Методы оздоровления винограда от бактериального рака и короткоузлия

Маслова, Елена Борисовна

Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему
Методы оздоровления винограда от бактериального рака и короткоузлия
ВАК РФ 06.01.07, Плодоводство, виноградарство

Автореферат диссертации по теме "Методы оздоровления винограда от бактериального рака и короткоузлия"

На правах рукописи

Маслова Елена Борнсовна

МЕТОДЫ ОЗДОРОВЛЕНИЯ ВИНОГРАДА ОТ БАКТЕРИАЛЬНОГО РАКА И КОРОТКОУЗЛИЯ

Специальность 06.01.07 - плодоводство, виноградарство

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

п. Персиановский - 2009

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Донской государственный аграрный университет»

Научный руководитель: доктор сельскохозяйственных наук,

профессор Малых Григорий Павлович

Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук,

профессор Батукаев Абдулмалик Абдулхамидович

кандидат сельскохозяйственных наук, Ананьева Людмила Ивановна

Ведущая организация Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный аграрный университет - МСХА им. К.А. Тимирязева»

Защита состоится « 25 » декабря 2009 г. в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 220.028.02 при Донском государственном аграрном университете по адресу: 346493, пос. Персиановский Октябрьского (с) района Ростовской области, Донской госагроуниверситет, тел., факс (86360)-3-61-50, официальный сайт в сети Интернета: \v\vw. скидай, ги.

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Донского государственного аграрного университета

Автореферат разослан «_»_2009 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета . ___.

доктор с.-х. наук, профессор И.В. Фетюхин

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследований. Одним из существенных резервов повышения урожайности винограда является его защита от болезней и вредителей. Проблема сохранения продуктивности насаждений усложняется тем, что наряду с типичными болезнями винограда, против которых производство уже применяет эффективные меры борьбы, в последнее время значительно возросла вредоносность бактериального рака. Массовое проявление опухолеобразования при заготовке черенков с больных раком маточников наблюдается уже на 3-й год после посадки саженцев, а процент больных растений иногда достигает 50%. Это приводит к преждевременной гибели кустов и изреженности виноградников еще до их вступления в плодоношение. С возрастом гибель кустов увеличивается и приходится производить раскорчевку виноградников, так как на сегодняшний день меры борьбы с этим заболеванием не достаточно разработаны. Это побудило нас к проведению исследований по изучению данной проблемы.

Другим опасным заболеванием винограда является короткоузлие, которое легко передается при вегетативном размножении зараженных растений (через черенки, подвои или привои). Кроме того, если здоровые привои прививаются зараженными подвоями или наоборот, то через несколько месяцев после срастания компонентов прививки все растение оказывается зараженным вирусом. Такой зараженный материал становится разносчиком короткоузлия на виноградниках.

Снижение урожайности кустов, больных короткоузлием достигает 90%. Пораженное виноградное растение вырождается, болезнь уменьшает укоренение черенков и приживаемость саженцев. Вирус короткоузлия обнаружен в оболочке семян и пыльце винограда.

В тех случаях, когда вирус передается через семена, этот источник инфекции может играть огромную роль в распространении болезни. Обработка черенков, находящихся в стадии покоя, горячей водой (55°С) в течение 5 мин не освобождает растения винограда от вируса короткоузлия. Однако вегетирующие растения реагируют на тепловую терапию. Бови (1967) первый применил в отношении лоз, зараженных короткоузлием, воздействие температурой 37—38°С в течение нескольких недель. Удалить вирус ему не удалось, но симптомы были на некоторое время ослаблены. Усугубляется положение так же тем, что в настоящее время многие селекционеры передают свои сорта в производство уже больными бактериальным раком и вирусными болезнями. По данным В.А. Урсу (1983), заражение этими болезнями сортов винограда происходит на 18- 97% уже при их создании

числом растений, или же сами результаты экспериментов могут быть интерпретированы иначе. Ни один из способов химической обработки растений с целью избавления их от вирусов сам по себе еще не нашел применения в практике.

Все это представляет большую угрозу современному и будущему виноградарству. Решение этой актуальной проблемы явилось основной задачей наших исследований, направленных на получение семян подвоя, свободных от бактериального рака и короткоузлия, для создания здоровых привитых насаждений.

Цель исследований. Разработка способа размножения подвоев, обеспечивающего получения свободного от бактериального рака и короткоузлия посадочного материала и экспериментальное применение химиотермотерапии для получения здоровых семян, при выведении новых сортов и создания маточников.

В задачи исследований входило:

• определение устойчивости А. ШтеГаЫепв к органическим кислотам и к антибактериальным препаратам;

• уточнение возможности обеззараживания семян винограда при их искусственной контаминации при помощи антибактериальных средств;

• исследование возможности химиотерапии при освобождении от бактериального рака и короткоузлия для получения здоровых семян и растений;

• изучение микрофлоры семян винограда, полученных со здоровых и больных виноградных кустов;

• изучение влияния семенных и вегетативных подвоев на возможность передачи возбудителя бактериального рака и короткоузлия, а также приживаемости, роста и развитие растений винограда;

• разработка приемов индикации и выделение А. йнпеГааепз из пасоки, побегов и семян винограда.

Научная новизна. Получены новые данные по устойчивости А. ШтеГааепз к некоторым органическим кислотам и антибактериальным препаратам. Впервые проведено комплексное изучение способа химотермотерапии при создании новых сортов винограда. На основе разработанного нами способа химиотермотерапии при проведении гибридизации с использованием инфекционной пыльцы получены семена и растения, свободные от бактериального рака и короткоузлия.

Практическая значимость. Практическая значимость состоит в том, что предлагаемая производству технология обеспечивает получение семян подвоя, свободных от бактериального рака и короткоузлия и создавать насаждения маточников подвоя с сильно развитой стержневой корневой системой. Это позволяет быстро создать базовые маточники.

Внедрение способа химиотермотерапии позволит селекционерам получать селекционный материал, свободный от бактериального рака и

короткоузлия и закладывать супер-элитные маточники этих сортов винограда. Технология внедрена в хозяйствах Ростовской области ООО «Виноградарь». Выращено 2 млн. сеянцев, свободных от бактериального рака и короткоузлия. Заложены маточники в ООО «Виноградарь» на площади 6,5 га и в ряде других хозяйств. Способ химиотермотерапии внедрен в ОАО «Янтарное», ОАО «Ключевое», в ГНУ Всероссийском научно- исследовательском институте виноградарства и виноделия им. Я.И. Потапенко, в Малом инновационном предприятии «Центр питомниководства» г. Анапа.

Апробация работы. Результаты проведенных исследований и основные выводы настоящей работы докладывались на совещаниях специалистов-виноградарей, г. Краснодар (2005 г), на Международной научно-производственной конференции, п. Персиановский (2006 г), на ученом совете ГНУ ВНИИВиВ им. Я. И. Потапенко г Новочеркасск (2007 г), на шестой региональной научно-практической конференции молодых ученых «Научное обеспечение агропромышленного комплекса», г. Краснодар (2008 г).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 2 работы в изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 146 страницах компьютерного текста, включает введение, обзор литературы, методику и условия проведения работы, результаты исследований, выводы и рекомендации производству; содержит 24 таблицы, 23 рисунка. Список использованной литературы включает 230 наименований, в том числе 118 иностранных авторов.

УСЛОВИЯ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Условия проведения исследований. Основные исследования выполнялись в виноградарском хозяйстве ООО «Лоза» Семикаракорского района Ростовской области, где климат умеренно континентальный с недостаточным увлажнением. Территория опытного участка расположена в засушливом районе черноземной зоны.

Содержание азота в почве низкое и составляет от 18,4 до 19,2 мг/кг. Гидролизуемым азотом почвы также мало обеспечены, его содержание не превышает 110-120 мг/кг почвы. Подвижного фосфора 11-15 мг/кг почвы. Содержание обменного калия 200-300 мг/кг почвы.

Среднегодовое количество осадков по многолетним данным равно 400 мм. Среднемноголетняя сумма активных температур - 3351°С. Погодные условия 2005-2007 годов существенно отличались между собой. Зима 20052006 гг. была холодная и суровая. Самым холодным днем было 23 января, когда минимальная температура воздуха достигла минус 28 С, среднесуточная минус 24°С и на почве зафиксирована температура минус 26°С.

Начиная с 21 января и до конца месяца, отмечено промерзание почвы на глубину 40 см. Сумма отрицательных среднесуточных температур за январь месяц составила минус 308,7°С при средней многолетней минус 154,6°С, т.е. в 2 раза больше. Летний период 2007 года характеризовался высокой суммой активных температур ( 3981°С) при средне многолетней 3350,8°С. С 25 мая по 5 сентября период резкого повышения температуры сопровождался отсутствием осадков. Все это позволило изучить и получить объективную информацию о приживаемости растений, их развитии и продуктивности.

Объект исследований. Подвои Рипариа * Рупестрис 101-14, Кобер 5 ББ и сорта винограда, привой Саперави северный

Предмет исследований, Антибактериальные и антивирусные препараты: лимонная, щавелевая, уксусная, молочная и муравьиная кислота фурациллин, фуразолидон, гентамицин, тетрациклин, стрептомицин, неомицин, полимиксин, хинозол, канамицин, энрофлоксацин и технологии избавления семян подвоев от вирусной и бактериальной инфекции.

Схемы опытов и методика исследований.

Проводившиеся исследования включали следующие опыты.

Опыт I. Определение устойчивости А. йипеГанепв к органическим кислотам и к антибактериальным препаратам

В качестве антибактериальных препаратов нами изучались кислоты -лимонная, щавелевая, уксусная, молочная, муравьиная. Антибиотики -фурациллин, фуразолвдон, гентамицин, тетрациклин, стрептомицин, неомицин, полимиксин, хинозол, канамицин, энрофлоксацин.

Опыт II. Влияние химиотерапии на получение свободных от короткоузлия и бактериального рака гибридных семян и растений (табл. 1)

Таблица 1 - Схема опыта

Варианты Опыленный сорт больной короткоузлием и бактериальным раком Сорта - опылители со здоровой ПЫЛЬЦОЙ

I Сорт Шардоне больной короткоузлием Феркаль; С04; Северный; Анапский устойчивый;

II Сорт Красностоп золотовский больной короткоузлием Феркаль; С04; Достойный; Кунлиань

III Сорт Сибирьковый больной короткоузлием V. riparia; V. Silvestris Рилайнс Пинк Сидлис; Северный;

IV Сорт Кристалл больной бактериальным раком Феркаль; С04; Платовский; Рилайнс Пинк Сидлис;

V Сорт Денисовский больной бактериальным раком Рилайнс Пинк Сидлис; С04; Мерло; Каберне

Для испытания предложенного способа, при гибридизации подбирались кусты больные раком и короткоузлием в ампелогрофических коллекциях СКЗНИИСиВ г. Анапа и ВНИИВиВ им. Я.И. Потапенко, ООО «Ключевое», ОАО «Янтарное», ООО «Виноградарь». Согласно предусмотренным вариантам использовалась пыльца с инфекционных растений. Кусты с

признаками короткоузлия, с бледной окраской листовых пластинок и зелеными полосками вдоль жилок с укороченными междоузлиями побегов отмечались бирками.

Кроме того, кусты тестировались на короткоузлие и бактериальный рак, чтобы убедиться, что они действительно больные. За две недели до цветения, кусты опыляемых сортов обрабатывали щавелевой кислотой и изолировали полиэтиленовой пленкой. За 3-4 дня до начала цветения производили кастрацию цветков и опыление соцветий.

Изучение созданного гибридного фонда семян и растений проводилось в лаборатории СКЗНИИСиВ, в ВНИИВиВ им. Я.И. Потапенко; в ООО «Лоза» Семикаракорского района.

В качестве субстрата для посева семян использовали глауконитовый песок, которым наполняли чехлики длиной 15 см и диаметром 5 см. Это экологически чистый, доступный субстрат, свободный от инфекционного начала, обладающий высокими адсорбционными, ионообменными, каталитическими и фильтровальными свойствами. Глауконитовый песок, являясь адсорбентом, не вызывает накопления токсических веществ. Увеличение численности болезнетворных микроорганизмов не происходит, а значит, не повышается инфекционный фон, что немаловажно при выращивании оздоровленного посадочного материала.

Растения выращивались в теплицах с полиэтиленовым покрытием. Каждый вариант включал три повторности по 10 кустов, тестируемых растений 30 штук в каждом варианте опыта

Опыт Ш. Влияние семенных и вегетативных подвоев на приживаемость, рост и развитие растений винограда

Опыт заложен в ООО «Янтарное» по следующим схемам:

I. Вариант: посадка маточников подвоев сеянцами, выращенными из семян, заготовленных с кустов больных бактериальным раком, обработанных химиотермотерапией.

И. Вариант: посадка маточников саженцами, выращенными из черенков, заготовленных с кустов больных бактериальным раком, обработанных химиотермотерапией.

III. Вариант: посадка маточников саженцами, выращенными из черенков, заготовленных с кустов больных короткоузлием, обработанных химиотермотерапией.

IV. Посадка маточников саженцами, выращенными из черенков, заготовленных с внешне здоровых кустов (обработанных химиотерапией)

V. Посадка маточников сеянцами, выращенными из семян, заготовленных с кустов больных бактериальным .раком без обработки химиотерапией (контроль).

Схема посадки маточников в грунт 3 * 1 метр. Количество кустов на 1 га 3333 растения. Исследовались сорта подвоя Рипариа х Рупестрис 101-14 и привоя Саперави северный. Каждый вариант включал три повторности по 10 кустов. Исследования проводились согласно общепринятой в виноградарстве

методике «Агротехнические исследования по созданию интенсивных виноградных насаждений на промышленной основе», Новочеркасск (1988).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Влияние органических кислот, антибиотиков и химиоирепаратов на возбудителя бактериального рака

В виноградарстве в целях профилактики растений от бактериального рака при вегетативном размножении уже давно используется такой прием, как замачивание черенков в растворах формалина, ДНОК, тетроциклина. Однако, обработка семян винограда для их санации от А.ШтеГааепБ при проведении селекционных работ еще ни кем не проводились. Осеменение семян и ягод возбудителем бактериального рака возможно при обрезке и травмах лозы, при пасынковании, сборе и переработке ягод, а также через почву при соприкосновении с ней треснутых ягод. Наличие А. ШтеГааепз диктует необходимость изучения способов санации семян винограда, используемых при селекции. В связи с этим мы изучали устойчивость полевого изолята А.ШтеГашеш к растворам отдельных органических кислот, химическими и антибактериальными препаратами. В нашей работе были использованы молочная (СН3СН (ОН) СООН), уксусная (СН3СООН), щавелевая (НООССООН), лимонная (НОС (СН2СООН)2СООН) и муравьиная (НСООН) кислоты, отнесенные к классу химически чистых препаратов.

Как следует из данных таблицы 1, наиболее активно угнетали рост агробактерий щавелевая и муравьиная кислоты. Для более точного определения антибактериальной активности кислот по отношению к А. ШтеГаЫепБ был использован метод двукратных серийных разведений. Результаты его применения изложены в таблице 2.

Таблица 2 - Задержки роста колоний А. инпеГааепз под

воздействием 2% концентрации органических кислот, 2006-2009 гг

Наименование кислот Кратность определения Задержки роста колоний АЛитеГаамк, мм

№ определения среднее

1 2 3 4 5

Лимонная 5 16 24 21 25 17 20,8

Щавелевая 5 40 31 31 33 31 33,2

Уксусная 5 27 35 29 33 30 30,8

Молочная 5 20 15 23 18 19 19,0

Муравьиная 5 28 34 32 34 29 31,4

Метод двукратных серийных разведений подтвердил, что наибольшей антибактериальной активностью по отношению к возбудителю обладают щавелевая и муравьиная кислоты, а наименьшей - лимонная, молочная и уксусная. После воздействия муравьиной и щавелевой кислотой наблюдалось изменение возбудителя, характеризовавшееся увеличением размеров бактериальной клетки и ее утолщением. Претерпела изменение и морфология выросших колоний на твердых средах, что проявлялось появлением шероховатых Я - форм, которые вырастали при высеве из пробирок с

суббактеристатическими концентрациями щавелевой и муравьиной кислот (312 мкг/мл) (табл. 3).

Таблица 3 - Гибель колоний АЛитеГаыепз от минимальной бактериостатнческой концентрации органических кислот 2006-2009 гг

Наименование кислот Содержание кислот в среде, мкг/мл

20000 10000 5000 2500 1250 625 312 156 78 39

Лимонная — _+ — — — + + + + +

Щавелевая — + + +

Уксусная — — — — + + + + + +

Муравьиная — — — — — — — + + +

Молочная — — — — — + + + + +

* Примечание: в данной таблице + наличие роста, - отсутствие роста

Обеззараживание семян изученными органическими кислотами возможно, но их МБСК (минимальная бактериостатическая концентрация на А. ШтеГааепБ) намного выше и превосходит активные антибиотики в тысячу и сотни раз.

Результаты определения устойчивости А. гитеГаЫепз к антибиотикам и различным химиопрепаратам, выполненные методами бумажных дисков и двухкратных серийных разведений, показали значительную вариабельность этого показателя от резистентности до высокой степени чувствительности, что отражено в таблицах 4 и 5.

Таблица 4 - Чувствительность А. 1итеГааеш к различным антибактериальным препаратам 2006-2007 гг_

№п/п Наименование антибактериальных препаратов Задержки роста диаметра колоний (в мм).

1 Ампицшшн 7

2 Амоксициллин 10

3 Бацитрацин 0

4 Гентамицин 18

5 Канамицин 13

6 Линкомицин 0

7 Неомицин 11

8 Левомицетин 11

9 Норфлоксацин 18

10 Оксациллин 7

11 Пенициллин 0

12 Полимиксин 16

13 Рифампицин 12

14 Стрептомицин 9

15 Тетрациклин 10

16 Тилан 0

17 Цефалексин 9

18 Эритромицин 0

19 Фуразолидон 9

20 Энрофлоксацин 15

Высоко чувствительным возбудитель бактериального рака, а точнее используемый штамм возбудителя оказался к норфлоксацину, энрофлоксацину, полимиксину и гентамицину. Менее чувствительным к канамицину, неомицину, левомицетину, амоксициллину, рифампицину. Абсолютно устойчив к пенициллину, тилану, эритромицину и бацитрацину.

Минимальная бактериостатическая концентрация, задерживающая рост агробактерий, как это видно из таблицы 5 установлена у гентамицина (1,06 мкг/мл), полимиксина и энрофлоксацина (2,12 мкг/мл), а наибольшая - у хинозола (135 мкг/мл) и у фурацилина и тетрациклина (17 мкг/мл).

Таблица 5 - Минимальная концентрация антибактериальных

препаратов, задерживающая рост АЛитеГааепэ 2006-2007 гг

Наименование антибактериальных препаратов Концентрация веществ в 1 мл (в мкг на 1 мл)

135 68 34 17 8,5 4,25 2,12 1,06 0,5

Фурациллин — — — — + + + + +

Фуразолидон + +

Гентамицин +

Тетрациклин — — — — + + + + +

Стрептомицин + + + +

Неомицин + + +

Полимиксин — — — — — — — + +

Хинозол — + + + + + + + +

Канамицин — + + +

Энрофлоксацин + +

Однако для нас наибольший интерес представляли антибактериальные средства, которые оказывают на возбудителей не бактериостатический, а прямой бактерицидный эффект (прямое бактерицидное действие). К таким отнесены неомицин, стрептомицин, канамицин, энрофлоксацин.

Последующим этапом нашей работы явилось обеззараживание семян винограда, искусственно контаминированных возбудителем бактериального рака при использовании неомицина.

Для определения санирующего действия неомицина его использовали в концентрации 100 ЕД на 1 мл физиологического раствора. Семена, контаминированные А. илпеГаЫепэ заливали этим раствором (разведением) на 30 минут, затем на 1 час, 2 часа, 3 и 4 часа и выдерживали при температуре 28-30°С. Для удобства работы заранее готовили 5 проб семян каждые 30 мин. И каждый час их пятикратно отмывали стерильным физиологическим раствором. Из семян, отмытых от неомицина, готовили гомогенезаты, каждый из которых использовали для посева на агар Лиске по 2 капли на каждую чашку Петри. Как следует из данных приведенной таблицы 6, неомицин сульфат в концентрации 100 ЕД на 1 мл в течение 3-х часов способен инактивировать возбудителя бактериального рака на поверхности семян винограда.

Таблица 6 - Гибель АЛитеГааепв действие неомицина сульфата в _зависимости от экспозиции_

№ исследованных проб Продолжительность действия неомицина Наличие роста Количество колоний на 1-ой чашке.

1 0,5 часа + 45

2 1 час + 42

3 2 часа + 15

4 3 часа — —

5 4 часа — —

6 — + 62

Примечание: проба № 6 - контроль без антибиотика, посев через 4 часа

Его инактивация подтверждается не только отрицательными результатами бактериальных исследований, но и негативными результатами постановки биопроб на каланхое и проростках гороха.

1.2 Влияние химиотерапии на получение гибридных семян и

корнесобственных растений, свободных от бактериального рака,

короткоузлия

Фитоиммунитет обусловлен анатомо-физиологическими особенностями растений, препятствующих проникновению и распространению в организме бактерий и вирусов. Это покровные и механические ткани, сосуды, трахеиды, ситовидные и млечные трубки, имеющие различный диаметр. Активный фитоиммунитет связан с продукцией фитонцидов, (органических кислот, щавелевая, лимонная, янтарная, уксусная кислоты), фитоалексинов, токсичных для патогенов, образующихся в ответ на внедрение их в растения. Изучением влияния химиотермотерапии при семенном и вегетативном размножении, для получения здоровых семян и растений ранее не занимались.

Проведенные нами исследования о влиянии органических кислот на семена, пасоку и вегетативные органы растений были не только целью изоляции и изучения агробактерий, но и определение родового и видового состава выделенной микрофлоры. Важно было выяснить взаимосвязь между обсеменением растений возбудителями бактериального рака и короткоузлия и составом их эпифитной микрофлоры.

Однако, как показали проведенные исследования, такой зависимости выявить не удалось. Микрофлора семян, пасоки, тканей побегов была предоставлена преимущественно дрожжами, псевдомонадами (Рэ. НегЫсо1а, Рб. У1ауа, Ре. А1са%епе5, Ре. Ркогевсем), хантомонадами (X. сашревйв, X. ашреНпа), лучистыми и плеснивыми грибками, представителями рода ризобиум, а также немногочисленными культурами агробактерий вида гасНоЬайег. Каждая исследуемая проба, не считая стерильных, была обсеменена 2-4 раза, видами микроорганизмов. Проведенные бактериологические исследования многократно повторенные с использованием различных сред (Кларка, Лиске, Пателя), поставленные

Таблица 7- Мониторинг семян и растений на короткоузлие, их рост и

развитие (ООО «Лоза» Семикаракорского района, 2008 г.)

Масса семян Масса Сднолетки Двухлетки Больных

Варианты опыта Схема гибридизации для индикации возбудителя A.tumefaciens, г семян для высева, г | Прирост, см Вызревай ие. % Прирост, I см | Вызревай ие. % трехлетних растений, шт

Шардоне х Феркаль; 1 6 56,4 41,4 164,4 79,1 0

и _ S О 5 ¡5 Шардоне х С04; 0,5 0,5 68,5 50,4 117,5 80,4 0

Шардоне х Северный; 0,3 0,7 70,1 55,0 121,1 85,6 0

I ñ Шердоне х Анапский устойчевый; 0,3 4 69,5 61,2 105,9 79,4 0

Красностоп золотовский х Феркаль; 0,3 1 80,1 60,1 136,4 80,6 0

Красностоп ЗОЛОТОВСКИЙ X СО 4; 0,16 6 69,5 55,3 150,0 75,6 0

о S 5 Красностоп золотовский X Достойный; 0,6 2 71,6 60,0 147,0 80,1 0

зроткоуэ 'пыльца] Красностоп золотовский х Кунлиань 0,5 5 90,4 70,4 164,0 79,3 0

ГЦ Сибирьковый х V. riparia; од 4 79,6 53,0 149,0 90,1 0

Сибирьковый х V. Silvestris 0,1 3 59,0 63,1 118,6 90,2 0

Сибирьковый х Рилайнс Пинк Сидлис; 0,2 4 58,4 52,0 119,4 69,7 0

Сибирьковый х Северный; 0,4 5 60,3 50,4 125,0 85,3 0

Кристалл х Феркаль; 0,3 2 81,5 67,0 161,3 80,0 0

Кристалл х С04; 0,2 10 90,4 70,0 168,5 85,1 0

i s? Кристалл х Платовский; 0,1 3 81,6 73,4 164,4 70,8 0

X сЗ о. := Кристалл х Рилайнс Пинк Сидлис; 0,3 1 88,4 76,3 170,5 69,4 0

Я Л 5 в 8- Денисовский х Рилайнс Пинк Сидлис; 0,3 1 90,0 57,6 165,7 70,5 0

W Денисовский х СО„; 0,9 5 97,5 64,5 171,6 74,4 0

Денисовский х Мерло; 0,6 7 45,4 49,1 91,3 60,0 0

Денисовский х Каберне 0,1 0,12 60,1 40,0 121,3 59,4 0

биопробы, на проростках гороха и коланхое убедительно показали, что семена прошедшие химиотермотерапию, используемые в селекционной работе не имели бактериальной обсемененности (табл. 7). Об отсутствии возбудителей изучаемых болезней в семенах мы судили не только по результатам их бактериологического и вирусологического исследования, но и по материалам фитосанитарного контроля за сеянцами, их ростом и развитием, полученными из семян винограда, где при гибридизации использовались кусты больные раком и короткоузлием. Средний прирост в первый год роста сеянцев у гибридных растений был от 45 до 97,5 см. вызревание побегов от 40 до 76,3% (табл. 7).

На второй год у двухлетних растений прирост достигал до 171,6 см, вызревание побегов от 59,4 до 90,2%. Сеянцы имели мощное развитие, не было отмечено признаков заболеваний растений, угнетения роста побегов и корневой системы. Ни на одном из растений в течение вегетации не наблюдалось признаков заболевания бактериальным раком, а также короткоузлием, асимметрии листьев с заостренными зубцами, увеличенной черешковой выемкой, укороченными междоузлиями и образованием двойных узлов.

1.3 Влияние химиотермотерапии, типа подвоев, на приживаемость, рост, развитие и продуктивность привитых растений винограда

Для борьбы с бактериальным раком мы впервые применили химиотермотерапию. Способ осуществлялся по технологии разработанной профессором Малых Г.П. (2004). Суть данной технологии заключается в следующем. На каждый куст подвойного сорта Кобер 5ББ, с функционально женским типом цветка прививали три глазка подвоя Рипариа х Рупестрис 3309 с цветками мужского типа. Для прививки на сорте, с уменьшенной нагрузкой (10 - 12 побегов), отсчитав 2 глазка от основания побега, делали по 3-4 прививки на каждом из трех побегов.

За неделю до цветения винограда, кусты обрабатывали щавелевой кислотой и сразу укрывали полиэтиленовой светоотражающей дублированной вспененной пленкой (СВД-ПЭ) со светопроницаемостью на уровне 30%. Солнечное излучение в таком случае проникает к укрытым кустам исключительно в виде рассеянных лучей. А обильный конденсат влаги на шероховатой поверхности вспененного слоя на 15 -25% повышает относительную влажность воздуха под укрытиями, что дополнительно увлажняет рыльце пестика. При этом соцветия подвергаются химиотермотерапией за неделю до начала цветения. Из полученной по этой технологии обеззараженных семян выращивали сеянцы, на которые привали окулированный сорт Саперави северный. В качестве контроля окулировали сортом Саперави северный саженцы, выращенные из черенков. Те и другие растения высаживались в маточники по схеме 3 х 1 метр. Нашими исследованиями установлено, что маточные кусты, заложенные сеянцами, выращенными с семян заготовленных с кустов больных бактериальным раком, обработанных химиотермотерапией (вариант

I) имели более высокие показатели по приживаемости растений на плантации 87%, приживаемости прививок 68%, средний длине прироста 55,3 см, вызревание побегов 75,4%, по сравнению с другими вариантами. Все протестированные кусты были здоровы. Результаты исследований показали, что данные преимущества были обусловлены двумя факторами: обработкой маточных растений химиотермотерапией и происхождением подвоев. При вегетативном размножении (вариант II) эти же показатели были значительно ниже, чем при семенном, а больных кустов бактериальным раком было 27,8%, а при закладке саженцами, выращенных из черенков заготовленных с кустов инфицированных короткоузлием больных растений, было 17,1%. Это объясняется тем, что при вегетативном размножении обработка больных кустов химиотермотерапией мало эффективна. Посадка маточников саженцами, выращенными из черенков, заготовленных с внешне здоровых кустов (обработанных химиотермотерапией больных кустов было 3,7%. На двухгодичных сеянцах также проводилось тестирование на наличие болезней. У сеянцев, выращенных из семян, оздоровленных по новому методу, и протестированных на растительных индикаторах на втором году их развития также отмечено отсутствие этих заболеваний.

Заложенные маточники сеянцами, выращенными из семян заготовленных с кустов больных бактериальным раком без обработки химиотермотерапией (контроль) больных растений было всего только 1,1%.

Как отмечал A.M. Негруль, при семенном размножении, в силу обособленности полового аппарата и в силу конструктивной изолированности семени, возможность передачи потомству болезни сводится к минимуму. Как видно из наших данных, при семенном размножении передача возбудителей болезни уменьшается в десятки раз по сравнению с вегетативным.

По данным A.M. Негруль (1935), С.А. Погосяна (1955), С.С. Хачатряна (1967), А.А Авакяна (1970) у растений, вегетативно размножаемых длительный период времени наблюдается ослабление их роста, замедление интенсивности обмена веществ, изменение химического состава протоплазмы, снижение сопротивляемости к болезням, непостоянство урожаев. Как эти авторы отмечают, для восстановления высокой продуктивности и жизнеспособности виноградного растения после его длительного вегетативного размножения необходимо использовать и половое размножение. У растений, привитых на эти подвои, на пятый год их жизни на плантации на одревесневших надземных частях (штамб, рукава) были обнаружены раковые темно-коричневые наплывы продолговатой формы, которые привели к угнетению растений.

Качество привитых растений, длина годичных приростов, вызревание побегов у привоев, привитых на семенном подвое были значительно выше, чем на вегетативном.

Таблица 8 - Влияние химиотермотерапии, типа подвоя, на

получение здоровых маточных растений, их приживаемость, рост и

развитие (подвой Рипариа х Рупесгрис 101-14, привой Саперави _ северный)___

Варианты опыта посадки маточников Высажено растений, шт Приживаемость на плантации 2005 год Больных кустов в 2008 году

шт % Приживаемость прививок, % .... Средняя длина 1 прироста, см. 1 Вызревание побегов. %. шт %

I. Из семян, заготовленных с кустов больных бактериальным раком обработанных химиотермотерапией. 100 87 87 68 55,3 75,4 0 0

II. Из черенков заготовленных с кустов больных бактериальным раком обработанных химиотермотерапией. 100 79 79 54 47,7 69,2 22 27,8

III Из черенков, заготовленных с кустов больных короткоузлием обработанных, химиотермотерапией 100 70 70 49,7 40,5 50,3 12 17,1

IV Из черенков, заготовленных с внешне здоровых кустов (обработанных химиотермо терапией) 100 81 81 62,0 50,3 70,4 3 3,7

V Из семян заготовленных с кустов больных бактериальным раком(без обработки химиотермотерапией (контроль) 100 85 85 63, 52,8 70,7 1 1,1

Маточники, заложенные сеянцами подвоя и привитые зеленой прививкой имели более мощное развитие кустов, что соответствует требованиям к маточникам привоев супер-интенсивного типа на безвирусных подвоях. В наших опытах, корневая система растений выращенных из семян, значительно отличается от такой у растений вегетативно размножений Корневая система у сеянцев, во-первых - стержневая, уходит в более глубокие горизонты почвы. Корни сеянцев развиваются так быстро, что уже в первый год жизни образуют в пахотном слое густую сеть тонких корешков. Стержневой корень достигает глубины более 1,5 м. На второй год корневая система развивается еще более мощно и принимает мочковатый характер. В результате чего увеличивается ее поглотительная способность. На двухгодичных сеянцах также проводилось тестирование на наличие болезней. У сеянцев, выращенных из семян, оздоровленных по новому

методу, и протестированных на растительных индикаторах на втором году их развития также отмечено отсутствие этих заболеваний.

Таблица 9 - Влияние хнмиотермотерапии, типа подвоя, на получение здоровых растений, выход и качество черенков

Варианты создания маточников Длина основных побегов, см Вызре вшая часть побегов, % Диаметр средней части побега, мм Количес тво здоровых кустов, ют Выход станда ртиых черенков с куста, шт Выход стандар -тных черенко в с 1 га/шт Содержание углеводов в черенках, в%

I. Из семян заготовленных с кустов больных бак. раком обработанных химиотерапией 438 80,4 7,3 3333 27,8 92657 14,2

П. Из черенков заготовленных с кустов больных бак раком обработанных химиотерапией 401,6 70,5 6,9 2407 25,1 60415 13,7

III. Из черенков заготовленных с кустов больных короткоузлием, обработанных химиотерапией 414,7 72,6 6,7 2764 25,9 71587 13,6

IV. Из заготовленных черенков со здоровых кустов без обработки химиотерапией, 418,9 76,6 7,2 2833 29,5 83658 13,8

V Из семян, заготовленных с больных раком кустов без обработки химиотерапией (контроль) 422,6 77,9 7,1 2833 26,8 75844 13,9

НСРи 4,90 1,86 0,88

Показатели, характеризующие эффективность использования семенных подвоев при выращивании черенкового материала является: урожайность черенков. В первом варианте растения, в силу генетического потенциала, отсутствия латентной инфекции обладают преимуществами в росте, развитии, толерантности к неблагоприятным условиям внешней среды, в более высоком выходе стандартных черенков и урожайности по сравнению с другими вариантами.

Раскопки показали, что у растений, выращенных из семян, корни растений проникали глубже, их было больше на 94,2 г в слое почвы 81-100

см в слое почвы 101-200 см больше на 71,8 г, чем при посадке саженцами (табл. 10).Подвой оказывал влияние на урожайность.

Таблица 10 - Характер развития корневой системы 2-х и 3-х летних кустов (подвой Рипариа х Рупестрис 101-14, привой Саперави северный (ОАО «Янтарное» Мартыновского района Ростовской обл., 2006-2007 гг)

Варианты опытов Годы Масса корней по горизонтам почвы (см) Общий вес корней, г

0-20 21-40 41-60 61-80 81-100 101-200

1. Посадка маточника сеянцами 2006 29,5 55,0 83,3 112,0 55,3 32,6 367.,7

2007 39,2 125,6 240,7 297,3 99,7 66,5 879,0

ИТОГО 68,7 180,6 323,0 352,7 155,0 99,1 1246,7

2. Посадка маточника саженцами 2006 12,1 35,3 45,7 71,2 22,5 ■11,3 198,1,0

2007 20,1 78,0 51,3 88,5 38,3 16,0 227,2

ИТОГО 32,2 113,3 77,0 159,7 60,8 27,3 425,3

Сорт Саперави северный привитой на семенном подвое выращенный из семян, заготовленных с кустов больных бактериальным раком, обработанных химиотермотерапией имел урожайность винограда 48,3 ц/га. Выращенным из черенков заготовленных с кустов больных бактериальным раком, обработанных химиотерапией на 7,6 ц/га ниже. Выращенными из черенков, заготовленных с кустов больных короткоузлием обработанных химиотерапией ниже на 10,0 ц/га (табл. 11).

Таблица 11 - Влияние химиотермотерапии, типа подвоя на рост и урожайность пятилетних растений (подвой Рипариа х Рупестрис 101-14, привой Саперави северный ОАО «Янтарное» Мартыновского района Ростовской обл., 2008 г)

Варианты опыта Я о а" В <8 Щ « 8 о ю о а о i е о Сахаристость сусла г/дм3 ё о В о ч о § я « -5

я Ч м 8. м 3 Я * £ а ь-s о Н

I. Из семян заготовленных с кустов больных бактериальным раком обработанных химиотерапией. 139 61 48,3 223 7,1

II. Из черенков заготовленных с кустов больных бактериальным раком обработанных химиотерапией. 114 52 40,7 213 7,9

III. Из черенков, заготовленных с кустов больных короткоузлием обработанных химиотерапией. 98,7 53 38,3 199 8,1

IV. Из черенков, заготовленных с внешне здоровых кустов (обработанных химиотерапией) 100 56 42,8 220 7,3

V. Из семян заготовленных с кустов больных бактериальным раком (без обработки химиотермотерапией. контроль) 95,5 59 39,6 211 7,2

Определение химического состава сусла из винограда, полученного на семенных подвоях показало, что общая сахаристость сусла на 1-2,4 г/дм3 выше, чем на вегетативных. Что же касается титруемых кислот, то их содержание на семенных подвоях значительно ниже.

Таким образом, используя технологию оздоровления семян подвоев и выращенные из них маточные растения можно быстро и дешево создавать здоровые высоко рентабельные маточники. Внедрение новых приемов для создания супер-элитных маточников с применением семенных подвоев могут существенно повлиять переводу питомниководства на производство сертифицированных саженцев. Как нами установлено ранее, чем гуще посажены подвои, тем больше будет сеянцев и маточных растений со стержневой корневой системой. Поэтому в ОАО «Ключевое» была применена схема посадки сеянцев и саженцев подвоев сорта Рипариа х Рупестрис 101-14 по схеме 1 х 0,5 метра. Сеянцы образовывали мощную, довольно выровненную и сильно развитую корневую систему.

Они обладали более сильным приростом и лучшим вызреванием побегов по сравнению с саженцами.

Тип подвоя определял рост, развитие и их продуктивность. При посадке семенным подвоем, средняя длина одного побега была больше на 73 см. Вызревание побегов на 3,8% выше, чем при посадке саженцами. Средний диаметр побега больше на 0,2 см, площадь листовой поверхности на куст на 8,6 м2, чем при посадке саженцами (табл. 12.).

Таблица 12 - Рост и развитие пятилетних корнесобственных растений

подвоя Рипариа * Рупестрис 101-14 (ОАО «Ключевое», 2008 г)

Варианты опыта Средняя длина одного побега, см Вызревание Средний диаметр побега, см Площадь листовой поверхности, м2 на куст Выход черенков тыс. шт. в пересчете на 1 га

см %

I. На семенных подвоях 365,4 301,2 82,4 0,7 31,4 350

II. На вегетативных подвоях 292,4 230,0 78,6 0,5 22,8 210

НСР„5 2,88 1,58 2,82

Пятилетние насаждения в теплицах в ОАО «Ключевое», заложенных сеянцами, имеют выход черенкового материала в пересчете 350 тыс. штук на 1 га, а саженцами 210 тыс. штук на 1 га.

Правильное понимание роли семенного размножения подвоев позволит использовать их в практике виноградарства.

Применяя в условиях высокого агротехнического фона закладку супер - элитных маточников сеянцами подвоя, с целью создания насаждений свободных от бактериального рака, можно не только снизить себестоимость закладки насаждений, но и значительно увеличить продуктивность и долговечность.

2. Экономическая эффективность применения семенных подвоев для создания насаждений свободных от бактериального рака

Экономическая эффективность использования саженцев, привитых на вегетативно-размножаемых (выросщенных из черенков) и семенных подвоях применительно к сорту Саперави северный, нами рассчитана по затратам на ремонт виноградников, образовавшихся в течении первого года жизни растений на плантации. При этом учитывалась как стоимость посадочного материала, так и затраты на проведение ремонтных работ. С 2005 года в ООО «Виноградарь» Семикаракорского района Ростовской области была проведена работа по отработке технологии выращивания подвоев из семян с последующей их окулировкой сортами - привоями. Выращенные сеянцы были высажены в ООО «Виноградарь» на площади 6,5 га. В результате проведенных исследований, была разработана технологическая карта закладки маточных насаждений сеянцами с дальнейшей их зеленой прививкой на постоянном месте

Результаты этих расчетов на ремонт виноградников приведены в таблицы 13, из которых видно, что при закладке семенными подвоями они ниже на 21894 рубля, чем вегетативными.

Таблица 13 - Экономическая эффективность использования семенных подвоев при закладке виноградников (подвой Рнпариа Рупестрис 101-14, привой Саперави северный ОАО «Янтарное» Мартыновского района Ростовской области, 2008г)

Варианты опыта Количество высаженных растений на 1 га, шт Погибших растений на I га, на конец вегетации % Требуется растений на 1 га, для ремонта, шт Стоимость саженцев необходимых на ремонт, 1га (руб.) Стоимость работ по ремонту и уходу за насаждениями, (РУ6.) Всего затрат на ремонт 1 га, руб

I. Маточник, подвой семенной 3333 13 433 15155 20351 35506

II. Маточник, подвой вегетативный 3333 21 700 24500 32900 57400

Закладка виноградников оздоровленными сеянцами с дальнейшей их прививкой позволит, на наш взгляд, значительно продлить продуктивный возраст виноградников, создать виноградники с мощной стержневой корневой системой, позволяющей полнее использовать природные условия для удовлетворения биологической потребности виноградного растения.

Экономические показатели, характеризующие эффективность оздоровления семян, растений химиотермотерапией при выращивании черенкового материала сорта Саперави северный приведены в таблице 14.

В первом варианте растения, в силу генетического потенциала, отсутствия латентной инфекции обладают преимуществами в росте, развитии, толерантности к неблагоприятным условиям внешней среды.

Выход стандартных черенков с 1 га наивысший - 92657 шт., более высокий по сравнению с другими вариантами (табл. 14). В первом варианте маточные кусты являлись базовыми протестированными на вирусные и микоплазменные болезни. Поэтому стоимость черенка установлена 2 рубля. Черенки других вариантов нельзя отнести к сертифицированными их качество ниже, поэтому стоимость их составляет один рубль.

Таблица 14 - Экономическая эффективность оздоровление растений по вариантам опытов, (подвой Рипариа Рупестрис 101-14, привой Саперави северный ОАО «Янтарное» Мартыновского района Ростовской области)

...... Варианты опыта Выход черенков с 1 га, шт | Стоимость черенка, 1 шт/руб Стоимость валовой продукции, руб Затраты по уходу за виноградниками • га/руб _ | Затраты на проведение химиотермотерапии га/руб Итого затрат, руб Чистый доход с га/руб Производственная рентабельность, %

I. Из семян заготовленных с кустов больных бак. раком обработанных химиотерапией 92657 2 185314 72500 17428 89928 95386 51,5

11. Из черенков заготовленных с кустов больных бак раком (обработанных химиотерапией) 60415 1 60415 60800 17428 78228 -17813 -29,5

Ш.Из черенков, заготовленных с кустов больных короткоузлием обработанных химиотерапией 71587 1 71587 62400 17428 79828 -8241 -11,5

IV. Из черенков, заготовленных с внешне здоровых кустов (обработанных химиотерапией) 83658 1 83658 54900 17428 72328 +11330 +13,3

V. Из. семян заготовленных с кустов больных бак. раком (без обработки химиотерапией контроль) 75844 1 75844 70000 — 70000 5844 +7,7

Производственная рентабельность выращивание черенков согласно технологическим картам-сметам при закладке маточников сеянцами из семян заготовленных с кустов больных раком обработанных химиотермотерапии составило 51,5% из черенков заготовленных с больных кустов раком и

короткоузлием обработанных химиотермотерапией производство черенкового материала убыточно.

ВЫВОДЫ

На основании проведенных исследований и обобщения литературных данных, считаем возможным, сделать следующие выводы:

1. Применение для обработки семян щавелевой и муравьиной кислоты в наибольшей степени подавляет рост А. ШтеГаЫепз.

2. Наилучшие результаты при обеззараживании семян винограда, достигаются при обработке их в течении 3-х часов неомицином в концентрации 10 ЕД на 1 мл.

3. Чувствительность А. ШтеГааепз к различным антибактериальным средствам зависит от бактериостатической концентрации. Наилучшей концентрацией, угнетающей рост агробактерий: у гентамицина была 1,06 мкг/мл, полимиксина и энрофлоксацина 2,12 мкг/мл, а у хинозола 135 мкг/мл и у фурацилина 8,5 мкг/мл.

4. Опыление соцветий у кустов больных бактериальным раком и короткоузлием, здоровой пыльцой сортов винограда показало, что при обработке больных кустов до цветения винограда щавелевой кислотой (концентрации 5% раствора) с расходом 100 мл. на куст, с последующим укрытием их полиэтиленовой пленкой, под которой температура воздуха достигала выше 50°С, оказало ингибирующее действие и потерю патогенности бактерий и вирусов.

5. Тип подвоя влияет на приживаемость, рост и развитие привитых растений. Семенной подвой способствует формированию более мощной и физиологически активной корневой системы и надземных органов, в сравнении с подвоем размноженным вегетативным способом.

6. Закладка виноградников оздоровленными сеянцами с дальнейшей их прививкой требуемыми сортами позволяет получать более высокие показатели по приживаемости, долговечности растения, создавать виноградники с более развитой стержневой корневой системой, чем при посадке саженцами.

7. При проведении бактериального мониторинга, привитых на различных подвоях растений, установлено, что среди прочих причин массового распространения бактериального рака, вегетативное размножение, помимо способности поддерживать генетическую константность, имеет, и отрицательное свойство накапливать и передавать вегетативному потомству различные заболевания.

8. Симптомы бактериального рака и возбудителя короткоузлия не были обнаружены ни в одном случае у растений, выращенных из семян, где больные кусты обрабатывались химиотермотерапией.

При семенном размножении передача возбудителей болезни уменьшается в десятки раз по сравнению с вегетативным размножением.

9. Экономия затрат на ремонт виноградников с использованием оздоровленных семенных подвоев при их закладке, составила в сравнении с

вегетативными применяемыми в настоящее время в производств 21894 рублей на га.

10. Рентабельность способа оздоровления растений обработкой химиотермотерапией при производстве сертифицированных черенков самая высокая на семенных подвоях по сравнению с вегетативными.

11. Стоимость закладки 1 га виноградника на семенном подвое с дальнейшей прививкой и уходными работами за однолетними насаждениями составляет 82574 рублей, а на вегетативном подвое дороже в 6,4 раза.

ПРЕДЛОЖЕНИЕ ПРОИЗВОДСТВУ

Для получения семян и выращивания сеянцев и саженцев высших категорий качества следует использовать способ химиотермотерапии: проводить обработку больных кустов до цветения винограда щавелевой кислотой (концентрация 5% раствора) с расходом 100 мл. на куст, с последующим укрытием их полиэтиленовой пленкой под которой высокая температура воздуха, усиливает ингибирующее действие и потерю патогенности бактерий и вирусов.

Для исключения повторного заражения семян от бактериального рака их перед посевом следует обеззараживать щавелевой или муравьиной кислотой с концентрацией 312 мкг/мл в течение 4-х часов.

На второй год после посадки, сеянцы подвоя следует прививать глазком, используя зеленые побеги привоя с маточных кустов, протестированные на бактериальный рак и короткоузлие.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Публикации в изданиях, определенных ВАК Минобразования и науки РФ:

1. Маслова, Е.Б. Получение семян, свободных от бактериального рака и

вирусов. / Л.А. Аверченко, Е.П. Шкуланова, Е.Б. Маслова // Виноделие и виноградарство. - №4, 2008. - С. 40-41.

2. Маслова, Е.Б. Влияние антитранспирантов на приживаемость

саженцев винограда на Терско - Кумских песках Чеченской Республики. / A.C. Магомедов, Г.П. Малых, Л.А. Аверченко, Е.Б. Маслова // Виноделие и виноградарство. - №3,2008 - С. 42-43.

Публикации в других изданиях:

3.Маслова, Е.Б. Оздоровление подвоя сорта Берландиери * Рипариа Кобер 5ББ при семенном размножении. / Г.П. Малых, П.Г. Малых, Л.А. Аверченко, М.Г. Барило, Е.Б. Маслова // Материалы международной научно-практической конференции, г.Новочеркасск, 2008. - С. 197-203.

4. Маслова, Е.Б. Испытание нового способа получения семян свободных

от бактериального рака и вирусов. / Л.А. Аверченко, Е.П. Шкуланова, Е.Б. Маслова // Тематический сборник материалов

Международной научно—практической конференции, Северо— Кавказский зональный НИИ садоводства и виноградарство. г.Краснодар, 2008.- С. 178.

5.Маслова, Е.Б. Технология получения супер-элитных маточников подвойных сортов винограда, свободных от бактериального рака. / Л.А. Аверченко, Е.П. Шкуланова, Е.Б. Маслова // Материалы международной научно-практической конференции. - п.-Персиановский, 2008.- С. 204

6. Маслова, Е.Б. Роль семян в получении здоровых растений. / Л.А.

Аверченко, Е.П. Шкуланова, Е.Б. Маслова // Тематический сборник материалов Международной научно-практической конференции. Северо—Кавказский зональный НИИ садоводства и виноградарство. г.-Краснодар, 2008. - С. 178.

7. Маслова, Е.Б. Влияние антибиотиков и органических кислот на

возбудителя бактериального рака. / Г.П. Малых, Л.А. Аверченко, Е.Б. Маслова // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Инновационное обеспечение развития плодоовощного комплекса Юга России» - п.- Персиановский, 2008. - С. 110-112.

8. Маслова, Е.Б. Влияние саженцев семенного и вегетативного потомства

на приживаемость, рост и развитие растений. / Г.П. Малых, Л.А. Аверченко, A.C. Магомадов, Е.Б. Маслова // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Инновационное обеспечение развития плодоовощного комплекса Юга России» - п.-Персиановский, 2008. - С.112-117.

Маслова Елена Борисовна

МЕТОДЫ ОЗДОРОВЛЕНИЯ ВИНОГРАДА ОТ БАКТЕРИАЛЬНОГО РАКА И КОРОТКОУЗЛИЯ

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук

Подписано в печать 23.11.09 Печать оперативная Усл. печ. л. 1 Заказ № 2965 Тираж 100 экз. Издагельско-полшрафическин комплекс «Биос» РГУ 344091, г.Ростов-на-Дону, ул.Зорге, 28/2, корпус.5 «В»

Содержание диссертации, кандидата сельскохозяйственных наук, Маслова, Елена Борисовна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные средства и приемы получения здоровых саженцев и разработка новых технологий

1.2. Возбудитель бактериального рака, его распространение вредоностность и меры борьбы

1.3 Вредоносность короткоузлия и способы получения здорового посадочного материала

2. МЕСТО, МЕТОДИКА И ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Место проведения исследований

2.2 Объекты исследований

2.3 Методика исследований

2.4 Схемы опыта

2.5 Почвенно-климатические и метеорологические условия зоны проведения исследований

2.6 Особенности метеорологических условий в годы исследований

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Влияние органических кислот и антибиотиков химиопрепаратов на возбудителя бактериального рака

3.2 Влияние химиотермотерапии на получение гибридных семян и корнесобственных растений, свободных от бактериального рака и короткоузлия

3.3 Влияние химиотермотерапии и типа подвоев, на приживаемость, рост, развитие и продуктивность привитых растений винограда

4. Экономическая эффективность применения семенных подвоев для создания насаждений свободных от бактериального рака и короткоузлия

ВЫВОДЫ

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Методы оздоровления винограда от бактериального рака и короткоузлия"

Актуальность исследований. Одним из существенных резервов повышения урожайности винограда является его защита от болезней и вредителей. Проблема сохранения продуктивности насаждений усложняется тем, что наряду с типичными болезнями винограда, против которых производство уже давно применяет эффективные меры борьбы, в последнее время значительно возросла вредоносность бактериального рака, А. tumefaciens который является полифагом. Установлено, что патоген поражает растения 643 видов, относящихся к 331 роду из 93 семействам. Развитие рака в новых районах привитого виноградарства, можно сравнить по вредоносности с филлоксерой. Так, например, в Краснодарском крае при обследовании 38% площадей привитых виноградников поврежденные раком кусты составляли от 20 до 80% в зависимости от сорта.

Массовое проявление опухолеобразования при заготовке черенков с больных раком маточников наблюдается уже на 3-й год после посадки саженцев, а процент больных растений иногда достигает 50%. Это приводит к преждевременной гибели кустов и изреженности виноградников еще до их вступления в плодоношение. С возрастом гибель кустов увеличивается и приходится производить раскорчевку виноградников на третий и четвертый год после посадки. Однако на сегодняшний день вопросы борьбы с этим заболеванием недостаточно исследованы и требуют срочного и пристального изучения.

Другим опасным заболеванием винограда является короткоузлие, которое легко передается при вегетативном размножении зараженных материнских растений (через черенки, подвои или привои). Кроме того, если здоровые привои прививаются на зараженные подвои или наоборот, то через несколько месяцев после срастания компонентов прививки все растение оказывается зараженным вирусом короткоузлия.

Снижение урожайности кустов, больных короткоузлием, достигает 90%. Пораженный виноград вырождается, болезнь уменьшает укоренение черенков и приживаемость саженцев. Вирус короткоузлия обнаружен в оболочке семян и пыльце винограда.

Ряд зарубежных авторов Cilmer, Kelts, Vytoto, Fasohenbery, Hammer (1968) и другие считают, что рак и многие вирусные болезни передаются потомству не только вегетативным путем, но и через семена винограда. В тех случаях, когда вирус передается через семена, этот источник инфекции может играть огромную роль в распространении болезни.

Обработка подготовленных к посадке черенков, находящихся в покое, горячей водой (55°С) в течение 5 мин не освобождает растения винограда от вируса короткоузлия. Однако вегетирующие растения реагируют на тепловую терапию. Бови (1967) первый применил в отношении лоз, зараженных короткоузлием, воздействие температурой 37—38°С в течение нескольких недель [122]. Удалить вирус ему не удалось, но симптомы заболевания растений были на некоторое время ослаблены.

Усугубляется положение так же тем, что в настоящее время многие селекционеры передают свои сорта в производство уже больными бактериальным раком и вирусными болезнями. По данным В.А. Урсу (1983), заражение сортов винограда происходит уже при их создании. Клоны вновь полученных европейских сортов селекции Г.М. Караджи (1961) оказались зараженными вирусами на 97,1%, комплексноустойчивые сорта и формы селекции Н.И. Гузуна (1975) на 81%, сорта селекции М.С. Журавля (1976) на 57%, милдьюустойчивые сорта селекции Д.Д. Вердеревского (1972) на 28%, клоны подвоев Рипариа х Рупестрис 101-14 и Берландиери х Рипариа Кобер 5ББ селекции И.П. Гаврилова (1975) были заражены на 18,2%.

Результаты многочисленных опытов, в которых с целью освобождения растений от бактериального рака использовались антираковые и антивирусные препараты, принесли разочарования. Имеется несколько сообщений об излечении растений с помощью таких препаратов, однако при этом выводы авторов основываются на экспериментах с очень небольшим числом растений, или же сами результаты экспериментов могут быть интерпретированы иначе. Ни один из способов химической обработки растений с целью избавления их от вирусов сам по себе еще не нашел применения в практике.

Цели и задачи исследований

Целью настоящей работы является обоснование семенного способа размножения подвоев, как метода получения безвирусного и безбактериального посадочного материала и экспериментальное применение химиотермотерапии для получения здоровых семян, что позволит получить новые сорта и создавать маточники, свободные от инфекций.

В задачу исследований входило:

• Определение устойчивости A. tumefaciens к органическим кислотам и к антибактериальным препаратам;

• Изучение микрофлоры семян винограда, полученных со здоровых и больных виноградных кустов;

• Уточнение возможности обеззараживания семян винограда при их искусственной контаминации при помощи антибактериальных средств;

• Исследование возможности освобождения от бактериального рака и короткоузлия воздействием химиотермотерапией для получения здоровых семян и растений;

• Изучение влияния семенных и вегетативных подвоев на передачу возбудителя бактериального рака и короткоузлия, а также приживаемость, рост и развитие растений винограда;

• Разработка приемов индикации и выделения A. tumefaciens из пасоки, побегов и семян винограда.

Научная новизна. Получен новый научный материал по устойчивости A. tumefaciens к некоторым органическим кислотами и антибактериальным препаратам. Впервые проведено комплексное изучение нового способа химотермотерапии при создании новых сортов винограда. На основе разработанного нами способа химиотермотерапии при проведении гибридизации с использованием инфекционной пыльцы получены семена и растения, свободные от бактериального рака и короткоузлия. Также впервые обоснована экономическая эффективность создания суперэлитных маточников подвоя с использованием их оздоровленных сеянцев. Всем разработкам дана экономическая оценка.

Практическая значимость. Практическая значимость состоит в том, что предлагаемая производству технология получения семян подвоя, свободных от бактериального рака и короткоузлия позволяет получать насаждения здоровых маточников подвоя с сильно развитой заглубленной стержневой корневой системой. Это позволяет быстро создать базовые маточники.

Технология апробирована в хозяйствах Ростовской области: в ОАО «Янтарное», ООО «Виноградарь», ОАО «Ключевое», в МИП «Центр питомниководетва» г. Анапа. В ООО «Виноградарь», выращены сеянцы, свободные от бактериального рака и короткоузлия и на площади 6,5 га заложены маточники. Внедрение способа химиотермотерапии позволит селекционерам создавать сорта, свободные от бактериального рака и короткоузлия и закладывать суперэлитные маточники этих сортов винограда.

Апробация работы. Результаты проведенных исследований и основные выводы настоящей работы докладывались на Совещаниях специалистов-виноградарей г. Краснодар (2005 г), на Международных научно-производственных конференциях п. Персиановский (2006 г), ГНУ ВНИИВиВ им. Я. И. Потапенко. (2007 г), на Шестой региональной научно-практической конференции молодых ученых «Научное обеспечение агропромышленного комплекса» г. Краснодар (2008 г).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 2 работы в изданиях, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 146 страницах текста, включает введение, обзор литературы, методику и условия проведения работы, результаты исследований, экономические расчеты, выводы и рекомендации производству; содержит 25 таблицы, 21 рисунка, список использованной литературы включает 230 наименований, в том числе 118 иностранных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Плодоводство, виноградарство", Маслова, Елена Борисовна

ВЫВОДЫ

1. Применение для обработки семян щавелевой и муравьиной кислоты в наибольшей степени подавляет рост A. tumefaciens.

3. Чувствительность A. tumefaciens к различным антибактериальным средствам зависит от бактериостатической концентрации. Наилучшей концентрацией, угнетающей рост агробактерий: у гентамицина была 1,06 мкг/мл, полимиксина и энрофлоксацина 2,12 мкг/мл, а у хинозола 135 мкг/мл и у фурацилина 8,5 мкг/мл.

9. Экономия затрат на ремонт виноградников с использованием оздоровленных семенных подвоев при их закладке, составила в сравнении с вегетативными применяемыми в настоящее время в производств 21894 рублей на га.

ПРЕДЛОЖЕНИЕ ПРОИЗВОДСТВУ

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата сельскохозяйственных наук, Маслова, Елена Борисовна, Новочеркасск

1. Абрашева, П. Мозаика по нерватурапа на листата на лозата в България. /П. Абрашева// Градинска и лозарска наука. 1978. - XVI,1979, №4. - С.87-90

2. Абдуллиев, А.И. Эффективность внедрения новой технологии в виноградарстве. / А.И. Абдуллиев // Повышение эффективности производства и улучшение качества винограда и вина. — Новочеркасск. 1980. - С.13-14.

3. Агротехнические исследования по созданию интенсивных виноградных насаждений на промышленной основе. — Новочеркасск, 1978.-173 с.

4. Архипов, М.В. Жизнь популяций в гетерозисной среде. / М.В. Архипов, Л.И. Никитина // Материалы 2-го Всерос. популяц. семинара. Йошкар-Ола, 1998-1999. -4.1. С.106-108.

5. Аскеров, Э.С. Перспективные подвои для винограда сорта Степняк. / Э.С. Аскеров // Виноград и вино России. 2001. - №2. - С.34-35.

6. Азарянская, Н.Н. Возделывание виноградных насаждений на семенных подвоях. / Н.Н Азарянская. // Ж. Виноделие и виноградарство № 4, 2006, 40-41.

7. Бузин, Н.П. Методика полевых опытов в виноградарстве/ Н.П. Бузин // Вопросы рационального ведения виноградарства. — Ростов-на-Дону. -1960. С.158-171.

8. Бутенко, Р.Т. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. / Под ред. Р.Т. Бутенко М.: Наука, 1964. - 171 с.

9. Браун, А. Опухолевая клетка снова становится нормальной. / А. Браун / // Молекулы и клетки. М.: МИР, 1967.- С.84-93

10. Вердеревский, Д.Д. Короткоузлие на виноградниках Молдавии. / Д.Д. Вердеревский, Н. Лукина. // Виноделие и виноградарство СССР. -1948. №5.-С. 29-31.

11. Вердеревский, Д.Д. Вирусные заболевания винограда в Молдавии. Вирусные болезни сельскохозяйственных растений и меры борьбы с ними. / Д.Д. Вердеревский, Е.А. Звягина // Киев. - 1966. - С. 462-469.

12. Вердеревская, Т.Д. Хронические болезни плодовых культур и винограда. / Т.Д. Вердеревский // Кишинев, 1968. - С.135.

13. Вердеревская, Т.Д. Методы получения безвирусного посадочного материала винограда. / Т.Д. Вердеревский, В.Г. Маринеску // Садоводство, виноградарство и виноделие Молдавии. 1972. - №2. -С. 38, 42

14. Вердеревский, Д.Д. Хронические болезни плодовых культур и винограда. / Д.Д. Вердеревский, Т.Д. Вердеревская, Е.А. Звягина/ — Кишинев. 1967. - 137с.

15. Гохин, А. Скручивание листьев. // Вирусные болезни ягодных культур и винограда. / Под ред. А. Гохин М.:Колос, 1975. - 286 с.

16. Гельцер, Р.Ю. Симбиоз с микроорганизмами основа жизни растений. / Р.Ю. Гельцер - Москва, 1990. - 235 с.

17. Гвоздяк, Р.И. Изучение серологических свойств фитопатогенных бактерий. / Р.И. Гвоздяк, И.Д. Симонович // Бактериологические болезни растений. -М.: Колос, 1981. С. 146-156.

18. Гусаренко, Т.И. Бактериальный рак на виноградниках Краснодарского края. / Т.И. Гусаренко, М.И. Миронова // Виноградарство и виноделие СССР.- 1975.-№4.-С. 32.

19. Долгова, А.Е. Влияние условий хранения семян винограда навсхожесть и развитие сеянцев. / А.Е. Долгова // Сад и огород. 1959. -№9. - С. 65-68.

20. Долгова, А.Е. Причины низкой всхожести семян винограда. / А.Е. Долгова // Агробиология. 1960. - №2. - С. 302-305.

21. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. / Под ред. Б.А. Доспехов -М.: Колос,- 1965.-423 с.

22. Жуков, А.И. Прогрессивные приемы получения виноградных саженцев / А.И Жуков / // Проблемы развития виноградарства в Краснодарском крае. Новочеркасск. — 1984. - С. 18-23.

23. Жуков, А.И. Новые научные разработки Анапской зональной опытной станции виноградарства и виноделия, рекомендуемые к внедрению в производство. / А.И Жуков // Анапа. — 1997. — С.3-7.

24. Израильский, В.П. Успехи современной биологии. / Под ред. В.П. Израильский. М.: Колос, 1947, т.23.

25. Израильский, В.П. Руководство для изучения бактериальных болезней растений. / Под ред. В.П. Израильский. М.: Колос, 1975. 286 с.

26. Колесник, JI.B. Физиологические основы прививки винограда. / JI.B. Колесник / //Труды Кишиневский с/х институт. —1956. т. 10. — С.71-76.

27. Колесник, З.В. О некоторых анатомо-морфологических особенностях прививочных компонентов винограда / З.В. Колесник // Бюллетень науч.- технич. информ. Молд. НИИСВиВ. 1961. - №1. - С.22-27.

28. Каранжи, Г.М. Использование облученной пыльцы в селекционной работе / Г.М. Каранжи, B.C. Семин //Садоводство, виноградарство и виноделие Молдавии. 1961. - №2. - С.34-36.

29. Кренке, Н.П. Теория циклического старения и омоложения растений и ее практическое применение. / Под ред. Н.П. Кренке- М.: Колос, 1970. -С. 135.

30. Леманов, Н.Б. К вопросу о методах борьбы с бактериальным раком винограда: / Н.Б. Леманов, П.Ф. Бергер // Тезизы 3-й Всеросс. Конф. По бактериальным болезням растений. Тбилиси: МСЦНИЕРСБС, 1976. -С. 150-152.

31. Леманова, Н.Б. Бактериальный рак винограда и способы борьбы с заболеванием. / Под ред. Н.Б. Леманова. Кишинев, «Штинца»., 1988. -177 с.

32. Маринеску, В.Г. Состав и распространение вирусных болезней винограда в Молдавии. / В.Г Маринеску // Пути повышения урожайности плодовых культур винограда. Кишинев. - 1972. - С. 103-110.

33. Маринеску, В.Г. Вирусные заболевания винограда в Молдавской ССР и обоснование мер борьбы с ними: / В.Г Маринеску // Дис. канд. с.-х. наук. Кишинев. - 1973.

34. Маринеску, В.Г. Состояние изученности вирусных заболеваний винограда. / В.Г Маринеску, Т.Д. Вердеревская // Вирусные, микроплазменные и бактериальные болезни плодовых культур и винограда в Молдавии. Кишинев, 1980. - С. 11-20.

35. Маленин, И. Производства на свободен от вируси, от бактериален рак и еакариозна лозов посадъин материал в България. / И. Маленин, П. Абрашева, Тодорова // Лозарство и винарство. 1988. -№6. - С. 9-12.

36. Малтабар, Л.М. Создание сертифицированных маточников винограда суперинтенсивного типа и технология производства черенков на них. / Л.М. Малтабар, Н.Д. Магомедов, Д.М. Казаченко, Е.Я. Якименко //

37. Виноград и вино Росси. -1997. №4. - С.6-8.

38. Малтабар, Л.М. Система и суперинтенсивная технология производства сертифицированного виноградного посадочного материала. / JI.M. Малтабар // Перспективы производства привитого посадочного материала винограда. Новочеркасск, 2001. - С. 7.

39. Малых, Г.П. Состояние и перспективы развития питомниководства в России. / Г.П. Малых / // Виноград и вино России. 1989.- №1. - С.8-10.

40. Малых, Г.П. Ускоренное размножение винограда. /Под ред. Г.П. Малых. Ростов-на-Дону. 1992 - 216 с.

41. Малых, П.Г. Технология производства привитых саженцев на Дону. / Г.П. Малых // Виноград и вино России. 1998. - №1. - С.9-10.

42. Малых, Г.П. Эффективный способ выращивания саженцев винограда. / Г.П. Малых, В.А Новикова, П.Г. Малых, С.И. Мельникова, О.И. Колесникова // Виноград и вино России. 1999. - №1. - С. 12-13.

43. Малых, Г.П., Способы повышения выхода сеянцев винограда. / Г.П. Малых, А.Ю Потапенко, М.Г. Барило, Т.Г. Киселева // Виноделие и виноградарство. 2004. -№2. - С.46-47.

44. Малых, Г.П. Выделение возбудителя бактериального рака при вегетативном размножении винограда. / Г.П. Малых, А.С. Овод, Т.Г. Киселева, П.Г. Малых / // Виноделие и виноградарство. — 2004. -№5. — С.26-28.

45. Малых, Г.П. Развитие питомниководческой базы и ее влияние на устойчивое развитие виноградарства. / Г.П. Малых // Проблемы устойчивого ведения виноградарства. Новочеркасск, 2004. - С. 120

46. Малых, Г.П. Семенное размножение — как способ борьбы с бактериальным раком. / Г.П. Малых, Т.Г. Киселева // Актуальные проблемы и пути ее решения в садоводстве, овощеводстве и виноградарстве Дона. — Персиановский: ДонГАУ, 2004. — С 39-40.

47. Малых, Г.П. Закладка привитых виноградников методом зеленой прививки. / Г.П. Малых, М.Г. Барило, Т.Г. Киселева / // Виноделие и виноградарство. 2004. - №3. - С 40-41.

48. Малых, Г.П. Новые технологии выращивания посадочного материала. / Г.П. Малых, Т.Г. Киселева, П.Г. Малых // Виноделие ивиноградарство. 2005. - №5. - С 26-27.

49. Малых, Г.П. Теория и практика производства сертифицированного посадочного материала. / Г.П. Малых, Т.Г. Киселева, П.Г. Малых // Современные достижения в биотехнологии в виноградарстве и других отраслях сельского хозяйства. Новочеркасск, 2005.

50. Малых, Г.П. Ускоренное создание оздоровленных привойных маточников зеленой прививки на постоянном месте / Г.П. Малых, А.С. Овод, Т.Г. Киселева, П.Г. Малых // Виноделие и виноградарство.-2006.-№6.- С 36-37.

51. Мержаниан, А.С. Селекция в виноградарстве. / А.С. Мержаниан // Ростов-на-Дону, 1928. С. 54.

52. Милкус, Б.Н. Вирусные и микроплазменные заболевания винограда на Украине (Диагностика, патогенез, меры борьбы). / Б.Н. Милкус. // Автореф. докт. с.х. наук. Киев 1982. - 47.с

53. Миренеску, В.Г. Вирусные болезни сельскохозяйственных растений и меры борьбы с ними. / В.Г. Миренеску, В.В. Бондарчук, И.Г. Цуркан // Л., 1978. С.49-50.

54. Методические указания по проведению агробиологических учетов и наблюдений по виноградарству: сб. науч. тр./ СКЗНИИСиВ — Краснодар, 1982. 28 с.

55. Негруль, A.M. Генетические основы селекции винограда. // Труды по прикладной ботанике и селекции. / A.M. Негруль // Серия 8. -Москва. - 1935.-С. 57.

56. Негруль, A.M. Селекция винограда. / A.M. Негруль, М.С. Журавель // -Сельхозизд., 1955. С. 152-165.

57. Николаева, М.Г. Некоторые итоги изучения покоя семян. / М.Г. Николаева // Ботанический журнал. 1977. - №62 (9). - С. 1350-1367.

58. Овод, А.С. О возможности заражения винограда бактериальным раком через семена. / А.С. Овод, JI.A. Майстренко // Виноделие виноградарство. 2002. - № 3. — С.44-45

59. Петрова, М.Ф. Исследование качества спаек привитых виноградных саженцев. / М.Ф. Петрова // Виноделие и виноградарство СССР, 1978, №3. С.25-26.

60. Погосян, С.А. О природе семенных растений стародавних сортов и их гибридов корнесобственного винограда. /Под ред. С.А. Погосян -Ереван, 1955.-200 с.

61. Погосян, С.А. Селекция столовых и технических сортов винограда. / С.А. Погосян, С.С. Хачатрян //-Ереван, 1983. С. 51-58.

62. Потапенко, А.И. Будущее российского виноградарства начинается сегодня. / А.И. Потапенко // Виноделие и виноградарство. 2003. -№4.-С. 18.

63. Перстнев, Н.Д. Теория и практика окулировки винограда в Молдавии. / Н.Д. Перстнев // Новое в виноградном питомниководстве ВНР и МССР. Кишинев. - 1984. - С.203-231.

64. Перстнев, Н.Д. Совершенствование существующей системы и разработка технологии производства саженцев способом окулировки на маточниках подвоев. / Н.Д. Перстнев // Автореф. дис. Кишинев, 1985.

65. Перстнев, Н.Д. Замена сортового состава виноградных насаждений прививкой. / Н.Д. Перстнев // Виноделие и виноградарство СССР. -1987. №2. - С.6-9

66. Перспективы производства привитого посадочного материала винограда //Материалы науч.-метод. совещания секции вин. и виноделия отд. растениеводства Россельхозакадемии. Новочеркасск, 2001.-С. 46-50.

67. Султанова, О.Д. Бактериальные заболевания винограда и изучение их распространения в Молдавии. / О.Д. Султанова, Н.Б. Леманова //В кн.: Защита винограда и плодовых культур от вредителей и болезней. Кишинев, 1979, С. 84-87.

68. Султанова О.Д. Защита винограда и плодовых культур от вредителей и болезней. / О.Д. Султанова, И.Н. Найденова // Кишинев, 1979, С. 5055.

69. Султанова, О.Д. Изучение вредоносности бактериального рака винограда и штаммового состава возбудителя в Молдавии. / О.Д. Султанова, Н.Б. Леманова // Микробиологический журнал, т. 42, в. I, Киев, 1980, С. 49-52.

70. Султанова, О.Д. Изучение штаммового состава возбудителя бактериального рака винограда для разработки методов диагностики заболевания. / О.Д. Султанова. // Тезисы докладов на IV Всесоюзном совещании. Ереван, М., 1980, С. 54-56.

71. Султанова, О.Д. Изучение пятнистостей бактериального происхождения на листьях и побегах винограда. / О.Д. Султанова, Н.Б.

72. Леманова // Повышение эффективности производства и улучшение качества винограда и вина. Новочеркасск, 1980, С. 57-59.

73. Султанова О.Д. Методические указания по диагностике бактериального рака винограда. / О.Д. Султанова, Р.И. Гвоздяк, В.И. Перепнихатка, П.М. Штеренберг // В надзаг. ВАСХНИЛ, М., 1981, 20 с.

74. Султанова, О.Д. Усовершенствование метода диагностики возбудителя бактериального рака для фитосанитарного отбора свободного от инфекции растений винограда / О.Д. Султанова -Кишинев, 1981, с. 59-60.

75. Султанова, О.Д. Методы и результаты оздоровления селекционного материала винограда от хронических болезней. / О.Д. Султанова, В.Г. Маринеску, Н.Б. Леманова, В.В. Бондарчук // Селекция устойчивых сортов винограда. Кишинев, «Штиинца», 1982, с. 93-99.

76. Султанова, О.Д. Радиационная стерилизация почвы для выращивания супер-элитного посадочного материала винограда. / О.Д. Султанова, Н.Б. Леманова, А.Я. Земшман // — Садоводство, виноградарство и виноделие Молдавии, 1983, № 8, с. 38-39.

77. Султанова, О.Д. Биология возбудителя бактериальных болезней винограда в условиях Молдавии и меры борьбы с ними. / О.Д. Султанова / Автореф. На соиск. уч. степени канд. биолог, наук. -Тбилиси, 1984. 19 с.

78. Урсу, В.А. Направленное выращивание привитого материала на маточниках интенсивного типа. / В.А. Урсу / Новое в виноградарском питомниководстве ВНР и МССР. Кишинев, 1983. - С. 135-149.

79. Хьюитт, У. Вирусные и вирусоподобные болезни винограда // в кн. Вирусные болезни ягодных культур и винограда. / У. Хьюитт М.: Колос, 1975. - С. 264-265.

80. Хонелидзе, Ш.Л. Разработка рациональной технологии выращивания подвойного материала и привитых саженцев винограда. / Ш.Л. Хонелидзе // Автореф. дис. канд. с/х. наук — Тбилиси. 1979. - 23 с.

81. Хохлов, В.И. Вирусные заболевания на виноградниках Краснодарского края / В.И. Хохлов / Вирусные и микроплазменные заболевания плодовых, ягодных культур и винограда в Молдавии. Кишинев. -1983.-С. 58-63.

82. Чернышева, З.С. Качество посадочного материала и бактериальный рак. / З.С. Чернышева, М.Ф. Петрова, Н.А. Жименко / Виноделие и виноградарство СССР, 1978, №3.-С.27-28.

83. Чернышева, З.С. Бактериальный рак как причина изреживания виноградных насаждений в Одесской области. / З.С. Чернышова, B.C. Назарчук //Проблемы онкологии к тератологии растений. Л.: Наука. -1975. — С.155-157.

84. Чумаевская, М.А. Изучение бактериозов декоративных растений в СССР / М.А. Чумаевская / Биологические науки. 1979. № 2. С. 5-11.

85. Чичинадзе Ж.А. Вредители, болезни и сорняки на виноградниках. / Ж.А. Чичинадзе, Н.Я. Якушина, А.С. Скориков, Е.П. Странишевская /Киев: Аграрна наука, 1995. — 303 с.

86. Чесноков, Ю.В. Устойчивость растений к патогенам / Ю.В. Чесноков / Сельскохозяйственная биология 2007 № 1.

87. Энциклопедия виноградарства //Односторонняя веерная форма куста с наклонным подвойным штамбом. // Кишинев: Глав. ред. Сов. энциклопедии. 1986. - т. 2. - с. 312.

88. Alghisi Р. 1954. Sulla degenerazione infettiva della vite. Ann. Sperim. Agraria (n. s.), No. 8, Suppl. 3, 36—76; 4, 1—16; 5, 1—38.

89. Anon 1962. Compte rendu, Troisieme Conference Internationale pour l'Etude des Maladies a Virus de la Vigne. Lisbon, May 21—26, 1962. Bui О. IV. 35 (381), 1456—1478.

90. Avramov L. Wirkung der foliaren fertilisatoren auf die entwicklung der pfropfreben. 5kh. Intern. Colleg// Control Plant Nutr. 1980. - S. 2-3.

91. Allen W.R., Tremaine J.H. Immune response to a plant virus bound or serologically precipitated in agar. Phytopathology, 52, 721. Abstr.

92. Amici Adriana, Baldacci E., Belli G., BelloE., RaskiD. J. Refatti

93. E. 1964. Ricerche con Xiphinema index Thorne and Allen isolato in vig-neti italiani, qual ё vettore di vidus della vite. Riv. Pat. Veg., S. 3 (4), 120—128.

94. Burr T.J., C. Be azzi., S. Sule, L. Otten. Biology of Agrobacterium vitis and the development of disease control strategies// Plant Disease. Vol. 82. -No.12.- 1288-1297.

95. Berhard C. Frutt bud studies. 11. The sultana: diff renoiation and developmend of the fruit buds// Count. Sci.Ind. Res. 1933. - 6. -P. 258294.

96. Boubals D., Nazemille A. 1966. La viticulture de lAzerbaidjan iranien. Ann. Ecole Nat. Agron. Montpellier (n. s.), 31 (1) 1—106.

97. Branas J., Bernon G., Levadoux L. 1938. Les maladies de degenerescence de la vigne. Compte rendu, Congres Viticole de Macon, January 16,1938. Union Nat. Ingen. Agricoles (Paris, 1938), pp. 11—13.

98. Baldacci E., Amici Adriana, Bonola P., Bello E., Fogliani G., Refatti E. 1960. Trasmissione su piante erbacee della virosi della vite nota come «degenerazione infettiva.» Ricerca Scientifica, 30, 981—983. Also: Nature (London) 190, 371—372, 1961.

99. Baldacci E., Ciferri R., Corbetta F., Fogliani A., Refatti E. 1961. Piante «test» arboree per la diagnosi della «degenerazione infettiva» della vite. Riv. Pat. Veg. S. 3(1), 261—293.

100. Bode H.R. 1937. Ueber die Entwicklungsgeschichte der intracellularen Stabe im Cambium. Ein Beitrag zum Problem der Reisigkrankheit des Weinstocks. Gartenbauwiss, 11,272—282.

101. Bercks R., Stellmach G. 1966. Nachweis verschiedener Viren in Reisigkrankheiten: Reben. Phytopath. Z, 56, 288—296.

102. ВгискЬаиег H., Rudel M. 1961. Untersuchungen uber die Viruskrankheiten der Rebe. II. Mechanische Uebertragung der Reisigkrankheit auf krautige Testpflanzen. D. Wein-Wiss., 16, 113—136.

103. BruckbauerH., Rudel M. 1961. Untersuchungen fiber die Viruskrankheiten der Rebe. IV. Weitere Untersuchungen zur mechanischen Uebertragung der Reisigkrankheit auf krautige Testpflanzen. D. Wein-Wiss., 16, 1,97—220.

104. Bovey R. 1958. Etat actuel des connaissances sur les maladies a virus de la vigne. Vitis, I, 237—256.

105. Cavara F. Tubercolosi della vite. Intorno alia eziolodia de alcune malatte di piante cultivate// Sperimentali Agrarie Ltaliane. 1897. - Vol/30. - p.483-487.

106. Crecu V., Nedelcu G. Cultira vitelor altoite in teren bilonat prin acoperirea partiala cu pamint la plantare H Prod. Veget. Hortic. 1982. - 2-.S.41-44.

107. Chanerin E., Lang I. Viticulture mauerne. Paris. - 1955. -S.22.

108. Cilmezh, M. Kelts I.J. Tzansmission of to bacco mosaic virus in grape seeds. // Phi topatholodu. 1968. - P. 58, 277-278.

109. Cozy L., Hewitt. W. B.-Phytopath-1968-58-1316 1320.

110. Ciferri R., Corte A. I960. Experimental transmission of vine «infectious degeneration virus» and its occurrence on various hosts in Italy. F. A. O. Plant Prot. Bui. 8, 79—81.

111. Corte A., Ciferri R., Scaramuzzi G. 1959. Transmissione della «degenerazione infettiva» della vite sul Ligustrum lucidum Ait. ed altre specie arboree. Riv. Vitic. edEnol., Conegliano, 12, 239—248.

112. Cadman C.H., Dias H.F., Harrison B.D. I960. Sap-transmissible viruses associated with diseases of grapevine in Europe und North America. Nature (London), 187, 577—579.

113. Cornuet P., Martin C., Limasset P, 1950. Extraction du virus de la mosaique du dahlia (Marmor dahliae Holmes) a partir de dahlias infectes et obtention de son antiserum. С R. Acad. Sci. Paris, 231, 913—914.

114. Chapman H. D. (Editor). 1966. Diagnostic criteria for plants and soils. 793 pages. Univ. California Div. Agr. Sci., Riverside. (Published at Berkeley.).

115. Dias H.F. 1963. Host ranges and properties of grapevine fanleaf and grapevine yellow mosaic viruses. Ann. Appl. Biol., 51, 85—95.

116. Dias H. F., Harrison B. D. 1963. The relationship between grapevine fanleaf, grapevine yellow mosaic, and arabis mosaic viruses. Ann, Appl. Biol., 51,97—105.

117. Dommergues P. 1961. Action des rayons gamma sur les bourgeons de la variete de poirier Max Red Bartlett. Ann. Amel. Plantes, 11, 349—356.

118. Dias H.F. L'etat actuel des connaissances sur les maladies a virus de la vigne. Bui. О. I. V. 36(393), 1280—1300.

119. Durquety P M. 1954. Anomalies pigmentaires et morphologiques chez le Vitis vinifera L., C. R. Acad. Sci. Paris, 239(8), 593—595. (August 23.)

120. Durquety P. M. 1954. Au sujet des anomalies pigmentaires et morphologiques chez le Vitis vinifera L. С R. Acad. Sci. Paris, 289 (14), 826—828 (October 4.).

121. Ferreira J.H.S., Zyl F.G.H. Susceptibility of grape-vine rootstocks to stains of Agrobacterium tumefaciens biovar 3//Afr.J.Enol. Vitis. 1986. -Vol.7.-101-104.

122. Fic V. 1958. Infekcni necrosa revy vinne. (Infectious necrosis of the grapevine.) Sbornik Ceskoslovenske Akad. Zemedelskych Ved (Rostlina Vuroba) 4 559—5.70.

123. Gifford E.M., Jr., Hewitt W.B. 1961. The use of heat therapy and in vitro shoot-tip culture to eliminate fanleaf vims from the grapevine. Arner. Jour. Enol. and Vitic, 12, 129—130.

124. Galzy Mme. R. 1964. Premieres observations sur la distribution de l'infection chez les souches de vigne atteintes de court-noue. С R. Acad. Sci. Paris, 259, 1761—1763.

125. Galzy Mme. R. 1961. Cofirmation de la nature virale du court-noue de la vigne par des essais de thermotherapie sur des cultures in vitro. C. R. Acad. Sci. Paris, 253(4), 706—708. Also: Prog. Agr. et Vitic, 78(20), 192— 194.

126. Galzy Mme. R. 1963. Thermotherapie de quelques varietes de vigne. Prog. Agr. et Vitic, No. 22, 255—261; No. 23, 292—296.

127. Hewitt. W., Cifford. E. Symptoms for indentifyng fan leaf in dormafnt grapevines. Calif. Dep. Agr. Bull. 1956. 45.

128. Hewitt W.B., Goheen A.C. 1959. Asteroid mosaic of grapevines in California. Phytopathology, 49, 541. Abstr.

129. Hewitt W.B., Goheen A.C, Rasici D.J. Gooding G.V. Jr., 1962. Studies on virus diseases of the grapevine in California Vitis, 3, 57—83.

130. Hewitt W.B., Cory L. 1964. Inoculation of etiolated but light-treated leaves of grape with fanleaf virus. Phytopathology, 54, 895. Abstr.

131. Hewitt W.B., Raski D.J., Goheen A.C. 1958. Nematode vectors of soil-borne fanleaf virus of grapevines. Phytopathology, 48, 586—595.

132. Jager J. Untersuchungen zum Ltenten Vorkommen von Agrobacterium tumefaciens Biovar 3 in der Weinrebe (Vitis vinifera L.)//Vitis. Enol. Sci. 1990. - Vol.45, -p.14-20.

133. Johnnsen A. 1933. Uber die Reisigkrankheit der Rebe. Dtsch. Weinbau, 12, 221—223; 238—240; 249—252; 265—267.

134. Lehoczky J. Furter evidence concerning the systemic spreading of Agrobacterium tumefaciens in the vascular system of grape vines.//Vitis/ -1971-10,215-221.

135. Lehoczky J. Inoculation experiment on trellised grapevines with Agrobacterium tumefaciens for study of the process of crown gall disease//Acta Phytopathol. Entomol. Hung. 1989. - Vol.24. - p.283-291.

136. Lehoczky J. Spread of Agrobacterium tumefaciens in the vessels of the grapevine after natural infection// Phytopathol. Z. 1968. - Vol. 63 — p239-246.

137. Martelli G.P., Hewitt W.B. 1963. Comparative studies on some Italian and Californian vims diseases of grapevine. Phytopath. Medit., 2, 275—284.

138. Munck Mile. Marie-Claire 1965. Inhibition des reactions serologiques par le phenomene de zone dans le cas du virus de la mosai'que de la vigne. Ann. Epiphyties, 17(1), 69—72.

139. Murtines M.C, Montilla. Morphological and field caparison between vitis vinifera Lev Albarino Grown from cuttis and from in vitro propagation. // A. J. of Enology and Viticulture. 1995. - 46/2. - P. 195-203.

140. Mozer L. Weinmal anders. Osterreichischer Agrarverlag. — 1966. -C.96-107.

141. Monares L.La fertilita dei polloni nella vitis vinifera // Riv. Viticolt. -1957. -N.3. p. 37-49.

142. Morel G. Recherche sur la culture associes de parasites oblidatetre et de tissues vedetsur // Ann. Epiphyt. 1948. - Vol. 14.

143. Morel G. Recherche sur Le development de fradment de lianes cultives in vitro// Bull.Soc.France. 1985. - Т. 92.-C.54-64.

144. Morel G. Le development du mildiou Bur des tissues de vidnes cultives in vitro // Cr. Acad. Sc.F. 1990. - Vol. 218.

145. Nysterakis F. 1947. «Court-noue» et Phylloxera vitifolii Fitch. Rev. Vitic. (Paris), 93(1), 9—12.

146. Ouchterlony O. 1958. Diffusion-in-gel methods for immunological analyses. In: Progress in allergy 5, 1—78. S. Karger, Basel and New York.

147. Petri L. 1912. Significato patologico dei cordoni endocellulari nelle viti affette da arricciamento. Rend. R. Accad. Lincei 21, S. V. 2e sem., pp. 113—119.

148. Petri L. 1912. Formazione e significato fisiologico dei cordoni endocel-lulari nelle viti affette da arricciamento. Rend. R. Accad. Lincei 21, S. V. Ire sem., pp. 505—511.

149. Raski D.J., Hewitt W.B. 1960. Experiments with Xiphinema index as a vector of fanleaf of grapevines. Nematologica, 5, 166—170.

150. RasKi D.J., Hewitt W.B. 1963. Plant-parasitic nematodes as vectors of plant viruses. Phytopathology, 53, 39—47.

151. Rozier Abbe. 1800. Dictionnaire. Cite par L. Ravaz. Prog. Agr. et Vitic. 1909(2), 720.

152. Sawada. H., Ieki, H., and Matsuda, 1. 1995. PCR detection of Ti and Ri Plasmids from pnytopaihogenic Agrobacterium strains. //Appi. Environ. Microbiol., 61, 828-831.

153. Schneiders E. 1936. Beobachtungen und Untersuchungen fiber die Reisigkrankheit der Reben (Rebenmiidigkeit). Gartenbauwiss., 10, 110— 150.

154. Schneiders E. 1938. Ueber die Zellstabe und ihre phytopathologische Bedeutung. Gartenbauwiss., 11,237—250.

155. Stranak F. 1931. La mosaique a virus de la vigne. С R. Deuxieme Cong-res International de Pathologie Сотр., Paris.

156. Stranak F. Blattny С, К1еека A. 1931. Mosaika revy vinne. Ochrana Rostlin, pp. 89—93.

157. Sequeira O.A., Dias H.F. 1964. Transmissao do vims do urti-cado da videira pelo nematodo Xiphinema index Thorne et Allen. Agron. Lusit., 24, 309—318.

158. Stover E.W., Swarz H.J., and Burr T.J. Susceptibility of a diverce collection of Vitis genotypes to crown dall caused dy Agrobacterium vitis// J.Am.Soc. Enol. Vitic. 1997. - Vol.48, -p.26-32.

159. Sule S., Mozsar J., Burr T.J. Crown gall resistance of Vitis spp. And grapevine rootstock//Phytopatholody. 1994. - Vol.84. - p.607-611/

160. Sule S., Burr T.J. The influence of rootstock resistance to crown dall (Agrobacterium spp.) on the susceptibility of scions in grape vine cultivars/ZPlant Pathol. 1998. Vol.47, -p.84-88.

161. Szegedi E., Kozma J. R/ Studies on the inheritance of resistance to crjwn dall disease of grahevine// Vitis. 1984/ - Vol. 23. -p. 121-126.

162. Smith E.F. and Townsend C.O. A plant tumor of bacterial origin// Science. 1907. - Vol. 25. - p. 671-673.

163. Tarbah F., Goodman R.N. Systemic spread Agrobacterium tumefaciens biovar 3 in the vascular system of grapes//Phytopathology. -1987.- Vol.77, -p.915-920.

164. Tarbah F., Goodman R.N. 1987 Systemic spread Agrobacterium tumefaciens biovar 3 in the vascular system of grapes// Phytopatholody, 77. 915-920.

165. Taylor P.H., Hewitt W.B. Austz. J. Agric. Res. 1964. - P. 15, 571585.

166. Taylor C.E., Raski D.J. 1964. On the transmission of grape fanleaf by Xiphlnema Index. Nematologica, 10, 489—495.

167. Taylor R.H., Hewitt W.B. 1964. Properties and serological relationship of Australian and Californian soil-borne viruses of the grapevine, and arabis mosaic virus. Australian Jour. Agr. Res., 15. 571— 585.

168. Terlidou Mary. 1964. La revelation de la presence du nematode Xiphinema index dans notre pays. (In Greek.) Geoponika, 116—117, 4 pages; 3 figures; 8 references.

169. Viala P. Maladies de la Viegne. - 1993/ - 232-238, 400-413, 421445.

170. Vyemoto I. К., Taschendezje Т., Hummen D. К. Ре Dis Report -1977-61. P 949-953.

171. Vuittenez A. 1954. Observation sur le diagnostic anatomique de la degenerescence infectieuse de la vigne. С R. Acad. Agr. France, seance du lOfev-rier, 40, 146—150.

172. Vuittenez A. 1957. Lutte preventive contre le court-noue de la vigne par la disinfection chimique du sol avant plantage. C. R. Acad. Agr. France, seance du 13 fevrier, 43, 185.

173. Vuittenez A. 1958. Transmission par greffage d'une virose du type «enroulement foliaire» commune dans les vignobles de Test et du centre-est de la France. С R. Acad. Agr. France, 44, 313—316.

174. Vuittenez A. 1958. Acquisitions recentes dans le domaine des viroses de la vigne. Vignes et Vins (Paris) 73 (novembre), 11—17.

175. Vuittenez A. I960. Nouvelles observations sur l'activite des traitements chimiques du sol pour l'eradication des virus de la degenerescence infectieuse de la vigne. С R. Acad. Agr. France, seance du 20 Janvier, 46, 89—96.

176. Vuittenez A. 1960. Mise en evidence chez les vignes atteintes de degenerescence infectieuse d'un virus transmissible mecaniquement aux chenopodes (Chenopodium amaranticolor et C. quinoa). С R. Acad. Sci. Paris, seance du 1 aout, 251 (5), 783—785.

177. Vuittenez A. 1962. Rapport de mission en Turquie pour l'etude des viroses de la vigne. June 1—15; 22 pages; 1 chart; 1 table. (Mimeographed.).

178. Vuittenez A. 1962. Sur la presence de cordons endovasculaires chez les vignes atteintes de panachure, et leur apparition dans des boutures inocu-lees par greffage. С R. Acad. Sci. Paris, seance du 10 mars, 234, 1205— 1207.

179. Vuillenez A. 1963. Isolement, proprietes physiques et serologiques du virus de la degenerescence infectieuse chez les chenopodes et la vigne. Virologie Appliquee, INRA. Station Centrale de Pathologie Vegetale, Versailles, 4, 133—142.

180. Vuillenez A., Munck Marie-Claire, Kuszala J. 1964. Souches de virus a haute agressiviti isolees de vignes atteintes de degenerescenceinfectieuse. Virologie Appliquee, INRA, Station Centrale de Pathologie Vegetale, Versailles, 5, 60—78. 1 plate.

181. Vuittenez A. 1966. Observations sur une mosalque de la vigne; probablement independante du virus du court-noue. Ann. Epiphyties, 17, 67—73.

182. Vuittenez A. 1966. Utilisation de la serologie dans l'etude de certaines maladies a virus des plantes fruitieres et ligneuses. Bui. Soc. Fr. Physiol. Veg., 12, 355—375.

183. Diseases of the Grapevine, Bernkastel (Germany), September 1,1—16, 1967. Ann. Epiphyties (n. s.), 19.

184. Kerr A. Transfer of virulence between isolates of

185. Agrobacterium//Nature. 1969. - Vol.233. - 1175-1976.

186. Патентные документы Запись под заголовком

187. Пат. 2270557 Российская Федерация, МПК7 А 01 G 17/02

188. Пат. 2146440 Российская Федерация, МПК7 А 01 G 17/02.

189. Способ получения прививок винограда. Текст. / Малых Г.П., Киселева Т.Г., Киселев И.Е.; заявитель патентообладатель научно-производственное объединение "Виноград". № 98121264/13; заявл. 26.11.98; опубл. 20.03.00, Бюл. № 8 (I ч.). - Зс. : ил.

Информация о работе

Маслова, Елена Борисовна
кандидата сельскохозяйственных наук
Новочеркасск, 2009
ВАК 06.01.07

Диссертация

Методы оздоровления винограда от бактериального рака и короткоузлия - тема диссертации по сельскому хозяйству, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы