Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфогенетическая активность деморфина и его аналогов в различных клеточных популяциях
ВАК РФ 03.03.04, Клеточная биология, цитология, гистология
Автореферат диссертации по теме "Морфогенетическая активность деморфина и его аналогов в различных клеточных популяциях"
00460Э&4]
На правах рукописи
'гч
\ V й
\М\К>
ФЛЕИШМАН
Марина Юрьевна
МОРФОГЕНЕТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ДЕРМОРФИНА И ЕГО АНАЛОГОВ В РАЗЛИЧНЫХ КЛЕТОЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЯХ
03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология
Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук
1 6 СЕН 20Ю
Владивосток 2010
004609641
Работа выполнена в Центральной научно-исследовательской лаборатории ГОУ ВПО «Дальневосточный государственный медицинский университет Росздрава»
Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ,
доктор медицинских наук, профессор Тимошин Сергей Серафимович
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор
Склянов Юрий Иванович ГОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет Росздрава»
доктор биологических наук Вараксин Анатолий Алексеевич
ГУ Институт биологии моря, г. Владивосток
доктор медицинских наук, профессор Елисеева Екатерина Валерьевна ГОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет Росздрава»
Ведущая организация: ГУ НИИ морфологии человека РАМН
(г. Москва)
Защита диссертации состоится 22 октября 2010 года
в «_» часов на заседании диссертационного совета Д 208.007.01 при ГОУ ВПО
«Владивостокский государственный медицинский университет Росздрава» (690002, г. Владивосток, пр. Острякова, 2).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Владивостокского государственного медицинского университета по адресу: 690002, г. Владивосток, пр. Острякова, 2
Автореферат разослан «
2010 года.
Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор
Г. В. Рева
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы Регуляторные пептиды филогенетически самая древняя форма управления. Они обнаружены у прокариот и выявлены, фактически, во всех тканях млекопитающих. Это дало основание для положения, что, «все органы и ткани животных являются эндокринными и секре-тируют гормоны пептидной природы» (Панков Ю. А., 1996; 2005).
Семейство опиоидных пептидов наиболее многочисленное и самое изученное из представителей регуляторных пептидов (Зайцев С. В. и соавт. 1993; Ашмарин И. П., 2005). Выделение эндогенных опиоидных пептидов изменило представление о функционировании регуляторных систем. Рецепторы опиоидных пептидов были идентифицированы в нейронах, в клетках иммунной и эндокринной систем, в клетках ЖКТ и др. Способность клеток интегративной системы секретировать различные регуляторные пептиды, а также наличие на них рецепторов к этим пептидам обеспечивает «закольцованность» интегративных систем в единый регуляторный континуум (Koroleva S. V., Ashmarin I. P., 2002, 2006).
w Высокая физиологическая активность РП послужила толчком для создания на основе их химических аналогов фармакологических препаратов. Список подобных лекарств исчисляется сотнями (Oliver K.R. et al., 2000; Brain S.D., Сох H.M., 2006; Delgado M., Ganea D., 2008). Это в полной мере относится к опиоидным пептидам.
Дерморфины - особый класс семейства опиоидных пептидов. У всех природных дерморфинов присутствует N-концевая последовательность Tyr-D-Ala-Phe, в которой между двумя ароматическими кольцами Туг и Phe расположен D-аминокислотный остаток аланина, что обусловливает специфику биологической активности дерморфинов. Устойчивость дерморфина к действию эндогенных пептидаз, а также уникальная анальгетическая активность, превышающая этот показатель у морфина на два порядка, послужили предпосылкой для создания синтетических аналогов дерморфина.
Изучение биологической активности пептидов выявило их адап-тогенные свойства, способность влиять на терморегуляцию, сон и оказывать антиалкогольное воздействие (Громова Е.А. и соавт., 1989; Ярова Е.П., 1990; Ковальзон В.М. и соавт., 2002; Емельянова Т.Г. и соавт., 2007; Reddy Р. A. et al., 2009). В наших предыдущих исследованиях было установлено, что дерморфин и его аналоги вовлечены в регуляцию процессов клеточного деления.
Одна из тенденций современных фундаментальных исследований в биологии направлена на получение предпосылок к созданию на основе исследуемых эндогенных регуляторов фармакологических препаратов. В настоящее время на базе одного из аналогов дермор-фина - седатина (Н-Ащ-Туг-Б-Ак-РЬе-Иу-ОН), создается лекарственная форма. Препарат является официнальным в ветеринарии и готовится к клиническим испытаниям. Поэтому всестороннее изучение его влияния на различные дитофизиологические процессы имеет прикладное значение.
На момент начала настоящей работы оставались неизученными такие важные аспекты влияния дерморфинов, как участие в поддержании тканевого гомеостаза в условиях патологии, в частности, при НПВП-гастропатии. Неизвестны механизмы, посредством которых дерморфины реализуют свое цитопротективное действие в этих условиях. Ранее нами было изучено влияние дерморфинов на процессы пролиферации у крыс.
Вопрос о способности влияния представителей этого семейства опиатов на процессы регенерации у других представителей типа хордовых, в частности, у рыб, отсутствует. Не исследовалось влияние дерморфинов на ранние этапы онтогенеза и возможные долгосрочные эффекты аналогов дермофина.
Отсутствовали сведения о вовлеченности дерморфина и его аналогов в регуляцию процессов свободнорадикального окисления. В последние годы имеет место переосмысливание представлений о сво-боднорадикальном окислении, как важном факторе патогенеза и ре-, гуляции, в том числе, процессов клеточного деления.
Цель настоящего исследования: Изучить влияние дерморфина и его аналогов на состояние тканевого гомеостаза в различных клеточных популяциях.
Задачи исследования: ¡.Изучить характер влияния дерморфина и его аналогов, обладающих различным сродством к мю- и дельта- рецепторам, на процессы синтеза ДНК в различных клеточных популяциях.
2. Изучить характер влияния дерморфина и его аналогов на процессы синтеза ДНК при непосредственном воздействии (аппликации на роговицу и введении в культуру дермальных фибробластов).
3. Изучить характер влияния различных доз аргининсодержащего аналога дерморфина - седатина на процессы синтеза ДНК в эпителии слизистой оболочки желудка и роговицы белых крыс.
4. Изучить характер влияния аналогов дерморфина на процессы синтеза ДНК в СОЖ при НПВП-гастропатии.
5. Изучить механизмы цитопротективного действия седатина при НПВП-гастропатии.
6. Изучить характер влияния аналогов дерморфина на процессы морфогенеза осетровых рыб и оценить возможность отдаленных эффектов при обработке оплодотворенной икры пептидами.
7. Изучить возможность использования аналогов дерморфина для оптимизации процессов разведения осетровых рыб.
Научная новизна:
Впервые установлена способность седатина стимулировать процессы синтеза ДНК в эпителии желудка в широком диапазоне доз.
Впервые установлена способность седатина осуществлять про-тективный эффект при нарушении целостности СОЖ, индуцированном производными ацетилсалициловой кислоты.
Впервые установлено участие системы А^-ЫОЗ в протективном эффекте седатина при НПВП-гастропатии.
Впервые установлено, что обработка оплодотворенной икры осетровых рыб седатином оптимизирует процессы развития осетровых рыб.
Впервые разработан метод использования седатина для оптимизации процессов разведения осетровых рыб.
Практическая значимость:
1. Установленная нами способность седатина - потенциального фармакологического препарата - оказывать цитопротективные эффекты при НПВП-гастропатии, может быть использована в клинической практике для профилактики нарушений целостности СОЖ при приеме нестероидных противовоспалительных препаратов.
2. Разработанный нами метод оптимизации разведения осетровых рыб используется на рыборазводных предприятиях Дальнего Востока.
3. Обнаруженные нами закономерности влияния аналогов дерморфина на процессы синтеза ДНК в норме и при патологии могут быть использованы при планировании направленного синтеза пептидов, обладающих цитопротективным действием.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Седатин уменьшает язвенно-эрозивные поражения, индуцированные в желудке нестероидными противовоспалительными препаратами.
2. В реализации морфогенетических эффектов седатина важная роль принадлежит его способности ослаблять проявления окислительного стресса.
3. Обработка икры осетровых рыб седатином оптимизирует процессы развития молоди.
Публикации:
По материалам диссертации опубликовано 32 научных работ (из них 16 - в изданиях рекомендуемых Высшей Аттестационной Комиссией), 2 патента РФ, 4 статьи в международных журналах; 3 - тезисы докладов на конференциях с международным участием.
Апробация работы:
Основные положения диссертации представлены на 2-ом съезде физиологов Сибири и Дальнего Востока (Новосибирск, 1995); на научно-практической конференции с международным участием «Проблемы фармакологии и фармации на Дальнем Востоке» (Хабаровск, 1997); на научно-практической конференции с международным участием «Фундаментальные и клинические аспекты охраны здоровья детского и взрослого населения Дальневосточного региона» (Хабаровск, 2003); на научно-практической конференции «Актуальные проблемы гастроэнтерологии» (Хабаровск, 2010).
Внедрение результатов:
Полученные данные о характере влияния регуляторных пептидов (синтетических аналогов дерморфина) на состояние тканевого гомео-стаза внедрены в курс лекций на кафедре нормальной физиологии ДВГМУ. Использование седатина по запатентованной нами схеме применяется на рыборазводных предприятиях Крайрыбакколхозсоюза, а также на Владимировском, Анюйском и Новоамурском предприятиях.
Объем и структура диссертации:
Диссертация состоит из оглавления, списка сокращений, введения, 6 основных глав, выводов и списка литературы, включающего ссылки на публикации 152 отечественных и 331 иностранных авторов. Объем диссертации составляет 201 страницы машинописного текста и включает 24 таблицы и 27 рисунков.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Характеристика исследуемых веществ Изучали влияние дерморфина и его аналогов на морфогенетиче-ские процессы у млекопитающих и рыб. Синтез пептидов осуществлялся в лаборатории химии пептидов (Институт биоорганической химии им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН) профессором, д.м.н. В.И. Дейгиным и к.б.н. Е.П. Яровой. В настоящей работе исследовали дерморфин и пептиды, получившие условные названия в лаборатории и имевшие следующие структурные формулы:
«дерморфин» - H-Tyr-D-A]a-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 «А-10» - H-Tyr-D-Orn-Phe-Gly-OH «А-43» - H-Arg-Tyr-D-Arg-Phe-D-Ala-NH2 «А-17» - H-Arg-Tyr-D-Lys-Phe-Gly-OH «седатин» - H-Arg-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-OH «седатин без аргинина» - H-Tyr-D-Ala-Phe-Gly-OH Пептиды синтезировались с применением классического и твердофазного методов синтеза. Очистка и контроль производилась с помощью ВЭЖХ (высокоэффективной обращеннофазовой жидкостной хроматографии) и тонкослойной хроматографии, в условиях, индивидуально подобранных для каждого аналога. Содержание пептидов в сухом веществе составляло не менее 97,5%. Вещества идентифицированы данными метода 'Н-ЯМР спектроскопии высокого разрешения (500 МГц.). Мы благодарим д.м.н., проф. В.И. Дейгина за предоставленные вещества.
По результатам биологического тестирования А10 и А43 относятся, в основном, к классу (i- агонистов (tecT GPI). А17 и седатин проявляют подобные свойства в отношении |i- рецепторов, но, по сравнению с А10 и А43, активно взаимодействуют с 5- рецепторами (тест MVD).
В экспериментах, где применялся ингибиторный анализ, использовались вещества L-NAME и налоксон:
«L-NAME» - метиловый эфир №-нитро-Ь-аргинина («ICN Biomedicals Inc.», USA) - неселективный ингибитор cNOS использовался в дозе 9,3x10"5 моль/кг (Boer R. et al., 2000).
«Налоксон» - налоксон-гидрохлорид ("Endo Lab.", USA) - бло-катор опиоидных рецепторов, использовался в дозе 5,5x10 моль/кг.
g
Экспериментальные животные, объекты и методы исследования
Опыты проводили на белых крысах-самцах массой 160-210 г., и самцах белых мышей массой 25 - 30 г. Содержание животных и проведение экспериментов осуществлялось в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденными Приказом МЗ СССР № 755 от 12.08.77 г. Экспериментальные группы формировали из 8-12 животных, достоверно не различающихся между собой по показателю массы.
Животных содержали при температуре 18-20°С, естественном световом режиме и свободном доступе к воде и пище. Всего в работе использовано 1123 животных. Дерморфин и его аналоги исследовали в дозах 0,1 мкг/кг-1 мг/кг. В основной группе исследований пептид вводился в дозе 10-100 мкг/кг. Вещества вводили внутрибрюшинно с 11 до 12 часов дня. Контролем служили интактные животные, а также животные, подвергнутые инъекции эквиобъемного количества (0,1 мл на 100 г. массы тела) стерильного изотонического раствора хлорида натрия в соответствующем режиме.
Объектом исследования служили эпителиальные ткани лабораторных мышей и крыс. Изучали влияние пептидов на синтез ДНК в эпителии роговицы и слизистой оболочке фундального отдела желудка.
Кроме внутрибрюшинного введения дерморфина и его аналогов лабораторным мышам и крысам, исследовалась аппликация пептидов на роговицу и инкубация культуры фибробластов. В экспериментах с осетровыми породами рыб осуществлялась водная аппликация веществ (Лаптев В.И., 1981). В ряде экспериментов исследовали свойства пептидов в отношении заживления язв ЖКТ. На фоне пятидневного введения пептида в дозе 100 мкг/кг животные через желудочный зонд получали раствор нестероидных противовоспалительных препаратов (индометацина) в дозе 250 мг/кг, что вызывало повреждения СОЖ. Использовались зонды оригинальной конструкции (двух размеров - для мышей и крыс).
Морфометрическую оценку действия пептида осуществляли путем вычисления суммарной площади язв слизистой оболочки желудка. Использовали компьютерную морфометрическую приставку «МЕКОС-Ц»
Эвтаназию осуществляли посредством быстрой декапитации предварительно оглушенных крыс через 4 и 24 часа после заключительной инъекции пептида.
При оценке влияния аналогов дерморфина на развитие осетра амурского Acipenser schrenckii исследования проводили на икре и молоди. Получение половых продуктов и выращивание мальков амурского осетра осуществлялось в производственно-экспериментальных цехах рыболовецких колхозов «Новоамурский», Анюйский РЗ, Вла-димировский РЗ. Инкубацию осетровых осуществляли в стадии набухания оплодотворенной икры. Контрольные и подопытные образцы икры получены от одной самки для минимизации генетических различий. Каждая экспериментальная и контрольная группы включали около 30000 икринок. После вылупливания предличинок поштучно пересаживали по 2500 особей в бассейны на подращивание. Наблюдение за общим состоянием, поведенческими реакциями, а также анализ соматометрических показателей молоди осетра осуществляли в течение 2 месяцев (60 дней) - с момента выклева до периода помещения особей в естественную среду обитания. Массо-ростовые показатели, индекс упитанности по Фултону определяли на 22, 38, 60 сутки.
Процессы синтеза ДНК оценивали с помощью авторадиографии с 3Н-тимидином. Тимидин вводили в дозе 0,6 мкКи/г массы тела крысам и 1 мкКи/г массы тела мышам. Радиоавтографы изготавливали по принятой в лаборатории методике. Использовали фотоэмульсию двух видов: производства НИИХИМФОТО и KODAK Autoradigraphy Emulsion, (Type NTB, for Light Microscope Autoradiography). Индекс меченых ядер (ИМЯ) определяли на основании просмотра 2,5-3 тысяч клеток и выражали в процентах. Интенсивность метки (ИМ) подсчитывали как среднее количество зерен серебра над 50 мечеными клетками.
Определение морфометрических показателей ядрышек и ядра проводили, основываясь на работах Мамаева Н.Н. и соавт. (1989) и Цыганкова В.И. и соавт. (2004, 2006). Под притертые стекла, покрывающие депарафинированные и гидратированные срезы, вводили гель из смеси 1 части желатины, приготовленной на 1% растворе муравьиной кислоты и 2 частей 50% раствора азотнокислого серебра. Стекла выдерживали в термостате при 37° С 10-15 минут. Морфомет-рию ядрышек и ядер проводили на анализаторе изображения «МЕ-КОС-Ц», окуляр 7х, объектив 60х. Для определения содержания общего белка в мышцах рыб в препаратах, окрашенных амидочерным 10В, оценивали оптическую плотность мышечных волокон, служившую показателем концентрации суммарного белка. Измерения не менее 50 мышечных клеток каждой особи проводили на анализаторе
изображения «МЕКОС-Ц». Проводили морфометрию средней и интегральной оптической плотности миоцитов, их площади и периметра. Для интегральной оценки процессов свободнорадикального окисления гомогенатов тканей желудка и сыворотки крови использовали метод хемилюминесценции. Регистрацию XJI осуществляли на люминесцентном спектрометре LS 50В «PERKIN ELMER». Спонтанную и индуцированную Fe + XJI исследовали по методу Владимирова Ю.А. (1991) и Арутюнян A.B. (2000). Определяли: светосумму за 1 мин. спонтанной XJI (Scn ), величина которой коррелирует с интенсивностью генерации свободных радикалов; максимум быстрой вспышки (НО индуцированной XJI, свидетельствующий о содержании гидроперекисей липидов, светосумму (S„w0 за 2 мин. после "быстрой" вспышки, отражающую скорость накопления перекисных радикалов липидной природы. Кинетику XJI, инициированную Н202 в присутствии люминола анализировали по двум параметрам (Арутюнян A.B. и соавт., 2000): максимуму свечения (Н2)> указывающему на потенциальную способность биологического объекта к перекис-ному окислению, и светосумме за 2 мин. XMJI (Sinw.2), величина которой свидетельствует об активности антиоксидантной антирадикальной защиты. Интенсивность XJI, измеренную в милливольтах, рассчитывали на I г влажной ткани или в 1 мл сыворотки, выражали в относительных единицах.
Определение содержания гистамина в ткани желудка белых мышей проводили флюориметрическим методом (Сидельников Ю.Н., Сиворакша Г.А., 1994).
Исследования процессов пролиферации в культуре дермальных фибробластов белых крыс проводились на первичной культуре по методике, описанной Д.С. Саркисовым и соавт. (1995). Обработка ре-гуляторными пептидами проводилась путем добавления раствора пептида в культуральную среду в концентрации 100 мкг/мл с последующей инкубацией в течение 3 часов. Затем, для приготовления радиоавтографов, клеточные монослои помещали в раствор Н-тимидина (1 мкКи/мл) на 1 час. После отмывки монослоев в растворе Хэнкса и фиксации в 96% этаноле производили приготовление радиоавтографов по принятой в лаборатории методике.
Статистическую обработку экспериментальных данных проводили с использованием компьютерной программы «Statistica 5.5». Данные подопытных и контрольных групп подвергали статистической обработке с использованием t-критерия Стьюдента. Различия
считали достоверными при р<0,05 (Рокицкий П.Ф., 1961; Сепетлиев Д.А., 1968; Боровиков В.П., 1998).
Результаты исследования и их обсуждение
Собственные исследования подразделяются на три части:
1. Влияние дерморфина и его аналогов на процессы синтеза ДНК в различных клеточных популяциях;
2. Влияние дерморфина и его аналогов на индуцируемое индо-метацином повреждение слизистой оболочки желудка;
3. Влияние аналогов дерморфина на ранние периоды развития рыб осетровых пород.
Влияние дерморфина и его аналогов на процессы синтеза ДНК в различных клеточных популяциях
При однократом введении селективных мю-агонистов - дерморфина, А10 и А43 в дозе 10 мкг/кг имело место достоверное уменьшение ИМЯ в роговице через 4 и 24 часа после инъекции в 1,8 -2,0 раза. Мю-дельта- агонисты седатин и А17 в этой дозировке не оказывали влияния на синтез ДНК в эпителии роговицы. Введение А10, А43, седатина и А17 привело к достоверному увеличению ИМЯ в эпителии фундального отдела желудка через 24 часа после введения пептидов. Аналогичная картина имела место при пятикратном введении пептидов в дозе 100 мкг/кг; при этом, мю-дельта-агонист седатин вызывал почти двукратное увеличение ИМЯ в эпителии роговицы. В эпителии желудка введение всех трех мю-агонистов (дерморфина, А10, А43) и введение мю-дельта-агонистов (седатина и А17) активировало синтез ДНК ( ИМЯ увеличивался в 1,4-1,5 раза). Это совпадает с данными литературы о том, что в тканях, где широко представлены мю-рецепторы, опосредующие аналитический эффект, при введении лигандов этих рецепторов имеет место торможение процессов пролиферации (Радивоз М.И. и соавт., 1991; Тимошин С.С. и со-авт., 1993). В энтодермальном эпителии желудка, где главным образом представлены дельта-рецепторы, мю-агонисты, взаимодействуя с ними, стимулируют пролиферативные процессы (Тимошин С.С. и соавт., 1993).
Другим существенным положением, основанным на данных этой группы экспериментов, было свойство остатка молекулы аргинина модифицировать способность опиатных пептидов оказывать влияние на пролиферативные процессы (рис. 1).
25 •
20
15
10
И контроль ИА10 ВА43
26,2+1,9*,**
♦♦♦♦•И ■♦♦♦♦■И
роговица
желудок
Рис. 1. Процессы синтеза ДНК в эпителии роговицы через 4 часа после введения пептидов и желудка - через 24 часа после введения пептидбв. Примечание: * р<0,05 по отношению к контролю.
* * р<0,05 различия достоверны между подопытными группами.
Синтетические аналоги дерморфина А10 и А43 являются селективными мю-агонистами (Ярова Е.П., 1987), при этом в структуре А43 аргинин присутствует в С-концевом положении. Присутствие аргинина в молекуле аналога дерморфина привело к достоверно меньшей депрессии ИМЯ в эпителии роговицы и к более выраженной стимуляции в эпителии желудка по сравнению с «безаргининовым» А10.
Доказательством зависимости митогенного эффекта аналогов дерморфина от присутствия в структуре пептида остатка аргинина послужили результаты опытов по оценке влияния на пролиферацию седатина (Н-А^-Туг-В-А1а-РЬе-01у-0Н) и его безаргининового аналога (Н-Туг-Б-А1а-РЬе-01у-0Н).
Пятикратное введение седатина в дозе 100 мкг/кг индуцировало выраженную стимуляцию процессов синтеза ДНК в эпителии СОЖ -ИМЯ увеличился в 1,6 раза, ИМ при этом не изменялась (табл. 1).
Таблица 1
Влияние пятикратного введения аналогов дерморфина на процессы синтеза
контроль седатин седатин без аргинина
ИМЯ% ИМ ИМЯ% ИМ ИМЯ% ИМ
10,19±0,б2 7,59±0,87 16,32±0,99* 9,41±1,5б 10,35±0,93 б,98±0,72
Примечание: * р<0,05
Безаргининовый аналог не оказал влияния на процессы синтеза ДНК. Аналогичная картина имела место в опытах с другим аргинин-содержащим опиатным пептидом даларгином. В то время, как далар-гин (Tyr-DAla-G ly-Phe-Leu-Arg), стимулировал синтез ДНК в эпителии фундального отдела желудка, его безаргининовый аналог утрачивал эту способность (Животова Е.Ю и соавт., 2007). На примере да-ларгина было показано, что в начальный период метаболизма in vivo происходит отщепление остатка аргинина от молекулы пептида. Аргинин является важным фактором фунционирования системы NOS-NO, которая, в свою очередь, является ключевым фактором поддержания кровотока в желудке, обеспечивающего поддержание целостности СОЖ. Для оценки роли этого механизма в реализации митогенного действия седатина были проведены эксперименты с блокадой NOS с помощью L-NAME. Результаты представлены в таблице 2.
Таблица 2
Влияние пятикратного введения седатина и L-NAME на процессы синтеза ДНК
конт роль L-NAME L-NAME+седатин
ИМЯ% ИМ ИМЯ% ИМ ИМЯ% ИМ
12,49±1Д5 19,1±1,55 7,67±0,84* 13,5±1,0* 6,52±0,53* 14,7±1,65*
Примечание: * р<0,05
Наши данные совпадают с результатами исследований, в которых введение L-NAME приводило к угнетению синтеза ДНК в миокарде новорожденных крыс. При этом, в эпителии кожи и в мышечной оболочке кишечника синтез ДНК не изменялся (Сазонова E.H., Пикалова В.М., Тимошин С.С., 2002). Введение седатина на фоне L-NAME не оказало влияния на процессы пролиферации по сравнению с группой животных, получавших только L-NAME. Эти эксперименты подтвердили важную роль тонического влияния NO-NOS на под-
держание тканевого гомеостаза в СОЖ. Блокада NOS привела к выраженному угнетению синтеза ДНК в СОЖ. ИМЯ уменьшился в 1,6 раза. Уменьшение числа ДНК-синтезирующих ядер сопровождалось уменьшением ИМ, свидетельствующим о замедлении скорости синтеза ДНК. Такая же закономерность имела место в эксперименте с даларгином. Введение его на фоне L-NAME отменяло способность стимулировать синтез ДНК в СОЖ (Животова Е.Ю и соавт., 2007).
Результаты этих исследований, в определенной степени, объясняют механизмы, через которые аргининсодержащие опиоидные пептиды реализуют свое воздействие на тканевой гомеостаз. Несмотря на наличие общих свойств у даларгина и седатина, некоторые физиологические и цитофизиологицеские эффекты различны. Оба пептида обладают антистрессорной активностью, при этом даларгин оказывает гипотензивное и релаксирующее влияние, а седатин повышает концентрацию внимания. В наших экспериментах седатин и его без-аргининовый аналог не оказывали влияния на процессы синтеза ДНК в дермальных фибробластах in vitro. В опытах Е.Ю. Животовой (2010) даларгин стимулировал синтез ДНК в фибробластах. Аппликация седатина на роговицу не оказывала влияния на синтез ДНК, в то время, как даларгин в этих условиях оказывал стимулирующее влияние.
Особо следует подчеркнуть способность седатина стимулировать синтез ДНК в эпителии желудка в широком диапазоне доз от 0,1 мкг/кг до 1 мг/кг (табл. 3).
Таблица 3
Влияние пятикратного введения различных доз седатина на процессы синтеза ДНК в эпителии желудка белых крыс (М ± т)_
Группа животных Дозы пептида
0,1 мкг/кг 1 мкг/кг 10 мкг/кг 100 мкг/кг 1 мг/кг
ИМЯ % через 24 часа после инъекции
контрольная 6,44±0,б4 6,44±0,64 7,31±0,42 7,54±0,53 6,44±0,64
подопытная 10,73±1,13* 9,13±0,31* 11,10+0,51* 11,61±1,11* 13,02±1,57*
Примечание: * р< 0,05
Индекс меченых ядер увеличивался в 1,42 - 2,02 раза. Дозы 0,1 мкг/кг и 1 мкг/кг приблизительно соответствуют 1,3-Ю'10 М/кг и 1,3-10"9М/кг1( что вполне сопоставимо со сверхнизкими дозами имму-ноактивных пептидов, стимулировавших пролиферативные процессы в исследованиях Григорьева Е.И. и соавт. (2003).
Определенный вклад в стимуляцию пролиферативных процессов в СОЖ под влиянием седатина осуществляется за счет способности пептида оптимизировать процессы СРО в тканях желудка (табл. 4).
Таблица 4
Влияние введения седатина и безаргининового аналога седатина на показатели
хемилюминесценции (в отн. ед.) гомогенатов желудка самцов белых крыс ___(М±ш) _
Sen. Инд. ХМЛ (Fe'+) Инд. ХМЛ (люминол-Н202)
HI S1ЛНД. Н2 S2hhS<
Контроль Седатин Безарг. аналог седатина 1,330±0,093 0,739±0,057* 1,450±0,081 2,280±0,077 1,500±0,093* 2,180±0,092 2,882±0,141 1,896±0,128* 2,209±0,121* 2,150±0,106 1,77±0,09* 2,020±0,143 1,090±0.099 0,660±0,053* 1,060±0,094
Примечание: * р<0,05
Седатин проявил выраженные антиоксидантные антирадикальные свойства, о чем свидетельствует уменьшение значений S2HIW , Н2 в 1,7 и 1,2 раза, соответственно. Это способствовало угнетению продукции свободных радикалов в целом (Scn сократилась в 1,8 раза). Кроме того, наблюдалось снижение уровня гидроперикисей липидов (HI) в 1,5 раза и торможение процессов образования и накопления перекисных радикалов (Slinw) в 1,5 раза. Введение безаргининового аналога седатина сопровождалось лишь снижением скорости образования свободных радикалов (Sl„w снизилась в 1,3 раза).
Мы считаем, что наличие аргинина в синтетических аналогах опиоидных пептидов не определяет многообразия их биологических эффектов. Однако присоединение аргинина к лиганду опиоидных рецепторов приводит к модификации их морфогенетической активности.
Не универсальный митогенный эффект седатина в различных клеточных популяциях, сочетающийся с его способностью стимулировать синтез ДНК в эпителии СОЖ в широком диапазоне доз, опо-средованность этого эффекта через активацию синтеза N0 и ослабление проявления оксидативного стресса послужили предпосылками для применения пептида в целях профилактики НПВП-гастропатий.
Влияние дерморфина и его аналогов на индуцируемое гтдометацином повреждение слизистой оболочки желудка
НПВП-гастропатии у мышей моделировали посредством внут-рижелудочного введения индометацина по описанной ранее методике. Средняя площадь язвенно-эрозивного поражения у животных, получавших индометадин без предварительного воздействия пептидов, составила 8,12±0,91 мм2. Введение дерморфина недостоверно снизило площадь повреждения СОЖ (7,10±1,10 мм2); пептид А10 утяжелил картину поражения слизистой (9,21±1,24 мм2), но различия также носили недостоверный характер. Результаты исследования состояния СОЖ у животных, получавших индометацин на фоне пятикратного введения седатина, свидетельствуют о протективном действии препарата в этих условиях (рис. 2). Об этом можно судить по уменьшению площади язвенно-эрозивных дефектов: в то время, как у животных, получавших индометацин, средняя площадь повреждения СОЖ составила 7,43±1,0 мм2, площадь язвенно-эрозивных дефектов СОЖ у мышей, получавших индометацин на фоне пятикратного введения седатина, уменьшилась до 4,24±1,12 мм2 , то есть, поражение СОЖ уменьшилось в 1,75 раз.
Коррекция повреждения СОЖ, вызванная индометацином
Рис. 2: Влияние дерморфина и его аналогов на площади эрозивно-язвенного повреждения слизистой оболочки желудка белых мышей, индуцируемые индометацином.
Примечание: * достоверное отличие от группы «индометацин» (р<0,05)
Одной из причин изъязвления СОЖ при воздействии НПВГГ считается угнетение процессов синтеза ДНК. В наших исследованиях наблюдалось достоверное уменьшение ИМЯ. В то время как показатель ИМЯ в контрольной группе составил 9,60 ± 0,34; у животных, получавших индометацин, ИМЯ уменьшился до 5,28 ± 0,20, то есть, в 1,8 раз (табл. 5). Другим важным показателем нарушения процессов пролиферации под воздействием индометацина является уменьшение ИМ, косвенно свидетельствующее об уменьшении скорости синтеза ДНК: в контроле ИМ составила 19,16 ± 0,70; под воздействием индометацина ИМ уменьшилась в 1,7 раз и составила 11,16 ± 0,90. Сочетание уменьшения количества ДНК синтезирующих клеток с уменьшением скорости прохождения клетками Я-периода свидетельствует о выраженном нарушении процессов пролиферации.
Таблица 5
Влияние седатина и его безаргининового аналога на процессы синтеза ДНК в слизистой оболочке желудка белых мышей, получавших индометацин
(М±т).
ИМЯ, % ИМ
контроль 9,60 ± 0,34 19,16 ±0,70
индометацин 5,28 ± 0,20* 11,16 ±0,90*
седатин пятикратно + индометацин 7,92 ± 0,44 19,20 ±1,17
безаргининовый седатин пятикратно + индометацин 5,38 ±0,51* 14,95 ±1,69*
Примечание: * р<0,05
Одним из механизмов протективного действия седатина при НПВП-гастропатиях, на наш взгляд, является его способность стимулировать пролиферативные процессы. Хотя ИМЯ в группе животных, получавших индометацин на фоне пятикратного введения седатина, оставался на уровне 7,92+0,44 (достоверно ниже показателя ИМЯ в группе интактного контроля), он достоверно - в 1,5 раза (р<0,05), превышал значение ИМЯ у животных из группы, получавшей только индометацин. Безаргининовый аналог седатина не оказал достоверного цитопротективного эффекта. Об этом свидетельствует отсутствие различий в величинах ИМЯ в СОЖ у животных в группах «индометацин» и «безаргининовый аналог седатина + индометацин».
Результаты ХМЛ анализа гомогенатов желудка животных, получавших НПВП, свидетельствуют о формировании выраженного ок-сидативного стресса. Все исследуемые показатели, характеризующие СРО, увеличивались, по сравнению с интактным контролем, в 2,7 -4,8 раза (табл. б).
Таблица 6
Влияние седатина и его безаргининового аналога на показатели хемилюминесценции (в отн. ед.) гомогенатов желудка белых мышей, __получавших индометацин (М±ш)___
Инд. ХМЛ (Ре'+) Инд. ХМЛ (люминол-Н202)
Н1 ^ 1 инд. Н2
контроль 1,04±0,0б 1,52±0,08 2,43±0,09 1,58±0,07 0,8610,05
индометацин 3,2610,24* 4,1710,22* 9,3210,60* 5,94±0,37* 4,1210,20*
седатин + индометацин 2Д7±0,11* 3,1010,19* 4,87±0,25* 2,9510,19* 1,8910,14*
седатин без аргинина + индометацин 3,1210,21* 4,0510,26* 8,8510,57* 6,1510,30* 4,6110,25*
Примечание: * р<0,05
Полученные нами результаты соответствуют литературным данным о свободнорадикальных механизмах гастротоксичности нестероидных противовоспалительных препаратов (Евсеев М. А., 2007). Предварительное воздействие седатина вызывает коррекцию проок-сидантно-антиоксидантного статуса тканей желудка у животных, получавших индометацин (табл. 6). Хотя ни один из исследуемых ХМЛ-показателей не достиг контрольного .уровня, все они значительно приблизились к нему, достоверно изменившись в сравнении с показателями группы животных, получавших индометацин без коррекции - пятикратного введения седатина. Интенсивность СРО снижалась и за счет угнетения первичного этапа пероксидации липидов и замедления образования перекисных радикалов. Об этом свидетельствует уменьшение амплитуды Н1 - в 1,3 раза и величины Б1 инд.. - в 1,9 раза, при сравнении показателей групп «индометацин» и «седатин + индометацин» (табл. 6). Подтверждением роли фланкирующего аргинина в реализации биологических эффектов седатина были результаты ХМЛ кнализа (оценка действия седатина и безаргининового аналога седатина). Отсутствие в пептиде молекулы аргинина привело к потере антирадикальных свойств. Защитный эффект седатина при
индометациновом повреждении СОЖ мог быть обусловлен селективной коррекцией нарушений в системе L-arginine-NOS-NO, играющей важную роль в формировании прооксидантно-антиоксидантного равновесия (Jones D.P., 2008).
Важным свойством седатина в реализации протективного действия по отношению к СОЖ, является сочетание в нем способности ослаблять выраженность оксидативного стресса и индуцировать образование N0. При оксидативном стрессе из N0 образуется токсичный пероксинитрит (ONOO-), который, индуцирует процессы апоп-тоза и некроза. При нормализации прооксидантно-антиоксидантного равновесия N0 осуществляет свои цитофизиологические эффекты, в частности, нормализует микроциркуляцию и стимулирует пролифе-ративные процессы в СОЖ (Ahmad R. et al., 2009).
Доказательством участия системы L-arginine-NOS-NO в адаптации СОЖ являются результаты опытов с введением ингибитора NOS L-NAME. В то время, как у интактных животных ИМЯ в эпителии СОЖ составил 4,10±0,83, у животных, получавших L-NAME+ индометацин, он составил 2,33±1,60. Введение L-NAME животным, получавшим, наряду с индометацином, седатин, нивелировало цито-протективный эффект седатина. ИМЯ в СОЖ у животных, получавших «L-NAME+седатин+индометацин», был 2,92±0,б1, достоверно не отличался от соответствующего показателя группы «L-NAME+ ин-дометацин», и в обоих случаях величина ИМЯ была достоверно ниже величины ИМЯ интактного контроля. Полученные нами результаты, в определенной степени, подтверждают выводы наших предыдущих исследований о важной роли молекулы аргинина в реализации морфо-генетических и антиоксидантных свойств седатина (Флейшман M.IO. и соавт., 2007). Одним из возможных механизмов, через которые седатин опосредует свои защитные эффекты, является изменение концентрации гистамина в СОЖ (табл. 7).
В наших опытах, на фоне индуцируемых НПВП язв и эрозий, имело место более чем двукратное падение концентрации гистамина в тканях желудка. Это свидетельствует в пользу гипотезы о том, что дефицит гистамина является одним из факторов нарушения целостности СОЖ. Способность седатина нормализовать содержание гистамина помогает выявить еще один механизм его цитопротективного действия. Тот факт, что способностью нормализовать концентрацию гистамина, наряду с седатином, обладал его безаргцниновый аналог, выводит полученные результаты из общей закономерности, согласно
которой седатин проявляет цитопротективные свойства только при наличии в структуре аргинина.
Таблица 7
Влияние пятикратного введения аналогов дерморфина в дозе 100 мкг/кг на концентрацию гистамина в ткани желудка белых мышей (М ± т)
группа животных концентрация гистамина (мкг/г ткани)
контроль 4,21±0,81
изотон. р-р №01 2,07±0,38 *
пятикратно + индометацин
седатин 5,91±0,88 *
седатин + индометацин 3,37±0,44 *
седатин без аргинина 4,24±0,58 *
седатин без аргинина + индометацин 3,51±0,31 *
Примечание: * р< 0,05
Результаты наших исследований о вовлеченности гистамина в процессы адаптации СОЖ к повреждающему действию НПВП, сопоставленные с данными литературы, могут служить в пользу, представления об участии гистамина в профилактике и заживлении язв и эрозий в этих условиях. Следует отметить, что эти предположения требуют дальнейшего экспериментального исследования.
В желудках грызунов гистамин депонируется в тучных и ECL (энтерохромафинподобных) клетках. Гистамин через Н1 и НЗ рецепторы может оказывать выраженные морфогенетические эффекты. В частности, гипергастринемия, которая стимулирует пролиферативные процессы в СОЖ, реализует эти эффекты через гистамин ECL клеток (Nakamura Е. et al., 2004). Согласно представлениям Parsons М. Е. (1985), Hernández-Angeles A. et al. (2001), Deyama Y. et al. (2002), гистамин является локальным митогеном. Процессы адаптации СОЖ к повторным воздействиям иммобилизационного стресса сопровождаются увеличением содержания гистамина в тканях желудка (Тимошин С. С. и соавт., 1991).
Влияние дерморфина на ранние периоды развития рыб осетровых пород Одним из облигатных условий апробации потенциальных фармакологических препаратов является подтверждение их эффектов и отсутствие токсических проявлений на нескольких видах животных объектов. Опиоидные пептиды присутствуют у рыб на эмбриональных, «донервных» стадиях развития (Яковлева Т.В. и соавт., 1986), а
также в тканях развивающихся и взрослых особей (Папин А.А., Карелин А.А., 1984; Singh R., Rai U., 2009; Macho Sanchez-Simon F., Rodriguez R.E., 2009). Исследования проводились на икре и молоди осетра амурского (Acipenser schrenckii) на протяжении четырех рыборазвод-ных сезонов. Инкубация оплодотворенной икры осетра амурского с раствором седатина (0,001-0,2 мг/л) в течение 1 часа приводила к увеличению процента выклева. Эффект зависел от использованной концентрации пептида (табл. 8).
Таблица 8
Влияние обработки оплодотворенной икры различными дозами седатина _на динамику выклева личинок осетра амурского_
Сроки наблюдения после проведения инкубации с пептидом Экспериментальные группы (доля сформировавшихся предличинок в % от общего количества предличинок в группе)
контроль 0,001 мг/л 0,01 мг/л 0,1 мг/л 0,2 мг/л
95 часов 3,2% 3,5% 2,6% 2,8% 1,6%
101 час 22,3% 32,1% 29,8% 29,5% 26,1%
113 часов 38,5% 38,5% 32,8% 52,4% 51,0%
118 часов 12,9% 9,1% 14,1% 8,2% 11,7%
125 часов 18,7% 13,8% 18,2% 6,7% 8,2%
130 часов 4,4% 3,0% 2,5% 0,4% 1,4%
Общее количество предличинок (шт.) 3899 5198 9749 9541 7254
% выклева от количества оплодотворенных икринок 14,3+0,20 17,1+0,21* 32,1+0,27* 31,4+0,27* 21,7+0,23*
Примечание: * р<0,05
Максимальный эффект был зарегистрирован при использовании дозы пептида 0,01 и 0,1 мг/л. Увеличение концентрации седатина до 0,2 мг/л привело к уменьшению выраженности эффекта, что, возможно, является отражением «колоколообразной» зависимости «доза-эффект», характерной для РП.
Наряду с общими показателями количества сформировавшихся личинок, важным параметром является скорость выклева. Обеспечение «дружного» выклева является важной проблемой рыбоводства.
Воздействие седатина значительно увеличивало скорость вы-клева, особенно, в первые 24 часа (рис. 3).
Рис. 3. Влияние обработки оплодотворенной икры различными концентрациями седатина на скорость выклева предличинок осетра амурского.
Максимальная выживаемость мальков через 60 дней после обработки седатином имела место при воздействии пептидом 0,1 мг/л. Это позволило нам остановиться в последущих исследованиях на дозе 0,1 мг/л.
Наблюдение за общим состоянием, поведенческими реакциями, а также анализ соматометрических показателей мальков экспериментальных групп осуществляли в течение 2 месяцев (60 дней) с момента выклева до периода помещения особей в естественную среду обитания.
Однократное воздействие седатином в дозе 0,1 мг/л на оплодотворенную икру осетра амурского индуцировало увеличение массо-ростовых показателей подопытных особей по сравнению с контрольными параметрами (рис. 4).
Рис. 4. Влияние однократной обработки оплодотворенной икры осетра амурского раствором седатина на динамику соматометрических показателей мальков в постнатальном периоде (а - длина тела; б-масса тела; * р<0,05).
Результаты исследования сравнения эффектов безаргининового аналога седатина и седатина свидетельствуют в пользу ускоренного развития мальков, подвергнутых воздействию аргининсодержащего аналога дерморфина (табл. 9).
Таблица 9
Влияние обработки оплодотворенной икры синтетическими аналогами дерморфина (седатин и седатин без аргинина) в дозе 100 мкг/л на соматометрические показатели 60-суточных мальков осетра амурского
контроль седатин седатин без аргинина
масса (г) 6,663 + 0,807 9,830+ 1,044 * р=0,038 7,873 + 0,859
длина (см) 11,46 + 0,53 12,98 + 0,48 * р=0,048 12,10 + 0,39
индекс по Фултону 0,431 +0,008 0,442 + 0,013 0,436 + 0,013
Примечание: * р<0,05
Таким образом, обработка икры осетровых раствором седатина не вызывает негативных отклонений в последующие 2 месяца развития рыб. Более того, по данным соматометрии, имеют место признаки ускоренного развития подопытных мальков. Полученные результаты, судя по стабильности индекса упитанности по Фултону,. свидетельствуют в пользу гармоничности процесса роста и развития мальков. Изменение структуры молекулы пептида удаление аминокислотного остатка аргинина (эксперимент с безаргининовым аналогом седатина), приводит к нивелированию эффекта седатина в отношении сома-тометрических показателей.
Активность процессов свободнорадикального окисления определяли в образцах оплодотворенной икры через 18 часов после проведения инкубации с пептидами. Установлено, что при воздействии седатина на инкубируемую икру осетра амурского активируются системы антиоксидантной антирадикальной защиты: в сравнении с контролем величина 821ШД статистически значимо снизилась в 1,6 раза. Наблюдается увеличение перекисной резистентности (Н2 снизилась в 2,1 раза) и замедление процесса генерации перекисных радикалов (81инД снизилась в 1,5 раза).
Анализ показателей хемилюминесценции (табл. 10) гомогенатов сердца и печени 60-суточных мальков, подвергнутых в антенатальном периоде развития однократной обработке сёдатином, продемонстрировал, что воздействие пептида увеличило буферную емкость антиоксидантной и антирадикальной системы защиты, а также перекисную резистентность в исследуемых тканях. Об этом свидетельствуют статистически значимое снижение амплитуды Н2 (в 1,26 и 1,36 раза) и
величины 82инд (в 1,31 и в 1,43 раза), соответственно. Выявленные изменения активности защитных систем не влияли на редокс-потенциал исследуемых тканей: величины Б эр не имели достоверных отличий от контрольных уровней.
Таблица 10
Влияние однократной обработки оплодотворенной икры осетра амурского седатином на показатели хемилюминесценции (в отн. ед.)
Инд. ХМЛ (люминол-Н202)
Н2 | 62,шд
сердце
контроль 10,37±0,12 9,08±0,18 12,71±0,29
седатин 11,08±0,18 7,69±0,21* 9,74±0,30*
печень
контроль 0,41+0,03 5,74+0,18 8,59±0,2б
седатин 0,37±0,03 4,5010,12* 6,0110,19*
Примечание: * р<0.05
Представляет интерес тот факт, что изменения свободноради-кального статуса (повышение уровня антиоксидантной защиты), сохранились в тканях сердца и печени у 60-суточных мальков (таблица 10). Таким образом, действие седатина носит долгосрочный характер. Одним их возможных объяснений этому может быть эффект эмбрионального импринтинга, опосредуемого свободнорадикальными механизмами. Подобные изменения могут быть оценены как позитивные, поскольку способствуют повышению адаптируемости особей к негативным воздействиям внешней среды.
Анализ состояния ЯО осуществляли в ткани печени и миокарда сорокапятисуточных особей. Выбранный возраст определялся тем, что к этому времени у мальков полностью сформированы органы. С показателями контрольной группы сопоставляли показатели группы мальков, подвергнутых в зародышевом периоде воздействию седатина и его безаргининового аналога в концентрациях 0,1 мг/л. В наших исследованиях получены результаты, свидетельствующие о достоверном увеличении количества ЯО у подопытных особей группы «седатин», по сравнению с контрольными. Среднее
число ядрышек в ядрах гепатоцитов в контрольной группе мальков составило 3,22 ± 0,15, в подопытной - 5,43 ± 0,30. У мальков, подвергнутых на ранних этапах развития воздействию «безаргинино-вого» аналога седатина, изменения носили недостоверный характер. При анализе гистологических препаратов сердца подопытных особей молоди осетра амурского среднее число ядрышек в ядрах клеток миокарда в контрольной группе мальков составило 3,14±0,14. В подопытной группе количество ядрышек на ядро в среднем составило 5,03±0,29 (р<0,05).
Прямым доказательством воздействия седатина на белоксин-тетическую активность были исследования по определению суммарного белка в поперечно-полосатых мышцах 60-суточных мальков. У рыб контрольной группы диаметр мышечных волокон составлял 22,28±0,71 мкм, а у подопытных он возрастал до 24,57±0,68 мкм, причем это увеличение было статистически значимым (р<0,05). Морфометрические измерения показали, что в мышцах контрольных рыб площадь ядер равнялась 57,38 ±1,48 мкм2 . В мышцах подопытных рыб этот показатель возрастал до 60,50 ±2,33 мкм2, но это увеличение было статистически недостоверным. Средние величины числа ядрышек и ядрышко-ядерного отношения также статистически не отличались между собой, а вот суммарная площадь ядрышек, при обработке седатином, возрастала до 8,03±0,14 мкм2 (табл. 11).
Таблица 11
Изменения морфометрических параметров мышечных волокон и ядерно-ядрышкового аппарата осетровых рыб под влиянием седатина (М ± ш)
группа контроль седатин
диаметр волокон, мкм 22,28±0,71 24,57±0,68 *
оптическая плотность волокон 0,403±0,012 0,514±0,012 *
площадь ядер, мкм2 57,38±1,48 60,50±2,33
число ядрышек 2,98±0,15 3,1б±0,14
площадь ядрышек, мкм2 7,32±0,14 8,03±0,14 *
ядерно-ядрышковое отношение 0,128±0,004 0,134±0,006
Примечание: * р<0,05
Компьютерная морфометрия показала, что у контрольных рыб оптическая плотность мышечных волокон при окраске амидо-черным 10В составляла 0,403±0,012. У подопытных рыб она возрас-
тала до 0,514±0,012, Причем, это возрастание было статистически достоверным (р<0,05).
Таким образом, результаты проведенного исследования свидетельствуют, что под влиянием седатина у подопытных рыб, наряду с увеличением диаметра мышечных волокон и возрастанием ядрышко-вой активности, отмечается также увеличение концентрации суммарного белка в саркоплазме.
Вопрос о механизмах активации ЯО в различных клеточных популяциях у мальков, подвергнутых воздействию седатина, требует своего экспериментального решения. Тот факт, что эффект отсутствовал при обработке безаргининовым аналогом, свидетельствует в пользу рабочей гипотезы о нитроксидергическом механизме или компоненте в реализации эффектов седатина.
Подтверждением справедливости этого предположения служат данные литературы об активации оксидом азота факторов транскрипции. Как и в других исследовательских ситуациях, эффект N0 на факторы транскрипции, зависит от дозы и ряда условий. Оксид азота может оказывать стимулирующий эффект на взаимодействие AP-I и молекулы ДНК - этот эффект опосредуется через активацию Jun-terminal Kinise (Van der Zwan L.P., et al. Kim H. et al., 2010). Кроме того, продемонстрирована возможность активации, посредством N0 и его метаболитов, другого важного транскрипционного фактора - NF-кВ. Полученные нами свидетельства вовлеченности нитроксидергических механизмов в реализацию адаптивных свойств седатина, находят подтверждение в опытах (Chadzinska М. et al., 2009). Отсутствие в наших исследованиях положительного эффекта у безаргининового аналога седатина еще раз подтверждает обоснованность предположения о вовлеченности нитроксидергического компонента в оптимизацию процессов развития рыб. В связи с этим представляют интерес данные Cadet P. et al. (2007) о важной роли оксида азота в становлении и функционировании кардиоваскулярной системы на разных этапах онтогенеза. Применительно к личинкам и молоди рыб этот вопрос обсуждается в работах F.B. Eddy, (2005). При этом также как в исследованиях Chadzinska М. et al. (2009), оценивается роль NO, как стрессмодулятора молоди рыб. Важно отметить, установленное в наших исследованиях повышение активности антиоксидантной антирадикальной защиты. Эта перестройка является необходимым фактором адекватного функционирования оксида азота. Способность седатина активировать антиок-сидантную и антирадикальную защиту во многом объясняет ускорение
выклева предличинок под влиянием пептидов. Сохранение в ткани сердца и печени 60-дневных мальков позитивных сдвигов в обмене активных кислородных метаболитов находит частичное объяснение в данных Chadzinska M. et al. (2009) о способности агонистов мю-рецепторов модулировать экспрессию генов цитокинов. Перестройка активности экспрессии генов на ранних этапах онтогенеза может быть еще одним фактором, обеспечивающим долгосрочные эффекты опиои-дов. Особо следует выделить такой эффект воздействия седатина, как увеличение массы мальков на ранних стадиях развития.
Увеличение соматометрических показателей под влиянием седатина является важным критерием более высоких адаптационных способностей. Рыбы одного возраста, но меньшего размера (массы), выживают в меньшем количестве (Бойко Н.Е., 2008). Выживаемость молоди зависит от ее массы и это лежит в основе весовых стандартов при выпуске мальков. Начальное отставание в массе сохраняется в последующие периоды, независимо от условий выращивания (Бойко Н.Е., 2008).
Результаты исследования влияния седатина на выклев, рост и развитие молоди осетровых рыб, а также на ряд морфометрических показателей сердца, печени и мышц, легли в основу нового способа оптимизации развития рыб осетровых пород (Флейшман М.Ю., Тимошин С.С. и соавт., патент РФ № 2298921 от 20.05.2007). Этот метод используется на ряде рыборазводных предприятий Дальнего Востока.
При анализе возможных внутриклеточных путей реализации митогенных эффектов опиоидов мы рассматривали: во-первых, активацию экспрессии рецепторов эпидермального фактора роста; и, во-вторых, GpY РБК-Akt каскада. Кроме того, активно изучается третий путь, связанный с модуляцией активности NO (Tegeder I., Geisslinger G., 2004).
Ряд лигандов субпопуляций опиоидных рецепторов, через мю-3 рецепторы, могут индуцировать образование NO посредством активации системы GPï -PI3K- Akt. Akt способна стимулировать эндоте-лиальную NOS (Dimmeler S. et al., 1999; Fulton D. et al., 1999). В им-муноцитах морфин может индуцировать образование NO также посредством взаимодействия и активации мю-3 рецепторов (Fimiani С. et al., 1999, b).
Процессы активации ангиогенеза и вазодилятации, индуцируемые морфином, связывают с активацией мю-3 рецепторов (Bilfinger T.V. et al., 1998; Gupta К. et al., 2002). Мю-3 рецепторы представялют
из себя сплайсинговый вариант, продуцируемый геном мю-опиатных рецепторов (Cadet Р. et al., 2003). Экспрессия мю-3 рецепторов продемонстрирована в легочной ткани, при этом их активация приводит к освобождению NO (Fimiani С. et al., 1999). Способность морфина индуцировать образование N0 в лейкоцитах, отменяемое L-NAME, показана в исследованиях (Mantione K.J. et al., 2008). Важную роль играют мю-3 опиатные рецепторы, регулирующие образование N0, что имеет место в процессах эмбриогенеза (Cadet Р. et al., 2007). Согласно данным этих авторов, мю-3 рецептор экспрессируется на ранних стадиях развития раньше, чем, традиционные мю-1, дельта- и каппа- рецепторы. Это может служить одним из объяснений столь эффективному воздействию седатина на развитие молоди рыб при обработке им оплодотворенной икры. Однако следует иметь ввиду, что мю-3 рецепторы взаимодействуют с непептидными лигандами. При этом возможность взаимодействия седатина с мю-3 рецепторами в настоящее время обсуждается. В задачи нашего исследования не входило решение вопроса о том, с какой субпопуляцией опиатных рецепторов взаимодействует седатин. Эта характеристика пептида определяется другими методическими подходами и требует экспериментального решения. У нас нет прямых доказательств опосредован-ности этого эффекта через мю-3 рецепторы. При этом следует иметь в виду, что система NOS-NO может запускаться различными механизмами, а не только аргинином или активацией мю-3 рецепторов. Так, было установлено, что активация NOS-NO в СОЖ может осуществляться посредством глипролина (Pro-Gly-Pro), являющегося составной частью опиоидного пептида бета-казоморфина (Samonina G.E. et al., 2008; Мартынова К.В. и соавт., 2009).
Следует еще раз подчеркнуть, что в опытах с мальками, как и при заживлении деффектов СОЖ при НПВП-гастропатиях, активация нитроксидергической компоненты происходит на фоне усиления ан-тиоксидантной и антирадикальной систем защиты. Это имеет принципиальное значение, так как образование NO при оксидативном стрессе приводит к появлению пероксинитрита ONOO", обладающего высокой токсичностью (Xia Z. et al., 2010), и являющиегося индуктором апоптоза (Troy С.М. et al., 1996).
NO является важным компонентом запуска системы регенерации, вовлекая в него стволовые клетки (Madhusoodanan К. S. and Murad F., 2007). Внутриклеточное содержание оксида азота является суммой NO, синтезируемого самой клеткой, плюс NO, синтезируе-
мый клетками ближайшего окружения. Изучению влияния N0 на процессы регенерации в норме и при патологических процессах посвящены многочисленные исследования (Тищенко О.В. и соавт., 2002; Коновко О.О. и соавт., 2004; Kalinichenko S.G. et al., 2005; Matveeva N.Y. et al., 2007).
При оценке роли системы NOS-NO в регуляции процессов пролиферации, следует иметь в виду, что участие оксида азота в этом процессе лишь частично иллюстрирует его физиологическую активность. Данному направлению посвящены многочисленные сведения литературы. В качестве иллюстрации приведем лишь некоторые данные литературы последних лет. Обсуждается участие NOS-NO в процессах канцерогенеза и хронического воспаления (Kanwar J.R. et al., 2009). Имеются сведения участия NOS-NO в функционировании эндокринной системы (Cadenas J.L. et al., 2010), в процессах метаболизма (Fioramonti X. et al., 2010; Marsollier N. et al., 2009), в частности, метаболизма костной ткани (Sabanai К. et al., 2009); в процессах терморегуляции (Robertson R.M. and Sillar К.Т., 2009; Lang J.A. et al., 2009), сперматогенеза (Lee N.P. and Cheng C.Y., 2008; Mauro A. et al., 2009); в процессах возбуждения - торможения в нервной системе (Le Roux N. et al., 2009) и в поведенческих реакциях (Rodrigues Pereira N. et al., 2010). Система NOS-NO, также, как и система циклических нуклеотидов, может служить примером универсальных функциональных блоков A.M. Уголева (1990). Согласно этой концепции, управление физиологическими процессами и реализация того или иного эффекта происходит не за счет специализированных регуля-торных сигналов, а за счет универсальных функциональных блоков, образующих цепи, приспособленные для этих задач.
В качестве другого возможного функционального блока можно привести PI3k/Erk, или PI3k/Akt каскад. Обсуждая неспецифичность активации PI3k/Erk, или PI3k/Akt каскадов посредством Gpy Schwindinger W.F. and Robishaw J.D., (2001) и Cheng К. et al., (2003) считают ростстимулирующий путь общей опцией G-протеинсвязанных рецепторов. Это имеет место с такими лигандами G-связанных рецепторов, как допамин (Narkar VA. et al., 2001), серотонин (Adayev T. et al., 2003), каннабиоиды (Esposito G. et al., 2002), a также AT-II и ЭТ-1 (Lüscher T.F., Barton M., 2000; Dzimiri N., 2002). Будет ли при этом усиливаться процесс пролиферации, зависит от целого ряда условий. Такими условиями могут быть различные композиции из Gp, GT и участие G„ и, конечно, от типа клеток. Подчеркивается зависимость
конечного эффекта от дозы лиганда (Singhal P.C. et al., 1998; Gupta et al., 2002).
Боль - стимул секреции опиоидов (Smith H.S., 2008; Janecka А. et al., 2010). Это, как правило, повреждение, а оно диктует включение восстановительных процессов. И если стресс - это время «получать раны», то постстрессорная активация опиоидной системы это время «зализывать раны».
Участие опиоидов в постстрессорной репарации включает в себя изменение целого ряда функций. Эта перестройка эндокринного фона, приводящая к уменьшению секреции кортикостерона и катехола-минов, угнетающих клеточное деление (Лишманов Ю.Б. и соавт., Ра-дивоз М.И., 1998; Дейгин В.И. и соавт., патент РФ № 2155064 от 16.04.99). Эта активация функционирования NOS-NO, обсуждавшаяся нами ранее. Наряду со свойствами опиоидов оптимизировать процессы микроциркуляции, следует отдельно выделить их способность повышать сократительную активность лимфатических микрососудов (Хугаева В.К., 1992; Хугаева В.К., Ардасенов А.В., 1995). Особо следует отметить тесное взаимодействие опиоидов, в частности, арги-нинсодержащего аналога дерморфина DALDA, с системой цитокинов при восстановлении тканевого гомеостаза в условиях воспаления. Приводятся сведения о вовлеченности в этот процесс интерлейкина 4, TNFa и INFy (Philippe D. et al., 2006). При этом DALDA угнетает продукцию TNFa при воспалительных заболеваниях толстого кишечника. Особо следует отметить способность седатина нормализовать или ликвидировать проявления оксидативного стресса.
Основным фактором, инициирующим возникновение оксидативного стресса, являются активные кислородные метаболиты АКМ. АКМ - это высокореактивные, преимущественно радикальные, кислородные соединения, образующиеся в живых организмах в результате неполного восстановления молекулярного кислорода (Зенков Н.К. и соавт., 2001). В период формирования концепции универсальных функциональных блоков, активные кислородные метаболиты не рассматривались в таком широком аспекте, как это происходит в настоящее время. Отнесение АКМ к универсальным функциональным блокам не бесспорно, но, у A.M. Уголева (1990), есть представление о блоках комбинированных, энергезирующих и сигнальных. АКМ, продуцируемые клеточными источниками, традиционно считались побочным продуктом метаболизма, потенциально способными вызывать повреждения липидов, белков и ДНК. С филогенетической точки
зрения, первоначальное, основное свойство АКМ заключалось в их способности защищать клетку от бактериальной агрессии. В процессе эволюции они обрели статус эффективного коммуникатора внутри и межклеточной коммуникации (Турпаев К.Т., 2002). Развернутые представления об участии АКМ в различных физиологических функциях представлены в работе B.JI. Воейкова (2001).
Значение АКМ, как фактора регуляции процессов клеточного деления у простейших представлены у Т. Finkel (1998) и Е. Ghosh et al. (2009). При оценке роли различных факторов в регуляции пролиферации высказывается предположение, что редокс-статус и регулирующие его АКМ являются филогенетически более древними, чем факторы роста (Меныцикова Е.Б. и соавт., 2008). При этом трудно не согласиться с авторами, что «Сегодня нет единого мнения о биологической роли окислительных процессов с участием АКМ. Мы не можем однозначно сказать, насколько токсичны АКМ или насколько они необходимы при развитии типовых патологических процессов» (цит. по Меныцикова Е.Б. и соавт., 2008).
Концепция, что АКМ являются сигнальными молекулами для процессов пролиферации, основывается на следующих положениях: 1. Факторы роста и цитокины способны генерировать АКМ в клетках различного типа. 2. Ингибиторы АКМ-генерирующих ферментных систем блокируют специфические рост-факторные эффекты. 3. Экзогенные оксиданты активируют рост-фактор опосредованные сигнальные пути (Thannickal VJ, Fanburg B.L., 2000). Кроме того, что АКМ могут выступать в качестве инициатора клеточного деления, они могут запускать процессы апоптоза - конечный результат зависит от соотношения регуляторного континуума, в частности, от соотношения прооксидантов и антиоксидантов (Лю М. Б. и др., 2005; Лю Б. Н. и др., 2006). Коррекция оксидативного стресса даларгином сопровождается нормализацией процессов пролиферации и заживлением язв при язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки и при атрофиче-ском гастрите и НПВП-гастропатиях (Наумова JI.A., 2001; Болоняева H.A. и соавт., 2005).
В наших исследованиях, выполненных совместно с Е.В. Ожеговым, показано, что даларгин нормализовал общие и локальные проявления оксидативного стресса при болезни Крона. При этом имела место нормализация процессов клеточного деления (Ожегов Е.В. и соавт. 2009; Ожегов Е.В., 2010).
Программа регенерации, «организуемая» лигандами опиатных рецепторов, включает в себя целый ряд универсальных функциональных блоков. Суммируя данные литературы и результаты собственных исследований, представим их. Это создание оптимального (для регенерации) эндокринного фона под воздействием опиатов, и седатина, в частности. Это формирование оптимального для регенерации цитокинового профиля (Philippe D., et al., 2006). Это включение нироксидергического компонента (Флейшман М.Ю. и соавт., 2009), имеющее место под воздействием других аргининсодержащих опиатов (Животова Е.Ю., Флейшман М.Ю. и соавт., 2009). Следствием этого является оптимизация процессов микроциркуляции (Сиротин Б.З. и соавт., 2002). Это поддержание оптимального уровня локального митогена гистамина, имеющее место под влиянием седатина и да-ларгина (Александрович А.Г. и соавт., 1989; Флейшман М.Ю. и соавт., 2004).
Отдельно следует подчеркнуть способность седатина стимулировать процесс синтеза ДНК, ключевой момент процессов регенерации. У седатина это свойство проявляется в широком диапазоне доз, в том числе, сверхнизких (Флейшман М.Ю. и соавт., 2004). Митоген-ный эффект, по-видимому, осуществляется за счет активации PI3K-Erk каскада, экспрессии рецепторов эпидермального фактора роста, а также, за счет модуляции активности NO. Стимуляция процессов роста и регенерации, присущая седатину, может сохраняться в течение длительного времени при воздействии опиоидов на ранние этапы онтогенеза. Это проиллюстрировано нами в опытах с рыбами осетровых пород.
Способность седатина оптимизировать фон свободнорадикаль-ного окисления и индуцировать образование NO также является важной частью, или существенным функциональным блоком реализации программы регенерации (Флейшман М.Ю. и соавт., 2004; 2007). Это свойство опиатов усилено у седатина благодаря присутствию молекулы аргинина.
В настоящее время, соединение в препарате его основных свойств с нитроксидергичской составляющей, используется при создании новых классов лекарств. Это относится к статинам (Ongini Е. et al., 2004), НПВП препаратам (Gao G. et al., 2005; Mackenzie I. et al., 2008) и к другим препаратам (Ашмарин И.П. и соавт., 2003; Schiller P.W., 2010). Целенаправленный синтез пептидов является одним из подходов современной молекулярной биологии и медицины.
выводы
1.В эктодермальном эпителии роговицы белых крыс агонист мю-рецепторов дерморфин и селективные мго-агонисты А10 и А43 вызывают угнетение процессов синтеза ДНК. В энтодермальном эпителии СОЖ дерморфин, А10 и А43, а также мю- дельта- агонисты се-датин и А17 вызывают активацию синтеза ДНК.
2.Аргининсодеражащий аналог дерморфина седатин вызывает активацию процессов синтеза ДНК в СОЖ в широком диапазоне доз (от ОД мкг/кг до 1 мг/кг).
3.Введение седатина уменьшает проявления НПВП гастропа-тий и уменьшает площадь язвенно-эрозивного поражения СОЖ.
4. Способность седатина уменьшать проявления НПВП-гастропатии складывается из нескольких факторов: повышение про-лиферативного потенциала эпителия СОЖ; уменьшение проявлений оксйдативного стресса; поддержание концентрации гистамина в тканях желудка. Безаргининовый аналог седатина не обладает этими свойствами. Введение ингибитора NOS L-NAME отменяет цитопро-тективное действие седатина.
5. Обработка оплодотворенной икры осетровых рыб седатином повышает процент выклева и синхронизирует выклев, достоверно увеличивает массу мальков, что оценивается, как благоприятные прогностические признаки. Свидетельства позитивного воздействия седатина на процессы развития осетровых рыб прослеживается в течение 2 месяцев.
6.Позитивные факторы развития мальков достигаются ослаблением проявлений окислительного стресса, увеличением активности ЯОР в печени, сердце и мышцах, увеличением содержания белка в мышцах мальков. Безаргиновый аналог седатина не обладает подобными свойствами.
7. Морфогенетическая активность аналогов дерморфина зависит не только от сродства к той или иной популяции опиатных рецеп-тров, но и от наличия в структуре лиганда аргинина.
8. Результаты исследования влияния седатина на выклев, рост и развитие молоди осетровых рыб легли в основу нового способа оптимизации развития осетровых на рыборазводных предприятиях.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Влияние синтетических аналогов дерморфина на процессы клеточного деления эпителия роговицы и языка белых крыс / М.Ю. Флейшман, М.И. Радивоз, С.С. Тимошин, Е.П. Ярова, CA. Кесельман // Бюлл. эскперим. биол. и мед. - 1994. - №11. - С. 508-510.
2. Влияние синтетического аналога дерморфина - седатина на процессы клеточного деления в эпителии роговицы и языка белых крыс / М.Ю. Флейшман, A.B. Кузнецов, М.И. Радивоз, С.С. Тимошин, Е.П. Ярова // Бюлл. эскперим. биол. и мед. - 1996. - №6. - С. 641-644.
3. Флейшман, М.Ю. Влияние синтетического аналога дерморфина
- седатина на процессы клеточного деления эпителия белых крыс / М.Ю. Флейшман, A.B. Кузнецов // Тез. Итоговой научн.-иссл. конф. КГМА, посвященной 40-летию КГМА. - Кемерово, 1996.- С.158-160.
4. Влияние регуляторных пептидов на синтез ДНК в гладкой мышечной ткани двенадцатиперстной кишки белых крыс в раннем пост-натальном онтогенезе / E.H. Сазонова, Е.Ю. Животова, О.Н. Сазонов, М.Ю. Флейшман, С.С. Тимошин //Бюлл. эскперим. биол. и мед. -1999, №6. - С.65-69.
5. Флейшман, М.Ю. Апоптоз: различные аспекты общебиологического феномена / М.Ю. Флейшман, С.С. Тимошин //Дальневосточн. мед. журнал. - 2000. - № 2. - С. 109-112.
6. Применение ингибиторов АПФ у больных с сочетанными заболеваниями внутренних органов / С.А. Алексеенко, С.С. Тимошин,
A.A. Авилова, В.Г. Ламехова, М.Ю. Флейшман // Гедеон Рихтер в СНГ. - 2002. - № 1. - С. 27 - 29.
7. Исследование пролиферативной активности и ядрышковых организаторов в эпидермисе у больных псориазом / К.Я. Терешин, В.И. Цыганков, М.Ю. Флейшман, Н.П. Мельникова // Клиническая лабораторная диагностика. - 2002. - № 1. - С. 39-40.
8. Влияние аргининсодержащего мю- дельта- агониста опиатных рецепторов седатина на процессы синтеза ДНК в эпителии фундаль-ного отдела желудка белых крыс / М. Ю. Флейшман, A.B. Кузнецов,
B.И. Дейгин, С.С. Тимошин // Бюл. эксперим. биологии и медицины.
- 2004. - 137(3). - С. 235-237.
9. Флейшман, М.Ю. Некоторые аспекты оптимизации искусственного воспроизводства осетровых рыб /E.H. Сазонова, М.Ю. Флейш-
ман, A.B. Соколов // Природные ресурсы Хабаровского края: проблемы науки и образования. - Хабаровск : изд-во ХГПУ, 2004. - С. 92-97.
10. Флейшман, М.Ю. Влияние регуляторных пептидов на состояние печени амурского осетра (Acipenser schrenckii) / A.B. Соколов, М.Ю. Флейшман, E.H. Сазонова // Природные ресурсы Хабаровского края: проблемы науки и образования. - Хабаровск : изд-во ХГПУ, 2004.-С. 115-119.
11. Флейшман, М.Ю. Некоторые аспекты оптимизации искусственного воспроизводства амурского осетра - Acipenser schrenckii /
A.B. Соколов, E.H. Сазонова, М. Ю. Флейшман // Новые исследования (Биология. Экология. Образование). Вып. 5. - Хабаровск : изд-во ХГПУ, 2004.-С. 25-30.
12. Применение даларгина для профилактики и лечения НПВП-гастропатий /H.A. Болоняева, Л.П. Исаенко, М.Ю. Флейшман, E.H. Сазонова, С.С. Тимошин // Дальневосточн. мед. журнал. - 2005. - № 2. -С. 62-66.
13. Влияние даларгина на состояние слизистой оболочки желудка пациентов, принимающих нестероидные противовоспалительные препараты / H.A. Болоняева, Е.Ю. Животова, М.Ю. Флейшман, E.H. Сазонова // Сб. науч. трудов 6-й Восточно-Сибирской гастроэнтерологической конференции «Клинико-эпидемиологические и этно-эко-логические проблемы заболеваний органов пищеварения», Красноярск, 2006. - С. 96.
14. Влияние седатина — синтетического аналога дерморфина — на развитие мальков осетра амурского / М.Ю. Флейшман, E.H. Сазонова, O.A. Лебедько, В.И. Дейгин, С.С. Тимошин // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 2007. - № 10. - С. 420.
15. Пролиферативные зоны мозга Амурского осетра. Взаимоотношение с нейромерами и миграцией вторичных матричных зон / Е.В. Пущина, М.Ю. Флейшман, С.С. Тимошин // Онтогенез. - 2007. - № 4. -С. 1-10.
16. Анализ механизмов влияния аргининсодержащего аналога дерморфина на процессы пролиферации в слизистой оболочке желудка белых крыс / М.Ю. Флейшман, Е.Ю. Животова, O.A. Лебедько,
B.И. Дейгин, С.С. Тимошин // Бюл. эксперим. биологии и медицины. -2007.-№9.-С. 282-285.
17. Влияние даларгина на процессы синтеза ДНК в слизистой оболочке желудка белых крыс /Е.Ю. Животова, М.Ю. Флейшман, O.A.
Лебедько, E.H. Сазонова, С.С. Тимошин // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 2007. - № 9. - С. 288-291.
18. Флейшман, М.Ю. Олигопептиды с опиоидной активностью и повышение эффективности искусственного воспроизводства амурских осетровых рыб /A.B. Соколов, М.Ю. Флейшман, E.H. Сазонова // Вестник ДВО РАН. - 2007. - №6. - С. 116-122.
19. Флейшман, М.Ю. Влияние морфиноподобных пептидов на нитроксидергическую и катехоламинергическую активность нейронов головного мозга молоди симы Onchorynchus masu / E.B. Цущина, М.Ю. Флейшман, С.С. Тимошин //Проблемы иммунологии, патологии и охраны здоровья рыб и других гидробионтов : мат. междунар. научно-практической конференции. - М. : Россельхозакадемия /под ред. Микрякова В.Р. и др. - Борок-Москва, 17-20 июля. 2007. - С. 564.
20. Флейшман, М.Ю. Влияние регуляторных пептидов на NO-зависимые процессы в головном мозге молоди амурского осетра Acipencer schrenki /Е.В. Пущина, М.Ю. Флейшман, С.С. Тимошин // Функциональные системы организма в норме и при патологии : сб. научн. тр. / под ред. B.C. Улащика, А.Г. Чумака, -г Минск : РИВШ, 2008.-С. 419-424.
21. Влияние дерморфинов на нейрональную пластичность и про-лиферативную активность NO-продуцирующих нейронов головного мозга молоди амурского осетра Acipencer schrencki / Е.В. Пущина, М.Ю. Флейшман, В.И. Цыганков, Д.К. Обухов, С.С. Тимошин / Актуальные вопросы функциональной межполушарной асиметрии и ней-ропластичности. Материалы Всероссийской конференции с международным участием. - М.: Научный мир, 2008. - С. 613-618.
22. Гастропротективный эффект даларгина при гастропатии, вызванной приемом нестероидных противовоспалительных препаратов / Е.Ю. Животова, М.Ю. Флейшман, E.H. Сазонова, O.A. Лебедько, С.С. Тимошин // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 2009. - № 4. -С. 422-426.
23. Протективное действие аналога дерморфина седатина на индуцируемое индометацином повреждение слизистой оболочки желудка / М.Ю. Флейшман, Е.Ю. Животова, O.A. Лебедько, В.И. Дейгин, С.С. Тимошин // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 2009. -№ 7. - С. 72.
24. Опыт применения опиоидных пептидов для повышения эффективности искусственного воспроизводства амурских осетровых рыб / М.Ю. Флейшман, A.B. Соколов, В.М. Авласенко, O.A. Лебедь-
ко, Е.Н. Сазонова, И.Е. Хованский, С.С. Тимошин // Вопросы рыболовства. - 2009. - № 3(36). - С. 564-574
25. Применение даларгина в комплексной терапии болезни Крона / Е.В. Ожегов, С.А. Алексеенко, О.А. Лебедько, М.Ю. Флейшман, С.С. Тимошин // Дальневосточный медицинский журнал. - 2009. - № 2. -С. 11-13.
26. Патент «Способ стимуляции развития осетровых рыб» / М.Ю. Флейшман, С.С. Тимошин, Е.Н. Сазонова, Е.П. Ярова, В.И. Дейгин Номер публикации 2298921, заявка RU 2005130685/12, 2007.05.20
27. Патент «Способ ослабления эрозивно-язвенного повреждения слизистой оболочки желудка при воздействии ацетилсалициловой кислоты (АСК) с помощью пептида формулы Arg-Tyr-D-Ala-Phe-Gly» / М.Ю. Флейшман, С.С. Тимошин, В.И. Дейгин, Е.П. Ярова Номер публикации 2303983, заявка RU 2005141112/14, 2007.08.10
28. Influence of synthetic Dermorphine analogues on proliferation processes of some types of epithelium and on Lipids Peroxide oxidation / M.Y. Fleishman, A.V. Kuznetsov // Problems Pharmacology and Pharmacy in the Far East. Summary. - Khabarovsk, 1997. - P. 99.
29. Does angiotensin II cellular growth in gastric mucosa? / M. Fleishman, A. Avilova, E. Jivotova, S. Timoshin, S. Alexeenko // Br. J. Pharmacol. - 2002. - V. 53, N. 4. - P. 447-448
30. The influence of angiotensin II and enalapril on a DNA synthesis of gastric epithelium in white rats and in patients with arterial hypertension / S. Timoshin, S. Alexeenko, A. Avilova, M. Fleishman // J. of Gastroenterology and Hepatology. -2002. - Vol. 17. - Suppl. A 185.
31. M(3) muscarinic receptors mediate contraction of human urinary bladder / C. Fetscher, M. Fleichman, M. Schmidt, S. Krege, M.C. Michel // Br. J. Pharmacol. - 2002 Jul., 136(5). - P. 641-643.
32. Signal transduction underlying carbachol-induced contraction of rat urinary bladder II. Protein kinases. / M. Fleichman, T. Schneider, C. Fetscher, M.C. Michel // J. Pharmacol Exp Ther. - 2004 Jan; 308(1). - P.54-58.
ЛИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ЛО, А17, А43 - условные рабочие названия синтетических аналогов ерморфина
lKM - активные кислородные метаболиты T-II - ангиотензин II
ЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ДК - дезоксирибонуклеиновая кислота
[МЯ - индекс меченых ядер
[М - интенсивность метки
>П - опиоидные пептиды
П - регуляторые пептиды
ОЖ - слизистая оболочка желудка
РО - свободнорадикального окисления
МЛ - хемилюминесценция
[ОГ - циклооксигеназа
T-I - эндотелии I
О - ядрышковый организатор
rk - extracellular-regulated kinase-mitogen-activated protein (MAP) kinase
(Py, GTP-binding protein, p and у subunit
-NAME - NG-nitro-L-arginine methyl ester
F-кВ - nuclear factor kappa В
О - nitric oxide
OS - nitric-oxide synthase
I3K - phosphatidylinositol 3-kinase
KA, protein kinase A (cAMP-dependent protein kinase)
KB/Akt-protein kinase В
КС-protein kinase С
NFa-tumor necrosis factor a
Флейшман Марина Юрьевна
МОРФОГЕНЕТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ДЕРМОРФИНА И ЕГО АНАЛОГОВ В РАЗЛИЧНЫХ КЛЕТОЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЯХ
АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук
Подписано в печать 28.06.2010 Формат 60x90 1/16. Усл. п.л. 2,0. Уч. изд. л. 1,85. Тираж 100 экз. Заказ 118
Отпечатано на участке оперативной полиграфии редакционно-издательского отдела ГОУ ВПО ВГМУ 690002, г. Владивосток, пр. Острякова, 4
Содержание диссертации, доктора медицинских наук, Флейшман, Марина Юрьевна
Оглавление
Список сокращений
Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Физиологические и цитофизиологические эффекты дерморфина 15 и его аналогов
1.2. Внутриклеточные механизмы реализации митогенных эффектов 31 лигандов опиоидных рецепторов
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Характеристика исследуемых веществ
2.2. Характеристика объектов исследования 39 Экспериментальные животные и объекты исследования
2.3. Постановка экспериментов
2.4. Метод моделирования НПВП-гастропатий
2.5. Метод оценки влияния аналогов дерморфина на развитие осетра 45 амурского (Аарешег зсИгепскп)
2.6. Приготовление гистологических препаратов
2.7. Метод авторадиографии
2.8. Метод определения морфометрических показателей зон 50 ядрышек и ядра
2.9. Метод исследования содержания общего белка в мышцах рыб
2.10. Метод хемилюминесценции
2.11. Определение содержания гистамина в ткани желудка
2.12. Методика исследования процессов пролиферации на культуре 52 дермальных фибробластов белых крыс
2.13. Метод статистической обработки полученных данных
Глава 3. Влияние дерморфина и его аналогов на процессы синтеза ДНК 54 в различных клеточных популяциях
3.1. Влияние однократного введения дерморфина и его аналогов на 54 процессы синтеза ДНК в эпителии роговицы и желудка белых крыс
3.2. Влияние пятикратного введения дерморфина и его аналогов на 57 процессы синтеза ДНК в эпителии роговицы и желудка белых крыс
3.3. Влияние различных доз аналогов дерморфина на процессы 59 синтеза ДНК в эпителии роговицы и желудка белых крыс
3.4. Влияние безаргининового аналога и седатина на фоне блокады 61 N08 на процессы синтеза ДНК в СОЖ белых крыс
3.5. Влияние однократного внутри брюшинного введения пептидов 64 А10 и седатина на процессы синтеза ДНК в гладких миоцитах мышечной оболочки двенадцатиперстной кишки новорожденных белых крыс
3.6. Влияние седатина на процессы синтеза ДНК в эпителии 66 роговицы и желудка белых крыс на фоне блокады опиатных рецепторов налоксоном
3.7. Влияние аппликации дерморфина и его синтетических аналогов 68 на процессы синтеза ДНК в эпителии роговицы белых крыс
3.8. Влияние дерморфина и его синтетических аналогов на процессы 70 пролиферации в культуре дермальных фибробластов белых
3.9. Состояние процессов свободно-радикального окисления 72 сыворотки крови белых крыс при введении дерморфина и его синтетических аналогов
3.10. Обсуждение полученных данных
Глава 4. Влияние дерморфина и его аналогов на индуцируемые индометацином повреждения слизистой оболочки желудка
4.1. Состояние проблемы
4.2. Влияние дерморфина и его аналогов на площадь повреждения слизистой оболочки желудка, индуцируемое индометацином
4.3. Влияние дерморфина и его аналогов на процессы синтеза ДНК в 89 слизистой оболочке желудка животных, получавших индометацин
4.4. Влияние седатина и его безаргининового аналога на процессы 91 свободнорадикального окисления в слизистой оболочке желудка животных, получавших индометацин
4.5. Влияние блокады NOS у животных, получавших индометацин 94 на фоне введения седатина, на процессы синтеза ДНК в слизистой оболочке желудка
4.6. Влияние аналогов дерморфина на концентрацию гистамина в 96 тканях желудка белых мышей, получавших индометацин
4.7. Обсуждение результатов исследования
Глава 5. Влияние аналогов дерморфина на ранние периоды развития рыб осетровых пород
5.1. Состояние вопроса
5.2. Влияние различных доз седатина на динамику и скорость 106 выклева личинок осетра амурского
5.3. Влияние аналогов дерморфина на соматометрические 109 показатели личинок и мальков осетра амурского
5.4. Влияние аналогов дерморфина на процессы 114 свободнорадикального окисления в икре, сердце и печени мальков осетра амурского
5.4.1. Состояние вопроса
5.4.2. Собственные исследования
5.5. Влияние аналогов дерморфина на состояние ядрышкового 120 аппарата в сердце и печени мальков осетра амурского
5.5.1. Состояние вопроса
5.5.2. Собственные исследования влияния аналогов дерморфина на 123 состояние ядрышкового аппарата в сердце и печени мальков осетра амурского
5.6. Влияние седатина на морфометрические показатели 127 белоксинтетической активности в мышечных волокнах мальков осетра амурского
5.7. Обсуждение результатов исследования
Глава 6. Обсуждение результатов исследований 133 Выводы 145 Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
А10, А17, А43 - условные рабочие названия синтетических аналогов дерморфина
АДФ - аденозиндифосфат
АКМ - активные кислородные метаболиты
АМФ - аденозинмонофосфат
АТФ - аденозинтрифосфат
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИМ - интенсивность метки
ИМЯ - индекс меченых ядер
ОП - опиоидные пептиды
ОР - опиоидные рецепторы
ПОЛ - перекисное окисление липидов
РНК - рибонуклеиновая кислота
СРО - свободнорадикальное окисление
СОЖ - слизистая оболочка желудка
XMJI или XJI - хемилюминесценция
ЦОГ - циклооксигеназа (СОХ - англ.) л,- мю-рецепторы
5- дельта- рецепторы к- каппа- рецепторы
DMEM - среда Игла в модификации Дульбекко EGF - epidermal growth factor
Erk - extracellular-regulated kinase - mitogen-activated protein (MAP) kinase
Ga - GTP-binding protein, a subunit
G(3y, GTP-binding protein, p and у subunit
Gi - inhibitory pertussis toxin-sensitive G-protein
GPCR - G-protein-coupled receptor
GRK - G-protein-coupled receptor kinase IL - interleukin
JNK - c-Jun-N-terminal kinase
KOR - K-opioid receptor
L-NAME - Ng - nitro-L-arginine methyl ester
MOR- (i-opioid receptor
NF-kB - nuclear factor kappa B
NO - nitric oxide
NOS - nitric-oxide synthase
PI3K - phosphatidylinositol 3-kinase
PKA, protein kinase A (cAMP-dependent protein kinase)
PKB/Akt - protein kinase B
PKC - protein kinase C
SAPK - stress activated protein kinasa
TNFa - tumor necrosis factor a
Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфогенетическая активность деморфина и его аналогов в различных клеточных популяциях"
Актуальность проблемы
Семейство опиоидных пептидов наиболее многочисленно и самое изученное из представителей регуляторных пептидов (Зайцев С. В. и соавт. 1993; Ашмарин И. П., 2005). Выделение эндогенных опиоидных пептидов изменило представление о функционировании регуляторных систем. Рецепторы опиоидных пептидов были идентифицированы в нейронах, в клетках иммунной и эндокринной систем, в клетках ЖКТ, и др. Способность клеток интегративной системы секретировать различные регуляторные пептиды, а также наличие на них рецепторов к этим пептидам обеспечивает «закольцованность» интегративных систем в единый регуляторный континуум (Кого1еуа 8. V., АзЬшапп I. Р., 2002; 2006). И. П. Ашмарин для обозначения непрерывности и единства интегративных систем обозначил регуляторный континуум понятием «океан Соляриса» (Ашмарин И. П., 2005). Регуляторные пептиды филогенетически самая древняя форма управления. Они обнаружены у прокариот и выявлены, фактически, во всех тканях млекопитающих. Это дало основание для положения, что, «все органы и ткани животных являются эндокринными и секретируют гормоны пептидной природы» (Панков Ю. А., 1996; 2005 (а, б)). Основная часть регуляторных пептидов состоит из 2 - 50 аминокислотных остатков, что позволяет отнести их к олигопептидам. В отличие от полипептидов, внутримолекулярные взаимодействия у олигопептидов немногочисленны. В результате этого, у них появляется возможность менять свои конформационные свойства что, в определенных пределах, обеспечивает взаимодействие с рядом рецепторных структур (Замятнин А. А., 1989). В какой-то мере, это служит объяснением плейотропных эффектов РП и невозможности предсказать характер их влияния на физиологические процессы, в частности, на клеточное деление. Период существования РП характеризуется промежуточным положением между классическими неиромедиаторами (10"2 - 10"4 с) и гормонами (103 - 105 с) (Исакова О.Л. и соавт., 1986).
В то же время, продолжительность целого ряда эффектов у этого класса регуляторов может составлять не только часы, но и дни, недели (Ашмарин И. П., 1984; Ашмарин И. П., Обухова М.Ф., 1994; АзЬшапп 1.Р., Кагагееуа Е.Р., 2007). Долгосрочные и отсроченные эффекты РП изучены недостаточно и выяснение их природы представляет интерес для фундаментальной науки и может иметь выраженное прикладное значение.
Открытие опиоидных пептидов заставило пересмотреть справедливость положения «один нейрон - один медиатор». Регуляторные пептиды, (первоначально это было установлено для опиоидных пептидов), способны тормозить или активировать эффекты традиционных нейротрансмиттеров. Возможность модифицировать настроение и эмоции, а также оказывать воздействие на структурные изменения клеточных популяций, заставило по-новому взглянуть на представления о регуляции психосоматических процессов. Уровень процессов пролиферации объективный критерий регенераторного потенциала клеточной популяции. Состояние синтеза ДНК - важнейший цитофизиологический критерий тканевого гомеостаза. При оценке участия опиоидов в регуляции клеточного деления, следует иметь в виду, что клетка является достаточно автономной, полуоткрытой системой, способной, при наличии ряда условий, к процессам самовоспроизведения. Ситуация качественно меняется у высших организмов, где различные клеточные популяции выполняют специфические функции. Здесь интегративные системы активно воздействуют на процессы «самовоспроизводства» клеток. Еще в большей степени роль регуляторного континуума в цитофизиологических процессах возрастает при необходимости адаптироваться к меняющимся условиям - к действиям факторов, возмущающих гомеостаз, к различным стрессам. Здесь, в полной мере, проявляется роль регуляторного континуума, в котором РП играют одну их ведущих ролей. Высокая физиологическая активность РП: послужила толчком для создания на их базе фармакологических препаратов. Список лекарств, созданных на основе регуляторных пептидов исчисляется сотнями (Oliver K.R. et al., 2000; Poyner D. et al., 2000; Brain S.D. and Сох H.M., 2006; Delgado M., Ganea D., 2008). Это в полной мере относится к опиоидным пептидам (Pryor S.C. et al., 2005; Capasso А., 2007). Первоначально они оценивались как идеальные анальгетики, однако, изучение опиоидов показало наличие у них чрезвычайно широкого спектра биологической активности, не связанного с анальгетическим эффектом (Булгаков С.А., 2005; Colman A.S., Miller J.H., 2002). Морфогенетические эффекты стабильного аналога лей-энкефалина даларгина достаточно разнообразны: в частности, он оказывает воздействие на процессы пролиферации (Панькова Т.Д. и Тимошин С.С., 1990; Тимошин С.С. и соавт., 1991). При синтезе даларгина присоединение аргинина к С-окончанию пептида, по замыслу создателей препарата, должно было предотвращать способность синтезированного олигопептида проникать через гематоэнцефалический барьер в ЦНС (Смагин В. Г. и соавт., 1983). Однако оказалось, что наличие молекулы аргинина является важным условием для проявления целого ряда физиологических эффектов, в частности, митогенного (Флейшман М.Ю. и соавт., 2007; Животова Е.Ю., Флейшман М.Ю. и соавт., 2009). При этом следует иметь в виду чрезвычайно широкий спектр цитофизиологических реакций, индуцируемых молекулой аргинина. Дерморфины - особый класс семейства опиоидных пептидов. У всех природных дерморфинов присутствует N-концевая последовательность Tyr-D-Ala-Phe, в которой между двумя ароматическими кольцами Туг и Phe присутствует D-аминокислотный остаток аланина, что обусловливает специфику биологической активности дерморфинов. Устойчивость дерморфина к действию эндогенных пептидаз, а также уникальная анальгетическая активность, превышающая этот показатель у морфина на 2 порядка, послужила предпосылкой для создания синтетических аналогов дерморфина. В настоящее время количество синтетических аналогов дерморфина исчисляется десятками. Анализ биологической активности пептидов показал их адаптогенные свойства, способность влиять на терморегуляцию, сон и оказывать антиалкогольное воздействие (Громова Е.А. и соавт., 1989; Ярова Е.П., 1990; Ковальзон В.М. и соавт., 2002; Емельянова Т.Г. и соавт., 2007; Яеёёу Р. А. е! а1., 2009). В наших предыдущих исследованиях было установлено, что дерморфин и его аналоги вовлечены в регуляцию процессов клеточного деления. В настоящее время на базе одного из аналогов дерморфина - седатина (Н-А^-Туг-0-А1а-Р11е-01у-ОН), создана лекарственная форма. Препарат является официнальным для ветеринарии и готовится к клиническим испытаниям. Поэтому всестороннее изучение его влияния на различные цитофизиологические процессы имеет прикладное значение. Седатин, также как и даларгин, является аргининсодержащим пептидом, однако, в отличие от даларгина, где аргинин расположен со стороны С-окончания, у седатина он находится в ТчГ-положении. В отличие от даларгина, который является дельта- мю-агонистом, седатин, главным образом, мю- и, частично, дельта- агонистом. Мю- и дельта- агонисты могут оказывать различное влияние на процессы пролиферации (Тимошин С.С. и соавт., 1994; Флейшман М.Ю. и соавт., 2004). Целый ряд биологических эффектов седатина совпадает с биологической активностью даларгина (Панькова Т.Д., Тимошин С.С., 1990;. В частности, седатин, также как и даларгин, обладает антистрессорной активностью (Лишманов Ю.Б. и соавт., 1985; Емельянова Т.Г. и соавт., 2007). Однако, в отличие от даларгина, который индуцирует сонливость и релаксацию, введение седатина приводит к повышению концентрации внимания (Ещенко О.В. и соавт., 1998; Ярова Е.П., 1990). Этот факт может служить одной из иллюстраций различной реакции интегративных систем, участвующих в регуляции пролиферации в условиях организма. Поэтому, несмотря на определенное структурное сходство между пептидами, экстраполировать сведения о вовлеченности даларгина в регуляцию процессов тканевого гомеостаза на седатин не представляется возможным. При этом остаются неизученными такие важные аспекты влияния дерморфинов, как участие в поддержании тканевого гомеостаза в условиях патологии, в частности, при НПВП-гастропатии. Тем более, неизвестны механизмы, посредством которых дерморфины реализуют свое цитопротективное действие в этих условиях. Ранее нами было изучено влияние дерморфинов на процессы пролиферации у крыс; вопрос о способности влияния представителей этого семейства опиатов на процессы регенерации у других представителей типа хордовых, в частности, у рыб, отсутствует. Остается неизученным влияние дерморфинов на ранние этапы онтогенеза и возможные долгосрочные эффекты аналогов дермофина. Важным компонентом реализации биологических эффектов аргининсодержащих опиоидов, является их способность оказывать воздействие на свободнорадикальные процессы, в частности, на систему NOS-NO (Лебедько O.A. и Тимошин С.С., 2004; Животова Е.Ю., Флейшман М.Ю. и соавт., 2007; Флейшман М.Ю. и соавт., 2007; 2009). Сведения о вовлеченности дерморфина и его аналогов в регуляцию процессов свободнорадикального окисления отсутствуют. В последние годы имеет место переосмысливание представлений о свободнорадикальном окислении, как важном факторе патогенеза, их вовлеченность в процессы регуляции, в том числе, процессы клеточного деления. Согласно представлениям Е.Б. Меныциковой и соавт. (2008), априорное решение вопроса о токсичности или необходимости активных кислородных метаболитов при развитии того или иного процесса невозможно. В частности, характер эффекта оксида азота на цитофизиологические процессы зависит от свободнорадикального статуса. Все это послужило предпосылкой для выполнения настоящего исследования.
Цель настоящего исследования:
Изучение влияния дерморфина и его аналогов на состояние тканевого гомеостаза в различных клеточных популяциях. Достижение этой цели планировалось осуществить с помощью решения следующих конкретных задач.
Задачи исследования:
1. Изучить характер влияния дерморфина и его аналогов, обладающих различным сродством к мю- и дельта- рецепторам на процессы синтеза ДНК в различных клеточных популяциях.
2. Изучить характер влияния дерморфина и его аналогов на процессы синтеза ДНК при непосредственном воздействии (аппликации на роговицу и введение в культуру дермальных фибробластов).
3. Изучить характер влияния различных доз аргининсодержащего аналога дерморфина - седатина - на процессы синтеза ДНК в эпителии слизистой оболочки желудка и роговицы белых крыс.
4. Изучить характер влияния аналогов дерморфина на процессы синтеза ДНК в СОЖ при НПВП-гастропатии.
5. Изучить механизмы цитопротективного действия седатина при НПВП-гастропатии.
6. Изучить характер влияния аналогов дерморфина на процессы морфогенеза осетровых рыб и оценить возможность отдаленных эффектов при обработке оплодотворенной икры пептидами.
7. Изучить возможность использования аналогов дерморфина для оптимизации процессов разведения осетровых рыб.
Научная новизна
Впервые изучено влияние аргининсодержащего аналога дерморфина седатина на процессы клеточного деления.
Впервые установлена способность седатина стимулировать процессы синтеза ДНК в эпителии желудка в широком диапазоне доз. Впервые установлена способность седатина осуществлять протективный эффект при нарушении целостности СОЖ, индуцированном производными ацетилсалициловой кислоты.
Впервые установлено участие системы А^-МОБ в протективном эффекте седатина при НПВП-гастропатиях.
Впервые установлено, что обработка оплодотворенной икры осетровых рыб седатином оптимизирует процессы развития осетровых рыб.
Впервые разработан метод использования седатина для оптимизации процессов разведения осетровых рыб.
Практическая значимость
1. Установленная нами способность седатина - потенциального фармакологического препарата — оказывать цитопротективные эффекты при НПВП-гастропатии, может быть использована в клинической практике дял профилактики нарушений целостности СОЖ при приеме салицилатов.
2. Разработанный нами метод оптимизации разведения осетровых рыб используется на рыборазводных предприятиях Дальнего Востока.
3. Обнаруженные нами закономерности влияния аналогов дерморфина на процессы синтеза ДНК в норме и при патологии могут быть использованы при планировании направленного синтеза пептидов, обладающих цитопротективным действием.
Положения, выносимые на защиту:
1. В реализации морфогенетических эффектов седатина важная роль принадлежит его способности ослаблять проявления окислительного стресса.
2. Седатин уменьшает язвенно-эрозивные поражения, индуцированные в желудке нестероидными противовоспалительными препаратами.
3. Обработка икры осетровых рыб седатином оптимизирует процессы развития молоди.
Заключение Диссертация по теме "Клеточная биология, цитология, гистология", Флейшман, Марина Юрьевна
8. Результаты исследования влияния седатина на выклев, рост и развитие молоди осетровых рыб легли в основу нового способа оптимизации развития осетровых на рыборазводных предприятиях.
Библиография Диссертация по биологии, доктора медицинских наук, Флейшман, Марина Юрьевна, Владивосток
1. Влияние эналаприла, лизиноприла и амлодипина на течение хронического гастрита у больных артериальной гипертонией Текст. / С. А. Алексеенко, А. А. Авилова, М. Ю. Флейшман [и др.] // Клиническая медицина. 2004. - № 5. - С. 49-51.
2. Арутюнян, А. В. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма Текст. : метод, рекомендации / А. В. Арутюнян, Е. Е. Дубинина, Н. Н. Зыбина. -СПб., 2000. 48 с.
3. Архипчук, С. В. Морфология ядрышек в эмбриогенезе карповых рыб Текст. / С. В. Архипчук // Цитология. 1996. - № 3. - С. 325335.
4. Атлас пресноводных рыб России Текст. : в 2 т. / под ред. Ю. С.Решетникова. М.: Наука, 2003. - Т. 1. - 379 с.
5. Ашмарин, И. П. Перспективы практического применения и некоторых фундаментальных исследований малых регуляторных пептидов Текст. / И. П. Ашмарин // Вопросы медицинской химии. 1984. - Т. 30. - С. 369-375.
6. Ашмарин, И. П. Регуляторные пептиды. Общие и избранные аспекты проблемы Текст. / И. П. Ашмарин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, корлопроктологии. 2005. - Т. XV, №5.-С. 11-15.
7. Пат. 2206573 Российская Федерация. Семейство пептидов, обладающих нейротропными свойствами Текст. / И. П. Ашмарин, JI. Ю. Алфеева, J1. А. Андреева [и др.] ; опубл. 20.06.2003, Бюл. № 17.
8. Ашмарин, И. П. Современное состояние гипотезы о регуляторном континууме регуляторных пептидов Текст. / И. П. Ашмарин, М. Ф. Обухова // Вестник РАМН. 1994. - № 40. - С. 28-34.
9. Баранникова, И. А. Гормональная регуляция репродуктивной функции у рыб с различной экологией Текст. / И. А. Баранникова // Биологические основы рыбоводства. 1984. - С. 178-218.
10. Бобров, И. П. Морфофункциональная характеристика белков областей ядрышковых организаторов при гладкомышечных опухолях матки / И. П. Бобров, А. М. Авдалян, А. Ф. Лазарев и др. // Архив патологии. 2008. - Т. 70, № 3. - С. 18-23.
11. Бойко, Н. Е. Физиологические механизмы адаптивных функций в раннем онтогенезе русского осетра Acipenser gueldenstaedtii BrandtТекст. : дис. д-ра биол. наук / Н. Е. Бойко. СПб., 2008. - 204 с.
12. Применение даларгина для профилактики и лечения НПВП-гастропатий Текст. / Н. А. Болоняева, Л. П. Исаенко, М. Ю. Флейшман [и др.] // Дальневосточный медицинский журнал. -2005.-№2.-С. 62-66.
13. Боровиков, В. П. Популярное введение в программу БТАТШТГСА Текст. / В. П. Боровиков. М.: Компьютер-Пресс, 1998. - 266 с.
14. Бузлама, В. С. Стрессогенный ульцерогенез и его коррекция синтетическими олигопептидами Текст. / В. С. Бузлама, И. В. Трутаев // Ветеринарная патология. 2008. - № 1 (24). - С. 121124.
15. Бузлама, В. С. Влияние синтетических олигопептидов на процессы анаболизма, кроветворение и иммунитет у животных Текст. / В. С. Бузлама, И. В. Трутаев, С. В. Шабунин // Ветеринария. 2007. -№ 1. - С. 46-49.
16. Бузлама, В. С. Влияние синтетических олигопептидов на адаптационные способности и выносливость организма Техт. / В. С. Бузлама, И. В. Трутаев, С. В. Шабунин // Ветеринарная патология. — 2008.-№ 1 (24).-С. 27-35.
17. Бузлама, В. С. Применение тимогена и седатина для профилактики транспортного стресса телят Текст. / В. С. Бузлама, С. В. Шабунин, И. В. Трутаев // Веткорм. 2007. - № 4. - С. 23-24.
18. Булгаков, С. А. Синтетические аналоги опиоидных пептидов какфармакологические препараты в гастроэнтерологии Текст. / С. А. Булгаков // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2005. - Т. XV, № 5. - С. 59-64.
19. Вараксина, Г. С. Действие даларгина на развитие зародышей морского ежа Текст. / Г. С. Вараксина, В. А. Виноградов, А. А. Вараксин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1987. - № 3. - С. 384.
20. Свободные радикалы в живых системах Текст. / Ю. А. Владимиров, О. А. Азизова, А. И. Деев [и др.] // Итоги науки и техники. 1991. - Т. 29. - С. 1-249.
21. Воейков, В. JI. Благотворная роль активных форм кислорода Текст. / В. Л. Воейков // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2001. - Т. XI, № 4. - С. 128-135.
22. Воронов, Б. А. Антропогенная динамика природных экосистем и пути развития экологической обстановки Текст. / Б. А. Воронов // Природные ресурсы Хабаровского края: проблемы науки и образования. Хабаровск: Изд-во ХГПУ, 2004. - С. 20-25.
23. Глубоков, А. И. Регуляция репродуктивной функции с помощью биологически активных веществ и факторов Текст. / А. И. Глубоков // Биологические основы марикультуры. М.: ВНИРО, 1998.-С. 205-215.
24. О роли водной среды в механизмах действия иммуноактивных пептидов в сверхмалых дозах Текст. / Е. И. Григорьев, В. X. Хавинсон, В. В. Малинин [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2003. - Т. 136, № 8. - С. 173-178.
25. Роль моноаминергических систем мозга в противоалкогольном действии дерморфина и пептида дельта-сна Текст. / Е. А. Громова, Н. В. Бобкова, Л. А. Плакхинас [и др.] // Физиологический журнал СССР. 1989. - Т. 75, № 5. - С. 633637.
26. Синтез, фармакокинетика и метаболизм С-концевого трипептида дерморфина и его диастереомера Текст. / П. С. Громовых, Л. С. Гузеватых, К. В. Шевченко [и др.] // Биоорганическая химия. -2007.-Т. 33, №6.-С. 1-7.
27. Сравнительный анализ анальгетической активности дерморфина, рЭРгоб.-дерморфина и их С-концевых трипептидов Текст] / Л. С. Гузеватых, Т. А. Воронина, Т. Г. Емельянова [и др.] // Известия РАН.- 2007. № 5. - С. 1-6.
28. Детлаф, Т. А. Развитие осетровых рыб Текст. / Т. А. Детлаф, А. С. Гинзбург, О. И. Шмальгаузен. М.: Наука, 1981. - 224 с.
29. Дубинина, Е. Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса Текст. / Е. Е. Дубинина // Вопросы медицинской химии. 2001. - Т. 47, № 6. - С. 561-581.
30. Евсеев, М. А. Гепато- и гастротоксичность нестероидных противовоспалительных препаратов: возможные точки пересечения Текст. / М. А. Евсеев // Российский медицинский журнал. 2007. - Т. 15, № 26. - С. 2029-2036.
31. Связь структуры дерморфинов с их терморегуляторной активностью Текст. / Т. Г. Емельянова, Л. С. Гузеватых, Л. А. Андреева [и др.] // Известия РАН. 2007. - № 6. - С. 711-719.
32. Изучение терморегуляторной активности фрагмента природного предшественника дерморфина- А^-дерморфина и его аналогов Текст. / Т. Г. Емельянова, Л. С. Гузеватых, Н. Горячева [и др.] // Известия РАН. 2005. - № 1. - С. 1-8.
33. Епифанова, О. И. Радоавтография Текст. / О. И. Епифанова, В. В. Терских, А. В. Захаров. -М.: Высшая школа, 1977. 246 с.
34. Психостимулирующее действие синтетического аналогадерморфина Текст. / О. В. Ещенко, К. А. Никольская, В. И. Дейгии, Е. П. Ярова // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1998. - Т. 126, № 9. - С. 252-255.
35. Влияние даларгина на процессы синтеза ДНК в слизистой оболочке желудка белых крыс Текст. / Е. Ю. Животова, М. Ю. Флейшман, О. А. Лебедько [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2007. - Т. 144, № 9. -С. 288.
36. Наркомания. Нейропептид-морфиновые рецепторы Текст. / С. Е. Жуйкова, В. И. Сергеев, Г. Е. Самонина, Н. Ф. Мясоедов. М.: Изд-во МГУ, 1993. - 256 с.
37. Замятнин, А. А. Система природных физиологически активных пептидов Текст. / А. А. Замятнин // Физиологический журнал. -1989.-№5.-С. 646-651.
38. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте Текст. / И. П. Западнюк, В. И. Западнюк, Е. А. Захария, Б. В. Западнюк. Киев, 1983.-311 с.
39. Иванова, Ф. Г. Перспектива развития химиотерапии с изучением этнического и индивидуального полиморфизма системы цитохромов Р-450 в Республике Саха (Якутия) Текст. / Ф. Г. Иванова // Современная онкология. 2003. - № 2. - С. 23-27.
40. Исследование деградации пептидов в сыворотке крови методом 1Н-ЯМР Текст. / О. Л. Исакова, Н. Ф. Сепетов, Ж. Д. Беспалова [и др.] // Биоорганическая химия. 1986. - Т. 12, № 1. - С. 106-111.
41. Каратеев, А. Е. Энтеропатия, индуцированная нестероидными противовоспалительными препаратами Текст. / А. Е. Каратеев, В. А. Насонова // Терапевтический архив. 2004. - № 2. - С. 79-82.
42. Климов, П. К. Физиологическое значение пептидов мозга для деятельности пищеварительной системы Текст. / П. К. Климов. -Л., 1986. 257 с.
43. Дерморфины, пептид ОЭ1Р и сон у кроликов Текст. / В. М. Ковальзон, Ю. В. Рожнов, В. Н. Калихевич, 3. А. Ардемасова // Нейрохимия. Т. 19, № 4. - 2002. - С. 302-306.
44. Колесников, С. И. Импринтинг действия токсикантов в эмбриогенезе Текст. / С. И. Колесников, А. В. Семенюк, С. В. Грачев. М.: МИА, 1999. - 263 с.
45. Влияние синтетических аналогов дерморфина на тканевой гомеостаз миокарда новорожденных белых крыс Текст. / С. Ю. Крыжановская, О. А. Лебедько, Е. Н. Сазонова [и др.] // Бюллетеньэкспериментальной биологии и медицины. 2007. - № 10. - С. 413-416.
46. Крыхтин, М. Л. Осетровые рыбы Дальнего Востока Текст. / М. Л. Крыхтин, Э. И. Горбач // Экономическая жизнь Дальнего Востока. -Хабаровск, 1994.-№1 (З).-С. 86-91.
47. Кукес, В. Г. Клиническая фармакология Текст. : учебник / В. Г. Кукес. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медицина, 1999. -528 с.
48. Курзанов, А. Н. Опиоидные пептиды и пищеварительная система Текст. / А. Н. Курзанов // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2005. - Т. XV, № 5. - С. 47-59.
49. Курзанов, А. Н. Роль энкефалинов в пептидергической и холинергической регуляции гастродуоденопанкреатического комплекса Текст. : дис. . докт. мед. наук / А. Н. Курзанов. -Краснодар, 2001. с.
50. Лебедько, О. А. Активные кислородные метаболиты как универсальные мессенджеры процессов сигнальной трансдукции Текст. / О. А. Лебедько, С. С. Тимошин // Дальневосточный медицинский журнал. 2004. - № 4. - С. 95-98.
51. Лебедько, О. А. Влияние регуляторных пептидов на синтез ДНК в эпителиоцитах и гладких миоцитах респираторного тракта белых крыс на раннем этапе постнатального онтогенеза Текст. : автореф. дис. . докт. мед. наук. Владивосток, 2003. - 43 с.
52. Лишманов, Ю. Б. Опиоидные нейропептиды, стресс и адаптационная защита сердца Текст. / Ю. Б. Лишманов, Л. Н. Маслов. Томск: Изд-во Том. ун-та, 1994. - 352 с.
53. Лишманов, Ю. Б. О механизме антистрессорного действия Д-ала2-лей5-арг6-энк Текст. / Ю. Б. Лишманов, Л. Н. Маслов, М. И. Титов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -1985.-№ 9.-С. 268-270.
54. Лю, Б. Н. Роль митохондрий в развитии и регуляции уровня окислительного стресса в норме, при клеточных патологиях и реверсии опухолевых клеток Текст. / Б. Н. Лю, М. Б. Лю, Б. И. Исмаилов // Успехи современной биологии. — 2006. Т. 126, № 4. -С. 388-399.
55. Лю, М. Б. Кислородно-перекисный механизм канцерогенеза и модификации ДНК Текст. / М. Б. Лю, Б. Н. Лю, Б. И. Исмаилов // Успехи современной биологии. 2005. - Т. 125, № 2. - С. 179-188.
56. Оценка пластической функции кардиомиоцитов методом серебрения ядрышек у оперируемых больных ишемической болезнью сердца Текст. / Н. Н. Мамаев, О. В. Ковалева, X. К. Аминева X. [и др.] // Архив патологии. 1993. - № 3. - С. 43-45.
57. Структурно-функциональное исследование глицин- и пролинсодержащих пептидов (глипролинов) как потенциальныхнейропротекторов Текст. / К. В. Мартынова, JI. А. Андреева, П.A. Климова и др. // Биоорганическая химия. 2009. - Т. 35, № 2 -С. 165-171.
58. Маслов, JI. Н. Гетерогенность, альтернативный сплайсинг и олигомеризация м опиоидных рецепторов Текст. / JI. Н. Маслов // Молекулярная медицина. - 2005. - № 4. - С. 3-15.5 6
59. Мельникова, Н. П. Влияние лигандов опиатных рецепторов на процессы синтеза ДНК в миокарде новорожденных крыс Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук / Н. П. Мельникова. -Владивосток, 1998. 18 с.
60. Мельникова, Н. П. Влияние эндотелина-1 и предсердного натрийуретичеекого пептида- II на морфогенез сердца белых крыс Текст. / Н. П. Мельникова, С. С. Тимошин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2002. - Т. 134, № 7 -С. 101-103.
61. Окислительный стресс: патологические состояния и заболевания Текст. / Е. Б. Меныцикова, Н. К. Зенков, В. 3. Ланкин. -Новосибирск: APTA, 2008. 284 с.
62. Микодина, Е. В. Биологические основы и методы управления функциями в раннем онтогенезе рыб Текст. / Е. В. Микодина // Биологические основы марикультуры. М.: ВНИРО, 1998. - С. 178-205.
63. Микодина, Е. В. Интенсификация форелеводства. Опыт и физиологические основы внедрения малых регуляторных пептидов Текст. / Е. В. Микодина // Рыбное хозяйство. 1995. -№ 1. - С. 1-20.
64. Микодина, Е. В. Оценка эффективности применения оплодотворяющих растворов при воспроизводстве радужной форели Текст. / Е. В. Микодина, Г. Т. Панченков, К. А. Яблоков // Рыбное хозяйство. Í990. - № 8. - С. 38-40.
65. Наумова, Л. А. Применение даларгина в комплексном лечении эрозивно-язвенной патологии желудка и двенадцатиперстной кишки у детей Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук / Л. А. Наумова. Хабаровск, 2001. - 22 с.
66. Новомодный, Г. В. Рыбы Амура: богатство и кризис Текст. / Г. В.Новомодный, С. Ф. Золотухин, П. О. Шаров. Владивосток: Апельсин, 2004. - 64 с.
67. Ожегов, Е. В. Клинико-патогенетическое обоснование применения месалазина и даларгина в лечении болезни Крона Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук / Е. В. Ожегов. Хабаровск, 2010. -21 с.
68. Применение даларгина в комплексной терапии болезни Крона Текст. / Е. В. Ожегов, С. А. Алексеенко, О. А. Лебедько [и др.] // Дальневосточный медицинский журнал. 2009. - № 2. - С. 11-13.
69. Панков, Ю. А. Все органы и ткани животных и человека являются эндокринными и секретируют в кровь гормоны пептидной природы? Текст. / Ю. А. Панков // Вопросы медицинской химии. 1996. - Т. 42, Вып. 3. - С. 179 - 184.
70. Панков, Ю. А. Радикальные перемены в современной эндокринологии Текст. / Ю. А. Панков // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 2005. - № 5. -С. 15-24.
71. Панков, Ю. А. Роль лептина и его белковых медиаторов в нейрофизиологии Текст. / Ю. А. Панков // Вестник РАМН. -2005.-№2.-С. 44-48.
72. Панькова, Т. Д. Влияние лиганда опиатных рецепторов даларгина на процессы клеточного деления различных видов эпителия Текст. : автореф. дис. . канд. биол. наук / Т. Д. панькова.Владивосток, 1992. 27 с.
73. Панькова, Т. Д. Доказательства реализации стимулирующего эффекта даларгина на процессы клеточного деления через опиатные рецепторы / Т. Д. Панькова, С. С. Тимошин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1990. - № 7. - С. 9698.
74. Папин, А. А. Опиатные рецепторы, эндорфины и их антагонисты Текст. / А. А. Папин, Т. Д. Панькова, С, С. Тимошин // Анестезиология и реаниматология. 1984. - № 3. - С. 52-61.
75. Пикалова, В. М. Свободно-радикальное окисление в сердце и желудке крыс при введении эндотелина-1 и ангиотензина II Текст. : автореф. дис. . канд. биол. наук / В. М. Пикалова. -Владивосток, 2003. 21 с.
76. Радивоз, М. И. Участие лигандов опиоидных рецепторов регуляции клеточного деления в эпителиальных тканях организма Текст. : автореф. дис. . докт. мед. наук /М. И. Радивоз. -Владивосток, 1998. 48 с.
77. Влияние дерморфина на процессы клеточного деления в эпителии роговицы языка белых крыс Текст. / М. И. Радивоз, Е. И. Мельник, С. С. Тимошин, В. И. Дейгин // Бюллетеньэкспериментальной биологии и медицины. 1991. - № 8. - С. 162— 164.
78. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ Текст. / под ред. В. П. Фисенко. М.: Минздрав РФ, ЗАО ИИА "Ремедиум", 2000. - 441 с.
79. Влияние эндотелина-1 на синтез ДНК в миокарде белых крыс на раннем этапе постнатального онтогенеза Текст. / Е. Н. Сазонова, О. А. Сазонов, О. А. Лебедько [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000. - Т. 130, № 12. -С. 623-626.
80. Использование культвированных фибробластов для восстановления кожных покровов у тяжело обожженных Текст. / Д. С. Саркисов, В. Д. Федоров, Е. В. Глущенко [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1995. - № 6. - С. 566570.
81. Сергеев, П. В. Рецепторы Текст. / П. В. Сергеев, Н. JI. Шимановский. М.: Медицина, 1987. - 400 с.
82. Сиротин, Б. 3. Даларгин в комплексном лечении язвенных поражений при синдроме диабетической стопы Текст. : монография / Б. 3. Сиротин, К. В. Жмеренецкий, О. В. Ушакова. -Хабаровск: Изд-во РИОТИП, 2002. 80 с.
83. Смагин, В. Г. Лиганды опиатных рецепторов Текст. / В. Г. Смагин, В. А. Виноградов, С. А. Булгаков. М.: Наука, 1983. - 272 с.
84. Флюориметрическое определение серотонина и гистамина в одном образце Текст. / В. М. Соминский, В. А. Кузнецов, Т. С. Сомжура [и др.] // Лабораторное дело. 1982. - № 2. - С. 104.
85. Исследование пролиферативной активности и ядрышковых организаторов в эпидермисе у больных псориазом Текст. / К. Я. Терешин, В. И. Цыганков, М. Ю. Флейшман, Н. П. Мельникова // Клиническая лабораторная диагностика. 2002. - № 1. - С. 39^40.
86. Тимошин, С. С. Ускорение вертикальной миграции клеток эпителия роговицы белых крыс при хроническом иммобилизационном стрессе Текст. / С. С. Тимошин, Н. И. Бережнова // Бюллетень экспериментальной биологии имедицины. 1985. -№ 8. - С. 167-169.
87. Пептидный морфоген гидры ослабляет постстрессорные нарушения у белых крыс Текст. / С. С. Тимошин, И. Г. Яковенко, Г. П. Березина [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1997. - Т. 124, № 10. - С. 392-395.
88. Тищенко, О. В. Значение оксида азота в развитии гипертрофии сердца в условиях экспериментальной почечной гипертензии Текст. / О. В. Тищенко, Е. В. Елисеева, П. А. Мотавкин // Цитология. 2002. - Т. 44, № 3. - С. 263-269.
89. Трутаев, И. В. Кислородная недостаточность и её коррекция синтетическими олигопептидами Текст. / И. В. Трутаев // Ветеринарная патология. 2008-№ 1 (24). - С. 187-194.
90. Трутаев, И. В. Токсичность синтетических олигопептидов Текст. / И. В. Трутаев // Ветеринария. 2008.- № 8. - С. 52-56.
91. Трутаев, И. В.Применение седатина и неогена для повышениярезистентности поросят при отъёме Текст. / И. В. Трутаев, В. С. Бузлама // Свиноводство. 2007. - № 2. - С. 33-35.
92. Трутаев, И. В. Уменьшение отрицательных последствий гиподинамии животных с помощью олигопептидов Текст. / И. В. Трутаев, С. В. Шабунин, В. С. Бузлама // Вестник РАСХН. 2009. -№ 1. - С. 67-69.
93. Турпаев, К. Т. Активные формы кислорода и регуляция экспрессии генов Текст. / К. Т. Турпаев // Биохимия. 2002 - Т. 61.-С. 339-352.
94. Уголев, А. М. Естественные технологии биологических систем Текст. / А. М. Уголев. Л.: Наука, 1987. - 347 с.
95. Уголев, А. М. Концепция универсальных функциональных блоков и дальнейшее развитие учений о биосфере, экосистемах и биологических адаптациях Текст. / А. М. Уголев // Журнал эвол. физиологии и биохимии. -1990. Т. 26, № 4. - С. 441^4-54.
96. Уголев, А. М. Теория адекватного питания и трофология Текст. / А. М. Уголев. СПб.: Наука, 1991. - 271 с.
97. Уголев, А. М. Трофология новая междисциплинарная наука Текст. / А. М. Уголев // Вестник АН СССР. - 1980. - № 1. - С. 5061.
98. Уголев, А. М. Эволюция пищеварения и принципы эволюции функций Текст. / А. М. Уголев. Л.: Наука, 1985. - 544 с.
99. Влияние синтетических аналогов дерморфина на процессы клеточного деления эпителия роговицы и языка белых крыс Текст. / М. Ю. Флейшман, М. И. Радивоз, С. С. Тимошин [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1994. - № 11. -С.508-510.
100. Влияние седатина — синтетического аналога дерморфина — на развитие мальков осетра амурского Текст. / М. Ю. Флейшман, Е. Н. Сазонова, О. А. Лебедько [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2007. - Т. 144, № 10. -С. 420-423.
101. Профилактический эффект альгината кальция при повреждении слизистой оболочки желудка, вызванном индометацином, у крыс Текст. / М. Ю. Хотимченко, Т. Г. Разина, Н. В. Шилова [и др.] // Тихоокеанский медицинский журнал. 2007. - № 4. - С. 42-44.
102. Хугаева, В. К. Сократительная активность лимфатических микрососудов и роль опиоидных пептидов в ее регуляции Текст. / В. К. Хугаевва // Физиологический журнал СССР им. И. М. Сеченова. 1992.-Т. 78, № 12.-С. 109-118.
103. Влияние даларгина на процессы размножения клеток в эпителии желудка при стрессе Текст. / С. И. Швец, С. С. Тимошин, Н. Б. Мурзина, Г. П. Березина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1990. -№ 10. - С. 399-401.
104. Шептулин, А. А. Ненаркотические анальгетики и нестероидные противовоспалительные средства и эрозивно-язвенные пораженияслизистой оболочки желудка Текст. / А. А. Шептулин // Клиническая медицина. 1999. -№ 2. - С. 12-16.
105. Штейн, Г. И. Изменение морфометрических параметров окрашенных серебром ядрышек гепатоцитов крыс при циррозе печени и в процессе ее реабилитации Текст. / Г. И. Штейн, М. В. Кудрявцева, Б. Н. Кудрявцев // Цитология. 1999. - № 7. - С. 574— 579.
106. Яковлева, Т. В. Влияние специфических опиатных антагонистов на индуцированное прогестероном созревание ооцитов жабы и вьюна Текст. / Т. В. Яковлева, JI. А. Никитина, А. Б. Бурлаков // Докл. АН СССР. 1986.-Т. 286, №3.-С. 718-721.
107. Ярова, Е. П. Структурно-функциональные исследования дерморфина и его аналогов Текст. : автореф. дис. . канд. мед. наук / Е. П. Ярова. Владивосток, 1987. - 20 с.
108. The G protein-coupled 5-НТ1А receptor causes suppression of caspase-3 through МАРК and protein kinase Calpha Text. / T. Adayev, I. Ray, R. Sondhi [et al.] // Biochim. Biophys. Acta. 2003. -N7.-P. 85-96.
109. Ahmedzai, S. H. Opioids for chronic pain: molecular and genomic basis of actions and adverse effects Text. / S. H. Ahmedzai, J. Boland // Cuit. Opin. Support Palliat Care. 2007. - N 1 (2). - P. 117-25.
110. Ananthan, S. Opioid ligands with mixed mu/delta opioid receptor interactions: an emerging approach to novel analgesics Text. / S. Ananthan//AAPS J. 2006. - Vol. 10, N8(1).-P. 118-125.
111. Andrews, F. J. Expression of adhesion molecules and leucocyte recruitment into gastric mucosa following ischemia-reperfusion Text. / F. J. Andrews, C. Malcontenty-Wilson, P. E. O'Brien // Dig. Dis. Sci. -1997. Vol. 42. - P. 326-329.
112. Tumor necrosis factor mediation of NSAID-induced gastric damage: role of leukocyte adherence Text. / C. B. Appleyard, D. M. McCafferty, A. W. Tigley [et al.] // Am. J. Physiol. 1996. - Vol. 270. - P. 42-48.
113. Modulation of leukocyte adhesion in rat mesenteric venules by aspirin and salicylate Text. / H. Asako, P. Kubes, J. L. Wallace [et al.] // Gastroenterology. 1992. - Vol. 103. -P. 146-152.
114. HSP70 confers protection against indomethacin-induced lesions of the small intestine Text. / T. Asano, K. Tanaka, N. Yamakawa [et al.] // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2009. - Vol. 330 (2). - P. 458-467.
115. Ashmarin, I. P. Search for evolutionary ancient, relict regulatory peptides Text. / I. P. Ashmarin, E. P. Karazeeva // Zh Evol Biokhim Fiziol. 2007. - Vol. 43 (l).-P. 104-106.
116. Baeuerle, P. NF-kB: ten years after Text. / P. Baeuerle, D. Baltimore // Cell. 1996. - Vol. 87/ - P. 13-20.
117. Bal-Price, A. Nitric oxide stimulates PC 12 cell proliferation via cGMP and inhibits at higher concentrations mainly via energy depletion Text. / A. Bal-Price, J. Gartlon, G. C. Brown // Nitric. Oxide. 2006. - Vol. 14(3).-P. 238-246.
118. Cellular sources of reactive oxygen and nitrogen species. Roles in signal transcription pathways Text. / J. L. Beaudeux, J. Peynet, D. Bonnefont-Rousselot [et al.] // Ann Pharm Fr. 2006. - Vol. 64 (6). -P. 373-381.
119. Beckman, J. S. Nitric oxide, superoxide, and peroxynitrite: the good, the bad, and ugly Text. / J. S. Beckman, W. H. Koppenol // Am J Physiol. 1996. - Vol. 271. - P. 1424-1437.
120. Mu and kappa opioid receptors activate ERK/MAPK via different protein kinase C isoforms and secondary messengers in astrocytes Text. / M. M. Belcheva, A. L. Clark, P. D. Haas [et al.] // J. Biol. Chem. 2005. - Vol. 280 (29-30). - P. 2762-2769.
121. Bilfinger, T. V. Morphine's immunoregulatory actions are not shared by fentanyl Text. / T. V. Bilfinger, C. Fimiani, G. B. Stefano // Int. J. Cardiol. 1998. - Vol. 64, Suppl 1. - P. 61-66.
122. Protective effect of mirtazapine on indomethacin-induced ulcer in rats and its relationship with oxidant and antioxidant parameters Text. / M. Bilici, C. Ozturk, H. Dursun [et al.] // Dig. Dis. Sci. 2009. - Vol. 54 (9).-P. 1868-1875.
123. Booz, G. W. Role of type 1 and type 2 angiotensin receptors in angiotensin II-induced cardiomyocyte hypertrophy Text. / G. W. Booz, K. M. Baker // Hypertension. 1996. - Vol. 28 (4). - P. 635640.
124. Mechanisms of opioid-mediated inhibition of human T cell receptor signaling Text. / C. Borner, B. Warnick, M. Smida [et al.] // J. Immunol. 2009. - Vol. 15, N 183 (2). - P. 882-889.
125. Borutaite, V. Nitric oxide induces apoptosis via hydrogen peroxide, but necrosis via energy and thiol depletion Text. / V. Borutaite, G. C. Brown // Free Radic. Biol. Med. 2003. - Vol. 1, N 35 (11). - P. 1457-1468.
126. Brain, S. D. Neuropeptides and their receptors: innovative science providing novel therapeutic targets Text. / S. D. Brain, H. M. Cox // Br. J. Pharmacol. 2006. - Vol. 147, Suppl l.-P. 202-211.
127. Phosphatidylinositol 3-kinase couples the interleukin-2 receptor to thecell cycle regulator E2F Text. / P. Brennan [et al.] // Immunity. 1997.-N7(5).-P. 679-689.
128. Roles of G beta gamma in membrane recruitment and activation of pi 10 gamma/plOl phosphoinositide 3-kinase gamma Text. / C. Brock, M. Schaefer, H. P. Reusch [et al.] // J. Cell. Biol. 2003. - Vol. 160 (l).-P. 89-99.
129. Brooks, P. M. Treatment of rheumatoid arthritis: from symptomatic relife to potential cure Text. | P. M. Brooks // Brit. J. Rheumatol.1998.-N37.-P. 1265-1271.
130. Brown, G. C. Nitric oxide inhibition of mitochondrial respiration and its role in cell death Text. / G. C. Brown, V. Borutaite // Free Radic. Biol. Med. 2002. - Vol. 133 (11). - P. 1440-1450.
131. Prostaglandin E2 regulates cell migration via the intracellular activation of the epidermal growth factor receptor Text. / F. G. Buchanan, D. Wang, F. Bargiacchi, R. N. DuBois // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 278.-P. 35451-35457.
132. Cadet, P. Mu opiate receptor subtypes Text. J P. Cadet // Med. Sei Monit. 2004. - Vol. 10 (6). - P. 28-32.
133. Capasso, A. Bioactivity of new mu and delta opioid peptides Text. / A. Capasso // Med. Chem. 2007. - N 3 (5). - P. 480-487.
134. Mitochondrial nitric oxide synthase drives redox signals for proliferation and quiescence in rat liver development Text. / M. C. Carreras, D. P. Converso, A. S. Lorenti [et al.] // Hepatology. 2004. -Vol. 40.-P. 157-166.
135. Subapoptogenic oxidative stress strongly increases the activity of the glycolytic key enzyme glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase Text. / C. Cerella, M. D'Alessio, S. Cristofanon [et al.] // Ann. N. Y. Acad. Sei. 2009. - Vol. 1171.-P. 583-590.
136. Cloning of opioid receptors in common carp (Cyprinus carpio L.) and their involvement in regulation of stress and immune response Text. / M. Chadzinska [et al.] // Brain. Behav. Immun. 2009. - Vol. 23 (2). -P. 257-266.
137. Chadzinsk, M. Morphine affects the inflammatory response in carp by impairment of leukocyte migration / M. Chadzinska, H. F. Savelkoul, B. M. Verburg-van Kemenade // Dev. Comp. Immunol. 2009. - Vol. 33(1).-P. 88-96.
138. Antinociceptive cross-tolerance between D-Arg2.-dermorphin tetrapeptide analogs and morphine [Text] / K. Chaki, S. Sakurada, T. Sakurada [et al.] // Peptides. 1990. - Vol. 11 (1). - P. 139-144.
139. Chan, T. A. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs, apoptosis, and colon-cancer chemoprevention Text. / T. A. Chan // Lancet Oncol. -2002.-Vol. 3.-P. 166-174.
140. Mechanisms underlying nonsteroidal anti-inflammatory drug-mediated apoptosis Text. / T. A. Chan, P. Morin, B. Vogelstein, K. W. J. Kinzler // Proct. Natl. Sei. USA. 1998. - Vol. 95. - P. 681-686.
141. Chandel, N. S. The cellular basis for diverse responses to oxygen Text. / N. S. Chandel, G. R. Budinger // Free Radic. Biol. Med. -2007.-Vol. 15, N42 (2).-P. 165-174.
142. Rat stomach ECL cells up-date of biology and physiology Text. / D. Chen, C. M. Zhao, E. Lindstrom, R. Hakanson // Gen. Pharmacol. -1999. Vol. 32. - P. 413-422.
143. Effect of glutathione redox state on Leydig cell susceptibility to acute oxidative stress Text. / H. Chen, L. Zhou, C. Y. Lin [et al.] // Mol. Cell. Endocrinol. 2010. -N 3. - P. 34.
144. Chen, Q. W. Role of ERK/MAPK in endothelin receptor signaling in human aortic smooth muscle cells Text. / Q. W. Chen, J. Edvinsson, C. B. Xu // BMC Cell. Biol. 2009. - Vol. 3. - P. 10-52.
145. Cheng, K. Transactivation of the epidermal growth factor receptor mediates cholinergic agonist-induced proliferation of H508 human colon cancer cells Text. / K. Cheng, P. Zimniak, J. P. Raufman // Cancer. Res. 2003. - Vol. 63. - P. 674-675.
146. Investigation of the Mechanism of Intranasal Effect of Dermorphin in Representatives of Two Classes of Vertebrates Text. / L. S. Chervova, A. A. Kamenskii, G. A. Malyukina [et al.] // Zh. Evol. Biokhim. Fiziol. 1992. - Vol. 28, N. 1. - P. 45-48.
147. Chervova, L. S. Pain Sensitivity of Trout and Analgesia Caused byDermorphin Administrated Intranasally Text. / L. S. Chervova, D. N. Lapshin, A. A. Kamenskii // Dokl. Biol. Scienc. 1994. - Vol. 338. -P. 424-425.
148. Colman, A. S. Lack of involvement of mu(l) opioid receptors in dermorphin-induced inhibition of hypoxic and hypercapnic ventilation in rat pups Text. / A. S. Colman, J. H. Miller // Respir Physiol Neurobiol. 2002. - Vol. 1,N 131 (3).-P. 199-212.
149. Colman, A. S. Modulation of breathing by mul and mu2 opioid receptor stimulation in neonatal and adult rats Text. / A. S. Colman, J. H. Miller // Respir Physiol. 2001. - Vol. 127 (2-3). - P. 157-172.
150. Protein kinase G transmits the cardioprotective signal from cytosol to mitochondria Text. / A. D. Costa, K. D. Garlid, I. C. West [et al.] // Circ. Res. 2005. - Vol. 19, N 97 (4). - P. 329-336.
151. Czarna, M. Role of mitochondria in reactive oxygen species generation and removal; relevance to signaling and programmed cell death Text. / M. Czarna, W. Jarmuszkiewicz // Postepy Biochem. 2006. - Vol. 52 (2).-P. 145-156.
152. Identification and characterization of the autophosphorylation sites of phosphoinositide 3-kinase isoforms beta and gamma Text. / C. Czupalla, M. Culo, E. C. Muller [et al.] // J. Biol. Chem. 2003. - Vol. 28, N278 (13).-P. 11536-11545.
153. Day, Y. Non-steroidal anti-inflammatory drugs in prevention of gastric cancer Text. / Y. Day, W. H. Wang // World. J. Gastroenterol. 2006. -N 12.-P. 2884-2889.
154. Delgado, M. Anti-inflammatory neuropeptides: a new class of endogenous immunoregulatory agents Text. / M. Delgado, D. Ganea // Brain Behav. Immun. 2008. - N 22 (8). - P. 1146-1151.
155. Gastroprotective and antioxidant effects of montelukast on indomethacin-induced gastric ulcer in rats Text. / G. O. Dengiz, F. Odabasoglu, Z. Halici [et al.] // J. Pharmacol. Sei. 2007. - Vol. 105 (l).-P. 94-102.
156. Derenzini, M. The AgNORs Text. / M. Derenzini // Micron. 2000. -Vol.31 (2).-P. 117-120.
157. Nucleolar size indicates the rapidity of cell proliferation in cancer tissues Text. / M. Derenzini, D. Trere, A. Pession [et al.] // J. Pathol. -2000.-Vol. 191 (2).-P. 181-187.
158. Activation of nitric oxide synthase in endothelial cells by Akt-dependent phosphorylation Text. / S. Dimmeier, I. Fleming, B. Fisslthaler [et al.] // Nature (Lond). 1999. - N 399. - P. 601-605.
159. Dockray, G. J. Cholecystokinin and gut-brain signaling Text. / G. J. Dockray//Regul. Pept. 2009. - Vol. 5,N 155 (1-3).-P. 6-10.
160. The gastrins: their production and biological activities Text. / G. J.Dockray, A. Varro, R. Dimaline, T. Wang // Annu. Rev. Physiol. —2001.-Vol. 63.-P. 119-139.
161. Gastroprotective and antioxidant effects of opipramol on indomethacin-induced ulcers in rats Text. / H. Dursun, F. Albayrak, M. Bilici [et al.] // Yakugaku Zasshi. 2009. - Vol. 129 (7). - P. 861-869.
162. Antiulcer activity of fluvoxamine in rats and its effect on oxidant and antioxidant parameters in stomach tissue Text. / H. Dursun, M. Bilici, F. Albayrak [et al.] // BMC Gastroenterol. 2009. - Vol. 20, N 9. - P. 36.
163. Dzimiri, N. Receptor crosstalk. Implications for cardiovascular function, disease and therapy Text. / N. Dzimiri // Eur. J. Biochem.2002. Vol. 269 (19). - P. 4713-4730.
164. Nociceptin-induced modulation of human T cell function Text. / K. H. Easten, R. A. Harry, W. M. Purcell [et al.] // Peptides. 2009. - Vol. 30 (5).-P. 926-934.
165. Eddy, F. B. Role of nitric oxide in larval and juvenile fish Text. / F. B. Eddy // Comp. Biochem. Physiol. A. Mol. Integr. Physiol. 2005. -Vol. 142 (2).-P. 221-230.
166. Phosphorylation of GluRl, ERK, and CREB during spontaneous withdrawal from chronic heroin self-administration Text. / S. Edwards, D. L. Graham, K. N. Whisler, D. W. Self// Synapse. 2009. -Vol. 63 (3).-P. 224-235.
167. A nitric oxide-releasing nonsteroidal anti-inflammatory drug accelerates gastric ulcer healing in rats Text. / S. N. Elliott, W. McKnight, G. Cirino, J. L. Wallace // Gastroenterology. 1995. - Vol.109 (2).-P. 524-530.
168. In vitro and in vivo opioid activity of DPro6. dermorphin, a novel analogue to dermorphin [Text] / T. G. Emel'anova, A. B. Usenko, M. G. Uranova [et al.] // Peptides. 2003. - Vol. 24 (3). - P. 419-428.
169. Thermoregulatory activity of dermorphin fragments Text. / T. G. Emel'ianova, N. N. Goriacheva, L. S. Guzavatykh [et al.] // Izv. Akad. Nauk. Ser. Biol. 2004. - Vol. 5. - P. 570-576.
170. Effect of dermorphin analogs on thermoregulation of rats under various thermal conditions Text. / T. G. Emel'ianova, A. B. Usenko, A. P. Bonartsev [et al.] // Izv Akad Nauk Ser Biol. 2002. - Vol. 3. - P. 348-354.
171. Effects of dermorphine on thermoregulation Text. / T. G. Emel'yanova, A. B. Usenko, A. A. Kamenskii [et al.] // Biomed Sei. -1991. Vol. 2 (6). - P. 601-606.
172. The endocannabinoid system protects rat glioma cells against HIV-1 Tat protein-induced cytotoxicity. Mechanism and regulation Text. / G. Esposito, A. Ligresti, A. A. Izzo [et al.] // J Biol Chem. 2002. - Vol. 277.-P. 50348-50354.
173. Naloxone acts as an antagonist of estrogen receptor activity in MCF-7 cells Text. / M. Farooqui, Z. H. Geng, E. J. Stephenson [et al.] // Mol Cancer Ther. 2006. - Vol. 5 (3). - P. 611-620.
174. Central and peripheral sites of action for the protective effect of opioids of the rats stomach Text. / S. Ferri, R. Arrigo-Reina, S. Candeletti [et al.] //Pharmacol. Res. Commun. 1983. - Vol. 15. - P. 409-418.
175. Fialkow, L. Reactive oxygen and nitrogen species as signaling molecules regulating neutrophil function Text. / L. Fialkow, Y. Wang, G. P. Downey // Free Radie. Biol. Med. 2007. - Vol. 15, N 42 (2). -P. 153-164.
176. Mu3 opiate receptor expression in lung and lung carcinoma: ligand binding and coupling to nitric oxide release Text. / C. Fimiani, E.Arcuri, A. Santoni et al. // Cancer Lett. 1999. - Vol. 1, N 146 (1). -P. 45-51.
177. Morphine and anandamide stimulate intracellular calcium transients in human arterial endothelial cells: coupling to nitric oxide release Text. / C. Fimiani, D. Mattocks, F. Cavani [et al.] // Cell Signal. 1999. - Vol. 11.-P. 189-193.
178. Finkel, T. Oxygen radicals and signaling Text. / T. Finkel // Curr. Opin. Cell. Biol. 1998. -N 10 (2). - P. 248-253.
179. Ventromedial hypothalamic nitric oxide production is necessary for hypoglycemia detection and counterregulation Text. / X. Fioramonti, N. Marsollier, Z. Song [et al.] // Diabetes. 2010. - Vol. 59 (2). - P. 519-528.
180. Does angiotensin II affect cellular growth in gastric mucosa? Text. / M. Iu. Fleishman, A. A. Avilova, S. A. Alexeenko, E. Iu. Jivotova // Br. J. Clin. Pharmacol. 2002. - Vol. 53. - P. 447-448.
181. PI3K/Akt and apoptosis: size matters Text. / T. F. Franke, C. P. Hornik, L. Segev [et al.] // Oncogene. 2003. - Vol. 8, N 22 (56). - P. 8983-8998.
182. Fuerstain, G. Dermorphin cardiovascular and sympathetic modulation in the an tervn tral hypothalamus of conscions rats Text. / G. Fuerstain, A. I. Faden, Z. Grageu // Life Sei. 1983. - Vol. 33, Suppl. l.-P. 731-734.
183. Fuerstain, G. Effect of dermorphins and morphin on the sympathetic and cardiovascular system of the pitted rat Text. / G. Fuerstain, Z. Zukowska-Grodec // Neuropeptides. 1987. - № 9. - P. 139-150.
184. Blockade of angiotensin ATI a receptor signaling reduces tumor growth, angiogenesis, and metastasis Text. / M. Fujita, I. Hayashi, S. Yamashina [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. - Vol. 7, N294 (2).-P. 441^447.
185. Regulation of endothelium-derived nitric oxide production by the protein kinase Text. / D. Fulton, J. P. Gratton, T. J. McCabe [et al.] // Akt. Nature (Lond). 1999. - Vol. 399. - P. 597.
186. Opioid antagonist-induced regulation of the mu-opioid receptor expression in MCF-7 breast cancer cell line Text. / K. Gach, M. Piestrzeniewicz, J. Fichna [et al.] // Endocr Regul. 2009. Vol. 43 (1). -P. 23-28.
187. Endothelin-1 stimulates sphingosine kinase in human hepatic stellate cells. A novel role for sphingosine-1-P as a mediator of growth inhibition Text. / C. Gallois, J. Davaille, A. Habib [et al.] // Ann. N. Y. Acad. Sci.-2000.-Vol. 905.-P. 311-314.
188. Gao, G. Nitric oxide-donating aspirin induces apoptosis in human colon cancer cells through induction of oxidative stress Text. / G. Gao, X. Liu, B. Rigas // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. - Vol. 22, N 102 (47).-P. 17207-17212.
189. Garg, A. Nuclear transcription factor-kB as a target for cancer drug development Text. / A. Garg, B. B. Aggarwal // Leukemia. 2002.Vol. 16.-P. 1053-1068.
190. Oxidative stress-induced cell cycle blockage and a protease-independent programmed cell death in microaerophilic Giardia lamblia Text. / E. Ghosh, A. Ghosh, A. N. Ghosh [et al.] // Drug. Des. Devel. Ther. 2009. - Vol. 21, N3.-P. 103-110.
191. Endothelin-1 as a putative modulator of gene expression and cellular physiology in cultured human corporal smooth muscle cells Text. / A. Giraldi, S. Serels, M. Autieri [et al.] // J. Urol. 1998. -Vol. 160 (5). -P. 1856-1862.
192. Actinic keratosis associated with squamous and basal cell carcinomas: an evaluation of neoplastic progression by a standardized AgNOR analysis Text. / G. Giuffre, V. Barresi, A. Catalano [et al.] // Eur J Histochem. 2008. - Vol. 52 (1). - P. 53-60.
193. Goessens, G. Nucleolar structure Text. / G. Goessens // Int. Rev. Cytol.-1984.-Vol. 87. P. 107-158.
194. Goldstein, A. Stereospecific and nonspecific interactions of the morphine congener levorphanol in subcellular fractions of mouse brain Text. / A. Goldstein, L. I. Lowney, B. K. Pal // Proc. Natl. Acad. Sci U S A. 1971. - Vol. 68 (8). - P. 1742-1747.
195. Activation of angiotensin II type I receptor promotes protein kinase C translocation and cell proliferation in human cultured breast epithelial cells Text. / S. Greco, A. Muscella, M. G. Elia [et al.] // J. Endocrinol. -2002.-Vol. 174 (2).-P. 205-214.
196. The role of the brain monoaminergic systems in the anti-alcohol action of dermorphin and the delta-sleep peptide Text. / E. A. Gromova, N. V. Bobkova, L. A. Plakkhinas [et al.] // Fiziol. Zh. SSSR Im. I. M. Sechenova. 1989. - N 75 (5). - P. 633-637.
197. Gupta, K. Morphine induces mesangial cell proliferation and glomerulopathy via k-opioid receptors Text. / K. Gupta // Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 2008. - Vol. 294. - P. 1388-1397.
198. Morphine stimulates angiogenesis by activating proangiogenic and survival-promoting signaling and promotes breast tumor growth Text. / K. Gupta, S. Kshirsagar, L. Chang [et al.] // Cancer. Res. 2002. -Vol. 62.-P. 4491-4498.
199. Gupta, R. A. Aspirin, NSAIDS, and colon cancer prevention: mechanisms? Text. / R. A. Gupta, R. N. DuBois // Gastroenterology. -1998.-Vol. 114.-P. 1095-1098.
200. Effect of structural changes of Pro6 in dermorphin molecule on its antinociceptive activity Text. / L. S. Guzevatykh, T. G. Emel'ianova, A. B. Usenko [et al.] // Izv. Akad. Nauk. Ser. Biol. 2002. - Vol. 4. -P. 472-476.
201. Analgesic activity of dermorphin and its proline analogs Text. / L. S. Guzevatykh, D. V. Valuiskii, T. A. Voronina [et al.] // Eksp. Klin. Farmakol. 2005. - Vol. 68 (2). - P. 8-10.
202. Gyires, K. Gastric mucosal protection: from prostaglandins to gene-therapy Text. / K. Gyires // Curr. Med. Chem. 2005. - Vol. 12 (2). -P. 203-215.
203. Gyires, K. The role of endogenous nitric oxide in the gastroprotective action of morphine // Eur. J. Pharmacol. 1994. - Vol. 255(1-3). - P. 33-37.
204. Endothelin-1 stimulates proliferation of human coronary smooth muscle cells via the ET(A) receptor and is co-mitogenic with growth factors Text. / S. Hafizi, S. P. Allen, A. T. Goodwin [et al.] // Atherosclerosis. 1999. - Vol. 146 (2). - P. 351-360.
205. Inflammation of the rat paw enhances axonal transport of opioid receptors in the sciatic nerve and increases their density in the inflamed tissue Text. / A. H. Hassan, A. Ableitner, C. Stein [et al.] // Neuroscience. 1993. - Vol. 55. - P. 185-195.
206. Histamin HI receptor activation stimulates mitogenesis in human astrocitoma U373 MG cells Text. / A. Hernández-Angeles, L. E. Soria-Jasso, A. Ortega, J. A. Arias-Montaño // J. Neurooncol. 2001. -Vol. 55 (2).-P. 81-89.
207. P-Rexl links mammalian target of rapamycin signaling to Rae activation and cell migration Text. / I. Hernández-Negrete, J. Carretero-Ortega, H. Rosenfeldt [et al.] // J. Biol. Chem. 2007. - Vol. 10, N 282 (32). - P. 23708-23715.
208. Heat-shock protein 70-overexpressing gastric epithelial cells are resistant to indomethacin-induced apoptosis Text. /1. Hirata, Y. Naito, O. Handa [et al.] // Digestion. 2009. - Vol. 79 (4). - P. 243-250.
209. Angiotensin II stimulates the proliferation of osteoblast-rich populations of cells from rat calvariae Text. / Y. Hiruma, A. Inoue, S. Hirose, H. Hagiwara // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1997. -Vol. 3, N 230 (1). - P. 176-178.
210. Synthesis and cloning of a human beta-casomorphin-5 gene Text. / S, Hoffmann, E. Gunther, G. Kunze [et al.] // Nucleic. Acids. Symp. Ser. 1987.-Vol. 18.-P. 229-232.
211. Holzer, P. Opioid receptors in the gastrointestinal tract Text. / P. Holzer // Regul. Pept. 2009. - Vol. 5,N 155 (1-3).-P. 11-18.
212. Hsu, D. Z. Involvement ofnitric oxide in gastric protection of epinephrine in endotoxin intoxication in rats Text. / D. Z. Hsu, M. Y. Liu // Toxicology. 2004. - Vol. 15, N 204 (2-3). - P. 203-208.
213. Hut, H. M. Hsp70 protects mitotic cells against heat-induced centrosome damage and division abnormalities Text. / H. M. Hut, H. H. Kampinga, O. C. Sibon // Mol. Biol. Cell. 2005. - Vol. 16 (8). - P. 3776-3785.
214. Role of the arginine-nitric oxide pathway in the regulation of vascular smooth muscle cell proliferation Text. / L. J. Ignarro, G. M. Buga, L. H. Wei [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sei U S A. 2001. - Vol. 27, N 98 (7). - P. 4202-4208.
215. Neural regulation of gastric acid and secretion in rats: influence of dermorphin Text. / G. Importa, M. Broccardo, A. Lisi [et al.] // Regul. Pept. 1982. - Vol. 3. - P. 251-256.
216. Production of endothelin by canine prostatic epithelial cells and its stimulatory effects on their growth Text. / K. Ishizaka, H. Azuma, J. Matsubara [et al.] // J. Androl. 1999. - Vol. 20 (4). - P. 529-536.
217. Iwamoto, E. T. Multiple opioid receptors Text. / E. T. Iwamoto, W. R. Martin // Med. Res. Rev. 1981. - Vol. 1 (4). - P. 411-440.
218. Jana, N. R. NSAIDs and apoptosis Text. / N. R. Jana // Cell. Mol. Life Sei.-2008.-Vol. 65 (9).-P. 1295-1301.
219. Development of opioid Peptide analogs for pain relief Text. / A. Janecka, R. Perlikowska, K. Gach [et al.] // Curr. Pharm. Des. 2010. -Vol. 16 (9).-P. 1126-1135.
220. Enzymatic degradation of endomorphins Text. / A. Janecka, R. Staniszewska, K. Gach, J. Fichna // Peptides. 2008. - Vol. 29, N 11. -P. 2066- 2073.
221. Protection from nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID)-inducedgastric ulcers by dietary nitrate Text. / E. A. Jansson, J. Petersson, C. Reinders [et al.] // Free Radie. Biol. Med. 2007. - Vol. 15, N 42 (4). -P. 510-518.
222. Interleukin 1 beta induces long term increase of axonally transported opiate receptors and substance P Text. / A. P. Jeanjean, S. M. Moussaoui, J. M. Maloteaux [et al.] // Neuroscience. 1995. - P. 68151-68157.
223. Biosynthesis of a D-amino acid in peptide linkage by an enzyme from frog skin secretions Text. / A. Jilek, C. Mollay, C. Tippelt [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sei USA.- 2005. Vol. 22, N 102 (12). - P. 42354239.
224. Mechanisms involved in protection afforded by L-arginine in ibuprofen-induced gastric damage: role of nitric oxide and prostaglandins Text. / D. Jiménez, M. J. Martin, D. Pozo [et al.] // Dig. Dis. Sei. 2002. - Vol. 47 (1). - P. 44-53.
225. Oxidative stress response and gene expression with atrazine exposure in adult female zebrafish (Danio rerio) Text. / Y. Jin, X. Zhang, L. Shu [et al.] // Chemosphere. 2010. - Vol. 78 (7). - P. 846-852.
226. Jones, D. P. Radical-free biology of oxidative stress Text. / D. P. Jones // Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 2008. - Vol. 295, N 4. - P. 849-868.
227. DNA image cytometry and Ag-NORs-staining application in biocompatibility studies on human osteoblast cells in vitro Text. / Y. Josset, Z. Oum'hamed, A. Zarrinpour [et al.] // Biomaterials. 1998. -Vol. 19 (19).-P. 1791-1798.
228. Recent advances on the roles of NO in cancer and chronic inflammatory disorders Text. / J. R. Kanwar, R. K. Kanwar, H. Burrow, S. Baratchi // Curr. Med. Chem. 2009. - Vol. 16 (19). - P. 2373-2394.
229. Karihtala, P. Reactive oxygen species and antioxidant mechanisms in human tissues and their relation to malignancies Text. / P. Karihtala, Y. Soini // APMIS. 2007. - Vol. 115 (2). - P. 81-103.
230. Kharkevich, D. A. Opioid ligands with extraordinarily high mu-selectivity: dermorphin tetrapeptides containing thymine-modified alanine residues Text. / D. A. Kharkevich, N. V. Sumbatyan, A. N. Topin//FEBS Lett.- 1994.-Vol. 12,N351 (3).-P. 308-310.
231. Regulation of apoptosis by nitrosative stress Text. / K. M. Kim, P. K. Kim, Y. G. Kwon [et al.] // J. Biochem. Mol. Biol. 2002. -Vol. 31, N 35 (l).-P. 127-133.
232. Effects of endothelin-1 and nitric oxide on proliferation of cultured guinea pig bronchial smooth muscle cells Text. / Y. Kizawa, N.Ohuchi, K. Saito et al. // Comp. Biochem. Physiol. C. Toxicol. Pharmacol. -2001.- Vol. 128 (4). P. 495-501.
233. Konturek, P. C. Physiological, immunohistochemical and molecular aspects of gastric adaptation to stress, aspirin and H. pylori-derived gastrotoxins Text. / P. C. Konturek // J. Physiol. Pharmacol. 1997. -Vol. 48, N 1. - P. 3-42.
234. Nitric oxide in gastroprotection by sucralfate, mild irritant, and nocloprost. Role of mucosal blood flow Text. / S. J. Konturek, T. Brzozowski, J. Majka [et al.] // Dig. Dis. Sci. 1994. - Vol. 39 (3). - P. 593-600.
235. Koroleva, S. V. Functional continuum of regulatory peptides (RPs): vector model of RP-effects representation Text. / S. V. Koroleva, I. P. Ashmarin I. // J. Theor. Biol. 2002. - Vol. 7, N 216 (3). - P. 257-271.
236. Koski, G. Opiates inhibit adenylate cyclase by stimulating GTP hydrolysis Text. / G. Koski, W. A. Klee // Proc. Natl. Acad. Sci U S A.-1981.-Vol. 78 (7).-P. 4185-4189.
237. Delta opioid activation of the mitogen-activated protein kinase cascade does not require transphosphorylation of receptor tyrosine kinases Text. / H. K. Kramer, I. Onoprishvili, M. L. Andria [et al.] // BMC Pharmacol. 2002. - Vol. 2. - C. 5.
238. Krychtin, M. L. Endemic sturgeons of Amur river: kaluga, Huso dauricus, and Amur sturgeon, Acipenser schrenckii Text. / M. L. Krychtin, V. G. Svirskiy //Envir. Biol, of Fishes. 1997. -Vol. 48. - P. 231-239.
239. Kummoona, R. Proliferative activity in oral carcinomas studied withAg-NOR and electron microscopy Text. / R. Kummoona, A. Jabbar, Al-Rahal D. Kareem // Ultrastruct. Pathol. 2008. - Vol. 32 (4). - P. 139-146.
240. Laine, L. Approaches to nonsteroidal anti-inflammatory drug use in he high-risk patient Text. / L. Laine // Gastroenterology. 2001. - Vol. 120 (3).-P. 594-606.
241. Laine, L. GI risk and risk factors of NSAIDs Text. / L. Laine // J. Cardiovasc. Pharmacol. 2006. - Vol. 47, Suppl. 1. - P. 60-66.
242. Lanas, A. Role of nitric oxide in the gastrointestinal tract Text. / A. Lanas // Arthritis. Res. Ther. 2008. - N 10. - P. 4.
243. Role of nitric oxide in omeprazole protection of the gastric mucosa in rats Text. / Q. L. Le, J. Zhang, Q. Z. Xu, H. Y. Gao // Di Yi Jun, Yi Da Xue, Xue Bao. 2001. -N21 (12).-P. 926-928.
244. Roles of nitric oxide in the homeostatic control of the excitation-inhibition balance in rat visual cortical networks Text. / N. Le Roux, M. Amar, A. W. Moreau, P. Fossier // Neuroscience. 2009. - Vol. 20, N 163 (3).-P. 942-951.
245. Lee, N. P. Nitric oxide and cyclic nucleotides: their roles in junction dynamics and spermatogenesis Text. / N. P. Lee, C. Y. Cheng // Adv. Exp. Med. Biol. -2008. Vol. 636. - P. 172-185.
246. Receptor-selective changes in u-, 5- and k- opioid receptor after chronic naltrexone treatment in mice Text. / H. M. B. Lesscher, A. Bailey, J. P. H. Burbach [et al.] // Eur. J. Neurosci. 2003. - N 17. - P. 1006-1012.
247. Ling-Yang, Li. The stimulatory effect of opioids on mitogen-activated protein kinase in Chinese hamster ovary cells transfected to express (j,-opioid receptors Text. / Ling-Yang Li, Kwen-Jen Chang // Mol. Pharmacol. 1996. - Vol. 50. - P. 599-602.
248. Liischer, T. F. Endothelins and endothelin receptor antagonists: therapeutic considerations for a novel class of cardiovascular drugs Text. / T. F. Liischer, M. Barton // Circulation. 2000. - Vol. 7, N 102 (19).-P. 2434-2440.
249. Liischer, T. F. Endothelins Text. / T. F. Liischer, A. Lerman // Cardiovasc. Res. 1998. - Vol. 39 (3). - P. 529.
250. Macho Sanchez-Simon, F. Expression of the nociceptin receptor during zebrafish development: influence of morphine and nociceptin Text. / F. Macho Sanchez-Simon, R. E. Rodriguez // Int. J. Dev. Neurosci. -2009. Vol. 27 (4). - P. 315-320.
251. Mackenzie, I. S. Nitric oxide and cardiovascular effects: new insights in the role of nitric oxide for the management of osteoarthritis Text. / I. S. Mackenzie, D. Rutherford, T. M. MacDonald // Arthritis. Res. Ther.-2008.-N 10, Suppl. 2.-P. 3.
252. Madhusoodanan, K. S. NO-cGMP signaling and regenerative medicine involving stem cells Text. / K. S. Madhusoodanan, F. Murad // Neurochem. Res. 2007. - Vol. 32. - P. 681-694.
253. Endogenous morphine signaling via nitric oxide regulates the expression of CYP2D6 and COMT: autocrine/paracrine feedback inhibition Text. / K. J. Mantione, P. Cadet, W. Zhu [et al.] // Addict.Biol.-2008.-N 13 (l).-P. 118-123.
254. Marasciulo, F. L. Endothelin-1: the yin and yang on vascular function Text. / F. L. Marasciulo, M. Montagnani, M. A. Potenza // Curr. Med. Chem. 2006. - N 13.-P. 1655-1665.
255. Marshall, H. E. Nitrosation and oxidation in the regulation of gene expression Text. / H. E. Marshall, K. Merchant, J. S. Stamler // FASEB J. 2000. N 14 (13). - P. 1889-1900.
256. Deregulation of hepatic insulin sensitivity induced by central lipid infusion in rats is mediated by nitric oxide Text. / N. Marsollier, N. Kassis, K. Mezghenna [et al.] // PLoS One. 2009. Vol. 14, N 4 (8). -P. 6649.
257. Martin, W. R. A new receptor nomenclature Text. / W. R. Martin // Life Sei. 1981. - Vol. 6, N 28 (14). - P. 1555-1557.
258. Martin, W. R. Multiple opioid receptors: a little about their history and some implications related to evolution Text. / W. R. Martin // Life Sei. 1981. - Vol. 6, N 28 (14). -P. 1547-1554.
259. Mattson, M. P. NF-kappaB in neuronal plasticity and neurodegenerative disoders Text. / M. P. Mattson, S. Camandola // J. Clin. Invest. 2001. - Vol. 107. - P. 247-254.
260. The role of nitric oxide in the apoptosis of neurons in the retina of thehuman fetal eye Text. / N. Y. Matveeva, S. G. Kalinichenko, I. I. Pushchin, P. A. Motavkin // Neurosci Behav. Physiol. 2007. - Vol. 37 (2).-P. 111-118.
261. Immunohistochemical and biomolecular identification of orphanin FQ, eNOS, atrial natriuretic factor and oxytocin in rat seminal vesicles Text. / A. Mauro, M. Buscemi, F. Cappello [et al.] // Anat. Histol. Embryol. 2009. - N 3 8 (6). - P. 443-451.
262. McLaughlin, P. J. Identification and characterization of the zeta-opioid receptor in developing rat heart Text. / P. J. McLaughlin, Y. Wu // Am. J. Physiol. 1997. - Vol. 272, N 6. - P. 1841-1846.
263. Kappa opioids promote the proliferation of astrocytes via Gbetagamma and beta-arrestin 2-dependent MAPK-mediated pathways Text. / G. P. McLennan, A. Kiss, M. Miyatake [et al.] // J. Neurochem. 2008. -Vol. 107 (6).-P. 1753-1765.
264. Identification and characterization of two dermorphins from skin extracts of the Amazonian frog Phyllomedusa bicolor Text. / G. Mignogna, C. Severini, M. Simmaco [et al.] // FEBS Lett. 1992. -Vol. 11,N302 (2).-P. 151-154.
265. Montecucchi, P .C. Identification of dermorphin and Hyp6-dermorphin in skin extracts of the Brazilian frog Phyllomedusa rhodei Text. / P. C. Montecucchi, R. de Castiglione, V. Erspamer // Int. J. Pept. Protein. Res. 1981.-Vol. 17(3).-P. 316-321.
266. Amino acid composition and sequence of dermorphin, a novel opiatelike peptide from the skin of Phyllomedusa sauvagei Text. / P. C. Montecucchi, R. de Castiglione, S. Piani [et al.] // Int. J. Pept. Protein.Res. 1981. - Vol. 17 (3). - P. 275-283.
267. HIV-1 gpl20 primes lymphocytes for opioid-induced, beta-arrestin 2-dependent apoptosis Text. / J. Moorman, Y. Zhang, B. Liu [et al.] // Biochim. Biophys. Acta. 2009. - Vol. 1793 (8). - P. 1366-1371.
268. Beta endorphin containing memory cells and mu opioid receptors undergo transport to peripheral inflamed tissue Text. / S.A. Mousa, Q. Zhang, N. Sitte [et al.]//J. Neuroimmunol.-2001.-P. 11571-11578.
269. Naftilan, A J. The role of angiotensin II in vascular smooth muscle cell growth Text. / A. J. Naftilan // Cardiovasc. Pharmacol. 1992. - Vol. 20, Suppl. 1. - P. 37-40.
270. Dopamine D(2) receptor activation causes mitogenesis via p44/42 mitogen-activated protein kinase in opossum kidney cells Text. / V. A. Narkar, T. Hussain, C. Pedemonte, M. F. Lokhandwala // J. Am. Soc. Nephrol. 2001. -N 12. - P. 1844-1852.
271. Biological activities of Bv8 analogues Text. / L. Negri, R. Lattanzi, E. Giannini [et al.] // Br. J. Pharmacol. 2005. - Vol. 146 (5). - P. 625632.
272. Negri, L. Pharmacology of amphibian opiate peptides Text. / L. Negri, P. Melchiorri, R. Lattanzi // Peptides. 2000. - Vol. 21 (11). - P. 1639-1647.
273. Characterization of the binding of 3H.[Dmtl]H-Dmt-D-Arg-Phe-Lys-NH2, a highly potent opioid peptide [Text] / C. L. Neilan, A. J. Janvey,E. Bolan et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2003. - Vol. 306 (2). - P. 430-436.
274. NO-NSAIDs: Gastric-sparing nitric oxide-releasable prodrugs of nonsteroidal anti-inflammatory drugs Text. / K. V. Nemmani, S. V. Mali, N. Borhade [et al.] // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009. - Vol. 15, N 19 (18).-P. 5297-5301.
275. Characterization of angiotensin receptors on human skin fibroblasts Text. / G. Nickenig, G. Geisen, H. Vetter, A. Sachinidis // J. Mol. Med. 1997. - Vol. 75 (3). - P. 217-222.
276. Nishimura, E. Autoradiographic localization of mu- and delta-type opioid receptors in the gastrointestinal tract of the rat and guinea pig Text. / E. Nishimura, A. M. Buchan, C. H. Mcintosh // Gastroenterology. 1986. - Vol. 91 (5). - P. 1084-1094.
277. Role of endogenous nitric oxide in mucosal defence of inflamed rat stomach following iodoacetamide treatment Text. / H. Nishio, Y. Hayashi, S. Terashima, K. Takeuchi // Life Sei. 2006. - Vol. 13, N 79 (16).-P. 1523-1530.
278. Endothelin-induced apoptosis of A375 human melanoma cells Text. / M. Okazawa, T. Shiraki, H. Ninomiya [et al.] // J. Biol. Chem. 1998. -Vol. 15, N273 (20).-P. 12584-12592.
279. Olianas, M. C. Agonist activity of naloxone benzoylhydrazone at recombinant and native opioid receptors Text. / M. C. Olianas, D. Concas, P. Onali // Br. J. Pharmacol. 2006. - Vol. 147 (4). - P. 360370.
280. Oliver, K. R From basic research on neuropeptide receptors to clinical benefit Text. / K. R. Olive , D. J. Sirinathsinghji, R. G. Hill // Drug. News. Perspect. 2000. - Vol. 13 (9). - P. 530-542.
281. Influence of L-NAME and L-Arg on ischaemia-reperfusion induced gastric mucosa damage Text. / H. Oztürk, I. H. Kara, S. Ot?u [et al.] // Acta Gastroenterol. Belg. 2002. - Vol. 65 (3). - P. 150-154.
282. Park, S. Synergic effects of alpha-tocopherol and beta-carotene on tert-butylhydroperoxide-induced HepG2 cell injury Text. / S. Park, A. J. Kim, M. Lee // Toxicol. Ind. Health. 2009. - Vol. 25 (4-5). -P. 311320.
283. Parsons, M. E. Histamine and the pathogenesis of duodenal ulcer disease Text. / M. E. Parsons // Gut. 1985. - Vol. 26 (11). - P. 1159-1164.
284. Feedback between p21 and reactive oxygen production is necessary for cell senescence Text. / J. F. Passos, G. Nelson, C. Wang [et al.] // Mol. Syst. Biol. 2010. - N 6. - P. 347.
285. Passos, J. F. Mitochondrial dysfunction and cell senescence: cause or consequence? Text. / J. F. Passos, T. von Zglinicki, G. Saretzki // Rejuvenation Res. 2006. - N 9 (1). - P. 64-68.
286. Mu opioid receptor expression in inflammatory bowel diseases: implications for homeostatic intestinal inflammation Text. / D. Philippe, D. Chakass, X. Thuru [et al.] // Gut. 2006. - Vol. 55. - P. 815-823.
287. Anti-inflammatory propreties of the ¡1 opioid receptor support its use in the treatment of colon inflammation / D. Philippe, L. Dubuquoy, H. Groux, V. Brun et al. // J. Clin. Invest. 2003. - Vol. 111, № 9. - P. 1329-1338.
288. Inducible nitric oxide synthase is involved in acid-induced gastric hyperemia in rats and mice Text. / M. Phillipson, J. Henriksnas, M. Holstad [et al.] // Am. J. Physiol. Gastrointest Liver Physiol. 2003. -Vol. 285 (1).-P. 154-162.
289. Neuropeptides in drug research Text. / D. Poyner, M. K. Demetrikopoulos, H. Cox, M. Bushfield, J. M. Treherne // Prog. Drug. Res. -2000. Vol. 54.-P. 121-149.
290. Endogenous morphine: opening new doors for the treatment of pain and addiction Text. / S. C. Pryor, W. Zhu, P. Cadet [et al.] // Expert. Opin. Biol. Ther. 2005. - Vol. 5 (7). - P. 893-906.
291. Rainsford, K. D. Anti-inflammatory drugs in the 21st century Text. / IC. D. Rainsford // Subcell. Biochem. 2007. - Vol. 42. - P. 3-27.
292. Reddy, P. Anantha. Synthesis and Pharmacological Evaluation of Highly Potent Dmt1. DALDA Analogs [Text] / P. Anantha Reddy, Anita H. Lewin., Peter W. Schiller. // Adv. Exp. Med. Biol. 2009. -Vol. 611.-P. 473-^474.
293. Reisine, T. Molecular biology of opioid receptors Text. / T. Reisine, G. I. Bell // Trends Neurosci. 1993. - Vol. 16 (12). - P. 506-510.
294. Robertson, R. M. The nitric oxide /cGMP pathway tunes the thermosensitivity of swimming motor patterns in Xenopus laevis tadpoles Text. / R. M. Robertson, K. T. Sillar // J. Neurosci. 2009. -Vol. 4, N 29 (44). - P. 13945-13951.
295. Angiotensin II stimulates contraction and growth of testicular peritubular myoid cells in vitro Text. / F. Rossi, A. Ferraresi, P. Romagni [et al.] // Endocrinology. 2002. - Vol. 143 (8). - P. 30963104.
296. Roth, S. H. NSAID gastropathy Text. / S. H. Roth // Arch. Intern. Med.-1996.-Vol. 156.-P. 1623-1627.
297. Molecular characterization of a dual endothelin-1/Angiotensin II receptor Text. / N. Ruiz-Opazo, K. Hirayama, K. Akimoto, V. L. Herrera // Mol. Med. 1998. - Vol. 4 (2). - P. 96-108.
298. Biochemical markers of bone turnover. New aspect. Nitric oxide synthase and bone metabolism Text. / K. Sabanai, M. Tsutsui, A. Sakai [et al.]//Clin. Calcium. 2009. - Vol. 19 (8).-P. 1133-1141.
299. Mitogenic activity of endothelin on human cultured prostatic smooth muscle cells Text. / Y. Saita, H. Yazawa, T. Koizumi [et al.] // Eur. J. Pharmacol.- 1998.-Vol. 15, N 349 (1).-P. 123-131.
300. Sakellaridis, N. Effects of opiates on the growth of neuron-enriched cultures from chick embryonic brain Text. / N. Sakellaridis, D. Mangoura, A. Vernadakis // Int. J. Dev. Neurosci. 1986. - Vol. 4. - P. 293-302.
301. Salzman, A. L. A. D. Nitric oxide in the gut Text. / A. L. A. D. Salzman // New. Horiz. 1995. - Vol. 3 (2). - P. 352-364.
302. Samonina, G. E. The Pro-Gly-Pro tripeptide and homeostasis of the gastric mucosa Text. / G. E. Samonina, G. N. Kopylova, B. A. Umarova // Neurochemical Journal. 2008. - Vol. 2, N 1-2. - P. 111114.
303. Pentoxyfilline prevents indomethacin-induced acute gastric mucosal damage in rats: role of tumor necrosis factor alpha Text. / L. Santucci, S. Fiorucci, M. Giansaqnti [et al.] // Gut. 1994. - Vol. 35. - P. 909915.
304. Savarino, V. Effect of one-month treatment with nonsteroidal antiinflammatory drugs on gastric pH of rheumatoid arthritis patients Text. / V. Savarino, G. S. Mela, P. Zentilin // Dig. Dis.Sci. 1998. -Vol. 43, N3.-P. 459-463.
305. Schafer, B. Multiple G-protein-coupled receptor signals converge on the epidermal growth factor receptor to promote migration and invasion Text. / B. Schäfer, A. Gschwind, A. Ullrich // Oncogene. 2004. -Vol. 23.-P. 991-999.
306. Scheiman, J. M. NSAIDs, gastrointestinal injury and cytoprotection Text. / J. M. Scheiman // Gastroenterol. Clin. N. Amer. 1996. - Vol. 25.-P. 279-298.
307. Schieke, S. M. Mitochondrial signaling, TOR, and life span Text. / S. M. Schieke, T. Finkel // Biol. Chem. 2006. - Vol. 387 (10-11). - P. 1357-1361.
308. Schiller, P. W. Bi- or multifunctional opioid peptide drugs Text. / P. W. Schiller // Life Sei. 2010. - Vol. 10, N 86 (15-16). - P. 598-603.
309. Schiller, P. W. Opioid peptide-derived analgesics Text. / P. W. Schiller // AAPS J. 2005. - Vol. 14, N 7 (3). - P. 560-565.
310. Schreinemachers, D. M. Aspirin use and lung, colon, and breast cancer incidence in a prospective study Text. / D. M. Schreinemachers, R. B. Everson // Epidemiology 1994. - N 5. - P. 138-146.
311. Schwindinger, W. F. Heterotrimeric G-protein betagammadimers in growth and differentiation Text. / W. F. Schwindinger, J. D. Robishaw // Oncogene. 2001. - Vol. 20. - P. 1653-1660.
312. Sharma, S. K. Opiate-dependent modulation of adenylate cyclase Text. / S. K. Sharma, W. A. Klee, M. Nirenberg // Proc. Natl. Acad. Sei. USA.- 1977. Vol. 74 (8). - P. 3365-3369.
313. Sharma, S. K. Morphine receptors as regulators of adenylate cyclase activity Text. / S. K. Sharma, M. Nirenberg, W. A. Klee // Proc. Natl. Acad. Sei USA.- 1975. Vol. 72 (2). - P. 590-594.
314. Shen, H. Y. Synthesis of dermorphin-(l-4) derivatives catalyzed by proteases in organic solvents Text. / H. Y. Shen, G. L. Tian, Y. X. Ye // J. Pept. Res. 2005. - Vol. 65 (1). - P. 143-148.
315. Differential respiratory effects of Dmtl.DALDA and morphine in mice [Text] / M. Shimoyama, T. Kuwaki, A. Nakamura [et al.] // Eur. J. Pharmacol.-2005.-Vol. 28, N511 (2-3).-P. 199-206.
316. Antinociceptive and respiratory effects of intrathecal H-Tyr-D-Arg-Phe-Lys-NH2 (DALDA) and Dmtl. DALDA [Text] / M. Shimoyama, N. Shimoyama,G. M. Zhao [et al.] // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2001. -Vol. 297(1).-P. 364-371.
317. Simmaco, M. Bombinins, antimicrobial peptides from Bombina species Text. / M. Simmaco, G. Kreil, D. Barra // Biochim. Biophys. Acta. -2009.-Vol. 1788 (8)-P. 1551-1555.
318. Singh, R. Delta opioid receptor-mediated immunoregulatory role of methionine-enkephalin in freshwater teleost Channa punctatus (Bloch.) Text. / R. Singh, U. Rai // Peptides. 2009. - Vol. 30 (6). - P. 11581164.
319. Morphine modulates proliferation of kidney fibroblasts Text. / P. C. Singhal, P. Sharma, V. Sanwal [et al.] // Kidney Int. 1998. - Vol. 53. -P. 350-357.
320. Siragy, H. M. AT(1) and AT(2) receptors in the kidney: role in disease and treatment Text. / H. M. Siragy // Am. J. Kidney Dis. 2000. -Vol. 36, N3.-P. 4-9.
321. Sirohi, S. Mu-opioid receptor up-regulation and functional supersensitivity are independent of antagonist efficacy Text. / S. Sirohi, P. Kumar, B. C. Yoburn // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2007. -Vol. 323 (2).-P. 701-707.
322. Sirri, V. In vivo release of mitotic silencing of ribosomal gene transcription does not give rise to precursor ribosomal RNA processing Text. / V. Sirri, P. Roussel, D. Hernandez-Verdun // J. Cell. Biol. -2000. Vol. 24, N 148 (2). - P. 259-270.
323. Sirri, V. The AgNOR proteins: qualitative and quantitative changes during the cell cycle Text. / V. Sirri, P. Roussel, D. Hernandez-Verdun //Micron.-2000.-Vol. 31 (2).-P. 121-127.
324. Slomiany, A. Supression of endotelin-1 by ebrotidine in indomethacin-induced gastric mucosal injury Text. / A. Slomiany, J. Piotrowski, B. L. Slomiany // Digestion. 1998. - Vol. 59, N 3. - P. 207-209.
325. Mean diameter of nucleolar bodies in cultured human leukemic myeloblasts is mainly related to the S and G2 phase of the cell cycle Text. / K. Smetana, K. Kuzelova, M. Zapotocky // Eur. J. Histochem. 2007. -Vol. 51 (4). - P. 269-274.
326. Smith, H. S. Peripherally-acting opioids Text. / H. S. Smith // Pain. Physician. 2008. - Vol. ll,Suppl. 2.-P. 121-132.
327. Sneddon, J. M. Endothelial derived relaxing factor reduces platelet adhesion to bovine endothelial cells Text. / J. M. Sneddon, J. R. Vane // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1988. - Vol. 85. - P. 2800-2804.
328. Snyder, S. H. Brain peptides as neurotransmitters Text. / S. H. Snyder // Science. 1980. - Vol. 29. - N 209 (4460). - P. 9769-9783.
329. Soh, J. W. Role of COX-independent targets of NSAIDs and related compounds in cancer prevention and treatment Text. / J. W. Soh, I. B. Weinstein // Prog. Exp. Tumor Res. 2003. - Vol. 37. - P. 261-285.
330. Sollertinskaya, T. N. The role of dermorphin in the regulation of the processes of hibernation in mammals Text. / T. N., Sollertinskaya, E. N Nuritdinov, M. F. Obukhova // Neurosci Behav. Physiol. 1993. -Vol. 23 (5). - P. 459-469.
331. Steckelings, U. M. Angiotensin II stimulates proliferation of primary human keratinocytes via a non-ATI, non-AT2 angiotensin receptor Text. / U. M. Steckelings, M. Artuc // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1996. - Vol. 4, N 229 (1). - P. 329-333.
332. Presence of the mu3 opiate receptor in endothelial cells. Coupling to nitric oxide production and vasodilation Text. / G. B. Stefano, A. Hartman, T. V. Bilfmger [et al.] // J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270. -P. 30290-30293.
333. Endogenous morphine/nitric oxide-coupled regulation of cellular physiology and gene expression: implications for cancer biology Text. / G. B. Stefano, R. M. Kream, K. J. Mantione [et al.] // Semin. Cancer. Biol. 2008. - Vol. 18(3).-P. 199-210.
334. Steine-Martin, A. Opioid-dependent growth of glial cultures: suppression of astrocyte DNA synthesis by met-enkephalin Text. / A. Steine-Martin, K. F. Hauser. // Life Sei. 1990. - Vol. 46. - P. 91-98.
335. Sternini, C. Receptors and transmission in the brain-gut axis: potential for novel therapies. III. Mu-opioid receptors in the enteric nervous system Text. / C. Sternini // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol.-2001.-Vol. 281.-P. 8-15.
336. A role for HSP70 in protecting against indomethacin-induced gastric lesions Text. / S. Suemasu, K. Tanaka, T. Nama [et al.] // J. Biol. Chem. 2009. - Vol. 17, N284 (29).-P. 19705-19715.
337. Comparative study on the gastroprotective potential of some antidepressants in indomethacin-induced ulcer in rats Text. / H. Suleyman, E. Cadirci, A. Albayrak [et al.] // Chem. Biol. Interact. -2009. Vol. 15, N 180 (2). - P. 318-324.
338. Surratt, C. K. G protein-coupled receptor structural motifs: relevance to the opioid receptors Text. / C. K Surratt, W. R Adams // Curr. Top. Med. Chem. -2005. -N 5 (3). P. 315-324.
339. Endogenous opioid peptides contribute to antinociceptive potency of intrathecal Dmtl. DALDA [Text] / H. H Szeto, Y. Soong, D. Wu [et al.] // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2003. - Vol. 305 (2). - P. 696-702.
340. Stimulation by nitric oxide synthase inhibitors of gastric and duodenal HC03-secretion in rats Text. / K. Takeuchi, T. Ohuchi, H. Miyake, S. Okabe // J. Pharmacol. Exp. Ther. 1993. - Vol. 266 (3). - P. 15121519.
341. Takeuchi, K. Endogenous nitric oxide in gastric alkaline response in the rat stomach after damage Text. / K. Takeuchi, T. Ohuchi, S.Okabe // Gastroenterology. 1994. - Vol. 106 (2). - P. 367-375.
342. Tartara, A. Autonomic effects of centrally administrated dermorhin in conscoscous rabit Text. / A. Tartara, M. Maurelli, E. Marchioni // Farmaco. Ed. Sei. 1986. - Vol. 41, № 3. - P. 215-224.
343. Three-dimensional reconstruction of nucleolar components by electron microscope tomography Text. / P. Tchelidze, H. Kaplan, A. Beorchia [et al.] // Methods. Mol. Biol. 2008. - Vol. 463. - P. 137-158.
344. Tegeder, I. Opioids as modulators of cell death and survival-unraveling mechanisms and revealing new indications Text. / I. Tegeder, G. Geisslinger // Pharmacol. Rev. 2004. - Vol. 56 (3). - P. 351-369.
345. Thannickal, V. J. Reactive oxygen species in cell signaling Text. / V. J. Thannickal, B. L. Fanburg // Am. J. Physiol. Lung. 2000. - Vol. 279.-P. 1005-1028.
346. Thun, M. J. Pharmacologic effects of NSAIDs and implications for the risks and benefits of long-term prophylactic use of aspirin to prevent cancer Text. / M. J. Thun, B. Blackard // Recent. Results. Cancer. Res. 2009. - Vol. 181. - P. 215-221.
347. Townsend, D. T. Characterization of specific opioid binding sites in neural membranes from the myenteric plexus of porcine small intestine Text. / D. T. Townsend, P. S. Portoghese, D. R. Brown // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2004. - P. 385-393.
348. Opioid pharmacology Text. / A. M. Trescot, S. Datta, M. Lee, H.Hansen // Pain. Physician. 2008. - Vol. 11. - P. 133-153.
349. Troy, C. M. Downregulation of Cu/Zn superoxide dismutase leads to cell death via the nitric oxide-peroxynitrite pathway Text. / C. M. Troy, D. Derossi, A. Prochiantz // J. Neurosci. 1996, Jan. - Vol. 16 (l).-P. 253-261.
350. Tsukimi, Y. Recent advances in gastrointestinal pathophysiology: role of heat shock proteins in mucosal defense and ulcer healing Text. / Y. Tsukimi, S. Okabe // Biol. Pharm. Bull. 2001. - Vol. 24 (1). - P. 1-9.
351. Endoplasmic reticulum stress response in involved in nonsteroidal antiinflammatory drug-induced apoptosis Text. / S. Tsutsumi, T. Gotoh, W. Tomisato [et al.] // Cell. Death. Differ. 2004. - Vol. 11. - P. 1009-1016.
352. Morphological types of the glandular epithelium nuclei from benign and malignant mammary gland diseases Text. / V. I. Tsygankov, N. P. Mel'nikova, G. L. Mogileva, S. G. Vyborov // Klin. Lab. Diagn. -2004.-Vol. l.-P. 43-45.
353. Uefuji, K. Cyclooxygenase-2 expression is related to prostaglandin biosynthesis and angiogenesis in human gastric cancer Text. / K. Uefuji, T. Ichikura, H. Mochizuki // Clin. Cancer Res. 2000. - Vol. 6. -P. 135-138.
354. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease Text. / M. Valko, D. Leibfritz, J. Moncol [et al.] // Int. J. Biochem. Cell. Biol. 2007. - Vol. 39 (1). - P. 44-84.
355. Hyperglycemia and Oxidative Stress Strengthen the Association Between Myeloperoxidase and Blood Pressure Text. / L. P. Van der Zwan, P. G. Scheffer, J. M. Dekker [et al.] // Hypertension. 2010. -Vol. 12.
356. Angiotensin Il-mediated growth and antigrowth effects in cultured neonatal rat cardiac myocytes and fibroblasts Text. / C. A. van Kesteren, H. A. van Heugten, J. M. Lamers [et al.] // J. Mol. Cell.Cardiol. 1997. - Vol. 29 (8). - P. 2147-2157.
357. Vandelaer, M. AgNOR proteins from morphologically intact isolated nucleoli Text. / M. Vandelaer, M. Thiry, G. Goessens // Life Sci. -1999. -Vol. 64 (22). P. 2039-2047.
358. Vane, J. R. Mechanism of action of non-steroidal anti-inflammatory drugs Text. / J. R. Vane // Am. J. Med. 1998. - Vol. 104, N 3. - P. 62-63.
359. Opioids modulate constitutive B-lymphocyte secretion Text. / D. Vassou, E. Bakogeorgou, M. Kampa [et al.] // Int. Immunopharmacol. 2008. - Vol. 8 (5). - P. 634-644.
360. Veening, J. G. The regulation of brain states by neuroactive substances distributed via the cerebrospinal fluid; a review Text. / J. G. Veening, H. P. Barendregt // Cerebrospinal. Fluid. Res. 2010. - Vol. 6, N 7. -P. 1.
361. Watkinson, A. Functional control of chromogranin A and B concentrations in the body of the rat stomach / A. Watkinson, G. J. Dockray // Regul. Pept. 1992. - Vol. 40. - P. 51-61.
362. Developmental changes in the inhibition of cultured rat uterine cell proliferation by opioid peptides Text. / M. L. Weber, M. Farooqui, J. Nguyen [et al.] // Cell Prolif.-2003. Vol. -36 (3). P. 151-163.
363. Morphine induces mesangial cell proliferation and glomerulopathy via kappa-opioid receptors Text. / M. L. Weber, M. Farooqui, J. Nguyen [et al.] // Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 2008. - Vol. 294 (6). - P. 1388-1397.
364. Neuronal adaptations, neuroendocrine and immune correlates of heroin self-administration Text. / R. J. Weber, R. Gomez-Flores, J. E. Smith, T. J. Martin // Brain. Behav. Immun. 2009. - Vol. 23 (7). - P. 9931002.
365. Wolfe, M. M. Gastrointestinal toxicity of nonsteroidal antiinflammatory drugs Text. / M. M. Wolfe, D. R. Lichtenstein, G. Singh // N. Engl. J. Med. 1999. - Vol. 341, N 7. - P. 548-556.
366. Wollemann, M. Recent developments in the research of opioid receptor subtype molecular characterization Text. / M. Wollemann // J. Neurochem. 1990. - Vol. 54 (4). - P. 1095-1101.
367. Wollemann, M. Capsaicin inhibits the in vitro binding of peptides selective for mu- and kappa-opioid, and nociceptin-receptors Text. / M. Wollemann, E. Ioja, S. Benyhe // Brain. Res. Bull. 2008. - Vol. 30, N77 (2-3).-P. 136-142.
368. Suppression of RelA/p65 nuclear translocation independent of IkappaB-alpha degradation by cyclooxygenase-2 inhibitor in gastric cancer Text. /B.C. Wong, X. Jiang, X. M. Fan [et al.] // Oncogene. -2003.-N22.-P. 1189-1197.
369. Xia, Z. L-Arginine Enhances Nitrative Stress And Exacerbates TNF-Alpha Toxicity To Human Endothelial Cells In Culture: prevention by propofol Text. / Z. Xia, T. Luo, H. M. Liu // J. Cardiovasc. Pharmacol. -2010.-Vol. 30.-P. 357-371.
370. Xu, J. Isolation and characterization of new exon 11-associated N-terminal splice variants of the human mu opioid receptor gene Text. / J. Xu, M. Xu, Y. L. Hurd // J. Neurochem. 2009. - Vol. 108 (4). - P. 962-972.206.
371. Yin, M. J. The anti-inflammatory agents aspirin and salicyate inhibit the activity of I(kappa)B kinase-beta Text. / M. J. Yin, Y. Yamamoto, R. B. Gaynor // Nature. 1998. - Vol. 396. - P. 77-80.
372. Zagon, I. S. Endogenous opioid systems regulate growth of neural tumor cells in culture Text. / I. S. Zagon, P. J. McLaughlin. // Brain. Res. 1989. - Vol. 490. - P. 14-25.
373. Zagon, I. S. Opioid antagonist (naltrexone) stimulation of cell proliferation in human and animal neuroblastoma and human fibrosarcoma cells in culture Text. /1. S. Zagon, P. J. McLaughlin. // Neuroscience. 1990. - Vol. 37. - P. 223-226.
374. Malignant transformation and antineoplastic actions of nonsteroidal antiinflammatory drugs (NSAIDs) on cyclooxygenase-null embryo fibroblasts Text. / X. Zhang, S. G. Morham, R. Langenbach, D. A. Young // J. Exp. Med. 1999. -Vol. 190. - P. 451-459.
375. Comparison of Dmtl. DALDA and DAMGO in binding and G protein activation at mu, delta, and kappa opioid receptors [Text] / G. M. Zhao, X. Qian, P. W. Schiller, H. H. Szeto // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2003. -Vol.307 (3). - 947-954.
376. Human white blood cells synthesize morphine: CYP2D6 modulation Text. / W. Zhu, P. Cadet, G. Baggerman [et al] // J. Immunol. 2005. -Vol. 175.-P. 7357-7362.
-
Флейшман, Марина Юрьевна
-
доктора медицинских наук
-
Владивосток, 2010
-
ВАК 03.03.04
- Роль иммунной системы в регуляции регенерации тканей с разной восстановительной способностью
- Регенерация глотки у планарий DUGESIA TIGRINA и ее регуляция
- Цитологические аспекты регенерации сортов ячменя
- Свободнорадикальные процессы в пространственно-временной регуляции развития низших позвоночных
- Морфологическая гетерогенность колоний Alcaligenes eutrophus и Photobacterium leiognathi
