжалова, Агафонов, 1984) Определение количества хромосом проводили путем окрашивания ацетокармином соматических клеток вегетативных органов свеклы (Ярмолюк, Ширяева, 1982)

Микрофотосъемки выполнены с помощью микрофотонасадки МФН-10, микроскопа МБИ-15 при увеличении 10x2,5x40, 10x2,5x90 Для просмотра препаратов использовали микроскопы МБИ-11, "Биолам"-Р-14 с люминесцентным осветителем ОИ-18

Молекулярный анализ по ДНК-маркерам проводили в ООО «Компания Биоком», (г Москва) по методу Sagai-Maroof (1984), в модификации для сахарной свеклы (Федулова, 2005)

Проведение парных скрещиваний и инцухтирование семенных растений с оценкой по закрепительной способности осуществляли как в условиях искусственного климата, так и в полевых условиях под бязевыми изоляторами, применяя методику И Я Балкова (1975, 1978) Определение завязывае-мости семян проводили через 30 суток после опыления путем подсчета количества завязавшихся семян к общему числу цветущих бутонов (Слюсаренко, Бережко, 1976) Анализ корнеплодов по определению массы корнеплода, содержанию сахара и технологическую оценку осуществляли на автоматизированной линии "Венема" методом холодной дигестии (Силин, 1959)

Статистическую обработку полученных данных проводили методом однофакторного дисперсионного анализа (Доспехов, 1985) и с использованием критерия достоверности %2 (Плохинский, 1970, Зайцев, 1973, Перфильев, 1980, Лакин, 1980)

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ОБЛУЧЕННОЙ ПЫЛЬЦЫ ДЛЯ ИНДУЦИРОВАНИЯ НОВОГО ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА

В настоящее время широкое распространение в селекции сахарной свеклы получило создание гетерозисных гибридов на MC-основе Одним из основных требований , предъявляемых к родительским компонентам, является их гомозиготность по большинству генов, которая достигается в традиционной селекции глубоким инбридингом, что влечет за собой инбредную депрессию.

Альтернативным методом получения гомозиготных линий сахарной свеклы является метод индуцирования их с использованием гамма-радиации

Установлено, что ионизирующие излучения, действуя на генеративные органы растений, в одних случаях вызывают апомиктическое развитие семян, ведущее к возникновению матроморфных форм (Петров, 1979, Петров, Сухарева, 1985, Сарычев, 1986, Батурин, 1994, 2004), в других - на основе трансформации формируют растения с рекомбинантными генами (Сёмин, 1970,1988, Hess, 1975, Pandey, 1975,1980, Картель, 1981,1983; Engvild, 1985, Stephen, 1989, Жученко, 2003,2004)

Принцип таких воздействий заключается в побуждении яйцеклетки к развитию опылением пыльцевыми зернами, имеющими функционально неполноценные спермии, повреждённые высокими дозами гамма-радиации

Это позволило предположить, что радиационные воздействия можно использовать для получения мутаций и формировать растения сахарной свеклы с ценными признаками Поэтому в наших исследованиях был использован аналогичный подход

Влияние гамма-радиации на оплодотворяющую способность пыльцевых зерен и завязываемость семян

Различные физические факторы оказывают на генеративные органы определенное влияние, как на оплодотворяющую способность пыльцевых зерен, так и в целом на завязываемость семян (Агафонов, Жужжапова, 1984, Моргун и др , 1985, Ларченко, Моргун, 1990, Юдакова, 1994).

Поскольку при опылении облучённой пыльцой особенности процесса оплодотворения и постгамного развития в значительной степени зависят от характера прорастания пыльцевых зерен, роста пыльцевых трубок и типов аномалий в мужских генеративных органах , нами была изучена жизнеспособность пыльцевых зерен и рост пыльцевых трубок у сахарной свёклы после гамма-облучения

В процессе проведенных наблюдений нами выявлено, что дозы в пределах 1 - 500 Гр с интервалом в 25 Гр не оказывали существенных изменений в развитии генеративных органов опылителей В то время как использование высоких доз радиации вызывало снижение жизнеспособности пыльцы у культурной свеклы, маркированной по генам окраски вегетативных органов примерно в 2 - 2,5 раза по сравнению с контрольным вариантом без облучения (Богомолов и др , 1984, 1987).

При опылении МС-растений облученной пыльцой диких видов свеклы в дозе 1000 Гр несколько увеличивался процент проросших пыльцевых зерен у Beta corolhflora с 9,8 % до 13,6 %, у Beta trigyna с 1,8 % до 58,0 %

Увеличение количества проросшей пыльцы у диких видов свеклы подтверждается сделанными ранее исследованиями о снятии половой несовместимости при использовании радиации в результате межвидовых скрещиваний (Жуков, Рыжков, 1980, Жученко, Кравченко, 1986).

При анализе результатов опыта обращает на себя внимание тот факт, что дальнейшее повышение доз облучения до 2000-3000 Гр вызывало у пыльцы диких видов снижение жизнеспособности, но прорастание пыльцевых зерен сохранялось, что согласуется с результатами, полученными на свёкле (Yuce, 1973) и на петунии (Андрейченко, Гродзинский, 1982, 1983)

Установлено, что с увеличением дозы облучения наблюдается снижение темпа её прорастания, а также уменьшается активность роста пыльцевых трубок и проникновение их в околоплодник и семязачаток Поскольку аналогичная ситуация описана и для других культур (Marcucci, Ragazzmi, 1984, Pfahler, 1971, Андрейченко, 1989, Юдакова, 1994 и др), можно говорить об универсальном характере отмеченной зависимости При этом наблюдается неадекватное влияние радиации на активность роста пыльцевых трубок в зависимости от вида опылителя Так, если в качестве опылителя используется облученная пыльца культурной свеклы Red tester, активность проникновения снижается прямо пропорционально дозе облучения

Исследование роста пыльцевых трубок с помощью флуоресцентной микроскопии показало, что облучение пыльцы угнетающе действует на рост пыльцевых трубок Следует отметить, что с увеличением дозы облучения увеличивалось количество аномальных пыльцевых трубок в виде утолщений, вздутий, изгибов и спиралевидных закручиваний, повышается количество пыльцевых зерен с короткими пыльцевыми трубками Даже через сутки после опыления значительная доля пыльцевых трубок не дорастает до завязи

Проведение нами эмбриологического анализа показало, что опыление пыльцой, облученной дозами радиации свыше 1500 Гр, вызывало значительное снижение количества нормально развитых зародышей и резкое увеличение дегенерировавших, которое составило при опылении Red tester 63,6 %, Beta corolhflora - 56,2 %

Таким образом, большая часть семязачатков (30 - 65 %) при радиационном воздействии на пыльцу остаётся неоплодотворенной, причём с увеличением дозы облучения число оплодотворенных зародышевых мешков уменьшается Это связано с недорастанием пыльцевых трубок до семязачатков, о чем свидетельствуют исследования пыльцевых трубок в тканях пестика

Мы полагаем, что увеличение доз облучения вызывает определенные нарушения в хромосомном аппарате пыльцы, снижающие ее оплодотворяющую способность и количество нормально развитых зародышей Полученные данные согласуются с результатами исследований Р Д Василёвой и Е А Ларченко (1984), установленными для кукурузы

При проведении принудительных опылений мужскостерильных форм сахарной свеклы различного происхождения пыльцой В corolliflora было выявлено, что завязываемость семян зависит не только от дозы облучения пыльцы опылителя, но и от генотипа исходной материнской формы Так, у генотипа МС-1066 происхождения из Германии она увеличилась с 10,5 % на контроле без облучения до 12,5 - 47,6 % при дозах 1000 Гр и 1500 Гр, соответственно У генотипа МС-1158 происхождения из Швеции завязываемость семян увеличилась с 16,7 % на контроле до 70,8 - 80,6 % при дозе 1000 Гр и 1500 Гр, соответственно

Экспериментальные исследования показали, что завязываемость семян при опылении пыльцой культурной сахарной свеклы, маркированной по генам окраски вегетативных органов - Red tester, была низкой и в среднем на контроле составила 44,1 % (табл 1)

Таблица 1 - Влияние различных доз радиации на завязываемость семян при опылениях МС-форм сахарной свеклы, 1986 - 1990 годы

Вид Доза Количество анализируемых семян у Кри-

опылителя облучения материнских растений терии

пыльцы, Всего, из них % х2

Гр шт завязалось, шт

Red tester контроль 510 225 44,1 -

2n=18 1000 382 77 20,2 8,88

1500 376 47 12,5 17,64

2000 434 77 17,7 11,28

Beta corolliflora контроль 657 58 8,8 -

2n=36 1000 893 144 16,1 2,14

1500 892 145 16,2 2,19

2000 798 76 9,5 0,03

2500 423 17 4,0 1,80

3000 481 24 5,0 1,05

х2 05 = 3,84

Опыление облучённой пыльцой дикой свеклы Beta corolliflora, наоборот, увеличивало завязываемость семян с 8,8 % на контроле до 16,2 % при дозе 1500 Гр, дальнейшее увеличение дозы облучения свыше 2000 Гр снижало завязываемость семян до 4,0-5,0 %

Проращивание семян, полученных в результате индуцированных опылений, показало их пониженную всхожесть Наибольшее количество проросших семян имели варианты с использованием принудительных опылений мужскостерильных растений гамма-облученной пыльцой различных видов свеклы в дозах 1500 - 2000 Гр Так, при опылении облученной пыльцой маркированной свеклы количество проросших семян составило 76,5 и 67,6 % В вариантах с использованием облученной пыльцы диких форм свеклы количество проросших семян варьировало от 57,2 до 66,5 %

Большую помощь в определении выполненности и всхожести семян без проращивания оказал метод рентгенодиагностики семян, заключающийся в просвечивании семян рентгеновскими лучами в дозах 60 рентген/мин Сравнение рентгенографического метода с методом проращивания семян в термостате показало достоверность полученных результатов Это позволило нам модифицировать метод рентгенодиагностики семян для сахарной свеклы (Богомолов, 1986), который способствует повышению эффективности селекционных работ при отборе и формировании матроморфного потомства.

Особенности стимулирования индукции матроморфного потомства

В результате индуцированных воздействий на пыльцу опылителя гамма-радиацией и последующего проведения принудительных внутривидовых и межвидовых опылений было получено семенное потомство Му,

Морфологический анализ потомства, проведенный нами на стадии проростков, показал, что использование в качестве опылителя маркированной свеклы Red tester позволило получить на контроле без облучения почти полностью гибридное потомство Так, из 1860 проростков 99,6 % были с красной окраской гипокотиля, что связано с высокой совместимостью скрещиваемых компонентов культурных видов свеклы и их повышенной степенью гибридизации

Нашими наблюдениями установлено, что наибольшее количество проростков материнского типа (зеленая окраска гипокотиля) было получено при опылении мужскостерильных растений облученной пыльцой в дозах 1500 и 2000 Гр -34,6 и 35,5 %, соответственно (табл 2)

Таблица 2 - Влияние доз гамма-радиации на выход растений с материнскими признаками, Red tester, 1986-1990 годы _

Дозы облучения пыльцы, Гр Высеяно семян, шт Количество проростков Критерий достоверности, х2

Всего, шт в т ч. с гипокотилем

зеленым красным

шт % шт %

контроль 2369 1860 7 0,4 1853 99,6 -

1000 912 405 13 3,3 392 96,7 36,58

1500 102 78 27 34,6 51 65,4 53,21

2000 71 48 17 35,5 31 64,5 113,79

X2 05 =3,84

При опылении пыльцой Beta corolliflora на контрольном варианте без облучения было зарегистрировано 81,5 % растений отцовского типа и 18,5 % материнского типа, которые, видимо, возникли в результате стимулированного чужеродной пыльцой псевдооплодотворения

Наибольшее количество растений материнского типа наблюдалось при опылении облученной пыльцой Beta corolliflora при более высоких дозах -2000 Гр, 2500 Гр и 3000 Гр, что составило 42,7 %, 55,3 % и 54,0 %, соответственно, однако при этих дозах значительно снижалось общее количество выживших проростков, и они погибали на стадии 2-3 пар листьев (табл 3)

Таблица 3 - Влияние доз гамма-радиации на выход растений с материнскими признаками при опылении пыльцой Beta corolliflora, 1986-1990 годы

Дозы облучения пыльцы, Гр Высеяно семян, шт Количество проростков Критерий достоверности, х2

Всего, шт в том числе

материнского типа отцовского типа

шт % шт %

контроль б/о 512 389 72 18,5 317 81,5 -

1000 406 156 52 33,3 104 66,7 8,91

1500 636 364 98 26,9 266 73,1 15,04

2000 197 131 56 42,7 75 57,3 31,35

2500 93 47 26 55,3 21 44,7 26,84

3000 114 50 27 54,0 23 46,0 24,81

3500 29 15 2 13,3 13 66,7 1,15

Х2о5 = 3,84

Число выживших растений материнского типа колебалось от 23,1 до 100,0 % Наименьшее количество выживших растений наблюдалось у генотипов МС-89-6-05 от 37,5 до 23,1 % и МС-1158-19 - от 28,3 % при дозе облучения в 1000 Гр до 0 % при дозе 2000 Гр, соответственно

Матроморфное потомство, однородное по окраске вегетативных органов, форме листа, форме розетки листьев в период вегетации 2-го года жизни не отличалось по типу куста от исходных семенных растений МС-формы сахарной свеклы и сохраняло ее признаки, такие как стерильность, раздельноп-лодность Оценка плоидности показала, что все растения материнского типа имели диплоидный набор хромосом (2п = 18), т е. в процессе опылений гам-ма-облучённой пыльцой гибридизации не происходило, а индуцировалось диплоидное апомиктичное потомство, что согласуется с результатами, полученными на кукурузе (Моргун и др , 1985, Ларченко, Моргун, 1990)

Признак раздельноплодности, характерный для материнских мужско-стерильных растений при гамма-облучении пыльцы опылителя, сохранялся от 60 % до 100 % в зависимости от генотипа исходных форм и дозы облучения

Полная мужская стерильность у потомства Myi была отмечена в материалах от облучения пыльцы опылителя высокими дозами радиации — 20002500 Гр При облучении пыльцы дозами 1000-1500 Гр стерильность потомств колебалась в пределах 50-60 %

Таким образом, с помощью облученной пыльцы опылителя и проведения принудительных опылений мужскостерильных растений было получено матроморфное диплоидное потомство с ценными селекционными признаками - высокой раздельноплодностью, различающееся по стерильности и сохраняющее морфологические признаки материнской формы Наибольшее количество растений материнского типа было получено при дозах облучения в 1500 Гр для всех видов опылителей

Полученные результаты позволили нам предположить, что возникновение диплоидного матроморфного потомства обусловлено явлением псевдогамии, основанном на стимуляции развития неоплодотворенной яйцеклетки пыльцой, хромосомный аппарат которой поврежден высокими дозами радиации

Морфо-генетические аспекты формирования андрогенного потомства

При опылении мужскостерильных форм облученной пыльцой было получено потомство и с отцовскими морфологическими признаками (розовая окраска гипокотиля - Rr) Как оказалось, гибриды, имеющие триплоидный (2п=27) набор хромосом, были обнаружены только при опылении пыльцой Beta corolhflora в контрольном варианте без облучения

Данные гибридные растения морфологически не отличались от исходных форм дикого отцовского родителя прижатая, раскидистая прикорневая розетка листьев, форма листьев яйцевидная, удлиненная с заостренной верхушкой Листья темно-зеленые, матовые, опушенные с хорошо выраженной нервацией Стебли и черешки листьев у основания окрашены антоциановой окраской Цветоносные побеги у семенных растений крупных размеров, восьмиреберные и хорошо облиственные, полые внутри Цветы сидят раздельно или по два-три вместе, семена с твердой кремнистой оболочкой

Остальные растения, полученные от опыления облученной пыльцой Beta corolhflora (2п=36), были негибридного происхождения и имели, также как и матроморфное потомство, диплоидный набор хромосом (2п=18) Количество таких растений варьировало от 18,8 % до 100,0 %, всхожесть тоже колебалась в пределах от 50,0 до 100,0 %

Кроме того, у остальных растений отцовского типа, полученных в результате гамма-индуцированных опылений, обнаружена по гену MDH-1 трансформация аллелей с повышенной электрофоретической подвижностью (NN-O), присущая отцовскому родителю, обладающему доминантными генами красной окраски гипокотиля

Присутствие у части растений признаков опылителя подтверждает аналогичные результаты, полученные Р D Cafhgari, N R Ingrem, J I Jinks (1981) при "трансформации" генов у табака облученной пыльцой

Следует отметить, что растения отцовского типа различались по типу семенного растения Так, были выделены одностебельные формы (семенные растения I типа) у потомков МС-104-8 х В corolhflora, 2000 Гр, 2п=18 и многостебельные (семенные растения II и III типов) у потомств МС-104-8 х В corolhflora, 1500 Гр, 2п=18 Вместе с тем, у растений отцовского типа наблюдались признаки материнской формы такие, как раздельноплодность и стерильность

Анализ семенных растений 2 года жизни показал, что растения отцовского типа практически полностью были стерильными, исключение составил один образец МС-152-13, у которого стерильность оказалась на уровне 75,0

% При этом раздельноплодность потомств варьировала от 71,4 % у МС-89-6 до 94,7 % у МС-152-25 Андрогеиное потомство было отобрано и изучено в дальнейшем для определения его селекционного использования

Таким образом, проведенные исследования показали, что присутствие у части растений признаков отцовского родителя, свидетельствуют о наличии у подобных форм отцовских генов, доставшихся потомству в результате индуцированных скрещиваний

Механизм взаимодействия генов нефункционирующих спермиев и пар-теногенетически развивающейся яйцеклетки до сих пор не выявлен, хотя есть предположения о включении фрагментов экзогенной ДНК в геном яйцеклетки или апомиктично развивающегося зародыша (Семин, 1970, Рапску, 1981)

Использование гаметной трансформации для переноса генетической информации из пыльцы с помощью пыльцевых трубок в последнее время считается перспективным, наряду с включением экстрактов ДНК в изолированные клетки и протопласты растений, что в целом может способствовать генетическому преобразованию растений (Жученко, 1988, 2001, 2003) Это явление может быть использовано, как один из методов генетической инженерии для переноса некоторых ценных признаков (холодостойкости, засухоустойчивости, устойчивости к болезням, апомиксиса) от диких видов к культурным растениям

ТЕХНОЛОГИЯ СОЗДАНИЯ И ОЦЕНКИ гомозиготных ГАММА-ЛИНИЙ

Решающее значение в гибридной селекции имеет создание большого количества инбредных линий, обладающих высокой комбинационной способностью и генетической выравненностью по данному признаку

Для успешного проведения исследований по получению линий, а на их основе гибридов, очень важное значение имеет изучение маркерных генов, необходимых в работах по идентификации линий и контролю за их скрещиванием Маркерные гены должны иметь простое наследование, четкое фено-типическое проявление и легкость идентификации, не зависящие от условий выращивания растений

Применение в качестве генетических метчиков морфологических признаков, обусловленных различными типами окраски вегетативных органов, должного эффекта для выделения гомозиготных форм не обеспечило Объясняется это тем, что из-за невысокой информативности морфологических маркеров, ограниченной проявлением их доминантности и рецессивности, в большей степени зависящих от условий выращивания, терялась объективность оценки полученных результатов

Использование в качестве маркеров изоферментов оказалось более надежным методом, нежели применение морфологических маркеров, так как эти признаки не подвержены фенотипической изменчивости, они более стабильны (Левитес, 1986, Глазко, Созинов, 1999) Поэтому при формировании гомозиготных линий мы применяли генетическое маркирование

Использование молекулярно-генетических маркеров для отбора гомозиготных линий сахарной свёклы

Генетическое маркирование основано на кодоминантном типе наследования изоферментов, т е в гетерозиготном состоянии предполагается проявление признаков обоих родителей, а в потомстве - расщепление на составляющие гомозиготы На основе изоферментного анализа состава аллелей маркерного гена Ме-1, контролирующего фермент мапатдегидрогеназу -НАДФ- зависимую, был выделен ряд генотипов материнской формы с высокой степенью гомозиготности (табл 4)

Как свидетельствуют полученные нами данные, наибольшее количество гомозиготных растений (65,2 %) получено при опылении МС-форм облученной пыльцой Beta corolliflora в дозе 1500 Гр

При опылении мужскостерильных растений облученной пыльцой маркированной свеклы Red tester наибольшее количество гомозигот было получено в дозах 1500-2000 Гр - 60,0 и 61,4 %, соответственно

Таблица 4 - Результаты изоферментного анализа матроморфного потомства

по гену Ме-1,1986-1988 годы

Доза об- Анализи- Из них по составу аллелей В том чис- Кри-

лучения ровалось гена Ме-1 ле гомози- терий

пыльцы, зеленых FF SS FS гот дос-

Гр раст шт (FF+SS) тов

шт % шт % шт % шт % х2

a) Beta corolliflora

контроль б/о 53 15 28,3 8 15,1 30 56,6 23 43,4 -

1000 51 18 35,3 8 15,7 25 49,0 26 51,0 2,08

1500 132 71 53,8 15 11,4 46 34,8 86 65,2 12,10

2000 78 39 50,0 11 14,1 28 35,9 50 64,1 7,57

2500 20 13 65,0 0 0,0 7 35,0 13 65,0 15,10

3000 19 4 21,0 3 15,8 12 63,2 7 36,8 1,12

б) Red tester

контроль б/облучения все растения с красной окраской гипокотиля выбракованы как гибриды

1000 21 7 33,5 4 19,1 10 47,6 11 52,4 -

1500 5 3 60,0 0 0,0 2 40,0 3 60,0 0,51

2000 7 3 42,8 2 28,6 2 38,6 5 61,4 0,71

Хм=3,84

По данным наших исследований было показано, что среди гомозигот по генам окраски процент гетерозиготных FS-генотипов составил от 34,8 при опылении облученной пыльцой В corolliflora в дозе 1500 Гр до 63,2 % при дозе 3000 Гр При опылении облученной пыльцой маркированной свёклы Red tester количество таких растений варьировало от 47,6 % при дозе в 1000 Гр до 38,6 % при дозе 2000 Гр

Кроме того, было установлено, что количество гомозиготных растений определялось не только дозой облучения пыльцы опылителя, но и зависело от генотипа исходной материнской формы (табл 5)

Таблица 5 - Влияние генотипа реципиента на выход гомозиготных по гену _Ме-1 растений при опылении пыльцой Beta corolhflora

Доза МС- 104 Критерий МС-1517 Крите-

облучения получено из них х2 получено из них рий

Гр растений гомози- растений гомози- х2

материн гот, % материн гот, %

типа, шт типа, шт

Контроль б/о 6 50,0 - 12 61,9 -

1000 4 50,0 - 19 69,7 0,73

1500 14 75,7 0,67 13 87,7 1,03

2000 9 80,2 0,75 6 97,4 3,03

X2os=0,10

Так, генотип материнской формы МС-1517 при опылении облученной пыльцой давал не только наибольший выход растений материнского типа, но и наибольшее количество гомозиготных по гену Ме-1 форм растений, которое варьировало от 69,7 % при облучении пыльцы в дозе 1000 Гр до 97,4 % при дозе 2000 Гр Опыление генотипа МС-104 гамма-облученной пыльцой индуцировало меньшее количество гомозиготных форм и составило от 50,0 % при дозе облучения 1000 Гр до 80,2 % при дозе 2000 Гр

Таким образом, количество гомозиготных растений при однократном опылении исходных МС-форм облученной пыльцой составило от 64,1 % до 65,2 % Гомозиготность отдельных потомств при опылении облученной пыльцой в дозах 1500 -2000 Гр варьировала в пределах 87,7-97,4 % Чтобы создать линии с такой степенью гомозиготности традиционным способом необходимо провести цикл близкородственных (сибсовых) скрещиваний с чередующимся инцухтированием в течение нескольких поколений, на что обращали внимание в своих исследованиях И Я Балков (1978), С И Малецкий в соавторстве (1988) и другие

Использование других изоферментных маркеров - малатдегидрогеназы НАД-зависимой, алкогольдегидрогеназы и глутаматдегидрогеназы позволило нам выделить линии, гомозиготные по 4 изоферментным локусам, а также по маркерным генам окраски

Отобранные, гомозиготные по четырем маркерным локусам растения, послужили основой для создания гамма-линий сахарной свеклы с ценными селекционными признаками (Богомолов, Жужжалова, Корниенко, 1994)

Метод создания гомозиготных гамма-линий

Гомозиготные линии сахарной свеклы получают принудительным самоопылением растений исходной формы в течение нескольких поколений (инбридинг) Недостатками известного метода являются длительность получения линейного материала, большие затраты, невозможность получения линий от самонесовместимых растений и форм, обладающих мужской стерильностью

Широкое применение на разных культурах нашёл метод индуцирования гомозиготных линий с использованием ионизирующего излучения и мо-лекулярно-генетического маркирования

Полученный нами экспериментальный материал послужил основой для разработки способа получения гомозиготных линий сахарной свеклы (ас №1708210, 1991) и предложен принцип его практического применения в селекционном процессе, метод основан на использовании принудительных опылений мужскостерильных растений сахарной свеклы пыльцой диких видов или пыльцой маркированной свеклы, облученной гамма-лучами в дозе 1500-2000 Гр и генетическом маркировании исходных форм, а также индуцированных потомств

Принципиальная схема способа получения гомозиготных гамма-линий включает в себя следующие этапы: подбор скрещиваемых компонентов с учетом наличия маркерных признаков, цитоэмбриологических, молекулярно-генетических, биоморфологических, физиологических для проведения контроля за гибридизацией и отбором ценных форм растений, строгая изоляция растений перед опылением и после его проведения, сбор и облучение пыльцы опылителя, проведение принудительных скрещиваний облученной пыльцой, применение цитоэмбриологических методов для контроля процессов оплодотворения, формирования зародыша и семени, получение растений второго года жизни, оценка и браковка растений по раздельноплодности, стерильности и другим признакам, подсчет завязываемости семян, проращивание семян и отбор растений по цитоморфогенетическим признакам, соответствующим материнской форме (окраска гипокотиля, плоидность, плод-ность, форма розетки, листа и др.), формирование гамма-линий путем отбора растений, гомозиготных не менее чем по трем изоферментным локусам и выравненным по другим признакам.

Обязательным условием проведения принудительных опылений является использование генетически обусловленных маркеров, позволяющих идентифицировать гомозиготные линии практически на 100 %

Определение плоидности индуцированного потомства также является необходимым условием нового метода, т к позволяет выделить диплоидные апомиктичные растения, из которых в дальнейшем формируются диплоидные гомозиготные гамма-линии с ценными селекционными признаками

Полученные данным методом линии отличаются друг от друга типом цитоплазмы (фертильная или стерильная), высокой раздельноплодностькг от 83,3 % у линий 186 и 159 до 100,0 у линии 154, хорошей обсемененностью и сохранением в потомстве признаков материнского родителя зеленой окраски

вегетативных органов и высокой гомозиготностью по маркерным генам Ме-1, СсШ-1, Mdh-l и АсШ-1, диплоидным набором хромосом (табл 6)

Таблица 6 - Характеристика выделенных гамма-линий, 2000 - 2001 годы

Номер линии по каталогу Генотип по генам Тип цитоплазмы Раздель-ноплод- ность, % Получено семян, шт

Ме-1 Gdh-1 Mdh-1 Adh-1

68 SS FF NN FF фертильн 83,7 1576

71 FF SS NN FF фертильн 97,5 2177

186 FF FF NP FF фертильн 83,3 936

159 FF FF PP FF фертильн 83,3 2807

154 FF SS PP FF фертильн 100,0 2960

194 SS FF PP FF стерильн 92,6 2860

95 SS SS NN FF стерильн 99,4 1930

96 FF SS NN FF стерильн 90,4 1620

102 FF FF PP FF стерильн 99,1 110

107 FF FF PP SS стерильн 92,0 830

Разработанный метод имеет большое практическое значение при создании нового исходного материала с ценными признаками Кроме того, в 2—3 раза ускоряет процесс гомозиготизации селекционного материала при одновременном отсутствии депрессии, характерной для инбридинга Данный способ даёт возможность создавать в кратчайшие сроки гомозиготные линии с ценной комбинацией генов при использовании их в гетерозисной селекции

Способ ускоренного получения гомозиготных линий с использованием генетического маркирования и принудительным опылением МС-растений пыльцой, обработанной гамма-лучами в дозах 1500-2000 Гр, позволил создать нам свыше 30 гомозиготных линий, характеризующихся различным типом цитоплазмы, высокой раздельноплодностью и выравненностью по морфологическим и генетическим признакам

Использование ДНК-маркеров для идентификации гамма-линий сахарной свеклы

В настоящее время для идентификации селекционных материалов все чаще используют ДНК-маркеры, причём наиболее часто - ЯАРО и ББЯ -маркеры (Гостимский, Кокаева, Боброва, 1999, Сиволап, Топчиева, Чеботарь, 2000) Эти методы обладают высокой производительностью, получаемые с их помощью результаты не зависят от условий выращивания и стадии развития растений, продолжительности и условий хранения семян С помощью 11АРО-метода можно анализировать изучаемые формы одновременно по многим локусам, случайно распределённым по всему геному, что позволяет различать даже близкородственные материалы (Кочиева и др , 2002, Хавкин, 2003)

Для поиска новых молекулярных маркеров, позволяющих исследовать полиморфизм геномной ДНК у созданных гамма-линий сахарной свёклы, нами были применены праймеры Paw S 5, Paw S 6, Paw Sil, Paw S 16, Paw S 17, ранее успешно использованные другими исследователями для различения сортов ржи (Забродина, Шаденков, Хавкин, 1998), сортообразцов сахарной свеклы (Федулова, 2005), видов Brassica и Solanum (Анискина, и др, 2005)

Результаты проведенных нами исследований показали, что использованные праймеры в изученных гамма-линиях сахарной свеклы давали четкие спектры с достаточной степенью полиморфизма Указанные произвольные праймеры при амплификации с геномной ДНК сахарной свеклы выявили от 5 до 18 полос (ампликонов) на образец с молекулярной массой от 250 до 300 п н В процессе исследований показано, что апомиктичные гамма-линии сахарной свёклы характеризовались большей выравненностью - количество ам-плифицированных ПЦР-продуктов варьировало от 2 до 4-х, тогда как у ин-бредных линий, созданных традиционными методами, их количество достигало 6-ти Это связано, по-видимому, с тем, что в процессе создания гамма-линий были отобраны формы, гомозиготные по изоферментным локусам

Анализ RAPD-спектров гибридов, полученных на основе гамма-линий и их родительских форм, подтвердил гибридную природу полученных образцов с высоким уровнем интрогрессии геномов Сравнительный анализ RAPD-спектров гибридных генотипов (Fi у-МС-2113 х 15465 и Ft у-МС-2113 х 14840) показал наличие специфического фрагмента ДНК с молекулярной массой 1000 п н , характерного для материнского компонента, что указывает, по-видимому, на апомиктическую природу гибридов Данный компонент отсутствует в геномной ДНК сростноплодных опылителей 14840 и 15465

В результате проведенного молекулярного анализа методом ПЦР у генотипов сахарной свеклы обнаружены существенные различия между МС-формой и фертильными сростноплодными опылителями, как по количеству амплифицированных продуктов, так и по размеру этих фрагментов

Анализируя данные RAPD-анализа, можно также отметить отличие линии-закрепителя стерильности О-типа от ее MC-аналога по количеству и размеру амплифицированных фрагментов Что, по-видимому, объясняется влиянием ядерных генов (xxzz/XXZZ), определяющих стерильность или фертиль-ность цитоплазмы

Таким образом, данные, полученные с использованием ограниченного набора праймеров на примере гамма-линий сахарной свеклы и гибридных комбинаций с их участием, позволили найти RAPD-маркеры, специфические для некоторых селекционных образцов и идентифицировать их

СЕЛЕКЦИОННО - ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ГАММА-ЛИНИЙ

Главная задача селекции сахарной свеклы состоит в создании гибридов на МС-основе и внедрении новых высокопродуктивных гибридов, основанных на эффекте гетерозиса Чтобы наиболее эффективно выполнить эту сложную задачу, необходимо располагать богатым генетически разнообразным исходным материалом

В практической селекции сахарной свеклы, в особенности с использованием методов радиационного мутагенеза и отдаленной гибридизации с применением различных форм свеклы в качестве исходного материала актуальным вопросом остается оценка важнейших селекционно-ценных признаков таких, как плодность, цитоплазматическая мужская стерильность и связанная с ней закрепительная способность линий, масса корнеплода и содержание сахара, создание гамма-линий (Богомолов, 2000) Огромное внимание в последние годы уделяется апомиктическому способу семенной репродукции, играющему важную роль в закреплении гетерозиса (Соколов, 2003, Ма-лецкий, 2003, Богомолов, 2005)

Экспрессия и наследование признака раздельноплодности у гамма-линий сахарной свёклы

Раздельноплодность является одним из наиболее важных признаков у сахарной свеклы, так как позволяет использовать технологию выращивания этой культуры без затрат ручного труда В этой связи определенный интерес представляет изучение сохранения признака раздельноплодности, а именно при индукции новых форм растений сахарной свеклы, путем опыления раз-дельноплодных мужскостерильных растений гамма-облученной пыльцой сростноплодных диких форм и маркированного сростноплодного тестера культурной свеклы Генетическая природа нестабильности признака раздельноплодности в популяциях сахарной свёклы до последнего времени оставалась неясной, и только открытие множественных рецессивных аллелей М-ш - локуса позволило отчасти понять природу нестабильности данного признака (Савицкий, 1954).

С И Малецкий с коллегами (1991) выдвигают дигенную гипотезу наследования признака раздельноплодности, учитывающую взаимодействие множественных рецессивных аллелей структурного (ш) и регуляторного (1) локусов, позволяющую искать разумные объяснения скрытого генетического полиморфизма раздельноплодных фенотипов

Следует отметить, что в новой генетической модели наследования раздельноплодности внимание было сосредоточено на основных (базисных) генах, однако на формирование данного признака могут оказывать действие и множество других генов, каждый из которых в отдельности оказывает слабое влияние Существование таких генов свидетельствует об эффективности отбора по раздельноплодности (Коломиец, 1960, Лободин, 1972, Корниенко, Орлов, 2002 и др )

Как показали наши наблюдения, при инбридинге раздельноплодных растений, данный признак становится нестабильным Возникают растения, у которых на цветоносных побегах формируются 2-3-плодные семена (табл 7) Поддержание раздельноплодности на высоком уровне осуществляется именно отбором, инбридинг же дает прямо противоположный эффект, так как комплекс минор-генов, обеспечивающих гомеостаз этого признака, рассыпается, а доминантные ингибиторные аллели локуса I-I с сильным эффектом отсутствуют Это нашло свое подтверждение в нашей работе при изучении влияния инбридинга как на материалы, полученные в результате применения традиционных методов селекции, так и на материалы, созданные в результате гамма-индуцированных скрещиваний

Таблица 7 - Влияние инбридинга на проявление признака раздельно_сростноплодности в потомстве, 2000- 2004 годы_

Потомство Количество семян, штук

1-плодных 2-плодных 3-плодных

МС -505,1, 306 - -

МС -505 - 7, h - 208 36

МС -505 -14,12 - 32 300

МС-505-15,12 - 27 553

МС -505 хВ cor 2000 Гр, 11 110 - -

МС -505-7хВ cor 2000 Гр, 12 65 8 57

МС -505-14хВ cor 2000 Гр, 12 - 1023 165

МС -505-15х В cor 2000 Гр, 12 40 1905 315

Из приведенных данных становится ясно, что только проведение жесткого отбора по признаку раздельноплодности на любых материалах, с любыми методами их создания будет способствовать сохранению этого важного признака в потомствах

В своих исследованиях в качестве материнской формы мы использовали мужскостерильные растения со 100 % -ной раздельноплодностью Однако под влиянием гамма-индуцированных опылений этот признак изменился

Так, в контрольном варианте (опыление без облучения) процент растений, имеющих семена с раздельноплодностью свыше 90 %, оказался невысоким и варьировал от 56, 2 при опылении пыльцой маркированной свеклы Red tester до 69, 5 при использовании в качестве опылителя пыльцы дикого вида Beta corolliflora В ходе проведенных экспериментов нами обнаружено повышение количества раздельноплодных семян у потомств от опыления дикой свеклой В corolliflora в дозе 1000 Гр (табл 8).

Таблица 8 - Изменчивость признака плодности в потомстве Му1 _индуцированных опылений, 2000 - 2001 годы _

Комбинации скрещиваний, дозы облучения Изучено растений, шт Из них Кол-во одно-плодных растений, %

1-плодных 2-плодных

МС-1517-8 xRt контр 1282 721 561 56,2

МС-1517-8 х R11000 565 462 103 81,8

МС-1517-8 х Rt 1500 256 183 73 71,5

МС-1158-5 х В cor конт 279 194 85 69,5

МС-1158-5 х В cor 1000 1128 946 182 83,9

МС-1158-5 х В cor 1500 669 498 171 74,4

МС-1158-19 х В trig кон 294 189 105 64,3

МС-1158-19 х В trig 1000 194 151 43 77,8

МС-1158-19 х В trig 1500 127 89 38 70,1

*)- растения с раздельноплодностью >90 %

С увеличением дозы облучения пыльцы всех трёх видов опылителей до 1500 Гр наблюдается снижение количества раздельноплодных растений от 74,4 до 70,1 % Данное явление можно объяснить тем, что в облученной пыльце происходят изменения цитофизиологических и генетических процессов, которые в одних случаях ослабляют наследственную передачу отцовских признаков, а в других, наоборот, усиливают, что находит свое подтверждение в работах многих исследователей (Дрягина, 1969, 1976, Жукова, Остапенко,1984, Семин, 1970,1988 и др)

Таким образом, мы полагаем, что множественность аллелей в структурном и регуляторном локусах, с одной стороны, и множество генов-модификаторов, влияющих на формирование раздельно-сростноплодности, с другой, а также взаимодействие генетических факторов с условиями произрастания растений создают в совокупности сложную и противоречивую экспрессию признака раздельноплодности

В наших исследованиях было установлено, что признак раздельноплодности при индуцированных скрещиваниях у различных материалов проявляется по-разному Так, у номера 231 при опылении облученной пыльцой сростноплодного опылителя Beta corolliflora в потомстве Му2 из 10 высаженных растений было отобрано 2 растения 231-1 и 231-8 с раздельноплодностью 92,5 и 95,8 %, соответственно При дальнейшем репродуцировании из 30 высаженных растений наблюдалось сильное варьирование признака раздельноплодности от 6,8 % у номера 231-1-8 до 99,1 % у номера 231-1-26 Аналогичная картина отмечалась и у потомств растения 231-8 Проявление признака раздельноплодности наблюдалось у потомств номера 265, где раз-дельноплодность у всех изучаемых растений была довольно высокой 84,699,5 % Полученные данные свидетельствуют о том, что признак раздельноплодности передается по материнской линии Известно, что по материнской линии передаются признаки, которые контролируются генами, расположенными в половых хромосомах, либо в мтДНК, либо у апомиктичных форм

Аналогичная картина наследования раздельноплодности наблюдается и у гибридов, созданных с использованием гамма-линий (рис 1)

У МС-2113 ---- 15 00% Раздельноплодность

63,33 %

Р1? МС-2113 X »5465

12,50%

21,67%

О 85-90 % □ 91-95% 096-100%

62,60

24,90 %

59,00 %

у МС-2113 х 15465

14,90%

26,10 %

Рис 1 Наследование раздельноплодности у гибридов на основе гамма-линий, 2003 - 2006 годы

Так, результаты генетического анализа показали, что у гибридов первого и второго поколения, созданных на основе гамма-МС-линий, признак раздельноплодности остаётся на том же высоком уровне, что и у материнской формы Количество растений с раздельноплодностью от 96 до 100 % составляет 59,0 - 62,6 %, а у материнской гамма-линии - 63,33 %

В ходе проведенных нами исследований выявлено, что индивидуальные отборы типичных раздельноплодных семенных растений при создании и дальнейшем размножении гамма-линий с проведением постоянных негативных браковок сростноплодных и двуплодных генотипов до цветения растений позволяют стабилизировать признак раздельноплодности В результате проведенных отборов и браковок селекционных материалов от сростноплодных генотипов нам удалось выделить линии, устойчиво сохраняющие раздельноплодность в потомстве на уровне 100 % у-РФ-154, у-РФ-2113 (табл 9)

Таблица 9 - Стабилизация признака раздельноплодности у гамма-

Линии Раздельноплодность, %

Му; Му2 Муз Му4 Му5

у-РФ-68 66,0 83,7 90,6 100,0 100,0

у-РФ-70 72,6 73,9 94,3 92,6 99,8

у-РФ-94 79,2 84,6 94,9 99,7 100,0

у-РФ-109 92,0 81,4 93,0 98,7 100,0

у-РФ-154 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0

у-РФ-2093 92,6 96,0 99,4 100,0 100,0

у-РФ-2113 99,6 100,0 100,0 100,0 100,0

Таким образом, признак раздельноплодности при гамма-индуцирован-ных опылениях мужскостерильных раздельноплодных растений сахарной свеклы постепенно возрастает в ряду поколений Стабилизация признака раздельноплодности у гамма-линий сахарной свеклы возможна при проведении постоянных браковок сростноплодных генотипов до цветения семенных растений Постепенное возрастание доли раздельноплодных растений в по-томствах Му! -.Mys гамма-линий, на наш взгляд, свидетельствует в пользу полигенной гипотезы наследования признака раздельноплодности и подтверждает сделанные ранее выводы Н Röstel (1962), Э Кнаппа (1962, 1967), К Герцога (1984), И Ф Голева(1990),ИЯ Балкова (1990)

Селекционный процесс еще более усложняется, когда ставится цель сочетания у растений сахарной свёклы раздельноплодности и стерильности пыльцы у MC форм, раздельноплодности и закрепительной способности у линий О-типа, контролируемых рецессивными генами

Особенности проявления признака мужской стерильности и получение самофертильных гамма-линий закрепителей О-типа

Впервые формы сахарной свёклы, обладающие мужской стерильностью, были найдены Ф В Оуэном (Оуэн, 1942) в сортах и линиях, ведущих родословную из американского сорта «US - 1» Его интерпретация генетического контроля стерильности пыльцы у растений построена на предположении, что комплементарное взаимодействие двух рецессивных генов ядра и особой цитоплазмы (цитоплазма S - типа) ведет к формированию цветков со стерильными пыльниками. Предложенная им гипотеза закрепления стерильности и восстановления фертильности признается исследователями в качестве основной

В настоящее время общепризнанным является представление, что ци-топлазматическая наследственность является результатом особых ядерно-плазматических взаимоотношений (Палилова, 1979,1986), заключающихся в прямых или косвенных взаимодействиях геномов митохондрий и пластид с геномом ядра, что способствует выполнению разнообразных метаболических функций, свойственных каждой органелле

Для объяснения генетики признака ЦМС ряд исследователей (Michaelis, 1967, Корниенко, Макогон, Балков, Орлов, 1983, Малецкий, 1995, Kinoshita, Onodera, 1992, Вепрев и др , 1997, Ошевнев, 1999) предложили гипотезу о гетерогенности плазмы (гетероплазмия) Совокупные действия генов ядра и внутриклеточная гетероплазмия популяций митохондрий являются единой генетической системой, детерминирующей ЦМС у сахарной свёклы

Исследования по изучению характера наследования ЦМС на нашем материале показали, что этот признак имеет более сложную генетическую структуру, чем дигенная гипотеза Ф Оуэна Тем более что данный признак тесно сцеплен с раздельноплодностью сахарной свеклы (Миками, 1979, Та-кахаси, 1979 и др ).

В наших исследованиях (Богомолов, Жужжапова, Корниенко, 1990) были получены материалы, различающиеся по признакам стерильности и фертильности (табл 10)

Таблица 10 - Частота встречаемости растений с различными типами _цитоплазмы у потомства Му]. 1986-1990 годы

Комбинации скрещиваний Изучено растен шт Частота вел зечаемости Критерий х2

стерильных фертильных

шт % шт %

МС-1158-5 х В coroll, контр 53 51 96,2 2 3,8 -

МС-1158-5 х В coroll, 1000 Гр 139 76 54,7 63 45,3 36,62

МС-1158-5 х В coroll, 1500 Гр 114 54 47,4 60 52,6 37,77

МС-1158-5 х В coroll, 2000 Гр 26 24 92,3 2 7,7 1,30

МС-1158-19 х В trig, контроль 16 16 100,0 0 0,0 -

МС-1158-19 х В trig, 1000 Гр 151 127 84,2 24 15,5 9,09

МС-1158-19 х В trig, 1500 Гр 116 83 72,0 33 28,0 16,10

МС-1517-8 х R test, контроль 504 0 0,0 504 100,0 -

МС-1517-8 х R test, 1000 Гр 214 134 62,6 80 37,4 215,41

МС-1517-8 х R test, 1500 Гр 154 91 59,1 63 40,9 161,28

МС-1517-8 х R test„ 2000 Гр 4 4 100,0 0 0,0 -

Х2о5 = 3,84

Количество фертильных растений, выделенных из гамма-индуцированного потомства Му,, достоверно оказалось наибольшим при опылении облученной пыльцой дикой формы свеклы В corolliflora в дозах 1000-1500 Гр

Таким образом, в результате принудительных опылений мужскосте-рильных форм сахарной свёклы облученной пыльцой диких видов и маркированного тестера культурной свёклы в потомстве Myi наблюдается полиморфизм по типу цитоплазмы (S и N)

Впервые полиморфизм цитоплазмы был детально рассмотрен при изучении аллоплазматической мужской стерильности, возникающей в результате межвидового и межродового скрещиваний (Edwardson, 1970), а также при исследовании аутоплазматической мужской стерильности, обнаруженной у кукурузы и проса (Duvick, 1965, Burton, Athwal, 1967)

Затрудняет селекционную работу с мужской стерильностью у сахарной свеклы то обстоятельство, что в обычных фертильных сортах-популяциях имеется ограниченное число растений-закрепителей стерильности, так называемых растений О-типа (Оуэн Ф , 1942).

Среди новых приемов, позволяющих увеличить частоту встречаемости закрепителей О-типа, используется индукция их с помощью облученной пыльцы

Частота встречаемости фертильных растений при опылении мужско-стерильных форм гамма-облученной пыльцой Beta corolliflora составила 45,352,6 %, Beta trigyna - 15,8-28,0 %, маркированного тестера - 37,4 - 40,9 %

К кандидатам в самофертильные растения мы относили биотипы со степенью завязывания семян в первый год отбора не ниже, чем у МС растений, подсаженных под один изолятор Окончательное дифференцирование исходных семенных растений на самосовместимые и самофертильные проводилось с учётом оценок в потомстве

Признак самосовместимости контролируется аллелями гена Б и аллелями гена Sf В зависимости от их присутствия завязывается разное количество семян под изолятором. Признак самофертильности обусловливается аллелями только гена БГ и поддерживает высокую степень завязываемости семян в потомстве при самоопылении

В материалах, склонных к самофертильности, во втором и последующих поколениях инбридинга при сочетании с отбором увеличивается степень самосовместимости Так, у апомиктичной гамма-линии РФ-70 в течении десяти поколений (1995-2005 гг) завязывалось семян под изолятором с 1 изолированного растения от 4300 до 10680 штук при раздельноплодности 100 % Проведение пробных скрещиваний гамма-индуцированных самофер-тильных линий с их МС-аналогами показало в потомстве р! высокую их закрепительную способность (табл 11)

Таблица 11 - Результаты закрепительных скрещиваний гамма-

Исходная форма Комбинации скрещиваний Изучено растений штук Из них получено

стерильн фертильн

шт % шт %

МС-1517-1 х В cor 1000 Гр у-МС-69 х у-РФ-68 24 24 100,0 0 0,0

MC-1555 -4 х В cor 1000 Гр у-МС-70 х у-РФ-71 24 18 75,0 6 25,0

MC-1158-5 х В cor 1000 Гр у-МС-185 х у-РФ-186 28 21 75,0 7 25,0

MC-1158-5 х В cor 1500 Гр у-МС-158 х у-РФ-159 46 46 100,0 0 0,0

MC-1158-SxB cor 1500 Гр у-МС-165 х у-РФ-154 49 49 100,0 0 0,0

MC-1517-8 xR test 1500 Гр у-МС-95 х у-РФ-94 31 31 100,0 0 0,0

МС-1517-8 х R test 2000 Гр у-МС-106 х у-РФ-109 10 10 100,0 0 0,0

Полученные нами результаты свидетельствуют о высокой закрепительной способности фертильных гамма-линий

Особый интерес вызывает тот факт, что созданные линии (стерильные и фертильные) представляют собой потомство, полученное в результате гамма-индуцированных межвидовых и внутривидовых скрещиваний, и согласно гипотезе ВС Семина (1970, 1988) и К К Рапс1еу (1980) возможна "трансформация" отдельных генов, в результате чего получается потомство с индуцированной стерильной или нормальной (фертильной) цитоплазмой (у-8-плазма и у-Ы-плазма) При анализе растений - опылителей оказалось, что в

ряду поколений при самоопылении они завязывали семена, т е имели гены самофертильности (Б!), обеспечивающие хорошую завязываемость (табл 12)

Таблица 12-Характеристика самофертильных гамма-линий, 2004-2005 годы

Наименование Завязываемость Количество семян Раздельноплод-

линий семян, % с 1 изолированно- ность, %

го растения, штук

у-РФ-94 87,5 6698 99,5

у-РФ-94-3-12 78,9 2319 100,0

У-РФ-Ю9СВОП 92,8 8383 99,9

у-РФ-109 81,6 1766 100,0

у-РФ-2093 94,7 10678 100,0

у-РФ-2113 96,4 12876 100,0

При этом у отдельных самофертильных гамма-линий выявлены элементы апомиктичного размножения в виде дополнительных семязачатков и зародышевых мешков, нескольких зародышей в зародышевом мешке (полиэмбрионы) Аналогичные данные получены ТП Жужжаловой у обычных самофертильных материалов сахарной свёклы

Таким образом, результаты проведенных исследований выявили, что фертильное гамма-индуцированное потомство закрепляет стерильность у у -МС форм Это дало нам возможность сформировать на его основе самофер-тильные и самостерильные линии, на которые получены патенты РФ №2708, 2785, 2709,2713, характеризующиеся ценными селекционными признаками

Теоретическое обоснование и практическое использование индуцированного апомиксиса в селекции сахарной свёклы

Селекционное значение экспериментального получения устойчивого апомиксиса трудно переоценить Считается перспективным исследование апомиксиса в селекции при закреплении гетерозиса и других уникальных свойств гибридов, получение из гаплоидов апомиктов, гомозиготных линий и их аналогов с ЦМС, размножение семенами сложных полиплоидов Апомик-ты практически не нуждаются в опылении и поэтому формируют однородное матроморфное потомство, обладающее высокими жизне- и конкурентоспособностью, повышенной семенной продуктивностью (Захариев, 1976, Петров, 1979, Тырнов, 2002)

Среди разных подходов к получению апомиктичных форм заслуживает внимания индуцированный диплоидный апомиксис с использованием облучённой высокими дозами гамма-радиации пыльцы диких форм Данный метод был апробирован на винограде (Семин и др , 1970, 1988), табаке (Рап(1еу, 1975, Сарычев, 1986), землянике (Петров, Сухарева, 1985, Батурин, 1987), моркови (Валеева, Тимин, Пыжьянова, 1994 и др ), сахарной свекле (Богомолов и др , 1987,1994, Богомолов, 2000,2005)

Первые сведения о размножении апомиктическим путём диких видов рода Beta принадлежат К Барокка (Barocka, 1966). Приводимые автором данные показывают, что почти все полиплоидные растения формируют семена без оплодотворения

Нашими наблюдениями было установлено, что функционально неполноценные облучённые пыльцевые зерна, прорастая на рыльцах пестика частично (6-8 %), проникают в завязь и играют роль индуктора при образовании апомиктичных семян (Богомолов и др, 1988) В проведенных исследованиях по получению апомиктичных растений мы использовали ранее описанную схему создания гомозиготных гамма-линий, значительно дополнив ее элементами идентификации апомиксиса, включающими стерильность пыльцевых зерен, рост пыльцевых трубок и высокую завязываемость жизнеспособных семян при изоляции МС растений

Изучение свыше 500 растений с ЦМС, представленных потомствами Му2 индуцированных опылений и завязавших ранее качественные семена, показало, что 80 % исследованных растений имели цветки со стерильной пыльцой, у которых в пыльцевых зернах отсутствовали спермин

Наибольшее количество семян было получено в беспыльцевом режиме у материалов Му2 с цитоплазматической мужской стерильностью №№ 300, 310, 356, которые возникли вследствие автономного апомиксиса (табл 13)

Таблица 13 - Характеристика стерильных по пыльце растений потомства _Му2 сахарной свеклы при принудительной изоляции _

Полевой номер Происхождение Получено семян, шт. Раздельно- плодность, %

300 МС - 1178 х В cor, 1000 Гр, раст.9 - 4 726 98,0

306 МС - Перла х В.сог, 2000 Гр, раст 8-7 188 90,0

306 МС - Перла х В cor, 2000 Гр, раст 8-9 110 100,0

306 МС - Перла х В cor, 2000 Гр,раст 8-19 92 100,0

310 МС - 1178 х В cor, 1500 Гр, раст 9 - 3 1335 100,0

310 МС — 1178 х В cor, 1500 Гр, раст9-4 104 100,0

333 МС - 1178 х В cor, 1500 Гр, раст 20-1 20 100,0

333 МС - 1178 х В cor ,1500 Гр, раст 20-15 180 100,0

356 МС - 2085 раст 2—1 622 99,0

356 МС - 2085 раст 2-5 874 93,0

Изученные растения характеризовались высокой раздельноплодностью и отобраны для дальнейшей селекционной работы с целью изучения возможности закрепления гетерозиса у создаваемых гибридов сахарной свеклы (табл 14)

Таблица 14 - Характеристика гамма-линий, склонных к апомиктичному _способу семенной репродукции, 2000 - 2005 годы _

Номера линий Получено семян с 1 изо- Раздельноплодность %

лятора, штук

АР, ар2 АР3 АР, ар2 АР3

у-МС-90-47 1411 1306 497 95,1 96,2 98,7

у-МС-90-67 693 1046 144 90,4 96,4 100,0

■у-МС-90-86 1600 1491 177 85,0 92,7 95,5

у-МС-95 1148 1767 902 90,2 99,4 98,0

у-МС-96 1263 2133 231 90,4 95,6 100,0

у-МС-107 1896 2068 180 92,0 96,0 100,0

Проведенные нами совместно с Н Р Фоменко (Фоменко и др, 2003) цитоэмбриологические исследования показали, что у изученных апомиктич-ных гамма-линий сахарной свеклы начальные этапы микроспорогенеза, связанные с заложением археспория и выделением мегаспороцита, происходили аналогично с амфимиктичными растениями, но в процессе дальнейшего развития у апомиктичных гамма-линий были выявлены некоторые отклонения от нормы, выражающиеся в нарушении или отсутствии процесса мейоза

Результаты проведенных исследований свидетельствуют, что направленная индукция апомиксиса эффективна в случае опыления мужскосте-рильных растений сахарной свёклы гамма-облучённой пыльцой ее диких сородичей, обладающих элементами апомиксиса и получение на основе этого метода гомозиготных апомиктичных гамма-линий

В результате экспериментов нами выявлено, что у растений апомиктичных гамма-линий сахарной свёклы наблюдается автономный факультативный апомиксис, проявляющийся в форме гаметофитного апомиксиса и адвентивной эмбрионии (Фоменко, Федулова, Жужжалова, Богомолов, 2003) Гаметофитный апомиксис выражается в явлении диплоспории, связанной с нарушением или отсутствием первого деления мейоза при мегаспорогенезе, что ведет к формированию зародышей путем диплоидного партеногенеза В единичных случаях отмечалась синергидная и антиподальная апогаметия

Адвентивная эмбриония у исследуемых растений связана с образованием соматических зародышей из клеток интегументов семязачатков Образование дополнительных соматических и гаметофитных зародышей путем адвентивной эмбрионии, апогаметии приводит к явлению полиэмбрионии, наблюдающейся у исследуемых линий и подтвержденных рентгенографическим методом анализа завязавшихся апомиктичных семян

Вместе с тем, для растений с факультативным апомиксисом характерно наличие нормального цикла полового размножения, что выражается в ага-моспермном пути образования семян Это позволяет использовать исследуемые нами формы в селекционном процессе не только как доноры апомиксиса, но и для получения высокопродуктивных гибридов-апомиктов

Результаты проведенных нами исследований показали, что морфологические, цитоэмбриологические, генетические параметры можно использовать как «маркерные» признаки для отбора апомиктичных растений, что подтверждается практическим получением апомиктичных гамма-линий

Изменчивость количественных признаков у гаммя-индуцированных линий

Изучение путей повышения и удержания в последующих поколениях таких хозяйственно-ценных признаков, как масса корнеплодов и их сахаристость - основная задача в селекционной и семеноводческой работе Эти полигенные признаки имеют максимальное проявление в гетерозиготном состоянии, что достигается скрещиванием мужскостерильных форм с неродственными опылителями О-типа и последующей гибридизацией полученных простых гибридов со сростноплодными опылителями Но прежде, чем это произойдет, необходимо отобрать линии и определить их хозяйственную ценность, с последующей оценкой по комбинационной способности

Изучению основных количественных признаков у линий сахарной свеклы, определяющих их продуктивную ценность, посвящено большое количество работ (Гринько, 1940, Денисова, 1975, Балков, 1978, Вихрова, 1980, Шевцов, 1981, Голев, 1990, Корниенко, 1990 и другие) Многие исследователи отмечают различную степень изменчивости признаков сахаристости и массы корнеплода при инцухтировании отдельных растений из сортов-популяций При этом по массе корнеплода наблюдается депрессия в большей степени, нежели по сахаристости В целом же сахаристость линий остается на том же высоком уровне, что и у исходного материала, а в отдельных случаях и превышает

Проведенные нами исследования показали, что колебание признака сахаристости в сравнении с исходными формами у гамма-линий было незначительным и составляло от + 0,1 до +0,3 %, тогда как варьирование массы корнеплода оказалось в пределах от -45 г до +49 г

При оценке потомств, участвующих в дальнейшем при формировании гамма-линий, отмечено, что дифференциация их по массе корнеплода и сахаристости в Му2 была более значительной Так, у потомств от скрещиваний МС-1158-19хВ ищупа,1000 Гр колебание по массе корнеплода составило от — 62 г до +66 г и по сахаристости от -0,9 % до +1,0 % У этих потомств для формирования линий были отобраны номера 94-54 и 94-60 урожайного направления и образец 94-58 -сахаристого направления

На основе проведенных отборов из потомств урожайного и сахаристого направлений были отобраны и зарегистрированы в селекцентре ВНИИСС 20 перспективных гамма-линий сахарной свёклы (табл 15)

Таблица 15 - Продуктивность выделенных гамма-линий, 2004 - 2005 годы

Линии Средняя масса 1 корнеплода, г Средняя сахаристость, % Раздельно- плодность, %

у - РФ - 68, О-тип 525 17,8 100,0

у - РФ - 92, О-тип 500 17,4 99,0

у - РФ - 94, О-тип 595 17,8 99,7

у-РФ - 109, О-тип 455 17,2 100,0

у-РФ-159, О-тип 644 16,7 100,0

у - РФ - 498, О-тип 558 17,8 100,0

у - РФ - 70 АР 450 18,5 100,0

у - МС - 90 АР 606 17,2 99,0

у - МС - 90 - 204АР 615 18,8 100,0

у - МС - 90 - 246АР 595 18,2 99,7

у - МС - 94 - 3 - 12АР 431 17,6 99,3

у - МС — 94 — 13 — ЗАР 568 17,3 99,3

у-МС-94-73АР 530 18,3 99,8

у - МС - 94 - 80АР 450 18,4 99,5

у - МС - 2093 451 18,1 100,0

у-РФ-2093, О-тип 482 18,4 100,0

у-МС-2113 472 18,2 100,0

у-РФ-2113, О-тип 643 18,2 100,0

у - МС - Перла 610 18,0 100,0

у - РФ — Перла, О-тип 568 17,6 99,5

НСР05 11,2 0,2

Выделенные линии отличаются хорошей продуктивностью, масса корнеплодов варьирует от 431 г до 644 г при сахаристости от 16,7 % до 18,8 %, высокой раздельноплодностью 99,0 - 100,0 % Отдельные из них характеризуются хорошей закрепительной способностью, а также склонностью к апо-миктическому способу семенной репродукции

ОСОБЕННОСТИ СОЗДАНИЯ ГИБРИДОВ САХАРНОЙ СВЁКЛЫ НА ОСНОВЕ ЦМС С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АПОМИКСИСА

В настоящее время приоритет в селекции сахарной свеклы отдан выведению МС гибридов, потому что вовлечение мужскостерильных форм позволяет получать полностью гибридное потомство с наиболее выраженным эффектом гетерозиса Как известно, для создания МС гибридов сахарной свек-

лы необходимо иметь раздельноплодные линии-закрепители стерильности О-типа, МС аналоги и сростноплодные опылители

Для длительного использования в производстве гибридов сахарной свеклы на МС основе необходимо постоянно поддерживать и улучшать закрепители стерильности и их МС аналоги по целому ряду количественных и качественных признаков растений первого и второго годов жизни При этом большое значение имеет сохранение высокого уровня закрепительной способности у опылителей-закрепителей стерильности, детерминирующих полную стерильность у МС форм

На современном этапе развития селекции особенно остро встает проблема создания принципиально новых форм, способных закреплять эффект повышенной продуктивности (гетерозиса) в ряде поколений, например, апо-миксиса или разработки технологии такого клонирования, которое способно заменить половой процесс с его эффектом постоянного созидания и одновременного разрушения того комплекса хозяйственно ценных признаков, который так редко удаётся сочетать в гибридном организме (Балков, 1990)

Определение комбинационной способности апомиктичных гамма- МС- линий и многосемянньп опылителей

В селекции сахарной свёклы на гетерозис оценка комбинационной способности является основным звеном в практической работе селекционера Понятие комбинационной способности (КС) тесно связано с гетерозисом О ней судят по продуктивности гибридов первого поколения (Fi), полученных от скрещивания линий, сибсов, клонов и других селекционных материалов, в сравнении с исходными формами или районированными сортами (Балков, 1978,1983)

При изучении гетерозиса у сахарной свеклы оперируют, как правило, количественными признаками, которые детерминируются большим числом генов Поэтому с помощью математико-статистических методов генетического анализа обычно ограничиваются определением типов действия генов, контролирующих признак Наиболее адекватно отражают эффект гетерозиса различия по урожайности или другим признакам между родительскими формами и поколением F, (Fischer, 1978)

Анализ наследования количественных признаков показывает, что у гибридов F, наблюдается, как правило, промежуточная по сравнению с родительскими компонентами величина признака Отклонение её от средних показателей родительских форм обусловливается прежде всего степенью доминирования наследственных факторов одного из компонентов (Савченко, 1984). Если в генетической формуле количественного признака преобладают гены доминирования, то средняя величина признаков F, приближается к показателям одной из родительских форм При полной доминантности феноти-пическая ценность признаков Fi равна фенотипической ценности лучшего родительского компонента (Бороевич, 1984)

Для определения доминирования количественных признаков в наших исследованиях в испытание включались родительские гамма-линии и МС-гибриды с их участием Гетерозис же — это свойство гибридов превосходить по определенным признакам растения, взятые для скрещивания

Различают гетерозис истинный и гипотетический Истинный гетерозис показывает превышение значения признака у гибрида по сравнению с величиной признака у лучшего из родительских компонентов Гипотетический показывает сдвиг признака при гибридизации от его среднего уровня у родительских форм (Бороевич, 1984, Савченко, 1984)

Следует отметить, что истинный и гипотетический гетерозис в наших исследованиях проявлялся, не всегда одинаково, например, гибридная комбинация с опылителем 15465 в 2002 году имела показатели истинного гетерозиса по урожайности корнеплодов 5,19 % и гипотетического 10,43 % при степени доминирования признака 6,76, что является показателем сверхдоминирования данного признака (табл.16)

Таблица 16 - Фенотипическое проявление признака урожайности _у МС-гибридов Р, (на основе линии у-МС-2113-8)_

2002 год 2003 год

Комбинации Гетерозис, % Гетерозис, %

скрещиваний ьР Истин- Гипоте- Ьр Истин- Гипоте-

ный тическии ный тический

у МС -2113 х 15202 + 1,10 + 0,78 + 9,09 + 2,4 + 5,3 + 9,4

уМС-2113 х 15203 -0,58 -4,72 - 1,72 + 10,1 + 0,6 + 5,9

уМС-2113х 15676 +17,5 25,05 26,98 + 0,05 -8,8 + 0,4

Г МС-2113 х 15465 + 6,76 + 5,19 10,43 + 0,2 -5,9 + 2,6

уМС-2113 х 15153 + 2,74 + 5,18 + 8,40 + 1,5 +14,3 +55,9

уМС- 2113 х 15508 -0,42 -10,17 -4,25 -0,13 -9,6 - 1,1

у МС - 2113 Х13384 230,5 12,37 12,43 +1,66 + 4,5 + 12,1

уМС-2113 х 13307 -0,06 -6,99 -0,37 + 1,66 + 2,36 + 6,15

Следует отметить, что величина оценки доминантности (Ьр) тем больше, чем ближе по величине истинный и гипотетический гетерозис Так, у гибрида, полученного от скрещивания гамма-МС-линии 2113 со сростноп-лодным опылителем 15676, величина оценки доминантности по признаку урожайности корнеплодов равнялась + 17,5, истинный гетерозис составил 25,05 %, гипотетический - 26,98 Гибрид, полученный от скрещивания этой же линий с опылителем 13384, показал истинный гетерозис 12,37 %, а гипотетический — 12,43 % Величина оценки доминантности составила + 230,5

При этом в разные годы испытаний одних и тех же гибридов показатели истинного и гипотетического гетерозиса имели прямо противоположные результаты Так, тот же гибрид с опылителем 15465 в 2003 году проявил промежуточное наследование, вызванное аддитивными эффектами генов, в отличие от показателей 2002 года, где он имел тип наследования - сверхдоминирование признака или истинный гетерозис Такое же изменение величи-

ны оценки доминантности характерно и для признака сахаристости — гибридные комбинации, проявлявшие сверхдоминирование в один год, в другой год давали отрицательный гетерозис (табл 17), что находит свое подтверждение в исследованиях И Я Бапкова (1990),В А Бычковой (1993) и др

Так, гибридные комбинации с опылителями 15202 и 15203, имевшие в 2002 году сверхдоминирование по признаку сахаристости, в 2003 году оказались с отрицательным гетерозисом, и, наоборот, гибридная комбинация в варианте с опылителем 15676, проявившая отрицательный гетерозис, в 2003 году показала сверхдоминирование или истинный гетерозис

Объяснить сдвиг типа наследования гетерозиса можно нестабильными показателями продуктивности, связанными с условиями выращивания в разные годы

Таблица 17 -Проявление признака сахаристости у МС-гибридов Р) (на основе линии у-МС-2113-8)

2002 год 2003 год

Комбинации Гетерозис, % Гетерозис, %

скрещиваний Ьр Истин- Гипоте- Истин- Гипоте-

ный тический ный тический

у МС- 2113 х 15202 + 2,07 + 0,95 +1,85 -0,4 -4,9 -2,1

уМС-2113х 15203 0,045 - 1,01 + 0,06 4 0,66 -0,17 + 0,35

у МС - 2113 х 15676 -0,42 -3,23 -0,95 н 2,54 + 1,14 + 1,89

у МС-2113 х 15465 +36,0 + 2,25 2,32 Ю,6 -0,8 + 1,5

уМС-2113х 15153 + 2,31 + 1,26 + 2,35 -0,3 -7,6 - 1,6

у МС-2113 х 15508 - 1,8 -2,72 -1,75 -0,7 -2,3 - 1,0

у МС-2113x13384 + 4,67 + 3,72 + 4,71 4 14,0 + 0,8 + 0,8

у МС-2113 х 13307 + 11,5 + 2,70 + 2,96 + 18,0 + 1,15 + 1,04

Существует нестойкая доминантность, когда один и тот же аллель может быть то доминантным, то рецессивным в зависимости от среды (геноти-пической или фенотипической), что подтверждав! аналогичный вывод, сделанный другими исследователями (Гуляев, 1984, Алиханян, Акифьев, Чер-нин, 1985; Дубинин, 1985)

Таким образом, наши исследования показывают, что истинный и гипотетический гетерозис наблюдаются не только по признаку урожайности корнеплодов, но и по сахаристости Это свидетельствует о том, что сахаристость в результате гибридизации может быть выше, чем у исходных форм, вопреки мнению о строго промежуточном типе наследования данного признака у сахарной свёклы. Этот факгг имеет большое значение в селекции на гетерозис, где основным критерием отбора родительских форм служит не столько собственная продуктивность линий, сколько комбинационная ценность по этому признаку

Большую роль в получении высокопродуктивных гибридов сахарной свёклы имеет совершенствование сростноплодных опылителей Исходным материалом для получения этих линий служили многосемянные популяции

рамонского происхождения, отличающиеся повышенной сахаристостью, урожайностью корнеплодов, устойчивостью к кагатной гнили и болезням листьев (Мазепин, Богомолов, Попова, 1979) В результате проведенных нами испытаний были отобраны перспективные сростноплодные опылители, на которые получены патенты РФ на селекционное достижение №№ 2710, 2711, 2712 (2005)

Для выявления комбинационно ценных опылителей были созданы и изучены по продуктивности гибриды, полученные от скрещивания раздельно плодных МС-форм со сростноплодными диплоидными линиями повышенной сахаристости (табл 18)

Таблица 18 - Продуктивность гибридов на МС-основе, 2000 - 2002 годы

Компоненты, комбинации скрещиваний Урожайность, т/га Сахаристость, % Сбор сахара, т/га В % от стандарта

Урожайность Сахаристость Сбор сахара

PMC - 46, стандарт 39,36 15,92 6,27 - - -

МС - 94472 32,20 15,95 5,14 81,8 100,2 82,0

ОП- 13384 34,33 16,86 5,79 87,2 105,9 92,3

МС - 94472 х 13384 47,22 16,59 7,81 120,0 104,2 124,6

МС - 97662 35,62 16,95 6,04 90,5 106,5 96,3

ОП - 14044 38,87 16,32 6,34 98,8 102,5 101,1

МС - 97662 х 14044 52,71 16,23 8,56 133,9 101,9 136,5

МС - 5418 40,71 15,59 6,35 103,4 97,9 101,3

ОП - 15465 39,96 16,26 6,50 101,5 102,1 103,7

МС - 5418 х 15465 50,38 15,98 8,05 128,0 100,4 128,4

НСР05 4,6 0,2 0,94 - - -

Полученные нами результаты позволили выделить лучший сростноп-лодный опылитель под номером 14044, так как гибридная комбинация с его участием превосходила стандарт по урожайности корнеплодов на 33,9%, сахаристости на 1,9% и сбору сахара на 36,5% В его создании принимала участие МС-форма, превысившая стандарт по сахаристости на 6,5% и сростноп-лодный опылитель, также превосходивший стандарт по сахаристости на 2,5%

Испытание гибридов на стерильной основе показало, что среди линий встречаются комбинационно ценные образцы, перспективные в селекции на гетерозис не только по урожаю корнеплодов, но и по сахаристости При этом лучшую сахаристость имеют гибриды, полученные при использовании в качестве опылителей материалов с повышенной сахаристостью

Испытание созданных нами гибридов на стерильной основе показало, что продуктивность их зависит от обеих родительских форм, что согласуется с результатами исследований И Я Балкова (1990) и В П Ошевнева (1999)

Таким образом, при подборе сростноплоднькх опылителей для производства гетерозисных гибридов нужно учитывать не только данные по урожайности, но также и показатели сахаристости, устойчивости к основным болезням, технологические качества Кроме того, необходимо учитывать их комбинационную способность с МС тестерами, так как только оценка по комбинационной способности позволит выделить лучшие сростноплодные материалы для последующей гибридизации

Создание гибридов на стерильной основе с использованием апомиктичных гамма-линий

Наиболее перспективным направлением в селекции сахарной свеклы является получение гетерозисных гибридов на стерильной основе (Балков, 1978, 1990, Корниенко А В, Орлов СД, 1996, Ошевнев, 1999, Корниенко, Моргун, Труш, 2007 и др )

В наших исследованиях был получен гетерозисный гибрид РМС-90 на основе использования МС-компонента PC -106, опылителя О-типа у - РФ -2113 и сростноплодного опылителя № 14840 По результатам двухлетнего государственного сортоиспытания гибрид РМС - 90 был признан перспективным Колебания по продуктивности у гибрида РМС —90 составили по урожаю 26,4-65,6 т/га, по сахаристости 14,0-20,2 %, по сбору сахара 5,2-12,1 т/га В 2001 году этот гибрид внесен в Госреестр селекционных достижений России и районирован по 8 региону (Нижневолжский) (Ас № 31185, 2001) Гибрид РМС — 90 устойчив к засухе, отличается высокой степенью одноро-стковости (98,5 - 99,5 %) повышенной энергией прорастания, отзывчив на высокий уровень агротехники, обладает высокой сохранностью корнеплодов при хранении На отдельных сортоучастках гибрид РМС-90 занял призовое место по урожайности корнеплодов, сахаристости и сбору сахара Высокая продуктивность гибрида сочетается с повышенной сахаристостью и высокими технологическими качествами Отличительной чертой гибрида является выравненность корнеплодов по форме, что определяет его высокую технологичность при уборке (Богомолов, Федулова, 2005)

Изучению пролонгированного гетерозиса у сельскохозяйственных культур уделяется в последние годы большое внимание, и это небезосновательно Речь идёт о создании высокопродуктивных гибридов, способных размножаться апомиктичным путём, то есть давать семенное потомство бесполым путем (Балков, 2003)

На основе выделенных апомиктичных линий нами были сформированы ряд гибридных комбинаций, отдельные из которых могут сохранять гетерозис в первом и втором поколениях (табл 19)

Так, в 2001 году по результатам сортоиспытания гибридная комбинация на основе апомиктичной линии гамма-МС-2113 с опылителем 15465 превысила групповой стандарт по урожайности корнеплодов на 4,6 %, сахаристости 2,4 % и сбору сахара на 7,2 %

Испытание данной гибридной комбинации в ¥2 показало, что она удерживает свои показатели на уровне гибрида первого поколения, сбор сахара составил от стандарта 107,0 %

Таблица 19 - Продуктивность гибридной комбинации с использованием апомиктичной гамма-линии-МС-2113-6 АР

Комбинации скрещиваний Урожайность, т/га Сахаристость, % Сбор сахара, т/га В % от станда эта

Урожайность Сахаристость Сбор сахара

Среднее 2000 - 2001 годы

Групп стандарт 41,6 16,4 1 6,9 - - -

у-МС-2113x15465?! 43,5 16,8 1 7,4 104,6 102,4 107,2

Среднее 2002 - 2003 годы

Групп стандарт 42,8 16,4 7 1 - - -

у-МС-2113х15465р2 45,1 16,6 7,6 105,4 101,2 107,0

Среднее 2003 - 2004 годы

Групп стандарт 48,7 17,4 8,5 - - -

У-МС-2ИЗХ15465Р1 49,7 18,0 8,9 102,0 103 2 105,3

у-МС-2113х15465Р2 51,7 17,6 9,1 106,3 100,9 107,3

НСР05 4,5 0,2 0,7 - - -

Результаты, полученные нами при испытании гибридов первого и второго поколения, подтвердили предположение о том, что апомиксис у сахарной свёклы сохраняет продуктивность гибридной комбинации во втором поколении Полученные нами данные свидетельствуют о том, что ожидаемого расщепления в Р2 по показателям продуктивности не произошло, что подтверждает выводы о том, что применение апомиктичных линий обеспечивает не только материнскую наследственность и однородность потомства, но и сохраняет его высокую продуктивность в течение ряда поколений

Это позволяет использовать созданные нами формы в селекционном процессе не только как доноры апомиксиса, но и для получения высокопродуктивных гибридов с пролонгированным гетерозисом В другой испытанной нами гибридной комбинации в качестве материнской формы была выбрана апомиктичная гамма-линия МС-94—АР, а в качестве отцовской формы хорошо зарекомендовавший себя сростноплодный опылитель 14044

Анализ данных сравнительного сортоиспытания показывает, что гибридная комбинация с участием апомиктичной линии МС-94 АР обеспечивает гетерозис в поколении Р1 и Рг как по урожайности корнеплодов, так и по сбору сахара (табл 20)

Таблица 20 - Результаты испытаний перспективного апомиктичного гибрида ___сахарной свеклы__

Комбинации Уро- Саха- Сбор В % от стандарта

скрещиваний жай- рис- сахара, Урожай Сахари- Сбор

ность, тость, т/га ность стость сахара

т/га %

2005 год

Групп стандарт 19,91 17,37 3,46 - - -

МС94АРх14044Р, 32,62 17,70 5,78 163,9 101,9 167,2

НСР05 4,9 0,36 0,84 - - -

2006 год

Групп стандарт 40,87 16,60 6,80 - - -

МС94АРх14044Р2 46,34 16,60 7,70 113,4 100,0 113,4

НСР05 4,0 0,42 0,72 - - -

Таким образом, применение апомиктичных гамма-линий при создании гибридов сахарной свеклы может привести к коренному перелому в ее селекции Поскольку при этом можно будет закрепить и довести до производства удачное сочетание высокой урожайности и высокого содержания сахара, ликвидировать сложную проблему поддержания компонентов, удовлетворить потребность промышленного производства в подборе отвечающих ему генотипов, а семеноводство сделать проще и дешевле (Сеилова, 1996, Балков, 2003)

* * *

В результате проведенных нами исследований были получены экспериментальные данные, которые послужили основанием для разработки схемы использования апомиктичных линий в практической селекции сахарной свеклы Использование новой селекционной технологии с применением апомиктичных линий делает длительный инбридинг родительских форм для стабилизации их по морфологическим признакам не нужным, поскольку апо-миктичные растения единообразны, равно как и их оценка по комбинационной способности Все это значительно сокращает селекционный процесс

Полученные нами данные подтвердили гипотезу о том, что использование апомиктичных линий при создании гибридов сахарной свёклы способствует закреплению гетерозиса, что послужило основой для разработки методики применения апомиктичных линий в селекционном процессе сахарной свеклы, включающей следующие основные этапы

-оценка исходного материала по морфогенетическим и хозяйственно-ценным признакам, устойчивости к болезням,

-поддержание исходных материалов в чистоте с оценкой и браковкой по стерильности, раздельноплодности, семенной продуктивности и др признакам,

-гибридизация апомиктичных гамма-линий с многоплодными опылителями,

-сравнительное испытание гибридных комбинаций и создание на основе лучших из них гетерозисных гибридов

Предлагаемая технология дает возможность использовать при создании гетерозисных гибридов в первом случае, в качестве материнского компонента апомиктичные гамма-линии, стерильные по пыльце, по схеме

1 АРтту-МС х ГО ММ Р, АРтт МС -> Р2 АРтт МС

и во втором случае использовать самофертильные апомиктичные линии, как закрепители стерильности, с одновременной передачей МС-линиям, генов апомиксиса по схеме

2 у-МСют х АР,,,,,^-* Р, АРтт МС х ГОММ -> Б, АРтю МС ->ит д

Таким образом, в результате опьшения мужскостерильных форм гамма-

облученной пыльцой диких видов свеклы возникает потомство, наследующее материнские и отцовские признаки В связи с этим образуются апомиктичные МС-растения и апомиктичные самофертильные растения, являющиеся исходной компонентой при создании апомиктичных МС-линий и апомик-тичных самофертильных линий О-типа

При использовании апомиктичных линий в качестве МС-компонентов из цикла ^создания гибридов выпадают этапы, связанные со стабилизацией линий по морфологическим признакам, анализом по общей и специфической комбинационной способности, необходимостью закрепления стерильности у МС-форм

Самофертильные апомиктичные линии продуцируют высокофертиль-ную пыльцу, опыление которой приводит к образованию линий, состоящих из апомиктов и амфимиктов, находящихся в динамическом равновесии под общим генетическим контролем Сочетание данных типов воспроизводства, взаимодополняющих и взаимозамещающих друг друга, способствует превращению таких линий в генетически подвижные системы с высокой семенной и общей продуктивностью Как показали проведенные нами эксперименты, такие формы могут быть использованы в качестве опылителей-закрепителей стерильности О-типа

Существенным образом упрощается и семеноводство апомиктичных линий, размножение которых не требует пространственной изоляции В силу присущих им самофертильности и апомиксиса они при свободном цветении практически не воспринимают чужеродную пыльцу, поскольку формируют семена путём агамоспермии и аутогамии

Таким образом, использование линий-апомиктов может идти в двух направлениях 1) в качестве родительских форм (МС или О-типа) создаваемых гибридов, 2) в качестве доноров апомиксиса, либо модельных объектов для изучения различных его селекционно-генетических аспектов

ВЫВОДЫ

1 Разработаны научно-методические и прикладные основы создания исходного материала с использованием у-линий, способствующих ускоренному получению перспективных высокопродуктивных гибридов сахарной свеклы

2 Показано, что для создания гомозиготных диплоидных линий сахарной свеклы наряду с традиционным методом инбридинга может успешно применяться метод радиационного мутагенеза, основанный на гамма-облучении пыльцы опылителя высокими дозами гамма-радиации и последующих контролируемых опылениях мужскостерильных форм

3 Установлено, что жизнеспособность облученной пыльцы снижается с увеличением доз гамма-радиации Впервые доказано, что для пыльцы маркированного тестера предельной дозой является 2000 Гр, для пыльцы диких видов свёклы - 3000 - 3500 Гр

На жизнеспособность пыльцевых зёрен, активность роста пыльцевых трубок и формирование зародыша оказывают влияние дозы облучения пыльцы Наивысший процент нормально развитых зародышей (43,7 %) наблюдается на 24 день после опыления при дозе облучения пыльцы дикой свеклы в 1500 Гр

4 Наибольшее количество завязавшихся семян получено при опылении маркированным тестером в дозе 1000 Гр (20,2 %), дикой формой свеклы в дозе 1500 Гр (16,2 %) Выявлено, что на завязываемость семян влияет генотип материнских растений Наибольшее количество завязавшихся семян (до 80,6 %) получено от опыления облучённой пыльцой мужскостерильных форм номер 1066 (Германия) и номер 1158 (Швеция)

5 Показано, что на выход матроморфного потомства при индуцированных скрещиваниях оказывают влияние дозы облучения пыльцы, вид опылителя, условия среды и генотип опыляемых растений Наибольший выход матроморфного потомства (55,3 %) получен при опылении облученной пыльцой диких форм свёклы в дозе 2500 Гр Наибольшее количество гомозиготных по маркерному гену Ме-1 растений (64,1 - 65,2 %) потучено при опылении мужскостерильных форм растений гамма-облученной пыльцой Beta corolliflora в дозах 1500-2000 Гр. Использование изоферментных маркеров позволило выделить гомозиготные гамма-линии, маркированные по четырём генам.

6 Установлено, что у растений апомиктичных гамма-линий имеет место нарушение мейоза при мегаспорогенезе, свидетельствующее о явлении диплоспории, ведущей к образованию нередуцированных яйцеклеток Выявлено, что у гамма-линий сахарной свёклы наблюдается автономный факультативный апомиксис, ведущий к агамоспермному пути образования семян, проявляющийся в наличии, наряду с нормальным (амфимиктичным) циклом полового размножения

7 Показано, что апомиктичные гамма-линии сохраняют ценные селекционные признаки исходных материнских форм (высокая раздельноплод-ность, стерильность) и характеризуются высокой продуктивностью Установлено, что апомиктичные гамма-линии способны давать высокопродуктивные гибриды и сохранять этот признак в потомстве С использованием апомиктичной гамма-линии МС-2113-6-АР получены гибридные комбинации, сохраняющие показатели высокой продуктивности у гибридов F! и F2, при этом признак высокой раздельноплодности у гибридов F2 сохраняется

8 Разработана и реализована в практической селекции технологическая схема индукции диплоидного апомиксиса и способ получения гомозиготных линий сахарной свёклы (а с № 1708210), позволившие сформировать свыше 30 гамма-линий, обладающих высокой раздельноплодностью, апомиктиче-ским размножением, способностью закреплять ЦМС и другими ценными признаками Это позволяет успешно использовать их в селекционной работе в качестве родительских компонентов при создании гибридов На 7 линий получены патенты РФ на селекционное достижение №№ 2708, 2709, 2710, 2711,2712,2713,2785

9 Создан и включён в Государственный реестр селекционных достижений России (а с № 31185), высокопродуктивный гибрид сахарной свеклы РМС-90 (с использованием в качестве опылителя О-типа линии у- РФ 2113), превышающий групповой стандарт на 6,74 - 7,07 т/га По результатам экологического сортоиспытания 2005 - 2006 годов подготовлены для передачи в Госсортоиспытание 2 перспективных апомиктичных гибрида сахарной свеклы

10 Выделены гамма-линии сахарной свеклы - новые генетические источники высокой раздельноплодности и высокой продуктивности При исследовании характера наследования признака раздельноплодности выявлено, что он передается по материнской линии Установлено, что стабилизация данного признака возможна при проведении постоянных браковок сростноп-лодных генотипов до цветения семенных растений

11 Экспериментально подтверждена трансформация гена самофертильности (8<) гамма-линиям от диких форм свеклы Полученные при этом самофертильные апомиктичные гамма-линии используются в качестве новых закрепителей стерильности О-типа

12 Разработана оригинальная схема использования апомиктичных гамма-линий в селекции сахарной свеклы, основанная, в одном случае, на применении апомиктичных мужскостерильных форм в качестве материнского компонента, а в другом - на использовании апомиктичных самофертильных форм в качестве опылителей-закрепителей стерильности О-типа

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ И ПРОИЗВОДСТВА

1 При разработке новых селекционных программ и технологий по ускоренному созданию нового исходного материала и высокопродуктивных гибридов сахарной свеклы рекомендуется использовать предлагаемый нами способ получения гомозиготных линий (а с № 1708210), основанный на проведении опылений гамма-облученной пыльцой и генетическом маркировании

2 Полученные в результате гамма-индукции самофертильные линии предлагается использовать в селекционном процессе для закрепления стерильности и при создании простых гибридов, используя их в качестве отцовского родителя, как неродственные опылители О-типа к мужскостерильным формам

3 Рекомендуются к использованию выделенные апомиктичные муж-скостерильные формы в качестве материнского компонента для получения высокопродуктивных гибридов сахарной свеклы с пролонгированным гетерозисом

4 Созданный и внесённый в Госреестр селекционных достижений РФ высокопродуктивный гибрид сахарной свеклы PMC-90, обладающий высокой засухоустойчивостью, предлагается использовать в сельскохозяйственном производстве

Научные публикации, рекомендуемых списком ВАК РФ

1. Агафонов Н С Рентгенографическое исследование семян сахарной свеклы /НС Агафонов, М.А. Богомолов //Сахарная свекла - 1982 - С 38

2 Жужжалова Т П Экзогенные факторы и индуцирование апомикси-са /Т П Жужжалова, Т П Федулова, М.А. Богомолов // Сахарная свекла -2000 - № 12 - С 17-18.

3 Жужжалова Т П Селекционно-генетические особенности апомик-тичных форм /Т П Жужжалова, Т П Федулова, М.А. Богомолов //Сахарнаясвекла -2001 -№6 -С 15-16

4 Корниенко А В Методы биотехнологии в селекционной практике /А.В Корниенко, Т П. Жужжалова, В В Знаменская, Т П Федулова, О А Подвигина, М.А. Богомолов, Н Н Черкасова // Сахарная свекла - 2002 -№ 10 - С 25

5 Жужжалова ТП Направленное индуцирование апомиксиса у сахарной свеклы /Т П Жужжалова, М.А. Богомолов, Т П Федулова, Н Р Фоменко//Сахарная свекла -2003 -№10 - С 25-26

6 Богомолов М.А. Апомиксис и его роль в селекции сахарной свеклы / М А Богомолов М А // Сахарная свекла - 2005 - №8 - С 19-21

7 Богомолов М.А. Новый высокопродуктивный гибрид сахарной свеклы / М А Богомолов, Т П Федулова // Сахарная свекла. — 2005 - №9 -С 25-26

8. Федулова Т П Взаимосвязь между изменчивостью количественных признаков и изоферментным полиморфизмом у сахарной свеклы / Т П Федулова, М.А. Богомолов // Сахарная свекла - 2007 - № 1 -С 18-19.

Авторские свидетельства

9 А С 1708210 СССР, МКИ А 01 Н 1/04 Способ получения гомозиготных линий сахарной свеклы Заявл 12 03 90 № 4818227/13 Приоритет изобр 12 03 1990, Опубл 30 01 92 Бюл № 4- 6с Н С Агафонов, М.А.Богомолов, А В Корниенко, Т П Федулова, И Р Попова

10. А С № 31185 Свекла сахарная РМС 90 - от 29 01 01 по заявке № 9802312 с датой приоритета 10 02 1998 Богомолов М.А, Бычкова В А.,Горячих Н Г, Грибанова Н П , Федулова Т П , Жужжалова Т П, Знаменская В В , Корниенко А В , Мазепин М Г, Нуждина В В , Ошевнев В П

Патенты

11 Богомолов М.А. Патент РФ №2708 на селекционное достижение ЛБС-16 / М А Богомолов, ТП Федулова -М,2005

12 Богомолов М.А. Патент РФ №2785 на селекционное достижение ЛБО-17/МА Богомолов, ТП Федулова -М ,2005

13 Богомолов М.А. Патент РФ №2709 на селекционное достижение ЛБС-18/М А Богомолов, ТП Федулова -М,2005.

14 Богомолов М.А. Патент РФ №27113 на селекционное достижение ЛБО-19 /М А Богомолов, ТП Федулова -М,2005

15 Богомолов М.А. Патент РФ №2710 на селекционное достижение ЛБМ-22 / М А Богомолов, Т П Федулова - М, 2005

16 Богомолов М.А. Патент РФ №2711 на селекционное достижение ЛБМ-23 / М А Богомолов, Т П Федулова - М, 2005

17 Богомолов М.А. Патент РФ №2712 на селекционное достижение ЛБМ-24 / М А Богомолов, Т П Федулова - М, 2005

Монография

18 Богомолов М.А. Создание исходного материала сахарной свеклы на основе индуцированного апомиксиса / М А Богомолов, Т П Федулова -Воронеж ФГОУ ВПО ВГАУ, 2007 - 136с

Список работ, опубликованных по теме диссертации

19 Мазепин МГ Некоторые результаты селекции сахарной свеклы на иммунитет / М Г Мазепин, М.А. Богомолов, Попова ИВ// Новое в селекции и семеноводстве сахарной свеклы и зернобобовых Сборник научных трудов -Воронеж, 1979 - С 30-41

20 Агафонов Н С Генетическое маркирование сахарной свеклы на гетерозис /НС Агафонов, М.А. Богомолов, А А Коновалов // Физиолого-генетические основы интенсификации селекционного процесса Тезисы докл Всесоюзной конференции - Ч II — Саратов, 1984 - С 56

21 Богомолов М.А Рентгенодиагностика семян сахарной свеклы / М А Богомолов // Пути интенсификации свекловодства и производства сахара Сборник научных трудов ВНИИСС - Воронеж, 1986 - С 28-34

22 Жужжалова ТП Влияние ионизирующей радиации на пыльцу опылителя, как модифицирующего фактора при получении гомозиготных линий сахарной свеклы /Т П Жужжалова, М.А.Богомолов, Т П Федулова, В П Ошевнев // Тез докл Ш Всес конф - Кишинев Штиинца, -1987 -С 198-199

23 Богомолов М.А. Индукция новых форм сахарной свеклы с использованием гамма-облученной пыльцы / М А Богомолов, Т П Жужжалова, А В Корниенко // Резервы увеличения производства сахарной свеклы и сахара Сборник научных трудов ВНИИСС -Воронеж, 1990 - С 15-22

24 Богомолов М.А Индукция новых гомозиготных линий сахарной свеклы с использованием гамма-облученной пыльцы опылителя / М А Богомолов, А В Корниенко, Г П Филатов // Новые методы биотехнологии растений Тезисы докл И Российского симпозиума - Пущино, 1993 -С 115

25 Богомолов М.А. Использование изоферментов при создании у-индуцированных линий сахарной свеклы / М.А Богомолов, Т П Жужжалова, Т П Федулова // Молекулярно-генетические маркеры и селекция растений Тез докл 1 Международной конференции - Киев Аграрна наука, 1994.-С 14-15.

26 Богомолов М.А. Получение нового исходного материала сахарной свеклы с использованием индуцированного апомиксиса / М А Богомолов, Т П Жужжалова, А В Корниенко // Молекулярно-генетические маркеры и селекция растений Материалы I Международной конф - Киев, 10-13 мая 1994-Киев Аграрна наука, 1994 -С 47-48

27 Богомолов М.А. Использование индуцированного апомиксиса в создании новых форм сахарной свеклы / М А Богомолов, Т П Жужжалова, А В Корниенко // Апомиксис у растений состояние проблемы и перспективы исследований Труды Международ Симпозиума — Саратов, 21-22 июля 1994 - Сарстов,1994 - С 22-23

28 Богомолов М.А. Способ получения гомозиготных гамма-линий сахарной свеклы / М А Богомолов, Т.П. Жужжалова, Т П Федулова, А В Корниенко // Научные разработки ВНИИСС: Рекомендации - Рамонь, 1995 - 7 с.

29 Богомолов М.А Индукция гомозиготных гамма-линий сахарной свеклы с ценными селекционными признаками / М А Богомолов, Т П Жужжалова, Т.П. Федулова, А В Корниенко // Об Пути повышения эффективности свеклосахарного производства России в условиях рыночной экономики Тез докл Всерос науч -практич.конф , посвященной 100-летию со дня рождения А JI Мазлумова -4L-Рамонь, 1996 - С 5-6

30 Богомолов М.А Модифицирующее влияние облученной пыльцы на процесс опьшения и формирование зародышей у сахарной свеклы / М А Богомолов, Т П Федулова, Т П Жужжалова, // Проблемы ботаники на рубеже XX-XXI веков: Тез докл , представленных 11(Х) съезду Русского ботанического об-ва 26-29 мая 1998 г, Санкт-Петербург - Санкт-Петербург, 1998-Том 1 -С 137-138

31 Богомолов М.А. Использование стимулятивного радиационного мутагенеза в селекции сахарной свеклы / М А Богомолов, М.Г Мазепин // Тез докл II съезда ВОГиС 1-5 февраля 2000 г Санкт-Петербург, 2000 -Т1 -С 14-15

32. Богомолов М.А. Индукция и генетико-селекционное изучение гамма-линий сахарной свеклы / М А Богомолов // Автореф дис к с/х н -Рамонь, 2000 -2 8с.

33 Федулова ТП Использование генетических маркеров для идентификации апомиктичных потомств сахарной свеклы/Т П Федулова, Т.П

Жужжалова, М.А. Богомолов //Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования Тез докл IV Междунар симпозиума, Пущино, Московской обл 20-22 июня 2001 г - Москва, 2001 - Т 2 - С 356-358

34 Богомолов М.А. Создание самофертильных линий сахарной свеклы путем индуцированных опылений у сахарной свеклы /М А Богомолов, Т П Федулова, Т П Жужжалова, А В Корниенко //Научное обеспечение устойчивого свекловодства в России Матер междунар научно-практ. конф , посвященной 80-летию ВНИИСС - Воронеж, 2003 - С 50-54

35 Богомолов М.А. Нетрадиционные методы получения гомозиготных диплоидных линий сахарной свеклы /М А Богомолов, Т П Федулова //Научное обеспечение устойчивого свекловодства в России Матер междунар научн -практич конф , посвященной 80-летию ВНИИСС - Воронеж,

2003 - С 54-58

36 Богомолов М.А. Индуцированный диплоидный апомиксис у сахарной свеклы (В vulgaris 2п=18) /М А Богомолов, ТП Федулова, ТП Жужжалова, Н Р Фоменко //Научное обеспечение устойчивого свекловодства в России Матер Междунар науч -практич конф , посвященной 80-летию ВНИИСС - Воронеж, 2003 - С 58-64

37 Фоменко Н Р Цитоэмбриологическая и морфогенетическая характеристика растений апомиктичных гамма-линий сахарной свеклы /Н Р Фоменко, Т П Жужжалова, Т П Федулова, М.А. Богомолов //Факторы експе-риментальной еволюцп организмт Збфник науковых праць за редакцию акадепнка УААН М В Роша - Kuib Аграрна наука, 2003 - С 212-217

38 Богомолов М.А. Создание нового исходного материала сахарной свеклы с обновленной цитоплазмой / М А Богомолов, Т П Федулова, Т П. Жужжалова // Приоритетные направления в селекции и семеноводстве сельскохозяйственных растений в XXI веке Материалы междунар науч -практконф (15-18декабря2003г) -М,2003 -С 361-363

39 Bogomolov М.А New methodes for sugar beet starting material development / M A Bogomolov, TP Fedulova, TP Zhuzhzhalova, AV Kornienko// 1st joint IIRB-ASSBT Congress, 26 feb -1st March, 2003 - San Antonio (USA) - P. 947-950

40 Kornienko A V Biotechnology methods using in Sugar beet breeding /А V Kornienko, T P Zhuzhzhalova, V V Znamenskaja, T P Fedulova, О A Podvigina, M.A Bogomolov, NN Cherkasova // 1st joint IIRB-ASSBT Congress, 26 feb -1st March, 2003 - San Antonio (USA) -P 955-956

41 Bogomolov M.A. Prospects of isozymes usage for sugar beet genetic improvement /М A Bogomolov, T P Zhuzhzhalova T P Fedulova // 1st joint IIRB-ASSBT Congress 26th Feb - 1st March 2003 - San Antonio (USA) - P 951-953

42 Федулова T П Индуцированный апомиксис у сахарной свеклы и использование его в селекции / ТП Федулова, М.А. Богомолов, ТП Жужжалова, Н Р Фоменко//Генетика в XXI веке современное состояние и перспективы развития Материалы Ш съезда ВОГиС, Москва, 6-12 июня

2004 г - М , 2004 - С 299

43 Богомолов М.А Эволюционная роль апомиксиса у сахарной свеклы/М А Богомолов, Т П Федулова // Нетрадиционное растениеводство Эниология Экология и здоровье 1-й Учредительный съезд селекционеров и экологов Материалы ХШ Международного симпозиума - 5-12 сентября 2004 г, Алушта - Симферополь, 2004 - С 343-345

44 Богомолов М.А Пыльцевые трубки - биологический вектор в генетической инженерии сахарной свёклы (Beta vulgaris L ) / М А Богомолов // Биотехнология состояние и перспективы развития Материалы Четвертого Международного конгресса (12 - 16 марта 2007 г, Москва - М ЗАО «Экспо-биохим-технологии», РХТУ им Д И Менделеева, 2007 - Ч 1 - С 258

45 Богомолов М.А. Экспериментальный индуцированный апомик-сис у сахарной свёклы (Beta vulgaris L ) / М А Богомолов // Селекция и семеноводство полевых культур Материалы Юбилейного сборника научных трудов - 42 - Воронеж ФГОУ ВПО ВГАУ, 2007 -С 15-35

46 Богомолов М.А. Особенности получения новых закрепителей стерильности у сахарной свёклы (Beta vulgaris L ) / М А Богомолов // Селекция и семеноводство полевых культур- Материалы Юбилейного сборника научных трудов -42 - Воронеж ФГОУ ВПО ВГАУ, 2007 - С 36-47

Подписано в печать 15 08 07 г. Формат 60x84'Аб Уел п л 3,0 Зак №452 Тир 100 экз

Центр оперативной полиграфии ФГОУ ВПО РГАУ - МСХА имени К. А Тимирязева 127550, Москва, ул. Тимирязевская, 44

Содержание диссертации, доктора сельскохозяйственных наук, Богомолов, Михаил Алексеевич

ВВЕДЕНИЕ 4

1. МЕТОДЫ СОЗДАНИЯ ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА 12

1.1. Получение инбредных линий классическим методом 12

1.2. Радиационный мутагенез - эффективный метод создания нового исходного материала 20

1.3. Индуцированный апомиксис и его роль в селекции сахарной свёклы 29

1.4. Использование гетерозиса в селекции сахарной свёклы 35

2. ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ, МЕТОДИКА И УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ 40

2.1. Условия проведения экспериментов 40

2.2. Исходный материал и методика проведения исследований 43

3. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ОБЛУЧЁННОЙ ПЫЛЬЦЫ ДЛЯ ИНДУЦИРОВАНИЯ НОВОГО ИСХОДНОГО МАТЕРИАЛА 51

3.1 Влияние гамма-радиации на оплодотворяющую способность пыльцевых зёрен и завязываемость семян 52

3.2. Особенности стимулирования возникновения матроморфного потомства 73

3.3.Морфо-генетические аспекты формирования андрогенного потомства 82

4. ТЕХНОЛОГИЯ СОЗДАНИЯ И ОЦЕНКИ ГОМОЗИГОТНЫХ ГАММА-ЛИНИЙ 91

4.1. Использование молекулярно - генетических маркеров для отбора гомозиготных линий сахарной свёклы 92

4.2. Метод создания гомозиготных линий 99

4.3. Использование ДНК - маркеров для идентификации гамма - линий сахарной свёклы 110

5. СЕЛЕКЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ

ГАММА - ЛИНИЙ 117

5.1. Экспрессия признака раздельноплодности у гамма-линий сахарной свёклы 117

5.2. Особенности проявления признака мужской стерильности и получение самофертильных гамма - линий закрепителей стерильности 133

5.3. Теоретическое обоснование и практическое использование индуцированного апомиксиса в селекции сахарной свёклы 154

5.4. Экспрессия количественных признаков у гамма - линий и гибридов сахарной свёклы 176

6. ОСОБЕННОСТИ СОЗДАНИЯ ГИБРИДОВ САХАРНОЙ

СВЁКЛЫ НА ОСНОВЕ ЦМС И АПОМИКСИСА 183

6.1. Определение комбинационной способности апомиктичных гамма - линий и много плодных опылителей 184

6.2. Создание и поддержание диплоидных многоплодных Опылителей 197

6.3. Создание гибридов на стерильной основе и с использованием апомиктичных гамма - линий 202

ВЫВОДЫ 216

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКИ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Научное обоснование и приёмы создания исходного материала для гетерозисной селекции сахарной свёклы (Beta vulgaris L.)"

Актуальность проблемы. Одним из главных путей дальнейшего повышения продуктивности сахарной свёклы и производства сахара является создание и внедрение высокопродуктивных гибридов сахарной свёклы. Задачи селекции сахарной свёклы за последнее время сильно усложнились в связи с повышением требований производства к ряду признаков и с переходом к использованию контролируемого гетерозиса. Сейчас необходимы прогрессивные научные решения, которые позволяют максимально использовать эффект гетерозиса и создавать гибриды с высокой продуктивностью и комплексом полезных признаков (Корниенко, Орлов, 1996; Корниенко, 2002; Ошевнев, 1999; Ошевнев, Грибанова, 2003; Жученко, 2001, 2003; Балков, 2003).

Гетерозисная селекция раздельноплодной сахарной свёклы с использованием цитоплазматической мужской стерильности (ЦМС) требует глубоких теоретических и практических разработок по созданию, изучению и использованию исходного материала разных форм, поддержанию линейных материалов прежде всего по хозяйственно-ценным признакам, таким как масса корнеплодов и их сахаристость, получению высокопродуктивных, устойчивых к биотическим и абиотическим факторам гибридов, пригодных к высоким технологиям выращивания, уборки и переработки сырья.

Переход от популяционной к гибридной селекции перекрёстноопыляющихся культур, к которым относится сахарная свёкла, потребовал привлечения совершенно иного исходного материала - гомозиготных инбредных линий. Основным классическим приёмом создания таких линий уже более 70 лет является метод инбридинга, базирующийся на поиске и отборе форм свёклы с проявлением склонности к авто- и гейтеногамии. Вместе с тем, контроль аутбридинга осуществляется генетически детерминированной системой самонесовместимости, так как самоопыление у сахарной свёклы невыгодно с эволюционной точки зрения. Как и всякий генетически обусловленный признак, самонесовместимость может изменяться в зависимости от условий среды (Харечко- Савицкая, 1940; Зайковская, 1955; Малецкий, 1978; Шевцов, 1983; Знаменская, 1985), что в конечном итоге сказывается на количестве и качестве сформировавшихся семян. Поэтому исследования в этом направлении до сих пор остаются проблемными, а задачи по стабильному созданию линий до конца не решёнными (Знаменская, 1999).

Дальнейшее развитие и усложнение селекционно-генетических программ всё с большей остротой требует поиска новых нетрадиционных подходов и методов, позволяющих выявить все потенциальные возможности растительного организма и вместе с тем в более короткие сроки получить новый исходный материал. Этому могут способствовать открытия в области биотехнологии по гаплоидии и микроклональному размножению in vitro различных сельскохозяйственных культур (Бутенко, 1986; Ильенко и др., 1983; Катаева, Бутенко, 1983; Бугара и др., 1986; Амерханова, Рахимбаев, 1986; Батыгина, 1987; Павлова, 1987; Славова, 1988; Атанасов, 1993; Maheshwari et. al, 1982; Hosemann, Bossoutrot, 1983; Знаменская, 1999; Подвигина, 2003). Однако все возможности этих технологий не были реализованы на сахарной свёкле, так как в конкретных условиях они практически не воспроизводимы, а полученные гаплоидные растения обычно слабые, мелкие и частота их довольно низкая. Поэтому в практической селекции данный метод не получил широкого распространения.

Огромные перспективы для селекционного процесса имеет использование экспериментального радиационного мутагенеза, позволяющего не только управлять ростом и развитием растений для повышения их продуктивности, но значительно быстрее, чем в природных условиях создавать разнообразные генотипы, которые могут быть источником ценных рекомбинантов с новыми качественными признаками. Они могут служить исходным материалом при создании разнообразных селекционно-ценных линий.

Эффективным приёмом, значительно увеличивающим разнообразие потомства, явилось использование облучённой пыльцы.

В зависимости от задач, поставленных селекционером, опыление облучённой пыльцой может быть использовано для усиления формообразовательного процесса, преодоления нескрещиваемости при отдалённой гибридизации, повышения продуктивности скрещиваний, изменения частоты проявления признака, преодоления самонесовместимости, получения нередуцированных гамет, стимуляции апомиксиса, индукции трансформации и решения ряда других задач.

Благодаря развитию данного направления в селекции растений были получены разнообразные межвидовые и межродовые формы у плодовых и овощных культур (Дрягина, 1985), гаплоиды у сахарной свёклы (Бешап, 1983), и петунии (Андрейченко, Гродзинский, 1986), апомикты у земляники (Петров, Сухарева, 1985) и сахарной свёклы (Сеилова, 1996; Богомолов, 2000).

В связи с этим использование экспериментального радиационного мутагенеза для индукции ценных форм сахарной свёклы и формирование на их основе гомозиготных линий для создания гибридов, обладающих гетеро-зисным эффектом является актуальным направлением исследований.

Сочетание методов индуцированного мутагенеза с традиционными, классическими методами селекции значительно повысит разрешающую способность потенциальных систем размножения и сократит продолжительность селекционного цикла, что определяет важность и необходимость проведения данной работы.

Экспериментальная работа выполнялась во Всероссийском научно-исследовательском институте сахарной свёклы и сахара им. А.Л. Мазлумова, начиная с 1983 по 2006 годы по проблеме О.Ц.ОЗб "Создание и хозяйственное освоение высокопродуктивных сортов и гибридов сахарной свёклы", задание

01 (СЭВ); проблеме 0.51.104 "Разработать генетические и физиолого-биохи-мические принципы селекции на гетерозис, создать новые исходные материалы"; проблеме 5.11. КПНТП- стран-членов СЭВ и СФРЮ, и в рамках Государственной научно-технической программы "Сахар и его заменители", а затем Республиканской целевой научно-технической программы "Сахароносные растения и сахар" и тематического плана ВНИИСС (раздел 01.01.Н1. "Изучить роль генотипа и влияние факторов регуляции генома на систему размножения сахарной свёклы" и раздел 01.02 "Разработать метод экспериментального создания форм свёклы с апомиктическим размножением".

Для реализации данной проблемы было предусмотрено решение следующих задач:

1. Исследовать влияние различных доз гамма-облучения пыльцы донора на процесс оплодотворения и формирования семян у сахарной свёклы.

2. Изучить особенности формирования матроморфного и андрогенного потомства при проведении индуцированных опылений.

3. Разработать эффективный способ создания гомозиготных гамма-линий с использованием облучённой пыльцы и генетического маркирования, сформировать на его основе гомозиготные гамма-линии и провести их гене-тико-селекционное изучение.

4. Установить характер изменчивости и наследования признака раздель-ноплодности у гамма-индуцированных линий сахарной свёклы.

5. Исследовать особенности проявления признака ЦМС у гамма-линий сахарной свёклы.

6. Разработать технологию эффективного использования апомиктичных гамма-линий в селекционном процессе сахарной свёклы.

Научная новизна исследований. Теоретически разработаны и практически реализованы селекционно-генетические аспекты создания нового исходного материала сахарной свёклы на основе индуцированных опылений облучённой пыльцой. Для сахарной свёклы установлено, что гамма-облучение избирательно повреждает хромосомный аппарат пыльцы донора, в результате чего стимулирует псевдооплодотворение и вызывает появление растений, наследующих признаки материнского родителя.

Впервые теоретически обоснованы оптимальные дозы для маркированного тестера культурной свёклы - Red tester в 1000 - 1500 Гр, для диких форм свёклы Beta corolliflora Z. и Beta trigyna W. et К. - 1500 - 2000 Гр, послужившие принципиальной основой для разработки способа ускоренного получения гомозиготных линий (A.c. № 1708210), позволившего создать новый исходный материал, отличающийся ценными селекционно-генетическими характеристиками.

Молекулярно - генетическим анализом показано, что опыление пыльцой дикой свёклы В.corolliflora Z. обеспечивает передачу генетического материала из мужских гамет в женские по типу «трансформации», в результате чего возникают матроморфные растения с изменениями лишь по некоторым признакам, что послужило основанием для создания гомозиготного материала сахарной свёклы.

У гамма-линий сахарной свёклы выявлены эмбриологические особенности проявления диплоспории, что выражается в нарушении или отсутствии процесса мейоза в мегаспороците и формировании диплоспорических зародышевых мешков. Получены оригинальные данные по сходству и различию эмбриологического развития апомиктичных растений в сравнении с амфи-миктичными. Эмбриологически подтверждено у сахарной свёклы наличие агамоспермного пути образования семян наряду с нормальным циклом полового размножения, проявляющегося в виде гаметофитного апомиксиса и адвентивной эмбрионии.

Впервые установлены закономерности проявления признаков стерильности и закрепительной способности у апомиктичных самостерильных и самофертильных форм сахарной свёклы. Это позволило на принципиально новой основе проводить ускоренное создание гомозиготных раздельноплод-ных линий О - типа.

Экспериментально показано, что признак раздельноплодности у гамма-индуцированных линий передаётся по материнской линии. Это расширяет и углубляет теоретические представления о природе данного признака, и имеет важное значение в практической селекции при проведении скрещиваний и отборе ценных генотипов с высокой степенью его проявления.

Разработана методология генетико-селекционного использования апомиктичных гамма-линий сахарной свёклы. Экспериментально доказано, что апомиктический способ семярепродукции в сочетании с гибридизацией, отбором, молекулярным маркированием является эффективным средством ускоренного выведения новых гибридов, создания исходного материала в селекции на высокую продуктивность и другие ценные признаки.

Впервые предложена оригинальная технологическая схема использования апомиктичных гамма-линий в селекционном процессе сахарной свёклы, позволившая создать гибридные комбинации, проявляющие гетерозис в ряду поколений.

Практическая ценность и реализация результатов исследований.

Выявленные цитоэмбриологические особенности апомиктичных растений сахарной свёклы могут быть использованы в качестве маркерных признаков при отборе апомиктичных форм и представляют практический интерес для совершенствования селекционной работы. знаков при отборе апомиктичных форм и представляют практический интерес для совершенствования селекционной работы.

Селекционная ценность апомиктичных гамма-линий заключается в возможности использования их при разработке новых селекционных программ, основанных на применении элементов апомиктичного размножения. Апомиктичные гамма - линии рекомендуется использовать в селекционном процессе сахарной свёклы для получения гибридов разных направлений продуктивности.

Создан и включён в Государственный реестр селекционных достижений России перспективный гибрид РМС - 90, (A.c. № 31185) с использованием маркированной по изоферментному составу гамма-линии у - РФ - 2113, превышающий стандарт по урожайности корнеплодов на 18,6 % и сбору сахара на 17,3 %. Получены патенты на селекционное достижение РФ на 7 линий сахарной свёклы №№ 2708, 2709, 2710, 2711, 2712, 2713, 2785, являющихся исходными формами создаваемых перспективных гибридов. По данным экологического сортоиспытания предложены для передачи в ГСИ два апомиктичных гибрида, сохраняющих гетерозис в поколении F, и F2.

Разработанные в процессе исследований методические подходы апробированы и могут быть использованы в учебных программах по биологии, цитологии, генетике, селекции и семеноводству в высших и средних учебных заведениях. Полученный в работе новый исходный материал сахарной свёклы также может использоваться в дальнейших фундаментальных и прикладных исследованиях.

Положения, выносимые на защиту: экспериментальное обоснование использования облучённой гамма-радиацией пыльцы для стимуляции неоплодотворённой яйцеклетки и индуцирования диплоидного матроморфного потомства у сахарной свеклы; эффективный способ получения гомозиготных линий сахарной свёклы, основанный на использовании облучённой пыльцы и генетическом маркировании; созданные гамма - линии, обладающие высокой раздельноплодно-стью, способностью закреплять ЦМС и склонностью к апомиктическому размножению; технологическая схема создания гибридов сахарной свёклы, основанная на использовании в селекционном процессе индуцированного апомикси-са.

Заключение Диссертация по теме "Селекция и семеноводство", Богомолов, Михаил Алексеевич

выводы

1. Разработаны научно-методические и прикладные основы создания исходного материала с использованием индуцированных опылений и получения высокопродуктивных гибридов сахарной свёклы.

2. Впервые показано, что для создания гомозиготных диплоидных линий сахарной свёклы наряду с традиционным методом инбридинга может успешно применяться метод радиационного мутагенеза, основанный на гамма-облучении пыльцы опылителя высокими дозами гамма-радиации и последующих контролируемых опылениях мужско стерильных форм.

3. Установлено, что жизнеспособность облучённой пыльцы снижается с увеличением доз гамма-радиации. Для пыльцы маркированного тестера предельной дозой является 2000 Грей, для пыльцы диких видов свёклы -3000 - 3500 Грей.

На жизнеспособность пыльцевых зёрен, активность роста пыльцевых трубок и формирование зародыша оказывают влияние дозы облучения пыльцы. Наивысший процент нормально развитых зародышей (43,7 %) наблюдается на 24 день после опыления при дозе облучения пыльцы дикой свёклы в 1500 Грей.

4. Наибольшее количество завязавшихся семян получено при опылении маркированным тестером в дозе 1000 Грей (20,2 %), дикой формой свёклы в дозе 1500 Грей (16,2 %). Выявлено, что на завязываемость семян влияет генотип материнских растений. Наибольшее количество завязавшихся семян (до 80,6 %) получено от опыления облучённой пыльцой мужско стерильных форм: номер 1066 (Германия) и номер 1158 (Швеция).

5. Показано, что на выход матроморфного потомства при индуцированных скрещиваниях оказывают влияние дозы облучения пыльцы, вид опылителя, условия среды и генотип опыляемых растений. Наибольший выход матроморфного потомства (55,3 %) получен при опылении облучённой пыльцой диких форм свёклы в дозе 2500 Грей. Наибольшее количество гомозиготных по маркерному гену Ме-1 растений (64,1 - 65,2 %) получено при опылении мужскостерильных форм растений гамма-облучённой пыльцой Beta corol-liflora в дозах 1500-2000 Грей. Использование изоферментных маркеров позволило выделить гомозиготные гамма-линии, маркированные по трём генам.

6. Установлено, что у растений апомиктичных гамма-линий имеет место нарушение мейоза при мегаспорогенезе, свидетельствующее о явлении диплоспории, ведущей к образованию нередуцированных зародышевых мешков. Выявлено, что у сахарной свёклы наблюдается автономный факультативный апомиксис, ведущий к агамоспермному пути образования семян, проявляющийся в наличии, наряду с нормальным (амфимиктичным) циклом полового размножения.

7. Показано, что апомиктичные гамма-линии сохраняют ценные селекционные признаки исходных материнских форм (высокая раздельноплод-ность, стерильность) и характеризуются высокой продуктивностью. Установлено, что апомиктичные гамма-линии способны давать высокопродуктивные гибриды и сохранять этот признак в потомстве. С использованием апомик-тичной гамма-линии МС-2113 получены гибридные комбинации, сохраняющие показатели высокой продуктивности у гибридов Fi и F2, при этом признак высокой раздельноплодности у гибридов F2 сохраняется.

8. Разработана и реализована в практической селекции технологическая схема индукции диплоидного апомиксиса и способ получения гомозиготных линий сахарной свёклы (A.C. № 1708210, 1991), позволившие сформировать 36 гамма-линий, обладающих высокой раздельноплодностью, апо-миктическим размножением, способностью закреплять ЦМС и другими ценными признаками. Это позволяет успешно использовать их в селекционной работе в качестве родительских компонентов при создании гибридов.

На 7 линий получены патенты РФ на селекционное достижение №№ 2708, 2709, 2710, 2711, 2712, 2713, 2785 (2005).

9. Создан и включён в Государственный реестр селекционных достижений России (A.C. № 31185), и допущен к использованию по Нижневолжскому региону высокопродуктивный гибрид сахарной свёклы РМС-90 (с использованием в качестве опылителя О-типа линии у-РФ 2113), превышающий групповой стандарт на 6,74 - 7,07 т/га. По результатам экологического сортоиспытания 2005 - 2006 годов подготовлены для передачи в Госсортоиспытание 2 перспективных гибрида сахарной свёклы.

10. Выделены гамма-линии сахарной свёклы - новые генетические источники высокой раздельноплодности и высокой продуктивности. При исследовании характера наследования признака раздельноплодности выявлено, что он передаётся по материнской линии при неполном его доминировании. Установлено, что стабилизация данного признака возможна при проведении постоянных браковок сростноплодных генотипов до цветения семенных растений.

11. Экспериментально подтверждена трансформация гена самофертильности (Sf) гамма-линиям от диких форм свёклы. Полученные при этом самофертильные апомиктичные гамма-линии используются в качестве новых закрепителей стерильности О-типа.

12. Разработана оригинальная схема использования апомиктичных гамма-линий в селекции сахарной свёклы, основанная, в одном случае, на применении апомиктичных андро стерильных форм в качестве материнского компонента, а в другом - на использовании апомиктичных самофертильных форм в качестве опылителей-закрепителей стерильности О-типа.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ СЕЛЕКЦИИ И ПРОИЗВОДСТВА

1. При разработке новых селекционных программ и технологий по ускоренному созданию нового исходного материала и высокопродуктивных гибридов сахарной свёклы рекомендуется использовать предлагаемый нами способ получения гомозиготных линий (А. С. № 1708210), основанный на проведении опылений гамма-облучённой пыльцой и генетическом маркировании.

2. Полученные в результате гамма-индукции самофертильные линии предлагается использовать в селекционном процессе для закрепления стерильности и при создании простых гибридов, используя их в качестве отцовского родителя, как неродственные опылители О-типа к мужскостериль-ным формам.

3. Рекомендуются к использованию выделенные апомиктичные мужс-костерильные формы в качестве материнского компонента для получения высокопродуктивных гибридов сахарной свёклы с пролонгированным гетерозисом.

4. Созданный и внесённый в Госреестр селекционных достижений РФ высокопродуктивный гибрид сахарной свёклы РМС-90, обладающий высокой засухоустойчивостью, предлагается использовать в сельскохозяйственном производстве.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, доктора сельскохозяйственных наук, Богомолов, Михаил Алексеевич, Рамонь

1. Агафонов Н.С Рентгенографическое исследование семян сахарной свеклы / Н.С. Агафонов, М.А Богомолов // Сахарная свекла. - 1982. - № 2. - С.38.

2. Айала Ф. Современная генетика / Ф. Айала, Дж. Кайгер. М.: Мир, 1988. - Т. 3.-335 с.

3. Амерханова М.Б., Рахимбаев И.Р. Вегетативное размножение сахарной свёклы в культуре тканей / М.Б. Амерханова, И.Р.Рахимбаев // Вестник АН КазССР. 1986. -№3.- С. 49-54.

4. Андрейченко C.B. Получение гаплоидов Petunia hybrida опылением у облучённой пыльцой /C.B. Андрейченко, Д.М. Гродзинский // Доклады АН УССР. -1982.-Б № 12.-С. 54-56.

5. Андрейченко C.B. Опыляющая способность и ростовые свойства пыльцевых зерен после у- облучения / C.B. Андрейченко, Д.М. Гродзинский //Физиология и биохимия культурных растений. М.: Наука, 1983.- 15, № 2. - С. 148-152.

6. Андрейченко C.B. Использование у облученной пыльцы для переноса генов у петунии / C.B. Андрейченко, Д.М. Гродзинский // Докл. АН СССР. - 1986. -288, №5.-С. 1233-1236.

7. Андрейченко C.B. Получение гаплоидов Petunia hibrida опылением гамма-об-лученной пыльцой / C.B. Андрейченко, Д.М. Гродзинский // Доклады АН СССР.- 1992.-Б. № 12.-С. 54-56.

8. Анискина Ю.В. ДНК генотипирование растений родов Brassica и Solanum / Ю.В. Анискина, В.А. Бирюкова, Н.С. Велишаева, A.A. Панкин, Т.А. Прибылова, Э.Е. Хавкин, И.А. Шилов // Сельскохозяйственная биология. - 2005. - № 1. - С. 110-118.

9. Арапова Т.С. К вопросу об апомиксисе и полиплоидии у некоторых видов рода Beta / Т.С. Арапова // Индуцированный мутагенез и апомиксис. Новосибирск: Наука Сиб. отд-е, - 1980. - С. 120 - 123.

10. Арапова Т.С. О возможности апомиксисау сахарной свёклы путём заимствования его элементов у диких видов / Т.С. Арапова // Генетика сахарной свёклы.- Новосибирск: Наука. 1984. - С. 171 - 177.

11. Арклис О.В. Идентификация косточковых культур с помощью молекулярных маркеров / О.В. Арклис, В.А. Высоцкий, И.Л. Цветков // Биотехнология: состояние и перспективы развития: Материалы III Моск. Междун. конгресса. -Москва, 14-18 марта 2005, М. С. 223.

12. Архимович А.З. К вопросу об изоляции высадков сахарной свёклы. / А.З. Архимович // Труды Белоцерковской селекционной станции. 1927.- Т. 1. С 7 -36.

13. Архимович А.З. Работы по инцухт-методу / А.З. Архимович // Труды Центрального НИИ сахарной промышленности. 1929. - Вып. 2. - С. 183 - 185.

14. Архимович А.З. К вопросу об инцухт-методе у сахарной свёклы. / А.З. Ар-химович // Труды Белоцерковской селекционной станции. 1931. - Т. -VI. -Вып. З.-С. 1-63.

15. Атанасов А. Биотехнология в растениеводстве / А. Атанасов //. Новосибирск, 1993.-241 с.

16. Бабьяж И.А. К вопросу аутофертильности и аутостерильности у сахарной свеклы / И.А. Бабьяж // Вопросы генетики, селекции и цитологии сахарной свеклы. Киев, 1971. - С. 254-262.

17. Балков И.Я. Получение и использование стерильных по пыльце форм сахарной свёклы на базе сортов ВНИИСС / И.Я. Балков // Селекция растений с использованием ЦМС: Тр. Совещания по ЦМС (Харьков, 1965). Киев: Урожай, 1966. С. 285-296.

18. Балков И.Я. Цитологическое проявление и генетические особенности ЦМС у сахарной свёклы. / И.Я. Балков // Некоторые вопросы генетики и селекции растений. Воронеж: ВГУ, 1970. С. 108 - 111.

19. Балков И.Я. Цитоплазматическая мужская стерильность сахарной свеклы (особенности проявления, наследования и использования в селекции / И.Я. Балков // Труды ВНИИСС. Т. 5, Вып. 1. - Воронеж, 1975. - С. 3-69.

20. Балков И.Я. Селекция сахарной свеклы на гетерозис / И.Я. Балков //. М.: Россельхозиздат, 1978. - 167с.

21. Балков И.Я. Состояние селекционно-генетических исследований по сахарной свёкле / И.Я. Балков // Вестник с. х. науки. - 1982. - № 3. - С. 94 - 98.

22. Балков И.Я. Проблемы использования межлинейных гибридов сахарной свёклы на стерильной основе / И.Я. Балков // Вестник с. х. науки. 1983. - С. - 117 -126.

23. Балков И.Я. ЦМС сахарной свеклы / И.Я. Балков. М.: Агропромиздат, 1990. - 239с.

24. Балков И.Я. Селекция и свекловодство России: прошлое, настоящее, будущее / И.Я. Балков // Сахарная свёкла. 1999. - № 3. - С. - 20 - 23.

25. Балков И.Я. У истоков отечественной селекции свёклы на гетерозис. (К 80-летию ВНИС и ВНИИСС) / И.Я. Балков // Сахарная свёкла. 2003. - № 3. - С. 26-27.

26. Балков И.Я. Получение и использование мужскостерильных линий сахарной свеклы в селекции на гетерозис / И.Я. Балков, В.П. Ошевнев, Л.Н. Прохорова // Тр. ВНИИСС. 1973. - Т. IV. - С. 61-71.

27. Балков И.Я. Наследование признака самофертильности и раздельноплодно-сти у сахарной свеклы / И.Я. Балков, В .П. Ошевнев, Э.И. Черепухин, Л.Н. Прохорова. // С.-х. биология. 1976. - Т.Ш, № 3. - С. 360-364.

28. Балков И.Я., Зубенко В.Ф., Гавва И.А. Селекция сахарной свеклы в США / И.Я. Балков, В.Ф. Зубенко, И.А. Гавва // Сельское хозяйство за рубежом.- М., 1980.-№7.-С. 17-21.

29. Балков И.Я. О схеме первичного и фабричного семеноводства гетерозисных гибридов / И.Я. Балков // Сахарная свёкла, 2007. № 2. - С. 2 - 8.

30. Батурин С.О. Индукция апомиксиса у земляники методом облучения пыльцы / С.О. Батурин // Тез. докл V съезд ВОГИС: Тез. докл. 1987- Т.1У, ч.1. С. 37.

31. Батурин С.О. Экспериментальный апомиксис у земляник / С.О. Батурин // Апомиксис у растений: состояние проблемы и перспективы исследований:- Труды Межд. симп. (Саратов, 21-24 июня, 1994 г.). Саратов, 1994. - С. 13-15.

32. Батурин С. О. Генетическая изменчивость в дигаплоидном потомстве Fragaria vesca L. / С.О. Батурин // Генетика в XXI веке: современное состояние и перспективы развития: Материалы III съезда ВОГиС. Москва, 6-12 июня 2004, М. - Т. 1. - С. 150.

33. Батыгин Н.Ф. Направленные изменения структуры растений при гамма-облучении в различные периоды онтогенеза / Н.Ф. Батыгин // Морфогенез растений. Т.2. -М.: издательство МГУ, 1961. - С. 37-40.

34. Батыгин Н.Ф. Использование ионизирующей радиации при получении направленных изменений / Н.Ф. Батыгин // Управление наследственностью сельскохозяйственных растений. М.: Изд-во с.-х. литературы, 1963. - С. 521524.

35. Батыгин Н.Ф. Использование ионизирующей радиации при получении направленных изменений / Н.Ф. Батыгин // Вестник с. х. науки. - 1963. - № 3. - С. 62 - 64.

36. Батыгин Н.Ф. Использование ионизирующей радиации для управления жизнедеятельностью растений: Автореф. дис . д-ра биол. наук / Н.Ф. Батыгин //. -Л., 1968, ВИР. -53с.

37. Батыгин Н.Ф. О генетических процессах в онтогенезе высших растений / Н.Ф. Батыгин // Мутагенез при действии физических факторов. М.: Наука, 1980. -С.130-147.

38. Батыгин Н.Ф. Использование ионизирующей радиации при получении направленных изменений / Н.Ф. Батыгин // Вестник с.-х. науки. 1983. - № 3. -С. 13-15.

39. Батыгин Н.Ф. Селекционный процесс и индуцированный мутагенез / Н.Ф. Батыгин // Радиационный мутагенез и его роль в эволюции и селекции. М.: Наука, 1987. - С. 164-185.

40. Батыгина Т.Б. Апомиксис, агамоспермия и вивипария и их роль в системе репродукции цветковых растений / Т.Б. Батыгина // Апомиксис у растений: состояние проблемы и перспективы исследований. Саратов, 1994. - Т. 1. - С. 19 -23.

41. Батыгин Н.Ф., Куперман Ф.М., Питиримова М.А. Острое облучение вегети-рующих растений и перспективы использования его в растениеводстве и селекции. / Н.Ф. Батыгин, Ф.М. Куперман, М.А Питиримова //.- М.: Наука, 1975. -71с.

42. Батыгин Н.Ф., Питиримова М.А. Влияние гамма-лучей и лакирующих соединений на изменчивость ячменя при обработке растений в различные периоды онтогенеза / Н.Ф. Батыгин, М.А. Питиримова / Индуцированный мутагенез у растений. Талин, 1972. - С. 13-19.

43. Батыгин Н.Ф., Питиримова М.А., Потапова С.М. О периодах повышенной мутабильности в онтогенезе ячменя / Н.Ф.Батыгин, М.А. Питиримова, С.М. Потапова // Докл. ВАСХНИЛ. 1977. № 2. - С. 10-11.

44. Батыгин Н.Ф., Потапова С.М. Реакция растений на облучение в различные периоды их онтогенеза / Н.Ф. Батыгин, С.М.Потапова // Радиационная биофизика и радиобиология растений. Л., 1979. - Вып. 17. - С. 74-83.

45. Батыгин Н.Ф., Савин В.Н. Использование ионизирующих излучений в растениеводстве / Батыгин Н.Ф., Савин В.Н. //. Л.: Колос, 1966. - 123с.

46. Бовкис E.H. Гаплоиды пшенично-пырейных гибридов (методы получения и использования в селекции): Автореф. дис. . канд. с.-х. наук / E.H. Бовкис //. -Немчиновка, 1973. 47с.

47. Бовкис E.H. Материнский радиобиологический эффект и ускорение селекции / E.H. Бовкис // Вестник РАСХН. 1997. - № 5. - С. 31 - 33.

48. Богомолов М.А. Рентгенодиагностика семян сахарной свеклы / М.А. Богомолов // Пути интенсификации свекловодства и производства сахара: Научн. труды ВНИИСС, 1986.-С. 28-34.

49. Богомолов М.А. Прибор для сбора пыльцы у сахарной свеклы / М.А. Богомолов//Рацион. предложение. ВНИИСС, 1988. - № 1. - 88. - 2с.

50. Богомолов М.А Индукция новых форм сахарной свеклы с использованием гамма-облученной пыльцы / Богомолов М.А., Жужжалова Т.П., Корниенко A.B. / Резервы увеличения производства сахарной свеклы и сахара: Тр. ВНИИСС. -Воронеж, 1990. С. 15-22.

51. Богомолов М.А. Способ получения гомозиготных гамма-линий сахарной свеклы / М.А.Богомолов, Т.П.Жужжалова, Т.П.Федулова, A.B. Корниенко // Научные разработки ВНИИСС: Рекомендации. Рамонь, 1995. - 7 с.

52. Богомолов М.А. Использование стимулятивного радиационного мутагенеза в селекции сахарной свеклы / М.А. Богомолов, М.Г. Мазепин // Тез. докл. II съезда ВОГиС 1-5 февраля 2000 г. Санкт-Петербург, 2000. - Т. 1. - С. 14-15.

53. Богомолов М.А. Индукция и генетико-селекционное изучение гамма-линий сахарной свеклы / М.А. Богомолов // Автореф. дис. . канд.с. х. наук. - Рамонь, 2000. -2 8с.

54. Богомолов М.А. Апомиксис и его роль в селекции сахарной свеклы / М.А. Богомолов М.А. // Сахарная свекла. 2005 - №8. - С. 19-21.

55. Богомолов М.А. Новый высокопродуктивный гибрид сахарной свеклы / М.А. Богомолов, Т. П. Федулова // Сахарная свекла. 2005 - №9. - С. 25-26.

56. Болелова З.А Использование генетических особенностей признака самонесовместимости у свёклы при создании самоопылённых линий / З.А. Болелова // Советско-шведский симпозиум. Киев, 1980. - С. 1 - 8.

57. Болелова З.А. О генетических и физиологических особенностях признака цветушности у растений сахарной свеклы / З.А. Болелова, В.Г. Тихонова, Е.В. Лещенко // С.-х. биология. 1984. - № 10. - С. 95-100.

58. Болелова З.А. Генетические аспекты повышения сахаристости односемянной сахарной свеклы / З.А. Болелова, А.И. Бондаренко // IV съезд генетиков и селекционеров Украины: Тез. докл. 4.3. Киев, 1981. - С. 160-162.

59. Бордонос М.Г. Характер расщепления и некоторые особенности свекловичных высадков с одноцветковыми саменами / М.Г. Бордонос // Селекция и семеноводство. 1938. - № 6. - С. 24 - 27.

60. Бордонос М.Г. К изучению наследственности односемянности у свеклы / М.Г. Бордонос // Основные выводы научно-исследовательских работ ВНИС за 1937 г. М.-Л.: Пищепромиздат, 1939.

61. Бордонос М.Г. Односемянные формы сахарной свёклы / М.Г. Бордонос // Доклады ВАСХНИЛ. 1941. - № 11. -С. 3-4.

62. Бриге Ф., Ноулз П. Научные основы селекции растений: пер. с англ. / Ф. Бриге, П. Ноулз. М: Колос, 1972. - 399 с.

63. Бугара A.M., Русина JI.B. Культура неоплодотворённых завязей и семяпочек in vitro как способ получения гаплоидных растений / A.M. Бугара, JI.B. Русина // Физиология и биохимия культ, раст. 1988. -Т. 20. - № 5. - С. 219 - 430.

64. Бутенко А. И., Набоких К. И. Инцухт-метод в селекции сахарной свёклы / А.И. Бутенко, К.И. Набоких // Вестник с. -х. науки Казахстана. 1978. - № 12. -С. 36.

65. Бутенко Р.Г. Морфогенез in vitro как важный этап клеточной и генной инженерии растений / Р.Г. Бутенко // Новые методы биотехнологии: Тезисы докл. II Российского симпозиума. Пущино, 1993. - С. 118.

66. Бычкова В.А. Селекционно-генетическое изучение и использование инбред-ных линий сахарной свеклы при создании гетерозисных гибридов на фертиль-ной основе: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук / В.А. Бычкова //. Санкт-Петербург, 1993. - 22с.

67. Вавилов Н.И. Селекция как наука / Н.И. Вавилов // Теоретические основы селекции растений. Общая селекция растений. JL: ГИСХ совхозной и колхозной литературы. - 1935. - С. 17-74.

68. Вавилов Н.И. Метод инцухта. Избр. соч. / Н.И. Вавилов. М.: Колос, 1966.

69. Вайсман Н.Я. Псевдосовместимость исходной и инбредных популяций сахарной свёклы в двух географических точках / Н.Я. Вайсман // Сиб. вестн. С. -х. науки, 1981. -№ 1.-С. 25-31.

70. Вайсман Н.Я. Цитоэмбриология несовместимости у сахарной свеклы / Вайсман Н.Я., Жужжалова Т.П., Агафонов Н.С. // Генетика сахарной свеклы. -Новосибирск: Наука, 1984. С. 121-129.

71. Валеева З.Т., Тимин Н.И., Пыжьянова П.Г. Получение гомозиготных форм моркови на основе индуцированного апомиксиса / З.Т Валеева., Н.И. Тимин,

72. П.Г. Пыжьянова // Апомиксис у растений: состояние проблемы и перспективы исследований / Труды Междунар. симп. (Саратов, 21-24 июня 1994). Саратов, 1994.-С. 24-25.

73. Васильев И.М. Действие ионизирующих излучений на растения / И.М. Васильев. М.: АН СССР, 1962. - 222с.

74. Вепрев С.Г. Изменение типа цитоплазмы у сахарной свёклы (Beta vulgaris L.) при инбридинге. Влияние гибридизации / С.Г. Вепрев, И.Б. Хворостов, Г.М. Дымшиц // Генетика. 2003. - Т.39, № 6. - С. 796 - 804.

75. Вихрова Л.А.Изменчивость признака сахаристости у самоопыленных линий сахарной свеклы / Л.А. Вихрова, К.И. Набоких, Р.К. Джантагулова, А.И. Бутенко // Вестник с.-х. науки Казахстана. 1980. - № 4. - С. 35-36.

76. Володин В.Г., Мушинская Л.Г. Изучение частоты возникновения радиационных мутаций у пшеницы из коллекции ВИР / В.Г. Володин, Л.Г. Мушинская // Экспериментальный мутагенез. Минск: Наука и техника, 1967. - С. 50-57.

77. Гельмер О.Ф. Основные выводы из работ Ивановской свекловичной станции за 1937 г. / О.Ф. Гельмер. М. - Л.: Пищепромиздат, 1939. - С. 288 - 292.

78. Гельо С. О. Облучение овса на разных стадиях развития и в различных физиологических состояниях / С.О. Гельо // Экспериментальный мутагенез в селекции. М.: Колос, 1972. - С. 272 -.284.

79. Герцог К. Итоги работ с раздельноплодной свеклой в ГДР / К. Герцог // Генетика сахарной свеклы. Новосибирск: Наука, 1984. - С. 65-70.

80. Голев И.Ф. Исследование методов селекции генетически новых форм раз-дельноплодной сахарной свеклы: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук / И.Ф. Голев //.-Киев, 1972.- 36с.

81. Голев И.Ф. Исследование методов селекции генетически новых форм раз-дельноплодной сахарной свеклы: Тез. докл. ВНИС / И.Ф. Голев. Киев: ВНИС, 1972.-С. 27-28.

82. Голев И.Ф. Результаты отбора индуцированных мутантов в популяциях многосемянной сахарной свеклы / И.Ф. Голев //: Тр. ВНИИСС. 1975. - Т.5, Вып. 1.-С. 91-100.

83. Голев И.Ф. Получение односемянной свеклы методом радиомутагенеза / И.Ф. Голев // Использование биофизических методов в генетико-селекционном эксперименте. Кишинев: Штиинца, 1977. - С. 16.

84. Голев И.Ф. Селекция раздельноплодной свеклы на основе радиационных мутантов // Использование биофизических методов в генетико-селекционном эксперименте. Кишинев, 1977. - С. 16.

85. Голев И.Ф. Индукция и селекционное использование радиационных раз-дельноплодных макромутаций сахарной свеклы / И.Ф. Голев // Тез. докл.: Вторая Всесоюз. конференц. по с.-х. радиологии. Обнинск, 1984. - С. 44.

86. Голев И.Ф. Раздельноплодные мутанты сахарной свеклы (индукция, фено-типическое проявление и селекционное изучение) / И.Ф. Голев // Совершенствование методов селекции и агротехники сахарной свеклы. Воронеж, 1985. - С. 3-7.

87. Голев И.Ф. Раздельноплодные мутанты сахарной свеклы и факторы интенсификации их отбора в процессе селекции: Автореф. . д-ра с.-х. наук / И.Ф. Голев//.-Киев, 1991. -48с.

88. Юб.Голубовская И.Н. Генные системы мейоза, влияющие на рекомбинацию у эукариот / И.Н. Голубовская // Экологическая генетика растений и животных:

89. Тез. докл. Всесоюзной конференции 12-14 октября 1987. Кишинев: Штиинца, 1987.-С. 59-60.

90. Гостимский С.А. Использование молекулярных маркеров для анализа генома растений / С.А. Гостимский, З.Г. Кокаева, В.К. Боброва // Генетика. 1999. -Т.35, № 11.-С. 1538- 1549.

91. Грант В. Видообразование у растений / В. Грант //. М.: Мир, 1984. 328 с.

92. Гринько Т.Ф. Самоопыляющиеся расы сахарной свеклы / Т.Ф. Гринько // Бюл. Ивановской опыта, станции. 1927. - № 4. - С. 47-63.

93. Гринько Т.Ф. Инцухт у сахарной свеклы / Т.Ф. Гринько // Свекловодство. -Киев: Госсельхозиздат, 1940. Т. 1. - С. 627-741.

94. Гуляев Г.В., Мальченко В.В. Словарь терминов по генетике, цитологии, селекции, семеноводству и семеноведению / Г.В. Гуляев, В.В. Мальченко //. М.: Россельхозиздат, 1983. - 240с.

95. Густафссон A.B. Селекция растений и мутации / A.B. Густафссон // Радиак-тивные излучения и селекция растений. М.: Издательство иностранной литературы, 1957. - С. - 57-58.

96. Густафссон О., Тедин О. Селекция растений и мутации / О. Густафссон, О. Тедин // Радиактивные излучения и селекция растений. М.: Изд-во иностр. лит., 1987. - С. 57-58.

97. Дальке JI. Само совместимые инбредные линии сахарной свеклы и возможность их использования в селекции гибридных сортов / JI. Дальке // Советско-польский симпозиум. Киев, 1980. - С.206.

98. Делоне Л.Н. Опыты по рентгенизации культурных растений. / Л.Н. Делоне // Пшеницы: Труды научно-исследовательского института селекции. Харьков, 1928.-Вып.4.-С. 3-16.

99. Делоне Л.Н. Опыт экспериментального получения искусственных вариаций у пшеницы путем рентгенизации молодых колосьев: Тр. Всесоюз. съезда по генетике, селекции, семеноводству и животноводству / Л.Н. Делоне //. 1930, -Т.2.-С. 35-41.

100. Делоне Л.Н. Рентгеномутации у пшеницы. Наслидки третичного / Л.Н. Делоне // Докл. ВИСТИ. Присил. бот. 1930. - С. 5-14.

101. Денисова Э.В. Получение инцухт-линий у самонесовместимых растений сахарной свёклы: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Э.В. Денисова //. — Новосибирск, 1973. 18 с.

102. Денисова Э.В. Исследование самофертильности сахарной свёклы в различных экологических условиях / Э.В. Денисова, С.И. Малецкий, A.M. Лутков // Генетика. 1971.-Т.7. - Вып.-С.

103. Дидусь В.М. Получение мутационных форм у гороха и сои / В.М. Дидусь // Записки Харьковского с.-х. института, 1938. Т.1., вып.1. - С. 18-21.

104. Добросотсков В.В. Пути получения линейного материала сахарной свеклы /В.В. Добросотсков //Селекция, генетика и физиология сахарной свеклы. Киев,1972. С. 62-64.

105. Добросотсков В.В. Изменчивость самосовместимости / В.В. Добросотсков // Сахарная свёкла. 1982. - № 3. - С. 31 - 33.

106. Добросотсков В.В., Перетятько В.Г. Сочетание различных систем инбридинга при создании линейных материалов сахарной свёклы / В.В. Добросотсков, В.Г. Перетятько // Сельскохозяйственная биология. 1975. - Т. X. - № 1. -С. 26-31.

107. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта / Б.А. Доспехов. М.: Колос,1973.-366 с.

108. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта (с основами статистической обработки результатов исследований) / Б.А. Доспехов. М.: Агропромиздат, 1985. -351 с.

109. Дрягина И.В. Использование ионизирующей радиации в селекции садовых растений (краткий литературный обзор) / И.В. Дрягина // Вестник МГУ.- Сер. Биология,почведение. 1969. - № 6. - С. 62-83.

110. Дрягина И.В. Использование ионизирующей радиации в селекции яблони / И.В. Дрягина // Биология и селекция яблони. -М.: Изво-во МГУ, 1976. С. 54-84.

111. Дрягина И.В. Радиационный мутагенез при селекции вегетативно размножаемых растений / И.В. Дрягина // Радиационный мутагенез вегетативно размножаемых растений. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 100-107.

112. Дубинин Н.П. Молекулярная генетика и действие излучений на наследственность /Н.П. Дубинин. М.: Госатомиздат, 1963. - С. 239-240.

113. Дубинин Н.П. Общая генетика / Н.П. Дубинин . М.: Наука, 1976. - 590

114. Дубинин Н.П. Генетические последствия действия ионизирующих излучений на популяции /.Н.П. Дубинин, В.А. Шевченко, В.А. Кальченко, В.И. Абрамов, С.А. Фамелис, В.А. Рубанович // Мутагенез при действии физических факторов. М.: Наука, 1980. - С. 3-44.

115. Дьячук П.А., Дьячук Т.И. Получение гаплоидных растений мягкой пшеницы саратовских сортов в культуре пыльников / П.А. Дьячук, Т.И. Дьячук И Докл. ВАСХНИЛ. 1986. - № 10. - С. 3-4.

116. Еналеева Н.Х. Выделение зародышевых мешков покрытосеменных растений путём мацерации тканей / Н.Х. Еналеева, B.C. Тырнов, B.C. Хохлов // Цитология и генетика. 1972. - Т.6, № 5. - С. 439 - 441.

117. Железнов A.B. Новые экспериментальные данные по межлинейной гибридизации гречихи / A.B. Железнов // Апомиктическое размножение и гетерозис. -Новосибирск: Наука, 1974. С. 137- 143.

118. Жужжалова Т.П., Агафонов Н.С. Влияние ионизирующей радиации на оплодотворяющую способность пыльцы сахарной свеклы: Тез. докл. II Всесо-юзн. конф. по с.-х. радиологии / Т.П. Жужжалова, Н.С. Агафонов //. Обнинск, 1984.-С. 43-44.

119. Жужжалова Т.П. Экзогенные факторы и индуцирование апомиксиса /Т.П. Жужжалова, Т.П. Федулова, М.А. Богомолов // Сахарная свекла. 2000. - № 12. -С.17-18.

120. Жужжалова Т.П. Селекционно-генетические особенности апомиктичных форм /Т.П. Жужжалова, Т.П. Федулова, М.А. Богомолов //Сахарная свекла. -2001.-№6.-С. 15-16.

121. Жужжалова Т.П. Направленное индуцирование апомиксиса у сахарной свеклы /Т.П. Жужжалова, М.А. Богомолов, Т.П. Федулова, Н.Р. Фоменко //Сахарная свекла. 2003. - № 10. - С. 25-26.

122. Жуков О.С., Рыжков С.Д. Применение физических факторов в генетико-се-лекционной работе с плодовыми культурами / О.С. Жуков, С.Д. Рыжков // Мутагенез при действии физических факторов. М.: Наука, 1986. - С.163-175.

123. Жукова Н.В., Остапенко В.И. Активность окислительных ферментов, и выход семян в связи с радиационной обработкой пыльцы / Н.В. Жукова, В.И. Остапенко // II Всесоюзн. конференция по с.-х. радиологии: Тез. докл. Обнинск, 1984.-Ч. 2.-С. 60.

124. Жученко A.A. Влияние физических факторов на рекомбинационные процессы у томатов / A.A. Жученко, Д.А. Выродов, А.Б. Король, В.К. Андрющенко // Мутагенез при действии физических факторов. М.: Наука, 1980. - С. 148-162.

125. Жученко A.A. Рекомбинация в эволюции и селекции / A.A. Жученко, А.Б Король.-М., 1985.

126. Жученко А.А Некоторые подходы и перспективы гаметной и зиготной селекции / A.A. Жученко, А.Н. Кравченко // Генетические методы ускорения селекционного процесса. Кишинев: Штиинца, 1986. - С. 5-17.

127. Жученко A.A. Адаптивный потенциал культурных растений (эколого-гене-тические основы) / A.A. Жученко. Кишинёв: Штиинца, 1988. - 767 с.

128. Жученко A.A. Роль продуктивного направления селекции культурных растений / A.A. Жученко // Методические указания по гаметной селекции сельскохозяйственных растений (методология, результаты и перспективы). — М., 2001. -С. 7-46.

129. Забродина М.В. Сравнение многолетней и однолетней ржи методом ПЦР-амплификации случайных и известных последовательностей / М.В. Забродина, A.A. Шаденков, Э.В. Хавкин И Биотехнология. 1998. - № 3. - С. 82 - 86.

130. Зайковская Н.Э. Изменчивость опыления и оплодотворения сахарной свёклы в зависимости от внешних условий / Н.Э. Зайковская // Доклады АН СССР. 1955.-Т. 102. - № 1.-С. 177- 179.

131. Зайцев Г.Н. Методика биометрических расчетов / Г.Н. Зайцев //- М.: Наука, 1973.-256с.

132. Знаменская В.В. Влияние некоторых регуляторных факторов на формирование семян и их качество у линий и гибридов сахарной свёклы / В.В. Знаменская // Автореф. дис. . канд.с. -х. наук. Л., 1985. - 16 с.

133. Знаменская В.В. Принципы и методы создания и поддержания исходного материала на современном этапе селекции сахарной свёклы / В.В. Знаменская // Автореф. дис. . докт.с. -х. наук. Рамонь, 1999. - 40 с.

134. Ибрагимова С.С. Использование механизмов опыление-оплодотворение для получения трансгенных растений у люцерны / С.С. Ибрагимова, Е.В. Дей-неко, В.К. Шумный // Новые методы биотехнологии растений: Тезисы докл. II

135. Российского симпозиума, 18-20 мая 1993, Пущино Московск.обл. Пущино, 1993.-С.22.

136. Ильенко И.И. Микроклональное размножение и сохранение селекционного материала сахарной свёклы в культуре in vitro / И.И. Ильенко // Физиология и биохимия культурных растений. 1983. - Т. 15, № 4. - С. 351 - 355.

137. Инге-Вечтомов С.Г. Генетика с основами селекции / С.Г. Инге-Вечтомов. -М.: Наука, 1989. 592с.

138. Иорданский A.B., Лутков А.Н. Цитоплазматическая мужская стерильность у сахарной свеклы / A.B. Иорданский, А.Н. Лутков // Экспериментальная полиплоидия в селекции растений. Новосибирск: Наука, 1966. - С. 147-150.

139. Картель H.A. Эффекты экзогенной ДНК у высших растений / H.A. Картель. Минск: Наука и техника, 1981.

140. Картель H.A. Генетическая трансформация у растений: проблемы и перспективы / H.A. Картель // Известия АН БСССР. Сер. биол. наук. 1983. - № 1. -С. 20-26.

141. Картель H.A. Взаимодействие экзогенного генетического материала с геномом растений / H.A. Картель, К.И. Забенькова, О.В. Квитко, С.Е. Аблов, С.С. Савченко // Генетические методы ускорения селекционного процесса. Кишинев: Штиинца, 1986. - С. 96-105.

142. Катаева Н.В., Бутенко Р.Г. Клональное микроразиножение растений / Н.В. Катаева, Р.Г. Бутенко. -М.: Наука, 1983. 95 с.

143. Кашин A.C. Гаметофитный апомиксис и проблемы хромосомной нестабильности геномов у покрытосеменных растений / A.C. Кашин // Генетика. -1999. Т.35, № 8. - С. 1041 - 1054.

144. Кельрейтер И. Учение о поле и гибридизации растений / И. Кельрейтер. -М.: Сельхозгиз, 1940. 245 с.

145. Керкадзе И.Г. Радиационный мутагенез субтропических культур / И.Г. Керкадзе // Радиационный мутагенез и его роль в эволюции и селекции. М.: Наука, 1987.-С. 231-254.

146. Ковалевская М.Ф. К вопросу экспериментального получения мутаций свеклы / М.Ф. Ковалевская // Тр. ВНИС. 1939. - Т. 24. - С. 367-369.

147. Ковалевская М.Ф. О действии Х-лучей на свеклу / М.Ф. Ковалевская // Тр. ВНИС. 1940. - Т. 24. - С. 261-263.

148. Коломиец O.K. Односемянная сахарная свекла / O.K. Коломиец // Сахарная свекла. М., 1956. - № 7.

149. Коломиец O.K. Селекция и методика работ, применяемых при выведении сортов сахарной свеклы с односемянными плодами на Белоцерковской опытно-селекционной станции / O.K. Коломиец //Односемянная сахарная свекла. М., 1960.-С. 22-44.

150. Конарев В.Г. Белки растений как генетические маркеры / В.Г. Конарев. М.: Колос, 1983.- 320с.

151. Корниенко A.B. Основы мутационной селекции свеклы / A.B. Корниенко. -М.: Агропромиздат, 1990. -208с.

152. Корниенко A.B., Орлов С.Д. Методы селекциии сахарной свеклы на гетерозис. М.: ИК "Родник". - 1996. - 240с.

153. Корниенко A.B. Новое о природе стерильности и фертильности пыльцы сахарной свёклы / A.B. Корниенко, A.M. Макогон, И.Я. Балков, С.Д. Орлов // Вестник с.-х. науки. 1983. -№ 4.-С.37-42.

154. Корниенко A.B. Мутагенез в генетике свёклы / A.B. Корниенко // V съезд генетиков и селекционеров Украины: Тез. Докл. Киев, 1986. - 4.4. - С. 107.

155. Кочиева Е.З. Использование методов на основе полимеразной цепной реакции и маркирования растительного генома / Е.З. Кочиева // Сельскохозяйственная биология, 1999. № 3. - С. 3 - 14.

156. Крупнов В.А. Генная и цитоплазматическая мужская стерильность растений / В. А. Крупнов. М. : Колос, 1973. - С. 18 - 20.

157. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф.Лакин. М.: Высшая школа, 1980. - 293с.

158. Ларченко Е.А., Моргун В.В. Использование облученной пыльцы для ограниченного переноса генов у кукурузы / Е.А. Ларченко, В.В. Моргун // Вестник с.-х. науки. 1990. - № 3. - С. 126-130.

159. Левитес E.B. Генетический контроль НАДФ зависимого малик-фермента у сахарной свеклы (Beta vulgaris L.) / E.B. Левитес // Докл. АН СССР. - 1979. - Т. 299, № 1.-С. 215-217.

160. Левитес Е.В. Генетика изоферментов растений / Е.В. Левитес. Новосибирск: Наука, 1986. - 144с.

161. Левитес Е.В. Генетические аспекты понятий и терминов, используемых в репродуктивной биологии растений / Е.В. Левитес. — Новосибирск: ИЦиГ СО РАН, 2003.- 13 с.

162. Лейбович A.C. К вопросу получения самофертильных закрепителей стерильности у сахарной свёклы / A.C. Лейбович, Л.С. Борисова // Генетические основы семеноводства сельскохозяйственных растений. Киев, 1979. - С. 51 -54.

163. Лободин O.K. Наследование признака односемянности у сахарной свеклы и значение промежуточных по числу плодов форм в процессе селекции на одно-семянность: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук / O.K. Лободин . Киев, 1971. - 28с.

164. Лутков А.Н. Мутации и их значение для селекции растений // Теоретические основы селекции растений / А.Н. Лутков. М., Л., 1935. - Т. 1. - С. 183-214.

165. Лысиков В.Н. Получение новых форм кукурузы при гамма- и нейтронном облучении /В.Н. Лысиков // Радиобиология. 1965. - Т.5, № 4. - С. 623-624.

166. Магаши Л. Применение реципрокно-реккуррентного отбора в селекции свёклы / Л. Магаши // Полиплоидия в селекции сахарной свёклы. М.: Наука, 1970.-С. 234-245.

167. Магаши Л., Фаркаш Ф. Получение мутаций у сахарной свеклы с помощью облучения / Л. Магаши, Ф. Фаркаш // Экспериментальный мутагенез в селекции. М.: Колос, 1972. - С. 166-190.

168. Магешвари П. Эмбриология покрытосеменных / П. Магешвари. М.: Изд-во иностр. лит, 1954. - 440 с.

169. Мазепин М.Г. Некоторые результаты селекции сахарной свеклы на иммунитет / М.Г. Мазепин, М.А. Богомолов, Попова И.В. // Новое в селекции и семеноводстве сахарной свеклы и зернобобовых: Сборник научных трудов. Воронеж, 1979.-С. 30-41.

170. Макогон A.M. Выведение гибридов сахарной свёклы с использованием форм с цитоплазматической мужской стерильностью / A.M. Макогон // Селекция и семеноводство технических культур. М.: Колос, 1973. - С. 120-128.

171. Мазлумов A.JI. Селекция сахарной свёклы / A.J1. Мазлумов. М.: Сельхоз-гиз, 1950.- 175 с.

172. Малецкий С.И. Генетический контроль размножения сахарной свеклы / С.И. Малецкий, С.Г Вепрев, Ю.Н. Шавруков, A.A. Коновалов, E.H. Малецкая, H.A. Дударева, A.B. Мглинец //. Новосибирск: Наука, 1991. - 168с.

173. Малецкий С.И. О происхождении гаметофитных генов у самонесовместимых видов растений / С.И. Малецкий // Генетика. 1969. - Т.5, № 5. - С. 159 -167.

174. Малецкий С.И. Инцухт-метод в селекции сахарной свёклы / С. И. Малецкий // Сахарная свёкла. 1973. - № 12. - С. 28 - 30.

175. Малецкий С.И. Псевдосовместимость и инцухт в селекции сахарной свёклы / С.И. Малецкий // Селекция сахарной свёклы на повышение продуктивности и технологических качеств. Киев, 1976. - С. 113 - 116.

176. Малецкий С.И. Получение и размножение инбредных линий у самонесовместимых растений / С.И. Малецкий // Тез. Докл. III съезда Всесоюзного об-ва генетиков и селекционеров. JL, 1977. - С. 280.

177. Малецкий С.И. Популяционно-генетические модели анализа самонесовместимости у растений / С.И. Малецкий // XIV Международный генетический конгресс: Тез. Докл. М., 1978. - С. 53.

178. Малецкий С.И. Перспективы селекции гибридных сортов сахарной свёклы / С.И. Малецкий // Сельскохозяйственная биология. 1981. - Т. XVI. - № 3. - С. 394-401.

179. Малецкий С.И. Групповые признаки растений / С.И. Малецкий // Популя-ционно-генетические аспекты продуктивности растений. Новосибирск: Наука. Сиб. отд-ние, 1982. - С.5 -26.

180. Малецкий С.И. Получение, размножение и гибридизация инбредных линий сахарной свёклы (популяционно-генетические модели) / С.И. Малецкий // Успехи современной генетики. 1983. —Вып.11.-С. 196-240.

181. Малецкий С.И. Одноростковость свеклы (эмбриология, генетика, селекция / С.И. Малецкий, Ю.Н. Шавруков, С.Г. Вепрев, Е.И. Малецкая, А.И. Бутенко, O.A. Кудрявцева, A.B. Мглинец, М.А. Костыря. Новосибирск: Наука, 1988. -168с.

182. Малецкий С.И. Слитное наследование (новая парадигма) / С.И. Малецкий. Новосибирск: ИЦиГ СО АН СССР, 1991. - 45 с.

183. Малецкий С.И. Введение в популяционную генетику / С.И. Малецкий. -Новосибирск:, 1995. 154 с.

184. Малецкий С.И. Генетическая изменчивость в популяциях соматических клеток и её влияние на репродуктивные признаки у покрытосеменных растений / С.И. Малецкий, Я.С. Колодяжная // Успехи современной биологии. 1999. -Т.119, № 2. - С. 128- 143.

185. Малецкий С.И. Биноминальные распределения в генетических исследованиях на растениях / С.И. Малецкий. Новосибирск: ИЦиГ СО РАН, НГАУ МСХ, 2000. - 126 с.

186. Малецкий С.И. Эпигенетические и синергетические формы наследования репродуктивных признаков у покрытосеменных растений / С.И. Малецкий // Журн. Общ. Биологии, 2004. Т.65, № 22. - С. 116 - 135.

187. Малецкий С.И., Малецкая E.H. Самофертильность и агамоспермия у сахарной свёклы (Beta vulgaris L.) / С.И. Малецкий, Е.И. Малецкая // Генетика. -1996. Т. 32, № 2. - С. 1643 - 1650.

188. Мамонов У.В. Проявление самонесовместимости у кочанной капусты в зависимости от состояния цветка и условий среды / Е.В. Мамонов: Автореф. дис. . канд.с. х. наук /. - М., 1976. - 19 с.

189. Маринчик А.Ф. Межвидовые гибриды свёклы высокосахаристый исходный материал для селекции / А.Ф. Маринчик // Основные выводы научно-исследовательских работ по сахарной свёкле за 1966 год. Т.1. - Киев, 1968. - С. 9 - 12.

190. Мейстер Г.К. Инцухт и его значение в формообразовательных процессах. Теоретические основы учения об изменчивости // Пособие по селекции. Выпуск первый. / Г.К. Мейстер. М.: Сельхозгиз, 1936. - 314 с.

191. Мельцер Р. Методы создания нового исходного материала в селекции сахарной свеклы / Р. Мельцер // Генетика сахарной свеклы. Новосибирск, 1984. -С. 31-37.

192. Модилевский Я.С. Апомиксис у покритонасшних растений / Я.С. Модилев-ский // Бот. жур. АН УССР. 1948. - 5 (2). - С. 5 - 21.

193. Моргун В.В. Генетические эффекты экзогенной ДНК на кукурузе / .В.В. Моргун, Е.А. Ларченко, Л.В. Ткаченко П Генетические методы ускорения селекционного процесса. Кишинев: Штиинца, 1986. - С. 106-114.

194. Мюнтцинг А. Генетические исследования / А. Мюнтцинг. М.: Изд-во иностр. лит., 1963. - С. 68.

195. Наумова Т.Н. Диплоспория / Т.Н. Наумова // Эмбриология цветковых растений. Терминология и концепции. Система репродукции: под ред. Т.Б. Батыги-ной. С.-П.: Мир и семья, 2000. Т.З. - С. 151 - 158.

196. Неговский H.A. О продуктивности полиплоидных сортов сахарной свеклы / H.A. Неговский. М.: Сельхозиздат, 1963. - С. 531-541.

197. Неговский H.A., Макогон A.M. Получение односемянной свеклы с ЦМС методом насыщающих скрещиваний / H.A. Неговский, A.M. Макогон // Новое в свекловодстве. Киев, 1969. - С. 67.

198. Николайчук В.И. Создание самоопылённых линий сахарной свёклы и изучение у них генетики биологических и хозяйственных признаков: Автореф. дис. . канд биол. наук / В.И. Николайчук //. Киев, 1982. - 17 с.

199. Ницше В. Гаплоиды в селекции растений / В. Ницше, Г. Венцель. М.: Колос, 1980.- 127 с.

200. Омельченко П.И. Односемянность и азотное питание свеклы / П.И. Омель-ченко // Сахарная свекла. 1965. - № 11. - С. 22.

201. Орлов С.Д. Создание и селекционно-генетическое изучение самоопыленных линий сахарной свеклы / С.Д. Орлов // Автореф. дис. . канд. с.-х. наук. -Киев, 1984. -23с.

202. Орловский Н.И. Односемянная сахарная свёкла / Н.И. Орловский // Вестник сельскохозяйственной науки. 1957. - № 12. - С. 7 - 13.

203. Орловский Н.И. Односемянная сахарная свекла в СССР / Н.И. Орловский, O.K. Коломиец, A.B. Попов//Вестник с.-х. науки. 1957. - № 12. - С. 65-74.

204. Ошевнев В.П. Научные основы интенсификации селекционного процесса раздельноплодной сахарной свёклы с использованием признака генной и цито-плазматической мужской стерильности / В.П. Ошевнев // Автореф. дис. . докт. с. х. наук. - Рамонь, 1999. - 40 с.

205. Ошевнев В.П., Грибанова Н.П. Улучшение компонентов гибридов сахарной свёклы в процессе поддерживающей селекции и первичного семеноводства / В.П. Ошевнев, Н.П. Грибанова // Доклады РАСХН, 2003. № 1. - С. 11 - 15.

206. Ошевнев В.П. Способ получения односемянных самофертильных опылителей "О-типа" у сахарной свеклы / В.П. Ошевнев, JI.H. Прохорова, Э.И. Чере-пухин, И .Я. Балков // Авт. св-во № 997634 18.02.81. Б.- 1983. № 7.

207. Павленко Е.А. Принципы подбора церкоспороустойчивых компонентов при создании высокопродуктивных гибридов сахарной свёклы, устойчивых к церкоспорозу: Автореф. дис. . канд. с. -х. наук/Е.А. Павленко //. Киев, 1991. -23 с.

208. Павлова М.С. Культура неоплодотворённых завязей и семяпочек: возможности и перспективы / М.С. Павлова // С. х. биология. - 1987. - № 1. - С. 27 -33.

209. Палилова А.Н. Молекулярно-генетические основы ЦМС у кукурузы / А.Н. Палилова // Цитоплазматическая мужская стерильность и селекция растений. -Киев: Наукова думка, 1979. С. 147 - 154.

210. Палилова А.Н. Цитоплазматическая мужская стерильность / А.Н. Палилова. Минск: Наука и техника, 1982. - С. 190 - 203.

211. Палилова А.Н. Генетические системы у растений и их взаимодействие / А.Н. Палилова //. Минск: Наука и техника, 1986. - 160 с.

212. Панин В.А., Рыбак Д.А. Особенности создания линейных материалов свёклы на основе частично самофертильных форм / В.А. Панин, Д.А. Рыбак // Доклады Академии сельскохозяйственных наук. М., 1981. - № 10. - С. 17 - 19.

213. Панин, В.А., Рыбак Д.А. Исследование популяций свёклы по признаку самофертильности / В.А. Панин, Д.А. Рыбак // Вестник сельскохозяйственной науки. 1982.-Т.5.-С. 3-26.

214. Паншин Б.А. К биологии сахарной свёклы в связи с автофертильностью / Б.А. Паншин // Тр. ВНИС, Киев. 1932. -Т.5. - С. 3 - 26.

215. Патент США, № 6093571, 2000.

216. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений / З.П. Паушева. М.,: Колос, 1980. - 304 с.

217. Перетятько В.Г., Орловский Н.И. Изучение комбинационной способности линейных материалов сахарной свёклы / В.Г. Перетятько, Н.И. Орловский // Вопросы генетики, селекции, и цитологии сахарной свёклы. Киев, 1971. - С. 262 -268.

218. Перетятько В.Г., Перетятько Н. А. Селекция самофертильных О-типов сахарной свёклы / В.Г. Перетятько, Н.А. Перетятько // Советско-польский симпозиум.-Киев, 1980.-С. 34-41.

219. Перетятько В.Г. Селекционно-генетические основы создания гетерозисных гибридов сахарной свёклы: Автореф. дис. . докт. с. х. наук / В.Г. Перетятько. -Киев, 1981. -34 с.

220. Перетятько В.Г. Инбридинг, качество пыльцы и семян у сахарной свёклы / В.Г. Перетятько // Цитоплазматические и цитоэмбриологические исследования в селекции сахарной свёклы. Киев. - 1986. - С. 169 - 173.

221. Перетятько В.Г. К вопросу о наследовании признака односемянности и его сцепления с ЦМС у сахарной свеклы / В.Г. Перетятько // Селекция сахарной свеклы на повышение продуктивности и технологических качеств. Киев, 1976. -С. 136-140.

222. Перфильев В.Е. Методические рекомендации по применению статистических методов в генетике и селекции плодовых культур / В.Е.Перфильев. Мичуринск, 1980. - 133с.

223. Петров Д.Ф. Генетически регулируемый апомиксис / Д.Ф. Петров. Новосибирск: Наука, 1964. - 187 с.

224. Петров Д.Ф. Апомиксис в природе и опыте / Д.Ф. Петров. Новосибирск: Наука, 1988.-214 с.

225. Петров Д.Ф. Генетические основы апомиксиса / Д.Ф. Петров. Новосибирск: Наука, 1979. - 280с.

226. Петров Д.Ф. Индуцированный мутагенез и апомиксис / Д.Ф. Петров. Новосибирск.: Наука, 1980. - 256с.

227. Петров Д.Ф., Сухарева Н.Б. Трансформация как возможная причина передачи наследственной информации регулярным апомиктам Fragaria при опылении пыльцой, облученной тяжелыми дозами ионизирующей радиации /Д.Ф.

228. Петров, Н.Б. Сухарева // Теоретические основы селекции: Сборник научных работ. Новосибирск.: Наука, 1985. - С. 141-151.

229. Плохинский H.A. Биометрия / H.A. Плохинский //. М. - Изд-во МГУ, 1970. - 367с.

230. Подвигина O.A. Теоретическое обоснование и приёмы использования методов биотехнологии в селекции сахарной свёклы: Авгореф. дис. . докт. с. х. наук / O.A. Подвигина. - Воронеж, 2003. - 44 с.

231. Поддубная-Арнольди В.А. Общая эмбриология покрытосеменных растений / В.А. Поддубная-Арнольди. М.: Наука, 1964. - 482 с.

232. Попов A.B. Результаты работ Ялтушковского селекционного пункта по выведению и изучению односемянной сахарной свёклы / A.B. Попов // Односемянная сахарная свёкла. М.: МСХ СССР, 1960. - С. 45 - 73.

233. Равкин A.C. Действие ионизирующих излучений и химических мутагенов на вегетативно размножаемые растения / A.C. Равкин. М.: Наука, 1981. - 192с.

234. Родионов Т.А. Действие гамма-лучей (Со60) на изменение некоторых биологических особенностей, формирование урожая и качества корнеплодов и семян сахарной свеклы: Автореф. дис. . канд. биол. наук / Т.А. Родионов. Воронеж, 1974. -20с.

235. Руденко Н.М., Лысенко Н.И. Влияние инбридинга на количественные признаки сахарной свёклы / Н.М. Руденко, Н.И. Лысенко // IV съезд генетиков и селекционеров Украины: Тез. докл. Ч. 3. Киев, 1981. - С. 211 -223.

236. Романцев Е.Ф., Блохина В.Д. Ранние радиационно-биохимические реакции / Е.Ф. Романцев, В.Д. Блохина. М.: Атомиздат, 1966. - 267с.

237. Сарычев Ю.Ф. Новый способ получения ионизированного диплоидного апомиксиса у Nicotiana tabacum L. /Ю.Ф. Сарычев // Генетика. 1986. - Т.ХХИ, №7.-С. 1138-1142.

238. Сеилова Л.Б. Апомиксис у сахарной свёклы и его использование в практической селекции: Автореф. дис. . докт. биол. наук / Л.Б. Сеилова. Алматы, 1996.-45 с.

239. Сёмин B.C., КондратьевВ.Д., Маслов В.Я. Облученная пыльца стимулятор оплодотворения при отдаленной гибридизации плодовых культур // Бюл. науч-но-техн. информ Молдав. НИИ садоводства, виноградарства и виноделия. -1961. - № 4 (13). - С. 14-18.

240. Сёмин B.C. Применение облученной ионизирующими излучениями пыльцы в селекции винограда /B.C. Сёмин // Цитология и генетика: 1988. - Т. 22, № 2. - С. 73-76.

241. Сёмин B.C. Применение ионизирующих излучений в селекции винограда / B.C. Сёмин, Г.М. Караджи, Л.М. Якимов. Кишинёв: Штиинца, 1970. - С.77.

242. Серебровский A.C. Генетический анализ / A.C. Серебровский. М.: Наука, 1970.-342 с.

243. Сиволап Ю.М. ДНК i генетична специф1чность / Ю.М. Сиволап // Фактори экспериментальной еволюцп opramoMÎB. -Кшв: Аграрна наука, 2003. С. 375 -380.

244. Сиволап Ю.М. Идентификация и паспортизация сортов мягкой пшеницы методами RAPD и SSR-анализа / Ю.М. Сиволап, Е.Ф. Топчиева, C.B. Чеботарь // Генетика. 2000. - 36, № 1. - С. 44 - 59.

245. Славова И.В. Разработка метода вегетативного размножения и получения гаплоидов в культуре in vitro у сахарной свёклы / И.В. Славова // Автореферат дис. . канд. с. х. наук. - Пловдив, 1988. — 33 с.

246. Соколов В.А. Будет ли следующая «зелёная революция» / В.А. Соколов // Наука и жизнь. № 3. - 2003. - С. 25 - 31.

247. Солнцева М.П. Что же такое апомиксис у цветковых растений / М.П. Солнцева // Ботанический журнал. 1991. -№ 6. - С. 801 - 807.

248. Суриков И.Н. Генетика внутривидовой несовместимости мужского гамето-фита и пестика у цветковых растений / И.Н. Суриков // Успехи современной генетики. 1972. - С. 119-169.

249. Суриков И.Н. Несовместимость и эмбриональная стерильность растений / Н.И. Суриков. М.: Агропромиздат, 1991. - 222 с.

250. Сухарева Н.Б. Значение нередукции гамет у Fragaria / Н.Б. Сухарева // Апо-миксис у растений и животных . Новосибирск: Наука, 1978. - С. 158 - 170.

251. Терёхин Э.С. Семя и семенное размножение / Э.С. Терёхин. С-Пб.: Мир и семья, 1996. - 376 с.

252. Тимофеев-Рессовский Н.В. Развитие и современное состояние радиационной генетики / Н.В. Тимофеев-Рессовский // Сборник работ лаборатории биофизики / Труды института биологии УФ АН СССР, Вып. 13. Свердловск, 1960. -С. 73-86.

253. Турбин Н.В. Генетика гетерозиса и методы селекции растений на комбинационную способность / Н.В. Турбин // Генетические основы селекции растений. -М.: Наука, 1971.-С. 112-155.

254. Тырнов B.C. Роль генотипа материнского родителя в определении гаплои-дии у кукурузы /B.C. Тырнов // Апомиксис и цитоэмбриология растений. Саратов, 1975. - Вып. 3. - С. 64 - 77.

255. Тырнов B.C. Гаплоидия и апомиксис / B.C. Тырнов // Апомиксис у растений: состояние проблемы и перспективы исследований: Тр. Междун. симп. -Саратов, 1994.-С. 141 142.

256. Тырнов B.C. Гаплоидия и апомиксис / B.C. Тырнов // Репродуктивная биология, генетика и селекция. Саратов, 2002. - С. 32 - 46.

257. Уильяме У. Генетические основы и селекция растений / У. Уильяме //. — М.: Колос, 1968.- 148 с.

258. Фаворский Н.В. Материалы по биологии и эмбриологии сахарной свёклы / Н.В. Фаворский // Доклады ВАСХНИЛ, 1928. № 3. - С. 3 - 11.

259. Федорович Л.И. Некоторые данные по вопросам, связанным с применением метода инцухта в свекловичном сортоводстве / Л.И. Федорович // Сборник ССЦ. Киев, 1928. №4(12).-С. 41-57.

260. Федорович Л.И. Некоторые данные по вопросам, связанным с применением метода инцухта в свекловичном сортоводстве / Л.И. Федорович // Труды инта ЦИНС. 1929. - Вып.2. - С. 186 - 187.

261. Федулова Т.П. Взаимосвязь между изменчивостью количественных признаков и изоферментным полиморфизмом у сахарной свеклы / Т. П. Федулова, М.А. Богомолов // Сахарная свекла. 2007 - №1. - С. 18-19.

262. Фоменко Н.Р. Морфогенетические и цитоэмбриологические особенности онтогенеза апомиктичных растений сахарной свёклы (Beta vulgaris L.): Авто-реф. дис. . канд. биол. наук /Н.Р. Фоменко //. -Рамонь, 2003. -24 с.

263. Хавкин Э.Е. Молекулярная селекция растений: ДНК-технологии создания новых сортов сельскохозяйственных культур / Э.Е. Хавкин // Сельскохозяйственная биология. 2003. - № 3. - С. 26 - 41.

264. Хагеман Р. Плазматическая наследственность / Р. Хагеман . М.: Иностранная литература, 1962. - 111 с.

265. Хаджинов М.И. Генетические основы цитоплазматической мужской стерильности / М.И. Хаджинов // Гетерозис: Теория и практика. Л., 1968. - С. 23 -45.

266. Харечко-Савицкая Е.И. Метод получения семян при самоопылении ауто-стерильных рас свёклы / Е.И. Харечко-Савицкая // ДАН СССР, 1938. Т. 18. - С. 469 - 474.

267. Харечко-Савицкая Е.И. Регулирование процесса самооплодотворения у сахарной свёклы / Е.И. Харечко-Савицкая // Основные выводы ПИР ВНИС за 1937 г. Л.: Пищепромиздат, 1939. - С. 369-371.

268. Хохлов С.С. Апомиксис: классификация и распространение у покрытосеменных растений / С.С. Хохлов // Успехи современной генетики. М.: Наука, 1967.-Вып. 1.-С. 43- 105.

269. Хохлов С.С. Выявление апомиктичных форм во флоре цветковых растений СССР / С.С. Хохлов, М.И. Зайцева, П.Г. Куприянов. Саратов, 1978.-224 с.

270. Чесноков Ю.В. Перенос чужеродных генов в зародышевый мешок высших растений посредством прорастающей пыльцы / Ю.В. Чесноков // Биополимеры и клетка. 1992. - Т. 8. - № 2. - С. 53 - 58.

271. Чесноков Ю.В. Эффекты действия экзогенной ДНК у томата. I. Генетическая трансформация /Ю.В. Чесноков, Г.И. Седов, H.A. Виконская // Генетика, 1995. Т. 31. - № 5. - С. 684 - 691.

272. Чесноков Ю.В. Генетическая трансформация кукурузы посредством процесса опыления-оплодотворения / Ю.В. Чесноков, А.Б.Король // Новые методы биотехнологии растений: Тезисы докл. II Российского симпозиума. — Пущино, 18-20 мая 1993.-Пущино, 1993.-С. 58.

273. Чучмий И.П., Моргун B.B. Генетические основы и методы селекции скороспелых гибридов кукурузы / И.П. Чучмий, В.В. Моргун. Киев.: Наукова думка, 1990. - 283с.

274. Шевцов И.А. Применение инбридинга у сахарной свеклы / И.А. Шевцов // IV съезд генетиков и селекционеров Украины: Тез.докл. Киев, 1981. - С. 239.

275. Шевцов И.А. Использование инбридинга у растений / И.А. Шевцов. -Киев: Наукова думка, 1983. 272 с.

276. Шишкинская H.A. О классификации и терминологии апомиксиса / H.A. Шишкинская // Гаметогенез, оплодотворение и эмбриогенез семенных растений, папоротников и мхов: Тез. докл. IX Всесоюзн. совещ. по эмбриологии растений. Кишинёв: Штиинца, 1986. - С. 39.

277. Шишкинская H.A. Развитие концепции эволюционной роли апомиксиса / H.A. Шишкинская // Сборник научн. тр., поев. 90-летию со дня рожд. С.С. Хохлова: Изд-во Саратовского Университета, 2002. С. 22 - 32.

278. Шкварников П.К. Достижения мутационной селекции в СССР / П.К. Шкварников // Цитология и генетика. 1970. - Т. 4, № 2. - С. 108-122.

279. Шумный В.К. Исследование действия генов в связи с проблемой гетерозиса у растений: Автореф. дис. . докт. биол. наук / В.К. Шумный. Новосибирск, 1973.-52 с.

280. Шумный В.К. Некоторые общие принципы селекции на гетерозис / В.К. Шумный // Генетические методы в селекции растений. М., 1974. - С. 6 - 18.

281. Шумный В.К. Генетические методы в селекции растений / В.К. Шумный, В.М. Чекуров, К.К. Сидоров. Новосибирск: Наука СО, 1992. - 296 с.

282. Щербаков В.К. Мутации в эволюции и селекции растений / В.К. Щербаков. -М.: Колос, 1982. 327с.

283. Щербаков В.К. Новые направления генетического изменения растений: трансформация, инсерции, мутагенез, рекомбиногенез / В.К. Щербаков // II

284. Конф. по с.-х. радиологии (Обнинск, 16-20 июля 1984). Обнинск: Наука, 1984. -Т.1.-С. 10-11.

285. Юдин Б.Ф., Лукина Л.А. Индуцированные мутации у апомиктичной формы гибрида кукурузы с трипсакум / Б.Ф. Юдин, Л.А. Лукина // Генетика. 1983. -T.XIX, № 9. - С. 1495-1504.

286. Юсубов A.M., Мосина Н.Р. К методике получения тетраплоидной сахарной свеклы / A.M. Юсубов, Н.Р. Мосина: Тр. ВНИИСС.- Воронеж, 1969. - Т. 3. - С. 29-53.

287. Юсубов A.M., Попов И.С., Сухопрутский А. А. Степень самофертильности различных форм сахарной свёклы / A.M. Юсубов, И.С. Попов, A.A. Сухопрутский // Сахарная свёкла. 1978. - № 6. - С. 33 - 34.

288. Юрко B.C. Влияние отбора и условий выращивания на изменение раздель-ноплодности у сахарной свеклы: Автореф. дис. . канд. с.-х. наук / B.C. Юрко. -Киев, 1968.-20с.

289. Юрцев В.Н., Пухальский В.А. Методическое руководство к лабораторно-практическим занятиям по цитологической и эмбриологической микротехнике / В.Н. Юрцев, В.А. Пухальский. М.: ТСХА, 1968. - 113с.

290. Ярмолюк Г.И. Апомиксис у сахарной свёклы / Г.И. Ярмолюк, С.П. Белгородская, И.Я. Балков // Апомиксис у растений: состояние проблемы и перспективы исследований: Тр. междунар. симп. Саратов, 1994. - С. 166 - 168.

291. Ярмолюк Г.И., Ширяева Э.И. Цитологические и цитогенетические исследования в селекции сахарной свеклы / Г.И. Ярмолюк, Э.И. Ширяева // Методические рекомендации. Киев: Наукова думка, 1982. - 56с.

292. Asker S. View points on apomictic and sexual reproduction in Angiosperms / S. Asker //Acta. Soc. bot. pol. 1981. - № 1-2. P. 195 - 200.

293. Asker S. Jerting L, Apomixis in plants / S. Asker, L. Jerting // CRC Press Boca Raton, 1992. 298 p.

294. Bandlow G. Über Reizfruchtungsversuche bei der Zuckerrübe / G Bandlow // Der Zuchter, 1953. № 23. - S. 295.

295. Bandlow G. Über einige bei Röntgenbestrahlung von Zuckerrübenäueln auf getretene Erscheinungen und Fragen / G. Bandlow II Züchter. 1962. - 32. - S.250-257.

296. Bandlow G. Untersuchungen über die Genetik monokarper Zuckerrüben Aufgrund einer Kreuzung monokarp x dikarp / G. Bandlow // Der Züchter. 1967. -Bd.37, № 2. - S.62-64.

297. Barocka K.H. Die Variabilität des Fruchtmerkmals Mehrblüttigkeit von Beta vulgaris L. / K.H. Barocka II Züchter Pflanzenzucht.- 1966. S.377-389.

298. Battaglia E. Apomixis / E. Battaglia II Rec.adv. Embryology of Angiosperms. Delhi: Int. Soc. Plant Morph. Univ. Delhi, 1963. -P. 221 -264.

299. Batygina T.B. New approach to the system of reproduction in flowering plants / T.B. Batygina //Apomixis newlet. 1989. - 1. - P. 52 - 55.

300. Batygina T.B. Embryoidogenic type of reproduction in flowering plants / T.B. Batygina // Apomixis Newlet. 1990. - 2. - P. 58 - 66.

301. Bene J. The use of irradiation by Co60 in sugar beet breeding / J. Bene // Induced mutations and their utuluzation. Berlin: Acad. Verlag. - 1967. - P. 137.

302. Benzer S. On the topography of the genetic fine structure / S. Benzer // Proc. Nat. Acad. Sei. USA. 1961. -V. 47. - P. 403-405.

303. Bliss F., Gabelman W. Inheritence of male sterility in beets / F.Bliss, W. Gabel-man // Crop Sei. 1965. - vol. 5. - P. 403 - 406.

304. Bogomolov M.A. New methodes for sugar beet starting material development /M.A. Bogomolov, T.P. Fedulova, T.P. Zhuzhzhalova, A.V. Kornienko// 1st joint IIRB-ASSBT Congress, 26 feb. -1st March, 2003. San Antonio (USA). - P. 947-950.

305. Bogomolov M.A. Prospects of isozymes usage for sugar beet genetic improvement /M.A. Bogomolov, T.P. Zhuzhzhalova. T.P. Fedulova // 1st joint IIRB-ASSBT Congress 26th Feb.- 1st March 2003. San Antonio (USA). - P. 951-953.

306. Bosemark N. O. Interspecific hybridization in Beta L. prospects and value in sugar beet breeding / N.O. Bosemark // Journal I.I.R.B., 1969. vol. 69 - P. 193 -204.

307. Bosemark N.O. Haploids and homozygous diploids, triploids and tetraploids in sugar beet / N.O. Bosemark // Hereditas. 1971. - 69. - P.193-204.

308. Brewbaker H. E. Self-fertilization in sugar beets as influenced by type of isolator and other factors / H.E. Brewbaker // Agric. Res. 1934. - № 48. - P. 323.

309. Burnham C.R. Discussion in Cytogenetics / C.R. Burnham //. St. Paul: University of Minnesota, 1962. 393 p.

310. Burnham C.R. Autopoliploidy / C.R. Burnham // Discussions in Cytogenetics. -University of Minnesota, 1977. P. 168 - 202.

311. Burton G.W., Atwal D.S. Twoadditional sources of cytoplasmic male sterility in pearl mielt and their relationship to Tift 23 Ai / G.W. Burton, D.S. Atwal // Crop. Sci. 1967. -№ 7. - P.209-211.

312. Calligari P.D.S. Gene transfer in Nicotiana rustica by means of irradiated pollen. I.Unselected progenies / P.D.S. Calligari, A.N. Ingram, J.L. Jinks // Heredity. 1981.-V.47 (1). - P.17-26.

313. Calligari P.D.S. Gene transfer in Nicotiana rustica using irradiated pollen / P.D.S. Calligari, A.N. Ingram, J.L. Jinks // Nature. 1981. - 291. - P.586-588.

314. Cleij G. Influencing of the cytoplasmic male sterility and fertility in beets / G. Cleij // Euphytica. 1967. - 16. - P. 23 - 28.

315. Clement W.M. Plasmon mutations in cytoplasmic male sterile pearl millet Penis-setum typoides / W.M. Clement // Genetics. 1975. - 79. - P. 583 - 588.

316. Darlington C.D. Apomixis: the escape / C.D. Darlington // The evolution of Genetic Systems. Cambrige: Cambr. Univ. Press. 1939. - P. 108 - 113.

317. Davis D.R. Pollen irradiation and transfer of maternal genes in Pisurn sativum /

318. D.R. Davis // Theor. and Appl. Genet. 1984. - Y.67, № 2-3. - P.245-248.

319. Duvick D.N. Cytoplasmic pollen sterility in corn / D.N. Duvick // Adv. Genet. -1965. -№ 13.-P.1-56.

320. East E.M. A new interpretation of hereditary behaviour of self-sterile plants /

321. E.M. East, A.J. Mangelsdorf // Proc. Nat. Acad. Sei. USA. 1925. - vol. 11. - P. 166- 183.

322. Edwardson I.R. Cytoplasmic male sterility / I.R. Edwardson // Bot. Rev. 1970.- V.36, №4. -P.341-420.

323. Eenink A.H. Genetic of host-parasite relationships and the stability of resistance / A.H. Eenink. London, 1959. - P. 47 - 54. 1974

324. Engwild K.S. Pollen irradiation and possible gene transfer in Nicotiana species / K.S. Engwild // Theor. Appl. Genet. 1985. - V.69, № 5-6. - P.457-461.

325. Erichsen A.W. Inheritence of colchicines-induced male sterility in Sorghum / A.W. Erichsen // Crop. Sei. 1963. - 3. - P. 335 - 338.

326. Ernst A. Bastardierung Ursache der Apogamie im Pflanzenreich. Eine Hypothese zur experimentellen Vererbungus und Abstammungslehre / A. Ernst. Jena: G Fisher, 1918.-666 p.

327. Fagerlind F. Die Terminologie der Apomixis-Processe / F. Fagerlind // Hereditas. -1940.-26(1).-P. 1-22.

328. Filutowitz A. Results of monogerm sugar beet breeding in Poland / A. Filutowitz // Report of the I.I.R.B. 26-th Winter Congress. 1963. - P.223-227.

329. Filutowitz A. Miesanche buraka cukrowego (Beta vulgaris L.) z Beta lomato-gona F. et. M. / F. Filutowitz, L. Dalke // Hod. Rosl. Ake. I Nas., 1972. b. 16. - h. 2 -S. 856-892.

330. Filutowitz A. Polihaploidy w. sekcj Corollinae Rodzaj u Beta / A. Filutowtz, B. Jassem // Hodowla roslin aklimatyzacja i nasiectwo , 1975. T. 19, № 4. - S. 307 -314.

331. Fisher H.E. Über vorkommen und Bedeutung verschiedene Genomstufen bei Beta vulgaris L. / H.E. Fischer // Züchter, 1962. 32. - S. 40 - 48.

332. Franklin W. M. Staining and observing pollen tubes in the stycle by means of fluorescence / W. M. Franklin// Stain Technology. 1959. - V.34., № 2. - P.125-128.

333. Fruwirt C. Die Züchtung von Mais, Futterrübe und anderen Rüben, Ölpflanzen und Grasern / C. Fruwirt //. Berlin, 1924. - 225 s.

334. Gustafsson A. Mutations in agricultural plants / A. Gustafsson // Hereditas. -1947.-V.33,№ 1,2. -P.28-36.

335. Hammond B.Z. Homozygous diploid sugar beets / B.Z. Hammond // J. Amer. Soc. Sugar Beet Techn. 1966, № 14. - P.75-78.

336. Hanson M.R. Functioning and variation of cytoplasmic genomes: Lessons from cytoplasmic nuclear interactions affecting male fertility in plants / M.R. Hanson, M.F. Conde //Intern. Rev. Cytol. - 1985. - Vol. 94. - P. 213 - 267.

337. He Peiru. H^yam. cioaßao / He Peiru, Li Zhengde, Li Dongxiano // Acta genet. Sin.- 1989.-16, № l.-C. 1 -6.

338. Heinisch O. Ein Beitrag zur Qualitätsbeurteilung vor Rübenmonogermsaat gut /0. Heinisch // Z. Zuckerindustrie. 1955. - № 5. - S. 225 - 230.

339. Henny R.J. The inheritance of pseudo-compatibility (PSC) in Nemesia strumusa Berth / RJ. Henny, P.D. Ascher // Theoret. Appl. Genet. 1976. V. 48. - P. 185 - 195.

340. Hermelin T. The effect of acute gamma-irradiation in growing barley plots / T. Hermelin // Hereditas. 1970. - V. 65. - № 2. - P.203-226.

341. Herzog K. Möglichkeiten der züchterischen Verbesserung von Samenträ-gerung Saatguteigenschaften bei monokarper Zuckerrüben und deren Einfluß auf Leistung und Schoßresistenz / K. Herzog // Diss. Kleinwanzleben, A1973. 241s.

342. Hess D. Uptake of DNA and bacteriophage into pollen and genetic manipulation / D. Hess // Genetic manipulation with plant material. 1975. - P.519-537.

343. Hosemans D. Induction of haploid plant from in vitro culture of unpollinaited beet ovules (Beta vulgaris L.) / D. Hosemans, D. Bossoutrot // Z. Pflanzenzucht, 1983.-V. 91, № l.-S. 74-77.

344. Imanishi S. Freguence of so-called O-type of plants as a maintainer of cytoplasmic male sterility in sugar beet population / S. Imanishi, T. Takeda, S. Nosokawa // Jap. J. Breed. 1970. Vol. 20. - P. 40-46.

345. Jassem B. Embriología tetraploidnych mieszancow miedzy jednorasiennym burakiem cukrowymi Beta lomatogona F. et.M. / Jassem B., Jassem M., // Hod. Rosl. Akl. I Nas., 1969. -1. 13. S. 257 - 265.

346. Jassem B. Embriology and genetics of apomixes in the section Corollinae of the genus Beta / B. Jassem //Acta Biol. Cracovensia. Ser. Botanica, 1976. V. 19. P. 151 -172.

347. Jinks J.L. Gene transfer in Nicotiana rustica using irradiated pollen / J.L. Jinks, P.D.S. Calligari, N.R. Ingrem // Nature, 291. 1981. - V. 47, № 1. - P. 586 - 588.

348. Jones D.F. Genie and cytoplasmic control of pollen abortion in maize / D.F. Jones // Brokkaven Symp. Biol., 1956. vol. - P. 101 - 112.

349. Juce S. Haploide bei der Zuckerrübe / S. Juce // Inaugural. Dissert. Unuvers. Gießen. 1973.

350. Kinoshita T. Induction of cytoplasmic male sterility by gamma ray irradion in sugar beets / T. Kinoshita, M. Takahashi // Japan J. Breed. 1969. - 19. - P. 445 -457.

351. Kinoshita Т. Genetical studies on cytoplasmic male sterility induced by gamma-ray irradiation in sugar beets / T. Kinoshita // Jap. J. Breed. 1976. - V.26, № 3 -P.256-295

352. Kinoshita Т. Селекция линий опылителей, эффективно действующих на ЦМС сахарной свёклы, индуцированную гамма-лучами (перевод) / Т. Kinoshita, М. Takahashi // Proc. Sugar Beet Res. Assoc., 1978. С. 39 - 44.

353. Knapp E. Zur plasmonisch kontrollierten pollen Sterilität der Zuckerrüben / E. Knapp //Der Züchter. 1955. - 25, № 7/9. - S.231-236.

354. Koltunova A.M. Apomixis: molecular strategies for the generation of genetically identical seeds without fertilization / A.M, Koltunowa, R.A. Bicknel, A.M. Chaudhuri // Plant Physiol. 1995. - V. 108. - P. 1345 - 1352.

355. KuboT. Изменения в организации и транскрипции митохондриального генома мужски стерильной сахарной свёклы (Beta vulgaris L.): Перевод / Т. Kubo, S. Nishizava, Т. Micami //Mol. Gen. Genet. 1999. - 262. - P. 283 - 290.

356. Larsen K. Self-incompatibility in Beta Vulgaris. 1. Four gametophitic, complementary S-loci in sugar beet / К. Larsen // Hereditas, 1977. v. 85. - P. 227 - 248.

357. Lewis D., Crowe L. The induction of self-fertility in tree fruits / D. Lewis, L. Crowe // J. Hort. Sei. 1954. - 29. - № 3. - P.220-225.

358. Levites E.V. Redeetermination: an interesting epigenetic phenomenon associated with mitotic agamospermy in sugar beet / E.V. Levites // Sugar Tech. 2002. - 4. - № 3/4.-P. 137-141.

359. Levites E.V. Epigenetic Variability of unlinked Enzyme Genes in Agamosperm-ous Progeny of Sugar Beet / E.V. Levites, S.S. Kirikovich // Sugar Tech. 2003. - V. 5, №5. -P. 289 -292.

360. Lindgren D. Влияние хронического ß-излучения на частоту мутаций у ячменя: Перевод / D. Lindgren // Hereditas, 1975. 79 (2). - P. 227 - 237.

361. Lonsdale D. M. Cytoplasmic male sterility: a molecular perspective /D.M. Lonsdale//Plant Physiol., Biochem., 1987. vol. 25. - № 3. - P. 265-271.

362. Lundqvist A. Complex self-incompatibility systems in Ranunculus acris L. and Beta vulgaris L. / A. Lundqvist, V. Osterbye, K. Larsen, lb Linde Laursen // Hereditas, 1973.-v. 74. P. 161 - 168.

363. Magassy L. Sugärkezelezek cukorrepänäl / L.Magassy // Eloadäs a MTA Novenynemes itesi Bizottsäga ältal 1964 märcius 5-en Budapesten rendezelt anketon. 1964.

364. Magassy L. Recent experimental results on self-incompatibility and self-compatibility in beet (Beta vulgaris L.) / L. Magassy // Acta agron. 1965. V. 13, № 3, 4. -P. 241-262.

365. Mageshwari S.C. Haploids from pollen grainretrospect and prospect / S.C. Mageshwari, A. Rashid, A.K. Tyagi // Amer. J. Bot. 1982. 69, № 5. - P. 865 - 879.

366. Melzer R., Sackewitz H. Results of mutational researches on sugar beet / R.Melzer, H. Sackewitz // Vortag, auf 14 international Congress of Genetics Contributed paper sessions, Moscow. 1979. - P.17.

367. Melzer R., Sackewitz H. Probleme der Mutationslösung und Nutzung von Mutationen bei der Zuckerrübe (Beta vulgaris L.) / RMelzer, H. Sackewitz // Arch. Züchtungsforsch. 1979. - V.9. - № 1. - S.65-72.

368. Michaelis P. The investigation of plasmon segregation by the pattern analysis / P. Michaelis // Nucl. Calcutta. 1967. - V. 10. - № 1. - P. 1 - 14.

369. Nagao S. A basic gene for monogerm character in beets / S. Nagao, M. Taka-hashi, N. Kinoshita // J. Fac. Agric. Hokkaido Univ. 1962. - Vol. 52. - P. 246 - 255.

370. Nettancourt D. Incompatibility in Angiosperms / Nettancourt D- Berlin: Springer-Verlag, 1977. 230 s.

371. Nielson K. Selection for the type O character in Beta vulgaris / K. Nielson, J. Nemazi // J. Am. Soc. Sugar Beet Tech. 14. - 1967. - P. 368 - 376.

372. Nogler G.A. Gametophytic apomixes / G.A. Nogler H Embriology of Angiosperms / Ed.Johri B.M. Berlin: Springer-Verlag, 1984. P. 476 - 518.

373. Owen F. V. Male sterility in sugar beet produced by complementary effects of cytoplasmic and Mendelian inheritance / F.V. Owen // J. Bot. 1942. - V. 29. - P.328 -335.

374. Owen F.V. Inheritance of cross- and selfsterility in Beta vulgaris L. / F.V. Owen // J.of Agric. Research. 1942. - V.64, № 12. - P.679-698.

375. Owen F.V. Cytoplasmically inherited male sterility in sugar beet / F.W. Owen // J. of Agr. Res., USA, 1945. V.71, № 10. - P.423-440.

376. Owen F.V. Utilisation of male sterility in breeding superiorybielding sugar beet / F.V. Owen // Proc. Amer. Soc. Sugar Beet Technol. 1948. - № 1. - P. 156 - 161.

377. Owen F.V. The sugar beet breedr s problem of establishing male sterile populations for hybridization purposes / F.V. Owen // Proc. Amer. Soc. Sugar Beet Technol. 1950.-№ 1.-P.194 - 195.

378. Owen F.V. Hybrid sugar beets made by utilising both cytoplasmic and Mendeli-an male sterility / F.V. Owen // Proc. Amer. Soc. Sugar Beet Technol. 1954. - V.8, № 2. - P.64.

379. Palmer T.G. Single-germ beets and other suggestions for improving beet culture / T.G. Palmer// USDAReport. 1903. - V.74. - P.141-152.

380. Pandey K.K. Sexual transfer of specific genes without somatic fusion / K.K. Pandey // Nature. 1975. - V.256. - P.310-313.

381. Pandey K.K. Gametic gene transfer in Nicotiana by means of irradiated pollen / K.K. Pandey // Genetics. 1978. - V.43. - P.56-59.

382. Pandey K.K. Future evidence for gene transformation in Nicotiana / K.K. Pandey // Heredity. 1980. - V.45, № 1. - P. 15-29.

383. Pandey K.K. Ionising radiation as a tool for inducing parthenogenetic diploidy and egg transformation / K.K. Pandey // Int. Symp. Induced Mutat. Tool Crop Plant Improve. Vienna, 1981. - P.17-18.

384. Pandey K.K. "Egg-transformation" induced by irradiated pollen in Nicotiana: critical appraisal of Chyi and Sanford's observations / K.K. Pandey // Theor. Appl. Genet. 1986. - 72. - P.73 9-742.

385. Pandey K.K. Induced parthenogenesis in Rinifruit (Actinidia deliciosa) through the use of lethally irradiated pollen / K.K. Pandey, L. Przyware, P.M. Sanders // Eu-phytica. 1990. - 51, № 1. - P. 1 - 9.

386. Pelletier G. CreDation et transfert de aytoplasmes induisant la steDriliteO maie chez Nicotiana tabacum / G. Pelletier // Ann. Tabac. 1987, № 2. - N. - Num. spec. -P. 45-50.

387. Peterson D.F. Inbred seed production in progeny classification for type O-plants in open-pollinated varieties / D.F. Peterson // Proc. Amer. Soc. Sugar Beet Technol. -1952. V.7-P.351-356.

388. Pirovano A. Barriere superate nella gibridaziene interspecific / A. Pirovano // Riv. ortoflorofluticolt. Ital. 1958. - V.42, № 3/4. - P.121-126.

389. Pinghun J. Передача генов с помощью облучённой пыльцы: Перевод / J. Pinghun // Хэнуй сюэбао = Acta agr. Sin. 1988. - 2, № 1. - С. 1 - 4.

390. Rieger R. Glossary of Genetics. Ckassical and Molecular / R. Rieger, A. Michaelis, M.M. Green. Berlin: Springer-Verlag, 1991. - 553 p.

391. Röchrbach U. Beitrage zum Problem der Pollensterilität bei Beta vulgaris L. 1. Untersuchungen über die Ontogenese des Phänotyps / U. Rohrbach // Z. Pflanzen-züchtg. 53. - 1965. - S. 105 - 123.

392. Rogovsky P.M. Genom / P.M. Rogovsky, K.W. Shepherd. 1992. - V. 35. - № 4. -P. 621 -626.

393. Röstel H.J. Ergebnisse der Züchtung und des Anbaues monokarper Zuckerrüben / H.J. Röstel // Dt. Landwirtsch. 1962. - Bd. 13, № 12. - S.590-593.

394. Savidan Y. Apomixis and agamic complexes: from theory to practice (Fr) / Y. Savidan // Species complexes, gene flowes and plant genetic resources. Proc. Int. Coll., Durean des Ressources Genetigues Publ. Paris, 1992. - P. 291 - 300.

395. Savidan Y. Les promesses de LDapomixis / Y. Savidan // ORSTOM Actual. -1995. -№47.-P. 2-7.

396. Savitsky V.F. Embryology of mono- and multigerm fruits in the genus Beta L. / V.F. Savitsky // Proc. Amer. Soc. Sugar Beet Technol. 1950. - V.4, № 6. - P. 161-164.

397. Savitsky V.F. A genetic study of monogerm characters in beets / V.F. Savitsky // Proc. Amer. Soc. Sugar Beet Technol. 1952. - V.7. - P.331-338.

398. Savitsky V.F. Inheritance of flowers in flowers clusters of Beta vulgaris L. / V.F. Savitsky // Proc Amer. Soc. Sugar Beet Technol. 1954. - Vol. 8. - P. 3 - 15.

399. Savitsky V.F. Genetische Studien und Züchtungsmetoden bei monogermen Zuckerrüben / V. F. Savitsky // Z. Pflanzenzücht. 1958. - Bd.40. - S.l-36.

400. Sedlmayer K. Monogerme Zuckerrüben, ihre Genetik Züchtung und Bedeutung fur den Zuckerrübenanbau / K. Sedlmayer // Der Züchter. 1964. - Bd.2, № 34. -S.45-51.

401. Seman I. Possibilities of detection and induction of haploids in Beta vulgaris L. / I. Seman//Biologia. Bratislava, 1983. - V. 38. - 11. - S. 1113-1122.

402. Shishkinskaya N.A. Non-traditional view on apomixes / N.A. Shishkinskaya // Apomixis Newsletter. 1991. - № 3. - P. 34 - 36.

403. Singh B.N. Growth studies in relation to UV-radiation / B.N. Singh, G.P. Ka-poor, R.S. Choudhari // Bot. Gaz., 1936. 97. - № 3. - P. 649.

404. Singh B.N. Instability of S male sterile cytoplasm in maize / B.N. Singh, J.R. Laughnan // Genetics, 1972. 71. - P. 607 - 620.

405. Singleton W.R. Effect of time of gamma-irradiation on microspore mutation rate in maize / W.R. Singleton, A.L. Caspar// Genetics. 1954. - № 39. - P.993.

406. Smith J. Notice of a plant produced seeds with out any apparent action of pollen / J. Smith // Transactions of the Linn. Soc. London 18 (Meeting of June 18-th 1959), 1841.-P. 509-512.

407. Stebbins G.L. Apomixis in Angiosperms / G.L. Stebbins // Bot. Rev. 1941. -Vol. 7, №7 P. 314-326.

408. Stoilov M. Possibility of producting male sterile forms and restering fertility in maise by means of gamma-rey and fast-neutron radiation. Induced Mutations in plant / M. Stoilov // IAEA, Vienna. 1969. - P. 227 - 237.

409. Swanson C.P. Effects of ultra-violet light and x-rays on pollen tube chromosomes of Tradescantia /C.P. Swanson // Cytology and cytogenetics, Prentice-Hall, JNC. 1957.-P.372-373.

410. Timopheev-Resovsky N.V. The experimental production of mutations / N.V. Timopheev-Resovsky // Biol. Rev. 1934. - 9. - P.411-457.

411. Townsend C.O. Single-germ beet seed / C.O. Townsend // The Journal of Heredity. 1915.-V.6.-P.351-354.

412. Townsend C.O The development of single-germ beet seed / C.O. Townsend, E.E. Rittue // USDA Bureau Plant Indust. Bui. 1905. - № 7. - P.9-26.

413. Van Geyt J. Induction of nuclear and cell divisions in microspores of sugar beet (Beta vulgaris L.) / J. Geit Van, K.DD. Halluin, M. Jacobs // Z. Pflanzucht. 1985. -95, №4.-P. 325-335.

414. Werner C.P. Gene transfer in Nicotiana rustica by means of irradiated pollen. IV. Avalitative characters / C.P. Werner, M.A. Cornish // Heredity. 1985. - 55., № 3. -P.315-320.

415. Winkler H. Uber Pertenogenesis und Apogamie in Pflanzenreiche Prodr. Rey Bot. / H. Winkler. 1908. -V. 2. - S. 293 - 454.

416. YÜce S. Haploide bei der Zickerrübe / S. YÜce. Inaugural: Dissert. Univers. -Giebe, 1973.-73 c.

417. Young Stephen Wayward genes play the field /Stephen Young // New Sei. -1989. 123. -P.49-53.

418. Зс.п.о 22 20,5 19,6 3,2 0,0 65 764с.п.о 23 16,8 20,8 0,0 15,2 61 825с.п.о 24 13,0 21,0 13,2 0,0 74 80бс.п.о 25 10,3 21,4 7,5 0,7 92 797с.п.о 26 13,6 21,5 2,0 137,8 73 818с.п.о 27 15,0 21,4 0,0 0,0 79 799с.п.о 28 17,5 20,6 0,0 0,0 64 89

419. Юс.п.о 29 16,0 20,5 9,6 5,0 87 89

420. СУММА 556,1 632,3 88,9 273,7 2073 2518

421. СРЕДНЕЕ 17,9 20,4 2,9 8,8 67 81

422. Сумма за 1-24 сутки после опыления 432,7 503,9 87,7 228,8 70 81

423. Гибридные комбинации Урожай ность,т/га Сахарис тость,% Сбор сахара, т/га В % от группового стандарта

424. Урожай ность Сахарис тость Сбор Сахара

425. Гибридные комбинации Урожай ность,т/га Сахарис тость,% Сбор сахара, тУга В % от группового стандарта

426. Урожай ность Сахарис тость Сбор Сахара

427. Гибридные комбинации Урожай ность,т/га Сахарис тость,% Сбор сахара, т/га В % от группового стандарта

428. Урожай ность Сахарис тость Сбор Сахара

429. Гибридные комбинации Урожай ность,т/га Сахарис тость,% Сбор сахара, т/га В % от группового стандарта

430. Урожай ность Сахарис тость Сбор Сахара