Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Нарушение микробиоценоза кишечника, кожи и системы иммунитета при ожоговой болезни у детей и способы их коррекции

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Нарушение микробиоценоза кишечника, кожи и системы иммунитета при ожоговой болезни у детей и способы их коррекции"

Министерство Здравоохранения Республики Узбекистан Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний

РГЬ Ой

На правах рукописи

1 и 2103

КАСЫМОВА ИРОДА КЛДЫРОВНА

УДК: 617.00117-093-098

НАРУШЕНИЕ МИКРОБИОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА, КОЖИ И СИСТЕМЫ ИММУНИТЕТА ПРИ ОЖОГОВОЙ БОЛЕЗНИ У ДЕТЕЙ И СПОСОБЫ ИХ КОРРЕКЦИИ

а1 па с\п ---_----г__________

У-'.Уи.и/ - лгг1К1ЛЛШи.}Ш1 1112

АВТОРЕФЕРАТ

лпсссптапии ня сппскяппе \чемп» степени

1 1 .....

¡ии!Д1!ЛаТЗ »¡еДНЩШСКПХ ¡ш)"к

ТАШКЕНТ- 2000

Работа выполнена: в Первом Ташкентском государственного медицинском институте

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ: доктор медицинских наук,

профессор И. М. МУХАМЕДОВ

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ: Академик АН РФ и АН Руз

доктор медицинских наук, профессор А.А.Абндов

доктор медицинских наук профессор А.А.Батыроеков

ВЕДУЩЕЕ УЧРЕЖДЕНИЕ: Второй Ташкентский государственный

Защита диссертации состоится "л? " _ 2000 г. в

часов на заседании Специализированного Совета Д.087.11.01 в НИИ Эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний МЗ РУз. по адресу: г. Ташкент, ул. Решетова, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИ Эпидемиологии, микробиологии и инфекционных заболеваний МЗ

РУз

Автореферат разослан ^¿.-^О.________2000 г.

Ученый секретарь С пециализированного Сдвета, доктор медицински?И?аук^д 1с И.Х. МАМАТКУЛОВ.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Проблема ожогового травматизма является весьма актуальной во многих странах, в частности в США (Fordal S.O. et al.,1985), России (С.П.Пахомов с соавт., 1990), на Украине (Ю.Б.Вороненко, 1990) и др.

В связи с тем, что в структуре населения Средней Азии, значительную часть составляют дети, особо остро стоит проблема детского травматизма среди населения нашего региона (Х.А.Нуралиева, 1996).

По статистическим данным ожоги занимают третье место среди всех причин травм и являются важной социально-гигиенической проблемой, решение которой связано с улучшением состояния здоровья населения, снижением временной трудоспособности, инвалидности и смертности, увеличением продолжительности жизни.

Патогенетически важным звеном ожоговой болезни является токсемия, которая отрицательно влияет практически на все органы и

системы опгяттнчмя r том ииоче и ня ummviihvio cuctcmv я тякжр, ня

"1......--—- ---- ------- -- — -----..... ; -микробиоценоз кишечника и кожи (H.A. Федоров с соавт., 1985).

ПОСТОЯНСТВО w N \"l lli 'l I I Jt 'М Г»ПГЧММ'?\ЛЯ -1(1 ТЛ11 111Т1 \ ( ' I /' Ч

нервной, эндокринной и иммунной системами, также нормальной микрофлорой, которые все вместе |тредстзвя?пот собой единое целое. Изменение в одном из этих звеньев неминуемо приводит к определенным сдвигам в слаженном функционировании всего комплекса (В.Г. Петровская, О.П. Марко, 1976; Ш!'. Ьалакина с соавт., 1980: И.Б.Куваевл, 1991; ТХЛопатина, М.С.Бляхер, 1996; Т.П.Шаманек, В.Н.Подледнев, 1996).

Известно, что нарушения барьерной функции слизистом оболочки кишечника при дисбактериозе может быть причиной гематогенного и лимфогенного распространения кишечной микрофлоры в организме, развития сенсибилизации условко-патогенными микроорганизмами кишечника, приводящими к аутоаллергическим реакциям, являющимся причиной рецидивов и перехода в хроническую форму заболевания (А.Е.Веселов, 1988; В.А.Знаменский, И.В.Дегтярь, 1989; В.Н.Красноголовец, 1989; G.W. Тагаюск, 1988).

Другими словами, дисбактериоз представлет собой сложный процесс отягощающий основное заболевание, а в ряде случаев

являющийся одним из основных звеньев в патогенезе ожоговой болезни у детей.

В литературе недостаточны сведения по комплексному изучению состояния микрофлоры кишечника, кожи и иммунной системы у детей с ожоговой болезнью, не изучена динамика микробиологических изменений в зависимости от тяжести болезни.

В последние годы в клинической практике апробируется большое количество биопрепаратов (Н.М.Грачева, Г.Н.Гончарова, 1986; И.Б.Куваева, К.СЛадодо, 1991; Т.ПЛопатина, М.С.Бляхер, 1996) для коррекции микрофлоры кишечника, в том числе приготовленных на основе местных штаммов бактерий, выделенных от жителей нашего региона.

Однако, по настоящее время не разработаны оптимальные схемы лечения больных, не изучено влияние биопрепаратов на иммунную систему.

Цель работы. Изучение нарушений микроэкологии толстого кишечника, кожных покровов и иммунной системы у детей с ожоговой болезнью и их адекватная биокоррекция.

В соответствие с поставленной целью определены конкретные задачи исследования:

1. Изучить микпоэкологию толстого кишечника у детей с ожоговой

болезнью в динамике заболевания; 7 Изучить микро&лооу кожи v петвн с ож-г-с—и б— гт^тц,-— £

динамике заболевания; 3. Изучить у выделенных штаммов микроорганизмов факторы

4. Определить показатели состояния клеточного и гуморального иммунитета у детей с ожоговой болезнью;

5. Изучить влияние биопрепаратов (бифидумбактернн, лактобактерин) на микробиоценоз кишечника, иммунный статус у детей с ожоговой болезнью.

Научная новизна работы. Установлено, что у детей с ожоговой болезнью формируется дисбактериоз кишечника, характеризующийся дефицитом бифидобактерий и увеличением количества факультативных условно-патогенных микроорганизмов. Нарушение микрофлоры кожных покровов у больных детей характеризуется повышением общего количества аэробных микроорганизмов.

Показано, что при ожоговой болезни развивается иммунодефицитное состояние, выражающееся в снижении количества Т- и В-лимфоцитов и дисгаммаглобулинемией.

Установлена зависимость между степенью нарушений в составе микрофлоры кишечника, иммунодефицитом и тяжестью клинического течения ожоговой болезни. Параллелизм нарушений иммунного статуса и дисбактериоза кишечника затрагивает все звенья изучаемых систем: анаэробную и аэробную микрофлору кишечника, а также клеточные и гуморальные звенья иммунитета.

Выявлено, что между определенными показателями микробиоценоза и иммунного статуса существуют корреляционные взаимосвязи, количество и степень которых изменяются в процессе лечения.

Практическая ценность. Установленные имунномодулируго-шие свойства эубиотиков бифидумбактерина - Ь и лактобактериня обуславливуют целесообразность их использования у детей страдающих ожоговой болезнью.

Предложенные оптимальные схемы назначения препаратов

б И г1> Н Л V М б Я КТП ПИ Н Я — Т. и 11 я [пп п я тгтр п т } я ппя тпгеч-ипн

А ' V . I--------------' ---Г/

дисбактериоза кишечника у больных детей с ожоговой болезнью

ПОЗВОЛЯЮТ ТТОВЫСТ'Ь 'и!и■ ^-( м 1м1'и"1и Iлечения.

Внедрение. Результаты полученных нселедоианий внедрены в тактику работы Ожогового Центра при 1 городской кптгтгческпй бпггмппгг. г. Ташкента, Ожоговом Центре при 1 городской клинической болышце г. Андижана. Полученные результаты дисссртации.исиолъзуются в учебном процессе на кафедрах ми1сробиологии, Епрусолопп: и пммушлогик I ТашГосМИ и АндГосМИ.

Настоящая работа выполнена по плану № 01910006906. Апробация работы. Диссертационная работа апробирована на научной конференции молодых ученых с международным участием

^Тяштсрчт ттРКяГлт, на (ччгашпй « Пмтгпппн ПеТГГПЙ I

клинической гор. Больницы (Ташкент, май 1997); межкафедральном заседании I ТашГосМИ (Ташкент, февраль 1999); на научных семинарах кафедры микробиологии ТашПМИ (Ташкент, октябрь 1999); институте Микробиологии АН РУз (Ташкент, октябрь 1999); па научной конференции апробационного Совета НИИЭМИЗ МЗ РУз (Ташкент, октябрь 1999).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. При ожоговой болезни у детей выявлен дисбактериоз кишечника, характеризующийся дефицитом аспорогенно-анаэробных микроорганизмов и увеличением факультативной флоры.

2. У больных детей с ожогами имеет место Т-иммунодефицит по клеточному звену и повышение гуморальных факторов иммунитета.

3. Существует прямая зависимость нарушений биоценоза кишечника, кожи от тяжести болезни и сдвигов в иммунной системе.

4. Положительное влияние эубиотиков - бифидумбактерина-Л и лактобактерина на состояние биоценоза кишечника, динамику клинических симптомов болезни, иммунный статус, позволяет рекомендовать их в комплексном лечении ожоговой болезни.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 научных трудов, в том числе 2 журнальные статьи.

Благодарность. Выражаю искреннюю благодарность д.м.н., профессору САИДОВУ А.А. за оказанную методическую помощь при сборе материала, а также всем сотрудникам Ожогового Центра 1 городской клинической больницы г. Ташкента.

Объём и спгпукгпура. Диссертация изложена на 132 страницах машинописи,содержит введение, обзор литературы, главу материал и метопы исследования. 3-х глав собственных ^'.сс п ^ р.'? ? тм м заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, содержащего 162 источника, в том числе 115 отечественных авторов и стран , а так же 4 / иностранных авторов. Диссертация иллюстрирована 23 таблицами 1 рисунком.

Материалы, представленные в диссертации, обработаны и проанализированы лично автором.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Нами обследовано (табл. 1) 123 больных детей с ожоговой болезнью. Из них у 79 исследован микробиоценоз кишечника и кожи; параллельно у 50 больных детей показатели клеточного и гуморального иммунитета.

Больным детям была назначена традиционная терапия (проведение противошоковых мероприятий, введение антикоагулянтов, антибиотикотерапня как местно, так и общее

применение их, назначение антисептических средств, витаминотерапия.

Контрольную группу составили 21 практически здоровый ребенок.

Наибольшее число детей с ожоговой болезнью было в возрасте от 1 года до 3 лет - 30 (38,9%). Детей до 1 года было - 16 (20,5%), в возрасте 4-6 лет - 16 (20,5%); от 7 до 17 (21,5%).

Среди больных детей мальчиков было 67 (54,5%), а девочек -56 (45,5%). Этиологическими факторами ожогов были пламя - в 24 случаях (33,3%), и в 55 случаев (69,7%) - горячие неагрессивные жидкости (кипяток, суп, чай, молоко, раскаленное масло).

Таблица I

Распределение больных детей с ожоговой болезнью но возрасту, полу и тяжести заболевания

Распределение Площадь поражения Индекс тяжести

Возрастные больных ПО поверхности тела, % поражения, ед.(ИФ)

№ группы полу

мальчики Девочки до 10 до 20 более 20 до 10 до 20 20

1 До 1 года 8 8 6 5 5 4 9 3

2-3 года 15 15 12 7 10 | 8 10 12

3 4-6 лет 7 9 6 5 6 5 6 5

Л *+ п 1 Л „-- /-1ч- Лс 1 10 •п 1 7 с ■э 5 6 г о 5

"О ! У Л 1 ¿3

Все больные дети имели ожоги 1, 2, 3 АБ степени с поражением от 1% до 20% и более поверхности тела. Локализация ожогов была самой разнообразной, она зависела от ситуации при получении ожога.

Поскольку влияние поверхностных и глубоких ожогов на организм неоднозначно, для определения их суммарного воздействия мы использовали индекс тяжести поражения ИТП и/или индекс Франка.

Как видно из таблицы 1 среди обследованных, площадь поражения тела до 10% имели 31 обожженный ребенок; до 20% поверхности тела - 22 ребенка и более 20% поверхности тела - 26 обожженных. Индекс тяжести поражения до 10 ед. имели 23

обожженных детей; до 20 ед. - 31 ребенок; более 20% ед. - 2: обожженных детей.

У 44 больных проведена биокоррекция эубиотиками на фон» общего традиционного лечения. Из них 12 больных детей получал! лактобактерин, 17-бифидумбактерина-Ь и 15 детей получал! сочетанное применение лактобактерина с бифидумбактерином-Ь Эубиотики применялись в растворенном виде по 2,5-5 доз (1 зависимости от возраста и площади поражения поверхности тел; больных детей) 2 раза в день в течение 14-28 дней. У всех больны> изучались проявления диспепсических нарушений в динамике лечения: наличие метеоризма, болевые ощущения по ходу кишечника регулярность опорожнения кишечника, характер стула.

Бифидумбактерин и лактобактерин получены в Институте Микробиологии АН Республики Узбекистан на основе штаммов, выделенных у здоровых детей (Д.К. Огай, 1994).

Материалом для исследования служили фекалии, смывы сс здоровой кожи и ожоговой поверхности и гепаринизированная венозная кровь больных детей с ожогами.

Микробиологические исследования количественного и качественного состава фекальной микрофлоры проводили с учетом методических рекомендаций Н,М. Грачевой, В.!'. Петровской и А.З.

ъми.чли^ши 1 лУои).

Основная чать Н^СпСРОаЗ-ИИИ ппор.сленя пг; ТТ

- - - ...... ........ .... - ' - - 'о-----

Грачевой, модифицированной в отделе микробиологии ЦНШ! Второго ТашГосМИ (И.Э. Норбаева, 1995).

культивирование посевов исследованного материала с целью выделения аспорогенных анаэробов и лактобактерий осуществляли методом "запаянных" полиэтиленовых мешочков, заполненных магистральным природны?>{ газом. Аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы выделяли общепринятыми методами с использованием элективных и дифференциально - диагностических питательны^ сред.

Для исследования ферментов патогенности использованы общепринятые методы. Выделенные микроорганизмы идентифицировали до родовой принадлежности в соответствие с приказом об унификации микробиологических методов исследований.

При работе модифицированной методики результат учитывали по последнему разведению, в котором получен рост бактерий. Их количество подсчитывали по следующей формуле:

К= А х 200 х Р (КОЕ/г), где

К - количество колоний определенного вида;

А - число колоний на чашке в последнем разведении, где есть микробный рост;

200 - коэффициент, приводящий посев петлей (объем равен 0,0005 мг в соответствии с 1 мл);

Р- степень разведения.

Количество бактерий каждого вида выражали в lg КОЕ/г.

Для исследования микрофлоры кожи и ожоговой поверхности применяли метод смывов по Williamson et Kligman (1989) с использованием стерильных ватных тампонов, смоченных в питательном бульоне.

Смыв производили с 1 см2 поверхности кожи. Посев производил!! на элективные среды: желточно - солевой агар, среды Сабуро и Эндо, а также на сахарный, желчный бульон для выделения стрептококков.

На 5% кровяном агаре подсчитывали общее количество аэробной флорыв i см2 кожи. Сплошной рост микрофлоры, не подлежащий количественному учету, свидетельствовал об изменениях в состпянчи алтофдоры кожи, Количественные показатели Т-лимфоцитов и их субпопуляций, В-лимфоцитов были изучены с

ПП*»Г>ШТ.1Л nOnnfTWrtli IMCtM'TIMfH r-v Tl'T-II^.' i «.-.л т'141 ri /-*

использованием специфических монокяоиальных антител ЛТ производства Ипстятзта И:.""у;:ологпн РФ.

Иммуноглобулины основных классов (A,M,G) определяли методом радиальной иммунодиФФузии по Манчини (1.964).

Статистическая обработка полученных данных. Цифровой материал подвергнут статистической обработке путем вычисления средних арифметических, ошибок, достоверности полученных данных с вероятностью 95%.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Проведенные исследования показали, что у детей, получивших ожоги, в кишечнике развивается дисбактериоз. Характерной особенностью этих нарушений на ранних этапах исследования является уменьшение общего количества анаэробных микробов, при этом наиболее выражено снижение бифидобактерий и лакгобактерий (табл. 2).

Так, общее количество анаэробов составило 6,71 ±0,09 КОЕ/г, при норме 10,76±1,27 КОЕ/г, отмечено уменьшите количества

бифвдобактерий до 4,17±0,04 КОЕ/г, при норме 9,17+0,41 КОЕ/г, а лактобакгерий до 4,00±0,03 КОЕ/г, при норме 9,28±0,54 КОЕ/г.

В то же время общее количество факультативных аэробов существенно возрастает, особенно это выражено у лактозонегативных штаммов эшерихий и грибов рода Кандида.

Таблица 2

Микрофлора кишечника у больных детей при ожоговой болезни в динамике традиционного лечения (М±т) КОЕ/г

Количество микробов на 1 гр

№ Группы микроорганизмов фекалий КО Е/г

Контроль До лечения После

(21) (79) лечения(46)

1 Общее кол-во анаэробов 10,76+1,27 6,71+0,15* 1 6,54+0,03**

2 Бифидобактерии У,71±0,41 4,17+0,06* 4,19+0,05**

3 Лактобактерии 9,28+0,54 4,00+0,04* 4,28+0,07**

Л п /ЧТ. _______________с _ члнцее ки; ¡-вм «ирииив Л ол 1 л '»л Г* У ■— . Л 14 + 11 ' т /-"л , л /ч^о.^. /,0£> ги,и/ "" "

5 Кишечная палочка (Л+) 9.16+0.44 4.03+0.06* 3.13+0.06**

6 кишечная палочка (Л-) 4,4У_г0,У4,°

^ 1 Ц\рЯЛ ококкн •4,1н_!_и,и6'"

8 Стрептококки - Д 4,03+0,12 4,62+0,02* 4,51+0,ОЬ

о У Рпипт 1 «ЛПЧ ЛТОГТТТТХТЛ А рпЪш риди ^и11ДГ1Да 2,60+0,06 С ЛП_1_Л 1 1 * Л ОС_1_Л П/1**

1 П "П.". ^ - 1 а .. »» » п 4.60-10.04* 4,55+0.03

11 Протей 1,30+0,20 4,45+0,09* 4,83+0,19**

Примечание: в скобках - число обследованных, * - достоверно по отношению к контролю, ** - достоверно по отношению «до

ле чския».

Так же нами выявлено резкое уменьшение количества лактозоположительных эшерихий в микрофлоре больных детей с ожоговой болезнью составила 5,13 КОЕ/г по сравнению с их количеством у здоровых (9,16+0,44 КОЕ/г).

Изучение состояния микрофлоры проводилось нами в динамике лечения ожоговой болезни. Особый интерес представляет то, что после традиционного лечения, отдельные показатели микробиоценоза кишечника не изменялись, а стали более выраженными.

Прежде всего это касается лактозопозитивных кишечных палочек, показатели которых снизились до 3,13±0,06 КОЕ/г по сравнению с результатами до лечения (4,03+0,06 КОЕ/г) на 0,90 КОЕ/г.

Так же отмечается снижение общего количества аэробов на 0,97 КОЕ/г по сравнению с результатами до лечения - 8,65±0,17 КОЕ/г и на 2,86 завышены по сравнению с контрольной группой.

Анализ результатов изучения состояния микрофлоры кишечника в половом отношении не выявил различий в характере дисбактериоза у больных детей с ожоговой болезнью. Однако, у мальчиков отмечается более значительное снижение лактозопозитивных энтеробактерий (Р<0,001) и увеличение грибов рода Кандида (Р<0,001) по сравнению с больными девочками.

Оценивая возрастные особенности нарушений микрофлоры кишечника у больных детей с ожоговой болезнью, нами установлено, что наиболее выраженные отклонения дисбиотического характера наблюдаются у детей до 1 года, в остальных возрастных группах дисбиотические отклонения были менее выраженными.

То I,* Т Т ттат«3 II ТТГ» 1 Т'Л ТТ«-» ПлЛ т гттгт-г л {читппп »»л л -

бифидобактерий и лактобацилл обнаружен в 100% случаев (Р<0,01). При этом достоверно увеличилось содержание лактозонега'ишных кишечных палочек, грибов рода Кандида я протея 5,76+0,13, 5,70±16,0 и 5,3310,33 КОЕ/г соответственно.

И, наконец, оценка дисбиотических нарушений при различных степенях ожоговой болезни показала, что при тяжелых п- 1слипнг;есг-о',т течения 2-3 степенях, когда процент термического повреждения доходит до 20% и выше абсолютно у всех больных регистрировалась 3 степень дисбактериоза; при легкой степени ожоговой болезни (процент ожога до 10%) отмечается 2 степень дисбактериоза.

Изучение основных факторов патогенности у штаммов микроорганизмов, выделенных из испражнений больных детей, показало, что количество штаммов, вырабатывающих комплекс факторов патогенности, увеличилось.

Литературные данные указывают на синхронность изменений аутофлоры в различных отделах человека (У.К. Нобл, 1986; И.Н.Клемпарская, Г.А.Шальнова, 1996; З.Ь. 1огЬас11, М.Вагза, 1988).

Поэтому, параллельно с выявлением кишечного дисбактериоза у больных детей мы изучали состояние микрофлоры здоровой кожи и ожоговой поверхности.

Результаты исследования показали, что ожоговая поверхность и симметричный участок колеи были колонизированы кокковой группой микробов (табл.3).

Так, количество золотистых стафилококков составило на ожоговой поверхности 8,67+8,32 КОЕ/см2, на здоровой коже -18,83±6,21 КОЕ/см2. Эпидермальных стафилококков - 93,7±8,32 КОЕ/см2 на ожоговой поверхности, на здоровой коже - 64,97±8,32 КОЕ/см2.

Таблица 3

Микробный пейзаж кожи у детей при ожоговой болезни в динамике заболевания (М±т)

№ Микроорганизм ы Количество микробов КОЕ/1 см2

Здоровые (21) При поступлении Перед выпиской

Кожа (79) Ожоговая поверх. Кожа (79) Ожоговая поверх.

1 ± Стафилококк золотистый - 18,83+6,21 48,67+8,32 8,82+5,60 8,00+1,5

2 Стафилококк эпидерм. 1 1 ПО I Л г 1 1,^.0 г л т 1 о лл / то,^^. 93,79+г>,32 81,47+13,93 102,9-112,47

Л (;тг>ептоко»:ки 0,1 16,1-го,22 11-1-0,.¿и /3,23+0,20

Л Г^ТМ,»^!-* ПАП^ Г'*'-'"' с Кандида 11,9+2,5 9,46-1-8,31 12,67+12,40 ¡4,60+1^,4

5 Кишечная палочка - *2 1 ОД 54.66+ я.32 34,26 И 2.45 Г.1 ^ Л

6 Синегнойная палочка - 2,12+0,21 7,14+1,6 2,01+0,14 2,6+0,38

Содержание стрептококков на ожоговой поверхности и здоровом участке кожи составило 18,22±3,72 КОЕ/см2 и 16,1±6,22

Г/'/ЛТ1 / 2 ____ _ п » л . л /•« тя/^т? ! 2

Г\л^Г,/СМ СОи 1не 1С1 венно, при норме 6,1V—ГчЛЛУсм .

Кроме того, с поверхности кожи и ожоговой поверхности высевалось значительное количество кишечных палочек: 54,66±8.32 и 42,31±6,24 КОЕ/см2 соответственно, в то время на коже здоровых людей они отсутствовали. Не исключено, что кишечная палочка является показателем состояния резистентности кожи у больных детей с ожоговой болезнью. Содержание грибов рода Кандида на коже составило 11,90±2,50, на ожоговой поверхности - 9,46±8,31 КОЕ/см2, при норме 3,96±0,70 КОЕ/см2.

Изучение микрофлоры кожи и олсоговой поверхности в динамике лечения показало, что количество золотистых стафилококков снижены по сравнению с результатами до лечения (8,82±5,60 и 8,00±1,50 КОЕ/см2 соответственно. Некоторые показатели были повышены (эпидермальные стафилококки и грибы рода Кандида) по сравнению с результатами до лечения.

Остальные микроорганизмы не претерпели существенных изменений. Следовательно, у больных детей с ожоговой болезнью с сопутствующим дисбактериозом кишечника наблюдается и дисбактериоз кожи, характеризующий увеличением общего количества микробов и появлением микроорганизмов, не присущих аутофлоре кожи здоровых людей.

Многие авторы свидетельствуют об определенном параллелизме изменений при нарушении иммунного статуса и дисбактериозе кишечника при различных патологических состояниях. Вместе с тем мало известно о количестве и структурном содержании наблюдаемых параллелей при нарушениях иммунного статуса и дисбактериозе кишечника (Т.Т. Шаманекс соавт., 1996).

Учитьтяя эти сведения мы изучили основные показатели клеточного и гуморального иммунитета у детей при ожоговой болезни. Результаты иммунологических исследований гтокзлзлт?, что у больных детей с ожогами происходит снижение Т-лиадфоиитпв р. 1,5 рязя. |?е?.нячите.лыгсм? снижение Т-хеллеров, 2-х кратное снижение Т-супрессоров, В-лнмфоцитов. Иммунодефицит по Т- ¡г В-лимфоцнтов, привело к 2-х и 3-х кратному повышению О-днмФоцитов,

Изучение состояния основных показателей иммунитета проводи лось в динамике ожоговой болезни. Результаты показали, что отмечается повышение Т-лимфоцитов. Остальные параметры остались на прежнем уровне, т.е. завышенными по сравнению с результатами до лечения.

Сывороточные иммуноглобулины А, М, в повышены по сравнению с контрольной группой. В то лее время отмечается снижение фагоцитарной активности нейтрофилов на 25%. Перед выпиской со стороны гуморальных факторов особых изменений не наблюдается. Хотя, они были завышены по сравнению с контролем.

В последние годы большинство авторов (Н.М.Грачева, Г.И.Гончарова, 1986; М.Н.Мальцева и соавт., 1992) с целью коррекции дисбакгериоза рекомендуют использовать имплантацию живых культур нормальной флоры: колибактерина, бифидобактрина, бификола и лактобактерина и др.

Для коррекции выявленных микробиологических нарушений нами были использованы препараты, приготовленные на основе местных штаммов, бифидумбактерин-Ь и лактобактерин, предназначенные для лечения дисбактериозов.

В наших исследованиях больные дети с термическими поражениями кожи были распределены на 3 группы:

1 группа (12 больных) - получали в качестве эубиотика лактобактерин;

2 группа (17 больных) - биокорректор - бифидумбактерин-Ь;

3 группа (15 больных) - получали сочетанное применение лактобактерина с бифидумбактерином-Ь.

Полученные результаты после биокоррекции показали (табл.4), что в 1 группе больных детей отмечалось нормальное содержание лактобактерий - 8,49±0,50 КОЕ/гр, количество бифидобактрий оказалось ниже, чем в норме - 6,28±0,23 КОЕ/гр, хотя следует отметить, что содержание до лечения лактобактерий было 4,18±0,04 КОЕ/гр. Содержание лактозопозитивных кишечных палочек, грибов рода кандида близко к норме, несколько повышенным по сравнение с нормой оказалось содержание лактозоотрицательных эшерихий (3,88±0,11 КОЕ/гр).

Таким образом. введение лактобактерина оказывает относительное коррегирующее действие на микрофлору кишечника.

Но втооой гпуппе больных получавших би?Ьиг!обяктег>ин наблюдалось восстановление показателей микрофлоры кишечника у 90% больных детей. Отмечено увеличение количества оифидооакгерин ДО 3 1\Л-/1 \ р. ЛаКТОиаКТСрйй - ДО

КОЕ/гр, содержание которых было до лечения 4,14±0,04 КОЕ/гр. Количество лактозоотрицательных штаммов кишечных палочек значительно снизилось от 4,49±0,04 до 2,10±0,21 КОЕ/гр при норме у здоровых - 2,21 ¿0,33 КОЕ/гр. Все это подтверждает о положительном эффекте применяемого в качестве биокорректора эубиотика ^ н гЬ I ^ {5с1 ^ТС—?1 ^—-

Как уже отмечалось выше, больных детей с ожогами были распределены на 3 группы, последняя, которая получала сочетанное применение лактобактерина с бифидумбактерином.

Исследование у этой группы больных детей этот вид применения показало более выраженное коррегирующее действие на микрофлору кишечника и способствовало более легкому течению ожоговой болезни.

В среднем по этой группе отмечалось высокое содержание бифидобактерий - до 9,76+0,30 КОЕ/г, лактобактерий до 8,69+0,71 КОЕ/г за счет чего повысилось и общее количество анаэробов - до 9,72-1,60 КОЕ/г.

Увеличилось общее количество лактозоположительных кишечных палочек от 3,13±0,04 до 7,22±0,44 КОЕ/г за счет снижения до нормы лактозоотрицательных эшерихий от 4.39+0,05 КОЕ/г до 2,70+0,27 КОЕ/г. Полностью нормализовалось содержание грибов Кандида, их количество снизилось от 4,85+0,03 КОЕ/г до 2,99±0,17 КОЕ/г.

Таким образом, наиболее выраженный клинический эффект наблюдался при сочетанном назначении диух биокорректоров. При чем, помимо нормализации количественного и качественного состава микроорганизмов, наблюдается существенное снижение микробов, вырабатывающее факторы патогешюсти.

Так, число стафилококков, продуцирующих плазмокоагулазу снижается в 7,2 раза, и летициназу - в 2,6 раза, а фибринолизии - в 2 раза.

Л ия пи*? 1ЛПМЛТ1 Г то плплм/чаттпт IV лм--лг<л» #тт

Л * -.»-•.ш^ »»»¿¿иилки и^иуиъ.ихшьг шли* итп

участках и на симметричных им здоровых зонах дал следующие результаты. По сравнению с общепринятым лечением биокоррекция способстр.опяття снижению обсемененности кожкых покровов. На непораженных участках кожи после биокоррекции, наблюдалось снижение высеваемости и зпидермальных стафилококков, стрептококков. гоибов рола Канлипа и кишечных палочек. Более существенное изменение выявлялось на ожоговой поверхности. Наблюдалось полное отсутствие стрептококков, грибов рода Каидида и кишечных палочек.

Полученные результаты свидетельствуют о положительном влиянии биокорректоров не только на микробиоценоз кишечника, но и на микробный пейзаж кожи на пораженных ожогами участках, так и па здоровых зонах. В дальнейшем нами было изучено состояние иммунной системы у детей с ожоговой болезнью при биокоррекции.

По мнению ряда исследователей (Н.Н.Мальцев с соавт., 1992; В.В.Шкарупета, 1992) нормальная микрофлора кишечника оказывает существенное влияние на становление и функционирование иммунной системы организма. Нами установлено, что назначение детям с ожоговой болезнью биокорректоров, в отличие от общепринятого лечения, способствует устранению дисбаланса в иммунной системе.

Рис.2. Микрофлора псишечнмка у (Зольных детей при ожоговой болезни после коррекции

1 - контроль, 2 - при поступпеним, 3 - лактобактерин, 4 - 6иф|ид0баетерин, 5 - лак'гобактерин'+бифмдсбнкгерин

Так, относительное и абсолютное содержание Т-лимфоцитов восстанавливается до нормальных значений. То же самое зарегистрировано по Т-супрессорам и B-лимфоцитам. Наблюдалась нормализация показателей гуморального иммунитета. Так, повышенное содержание иммуноглобулинов А, М, G снижалось до контрольных цифр. Одновременно с этим происходило повышение фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови.

Таким образом, можно сделать вывод о том, что биокоррекция бифидумбактерином и лактобактерином, помимо коррекции дисбаланса s кишечнике и коже, оказывает иммунокоррегирующий эффект на организм.

Логическим продолжением исследований явилось изучение кореляциониых взаимосвязей между показателями микробиоценоза кишечника и иммунной системы при общепринятом лечении и биокоррекции бифидумбактерином и лактобактерином.

Оказалось, что общепринятое лечение не оказывает существенного влияния на внутри- и межсистемные корреляционные связи у детей с ожоговой болезнью. Наблюдалось уменьшение и ослабление связей между показателями микгюфлоры кишечника и иммунитета.

Vi^T^llinD П^Т^ГЧ ТТТГЧ И T*V11) ."> 1Т < > U I Г, г' о Г t i l Т Т > 1Т Г11 ГТ I М J i Л T T f-l < > 1111Л П "I 'l I < Т I

_- -.-i-^iiw, ist,- - ^wi:... ww - ' — " '"j "^i * "

по сравнению с общепринятым лечением, существенно повышает число корреляционных сплзей внутри; микробкоцепоза кишечника и иммунной системы.

Проведенный корреляционный анализ между показателями м и крооио ценоза кишечника показывает преимущество комбинированного лечения дисбактериоза кишечника у больных детей с ожоговой болезнью с помощью бифидумбакгерина и лактобактерина.

Таким образом, на основании микробиологических исследований содержимого кишечника, микрофлоры кожи, а также иммунологического статуса и корреляционного анализа мокло сделать однозначный вывод, что наибольшее адекватным, патогенетически обоснованным методом лечения детей с ожоговой болезнью является назначение биопрепаратов, и в особенности, их сочеганное применение, обеспечивающее полную коррекцию дисбактериоза кишечника и повышение иммунологических потенций организма.

16

выводы

1. У 100% детей с ожоговой болезнью в микрофлоре толстогс кишечника имеются дисбиотические изменения, проявляющиеся I уменьшении: общего количества анаэробов, бифидобактерий лактобактерий и на этом фоне резко увеличены общее количестве факультативных анаэробов.

2. У всех больных детей с ожоговой болезнью имеются значительные нарушения иммунной системы, характеризующиеся тяжелым угнетением Т-системы, выраженной дисиммуноглобулинемией.

3. У всех обследованных детей с- ожоговой болезнью с сопутствующим дисбактериозом кишечника, нарушен и микробиоценоз кожных покровов, характеризующийся повышенной обсемененностью на ожоговой поверхности. Выявлены корреляционные связи между отдельными представителями микрофлоры кишечника и кожи.

4. Полученные результаты свидетельствуют о нарастании у выделенных штаммов микроорганизмов способности вырабатывать фактори патогенности.

5. На основании проведенных микробиологических исследований содержимого кишечника, микрофлоры кожных покровов- а также иммунологического статуса больных детей с ожоговой болезные можно указать, что наиболее адекватным патогенетически обоснованным методом лечения является назначение иифндоойктвргш ¿1 лиььюиаитернн и б осооскности их сочетанное применение, обеспечивающее полную коррекцию дисбактериоза кишечника и повышение иммунологических потенций организма.

ПРАХСТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. При обследовании детей с ожоговой болезнью необходимо проводить микробиологические исследования, а именно, определение дисбаланса анаэробной и аэробной микрофлоры кишечника, а также исследовать иммунологическую напряженность организма.

2. При назначении эубиотиков необходимо учитывать характер дисбаланса, возраст больных детей и тяжесть ожоговой болезни. Для получения хорошего клинико-микробиологического эффекта

препараты следует назначать по 2-3 и 5 доз 2 раза (утром и вечером натощак) в день в течение 21-28 дней.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Нарушения микробноценоза кишечника и способы его коррекции при ожоговой болезни у детей //Узбекистан тиббиет журнали,-Тошкент, 1999- №3- С.56-58 (соавт.Мухамедов И.М., Саидов А.А.).

2. Особенности дисбактериоза кишечника и их взаимосвязь с нарушениями иммунитета при ожоговой болезни у детей //Узбекистон тнббиёт журнали .- Тошкент, 1999.-№4..- С.43-45.

3. Особенности микробиоценоза кишечника при ожоговой болезни у детей //Конференция молодых ученых с междунар. участием.(Ташкент, декабрь 1995).- Ташкент, 1996.- С. 95-96.

4. Куйнш касаллиптда болаларда ичак ва тари дисбактериозлари ва уларни коррекция усуллари/Информационное письмо.- Ташкент, 199Я-4<г

И.КДоеимоБанинг

"БОЛАЛАРДА КУЙИШ КАСАЛЛИГВДА ИЧАК, ТЕРИ МИКРОБИОЦЕНОЗИ ВА ИММУН ТИЗИМИНИНГ БУЗИЛИШЛАРИ БА УЛАРНИ КОРРЕКЦИЯ УСУЛЛАРИ" мавзусидаш диссертация шпнга X У Л О С А

Урта Осиёда ах,оли ичида куп кдсмшш болалар ташкил этганлиги сабабли, болаларда куйиш шикастлапиш муаммоси б> решонда долзарбдир.

Куйиш касаллншнипг боскичларидан бири токсемия булиб, органнзмкинг дамма системаларига, жумладан, ичак, тери микробиоценозларига ва иммун тизимига садбий таъсир курсатади. Коррекцнягача утказшшш тeкшIipишJJap, болаларнинг ичагида дисиакзсриоз келиб чикканшш ва уни анаэробларшшг умушш микдоршш камайиши. птяпттщ-патоген мжроортштямтгяпнирг купайишп бшхан таьрифланашшш курсатди. Шу билан бир кдторда нчак дисбпозида куЛнш кнасвда ва симметрии жоплашкан сопюм тери юзасида мккробларципг юкрри куреаткичлари кузатилди.

Иммунологию текширцшлар натижалари куйиш касачлипща болаларда Т-ва В-Л1шфоцитлар, Т-хелперлар, ва айникса Т-супрессорларнинг камайиши б план кечадигаи иккиламчи иммунтанкдслнги ривождашшгани курсатди.

Бнфндумбактсрнн ва да1Стобактсршшардан фойдаланиш, айн!щса уларни биргаликда куллащ ичак ва тери днсбактеркозларинц бартараф зтнбгина колмай, балки иммун тизимини коррскциялаш самарасиии х,ам курсатди.

SUMMARY

Theme of Kasimova I.R.

"VIOLATION OF MICROBIOCYNOSIS OF INTESTINE SKIN AND IMMUNITET SYSTEM BY BURN DISEASE AND METHODS OF THEIR CORRECTION"

In the structure of population in Middle Asia the main population are children, on that way Sharply stands the problem of infants burning traumatismus among population of this region.

Pathogeneticus the important link of burning disease is toxemia, which negatively influence on immimic system and also on microbiocynosis of intestine and skin.

The results of microbiological researches before correction shows, that in intestine on ill infants with burning disease developments uisbacteriosis of intestine, characterized by diminishing of common quantity anaerobic flora and increasing maintenance conditioned pathogen11 s mi cronronnismu s.

Also established (fixed), that disbiosis of intestine on infants with burning registraled higher indicators micrehs not only on burning surface, but also on healthy skin.

Results of immunological researches evidence about development on infants with burning disease second immunologic deficit on T- and B-lymphocytes, T-, helper particularly on T-supressors.

Biocorreciion biiidum bacierinum and laciobacterium, and particularly their Combining, beside correction disbalance in intestine and skin, rendered immunocirrective effect on organism of illness infants with burning disease.