Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Морфофункциональные изменения аутотрансплантата селезенки в первые два месяца после операции

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональные изменения аутотрансплантата селезенки в первые два месяца после операции"

На правах рукописи

МОСКВИЧЁВ ЕВГЕНИЙ ВАСИЛЬЕВИЧ

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ АУТОТРАНСПЛАНТАТА СЕЛЕЗЕНКИ В ПЕРВЫЕ ДВА МЕСЯЦА ПОСЛЕ ОПЕРАЦИИ

03.00.25 - Гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Саранск 2004

Работа выполнена в Чувашском государственном университете им. И.Н. Ульянова

Научный руководитель

Официальные оппоненты:

Ведущая организация:

доктор медицинских наук, профессор МЕРКУЛОВА Лариса Михайловна

доктор медицинских наук, профессор ЯМЩИКОВ Николай Васильевич

доктор биологических наук, профессор КУРИЛО Любовь Федоровна

Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова

Защита диссертации состоится «2Л>»_ Л-аЯ 2004

г. в «40» часов на заседании диссертационного совета Д.212.117.01 при Мордовском государственном университете имени Н.П. Огарева по адресу: 430000, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68

С диссертацией можно ознакомится в научной библиотеке университета.

Автореферат разослан «<2ЦР» чАЛ&^ГА 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор биологических наук,

профессор ПЛ. Кругляков

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Иммунная система является одной из сложнейших автономных регуляторных систем организма и нарушения в ее деятельности приводят к возникновению тяжелых осложнений аутоиммунной, инфекционной и опухолевой природы. По этой причине в последние годы все более актуальным становится вопрос сохранения иммунного гомеостаза как ведущего фактора, обуславливающего эффективность лечения и прогноз большинства известных соматических заболеваний.

Спленэктомия - достаточно широко применяемая операция в настоящее время. Ее выполняют при многих патологических состояниях с вовлечением селезенки (Пугачев А.Г. и др., 1983; Кущ Н.Л. и др., 1988; Benoist S., 2000; Eber S.W. et al., 2001) Однако наиболее часто спленэктомию выполняют при травматических разрывах селезенки и ее шпраоперационных повреждениях (Игнатьев В.Г., Михайлова В.М. 2000; Pabst R.

Накопленные в последние годы данные свидетельствуют, что после удаления селезенки развиваются различные осложнения, спектр которых весьма широк. Наиболее опасным из лих считается синдром OPSI- overwhelmingpostsplenectomy infection -подавляющая (непреодолимая) постспленэктомическая инфекция (Leemans R. et al., 1999; Hansen K., Singer D.B., 2001) с

1999).

летальностью до 50% (Benoist S., 2000).

Значительное расширение знаний о строении и физиологическом значении селезенки заставили более избирательно назначать спленэктомию, активно изучать возможные способы сохранения органа, искать пути медикаментозной коррекции осложнений спленэктомии. В этой связи изменилась лечебная тактика при повреждениях и патологических процессах с вовлечением селезенки (Rose A.T. et al.,2000).

В настоящее время разработано большое количество органосохраняющих операций, часть, из которых оказалась достаточно эффективной в клинике (Благитко Е.М, Толстых Г.Н., 2000; Гаджиев Д.Н., 2000; Ефименко Н.А. и др., 2000; Шапкин Ю.Г. и др., 2000). Вместе с тем, большинство авторов указывают на опасность подобных операций, связанную с особенностями строения и кровоснабжения селезенки. Зачастую такие вмешательства оказываются технически невыполнимыми, особенно при обширных разрывах селезенки в области ворот, размозжении большей части органа.

В подобных случаях альтернативным способом восстановления функции селезенки является гетеротопическая трансплантация фрагмента ее ткани в хорошо кровоснабжаемые органы (большой сальник, брыжейка кишки). Немногочисленные клинические и экспериментальные результаты применения аутолиенотрансплантации отмечают ее эффективности как в раннем, так и в отдаленном

послеоперационном-периоде.(Абасов Б.Х. и др., 1982; Кузин М.И. и др., 1985; Szendroi T et al., 1997; Leemans R. et al., 1999).

Однако, имеется большое количество противоречивых данных, указывающих на неэффективность или недостаточную эффективность этой операции (Eskiturk A. et al., 1995; Zhao В et al., 1995; Tang WH. et al., 2003). Многие авторы отмечают недостаточную изученность как клинических результатов применения данного метода, так и многих морфологических аспектов приживления и регенерации селезеночной ткани (Pisters PW, Pachter HL, 1994; Westermann J., Pabst R., 1997).

Строение и динамика репаративных процессов в трансплантате достаточно подробно изучены на гистологическом -уровне (Саполсникова М.А. и др., 1987; Тихомирова В.Д. и др., 1988), однако практически не освещенным остается процесс восстановления функциональной активности клеточных структур трансплантата, особенно в раннем послеоперационном периоде. Кроме того, не выясненными остаются механизмы, регулирующие реваскуляризацию трансплантата (Power RE. et al., 2002). Вероятно поэтому, до сих пор не существует единого мнения о целесообразности применения

аутолиенотрансплантации при спленэктомии и невозможности выполнения органосохраняющей операции.

Таким образом, углубленное изучение состояния трансплантата и организма в целом в условиях эксперимента представляет несомненный интерес для морфологов и

практических врачей и имеет важное фундаментальное научное значение.

Цель исследования.

Изучить морфофункциональное состояние трансплантата селезенки через 3-60 суток после гетеротопической аутолиенотрансплантации.

В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:

1. Изучить динамику тканевых изменений трансплантата через 3, 7,15, 30, 45 и 60 суток после операции.

2. Исследовать биоаминсодержащие структуры фрагмента селезенки в процессе регенерации ткани трансплантата.

3. Определить уровень серотонина, гистамина и катехоламинов в люминесцирующих структурах фрагмента селезенки и их клеточном микроокружении в указанные сроки.

4. Исследовать популяцию тучных клеток в трансплантате через 3-60 суток после операции.

Научная новизна работы.

♦ Впервые установлено, что на 15 сутки после операции в сохраненных фолликулах на периферии трансплантата выявляются люминесцирующие внутрифолликулярные клетки. В формирующихся фолликулах эти клетки появляются через 30 суток.

♦ Впервые показано; что регенерация селезеночной ткани сопровождается волнообразным колебанием уровня биогенных аминов в люминесцирующих структурах трансплантата с максимальным увеличением на 7 сутки и снижением через 30 суток после операции.

♦ Впервые установлено, что в процессе ангиогенеза и регенерации ткани трансплантата участвуют тучные клетки.

♦ Представлены данные о возможности реваскуляризации и восстановления' сохраненных фолликулов, локализованных ближе к капсуле трансплантата.

♦ Приоритетным следует признать данные о том, что окончательная дифференцировка фолликулов трансплантата и формирование маргинальной зоны происходит через 60 суток после операции.

Научно-теоретическая значимость:

Результаты исследования значительно расширяют и дополняют представления о процессе регенерации селезеночной ткани, сроках восстановления клеточных и тканевых структур трансплантата, а также клеточных и гуморальных факторах регулирующих эти процессы. Работа представляет несомненный интерес для гистологов, иммунологов и хирургов.

Практическая значимость:

Материалы работы используются в лекциях, читаемых на кафедре гистологии, цитологии и эмбриологии медицинского

факультета Чувашского госуниверситета, а также в практической работе врачей-онкологов Республиканского клинического онкологического диспансера МЗ ЧР. Итоги исследования отражены в опубликованных статьях и тезисах.

Основные положения, выносимые па защиту:

1. В сохраненных фолликулах периферической зоны трансплантата внутрифолликулярные люминесцирующие клетки появляются на 15 сутки. На 30 сутки эти клетки выявляются в формирующихся фолликулах. Береговые клетки регистрируются только на 60 сутки. Окончательная дифференцировка селезеночных фолликулов и формирование маргинальной зоны происходит через 60 суток после операции.

2. Во всех изучаемых структурах трансплантата после операции отмечается значительное и волнообразное изменение содержания гистамина, серотонина и катехоламинов. Наиболее существенно - колебание уровня гистамина, которое разнонаправлено с серотонином и катехоламинами.

3. В сохраненной пульпе трансплантата селезенки на 7 и 15 сутки регистрируется значительное увеличение количества тучных клеток, которое совпадает со сроком появления в ней новых сосудов. С 30-х суток количество тучных клеток уменьшается. Степень миграции тучных клеток и увеличение уровня тистамина в пульпе в первые 7 суток могут считаться критерием интенсивности ангиогенеза.

Чувашского государственного университета (Чебоксары,2002). IV Международной конференции по функциональной нейроморфологии «Колосовские чтения - 2002» (С.-Петербург, 2002).

Публикации: По теме диссертации опубликовано 5 научных работ, из них 1- статья, 4 - тезисы в материалах Международных и Всероссийских научных конференций.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 107 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, результатов собственного исследования, обсуждения результатов и заключения, выводов и списка использованной литературы. Диссертация иллюстрирована 7 таблицами, 33 рисунками. Список использованной литературы включает 259 источников, из них 143 - иностранных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты проведены на 120 белых беспородных крысах самцах. Животные содержались в виварии, уход за ними осуществляли по нормам и правилам обращения с лабораторными животными. Эксперименты проводились в промежутке между 15 и 17 часами. Объектом исследования служили селезенка и ее аутотрансплантат. .

промежутке между 15 и 17 часами. Объектом исследования служили селезенка и ее аутотрансплантат.

Животные были разделены на две группы: 1-интактные 2-спленэктомированные с гетеротопической аутолиенотрансплантацией (п=100). Под глубоким масочным эфирным наркозом, с соблюдением всех правил асептики и антисептики животным выполнялась спленэктомия. Затем из предварительно декапсулированной селезенки выкраивался фрагмент кубической формы размером 4 мм. Он ополаскивался в теплом стерильном, физиологическом растворе, окутывался большим сальником и фиксировался кисетным швом. Селезенка интактных крыс и ее аутотрансплантат забирались под тем же наркозом, после операции взятие трансплантата - на 3, 7, 15," 30, 45 и 60 сутки после операции. Готовились криостатные срезы селезенки и аутотрансплантата толщиной 10 мкм.

В работе использовались следующие методы:

1. Люминесцентно-гистохимический метод Фалька-Хилларпа (B.Falk et all 1962) в модификации Е.М. Крохиной (Крохина Е.М, Александров П.Н., 1969) - для избирательного выявления катехоламин- и; серотонинсодержащих структур селезенки и ее ауготрансплантата

2. Люминесцентно-гистохимический метод Кросса, Эвена, Роста (Cross et al., 1971) - для выявления гистаминсодержащих структур селезенки и аутотрансплантата.

3. Метод цитоспектрофлуориметрии (Юденфренд С, 1965; Карнаухов В.Н., 1978; Калмыков. В.Л., 1982) - для количественного определения уровня серотонина, катехоламинов и гистамина. На люминесцентный микроскоп была установлена насадка ФМЭЛ-1А при выходном напряжении 500В. Замер интенсивности свечения производился в условных единицах флуоресценции по цифровым показаниям шкалы

регистрирующего прибора-усилителя.

4. Окраска полихромным толуидиновым синим по Униа - для качественной и количественной оценки тучных клеток. По степени дегрануляции тучные клетки разделялись на 4 типа Т-0 - клетки с неразличимыми гранулами и ядром; Т-1 - тучные клетки с отдельными различимыми гранулами и не полностью замаскированным ядром; Т-2 - клетки с хорошо различимыми гранулами как внутри, так и вокруг и отчетливым ядром; Т-3 -опустошенные тучные клетки с единичными гранулами внутри и рассеянными гранулами вокруг (Линднер Д.П. и др., 1976, 1980; Стручко Г.Ю. и др., 1995). Для выявления особенностей гистотопографии и функционального состояния тучных клеток производили их подсчет в 10 полях зрения при увеличении об 20, ок.40.

5. Окраска гематоксилином-эозином.

6. Статистическая обработка цифровых данных проводилась с помощью пакета программ Microsoft office (Word и Excel) на компьютере Pentium Ш-667, достоверность определяли

критерием Стьюдента (0 (Гублер Е.В. и др., 1973; Автандилов ГГ., 1996).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

При окраске гематоксилином - эозином селезенка интактных крыс имеет красную и белую пульпу, трабекулы и сосуды. Белая пульпа представлена фолликулами и периартериальной Т-зависимой зоной. Фолликулы содержат лимфоциты и окрашиваются базофильно. В центре фолликула определяется более светлый участок, называемый зародышевым центром. На периферии фолликула расположена маргинальная зона. Примерно в половине случаев в фолликулах выявляется эксцентрично располоясенная центральная артерия. Красная пульпа, окрашиваемая в оксифильные тона, содержит макрофаги, эритроциты и плазматические клетки.

При обработке препаратов селезенки люминесцентно-гистохимическими методами выявляется специфическое свечение клеточных и тканевых структур. В фолликулах определяются внутрифолликулярные и береговые люминесцирующие гранулярные клетки (ЛГК). Между ними располагается слабо люминесцирующее пространство, представленное

лимфоцитарным микроокружением. Вокруг пульпарных и фолликулярных ветвей селезеночной артерии выявляются немногочисленные ЛГК Т-зоны. В красной пульпе на фоне красновато-коричневого свечения эритроцитарного фона светятся многочисленные макрофаги. Из литературы известно, что

внутрифолликулярные и береговые клетки являются клетками макрофагальной природы и совмещают всебе свойства клеток АПУД - системы и дендритных клеток (Гордон Д.С. и др., 2001, Бочкарева А.Г.2002).

С помощью цитоспектрофлуориметрии установлено, что люминесцирующие структуры селезенки содержат гистамин (ГСТ), серотонин (СТ) и катехоламины (КА), преобладающим амином во всех структурах селезенки интактных крыс является гистамин. Максимальное содержание биоаминов регистрируется во внутрифолликулярных клетках и ЛГК красной пульпы, минимальное - в лимфоцитах маргинального синуса.

В селезенке интактных крыс выявляются единичные тучные клетки, представленные недегранулированными (Т-0) формами. Они располагаются в пределах капсулы и трабекул.

Уже через 3 дня после операции отмечается существенное изменение морфологии трансплантата и гистотопографип его люминесцирующих клеток. В центре формируется зона некроза на периферии определяется зона сохраненной ткани. Регистрируется значительное уменьшение количества всех ЛГК в периферической зоне и исчезновение внутрифолликулярных клеток. Через неделю на границе между некрозом и сохраненной тканью определяется широкая промежуточная зона, состоящая из клеток, напоминающих по морфологии макрофаги красной пульпы. Появляются немногочисленные тонкостенные сосуды. врастающие со стороны формирующейся капсулы. На 15 сутки в сохраненных фолликулах появляются единичные

внутрифолликулярные ЛГС Одновременно увеличивается количество и толщина новообразованных сосудов, вокруг которых определяются многочисленные ЛГК Т-зоны. В течение первых двух недель увеличивается количество макрофагов красной пульпы и на 15 сутки их количество становится больше, чем у интактных крыс. Через месяц в пульпе видны многочисленные формирующиеся фолликулы, в большинстве которых определяются внутрифолликулярные клетки, однако, граница фолликулов выглядит нечеткой, отсутствуют береговые ЛГК и маргинальная зона. Через 45 суток значительно возрастает количество внутрифолликулярных клеток, их становится больше, чем у интактных крыс. Клетки-крупные, яркие, располагаются хаотично по всему фолликулу. По-прежнему отсутствуют береговые клетки и маргинальная зона. На 60 сутки после операции количество и топография внутрифолликулярных ЛГК соответствует таковым в селезенке интактных крыс. На границе большинства фолликулов в 1-2 слоя располагаются береговые люминесцирующие клетки, имеющие вытянутую форму и характерную неяркую беловатую люминесценцию. Вокруг фолликулов хорошо видно более темное пространство маргинальной зоны.

С помощью цитоспектрофлуориметрии нами выявлены существенные изменения содержания биогенных аминов в люминесцирующих структур трансплантата. На 3 сутки после операции отмечается достоверное снижение уровня СТ, ГСТ и КА в макрофагах красной пульпы и их эритроцитарном

микроокружении. Однако уже через неделю регистрируется значительное повышение уровня всех биоаминов, при этом более других изменяется содержание ГСТ - по сравнению с предыдущим сроком его значения возрастают в 3.5 раза (рис.1). Следует отметить, что на этом сроке уровень ГСТ в структурах красной пульпы достигает максимальных величин. В дальнейшем наблюдается волнообразное колебание его уровня с понижением на 30 сутки и повторным повышением через два месяца Изменение уровня СТ и КА в структурах красной пульпы происходит также волнообразно, но разнонаправлено с гистамином - постепенно повышается с 3 суток и достигает максимальных величин через полтора месяца (рис. 1), достоверно превышая значения у интактных крыс. На 60 сутки уровень всех биогенных аминов в люминесцирующих структурах красной пульпы достоверно не отличается от интактных животных.

Рис. 1 Гистограмма интенсивности свечения биогенных аминов в эритроцитарном микроокружении ПГК красной пульпы селезенки иитактных крыс и аутотрансплантата через 3-60 суток после операции (вуе)

200

норма Здня 7днвй 15 дней ЗОднеи 45днеи бОднеи

□ серотонин Егистамин Шатехоламины

Мы полагаем, что причинами повышения уровня гистамина в пульпе на 7 сутки являются, во-первых: развивающееся воспаление и некроз, во-вторых, повышенная секреция его тучными клетками, что может считаться дополнительным критерием интенсивности ангиогенеза, а также повышение функциональной активности ЛГК красной пульпы и увеличение их количества.

В люминесцирующих структурах белой пульпы также отмечаются волнообразные колебания уровня всех биоаминов. В лимфоцитах фолликула, начиная с 7 дневного срока, регистрируется повышение уровня серотонина и катехоламинов, достигающее максимальных значений на 45 сутки, достоверно превышающих показатели у интактных крыс (рис.2). Уровень гистамина возрастает и достигает максимальных значений уже на 7 сутки после операции, в дальнейшем регистрируется волнообразное колебание со снижением к 30-ти дням и повторным повышением через два месяца (рис.2).

Мы считаем, что причинами повышения уровня серотонина и катехоламинов в лимфоцитах фолликула селезенки может быть, во-первых, активизация работы внугрифолликулярных клеток и увеличение их количества. Во-вторых, известно, что внутрифолликулярные клетки являются аминопродуцентами, а береговые ЛГК - аминопоглотителями (Гордон Д.С. и др., 1982), поэтому отсутствие береговых клеток может способствовать накоплению этих аминов в лимфоцитарной паренхиме трансплантата.

Рис. 2 Динамика уровня биоаминов в лимфоцитах Фолликула селезенки интактных крыс и аутотрансплантата (в у е)

Во внутрифолликулярных клетках и ЛГК Т-зоны регистрируется однонаправленное колебание уровня всех биоаминов с постепенным повышением к 45 суткам во внутрифолликулярных ЛГК и 60 суткам в ЛГК Т-зоны, однако, не достигающее значений у интактных крыс (рис.3).

Рис. 3 Гистограмма интенивности свечения биогенных аминов во внутрифолликулярных клетках селезенки интактных крыс и аутотрансллантата (в у е)

Что касается тучных клеток, то через 3 суток после операции их количество практически соответствует интактным крысам с преобладанием дегранулированных (Т-3) форм, однако, уже на 7 сутки количество ТК возрастает более чем в 9 раз. При этом меняется локализация и соотношение по степени дегрануляции в сторону малодегранулированных (Т-1) форм. На этом сроке ТК выявляются в формирующейся капсуле, под капсулой и в зоне сохраненной селезеночной ткани. На 15 сутки количество клеток в пульпе увеличивается, также меняется соотношение по степени дегрануляции в сторону преобладания дегранулированных (Т-3) форм (рис.4).

Рис. 4 Соотношение различных форм тучных клеток в трансплантате селезенки через 15 суток после операции

Т-2 22%

В' более поздние сроки количество тучных клеток уменьшается, но остается выше, чем у интактных крыс. Количество ТК к 60 суткам превышает норму в 4,5 раза, но при этом локализация и степень дегрануляции соответствует таковым у интактных крыс.

Мы полагаем, что миграция тучных клеток в пульпу трансплантата происходит через мембрану новообразованных капилляров, а ее интенсивность зависит от ширины зоны сохраненной ткани. Известно, что факторами хемотаксиса тучных клеток являются компонент базальных мембран - ламин (Walsh et al., 1991), фактор роста стволовых клеток (ФСК), вырабатываемый эндотелиоцитами и фибробластами, и ИЛ-3 (Meininger C.J. et al., 1992; Nilsson G. et al., 1994).

Установлено, что гистамин тучных клеток влияет на Н| и Н2 рецепторы эндотелиоцитов и стимулирует образование микрососудов (Sorbo J. et al., 1994). Кроме того, тучные клетки вырабатывают основной фактор роста фибробластов, обладающий мощным ангиогенным и репративным действием (Клименко Н.А.. Татарко СВ., 1995; Reed J.A. et al., 1995). Вероятно, ТК являются важными регуляторами фибриллогенеза капсулы и трабекул транпслантата, поскольку известно, что одним из секреторных продуктов тучных клеток является эпдотелин-1 - фактор пролиферации фибробластов (Ehrenreich Н. et al., 1992), а периваскулярно расположенные тучные клетки сами способны к выработке коллагена (Ruger В. et al., 1994).

На основании вышеизложенного мы предлагаем гипотетическую схему развития изменений в аутотрансплантате и возможной роли тучных и люминесцирующих гранулярных клеток в процессе регенерации (рис. 5).

Таким образом, опираясь на полученные результаты и литературные данные, мы можем заключить, что эффективность

процесса регенерации селезеночного трансплантата зависит от многих причин, но наиболее значимыми, на наш взгляд, могут считаться наличие широкой зоны сохраненной ткани с достаточным количеством лимфоидной ткани и высокая степень миграции тучных клеток. Сохранение достаточного количества пульпы, вероятно, является основным условием для раннего восстановления функциональной активности трансплантата, инициирующим моментом которого, возможно, является антигенпрезентирующая активность внутрифолликулярных клеток.

Рис. 5Гипотетическая схема развитияморфофункциональных изменений ваутотрансплантате селезенки

выводы

1. После аутолиенотрансплантации в центре фрагмента селезенки формируется зона некроза, на периферии определяется зона сохраненной ткани с немногочисленными фолликулами. На 7 сутки в трансплантате появляются новообразованные сосуды. Начиная с 15 суток, расширяется периферическая зона, на 30 сутки выявляются формирующиеся фолликулы. Через два месяца в фолликулах определяются светлые центры, вокруг фолликулов -маргинальная зона.

2. После операции в трансплантате селезенки отмечаются существенные изменения гистотопографии люминесцирующих гранулярных клеток:

а) значительное уменьшение количества люминесцирующих макрофагов красной пульпы в периферической зоне трансплантата в первые 7 суток;

б) полное отсутствие внутрифолликулярных и береговых клеток на 3 и 7 сутки;

в) обнаружение внутрифолликулярных люминесцирующих гранулярных клеток через 15 дней и увеличение их количества на 30 и 45 сутки;

г) появление береговых клеток через два месяца после операции.

3. В лимфоцитах В-зоны и структурах красной пульпы трансплантата регистрируются волнообразные изменения уровня гистамина с максимальным повышением на 7 сутки, снижением к 30 и 45 суткам после операции и повторным увеличением через

два- месяца. Во внутрифолликулярных клетках минимальный уровень гистамина отмечен через 30 дней, максимальный через 45 суток. В люминесцирующих клетках Т-зоны максимальный уровень гистамина выявляется через 60 суток после операции.

4. Уровень серотонина и катехоламинов во всех люминесцирующих структурах трансплантата изменяется волнообразно, но разнонаправлено с содержанием гистамина значительно уменьшается на 3 сутки, постепенно повышается к 45 дню и снова несколько снижается на 60 сутки после операции

5. В трансплантате фрагмента селезенки на 7 и 15 сутки отмечается значительное увеличение количества тучных клеток с диффузным расположением их в пульпе. Это совпадает с появлением новых сосудов в сохраненной пульпе трансплантата С 30-х суток количество тучных клеток уменьшается.

6. Появление береговых люминесцирующих клеток, формирование маргинальной зоны, уменьшение уровня серотонина, гистамина и катехоламинов во внутрифолликулярных клетках, а также серотонина и катехоламинов в лимфоцитах В-зоны и красной пульпе к 60 суткам после операции указывает на восстановление маргинальной зоны фолликула.

Практические рекомендации. В работе отражены новые аспекты регенерации селезеночной ткани, раскрывающие особенности реваскуляризации трансплантата и восстановления функциональной активности его клеточных структур, которые необходимо учитывать в клинике для определения сроков

восстановления иммунокорригирующего действия селезенки. Особый интерес для практических врачей представляю данные о сроках и механизмах восстановления кровообращения в трансплантате, которые могут оказаться полезными в разработке способов медикаментозного воздействия с целью стимуляции реваскуляризации и регенерации селезенки.

Результаты исследования могут служить обоснованием к назначению аутотрансплантации селезенки в случае спленэктомии и невозможности выполнения органосохраняющей операции.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ЛГК - люминесцирующие гранулярные клетки СТ - серотонин ГСТ - гистамин КА - катехоламины ТК - тучные клетки

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Шумилова Е.Б., Москвичев Е.В., Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю. Люминесцентно-гистохимическое исследование структур тимуса, после гетеротопической аутотрансплантации селезенки // Мат. IV Международной конф. по функциональной нейроморфологии «Колосовские чтения - 2002». - СПб, 2002. -С. 315-316

2. Меркулова Л.М., Москвичев Е.В., Шумилова Е.Б, Стручко Г.Ю. Морфофункциональное исследование аутотрансплантатов селезенки и иммуноглобулинов крови в разные сроки'после операции // Вестник Чувашского

университета, 2002. - № 2. - С. 115 - 120.

3. Стоменская И.С., Меркулова Л.М., Стручко Г. Ю. Москвичев Е.В., Шумилова Е.Б., Лаврентьев СВ. Влияние спленэктомии на морфофункциональное состояние надпочечников // Аллергология и иммунология, 2003.- Т. 4, №2 -СЛ45-146.

4. Шумилова Е.Б., Москвичев Е.В., Стоменская И С, Лаврентьев СВ., Иванова Н.Н. Аутолиенотрансплантация как возможный метод коррекции нарушений, возникающих в тимусе при спленэктомии // Аллергология и иммунология, 2003.- Т. 4, №2.-С. 146.

5. Москвичев Е.В., Стоменская И.С., Стручко ПО., Шумилова Е.Б. Морфогистохимическое исследование ауготрансплантатов селезенки на разных сроках после операции // Аллергология и иммунология, 2003.- Т. 4, №2. - С. 147-148.

Формат 60х84х/16. Бумага офсетная. Объем 1,0 печ. л. Тираж 100 экз. Заказ № 120.

Чувашский государственный университет

Типография университета 428015 Чебоксары, Московский просп., 15

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Москвичев, Евгений Васильевич

ВВЕДЕНИЕ3

Глава 1. Обзор литературы8

1.1. Общие сведения о строении и физиологическом значении селезенки8

1.2. Современные представления о функциональных свойствах биоаминов и их участии в реакциях иммунитета14

1.3. Современные сведения о реакции организма на удаление селезенки21

1.4. Современные органосохраняющие операции и аутотрансплантация селезеночной ткани29

Глава 2. Материал и методы исследования 33

Глава 3. Результаты собственных исследований36

3.1. Селезенка интактных крыс3 6

3.2 Морфофункциональное состояние аутотрансплантата селезенки через 3 суток после операции42

3. 3через 7 суток после операции47

3. 4через 15 суток после операции52

3. 5через 30 суток после операции57

3. 6через 45 суток после операции61

3. 7через 60 суток после операции65

Глава 4. Обсуждение результатов и заключение70

ВЫВОДЫ82

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфофункциональные изменения аутотрансплантата селезенки в первые два месяца после операции"

Актуальность темы.

Иммунная система является одной из сложнейших автономных регуляторных систем организма, сбои в деятельности которой приводят к возникновению тяжелых осложнений аутоиммунной, инфекционной и опухолевой природы. По этой причине в последние годы все более актуальным становится вопрос о сохранении иммунного гомеостаза, как основного фактора, обуславливающего эффективность лечения и прогноз большинства известных соматических заболеваний.

Спленэктомия - достаточно широко применяемая операция в настоящее время. Ее выполняют при синдроме портальной гипертензии, наследственном микросфероцитозе, идеопатической тромбоцитопенической пурпуре, лейкозах, лимфогранулематозе, гипопластическиех состояниях кроветворения, кистах селезенки, болезнях накопления (Пугачев А.Г. и др., 1983; Кущ H.JI. и др., 1988; Benoist S., 2000; Eber S.W. et al., 2001). Однако наиболее часто спленэктомию выполняют при травматических разрывах селезенки и ее интраоперационных повреждениях во многих, даже крупных, хирургических клиниках (Игнатьев В.Г., Михайлова В.М. 2000; Pabst R. 1999).

Селезенка не является жизненно важным органом, однако, накопленные в последние годы знания свидетельствуют, что после ее удаления развиваются различные осложнения, спектр которых весьма широк. Наиболее опасным из них считается синдром OPSI- overwhelming postsplenectomy infection -подавляющая (непреодолимая) постспленэктомическая инфекция (Leemans R et al., 1999; Hansen К., Singer D.B., 2001), с летальностью, по данным ряда авторов, до 50% (Benoist S., 2000). В отечественной литературе этот синдром определяют как постспленэктомический гипоспленизм (Апарцин К.А. 2000), проявлениями которого являются резкое снижение противомикробной резистентности, возможность развития «молниеносных» инфекций, а также повышение заболеваемости острыми и хроническими инфекциями на протяжении всей жизни больного.

Значительное расширение знаний о строении и физиологическом значении селезенки заставили более избирательно назначать спленэктомию, активно изучать возможные способы сохранения органа, искать пути медикаментозной коррекции осложнений спеленэктомии. В этой связи изменилась лечебная тактика при повреждениях и патологических процессах с вовлечением селезенки (Rose А.Т. et al., 2000).

В настоящее время разработано большое количество органосохраняющих операций, часть из которых оказалась достаточно эффективной в клинике (Благитко Е.М, Толстых Г.Н., 2000; Гаджиев Д.Н., 2000; Ефименко Н.А. и др., 2000; Шапкин Ю.Г. и др., 2000). Вместе с тем большинство авторов указывают на опасность органосохраняющих операций, связанную с особенностями строения и кровоснабжения органа. Зачастую такие вмешательства оказываются технически невыполнимыми, особенно при обширных разрывах селезенки в области ворот, размозжении большей части органа.

В подобных случаях альтернативным способом восстановления функции селезенки является гетеротопическая трансплантация фрагмента ее ткани в хорошо кровоснабжаемые органы (большой сальник, брыжейка кишки). Предпосылками для разработки этого метода стала высокая способность селезеночной ткани к регенерации и клинические наблюдения очагов спленоза брюшины после разрывов селезенки и внутрибрюшного кровотечения (Королев В.Ф. 1981). Немногочисленные клинические и экспериментальные результаты применения аутолиенотрансплантации отмечают ее эффективность как в раннем, так и в отдаленном послеоперационном периоде (Абасов Б.Х. и др., 1982; Кузин М.И. и др., 1985; Бобров и др., 1986; Тихомирова и др., 1988; Szendroi Т et al., 1997; Leemans R. et al., 1999).

Вместе с тем, имеется большое количество противоречивых данных указывающих на неэффективность или недостаточную эффективность этой операции (Eskiturk A. et al., 1995; Zhao В. et al., 1995; Tang WH. et al., 2003). Многие авторы отмечают недостаточную изученность, как клинических результатов применения данного метода, так и многих морфологических аспектов приживления и регенерации селезеночной ткани (Pisters PW, Pachter HL., 1994; Westermann J., Pabst R., 1997; Power RE. et al., 2002). Вероятно поэтому, до сих пор не существует единого мнения о целесообразности применения аутолиенотрансплантации при спеленэктомии и невозможности выполнения органосохраняющей операции.

Таким образом, углубленное и всестороннее изучение метода гетеротопической аутолиенотрансплантации представляет непосредственный интерес для морфологов и для практических врачей - хирургов и иммунологов.

Исходя из вышеизложенного, нами была поставлена цель исследования и определены его конкретные задачи. Цель исследования.

Изучить морфофункциональное состояние трансплантата селезенки через 3-60 суток после гетеротопической аутотрансплантации.

В соответствие с целью работы были поставлены следующие задачи:

1. Изучить динамику тканевых изменений трансплантата через 3, 7, 15,30,45 и 60 суток после операции.

2. Исследовать биоаминсодержащие структуры фрагмента селезенки в процессе регенерации трансплантата.

3. Изучить уровень серотонина, гистамина и катехоламинов в люминесцирующих структурах трансплантата и их клеточном микроокружении в указанные сроки.

4. Исследовать популяцию тучных клеток в трансплантате через 3-60 суток после операции.

Научная новизна.

• Впервые установлено, что на 15 сутки после операции в сохраненных фолликулах на периферии трансплантата появляются люминесцирующие внутрифолликулярные клетки. В формирующихся фолликулах эти клетки появляются через 30 суток.

• Впервые показано, что регенерация селезеночной ткани сопровождается волнообразным и разнонаправленным колебанием уровня гистамина, серотонина и катехоламинов в разных люминесцирующих структурах трансплантата.

• Впервые установлено, что в процессе ангиогенеза и регенерации ткани трансплантата участвуют тучные клетки.

• Представлены данные о возможности реваскуляризации и восстановления сохраненных фолликулов, локализованных ближе к капсуле трансплантата.

• Показано, что окончательная дифференцировка фолликулов трансплантата и формирование маргинальной зоны происходит через 60 суток после операции.

Научно-теоретическая значимость.

Результаты исследования существенно расширяют знания о процессе регенерации ткани селезеночного трансплантата, сроках восстановления функциональной активности его клеточных и тканевых структур. Впервые представлены данные об участии тучных клеток в процессе ангиогенеза пульпы трансплантата. Результаты исследования могут быть использованы в качестве морфологического обоснования изучения возможного медикаментозного воздействия с целью стимуляции ангиогенеза и регенерации пульпы и уменьшения объема некроза трансплантата. Работа представляет безусловный интерес для морфологов и практических хирургов, занимающихся проблемой спленэктомии.

Результаты работы используются в материалах лекций и практических занятий на кафедрах функциональной и лабораторной диагностики, нормальной анатомии медицинского института Чувашского государственного университета. Результаты исследования нашли отражение в опубликованных статьях, тезисах и сообщениях.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. В сохраненных фолликулах периферической зоны трансплантата внутрифолликулярные люминесцирующие клетки появляются на 15 сутки. На 30 сутки эти клетки выявляются в формирующихся фолликулах. Береговые клетки регистрируются только на 60 сутки. Окончательная дифференцировка селезеночных фолликулов и формирование маргинальной зоны происходит через 60 суток после операции.

2. Во всех изучаемых структурах трансплантата после операции отмечается значительное и волнообразное изменение содержания гистамина, серотонина и катехоламинов. Наиболее существенно - колебание уровня гистамина, которое разнонаправлено с серотонином и катехоламинами.

3. В сохраненной пульпе трансплантата селезенки на 7 и 15 сутки регистрируется значительное увеличение количества тучных клеток, которое совпадает со сроком появления в ней новых сосудов. С 30-х суток количество тучных клеток уменьшается. Степень миграции тучных клеток и увеличение уровня гистамина в пульпе в первые 7 суток могут считаться критерием интенсивности ангиогенеза.

Апробация работы.

Основные материалы диссертации доложены и обсуждены на итоговой научной конференции Чувашского государственного университета (Чебоксары,2002), IV Международной конференции по функциональной нейроморфологии «Колосовские чтения - 2002» (С.-Петербург, 2002). По теме диссертации опубликовано 5 научных работ, из них 1-статья, 4 — тезисы в материалах Международных и Всероссийских научных конференций.

Структура и объем диссертации.

Диссертация изложена на 107 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, результатов собственного исследования, обсуждения результатов и

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Москвичев, Евгений Васильевич

Результаты исследования могут служить обоснованием к назначению аутотрансплантации селезенки в случае спленэктомии и невозможности выполнения органосохраняющей операции.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Селезенка является периферическим органом иммунной защиты и ее функции до сих пор не до конца изучены. В нормальных условиях селезенка выполняет 4 основные функции: 1) синтез иммуноглобулинов; 2) элиминация истощенных или патологически измененных циркулирующих эритроцитов; 3) удаление микроорганизмов и частиц антигенов из кровотока; 4) участие в эмбриональном гемопоэзе (Павловский М.П. и др., 1986). В последние годы в литературе высказываются мнения о том, что главная функция селезенки заключается в фильтрации крови от бактерий, токсинов и другого чужеродного антигенного материала (Jakubovsky J, Hromec А., 1998; Altamura М. et al., 2001; Marques RG. et al., 2002). Обусловлено это, во-первых, тем, что в селезенке содержится большая часть макрофагов организма; во-вторых, выработкой белков — опсонинов против липополисахаридной стенки микробов и сывороточного пептида тафтсина; в-третьих, особенностями кровотока в синусоидах пульпы (Бойчук Н. В. и др., 2001; Kubo S.,et al., 1994; Jakubovsky J., Hromec A. 1998). По сути, лишая организм селезенки мы лишаем ее бактериального фильтра. Возможно, именно поэтому вынужденное удаление селезенки часто приводит к развитию осложнений, наиболее опасными из которых являются инфекционные. Самым грозным осложнением считается синдром OPSI- overwhelming postsplenectomy infection - подавляющая (непреодолимая) постспленэктомическая инфекция (Leemans R, et al., 1999; Hansen К. Singer D.B., 2001), с летальностью по данным ряда авторов до 50% (Benoist S., 2000).

Поиски путей компенсации постспленэктомических осложнений ведутся достаточно давно. Одним из перспективных и широко изучаемых методов коррекции постспленэктомического гипоспленизма является гетеротопическая аутотрансплантация селезеночной ткани. В немногочисленных работах по трансплантации селезенки в клинике и эксперименте показано снижение уровня инфекционных осложнений в послеоперационном периоде (Кузин М.И. и др., 1985). Установлено наличие функциональной активности трансплантатов уже через 3-4 недели после пересадки (Сапожникова М.А. и др., 1987). В более поздние сроки - восстановление фагоцитарной и антителпродуцирующей функций с восстановлением структуры нормальной селезеночной ткани (Leemans R. et al., 1999; Piccardo A. et al., 1999; Miko I. et al., 2001; Marques RG. et al., 2002). Но до сих пор не существует единого мнения о целесообразности применения этого метода в случаях экстренной или плановой спленэктомии и обусловлено это недостаточной изученностью как самого метода, так и морфологической обоснованности аутолиенотрансплантации (Westermann J., Pabst R., 1997; Power R.E. et al.,

2002). Практически не изучены механизмы, инициирующие ангионеогенез пульпы и ее регенерацию (Power RE. et al., 2002). He исследован процесс восстановления функциональной активности селезенки на клеточном и тканевом уровне. Существует множество противоречий о сроках восстановления антителподуцирующей функции селезенки и ее фагоцитарной активности (Eskiturk A. et al., 1995; Leemans R. et al., 1996; Tang WH. et al.,

2003). Все это создает необходимость углубленного и всестороннего изучения метода аутотрансплантации селезеночной ткани и имеет важное практическое значение.

Нами установлено, что аутотрансплантация селезенки сопровождается существенными изменениями в цитоархитектонике трансплантата, биоаминном обеспечении клеточных и тканевых люминесцирующих структур, а также в состоянии тучноклеточной популяции. Изменения регистрируются уже с 3-их суток и сопровождаются перестройкой системы кровоснабжения трансплантата, регенераторными процессами с образованием незрелой лимфоидной ткани, последующим ее созреванием, дифференцировкой, что совпадает с результатами большинства исследователей (Сапожникова М.А. и др., 1987; Alves H.J. et al., 1999; Leemans R et al., 1999, Mico I et al., 2001).

В экспериментальных работах показано, что в течение первых 3 суток трофика трансплантата происходит, в основном, за счет осмоса питательных веществ и кислорода со стороны сальника, что и обуславливает массивный некроз центральной зоны пересаженного селезеночного фрагмента (Сапожникова М.А. и др. 1987). Восстановление селезеночной пульпы начинается с процесса неоангиогенеза зоны сохраненной ткани, однако, по-прежнему не известно, что является пусковым моментом для этого процесса, не изучены вещества, стимулирующие сосудообразование. Исследованиями авторов установлена неэффективность использования эндогенных (human recombinant vaskular endothelial factor (VEGF)) и экзогенных (6/0 polypropylene) стимуляторов ангиогенеза. Введение этих препаратов не влияло на скорость реваскуляризации селезеночных трансплантатов (Power RE. et al., 2002). В других исследованиях применение сальникового липидного фактора ангиогенеза (omental angiogenic lipid factor (OAF)) способствовало более быстрому приживлению транспланата по сравнению с контрольной группой без введения препарата (Levy Y. et al., 1998). По мнению Leitner W. с соавторами (1994), факторы, стимулирующие ангиогенез, вырабатывает сама сохраненная селезеночная пульпа. Из литературы известно, что восстановление кровоснабжения периферической зоны трансплантата начинается уже через 3 суток после операции (Alves H.J. et.al. 1999).

Нами впервые установлено, что через 3 суток происходит усиленная миграция тучных клеток, сначала в область формирующейся капсулы, а затем в пульпу зоны сохраненной ткани трансплантата. В своих исследованиях мы обратили внимание, что в случае неудовлетворительного приживления трансплантата и его тотального некроза, реакции со стороны тучноклеточной популяции не происходит. Мы полагаем, что миграция тучных клеток в пульпу трансплантата происходит через мембрану новообразованных капилляров, а ее интенсивность зависит от ширины зоны сохраненной ткани. Известно, что факторами хемотаксиса тучных клеток являются компонент базальных мембран - ламин (Walsh et al., 1991), фактор роста стволовых клеток (ФСК), вырабатываемый эндотелиоцитами и фибробластами, и ИЛ-3 (Meininger C.J. et al., 1992; Nilsson G. et al., 1994).

Мы считаем, что присутствие тучных клеток в трансплантате и их влияние на процессы регенерации, вероятно, обусловлены содержанием в них большого количества биологически активных веществ. Установлено, что в зависимости от локализации тучные клетки неоднородны по своему химическому составу. Тучные клетки соединительной ткани у крыс содержат протеазы, протегликаны, цитокины, серотонин и гистамин, концентрация которого в этих клетках 10 раз выше, чем в тучных клетках слизистых оболочек (Быков B.JI. 2000). Известно, что гистамин тучных клеток влияет на Hj и Н2 рецепторы эндотелиоцитов и стимулирует образование микрососудов (ангиогенез)(8огЬо J. et al., 1994). Кроме того, тучные клетки вырабатывают основной фактор роста фибробластов (оФРФ), обладающий мощным ангиогенным и репративным действием (Клименко Н.А. Татарко С.В., 1995; Reed J. A. et al., 1995).

Мы полагаем, что помимо ангиогенеза тучные клетки принимают непосредственное участие в процессах дифференцировки фибробластов и формирования трабекулярного аппарата трансплантата и его капсулы. Braunwood (1963) в экспериментальных работах показал, что при добавлении в культуру ткани гиперлипидемической плазмы соединительнотканные клетки развиваются в гистиоциты и пенистые клетки, а при добавлении к среде гепарина все гистиоциты превращаются в фибробласты, которые вскоре окружаются коллагеновыми волокнами (Цит. по Н.А. Юриной 1977). Кроме того, известно, что одним из секреторных продуктов тучных клеток является эндотелии -1- фактор пролиферации фибробластов (Ehrenreich Н. et al., 1992), а периваскулярно расположенные тучные клетки сами способны к выработке коллагена (Ruger В. et al., 1994).

Кроме того, мы полагаем, что одним из возможных механизмов уменьшения воспалительного отека трансплантата на 7 сутки после операции является влияние гепарина тучных клеток, способного связывать биогенные амины как внутри клетки, так и за ее пределами (Быков В.Д., 1999). Взаимодействуя с эндотелиальными клетками и перицитами сосудов, тучные клетки связывают гистамин и серотонин сосудистой стенки. Это приводит к снижению ее проницаемости, уменьшению тканевого отека и клеточной гипоксии (Машковский М.Д., 1997).

Мы считаем, что интенсивность миграции тучных клеток в трансплантат можно считать критерием эффективности ангиогенеза. Поэтому наличие широкой зоны сохраненной ткани, вероятно, является главным условием полноценного ангиогенеза и регенерации пульпы трансплантата.

С помощью люминесцентно-гистохимических методов нами установлено, что уже через 3 суток после операции на границе между некротизированной и сохраненной тканью появляются люминесцирующие гранулярные клетки, схожие построению с ЛГК красной пульпы. При этом в зоне сохраненной ткани количество ЛГК значительно уменьшается. Вероятнее всего, это обусловлено миграцией большей части макрофагов красной пульпы на границу зоны некроза. Мы считаем, что, в условиях отсутствия кровоснабжения трансплантата в первые 3 суток после операции и невозможности проникновения в пульпу циркулирующих моноцитов и гранулярных лейкоцитов, миграция макрофагов красной пульпы в промежуточную зону является важным защитным механизмом, необходимым для ограничения зоны некроза.

С помощью цитоспектрофлуориметрии нами установлено, что уровень серотонина, гистамина и катехоламинов в ЛГК красной пульпы через 3 суток после операции снижается почти в 3 раза, но уже на 7 сутки превышает значения у интактных крыс более чем в 3 раза. На этом же сроке возрастает количество люминесцирующих клеток красной пульпы, одновременно в клеточном микроокружении ЛГК красной пульпы регистрируется самый высокий уровень гистамина.

Мы полагаем, что причинами повышения уровня гистамина в пульпе являются, во-первых: повышенная секреция его тучными клетками, что может считаться дополнительным критерием интенсивности ангиогенеза, во-вторых, повышение функциональной активности ЛГК красной пульпы и увеличение их количества. Из литературы известно, что гистамин, взаимодействуя с Н2 рецепторами макрофагов, подавляет перекисное окисление НАДФ-Н оксидазы и, тем самым, защищает NK-клетки и Т-лимфоциты от апоптоза (Hellstrand К., 2002). Кроме того, известно, что Н2-рецепторы содержат на своей мембране и Т-супрессоры. Гистамин, воздействуя на них, активирует супрессивную активность (Дюговская Л.А., 1981; Schnaper H.W. et al., 1987; Inage Z. et al., 1990). В сочетании с другими медиаторами (серотонином и гепарином) диамин оказывает иммуномодулирующее влияние на лейкоцитарную реакцию при воспалении (Клименко Н.А., Пышнов Г.Ю., 1993). Возможно, высокий уровень гистамина в красной пульпе является одним из регуляторных механизмов подавления апоптоза Т-лимфоцитов и аутоиммунных реакций на некроз селезеночной ткани в первые 7 суток после операции.

В экспериментальных работах, посвященных изучению аутотрансплантации селезенки, как возможного метода коррекции постспленэктомического гипоспленизма, основное значение придается новообразованной селезеночной ткани и именно ей приписывается иммунокорригирующее действие аутотрансплантата (Кузин М.И. и др., 1985; Сапожникова М.А. и др. 1987). По этой причине большинство клинических и экспериментальных исследований проводилось в отдаленные сроки после операции, когда с помощью лабораторных и лучевых методов можно определить функциональную активность пересаженной селезенки (Tricarico А. et al., 1993; Zoli G. et al., 1994; Brandt C.T. et al., 2001; Marques RG. et al.; 2002). Лишь в отдельных работах имеются указания на наличие сохраненных лимфоидных фолликулов в периферической зоне трансплантата в ранние сроки после операции, однако, какого-либо значения этим структурам не придается (Скуба Н.Д, Дурдыев М.Д., 1984; Мироненко О.Н., Абакаров М.Х.,1985).

Нами впервые установлено, что через 15 суток после операции в сохраненных фолликулах периферической зоны появляются немногочисленные люминесцирующие внутрифолликулярные клетки, количество которых в более поздние сроки увеличивается. Уровень биогенных аминов в них достоверно ниже, чем у интактных крыс. Учитывая последние литературные данные о возможной принадлежности этих клеток к дендритным (Гордон Д.С. и др., 2001; Бочкарева А.Г., 2002), мы считаем, что через 15 суток после операции в сохраненных фолликулах трансплантата появляются фолликулярные дендритные клетки.

В настоящее время выделяют 4 иммунофенотипически и функционально отличающихся друг от друга типа дендритных клеток: миелоидные (интердигитальные ДК), лимфоидные (ДК тимуса), фолликулярные ДК и клетки Лангерганса (Пащенков М.В., Пинегин Б.В. 2000; Макаренкова В.П. и др. 2002). В селезенке встречаются два типа ДК: миелоидные и фолликулярные ДК. Последние располагаются в "зародышевых" центрах В - зависимых фолликулов селезенки и других периферических лимфоидных органов и их основной функцией является поддержание жизнеспособности, роста и дифференцировки активированных В - лимфоцитов (Пащенков М.В., Пинегин Б.В. 2000). ДК миелоидного происхождения (интерстициальные ДК) располагаются преимущественно в маргинальных слоях белой пульпы, коже и слизистых оболочках в незрелом виде. В случае антигенной стимуляции они превращаются в зрелые ДК и мигрируют в Т - зависимые зоны белой пульпы, где превращаются в интердигитальные дендритные клетки. Здесь они активируют "наивные" Т-хелперы и вместе с ними стимулируют цитотоксические CD8+ Т - и В - клетки (Пащенков М.В., Пинегин Б.В., 2000, Gallucci et al., 1999). Кроме того, интердигитальные дендритные клетки способны влиять на синтез антител В -клетками (Макаренкова В.П. и др. 2002).

В своих исследованиях мы установили, что наибольшее количество ЛТК в красной пульпе регистрируется через 15 суток после операции. Одновременно на этом сроке выявляется максимальное количество люминесцирующих клеток в промежуточной и центральной зоне трансплантата. Вероятнее всего, это обусловлено проникновением в трансплантат циркулирующих моноцитов крови и указывает на восстановление кровотока в сохраненной пульпе трансплантата. Мы полагаем, что восстановление фагоцитарной и фильтрационной функций селезенки, которые в норме обусловлены активностью макрофагов красной пульпы, начинается именно на этом сроке.

Нами установлено, что на 30 сутки после операции в сохраненных и формирующихся фолликулах возрастает количество внутрифолликулярных клеток, увеличивается интенсивность свечения в них биогенных аминов, что указывает на повышение функциональной активности этих клеток. По данным литературы именно в этот срок в крови пациентов, перенесших аутотрансплантацию селезенки, и экспериментальных животных, повышается уровень тафтсина (Zhang Н. et al., 2002). Радиоизотопными методами регистрируется функциональная активность пересаженной селезенки (Сапожникова М.А. и др. 1987), с помощь меченых Esherichia coli регистрируется фагоцитарная активность селезенки (Marques R.G. et al., 2002).

Через 45 суток после операции количество внутрифолликулярных клеток значительно больше, чем у интактных крыс, расположены они хаотично по всему фолликулу. Интенсивность свечения всех биоаминов в них достигает максимальных значений. В лимфоцитах В-зоны на 30 и 45 сутки регистрируются самые высокие уровни катехоламинов и серотонина на фоне сниженного уровня гистамина.

Мы считаем, что причинами повышения уровня серотонина и катехоламинов в лимфоцитах фолликула селезенки может быть, во-первых, активизация работы фолликулярных дендритных клеток и увеличение их количества. Во-вторых, известно, что внутрифолликулярные клетки являются аминопродуцентами, а береговые ЛГК — аминопоглотителями (Гордон Д.С. и др., 1982), поэтому отсутствие береговых клеток может способствовать накоплению этих аминов в лимфоцитарной паренхиме трансплантата. Максимальное снижение уровня иммуносупрессирующего медиатора гистамина в лимфоцитах фолликула на 30 сутки совпадает с уменьшением его выработки виутрифолликуляриыми клетками, что несомненно оказывает благоприятное влияние на развитие и дифференцировку В - лимфоцитов. Кроме того, причиной снижения уровня гистамина может быть антагонистическое влияние протеинкиназы Р38 - фермента, участвующего в процессе дифференцировки незрелых дендритных клеток в зрелые и препятствующего их апоптозу (Aisher A. et al., 1999; Hur J. et al., 2003).

Нами установлено, что с 30-х суток эксперимента происходит уменьшение количества тучных клеток, также меняется их локализация. Соотношение форм тучных клеток по степени дегрануляции соответствует интактным через 2 месяца после операции. Мы полагаем, что уменьшение количества тучных клеток и их локализация ближе к капсуле обусловлены завершением формирования и дифференцировки сосудистого и соединительнотканного компонента трабекул. А значительное преобладание недегранулированных Т-0 форм через 60 суток, обусловлено снижением секреции гепарина и гликозоаминогликанов, что может быть обусловлено снижением выработки и накопления биоаминов в люминесцирующих структурах трансплантата.

Мы полагаем, что появление люминесцирующих гранулярных клеток на границе фолликула к 60 суткам свидетельствует о завершении его дифференцировки и формировании маргинального синуса. Снижение уровня катехоламинов и серотонина во внутрифолликулярных клетках и лимфоцитах В-зоны на этом сроке, вероятнее всего, обусловлено аминопоглотительной активностью береговых ЛГК (Гордон Д.С. и др., 1982). Возможно, что снижение уровня биоаминов в эритроцитарном фоне красной пульпы через 60 суток также обусловлено аминопоглотительной активностью берговых ЛКГ. Гистогенез береговых клеток в настоящее временя до конца не установлен, однако, в последние годы высказываются мнения о принадлежности береговых ЛГК к подтипу интердигитальных дендритных клеток (Гордон Д.С., 2001; Бочкарева А.Г., 2002).

Известно, что маргинальная зона является своеобразным полигоном для взаимодействия между Т- и В- лимфоцитами, посредниками между которыми выступают интердигитальные дендритные клетки. В маргинальной зоне содержится большое количество IgM и IgD позитивных В - лимфоцитов, которые при антигенной стимуляции раньше других мигрируют в фолликулярные центры и, вступая во взаимодействие с фолликулярными дендритными клетками, вырабатывают специфические IgM. В меньшей степени на антигенное воздействие реагируют IgM позитивные В - лимфоциты крови (Gray D. et al., 1984).

Наши исследования показывают, что полноценное восстановление маргинальной зоны фолликула происходит лишь спустя 2 месяца после операции. Мы полагаем, что именно отсутствие полноценной маргинальной зоны фолликула не позволяет в полном объеме компенсировать дефицит иммуноглобулинов, особенно М фракции, возникающий в раннем послеоперационном периоде после аутолиенотрансплантации (Knezevic S. et al., 2002., Zhang H et al., 2002).

Проанализировав полученные результаты, мы предлагаем гипотетическую схему развития морфофункциональных изменений в аутотрансплантате и возможного участия тучных и люминесцирующих гранулярных клеток в процессах регенерации селезеночной ткани трансплантата, его иммунокорригирующем действии (Рис. 33).

Рис. 33 Гипотетическая схема морфофункциональных изменений в аутотрансплантат еселезекни

Щ I

Трансплантация

Начало ангиогенеза, начало миграции незрелых тучных клеток в область формирующейся капсулы

Некроз центральной части трансплантата, высвобождение хемотакси ч ее ки х факторов I

Созревание и дегрануляция тучных клеток

•V

3 суток 1 и * р>

• Л*V

Миграция макрофагов. — гранулярных лейкоцитов в зону некроза, опустошение периферической зоны V

7 суток к м

Стимуляция ангиогенеза

Появление ЛГК в сохраненных фолликулах

Завершение васкуляризапии

Реваску.аяризация сохраненных фолликулов

15 суток трансплантата, формирование незрелых фолликулов

Повышение уровня биоаминов а люминесцирующих структурах

Увеличение количес! ва и интенсивности свечения внутри-фолликулярных клеток

Созревание лимфоидноЙ ткани, появление в фолликулах светлых цен тров

30 суток

Увеличение функциональной ^ активности трансплантата

45 суток

Завершение дифференцировки красной и белой пульпы, формирование маргинальной зоны 60 Суток

Таким образом, метод гетеротопической аутотрансплантации является перспективным, но не до конца изученным способом коррекции осложнений спленэктоми. Главной задачей для исследователей и практических хирургов в настоящее время является минимизация объема некроза трансплантата, причиной развития которого является недостаточное кровоснабжение. Поэтому изучение факторов, стимулирующих ангиогенез пульпы, по всей видимости, будет приоритетным направлением в экспериментальных работах ближайшего времени. Нами установлено, что немаловажное значение в процессе восстановления кровоснабжения трансплантата принадлежит тучным клеткам, а эффективность ангиогенеза и его интенсивность напрямую зависят от ширины зоны сохраненной селезеночной ткани. Нами также впервые выявлено, что первые функционально активные внутрифолликулярные клетки, возможно, являющиеся дендритными, появляются в сохраненных фолликулах периферической зоны уже на 15 сутки после операции. И, возможно, именно их антигенпрезентирующая активность лежит в основе иммунокорригирующего действия селезеночного трансплантата.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Москвичев, Евгений Васильевич, Саранск

1. Абасов Б.Х., Гаджиев Д., Юсубов В.И. Органосохраняющиеоперации при травматических повреждениях селезенки // Вестник хирургии -1982.-№6,- С. 84-88.

2. Абрамов В.В. Взаимодействие иммунных и нервных систем. -Новосибирск: Наука. Сиб. отд. НИС, 1988. - 166 с.

3. Абрамов В.В. Интеграция иммунной и нервной систем // иммунология, 1999. №3. - С. 62-64.

4. Авакян О.М. Фармакологическая регуляция высвобождения и захвата норадреналина. Ереван, 1973. - 120 с.

5. Автандилов Г.Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностике гистоцитопатологии. М.: РМАПО. - 1996. - 256 с.

6. Анчикова И.В. Количественное люминесцентно-гистохимическое исследование лимфатических узлов // Морфология и люминесцентная гистохимия. Чебоксары. - 1983. - С. 60-62.

7. Апарцин К.А. Аутотрансплантация ткани селезенки при вынужденной спленэктомии в условиях хирургической инфекции живота / Григорьев Е.Г., Коган А.С. Хирургия тяжелых гнойных процессов.-Новосибирск: Наука, 2000.- Гл.8.- С.193-209

8. Арион В.Я. Сорбционные методы детоксикации и иммунокоррекции в медицине. Харьков, 1982. С. 216-217.

9. Арцимович Н.Г., Корнев А.В., Заяшникова Т.С. Роль симпато-адреналовой системы в регуляции иммунитета // XVIII съезд физиологического общества им. И.П. Павлова. Казань, 2001. — С. 304.

10. Балмасова И.П., Кветной И.М., Смородинов А.В. Эндокриннаяфункция апудоцитов иммунокомпетентных органов при некоторых формах иммунного ответа // Бюлл. эксп. биол. 1983. - № 9. - С.78-80.

11. Баиров Г.А., Кудрявцев В.А. // Вестн. хир.-1971-№ 10.- С. 102 -103.

12. Белоусов Ю.Б., Кривонкин К.Ю. Роль серотонина и его рецепторов в генезе артериальной гипертонии // Кардиология. 1992. - №11. - С. 5-10.

13. Благитко Е.М., Толстых Г.Н. Органосохраняющие операции при хирургических заболеваниях селезенки // Анн. Хир. Гепатол.- 2000.- Т.5, №2,-С.267

14. Бобров О.Е. Воизянов С.А. // Клин. хир. -1986.- №6.-С.-75.

15. Бойчук Н. В., Исламов Р. Р., Кузнецов С. Л., Улумбеков Э. Г., Челышев Ю. А. "Гистология. Учебник для вузов" // ГЭОТАР — МЕД, 2001 г. -672 с.

16. Бочкарева А.Г. Влияние болевого стресса и КВЧ-поля на морфофункциональное состояние селезенки крыс. // Автореф. дисс. канд. биол. наук, Саранск 2002, 25с.

17. Бочкарев В.А., Гордон Д.С., Андреев С.Н. Возрастной спектр тучных клеток. // Морфология и гистохимия тканей в норме, патологии и эксперименте. Чебоксары. - 1992. - С. 98-103.

18. Бутенко ГЛ., Харази А.И. Действие спленэктомии на развитие лимфоидных органов в неонатальном периоде у животных // Физиология. — 1991. Т.35 - №5. - С. 78-81.

19. Быков В.Л. Секреторные механизмы и секреторные продукты тучных клеток // Морфология, 1999. Т. 115. - №2. - С. 64-72.

20. Быков В.Л. Развитие и гетерогенность тучных клеток // Морфология , 2000.-№2.-С.86-92.

21. Вальдман А.В., Козловская М.М., Ашмарин И.П. и др. Центральные эффекты тетрапептида тафцина // Бюл. эксперим. биол. и мед. — 1981. -Т.92, №7.-С.31-33.

22. Вайсфельд И.Л., Кассиль Г.Н. Гистамин в биохимии и физиологии. М.: Наука, 1981. - 80 с.

23. Виноградов С.Ю., Погорелов Ю.В., Торшилова И.Ю. Функциональная морфология нейромедиаторного биоаминного обеспечения щитовидной железы в процессе беременности // Вестник Ивановской медицинской академии. 1996. - Т.7. - №1. - С. 23-27.

24. Гаджиев Дж.Н. Сберегающие операции при травмах селезенки // Анн. Хир. Гепатол.- 2000.- Т.5, №2.- С.271

25. Гарвин Л.И. // Вестн. Хир.-1948-№4.-С. 57-58.

26. Гогин Е.Е., Рутковский В.В. Инфекционные сложнения у больных с заболеваниями крови после спленэктомии // Клин. Мед. — 1985. №5. - С. 9598

27. Гордон Б.М. Интегральная характеристика динамики процесса гистаминообеспечения тимуса в первый час контакта организма с растворимым антигеном // Научная конференция молодых ученых и специалитов города Чебоксары. Чебоксары, 1990. - С. 83.

28. Гордон Д.С., Сергеева В.Е., Зеленова И.Г. Нейромедиаторы лимфоидных органов. // Л., Наука, 1982. 128с.

29. Гордон Д.С., Сергеева В.Е., Гунин А.Г. и др. Возможная идентичность люминесцирующих гранулярных клеток тимуса, селезенки и лимфоузлов с дендритными макрофагами // Сб. науч. трудов. — Чебоксары: Чувашек, госпедун-т им. И.Я. Яковлева, 2001. С. 19-25.

30. Гублер Е.В., Генкин А.А. Применение критериев непараметрической статистики для оценки различий двух групп наблюдений в медикобиологических исследованиях. М., 1973. - С. 3-100.

31. Девойно Л.В., Ильюченок Р.Ю. Моноаминергические системы в регуляции иммунной реакции. Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1983. - 120 с.

32. Денисенко П.П., Чередниченко Р.П. Функциональное состояние холино- и адренореактивных систем, циклические нуклеотиды и интенсивность иммунных реакций // Физиология иммунного гомеостаза. -Ростов н/Д, 1977. С. 60-61.

33. Денисенко П.П., Чередниченко Р.П. Участие холино- и адренореактивных систем в регуляции интенсивности иммунных реакций // Материалы XIII съезда Всесоюз. физиологического об-ва им. И.П.Павлова. -Кишенев. 1979. - Т. I. - С. 237-238.

34. Дурдыев М.Д., Пашутин С.Б. Изменение иммунологических показателей после спленэктомии и реимплантация фрагментов селезенки // Бюл. экспер. биол. и мед. 1985. — Т.99. - №6. - С. 719-720.

35. Дюговская Л.А. Роль гистамина в функции супрессорной активности тимоцитов // Актуальные проблемы современной патофизиологии. -Киев, 1981.-С. 126-127.

36. Елисеева Л.С., Стефанович Л.Е., Попова B.C. Специфическое связывание серотонина клетками интактных и иммунизированных мышей // Регуляция иммунного гомеостаза. Л., 1982. - С. 139-140.

37. Епифанов Н.С. удаление селезенки и риск развития тяжелых инфекций у детей // педиатрия. — 1991. — ЗЗю — С.96-99.

38. Ефименко Н.А., Розанов В.Е., Халимбеков Р.К. и др. Органосохраняющие операции при заболеваниях и поврежденниях селезенки // Анн. Хир. Гепатол.- 2000.- Т.5, №2.- С.274-275

39. Зеленова И.Г. Адренэргические структуры лимфоидных органов млекопитающих в разные периоды эмбрионального развития // Макро- и микроструктура тканей в норме, патологии и эксперименте. — Чебоксары, 1978. -С. 8-14.

40. Иванчев И., Трифонов Г., Христов X., и др. // Вестн.хир.- 1979.7.С.104-105.

41. Игнатьев В.Г., Михайлова В.М. Диагностика и лечение повреждений селезенеки // Тез. докл. Науч.-практ. конф., поев. 60-летию сан. авиации Якутии.- Якутск: Изд-во Якут. Ун-та, 2000.- С.92-94

42. Калмыков B.JI. Современные методы количественного определения катехоламинов и серотонина // Лаб. дело. 1982. - №7. - С. 31-36.

43. Карр Я., Хэннок Б., Ленри Л., Лимфоретикулярные болезни // М.,1980.

44. Каримова М.Х., Кудрин B.C., Гайнетдинов P.P. Оценка содержания катехоламинов в крови у практически здоровых людей // Лаб. дело. 1993. -№2. - С. 33-35. 93.

45. Карнаухов В.Н. Люминесцентный спектральный анализ клетки. -М.: Наука, 1978.-208 с.

46. Кветной И.М. APUD-система (структурно-функциональная организация, биологическое значение в норме и патологии) // Успехи физиологических наук. 1987. - Т. 18. - №1. - С. 84-85.

47. Клименко Н.А., Пышнов Г.Ю. Механизмы модулирующего влияния тучных клеток на лейкоцитарную реакцию при воспалении. // Бюл. эксп. биол. и мед, 1993.- т. 115, вып. 1. — С. 29-30.

48. Клименко Н.А. Траско С.В. Роль тучных клеток в репаративных явлениях при воспалении. // Бюл. эксп. биол. и мед, 1995.- т. 119, вып. 3. — С. 262-265.

49. Козловский И.И. Психофизиологическое и нейрофармакологическое исследование синтетического гептапептида селанка: Автореф. дис. д-ра мед. наук. М., 2000. — 61 с.

50. Королев В.Ф. // Вестн.хир.- 1981- №8.- С. 57-58.

51. Крохина Е.М., Александрова П.Н. Симпатический (адренергический) компонент эффекторной иннервации сердечной мышцы // Кардиология. 1969. - № 3. - С.97-102.

52. Кузин М.И., Руднева В.Г., Дурдыев М.Д., Шимкевич JI.JI.

53. Состояние тромбоцитарного компонента гемостаза у больных после спленэктомии и реимплантации фрагментов селезенки // гематология и трансфузиология, 1985. №8. - С. 26-29.

54. Кузин М.И., Данилов М.В., Скуба Н.Д., ДурдыевМ.Д.

55. Аутотрансплантация ткани селезенки после спленэктомии // Клин.Мед.1985.-№3 С. 34-39.

56. Кущ Н.П., Журило И.П., Кононученко В.П. Спленэктомия у детей // Хирургия. 1988. - №7. - С. 84-88.

57. Ляпина Л.А., Кондашевская М.В., Азиева Л.Д., Соболева Т.И. Комплексные соединения гепарина с белками крови и их естественные ингибиторы при спленэктомии у животных // Пат. физиология и экспериментальная терапия, 1990. №4. - С. 20-22.

58. Линдлер Д.П., Коган Э.М. Тучные клетки как регуляторы тканевого гомеостаза и их место в ряду биологических регуляторов // Архив патологии. 1976. - №8. - С. 3-13.

59. Линдлер Д.П., Поберий И.А., Розкин М.Я., Ефимов B.C. Морфометрический анализ популяции тучных клеток // Архив патологии. -1980. №6. - С. 60-64.

60. Любовцева Л.А. Люминесцентно-гистохимическое исследование аминосодержащих структур костного мозга, тимуса и крови при действии нейромедиаторов и антигенов. Чебоксары: Изд-во Чуваш, ун-та, 1993. - 100 с.

61. Макаренкова В.П, Кост Н.В., Щурин М.Р. Система дендритных клеток: роль в индукции иммунитета и в патогенезе инфекционных, аутоиммунных и онкологических заболеваний // Иммунология, 2002, №2, С. 68 -76.

62. Марков P.M., Бордуновский В.Н. // Вестн. хир.-1975.-№1.-С.76-77.

63. Машковский М.Д. Лекарственные средства. — Изд. 13 — Харьков: Торсинг, 1997. Т. 1. - С. 237-295.

64. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. Новосибирск, 1983.

65. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. -2-е изд., перераб. и доп. — Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1989. — 344 с.

66. Медуницын Н.В. Процессинг и презентация антигена макрофагами //Иммунология. 1995.-№ 3. -С.17-21.

67. Меркулова JI.M. Реакция нервной ткани крыс на быстропеременное магнитное поле высокой интенсивности (по критериям морфофункциональных изменений) // Автореф. дис. док. мед. наук — Обнинск, 1990-40 с.

68. Мироненко О.Н., Абакаров М.Х. // Врач. Дело. 1985. №11.- С. 71-74.

69. Наточин Ю.В. Архитектура физиологических функций: тот же фундамент, новые грани. // Росс. Физиологический журнал им. И.М. Сеченова №8, 2002 С. 129-143.

70. Недоспасов В.О. О патогенезе анемии после удаления селезенки в эксперименте. Автореф. дис. канд. мед. наук. Челябинск, 1971.

71. ОрлянскаяВ.Ф., Бородин И.Ф., Гудимов Б.С. и др. // Вестник хирургии, 1981 №2- С. 32-33.

72. Павловский М.П., Чуклин С.Н., Орел Г.Л. Влияние спленэктомии на иммунологическую реактивность: Обзор // Хирургия, 1986.- №6.- С.136-141.

73. Павловский М.П. Иммуногормональные последствия спленэктомии // Журнал академии мед. наук Украины, 1995. №2. — С. 311322.

74. Павлюк В.Д. Влияние спленэктомии и перевязки селезеночной артерии с органоанастомозами на гемодинамику, функции печени и аутоагрессию у больных циррозом печени. Автореф. дис. док. мед. наук. — кишенев, 1973.

75. Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Основные свойства дендритных клеток // Иммунология, 2001. №4. — С. 7-15

76. Петров Р.В., Хаитов P.M., Манько В.М., Михайлова А.А., Контроль и регуляция иммунного ответа // JL: Медицина 1981, 311с.

77. Попова Н.К., Науменко Е.В., Колпаков В.Г. Локализация серотонина и обмен. Экспериментальные подходы, применяемые при изучении его роли в поведении // Серотонин и поведение. Новосибирск: Наука, Сибирское отд., 1978. - С. 6-63.

78. Порфирьева С.А., Сергеева В.Е., Алексеев В.А. Реакция биоаминсодержащих структур тимуса и селезенки на введение гидрокортизона // Сб. трудов 1-ой Национальн. конф. РАККИ. М. - 1997. - С.501.

79. Пугачев А.Г., Горячев В.В. Влияние спленэктомии на иммунологические показатели у детей // Клин, хир., 1983. №6. — С. 13-16.

80. Пыцкий В.И., Адрианова Н.В., Артомасова А.В. Патогенез аллергических процессов // Аллергические заболевания: 2-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 1991. - С. 28-78.

81. Рожинский М.М. Постспленэктомический гипоспленизм // Вопросы клинической медицины: Сб. науч. тр. Чита, 1970. - С. 84-85.

82. Ройт А. Основы иммунологии. М.: Мир, 1991. — 327 с.

83. Рохья Б., Максимович Я.Б. Влияние нейропептида тафтсина и его производных на обмен веществ в различных структурах головного мозга // Фармакология и токсикология, 1985 Т.48, №2. - С.41-45.

84. Самсыгин С.А., Долгина Е.Н., Смирнов А.Н., Мортина С.В., Коняева О.Л., Костомарова Т.Д. Иммунный статус детей после спленэктомии по поводу травмы // Гематология и трансфузиология, 1985. №6. — С. 42-47.

85. Сапин М.Р., Этинген Л.Е. Иммунная система человека. — М.: Медицина, 1996. 302 с.

86. Сапожникова М.А., Тверитнева Л.Ф., Ильницкая Т.И. Морфологические изменения аутотрансплантатов селезенки после спенэктомии в клинике и эксперименте // Арх. Пат, 1987. №12. — С. 31—37.

87. Сафаров С.Ю. Трансплантация и искусственные органы. М., 1981.-С. 87-89.

88. Сергеева В.Е., Гунин А.Г., Гордон Д.С. Сочетание свойств макрофагов и клеток APUD-серии в моноаминсодержащих клетках тимусной дольки// Морфология, 1994. № 1-3. -С. 159-163.

89. Сергеева В.Е., Спирин И.В. Реакция серотонинсодержащих структур тимуса на введение соматотропного гормона // Российск. морфол. Ведомости, 1999. -№ 1-2. С. 133.

90. Скуба Н.Д. Дурдыев М.Д. Морфологическая оценка ауторансплантации фрагментов селезенки // Бюл. Эксп. Биол, 1984.- №8.- С. 237-240.

91. Смирнова Т.С., Ягмуров О.Д. Строение и функции селезенки // Морфология, 1993. Т. 104. - № 5-6. - С. 142-160.

92. Смородченоко А.Т. Лимфатические узлы в норме и при антигенных воздействиях: Учеб. пособие / Чуваш, ун-т. Чебоксары, 1996. - 76 с.

93. Соломонова В.Г., Сорокин Л.В. Взаимодействие медиаторных систем, гипотезы, факты // Физиол. и биохимия медиаторных процессов: Тез. докл. 5-ой Всесоюз. конф. М., 1990. - С. 281.

94. Стоменская И.С., Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю., Москвичев Е.В., Шумилова Е.Б., Лаврентьев С.В. Влияние спленэктомии на морфофункциональное состояние надпочечников// Аллергология и иммунология, 2003 Т. 4, №2- С. 145-146.

95. Стручко Г.Ю. Морфофункциональное исследование тимуса и иммунобиохимических показателей крови после спленэктомии и иммунокоррекции // Автореф. дис. докт. мед. наук.- Саранск, 2003 .-23с.

96. Судаков К.В. Нормальная физиология: курс физиологиифункциональных систем. // Москва, Медицинское информационное агентство, 1999.-718с.

97. Сысоева Л.А. Люминесцентно-гистохимическая характеристика ранней реакции моноаминсодержащих структур селезенки на антигенное воздействие: Автореф. дис. канд. биол. наук. Чебоксары, 1986. - 23 с.

98. Тенюков В.Б. Статус биогенных аминов в тканевых структурах легких в норме и эксперименте: Автореф. дис. канд. мед. наук. М., 1981.-20 с.

99. Тихомирова В. Д., Орлов М.Н., Медведев П.Б. и др. Аутотрансплантация ткани селезенки у детей // Вестн. Хир, 1988.- №11.- С.79-81

100. Томилец В.А. Регулирующее действие цАМФ и гистамина на иммунный ответ, опосредованное поверхностными рецепторами клеток // Гигиена и эпидемиолоия, микробиология, иммунология, 1981. №3. - С. 265270.

101. Труфакин В.А. К оценке структурно-функциональных отношений в центральных органах иммунитета // Функциональная морфология лимфатических узлов и других органов иммунной системы и роль в иммунных процессах. М., 1983. - С. 171-172.

102. Фокина Т.В., Чистова Л.В., Лонтьев А.Ф., Шкаренкова Л.В. // Вопросы материнства и детсва, 1979. №8. - С. 70.

103. Фриндерштейн А.Я., Лурия Е.Л. Клеточные основы кроветворного микроокружения // М. 1980.

104. Хавинсон В.Х., Кветной И.М., Ашмарин И.П., Пептидергическая регуляция гомеостаза // Успехи современной биологии, 2002 №6-С. 190-203.

105. Хаитов P.M., Алексеев Л.П., Система генов HLA и регуляция иммунного ответа // Аллергия, астма и клиническая иммунология, 2002- №8-С. 7-16.

106. Цыбэрнэ К. А., Барган Г.А., Кандиба С.И. Аутолиенотрансплантация //Вестн. хир., 1989-№5-С.41-45.

107. Чернух A.M. Воспаление. М.: Медицина, 1979. - 448 с.

108. Шалимов А.А., Шалимов С.А., Земсков B.C., Подпрятов С.Е. // Вестн. хир., 1979. №7. - С. 37-40.

109. ПО.Шапкин Ю.Г., Чалык Ю.В., Масляков В.В. Возможности и результаты органосохраняющих операций при травмах селезенки // Вестн. хир, 2000, С.41-42

110. Ш.Шиляев P.P., Виноградов С.Ю., Виноградова Е.Е. Нейромедиаторные биоамины и их значение в диагностике заболеваний у детей // Вестник Ивановской мед. академии, 1996. Т.1. - №2. - С. 81-88.

111. Юденфренд С. Флуоресцентный анализ в биологии и медицине. -М.: Мир, 1965.-484 с.

112. ПЗ.Юрина Н.А. Тучные клетки: их роль в организме // Москва, 1977-Изд. ун-та Др. нар. 75с.

113. Юсин В.А., Сахарова Н.Г., Асеева Н.Д. Влияние серотонина на состояние тимико-лимфатической системы // Здравоохранение Туркменистана, 1972.-№6.-С. 11-13.

114. Яглов В.В. Актуальные проблемы биологии диффузной эндокринной системы // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии, 1989. -Т. 96.-Вып. 1.-С. 14-25.

115. Пб.Ялкут С.И., Котова С.А. Циклические нуклеотиды и особенности гомеостаза при аллергии. Киев, 1987. - С. 47.

116. Aisher A., Shu G.L., Magaletti D., et al., // J.Immunol., 1999.-Vol. 163.- P. 5786-5795.

117. A1-Jmara L.J., Dale M.M. The inhibitory effect of histamine on lynphoid tissue proliferation in mice // Cell. Immunol., 1985. V.91. - N.l. - P.284-281.

118. Alves H.J., Viana G., Magalhaes M.M., Arantes R.M., Coelho P.M. Cunha-Melo J.R. Kinetics of neovaskularisatione of spleen autotransplants in mice // Jor. of anat., 1999.-Oct. 195, P. 387-392

119. Altamura M., Caradonna L., Amati L., Pellegrino N.M. Splenectomy and sepsis: the role of the spleen in the immune-mediated bacterial clearace // Immunopharm, Immunotox, 2001. — V.23, №2. — P. 153-161

120. Akhter N., Robayashi M., Hoshino T. Avian epidermis contains AMPase and la- positive Langergans-like cells // Cell. Tissue. — Res. 1993. — Jap. — V. 271.-№ 1.-P.103-106.

121. Arraug J.-M., Devaux В., Chodkiewicz J.-P. H3-receptors control histamin reliase in human brain // J. Neurochem., 1988. V.51. - N. 1. - P. 105-108.

122. Axelrod J. The uptake and release catecholamine and the effect of drugs // J. Prog. Brain. Res. Elseries. Publ. Amsterdam., 1964. V.8. - P.81-89.

123. Bado A., Moiro L., Laigneau S.-P. Lewin M. J. Pharmacological characteri-zation of histamine Нз-receptors in isolated rabbit gaster glands // Amer. J. Physiol., 1992. V.262. - N.l. - P.656-667.

124. Banchereau J., Steinman R.M. // Ibid., 1998.- Vol.392- P. 245-252.

125. Bar-Shavit Z., Bursuber I., Goldman R Functional tuftsin binding sites on macrophage-like tumor line P388D1 and on bone marrow cells differentiated in vitro into mononuclear phagocytes // Molecular Cellular Biochem., 1980. Vol.30, №3. —P. 151-155.

126. Benoist S. Median and long-term complications of splenectomy // Ann. Chir, 2000. V. 125, №4. - P. 317-324.

127. Berg S.F., Mjaaland S., Fossum S. Comparing macrophages and dendritic leukocytes as antigen-presenting cells for humoral responses in vivo by antigen targeting // Eur. J. Immunol.,1994. V.24. - N.6. - P. 1262-1268.

128. Bergendorff A., Uvnas B. Storage properties of rat mast cells granules in vitro. // Acta Physiol. Scand., 1973 Vol. 87- P.213-222.

129. Bernton E., Hoover D., Galloway R., Popp K. Adaptation to chronic stress in military trainess. Adrenal androgens, testosterone, glukocorticoids, IGF-1 and immune function // Ann. NY Acad. Sci., 1995. V. 135, №6. - P. 5-8.

130. Bjorklund A., Nobin A., Stenevi H. Regeneration of central serotonin neu-rons after axonal degeneration induced by 5,6-dihydrooxytryptamine // Brain Res., 1973. V.50. - N.l. - P.214-220.

131. Brands W., Kunz K. // Wild. J. Surg., 1981. V.5.- P.427.

132. Brandt CT, Maciel DT, Caneca CM, Araujo LB. Autotransplant of spleen tissue in children with shistosomosis: evalution of splenic function after splenosis // Mem Inst Oswaldo Cruz, 2001, V. 96, P.l 17 122.

133. Burlui D., Constantinescu C., Dragoncea C. // Chirurgia, 1979. V. 28. -P. 93-101.

134. Bump N.J., Najjar V.A. Tuftsin (Thr-Lys-Pro-Arg), a natural modulator of macrophage activity further studies // Molecular Cellular Biochem., 1984. — Vol.63, №2. -P.137-142.

135. Bunce J.V., Mason D.W. A spleen-thymus interaction is involved in the tolerization of thymocytes to xenogenetic erythrocytes // Eur. J. Immunol., 1983. -13, №1-P. 85-87.

136. Burtain W.L., lynn H.B.// Surgery., 1979 -V.86 P. 748-760.

137. Cario W.R., Май H., Specht U. // Pediatr., 1986. V.25, №2-3 - P. 239-249.

138. Chairof E.L., mcCabe C.J. // Amer. J. Surg., 1985. V.149, №4 -P.534-539.

139. Chu D.Z., Nishioka K. Tuftsin increases survival in murine peritoneal carcinomatosis. // J. Biol. Response Mod., 1990. Vol.9, №2. - P.264-267.

140. Claret I., Morales L., Monetr A. // J. Pediet. Surg., 1975. V. 10. - P.388.397

141. Constantopoulos A., Najjar V.A., Wish J.B. // Amer. J. Dis. Child., 1973.-V. 125.-P. 663-665.

142. Cooney DR., Swanson SE, Dearth JC, Dewanjee MK, Telander RL. Heterotopic splenic autotransplantation in prevention of overwhelming postsplenectomy infection. // J Pediatr Surg, 1979 Jun- V.14, №3- P.337-342.

143. Coronato S., Laguens G.E., Spinelli O.M., Salas M.A., Di Girolamo W. Celulas dendriticas у su papel en patologia (Dendritic cells and their role in pathology) // Medicina (B. Aires)., 1998. V.58. - N.2. - P.209-218.

144. Craig S.S., Irani A.M., Metcalfe D.D., Shwarts L.B. Ultrastructural localization of heparin to human mast cells of the MCTC and MCT types by labeling with antithrombin III gold. // Lab. Invest., 1993 Vol. 69. - P. 552-561.

145. Cross S.A., Ewen S.W., Rost F.W. A study of methods available for cyto-chemical localization of histamine by fluorescence induced with o-phtaldehyde or acetaldehyde // Histochem. J., 1971.- V.3. N.6. - P.471 -476.

146. Dagan S., Gottlieb P., Fridkin M. The tuftsin receptors // Academic., 1986.-Vol.3. P.243-280.

147. David Z.J., Nishioka K., Tawfik E-H. Effects of tuftsin on postsplenectomy sepsis // Surgery., 1985. Vol.97, №6. - P.701-706.

148. Davis A.L., McKenzie J.L., Hart D.N. HLA-DR-positive leucocyte subpopulations in human skin include dendritic cells, macrophages, and CD7-negative T cells // J. Immunol., 1988. V.65. - N.4. - P.573-581

149. Durug M., Heberer M., Wadstrom J. // Helv. chir. Acta, 1982. V. 49. -P. 795-798.

150. Ehrenreich H., Burd P.D., Rottem M. et al. Endothelins belong to the assortment of mast cells — derived and mast cells — bound cytokines. // New Biol., 1992.-Vol.4.-P. 147-156.

151. Eikelenboom P. Dendritic cells in the rat spleen follicles. A combined immuno- and enzyme histochemical study. // Cell Tissue Res, 1978 Jun -P.79-87.

152. Eikelenboom P, Nassy JJ, Post J, Versteeg JC, Langevoort HL. The histogenesis of lymph nodes in rat and rabbit. // Anat Rec, 1978 Feb P. 201-15.

153. Ejstrud P., Kristensen В., Hansen J.B. et al. Risk and patterns of bacteraemia after splenectomy: a population-based study // Scand. J. Infect. Dis., 2000. Vol. 32, №5. - P. 521-525.

154. Falk В., Hillarp N.A., Thieme G., Torp A. Fluorescence of catecholamines and related compounds condensed with formaldehyde // J. Histochem. Cyto-chem., 1962. V.10. - P.348-354.

155. Florentin I., Chung V., Martinez J. In vitro immunopharmacological properties of tuftsin (Thr-Lys-Pro-Arg) and some analogues // Methods Finding Experimental Clin. Pharmacol., 1986. Vol.8, №2. - P. 73.

156. Gallucci S., Lolkema M., Matzinger P. //Nat.Med., 1999.-V.5 -P.12401255.

157. Genetet N., sapene M., Genetet B. // Nouv. Presse med., 1981. V. 11. — P. 433-437.

158. Gray D, Kumararatne DS, Lortan J, Khan M, MacLennan 1С. Relation of intra-splenic migration of marginal zone В cells to antigen localization on follicular dendritic cells.// Immunology, 1984 Aug.- P.659-669.

159. Greco R.S. // Wild. J. Surg., 1981.-V. 90- P.430.

160. Gruber B.L., Marchese M.J., Kew R.R. Transforming growth factor — beta 1 mediates mast cells chemotaxis. // J. Immunol., 1994.- Vol. 152.- P. 5860 -5867.

161. Hansen К. Singer D.B. Asplenic-hyposplenic overwhelming sepsis: postsplenectomy sepsis revised // Pediatric & Developmental Pathology , 2001. Mar.-Apr.-Vol. 4 №2 -P.105-121.

162. Hellstrand K. Histamine in cancer immunotherapy: a preclinical background. // Semin. Oncol., 2002-Jun.-P.35-40.

163. Huchet R., Graudjon D. Histamino-induced regulation of IL-2 synthesis in man: Characterization of two pathways of inhibition // Ann. Jnst. Pastenz. Immunol., 1988. V.139. - N5. - P.485-489.

164. Jakobs KH, Schultz G. Signal transformation involving alpha-adrenoceptors. // J Cardiovasc Pharmacol., 1982. №4 - Suppl. 1- P. 63-67.

165. Jakubovsky J., Hromec A. Current knowlege on the functional morphology of the human spleen // Bratisl Lek Listy, 1998 №6 - P. 287-290

166. Katz S. Berlats D. // Amer. J. surg., 1981. -V.50- P.711-716.

167. Kitchens C.S. The syndrome of post-splenectomy fulminant sepsis. Case report and review of the literature // Am. J. Med. Sci., 1977. V. 274, №3. -P. 303-310.

168. Knezevic S, Stefanovic D, Petrovic M, Djordjevic Z, Matic S, Artiko V, Milovanovic A, Popovic M. Allotransplantation of the spleen // Acta Chir Iugosl 2002-V.49- P. 101-106.

169. Koren A., Haasz R., Tiatler A., Katzuni E. // Amer. J, Dis. Child., 1984.-V. 1381-P. 53-55.

170. Kovalchuk L.V., Sotnikova N.L. Participation of spleen cells in regulation the production of macrophage migration inhibitory factor in mice // Bui. exp. biol. and med., 1981. -V. 91 P. 335-338.

171. Kragballe K., Lanng N.J., Soiling J., Ellegaard J. // Scand. J. haemat., 1981.-V. 27.-P. 271-278.

172. Krivit W. Amer. J. Haemat., 1977. V.2. - P. 193-201.

173. Kubo S., Rodriguez T.Jr., Roh M.S. Stimulation of phagocytic activity of murine Kupffer cells by tuftsin // Hepatology., 1994. Vol. 19, №4. - P. 10441049.

174. Kumar A., Cleveland R.P. Immunoregulatory effects of cimetidine. Ingibi-tion of supressor cell effects function in vivo // Immunofarmacol. and immunotoxicol., 1988. V. 10. - N3. - P.327-332.

175. Lanng N.J., Buskjoer L., Lamn L.U. // Ibid., 1983. V. 30. - P. 194200.

176. Leemans R., Beekhuis H., Timens W., The TH., Klasen HJ. Fc-receptor function after human splenic allotransplantation. // Br J Surg, 1996 №4 - P.543-546.

177. Leemans R, Manson, Snijder JA, Smit JW, Klasen HJ, The TH, Timens W. Immune response capacity after human splenic allotransplantation: restoration of response to individual pneumococcal vaccine subtypes // Ann Surg., 1999. V. 229-№2-P. 279-285.

178. Leitner W, Bergmann ES, Thalhamer J. Regeneration of splenic stromal elements. // Res Exp Med (Berl), 1994 №4 - P.221-230.

179. Levy Y, Miko I, Hauck M, Mathesz K, Furka I, Orda R. Effect of omental angiogenic lipid factor on revascularization of autotransplanted spleen in dogs. // Eur Surg Res, 1998 №2 - P.138-143.

180. Lishajko F. Incorporation of biogenic amines into phospholipids studied in two-phase-system. // Acta Physiol Scand, 1984 Nov - P. 387-396.

181. Llende M., Santiago-Delpin E.A., Lavergne D. Immunological consequences of splenectomy: a review // J. surg. Res., 1986. — Vol. 40. — P. 85-94.

182. Luo X.-X., Tan Y.-H., Sheng B.-H. Histamine H3-receptor inhibit sympathetic neurotrous mision in guinea pig myocardium // Eur. J. Pharmacol., 1991. V.204. - N3. - P.311-314.

183. Lynch A.M., Kapila R. Overwhelming postsplenectomy infection // Infect. Dis. Clin. N. Amer., 1996. Vol. 10, №4. - P. 693-707.

184. Machesky K.K., Cushing R.D. Overwhelming postsplenectomy infection in patient with penicillin-resistant Streptococcus pneumoniae., 1998. — Vol. 7, №2.-P. 178-180.

185. Mandalenari-Lambrou K., Vrachnou E., Calogeropoulou C. // Acta Haemat., 1987. V. 78, №4. - P. 243- 248.

186. Marques RG, Petroianu A, Coelho JM, Portela MC. Regeneration of splenic autotransplants.// Ann Hematol, 2002 Nov.- Vol.81, №11.- P. 622-626.

187. Mecheri S. New insights into the immunoregulatory functions of mast cells. // Rev. fr. allerg. et immunol., 2002.- Vol. 42 №1. P.6-10.

188. Meger J.A., Meger J.D. Splenectomy and the thymic involution of increasing age // Arch. Surg., 1978. Vol. 113, №8. - P. 972-975.

189. Meinenger C.J., Yano H., Rottapel R., et al. The c-kit receptor ligand functions as a must cell chemoattractant.// Blood, 1992- V.79 P.958-963.

190. Miko I., Brath E., Furka I., Kovacs J., Kelvin D., Zhong R., Spleen autotransplantation in mice: a novel experimental model for immunology study // Microsurgery, 2001- №4- P. 140-142

191. Miller Т., Scott L., Steward E. // J. Clin. Invest., 1978. V.61. - P. 964-972.

192. Morgenstern L. // Amer. J. chir, 1977. V. 14. - P. 121-126.

193. Nairn J.O., Lanzafame R.J., van Oss C.J. The effect of anti-tuftsin antibody on phagocytosis of bacteria by human neutrophyls // Immunol. Invest., 1991. Vol.20, №5-6. - P.499-506.

194. Nair R.M.G., Ponce B, Fudenberg H.H. Interaction of radiolabeled tuftsin with human neutrophils // Immunochemistry., 1978. Vol.15, №12. -P.901-907.

195. Najjar V.A., Nishioka K. Tuftsin, a natural phagocytosis stimulating peptide//Nature., 1970. Vol. 228.-P.261-267.

196. Najjar V.A. // Klin. Biol., 1981.-V. 59.-P. 134-138.

197. Nilsson G., Butterfleld J.H., Nilsson K., Siegbahan A. Stem cell factor for is a chemotactic factor for human must cell // J. Immunol., 1994, V.153, P. 3717-3723.

198. Nishioka K., Constantinopulus A. Characteristics and isolation of the phagocytosis-stimulating peptide, tuftsin // Biochem. Biophis. Acta., 1973. -Vol.310.-P. 217-229.

199. Nishioka K. Anti-tumor effect of the physiological tetrapeptide, tuftsin // Brit. J. Cancer., 1979. Vol.39. - P.342-345.

200. Nishioka K., Wagle J. R., Minter A.M. Tuftsin-enhanced thimidine incorporation by murine monocytes. // Int. J. Immunopharmacol., 1990. Vol.12, №8. - P.905-908.

201. Pabst R. Regeneration or autotransplanted splenic fragments: basicimmunological and clinical relevance // Clin. Exp. Immunol., 1999. Vol.117. -P.423-424.

202. Pawan K., Ivanov B.B., Kabilan L. Constraction of a synthetic immunogen: use of the natural immunomodulator polytuftsin in malaria vaccines against RES A antigen of Plasmodium falciparum // Vaccine., 1994. Vol. 12, №9. -P.819-824.

203. Phillips J.H., Babcock G.F, Nishioka K. Tuftsin: a naturally occurring immunopotenting factor. In vitro enhancement of murine natural cell-mediated cytotoxicity // J. Immunol., 1981. Vol. 126, №3. - P. 915-921.

204. Piccardo A, Santoro E, Masini R, Bartolomeo S, Pramaggiore P, Boschi M. A splenic autografts in posttraumatic splenectomies // Minerva Chir., 1999, Jan — Feb; V. 54, №1-2, P. 31-35.

205. Pisters PW, Pachter HL. Autologous splenic transplantation for splenic trauma. // Ann Surg, 1994 V. 219, №3 -P. 225-235.

206. Power RE, Kay EW, Bouchier-Hayes D. Exogenous and endogenous angiogenic stimuli do not augment splenic autotransplantation. // Eur J Surg, 2002-V. 168, №4- P. 247-250

207. Price L.E., Norman J.C., Ridley A.J., Koffer A. The small GTPases Rac and Rho as regulators of secretion in mast cells. // Curr. Biol., 1995. Vol. 5. — P. 68-73.

208. Price R.E., Templeton J.W.,Smith R. Modulation of intracellular survival of Brucells abortus by tuftsin and muramiyl dipeptide // Vet. Immunol. Immunopathol., 1993. Vol.36, №3. - P.265-273.

209. Reed J.A., Albino A.P., McNutt N.S. // Human cutaneus mast cells express basic fibroblast growth factor/ // Lab. Invest, 1995. Vol. 72 - P.215-222.

210. Rodriguez Gomez M., Oehler U., Helpar B. Fulminant infection outcome after splenectomy // Patholog., 1997. Vol. 18, №3. - P. 257-260.

211. Rose A.T., Newman M.I., Debelak J. et al. The incidence of splenectomy is decreasing: lessons learned from trauma e xperience // Amer. Surg., 2000. Vol. 66, №5. - P. 481-486.

212. Ruger В., Dunbar P.R., Hasan Q. et al. Human mast cells produce type VIII collagen in vivo. // Int Jur. Exp. Pathol., 1994. Vol. 75 - P. 397-404.

213. Rusu U.M., Constantin C. Ultrastructural changes of the hypertrophic epithelial cells in the thymus of splenectomized chickens. // Thymus, 1981. V. 3(4-5).-P. 213-222.

214. Salinas Payer J.C., Navarro Z.M., Revilla M.J.M. // Cirurgia esp., 1982. -V.36.-P. 121-126.

215. Schlicker E., Betz R., Gothert M. Histamine Нз-receptor mediated inhibi-tion of serotonin reliase in the rat brain cortex // Arch. Pharmacol., 1988. -V.337. N5. - P.588-590.

216. Schnaper H.W., Anne T.M., Roly Rh.H. A role for histamine type II (H2) receptor binding in production of the lymphokine, soluble immune response supres-sor // Eur. J. Immunol., 1987. V.139. - N4. - P.l 185-1190.

217. Schulkind M.K., Ellis E.F., Smith R.T. Effect of antibdody upon clearance of I 125-labelled pneumococci by the spleen and liver // Pediatr. J. Res., 1967.-№ l.-P. 178-184.

218. Schultz G, Jakobs KH, Hofmann F. Action principles of hormones and neurotransmitters // Arzneimittelforschung. 1980- №30-Vol. 11 a -P. 1981 -1986.

219. Schwartz L., Huff T. Biology of mast cells and basophils. In Allergy: Principes and Practice 4ht. // St. Louis , Mosby — Year Books Inc., 1993.- P 135168.

220. Schwartz S. The Spleen // Schwartz S.I. Principles of Surgery. New York: McGraw-Hill, 1994. - 6th ed. - P. 1433-1447.

221. Selby C., Hart S., Ispahani P., Toghill P.J. Bacteraemia in adults after splenectomy or splenic irradiation // Q. J. Med., 1987. — Vol.63, №242. — P. 523530.

222. Sorbo J., Jakobsson A., Nurrby K. Mast cells histamine is angiogenetic through receptors for histamine land histamine 2. // Int.J. Exp. Pathol., 1994.- Vol. 75.- P. 43-50.

223. Spelman D. Prevention of overwhelming sepsis in asplenic patients: could do better // Lancet, 2001. V. 357

224. Stabinsky Y., Gottlieb P., Zakuth Z. Specific binding sites for the phagocytosis stimulation peptide tuftsin on human polymorphonuclear leukocytes and monocytes // Biochem. Biophis. Research Communication., 1978. Vol.83, №2.-P. 599-606.

225. Staykova M., Kozovska M., Kisarian N., Goranov J. Aggravation of experi-mental allergic encefalomyelitis by cimetidine // Ann. Jnst. Pastenz. Immunol., 1988. V.13. - N5. - P.501-505.

226. Shortman K., Saunder D., Vremek D. Thymic dendritic cells: developmental and functional relationships to T cells // Cell. Biochem., 1995. — Suppl. 21a. — P. 3.

227. Sumaraju V., Smith LG, Smith SM Infectious complications in asplenic hosts // Infect. Dis. Clin. North Am., 2001. V. 15, №2 - P. 551-565

228. Szendroi T, Miko I, Hajdu Z, Acs G, Kathy S, Furka I, Szabo L. Splenic autotransplantation after abdominal trauma in childhood. Clinical and experimental data.// Acta Chir Hung, 1997- V.36, №1-4- P.349-351

229. Tang WH, Wu FL, Huang MK, Friess H. Splenic tissue autotransplantation in rabbits: no restoration of host defense. // Langenbecks Arch Surg, 2003 —Jan.-P.379-385.

230. Thompson H.L., Shultman E.S., Matcalfe D.D. Identification of chondroitin sulfate in human lung mast cells. // J.Immunol., 1988.- Vol. 140.-P. 2708-2713.

231. Tricarico A, Tartaglia A, Sessa R, Taddeo F, Sessa E, Bardi U, Triscino GG. Repair of splenic lesions with video-laparoscopy // Minerva Chir, 1993 Nov; V. 48-P. 1245-1248.

232. Trigg M. // S. Med. J., 1976. V. 72. - P. 593-599.

233. Tritsch G. L., Niswander P.W. Purine salvage pathway enzyme activity in tuftsin-stimulated macrofages // Ann. N.Y. Acad. Sci., 1983. Vol. 419. - P. 8792.

234. Tschakarov S., Mateev V, Tzekov G, Mitov A. Experimental and clinical results of autotransplantation of part of the spleen // Z Exp Chir, 1975-V.8, №5- P. 288-292.

235. Urata Y., Hasegawa H., Shicano M. et al. A fatal case of overwhelming postsplenectomy infection syndrome developing 10 years after splenectomy // Nihon Rinsho Meneky Kaishi., 1997. Vol.20, №3. - P. 184-190.

236. Waghorn D.J. A study of 42 episodes of overwhelming postsplenectomy infection: is current guidance for asplenic individuals being followed? //J. Infect., 1997.- Vol. 35, №3.-P. 289-294.

237. Waghorn D.J., Mayon White R.T. A study of 42 episodes of overwhelming post-splenectomy infection: is current guidance for asplenic individuals being followed? // J. Infect., 1997. Vol. 35, №3. - P. 289-294.

238. Walsh L.J., Kaminer M.S., Lazarus et al., Role of lamin in localisation of human dermal mast cell // Lad. Invest., 1991, V. 65, P. 433-439.

239. Westerhausen M., Wordorfer O., Gesser U. // Blut., 1981. V. 43, №6. -P. 345-353.

240. Westermann J, Pabst R Autotransplantation of the spleen in the rat: donor leukocytes of the splenic fragment survive implantation to migrate and proliferate in the host.// Cell Tissue Res, 1997- V.287, №2- P.357-364.

241. Wleklik M.S., Luszak M.S., Najjar V.A. Tuftsin induced necrosis activity // Mollecular Cellular Biochem., 1987. Vol.75, №2. - P. 169-174.

242. Wleklik M., Panasiak W., Luszak M. Tuftsin, a natural peptide with antiviral activity: Atructural basis of its action // Acta Virol., 1988. Vol. 32, №1. -P.79-82.

243. Wright J.B., Hambleton I.R., Thomas P.W. et al. Postsplenectomy course in homozygous sickle cell disease // J. Pediatr., 1999. Vol. 134, №3. - P. 304-309.

244. Zhang H, Chen J, Kaiser GM, Mapudengo O, Zhang J, Exton MS, Song E. The value of partial splenic autotransplantation in patients with portal hypertension: a prospective randomized study. // Arch Surg. 2002- Jan.- P.89-93.

245. Zhang Y, Ma H, Cai Z. Serum tuftsin concentration as an indicator of postoperative splenic function after spleen-preserving surgery// Zhonghua Wai Ke Za Zhi, 1996 V. 34, №8- P.479-481.

246. Zhao B, Moore WM, Lamb LS Jr, Eddy VA, Parrish RS, Almond CH, Barwick EM, Haynes JL, Brown JJ. Pneumococcal clearance function of the intact autotransplanted spleen// Arch Surg, 1995 V.130, №9-P.946-950; discussion 951

247. Zoli G, Corazza GR, D'Amato G, Bartoli R, Baldoni F, Gasbarrini G. Splenic autotransplantation after splenectomy: tuftsin activity correlates with residual splenic function.// Br J Surg, 1994- V.81, №5 -P.716-718.