Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Механизмы гормональной регуляции электрической и сократительной активности гладких мышц

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Механизмы гормональной регуляции электрической и сократительной активности гладких мышц"



2 У ?0

м>

АКАДЕМИЯ НАУК СССР ИНСТИТУТ ЭБОЛГЦИОШЮЙ 1ИЗИ0Л0ГИИ И ЕИОХИШИ им.И.Ы.СЁЧКШВА

Ш5ХАШЗШ1 ГОриОНАЛЫЮИ РЕПУЛИЦИИ ЭЛЕКТРИЧЕСКОЙ И СОКРАТИ ТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ГЛАДКИХ ШИЦ

03.00.13 - физиология человека и животных

Автореферат диссертации на соискание ученой степени

На правах рукописи

СКРШШШ Зеновий Дмитриевич

УДК 612.73 612.43

доктора биологических наук

Ленинград 1989

Работа выполнена в научно-исслгцоиатсльском Институте физиологии Киевского ордена Ленина и ордена Октябрьской революций государственного университета им. Т.Г.Шевченко.

Официальные оппоненте:

доктор медицинских наук, профессор Р.С.ОРЛОВ

доктор биологических наук, профессор В.В.ТАРАКАНОВА

доктор биологических наук, профессор А.Д.НОЗДРАЧЕВ

Ведуиое учреадение - Институт физиологии им.И.II.Павлова АН СССР

Зашита состоится "_"_ I9Ö9 г. в_

часов на заседании специализированного совета Д.002.09.01 по присуждении ученой степени доктора биологических наук при Институте эволюционной физиологии и биохимии им.И.М.Сеченова АН СССР (19-5223, Ленинград, пр. U.Тореза, 141.

С диссертацией можно ознакомиться п библиотеке института.

Автореферат разослан "_"_ Т909 г.

Ученнй секретарь специализированного совета доктор биологических наук, профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Одной из центральных проблем физиологии и молекулярной эндокринологии является выяснение первичных эффектов гормонов и нейромедиаторов, которые в конечном итоге приводят к изменению метаболизма или функциональной активности клеток.

Предпосылкой для исследования первичных эффектов гормонов и нейромедиаторов на клетки явилось изучение механизмов индукции и репрессии синтеза белка, роли циклических нуклеотидов, способов функционирования ионных каналов и насосов /Ткачук, 1983/.

До недавнего времени в эндокринологии существовало положение об узкой направленности и строгой ограниченности сферы действия каждого гормона на определенные тканевые структуры. К клеткам-мишеням относили клетки только тех тканей, на которые сугубо избирательно действуют гормональные соединения и которые наиболее нагладно и по всем заданным параметрам реагируют на соответствующий гормон, а клетки всех остальных органов достаточно произвольно обозначались как немишени. Такого рода классификация клеток упускала из виду давно известные данные о чрезвычайно широком спектре тканевого действия многих гормонов. В настоящее время принята новая классификация, которая позволяет уточнить представления о клетках-мишенях и множественности гормональных эффектов /Розен, 1973,1977; Розен, Смирнов, 1981/.

В течение последних десятилетий исследованы первичные эффекта медиаторов, гормонов - производных аминокислот и некото-pje аспекты действия пептидных гормонов на электричеокую и сократительную активность гладких мышц /Орлов, 1967; Шуба, Клевец, 1967; Орлов и др., 1971,1983; Богач, 1974; Климов, 1983,1986; Bolton, 1979|1981 /• Однако до настоящего времени не выяснены первичные эффекта большинства белково-пептидных и кортико-сте-роидных гормонов на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц. Учитывая, что изучение механизмов гормональной регуляции сократительной активности гладкомышечных клеток имеет огромное значение в связи с важной ролью этих мышц в функционировании внутренних органов и кровеносных сосудов, представляет интерес исследование первичных эффектов белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мшщ. Сравнитель-

ный анализ механизмов действия белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на клетки-мишени и клетки-немишени представляется необходимым при построении обшей теории нейроэнпо-кринной регуляции функциональной активности и метаболизма клеток.

Выяснение механизмов действия пептидных и глюкокортикостероидных гормонов, этих постоянно циркулирующих в крови регуляторов нейроэцдокринной системы, на гладкие мышцы сосудов и внутренних органов позволит разработать новый подход к анализу терапевтических и побочных эффектов действия лекарственных гормональных препаратов и к использованию медикаментозных и немедикаментозных способов лечения различных заболеваний.

Цель и задачи исследования. Основная цель исследования состояла в выяснении механизмов действия белково-пептидных и глю-кокортикостероидных гормонов на функциональную активность висцеральных гладких мышц и проведении сравнительного анализа механизмов действия гормонов на гладкомышечные клетки-мишени и клетки-немишени.

Исходя из цели исследования были поставлены следующие задачи:

- исследовать роль различных белково-пептидных и глюкокор-тикостеровддах гормонов в регуляции электрической и сократительной активности гладкомышечных клеток органов, которые не являются органами-мишенями для этих гормонов;

- выяснить роль аденилатциклазной системы в механизме действия белково-пептидных гормонов на электрическую и сократительную активность гладких мышц;

- исследовать роль системы биосинтеза белка в первичных эффектах глюкокортикостероидных гормонов на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц;,

- исследовать влияние белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на проницаемость плазматической мембраны гладкомышечных клеток к ионам натрия и калия;

- выяснить роль потенциалозависимых и хемочувствительных кальциевых каналов плазматической мембраны в механизмах действия белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на гладкие мышцы;

- исследовать роль внутриклеточных и примембранных кальцие-иых пулов в механизмах действия гормонов;

. - провести сравнительный анализ механизмов действия белково-

пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на электрическую и сократительную активность гладкомышечных клеток-мишеней и клеток-немишеней.

Научная новизна. В данной работе впервые исследовано влияние кортизона и гидрокортизона на электрическую и сократительную активность гладкомышечных клеток. Установлено, что специфическое действие гидрокортизона на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц обусловлено уменьшением проницаемости плазматической мембраны гладкомышечных клеток к ионам кальция. Впервые исследовано влияние кортикотропина, тиреотропи-на, паратиреоидина, инсулина на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц. Показано, что паратирео-идин и инсулин оказывают модулирующее действие на потенциалоэа-висимые кальциевые каналы.

Впервые исследовано влияние вазопрвссина, брадикинина, вещества Р, ангиотензина на гладкомышечные клетки мочеточника морской свинки. Показано, что окситоции оказывает разнонаправленное действие на окситоцинзависимые и окситоцинчувствительные гладкошшечные клетки. Впервые показана роль мембраносвязаншх ионов кальция в механизме действия окситоцина на сократительную активность гладких мьппц матки и яйцевода. Показано, что вазо-прессин, брадикинин, вещество Р, ангиотензин вызывают сокращение гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки, яйцевода. Впервые выяснена роль примембраносвязанных ионов кальция в механизмах действия вазопрессина, брадикинина, вещества Р на висцеральные гладкие мышцы. Показано отличие в механизмах действия ангиотензина на гладкошшечные клетки мочеточника и матки.

Полученные данные позволяют заключить, что возбуждающее и первичномодулирующее действие белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на сократительную функцию гладкомышечных клеток обусловлено изменением ионной проводимости плазматической мембраны.

Теоретическое и практическое значение работа. Полученные данные о действии белково-пептидных и глюкокортикостероидных гордонов на электрическую и сократительную активность гладких ■апщ позволяют сформулировать новое представление о механизме 1ействия исследуемых гормонов на возбудимые ткани. Результата ^следования показали, что регуляция обменных процессов с мета -5олизмя) и сократительной функции гладкомышечных клеток осуще-

ствляется разными путями. Влияние исследуемых гормонов на функциональную активность висцеральных гладких мышц осуществляется через изменение уровня ионизированного кальция в клетке.

Практическое значение работе заключается в возможности использования полученных экспериментальных дандах для обоснования и изыскания способов медикаментозного и немедикаментозного лечения заболеваний сердечно-сосудистой, пищеварительной и Емде^ лительной систем, а также патологии родовой деятельности.

Полученные результата позволяют объяснить механизмы побочного действия рада фармакологических препаратов и указывают возможности их коррекции. Результаты исследования расширяют представления о механизмах гормональной! регуляции электрической и сократительной активности гладких мышц и могут быть использованы при чтении курсов физиологии и фармакологии в высших учебных заведениях.

Основные положения работы. Белково-пептидкые гормоны (окси-тоцин, вазопрессин, брадикинин, вещество Р, ангиотенэин, инсулин, паратиреоидин) и гидрокортизон оказывают регулирующее действие на функциональную активность висцеральных гладких мышц. Их действие на сократительную активность гладкомышечных клеток реализуется через изменение уровня ионизированного кальция в саркоплазме.

Различные внутриклеточные медиаторы (ионы кальция, цАЮ?, диацилглицерин, инозит-1,4,5-трифосфат) регулируют различные по скорости внутриклеточные биохимические процессы. Ионы кальция регулируют наиболее быстрые биохимические процессы, протекание которых определяет функциональную активность клетки.

Первичная сократительная реакция гладких мышц матки, вызванная окситоцином, ангиОтенэином.и различных висцеральных гладких мышц, вызванная вазопрессином, брадикинином, веществом Р, обусловлена увеличением концентрации свободноионизированного кальция в саркоплазме гладкомышечных клеток, которая создается входом этих ионов иэ внеклеточного- примембранного кальциевого пула и внеклеточной среды через хемочувствительные кальциевые каналы. Усиление первичного сократительного ответа обусловлено входом ионов кальция из внеклеточной1 среды внутрь гладкомышечных клеток через потенциалозависише кальциевые каналы. Гидрокортизон является эндогенным' блокатором кальциевых каналов.

Эффекты белково-пептидных гормонов' на* сократительную активность висцеральных гладких мыиг? отличаются от эффектов дибути-

рил-цАЫФ,папаверина, ионов магния, кофеина, а эффекты глюкокор-тикостероидных гормонов отличаются от эффектов ингибиторов и стимуляторов биосинтеза белка.

Между функциональной активностью и метаболизмом клеток существует взаимосвязь, которая обусловлена взаимовлиянием внутриклеточных медиаторов на образование и распад или связывание одного с другим.

Апробация работ. Материалы диссертации обсуждались на конференции "Физиологическая роль поверхностноактивных веществ* (г.Черновцы, 1975), международных симпозиумах "Физиология и фармакология гладких мышц" (г.Варна, 1976,1982), X съезде Украинского физиологического общества им.И.П.Павлова (г.Одесса, 1977), ХХУП Международном конгрессе физиологического общества (Г.Париж, 1977), ХШ съезде Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова (г.Алыа-Ата, 1979), конференции по биофизике мембран (г.Паланга, 1979), I Всесоюзном биофизическом съезде Iг.Москва, 1982), Х1У съезде Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова (г.Баку, 1983), Всесоюзном симпозиуме "Биофизика и биохимия мышечного сокращения" (г.Тбилиси, 1983), УП Всесоюзной конференции по физиологии почек и водно-солевого обмена (г.Чернигов, 1985), Всесоюзной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения акад.И.С.Бериташвили (г.Тбилиси, 1985), ХП съезде Украинского физиологического общества им. И.П. Павлова (г.Львов, 1986), ХУ съезде Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова (г.Кишинев, 1987).

Публикации. По теме диссертационной работа опубликовано 40 работ.

Структура и объем работа. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 6 глав с изложением материалов экспериментов, обсуждения результатов, выводов и указателя литературы.

Работа изложена на 296 страницах машинописного текста, иллюстрирована 117 рисунками и содержит 32 таблицы. Указатель литературы включает 466 источников (196 отечественных и 270 иностранных) .

Объекты и метопы исследования. Исследования выполнены на полосках гладких мышц мочеточника, taenia coli , кольцевого слоя толстого кишечника, антрального отдела желудка, продольных шшц рога матки, яйцевода морской свинки и полосках гладких

мышц кольцевого слоя антрального отдела желудка котки.

В исследованиях использовались раствори Кребса нормального и измененного состава. Нормальный раствор Кребса был следующего состава (ммоль/л): NaCl - 120,4; KCl - 5,9; Naiico3 - 15,5; НаН^РО^ - 1,2; CaCIg - 2,5; MgCl2 - 1,2; глюкоза - 11,5.

Беэнатриевый раствор готовили путем замены в растворе Кребса ионов натрия на ионы триса. В части экспериментов использовались гипонатриевые раствори, в которых ПаС1 заменили изоос-мотическим Количеством HgCl2 или холинхлоридом,

Гипонатриевый гипохлорный раствор готовили путем замены в растворо Кребса 120,4 ммоль/л NaCl на изотоническое количество сахарозы. Растворы с повышенным содержанием ионов магния или кальция готовили путем заметь изоосмотического количества NaCl на lilgCl2 или CaCIg. Раствор, не содержагаие ионов магния, глюкозы, готовили путем замены MgCl2 или глюкозы на изоосмо-тическое количество NaCl . Бескальциевый раствор готовили заменой ионов кальция ионами магния и добавляли 0,5 ммоль/л ЭРТА для связывания остатков ионов кальция. Гиперкалиевыо раствори готовили путем замены всего количества NnCl на KCl. Растворы, содержащие тетраэтиламмоний, 3,4-диаминопиридин, кофеин, азид натрия, готовили путем замены NaCl на изоосмотическое количество данного веиества. Растворы, содержащие ионы лантана, готовили путем смешивания изотонических растворов NaCl и LaCl^.

В исследованиях использовались растворы, содержащие оксито-цин, вазопрессин, кортикотропин, тиротропин, брадикинин, вещество Р, ангиотснзин, инсулин, паратиреоидин, гидрокортизон, кортизон, преднизолон, папаверин, дибутирил-цАМФ, актиномицин Д, пуромицин, винбластин, винкристин, вонодат натрия, рутениевый красный, Д600. Для приготовления этих растворов необходимые вещества прибавляли к растворам нормального или измененного состава. Показатель pH раствора определялся непосредственно перед опытом И после его окончания с помощью рН-метра и был равен 7,37,4.

Через сахарозные секции камеры двойных сахарозных промежутков пропускался изотонический раствор сахарозы (Зо9,2 ммоль/; с большим удельным сопротивлением. Для приготовления этого раствора использовали только химически чистую сахарозу и бедистил-лированную или деионизировонную воду.

Для регистрации потенциалов действия, электротонических потенциалов гладкомышечных клеток была использована методика двой ных сахарозных промежутков /Borger, Barr, 1969 /. При помощи

механотрона 6MXIC механические сокращения мышцы преобразовывались в электрические сигналы, которые усиливались и регистрировались одновременно с электрической активностью гладкомышечных клеток. Полученные данные обрабатывались вариационно-статистическим методом /Бейли, 1964; Дакин, 1973/.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

I. Влияние нейропептидов на функциональную активность гладкомышечных клеток

Для выяснения первичных эффектов нейропептидов на гладко-мышечные клетки и проведения сравнительного анализа механизмов действия белково-пептидных гормонов на электрическую и сократительную активность клеток-мишеней и немишеней для этих гормонов исследовали действие нейропептидов на изолированные полоски гладких мышц матки, яйцевода, желудочно-кишечного тракта, мочеточника.

Влияние брадикинина. Гладкие мышцы мочеточника морской свинки, лишенные почечного конца, не проявляли спонтанной электрической и сократительной активности. В ответ на электрическое раздражение клетки мочеточника генерировали сложные потенциалы действия (ЦЦ), состоящие из пиковых потенциалов и плато. Амплитуда ЦЦ равняется 34,5 + 2,8 мВ, а продолжительность -0,75 + 0,3 с. ПД гладких мышц мочеточника сопровождались фазными сокращениями этих мышц.

В концентрациях Ю-7 - Ю~5 моль/л брадикинин вызывал фаз-нотоническое сокращение гладких мышц мочеточника. Амплитуда фазного компонента сокращения, вызванного брадикинином, составляла 127,5 + 9,6% от амплитуды вызванного электрическим током сокращения мышц мочеточника, находящихся в нормальном растворе, и 108,4 + 7,25? от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры. Амплитуда тонического компонента вызванного брадикинином сокращения составляла 14 + 2,2$ от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры.

В нормальном растворе Нребса гладкомышечные клетки taenia coli спонтанно генерировали медленные волны, ЦЦ, которые сопровождались сокращениями. Частота медленных волн и спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli равна 0,009 + 0,0004 сокращений/с (0,54 + 0,024 сокращений/мин), а их продолжитель-

ность равна 68,4+2,1 с. Гладкомышечные клетки кольцевого слоя толстого кишечника и антрального отдела желудка морской свинки также обладали спонтанной активностью. Частота спонтанных сокращений мышц кольцевого слоя толстого кишечника составляла 0,0248 + 0,0068 сокращений/с (1,488 + 0,408 сокращений/мин), их продолжительность - 27,1 + 1,6 с, а частота сокращений гладких мышц антрального отдела желудка - 0,1042 + 0,0042 сокращений/с (6,252 + 0,252 сокращений/мин). Ерадикинин вызывал фазно-тонические сокращения гладких мышц желудочно-кишечного тракта. Амплитуда фазных компонентов сокращений гладких мышц taenia coli и кольцевого слоя толстого кишечника, вызванных брадикинином в концентрации моль/л, составляли 192 + 24,-2% и 160,5 + 10,4% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц.

В нормальном растворе Кребса при температуре 37°С в 53,7$ опытов гладкие мышцы матки спонтанно сокращались. Продолжительность спонтанных сокращений этих мышц составляла IUI,5 + 7,8 с, а частота 0,004 + 0,0004 сокращений/с (0,24 + 0,024 сокращений/мин) . Гладкие мышцы яйцевода также обладают спонтаннпй сократительной активностью. Частота спонтанных сокращений гладких мышц яйцевода значительно превышала частоту спонтанных сокращений гладких мышц матки и составляла 0,176 + 0,008 сокра-иений/с (10,56 + U,48 сокращений/мин).

Ерадикинин в концентрации Ю-^ моль/л вызывал фазно-тони-ческое сокращение гладких мышц матки и яйцевода.

При продолжительном действии брадикинина на гладкомышечные клетки мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки, и яйцевода его эффекты на сократительную активность этих мышц ослаблялись, т.е. наступала десенситизация клеток к действию этого пептида.

Влияние вещества Р и ваэопрессина. Вещество Р и вазопрес-сни в нормальном растворе Кребса вызывали сокращение или усиление спонтанной сократительной активности гладких мышц мочеточника, антрального отдела желудка, taenia coli , кольцевого слоя толстого кишечника, матки морской свинки.

При продолжительном действии вещества Р и ваэопрессина на гладкие мшар амплитуда сокращений уменьшалась, что свидетельствует о том, что к этим веществам наступала десенситизация гладких мышц.

Влияние ангиотензина. Исследование действия ангиотензина

на функциональную активность гладких мышц мочеточника, фундаль-ного отдела желудка, кольцевого слоя толстого кишечника, матки, яйцевода показало,что этот нейропептид вызывает сокращение спонтанно неактивных гладких мышц и увеличение амплитуды и частота спонтанных сокращений гладких мышц кишечника, матки, яйца-вода. Амплитуда сокращений гладких мышц,вызванных ангиотензи-ном, не превышала амплитуды сокращений этих мышц, вызванных гиперкалневым раствором. Возбуждающее действие ангиотензина на функциональную активность гладких мышц максимально выражено на первых минутах действия ангиотензина. С течением времени амплитуда сокращений мышц, вызванных ангиотензином, уменьшалась, а сокращения спонтанно неактивных гладких мышц прекращались, т.е. развивалась десенситизация к ангиотензину.

Влияние окситоцина. Окситоцин в концентрациях Ю-10 - 10"^ ыоль/л вызывал сокращение спонтанно неактивных препаратов гладких мышц матки, увеличение амплитуды сокращения спонтанных сокращений мышц матки и яйцевода. В растворе, содержащем окситоцин в концентрации 5-10"® моль/л, максимальная амплитуда сокращений мышц матки составляла 124,1 + 4,5% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц. Амплитуда спонтанных сокращений гладких мышц яйцевода на первой минуте действия окситоцина в концентрации 5»10~® моль/л составляла 164,4 + 15»7/6 от амплитуда спонтанных сокращений в нормальном растворе.

В нормальном растворе Кребса окситоцин в концентрациях, 5>10~® - 5-I0-® моль/л угнетал вызванные электрическим тоноы ЦЦ и сокращения гладких мышц мочеточника.

Окситоцин вызывал также угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц желудочно-кишечного тракта: taenia coli , кольцевого слоя толстого кишечника и антраль-ного отдела желудка морской свинки. При продолжительном действии окситоцина на гладкие мышцы происходило частичное восстановление сократительной активности гладких мышц, что свидетельствует о том, что к действию этого пептида наступает десенситизация.

Влияние кортикотролнна и гаротропина. Кортикотропин и ти-ротропин в концентрациях Ю-0 - 10 моль/л не вызывали достоверного изменения электрической и сократительной активности гладких мышц мочеточника, taenia coli , антрального отдела желудка, матки и яйцевода морской свинки.

2. Роль системы аденилатциклаза-цАШ? в механизме действия нейропептидов на гладкомышечные клетки

Для выяснения роли аденилатциклазной системы в механизмах действия нейропептидов на гладкомышечные клетки исследовали влияние веществ, которые вызывает увеличение уровня цА® в возбудимых клетках, на электрическую и сократительную активность гладких мышц и эффекты нейропептидов на фоне действия этих веществ.

Влияние ионов магния, папаверина и кофеина. Исследовали влияние веществ, которые обладают способностью вызывать увеличение уровня внутриклеточной цАШ> путем активации аденилатцик-лазы: ионы магния или ингибирования фосфодиэстеразы: папаверин, кофеин Дивков, Челибонова, 1977/.

Увеличение концентрации ионов магния в 2-10 раз (2,4 - 12 ммоль/л) вызывало уменьшение скорости нарастания потенциалов действия, их продолжительности, скорости и амплитуды сокращения гладких мышц мочеточника, taenia coli > антрального отдела желудка морской свинки и антрального отдела желудка кошки. В гипермагниевых растворах происходила гиперполяризация плазматической мембраны гладкомышечных клеток и увеличивалась величина электротонических потенциалов. Удаление ионов магния из тестирующего раствора вызывало увеличение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения мышц мочеточника, частоты и амплитуды спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli > антрального отдела желудка морской свинки и антрального отдела желудка кошки.

В гипермагниевом растворе, в котором хлористый натрий был заменен на хлористой магний, наблюдалось расслабление и угнетение спонтанных сокращений гладкомышечных клеток желудочно-кишечного тракта, матки, яйцевода и мочеточника.

Папаверин в концентрации 2«Ю-4 моль/л также вызывал угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц мочеточника. Кофеин в концентрациях 1-2-Ю-2 моль/л вызывал кратковременное сокращение и последующее расслабление гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода.

Влияние дибутирил-цАМФ на сократительную активность гладких мышц. Исследование влияния ионов магния, папаверина показало, что эти вещества вызывают угнетение электрической и сократительной активности гладкомышечных клеток. Однако эти веще-

ства народу с действием на аденилатциклазу или фосфодиэстера-зу обладают способностью оказывать угнетающее действие на кальциевые каналы плазматической мембраны. Поэтому для моделирования эффектов влияния увеличения уровня внутриклеточного цАК® без изменения свойств кальциевых каналов исследовали влияние дибутирил-цАМФ, который, в отличие от цкЫЪ, проникает через плазматическую мембрану в вызывает такие же биохимические и физиологические процессы, как и внутриклеточный цАМФ.

В концентрациях - 10 моль/л дибутирил-цАШ не вызывал возбуждения и активации сокращения спонтанно неактивных препаратов гладких мышц. В концентрациях 10"^ - 10"^ моль/л дибутирил-цАМФ вызывал увеличение амплитуды сокращения гладдо-мышечных клеток мочеточника, вызванного электрическим раздражением.

Прибавление в тестирующий раствор дибутирил-цАМФ вызывало увеличение амплитуды спонтанных сокращений гладких мышц. В растворе, содержащем Ю-4 моль/л дибутирил-цАКЙ, амплитуда спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli составляла 124,76 + 11,6%, матки - 116,6 + 2,8% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц в нормальном растворе Кребса.

Действие нейропептидов на сократительную активность гладких мышц на фоне действия гипермагниевого раствора и дибутирил-цАМФ. В гипермагниевом растворе (81,4 моль/л) брадикинин, вещество Р, вазопрессин вызывали сокращение гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода. Окситоцин вызывал сокращение гладких мышц матки в гипермагниевом растворе.

Ангиотензин не вызывал сокращения гладких мышц на фоне действия гипермагниевого раствора.

В растворе, содержащем I0"4 моль/л дибутирил-цАМФ, окситоцин вызывал возбуждение и активацию сокращения гладких мышц матки, а брадикинин, вещество Р и вазопрессин вызывали активацию сокращения гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода. На фоне действия дибутирил-цАМФ окситоцин угнетал вызванные электрическим током ПД и сокращения гладких мышц мочеточника и спонтанную сократительную активность гладких мышц taenia coli . В гиперкалиевом растворе, содержащем дибутирил-цАМФ, окситоцин не вызывал изменения величины тонического компонента гиперкалиевой контрактур" глапких мышц мо-

Т2

четочника и taenia coli.

3. Роль ионов натрия, хлора и калия в механизме действия брадикинина, вещества Р, вазопрессина, ангиотенэина и окситоцина на функциональную активность гладких мышц

Влияние брадикинина на функциональную активность гладких мышц в условиях изменения ионного состава с.репы. В безнатриевом растворе брадикинин вызывал сокращение гладких мышц. Амплитуда сокращения мышц мочеточника, вызванного браднкинином, в безнатриевом растворе составляла 23,2 + 2,6% от амплитуды сокращения, вызванного электрическим раздражением этих мышц, находящихся в нормальном растворе. Брадикинин вызывал также сокращение -гладких мышц, находящихся в гипонатриевом, гипохлорном (сахарозном) растворе.

Для определения роли калиевых каналов в передаче гормонального сигнала, генерируемого гормон-рецепторным комплексом, на сократительный аппарат гладкомышечных клеток исследовали влияние этого пептида на электрическую и сократительную активность гладких мышц в растворе, содержащем блокатор калиевых каналов -тетраэтиламмоний (ТЗЛ), и гиперкалневом растворе.

Брадикинин вызывал сокращение гладких мышц на фоне действия ТВА и в гиперкалиевом растворе.

Влияние вещества Р и вазопрессина на сократительную активность гладких мышц в условиях изменения ионного состава среды. Вещество Р и вазопрессин вызывали сокращение гладких мышц мочеточника, taenia coli , желудка, матки, находящихся в гиперкалиевом растворе. Амплитуда и скорость сокращения гладких мышц, вызванных этими веществами, в гиперкалиевом растворе были значительно меньше амплитуды и скорости сокращения этих мышц, вызванных веществом Р и вазопрессином на фоне действия нормального раствора Кребса.

Вазопрессин вызывал сокращение висцеральных гладких мышц, находящихся в беэНатриевом растворе. Амплитуда сокращения мышц taenia coll , вызванного вазопрессином в концентрации 5*I0~7 моль/л в безнатриевом растворе, составляла 20,9 + 1,9% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц, находящихся в нормальном растворе.

Влияние ангиотенэина на сократительную активность гладких мышц в условиях изменения ионного состава среды. Для выяснения

роли калиевых каналов в механизме передачи ангиотенэинового сигнала на сократительный аппарат гладких мышц исследовали влияние этого нейропептида на сократительную активность гладких мышц мочеточника в растворе, содержащем ТЭА. В этом растворе ангиотензин вызывал сокращение мышц.

Ангиотензин не вызывал сокращений гладких мышц мочеточника и желудочно-кишечного тракта в безнатриевом и гиперкалиевом растворах. Однако этот нейропептид вызывал сокращение гладких мышц матки, находящихся в безнатриевом или гиперкалиевом растворах.

Амплитуда сокращения гладких мышц матки, вызванного ангио-тенэином в концентрации Ю-5 моль /л, в безнатриевом растворе составляла 42,1+4,3%, а в гиперкалиевом растворе - 20,7 + + 4,1% от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры. Ангиотензин не вызывал сокращения гладких мышц матки в бескальциевом растворе после воздействия на препараты этих мышц ионов лантана.

Результаты этих исследований позволяют сделать заключение, что сигналы, генерируемые при связывании ангиотензина с рецепторами гладкомышечных клеток мочеточника, желудочно-кишечного тракта и матки, передаются на различные ионные каналы.

Действие 'окситошша на гладкие шжш в условиях изменения ионного состава среды. В концентрации 5-Ю"^ моль/л окситоцин вызывал сокращение мышц матки, находящихся в гипонатриевом, ги-похлорном (сахарозном) растворах. Амплитуда этого сокращения была' значительно меньше амплитуды сокращения мышц, вызванных окситоцином в нормальном растворе, и составляла 10,9 + 1,3% от амплитуды спонтанных сокращений.

Амплитуда сокращения гладких мышц матки, вызванного окситоцином, в гиперкалиевом растворе составляла 38,3 + 7,2ч5, а мышц яйцевода составляла 39,4 + 3,6$ от амплитуды спонтанных сокращений.

Окситоцин вызывал угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц мочеточнина и желудочно-кишечного тракта, находящихся в растворе, содержащем Б ммоль/л ТЭА и безнатриевом растворе.

4. Роль ионов кальция в механизмах действия нейропептидов на сократительную активность гладкомытечных клеток

Роль ионов кальция в механизмах действия брадикинина, вещества Р и вазопрессина на сократительную активность гладких мышц. В бескальциевом растворе брадикинин, вешество Р, вазо-лрессин вызывали одиночное сокращение гладкомытечных клеток. Повторное воздействие нейропептидов после отмывания препаратов гладких мышц бескальциевым раствором не вызывало сокращения мышц.

Брадикинин вызывал сокращение гладких мышц, находящихся в гиперкалиевом растворе, содержащем Д600 в концентрации 10"^ моль^.и в гиперкалиевом, бескальциевом растворе. Амплитуда сокращения мышц матки, вызванного брадикинином в концентрации 10"^ моль/л, в гиперкалиевом, бескальциевом растворе составляла 7,4 + 1,9% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц в нормальном растворе.

Для выяснения роли кальциевого насоса в механизме действия нейропептидов исследовали их влияние в растворах, содержащих ингибитор кальциевого насоса - ванадат натрия. Амплитуда сокращений гладких мышц мочеточника и taenia coli , вызванных брадикинином в концентрации 10"^ моль/л в растворе, содержащем ванадат натрия в концентрации Ю-^ моль/л, составляла 12,5 + + 7,7% и 16,5 + 2,9£ от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры.

Для выяснения роли ионов кальция, запасенных в саркоплазма тическом ретияулуме, в механизмах действия нейропептидов исследовали их влияние на сократительную активность гладких мышц на фоне кофеина. Прибавление кофеина в концентрации 20 ммоль/л в контрольный раствор вызывало двухфазный эффект: начальное сокращение и последующее расслабление гладких мышц, находящихся в нормальном, безнатриевом и гиперкалиевом растворах. Амплитуда сокращения мышц матки, вызванного кофеином в безнатриевом растворе, составляла 14,4 + 2,7^ от амплитуды спонтанных сокращений в нормальном растворе, а амплитуда сокращения, вызванного кофеином в гиперкалиевом растворе, составляла 7,1 + от амплитуды спонтанных сокращений в нормальном растворе. При действии кофеина в концентрации 20 ммсль/л в.бескальциевом растворе на первых минутах его действия глад-

кие мышцы сокращались, однако через 10-30 минут действия бескальциевого раствора прибавление кофеина не вызывало сокращения мышц.

В растворе, содержащем 20 ммоль/л кофеина, брадикинин вызывал сокращение гладких мышц.

Роль митохондриального кальциевого пула в механизме действия нейропептидов на гладкие мышцы мочеточника определяли, исследуя влияние каждого нейропептида на сократительную активность гладких мышц в растворах, содержащих ингибиторы транспорта ионов кальция через митохондриальные мембраны. Замена нормального раствора Кребса на раствор, содержащий один из ингибиторов транспорта ионов кальция через мембраны митохондрий (азид натрия или рутениевый красный), не вызывала сокращения гладких мышц.

Амплитуда сокращения гладких мышц мочеточника, вызванного брадикинином в концентрации моль/л на фоне действия 10 ммоль/л азида натрия, составляла 208,8 + 63,9% от амплитуды вызванных электрическим током сокращений гладких мышц мочеточника, находящихся в растворе, содержащем 10 ммоль/л азида натрия.

Для выяснения роли кальмодулина в механизме действия нейропептидов исследовали их влияние на сократительную активность гладких мышц, находящихся в растворе, содержащем ингибитор кальмодулина - аминазин. Замена нормального раствора на раствор, содержащий ингибитор кальмодулина - аминазин в концентрации 10" моль/л, угнетала вызванные электрическим током сокращения гладких мышц мочеточника, спонтанные сокращения гладких мышц желудочно-кишечного тракта. На фоне действия аминазина брадикинин вызывал сокращение гладких мышц. Амплитуда сокращения мышц мочеточника, вызванного брадикинином в концентрации 10"° моль/л в растворе, содержащем 1СГ5 моль/л аминазина, составляла 14,3 + 0,5% от амплитуда сокращения этих мышц, вызванного электрическим током в нормальном растворе Кребса.

Роль примембранного кальциевого пула в механизме действия нейропептидов определяли, исследуя их влияние на сократительную активность висцеральных гладких мышц в бескальциевом растворе после предварительной обработки препаратов мочеточника бескальциевнн раствором, содержащим ионы лантана в концентра-

ции 5-10 ммоль/л. Эффекты брадикинина, вещества Р и вазопрес-сина на сократительную активность гладких мышц, предварительно обработанных ионами лантана, в бескальциевом растворе либо отсутствовали, либо были незначительными. Отмывание препаратов' гладких мышц нормальным раствором приводило к восстановлению сократительной активности мышц и к восстановлению их ответов на нейропептиды.

Роль ионов кальция в механизме действия окситоцина на сократительную активность гладких мышц. Окситоцин вызывал сокращение гладких мышц матки, находящихся в бескальциевом растворе, содержащем 0,5 ммоль/л ЭГТА. Амплитуда этого сокращения составляла 15,6 + 4,975 от амплитуды спонтанных сокращений. Повторное воздействие окситоцина в бескальциевом растворе не вызывало сокращения мышц матки.

Окситоцин вызывал сокращение мышц матки в гиперкалиевом растворе, содержащем ванадат натрия. Амплитуда этого сокращения составляла 10,2 + 0,8% от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры.

. Окситоцин вызывал сокращение гладких мышц матки в растворе, содержащем кофеин,и на 30 - 60 минутах действия бескальциевого раствора, что свидетельствует о том, что сокращение, вызванное окситоцином, не обусловлено освобождением ионов кальция из саркоплазматического ретикулума.

В растворе, содержащем азид натрия, окпитоцин также вызывал сокращение мышц матки.

Замена бескальциевого раствора на бескальциевый раствор, содержащий ионы лантана в концентрация^ - 10 ммоль/л, вызывала медленно нарастающее сокращение мышц матки. После воздействия на гладкие мышцы ионов лантана препараты отмывали бескальциевым раствором и действовали окситоцином. В этих условиях окситоцин не вызывал сокращения мышц матки. Отмывание мышц нормальным раствором приводило к восстановлению сократительной активности гладких мышц матки. После отмывания мышц матки нормальным раствором Кребса окситоцин вызывал сокращение мышц как в нормальном, так и в бескальциевом растворе.

5. Влияние инсулина и паратиреоидина на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц

Т7

Действие инсулина. В нормальном растворе инсулин в концентрациях 10_у - Ю-0 моль/л вызывал гиперполяризацию плазматической мембраны, увеличение электротонических потенциалов гладко-мышечных клеток мочеточника, угнетение электрической и сократительной активности этих клеток. В растворе, содержащем 10 моль/л инсулина, гиперполяризация плазматической мембраш глацкомышечных клеток мочеточника составляла 2,27 + 0,49 мВ, величина катэлектротонических потенциалов (НЭП) составляла 107,1 + 2,4%, а анэлектротонических потенциалов (АЭП) - 108,6 +

2,6t. Инсулин (Т0~® - 10"^ моль/л) вызывал достоверное уменьшение скорости нарастания, продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладких мышц. В больших концентрациях (10"ь моль/л) инсулин вызывал уменьшение скоростей и про-должительностей сокращения и расслабления мышц ыочеточника.

Инсулин вызывал также гиперполяризацию плазматической мембраш, увеличение КЭП и АЭП гладкоыышечных клеток taenia coli , антрального отдела желудка, кольцевого слоя толстого кишечника морской свинки и антрального отдела желудка кошки. В растворе, содержащем 10 ® моль/л инсулина, происходила гиперполяризация клеток taenia coli на 1,67 + 0,56 мВ, а КЭП и АЭП составляли 111,9 + 4,3% и 113,5 + 4,1% соответственно от величины в нормальном растворе. Инсулин угнетал электрическую и сократительную активность гладких мышц желудочно-кишечного тракта.

Для выяснения роли цАШ> в механизме действия инсулина на электрическую и сократительную активности гладких мышц исследовали влияние этого гормона в растворе, содержащем дибутирил-цАШ>. На фоне действия дибутирил-цАКЙ инсулин также вызывал угнетение спонтанных сокращений гладких мышц.

Угнетающее действие инсулина на сократительную активность гладких мышц не обусловлено транспортом глюкозы через плазматическую мембрану гладкомышечшх клеток, о чем свидетельствуют результаты исследования влияния инсулина на спонтанную сократительную активность гладких мышц в безглюкозном растворе. Амплитуда спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli морской свинки в безглюкозном растворе, содержащем Ю-® моль/л инсулина, составляла 70,7 + 4,6%, а антрального отдела желудка - 57,9 + 6,9t от амплитуды сокращения этих мышц в беэглю-коаном растворе.

Для выяснения ионного механизму угнетающего действия инсу-

лина на электрическую и сократительную активность гладких мышц исследовали влияние этого гормона на функциональную активность гладкомышечных клеток в гиперкалиевом растворе, в растворе, содержащем ТЭА, а также в безнатриевом, безмагниевом, гиперкалиевом растворах. Результаты этих исследований свидетельствуют о том, что инсулин угнетает электрическую и сократительную активность гладких мышц, находящихся в растворе, содержащем 5 ммоль/л ТЭА, безнатриевом, гиперкальциевом, без-магтшевом растворах. Однако этот гормон не вызывал изменения амплитуды тоничеснсго компонента гиперкалиевой контрактуры.

Инсулин вызывал уменьшение амплитуды сокращений мышц мочеточника, вызванных брддикинином. Относительное уменьшение амплитуды этого сокращения было меньше по сравнению с уменьшением вызванных электрическим током сокращений мышц мочеточника, находящихся в нормальном растворе.

Амплитуда сокращений гладких мышц мочеточника в растворе, содержащем Ю-^ моль/л брадикинина и моль/л инсулина, составляла 89,9 + 1,6% от амплитуды сокращений этих мышц, находящихся в растворе, содержащем 10"^ моль/л брадикинина.

Действие пара тиреоидина. Паратиреоидин (б-Ю""7 моль/л) вызывал гиперполяризацию гладкомышечных клеток мочеточника, увеличение КЭП и АЭП, уменьшение продолжительности и максимальной скорости нарастания ПД, амплитуды и продолжительности сокращения. В растворе, содержащем паратиреоидин в концентрации 5«10" моль/л, гиперполяризация мышц мочеточника составляла 2 + 0,8 мВ, КЭП - 111,2 + 3,2%, АЭП - ИЗ + 4,8%.

Паратиреоидин вызывал уменьшение амплитуды спонтанных сокращений taenia coli , антрального отдела желудка, матки морской свинки.

Эффект действия паратиреоидина на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц не уменьшался при продолжительном действии этого гормона, что свидетельствует о том, что десенситизация гладких мышц к действию паратиреоидина не наступает или развивается очень медленно.

Паратиреоидин оказывал угнетающее действие на сократительную активность гладких мышц, находящихся в растворе, содержащем Ю-^ моль/л дибутирил-цАШ>,

Для выяснения ионного механизма действия паратиреоидина на электрическую и сократительную активность висцеральных глад-

ких мышц исследовали влияние этого гормона на гладкие мышцы, находящиеся в растворе, содержащем моль/л ТЭА, безнат-

риевом и гиперкалиевом растворах. В безнатриевом растворе паратиреоидин не вызывал гиперполяризации плазматической мембраны мышц мочеточника. Паратиреоидин вызывал угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц, находящихся в растворе, содержащем ТЭА и в безнатриевом растворе.

В гиперкалиевом растворе паратиреоидин не оказывал влияния на амплитуду сокращения гладких мышц мочеточника, taenia coli , антрального отдела желудка, матки морской свинки.

б. Влияние глюкокортикостероидных гормонов на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц

Действие кортизона. Исследования действия кортизона в физиологических концентрациях (5-10"® - моль/л) на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц показали, что этот гормон не вызывает достоверного изменения мембранного потенциала покоя, электротонических потенциалов, электрической и сократительной активности гладко-мышечных клеток.

В фармакологических концентрациях (5-1СГ5 - 5*10"^ моль/л) кортизон вызывал гиперполяризацию плазматической мембраны гладкомышечных клеток и увеличение электротонических потенциалов. В растворе, содержащем кортизон в концентрации 5*10~® моль/л гиперполяризация гладкомышечных клеток мочеточника составляла 0,23 + 0,1 мВ, а амплитуда электротонических потенциалов составляла 108,7 + 4,9% от амплитуды этих потенциалов гладкомышечных клеток, находящихся в нормальном растворе Креб-са.

Одновременно с изменением величины мембранного потенциала покоя гладкомышечных клеток кортизон вызывал уменьшение максимальной скорости нарастания, потенциалов действия, амплитуды и скорости сокращения гладких мышц мочеточника, антрального отдела желудка, taenia coli морской свинки.

При продолжительном действии кортизона на гладкие мипцы мочеточника и желудочно-кишечного тракта эффекты действия сто-го глюкокортикостероидного гормона не уменьшались, т.е. к де?1.-ствию кортизона десенситизация не наступала.

Для выяснения роли генетического аппарата в механизме передачи сигнала, генерируемого кортизон-рецепторшм комплексом, на сократительный аппарат гладкомышечных клеток сравнили действие кортизона с действием веществ, которые угнетают или активируют биосинтез белка, а также исследовали влияние кортизона на электрическую и сократительную активность гладких мышц в присутствии ингибиторов биосинтеза белка. В качестве активаторов биосинтеза белка использовали фитогемаглютинин, а в качестве ингибиторов биосинтеза белка использовали пуромицин, ак-тиноыицин Д, винбластин, винкристин. Фитогемаглютинин не вызывал угнетения сократительной активности гладких мышц. Пуромицин, актиномицин Д, винбластин, винкристин вызывали угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц, однако эффвкты ингибиторов биосинтеза белка на электрическую и сократительную активности гладких мышц, однако эффекты ингибиторов биосинтеза белка на электрическую и сократительную активность гладких мышц проявлялись на 20 - 40 минутах их действия. Кортизон вызывал угнетение электрический и сократительной активности гладких мышц в растворах, содержащих ингибиторы биосинтеза белка.

Эти данные позволили предположить, что угнетающее действие кортизона на электрическую и сократительную активность ■висцеральных гладких мышц не опосредовано изменением генной экспрессии, а обусловлено изменением проницаемости плазматической мембраны гладкомышечных клеток.

В растворе, содержащем 5-10"^ моль/л ТЭк кортизон (5-10"^ моль/л) вызывал угнетение электрической и сократительной ак- • тивности висцеральных гладких мышц.

При действии кортизона на гладкие мышцы мочеточника, taenia coli , антрального отдела желудка юрской свинки в гиперкалиевом растворе на фоне развития тонического компонента гиперкалиевой контрактуры этот глюкокортикостер ^д вызывал частичное или полное расслабление гладьях мышц. В отличие от кортизона ингибиторы биосинтеза белка не вызывали достоверного изменения тонического компонента гиперкалиевой контрактуры.

Синтетический кортикостероидный гормон - преднизолон вызывал угнетение ПД и сокращение гл адких мышц мочеточника, taenia coli , кольцевого слоя антрального отдела желудка морской свиюги. Десенситиэации гладких мышц к действию этого

стероида не наблюдали. В гиперкалиевом растворе предкизолон вызывал расслабление висцеральных гладких мышц.

Действие гидрокортизона, В нормальном растворе Кребса гидрокортизон в концентрациях5• 10"® - 5-Ю-^ моль/л вызывал уменьшение продолжительности ПД, амплитуды сокращения гладких мышц мочеточника и антрального отдела желудка морской свинки.

В более высоких концентрациях 15* 10"^ - 5-моль/л) гидрокортизон вызывал увеличение продолжительности потенциалов и амплитуды сокращения гладких мышц мочеточника. По-видимому, эффекты гидрокортизона обусловлены взаимодействием глюкокорти-коидного гормона с рецепторами, локализованными на плазматической мембране, так как изменение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения мышц мочеточника, вызванное гидрокортизоном, наступало на первых минутах действий этого гормона, и этот эффект был обратим. На 5-10 минутах отмывания препаратов гладких мышц нормальным раствором Кребса после продолжительного (30 - 60 минут) пребывания препяп»тов в растворе, содержащем гидрокортизон, эффект действия этого гормона на электрическую и сократительную активность гладких мышц мочеточника устранялся. К действию гидрокортизона при высокой концентрации наступала десенситизация гладких мышц мочеточника, т.е. при продолжительном действии гидрокортизона наблюдалось уменьшение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращений, вызванных гидрокортизоном на первых минутах действия этого глюкокортикостероидного гормона. Гидрокортизон вызывал также увеличение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладкомышечных клеток антрального отдела желудка, taenia coli' , матки морской свинки.

Амплитуда спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli в растворе, содержащем 5«10 моль/л гидрокортизона, составляла 153,8 + 18,4% от амплитуды спонтанных сокращений гладких шшц taenia coli морской свинки в нормальном растворе Кребса'.

В основе современных представлений о механизмах специфического действия стероидных гормонов на' клетки-мишени лежит постулат об опосредовании большинства эффектов этих гормонов изменением генной экспрессии индукции синтеза клеточных белков, а также синтеза ДНК, если последний имеет место, специфически вызываемого различными стероидными гормонами, у большинстве случаев, что блокируется не только ингчСято^: ; транс-

ляции (пуромицин, циклогенсимид), но и ингибитором транскрипции (актиномицин Д)./Розен, Смирнов, 1981/.

Для определения роли генетического аппарата в механизме действия гидрокортизона на электрическую и сократительную активность гладких мышц исследовали влияние этого стероида на фоне действия актиномицина Д и пуромицина. Замена нормального раствора Кребса на раствор, содержащий актиномицин Д, вызывала уменьшение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладких мышц.

Пуромицин также вызывал уменьшение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладких мышц. Эффекты действия ингибиторов биосинтеза белка проявлялись спустя продолжительное время, а отмывание препаратов гладких мышц нормальным раствором Кребса после действия ингибиторов биосинтеза белков не вызывало восстановления электрической и сократительной активности гладких мышц. Отмывание препаратов гладких мышц нормальным раствором Кребса после действия кортико-стероидных гормонов вызывало восстановление электрической и сократительной активнооти гладкомышечных клеток.

В растворе, содержащем актиномицин Д или пуромицин, гидрокортизон в концентрации 5»10~^ моль/л вызывал увеличение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладких мышц мочеточника.

Таким образом, полученные данные позволяют предположить, что передача сигнала от гидрокортизона на сократительный аппарат висцеральных гладких мышц осуществляется путем передачи сигнала на ионные каналы, которые трансформируют полученную информацию и передают на сократительный аппарат клетки. На 3-5 минутах действия гидрокортизона в концентрациях10"^ -Ю-4 моль/л в безнатриевом или гипонатриевом растворах появлялось плато потенциалов, если оно отсутствовало в этих растворах без гидрокортизона, либо продолжительность его значительно увеличивалась. Одновременно с увеличением продолжительности плато потенциалов в гипонатриевом или безнатриевом растворах гидрокортизон вызывал увеличение амплитуды сокращения гладких мышц в этих растворах.

В растворе, содержащем 73А, гидрокортизон в концентрации 5-10" моль/л не вызывал увеличения продолжительности потенциалов действия, уменьшения скорости спада пиковых потенциа-

лов и увеличения амплитуды сокращения.

Л ---------м растворе гидрокортизон в концентрациях

ника и желудочно-кишечного тракта.

Полученные данные показали, что в физиологичеоких концентрациях (10"^ - ГО-7 моль/л) кортизон не вызывает достоверного изменения электрической и сократительной активности висцеральных гладких мшц, а гидрокортизон вызывает уменьшение скорости нарастания потенциалов действия, амплитуды и скорости сокращения гладкомышечных клеток. В фармакологических концентрациях (5«10"^ - 5-10"^ моль/л) кортизон вызывает угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц, а гидрокортизон - увеличение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения висцеральных гладких мышц.

Постановка проблемы гормональной регуляции функциональной активности гладкомышечных клеток потребовала выяснения механизмов действия белково-пептидных и стероидных гормонов на электрическую и сократительную активность гладких мышц различных внутренних органов.

Полученные нами результата показали, что гладкомышечные клетки мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода реагируют на действие брадикинина, ангиотензина, оксито-цина, инсулина, паратиреоидина, кортизона, гидрокортизона и свидетельствуют о том, что эти клетки являются компетентными к указанным гормонам. Эти данные расширяют наше представление о клетках-мигаенях к белково-пептидным и глгококортикоидным гормонам. Пороговые концентрации, вызывающие изменение электрической и сократительной активности гладкомышечных клеток различных органов и систем (мочеточника, желудка, матки, яйцевода) , отличаются метлу собой. Это свидетельствует о том, что плотности рецепторов белково-пептидных гормонов на гладкомышечных клетках мочеточника, желз'дка, кишечника, матки и яйцевода различны. Результаты наших исследований показали, что белкого-пептидные и глюкокортикостероидные гормоны оказываю* как возбуждающее, так и модулирующее действие на электрическую и сократительную активность гладкомышечных клеток.

На основании сравнительного анализа действия брадикинина, вещества Р, вазопряссина, ангиотензина, окситоцина, инсулина, паратиреоидина, кортикотропина и тиротропина можно сделать

вызывал расслабление гладких мышц мочеточ-

заключение, что возбуждающее и модулирующее действие пептидов на электрическую и сократительную активность глапких мышц не является неспецифическим действием пептидов. Это заключение основано на том, что некоторые пептиды (кортикотропин, тиро-гропин) даже в высокой концентрации (КГ4 - Ю-^ моль/л) не вызывают изменения электрической и сократительной активности гладкомышечных Клеток, т.е. гладкие мышцы мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода являются кортикотро-пинрезистентными и тиротцопинрезистентными.

Исходя из классификации компетентных клеток к действию гормонов В.Б.Розена и А.Н.Смирнова /Розен, 1973,1977; Розен, Смирнов, 1981/ и учитывая специфичность действия брадикинина, вещества Р, окситоцина, вазопрессина, инсулина и паратиреоидина на гладкомышечные клетки, а также различия в пороговых концентрациях, которые оказывают выраженное действие на электрическую и сократительную активность гладких мышц разных органов и систем, можно подразделить гладкомышечные клетки на гормонзависимые и гормончувствительные. Гладкомышечные клетки классических органов-мишеней являются гормонзависимыми, а остальные - гормончувствительными.

Увеличение продолжительности генерации потенциалов действия и амплитуды сокращения гладкомышечных клеток в растворе, содержащем дибутирил-цАМФ, свидетельствует о том, что это вещество вызывает увеличение продолжительности входа ионов кальция при генерации потенциалов действия. Эти данные подтверждают результаты исследования действия дибутирил-цАМФ в внутриклеточного действия цА1$ на мышечные клетки миокарда, которые доказывают, что цАМФ приводит к фосфорилированию белка, ассоциированного с кальциевым каналом. Вследствие этого возрастает среднее время, в течение которого кальциевый канал остается открытым /Рейхарц, 1987/.

Предполагается, что действие исследуемого агента опосредуется образованием цАШ? и последующими реакциями цАШ-зависи-мого фосфорилирования белков, если действие этого агента оказывает на клетку такие же эффекты, как и известные активаторы аденилатцикл&зы, ингибиторы фосфодиэстеразы и дибутирил-цАЬ® /Йсачук, 1983/. Сопоставление эффектов действия пептидных гормонов и папаверина, кофеина, ионов магния и дибутирил-цАМФ на эту активность показало, что они отличаются между собой. На

фоне действия дибутирил-цАМФ и гипермагниевых растворов бел-ково-пептидные гормоны оказывают действия на электрическую и сократительную активность гладких мышц, аналогичные действию этих гормонов в нормальном растворе Кребса. Эти данные свидетельствуют о том, что цАШ> не является вторичным мессецджером при регулирующем действии гормонов на сократительную активность гладкомышечных клеток. Однако результаты наших исследований свидетельствуют о том, что цАМФ оказывает модулирующее действие на сократительную активность гладкомышечных клеток.

Белково-пептидные гормоны не вызывали медленнонарастающе-го тонического сокращения гормонзависимых и гормончувстви-тельных гладкомышечных клеток, котбрые вызывают форболовые эфиры и диацилглицерин, активирующие протеинкиназу С / v/ei, Triggie, 1936 /. Их действие на сократительную активность висцеральных гладких мышц отличалось также от действия инози-тол-1,4,5-трифосфата и кофеина, веществ, вызывающих освобождение ионов кальция из саркоплазматического ретикулума /н±-shimato et al., 1986} Saida, van Breemen, 1937 /. Кроме того, в растворе, содержащем кофеин, брадикинин, вещество Р, вазопрессин и окситоцин, вызывали сокращение гладкомышечных клеток, т.е. нейропептиды вызывали сокращение гладкомышечных клеток в условиях, при которых инозитол-1,4,5-трифосфат не может вызвать сокращения мышц.

Полученные результаты свадетельствуют о том, что диацилглицерин и инозитол-1,4,5-трифосфат не являются вторичными посредниками в передаче гормонального сигнала, генерируемого гормонрецепторными комплексами на сократительный аппарат гладкомышечных клеток.

Таким образом, полученные данные позволяют предположить, что передача сигналов, генерируемых гормонрецепторными комплексами на сократительный аппарат висцеральных гладких мышц, осуществляется на ионные каналы, которые трансформируют полученную информацию и передают на сократительный аппарат клетки.

Результаты опытов показали, что брадикинин, вещество Р, вазопрессин и окситоцин вызывают сокращение гладкомышечных клеток на фоне действия Д600 в концентрации 10 моль/л, т.е. в условиях полной блокады потенциалозависимых кальциевых каналов. Эти данные свидетельствуют о том, что потенциалозави-симые кальциевые каналы плазматической мембраны гладкошшеч-

ных клеток не является необходимыми для возникновения первичной сократительной реакции на действия нейропептидов. Однако эти каналы играют важную роль в усилении ответа гладкомышеч-ных клеток пептидов.

Сокращения гладких мышц, вызванные нейропептидами на фоне действия кофеина, азида натрия и ванадата натрия, свидетельствуют о том, что внутриклеточные кальциевые пулы саркоплазма-тического ретикулума и митохондрий не играют существенной роли в развитии первичной сократительной реакции гладкомышечных клеток в ответ на действие нейропептидов.

Таким образом, можно сделать заключение, что важную роль в развитии первичной сократительной реакции, вызванной пептидами, играют хемочувствительные кальциевые каналы плазматической мембраны гладкомышечных клеток. Отсутствие сократительной реакции гладкомышечных клеток на действие нейропептидов в бескальциевом растворе после кратковременного воздействия ионов лантана, которые обладают способностью вытеснять и удалять ионы кальция из внеклеточного примембранного кальциевого пула, свидетельствуют о том, что в развитии первичной сократительной реакции гладкомышечных клеток важную роль играют ионы кальция, которые запасены в примембранном внеклеточном кальциевом пуле.

Учитывая все вышесказанное, мы полагаем, что при возбуяща-юшем действии брадикинина, вещества Р, вазопрессина, оксито-цина на гладкомышечные клетки развивается следующая цепь событий: I. Активация хеморецепторов плазматической мембраны гладкомышечных клеток и образование комплекса гормон-хеморе-цептор.

2. Открывание хемочувствительных кальциевых каналов и вход ионов кальция из примембранного внеклеточного пула (гли-кокаликса) и внеклеточной среды черев хемочувствительные кальциевые каналы внутрь гладкомышечных клеток.

3. Деполяризация клеток.

4. Открывание потенциалозависимых кальциевых каналов, генерация потенциалов действия и вход ионов кальция из внеклеточной среды через потенциалозависимые кальциевые каналы внутрь гладкомышечных клеток.

5. Активация сокращения мышц.

Окситоцин в отличие от брадикинина, вещества Р, вазопрес-сина вызывает также угнетение активности кальциевого насоса плазматической мембраны, т.е. оказывает регулирующее влияние на процесс расслабления гладких мышц.

Активация сокращения гладкомышечных клеток, вызванная ан-гиотензином, обусловлена открыванием хемочувствительных натриевых каналов, деполяризацией плазматической мембраны, открыванием потенциалоэависимых кальциевых каналов и входом этих ионов из вненлеточной среды внутрь клеток через потенциалозависимые кальциевые каналы.

В настоящее время показано, что взаимоотношения между цАШ и кальцием подразделяются на два типа в соответствии с их ролью в качестве одно- или двухуправляемых контрольных систем в отдельных тканях-мишенях. Одноуправляемые системы - это системы, присутствующие в клетках, регулируемых одним стимулом, где функционирует лишь простая регуляция типа "включение-выключение", в зависимости от присутствия или отсутствия стимула. В разных видах клеток в качестве второго медиатора может действовать кальций либо цАШ. Если вторым медиатором является кальций, то цАШ, который образуется в этой клетке, усиливает кальциевый сигнал. Двухуправляемые контрольные системы функционируют в клетках, регулируемых двумя независимыми стимулами, например, когда один стимул "запускает" клеточную активность, а второй останавливает реакцию, обычно противодействуя первому стимулу. В этих тканях,как правило, именно кальций служит первичным сигналом 1-го стимула, а цАШ опосредует ингибиторныЙ эффект 2-го стимула, модулируя внутриклеточный уровень кальция. Таким образом, в отличив от синергизма между цАМФ и кальцием в одно-управляемых системах, в двухуправляемых - эффекты цАШ> и кальция антагонистичны /Кэтт, Дюфо, 1985/. Полученные нами результат свидетельствуют о том, что цАМ5 и кальций являются синер-гистами. Это позволяет заключить, что гладКомышечные клетки являются одноуправляемой системой. Включение сократительной активности гладкомышечных клеток обусловлено ионами кальция, а цАШ усиливает кальциевый сигнал. Выключение активности гладкомышечных клеток обусловлено инактивацией кальциевых каналов и активацией кальцийактивируемых калиевых каналов вследствие увеличения внутриклеточной концентрации ионов кальция.

Результата наших исследований показали, что нардау с воз-

бувдаюшиы действие« на гладкомышечные клетки гормоны оказывают также модулирующее действие. Это действие может быть либо тормозным, либо приводящим к положительному инотропному эффекту. Тормозное действие гормонов на электрическую и сократительную активность гладкомышечных клеток обусловлено уменьшением входа ионов натрия через натриевые и кальциевые каналы плазматической мембраны. Положительный инотропшй эффект гормонов обусловлен уменьшением выхода ионов калия на гладкомышечных клеток через кальцийантивируемые и потенциалозависимые калиевые каналы. Кроме этого, положительный инотропшй эффект гормонов обусловлен увеличением внутриклеточной концентрации цАШ, который вызывает увеличение среднего времени, в течение которого кальциевый канал остается открытым /Рейхардт, 1987/.

Таким образом, полученные нами результаты показали, что белково-пептидные и глюкокортикостероидные гормоны оказывают регулирующее влияние как на прямые связи, которые управляют входом ионов кальция в гладкомышечные клетки и приводят к увеличению концентрации свободноионизированного кальция в саркоплазме и активации гладкомышечных клеток, так и на обратные связи, которые управляют процессами, регулирующими продолжительность входа ионов кальция в клетки, скорость шхера ионов кальция из саркоплазмы во внеклеточную среду и расслаблением гладких мышц.

• ВЫВОДЫ

1, Регулирующее действие белково-пептидшх и глюкокорти-костероидных гормонов на сократительную активность гладких мышц осуществляется через воздействие этих веществ на транспортные системы ионов кальция.

2. Брадикинин, вещество Р, вазопрессин вызывают открывание хемочувствительных кальциевых каналов плазматической мембраны гладкомышечных клеток мочеточника, келудочно-ккшечного тракта, матки и яйцевода и вход ионов кальция из примембранного кальциевого п у л а и внеклеточной среды через эти каналы, что приводит к увеличению' внутриклеточной концентрации свободных ионов кальция, которые активную* сокращение гладких мышц. Углубление эффектов действия брадикинина, вещества Р, вазо-

прессина обусловлено открыванием потенциалозави-с и м ы х кальциевых каналов плазматической мембраны, входом ионов кальция в клетки через эти каналы и дополнительным увеличением внутриклеточной концентрации кальция, которые увеличивают амплитуду и скорость сокращения гладких мышц.

3. Сокращение гладких мышц, вызванное брадикинином, веществом Р, вазопрессином, окситоцином в бескальциевом растворе, не обусловлено освобождением ионов кальция из внутриклеточных кальциевых пулов.

4. Активация сокращения гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, вызванного ангиотензином, обусловлена открыванием.хемочувствительдах натриевых каналов плазматической мембраны, деполяризацией плазматической мембраны, открыванием потенциалозависимых кальциевых каналов и входом этих ионов из внеклеточной среды внутрь клеток через потёнциало-зависимые кальциевые каналы.

5. Окситоцин вызывает открывание хемочувствительных кальциевых каналов плазматической мембраны гладкомышечных клеток матки и яйцевода; уменьшение входа ионов кальция через быстрые инактивируюшиеся потенциалоэависимые кальциевые каналы клеток мочеточника и желудочно-кишечного тракта и угнетает активность кальциевого насоса плазматической мембраны гладко-мышечных клеток матки, мочеточника и желудочно-кишечного тракта.

6. Инсулин, паратиреоидин вызывают уменьшение натриевой проводимости и входа ионов кальция через быстрые инактивируюшиеся потенциалоэависимые кальциевые кагалы плазматической мембраны гладкомышечных клеток мочеточника, желудочно-кишечного тракта и матки.

7. Эффекта действия брадикинина, вещества Р, вазопресси-на, ангиотензина, опситоцина, инсулина, паратиреоидина на сократительную активность гладкомышечных клеток мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода не обусловлены увеличением внутриклеточной концентрации цА№$.

0. Гидрокортизон и кортизон вызывают уменьшение входа ионов кальция в гладкомышечные клетки через быстрые инактиви-рувщиеся и медленные неинактивирушиеся потенциалозависикые

кальциевые каналы плазматической мембраны.

9. Гедроиортизон вызывает уменьшение выхода ионов калия

из гладкомышечных клеток через кальцийактивируемые и потенциа-лозависимые калиевые каналы.

10. Белково-пептидные и глюкокортикостероидные гормоны оказывают регулирующее действие: а - на прямые связи, которые управляют входом ионов кальция в гладкомышечные клетки, что приводит к увеличению концентрации свободноионизированного кальция в саркоплазме, б - на обратные связи, которые управляют процессами, регулирующими продолжительность входа ионов кальция в гладкомышечные клетки и скорость выхода ионов кальция из саркоплазмы во внеклеточную среду.

РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Влияние замещения ионов Са некоторыми двухвалентными катионами на электрическую и сократительную активность гладких мышц // Молекулярная генетика и биофизика. 1976. Вып. I. C.I3I-I33.

2. Role of magnesium ions in regulating the electrical processes end contraction-relaxation of smooth muscle // Abstracts of papers international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna. 1976« (Совместно с П.Г.Богачем)

3. The temperature effect and some ATPase inhibitors action on the transmembrane electrogenesis and contraction-relaxation of smooth muscle // Abstracts of papers international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 197&. P.63. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой)

4. Роль ионов магния в регуляции проницаемости сарколеммы и электрической активности клеток гладких мышц // Молекулярная генетика и биофизика. 1977. Вып. 2. C.I09-II2.

5. Hole of Mg in regulating the electrical processes and contraction-relaxation of smooth muscle // Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle. Sofia, 1977. P.11-17. (Совместно с П.Г.Богачем)

6. The temperatura effect and soma ATPase Inhibitors action on the transmembrane electrogenesis and contraction-relaxation of smooth muscle // Physiology and Pharmacology of Smooth Muacle. Sofia, 1977. P.69-74. (Совместно с Ф.В. Бурдыгой)

7. Role of Mg and Ca ions and their interrelation in regulating the transmembrane electrical processes and contraction-relaxation of smooth muacle // Abstract of volunteer papera of 27th international congress of physiological sciences. Paris, 1977. V.13. P.84. (Совместно с П.Г.Богачем)

8. Роль сарколеммы в расслаблении гладких мышц // Реферативная информация о научно-исследовательских работах в вузах УССР: Биология. 1978. C.I2-I3. (Совместно с П.Г.Богачем и Ф.В.Бурдыгой)

9. Некоторые механизмы расслабления гладких мышц // Реферата докладов на симпозиумах 13 съезда Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова, Алма-Ата, 1979. Л.:Наука, 1979. С,194-195. (Совместно с Ф.В.Еурдыгой)

10. Effoct of some hormones on the smooth muscle relaxation ruto // Abstracta of papers 2—d international symposium "Fliyaiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1979. P.110. (Совместно с Ф.В.Еурдыгой и В.И.Косогором)

11. Эффекты ацетилхолина и адреналина на электрические и сократительные свойства гладких мышц в норме и в условиях гипотермии // Молекулярная генетика и биофизика. 1979. Вып. 4. С.43^19. (Совместно с П.Г.Богачем и Ф.В.Еурдыгой)

12. Роль ионов магния в регуляции электрических процессов, сокращения-расслабления и чувствительности гладких мышц к ацетилхолину // Молекулярная генетика и биофизика. 1980. Вып.5. С.51-56. (Совместно с П.Г.Богачем и Ф.В.Еурдыгой) .

т3. Кинетика сокращения-расслабления гладких мышц taenia coli морской свинки // Фундаментальные проблемы гастроэнтерологии. Киев, 1981. С.230-231. (Совместно с Ф.В.Еурдыгой)

14. Кинетика сокращения-расслабления гладких мышц мочеточника морской свинки // 1-й Всесоюзный биофизический сгеад: Тезисы докладов стецд.сообш. М., 1982..С.62. (Совместно с

П.Г.Богачем, Ф.В.Бурдыгой, П.Ф.Пелюхом)

15. Effect of Insulin and hydrocortieon on the action potentials and kinetics of contractions and relaxation of ureteral amooth muscles // Abstracts of papers 3-<l international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1,983. P.102.

16. Changes in the excitation-contraction coupling in the gastric smooth muscles upon increasing the Mg^+ concentrations in the medium // Abstracts of papers 3-d international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1982. Р.ЮЗ. (Совместно с К.Боевым, М.Папазовой, А.Боневым)

17. Electro-mechanical coupling and contraction-relaxation kinetics in the ureter smooth muscle of the guinea pig // Abstracts of papers 3—cL international symposium "Physiology and. Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1982. P.40.

(Совместно с П.Г.Богачем, Ф.В.Бурдыгой, П.Ф.Пелюхом)

16. The effects of papaverine on the electrical and mechanical activity of the guinea-pig ureter // J. Physiol. (Gr.Brit.), 198}. 334. P.79-89. (Совместно с А.Ф.Брединг и В.В.Бурды-гой)

19. Анализ кинетики сокращения - расслабления гладких мышц мочеточника // Биофизика р биохимия мышечного сокращения. Тбилиси, 1963. С.109-110, (Совместно с Ф.В.Еурдыгой и П.Ф.Пелюхом)

20. Влияние физиологически активных веществ на электрическую и механическую активность гладких мышц // 14-й съезд Всесоюзного физиологического общества. Баку, 1903. Т.2. С.14. (Совместно с П.Г.Богачем, Ф.В.Бурдыгой, П.Ф.Пелюхом, П.Н. Шевчуком, Н.А.Каплуненко, Н.Г.Пискорской)

21. Влияние бескальциевого и гипокальциевого растворов Кребса на потенциалы действия и кинетику сокращения - расслабления гладких мышц мочеточника // Проблемы обшей и молекулярной биологии. 1985. Вып.4. С.42-44. (Совместно с Ф.В. Бурдыгой)

22. Роль гормонов в регуляции ионной проводимости плазматической мембраны гладких мышц мочеточника морской свинки // 7-я Всесоюзная конференция по физиологии почек и водно-солевого обмена. Чернигов, 19в5. С.209-210.

23. Effect of hormones on electrical end contractive activitlea of smooth muscle // Abstracts of papera 4-d international sympûsium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1985. P.109.

24. On the mechanism of Cortisol and parathormone action on the ureter smooth muscle of the guinea pig // Молекулярные механизмы и энергетика подвижности. Братислава, 1985. С.63.

25. Взаимосвязь между метаболизмом белков, электрической и механической активностью гладких мышц // Тезисы Всесоюзной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения академика И.С.Бериташвили. Тбилиси, 1985. С.160,

26. Действие кортикостероипннх гормонов на электрическую и сократительную активность гладкомнтечных клеток мочеточника // Тезисы докладов 5-го съезда фармакологов Украинской ССР. Запорожье, 1985. С.146.

27. Влияние гидрокортизона и инсулина на ритмичность электрической и сократительной активности гладких мышц желудка кошки // Проблемы общей и молекулярной биологии. 1985. Вып.4.

С.39^12. (Совместно с И.С.Кучеровым, В.И.Косогором)

28. Влияние гормонов гипофиза на электрическую и механическую активность гладкомышечных клеток мочеточника морской свинки // Проблемы физиологии гипоталамуса. 1986. Вып.20. С. 74-77.

29. Влияние понижения температуры на электрическую и механическую активность гладких мытц мочеточника морской свинки // Проблемы общей и молекулярной биологии. 1986. Вып.5.

С,110-114. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой)

30. Влияние валина, цистеина и гидрокортизона на спонтанную электрическую и механическую активность гладких мышц taenia coli морской свинки // Молекулярная генетика и биофизика. 1986. Вып.II. С.42-44. (Совместно с И.С.Кучеровым и

B.И.Косогорой)

31. Влияние ионов магния и водорода на электрическую и механическую активность гладких мышц мочеточника морской свинки // Молекулярная генетика и биофизика. 1966. ftjn.II. С.44-47. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой)

32. Вплив гормон1в на електричну I механГчну активн1сть гладеньких м»яз1в морсько1 свинки // 12-й з*1зд Укра1нського ф1э1олог1чного товариства: Тези допов1дей, Льв1в, 1966.

C.375. (Совместно с Н.Г.Пискорской, Ц.О.Джангавадзе, Н.З. Майсурадзе, П.Ф.Пелюхом)

33. О механизмах действия инсулина на моторику желудочно-кишечного тракта // Нейрогуморальные механизмы старения. Киев, 1986. С.91. (Совместно с С.Д.Гройсманом) ,

34. Ионные механизмы действия дезаминнокситоцина, простаглан-динов #21, и Eg на электрическую и механическую активность гладких мышц мочеточника морской свинки // Всесоюзная конференция "Проблемы нейрогуморалыюй регуляции деятельности висцеральных систем", посвященная 80-летию со дня рождения академика В.Н.Черниговского: Тезисы докладов и научных сообщений. Л., 1937. С.127-128. (Совместно с П.Ф.Пелюхом, P.D. Калнберга)

35. Влияние гормонов гипофиза на сократительную активность гладких мышц яйцевода и мауки морской свинки // Проблемы физиологии гипоталамуса. 1987. Вып.21. С.79-81. (Совместно с М.О.Дкангавадзе, Н.З.Майсурадзе)

35. Пути поступления ионизированного кальция в гладкомышвчные и железистые клетки (Фармакологический анализ // 15-й съезд Всесоюзного физиологического обвества им.И.П.Павлова. Кишинев, 1937. Т.2. С.204. (Совместно с И.С.Ыагурой, Ф.В.Бурдыгой, Н.А.Каплуненко, Н.Г.Пискорской, П.Ф.Пелюхоы, Ж.П. Смирновой, П.Н.Шэвчукоы)

37. Влияние преднлзолона на электрическую и механическую активность гладких мыод // Молекулярная генетика и биофизика. 1937. Вып.12. С.50-51.

38. Влияние брадикинина на механическую активность гладких мышц толстого кишечника морской свинки // Молекулярная генетика

и биофизика. 1988. Вып.13. С.74-76. (Совместно с Н.Г.Пискор-ской)

39. About the mechanism of cortisone action on electrical end. contractile activity of smooth muscles // Abstracts of papers Fifth international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1988. P.114.

40. The influence of neuropeptides on the electrical and contractile activity of smooth muscles // Abstracts of papers Fifth international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1988. P.115. (Совместно с H.Г. Пискорской)