Изменение патогенности Klebsiella pneumoniae при дисбиозе кишечника, вызванного бластоцистной инвазией

Бурганова, Рамиля Фаритовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Изменение патогенности Klebsiella pneumoniae при дисбиозе кишечника, вызванного бластоцистной инвазией
ВАК РФ 03.02.03, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Изменение патогенности Klebsiella pneumoniae при дисбиозе кишечника, вызванного бластоцистной инвазией"

На правах рукописи 484BÜ1U

БУРГАНОВА РАМИЛЯ ФАРИТОВНА

ИЗМЕНЕНИЕ ПАТОГЕННОСТИ KLEBSIELLA PNEUMONIAE ПРИ ДИСБИОЗЕ КИШЕЧНИКА, ВЫЗВАННОГО БЛАСТОЦИСТНОЙ

ИНВАЗИЕЙ

03.02.03 - Микробиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

2 С!ЮН 2011

Челябинск - 2011

4848610

Работа выполнена на кафедре общей и клинической фармакологии с курсом микробиологии Института медицины, экологии и физической культуры Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Ульяновский государственный университет

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук, профессор Ведущая организация:

Потатуркина-Нестерова Наталия Иосифовна

Бурмистрова Александра Леонидовна

Жесткое Александр Викторович

ФГВОУ ВПО «Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова»

Защита диссертации состоится «_» июня 2011 года в_часов на

заседании диссертационного совета Д 208.117.03 при ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 454092, г. Челябинск, ул. Воровского, 64.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию». Автореферат разослан «_»_2011 года.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук

Л.С. Латюшина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

В последние годы наблюдается значительный рост инфекционных заболеваний, этиологически ассоциированных с условно-патогенными микроорганизмами, среди которых одно из ведущих мест занимают бактерии рода Klebsiella (Леванова Л.А., 2001; Фиалкина С.В., 2004; Прозоркина Н.В., Рубашкина Л.А., 2005; Егорова С.А., 2007). Многие исследователи признают значительную роль этих бактерий в инфекционной патологии человека и особенно в развитии госпитальных инфекций вызывают 4,5-44,0% всех внутрибольничных острых кишечных инфекций, 8,7-56,9% - госпитальных пневмоний, 6,0-86,0% - бактериемий, 7,0-42,0% - инфекций мочевыводящей системы, 4,8-12,0% - инфицирование послеоперационных ран и ожоговых поверхностей. Спектр заболеваний, вызываемых клебсиеллами, чрезвычайно широк, они являются причиной заболеваний различной локализации. Их выявляют как при острых кишечных, так и при ряде парентеральных инфекций - урологических, менингиальных, токсикосептических и др. К частым проявлениям клебсиеллезной инфекции относятся внутригоспитальные заболевания, наблюдаемые среди детей раннего периода жизни в родовспомогательных учреждениях, больных в палатах интенсивной терапии, онкологических, геронтологических стационарах, ожоговых центрах (Тришин А.В. и соавт., 2005).

Клебсиеллезы характеризуются тяжелым течением и высокой летальностью, многообразием клинических проявлений. Однако концентрация клебсиелл в различном биологическом материале, полученном у больных и контактных, колеблется в значительных пределах, нередко клебсиеллы обнаруживаются в верхних дыхательных путях, в кишечнике и у здоровых людей.

Вероятно, этим обусловлено неоднозначное суждение об этиологической роли клебсиелл в развитии инфекционного заболевания. По данным некоторых авторов, у детей раннего возраста без клинических проявлений острого кишечного заболевания в значительном количестве выделяют различные энтеробактерии. Несмотря на проведение этиотропного лечения и применение пробиотиков, длительность их выделения может продолжаться несколько лет (Коршунов В.М., 2001; Леванова Л.А., 2002).

массивности выделения является сложной задачей и требует дальнейшего изучения факторов патогенности бактерий рода Klebsiella.

Показано, что условно-патогенные энтеробактерии, относящиеся к факультативной микрофлоре кишечника, обладают различными факторами патогенности (Бондаренко В.М., 1996; Мавзютов А.Р. и соавт., 2007; Жеребцов Н.Ю. и соавт., 2007). Однако информация о них до сих пор неполная, мало изученными являются генетические детерминанты факторов патогенности клебсиелл. Особую актуальность данная проблема приобретает в связи с высокой мобильностью этих нуклеотидных последовательностей, что позволяет им распространяться среди близкородственных бактерий. Именно интеграция, стабилизация и экспрессия генов вирулентности лежат в основе формирования новых свойств, в том числе патогенных.

В течение последних лет получены данные о значительном влиянии на микробиоценоз кишечника паразитарных инвазий (Торопова Н.П., Сафронова Н.А., Гордеева JI.M., 1998). Обнаружена роль паразитозов в развитии дисбиоза, сопровождающегося нарушением биоценотических взаимоотношений между патогенными бактериями и нормальной кишечной микрофлорой. В связи с этим, особую актуальность приобретает широко распространенная протозойная инвазия, обусловленная паразитированием в толстом кишечнике простейших Blastocystis hominis. Показано, что Blastocystis hominis способствуют реализации патогенного потенциала бактерий рода Proteus (Курзин А.В., 2008; Мое К.Т. et al., 1998). Однако влияние бластоцист на свойства других энтеробактерии, в частности клебсиелл, до сих пор остается не изученным. Цель исследования

Выявить факторы патогенности и их генетические детерминанты, а также чувствительность к антибактериальным препаратам у Klebsiella pneumoniae, выделенных при инвазии простейших Blastocystis hominis у гастроэнтерологических больных. Задачи исследования

1. Определить частоту встречаемости бластоцистной инвазии у гастроэнтерологических больных в зависимости от нозологической формы, стадии и продолжительности заболевания.

2. Оценить состояние микрофлоры толстого кишечника гастроэнтерологических больных при бластоцистной инвазии.

3. Провести сравнительное изучение факторов патогенности и чувствительности к антибактериальным препаратам клебсиелл, выделенных у гастроэнтерологических больных при наличии и отсутствии у них бластоцистной инвазии.

4. Дать сравнительную характеристику частоты

встречаемости некоторых генетических детерминант патогенности клебсиелл, изолированных у гастроэнтерологических больных в условиях бластоцистной инвазии и без нее. Научная новизна работы

Впервые обнаружено, что у гастроэнтерологических больных при бластоцистной инвазии среди условно-патогенных энтеробактерий доминируют бактерии рода Klebsiella.

Показано достоверное увеличение экспрессии в пуле штаммов клебсиелл, выделенных при бластоцистозе, генетических детерминант патогенности, обеспечивающих адгезию и токсинообразование (рар С, hly А, ell LT-1 и LT-2).

Впервые установлено, что уровень распространенности изученных ампликонов у штаммов Klebsiella pneumoniae после их сокультивирования с вирулентными бластоцистами достоверно увеличивался.

Дана характеристика особенностей микропейзажа кишечника гастроэнтерологических больных при бластоцистной инвазии. Показаны глубокие перестройки микробиоценоза кишечника, сопровождающиеся сменой ценотипа и иерархии групп микроорганизмов, которые зависели от периода (обострение, ремиссия) и продолжительности заболевания. Степень реализации патогенного потенциала клебсиелл усиливалась при их взаимодействии с бластоцистами.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Частота встречаемости простейших Blastocysts hominis у гастроэнтерологических больных значительно превышала этот показатель у здоровых людей (62,9% и 5,8% соответственно, р<0,05). Данное различие было наиболее выражено при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, хроническом гастрите и холецистите. Инвазированность больных бластоцистами нарастала в зависимости от продолжительности заболевания с 63,7% пациентов при стаже 1-5 лет до 87,4% обследованных при длительности заболевания свыше 10 лет. В период обострения заболевания, по сравнению с ремиссией, повышалась не только частота встречаемости В. hominis, но и их вирулентность, а также резистентность к антипротозойным препаратам.

патогенной группы. Выявленные нарушения микробиоты были характерны для всех больных в период обострения заболеваний и носили менее выраженный характер во время ремиссии.

3. Среди условно-патогенных энтеробактерий, выделенных у гастроэнтерологических больных при бластоцистной инвазии, Klebsiella spp. являлся доминирующим микроорганизмом. Достоверных различий фенотипических признаков патогенности клебсиелл, выделенных у пациентов с бластоцистной инвазией и без нее, выявлено не было, однако, обнаружено статистически подтвержденное увеличение в пуле исследуемых штаммов экспрессии некоторых генетических детерминант патогенности, усиливающейся при совместном культивировании вирулентных Blastocysts hominis. Кроме того, у клебсиелл, выделенных у больных без бластоцистной инвазии, после сокультивирования с простейшими происходило достоверное увеличение искомых ампликонов.

Теоретическая и практическая значимость работы

Данные, полученные при оценке факторов патогенности бактерий рода Klebsiella, наряду с количественной характеристикой позволяют судить об их этиологической роли в возникновении дисбиотических состояний кишечника, сопровождающих заболевания пищеварительного тракта при бластоцистной инвазии. Выраженные дисбиотические сдвиги микрофлоры кишечника диктуют необходимость проведения регулярных исследований кишечного микропейзажа при данной патологии.

Высокая выявляемость бластоцист при заболеваниях желудочно-кишечного тракта диктует необходимость паразитологического обследования больных, особенно при тяжелом течении. Для выявления бластоцист рекомендуется применять, помимо микроскопического, культуральный метод, значительно повышающий эффективность диагностики.

Полученные результаты свидетельствуют о необходимости включения в программу обследования гастроэнтерологических больных проведения микробиологических и паразитологических исследований с целью прогнозирования течения заболевания для выявления дополнительных факторов, отягощающих течение основного заболевания.

Определение степени выраженности патогенных свойств и чувствительности к антимикробным препаратам отдельных представителей микробиоценоза кишечника в различные периоды гастроэнтерологических заболеваний позволяет использовать данные исследования для прогнозирования их течения, а также будет способствовать разработке наиболее оптимальной терапии данных заболеваний с учетом микроэкологических особенностей кишечника.

Получен патент на изобретение РФ № 2224465 от 27.02.2004. «Способ заражения экспериментальных животных бластоцистами».

Опубликованы практические рекомендации «Проблема клебсиеллезов в неинфекционной клинике» (г. Ульяновск, 1998) и «Микрофлора кишечника при бластоцистозной инвазии» (г. Ульяновск, 2003).

Результаты исследований используются в процессе преподавания на кафедрах биологии и биоэкологи, инфекционных и кожно-венерических болезней, курса микробиологии ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет».

Апробация работы и публикации

Диссертация выполнена в соответствии с учебным планом научной работы ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет».

Результаты работы доложены на Региональной научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы современного здравоохранения и экологии» (г. Ульяновск, 2003); XIII ежегодной научно-практической конференции студентов и аспирантов (г. Ульяновск, 2003, 2004, 2005); 11-й межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и соискателей (г. Пенза, 2004); 45-й научно-практической межрегиональной конференции врачей (г. Ульяновск, 2010).

По теме диссертации опубликовано 23 научные работы, из них 2 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ, патент РФ на изобретение.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 156 страницах. Состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендаций и списка использованных литературных источников. Список литературы включает 217 источников, в том числе 133 -отечественных автора и 84 - зарубежных. Работа иллюстрирована 25 таблицами и 32 рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследования

При выполнении работы клинические изоляты микроорганизмов получали в период 2007-2009 гг. у 243 больных, находящихся на лечении в ГУЗ Ульяновская областная клиническая больница (г. Ульяновск), с заболеваниями желудочно-кишечного тракта. Из всех обследованных больные язвенной болезнью желудка составили 54 (22,2%), язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки - 56 (23,0%), хроническим гастритом -32 (13,2%), хроническим холециститом - 38 (15,6%), синдромом раздраженного кишечника - 32 (13,2%), неспецифическим язвенным колитом

- 31 (12,8%) пациент. Группа сравнения включала 52 клинически здоровых человека, репрезентативных по полу и возрасту.

Программа исследования состояла из нескольких этапов:

- отбор пациентов и включение их в исследование;

- выявление бластоцистной инвазии у гастроэнтерологических больных;

- оценка бактериального пейзажа кишечника пациентов в зависимости от наличия бластоцистной инвазии;

- характеристика вирулентности клебсиелл, выделенных у пациентов с заболеваниями желудочно-кишечного тракта при бластоцистозе;

- молекулярно-генетические исследования клинических изолятов к Klebsiella pneumoniae;

- статистическая обработка полученных данных.

В работе были использованы штаммы Klebsiella pneumoniae (n=190), выделенные у 78,2% пациентов из 243 обследованных больных.

С целью культивирования кишечной микробиоты использовали специальные дифференциально-диагностические и элективные среды. Изучение микрофлоры кишечника у больных и лиц контрольной группы проводили согласно приказу Минздрава России от 09.06.2003 № 231 «Об утверждении отраслевого стандарта «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника.» (ОСТ 91500.11.0004-2003) на базе бактериологической лаборатории ГУЗ Ульяновская областная клиническая больница. При изучении микробного пейзажа толстого кишечника определяли частоту высеваемости отдельных видов и их количественные показатели в пересчете на 1 г фекалий (Багрянцева О.В., 2002).

Культуры, выросшие на питательных средах, подвергали групповой (анаэробные, неспорообразующие бактерии), родовой (лактобациллы, бифидобактерии, энтерококки) и видовой идентификации (стафилококки, эшерихии). Таксономическую принадлежность изолированных бактерий оценивали на основании изучения роста бактерий в аэробных и анаэробных условиях, отношения к окраске по Граму, характера роста на селективных средах, биохимической и серологической идентификации. Адгезивную колонизирующую и цитотоксическую активность исследуемых штаммов изучали на перевиваемых клеточных линиях НЕр-2 (Gibb А.Р., 1993).

Для детекции генов, кодирующих факторы патогенности Klebsiella pneumoniae, применяли ПЦР со специфическими праймерами (Muhldorfer I., 1994; Tamaki Y., 2005). Тотальную ДНК для идентификации генов выделяли с использованием набора реагентов ООО «ИзоГен» (Москва), НПФ «Литех» (Москва).

Проводили выявление генетических детерминант синтеза Р-

фимбрий (рар С), а-гемолизина (hly А) и термолабильных энтеротоксинов (ell LT-1, LT-2). Для этого использовали праймеры, указанные в таблице 1.

Таблица 1

Используемые праймеры и соответствующие температуры отжига

PCR мишень Название праймера Нуклеотидная последовательность праймера Tm (°C)

рарС РАР1 (f) 5'-GACGGCTGTACTGCAGGGTGTGGCG-3' 65

РАР2® 5' -А ТА TCCTTTCTGCA GGGA TGCAA ТА - J 65

hly hly A 1(f) 5'-GGTG С AG CA GA AAAAGTTGTAG-3 57

hly .42® S-TCTCGCCTGA TAGTGTTTGGTA-3' 64

elf LTl( f) S-A TTTA CGGCGTTA СТА TCCTC-3' 50

LT2® 5' - TTTTGG TCTCGG TCA GA TA TG-3 50

Наличие бластоцист выявляли путем микроскопии нативных или окрашенных препаратов, приготовленных из фекалий больных. Размеры бластоцист определяли при помощи окуляр-микрометра. Исследования по выделению и первичной идентификации бластоцист из биологического материала проводили на базе бактериологической лаборатории ГУЗ Ульяновский областной клинический кожно-венерологический диспансер. Культивирование простейших В. hominis проводили с использованием среды Suresh СЕМ.

Микрофотографии сделаны на базе лаборатории научных исследований экспериментальной и клинической морфологии медицинского факультета ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет» с использованием микроскопа «Биолам I» (хЮОО).

Все полученные данные подвергали математической обработке с определением коэффициента достоверности Сгьюдента и проведением корреляционного анализа Спирмена. Статистическую обработку материала осуществляли с помощью пакета программ Statistica 8,0.

Результаты исследований

Из 243 обследованных у 153 больных (62,9%) были обнаружены В. hominis, в группе сравнения инвазированность составила 5,8%.

Среди выделенных из фекалий Blastocystis hominis встречались две формы - вакуолярная и гранулярная, имеющие значительные структурные отличия. Вакуолярные формы бластоцист были обнаружены у 136 (88,9%), гранулярные - у 11 (7,2%) инвазированных больных, у 6 пациентов (3,9%) встречались обе формы бластоцист.

Выявляемость бластоцист у больных язвенной болезнью желудка (ЯБЖ) составила 88,9%, язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (ЯБДК) - 81,2%, хроническим гастритом (ХГ) - 66,1%, хроническим холециститом (XX) - 50%, синдромом раздраженного кишечника (СРК) -37,5%, неспецифическим язвенным колитом (МЯК) - 35,5%. Частота встречаемости бластоцист была наиболее высокой при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки (рис.1).

Здоровые НЯК СРК XX ХГ ЯБДК ЯБЖ

100

Рис. 1. Инвазированность обследованных с различными заболеваниями органов пищеварительного тракта

Анализ инвазированности бластоцистами показал, что в стадии обострения заболевания бластоцисты выявлялись у 71,5±19,6% пациентов, в то время как в период ремиссии показатель снижался до 57,7±9,8% (р<0,05).

С целью аргументации этиологической значимости бластоцист в развитии патологического процесса изучена их вирулентность. Установлено, что 71,3±4,7% штаммов бластоцист, выделенных у больных во время обострения заболевания, обладали вирулентностью, в то время как в период ремиссии доля вирулентных штаммов уменьшалась до 42,5±3,4% (х"=23,6; р<0,001). Уровень вирулентности в период обострения заболеваний варьировал от ЬО50 3,1±0,4 до Ь05о 5,6±0,6. В зависимости от величины этого показателя все вирулентные штаммы были разделены на 3 группы.

Наиболее часто у пациентов с заболеваниями ЖКТ обнаруживались бластоцисты 2-й группы (43,1%), их вирулентность составила ЬЭ5о/1§ 4,6±0,5. У бластоцист 1-й группы (27,3%) показатель вирулентности был ниже -ЬО50/1ё 3,0±0,2, у простейших 3-й группы (29,6%) - ЬО50/1§ 5,4±0,1 (рис. 2).

LDso/lg

ЕВ I группа ■ II группа S Ш группа

Рис. 2. Соотношение клинических изолятов Blastocystis hominis с различной вирулентностью (LD50/lg)

Проведенное изучение микробиоценоза кишечника у гастроэнтерологических больных выявило значительное уменьшение показателей плотности колонизации индигенной микробиоты на фоне увеличения условно-патогенной (табл. 2).

Таблица 2

Микрофлора толстого отдела кишечника в зависимости от наличия бластоцистной инвазии у гастроэнтерологических больных

Микроорганизмы Больные (n=243)

с бластоцистной инвазией (n=153) без бластоцистной инвазии (n=90)

абс. % абс. %

Bifidobacterium 121 79,1±6,7* 89 98,9±6,2

Lactobacillus 112 73,2±3,2* 83 92,2±5,7

Е. coli типичные 141 92,2±4,9 88 97,8±7,2

Е. coli лактозонегатавные 21 13,7±2,6* 8 7,9±0,5

Е. coli гемолитические 78 50,1±6,2* 19 21,1±8,4

Enterococcus 76 49,7±3,8 49 53,4±3,2

Klebsiella 119 77,8±5,2 71 78,9±3,6

S. viridans 31 20,3±3.7 17 18,9±2.6

S aureus 14 9,1±1.3 6 7,7±1,7

S. epidermidis 38 24,8±4,8 26 28,9±4,7

Proteus 63 41,2±5,2 35 38,9±4,9

Candida 79 5I,6±4,1 39 43,3±5,9

Примечание: * - достоверность различий показателей с группой сравнения

(р<0,05У

Указанные нарушения, характерные для дисбиоза, в наибольшей мере

были выражены при заболеваниях, протекающих на фоне бластоцнстной инвазии.

Полученные результаты свидетельствуют о наличии значительных изменений в составе микрофлоры кишечника у обследованных лиц при бластоцистной инвазии.

Установлены значительные изменения обсемененности кишечника такими условно-патогенными представителями семейства энтеробактерий, как клебсиеллы и протеи. У пациентов с язвенной болезнью желудка уровень контаминации клебсиеллами превышал аналогичный показатель в группе сравнения в 12,3 раза, у пациентов с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки - в 12,7 раза, что значительно превышало значения микробного числа для других бактерий (рис. 3).

Я Язвенная болезнь желудка 1= Язвенная болезнь 12-перстноП кишки □ Группа сравнения

Рис. 3. Изменения патогенной и условно-патогенной микрофлоры кишечника при ЯБЖ и ЯБДК на фоне бластоцистной инвазии

Из выделенных 190 штаммов Klebsiella pneumoniae 119 (77,8%) получены у гастроэнтерологических больных с бластоцистной инвазией (1 группа) и 71 (78,9%) - у пациентов с таким же спектром заболеваний, но без бластоцитоза. (2 группа). У всех клинических изолятов К. pneumoniae изучат морфологические и физиологические свойства.

Из всех выделенных К. pneumoniae 72 штамма (43,7%) 1-й группы и 13 штаммов (46,4%) 2-й группы обладали слабо выраженной адгезией. Они поражали 19,2±2,7% и 18,7±2,6% клеток НЕр-2 соответственно, при этом на плазмолемме одной клетки обнаруживалось по 1-2 адгезированной бактерии, адгезивное число составило 3,3±0,7% и 3,1±0,4% соответственно.

Умеренную адгезивную активность проявили 39 штаммов (32,8%) 1-й группы и 25 штаммов (35,2%) 2-й группы. Они поражали 27,8±4,7% и 26,3±2,6% монослоя соответственно, адгезивное число в этих группах составило 3,9±0,6% и 3,6+0,4%.

Высокой адгезивностью обладали 27 штаммов (22,6%) первой группы и 15 штаммов (21,1%) второй группы. Они поражали 44,3±1,3% и 40,1±1,3% клеток НЕр-2, на каждой клетке пласта культуры фиксировались по 3-5 бактерий (адгезивное число - 4,8±0,7% и 4,5±0,9% соответственно).

Гемолитической активностью обладали 52,8% изолята Klebsiella pneumoniae 1 -й группы и 51,7% штаммов 2-й группы.

В ходе работы выявлено, что частота встречаемости вирулентных клебсиелл, выделенных у гастроэнтерологических больных без бластоцистной инвазии, была достоверно меньше, чем при бластоцистной инвазии. Из 119 штаммов клебсиелл первой группы только 96 (80,7%) вызывали положительную кератоконъюнктивальную пробу. Среди клинических изолятов 2-й группы кератоконъюнктивит у животных вызывали 37 штаммов (52,1%; р<0,05). Из 96 штаммов клебсиелл 1-й группы, вызывавших положительную кератоконъюнктивальную пробу, 37 изолятов (38,5%) были выделены в ассоциации с высоковирулентными штаммами Blaslocyslis hominis.

Одним из основных свойств Klebsiella pneumoniae, способствующих реализации их патогенных свойств, является устойчивость к действию антибактериальных препаратов.

Таблица 3

Чувствительность к антибиотикам штаммов Klebsiella pneumoniae, _выделенных у гастроэнтерологических больных _

Антибиотики Количество штаммов (%)

без бластоцистоза при бластоцистозе

гентамицин 61,4±4,7 59,3±6,1

канамицин 51,3±5,1 52,6±4,7

рифампицин 75,8±3,1* 57,2±4,4

эритромицин 58,2=7,1 55,3±4,7

оксациллин 51,4+3,2 50,1±2,9

линкомицин 87,4±5,3* 58,8±4,7

ампициллин 77,1 ±3,4* 57,2±4,1

пенициллин 69,7±2,8* 59,3±3,6

Примечание: * - показатель достоверности между чувствительностью к антибиотикам клебсиелл, выделенных при бластоцисгозе и без него.

Проведено определение чувствительности 190 штаммов

Klebsiella pneumoniae к 10 антибиотикам. Результаты проведенных исследований показали, что частота встречаемости чувствительных изолятов к различным антибиотикам была неодинакова (табл. 3).

Известно, что изменение патогенности у бактерий реализуется на генетическом уровне через мутации и генетические рекомбинации. Используя набор праймеров, амплифицирующих фрагменты генов рар С, hly А, elt LT-I, LT-2, были протестированы фенотипически различные Klebsiella pneumoniae: 119 штаммов, выделенных у гастроэнтерологических больных с бластоцистной инвазией, и 71 изолят, выделенный из консорциумов, где бластоцисты не являлись участниками микробного сообщества.

Выявление ампликонов проводили у клебсиелл, выделенных из ассоциаций с В. hominis различной степени вирулентности, а также после их совместного культивирования. В качестве контрольного использовали эталонный штамм К. pneumoniae, содержащий гены, детерминирующие синтез факторов патогенности. Культуры бактерий при сокультивировании с простейшими отбирали в период увеличения их численности и проявления цитопатогенного действия на клетки бластоцист.

Таблица 4

Частота встречаемости нуклеотидных последовательностей рар С гена у культур К. pneumoniae

Штаммы К. pneumoniae в ассоциации с бластоцистами: Период изучения Частота встречаемости (%) фрагмента рар С гена

Авирулентными до сокультивирования 4,5±0,4

после 3-х суток сокультивирования 5,3±0,9

Умеренно вирулентными до сокультивирования 6,4 ±1,1

после 3-х суток сокультивирования 10,8±0,21*

Высоко вирулентными до сокультивирования 9±0,9

после 3-х суток сокультивирования 21,8±1,5*

Клебсиеллы, выделенные у больных без бластоцистной инвазии до сокультивирования 3,4±0,21

после 3-х суток сокультивирования 10,4±1,2*

Примечание: * - показатель достоверности между частотой встречаемости нуклеотидных последовательностей рарС гена у культур Klebsiella pneumoniae до и после их сокультивирования с бластоцистами (р<0,05).

Для детекции генов, кодирующих определенные факторы патогенности, были протестированы штаммы с праймерами к рар С гену. Положительный сигнал был получен в 1-й группе клебсиелл с 31 культурой (26,1%). В общем пуле штаммов, изолированных от больных 2-й группы, положительные сигналы были получены у 2 культур (2,8%) (табл. 4).

Анализ уровня распространенности ампликонов рар С генов после проведенного сокультнвирования (табл.4) штаммов К. pneumoniae с бластоцистамн различной степени вирулентности показал, что частота встречаемости фрагмента рар С гена клебсиелл была наиболее высокой после 3-х суток сокультнвирования в ассоциации с высоковирулентными бластоцистамн (21,8±2,5%).

Частота встречаемости нуклеотидных последовательностей hly Л гена была практически одинаковой в первой и второй группах клебсиелл (табл. 5).

Таблица 5

Частота встречаемости нуклеотидных последовательностей hly А гена у культур К. pneumoniae

Штаммы К. pneumoniae в ассоциации с бластоцистамн: Период изучения Частота встречаемости фрагмента hly А гена (%)

Авирулентнымп до сокультнвирования 0,9±0,3

после 3-х суток сокультнвирования 1,2±0,4

Умеренно вирулентными до сокультнвирования 1,0 ±0,3

после 3-х суток сокультнвирования 3,8±0,6

Высоко вирулентными до сокультнвирования 1,2±0,2

после 3-х суток сокультнвирования 5,3±0,4 *

Клебсиеллы, выделенные у больных без бластоцистной инвазии до сокультнвирования 0,8±0,1

после 3-х суток сокультнвирования 1,9±0,4

Примечание: * - показатель достоверности между частотой встречаемости нуклеотидных последовательностей Му А гена у культур К рпеитотае до и после их сокультнвирования с бластоцистамн (р<0,05).

Наиболее значимые различия в частоте обнаружения Ыу А генов имелись у клебсиелл, выделенных совместно с вирулентными бластоцистамн, после их совместного культивирования

В результате изучения распространения генетических

детерминант термалабильных энтеротоксинов {elt LT-1, LT-2), являющихся основными факторами патогенности клебсиелл, установлено, что при инкубации с авирулентными бластоцистами искомые ампликоны имели 2,8±0,4% и 2,5±0,3% штаммов Klebsiella pneumoniae (табл. 6).

Таблица 6

Частота встречаемости нуклеотидных последовательностей elt LT-1, LT-2 генов культур Klebsiella pneumoniae

Штаммы К. pneumoniae в ассоциации с бластоцистами: Период изучения Частота встречаемости гена (%)

eltLT-1 LT-2

Авирулентными до сокультивирования 2,8±0,4 2,5±0,3

после 3-х суток сокультивирования 7,2±0,7* 2,6±0,5

Умеренно вирулентными до сокультивирования 4,1±0,4 3,6±0,4

после 3-х суток сокультивирования 8,6±0,7* 7,2±0,9*

Высоко вирулентными до сокультивирования 23,4±2,7 5,3±1,2

после 3-х суток сокультивирования 34,1±2,1* 14,1±1,3*

Клебсиеллы, выделенные у больных без бластоцистной инвазии до сокультивирования 2,1±0,9 2,3±0,8

после 3-х суток сокультивирования 12,3±2,1* 13,7±2,3*

Примечание: * - показатель достоверности между частотой встречаемости нуклеотидных последовательностей elt LT-1 и LT-2 генов К. pneumoniae до и после их сокультивирования с бластоцистами (р<0,05).

Частота обнаружения ампликонов, специфичных изучаемым генам, после проведения совместного культивирования клебсиелл с умеренновирулентными бластоцистами увеличилась в 2,1 и 2,0 раза, с высоковирулентными бластоцистами - 1,5 и 2,7 раза соответственно (табл.6).

В работе установлено статистически достоверное увеличение встречаемости изучаемых генов, индуцированное усилением вирулентности симбионтов Blastocystis hominis. Полученные данные свидетельствуют об изменении патогенного потенциала бактерий под воздействием бластоцист, приводящим к селекции и накоплению вирулентных вариантов в гетерогенной бактериальной популяции.

ВЫВОДЫ

1. Простейшие Blastocystis hominis выявлены у 62,9% гастроэнтерологических больных, у здоровых людей этот показатель не превышает 5,8%. Наиболее высокие показатели инвазированности установлены при язвенной болезни желудка (88,9%), язвенной болезни двенадцатиперстной кишки (81,2%), хроническом гастрите (66,1%) и хроническом холецистите (50,0%). Частота встречаемости В. hominis, а также их вирулентность и резистентность к антипротозойным препаратам зависит от продолжительности и периода заболевания.

2. Гастроэнтерологические заболевания при бластоцистной инвазии сопровождаются более выраженным дисбиозом кишечника, чем без бластоцистоза. Это проявляется снижением доминирования основных симбионтов, таких как бифидобактерии и лактобациллы, на фоне повышения показателей частоты встречаемости и плотности колонизации патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, максимально выраженных у бактерий рода Klebsiella. Выявленные изменения микробиоты кишечника усиливаются в период обострения заболевания и носят менее выраженный характер во время ремиссии.

3. Частота встречаемости вирулентных и антибиотикорезистентных клебсиелп, выделенных у гастроэнтерологических больных при бластоцистной инвазии достоверно выше, чем у пациентов без бластоцистоза.

4. Установлено увеличение частоты выявления генетических детерминант факторов патогенности клебсиелл, обеспечивающих адгезию и токсинообразование (рар С, hly A, elt LT-1 и LT-2), изолированных у гастроэнтерологических больных при бластоцистной инвазии. Уровень распространенности изученных ампликонов у штаммов Klebsiella pneumoniae после их сокультивирования с вирулентными бластоцисгами увеличивается.

Практические рекомендации

1. Полученные результаты свидетельствуют о необходимости проведения микробиологических исследований, направленных на выявление дисбиоза кишечника, развивающегося у пациентов с ЯБЖ, ЯБДК, ХГ на фоне бластоцистной инвазии, для последующей коррекции дисбиотических нарушений с учетом продолжительности и степени тяжести заболевания.

2. В протокол исследования на дисбиоз кишечника у больных гастроэнтерологического профиля дополнительно включать исследования

на выявление Blastocystis hominis с целью дальнейшей санации пациентов.

3. Для выявления бластоцист рекомендуется применять, помимо микроскопического, культуральный метод, значительно повышающий эффективность диагностики.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Бурганова, Р.Ф. Значение простейших Blastocystis hominis в патологии человека / Р.Ф. Бурганова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, Л.К. Богомолова, H.A. Квасова, Ю.Ю. Красноперова, A.C. Нестеров, И.Н. Исаева, О.Н. Кометова, В.М. Евдокимова // Материалы Всероссийской научной конференции «Проблема инфекции в клинической медицине» VIII съезда Итало-Российского общества по инфекционным болезням. - Санкт-Петербург, 2002. - С.23-31.

2. Бурганова, Р.Ф. Выделение клинических изолятов В. hominis у больных с различной патологией / Р.Ф. Бурганова, H.A. Ильина, И.Н. Исаева, Ю.Ю. Красноперова, В.М. Евдокимова // Сб. тезисов докладов I Всероссийской университетской научно-практической конференции молодых учёных и студентов по медицине. - Тула, 2002. - С.43.

3. Бурганова, Р.Ф. Выявление простейших Blastocystis hominis у больных с заболеванием желудочно-кишечного тракта / Р.Ф. Бурганова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, Т.И. Волгина, М.М. Хамитова, H.A. Ильина, И.Н. Исаева, В.М. Евдокимова, Ю.Ю. Красноперова, O.A. Кометова // Материалы XXXVII научно-практической межрегиональной конференции врачей «Здравоохранение Ульяновской области в XXI веке» 23-24 мая 2002 г. -Ульяновск, 2002. - С.105.

4. Бурганова, Р.Ф. Влияние простейших Blastocystis hominis на микробиоту толстой кишки мышей / Р.Ф.Бурганова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, Ю.Ю. Красноперова, H.A. Квасова, И.Н. Исаева // Материалы 18-й Всероссийской научной конференции с международным участием «Физиология и патология пищеварения» 4-6 сентября 2002 г. - Краснодар,2002. - С.203-204.

5. Бурганова Р.Ф. Протозойно-бактериальные ассоциации кишечника в условиях бластоцистной инвазии / Р.Ф.Бурганова, H.A. Квасова, Ю.Ю. Красноперова, Н.В. Бугеро, O.E. Фалова, И.С. Немова, A.C. Нестеров // Материалы 4-й Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» 23-25 мая 2003 г. - Москва,2003. -С.508-509.

6. Бурганова, Р.Ф. Влияние простейших В. hominis на функциональную активность печени / Р.Ф. Бурганова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, H.A. Квасова, И.Н. Исаева // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2003. -№2. -С.16-18.

7. Бурганова, Р.Ф. Бластоцистная инвазия у гастроэнтерологических больных / Р.Ф. Бурганова, H.A. Квасова, Ю.Ю. Красноперова, Н.В. Бугеро, O.E. Фалова, В.Е. Струнаева, A.C. Нестеров // Медлайн-Экспресс. - 2003. -№12 (169). - С.3-5.

8. Бурганова, Р.Ф. Реализация потенциала патогенности простейших Blastocystis hominis в условиях пониженной резистентности макроорганизма / Р.Ф. Бурганова, H.A. Квасова, Ю.Ю. Красноперова, A.C. Нестеров, Н.В. Бугеро, И.С. Немова, O.E. Фалова, В.М. Кудрова, В.Е. Струнаева // Материалы региональной научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы современного здравоохранения и экологии» 27 ноября 2003 г. - Ульяновск, 2003. - С.64-65.

9. Бурганова, Р.Ф. Экологическое ранжирование эндофлоры кишечника населения Ульяновской области / Р.Ф. Бурганова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, Н.В. Бугеро, O.E. Фалова, Ю.Ю. Красноперова, H.A. Квасова, И.С. Немова // Успехи современного естествознания. -№3. -2004. - С.28-29.

10. Бурганова, Р.Ф. Бластоцистоз - протозооз человека / Р.Ф. Бурганова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, H.A. Квасова, И.Н. Исаева, Ю.Ю. Красноперова, Н.М. Чебан, JI.K. Богомолова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни.-2004.-№4.-С. 58-61.

11. Бурганова, Р.Ф. Влияние микробиоценоза кишечника на формирование и тяжесть течения экспериментальной язвы желудка ассоциированной с бластоцистозом / Р.Ф. Бурганова, Ю.Ю. Красноперова, H.A. Квасова, Н.В. Бугеро, В.М. Кудрова, O.E. Фалова, И.С. Немова // Материалы 5-го конгресса молодых ученых и специалистов «Науки о человеке» 20-21 мая 2004 г. -Томск, 2004. - С.147-148.

12. Бурганова, Р.Ф. Некоторые показатели клеточного иммунитета при экспериментальной язве желудка на фоне инвазии простейших Blastocystis hominis / Р.Ф.Бурганова, Ю.Ю. Красноперова, H.A. Квасова, Н.В. Бугеро, В.М. Евдокимова, O.E. Фалова, И.С. Немова, A.C. Нестеров // Материалы 11-й межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и соискателей «Актуальные вопросы диагностики, лечения и реабилитации» 18 октября 2004 г. - Пенза, 2004. - С. 112-113.

13. Бурганова, Р.Ф. Распространенность простейших Blastocystis hominis у гастроэнтерологических больных / Р.Ф. Бурганова, Ю.Ю. Красноперова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, H.A. Квасова, Н.В. Бугеро, O.E. Фалова, И.С.

Немова, A.C. Нестеров // Материалы выездного пленума НОГР «Новые горизонты гастроэнтерологии» 23-24 ноября 2004 г. - Новосибирск, 2004. -С.318-319.

14. Бурганова, Р.Ф. Активность нейтрофильных гранулоцитов при экспериментальной язве желудка на фоне Blastocystis hominis / Р.Ф. Бурганова, Ю.Ю. Красноперова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, И.С. Немова, H.A. Квасова, O.E. Фалова, Н.В. Бугеро, В.М. Евдокимова, A.C. Нестеров // Материалы выездного пленума НОГР «Новые горизонты гастроэнтерологии» 23-24 ноября 2004 г. - Новосибирск, 2004. - С. 63-64.

15. Бурганова, Р.Ф. Влияние микробиоценоза кишечника на формирование и тяжесть течения экспериментальной язвы желудка, ассоциированной с бластоцистозом / Р.Ф. Бурганова, Ю.Ю. Красноперова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, И.С. Немова, H.A. Квасова, O.E. Фалова, Н.В. Бугеро,

B.М.Евдокимова, А.С.Нестеров // Материалы выездного пленума НОГР «Новые горизонты гастроэнтерологии» 23-24 ноября 2004 г. - Новосибирск, 2004. - С.65-66.

16. Бурганова, Р.Ф. Изучение энтеротоксигенной активности бластоцист / Р.Ф. Бурганова, Ю.Ю. Красноперова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, И.С. Немова, H.A. Квасова, O.E. Фалова, Н.В. Бугеро, В.М. Евдокимова // Материалы выездного пленума НОГР «Новые горизонты гастроэнтерологии» 23-24 ноября 2004 г. - Новосибирск, 2004. - С. 148-149.

17. Бурганова, Р.Ф. Некоторые показатели микробиоценоза кишечника при бластоцистозной инвазии / Р.Ф. Бурганова, Ю.Ю. Красноперова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, И.С. Немова, H.A. Квасова, O.E. Фалова, Н.В. Бугеро, В.М. Евдокимова // Материалы выездного пленума НОГР «Новые горизонты гастроэнтерологии» 23-24 ноября 2004 г. - Новосибирск, 2004. -

C.142-143.

18. Бурганова, Р.Ф. Патогенные свойства штаммов Blastocystis hominis / Р.Ф. Бурганова, Ю.Ю. Красноперова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, И.С. Немова, H.A. Квасова, O.E. Фалова, Н.В. Бугеро // Материалы выездного пленума НОГР «Новые горизонты гастроэнтерологии» 23-24 ноября 2004 г. -Новосибирск, 2004. - С.303-304.

19. Способ заражения экспериментальных животных бластоцистами: патент № 2224465 Рос. Федерация; заявка № 2002114890; опубл. 27.02.2004 , бюл. Т. 6.4.3. т-С. 598-599.

20. Бурганова, Р.Ф. Частота бластоцистозной инвазии у рабочих вредного производства / Р.Ф. Бурганова, Н.В. Бугеро, Ю.Ю. Красноперова, И.С. Немова, O.E. Фалова, Т.И. Волгина, Н.С. Глебова // Материалы Всероссийской научной конференции молодых ученых с международным

участием «Актуальные вопросы инфекционной патологии - 2005» 2728 января 2005 г. - Санкт-Петербург, 2005. - С.66.

21. Бурганова, Р.Ф. Бластоцистозная инвазия и дисбиоз кишечника / Р.Ф. Бурганова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, Ю.Ю. Красноперова, И.С. Немова, H.A. Ильина, A.B. Курзин // Материалы Всероссийской научной конференции молодых ученых с международным участием «Актуальные вопросы инфекционной патологии - 2006» 14-15 декабря 2006 г. - Санкт-Петербург, 2006. - С.36.

22. Бурганова, Р.Ф. Этиологическая роль бактерий рода Klebsiella / Р.Ф. Бурганова // Материалы Российской научно-практической конференции с международным участием «Высшее сестринское образование в системе Российского здравоохранения» 15-16 декабря 2010 г. - Ульяновск, 2010. - С. 92-93.

23. Бурганова, Р.Ф. Дисбактериоз кишечника в условиях колонизации бактериями рода Klebsiella / Р.Ф. Бурганова, Е.Г. Сабанова // Материалы 45-й межрегиональной научно-практической медицинской конференции «Повышение качества и доступности медицинской помощи - стратегическое направление развития здравоохранения» 20-21 мая 2010 г. - Ульяновск, 2010. -С.200.

Бурганова Рамиля Фаритовна

Изменение патогенности Klebsiella Pneumoniae при дисбиозе вызванного бластоцистной инвазией

03.02.03 - Микробиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Издательство «Веетор-С» 432045, г. Ульяновск, ул. Промышленная, 51а.

Подписано к печати 05.2011 Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Печать ризографическая. Гарнитура Times New Roman. Усл.печ.л. 1,32. Заказ № 11/093

Тираж 100 экз.

Отпечатано в типографии ООО «Вектор-С» 432045, г.Ульяновск, ул. Промышленная, 51а, Тел.: 8 (8422) 65-84-05

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Бурганова, Рамиля Фаритовна

ПЕРЕЧЕНЬ ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1Л. Патогенный потенциал бактерий рода Klebsiella и их роль в патологии человека.

1.2. Микробиоценоз кишечника и причины возникновения дисбиотических состояний.

1.3. Значение инвазии Blastocysts hominis в нарушении микробиоценоза кишечника.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Методы исследования.

2.3. Методы статистического анализа данных.

ГЛАВА 3. БЛАСТОЦИСТНАЯ ИНВАЗИЯ У ГАСТРОЭНТЕРОЛО

ГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ.

3.1. Результаты обнаружения В. hominis у гастроэнтерологических больных.

3.2. Морфологическая организация бластоцист.

3.3. Вирулентность бластоцист.

3.4. Чувствительность клинических изолятов

В. hominis к антипротозойным препаратам.

ГЛАВА 4. ОСОБЕННОСТИ МИКРОБИОЦЕНОЗА КИШЕЧНИКА

ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ ПРИ

ИНВАЗИИ ПРОСТЕЙШИХ В. hominis.

4.1. Микрофлора толстой кишки при бластоцистной инвазии в период обострения заболеваний желудочно-кишечного тракта.

4.2. Микроценоз кишечника на фоне бластоцистной инвазии в период ремиссии заболеваний.

4.3. Особенности микрофлоры кишечника у гастроэнтерологических больных без бластоцистной инвазии.

ГЛАВА 5. ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКИХ ИЗОЛЯТОВ

К. pneumoniae.

5.1. Характеристика клинических изолятов

К. pneumoniae в связи с источниками выделения.

5.2. Характеристика адгезивной активности и цитотоксичности.

5.3 Гемолитическая активность клинических штаммов

К. pneumoniae.

5.4. Чувствительность к антибиотикам клинических изолятов К. pneumoniae.

5.5. Выявление вирулентности К. pneumoniae на модели кератоконъюнктивально й пробы.

5.6. Изучение встречаемости нуклеотидных последовательностей генов патогенности

К. pneumoniae.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изменение патогенности Klebsiella pneumoniae при дисбиозе кишечника, вызванного бластоцистной инвазией"

В последние годы наблюдается значительный рост инфекционных заболеваний, этиологически ассоциированных с условно-патогенными микроорганизмами, среди которых одно из ведущих мест занимают бактерии рода Klebsiella (Леванова Л.А., 2001; Фиалкина C.B., 2004; Прозоркина Н.В., Рубашкина Л.А., 2005). Многие исследователи признают значительную роль этих бактерий в инфекционной патологии человека и, особенно, в развитии госпитальных инфекций. Так, по данным M.Inoue (2001), E.J.Elliott et al. (2001) клебсиеллы вызывают 4,5-44% всех внутрибольничных острых кишечных инфекций, 8,7-56,9% госпитальных пневмоний, 6,0-86,0% бакгериемий, 7,0-42% инфекций мочевыводящей системы, 4,8-12,% инфицирования послеоперационных ран и ожоговых поверхностей. Спектр заболеваний, вызываемых клебсиеллами чрезвычайно широк, они являются причиной заболеваний различной локализации. Их выявляют как при острых кишечных, так и при ряде парентеральных инфекций - урологических, менингиальных, токсикосептических и др. К частым проявлениям клебсиеллезной инфекции относятся внутригоспитальные заболевания, наблюдаемые среди детей раннего периода жизни в родовспомогательных учреждениях, больных в палатах интенсивной терапии, онкологических, геронтологических стационарах, ожоговых центрах (Тришин А. В. и соавт., 2005).

Клебсиеллезы характеризуются тяжелым течением и высокой летальностью, многообразием клинических проявлений. Однако, концентрация клебсиелл в различном биологическом материале, полученном у больных и контактных колеблется в значительных пределах, нередко они обнаруживаются в верхних дыхательных путях, в кишечнике и у здоровых людей.

Вероятно этим обусловлено неоднозначное суждение об этиологической роли клебсиелл в развитии инфекционного заболевания. По данным некоторых авторов, у детей раннего возраста без клинических проявлений острого кишечного заболевания в значительном количестве выделяют различные энтеробактерии. Несмотря на проведение этиотропного лечения и применение пробиотиков длительность их выделения может продолжаться несколько лет (Коршунов В.М., 2001; Леванова Л.А., 2002).

Поскольку эти микроорганизмы являются представителями факультативной микрофлоры толстого кишечника, обоснование их этиологической значимости при патологических состояниях даже при массивности выделения, является сложной задачей и требует дальнейшего изучение факторов патогенности бактерий Klebsiella.

Показано, что условно-патогенные энтеробактерии, относящиеся к факультативной микрофлоре кишечника, обладают различными факторами патогенности (Бондаренко В.М., 1996; Мавзютов А.Р. и соавт., 2007; Жеребцов Н.Ю. и соавт., 2007). Однако, информация о них до сих пор не полная, мало изученными являются генетические детерминанты факторов патогенности клебсиелл. Особую актуальность данная проблема приобретает в связи с высокой мобильностью этих нуклеотидных последовательностей, что позволяет им распространяться среди близкородственных бактерий. Именно интеграция, стабилизация и экспрессия генов вирулентности лежит в основе формирования новых свойств, в том числе патогенных.

В течение последних лет получены данные о значительном влиянии на микробиоценоз кишечника паразитарных инвазий (Торопова Н.П., Сафронова Н.А., Гордеева J1.M., 1998). Обнаружена роль паразитозов в развитии дисбиоза, сопровождающегося нарушением биоценотических взаимоотношений между патогенными бактериями и нормальной кишечной микрофлорой. В связи с этим, особую актуальность приобретает широко распространенная протозойная инвазия, обусловленная паразитированием в толстом кишечнике простейших Blastocystis hominis. Показано, что В. hominis способствуют реализации патогенного потенциала бактерий рода Proteus (Курзин А.В., 2008; Мое К.Т. et al., 1998). Однако влияние бластоцист на свойства других энтеробактерий, в частности клебсиелл, до сих пор остается не изученным.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

4. Дать сравнительную характеристику частоты встречаемости некоторых генетических детерминант патогенности клебсиелл, изолированных у гастроэнтерологических больных в условиях бластоцистной инвазии и без нее.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ:

Впервые установлено, что уровень распространенности изученных ампликонов у штаммов К. pneumoniae после их сокультивирования с вирулентными бластоцистами достоверно увеличивался.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ:

Высокая выявляемость бластоцист при заболеваниях желудочно-кишечного тракта диктует необходимость паразитологического обследования больных, особенно тяжелыми, часто дающими рецидивы и резистентными к проводимой терапии формами заболеваний. Для выявления бластоцист рекомендуется применять, помимо микроскопического, культуральный метод, значительно повышающий эффективность диагностики.

Определение степени выраженности патогенных свойств и чувствительности к антимикробным препаратам отдельных представителей микробиоценоза кишечника в различные периоды гастроэнтерологических заболеваний позволяет использовать данные исследования для прогнозирования их течения, а также будет способствовать разработке наиболее оптимальной терапии данных заболеваний, с учетом микроэкологических особенностей кишечника.

На основе проведенных микробиологических исследований представлена количественная и качественная характеристика микрофлоры кишечника здоровых лиц и гастроэнтерологических больных, проживающих в г. Ульяновске. Результаты могут быть использованы при разработке критериев содержания облигатной и факультативной микрофлоры.

Получен патент на изобретение № 2224465 от 27.02.2004. на «Способ заражения экспериментальных животных бластоцистами».

Опубликованы практические рекомендации «Проблема клебсиеллезов в неинфекционной клинике» (Ульяновск, 1998) и «Микрофлора кишечника при бластоцистозной инвазии» (Ульяновск, 2003).

Результаты исследований используются в процессе преподавания на кафедрах биологии и биоэкологии, инфекционных и кожно-венерических болезней, курса микробиологии ГОУ ВПО «Ульяновский государственный университет», а также в работе клинико-диагностической лаборатории ГУЗ Ульяновская областная клиническая больница (г. Ульяновск).

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Частота встречаемости простейших Blastocystis hominis у гастроэнтерологических больных значительно превышала этот показатель у здоровых людей (62,9% и 5,8% соответственно, р<0,05). Данное различие было наиболее выражено при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, хроническом гастрите и холецистите. Инвазированность больных бластоцистами нарастала в зависимости от продолжительности заболевания с 63,7% пациентов при стаже 1-5 лет до 87,4% при длительности заболевания свыше 10 лет. В период обострения заболевания, по сравнению с ремиссией, повышалась не только частота встречаемости В hominis, но и их вирулентность, а также резистентность к антипротозойным препаратам.

2. Бластоцистная инвазия сопровождалась более выраженными дисбиотическими сдвигами микробиоценоза кишечника, чем при ее отсутствии. Эти изменения проявлялись сменой абсолютных доминант и увеличением видового разнообразия, характеризующиеся снижением уровня содержания облигатной микробиоты и увеличением представителей условно-патогенной группы. Выявленные нарушения микробиоты были характерны для всех больных в период обострения заболеваний и носили менее выраженный характер во время ремиссии.

3. Среди условно-патогенных энтеробактерий, выделенных у гастроэнтерологических больных при бластоцистной инвазии, Klebsiella spp. являлся доминирующим микроорганизмом. Достоверных различий фенотипических признаков патогенности клебсиелл, выделенных у пациентов с бластоцистной инвазией и без нее, выявлено не было, однако, обнаружено достоверное увеличение в пуле исследуемых штаммов экспрессии некоторых генетических детерминант патогенности, усиливающейся при совместном культивировании вирулентных В. hominis. Кроме того, у клебсиелл, выделенных у больных без бластоцистной инвазии, после сокультивирования с простейшими происходило достоверное увеличение искомых ампликонов.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ:

Диссертация выполнена в соответствии с учебным планом научной работы Ульяновского государственного университета.

Результаты работы доложены на Региональной научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы современного здравоохранения и экологии» (г. Ульяновск, 2003); XIII ежегодной научно-практической конференции студентов и аспирантов (г. Ульяновск, 2003; 2004), 11-я межрегиональной научно-практической конференции молодых ученых и соискателей (г. Пенза, 2004), 45 научно-практической межрегиональной конференции врачей (г. Ульяновск, 2010).

ПУБЛИКАЦИИ: по теме диссертации опубликовало 23 научных работ, из них 2 из них в изданиях, рекомендованных ВАК РФ, патент РФ на изобретение, 2 практические рекомендации.

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ:

Диссертация изложена на 153 страницах. Состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, обсуждения, выводов, практических рекомендации и списка использованных литературных источников. Список литературы включает 217 источника, в том числе 133 — отечественных авторов и 84 — зарубежных. Работа иллюстрирована 25 таблицами и 32 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Бурганова, Рамиля Фаритовна

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

2. В протокол исследования на дисбиоз кишечника у больных гастроэнтерологического профиля дополнительно включать исследования на выявление Blastocystis hominis с целью дальнейшей санации пациентов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Бурганова, Рамиля Фаритовна, Челябинск

1. Аклан Набила, ULM. / Распространенность и биологические свойства клебсиелл в условиях техногенной нагрузки крупного промышленного города: Автореф. дис. . канд.биол.наук. / Ш.М. Аклан Набила.—Волгоград, 2006.-23 с.

2. Ардатская, Н.Д. / Дисбактериоз кишечника: современные аспекты изучения: проблемы; принципы диагностики и лечения / Н.Д. Ардатская, A.B. Дубинин, О.Н. Минушкин // Тер. Архив. 2001. - № 2. - С. 67-72.

3. Арутюнян, Н.М. / Биолоические свойства условно-патогенных энтеробактерий, выделенных от больных и здоровых детей / Н.М. Арутюнян, A.A. Лалаян, Ю.Т. Алексанян // Журн. Микробиология. -2001. -№2.-С. 124-125.

4. Багрянцева, О.В. / Возможность использования общего анализа крови для диагностики дисбактериоза кишечника, осложненного бактериемией / О.В. Багрянцева // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2002. — №3. — С. 1.06-110.

5. Бадиков, В.Д. / Микробиологические основы антимикробной терапии инфекционных заболеваний: руководство для врачей / В.Д. Бадиков. СПб., 2005. - 184с.

6. Барановский, А.Ю. Дисбактериоз и дисбиоз / А.Ю. Барановский, Э.А. Кондрашина. СПб.: Питер, 2000. - 209с.

7. Барсук, А.Л. / Представления поликлинических врачей-педиатров по вопросам диагностики, профилактики и лечения дисбактериоза / А.Л. Барсук // Клин, микроб, антимикроб, химиотерапия. — 2006. — Т.6. -№ 2. — С.145-150.

8. Бельмер, C.B. / Лямблиоз у детей // Русский медицинский журнал. — 2004. -Т.12, №3. — С.141-143.

9. Березина, Л.А. / Некоторые биологические свойства госпитальных штаммов Klebsiella pneumoniae в вязи с их этиологическим значением: Автореф. дис. . канд.мед.наук. / Л.А. Березина. — СПб., 1996. — 21 с.

10. Билимова, С.И. / Характеристика факторов персистенции энтерококков /

11. Бойцов, А.Г. / Дисбактериоз: проблемы и возможные пути их решения /

12. A.Г. Бойцов, Е.А. Оршиак, Л.Ю. Нилова // Современные проблемы медицинской микробиологии: мат. Всерос.науч.-практ.конф. — СПб., 2007. -36 с.

13. Бондаренко В.М., Петровская В.Г., Потатуркина-Нестерова Н.И. / Проблема патогенности клебсиелл / В.М. Бондаренко, В.Г. Петровская, Н.И. Потатуркина-Нестерова. -Ульяновск: УлГУ, 1996. 132с.

14. Бондаренко, В.М. / «Острова» патогенности бактерий // Микробиология.2001. — №4. С.67-74.

15. Бондаренко, В.М. / Секретируемые факторы патогенности энтеробактерий /

16. B.М. Бондаренко, А.Р. Мавзютов, E.H. Голкочева // Журн. микробиология.2002.-№1.-С. 67-71.

17. Бондаренко, В.М. / Дисбактериозы кишечника у взрослых / В.М. Бондаренко, Н.М. Грачева, Т.В. Мацулевич, М.: КМК, 2003. - 224 с.

18. Бондаренко, В.М. / Дисбиозы / В.М. Бондаренко, A.A. Воробьев // Микробиология. 2004. - №1. - С. 84-92.

19. Бондаренко, В.М. / Дисбиотические состояния и лечебные мероприятия при них / В.М. Бондаренко, Н.М. Грачева // Вестн. РАМН. 2005. - №12.1. C. 23-29.

20. Бондаренко, В.М. / Прикладные аспекты молекулярной биологии бифидобактерий и лактобацилл / В.М. Бондаренко // Микробиология. 2006. - № 2. — С. 89-97.

21. Бондаренко, В.М. / Дисбактериоз кишечника как клинико-лабораторный синдром: современное состояние проблемы / В.М. Бондаренко, Т.В. Мацулевич // М.: ГЭОТАР-Медиа. 2007. - 304 с.

22. Бронштейн, A.M. / Гельминтозы органов пищеварения: кишечные нематодозы, трематодозы печени и ларвальные цестодозы (эхинококкозы) / A.M. Бронштейн, H.A. Малышев // Российский медицинский журнал. -2004. -№4. -С. 208-211.

23. Бугеро, Н.В. / Влияние условий литейного производства на микробиоценоз кишечника человека: Автореф. дис. канд. биол. наук / Н.В. Бугеро. — Ульяновск: УлГУ, 2004. 23 с.

24. Бугеро, Н.В. / Биологическое значение антиинтерфероновой активности простейших Blastocystis hominis / Н.А.Квасова, Ю.Ю.Красноперова // Сборник статей НИИ кардиологии ТНЦ СО РАМН «Науки о человеке». Томск, 2004. С. 134-135.

25. Бурмистрова A.JI. / Иммунный гомеостаз и микросинбиоценоз. Метаморфозы и пути развития воспалительных заболеваний кишечника / под ред. A.JI. Бурмистровой. Челябинск, 1997.

26. Бухарин, О.В. / Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / О.В. Бухарин. — М.: Медицина, УрО РАН, 2002. С. 221.

27. Бухарин, О.В. / Коли ци но генная активность кишечной микрофлоры как показатель дисбиотического состояния ЖКТ / О.В. Бухарин, A.B. Валышев, O.E. Челпаченко, H.H. Елагина // ЖМЭИ. 2002. - № 4. - С. 55-57.

28. Бухарин, О.В. / Механизмы выживания бактерий / О.В. Бухарин, A.JI. Гинцбург, Ю.М. Романова и др. — М.: Медицина, 2005. — 367с.1o

29. Бухарин, О.В. / Ассоциативный симбиоз / О.В. Бухарин, Е.С. Лобакова, Н.В. Немцева, C.B. Черкасов // Екатеринбург:УрО РАН, 2007. 264 с.

30. Вартанян, Ю.Д. / Отек лап белых мышей — тест для оценки активности энтеротоксинов E.coli / Ю.Д. Вартанян // Бюлл.экспер.биолог. и мед. 1978. — №2. - С.150-155.

31. Воеводин, Д.А. / Роль дисбактериоза в формировании хронической неинфекционной патологии у детей / Д.А. Воеводин // Журн. Микробиология. 2001. - №6. - С. 88-93.

32. Воробьев, A.A. / Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции / A.A. Воробьев, Е.А. Лыкова // Микробиология. 1999. - №6. - С.102-105.

33. Воробьев, A.A. / Исследование пристеночной микрофлоры кишечника человека / A.A. Воробьев, Ю.В. Несвижский, Е.М. Липицкий // Микробиология. 2003. - №1. - С. 60-63.

34. Воробьев, A.A. / Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их регуляция бифидосодержащими пробиотиками /

35. A.A. Воробьев, В.М. Бондаренко, Е.А. Лыкова и др. // Вест. РАМН. 2004. -№2.-С. 13-17.

36. Габидуллин, З.Г. /Характеристика свойств, определяющих персистенцию моно- и ассоциированных культур условно-патогенных энтеробактерий / З.Г. Габидуллин, Ю.З. Габидуллин, A.A. Ахтариев // Микробиология. -2006. № 4. - С. 62-64.

37. Габидуллин, З.Г. / Факторы патогенности бактерий семейства Enterobacteriacae, обеспечивающие выживание в организме хозяина / З.Г. Габидуллин, A.A. Ахтариева, М.М. Туйгунов, Р.С.Суфияров,

38. B.Г. Туйгунова, P.P. Суфияров, Ю.З. Габидуллин, В.М. Изикаев, Г.А. Идиатуллина // Медицинский вестник Башкортостана. — 2009. Т. 4, №5.-С. 86-94.

39. Гайдеров, А.А. / Изучение свойств штаммов Escherichia coli М-17 и Bacillus subtilis 1719 на модели экспериментального дисбактериоза: Автореф. дис. . канд.мед.наук / А.А. Гайдеров. — Москва, 2007. 19с.

40. Генис, Д.Е. / Медицинская паразитология / Д.Е. Генис. // М.: Медицина, 1991.-238 с.

41. Глебова, Н.С. / Особенности микробиоценозов кожи и кишечника при экземе на фоне инвазии Blastocysts hominis: Автореф. дис. канд. биол. наук /Н.С. Глебова. Ульяновск, 2007. - 22 с.

42. Грачева, Н.М. / Пробиотические препарты в терапии и профилактике дисбактериоза кишечника / Н.М. Грачева, В.М. Бондаренко // Инфекц. болезни. 2004. -Т.2. - № 2. - С. 53.

43. Гриневич, В.Г. / Клинические аспекты диагностики и лечения дисбиоза кишечника в общетерапевтической практике: учебно-методическое пособие / состав. В.Г. Гриневич и др. / под ред. В.И. Симаненкова. — СПБ., 2003. — 36 с.

44. Гумаюнова, Н.Г. / Новые подходы к диагностике кишечного дисбиоза у пациентов с псориатической болезнью / Н.Г. Гумаюнова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, М.А. Магомедов // Вестник РУДН. Серия «Медицина». 2009. -№2. - С. 93-97.

45. Дегтяр, Ю.С. / Роль дисбиотических нарушений в развитии микробной экземы у жителей Крайнего Севера / Ю.С. Дегтяр, Л.П. Лисишникова, Ж.В. Пономарева // Российский журнал кожных и венерических болезней. — 2005.-№2. -С. 37-39.

46. Дельфин, М. / Cryptosporidium sp. у детей на Кубе / М. Дельфин, Э. Санхурхо // Мед. паразитология. 1989. - № 4. - С. 36-39.

47. Дерябин, А.Г. / Стафилококки: Экология и патогенность / А.Г. Дерябин // Екатеринбург: УрО РАН, 1996. 238 с.

48. Евтодиенко, В.Г. / Этиологический фактор при острых кишечных инфекциях / В.Г. Евтодиенко, О.Н. Котец, А.Г. Халаку // Материалы VIII съезда ЭМИП. М, 2002. -Т.2. С. 169.

49. Егорова, С.А. / Характеристика бактерий рода Klebsiella, выделенных при дисбиозах кишечника: Автореф. дис. . канд.мед.наук. / С.А. Егорова. С-Петербург, 2007. - 23 с.

50. Егорова, Т.Н. / Роль бактериальных токсинов в патогенезе гемолитико-уремического синдрома, вызванного энтерогемолитическими эшерихиями / Т.Н. Егорова, В.М. Бондаренко, Д.В. Зверев // Микробиология. 2001. - №1. - С.82-89.

51. Ермак, Т.Н. / Вторичные заболевания у больных ВИЧ-инфекцией в России / Т.Н. Ермак, А.В. Кравченко, О.Г. Юрин // Эпидемиология и инфекционные болезни. 1998. - № 5. - С. 32-35.

52. Ефимов, Б.А. / Характеристика микроорганизмов, колонизирующих кишечник человека / Б.А. Ефимов, Н.Н. Волошин, Л.И. Кафарская // ЖМЭИ. 2002. - № 5. — С. 98-104.

53. Ефимов, Б.А. / Современные методы оценки качественных и количественных показателей микрофлоры кишечника и влагалища / Б.А. Ефимов, Л.И. Кафарская, В.М. Коршунов // ЖМЭИ. 2002. - № 4. -С. 72-78.

54. Жеребцов, Н.Ю. / Генетические маркеры патогенности условно-патогенных энтеробактерий, выделенных у детей и подростков при острых кишечныхинфекциях / Н.Ю. Жеребцов и др. // Журн. Микробиолог. 2007. - №2. -С.З.

55. Звягинцева, Т.Д. / Дисбактериоз кишечника: клиническое значение и перспективы лечения / Т.Д. Звягинцева, Е.И. Сергиенко // Экспериментальная клиническая гастроэнтерология. 2003. — №3. — С. 70-74.

56. Иванов, В.П. / Повышение точности лабораторной диагностики дисбактериоза / В.П. Иванов, А.Г. Бойцов, Е.А. Нилова // Вестник СПбГМА им. И.И. Мечникова. 2003. - № 1. - С. 75-76.

57. Иванова, Т.Н. / Микробиологические особенности дисбиоза кишечника у жителей крайнего севера: Автореф. дис. . канд. мед.наук. / Т.Н. Иванова. -Пермь, 2007. 27с.

58. Ивашкин, В.Т. / Синдром диареи / В.Т. Ивашкин, A.A. Шептулин. -М.: ГЭОТАР Медиа, 2000. 135 с.

59. Камышева, К.С. / Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии / К.С. Камышева. Ростов н/Д: Феникс, 2009. - С. 43.

60. Коршунов, В.М. / Качественный состав нормальной микрофлоры кишечника у лиц различных возрастных групп / В.М. Коршунов и др. // Журн. Микробиология. 2001. - № 2. - С. 57-62.

61. Квасова, H.A. / Биологические свойства простейших Blastocystis hominis и их влияние на микроэкологию кишечника: Автореф. дис. канд. биол. наук / H.A. Квасова. Волгоград, 2002. — 22 с.

62. Киреева, Н.В. / Тактика ведения пациентов с нарушениями микробиоценоза кишечника в сочетании с кожными проявлениями / Материалы шестой международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в XXI веке» // М.: 2005. С. 227-228.

63. Клеганов, В.К. / Выявление энтеротоксигенных эшерихий при помощи теста отека лапы белой мыши / В.К. Клеганов // Острые кишечные инфекции: республиканский сборник. Д., 1980. - Вып.4. - С. 96-103.

64. Козлов, С.С. / Кишечные простейшие и их роль в патологии желудочно-кишечного тракта человека / С.С. Козлов, A.B. Ласкин // Санкт-Петербург-Гастро. 2006. - №1-2. - С. 70.

65. Красноперова, Ю.Ю. / Микрофлора кишечника при бластоцистной- инвазии. Практические рекомендации / Ю.Ю. Красноперова, Н.И. Потатуркина-Нестерова, И.Н. Исаева, H.A. Квасова, A.C. Нестеров, Р.Ф. Бурганова Ульяновск: УлГУ, 2003. 23 с.

66. Кретинин, C.B. / Экспериментальное обоснование сочетанного применения антибиотика и окситоцина в лечении абдоминального сепсиса: Автореф. дис. . канд.мед.наук. / C.B. Кретинин. Оренбург, 2008. -21 с.

67. Курзин, A.B. / Влияние паразитических простейших на изменение биоэкологических свойств участников микробоценоза кишечника: Автореф. дисканд.мед.наук. / A.B. Курзин. Ульяновск, 2009. — 23 с.

68. Куропатенко, М.В. / Паразитозы, лямблиоз и аллергические заболевания в детском возрасте / М.В. Куропатенко^ Т.Ю. Бандурина, H.A. Безушкина // РМЖ. 2003. - № 3. - С. 3-6.

69. Леванова, Л.А. / Возрастные особенности микробиоценоза кишечника у жителей г. Кемерово / Л.А. Леванова и др. // Журн. Микробиология. — 2001.-№3.-С. 72-75.

70. Леванова, Л.А. / Особенности биологических свойств, условно-патогенных бактерий, определяющих характер дисбиотических нарушений в составе нормальной микрофлоры толстой кишки / Л.А. Леванова, В.А. Алешкин,

71. A.A. Воробьев, B.A. Леванова, B.M. Бондаренко // Микробиология. 2002. -№5.-С. 48-53.

72. Лобзин, Ю.В. / Дисбактериозы кишечника / Ю.В. Лобзин, В.Г. Макаров, Е.Р. Корвякова, С.М. Захаренко // СПб.: Фолиант, 2003. 256 с.

73. Лысенко, А.Я. / Клиническая паразитология / А.Я. Лысенко, М:Г. Владимова, A.B. Кондрашин A.B. // Женева. — 2002. — С. 65-66.

74. Мавзютов, А.Р. / Острова патогенности условно-патогенных эентеробактерий / А.Р. Мавзютов, C.B. Фиалкина, В.М. Бодаренко // Журн. Микробиология. 2002. - №6. - С. 5-9.

75. Мавзютов, А.Р. / Факторы патогенности оппортунистических энтеробактерий и их роль в развитии диареи / А.Р. Мавзютов и др. // Журн. Микробиология. 2007. - №1. - С. 89-97.

76. Мамбетова, Э.Ф. / Сравнительная характеристика некоторых биологических свойств монокультур и сокультивируемых вариаций бактерий рода Serratia и Staphylococcus aureus: Автореф. дис. . канд.мед.наук. / Э.Ф. Мамбетова. Челябинск, 2007. - 21 с.

77. Маянский, А.Н. / Патологическая микробиология / А.Н. Маянский. — Н.Новгород: Изд-во НГМА, 2006. С. 320.

78. Митрохин, С.Д. / Дисбактериоз: современный взгляд на проблему / С.Д. Митрохин // Инфекции и антимикробная терапия. 2000. - Т.2. - № 5. — С. 12-15.

79. Нестеров, A.C. / Особенности патогенеза и терапии хронических дерматозов при бластоцистной инвазии: Автореф. дис. . канд. мед. наук. / A.C. Нестеров. С.-Петербург, 2009. - 41 с.

80. Нестерова, М.В. / Экспериментально-клиническая разработка метода лазерной флуоресцентной диагностики дисбиоза кишечника у детей: Автореф. дис. . канд.мед.наук. / A.M. Нестерова. -Москва, 2001. 25 с.

81. Николаева, Т.Н. / Иммуностимулирующая и антиканцерогенная активность нормальной лактофлоры кишечника // Эксперим. клин, гастроэнтерол. — 2004.-№4.-С. 39-43.

82. Онищенко, Г.Г. / Заболеваемость паразитарными болезнями в Российской федерации и основные направления деятельности по ее стабилизации / Г.Г. Онищенко // Медицинская паразитология. 2002. - № 4. - С. 3-10.

83. Паразитологические методы лабораторной диагностики гельминтозов и протозоозов // Постановление Главного государственного санитарного врача РФ. 25.02.1999. - МУК № 4.2.735-99.

84. Парфенов, А.И. / Синдром раздраженного кишечника. В кн.: Избранные главы клинической гастроэнтерологии / Под ред. Лазебника Л.Б // М.: Анахарсис,- 2005.- С. 272-276.

85. Плотников, А.О. / Механизмы формирования протозойно-бактериальных ассоциаций в водных экосистемах: Автореф. дис. . канд.мед.наук. / А.О. Плотников. Оренбург, 2002. - 23 с.

86. Плотников, А.О. / Персистентные свойства бактерий-ассоциантов простейших / А.О. Плотников, Н.В. Немцева, О.В. Бухарин // Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2002. - № 4. - С. 60-62.

87. Поздеев, O.K. / Энтеробактерии: руководство для врачей / O.K. Поздеев, Р.В. Федоров // М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. С. 322-349.

88. Покателов, A.A. / Бактериальная колонизация и сукцессия у больных хирургических стационаров с различной экологической нагрузкой в условиях крупного промышленного города: Автореф. дис. . канд.мед.наук. / A.A. Покателов. Волгоград, 2009. — 23 с.

89. Постникова, Е.А. / Изучение качественного и количественного состава микрофлоры кишечника у клинически здоровых детей в раннем возрасте / Постникова Е.А. и др., // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2004. - №1. - С. 62-67.

90. Потатуркина-Нестерова Н.И. / Простейшие Blastocystis hominis и их воздействие на макроорганизм / Н.И. Потатуркина-Нестерова, Н. В. Бугеро, H.A. Ильиа // СПб.: Наука, 2009. С. 25-30.

91. Потатуркина-Нестерова, Н.И. / Бластоцистоз протозооз человека / Квасова H.A., Исаева И.Н., Красноперова Ю.Ю., Бурганова Р.Ф., Чебан Н.М., Богомолова JT.K./ Журн. Медицинская паразитология и паразитарныеболезни. 2004.-№ 4. - С. 58-61.

92. Приказ Минздрава России от 09.06.2003 г. № 231 «Об утвержденииотраслевого стандарта «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (ОСТ 91500.11.0004-2003).

93. Прозоркина, Н.В. / Основы микробиологии, вирусологии и иммунологии: Учебное пособие для специальных медицинских учебных заведений / Н.В. Прозоркина, JI.A. Рубашкина // Ростов н/Д: Феникс, 2006. С. 161-163.

94. Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника: ОСТ 91500.11.0042003: утв. Минздравом РФ. 09.06.03. М., 2003. - 115с.

95. Пыльцев, М.А. / Введение в молекулярную медицину / М.А. Пыльцев // М.: Медицина. 2004. - 496 с.

96. Реброва, О.Ю. / Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica / Реброва О.Ю. // М.: МедиаСфера. — 2002.-312 с.

97. Романенко, H.A. / Среда обитания человека и паразитарные болезни / H.A. Романенко, Н.С. Малышева // М.: 2002. 63 с.

98. Рыбальченко, О.В. / Проявление антагонистического действия бактериоциногенных Lactobacillus acidophilus на клетки Klebsiella pneumoniae, Citrobacter freundii и Proteus mirabilis / О.В. Рыбальченко,

99. B.M. Бондаренко, Н.Б. Вербицкая // Журн. Микробиология. 2006. - № 7.1. C. 8-11.

100. Савицкая К.И. / Оценка микроэкологии содержимого толстой кишки у больных хроническим панкреатитом / К.И. Савицкая, Е.Ф. Мельникова,

101. A.А. Воробьев, Н.В. Загальская // Вестник Рос. АМН. 2002. - № 4. -С. 20-23.

102. Ш.Сахарова, Т.В. / Изучение морфологии бластоцист низших обезьян с помощью световой микроскопии / Т.В. Сахарова, J1.M. Гордеева,

103. B.П. Сергиев // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. -1997.-№2.-С. 24-27.

104. Сергиев, В.П. / Паразитарные болезни человека, их профилактика и лечение / В.П. Сергиев, М.П. Лебедева, А.А. Фролова // Эпидемиол. и инф. болезни. 1997.-№2.-С. 8-12.

105. Сереброва, С.Ю. / Ятрогенный дисбиоз кишечника у гастроэнтерологических больных / С.Ю. Сереброва // Русский медицинский журнал. 2006. - Т. 14, №29.-С. 2110-2116.

106. Сидоренко, С.В. / Инфекционный процесс как «диалог» между хозяином и паразитом / С.В. Сидоренко // Клин, микроб, антимикроб, химиотерапия. -2001. Т. 3, № 4. - С. 301-315.

107. Совершенствование методов диагностики дисбактериоза толстого кишечника: инф. письмо / состав. В.П. Иванов, А.Г. Бойцов, А.Д. Коваленко // СПб. гос. мед. акад. им. И.И. Мечников. СПб., 2002. - 31 с.

108. Справочник «Медицинские лабораторные технологии» / Под ред. А.И. Карпищенко // СПб.: 1999. Т. 2. - 656 с.

109. Сурикова Е.В. / Диагностическая ценность определения факторов персистенции клебсиелл при дисбактериозах / Е.В. Сурикова, Л.А. Леванова // Журн. Микробиология. 1999. - № 4. - С. 87-88.

110. Терновская, JI.H. / Особенности микробиоценоза толстой кишки людей с дисфункциональными расстройствами билиарного тракта / Л.Н. Терновская, М.Н. Гапон, Н.С. Хиштова // Журн. Микробиология. 2009. - № 23. - С. 8992.

111. Титов, Л.П. / Использование продигиозана и тактивина в лечении больных хроническими клебсиеллезами / Л.П. Титов, Ж.Г. Шабан, А.И. Картель // Журн. Микробиология. 2001. - № 5. - С. 46-49.

112. Токмалаев, А.К. / Гельминтозы человека / А.К. Токмалаев // Русский медицинский журнал. 2001. - Т.9. -№16-17. - С. 690-693.

113. Торопова, Н.П. / Паразитарная флора кишечника у детей, страдающих атопическим дерматитом. Аспекты диагностики и патогенеза / Н.П. Торопова, Н.А. Сафронова, Л.М. Гордеева // Российский журнал кожных и венерических болезней. 1998. — № 2. - С. 27-32.

114. Тришин, А. В. / Сопряженный синтез некоторых секретируемых факторов патогенности Klebsiella pneumoniae / А.В. Тришин, М.Ю. Жданович, Л.В. Саватеева // Вестник Российской Академии медицинских наук. — 2005. № 9. - С. 43-47.

115. Туйгунов, М.М. / Молекулярные механизмы взаимоотношений организма и патогенных энтеробактерий / М.М. Туйгунов, З.Г. Габидуллин, А.В. Зурочка // Микробиология. 2003. - № 4. - С. 23-27.

116. Турчанинов, Д.В. / Гнойно-септические инфекции новорожденных в перинатальном центре / Д.В. Турчанинов, В.Л. Стасенко, С.В. Николаев // Материалы VIII съезда ЭМИП. Москва. - 2002. - Т. 3. - С. 172-173.

117. Фиалкина, С.В. / Генетические детерминанты патогенности клинических штаммов Klebsiella pneumoniae: Автореф. дис. . канд. биол. наук. / С.В. Фалкина. Москва, 2004. - 21 с.

118. Хаитов, P.M. / Микробиоценоз: кишечника и иммунитет / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин // Русский медицинский журнал. 2003. — № 11. - С. 122-125.

119. Циммерман, Я.С. / Дисбиоз (дисбактериоз) кишечника и/или «синдром избыточного бактериального роста» / Я.С. Циммерман // Клиническая медицина. 2005. - №4. - С. 14-22.

120. Чайка, Н.А. / Бластоцистоз и СПИД / Н.А. Чайка // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1992. - № 4. - С. 48-51.

121. Чеснокова, М.Г. / Формирование дисбактериоза у больных полипозом толстого кишечника: Автореф. дис. . док. мед. наук. / М.Г. Чеснокова. -Москва, 2003.-35 с.

122. Шагинян, И.А. / Роль и место молекулярно-генетических методов в эпидемиологическом анализе внутрибольничных инфекций / И.А. Шагинян // Клин, микробиол. атимикробн. химиотерапии. 2000. - Т. 2. - № 3. -С. 82-94.

123. Abo-Amer, A.E. Chromosomal-gene-mediated inhibition of intestinal and foodbome pathogens by Lactobacillus acidophilus AA1 / A.E. Abo-Amer // Rev. Latinoam Microbiol. 2006. - № 48(1). - P. 24-30.

124. Abul-Milh, M. / Induction of epithelial cell death including apoptosis by enteropathogenic Escherichia coli expressing bundle-forming pili / M. Abul-Milh, Y. Wu, B. Lau // Infect Immun. 2001. - Vol.69 (12). - P. 7356-64.

125. Ahmed, M. / Impact of consumption of different levers of Bifidobacterium lactis HNO 19 on the intestinal microflora of elderly human subjects / M. Ahmed, J. Prasad, H. Gill et ab // J.Natur. Health Aging. 2007. - Vol.1. - P. 26-31.

126. Albano, F. / Structural and functional faetureus of modified heat-stable toxins produced by enteropatogenic Klebsiella cells. / F. Albano, M.R. Thompson, S. Orru et al. // Pediatr Res. 2000. - Vol. 48 (5). - P. 685-90.

127. Amin, O.M. / Seasonal prevalence of intestinal parasites in the United States during 2000 / O.M. Amin // Am. J. Trop. Med. Hyg. 2002. - V. 66(6). -P. 799-803.

128. Are, A. / Enterococcus faecalis from newborn babies regulate endogenous PPARgamma activity and IL-10 leves in colonic epithelial cells / A. Are, L. Aronsson L., S. Wang et al. // Proc/ Natl. Acad/ Sei. USA. 2008. - Vol. 12, № 105.-P. 1943-1948.

129. Arribas, J.M. / Acute infectious lymphocytosis associated to Giardia lamblia and Blastocystis hominis coinfection / J.M. Arribas, G.H. Fernandes // An. Esp. Pediatr. 2001. - Vol. 54(5). - P. 518-520.

130. Arienti, H. / Prevalence of enteroparasites in a residence for children in the Cordoba Province, Argentina / H. Arienti // Eur. J. Epidemiol. 2000. - Vol. 16. — P.287-293.

131. Basu, S. / An unusual case of neonatal brain abscess following Klebsiella pneumoniae septicemia / S. Basu, K.K. Mukherjee, B. Poddar // Infection. — 2001. Vol. 29(5). - P. 283-285.

132. Bingen-Bidous, M. / Phylogenetic analysis and prevalence of urosepsis strains of Escherichia coli bearing pathogenicity island-like domains / M. Bingen

133. Bidous, O. Clermont, S. Bonacorsi et al. // Infect. Immun. 2002. - Vol. 70(6). -P. 3216-3226.

134. Bouhnic, Y. / Can we modify colonic microflora and what end / Y. Bouhnic // Gastroenterol. Clin. Biol. -2001. Vol. 25, №2. - P. 101-104.

135. Boutiba-Ben Boubaker, I., Ben Salah, D., Besbes, M. / Multidrug resistance in Klebsiella pneumoniae: multicenter study / 1. Boutiba-Ben Boubaker, D. Ben Salah, M. Besbes // Tunis Med. 2002. - V. 80(1). - P. 26-28. '

136. Brisse, S. / Molecular Serotyping of Klebsiella Species Isolates by Restriction of the Amplified Capsular Antigen Gene Cluster / S. Brisse // J. Clinical Microbiology. 2004. - Vol.42, №8. - P.3388-3398.

137. Brunder, W. / Genome plasticity in Enterobacteriaceae / W. Brunder, H. Karch // Int. J. Med. Microbiol. 2000. - № 290. - P. 153-165.

138. Camli, C. / Ilymenolepis nana. 45-year-old refugee the Kosovo region with epigastric pain and detection of Hymenolepis nana and Blastocystis hominis in the stool / C. Camli, J.Blum // Int. J. STD. AIDS. 1999. - Vol. 10. - P. 780-784.

139. Casiraghi, M.C. / Effects of a symbiotic milk product on human interstinal ecosystem / M.C. Casiraghi, E.Canzi, R. Zanchi et al. // Appl. Microbiol. 2007. -Vol. 12.-P. 499-506.

140. Clark, C.G. / Methods for cultivation of luminal parasitic protists of clinical importance / C.G. Clark, L.S. Diamond // Clinical Microbiology Reviews. -2002.-Vol.15.-P.329-341.

141. Dagci, H. / Protozoon infections and intestinal permeability / H. Dagci, S. Ustun, M.S. Taner // Acta. Trop. 2002. - V. 81(1). - P. 1-5.

142. Doyle, P.W. / Epidemiology and pathogenecity of Blastocystis hominis / P.W. Doyle, M.M. Helgason // J. Clin. Microbiol. 1990. - Vol. 28. -P. 115-121.

143. Elliott, E.J. / Nationwide study of haemolytic uraemic syndrome: clinical, microbiological, and epidemiological features / E.J. Elliott, R.M. Robins-Browne, E.V. O'Loughlin et al. // Arch Dis Child. 2001. - Vol. 85(2). -P.125-131.

144. Eckburg, P.B. / Diversity of the human intestinal microbial flora / P.B.Eckburg, E.M. Bik, C.N.Bernstein // Scince. 2005; 308. - P.1635-1638.

145. Estlinbaum, T. / 50-year-old patient returning from Hawaii with changed stool habits Blastocystis homini / T. Estlinbaum, Ch.Halts // Schweiz. Rundsch. Med. Prax. 2002. - Vol. 22. - P. 936-938.

146. Garavelli, P.L. / The therapy of blastocystosis / P.L. Garavelli // J. Chemother. 1991. - Vol. 3. - Suppl. 1. - P. 245-246.

147. Guignard, S. / Prevalence of enteroparasites in a residence for children in the Córdoba province, Argentina / S. Guignard, H. Arienti, L. Freyre, H. Lujan,

148. H.Rubinstein, M. Frasi // European Journal of Epidemiology. 2000. - Vol.16. -P. 287-293.

149. Gupta, A. / Hospital-acquired infections in the neonatal intensive care unit-Klebsiella pneumoniae / A. Gupta // Semin Perinatol. — 2002. — Vol. 26, №5. -P. 340-345.

150. Harms, G. / Infections and diseases after traveling / G. Harms, F.Dorner // Dtsch. Med. Wochenschr. 2002. - Vol. 23. - P. 1748-1753.

151. Herwaldt, B.L. / Multiyear prospective study of intestinal parasitism in a cohort of Peace Coips volunteers in Guatemala / B.L.Herwaldt, K.R.de Arroyave, S.P. Wahlquist // J: Clin. Microbiol. 2001. - Vol. 39(1). - P. 34-42.

152. Hostacka, A. / Klebsiella species fporn the viewpoint of nosocomial infections and virulence factors / A. Hostacka // Epidemiol. Microbiol. Imunol. 2001. -Vol. 50(2).-P. 92-96.

153. Horton, J. / Treatment of parasitic diseases / J.Horton // Parasitology. -Cambridge University Press. 2000. - P. 113, 132.

154. Hunter, J.O. / A review of the role of the gut microflora in irritable bowel syndrome and the effects of probiotics / J.O. Hunter, J.A. Madden // Br. J. Nutr. 2002. - 88 (suppl. 1). - P. 67-72.

155. Iqbal, J. / Cryptosporidiosis in Kuwaiti children: seasonality and endemicity / J. Iqbal, P.R. Hira, F. Al-Ali, R. Philip // Clin. Microbiol. Infect. 2001. - Vol. 7(5).-P. 261-266.

156. Inoue, M. / Hospital outbreak of MEN-1-derived extended spectrum beta-lactamase-producing Klebsiella pneumoniae / M. Inoue // J Infect Chemother. -2001.-Vol. 7(2).-P. 124.

157. Jacob-Dubuisson, F. / Two-pertner secreyion in gram-negative bacteria: a thrifty, specific pathway for large virulence-proteine / F. Jacob-Dubuisson, C. Locht, R. Antoine // Mol. Microbiol. 2001. - Vol. 40(2). - P. 306-313.

158. Katz, D.E. / Parasitic infections of the gastrointestinal tract / D.E.Katz, D.N. Taylor // Gastroenterol. Clin. North. Am. 2001. - Vol. 30(3). -P. 797-815.

159. Koszura, R. / Occurrence of the Yersinia high-pathogenicity island and iron uptake systems in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae/ R. Koszura, A. Kaznowski // Microbial Pathogenesis. 2003. - Vol. 35, №5. - P. 197-202.

160. Langstraat, J. / Type 3 fimbrial shaft (MrkA) of Klebsiella pneumoniae, but not the fimbrial adhesion (MrkD), facilitates biofilm formation / J. Langstraat, M Bohse, S. Clegg // Infection and Immunity. 2001. - Vol. 69, № 9. -P. 5805-5812.

161. Larrosa-Haro, A. / Utility of studying feces for the diagnosis and management of infants and preschool children with acute diarrhea // Salud. Publica. Mex. -2002. V. 44(4). - P. 328-334.

162. Lebbad, M. / Intestinal parasites in HIV-2 associated AIDS cases with chronic diarrhoea in Guinea-Bissau // Acta. Trop. 2001. - V. 80(1). - P. 45-49.

163. Lee, J.D. / A survey on the intestinal parasites of the school children in Kaohsiung country / J.D. Lee, J.J.Wang, L.Y.Chung // Kaohsiung. J. Med. Sei. -2000. Vol. 16(9). - P. 452-458.

164. Le Minor, L. / Methodes de labaratoire pour l'indentification des enterobacteries / L. Le Minor, C. Richard.// Institut Pasteur, Paris. 1993. -271 p.

165. Liliang, P.S. /Klebsiella ascess in adults / P.S. Liliang, Y.C. Lin, T.M. Suet al. // Infection. 2001. - Vol. 29(2). - P. 81-86.

166. Long, H.Y. / Blastocystis hominis modulates immune responses and cytokine release in colonic epithelial cells / H.Y. Long, A. Handschack, W. König, A. Ambrosch // Parasitol. Res. 2001. - Dec. - Vol. 87(12). - P. 1029-1030.

167. Manson, J.M. / A clonal lineage of Van A-type Enterococcus faecalis predominates in vancomycin-resistant enterococci isolated in New Zealand / J.M. Manson, S. Keis, J.M. Smith, G.M. Cook // Antimicrob. Agents Chemother. 2003. - Vol. 47. - P. 204-210.

168. Maroncle, N. / Identification of Klebsiella pneumoniae Genes Involved in Intestinal Colonization and Adhesion Using Signature-Tagged Mutagenesis / N. Maroncle, D. Balestrino, C.Rich et.al. // Infect Immun. 2002. - Vol. 70 (8). -P. 4729-4734.

169. Martino, P.D. / Klebsiella pneumoniae type 3 pili facilitate adherence and biofilm formation on abiotic surfaces / P.D. Martino et al. // Research in Microbiology. 2003. - Vol. 154, № 1. - P. 9-16.

170. Matsumoto, I. / Light microscopical appearence and ultrastructure of B. hominis, an intestinal parasite of man / I. Matsumoto, M. Iamada, I.Ioshida // Zentral. Bacteriol. Microbiol. Hyg. A. 1987. - Vol. 264. - P. 379-385.

171. Miller, S.A. / Intestinal parasitic infection and associated symptoms in children attendig day care centres in Trujillo, Venezuela / S.A. Miller, C.L. Rosaroi, E. Rojas // Tropical Medicine and International Health. 2003. - Vol. 8. - № 4. -P. 342.

172. Moe, K.T. / Development of Blastocystis hominis cysts into vacuolar forms in vitro / K.T. Moe // Parasitol Res. 1997. - Vol. 85. - № 2. - P. 103-108.

173. Moe, K.T. / Cytopathic effect of Blastocystis hominis after intramuscular inoculation into laboratory mice / K.T. Moe, M. Singh, P.Gopalakrishnakone, L.C.

174. Ho, S.W. Tan, X.Q. Chen, E.H. Yap // Parasitology Research. 1998. - Vol. 84. -P. 450-454.

175. Mohandas, S. / Prevalence of intestinal parasitic pathogens in HIV-seropositive individuals in Northern India / S. Mohandas, R. Sehgal, A. Sud, N. Malla // Jpn. J. Infect. Dis. 2002. - Jun. - V. 55(3). - P. 83-84.

176. Muhldorfer, I. / Genetic aspects of Escherichia coli virulence Mini-review / I. Muhldorfer, J. Hacker // Microbial Pathogenes. 1994. - Vol. 16. - P. 171-181.

177. Niyogi, S.K. / Enteroaggregative Klebsiella pneumoniae in association with childhood diarrhea / S.K. Niyogi, A.Pal, U. Mitra et. al. // Indian J Med Res. -2000.-Vol. 112.-P. 133-134.

178. Oyofo B.A. / Enteropathogens associated with acute diarrhea in community and hospital patients in Jakarta, Indonesia / B.A. Oyofo, D. Subecti // FEMS. Immunol. Med. Microbiol. 2002. - Oct. - Vol. 11; 34(2). - P. 139-146.

179. Phuong L. / Enteropathogenic Klebsiella pneumoniae in HIV-Infectd Adults, Africa / L. Phuong L, Thi Nguyen et al. // Emerging Infectious Diseases. — 2003. — Vol. 9,№ l.-P. 135-137.

180. Podschun R. / Incidence of Klebsiella species in surface waters and their expression of virulence factors // Appl Environ Microbiol. 2001. - Vol. 67. №7. - P. 3325-3327.

181. Qiao J. /Morphological observation on Blastocystis hominis II Zhongguo Ji Sheng Chong Xue Yu Ji Sheng Chong Za Zhi. 1998. - V. 16(2). - P. 124-125.

182. Rae, M.C. / O'Connor et al. Antimicrobial activity of lacticin 3,147 against clinical Clostridium difficile strains / M.C. Rae, Clayton E., O'Connor P.M. et al. // J. Med. Microbiol. 2007. - Vol.7. - P. 940-946.

183. Ronald, A. / The etiology of urinary tract infection: traditional and emerging pathogenes / A. Ronald // Am. J. Med. 2002. - Vol.8. - P. 14-19.

184. Scanlan, P.D. / Human methanogen diversity and incidence in healthy and diseased colonic groups using mcrA gene analysis / P.D. Scanlan, F. Shanahan, J.R. Marchesi // BMC Microbiology. 2008. - Vol. 8. - P. 79.

185. Sechi, L. A. / Molecular analysis of Klebsiella pneumoniae strains isolated in pediatric wards by ribotyping, pulsed field gel electrophoresis and antimicrobial susceptibilities / L. A. Sechi et al. // New Microbiologi. 2001. - Vol.24. №1. -P. 35-45.

186. See, K. / Multiplex PCR for detection of Enterobacteriaceae in blood / K. See, D.M. Asher // Transfusion. 2001. - Vol. 41, №1. - P. 1356-64.

187. Skotland, E.I. / Bacterial microflora of normal and telangiectatic livers in cattle / Skotland E.I., Edwards J.F., Roussel et al. // J. Am. Vet. Med. Assos. 2001. -Vol. 219, №1.-P. 36-39.

188. Suresh K. / Tubulovesicular elements in Blastocystis hominis from the caecum of experimentally-infected rats // International Journal for Parasitology. — 1995. — Vol.25. P.123-126.

189. Taamasri, P. / Prevalence of Blastocystis hominis carriage in Thai army personnel based in Chonburi, Thailand / P. Taamasri, S. Leelayoova // Mil. Med. 2002. - Aug. - Vol. 167(8). - P. 643-646.

190. Taamasri, P. / Transmission of intestinal blastocystosis related to the quality of drinking water // Southeast Asian Journal Tropical Medicine and Public Health. -2000. Vol.31. -P.112-117.

191. Tan, K.S. / Recent advances in Blastocystis hominis research: hot spots in terra incognita // Int. J. Parasitol. 2002. - Jun. - Vol. 15. - P. 789-804.

192. Tantillo, M.G. / Bacteriocin-producing Lactobacillus sake as starter culture in dry sausages / M.G. Tantillo, P.A. Di, L. Novello et al. // New Microbiol. 2002. -Vol. 25, №1.-P. 45-49.

193. Vdovenko, A.A. / Blastocystis hominis: origin and significance of vacuolar and granular forms / A.A. Vdovenko // Parasitol. Res. 2000. - Vol. 86. - P. 8-10.

194. Wang, K.X. / Epidemiological survey of Blastocystis hominis in Huainan City, Anhui Province, China / K.X. Wang, C.P. Li, J.Wang 11 World. J. Gastroenterol. -2002. Oct. - V. 8(5). - P. 928-932.

195. Yoshikawa, H. / Genomic analysis of Blastocystis hominis strains isolated from two long-term health care facilities / H.Yoshikawa, N.Abe, M. Iwasawa, S.Kitano, I.Nagano, Z.Wu, Y.Takahashi // J. Clin. Microbiol. 2000. - Vol.38. - P. 13241330.

196. Zierdt, C.H., Rude, W.S., Bull, B.S. / Protozoan characteristics of B. hominis / C.H. Zierdt, W.S. Rude, B.S. Bull // Am. J. Clin. Pathol. 1967. - V. 48. -P. 495-501.

197. Zierdt, C.H. / Blastocystis hominis a longmisunderstood intestinal pathogen / C.H. Zierdt // Parasitol. Today. 1988. - Vol. 4. - P. 15-19.

198. Zierdt, C.H. / B. hominis Past and future / C.H. Zierdt // Clin. Microbiol. Rev. - 1991.-Vol. 4.-P. 61-79.

199. Zierdt, C.H. / Enzyme-linked immunosorbent assay for detection of serum antibody to B. hominis in symptomatic infections / C.H. Zierdt, W.S. Zierdt // J. Parasitol. 1996. - Vol. 81. - P. 127-129.

Информация о работе

Бурганова, Рамиля Фаритовна
кандидата медицинских наук
Челябинск, 2011
ВАК 03.02.03

Диссертация

Изменение патогенности Klebsiella pneumoniae при дисбиозе кишечника, вызванного бластоцистной инвазией - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы