Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Микробиологические и экологические аспекты переработки вторичного лигноцеллюлозного сырья

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Микробиологические и экологические аспекты переработки вторичного лигноцеллюлозного сырья"

л

г

На правах рукописи

□03058354

Беловежец Людмила Александровна

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ И ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕРАБОТКИ ВТОРИЧНОГО ЛИГНОЦЕЛЛЮЛОЗНОГО СЫРЬЯ

03 00 16-экология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Иркутск - 2007

003058354

Работа выполнена в Иркутском институте химии им А Е. Фаворского СО РАН

Научный руководитель:

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник Волчатова Ирина Владимировна

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Стом Дэвард Иосифович доктор биологических наук, профессор

Ведущая организация:

Илли Иван Экидиусович

Сибирский институт физиологии и биохимии растений СО РАН

Защита состоится « 23 » мая 2007 г в 13 час на заседании диссертационного совета Д 212.074.07 при ГОУ ВПО «Иркутский государственный университет» по адресу г Иркутск, уп Сухэ-Батора, 5, Байкальский музей им проф ММ Кожова (ауд 219)

Отзыв просим направлять ученому секретарю диссертационного совета по адресу 664003, Иркутск, ул Сухэ-Батора, 5, биолого-почвенный факультет ИГУ, e-mail decanat@bio isti ru

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Иркутского государственного университета

Автореферат разослан «¿^ » Q^yijJiM^ 2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета, к б н

Е С Купчинская

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность проблемы. Россия является одной из ведущих стран мира по объему заготавливаемой древесины При существующих способах переработки древесного сырья в целом по России полезно используется около половины, а в сибирском регионе -лишь третья часть биомассы дерева Объем отходов в стране чрезвычайно велик Например, на полигонах гидролизных заводов только Иркутской области находится свыше 2 млн т ГЛ Несмотря на пригодность ГЛ для получения полезных продуктов, он вывозится па свалки, занимая значительные площади, и даже приводит к пожароопасным ситуациям, тк способен самовозгораться Вымываемые атмосферными осадками кислые агенты мигрируют в почву, а далее - в грунтовые воды, создавая угрозу обширного загрязнения прилегающей к предприятиям территории Необходимость утилизации отходов лесоперерабатывающей промышленности является одной из важнейших экологических проблем

В литературе имеется значительное количество работ, посвященных биоконверсии лигноцеллюлозных субстратов с целью создания средозащитных технологий их утилизации, однако экологические аспекты происходящих при этом процессов практически не освещены Наиболее оправданным способом утилизации древесных отходов с этой точки зрения является использование их в качестве удобрения

Ранее в лаборатории природных синтонов и лигандов ИрИХ СО РАН был разработан способ ускоренного компостирования ГЛ с минеральными добавками при активном участии специально составленной непатогенной микробной ассоциации, участвующей в биотрансформации и гумификации исходного субстрата Показана его эффективность для повышения урожайности сельскохозяйственных растений В то же время остались не решенными вопросы, касающиеся возможности управления процессом компостирования, вклада компонентов компоста и микроорганизмов закваски в общий эффект удобрения, оценки перспективы расширения сферы исходных субстратов

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы - изучение микробиологических и биохимических процессов, происходящих при компостировании древесных отходов (гидролизного лигнина и древесных опилок), и исследование биологической активности готового продукта и его компонентов

Для достижения цели были поставлены следующие задачи

- исследовать изменения микробиологического состава созревающего компоста на основе ГЛ и найти достоверные методы контроля его готовности,

- выявить взаимосвязь происходящих в созревающем компосте микробиологических и биохимических процессов с агрохимическими показателями удобрения,

- изучить действие компоста, полученного в результате биоконверсии ГЛ, на урожай сельскохозяйственных культур,

- выявить действующее начало удобрения на основе ГЛ, оценить влияние различных его компонентов на микроорганизмы и ферменты почвы, а также на рост и развитие сельскохозяйственных культур,

- определить ферментативную активность грибов, выделенных из ГЛ, и их потенциал для биодеградации ГЛ,

- провести скрининг микроорганизмов, обладающих высокой активностью при разложении опилок,

- изучить фитогормоны, образуемые грибами - агентами компостирования, определить их физиологическую активность по отношению к сельскохозяйственным растениям

Научная новизна. Исследована микробная сукцессия, принимающая участие в компостировании гидролизного лигнина Впервые для энзимоиндикации зрелости компоста применено определение активности оксидоредуктаз Выделены новые перспективные культуры, отличающиеся высокой скоростью утилизации соединений, моделирующих фрагменты и связи лигнина, и Мп-пероксидазной активностью, улучшающие гумификацию ГЛ Проведен скрининг дереворазрушающих микроорганизмов и создана и ассоциация, способная компостировать древесные опилки Выявлен вклад отдельны компонентов компоста и микроорганизмов закваски в биологическую активность готово го продукта Впервые исследован фитогормональный потенциал дереворазрушающи грибов - агентов компостирования

Практическая значимость работы. Изучены экологические аспекты биотрансфор мации ГЛ в удобрение и применения его в сельскохозяйственной практике Разработа метод энзимоиндикации зрелости лигнокомпостов В полевых испытаниях показана эф фективность лигнокомпоста для повышения урожайности зерновых культур и картофеля

оставлена ассоциация дереворазрушающих микроорганизмов для компостирования пилок Среди исследованных грибов выделены продуценты фитогормонов растений, оказано действие их культуральных фильтратов на рост и развитие сельскохозяйствен-ых растений

Апробация работы. Работа докладывалась и обсуждалась на региональных и меж-ународных конференциях «Проблемы экологии» (Иркутск, 1999), Российской научно-рактической конференции «Оценка современного состояния микробиологических ис-ледований в Восточно-Сибирском регионе» (Иркутск, 2002), межрегиональной научно-фактической конференции «Биология микроорганизмов и их научно-практическое ис-ользование» (Иркутск, 2004), Международной школе молодых ученых и специалистов «Перспективные технологии для современного сельскохозяйственного производства» Курск, 2005), Международной научной конференции «Современное состояние и пер-пективы развития микробиологии и биотехнологии» (Минск - Раков, 2006)

Работа выполнена в соответствии с планом НИР Иркутского института химии им Е Фаворского СО РАН по теме «Развитие химии и глубокой переработки древесины олучение новых биологически активных и технически ценных продуктов для медици-1ы, сельского хозяйства и критических технологий» (№ государственной регистрации 120 0 46380) и при финансовой поддержке РФФИ (грант № 05-04-97-269)

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 20 печатных работ, в том исле 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обора литературы, описания объектов и методов исследования, результатов и их обсужде-ия, выводов и списка цитируемой литературы Работа изложена на 151 страницах, со-ержит 25 рисунков и 29 таблиц Список литературы включает 218 источников, из них 00 работ зарубежных авторов

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Обобщены литературные данные о существующих способах переработки древесных тходов Показаны перспективы перевода этих отходов в удобрение путем их компости-

рования Проанализирована литература, описывающая процессы, происходящие при компостировании, участвующие при этом микроорганизмы, способы оценки зрелости готового продукта

ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Исходным материалом для приготовления удобрения служил ГЛ, взятый сразу после стадии гидролиза древесины (Зиминский гидролизный завод) Состав ГЛ (%) целлюлоза - 10 1, лигнин - 62 1, зола - 5 4, влажность - 75, рЫвод 2 8, pHKci 2 55 При компостировании на 3 т ГЛ вносили 36 кг извести, 27 кг аммофоса, 21 кг калия хлористого, 75 кг сульфата аммония и 50 кг закваски (Волчатова, 2000)

В состав закваски входили Trichosparon cutaneum (beigeln) D-46, T cutaneum 5, Strep-tomyces asterosporns, предоставленные чл -корр. HAH Беларуси Э И Коломиец (институт микробиологии НАН Беларуси, г Минск), Pemcillum citreo-viride, Cephalosporium (Acre-momum) sp, Phanerochaete chrysosporium Burds 1 MR-1, предоставленные дбн Тен Хак Муном (институт водных и экологических проблем ДВО РАН, г Хабаровск) Культуры выращивали на жидких средах в течение 5 суток (Г cutaneum - на среде для дрожжепо-добных грибов (Коломиец, 1990), S asterosporus - на среде для лигнинолитических акти-номицетов (McCarthy, 1984), Р chrysosporium, Р citreo-viride, Cephalosporium sp - на среде Кирка для грибов (Kirk, 1978))

Численность микроорганизмов и активность ферментов определяли по стандартным методикам (Егоров, 1995, Хазиев, 1990) Фитотоксичность созревающего компоста определяли по прорастанию семян пшеницы Полевые опыты осуществляли в 1999-2001 гг на светло-серых лесных почвах учебно-производственного участка Иркутской государственной сельскохозяйственной академии с ячменем Неван, пшеницей Ангара-86, кукурузой Коллективный 100 СВ, картофелем Невский

Выделение пионерных микроорганизмов проводили из ГЛ (контрольный опыт по компостированию) В качестве модельных соединений лигнина использовали ванилин, пирокатехин, ванилиновый спирт, гваяцилпропанол-1, вератровый спирт, сиреневую кислоту Состав метаболитов анализировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на хроматографе Милихром-1 (Россия) на колонке, заполненной сорбен-

том Сепарон Си В качестве элюента использовали 40-процентный раствор метанола в О 01 М КН2РО4, подкисленном Н3РО4 до рН 3 9 Детектирование осуществляли при X 280 нм

Рис 1 Схема фракционирования компоста

Для фракционирования использовали готовый компост (3 месяца компостирования) Фракционирование проводили по схеме (рис 1) Вегетационные опыты с выделенными

фракциями и культуральиыми фильтратами грибов проводили на семенах пшеницы, ячменя, кукурузы и гороха Результаты всех опытов обрабатывали дисперсионным методом анализа (Доспехов, 1985)

Скрининг проводили среди дереворазрушающих грибов микробиологической коллекции лаборатории природных синтонов и лигандов ИрИХ СО РАН Компостирование свежих опилок осуществляли в лабораторных условиях Состав опилок (%) целлюлоза -47 б, лигнин - 31 9, влажность - 10 9, рНВ0Д 5 6, pHKci 5 9 Для компостирования использовали грибы Trametes versicolor (L Fr ) Pilat, предоставленный Д И Стомом (НИИ биологии при ИГУ, г Иркутск), Phanerochaeie chrysosporium Burds АТСС-24725 (ВНПО Гидролизпром, г Санкт-Петербург), Sporotrichum pulverulentum (конидиальная стадия Р chrysosporium) Novobr 1766 и 1767 (ВКМ, г Пущино), Cephalosporium sp и Р chrysosporium 1 MR-1 (Институт водных и экологических проблем ДВО РАН, г Хабаровск)

Компостирование проводили в течение 4 месяцев в термостатируемых условиях (26 °С) В компосте определяли убыль лигнина и целлюлозы компостной массы, индекс ксилолиза, фитотоксичность, соотношение C/N готового компоста

Изучение гиббереллиноподобной активности (ГПА) проводили по удлинению гипо-котилей салата и по эндоспермальному тесту на беззародышевых половинках семян ячменя Для стимуляции образования ауксинов культурами, используемыми для компостирования, как ГЛ, так и опилок, в соответствующую питательную среду добавляли D,L-триптофан в концентрации 200 мг/л Количество ауксинов определяли по методу Саль-ковского (Чумаков, 1992), а их активность - по подавлению прорастания семян горчицы сарепской (Методы определения, 1978) и по интенсивности укоренения черенков фасоли (Возняковская, 1969)

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 1. Деградационная сукцессия в ходе компостирования гидролизного лигнина и анализ конечного продукта

Анализ динамики температуры в полупромышленном эксперименте показал, что подъемы температуры наблюдались в первую неделю компостирования и после переме-

шивания (через 3, 7, 10 недель после начала компостирования) Отсутствие температурной реакции компоста на перемешивание (13 нед) указывало на окончание ферментации Микробиологический анализ компоста выявил большое количество микроорганизмов практически всех исследованных физиологических групп уже в начале компостирования Лишь увеличение численности нитрификаторов происходило постепенно При том сначала размножались бактерии, окисляющие аммиак, и только к 6 нед появлялись бактерии, окисляющие нитриты Максимумы количества аэробных целлюлозолитиков и ермофилов коррелировали с максимумами температуры (рис 2)

Общее количество микроорганизмов стабилизировалось к 3 мес компостирования, ставаясь на достаточно высоком уровне, то есть к данному периоду создалось устойчивое микробное сообщество, что может служить показателем готовности компоста

А Температура — Аэр целл

■■и......Термофилы

4 6 8 9 10 11 _Время, нед_

А Б

Рис 2 Динамика количества термофилов, аэробных целлюлозолитиков (А) и изменение активности гидролаз (Б) в процессе компостирования гидролизного лигнина

Исследование активности ферментов выявило высокую активность оксидоредуктаз же на второй неделе ферментации (рис 3) В течение всего срока эксперимента уровень ксидазной активности коррелировал с изменением температурного режима компости-ования По мере созревания компоста активность ферментов этого класса снижалась почти до нуля

Иначе изменялась активность гидролаз, в частности, инвертазы Ее активность, воз-астала после 6 нед компостирования и стабилизировалась к 13 нед Максимумы целлю-

лазной активности совпадали с максимумами температуры и количеством аэробных цел-люлозолитиков (рис 2)

Исследование фитотоксичности созревающего компоста показало, что максимальная токсичность совпадала по времени с первыми максимумами активности пероксидазы и полифенолоксидазы через 2 нед компостирования Отсутствие фитотоксичности отмечено к 13 нед компостирования Таким образом, о степени готовности удобрения, кроме отсутствия фитотоксичности, свидетельствовало снижение активности оксидоредуктаз (наиболее целесообразно определение активности полифенолоксидаз) и стабилизация активности инвертазы

О 2 3 4 5 6 7 8 9 1011 1213 _Время, нед

03 3 70

02 с и 60

>ч ..50

0 1 л" о о 40

0 О 3 ¿30

-0 1 ш < 8-ю 1 о

* температура -О—полифенолоксидаза

0 2 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 _Впемя. нед_,

А Б

Рис 3 Изменение активности оксидоредуктаз в процессе компостирования гидролизного лигнина А - пероксидазы, полифенолоксидазы, Б - каталазы

Агрохимический анализ созревающего компоста выявил увеличение количества гу-миновых кислот, подвижных форм азота и фосфора в течение всего срока компостирования (табл 1)

Ранее было показано, что компост малого срока компостирования по своим удобрительным свойствам мало отличается от ГЛ, поэтому в рамках данной работы полевые опыты проводили с образцами со сроком компостирования свыше двух месяцев

В ходе испытаний 10-13-недельного компоста в дозе 10 т/га выявлено повышение урожайности пшеницы и ячменя в среднем на 130 % и 67 % Большой активностью обладал также годичный компост Исходный ГЛ, как сам по себе, так и с минеральными до-

бавками в дозе, соответствующей таковой компоста, не оказывал достоверного влияния на урожай исследованных культур

Анализ данных по урожайности зеленой массы кукурузы показал, что внесение лиг-нинового компоста в дозе 60 и 30 т/га дает прибавку 215 и 135 % соответственно, с улучшением качественных показателей продукции Перегной в тех же дозах и сложное минеральное удобрение обеспечивали меньшее повышение урожайности Содержание тяжелых металлов во всех вариантах не превышало допустимой концентрации

Таблица 1

Агрохимические показатели гидролизного лигнина и компоста на его основе

Срок компостирования Гуминовые кислоты, % Подвижные формы, мг/100 г

N-N03 N-N114 Р205

ГЛ 62 09 12 40

ГЛ + минеральные добавки 62 25 1020 700

Компост 4 нед 78 148 750 1000

Компост 8 нед 9 1 208 920 1150

Компост 12 нед 10 2 293 980 1200

Таким образом, исследования показали, что развитие деградационной сукцессии в процессе компостирования гидролизного лигнина сопровождается появлением микроорганизмов различных физиологических групп и отличается от контроля более ранним появлением актиномицетов На основании динамики ферментативной активности Микробного сообщества разработан метод энзимоиндикации зрелости компоста с учетом специфики субстрата Полевыми опытами выявлено, что полученный компост достоверно увеличивает урожайность сельскохозяйственных культур

2. Биологическая активность компонентов лигнокомпоста

Фракционирование компоста (рис 1) позволило провести сравнительный анализ биологической активности отдельных групп соединений, входящих в состав компоста

Предпосевная обработка семян пшеницы водными растворами фракций показала неоднозначные результаты. Водные фракции (6, 7), содержащие углеводы и аминокислоты, фенолы (фракция 1) и лигногуминовые вещества положительно влияли на ее рост, тогда как воздействие фенолов (фракция 2) и фенолокислот (фракция 3) приводило к снижению массы растений. Проростки ячменя оказались наиболее отзывчивыми на обработку лигпогуминовыми веществами и фенолами (фракция I). Основной эффект проявлялся в увеличении массы как ростка, так и корня. Все исследуемые фракции ингиби-ровали рост стебля и корневой системы кукурузы.

Внесение твердого остатка в почву (соотношение почва:(5) - 3:1) увеличивало среднюю длину и массу надземной части всех используемых сельскохозяйственных культур (рис. 5), Максимальный прирост наблюдался у проростков пшеницы (превышение длины на 60 %, массы - на 66 %). Развитие корневой системы было наиболее показательно для кукурузы, где средняя длина корня сравнима с контролем, а масса превышала его на 123 % за счет развития боковых корней и утолщения центральных.

При однократной обработке почвы экстрактами из компоста наблюдалось увеличение в почве количества микроорганизмов. Прирост количества бактерий был невысокий, но стабильный для всех фракций. Максимальный прирост бактерий отмечен при обработке почвы фенолами (фракция I). Большой отклик на обработку почвы экстрактами из компоста был выявлен в группе грибов: их количество возросло на 12-25 %. Более других веществ компоста рост грибов стимулировали фенол о кислоты. Влияние фракций на количество актиномицетов различно. Лишь лигногуминовые вещества и водная фракция 7 увеличивали их количество, тогда как в остальных случаях положительного действия не наблюдалось.

М контроль □ пшеница II ячмень Шкукуруза

Рис. 5. Влияние твердой фракции на рост растений

□схожастъ длина масса дпича ксрннэсса корня

рОСТКОВ рОСГТЧОТ!

Таким образом, среди всех выделенных фракций наибольшими удобрительными способностями обладали лигногуминовые вещества, фенолы (фракция 1) и твердый остаток Положительное действие лигногуминовых веществ и фенолов (фракция 1) связано со стимуляцией биохимических процессов в семени растения, а эффект твердого остатка проявлялся за счет структурирования почвы и повышения ее влагоемкости

Нами было исследовано физиологическое действие микроорганизмов закваски на рост и развитие растений, количество микроорганизмов почвы и ее ферментативную активность

Суммарная ГПА была обнаружена у всех грибов, за исключением дрожжеподобных Ауксиновая активность микроорганизмов оказалась индуцибельной при выращивании микроорганизмов на средах без триптофана фитогормоны этого класса обнаружены не были Добавление аминокислоты к среде приводило к стимуляции синтеза ауксинов у четырех культур из пяти Во всех экстрактах идентифицирована Р-З-индолилуксусная кислота, а у дрожжеподобных грибов еще и у-(3-индолил)-масляная кислота Высокая физиологическая активность выделяемых ауксинов подтверждалась биотестами

Обработка культуральными фильтратами семян ячменя привела к достоверному увеличению средней длины корней на 12-32 %, а массы - на 28-78 % Индукция ауксинов в культуральных фильтратах не изменила общей картины Таким образом, существенного влияния ауксинов на развитие ячменя отмечено не было

Влияние обработки культуральными фильтратами семян пшеницы в основном проявлялось в увеличении массы корней (до 63 %) Внесение в питательную среду триптофана инициировало синтез ауксинов, что, в конечном счете, заметно усилило стимулирующий эффект (превышение над контролем до 80 %) Культуральные фильтраты исследуемых культур ингибировали рост стебля и корневой системы кукурузы Исключением стал кулыуральный фильтрат ТсШапеит 5, воздействие которого привело к увеличению массы корней на 28 % за счет развития боковых корней

Влияние культуральных фильтратов на количество микроорганизмов почвы имело четко выраженную зависимость от типа воздействующего организма Так, культурапь-ный фильтрат грибов достоверно увеличивал численность почвенных бактерий и акти-номицетов Действие же актиномицета 5 asterosporus проявлялось исключительно в уве-

личении численности грибов. Культуральные фильтраты дрожжеподобных грибов положительно влияли на количество всех трех основных групп микроорганизмов

Таким образом, культуральные фильтраты исследованных лигнинолитических микроорганизмов активизируют рост почвенных бактерий и грибов, стимулируют развитие ячменя и пшеницы благодаря присутствию биологически активных веществ, интенсифицирующих обменные процессы в семенах растений Основной эффект направлен на увеличение количества боковых корней

3. Перспективы использовании пионерных штаммов грибов — колонизаторов древесных отходов для компостирования гидролизного лигнина

В ходе изучения деградационной сукцессии, протекающей при компостировании ГЛ, из контрольного бурта нами было выделено 46 изолятов пионерных микроорганизмов Проведен их первичный скрининг по способности расти на среде с ГЛ в виде единственного источника углерода По скорости роста и накопления биомассы для дальнейшего исследования были отобраны 8 грибных культур, определенных как Pénicillium cyclopium Westling (2 штамма) и Trichoderma asperellum Samuels, Lieckfeit et Nirenberg (6 штаммов) Это культуры грибов - сапротрофов, в природных условиях способных колонизировать практически любой органический субстрат Несмотря на то, что обычно они питаются легкодоступными веществами субстрата, их считают способными довести процесс деструкции до конца, и, следовательно, они могут оказаться перспективными при компостировании При этом они должны иметь хорошо развитый ферментативный аппарат, включающий ферменты как целлюлазного, так и оксидоредуктазного типов

Целлюлазная активность всех выделенных штаммов характеризовалась наличием двух максимумов (на 6-9 и 14-16 сут культивирования) Особенно выделялся Р cyclopium 6, проявлявший целлюлазную активность, существенно (в 5-15 раз) превышающую активность остальных культур

Среди оксидоредуктаз была выявлена только Mn-зависимая пероксидаза По динамике Mn-пероксидазной активности все штаммы были разделены на две группы Первая группа (Т asperellum 4, Т asperellum 7, Т asperellum 10, Г asperellum 11, Р cyclopium 6, Р cyclopium 9) имела два четких максимума активности на 5-7 и 13-15 сут культивиро-

ания Первый максимум соответствовал началу фазы экспоненциального роста, а второй фазы споруляции Вторая группа (Т аярегеНит 3, Т ачрегеНит 8) характеризовалась ремя максимумами активности 8, 13-14, 18 сут Наибольшей суммарной Мп-ероксидазной активностью обладали Т ачрегеНит 8, Т ахрегеПит 10 и Т аярегеНит 11 Известно, что Мп—пероксидаза является ключевым ферментом некоторых грибов и играет при этом важную роль в разложении лигнина Для оценки перспектив использования выделенных культур в компостировании необходимо выявить их способность к деградации этого биополимера В связи с трудностями изучения разрушения грибами самого игнина исследования проводили на соединениях, моделирующих его структурные фрагменты

Все исследованные культуры включали в метаболизм соединения со свободной фе-нольной гидроксилыюй группой (ванилин, пирокатехин, ванилиновый спирт, гваяцил-пропанол-1) Максимальная скорость утилизации субстратов наблюдалась на 3-5 сут с полным их исчезновением на 8-24 сут в зависимости от штамма Сиреневая кислота проявляла резистентность к биотрансформации всеми исследованными штаммами Соединение с замещенной фенольной гидроксильной группой (вератровый спирт) подвергалось утилизации со значительно меньшей скоростью

По скорости утилизации фенольных субстратов и активности Мп-зависимой перок-сидазы были отобраны 3 наиболее перспективные культуры для компостирования лиг-ноцеллюлозных отходов (Т аярегеЦит 3, 10, 11) Эти штаммы были проверены на совместимость с микроорганизмами закваски По совокупности данных лучшей была признана культура Т азрегеПит 3

Лабораторное компостирование ГЛ, проведенное с добавлением в разработанную ранее закваску штамма Т азрегеНит 3, показало, что компост, полученный с использованием модифицированной закваски, характеризуется большим содержанием гуминовых кислот и большей убылью лигнина

Таким образом, введение в компостную закваску Т азрегеПит позволило повысить степень гумификации удобрения на основе гидролизного лигнина без изменения срока компостирования

4. Компостирование опилок: скрининг культур и их физиологическая активность

Гидролизный лигнин - специфический продукт, наличие которого обусловлено существованием в регионе гидролизно-спиртовых предприятий Более распространенными являются отходы деревообработки опилки, кора, щепа, которые также зачастую не используются

Несмотря на общее, по сути, происхождение гидролизного лигнина и опилок, проведенные нами исследования показали, что биотрансформация последних с достаточной для биотехнологии скоростью культурами, используемыми для компостирования ГЛ, не происходит

Для скрининга был взят 21 штамм высших грибов, относящихся к разным классам Основным критерием отбора была скорость роста на опилках, изменение их внешнего вида (почернение древесных остатков и изменение их текстуры) В результате были выбраны 6 культур, из которых в соответствии с совместимостью составлены варианты для испытаний

1 Т versicolor, Spulverulentum 1767, Р chrysosporium 1 MR-1, Cephalosporium sp

2 T versicolor, S pulverulentum 1766, S pulverulentum 1767, P chrysosporium 1 MR-1, Cephalosporium sp

3 T versicolor, S pulverulentum 1767, Cephalosporium sp , P chrysosporium ATCC 24725, P chrysosporium 1 MR-1

4 T versicolor, S pulverulentum 1766, S pulverulentum 1767, Cephalosporium sp, P chrysosporium ATCC 24725, P chrysosporium 1 MR-1.

Как видно из таблицы 2, в процессе компостирования происходила деструкция и лигнина, и целлюлозы Убыль обоих компонентов находилась в интервале от 18 до 31 % Компосты (за исключением варианта 4) не обладали фитотоксичностью По совокупности параметров наилучшим был признан вариант 3

Таким образом, по результатам скрининга и совокупности химических и биологических исследований выбрана композиция, способная к биотрансформации опилок и наиболее эффективно воздействующая на субстрат

Таблица 2

Влияние микробиологического состава закваски на показатели компоста

Убыль

лигнина, % целлюлозы, %

Индекс ксилолиза

ст

Фитотоксичность (% проросших семян)

20 4

27 6

0 57

22 9

86

22 4

27 8

0 55

25 5

82

25 1

31 5

0 56

17 5

86

187

27 9

0 60

23 3

56

римечание Количество проросших семян в контроле — 76 %

ВЫВОДЫ

1 Показано, что развитие деградационной сукцессии в процессе компостирования гидролизного лигнина сопровождается появлением микроорганизмов различных физиологических групп и отличается более ранним появлением актиномицетов Динамика аэробных целлюлозолитических и термофильных микроорганизмов коррелирует с изменением температуры

2 Разработан метод энзимоиндикации зрелости компоста, основными критериями которого являются снижение активности оксидоредуктаз, стабилизация активности инвертазы и снижение фитотоксичности до уровня фитотоксичности почвы

3 Доказано, что благодаря микробиологической закваске в процессе компостирования происходит направленный рост количества гуминовых кислот, подвижных форм азота и фосфора

4 Показано стимулирующее действие культуральных фильтратов исследованных лигнинолитических микроорганизмов и фракций компоста на рост и развитие ячменя и пшеницы, а также целлюлазную и лакказную активность почвы

5 Выявлен фитогормональный потенциал ассоциации микромицетов способность секретировать физиологически активные вещества гиббереллиновой и ауксиновой природы, аналогичные фитогормонам растений Для синтеза ауксинов культурам необходимо присутствие в питательной среде триптофана

6 Среди пионерных микроорганизмов-деструкторов древесных отходов отобраны штаммы Trichoderma asperellum и Pénicillium cyclopium, проявляющие высокую цел-люлазную и Mn-пероксидазную активности Введение в компостную закваску культуры Т asperellum повысило степень гумификации гидролизного лигнина без изменения срока компостирования

7 В результате проведенного скрининга дереворазрушающих грибов создана ассоциация макромицетов, способная в короткие сроки эффективно деструктировать древесные опилки с образованием полноценного компоста

8. Внедрение предлагаемого способа утилизации лигноцеллюлозных субстратов позволит ликвидировать многотоннажные отходы, что, в конечном итоге, будет способствовать рациональному использованию лесных ресурсов и повышению экологической безопасности природной среды

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Удобрение из ГЛ (компост), показавшее высокую эффективность в полевых испытаниях, может в дальнейшем стать одним из основных органо-минеральных удобрений под пропашные культуры на территориях, прилегающих к гидролизным заводам

2 Использование составленной ассоциации макромицетов, способной в короткие сроки деструктировать древесные опилки, дает возможность получить полноценный компост из отходов деревообработки

3 Наличие в культуральных фильтратах дереворазрушающих грибов биологически активных веществ, аналогичных фитогормонам, позволяет использовать их в качестве регуляторов роста растений

4 Разработанный Метод энзимоиндикации может быть рекомендован для оценки зрелости компоста из ГЛ

5 Переработка лигноцеллюлозых отходов в удобрение позволяет решить одну из наиболее острых экологических проб нем промышленных регионов, связанных с накоплением многотоннажных отходов деревоперерабатывающих и гидролизных предприятий

Список работ, опубликованных по материалам диссертации

1 Волчатова И В , Беловежец Л А , Медведева С А Микробиологическое и биохимическое (сследование лигнокомпоста в процессе созревания//Микробиология - 2002 -Т 71 - №4 -

545-549

2 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А Стимуляция развития растений куль-уральными жидкостями микроорганизмов // Владимирский земледелец - 2004 - № 3-4 - С 7

3 Беловежец Л А, Волчатова И В , Медведева С А Эффективность лигнокомпоста в зави-имости ог его агрохимических и биологических показателей при выращивании зерновых куль-ур// Агрохимия -2005 -№1 -С 38-43

4 Волчатова И В , Медведева С А , Бутырин М В , Беловежец Л А Продуктивность агро-енозов при использовании продуктов биоконверсии гидролизного лигнина // Агрохимия -005 -Ки 5 -С 55-58

5 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А Ростстимулирующая активность фрак-щй компоста на основе гидролизного лигнина // Агрохимия - 2005 - № 7 - С 29-35

6 Волчатова И В , Медведева С А, Беловежец Л А, Коломиец Э И Дрожжеподобные гри-ы — источник получения биологически активных добавок // Успехи медицинской микологии -

I 5-М Национальная академия микологии -2005 —С 185-186

7 Белопсжец Л А, Волчатова И В , Медведева С А Биологическая акгивность культураль-1ых фильтратов лигнинолитических микроорганизмов//Земледелие -2006 -№2 - С 14-16

8 Беловежец JI А, Волчатова И В , Медведева С А Микробиологическая сукцессия и ерментативная активность в процессе' компостирования гидролизного лигнина // Гез докл

конф «Проблемы экологии» Иркутск - 1999 - С 5-7

9 Волчатова И В , Медведева С А , Беловежец J1 А , Хорошева С Г Участие микроорганизмов в разложении гидрозизного лигнина//Тез докл междун конф «Микробиология и биотехнология на рубеже XXI стопетия» Минск - 2000 - С 157-158

10 Волчатова ИВ , Медведева CA , Беловежец Л А Перспективы использования микроорганизмов для ускоренного компостирования древесных отходов // Матер Рос науч -практ конф «Оценка современного состояния микробиологических исследований в ВосточноСибирском регионе» Иркутск -2002 -С 199-201

11 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А Некоторые свойства компоста на основе гидролизного лигнина // Матер конф "Экологические проблемы промышленных регионов" Екатеринбург - 2003 - С 422-423

12 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А Возможность использования гидролизного лигнина в качестве органомииерального удобрения // Сб матер науч -практ конф «Химия - XXI век новые технологии, новые продукты» Кемерово - 2003 - С 87-89

13 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А Динамика агрохимических показателей компоста на основе гидролизного лигнина // Матер междуи научи конф «Закон Российской Федерации «Об охране озера Байкал» как фактор устойчивого развития Байкальского региона» Иркутск -2003 - С 62-63

14 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А Изменение численности микроорганизмов почвы под действием экстрактов из компоста // Матер междун конф «Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии» Минск -2004 —С 357-358

15 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А Изменение микробного сообщества и ферментативной активности почвы под действием экстрактов из компостон // Матер межрегион науч-практ конф "Биология микроорганизмов и их научно-практическое использование" Иркутск -2004 — С 11-14

16 Беловежец Л А, Волчагова ИВ, Медведева С А Биологическая активность феноло-кислот, выделенных из компоста // Матер II Всерос конф «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» Барнаул -2005 - С 658-661

17 Беловежец Л А, Волчатова И В , Медведева С А Скрининг культур высших грибов для компостировапия древесных отходов // Сб докл 4-го междун конгресса по управлению отходами ВэйстТэк-2005 -Москва -2005 -С 159-160

18 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А Влияние аминокислот, продуцируемых липшнолитическими микроорганизмами, на развитие растений И Ресурсосберегающие технологии земледелия Сб докл междун школы мол ученых и специалистов «Перспективные технологии для современною сельскохозяйственного производства» Курск -2005 -С 44-46

19 Беловежец Л А , Волчатова И В , Медведева С А, Петров А Н Скрининг новых лигни-нолитических микроорганизмов // Матер междунар научи конф «Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии» Минск - Раков - 2006 - С 66-68

20 Волчатова И В , Медведева С А, Беловежец Л А Научные основы применения биотех-ологии для утилизации органических отходов природного происхождения // Матер 4 съезда бщества биотехнологов России им Ю А Овчинникова Пущино - 2006 - С 39-40

Подписано в печать18 04 07 Формат 60x90x16 Бумага писчая белая Печать RIZO Уел печ л 1 0 Тираж ЮОэкз Заказ № 31 Отпечатано в ИЗК СО РАН

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Беловежец, Людмила Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Древесина как субстрат для биотрансформации.

1.2. Направления использования гидролизного лигнина.

1.2.1. Применение гидролизного лигнина в промышленности.

1.2.2. Использование гидролизного лигнина в сельском хозяйстве.

1.3. Процессы, происходящие при компостировании, и оценка зрелости конечного продукта.

1.3.1. Абиотические параметры компостирования.

1.3.2. Микробиологические параметры компостирования.

1.4. Ферменты, участвующие в разложении древесных материалов.

1.4.1. Гидролазы.

1.4.2. Оксидоредуктазы.

1.5. Индикация степени зрелости компоста.

1.6. Компостирование лигноцеллюлозных отходов.

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 3. ДЕГРАДАЦИОННАЯ СУКЦЕССИЯ ПРИ КОМПОСТИРОВАНИИ ГИДРОЛИЗНОГО ЛИГНИНА И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОНЕЧНОГО ПРОДУКТА.

3.1 Параметры компостирования и оценка зрелости компоста.

3.2 Продуктивность агроценозов при использовании лигнокомпостов.

ГЛАВА 4. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ КОМПОНЕНТОВ ЛИГНОКОМПОСТА.

4.1. Биологическая активность химических компонентов лигнокомпоста.

4.2 Биологическая активность культуральных фильтратов микроорганизмов, используемых в закваске.

ГЛАВА 5. ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПИОНЕРНЫХ ШТАММОВ

ГРИБОВ - КОЛОНИЗАТОРОВ ДРЕВЕСНЫХ ОТХОДОВ ДЛЯ

КОМПОСТИРОВАНИЯ ГИДРОЛИЗНОГО ЛИГНИНА.

ГЛАВА 6. КОМПОСТИРОВАНИЕ ОПИЛОК: СКРИНИНГ КУЛЬТУР И ИХ

ФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Микробиологические и экологические аспекты переработки вторичного лигноцеллюлозного сырья"

Актуальность проблемы.

Россия является одной из ведущих стран по объему заготавливаемой древесины. Масса древесной зелени спелых древостоев составляет в России свыше 3 млрд. т, из которых 30,4 млн. т являются экономически доступными [1]. Только в Восточной Сибири ежегодно вырубается около 16 млн. м спелой древесины (преимущественно сосны), которая используется лесоперерабатывающей, целлюлозно-бумажной и гидролизной промышленностью или экспортируется. При существующих способах переработки древесного сырья в целом по России полезно используется около половины, а в сибирском регионе лишь третья часть биомассы дерева. Основные потери приходятся на древесную зелень (лесосечные отходы), кору (отходы деревопереработки), опилки и стружки (отходы лесопиления), гидролизный лигнин (ГЛ) (отходы гидролизного производства). Объем отходов в стране чрезвычайно велик. Например, на полигонах гидролизных заводов только Иркутской области находится свыше 2 млн. т ГЛ [2].

Необходимость утилизации отходов лесоперерабатывающей промышленности является одной из важнейших экологических проблем Сибири. К настоящему времени разработаны многие технологии переработки различных видов древесного сырья. Среди них - и весьма эффективные, базирующиеся на глубокой переработке древесных отходов. Однако их внедрение хотя и предполагает значительный экономический эффект, требует больших капитальных и эксплутационных затрат, квалифицированных кадров, сложного оборудования. Например, химическая переработка древесных отходов может утилизировать лишь 25-30% от их общего количества [3]. Большая же часть отходов размещается на свалках, которые занимают значительные площади. Это приводит к пожароопасным ситуациям, т.к. все древесные отходы способны самовозгораться. С целью снижения антропогенного прессинга на территории, окружающие лесоперерабатывающие предприятия, наиболее экологически оправданным способом утилизации древесных отходов является использование их в качестве удобрения. Однако образующиеся при биодеструкции токсичные вещества не позволяют использовать непосредственно древесные отходы. Необходима длительная их переработка, обогащение доступными для растения питательными элементами, чтобы из отхода производства они превратились в ценное органическое удобрение. Самостоятельное разложение отходов де-ревопереработки растягивается на десятилетия, поскольку лигноцеллюлозные материалы устойчивы к микробной биодеградации и требуют заселения комплексом специфических высокоактивных микроорганизмов.

В литературе имеется значительное количество работ, посвященных биоконверсии лигноцеллюлозных субстратов с целью создания средозащитных технологий их утилизации [4], однако экологические аспекты происходящих при этом процессов практически не освещены.

В ИрИХ СО РАН разработан перспективно отличающийся от предложенных ранее способ ускоренного компостирования ГЛ с минеральными добавками при активном участии специально составленной микробной ассоциации, участвующей в биотрансформации и гумификации исходного субстрата [5]. Показана его эффективность для повышения урожайности сельскохозяйственных растений. В то же время остались не решенными вопросы, касающиеся возможности управления процессом компостирования, вклада компонентов компоста и микроорганизмов закваски в общий эффект удобрения, оценки перспективы расширения сферы исходных субстратов.

Цели и задачи исследования.

Цель настоящей работы - изучение микробиологических и биохимических процессов, происходящих при компостировании древесных отходов (гидролизного лигнина и древесных опилок), и исследование биологической активности готового продукта и его компонентов.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

- исследовать изменения микробиологического состава созревающего компоста и найти достоверные методы контроля его готовности;

- выявить взаимосвязь происходящих в созревающем компосте микробиологических и биохимических процессов с агрохимическими показателями удобрения;

- изучить действие компоста, полученного в результате биоконверсии ГЛ, на урожай сельскохозяйственных культур;

- выявить действующее начало удобрения на основе ГЛ, оценить влияние различных его компонентов на микроорганизмы и ферменты почвы, а также на рост и развитие сельскохозяйственных культур;

- определить ферментативную активность грибов, выделенных из ГЛ, и их потенциал для биодеградации ГЛ по способности утилизировать модельные соединения лигнина;

- провести скрининг микроорганизмов, обладающих высокой активностью при разложении опилок;

- изучить фитогормоны, образуемые грибами - агентами компостирования, определить их физиологическую активность по отношению к сельскохозяйственным растениям.

Научная новизна работы.

Исследована микробная сукцессия, принимающая участие в компостировании гидролизного лигнина. Впервые для энзимоиндикации зрелости компоста использовано определение активности оксидоредуктаз.

Выделены новые перспективные культуры для деструкции ГЛ, отличающиеся высокой скоростью утилизации модельных соединений лигнина и Мп-пероксидазной активностью.

Проведен скрининг дереворазрушающих микроорганизмов и создана их ассоциация, способная компостировать опилки.

Выявлен вклад отдельных компонентов компоста и микроорганизмов закваски в биологическую активность готового продукта. Впервые исследован фито-гормональный потенциал дереворазрушающих грибов - агентов компостирования.

Практическая значимость работы.

Изучены экологические аспекты биотрансформации ГЛ в удобрение и применения его в сельскохозяйственной практике.

Разработан метод энзимоиндикации зрелости лигнокомпостов.

В полевых испытаниях показана эффективность лигнокомпоста для повышения урожайности зерновых культур и картофеля.

Создана ассоциация дереворазрушающих микроорганизмов, которая рекомендована для компостирования древесных опилок.

Среди дереворазрушающих грибов были выделены продуценты фитогормо-нов растений, показано действие их культуральных фильтратов на рост и развитие сельскохозяйственных растений.

Апробация работы.

Работа докладывалась и обсуждалась на региональных и международных конференциях «Оценка современного состояния микробиологических исследований в Восточно-Сибирском регионе» (Иркутск, 2002), на международной конференции «Микробиология и биотехнология XXI столетия» (Минск, 2002), на международной конференции «Закон Российской федерации «Об охране озере Байкал» как фактор устойчивого развития Байкальского региона» (Иркутск, 2003), на конференции «Экологические проблемы промышленных регионов» (Екатеринбург, 2003), на международной научно-практической конференции «Химия - XXI век: новые технологии, новые продукты» (Кемерово, 2003,2004), на международной конференции «Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии» (Минск, 2004), на межрегиональной научно-практической конференции «Биология микроорганизмов и их научно-практическое использование» (Иркутск, 2004), на II Всероссийской конференции «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (Барнаул, 2005), на 4 международном конгрессе по управлению отходами ВэйстТэк-2005 (Москва, 2005), на международной школе молодых ученых и специалистов «Перспективные технологии для современного сельскохозяйственного производства» (Курск, 2005), на III Всероссийской научной молодежной конференции «Под знаком Сигма» (Омск, 2005), на международной научной конференции «Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии» (Минск - Раков, 2006).

Работа выполнена в соответствии с планом НИР Иркутского института химии им. А. Е. Фаворского СО РАН по теме: «Развитие химии и глубокой переработки древесины: получение новых биологически активных и технически ценных продуктов для медицины, сельского хозяйства и критических технологий» (№ государственной регистрации 0120.0 46380) и при финансовой поддержке РФФИ (грант №05-04-97-269).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 20 печатных работ, в том числе 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания объектов и методов исследования, результатов и их обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы. Работа изложена на 151 страницах, содержит 25 рисунков и 29 таблиц. Список литературы включает 218 источников, из них 100 работ зарубежных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Беловежец, Людмила Александровна

ВЫВОДЫ

1. Показано, что развитие деградационной сукцессии в процессе компостирования гидролизного лигнина сопровождается появлением микроорганизмов различных физиологических групп и отличается более ранним появлением актиномицетов. Динамика аэробных целлюлозолитических и термофильных микроорганизмов коррелирует с изменением температуры.

2. Разработан метод энзимоиндикации зрелости компоста, основными критериями которого являются: снижение активности оксидоредуктаз, стабилизация активности инвертазы и снижение фитотоксичности до уровня фитотоксичности почвы.

3. Доказано, что благодаря микробиологической закваске в процессе компостирования происходит направленный рост количества гуминовых кислот, подвижных форм азота и фосфора.

4. Показано стимулирующее действие культуральных фильтратов исследованных лигнинолитических микроорганизмов и компонентов компоста на рост и развитие ячменя и пшеницы, а также целлюлазную и лакказную активность почвы.

5. Выявлен фитогормональный потенциал ассоциации макромицетов: способность секретировать физиологически активные вещества гибберели-новой и ауксиновой природы, аналогичные фитогормонам растений. Для синтеза ауксинов культурам необходимо присутствие в питательной среде триптофана.

6. Среди пионерных микроорганизмов-деструкторов древесных отходов отобраны штаммы Trichoderma asperellum и Penicillium cyclopium, проявляющие высокую целлюлазную и Mn-пероксидазную активности. Введение в компостную закваску культуры Т. asperellum повысило степень гумификации гидролизного лигнина без изменения срока компостирования.

7. В результате проведенного скрининга дереворазрушающих грибов создана ассоциация макромицетов, способная в короткие сроки эффективно деструктировать древесные опилки с образованием полноценного компоста.

8. Внедрение предлагаемого способа утилизации лигноцеллюлозных субстратов позволит ликвидировать многотоннажные отходы, что, в конечном итоге, будет способствовать рациональному использованию лесных ресурсов и повышению экологической безопасности природной среды.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Удобрение из ГЛ (компост), показавшее высокую эффективность в полевых испытаниях, может в дальнейшем стать одним из основных органо-минеральных удобрений под пропашные культуры на территориях, прилегающих к гидролизным заводам.

2. Использование составленной ассоциации макромицетов, способной в короткие сроки деструктировать древесные опилки, дает возможность получить полноценный компост из отходов деревообработки.

3. Наличие в культуральных фильтратах дереворазрушающих грибов биологически активных веществ, аналогичных фитогормонам, позволяет использовать их в качестве регуляторов роста растений.

4. Разработанный метод энзимоиндикации может быть рекомендован для оценки зрелости компоста из ГЛ.

5. Переработка лигноцеллюлозых отходов в удобрение позволяет решить одну из наиболее острых экологических проблем промышленных регионов, связанных с накоплением многотоннажных отходов деревоперераба-тывающих и гидролизных предприятий.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Беловежец, Людмила Александровна, Иркутск

1. Р.А. Степень, С.М. Репях Альтернативные пути рациональной переработки древесных отходов // науч.-практ. конф. "Инвестиционный потенциал лесопромышленного комплекса Красноярского края" СибГТУ, 2001. - С. 14-19.

2. О состоянии окружающей природной среды Иркутской области в 1996 году: Гос. докл. Иркутск, 1997. 230 с.

3. Сергеева В.Н. Возможности использования отходов химической переработки древесины лигносульфонатов и гидролизного лигнина // Перспективы использования древесины в качестве органического сырья. Рига: «Зи-натне». - 1982. - С. 105-125.

4. Саловарова В.П., Козлов Ю.П. Эколого-биотехнологические основы конверсии растительных субстратов. Москва.: изд-во РУДН, 2001. - 331 с.

5. Волчатова И.В., Медведева С.А., Коломиец Э.И., Лобанок А.Г. Способ получения органо-минерального удобрения. Патент РФ № 2192403, 2000. -Б.И. 2002. -№31.

6. Фенгел Д., Вегенер Г. Древесина (Химия, ультраструктура, реакция) / Пер. с англ. М: Лесн. пром-сть, 1988.- 512 с.

7. Berguin P., Aubert J.P. The biological degradation of cellulose // FEMS Microbiol Rev. 1994. - V. 13. - P. 25-58.

8. Краткая химическая энциклопедия. M.: ГНУ «Советская энциклопедия», Т. 1. А-Е.-1961.-1262 стб.

9. Jeffries T.W. Biodegradation of lignin and hemicelluloses / In: Ratledge C. Biochemistry of microbial degradation. Kluwer, Dordrecht., 1994. P. 233-277.

10. Огарков В. И., Киселев О. М., Быков В. А. Биотехнологические направления использования растительного сырья // Биотехнология.- 1985. № 3. - С. 1-15.

11. Perez J., Munoz-Dorado J., de la Rubia Т., Martinez J. Biodegradation mid biological treatments of cellulose, hemicellulose and lignin: an overview // Int. Microbiol. 2002. - V. 5. - P. 53-63.

12. Гельфанд Е.Д. Технология гидролизных производств. JI.: Наука, 1986. -230 с.

13. Эпштейн Я.В., Ахмина Е.И., Раскин М.Н. Рациональные направления использования гидролизного лигнина // Химия древесины. 1977. - № 5. - С. 24-44.

14. Галимов Э.Р., Низамов Р.К., Аблясова А.Г., Шмакова Ю.А. Разработка дисперсно-наполненных композиционных материалов пониженной горючести // Современные проблемы технической химии. Казань: Изд-во Казан. гос. технол. ун-та, 2004. - С. 879-881.

15. Завадский В.Ф., Фомичева Г.Н., Мурзова О.В. Органоминеральные композиции в составе ячеистых бетонов // Проблемы и пути создания композиционных материалов и технологий из вторичных минеральных ресурсов. -Новокузнецк: Изд-во СибГИУ, 2003. С. 47-49.

16. Kadota J., Hasegawa К., Funaoka М. Modified ligophenols to polyuretans glues // Nippon setchaku gakkaishi J. Adhes. Soc. Jap. J. Adhes. Soc. Jap., 2004. -V. 40. - № 9. - P. 380-384.

17. Медведева E.H., Иванова H.B, Горохова В.Г., Бабкин В.А. Активированные лигнины заменители фенола при синтезе фенолформальдегидных смол // Химия в интересах устойчивого развития. 1998. - № 6. - С. 355-359.

18. Малькина А.Г., Соколянская Л.В., Цыханский В.Д., Татаринова А.А., Гусаров А.В., Хаматаев В.А., Фомина Е.Ю. Новые высокоэффективные сорбенты на основе лигнина // Химия в интересах устойчивого развития. 1996. -№4.-С. 307-311.

19. Сидоренко О.Д., Лубников С.И., Павликова Т.А. Биопрепарат для очистки объектов окружающей среды от нефти и нефтепродуктов / Пат. док. 2264357 N 2003130691/13, заявл. 17.10.03., опубл. 20.11.05.

20. Решетников В.И. Композиционный энтеросорбент и способ его приготовления / Пат. док. 2234931. Перм. гос. фарм. акад. - N 2002120546/15, за-явл. 29.07.02., опубл. 27.08.04.

21. Halahmi I., Gross М., Iacobs L., Kadosh G. Strong durable low cost composite materials made from treated cellulose and plastic / Пат. док. 6863971. Cy-cletec Ltd. - - N 10/102205, заявл. 21.03.02., опубл. 08.03.05.

22. Чудаков М.И. Промышленное использование лигнина. М.: Лесная пр-ть," 1983.-213 с.

23. Аналитическая записка счетной палаты РФ № 2 (50). 2002.

24. Федеральная программа мин-ва с\х РФ. 2007.

25. Гузев B.C., Иванов П.И. Функциональная структура зимогенной части микробной системы // Изв. РАН СССР. сер. биол. 1986. - № 5. - С. 739746.

26. Фокин Д.В., Дмитраков A.M., Соколов О.А. Участие микроорганизмов в трансформации гумуса почв // Агрохимия. 1999. - № 9. - С. 79-90.

27. Александрова Л.Н. Органическое вещество почвы и процессы его трансформации. Л.: Наука. 1980,287 с.

28. Азаркин Н.М. Лигнин как источник органических удобрений // Химия в сельском хозяйстве. 1987. - № 9. - С. 76-77.

29. Годунова Е.И., Шевякина А.В. Способы использования лигинна для повышения плодородия солонцовых почв // Тез. докл. 2 съезда общества почвоведов. С-Петербург. - 21-30 июня. 1996. - С. 269-270.

30. Страхов В.Л. Лигнин в сады и огороды // Гидролизная и лесохимическая пр-ть. - 1989.-№3.-С.18-19.

31. Харитонова Г.В., Завальнюк Н.М., Имранова E.JI Применение лигнина для повышения продуктивности луговых текстурно-дифференцированных почв Приамурья // Агрохимия. 1997. - № 6. - С.43-49.

32. Егоров П.А. Фосфорсодержащие органоминеральные удобрения // Химизация сельского хозяйства. -1990. № 11.- С.6-9.

33. Гисматуллина С.П., Гилязов М.Ю., Ишкаев Т.Х., Лучкин Г.С., Мухамадия-ров Х.Г., Михеева А.С. Способ получения органоминерального удобрения / А.с. 1627538 СССР.-1991.

34. Крупский Н.К., Головачев Е.А., Бацула А.А. Способ получения органоминерального удобрения / А.с. 1101439 СССР. -1984.

35. Применение органических удобрений в земледелии Хакассии (рекомендации) / Villi «Хакассия». Абакан. - 1988. - 50 с.

36. Комаров А.А. Влияние различных способов нейтрализации гидролизного лигнина на продуктивность злаковых и бобовых растений / Гумус и азот в земледелии Нечерноземной зоны РСФСР. Л.: 1987. С. 71-75.

37. Сюткин В.Н., Лодыгин В.А., Давыдов В.Д., Сюткина В.Г. Способ получения органоминерального удобрения на основе лигнина / А.с. 1261936 СССР. 1986.

38. Богатов В.А., Поликарпова Н.Н., Медведев Т.С. Способполучения росторе-гулирующего вещества на основе гидролизного лигнина / А.с. 1525166 СССР. 1989.

39. Чудаков М.И., Казарновский A.M. Способ получения сложных удобрений на основе лигнина / А.с. 333156 СССР. 1972.

40. Комаров B.C., Карпинчик В.Е. Способ получения органоминерального удобрения/ А.с. 1182018 СССР. 1985.

41. Vikas Singhal, Rathore V.S. Effect of Zn2+ and Cu2+ on growth, lignin degradation and ligninolytic enzymes in Phanerochaete chrysosporium // W. j. of Microbiol. and biotechnol. 2001. - V. 7. - P. 235-240.

42. Волчатова И.В., Медведева С.А. Применение углеродсодержащих твердых отходов в качестве нетрадиционных удобрений // Химия в интересах устойчивого развития. 2001. - № 9. - С. 533-540.

43. Омецинский П.И., Абрамец A.M., Лыч А.М., Кострома Г.Ф. Способ получения органоминерального удобрения / А.с. 1465438 СССР. 1989.

44. Чернивецкая Т.В. Использование гидролизного лигнина в качестве удобрения // Гидролизная и лесохимическая пр-ть. 1987. - № 4. - С.27-28.

45. Лясковский М.И., Овчинникова К.Н., Назирова Л.З. Органоминеральное удобрение / Пат. РФ. МКИ 6С 05 G 3/00, С 05 F 11\02.

46. Лясковский М.И. Влияние сложного органоминерального удобрения на основе гидролизного лигнина на рост и продуктивность овощных культур // Агрохимия. 2003. - № 4. - С. 29-38.

47. Крутько Н.П., Король Г.С., Рак М.В., Шакун М.Л., Юшкевич И.А., Можей-ко Ф.Ф.,Майснер А.Д. Способ получения органоминерального удобрения /1. A.с. 1511253 СССР.-1989

48. Якушкин В.Я., Закрытной О.Ф., Ревнивцев В.И., Смирнова Т.А., Трусов Ю.В. Способ обезвоживания птичьего помета / А.с. 1348325 СССР. 1987.

49. Коберник А.И., Чертов М.Н.,Шалобало В.Н., Осадчая Л.И., Таранушич

50. B.А. Комплексное органоминеральное удобрение и способ его получения / Пат. РФ №2174971.-2001.

51. Омецинский П.И., Абрамец A.M., Кострома Г.Ф., Сорокин А.И. Способ получения субстрата для выращивания растений / А.с. 1411323. 1988.

52. Трушкин А.В. Лигнин в хлопководстве. Ташкент.: Мехнат. 1986.- 79 с.

53. Тен Хак Мун, Харитонова Г.В., Имранова Е.Л. Биопотенциальная способность лигнина в тяжелых дифференцированныз почвах долины реки Амур // Геология и экология бассейна р. Амур. Тез. докл. конф. 1989. - С. 80.

54. Якименко О.С. // Современные проблемы почвоведения и экологии: Тез. докл. школы-семинара молодых ученых факультета почвоведения МГУ. Москва. -1993. С. 102.

55. Орлов Д.С., Аммосова Я.М., Якименко О.С. Агроэкологические аспекты использования нетрадиционных органических удобрений на основе гидролизного лигнина //Почвоведение. 1993. - № 2. - С. 36-44.

56. Рост растений и природные регуляторы / Под ред. Кефели В.И. М.: Наука., 1977.-290 с.

57. Seneci N. Composted materials as organic fertilizers // Sci. Total. Environ.-1989.-№81/82.-P. 521-542.

58. Herrmann R.F., Sharai J.F. Microbial community changes during the composting of municipal solid waste // Microbial Ecology. 1997. - V. 33. - P. 78-85.

59. Hoitink H.A.J., Kuter G.A. Effects of composts in growth media on soilborne pathogens / In: The Role of Organic Matter in Modern Agriculture., 1986 P. 289-306.

60. Hoitink H.A.J., Stone A.G., Han D.Y. Suppression of plant disease by composts. // Hort Science. 1997. - V. 32. - P. 184-187.

61. Frost D.I., Toth B.L., Hoitink H.A.J. Compost stability // Biocycle. 1992. - V. 33.-P. 62-66.

62. Goodfellow M., Williams S.T. Ecology of Actinomycetes // Annual Review of Microbiology. 1983. - V. 37. - P. 189-216.

63. Finstein M.S., Miller P.F., MacGregor S.T., Psarianos K.M. Composting ecosystem management for waste treatment // Bioresource Technology. 1983. - V. 1. -P. 347-353.

64. Itavaara M. Vikman M., Venelampi O. Windrow composting of biodegradable packaging materials // Compost Science and Utilization. 1997. - V. 5. - P. 8492.

65. Stentiford E.I. Composting control: principles and practice. / In: The Science of Composting, Part 1. London, England, 1996. - ISBN 0751403830. - P. 49-59.

66. Cook J.R., Zentmyer G.A. Basis for the control of soilborne pathogens with composts / Palo Alto, California, USA: Annual Reviews, Inc. 1986. - V. 24. -P. 93-114.

67. Sartaj M., Fernandes N., Patini, N.K. Influence zone of aeration pipes and temperature variations in passively aerated composting of manure slurries // Transactions of the ASAE. 1995. -V. 38. - P. 1835-1841.

68. Hellmann В., Zelles L., Palojarvi A., Bai Q. Emission of climate-relevant trace gases and succession of microbial communities during open-windrow composting // Applied and Environmental Microbiology. 1997. - V. 63. - P. 10111018.

69. Golueke C.G. Composting: A Study of the Process and its Principles. / Emmaus, Pennsylvania, USA: Rodale Press, Inc. ISBN 0878570519., 1972. 110 p.

70. Sesay A. A., Lasaridi K., Stertiford E., Budd T. Controlled composting of paper sludge using the aerated static pile method // Compost Science and Utilization. -1997.-V. 5.-P. 82-96.

71. Seekins B. Field test for compost maturity. // Biocycle. 1996. - V. 37. - P. 7275.

72. Barberis R., Nappi P. Evaluation of compost stability. / In: The Science of Composting, London, England, ISBN 0751403830. Part 1. - 1996. - P. 175-184.

73. Forster J.C., Zech W., Wiirdinger E. Comparison of chemical and microbial methods for the characterization of the maturity of composts from contrasting sources // Biology and Fertility of Soils. 1993. - V. 16. - P. 93-99.

74. McKinley V.L., Vestal J.R., Eralp A.E. Microbial activity in composting: part I. // Biocycle. 1985. - V. 26. - P. 39-43.

75. Тен Хак Мун Ферментация органических остатков с целью получения удобрений. Хабаровск., 1988. 47 с.

76. Сидоренко О.Д. Микробиологические основы получения компостов // Агрохимический вестник.- 1997.- № 6.- С. 3-4.

77. Finstein M.S., Morris M.L. Microbiology of municipal solid waste composting // Appl. Microbiology. 1975. - V. 19. - P. 113-151.

78. Veeken A., Nierop K., Wilde V.D., Hamelers B. Characterisation of NaOH-extracted humic acids during composting of a biowaste // Bioresource Technology. 2000. - V. 72. - № 1. - p. 33-41(9).

79. Herrmann R.F., Shann J.R. Enzyme activities as indicators of municipal solid waste compost maturity // Compost Science and Utilization. 1993. - V. 1. - P. 54-63.

80. Тен Хак Мун, Чень Вань Фен, Имранова E.JL, Кириенко О.А., Ганин Г.Н. Влияние компостной закваски на ускорение компостирования органических веществ // Агрохимия. 2004. - № 2. - С. 63-66.

81. Beffa Т., Blanc М., Marilley L., Fisher J.L., Lyon P.F., Aragno M. Taxonomic and metabolic microbial diversity during composting / In: The Science of Composting, Part 1, London, England, ISBN 0751403830. 1996a. - P. 149-161.

82. Davis C.L., Donkin C.J., Hinch S.A., Germishuizen P. The microbiology of pine bark composting: an electron-microscope and physiological study // Bioresource Technology. 1992. - V. 40. - P. 195-204.

83. Beffa Т., Blanc M., Lyon P., Vogt G., Aragno M. Isolation of Thermus strains from hot composts (60 °C to 80 °C) // Appl. and Environ. Microbiology. -1996b.-V. 62.-P. 1723-1727.

84. Головлева JI.A., Финкелыптеин З.И., Баскунов Б.П. Микробная детоксика-ция сточных вод коквохимического производства // Микробиология. -1995. т. 64. - № 2. - С. 197-200.

85. Имшенецкий А.А. Микробиология целлюлозы М.: Изд-во АН СССР, 1953. -417 с.

86. Leschine S.B. Cellulose degradation in anaerobic environments // Ann. Rev. Microbiol. 1995. - V. 49. - P. 399-426.

87. Crawford R.L. Lignin biodegradation and transformation / N.Y.: Wiley Intersc. Publication, 1981,-120 p.

88. Lacey J. Actinomycetales: Characteristics and Practical Importance. / New York: Academic Press. ISBN 0126799504. 1973. - P. 231-251.

89. McCarthy A.J., Williams S.T. Actinomycetes as agents of biodegradation in the environment: a review // Gene. 1992. - V. 115. - P. 189-192.

90. Мирчинк Т.Г. Почвенные грибы как компонент биогеоценоза / Почвенные грибы как компонент биогеоценоза. М.: Наука., 1984. С. 114-130.

91. Кивилёв К.В. Перспективы биотехнологического использования дерево-разрушающих грибов // Прикл. биохимия и микробиология. 2005. - Т. 35. - № 5. - 659-667.

92. Медведева С.А., Середкина С.Г., Бабкин В.А. Механизмы и реакции деструкции лигнина и моделирующих его ароматических соединений грибами белой гнили // Химия древесины. 1992.- № 2-3. - С.3-24.

93. В.Г. Бабицкая, В.В. Щерба. Деградация природных полимеров мицелиаль-ными грибами- продуцентами биологически активных веществ // Прикл. биохимия и микробиология. -1991. т. 27. - № 5. - С. 687-694.

94. Abd-Alla М.Н., Omar S.A. Wheat straw and cellololytic fungi application increases nodulation, nodule efficiency and growth of fenugreek (Tridonella foe-num-graceum L.) grown in saline soil // Biology and Fertility of Soils. -1998. -V. 26.-P. 58-65.

95. Hart T.D., De Leij F.A.A.M., Kinsey G., Kelley J., Lynch J.M. Strategies for the isolation of cellulolytic fungi for composting of wheat straw // W. j. Microbiol. Biotechnol. -2002. V. 18. -P. 471-480.

96. Kirk K, Cullen D. Enzymology and molecular genetics of wood degradation by white rot fungi / In: Young RA, Akhtar M (eds) Environmental friendly technologies for pulp and paper industry. Wiley, New York, 1998. P. 273-307.

97. Maheshwari R., Bharadwaj G., Bhat, M.K. Thermophilic fungi: their physiology and enzymes // Microb. Mol. Biol. Rev. 2000. - V. 64. - P. 461-488.

98. Kirk Т.К., Tien M., Kersten P.J. Ligninase of Phanerochaete chrysosporium. Mechanism of its degradation of the non-phenolic arylglycerol b-aryl ether substructure of lignin // Biochem. J. 1986. - V. 236. - P. 279-287.

99. Umezawa Т., Higuchi T. Aromatic ring cleavage of b-o-4 lignin model dimers without prior demeth(ox)ylation by lignin peroxidase // FEBS Lett. 1986. - V. 205.-№2.-P. 293-298.

100. Crawford R.L. Recent advances in studies of mechanism of microbial degradation of lignins // Enzyme Microb. Technol. 1984. - V.6. - P. 434-442.

101. Evans C.S. Lignin degradation // Process Biochemistry. 1987. P. 102-105.

102. Леонтьевский А.А. Лигнолитические ферменты гриба Panus tigrinus 8/18: биосинтез, выделение, свойства. Дисс. канд. биол. наук. Пущино. 1989. -150 с.

103. Perez J, Jeffries T.W. Roles of manganese and organic acid chelators in regulating lignin biodegradation and biosynthesis of peroxidases by Phanerochaete chrysosporium II Appl. Environ. Microbiol. 1992. -V. 58. P. 2402-2409.

104. Юб.Беккер Е.Г. Выделение, свойства и основные закономерности действия лигнолитических ферментов (лакказы, лигниназы, Mn-пероксидазы). Дисс. канд. хим. наук. Москва. 1993. 158 с.

105. Kapich A.N., Jensen К.A., Hammel К.Е. Peroxyl radicals are potential agents of lignin biodegradation // FEBS Lett. 1999. - V. 461. - P. 115-119.

106. Gomez-Toribio V., Martinez A., Martinez M.J., Guillen F. Oxidation of hydro-quinones by versatile ligninolytic peroxidase from Pleurotus eryngii. H2O2 generation and the in.uence of Mn2+ // Eur. J. Biochem. 2001. - V. 268. - P. 47874793.

107. Gianfreda L., Xu F., Bollag J-M. Laccases: A useful group of oxidoreductive enzymes // Bioremediation J. 1999. - V. 3. - P. 1-25

108. Ш.Медведева С.А. Превращения ароматической компоненты древесины в биохимических процессах далигнификации / Дисс. докт. биол. наук. Иркутск., 1995. 470 с.

109. Leonowicz A., Cho N.S., Luterek J., Wilkolazka A., Wojtas-Wasilewska M., Matuszewska A., Hofrichter M., Wesenberg D., Rogalski J. Fungal laccase: properties and activity on lignin // J. Basic Microbiol. 2001. - V. 41. - P. 185— 22.

110. Alexandre G., Zhulin I.B. Laccases are widespread in bacteria // Trends Bio-technol. 2000. - V. 18. - P. 41^12.

111. Haars A., Huttermann A. Function of laccase in write-rot fungus Fomes annosus // Arch. Microbiol. -1980. V. 125. - № 3. - P. 223-227

112. Ander P., Eriksson K.E. Lignin degradation and utilization by microorganisms / Progress Industrial. Microbiol. Elsevier Scient/ Publ. Comm. Oxford. N.-J. -1978.-V.41.-P.1-58.

113. Eriksson K.-E, Blanchette R.A., Ander P. Microbial and enzymatic degradation of wood and wood components / Springer. New York Berlin Heidelberg., 1990. -120 p.

114. Sethuraman A., Akin D.E., Eriksson K.-E. Production of lignolytic enzymes and synthetic lignin mineralization by the bird's nest fungus Cyanus stercoreus II Appl. Microbiol. Biotechnol. -1999. V. 52. - P. 689-697.

115. Faison B.D., Kirk Т.К., Farrell R.L. Role of veratryl alcohol in regulation ligni-nase activity in Phanerochaete chrysosporium II Appl. Environ. Microbiol. -1986. V.52.- № 2. - P. 251-254.

116. Harvey P.J., Schoemaker H.E., Palmer J.M. Veratryl alcohol as a mediator and a role of radical cations in lignin biodegradation by Phanerochaete chrysosporium IIFEBS Lett. 1986. - V. 195. - № 1-2. - P. 242-246.

117. Озолиня Н.Р., Сергеева В.Н. Роль лакказы при биодеградации лигнина и его модельных соединений // Изв. АН Латв. ССР. 1987. - № 4 (477). - С. 126-134

118. Senesi N., Brunetti G. Chemical and physico-chemical parameters for quality evaluation of humic substances produced during composting. / In: The Science of Composting, Part 1., 1996. 213 P.

119. Dinel H., Schnitzer M., Dumontet S. Compost maturity: chemical characteristics of extractable lipids // Compost Science & Utilization. 1996. - V. 4. - P. 1625.

120. Iannotti D.A., Pang Т., Toth B.L., Elwell D.L., Keener H.M., Hoitink H.A.J. A quantative respirometric method for monitoring compost stability // Compost Science and Utilization. 1993. - V. 1. - P. 52-65.

121. Richard D., Zimmerman R. Respiration rate reheating potential: a comparison of measures of compost stability // Compost Science and Utilization. 1995. - V. 3.-P. 74-79.

122. Insam H., Amor K., Renner M., Crepaz C. Changes in functional abilities of the microbial community during composting of manure // Microbial. Ecology. -1996.-V. 31.-P. 77-87.

123. Kostov O., Petkova G., Van Cleemput O. Microbial indicators for sawdust and bark compost stability and humification processes // Bioresource Technol. -1994.-V. 50.-P. 193-200.

124. Полянская Л.М., Гейдебрехт B.B., Чернов И.Ю., Початкова Т.Н., Звягинцев Д.Г. Репрезентативность данных о структуре микробных сообществ // Почвоведение. 2005. - № 1. - С. 92-97

125. Chung Y.C., Neethling J.B. ATP as a measure of anaerobic sludge digester activity // J. of Water Pollution Control Federation. 1988. - V. 60. - P. 197-212.

126. Palmisano A.C., Maruscik A., Ritchie C.J., Schwab B.S., Harper S.R., Rapaport R.A. A novel bioreactor simulating composting of municipal solid waste // J. of Microbiol. Methods. 1993. - V. 18. - P. 99-112.

127. Tunlid A., Hoitink H.A., Low C., White D.C. Characterization of bacteria that suppress Rhizoctonia damping-on in bark compost media by analysis of fatty acid biomarkers // Appl. and Environ. Microbiol. 1989. - V. 55. - P. 13681374.

128. Tiquia S.M. Microbiological parameters as indicators of compost maturity // J. Appl. Microboil. 2005. - V. 99. - № 4. - P. 816-828.

129. Smith D., Hughes J. Changes in maturity indicators during the degradation of organic wastes subjected to simple composting procedures // Biology and Fertility of Soils. 2004. - V. 39. - № 4. - P. 280-286(7)

130. Garland J.L. Analysis and interpretation of community-level physiological profiles in microbial ecology // FEMS Microbiol. Ecol. 1997. - V. 24. - P. 289300.

131. Carpenter-Boggs L., Kennedy A.C., Reganold J.P. Use of phospholipid fatty acids and carbon source utilization patterns to track microbial community succession in developing compost // Appl. and Environ. Microbiol. 1986. - V. 4. - P. 4062-4064.

132. Marambe R., Apdo T. Changes in ATP content in sorghum seeds imbibed in aqueous extracts of germination inhibitory animal - waste compost // J. of Agronomy and Crop Science. - 1993. - V. 170. - № 1. - P. 12-47.

133. Чеботарев H.T., Хмелинин И.Н., Швецова B.M. Использование лигнопо-метного компоста для удобрения дерново-подзолистой почвы при выращивании многолетних трав // Агрохимия. 2001.- № 5. - С.33-37.

134. Кононов О.Д., Лагутина Т.Б. Удобрения из отходов лесопредприятий // Химия в сельском хозяйстве. -1996. № 6. - С. 14-16.

135. Страхов В.Л. Лигнин и урожай // Гидролизная и лесохимическая пр-ть. -1986. -№ 4. С.2-4.

136. Чимитдоржиева Г.Д., Егорова Р.А. Экологические аспекты использования органических удобрений // Агрохимия. 2000. - № 4. - С. 72-74.

137. Король Г.С., Шакун M.JL, Рак М.В., Горностай О.М., Юшкевич И.А., Мо-жейко Ф.Ф. Способ получения органического удобрения / Пат. РФ. 1638139.- 1991.

138. Labrie С., Leclers P., Beaulieu С. Effect of waste-based composts produced by two-phase composting on two oomycete plant pathogens // Plant and soil. -2001.-V. 235.-P.27-34

139. Сутурин A.H., Бойко C.M., Бычинский B.A., Кочнев Н.К., Куликова Н.Н., Кулагин А.В. Способ получения органоминерального удобрения / Пат. РФ №2086521.- 1997.

140. Сутурин А.Н., Куликова Н.Н., Парадина Л.Ф., Верхозина А.И., Антоненко A.M. Отходы гидролизных предприятий резерв воспроизводства ресурсов плодородия // Экотехнологии и ресурсосбережение. - 1996. - № 5-6. - С. 92-96.

141. Романов Е.М., Мухортов Д.И. Биотехнологические аспекты производства новых органоминеральных удобрений для лесных питомников // Изв. ВУЗов. Лесной журнал. 1997. - № 4. - С. 76-81.

142. Арчегова И.Б., Маркарова М.Ю., Громова О.В. Способ получения органического удобрения / Пат. РФ № 2094414. 1997.

143. Shi Chunzhi, Pu Jitao, Zheng Zongrun, Li Rui Action nitrogen-fixed microorganisms on the contents of nitrogen in compost //Chin. J. Appl. and Environ. Biol. 2002. - V. 8. - № 4.- P. 419-421.

144. Сидоренко О.Д. Биокомпост / Пат.РФ № 2057103. 1996.

145. Пилюгина Л.Г., Кураева Г.М. Способ получения органоминерального удобрения / А.с. № 1165674. 1985.

146. Kosikova Bozena, Slavikova Elena Biotransformation of lignin polymers derived from beech woodpulping by Sporobolomyces roseus isolated from leafy material // Biotechnol. Lett. 2004. - V.26. - № 6. - P. 517-519.

147. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / Под ред. Егорова Н.С. М.: Изд-во МГУ, 1995. 224 с.

148. Alvarez M.L, Belloch C, Villa M, Uruburu F, Larriba G., Coque J.-J. R. Degradation of vanillic asid and prodaction of guaiacol by microorganisms isolated from cork samples // FEMS Micsobiol. Lett. -2003. V. 220. - P. 49-55.

149. Имранова E. JT. Сукцессия микроорганизмов при деструкции древесных остатков / Дисс. канд. биол. наук. Хабаровск., 1998. 138 с.

150. Волчатова И.В. Физиолого-биохимические механизмы микробиологической деструкции лигнина. / Дисс. канд. биол. наук. Иркутск, 1994. 227 с.

151. Blanchette R.A. Screening of wood decayed by white rot fungi for preferential lignin degradation // Appl. Environ. Microbiol. 1984. - № 48. - P. 647-653.

152. Buswell J.A, Cai Y.J, Chang S.T. Ligninolytic enzyme production and secretion in edible mushroom fungi / In: Mushroom Biology and Mushroom Product, et Royse D.J. pp. 113-122.

153. Mata G, Savoie J.M. Extracellular enzyme activities in six Lentinula edodes strains during cultivation in wheat straw // World J. Microbiol. Biotechnol. -1998.-V. 14.-P. 513-519.

154. Eyal Shimoni, Usi Ravid, Yuval Shoman Isolation of a Bacillus sp. capable of transforming isoeugenol to vanillin // J. Biotechnol. 2000. - V. 78. - P. 1-9.

155. Lorez M.J., Nichols N.N., Dien B.S., Moreno J., Bothast R.J. Isolation of microorganisms for biological detoxification of lignocellulosic hydrolysates // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2004. - V. 64. - P. 125-131.

156. Каретникова Е.Ф. Утилизация водорастворимых фенольных соединений, образующихся в процессе пиролиза лигнина // Прикладная биохимия и микробиология. 2006. - Т. 42. - № 1. - С. 55-58.

157. Волчатова И.В., Медведева С.А., Коржова Л.Ф., Рудых Н.В. Изменение состава гидролизного лигнина в процессе компостирования // Прикл. биохимия и микробиология. 2000. - Т. 36. - № з. - С. 293-298.

158. Коломиец Э.И., Романовская Т.В., Здор Н.А. Физиологические потребности Trichosporon cutaneum при выращивании на гидролизном лигнине // Микробиол. журн. (Киев). 1990. - Т. 52. - № 1. - с. 38-42.

159. McCarthy A.J., Broda P. Screening for lignin degrading actinomycetes and characterization of their activity against ,4C. lignin-labeled wheat lignocellulose // J. Gen. Microbiol. 1984. - V. 130. - P. 2905-2913.

160. Kirk Т.К., Schultz E., Connors W.J., Lorenz L.F., Zeikus J.I. Influence of culture parameters on lignin metabolism by Phanerochaete chrysosporium II Arch. Microbiol. 1978. - V. 117. - № 3. - P. 277-285.

161. Аринушкина E.B. Руководство по химическому анализу почв. M.: Изд-во МГУ., 1970. 487 с.

162. Хазиев Ф.Х. Методы почвенной энзимологии. М.: Наука., 1990. 189 с.

163. Методы почвенной микробиологии и биохимии / Под ред. Звягинцева Д.Г. М.: Изд-во МГУ., 1991. 304 с.

164. Синицын А.П., Гусаков А.В., Черноглазое В.М. Методы изучения и свойства целлюлолитических ферментов // Итоги науки и техники. Сер. Биотехнология. Т. 25. М., 1990. - 150 с.

165. Агрохимические методы исследования почв. / Руководство для полевых и лабораторных исследований. М.: Изд-во Академии наук СССР., 1960. 555 с.

166. Александрова JI.H., Найденова О.А. Лабораторно-практические занятия по почвоведению Л.: Изд-во Колос., 1967. 352 с.

167. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. М.: Агропромиздат., 1985. 351 с.

168. Методические указания по определению тяжелых металлов в кормах и растениях и их подвижных соединений в почвах. М.: Министерство сельского хозяйства., 1993. 22 с.

169. Методы определения фитогормонов и фенолов в семенах / Под ред. М.Г. Николаевой. Л.: Наука., 1979. 78 с.

170. Возняковская Ю.М. Микрофлора растений и урожай. Л.: Колос., 1969. -240 с.

171. Kawai S., Umezawa Т., Higuchi Т. // Arch. Biochem. and Biophys. 1988. - V. 262.-№1.-P. 99-110.

172. Tien M., Kirk Т.К. Lignin-degrading enzyme from Phanerochaete chrysosporium: purification, characterization and catalytic properties of a unique H2O2 -requiring oxygenase // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1984. - V. 81. - № 8. - P. 2280-2284.

173. Asada Y., Miyabe M., Kikkawa M., Kuwakara H. NADH-oxidazing peroxidase produced by lignin-degrading basidiomycete Phanerochaete chrysosporium II J. Ferment. Technol. -1987. V. 65. - № 4. - P. 483-487.

174. Методы экспериментальной микологии / Ред. Билай В.И. Киев: Наукова думка., 1982. 550 с.

175. Телышева Г.М., Панкова Р.Е. Удобрения на основе лигнина. Рига: «Зинат-не»., 1978. 64 с.

176. Avneesh D.S., Noorlidah A., Vikeneswary S. Optimizatoin of extraction of bulk enzymes from spent mushroom compost // J. of Chemical technology & Bio-technol. 2003. - V. 78. - № 7. - P. 743-752.

177. Низова A.A. Активность сахаразы в дерново-подзолистой почве разных угодий // Сборник докладов симпозиума по ферментам почвы. Минск: Наука и техника. 1968. - С. 190-197.

178. Smith D., Hughes J. Changes in maturity indicators during the degradation of organic wastes subjected to simple composting procedures // Biology and Fertility of Soils. 2004. - V. 39. - № 4. - P. 280-286(7).

179. Ryckeboer J., Mergaert J., Coosemans J., Deprins K., Swings J. Microbiological aspects of biowaste during composting in a monitored compost bin // J. Appl. Microbiol. -2003. V. 94. - № 1. - P. 127-137.

180. Eneji A. Egrinya, Yamamoto Sadahiro, Honna Toshimasa, Ishiguro Akihiro Physico-chemical changes in livestock feces during composting // Commun. Soil Sci. and Plant Anal. 2001.- V. 32, - № 3-4. - P. 477-289.

181. Волчатова И.В., Медведева С.А., Новикова JI.H., Серышев В.А. Исследование свойств органо-минерального удобрения на основе гидролизного лигнина // Агрохимия. 2000. - № 12. - С. 53-57.

182. McCarthy A., Paterson A., Broda P. Lignin solubilization by Thermomonospora mesophila II Appl. Microbiology and Biotechnology. 1986. - V. 24. - P. 347352.

183. Возбуцкая A.E. Химия почвы. M.: Высш. Школа., 1968. 427 с.

184. Органические удобрения. / Справочник. М.: Агропромиздат., 1988. - 207 с.

185. Sreeramulu N. Changes in endogenous growth regulation compounds during the after-ripening of the dormant seeds of groundnut // Z. Pflanz. 1974. V. 71. - № 2.-P. 101-107.

186. Морозова Э.В., Кораблева Н.П., Метлицкий JI.B. Определение содержания природных ингибиторов роста клубней картофеля кофейной кислоты и скополетина // Прикл. биохим. и микробиол. - 1974. - Т. 10. - Вып. 3. - С. 477-481.

187. Рас Min Ryol, Kim Yong Gun Variation of number of bacteria in soil, fertilized by various fertilizers // Biology. 2001. - № 4. - P. 16-18.

188. Plant Pathology/ Ed. G.N. Agrios. N.-Y.: Acad. Press., 1997. 635 p.

189. Каменева C.B., Муронец E.M. Генетический контроль процессов взаимодействия бактерий с растениями в ассоциациях // Генетика. 1999. - Т. 35. -№11.- С. 1480-1494

190. Tien Т.М., GaskinaM.N., Hubbell D.N. Plant growth substances produced by Azospirillum brasilense and their effect on the growth of pearl millet (Pennise-tum americanum) // Appl. Environ. Microbial. -1979. V. 115. - № 5. - P. 10161024

191. Биохимия фенольных соединений. / Под ред. Дж. Харборн. М.: Мир., 1968. -451 с.

192. Запрометов М.Н. Основы биохимии фенольных соединений. М.: Высшая школа., 1974.-214 с.

193. Chandramohan D., Purushothaman D. A., Kothandraman R. Soil phenolics and plant growth ingibition // Plant and Soil. 1973. - V. 39. - № 2. - P. 303-309.

194. Якушкина Н.И. Физиология растений. М.: Просвещение., 1993. 335 с.

195. Возняковская Ю.М., Нуржанов У.С. Влияние микробных метаболитов и гиббереллина на некоторые стороны обмена веществ кукурузы // Физиология растений. 1965. - Т. 12. - Вып. 4. - С. 714-720.

196. Запрометов М.Н. Фенольные соединения и их роль в жизни растения. М.: Наука., 1996. 45 с.

197. Кожевин П.А. Микробные популяции в природе. М.: Изд-во МГУ., 1989. -191 с.

198. Буйлов В.В., Личко Р.П., Волокитин М.П., Васильев Е.В. Улучшение свойств солонца-солончака техническим лигносульфонатом аммония // Тез. докл. V съезда Всесоюз. о-ва почвоведов. Минск. 1977. - Кн. 1. - С. 11-13.

199. Тейлор Д., Грин Н., Стаут У. Биология: В 3-х т. Т. 2. М.: Мир., 2002. 436 с.

200. Рабинович М.Л., Болобова А.В., Кондращенко В.И. Теоретические основы биотехнологии древесных композитов. / Кн. 1. Древесина и разрушающие ее грибы. М.: Наука., 2001. 264 с.

201. Wariishi H, Valli К, Gold M.H. // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1991. -V. 176.-№ l.-P. 269-275.

202. Gold M.H, Youngs H.L, Sollewijn Gelpke M.D. // In: Sigel A, Sigel H. (eds) Metal ions biological systems. New York: Marcel Dekker, 2000. P. 559-587.

203. Медведева С.А, Волчатова И.В, Бабкин В.А, Антипова И.А, Каницкая JI.B, Иванова С.З, Ступина Э.С. Превращения ароматических соединений базидиомицетами Phanerochaete sanguinea и Coriolus villosus II Химия природ. соед. 1994. - № 6. - С. 808-819.

204. Obregon-Gomez М. Use of Trichoderma sp. on soil microbiology improvement for organic agriculture in Costa Rica // J. Zhejiang Univ. Agr. and Life Sci. -2004.-V. 30.-№4.-P. 409.

205. Чхенкели В.А. Биоэкологические аспекты изучения и использования биологически активных веществ дереворазрушающего гриба Coriolus pubes-cens (shum.: FR) Quel. / автореф. докт. биол. наук. Иркутск. 2006. - 48 с.

206. Никонорова А.И. Оздоравливающее действие совместного внесения сиде-рата и микроба-антагониста от обыкновенной корневой гнили ячменя ярового // Тез. докл. 2 Съезда О-ва почвоведов, Санкт-Петербург, 27-30 июня. Кн. 1.М., 1996.-С. 279-280.