Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Молекулярно-генетическое исследование остеопороза
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия
Автореферат диссертации по теме "Молекулярно-генетическое исследование остеопороза"
На правах рукописи
Селезнева Лиана Ильдусовиа
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОСТЕОПОРОЗА
03.00.04 -биохимия 03.00.15 - генетика
АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук
УФА-2008
003170653
Работа выполнена в лаборатории молекулярной генетики человека Института биохимии и генетики Уфимского научного центра Российской академии наук и ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации»
Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор
Камилов Феликс Хусаинович
доктор биологических наук, профессор Хуснутдинова Эльза Камилевна
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор
Шараев Петр Низамиевич
доктор медицинских наук, профессор Викторова Татьяна Викторовна
Ведущая организация ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации»
Защита диссертации состоится 23 июня 2008 г
в часов на заседании диссертационного совета Д 208 006 03 при ГОУ ВПО
«Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации» по адресу 450000, г Уфа, ул Ленина, 3
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации» по адресу 450000, г Уфа, ул Ленина, 3
Автореферат разослан 22 мая 2008 года
Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор
МирсаеваГ X
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы
Остеопороз (ОП) - это системное заболевание скелета, характеризующееся снижением костной массы, микроархитектурными нарушениями костной ткани, приводящими к нарушению ломкости костей и повышению риска переломов [Consensus development conference diagnosis, prophylaxis and treatment of osteoporosis, 1993] Социальная значимость ОП определяется его последствиями и осложнениями -переломами позвоночника и трубчатых костей, обусловливающими значительный подъем заболеваемости, инвалидности и смертности Частота ОП повышается с возрастом, поэтому наблюдаемое в последние десятилетия старение населения ведет к постоянно растущей частоте заболевания и увеличению числа переломов Так, показано, что у 35% женщин после наступления менопаузы развивается остеопороз, а у лиц старше 75 пет остеопороз определяется более чем в 70% случаев [L J Melton, 2003] Оценка мировых тенденций показала, что только за счет старения населения земного шара частота переломов шейки бедра увеличится к 2050 году в два раза [WHO report, 2003]
ОП является многофакторным заболеванием, на развитие которого влияют средовые и генетические факторы Многочисленные исследования свидетельствуют о существенном вкладе генетических факторов в патогенез остеопороза, так, показано, что вариабельность минеральной плотности костной ткани (МПКТ) на 7080% обусловлена генетическими факторами, а риск возникновения остеопоретических переломов - на 50-60% [N A Pocock, et al, 1987, L Flicker et al, 1995, P Jouanny et al, 1995, SH Ralston et al, 1999, T. Andrew et al, 2005] В настоящее время наиболее перспективным методом изучения наследственной предрасположенности к ОП является поиск ассоциации заболевания с полиморфными вариантами генов-кандидатов, белковые продукты которых вовлечены в процессы метаболизма костной ткани [A G Uitterlinden et al, 2006, J M Zmuda et al, 2006, J M Williams et al, 2006] Известно более 100 генов-кандидатов, которые могут вносить вклад в развитие ОП [Н W Deng et al, 2004, S L Ferrari et al, 2005] К ним относят гены кальциотропных гормонов и их рецепторов, гены белков костного матрикса, гены цитокинов, факторов роста, их рецепторов и ряд других Однако, несмотря на многочисленные исследования роли генетических факторов в развитии ОП, молекулярно-генетические основы формирования заболевания до конца не ясны Понимание генетических механизмов заболевания имеет большое значения для разработки новых подходов к профилактике и лечению ОП
Цель исследования
В связи с вышеизложенным, целью работы явилось изучение молекулярно-генетических основ развития постменопаузального остеопороза в Волго-Уральском регионе
Задачи исследования
1 Провести исследование уровня эстрадиола и кальцитонина в сыворотке крови у женщин постменопаузального возраста
2 Провести анализ ассоциаций уровня эстрадиола с полиморфными вариантами с 454-397Т>С, с 454-351A>G и (ТА),, гена рецептора эстрогенов-а (ESR1) и уровня кальцитонина с полиморфным локусом (СЛ)„ гена кальцитонина CALCA
3 Провести исследование полиморфных вариантов генов альфа-1 цепи коллагена первого типа (COLIA1), рецептора эстрогенов-a (ESR1), рецептора витамина D (VDR), белка 5, связанного с рецептором липопротеина низкой плотности СLRP5), кальцитонина (CALCA), витамин D связывающего белка (DBP) в этнических группах Волго-Уральского региона (русские, татары, башкиры)
4 Провести анализ ассоциаций полиморфных вариантов -1997G>T, -1663indelT; +1546G>Tгена COLIAI, с 454-397Т>С, с 454-35JA>G, (ТА)„ гена ESRJ, Fokl, Bsml, Taql гена VDR, 40370T, 19800T, 1695G>A гена LRP5, (CA)„ гена CALCA, (TAAA)„ гена DBP с риском развития остеопороза, переломов и уровнем МПКТ
5 Оценить роль межгенных взаимодействий в развитии переломов у женщин постменопаузального возраста.
Научная новизна исследования
Впервые собрана коллекция ДНК женщин больных постменопаузальным ОП в Волго-Уральском регионе России Определена частота аллелей и генотипов полиморфных вариантов генов COLIAI, LRP5, DBP и CALCA у здоровых доноров русской, татарской и башкирской этнической принадлежности, проживающих на территории Волго-Уральского региона России Впервые проведен анализ ассоциаций полиморфных локусов генов COLIAI, ESR1, VDR, LRP5, DBP и CALCA с риском развития переломов, остеопороза и уровнем МПКТ в разных этнических группах и оценена роль взаимодействия рассматриваемых генов в формировании предрасположенности к переломам Выявлена ассоциация уровня эстрадиола с полиморфными вариантами гена ESR] и кальцитонина с (СА)„ полиморфизмом гена CALCA у женщин русской и татарской этнической принадлежности
Научно-практическая значимость работы
Результаты работы вносят вклад в общее представление о генетических детерминантах развития постменопаузального остеопороза Получены новые данные о влиянии исследуемых ДНК-локусов на риск развития переломов и уровень МПКТ в различных точках измерения Данные диссертационной работы могут служить основой для последующих исследований по определению генетических факторов риска развития ОП В клинической практике тестирование полиморфизмов генов-кандидатов ОП может быть применено для проведения пресимптоматической диагностики Результаты исследования могут быть использованы в процессе обучения в медицинских Государственных образовательных учреждениях высшего профессионального образования, на курсах повышения квалификации медицинских работников
Положения, выносимые на защиту
1 Ассоциация уровня эстрадиола с генотипом ESR1 *А *А и гаплотипом ESR1 *Т*А гена ESR1 у женщин татарской этнической принадлежности
2 Ассоциация уровня кальцитонина с аллелем CALCA* 17 гена CALCA у женщин русской этнической принадлежности
3 Этнические различия между популяциями русских, татар и башкир Волго-Уральского региона по полиморфным локусам с 454-351A>G гена ESR1, Fokl гена VDR и (ГААА)п гена DBP
4 Ассоциация риска развития переломов с полиморфными вариантами генов COLI Al, ESR1, DBP и VDR у женщин русской этнической принадлежности и (СА)„ полиморфизмом гена CALCA у женщин татарской этнической принадлежности
5 Генетические маркеры повышенного и пониженного риска развития ОП по полиморфным локусам генов COL1A1, CALCA, ESR] у женщин русской этнической принадлежности
6 Ассоциация показателей МПКТ с полиморфными вариантами генов C0L1A1, LRP5 и CALCA у женщин русской этнической принадлежности
7 Ассоциация уровня МПКТ с полиморфными локусами гена VDR при потреблении кальция менее 800 мг в сутки у женщин русской этнической принадлежности
8 Детерминация риска развития переломов взаимодействием полиморфных вариантов генов VDR и DBP, VDR и COL1A1 у женщин русской этнической принадлежности, полиморфных локусов генов VDR и COLI Al у женщин татарской этнической принадлежности
Апробация работы
Основные положения диссертации были представлены на ежегодных конференциях Европейского общества генетиков человека (Прага, 2005, Амстердам, 2006, Барселона, 2008), V съезде Российского общества медицинских генетиков (Уфа, 2005), II Российском конгрессе по остеопорозу (Ярославль, 2005), всероссийском конкурсе инновационных проектов «Живые системы» (Киров, 2005), международной конференции «Генетика в России и мире» (Москва, 2006), научно-практической конференции «Остеопороз эпидемиология, клиника, диагностика, профилактика и лечение» (Евпатория, 2006), школе-семинаре «Биомика-наука XXI века» (Уфа, 2007), научно-образовательной конференции «Современные проблемы травматологии и ортопедии» (Дубна, 2007), на ученом совете Института биохимии и генетики УНЦ РАН 8 ноября 2007 года
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 11 работ, из них 2 - в изданиях, рекомендованных ВАК
Структура и объем диссертации
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов исследования и обсуждения, заключения, выводов и списка литературы Работа изложена на 190 страницах машинописного текста, содержит 64 таблицы и 23 рисунка Список литературы включает 261 источник
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материалы исследования. В работе использованы образцы ДНК 477 женщин в возрасте от 48 до 77 лет, проживающих на территории Республики Башкортостан и Свердловской области Формирование выборки осуществлялось на базе МУ ГКБ №21 г Уфы, женской консультации МУ ГКБ №5 г Уфы и ОКБ №1 г Екатеринбурга Общая выборка была разделена в зависимости от этнической принадлежности и наличия переломов русские - 372 женщины (175 с переломами, 197 без переломов), татары - 105 (42 с переломами и 63 без переломов) При оценке переломов учитывался возраст и характер травмы В группы с переломами вошли женщины с наличием низкотравматичных переломов (возникающих при падении с высоты собственного тела, при незначительной нагрузке или без видимых причин), произошедших в постменопаузе Опрос участников исследования проводился по специально составленному протоколу, включавшему в себя сведения о наличии сопутствующих заболеваний и факторов риска остеопороза. Критерием исключения из исследования было наличие сопутствующих заболеваний и состояний, которые могут привести к потере костной массы инсулинзависимый сахарный диабет,
ревматоидный артрит, системная красная волчанка, хроническая почечная недостаточность, удаление яичников, резекция желудка, длительный прием глюкокортикоидов, иммунодепрессантов Все женщины подписали информированное согласие на участие в исследовании
Оценка МПКТ шейки бедра и поясничного отдела позвоночника проводилась методом двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DEXA) на аппарате QDR 4500А («Hologic», США) Показатели МПКТ шейки бедра измерены у 185 женщин, МПКТ поясничного отдела позвоночника - у 203 женщин Для диагностики ОП были использованы критерии ВОЗ (WHO, 1994), согласно которым к нормальным значениям МПКТ относятся показатели выше -1SD от референтной базы данных по Т-критерию, значения от -1SD до -2,5SD классифицируются как остеопения, отклонение ниже -2,5 SD - остеопороз
В группе из 168 женщин было проведено определение уровня эстрадиола и кальцитонина в сыворотке крови иммунохемилюминесцентным методом на анализаторе Immulite 2000 («DPC», США)
Также в работе использовались образцы ДНК популяционных выборок, состоящих из неродственных жителей Волго-Урапьского региона русской (106 человек), татарской (80 человек) и башкирской этнической принадлежности (113 человек)
Методы исследования ДНК выделяли из периферической крови стандартным методом фенольно-хлороформной экстракции [С С Mathew, 1984] Анализ полиморфных ДНК-локусов осуществляли методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК и полиморфизма длин рестрикционных фрагментов с последующим электрофорезом в 7% полиакриламидном и 2% агарозном геле Исследование -1663mdelT полиморфизма гена COL1A1 проводили методом анализа конформационного полиморфизма однонитевой ДНК (SSCP-анализ) Изучение микросателлитных полиморфизмов (СА)„ гена CALCA, (ТААА)п гена DBP, (ТА)„ гена ESR1 проводили методом электрофоретического разделения амплифицированных фрагментов в 8% полиакриламидном геле
Статистическая обработка полученных результатов. Математическую обработку результатов исследования проводили с помощью пакета программ статистического анализа "SPSS v 13" [SPSS Inc, Chicago, Illinois] Для сравнительного анализа двух независимых выборок применяли t-критерий Стьюдента, Т-критерий Манна-Уитни, трех и более выборок - однофакторный дисперсионный анализ, Н-критерий Краскала-Уоллеса. Взаимосвязь между количественными признаками оценивали с помощью метода корреляционного анализа Спирмена Стандартизация показателей МПКТ по возрасту и ИМТ проводилась с помощью множественного
регрессионного анализа При сравнении частот аллелей и генотипов в группах больных и контроля, а также у лиц с различными диагнозами применялся критерий х2. точный критерий Фишера и критерий % с поправкой Йетса для таблиц сопряженности 2x2 Силу ассоциаций оценивали в значениях показателя соотношения шансов (Odds Ratio, OR) Для оценки неравновесия по сцеплению применяли программу LDA, определение частот гаплотипов и тестирование различий в распределении частот гаплотипов в исследуемых группах проводили с помощью программы CHAPLIN [Epstein and Satten, 2003], для анализа межгенных взаимодействий использовали программу GMDR [Lou, 2007]
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 1. Исследование уровня эстрадиола и кальцитонина в сыворотке крови у
женщин постменопаузального возраста Исследование уровня эстрадиола у женщин постменопаузального возраста
Эстрогены непосредственно участвуют в формировании скелета и играют важную роль в поддержании костной массы и структуры кости [В L Riggs, 2002] Дефицит эстрогенов, приводящий к увеличению числа и активности остеокластов (ОК), является ключевым звеном в патогенезе постменопаузального ОП Согласно литературным данным, уровень эстрадиола у женщин в постменопаузе ассоциирован с риском развития ОП и переломов [Р Garnero et al, 2000, J R Center et al, 2000, I Lambrinoudaki et al, 2006] Существуют данные о том, что низкий уровень эстрадиола (менее 10 пг/мл) у женщин в постменопаузе приводит к более выраженной потере костной массы [К Stone et al, 1998, A Bagur et al, 2004]
Мы провели исследование уровня эстрадиола у женщин постменопаузального возраста. Сравнительный анализ не выявил статистически значимых различий в уровне эстрадиола в группах женщин с переломами и без переломов В большинстве исследований была обнаружена ассоциация уровня эстрадиола с переломами у женщин постменопаузального возраста [В Ettinger et al, 1998, Р Garnero et al, 2000, A Devine et al, 2005, S Sipila et al, 2006], однако рядом авторов не выявлена подобная закономерность [Е Barret-Connor et al, 2000, A Bjornerem et al, 2007] Также нами не обнаружена корреляция уровня эстрадиола с показателями МПКТ
Анализ ассоциаций уровня эстрадиола с полиморфными вариантами с.454-397Т>С. с 454-351A>G и (ТА)п гена рецептора эстрогенов-a ESR1
В результате проведенных нами исследований выявлена ассоциация уровня эстрадиола с полиморфными вариантами гена ESR1 у женщин татарской этнической принадлежности (рис 1) Уровень эстрадиола у лиц с генотипом ESR1 *А *А был выше
по сравнению с носителями генотипов ESRI*A*G (р=0,046) и ESR]*G*G (р=0,011) Также выявлено повышение уровня эстрадиола у лиц, гомозиготных по гаплотипу с 454-397 *Т/с 454-351*А (2 копии) по сравнению с группой женщин с наличием данного гаплотипа в гетерозиготном состоянии (1 копия) и с его отсутствием (О копий) (р=0,035) Не обнаружена ассоциация уровня эстрадиола с полиморфными локусами с454-397Т>С, с 454-35IA>G и (ТА)„ гена ESR1 у женщин русской этнической принадлежности Согласно литературным данным, гаплотип с 454-397*Т/с 454-351*А гена ESR1 ассоциирован с низким уровнем эстрадиола у женщин постменопаузального возраста из Голландии [S С Schult et al, 2005] У женщин из Чехии не было обнаружено ассоциации с 454-397Т>С и с 454-351A>G полиморфизмов гена ESR1 с уровнем эстрадиола [I Zofkova et al, 2002]
G О X
5
Q. H
u
m
*g*g *A'G 'A'A ■ Медиана □ 25%-75%Ш Мин-Макс
. Мин-Макс
А
Рис 1
-О-Медиана □ 25% 75% I
Б
Сравнительный анализ уровня эстрадиола у женщин татарской этнической принадлежности с различными генотипами локуса с 454-35JA>G гена ESR1
Сравнительный анализ уровня эстрадиола у женщин татарской этнической принадлежности с 0, 1 копиями (группа 1) и 2 копиями (группа 2) гаплотипа ESR1 *Т*А гена Е5К1
Исследование уровня калыштонина у женщин постменопаузального возраста Кальцитонин (КТ) секретируется парафолликулярными клетками щитовидной железы в ответ на повышение в крови концентрации циркулирующего кальция и способствует поддержанию гомеостаза кальция Гипокальцемическое действие КТ
обусловлено подавлением костной резорбции за счет ингибирования активности и образования остеокластов (OK), однако роль KT в поддержании кальциевого гомеостаза и патогенезе ОП до конца не ясна. Согласно литературным данным, у женщин из Кореи была выявлена ассоциация полиморфных вариантов гена кальцитонина (CALCA) с уровнем кальцитонина [J G Kim et al, 2003]
При сравнении уровня кальцитонина у женщин с переломами и без переломов выявлены статистически значимые различия (р=0,005) (рис 2) Уровень кальцитонина у женщин с переломами был выше - медиана 4,3 пг/мл (интерквартильный размах от 1,9-7,0 пг/мл) по сравнению с контрольной группой без переломов - 2,3 пг/мл (от 1,3 до 5 пг/мл) Повышение уровня KT у женщин с ОП было описано в работе R D Tiegs и соавт, что согласуется с полученными нами данными Авторы предположили, что повышенное высвобождение кальция при ОП и переломах может стимулировать секрецию кальцитонина [R D Tiegs et al, 1985]
Также нами не обнаружена корреляция уровня кальцитонина с показателями МПКТ у женщин постменопаузального возраста
с 2
с
X X X
0
Е а л
1
1 2 I Медиана О 2íVr-76% Ми^Маи
Рис 2 Сравнительный анализ уровня кальцитонина у женщин постменопаузального возраста без переломов (группа 1) и с переломами (группа 2)
Анализ ассоциаций уровня кальцитонина с полиморфным локусом (СА)п гена кальцитонина CALCA Выявлена ассоциация уровня кальцитонина с (СА)„ полиморфизмом гена CALCA у женщин русской этнической принадлежности (рис 3) Уровень кальцитонина у женщин, гетерозиготных по наличию аллеля CALCA* 17 (генотип CALCA* 17*Y) был выше по сравнению с лицами с отсутствием аллеля CALCA* 17 (генотип CALCA*Y*Y) (р=0,037) При сравнении уровня кальцитонина у женщин с наличием и отсутствием аллеля CALCA* 17 выявлена ассоциация аллеля CALCA* 17 с
повышенным уровнем кальцитонина (р=0,014) У женщин татарской этнической принадлежности не обнаружена ассоциация уровня кальцитонина с (СА)„ полиморфным локусом гена CALCA
■ Медиана О 25%-7Е%Ш Мин-Макс
-Медиана □ 25%-75%1
2
Мин-Макс
А
Рис 3
Сравнительный анализ уровня кальцитонина у женщин русской этнической принадлежности с различным числом копий аллеля CALCA*17
Сравнительный анализ уровня кальцитонина у женщин русской этнической принадлежности с наличием аллеля CALCA*17 (группа 2) и с отсутствием аллеля CALCA *17 (группа 1)
2. Изучение полиморфных вариантов ряда генов кандидатов остеопороза.
Исследование полиморфных вариантов -1997G>T, -1663indelT и +1546G>Tгена g-1 цепи коллагена первого типа (COLIAl)
Коллаген первого типа является основным белком костной ткани Мутации в гене COL1A1 приводят к развитию тяжелого наследственного заболевания -несовершенного остеогенеза, характеризующегося нарушением костеобразования и повышенной ломкостью костей Ген COLI Al является одним из кандидатов на участие в развитии ОП Ассоциация полиморфных локусов гена COLI Al с риском развития переломов и ОП подтверждена многими исследованиями [V Braga et al, 2000, Y Yamada et al, 2005, E Bandres et al, 2005, S H Ralston et al. 2006, T L Stewart et al, 2006, N Yazdanpanah et al, 2007]
При изучении полиморфных вариантов -1997G>T, -1663mdelT и +1546G>T гена COL1A1 не выявлено межпопуляционных отличий в распределении частот
аллелей и генотипов в этнических группах башкир, татар и русских, проживающих на территории Волго-Уральского региона.
Исследование -1997G>T полиморфизма гена COL1A1 не обнаружило ассоциацию с риском развития переломов и ОП у женщин русской и татарской этнической принадлежности.
Анализ распределения частот аллелей и генотипов -1663indelT полиморфного локуса гена COLI AI показал, что у женщин с переломами русской этнической принадлежности отмечается повышение частоты аллеля -1663*0 до 23,1% по сравнению с контролем (15,7%; х2=6,08; р=0,014; OR=l,61; 95%С1 1,12-2,33). Также было выявлено повышение частоты генотипа -1663*1*D у больных с переломами по сравнению с женщинами без переломов русской этнической принадлежности (38,3% и 27,4%; х2=4,51; р=0,034) и снижение частоты генотипа -1663*1*1 (57,7% и 79,6%, соответственно; х2=6,13; р=0,013). Генотип -1663*1*D ассоциирован с повышенным риском развития переломов (OR=l,64; 95%С1 1,06-2,54), генотип -1663*1*1 можно рассматривать как протективный (OR=Q,56; 95%С1 0,371-0,874) (рис. 4),
1
0,8 0,6 0,4 0,2 0
Ч *0 4*1 */*0 *0*0
□ Без переломов ЕВ С переломами
Рис. 4. Распределение частот аллелей и генотипов -1663Ме!Т полиморфного локуса гена COLlAl у женщин русской этнической принадлежности без переломов и с переломами.
При сравнении групп женщин с ОП, остеопенией и нормальными показателями МПКТ (здоровых) обнаружено, что аллель -1663*Э чаще встречался у больных ОП (26,4%) по сравнению с женщинами с остеопенией (16,7%; х2=4>74; р=0,029) и здоровыми (15%; х2=6,58; р=0,01) (рис. 5). Также отмечалось повышение частоты генотипа -1663*1*0 у больных ОП по сравнению со здоровыми (39,3% и 23,3% Х2=4,13; р=0,042; OR=2,29 95% С1 1,09-4,81). Аллель -1663*Б и генотип -1663*1*0 являются маркерами повышенного риска развития ОП (OR=2,3; 95%С1 1,09-4,8 и OR=2,29 95% О 1,09-4,81, соответственно) Согласно литературным данным, аллель
-1663*D ассоциирован с развитием ОП у женщин из Великобритании [T.L. Stewart et al., 2006].
□ Здоровые ООстеопений НОтсеопороз
Рис. 5. Распределение частот аллелей и генотипов -1663indelT полиморфизма гена COL1A1 у женщин русской этнической принадлежности в группах больных остеопорозом, с остеопенией и здоровых.
Исследование полиморфизма +¡546G>T гена COLI Al обнаружило более высокую частоту аллеля +154б*Т в группе с переломами по сравнению с контролем (20,43%, и 14,21%; х2=4,01; р=0,045), а также повышение частоты аллеля +1546*Т у женщин с ОП (24,7%) по сравнению с группой с остеопенией (14,64%; х2=5,45; р=0,019) и здоровыми (13,3%; х2=5,09; р=0,016) русской этнической принадлежности. Аллель +1546*Тявляется маркером повышенного риска развития переломов (OR=l,5; 95%С11,03-2,2) и остеопороза(ОЯ=2,13; 95%С11,14-3,9).
При сравнении частот генотипов полиморфного локуса +¡546G>T гена COL1A1 выявлено повышение частоты генотипа +1546*G*G у здоровых (76,7%) по сравнению с больными (58,4%; х2=4,51; р=0,033). Генотип +I546*G*G является маркером пониженного риска развития ОП (OR=0,43; 95%С1 0,20-0,89) у женщин русской этнической принадлежности.
Полученные нами данные согласуются с результатами изучения +¡546G>T полиморфизма гена COLI Al в различных популяциях мира [A.G, Uitterlinden et al., 1998; Е. Bandres et al., 2005, M.C. Navarro et al., 2007; N. Yazdanpanah et al., 2007]
В проведенном нами исследовании не выявлена ассоциация -1663indelT и +1546G>T полиморфных локусов гена COL1A1 с риском развития переломов у женщин татарской этнической принадлежности.
При анализе гаплотипов изученных локусов гена COL1A1 обнаружена тенденция к повышению частоты гаплотипа -1997*G/-1663*D/+1546*Т и снижению частоты гаплотипа-1997*G/-1663*1/+1546*G у женщин с переломами по сравнению с
контролем в группах русской и татарской этнической принадлежности, однако различия не были статистически значимыми
Выявлена ассоциация генотипа -1663*1*0 гена СОЫА1 с низким уровнем МПКТ поясничных позвонков у женщин русской этнической принадлежности у лиц с генотипом -1663*1*1 средние показатели минеральной плотности составили 0,890г/см2, у носителей генотипа -1663*1*1) - 0,844г/см2 (Р=3,39, р=0,03) У женщин с генотипом -1663*0*0 в среднем отмечались самые низкие показатели МПКТ поясничных позвонков (0,815г/сч2) Полиморфные локусы -199Ю>Т и +1546С>Т не ассоциированы с МПКТ поясничных позвонков и шейки бедра у женщин русской этнической принадлежности
Исследование полиморфных вариантов 40370Т. 198РОТ.
16950А гена ШР5 Белок Ы1Р5 (белок 5, связанный с рецептором липопротеина низкой плотности), являющийся представителем семейства рецепторов липопротеина низкой плотности, участвует в инициации каскада внутриклеточных реакций - \Vnt-сигнального пути, ответственного за развитие и функцию многих тканей и органов, в том числе и скелета. Мутации в гене ЬЯР5 были описаны у лиц, страдающих идиопатическим остеопорозом [Н НагПкка е1 а!, 2005], а также при заболеваниях и состояниях, характеризующихся высокой минеральной плотностью костной ткани [Ь \Vesenbeeck е1 а1, 2003, Я Ьеуаввеиг е! а1, 2005] Многие исследования подтвердили вклад гена Ы1Р5 в популяционную вариабельность МПКТ [М А Коау е[ а1, 2004, Э вн-оих й а1,2007]
Исследование распределения частот аллелей и генотипов полиморфных вариантов 4037С>Т, 1980С>Т, 16950>А гена И№5 в этнических группах Волго-Уральского региона не обнаружило популяционных отличий между башкирами, татарами и русскими
Сравнительный анализ не выявил ассоциацию полиморфных локусов 4037С>Т, 1980С>Т, 16950>А гена ШР5 с риском развития переломов и ОП в исследуемых нами выборках
У женщин русской этнической принадлежности обнаружена ассоциация полиморфизма 4037С>Т гена 1КР5 с уровнем МПКТ у лиц с генотипом 4037*С*Т отмечались в среднем более низкие показатели МПКТ поясничных позвонков (0,801 г/см2) по сравнению с носителями гомозиготного генотипа 4037*С*С (0,875 г/см2) (Р=4,83, р=0,029)
Полученные нами данные сходны с результатами многоцентрового европейского исследования, согласно которому аллель 4037*Т гена ЬКР5
ассоциирован с низким уровнем МПКТ шейки бедра и поясничных позвонков у женщин постменопзузалыюго возраста [J В van Meurs et al, 2008]
Исследование полиморфных вариантов Fokl. Bsml. Tagt гена VDR
Витамин D, поступающий в организм с пищей или синтезирующийся в коже под воздействием ультрафиолетовых лучей, в организме гидроксилируется до активной формы - кальцитриола. Кальцитриол действует через связывание с рецепторами витамина D (VDR) и играет ключевую роль в поддержании кальциевого гомеостаза, так как его основной функцией является стимуляция абсорбции кальция в тонком кишечнике Предполагается, что полиморфные варианты в гене рецептора витамина D могут влиять на структуру рецептора и таким образом изменять его функцию, так, в ряде работ показана ассоциация полиморфизмов Fokl и Bsml гена VDR с уровнем абсорбции кальция [S К Ames et al, 1999, S A Abrams et al, 2005]
Сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов Fokl полиморфизма гена VDR в популяциях Волго-Уральского региона выявил отличия в распределении частот аллелей и генотипов между башкирами и русскими (х2=5,74, р=0,017 и yj=l,12, р=0,021, соответственно), между башкирами и татарами (х2=10,24, р=0,002 и х2=4,68, р=0,003, соответственно) В этнической группе башкир отмечается более низкая частота аллеля VDR*f (29%) по сравнению с русскими (40%) и татарами (44%) и более низкая частота генотипа VDR*f*f(6,7%, 18%, 17,6%, соответственно)
Не обнаружено ассоциации Fokl, Bsml и Taql полиморфных локусов и гаплотипов гена VDR с риском развития переломов, однако выявлена ассоциация сочетания генотипов VDR*F*F/*b*b с повышенным риском развития переломов у женщин русской этнической принадлежности (%=4,6l, р=0,032, OR=2,02, 95%С1 1,09-3,72)
Не выявлена ассоциация полиморфизмов Fokl, Bsml и Taql гена VDR с уровнем МПКТ При разделении на группы с низким (менее 800 мг в день) и высоким (более 800 мг в день) потреблением кальция обнаружена ассоциация генотипа Fokl с уровнем МПКТ у лиц с генотипом VDR*j*f наблюдались в среднем более низкие значения МПКТ шейки бедра (0,677 г/см2) по сравнению с носителями генотипа VDR*F*F (0,736 г/см2, F=3,58, р=0,032) (рис 6)
Выявлена ассоциация гаплотипа VDR*b*T с уровнем МПКТ у женщин с потреблением кальция менее 800 мг в сутки у лиц, гомозиготных по наличию гаплотипа VDR*Г отмечались в среднем более низкие значения МПКТ шейки бедра и поясничных позвонков (F=4,09, р=0,045 и F=4,55, р=0,035, соответственно) (рис 7)
мпктшб г/см2
*F*F "П
-более 800 иг/с — -i
Рис 6 Средние значения МПКТ шейки бедра (скорректированных по возрасту и ИМТ) у женщин русской этнической принадлежности с различными генотипами Рок1 полиморфизма гена УОИ в зависимости от суточного потребления кальция
Полученные данные согласуются с результатами других исследований Ассоциация полиморфных вариантов гена с уровнем МПКТ в зависимости от суточного потребления кальция была показана в ряде работ [Е А Кга11 е( а1, 1995, БЬ Реггап е1 а1, 1998, НМ МасОопаМ е1 а1, 2006] Предполагается, что функциональная неполноценность рецепторов витамина О проявляется в большей степени при низком потреблении кальция и что полиморфные варианты гена КОЛ не влияют на МПКТ и метаболизм костной ткани у лиц с достаточным потреблением кальция [Ь. веппап й а!, 1997, В Ь Ьаг^аЫ е1 а1,2000, Н М МасОопаЫ й а1,2006]
мпктпп
г/см2
0,87 0,»6 0,85 0,84 083 0,82
0 858 0 865
■ 0,846
0 840
-более 800 иг/с —
- менее 800 мг/с
Рис 7 Средние значения МПКТ шейки бедра и поясничных позвонков (скорректированных по возрасту и ИМТ) у женщин русской этнической принадлежности с различным числом копий гаплотипа УйК*Ь*Т (2, 0 и 1) в зависимости от суточного потребления кальция
Исследование полиморфного варианта (ТААА)п гена витамин D связывающего белка DBP
Витамин D связывающий белок (DBP), является сывороточным сь глобулином, основной функцией которого является связывание, стабилизация и транспортировка витамина D и его метаболитов. Известно, что DPB играет важную роль в активации макрофагов и дифференциации остеокластов и таким образом оказывает влияние на процессы ремоделирования костной ткани [К.A. Bénis et al., 1996; P. White et al., 2000]. Ген витамин D связывающего белка (DBP) является одним из генов-кандидагов ОП.
В исследуемых выборках нами вьмвлено четыре аллеля микросателлитного (ТААА)„ полиморфизма гена DBP, соответствующие числу повторов 8, 10, И и 12. Преобладающим во всех этнических группах оказался аллель DBP*10, частота которого составила 86,3% у русских, 88% у татар и 77,2% у башкир. Отмечалось повышение частоты аллеля DBP*8 у башкир (16,9%) по сравнению с русскими (5,5%) и татарами (4%). Различия в распределении частот аллелей (ТААА)„ полиморфизма гена DBP между этническими группами башкир и татар (х2=П,94; р=0,008), башкир и русских (хг=11,15; р=0,001) были статистически значимы. Также было выявлено повышение частоты генотипа DBP*8*I0 в популяции башкир (26,47%) по сравнению с русскими (10,99%: х2=6,42; р=0,011) и татарами (8%; Х2=6,48; р=0,039)
Анализ ассоциаций (ТААА)„ полиморфизма гена DBP с риском развития переломов показал статистически значимое снижение частоты аллеля DBP*IO в группе с переломами (85,9%) по сравнению с контролем (91,1%) у женщин русской этнической принадлежности (х2=4,47; р=0,034) (рис. 8).
OR=<),59
1 X t
0,9 ^
П (I /
07 / щ- OR=l,93
06 /
0,5 /
04 и
0.2 / щш
/
/'С±ЯГ....... р—1.....\Ш j
'8 '9 '10 '11 '12
□ Без переломов ЕЗ С переломами
Рис. 8. Распределение частот аллелей полиморфного локуса (ТААА)„ гена ОВР у женщин русской этнической принадлежности с переломами и без переломов.
Аллель DBP*10 можно рассматривать как протективный (OR=0,59, 95%С1 0,370,94) Частота аллеля DBP*11 была выше у женщин с переломами по сравнению с контролем (8,91% и 4,82%, -£=4,2%, р=0,038), аллель DBP*J1 является маркером повышенного риска развития переломов (OR=l,93, 95%С1 1,06-3,48) У женщин татарской этнической принадлежности не выявлено ассоциации (ТААА)„ полиморфизма гена DBP с риском развития переломов Также не выявлена ассоциация (ТААА)„ полиморфного локуса гена DBP с риском развития ОП и уровнем МПКТ шейки бедра и поясничных позвонков у женщин русской этнической принадлежности
Исследование полиморфного варианта (СА)п гена кальцитонина CALCA Кальцитонин (КТ), наряду с другими кальций-регулирующими гормонами, участвует в поддержании гомеостаза кальция В ряде работ была выявлена ассоциация (СА)„ полиморфизма гена CALCA с риском развития ОП и уровнем МПКТ [М Miayo et al, 2000, J С Kim et al, 2003, J J Magaña et al, 2006]
В исследуемых нами группах было обнаружено шесть аллельных вариантов микросателлитного (СА)„ полиморфного локуса гена CALCA с числом СА повторов 10, И, 16, 17, 18 и 19 Распределение частот аллелей в исследуемых выборках бимодальное, с пиками частот аллелей, соответствующих числу СА-повторов 10 и 17 Частота аллеля CALCA* 17 составила 61% у русских, 54% у татар и 64% у башкир, а частота аллеля CALCA*!О составила 26%, 33% и 27%, соответственно Не обнаружено статистически значимых различий в распределении частот аллелей и генотипов данного полиморфизма между этническими группами Волго-Уральского региона
У женщин татарской этнической принадлежности выявлена ассоциация локуса (СА)„ гена CALCA с риском развития переломов Частота аллеля CALCA*10 в контроле составила 39,7% и была выше по сравнению с группой с переломами (22,6%, х2=6,65, р=0,009) Частота аллеля CALCA*]7 была повышена у женщин с переломами (65,5%) по сравнению с контролем (49,2%, /2=5,41, р=0,02) Аллель CALCA*]0 является фактором пониженного риска (OR=0,44, 95%С1 0,24-0,83), а аллель CALCA* 17 является маркером повышенного риска развития переломов (OR=l,95, 95%С1 1,11-3,46) у женщин татарской этнической принадлежности Не выявлено ассоциации (СА)„ полиморфного локуса гена CALCA с переломами у женщин русской этнической принадлежности
Обнаружено, что у женщин русской этнической принадлежности генотип CALCA*10*10 у здоровых встречается намного чаще по сравнению с больными ОП (18,3% и 4,5%, х2=6,13, р=0,013) и группой с остеопенией (18,3% и 5,1 %, ^=5,78, р=0,016) Таким образом, генотип CALCA*10*10 является маркером пониженного
риска развития ОП (OR=0,21, 95%С1 0,06-0,69) Сравнительный анализ средних значений МПКТ у женщин русской этнической принадлежности показал, что генотипы CALCA*10*10 и CALCA*17*17 ассоциированы с высокими показателями МПКТ шейки бедра. Так, у лиц, гомозиготных по наличию аплеля CALCA*]7, отмечаются в среднем более высокие значения МПКТ шейки бедра по сравнению с гетерозиготными носителями аллеля CALCA* 17 (F=3,78, р=0,025), также как и у лиц, гомозиготных по аллелю CALCA* 10, по сравнению с гетерозиготными носителями аллеля CALCA *10 (F=3,34, р=0,044)
Исследование полиморфных вариантов с.454-397Т>С, c.4S4-3SIA>G и (TAL
гена рецептора эстрогенов-a ESR1 На сегодняшний день роль дефицита эстрогенов в развитии постменопаузального ОП не вызывает сомнений, после наступления менопаузы наблюдается существенное увеличение скорости ремоделирования костной ткани [R Pacifici et al, 1998, LG Raisz et al, 2005] Считается, что эстрогены оказывают прямое и опосредованное действие на костную ткань [RT Turner et al, 1994, Т Kameda et al, 1997] Действие эстрогенов реализуется их связыванием со специфическими рецепторами, обнаруженными на остеобластах, остеокластах и остеоцитах [D G. Monroe et al, 2003, G E Weitsman et al, 2006] Согласно исследованиям, проведенным в различных популяциях, ген рецептора эстрогенов-а ESR1 является одним из важнейших генов-кандидатов ОП
Выявлены статистически значимые различия в распределении частот аллелей и генотипов с 454-351A>G полиморфизма гена ESR1 между популяциями татар и башкир (х2=6,607, р=0,01 и -¿=1,15, р=0,028, соответственно) У башкир отмечается снижение частоты аллеля ESR1 *А (53,2%) по сравнению с татарами (67,2%), а также более низкая частота гомозиготного генотипа ESR1 *А*А (25,9% и 43,3%)
Сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов с 454-397Т>С, с 454-351A>G и (ТА)„ полиморфизмов гена ESR1 обнаружил, что у женщин с переломами русской этнической принадлежности частота гетерозиготного генотипа ESR1*A*G ниже по сравнению с контролем (38,3% и 50,25%, х2=4,89, р=0,027), генотип ESR1*A*G является протективным (OR=0,61, 95%С1 0,46-0,95) Мы не вывили ассоциацию с 454-397Т>С и (ТА)„ полиморфизмов с риском развития переломов у женщин русской этнической принадлежности, а также связь полиморфных локусов с 454-397Т>С, с 454-351A>G и (ТА) „с переломами у татар
У женщин русской этнической принадлежности частота аллеля ESR1*G в группе больных ОП была максимальной и составила 47,7%, в группе с остеопенией -36,4%, у женщин с нормальными показателями МПКТ - 37,5% При сравнении групп женщин больных ОП с объединенной выборкой здоровых и женщин с остеопенией
выявлены статистически значимые различия Частота аллеля ESR1 *G в объединенной выборке составила 36,7%, в группе с ОП - 47,7% (х2=5,68, р=0,022), аллель ESR1*G является маркером повышенного риска развития ОП (OR=l,57, 95%С11,06-2,3)
Не обнаружена ассоциация полиморфных вариантов с 454-397Т>С, с 454351 A>G и (ТА)„ гена ESR1 с уровнем МПКТ шейки бедра и поясничных позвонков у женщин русской этнической принадлежности
Наши результаты согласуются с данными других исследований, где была обнаружена ассоциация с 454-351A>G полиморфизма гена ESR1 с повышенным риском развития переломов у женщин, независимо от уровня МПКТ [J Aerssens et al, 2000, J P Ioanmdis et al, 2004]
3. Анализ межгенных взаимодействий в детерминации риска развития переломов у женщин русской и татарской этнической принадлежности В основе возникновения многофакгорных заболеваний лежат сложные взаимодействия генетических и средовых факторов Известно, что межгенные взаимодействия, при которых эффект одного гена подавляется или усиливается другими генами, играют важную роль в детерминации биологических признаков [J Tong et al, 2004, L Hartwell, 2004] Согласно литературным данным, в последнее время все больше внимание уделяется анализу роли ген-генных взаимодействий в развитии многофакторных заболеваний [А М Glazier et al, 2002, J T Bell et al, 2006, V M Savage et al, 2006, L Bnollans et al, 2007, M M van Greevenbroek, 2008]
В результате проведенных исследований выявлено, что взаимодействие полиморфных вариантов Fokl, BsmI, TaqI гена VDR и (ТААА)„ гена DBF, а также локусов Fokl, BsmI гена VDR и -1997G>T, -!663indelT гена COL1A1 статистически значимо ассоциированы с переломами у женщин русской этнической принадлежности У женщин татарской этнической принадлежности на повышение риска переломов оказывают взаимное влияние полиморфные варианты BsmI гена VDR и -1997G>T те,ж COLIA (таблица 1)
Таблица 1 Статистически значимые взаимодействия полиморфных локусов генов,
влияющие на риск развития переломов
Нациоиа ! ; льность с ,, .. > - „77- 1 .......;;,u ч ::-> , : - - лГ - ■ "P
Русские Fokl(VDR) х Bsm(VDR) х Taq(VDR) х DBP(TAAA„) 0,001
FokI(VDR)x-l 997G> T(COLIA 1)x-l663mdelT(COLIA l)x Bsm(VDR) 0,01
Татары Bsml(VDR) x -1997G>T(COLlAl) 0,04
Примечание р- уровень статистической значимости
Согласно литературным данным, выявлено взаимное влияние локусов Bsml, Taql гена VDR и +1546G>T гена COLI Al на риск развития переломов у женщин из Голландии [AG Uitterlinden et al, 2001] В другом исследовании обнаружено взаимодействие генов COLI Al и ESR1 в детерминации риска развития переломов у женщин постменопаузального возраста [Е М Colin et al, 2003] Несомненно, межгенные взаимодействия играют важную роль в патогенезе ОП и представляют собой обширную область для дальнейших исследований
Таким образом, проведенное нами исследование позволило установить значимость полиморфных вариантов генов COLI Al, LRP5, DPB, VDR, ESR1 и CALCA в развитии ОП у женщин постменопаузального возраста русской и татарской этнической принадлежности Определены маркеры повышенного и пониженного риска переюмов, а также обнаружена ассоциация полиморфных локусов генов-кандидатов с уровнем МПКТ Установлена ассоциация уровня эстрадиола с полиморфными вариантами гена ESR1 у женщин татарской этнической принадлежности и уровня кальцитонина с локусом (СА)„ гена CALCA у женщин русской этнической принадлежности Выявлены ключевые межгенные взаимодействия детерминирующие развитие переломов Полученные нами результаты имеют высокую научную новизну и вносят вклад в общее представление о молекулярно-генетических основах развития постменопаузального остеопороза у женщин Волго-Уральского региона
Выводы
1 Выявлена ассоциация повышенного уровня эстрадиола с генотипом ESR1*A*A и гаплотипом ESR1 *Т*А гена рецепторов эстрогенов-а (ESR1) у женщин татарской этнической принадлежности
2 Установлена ассоциация повышенного уровня кальцитонина с аллелем CALCA* 17 гена кальцитонина (CALCA) у женщин русской этнической принадлежности
3 Обнаружены этнические различия по распределению частот аллелей и генотипов полиморфизмов с 454-351A>G гена ESR1 и FokI гена рецептора витамина D (VDR) между популяциями татар и башкир, а также частот аллелей и генотипов полиморфизма FokI гена VDR между популяциями башкир и русских По распределению частот аллелей и генотипов полиморфного локуса (ТААА)„ гена витамин D связывающего белка (DBP) выявлены отличия башкир от русских и татар
4 Маркерами повышенного риска развития переломов являются аллели +1546*Т, -1663*D и генотип -1663*I*D гена al-цепи коллагена первого типа (COLI Al), аллель DBP*11 гена DBP, сочетание генотипов VDR*F*F/*b*b у женщин русской
этнической принадлежности, аллель CALCA*J7 гена CALCA у женщин татарской этнической принадлежности
5 Маркерами пониженного риска развития переломов является генотип -1663*1*1 гена COLI Al, с 454-351 *А *G гена ESR1, аллель DBP*10 гена DBP у женщин русской этнической принадлежности и аллель CALCA* 10 гена CALCA у женщин татарской этнической принадлежности
6 Установлено, что аллели -1663*D, +1546*Т и генотип -1663*I*D гена COLI Al и аллель с 454-351 *G гена ESR1 являются факторами повышенного, а генотипы CALCA* 10* 10 гена CALCA, -1663*1*1 и +1546*G*G гена COLI Al - пониженного риска развития остеопороза у женщин русской этнической принадлежности
7 Обнаружена ассоциация генотипов -1663*I*D гена COL1A1 и 4037*С*Т гена белка 5, связанного с рецептором липопротеина низкой плотности (LRP5) с низким уровнем МПКТ поясничных позвонков и генотипов CALCA*10*10 и CALCA*17*17 гена CALCA с высоким уровнем МПКТ шейки бедра у женщин русской этнической принадлежности
8 У женщин русской этнической принадлежности с потреблением кальция менее 800 мг в сутки генотип VDR*f*f гена VDR ассоциирован с низким уровнем МПКТ шейки бедра, а гаплотип VDR*b*T гена VDR ассоциирован с низкими значениями МПКТ шейки бедра и поясничных позвонков
9 Установлено взаимодействие полиморфных вариантов Fokl, BsmI, Taql гена VDR и (ТААА)„ гена DBP, а также локусов Fokl, BsmI гена VDR и -1997G>T, -1663mdelT гена COL1A1 в детерминации риска развития переломов у женщин русской этнической принадлежности Выявлено, что у женщин татарской этнической принадлежности на риск развития переломов оказывают взаимное влияние полиморфных вариантов BsmI гена VDR и -1997G>T гена COLI А
Список публикаций по теме диссертации
1 Селезнева, J1И Генетические аспекты остеопороза /ЛИ Селезнева, Р И Хусаинова,ЭК Хуснутдинова// Медицинская генетика -2006 - №12 - С 3-12
2 Анализ ассоциаций полиморфизмов и гаплотипов 5' региона гена COL1A1 с риском развития остеопоретических переломов у женщин Волго-Уральского региона России /ЛИ Селезнева, Р И Хусаинова, Р 3 Нурлыгаянов [и др ] // Генетика.-2008 -№2 - С 219-225
3 Селезнева, Л И Поиск ассоциаций пониженной минеральной плотности костной ткани с полиморфизмом генов-кандидатов / ЛИ Селезнева, РИ
Хусаинова, Э К Хуснутдинова // Медицинская генетика Материалы V съезда Российского общества медицинских генетиков -Уфа, 2005 - №6 - С 264
4 Селезнева, Л И Исследование полиморфизмов ряда генов-кандидатов у больных остеопорозом из Башкортостана /ЛИ Селезнева, Р И Хусаинова, Э К Хуснутдинова // II Российский конгресс по остеопорозу Научная программа и материалы - Ярославль, 2005 -С 190
5 Селезнева, ЛИ Анализ ассоциаций полиморфизмов генов COL1A1 и VDR с риском развития остеопороза в трех этнических группах Волго-Уральского региона /ЛИ Селезнева, Р И Хусаинова, Э К Хуснутдинова // Генетика в России и мире материалы междун конф - М , 2006 - С 175
6 Изучение гена COL1A1 у больных остеопорозом /ЛИ Селезнева, Р И Хусаинова, Р 3 Нурлыгаянов [и др ] // Остеопороз эпидемиология, клиника, диагностика, профилактика и лечение материалы научно-практической конференции - Евпатория, 2006 - С 106-107
7 Анализ ассоциаций Spl полиморфизма гена COL1A1 с минеральной плотностью костной ткани и остеопоретическими переломами у женщин постменопаузального возраста из Волго-Уральского региона /ЛИ Селезнева, Е В Кожемякина, Р И Хусаинова [и др ] // Биомика - наука XXI века, материалы школы-семинара. - Уфа, 2007 - С 115-116
8 L Selezneva Analysis of association of candidate gene polymorphisms with decreased bone mineral density / L Selezneva, R Khusamova, E Khusnutdinova. // Abstracts of the European Human Genetics Conference - Prague, 2005 - P 255
9 L Selezneva Analysis of polymorphisms of VDR, COL1A1, ESR1 and DBF genes in three ethnic groups of Volga-Ural region / L Selezneva, R Khusamova, E Khusnutdinova. // Abstracts of the European Human Genetics Conference -Amsterdam, 2006 - P 245-246
10 Association of polymorphisms and hapiotypes in the 5' region of COLIAl gene with BMD and osteoporotic fractures in women from Volga-Ural region of Russia / L Selezneva, R Nurlugajanov, E Faslueva [et al ] // Abstracts of the European Human Genetics Conference - Barcelona, 2008 - P 267
11 L Selezneva Association of the calcitonin gene dinucleotide repeat (CA) polymorphism with BMD and osteoporotic fractures in women from Volga-Ural region of Russia / L Selezneva, R Khusamova, E Khusnutdinova//35th European Symposium on Calcified Tissues - Barcelona, 2008 - P 156
Отпечатано на оборудовании типографии РНТИК «Башгехинформ» тираж 100 экэ
450077. РБ, г Уфа, уп Кирова, 15, тел (347) 272-10-37, 272-41-20
Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Селезнева, Лиана Ильдусовна
ВВЕДЕНИЕ.
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
1.1 .Эпидемиология остеопороза.
1 ^.Классификация остеопороза.
1.3 .Патогенез постменопаузального остеопороза.
1 АРентгеновская денситометрия в диагностике остеопороза.
1.5 .Генетические факторы риска развития остеопороза.
1.5.1. Ген а 1-цепи коллагена I типа (COL1A1).
1.5.2. Ген рецептора витамина D ( VDR).
1.5.3. Ген рецептора эстрогенов-а (ESR1).
1.5.4. Ген кальцитонина (CALCA).
1.5.5. Гены цитокинов (IL6, IL1RN, TGFB1, IGF1).
1.5.6. Ген фактора некроза опухоли-а (TNF) и система RANKL/RANK/OPG.
1.5.7. Ген белка LRP5 (LRP5) и Wnt-сигнальный путь.
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1.Материалы исследования.
2.2.Методы исследования.
2.2.1. Выделение геномной ДНК.
2.2.2. Полимеразная цепная реакция синтеза ДНК.
2.2.3. Рестрикционный анализ.
2.2.4. Метод электрофореза.
2.2.5. SSCP-анализ.
2.2.6. Секвенирование.
2.3. Статистическая обработка результатов.
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖД ЕНИЕ.
3.1.Исследование полиморфных вариантов гена альфа-1 цепи коллагена первого типа (COL1A1) у женщин из Волго
Уральского региона России.
3.1.1. Изучение полиморфных локусов -1997G>Т, -1663indelTu +1546G>T гена COL1A1 в этнических группах Волго-Уральского региона.
3.1.2. Анализ ассоциаций полиморфных локусов -1997G>T, -1663indelT и +1546G>T и гаплотипов гена СОЫА1 с риском развития переломов.
3.1.3. Анализ ассоциаций полиморфных локусов -1997G>T, -1663indelT и +1546G>T гена COL1A1 с остеопорозом.
3.1.4. Анализ ассоциаций полиморфных локусов -1997G>T, -1663indelT и +1546G>T и гаплотипов гена COL1A1 с уровнем МПКТ.
3.2. Исследование полиморфных вариантов гена белка 5, связанного с рецептором липопротеина низкой плотности (LRP5) у женщин из Волго-Уральского региона России.
3.2.1. Изучение полиморфных локусов 4037С>Т, 1980С>Т, 1695G>A гена LRP5 в этнических группах Волго-Уральского региона.
3.2.2. Анализ ассоциаций полиморфных локусов 4037С>Т, 1980С>Т, 1695G>A гена LRP5 с риском развития переломов.
3.2.3. Анализ ассоциаций полиморфных локусов 4037С>Т, 1980С>Т, 1695G>A гена LRP5 с риском развития остеопороза.
3.2.4. Анализ ассоциаций полиморфных локусов 4037С>Т,
1980С> Т, 1695G>A гена LRP5 с уровнем МПКТ.
3.3. Исследование полиморфных вариантов гена рецептора витамина D (VDR) у женщин из Волго-Уральского региона
России.
3.3.1. Изучение полиморфного локуса Fokl гена VDR в этнических группах Вол го-Уральского региона.
3.3.2. Анализ ассоциаций полиморфных локусов Fokl, BsmI и TaqI и гаплотипов гена VDR с риском развития переломов.
3.3.3. Анализ ассоциаций полиморфных локусов Fokl, BsmI и TaqI гена VDR с остеопорозом.
3.3.4. Анализ ассоциаций полиморфных локусов Fokl, BsmI и TaqI и гаплотипов гена VDR с уровнем МГЖТ.
3.4. Исследование полиморфного варианта (ТААА)п гена витамин D связывающего белка (DBP) у женщин из Волго-Уральского региона России.
3.4.1. Изучение полиморфного локуса (ТААА)п гена DBP в этнических группах Волго-Уральского региона.
3.4.2. Анализ ассоциаций полиморфного локуса (ТААА)п гена DBP с риском развития переломов.
3.4.3. Анализ ассоциаций полиморфного локуса (ТААА)п гена DBP с риском развития остеопороза.
3.4.4. Анализ ассоциаций полиморфного локуса (ТААА)п гена DBP с уровнем МПКТ.
3.5. Исследование полиморфного варианта (СА)п гена кальцитонина
CALCA) у женщин из Волго-Уральского региона
России.
3.5.1. Изучение полиморфного локуса (СА)„ гена CALCA в этнических группах Волго-Уральского региона России.
3.5.2. Анализ ассоциаций полиморфного локуса (СА)п гена CALCA с риском развития переломов.
3.5.3. Анализ ассоциаций полиморфного локуса (СА)п гена CALCA с риском развития остеопороза.
3.5.4. Анализ ассоциаций полиморфного локуса (СА)п гена CALCA с уровнем МПКТ.
3.6. Исследование полиморфных вариантов гена рецепторов эстрогена-а (ESR1) у женщин из Волго-Уральского региона
России.
3.6.1. Изучение полиморфных локусов454-397Т>С и454-351A>G гена ESR1 в этнических группах Волго-Уральского региона.
3.6.2. Анализ ассоциаций полиморфных локусов454-397Т>С, c.454-351A>G и (ТА)п и гаплотипов гена ESR1риском развития переломов.
3.6.3. Анализ ассоциаций полиморфных локусов454-397Т>С,454-351A>G и (ТА)п гена ESR1риском развития остеопороза.
3.6.4. Анализ ассоциаций полиморфных локусов454-397Т>С, с.454-351A>G и (ТА)п гена ESR1 с показателями МПКТ.
3.7. Исследование уровня эстрадиола и кальцитонина в сыворотке крови у женщин постменопаузального возраста.
3.7.1. Исследование уровня эстрадиола и кальцитонина в группах женщин с переломами и без переломов.
3.7.2. Анализ ассоциаций уровня эстрадиола и кальцитонина с показателями минеральной плотности костной ткани.
3.7.3. Анализ ассоциаций уровня эстрадиолаполиморфными вариантами454-397Т>С, c.454-351A>G и (TA)nTeaa.ESRL.
3.7.4. Анализ ассоциаций уровня кальцитонина с полиморфным локусом (СА)п гена CALCA.
3.8. Анализ межгенных взаимодействий в детерминации риска развития переломов у женщин русской и татарской этнической принадлежности.
Введение Диссертация по биологии, на тему "Молекулярно-генетическое исследование остеопороза"
Актуальность проблемы
Остеопороз (ОП) - это системное заболевания скелета, характеризующееся снижением костной массы, микроархитектурными нарушениями костной ткани, приводящими к повышению ломкости костей и увеличению риска переломов [Consensus development conference: Diagnosis, prophylaxis and treatment of osteoporosis, 1993]. Социальная значимость ОП определяется его последствиями и осложнениями - переломами позвоночника и трубчатых костей, обусловливающими значительный подъем заболеваемости, инвалидности и смертности. Частота ОП повышается с возрастом, поэтому наблюдаемое в последние десятилетия старение населения ведет к постоянно растущей частоте заболевания и увеличению числа переломов. Так, показано, что у 35% женщин после наступления менопаузы развивается ОП, а у лиц старше 75 лет заболевание определяется более чем в 70% случаев [Melton, 2003]. Оценка мировых тенденций показала, что только за счет старения населения земного шара частота переломов шейки бедра увеличится к 2050 году в два раза [WHO report, 2003]. Общепринятой является классификация, согласно которой ОП разграничивается на первичный, не обусловленный каким-либо заболеванием, влиянием медикаментов, вредных привычек и вторичный, включающий вышеперечисленные причины. Постменопаузальный ОП в структуре первичного ОП занимает 85%.
ОП является многофакторным заболеванием, на развитие которого влияют средовые и генетические факторы. Доказана роль таких факторов, как дефицит потребления белка, кальция, витамина D, курение, злоупотребление алкоголем, гиподинамия, низкая масса тела, ранняя менопауза в повышении риска развития ОП. Многочисленные исследования свидетельствуют о существенном вкладе генетических факторов в патогенез остеопороза. Показано, что вариабельность минеральной плотности костной ткани (МПКТ) на 70-80% обусловлена генетическими факторами, а риск возникновения остеопоретических переломов - на 50-60% [Рососк, 1987; Flicker, 1995; Jouanny, 1995; Ralston, 1999; Andrew, 2005]. В настоящее время наиболее перспективным является поиск ассоциации заболевания с полиморфными вариантами генов-кандидатов, белковые продукты которых вовлечены в процессы метаболизма костной ткани [Uitterlinden, 2006; Zmuda, 2006; Williams, 2006]. Рядом исследователей показана роль полиморфных вариантов генов гормонов и их рецепторов (рецептора эстрогена-а - ESR1, рецептора витамина D - VDR, рецептора андрогенов - AR, рецептора кальцитонина -CTR, паратиреоидного гормона - РТН), генов цитокинов, факторов роста и их рецепторов (гены интерлейкина-4 - IL-4, интерлейкина-6 - 1L-6, трансформирующего фактора роста-pl - TGFB1, фактора некроза опухоли-а -TNF, инсулиноподобного фактора роста 2 - IGF2, рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 и 2 - IGF1R, IGF2R), генов компонента костного матрикса (а 1-цепи коллагена I типа - COL1A1, а2-цепи коллагена I типа - СОЫА2, остеокальцина - BGLAP, остеонектина - SPOCK) в развитии остеопороза [Ralston, 2003; Garnero, 2004; Deng, 2004; Uitterlinden, 2006; Zmuda, 2006; Lei, 2006]. Однако, результаты многочисленных исследований противоречивы, молекулярно-генетические основы формирования ОП до конца не ясны. Понимание генетических механизмов развития заболевания имеет большое значения для разработки новых подходов к профилактике и лечению ОП.
В Волго-Уральском регионе России молекулярно-генетическое изучение ОП ранее не проводилось и выявление полиморфных вариантов генов-кандидатов, наиболее значимых в развитии ОП, представляет собой актуальную задачу, как для фундаментальной науки, так и практической медицины.
В связи с вышесказанным были определены цели и задачи исследования.
Цель работы: изучение молекулярно-генетических основ развития постменопаузального остеопороза в Волго-Уральском регионе
Задачи исследования:
1. Провести исследование уровня эстрадиола и кальцитонина в сыворотке крови у женщин постменопаузального возраста.
2. Провести анализ ассоциаций уровня эстрадиола с полиморфными вариантами с.454-397Т>С, c.454-351A>G и (ТА)п гена рецептора эстрогенов-а (ESR1) и уровня кальцитонина с полиморфным локусом (СА)„ гена кальцитонина CALCA.
3. Провести исследование полиморфных вариантов генов альфа-1 цепи коллагена первого типа (COL1A1), рецептора эстрогенов-а ('ESR1), рецептора витамина D (VDR), белка 5, связанного с рецептором липопротеина низкой плотности (LRP5), кальцитонина (CALCA), витамин D связывающего белка (.DBP) в этнических группах Волго-Уральского региона (русские, татары, башкиры).
4. Провести анализ ассоциаций полиморфных вариантов -1997G>T, -1663indelT, +1546G>T гена COL1A1, с.454-397Т>С, c.454-351A>G, (ТА)п гена ESR1, Fokl, BsmI, TaqI гена VDR, 40370Т, 1980С>Т, 1695G>A гена LRP5, (СА)п гена CALCA, (ТААА)п гена DBP с риском развития ОП, переломов и показателями МПКТ.
5. Оценить роль межгенных взаимодействий в развитии переломов у женщин постменопаузального возраста из Волго-Уральского региона.
Научная новизна исследования
Впервые собрана коллекция ДНК женщин больных постменопаузальным ОП в Волго-Уральском регионе России. Определена частота аллелей и генотипов генов COL1A1, LRP5, DBP и CALCA у здоровых доноров русской, татарской и башкирской этнической принадлежности, проживающих на территории Волго-Уральского региона России. Впервые проведен анализ ассоциаций полиморфных вариантов генов COL1A1, ESR1, VDR, LRP5, DBP и CALCA с риском развития переломов, остеопороза и уровнем МПКТ в разных этнических группах и оценена роль взаимодействия рассматриваемых генов в формировании предрасположенности к переломам. Выявлена ассоциация уровня эстрадиола с полиморфными вариантами гена ESR1 и кальцитонина с (СА)„ полиморфизмом гена CALCA у женщин русской и татарской этнической принадлежности.
Научно-практическая значимость работы
Результаты работы вносят вклад в общее представление о генетических детерминантах развития постменопаузального остеопороза. Получены новые данные о влиянии исследуемых ДНК-локусов на риск развития переломов и уровень МПКТ в различных точках измерения. Данные диссертационной работы могут служить основой для последующих исследований по определению генетических факторов риска развития ОП. В клинической практике тестирование полиморфизмов генов-кандидатов ОП может быть применено для проведения пресимптоматической диагностики, а также при консультировании больных ОП для разработки более адекватных лечебно-профилактических мероприятий. Результаты исследования могут быть использованы при чтении спецкурсов на факультетах биологии, в медицинских высших образовательных учреждениях, на курсах повышения квалификации медицинских работников.
Положения, выносимые на защиту:
1. Ассоциация уровня эстрадиола с генотипом ESR1*A*A и гаплотипом ESR1*T*A гена ESR1 у женщин татарской этнической принадлежности.
2. Ассоциация уровня кальцитонина с аллелем CALCA* 17 гена CALCA у женщин русской этнической принадлежности.
3. Этнические различия между популяциями русских, татар и башкир Волго-Уральского региона по полиморфным локусам с.454-351A>G гена ESR1, Fokl гена VDR и (ТААА)„ гена DBP .
4. Ассоциация риска развития переломов с полиморфными вариантами генов COL1A1, ESR1, DBP и VDR у женщин русской этнической принадлежности и с полиморфизмом гена CALCA у женщин татарской этнической принадлежности.
5. Генетические маркеры повышенного риска и устойчивости к развитию ОП по полиморфным локусам генов COL1A1, ESR1, CALCA у женщин русской этнической принадлежности.
6. Ассоциация показателей МПКТ с полиморфными вариантами генов CALCA, LRP5 и СОЫА1 у женщин русской этнической принадлежности.
7. Ассоциация уровня МПКТ с полиморфными локусами гена VDR при потреблении кальция менее 800 мг в сутки у женщин русской этнической принадлежности.
8. Детерминация риска развития переломов взаимодействием полиморфных вариантов генов VDR и DBP, VDR и COL1A1 у женщин русской этнической принадлежности, полиморфных локусов генов VDR и COL1A у женщин татарской этнической принадлежности.
Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Селезнева, Лиана Ильдусовна
ВЫВОДЫ
1. Выявлена ассоциация повышенного уровня эстрадиола с генотипом ESR1*A*A и гаплотипом ESR1*T*A гена рецепторов эстрогенов-а (ESR1) у женщин татарской этнической принадлежности.
2. Установлена ассоциация повышенного уровня кальцитонина с аллелем CALCA* 17 гена кальцитонина (CALCA) у женщин русской этнической принадлежности.
3. Обнаружены этнические различия по распределению частот аллелей и генотипов полиморфизмов c.454-351A>G гена ESR1 и Fokl гена рецептора витамина D (VDR) между популяциями татар и башкир, а также частот аллелей и генотипов полиморфизма Fokl гена VDR между популяциями башкир и русских. По распределению частот аллелей и генотипов полиморфного локуса (ГААА)п гена витамин D связывающего белка (DBP) выявлены отличия башкир от русских и татар.
4. Маркерами повышенного риска развития переломов являются аллели +1546*Т, -1663*D и генотип -1663*I*D гена al-цепи коллагена первого типа (COL1A1), сочетание генотипов VDR*F*F/*b*b, аллель DBP*11 гена DBP у женщин русской этнической принадлежности, аллель CALCA* 17гена CALCA у женщин татарской этнической принадлежности.
5. Маркерами пониженного риска развития переломов является генотип -1663*1*1 гена COL1A1, c.454-351*A*G гена ESR1, аллель DBP*10 гена DBP у женщин русской этнической принадлежности и аллель CALCA* 10 гена CALCA у женщин татарской этнической принадлежности.
6. Установлено, что аллели -1663*D, +1546*Т и генотип -1663*I*D гена COL1A1 и аллель с.454-351*G гена ESR1 являются факторами повышенного риска развития ОП, генотипы CALCA* 10*10 гена CALCA, -1663*1*1 и +1546*G*G гена COL1A1 — протективными в отношении развития остеопороза у женщин русской этнической принадлежности.
7. Обнаружена ассоциация генотипов -1663*I*D гена COL1A1 и 4037*С*Т гена белка 5, связанного с рецептором липопротеина низкой плотности (LRP5) с низким уровнем МПКТ поясничных позвонков и генотипов CALCA* 10* 10 и CALCA* 17* 17 гена CALCA с высоким уровнем МПКТ шейки бедра у женщин русской этнической принадлежности.
8. У женщин русской этнической принадлежности с потреблением кальция менее 800 мг в сутки генотип VDR*f*f гена VDR ассоциирован с низким уровнем МПКТ шейки бедра, а гаплотип VDR*b*T гена VDR ассоциирован с низкими значениями МПКТ шейки бедра и поясничных позвонков.
9. Установлены взаимодействия полиморфных вариантов Fokl, BsmI, TaqI гена VDR и (ТААА)п гена DBP, а также локусов Fokl, BsmI гена VDR и -1997G>T, -1663indelT гена COL1A1 в детерминации риска развития переломов у женщин русской этнической принадлежности. Выявлено, что у женщин татарской этнической принадлежности на риск развития переломов оказывают взаимное влияние полиморфных вариантов BsmI гена VDR и -1997G>T гена COL1A.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Остеопороз является классическим многофакторным заболеванием, на развитие которого оказывают влияние как средовые, так и генетические факторы, при этом генетическая составляющая ОП формируется за счет взаимодействия множества генов. Знания о генетике ОП значительно расширились за последнее десятилетие в результате совершенствования методов молекулярно-генетических исследований. Наиболее широко распространенным является анализ ассоциаций полиморфных вариантов генов-кандидатов с фенотипическими проявлениями ОП.
В рамках настоящего исследования проведен анализ молекулярно-генетических основ развития остеопороза. Мы провели изучение полиморфных вариантов генов COL1A1, ESR1, VDR, LRP5, CALCA, DBP в этнических группах Волго-Уральского региона и поиск ассоциаций данных локусов с риском развития переломов, остеопороза и уровнем МПКТ у женщин в постменопаузе. Также проведено исследование уровня эстрадиола и кальцитонина в сыворотке крови у женщин постменопаузального возраста и анализ ассоциаций уровня гормонов с полиморфизмами генов ESR1 и CALCA.
По локусам генов ESR1 (c.454-351A>G), VDR (Fokl) и DBP ((ТА A A) J выявлены популяционные различия между этническими группами Волго-Уральского региона. Сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов изученных полиморфных вариантов генов COL1A1, ESR1, VDR, LRP5, CALCA, DBP обнаружил отличие исследуемых нами этнических групп от популяций мира.
Анализ -1663indelT полиморфизма гена COL1A1 показал ассоциацию аллеля -1663*D и генотипа -1663*L*D с повышенным риском развития переломов (OR=l,61; 95%CI 1,12-2,33 и OR=l,64; 95%CI 1,06-2,54, соответственно) и ОП (OR=2,33; 95%CI 1,25-4,34 и OR=2,29; 95%CI 1,09-4,81, соответственно), также генотип -1663*I*D оказался ассоциирован с низким уровнем МПКТ поясничных позвонков у женщин русской этнической принадлежности. Исследование +1546G> Т полиморфного локуса гена COL1A1 выявило ассоциацию аллеля +1546*Т с повышенным риском развития переломов (OR=l,5; 95%С1 1,03-2,22) и остеопороза (OR=2,13; 95%С1 1,143,99) у русских. Не обнаружена ассоциация аллеля +1546*Т с уровнем МПКТ, однако показана тенденция к снижению МПКТ во всех точках измерения у лиц с генотипами +1546*G*T и +1546*Т*Т по сравнению с носителями генотипа +1546*G*G.
При изучении полиморфного локуса 4037С>Т гена LRP5 выявлена ассоциация генотипа 4037*С*Т с низким уровнем МПКТ поясничных позвонков у женщин русской этнической принадлежности и не обнаружена связь полиморфизма 4037С>Т с риском развития переломов. Исследование гена VDR не выявило ассоциацию Fokl, Bsml и TaqI полиморфных локусов с переломами, однако показало, что сочетание генотипов VDR*F*F/*b*b является маркером повышенного риска развития переломов (OR=2,02; 95%С1 1,09-3,72) у женщин русской этнической принадлежности. Также выявлена ассоциация полиморфных локусов гена VDR с МПКТ в зависимости от потребления кальция. Обнаружено, что при потреблении кальция менее 800 мг в день генотип VDR*f*f ассоциирован с низким уровнем МПКТ шейки бедра, а гаплотип VDR*b*T — с низкими значениями МПКТ шейки бедра и поясничных позвонков.
Анализ (ТААА)п полиморфизма гена DBP показал, что аллель DBP*10 является протективным (OR=0,59; 95%С1 0,37-0,94), а аллель DBP*11 -фактором повышенного риска развития переломов (OR=l,93; 95%С1 1,06-3,48) у женщин русской этнической принадлежности, при этом не найдена связь (ТААА)п полиморфизма гена DBP с уровнем МПКТ и риском развития остеопороза. При исследовании (СА)„ полиморфизма гена CALCA выявлена ассоциация аллеля CALCA* 10 с пониженным (OR=0,44; 95%С1 0,24-0,83), а аллеля CALCA* 17 — с повышенным риском развития переломов (OR=l,95; 95%С1 1,11-3,46) у женщин татарской этнической принадлежности. У русских не обнаружена ассоциация (СА)п полиморфизма гена CALCA с переломами, однако показано, что у женщин с остеопорозом и остеопенией генотип CALCA* 10* 10 встречался с более низкой частотой по сравнению со здоровыми, что позволяет рассматривать генотип CALCA* 10* 10 как протективный в отношении развития остеопороза (OR=0,21; 95%С1 0,08-0,73). Кроме того, гомозиготные генотипы CALCA* 10* 10 и CALCA* 17*17 оказались ассоциированы с высоким уровнем МПКТ шейки бедра у женщин русской этнической принадлежности.
Изучение с.454-397Т>С, c.454-351A>G и {ТА),, полиморфных локусов гена ESR1 вывило ассоциацию генотипа ESR1*G*A с пониженным риском развития переломов (OR=0,61; 95%С1 0,46-0,95), а аллеля ESR1*G - с повышенным риском развития ОП (OR=l,57; 95%С1 1,06-2,3) у женщин русской этнической принадлежности. Не обнаружена связь изученных полиморфизмов и гаплотипов гена ESR1 с развитием ОП и уровнем МПКТ у женщин русской этнической принадлежности.
Анализ межгенных взаимодействий выявил, что риск развития переломов детерминирован взаимным влиянием генов VDR и DBP, VDR и COL1A у женщин русской этнической принадлежности, VDR и COL1A1 у женщин татарской этнической принадлежности.
При исследовании уровня эстрадиола и кальцитонина в сыворотке крови у женщин постменопаузального возраста обнаружено, что в группе женщин с переломами уровень кальцитонина достоверно повышен по сравнению с контрольной группой. Показана ассоциация аллеля CALCA* 17 с повышенным уровнем кальцитонина у женщин русской этнической принадлежности. Выявлена ассоциация генотипа ESR1*A*A и гаплотипа ESR1*T*A гена ESR1 с повышенным уровнем эстрадиола у женщин татарской этнической принадлежности.
Таким образом, проведенное нами исследование позволило установить значимость полиморфных вариантов генов COL1A1, LRP5, DPB, VDR, ESR1 и CALCA в развитии основных фенотипических проявлений ОП у женщин постменопаузального возраста русской и татарской этнической принадлежности. Определены маркеры повышенного и пониженного риска переломов, а также обнаружена ассоциация полиморфных локусов генов-кандидатов с уровнем МПКТ. Кроме того, выявлены ключевые межгенные взаимодействия, детерминирующие развитие переломов. Полученные нами результаты имеют высокую научную новизну и вносят вклад в общее представление о молекулярно-генетических основах развития постменопаузального остеопороза у женщин Волго-Уральского региона.
Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Селезнева, Лиана Ильдусовна, Уфа
1. Животовский, JI.A. Популяционная биометрия. М.5 1991. - 272 с.
2. Михайлов, Е.Е. Эпидемиология остеопороза и переломов / Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневоленская // Руководство по остеопорозу/ под ред. Л.И. Беневоленской - М.: Бином, 2003. - С. 8-36.
3. Рожинская, Л.Я. Системный остеопороз. Практическое руководство для врачей. М., 2000. - 196 с.
4. Частота остеопоретических переломов основных локализаций среди городского населения России / Е.Е. Михайлов, Л.И. Беневоленская, С.Г. Аникин и др. // Научно-практическая ревматология. 2001. - №3. - С. 75.
5. Шварц, Г.Я. Остеотропные цитокины семейства TNF и создание нового поколения лекарственных средств для лечения остеопороза / Г.Я. Шварц // Цитокины и воспаление. 2004. - Т. 3. - №3. - С. 3-9.
6. A COL1A1 Spl binding site polymorphism predisposes to osteoporotic fracture by affecting bone density and quality / V. Mann, E.E. Hobson, B. Li et al. // J. Clin. Invest.-2001.-Vol. 107, №7.-P. 899-907.
7. A functional polymorphic variant in the interleukin-6 gene promoter associated with low bone resorption in postmenopausal women / S.L. Ferrari, P. Garnero, S. Emond et al. // Arthritis. Rheum. 2001. - Vol 44, № 1. - P. 196-201.
8. A generalized combinatorial approach for detecting gene-by-gene and gene-by-environment interactions with application to nicotine dependence / X.Y. Lou, G.B. Chen, L. Yan et al. // Am. J. Hum. Genet. 2007 - Vol. 80, № 6. - P. 1125-1137.
9. A large-scale population-based study of the association of vitamin D receptor gene polymorphisms with bone mineral density / A.G. Uitterlinden, H.A. Pols, H. Burger et al. //J. Bone. Miner. Res. 1996. - Vol. 11, № 9. - P. 1241-1248.
10. A model of lifetime osteoporosis impact / E.A. Chrischilles, C.D. Butler, C.S. Davis, R.B.Wallace // Archives of Internal Medicine. 1991. -№ 151. P. 20262032.
11. A prospective study of sex steroids, sex hormone-binding globulin, and non-vertebral fractures in women and men: the Tromso Study / A. Bjornerem, L.A. Ahmed, R.M. Joakimsen et al. // Eur. J. Endocrinol. 2007 - Vol. 157, № 1. -P. 119-125.
12. Allelic variation at the interleukin-1 receptor antagonist gene is associated with early postmenopausal bone loss at the spine / R.W. Keen, K.L. Woodford-Richens, J.S. Lanchbury et al. // Bone. 1998. - Vol. 23, № 4. - P. 367-371.
13. Altered calcitonin gene in a young patient with osteoporosis / M. Alevizaki, J.C. Stevenson, S.I. Girgis et al. // BMJ. 1989. - Vol. 6, № 298 (6682). - P. 12151216.
14. An endocytic pathway essential for renal uptake and activation of the steroid 25-(OH) vitamin D3 / A. Nykjaer, D. Dragun, D. Waltheret al. // Cell. 1999 -Vol. 19, №4.-P. 507-515.
15. Analysis of Bsm I polymorphism of the vitamin D receptor (VDR) gene in Venezuelan female patients living in the state of Zulia with osteoporosis / L. Borjas-Fajardo, M. Zambrano, E. Fernandez et al. // Invest. Clin. 2003 - Vol. 44, №4.-P. 275-282.
16. Assessment of fracture risk / J.A. Kanis, F. Borgstrom, C. De Laet et al. // Osteoporos. Int. 2005. - Vol. 16, № 6. - P . 581-589.
17. Association between a functional interleukin-6 gene polymorphism and peak bone mineral density and postmenopausal bone loss in women: the OFELY study / P. Garnero, O. Borel, E. Sornay-Rendu et al. // Bone. 2002. - Vol. 31, №» 1. -P. 43-50.
18. Association between bone mineral density and LDL receptor-related protein 5 gene polymorphisms in young Korean men / J.M. Koh, M.H. Jung, J.S. Hong et al. // J. Korean. Med. Sci. 2004. - Vol. 19, № 3. - P. 407-412.
19. Association between bone mineral density and polymorphisms of the VDR, ERalpha, COL1A1 and CTR genes in Spanish postmenopausal women / E. Bandres, I. Pombo, M. Gonzalez-Huarriz et al. // J. Endocrinol. Invest. 2005. -Vol. 28,№4.-P. 312-321.
20. Association of 5' estrogen receptor alpha gene polymorphisms with bone mineral density, vertebral bone area and fracture risk / J.B. van Meurs, S.C. Schuit, A.E. Weel et al.//Hum. Mol. Genet. -2003. -Vol. 12, № 14.-P. 1745-1754.
21. Association of a -1997G—>T polymorphism of the collagen Ialphal gene with bone mineral density in postmenopausal Japanese women / Y. Yamada, F. Ando, N. Niino, H. Shimokata // Hum. Biol. 2005. - Vol. 77, № 1. - P. 27-36.
22. Association of a polymorphism of the transforming growth factor-betal gene with genetic susceptibility to osteoporosis in postmenopausal Japanese women / Y.
23. Yamada, A. Miyauchi, J. Goto et al. // J. Bone. Miner. Res. 1998. - Vol. 13, № 10.-P. 1569-1576.
24. Association of a single-nucleotide polymorphism in low-density lipoprotein receptor-related protein 5 gene with bone mineral density / T. Urano, M. Shiraki, Y. Ezura et al. // J. Bone. Miner. Metab. 2004. - Vol. 22, № 4. - P. 341-345.
25. Association of bone mineral density with a dinucleotide repeat polymorphism at the calcitonin (CT) locus / M. Miyao, T. Hosoi, M. Emi et al. // J. Hum. Genet.- 2000. Vol. 45, № 6. - P. 346-350.
26. Association of bone mineral density with polymorphism of the estrogen receptor gene / S. Kobayashi, S. Inoue, T. Hosoi et al. // J. Bone. Miner. Res. 1996. -Vol. 11, №3.-P. 306-311.
27. Association of COLIA1 Spl alleles with defective bone nodule formation in vitro and abnormal bone mineralization in vivo / T.L. Stewart, P. Roschger, B.M. Misof et al. // Calcif. Tissue. Int. 2005. - Vol. 77, № 2. - P. 113-118.
28. Association of CTR and COLIA1 alleles with BMD values in peri- and postmenopausal women / V. Braga, M. Mottes, S. Mirandola et al. // Calcif. Tissue. Int. 2000. - Vol. 67, № 5. - P. 361-366.
29. Association of estrogen receptor alpha gene polymorphisms with bone mineral density in Chinese women: a meta-analysis / C.L. Wang, X.Y. Tang, W.Q. Chen et al. // Osteoporos. Int. 2007 - Vol. 18, № 3. - P. 295-305.
30. Association of estrogen receptor alpha gene polymorphisms with postmenopausal bone loss, bone mass, and quantitative ultrasound properties of bone / O.M. Albagha, U. Pettersson, A. Stewart et al. // J. Med. Genet. 2005. - Vol. 42, № 3.-P. 240-246.
31. Association of estrogen receptor dinucleotide repeat polymorphism with osteoporosis / M. Sano, S. Inoue, T. Hosoi et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995. - Vol. 217, № 1. - P. 378-383.
32. Association of estrogen receptor-alpha gene polymorphisms with bone mineral density in postmenopausal Korean women / H.S. Nam, M.H. Shin, S.S. Kweon et al. // J. Bone. Miner. Metab. 2005. - Vol. 23, № 1. - P. 84-89.
33. Association of polymorphisms of the estrogen receptor alpha gene with bone mineral density of the femoral neck in elderly Japanese women / Y. Yamada, F. Ando, N. Niino et al. // J. Mol. Med. 2002. - Vol. 80, № 7. - P. 452-460.
34. Association of polymorphisms of the osteoprotegerin gene with bone mineral density in Japanese women but not men / Y. Yamada, F. Ando, N. Niino, H. Shimokata // Mol. Genet. Metab. 2003. - Vol. 80, № 3. - P. 344-349.
35. Association of the calcitonin gene (CA) polymorphism with bone mass and bone responsiveness to hormone therapy in postmenopausal Korean women / J.G. Kim, Y.M. Choi, S.Y. Moon, J.Y. Lee // Menopause. 2003. - Vol. 10, № 6. - P. 544549.
36. Association of the CT gene (CA) polymorphism with BMD in osteoporotic Mexican women / J.J. Magana, R. Gomez, B. Cisneros et al. // Clin. Genet. -2006. Vol. 70, № 5. - P. 402-408.
37. Association of the osteoprotegerin gene polymorphisms with bone mineral density in postmenopausal women / B. Arko, J. Prezelj, A. Kocijancic et al. // Maturitas. 2005. - Vol. 51, № 3. - P. 270-9.
38. Association of vitamin D receptor and estrogen receptor gene polymorphisms with bone mass in postmenopausal Korean women / J.G. Kim, K.S. Lim, E.K. Kim et al. // Menopause. 2001. - Vol. 8, № 3. - P. 222-228.
39. Association of vitamin D receptor and estrogen receptor-alpha gene polymorphism with peak bone mass and bone size in Chinese women / Y.J. Qin, Z.L. Zhang, Q.R. Huang et al. // Acta. Pharmacol. Sin. 2004. - Vol. 25, № 4. - P. 462-468.
40. Association of vitamin D receptor polymorphisms with osteoporosis in mexican postmenopausal women / R. Lisker, M.A. Lopez, S. Jasqui et al. // Hum. Biol. -2003 Vol. 75, № 3. - P. 399-403.
41. Associations between low levels of serum estradiol, bone density, and fractures among elderly women: the study of osteoporotic fractures / B. Ettinger, A. Pressman, P. Sklarin et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1998 - Vol. 83, № 7. -P. 2239-2243.
42. Associations of polymorphisms in the vitamin D receptor gene (BsmI and Fokl) with bone mineral density in postmenopausal women in Malta / C. Vidal, C. Grima, M. Brincat et al. // Osteoporos. Int. 2003. - Vol. 14, № 11. - P. 923928.
43. Axial and appendicular bone mineral density in patients with long-term deficiency or excess of calcitonin / D.L. Hurley, R.D. Tiegs, H.W. Wahner, H. Heath //N. Engl. J. Med. 1987 - Vol. 27, № 317(9). - P. 537-541.
44. Azria, M. The value of biomarkers in detecting alterations in bone metabolism / M. Azria // Calcif. Tissue. Int. 1989. - Vol. 45, № 1. - P. 7-11.
45. Bagur, A. Low levels of endogenous estradiol protect bone mineral density in young postmenopausal women / A. Bagur, B. Oliveri, C. Mautalen // Climacteric. -2004-Vol. 7, №2.-P. 181-188.
46. Basal plasma immunoreactive calcitonin in postmenopausal osteoporosis / C.H. Chesnut 3rd, D.J. Baylink, K. Sisom et al. // Metabolism. 1980 - Vol. 29, № 6.-P. 559-562.
47. Beringer, T.R. Absence of evidence for a role of calcitonin in the etiology of femoral neck fracture / T.R. Beringer, J. Ardill, H.M. Taggart // Calcif. Tissue. Int. 1986. - Vol. 39, № 5. - P. 300-303.
48. Biochemical markers of bone turnover, endogenous hormones and the risk of fractures in postmenopausal women: the OFELY study / P. Garnero, E. Sornay-Rendu, B. Claustrat, P.D. Delmas // J. Bone. Miner. Res. 2000 - Vol. 15, № 8. -P. 1526-1536.
49. Bone density determinants in elderly women: a twin study / L. Flicker, J.L. Hopper, L. Rodgers et al. // J. Bone. Miner. Res. 1995. - Vol. 10, № 11. - P. 1607-1613.
50. Bone mineral density and its change in white women: estrogen and vitamin D receptor genotypes and their interaction / M. Willing, M. Sowers, D. Aron et al. //J. Bone. Miner. Res. 1998. - Vol. 13, № 4. - P. 695-705.
51. Bone mineral density of the lumbar spine is associated with TNF gene polymorphisms in early postmenopausal Japanese women / I. Furuta, N. Kobayashi, T. Fujino et al. // Calcif. Tissue. Int. 2004. - Vol. 74, № 6. - P. 509-515.
52. Вопе mineral mass is associated with interleukin 1 receptor autoantigen and TNF-alpha gene polymorphisms in post-menopausal Mediterranean women / R. Fontova, G. Gutierrez, J. Vendrell et al. // J. Endocrinol. Invest. 2002. - Vol. 25,№8-P. 684-690.
53. Calcitonin secretion in postmenopausal osteoporosis / R.D. Tiegs, J.J. Body, H.W. Wahner et al. // N. Engl. J. Med. 1985 - Vol. 25, № 312(17). - P. 10971100.
54. Cdx-2 polymorphism in the promoter region of the human vitamin D receptor gene determines susceptibility to fracture in the elderly / Y. Fang, J.B. van Meurs, A.P. Bergink et al. // J. Bone. Miner. Res. 2003. - Vol. 18, № 9. - P. 16321641.
55. Christiansen, C. Osteoporosis: diagnosis and management today and tomorrow / C. Christiansen // Bone. 1995. - Vol. 17, № 5. - P. 513S-516S.
56. COL1A1, ESR1, VDR and TGFB1 polymorphisms and haplotypes in relation to BMD in Spanish postmenopausal women / M. Bustamante, X. Nogues, A. Enjuanes et al. // Osteoporos. Int. 2007. - Vol. 18, № 2. - P. 235-343.
57. Collagen Ialphal Spl polymorphism, bone mass, and bone turnover in healthy French premenopausal women: the OFELY study / P. Garnero, O. Borel, S.F. Grant et al. // J. Bone. Miner. Res. 1998. - Vol. 13, № 5. - P. 813-817.
58. Common genetic variation of the low-density lipoprotein receptor-related protein 5 and 6 genes determines fracture risk in elderly white men / J.B. van Meurs, F. Rivadeneira, M. Jhamai et al. // J. Bone. Miner. Res. 2006 - Vol. 21, № 1. - P. 141-50.
59. Common variants at the PCOL2 and Spl binding sites of the COL1A1 gene and their interactive effect influence bone mineral density in Caucasians / P.Y. Liu, Y. Lu, J.R. Long et al. // J. Med. Genet. 2004. - Vol. 41, № 10. - P. 752-757.
60. Consensus development conference: Diagnosis, prophylaxis and treatment of osteoporosis //The American Journal of Medicine. 1993. - V.94 № 6, P. 646650
61. Contribution of the collagen I alphal and vitamin D receptor genes to the risk of hip fracture in elderly women / T.V. Nguyen, L.M. Esteban, J. White // Clin. Endocrinol. Metab. 2005. - Vol. 90, № 12. - P. 6575-6579.
62. Contribution of the LRP5 gene to normal variation in peak BMD in women / D.L. Koller, S. Ichikawa, M.L. Johnson et al. // J. Bone. Miner. Res. 2005 - Vol. 20, № l.-P. 75-80.
63. Cooke, N.E. Serum vitamin D-binding protein is a third member of the albumin and alpha fetoprotein gene family / N.E. Cooke, E.V. David // J. Clin. Invest. -1985. Vol. 76, № 6. - P. 2420-2424.
64. Cooper, C. Hip fractures in the elderly: a worldwide projection / C. Cooper, G. Campion, L.J. Melton III // Osteoporos. Int. 1992. - № 2. - P. 285-289.
65. Correlation between vitamin D receptor genotypes and bone mineral density in Japanese patients with osteoporosis / M. Tamai, M. Yokouchi, S. Komiya et al. // Calcif. Tissue. Int. 1997. - Vol. 60, № 3. - P. 229-232.
66. CYP17 and COMT gene polymorphisms can influence bone directly, or indirectly through their effects on endogenous sex steroids, in postmenopausal Japanese women /1. Gorai, M. Inada, H. Morinaga et al. // Bone. 2007 - Vol. 40, № 1. -P. 28-36.
67. Deng, H.W. Gene mapping and identification for osteoporosis / H.W. Deng, R.R. Recker // J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. 2004. - Vol. 4, № 1. - P. 91100.
68. Detection of polymorphism of human DNA by gel electrophoresis as single cell conformation polymorphism / M. Orita, H. Jwahana, H. Kanazawa, T. Seky // Proc. Natl. Acad. Sci. 1989. - Vol. 86. - P. 2766-2770.
69. Determinants of peak bone mass: clinical and genetic analyses in a young female Canadian cohort / L.A. Rubin, G.A. Hawker, V.D. Peltekova et al. // J. Bone. Miner. Res. 1999. - Vol. 14, № 4. - P. 633-643.
70. Differential genetic effects of ESR1 gene polymorphisms on osteoporosis outcomes / J.P. Ioannidis, S.H. Ralston, S.T. Bennett et al. // JAMA 2004. -Vol. 292, № 17. -P. 2105-2114.
71. Does total thyroidectomy induce metabolic bone disturbance? / K. Sugino, Y. Kure, H. Iwasaki, A. Matsumoto // Int. Surg. 1992 - Vol. 77, № 3. - P. 178180.
72. Effect of vitamin D on falls: a meta-analysis / H.A. Bischoff-Ferrari, B. Dawson-Hughes, W.C. Willett et al. //JAMA. 2004. - № 291. - P. 1999-2006.
73. Effectiveness of alendronate treatment in postmenopausal women with osteoporosis: relationship with BsmI vitamin D receptor genotypes / S. Palomba, F.G. Numis, G. Mossetti et al. // Clin. Endocrinol (Oxf). 2003. - Vol. 58, № 3. -P. 365-371.
74. Effects of interacting networks of cardiovascular risk genes on the risk of type 2 diabetes mellitus (the COD AM study) / M.M. van Greevenbroek, J. Zhang, С .J. van der Kallen et al. // BMC Med. Genet. 2008 - Vol. 24, № 9(1). - P. 36.
75. Effects of vitamin D and estrogen receptor gene polymorphisms on the changes in lumbar bone mineral density with multiple pregnancies in Japanese women / H. Matsushita, T. Kurabayashi, M. Tomita et al. // Hum. Reprod. 2004. - Vol 19, № l.-P. 59-64.
76. Endogenous hormones, muscle strength, and risk of fall-related fractures in older women / S. Sipila, E. Heikkinen, S. Cheng et al.// J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 2006 - Vol. 61, № 1. - P. 92-96.
77. Endogenous sex steroids and bone mineral density in healthy Greek postmenopausal women / I. Lambrinoudaki, G. Christodoulakos, L. Aravantinos et al. // J. Bone. Miner. Metab. 2006 - Vol. 24, № 1. - P. 65-71.
78. Environmental and genetic factors affecting bone mass. Similarity of bone density among members of healthy families / P. Jouanny, F. Guillemin, C. Kuntz et al. //Arthritis. Rheum. 1995.-Vol. 38, № l.-P. 61-67.
79. Estrogen promotes apoptosis of murine osteoclasts mediated by TGF-beta / D.E. Hughes, A. Dai, J.C. Tiffee et al. // Nat. Med. 1996. - Vol. 2, № 10. - P. 1132-1136.
80. Estrogen receptor alpha gene polymorphisms and bone mineral density: haplotype analysis in women from the United Kingdom / O.M. Albagha, F.E. McGuigan, D.M. Reid, S.H. Ralston // J. Bone. Miner. Res. 2001 - Vol. 16, № 1. - P. 128134.
81. Estrogen receptor alpha gene polymorphisms are associated with estradiol levels in postmenopausal women / S.C. Schuit, F.H. de Jong, L. Stolk et al. // Eur. J. Endocrinol. 2005. - Vol. 153, № 2. - P. 327-334.
82. Estrogen receptor alpha polymorphism as a genetic marker for bone loss, vertebral fractures and susceptibility to estrogen / N. Kobayashi, T. Fujino, T. Shirogane et al. // Maturitas. 2002. - Vol. 416 № 3. - P. 193-201.
83. Estrogen receptor gene polymorphisms / T. Kurabayashi, H. Matsushita, M. Tomita et al. //Nippon. Rinsho. 2004. - Vol. 62, № 2. - P. 164-8.
84. Ethnic difference in osteoporosis-related phenotypes and its potential underlying genetic determination / S.F. Lei, Y. Chen, D.H. Xiong et al. // J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. 2006. - Vol. 6, № 1. - P. 36-46.
85. Extension of multifactor dimensionality reduction for identifying multilocus effects in the GAW14 simulated data / H. Mei, D. Ma, A. Ashley-Koch et al. // BMC Genet. 2005 - Vol. 30, № 6. - P. S145.
86. Ferrari, S.L. Gene variants for osteoporosis and their pleiotropic effects in aging / S.L. Ferrari, R. Rizzoli // Mol. Aspects. Med. 2005. - Vol. 26, № 3. - P. 145-167.
87. Feskanich, D. Vitamin D receptor genotype and the risk of bone fractures in women / D. Feskanich, DJ. Hunter, W.C. Willett et al. // Epidemiology. 1998 -Vol. 9, №5.-P. 535-539.
88. Garnero, P. Contribution of bone mineral density and bone turnover markers to the estimation of risk of osteoporotic fracture in postmenopausal women / P. Garnero, P.D. Delmas // J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. 2004. - Vol. 4, № l.-P. 50-63.
89. Genetic control of bone density and turnover: role of the collagen lalphal, estrogen receptor, and vitamin D receptor genes / M.A. Brown, M.A. Haughton, S.F. Grant et al. // J. Bone. Miner. Res. 2001 - Vol. 16, № 4. - P. 758-764.
90. Genetic determinants of bone mass in adults. A twin study / N.A. Pocock, J. A. Eisman, J.L. Hopper et all. // J. Clin. Invest. 1987. - Vol. 80, № 3. - P. 706710.
91. Genetic markers, bone mineral density, and serum osteocalcin levels / M. Sowers, M. Willing, T. Burns et al. // J. Bone. Miner. Res. 1999. - Vol. 14, № 8.-P. 1411-1419.
92. Genetic polymorphism of the calcitonin receptor gene and bone mineral density in Polish population of postmenopausal women / K. Drews, A. Seremak-Mrozikiewicz, J. Bartkowiak-Wieczorek et al. // Ginekol. Pol. 2005 - Vol. 76, №8.-P. 612-618.
93. Genetics of osteoporosis: role of steroid hormone receptor gene polymorphisms / L. Gennari, L. Becherini, A. Falchetti et al. // J. Steroid. Biochem. Mol. Biol. 2002. - Vol. 81, № 1. - p. 1-24.
94. Glazier, A.M. Finding genes that underlie complex traits / A.M. Glaier, J.H. Nadeau, T.J. Aitman // Science. 2002 - Vol. 20, № 298(5602). - P. 2345-2349.
95. Global mapping of the yeast genetic interaction network / A.H. Tong, G. Lesage, G.D. Bader et al. // Science. 2004 - Vol. 6, № 303(5659). - P. 808813.
96. Greendale, G.A. Endogenous sex steroids and bone mineral density in older women and men: the Rancho Bernardo Study / G.A. Greendale, S. Edelstein, E. Barrett-Connor//J. Bone. Miner. Res. 1997-Vol. 12, № 11. -P. 1833-1843.
97. Haplotypes defined by promoter and intron 1 polymorphisms of the COLIA1 gene regulate bone mineral density in women / T.L. Stewart, H. Jin, F.E. McGuigan et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2006. - Vol. 91, № 9. - P. 3575-3583.
98. Hartwell, L. Genetics. Robust interactions. / L. Hartwell // Science. 2004 -Vol. 6, № 303(5659). - P. 774-775.
99. Heterozygous mutations in the LDL receptor-related protein 5 (LRP5) gene are associated with primary osteoporosis in children / H. Hartikka, O. Makitie, M. Mannikko et al. // J. Bone. Miner. Res. 2005 - Vol. 20, № 5. - P. 783-789.
100. Holick MF. Vitamin D: photobiology, metabolism, mechanism of action, and clinical applications. In: Favus MJ, ed. Primer on the metabolic bone diseases and disorders of mineral metabolism, 3rd ed. Philadelphia, PA, Lippincott-Raven, 1996:74-81.
101. Hormonal and biochemical parameters and osteoporotic fractures in elderly men / J.R. Center, T.V. Nguyen, P.N. Sambrook, J.A.Eisman // J. Bone. Miner. Res. -2000 Vol. 15, №7.-P. 1405-1411.
102. Hormonal predictors of bone loss in elderly women: a prospective study. The Study of Osteoporotic Fractures Research Group / K. Stone, D.C. Bauer, D.M. Black et al. //J. Bone. Miner. Res. 1998-Vol. 13, № 7. - P. 1167-1174.
103. Identification of significant association and gene-gene interaction of GABA receptor subunit genes in autism / D.Q. Ma, P.L. Whitehead, M.M. Menold et al. // Am. J. Hum. Genet. 2005 - Vol. 77, № 3. - P. 377-388.
104. Identifying genetic risk factors for osteoporosis / A.G. Uitterlinden, J.B. van Meurs, F. Rivadeneira, H.A. Pols // J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. 2006. -Vol. 6, № 1.-P. 16-26.
105. In vitro functional assay of alleles and haplotypes of two COLlAl-promoter SNPs / N. Garcia-Giralt, A. Enjuanes, M. Bustamante et al. // Bone. 2005. -Vol. 36, №5.-P. 902-908.
106. Incidence of hip fractures in the elderly: a cross-national analysis / S. Maggi, J.L. Kelsey, J. Litvak, S.P. Heyse // Osteoporos. Int. 1991. -№ 1. - P. 232-241.
107. Influence of the vitamin D receptor gene alleles on bone mineral density in postmenopausal and osteoporotic women / C. Vandevyver, T. Wylin, J.J. Cassiman et al. // J. Bone. Miner. Res. 1997. - Vol. 12, № 2. - P. 241-247.
108. Interaction between the vitamin D receptor gene and collagen type Ialphal gene in susceptibility for fracture / A.G. Uitterlinden, A.E. Weel, H. Burger et al. //J. Bone. Miner. Res. -2001. Vol. 16, № 2. - P. 379-385.
109. Interaction between vitamin D receptor genotype and estrogen receptor alpha genotype influences vertebral fracture risk / E.M. Colin, A.G. Uitterlinden, J.B.van Meurs et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2003. - Vol. 88, № 8. - P. 3777-3784.
110. Investigation of the genetic influence of the OPG, VDR (Fokl), and COLIA1 Spl polymorphisms on BMD in the Irish population / F. Wynne, F. Drummond, K. O'Sullivan et al. // Calcif. Tissue. Int. 2002 - Vol. 71, № 1. - P. 26-35.
111. Johnson, M.L. The high bone mass family—the role of Wnt/Lrp5 signaling in the regulation of bone mass/ M.L. Johnson // J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. -2004.-Vol. 4, №2.-P. 135-138.
112. Kinoshita, Y. Induction of aromatase (CYP19) expression in breast cancer cells through a nongenomic action of estrogen receptor alpha / Y. Kinoshita, S. Chen//Cancer. Res.-2003.-Vol. 1,№63 (13).-P. 3546-3455.
113. Koay, M.A. Genetic disorders of the LRP5-Wnt signalling pathway affecting the skeleton / M.A. Koay, M.A. Brown // Trends. Mol. Med. 2005. - Vol. 11, № 3. - P. 129-137.
114. Krishnan, V. Regulation of bone mass by Wnt signaling / V. Krishnan, H.U. Bryant, O.A. Macdougald // J. Clin. Invest. 2002 - Vol. 116, № 5. - P. 12021209.
115. Kronenberg HM. Parathyroid hormone: mechanism of action. In: Favus MJ, ed. Primer on the metabolic bone diseases and disorders of mineral metabolism, 3rd ed. Philadelphia, PA, Lippincott-Raven, 1996: 68-70.
116. Lack of an intronic Spl binding-site polymorphism at the collagen type I alphal gene in healthy Korean women / K.O. Han, I.G. Moon, C.S. Hwang et al. // Bone. 1999 - Vol. 24, № 2. - P. 135-137.
117. Lack of association between estrogen receptor genotypes and bone mineral density, fracture history, or muscle strength in elderly women / C. Vandevyver, J. Vanhoof, K. Declerck et al. // J. Bone. Miner. Res. 1999 - Vol. 14, № 9. - P. 1576-1582.
118. Lack of association between vitamin D receptor genotypes and osteoporosis in Koreans / S.K. Lim, Y.S. Park, J.M. Park et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. -1995-Vol. 80, № l.-P. 3677-3681.
119. Large-scale analysis of association between LRP5 and LRP6 variants and. osteoporosis / J.B. van Meurs, T.A. Trikalinos, S.H. Ralston et al. // JAMA. -2008-Vol. 19, №299(11).-P. 1277-1290.
120. Large-scale evidence for the effect of the COLIA1 Spl polymorphism on osteoporosis outcomes: the GENOMOS study / S.H. Ralston, A.G. Uitterlinden, M.L. Brandi et al. // PLoS Med. 2006. - Vol. 3, № 4. - P. 90.
121. Large-Scale Population-Based Study Shows No Evidence of Association Between Common Polymorphism of the VDR Gene and BMD in British Women / H.M. MacDonald, F.E. McGuigan, A. Stewart et al. // J. Bone. Miner. Res. -2006.-Vol. 21, № l.-P. 151-162.
122. Levasseur, R. LRP5 mutations in osteoporosis-pseudoglioma syndrome and high-bone-mass disorders / R. Levasseur, D. Lacombe, M.C. de Vernejoul // Joint. Bone. Spine. 2005 - Vol. 72, № 3. - P. 207-214.
123. Lifetime fracture risk: an approach to hip fracture risk assessment based on bone mineral density and age / L.J. Melton 3rd, S.H. Kan, H.W. Wahner, B.L. Riggs // J. Clin. Epidemiol. 1988. - Vol. 41, № 10. - P. 985-994.
124. Linkage of human tumor necrosis factor-alpha to human osteoporosis by sib pair analysis / N. Ota, S.C. Hunt, T. Nakajima et al. // Genes. Immun. 2000. -Vol. 1, № 4. - P. 260-264.
125. Lips, P. Vitamin D deficiency and secondary hyperparathyroidism in the elderly: consequences for bone loss and fractures and therapeutic implications / P. Lips // Endocr. Rev. 2001. - № 22. - P. 477-501.
126. Logan, C.Y. The Wnt signaling pathway in development and disease / C.Y. Logan, R. Nusse // Annu. Rev. Cell. Dev. Biol. 2004. - № 20. - P. 781-810.
127. Long-term excess of endogenous calcitonin in patients with medullary thyroid carcinoma does not affect bone mineral density / C. Wuster, F. Raue, C. Meyer et al. // J. Endocrinol.- 1992-Vol. 134, № l.-P. 141-147.
128. Low levels of estradiol are associated with vertebral fractures in older men, but not women: the Rancho Bernardo Study / E. Barrett-Connor, J.E. Mueller, D.G. von Muhlen et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2000. - Vol. 85, № l.-P. 219-223.
129. LRP5 coding polymorphisms influence the variation of peak bone mass in a normal population of French-Canadian women / S. Giroux, L. Elfassihi, G. Cardinal et al. // Bone. 2007 - Vol. 40, № 5. - P. 1299-1307.
130. LRP5 gene polymorphisms predict bone mass and incident fractures in elderly Australian women / J. Bollerslev, S.G. Wilson, I.M. Dick et al. // Bone. 2005. -Vol. 36, №4.-P. 599-606.
131. LRP5, low-density-lipoprotein-receptor-related protein 5, is a determinant for bone mineral density / T. Mizuguchi, I. Furuta, Y. Watanabe et al. // J. Hum. Genet. 2004. - Vol. 49, № 2. - P. 80-86.
132. Mann, V. Meta-analysis of COL1A1 Spl polymorphism in relation to bone mineral density and osteoporotic fracture / V. Mann, S.H. Ralston // Bone. -2003. Vol. 32, № 6. - P. 711-717.
133. Manolagas, S.C. Bone marrow, cytokines, and bone remodeling. Emerging insights into the pathophysiology of osteoporosis / S.C. Manolagas, R.L. Jilka // N. Engl. J. Med. 1995. - Vol. 332, № 5. - P. 305-311.
134. Manolagos, S.C. Birth and death of bone cells: basic regulatory mechanisms and implication for the pathogenesis and treatment of osteoporosis / S.C. Manolagas // Endocrin. review. 2000. - № 21. - P. 115-137.
135. Martin TJ, Findlay DM, Moseley JM. Peptide hormones acting on bone. In: Marcus R, Feldman D, Kelsey J, eds. Osteoporosis. San Diego, CA, Academic Press, 1996:185-204.
136. Mathew, C.C. The isolation of high molecular weight eucariotic DNA / C.C. Mathew // Methods in molecular biology. Ed. Walker J.M. N.Y.; Haman press, 1984.-P. 31-34.
137. McClean, E. Do the COL1A1 and Taq 1 vitamin D receptor polymorphisms have a role in identifying individuals at risk of developing osteoporosis? / E. McClean, G.P. Archbold, H.M. Taggart // Ulster. Med. J. 2003. - Vol. 72, № 1. -P. 26-33.
138. Medical expenditures for the treatment of osteoporotic fractures in the United States in 1995: report from the National Osteoporosis Foundation / N.F. Ray, J.K. Chan, M. Thamer, L.J. Melton // J. Bone. Miner. Res. 1997. - Vol. 12, № 1. -P. 24-35.
139. Melton, L.J. 3rd, Epidemiology worldwide / L.J. Melton // Endocrinol. Metab. Clin. North. Am. -2003. Vol 32, № 1. - P. 1-13
140. Meta-analysis of molecular association studies: vitamin D receptor gene polymorphisms and BMD as a case study / A. Thakkinstian, C. D'Este, J. Eisman et al. // J. Bone. Miner. Res. 2004. - Vol. 19, № 3. - P. 419-428.
141. Mitra, S. Vitamin D receptor gene polymorphisms and bone mineral density in postmenopausal Indian women / S. Mitra, M. Desai, M.K. Ikram // Maturitas. -2006. Vol. 20, № 55(1). - P. 27-35.
142. Molecular studies of identification of genes for osteoporosis: the 2002 update / Y.Z. Liu, Y.J. Liu, R.R. Recker et al.// J. Endocrinol. 2003. - Vol. 177, № 2. -P. 147-196.
143. Monroe, D.G. Overview of estrogen action in osteoblasts: role of the ligand, the receptor, and the co-regulators / D.G. Monroe, F.J. Secreto, T.C. Spelsberg // J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. 2003. - Vol. 3, № 4. - P. 357-362;
144. Multi-factor dimensionality reduction applied to a large prospective investigation on gene-gene and gene-environment interactions / M. Manuguerra, G. Matullo, F. Veglia et al. // Carcinogenesis. 2007 - Vol. 28, № 2. - P. 414422.
145. Multifactor-dimensionality reduction reveals high-order interactions among estrogen-metabolism genes in sporadic breast cance / M.D. Ritchie, L.W. Hahn, N. Roodi et al. // Am. J. Hum. Genet. 2001 - Vol. 69, № 1. - P. 138-147.
146. No associations between genetic polymorphisms of TGF-beta, PAI-1, and COL1A1, and bone mineral density in Caucasian females / J.A. Hubacek, M. Weichetova, R. Bohuslavova et al. // Endocr. Regul. 2006. - Vol. 40, № 4. -P. 107-112.
147. No major effect of estrogen receptor gene polymorphisms on bone mineral density or bone loss in postmenopausal Danish women / Y.Z. Bagger, H.L. Jorgensen, A.M. Heegaard // Bone. 2000. - Vol. 26, № 2. - P. 111-116.
148. Non-association of estrogen receptor genotypes with bone mineral density and bone turnover in Korean pre-, peri-, and postmenopausal women / K. Han, J. Choi, I. Moon et al. // Osteoporos. Int. 1999. - Vol. 9, № 4. - P. 290-295.
149. Pacifici, R. Cytokines, estrogen, and postmenopausal osteoporosis the second decade / R. Pacifici // Endocrinology. - 1998. - Vol. 139, № 6. - P. 26592661.
150. Parfitt, A.M. Bone remodeling and bone loss: understanding the pathophysiology of osteoporosis / A.M. Parfitt // Clin. Obstet. Gynecol. 1987. -Vol. 30, №4.-P. 789-811.
151. Polymorphism in the type I collagen (COLIA1) gene and risk of fractures in postmenopausal women / M. Bernad, M.E. Martinez, M. Escalona et al. // Bone. 2002. - Vol. 30, № 1. - P. 223-228.
152. Polymorphisms in the vitamin D receptor gene and bone mass, bone turnover and osteoporotic fractures / B.L. Langdahl, C.H. Gravholt, K. Brixen, E.F. Eriksen // Eur. J. Clin. Invest. 2000. - Vol. 30, № 7. - P. 608-617.
153. Polymorphisms of the VDR, ER and COLIA1 genes and osteoporotic hip fracture in elderly postmenopausal women / J. Aerssens, J. Dequeker, J. Peeters et al. // Osteoporos. Int. 2000. - Vol. 11, № 7. - P. 583-591.
154. Pondel, M. Calcitonin and calcitonin receptors: bone and beyond / M. Pondel // Int. J. Exp. Pathol. 2000 - Vol. 81, № 6. - P. 405-422.
155. Prediction of bone mineral density from vitamin D receptor polymorphisms is uncertain in representative samples of Japanese Women / A. Morita, M. Iki, Y. Dohi et al. // Int. J. Epidemiol. 2000 - Vol. 33, № 5. - P. 979-988.
156. Prediction of incident osteoporotic fractures in elderly women using the free estradiol index / A. Devine, I.M. Dick, S.S. Dhaliwal et al. // Osteoporos. Int. -2005-Vol. 16, №2.-P. 216-221.
157. Prevalence of low femoral bone density in older U.S. adults from NHANES III / A.C. Looker, E.S. Orwoll, C.C. Johnston Jr. et al. // J. Bone. Miner. Res. -1997.-№ 12.-P. 1761-1768.
158. Prevention and management of osteoporosis: report of a WHO scientific group // WHO technical report series, Geneva, 2003. ser. 921.
159. Promoter and З'-untranslated-region haplotypes in the vitamin d receptor gene predispose to osteoporotic fracture: the rotterdam study / Y. Fang, J.B. van Meurs, A. d'Alesio et al. // Am. J. Hum. Genet. 2005. - Vol. 77, № 5. - P. 807-823.
160. PvuII and Xbal polymorphisms of the estrogen receptor gene and bone mineral density in a Bulgarian population sample / J.T. Ivanova, P.B. Doukova, M.A. Boyanov, P.R. Popivanov // Hormones (Athens). 2007 - Vol. 6, № 1. - P. 3643.
161. Racial differences in fracture risk / J.A. Baron, J. Barrett, D. Malenka et al. // Epidemiology. 1994. - Vol. 5, № 1. - P. 42-47.
162. Raisz, L.G. Pathogenesis of osteoporosis: concepts, conflicts, and prospects / L.G. Raisz // J. Clin. Invest. 2005 - Vol. 115, № 12. - P. 3318-3325.
163. Ralston, S.H. Analysis of gene expression in human bone biopsies by polymerase chain reaction: evidence for enhanced cytokine expression in postmenopausal osteoporosis / S.H. Ralston // J. Bone. Miner. Res. 1994. - Vol. 9, №6.-P. 883-890.
164. Ralston, S.H. Genetic determinants of susceptibility to osteoporosis / S.H. Ralston // Curr. Opin. Pharmacol. 2003. - Vol. 3, № 3. - P. 286-290.
165. Ralston, S.H. The genetics of osteoporosis / S.H. Ralston // Bone. 1999. -Vol. 25, № l.-P. 85-86.
166. Reduced bone density and osteoporosis associated with a polymorphic Spl binding site in the collagen type I a 1 gene / S.F. Grant, D.M. Reid, G. Blake et al. // Nature genetics. 1996. - Vol. 14 - P. 203-205
167. Reginster, J.Y. Calcitonin / J.Y. Reginster // Rev. Med. Liege. 1996 - Vol. 51,№ l.-P. 116-119.
168. Relation of alleles of the collagen type Ialphal gene to bone density and the risk of osteoporotic fractures in postmenopausal women / A.G. Uitterlinden, H. Burger, Q. Huang et al. //N. Engl. J. Med. 1998. - Vol. 338, № 15. - P. 10161021.
169. Relation of vitamin D receptor Fokl start codon polymorphism to bone mineral density and occurrence of osteoporosis in postmenopausal women in Taiwan / Y. Chen , W.C. Chen , C.D. Hsu et al. // Acta Obstet. Gynecol. Scand. 2002. -Vol 81, №2.-P. 93-98.
170. Risk of wrist fracture in women is heritable and is influenced by genes that are largely independent of those influencing BMD / T. Andrew, L. Antioniades, K.J. Scurrah et al. // J. Bone. Miner. Res. 2005. - Vol. 20, № 1. - P. 67-74.
171. Savage, V.M. A general multi-trait-based framework for studying the effects of biodiversity on ecosystem functioning / V.M. Savage, C.T. Webb, J. Norberg et al. // J. Theor. Biol. 2007 - Vol. 21, № 247(2). - P. 213-229.
172. Serum parathyroid hormone predicts time to fall independent of vitamin D status in a frail elderly population / P.N. Sambrook, J.S. Chen, L.M. March et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2004. - № 89. - P. 1572-1576.
173. Structural and cellular changes during bone growth in healthy children / A.M. Parfitt, R. Travers, F. Rauch, F.H. Glorieux // Bone. 2000. - Vol. 27, № 4. - P. 487-494.
174. Studies of bone density, quantitative ultrasound, and vertebral fractures in relation to collagen type I alpha 1 alleles in elderly women / R.U. Ashford, M. Luchetti, E.V. McCloskey et al. // Calcif. Tissue. Int. 2001. - Vol. 68, № 6. -P. 348-351.
175. Studies on the frequencies of vitamin D receptor gene polymorphism in postmenopausal women of Han and Kazak nationality in China / H. Zhang, G. Tao, Q. Wu et al. // J. Bone. Miner. Metab. 2001 - Vol. 19, № 5. - P. 321323.
176. Susceptibility for postmenopausal osteoporosis: interaction between genetic, hormonal and lifestyle factors / P. Mezquita-Raya, M. Munoz-Torres, G. Alonso et al. // Calcif. Tissue. Int. 2004. - Vol. 75, № 5. - P. 373-379.
177. Teitelbaum, S.L. Bone resorption by osteoclasts / S.L. Teitelbaum // Science. — 2000-Vol. 1,№ 289(5484). -P. 1504-1508.
178. Thakkinstian, A. Haplotype analysis of VDR gene polymorphism: a metaanalysis / A. Thakkinstian, C. D'Este, J. Attia // Osteoporos. Int. 2004. - Vol. 15, №9.-P. 729-734.
179. The -1997 G/T polymorphism in the COLIA1 upstream regulatory region is associated with hip bone mineral density (BMD) in Chinese nuclear families / Y.Y. Zhang, S.F. Lei, X.Y. Mo et al. // Calcif. Tissue. Int. 2005. - Vol. 76, № 2.-P. 107-112.
180. The apparent incidence of hip fracture in Europe: a study ofnational register sources. MEDOS Study Group / O. Johnell, B. Gullberg, E. Allander, J.A. Kanis // Osteoporos. Int. 1992. - № 2. - P. 298-302.
181. The association between common vitamin D receptor gene variations and osteoporosis: a participant-level meta-analysis / A.G. Uitterlinden, S.H. Ralston,
182. M.L. Brandi et al. // Ann. Intern. Med. 2006. - Vol. 15, № 145(4). - P. 255264.
183. The association of bone mineral density with estrogen receptor gene polymorphisms / G.A. Greendale, J. Chu, R. Ferrell et al. // Am. J. Med. 2006 -Vol. 119, №9. -P. S79-86.
184. The association of endogenous hormone concentrations and bone mineral density measures in pre- and perimenopausal women of four ethnic groups: SWAN / M.R. Sowers, J.S. Finkelstein, B. Ettinger et al. // Osteoporos. Int. -2003.-Vol. 14, № l.-P. 44-52.
185. The Bsml vitamin D receptor gene polymorphism in Israeli populations and in perimenopausal and osteoporotic Ashkenazi women / R.D. Pollak, A. Blumenfeld, I. Bejarano-Achache et al. // Am. J. Nephrol. 2001 - Vol. 21, № 3.-P. 185-188.
186. The Bsml vitamin D receptor restriction fragment length polymorphism (bb) influences the effect of calcium intake on bone mineral density / D.P. Kiel, R.H. Myers, L.A. Cupples et al. // J. Bone. Miner. Res. 1997 - Vol. 12, № 7. - p. 1049-1057.
187. The caudal-related homeodomain protein Cdx-2 regulates vitamin D receptor gene expression in the small intestine / H. Yamamoto, K. Miyamoto, B. Li et al. // J. Bone. Miner. Res. 1999. - Vol. 14, № 2. - P. 240-247.
188. The influence of Lys3Asn polymorphism in the osteoprotegerin gene on bone mineral density in Chinese postmenopausal women / H.Y. Zhao, J.M. Liu, G. Ning et al. // Osteoporos. Int. 2005. - Vol. 16, № 12. - P. 1519-1524.
189. The polymorphism in the caudal-related homeodomain protein Cdx-2 binding element in the human vitamin D receptor gene / H. Arai, K.I. Miyamoto, M. Yoshida et al. //J. Bone. Miner. Res. -2001. Vol. 16. -№ 7. - P. 1256-1264.
190. The relationship between COLIA1 polymorphisms (Sp 1) and COLI A2 polymorphisms (Eco R1 and Puv II) with bone mineral density in Chinese men and women / E.M. Lau, D.T. Choy, M. Li et al. // Calcif. Tissue. Int. 2004 -Vol. 75, №2.-P. 133-137.
191. The variable incidence of hip fracture in southern Europe: the MEDOS Study / I. Elffors, E. Allander, J.A. Kanis et al. // Osteoporos. Int. 1994. - Vol. 4, № 5.-P. 253-263.
192. TNF-alpha and pathologic bone resorption / B.F. Boyce, P. Li, Z. Yao et al. // Keio. J. Med. 2005. - Vol. 54, № 3. - P. 127-131.
193. Transforming growth factor-betal gene polymorphism, bone turnover, and bone mass in Italian postmenopausal women / F. Bertoldo, L. D'Agruma, F. Furlan et al. // J. Bone. Miner. Res. 2000. - Vol. 15, № 4. - P. 634-639.
194. Tsukamoto, K. A polymorphic CA repeat sequence at the human calcitonin locus / K. Tsukamoto, M.Emi. // J. Hum. Genet. 1998. - Vol. 43, № 2. - P. 146147.
195. Turner, R.T. Skeletal effects of estrogen / R.T. Turner, B.L. Riggs, T.C. Spelsberg // Endocr. Rev. 1994 - Vol. 15, № 3. - P. 275-300.
196. Two new single-nucleotide polymorphisms in the COL1A1 upstream regulatory region and their relationship to bone mineral density / N. Garcia-Giralt, X. Nogues, A. Enjuanes et al. // J. Bone. Miner. Res. 2002. - Vol. 17, № 3. -P. 384-393.
197. Vitamin D and estrogen receptor allelic variants in Italian postmenopausal women: evidence of multiple gene contribution to bone mineral density / L. Gennari, L. Becherini, L. Masi et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1998. -Vol. 83, №3.-P. 939-944.
198. Vitamin D binding protein gene in male osteoporosis: association of plasma DBP and bone mineral density with (TAAA)(n)-Alu polymorphism in DBP / S.S. Papiha, L.C. Allcroft, R.M. Kanan et al. // Calcif. Tissue. Int. 1999 - Vol. 65, № 4. - P. 262-266.
199. Vitamin D receptor alleles and rates of bone loss: influences of years since menopause and calcium intake / E.A. Krall, P. Parry, J.B. Lichter, B. Dawson-Hughes // J. Bone. Miner. Res. 1995. - Vol. 10, № 6. - P. 978-984.
200. Vitamin D receptor alleles, bone mineral density and turnover in postmenopausal osteoporotic and healthy women / B.S. Duman, R. Tanakol, N. Erensoy et al. // Med. Princ. Pract. 2004 - Vol. 13, № 5. - P. 260-266.
201. Vitamin D receptor Fokl polymorphisms affect calcium absorption, kinetics, and bone mineralization rates during puberty / S.A. Abrams, I.J. Griffin, K.M. Hawthorne et al. // J. Bone. Miner. Res. 2005 - Vol. 20, № 6. - P. 945-953.
202. Vitamin D receptor gene BsmI and TaqI polymorphisms and fracture risk: a meta-analysis / Y. Fang, F. Rivadeneira, J.B. van Meurs et al. // Bone. 2006. — Vol. 39, №4.-P. 938-945.
203. Vitamin D receptor gene Fokl polymorphism predicts calcium absorption and bone mineral density in children / S.K. Ames, K.J. Ellis, S.K. Gunn et al. // J. Bone. Miner. Res. 1999 - Vol. 14, № 5. - P. 740-746.
204. Vitamin D receptor gene polymorphisms and the risk of fractures in older women. For the Study of Osteoporotic Fractures Research Group / K.E. Ensrud, K. Stone, J.A. Cauley et al. // J. Bone. Miner. Res. 1999. - №.14 - P. 16371645.
205. Vitamin D receptor gene polymorphisms are associated with the risk of fractures in postmenopausal women, independently of bone mineral density / P. Garnero, F. Munoz, O. Borel et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2005. - Vol. 90, №8.-P. 4829-4835.
206. Vitamin D receptor gene polymorphisms are not related to bone turnover, rate of bone loss, and bone mass in postmenopausal women: the OFELY Study / P. Garnero, O. Borel, E. Sornay-Rendu et al. // J. Bone. Miner. Res. 1996. - Vol. 11, №6. -P. 827-834.
207. Vitamin D receptor genotypes influence the success of calcitriol therapy for recurrent vertebral fracture in osteoporosis / N.A. Morrison, P.M. George, T. Vaughan et al. // Pharmacogenet. Genomics. 2005. - Vol. 15, № 2. - P. 127135.
208. Vitamin D receptor polymorphisms and susceptibility to tuberculosis in West Africa: a case-control and family study / L. Bornman, S.J. Campbell, K. Fielding et al. // J. Infect. Dis. 2004 - Vol. 1,№ 190(9).-P. 631-641.
209. Vitamin D-binding protein gene microsatellite polymorphism influences BMD and risk of fractures in men / Z.H. Al-oanzi, S.P. Tuck, S.S. Mastana et al. // Osteoporos. Int. 2007 - Vol. 24.
210. Vitamin-D-receptor-gene polymorphisms and change in lumbar-spine bone mineral density / S. Ferrari, R. Rizzoli, T. Chevalley et al. // Lancet. 1995 -Vol. 18, № 345(8947). - P. 423-424.
211. Weitzmann, M.N. Estrogen deficiency and bone loss: an inflammatory tale / M.N. Weitzmann, R.Pacifici / J. Clin. Invest. 2006. - Vol. 116, № 5. - P. 11861194.
212. White, P. The multifunctional properties and characteristics of vitamin D-binding protein / P. White, N. Cooke // Trends. Endocrinol. Metab. 2000. - Vol. 11, №8.-P. 320-327.
213. Wille, A. Sum statistics for the joint detection of multiple disease loci in case-control association studies with SNP markers / A. Wille, J. Hoh, J. Ott et al. // Genet. Epidemiol. 2003 - Vol. 25, № 4. - P. 350-359.
214. Williams, F.M. Recent advances in the genetics of osteoporosis / F.M. Williams, T.D. Spector // J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. 2006. - Vol. 6, № 1.-P. 27-35.
215. Assessment of fracture risk and its application to screening for postmenopausal osteoporosis // WHO technical report, Geneva, 1994. ser. 843 -p. 129.
216. Guidelines for preclinical evaluation and clinical trials in osteoporosis // WHO technical report, Geneva, 1998.
217. Zajickova, К. Vitamin D receptor polymorphisms, bone ultrasound and mineral density in post-menopausal women / K. Zajickova, I. Zofkova, M.Hill et al. // Aging. Clin. Exp. Res. 2005 - Vol. 17, № 2. - P. 121-124.
218. Zhang, Z.L. Association of polymorphisms in low-density lipoprotein receptor-related protein 5 gene with bone mineral density in postmenopausal Chinese women / Z.L. Zhang, Y.J. Qin , J.W. He // Acta Pharmacol. Sin. 2005. -Vol. 26, №9.-P. 1111-1116.
219. Zmuda, J.M. The search for human osteoporosis genes / J.M. Zmuda, Y.T. Sheu, S.P. Moffett // J. Musculoskelet. Neuronal. Interact. 2006. - Vol. 6, № 1. -P. 3-15.
220. Zofkova, I. The estrogen receptor alpha gene determines serum androstenedione levels in postmenopausal women /1. Zofkova, K. Zajickova, M. Hill // Steroids. 2002 - Vol. 67, № 10. - P. 815-819.
221. Zofkova, I. The pathophysiological implications of circulating androgens on bone mineral density in a normal female population / I. Zofkova, R. Bahbouh, M. Hill // Steroids. 2000 - Vol. 65, № 12. - P. 857-861.
-
Селезнева, Лиана Ильдусовна
-
кандидата медицинских наук
-
Уфа, 2008
-
ВАК 03.00.04
- Влияние антиоксидантного витаминного препарата на нарушения обмена костной ткани при хроническом химическом воздействии малой интенсивности в эксперименте
- Изменения метаболизма костной ткани у работниц химического производства и экспериментальное обоснование их коррекции
- Биохимические механизмы нарушения метаболизма костной ткани под действием низкомолекулярных хлорорганических соединений
- Исследование генетических факторов развития постменопаузального остеопороза в Волго-Уральском регионе
- Возрастные изменения минеральной плотности костной ткани у женщин
