Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Механизмы гормональной регуляции электрической и сократительной активности гладких мышц

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Механизмы гормональной регуляции электрической и сократительной активности гладких мышц"

АКАДЕМИЯ НАУК СССР ИНСТИТУТ ЭБОЛГЦИОШЮЙ ФИЗИОЛОГИИ И ГЛО ХИМИИ ии.И.И.СЕЧКНОВА

На правах рукописи

СКРШНШ Зеновий Дмитриевич

УДС 612.73 V 612.43

МЕХАНИЗМЫ ГОРМОНАЛЬНОЙ РЕГУЛЯЦИИ ЭЛЕКТРИЧЕСКОЙ И СОКРАТИ ТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ГЛАДКИХ ШЛЩ

03.00.13 - физиология человека и кивопшх

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

29У&

/0(э

Ленингран 1909

Работа выполнена в научно-исследовательском Институте физиологии Киевского ордена Ленина и ордена Октябрьской револп-ции государстветюго университета им. Т.Г.Шевченко.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Р.С.ОРЛОВ доктор биологических наук, профессор В.В.ЕАРАБАНОВА доктор биологических наук, профессор А.Д.Н02ЩРАЧЕВ

Ведущее учреждение - Институт физиологии им.И.П.Павлова АН СССР

Зашита состоится "_"_ 1989 г. в_

часов на заседании специализированного совета Д.002.89.01 по присуждение ученой степени доктора биологических наук при Институте эволюционной физиологии и биохимии им.И.М.Сеченова ЛН СССР (194223, Ленинград, пр. U.Тореза, 44).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан _"_ Т989 г.

Ученый секретарь специализированного совета доктор биологических наук, профессор

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАКШ

Актуальность проблемы. Одной из центральных проблей физиологии и молекулярной эндокринологии является выяснение первичных эффектов гормонов и нейромедиаторов, которые в конечном итоге приводят к изменению метаболизма или функциональной активности клеток.

Предпосылкой для исследования первичных эффектов гормонов и нейромедиаторов на клетки явилось изучение механизмов ивдук-ции и репрессии синтеза белка, роли циклических нуклеотидов, способов функционирования ионных каналов и насосов /Ткачук, 1983/.

До недавнего времени в эндокринологии существовало положение об узкой направленности и строгой ограниченности сферы действия каждого гормона на определенные тканевые структуры. К клеткам-мишеням относили клетки только тех тканей, на которое сугубо избирательно действуют гормональные соединения и которые наиболее наглддно и по всем заданным параметрам реагируют на соответствующий гормон, а клетки всех остальных органов достаточно произвольно обозначались как немишени. Такого рода классификация клеток упускала из виду давно известные данные о чрезвычайно широком спектре тканевого действия многих гормонов. В настоящее время принята новая классификация, которая позволяет уточнить представления о клетках-мишенях и множественности гормональных эффектов /Розен, 1973,1У77; Розен, Смирнов, 1981/.

В течение последних десятилетий исследованы первичные эффекты медиаторов, гормонов - производных аминокислот и некоторые аспекты действия пептидных гормонов на электричеокую и сократительную активность гладких мышц /Орлов, 1967; Шуба, Клевец, 1967; Орлов и др., 1971,1983; Богач, 1974; Климов, 1903,1986; Bolton, 1979|1981 /• Однако до настоящего времени не выяснены первичные эффекты большинства белково-пептидных и кортико-сте-роидных гормонов на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц. Учитывая, что изучение механизмов гормональной регуляции сократительной активности гладкодашечных клеток имеет огромное значение в связи с важной ролью этих мышц в функционировании внутренних органов и кровеносных сосудов, представляет интерес исследование первичных эффектов белково-пептидных и глпкокортикостероидшх гормонов на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мнтц. Сравнитель-

ный анализ механизмов действия белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на клетки-мишени и клетки-немишени представляется необходимым при построении обшей теории нейрозндо-кринной регуляции функциональной активности и метаболизма клеток.

Выяснение механизмов действия пептидных и глюкокортикосте-роидных гормонов, этих постоянно циркулирующих в крови регуляторов нейроэндокринной системы, на гладкие мышцы сосудов и внутренних органов позволит разработать новый подход к анализу терапевтических и побочных эффектов действия лекарственных гормональных препаратов и к использованию медикаментозных и немедикаментозных способов лечения различных заболеваний.

Цель и задачи исследования. Основная цель исследования состояла в выяснении механизмов действия белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на функциональную активность висцеральных гладких мышц и проведении сравнительного анализа механизмов действия гормонов на глвдкомышечные клетки-мишени и клетки-немишени.

Исходя из цели исследования были поставлены следующие задачи:

- исследовать роль различных белково-пептидных и глюкокор-тикостероидных гормонов в регуляции электрической и сократительной активности гладкомышечных клеток органов, которые не являются органами-мишенями для этих гормонов;

- выяснить роль аденилатциклаэной системы в механизме действия белково-пептидных гормонов на электрическую и сократительную активность гладких мышц;

- исследовать роль системы биосинтеза белка в первичных эффектах глюкокортикостероидных гормонов на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц;,

- исследовать влияние белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на проницаемость плазматической мембраны гладкомышечных клеток к ионам натрия и калия;

- выяснить роль потенциалозависимых и хемочувствительных кальциевых каналов плазматической мембраны в механизмах действия белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на гладкие мыпиде;

- исследовать роль внутриклеточных и примембранных кальциевых пулов в механизмах действия гормонов;

. - провести сравнительный анализ механизмов действия белково-

пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на электрическую и сократительную активность гладкомышечных клеток-мишеней и клеток-немишеней.

Научная новизна. В данной работе впервые исследовано влияние кортизона и гидрокортизона на электрическую и сократительную активность гладкомышечных клеток. Установлено, что специфическое действие гидрокортизона на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких пышц обусловлено уменьшением проницаемости плазматической мембраны гладкомышечных клеток к ионам кальция. Впервые исследовано влияние кортикотропина, тиреотропи-на, паратиреоидина, инсулина на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц. Показано, что паратирео-идин и инсулин оказывают модулирующее действие на потенциалоза-висимые кальциевые каналы.

Впервые исследовано влияние вазопрессина, брадикинина, вещества Р, ангиотензнна на гладкомышечные клэтаи мочеточника морской свинки. Показано, что окситоцин оказывает разнонаправленное действие на окситоцинзависимые и окситоцинчувствительные гладкомышечные клетки. Впервые показана роль мембраносвязаншх ионов кальция в механизме действия окситоцина на сократительную активность гладких мышц матки и яйцевода. Показано, что вазо-првссин, брадикинин, вещество Р, ангиотензин вызывают сокращение гладких мышц мочеточника, нелудочно-кишечного тракта, матки, яйцевода. Впервые выяснена роль примембраносвязанных ионов кальция в механизмах действия вазопрессина, брадикинина, вещества Р на висцеральные гладкие мышцы. Показано отличие в механизмах действия ангиотензнна на гладкомышечные клетки мочеточника и матки.

Полученные данны^ позволяют заключить, что воэбуящающее и первичномодулирующее действие белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на сократительную функцию гладкомышечных клеток обусловлено изменением ионной проводимости плазматической мембраны.

Теоретическое и практическое значение работы. Полученные данные о действии белково-пептидных и глюкокортикостероидных гормонов на электрическую и сократительную активность гладких мышц позволяют сформулировать новое представление о механизме действия исследуемых гормонов на возбудимые ткани. Результата исследования показали, что регуляция обменных процессов (метаболизма) и сократительной функции гладкомышечных клеток осутае-

ствляется разными путями. Влияние исследуемых гормонов на функциональную активность висцеральных гладких шшц осуществляется через изменение уровня ионизированного кальция в клетке.

Практическое значение работе заключается в возможности использования полученных экспериментальных данных для обоснования и изыскания способов медикаментозного и немедикаментозного лечения заболеваний сердечно-сосудистой, пищеварительной и Енде1-лительной систем, а также патологии родовой деятельности.

Полученные результата позволяют объяснить механизмы побочного действия рада фармакологических препаратов и указывают возможности их коррекции. Результаты исследования расширяют представления о механизмах гормональной регуляции электрической и сократительной активности гладких шщ и могут быть использованы при чтении курсов физиологии и фармакологии в высших учебных заведениях.

Основные положения работы. Белкево-пептидше гормоны 1окси-тоцин, вазопрессин, брадикинин, вещество Р, ангиотензин, инсулин, паратиреоидин) и гидрокортизон оказывают регулирующее действие на функциональную активность висцеральных гладких мышц. Их действие на сократительную активность гладкомышечных клеток реализуется через изменение уровня ионизированного кальция в саркоплазма.

Различные внутриклеточные медиаторы (ионы кальция, цАШ>, диацилглицерин, инозит-1,4,5-трифосфат) регулируют различные по скорости внутриклеточные биохимические процессы. Ионы кальция регулируют наиболее быстрые биохимические процессы, протекание которых определяет функциональную активность клетки.

Первичная сократительная реакция гладких мышц матки, вызванная окситоцином, ангийтенэином.и различных висцеральных гладких мышц, вызванная вазопрессином, брадикинином, веществом Р, обусловлена увеличением концентрации свободноионизированного кальция в саркоплазме гладкомишечных клеток, которая создается входом этих ионов из внеклеточного примеыбранного кальциевого пула и внеклеточной среды через1 хемочувствительные кальциевые каналы. Усиление первичного сократительного ответа обусловлено Входом ионов кальция из внеклеточной среды внутрь гладкомышеч-ных клеток через потенциалозависише кальциевые каналы. Гидрокортизон является эндогенным- блокятореда кальциевых каналов.

Эффекты белково-пептидшх гормонов' на сократительную активность висцеральных гладких мышц отличаются: от эффектов дибути-

рил-цАЬЙ, папаверина, ионов магния, кофеина, а эффекта глюкокор-тикостероидных гормонов отличается от эффектов ингибиторов и стимуляторов биосинтеза белка.

Между функциональной активностью и метаболизмом клеток существует взаимосвязь, которая обусловлена взаимовлиянием внутриклеточных медиаторов на образование и распад или связывание одного с другим.

Апробация работа. Материалы диссертации обсуждались на конференции "Физиологическая роль поверхностноактивных веществ" (г.Черновцы, 1975), международных симпозиумах "Физиология и фармакология гладких мышц" (г.Варна, 1976,1982), X съезде Украинского физиологического общества им.И.П.Павлова (г.Одесса, 1977), ХХУП Международной конгрессе физиологического общества (Г.Париж, 1977), ХШ съезда Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова (г.Алма-Ата, 1979), конференции по биофизике мембран (г.Паланга, 1979), I Всесоюзном биофизическом съезде I г.Москва, 1982), Х1У съезде Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова (г.Баку, 1983), Всесоюзном симпозиуме "Биофизика и биохимия мышечного сокращения" (г.Тбилиси, 1983), УП Всесоюзной конференции по физиологии почек и водно-солевого обмена (г.Чернигов, 1985), Всесоюзной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения акад.И.С.Бериташвили (г.Тбилиси, 1985), ХП съезде Украинского физиологического общества им. И.П. Павлова (г.Львов, 1986), ХУ съезде Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова (г.Кишинев, 1987).

Публикации. По теме диссертационной работа опубликовано 40 работ.

Структура и объем работа. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, б глав с изложением материалов экспериментов, обсуждения результатов, выводов и указателя литературы.

Работа изложена на 296 страницах машинописного текста, иллюстрирована 117 рисунками и содержит 32 таблицы. Указатель литературы включает 466 источников (196 отечественных и 270 иностранных) .

Объекта и методы исследования. Исследования выполнена на полосках гладких мышц мочеточника, taenia coll , кольцевого слоя толстого кишечника, антрального отдела желудка, продольных мышц рога матки, яйцевода морской свинки и полосках гладких

мышц кольцевого слоя антрального отдела желудка кошки.

G

В исследованиях использовались растворы Кребса нормального и измененного состава. Нормальный раствор Кребса был следующего состава (ммоль/л): NaCl - 120,4; KCI - 5,9; Naiico^ - 15,5; NaiIgPO^ - 1,2; CaCIg - 2,5; MgCl2 - 1,2; глюкоза - 11,5.

Безнатриевый раствор готовили путем замены в растворе Кребса ионов натрия на ионы триса. В части экспериментов использовались гипонатриеЕые растворы, в которых NaCl заменили изоос-мотическим количеством UgCl2 или холинхлоридом.

Гипонатриевый гипохлорный раствор готовили путем замены в растворе Кребса 120,4 ммоль/л NaCl на изотоническое количество сахарозы. Раствори с повышенным содержанием ионов магния или кальция готовили путем замены изоосмотического количества NaCl m MgCl2 или CaCIg. Растворы, не содержащие ионов магния, глюкозы, готовили путем замены MgCl2 или глюкозы на изоосмо-тическое количество NaCl . Бескальциевый раствор готовили заменой ионов кальция ионами магния и добавляли 0,5 ммоль/л ЭГТА для связывания остатков ионов кальция. Гиперкалиесые растворы готовили путем замены всего количества НоС1 на KCI. Растворы, содержащие тетраэтилпммоний, 3,4-диаминопиридин, кофеин, азид натрия, готовили путей замены NaCl на изоосмотическое количество данного вещества. Растворы, содержащие ионы лантана, готовили путем смешивания изотонических растворов NaCl и LaCl^.

В исследованиях использовались растворы, содержащие оксито-цин, вазопрессин, кортикотропин, тиротропин, брадикинин, вещество Р, ангиотензин, инсулин, паратиреоидин, гидрокортизон, кортизон, преднизолон, папаверин, дибутирил-цАМФ, актиномицин Д, пуромицин, винбластин, винкристин, вонадат натрия, рутениевый красный, Д600. Для приготовления этих растворов необходимые вещества прибавляли к растворам нормального или измененного состава. Показатель рН раствора определялся непосредственно перед опытом и после его окончания с помошьс рН-метра и был равен 7,37,4.

Через сахарозные секции камеры двойных сахарозных промежутков пропускался изотонический раствор сахарозы (Зи9,2 ммоль/л) с большим удельным сопротивлением. Для приготовления этого раствора использовали только химически чистую сахарозу и бидистил-лированную или денонсированную воду.

Для регистрации потенциалов действия, электротонических потенциалов гладкомышечных клеток была использована методика двойных сахарозных промежутков /Berger, Вагг, 19бд /. При помогай

механотрона 6MXIC механические сокращения мышцы преобразовывались в электрические сигналы, которые усиливались и регистрировались одновременно с электрической активностью гладкомышечных клеток. Полученные данные обрабатывались вариационно-статистическим методом /Бейли, 1964; Лакин, 19ТО/.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

I. Влияние нейропептидов на функциональную активность гладкомышечных клеток

Для выяснения первичных эффектов нейропептидов на гладко-мышечные клетки и проведения сравнительного анализа механизмов действия белково-пептидных гормонов на электрическую и сократительную активность клеток-мишеней и немишеней для этих гормонов исследовали действие нейропептидов на изолированные полоски гладких мышц матки, яйцевода, желудочно-кишечного тракта, мочеточника.

Влияние брадикинина. Гладкие мышцы мочеточника, морской свинки, лишенные почечного конца, не проявляли спонтанной электрической и сократительной активности. В ответ на электрическое раздражение клетки мочеточника генерировали сложные потенциалы действия (ГЩ), состоящие из пиковых потенциалов и плато. Амплитуда ЦЦ равняется 34,5 ^ 2,8 мВ, а продолжительность — 0,75 + 0,3 с. ПД гладких мышц мочеточника сопровождались фазными сокращениями этих мышц.

В концентрациях Ю-7 - Ю-5 моль/л брадикинин вызывал фаз-нотоническое сокращение гладких мышц ыочеточника. Амплитуда фазного компонента сокращения, вызванного брадикинином, составляла 127,5 + 9,6% от амплитуды вызванного электрическим током сокращения мышц ыочеточника, находящихся в нормальном растворе, и 108,4 + 7,2$ от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры. Амплитуда тонического компонента.вызванного брадикинином сокращения составляла 14 + 2,Z% от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры.

В нормальном растворе Кребса гладкомышечные клетки taenia coll спонтанно генерировали медленные волны, ЦЦ, которые сопровождались сокращениями. Частота медленных волн и спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli равна 0,009 + 0,0004 со-крапений/с (0,54 + 0,024 сокращений/мин), а их продолжитель-

ность равна 68,4 + 2,1 с. Гладкомышечные клетки кольцевого слоя толстого кишечника и антрального отдела желудка морской свинки также обладали спонтанной активностью. Частота спонтанных сокращений мышц кольцевого слоя толстого кишечника составляла 0,0248 + 0,0068 сокращений/с (1,488 + 0,408 сокращений/мин), их продолжительность - 27,1 + 1,6 с, а частота сокращений гладких мышц антрального отдела желудка - 0,1042 + 0,0042 сокращений/с (6,252 + 0,252 сокращений/мин). Ерадикинин вызывал фазно-тонические сокращения гладких мышц желудочно-кишечного тракта. Амплитуда фазных компонентов сокращений гладких мышц taenia coli и кольцевого слоя толстого кишечника, вызванных бродикинином в концентрации 10"^ моль/л, составляли 192 + 24,-2% и 160,5 + 10,456 от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц.

В нормальном растворе Кребса при температуре 37°С в 53,7$ опытов гладкие мышцы матки спонтанно сокращались. Продолжительность спонтанных сокращений этих мышц составляла IUI,5 + 7,8 с, а частота 0,004 + 0,0004 сокращений/с (0,24 + 0,024 сокращений/мин) . Гладкие мышцы яйцевода также обладают спонтанной сократительной активностью. Частота спонтанных сокращений гладких мышц яйцевода значительно превышала частоту спонтанных сокращений гладких мышц матки и составляла 0,176 + U,008 сокра-шений/с (10,56 + U,48 сокращений/мин).

Брадикинин в концентрации 10"^ моль/л вызывал фазно-тони-ческоо сокращение гладких мышц матки и яйцевода.

При продолжительном действии брадикинина на гладкомышечные клетки мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки, и яйцевода его эффекты на сократительную активность этих мышц ослаблялись, т.е. наступала десенситизация клеток к действию этого пептида.

Влияние вещества Р и вазопрессина. Вещество Р и вазопрес-син в нормальном растворе Кребса вызывали сокращение или усиление спонтанной сократительной активности гладких мышц мочеточника, антрального отдела желудка, taenia coli , кольцевого слоя толстого кишечника, матки морской свинки.

При продолжительном действии вещества Р и вазопрессина на гладкие мышцы амплитуда сокращений уменьшалась, что свидетельствует о том, что к этим веществам наступала десенситизация гладких мышц.

Влияние ангиотензина. Исследование действия ангиотензина

на функциональную активность гладких мышц мочеточника, фундаль-ного отдела желудка, кольцевого слоя толстого кишечника, матки, яйцевода показало,что этот нейропептид вызывает сокращение спонтанно неактивных гладких мышц и увеличение амплитуды и частота спонтанных сокрашений гладких мышц кишечника, матки, яйцевода. Амплитуда сокращений гладких мышц,вызванных ангиотензи-ном, не превышала амплитуды сокращений этих мышц, вызванных гиперкалиевым раствором. Возбуждающее действие ангиотензина на функциональную активность гладких мышц максимально выражено на первых минутах действия ангиотензина. С течением времени амплитуда сокращений мышц, вызванных ангиотензином, уменьшалась, а сокращения спонтанно неактивных гладких мышц прекращались, т.е. развивалась десенситизация к ангиотензину.

Влияние окситоцина. Окситоцин в концентрациях Ю-1® - 10"' моль/л вызывал сокращение спонтанно неактивных препаратов гладких мышц матки, увеличение амплитуды сокращения спонтанных сокращений мышц матки и яйцевода. В растворе, содержащем окситоцин в концентрации 5.10"® моль/л, максимальная амплитуда сокрашений мышц матки составляла 124,i + 4,5% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц. Амплитуда спонтанных сокращений гладких мышц яйцевода на первой минуте действия окситоцина в концентрации моль/л составляла 164,4 + 15,7% от амплиту-

ды спонтанных сокращений в нормальном растворе.

В нормальном растворе Кребса окситоцин в концентрациях, 5.I0-® - 5-10~® моль/л угнетал вызванные электрическим тоном ПД и сокращения гладких мышц мочеточника.

Окситоцин вызывал также угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц желудочно-кишечного тракта: taenia coli , кольцевого слоя толстого кишечника и антраль-ного отдела желудка морской свинки. При продолжительном действии окситоцина на гладкие мышцы происходило частичное восстановление сократительной активности гладких мышц, что свидетельствует о том, что к действию этого пептида наступает десенситизация.

Влияние кортикотропина и тиротропина. Кортикотропин и ти-ротропин в концентрациях 10~° - 10 моль/л не вызывали достоверного изменения электрической и сократительной активности гладких мышц мочеточника, taenia coli , антралыгого отдела ае-лудкп, матки и яйцевода морской свинки.

2. Роль системы аденилатциклаза-цА® в механизме действия нейропептидов на гладкомышечные клетки

Для выяснения роли аденилатциклазной системы в механизмах действия нейропептидов на гладкомышечные клетки исследовали влияние веществ, которые вызывают увеличение уровня цА№ в возбудимых клетках, на электрическую и сократительную активность гладких мышц и эффекта нейропептидов на фоне действия этих веществ.

Влияние ионов магния, папаверина и кофеина. Исследовали влияние веществ, которые обладают способностью вызывать увеличение уровня внутриклеточной цАШ> путем активации аденилатцик-лазы: ионы магния или ингибирования фосфодиэстеразы: папаверин, кофеин Дивков, Челибонова, 1977/.

Увеличение концентрации ионов магния в 2-10 раз (¡¿,4 - 12 ммоль/л) вызывало уменьшение скорости нарастания потенциалов действия, их продолжительности, скорости и амплитуды сокращения гладких мышц мочеточника, taenia coli , антрального отдела желудка морской свинки и антрального отдела желудка кошки. В гипермагниевых растворах происходила гиперполяризация плазматической мембраны гладкомышечных клеток и увеличивалась величина электротонических потенциалов. Удаление ионов магния из тестирующего раствора вызывало увеличение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения мышц мочеточника, частота и амплитуды спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli . антрального отдела желудка морской свинки и антрального отдела желудка кошки.

В гипермагниевом растворе, в котором хлористый натрий был заменен на хлористой магний, наблюдалось расслабление и угнетение спонтанных сокращений гладкомышечных клеток желудочно-кишечного тракта, матки, яйцевода и мочеточника.

Папаверин в концентрации 2«10"^ моль/л также вызывал угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц мочеточника. Кофеин в концентрациях 1-2-Ю-2 моль/л вызывал кратковременное сокращение и последующее расслабление гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода.

Влияние дибутирил-цАШ> на сократительную активность гладких мышц. Исследование влияния ионов магния, папаверина показало, что эти вещества вызывают угнетение электрической и сократительной активности гладкомышечных клеток. Однако эти веще-

ства нардду с действием на аденилатциклазу или фосфодиэстера-зу обладают способностью оказывать угнетающее действие на кальциевые каналы плазматической мембраны. Поэтому для моделирования эффектов влияния увеличения уровня внутриклеточного цА№5 без изменения свойств кальциевых каналов исследовали влияние дибутирил-цАМ$, который, в отличие от цА!$, проникает через плазматическую мембрану в вызывает такие же биохимические и физиологические процессы, как и внутриклеточный цАМФ.

В концентрациях 10"® - 10"^ моль/л дибутирил-цАШ> не вызывал возбуждения и активации сокращения спонтанно неактивных препаратов гладких мышц. В концентрациях 10"^ - 10"^ моль/л дибутирил-цАШ> вызывал увеличение амплитуды сокращения гладдо-мышечных клеток мочеточника, вызванного электрическим раздражением.

Прибавление в тестирующий раствор дибутирил-цА!й вызывало увеличение амплитуды спонтанных сокращений гладких мышц. В растворе, содержащем Ю-4 моль/л дибутирил-цАКВг, амплитуда спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli составляла 124,76 + 11,6%, матки - 116,6 + 2,8% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц в нормальном растворе Кребса.

Действие нейропептидов на сократительную активность глапких мышц на фоне действия гипермагниевого раствора и дибутарил-цАШ. В гипермагниевом растворе (81,4 моль/л) брадикинин, вещество Р, вазопрессин вызывали сокращение гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода. Окситоцин вызывал сокращение гладких мышц матки в гипермагниевом растворе.

Ангиотензин не вызывал сокращения гладких мышц на фоне действия гипермагниевого раствора.

В растворе, содержащем моль/л дибутирил-цАШ1, окситоцин вызывал возбуждение и активацию сокращения гладких мышц матки, а брадикинин, вещество Р и вазопрессин вызывали активацию сокращения гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода. На фоне действия дибутирил-цАМФ окситоцин угнетал вызванные электрическим током ПД и сокращения гладких мышц мочеточника и спонтанную сократительную активность гладких мышц taenia coli . В гиперкалиевом растворе, содержащем дибутирил-цАМФ, окситоцин не вызывал изменения величины тонического компонента гиперкалиевой контрактур" глапких мигал мо-

четочника и taenia coli.

3. Роль ионов натрия, хлора и калия в механизме действия брадикинина, вещества Р, вазопрессина, ангиотенэина и

' окситоцина на функциональную активность гладких мышц

Влияние брадикинина на функциональную активность гладких мышц в условиях изменения ионного состава среды. В безнатриевом растворе брадикинин вызывал сокращение гладких мыгац. Амплитуда сокращения мышц мочеточника, вызванного браднкинином, в безнатриевом растворе составляла 23,2 + 2,6?, от амплитуды сокращения, вызванного электрическим раздражением этих мышц, находящихся в нормальном растворе. Брадикинин вызывал также сокращение гладких мышц, находящихся в гипонатриевом, гипохлорном (сахарозном) растворе.

Для определения роли калиевых каналов в передаче гормонального сигнала, генерируемого гормон-рецепторным комплексом, на сократительшй аппарат гладкомышечных клеток исследовали влияние этого пептида на электрическую и сократительную активность гладких мышц в растворе, содержащем блокатор калиевых каналов -тетраэтиламмоний 1ТЭА), и гиперкалиевом растворе.

Брадикинин вызывал сокращение гладких мышц на фоне действия ТЭА и в гиперкалиевом растворе.

Влияние вещества Р и вазопрессина на сократительную активность гладких мышц в условиях изменения ионного состава среды. Вещество Р и вазопрессин вызывали сокращение гладких мышц мочеточника, taenia coli , желудка, матки, находящихся в гиперкалиевом растворе. Амплитуда и скорость сокращения гладких мышц, вызванных этими веществами, в гиперкалиевом растворе были значительно меньше амплитуды и скорости сокращения этих мышц, вызванных веществом Р и вазопрессином на фоне действия нормального раствора Кребса.

Вазойрессин вызывал сокращение висцеральных гладких мышц, находящихся в безнатриевом растворе. Амплитуда сокращения мыш taenia coli , вызванного вазопрессином в концентрации 5- Ю-^ моль/л в безнатриевом растворе, составляла 20,9 + 1,9% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц, находящихся в нормальном растворе.

Влияние ангиотензина на сократительную активность гладких мышц в условиях изменения ионного состава среды. Для выяснения

роли калиевых каналов в механизме передачи ангиотензинового сигнала на сократительный аппарат гладких мышц исследовали влияние этого нейропептида на сократительную активность гладких мышц мочеточника в растворе, содержащем ТЭА. В этом растворе ангиотензин вызывал сокращение мышц.

Ангиотензин не вызывал сокращений гладких мышц мочеточника и желудочно-кишечного тракта в беэнатриевом и гиперкалиевом растворах. Однако этот нейропептид вызывал сокращение гладких мышц матки, находящихся в безнатриевом или гиперкалиевом растворах.

Амплитуда сокращения гладких мышц матки, вызванного ангио-тензином в концентрации Ю-5 моль/л, в безнатриевом растворе составляла 42,1 + 4,3$, а в гиперкалиевом растворе - 20,7 + + 4,1% от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры. Ангиотензин не вызывал сокращения гладких мышц матки в бескальциевом растворе после воздействия на препараты этих мышц ионов лантана.

Результаты этих исследований позволяют сделать заключение, что сигналы, генерируемые при связывании ангиотензииа с рецепторами гладкомышечных клеток мочеточника, желудочно-кишечного тракта и матки, передаются на различные ионные каналы.

Действие окситоиина на гладкие мышпы в условиях изменения ионного состава среды. В концентрации 5-10"^ моль/л окситоцин вызывал сокращение мышц матки, находящихся в гипонатриевом, ги-похлорном (сахарозном) растворах. Амплитуда этого сокращения была' значительно меньше амплитуды сокращения мышц, вызванных окситоцином в нормальном растворе, и составляла 10,9 + 1,3% от амплитуды спонтанных сокращений.

Амплитуда сокращения гладких мышц матки, вызванного окситоцином, в гиперкалиевом растворе составляла 38,3 + 7,2%, а мышц яйцевода составляла 39,4 + 3,6% от амплитуды спонтанных сокращений.

Окситоцин вызывал угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц мочеточника и желудочно-кишечного тракта, находящихся в растворе, содержащем б ммоль/л ТЭА и безнатриевом растворе.

4. Роль ионов кальция в механизмах действия нейропептидов на сократительную активность гладкомытечных клеток

Роль ионов кальция в механизмах действия брадикинина, вещества Р и вазопрессина на сократительную активность гладких мышц. В бескальциевом растворе брадикинин, вещество Р, вазо-прессин вызывали одиночное сокращение гладкомышечных клеток. Повторное воздействие нейропептидов после отмывания препаратов гладких мышц бескальциевым раствором не вызывало сокращения мышц.

Брадикинин вызывал сокращение гладких мыгац, находящихся в гиперкалиевом растворе, содержащем Д600 в концентрации молвЛ.и в гиперкалиевом, бескальциевом растворе. Амплитуда сокращения мышц матки, вызванного брадикинином в концентрации 10"^ моль/л, в гиперкалиевом, бескальциевом растворе составляла 7,4 + 1,9% от амплитуды спонтанных сокращений этих мышц в нормальном растворе.

Для выяснения роли кальциевого насоса в механизме действия нейропептидов исследовали их влияние в растворах, содержащих ингибитор кальциевого насоса - ванадат натрия. Амплитуда сокращений гладких мышц мочеточника и taenia coil , вызванных брадикинином в концентрации 10"^ моль/л в растворе, содержащем ванадат натрия в концентрации 10"^ моль/л, составляла 12,5 + + 7,7% и 16,5 + от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры.

Для выяснения роли ионов кальция, запасенных в саркоплаз-матичесяом ретикулуме, в механизмах действия нейропептидов ис-пледовали их влияние на сократительную активность гладких мышц на фоне кофеина. Прибавление кофеина в концентрации 20 ммоль/л в контрольный раствор вызывало двухфазный эффект: начальное сокращение и последующее расслабление гладких мышц, находящихся в нормальном, безнатриевом и гиперкалиевом растворах. Амплитуда сокращения мышц матки, вызванного кофеином в безнатриевом растворе, составляла 14,4 + 2,7% от амплитуды спонтанных сокращений в нормальном растворе, а амплитуда сокращения, вызванного кофеином в гиперкалиевом растворе, составляла 7,1 + 1,6% от амплитуды спонтанных сокращений в нормальном растворе. При действии кофеина в концентрации 20 ммсль/л в бескальциевом растворе на первых минутах его действия глад-

кие мышцы сокращались, однако через 10 - 30 минут действия бескальциевого раствора прибавление кофеина не вызывало сокращения мышц.

В растворе, содержащем 20 ммоль/л кофеина, брадикинин вызывал сокращение гладких мышц.

Роль митохондриального кальциевого пула в механизме действия нейропептидов на гладкие мышцы мочеточника определяли, исследуя влияние каждого нейропептида на сократительную активность гладких мышц в растворах, содержащих ингибиторы транспорта ионов кальция через митохондриальные мембраны. Замена нормального раствора Кребса на раствор, содержащий один из ингибиторов транспорта ионов кальция через мембраны митохондрий (азид натрия или рутениевый красный), не вызывала сокращения гладких мышц.

Амплитуда сокращения гладких мышц мочеточника, вызванного брадикинином в концентрации 10"^ моль/л на фоне действия 10 ммоль/л азида натрия, составляла 208,8 + 63,9^ от амплитуды вызванных электрическим током сокращений гладких мыещ мочеточника, находящихся в растворе, содержащем 10 ммоль/л азида натрия.

Для выяснения роли кальмодулина в механизме действия нейропептидов исследовали их влияние на сократительную активность гладких мышц, находящихся в растворе, содержащем ингибитор кальмодулина - аминазин. Замена нормального раствора на раствор, содержащий ингибитор кальмодулина - аминазин в концентрации 10" моль/л, угнетала вызванные электрическим током сокращения гладких мышц мочеточника, спонтанные сокращения гладких мышц желудочно-кишечного тракта. На фоне действия аминазина брадикинин вызывал сокращение гладких мышц. Амплитуда сокращения мышц мочеточника, вызванного брадикинином в концентрации 10"° моль/л в растворе, содержащем 10~5 моль/л аминазина, составляла 14,3 + 0,5% от амплитуды сокращения этих мышц, вызванного электрическим током в нормальном растворе Кребса.

Роль примембранного кальциевого пула в механизме действия нейропептидов определяли, исследуя их влияние на сократительную активность висцеральных гладких мышц в бескальциевом растворе после предварительной обработки препаратов мочеточника беокальциевым раствором, содержащим ионы лантана в концентра-

Ции 5-10 ммоль/л. Эффекты брадикинина, вещества Р и ззазопрес-сина на сократительную актевность гладких мышц, предварительно обработанных ионами лантана, в бескальциевом растворе либо отсутствовали, либо были незначительными. Отмывание препаратов' гладких мышц нормальным раствором приводило к восстановлению сократительной активности мышц и к восстановлению их ответов на нейропептиды.

Роль ионов кальция в механизме действия окситоцина на сократительную активность гладких мышц. Окситоцин вызывал сокращение гладких мышц матки, находящихся в бескальциевом растворе, содержащем 0,5 ммоль/л ЭГТА. Амплитуда этого сокращения составляла 15,6 + 4,9^ от амплитуды спонтанных сокращений. Поп-торное воздействие окситоцина в бескальциевом растворе не вызывало сокращения мышц матки.

Окситоцин вызывал сокращение мышц матки в гиперкалиевом растворе, содержащем ванадат натрия. Амплитуда этого сокращения составляла 10,2 + 0,8$ от амплитуды фазного компонента гиперкалиевой контрактуры.

. Окситоцин вызывал сокращение гладких мышц матки в растворе, содержащем кофеин,и на 30 - 60 минутах действия бескальциевого раствора, что свидетельствует о том, что сокращение, вызванное окситоцином, не обусловлено освобождением ионов кальция из саркоплазматического ретикулума.

В растворе, содержащем азид натрия, окситоцин также выдавал сокращение мышц матки.

Замена бескальциевого раствора на бескальциевый раствор, содержащий ионы лантана в концентрациях2 - 10 ммоль/л, вызывала медленно нарастающее сокращение мышц матки. После воздействия на гладкие мышцы ионов лантана препараты отмывали бескальциевым раствором и действовали окситоцином. В этих условиях окситоцин не вызывал сокращения мышц матки. Отмывание мышц нормальным раствором приводило к восстановлению сократительной активности гладких мышц матки. После отмывания мышц матки нормальным раствором Кребса окситоцин вызывал сокращение мышц как в нормальном, так и в бескальциевом растворе.

5. Влияние инсулина и паратиреоидина на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц

Действие инсулина. В нормальном растворе инсулин в концентрациях 10-у - Ю-0 моль/л вызывал гиперполяризацию плазматической мембраны, увеличение электротонических потенциалов гладко-мышечных клеток мочеточника, угнетение электрической и сократительной активности этих клеток. В растворе, содержащем 10 моль/л инсулина, гиперполяризация плазматической мембраны гладкомышечных клеток мочеточника составляла 2,27 + 0,49 мВ, величина катэлектротонических потенциалов (НЭП) составляла 107,1 + 2,4?, а анэлектротонических потенциалов (АЭП) - 108,6 + ± 2,6-t. Инсулин (Ю-® - 10"^ моль/л) вызывал достоверное уменьшение скорости нарастания, продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладких мышц. В больших концентрациях (10~ь моль/л) инсулин вызывал уменьшение скоростей и про-должительностей сокращения и расслабления мышц мочеточника.

Инсулин вызывал также гиперполяризацию плазматической мембраны, увеличение КЭП и АЭП гладкомышечных клеток taenia coli , антрального отдела желудка, кольцевого слоя толстого кишечника морской свинки и антрального отдела желудка кошки. В растворе, содержащем 10 ^ моль/л инсулина, происходила гиперполяризация клеток taenia coli на 1,67 + 0,56 мВ, а КЭП и АЭП составляли 111,9 + 4,3? и 113,5 +4,1$ соответственно от величины в нормальном растворе. Инсулин угнетал электрическую и сократительную активность гладких мышц желудочно-кишечного тракта.

Для выяснения роли цАШ в механизме действия инсулина на электрическую и сократительную активности гладких мышц исследовали влияние этого гормона в растворе, содержащем дибутирил-цАМЕ. На фоне действия дибутирил-цАМЕ инсулин также вызывал угнетение спонтанных сокращений гладких мышц.

Угнетающее действие инсулина на сократительную активность гладких шлиц не обусловлено транспортом глюкозы через плазматическую мембрану гладкомышечных клеток, о чем свидетельствуют результат исследования влияния инсулина на спонтанную сократительную активность гладких мышц в безглюкозном растворе. Амплитуда спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli морской свинки в безглюкозном растворе, содержащем 10"^ моль/л инсулина, составляла 70,7 + 4,6??, а антрального отдела желудка - 57,9 ± 6,9% от амплитуды сокращения этих мышц в беэглю-копном растворе.

Для рняснения ионного механизму угнетающего действия инсу-

лина на электрическую и сократительную активность гладких мышц исследовали влияние этого гормона на функциональную активность гладкомышечных клеток в гиперкалиевом растворе, в растворе, содержащем ТЭА, а также в безнатриевом, безмагниевом, гиперкалиевом растворах. Результаты этих исследований свидетельствуют о том, что инсулин угнетает электрическую и сократительную активность гладких мышц, находящихся в растворе, содержащем Б ммоль/л ТЭА, безнатриевом, гиперкальциевом, безмагниевом растворах. Однако этот гормон не вызывал изменения амплитуды тоническсго компонента гиперкалиевой контрактуры.

Инсулин вызывал уменьшение амплитуды сокращений мышц мочеточника, вызванных брадикинином. Относительное уменьшение амплитуды этого сокращения было меньше по сравнению с уменьшением вызванных электрическим током сокращений мышц мочеточника, находящихся в нормальном растворе.

Амплитуда сокращений гладких мышц мочеточника в растворе, содержащем Ю-^ моль/л брадикинина и Ю-® моль/л инсулина, составляла 89,9 + 1,6% от амплитуды сокращений этих мышц, находящихся в растворе, содержащем Ю-^ моль/л брадикинина.

Действие паратиреоидина. Паратиреоидин (5-КГ7 моль/л) вызывал гиперполяризацию гладкомышечных клеток мочеточника, увеличение КЭП и АЭП, уменьшение продолжительности и максимальной скорости нарастания ПД, амплитуды и продолжительности сокращения. В растворе, содержащем паратиреоидин в концентрации 5-10" моль/л, гиперполяризация мышц мочеточника составляла 2 + 0,8 мВ, НЭП - 111,2 + 3,2$, АЭП - 113 + 4,8$.

Паратиреоидин вызывал уменьшение амплитуды спонтанных сокращений taenia coll , антрального отдела желудка, матки морской свинки.

Эффект действия паратиреоидина на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц не уменьшался при продолжительном .действии этого гормона, что свидетельствует о той, что десенситизация гладких мышц к действию паратиреоидина не наступает или развивается очень медленно.

Паратиреоидин оказывал угнетающее действие на сократительную активность гладких мышц, находящихся в растворе, содержащем Ю-^ моль/л дибутирил-цАШ.

Для выяснения ионного механизма действия паратиреоидина на электрическую и сократительную активность висцеральных глад-

ких мышц исследовали влияние этого гормона на гладкие мышцы, находящиеся в растворе, содержащем 5-10"^ моль/л 1ЭА, безнатриевом и гиперкалиевом растворах. В безнатриевом растворе па-ратиреоидин не вызывал гиперполяризации плазматической мембраны мышц мочеточника. Пвратиреоидин вызывал угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц, находящихся в растворе, содержащем ТЭА и в безнатриевом растворе.

В гиперкалиевом растворе паратиреоидин не оказывал влияния на амплитуду сокращения гладких мышц мочеточника, taenia coli , антрального отдела желудка, матки морской свинки.

6. Влияние глюкокортикостероидных гормонов на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц

Действие кортизона. Исследования действия кортизона в физиологических концентрациях (5-КГ® - 5-Ю"6 моль/л) на электрическую и сократительную активность висцеральных гладких мышц показали, что этот гормон не вызывает достоверного изменения мембранного потенциала покоя, электротонических потенциалов, электрической и сократительной активности гладко-мышечных клеток.

Б фармакологических концентрациях 15-- 5» 10""* моль/л) кортизон вызывал гиперполяризацию плазматической мембраны гладкомышечных клеток и увеличение электротонических потенциалов. В растворе, содержащем кортизон в концентрации 5-Ю-® моль/л гиперполяризация гладкомышечных клеток мочеточника составляла 0,23 + 0,1 мВ, а амплитуда электротонических потенциалов составляла 108,7 + 4,9% от амплитуды этих потенциалов гладкомышечных клеток, находящихся в нормальном растворе Креб-са.

Одновременно с изменением величины мембранного потенциала покоя гладкомышечных клеток кортизон вызывал уменьшение максимальной скорости нарастания, потенциалов действия, амплитуды и скорости сокращения гладких мышц мочеточника, антрального отдела желудка, taenia coli морской свинки.

При продолжительном действии кортизона на гладкие мипцы мочеточника и желудочно-кишечного тракта эффекта действия этого глюкокортикостероидного гормона не уменьшались, т.е. я действию кортизона десенситиэация не наступала.

Для выяснения роли генетического аппарата в механизме передачи сигнала, генерируемого кортизон-рецепторным комплексом, на сократительный аппарат гладкомышечных клеток сравнили действие кортизона с действием веществ, которые угнетают или активируют биосинтез белка, а также исследовали влияние кортизона на электрическую и сократительную активность гладких мышц в присутствии ингибиторов .биосинтеза белка. В качестве активаторов биосинтеза белка использовали фитогемаглютинин, а в качестве ингибиторов биосинтеза белка использовали пуромицин, ак-тиномицин Д, винбластин, винкристин. Фитогемаглютинин не вызывал угнетения сократительной активности гладких мышц. Пуромицин, актиномицин Д, винбластин, винкристин вызывали угнетение электрической и сократительной активности гладких мышц, однако эффекты ингибиторов биосинтеза белка на электрическую и сократительную активности гладких мышц, однако эффекты ингибиторов биосинтеза белка на электрическую и сократительную активность гладких ыышц проявлялись на 20 - 40 минутах их действия. Кортизон вызывал угнетение электрический и сократительной активности гладких мышц в растворах, содержащих ингибиторы биосинтеза белка.

Эти данные позволили предположить, что угнетающее действие кортизона на электрическую и сократительную активность •висцеральных гладких ыышц не опосредовано изменением генной экспрессии, а обусловлено изменением ^.„ицаемости плазматической мембраны гладкомышечных клеток.

В растворе, содержащем 5-10"^ моль/л ТЭА кортизон (5-Ю-5 моль/л) вызывал угнетение электрической и сократительной ак- ■ тивности висцеральных гладких мышц.

При действии кортизона на гладкие мышцы мочеточника, taenia coli , антрального отдела желудка юрской свинки в гиперкалиевом растворе на фоне развития тонического компонента гиперкалиевой контрактуры этот глюкокортикостер вызывал частичное или полное расслабление гладких мышц. В отличие от кортизона ингибиторы биосинтеза белка не вызывали достоверного изменения тонического компонента гиперкалиевой контрактуры.

Синтетический кортикостероидный гормон - преднизолон вызывал угнетение ПД и сокращение гладких мыац мочеточника, taenie coli , кольцевого слоя антрального отдела желудка морской свинки. Десенситизации гладких мышц к действию этого

стероида не наблюдали. В гиперкалиевом растворе преднизолон вызывал расслабление висцеральных гладких мышц.

Действие гидрокортизона, В нормальном растворе Кребса гидрокортизон в концентрациях5"Ю-® - моль/л вызывал

уменьшение продолжительности ПД, амплитуды сокращения гладких мышц мочеточника и антрального отдела желудка морской свинки.

В более высоких концентрациях (5-Ю-5 - 5 I-"'-4 моль/л) гидрокортизон вызывал увеличение продолжительности потенциалов и амплитуды сокращения гладких мышц мочеточника. По-видимому, аффекты гидрокортизона обусловлены взаимодействием глюкокорти-коидного гормона с рецепторами, локализованными на плазматической мембране, так как изменение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения мышц мочеточника, вызванное гидрокортизоном, наступало на первых минутах действия этого гормона, и этот эффект был обратим. На 5-10 минутах отмывания препаратов гладких мышц нормальным раствором Кребса после продолжительного (30 - 60 минут) пребывания препар°тов в растворе, содержащем гидрокортизон, эффект действия этого гормона на электрическую и сократительную активность гладких мышц мочеточника устранялся. К действию гидрокортизона при высокой концентрации наступала десенситизация гладких мышц мочеточника, т.е. при продолжительном действии гидрокортизона наблюдалось уменьшение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращений, вызванных гидрокортизоном на первых минутах действия этого глгакокортикостероидного гормона. Гидрокортизон вызывал также увеличение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладкомышечных клеток ан-трпльного отдела желудка, taenia coli , матки морской свинки.

Амплитуда спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli в растворе, содержащем 5«10 моль/л гидрокортизона, составляла 153,8 + I8,4io от амплитуды спонтанных сокращений гладких мышц taenia coli морской свинки в нормальном растворе Кребса'.

В основе современных представлений о механизмах специфического действия стероидных гормонов на' клетки-мишени лежит постулат об опосредовании большинства эффектов этих гормонов изменением генной экспрессии индукции синтеза клеточных белков, а также синтеза ДНК, если последний имеет место, специфически вызываемого различными стероидными гормона>г/,, и большинстве случаев, что блокируется не только ингиб:-: трткс-

ляции (пуромицин, циклогенсимид), но и ингибитором транскрипции (актиномицин Д). /Розен, Смирнов, 1981/.

Для определения роли генетического аппарата в механизме действия гидрокортизона на электрическую и сократительную активность гладких мышц исследовали влияние этого стероида на фоне действия актиномицина Д и пуромицина. Замена нормального раствора Кребса на раствор, содержащий актиномицин Д, вызывала уменьшение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладких мышц.

Пуромицин также вызывал уменьшение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладких мышц. Эффекты действия ингибиторов биосинтеза белка проявлялись спустя продолжительное время, а отмывание препаратов гладких мышц нормальным раствором Кребса после действия ингибиторов биосинтеза белков не вызывало восстановления электрической и сократительной активности гладких мышц. Отмывание препаратов гладких мышц нормальным раствором Кребса после действия кортико-стероидных гормонов вызывало восстановление электрической и сократительной активности гледкомшечных клеток.

В растворе, содержащем актиномицин Д или пуромицин, гидрокортизон в концентрации 5|10-^ ыоль/л вызывал увеличение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения гладких мышц мочеточника.

Таким образом, полученные данные позволяют предположить, что передача сигнала от гидрокортизона на сократительный аппарат висцеральных гладких ыышц осуществляется путем передачи сигнала на ионные каналы, которые трансформируют полученную информацию и передают на сократительный аппарат клетки. На 3-5 минутах действия гидрокортизона в концентрациях 10"^ -10"^ моль/л в безнатриевом или гипонатриевом растворах появлялось плато потенциалов, если оно отсутствовало в этих растворах без гидрокортизона, либо продолжительность его значительно увеличивалась. Одновременно с увеличением продолжительности плато потенциалов в гипонатриевом или безнатриевом растворах гидрокортизон вызывал увеличение амплитуды сокращения гладких мышц в этих растворах.

В^раотворе, содержащем ТЭА, гидрокортизон в концентрации 5-10 моль/л не вызывал увеличения продолжительности потенциалов действия, уменьшения скорости спада пиковых потенциа-

лов и увеличения амплитуды сокращения.

В гиперкалиевом растворе гидрокортизон в концентрациях 10"^ - 10 моль/л вызывал расслабление гладких мышц мочеточника и желудочно-кишечного тракта.

Полученные данные показали, что в физиологичеоких концен-

о су

трациях (10 - 10 моль/л) кортизон не вызывает достоверного изменения электрической и сократительной активности висцеральных гладких мышц, а гидрокортизон вызывает уменьшение скорости нарастания потенциалов действия, амплитуды и скорости сокращения гладкомышечных клеток. В фармакологических концентрациях (5-10"® - 5-Ю-4 моль/л) кортизон вызывает угнетение электрической и сократительной активности глацких мышц, а гидрокортизон - увеличение продолжительности потенциалов действия и амплитуды сокращения висцеральных гладких мышц.

Постановка проблемы гормональной регуляции функциональной активности гладкомышечных клеток потребовала выяснения механизмов действия белково-пептидных и стероидных гормонов на электрическую и сократительную активность гладких мышц различных внутренних органов.

Полученные нами результаты показали, что гладкомышечные клетки мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода реагируют на действие брадикинина, ангиотензина, оксито-цина, инсулина, паратиреоидина, кортизона, гидрокортизона и свидетельствуют о том, что эти клетки являются компетентными к указанным гормонам. Эти данные расширяют наше представление о клетках-мишенях к белково-пептидным и глюкокортикоидным гормонам, Пороговые концентрации, вызывающие изменение электрической и сократительной активности гладкомышечных клеток различных органов и систем (мочеточника, желудка, матки, яйцевода) , отличаются метлу собой. Это свидетельствует о том, что плотности рецепторов белково-пептидных гормонов на гладкомышечных клетках мочеточника, желудка, кишечника, матки и яйцевода различны. Результаты наших исследований показали, что Селкоро-пептидше и глюкокортикостероидные гормоны оказывают как возбуждающее, так и модулирующее действие на электрическую и сократительную активность гладкомышечных клеток.

На основании сравнительного анализа действия брадикинина, вещества Р, ваэопрессина, ангиотензина, окситоцина, инсулина, паратиреоидина, кортикотропина и тиротропина можно сделать

заключение, что возбуждавшее и модулирующее действие пептидов на электрическую и сократительную активность глалких мышц на является неспецифическим действием пептидов. Это заключение основано на том, что некоторые пептиды (кортикотропин, тиро-тропин) даже в высокой концентрации (Ю-4 - Ю-^ моль/л) не вызывают изменения электрической и сократительной активности гладкомышечных клеток, т.е. гладкие мышцы мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода являются кортикотро-гшнрезистентными и тиротгюпинрезистентными.

Исходя из классификации компетентных клеток к действию гормонов В.Б.Розена и А.Н.Смирнова /Розен, 1973,1977; Розен, Смирнов, 1981/ и учитывая специфичность действия брадикинина, вещества Р, окситоцина, вазопрессина, инсулина и паратиреои-дина на гладкомышечные клетки, а также различия в пороговых концентрациях, которые оказывают выраженное действие на электрическую и сократительную активность гладких мышц разных органов и систем, можно подразделить гладномышечные клетки на гормонзависимые и гормончувствительные. Гладкомышечные клетки классических органов-мишеней являются гормонзависимыми, а остальные - гормончувствительными.

Увеличение продолжительности генерации потенциалов действия и амплитуды сокращения гладкомышечных клеток в растворе, содержащем дибутирил-цАМ5, свидетельствует о том, что это вещество вызывает увеличение продолжительности входа ионов кальция при генерации потенциалов действия. Эти данные подтверждают результаты исследования действия дибутирил-цАМФ в внутриклеточного действия цА1® на мышечные клетки миокарда, которые доказывают, что цАМФ приводит к фосфорилированию белка, ассоциированного с кальциевым каналом. Вследствие этого возрастает среднее время, в течение которого кальциевый канал остается открытым /Рейхарц, 1987/.

Предполагается, что действие исследуемого агента опосредуется образованием цАШ и последующими реакциями цАШ-зависи-ыого фосфорилирования белков, если действие этого агента оказывает на клетку такие же эффекты, как у известные активаторы аденилатциклазы, ингибиторы фосфодиэстеразы и дибутирил-цАМФ /Зйачук, 1983/. Сопоставление эффектов действия пептидных гормонов и папаверина, кофеина, ионов магния и дибутирил-цАШ на эту активность показало, что они отличаются между собой. На

фоне действия дибутирил-цАШ> и гипермагниевых растворов бел-ково-пептидные гормоны оказывают действия на электрическую и сократительную активность гладких мышц, аналогичные действию этих гормонов в нормальном растворе Кребса. Эти данные свидетельствуют о том, что цАМ'Б не является вторичным мессеццжером при регулирующем действии гормонов на сократительную активность гладкомышечных клеток. Однако результаты наших исследований свидетельствуют о том, что цАМФ оказывает модулирующее действие на сократительную активность гладкомышечных клеток.

Белково-пептиднне гормоны не вызывали медленнонарастающе-го тонического сокращения гормонэависимых и гормончувстви-тельных гладкомышечных клеток, которые вызывают форболовые эфиры и диацилглицерин, активирующие протеинкиназу С / Wei, Triggle, 1936 /. Их действие на сократительную активность висцеральных гладких мышц отличалось также от действия инози-тол-1,4,5-трифосфата и кофеина, веществ, вызывающих освобождение ионов кальция из саркоплазматического ретикулума /Hi-shiaato et al., 1986; Saida, van Згеешаа, 1937 /. Кроме того, в растворе, содержащем кофеин, брадикинин, вещество Р, вазопрессин и окситоцин, вызывали сокращение гладкомышечных клеток, т.е. нейропептиды вызывали сокращение гладкомышечных клеток в условиях, при которых инозитол-1,4,5-трифосфат не может вызвать сокращения мышц.

Полученные результата свидетельствуют о том, что диацил-глицерин и инозитол-1,4,5-трифосфат не являются вторичными посредниками в передаче гормонального сигнала, генерируемого гормонрецепторными комплексами на сократительный аппарат гладкомышечных клеток.

Таким образом, полученные данные позволяют предположить, что передача сигналов, генерируемых гормонрецепторными комплексами на сократительный аппарат висцеральных гладких мышц, осуществляется на ионные каналы, которые трансформируют полученную информацию и передают на сократительный аппарат клетки.

Результаты опытов показали, что брадикинин, вещество Р, вазопрессин и окситоцин вызывают сокращение гладкомышечных клеток на фоне действия Д600 в концентрации 10 моль/л, т.е. в условиях полной блокады потенциалозависимых кальциевых каналов. Эти данные свидетельствуют о том, что потенциалозави-симые кальциевые каналы плазматической мембраны гладкомашеч-

них клеток не является необходимыми для возникновения первичной сократительной реакции на действия нейропептидов. Однако эти каналы играют важную роль в усилении ответа гладкоыышеч-шх клеток пептидов.

Сокращения гладких мышц, вызванные нейропептидами на фоне действия кофеина, азида натрия и ванадата натрия, свидетельствуют о той, что внутриклеточные кальциевые пулы саркоплазма-тического ретикулуыа и мигохоццрий не играют существенной роли в развитии первичной сократительной реакции гладкомышечных клеток в ответ на действие нейропептидов.

Таким образом, можно сделать заключение, что важную роль в развитии первичной сократительной реакции, вызванной пептидами, играют хеыочувствительные кальциевые каналы плазматической мембраны гладкомышечных клеток. Отсутствие сократительной реакции гладкомышечных клеток на действие нейропептидов в бескальциевом растворе после кратковременного воздействия ионов лантана, которые обладают способностью вытеснять и удалять ионы кальция из внеклеточного примембранного кальциевого пула, свидетельствуют о том, что в развитии первичной сократительной реакции гладкомышечных клеток важную роль играют ионы кальция, которые запасены в примембранном внеклеточном кальциевом пуле.

Учитывая все вышесказанное, мы полагаем, что при возбуища-шеы действии брадикинина, вещества Р, вазопрессина, оксито-цина на гладкомышечные клетки развивается следующая цепь событий: I. Активация хеморецепторов плазматической мембраны гладкодащечных клеток и образование комплекса гормон-хеыоре-цептор.

2. Открывание хемочувствительных кальциевых каналов и вход ионов кальция из примембранного внеклеточного пула (гли-кокаликса) и внеклеточной среды черев хемочувствительные кальциевые каналы внутрь гладкомышечных клеток.

3. Деполяризация клеток.

4. Открывание потенциалозависимых кальциевых каналов, генерация потенциалов действия и вход ионов кальция из внеклеточной среды через потенциалозависимые кальциевые каналы внутрь гладкомышечных клеток.

5. Активация сокращения мышц.

Окситоцин в отличие от брадикинина, вещества Р, вазопрес-сина вызывает также угнетение активности кальциевого насоса плазматической мембраны, т.е. оказывает регулирующее влияние на процесс расслабления гладких мышц.

Активация сокращения гладкомышечных клеток, вызванная ан-гиотензином, обусловлена открыванием хемочувствительных натриевых каналов, деполяризацией плазматической мембраны, открыванием потенциалозависимых кальциевых каналов и входом этих ионов из внеклеточной среды внутрь клеток через потенциалозависимые кальциевые каналы.

В настоящее время показано, что взаимоотношения между цАМФ и кальцием подразделяются на два типа в соответствии с их ролью в качестве одно- или двухуправляемых контрольных систем в отдельных тканях-мишенях. Одноуправляемые системы - это системы, присутствующие в клетках, регулируемых одним стимулом, где функционирует лишь простая регуляция типа "включение-выключение", в зависимости от присутствия или отсутствия стимула. В разных видах клеток в качестве второго медиатора может действовать кальций либо цАШ>. Если вторым медиатором является кальций, то цАМФ, который образуется в этой клетке, усиливает кальциевый сигнал. Двухуправляемые контрольные системы функционируют в клетках, регулируемых двумя независимыми стимулами, например, когда один стимул "запускает" клеточную активность, а второй останавливает реакцию, обычно противодействуя первому стимулу. В этих тканях,как правило, именно кальций служит первичным сигналом 1-го стимула, а цАШ? опосредует ингибиторный эффект 2-го стимула, модулируя внутриклеточный уровень кальция. Таким образом, в отличие от синергизма мевду цАМФ и кальцием в одно-управляемых системах, в двухуправляемых - эффекта цАШ? и кальция антагонистичны Жзтт, Дюфо, 1985/. Полученные нами результата свидетельствуют о том, что цАМФ и кальций являются синер-гистами. Это позволяет заключить, что гладкомышечные клетки являются одноуправляемой системой. Включение сократительной активности гладкомышечных клеток обусловлено ионами кальция, а цАМЗ> усиливает кальциевый сигнал. Выключение активности гладкомышечных клеток обусловлено инактивацией кальциевых каналов и активацией кальцийактивируемых калиевых каналов вследствие увеличения внутриклеточной концентрации ионов кальция.

Результата наших исследований показали, что наряду с воз-

буждаюшим действием на гладкомышечные клетки гормоны оказывают также модулирующее действие. Это действие может быть либо тормозным, либо приводящим к положительному инотропному эффекту. Тормозное действие гормонов на электрическую и сократительную активность гладкомышечных клеток обусловлено уменьшением входа ионов натрия через натриевые и кальциевые каналы плазматической мембраны. Положительный инотропный эффект гормонов обусловлен уменьшением выхода ионов калия на гладкомышечных клеток через кальцийактивируемые и потенциалозависимые калиевые каналы. Кроме этого, положительный инотропный эффект гормонов обусловлен увеличением внутриклеточной концентрации цАМБ, который вызывает увеличение среднего времени, в течете которого кальциевый канал остается открытым /Рейхардт, 1987/.

Таким образом, полученные нами результаты показали, что белково-пептидные и глюкокортикостероидные гормоны оказывают регулирующее влияние как на прямые связи, которые управляют входом ионов кальция в гладкомышечные клетки и приводят к увеличению концентрации свободноионизированного кальция в саркоплазме и активации гладкомышечных клеток, таи и на обратные связи, которые управляют процессами, регулирующими продолжительность входа ионов кальция в клетки, скорость шхсда ионов кальция из саркоплазмы во внеклеточную среду и расслаблением гладких шшц.

• ВЫВОДЫ

1. Регулирующее действие белково-пептидных и глюкокорти-костероидных гормонов на сократительную активность гладких мышц осуществляется через воздействие этих веществ на транспортные системы ионов кальция.

2. Брадикинин, вещество Р, вазопрессин вызывают открывание хеыочувствительных кальциевых каналов плазматической мембраны гладкомышечных клеток мочеточника, келудочно-кшечного тракта, матки и яйцевода и вход ионов кальция из примеыбранного кальциевого п у л а и внеклеточной среды через эти каналы, что приводит к увеличению внутриклеточной концентрации свободных ионов кальция, которые активк ,уют сокращение гладких шшц. Углубление эффектов действия брадикинина, вещества Р, вазо-

прессина обусловлено открыванием потенциалозави-с и м ы х кальциевых каналов плазматической мембраны, входом ионов кальция в клетки через эти каналы и дополнительным увеличением внутриклеточной концентрации кальция, которые увеличивают амплитуду и скорость сокращения гладких мышц.

3. Сокращение гладких мышц, вызванное брадикинином, веществом Р, вазопрессином, окситоцином в бескальциевом растворе, не обусловлено освобождением ионов кальция из внутриклеточных кальциевых пулов.

4. Активация сокращения гладких мышц мочеточника, желудочно-кишечного тракта, вызванного ангиотензином, обусловлена открыванием.хемочувствительных натриевых каналов плазматической мембраны, деполяризацией плазматической мембраны, открыванием потенциалозависимых кальциевых каналов и входом этих ионов из внеклеточной среды внутрь клеток через потенциало-зависимые кальциевые каналы.

5. Окситоцин вызывает открывание хемочувствительных кальциевых каналов плазматической мембраны гладкомышечных клеток матки и яйцевода; уменьшение входа ионов кальция через быстрые инактивирующиеся потенциалоэависимые кальциевые каналы клеток мочеточника и желудочно-кишечного тракта и угнетает активность кальциевого насоса плазматической мембраны гладко-мышечных клеток матки, мочеточника и желудочно-кишечного тракта.

6. Инсулин, паратиреоидин вызывают уменьшение натриевой проводимости и входа ионов кальция через быстрые инактивирующиеся потенциалоэависимые кальциевые кагалы плазматической мембраны гладкомышечных клеток мочеточника, желудочно-кишечного тракта и матки.

7. Эффекта действия брадикинина, вещества Р, вазопресси-на, ангиотензина, окситоцина, инсулина, паратиреоидина на сократительную активность гладкомышечных клеток мочеточника, желудочно-кишечного тракта, матки и яйцевода не обусловлены увеличением внутриклеточной концентрации цАМФ.

О. Гидрокортизон и кортизон вызывают уменьшение входа ионов кальция в гладкомышечные клетки через быстрые инактивирующиеся и медленные неинактивирующиеся потенциалозаписимые

кальциевые каналы плазматической мембраны.

9. Гидрокортизон вызывает уменьшение выхода ионов калия

из гладкомышечных клеток через кальцийактивируемые и потенциа-лозависимые калиевые каналы.

10. Белково-пептидные и глюкокортикостероидные гормоны оказывают регулирующее действие: а - на прямые связи, которые управляют входом ионов кальция в гладкомышечные клетки, что приводит к увеличению концентрации свободноионизированного кальция в саркоплазме, б - на обратные связи, которые управляют процессами, регулирующими продолжительность входа ионов кальция в гладкомышечные клетки и скорость выхода ионов кальция из саркоплазмы во внеклеточную среду.

РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

I. Влияние замещения ионов Са некоторыми двухвалентными катионами на электрическую и сократительную активность гладкик мышц // Молекулярная генетика и биофизика. 1976. Вып. I. C.I3I-I33.

.2. Hole of magnesium ions In regulating the electrical processes and contraction-relaxation of smooth muscle // Abstracts of papers International symposium "Physiology and. Pharmacology of Smooth Muscle". Varna. 1976« P.6. (Совместно с П.Г.Богачем)

3. She temperature effect and some ATPase inhibitors action oa the transmembrane electrogenesis and contraction-relaxation of smooth muscle // Abstracts of papers international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 197^. P.65, (Совместно с Ф.В.Бурдыгой)

4. Роль ионов магния в регуляции проницаемости сарколеммы и электрической активности клеток гладких мышц // Молекулярная генетика и биофизика. 1977. Вып. 2. C.I09-II2.

5. Hole of Mg in regulating the electrical processes and contraction-relaxation of smooth muscle // Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle. Sofia, 1977. P.11-17. (Совместно с П.Г.Богачем)

6. The temperature effect and some ATPase inhibitors action on the transmembrane electrogenesin and contraotinn-rela-xation of smooth muscle // Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle. Sofia, 1977. p.69-74-. (Совместно с Ф.В. Бурдыгой)

7. Role of Mg and Ca ions and their interrelation in regulating the transmembrane electrical processes and contraction-relaxation of smooth muscle // Abstract of volunteer papers of 2?th international congress of physiological sciencea. Paris, 1977. V.13. P.84. (Совместно с П.Г.Богачем)

8. Роль сарколеммы в расслаблении гладких мышц // Реферативная информация о научно-исследовательских работах в вузах УССР: Биология. 1978. С.12-13. (Совместно с П.Г.Богачем и Ф.В.Бурдыгой)

9. Некоторые механизмы расслабления гладких мышц // Рефераты докладов на симпозиумах 13 съезда Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова, Алма-Ата, 1979. JI.:Наука, 1979. С.194-195. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой) -

10. Effect of some hormones on the smooth muscle relaxation rate // Abstracts of papers 2-d international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1979. P.110. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой и В.И.Косогором)

11. Эффекты ацетилхолина и адреналина на электрические и сократительные свойства гладких мышц в норме и в условиях гипотермии // Молекулярная генетика и биофизика. 1979. Вып. 4. С.43^9. (Совместно с П.Г.Богачем и Ф.В.Бурдыгой)

12. Роль ионов магния в регуляции электрических процессов, сокращения-расслабления и чувствительности гладких мышц к ацетилхолииу // Молекулярная генетика и биофизика. 1980. Вып.5. С.51-56. (Совместно с П.Г.Богачем и Ф.В.Бурдыгой) .

ТЗ. Кинетика сокращения-расслабления гладких мышц taenia coli морской свинки // Фундаментальные проблемы гастроэнтерологии. Киев, 1981. С.230-231. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой)

14. Кинетика сокращения-расслабления гладких мышц мочеточника морской свинки // 1-й Всесоюзный биофизический сгезд: Тезисы докладов стенд.сообш. М., 1982. С.62. (Совместно с

П.Г.Богачем, Ф.В.Бурдыгой, П.Ф.Пелюхом)

15. Effect of Insulin and hydrocortiaon on the action potentials and. kinetics of contractions and relaxation of ureteral smooth muscles // Abstracts of papers 3-d international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1982. P.102.

16. Changes in the excitation-contraction coupling in the gastric smooth muscles upon increasing the concentrations in the medium // Abstracts of papers 3-d international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1982. P.103. (Совместно с К.Боевым, М.Папазовой, А.Боневыы)

17. Electro-mechanical coupling and contraction-relaxation kinetics in the ureter smooth muscle of the guinea pig // Abstracts of papers 3-d- international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1982. P.40.

(Совместно с П.Г.Богачем, Ф.В.Бурдыгой, П.Ф.Пелюхом)

18« The effects of papaverine on the electrical and mechanical activity of the guinea-pig ureter // J. Physiol. (Gr.Brlt.). 1983. 334. P.79-89. (Совместно с А.Ф.Брединг и Э.В.Бурды-гой)

"19. Анализ кинетики сокращения - расслабления гладких мышц мочеточника // Биофизика yi биохимия мышечного сокращения. Тбилиси, 1963. С.109—110. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой и П.Ф.Пелюхом)

20. Влияние физиологически активных веществ на электрическую и механическую активность гладких мышц // 14-й съезд Всесоюзного физиологического общества. Баку, 1963. Т.2. С.14. (Совместно с П.Г.Богачем, Ф.В,Бурдыгой, П.Ф.Пелюхом, П.Н. Шевчуком, Н.А.Каплуненко, Н.Г.Пискорской)

21. Влияние бескальциевого и гипокальциевого растворов Кребса на потенциалы действия и кинетику сокращения - расслабления гладких мышц мочеточника // Проблемы общей и молеку- ' лярной биологии. 1985. Вып.4. С.42-44. (Совместно с Ф.В. Бурдыгой)

22. Роль гормонов в регуляции ионной проводимости плазматичес- ^ кой мембраны гладких мыгац мочеточника морской свинки //

7-я Всесоюзная конференция по физиологии почек и водно-солевого обмена. Чернигов, 1965. С.209-210.

23. Effect of hormones on electrical and contractiva activities of smooth muscle f/ Ab3tract3 of papers 4—d international symposium "Physiology mad Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1985. P.109.

24. On the mechanism of Cortisol and parathormone action on the ureter smooth muscle of the guinea pig // Молекулярные механизмы и энергетика подвижности. Братислава, 1935. С.63.

25. Взаимосвязь межпу метаболизмом белков, электрической и механической активностью гладких мышц // Тезисы Всесоюзной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения академика И.С.Бериташвили. Тбилиси, 1985. C.I60.

26. Действие кортикоетероипных гормонов на электрическую и сократительную активность гладкомытечных клеток мочеточника // Тезисы докладов 5-го съезда фармакологов Украинской ССР. Запорожье, 1985. С.146.

27. Влияние гидрокортизона и инсулина на ритмичность электрической и сократительной активности гладких мышц желудка кошки // Проблемы обшей и молекулярной биологии. 1985. Вып.4.

С.39-42. (Совместно с И.С.Кучеровым, В.И.Косогором)

28. Влияние гормонов гипофиза на электрическую и механическую активность гладкомышечных клеток мочеточника морской свинки // Проблемы физиологии гипоталамуса. 1986. Вып.20. С. 74-77.

29. Влияние понижения температуры на электрическую и механическую активность гладких мышц мочеточника морской свинки // Проблемы обшей и молекулярной биологии. 1966. Вып.5. С.110—114. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой)

30. Влияние валина, цистеина и гидрокортизона на спонтанную электрическую и механическую активность гладких мышц taenia coli морской свинки // Молекулярная генетика и биофизика. 1986. Вып.II. С.42-44. (Совместно с И.С.Кучэрот.ым и

B.И.Косогором)

31. Влияние ионов магния и водорода на электрическую и механическую активность гладких мышц мочеточника морской свинки // Молекулярная генетика и биофизика. 1986. Вып.II. С. 4447. (Совместно с Ф.В.Бурдыгой)

32. Вплив гормон1в на електричну I механ1чну активн1сть гладеньких м*яз1в морсько1 свинки // 12-й з'1зд Укра1нського ф1з1олог1чного товариства: Тези допов1дей, Льв1в, 1986.

C.375. (Совместно с Н.Г.Пискорской, Ы.О.Джангавадзе, Н.Э. Майсурадзе, П.Ф.Пелюхом)

33. О механизмах действия инсулина на моторику желудочно-кишечного тракта // Нейрогуморальные механизмы старения. Киев,

1986. С.91. (Совместно с С.Д.Гройсманоы) ,

34. Ионные механизмы действия дезаминнокситоцина, простаглан-динов F^l и Eg на электрическую и механическую активность гладких мышц мочеточника морской свинки // Всесоюзная конференция "Проблемы нейрогуморальной регуляции деятельности висцеральных систем", посвященная 80-летию со дня рождения академика В.Н.Черниговского: Тезисы докладов и научных сообщений. Л., 1937. С.127-128. (Совместно с П.Ф.Пелюхом, Р.Ю. Калнберга)

35. Влияние гормонов гипофиза на сократительную активность гладких мышц яйцевода и матки морской свинки // Проблемы физиологии гипоталамуса. 1987. Вып.21. С.79-81. (Совместно с М.О.Дкангавадзе, Н.Э.Майсурадзе)

36. Пути поступления ионизированного кальция в гладкомышечные

и железистые клетки (Фармакологический анализ // 15-й съезд Всесоюзного физиологического обнества им.И.П.Павлова. Кишинев, 1987. Т.2. С.204. (Совместно с И.С.Ыагурой, Ф.В.Бурдыгой, Н.Л.Каплуненко, Н.Г.Пискорской, П.Ф.Пелюхом, Ж.П. Смирновой, П.Н.Шевчуком)

37. Влияние предкизолона на электрическую и механическую активность гладких мышц // Молекулярная генетика и биофизика.

1987. Вып.12. С.50-51.

38. Влияние брадикинина на механическую активность гладких мышц толстого кишечника морской свинки // Молекулярная генетика

и биофизика. 1988. ВыпЛЗ. С.74-76. (Совместно с Н.Г.Пяскор-ской)

39. About the mechanism of cortisone action on electrioel end contractile activity of smooth muscles // Abstracts of papers Fifth international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1988. P.114.

40. The influence of neuropeptides on the electrioal and contractile activity of smooth musclea // Abstracts of papers Fifth international symposium "Physiology and Pharmacology of Smooth Muscle". Varna, 1988. . P.115. (Совместно с H.Г. Пискорской)