Морфо-функциональное состояние эритроцитов и гемоглобина лабораторных животных при анемиях и действии экдистероидсодержащей субстанции серпистен

Иванкова, Жанна Евгеньевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Морфо-функциональное состояние эритроцитов и гемоглобина лабораторных животных при анемиях и действии экдистероидсодержащей субстанции серпистен
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Морфо-функциональное состояние эритроцитов и гемоглобина лабораторных животных при анемиях и действии экдистероидсодержащей субстанции серпистен"

На правах рукописи

□03053921

Иванкова Жанна Евгеньевна

МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЫЮЕ СОСТОЯНИЕ ЭРИТРОЦИТОВ И ГЕМОГЛОБИНА ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ АНЕМИЯХ И ДЕЙСТВИИ ЭКДИСТЕРОИДСОДЕРЖАЩЕЙ СУБСТАНЦИИ СЕРПИСТЕН

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Ярославль 2007

003053921

Работа выполнена на кафедре физиологии человека и животных ГОУ ВПО "Сыктывкарский государственный университет"

Научный руководитель:

Кандидат биологических наук, доцент Мойсеенко Нелли Алексеевна

Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук, доцент Мельников Андрей Александрович

Доктор биологических наук, профессор Хомутов Александр Евгеньевич

Ведущая организация:

Институт физиологии природных адаптаций УрО РАН, г. Архангельск

Защита состоится " " Щ/ШТА 2007 г. в часов на

заседании диссертационного совета Д 212.307.02 при ГОУ ВПО "Ярославский государственный педагогический университет им. К.Д. Ушинского" по адресу: 150000, г. Ярославль, ул. Республиканская, д.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО "Ярославский государственный педагогический университет им. К.Д. Ушинского"

108.

Автореферат разослан

2007 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент

Тихомирова И.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В природных и производственных условиях нашего времени организм нередко испытывает влияние необычных, чрезмерных и жестких факторов среды. Адаптация к ним может носить самый различный характер и затрагивать все стороны организации и жизнедеятельности человека и животных (H.A. Агаджанян и соавт., 1997; H.A. Агаджанян, H.A. Ермакова, 1997). Неспецифическую сопротивляемость организма можно повысить с помощью физиологически активных соединений природного происхождения - адаптогенов. В качестве наиболее перспективных из них в настоящее время исследуют фитоэкдистероиды. Актуальной задачей современной физиологии является выяснение роли этих веществ в обменных процессах животных. Для теплокровных животных экдистероиды не являются эндогенными. Тем не менее, многие стороны обменных процессов в клетках и органах высших животных восприимчивы к действию экдистероидов в большей степени, чем ко многим другим веществам растительного происхождения (A.A. Ахрем, Н.В. Ковганко, 1989), в то время как сравнительные эксперименты с кортизолом млекопитающих не показали его активности у насекомых. Известно, что фитоэкдистероиды оказывают анаболическое, адаптогенное, антиоксидантное действие (А.П. Азизов, 1997; Р.Д. Сейфулла, 1998; И.Н. Тодоров и соавт., 2000; R. Lafont, L. Dinan, 2003). Однако многие стороны действия этих веществ, в частности, на систему крови, остаются либо не изученными, либо носят отрывочный, эпизодичный характер. Выяснение влияния этих веществ на систему крови очень важно, так как кровь является интегральной системой, связывающей воедино и затрагивающей все органы и ткани, поэтому изменение её состояния может сказаться на работе функциональных систем организма в целом (Г. И. Козинец, 1990).

Цель исследования. Целью настоящей работы является исследование морфо-функциональных свойств эритроцитов (Эр) и гемоглобина (Hb) лабораторных животных при действии экдистероидсодержащей субстанции Серпистен (ЭС) в норме и в условиях анемии.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Охарактеризовать параметры крови лабораторных животных после развития экспериментальной гемолитической фенилгидразиновой анемии и при введении ЭС Серпистен.

2. Исследовать особенности развития гемолитической анемии на фоне предварительного курсового введения ЭС Серпистен.

3. Исследовать динамику и характер восстановления параметров крови млекопитающих в условиях постгеморрагической анемии и при действии ЭС Серпистен.

4. Изучить влияние режима и дозы введения ЭС Серпистен на показатели и свойства Эр и НЬ, в зависимости от пола и возраста животного, сезона исследования.

5. Исследовать в опытах in vitro щелочерезистентность (ЩР) и электрофоретические свойства НЬ эритроцитарной массы и НЬ гемолизата крови животных при действии ЭС Серпистен.

Научная новизна. Впервые показано стимулирующее эритропоэз действие ЭС Серпистен, что выражается в увеличении относительного и абсолютного количества ретикулоцитов (Rt), ускорении созревания циркулирующих в русле крови Rt, сопровождающегося уменьшением количества в клетках ретикуло-филаментозной субстанции, что является отражением процесса стимуляции биосинтеза НЬ.

Впервые показано стабилизирующее действие фитоэвдистероидов на мембрану Эр в реакциях осмотического и кислотного гемолиза, и опосредованное мембраной стабилизирующее действие их на содержащийся в клетках НЬ. Морфология Эр крыс, мышей и кроликов модифицируется при введении ЭС Серпистен. Впервые показано нормализующее действие ЭС Серпистен на кислотно-основное состояние крови (КОС) лабораторных животных.

Впервые показан защитный эффект вещества на Эр при экспериментальных постгеморрагической (кролики) и гемолитической (фенилгидразин (ФГ), крысы) анемиях: уменьшение уровня Эр с тельцами Гейнца у животных с вызванной гемолитической анемией как при предварительном введении препарата, так и на фоне развивающейся анемии.

В опытах с кровопусканием на кроликах показан антистрессовый и адаптогенный эффекты ЭС Серпистен. Ретикулоцитоз (один из показателей стресса) наименее выражен у животных, получавших ЭС Серпистен.

Научно-практическая значимость. В результате проведенного исследования расширено представление о влиянии фитоэкдистероидов на кровь млекопитающих, предложен возможный механизм действия этих веществ. Полученные результаты найдут своё место в понимании физиолого-биохимических механизмов действия вещества в организме млекопитающих, а также при разработке лекарственных препаратов и (или) биологически активных пищевых (кормовых) добавок. На основании проведенного исследования ЭС Серпистен можно

рассматривать как гематопротекторное средство при приобретенной гемолитической анемии и острой кровопотере

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Усиление и ускорение регенерации крови в условиях анемии может быть достигнуто введением ЭС- Серпистен.

2. При анемиях и в норме ЭС Серпистен оказывает мембраностабилизирующее действие на поверхностную мембрану Эр лабораторных животных. Эффект зависит от вида, пола и возраста животного, от дозы вводимого вещества, а так же сезона, в котором проводилось исследование.

3. В условиях in vitro и iv vivo изменяются физико-химические свойства НЬ: фракционный спектр, относительная электрофоретическая подвижность отдельных фракций НЬ (ОЭФП) и щелочерезистентность НЬ при влиянии ЭС Серпистен. Эффект опосредован поверхностной мембраной Эр, зависит от вида, пола животных и сезона исследования.

Апробация работы. Результаты исследований были доложены и обсуждены на XVIII Съезде физиологического общества (г. Казань, 2001); научной конференции «Экологическая ботаника: наука, образование, прикладные аспекты» (г. Сыктывкар, 2002); Симпозиуме с международным участием «Актуальные проблемы адаптации к природным и экосоциальным условиям среды» (г. Ульяновск, 2002); XIX Съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (г. Екатеринбург, 2004); IV Молодежной научной конференции Института физиологии Коми НЦ УрО РАН «Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике» (г. Сыктывкар, 2005); IX Международном Съезде «Фитофарм 2005» (г. Санкт-Петербург, 2005); IV Всероссийской научной конференции «Химия и технология растительных веществ» (г. Сыктывкар, 2006).

По теме диссертации опубликовано 18 печатных работ, из них 5 статей.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 202 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов и их обсуждения, выводов, списка литературы, включающего 199 отечественных и 62 иностранных источников. Работа иллюстрирована 43 таблицами и 64 рисунками.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалом исследования служила смешанная кровь крыс линии Wistar (п=427, ш=200,9±13,9г) и нелинейных белых (п=233, ш=191,21±11,4г), мышей линии СВА (n=78, т=20,6±0,3г), мышей-

альбиносов (п=172, ш=24,6±2,4г), венозная кровь кроликов (п=59, т=3,38±0,03кг).

Выделение ЭС Серпистен из надземной части растений серпухи венценосной (БеггаМа согопШа Ь.) проведено в лаборатории биохимии и биотехнологии растений Института биологии Коми НЦ УрО РАН (зав. лаб., д.б.н., проф. В.В. Володин). В состав препарата входят фитоэкдистероиды: 20-гидроксиэкдизон - 80%, 25Б-инокостерон - 11%, а-экдизон - 5%. Схема эксперимента

Кровь крыс и мышей получали методом тотального обескровливания декапитацией после легкого хлороформного наркоза; у кроликов - пункцией краевой вены уха в объеме 1-1,25 мл, стабилизировали гепарином.

I. Вызванная гемолитическая (фенилгидразиновая) анемия. Анемию вызывали 2-3 кратными подкожными инъекциями 2,5% фенилгидразина (ФГ). Проведены семь серий эксперимента с использованием крыс линии ^г'^/яг (самцы и самки). Крыс делили на четыре группы: опытную (ЭС), контрольную №1 (0,9% ЫаС1), контрольную №2 (ФГ) и интактную. В разных сериях ЭС вводили как до введения ФГ (в дозах 5 и 20 мг/кг), так и после (в тех же дозах).

II. Кровопускание. Проведены две серии эксперимента на кроликах породы Шиншилла. Кроликов делили на три группы: опытную (ЭС), контрольную №1 (0,9% ЫаС1) и №2 (только кровопускание, без введения каких либо веществ). В первой серии животным опытной группы вводили подкожно раствор ЭС в дозе 2,5 мг/кг в день кровопускания, затем на 3,6,9,12 дни после. Кровь для анализа брали до эксперимента (за 5-14 дней), в день кровопускания и на 3,6,9,12,15 дни после. При кровопускании забирали »20% от общего объёма крови, который рассчитывали как 5,4% от массы тела (И.П. Западнюк и соавт.,1974). Во второй серии кроликам в течение 5 дней вводили растворы ЭС (по 2,5мг/кг). На 6-й день - кровопускание. Отслеживали восстановление параметров крови в течение 14 дней, кровь для анализа брали до кровопускания (фоновые исследования), в день кровопускания, и на 3, 6,9, 12 и 14 дни.

III. Однократное введение ЭС Серпистен. Эксперимент проводили на нелинейных белых крысах, мышах линии СВА, нелинейных белых мышах и кроликах породы Шиншилла. На нелинейных белых крысах проведены четыре серии эксперимента. Крыс делили на три группы: опытную (ЭС), контрольную (0,9% №С1) и интактную. Крысам опытных групп однократно вводили ЭС в дозе 20 мг/кг, декапитировали через: 1 (п=31); 2 (п=65); 12 (п=37) и 24 (п=51) часа.

Кроме опытов in vivo на крови белых нелинейных крыс проводили опыты in vitro. Кровь крыс делили на четыре пробы: 1 - опыт №1 (к эритроцитарной массе (ЭрМ) добавляли ЭС в объеме 0,007 мл на 1 мл ЭрМ); 2 - контроль №1 (к ЭрМ добавляли соответствующий объем 0,9% NaCl); 3 - опыт №2 (к Hb гемолизата крови добавляли ЭС в объеме 0,007 мл ЭС на 1 мл гемолизата); 4 - контроль №2 (к гемолизату добавляли 0,9% NaCl). Все пробы инкубировали в течение 60 минут при 37°С. Мышей СВА (5- (п=39) и 12-месячных (п=39)) делили на пять групп: интактная; опытные №1 и 2 (вводили ЭС в дозе 5 и 20 мг/кг, соответственно); контрольные №1 и 2 (вводили 0,9% NaCl). На белых мышах проведены две серии эксперимента (первая - в зимний период года, вторая - в летний). Мышей делили на 5 групп: интактная, опытные №1 и 2 (вводили ЭС в дозах 5 и 20 мг/кг, соответственно), контрольные №1 и 2 (получали 0,9% NaCl). Методы исследования крови

Показатели крови определяли по общепринятым методам (В.В. Меньшиков, 1987). Параметры КОС крови определяли с помощью анализатора фирмы «Ciba Corning» 288 Blood Gas System (Англия). Вязкость крови определяли с помощью вискозиметра ВК-4.

Осмотическую резистентность Эр (ОРЭ) определяли унифицированным методом с помощью растворов NaCl убывающей концентрации от 0,9% до 0,2% с шагом в 0,05% в модификации Л.И. Идельсона (М.А. Базарнова, 1988).

Кислотный гемолиз Эр (КРЭ) проводили по методу И.А. Терскова и И.И. Гительзона с помощью 0,002 н HCl и отслеживанием процесса гемолиза Эр каждые 15 сек (И.И. Гительзон, И.А. Терсков,1957).

Щелочерезистентность (ЩР) Hb определяли по Зингеру (И. Тодоров, 1968) в нашей модификации: прослеживание процесса денатурации белка в динамике на 1,3 и 5 минутах действия щелочи (NaOH) и использование гемолизатов с концентрацией Hb 5 г/%.

Электрофорез в полиакриламидном геле проводили по Г. Мауреру (1971) в системе буферных растворов и гелей №1. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Морфо-функциональное состояние крови крыс при развитии гемолитической анемии и влиянии ЭС Серпистен

Показано (табл.1), что у крыс контрольной группы №2 (вводили только ФГ) снижены концентрация Эр и показатель Гт по сравнению с интактной группой; увеличена абсолютная и относительная концентрации Rt, появляются Rt II стадии зрелости по Гейльмейеру, отсутствующие в норме у интактных крыс. Кроме того, появляются Эр, содержащие тельца Гейнца, характерные для гемолитических

анемий, доля которых является индикатором глубины анемии (Я.Г. Ужанский, 1968).

Отмечено увеличение среднеклеточного диаметра Эр характерный признак макроцитарной анемии, когда в мазках крови присутствуют (9% и более от общего числа клеток) Эр большого диаметра (>8,1 мкм). Уменьшена вязкость крови крыс. Известно (Л.Н. Катюхин, 1995), что она зависит от концентрации в ней Эр и НЬ. Снижение этих показателей в наших экспериментах и повлекло за собой уменьшение вязкости крови и некоторое увеличение СОЭ крови крыс контрольной группы №2 по сравнению с интактной (р<0,1 -порог доверительной вероятности >90% по Н.А. Плохинскому (1971)).

Таблица 1

Параметры крови крыс Wistar при различных воздействиях (М±т)

Показатели Интакт-ная п=8 Опыт (ФГ+ЭС) п=10 Кошроль№1 (сНЧД9%МО) п=9 Контроль №2 (ФГ) п=9

НЬ, г/л 117,5±2,9 107,0±1,9 115,3±1,2* 109,8±2,5*

Гт, % 39,2±0,7 33,5±0,8 33,7±0,6 31,9±0,8***

Эр, 1012/л 4,62±0,11 3,53±0,07 3,54±0,04** 3,39±0,06***

СрОЭ, мкм3 85,1±1,1 95,0±1,3 95,2±2,3 94,3±1,9***

ССЭ, пг 25,5±0,3 30,4±0,4* 32,7±0,4 32,3±0,6***

скг, % 29,9±0,3 32,0±0,5** 34,5±0,7 34,3±0,2***

Диаметр Эр, мкм 6,77±0,03 7,16±0,02 7,12±0,01 7,14±0,03***

Вязкость крови 3,6 0,2 3,7±0,1*** 3,3±0,1** 2,8±0,1***

СОЭ, мм/ч 1,2±0,1 1,2±0,1 0,9±0,01** 1,4±0,1

Ш,%0 15,5±0,7 67,2±5,3** 73,6±5,9** 106,1 ±9,4***

т, ю12/л 0,07±0,01 0,24±0,02* 0,24±0,01*** 0,37±0,04***

и, % - 1,1±0,01 0,8±0,01 1,6±0,3

ш,% 5,0±0,2 4,8±0,5 4,5±0,5** 5,4±0,9

IV,% 20,6±1,7 15,1±1,1** 16,5±2,0 20,9±2,2

У,% 73,6±1,7 79,9±1,4** 78,7±2,9* 71,5±2,6

Тельца Гейнца,% - 64,1±2,7** 61,3±1,3* 71,2±1,8

Примечание: здесь и далее * - разница достоверна при р<0,1 (с пониженной надежностью); ** - р<0,05; *** - р<0,01. Для контрольной группы №2 достоверность разницы оценена по сравнению с интактной группой, для опытной и контрольной №1 групп по сравнению с контрольной №2.

Однократное введение ЭС на 4-й день развития анемии практически не сказалось на форме клеток. В ответ на введение 0,9% ЫаС1 (контроль №1) Эр увеличились в объеме и среднеклеточной толщине, на фоне тенденции к уменьшению среднеклеточного диаметра, по сравнению с контролем №2. Это свидетельства сферуляции клеток. У крыс опытной и контрольной №1 групп достоверно снижено содержание в крови Ш по сравнению с крысами контрольной группы №2. При этом снижение в ответ на ЭС более выражено, чем на 0,9% ЫаС1. При этом ретикулоцитарная формула по Гейльмейеру сдвинута влево, в сторону более зрелых форм, так что доля Ш V стадии зрелости оказывается выше (р<0,2), чем у животных контрольной группы №2. Вероятно, ускоренное созревание Ш привело к более быстрому накоплению в циркуляции Эр и, соответственно, к увеличению показателя Гт. Всё это свидетельства ускоренного выхода организма крыс опытной и контрольной №1 групп из состояния анемии. Однако, насыщенность Эр НЬ (среднеклеточные концентрация и содержание) у крыс опытной группы и, соответственно, общее содержание НЬ в крови оказывается несколько ниже, чем у крыс контрольных групп №1 и №2. У крыс контрольной группы №1 насыщенность Эр НЬ соответствует уровню её у крыс контрольной группы №2, а общее содержание НЬ в крови увеличивается соответственно увеличению концентрации Эр. То есть, в ответ на введение ЭС на фоне развивающейся гемолитической анемии в циркуляцию поступают качественно иные (менее насыщенные НЬ) Ш, что может быть отражением более быстрого их созревания, которое в конечном итоге должно привести к более быстрому восстановлению организма животных. У крыс опытной и контрольной №1 групп значительно уменьшается доля Эр с тельцами Гейнца (р<0,1 и 0,05, соответственно), что можно также рассматривать как свидетельство нормализации структуры эритроцитарных мембран более быстрой, чем у крыс контрольной группы №2. У крыс опытной группы возвращается к норме (уровень у интактных животных) СОЭ и почти возвращается вязкость крови, видимо, прежде всего, за счет увеличения концентрации Эр в крови, поскольку вязкость плазмы остается пониженной.

2. Характер восстановления крови крыс при гемолитической анемии под влиянием предварительного введения ЭС Серпистен

В данном эксперименте ФГ вводили после курсовой дачи препарата. Исследование проведено в летний и зимний периоды года с использованием крыс линии \Vistar.

Показано, что у крыс контрольной группы №2 (ФГ) уменьшается

концентрация НЬ на 18,4% (р<0,01) и Эр на 30,1% (р<0,01), показатель Гт на 12,8% (р<0,01), СКГ на 5,7% (р<0,01), увеличивается СрОЭ на 25,4% (р<0,01) и ССЭ на 18,9% (р<0,01) по сравнению с интактной. В крови животных появляются тельца Гейнца (67,1%) и ретикулоцитоз (67,8%) (табл.2).

Таблица 2

Показатели крови крыс Wistar при различных воздействиях (М±т)

^Группы Показатели" Интактная n=12 Опытная (ЭС+ФГ) п=12 Контроль №1 (O^/oNaO+ФГ) п=13 Контроль №2 (ФГ) п=13

Hb, г/л 119,2±1,6 106,6 ±3,9** 104,7±1,8** 97,2±1,2***

Гт, % 38,1±0,7 35,2±0,4** 34,9±0,5* 33,3±0,7***

Эр, 10и/л 4,52±0,07 3,76±0,11** 3,61±0,10** 3,16±0,1***

СрОЭ, мкм3 84,3±1,2 95,0±3,7** 97,4±2,2** Ю5Д!2Д***

ССЭ, пг 26,4±0,4 28,9±1,7 29,3±0,9 31,4±1,2**

СКГ, % 31,3±0,3 30,2±0,9 30,0±0,4 29,5±0,6**

СОЭ, мм/ч 0,9±0,1 1,4±0,1** 2,0±0,2 2,3±0,3***

Вязкость крови 3,5±0,1 3,2±0,1* 3,3±0,1 3,4±0,1

Вязкость плазмы 1,6±0,7 1,4±0,03** 1,5±0,02 1,6±0,05

Диаметр Эр, мкм 6,85±0,03 6,81±0,01 6,82±0,02 6,82±0,03

Толщина Эр, мкм 2,2 9±0,04 2ДВД01*** 2,64±0,05** 2ДЖЩ7***

Индекс сферичности 2,96±0,06 2,70Щ04*** 2,59±0,086** 2,39У=0,06***

Rt, %о 21,5±0,1 29,3±1,6* 37,9±4,6 36,3±3,3***

Rt, 10 "/л 0,10±0,002 0ДЫД01*** 0,14±0,02 0,13±0,01**

Rt III, % 4,67±0,7 2,4±0,2* 2,5±0,6 2,1 ±0,3**

Rt IV,% 18,5±1,5 10,0±0,9 7,8±1,2 8,2±0,7***

Rt V,% 76,9±1,5 87,5±1,2 89,7±1,8 89,7±1,0***

Тельца Гейнца, % - 44,4±1,1*** 63,3±3,7 67,1±3,2

Среднеклеточный диаметр Эр практически не изменяется, однако увеличивается толщина и уменьшается индекс сферичности Эр, то есть Эр становятся более круглыми (сфероциты - терминальная стадия трансформации эхиноцитов, акантоцитов и стоматоцитов при необратимых повреждениях и естественном старении) (В.М. Погорелов, Г.И. Козинец, 2005). Все эти изменения в параметрах крови указывают на наличие в крови анемии (Г.Н. Зюзьков и соавт., 2004).

Вязкость крови и плазмы соответствует уровню у интактных животных. У крыс опытной группы показатели крови также снижены, но приближены к фоновым значениям у интактных животных. У них же отмечена минимальная доля Эр содержащих тельца Гейнца. Вязкость крови и плазмы, СОЭ (р<0,05) снижены по сравнению с контрольной группой №2. Менее выражен ретикулоцитоз (29,3 %о). Такие изменения могут указывать на стабилизацию мембран Эр, соответственно меньшее разрушение их под действием ФГ, и меньшее напряжение эритропоэза, который может стимулироваться продуктами деструкции Эр (Д.И. Бельченко, 1992; А.Д. Павлов, Е.Ф. Морщакова, 1999). КРЭ увеличивается у всех исследуемых групп крыс с вызванной гемолитической анемией (рис.1).

Рис. 1. Кислотный гемолиз Эр крови крыс Wistar. По оси абсцисс -время в мин; по оси ординат - % гемолизировавших Эр. Примечание:а -по сравнению с интактными; b - с контрольной №2.

У крыс контрольной №2 группы (ФГ) отмечена максимальная резистентность Эр, но уменьшено время начала гемолиза (1,81 мин, против 2,23 у интактных (р<0,05)), размах кривой увеличивается до 5 мин (р<0,05), и уменьшается амплитуда кривой до 13,1 % (р<0,3). Эритрограммы крыс опытной группы наиболее приближены к кривой интактных крыс, время полураспада Эр практически такое же, как и у интактных животных (4,3 мин).

Показано, что у крыс контрольной группы №2 (ФГ) достоверно уменьшается рС02, р02, концентрация карбонатов, буферных оснований, повышается рН, что характерно для анемий с интенсивным

гемолизом Эр и усиленным эритропоэзом. В крови этих животных наблюдается респираторный алкалоз. Предварительное введение ЭС привело к сохранению рС02 и рО; почти на уровне интактных животных. рН крови повышен, но организм крыс компенсирует это повышение с помощью бикарбонатов и буферных оснований.

У крыс-самцов контрольной группы №2 отмечена минимальная ОРЭ по сравнению с другими экспериментальными группами (рис.2) осмотического гемолиза Эр крыс-самцов. У крыс опытной группы отмечено увеличение ОРЭ в области 0,4-0,2 % ЫаС1 по сравнению с интактными и контрольными животными.

Рис. 2. Кривые осмотического гемолиза Эр крови крыс-самцов линии \Vistar. По оси абсцисс -% №С1; по оси ординат - гемолизировавшие Эр, %. Примечание: а - по сравнению с интактными; ь - с контрольной №2.

Показано, что под влиянием ФГ количество ЩР НЬ у самцов крыс снижается через 1 мин действия щелочи по сравнению с уровнем у интактных, однако через 3 мин оказывается несколько выше (р<0,01), а через 5 мин вновь ниже (р<0,05) уровня у интактных. Предварительные инъекции 0,9% №С1 делают снижение ЩР НЬ макимальным, а ЭС несколько уменьшают его эффект. Показано, что количество ЩР НЬ в норме у самок выше, чем у самцов. Под действием ФГ эта разница нивелируется. Более того, количество ЩР НЬ у самок оказывается даже чуть ниже, чем у самцов. У животных,контрольной группы №1 половая разница в количестве ЩР НЬ сохраняется, причем становится более ярко выраженной, чем у интактных.

Во всех группах крыс ОЭФП фракций НЬ самок оказывается ниже, чем у самцов (однако разница достоверна лишь в контрольной группе

№2 для фракции I - р<0,01, для II и III - р<0,05). Исключение составляют только VI, VII фракции интактной и контрольной №2 групп, а также VII - опытной, где ОЭФП НЬ самцов и самок не различаются. Показано, что инъекции ФГ приводят к достоверному и высоко достоверному снижению по сравнению с интактными ОЭФП быстрых минорных фракций НЬ у самок: I (р<0,05), И; основной фракции III (р<0,05); медленных минорных VI и VII (р<0,1 и 0,05). ОЭФП фракции IV и V испытывают выраженную тенденцию (р<0,2) к снижению. У самцов это снижение выражено слабее и оказывается достоверным только для фракций IV, VI (р<0,1) и VII (р<0,05), тогда как остальные испытывают лишь тенденцию к снижению, хотя и достаточно выраженную для основной 1П фракций (р<0,2). ОЭФП фракции II у самцов вовсе не изменяется. Предварительные инъекции ЭС сохраняют ОЭФП фракций практически на уровне у интактных, хотя и с некоторым превышением этого уровня, особенно у самцов, так что ОЭФП I минорной фракции НЬ и фракции IV у них оказывается выше (р<0,1), чем у интактных. Эффект превышения оказывается более выражен в ответ на предварительные инъекции 0,9% ЫаС1. ОЭФП фракций НЬ крыс опытной группы, которым предварительно вводили ЭС, оказалась ближе к уровню у интактных. Таким образом, профилактические инъекции ЭС удерживают ОЭФП фракций НЬ крыс на уровне у интактных животных при действии гемолитического яда ФГ, что обеспечивается, по-видимому, опосредованно через стабилизацию поверхностной мембраны клетки.

3. Динамика восстановления параметров крови кроликов после кровопускания и при влиянии ЭС Серпистен

В первой серии эксперимента установлено, что в ответ на кровопускание у кроликов всех трех подопытных групп отмечена типичная со стороны крови реакция организма на кровопотерю: снижение концентрации Эр, НЬ, показателя Гт на фоне увеличения относительной и абсолютной доли Ш. Однако, степень и динамика снижения разных концентрационных показателей у животных разных подопытных групп разная (табл.3). Минимальные значения концентрации Эр, НЬ, показателя Гт найдены на 3-й день после кровопотери, что соответствует данным литературы (Б.Г. Юшков и соавт., 1999).

Показано, что на 3-й день после кровопотери у всех групп кроликов снижается концентрация НЬ (на 30,3% у опытной, 12,5% у контрольной №1 и 27,9% у контрольной №2), показатель Гт (на 20,2%; 13,7% и 11,6%, соответственно). У кроликов опытной и контрольной №1 групп отмечено, кроме того, уменьшение ССЭ (на

11,3% и 19,3%, соответственно) и СКГ (на 13,5% и 20,2%). В связи со снижением уровня Эр в крови у кроликов опытной и контрольной №1 групп уменьшается вязкость крови. У этих же групп животных отмечено появление в крови Rt II стадии зрелости, увеличивается доля Rt III и уменьшается V стадии зрелости.

Таблица 3

Показатели Дни после кровопускания

Фон 3-й день 6-й день 9-й день 12-й день 15-й деяь

Hb, г/л 124,1+2,9 86,0+5,1 94,0+3,8 *** 111,0+2,8 *** 1113+13,1 109,7±5,5 **

Гт, % 34,7+0,8 27,7+2^** 30,7+2,8* 33,7+3,1 35,9+1,7 363+1,0

Эр, 10,2/л 4,26+0,11 ЗД7ЮД1 *** 3,93±0Д) 4,46+0,11 4,69±0ДЗ 4,63±0,22 **

СрОЭ, MHvi 82,02+2,4 84,6+11,2 79,8+13,6 75,9+10,1 76,7+3,7 77,9+4,1

ССЭ, пг 29,6+0,9 262+2,1 ** 24,5+3,4 ** 23,2+2,7 *** 23,6+2^ ** 23,7±1,6 ***

СКГ, г/дл 36,4+1,6 31,4+4,2 30,9+0,2 ** 30,6+0,6 30,8+2,9 ** ЗОД+13 **

Вязкость крови 2,4+0,04 1,6±0,15 *** 1,9*0,2 ** 1,4±0Д 2,0+0,1 ' ** 2,1±0,1 ***

Диаметр Эр, мкм 7,11+0,02 7,26+0,13 ** 7,21+0,11 7,23+0,11 7,17±0,01 ** 7,21+0,03

Rt, %о 23,6±33 30,6+6,9 40Д+33 *** 32,8+53 * 24,9+7,9 19ДЬ5£

Rt, II % — 0,4±02 0,4±0Д — — —

III, % 4,9+0,6 5,7+0,2 4^+0,5 2,7+1,7** ЗД+13 2,6+0,4**

IV, % 22,4+0,8 23,7±23 26,5+5,0 18,1±1Д *** 20,4+2,9 16,6t 0,4 ***

V,% 72,6+1,18 70,5+33 68,9+5,5 79,2+1,4 *** 76,0+4,2 80,9+0,1 ***

Rl, 10% 0,07+0,02 0,1+0,03 0,16+0,04 ** 0,15+0,03 ** 0,12+0,04 0,08+0,01

Примечание: достоверность разницы оценивали по отношению к фоновому исследованию.

На 6-й день после кровопотери картина крови кроликов в принципе сохраняется, но в крови всех групп животных отмечено достоверное увеличение относительной (а для опытной и контрольной №1 и абсолютной) концентрации Rt. Отмечено наличие К1 II, а у

контрольных (№1) даже I стадии зрелости. У всех групп животных снижена вязкость крови по сравнению с фоновым уровнем. У кроликов опытной и контрольной №1 групп увеличен диаметр Эр. На 9-й день после кровопотери у всех групп кроликов остаются сниженными концентрация НЬ, ССЭ, СКГ, у опытной и контрольной №1 групп вязкость крови также понижена, сохраняется ретикулоцитоз а диаметр Эр увеличен. Концентрация Эр у кроликов опытной группы уже превышает фоновое значение.

На 12-й день после кровопотери отмечены иные изменения со стороны крови. Концентрация НЬ и Ш, показатель Гт всех групп животных практически совпадают с таковыми в фоновом исследовании. Выше фонового уровня концентрация Эр, при сниженных ССЭ, СИ" у кроликов опытной и контрольной №2 групп. У кроликов опытной группы наблюдается увеличение диаметра и толщины Эр. На 15-й день исследования у кроликов контрольной группы №2 увеличен показатель Гт, при сниженной СКГ. В крови кроликов опытной группы продолжает увеличиваться концентрации Эр. Вязкость крови у кроликов опытной и контрольной №1 групп все так же снижена. У животных опытной и контрольной №2 групп наблюдается уменьшение долей Ш III и IV, увеличение V стадии зрелости.

Во второй серии эксперимента кроликам вводили ЭС и 0,9% ЫаС1 в течение 5 дней перед кровопусканием. В отличие от первой серии отмечен больший дисбаланс во всех показателях крови во все дни эксперимента. Особенно при введении кроликам 0,9% ЫаС1. В принципе, отмечены те же изменения в показателях крови: уменьшение концентраций НЬ, Эр и повышение Ш. Но, один из наиболее важных показателей в условиях кровопотери, свидетельствующий о запуске компенсаторных механизмов - вязкость крови - увеличивается у всех групп животных. Только у контрольной группы №2 отмечено её снижение на 3-й и 6-й дни после кровопотери. Возможно, постоянное добавление дополнительных порций ЭС и 0,9% №С1 в первой серии эксперимента, способствовало компенсации гиповолемии, которая наблюдается при кровопотере, что положительно сказалось в целом на регенерации крови.

У кроликов опытной группы на 3-й день развития анемии снижается рН крови (р<0,05), рС02 увеличивается, в крови обнаруживается дефицит буферных оснований, обусловленный избытком нелетучих кислот. Сатурация, или насыщение НЬ 02 и р02, несколько снижаются. На основании указанных сдвигов основных параметров КОС можно говорить о наличии в крови частично

компенсированного дыхательного ацидоза. У группы кроликов, предварительно получавших 0,9% №С1, наблюдается уменьшение рН крови и рСО?, на фоне дефицита буферных оснований. Параметр р02 практически не изменяется, а насыщение НЬ Ог снижается на 3,5% (р<0,1). Это указывает на возможность наличия частично компенсированного недыхательного ацидоза. Таким образом, у двух групп кроликов наблюдается ацидоз, как компенсаторная реакция на недостаток в крови Эр и НЬ, который компенсируется разными путями: у опытной группы за счет повышения уровня бикарбонатов в крови, у контрольной №1 - за счет увеличения выведения СО2 легкими. Величина рН и рС02 у кроликов опытной группы на 9-й день после кровопускания остаются сниженными, а р02 наоборот повышено, в крови всё так же дефицит буферных оснований. Это говорит о наличии в крови недыхательного ацидоза, частично компенсированного выведением СО2 через легкие. У животных контрольной группы №2 (только кровопускание) наблюдаются совершенно иные изменения КОС крови в ответ на кровопускание: увеличение рН крови, уменьшение рС02, избыток буферных оснований, повышенная сатурация НЬ. Такие сдвиги в КОС крови наблюдаются при некомпенсированном дыхательном алкалозе. К 12-му дню величины КОС практически такие же у опытной и контрольной №1 групп кроликов. У контрольной группы №2 отмечен более сильный, по сравнению с 9-м днем после кровопотери, дефицит буферных оснований, что наблюдается при дыхательном алкалозе, частично компенсированном. Компенсация нарушенных функций возможно обусловлена частичным возвращением к норме концентраций Эр и НЬ. Некоторыми изменениями КОС характеризуется 14-й день. У опытной и контрольной №1 групп величина рН ниже, чем у интактной пробы, рС02 повышено, в крови дефицит буферных оснований, все ещё низкая сатурация НЬ. Такие сдвиги в КОС крови наблюдаются при дыхательном ацидозе, частично компенсированном. У контрольной группы №2 на 14-й день после кровопускания КОС так же не пришло в норму, в крови наблюдается некомпенсированный недыхательный алкалоз.

4. Состояние эритроцитов и гемоглобина крови лабораторных животных при однократном введении ЭС Серпистен

Показано, что через 1 ч после введения ЭС и 0,9% №С1 рН крови самцов и самок крыс практически не изменяется, рС02 и р02 в крови, сатурация НЬ 02 повышаются у самцов. При этом в крови самцов опытной группы наблюдается дефицит буферных оснований и некоторое увеличение концентрации бикарбонатов в крови. Возможно

- это механизм поддержания на должном уровне величины рН и в этом выражается адаптогенный эффект ЭС. У самцов контрольной группы отмечено повышение концентрации бикарбонатов, при неизменном уровне буферных оснований, что, при повышенном рСОг в крови, может указывать на начало постепенного развития дыхательного алкалоза. У самок отмечено некоторое снижение рС02 и сильное снижение р02 в крови (особенно у крыс контрольной группы). Это характерно для гипокапнии при усиленном выведении из крови СОг. У самок опытной группы концентрация карбонатов в крови повышается, возможно, компенсаторно, при неизменном уровне буферных оснований, что тоже направлено на поддержание уровня рН.

Через 2 часа после введения ЭС у самцов увеличивается общая концентрация НЬ в крови (р<0,2) и насыщенность им Эр (ССЭ и СКГ (р<0,05)), на фоне тенденции к снижению концентрации Эр и Гт (р<0,05). У самок повышается концентрация Эр, на фоне уменьшения Гт. Увеличивается вязкость крови. Повышается доля Rt III и уменьшается V стадии зрелости. Через 24 часа у самцов имеется тенденция к увеличению концентрация Эр и НЬ без адекватного увеличения показателя Гт, что может быть обусловлено некоторым снижением СрОЭ (с 89,9 до 87,5 мкм3) и диаметра Эр с 7,05 мкм до 7,02 мкм. В циркулирующей крови крыс-самцов наблюдается перераспределение Rt по стадиям зрелости по Гейльмейеру - высоко достоверно (р<0,01) увеличивается доля Rt IV и уменьшается доля Rt V (р<0,01) стадии зрелости.

Показано, что ЩР НЬ самцов достоверно ниже, чем у самок. В результате введения ЭС и 0,9% NaCl количество ЩР НЬ у самцов оказывается достоверно увеличено через 1 минуту действия щелочи по сравнению с интактными. При этом изменения ярче выражены у крыс опытной группы (увеличивается количество ЩР НЬ на 25,4%).

В серии опытов in vitro, на крысах, диск-электрофорезом из НЬ эритроцитарной массы (ЭрМ), получено 8 фракций, из НЬ гемолизатов

- 7 (табл.4). В обоих случаях: III фракция - основная, остальные -минорные. В опытах in vivo также получено 7 фракций НЬ, что соответствует данным литературы (Н.Ф. Стародуб, В.И. Назаренко, 1987; Н.А. Мойсеенко и соавт., 1998). Появление дополнительной фракции из гемолизатов ЭрМ, обработанных ЭС или 0,9% NaCl, может свидетельствовать о структурных изменениях поверхностной мембраны Эр и (или) мембрано-НЬ комплекса Эр. Часть молекул НЬ могла изменить свой суммарный электрический заряд вследствие конформационных перестроек или взаимодействия с компонентами поверхностной мембраны.

Таблица 4

ОЭФП Hb крыс (опыты in vitro) (M±m)_

№ фра кци и Опыт№1 (ЭрМ+ЭС) Кошроль№1 (ЭрМ+0,9% NaCl) Опыт №2 (гемолизат+ЭС) Контроль №2 (гемолизаггИ),9 %NaCl)

самцы самки самцы самки самцы самки самц ы самки

I 0,55± 0,01 0,52± 0,01 0,53± 0,01 0,50± 0,01 0,51± 0,0 t*b 0,40± 0,01***ь 0,52± 0,02 0,45± 0,01

II 0,48± 0,01 0,46± 0,01 0,50± 0,01 0,44± 0,01 0,45± 0,01**" 0,42± 0,01**ь 0,46± 0,01 0,41± 0,01

III 0,44± 0,003 0,42± 0,01 0,44± 0,01 0,41± 0,01 0,42± 0,003***" 0,3 8± 0,01 **ь 0,43± 0,01 0,3 8± 0,01

IV' 0,42± 0,003*а 0,39± 0,01 0,41± 0,004 0,37± 0,01 нет нет нет нет

IV 0,34± 0,003*а 0,31± 0,01 0,33± 0,004 0,30± 0,01 0,34± 0,003 0,32± 0,01 0,34± 0,004 0,30± 0,01

V 0,28± 0,003 0,25± 0,01 0,28± 0,004 0,24± 0,004 0,28± 0,004 0,26± 0,01 0,2 8± 0,01 0,24± 0,01

VI 0,23± 0,003 0,21± 0,01*а 0,22± 0,01 0,19± 0,003 0,23± 0,003 0,20± 0,01 0,23± 0,004 0,18± 0,01

VII 0,18± 0,004*а 0,15± 0,01*а 0,16± 0,01 0,13± 0,004 0,17± 0,004*ь 0,15± 0,01 0,17± 0,004 0,13± 0,01

Примечание:а по сравнению с контрольной пробой '№1; ь - с опытной №1.

Показано, что у интактных 5 мес мышей достоверно ниже вязкость крови (на 12%), увеличен среднеклеточный диаметр Эр (на 1,5%) по сравнению с 12 мес. Кроме того, больше относительная и меньше абсолютная доля Ш: (на 97 и 115%, соответственно). Введение им ЭС (5 мг/кг) вызывает повышение концентрации НЬ (р<0,2) и Эр (р<0,01), однако Эр эти меньше по диаметру (на 2,5%) и СрОЭ (на 22,5%), содержат меньше НЬ (ССЭ уменьшено на 14,5%) по сравнению с интактными. Это привело к увеличению вязкости крови у мышей получавших ЭС. Доза 20 мг/кг вызывает уменьшение концентрации НЬ (на 12,3%) и СКГ (на 10,3%), Эр имеют больший диаметр и толщину по сравнению с интактными. У мышей 12 мес ЭС в дозе 5 мг/кг вызывает уменьшение концентрации Эр, без изменения насыщенности их НЬ и морфологии, в отличие от 5 мес мышей. Концентрация общего НЬ и Гт не изменяются. Доза ЭС 20 мг/кг приводит к уменьшению вязкости крови (на 10,6%), в отличие от 5 мес, и увеличение среднеклеточного диаметра Эр (на 2,5%).

Обнаружена более высокая КРЭ интактных самок мышей-альбиносов по сравнению с самцами. Разные дозы ЭС по-разному изменяют КРЭ самок мышей: меньшая доза (5 мг/кг) уменьшает КРЭ у

63% самок, и увеличивает её у 37%. Возможно это связанно с тем, что в популяции мышей присутствуют два типа особей по-разному реагирующих на ЭС в дозе 5мг/кг. Доза ЭС в 20 мг/кг увеличивает КРЭ. У самцов меньшая доза (5 мг/кг) уменьшает КРЭ у 25% самцов и увеличивает КРЭ у 75% самцов (рис. 3). Большая доза вещества однозначно увеличивает КРЭ самцов.

Рис. 3. Кислотный гемолиз Эр крови белых мышей-самцов. По оси абсцисс - время в мин; по оси ординат - % гемолизировавших Эр. Примечание:а по сравнению с интактными;b - с контрольной №1.

При сравнении морфо-функциональных показателей Эр белых нелинейных мышей и крыс, мышей СВА при влиянии ЭС (доза 20 мг/кг) показано, что у крыс-самцов увеличивается концентрация НЬ, и наблюдается перераспределение Rt по стадиям зрелости, в отличие от мышей. В ответ на введение ЭС у самок крыс и мышей линии СВА показаны схожие изменения в показателях крови: уменьшение концентрации НЬ и увеличение Rt; диаметр увеличивается, толщина клеток уменьшается (уплощение Эр), при этом такие Эр менее насыщены НЬ (снижение ССЭ).

ВЫВОДЫ

1. В условиях фенилгидразиновой анемии, развивающейся после предварительного введения субстанции Серпистен, показано ослабление признаков гемолитической анемизации: уменьшение количества эритроцитов с тельцами Гейнца в среднем на 13%; увеличение концентрации гемоглобина (на 11%) и эритроцитов (на 11%) по сравнению с контролем.

2. На фоне уже развившейся анемии инъекции субстанции Серпистен вызывают эффекты, направленные на нормализацию показателей: ускорение созревания ретйкулоцитов; увеличение осмотической и кислотной резистентности эритроцитов.

3. Восстановление показателей крови после кровопотери у кроликов происходит в более короткие сроки и более полно под влиянием экдистероидсодержащей субстанции Серпистен: концентрация эритроцитов, гематокрит восстанавливаются быстрее; концентрация ретикулоцитов максимальна на 3-й день после кровопускания (на 77% выше исходного), затем плавно возвращается к фоновому уровню на 12-й день; у контрольных она также максимальна на 3-й день (на 80% выше исходного), с фазными изменениями в последующие дни (варьируя от 5 до 80%) и на 15-й день после кровопускания ещё отлична от нормы.

4. Физико-химические свойства гемоглобина изменяются в зависимости от пола животного и условий эксперимента в ответ на введение экдистероидсодержащей субстанции Серпистен: щелочерезистентность уменьшается; относительная электрофоретическая подвижность отдельных фракций белка увеличивается.

5. В опытах in vitro впервые обнаружено, что изменения элеюрофоретической подвижности фракций гемоглобина после инкубации эритроцитов с препаратом Серпистен сильнее выражены, чем после инкубации с ним гемолизатов. Появляется дополнительная перед IV фракция гемоглобина. Электрофоретическая подвижность I, II и III (основной) фракций гемоглобина из эритроцитарной массы выше (на 19%, 8%, 8%, соответственно), чем гемоглобина из гемолизатов.

6. Свойства эритроцитов (размер, осмотическая и кислотная резистентность) индивидуальны для каждого животного, зависят от пола и сезона исследования, что особенно отчетливо выявляется при действии малых доз (5 мг/кг) субстанции экдистероидов Серпистен.

7. Выявлены различные возрастные особенности в реакции эритроцитов мышей на введении субстанции Серпистен. Мыши в возрасте 5 месяцев сильнее и отчетливее реагируют изменением формы эритроцитов (уменьшение среднеклеточного объема на 25% и толщины клеток на 55%, увеличение индекса сферичности на 130%, увеличением осмотической резистентности) на введение Серпистен, особенно в дозе 5 мг/кг, в отличие от мышей в возрасте 12 месяцев.

8. Выявлены половые и видовые реакции на Серпистен лабораторных животных. Концентрация гемоглобина и ретикулоцитов разных стадий

зрелости у мышей самцов в ответ на субстанцию Серпистен (в дозе 20 мг/кг) не изменяется, у самцов крыс концентрация гемоглобина повышается (на 4%) и наблюдается перераспределение ретикулоцитов по возрастным группам (на 45% увеличивается доля клеток IV, на 15% уменьшается доля ретикулоцитов V стадии зрелости). Самки исследованных видов реагируют на введение субстанции Серпистен однозначно: как у крыс, так и у мышей уменьшаются концентрация гемоглобина (в среднем на 11%), толщина клеток (на 10%); увеличивается концентрация ретикулоцитов (на 70%).

9. Кислотно-основное состояние крови (pH, рС02, р02) животных, нарушенное инъекциями 0,9% NaCl и фенилгидразина, возвращается к уровню интактных при введении экдистероидсодержащей субстанции Серпистен.

10. Ацидоз, развивающийся в ответ на кровопускание, частично компенсируется при введении субстанции Серпистен сначала за счет повышения уровня бикарбонатов в крови, а затем за счет интенсивного выведения углекислоты.

Список основных работ, опубликованных по теме диссертации

1.Иванкова Ж.Е, Мойсеенко H.A., Моисеенко С.А. Влияние 20-гидроксиэкдизона на восстановление показателей красной крови после постгеморрагической анемии у кроликов // Материалы XVIII Съезда физиологического общества им И.П. Павлова. - Казань, 2001. - С.391.

2.Иванкова Ж.Е., Мищенко A.A., Мойсеенко H.A., Петрова Н.Б. 20-гидроксиэкдизон выделенный из серпухи венценосной (Serratula coronata L.) и параметры крови крыс // Актуальные проблемы адаптации к природным и экосоциальным условиям среды: Материалы симпозиума с международным участием. - Ульяновск, 2002. - С. 75-76.

3.Иванкова Ж.Е., Людинина А.Ю., Мойсеенко H.A. Физиологические аспекты действия 20-гидроксиэкдизона из растений Serratula coronata L. in vitro на кровь белых мышей // Экологическая ботаника: наука, образование, прикладные аспекты: Тезисы докладов международной конференции посвященной 25-летию кафедры ботаники Сыктывкарского университета. - Сыктывкар, 2002.- С. 155-156.

4.Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Петрова Н.Б., Эффекты 20-гидроксиэвдизона из растений Serratilla coronata L. на эритроциты крыс // Актуальные проблемы экологии человека: Труды VIII международного конгресса. - Самара, 2002. - С. 156-157.

5.Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Петрова Н.Б., Репина E.H. 20-гидроксиэкдизон из растений Serratula coronata L. как адаптоген //

Эколого-физиологические проблемы адаптаци: Материалы XXI международного симпозиума. - М.: РУДН, 2003. - С.368-369.

6.Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A. Влияние 20-гидроксиэкдизона на регенерацию красной крови крыс линии Вистар на фоне фенилгидразиновой анемии // Вестник СГУ. - Сыктывкар, 2003. -Серия 4 «Биология». - С. 61-65.

7.Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Цветкова A.C. Влияние 20-гидроксиэкдизона на свойства компонентов красной крови крыс через 24 часа после инъекции // Радиоэкологические и биологические последствия низкоинтенсивных воздействий: Труды Коми научного центра УрО Российской АН. - Сыктывкар, 2003. - №27. - С. 242-256.

8. Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Мойсеенко С.А. Роль 20-гидроксиэкдизона в развитии постгеморрагической анемии у кроликов // Радиоэкологические и биологические последствия низкоинтенсивных воздействий: Труды Коми научного центра УрО Российской АН. - Сыктывкар, 2003. - №27. - С. 257-273.

9.Иванкова Ж.Е. Влияние режима введения 20-гидроксиэкдизона на показатели красной крови крыс // Молодежный вестник. - Сыктывкар, 2004. - В.2. - С. 25-28.

10. Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A. Кислотно-основное состояние крови кроликов после кровопускания на фоне 20-гидроксиэкдизона // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. - 2004. -Приложение. - Т.90. - №8. - 4.2. - С.194.

11. Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Репина E.H. Влияние 20-гидроксиэкдизона на параметры красной и белой крови при гемолитических анемиях // Экология человека. - 2004. - Приложение. -Т.1. - С.327-329.

12. Иванкова ЖЕ., Мойсеенко H.A., Петрова Н.Б., Репина E.H. Фитоэкдистероиды и кровь млекопитающих в норме и патологии // Экология и здоровье человека: Труды IX Всероссийского конгресса. -Самара, 2004. - С. 188-190.

13. Иванкова Ж.Е., Пономарёв М.Б. Влияние экдистероидов серпухи венценосной (Serratula coronata L.) на некоторые реологические параметры крови крыс линии Вистар при гемолитической анемии // Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике: Тезисы докладов IV Молодежной научной конференции Института физиологии Коми НЦ УрО РАН. - Сыктывкар, 2005. - С. 102-104.

14. Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A. Кислотно-основное состояние крови лабораторных животных при воздействии экдистероидов

Serratula coronata L. II Бюллетень сибирской медицины. - 2005. -Приложение 1. - Т.4 - С. 37.

15. Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Репина E.H., Володин В.В. Роль 20-гидроксиэкдизона растений Serratula coronata L. в развитии вызванной гемолитической анемии крыс Wistar II Фитофарм 2006: Материалы IX международного Съезда. - Санкт-Петербург, 2005. - С. 179-184.

16. Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Давыдова А.Р., Дунаева Е.Г. Влияние 20-гидроксиэкдизона растений Serratula coronata L. на физико-химические свойства гемоглобина крыс Wistar И Научные труды I Съезда физиологов СНГ. - М.: Медицина-Здоровье, 2005. - С. 244.

17. Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Давыдова А.Р. Влияние 20-гидроксиэкдизона растений Serratula coronata L. на электрофоретические характеристики гемоглобина лабораторных животных в опытах in vivo и in vitro II Химия и технология растительных веществ: Тезисы докладов IV Всероссийской научной конференции. - Сыктывкар, 2006. - С. 262.

18. Иванкова Ж.Е., Мойсеенко H.A., Петрова Н.Б., Репина E.H. Действие фитоэкдистероидов на количественные и качественные показатели крови млекопитающих в норме и при экспериментальных воздействиях // Вестник Сыктывкарского университета. - 2006. - Серия 2 «Физика, химия, биология». - Выпуск 1. - С. 122-137.

Список сокращений

Гт - показатель гематокрита

КОС - кислотно-основное состояние крови

КРЭ - кислотная резистентность эритроцитов

ОРЭ - осмотическая резистентность эритроцитов

ОЭФП - относительная электрофоретическая подвижность фракций

гемоглобина

СКГ - средняя концентрация гемоглобина в эритроците

СОЭ - скорость оседания эритроцитов

СрОЭ - средний объем эритроцита

ССЭ - среднее содержание гемоглобина в эритроците

ФГ - фенилгидразин

ЩР - щелочерезистентность гемоглобина Эр - эритроциты

ЭС - экдистероидсодержащая субстанция Серпистен Hb - гемоглобин Rt - ретикулоциты

Заказ 28/2007. Тираж 100 экз. Отпечатано в ООО «Типография «Полиграф-Сервис» г. Сыктывкар, ул. Ленина, 4, тел.21-48-36.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Иванкова, Жанна Евгеньевна

Список сокращений и обозначений.

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Структурно-функциональные особенности эритроцитов и гемоглобина млекопитающих.

1.1.1. Структура мембраны эритроцита.

1Л .2. Осмотическая и кислотная резистентность эритроцитов.

1.1.3. Структура и гетерогенность гемоглобина млекопитающих.

1.2. Экдистероиды: краткая характеристика.

1.3. Биологическая активность экдистероидов у позвоночных животных.

1.4. Влияние фитоэкдистероидов на систему крови теплокровных.

2. Материалы и методы исследования.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Реактивы и оборудование.

2.3. Методы исследования.

3. Результаты исследования.

3.1. Параметры крови крыс линии Wistar при экспериментальной гемолитической анемии и при действии ЭС Серпистен.

3.1.1. Показатели крови крыс при развитии гемолитической анемии и влиянии на них ЭС Серпистен.

3.1.2. Характер восстановления крови крыс при гемолитической анемии под влиянием предварительного введения ЭС Серпистен.

3.2. Динамика восстановления параметров крови кроликов после кровопускания при влиянии ЭС Серпистен.

3.3. Состояние эритроцитов и гемоглобина крови лабораторных животных при однократном введении ЭС Серпистен.

3.3.1. Нелинейные лабораторные крысы.

3.3.2. Мыши линии СВА.

3.3.3. Нелинейные белые лабораторные мыши.

3.3.4. Кролики породы Шиншилла.

3.4. Свойства эритроцитов и гемоглобина крови нелинейных белых крыс при многократном введении ЭС Серпистен.

4. Обсуждение результатов.

4.1. Возможный механизм действия фитоэкдистероидов при гемолитической анемии.

4.2. Роль фитоэкдистероидов в регенерации крови в условиях постгеморрагической анемии.

4.3. Свойства некоторых компонетов крови лабораторных животных при действии фитоэкдистероидов.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Морфо-функциональное состояние эритроцитов и гемоглобина лабораторных животных при анемиях и действии экдистероидсодержащей субстанции серпистен"

В природных и производственных условиях нашего времени организм нередко испытывает влияние необычЕШх, чрезмерных и жестких факторов среды. Адаптация к ним может носить самый различный характер и затрагивать все стороны организации и жизнедеятельности человека и животных. Такую адаптацию можно охарактеризовать как совокупность биологических, социальных и психологических свойств и особенностей, необходимых для существования оргаЕшзма в конкретной экологической среде обитания (Н.А. Агаджанян и соавт., 1997; Н.А. Агаджанян, Н.А. Ермакова, 1997). Неспецифическую сопротивляемость организма можно повысить с помощью физиологически активных соединений природного происхождения адаптогенов. Актуальной задачей современной физиологии является выяснение роли этих веществ в обменных процессах. В настоящее время исследуют, как наиболее перспективные, вещества подобного рода - экдистероиды. Эти соединения выполняют функции гормонов линьки у животных (беспозвоночных), стоящих на низших ступенях эволюции, играя существенную роль в регуляции клеточного метаболизма на разных этапах их роста и развития. Для теплокровных животных экдистероиды не являются эндогенными. Тем не менее, многие стороны обменных процессов в клетках и органах высших животных восприимчивы к действию экдистероидов в большей степени, чем ко многим другим веществам растительного происхождения (А.А. Ахрем, Н.В. Ковганко, 1989). В то время как сравнительные эксперименты с кортизолом млекопитающих, не показали его активности у насекомых. Это можно объяснить тем, что гормональная система млекопитающих является более узкоспециализироваЕшой и не может вызывать соответствующих эффектов у низших организмов. Более же примитивная гормональная система насекомых, влияя на общие стороны метаболизма клетки, сохраняет свою активность и у высших организмов (В.В. Володин, 2006). Экдистероиды обнаружены у представителей более 80 семейств высших растений (Р. Лафон, 1998; R. Bergamasco, D.H. Horn, 1983). Выявление растений с высоким содержанием экдистероидов (до 1-2% сухой массы) дало возможность создания экономически целесообразных технологий получения этих веществ и, таким образом, открыло перспективу их практического применения в народнохозяйственной практике: медицине, ветеринарии и т.д. (В.В. Володин, 1999; Фитоэкдистероиды, 2003; R. Lafont, 1997; V.V. Volodin et а!., 2002). Лекарственные препараты, созданные на основе растительных веществ, имеют ряд преимуществ: низкую токсичность, широкий спектр действия, отсутствие привыкания, такие соединения легко включаются в метаболизм, усваиваются организмом, выводятся из него и являются сравнительно экологически чистыми. Известно, что фитоэкдистероиды оказывают анаболическое (И.Н. Тодоров и соавт., 2000), адаптогенное и тонизирующее (Н.К. Абубакиров и соавт., 1988; А.П. Азизов, 1997; Р.Д. Сейфулла, 1998), кардиотропное и иммуномодулирующее действие (М.М. Маликов и соавт., 1982; Г.Н. Фомовская и соавт., 1992; D.S. Trenin, V.V. Volodin, 1996), а так же обладают свойствами антирадикального агента и антиоксиданта (Л.Ф. Осинская и соавт., 1992). Особого внимания заслуживают результаты исследований, показавших высокую эффективность фитоэкдистероидов при некоторых патологических состояниях, сопровождающихся ослаблением белкового и других обменов: гепатит, диабет и др. (О.А. Ермишина и соавт., 1982; В.Н. Сыров и соавт., 1986). Показан положительный эффект фитоэкдистероидов на гемореологию при синдроме повышенной вязкости крови (М.Б. Плотников и соавт., 2000). Этот класс соединений является одним из немногих классов стероидов, не оказывающих гормональных эффектов на млекопитающих (К. Slama, R. Lafont, 1996; R. Lafont, L. Dinan, 2003). Однако многие стороны действия этих веществ, в частности, на систему крови, остаются либо не изученными, либо носят отрывочный, эпизодичный характер. Выяснение влияния этих веществ на систему крови очень важно, так как кровь является интегральной системой, связывающей воедино и затрагиващей все органы и ткани, поэтому изменение её состояния может сказаться на работе функциональных систем организма в целом (Г. И. Козинец, 1990). Клетки крови одними из первых встречаются с веществами как экзогенного, так и эндогенного происхождения и чутко реагируют на изменения, происходящие в организме, а стабилизация физиологических реакций, ответственных за доставку и обмен газов в тканях является одним из критериев адаптации (Н.А. Агаджанян, 1989). Цель исследования.

Целью настоящей работы является исследование морфо-функциональных свойств эритроцитов (Эр) и гемоглобина (НЬ) лабораторных животных при действии экдистероидсодержащей субстанции Серпистен (смесь фитоэкдистероидов) в норме и в условиях анемии.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Охарактеризовать параметры крови лабораторных животных после развития экспериментальной гемолитической фенилгидразиновой анемии при введении ЭС Серпистен.

5. Исследовать в опытах in vitro щелочерезистентность (ЩР) и электрофоретические свойства НЬ эритроцитарной массы и НЬ гемолизата крови нелинейных белых крыс при действии ЭС Серпистен.

Научная новизна.

Впервые показано стимулирующее эритропоэз действие ЭС Серпистен, что выражается в увеличении относительного и абсолютного количества ретикулоцитов (Rt), ускорении созревания циркулирующих в русле крови Rt, сопровождающееся уменьшением количества в клетках ретикуло-филаментозной субстанции, что является отражением процесса стимуляции биосинтеза НЬ.

Впервые показано стабилизирующее действие фитоэкдистероидов на мембрану Эр в реакциях осмотического и кислотного гемолиза, и опосредованное мембраной стабилизирующее действие их на содержащийся в клетках НЬ.

Впервые показано нормализующее действие ЭС Серпистен на кислотно-основное состояние крови лабораторных животных.

Морфология Эр крыс, мышей и кроликов модифицируется при введении ЭС Серпистен.

Впервые показан защитный эффект вещества на Эр при постгеморрагической (кролики) и экспериментальной гемолитической (фенилгидразин (ФГ), крысы) анемиях: уменьшение уровня Эр с тельцами Гейнца у животных с вызванной гемолитической анемией как при предварительном введении препарата, так и на фоне развивающейся анемии.

Полученные результаты по влиянию фитоэкдистероидов на кровь лабораторных животных несомненно найдут своё место в понимании физиолого-биохимических механизмов действия вещества в организме млекопитающих, а также при разработке лекарственных препаратов и (или) биологически активных пищевых (кормовых) добавок.

На основании проведенного исследования ЭС Серпистен можно рассматривать как гематопротекторное средство при приобретенной гемолитической анемии и острой кровопотере. В результате проведенного исследования расширено представление о влиянии фитоэкдистероидов на кровь млекопитающих, предложен возможный механизм действия этих веществ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Усиление и ускорение регенерации крови в условиях анемии может быть достигнуто введением ЭС Серпистен.

3. В условиях in vitro и iv vivo изменяются физико-химические свойства НЬ: относительная электрофоретическая подвижность отдельных фракций НЬ (ОЭФП) и щелочерезистентность НЬ при влиянии ЭС Серпистен. Эффект опосредован поверхностной мембраной Эр и зависит от вида, пола животных и сезона исследования.

Апробация работы. Результаты исследований были доложены и обсуждены на XVIII Съезде физиологического общества (г. Казань, 2001); научной конференции «Экологическая ботаника: наука, образование, прикладные аспекты» (г. Сыктывкар, 2002); Симпозиуме с международным участием «Актуальные проблемы адаптации к природным и экосоциальным условиям среды» (г. Ульяновск, 2002); II конференции «Медицинские, социальные и экономические проблемы сохранения здоровья населения» (Турция, г. Анталия, 2004); XIX Съезде физиологического общества им. И.П. Павлова (г. Екатеринбург, 2004); IV Молодежной научной конференции Института физиологии Коми НЦ УрО РАН «Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике» (г. Сыктывкар, 2005); IX Международном Съезде «Фитофарм 2005» (г. Санкт-Петербург, 2005); IV Всероссийской научной конференции «Химия и технология растительных веществ» (г. Сыктывкар, 2006).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 22 печатные работы, из них 5 статей.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Иванкова, Жанна Евгеньевна

выводы

2. На фоне уже развившейся анемии инъекции субстанции Серпистен вызывают эффекты, направленные на нормализацию показателей: ускорение созревания ретикулоцитов; увеличение осмотической и кислотной резистентности эритроцитов.

5. В опытах in vitro впервые обнаружено, что изменения электрофоретической подвижности фракций гемоглобина после инкубации эритроцитов с препаратом Серпистен сильнее выражены, чем после инкубации с ним гемолизатов. Появляется дополнительная перед IV фракция гемоглобина. Электрофоретическая подвижность I, II и III (основной) фракций гемоглобина из эритроцитарной массы выше (на 19%, 8%, 8%, соответственно), чем гемоглобина из гемолизатов.

7. Выявлены различные возрастные особенности в реакции эритроцитов мышей на введении субстанции Серпистен. Мыши в возрасте 5 месяцев сильнее и отчетливее реагируют изменением формы эритроцитов (уменьшение среднеклеточного объема на 25% и толщины клеток на 55%, увеличение индекса сферичности на 130%», увеличением осмотической резистентности) на введение Серпистен, особенно в дозе 5 мг/кг, в отличие от мышей в возрасте 12 месяцев.

8. Выявлены половые и видовые реакции на Серпистен лабораторных животных. Концентрация гемоглобина и ретикулоцитов разных стадий зрелости у мышей самцов в ответ на субстанцию Серпистен (в дозе 20 мг/кг) не изменяется, у самцов крыс концентрация гемоглобина повышается (на 4%>) и наблюдается перераспределение ретикулоцитов по возрастным группам (на 45% увеличивается доля клеток IV, на 15% уменьшается доля ретикулоцитов V стадии зрелости). Самки исследованных видов реагируют на введение субстанции Серпистен однозначно: как у крыс, так и у мышей уменьшаются концентрация гемоглобина (в среднем на 11%), толщина клеток (на 10%); увеличивается концентрация ретикулоцитов (на 70%).

9. Кислотно-основное состояние крови (рН, рСС>2, р02) животных, нарушенное инъекциями 0,9%» NaCl и фенилгидразина, возвращается к уровню интактных при введении экдистероидсодержащей субстанции Серпистен.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Иванкова, Жанна Евгеньевна, Сыктывкар

1. Абидов М., Грачев С., Сейфулла Р.Д., Зигенфусс Т.Н. Экстракт корня Rhodiola rosea снижает уровень С-реактивного белка и креатинкиназы в крови // Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 2004. - №7. - С.73-75.

2. Абубакиров Н.К. Экдистероиды цветковых растений (.Angiospermae) // Химия природ, соединений. -1981. №6. - С.685-702.

3. Агаджанян Н.А. Экология человека: современное состояние и перспективы развития / Вестн. АМН СССР. 1989. - №8. - С. 4-8.

4. Агаджанян Н.А., Ермакова Н.В. Экологический портрет человека на Севере. М.: КРУК, 1997.-208с.

5. Агаджанян Н.А., Полунин И.Н., Павлов Ю.В. и соавт. Адаптация и резервы здоровья (очерки по экологии человека). М.-Астрахань: АГМА, 1997. - 156 с.

6. Азизов А. П. Влияние элеутерококка, Элтона, левзеи и леветона на систему свертывания крови при физической нагрузке у спортсменов // Эксперим. клинич. фармакология. 1997. - Т.60. - №5. - С. 58-60.

7. Азизова О.А., Пирязев А.П., Никитина Н.А. и соавт. Влияние окисленных ЛПНП на гемолитическую резистентность эритроцитов // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2002. - Т. 134. - №8. - С. 160-162.

8. Айзиков М.И., Курмуков А.Г., Сыров В.Н. Физиологическая активность и коррелятивные изменения в белковом, углеводном и жировом обмене под влиянием экдизонов и неробола // Сб. фарм. природн. вещ. Ташкент, 1978. - С 107-124.

9. Анищенко Т. Г. Половые аспекты проблемы стресса и адаптации // Успехи соврем, биологии. 1991. - Т.З. - Вып.З. - С. 460-675.

10. Анищенко Т.Г., Буршина С.Н., Шорина Л.Н. К анализу факторов, детерминирующих половые различия в стрессовых реакциях у белых крыс // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1989. - №11. - С. 616-618.

11. А.С. 1312774 A ISU . МКИ3 А61 К35/78 (СССР) Тонизирующее средство / Н.К. Абубакиров, М.Б. Султанов, В.Н. Сыров и соавт. №295016028/14. Заявл. 04.07.87. Опубл. 07.05.88. Б.И. 1988. №17.

12. А.С. 2153346, Россия, МКИ3 А 61 К 35/78. Способ получения экдистероидов / В.В. Володин, С.О. Володина № 99106351/14. Заявл. 29.03.99. Опубл. 27.07.2000. Б.И. №21.

13. А.С. 2155599, Россия, МКИ3 А 61 К 35/78. Способ выделения индивидуальных соединений из смеси экдистероидов из надземной части растений Serratula coronata L. / В.В. Володин, С.О. Володина № 99106350/13. Заявл. 29.03.99. Опубл. 10.09.2000. Б.И. №21.

14. Афонюшкин В.Н., Леонов С.В. Инструкция к применению тест-систем для определения осмотической резистентности эритроцитов. 2003. - С.4.

15. Ахрем А.А., Левина И.С., Титов Ю.С. Экдизоны стероидные гормоны насекомых. - Минск: Наука и техника, 1973. - 232с.

16. Ахрем А.А, Ковганко Н.В. Экдистероиды: Химия и биологическая активность. Минск: Наука и техника, 1989. - 327с.

17. Бабич Л.Г., Бурдыга Ф.В., Холодова Ю.Д., Костерин С.А. Влияние экдистерона на корбахоловую контрактуру гладко мышцы мочеточника и Mg , АТФ-зависимый транспорт Са через сарколемму // Докл. АН СССР. 1992. -Т.324. - № 3. - С.701-705.

18. Баев В.М. Влияние пола на реологические свойства крови у взрослых людей // Клинич. лабор. диагностика. 2001. - № 12. - С.33-34.

19. Балбатун О.А., Жмакин И.К. Изменение кислородно-транспортной функции крови в динамике эстрального цикла у крыс // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1996. - №7. - С. 93-98.

20. Балтаев У.А. Фитоэкдистероиды: структура, источники и пути биосинтеза в растениях // Биоорган, химия. 2000. - №12. - С. 892-925.

21. Баширова P.M., Гареев Е.М., Киреева Н.А. Роль гемоглобина в регуляции электрокинетических характеристик и объема эритроцитов // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1998. - №7.

22. Белов А.А. В вопросу о токсичности гидразина и его производных // Сучасни проблем! токсигологп. 2000. - №1.

23. Белокриницкая Т.Е., Кузник Б.И., Хавинсон В.Х. Влияние полипептидов эритроцитов на систему эритрона при экспериментальной анемии // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1992. - №2. - С. 132-133.

24. Бельченко Д.И. Внутрисосудистое ауторозеткообразование при гемолитической анемии // Гематол. и трансфузиол. 1992. - №4. - С. 23-25.

25. Бобова Л.П., Кузнецов С.А., Сапрыкин В.П. Гистофизиология крови и органов кроветворения и иммуногенеза. М.: Новая волна, 2003. - 157с.

26. Богданов Н.А. Патология, клиника и терапия поражений жидкими ракетными топливами. Л.: ВМОЛА, 1970. - С.36-38.

27. Бойтлер Э. Нарушение метаболизма эритроцитов и гемолитическая анемия. -М.: Медицина, 1981. 256с.

28. Болдырев А.А. Мембраны, молекулы, клетки. М.,1982. - 181с.

29. Бондарев Л.С., Зайцев И.А., Жидких В.Н. Влияние некоторых воздействий на осмотическую стойкость эритроцитов // Лабор. дело. 1990. -№ 7. - С . 29-31

30. Быкова И.А. Морфологические особенности эритроцитов периферической крови в норме и патологии (световая микроскопия) // Гематол. и трансфузиол. -1991.-№6.-С. 28-30.

31. Василенко Н.М. Действие ксенобиотиков на систему крови. / В кн.: Общая токсикология (под ред. Б.А. Курляндского, В.А. Филова). М.: Медицина, 2002. - С. 258—259.

32. Володин В.В. Экдистероиды в интактных растениях и клеточных культурах //Автореф. дис.д-ра. биол. наук. М., 1999. - 49с.

33. Володин В.В. Физиологическая активность фитоэкдистероидов и перспективы их использования в медицине // Фитофарм: Материалы X Съезда Фитофарм. С.-Пб., 2006. - С. 43-52.

34. Габриэлян Э.С., Акопов С.Э. Клетки крови и кровообращение. Ереван, 1985.-211с.

35. Гительзон И.И., Терсков И.А. Метод кислотных эритрограмм // Биофизика. -1957.-Вып. 2.-С. 259-266.

36. Гительзон И.И., Терсков И.А. О механизме гемолиза / Вопросы биохимии, биофизики и патологии эритроцитов. Красноярск, 1961. - Вып.2. - С.3-9.

37. Геннис Р. Биомембраны: Молекулярная структура и функции. М.: Мир, 1997.-624с.

38. Гладилов В.В. Гипоксия и гипероксия в онтогенезе системы крови. -Сыктывкар, 1996. 206с.

39. Горбунова Н.А. Патофизиология острой кровопотери. Механизмы нарушения гемокоагуляции. / В кн.: Патофизиология крови. Экстремальные состояния (сборник работ). М.: Бивитэк, 2004. - 268с.

40. Гордиенко Е.А., Некоз И.Л. Реактивный эффект при осмотическом лизисе клеток // Биол. мембраны. 1989. - №11. - С. 1170-1174.

41. Горошинская И.А., Голотина Л.Ю., Горло Е.И. и соавт. Изменение микровязкости мембран лимфоцитов и эритроцитов крови онкологических больных // Вопросы мед. химии. 1999. - №1.

42. Григорьева Г.И., Леонтьев В.Г. Гемоглобин крыс в норме и при действии гипоксии // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1978. - №1. - С. 18-20.

43. Губский Ю.И., Левицкий Е.Л., Холодова Ю.Д. и соавт. Механизмы генопротекторного действия препарата на основе фитоэкдистероидов (БТК-8л) в условиях повреждения хроматина тетрахлорметаном // Укр. биохим. журн. -1993. -№6. С.75-83.

44. Дайнан Л. Стратегия оценки роли фитоэкдистероидов как детергентов по отношению к беспозвоночным фитофагам // Физиол. растений. 1998. - Т.45. -№ 3. - С. 347-359.

45. Дворецкий Л.И. Анемия: стратегия и тактика диагностического поиска // Справочник поликлинического врача. 2002. - №6.

46. Джурко Б.И., Крылов М.К., Ассур М.В., Ильина В.А. Сравнительный анализ эффективности восстановления объема циркулирующей плазмы после кровопотери у новорожденных и взрослых млекопитающих // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1996. - №10. - С.391-394.

47. Долгов В.В., Морозова В. Клинико-диагностическое значение лабораторных показателей. М.: Лабинформ, 1995.

48. Ермишина О.А., Курмуков А.Г., Салихова Р.Э., Айзиков М.И. Влияние экдистерона на уровень ферментемии при экспериментальном инфаркте миокарда // Мед. журн. Узбекистана. 1982. -№11.- С.90-91.

49. Иванов И.Т., Бенов Л.И. Агрегация денетурированных мембранных белков -начальный этап кислотного гемолиза // Биофизика. 1991. - Вып.5,- С. 839-844.

50. Иванов И.Т., Данаилова Ю.Д. Кинетика кислотного гемолиза в изотонической среде сахарозы // Биофизика.-1991. Вып. 5. - С.845-849.

51. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран. -М.: Наука, 1982. 224с.

52. Иржак Л.И. Гемоглобины и их свойства. М.: Наука, 1975. - 240с.

53. Иржак Л.И. Действие растворов солей и глюкозы на сродство гемоглобина к кислороду у крыс // Физиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова. 1988. - №4. - С. 564-568.

54. Иржак Л.И. Дыхательная функция крови в онтогенезе и эволюции: учебное пособие. Сыктывкар: Изд-во Сыктывкарского университета, 2003. - 48с.

55. Иржак Л.И., Бубунин А.В., Пархачева С.Ю. и соавт. Действие прогревания крови на эритроциты и гемоглобин // VII Всесоюзн. конф. по экологич. физиол.: Тез. докл. Ашхабад, 1989. - С. 124.

56. Иржак Л.И., Качмарчик Э.В. Тип гемоглобина новорожденного и взрослого кролика // Докл. АН СССР. 1970. - №5. С.1240-1241.

57. Иржак Л.И., Тюрнин А.В. Влияние хлорида натрия на свойства гемоглобина в эритроците // Физиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова. 1985. - №7. - С. 867871.

58. Исследование системы крови в клинической практике. Под. ред. Козинца Г.И. и Макарова В.А. М.: Триада-Х, 1997. - 480с.

59. Казеннов A.M., Маслова М.Н. Структурно-биохимические свойства мембраны безъядерных эритроцитов// Физиол. журн. СССР им. И.М. Сеченова. 1987. - Т.73. - №12. - С.1587-1594.

60. Казеннов A.M., Катюхин JT.H., Маслова М.Н. и соавт. Изменение свойств эритроцитов в раннем постнатальном онтогенез у крыс // Журн. эвол. биохим. и физиол. 2001. -№2. - С. 154-156.

61. Каплан О.В. Участие липидного компонента эритроцитов в газообмене и состоянии дыхательной функции крови при геморрагических анемиях // Гематол. и трансфузиол. 1996. - №4. - С. 15-17.

62. Катюхин Л.Н. Реологические свойства эритроцитов. Современные методы исследования // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1995. - №6. - С. 122-129.

63. Кизелыитейн А.Л., Левин A.M., Цыбульский И.Е. Изменение некоторых биохимических и физико-химических свойств гемоглобина в процессе «старения» // Укр. биохим. журн. 1988. - №4. - С. 14-18.

64. Клиорин Г.Ф., Тиунов Л.А. Функциональная неравнозначность эритроцитов. -Л.: Наука, 1974,- 149с.

65. Козинец Г.И. Интерпретация анализов крови и мочи и их клиническое значение. М.: Триада-Х, 1998. - 104с.

66. Козинец Г.И. Цитологические особенности эритрона при анемиях. -Ташкент, 1988. 140с.

67. Козинец Г.И. Экология и кроветворение. // Гематол. и трансфузиол. 1990. -№12.-С. 7-11.

68. Козинец Г.И., Шишканова З.Г., Сарычева Т.Г. и соавт. Клетки крови и костного мозга: атлас. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. -203с.

69. Козлов М.М., Маркин B.C. Теория осмотического лизиса липидных везикул //Биол. мембраны. 1984. - №1. - С. 74-90.

70. Козлов М.М., Маркин B.C. Мембранный скелет эритроцита. Теоретическая модель //Биол. мембраны. 1986. - №4. - С.404-421.

71. Козлов М.М., Черномордик Л.В., Маркин В.Л. Механизм образования безбелковых участков мембраны эритроцитов: разрыв мембранного скелета // Биол. мембраны. 1989. - №6.

72. Колосова М.В., Лакомая Ю.А., Титова Н.М. Изучение свойств ферментов в эритроцитах напряженного эритропоэза // Физиол. журн. им. И.М. Сеченова. -2004. №8. - С.139.

73. Коржуев П.А. Гемоглобин: сравнительная физиология и биохимия. М.: Наука, 1964. - 285с.

74. Косовский М.И., Сыров В.Н., Мирахмедов М.М. и соавт. Влияние неробола и экдистерона на некоторые связанные инсулинзависимые процессы в норме и при инсулинрезистентности // Пробл. эндокринол. 1989. - Т.35. - №5. - С. 7781.

75. Коцюруба А.В., Ахмед И., Тараканов С.С., Холодова Ю.Д. Влияние экдистерона на обмен пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов в тканях цыплят//Укр. биохим. журн. 1992. - Т.64. - №5. - С.52-60.

76. Коцюруба А.В., Ахмед И., Тараканов С.С., Холодова Ю.Д. Изучение механизмов действия экдистерона у цыплят с D-гиповитаминозом. Ранняя фаза действия // Укр. биохим. журн. 1993. - Т.65. - №5. - С.83-90.

77. Коцюруба А.В., Буханев1ч О.М., Мегедь О.Ф. и соавт. С27-стероУдш гормони екдистерон та кальцитрюл активирують фосфошозитольний цикл у мембраннш фаз! ди'// Украинск. биохим. журн. 1999. - №1. - С.27-32.

78. Крымский А.Д., Нестайко Г.В. Растровая электронная микроскопия сосудов и крови. М.: Медицина, 1976. - 232с.

79. Кудрявцев А.А., Кудрявцева Л.А. Клиническая гематология животных. М.: Колос, 1974. - 399с.

80. Кузьменко А.И., Морозова Р.П., Николенко И.А. и соавт. Влияние витамина D3 и экдистерона на свободнорадикальное окисление липидов // Биохимия. -1997. Вып.6. - С.712-715.

81. Куракина И.О., Булаев В.М. Экдистен тонизирующее средство в таблетках по 0,005 г // Новые лекарственные препараты. Экспресс-информация. - М., 1990.- Вып.6. - С.16-18.

82. Курмуков А.Г., Сыров В.Н. Противовоспалительный эффект экдистерона // Мед. журн. Узбекистана. 1988. - №10. - С. 68-70

83. Куротченко С.П., Субботина Т.И., Туктамышева И.И. и соавт. Экранирующий эффект минерала шунгита при электромагнитном облучении крыс // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2003. - №11. - С. 516-518.

84. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. - 293с.

85. Лафон Р. Фитоэкдистероиды и мировая флора: разнообразие, распределение и эволюция // Физиол. раст. 1998. - Т. 45. - № 3. - С. 326-346.

86. Левицкий Е.Л., Холодова Ю.Д., Губский Ю.И. и соавт. Биохимические характеристики фракционирования хроматина печени крыс в условиях экспериментального D-гиповитаминоза и при введении препаратов стероидов // Укр. биохим. журн. 1993. - №1. - С.28-36.

87. Левицкий Е.Л., Холодова Ю.Д., Губский Ю.И. и соавт. Механизмы генопротекторного действия препарата на основе фитоэкдистероидов (БТК-8л) в условиях повреждения хроматина хлорофосом // Укр. биохим. журн. 1993. -№6. - С.84-91.

88. Левтов В.А., Ригерер С.А., Шадрина Н.Х. Реология крови. М.: Медицина, 1982.-272с.

89. Луганова И.С., Блинова М.Н., Абдулкажырова А.С. Возрастной состав эритроцитарной популяции, содержание АТФ и 2,3-дифосфоглицерата в эритроцитах при некоторых формах гемолитических анемий // Вопр. мед. химии. 1978. - Вып. 5. - С. 499-505.

90. Люсов В.А., Белоусов Ю.Б. Роль гемостаза и реологии крови в патогенезе ишемической болезни сердца// Кардиология. 1977. - №5. - С.8-13.

91. Максина А.Г., Тихомирова А.Н., Дайняк Б.А. Изменение структурного состояния мембран эритроцитов при дегидратации // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1996. - №10. - С.402-404.

92. Маликов М.М., Есенбаева В.З., Асанова Д.Т. Влияние экдистерона и ретаболила на показатели углеводного обмена печени и миокарда в возрастном аспекте // Мед. журн. Узбекистана. 1982. -№11.- С.68-69.

93. Маслова М.Н. Активность мембранных ферментов при различных стрессорных воздействиях // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1994. - Т. 80. - №7. - С.76.

94. Матвеев А.В., Акоев В.В. Сравнительное исследование структурных переходов в эритроцитарных мембранах доноров и новорожденных // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1997. - №2. - С. 196-200.

95. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г., Музафарова Д.А., Гуцаева Д.Р. Качественное различие эритроцитов крови мужчин и женщин // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1999. - №10. - С. 372-374.

96. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г., Ахунова А.Р., Гуцаева Д.Р. Половые и возрастные особенности распределения эритроцитов крови по их электрофоретической подвижности // Журн. эвол. биохим. и физиол. 2000. -№3. - С.273-275.

97. Матюшичев В.Б., Шамратова В.Г., Саврасова И.В. Особенности взаимосвязей количества и среднего объема эритроцитов крови у человека и крысы // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2000. - №9. - С. 265-267.

98. Маурер Г. Диск-электрофорез. М.: Мир, 1972. - 215с.

99. Меньшиков В.В. (Ред.) Лабораторные методы исследования. М.: Медицина, 1987.-369с.

100. Микашинович З.И., Шепотиновский В.И. Влияние пирувата на обменные процессы в эритроцитах после острой массивной потери крови // Укр. биохим. журн. 1988.-№2.-С. 57-61.

101. Мирзаев Ю.Р., Сыров В.Н. Эффект фитоэкдистероидов на сексуальную активность самцов крыс // Докл. АН Респ. Узб. 1992. - №3. - С. 47-49.

102. Миронова В.Н., Холодова Ю.Д., Скачкова Т.Ф. и соавт. Гипохолестеринемичное действие фитоэкдизонов при экспериментальной гипхолестеринемии у крыс // Вопр. мед. химии. 1982. - №3. - С.101-105.

103. Моисеева О.И. Физиологические механизмы регуляции эритропоэза. JL: Наука, 1985. - 183с.

104. Мойсеенко Н.А. Гетерогенность эритроцитов и гемоглобина в онтогенезе золотистого хомяка. Автореф. дис. канд. биол. наук. JI., 1979. - 26с,

105. Мойсеенко Н.А., Иржак Л.И. Агглютинация эритроцитов кролика при напряжённом эритропоэзе // Журн. общ. биол. 1972. - Т. 33. - № 6. - С. 779786.

106. Мойсеенко Н.А., Иржак Л.И., Печеницына Е.Г. Влияние отмывки, антикоагулянтов и солевых растворов из семян бобовых на физико-химические свойства гемоглобина, содержащегося в эритроцитах крыс // Вестник СыктГУ, 1998. Серия.4. - Вып. 1. - С.36-43.

107. Молчанова Т.П. Основы молекулярной организации белков мембраны эритроцита и их дефекты, приводящие к гемолитическим анемиям // Гематол. и трансфузиол. 1989. - №7. - С. 32-41.

108. Назаренко В.И., Лишко В.К., Кутинов С.А. Электрофорез и авторадиография на ПААГ // Лаб. дело. 1971. - №5. - С. 309-311.

109. Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Иванова И.А. Возрастные и половые особенности фосфолипидного состава эритроцитов крыс линии Вистар в процессе постнатального онтогенеза // Рос. физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 2002. -№1. - С. 53-62.

110. Новицкий В.В., Рязанцева Н.В., Степовая Е.А. Физиология и патофизиология эритроцита. Томск: Изд-во Том. ун-та, 2004. - 202с.

111. Орлов С.Н., Покудин Н.И., Эль-Раби JI.C. и соавт. Транспорт ионов при различных формах гемолитической анемии: корреляционный анализ // Биохимия. 1993. - Вып. 6. - С. 866-871.

112. Осинская Л.Ф., Саад Л.М., Холодова Ю.Д. Антирадикальное действие и антиоксидантная активность экдистерона // Укр. биохим. журн. 1992. - №64. С. 114-117.

113. Павлов А.Д., Морщакова Е.Ф. Регуляция эритропоэза. М.: Медицина, 1987.-272с.

114. Павлов А.Д., Морщакова Е.Ф. Синдром неадекватной продукции эритроцитов при анемии // Гематол. и трансфузиол. 1999. - №3.- С. 30-32.

115. Петрова М.П., Сербинова Т.А. Влияние концентраций хлористого Na на содержание связанного гемоглобина в мембране эритроцитов // Гематол. и трансфузиол. 1987. - №4. - С.53-55.

116. Плотников М.Б., Зибарева Л.Н., Колтунов А.А. и соавт. Гемореологические свойства экстрактов из некоторых растений, содержащих экдистероиды // Растит, ресурсы. 1998. - Вып. 34. - С.91-96.

117. Плотников М.Б., Алиев О.И., Васильев А.С. и соавт. Гемореологические эффекты экстрактов Lychnis chalcedonica L // Эксперим. и клинич. фармакол. -2000. №2. - С.54-56.

118. Плотников М.Б., Зибарева JI.H., Васильев А.С. и соавт. Гемореологическая активность экдистерона и различных фракций экстракта из надземной части Lychnis chalcedonica L. in vitro II Растит, ресурсы. 2000. - Вып. 3. - С. 91-94.

119. Плотников М.Б., Алиев О.И., Васильев А.С. и соавт. Гемореологическая и церебропротекторная активность экстракта Lichnis chalcedonika L. при ишемии мозга у крыс // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2005. - №1. - С.68-71.

120. Погорелов В.М., Козинец Г.И. Диагностическая значимость морфологических особенностей эритроцитов в мазках периферической крови // Гематол. и трансфузиол. 2005. - №5. - С.13-17.

121. Попова Е.Г., Повалий Т.М. Выявление холестерина плазмалеммы эритроцитов помощью латексного маркера // Цитология. 1991. - №7. - С. 3537.

122. Приезжев А.В., Тюрина АЛО., Фадюкова О.Е., Кошелев В.Б. Уменьшение дефомируемости эритроцитов у крыс с ишемией мозга // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2004. - №3. - С.352-355.

123. Проданчук Г.Н., Балан Г.М. Окислительный стресс в формировании гемолитической анемии при токсическом воздействии соединений гидроксиламина// Сучасни проблеми токсикологи. 2005. - №1.

124. Пчеленко Л.Д., Метелкина Л.Г., Володина С.О. Адаптогенный эффект экдистероидсодержащей фракции Serratula coronata L. И Химия растит, сырья. -2002. №1. - С.669-80.

125. Рабинович Ф.М., Рыбкина А.Г. О факторах, определяющих осмотическую резистентность эритроцитов. / В кн.: Биофизика, физиология и патология эритрона. Красноярск, 1974. - С.20-217.

126. Радзивилл Г.Г., Григорян С.С., Гайстер Н.А. и соавт. Реологические свойства крови у больных острым инфарктом миокарда и кардиосклерозом // Кардиология. 1977. - №5. - С.8-24.

127. Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике. Под ред. проф. Базарновой М. А. Киев: Выща школа, 1988. -317с.

128. Рыбальченко В .К., Коганов М.М. Структура и функции мембран. Киев: Выща школа, 1988. - 312с.

129. Садио Б.М. Кислотный и вирусный гемолиз эритроцитов. Автореф. дисс.канд. биол. наук. Минск, 1986. - 20с.

130. Свидетельство на товарный знак (знак обслуживания) Серпистен. № 282636. Заявка № 2004717505. Зарег. в Госуд. реестре товарных знаков и знаков обслуживания РФ 22.02.2005.

131. Сейфулла Р.Д. Модуляция рецепторов при взаимодействии с фаракологически активными веществами // Фармакол. и токсикол. 1976. - №4. - С.492-500.

132. Сейфулла Р.Д. Новые комбинированные адаптогены, повышающие работоспособность спортсменов высокой квалификации // Теорет. и практ. физич. культура. 1998. - №10. - С.43-47.

133. Сейфулла Р.Д., Вайсберг М.А., Сыров В.Н. Действие ратибола на систему свертывания крови // Фармакол. и токсикол. 1986. - №4. - С.40-42.

134. Сергеев П.В. Стероидные гормоны. М.: Наука, 1984. - 325с.

135. Сергеев П.В., Духанин А.С., Шимановский H.JI. Плазматическая мембрана клетки-мишени и стероидные гормоны: начало спора или его завершение? // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1995. - №10. - С.34-348.

136. Соловьев Г.М., Радзивил Г.Г. Кровопотеря и регуляция кровообращения в хирургии. М.: Медицина, 1973. - 335с.

137. Станевская Т.Ю., Гришкова Л.И. О неточности метода Лимбека при определении осмотической резистентности эритроцитов // Лаб. дело. 1990. -№1. - С. 14-16.

138. Станчева Е., Николова П., Кавалджиева Б. и соавт. Влияние алюминия на эритропоэз // Гематол. и трансфузиол. 2003. - №3. - С.36-38.

139. Стародуб Н.Ф. Изучение свойств фракций гемоглобина крыс // Биохимия. 1974. - Т.39. - №4. - С.757-761.

140. Стародуб Н.Ф. Щелочная денатурация фракций гемоглобина крыс // Мол. биология. 1978. - Вып. 20. - С.32-39.

141. Стародуб Н.Ф., Артюхов В.П., Грищак А.Н., Радавский Ю.Л. О природе гетерогенности гемоглобина крыс // Укр. биохим. журн. 1979. - №2. - С. 117129.

142. Стародуб Н.Ф., Грищак А.Н. Морфогенетическая смена типов гемоглобина в онтогенезе крыс // Онтогенез. 1979. - №6. - С. 567-575.

143. Стародуб Н.Ф., Назаренко В.И. Гетерогенная система гемоглобина. Киев: Наукова думка, 1987. -200с.

144. Сторожок С.А., Санников А.Г., Захаров Ю.М. Молекулярная структура мембран эритроцитов и их механические свойства. Тюмень: Изд-во Тюм. унта, 1997.- 140 с.

145. Стрекалов А.А. Гемоглобины мышей некоторых инбредных линий // Генетика. 1967. - №3. - С. 39-47.

146. Стусь Л.К. Кислотный гемолиз эритроцитов в зависимости от температуры и сроков хранения // Биофизика. 1994. - Вып. 2. - С. 362-364.

147. Сыров В.Н. К механизму анаболического действия фитоэкдистероидов в организме млекопитающих // Биол. науки. 1984. - №11. - С. 16-19.

148. Сыров В.Н., Курмуков А.Г. Результаты поиска эстрогенных веществ среди растительных соединений // Докл. АН УзССР. 1975. - №4. - С.45-46.

149. Сыров В.Н., Курмуков А.Г. К анаболическому действию витикостерона Е //Докл. АН УзССР. 1975. - №6. - С.31-32.

150. Сыров В.Н., Курмуков А.Г. О биологической активности циастерона в опытах на самцах крыс // Биол. науки. 1976. - №5. - С.72-74.

151. Сыров В.Н., Курмуков А.Г. О тонизирующих свойствах экдистерона выделенного из левзеи сафлоровидной // Докл. АН УзССР. 1977. - №12. -С.27-30.

152. Сыров В.Н., Курмуков А.Г., Сахибов А.Д. Влияние туркестерона и неробола на активность белоксинтезирующей системы печени мышей // Вопр. медиц. химии. 1978. - №4. - С.456-460.

153. Сыров В.Н., Курмуков А.Г., Султанов М.Б. Оценка анаболического действия фитоэкдизонов и их 6-кетоаналогов в опытах на крысах-самках // Докл. АН УзССР. 1981. -№3. - С. 31-33.

154. Сыров В.Н., Курмуков А.Г., Усманов Б.З. К анаболическому действию туркестерона и тетраацетата туркестерона // Докл. АН УзССР. 1975. - №2. -С.32-34.

155. Сыров В.Н., Матвеев С.Б., Курмуков А.Г, Исламбеков У.С. Влияние экдистерона и неробола на течение перелома костей в эксперименте // Мед. журн. Узбекистана. 1986. - №3. - С.67-69.

156. Сыров В.Н., Набиев А.Н., Султанов М.Б. Действие фитоэкдистероидов на желчеотделительную функцию печени в норме и при экспериментальном гепатите // Фармакол. и токсикол. 1986. - №3. - С. 100-103.

157. Сыров В.Н., Насыров С.С., Хушбактова З.А. Результаты экспериментального изучения фитоэкдистероидов в качестве стимуляторов эритропоэза у лабораторных животных // Эксперим. и клинич. фармакол. -1997. -№3. С.41-44.

158. Сыров В.Н., Хушбактова З.А., Абзалова М.Х., Султанов М.Б. О гиполипидемических и антиатеросклеротических свойствах фитоэкдистероидов // Докл. АН УзССР. 1983. - №9. - С.44-45.

159. Сыров В.Н., Хушбактова З.А. Фармакотерапевтический эффект фитоэкдистероидов и неробола при токсическом поражении почек в эксперименте // Эксперим. и клинич. фармакол. 2001. - №4. - С. 56-58.

160. Ташмухамедова М.А., Алматов К.Т., Хушбактова З.А. и соавт. Влияние фитоэкдистероидов и стераноболов на активность и стабильность мембранно-связанных ферментов митохондрий печени при экспериментальном гепатите // Вопр. мед. химии. 1986. -№1. - С.81-84.

161. Ташмухамедова М.А., Алматов К.Т., Сыров В.Н. и соавт. Сравнительное изучение действия экдистерона, туркестерона и неробола на функции митохондрий печени крыс при экспериментальном диабете // Вопр. мед. химии. 1986. - Вып.5. - С.24-28.

162. Терней А. Современная органическая химия. М.: Мир, 1981. - Т.2. - С. 493.

163. Титова Н.М. Структурно-функциональные свойства эритроцитов напряженного эритропоэза // Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 2004. -№8. - С.49-50.

164. Тодоров И.Н., Митрохин Ю.И., Ефремова О.И., Сидоренко Л.И. Влияние экдистерона на биосинтез белков и нуклеиновых кислот в органах мышей // Хим.-фарм. журн. 2000. - №9. - С.3-5.

165. Тодоров И.Н., Митрохин Ю.И., Ефремова О.И., Сидоренко Л.И. Действие экстрактов левзеи сафлоровидной на биосинтез РНК и белков в органах мышей // Хим.-фарм. журн. 2000. - №9. - С. 24-26.и

166. Тодоров И. Клинические лабораторные исследования в педиатрии. -София: Физкультура и медицина, 1963. 665с.

167. Трикуленко А.В., Пинишко У.В., Панкевич Г.Л. Кинетика кислотного лизиса эритроцитов в присутствии лигандов некоторых интегральных белков плазматической мембраны //Биофизика. 1996. - Вып.6. - С. 1275-1277.

168. Ужанский Я.Г. Физиологические механизмы регенерации крови. М.: Медицина, 1968. - 264 с.

169. Фитоэкдистероиды / Под. ред. В.В. Володина. С.-Пб.: Наука, 2003. - 293с.

170. Фомовская Г.Н., Бердышев А.Г., Холодова Ю.Д. Иммуномодуляторный эффект экдистерона // Укр. биохим. журн. 1992. - №2. - С.56-61.

171. Фултон А. Цитоскелет. Архитектура и хореография клетки. М.: Мир, 1987.- 115с.

172. Холодова Ю.Д. Фитоэкдистероиды // Биохим. животн. и челов.: Республ. межвед. сб. научн. тр. 1987. -№11.- С.27-41.

173. Хушбактова З.А., Сыров В.Н., Умарова Ф.Т. и соавт. Изменение активности Na, К-АТФ-азы миокарда под действием препаратов растительного происхождения при экспериментальном атеросклерозе // Докл. АН УзССР -1987. -№1. С.51-53.

174. Черницкий Е.А., Воробей А.В. Структура и функции эритроцитарных мембран. Минск: Наука и техника, 1981. - 216с.

175. Черницкий Е.А., Сенькович А.В., Козлова Н.М. Гетерогенность пор, образуемых в мембране эритроцитов липофильными гемолитиками // Биофизика. 1996. - Вып. 6. - С. 1270-1274.

176. Шашкин Л.В., Терсков И.А. Продукция и деструкция эритроцитов в организме. Новосибирск: Наука, 1986. - 89с.

177. Шиффман Ф.Дж. Патофизиология крови. М.-С.-Пб.: БИНОМ-Невский Диалект, 2000.-451с.

178. Шперлинг И.А., Новицкий В.В., Рязанцева Н.В. и соавт. Механизмы нарушения функциональных свойств эритроцитов при экспериментальной фенилгидразининдуцированной метгемоглобинемии // Бюлл. сибирск. мед. -2005. -№3. С.48-53

179. Юшков Б.Г., Климин В.Г., Северин М.В. Система крови и экстремальные воздействия на организм. Екатеринбург: УрО РАН, 1999. - 204с.

180. Ямайкина И.В., Фурманчук Д.А. Перекрестный метод анализа скорости оседания и коэффициента агрегации эритроцитов в медицинской диагностике // Гематол. и трансфузиол. 1999. - №3. - С. 39-41.

181. Ярочкин B.C., Панов В.П., Максимов П.И. Острая кровопотеря. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. - 363с.

182. Benga G., Borza Т. Diffusion water permeability of mammalian red blood cells // Compar. biochem. and physiol. 1995. - V.l 12. - №4. - P. 652-659.

183. Bergamasco R., Horn D.H.S. Distribution and role of insect hormones und plants / Invertebrate endocrinology.V. 1: Endocrinology of insects / Eds. Downer R.G.H., Laufer H. N. Y., Listss A. R. 1983. - P.627-654.

184. Bessis M., Mohandas N. Deformability of normal, shape altered and pathological red cells//Blood cells. - 1975.-V. 1. - P. 315-321.

185. Brann D.W., Hendry L.B., Mahesh V.B. Emerging diversities in the mechanism of action of steroid hormones // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 1995. - V.52. -P.l 13-133.

186. Brugnara C., Tosteson D.C. Cell volume, К transport, and cell density in human eiythrocytes // Am. J. Physiol. 1987. - V.252. - P.269-276.

187. Butenandt A., Karlson P. Uber die isolierung eines metamorphosehormone der insecten in kristallisierter form // Z. Naturforsch. 1954. - V. 96. - P. 389-391.

188. Catalan R.E., Aragones M.D., Martines A.M. Effects of ecdysterone on cyclic AMP and cycling GMP in mouse plasma // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1979. -V. 89. - P. 44-49.

189. Catalan R.E., Martines A.M., Aragones M.D. et al. Alterations in rat lipid metabolism following ecdysterone treatment // Сотр. Biochem. Physiol. 1985. - V. 81.-P. 771-775.

190. Christopherson K.S., Mark M.R., Bajaj V., Godowski P.J. Ecdysteroid-dependent regulation of genes in mammalian cells by a Drosophila ecdysone receptor and chimeric transactivators // Proc. Nat. Acad. 1992. - V. 89. - P. 6314-6318.

191. Cianciarullo A.M., Bertho A.L., Soares M.J. et al. Haemoglobin biosynthesis site in rabbit embryo eiythroid cells // Cell Biol. Int. 2003.- V. 27. - №9. - P. 747753.

192. Detmar M., Dumas M., Bonte F. et al. Effects of ecdysterone on the differentiation of normal human keratinocytes in vitro // Europ. J. Dermatol. 1994. -V. 4. - P. 558-562.

193. Dinan L. Phytoecdysteroids: biological aspects // Phytochemistry. 2001. - V. 57. - P. 325-339.

194. Galbraith M.N., Horn D.H.S. An insect-moulting hormone from a plant // J.Chem. Soc. Chem. Commun. 1966. - P. 905-906.

195. Gross P. Biological activity of hydroxyl-amine // CRC Crit. Rev. Toxicol. V. 14. -P. 87-99.

196. Grossman S.J., Simson J., Jollow D.J. Dapsone induced hemolytic anemia: effect of N-hydroxydapsone on the sulfhydryl status and membrane proteins of erythrocytes // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 1992. - V. 117. - P. 208-217.

197. Hoobs A.J., Higgs A., Moncada S. Inhibition of nitric oxide synthase as a potential therapeutic target // Annnu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1999. - V.39. -P.191-200.

198. Horn D. Hystorical introduction // Ecdysone. From chemistry to mode of action / Ed.Koolman J.Stuttgart; New York: Thieme. Med.Publ, 1989. - P. 8-19.

199. Janowski B.A., Grogan M.F., Jones S.A. et al. Structural requirements of ligands for the oxysterol liver X raceptors LXRalpha and LXRbeta // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1999.-V.69.-P.266-271.

200. Jizba J., Herout V., Sorm F. Isolation of ecdysterone (crustecdysone) from Polipodium vulgare L. Rhisomes II Tetrahedron Lett. 1967,- V.18. - P. 1689-1691.

201. Jones S.A., Moore L.B., Shenk J.L. et al. The pregnane X raceptor: a promiscuous xenobiotic raceptor that has diverged during evolution // Mol. Endocrinol. 2000. - V.14. - P.27-39.

202. Koch W., Heim G. Die Haltung und Zucht von Versuchstieren. Stuttgart, 1955.- 134 P.

203. Kholodova Ju. D. Phytoecdysteroids: biological effects, application in agriculture and complementary medicine // Укр. 6ioxiM. журн. 2001. -№3.

204. Koolman J. Ecdysteroids // Zoolog. Sci. 1990. - V.5. - P. 563-580.

205. Koudela K., Tenora J., Bajer J. et al. Stimulation of grrowth and development in Japanese quails after oral administration of ecdysteroid containing diet // Europ. J. Entomol. - 1995. - V.92. - P. 349-354.

206. Lafont R. Ecdysteroids and related molecules in animals and plants // Arch, insect biochem. physiol. 1997. - V. 35. - P. 3-20.

207. Lafont R., Girault J.-P., Kerb U. Excretion and metabolism of injected ecdysone in the white mouse // Biochem. Pharmacol. 1988. - V. 37. -№. 6. - P. 1174-1177.

208. Lafont R., Dinan L. Practical uses for ecdysteroids in mammals including humans // J. of insect sci. 2003. - V.7. - 30 p.

209. Lauf P.K. Thyol-dependent passive K+, СГ transport in sheep redcells/ Dependence on metabolism // Am. J. Physiol. 1983. - V.245. - P.445-448.

210. McEwen B.S. Non-genomic and genomic effectsof steroids on neural activiti // TIPS. -1991.-V.12.-P. 141-147.

211. Matsuda H., Kawaba Т., Yamamoto Y. Pharmacological studies of insect metamorphosing steroids from Achyranthis radix II Folia Pharmac. 1970. - V. 66. -P. 551-563.

212. Meybeck A. Hydrated lipidic lamellar phases or liposomes based on ecdysteroids // United states patent and trademark office / Certificate of correction. 1991.-Patent№5,198,225.

213. Morton D.B., Abbot D., Barelay R. et al. Laboratory animals. 1993. - V.27. -P. 1-22.

214. Muscara M.N., Wallase J.L. Nitric oxide. Therapeutic potential of nitric oxide donors and inhibitors // Am. J. Physiol. 1999. - V. 276. - P. 1313—1316.

215. Nakanishi K., Koreeda M., Sasaki S. et al. The Strukture of ponasteron A an insect moulting hormone from the leaves of Podocarpus nakaii Hay // Chem.Commun. 1966. - P. 915-917.

216. Oberdorster E., Clay M.A., Cottam D.M. et al. Common phytochemicals are ecdysteroid agonists and antagonists: a possible evoluationary link between vertebrate and invertebrate steroid hormones // J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2001. -V.77.-P. 229-238.

217. Odek-Ogunde M., Rajab M.S., Migwi G. J., Ndegwa J. M. Blood Pressure Responses to an Extract of Ajuga remota in Experimenally Hypertensive Rats // Planta Med. 1993. - V. 59. - P. 573-574.

218. Ogawa S., Nishimoto N., Matsuda H. Pharmacology of ecdysone in Vertebrates / Invertebrate Endokrinology and Hormonal Heterophylly. (In Berdette W.J. (ed.)). -Berlin, 1974. P.341-344.

219. Okui S., Otaka Т., Uchiyama M. et al. Stimulation of protein synthesis in mouse liver by insect-moulining steroids // Chem. Pharm. Bull. 1968. - V.16. - P. 384-387

220. Otaka Т., Okui S., Uchiyama M. Stimulation of protein synthesis in mouse liver by ecdysterone // Chem. pharm. Bull. 1996. - V. 17. - P. 75-81.

221. Packer L. Nitric Oxide Part В Physiological and Pathological Processes // Methods. Enzymol. 1996. - V. 269. - P. 66—76.

222. Prabhu V., Nayar K. Crustecdysone is estrogenic or antiestrogenic activity in the rat // Experietia. 1974. - V. 30. - P. 821.

223. Schroepfer Jr.G.J. Oxisterols: modulators of cholesterol metabolism and other processes // Physiol. Reviews. 2000. - V.80. - P.361-554.

224. Schumacher M. Rapid membrane effects of steroid hormones: an emerging concept on neuroendocrinology I I TINS. 1990. - V. 13. - P. 359-362.

225. Selepcova L., Sommer A., Vargova M. Effect of feeding on a diet containing varying amounts of Rhaponticum carthamoides hay meal on selected morphological parameters in rats 11 Europ. J. Entomol. 1995. - V92. - P. 391-397.

226. Simon P., Koolman J. Ecdysteroids in Vertebrates: Pharmacological aspects / J. Koolman. Ecdysone. From chemystry to mode of action. Stuttgart; New Jork: Thieme Med. Publ, 1989. - P. 254-259.

227. Slama K. Ecdysteroids: Insect Hormones, Plant Defensive Factors, or Human Medicine? // Phytoparasitica. 1993. - V.21. - P. 3-8.

228. Slama K., Koudela K., Tenora J., Mafhova A. Insect hormones in vertebrates: anabolic effects of 20-hydroxyecdysone in Japanese quail // Experientia. 1996. - V. 52. - P. 702-706.

229. Slama K., Lafont R. Insect hormones ecdysteroids: their presens and actions in vertebrates // Eur. J. Entomol. - 1995. - № 22. - P. 355-377.

230. Sogami M., Uyesaka N., Era S., Kato K. Saturation transfer in human red blood cells with normal and unstable hemoglobin // NMR Biomed. 2003. - V.16. - №1. -P. 19-28.

231. Spooren A.M.G., Evelo C.T.A. In vitro erytrotoxic effects of hydroxylamine analogues // Hum. Experim. Toxicol. 1996. - V. 15. - №11. - P. 943-944.

232. Spooren A.A.M.G., Evelo C.T.A. In vitro haematotoxic effects of three methylatea hydroxylamines // Arch. Toxicol. 1997. - V. 71. - P. 299-305.

233. Spooren A.A.M.G., Evelo C.T.A. Only the glutathione dependent antioxidant enzymes are inhibited by haematotoxic hydroxylamines // Hum. Experim. Toxicol. -1998.-V. 17.-№10.-P. 554-559

234. Takemoto Т., Shuntaro O., Nishimoto N. et al. Activity of Crude Drugs and Plants // Yakugaku Zasshi. 1967. - № 11. - P. 1414-1418.

235. Tanaka Y., Schroit A.J. Insertion of fluorescent phosphatidylserine into the plasma membrane of red blood cells: Recognition by autologous macrophages // J. Biol. Chem. 1985.- V. 258. - P. 11335-11343.

236. Tingle M.D., Coleman M.D., Park B.K. An investigation of the role of metabolites, in dapsone-unduced methemoglobinemia using a two compartment in vitro test system // Br. J. Clin. Pharmacol. 1990. - V. 30. - P. 829-838.

237. Trenin D.S., Volodin V.V. 20-hydroxyecdtsone as a Human Lymphocyte and Neutrophil Modulator: In Vitro evaluation // Arch. Insect bioch. physiol. 1999. -V.41.-P. 156-161.

238. Tuganova A.V., Kotsyuruba A.V. The in vitro interaction of C27-sterols with the erythrocyte membranes depends on the sterol structure and concentration // Cell. Mol. Biol. Letters. 1996. - V.l. - P. 129-135.

239. Turrini F., Arese P., Yuan J., Low P.S. Clustering of integral membrane proteins of the human erythrocyte membrane stimulates autologus Ig G binding, comlement deposition, and phagocytosis //J. Biol. Chem. 1991.- V. 266. - P. 23611-23617.

240. Volodin V., Chadin J., Whiting P., Dinan L. Screening plats of European Nort-East Russia for ecdysteroids // Biochem. sistemat. ecology. 2002. - V. 30. - P. 525578.

241. Xie L., Yang H., Sun D. et al. On the biophysics characteristics of reticulocytes // Sheng Wu Yi Xue Gong Cheng Xue Za Zhi. 2006.- V. 23. - №2. - P.392-395.

Информация о работе

Иванкова, Жанна Евгеньевна
кандидата биологических наук
Сыктывкар, 2007
ВАК 03.00.13

Диссертация

Морфо-функциональное состояние эритроцитов и гемоглобина лабораторных животных при анемиях и действии экдистероидсодержащей субстанции серпистен - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы