Морфофункциональное состояние тимуса через 3 - 60 сут после аутолиенотрансплантации

Шумилова, Елена Борисовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфофункциональное состояние тимуса через 3 - 60 сут после аутолиенотрансплантации
ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Автореферат диссертации по теме "Морфофункциональное состояние тимуса через 3 - 60 сут после аутолиенотрансплантации"

Направахрукописи

ШУМИЛОВА ЕЛЕНА БОРИСОВНА

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ТИМУСА ЧЕРЕЗ 3-60 СУТОК ПОСЛЕ АУТОЛИЕНОТРАНСПЛАНТАЦИИ

03.00.25 - гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Саранск-2004

Работа выполнена в Чувашском государственном университете

им. И.Н. Ульянова

Научный руководитель:

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор МЕРКУЛОВА Лариса Михайловна

доктор биологических наук, профессор ВАЛИУЛЛИН Виктор Владимирович

доктор медицинских наук, профессор ПАВЛОВ Алексей Владимирович

Ведущая организация: Российский университет

дружбы народов

Защита диссертации состоится 2004 г. в

часов на заседании диссертационного совета Д 212.117.01 при Мордовском государственном университете имени Н.П. Огарева по адресу: 430000, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке университета.

Автореферат разослан 2004 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор биологических наук, профессор

П. П. Кругляков

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы.

Изучение механизмов функционирования иммунной системы является актуальнейшей медицинской проблемой (Сепиашвили Р.И., 2003). Эта актуальность обусловлена не только сиюминутными запросами клиники, но также связана с тем, что выяснение механизмов реализации иммунных функций может помочь в предотвращении развития различных заболеваний. Недостаточная изученность многих аспектов деятельности иммунной системы связана, с одной стороны, с чрезвычайно большим 'количеством типов клеток, участвующих в иммунных реакциях, а с другой - отсутствием доступных способов их идентификации в каждой конкретной ситуации. Иммунная система является уникальным защитным механизмом, обеспечивающим гомеостаз, и при контакте с любым антигеном она не только реагирует в виде специфического иммунного ответа, но и способна вовлекать в этот процесс через гуморальные факторы нервную и эндокринную системы (Ноздрачев А.Д., 2000; Труфакин В.А., 2002). Ведущая роль в таких взаимодействиях, безусловно, принадлежит тимусу, в котором присутствуют многочисленные клеточные типы, обеспечивающие процессы иммуногенеза. Морфологические перестройки в тимусе, возникающие в ответ на стресс, на различные антигены, носят адаптивный характер и сопровождаются изменением цитоархитектоники, а следовательно, и микроокружения клеток, что, по видимому, и является причиной развития иммунодефицитов в этих условиях.

сведений о клинических и иммунологии ^ш^вающихся

библиотека I

после спленэктомии, причем их патогенез, как правило, сложен и многоступенчат (Груздева О.Н., Чихман В.Н., 1999; Стручко Г.Ю., 2003; Leemans R., Manson W., 1999; Benoist S., 2000). Одной из основных причин развития постспленэктомического гипоспленизма являются разнообразные нарушения в системе гипофиз-надпочечники-тимус, которые и приводят к акцидентальной инволюции вилочковой железы, сопровождающейся усилением апоптоза лимфоцитов. (Ажипа Я.И., 1976). Одним из негативных последствий спленэктомии является нарушение функционирования гуморальной системы организма, в частности, в этих условиях происходит нарушение синтеза глюкокортикоидов, являющихся важным звеном в регуляции функций иммунной системы (Стручко Г.Ю., 2003). Кроме того, обнаружено, что, наряду с глюкокортикоидами, регуляторами апоптоза лимфоцитов в тимусе могут выступать биогенные амины, некоторые интерлейкины и другие гуморальные факторы (Потапнев М.П., 2002; Rook. Graham A.W., 1999). Несмотря на кажущуюся изученность эффектов биогенных аминов в организме, их роль в реакциях иммунологической адаптации не достаточно исследована (Дейвоно Л.В., 2003). Известно, что биогенные амины принимают участие в регуляции многочисленных процессов, в которых задействованы нервная, эндокринная и иммунная системы, вот почему любые нарушения их синтеза после вынужденного удаления селезенки неизбежно приводят к развитию различных осложнений, нередко опасных для жизни больного (Самсыгин С.А., Долгина Е.Н., 1986; Leemans R., Manson W., 1999). В связи с этим в последнее время ведется активный поиск способов их профилактики (Григорьев Е.С. и др., 1998). Одним из возможных методов компенсации иммунных функций после удаления селезенки является пересадка ее фрагмента в брюшную полость - аутолиенотрансплантация (Гешелин СА. 2000; Цецхладзе Г.Н., 2002; Knezevic S., Stefanovic D.,

Petrovic M., 2002). Однако литературные данные об эффективности такой операции весьма противоречивы, что свидетельствует о недостаточной изученности этих вопросов. По мнению одних авторов (Henneking К, Muiler С, 1994; Power RE, 2002), аутолиенотрансплантация приводит к восстановлению фильтрационной функции пересаженного фрагмента селезенки, способствует нормализации выработки антител, увеличению фагоцитарной активности клеток мононуклеарной системы и активации натуральных киллеров (Ota N, 1994; Leemans R, Beekhuis H, 1996; Tang WH, 2003). По данным других авторов, пересадка фрагмента селезенки не приводит к полной нормализации клиренса микроорганизмов (Pabst R., 1999; Smith E., De Young N.J., 1999). Кроме того, в литературе практически нет данных, описывающих морфофункциональное состояние тимуса после аутолиенотрансплантации, в частности, не известно как изменяется содержание биогенных аминов в этом органе и уровень глюкокортикоидов в крови. В связи с вышесказанным, изучение морфофункциональной характеристики тимуса после аутолиенотрансплантации и возможной роли биогенных аминов в процессах адаптации иммунной системы является актуальной научной задачей как для практической медицины, так и для запросов морфологии и иммунологии.

Цель исследования - изучить морфофункциональное состояние тимуса и уровень кортизола в крови через 3 — 60 суток после аутолиенотрансплантации.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи: 1. Изучить морфофункциональную характеристику дольки тимуса крыс через 3, 7, 15, 30, 45 и 60 суток после аутолиенотрансплантации.

2. Исследовать уровень биогенных аминов (серотонина, гистамина и катехоламинов) в люминесцирующих структурах тимуса и их соотношение через. 3, 7, 15, 30, 45 и 60 суток после аутолиенотрансплантации.

3. Изучить популяцию тучных клеток тимуса крыс через 3, 7,15, 30, 45 и 60 суток после аутолиенотрансплантации.

4. Провести морфометрическое исследование коркового и мозгового вещества дольки тимуса через 3, 7, 15, 30, 45 и 60 суток после операции.

5. Определить уровень кортизола в крови крыс через 3, 7, 15, 30, 45 и 60 суток после аутолиенотрансплантации.

Научная новизна работы:

• В исследовании впервые в динамике прослежены изменения морфологической характеристики тимуса после спленэктомии с последующей аутолиенотрансплантацией, что позволило получить ряд принципиально новых результатов. Показано, что максимально выраженные изменения в тимусе крыс наблюдаются через 7 суток и заключаются в увеличении количества и размеров люминесцирующих гранулярных клеток на фоне усиления люминесценции коркового и мозгового вещества дольки тимуса.

• Приоритетными следует считать данные о возрастании уровня серотонина и катехоламинов в структурах тимуса к 3 суткам после аутолиенотрансплантации, достижении максимальных значений через 7 суток (в 1,5-2 раза) и снижении до уровня у интактных животных через 30 суток. Уровень гистамина повышается через 3 и 7 суток и возвращается к норме через 15 суток.

• Впервые было выявлено, что в течение 60 дней после аутолиенотрансплантации соотношение (серотонин + гистамин)катехоламины ниже значений у интактных крыс, но его максимальное снижение наблюдается через 15 суток.

• Новыми следует считать данные об изменениии количества тучных клеток после аутолиенотрансплантации и связи этих изменений с уровнем биогенных аминов.

• Впервые обнаружена обратная зависимость между увеличением уровня кортизола в крови через 15-45 суток и уменьшением содержания биогенных аминов в тимоцитах коркового и мозгового вещества тимуса.

Научно-теоретическая значимость работы

Результаты исследования приближают к раскрытию механизмов межклеточных взаимоотношений в нервной, иммунной и эндокринной системах. Они позволяют выработать подходы к регуляции функционирования различных звеньев этих систем. Особенно важно, что одновременно были изучены морфологические и биохимические корреляты функциональной активности тимуса и показана связь различных характеристик тимуса и содержания кортизола в крови. Материалы исследования имеют фундаментальное значение и представляют интересс для практической медицины.

Практическая значимость работы

Материалы диссертационного исследования используются в учебном процессе на кафедре цитологии, гистологии и эмбриологии Чувашского государственного университета, а также при чтении лекций и проведении практических занятий и семинаров на кафедре терапии и семейной медицины, кафедре хирургии и травматологии ГОУ «Институт

усовершенствования врачей» МЗ ЧР. Итоги исследования отражены в опубликованных статьях и тезисах.

Основные положения, выносимые на защиту

1. После гетеротопической трансплантации фрагмента селезенки выявляются морфофункциональные изменения со стороны премедуллярных, субкапсулярных, тучных клеток, тимоцитов коркового и мозгового вещества тимуса, свидетельствующие об активации иммунных процессов: изменение морфологической структуры тимусной дольки с увеличением количества люминесцирующих гранулярных клеток.

2. Максимальное увеличение количества тучных клеток и уровня биогенных аминов в тимусной дольке крыс происходит к 7 суткам после аутолиенотрансплантации, преобладающим биогенным амином является серотонин.

3. Аутолиенотрансплантация вызывает менее выраженные и более кратковременные изменения морфологической картины тимуса и содержания биогенных аминов в его структурах по сравнению с тимусом спленэктомированных животных. Это свидетельствует о проявлении иммунокорригирующего действия аутотрансплантата фрагмента селезенки.

Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены на IV международной конференции по функциональной нейроморфологии «Колосовские чтения-2002» (С.-Петербург, 2002), V Юбилейном съезде иммунологов и аллергологов СНГ (С.-Петербург, 2003).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 работ, из них - 1 статья, 4 - в материалах международных конференций.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 131 странице машинописного текста (собственно текста - 102 страницы), состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, раздела собственных исследований, обсуждения результатов и заключения, выводов, списка литературы. Работа иллюстрирована 46 рисунками, 7 таблицами. Список литературы включает 294 источника, в том числе 153 - зарубежных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты проведены на 215 белых беспородных крысах-самцах массой 170-320 грамм. Животных содержали в соответствии с нормами и правилами обращения с лабораторными животными. Операции проводили под эфирным наркозом в асептических условиях с соблюдением правил антисептики.

Животные были разделены на 4 группы:

I - интактные (10 крыс);

II - ложнооперированные, которым проводили разрез брюшной стенки по белой линии живота, после чего операционную рану наглухо ушивали (30 крыс);

III - спленэктомированные. Удаление селезенки проводили через разрез брюшной стенки по белой линии живота. Операционную рану также наглухо ушивали (85 крыс);

IV — спленэктомированные с аутоимплантацией ткани селезенки. После спленэктомии декапсулированный кусочек ткани селезенки

кубической формы размером 4x4x4 мм3 погружали в большой сальник, ушивая кисетным швом. Рану ушивали наглухо (90 крыс).

В ходе эксперимента после аутолиенотрансплантации погибло 15% крыс, что в 2 раза ниже по сравнению со спленэктомированными животными, у 20% крыс трансплантат селезенки не обнаруживался и такие животные не исследовались (55 крыс).

Исследуемый материал - тимус, и кровь - забирали под глубоким эфирным наркозом через 3, 7, 15, 30, 45 и 60 суток после операции. Кровь подвергалась иммуноферментному исследованию. Животные и тимус взвешивались. Из тимуса готовили криостатные срезы толщиной 10 мкм. В работе использованы следующие методы.

1 .Люминесцентно-гистохимическийметодФалька -Хилларпа (Falk В., НШатр N, 1962) в модификации Е.М. Крохиной (Крохина Е.М., Александров П.Н., 1969) - для избирательного выявления серотонина и катехоламинов.

2. Люминесцентно-гистохимический метод Кросса, Эвена, Роста (Cross S. et. al., 1971)-для идентификации гистаминсодержащих структур тимуса.

3. Методцитоспектрофлуориметрии - для оценки количественного содержания в структурах тимуса катехоламинов, серотонина и гнстамина (Юденфренд С, 1965; Карнаухов В. Н., 1978; Калмыков В. Л., 1982). Измерения производили в условных единицах флуоресценции (у. е.) с помощью насадки ФМЭЛ-1А, установленной на люминесцентный микроскоп. В каждом препарате делали не менее 120 измерений. Для определения уровня катехоламинов использовали интерференционный фильтр с длинной волны 480 нм, гистамина - с длинной волны 515 нм, серотонина - с длинной волны 525 нм.

4. Окраска гематоксилином-эозином — для морфометрии коркового и мозгового вещества дольки тимуса (Ромейс Б., 1954). С помощью светового микроскопа при увеличении объектива 3,2х и винтового окулярного микрометра М0В-1-15х, установленного на микроскоп, производили измерение толщины коркового и диаметра мозгового вещества. С каждого препарата было сделано по 15 измерений.

Площадь мозгового вещества вычисляли по формуле S = (Dxdjt)/4; где D и d- максимальный и минимальный диаметры мозгового вещества тимусной дольки соответственно.

5. Окраска полихромным толуидиновым синим по Унна - для качественной и количественной характеристики тучных клеток тимуса. При оценке количественного распределения тучных клеток проводили их подсчет в десяти полях зрения микроскопа при увеличении об. 10, ок.40. По степени дегрануляции выделяли 4 типа клеток: Т-0 - тучные клетки с неразличимым ядром и плотно заполненные гранулами; Т-1 - тучные клетки с не полностью замаскированным ядром и отдельными различимыми гранулами; Т-2 - клетки с отчетливым ядром и хорошо различимыми гранулами как внутри, так и вокруг клетки; Т-3 - тучные клетки с рассеянными гранулами вокруг и единичными гранулами внутри клетки (Линднер Д.П. и др., 1976,1980; Бочкарев В.А., Гордон Д.С., 1992).

6. Для характеристики с> ммарно-направленного действия биогенных аминов вычислялось соотношение (серотонин + гистамин)/ катехоламины (Стручко Г.Ю., 2003), свидетельствующее о функциональном состоянии клеток тимуса..

7. Для количественного определения кортизола в сыворотке крови применялся твердофазный иммуноферментный метод с использованием набора реактивов «Стеоид-ИФА-кортизол» при помощи автоматического спектрометра «CERES uv900C».

8. Статистическая обработка цифровых данных проводилась с помощью пакета программ Microsoft office (Word и Excel) по специально поставленной программе на компьютере Pentium 166 ММХ, достоверность определяли критерием Стьюдента (t) (Грублер Е.В. и др., 1973; Автандилов ГГ., 1996).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

При исследовании тимуса интактных животных с помощью люминесцентной микроскопии выявляются округлые дольки с хорошо различимым корковым и мозговым веществом. Располагающееся в центре дольки мозговое вещество имеет менее интенсивную люминесценцию по сравнению с корковым и окружено рядом люминесцирующих гранулярных клеток, условно названных «премедуллярные клетки» (Гордон Д.С., 1982). Эти клетки имеют яркое беловато-желтое свечение и содержат компактные гранулы. По периферии дольки, кнаружи от клеток внутренней кортикальной зоны хаотично разбросаны мелкие люминесцирующие клетки субкапсулярного ряда, обладающие зеленовато-желтой люминесценцией. Цитоспектрофлуориметрическое исследование позволило выявить, что в гранулах люминесцирующих клеток содержатся биогенные амины: серотонин, гистамин, катехоламины, преобладающим среди них является серотонин.

Аутолиенотрансплантация вызывает изменения в люминесцентно-гистохимической картине тимуса, максимально выраженные к 7 суткам после операции. Они проявляются увеличением количества и размеров люминесцирующих гранулярных клеток на фоне усиления люминесценции коркового и мозгового вещества дольки тимуса. Но уже начиная с 15 суток, отмечается тенденция к нормализации морфологических характеристик тимуса, а к 60 суткам эти изменения практически

полностью нивелируются Однако после изолированной спленэктомии изменения в цитоархитектонике тимуса более выражены, уже с 3 суток отмечается значительное увеличение размеров и количества люминесцирующих клеток в корковом веществе дольки, резкое усиление люминесценции паренхимы органа. В последующие периоды наблюдения, вплоть до 30 суток, изменения продолжают нарастать и лишь к концу эксперимента отмечается тенденция к их нормализации.

Уже через 3 суток после аутолиенотрансплантации цитофлуориметрическое исследование позволяет выявить повышение и перераспределение биогенных аминов в тимусе. Максимальное увеличение серотонина и катехоламинов во всех структурах тимуса зарегистрировано через 7 суток после операции (рис.1), но оно наиболее выражено в тимоцитах коркового, мозгового вещества, а также тучных клетках. Уровень гистамина во всех люминесцирующих структурах тим>са также максимально повышен через 7 суток после аутолиенотрансплантации, за исключением тимоцитов мозгового вещества и субкапсулярных клеток, в которых максимальный уровень гистамина отмечается через 3 суток.

|Рис 1 Уровень биогенных аминов в тимоцитах коркового вещества в норме и '

через 3-60 суток после аутолиенотрансплантации

180 -

160 ----ft---- -

:: _ JLz_ Jl_ it ^ЗЁ I

норма 3 сут 7 сут 15 сут 30 сут 45 сут 60 сут }

[□серотоиин Ягистамии □ катехолауиньГ|

Однако уже через 15 суток после аутолиенотрансплантации уровень серотонина и катехоламинов снижается, а содержание гистамина возвращается к значениям у интактных животных. Начиная с 30 суток и до конца наблюдения уровень биогенных аминов в структурах тимуса не отличается от содержания в тимусе интактных животных.

После спленэктомии во всех люминесцирующих структурах тимуса регистрируется более выраженное повышение содержания биогенных аминов, сохраняющееся до конца эксперимента. Максимальный уровень всех биогенных аминов выявлен через 30 суток после удаления селезенки (рис.2).

В этот период уровень гистамина в структурах тимуса превышает показатели, характерные для интактных животных и животных после аутолиенотрансплантации, более чем в 3 раза, а содержание серотонина и катехоламинов в этот период увеличено почти в 2,5 раза.

Известно, что для регуляции функции тимуса имеет значение не столько содержание в структурах биологически активных веществ, сколько их соотношение, отражающее суммарно-направленное действие биогенных аминов (Стручко Г.Ю., 2003). Нами выявлено, что после аутолиенотрансплантации, начиная с 3 суток исследования, наблюдается

снижение соотношения (серотонин + гистамин)/катехоламины во всех структурах тимуса, максимально выраженное через 15 суток после операции, что свидетельствует об активации функциональной деятельности клеток тимуса. Это особенно выражено в тимоцитах коркового вещества и тучных клетках, что, вероятно, говорит об усилении их пролиферации, дифференцировки, а следовательно - увеличении продукции ими цитокинов, оказывающих иммуномодулирующее действие.

После изолированной спленэктомии соотношение (серотонин + гистамин)/катехоламины во всех структурах тимуса, а особенно в тимоцитах коркового и мозгового вещества, волнообразно изменяется на разных сроках, но превышает значения у интактных животных, а также животных после аутолиенотрансплантации в течение всего периода наблюдения (рис.3).

Рис 3 Соотношение (серотонин+гистэмин)/кзтехалаиины в тимоцитах коркового вещества у интактных животных и через 3-60 суток после аутолиенотрансплантации и спленэктомии

норма Здня 7 дмн ЭОдивй 45ди*> еОдием <

спленэктомироваиные животные - - - животные после аутолиемотрансплэхтзцми | |

Это свидетельствует о значительном подавлении функциональной активности структур тимуса после спленэктомии и, вероятно, является одним из пусковых моментов развития иммунодефицита.

После аутолиенотрансплантации нами зарегистрировано изменение количества тучных клеток в септах тимуса. Установлено, что через 3, 7 и 15 суток их количество увеличивается, максимально- через 7 суток (в 2,3 раза), преобладающими в этот период являются недегранулированные (Т-0

и Т-1) формы. Через 7 суток после изолированного удаления селезенки содержание тучных клеток в тимусе резко повышается, превышая показатели нормы в 7-10 раз, при этом содержание тучных клеток также увеличивается и в жировой ткани, окружающей тимус. Весь период наблюдения преобладающими среди них являются недегранулированные формы.

Тучные клетки многофункциональны и при стимуляции они дегранулируют с выделением разнообразных медиаторов и цитокинов, которые участвуют в иммунных реакциях, ангиогенезе и в выполнении других биологических функций, что позволяет рассматривать их как важные иммунорегуляторные клетки. Являясь главным источником ИЛ-4, основного фактора роста В-лимфоцитов (Фрейдлин И. С., 2001; Сепиашвили Р.И., 2003), тучные клетки обеспечивают дифференцировку и созревание ТИ2-хелперов (Хаитов P.M., 2000), что, вероятно, способствует регенерации ткани селезенки и восстановлению ее функций. Важной особенностью тучных клеток является также их способность инактивировать высокие уровни биогенных аминов путем связывания их гликозаминогликанами (Быков В.Л., 1999), что, вероятно, объясняет значительное увеличение количества тучных клеток именно после спленэктомии.

Начиная с 7 суток после аутолиенотрансплантации, масса тимуса имеет тенденцию к увеличению, а к 30 суткам уже достоверно увеличивается по сравнению с тимусом интактных животных на 20% (рис.4). В этот же период отмечено и максимальное увеличение толщины коркового вещества тимуса на 33%, площадь мозгового увеличена на 39%. После спленэктомии отмечается постоянное снижение массы тимуса весь период исследования, что обусловлено уменьшением площади мозгового и толщины коркового вещества дольки, расширением междольковых септ и

служит подтверждением развития- острой инволюции тимуса после спленэктомии (рис.4).

| Рис. 4. Масса тимуса у интактных животных и через 3-60 суток после |

I спленэктомиии аутолиенотрансплантации

40 20 0

норма 3 суток 7 сутоя 15 суток 30 суток 45 суток 60 суток ^спленэктомия • - - аутолиенотраксплантация !

Через 3, 7 и 15 суток после аутолиенотрансплантации уровень кортизола в крови повышен незначительно по сравнению с интактными животными, в тоже время через 7 суток после спленэктомии наблюдается максимальное повышение его уровня. Вероятно, повышение уровня глюкокортикоидов после спленэктомии носит компенсаторно -регуляторный характер, так как глюкокортикоиды способны направлять иммунный ответ на ТЬ2-путь (Ashwell Jonathan D., Lu Frank W.M., 2000). Вожможно, повышение уровня глюкокортикоидов является оправданным в этих условиях, так как спленэктомия вызывает нарушение гуморального иммунитета. Но значительное повышение уровня глюкокортикоидов в этот период имеет и отрицательные последствия, так как приводит к активации апоптоза тимоцитов, что способствует развитию акцидентальной инволюции тимуса и вторичного иммунодефицита (Ажипа Я.И., 1976; Стручко Г.Ю., 2003). Максимальное повышение уровня кортизола в крови после аутолиенотрансплантации совпадает по срокам (30 суток) с максимальным увеличением массы тимуса, что, по-видимому, носит регуляторный характер и направлено на подавление избыточной

активности иммунной системы и, в свою очередь, будет препятствовать развитию аутоиммунных заболеваний (Никитин З.С., 1996; Ader R., Cohen N., Felten D., 1995). К 60 суткам после аутолиенотрансплантации содержание кортизола возвращается к значениям нормы (рис.5).

I---------

Рис. 5. Уровень кортизола в крови в норме и через 3-60 суток после аутолиенотрансплантации (а/тр) и сгтленэктомии (с/экт)

90 -

норма Зсуток 7 суток 15 суток 30 суток 45еуток 60 суток

! I* * " " " С/ЭКТ |

Таким образом, проведенное морфофункциональное исследование тимуса и содержания кортизола крови после аутолиенотрансплантации не выявляет существенных отличий этих показателей от интактных животных к концу эксперимента, что свидетельствует о предотвращении развития инволютивных процессов в тимусе, вызваемых спленэктомией. Это позволяет рекомендовать выполнение гетеротопической трансплантации фрагмента селезенки для профилактики развития постспленэктомического гипоспленизма и вторичного иммунодефицита.

ВЫВОДЫ;

1. После аутолиенотрансплантации через 7 суток наблюдаются

максимально выраженные изменения в люминесцентно-гистохимической картине тимуса: увеличиваются количество и размеры люминесцирующих гранулярных клеток на фоне усиления люминесценции коркового и мозгового вещества

тимусной дольки. В дальнейшем эти изменения постепенно нивелируются и через 60 суток морфологическая картина тимуса возвращается к норме.

2. Аутолиенотрансплантация вызывает повышение и перераспределение уровня биогенных аминов во всех люминесцирующих структурах тимуса животных:

а) содержание серотонина и катехоламинов увеличивается к 3 суткам, достигает максимальных значений к 7 суткам и к 30 суткам снижается до значений у интактных крыс;

б) уровень гистамина повышен через 3 и 7 суток, а к 15 суткам снижается до значений, аналогичных интактным животным.

3. После аутолиенотрансплантации соотношение (серотонин + гистамин)/катехоламины во все сроки наблюдения ниже значений у интактных крыс, максимальное снижение наблюдается через 15 суток.

4. Количество тучных клеток в септах тимуса после аутолиенотрансплантации изменяется волнообразно-повышается через 3 суток, достигает максимума к 7 дням, возвращается к значениям нормы через 30 суток и вновь возрастает через 45 и 60 дней после операции.

5. Масса тимуса крыс после аутолиенотрансплантации достоверно увеличена через 30 суток, что сопровождается одновременным увеличением толщины коркового и площади мозгового вещества дольки тимуса.

6. Уровень кортизола после аутолиенотрансплантации постепенно повышается, достигая максимума к 30 суткам и снижается до значений, характерных для интактных животных к 60 суткам исследования.

7. Изменения уровня биогенных аминов и морфологической

характеристики тимуса после аутолиенотрансплантации менее выражены и более кратковременны по сравнению со спленэктомированными животными, что косвенно позволяет сделать вывод о корригирующем влиянии аутолиенотрансплантации.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Выявленные морфофункциональные изменения в тимусе после аутолиенотрансплантации позволяют рекомендовать ее выполнение в клинике для коррекции постспленэктомических нарушений и вторичного иммунодефицита.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Шумилова Е.Б., Москвичев Е.В., Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю. Люминесцентно-гистохимическое исследование структур тимуса после гетеротопической аутотрансплантации селезенки. - Мат. IV международной конф. по функциональной нейроморфологии «Колосовские чтения - 2002», СПб, 2002. - С. 315-316.

2. Шумилова Е.Б., Москвичев Е.В., Стоменская И.С., Лаврентьев СВ., Иванова Н.Н. Аутолиенотрансплантация как возможный метод коррекции нарушений, возникающих в тимусе при спленэктомии. -Аллергология и иммунология, 2003. - Т. 4, №2. - С. 146.

3. Меркулова Л.М., Москвичев Е.В., Шумилова Е.Б., Стручко Г.Ю. Морфофункциональное исследование аутотрансплантатов селезенки

и иммуноглобулинов крови в разные сроки после операции. -Вестник Чувашского университета, 2002. - № 2. - С. 115 - 120.

4. Москвичев Е.В., Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю., Шумилова Е.Б., Стоменская И.С. Морфогистохимическое исследование аутотрансплантатов селезенки на разных сроках после операции. -Аллергология и иммунология, 2003. - Т. 4, №2. - С. 147-148.

5. Стоменская И.С, Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю., Москвичев Е.В., Шумилова Е.Б., Лаврентьев СВ. Влияние спленэктомии на морфофункциональное состояние надпочечников. - Аллергология и иммунология, 2003. - Т. 4, №2. - С.145-146.

Формат 60x84/16. Бумага офсетная. Объем 1,0 печ. л. Тираж 100 экз. Заказ № 12<т.

Чувашский государственный университет

Типография университета 428015 Чебоксары, Московский просп., 15

№ -574 2

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Шумилова, Елена Борисовна

ВВЕДЕНИЕ3

ГЛАВА 1. Обзор литературы9

1.1 Современное представление об анатомо-гистологическом строении тимуса9

1.2 Физиологическая роль тимуса20

1.3 Современное представление о физиологической роли биогенных аминов23

1.4 Применение аутолиенотрансплантации ткани селезенки для коррекции постспленэктомических нарушений31

ГЛАВА 2. Материал и методы исследования37

ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований41

3.1 Морфофункциональная характеристика тимуса интактных животных 41

3. 2через 3 суток после аутолиенотрансплантации45

3. 3через 7 суток после аутолиенотрансплантации52

3. 4через 15 суток после аутолиенотрансплантации59

3. 5через 30 суток после аутолиенотрансплантации67

3. 6через 45 суток после аутолиенотрансплантации74

3. 7через 60 суток после аутолиенотрансплантации80

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ86

ВЫВОДЫ99

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфофункциональное состояние тимуса через 3 - 60 сут после аутолиенотрансплантации"

Актуальность темы.

Изучение механизмов функционирования иммунной системы является актуальнейшей медицинской проблемой (Сепиашвили Р.И., 2003). Эта актуальность обусловлена не только сиюминутными запросами клиники, но также связана с тем, что выяснение механизмов реализации иммунных функций может помочь в предотвращении развития различных заболеваний. Недостаточная изученность многих аспектов деятельности иммунной системы связана, с одной стороны, с чрезвычайно большим количеством типов клеток, участвующих в иммунных реакциях, а с другой - отсутствием доступных способов их идентификации в каждой конкретной ситуации. Иммунная система является уникальным защитным механизмом, обеспечивающим гомеостаз, и при контакте с любым антигеном она не только реагирует в виде специфического иммунного ответа, но и способна вовлекать в этот процесс через гуморальные факторы нервную и эндокринную системы (Ноздрачев А.Д., 2000; Труфакин В.А., 2002). Ведущая роль в таких взаимодействиях, безусловно, принадлежит тимусу, в котором присутствуют многочисленные клеточные типы, обеспечивающие процессы иммуногенеза. Морфологические перестройки в тимусе, возникающие в ответ на стресс, на различные антигены, носят адаптивный характер и сопровождаются изменением цитоархитектоники, а следовательно, и микроокружения клеток, что, по видимому, и является причиной развития иммунодефицитов в этих условиях.

Недостаточно изученной и важной клинической проблемой остается поддержание адекватного иммунного статуса при развитии вторичных иммунодефицитов, связанных с удалением селезенки. В литературе много сведений о клинических и иммунологических нарушениях, развивающихся после спленэктомии, причем их патогенез, как правило, сложен и многоступенчат (Груздева О.Н., Чихман В.Н., 1999; Стручко Г.Ю., 2003; Leemans R., Manson W., 1999; Benoist S., 2000). Одной из основных причин развития постспленэктомического гипоспленизма являются разнообразные нарушения в системе гипофиз-надпочечники-тимус, которые и приводят к акцидентальной инволюции вилочковой железы, сопровождающейся усилением апоптоза лимфоцитов (Ажипа Я.И., 1976). Одним из негативных последствий спленэктомии является нарушение функционирования гуморальной системы организма, в частности, в этих условиях происходит нарушение синтеза глюкокортикоидов, являющихся важным звеном в регуляции функций иммунной системы (Стручко Г.Ю., 2003). Кроме того, обнаружено, что, наряду с глюкокортикоидами, регуляторами апоптоза лимфоцитов в тимусе могут выступать биогенные амины, некоторые интерлейкины и другие гуморальные факторы (Потапнев М.П., 2002; Rook Graham A.W., 1999). Несмотря на кажущуюся изученность эффектов биогенных аминов в организме, их роль в реакциях иммунологической адаптации не достаточно исследована (Дейвоно JI.B., 2003). Известно, что биогенные амины принимают участие в регуляции многочисленных процессов, в которых задействованы нервная, эндокринная и иммунная системы, вот почему любые нарушения их синтеза после вынужденного удаления селезенки неизбежно приводят к развитию различных осложнений, нередко опасных для жизни больного (Самсыгин С.А., Долгина Е.Н., 1986; Leemans R., Manson W., 1999). В связи с этим в последнее время ведется активный поиск способов их профилактики (Григорьев Е.С. и др., 1998). Одним из возможных методов компенсации иммунных функций после удаления селезенки является пересадка ее фрагмента в брюшную полость - аутолиенотрансплантация (Гешелин С.А., 2000; Цецхладзе Г.Н., 2002; Knezevic S., Stefanovic D., Petrovic M., 2002). Однако литературные данные об эффективности такой операции весьма противоречивы, что свидетельствует о недостаточной изученности этих вопросов. По мнению одних авторов (Henneking К, Muller С, 1994; Power RE, 2002), аутолиенотрансплантация приводит к восстановлению фильтрационной функции пересаженного фрагмента селезенки, способствует нормализации выработки антител, увеличению фагоцитарной активности клеток мононуклеарной системы и активации натуральных киллеров (Ota N., 1994; Leemans R, Beekhuis H, 1996; Tang WH, 2003). По данным других авторов, пересадка фрагмента селезенки не приводит к полной нормализации клиренса микроорганизмов (Pabst R., 1999; Smith Е., De Young N.J., 1999). Кроме того, в литературе практически нет данных, описывающих морфофункциональное состояние тимуса после аутолиенотрансплантации, в частности, не известно как изменяется содержание биогенных аминов в этом органе и уровень глюкокортикоидов в крови. В связи с вышесказанным, изучение морфофункциональной характеристики тимуса после аутолиенотрансплантации и возможной роли биогенных аминов в процессах адаптации иммунной системы является актуальной научной задачей как для практической медицины, так и для запросов морфологии и иммунологии.

Цель исследования - изучить морфофункциональное состояние тимуса и уровень кортизола в крови через 3-60 суток после аутолиенотрансплантации.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Изучить морфофункциональную характеристику дольки тимуса крыс через 3, 7, 15, 30, 45 и 60 суток после аутолиенотрансплантации.

2. Исследовать уровень биогенных аминов (серотонина, гистамина и катехоламинов) в люминесцирующих структурах тимуса и их соотношение через 3, 7, 15,30, 45 и 60 суток после аутолиенотрансплантации.

3. Изучить популяцию тучных клеток тимуса крыс через 3, 7, 15, 30, 45 и 60 суток после аутолиенотрансплантации.

5. Определить уровень кортизола в крови крыс через 3, 7, 15, 30, 45 и 60 суток после аутолиенотрансплантации.

Научная новизна работы:

• Впервые было выявлено, что в течение 60 дней после аутолиенотрансплантации соотношение (серотонин + гистамин)/катехоламины ниже значений у интактных крыс, но его максимальное снижение наблюдается через 15 суток.

Научно-теоретическая значимость работы

Результаты исследования приближают к раскрытию механизмов межклеточных взаимоотношений в нервной, иммунной и эндокринной системах. Они позволяют выработать подходы к регуляции функционирования различных звеньев этих систем. Особенно важно, что одновременно были изучены морфологические и биохимические корреляты функциональной активности тимуса и показана связь различных характеристик тимуса и содержания кортизола в крови. Материалы исследования имеют фундаментальное значение и представляют интересе для практической медицины.

Практическая значимость работы

Основные положения, выносимые на защиту

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 131 странице машинописного текста (собственно текста — 102 страницы), состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, раздела собственных исследований, обсуждения результатов и заключения, выводов, списка литературы. Работа иллюстрирована 46 рисунками, 7 таблицами. Список литературы включает 294 источника, в том числе 153 — зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Шумилова, Елена Борисовна

ВЫВОДЫ

1. После аутолиенотрансплантации через 7 суток наблюдаются максимально выраженные изменения в люминесцентно-гистохимической картине тимуса: увеличиваются количество и размеры люминесцирующих гранулярных клеток на фоне усиления люминесценции коркового и мозгового вещества тимусной дольки. В дальнейшем эти изменения постепенно нивелируются и через 60 суток морфологическая картина тимуса возвращается к норме.

2. Аутолиенотрансплантация вызывает повышение и перераспределение уровня биогенных аминов во всех люминесцирующих структурах тимуса животных: а) содержание серотонина и катехоламинов увеличивается к 3 суткам, достигает максимальных значений к 7 суткам и к 30 суткам снижается до значений у интактных крыс; б) уровень гистамина повышен через 3 и 7 суток, а к 15 суткам снижается до значений, аналогичных интактным животным.

4. Количество тучных клеток в септах тимуса после аутолиенотрансплантации изменяется волнообразно: повышается через 3 суток, достигает максимума к 7 дням, возвращается к значениям нормы через 30 суток и вновь возрастает через 45 и 60 дней после операции.

7. Изменения уровня биогенных аминов и морфологической характеристики тимуса после аутолиенотрансплантации менее выражены и более кратковременны по сравнению со спленэктомированными животными, что косвенно позволяет сделать вывод о корригирующем влиянии аутолиенотрансплантации.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последние годы все большее внимание уделяется иммунной системе и иммунитету, как одному из главных составляющих, обеспечивающих постоянство внутренней среды. Иммунная система имеет возможность, при контакте с каждым конкретным антигеном, реагировать специфическим иммунным ответом и вовлекать в этот процесс нервную и эндокринную системы (Сепиашвили Р.И., 2003; Хаитов P.M., 2000). Ведущее значение принадлежит при этом тимусу. В то же время сам тимус находится под постоянным влиянием и эндокринной, и нервной систем (Акмаев И.Г., 1997, 1999; Труфакин В.А., 2002). Взаимодействие клеток иммунной системы с клетками других органов и систем осуществляется при помощи биологически активных веществ: регуляторных пептидов, цитокинов, стероидных и пептидных гормонов, биогенных аминов (Ноздрачев А.Д., Колосова Л.И., 2000). Особая роль отводится биогенным аминам, выполняющим функции межклеточных медиаторов в иммунных реакциях, процессах гемопоэза, в развитии воспаления, в передаче нервных стимулов лимфоидным клеткам. В зависимости от концентрации и соотношения они обеспечивают нейроиммуномодуляцию, непосредственно влияя на процесс пролиферации и дифференцировки Т- и В-лимфоцитов (Вайнсфельд И.Л., Кассиль Т.Н., 1981).

Часто вынужденное удаление селезенки, выполняемое при невозможности сохранить орган, приводит к развитию на этом фоне нарушений во многих системах: кроветворной, иммунной, нейроэндокринной. Комплекс патологических симптомов, развивающихся после спленэктомии -постспленэктомический гипоспленизм - проявляется предрасположенностью к паразитарной, грибковой и вирусной инвазии, снижением антибластической резистентности, астеническим синдромом. Крайняя форма проявления данного синдрома - молниеносный сепсис (Brigden M.L., 2001; Tice А., 2001). Считается, что одним из звеньев развития постспленэктомического гипоспленизма является нарушение функционирования оси гипоталамус-надпочечники-тимус, что способствует возникновению на этом фоне акцидентальной инволюции тимуса (Ажипа Я.И., 1976; Стручко Г.Ю., 2003), нарушению и клеточного, и гуморального иммунитета и, как следствие, вторичному иммунодефициту. Известно, что пусковым моментом развития акцидентальной инволюции тимуса является повышение в крови уровня глюкокортикоидов и возникающий на этом фоне дисбаланс биогенных аминов в тимусе (Стручко Г.Ю., 2003). В связи с этим при вмешательствах на селезенке расширились показания к выполнению органосохраняющих операций (Rose А.Т., Newman M.I., Debelak J. et al., 2000). Одним из способов сохранения органа и профилактики развития постспленэктомического гипоспленизма является аутолиенотрансплантация.

Проведенные нами исследования позволили выявить, что после аутолиенотрансплантации, начиная с 3 суток исследования, меняется визуальная картина тимуса: отмечается увеличение размеров люминесцирующих клеток. К 7 суткам эти изменения нарастают, являясь наиболее выраженными за весь период наблюдения: увеличиваются количество и размеры люминесцирующих клеток, усиливается люминесцентное свечение коркового и мозгового вещества дольки тимуса. Но уже через 15 суток -снижаются интенсивность люминесценции паренхимы и количество люминесцирующих гранулярных клеток. Однако после изолированной спленэктомии визуальная картина изменяется более выражено: с 3 суток отмечается значительное увеличение размеров и количества люминесцирующих клеток на фоне усиления люминесценции паренхимы тимуса. В следующие периоды наблюдения изменения продолжают нарастать: через 7 суток люминесцирующие гранулярные клетки плотным кольцом охватывают мозговое вещество дольки, отмечается уменьшение размеров дольки и расширение междольковых промежутков. Через 15 суток выявляются дольки, переполненные крупными, нередко сливающимися клетками, дольки с малым содержанием клеток, и дольки полностью лишенные люминесцирующих гранулярных клеток с неразличимым корковым и мозговым веществом.

Проведенное цитофлуориметрическое исследование выявляет повышение серотонина и катехоламинов уже через 3 суток после аутолиенотрансплантации, наиболее выраженное в тимоцитах коркового, мозгового вещества тимуса и в тучных клетках. Максимальное повышение этих биогенных аминов во всех люминесцирующих структурах выявляется через 7 суток. Гистамин также во всех структурах тимуса максимально повышен через 7 суток после операции, за исключением тимоцитов мозгового вещества и субкапсулярных клеток, в которых пик повышения отмечается через 3 суток. Через 15 суток после аутолиенотрансплантации уровень серотонина и катехоламинов несколько снижается, а гистамин возвращается к значениям у интактных животных.

При сравнении со спленэктомированными животными выявляется, что после аутолиенотрансплантации серотонин выше почти во всех исследуемых структурах тимуса, кроме премедуллярных и тучных клеток. Содержание катехоламинов имеет равное со спленэктомированными животными значение через 3 суток, а через 15 суток превышает значения у спленэктомированных крыс, за исключением премедуллярных и тучных клеток. Уровень гистамина после аутолиенотрансплантации значительно ниже значений у животных после изолированной спленэктомии во всех исследуемых структурах, а особенно в тимоцитах мозгового вещества и тучных клетках.

Известно, что для регуляции функции имеет значение не столько содержание в средах биологически активных веществ, сколько их соотношение. Накопление в организме одних веществ компенсируется, как правило, адаптивным нарастанием уровня веществ противоположенного ряда, усилением ферментативных систем, инактивирующих или разрушающих образующиеся метаболиты и медиаторы, а также повышением связывания кровью и тканями

Вайнсфельд И.Л., Кассиль Г.Н., 1981). Поэтому мы использовали соотношение (серотонин + гистамин)/катехоламины, характеризующее суммарно-направленное действие биогенных аминов. Так как серотонин и гистамин оказывают на иммунную систему преимущественно супрессирующее действие (Девойно Л.В., 2002; Бережная Н.М., Сепиашвили Р.И., 2003), а катехоламины - стимулирующее (Девойно Л.В., 2002), то возрастание показателя свидетельствует об угнетении функциональной активности структур, а снижение - о стимулировании (Стручко Г.Ю., 2003).

Нами выявлено, что после аутолиенотрансплантации, начиная с 3 суток исследования, наблюдается постепенное снижение этого соотношения во всех структурах тимуса, максимально выраженное через 15 суток после операции в тимоцитах коркового вещества, тучных и субкапсулярных клетках. Мы полагаем, что выявленное снижение соотношения (серотонин + гистамин)/катехоламины сказывается на функциональной деятельности этих структур тимуса, приводя к их активации. В условиях повышенного содержания биогенных аминов является необходимым активирование структур, способных поглощать избыточное количество этих веществ, о чем, вероятно, свидетельствует наибольшее снижение соотношения (серотонин + гистамин)/ катехоламины в субкапсулярных клетках, как известно, являющихся аминопоглотителями. Активация Т-лимфоцитов коркового вещества и тучных клеток проявляется усилением пролиферации, дифференцировки этих клеток, а также увеличением продукции ими различных цитокинов, оказывающих иммуномодулирующее действие (Ноздрачев А.Д., Колосова Л.И., Моисеева А.Б., Рябчикова О.В., 2000).

При сравнении со спленэктомированными животными, выявилось, что в этот же период после спленэктомии соотношение (серотонин + гистамин)/катехоламины во всех структурах тимуса, а особенно в тимоцитах коркового и мозгового вещества, значительно выше и соотношения у интактных животных, и животных после аутолиенотрансплантации, что свидетельствует о значительном подавлении функциональной активности структур тимуса после спленэктомии и, вероятно, является одним из пусковых моментов в развитии иммунодефицита.

Происходящие в этот период (3, 7 и 15 суток) изменения в ткани пересаженной селезенки (некроз в центре и сохраненный тонкий ободок ткани по периферии трансплантата) свидетельствуют о преобладании деструктивных процессов (Скуба Н.Д., Дурдыев М.Д., 1984; Тихомирова В.Д., Орлов М.Н., 1988, Муратов И.Д., Кузмичев П.П. и др., 1999) и скорее позволяют рассматривать селезенку на этом этапе не как полноценный иммунный орган, способный адекватно выполнять свои функции, а как источник эндогенного воспаления. Однако, возможно, сохранение даже незначительного количества ткани селезенки, может являться достаточным для стимуляции функциональной активности структур тимуса, чем, вероятно, и объясняются изменения, происходящие в нем в этот период, так как известно, что клетки стромы селезенки, к которым относятся ретикулярные клетки и фибробласты в низких дозах (5><10"3 клеток во взвеси) способны оказывать сильное стимулирующее действие на клетки иммунной системы (Фриденштейн А.Я., Лурия Е.А., 1980). Помимо этого известно, что дендритные клетки селезенки в 100 раз активнее стимулируют иммунный ответ, чем дендритные клетки другой локализации в смешанных культурах клеток (Фриденштейн А.Я., Лурия Е.А., 1980).

Активированные Т-лимфоциты и макрофаги способны синтезировать различные цитокины, в том числе ИЛ-1. Биологические эффекты ИЛ-1 связаны со стимуляцией пролиферации преактивированных клеток, с усилением экспрессии рецептора ИЛ-2, 1а-антигенов, продукции ИЛ-2, ИЛ-4, у-интерферона, ФНОа, и стимуляцией фагоцитоза (Симбирцев А.С., 1998; Аутеншлюс А.И. и др., 2003). Кроме того известно, что ИЛ-1 является одним из наиболее сильных стимуляторов роста тучных клеток с включением механизма, зависимого от фибробластов, а также ИЛ-1 способен усиливать продукцию и выделение тучными клетками цитокинов (Heltner L., Kolsch S., 2000; Kameyoshi Y., Morita E., 2000).

Нами установлено, что количество тучных клеток в септах тимуса увеличивается через 3, 7 и 15 суток после аутолиенотрансплантации, преобладающими в этот период являются недегранулированные (Т-0 и Т-1) формы. Причем, через 7 суток после аутолиенотрансплантации количество тучных клеток имеет наивысшее значение за весь период исследования.

По своим свойствам тучные клетки многофункциональны, среди их свойств основными являются: дегрануляция с последующим выделением медиаторов и цитокинов, фагоцитоз, регуляция ангиогенеза, представление антигена и т.д. (Бережная Н.М., Сепиашвили Р.И., 2003). Важной особенностью тучных клеток является их способность без дополнительной стимуляции вырабатывать цитокины ИЛ-1, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, GM-CSF, ИНФ, а после стимуляции они выделяют ИЛ-3, ИЛ-5, ИЛ-9, ИЛ-13, ФНОа (Marschall J.S., Gomi К., 1999; Lorentz A., Schwengberg S., 2000; Hatae N., Kita A., 2003; Marschall J.S., King C.A., 2003), что позволяет рассматривать их как важные иммунорегуляторные клетки (Mesheri S., 2002). Тучные клетки, являясь главным источником ИЛ-4, способны обеспечить дифференцировку и созревание ТЬ2-хелперов (Хаитов P.M., 2000), что, необходимо для регенерации ткани селезенки и восстановления ее функций, так как известно, что ИЛ-4 является основным фактором роста В-лимфоцитов (Фрейдлин И.С., 2001; Сепиашвили Р.И., 2003), способствует пролиферации, дифференцировке и выходу в кровяное русло В-клеток (Кетлинский С.А., 2002; Аутеншлюс А.И. и др., 2003). Так как элиминация ИЛ-4 приводит к блокированию ТЬ2-зависимого гуморального ответа (Кетлинский С.А., 2002), то увеличение в этот период исследования количества тучных клеток, способных синтезировать ИЛ-4, вероятно связано с необходимостью стимулировать ТЬ2-зависимый гуморальный ответ, и будет положительно влиять на регенерацию имплантированной ткани селезенки.

В присутствии ИЛ-4, а также ФНОа, в большом количестве вырабатываемом тучными клетками (по продукции ФНОа тучные клетки являются самым мощным источником этого цитокина (Бережная Н.М., Сепиашвили Р.И., 2003)), происходит активация незрелых дендритных клеток, в большом количестве содержащихся в лимфоидных органах: селезенке, тимусе (Пащенков М.В., Пинегин Б.В., 2001; Wilson N.S., El-Sukkari D., 2003). Активированные дендритные клетки вступают в фазу пролиферации и дифференцировки, в процессе чего выделяется протеинкиназа, которая способствует снижению уровня гистамина, и способна достоверно блокировать апоптотическое действие гистамина на клетки (Hur J., Kang М.К., 2003). Кроме того, интердигитальные дендритные клетки способны влиять на синтез антител В- клетками (Макаренкова В.П. и др., 2002), что также является положительным моментом и будет способствовать процессу регенерации ткани селезенки.

Уровень глюкокортикоидов после аутолиенотрансплантации через 3, 7 и 15 суток по сравнению с интактными животными повышен незначительно, в то время как после спленэктомии через 7 суток наблюдается максимальное повышение уровня кортизола. Вероятно, повышение уровня глюкокортикоидов после спленэктомии носит регуляторный характер, так как известно, что глюкокортикоиды способны ориентировать иммунный ответ на ТЬ2-путь (Ashwell Jonathan D., Lu Frank W.M., 2000), что является обоснованным в условиях спленэктомии и выраженного нарушения иммунного ответа по гуморальному типу. Но значительное повышение уровня глюкокортикостероидов в этот период имеет и отрицательное влияние: приводит к активации апоптоза тимоцитов и способствует развитию акцидентальной инволюции тимуса и вторичного иммунодефицита (Ажипа Я.И., 1976; Стручко Г.Ю., 2003).

Через 30 суток после аутолиенотрансплантации при люминесцентном исследовании в структурах тимуса не выявляется значимых изменений -тимоцитарная паренхима имеет неяркое свечение, премедуллярные клетки в 1

2 ряда окружают мозговое вещество, субкапсулярные клетки небольших размеров, хаотично разбросаны кнаружи от премедуллярных клеток. После спленэктомии изменения сохраняются и даже продолжают увеличиваться количество и размеры гранулярных клеток, усиливается люминесценция и коркового, и мозгового вещества.

Содержание серотонина и катехоламинов через 30 суток после аутолиенотрансплантации в люминесцирующих структурах тимуса повышено не достоверно по сравнению с интактными животными, содержание гистамина в тимоцитах коркового вещества, тучных клетках несколько снижено, а в премедуллярных клетках — достоверно ниже. Обращает на себя внимание, что в этот период после изолированной спленэктомии выявляется повторный пик (первый - через 7 суток) содержания всех биогенных аминов, а особенно гистамина во всех структурах тимуса, наиболее значительно выраженный в тимоцитах коркового и мозгового вещества.

Гистамин, по данным литературы, является сильным иммуносупрессором, оказывая ингибирующее влияние на функциональную активность клеток, подавляет продукцию многих цитокинов, в том числе ИЛ-4 и ФНОа, наиболее мощным источником которых являются тучные клетки (Бережная Н.М., Сепиашвили Р.И., 2003). Гистамин также влияет на незрелые дендритные клетки, которые имеют 2 активных рецептора — HI и Н2. На зрелые дендритные клетки действие гистамина проявляется в повреждении цитокинового и хемокинового профилей этих клеток (Mazzoni A., Leifer С.А. et al., 2003), что будет значительно сказываться на функциональном состоянии иммунной системы и усиливать состояние иммунодефицита, возникшего после спленэктомии. В тоже время, возможно, повышение гистамина оправдано, так как из литературы известно, что гистамин, взаимодействуя с Н2 гистаминовыми рецепторами макрофагов, подавляет перекисное окисление НАДФ-Н оксидазы и тем самым защищает NK-клетки и Т-лимфоциты от апоптоза (Hellstrand К., 2002), стимулированного глюкокортикостероидами.

Также, вероятно, повышение гистамина связано с его способностью через активацию HI-рецепторов стимулировать гуморальный иммунитет через увеличение продукции цитокинов ТЬ2-лимфоцитами (Krouwels F.H. et al., 1998; Sirois J. et al., 2000; Jutel M. Klinker S., 2001; Jutel M. Watanabe Т., 2001; Kohka Takahashi H. et al., 2002).

Через 30 суток после аутолиенотрансплантации соотношение (серотонин + гистамин)/катехоламины, также как и в предыдущие сроки, не превосходит значений у интактных крыс во всех структурах за исключением субкапсулярных клеток, где выявляется возрастание данного соотношения, что будет свидетельствовать об угнетающем влиянии биогенных аминов на данные структуры. После изолированной спленэктомии происходит снижение данного соотношения по сравнению с предыдущими периодами исследования, но, все равно, соотношение (серотонин + гистамин)/катехоламины остается выше значений интактных крыс во всех структурах тимуса, что говорит о сохранении иммуносупрессивного действия биогенных аминов в этот период исследования.

Исследование тучноклеточной популяции тимуса через 30 суток после аутолиенотрансплантации выявляет, что количество тучных клеток не отличается от значений нормы, преобладающими, также как и в норме, являются дегранулированные формы. После спленэктомии количество тучных клеток остается повышенным по сравнению с интактными животными, практически весь период наблюдения преобладают недегранулированные клетки. Вероятно, повышение количества тучных клеток является компенсаторной реакцией на значительно повышенное содержание гистамина в ткани тимуса после спленэктомии, так как известно, что гепарин, в больших количествах содержащийся в тучных клетках, обладает инактивирующим действием на биогенные амины и будет способствовать снижению их содержания (Быков В.Л., 1999).

В крови крыс через 30 суток после аутолиенотрансплантации выявляется значительное повышение уровня кортизола, как по сравнению с интактными животными, так и животными после спленэктомии. Вероятно, повышение уровня кортизола в этот период развивается в ответ на увеличенное образование провоспалительных цитокинов. Активация ядерных глюкокортикоидных рецепторов Т-лимфоцитов кортизолом будет ослаблять выработку цитокинов воспаления этими клетками (Rook Graham A.W., 1999) и является защитной реакцией организма на гиперфункцию иммунной системы (Никитин З.С., 1996; Ader R., Cohen N., Felten D., 1995).

Полученные данные хорошо согласуются со свойствами цитокинов осуществлять свое влияние как паракринным путем, вовлекая в реакцию близлежащие структуры, так и действовать дистантно. Как острое, так и субхроническое повышение в крови уровня циркулирующих цитокинов (в первую очередь ИЛ-1 и ФНОа (Song С., 2002)) в ответ на активацию клеточных структур тимуса и тучных клеток, вызывает в ЦНС неспецифические реакции, в том числе активизацию гипоталамо-гипофизарно-надпочениковой системы (Kapcala L.P., Не J.R., Gao Y., et al., 1996; Fleshner M., Goehler L.E. et al., 1998; Halasz В., 1999). Повышенный уровень этих веществ приводит к усиленному стимулированию PgE зависимого образования и выброса в кровь АКТГ, с последующим синтезом и выделением глюкокортикостероидов надпочечниками (Гаврилова Е.К., Шабанова Л.Ф., 1998; Rivier С., 1998), что, соответственно, проявляется значительным повышением АКТГ и кортизола в плазме крови. Также известно, что ИЛ-1 способен стимулировать выброс глюкокортикостероидов и вследствие прямого воздействия на надпочечники (Перцов С.С., 1997).

В свою очередь, повышение уровня кортизола, возможно, связано и с функциональной активностью регенерирующей селезенки, так как известно, что среди спленоцитов СД4+ Т-лимфоциты играют особо важную роль в освобождении АКТГ (Gaillard R.C., Daneva Т., 1998).

Повышенный уровень глюкокортикостероидов двойственно влияет на апоптоз: возможна его индукция (главная мишень - CD4+CD8+ тимоциты), и, в то же время, в результате снижения экспрессии Fas-лиганда возможно блокирование развития апоптоза, опосредованного взаимодействием Fas/FasL (Ashwell Jonathan D., Lu Frank W.M., Vacchio Melanie S., 2000). Кроме того, апоптоз клеток, вызванный глюкокортикостероидами, может быть блокирован высоким уровнем ФНОа, так как ФНОа препятствует перемещению глюкокортикостероидов в ядро клетки и связыванию их с ядерным рецептором. Это является одним из механизмов действия провоспалительных цитокинов (Rook Graham A.W., 1999). Кроме того, известно, что гормоны коры надпочечников способны увеличивать метаболическую активность спленоцитов (Панин JI.E., Клейменова Е.Ю., 2002), что будет благоприятно сказываться на процессах регенерации в трансплантированной ткани селезенки.

Но, вероятнее всего, повышение в крови уровня кортизола носит защитный характер и направлено на предотвращение гиперфункции иммунной системы, ведущей к развитию аутоиммунных заболеваний (Никитин З.С., 1996; Ader R., Cohen N., Felten D., 1995).

Только через 30 суток после аутолиенотрансплантации выявляется достоверное увеличение массы тимуса, связанное с увеличением толщины коркового и площади мозгового вещества тимуса. После спленэктомии, напротив, выявляется уменьшение массы тимуса, толщины коркового и площади мозгового вещества дольки тимуса в течение всего периода исследования, наиболее выраженное через 15 суток.

По данным литературы именно на 30 сутки в крови пациентов и экспериментальных животных, перенесших аутотрансплантацию ткани селезенки, повышается уровень тафтсина (Zhang Y. et al., 1996), радиоизотопными методами регистрируется функциональная активность пересаженной селезенки (Сапожникова М.А. и др., 1987) и с помощью меченых Esherichia colli регистрируется фагоцитарная активность селезенки (Marques R.G., et al., 2002), что будет свидетельствовать о частичном восстановлении функций селезенки.

Через 45 суток после аутолиенотрансплантации люминесцентно-гистохимическая картина характеризуется неярким свечением паренхимы тимуса и скудностью клеточных элементов, а к 60 суткам исследования — практически соответствует интактным животным. Это существенно отличается от люминесцентно-гистохимической картины через 45 суток после спленэктомии, когда продолжает оставаться увеличенным содержание ярко люминесцирующих гранулярных клеток, которые нередко сливаются между собой и плотным кольцом охватывают мозговое вещество тимуса, но к 60 суткам также наблюдается тенденция к нормализации.

С помощью цитоспектрофлуориметрии и через 45 суток, и через 60 суток после аутолиенотрансплантации выявлено, что уровень всех биогенных аминов в структурах тимуса практически не отличается от значений у интактных животных. Через 45 суток после спленэктомии уровень всех биогенных аминов, особенно гистамина, продолжает оставаться высоким, но к 60 суткам исследования в большинстве структур тимуса (за исключением тучных клеток) серотонин и катехоламины снижаются до значений нормы, хотя гистамин все же превышает показатели у интактных крыс.

Исследование тучноклеточной популяции после аутолиенотрансплантации выявляет, что процентное распределение тучных клеток по степени дегрануляции через 45 и 60 суток соответствует интактным животным.

Уровень кортизола через 45 суток после аутолиенотрансплантации снижается, и к 60 суткам исследования достигает значений нормы. При сравнении с уровнем кортизола у животных после спленэктомии, обращает на себя внимание, что через 45 суток после спленэктомии уровень кортизола значительно падает (в 2,5 раза) по сравнению с нормой, но к концу экспериментального исследования повышается, хотя и не достигает значений нормы. Вероятно, падение в крови глюкокортикоидов в это период свидетельствует о наступлении фазы истощения по теории Г. Селье (Selye Н.,

1946) об общем адаптационном синдроме, характеризующейся снижением секреторной активности надпочечников (Стоменская И.С., 2003).

Таким образом, проведенное нами морфофункциональное исследование тимуса и кортизола крови после аутолиенотрансплантации к концу эксперимента не выявляет существенных отличий от интактных животных. Вероятно, это свидетельствует о предотвращении развития инволютивных процессов в тимусе, сопровождающих спленэктомию, и позволяет рекомендовать выполнение аутолиенотрансплантации для профилактики развития постспленэктомического гипоспленизма и вторичного иммунодефицита.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Шумилова, Елена Борисовна, Саранск

1. Автандилов Г.Г. Компьютерная микротелефотометрия в диагностике гистоцитопатологиии. М.: РМАПО., 1996. - 256 с.

2. Агеев А.К. Гистопатология вилочковой железы человека. Л.: Медицина., 1973. - 126 с.

3. Агеева В.А., Самусев Р.П. Соотношение коркового и мозгового веществ тимуса в пренатальном периоде онтогенеза // Морфология, 2000. — №3. -С.10.

4. Ажипа Я.И. Нервы желез внутренней секреции и медиаторы в регуляции эндокринных функций. М.: Наука, 1976. - 438 с.

5. Акмаев И.Г. Нейроиммуноэндокринология: факты и гипотезы // проблемы эндокринологии, 1997. Т 43. - № 1. - С. 3-8.

6. Акмаев И.Г. Проблемы и перспективы развития нейроиммноэндокринологии // Проблемы эндокринологии, 1999. Т 45. -№5. - С.3-7.

7. Акмаев И.Г. Нейро-иммуно-эндокринные взаимодействия в физиологии и патологии // XVIII съезд физиологического общества им. И.П. Павлова. -Казань, 2001.-С.296.

8. Анчикова И.В. Количественное люминесцентно-гистохимическое исследование лимфатических узлов // Морфология и люминесцентная гистохимия. Чебоксары, 1983. - С. 60-62.

9. Арцимович Н.Г., Корнев А.В., Заяшникова Т.С. Роль симпато-адреналовой системы в регуляции иммунитета // XVIII съезд физиологического общества им. И.П. Павлова. Казань, 2001. — С.304.

10. Ю.Аутеншлюс А.И., Иванова Г.Г., Сидоров С.В., Михайлова Е.С., Морозов Д.В., Черенкова М.М. Содержание цитокинов и антител к ФНО-а у больных раком молочной железы и фиброаденоматозом // Иммунология, 2003. Т.24. - №3. - С.140-142.

11. Батырбеков А.А., Манько В.М., Руднева Т.Б., Халатян Н.А. Влияние спленэктомии на дифференцировку гемопоэтических стволовых клеток и функциональную активность Т-дифференцирующих лимфоцитов // Иммунология, 1985.-№5.-С.41-44.

12. Бережная Н.М. Иммунорегуляция при аллергических заболеваниях и подходы к ее коррекции // Биохимия человека и животных, 1985. — № 9. -С.28-38.

13. Бережная Н.М., Котова С.А., Бобкова Л.П., Бейко В.А., Магдик И.В., Глинский В.В. Гистамин и дисбаланс системы иммунитета при атопии (клеточный, субклеточный и молекулярный уровни) // Тез. докладов I съезда иммунологов, Новосибирск, 1992. С.47.

14. Н.Бережная Н.М., Сепиашвили Р.И. Тучные клетки и гистамин: физиологическая роль // Аллергология и иммунология, 2003. — Т.4. №3. -С.29-38.

15. Бойчук Н.В., Исламов P.P., Кузнецов С.Л., Улумбеков Э.Г., Челышев Ю.А. Гистология. Учебник для ВУЗов М.: ГЭОТАР., 2001. - 671 с.

16. Бордуновский В.Н. Сберегательная хирургия при повреждениях и очаговых образованиях селезенки // Хирургия, 1999. № 5. - С. 38-42.

17. Бочкарев В.А. Сезонные изменения содержания гистамина в перитонеальных тучных клетках крыс // Экспериментальная и прикладная морфология. Межвузовский сборник научных трудов. -Чебоксары, 1988.-С.23-25.

18. Бочкарев В.А., Гордон Д.С., Андреев С.Н. Возрастной спектр тучных клеток // Морфология и гистохимия тканей в норме, патологии и эксперименте. Чебоксары, 1992. - С.98-103.

19. Быков В.Л. Секреторные механизмы и секреторные продукты тучных клеток // Морфология, 1999. Т. 15. - № 2. - С.64-72.

20. Быков В.Л. Развитие и гетерогенность тучных клеток // Морфология, 2000. — № 2. С.86-92.

21. Быкова В.П. О происхождении клеток, накапливающих биогенные амины // В кн.: Материалы 4-го Всесоюзного симпозиума по проблемам гистофизиологии соединительной ткани. Под ред. Ю.И. Афанасьева., Новосиб., Наука, 1972.- Т.1.-С.23-26.

22. Былинкина Т.И. Морфофункциональная характеристика гистамин- и серотонинпродуцирующих клеток при сенсибилизации // Иммунные дисфункции. Алма-Ата, 1990. - С.51-55.

23. Вайнсфельд И.Л., Кассиль Г.Н. Гистамин в биохимии и физиологии. — М.: Наука, 1981.-80 с.

24. Васина И.Г., Полосина О.В. Особенности изменения содержания катехоламинов в органах иммуногенеза при антигенной нагрузке // Физиология иммунного гомеостаза: Тез. II Всесоюз. симпозиума, Ростов н/Д, 1977.-С. 55-56.

25. Виноградов С.Ю. Погорелов Ю.В. Серотонин и его участие в регуляции функции щитовидной железы // Успехи совр. биол., 1984. Т.98. - №2. -С. 206-218.

26. Виноградов С.Ю. Погорелов Ю.В. Морфогенез и нейромедиаторные биогенные амины // Морфология, Санкт-Петербург, изд. «Гиппократ», 1993. Т. 105. - вып.9-10. - С.59.

27. Гаврилова Е.К., Шабанова Л.Ф. Сресс-индуцированные нарушения иммунной функции и их психокоррекция // Физиология человека, 1998. -Т. 24(1).-С. 123-130.

28. Галил-Оглы Г.А., Ингберман Я.Х., Берщанская A.M. Сравнительная ультраструктурная характеристика эпителиальных клеток вилочковой железы и тимом // Архив патологии, 1988. №9. - с. 51-60.

29. Галустян Ш.Д. Строение зобной железы в свете экспериментального анализа М., Медгиз., 1949. - 325 с.

30. Гешелин С.А., Бабур А.А., Гирля В.И. Гетеротопическая аутотрансплантация селезеночной ткани у пациентов перенесшихспленэктомию по поводу травмы // Анн. хир. гепатол., 2000. — Т.5. — №2.-С.272

31. Гланц P.M., Рожннский М.М. Сберегательная хирургия поврежденной селезенки-М.: Медицина, 1973. — 101 с.

32. Гнездицкая Э.В., Белецкая J1.B. Изучение методом иммунофлюоресценции клеток тимуса, синтезирующих лактоферрин // Бюлл. эксп. биол. и мед., 1980. Т.90. -№11.- С.580-583.

33. Гогин Е.Е., Рутковский В.В. Инфекционные осложнения у больных с заболеваниями крови после спленэктомии // Клин, медицина, 1985. №5. -С.98.

34. Гордон Д.С., Сергеева В.Е., Зеленова И.Г. Нейромедиаторы лимфоидных органов М.: Наука, 1982. - 128с.

35. Гордон Д.С. Участие простагландин-позитивных структур тимуса в инициализации иммунного ответа // Морфология, 1993. № 7-8. - С. 2627.

36. Григорьев Е.С., Мартинян Н.С., Апарцин К.А. По поводу обзора литературы В. А. Зурнаджьянца и Ю.В. Назарочкина " Аутотрансплантация ткани селезенки" // Хирургия, 1998. № 7. - С.44-47.

37. Гриневич Ю.И., Чеботарев В.Ф. Иммунобиология гормонов тимуса. -Киев: Здоровье, 1989. 154 с.

38. Грублер Е.В., Генкин А.А. Применение критериев непараметрической статистики для оценки различий двух групп наблюдений в медикобиологических исследованиях М., 1973. - С.3-100.

39. Груздева О.Н., Чихман В.Н. Структура белой пульпы селезенки и показатели периферической крови у крыс в условиях повышенной мышечной деятельности // Морфология, 1999. Т.116. - № 6. - С.65-68.

40. Гунин А.Г., Гордон Д.С. Принадлежность гранулярных биоаминсодержащих клеток эндометрия крыс к системе мононуклеарных фагоцитов // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии, 1990. Т. 98, вып. 1. - С. 68-70.

41. Гунин А.Г., Гордон Д.С., Сысоева JI.A., Зеленова И.Г. Природа аутолюминесцирующих антигенчувствительных клеток лимфоидных органов // Морфология и развитие органов иммунной системы. Пермь, изд. Пермск. мед. ин-та, 1988. С. 17.'

42. Гусман Б.С. Иммунология детских инфекций М.: Медицина, 1975. -216 с.

43. Дейвоно Л.В., Морозова Н.Б. Участие клеток-супрессоров в угнетающем действии серотонина на иммуногенез // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии, 1979. -№5. С. 60-63.

44. Дейвоно Л.В., Ильюченок Р.Ю. Моноаминэргические системы в регуляции иммунных функций. М.: Наука, 1983. - 232 с.

45. Дурдыев М.Д., Пашутин С.Б., Белоруцкий С.М. Изменения иммунологических показателей после спленэктомии и реимплантации фрагментов селезенки в эксперименте // Бюл. экспер. биол. и мед., 1985. -№6.-С. 719-720.

46. Елаев Н.С. Норадреналин как регулятор синтеза РНК, К+ АТФазы в нервной клетке // Пробл. эндокринологии, 1981. Т. 27. -№ 1. — С. 58-62.

47. Епифанов Н.С. Удаление селезенки и риск развития тяжелых инфекций у детей // Педиатрия, 1991. № 3. - С.96-99.

48. Зозуля А.А., Хомяков Ю.Н., Безвершенко И.А. Взаимодействия третьей фракции тимозина с опиатными рецепторами // Бюлл. экспер. биол. и мед.- 1986.-№3.-С. 298-299.

49. Зубарев П.И., Еременко В.П. Тактика хирурга при травме селезенки и последствия спленэктомии // Вест. хир. им. Грекова, 1990. №7. - С. 5558.

50. Идова Г.В., Чейдо М.А. Формирование IgM- и IgG-иммунного ответа в зависимости от перераспределения Т- и В-субпопуляций под действием серотонина // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1979.-№7.-С. 54-58.

51. Идова Г.В., Чейдо М.А. Участие различных клеточных популяций в иммунном ответе (IgM и IgG) при действии биогенного амина серотонина // Вестник АМН СССР, 1981. № 5с. 39-41.

52. Ионкин Д.А., Кубышкин В.А., Елагина JI.B. Отдаленные результаты вмешательства на селезенке // Анн. хир. гепатол., 2000. Т.5. - № 2. -С. 275-276.

53. Калмыков В. JI. Современные методы количественного определения катехоламинов и серотонина // Лаб. дело, 1982. № 7. - С. 31-36.

54. Караулов А.В. Вторичные иммунодефицитные состояния: молекулярно-биохимические механизмы развития и методы коррекции // Аллергология, астма и клин, иммунология, 2000. — № 1. С. 24-25.

55. Карнаухов В. Н. Люминесцентный спектральный анализ клетки. — М.: Наука, 1978.-208 с.

56. Кветной И.М. Диффузная эндокринная система: Автореф. дис.докт. мед. наук. М., 1983. - 32 с.

57. Кветной И.М. APUD-система (структурно-функциональная организация, биологическое значение в норме и патологии) // Успехи физиологических наук, 1987. -Т.18. С.134-138.

58. Кемилева 3. Вилочковая железа. М.: Медицина, 1984. - 252 с.

59. Кетлинский С.А. Роль Т-хелперов типов 1 и 2 в регуляции клеточного и гуморального иммунитета // Иммунология, 2002. № 2. - 2002. - С. 7779.

60. Крохина Е.М., Александров П.Н. Симпатический (адренергический) компонент эффекторной иннервации сердечной мышцы // Кардиология, 1969. Т.9. - № 3. - С.97-102.

61. Кузьмин М.Ф., Сапин М.Р. Строение печени у спленэктомированных крыс // Морфология, 2000. № 3. - С.65.

62. Куский М.Д., Бакшеев Н.С. Биохимические основы действия серотонина Киев: Наукова думка, 1974. - 255с.

63. Линд ер Д.П., Коган Э.М. Тучные клетки как регулятор тканевого гомеостаза и их место в ряду биологических регуляторов // Архив патологии, 1976. Т. 38. - № 8. - С. 3-14.

64. Линдер Д.П., Поберий И.А., Розкин М.Я., Ефимов B.C. Морфометрический анализ популяции тучных клеток // Арх. патологии, 1980.-№8.-С. 41-43.

65. Любовцева Л.А. Локализация гистамина в структурах вилочковой железы в норме и в условиях эксперимента у лабораторных животных: Автореф. дис. канд. биол. наук. -М., 1980. -23 с.

66. Любовцева Л.А., Гордон Д.С., Павлова Л.Г. Содержание серотонина в клетках тимуса при введении гистамина // Морфология и гистохимия тканей в норме, патологии и эксперименте. Чебоксары, 1982. — С. 2829.

67. Любовцева Л.А. Люминесцентно-гистохимическое исследование аминосодержащих структур костного мозга, тимуса и крови при действиинейромедиаторов и антигенов. Чебоксары: Изд-во Чуваш, ун-та, 1993. -100 с.

68. Макаренкова В.П., Кост Н.В., Щурин М.Р. Система дендритных клеток: роль в индукции иммунитета и в патогенезе инфекционных, аутоиммунных и онкологических заболеваний // Иммунология, 2002. -№2. С.68-76.

69. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Медицина, 1994. - Т.1. -С. 236-238.

70. Меркулова Л.М., Москвичев Е.В., Стручко Г.Ю., Шумилова Е.Б. Морфофункциональное исследование аутотрансплантатов селезенки и иммуноглобулинов крови в разные сроки после операции // Вестник Чувашского университета, 2002. №2. - С. 115-120.

71. Мироненко О.Н. Клинико-экспериментальное обоснование аутотрансплантации ткани селезенки: Автореф. дис. канд. мед. наук. -Ворошиловград, 1986. 24 с.

72. Молодцова Г.Ф. Различия в вовлечении серотонина и дофамина в мозге крыс при латентном торможении // XVIII съезд физиологического общества им. И.П. Павлова. Казань, 2001. - С.163.

73. Муратов И.Д., Кузмичев П.П., Костенко В.Н. Аутолиенотрансплантация селезеночной ткани после спленэктомии // Хирургия, 1999. — №9. — С.67-69.

74. Никитин З.С. Взаимодействие между нервной и иммунной системами // Рус. мед. журн., 1996. Т.2. - № 3. - С.63-65.

75. Николаева О.Я. Взаимодействия между тимоцитами и стромальными элементами тимуса // Морфология, 2002. Т.121. - № 2-3. - С. 113-114.

76. Никонова М.Ф., Литвина М.М., Варфоломеева М.И. Апоптоз и пролиферация как альтернативные формы ответа Т-лимфоцитов на стимуляцию // Иммунология, 1999. №2. - С. 20-23.

77. Панин Л.Е., Клейменова Е.Ю. Роль алипопротеина А-1, стероидных гормонов и их комплексов в регуляции биосинтеза белка и ДНК в лимфоцитах селезенки // Иммунология, 2002. № 4. - С. 206-208.

78. Пащенков М.В., Пинегин Б.В. Основные свойства дендритных клеток // Иммунология, 2001. №4. - С.7-16.

79. Перцов С.С., Сосновский А.С., Пирогова Г.В. Влияние интерлейкина-ip на состояние тимуса, надпочечников и селезенки при иммерсионном эмоциональном стрессе у крыс Август, Вистар и Вэг // Бюл. эксперим. биол. и мед., 1997. Т. 124. - № 7. - С. 32-35.

80. Петренко В.М. Эмбриональный морфогенез тимуса и грудного протока // Биомед. и биосоц. проблемы интегративной антропологии, 1998. — № 2 -С. 165-168.

81. Петренко В.М. Развитие посткапиллярных венул тимуса в пренатальном онтогенезе человека // Морфология, 1999. № 4. - С. 34-36.

82. Петров Р.В., Хаитов P.M., Манько В.М., Михайлова А.А. Контроль и регуляция иммунного ответа. М.: Медицина, 1981. - 310 с.

83. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина, 1987. - 261 с.

84. Пидевич И.Н. Фармакология серотонин реактивных структур. М.: Медицина, 1977. -280 с.

85. Попова Г.Н., Медуницин Н.В., Быкова В.П. Серотонин в тучных клетках человека // Арх. патологии, 1969. № 11. - С. 80-84.

86. Попова Н.К., Науменко Е.В., Колпаков В.Г. Локализация серотонина и обмен. Экспериментальные подходы, применяемые при изучении его роли в поведении // Серотонин и поведение. Новосибирск: Наука. Сибирское отд., 1978.-С.6-63.

87. Потапнев М.П. Апоптоз клеток иммунной системы и его регуляция цитокинами // Иммунология, 2002. №4. - С.237-242.

88. Ромейс Б. Микроскопическая техника. М.: Изд-во иностр. лит., 1954. -210с.

89. Самохвалов Г.И., Чуприянова Н.Е., Вейнберг Л.Я. Взаимодействие ганглиозидов с серотонином: физико-химические особенности и вероятное физиологическое значение. В кн.: 3-й Всесоюзный биохимический съезд: Тез. симпоз. докл. Рига, 1974. - С. 173-174.

90. Самсыгин С.А., Долгина Е.Н., Смирнов А.Н., Мортина С.В., Коняева О.Л., Костомарова Т.Д. Иммунный статус детей после спленэктомии по поводу травмы // Гематология и трансфузиология, 1986. № 12. - С. 4247.

91. Сапин М.Р., Борзяк Э.И., Бочаров М.Р., и др. Анатомия человека. М.: Медицина, 1993. - С.247-249.

92. Сапожникова М.А., Тверитнева Л.Ф., Ильницкая Т.И. Морфологические изменения аутотрансплантатов селезенки после спленэктомии в клинике и эксперименте // Арх. патологии, 1987. Т 49. - вып. 12. - С 31-37.

93. Сепиашвили Р.И. Функциональная система иммунного гомеостаза // Аллергология и иммунология, 2003. Т.4. - № 2. - С. 5-14.

94. Сергеева В.Е. Гистотопография катехоламинов в зобной железе млекопитающих // Бюлл. экспер. биол. и мед., 1974. № 4. - С. 115-118.

95. Сергеева В.Е., Маркина В.М., Скворцова И.В. Активность фосфотаз в вилочковой железе // Макро-, микроструктура тканей в норме, патологии и эксперименте. Изд-во Чув. гос. ун-та, Чебоксары, 1976. С. 16-18.

96. Сергеева B.E., Ослопова С.И. Изучение структуры популяции тимусных тучных клеток в норме и после введения корпускулярного антигена // Экспериментальная и прикладная морфология. Межвуз. сборник научных трудов, Чебоксары, 1988.-С. 31-35.

97. Сергеева В.Е., Возякова Т.Р., Сергеева А.Т. Функциональные связи клеток тимуса и лимфоузла по обеспечению нейромедиаторами // Физиология и биохимия медиаторных процессов. М., 1990. — С. 264-265.

98. Сергеева В.Е., Гордон Д.С., Гунин А.Г. Сочетание свойств макрофагов и клеток АПУД-серии в моноаминсодержащих премедуллярных клетках тимусной дольки // Морфология, 1994.-Т. 106. -№ 1-3.-С. 159-163.

99. Симбирцев А.С. Биология семейства интерлейкина-1 человека // Иммунология, 1998. -№3. -С.9-17.

100. Скуба О.Д., Дурдыев М.Д. Морфологическая оценка ауторансплантации фрагментов селезенки // Бюлл. эксперим. биол., 1984. № 8. - С. 237-240.

101. Смородченко А.Т. Лимфатические узлы в норме и при антигенных воздействиях: Учеб. пособие. Изд-во Чуваш, гос. ун-та, Чебоксары, 1996. -76 с.

102. Соловьев Ю. Н., Демина Д.М. Действие холода и ультрафиолетового излучения на систему тучных клеток // Архив патологии, 1964. — № 8. -С. 63-68.

103. Спирин И.В., Сергеева В.Е. Локализация белка S-100 в структурах тимуса методом непрямой иммуногистохимии // Актуальные проблемы диагностики и лечения в клинике внутренних болезней. Чебоксары, 2000.-С. 104-105.

104. Стоменская И.С., Стручко Г.Ю., Мохамед Захид. Морфофункциональное исследование структур надпочечников после удаления селезенки // Актуальные проблемы диагностики и лечения в клинике внутренних болезней. Чебоксары, 2000. - С. 105-107.

105. Стручко Г.Ю., Стоменская И.С., Мохамед Захид. Показатели общего анализа крови крыс после удаления селезенки // Актуальные проблемы диагностики и лечения в клинике внутренних болезней. — Чебоксары, 2000.-С. 107-109.

106. Стручко Г.Ю., Меркулова JI.M., Стоменская И.С., Мохамед Захид, Никифорова Н.В., Соловьева И.А. Акцидентальная инволюция тимуса после спленэктомии (иммуногистохимическое исследование) // Морфология, 2001. — Т.120. -№ 5.

107. Стручко Г.Ю. Морфофункционльное исследование тимуса и иммунобиохимических показателей крови после спленэктомии и иммунокоррекции. Автореф. дис. док. мед. наук. — Саранск, 2003.

108. ИЗ.Сукерник Р.И. Содержание гистамина в крови и гистаминопексия при ревматизме // Терапевтический архив, 1965. — Т. 3. С. 75-78.

109. Сысоева Л.А., Гунин А.Г. О принадлежности люминесцирующих моноаминсодержащих клеток селезенки к АПУД-системе // Экспериментальная и прикладная морфология. Изд-во Чуваш, гос. ун-та, Чебоксары, 1982. С. 16-19.

110. Тенюков В.В., Федотов В.Н. Локализация катехоламинов и серотонина в тканях легкого // Морфология и гистохимия тканей в норме, патологии и эксперименте. Изд-во Чуваш, гос. ун-та, Чебоксары, 1982. С. 86-91.

111. Тимербулатов М.В. Хасанов А.Г., Каюмов Ф.А. Морфофункциональные особенности печени и лимфатических узлов большого сальника в отдаленном периоде после спленэктомии // Морфология, 2002. Т. 121. -№ 2-3. — С. 154.

112. П.Тихомирова В.Д., Орлов М.Н., Медведев П.Б. Аутотрансплантация ткани селезенки у детей // Вестн. хир. им. Грекова, 1988. №11. - С.79-81.

113. Токмаков А.А., Кыхова М.П., Кошкина О.В., Васильев В.Ю. Влияние серотонина на функциональную активность моноцитов // Цитология, 1991. — Т.ЗЗ.-№ 1.-С. 81-87.

114. Томилец В.А., Донцов В.И. Действие серотонина на пролиферацию субпопуляций лимфоцитов селезенки мышей в ходе иммунного ответа // Иммунология, 1984. -№ 5. С.43-46.

115. Томнюк Н.Д., Рябков И.А., Данилина Е.П., Лапешин П.В. Хирургическая тактика при повреждениях селезенки // Анн. хир. гепатол., 2000. — Т. 5. — №2.-С. 290.

116. Труфакин В.А., Шурлыгина А.В. Проблемы гистофизиологии иммунной системы // Иммунология, 2002. № 1. - С. 4-8.

117. Фрейдлин И.С. Паракринные и аутокринные механизмы цитокиновой иммунорегуляции // Иммунология, 2001. № 5. - С. 4-7.

118. Фриденштейн А .Я., Лурия Е.А. Клеточные основы кроветворного микроокружения. М.: Медицина, 1980. - 210 С.

119. Хаитов P.M. Физиология иммунитета // Аллергия, астма и клиническая иммунология, 2000. № 2. - С.3-16.

120. Харченко В.П., Саркисов Д.С. и др. Болезни вилочковой железы. М., «Триада - X», 1998. - 230 с.

121. Хлыстова З.С., Калинина И.И., Шмелева С.П., Рябчиков О.П. Время появления эндокринной и лимфопоэтической функции тимуса человека в эмбриогенезе // Бюлл. экспер. биол. и мед., 2000. -№ 10. С. 453-456.

122. Хлыстова З.С., Калинина И.И., Хавинсон В.Х. Гормоны тимуса в эпидермисе кожи плода человека // Бюлл. экспер. биол. и мед., 2002. -№2.-С. 231-233.

123. Хэм А., Кормак Д. Гистология. М.: Мир, 1983. - Т.2. - С. 95.

124. Цецхладзе Г.Н. Сравнительная оценка изменений в системе иммунитета после спленэктомии, органосохраняющих операций и аутотрансплантации ткани селезенки // Georg. Med. New., 2002. №3. - С. 45-48.

125. Цыбырнэ К.А., Багдан М.А., Кандиба С.И. Аутолиенотрансплантация // Сов. Медицина, 1989. -№11. С.41-45.

126. Чеботарев В.Ф. Эндокринная регуляция иммуногенеза. Киев: Здоров я, 1979.- 194 с.

127. Чередеев А.Н., Ковальчук J1.B. Клеточные и молекулярные аспекты иммунных процессов // Итоги науки и техники. Сер. Иммунология / Под ред. Р.В. Петрова. М., 1989. - С. 19.

128. Чеснокова В.М., Иванова Л.Н., Грунтенко Е.В. Влияние тимуса на эндокринную функцию гонад и надпочечников у мышей // Бюл. эксп. биол. и мед., 1983. № 8. - С.89-92.

129. Шарова Н.И., Дзуцев А.Х., Литвина М.М., Харченко Т.Ю., Ярилин А.А. Результаты взаимодействия лимфоидных и эпителиальных клеток тимуса человека in vitro. Активация и апоптоз // Иммунология, 2000. — № 3. — С. 7-11.

130. Шиляев P.P., Виноградов С.Ю., Виноградова Е.Е. Нейромедиаторные биоамины и их значение в диагностике заболеваний у детей // Вестник Ивановской мед. академии, 1996. Т. 1. - № 2. - С.81-88.

131. Юденфренд С. Флуоресцентный анализ в биологии и медицине. М.: Мир, 1965.-484 с.

132. Юсин В.А., Сахарова Н.Г., Агеева Н.Д. Влияние серотонина на состояние тимико-лимфатической системы // Здравоохранение Туркменистана, 1972. -№ 6. С.11-13.

133. Ярилин А.А., Мирошниченко И.В., Рябинина И.Д., Филатов А.В. Исследование миграции предшественников Т-лимфоцитов в тимус ифакторов, влияющих на этот процесс // Бюл. эксперим. биол. и мед., 1986. -№ 10.-С. 447-449.

134. Ярилин А.А., Никонова М.Ф., Ярилина А.А. Апоптоз, роль в патологии, значимость его оценки при клинико-иммунологическом обследовании больных // Медицинская иммунология, 2000. Т.2. - № 4. - С.7-16.

135. Ярилин А.А. Симбиотические взаимоотношения клеток иммунной системы // Иммунология, 2001. № 4. - С.16-20.

136. Ярилин А. А. Возрастные изменения тимуса и Т-лимфоцитов // Иммунология, 2003. № 2. - С. 117-128.

137. Ader R., Cohen N., Felten D. Psychoneuroimmunology: interactions between the nervous system and the immune system // Lancet., 1995. Vol. 345. - P. 99-103.

138. Agarwala S.S., Sabbagh M.H. Histamine dihydrochloride: inhibiting oxidants and synergising IL-2-mediated immune activation in the tumour microenvironment // Expert Opin Biol Ther., 2001. Sep; 1(5). - P. 869-79.

139. Allison A.C. Some effects of pharmacologically active compuds on membrans //Brits. Med. Bull., 1968.- V.24.-P.135-140.

140. Altamura M., Caradonna L. Splenectomy and sepsis: the role jf the spleen in the immune-mediated bacterial clearance // Immunopharmacol Immunotoxicol., 2001. 23(2). - V. 153-161.

141. Alves Humberto J., Viana Gisele, Magaihaes Monica M. Kinetics of neovascularisacion of splenic autotransplantants in mic // J. Anat., 1999. -195(3).-V.387-392.

142. Amsen D., Kruisberg A.M. //Immunol. Rev., 1998. Vol.165. -P.209-229.

143. Anjuere F. et al. Definition of dendritic cell subpopulations present in the spleen, Peyerspatches, lymph nodes and skin of the mous // Blood, 1999. -Vol.15.-№93.-P.590-598.

144. Arya S., Gilbert E., Hong R., Bloodworth B. The Thymus // In: Endocrine patology, general and surgical / Ed. J. Bloodworth. N.-Y., etc., 1982. - 2 ed. -P.767-833.

145. Ashwell Jonathan D., Lu Frank W.M., Vacchio Melanie S. Glucocorticoids in T cell development and function. // Annu. Rev. Immunol. Palo Alto (Calif.), 2000.-Vol. 18.-P. 309-345.

146. Auger C., Monier J., Dardenne M. Identification of FTS on thymus ultrathin sections using monoclonal antibodies // Immunol. Lett., 1982. №5. - P.71-78.

147. Audya Т.К., Goldstein A.L. // Ann. N. Y. Acd. Sci., 1988. Vol. 548. -P.187-201.

148. Azuma Y., Shinohara M., Wang P.L. Histamine inhibits chemotaxis, phagocytosis, superoxide anion production, and the production of TNFalfa and IL-12 by macrophages via H2-receptors // Int. Immunopharmacol., 2001. -№9. — V. 1867-1875.

149. Bach J.-F., Carnaud C. In: Progress in Allergy. // New York, 1976. Vol.21. -P. 342-408.

150. Bach J.-F. Thymic factors and immunoregulation: role in autoimmue diseases // Regulation of the imune response / Ed. P. Ogra, D. Jacobs.-N.-Y., etc. -1983. — P.20-29.

151. Bach J.-F., Dardeune M. Thymus. Physiology // In: Surgery of the Thymus / Ed. J.-C. Givel.-Berlin, et,: Springer Verlag. 1990. - P. 39-45.

152. Bar-Dayan Y., Afek A. Proliferation, apoptosis and thymic involution // Tissue Cell., 1999. Vol.31. -P.391-396.

153. Bellinger D.L., Lorton D., Felten S.Y., Felten D.L. Innervation of lymphoid organs and implications in development, aging, and autoimmunity // Int J Immunopharmacol., 1992.- Apr; 14(3). P. 329-44.

154. Benditt E.P., Wong R. Proc. Soc. exp. Biol. // New York, 1955. V.90. -P.303.

155. Benet A.E., Bayer Y., Chaimof C. A rare pelvic tumor // Harefuah., 1990. -Vol. 118.-№6.-P. 325-326.

156. Benoist S. Median and long-term complications of splenectomy // Ann. Chir., 2000.- 125(4). -V.317-324.

157. Bjorklund A., Nobin A., Steveni H. Regeneration of central serotonin nurons ater axonal degenetion induced у 56-dihydrooxytryptamine // Brain Res., 1973. — V.50.-№1.- P.214-220.

158. Brandt C.T., Maciel D.T., Caneca O.A., Castro C.M., Araujo L.B. Autotransplantant of spleen tissue in children with schistosomiasis: evaluation of splenic function after splrnosis // Mem. Inst. Oswaldo Cruz., 2001. — 96 Suppl.-V. 117-122.

159. Brigden M.L. Detection, education and management of the asplenic or hyposplenic patient // Amer. Fam. Physician., 2001. Vol. 63. - №3. - P. 499-506.

160. Brow O.A., Sosa Y.E., Dardenne M. Studies on the gonadotropin-releasing activity of thymulin: changes with age // J. Gerontol. Biol.Sci., 2000. Vol.55. -P. B170-B176.

161. Burke A., Cunha M. Infections in nonleukopenic compromised hosts (diabetes mellitus, steroides and asplenia) in critical care //- J. Critical Care Clinics., 1998.- Vol.14.-P.263-282.

162. Chaffoy de Courcellecs et al. The signal transducing system coupled to serotonin-S2-receptors // Experientia., 1988. Vol.44. - P. 131-133.

163. Christo M.C., DiDio L.J. Anatomical and surgical aspect of splenic segmentectomies // Anat. Anz., 1997. 179(5). - V.461-474.

164. Cross S.A., Ewen S.W., Rost F.W. A study f methods available for cytochemical loclisation of histamine byfluorescece induced with o-phtandehyde or aceldehyde // Hystochem. J., 1971. V.3. - №6. - P.471-476.

165. Consolinni R., Legitimo A., Calleri A., Milani M. Distribution of age-related thymulin titres in normal subject through the course of life // Clin. Ex. Immunol., 2000. Vol.121. - P.444-447.

166. Corazza G.R., Zoli G., Ginaldi L. Tuftsin deficiency in AIDS // Lancet., 1991. -Vol.337. Issue 8732.-P.12-13.

167. Crosby W.H. Hyposplenism: an inquiry into normal functions of the spleen // Annu. Rev. Med., 1963. Vol. 14. - P. 349 - 360.

168. Davidova T.V., Evseev V.A., Fomina V.G. Comparative analisis of action of antibodes to do pamie and peritoneal macrophages // Patl. Fisiol. Exp. Ter., 1998.-№2.-P. 10-12.

169. Dasi F.J. Ortiz J.L., Morcillo E.J. Histamine upregulates phosphodiesterase 4 activity and reduces prostaglandin E2-inhibitory effect in human neutrephils // Inflamm. Res., 2000. -№11. 600-609.

170. Del Rey A., Kabiersch A., Petzoldt S., Besedovsky H.O. Sympathetic abnormalities during autoimmune processes: potential relevance of noradrenaline-induced apoptosis // Ann N Y Acad Sci. 2003 May;992:158-67.

171. Diamond L.K. Splenectomy in childhood and the hazard of overwhelming infection // Pediatrics., 1969. Vol. 43. - №5. - P. 886-889.

172. Elenkov I.J., Wilder R.L., Chrousos G.P., Vizi E.S. The sympathetic nerve—an integrative interface between two supersystems: the brain and the immune system // Pharmacol Rev., 2000. Dec;52(4). - P.595-638.

173. Escuturk A., Soyletir G. The effects of experimental splenic autotransplantation and imipenem-cilastatin treatment in postsplenectomy Pseudomonas aeruginosa sepsis // Res. Exp.Med., 1995. 195(3). — V.46-49.

174. Falk В., Hillarp N., Thieme G., Torp A. Fluorescence of catecholamines and related compoundscondesed with formaldehyde // J. Histochem. Cytochem., 1962. — V.10. -P.348-354.

175. Ferrone D., Piveonello R., Van Hagen P.M. Age-related decrease of somatostatin receptor number in the normal human thymus // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 2000. Vol.279. - P.E791-E798.

176. Fleshner M., Goehler L.E. Termogenic and corticosterone responses to intravenous cytokines (IL-1 and TNF-a) are attenuated by subdiaphragmtic vagotomy // J. Neuroimmunol., 1998. Vol. 86 (2). - P. 134-141.

177. Flores K.G., Sempowski G.D., Haynes B.F., Hale L.P. Analysis of the human thymic perivascular space during aging // J.Clin. Invest., 1999. Vol.104. -P.1031-1039.

178. Furano A. V., Green J. P. The upake of biogenic amines by mast cells of te rat //J. Physiol.,Lond., 1964.-Vol. 170.-P. 263-271.

179. Gaillard R.C., Daneva Т., Hadid R., Muller K., Spinedi E. The hypothalamo-pituitary-adrenal axis of athymic Swiss nude mice. The implications of T lymphocytes in the ACTH release from immune cells // Ann N Y Acad Sci., 1998. May 1;840. - P.480-90.

180. Geenen V., Robert F., Fatemy M. Neuroendocrine-immune interactions in N-cell entogeny // Thymus, 1989. Vol. 13. - P.l31 -140.

181. Gomez L. et al. Histologic study of experimental splen transplant in rats // minerva Chir., 2000. 55(11). - V.741-744.

182. Gordon DS, Sergeeva VE, Smorodchenko AT, Kirillov NA, Petrova TL, Olangin OI, Spirin IV. Fluorescent granular cells of the thymus can be identified as dendritic macrophages // Bull Exp Biol Med, 2001. Jul; 132(1). -P.713-4.

183. Goverman J., Brabb Т., Huseby E.S., Farr A.G. // Immunol. Today. 1997. -Vol. 18. -P.204-208.

184. Groebli Y., Tschantz P., Baumann R.P. Autotransplantation splenique: a propos de 3 cas // Helv. Chir. Acta., 1983. Vol. 50. - № 1-2. - P. 87-91.

185. Halasz B. Complexity of the neuroendocrine system // Bull, et mem. Acad, roy. med., 1999.- 154.-№10-12. C.349-355.

186. Harman B.C., Jenkinson E.J., Anderson G. Microenvironmental regulation of Notch signalling in T cell development // Semin Immunol., 2003. Apr; 15(2). -P.91-7.

187. Hatae N., Kita A., Tanaka S., Sugimoto Y. Inductin of adherent activity in mastocytoma P-815 cells by the cooperation of two prostaglandins in UV-induced systemic immunosupression // J. Biol. Chem., 2003. Vol. 278 (20). -P. 17977-17981.

188. Haynes B.F. Mast cells initiators immuniti and host defense // Thymus., 1990. -Vol.16. -P.143-157.

189. Haynes L., Linton P.J., Eaton S.M. IL-2< but not other © chain-binding cytokines, can reverse the defect in generation of CD44 efector T cells from nai've T cells of aged mice // J.Exp, med., 1999. Vol.190. - P. 1013-1024.

190. Hellstrand K. Histamine in cancer immunotherapy: a preclinical background // Semin Oncol., 2002. Jun;29(3 Suppl 7). - P.35-40.

191. Heltner L., Kolsch S., Stassen M., Kaspers U., Kremer J.-P. Inactivated Mast Cells, IL-1 Up-regultes the Production of Several Th2-Related Cytokine Including IL-9 // J. Immunol., 2000. 164: -V. 5556-5563.

192. Henneking K., Muller C., Franke F., Becker H., Schwemmle K. Follow-up of heterotopic autotransplantation of splenic tissue after traumatic splenic rupture in childhood//Chirurg., 1994.- May;65(5).-P.457-68.

193. Henz B.M., Maurer M., Lippert U., Worm M., Babina M. Mast cells initiators immuniti and host defense // Exp. Dermatol., 2001. 10(1). - V.l-10.

194. Hirokawa K., Mollure J., Goldstein A. Age-related changes in localisation of thymosin in the human thymus // Thymus, 1982. Vol.129. - P.2673-2677.

195. Hirokawa K., Saitoh K., Hatakeama S. Enzyme histochemical study on human thymus and its age change // Acta. Pathol. Jpn., 1983. 33. - P. 275-285.

196. Hollander G. A., Wang В., Nichoglannopoulou A. // Nature, 1995. Vol. 6. -P. 350-353.

197. Jameson S.C.// Ann. Rev. Immunol., 1999.-Vol.13.-P.93-126.

198. Janossy G., Bofill M., Tredosiewicz L. Cellular Differentiation of lymphoid subpopulations and their microinviron // The Human Thymus / Ed. H. Muller-Hermellink.-Berlin, etc.,: Springer Verlag., 1986. -P.89-127.

199. Jenkinson E. Embriology of lymphoid system // Prog. Allergol., 1981. — 29. — P.2-27.

200. Jenkinson W.E., Jenkinson E.J., Anderson G. Differential requirement for mesenchyme in the proliferation and maturation of thymic epithelial progenitors//J Exp Med., 2003. Jul 21; 198(2). - P.325-32.

201. Josefsson E. Chatecholamines are synthesized by mous lymphocytes and regulate function of apoptosis // Immunology, 1996. №86. - P.140-146.

202. Jutel M, Klinker S., Histamine upregulates Thl and downregulates Th2 responses due to different patterns of surface histamine 1 and 2 receptor expression // Int. Arch.Allergy Immunol., 2001. № 1 -3. - V.l90-192.

203. Jutel M. Watanabe T. Histamine regulates T-cells and antibody responses by differential expression of HI and H2 receptors // Nature., 2001. №413(6854) — P.420-425.

204. Kameyoshi Y., Morita E., Tanaka Т., Hiragun Т., Yamamoto S. Interleukin-1 alpha enhances mast cell growth by a fibroblast-dependent mehanism // Arch. Dermatol. Res., 2000. 292 (5). - P.240-247.

205. Kapcala L.P., He J.R., Gao Y.Subdiaphragmatic vagotomy inhibits intraabdominal IL-1 beta stimulation of arenocorticotropin secretion // Brain Res, 1996.-728 (2).-P. 247-254.

206. Kato Y., Yu D., Lukish J.R. Hepatocyte growth factor enhances intestinal mucosal cell function and mass in vivo // J. pediatr. Surg., 1997. №7. -Vol.32.-P.991-994.

207. Kawahara J. Histochemical and mmunohistochemical demnstration of mcrophages and dendritic cells in te lingual periodontal ligament f rat incisura // Arch. Histol. Cytol.,1992. -№55. -P.211-217.

208. Kendall M.D. Age and seasonal changes in the thymus. The cells of the thymus // In: The Thymus Gland / Ed. M. Kendall.-London., 1981. P. 21-37, 63-85.

209. Kendall M., van der Wijngaert F., Schuurman H. Heterogenity of the Human thymus epitelial microenviroment at the ultrastructural level // In: Microenviroments in the lymphoid system / Ed. G. Klaus. Adv. Exp. Med. Biol. - 1985. - V.l86. - P.289-297.

210. Kendall M. Thymus. Anatomy //In: Surgery of the Thymus / Ed. J. C. Givel.-Berlin, etc,: Springer Verlag., 1990. P. 16-27.

211. Kirchner Т., Tzartes S., Hoppe F. Pathogenesis of Myastenia Gravis. Ach-R-related antigenic determinants in tumor-free ttthymuses and thymic epitelial tumors // Am. J. Pathol., 1988. 130. - P.268-280.

212. Knezevic S., Stefanovic D., Petrovic M. Allotransplantation of the spleen // Acta Chir. Iugosl., 2002. 49 (3). - V. 101-106.

213. Kohm A.P., Sanders V.M. Norepinephrine and beta 2-adrenergic receptor stimulation regulate CD4+ T and В lymphocyte function in vitro and in vivo // Pharmacol Rev., 2001. Dec;53(4). - P.487-525.

214. Kovalchuk L.V., Cheredeev A.N. Apoptogenesis of immunodeficiency diseases //Rus. J. Immunol., 1999. Vol. 71. - P.2-8.

215. Krouwels F.H. Histamine affects IL-4, IL-5, and INF-production by human T cell clones from the airways and blood // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol., 1998. -№18(5). -V.721-730.

216. Laufer T.M., Fan L., Glimcher L. H. // J. Immunol., 1999. Vol. 162. -P.5078-5084.

217. Leemans R., Beekhuis H., Timens W., The Т.Н., Klasen H.J. Fc-receptor function after human splenic autotransplantation // Br. J. Surg., 1996. -Apr;83(4). P.543-6.

218. Leemans R., Manson W., Snijder A.M. Immune response capacity after human splenic autotransplantation restoration of response to individual pneumococcal vaccine subtypes // J. Ann. of surg., 1999. Vol.229. - P.279-285.

219. Leng J., Chen W., Zhang J. The effect of splenectomy on alveolar macrophages morphology and function // Zhonghua Yi Xue Za Zhi, 1996. -Jul;76(7). P.524-6.

220. Lorentz A., Schwengberg S., Sellge G., Manns M.P. Human Intestinal Mast Cells Are Capable of Producing Different Cytokine Profiles: Role of IgE Receptor Cross-Linking an IL-41 // J. Immunol., 2000. 164. - P. 43-48,.

221. Lynch A.M., Kapila R. Overwhelming postsplenectomy infection // Infect. Dis. Clin. N. Amer., 1996.-Vol. 10.-№4.-P. 693-707.

222. Madden K.S., Rajan S., Bellinger D.L., Felten S.Y., Felten D.L. Age-associated alterations in sympathetic neural interactions with the immune system // Dev Comp Immunol., 1997. Nov-Dec;21 (6). - P.479-86.

223. Maestroni G.J. Dendritic cell migration controlled by alpha lb-adrenergic receptors // J Immunol., 2000. Dec 15; 165(12). - P.6743-7.

224. Marschall J.S., King C.A., McCurdy J.D. Mast cell cytokine and chemokine responses to bacterial and viral infection // Curr. Pharm., 2003. Des. 9 (1). -P. 11-24.

225. Marques R.G. Regeneration of splenic utotransplantants // Ann. Hematol., 2002.- 81(1 l).-V.622-626.

226. Mazzoni A., Leifer C.A. Histamine regulates cytocine production in maturing dendritis cells, resulting in ltered T cell polarisation // J. Clin. Invest., 2003. -108(12).-P. 1865-1873.

227. McCurdy J.D., Lin T.J., Marshall J.S.Toll-like receptor 4-mediated activation of murine mast cells // J. Leukoc. Biol., 2001. 70(6). - P.977-984.

228. Melmon A., Rocklin R.E., Rosenkranz R.P. Autocoids as modulators of the inflammatory and immune respone // Am. J. Med., 1981. № 1. - P. 100-106.

229. Mesheri S. New insights into the immunoregulatory functions of mast cells // Rew. Fr.allergol. et immunol., 2002. 42. - № 1. - P.6-10.

230. Mignini F., Streccioni V., Amenta F. Autonomic innervation of immune organs and neuroimmune modulation // Auton Autacoid Pharmacol., 2003. -Feb;23(l). -P.l-25.

231. Miko I., Brath E., Kovacs J. Spleen transplantation in mice: a novelexperimental model for immunology study // Microsurgery., 2001. -21(4). — V.140-142.

232. Minter L.M., Osborne B.A. Cell death in the thymus it1 s all a matter of contacts // Semin Immunol., 2003. Jun;15(3). - P. 135-44.

233. Moore F.A., Stevens R.E., Moore E.E., Aragon G.E. Failure of splenic implants to protect against fatal postsplenectomy infection // Amer. J. Surg., 1983.-Vol. 146.-P. 413-414.

234. Muller U., Rothlin M. Splenic neoformation following trauma-induced splenectomy diagnosis and function // Swiss. Surg., 1995. - №5. - P. 230235.

235. Naredi P. Histamine as an adjunct to immunotherapy // Semin Oncol., 2002. -Jun;29(3 Suppl 7).-P.31-4.

236. Nossal G.J.V. // Cell., 1997. vol.76. - P.229-240.252.01sen N.J. Olson G., Viselli S.M. Androgen eceptors I thymic epitelium modulate thymus size and thymocyte devlopment // Endocrinology, 2001. -Vol. 142.-P. 1278-1283.

237. Ota N. Splenic autotransplantation restores the immune function of the spleen // Nippon Geka Gakkai Zasshi, 1994. Sep. 95(9). - P.689-98

238. Pabst R. Regeneration of autotransplanted spnic fragments: Basis immunological and clinical relevance // Clin, and Exp. Immunol., 1999. 117. - № 3. - P.423-424.

239. Panigada M. GKLF in thymus epithelium as a developmentally regulated element of thymocytestroma cross-talk // Mech Dev., 1999. № 81 (1-2). -P.103-113.

240. Patay В., Lipnow H., Feindt J., KurzB. Catecholamines and lipopolisaccharide synrgetically induced the release of interleukin-6 from thymic epitelial cells // J. Neuroimmunol., 1998.-V. 15.-№ 86(2).-P. 182-189.

241. Pentikainen P., Kekki M., Mustala O. // Scand. J. Gastroent., 1969. Vol.4. -Suppl. 4.

242. Perla D. The regeneration of autoplastic splenic transplants // Amer. J. Pathol., 1936.-Vol. 12.-P. 665-675.

243. Pierpaoli F., Koop H., Muller J. Interdependence between neuroendocrine programming and the generation of immune recognition in ontogeny // Cell. Immunol., 1977.-Vol.29.-P. 16-27.

244. Pitkanen J., Peterson P. Autoimmune regulator: from loss of function to autoimmunity // Genes Immun., 2003. Jan;4(l). - P. 12-21.

245. Pongracz J., Hare K., Harman В., Anderson G., Jenkinson E.J. Thymic epithelial cells provide WNT signals to developing thymocytes // Eur J Immunol., 2003. Jul;33(7). - P. 1949-56.

246. Power R.E., Kay E.W., Bouchier-Hayes D. Exogenous and endogenous angiogenic stimuli do not augment splenic autotransplantation // Eur. J. Surg., 2002.- 168(4).-P.247-50.

247. Reichert R., Weissman J., Buncher E. Phenotipic analysis of thymocytes that express homing receptors for peripherial lymph nodes // J. Immunol., 1986. -136.-P. 3521-3529.

248. Rivier С. Role if nitric oxide and carbon monoxide in modulting the ACTH response to immune and non-immune signals // Neuroimmunomodulation., 1998.-5 (3-4).-P. 203-13.

249. Rook Graham A.W. Glucocorticoids and immune function // Best. Pract. and Res. Clin.Endocrinol. andMetab., 1999. 13.-№4. - C.567-581.

250. Rose A.T., Newman M.I., Debelak J. The incidence of splenectomy is decreasing: lessons learned from trauma experience // Amer. Surg., 2000. -Vol. 66. -№5. P. 481-486.

251. Rotenberg E.V. // Curr. Opin. Immunol., 1994. Vol.6. - P.257-265.

252. Savino W., Hung P., Corrgan A. Thymic hormone-containing cells. Immunohistological defection of metallothionein within the cells bearing thymulin in human and mouse thymuses // J. Histochem. Cytochem., 1984. -32.-P. 942-946.

253. Savino W., Dardenne M., Marche C. Thymic epitelium in AIDS // Amer. J. Pathol., 1986. 22. - P.302-307.

254. Schmitt D., Monier J., Dardenne M. Cytoplasmic localisation of FTS in thymic epitelial cells: an immunoelectronmicroscopical study // Thymus, 1980. 2. -P. 177-186.

255. Schultz J., Daly J.W. Adenosine 3x, 5x-monophosphate in guineapig cerebral cortical slices: effects of a and p-adrenenergic aents, histamine, serotonin and adenosine// J. Neurochem., 1973. Vol.21,3. -P.573.

256. Selye H. Thymic and adrenals in the response of the oganism to injuries and intoxications // Brit.J.Exp.Panth., 1946. 17. - P. 234-248.

257. Sher K.S. Splenic autotransplantation // N. Engl. J. Med., 1988. Vol.318. -№3. —P. 1542-1543.

258. Shiraishi J., Utsuyama M. Essential microenvironment for thymopoiesis is preserved in human adult and agend thymus // Clin. Dev. Immunol., 2003. -Mar.-10(1).-P.53-9.

259. Shier К. The thymus according to Schambacker: medullary duct and reticular epitelium of thymus and thymomas // Cancer., 1981. 48. - P. 1183-1199.

260. Sirois J. Importance of Histamine in the Cytokine Network in the Lung through H2 and H3 Receptors: Stimulation of IL-10 production // J. Immunol., 2000. №164. - V2964-2970.

261. Smith E., De Young N.J., Drew P.A. Immune cell subpopulations in regenerated splenic tissue in rats // Aust N Z J Surg, 1999. Jul;69(7). - P.522-5.

262. Song C. The effect of thymectomy and IL-1 on memory: implications for the relationship between immunity and depression // Brain Behav Immun., 2002. -Oct; 16(5). P.557-568.

263. Stefulj J., Jernej В., Cicin-Sain L., Rinner I., Schauenstein K. mRNA expression of serotonin receptors in cells of the immune tissues of the rat // Brain Behav Immun. 2000 Sep; 14(3):219-24.

264. Szendroi Т., Miko I., Hajdu Z., Acs G., Kathy S., Furka I., Szabo L. Splenic autotransplantation after abdominal trauma in childhood. Clinical and experimental data // Acta Chir Hung, 1997. 36(1-4). - P.349-51.

265. Talle M.A., Brown M.J., Blynn C.M., Audhya Т.К., Goldstein G. Use of monoclonal antibodies to identify thymopoietin in cultured human thymic epithelial cells // Thymus, 1991. Nov; 18(3). - P. 169-84.

266. Tang W.H., Wu F.L., Huang M.K., Friess H. Splenic tissue autotransplantation in rabbits: no restoration of host defense // Langenbecks Arch Surg, 2003. -Jan;387(9-10). P.379-85.

267. Tice A. Hope for patients with asplenia or hyposplenism // Amer. Fam. Physician., 2001. Vol. 63. - №3. - P. 439-440.

268. Van Ewijk W. Immunohistology of lymphoid and non-lymphoid cells in the thymus in relation to lmphocyte differention // Amer. J. Anat., 1984. 70. -P.643-644.

269. Vizi E.S., Elenkov I.J. Nonsynaptic noradrenaline release in neuro-immune responses // Acta Biol Hung., 2002. 53(1-2). - P.229-44.

270. Von Gaudecker B. The development of the human thymus microinvironment // The Human Thymus / Ed. H. Muller-Hermellink.-Berlin, ect.,: Springer Verlag., 1986.-P.2-43.

271. Wekerle H., Ketelson V., Zurn A., Fulpuis B. Interathymic patogenesis of Myasthenia Gravis: Transient expression of AchR on thymus derived myogenic cells // Eur. J. Immunol., 1978. 8. -P.579-581.

272. Wekerle H., Muller-Hermelink H. The thymus in Myasthenia Gravis // The Human Thymus / Ed. H. Muller-Hermelink.-Berlin, etc.,: Springer Verlag., 1986.-P. 179-207.

273. Wilson N.S., El-Sukkari D., Belz G.T., Smith C.M., Steptoe R.J., Heath W.R., Shortman K., Villadangos JA. Most lymphoid organ dendritic cell types are phenotypically and functionally immature. // Blood. 2003 Jun 5.

274. Woodhead V.E. From sentinel to messengeri an extended phenotypic analisis of the monocyte to dendritic cell transiten // Immunol., 1998. № 94. - P.552-559.

275. Zatz V., Goldstein A. Thymosins, lymphokies and the immunology of aging // Gerontology., 1985. 31. - P.263-277.

276. Zhang Y, Ma H, Cai Z. Serum tuftsin concentration as an indicator of postoperative splenic function after spleen-preserving surgery // Zhonghua Wai Ke Za Zhi, 1996. Aug;34(8). - P.479-81.

277. Zhao В., Moore W.M., Lamb L.S. Jr, Eddy V.A., Parrish R.S., Almond C.H., Barwick E.M., Haynes J.L., Brown J.J. Pneumococcal clearance function of the intact autotransplanted spleen // Arch Surg, 1995. Sep; 130(9). - P.946-50.

278. Yarilin A.A. Immunohistology of lymphoid and non-lymphoid cells in the thymus in relation to lmphocyte differention // Russian J. Immunol., 1998. -Vol.3.-P.5-20.

Информация о работе

Шумилова, Елена Борисовна
кандидата медицинских наук
Саранск, 2004
ВАК 03.00.25

Диссертация

Морфофункциональное состояние тимуса через 3 - 60 сут после аутолиенотрансплантации - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы