Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Наследственные факторы при различных формах нарушения репродуктивной функции супружеской пары

ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Наследственные факторы при различных формах нарушения репродуктивной функции супружеской пары"

На правах рукописи

ФЕТИСОВА Ирина Николаевна

НАСЛЕДСТВЕННЫЕ ФАКТОРЫ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ НАРУШЕНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СУПРУЖЕСКОЙ ПАРЫ

03 00 15 - генетика

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Москва 2007

003058158

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им В Н Городкова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» и Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ивановская государственная медицинская академия Федерального агентства по .здравоохранению и социальному развитию»

Научные консультанты:

доктор биологических наук,

профессор Поляков Александр Владимирович

Заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук,

профессор ГГосисеева Любовь Валеитиновна

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук,

профессор Ордиянц Ирина Михайловна

доктор медицинских наук,

профессор Бахарев Владимир Анатольевич

доктор медицинских наук,

профессор Мутовнп Геннадии Романович

Ведущая организация—Государственное учреждение Научно-исследовательский инештут акушерства и гинекологии им ДО Отта Российской академии медицинских наук

Защита диссертации состоится ч^Зп в^Г' часов

на заседании диссертационного совета Д 212 203 05 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов» по адресу 117198, г Москва, ул Миклухо-Маклая, д 8

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО «Российского университета дружбы народов» (117198, г Москва, ул Миклухо-Маклая^ 6)

Автореферат разослан

«/У» ¿г^^7 2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент г О.Б. Гигани

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность научного исследования

Исследование роли генетических факторов при различных формах нарушения репродуктивной функции (НРФ) в супружеской паре является одним из наиболее перспективных направлений современной генетики и приоритетной областью здравоохранения Актуальность проблемы, в частности, обусловлена ухудшающимися показателями репродуктивного здоровья населения и высокой частотой бесплодия и невынашивания беременности Согласно результатам эпидемиологических исследований, частота бесплодия в браке колеблется от 8 до 29% (Кулаков В И, 2002), частота самопроизвольных выкидышей составляет от 15 до 20% от всех желанных беременностей (Сидельникова В М , 2002), причем на долю I триместра приходится от 50 до 80% потерь (Серов В Н, 1997) В настоящее время бесплодие и невынашивание беременности рассматривают как мультифакториальные заболевания, являющиеся результатом совместного действия множества генетических и средовых факторов, относительная роль которых различна в каждом конкретном случае (Баранов В С с соавт , 2000, Сидельникова В М , 2002) Следует сказать, что грань, отделяющая эти два состояния весьма условна, поскольку определенный процент беременностей, прерывающихся на ранних стадиях развития, остается недиагностированным, с другой стороны, в части случаев лечебно-диагностические мероприятия в афертияьиой супружеской паре делают возможным наступление желанной беременности, которая заканчивается самопроизвольным выкидышем Бесплодие и(или) невынашивание по сути представляют единый патологический процесс нарушения деторождения различной степени тяжести, обусловленный в каждой семье индивидуальной поломкой тонких механизмов репродукции гаметогенеза, оплодотворения, имплантации, эмбрионального развития

Развитие современных методов исследования позволило существенно расширить представление о наследственном генезе нарушения фертильности (Кузнецова Т В , 2000, Беспалова О Н , 2001, Иващенко Т Э с соавт , 2003, Бес-коровайная Т С , 2005, гшЮ^ее! Р Ь М, 2000, Сагр Н , 2002, НоЫа§-БсЬугапскпег М , 2003, Сои1аш С , 2004) Генетический компонент этиологии и патогенеза нарушения репродукции включает не только эффект генных и хромосомных мутаций, связанных с изменением непосредственно наследственного материала, но и генетические факторы предрасположенности, которые при взаимодействии со средовыми, обуславливают развитие целого ряда состояний, в частности, эндокринопатии, тромбофилии, иммунопатологию, пороки развития половой сферы, генитальный инфантилизм и др Таким образом, генетический механизм возникновения мультифакториальных заболеваний, в частности, различных форм нарушения репродукции, является наиболее сложным, так как' в основе его лежат различные комбинации аллельных вариантов многих генов, получившие название генных сетей (Баранов В С с соавт , 2000) Определение

генной сети мультифакториального заболевания, идентификация в ней центральных генов и генов-модификаторов, анализ ассоциации их полиморфизмов с определенным заболеванием, разработка на этой основе комплекса профилактических мероприятий для пациента является важной задачей современной медицинской науки Генетическое тестирование в досимптоматический период дает возможность выявить существующие в геноме наследственные тенденции к развитию будущих болезней и, исходя из современного врачебного опыта, наметить п>ти их ранней профилактики (Баранов В С с соавт , 2000)

Поскольку отсутствие беременности или самопроизвольное прерывание ее является следствием разнообразных нарушений репродуктивного здоровья человека, логично предположить участие разных аллельных вариантов генов в генезе различных нозологий, ограничивающих женскую или мужскую фер-шльность

Цель научного исследования — на основании комплексного клинико-генетического обследования супружеских пар с первичным бесплодием и первичной привычной потерей беременности ранних сроков оценшь значение наследственных факторов при различных формах нарушения репродуктивной функции

Задачи научно« о исследования

1 Изучить спектр причин нарушения репродуктивной функции у женщин и мужчин в супружеских парах с первичным бесплодием (St I) и первичной привычной потерей беременности ранних сроков (ГТПБ) в популяции Ивановской области

2 Изучить в популяции Ивановской области частоту и типы хромосомных аномалий у лиц с нарушением репродукции Изучить частоту и типы делений в локусе AZF Y хромосомы у мужчин с азооспермией и олигозоос-пермией тяжелой степени

3 Изучить особенности полиморфизма генов главного комплекса гистосов-местимости HLA II класса (DRB1, DQA1, DQBI), фолатаого обмена (гены 5,10-метипентетрагидрофолат-редуктазы MTHFR и метионин-синтазы-редуктазы MTRR) и системы детоксикации (гены семейства глутатион-S-трансфераз Ml, Т1 и PI) в репродуктивно здоровых супружеских парах в популяции Ивановской области

4 Изучить особенности полиморфизма генов главного комплекса гистосов-местимости HLA II класса (DRB1, DQA1, DQB1), фолатного обмена (гены 5,10-метилентетрагидрофолат-редуктазы MTHFR и метионин-синтазы-редуктазы MTRR) и системы детоксикации (гены семейства глутатион-S-трансфераз Ml, Tl и PI) в супружеских парах с первичным бесплодием и первичнои привычной потерей беременности ранних сроков

5 Определить маркеры предрасположенности к различным формам нарушения репродукции в супружеской паре, а также к заболеваниям, ограни-

чивающим женскую и мужскую фертильпос1ь, в генах HLA II класса, фо-патного цикла и системы детоксикации, оценить степень их накопления в i енотипе как по отдельности, так и в совокупности

Научная новизна исследоиания

При исследовании супружеских пар с нарушенной репродуктивной функцией выявлены маркеры предрасположенности к первичном}' бесплодию и первичной привычной потере беременное ги ранних сроков в генах системы 1ILA II класса, фоланюго цикла и семейства глутатион-8-трансфераз как по отдельности, так и в их совокупности Установлена ассоциация между наличием в генотипе женщины низкофункциопальных аллелей в ienax MTHFR и MTRR, аллелей DQA1 0401 ,DQBl 0401, ï аплотипа DQA1-DQB1 0401-0401 и развитием первичной привычной потери беременности ранних сроков Выявлено достоверное увеличение частот низкофункциональных аллелей в генах семейства глугатнон-Б-трансфераз у мужчин в бесплодных браках Показано, чю совпадение супругов по аллелям HLA II класса не является фактором риска нарушения репродук1ивнои функции в супружеской паре

Установлена связь между особенностями генотипа (полиморфизм генов системы HLA II класса, фолатного цикла и семейства глутатион-В-трансфераз) и развитием определенных нозологических форм, ограничивающих женскую и мужскую фертильиость эндокринопагий, наружного генитальпого эндомет-риозд (НГЭ), ангифосфолипидного синдрома (АФС) у женщин, разных типов паюзооспермии у мужчин Показано, что разные аллельные варианты генов семейства глутагион-8-трансфераз {Ml, Tl, Р1), фолашого никла (MTHFR и MTRR) и HLA системы II класса (DRB1, DOA1, DQB1) ассоциированы с разными заболеваниями

Установлены особенности аллельного полиморфизма при различных типах энчокринопатий у женщин Показано, что фактором риска развития гипер-проиактинемии (ГПрл) явтяются аллели DOA1 0102, DQB1 0602, генотипы DQ41 0101/0102, DQA1 0102/0201, ienorvin GSTT1 0'0, сочетание генотипа GSm 0/0 и аллеля В в гене GSTPI

Выявлена свя5ь между развитием у женщины пшерандрогении (ГА) и наличием аллелей DRB1 08, D041 0401, DQB1 0401, DQB1 0503, гаплошпа DRBI-DOA1-DOB1 08-0401-0401, аллеля MTHFR 6771 в юмо- и(или) гетерози-ютном состоянии, сочетания геношпов M1HFR 671 Г/- и MTRR 66G/-, а также генотипа GSTM1 0/0 и аллеля С в гене GSTP1

Установлено, что фактором риска развития наружного генитальпого эн-домегриоза и эндометрцоз-ассоцнировашюго первичного бесплодия явччстся npucyiciBue в генотипе женщины аллелей DQA1 0102, DQB1 0502 и генотипов DQBI 0502/0502, DOB1 0303/0602 Показано, что особенности полиморфизма генов фолатного цикла и семейства 1лугатион-З-трзнсфераз (Л//, 77, Р1) не имеют связи с развитием наружного генитальпого эндометриоза

Выявлена ассоциация между развитием антифосфолинидного синдрома у женщин с первичной привычной потерей беременности ранних сроков и наличием атлеля MTHFR 677Т в гомо- и гетерозиготном состоянии, генотипа MTHFR 677Т/Т, сочетания генотипов MTHFR 6771/- + MTRR 66G/-, MTHFR 677Т/1 + MTRR 66A/G, генотипа 0101/0501 в локусе DQ41 Роль генов семейства глуташон-5-трансфераз (М1, 77, PI) в развитии антифосфолипидного синдрома не подтверждена

Показано, что фактором риска развития астенозооспермии является наличие у мужчины генотипов GSTM1 0/0 и GSTP1 В/- Установлена ассоциация между присутствием аллелей DRB1 01, DQA1 0101, DQBI 0503, гаплотипа DRB1-DQA1 06-0101, «двойного» пуля в генах GSTM1 и GSTTI, аллеля GSTP1 В и развишем тяжелых форм патозооспермии (олигозооспермия III степени, азооспермия)

Показано, что фактором риска формирования врожденных пороков развития (ВПР) у плода является наличие в генотипе матери аллеля MTHFR 677Т в гомо- или гетерозиготном состоянии, в генотипе отца — «нулевого» аллеля в гене GSTM1, сочетания GSTM1 0/0 + GSTT1 0/0, аллеля MTRR 66G, генотипа MTRR 66G/G Генетическим маркером предрасположенности к самопроизвольному прерыванию беременности и анэмбрионии является носительство обоими супругами аллеля MTRR 66G в гетерозиготном состоянии

Практическая значимость работы

Проведена оценка вклада наследственных факторов в нарушение репродуктивной функции в супружеской паре Показана целесообразность исследо-ьания особенностей аллельного полиморфизма генов семейства глутатион-S-трансфераз, фолатного цикла и системы HLA II класса при различных типах нарушения репродукции Генетическому тестированию подлежат все семьи с нарушенной репродукцией после исключения аномалий кариотипа у обоих супругов и делений AZF-локуса Y хромосомы у бесплодных мужчин Выявленные в насюящем исследовании ассоциации могут быть использованы в качестве генетических маркеров предрасположенности к формированию определенных заболеваний и патологических состояний, ограничивающих женскую и мужскую фер i ильность у женщин — эндокринопатий, наружного генптально-го эндометриоза, антифосфолипидного синдрома, у мужчин — различных типов паюзооспермии Результаты работы могут быть использованы при медико-генетическом консультировании для расчета риска патологии репродукции в супружеской паре Предложен способ прогнозирования нарушения ферч-шьно-сти у мужчин По результатам исследования подана одна заявка на изобретение (peí истрационный номер 2006113973 от 26 04 06)

Основные положения, выносимые на защиту

• Присутствие в генотипе женщины низкофункциональных аллелей в генах 5,10-метилегггетрагидрофолат-редуктазы и метионин-синтазы-

редуктазы, аллелей О0/11 0401, В()В1 0401, гаплотипа Г)()А1-0()В1 0401-0401 является фактором риска развития первичной привычной потери беременности ранних сроков

• Присутствие в тютипе мужчины иизкофункционалышх аллелей в генах семейства глутатион-8-1рансфераз (М1, ТУ, Р1) является фактором риска снижения фертильности и развития первичного бесплодия в супружеской паре

• Наличие у женщины аллелей 0()А I 0102, В()В1 0602, генотипов DQA¡ 0101/0102 и 0102/0201, генотипа (75777 0/0, сочетания генотипов 65ГГ/ 0/0 и СБТР! В/- является фактором риска развития гипер-пролактииемни и нарушения репродуктивной функции

• Наличие аллелей ОЯВ1 08, Г>£Ш 0401, £>057 0401, £>0Б7 0503, гаплотипа 1ЖВ1-П0,А1-В0В1 08-0401-0401, генотипа МТНГЛ 61111-, сочетания генотипов МГЯ/7/? 61111- и МТЯЛ 660/-, а также генотипов СБТМ! 0/0 и СБТР! С/- у женщины является фактором риска развития гиперандрогении и нарушения репродуктивной функции

• Присутствие в генотипе женщины аллелей DQA1 0102, DQB1 0502 и генотипов ВдВ1 0502/0502, 0(?В1 0303/0602 является фактором риска развития наружного генитального эндометрпоза и зндометриоз-ассоциироваппого первичною бесплодия

• Наличие аллеля А/Ш77? 677Т, генотипа МТНРЯ 677Т/Т, сочетаний генотипов МТНРЯ 61111- + МТЯЯ 6601-, МТНРЛ 677Т/Т + МТ11И 66АЛЗ, генотипа Х)£Ш 0101/0501 у женщины является фактором риска развшия антифосфолипидного синдрома и первичной привычной потери беременности ранних сроков

• Наличие у мужчины генотипов СБТМ! 0/0 и С.^'ГР/ В/- является фактором риска развития астенозооспермии Присутствие в генотипе мужчины аллелей ОЯВ1 01, П£)А1 0101, £>057 0503, гаплотипа £>ДЙ7-¡)()Л 1 06-0101, «двойного» нуля в генах С57М/ н (75777, аллеля СБ1Р1 В является фактором риска развития тяжелых форм патозоос-пермии (олигозооспермия III степени, азооспермия)

• Наличие у маюри генотипа МТНРЯ 677Т/-, у отца — генотипа СБТМ! 0/0, сочетания вБТМI 0/0 + в5ГГ7 0/0, аллеля МТКК 660, генотипа MTR.ll 660/0 является фактором риска формирования ВПР у плода Носитсльство обоими супругами аллеля МТКК 660 в гетерозиготной состоянии является факюром риска аюмбрионии

Реализация результатов исследования

Резупыаты исследования внедрены в работу акушерской, гинекологической клиник, консультативной поликлиники, Центра планирования семьи, межобластной медико-генетической консультации ФГУ «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им В Н Городкова Рос-здрава», используются в учебном процессе на кафедре акушерства, гинеколо-

гии и медицинской генетики ГОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия Росздрава» Автором самостоятельно проводился сбор первичного материала по теме диссертации, его обработка, анализ и интерпретация полученных данных, их систематизация, статистическая обработка, внедрение в практику результатов работы Все научные результаты, представленные в работе, автором получены лично По теме диссертации опубликовано 42 печатные работы

Апробация результатов исследования

Материалы диссертации представлены и доложены на Научно-практичсскои конференции, посвященной 130-летию Ивановской областной клинической больницы (Иваново, 1991), Российской конференции «Мутагены и канцерогены окружающей среды Проблемы антимутагенеза» (Казань, 1996), Научно-практической всероссийской конференции, посвященной 70-летию со дня рождения основателя института, заслуженного деятеля науки РФ, профессора В Н Городкова (Иваново, 2002), Российской научно-практической конференции «Современные технологии в иммунологии иммунодиагностика и иммунотерапия» (Курск, 2006), X Всероссийском форуме с международным участием им академика В И Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Пегербург, 2006), VIII Всероссийском научном форуме «Мать и дитя» (Москва, 2006)

Объем и С1руктура диссертации

Диссертация изложена на^7Устраницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, четырех глав собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций, иллюстрирована 63 таблицами, 24 рисунками Библиография содержит 341 источник 127 отечественных и 214 иностранных

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Мат ериал и методы исследования

Работа выполнена на базе ФГУ «Ивановский НИИ материнства и детства им В Н Городкова Росздрава» (директор — Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор JI В Посисеева) и ГОУ ВПО «Ивановская государственная медицинская академия Росздрава» (ректор — Заслуженный деятель наук РФ, доктор медицинских паук, профессор Р Р Шиляев) Обследование пациентов осуществлялось в следующих структурных подразделениях гинекологической клинике НИИ МиД (гл специалист — канд мед наук А И Малышкина), акушерской клинике НИИ МиД (i л специалист, канд мед наук И А Панова), консультативно-диагностической поликлинике НИИ МиД (зав поликлиникой — д-р мед наук А А Шевелева), Центре планирования семьи НИИ МиД (зав Центра планирования семьи — д-р мед наук, профессор

И К Ботатова), лабораюриях кчпнической иммунологии и генетики ПИИ МиД (зав лабораторией — д-р мед наук, профессор Н Ю Сотнпкова), патоморфо-чогии и эиектронной микроскопии НИИ МиД (заь лабораторией—д-р мед нрук Л П Перетятко), клинической биохимии НИИ МиД (зав лабораторией — канд мед наук Г Н Кузьменко), межобластной медико-генетической консультации НИИ МиД (зав консультацией — канд мед наук ГП Жукова), на клинической базе кафедры акушерства, тинекологни и медицинской генетики Ив-ГМА (зав кафедрой — Заслуженный деятель науки РФ, д-р мед наук, профессор Л В Посисеева)

В основу работы легли результаты комплексного клипико-тепетического обследования 292 супружеских пар с нормальной л нарушенной репродуктивной функцией

Основн)ю I рупиу составили 235 супружеских пар с нарушенной репродукцией, которые в зависимости 01 характера нарушения репродуктивной функции были подразделены на две подгруппы В 1 подгруппу вошли 155 семей с первичным бесптодием (при исключении первичной аменореи и трубного бесплодия у женщины) 2 подгруппу составили 80 семей с первичной привычной потерей беременности ранних сроков, под которой подразумевалось самопроизвольное прерывание двух и более беременностей до 12 недеть при отсутствии в анамнезе указаний на роды, медицинские аборты, внематочную беременность Из них у 11 пар наличие двух самопроизвольных прерываний первой и второй беременности до 12 недель сочеталось с указанием в анамнезе на наличие ВПР плода при последующих беременностях, у 8 пар при самопроизвольном прерывании беременности до 12 недель имела место аиэмбриопия

Контрольную группу составили 57 супружеских пар, имеющих одного и боиее здорового ребенка при указании на нормально протекавшие у женщины беременность и роды В анамнезе у женщин контрольной группы не было случаев невынашивания беременности, перинатальной смертности, рождения де-1 ей с ВПР, периодов бесплодия

Дня выпотпения поставленных задач исследование было разделено на три

лапа

11а первом этапе проведено комплексное обследование женщин и мужчин в супружеских парах с цетью оценки состояния их здоровья, репродуктивной функции, выявления возможных причин первичною бесплодия и первичной Г1ПБ ранних сроков Ци тогенетическое обследование супружеских пар было проведено с целью выявления хромосомной патологии

На втором этане выполнено молекулярно-генегическсс обследование в группах супружеских пар с первичным бесплодием, первичной ППБ и с нормальной репродукцией Отбор супружеских пар для проведения мочекулярно-генетического обследования проводился с исключением пациентов, имевших численные и структурные аномалии кариотнпа

Па третьем этапе анализ аллельиого полиморфизма генов главного комплекса гистосовместимости HLA II класса (DRB1, DQA1, DQB1), фолатного обмена (гены MTHFR и MTRR) и системы детоксикации (гены семейства глуга-тион-З-трансфераз MI, Т1 и Р1) проведен в группах, сформированных с учетом заболеваний и патологических состояний, ограничивающих женскую и мужскую фертитьносгь

Материалом для исследования служили у женщин — периферическая венозная кровь, содержимое цсрвнкального капала и уретры, соскоб из полости матки, у мужчин — периферическая венозная кровь, соскоб из уретры, сперма

Проводилось общекпиническое обследование женщин и мужчин, в том числе общепринятое лабораторное обстедование Женщины были консультированы врачом акушером-гинекологом, проведено обследование по тестам функциональной диашосшки Мужчины были консультированы врачом-андрото!ом

Ультразвуковое исследование женщин осуществляли с использованием аппарата ALOKA SSD-170 с применением конвексною абдоминального и влагалищного датчиков 3,5—4,5 МГц, мужчин — с применением аппарата фирмы Toshiba Sal 38 AS, Sal 50A

Иммунологические методы

В мажах-соскобах из цервикального канала и уретры методом ПЦР в реальном времени определяли наличие ДНК HSV 1, 2, CMV, Chlamydia trachomatis, Uieaplasma urealyticum, Mycoplasma homims и Mycoplasma gemtahum с использованием коммерческих систем НПФ «ДНК-технология» (Россия) на приборе iCycler (BIO-RAD, США) В периферической крови методом ELISA на микропланшетном ридере Multiscan EX Labsystems (Финляндия) с использованием коммерческих систем ЗАО «Вектор-Бест» определяли уровень IgM и IgG антител к HSV 1, 2, CMV, Chlamydia trachomatis и содержание IgG антител к Uieaplasma urealyticum и Мусор1аьта hommis

Определение гормонов в сыворотке крови осуществляли микроиммуноф-луоресцентным методом па системе «ARCUS-1230 Fluorometer» фирмы Delphia (у женщин — на 5—7 и 21—22 дни менструального цикла)

Определение уровня гомоцистеина в крови проводилось иммунофер-ментным методом на фоюметре EL 808 (США) с использованием наборов реактивов фирмы Axis-Shield (Норвегия)

Рентгенологические методы гистеросальпингография (ГСГ) выполнялась с применением аппарата РУМ-20-М и использованием водных растворов контрастных веществ

Эндоскопические ,методы лапароскопию производили с помощью аппаратуры фирмы «Karl Storz» (Германия)

Морфологические методы исследовался морфологический ма1ериал, полученный методами кюрегаж-биопсии (ЦУГ) и инцизионной биопсии при проведении лапароскопии С постфиксированного и проведенного по общеприня-

топ методике материала гоговичиеь срезы тотщиной 3—4 мкм с последующей окраской гематоксилином и эозином

Спертююгическкй аначш эякулята выполняли по стандартной методике, рекомендованной ВОЗ (1992, 1999)

Цшпогеиетический метод исследование кариотипа было проведено у 68 женщин и 79 мужчин из семей с первичным бесплодием, 67 женщин и 58 муж-чип из семей с ППБ, 46 женщин и 32 мужчин контрольной группы Материалом дчя исследования служили хромосомные препараты полученные из кулыур лимфоцитов периферической крови по стандартному методу (Ilungerford, 1965) G-окраску хромосом проводили по общепринятому методу Seabnght (1971) в модификации (Захаров А Ф , 1982) Дпя выявления структурного гетерохрома-типа использовали модифицированную методику Arnghi и Hsu (1971) Результаты цитогенетического исследования приведены согласно Международной системе номенклатуры циюгенетики человека (ISCN, 2005)

Момекупярно-гепепшческие методы проведено исследование 212 образцов ДНК пациентов с первичным бесплодием (119 женщин и 93 мужчины), 126 образцов ДНК пациентов из семей с привычной потерей беременности (65 женщин и 61 мужчина) и 111 образцов ДНК лиц контрольной группы (55 женщин и 56 мужчин) Всего исследовсчго 449 образцов ДНК лиц с нормальной и нарушенной репродукцией, проанализировано 3320 генотипов (табл )

Молекулярно-гепетическое исследование включало выделение геномной ДНК из лейкоцитов периферической крови, полимеразную цепную реакцию (ПЦР) фрагментов изучаемых генов, анализ полиморфизма длины амплифика-ционных/рестрикционных фрагментов (ПДАФ/ПДРФ-анализ), электрофорез в полиакрнламидном геле (ПААГ)

Выделение геномной ДНК из лейкоцитов периферической крови выпол-няпи с помощью набора реактивов для выделения D1A/cj/h1m DNA Piep 100 (Isogene Lab Ltd , Россия) но протокопу производителя

Амплификацию всех исследуемых фрагментов ДНК проводили методом ПЦР па программируемом термоциклере МС2 фирмы «ДНК-техпология» (Россия)

Полиморфизмы, которые представляли собой однонуклеогидпые замены, выявлячись методом ПДРФ-анализа по наличию или отс>гствию сайта рестрикции специфической эидонухлеазы В работе использованы эндонуклеазы производства НПО «Feimentas» (Лпгва) и фирмы «Сибэнзим» (Россия) реакцию проводили согласно протоколу фирмы-производителя Делецчонньге полиморфизмы определялись с помощью метода ПДАФ-анализа

Результаты амплификации и ПДРФ-анализа оценивали в 7% ПААГ Приготовленные пробы наносили в лунки и проводили электрофорез при напряженности поля 15—18 В/см в течение 1— 3 часов В качестве маркера молекулярного веса использовали ДНК фага X, рестрицировашгуто PstI После разделения фрагментов гель окрашивали в растворе бромистого этидия (0,1 мкт/мл г, IxTBC) в течение 20 минут промывали водой Результаты исследования реги-

ырировсгшсь на тель-докумс1пир)гощеи системе веШос® 2000 фирмы ВЮ-КА1) (США)

Таблица

Обьем выполненные молскулярно-генежческпч исследовании

До кус 1 р\ ш:.!^^^'"----. СЭТз мшгч \1TRR АббО Ш Л И класса А? Г Всего

\11 Г1 Р1 С6771 А1298С ПЯВ1 ОрА1 О0В1

Конгрогь С ->5 55 53 52 52 Ч <¡2 52 52 477

<<: 56 55 50 50 54 53 53 53 0 480

41 V ( 48 Н8 81 114 113 118 41 47 46 796

»5 85 73 75 74 81 43 45 45 32 638

ппп V 04 64 47 58 58 о! 41 41 41 475

л' 59 59 45 55 54 53 41 41 41 6 454

Ню о 437 437 354 404 | 401 | 421 271 279 278 38 3320

В том чи.че

ГПгч 12 12 Ь 12 12 12 7 7 7 89

1 А 33 33 26 30 31 (2 14 16 15 230

ПТрг^ГЛ г, 7 7 Ь~ 7 7 6 5 6 6 57

О 52 52 32 1 54 52 49 14 1 15 15 335

ЛФС 27 27 27 16 16 16 129

ВНР тол 11 11 7 ) 1 11 11 62

о 11 1 1 7 10 9 И 59

АЭ О , а_ п & 8 8 47

ь 8 7 Ь 8 8 47

Чормозоо-сиермич 35 35 28 24 24 24 170

Ас геиозоо- с? 54 54 47 35 37 37 264

Олигозоо-спермия с? 26 26 18 8 8 8 94

Азоосперч и А 10 10 7 9 9 9 54

Опиго- азоо-, некро-, терчгоспери -г>. 42 42 31 17 17 17 38 204

Статистический анапиз проводили с использованием критерия %2 В случае малой численности или отсутствия каких-либо генотипов, гаплотипов или аллелей для проверки достоверности был применен точный критерий Фишера Оценку относительного риска развития патологии проводили по величине соошошения шансов (ОКэ) Для ананиза влияния различных сочетаний низкофункциональных аллелей в разных системах генов предрасиотоженносги была использована компьютерная программа, предложенная Т С Бескоровай-ной (2005)

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ II ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Все обследованные супружеские пары находились в активном репродуктивном возрасте Спектр причин патологии репродуктивной функции у женщин в настоящем исследовании был представлен следующим образом В структуре бесплодного брака 53,0% приходилось на долю гормональных нарушений в женском организме, причем более чем в половине случаев имело место нару-

шение процесса овуляции Второе место по распространенности среди причин женского бесплодия занимал наружный генитальный эндометриоз (39,1%) Наши данные согласуются с результатами рабог других авторов (Кулаков В И, 2005), хотя исключение трубно-перитонеального фактора при формировании выборки, как наиболее часто встречающегося при женском бесплодии, безусловно, оказало влияние на структуру причин женского бесплодия в настоящем исследовании

При привычной потере беременности у женщин наиболее часто выявлялась гормональная дисфункция (56,8%) и антифосфолипидный синдром (31,1%) Степень тяжести гормональных нарушений при невынашивании значительно отличалась от таковой при бесплодии Так, среди пациенток с ППБ достоверно чаще, чем у бесплодных женщин, определялась недостаточность лютеиновой фазы цикла (НЛФ) (44,6 и 21,2% при ППБ и I соответственно, р < 0,001) В то же время наличие ановуляции и сочетания ПЛФ с перемежающейся ановуляцией наблюдалось значительно чаще в контингенте пациенток с первичным бесплодием (31,9 и 12,2% в первой и второй подгруппах соответственно, р < 0,020) Наиболее часто среди эндокринопатий, приводящих к нарушению менструальной функции, диагностировалась ГА, причем у женщин с ППБ (32,4%) наблюдалось достоверное увеличение ГА но сравнению с бесплодными женщинами (17,9%, р < 0,020) ГПрл, как причина нарушения менструальной функции, была выявлена у 8,7% женщин с первичным бесплодием и у 4,1% пациенток с ППЬ Увеличение содержания сывороточного пролактина в сочетании с ГА было отмечено в 4,6 и 1,4% случаев при 811 и ППБ соответственно

Наличие инфекционного фактора имело место у 31,8% больных с бесплодием и у 56,8% пациенток с ППБ Причем па момент обследования у всех женщин с нарушенной репродукцией определялись только иммуноглобулины класса О (^О), что свидетельствовало об отсутствии острого инфекционного процесса Среди возбудителей инфекционного процесса чаще всего выявлялись генитальный герпес, СМУ, уреаплазменная и хламидийная инфекции

Врожденные пороки развития гениталий имели место у 6 женщин основной группы у 4 пациенток с бесплодием определялась седловидная матка (2,6%), у 1 женщины с I была односторонняя аплазия маточной трубы, у пациенток с ППБ в одном случае имела место двурогая матка (1,6%)

Структура патологии репродуктивной сферы у мужчин была предешвле-на следующим образом Врожденные пороки развития органов репродуктивной системы имели место только у пациентов из семей с первичным бесплодием крипторчизм — у 3 пациентов (1,9%), монорхизм в сочетании с крипюрхизмом и гипоплазией единственного яичка— в одном случае (0,6%), у одного больного при рождении была диагностирована гипоспадия (0,6%)

На основе данных андрологического осмотра, ультразвукового обследования и исследования гормонального фона 10 больным с бесплодием был поставлен диагноз гипогонадизма у 9 человек имел место первичный гипергона-

дотропиый гипогонадизм (5,8%) и у одного больного (0,6%) — вторичный ги-погонадотропный гипогонадизм Из 9 пациентов с первичным гипогонадизмом 5 человек еградали синдромом Клайнфельтера (47,XXY), у одного наблюдался врожденный порок развития монорхизм, крипторхизм и гипоплазия единственного яичка 8 пацисшов из 10 страдали азооспермией, у 2 больных определялась олигозооспермия тяжелой степени

Гормональные нарушения были выявлены у 6 пациентов с бесплодием (3,9%) Гиперпролактинемия определялась у 1 пациента (0,6%), гиперэстроге-ния — у 2 (1,3%), изолированное повышение фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) и изолированное повышение лютеинизирующего юрмона (ЛГ) имели место в единственном случае каждое (по 0,6%), пониженный уровень гонадогропинов при нормальном уровне содержания тестостерона определялся у одного пациента с вторичным гипогонадизмом (0,6%)

Проведенное стандартное (по ВОЗ, 1992, 1999) спермиологическое исследование у мужчин основной группы показало следующие результаты Нор-мозооспермия у мужчин 2 подгруппы имела место достоверно чаще, чем у мужчин 1 подгруппы (36,1 и 57,5% в 1 и 2 подгруппах соответственно, р = 0,001) Наиболее распространенным типом иатозооспермии у пациентов обеих подгрупп являлась астснозооспермия, которая в обеих выборках встречалась в одинаковом проценте случаев (31,0 и 30,0% в 1 и 2 подгруппах соответственно) В 14,8% в 1 и в 11,3% случаев во 2 подгруппах астенозооспермия сочеталась с лейкоспермией на фоне хронического простатита Олигозооспермия была диагностирована у 26 пациентов 1 (16,8%) и 8 пациентов 2 подгруппы (10,0%), при этом у 8 мужчин из беспчодпых браков была диагностирована олигозооспермия III степени (5,2%) В 12,3 и 8,8% случаев у пациентов 1 и 2 подгрупп олигозооспермия сочеталась с астенозооспермией, в единичных случаях в обеих подгруппах у больных наблюдалось сочетание нарушения под-ВИЖНОС1И и формы гамет (2,5 и 2,6% в 1 и 2 подгруппах соответственно) У 8 мужчин из бесплодных браков (5,2%) и у одного пациента (1,3%) из семей с ППБ в эякуляте обнаруживались только неподвижные гаметы (некроспермия)

Азооспермия была выявлена только в 1 подгруппе — у 22 пациентов (14,2%) при отсутствии во 2 подгруппе У одного из 22 пациентов была диагностирована обтурационная азооспермия, в остальных случаях имела место необ-структивная азооспермия У 5 (22,7%) больных азооспермией определялся синдром Клайнфельтера (47,XXY), 1 пациент являлся носителем сбалансированной гранслокации хромосом 13 и 14 (4,5%), 1 мужчина являлся носителем инверсии leiepoxpoMarmioBoro блока хромосомы 9 (4,5%), в одном случае была выявлена микроделеция AZF локуса Y хромосомы (del AZFc) (4,5%) Пороки развития гениталий имели место у 2 пациентов с азооспермией (9,1%) в одном случае — двусторонний крипторхизм, в другом — монорхизм, крипторхизм и гипоплазия единственного яичка Нарушения гормонального фона при азооспермии были выявлены у 3 больных (13,6%) в единичных случаях определялись гипе-

рэстрогения, изолированное повышение уровня ФС1, у 1 больного имел место гипогопадотропный гипогонадизм

Повышенная агглютинация сперматозоидов имела месго у 4 пациентов 1 подгруппы, причем у 3 мужчин она сочеталась с астенозооспермией, у 1 носила изолированный характер

Таким образом, наиболее распространенными видами нарушений в репродуктивной системе у мужчин в парах и с 81 1 и с ППБ были достоверное снижение количества актвно подвижных сперматозоидов и воспалительные заболевания гениталий Вместе с тем, частота и степень нарушения мужской фергильности значительно преобладала в семьях с первичным бесплодием по сравнению с семьями с ППБ тяжелые формы патозооспермии, гормональные нарушения, врожденные пороки развития органов половой системы были отмечены только у пациентов данной выборки

Анализ состояния репродуктивного здоровья у женщины и мужчины в паре показал, что в подавляющем большинстве стучаев в семьях с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом патология репродуктивной функции имеется у обоих супругов Так, в бесплодных браках сочетанное наличие «женского» и «мужскою» факторов определялось у 52,3% семей, при ППБ — у 51,3%) Однако нарушение фертильности только у женщины достоверно превалировало в парах с ППБ (42,5%) по сравнению с бесплодными семьями (27,7%, р < 0,05) Вместе с тем, патология репродукции только у мужчины при ненарушенном репродуктивном здоровье женщины выявлялась у 20,0% супружеских пар с первичным бесплодием и у 6 2% семей с ППБ (р < 0,01) Такое достоверное превалирование частоты встречаемости изолированного «мужского» фактора в бесплодных браках связано с наличием у мужчин данной выборки абсолютных факюров бесплодия, а именно, тяжелых форм патозооспермии, обусловленных в ряде случаев хромосомными и генными мутациями, гормональным дисбаланъом или пороками развития гениталий

Цитогенетическое обследование супругов с нормальной и нарушенной репродукцией позволило велявить следующие закономерности В семьях с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом в 5,1% случаев у супругов определялись численные и структурные аномалии кариошпа Причем, геномные муктции преобладали у больных с бесплодием по сравнению с пациентами с ППБ У афертильных мужчин во всех случаях численные аномалии были представлены полной формой синдрома Клайнфельтера (47,ХХУ) (6,3%), сопровождались азооспермией и, соответственно, обуславливали мужской фактор бесплодного брака (абсолютное мужское бесплодие) Среди пациентов с ППБ лишь в единственном случае у женщины определялась мозаичная форма синдрома поли-Х (1,5%), при которой у пациентки, несмотря на наличие нарушения менструальной функции, присутствовали овуляторные циклы и, следовательно, была сохранена возможность зачатия Отсутствие больных с синдромом Шерешевского-Тернера среди пациенток с бесплодием было связано с крпте-

риями отбора обследуемых при формировании настоящей выборки больные с первичной аменореей не включались в группу наблюдения

Хромосомные аберрации у супруг ов основной группы были выявлены в 2,9% случаев, причем в подавляющем большинстве носителями хромосомных мутаций являлись женщины, страдающие ГТПБ (9,0%) Наличие структурных аномалий кариотипа у мужчин определялось в единичных случаях среди бесплодных пар и пар с ППБ Наши результаты соотносятся с данными литературы, согласно которым частота встречаемости структурных хромосомных перестроек в семьях с ППБ колеблется от 7,0 до 14,3%, что существенно превышает общепопуляционный показатель (0,2%) (Boue J et al, 1975, Беспалова О H и соавт , 2001) Известно, чго хромосомный дисбаланс у плода является одним из факторов, определяющих нарушение эмбрионального развития и самопроизвольное прерывание беременности В то время как при спорадических спонтанных абортах аномалии кариотипа плода являются, как правило, следствием случайной, вновь возникшей мутации, при привычном невынашивании беременности существенно возрастает доля генетически детерминированных аномалий хромосомного набора плода вследствие наличия у родителей сбалансированных хромосомных аберраций

Анализ частоты встречаемости хромосомных вариантов у лиц с нормальной и нарушенной репродукцией ire выявил статистически значимых различий между этими группами, хотя и отмечалось некоторое превалирование показателя в семьях с патологией репродукции (21,7 и 18,0%) У супругов с НРФ достоверно чаще по сравнению со здоровой выборкой встречался лишь один полиморфный вариант, а именно, инверсия гетерохроматина хромосомы 9 (5,2 и 0,0% в основной и контрольной группах, р<0,05) Как известно, согласно последней редакции Международной номенклатуры хромосом (ISCN, 2005) инверсия С-блока хромосомы 9 расценивается как вариант полиморфизма Однако в последнее время в литературе появились сведения о негативном влиянии 9ph на репродукцию и эмбриогенез (Кузнецова Т В , 2000) Результаты нашего исследования подтверждают эти данные и позволяют отнести вариант 9ph к факторам риска развития патологии репродукции в супружеской паре вне зависимости от пола носителя данного варианта

Изучение полиморфизма хромосомы Y в здоровых семьях и семьях с НРФ показало отсутствие статистически значимой разницы в частотах встречаемости экстремальных вариантов у мужчин обеих групп (8,7 и 3,1% в основной и контрольной группах), хотя обращает внимание факт наличия варианта Yqb- в настоящем исследовании только у пациентов с нарушенной репродукцией (5,8%) при отсутствии такового в контроле Более того, в 10 из 12 случаев наличие экстремальных вариантов хромосомы Y у мужчины сочеталось с патологией сперматогенеза— снижением концентрации и количества активно подвижных гамет

У одного пациента с азооспермией выявлена микроделеция в локусе AZFc, что составило 4,5% всех больных с данным типом патозооспермии Со-

i ааспо данным литературы, делении AZF-локуса обнаруживаются в среднем в 10—15% случаев азооспермии и в 5—10% случаев олигозооспермии гяжелоп степени и обусповтивают бесплодие у мужчин (Krausz С , 1999) Наиболее часто выявляются делеции в локусе AZFc (Лот тшова Ю А , 2000, Черных В Ь с со-ав! , 2001, 2002, Moro Е , 2000)

Лнализ полиморфизма генов семейства глуташон-Б-трансфераз, фолат-ного цпкча, а также генов II класса системы IILA у супрутов с нормальной и нарушенной репродуктивной функцией в ивановской популяции выявил следу ютцие закономерное i ti

У женщин из семей с первичным бесплодием не бы то отмечено достоверных отли«ли от здоровой выборки в характере распредеттения аллелей и генотипов в геьах семейства путатион-Б-трансфераз Однако у пациенток с первичным бесплодием достоверно чаще, чем у здоровых женщин, наблюдались счедующие со 1етанпя генотипа CjSTI 1 0/0 и отсутствия делеции в гене GSTM1 tll,0 н 1,8% соответственно, р - 0,04, OR = 4,6 (1,1—20,0)), тепотипов GS1 11 0/0 и GSFP1 А/В (15 0 и 3,8% соответственно, р = 0,047, OR = 3,7 (1,0— 13,0)) а также генотипа GS1T1 0/0, GSTP1 А/- и отсутствия делеции в гене GSTM1 (8,8 и 0,0°/о соответственно, р = 0,042, OR= 10,7 (1,3—89,3)) В генах фолатпою цикча у женщин с первичным бесплодием по сравнению с контролем отмечалось некоторое увеличение часто<ы встречаемости аллечя MTHFR 677Т, однако разница не была статистически значимой (28,1 и 18,3% соответственно, р ~ 0,056) У пациенток с St I по сравнению со здоровыми женщинами было выявчено достоверное увеличение частоты одновременного носительства низкофупкциоьальных аллелей 677Т и 66G в генах MTHFR и MTRR (43,3 ti 26,0% соответственно, р = 0,038, OR = 2,1 (1,0—4,3)) Анализ особенностей те-нов HLA II класса не выявил статистически значимых отличий от контрольной т руппы

У мужчин в пара\ с первичным бесплодием по сравнению с контролем было отмечено достоверное увеличение частоты «нулевого» варианта в гене GS1M1 (54,1 и 32,1% соответственно, р = 0,01, OR = 2,5 (1,2—4,9)), а также сочетания iенотипов GS7M1 0/0 и GSTPJ В/- (27,8 и 7,4% соответственно, р = 0,005, OR = 4,4 (1,6—12,0)) Анализ полиморфизма генов фолатиого цитла и генов HLA II класса у мужчин из беепчодных бррков не выявил отличий от группы репроду ктпвпо здоровых мужчин

У женщин с первичнои привычной потерей беременности ранних сроков по сравнению с контролем было отмечено достоверное увеличение частоты сочетания биотипов GSTM1 0/0 и GSTP1 С/- (8,5 и 0,0% соответственно, р ~ 0,047, OR= 10,9 (1,2 — 95,8)) Анализ полиморфизма генов фочатного цикла и тенов HLA II класса у женщин с первичной ППЪ ранних сроков показал значительные отличия от контрольной труппы laic, у нацисток с ППБ rio сравнению со здоровыми женщинами имело место i гагистически значимое увеличение частоты встречаемости низкосЬункционального а тлел я 6777 в тене MTHFR (34,5 и 18,3% соответственно, р = 0 007, OR - 2,3 (1 3— 4,3)), генотипов

677С/Т + 677Т/Т в гене M1HFR (58,6 и 34,6% соответственно, р = 0,012, UR = 2,6 (1,2—5,6)), а также одновременного носительства аллелей M1HFR 677 Г и M7RR 66G (46,6 и 26,0% соответственно, р = 0,027, OR-= 2,4 (1,1—5,3)) Достоверно чаще по сравнению с контролем были отмечены аллели DQ4J 0401 (7,3 и 1,0% соответственно, р-0,045, OR= 5,9 (1,3—27,2)) и DQB1 0401 (7,3 и 1,0% соответственно, р = 0,045, OR= 5,9 (1,3—27,2)) При привычной потере беременности у женщин по сравнению с группой здоровых женщин достоверно чаще выявлялся гаплотпп DQ41-DQB1 0401-0401 (7,3 и 1,0% соответ-C1 венно, р 0,045, OR = 5,9 (1,3—27,2))

У мужчин из семей с ППБ анализ по диморфизма генов семейства глута-THOit-S-дрансфераз, фолатного цикла и системы HLA II класса выявил крайне немно! очпе лепные отличия от контрольной группы Так, достоверное увеличение частоты встречаемости было отмечено только относительно генотипа В/С в гене GSTF1 (8,9 и 0,0% соответственно, р = 0,038, OR= 12,0 (1,4—104,5)) Особенное) ей полиморфизма генов фолатного цикла и системы HLA II класса установлено не было

В последние годы в литературе появились сообщения о негативной роли повышенною числа совпадений по локусам системы HLA у супругов в реализации репродуктивной функции в паре По данным ряда авторов, увеличение количества совпадений обуславливает повышенный риск самопроизвольного прерывания беременности (Серова Л Д, 1997, Бескоровайная Т С , 2005) Система генов главного комплекса гистосовместимости (Major Histocompatibility Complex — МНС, у человека это лейкоцитарные антигены — Human Leukocyte Antygen — HLA) осуществляет генетический контроль за развитием специфического иммунпою oiBeia и участвует в поддержании иммунного гомеостаза организма (Акопян А В с соавт , 1998) Полнгеиность и полиморфизм генов комплекса HLA обуславливает широкое разнообразие индивидуумов по антигенам M1IC Уникальность белков комплекса гистосовместимости в определенной мере играет роль при формировании различной степени чувствительности организма к этиологическим факторам многих видов патологии Широко дискутируется проблема аллоиммунных отношений при беременности с учетом совместимости супругов и, соответственно, матери и плода по антигенам системы HLA (Коненков В И , 1999, Сотникова Н 10 с соавт , 2005)

В насюящем исследовании был проведен анализ количества и качества совпадений аллелей в локусах DRB1, DQA1 и DQB1 в супр>жеских парах с первичным бесплодием (п = 39), первичной привычной потерей беременности ранних сроков (п = 41) и в репродуктивпо здоровых семьях (п = 52) в поиучя-цпи Ивановской области В исследуемых группах семей с St I и ППБ достоверных отличии от контрольной группы по члс'|у пар, где супруги имели идентичные аллели в одном, двух иди трех локусах, выявлено не было Так, совпадение но одному аллелю у супруюв с St I, ППБ и в контроле имело место соответсь венно в 23,1, 31.7 и 30,8% семей, rio двум - - в 23,1, 17,4 и 15,4% семей, по трем — в 28,2, 24,4 и 28,8% семей При анализе попарного совпадения указанных

локусов в исследуемых группах также отсутствовали статистически значимые отлнчия ог здоровой выборки Совпадение супругов но локусу ИКВ1 было выявлено в 13 парзх с I (33,3%) и 20 парах здоровой выборки (38,5%), анализ аллельных вариантов этих совпадений показал, что аллель ВЯВ! 07 имеют оба супруга 30,8% семей с бесплодием и только 5,0% пар контроля (р- 0,066) В группе с ППБ отличий о г контроля по количеству пар, имеющих совпадение в локусе ОЯВ! (39,0 и 38,5% соответственно), а также в аллельных вариантах этих совпадений не выявлено Совпадение супругов по локусу ООЛ1 было определено в 27 парач с 1 (60,0%), 22 парах с ГГПБ (53,7%) и 33 парах контроля (63,5%) При этом среди бесплодных семей в большинстве случаев (40,7%) оба супруга имели аллель В()41 0102, в то время как в репродуктивно здоровой выборке идентичность по данному аллелю определялась лишь у 18,2% пар (р = 0,054) В семьях с ППБ значимые отличия от контроля по аллельным вариантам совпадений в локусе ИОЛ! выявлены не были Количество пар, в которых супруги совпадали по локусу В()В1, во всех группах было сходным (54,5, 46,3, 46,2% при 1, ППБ и в контроле соответственно) Не выявлено также отличии по видам совпадающих аллелей в данном локусе у супругов разных групп Таким образом, в настоящем исследовании показано, что совпадение супругов по аллелям НЬА II класса не является фактором риска нарушения репродуктивной функции в супружеской паре

Полученные нами данные свидетельствуют о возможной ассоциации между выявленными особенностями полиморфизма генов системы детоксикации, фо латного цикла, комплекса НЬА II класса и нарушением репродукции в супружеской парс Согласно результатам настоящего исследования у супругов с нарушенной репродуктивной функцией наблюдается увеличение частоты встречаемости нтгзкофупкциональньтх аллелей в генах семейства глутатион-8-грансфераз, которое максимально выражено у мужчин в бесплодных браках Как известно, ферменты семейства глутатион-8-трансфераз участвуют во втором этапе процесса детоксикации ксенобиотиков (Баранов В С с соавт , 2001) Дефект ферментативных систем, участвующих в инактивации токсических метаболитов, вероятно, негативно сказывается на процессах гамегогенеза, что приобретает особое значение в условиях современного экологического неблагополучия Вместе с тем, нельзя исключить нарушение процесса плацепгации вследствие снижения детоксикацнонной функции плаценты при наличии у женщины мутантных аллелей в генах метаболизма

Результаты настоящего исследования свидетельствуют о том, что присутствие чизкофу ¡национальных аллелей в генах фолатггого цикла, возможно, явля-егся фактором риска самопроизвольною прерывания беременности Причем можно предположить наиболее неблагоприятное влияние па репродукцию именно женского организма для полиморфизма 677Т в гене МТНГН Согласно нашим данным, у женщин с первичным бесптодием наблюдается тишь некоторое увеличение частоты аллеля MTH.FR 677Т, в то время как у пациенток с ППБ по сравнению с контролем разница в частотах аллеля МТНРЯ 677Т является

статистически значимой Как известно, 5,10-метиленгетрагидрофолат-редуктаза является кчючевым ферментом в процессе синтеза метионина из гомоцистеина (Зайчик АШ, 2001) Гомо- и гетерозиготное носительство аллеля 677Т обуславливает снижение активности энзима и, соответственно, приводит к развитию i ипергомоцистеинемии Повышение уровня содержания гомоцистеина является фактором риска развития тромбофилических осложнений, вероятность которых еще более повышается в период беременности вследствие перестройки свертывающей, противосвертывагощей и фибринолитической систем организма (МухинНА, 2001, БаймурадоваС М , 2004, Undas А , 2001) Тромбофшшче-ский и атерогенный эффекты гипергомоцистеинемии проявляются в нарушении плацентации и прерывании беременности (Бескоровайная Т С , 2005, Lissak А , 1999, Hohlagschwandtner М , 2003, Kumar К S , 2003) Возможно, в ряде случаев данный патогенетический механизм имеет место при нарушении имплантации и очень ранней гибели плодною яйца, которая остается недиагностированной и проходит под маской бесплодия Однако можно предположить, что среди массы факторов, обуславливающих женское бесплодие, наследственные тромбо-филии хотя и играют определенную роль, но уступают по значимости другим факторам, в то время как среди причин прерывания беременности они имеют более актуальное значение

Для выяснения роли полиморфизма генов фолатного цикла в развитии гипергомоцистеинемии нами было проведено определение базового уровня общего гомоцистеина (ГЦ) в плазме крови у 29 женщин с ППБ вне состояния беременности Выявлена тенденция увеличения показателя среднего уровня содержания ГЦ в плазме крови у пациенток с ППБ в зависимости от «дозы» аллеля 677Т в гене MTHFR Отсутствие статистической достоверности, возможно, обусловлено небольшими размерами выборки Тем не менее, можно отметить, что самый высокий уровень гомоцистеина в сыворотке крови (45,47 и 29,08 мкмоль/л при норме до 15,00 мкмоль/л) наблюдался у женщин с генотипом MTHFR 677 Т/Т, причем в одном случае он сочетался с генотипом 1298А/А в гене MTHFR и 66А/А в гене MTRR, в другом — с генотипом 1298А/А в гене MTHFR и 66A/G в гене M'IRR Вероятно, умеренная гипергомоцистеинемия связана именно с гомозиготным вариантом полиморфизма гена MTHFR С677Т Можно предположить, что алтель 677Т в гене MTHFR играет большую роль при синдроме потери плода, чем аллели MTHFR 1298С и MTRR 66G, именно вследствие того, что влияет на уровень содержания ГЦ в плазме крови и обуславливает развитие тромбофилических осложнений Результаты настоящего исследования согласуются с мнением ряда авторов Так, по данным Е Н Калашниковой и С Н Кокаровцевой (2005) у женщин с привычным невынашиванием беременности выявляется прямая корреляция значений гомоцистеина с «дозой» аллеля 677Т в гене MTHFR, котя авторы не выявили достоверных отличий в частотах гомо- и гетерозиготных генотипов в гене MTHFR у здоровых женщин и пациенток с привычным невынашиванием беременности

Вместе с тем, негативного влияния на мужскую фертильность, низко-функциопальные аллели в генах фолатного цикла, вероятно, не оказывают В доступной нам литературе мы встретили лишь два исследования с противоположными выводами, посвященные анализу полиморфных вариантов гена 5,10-метилешетрагидрофолат-редуктазы у мужчин с олиго- и азооспермией (Stuppia L , 2003, Singh К , 2005) Вероятно, наличие мутантных аллелей у отца имеет значение лишь при формировании генотипа плода По данным ряда авторов, присутствие у плода неблагоприятных аллелей в генах фолатного цикла вследствие изменения профиля метилирования ДНК може1 оказывать негативное влияние на процесс деления и дифференцировки клеток развивающегося организма (Fell D, 1990, MotulskyAG, 1996, IsotaloPA, 2000, ZetterbeigH, 2002) Подтверждением этой гипотезы служит факт достоверного увеличения частоты носигельства низкофункциональных аллелей в генах MTHFR и MTRR обоими супругами в парах с ППБ, что было продемонстрировано в нашем исследовании Так, в группе семей с ППБ у 12% обследованных пар оба супруга имели сочетание MTHFR 677С/- + MTRR 66G/G при отсутствии таких семей в контрольной группе (р = 0,028, OR = 13,0 (1,6—108,0)), комбинация MTHFR 677С/Т + MTRR 66G/- в группах с ППБ и в контроле была выявлена соответственно в 14,0 и 2,3% случаев (р = 0,063) Недостаточная активность ферментов фолатного обмена может быть причиной снижения метилирования не только в соматических клетках эмбриона, но и в половых клетках Изменение профиля метилирования центромерных районов хромосом в процессе гаметогенеза, возможно, способствует нарушению расхождения гомологов в мейозе, формированию несбалансированных гамет и возникновению анэуплоидии у плода (Hobbs С А , 2000, O'Leary V В , 2002) Результатом хромосомною дисбаланса у плода является или самопроизвольное прерывание беременности, иногда на самых ранних стадиях эмбриогенеза, что протекает под маской бесплодия, или формирование пороков развития

Поскольку первичное бесплодие и привычная потеря беременности являются следствием разнообразных морфо-функциональных нарушений в организме одного или обоих супругов, констатация факта увеличения частот определенных полиморфных аллелей в семьях с отягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом не всегда оправдана Группы супружеских пар с патологией репродукции, даже при условии тщательного отбора по анамнестическим признакам, объединяют совершенно различные по генезу случаи нарушения сЬертильности Логично предположить, что различные нозологии (варианты эндокрииопатий, эндометриоз, антифосфолипидныи синдром, патозоо-спермии и др) могут быть ассоциированы с определенными полиморфными аллелями некоторых генетических маркеров различных систем Исходя из вышесказанного, нам представлялось важным провести анализ особенностей полиморфизма генов семейства i лутатион-Б-трансфераз, фолатного обмена и системы HLA II класса у женщин и мужчин в семьях с первичным бесплодием и ППБ с учетом выявленной патологии у супругов Поскольку в настоящем ис-

следовании у женщин из семей с НРФ наиболее частой причиной патологии репродукции являлось нарушение менструальной функции, обусловленное 1 При и'in ГА, наружный генптальнын лщометриоз, ангифосфолипидпый синдром, а у мужчин нарушение фертильности было связано с наличием различных гнпов паюзооспермип, анализ распределения полиморфных аллелей ienoB cncicM детоксикации, фолатною обмена, а также антигенов второго класса ьтавного Kovmeicca гистосовместимости был проведен в пределах каждой но-ютогической формы

Установлено, что пациентки с повышенным уровнем сывороточного про-чакшна достоверно чаще, чем здоровые ленщины, имеют генотип GSTT1 0/0 (41,7 и 14 5% соответственно, р = 0,031, OR = 4,1 (1,1—14,8)), а также сочетание генотипов GSTTI 0/0 и GSTP1 В/- (50,0 и 7,7% при ГГ1рл и в контроле соответственно, р •= 0,008, OR - 10,8 (2,6—44,7)) Выявлена достоверная ассоциация между развишем ГПрл и наличием в генотипе женщины аллеля DQB1 0602 (42,9 и 19,2% при ГПрч и в контроле соответственно, р = 0,045, OR = 3,2 (1,0— 9 7)) и аллеля D041 0102 (35,7 и 14,4% при ГПрл и в контроле соответственно, р-- 0,046, OR-3,3 (1,0—11,0)), генотипов 0101/0102 и 0102/0201 в локусе DQ41 (для каждого генотипа 28,6 и 1,9% при ГПрл и в контроле соответственно, р = 0,035 011= 15 6 (2,6--93,2)), а также сочетаний аллелей DRB1 01 + DOAJ 0102 + DQB1 0501 (28,6 и 0,0% при ГПрл и в контроле соответственно, р = 0,012, OR = 47,7 (6,9—329,5)), DRB1 07 + DQA1 0102 + DQB1 0о02, DRB1 07 + DQ41 0201 + DQB1 0602, DRB1 15 + DQA1 0201 + DQBI 0602 (для каждого сочетания 28,6 и 1,9% при ГПпл и в контроле соответственно, р = 0,035, OR = 15,6 (2,6—93,2)) Роль генов фолатного цикла в развитии ГПРЛ в женском организме не была установлена

Выявлено, что больные, страдающие ГА, достоверно чаще, чем здоровые женщины, имеют сочетание генотипов GSTM1 0/0 и GSTPI С/- (16,0 и 0,0% соответственно, р = 0,009, OR= 22 0 (2,8—169,8)) Также у больных данной категории по сравнению с контролем было выявлено достоверное увеличение час-юты аллеля MTHFR 677Т (35,0 и 18,3% соответственно, р-= 0,016, OR - 2,4 (1,2—4,9)) и одновременного носителгства низкофункциональных аллелей Ml'HFR 677Т и MTRR 66G в томо- и гетерозиготном состоянии (51,7 и 26,0% соотвсictbciiho, р = 0,021, OR = 3,0 (1,2—7,5)) В генах HLA II класса у пациенток с ГА по сравнению со здоровыми женщинами отмечалось достоверное увеличение частош аллелей DRB1 08 (10,7 и 1,0% соответственно, р = 0,030, OR - 9,5 (1,8—49,3)), DQil 0401 (9 4 и 1,0% соответственно, р =-0,040, OR = 8,2 (1,5—43,6)), DQB1 0401 (10,0 и 1,0% соответственно, р = 0,035, OR ~ 8,8 (17—46,3)) и DQB1 0503 (13,3 и 1,9% соответственно, р = 0,023, OR - 7,0 (1,7—29,1)), а также га плотина DRB1-DQ41-DQB1 08-0401-0401 (10,7 и 1,0% соответственно, р = 0,030, OR - 9,5 (1,8—49,3)) Характерно, что данные особенности комплекса HLA были выявлены у женщин с ППГ> Верояшо, указанные особенности системы HLA II класса являются фактором риска развития

именно ГА, а самопроизвольное прерывание беременности - лишь следствием iopMOiiam.Horo дисбаланса в организме женщины

V ботьныч, сфадавших ГПрл в сочетании с ГА, по сравнению с контро-пем отмечалось достоверное увеличение частоты аллеля В в гене GSTP1 (50,0 и 21,7% соответственно, р = 0,031, OR = 3,ó (1,1—11,2)), аллеля 677Т в гене MTHFR (50,0 и 18,3% соответственно, р = 0,007, OR= 4,4 (1,5—12,9)) и аллеля DRB1 11 (50,0 и 16,3% соответственно, р - 0,010, OR = 5,0 (1,5—17,0)) Достоверно чаще, чем в коптроте, у больных с данным типом эндокринопатии наблюдался генотип MTHbR 677Т/Т (28,6 и 1,9% соответственно, р^ 0,035, OR = 15,6 (2 6—93,2)) а также сочетание аллелей в трех локусзх HLA II класса DRBI 11 + DOAÍ 0101 + DQBI 0301 (40,0 и 1,9% соответственно, р = 0,018, OR = 24.5 (4,4 -137,2)), DRBI 11 -г DOAI 0501 + DOB1 0301 (80,0 и 28,8% соответственно, р =- 0,038, OR - 7,3 (1,4—38,8))

Таким образом, установлены тенотипические различия у женщин в зависимости oí характера изменения эндокринного фона У пациенток с первичным беенчодием и Г1Г1Б наблюдается увеличение частот разных аллелей и генотипов по генам системы HLA II кпасса, фочатпою цикла и системы детоксикации Можно предположить, что выявленные тенотипические особенности являются фактором риска метаболических нарушений в организме женщины и способствуют развитию разных титов эндокринопатии

Второе по распространенности место среди причин первичного бесплодия у женщин в настоящем исследовании занимал наружный генитальный эн-дометрноз У больных с НГЭ и эндометриоз-ассоциированным бесплодием по сравнению со здоровыми женщинами было отмечено достоверное увеличение частот алпелей DQA1 0102 (30,0 и 14,4% соответственно, р = 0,050, OR = 2,6 (1,0—6,5)), DQBI 0502 (13,3 и 2,9% соответственно, р = 0,044, OR = 4,9 (1,2 — 19,6)) ti снижение частоты аллеля DQB1 0501 (0,0 и 14,4% соответственно, р = 0,023, OR = 0,1 (0,0—0,8)) У пациенток с НГЭ достоверно чаще, чем у здоровых женщин, отмечался генотип 0502/0502 в локусе DQB1 (13,3 и 0,0% соответственно, р = 0,047, OR = 19,4 (2,2—171,3)) и генотип 0303/0602 в локусе DQB1 (20,0 и 1,9% соответственно, р = 0,033, OR=9,6 (1,7—52,8)) Анализ полиморфизма генов фолатного цикла показал, что у больных НГЭ достоверно реже чем у здоровых женщин, встречается сочетание генотипов MTIIFR 677С/С и MTHFR 1298А/А (13,5 и 34,6% соответственно, р = 0,012, OR = 0,3 (0,1 --0,8))

В настоящем исследовании генетически обусловленные и приобретенные томбофилии в труппе пациенток с привычным невынашиванием беременности были обнаружены практически с одинаковой частотой в 31,1% счучаев у больных с ППЬ определялся аитифосфолипидный синдром, 34,5% женщин с ППБ являчись носительницами аплеля M'LHFR 677Т Установлена ассоциация между наличием воччаночного антикоагулянта (ВА) и присутствием HiiiKoqiyHKHVío-иальных аллелей в генах фолатного цикла у женщин с первичной ППБ В группе ВД-нозитивных пациенток, страдающих; ППБ, по сравнению с контрольной

i ручной выявлено достоверное увеличение часто1 ы аллеля MTIJFR 677 I (37,0 ч 18,3% соответственно р = 0,009, OR = 2,6 (1,3—5,4)), генотипа MJHFR 6771/Т (18,5 и 1 9% соответственно, р = 0,016, OR = 8,4 (1,7-40,7)), одновременною носитетьыва аллелей MIHFR 677Т и AfIRR 66G в гомо- и гетерозиготном состоянии (51,9 и 26,0% соответственно, р = 0,023, OR = 3,0 (1,2—7,7)), а также сочетания генотипов MTHFR 677Г/1 + MTRR 66A/G (11,1 и 0,0% соответственно, р = 0,04, OR = 14,4 (1,6—127,1)) Полученные результаты позволяют высказать предположение о возможной тромбогепной значимости комбинации В А и наличия аллеля MTHFR 677Г, особенно в гомозиготном состоянии Наиболее вероятным путем реализации такой ассоциации является продукция антител к некоторым линопротеинам и/или находящимся в комплексе с фосфолипидамн (ракгорам системы гемостаза вследствие окисления последних в условиях гн-перюмоцнсгеинсмии У ботьных с антифосфолипидным синдромом по сравнению с контрольной группой было выявлено достоверное увеличение частот генотипа 0101/0501 в локусе DQA1 (25,0 и 5,8% соответственно, р = 0 048, OR - 5,1 (1,2—21,5)) В то же время причастность генов семейства глутатион-S-цэансфераз к развитию ангпфосфолипидного синдрома не подтверждена

Сравнительная характеристика особенностей генотипа у пациентов с различными типами патозоосгюрмии наглядно демонстрирует ассоциашвнуто связь между наличием низкофункциональных вариантов генов семейства глу-[aihoh-S-траисфераз, характерным распределением аллелей, генотипов и ian-лотиноп комплекса HLA в генотипе больною и формами нарушения сперматогенеза Если у пациентов с астепозоопермией частота «нулевого» аллеля гена GSTM1 по сравнению с контрольной группой была лишь несколько повышена (50,0 и 32,1% соответственно, р ~ 0,057), то у больных с более выраженным нарушением процесса сперматогенеза (олиго-, пекро-, терато-, азооспермия) разница в частоте встречаемости i енотипа GSTMI 0/0 (64,3%) по сравнению со здоровыми мужчинами являлась статистически значимой (р = 0,002, OR = 3,7 (1,6—8,3)) В лои группе пациентов (с олиго-, пекро-, терато-, азооспермией) было отмечено достоверное увеличение по сравнению с контрольной группой частоты гомозиготного носительства «двойною нуля» по генам GSTM1 и GSTT1 (21,4 и 5,4% соответственно, р = 0,027, OR - 4,3 (1,3—14,3)) У пациентов со всеми видами патологии талетогенсза отмечалось достоверное увеличение частоты одновременного носительства аллеля GSTFI В и генотипа GS1MI 0/0 В то время как в кошрольной группе сочетание GSTM1 0/0 + GSTPi BL наблюдалось в 7,4% случаев, при астенозооспермни оно было отмечено в 26,1% (р~ 0,014, OR =4,1 (1,4 - 12,0)), в группе больных с более выраженным нарушением процесса сперматогенеза (олиго-, чекро-, терато-, азооспермия) — в 29,0% (р = 0,012, OR--~4,7 (1,5—14,9)j, у пациентов с азооснермчеи -в 42,9% (р ~ 0,027, OR = 8,7 (1,9- -10,5)) Более тою, у мужчин с нормозооспер-пиен в семьях с нарушенной репродукцией по сравнению с контрольной выборкой наблюдалось увеличение частоты генотипа В/С в гене GSTPI (10,7 и 0,0% соответственно, р - 0,036, OR=15,2 (1,8—132,0)) Возможно, наличие

данного генот ипа негативно сказывается на тех фертильных свойствах спермы, оценить которые при слермиологическом исследовании не представляется возможным В литературе есгь сведения о том, что при ингибировании активности GSTM1 и GSTP1 сперматозоиды уфачивают способность к нормальной акро-сомалыюй реакции (Gopalaknshnan В, 1998) Таким образом, присутствие функционально неполноценных вариантов в генах семейства глутатион-S-фансфераз в генотипе мужчины, возможно, является фактором риска повышенной восприимчивости мужского ор1анизма к действию неблагоприятных средовых факторов и обуславливает поломку столь тонкого и чутко реагирующего на любое изменение внешних и внутренних констант процесса, каким является процесс формирования половых клеток Наибольшее значение при нарушении сперматогенеза вероятно, имеют гены GSTM1 и GSTP1 Поскольку у пациентов с патологией гаметогенеза увепичение частоты встречаемости GS FMI 0/0, а также сочетания GSFM1 0/0 и GSTP1 В/- напрямую соотносилось с ухудшением результатов спермиологического обследования, мы имеем основание говорить о неслучайной ассоциации между генотипом GSTM1 0/0 и носи-тельством аллеля GSTP1 В в юмо- и гетерозиготном состоянии и нарушением сперматогенной функции у мужчины

Установлены достоверные ассоциации между наличием тяжелых форм патозооспермии (азооспермия и олигозооспермия III степени) и особенностями 11LA комплекса Так, у больных из этой группы достоверно чаще по сравнению с контролем регистрировался аллель DRBI 01 (29,4 и 12,5% соответственно, р = 0,022, OR = 2,9 (1,2—7,2)), аллель DQA1 0101 (35,3 и 15,4% соответственно, р - 0,012, OR = 3,0 (1,3—7,0)) и аллель DQB1 0503 (8,8 и 1,0% соответственно, р = 0,046, OR = 7,7 (1,4—41,3)) Гаплотип DRB1-DQA1 06-0101 у больных с тя-лелыми формами патозооспермии был отмечен в 8,8% случаев против 1,0% в конфольной группе (р = 0,046, OR = 7,7 (1,4—41,3))

В 11 семьях наряду с ППБ имело место указание в анамнезе на наличие врожденных пороков развития плода, у 8 пар при самопроизвольном прерывании беременности до 12 недель имела место анэмбриония Аномалии кариогипа у всех обследованных были исключены В семьях с ВГ1Р плода у мужчин по сравнению с контролем было отмечено достоверное увеличение частоты генотипа GSTM1 0/0 (72,7 и 32,1% соответственно, р = 0,018, OR = 5,1 (1,4—17,8)), а также «двойного нуля» в генах GSTM1 и GSTT1 (27,3 и 5,4% соответственно, р = 0,050, OR = 6,3 (1,3—29,6)) Примечательно, что при анализе полиморфизма

I енов GSTs в целом в группе семей с привычной потерей беременности не было выявлено статистически значимых разчичий в частотах встречаемости аллелей и генотипов по генам GS Ts по сравнению со здоровыми парами Достоверные отличия по сравнению с контрольной группой в частотах GSTM1 0/0 и GSTT1 0/0 были получены при выделении из общего контингента пар с ППБ семей в которых ППБ сочеталась с наличием ВГ1Р плода Необходимо отметить, что из

II мужчин в семьях с ВПР плода у 7 (63,6%) наблюдалась патозооспермия у 3 пациентов была диагностирована олигозооспермия (27.3 %), у 4 — астенозоос-

пермия (36,4%) Как было показано в настоящем исследовании, выше у мужчин частота вЗТМ/ 0/0 изолированно и в сочетании с С5Г77 0/0 соотносится со степенью поражения сперматогенеза Возможно, результаты, полученные в семьях с наличием ВПР у плода, являются лишь следствием распространенности патологии гаметогенеза у мужчин в данной выборке Однако необходимо помнить, что степень участия мужчины в формировании здоровья потомства определяется прежде всего качеством гаметы, участвующей в процессе оплодотворения Следовательно, можно предположить, что негативное влияние функционально неполноценных аллелей по генам метаболизма проявляется не только в снижении фертильных свойств спермы, но и неблагоприятно отражается на качественных характеристиках сперматозоида, что в дальнейшем способствует нарушению нормального хода эмбриогенеза и формированию пороков развития плода

В генах МТИРЯ и MTR.lt у супругов, имевших ВПГ плода в анамнезе, было выявлено достоверное увеличение частот низкофункциональных аллелей у женщин — МТ1Ш 677Т (40,9 и 18,3% соответственно, р = 0,020, 011 = 3,1 (1,2—8,0)), у мужчин— МТЯЯ 660 (86,4 и 51,9% соответственно, р = 0,004, 011 = 5,2 (1,8—15,2)) Примечательно, что статистически значимое увеличение частоты аллеля MTHFR 677Т по сравнению с контролем было отмечено и ранее у женщин с самопроизвольным прерыванием беременности (34,5%), однако в группе пациенток, у которых ГТПБ сочеталось с наличием пороков развития плода, частота встречаемости данного аллеля еще более возрастала (40,9%) У мужчин ранее не было отмечено повышенной частоты аллеля MTRR 660 ни в группах, сформированных по анамнестическому принципу (811 или ППБ), ни в выборках с учетом различных типов патозооспермии То есть низкофункцио-иальный аллель MГRR 66в не обнаруживал ассоциаций с нарушением показателей спермограммы, и частота его встречаемости нивелировалась в общей группе мужчин из семей с ППБ Однако при вычленении контингента супружеских пар с признаками грубого нарушения эмбриогенеза из общей группы семей с ППБ наблюдалось выраженное увеличение частоты встречаемости данного полиморфизма Кроме того, 72,7% мужчин в семьях с ППБ и ВПР плода имели 1 енотип МТШ 66С/С (в контроле 27,8%, р = 0,005, 011 = 6,2 (1,8—21,8)) Факт высокой частоты гомо- и гетерозиготного носительства аллелей 677 Г и 66в в генах MTHFR и MTRR у супругов с ВПР плода могут свидетельствовать в пользу гипотезы о причастности данных полиморфизмов к нерасхождению хромосом в ходе гаметогенеза и возникновению несбалансированных тамет Формирование пороков развития в данном случае может быть связано с наличием хромосомной аномалии у плода (НоЬЬб С А , 2000, О'Ьеагу V В , 2002)

Анализ особенностей полиморфизма генов фолатного цикла в группе супружеских пар с ППБ и анэмбрионией показал, что в этих семьях по сравнению с контролем отмечается достоверное снижение количества пар, в которых оба супруга являются носителями аллеля «дикого» типа М77//<7? 1298А (50,0 и 87,5% соответственно, р - 0,027, ОЯ = 0,2 (0,0—0,6)) и достоверное увеличение

числа пар, в которых оба супруга являются гетерозиготными носителями алле-ля М7ЛЛ 66в (50,0 и 13,5% при АЭ и в контроле соответственно, р = 0,031, СЖ-6,1(1,5—25,1))

Поскольку накопление в генотипе человека неблагоприятных полиморфизмов может способствовать усилению их негативного влияния на репродуктивное здоровье индивидуума, нами была проведена оценка суммарного вклада всех признаков, для которых выявлялась ассоциативная связь с патологией Анализ накопления негативных факторов был проведен у женщин и мужчин в семьях с первичным бесплодием и привычной потерей беременности, а также в группах пациентов с определенными состояниями, повлекшими нарушение фертильпости (эндокрипопатии, НГЭ, АФС у женщин и патозооспермии у мужчин)

Оценка суммарного вклада всех признаков, для которых нами была выявлена ассоциация с патологией, показала следующее У женщин с первичным бесплодием суммарное накопление таких аллелей, как «нулевой» в гене СБТТ], ОЗТР1 В, MTR.Il 66в и МТНРЯ 677Т, оказалось достоверно большим по сравнению с женщинами из контрольной группы (р = 0,005) Пациентки с первичным бесплодием досюверно чаще, чем здоровые женщины, имели в генотипе одновременно четыре неблагоприятных аллеля (16,2 и 4,2% соответственно, р - 0,043, ОЯ = 3,7 (1,0—13,3))

У мужчин из бесплодных пар частота сочетанного присутствия аллеля СБТР! В и генотипа СБТМ1 0/0 была также достоверно большей по сравнению с контрольной выборкой (29,2 и 5,6%> соответственно, р = 0,001, 011 = 6,1 (2,1— 17,8)) Суммарное накопление низкофункциональных аллелей у мужчин в семьях с Б1 I было достоверно большим по сравнению с таковым у здоровых мужчин (р = 0,008)

У женщин с ПГ1Б суммарное накопление неблагоприятных аллелей МТНРЯ 677Т, Э(2А1 0401, 0(2В1 0401 достоверно превышало таковое у женщин контрольной группы (р = 0,023) У пациенток с Г1ПБ в 10,5% случаев было выявлено наличие в генотипе грех и более неблагоприятных факторов при отсутствии подобной комбинации у здоровых женщин (р - 0,035, ОИ. = 12,7 (1,5— 109,8))

В группе мужчин из семей с ППБ не проводилось изучение накопления небла! оприятных факторов, поскольку у пациентов этой выборки достоверная разница в частотах встречаемости по сравнению с контролем была о I мечена только для генотипа СБТР1 В/С

У женщин с гиперпролактинемией суммарное накопление аллелей DQ41 0102, 0()В1 0602, ОБТР1 В и «нулевого» аллеля в гене С57Т7 было достоверно выше, чем в контрольной группе (р — 0,001) Установлено также, что в генотипе женщин с данным видом эндокринопатии достоверно чаще, чем у здоровых женщин, одновременно присутствуют четыре негативных аллеля (40,0 против 2,0%, р = 0,020, 011 = 23,1 (4,0—132,0))

Суммарное накопление неблагоприятных аллелей («нулевого» в гене GSTM1, GSTP1 С, MTIIFR 677Т, MTRR 66G, DRB1 08, DQA1 0401, DQB1 0401, DQBI 0503) у женщин с гиперандрогенией было достоверно выше, чем в группе здоровых женщин (р = 0,010) Сочеганное наличие шести негативных аллелей в генотипе достоверно чаще определялось у больных с ГА по сравнению с контролем (18,2 против 0,0%, р = 0,036, OR = 23,9 (2,8—202,9))

У пациенток с гиперпролактинемией в сочетании с гиперандрогенией суммарное накопление аллелей GSTP1 В, MTHFR 677Т, DRB1 11 достоверно превышало таковое в контроле (р = 0 001)

У больных с НГЭ изучали накопление аллелей DQA1 0102 и DQB1 0502 Показано достоверное увеличение суммарного количества неблагоприятных факторов в группе пациенток с НГЭ (р = 0,010)

У женщин с ангифосфолипидным синдромом проанализированный комплекс включал а тлел и M1HFR 677Т, MTRR 66G и DQB1 0502 Присутствие одновременно четырех неытивных факторов в генотипе было отмечено у 18,8% больных и 2,1% здоровых женщин (р = 0,047, OR = 8,0 (1,4—45,5)) Суммарное накопление негативных факторов у пациенток с АФС было достоверно выше, чем в контрольной группе (р = 0,003)

В группе семей с НРФ у мужчин, страдавших астенозооспермией, одновременное присутствие в генотипе аллеля GSTP1 В и «нулевого» аллеля в гене GSTM1 было отмечено в 27,4% случаев против 5,6% в контроле (р = 0,020, OR- 5,7 (1,9—16,9)) Показано достоверное увеличение суммарного накопления неблагоприятных аллелей у пациентов с астенозооспермией по сравнению с таковыми у здоровых мужчин (р = 0,014)

У пациентов с выраженным нарушением сперматогенеза (олиго-, некро-, терато-, азооспермия) из супружеских пар с патологией репродукции было проанализировано накопление следующих аллелей DRB1 01, DQA1 0101, DQB1 0503, GSTP1 В и «пулевых» аллелей в генах GSTM1 и GSTT1 Обращает внимание факт большей насыщенности генотипа больного с выраженными формами нарушения сперматогенеза низкофункциональными аллелями, чем у больных с более легким поражением гаметогенеза Характерно, что сочеганное присутствие пяти негативных аллелей определялось только в генотипе больных с тяжелыми патозооспермиями при отсутствии подобных вариантов в контроле (20,0 и 0,0% соответственно, р = 0,010, OR = 28,8 (3,8—216,5)) Суммарное накопление негативных факторов у мужчин с тяжелыми формами пагозооспермии (азооспермия, олигозооспермия III степени) было достоверно выше, чем в контрольной группе (р = 0,002)

В группе мужчин из семей с ППБ и указанием на наличие ВПР плода бы-по изучено накопление аллелей MTRR 66G и «нулевых» аллечей в генах GSTM1 и GSTT1 Одновременное присутствие в генотипе трех неблагоприятных аллелей наблюдалось у 36,4% мужчин из семей с ВПР плода и только у 7,4% мужчин здоровой выборки (р = 0,023, OR = 6,7 (1,7—27,4)) Суммарное накопление

ш.нефункциональных алчелей в данном коншнгенге составило 68,2 против 38 0% в контрольной труппе (р =■ 0,001)

В семьях с ППЬ и лиэчбрионней достоверно чаше, чем в контроле, оба супруга япчятись носителями алчеля M1RR 66G в гетерозиготном состоянии (50 0 и 13,5% соответственно, р = 0,031, OR = 6,l (1,5—25,1), а также значи-зеаьчо рс/ке, чем в котпроче, оба супруга имели генотип MTHFR 1298А/- (50,0 и 87,5% соответственно, р = 0,027, OR = 0,2 (0,0 -0,6))

1аким образом насюящее исследование показало, что генетические факторы предрасположенности i нарушению репродуктивной функции в супружеской парс могут быть абсолютными н относительными К абсолютным факторам ошосятся аномалии кариотипа и генные мутации, определяющие развипте абсочютною бесплодия или хромосомную патологию плода, вследствие чего беременность самопроизвольно прерывается К относительным факторам можно отнести те ачлечьные полиморфизмы, для которых в настоящем исследовании выявлена ассоциативная связь с патологией репродукции в супружеской паре Важно, что и предела^ каждой нозоло1 ичсской формы, при которой имеет место ограничение женской или мужской фертилытости, наблюдается накопление определенных, специфичных аллельчых полиморфизмов но генам системы гтиокепкации, фолатного цикла и комплекса HLA [I класса Установленные особенности генотипа пациентог с разными формами нарушения репродукции могут использоваться как генетические маркеры предрасположенности к формированию конкретной патологии Раннее генетическое тестирование супругов в ходе проспективного консультирования при планировании семьи позволит сформировать группы риска развития различных форм нарушения репродуктивной функции и провести раннюю профилактику возможной патологии

ВЫВОДЫ

1 В бесплодных браках у женщин гормональные нарушения имеют место в 53,0% случаев, наружный гепптальный эндометриоз — в 39,1%, при первичной привычной потере беременности ранних сроков у женщин ондок-ринопатии наблюдаются в 56,8% случаев, антифосфолипидныи синдром— и 31,1% У мужчин в бесплодных браках в 63,9% случаев и в семьях с ПНБ в 42 5% имеет место нарушение процесса сперматогенеза нанбочее распространенной формой иатозооегтермии является астенозо-оспермпя, тяжелые формы патозооеттермии (азооспермия, олигозооспер-мия Ш степени) имеют место только у мужчин в бесплодных браках

2 В беепчодных браках в популяции Ивановской области у мужчин численные аномалии кариотипа составляют 6,3% Азооспермия в 22,7% обу-счоччена геномными мутациями, в 4 5% случаев-— делециеи AZF локуса Y хромосомы Среди пациеншк с Г1ПБ 9,0% женщин являются носительницами сбалансированных транслокацпй Вариант 9ph можно отнести к факторам риска развития патологии репродукции

3 Совпадение супругов гю аллелям II LA II класса не является фактором риска нарушения репродуктивной функции в супружеской парс Установлена ассоциация между наличием в генотипе женщины низкофунк-цпопальных аллелей в генах M7IIFR и MTRR, аллелей UOA1 0401, DOfíl 0401, гаплотина DQA1-DORI 0401-0401 и развитием первичной привычной потери беременности ранних сроков У мужчин в бесплодных браках наблюдается досюверное увеличение частот низкофункциональпых аллелей в генах семейства i лутагион-Э-трансфераз

4 Фактором риска развишя гиперпролактшгемии является наличие в генотипе женщины аллелей DQAJ 0102, DQBI 0602, генотипов DQA1 0101/0102 и DQA1 0102/0201, генотипа GSTT1 0/0, сочетания GSTTJ 0/0 и GS7P1 В/-

Устаповленл ассоциация мел ду развшием гнперачдрогении и наличием в геношпс женщины аплелсй DRB1 08, DQ4I 0401, DQB1 0401, DQBI 0503, гаплотина DRBI-DQ4I-DQB1 08-0401-0401, генотипа MTHFR 677 Г/-, сочетания генотипов MTHFR 6771/- и MTRR 66G/-, а также GSTM1 0/0 и GSTP1 С/5 Фактором риска развития наружного геннтального эндометриоза и эпдо-метрпоз-ассоциированного бесплодия является присутствие в генотипе женщины аллелей DQA1 0102, DQB1 0502 и генотипов DQB1 0502/0502, DQBI 0303/0602 Связи между особенностями полиморфизма генов фола! ног о цикла и семейства глутатион-Б-трансфераз с развитием наружного гениального эндометриоза не выявлено

6 Выявлена ассоциация между развитием антифосфолипидного синдрома у женщин с привычной потерей беременности и наличием аллеля MTIIFR 677Т, генотипа MTHFR 677Т/Г, сочетаний MTHFR 677Т/- + Ml RR 66G/-, MTHFR 677Т/Г ■+ MTRR 66A/G, генотипа DOAI 0101/0501 Роль генов семейства i лутатион-З-грансфераз в развитии антифосфолипидного синдрома не подтверждена

7 Фактором риска развития астеиозооспермии является наличие у мужчины генотипов GSTM1 0/0 и GS1PI В/- Установлена ассоциация между присутствием аллелей DRB1 01, DQA1 0101, DQB1 0503, гаплотипа DRB1-DQ41 06-0101, «двойного» нуля в генах GSTM1 и GSTTT, аллеля GSTP1 В и развитием тяжелых форм патозооспермпи (олигозооспермия III степени, азооспермия)

8 Фактором риска формирования врожденных пороков развития у плода явтяегся наличие

- у матери генотипа MTIIFR 677Т/-,

- у о та генотипа GS1MI 0/0, сочетания GSTM1 О'О + GSTT1 0/0 аллеля MTRR 66G, генотипа MTRR 66G/G

Фактором риска анэмбрионии является носигельство обоими супругами аллеля MTRR 66G в гетерозиготном состоянии

П PA КТ114ECICI IE PEKOM EU ДА IЩП

Выявленные в настоящем исследовании ассоциации можно использовать в качестве генетических маркеров предрасположенности к формированию определенных заболеваний и патологических состояний, ограничивающих женскую и мужскую фергильноегь у женщин — эндокрикопанш, наружного генн-тачыгою эндометрноза, аптифосфолипидного синдрома, у мужчин — различных типов патозоосиермии Генетическому тестированию подлежат все семьи с нарушенной репродукцией после исключения аномалий кариотипа у обоих супругов и делений AZF-локуса Y хромосомы у бесплодных мужчин

Указанные особенности генотипов супругов являются генетическими маркерами предрасположенности к

• Гнпсрпролактинсмнн у женщин.

Аллели DQA1 0102 (OR-3,3), DQB1 0602 (OR = 3,2), генотипы DQA1 0101/0102 (OR *= 15,6), DQA1 0102/0201 (OR= 15,6), геногнп GS1T1 0/0 (OR = 4,1), сочегапие GSTT1 0/0 + GSTP1 В/- (OR = 10,8)

• Гнперандрогенни у жешцшг

Аллели DRB1 08" (OR = 9,5), DQA1 0401 (OR = 8,2), DQB1 0401 (OR 8,8), DQB1 0503 (OR = 7,0), гаплотип DRB1-DQA1-DQB1 08-04010401 (OR = 9,5), аллель MTHFR 6771' (OR = 2,4), сочетания MTHFR 677Т/- + Ml RR66G/- (OR - 3,0), GSTM1 0/0 + GSTP1 С/- (OR = 22,0)

• Наружного генитлльного эидомстриоза:

Аллели DQA1 0102 (OR - 2,6), DQB1 0502 (OR = 4,9), генотипы DQB1 0502/0502 (OR = 19,4), DQB1 0303/0602 (OR = 9,6)

• Ант ифосфолнпидного синдрома:

генотип DQA1 0101/0501 (OR = 5,1), аплель MTHFR 677Т (OR = 2,6), ге-нопш MIHFR 6771/Т (OR = 8,4), сочетания MTHFR 677Т/- + Ml RR 66G/- (OR = 3,0), M THFR 677T/T + MTRR 66A/G (OR = 14,4)

• AcienosoocncpMinr

Сочетание GSTM1 0/0 и GSTP1 B/- (OR = 4,1)

» Олш озооспермпн 111 С1 сисни и азооспермии:

гсношп ГМ1 0/0 (011 = 3,7), сочетание генотипов С8ГМ1 0/0 + СБТИ 0/0 (ОЯ 4,3), аллели 01Ш1 01 (СЖ = 2,9), П0А1 0101 (011 = 3,0), Б0В1 0503 (ОЯ = 7 7), гаплотпгт 1ЖВ1-ВдА1 06-0101 (011 = 7,7)

• Генетическими маркерами предрасположенности формирования врожденных пороков разки I пи плода является наличие - в 1еногипе матери аллеля АПНРЕ 677Т (011=3,1), -у оща ]еиопша СБТМ1 0/0 (ОЯ = 5,2), «двойною пуля» в генах С,8ТМ1 и С57/7 (011 = 6,3), аллеля .\ITRR 660 (011 = 5,2), генотипа МТЯЯ 66С/в (ОК - 6,2) Фактором риска анэмбрнонип является гетерозиготное носительство аллеля \iTRR 66С обоими супругами (ОЯ = 6,1)

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1 Факторы риска в возникновении врожденных пороков развития у детей при угрозе невынашивания [Текст] / В Н Городков, Л В Лобанова, ТГ Конева, МП Фетисова //Формирование здоровья и профилактика его нарушении у детей сб науч ф —М, 1986 —С 16—21

2 Фетисова, И Н Гормональные нарушения у женщин с привычным невынашиванием беременности [Текст] / ИН Фетисова //Проблемы управления здоровьем матери и ребенка сб науч тр —М , 1987 —С 37—43

3 Фетисова, II Н Результаты клинико-генеалогического исследования супружеских пар с привычным невынашиванием беременности [Гекст] / И Н Фетисова // Прогнозирование и профилакшка нарушений здоровья матери и ребенка сб науч тр —М,1988 —С 94—99

4 Фетисова, И Н Особенности рутинного полиморфизма хромосом в супружеских парах как факюр прогноза течения беременности [Текст] / И Н Фетисова // Критические периоды развития ребенка и профилактика донозологичсских состоянии сб науч тр —М 1989 —С 43—48

5 Фетисова, И Н Роль полиморфизма хромосом по сфуктурному гетеро-хроматипу в этиологии привычного невынашивания беременности [Текст] / И 11 Фетисова // Перинатальная охрана плода и новорожденного при невынашивании беременности сб науч тр —М, 1989 —С 54—61

6 Городков, В И Диспансеризация женщин с риском невынашивания генетической природы [Текст] / В Н Городков, И Н Фетисова//Вопр охраны материнства и детства — 1990 —Т 35, № 9 — С 62—65

7 Фетисова, И Н Клинико-генетические показатели супружеских пар с привычным невынашиванием беременности [Текст] /ИН Фетисова //Профилактика, диагностика и лечение женщин с невынашиванием беременности и оказание помощи их д^тям сб науч тр —М, 1990 — 4 1 — С 34 -38

8 Фетисова, И Н Наследственные факторы в генезе невынашивания беременности [Текст] /ИН Фетисова //Материалы научно-практической конференции, посвященной 130-летию Ивановской областной клинической больницы — Иваново, 1991 —4 1 —С 114—115

9 Фетисова, И II Показатели определения группы риска невынашивания беременности наследственного генеза [Текст] / ИН Фетисова //Материалы научно-практической конференции, посвященной 130-ле1ию Ивановской областной клинической больницы —Иваново, 1991 —4 1 — С 134—135

10 Фетисова, И II Особенности гормональных взаимоотношений вне беременности у женщин, страдающих привычным выкидышем [Текст] / И Н Фетисова // Научные основы формирования здоровой семьи сб науч тр —М, 1991 — С 15—18

11 Фетисова, И Н Прогнозирование нарушений репродукции наследственною 1енеза в супружеской паре [Текст] / ИН Фетисова //Научные основы формирования здоровой семьи сб науч тр —М,1991 —С 56—58

12 Жукова, Т II Преконцепционная профилактика как метод защиты генома человека и снижения репродуктивных потерь в условиях ухудшения экологической обстановки [Текст] / Т П Жукова, И Н Фетисова // Мутагены и канцерогены окружающей среды Проблемы мутагенеза сб тезисов и докладов республиканской конференции —Казань, 1996 —С 13—14

13 Изучение вариабельности размера У-хромосомы у мужчин из супружеских пар с нарушением репродукции и ее связь с уровнем плацентарного альфа-2-микроглобулина в спермальной жидкости [Текст] / НБ Седова, Т П Жукова, Т Г Конева, С С Александрова, И Н Фетисова // Охрана здоровья семьи сб науч тр —Иваново, 1996 —С 27—31

14 Фетисова, И Н Роль наследственных факюров в юнезе нарушения репродуктивной функции в супружеской паре [Текст] / И Н Фетисова, ТП Жукова//Охрана здоровья семьи сб науч тр —Иваново, 1996 — С 32—37

15 Роль цитсненетических исследований у девушек-подростков с нарушением менструальной функции [Текст] /ТП Жукова, ТГ Конева И II Фетисова, ИП Котлова, II Б Седова//Владимирский медицинский вести — 1996 — Т 3—4 — С 205—208

16 Фетисова, И Н Особенности полиморфизма хромосом у женщин с нарушением менструальной функции [Текст] /И Н Фетисова//Владимирский медицинский вести — 1996 —Т 3—4 —С 297—301

17 Фетисова, И Н Результаты клинико-генетического обследования мужчин из супружеских пар с привычным невынашиванием беременности [Текст] / И 11 Фетисова, Л В Посисеева, Т П Жукова // Владимирский медицинский вестн — 1996 — Т 3—4 — С 301—304

18 Фетисова, И Н Полиморфизм хромосом у лиц с нарушением репродукции [Текст] / И Н Фетисова //Медико-биологические, клинические и со-

циальные вопросы здоровья и патологии человека сб науч тр — Иваново, 1997 —С 87—92

19 Седова, Н Б Роль медико-генетической консультации в ор1анизации мониторинга ВПР [Гексг] /НБ Седова, Г В Верхоглядова, ИН Фетисова // Тезисы докладов II (IV) Российского съезда медицинских генетиков — Курск, 2000 — Ч 2 — С 170

20 Жукова, Т П Опыт распространения медико-генетических знаний среди врачей [Текст] / Т П Жукова, И Н Фетисова // Тезисы докладов II (IV) Российского съезда медицинских генетиков —Курск, 2000 —Ч 2 — С 198—199

21 Фетисова, И Н Оказание специализированной медико-генетической помощи супружеским парам с нарушением репродукции в условиях консультативно-диагностической поликлиники [Текст] /И Н Фетисова, Т П Жукова // Актуальные проблемы здоровья семьи, общественного здоровья и здравоохранения сб науч тр —Иваново, 2001 —С 144

22 Значение цигогенетических исследований у супружеских пар с нарушением репродуктивной функции [Текст] /ПО Виноградова, И С Коттова, 3 Н Барабанова, Т Г Конева, И Н Фетисова // Актуальные проблемы лабораторной и функциональной диагностики в акушерстве, гинекологии и перинатологии сб науч тр —Иваново, 2002 —С 40—41

23 Фетисова, И Н Роль полиморфизма хромосом в патогенезе нарушения менструального цикла у женщин [Текст] / И Н Фетисова, Т П Жукова // Актуальные проблемы лабораторной и функциональной диагностики в акушерстве, гинекологии и перинатологии сб науч тр — Иваново, 2002 —С 196—198

24 Роль наследственных факторов в генезе пагозооспермии [Текст] / И Н Фетисова, А С Серебрянников, Д Г Почерников, А И Стрельников, М А Липин // Мужское здоровье матер конф — М , 2005 -— С 205

25 Фетисова, И Н Полиморфизм генов глютатион-Б-трансфераз Ml, Т1 при привычном невынашивании беременности [Текст] / И Н Фетисова, Г С Ковалевская // Современные проблемы материнства и детства сб науч тр —Иваново, 2005 —С 176—181

26 Фетисова, И II Полиморфизм генов метаболизма ксенобиотиков при нарушении фертильности у мужчин [Текст] / И И Фетисова, А С Серебрянников, М А Липин //Современные проблемы материнства и детства сб науч тр —Иваново, 2005 —С 146—152

27 К вопросу о роли генетических факторов мужского бесплодия [Текст] / И II Фетисова, Т Г Конева, Ж А Дюжев, М А Липин, А В Гусева // Современные проблемы материнства и детства сб науч тр — Иваново, 2005 — С 142—146

28 Павлова, Н Н Полиморфизм хромосом при малых аномалиях развития сердца [Текст] / Н Н Павлова, Т Г Конева, И Н Фетисова//Современные

проблемы материнства и детства сб науч тр —Иваново, 2005 — С 260—265

29 Серебрянников, А С Некоторые особенности социально-гигиенической характеристики мужчин из семей с нарушенной репродуктивной функцией [Текст] /АС Серебрянников, ИН Фешсова, МВ Кулипша // Современные проблемы материнства и детства сб науч тр —Иваново, 2005 — С 637—641

30 Фетисова, И Н Эндометриоз-ассоциировашюе бесплодие и генетическое тестирование [Текст] / И Н Фетисова, MJI Добрынина, Д М Полумисков //Современные проблемы материнства и детства сб науч тр —Иваново, 2005 — С 323—327

31 Фетисова, И Н Аномалии кариотипа у пациентов с привычной потерей беременности в ивановской популяции [Текст] /И Н Фетисова, Г Г Конева, Ж А Дюжев // Современные проблемы материнства и детства сб науч тр —Иваново, 2005 —С 181—185

32 Иммунологическая загадка беременности [Текст] /НЮ Сотникова, Ю С Лтщпферова, А В Кудряшова, Л В Посисеева, И А Панова, АН Малышкина, ИН Фешсова /Иод ред НЮ Согниковой — Иваново МИК, 2005 —276 с

33 Фешсова, И Н Исследование полиморфизма генов детоксикации, фо-латною обмена и антигенов IlLA-сисгемы II класса в семьях с 11ПБ [Текст] /ИИ Фешсова, Ж А Дюжев // Современные технологии в иммунологии иммунодиагностика и иммунотерапия тез докл — Курск, 2006 — С 111—112

34 Фешсова, И 11 Полиморфизм генов HLA II класса в семьях с привычной потерей беременности [Текст] / ИН Фетисова, МЛ Добрынина Ж А Дюжев // Медицинская иммунология —2006 —Т 8, № 2—3 — С 323—324

35 Полиморфизм генов HLA II класса в семьях с нормальной н нарушенной репродукцией [Текст] / И II Фетисова, Л В Посисеева, МЛ Добрынина, Ж Л Дюжев //Материалы VIII конгресса «Мать и дитя» —М, 2006 — С 547—548

36 Распределение частот аллепей, генотипов и гаплотипов TILA II класса у женщин с птперпротактинемисй и гиперандрогенией [Текст] /ИН Фетисова, Л В Посисеева, МЛ Добрынина Ж А Дюжев //Материалы VIII конгресса «Мать и дитя» — М , 2006 — С 546—547

37 Фетисова, И Н Полиморфизм генов глютатнон-S-транефераз в семьях с первичным бесплодием [Текст] / ИН Фетисова //Медицинская генетика — 2006 — № 11

38 Полиморфизм генов фолашого обмена у женщин с первичной привычном потерей беременности ранних сроков [Текст] / А С Добролюбов. МЛ Добрынина, Ж А Дюжев, МА Липни, А В Поляков, ИН Фетисова //Вести новых медицинских технологии - 2006 —Т XIII, № 4 —С 60

39 Полиморфизм генов фолатного обмена и болезни человека [Текст] /АС Добролюбов, МА Линии. А В Поляков, ИН Фетисова //Весгн новых медицинских технологий — 2006 —Т XIII, № 4 —С 71—73

40 Значение полиморфизма генов системы детоксикации при привычной потере беременности ранних сроков [Текст] /ИН Фетисова, Т С Бесгоровайная, Л В Посисеева, Ж А Дюжев, А С Добролюбов, СМ Тверская, А В Поляков //Рос вести акушеров-гинекологов -2006 — Т 6, № 5 -- С 23—28

41 Полиморфизмы генов фолатното обмена у женщин с наружным гепи-тальным эндометрпозом [Текст] / М Л Добрынина, Ж А Дюжев, МА Липин, ДМ Полумисков, А В Поляков, ИII Фетисова //Вестн новых .медицинских технологий — 2007 —I XIV, № 1 —С 110—112

42 Полиморфизм генов глюгатиоп-Б-трансфераз Ml, TI и PI у мужчин в семьях с первичным бесплодием [Текст] /Ж А Дюжев МА Липин, А В Поляков, Л В Посисеева, ИН Фетисова //Весгн новых медицинских технологий — 2007 — 1 XIV, №1 —С 112

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АФС — антифосфолипидный синдром

АЭ — анамбриония

В А — волчаночный антикоагулянг

ВПР — врожденные пороки развития

ГА — гиперандрогения

ГПрл — гиперпролактинемия

ГЦ — гомоцистеин

ДНК —дезоксирибонуклеиновая кисло га

ЛГ — лютеинизирующий гормон

11Г Э — наружный генигальный эндомезриоз

11ЛФ — недостаточное ib лютеиновой фазы

НМФ — нарушение менсфуальной функции

НРФ -- нарушение репродуктивной функции

ПААГ — полиакриамидный гель

ПДАФ — полиморфизм длины амплификационных фрагментов

ПДРФ — полиморфизм длины рестрикционных фрагментов

П11Б — привычная потеря беременности

П1JP — полимеразная цепная реакция

ФСГ — фолликулостимулирующий гормон

AZF — фактор азооспермии

GSTs — семейство глутатион-8-трансфераз

HLA — Human Leukocyte Antygen

МНС — Major Histocompatibility Complex

MTHFR — 5,10-ме'шленгетрагидрофолат-редуктаза

MTRR — метионин-синтаза-рсдуктаза

St 1 — первичное бесплодие

НАСЛЕДСТВЕННЫЕ ФАКТОРЫ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ НАРУШЕНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СУПРУЖЕСКОЙ ПАРЫ

Фетисова Ирина Николаевна (Россия)

Диссертация посвящена комплексному клинико-генетическому обследованию супружеских пар с первичным бесплодием и первичной привычной потерей беременности ранних сроков Проводилось изучение кариотипа и особенностей аллельното полиморфизма генов второго класса главного комплекса гистосовместимости (ОЯВ1, И()А1, ООН!), системы детоксикации (С57М1, Г/5777, С5ТР1) и фолатного обмена (МТПГЯ, МТКК) у супругов с нормальной п нарушенной репродукцией Выявлены генетические маркеры предрасположенности к развитию первичного бесплодия, первичной привычной потери беременности ранних сроков, т иперпролактинемии, типерандрогении, наружного гениталыгого эндометриоза, антифосфолигшдного синдрома — у женщин, различных типов патозооспермии — у мужчин Результаты работы могут быть использованы при медико-генетическом консультировании для расчета риска патологии репродукции в супружеской паре

HEREDITARY FACTORS IN VARIOUS FORMS OF DERANGED REPRODUCTIVE FUNCTION IN THE MARRIED COUPLE

Fetisova Irina Nikolayevna (Russia)

The thesis concerns the complex clinical genetic diagnostic study of married couples with initial infertility and initial lecurrent early pregnancy loss The study of karyotype and charactcnstics of allele polymorphisms in HLA II class genes (DRB1, DQA1, DQBI), detoxification system genes (GSTM1, GS1T1, GSTP1) and folate metabolism genes (MTHFR, MTRR) were carried out in spouses with normal and deranged reproduction The author revealed genetic markers of initial infertility, initial recurrent early pregnancy loss, hyperprolactmemia, hyperandrogenism, external genital endometriosis and antiphosphohpid syndrome in women, various types of patho-zoospermia 'n men These results can be used in medicogenetic consu'tation for estimation of leproductive pathology risk in married couples

ФЕ ГИСОВА Ирина Николаевна

НАСЛЕДСТВЕННЫЕ ФАКТОРЫ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ НАРУШЕНИЯ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СУПРУЖЕСКОЙ ПАРЫ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Подписано в печать 28 03 2007 Формат 60x84 1/16 Печ л 2,5 Уел печ л 2,3 Тираж 100 экз

ГОУ ВПО ИвГМА Росздрава 153012, г Иваново, пр Ф Энгельса, 8

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Фетисова, Ирина Николаевна

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ,

1.1, Этиология бесплодия и привычной но!ери беременности

1.2. Цитогенетпчссьне факторы нар\ пенни ремрчд; кции

1.3 Полиморфизм генов системы детокенкации

1.3.2. Краткая характеристики классов гдутагпоп S-трансфераз

1.3.3. Полиморфизм генов семейства глугатнон S фансфераз и предрасположенности, кчаболенанням

1.4. Полиморфном генов фо.чатного никла _ —

1.4.1. Фолатнын цикл и метаболизм iомо!шстеина ___

1.4.2. Патофи IHO.IOI пческое ici'ie i кие гомон не: сипа

1.4.3. Частота встречаемости В причины гипергомоцистсинемии

1.4.4. Строениен полиморфном генов фолаикно обмена_

1.5. Иммунологические факторы нарушения репродукции

1.5.1. Иммуполошчсскпе нарушения при патологии репродукции

1.5.2. Организации i лашюго комплекса п

1.5.3. Роль генов системы

III.А в регуляции материнского иммунного ответа

1.6. А2Р-МИ криле, ICHHH и MVIKCKIV бесплодие _

Глава 2. ОБЪЕМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЖННЩИН И МУЖЧИН СЕМЬЯХ С НОРМАЛЬНОЙ И НАРУШЕННОЙ РЕПРОДУКЦИЕЙ

Глава4 РЕЗУЛЬТАТЫ ЦИГ01Т;11Е1 ИЧЕСКОГО ОЬСЛКДОВЛНИЯ СУПРУЖЕСКИХ ПАР С НОРМАЛЬНОЙ И НАРУШЕННОЙ РЕПРОДУКЦИЕЙ

Глава 5. ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ СИСТЕМЫ ДЕТОКСИКАЦИИ. ФОЛАТНОГО ЦИКЛА И HLA КЛАССА В СУПРУЖЕСКИХ ПАРАХ С НОРМАЛЬНОЙ И НАРУШЕННОЙ РЕПРОДУКЦИЕЙ _ _._ —

5.1. Полиморфизм генов семейства г.гутатпоп S-трансферам

5.1.1. Поли морф! us' [сноп семени I на глс кипой S фансфераз it семьях с нормальной репродукцией первичным бесплодием и первичной привычной потерей беременности ранних сроков

5.1.2. Полиморфном [спои Семене! на глутапюп-Н- фансфераз у женщин с гиперпролакшпемней н гниерандрогенией __

5.1.3. Полиморфизм генов семейс на глутамюн S фансфераз у женщин с наружным сна кип,ним тнломсфиозом —

5.1.4. Полиморфном гении семейства глугатнон S фансфераз у мужчине различными типами патозооспермин __

5.1.5. Полиморфизм ГОНОВ семейства глутатион-S-фансфераз в семьях с привычной потерей беременности пороками развития плода и анэмбриокией _ _ _ — _

5.2. Полпмнрфн ™ генов фола] ною никла

5.2.1. Полиморфизм генов фолатного цикла в семьях с нормальной репродукцией первичным беенлолием и перЕчгчнон нрпаычной потерей беременности ранняя ериков — —

5.2.2. Полиморфизм генов фолатного цикла у женщин с гиперпролактииемней к гиперандрогенией , —

5.2.3. Полиморфизм геи эндометриозом

5.2.4. Полиморфизм гет си!гдромом

5.2.5. Полиморфизм re* беременное I'll пороками развития i

5.3. Полиморфизм генов HLA II класса 18]

5.3.1. Полиморфизм генов HLA II класса в семьях с нормальной репродукцией, первичным бесплодием и первичной привычной потерей переменности ранних сроков „

5.3.2. Полиморфизм генов HLA класса у женщин с гиперпролактинемней и гиперандрогенией

5.3.3. Полиморфизм генов Н1.Л II класса > жешппн е наружным геннтальным эндометриозом

5.3.4. Полиморфизм генов HI,Л II класса у женщин е аншфосфолипидным синдромом -

5 3.5. Полиморфизм генов Н1.А II класса у мужчин с различными типами натозооспермии

Глава б. АНАЛИЗ НАКОПЛЕНИЯ ПОЛИМОРФНЫХ АЛЛЕЛЕЙ ГЕНОВ РАЗНЫХ СИСТЕМ У ЛИЦ С НАРУШЕНИЕМ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУ11КЦИИ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Наследственные факторы при различных формах нарушения репродуктивной функции супружеской пары"

Исследование роли КПШСОВ факторов ГТрН различных формах iHtpyUKtDM репродуктивной функции (НРФ) в супружеской пире я «.гнете я одним га наиболее перспективных нацршений современной генетики и приоритетов областью здравоохранения Актуальность фобкны, о частности, обусловлена ухудшающимися показателями репродуктивного здоровья населения и высокой <юстотоИ бесплодия it невынашивания беременности. Согласно результатам эпидемиологических исследований, частота бесплодия в браке колеблете* от 8 до 29% [60], частота самопроизвольных выкидышей составляет от 15 да 20% от всех желанных беременностей [102], причем на долю 1 триместра приходится от 50 до SO®/» потерь [99]. В настоящее время бесплодие н невынашивание беременное nt ряссыатряпчют как мультифокториальиые заболевания. яиляюшисс* результатом совместного действия множества генетических и средовы* факторов, относительна* роль которых рволична в каждом конкретном случае. Следует скатать, что грань, отделяющая ли два состояния весьма условия, поскольку определенный процент беременностей, прерывающихся нл рлнннч стадиях развития, остается недиагностированный, с другой стороны, я части случаев лечеб!Ю-лмагностическне мероприятия п аферныьиой супружеской парс делают возможным наступленнс желанной беременности» которая заканчивается самопроизвольным выкидышем Бесплодие н(или> невынашивание по сути представляют единый патологический процесс нарушення деторождения рлепшкой степени тяжести, обусловленный в каждой семье индивидуальной подом koii тонких механизмов репродукции: гаметогеие-за, оплодотворения, имплантации, змбрнональното развития

1'азвитне современных методов исследования позволило существенно расширить представление о наследственном генеэс нарушения фертильиостн

Важно помнить, что развитие подавляющего числа фенопшнчккмх пртншюа находится под генным контролем. И нормальный it патологический при так может определяться как одним, так и многими генами ври различной ептии участия факторов внешней среды Следовательно, в генетическую компоненту этнояопш и патогенез» нарушении репродукции необходимо включап. не только эффект генных н хромосомных мутаций, связанных с Изменением непосредственно наследствен кого материки, но и генетические факторы ПрСДрИСПОЛОШВООН, которые при вннмодейстиии со Среловычн, обуславливают развитие целого ряда состояний, в частности, зндокринопзтни. тромбофилни. иммунопатологию, пороки рпзвитня половой сферы, гсннталыгыП ннфактилтм н др. Таким образом, генетический механизм возникновения мультифдкторнальных заболеваний, в частности. различных форм нарушения репродукции, является наиболее сложным, так как и основе сто лежат различные комбинации аллелышх вариантов многих генов, получившие название лютшг сепий. Определена генной сети каждою мультифаьторналыюго заболевания. идентификация в ней центральных генов н ГСВ№молифМЛТОрОп. анализ ассоциации их полиморфизмов с конкретным заболеванием, разработка на этой основе комплекса профилактических мероприятий для конкретного пациента является важной задачей современной МЛЦМКМЙ науки- Генетическое тестирование а досимптоматический период диет возможность выявить существующие пока только в геноме наследственные тенденции к развитию будущих болезней и, исходя из «•ременноговрачебного опытв, наметитьпути их ранней профилактики (II].

Необходимо подчеркнуть» что отсутствие беременности или самопроизвольное прерывание сё по сути дело является следствием разнообразных нарушений репродуктивного здоровья человека. Следовательно, логично предполсяогть участие разных алтельныч варил>гтов генов в генгн" различных нозологнй, ограничивающих женскую или мужскую фертилыюсть

Цель: на основании комплексного клинико-гено нческого обследования супружеских пар с перянчным бесплодием л первичной привычной потерей беременности ранних срокоо оиеннтъ значение генетических факторов при различных формах нарушения репродуктивной функции.

Дм достижсиия поставленной цели определить следующие задачи 1- Изучить спектр причин нарушения репродуктивной функции у женщин и мужчин в супружссйи юрах с первичный бесплодием (St I) и лерянч1юЛ привычной потерей беремеииосги ранних сроки» (ППБ) в популяции Ивановской обдаст 2. Изучить в популяции ИюновекоП области частоту и типы хромосомных аномалий у лиц с нарушением репродукции, Изучить частоту и типы делений в локусе AZF Y хромосомы у мужчин с азоослермиен и

3, Изучим, особенности полиморфизма геноя главного комплекса гнсгосовмссткмости HLA И класса (DRBl, DQAI, DQB1). фолаттюго обмена (гены 5,10'мегияеигеграгндрофолят-релуктазы ЛfTllf-'R и метионкн-еинтэтм-редуктазы \fTRR) н системы детокеикацнн (гены семейства оутатнон-S-траисфероз Ml, Т1 и Р1\ в релродуктивио ЩККЫХ супружеских парах н популяции Кпшюккой области.

4. Изучить особенности полиморфизма генол главного комплекса гистосовместкмосш HLA II класса (DRBl, DQAI, DQBI), фолатного обмена (гены 5Л0-мсгилентетрагидрофомТ'реду»ла1ы SfTHFR и метзкмнн-еннтазы-редукпчы MTRR) и системы дюкешешж (гены сеакЛства глутатнон-S-тронсфераз Ml, 77 и PI) в супружеских пария с первичным бесплодием и первичной привычной потерей беременности ранних сроков Определить маркеры предрасположенности к различным формам нарушения репродукции в супружеской nape, а также к заболеваниям, ограничивающим женскую и мужскую фсртнльность. в генах HLA II класса, фолатиого цикла it системы лстоксикаиин; оценить степень их накопления н генотипе как по отдельности, так и в совокупности,

Научная нптина

При исследовании супружеских пар с мруикиюК репродуктивной функцией выявлены маркеры предрасположенное!и к первичному бесплодию и первичной привычкой потере беременности ранних сроков ■ генах снегами HLA II класса, фолитного цикла и семейства глутатнон-5-трансфсраз как по отдельности, тих и в их совокупности. Установлена ассоциация между наличием п генотипе женщины нткофункцноНАлт.ных шмелей ь гене* MTHFR и А/ГЛЯ, аллелей DQA1 0401, DQBI 0401, гаплотипа DQAl-DQBi 0401-040] и р:игиниси первичной привычной потери беременности ран ни л сроков выявлено достоверное увеличение частот низкофункинонвльиых аштелей и генах семейства глутатнон-$-*траисфсраз у мужчин и бесплодных браках. Показано, что совпадение супругов по оллсляы HLA II класса не J ил летен фактором риска нарушения репродуктивной функции в супружеской паре.

Устном»» емть между особенностями генотипа (полиморфизм генов системы HLA II класса. фолатного цикла и семейства глупгтион-8-трансфераз> и развитием определенных нозологических форм, ограничивающих женскую и мужскую фертнльноегь эндо крина пвтнЛ, наружного геннтального эидомстрноза (НГЭ), вшжфосфолииидного синдрома (АФС) у женщин, ратных тиной патозооспсрмни у мужчин. Показано, ■по разные ашкльные варианты геиоп семейства глутатиои-Еи-тронсфераз (MI, Tl. Pi), фолотного цикла (WHFR н ШИК) и HLA системы II класса (DRB/, DQA1, DQBI) ассоциировали с разными заболеваниями

Установлены особей ностн аллельцого полиморфнтмв при роъигчных типах энлокринопатий у Женщин. Покатано, что фактором риска рщвития гнперпролактинемии (ГПрд) * ил*нуга» аллели DQA! 0102» DQB! 0602, генотипы DQA1 0101/0102. DQA1 0102/0201, генотип GSTTI ОГО, сочетание генотипа GSTTIОЮ н аллея* В в гене CSTPI.

Вмяыена связь между развитием у женщины гнперанлрогенин (ГА) и наличием аллелей DRBI Og. DQAJ (МОI, DQBI 0-101, DQBI 0503. гашютнпа DRBI-DQAI'DQBI 08-0401-0401, вллеля MTHFR 677Т » гомо- щИли> гсгсрозKiontov состоянии, сочетания генотипов MTHFR 677Т/- и MTRR 66GI-, а также генотипа GSTMI 0f0 и лялелл С ш гене GSTF4

Установлено, что фактором риска раз-витня нвружного гениталии* о эндометриоза и эилометрмот-ассоширопанного первичного бесплодна ялляется прнсутстмге в генотипе женщины аллелей DQAI 0102. DQBI 0502 и генотипов DQBI 0502/050;, DQBI 030Э/Ш2. Покатано, что особенности полиморфизма геном фолптного цикла и семейство глупггион-S-трансферт (Ait. 77. Pi) не ичеют связи с распитием наружного генитвльного эндомстриои.

Выявлена ассоциация между развитием антнфосфодинид1ЮГО синдрома \ женшин с первичной привычной потерей беременности ранинх сроков и наличием аллеля MTHFR 677Т iv гомо- и тероинотном состоянии, геяотнпа MTHFR 677Т/Т, сочетания генотипов MTHFR 677X1- + AfTRR G6GA, AiTJIFR 677Т/Т + AfTRR ОЬАХл, генотипа 010b'050t в локусе DQAt Роль генов семейства глуптюн-!>-трансфер(» {ML 77. PI) в ратитии аитнфосфолнпидиого синдрома не подтверждена

Показано, что фактором риска развития астснозооепермии является наличие у Мужчины 1СНСГТИПОП GSTMI0/0 н GSTPI В/-- Установлена ассоциация между присутствием аллелей DRBI 01, DQAt 0101. DQBI 0503. ганлотнпа DRBI-DQAI 06-0101. «двойного» нуля в генах GSTMI и GSTl't, аялела GSTP1 В и рашитнеч тяжелых форм пакиоосперыии (олнгоэооспсрмня Ш степени, азооспермия)

Показано, чю фактором риска формирования врожденны* пороков развития (ВПР) у iL'iojii является наличие в генотипе матери иллеля MTHFR 677Т в гомо» или гетерозиготном состоянии, в генотипе опав - «нулевогои аллеля в гене GSTMI. сочетания GSTMJ 0/0 + GS7TI №0. оллеля MTRR 660, генотипа MTRR 66Gi'G. Генетическим маркером предрасположенности к самопроизвольному

Прерыванию береыенностн н анмбрноннн (АЭ) является носнтельстао обоими супругами аллеля MTRR 66G в гетерозиготном состоянии

Основные положения, выносимые на таному Присутствие в генотипе женщины инзкофункииоиальных аллелей и генах 5,!0'мстнлентетрал1дрофолат-редуктаэы н метионин-синтазы-рсдуктазы, аллелей DQAI 0401, DQBI 0401. ГИ1Л0ТЮИ DQAt-DQBl (H01-040I является фактором рнскл развитая первичной привычной потери беременности ранних сроков.

• Присутствие в генотипе мужчины нижофувммонаяышм аллелей в генах сечейства гл>татион-5-трансфераз (Mi, 77, PI) является фактором риска снижения фертилмюстн н развития первичного бесплодия в супружеской паре.

• Наличие у женщины аллелей DQAt 0)02, DQB1 0602, генотипов DQA! 0101/0102 н DQA1 0102)0201. генотипа GSTTI <№. сочетания генотипов CSTTI О'О и GSTPI В,- является фактором риска развития птерпролахтннемнн н нарушения репродуктивной функции

• Наличие аллелей DRBI OS, DQAt 0401. DQM 0401, DQB J 0503, гаилошна DRBl-DQAi-DQBl OB-0401-Q4DI. генотипа JifTJiFR 677Т/-. сочетайня генотипов MTIIFR 67Л7- и МТЯЛ 66G.4 а также генотипов GSTMI О'О н G5TPI С/- у женщины является фактором риска развития пщерамлрогенин и нарушения репродуктивной функции

• Присутствие в генотипе женщины аллелей DQAt 0(02, DQB! 0502 н генотипов DQBS 0502/0502. DQB1 0303/0602 янляется фактором риска развития наружного генитшышго эидомстрноза к шдомстриоз-весоцинрованного первичного бесплодия.

• Наличие М.МЯЯ \tTHFR 677Т. генотипа \TT11FR 677Т/Т. опепмиВ генотипов SfTHFR 677ТА + AfTRR 66G -, SiTHFR 677Т/Т + KfTRR 66/VG. генотипа DQAt 0101 <'0501 у женщины является фактором риска развития аитнфосфодипнлноге синдрома и первичной привычной потери беременной* ранних сроков.

• Наличие у мужчины генотипов GSTMi 0/0 и GSTP1II'- является фактором риска развития астснозооспермии. Присутствие в генотипе мужчины аллелей DftBl 01, DQAl 0101. DQBI 0503. гаиютнпа DRBI-DQAl 06-0101, «днИногм нуля в генах GSTMI и GSTT1, аллеля GSTPI В Является фактором риска развития тяжелых форм патоюоепермнн (апНГОЭООСперыиЯ III степени, мооспермия)

• Наличие у матери генотипа KfTHFR 677ТА; у отца - генотипа GSTXfl 00. сочетания QSTMI Ш + GSTTI 0/0. аллеля МТЯЙ 660. генотипа AfTRR 66G<'G является фактором риска формирования врожденных пороков развития у плоив НОСИТСЯ КГПО обоими супругами аллеля \fTRR 660 в гетерозиготном состоянии является фактором |икка анзмбрнонии.

Практическая шлчшюсть работы

Проведена оценка вклада наследственных факторов в Нарушение репродуктивной функции а супружеской паре. Показана целесообразности исследования особенностей аллсльного полиморфизма генов семейства глутатион'^-трансфераз, фолатиош цикла » системы HLA II класса при различных типах нарушения репродукции, Генетическому тестированию подлежат все семьи с нарушенной репродукцией после исключения аномалии кариотипа у обоих супругов и делений AZF-локуса ¥ хромосомы у бесплодных мужчин Выявленные в настоящем исследовании ассоциации могут быть HCDOJIUOMMU в качестве генетических маркеров предрасположенности к формированию определенных заболевший и патологических состояний, ограничивающих женскую и мужскую фергильность. у женщин зидокрииоплтий, наружного геюгпшшюго эндоыетрнода. ai гтифосфолн П нд и ого синдрома; у мужчин - различных типов патозооспермнн. Результаты работы могут быть использованы при мелико-генетическом консультировании для расчета риска патологам репродукции в супружеской парс. Предложен способ прогнозирования нарушения фсртзыьностн у мужчин По результатам исследования подана одна гаявка иа изобретение (регистрационный номер 2006! 13973 от 26.04,06).

Внслрсннс резулы а то в исследовании

Результаты исследования внедрены п работу акушерской, помологической клиник, консультативной поликлиники, Центра планирования семьи, межобластной меднко-генетической консультации ФГУ * Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. ВН Городкова Рос-здрава», используются в учебном процессе на кафедре акушерства, гинекологии и медицинской генетики ГОУ НПО -Ивановская государственная медицинская академия Росздрявол, Автором самостоятельно проводился сбор перинного материала по теме диссертации, его обработка, анализ VI интерпретации полученных данных, их систематизация, статистическая обработка, внедрение в практику результатов роботы, Все научные результаты, представленные ш рябо-тс, автором получены лтшо. По теме лнссертации опубликовано 42 печатные работы,

Апробяинн результатов исследовании

Материалы диссертации нредегавлеиы и доложены на Научно-практической конференции, посвященной 130-лети» Ивановской областной клинической больницы (Иваново, 1991): Российской конференции «Мутагены и канцерогены окружающей среды Проблемы анти мутагенеза» (Казань, 1996); Научно-практической всероссийской конференции, посвященной 70-лети» со дня рождения основателя институте, медужеиного деятеля науки РФ, профессора В.Н, Городкова {Иваново, 2002). Российской научно-практической конференции «'Современные технологии d иммунологии: иммунодиагностика и иммунотерапия» (Курск, 2006>-. X Всероссийском форуме с международным участаем нм^ академика В .И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург. 2006); VIII Всероссийском научном форуме «Мать и днт«» (Москва, 2006).

Шьем и структура диссертации

Диссертация изложена на 277 страницах машинописного текста, состоит in введения, обзора литературы, четырех пав собственных исследований, заключения, выполов и практических рекомендаций, иллюстрирована 63 таблицами, 24 рисунками. Б]!блнографи1 содержит 341 источник: 127 отечествениы»; и 2JJ иностранных.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Фетисова, Ирина Николаевна

ВЫВОДЫ

L В бесплодных браках у женщин гормональные нарушения имеют место в 53.0% случаев, наружный генитальный эндометрноз — в 39,1%; при первичной привычной потере беременности ранних сроков у женшин зидокрииопотин наблюдаются в 56,8% случаев, антифоефолнпидный синдром — 31.1%. У мужчин в бесплодных браках в 63,9% случаев и в семьях с ППБ в 42,5% имеет место нарушение процесса сперматогенеза; наиболее распространенной формой плтозооспсрмии является астснозооспермия, тяжелые формы патоюоепермни (азооспермия, олнгоэооспермкя III степени) имеют место только у мужчин в бесплодных браках.

2. В бесплодных браках в популяции Ивановской области у мужчин численные аномалии карнопгпа составляют 6,3%. Азооспермия в 22,7% обусловлена геномными мутациями, в 4,5% случаев — делецией AZF локуса Y хромосомы. Среди пациенток с ППБ 9.0% женшин ЯВЛЯЮТСЯ носительницами сбалансированных трлнедокаций Вариант 9ph можно отнести к фактором риска развития патологии репродукции.

3. Совпадение супругов По аллелям HLA [| класса не является фактором риска нарушения репродуктивной функции в супружеской паре. Установлена ассоциация между наличием в генотипе женщины ннткофуикцнонхтьных аллелей в генах \fTHFR и MTRR, аллелей DQ.41 0401, DQBl 0401. гвплотнпа DQA1-DQBI 0401-0401 и развитием первичной привычной потерн беременности ранних сроков. У мужчин и бесплодных браках наблюдается достоверное увеличение частот ннкофункшюналъных аллелей в генах семейства тутион-в-траисфераа.

4. Фактором риска развития пнкрпролактииечин является наличие в генотипе женщины аллелей DQAI 0102, DQBl 0602. генотипов DQA! 0101/0102 и DQAI 0102/0201, генотипа GSTTI 0/0, сочетания GSTTI 0/0 и GSTPI В/-. Установлена ассоциация между развитзкм гипсрандро»енни и наличием в генотипе женщины аллелей DRBI 08. DQAI 0401, DQBI 0401. DQBI 0503, «плотина DRBI-DQA I-DQB I 08-0401 -0401. генотипа MTHFR 677ТУ-. сочетания генотипов MTHFR 67717- и MTRR 66GA, а также GSTMI 0/0 и GSTPI СI:

5. Фактором риска развития наружного генитального ИЦбИПрмп и эиломегриоз-асеошшрованного бесплодия является присутствие в генотипе женщины аллелей DQAI 0102. DQBI 0502 и генотипов DQBI 0502/0502, DQBI 0303/0602. Смзи между особенностями полиморфизма генов фолатного никла и семейства глутатион-Б-трансфсраз с развитием наружного генитального эндомстрноза не выявлено.

6, Выявлена ассоциация между развитием антифосфолнпидного синдрома у женщин с привычной потерей беременности н наличием аллсля MTHFR 677Т, геногнпа MTHFR 677Т/Г. сочетаний MTHFR 677Т/- + MTRR 66GA. MTHFR 677ТЛ" + MTRR 66A/G, генотипа DQAI 0101/0501. Роль генов семейства глутатнон-Б-траисфсраз в развитии антифосфолнпидного синдрома не подтверждена.

7. Фактором риска развития астс1юзооспсрмии яатяегся наличие у мужчины 1чжотипов GSTMI 0/0 и GSTPI В/-, Установлена ассоциация между присутствакм аллелей DRBI 01, DQAI 0101, DQBI 0503. гаплотнпа DRBI-DQAI 06*010], «двойного» нуля в генах GSTMI н GSTTI, адлеля GSTPI В и развитием тяжелых форм пвтоадоспсрмни (олигозооспсрмия III степени, азооспермии).

8, Фактором риска формирования врожденных пороков развития у плода является наличке:

- у матери генотипа MTHFR 677Т/-:

- у отца генотипа GSTMI О.'О. сочетания GSTM1 0/0 + GSTTI 0 0, адлеля MTRR 66G, генотипа MTRR 66G/G,

Фактором риска анэмбрионни является носителигтво обоими супругами алделя MTRR 66G в гетерозиготном состоянии

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Выявленные в настоящем исследовании ассоциации можно использовать в качестве генетических маркеров предржположетюсти к формированию определенных ябмпш! и патологических состояний, огриппкмюижх Женскую н мужскую фертильность: у женщин - эндокрннопатий, наружного геинталыюго эндометрии». аигнфоефолниидиого симлромх у мужчин -различных типов штяооспсрмнн. Генетическому тестированию подлежат все семьи е нарушенной репродукцией после исключении аномалия кврнотнпа у обоих супругов я делений AZF-локуса V хромосомы у бесплодных мужчин

Указанные особенности генотипов супругов являются генетическими маркерами предрасположенности к:

• Гипгрпролйкпшемнн уженшян;

Аллелн DQAI 0102 (OR-3,3). DQBl0602 (OR-3.2), генотипы /0101/0102 (OR - 15.6). DQAI 0102/0201 (OR = 15,6). генотип CS7TI 0.'0 (OR ~ 4.1), сочетание генотипов GSTTI 0/0 + GSTPJ ВI- (OR ' 10,8).

• Гиперянлрогекни у женшин:

Аллели DM1 08 (OR ■= 9.5). DQAI 0401 (OR - 8.2). DQBl 0401 (OR =■ 8,8», DQBl 0503 (OR-7.0), гвшютип DRBl-DQAl-DQBi 08-0401-0401 (OR-0.5). вшиун. MTHFR 677T (OR = 2,4), сочетания генотипов MTHFR 677T7- + or - з.о). cstmi ото+gstpi a- <or = 22.0).

• Наружного гсшгтяльиого nuowrpHOiat

Апяеян DQAI 0102 (OR-2,6). DQBl 0502 (OR- 4.0); генотипы DQBl 0502/0502 (OR - 19,4), DQBl 0303/0602 (OR - 9,6),

• Антнфосфолипидного еннлрома:

Геношп DQAI 0101/0501 (OR-5J), аштель MTHFR 677T (OR ~ 2.6). ренегат MTHFR 677T/T (OR = 8.4), сочетания генотипов MTHFR 6777/- + \tTRR 66СУ- (OR - 3.0). MTHFR 677T/T + ATTRR 66A/G (OR - 14,4)

• Асггионмкпсрчин:

Сочетание генотипов GSTMI №0 и GSTPI fr1- {OR - 4,!)

• Олммшмкпсрчни III степени и вюосперчии:

Генотип GSTMI (У'О {OR = 3,7), сочетание генотипов GSTMI О-'О + GS7TIШО (OR = 4JX аллели DRBI 01 (OR**2,9X DQAl 010) (OR - 3.0), DQBj 0503 (OR » 7.7). гаплотип DRBI-DQA I 06-0101 (OR - 7,7)

• Генетическими маркерами предрасположенности формирования врожленных пороков pa ннкни плода является наличие:

- в генотипе матери аллеля MTHFR 677Т (OR - 3,1);

• у отца генотипа GSTMI 0/0 (OR = 5.2), «двойного нулю в генах GSTMI и GSTTI (OR = 63). «меля MTRR 660 (OR = 5Д). генотипа MTRR 66G/G (OR-6.2),

Фактором риска ан>чбрноиин является гетерозиготное иоситеяьсгво аллеля MTRR 66G обоими супругами (OR = 6.1).

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Фетисова, Ирина Николаевна, Москва

1. Агаджанова, A. A. Ann i фос фаятццимЯ синдром при привычном невынашивании беременности (профилактика и комплексная терапия с использованием плазмофереза} Тскст. /А, А Агаджанова^ днсс . д-ра мед наук. М-, 1999.

2. Адамяи, Л. В- Пороки развития матки и влагалища Текст./ Л. В. Адамяи. 8. И, Кулаков, А. 3. Хашукосва М: Медицина, 1998. - 320 с.

3. Айлямазяи, Э, К. Эпидемиология бесплодия в семье Текст. / Э, К, Айламатяк, Т. К, Устникяна, И. Г. Баласацян //Акушерство и гинекология. -1990,-N9.-С,46-49.

4. Аколян, А. В, Иммунологические н нммуногеистичсские аспекты периодической болезни |Тскст| / А. В. Акопян. Л. П Алексеев, P.M. Хаитов '' Иммунолога. -1998-N I С.4 -6

5. Артифексов, С- Б. Биохимическая характеристика спермы больных варикоцелс Текст. / С. Б. Артифексов // Урология и нефрология. 1991. - N 5, -C.50.S2,

6. Афанасьева, И. С. Наследственный полиморфизм глутвтион-S-трансферозы печени человека в норме и патологии Текст. / И. С. Афанасьева,, 13 А Спнцын// Генетика. -1990, -Т. 26, №7 С.1309-1314.

7. Ахмедова, Ш, У. Полиморфизм генов 1ILA II класса у больных инсулин-зависимым сахарный диабетом в узбекской популяции Текст. I Ш. У. Ахмедова, Д А Рахимова Н Иммунология. 2002.- №5.- С.298-300.

8. Баймуродова. С. М АФС и генетические формы тромбофнлии у беременных с гестозаын (Текст} / С, М, Баймурадова, В.О, Бишше, Т £ Матвеева, О.С Аляутдити, J1. И. Патрушев, А. Д Макацарня //Акушерство н гинекология. 2004 - №2 -С. 21-27.

9. Бакиров, Б, А Мояекулярио-гснетичсскиЙ анализ генов ннтерлейкииа б, факторов некроза опухолей и гдутзтион-З-траисфсраил Ml у больных хроническим лимфолейкозом Текст. / Б. А- Бакиров, Э. В Якупова, Д X

10. Калимулдина, О. В. Гринчук, Т- В Викторова // Медицинская генетики 2003 -Т-2,,Кг12.-С.537-540

11. Баранов, В. С. Геном человека и тени «предрасположенности» (Введение в нреднктнвмую медицину) Текст./ В. С. Баранок, Е. В. Баранова, Ц Н. Иващенко, М. В. Асеев. СПб.: Интермелика, 2000. - 272 с.

12. Баскаков, В П. Эндометрнондная болезнь Текст./ В, И. Баскаков, К). В, Цвелев, L Ф. Кира. СПб. 2002.

13. Бесхоровайиав, Г С, Влияние некоторых генетических факторов на нарушение репродукции у человека Текст.,'Т. С, Бескоровайная: дисс . канд. мед. наук. М, 2005. - 89с

14. Беспалова, О, Н, Цитогеиетическис факторы привычного невынашивания (Текст./ О. Н. Беспалова, О, Н. Аржанова // Материалы VI съезда акушеров-гннекологов Казахстан». ■ Адматы, 2000. ■ С Л 28.

15. Беспалова, Q. Н Генетические факторы предрасположенности к привычному невынашиванию беременности ранннх сроков (Текст.' О. Н, Беспалова, О, Н Аржанова, Т. Э. Иващенко и др. // Жури, акушерства н женских болезней. 2001. - №2, - С,8-13.

16. Бесплодный брак Текст. / Под ред Р.Дж- Пспперслла, Б. Халсонп, К. By да. М.: Медицина, 1986, ■ 336 с,

17. Бесплодный брак. Современные подходы к диагностике и лечению / Под ред. В,И Кулакова Текст. М.: ГЭОТАР ■ Медиа, 2005. - 616с.

18. Богданов. Ю. Ф, Мейоз как фильтр хромосомных перестроек (Теист./ Ю Ф. Богданов, О. Л, Коломиец Ч Тез. докл. II Всесоюзного Съезда медицинских генетиков (Алма-Ата). М., 1990, - С 516.

19. Боже домов В. А. , Лоран О-Б. Сухих ГТ Этиология и патогенез мужского иммунологического бесплодна Текст.: часть 1 / В. А, Божедомов, О. Б. Лоран, Г. Т. Сухих //Андрологи* и геннтальиал хирургия. 2001. - №1- -С-72-77.

20. Вахитова, Ю. В. Анал1П полиморфизма гена глутатион-Б-трансферазы Stl а популяциях Волго-Ураяьского региона (Текст) / Ю. В. Вахитова, 3. М. Султанаева, Т. В. Викторова и др7/ Генетики. • 2001- Т. 37, Jfe 2. С- 268-270

21. Волков, Н. И. Бесплодие при наружном генитальном эндомстриозе Текст}' И, И, Волков: дис. д-ра мед. наук, М-, 19%,27, Ворсанона, С- Г- Аномалии половых хромосом при нарушении репродуктивной функции у мужчин: Обзор литературы. JTckct.

22. С. Г, Ворсанова, В. О. Шароиин, Л, Ф, Курило // Проблемы репродукции ■ 1998. Ле2 - С-12-21.

23. Гвепаров, А. С. Клиника, диагностика и отдаленные результаты лечения бесплодия у больных с полишютаиыми яичниками Текст. l А,С. Гаспаров автореф. дне, . л-ра мед. наук. М, 1996.

24. Гинекология по Эмилю Новаку (Текст./ под ред. Дж. Берека, Н.Адашн и П.Хиллард: пер с Опт, М.; Практика» 2002, - 896 с,

25. Говалло. В, И. Иммунология репродукции (Текст. /В. И. Говалло. М : Медицина, 1987.- 304 с.

26. Голубева, Е, Л, Аугоантитела при бесплодии и их влияние на функции сперматозоидов Текст}/ Е, Л. Голубе аа автореф. дне. канд. мед. наук. М. 2000. - 24 с.

27. Горюнов. В. Г Причины и признаки мужского бесплодия Текст. / В. Г Горюнов, Б, И Жнборев, В. В. Евдокимов. Рязань, 1993, - 84 с

28. Громыко, Г. Л. Роль антифосфолипидиого синдрома в развитии акушерских осложнений: обзор литературы Текст. ) Г. Л, Громыко И Проблемы репродукции. 1997. -Л«4, - С. 13-18.

29. Демидова, В- М Патогенез привычного выкидыига Текст./ Е М. Демидова дне, д-ра мед. наук, М-, 1993.

30. Дисанджгава, Ж. Г. Неудачи ЭКО и материнская тромбофияия Текст. / Ж. Г. Джйиджг4№ц В. О, Бинддте И Проблемы репродукции 2005. - Hi5. - С. 41-43

31. Дзеннс, И, Г. Современные пути диагностики и профилактики наследственной недостаточности ЗЬгкдроксилаэы {Текст}/ И Г Дкнис-автореф. дне. д-ра мед. наук. М , 1995, - 53 с.

32. Дмитриева, А, И. Изучение полиморфизмов генов GSTTI и GSTMI у больных раком леших Текст./ А. И. Дмитриева, В. В Новицкий. Н. В Севостьянова и др. // Бюллетен ь СО РАМН 20СМ - № 1< 111). - С.60-62,

33. Жнвотовскнй Л А, Пооуяэдюншя биометрия Тексту Л, А, Животовский. М-- Наука. 1991. - 271 с.

34. Захаров, Л Ф. Генетические исследования в акушерстве и гинекологии Текст. / А Ф. Ъхаров, Н, М. Победннскнй И Вест. АМН СССР- 1982-№6 -СЛ8-24

35. Нващснко. Т. Э. А нал in полиморфных аллелей генов, кодирующих ферменты 1-й и 2-Й фа-ш детокенкацни, у больных зндометриоюм Текст.1 Т '3. Нващснко, Н Ю. Швед, Н Л, Крйчарева И др, Н Генетика 2003, - Т39, №4. - С.525-529.

36. Иммунологическая загадка беременности (Текст. /под ред. Н. Ю. Сотннковой Иваново; МИК. 2005. -276 с.

37. Ншенко, А. И, Эндометрии. Диагностика и лечение Текст./ А. И. Ншенко, Е, А. Кудрина,-М.: ПЮТАР-МЕД, 2002.

38. Калантари. П. Хромосомное исследование мужского бесплодия Текст./ П. Калантари // Генетика. 2003--Т.39, Ш. - С.423-426

39. Калашникова, 1; А- Ассоциация наследственных факторов тромбофилни с невынашиванием беременности у женщин в русской популяции |Текет./ Н. А Калашников», С- Н. Кокаровцева И Медишпккая геиетгаса. 2005 - №8, -С.386-391.

40. Карагеоргнй. Н. М, С-полиморфные варианты хромосом в механизме нарушения эмбрионального развития человека Текст./ Н. М, Kapareopmfi; автореф. лис. канд. мед, наук -Томск, 1994. 22 с-.

41. Каретникова, Н. А, Теистические факторы в этнологии привычного выкидыша и врожденных пороков развития неясного пенеза TeKcrj/H. А. Каретникова; анторсф. лис . квид. мед. наук.- М., 1980.

42. Каретникова, Н, А. Значение медико-генетических исследований при привычном невынашивании беременности Текст./ Н. А Каретникова // Акушерство н гинекология. -1988 №2, - С, 16-19.

43. Кариаух, В, И. Варикоцслс и бесплодие у мужчин (особенности состояния репродуктивной функции и диагностика заболевания) Текст.'

44. B. И. Карнвух: автореф дне. канд. мед. наук- — М, 1986. 22 с.

45. Карпухин, К, В. Некоторые вопросы патогенеза вторичного бесплодия у мужчин Текст./ И В. Карпухин //Акушерство и пнюкология. 1987. • N9.1. C,58-59,

46. Кириллова, Е, А. Цнтогенстлчсские особенности хорноил при неразвивающейся беременности Текст./ Е. А, Кириллом, С, Г Воронова. Н. М, Дышева и др, // Акушерство н гинекология 2006. - №2. - С.22-24,

47. Ковалева. Н. Ю Ассоциации акроиентрических хромосом у родителей детей с бодетнью Дауна Текст./ Н, Ю Ковалем /I Цитология- 1991. ■ Т. 33, №б.- С. 3-11,

48. Коволевския, Т. С. Генетические аспекты невынашивания бсремешюсти Текст./ Т. С. Ковалевская, Н, Н. Вассерман, С. М Тверская и др. it Медицинская генетика 2003. - Т.2, JfeJ 1. — С .480-484.

49. Козлова, С И. Наследственные синдромы и медико-генетическое консультирование Текст./ С И. Козлова, Н. С- Дсмихова, Е. М. Семанова и др. -М : Практика. 1996. С. 305.

50. Коненков, В, И Медицинская и экологическая нммунопягстикв |Текст./ В. И, Коненков. • Новосибирск. 1999. • 250 е.

51. Коротытииа, Г. Ф. Спектр мутаций гена cftr у больных муковнецидозом из Башкортостана (Текст}'1 Г. Ф Коротытииа, Т В Викторова. Т. О- Иатиенко н др. // Молекулярная биология. 2Q03 - Т, 37, № 1, • С 61 -67.

52. Кулаков, В. И. Репродуктивное адерошье населении России Текст. / В. И. Кулаков //Акушерство и гинекология. 2002- - St 2. - С- 4- 7

53. Кулешов, Н. П. Частота возникновения и судьба хромосомных аномалий в популяциях человека ТекстJi1 Н. П. Кулонов: лнсс . д-ра мел наук. ■ М f 1979-312 с

54. КулинскнЙ, В. И ОбепрСЖНМНКе хсеиобнотиков Текст.'' В, И. Кулинский U Соросовскнй образовательный журнал. -1999. №1.- С.8-12.

55. Курило, Л, Ф- Структура наследственной патологии половой системы при обследовании пациентов с нарушением репродукции Тексту Л. Ф. Курило, JT. В. Шнлейко. Е В, Мхнтарова и др. //Инвапиднзаиня Наследственные заболевания; тез. копф. М.1997.

56. Курило, Л Ф. Возможности цитогенстичсского исследовании чеГима при мужском бесплодии (Текст./ Л. Ф. Курило // Цитология и генетика. 19891. Т.23, №2. С.63-70.

57. Корило, Л. Ф. Оценка сперматогенез по незрелым половым меткам эякулята Текст./ Л- Ф. Курило, В. ЛДубинская . Т. В- Остроумова и др // Проблемы репродукции. 1995.-J&, 3. - С.33-38.

58. Курило, Л Ф. Структура наследственных нарушений репродуктивной системы Текст./ ЛФ-Курило, Л. В. Шнлейко, Т. М, Сорокина и др Л Вестн РАМН 2000 - №5 - СЭ2-36

59. Курило, Л- Ф- Структура хромосомной патологии среди пациентов с нарушением репродуктивной системы Тскст./ Л Ф.Курило, И В Шаповал, В П и др. // Дубинская Российский съезд медицински генетиков. М , 1994. ■ С85.86.

60. Макацарии, А. Д.- Тромбофилнчсекне состояния в акушерской практике Текст./ А. Д- Макацарии, 8. О. Ьннаак- М : Rtuso, 2001

61. Мари, P. Ehhudoh человека (Текст./ Р. Мары. Д Греннер, Л- МсЛсе, В Родуздл. М.: Мир, 1993- - С. 303-305.

62. Марона. Е. И. Гнпсрпролакгннемии v жешцнн и мужчин (Текст.' Е. И. Марова, В- В. Ваке, Л. К. Дзсряиова. М,, 1999.- С. 18

63. Мнхайлин, Е, С Встречаемость некоторых наследственных тромбофнлий при гестозе и преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты Текст.®. С. Михайлнн // Медицинская генетика- 2005, *№5.

64. Мухин» Н. А. Гипергамсщистеннсмня как фактор риска развит* заболеваний сердечно-сосудистой системы (Текст)/ 1-L А. Мухин, С. В. Моисеев, В. В. Фомин //Клиническая медицина- 2001. ■ - С.7-14.

65. Назаренко, С, А. Изменчивость хромосом и развитое человека (Текст)/ С. А Назаренко .'/Томск: Томский университет, 1993. 200с

66. Наарснко, Т. А Женское бесплодие, обусловленное нарушением процесса овуляшен (клиника, диагностика, лечение) (Текст./ Т. А. Назаренко. автореф. лнсс- . д-ра мед, наук.- М, 1998.

67. Насонов, Е. Л. Антифосфолкпидный синдром (синдром Hughes): 10 лет изучения в России (Текст)/ Е, Л. Насонов, 3. С. Алскберова, Л. А, Калашникова и др. //Клиническая медицина. 1998. - № 2. — С. 4-11.

68. Недоношенность Текст./ под ред, ВХ. Виктора, Э,К Вуда: пер. с англ-М., 199179, Несяева, Е В, Нерюшнюшиен беременность: этиолопи, патогенез, клиника, диагностика /Текст)/ Ё, В Несяева // Акушерство н гинекология. -2005, J&2, - С, 3-7.

69. Никитин, А. И Гормоноподобные ксенобиотики и репродуктивная система Текст./ А. И. Никитин // Проблемы репродукции. 2002 - ,4. 2-- С.5-15,

70. Овсянникова. Т, В Эндокринное бесплодие в браке (Текст}/ Т. В. Овсянникова, И. Е. Корнеева, Т. В. Тер-Аванссов: практическое руководство ■ М-: Медицина, 1997. 280 с,

71. ОковитыЙ, С- 8, Клиническая фармакологи* антнокекдантов /Текст)С. В Окоаитый // ФАРМиндскс-практнк 2003 - Вып,5,- С,85-111.

72. Плсйфер, Дж, Наглядная иммунология (Текст): пер. с аитлУ Дж. Плейфер. М-; ГЭОТАР - Медицина, 1999.

73. Побединский, Н. М Стероидные рецепторы нормального шдомстрия (Тексту Н. М Побединский, О, И Балтуцкая, А. И. Омельяненко /,' Акушерство и гинекология 2000.-J63.-C, 5-8.

74. Я5. Попова. С Н. Полиморфизм глупгпюн- S-трансфераз Ml и Г/ в ряде популяций России (Текст./ С- Н Попом, П, А, Сломинскнй. С. Н. Галушкин и др. II Генетика. 2002,- Т.38. №2, ■ С, 281 -284.

75. Поснсссва, Л. В- "Новые" плацентарные белки в оценке нормальной и иарушешюй репродукции человека Текст}/ Л. В. Поснсссва: днсс . д-ра мед наук. Иваново. 199 Г - 326 с.

76. Потин, В, В. Гонвдотропная недостаточность у мужчин с нарушением сперматогенеза Текст)' В, И Потнн, Т. ИУстинкииа Н Проблемы эндокринологии. 1989. Т.35, N2. - С.3-6

77. Предложение по стандартизации методов учета полиморфизма хромосом человека'1 Институт мед. генетики АМН СССР, М , I976, ■ 36 с.

78. Прокофьева-Бсльговская, А. А. Гетерохроматические районы хромосом Текст})' А. А. Прокофьева-Бсльговская. М Наука, 1986 - 431 с.

79. Прохоренко, А. В. Комплексуй характеристика этнологических и патогенетических факторов мужского бесплодия н их взаимосвязь Текст. /

80. A. В. Прохоренко; лис канд. мед. наук ■ Днепропетровск, 1990. 232 с.

81. Пшеничникова, Е. Я- Бесплодие в браке Тексту Е. Я Пшеничникова.-М.1 Медицина, 1991. 320 с.

82. Раисова, А, Г, Невынашивание беременности у жен шин с пнюраидрогснней Текст}/ А. Г. Раясоан.-лмес. д-ра мед. на}*. ■ М-, 1990.

83. Райе, С. X. Биологические эффекты токсических соединений Текст./ С. X, Рлйс. Л. Ф, Тулеева: куре лекций, Новосибирск. 2003, - 208 с,

84. Репродуктнвзмя эндокринология Текст.: а 2 т. Пер. с англ. / Под ред. С-С.К. Йена, Р Б. Джаффе. М.г Медицина, 1998 - 704 с

85. Руководство по акарологии Текст. /под ред. О-Л. Тнктиискмо. Л.: Медицина, 1990-416 с.

86. Руководство по эндокринной гинекологии Текст. / под ред. Е. М. ВихляевоЙ -М Медицинское информационное агентство, 1997. 768 с.

87. Савельева, А. П. Структура хромосомной патологии среди пациентов с мужским бссплсда«ем и патозооспермней TckctJ/A П. Савельева- автореф дис, коид. мед. наук. М„ 2001 .-31с.

88. Серое, В. Н. Гинекологическая эндокринология Техст)'' В. Н, Серов,

89. B, Н Прияспская, Т В Овсянникова М МЕДпрссс-ннформ, 2004. - 528 с.

90. Серов, В. И. Руководство по практическому акушерству Текст. I В. Н. Серов. А. Н. Стрижаков. С. A. SlapiatH.- М., 1997,

91. Серова, Л, Д. Иммун ал огнческн й HLA-статус у женщин с привычным невынашиванием н бесплодием неясного геием (Текст) / Л, Д. Серова и др,г пособие для вртчей М., 1997.

92. Сидельникова, В. М- Привычная потеря беременности (Текст.'1

93. B. М. Сидельникова ■ М: Триала-Х, 2002,- 304 с.

94. Сидоров. А, Н Роль «мужскою» фактора при бесплодии и невыиашивлини беременности в супружеской парс (Текст./А Н. Сидоров; днекайл мед. наук Иваново, 1997.

95. Сломннскнй, П. А. Полиморфизм глютатнон-Б-трансфераз разного типа в различных популяциях из России Текст./ П. А. Сломннскнй, С, Н Попова.

96. C. Н. Галушкин //Первое международное рабочее совещание «Биоразнообразие и динамика экосистем Северной Евразии: информационные технологии и моделирование» (WITA-2D01): тез. докл. Новосибирск, 2001

97. Спиридонова, М, Г. Популяционнос исследование частоты полиморфизма С677Т гена метклектстрагилрофолвт-рсдуктазы Якутии Текст./ М. Г. Спиридонова, В. А. Степанов. Н. Р Максимов и дрЛ Генетика. 2004. -Т. 40, Л-5,-С. 704-708.

98. Спиридонова, М. г О роли полиморфных вариантов гена 5.10-метилентстрапщрофолатредуктазы (sfthfr) в патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний (Текст. ' М Г. Спиридонова. В. А Степпнов, В. П. Пузырен '/Клиническая медицина 2001. ■ №2. - С-10-16

99. Спиридонова, М. Г. Анализ генных комплексов подверженности к коронарному атеросклерозу Текст}' М, Г, Спиридонова, В- А. Степанов,

100. B. П. Пузырен и др Л Генетика. 2002. - Т. 38, №3. - С, 383-392

101. Тарасеико, О. А- Полиморфизм генов глютвтион-К-транефераз Ml и Т1 и риск возникновения плацентарной недостаточности Текст./ О. А Тарасеико, Т. Э.Иващснко, О, Н Беспалова и дрЛ Медицинская генетика- 2005 ' №6.1. C.274.

102. Тер-Аванесов, Г. В. Андрологичесхне аспекты бесплодного брака Текст.' Г, В- Тер-Аванесов: практическое руководство.- М-, 2000. ■ 68 с.

103. Тер-Аванесов, Г, В. Эндокринное бесплодие у мужчин Текст. / Г. В. Тер-Аванесов, Т. В, Овсянникова, В. И. Кулаков и др. / Проблемы репродукции ■ 1997. -ЯгА.-С 30-37

104. Тструашвнлн, H. К Диагностическая и прогностическая значимое!ь определения шггокииов у больных с привычным невынашиванием беременности (Тексту Н. К. Тструашвнлн: дне. . канд. мед. наук М-, 2000.

105. Устинкина, Т. И. Этиологическая и патогенетическая структура бесплодия в семье Текст./ Т. И- Устинкина: авгореф. дксс. . д-ра мед. наук. ■ Л.,1990 -36 с.

106. Фетисова, И. Н, Кдиинко-днапюстичсское жвчение наследственных факторов привычного невынашивания беременности в супружеской паре Текст.; автореф, лис. канд мед иаук,- Иваново. 1990 22 с

107. Фролова, О. Г. Основные показатели деятельности акушсрско-пtнекологической службы и репродуктивного здоровья Текст. / О. Г. Фролова. 3.3. Токова // Акушерство н гинекология. 2005, - №1. - С. 3-6

108. Хаитов, Р М. Система генов HLA н регуляция иммунного ответа Текст./ Р. М-Хаитов. Л. П. Алексеев Н Аллергия, астма и клиническая иммунология. -2000. Jft 8. - С.7 -16

109. Цвсткова, Т. Г. С-полиморфнэм хромосом в группе супружеских пар с отягощенным акушерским анамнезом | Текст|/Т- Г- Цвсткова // Полиморфизм хромосом у человека. М , 1981. - С. 163-175.

110. Цвсткова, Т. Г. Экстремальные варианты полиморфизма коротких идеч акроцентрических хромосом у пациентов медико-гснсгнчсекнх консультации Текст.,Т. Г. Цвсткова, И. А Мандрон, Н, В Косякова и др. // Медицине*»» генетика 2005, -Ш. ■ С 286,

111. Черных, В. Б- Комплексное клнннко-генетнческое обследование пациентов с азооспермией нлн олигозооспермией неясной этиология |Текст| / В, Б, Черных, Л Ф. Курило. И К. Гоголевская и др. II Проблемы репродукции 2001. - Т.7, №3. - С. 58-63,

112. Черных, В Б V-хромосома, AZF-микродедсцнн н иднопатнческое бесплодие у мужчин: обзор литературы Тексту В. Б. Черных, Л. Ф. Курило. А. В. Поляков /I Проблемы репродукции 2001 • Л5. - С 47-58.

113. Черных, В Б. Мнкродслеииоиный анализ AZF-локуса ft рачках комплексзюго клннико-генетнчсского обследования мужчин с азооспермией и олнгозооспермней Тексту В, Б, Черных: лисе. канд. мед наук. М, 2002. -145 с,

114. Шакава, В. А. Клнннко-цигологнческис if гормональные 1келсдовдння при андродогическнх заболеваниях Текст./ В. А. Шанлка дис, канд. мед. наук. Л, 198», - 223 с.

115. Шангареево, 3. А, Анализ полиморфизма ненов, участвующих п метаболизме зтанода, у лнц с алкогольной болезнью печени Текст. / 3. А. Шангареева, Т. А. Виктором, Х- М Иасыров и др. // Мелишигсквн генетика, 2003. - Т.2, № 11 - С 485-490.

116. Шарофисламова. Э. Ф. Полиморфизм генов глутатнон S-трансфсраз МI и Р! у больных зндометриоюм из Башкортостана (Текст. / Э, Ф, Шлрафисламона, Т В. Викторова, Э. К. Хуснутдннова //Медицинская генетика. 2003. - Т.2,ХеЗ. -С. 136-140

117. Е26. Швед, Н. Ю. Ассоциация аллсльных вариантов некоторых генов детоксикацни с результатами лечения больных зндометриоюм Текст. / Н. Ю, Швед, Т. Э- Нващснко, Н. Л. Крамарсва и др. II Медицинская генетика -2001-Т.1.3А5.-С.242-245,

118. Г27. Ярилни, А. А-Основы иммунологии ТекстJ/ А, А. Ярилнн. М-Медицина, 1999 - С.216-217.

119. Adler, V. Regulation of INK signaling by CSTp (Text./ V Adler et в1 // EMBO J. 1999 - Vol, 18.- P. 1321-1334

120. Advances in Drug Metabolism in Man Text./ F-d. G-V. Pacific i, G.N. Frocchia. Brussels; Luxembourg" litirop, Conlis,. 1995. - 834 p,

121. Anderson, М- У: autosome translocation* and mosaicism in the aethiology of 45,X maleness- assignement of fertility factor to distal Yqt 1 |Tex.t| / M Anderson, D, C, Page. D. Pettay et al. // Hum Genet -1988 Vol- 79 - p.2-7,

122. Ando. S. The evaluation of free L-eamiiine, »nc and fructose in the seminal plasma of patients with varicocele and normozoospetrnia (Tcxiy S. Ando, A. Carpino, M. ButTone WAndrologia. 1989. - Vol.21. N1. - E* 155 -160

123. Arrighi. F. E. Localisation ofhdcrochromniin in human chromosomes (Text) / F- E. Arrighi, Т. C. Hsu //Cytogenetics 1977.- VoJ.10, N.2. - P.SI-86

124. Baby. К. А. CYPlAJ, GSTMI arid GS7T1 genetic polymorphism is associated wrlh susceptibility to polycystic ovaries in South Indian women Text. / K. A Babu, K. L. Rao, M. K. Kanakavalli el al. II Reprod Bioroed Online,- 2004.-Vol.91. P, 194-200.

125. Beer Л.Ел Kwak J-YH Reproductive Medicine Program. Finch University of Health Science Text. / A. E. Beer, J. Y, It, Kwak. Chicago, 2000 - % p

126. Billington, W. D. The nature and possible ftmetkins of MHC antigens on the surface of human trophoblast Text. f W. D. Billington //Reproductive immunology.- New Delhi: Narosa Publishing House, 1999, -P.71-77.

127. N7. Board, P, G, Isolation of a cDNA clone and localization of human glutathione S-transfctase 2 genes to chromosome band 6pl2 Text. / P. G Board, G. С Webb it Proc Nat. Acad. Sci. -1987, Vol,84, - P.2377-2381.

128. Board. P. C. Zeta, a novel class of glutathione transferases in a range of species from plants to humans Text) / P, G Board, R. T. Baker, G. Chelvanayagam et al Biocheifl. J. 1997.- Vol.328 - P 929-935

129. Board, P. G. The human Pi class glutathione transferase sequence at I2ql3-ql4 is a reverse-transcribed pseudogene (Text. / P. G, Hoard. M. Coggan, D. M- Woodcock//Genomics. -1992, Vol. 14. - P.47CW73.

130. Bora, P. S- Molecular cloning, sequencing, and expression of human myocardial fatty acid ethvl ester synthase-III cDNA (TcxtJ I P. S Bora, N. S. Bora, X Wu eL Л/t i Biol Chem. 1991. - Vol 266, - P 16774-16777

131. Botto, I. D, 5.10-Methylcnetetrahydrofolatc reductase gene variants and congenital anomalies: a HuGE review TcxtJ/ L, D, Bolto, Q. Yang tt Arn. i, Epidemiol, 2000. - Vol.151- - P.862-877

132. Boue, )- Retiospcctivc and prospective epidemiological studies of 150O karyotyped spontaneous human abortions Text) / J Boue, A. Boue, P. Lasar // Teratology- 1975,- Vol. 12. №. I. P, 11 -26.

133. Boue, J- The epidemiology of human spontaneous abortions with chromosomal anomalies (Text) / J. Boue, A Boue, P- Lasar/ Aging gametes.-1975- Vol,12, №1 .P 330-348

134. Boue, I. Association of pericentric inversion of chromosomc 9 and reproductive in ten unrelated ftun(?r« Text. i J. Boue, J. L. TmJfemite, P. Haxacl-Massieux et al tt Human genetic.- 1975-- Vol.30, №3 P-217-224

135. Carless, M. A. The GSTMI null genotype confers an increased risk foe solar keratosis development in an Australian Caucasian population (Text. / M, A. Carless. R. A- Lea, J- E Ciirran et al. 113. Invest. Derm. 2002. - Vol. 119. - P. 1373-137».

136. Carisen, E. Evidence of decreasing quality of semen during the past 50 years (Text.E. Carisen, A, Giverman, N. Keiding el al // Br Med- J ■ 1992. Vol,305, -P.609-613.

137. Carp H, Prevalence of genetic markers for thrombophilia in recurrent pregnanes loss. (Text. /Н. Carp, O. Salomon, D. Scidman, R Dardik et al. // Hum. Reprod 2002, Vol 17(6), - P. 1633-1637,

138. Recommendations and protocols for prenatal diagnosis /Eds, J. M. Сагтсга, G, C- Di Renzo. Barcelona. 1993, - 52p.

139. Caslro, R. 5,10-MethyleiMtcirahydrofolate reductase (MTHFR) 677C-T and 1298A-C mutations are associated with DNA hypomethylation (Letter) Text. / R Castro, I Rivera, P Ravasco et-aU/ J Med Genet, ■ 2004. Vol.41, - P454-458

140. CJian. Q K Single nucleotide polymorphism of pi-class glutathione s-tninsferase and susceptibility to endometrial carcinoma |Text. / Q K, Chan, U. S, Khoo, H, Y. Ngan el al. //Clin Cancer Res. -2005, Vol.15 P 2981-2985

141. Chandley, A. C. The chromosomol basis of human infertility Text) ' A. c. Chandley t!Br. Med. BuH. /979. - VofJ5. - P. ISM86.

142. Chen, S, S Polymorphisms of glutathione S-iramferase Ml and male infertility in Taiwanese patients with varicocele Text. / S. S. Chen, L,S. Chang, H.W Chen Hum Reprod 2002- - Vol-17. - P.718-25,

143. Chen, C.-L Simultaneous dtaracterwiaijon of glutathione S-transfcrase AII and Tl polymorphisms by polymerase chain reaction in American whites and blacks Text. / C--L, Chen, Q. Liu, M, V. Relling U Pharmacogenetics . 1996. - Vol- 61. P 187-191,

144. Choi, Y M GSTAfl and GST77 gene polymorphisms and susceptibitiiv to endometriosis in a Korean population Text. 1Y. M Choi, T. J. Kim, S. H Kim ct at. // Sttrit. Fertit.- 2003- VqJ.80, Suppl.3.- P.224.

145. Choudhury, S. R. Human reproductive failure I: tnrnnmolojtieal factors Text. / S, R. Choudhury, L, A. Knapp //Hum. Reprod Update. 2000.- Vol-7. - №2. - P. 113134.

146. Cooke. H. J. A murine homologue of «he human DAZ gene is autosome and expressed only in male and female gonads Text. / H i. Cooke, M. Lee, S. Kerr ct •IJl Hum, Mol- Genet- 1996. - Vol. 5. - P. 513-516

147. Coulam, C. Update on recurrent pregnancy loss Text./ C. Coulam // Am. I Reprod. Immunol. 2004. -Vol 51, - P.459-460.

148. Cristtanson, О. В Л fresh look (tl the causes and treatments of recurrent miscarriage, especially its immunological aspects Text. / О В. Cristianscn // Hum, Reprod Update- 1996, - Vol. 2, № 4, - P.271,

149. Cristiansen, О. B. HLA class II and manivan-binding lectin gene polymorphism in recurrent miscarriage Text. / О. B. Cristianscn, С Krue, R. Sreflensen et al AmJ.Reprod-lmmunol. -2004, -Vol.5!.- P.4S9,

150. Dc Vries, J. W, Reduced copy number ofD.4Z genes in subfcrtile and infertile men Text) / J. W, De Vries, M. J. Hoffer, S. Repping « al. /I Fertil Stent. 2002. -Vol- 77.-P. 68-75.

151. Delbridgc, M. L The candidate spennatogcnesis gene RBMY has a homologue on the human X chromosome (Text. / M, L. DeJbrrdge, P. A. Lmgcnfcllcr, С M.Disteehe el al, //Nal Genet 1999. - Vol. 22 - P, 223-224

152. Demuth, K. Opposite effects of plasma homocysteine and Ihc mcthylenetetrabydrofolate reductase С677Г mutation on carotid artery geometry inasymptomatic adults Text. / К Demuth, N. Moatti. О, Honon et.al.// Ibid- 1948 Vol, 18,- P. 1838-1843,

153. Detitt, Z !-. Polymorphism of glutathione S-transfcrase mu I and tlwia I gem» and hepatocellular carcinoma in so nil ten» Guangxi, China Text. / Z. L. Deng, V. P. Wei. Y. Ма II World J Gastroenterol 2005, - VoU I, - P272-274,

154. O. Dilley A- Mutations ш the factor V, prothrombin wid SfTHFR genes are no4 risk factors for recunem fetal loss Tcxtji1 A. Dilley, C. Benito,W. C- Hooper et al // J. Matcm. Fetal. Neonatal. Med. 2002, - Vol. 11(3). - P 176-182

155. Dirr, H- W. X-ray crystal structures of cytosolic glutathione S-transFerascs. Implications for protein architecture, substrate recognition and catalytic function Text. IH. W Din, P. Reinemer. R. Huber // Ew У Biochem. ■ 1994. Vol.220. -P.645-661,

156. Dulhunly, A. The glutathione transferase structural family include* a nuclear chloride channel and a ry anodine receptor calcium release channel modulator Text./ A. Dulhunty, P. Gage, , S. Curtis d alJ/ J. Biol. Chcm. 2001. - Vol 276. - P 3319-3323

157. Edwards, R. G. On the origin and frequency of V chromosome deletions responsible for severe male infertility Text. / R, O. Edwards, С. E- Bishop H Mol. Hum Re prod 1997, - Vol 3. - P.549-554.

158. Edwards, R The role of glutathione transferases in herbicide metabolism Text., //In: Herbicides and their mechanisms of action /Eds. A, H. Cobb, R C. Kirkwood. * Sheffield: Sheffield Academic Press, 2000,- P.33-71

159. Elliot, D. Expression of RBM m die nuclei of human germ cells is dependent on a critical region of the Y chromosome long arm Text. I D Elliot, M, Millar, K.Oghene ci al IIPNAS. 1997. - Vol. 94. - P. 3848-3853.

160. Ertunc, D, Glutathionc-S-transEcrase PI gene polymorphism and susceptibility to endometriosis Text.1 D- Eftunc, M-Ahan. E. С. Ток ct al. // Hum. Reprod. -2005. Vol, 20 - P 2157-2161

161. Fell, D, Disruption ofthymidylate synthesis and glycine-serine Interconvenion by (.-methionine and L-homocystine in Raji cells Text. / D.Fell, J.Sclhub // Biochim, Bipphys. Acta. 1990. -Vol. 1033. - P.80-84

162. Ferlin, A Association of partial AZFc region deletions with spermatogenie nnpairmcnt and male infertility Text. / A. Ferlin. A. Tessari, F. Gmu: et aL // J. Med Genet, 200$ - VoJ.42- - P.309-21X

163. Fernandez-Canon, J. M. Characterization of a fungal maley'-lacctoaceiate isomerasc gene and identification of its human homotogue (Text. / J, M. Fernandez-Canon, M A. Penalva// J. Biol. Chem 1998 Vol.273. - P- 329-337.

164. Fletcher, О. MTHFR association with arteriosclerotic vascular disease? Text. i O. Fletcher, A. M. Kessling // Hum. CcneL 1998. - VoU03.- P.l 1-21.

165. Goyette, P. Gene structure of human nnd mouse methylenetctrahydrofolatc reductase (KfTHFR) Text. / P. Goyette, A, Pai, R, Milos et al // Mamm. Genome -1998 Vot.9. - P.652-656

166. Gutlenbach, M. Analysis of structural and numerical chromosome abnormalities in sperm of normal men and carriers of constitutional chromosome aberration. A review Text. I M. Guttcnbach, W. Engel, M, Schnvid H Human Genet.- 1997,-Vol.100.-P. 1-21.

167. Gopalakrishnan, В Inhibition of sperm glutathione-S-transferase leads to functional impairment due to membrane damage Text. f В Gopalakrishnan, Ch Shaba H FEBS letter 1998, - Vol,422. - P.296-300.

168. Шкапа», В, DA A (deleted in azoospermia) genes encode proteins located in human late spermatids and in sperm tails Text. / 0 Habermann, H -F Mi, A EdelmmnvV Hum. Reprod. 1998,-Vol. 13- - P. 363-369

169. Hankev, G J. Homocysteine and vascular disease Texl| I G J- Hankey, J. W. Eikelboom ft Lanoet. 1999, - Vol, 3S4. - P. 407-413.

170. Hanslcen, t.-L. Cytogenetic screening of a newborn population Text. ' !-• t. Hanstcen rtHmn.Gcnet. -1982. Vol. 21 - P.309-314

171. Hassold, T. J Maternal folate polymorphisms and the etiology of human nondisjunction ITcxi.! T, J, Hassold, L, С Burrage, E. R. Chan et al Л Am, J- Hun». Genet. 2001 --Vol. 69. - P.434-439

172. Hirvonen, A. Xenobiotic metabolism genes and the risk of recurrent spontaneous abortions (Text) I A- Hirvonen, J, A, Taylor. A-Wilcox et al. Epidemiology. -1996. Vol.7. - Р.206-20».

173. Kobbs, C, A, Polymorphisms in Genes Involved in Foible Metabolism as Maternal Risk Faciors for Down Syndrome Texi. / С A Kobbs. S. L Sherman. P Yi el al. // Am. J. Hum. Genet. 2000 - Vol.67. - P.623-630.

174. Hohlagschwandtner, M, Combined Lhrombophilic polymorphisms in women with idiopathic recurrent miscarriage Text./ M Kohlagsehwandiner, G. Unfricd. G. Hcinzc et al. //Fertil. Steril, 2003 - Vol.79f5} - P,l 14Ы148

175. Hong, Y.-Ch Influence of genetic susceptibility on llw uriivary excretion of 8-hydrosydeoxyguanosine of firefighteis (Text. t Y.-Ch. Hong, H.-S. Park, E.-H. Ha И Oecup. Environ Med 2000, - Vol 57. ■ P. 370-375.

176. Hungerford, D, A, Leucocytes cultured from small inoculaof the whole blood and the preparation of mciapliasc chromosomes by treatment with hypotonic КС I (Text) I D. A. Hungerford И Stain Tcchn. 1965- - Vol-40. - P.333-338

177. Hur, S. E Polymorphisms of the genes encoding the GSTMI, GSTTI and G5TP/ in Korean women: no association wiih endometriosis |Texl. / S.E. Huf, J,Y. Lee, H.S. Moonct аЫ МЫ. Hum. Reprod. 2005. - Vol.11. - P. 15-19.

178. Incerpi. M- N. Significance of anlinuclear antibody testing in unexplained second and third trimester fetal deaths Text. / M. N. Incerpi, E. Bank, S, N, Goodwein etali/J. Malem Fetal. Med 1998. - Vol, 7, Яй. - P.61-64

179. ISCN 2005. A System of Human Cytogenetic Nomenclature / Ed.: L. G. Shaffer, N. Tommerup, Basel: Karger, 2004, - 130 p,

180. Iso«alo, P. A. Neonatal and fetal mcthylenctctrahydrofolate reductase genetic polymorphisms: an examination of C677T and A1298C mutation* (Text) / P, Л. Isolate, G, A. Wells, J. G. Donnelly U Am. J. Hum. Genet. 2000. - Vol-67 ■ P9B6-990

181. Jackson, M ft. The epidemiology of cryptorchidism Text. / М- B. Jackson H Hormone Res. 19ДВ. - Vol.30. N4-5. - P.153-156.

182. Jacobs, P. The origin of numerical chromosome abnormalities Text. / P. Jacobs, T. Hussold / Adv.Genet. • 1995. • Vol.33. P. 101-133,

183. Kamp, С High deletion frequency of the complete AZfa sequence in men vsith Scnoli-celUofily syndrome Text. I С Kamp, K. Huellen, S. Fcmandes et al Mol. Hum- Reprod.2001. Vol.7. - P.987-994.

184. Kenneth, J Genetic factors m recurrent pregnancy loss Text) f 3, Kenneth, M. D Ward// Seminars in Reprod. Medicine, 2000/ - Vol I My 4. - P.425-432,

185. Kernmitsoglou, T, HLA-DQAI allele sharing between partners in different groups of subfertile couples fTe*1. / T. Kcramitsoglou U Am. J Reprod Immunol. -2004. -Vol-51. -P 494-495.

186. Kolsch, H. Polymorphisms in glutathione S-transferase omega-1 and AD, vascular dementia, and stroke |Textj! H- Kolsch, M. Linnebank. D. Lutjobann et al. U Neurology. 2004. - Vol.63. - P-2255-2260,

187. Komiyo, Y Human glutathione S-transferase Al, 77, Af/, and P! polymorphisms and susceptibility to prostate cancer in the Japanese population Textj t Y. Komiya, H Tsukmo, И Nakao ct ai. // J. Cancer. Res Clin Oncol, 2005 -Vol,131. - P. 238-242

188. Konohuu. Л Placental glutiuhjonc-S-transferase-pi mRNA is abundantly expressed in human skin Text. / A Konohana, I Konohana. W T Schrocdcr ct alV/ J. Invest, Derm 1990. - Vol. 95. - P. 119-126.

189. Кшя, С. Y hromosomc and male infertility Text. / C. Krausz, K, McElreavey // Frontier* in Biosince- 1999. - Vol-4. - P.t-8.

190. Krausz, C. Prognostic value of Y deletion analysis Text. / C. Krausz L Quintana-MurcL, K. McElreavey// Hum. Reprod, 2000, - Vol, 15, - P. 1431-1434

191. Kruger. T F. Self Teaching Pogramme for Strki Sperm Morphology Text. T F. Kruger, D, R, Franken, R. Mcakvctd. Bellville, South Africa: MO Medical, 1993.

192. Lahn, В T Functional coherence of the human Y chromosome (Text) / В. T. Lahn. D. C. Page it Siciencc- 1997. - Vol- 278- - P.675-680.

193. Lanciotti, M Glutathione S-transfcrasc polymorphisms and susceptibility to neuroblastoma T«*i. t M. Lanciotti, S. Coco, PD Michel с et al // Pheffmacogeoet Genomics. 2005. - Vol.l 5. - P.423-6

194. Lecterc, D. Cloning and mapping of a cDNA for methionine synthase reductase, a flavoprotein defective in patients with homocyslinuna |Texi. / D. Leclere, A. Wilson, R. Dumas« al. // Prat Natl. Acad. Sci. 1998. - Vol,95 ■ P3Q59-3004

195. Lee. K. A. Increased frequencies of glutathione S-transfcrasc (GSTMI and GSTTI) gene deletions in Korean patients with acquired aplastic anemia Text. > K. A Lee, S, H Kim, H. Y, Wooet al, // Blood. -2001. Vol.98 - P. 3483-3485

196. Li, YJ, Glutathione S-transferase omega-1 modifies agc-at-onset of Alzheimer disease and Parkinson disease Text. / YJ. Li, S.A. Oltveira, P Xu el al, // Hum. Mot. Genet, 2003. - Vol, 12. - P-3259-3267.

197. Lombardo, Г. Airti sperm immunity in assisted reproduction Тем. / F. Lombordo, L. Gardini, A- Lenzi et al- //J Reprod, Immunol 2004 - Vol.62, №1-2.-P 101-109

198. UonguenuHK, S, Candidate genetic modifiers of individual susceptibility lo renal celt carcinoma: a study of polymorphic human xenobiotic-mctabolizing emsymes Text. / S, Longuemaux. С Detomeme, C, Gallou et ali/Canccr Res -1999 Vol. 59. -P- 2903-2908.

199. Ma, KAY chromosome gene family with RNA-binding protein homology: candidates for the azoospermia factor AZF controlling human spermatogenesis Text. / K. Ma, J. Inglis, A. Sharkej et al. // Cell. 1993. - Vol. 75. - P 1287-1295.

200. Ma, K, Towards the molecular localisation of the A2F Focus: mapping ol microdeletions in azoospermic men within 14 subintervals of interval 6 of the human

201. Y chromosome Text. I К Ma, A, Sharkey, S, Kirsch et at, // Hum. МЫ. Genet 1992--VoLL-P 29-33.

202. Machev, N. Sequence family variant loss from the AZFc interval of the human

203. Y chromosome, but not gene copy loss, is strongly associated with male infertility Text. / N. Machev, N. Saul, G. Longepicd ct al. it J. Med Genet. 2004. - Vol.41. -P 814-825

204. Marti iwlli, M. C677T variant form at the MTHFR gene and CUP я nsk factor for mothers? Text. / M. Martinelli, L. Scapoli, F. Pezzetti ct al И Am. J. Med Genet. 2001- Vo»98. - P 357-360

205. Mathcson, M.C. GSTTI null genotype increases risk of premenopausal breast cancer Text./ M. С Mathcson, T, Stevenson. S-Abbanadelt et al. U Cancer- Lett. -2002--Vol.181.-P-73-79

206. Mazumdar, S. Antisperm antibodies; etiology, pathogenesis, diagnos-is, and treatment Text. I S, Mazumdar, A,S- Levine // Fertil. Steril l998.-Vot.70,- P 799810.

207. Meister. A. Glutathione Text. / A Meister, M E. Anderson //Ann. Rev Biochem 1983. - Vol. 52 -Р.7П-760.

208. Mcndola, P. Rise of spontaneous abortion, cigarette smoking, and genetic polymorphisms in МЛТ2 and GSTMI Text. / P Mcndola, К. B. Moysich, L L Freundenheim et al. //Epidemiology, 1997. - Vol.9.- p.666-667

209. Mcnegon, A. Parkinson's disease, pesticides, and glutathione transferase polymorphisms Text. / A. Menegon, P. G. Board, А. С Blackburn et al. fl Lancet. -1998. Vol. 352. - P 1344-1346.

210. Mortimer, D. Morphological selection of human spermatozoa in vivo and in vitro Text. I D. Mortimer, E. E Leslie, R W Kelly et al J) J. Reprod Fertil 1982. - Vol.64. - P. 391-399.

211. Motulsky, A. G. Nutritional ccogenctics: homocysteine-relaled arteriosclerotic vascular disease, neural tube defects, and folic acid. (Editorial) ITextJ / A. G. Motulsky tl Am. J. Hum. Genet. «996. - Vol.58. - P. 17-20

212. Mudd, S. К The natural history of homocystinuria due to cystalhioine beta-syntetase deficiency Text. / S. H. Mudd, F. Skovby, H. I- 1-evy et al7/Am. J. Hum. Genet 1985. - Vol.37.-P. 1-31.

213. Nakahori, Y. The Y chromosome region essential for spermatogenesis (Text. Y. Nakahori, Y. Kuroki, R. Komaki ct al. H Harm. Res. 1996 - Vol.46 - P 2023.

214. N'ebcrt, D. W. Ecogcnetics; from biology <o health Text) / D. W. Neben, M. J. Carvan U Toxicol. Indust. Hlth. 1997. - Vol.13, - P. 163-192

215. Nebert, D, W. Analysis of the glutathione S-transferabo (GST) gene family Text. / D. W Nebert, V Vasiliou ft Hum. Genomics, 2004 - Vol I, №6 - P.460-464.

216. Nelcti, W. L. Genetic risk factor for unexplained recurrent early pregnancy loss Text. f W. L. Nelcn, E. Steegcrs et al Л Lancet 1997. - Vol, 350 - P. «61.

217. Nielsen, J, Lurge Y-chromosome (Yq+) and increased risk of abortion Text. / J. Nielsen//Clin. Genet. -1978. ~ Vol. 13. P 415-4(6.

218. Nufcui, T. Maternal/newborn GSTTI null genotype contributes to risk of preterm. low birthweight infants Text. / T. Nukui, R. D Day. C, S, Sims et al U Pharmacogenetics. 2004 - Vol. 14 - P, 569-76.

219. Owes. R. The spectrum of spermatogenic deficiency in 20 men with Y interstitial microdeletions confined to the AZFc (DAZ) region (Text. / R. Dates et al.: poster, 16th Wold Congress on Fertility and Sterility. IFFS' 98. San Francisco. USA, I98g.

220. Ober, C. HLA and reproduction, lesions from students in the Hulterites Text. t C. Ober // Placenta 1995- - Vol.16, - P 569-577

221. Ober, C. Human leukocyte antigen matching nnd fetal loss, results ofa 10 year prospective study Text. 1С. Ober, T Hyslop. S. Elias et al. ft Hum. Reprod -1998. -Vol, 13 -P.33-38

222. Ogasawara, \1 Prevalence of autoantibodies in patients with recurrent miscarriage Text. I M, Ogasawara, K, Aoki, S Kagiura et al // Am ), Reprod Immunol 1999. ■ Vol.41, №1 - P.86-90.

223. O'Leary, V. B. MTRR and MTHFR polymorphism: link to Down syndromen Text. f V. B. OLcarv, A Pailc-McDermoU, A M. Molioy et al, H Am. J, Med Genet 2002 - Vol, 107, - P. 151-155,

224. Ozturk, A. Three SNPs in the GSTOl, GSTU2 and PRSSII genes on chromosome 10 are not associated with age-at-onsei of Alzheimer's disease Text. /А. Ozturk, P. P. Dcsai. R.L. Minster et al If Neurobool Aging 2005 Vol ,26 P.l 161-1165.

225. Рае, CrU. Glutathione S-transferase Ml polymorphism may contribute to schizophrenia in the Korean population Text. / C.U. Рас, H. S. Yu. J. J. Kim et al ft Psychiatr. Genrt 2004. - Vol.14. - P.147-150.

226. Pandey, M. K. Characterization ol' mixed lymphocytc reaction blocking antibodies (MLR-Bf) in human pregnancy Text) / M. K. Pandey. V, Saxena. S Agrawal et al itBMC Pregnancy Childbirth 2003 - Vol. 19. - P.2.

227. Patil, S. R. A possible association of long Y chromosomes and fetal loss Text. /S. R. Patil, H. Л. Lubs //Hum. Genet. 1977. Vol. 35- - P- 233-235.

228. Pemble, S, E, An evolutionary perspective on glutathione transferases inferred from class dicta gluiaihione transferase cDNA Text. / S, E Pemble. J, B. Taylor // Biochem, J.- 1992,- Vol.287,- P,957-963

229. Pecterssofi, P. L, Transmutation of Human Glutathione Transferase A2-2 with Peroxidase Activity into an Efficient Steroid Isomerose Text. / P. L. Peltersson, Л,-S. Johansson, B, Maimervifc //J, Biol, Chem 2002 - Vol.277, Issue 33. - P.30019-30022.

230. Pihusch, R Thrombophilic gene mutations and recurrent spontaneous abortion: prothrombin mutation increases the risk in the first trimester Text./ R. Pihusch, T. Buchholz, P. Lohsc et a\J1 Am. J. Reprod. Immunol 2001 - Vol 46(2), - P 124131

231. PLnarbasi, H Genetic polymorphisms of GSTs and their association with primary' brain tumor incidence Text) / H, Pinarbosi. Y Silig, M Gurelik // Cancer Genet. CytogcneL 2005. - Vol. 156. - P.l44-149.

232. Рокоту, M. Chromosomatni aberaee u infertilnich muzo Text. > M, Рокоту. F. Losan // Plzen. Lek. Ab. 1987. - Vol.54, - P.223-226.

233. Pryor, J. L. Microdetetions in the Y chromosome of infertile men Text. / J L Prvor, M. Kent-First, A Muallem et al, it N. Engl J Med 1997 Vol. 336 -P.534—539.

234. Quere, 1. Red blood cell methylfolale and plasma homocysteine as risk factors for venous thromboembolism: a matched case-control study Text) I I. Que re, T- V. Pemeger, J- Zittoun et al. //Lancet, 2002 - Vol.359 - P 747-752

235. Rao, A.V Role of glutathione S'tronslerascs in oxidative stress-induced male germ cell apopiows Text. / A- V. Rao. C. Shaha // Free Radical Biol Med 2000 - Vol.29 -P 1015-1027

236. Reijo, R. Severe ohgozoospcrmia resulting from deletions of azoospermia factor gene on die Y chromosome Tew. / R. Reijo, R. К Alagappan, P- Pairino et al- /I Lancet- 1996, - Vol, 347, - R1290—1293.

237. Reijo, R. Diverse spermatogenetie defects in human causcd by Y chromosome deletions encompassing a novel RNA-biriding protein gene Text. 1 R Reijo, 'Г Lee, P Salo et o&Jt Nature Genet, 1995, - Vol 10, - PJJ83-393.

238. Rhodes, D Genetics and molecular genetics of the MHC Text. / D. Rhodes, J, TrowsdaJe, Combridge, 1998,

239. Roberts. K. P. Y-ehromosomc deletions and male infertility: state of the an and clinical implications Text. / К P Roberts tt J. Androt 1998 - Vol Л 9, - P. 255— 259.

240. Rossini, A. Frequencies of CSTMIt GSTTJ, and GST?I polymorphisms in а Brazilian population Text. / A. Rossini, D, С. M, Rapozo, L M, F. Amorim et al ft Genet. Mol, Res. 2002. - Vol-1. - P.233-240.

241. Saadat, M. Influence of polymorphism of glutathione S-transfcrase Ml on systolic blood pressure of normotensivc individuals Text.! M, Saadat, A. Dadbine-Pour // Bioehem. Biophys, Res. Commuu 2005. - Vol.326. - P 449-454.

242. Sargent, C. A. The critical region of overlap defining the AZFa male infertility interval of proximal Yq contains three transcribed sequences Text. / C, A- Sargent, C- A. Boucher. S. Kirsch. et al. //J. Med. Genet. 1999, - Vol.36. - P. 670-677

243. Sata, F. Glutathione S-transfernse Ml and 77 polymorphisms and the risk of recurrent pregnancy toes fTcxi. t F. Sata, H Yamada, T. Rondo // Mol. Hum Reprod. 2003, - Vol.9. - РЛ65-169.

244. Saxena, R The PAZ gene cluster on human Y chromosome arose from an autosomal gene that was transposed, repeatedly amplified and prunded Text. I R. Saxena, L. G. Brown, W. Hawkins ct al.//Nat. Genet 199ft - Vol.14. - P 292299

245. Schneider, A. Genetic analyse of the glutathione s-transferase genes MGSTL GSTM3, GSTTI, and GSTMI in patients with hereditary pancreatitis Text. / A. Schneider. S. Togel, M. M- Barmada et al. //J. Gastroenterol. 2004. - Vol.39 -P.783-787.

246. Shen, P. Population genetic implications from sequence variation in four Y chromosome genes |Tcxt. ! P. Shen, F Wang, P. A Underbill et al. H Proc. Nat Acad. Sci. ■ 2000, Vol,97, - P, 7354-7359.

247. Silbcr, S Y chromosome deletions in azoospermic and scvery oligoaoospcrmje men undergoing intracytoplasmic sperm injection after testicular sperm extraction Теза. /S.SilberWarn Reprod- 1998.-Vol. 13, - P- 3332-3337,

248. Singh, К Mutation C677T in the methylenctetrahydrofolatc reductase gene is associated with male infertility in an Indian population. Text./ K. Singh,S K. Singh. R- Saheial,// Int. J- Androl 2005, - Vol.28. №2. -P.I 15-119.

249. Strange, R.C. The glutathione S-tranferascs: influence of polymorphism on cancer susceptibility TextJ / R. С Strange, A, A Fryer //Metabolic Polymorphisms and Susceptibility to Cancer . Lyon, France. - 1999. - P. 231-249.

250. Stuppia, L. The methylenetethrahydrofolatc reductase {MTHFR) C677T polymorphism and male infertility in Italy. Text. J L Stuppia, V Gatta, О Scarciolla et a\MEndocrinol, Invest. ■- 2003. Vol-26. tff7 - P.620-622.

251. Sugiura-Ogasawara Mayumi, M Poor prognosis of recurrent aborters with either maternal or paternal reciprocal translocations Text. / M. Sugiura-Ogasawara Mayumi, Y Ozaki Yasuhiko, T Sato Takeshi et al-// Fertil, Steril • 2004 Vol 81- P .367-73

252. Sun, С. An nzoospcrmic man with a de nova point mutation in the Y-chromosomal gate USP9Y (Text. / C, Sun, H. Sfealetsky, В Birren el al// Nat Genet- 1999Vol. 23, - P,429-432.

253. Takahashi, Y. A basis for dilTerenlioling among the multiple human mu-gtulathionc S-transfcrases and molecular cloning of brain GSTM5 Text. / Y. Takahashi, E, A, Campbell, Y Hirata et al. tl J, Biol Chem. 1993. - Vol JZt>8 - P. 8893-8898.

254. Tamer, L Glutathione S-transfciBse Ml. Tl and PI genetic polymorphisms, cigarette smoking and gastric cancer risk Text. t L. Tamer, N. A, Ales, C- Ate* et at, it Cell. Biochcm Funct. 2005. - V6L23, - P.267-272.

255. Tchaikovskaya, T, Glutathione S-transfcrasc hG"5TMJ and ageing-associated ueurodegeneratioet: relationship to Alzheimer's disease Text. I T Tchaikovskaya, V. Fntifeld, T. Urphanishvili ct al 11 Mech Ageing. Dev. 2005. - Vol.126. -P.309-315,

256. Ttcpolo, L. Localization of factors controlling spermatogenesis in the nonfluorescent portion of human Y chromosome long arm Text. I L, Tiepolo, O. Zuffardi it Hum. Genet. l976.-Vol. 34. -P.U9-124.

257. Tsai, J, Induction of cyclin. A gene expression by homocysteine in vascular smooth muscle cells fT'exe. / J, Tsai, H, Wang, M.Perrella et, al. rf i, Clin Invest, ■ 1996. Vol. 97. - P. 146-153.

258. Undas, A. Homocysteine inhibits inactivation of factor Va by activated protein С Text. / A. Undas. E. B. Williams. S Butenas et al tl J Biol. Cliem 3001. -Vol. 276. - P. 4389-4397.

259. Van der Gaag, M, S Effect of consumption of red wine, sptrits, and beer on serum homocysteine Text| / M.S. Van der Gaag, J. B. Ubdink, P Silanaukce ct. al. tl Lancet. 2000 - Vol. 355. - P 1522,

260. Vogt, P, H. Mlcrodeletions in interval 6 of ihc Y chromosome of males wilh idiopathic sterility point to disruption of AZF, a human spermatogenesis gene Text. / P. H. Vogt, Л. С Hundley, Т. B. Hargreavc adJf Hum. Genet 1992 Vol.89 -P. 491-496.

261. Vogt, P. H. The azoospermia factor (AZF) on the human Y chromosome in Yqll function and analysis in spermatogenesis |Te*t. / P H, Vogt, A. Edelmann, P. Hirechmann ct al.// Reprod. Fcttil. Dev. 1995. - Vol. 7. - P.6S5-693.

262. Vogt, P, H, Human Y chromosome azoospermia factors (AZF) mapped In different subregions in Yqll Text. / P. H. Vogt, A- Edelmann, S Kirsh ct al Ji Hum. MoJ, Genet =1996 Vol, 5. - P 933-943

263. Vollrath D,, Foote S., Hilton A, Et al. The human Y chromosome: a 43-inierval map based on naturaHv occurring deletions {Text. / Vollrath D., Foote S. Hilton A. et ol, // Science. 1992 - Vol, 258, - P 52-59

264. Wang, X. Maternal cigarette smoking, metabolic gene polymorphism, and infant birth weight Text. / X. Wang, B. Zucketman, C. Pearson et al Jl i A M.A, -2002--Vol.287.-P. 195-202.

265. Wcisbcrg, i. A second genetic polymorphism in mcthylcnetetiahydrofolate reductase (MTHFR) associated with decreased eitfyme activity |Text. /1, Wcisbcrg. P. Tran. B. Chriitensen et al.// Mol. Genet. Metab 1998. - Vol.64. -P. 169-172.

266. Whitbrcad, A. K. Characterisation of the human Omega class glutathwne transferase genes and associated polymorphisms Text. / A. K. Whitbrcad, N. Tetlow, F. H. J.yreet oJ. // Pharmacogenetics. 2003. - Vol.13.- P. 131-144,

267. WHO Laboratory Manual for the Examination of Human Semen and S-Ccrvical Mucus Interaction; 3td ed, Text. Cambridge: Cambrigc University Press, 1992

268. WHO (1999) Руководство ВОЗ no лабораторному исследованию эякулята человека и взаимодействия сперматозоидов с цервнкадьной слизью: 4-е нзд Cambridge: Cambridge University Press, 1999.

269. Wiebel, F. A. The hereditary' transmission of the glutathione transferase hCSTTZ-l conjugator phenotype in a large family (Text) / F A. Wiebel, л Dommemwrh, r. The»'/ Pharmacogenetics. 3999. - Vol.9. - P. 251-256.

270. Wilcc, M. C. J. and Paritcr M.W Structure and function of glutathione S-transferases Text. / M С J- Wifce, M W, Parker /,'Biochtm. Btophys. Acia~- 1994-Vol. 1205,-P. 1-18.

271. Wjlee. M. с. У С mini structure of л theta-class glutathione transferase (Text. I M. C. I. Шее, M. W Parker SiEMBO У -1995. Vol.]4. • P2I33-2N3

272. Wilson, M If Association between the risk of coronary artery disease in South Asians and a deletion polymorphism iri glutathione S-transferase Ml Te*t| f M, H. Wilson. P, У Grant, К Kain et ol. // Bioroarkcrs. 2003. - Vol.8. - P.43-50.

273. Wrcnsch, M Glutathione-S-Tnmsferase Variants and Adult Glioma |Tcxi| M. Wrensch, К. T. Kelsey, M. Liu et al- //Cancer Epidemiology Biomurkers & Prevention , 2004, • Vol, 13, - P,461-467

274. Yang. Y Glutathione S-transferase Tl deleuon is a nsk factor for developing end-stage renal disease in diabetic patients Text. / Y. Yang, M. Т. Као, С. С. Chang etal. /Леи J Mol Med. 2004 - Vol, 14, - P85S-8S9.

275. Yang, Y. Glutathioac-S-lransferase A4-4 modulates oxidative stress in endothelium: possible role in human atherosclerosis Text. I Y Yang. Y. Yang, M. B, Trent //Atherosclerosis, 2004, - Vol. 173(2). - Pit 1-221.

276. Yuille. M Relationship between glutathione S-transferase Ml, Tl. and PI polymorphisms and chronic lymphocytic leukemia (Text) / M Yuille, A, Condte, C. Hudson el al, II Blood- 2002. - Vol.99. Mil. ■ P.4216-4218,

277. Yun, B. R. Glutathione S-tnuufcrasc Ml, Tl. and PI genotypes and rheumatoid arthritis Text. I B. R. Yun, A, El-Sohcrny, M, C- Comclis // У Rheumatol. -2005. VoJ.32. - P.992-997.

278. Zang, J. Aromatic DNA adducts in coke-oven workers, in relation to exposure, lifestyle and genetic polymorphism of metabolic enzymes Text. /). Zang. M Ichiba, Y. Feng et.al. II Int. Arch. Oceup. Environ. Health. 2000. - Vol. 73. - P 127-135,

279. Zang, J. Urinary l-Hydroxipynene in coke-oven workers relative to exposure, alcohol consumption, and metabolic enzymes |Text. / У Zang. M. lehiba, К. Hara et.al. // Oceup. Environ. Med. 2001. - Vol. 58, - P, 716-721.

280. Zenzes, M. T. Organization rn vitro of ovarian cells in testicular structures Text. / M. Г Zenzes, U, Wolf, W. Engel .'/Hum. GeneL 1978. - Vol.44 - PJ33338.

281. Zetterberg, H. No association between the MTHFR A1298C and trartscobalomin C776G genetic polymorphisms and hypcrhomocysteincmia in thrombotic disease Text. / H. Zetterberg, A, Coppola, A, t/Angelo et al, // Thromb Res. 2002,- Vol 108, - P127-131

282. Zusterzeel, P. L. M. Polymorphisms in biotransformation enzymes and the n*k for recurrent early pregnancy loss Text. / P. L. M. Zusterzeel, W L D. M. Nclcn, H. M. J. Roelofs et al ft Mol. Hum. Reprod ■ 2000. Vol.6. №5. - P 474-478.1. Q ы

283. Zustcraedl, P. I. M, Gtulathione^lraiKfcrasc isoenzymes in decidua and placenta of preeclamptic pregnancies Text) / P. L. M. Zuttereeel, W. H. M. Peters. M. A. H. de Btuyn et al. //Obtet. Gjnec. 1990. - Vol.94. - P, 1033-1038.