Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Механизмы гемостатических сдвигов при отсутствии, дефиците и избытке витаминов с антиоксидантными свойствами в рационе питания
ВАК РФ 03.03.01, Физиология
Автореферат диссертации по теме "Механизмы гемостатических сдвигов при отсутствии, дефиците и избытке витаминов с антиоксидантными свойствами в рационе питания"
На правах рукописи
¿-¿Луг,/
Шаповалова Елена Михайловна
МЕХАНИЗМЫ ГЕМОСТАТИЧЕСКИХ СДВИГОВ ПГИ ОТСУТСТВИИ, ДЕФИЦИТЕ И ИЗБЫТКЕ ВИТАМИНОВ С АНТИОКСИДАНТНЫМИ СВОЙСТВАМИ В РАЦИОНЕ ПИТАНИЯ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)
03.03.01 - Физиология
Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук
Челябинск-2010
004601152
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Тюменская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Научный консультант:
доктор медицинских наук, профессор Бышевский Анатолий Шулимович
Официальные оппоненты:
академик РАМН,
доктор медицинских наук, профессор Захаров Юрий Михайлович доктор биологических наук Лунева Светлана Николаевна
доктор биологических наук, профессор Фатеева Надежда Михайловна
Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию», г. Москва
Защита состоится «30» апреля 2010 года в 10:00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.295.03 при ГОУ ВПО «Челябинский государственный педагогический университет» по адресу: 454080, г. Челябинск, проспект В.И. Ленина, д. 69.
С диссертацией можно ознакомиться в читальном зале библиотеки ГОУ ВПО «Челябинский государственный педагогический университет», г. Челябинск.
Автореферат разослан «// » 2010 года
Ученый секретарь диссертационного совета
доктор биологических наук
Общая характеристика работы. Витамины рассматривают не только как соединения, дефицит которых ведет к специфическим нарушениям; важные функции организма, в их числе и свободнорадикапьное окисление, зависят от обеспеченности витаминами (М.И.Смирнов, 1974; П.Н.Шараев, 2004; А.Ш.Бышевский и др., 2007; J.К.Campbell е.а., 2004; A.Opperhuizen е.а., 2005; C.Weiss е.а., 2005; A.K.Shirakawa, 2008). Рано сформировавшиеся представления о связях витамина С с метаболизмом (С.Д.Певзнер, 1940) относят ко всем витаминам (В.В.Ефремов, 1969; М.И.Смирнов, 1974; C.Weiss е.а., 2005; A.K.Shirakawa, 2008). Взгляд на них как на средства профилактики и лечения гиповитаминозов сменился представлением как о соединениях, определяющих за счет неспецифических свойств характер метаболизма и устойчивость организма (Б.А.Лавров 1957), и это расширило область их применения.
К заболеваниям, в лечении которых используют витамины, относят и протекающие с нарушениями гемостаза, некоторые из них эффективны и при заболеваниях с явлениями гипероксидации (A.Opperhuizen, 2008), особенно витамины с антиоксидантными свойствами (В.П.Мищенко, 1981, 2005; А.Ш.Бышевский и др., 2003, 2009; M.P.Iqbal е.а., 2005; M.R. Biagini е.а., 2006; Y.Nadir е.а., 2007). В последние годы выявлено их влияние не только на отдельные прокоагулянты, но и на уровень маркеров гемостаза, отражающий наклонность к кровоточивости или тромбофилии. Появились и первые оценки интенсивности непрерывного внутри-сосудистого свертывания крови (НВСК) в связи с витаминной обеспеченностью, выявлены связи между уровнем маркеров НВСК с липидпероксидацией (ЛПО) (А.Ш.Бышевсйии и др., 2005; В.П.Мищенко и др., 2005). Утвердилось представление о том, что физиологический процесс НВСК, усиливаясь, может перерасти в диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови (Д.М.Зубаиров, 1978, 1989, 2000; А.Ш.Бышевский и др., 1990). Появились основания выстроить в зависимости от скорости НВСК ряд, который отражает его связь с диссеминирован-ным внутрисосудистым свертыванием. Полагают, что сдвиги НВСК, оцениваемые по уровню его маркеров, позволяют выявить наклонность к внутрисосу-дистому тромбообразованию, как к следствию усиленного тромбиногенеза (З.С.Баркаган, 1998; И.Н.Бокарев, 2002; M.Lomtadze е.а., 2005; H.W.Park е.а., 2005). Обращает на себя внимание ещё и следующее: в лечении заболеваний с нарушениями гемостаза чаще других используют витамины А, Е, Bs, В12 и С; при изучении связи витамины-гемостаз не оценивался исходный уровень обеспеченности витаминами организма подопытных животных, и редко использовались рационы, сбалансированные по нутриентам; не всегда учитывается витаминная
обеспеченность организма пациентов, что позволяет критически оценивать выводы о дозазависимости эффекта витаминов на гемостаз, так как эффекты от введения витамина, зависят от его исходного уровня в организме (А.Ш.Бышевский и др., 2006; К.ОгоепЬаек е.а., 2006); до 80 гг. эффекты витаминов на гемостаз описывали без учета их антиоксидантных свойств; влияние витаминов на интегральный показатель состояния гемостаза (толерантность к тромбину), отражающий ответ организма на гипертромбинемию, не изучали, единичны и сведения об их влиянии на интенсивность НВСК - величину, обратную толерантности к тромбину (Р.Г.Алборов и др., 2005; А.БЬ.ВузЬеузку е.а., 2008); результаты изучения отдельных про- и антикоагулянтов, компонентов плазминовой системы в силу их противоречивости не позволяют оценить эффекты на гемостаз отсутствия, дефицита или избытка витаминов; экспериментаторы крайне редко изучали обеспеченность организма витаминами, использовали рационы питания, в которых баланс нутриентов, в их числе и витаминов, не учитывали.
Всё это обосновывает актуальность дальнейших исследований для решения вопроса, возникшего в XX столетии - целесообразно ли использовать витамины А, Е, В5, В п, С и особенно их комбинации для коррекции гемостатических сдвигов при заболеваниях, протекающих с гиперкоагуляцией.
Цель исследования - экспериментально установить закономерности изменения интегральных показателей состояния гемостаза (непрерывного внутрисосу-дистого свертывания крови и толерантности к тромбину), липидпероксидации и антиоксидантного потенциала тромбоцитов в отсутствии, при дефиците или избытке витаминов А, Е, В5, В12 и С, а также при избытке их сочетаний.
Предполагалось, что анализ влияния на гемостаз намеченных нами к изучению и широко используемых в медицинской практике витаминов А, Е, В5, В12 и С углубит представления о связи и механизмах их действия на систему свертывание крови, одна из значимых физиологических функций которой - защитная реакция организма на гипертромбинемию.
Задачи исследования
1. Установить, как изменяется в плазме крови уровень факторов Р3, Р4, фибриногена, продуктов деградации фибрина, растворимых комплексов мономерного фибрина и Б-димеров, интенсивность липидпероксидации, антиоксидантный потенциал тромбоцитов и толерантность к тромбину в отсутствии витамина А, его дефиците и избытке в пищевом рационе, сбалансированном по остальным макро-и микронутриентам.
2. Изучить, как изменяются эти величины в отсутствии, при дефиците и избытке витаминов Е, В5, В12, С в аналогичных экспериментальных условиях.
3. Изучить активность фибринолиза в эуглобулиновой фракции плазмы, а также активированное время рекальцификации и активированное частичное тромбо-пластиновое время, как показателей общей свертываемости крови.
4. Изучить физиологические эффекты сочетанного введения тех же витаминов при их избыточном поступлении с пищевым рационом.
В экспериментах мы сочли необходимым применять в качестве авитаминного рациона такой, в котором отсутствует только один из изучающихся в отдельном опыте витамин; как модель дефицита витамина применять пищевой рацион, содержащий исследуемый витамин в количестве, равном 25, 50 или 75% от суточной потребности; как модель избытка - рацион с двух-, четырёх-, восьми- и 16-кратным избытком витамина относительно суточной потребности в нём.
• Дизайн экспериментов
Оценить фибринолиз, уровни маркеров НВСК , интенсивность ЛПО и АОП при питании крыс рационом, в состав которого не включен витамин А, Е, В¡, В¡2 или витамин С:
1. При питании рационом, не содержащим витаминов А, Е, В5, В|2 (крысы) или витамина С (морские свинки).
2. На фоне прооксиданта или антиоксиданта.
3. При длительном введении избытка витаминов А, Е, В5 и В|2 (крысы).
4. При внутривенном введении избытка витамина Р5 (однократно и повторно, крысы)
5. При введении избытка витаминов А, Е, В5, В|2 и С в сочетаниях по 2, 3,4 и 5.
Научная новизна
- Экспериментально доказано, что отсутствие витамина А, Е, В5 или Вп в рационе аскорбатнезависимых (крысы) и витамина С в рационе аскорбатзависи-мых животных (морские свинки) активирует липидпероксидацию, снижает ан-тиоксидантный потенциал тромбоцитов, ускоряет непрерывное внутрисосудис-тое свертывание крови и ослабляет защитную реакцию организма на гипер-тромбинемию.
- Впервые определено, что у животных содержащихся на моноавитаминном рационе питания, сдвиги в гемостазе причинно связаны с отсутствием данного витамина - введение в рацион витамина А, Е, В5 или В12 в дозах, равных 25, 50 или 75% суточной потребности, ослабляет сдвиги (от 1,2 до 1,8 раза соответственно, р < 0,05) , в дозах, превышающих потребность в 2 раза, предупреждает их появление, а в дозах 4-х, 8-и и 16-кратных - достоверно тормозит липидпероксидацию, повышает антиоксидантный потенциал, снижает коагулоак-тивность тромбоцитов и уровень маркеров непрерывного внутрисосудистого
свертывания крови, одновременно увеличивая толерантность к тромбину (р < 0,05).
- Найдено, что отсутствие и избыток витамина А, Е, В; или В|2 сопровождается сдвигами интегральных показателей состояния гемостаза за счет анти-оксидантных свойств.
- Обнаружено, что связи между сдвигами непрерывного внутрисосудистого свертывания крови в отсутствии в рационе одного из витаминов ассоциированы со сдвигами липидпероксидации положительно, с изменениями АОП - отрицательно; что эти связи более выражены в эффектах витаминов А, Е и В12 (г5 = 0,82), и менее выразительны (г5 = 0.48) в эффектах витаминов В5 и С, что избыток витамина А, Е, В5, или В|2 в количествах, эквивалентных лечебным дозам, замедляет непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, ускоряет фибринолиз в эуглобулиновой фракции плазмы и повышает толерантность к тромбину.
- Выявлена высокая индивидуальная вариабельность сдвигов в отсутствии и избытке ниацина в рационе и что его внутривенное введение быстро и доза-зависимо повышает общую свертываемость крови, сменяющуюся вскоре ги-покоагуляцией, и что при повторных внутривенных введениях этот ответ ослабляется.
- Впервые показано, что отсутствие витамина С в рационе аскорбатзави-симых животных активирует липидпероксидацию и снижает антиоксидантный потенциал в тромбоцитах уже через 2 недели, усиливая высвобождение факторов Рэ и Р4, и что при длительном (свыше шести недель) С-авитаминном питании уровень этих факторов в плазме снижается на 12,5 и 16,6% соответственно относительно контроля (р < 0.05).
- Впервые установлена фазность влияния С-авитаминного питания и введения витамина С в избытке на липидпероксидацию в тромбоцитах и на сдвиги в гемостазе аскорбатзависимых и аскорбатнезависимых животных. Теоретическая и практическая значимость. На основании анализа изменения показателей, характеризующих коагулоактивность тромбоцитов, непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, ф.ХПа-зависимый фибринолиз и толерантность к тромбину у животных, содержавшихся на сбалансированном рационе питания, из которого исключали один из витаминов - А, Е, В5, В12, С (последний у аскорбатзависимых и аскорбатнезависимых животных) или получавших эти витамины в избытке, эквивалентном лечебным дозам, установлено следующее.
Отсутствие витамина А, Е, В5 или В|2 в рационе, сбалансированном по остальным нутриентам, ускоряет ЛПО и снижает АОП в тромбоцитах - клетках, участвующих в поддержании ЛПО на физиологическом уровне. Показано, что синхронно с этим ускоряется НВСК, снижается фибринолиз и защитная реакция организма на гипертромбинемию, следовательно, и на появление в кровотоке микромицелл - фрагментов клеточных мембран. Доказано, что сдвиги в гемостазе, возникающие при содержании животных на рационе питания, из которого исключен витамин А, Е, Вб или Ви, реализуются за счет ускорения ЛПО и снижения АОП тромбоцитов, так как при введении в моноавитамин-ный рацион отсутствующего витамина в дозах ниже потребности, сдвиги ЛПО и гемостаза ослабляются, а при дозе, в 2 раза превышающей суточную потребность, не возникают.
Новыми являются данные, указывающие, что избыток одного из этих витаминов в рационе угнетает пропорционально дозе и длительности введения ЛПО в тромбоцитах и повышает их АОП, активирует ф.ХИа-зависимый фибринолиз, замедляет высвобождение факторов Р3, Р4 и непрерывно протекающее с малой интенсивностью внутрисосудистое свертывание и, как следствие, увеличивает способность организма реагировать на гипертромбинемию. Получено и дополнительное свидетельство того, что эффект этих витаминов на гемостаз реализуется через их антиоксидантные свойства - эффект каждого из витаминов на ЛПО, АОП и гемостаз поддерживается введением антиоксидан-та невитаминной природы и подавляется введением прооксиданта.
Данные, Полученные при изучении эффекта избытка одного из четырёх витаминов (А, Е, В} или В|2) в дозах, эквивалентных лечебным, замедляют НВСК, ускоряют фибринолиз и увеличивают ТкТР, что указывает на перспективность их применения для коррекции тромбофилических сдвигов при заболеваниях, которые сопровождаются оксидативным стрессом.
Важным является и установление того факта, что эффекты ниацина на НВСК и ТкТР вариабельнее, чем эффекты остальных исследованных витаминов, и что при его внутривенном введении влияние на гемостаз двухфазно: рост общей свертываемости сменяется снижением из-за компенсаторной активации фибринолиза.
Найдено, что отсутствие витамина С в рационе аскорбатзависимых животных ускоряет ЛПО и снижает АОП тромбоцитов, но усиливает (в отличие от других витаминов высвобождение фф. Рз и Р4, а при длительном С-авита-минном питании (8 недель) уровень фф. Рз и Р4 снижается, замедляется фиб-
ринолиз и падает ТкТР. Эти сдвиги ослабляются при наличии в рационе ас-корбата в дозе, равной 25, 50 или 75% потребности, и не возникают при введении в рацион удвоенной против потребности дозы. Особенно важно, что при потреблении с рационом аскорбата в дозах, эквивалентных лечебным, сдвиги, вызываемые его дефицитом или отсутствием в питании, не выявляются до 6-й недели, но при дозах, превышающих потребность в 4, 8 и 16 раз, после шести недель ускоряется ЛПО и снижается АОП тромбоцитов, ускоряется НВСК и растет толерантность к тромбину, обусловленная активацией фибринолиза. Существенное значение имеют данные о том, что введение аскорбата аскор-батнезависимым животным в дозе, превышающей потребность в 8 раз, антиок-сидантный эффект проявляется в первые две недели, а позднее ЛПО ускоряется, а рост АОП сменяется снижением при одновременном ускорении НВСК. При введении шестнадцатикратной дозы аскорбата кратковременно длящийся антиоксидантный эффект сменяется прооксидантным, сопровождаясь ускорением НВСК. Это доказательно свидетельствует о связи эффекта аскорбата на гемостаз с его влиянием на скорость липидпероксидации.
Экспериментально обнаружено, что сдвиги НВСК при исключении из рациона одного из витаминов (А, Е, С, В5 или В12) положительно ассоциированы с изменениями ЛПО, и отрицательно - с изменениями АОП, что связи эти тесны (rs > 0.9) в эффектах, вызываемых витаминами А, Е и В!2, и менее тесны в эффектах витаминов В5 и С (rs < 0.7). Установлено, что по степени сдвигов при авитаминозе интегрального показателя (ТкТР) витамины практически равноценны (лишь менее, чем у остальных выражен эффект отсутствия в питании витамина В12), а по степени влияния избытка витаминов на толерантность к тромбину и по скорости развития эффекта они располагаются в последовательности A>E>B|2>C>Bj.
Математический анализ выявил, что сдвиги НВСК при всех исследованных нами авитаминных рационах питания отрицательно ассоциированы с изменениями толерантности к тромбину - тесная связь эффекта витаминов А, Е (rs > 0.9) и менее тесная - витаминов В)2, В5 и С (rs < 0.7); изменения толерантности к тромбину положительно ассоциированы с фибринолизом.
Доказано экспериментально, что введение всех возможных сочетаний витаминов по два (А-Е, А-В5, А-В|2, Е-В5, Е-В12, В5-В|2) повышает степень прироста ТкТР, при всех сочетаниях по три это заметнее, и ещё заметнее при сочетаниях по четыре, показано что наибольший эффект свойственен сочетанию, включающему все пять витаминов (если доза аскорбата не проявляет
прооксидантных свойств, т.е ниже четырёхкратной относительно суточной потребности).
Внедрение в практику. Совместно с Тюменским отделением Всероссийского физиологического Общества им. И.П.Павлова, с сотрудниками кафедр биологической химии, акушерства и гинекологии ТГМА разработаны и внедрены для использования в лечебных учреждениях г. Тюмени (ГЛПУ ТО ОКБ № 2, ГЛПУ ТО ОКБ № 1) и области (МУЗ «ЦРБ» г. Надым, ГУЗ «СОКБ» г. Салехард) методические рекомендации, оформленные актами: «Эффекторы свертывания крови из сапропеля: влияние на плазмокоагуляцию, тромбоцитарный гемостаз и некоторые жизненные функции лабораторных животных», «Внут-рисосудистое свертывание крови, толерантность к тромбину, активность тромбоцитов и интенсивность ЛПО при гипер- и гипотиреозе» и «Непрерывное внутрисосудистое свертывание крови при отсутствии и избытке в рационе витамина В12».
Основные материалы работы обсуждены на российских и международных конференциях: конференции «Теория и методология современного научного исследования Тюменского региона» - Тюмень. - 2003 (2 сообщения), на 2-й региональной научно-практической конференции «Экологическое образование и здоровый образ жизни». - Сургут. - 2006, 3-й научной международной конференции «Актуальные проблемы науки и образования». - Варадеро, Куба. - 2008, IV Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечнососудистой хирургии». - Москва. - 2009, Материалы Российской конф. «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии». - Челябинск: ЧГМА, Объединение биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири, Южно-Уральский научный центр РАМН.-2009(3 сообщения).
Результаты, полученные при выполнении работы, используются в обучении студентов и клинических ординаторов по курсам «Нормальная физиология», «Биохимия» и «Клиническая фармакология».
Положения, выносимые на защиту
1. Исключение из сбалансированного рациона питания витамина А, Е, Bs, В12 или С (последний у аскорбатзависимых животных) сопровождается ускорением липидпероксидации, снижением антиоксидантного потенциала тромбоцитов, ростом их коагулоактивности, ускорением НВСК и снижением толерантности к тромбину.
2. Избыточное введение с рационом питания витаминов А, Е, или В|2 в до-
зах, эквивалентных лечебным, угнетает липидпероксидацию, повышает анти-оксидантный потенциал тромбоцитов, снижает их коагулоактивность, замедляя НВСК и повышая толерантность к тромбину.
3. При внутривенном введении витамина В5 (500, 1000, 2000 или 4000 мкг/кг) через 5, 15 и 30 мин наблюдается значительная активация фибриноли-за, исчезающая к 60-й мин, которая является реакцией на повышение общей свертывающей активности крови, развивающейся через 5-й мин после инъекции.
4. При введении значительного избытка витамина С (44,0 и 88,0 мг/кг массы тела) или длительном (6-8 недель) введении небольших, но превышающих потребность доз ( 11,0 и 22,0 мг/кг массы тела) наблюдается угнетение (первые две недели), а затем ускорение липидпероксидации. Эти сдвиги сопровождаются фазными изменениями НВСК и толерантности к тромбину (вначале увеличение и затем снижение).
5. Липидпероксидация (ЛПО) и антиоксидантный потенциал (АОП) отрицательно ассоциированы (г„ = -0,92), ЛПО и НВСК с одной стороны, толерантность к тромбину с другой - ассоциированы отрицательно в опытах с витаминами А, Е и В12 (г5, = -0.95) и менее тесно (г5, = -0.75) - в опытах с витаминами В5 и С.
6. Эффекты изучавшихся витаминов на толерантность к тромбину при со-четанном введении характеризуются неполной суммацией, особенно, если в сочетании содержится аскорбиновая кислота, ведущая себя в дозах восьми- и шестнадцатикратно превышающих потребность (44,0 и 88,0 мг/кг) как проок-сидант.
Апробация. Основные положения диссертации доложены на 5-й Всероссийской конференции «Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром.» (М., 2000); 6-й национальной конференции «Атеротромбоз, артериальная гипертензия» (М., 2001); III Российской конференции с международным участием в НЦ ССХ им. Бакулева (М., 2001), Всероссийской конф. "Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром. Проблемы лечения». М., 2001, на сессии (с международным участием) Всероссийской ассоциации тромбозов, геморрагии и патологии сосудов им. А.А.Шмидта-Б.А.Кудряшова (М,, 2003); конференции «Актуальные вопросы экспресс-диагностики в хирургии» (М., РНЦХ РАМН, 2003); конференции РАЕ «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине» (Греция, 2003); 2-й конф. РАЕ «Гомеостаз и эндоэкология» (Египет, 2004); конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья (Оренбург, 2003); на
14 конгрессе Дунайской ассоциации гемостазиологов (С.-Петербург, 2004), на международном симпозиуме «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии» (Дубай, 2006), 2-й региональной научно-практической конференции «Экологическое образование и здоровый образ жизни» (Сургут, 2006), Международной конференции РАЕ «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине» (ОАЭ, Лутраки, 2006), на III научной международной конференции «Актуальные проблемы науки и образования» (Куба, Вара-деро, 2008), на IV Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии» (М.: РНЦХ РАМН, 2009), на заочных электронных конференциях «Экологические проблемы внутренних болезней, перинатологии и педиатрии». -2007. 6., «Экологические проблемы внутренних болезней, перинатологии и педиатрии». - 2007. 6, «Химический анализ». - 2007. 2., «Фундаментальные исследования». - 2008. 2. (3 работы); на ежегодных заседаниях регионального отделения РАЕ (Тюмень, 2005-2009), на ежегодных заседаниях Тюменского отделения ВБО (2006-2009), на совместном заседании профессорско-преподавательского состава кафедр нормальной физиологии, биохимии и гигиены с основами экологии, общей фармакологии ТГМА (2006, 2008). Публикации. По теме диссертации опубликованы 62 статьи, из них 12 в журналах рекомендованных ВАК РФ для публикации материалов докторских диссертаций, 28 - в других медико-биологических журналах, опубликованы 1 монография (Москва: Медицинская книга - 2009. - 112 с) и 4 главы в монографиях (М.: Медицина - 2006; Х-Мансийск: Издат. центр Х-МГМИ, филиал ЮУНЦ РАМН - 2007).
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 238 страницах, содержит 26 таблиц и 21 рисунок, включает введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследований, результаты исследований, их обсуждение, выводы, и список использованной литературы (273 отечественных и 345 зарубежных источников).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Выбор животных. Опыты с витаминами А, Е, B¡ и В|2 провели на нелинейных белых крысах-самцах (864 особи, 175115 г). Для них разработан пищевой рацион, содержащий белок, липиды, углеводы, витамины и минералы согласно суточной потребности. В связи с зависимостью гемостаза от метеофакторов и сезонных ритмов (В.П.Балуда и др., 1978; А.Ш.Бышевский и др.,
1986) во все опыты включали контрольную группу. Опыты с витамином С проведены на аскорбатзависимых морских свинках-самцах (294, 272±27 г) -корректном объекте для моделирования С-гипо - и С-авитаминоза (Б.А.Лавров, 1963).
Крысы получали сбалансированный рацион, разработанный институтом питания АМН СССР, включающий маисовый крахмал, казеин, подсолнечное масло, солевую смесь и витамины по прописи (О.Я.Курцинь, 1952), а также витамины В|2, Вс, инозит и викасол (Б.А.Лавров и др., 1963). Рацион в готовом виде - вязкая кашица, в которой равномерно распределяются добавки. Суточная порция содержала витамины в соответствие с суточной потребностью, а также солевую смесь (Б.А.Лавров и др., 1963). Готовую смесь (100 г/кг массы тела) помещали в кормушки. Рацион этот эффективнее стандартов Дональд-сона для «идеальных» крыс, получающих обычный смешанный корм (P.W.Hawk, B.L.Ozer, 1954), что подтверждено работами института питания АМН СССР и УССР, НИИ витаминологии и ряда кафедр биохимии мединститутов страны СССР. Е-авигтаминный рацион содержал растительное масло без токоферола (ТФ) (А.И.Штенберг, 1960).
Морских свинок содержали на рационе, обеспечивающем нормальный прирост массы и приплод - сено, свёкла, овес, морковь, печеный хлеб, молоко, дрожжи и вода (К.Л.Ковалевский, 1949). Содержание аскорбата в суточной порции - 5.5 мг/кг массы тела. С-авитаминный рацион содержит те же продукты после обработки, устраняющей витамин С (рекомендации Всесоюзной конференции по витаминам, М.). С-гиповитаминный рацион - это С-авитаминный с добавкой аскорбиновой кислоты (АК) в дозах, составляющих 25, 50 или 75% от потребности (т.е. от 5.5 мг/кг/сут). Морковь, молоко и сено - источники ретинола и каротина, не разрушающегося при использованной обработке (Б.Г.Савинов, 1948).
Суточную потребность в витаминах группы В обеспечивали высушенные на свету дрожжи (0.4 г/кг). Источник витамина Е - овес (П.Х. Попандопуло, 1949). Сходные рационы использованы ранее и при изучении гемостаза (Б.А.Кудряшов, 1975; Б.А.Лавров и др., 1963; C.B. Шидин, 2006). Аскорбино-
вую кислоту (AK) -5.5 мг/кг/сут - получали контрольные группы.
Приемы и методы. Пробы крови брали по правилам гемостазиологии (З.С.Баркаган, 1998) из v. jugularis у наркотизированных животных. Рану закрывали 2-3 швами. В плазме определяли уровень маркеров НВСК (З.С.Баркаган и др., 1998; Д.М.Зубаиров, 2000; M.Levi и др., 2004): 1. Продукты деградации фибрина (ПДФ) - маркеры НВСК и фибринолиза (H.Wada е.а., 2003) -по описанию (А.Ш.Бышевский и др., 1991); 2. Растворимые комплексы мономерного фибрина (РКМФ) - их прирост сопровождает гиперкоагуляцию - фе-нантролиновым тестом (А.П.Момот и др., 1999); 3. D-димеры - маркеры фиб-ринации и фибринолиза (Е.Г.Соболева и др. 2003; P.de Moerloose е.а., 2003) -с помощью моноклональных антител, используя «D-dimer test", Roche; 4. Уровень фф. Р3 и Р4 в плазме определяли по описанию (В.П.Балуда и др., 1980). Эти факторы - косвенные маркеры НВСК - их уровень в плазме пропорционален тромбинемии, а тромбин ускоряет реакцию высвобождения (А.С.Шитикова, 2000); 5. Концентрацию в плазме ф. I - её снижение признак активации НВСК (I.Wada е.а., 2003) - определяли спектрофотометрически (А.Ш.Бышевский и др., 1969); 6. Ф.ХПа-зависимый фибринолиз оценивали по З.С.Баркагану и др. [1998]; 7. Активированное время рекальцификации (АВР) и активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) - по описанию (Г.Н.Детинкина и др. 1984); 8. Толерантность к тромбину - запатентованным (А.Ш.Бышевский и др., 2003) и апробированным приемом (М.К.Умутбаева, 2005; Р.Г.Алборов, 2006; С.В.Шидин, 2007). Специфичность результатов при использовании способа обусловлена тем, что ф. I - субстрат тромбина, снижение уровня которого зависит от состояния физиологических систем, обеспечивающих выживание (Д.М.Зубаиров, 2000).
ЛПО н АОП в тромбоцитах оценивали, определяя уровень диеновых конъюгат (ДК), уровень ТБК-продуктов, период индукции (ПИ), скорость индуцированного окисления (СО). Тромбоциты изолировали по описанию (А.Б.Самаль и др., 1990). Величины ЛПО и АОП in vivo изменяли, вводя с рационом прооксидант (ацетат свинца, 50 мг/кг массы) или антиоксидант (ди-мефосфон, 1 г/кг/сут). Свинец ускоряет ЛПО и снижает АОП, не нарушая обмена порфиринов (А.А.Мкртумян, 1994), так как всасывается в кишечнике
лишь около 5% свинца (Материалы ВОЗ: Свинец, 1980). Димефосфон (1,1-диметил-3-оксибутирилфосфоновая кислота) - синтетический антиоксидант, усиливающий эффект физиологических антиоксидантов, не изменяя гемостаза (А.А.Мкртумян, 1994). В использованной дозе димефосфон умеренно повышает АОП, что позволяет выявлять эффекты других антиоксидантов (М.К.Умутбаева, 2003).
Статистическую обработку числовых данных проводили с помощью медико-биологической программы Biostat 4.03 (С.А.Гланц, 1998) методом вариационной статистики для малых рядов наблюдений, вычисляя среднюю арифметическую (М), её среднюю ошибку (ш) и среднеквадратическое отклонение (а). Оценивали достоверность отличий по доверительному коэффициенту Стьюдента (t) и степени вероятности (р). Интенсивные показатели сравнивали приемом альтернативного варьирования, вычисляя те же величины. Связи переменных анализировали методом ранговой корреляции Спирмена. Различия считали достоверными при величине р < 0.05. Графический анализ проводили в Microsoft Graf (приложение MS Word 2000), корректность трендов оценивали по коэффициентам аппроксимации (R2). Сопоставляя результаты действия двух и более факторов, дифференцировали суммацию, синергизм или антагонизм (М.Диксон и Э.Уэбб, 1966).
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ Эффекты рациона питания без витамина А и с его возрастающим количеством. Крысы получали стандартный рацион: 1-я группа (контроль) - ретинол 200 ME/кг (суточная потребность); 2-я - А-авитаминный рацион; 3-я, 4-я и 5-я - ретинол 50, 100 и 150 ME/кг; 6-я, 7-я и 8-я - в 2, 4 и 8 раза выше потребности (400, 800, 1600, ME/кг); 9-я - 3 200 ME/кг ретинола (в 2 раза выше эквивалента высокой лечебной дозы). Пробы брали через 2,4,6, и 8 недель.
Оказалось (табл. 1), что при содержании крыс на рационе без ретинола (А-авитаминный рацион питания) нарастают уровни ДК, ТБК и снижается АОП. Прирост уровня липидпероксидов ДК и ТБК и соответственно снижение АОП менее значительны при дозе ретинола в 25, 50% и особенно 75% от суточной потребности. При дозах, превышающих потребность, замедлялась ЛПО, и увеличивался АОП пропорционально дозе и длительности введения ретинола.
Таблица 1.
Изменения ЛПО и АОП в тромбоцитах крыс, не получавших витамин А, получавших его в дозе, равной суточной потребности, в дозах,
ниже потребности и в превышающих потребность в 2,4, 8 и 16 раз
Показатели Контроль, п=12 Животные (п - 5 на каждом этапе) получали ретинол (МЕ/кг массы тела) в дозах:
200 0.0 50 100 150 400 800 1600 3200
ДК. А/мгЛП 0.051±0.003 0.057±0.004 0.063±0.002* 0.072±0.002* 0.081±0.002* 0.050±0.003 0.0Б1±0.002* 0.06710.002* 0.07110.002* 0.04710.004 0.057Ю.002* 0.06210.002" 0.05710.002' 0.05210.003 0.05510.002 0.05910.002* 0.05810.002* 0.04610.003* 0.04410.002* 0.038Ю.003* 0.03810.003* 0.04210.004* 0.035Ю.007* 0.03210.003" 0.031Ю.004* 0.02410.002* 0.014Ю.004* 0.01110.003* 0.01210.002* 0.014Ю.001* 0.01010.002' О.ООЭЮ.ООЗ* 0.00810.004'
ТБК, ед./мг ЛП 0.76±0.05 0.81±0.03 0.91±0.04* 0.99±0.05* 1.22±0.005* 0.80±0.02 0.87±0.03* 0.95±0.04* 1.1010.005* 0.7710.02 0.84Ю.02* 0.91Ю.03* 1.01Ю.006* 0.7610.03 0.7410.02 0.8110.04* 0.0910.004* 0.69Ю.03* 0.6410.05* 0.5510.03* 0.5710.03* 0.65Ю.03* 0.60Ю.04* 0.5110.02' 0.044+0.01* 0.44Ю.04* 0.35Ю.03* 0.24Ю.04* 0.22М.03* 0.40Ю.04* 0.35Ю.02* 0.1810.03* 0.1710.05*
ПИ. мин/мл 45.711.4 46.0±1.6 43.8±1.2 35.7 ±1.4* 28.111.1* 46.311.7 44.911.3 35.811.3* 31.011.0* 46.711.6 44.011.1 38.611.3* 34.011.2* 45.711.4 45.011.2 39.211.2* 40.111.4* 46.111.7 56.011.3* 62.611.9* 64.811.9* 50.411.1* 60.911.7* 67.611.5* 69.711.9* 63.711.2* 68.911.6* 78.211.7* 79.911.7* 63.911.2* 69.911.6* 83.21197* 91.611.8'
СО, мм3/мл/мин 0.75±0.03 0.77±0.05 0.81±0.04 0.92±0.04* 0.9910.003* 0.7310.05 0.8010.043 0.8410.03* 0.9210.003* 0.7110.06 0.77Ю.04 0.7210.03* 0.8310.003* 0.7110.06 0:7710.04 0.7210.03* 0.8310.003* 0.7710.03 0.6710.02' 0.59Ю.04' 0.5510.04* 0.6310.04* 0.5410.03* 0.48:10.04* 0.47Ю.02* 0.42Ю.02* 0.31Ю.02* 0.23Ю.04* 0.2110.03' 0.4010.03* 0.2710.03* 0.20Ю.04* 0.17Ю.03*
Обозначения (здесь и в следующих таблицах): ДК - диеновые конъюгаты, ЛП - липид, ТБК - продукты, реагирующие с тнобарбитуровой кислотой, ПИ - период индукции, СО - скорость окисления; знак * - достоверное отличие от контроля (жирным выделены все достоверно отличающиеся от контроля величины); строки 1,2, 3 и 4 - соответственно после 2,4, 6 и 8 недели от начала опыта
Таблица 2.
Содержание маркеров НВСК в плазме и ТкТР у крыс, не получавших витамин А, получавших его в дозе, равной суточной потребности, ___дозах ниже потребности и выше неё в 2,4, 8 и 16 раз_
Показатели Контроль, п=12 Животные (п = 6 на каж дом этапе) получали ретинол (МЕ/кг массы тела) в дозах:
200 0.0 50 100 150 400 800 1600 3200
Ф. Р3,% 89.0±1.3 87.511.2 91.411.3 97.211.1' 99.511.6' 87.011.3 91.111.2 95.711.2 96.911.6* 87.411.3 89.411.5 95.111.0* 93.211.0* 87.911.2 90.711.6 92.211.4 92.911.0* 35.111.3 82.411.2* 76.01132* 75.111.3* 82.311.6* 78.211.4' 68.911.6* 64.111.7* 78.311.4* 64.211.3* 60.111.6* 57.411.6* 74.0113* 61.211.4* 60.011.2* 57.411.6*
Ф- Рч. с 3.410.02 3.510.03 3.610.05 3.810.02' 4.310.03* 3.410.05 3.610.07 3.710.02* 4.110.03* 3.510.03 3.410.03 3.710.02* 4.010.05* 3.510.04 3.710.09 3.810.02' 4.010.03* 3.210.03 3.010.02' 2.710.02* 2.710.02* 2.910.04* 2.510.05* 2.110.03* 1.710.02* 2.110.02* 1.910.02* -1.710.01* 1.410.01* 2.010.02* 1.610.02* 1.510.02* 1.210.01*
ФГ, г/л 2.310.04 2.210.09 2.110.11 2.210.03 1.510.05* 2.210.11 2.210.17 2.110.06 1.710.02* 2.210.09 2.110.11 2.210.08 1.910.05' 2.110.08 2.210.10 2.210.08 2.210.04 2.110.08 2.110.09 2.210.07 2.110.08 2.410.06 2.210.07 2.210.07 2.510.07 2.110.04 2.110.14 2.510.08' 2.610.08' 2.110.03 2.210.10 2.610.04* 2.510.05*
ПДО, мг% 15.111.0 15.511.1 16.011.3 19.311.0* 22.311.1* 15.011.1 16.211.2 18.011.0* 20.111.0* 15.311.0 16.111.4 17.011.* 18.911.1* 15.311.0 16.111.4 18.411.0* 17.711.1* 14.611.5 14.810.6 9.710.5* 8.110.3* 12.111.0* ' 11.010.7* 8.810.9' 7.610.02* 11.011.9 10.110.9' 8.710.5* 6.410.01* 11.011.7 10.210.8* 8.510.4* 6.210.01*
РКМФ, мкг/мл 24.110.7 22.611.2 25.0+0.9 2S.110.9-32.9+0.9* 23.5 11.1 25.110.8 27.911.2 30.110.9* 22.911.2 25.010.8 ' 26.810.9* 25.4+0.8* 22.911.2 24.010.8 25.110.9 . 24.5+0.7 21.810.9 18.110.9* 15.910.7* 14.0+0.01* 17.411.0* 14.2Ю.6* 13.1Ю.5* 11.3+0.02* 15.310.7* 12.411.1* 11.910.4* 10.0+0.01* 15.010.7* 11.311.0* 10.510.5* 9.1+0.02*
О-Д, мкг/мл 0.2010.009 0.1810.012 0.1810.011 0.2210.008* 0.2510.009* 0.1910.013 0.1810.014 0.2210.009 0.2310.006* 0.1910.012 0.1910.011 0.2010.008* 0.1910.011* 0.19+0.012 0.20+0.011 0.21+0.008 0.2010.009* 0.1810.011 0.1510.013* 0.1310.009* 012.010.03* 0.17Ю.011* 0.1310.010* 0.0910.009* 0.0810.01* 0.1610.010* 0.1510.009* 0.0710.004* 0.0610.01* 0.1510.010* 0.1310.008* 0.0610.005* 0.0510.02*
ТкТР, % 10011.6 90.111.4 85.1+1.3* 78.6±1.2* 65.011.4* 87.311.4 89.4+1.5* 87.6±1.1* 78.911.3* 86.311.5 91.9+1.2* 93.1 ±1.1* 91.8+1.3* 97. ±1.6 95.111.3 98.6+1.2 87.911.4* 10712.1 11312.2 12712.1* 13111.5* 11411.7* 12512.2* 13012.3* 14812.0* 12312.1* 13512.1* 13812.5* 15412.3* 12912.1* 13912.1' 14112.5' 15612.0'
Обозначения здесь и далее: Ф. - фактор, ФГ - фибриноген, ПДФ - продукты деградации фибрина, РКМФ - растворимые комплексы мономерного фибрина, й-Д - О-димеры; ТкТР -толерантность к тромбину; *-достоверное отличие от контроля (полужирным шрифтом для удобства восприятия выделены достоверно отличающиеся от контроля величины); строки в ячейках 1,2, 3 и 4 - соответственно после 2,4, 6 и 8 недели от начала опыта
Из данных табл. 2 следует, что уровень маркеров непрерывного внутрисосуди-стого свертывания крови (НВСК) в отсутствии ретинола становился выше с увеличением длительности опыта, а толерантность к тромбину (ТкТР) снижалась.
При введении ретинола в долях потребности показатели уровня маркеров НВСК приближались к контрольным величинам.
При дозах ретинола, превышающих потребность в 2, 4, 8 и 16 раз, уровень маркеров НВСК, напротив, опускался ниже контрольных значений, а толерантность к тромбину увеличивалась - т.е. А-авитаминное питание ускорило липид-пероксидацию и снизило антиоксидантный потенциал. Непрерывное внутрисосу-дистое свертывание крови при этом ускорилось, чему сопутствовало снижение ТкТР.
Так как ретинол в дозах, превышающих потребность в 8 и 16 раз (1600 и 3200 МЕ/кг), снижал, а при продолжительном введении увеличивал уровень ПДФ, О-димеров (А.В Пустынников, 2007) и активировал фибринолиз, провели опыты с ббльшей из этих доз (2400 МЕ/кг) и с удвоенной дозой (4800 МЕ/кг), увеличив длительность опыта до 12 недель, контролируя ещё и фибринолиз.
В табл. 3 видно, что при содержании крыс на А-авитаминном рационе питания уровень фф. Рз и Р4 снизился значительнее, чем за 8 недель (сравнить с табл. 2), а уровень фибриногена не менялся. Уровень РКМФ, снизившись за 10 недель, таким же остался и через 12 недель. Уровень ПДФ при дозе 3200 МЕ/кг вырос за 10, и заметнее - за 12 недель, особенно при дозе 6400 МЕ/кг. Уровень О-димеров при обеих дозах уже за 10 и 12 недель стал выше, чем на 8-й неделе. Фибринолиз замедлялся при А-авитаминном питании с 8-й недели. При избытке ретинола активность фибринолиза росла при всех дозах.
Эффекты А-авитамшшого питания на фоне про- или антиокснданта. Возможно ретинол влияет на гемостаз не как антиоксидант, а иным путем и его эффект может не зависеть от исходного состояния ЛПО. Чтобы выяснить это, крысы ежедневно получали ретинол одновременно со свинцом или димефосфоном (про-или антиоксидантом соответственно). В отсутствии ретинола (табл. 4) воспроизвелись сдвиги, найденные ранее: ускорение ЛПО, НВСК и снижение АОП. Свинец при А-авитаминном питании усилил сдвиги в том же направлении (группа 3), и при введении свинца и ретинола (группа 4) сдвиги ослаблены. Димефосфон без ретинола (группа 5) ограничил эти сдвиги.
Таблица 3. НВСК, коагулоактивность тромбоцитов, ф.ХНа-зависимый фибринолиз и ТкТР у крыс, не получавших ретинола, получавших его в суточной потребности, или в дозах, выше _потребности в 8,16 и 32 раза (верхняя строка -10, нижняя -12 недель)_
Показатели Крысы получали ретинол (200 МЕ/кг), п на этапе =10 (контроль) Крысы (п на этапе = 5) получали ретинол (МЕ/кг) в дозах:
0.0 1200 3200 6400
Ф. Рз,% 80.611.4 89.8±1.9* 92.5±1.3* 61.9±1.3* 63.2±1.2* 52.4±1.3* 48.9±1.5* 55.6±1.3* 51.9±1.5*
Ф. Р«. с 3.4Ю.02 3.9±0.04* 4.1±0.04* 2.1±0.04* 1.8.03* 1.5±0.03* 1.110.04* 1.4±0.03* 1.010.04*
ФГ, г/л 2.240.02 2.0±0.05 2.4±0.06 2.1±0.03 2.0±0.06 2.1±0.04 1.8±0.06 2.310.03 1.910.04*
ПДФ, мг% 15.7±0.4 18.9±1.1* 19.6±0.4* 18.311.4* 21.9±1.2* 22.7±1.7* 27.4±1.9* 23.9±0.07* 29.1 ±0.04*
РКМФ, мкг/мг 25.2±0.8 30.5±1.1* 29.9±1.2* 14.6±0.5* 13.9±1.1* 12.7±0.9* 10.9±1.1* 12.9±0.03* 11.4±0.04*
О-Д, мкг/мл 0.20Ю.001 0.24Й.008* 0.25Ю.003* 0.31±0.013* 0.34±0.013* 0.37±0.014* 0.39±0.015* 0.40±0.03* 0.43±0.04*
ФЛНа-зависимый фибринолиз, мин 8.1 ±0.03 8.4±0.03 9.5±0.07* 11.0±0.04* 13.1±0.06* 8.4Ю.05 7.9±0.06 6.4±0.05* 6.0±0.04* 6.1±0.07* 5.9±0.06* 5.5±0.04* 5.0+0.05* 5.8±0.03* 6.1±0.04* 4.9±0.03* 4.6Ю.04*
ТкТР,% 100±4.4 90.3±1.4 85.4±1.3* 79.1±1.2* 66.111.4* 125±2.1* 134 ±2.3* 139±2.6* 153±2.1* 129±2.1* 139±2.1* 141 ±2.5* 156±2.2* 129±2.1* 139±2.1* 141±2.5* 15613.0
Знак * - достоверные отличия от контроля; фибринолиз и ТкТР - за 6, 8, 10 12 недель
Таблица 4. Изменения ЛПО, АОП и НВСК при введении свинца или димефосфона с А-авитаминным рационом и рационом с ретинолом в количестве, равном суточной потребности; 1-я строка - через 6,2-я - через 8 недель от начала опыта,
Показатели Группа 1 (без ретинол; Группа 2 (200 МЕ/кг ретинола) Группа 3 (без ретинол; + свинец) Группа 4 (200 МЕ/кг ретинола+ свинец) Группа 5 (без ретинола +димефосфон) Группа 6 (200 МШ ретинола+ ди-мефосфон)
ДК. А/нгЛП 0.071±0.003 0.081±0.004 0.05110.002* 0.05410.005* 0.08810.004" 0.09310.006* 0.057Й.002+ 0.06010.005+ 0.06110.002* 0.07210.005* 0.050Ю.004# 0.04710.003»
ТБК. едУмгЛП 0.99±0.05 1.23±0.004 0.7610.07* 0.7410.04* 1.3410.07" 1.5110.009" 0.8010.06+ 0.8510.08+ 0.8810.06* 0.9710.005* 0.7010.04» 0.6510.04»
ПИ. мин/мл 35.4±1.3 28.3±1.2 45.611.3* 45.311.1* 28.4И.6" 24.411.9" 35.911.4+ 41.311.1 + 37.110.7* 34.211.0* 41.411.3» 53.611.2»
СО. ммэ/мл/мин 0.90±0.04 0.98±0.002 0.7510.03* 0.7510.03* 1.2010.07" 1.3810.009" 0.8610.06+ 0.9410.03+ 0.8110.05* 0.8810.004* 0.7010.02» 0.68±0.02#
Ф. Рз.% 97.4±1.1 99.7±1.5 89.111.2* 89.411.1* 10711.6* 12012.0" 96.111.2+ 99.811.1 + 94.011.1* 96.111.3* 85.011.0» 83.311.2»
Ф. Р<, с 3.7±0.03 4.4±0.03 3.510.03* 3.310.04* 4.110.06" 4.910.08" 3.810.04+ 4.310.03+ 3.610.01 4.010.02* 3.110.02» 3.0±0.03#
ФГ. г/л 2.3±0.06 1.6±0.04 2.2 10.04* 2.110.03* 1.710.04" 1.410.03" 2.0 10.03 2.1Ю.01 2.210.04 1.710.06 2.2 10.04 2.210.03
ПДФ. мг% 19.2±1.1 22.2±1.3 15.310.9* 15.011.2* 23.011.2" 27.411.6" 20.010.8+ 23.011.1 + 18.010.5* 20.110.2* 14.110.6» 13.610.5»
РКМФ. мкг/м 28.4±0.7 33.010.8 23.110.9* 22.810.7* 32.910.8" 37.3+0.9" 27.210.7+ 28.9+0.7+ 26.510.7* 30.3Ю.6* 20.110.7» 19.910.5»
о-д. мкг/мл 0.22±0.006 0.25±0.007 0.1910.009* 0.1910.007* 0.2510.008" 0.2910.006" 0.2410.003+ 0.2710.002+ 0.2110.004 0.2310.006* 0.1810.006 0.1710.003»
ТкТР, % 78.111.1 65.3±1.1 100И.6* 10011.6* 67.211.4" 60.711.0" 80.311.4+ 71.811.7+ 86.111.0* 76.410.9* 11111.4» 11811.7»
Обозначения: * - достоверные отличия от величин, найденных в те же сроки в группе 2-й от 1-й, *- в группеЗ-й от 1-й, + - в группе 4-и от 2-й,л - в группе 5-й от 1-й, и - в группе 6-й от
Димефосфон на фоне ретинола (группа 6) замедлил НВСК, ЛПО и повысил АОП.
Видимо, эффекты ретинола на гемостаз реализуются за счет его антиокси-дантных свойств - прооксидант усиливает, а антиоксидант ограничивает эффекты ретинола на ЛПО, АОП и соответственно на гемостаз.
Оценим связи между маркерами НВСК (по величие РКМФ), ЛПО (по величине ДК), АОП (по величине СО) и толерантности к тромбину в условиях моноави-таминного рациона. На рис. 1 видно следующее:
- при продолжительном А-авитаминном питании ускоряется ЛПО и НВСК, снижается АОП и ТкТР;
- достоверность аппроксимации трендов близка к единице, что говорит о линейности изменения этих величин во времени;
- коэффициенты ранговой корреляции (г,) пары ДК и ПИ (г5 = - 0.9) указывают на их тесную отрицательную связь, для пары ДК и РКМФ - на тесную положительную связь (г5 = 0.8), для пар ДК и ТкТР, РКМФ и ТкТР - на тесную отрицательную связь (г5 = -1.0 и - 0.9 соответственно).
Рисунок 1. Сдвиги (в % к контролю) уровня ДК, длительности ПИ, значений РКМФ и ТкТР в отсутствии ретинола в рационе (тонкие линии - графики; жирные - тренды, сверху вниз
ДК, ПИ, РКМФ и ТкТР)
Следовательно, при содержании крыс на А-авитаминном рационе питания ТкТР отрицательно и тесно ассоциирована с интенсивностью ЛПО и НВСК, тесно положительно - с АОП. Это подтверждается ещё и тем, что ретинол в долях суточной потребности, уменьшает степень сдвигов каждого показателя.
Анализ эффектов разных доз ретинола (рис. 2) позволяет констатировать что: 1. Двукратный избыток витамина А замедляет ЛПО и повышает АОП, чему
сопутствует замедление НВСК и рост ТкТР;
2. Четырёхкратный избыток вызывает более сильные сдвиги, усугубляющиеся
при восьмикратном избытке (при шестнадцатикратном избытке сдвиги ЛПО, АОП и НВСК равны найденным при восьмикратном избытке);
3. Зависимости мевду сдвигами ЛПО, АОП, НВСК и ТкТР одинаковы при разных дозах ретинола (в пределах суточной потребности);
4. Характер связей в парах ДК-ПИ, ДК-РКМФ, ДК-ТкТР, РКМФ-ТкТР сохраняется прежним - тесная отрицательная, тесная положительная, тесная отрицательная и тесная отрицательная связь соответственно. Поэтому можно считать, что отсутствие ретинола в рационе, сбалансированном по другим нутриентам, ускоряет ЛПО и НВСК, снижает АОП, сопровождаясь снижением ТкТР. Это согласуется с наличием прямой связи между скоростью ЛПО и гиперкоагуляционны-ми сдвигами, возникающими при воздействиях, ускоряющих ЛПО [С.Л.Галян и др., 1998; С.В.Шидин, 2007; К.М.СоПегап е.а., 2003; Шазгоп е.а., 2003].
й*"« ода
2 нед. 4 нед. 6 нед. 8 нед. 2 нед. 4 нед. 6 нед. 8 нед. 2 нед. 4 нед. 6 нед. 8 нед. 2 нед. 4 нед. 6 нед. 8 нед.
Дозы, МЕ/кп 400 800 1200 2400
Рисунок 2. Изменения (в % к контролю) уровня ДК, длительности ПИ, уровня РКМФ и ТкТР при избытке ретинола; тонкие линии - графики, жирные - тренды (сверху вниз ДК,
ПИ, РКМФ и ТкТР)
Сравнивая сдвиги ПДФ и Э-димеров при высоких дозах ретинола, нашли, что рост их концентрации пропорционален длительности введения, тогда как при введении меньших доз и в более короткие сроки их уровень падал, что служит признаком замедления НВСК, подтверждаемого снижением уровня РКМФ, фф. Р3
и Р4. Так как уровень фф. Р3 и Р4 продолжает падать и при больших дозах ретинола, нет оснований отрицать его способность замедлять НВСК.
Рост уровня ПДФ и О-димеров объясняется активацией фибринолиза, ускорившегося за 10 и 12 недель при дозе ретинола в 1600 МЕ/кг на 21 и 30%, при дозе 3200 МЕ/кг - на 32 и 38%, при дозе 6400 МЕ/кг - на 39 и 43% (р < 0.05). Объяснение правомерно ещё и потому, что толерантность к тромбину, увеличившаяся при замедлении НВСК (рис. 3), продолжает расти и с повышением дозы ретинола в рационе.
| ЕЗ ПДФ ■ Р-димеры □ (Риб-з □ ТкТР |
55 70
"39
-30 -32 -3« Л из
10 12 10 12 10 12 нед. нед. нед. нед. над. нед.
Дозы, МЕ/кг: 1200 2400 4800
Рисунок 3. Изменения (в % к контролю) уровня ПДФ, О-димеров, фибринолиза и ТкТР при избытке ретинола в рационе.
Следовательно, избыток ретинола в дозах, эквивалентных лечебным для человека, замедляет НВСК, ускоряет фибринолиз и увеличивают ТкТР. НВСК, фибринолиз, ТкТР, ЛПО и АОП при рационе питания без токоферола и с его возрастающим количеством. Схема опыта: группа контроля добавок не получала, подопытные группы получали с рационом токоферол (ТФ) в дозах 3.0, 6.0, 12 и 24 мг/кг массы.
В пробах крови определяли кроме этого активность фибринолиза, так как выявилась роль его сдвигов в парадоксальной динамике уровня ПДФ, О-димеров и фибринолиза, активность которого, как известно, в одних случаях растет, в других - снижается (Я.У^о, 2007; А.ВНпс е.а., 2007).
Как и в условиях А-авитаминного питания, при содержании на рационе без витамина Е, ускорялась ЛПО и падал АОП уже за две первые недели. Степень изменений уменьшало введение токоферола в дозах, составляющих 25, 50% и 75% от потребности. При 2-кратной против потребности дозе токоферола за 4 недели ЛПО замедлялась. Ещё быстрее это произошло при больших дозах ТФ (как это находили и в рассмотренных выше опытах с ретинолом).
Отсутствие токоферола в рационе ускорило НВСК за 6, и заметнее за 8 недель. Толерантность к тромбину (ТкТР) падала уже за 4, и сильнее за 6 и за 8 недель, как и в опытах с ретинолом. При дозах токоферола меньших потребности, ограничивались все эти сдвиги, не устраняясь полностью. С увеличением доз токоферола происходило то же, что при введении средних или больших доз ретинола.
Принципиальное сходство сдвигов ЛПО, АОП и показателей состояния гемостаза во всех вариантах опытов со сдвигами, найденными при изучении эффектов ретинола, отраженных в таблицах 1-4, позволяют не усложнять изложения приведением абсолютных значений, полученных в экспериментах, так как направленность и степень сдвигов практически идентичны в опытах с ретинолом и токоферолом. Поэтому мы приводим ниже результаты графического анализа этих экспериментов и результаты оценки ранговой корреляции.
-ДК -ПИ —А — РКМФ .............--ТкТР
-Линейный (ДК) — "Линейный (ПИ) Линейный (ТкТР) Линейный (РКМФ)
55 -35 -15 --5 --25 --45 -
Рисунок 4. Сдвиги (в % к контролю) уровня ДК, длительности ПИ, значений РКМФ и ТкТР в отсутствии токоферола в рационе (тонкие линии - графики; жирные - тренды, сверху вниз ДК, ПИ, РКМФ и ТкТР)
Здесь видно, что при содержании крыс на Е-авитаминном рационе питания толерантность к тромбину (ТкТР) отрицательно и тесно ассоциирована с интенсивностью липидпероксидации (ЛПО) и непрерывным внутрисосудистым свертыванием крови (НВСК), и тесно положительно - с антиоксидантным потенциалом (АОП).
Анализ эффектов возрастающих доз токоферола (рис. 5) позволяет видеть, что двукратный его избыток замедляет липидпероксидацию и повышает антиок-
22
сидантный потенциал, чему сопутствует замедление непрерывного внутрисосу-дистого свертывания крови (НВСК) и рост толерантности к тромбину (ТкТР). Четырёхкратный избыток вызывает более сильные сдвиги, которые становятся ещё значительнее при восьмикратном избытке, сохраняясь примерно такими же и при шестнадцатикратном избытке токоферола.
110 90 70 50 30 10 -10 -30 -50 -70 -90
Дозы, мг/кг: 3,0 6,0 12,0 24,0
Рисунок 5. Изменения (в % к контролю) уровня ДК, длительности ПИ, уровня РКМФ и ТкТР при избытке токоферола; тонкие линии - графики, жирные - тренды (сверху вниз ДК,
ПИ, РКМФ и ТкТР)
В целом зависимости НВСК, ЛПО, АОП и ТкТР от количества в рационе токоферола таковы: величина г5 (-0.86) для пары ДК-ПИ указывает на их тесную отрицательную связь, для пары ДК-РКМФ (г5 = 0.66) - на слабую положительную, для пар ДК-ТкТР и ДК-ПИ (г5 = -0.54, -0.51 соответственно) на слабую отрицательную связь, для пары РКМФ-ТкТР (г5 = -0.9) на тесную отрицательную связь. Фибринолиз при Е-авитаминном рационе замедляется, будучи тесно положительно ассоциирован с ТкТР, и отрицательно - с ПИ (г,= 0.88 и -0.89).
Выявлены сходные зависимости НВСК, ЛПО, АОП и ТкТР от количества в рационе ТФ: величина г5 (-0.86) для пары ДК-ПИ указывает на их тесную отрицательную связь, для пары ДК-РКМФ (г3 = 0.66) - на слабую положительную, для пар ДК-ТкТР и ДК-ПИ (г5= -0.54, -0.51) на слабую отрицательную связь и для пары РКМФ-ТкТР (г5 = -0.9) на тесную отрицательную связь. Фибринолиз при Е-авитаминном рационе замедляется, будучи тесно положительно ассоциирован с ТкТР, и отрицательно - с ПИ (г5= 0.88 и -0.89).
-------Линейный (ДК) ------Линейный (РКМФ 1 1 РКМФ 1 П«|Р -----Линейный (ТкТР) -Линейный (ПИ)
Я2 - 0,72 —
Т"1 - о.го; в
1 П 1
-1 -111 -
- ! 1
— ■ •-..У - 1
р1 —" 1 ••___I У -к! .У -р -5
■■-Л
2 нед. 4 нед 6 нед. 8 нед 2 нед. 4 нед 6 нед. 8 нед 2 нед. 4 нед 6 нед. 8 нед. 2 нед. 4 нед 6 нед 8 нед
Следовательно, при Е-авитаминозе ТкТР находится в тесной отрицательной связи со скоростью ЛПО и НВСК, и в прямой - с АОП и фибринолизом. Это подтверждается ещё и тем, что с увеличением дозы ТФ (в пределах потребности) степень сдвигов падает. При избытке ТФ сдвиги этих величин сохраняют направленность: увеличение длительности опыта с избытком ТФ замедляет ЛПО и увеличивает АОП, замедляет НВСК, повышает фибринолиз и ТкТР.
Усредненные графики данных из опытов с токоферолом, близки к приведенным на рис. 3 для ретинола. Величина г, для пары ЛПО-НВСК (0,72), отражает положительную связь с относительно невысокой теснотой. Связь между ЛПО и АОП тесная отрицательная (rs = -0.87), что вообще характерно для отношения ЛПО/АОП в тромбоцитах при экстремальных воздействиях или заболеваниях [Г.А.Сулкарнаева, 2004; Р.Г.Алборов, 2006]. Связь НВСК-ТкТР умеренно тесная отрицательная (г5 = -0.79), как и при эффектах, вызываемых отсутствием ТФ. Связь фибринолиз-РФМК слабая отрицательная (rs= -0.48).
Если учесть, что уровень РФМК растет при ускорении фибринолиза [З.С.Бар-каган, 1998], что нами и было найдено, то уровень РФМК должен был бы возрастать. Однако у крыс при избытке токоферола уровень РФМК падал, т.е. связь РФМК-фибринолиз отсутствует, а фибринолиз и толерантность к тромбину связаны тесно положительно (rs = 0.80). Таким образом, избыток ТФ ведет к сдвигам, обратным тем, которые возникают при его дефиците или отсутствии - замедление ЛПО и НВСК, рост АОП и ускорение фибринолиза. Главное, что все это сопровождается ростом толерантности к тромбину (ТкТР).
Следовательно, при Е-авитаминозе ТкТР находится в тесной отрицательной связи со скоростью ЛПО и НВСК, и в прямой - с АОП и фибринолизом. Это подтверждается ещё и тем, что с увеличением дозы ТФ (в пределах потребности) степень сдвигов падает. При избытке ТФ сдвиги этих величин сохраняют направленность: увеличение длительности опыта с избытком ТФ замедляет ЛПО и увеличивает АОП, замедляет НВСК, повышает фибринолиз и ТкТР.
Таким образом, избыток токоферола ведет к сдвигам, обратным тем, которые возникают при его дефиците или отсутствии - замедление липидпероксидации и непрерывного внутрисосудистого свертывания крови, рост антиоксидантного потенциала и ускорение фибринолиза. Главное, что все это сопровождается ростом толерантности к тромбину.
Зависимости между сдвигами ЛПО, АОП, НВСК и ТкТР одинаковы при разных избыточных дозах токоферола (в том числе, и в дозах, недостигающих су-
точной потребности, которые не приведены на графике).
Касаясь характера связей в парах ДК-ПИ, ДК-РКМФ, ДК-ТкТР, РКМФ-ТкТР, отметим, что он таков же, как и при отсутствии или дефиците ретинола: тесная отрицательная, тесная положительная, тесная отрицательная и тесная отрицательная связь соответственно. Поэтому, как и в случае с ретинолом, отсутствие токоферола в сбалансированном по другим нутриентам рационе, ускоряет ЛПО и НВСК, снижает АОП, и ТкТР.
На рис. 6 представлены соотношения сдвигов ПДФ, Э-димеров, фибринолиза и ТкТР при избытке токоферола в рационе.
□ ПДФ
I Э-дим еры
О Фиб-з
ОТкТР
155 -
105 -
55 -
5 -
-45
ю
нед.
12 нед.
Дозы, мг/кг:
■32 г
•28
10 12
нед. нед.
24,0
10 нед.
48,0
12 нед.
Рисунок 6. Изменения (в % к контролю) уровня ПДФ, О-димеров, фибринолиза и ТкТР при избытке токоферола в рационе.
При рассмотрении диаграмм видно, что растет уровень ПДФ и П-димеров при избытке ТФ, и объясняется это (как и при избытке ретинола), активацией фибринолиза, ускорившегося за 10 и 12 недель при дозе токоферола в 24 мг/кг на 32 и
38%, при дозе 48 мг/кг - на 39 и 43%, (р < 0.05). Толерантность к тромбину, увеличившаяся при замедлении НВСК, продолжает расти и при повышении в рационе дозы токоферола. Этим объясняется упоминавшаяся выше парадоксальность -рост уровня ПДФ и О-димеров при одновременном замедлении НВСК. Связано это с тем, что уровень ПДФ и О-димеров растет за счет ускорения фибринолиза, а не только в результате ускорения НВСК. Следовательно, в отсутствии или избытке токоферола в рационе сдвиги таковы же, как в отсутствии или избытке ретинола. Для уточнения возможной роли антиоксидантных свойств ТФ во влиянии на гемостаз мы провели опыты с его введением вместе с прооксидантом или антиок-сидантом (табл. 5).
Таблица 5. Сдвиги ЛПО, АОП, уровня маркеров НВСК, фибринолиза и ТкТР при введении прооксиданта (свинца) или антиоксиданта (димефосфона) на фоне Е-авитаминного рациона и рациона, содержащего витамин Е в соответствии с суточной потребностью (верхняя строка - через 6, нижняя - через 8 недель от начала опыта)
Показатели Группа 1 (без ТФ), п=12 Группа 2 (1,5 мг/кг ТФ), п=6 Группа 3 (без ТФ+ свинец) п=6 Группа 4 (1,5 мг/кг ТФ+свинец), п=6 Группа 5 (без ТФ+ДМ) п=6 Группа 6 (1,5 мг/кг ТФ+ДМ), п=6
ДК, А/мг ЛП 0.069±0.001* 0.075±0.002* 0.05310.004" 0.05410.003* 0.08910.003* 0.09910.008' 0.05910.003+ 0.06110.004+ 0.060+0.003* 0.06810.005* 0.05110.006# 0.04610.003#
ТБК, ед./мг ЛП 0.85±0.02* 0.95±0.03* 0.73+0.04* 0.7410.05* 1.4110.07' 1.5510.09* 0.8110.05+ 0.8410.09+ 0.8810.07* 0.9410.006* 0.7010.04# 0.6910.04#
ПИ, мин/мл 38.011.0* 33.711.4* 45.8+1.2* 45.411.0* 26.711.4* 23.511.7* 35.611.5+ 41.911.4+ 37.310.7* 35.011.1* 41.411.3# 48.411.4#
СО, мм3/мл/мин 0.9010.03* 0.9510.04* 0.7310.04* 0.74+0.03* 1.2210.09' 1.48+0.005' 0.8510.07+ 0.9510.04+ 0.8010.05* 0.8710.006* 0.7010.02# 0.69±0.03#
Ф. Рэ.% 99.911.2* 10411.9* 88.911.1* 89.2+1.2* 11111.6* 12812.1* 10211.2+ 11011.5+ 94.111.2* 95.811.3* 85.211,2# 83.411.0*
Ф. Р4, с 4.5Ю.03* 5.510.04* 3.5+0.02* 3.210.06* 4.810.06* 5.810.09* 3.9Ю.03+ 4.610.04+ 3.710.01 4.410.03* 3.010.01# 2.910.02#
ФГ, г/л 1.910.06 1.310.08* 2.1 ±0.03* 2.010.05* 1.710.03* 1.110.02" 2.1 ±0.03 2.0+0.02 2.210.04 1.610.03 2.1 ±0.04 2.010.03
ПДФ, мг% 21.411.2* 25.611.3* 15.7+0.8* 15.111.1* 23.511.4* 28.6+1.7* 22.110.6+ 23.211.3+ 18.110.4* 19.210.2* 14.010.6# 13.510.4#
РКМФ, мкг/мл 34.210.8* 38.9+0.9* 22.810.9* 22.410.8* 35.010.6* 40.410.8* 27.810.9+ 29.210.7+ 28.510.6* 33.410.4* 20.010.8# 19.710.4#
О-Д, мкг/мл 0.3110.009* 0.3510.007* 0.2010.008* 0.2110.005* 0.3510.008* 0.3910.005* 0.2610.004+ 0.2910.002+ 0.2510.005 0.2710.004* 0.1910.005 0.18±0.002#
Ф.ХПа-зависимый фибри-нолиз, мин 14.610.06* 18.010.05* 8.210.05* 8.0Ю.06* 15.810.06* 16.910.05* 13.210.06* 14.310.07* 13.210.08* 15.410.05* 9.510.04* 8.910.01*
ТкТР, % 73.111.2* 58.111.1* 10011.8* 10011.5* 66.911.1* 53.411.0* 70.1+1.5+ 65.8+1.6+ 72.111.1* 66.410.7* 112±1.7# 12111.5#
Обозначения: как в табл. 1; * - достоверные отличия от величин, найденных в соответствующие сроки в группе 2-й от группы 1-й," - в группе 3-й от группы 1-й, + - в группе 4-й от группы 2-й,л - в группе 5-й от группы 1-й, # - в группе б-й от группы 2-й.
Сопоставляя данные, полученные при введении токоферола одновременно с про- или антиоксидантом невитаминной природы (табл. 5), нашли, что воспроизвелись результаты аналогичного опыта с ретинолом - Е-авитаминоз ускоряет ли-пидпероксидацию, непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, снижает антиоксидантный потенциал, подавляет фибринолиз и толерантность к тромбину (ТкТР). Так, сравнение величин в столбцах 4 и 3 показывает, что если свинец вводится с рационом, содержащим ТФ в дозе, равной потребности, эффект проок-сиданта ограничивается - сдвиги имеют ту же направленность, но менее выражены у крыс, получавших свинец и токоферол, чем у крыс, получавших только ТФ. Антиоксидант ослабил сдвиги у крыс, получавших Е-авитаминный рацион питания (столбцы 5 и I), повысил АОП, замедлил ЛПО и НВСК (столбцы 6 и 2), ограничил угнетение фибринолиза и повысил толерантность к тромбину. Следовательно, действие токоферола на гемостаз действительно реализуется благодаря его антиоксидантным свойствам.
Эффекты отсутствия кобаламина (КБ), его дефицита или избытка. Схема опытов не отличается от уже использованной. Сходны и полученные данные, которые мы в связи с этим приводим в графическом изображении.
Рисунок 7. Сдвиги (в%к контролю) уровня ДК, длительности ПИ, значений РКМФ и ТкТР в отсутствии кобаламина в рационе (тонкие линии - графики; жирные - тренды, сверху вниз
ДК, ПИ, РКМФ и ТкТР)
На рис. 7 видно, что в отсутствии в рационе кобаламина ускоряется ЛПО и снижается АОП, начиная с 4-й недели (рост уровня ДК и ТБК, увеличение СО и удлинение ПИ). При введении кобаламина в дозах, составляющих 25, 50 и 75% потребности сдвиги ослабевают, не исчезая полностью, сохраняя прежнюю зависимость - чем ближе доза к суточной потребности, чем менее выражены послед-
ствия дефицита витамина.
На рис. 8 видно, что двукратная против потребности доза предупреждала сдвиги, а через 6 и 8 недель ограничивала ЛПО, скорость окисления (СО) и удлиняла ПИ.
Ш&ЖЭД ДК вапи 1 1РКМФ
1-1Т*ТР — • - — Линейный (ДК) ----Линейный (РКМФ)
---Линейный (ТкТР) -Линейный (ПИ)
Дозы, мкг/кг: 2,0 4,0 8,0 16,0
Рисунок 8. Изменения (в % к контролю) уровня ДК, длительности ПИ, уровня РКМФ и ТкТР при избытке кобаламина; тонкие линии - графики, жирные - тренды (сверху вниз ДК,
ПИ, РКМФ и ТкТР)
Вместе с тем, эффекты более высоких доз кобаламина, подчиняясь в общих чертах уже установленной закономерности во влиянии на липидпероксидацию и антиоксидантный потенциал тромбоцитов, не были строго пропорциональны дозе и длительности введения кобаламина, отличаясь в этом отношении по эффекту от ретинола и токоферола. Однако толерантность к тромбину более строго «соблюдала» пропорциональность, увеличиваясь с повышением дозы и длительности введения кобаламина. Об этом свидетельствует и характер трендов - величины коэффициентов аппроксимации (Я2), близкие к единице, т.е. свидетельствующие о корректности аппроксимации, обнаруживаются здесь только для трендов, характеризующих динамику уровня в тромбоцитах, диеновых конъюгат и динамику периода индукции, в остальных случаях эти величины далеки от единицы. Влияние на ЛПО, ЛОТТ, НВСК, фибринолиз и ТкТР рационов без ниацина (НЦ) и с его возрастающим количеством. Схема опытов этой серии не отличалась от предыдущих. Диаграммы рис. 9 свидетельствуют, что у крыс, не получавших витамина В5, ускорение липидпероксидации и снижение антиок-
сидантного потенциала выявляется через 6 недель от начала опыта, и это становится ещё более выразительным после 8 недель.
Пробы взяты:
через 2 недели через 4 недели через 6 недель через 8 недель
■ дк втек ппи осо
Рисунок 9. Изменения (в % от контроля) уровня ДК, ТБК, длительности ПИ и скорости окисления (СО) в тромбоцитах при содержании крыс на рационе без ниацина и с ниацином в дозах, составляющих 25, 50 и 75% от суточной потребности. Знаки 0 на графике означают отсутствие сдвига (периоды отбора проб приведены над рисунком)
У крыс, получавших ниацин в количестве, составляющем 25, 50 и 75% от суточной потребности (соответственно 62.5, 125.0 и 187.5 мкг/кг), степень сдвигов интенсивности липидпероксидации и антиоксидантного потенциала, возникающих в его отсутствии, после 6 и 8 недель от начала опыта, уменьшается с увеличением дозы. Однако и при наибольшей из этих доз величины, характеризующие состояние перекисного окисления липидов ещё отличаются от контроля, хотя и в небольшой, но достоверной степени (р < 0,05). Следовательно, ускорение ЛПО и снижение АОП у крыс, получавших ниацин в дозах, не достигающих суточной потребности, менее выражены в сравнении с обнаруженным при В5-авитаминном рационе, однако, не исчезает полностью и к концу опыта.
При введения избытка витамина В5 (рис. 10, где рассмотрены в качестве показателей состояния ЛПО и АОП уровень ДК и период индукции - ПИ, состояния НВСК - изменения РКМФ) с увеличением длительности эксперимента снижается интенсивность липидпероксидации (убыль уровня ДК) и растет АОП (удлинение ПИ), замедляется НВСК (снижение уровня РКМФ), активируется фибринолиз (укорочение времени лизиса сгустка фибрина), а также повышается толерантность к тромбину (ТкТР).
ШШаШ! ПИ I I РКМФ
i i фио-лиз шогаияи I х | Р ......................Линейный (ТкТР)
— - Линейный Фиб-лиз) -Линейный (ПИ) Линейный (ДК)
— - Линейный (РКМФ)
114 114
Дозы ниацнна: 1000 мг/кг 2000 мг/кг 4000 мг/кг
Рисунок 10. Изменения (в % к контролю) уровня ДК, длительности ПИ, уровня РКМФ, активности фибринолиза и толерантности к тромбину (ТкТР) при избытке ниацина в рационе крыс (тренды сверху вниз: ПИ, фибринолиз, ТкТР, РКМФ и ДК)
Сдвиги уровня ДК (показатель скорости липидпероксидации) ассоциированы с изменениями антиоксидантного потенциала (по значениям ПИ) достаточно тесной отрицательной связью (г5 = -0.87), с уровнем РКМФ - тесной положительной связью (г,= 0.83), как это находили и при изучении витаминов А, Е и В|2. Тесная положительная связь выявлена также между активностью фибринолиза и толерантностью к тромбину (г5 = 0.91).
При дозе ниацина в 2, 4, 8 и 16 раз превосходящей потребность, липидперок-сидация протекала медленнее, чем в контроле, а антиоксидантный потенциал увеличивался. Степень сдвигов, как видно по характеру диаграмм, менялась непропорционально дозе, начиная с восьмикратной.
Особенностью влияния ЕЦ-авитаминного рациона питания, не представленной на диаграмме, является то, что за 6 и особенно за 8 недель замедлилось высвобождение фф. Рэ, Р4, Непрерывное свертывание крови (НВСК) замедлилось и упала активность фибринолиза, снизилась ТкТР. При введении ниацина в дозах меньших, чем потребность, эти сдвиги, как и сдвиги в процессах перекисного окисления липидов, уменьшались, но не исчезали. Фибринолиз, будучи замедленным в отсутствии НЦ, активировался параллельно приросту дозы НЦ. Сниженная при В$-авитаминозе толерантность к тромбину, увеличивалась с введением ниацина пропорционально его дозе.
При двукратной против потребности дозе ниацина (500 мкг/кг) через 2 недели интенсивность НВСК была такой же, как у крыс, получавших ниацин в соответствии с потребностью. Активность фибринолиза за 8 недель стала выше контрольной, как и ТкТР (на 123%). Введение НЦ в четырёхкратной дозе влияло на НВСК аналогичным образом, активность же фибринолиза повышалась, начиная со 2-й недели и за 8 недель превысила контроль на 40,7%. Толерантность к тромбину (ТкТР) уже через 2 недели была выше контроля, а за 8 недель превысила его на 131%. Степень ускорения фибринолиза и роста ТкТР относительно контроля оставалась такой же, как и при четырёхкратной дозе. При введении шестнадцат-рикратной дозы НЦ сдвиги по времени появления, направленности и степени не отличаются от найденных при введении ниацина в восьмикратной дозе. Влияние внутривенного введения ниацина на ЛПО, АОП, НВСК, фибринолиз и ТкТР. Так как эффекты ниацина на гемостаз зависят от пути введения (Г.Х.Довгялло и др., 1967; J.A.Pires, 2007), мы провели опыты с его внутривенными инъекциями. Инъекция растворителя («слепой» опыт) не меняла показателей. После инъекций ниацина нашли, что его введение в дву- и четырёхкратной дозе изменений ЛПО и АОП в течение 1 ч не вызывала, а при восьмикратной дозе через 1 ч наблюдалось замедление ЛПО и рост АОП.
При шестнадцатикратной дозе это выявилось уже через 0.5 ч, усилившись через 1 ч. Судя по значениям т индивидуальные колебания выше, чем у крыс, получавших ниацин с пищей.
При введении двукратной дозы ниацина через 30 и 60 мин в одинаковой степени снижена фибриногенемия и ускорено НВСК. Фибринолиз ускорился через 15 и 30 мин, а ТкТР увеличилась. При четырёхкратной дозе гипофибриногенемия усугубилась, ускорилось НВСК (на 15-й и 60-й мин), заметнее активировался фибринолиз (начиная с 15-й мин и до конца опыта) и увеличилась ТкТР (начиная с 5-й мин).
При 8-кратной дозе за 30 и 60 мин увеличился уровень фф. Р3 и Р4, усугубилась гипофибриногенемия. Ускорение НВСК выявлялось уже через 15 мин, усиливаясь к концу опыта. Скорость фибринолиза была выше, чем в контроле, как и при четырёхкратной дозе, и сравнялась с контролем к концу опытов. ТкТР при этой дозе на 5-й и 15-й мин выше, чем при четырёхкратной, а к 60-й минуте упала ниже контроля.
После введения ниацина в шестнадцатикратной дозе уровень фф. Р3 и Р4 остался таким же, как и при восьмикратной, гипофибриногенемия усугубилась. Скорость НВСК изменялась, как и при восьмикратной дозе. Заметнее ускорился фибринолиз, сравнявшись к 60-й мин с контролем. ТкТР на 5-й и 15-й мин выше, чем при 8-кратной дозой, на 30-й минуте снизилась, и через 60 мин стала ниже контрольной.
В целом эффекты введения ниацина в вену свидетельствуют, что скорость НВСК после инъекции растет с увеличением дозы. Растет при этом и уровень РФМК, постепенно снижаясь к концу опыта. Параллельно ускоряется фибринолиз и растет ТкТР, и это также через 1 ч сменяется снижением.
Эта фазность сдвигов при введении НЦ в вену потребовала изучить показатели общей свертываемости крови - АВР и АЧТВ. В эксперименте мы нашли, что через 5 и заметнее через 15 мин, но слабее через 30 мин после инъекции ниацина дозазависимо сокращается АВР и АЧТВ, нормализуясь через 60 мин.
После введения НЦ в 4-, 8- и 16-кратной дозе через 30 мин АВР и АЧТВ удлинены в степени, возрастающей с увеличением дозы.
Принимая во внимание данные об изменении ответа на повторные внутривенные инъекции НЦ [Е.В.Шаповалова, 1967; СЛ. КаЮ е.а., 2008], мы провели опы-
ты с ежедневным введением ниацина в вену хвоста в дозах, эквивалентных лечебным, отбирая пробы крови через 5, 15, 30 и 60 мин. После 5-й инъекции (500 мкг/кг ежедневно) укорочение АВР и АЧТВ наблюдали лишь через 30 мин., степень укороченния становилась менее заметной через 60 мин. Активность фибри-нолиза повышалась в малой мере лишь через 60 мин, а ТкТР не изменялась.
При ббльших дозах ниацина повторное введение не сказывалось на значении АВР, АЧТВ, фибринолиза и ТкТР в период наблюдений. После 10-й и 20-й ежедневной инъекции ниацина изменения протекали с такой же динамикой. ЛПО и гемостаз у морских свинок при питании рационом без витамина Сне его избытком также выполнены по общей схеме.
В отсутствии АК (рис. 11) через 2 недели плавно ускоряется ЛПО, и позже снижается АОП.
Рисунок 11. Изменения (в % к контролю) ДК, ПИ, РКМФ, ПДФ, фибринолиза и ТкТР в отсутствии АК в рационе морских свинок. Примечания: линии трендов (сверху вниз) - динамика ДК, РКМФ, ПДФ. О-димероп, ПИ, фибринолиза и ТкТР; рядом с трендами расположены значения К2; -шаки 0 на рисунке означают отсутствие отклонений от контроля
При дозе АК, составляющей 25% потребности, сдвиги ЛПО менее выражены. При дозе АК, составляющей 50% или 75% от потребности, ускорение ЛПО ещё менее значительно. При двукратной против потребности дозе уже за 4 недели замедляется ЛПО и растет АОП. Через 6 и 8 недель сдвиги усилены. При четырёхкратной дозе до 6-й недели сдвигов не было, а через 8 недель ЛПО ускорилась, а АОП упал. При восьмикратной дозе ускорение ЛПО и падение АОП выявились через 6 недель, то же нашли и при шестнадцатикратной дозе АК.
Способность витамина С повышать общую коагулоактивность тромбоцитов согласуется с его свойством поддерживать активность энзимов-антиоксидантов [Т.\У.8пеГ е.а. 2000; S.A.Raghavan е.а., 2003], а снижение АОП при С-авитаминном рационе питания свидетельствует, что оксидативный стресс является одним из проявлений дефицита аскорбата.
То, что прооксидантный эффект АК заметнее проявляется у аскорбатзависимых животных, согласуется с понятием «степень насыщения организма витамином С»: потребность в АК определяется её количеством в организме, превышение которого в рационе уже не изменяет «насыщенности» крови аскорбатом в связи с ускоренным его выведением с мочой (В.В.Ефремов, 1964, 1969; П.Н.Шараев, 2004).
Графический анализ выявил у аскорбатзависимых животных то, что на рационе без АК динамика исследуемых величин отличается от найденной при изучении эффекта рационов без ретинола, токоферола или кобаламина: И2 трендов, описывающих сдвиги РКМФ, ПИ и фибринолиза, заметно ниже единицы потому, что в ранние сроки эти величины не менялись.
Однако ряд показателей изменялся пропорционально протяженности опытов. Так, коэффициенты Я2 близки к единице: в паре ДК-ПИ (здесь найдена тесная отрицательная связь - г, = -0.92), пара ДК и ТкТР ассоциированы такой же связью (г, = -0.83), как и ДК-фибринолиз (хотя теснота во втором случае ниже - г, = -0.65). Связи между РКМФ и ПДФ, РКМФ и Э-дим ерам и, ПДФ и О-димерами положительны, но малозначимы (г, от 0.34 до 0.41) из-за разной величины сдвигов на отдельных этапах наблюдений. Вместе с тем связь этих сдвигов с отсутствием АК несомненна, так как даже в озах меньших, чем потребность, аскорбат ограничивает эти сдвиги, хотя и не устраняет их полностью.
Следовательно, отсутствие аскорбата в рационе аскорбатзависимых животных снижает коагулоактивность тромбоцитов, изменяет скорость НВСК, что не наблюда-ось при авитаминозах А, Е, В5 и В12.
Снижение уровня фф. Р3 и Р4 не связано со сдвигами ЛПО и АОП. Более вероятно, то снижение высвобождающей способности тромбоцитов сопряжено с торможением ибринолиза при С-авитаминозе. Видимо, ускорение ЛПО в этом случае сказывается на активности фибринолитического процесса, сопровождаясь снижением толерантно-и к тромбину.
То, что С-авитаминоз сопровождается снижением способности тромбоцитов вы-вобождать фф. Р3 и Р4, раскрывает механизм уменьшения «тромбопластической ктивности» кровяных пластинок, обнаруженного ещё в то время, когда пред-авления о реакции высвобождения только начали формироваться [Г.В.Андреенко и
др., 1958,1959,1960].
Влияние всех возможных сочетаний из пяти витаминов на ЛПО, АОП, НВСК, фибринолиз и ТкТР. Рассмотренные выше опыты не выявили равно выраженной зависимости между эффектами отсутствия, дефицита или избытка каждого из этих витаминов на ЛПО, АОП, НВСК или фибринолиз. Вместе с тем, близкими были изменения ТкТР при всех рассмотренных видах авитаминоза (лишь при В^-авитами-нозе ТкТР снижена в меньшей мере, чем в других случаях). По влиянию избытка витаминов на ТкТР они ранжированы так: А > Е > В12 > С = В5.
Так как толерантность к тромбину - это результирующая взаимодействия многих физиологических систем, ответственных за реакцию организма на гипертромбинемию, при постановке очередных опытов, мы ориентировались на сдвиг ТкТР, роль которой в жизнеобеспечении детально изучена лабораторией физиологии гемостаза МГУ [Б.А.Кудряшов, 1975] и подтверждена во многих экспериментальных и клинических ситуациях (А.Ш.Бышевский и др., 1963, 1964, 2005, 2007; В.А.Полякова, 1994; Е.А.Матейкович, 2006; Р.Г.Алборов, 2006; Э.В.Багумян и др., 2007).
Из всех возможных сочетаний мы начали с сочетания по 2 из 5, используя дозы, эквивалентные лечебным (четырёх- и восьмикратные против потребности). Вводили эти сочетания 8 недель с тем, чтобы сопоставить их эффекты при максимальном сдвиге ТкТР. Результаты опытов (табл. 6) свидетельствуют, что при всех сочетаниях растет степень их влияния на ТкТР в сравнении с эффектом тех же витаминов, вводимых порознь.
Таблица 6. Влияние на ТкТР (в % к контролю, принятому в среднем за 100%) сочетаний витаминов А, Е, С, В5, и В12 по 2 (4- и 8-кратный избыток каждого) в рационе в течение 4 и 8
Сочетания витаминов по два Крысы (п = 5 на каждом этапе) получали витамины, обозначенные в столбце 1-м
4-кратный избыток 5-кратный избыток
Е+С 125±2.3*; 129±2.1* 125±2.4*; 140±2.7*
Е+РР 125±2.7*; 127±2.3* 12б±2.4* |39±2.7*
Е+А 140±2.1*; 147±2.4» 150±2.8Ф; 174±3.1*
Е+В|2 127±2.2*; 135±2.7* 138±2.2*; 154±2.9*
С+РР 120±2.б; 132± 1.8 13013.4*; 137±3.1*
С+А 13112.8«; 14013.7* 13914.1*; 148±2.7»
С+В|2 11512.2»; 11811.3* 120±3.2*; 12812.9*
РР+А 143±3.2*; 162±4.5* 15213.6*; 165±4.1*
РР+В13 12912.И: 13712.6* 13313.1*; 15414.7*
А + В.з 134±2.1*; 140±2.6* 152±3.4*; 159±4.3*
Знак * - достоверное отличие от кошроля
Изучили также влияние на ТкТР сочетаний по 3, 4 и 5 витаминов. По данным
табл. 7 сочетания по три эффективнее, чем по два, ещё эффективнее сочетания по четыре, и максимальны - сочетание всех пяти.
Оказалось, что все сочетания усиливают влияние витаминов на ТкТР, повышающееся с увеличением длительности введения (как и при их исследовании порознь). Прирост ТкТР при сочетании из пяти относительно невелик.
Чтобы выяснить не связано ли это с прооксидантными свойствами высоких доз АК, сопоставили эффект на ТкТР сочетания из пяти витаминов, вводя АК в дозе, проявляющей антиоксидантную активность (в 4-хкратной против потребности). В этом случае ТкТР увеличилась со 100 до 232+5.1% (на 132%), т.е. сильнее, чем при введении того же сочетания с 8-кратной дозой АК, когда ТкТР выросла только на 98±4.8%.
Итак, снижение (при сочетании из пяти) дозы АК с 8- до 4-кратной усилило влияние на ТкТР. Следовательно, ограничение эффекта при восьмикратной дозе АК в составе сочетания обусловлено тем, что четырёхкратная доза не проявляет столь выраженной прооксидантной активности.
Таблица 7.
Влияние на ТкТР сочетаний витаминов А, Е, С, В5, и Вцпо 3,4 и 5 (4- и 8- кратный из-
Перечень сочетаний витаминов по 3, 4 и 5 Крысы (п = 5 на этапе) получали в избытке витамины, обозначенные в первом столбце
4-кратный избыток 8-кратный избыток
Е+С+В5 129+2.2*; 136+2.1* 129+2.1*; 146+2.8*
Е+С+А 157+3.1*; 179+4.1* 150+2.8*; 198+5.1*
Е+С+В12 140+3.3*; 167+2.9* 162+4.5*; 189+5.2*
С+В5+А 143+3.2*; 159±4.1* 166+3.7*; 176+5.2*
С+В5+В12 125+2.3; 145+2.7 133±3.4; 148±3.9
В3+А+В12 145+3.0*; 150+3.2* 161+3.6*; 165+4.2*
Е+С+В5+В12 14914.0*; 171±4.3 * 157+3.8*; 17814.3*
Е+С+В5+А 153+3.5*; 175±4.6* 160±3.9*; 181±4.4*
С+В5+В12+А 160±3.5*; 173±4.7* 163±4.2*; 17814.7*
Е+С+В 5+В12+А 157+3.6*; 19314.6* 16614.5*; 198+4.8*
Знак * - достоверное отличие от контроля
При всех исследованных нами видах авитаминоза однонаправлено изменяется ТкТР. Степень её сдвигов (в сравнении с найденными при введении витаминов порознь), позволяет судить о характере кооперации эффектов, вызываемых сочетаниями.
В табл. 8 видно, что при введении сочетаний по два эффекты суммируются не полностью (расчет по Диксону и Уэббу), и это признак реализации их влияния за счет одинакового механизма действия каждого витамина из изученных пар на ЛПО или на фибринолиз.
Таблица 8. Сдвиги (в % к контролю) ТкТР (выделены полужирным шрифтом) при введении витаминов А, Е, В12, В5 и С порознь, и в сочетаниях по 2, 3, 4 и 5 в течение 8
недель
Сдвиг ТкТР, % при введении витаминов порознь Сдвиг ТкТР и характер взаимодействия при попарном введении витаминов Сдвиг ТкТР и характер взаимодействия при введении витаминов 1 сочетаниях по 2. 3. 4 м 5
54 (А) 74 (А+Е - неполная суммация) 4$ (Е+С+В5 - антагонизм)
59 (А+В12) - неполная суммация 98 . (Е+С+А - антагонизм)
42 (Е) 65 (А+Вз) • неполная суммация) 89 (Е+С+В12- антагонизм)
48 (А+С - антагонизм) 76 (С+Вв+А - антагонизм)
28 (Ви) 54 (Е+В12 • неполная суммация) 43 (С+Вб+В12 - антагонизм)
39 (Е+в5 - неполная суммация) 65 (В5*А^В12 - неполная суммация;
33 (В,) 40 (Е+С - отсутствие суммации) 78 (Е+С+Ва+В« - антагонизм)
5 (в12+в5 .неполная суммация) 81 (Е+С+Вг+А - антагонизм)
12 (С) [ 2 (Ви+С - антагонизм) 78 {С+в5+в12+А - антагонизм)
37 (В5+С -антагонизм) 98 (Е+С+В5+В12+А- антагонизм)
Примечания: доза витаминов восьмикратна относительно потребности; в столбцах после чисел, выделенных полужирным шрифтом, в скобках указан эффект сочетания витаминов и характер их взаимодействия, рассчитанный по М.Диксон, Э.Уэбб [1966].
Высказанное допущение корректно, так как витамины А, Е, В5 и Ви однонаправлено влияют на оба процесса, замедляя первый и ускоряя второй из них. Во всех сочетаниях, содержащих АК, найден антагонизм. Опыты с сочетаниями из пяти витаминов, подтвердили предположение, так как - 2-кратное снижение дозы АК в этой комбинации усилило её влияние на ТкТР на 34,5% (р < 0.02).
ВЫВОДЫ
1. Отсутствие или дефицит витамина А, Е или Ви в сбалансированном по остальным нутриентам пищевом рационе пропорционально длительности воздействия (от 2 до 12 недель) снижает антиоксидантный потенциал и ускоряет
липидпероксидацию в тромбоцитах, интенсифицируют непрерывное внутри-сосудистое свертывание крови и уменьшают толерантность к тромбину.
2. Избыток в рационе витамина А, Е или В12 в количестве, эквивалентном лечебным дозам, замедляет (р < 0.05) липидпероксидацию, уменьшает интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови (р < 0.05), ускоряет ф.ХНа-зависимый фибринолиз и увеличивает толерантность к тромбину (р < 0.05).
3. Интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови в отсутствии и при избытке витамина А, Е или В|2 ассоциирована тесно отрицательно с интенсивностью липидпероксидации, с толерантностью к тромбину и с ф.ХПа-зависимым фибринолизом (rs > -0,9).
4. Отсутствие витамина В5 в рационе замедляет (р < 0.05) высвобождение факторов Р3, Р4, снижает (р<0.05) интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови, фибринолитическую активность и толерантность к тромбину; наличие витамина В5 в количествах, составляющих часть суточной потребности, достоверно ограничивает эти сдвиги, в количестве, превышающем потребность в два раза, предупреждает их и ускоряет фибринолиз, а в количествах, эквивалентных лечебным, достоверно замедляет непрерывное вну-трисосудистое свертывание крови, ускоряет фибринолиз и повышает толерантность к тромбину.
5. Внутривенное введение витамина В5 в дозах, эквивалентных лечебным, вызывает кратковременную гиперкоагуляцию (р < 0.05), повышает коагулоак-тивность тромбоцитов, ускоряет непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, снижает толерантность к тромбину, ускоряет в последующем фибринолиз, что сопровождается вторичной гипокоагуляцией (р < 0.05).
6. Отсутствие витамина С в рационе аскорбатзависимых животных ведет к нарастающему ускорению липидпероксидации и увеличению коагулоактив-ности тромбоцитов (на 15-25% в разные сроки), интенсифицирует непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, сменяющееся его замедлением; витамин С в количествах, составляющих часть суточной потребности, ограничи-
вает эти сдвиги, отодвигая сроки их наступления, а 2-кратный избыток предупреждает их появление.
7. У аскорбатзависимых животных витамин С в количествах, эквивалентных лечебным, дозазависимо снижает антиоксидантный потенциал, ускоряет липидпероксидацию и непрерывное внугрисосудистое свертывание крови, фибринолиз и повышает (р < 0.05) толерантность к тромбину (р<0.05). У ас-корбатнезависимых животных витамин С в малых дозах действует на тромбоциты как антиоксидант, в больших (и при длительном введении - 8 недель) -как прооксидант, что повышает (р < 0.05) их коагулоаетивность
8. Отсутствие в рационе витаминов А, Е, В5, Вп и С практически в равной мере влияет на толерантность к тромбину, а по степени влияния их избытка на толерантность к тромбину витамины располагаются так: А > Е > В)2 > С > В5.
9. Изменения интенсивности непрерывного внутрисосудистого свертывания крови при А- или Е-авитаминном питании ассоциированы со сдвигами толерантности к тромбину тесно отрицательно (г, > -0,97) и менее тесно (rs > -0,72) - при питании В5-, В|2- или С-авитаминными рационами; изменения толерантности к тромбину положительно ассоциированы с фибринолизом.
10. При всех сочетаниях витаминов А, Е, В5, В12 и С (по два, по три, по четыре и по пяти, в дозах, эквивалентных лечебным) их влияние на толерантность к тромбину, на интенсивность липидпероксидации и фибринолиз является результатом неполной суммации эффектов, вызываемых их введением порознь; в сочетаниях, содержащих витамин С, полнота суммации ниже из-за прооксидантной активности высоких доз аскорбата, в частности, уменьшение дозы витамина С в составе сочетания из пяти витаминов усиливает влияние на толерантность к тромбину на 34,5% (р < 0.02).
11. Интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови при А- или Е-авитаминном рационе, дефиците или избытке этих витаминов в рационе тесно отрицательно (rs> -0,91) ассоциирована со сдвигами толерантности к тромбину, и менее тесно (г, <-0,72) при В|2-, В5- или С- авитаминном питании, или питании рационом, дефицитным либо содержащим избыток этих
витаминов. Толерантность к тромбину ассоциирована с фибринолизом положительно.
Таким образом, отсутствие, дефицит или избыток витаминов А, Е, В5 или В12, обладающих антиоксидантными свойствами (а витамин С - и прооксидантными), модифицирует липидпероксидацию в тромбоцитах - клетках, синтезирующих (и депонирующих) ряд факторов, способных инициировать гиперкоагулемию, ускорять внутрисосудистое свертывание крови и снижать способность организма реагировать на тромбин и на воздействия, ускоряющие тромбиногенез.
Следовательно, сохраняется необходимость продолжать изучение связи между витаминной обеспеченностью организма и гемостазом, обращая внимание также на эффекты комбинированных гиповитаминозов - состояний, характерных для многих заболеваний, протекающих с наклонностью к тромбофилии или кровоточивости. Особенно важно это при лечении тех заболеваний, в лечебный комплекс которых включают исследовавшиеся нами витамины и их сочетания.
Практические рекомендации
1. Применение витаминов А, Е, В5, В12, С и их сочетаний в комплексе лекарственной терапии заболеваний, заведомо протекающих с нарушениями гемостаза и изменениями интенсивности процессов липидпероксидации (артериальная гипер-тензия, атеросклеротические изменения, воспалительные процессы, нарушения питания и многие другие), рекомендуется предварять оценкой степени обеспеченности организма больного витаминами, в частности (и в особенности) аскорбиновой кислотой (в этом случае важно устанавливать степень насыщенности организма витамином С, используя известный и апробированный на протяжении ряда десятилетий прием) [С.Г.Аптекарь, С.Г.Лорие, 1959].
2. Перед назначением витаминов и в процессе их применения в лечебных целях (особенно высоких доз) рекомендуется контролировать интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови, оценивая плазменный уровень маркеров гипертромбипемии - растворимых комплексов мономерного фибрина (РКМФ), продуктов его деградации (ПДФ), Э-димеров, общую коагулоак-
тивность тромбоцитов и их высвобождающую способность, а также ф.ХПа-зависимый фибринолиз. При невозможности выполнения всех анализов можно ограничиться оценкой уровня РКМФ, активированного времени рекальцифика-ции, активированного частичного тромбопластинового времени, протромбиново-го отношения, международного нормализованного отношения и ф.ХПа-зависи-мого фибринолиза с помощью стандартных диагностикумов (например, реаген-тов-диагностикумов фирмы «Технология-Стандарт», Барнаул или других).
В минимальном варианте можно ориентироваться по плазменному уровню РКМФ и активности ф.ХИа-зависимого фибринолиза (1-й тест характеризует интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания, 2-й - состояние фибринолиза, зависимого от скорости образования ф. Х11а).
Ещё эффективнее - определение степени тромбинемии с помощью специфического окрашенного субстрата тромбина.
3. Важными направлениями в дальнейших экспериментальных исследованиях являются:
- изучение влияния на гемостаз сочетанных авитаминозов, вызываемых исключением из рационов витаминов-антиоксидантов,
- изучение дозазависимости влияния на гемостаз сочетания витаминов в дозах, эквивалентных лечебным (особенно это касается сочетаний, включающих витамин С).
4. Необходимо продолжать изучение эффекта сочетаний витаминов-антиоксидантов на гемостаз в клинике при заболеваниях, которым свойственна наклонность к гипертромбинемии, сопровождающейся оксидативным стрессом. Результаты таких наблюдений позволят определить оптимальные сочетания витаминов и соотношения доз, корригирующих гемостатические сдвиги.
Всего опубликовано по теме диссертационных исследований 62 работы, наиболее значимые из их числа (45) представлены ниже:
В журналах, рекомендованных ВАК РФ
1.Шаповалова Е.М. Влияние ингибиторов превращения арахидоновой кислоты в тромбоцитах на взаимодействие тромбин-фибриноген и толерантность к тромбину / Е.М.Шаповалова, А.Ю. Рудзевич И Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 2007. -
144,- 10.-С.-408-409
2.Полякова В.А. Использование витаминов-антиоксидантов для коррекции нарушений гемостаза при лапароскопических гинекологических операциях / В.А.Полякова, Е.М.Шаповалова, Е.А.Винокурова и др. / Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. - 2007. - 6. -1. - С.24-29
3.Бышевский А.Ш. Маркеры взаимодействия тромбина с фибриногеном в плазме крови как показатель толерантности к тромбину / А.Ш.Бышевский, Е.М.Шаповалова, С.Л.Галян, А.Ю.Рудзевич // Казанский медицинский журнал -2008.-89.-.-С.21-26
4. Бышевский А.Ш, Интенсивность взаимодействия тромбин-фибриноген, ли-пидпероксидация и толерантность к тромбину при дефиците витамина С / А.Ш.Бышевский, Е.М.Шаповалова, А.Ю.Рудзевич // Гематология и трансфузио-логия. - 2008. - 53. - 4. С.41-46
5.Бышевский А.Ш. Гемостаз и обеспеченность организма витамином С / А.Ш.Бышевский, С.И.Матаев, Е.М.Шаповалова и др. // Вопросы питания. -2008.-77.-3.-С.21-29
6. Шаповалова Е.М. Непрерывное внутрисосудистое свертывание крови у беременных с артериальной гипертензией / Е.М.Шаловалова, А.Ю.Рудзевич // Вестник Волгоградского ГМУ, 2008. - 2(26). - С. 71-74
7.Шаповалова Е.М. Витамины с антиоксидантными свойствами и гемостаз /Е.М.Шаповалова, А.Ш.Бышевский и др. // Вестник Уральской медицинской академической науки. - 2009. - 2(25). - С. 109 -110
8. Бышевский А.Ш. Влияние сочетаний витаминов-антиоксидантов на толерантность к тромбину /А.Ш. Бышевский, Е.М. Шаповалова // Вестник ЮжноУральского государственного университета - 2009. - 27 (160). - С.77-80
9.Алборов Р.Г. Витамин С (аскорбиновая кислота) и гемостаз (обзор) /Р.Г.Алборов, Л.А.Васильев, Е.М.Шаповалова и др. // Медицинская наука и образование Урала. - 2009. - 2(58). - С.143-146
Ю.Галушко М.Г. Гемостаз при гипертиреозе и тиреотоксикозе (обзор) / М.Г.Галушко, Р.Г.Алборов, Е.М.Шаповалова и др. // Медицинская наука и образование Урала. - 2009.-2(58). - С. 147-150
11 .Бышевский А.Ш. Гемостаз при отсутствии, дефиците и избытке кобаламина у крыс, содержащихся на сбалансированном пищевом рационе / А.Ш.Бышевский, П.Я.Шаповалов, Е.М.Шаповалова // Известия Самарского научного центра Российской Академии Наук. - 2009. - 1 (4). - Том 11,- С.752-757
12.Шаповалова Е.М. Липидпероксидация и гемостаз у аскорбатзависимых животных при их содержании на рационе без аскорбата, с его дефицитом и избытком / Е.М.Шаповалова // Известия Самарского научного центра Российской
Академии Наук. - 2009. - 1 (4). - 11. - С.758-764
В других медико-биологических журналах (отечественных и зарубежных)
13-Сулкарнаева Г.А. Влияние тироксина на эффекты ингибитора превращения арахидоновой кислоты на уровне фосфолипазы Аг при изменении липидперокси-дации в тромбоцитах // Г.А.Сулкарнаева, Е.М.Шаповалова, А.Ю.Рудзевич / Фундаментальные исследования - 2006. - 11. - С.63-64
14.Шаповалова Е.М. Влияние аспирина на тромбоциты при активации или угнетении липидпероксидации / Е.М.Шаповалова, Г.А.Сулкарнаева, А.Ю.Рудзевич // Фундаментальные исследования. - 2006. -11. - С.52-53
15.Бышевский А.Ш. Влияние витаминов А, Е, С, Р, вводимых порознь и одновременно, на внутрисосудистое свертывание крови / А.Ш.Бышевский, С.Л.Галян, Е.М.Шаповалова и др. // Современные наукоёмкие технологии. - 2007. - 1. - С. 24-24
16.Пустынников A.B. Взаимодействие тромбин-фибриноген, толерантность к тромбину и липидпероксидация зависят от обеспеченности витамином Е / A.B.Пустынников, Е.М Шаповалова., М.К.Умутбаева // Современные наукоёмкие технологии. - 2007,- 11. - С. 98-99
17. Бышевский А.Ш. Состояние системы гемостаза и перекисного окисления липидов у декомпенсированных больных сахарным диабетом 1 типа / А.Ш.Бышевский, Е.М.Шаповалова, С.Л.Галян, Б.И.Кузник и др. // Тромбоз, гемостаз и реология (Москва). - 2007. - 1. - С. 19-29
18.Бышевский А.Ш. Коагуляционная активность надмолекулярных частиц, циркулирующих в кровотоке, свертываемость артериальной и венозной крови, интенсивность липидпероксидации и толерантность к тромбину / А.Ш.Бышевский, Б.И.Кузник, Е.М Шаповалова и др. // Тромбоз, гемостаз и реология (Москва). - 2007,- 4,- С.33-38
19.Шаповалова Е.М. Витамин С, липидпероксидация и непрерывное внутри-сосудистое свертывание крови / Е.М.Шаповалова, А.В.Пустынников, А.Ю.Рудзевич // Современные наукоёмкие технологии. - 2007. -11. - С. 99-100
20.Бышевский А.Ш. Связь кобаламина с гемостазом / А.Ш.Бышевский, Е.В.За-бара, Е.М.Шаповалова и др. / Медицинская наука и образование Урала, 2007. -6. - С.9-12 Витамин РР: влияние на гемостаз (обзор литературы) / Е.М.Шаповалова, Е.В.Забара, И.В.Зверева и др. // Медицинская наука и образование Урала, 2008. - 3. С. 189-192
21. Бышевский А.Ш. Маркеры взаимодействия тромбин-фибриноген, коагуло-активность тромбоцитов, фибринолиз, толерантность к тромбину и состояние ЛПО при содержании крыс на сбалансированном рационе без витамина Bj и с его
избытком / А.Ш.Бышевский, С.Л.Галян, Е.М.Шаповалова и др. // Медицинская наука и образование Урала. - 2008. - 4. - С.32-35
22.Шаповалова Е.М. Влияние токоферола на ф.ХНа-зависимый фибринолиз и толерантность к тромбину / Е.М.Шаповалова, П.Я.Шаповалов, А.В.Шидин // Медицинская наука и образование Урала. - 2007. - 3. - С.86-89
23.Шаповалова Е.М. Эффекты эстрогенов и гестагенов на гемостаз / Е.М.Шаповалова, A.B.Пустынников, Г.А.Сулкарнаева и др. / Медицинская наука и образование Урала. - 2007. - 4. - С.81-86
24.Бышевский А.Ш. Тканевой фактор, его место в свертывании крови / А.Ш.Бышевский, С.Л.Галян, Е.М.Шаповалова и др. // Медицинская наука и образование Урала. - 2007. - 4. - С.78-80
25.Шаповалова Е.М. Эффекты ретинола на гемостаз, липидпсроксидациго при одновременном введении с прооксидантом / Е.М.Шаповалова, A.B. Пустынников, А.Ю.Рудзевич // Современные наукоёмкие технологии. - 2007. 11. - С. 98-99
26.Бышевский А.Ш. Состояние иммунитета, гемостаза, процессов ПОЛ и лим-фоцитарно-тромбоцитарной адгезии при диффузном токсическом зобе / А.Ш.Бышевский, Е.М.Шаповалова, С.Л.Галян и др. // Тромбоз, гемостаз и реология (Москва). - 2008. - 2. - С. 27-37
27.Бышевский А.Ш. Неспецифическая коррекция изменений гемостаза при заболеваниях, протекающих с гиперкоагуляцией /А.Ш.Бышевский, С.Л.Галян, В.А. Полякова Е.М.Шаповалова и др. // Фундаментальные исследования. - 2008. - 2. - С.29-30
28. Шаповалова Е.М.Гемостаз при избытке и отсутствии витамина С в рационе питания / Е.М.Шаповалова // Фундаментальные исследования. - 2008. - 3. -С.93-94
29.Бышевский А.Ш. Липидпероксидация, антиоксидантный потенциал и непрерывное внутрисосудистое свертывание крови при действии кобаламина / А.Ш.Бышевский , Е.В.Забара, Е.М. Шаповалова и др. // Фундаментальные исследования. - 2008. - 3. - С.91-91
30. Бышевский А.Ш. Гемостаз при неразвивающейся беременности, влияние антиоксиданта селмевита /А.Ш.Бышевский , В.А.Полякова, Е.М.Шаповалова // Успехи современного естествознания. - 2008. 5. С.83 - 83
31.Бышевский А.Ш. Эффект кобаламина на гемостаза / А.Ш.Бышевский, И.В.Зверева, Е.М.Шаповалова и др. // Современные наукоёмкие технологии. -2008.-2. - С.153-153
32. Шаповалова Е.М.Эффекты кобаламина на липидпероксидацию, уровень маркеров взаимодействия тромбин-фибриноген и толерантность к тромбину на фоне атерогенного рациона / Е.М.Шаповалова, Е.В.Забара, И.В.Зверева // Ака-
демический журнал Западной Сибири, 2008. - 3.- С.72-73
33. Bishevsky A.Sh. The connection between lipid peroxidation and thrombin-fibrinogen interaction / A.Sh Bishevsky., E.M.Shapovalova, A.V.Shidin e.a. H European journal of natural history, 2007. - 2. - P.43-46
34. Bishevsky A.Sh. Influence of ethinylestradiol and levonorgestrel on thrombin-fibrinogen interaction and thrombin tolerance / A.Sh.Bishevsky, E.M.Shapovalova, S.L.Galyan e.a. // European journal of natural history, 2007. - 5. - P.53-55
35.Bishevsky A.Sh. Plasmatic level of thrombin-fibrinogen interaction markers is connected with lipid peroxidation in thrombocytes, leucocytes and erythrocytes / A.Sh.Bishevsky, E.M.Shapovalova, S.L.Galyan e.a. // International J. of experimental education. - 2008. - 3. - P.22-27
36.Алборов Р.Г. Маркеры непрерывного внутрисосудистого свертывания крови и толерантность к тромбину при гипертромбинемии /Р.Г.Алборов, Л.А.Васильев, Е.М.Шаповалова и др. // Медицинская наука и образование Урала. - 2009. - 2 (58). - С. 49-51
37.Бышевский А.Ш. Влияние разных доз витамина С на толерантность к тромбину у несинтезирующих его животных /А.Ш.Бышевский, Р.Г.Алборов, Е.М.Шаповалова и др. // Медицинская наука и образование Урала. - 2009. - 2 (58). -С.55-56
38. Bishevsky A.Sh. Antioxidant complex selmevit in hemostasis correction at some uterine surgeries / A.Sh.Bishevsky, S.L.Galyan, E.M.Shapovalova e.a./ European J. of natural history. - 2008. - 3. - P.10-15
39. Bishevsky A.Sh. Plasmatic level of thrombin-fibrinogen interaction markers is connected with' lipid peroxidation in thrombocytes and erythrocytes /A.Sh.Bishevsky, S.L.Galyan, E.M.Shapovalova, e.a. // European J. of natural history. - 2008. - 3. - P.62-66
40. Bishevsky A.Sh. The connection between lipid peroxidation and thrombin-fibrinogen interaction / A.Sh. Bishevsky, A.Y.Rudzevich E.M.Shapovalova e.a. // The fundamental researches. - 2009. - 3. - P.4-6
Монографии (и главы в них)
41. Шаповалова Е.М.. Шаповалов П.Я., Ткаленко И.А.и др. Влияние на ге-мокоагуляцию донатора метальных групп витамина Ви (пангамата) // в монографии «Витамины, внутрисосудистое свертывание крови и липидпероксидация». -Москва: Медицина. - 2006. - С.51-55
42.Соловьев В.Г., Шаповалова Е.М., Зверева И.В. Вторичный (коагуляцион-ный) гемостаз / / в монографии «О перспективах коррекции природными цеолитами гемостатических сдвигов». - Ханты-Мансийск: Издательский центр X-
МГМИ, филиал ЮУНЦ РАМН, ТГМИ. - 2007. - С.27-38
43.Шаповалова Е.М. Перекисное окисление липидов и его роль в регуляции гемостаза // в монографи «О перспективах коррекции природными цеолитами ге-мостатических сдвигов». - Ханты-Мансийск: Издательский центр Х-МГМИ, филиал ЮУНЦ РАМН, ТГМИ. - 2007. - С.43-51
44.Шаповалова Е.М., Рудзевич А.Ю., Шидин А.В.и др. Влияние аскорбиновой кислоты на липидпероксидацию и внутрисосудистое свертывание крови при гипероксидации / / в монографии «Зависимость гемостаза от С-витаминной обеспеченности организма» - Москва: Медицинская книга. - 2007. - С.40-61
45.Бышевский А.Ш., Галян С.Л., Шаповалов П.Я., Шаповалова Е.М. // монография «(Влияние важнейших витаминов-антиоксидантов на непрерывное внутри-сосудистое свертывание толерантность к тромбину». - Москва: Медицинская книга-2009. -112 с
Используемые сокращения
АВР Активированное впемя оекалышФикации
АК Аскообиновая кислота
АЧТВ Активиоованное частичное тоомбопластиновое воемя
ВТФ Взаимодействие тпомбин-Аибпиноген
ГП Гомоиистеин
гги Гипеогомоиистеинемия
ЛВС Лиссемитгоованное гшутписосудистое свептывание Сксови1
ЛК Лиеновые конъюгаты
КБ Кобаламин
ЛПО Липидпепоксидаиия (пеоекисное окисление липипов!
НВСК Непоерывное внугписосупистое свеотывание коови
НК Никотиновая кислота
ни Ниаиин
ТБК Поодукты. взаимодействующие с тиобаобитуоовой кислотой
ТкТР Толеоантность к тоомбину
ТФ ТокАеиол (витамин Е)
РКМФ Раствооимые комплексы мономерного Либпина
ППФ Продукты легпалации Аибоина
ПИ Пеоиоц индукпии
со Скосость индуциоованного окисления
Ф. фф. Фактор (факторы)
Шаповалова Елена Михайловна
МЕХАНИЗМЫ ГЕМОСТАТИЧЕСКИХ СДВИГОВ ПРИ ОТСУТСТВИИ, ДЕФИЦИТЕ И ИЗБЫТКЕ ВИТАМИНОВ С АНТИОКСИДАНТНЫМИ СВОЙСТВАМИ В РАЦИОНЕ ПИТАНИЯ
(экспериментальное исследование)
Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук 03.03.01 - Физиология
Подписано в печать 29.01.2010г. Усл.печ.л. 2,0. Бумага писчая №1. Тираж 100 экз. Заказ № 301. Отпечатано в ОАО «НИИПлесдрев» г. Тюмень, ул. Одесская, 52А.
Содержание диссертации, доктора биологических наук, Шаповалова, Елена Михайловна
Используемые сокращения.
ВВЕДЕНИЕ.
1. СВЯЗЬ ВИТАМИНОВ А, Е, С, РР и В12 С ГЕМОСТАЗОМ И ПЕ-РЕКИСНЫМ ОКИСЛЕНИЕМ ЛИПИДОВ (обзор литературы).
1.1. Витамин А (ретинол).
1.2. Витамин Е (токоферол).
1.3. Витамин С (аскорбиновая кислота).
1.4. Витамин В5 (ниацин).
1.5. Витамин В12 (кобаламин, корриноид, антианемический фактор).
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
3.1. Эффекты на НВСК и ЛПО рационов без ретинола и и с его избытком.
3.2. Эффекты А-авитаминного питания на фоне прооксиданта или антиоксиданта.
3.3. НВСК, фибринолиз, толерантность к тромбину, ЛПО и АОП при содержании животных на рационе без витамина Е и с его возрастающим количеством
3.4. Эффекты витамина Е на гемостаз при одновременном введении прооксиданта или антиоксиданта
3.5. Влияние на ЛПО, АОП и гемостаз отсутствия витамина В12 и его избытка в дозах, составляющих часть суточной потребности или превышающих её.
3.6. Влияние витамина В12 на ЛПО, АОП и гемостаз в зависимости от наличия в рационе про- или антиоксиданта.
3.7. Состояние ЛПО, АОП, НВСК, фибринолиза и ТкТР при отсутствии в рационе витамина В5 и рационов с его возрастающими дозами.
3.8. Влияние внутривенного введения витамина В5 на ЛПО, АОП, НВСК, фибринолиз и ТкТР.
3.9. Изменения ЛПО и гемостаза у аскорбатзависимых животных (морских свинок) при использовании рационов без витамина С и с его избытком
3.10. Изменения ЛПО, АОП, НВСК и фибринолиза у аскорбатнезависимых животных при их содержании на рационе без аскорбиновой кислоты и с её возрастающим количеством.
3.11. Эффекты всех сочетаний витаминов А, Е, С, РР и Bi2 на АОП, ЛПО, НВСК, фибринолиз и ТкТР.
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ И ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
5. ВЫВОДЫ.
Введение Диссертация по биологии, на тему "Механизмы гемостатических сдвигов при отсутствии, дефиците и избытке витаминов с антиоксидантными свойствами в рационе питания"
Уже с середины XX столетия витамины перестали рассматривать как соединения, дефицит которых ведет к появлению специфических нарушений, так как было установлено, что ряд важнейших функций организма зависит от витаминной обеспеченности: нервно-эндокринные, иммунобиологические и репаративные процессы, гематопоэз, липидпероксидация (ЛПО), антиокси-дантный потенциал (АОП) и другие [М.И. Певзнер, 1940; JI.A. Черкес, 1953; Б.А.Лавров, 1957; А.О.Натансон, 1961; В.В. Ефремов, 1964; М.К.Аб-дурахманов, 1971; М.И.Смирнов, 1974; А.Ш.Бышевский, В.Н.Кожевников, 1991; О.А.Громова, Л.С.Намазова, 2003; П.Н. Шараев, 2004; А.Ш.Бышевский и др., 2003, 2004, 2005, 2007; J.K.Campbell е.а., 2004; A.Opperhuizen е.а., 2005; C.Weiss е.а., 2005; A.K.Shirakawa, 2008]. Рано сформировавшиеся представления о связях витамина С с метаболическими процессами уже в начале 40-х гг. [М.И.Певзнер, 1940] были отнесены и к другим витаминам и витаминопо-добным соединениям [Б.А.Лавров, 1957; В.В. Ефремов, 1964; М.И.Смирнов, 1974; A.Opperhuizen е.а., 2005; C.Weiss е.а., 2005; А.К. Shirakawa, 2008]. В связи с этим взгляд на витамины как средства профилактики и лечения гипо-витаминозов сменился представлением о них как о соединениях, определяющих за счет неспецифических свойств характер метаболизма и устойчивость организма [Б.А.Лавров 1957], что чрезвычайно расширило область их применения.
К числу патологических состояний, в лечении которых использовали витамины, стали относиться и заболевания, протекающие с нарушениями гемо-статической функции. Было обращено внимание и на позитивные эффекты некоторых витаминов при обменных нарушениях с признаками гипероксидации [A.Opperhuizen, 2008]. В этом отношении особенно эффективными оказались витамины с антиоксидантными свойствами [В.П.Мищенко, 1981; A.M. Мкртумян, 1994; В.П.Мищенко и др., 2005; С.Л.Галян и.др., 2003; А.Ш.Бышевский и др., 2003; Р.Г.Алборов и др., 2005; П.Я.Шаповалов и. др., 2005; М.Р. Iqbal е.а., 2005; A.Mahmood, е.а., 2005; M.R Biagini е.а., 2006; Y.Nadir е.а., 2007]. Однако лишь в последние годы в эксперименте и клинике обращено пристальное внимание на влияние витаминов не только на отдельные прокоагулянты и антикоагулянты, но и на изменения такой совокупности маркеров состояния гемостаза, которая интегрально отражает наклонность к кровоточивости или тромбофилии. Проводились также исследования, в которых оценивали интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови (НВСК) в связи с витаминной обеспеченностью организма. Это позволило выявить определенные соотношения между уровнем маркеров НВСК с одной стороны и интенсивностью липидпероксидации (ЛПО) - с другой [Е.А.Винокурова, 2003; А.Ш.Бышевский и др., 2003-2005; В.П.Мищенко и др., 2005]. Этому способствовало и развитие представлений, согласно которым непрерывное внутрисосудистое свертывание крови (физиологический процесс), усиливаясь, может перерасти в диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови (ДВС) [Д.М.Зубаиров, 1978, 2000; Д.М.Зубаиров и др., 1989; А.Ш.Бышевский и др., 1990]. Появились основания выстроить (в зависимости от скорости внутрисосудистого микросвертывания крови) следующий ряд [И.Н.Бокарев, 2002], отражающий связь НВСК и диссеминиро-ванного свертывания крови:
1) уровень маркеров свертывания крови в пределах физиологической нормы - 1-я степень,
2) уровень маркеров свертывания крови повышен — преходящее состояние, не отражающееся на функции органов и систем — 2-я степень,
3) уровень маркеров свертывания крови постоянно повышен, но не отражается существенно на клинической картине заболевания,
4) уровень маркеров свертывания крови нарастает быстро и заметно влияет на функции органов, угрожая жизни - ДВС-синдром.
Полагают, что изменения НВСК, контролируемые по уровню маркеров взаимодействия тромбин-фибриноген (ВТФ), позволяют выявить наклонность к внутрисосудистому тромбообразованию - следствию усиленного тромбиногенеза, или к гипокоагуляции [З.С.Баркаган, 1988, 1998; И.Н.Бокарев, 2000 а, б, в; 2002; А.Ш.Бышевский и др., 2005; МХоп^аёге е.а., 2005; НЖРагк е.а., 2005].
При чтении медико-биологических работ обращает на себя внимание ещё и следующее: 1. Чаще других витаминов в лечении заболеваний, сопровождающихся сдвигами в гемостазе, используют витамины А, Е, В3, В12 и С; 2. В публикациях, касающихся экспериментально изучаемой связи между витаминами и гемостазом, лишь изредка оценивают исходный уровень обеспеченности витаминами организма подопытных животных и только в единичных случаях используют рационы, сбалансированные по содержанию макро-и микронутриентов; 3. Далеко не всегда учитывается обеспеченность изучаемым витамином организма пациента, что заставляет критически относиться к выводам, основанным на оценке дозазависимости влияния витаминов на гемостаз, так как известно, что изменения, вызываемые введением какого-либо витамина, зависят и от его предшествующего уровня в организме [А.Ш.Бышевский и др., 2006; Е.М.Шаповалова и др., 2008; М.-Г.Соорег, 2006; К. ОгоепЬаек е.а., 2006]; 4. В периодической печати до 70 гг. эффекты витаминов на гемостаз описаны без учета их антиоксидантных свойств; 5. Влияние витаминов на интегральные показатели состояния гемостаза, которые отражают способность организма отвечать на гипертромбинемию (толерантность к тромбину и НВСК), не изучали, немногочисленны и сведения об их влиянии на интенсивность НВСК - величину, обратную толерантности к тромбину [Р.Г.Алборов и др., 2005; А.Ш.Бышевский и др., 2003, 2004, 2005; Е.М.Шаповалова и др., 2008; А.8Ь. ВузЬеуэку е.а., 2008а].
Результаты экспериментальных и клинических исследований, в которых изучали поведение отдельных факторов плазмокоагуляции, антикоагулянтов и некоторых компонентов плазминовой системы в силу их противоречивости (что видно при чтении «Обзора»), как и отсутствие комплексных наблюдений не позволяют оценить эффекты авитаминного питания, дефицита или избыточного введения витаминов на гемостаз в целом. Важно и то, что экспериментаторы, как правило, не учитывали уровень обеспеченности организма подопытных животных витаминами и использовали рационы, в которых баланс между белками, липидами и углеводами не принимался во внимание, не контролировалась и их витаминная полноценность.
Всё это обосновывает необходимость продолжения исследований с тем, чтобы приблизиться к ответу на вопрос, возникший ещё в прошедшем столетии: целесообразно ли использовать витамины с выраженными антиокси-дантными свойствами, в частности, витамины А, Е, В5, В]2 и С, а также их комбинации для коррекции или предупреждения изменений в системе гемостаза при заболеваниях, протекающих с гиперкоагуляцией.
Цель исследования — экспериментально установить закономерности изменения интегральных показателей состояния гемостаза (непрерывного внутрисо-судистого свертывания крови и толерантности к тромбину), липидпероксида-ции и антиоксидантного потенциала тромбоцитов в отсутствии, при дефиците или избытке витаминов А, Е, В5, В12 и С, а также при избытке их сочетаний.
Предполагалось, что анализ влияния на гемостаз намеченных нами к изучению и широко используемых в медицинской практике витаминов А, Е, В5, В12 и С углубит представления о связи и механизмах их действия на систему свертывание крови, одна из значимых физиологических функций которой -защитная реакция организма на гипертромбинемию.
Задачи исследования
1. Установить, как изменяется в плазме крови уровень факторов Р3, Р4, фибриногена, продуктов деградации фибрина, растворимых комплексов мономерного фибрина и Б-димеров, интенсивность липидпероксидации, анти-оксидантный потенциал тромбоцитов и толерантность к тромбину в отсутствии витамина А, его дефиците и избытке в пищевом рационе, сбалансированном по остальным макро- и микронутриентам.
2. Изучить, как изменяются эти величины в отсутствии, при дефиците и избытке витаминов Е, В5, В12, С в аналогичных экспериментальных условиях.
3. Изучить активность фибринолиза в эуглобулиновой фракции плазмы, а также активированное время рекальцификации и активированное частичное тромбопластиновое время, как показателей общей свертываемости крови.
4. Изучить физиологические эффекты сочетанного введения тех же витаминов при их избыточном поступлении с пищевым рационом.
В экспериментах мы сочли необходимым применять в качестве авитамин-ного рациона такой, в котором отсутствует только один из изучающихся в отдельном опыте витамин; как модель дефицита витамина применять пищевой рацион, содержащий исследуемый витамин в количестве, равном 25, 50 или 75% от суточной потребности; как модель избытка - рацион с двух-, четырёх-, восьми- и 16-кратным избытком витамина относительно суточной потребности в нём.
Дизайн экспериментов
Оценить фибринолиз, уровни маркеров НВСК , интенсивность ЛПО и АОП при питании крыс рационом, в состав которого не включен витамин А, Е, В5, В о или витамин С:
1. При питании рационом, не содержащим витаминов А, Е, В5, В12 (крысы) или витамина С (морские свинки).
2. На фоне прооксиданта или антиоксиданта.
3. При длительном введении избытка витаминов А, Е, В5 и В12 (крысы).
4. При внутривенном введении избытка витамина Р5 (однократно и повторно, крысы)
5. При введении избытка витаминов А, Е, В5, В12 и С в сочетаниях по 2, 3, 4 и 5.
Научная новизна
Экспериментально доказано, что отсутствие витамина А, Е, В5 или В12 в рационе аскорбатнезависимых (крысы) и витамина С в рационе аскорбатза-висимых животных (морские свинки) активирует липидпероксидацию, снижает антиоксидантный потенциал тромбоцитов, ускоряет непрерывное внутрисосудистое свертывание крови и ослабляет защитную реакцию организма на гипертромбинемию.
Впервые определено, что у животных содержащихся на моноавитамин-ном рационе питания, сдвиги в гемостазе причинно связаны с отсутствием данного витамина - введение в рацион витамина А, Е, В5 или В12 в дозах, равных 25, 50 или 75% суточной потребности, ослабляет сдвиги (от 1,2 до 1,8 раза соответственно, р < 0,05) , в дозах, превышающих потребность в 2 раза, предупреждает их появление, а в дозах 4-х, 8-и и 16-кратных - достоверно тормозит липидпероксидацию, повышает антиоксидантный потенциал, снижает коагулоактивность тромбоцитов и уровень маркеров непрерывного внутрисосудистого свертывания крови, одновременно увеличивая толерантность к тромбину (р < 0,05).
Найдено, что отсутствие и избыток витамина А, Е, В5 или В12 сопровождается сдвигами интегральных показателей состояния гемостаза за счет антиоксидантных свойств.
Обнаружено, что связи между сдвигами непрерывного внутрисосуди-стого свертывания крови в отсутствии в рационе одного из витаминов ассоциированы со сдвигами липидпероксидации положительно, с изменениями АОП - отрицательно; что эти связи более выражены в эффектах витаминов А, Е и В12 (г5= 0,82), и менее выразительны (г8= 0.48) в эффектах витаминов В5 и С, что избыток витамина А, Е, В5, или В12 в количествах, эквивалентных лечебным дозам, замедляет непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, ускоряет фибринолиз в эуглобулиновой фракции плазмы и повышает толерантность к тромбину.
Выявлена высокая индивидуальная вариабельность сдвигов в отсутствии и избытке ниацина в рационе и что его внутривенное введение быстро и дозазависимо повышает общую свертываемость крови, сменяющуюся вскоре гипокоагуляцией, и что при повторных внутривенных введениях этот ответ ослабляется.
Впервые показано, что отсутствие витамина С в рационе аскорбатзави-симых животных активирует липидпероксидацию и снижает антиокси-дантный потенциал в тромбоцитах уже через 2 недели, усиливая высвобождение факторов Р3 и Р4, и что при длительном (свыше шести недель) С-авитаминном питании уровень этих факторов в плазме снижается на 12,5 и 16,6% соответственно относительно контроля (р < 0.05).
Впервые установлена фазность влияния С-авитаминного питания и введения витамина С в избытке на липидпероксидацию в тромбоцитах и на сдвиги в гемостазе аскорбатзависимых и аскорбатнезависимых животных. Теоретическая и практическая значимость. На основании анализа изменения показателей, характеризующих коагулоактивность тромбоцитов, непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, ф.ХНа-зависимый фибринолиз и толерантность к тромбину у животных, содержавшихся на сбалансированном рационе питания, из которого исключали один из витаминов - А, Е, В5, В12, С (последний у аскорбатзависимых и аскорбатнезависимых животных), или, получавших эти витамины в избытке, эквивалентном лечебным дозам, установлено следующее.
Отсутствие витамина А, Е, В5 или В12 в рационе, сбалансированном по
9 ! остальным нутриентам, ускоряет ЛПО и снижает АОП в тромбоцитах -клетках, участвующих в поддержании ЛПО на физиологическом уровне. Показано, что синхронно с этим ускоряется НВСК, снижается фибринолиз и защитная реакция организма на гипертромбинемию, следовательно, и на появление в кровотоке микромицелл - фрагментов клеточных мембран. Доказано, что сдвиги в гемостазе, возникающие при содержании животных на рационе питания, из которого исключен витамин А, Е, В6 или В]2, реализуются за счет ускорения ЛПО и снижения АОП тромбоцитов, так как при введении в моноавитаминный рацион отсутствующего витамина в дозах ниже потребности, сдвиги ЛПО и гемостаза ослабляются, а при дозе, в 2 раза превышающей суточную потребность, не возникают.
Новыми являются данные, указывающие, что избыток одного из этих витаминов в рационе угнетает пропорционально дозе и длительности введения ЛПО в тромбоцитах и повышает их АОП, активирует ф.ХПа-зави-симый фибринолиз, замедляет высвобождение факторов Р3, Р4 и непрерывно протекающее с малой интенсивностью внутрисосудистое свертывание и, как следствие, увеличивает способность организма реагировать на гипертромбинемию. Получено и дополнительное свидетельство того, что эффект этих витаминов на гемостаз реализуется через их антиокси-дантные свойства - эффект каждого из витаминов на ЛПО, АОП и гемостаз поддерживается введением антиоксиданта невитаминной природы и подавляется введением прооксиданта.
Данные, полученные при изучении эффекта избытка одного из четырёх витаминов (А, Е, В5 или В12) в дозах, эквивалентных лечебным, замедляют НВСК, ускоряют фибринолиз и увеличивают ТкТР, что указывает на перспективность их применения для коррекции тромбофилических сдвигов при заболеваниях, которые сопровождаются оксидативным стрессом.
Важным является и установление того факта, что эффекты ниацина на НВСК и ТкТР вариабельнее, чем эффекты остальных исследованных витаминов, и что при его внутривенном введении влияние на гемостаз двухфазно: рост общей свертываемости сменяется снижением из-за компенсаторной активации фибринолиза.
Найдено, что отсутствие витамина С в рационе аскорбатзависимых животных ускоряет ЛПО и снижает АОП тромбоцитов, но усиливает (в отличие от других витаминов высвобождение фф. Р3 и Р4, а при длительном
10
С-авитаминном питании (8 недель) уровень фф. Рз и Р4 снижается, замедляется фибринолиз и падает ТкТР. Эти сдвиги ослабляются при наличии в рационе аскорбата в дозе, равной 25, 50 или 75% потребности, и не возникают при введении в рацион удвоенной против потребности дозы. Особенно важно, что при потреблении с рационом аскорбата в дозах, эквивалентных лечебным, сдвиги, вызываемые его дефицитом или отсутствием в питании, не выявляются до 6-й недели, но при дозах, превышающих потребность в 4, 8 и 16 раз, после шести недель ускоряется ЛПО и снижается АОП тромбоцитов, ускоряется НВСК и растет толерантность к тромбину, обусловленная активацией фибринолиза. Существенное значение имеют данные о том, что введение аскорбата аскорбатнезависимым животным в дозе, превышающей потребность в 8 раз, антиоксидантный эффект проявляется в первые две недели, а позднее ЛПО ускоряется, а рост АОП сменяется снижением при одновременном ускорении НВСК. При введении шестнадцатикратной дозы аскорбата кратковременно длящийся антиоксидантный эффект сменяется прооксидантным, сопровождаясь ускорением НВСК. Это доказательно свидетельствует о связи эффекта аскорбата на гемостаз с его влиянием на скорость липидпероксидации.
Экспериментально обнаружено, что сдвиги НВСК при исключении из рациона одного из витаминов (А, Е, С, В5 или В]2) положительно ассоциированы с изменениями ЛПО, и отрицательно - с изменениями АОП, что связи эти тесны (г5 > 0.9) в эффектах, вызываемых витаминами А, Е и В]2, и менее тесны в эффектах витаминов В5 и С (г5 < 0.7). Установлено, что по степени сдвигов при авитаминозе интегрального показателя (ТкТР) витамины практически равноценны (лишь менее, чем у остальных выражен эффект отсутствия в питании витамина В12), а по степени влияния избытка витаминов на толерантность к тромбину и по скорости развития эффекта они располагаются в последовательности А>Е>В12>С> В5.
Математический анализ выявил, что сдвиги НВСК при всех исследованных нами авитаминных рационах питания отрицательно ассоциированы с изменениями толерантности к тромбину - тесная связь эффекта витаминов А, Е (г5 > 0.9) и менее тесная - витаминов В12, В5 и С (г5 < 0.7); изменения толерантности к тромбину положительно ассоциированы с фибрино-лизом.
Доказано экспериментально, что введение всех возможных сочета
11 ний витаминов по два (A-E, А-В5, А-В12, Е-В5, Е-В12, В5-В12) повышает степень прироста ТкТР, при всех сочетаниях по три это заметнее, и ещё заметнее при сочетаниях по четыре, показано что наибольший эффект свойственен сочетанию, включающему все пять витаминов (если доза аскорба-та не проявляет прооксидантных свойств, т.е ниже четырёхкратной относительно суточной потребности).
Внедрение в практику. Совместно с Тюменским отделением Всероссийского физиологического Общества им. И.П.Павлова, с сотрудниками кафедр биологической химии, акушерства и гинекологии ТГМА разработаны и внедрены для использования в лечебных учреждениях г. Тюмени (ГЛПУ ТО ОКБ № 2, ГЛПУ ТО ОКБ № 1) и области (МУЗ «ЦРБ» г. Надым, ГУЗ «СОКБ» г. Салехард) методические рекомендации, оформленные актами: «Эффекторы свертывания крови из сапропеля: влияние на плазмокоагуля-цию, тромбоцитарный гемостаз и некоторые жизненные функции лабораторных животных», «Внутрисосудистое свертывание крови, толерантность к тромбину, активность тромбоцитов и интенсивность ЛПО при гипер- и гипотиреозе» и «Непрерывное внутрисосудистое свертывание крови при отсутствии и избытке в рационе витамина Bi2».
Основные материалы работы обсуждены на российских и международных конференциях: конференции «Теория и методология современного научного исследования Тюменского региона» - Тюмень. - 2003 (2 сообщения), на 2-й региональной научно-практической конференции «Экологическое образование и здоровый образ жизни». - Сургут. - 2006, 3-й научной международной конференции «Актуальные проблемы науки и образования». - Варадеро, Куба. - 2008, IV Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечнососудистой хирургии». - Москва. - 2009, Материалы Российской конф. «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии». -Челябинск: ЧГМА, Объединение биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири, Южно-Уральский научный центр РАМН. - 2009 (3 сообщения).
Результаты, полученные при выполнении работы, используются в обучении студентов и клинических ординаторов по курсам «Нормальная физиология», «Биохимия» и «Клиническая фармакология».
Положения, выносимые на защиту
1. Исключение из сбалансированного рациона питания витамина А, Е, В5, В12 или С (последний у аскорбатзависимых животных) сопровождается ускорением липидпероксидации, снижением антиоксидантного потенциала тромбоцитов, ростом их коагулоактивности, ускорением НВСК и снижением толерантности к тромбину.
2. Избыточное введение с рационом питания витаминов А, Е, или Bi2 в дозах, эквивалентных лечебным, угнетает липидпероксидацию, повышает ан-тиоксидантный потенциал тромбоцитов, снижает их коагулоактивность, замедляя НВСК и повышая толерантность к тромбину.
3. При внутривенном введении витамина В5 (500, 1000, 2000 или 4000 мкг/кг) через 5, 15 и 30 мин наблюдается значительная активация фибрино-лиза, исчезающая к 60-й мин, которая является реакцией на повышение общей свертывающей активности крови, развивающейся через 5-й мин после инъекции.
4. При введении значительного избытка витамина С (44,0 и 88,0 мг/кг массы тела) или длительном (6-8 недель) введении небольших, но превышающих потребность доз ( 11,0 и 22,0 мг/кг массы тела) наблюдается угнетение (первые две недели), а затем ускорение липидпероксидации. Эти сдвиги сопровождаются фазными изменениями НВСК и толерантности к тромбину (вначале увеличение и затем снижение).
5. Липидпероксидация (ЛПО) и антиоксидантный потенциал (АОП) отрицательно ассоциированы (rs, = -0,92), ЛПО и НВСК с одной стороны, толерантность к тромбину с другой - ассоциированы отрицательно в опытах с витаминами А, Е и В12 (rs, = -0.95) и менее тесно (rs, = -0.75) - в опытах с витаминами В5 и С.
6. Эффекты изучавшихся витаминов на толерантность к тромбину при со-четанном введении характеризуются неполной суммацией, особенно, если в сочетании содержится аскорбиновая кислота, ведущая себя в дозах восьми- и шестнадцатикратно превышающих потребность (44,0 и 88,0 мг/кг) как проок-сидант.
Апробация. Основные положения диссертации доложены на 5-й Всероссийской конференции «Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром.» (М., 2000); 6-й национальной конференции «Атеротромбоз, артериальная гипертензия» (М., 2001); III Российской конференции с международным участием в
13
НЦ ССХ им. Бакулева (М., 2001), Всероссийской конф. "Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром. Проблемы лечения». М., 2001, на сессии (с международным участием) Всероссийской ассоциации тромбозов, геморрагий и патологии сосудов им. А.А.Шмидта-Б.А.Кудряшова (М., 2003); конференции «Актуальные вопросы экспресс-диагностики в хирургии» (М., РНЦХ РАМН, 2003); конференции РАЕ «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине» (Греция, 2003); 2-й конф. РАЕ «Гомеостаз и эндоэкология» (Египет, 2004); конференции биохимиков Урала, Западной Сибири и Поволжья (Оренбург, 2003); на 14 конгрессе Дунайской ассоциации гемостазиологов (С.-Петербург, 2004), на международном симпозиуме «Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии» (Дубай, 2006), 2-й региональной научно-практической конференции «Экологическое образование и здоровый образ жизни» (Сургут, 2006), Международной конференции РАЕ «Фундаментальные и прикладные исследования в медицине» (ОАЭ, Лутраки, 2006), на III научной международной конференции «Актуальные проблемы науки и образования» (Куба, Варадеро, 2008), на IV Всероссийской конференции с международным участием «Клиническая гемостазиология и гемо-реология в сердечно-сосудистой хирургии» (М.: РНЦХ РАМН, 2009), на заочных электронных конференциях «Экологические проблемы внутренних болезней, перинатологии и педиатрии». - 2007. 6., «Экологические проблемы внутренних болезней, перинатологии и педиатрии». - 2007. 6, «Химический анализ». - 2007. 2., «Фундаментальные исследования». - 2008. 2. (3 работы); на ежегодных заседаниях регионального отделения РАЕ (Тюмень, 20052009), на ежегодных заседаниях Тюменского отделения ВБО (2006-2009), на совместном заседании профессорско-преподавательского состава кафедр нормальной физиологии, биохимии и гигиены с основами экологии, общей фармакологии ТГМА (2006, 2008).
Публикации. По теме диссертации опубликованы 62 статьи, из них 12 в журналах рекомендованных ВАК РФ для размещения материалов докторских диссертаций, 28 - в других медико-биологических журналах, опубликованы 1 монография (Москва: Медицинская книга - 2009. - 112 с) и 4 главы в монографиях (М.: Медицина - 2006; Х-Мансийск: Издат. центр Х-МГМИ, филиал ЮУНЦ РАМН-2007).
Заключение Диссертация по теме "Физиология", Шаповалова, Елена Михайловна
5. ВЫВОДЫ
1. Отсутствие или дефицит витамина А, Е или В12 в сбалансированном по остальным нутриентам пищевом рационе пропорционально длительности воздействия (от 2 до 12 недель) снижает антиоксидантный потенциал и ускоряет липидпероксидацию в тромбоцитах, интенсифицируют непрерывное внутри-сосудистое свертывание крови и уменьшают толерантность к тромбину.
2. Избыток в рационе витамина А, Е или В12 в количестве, эквивалентном лечебным дозам, замедляет (р < 0.05) липидпероксидацию, уменьшает интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови (р < 0.05), ускоряет ф.ХПа-зависимый фибринолиз и увеличивает толерантность к тромбину (р < 0.05).
3. Интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови в отсутствии и при избытке витамина А, Е или В]2 ассоциирована с интенсивностью липидпероксидации, с толерантностью к тромбину и с ф.ХПа-зависимым фибринолизом.
4. Отсутствие витамина В5 в рационе замедляет (р < 0.05) высвобождение факторов Р3, Р4, снижает (р<0.05) интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови, фибринолитическую активность и толерантность к тромбину; наличие витамина В5 в количествах, составляющих часть суточной потребности, достоверно ограничивает эти сдвиги, в количестве, превышающем потребность в два раза, предупреждает их и ускоряет фибринолиз, а в количествах, эквивалентных лечебным, достоверно замедляет непрерывное вну-трисосудистое свертывание крови, ускоряет фибринолиз и повышает толерантность к тромбину.
5. Внутривенное введение витамина В5 в дозах, эквивалентных лечебным, вызывает кратковременную гиперкоагуляцию (р < 0.05), повышает коагулоак-тивность тромбоцитов, ускоряет непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, снижает толерантность к тромбину, ускоряет в последующем фибринолиз, что сопровождается вторичной гипокоагуляцией (р < 0.05).
6. Отсутствие витамина С в рационе аскорбатзависимых животных ведет к нарастающему ускорению липидпероксидации и увеличению коагулоактив-ности тромбоцитов (на 15-25% в разные сроки), интенсифицирует непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, сменяющееся его замедлением; витамин С в количествах, составляющих часть суточной потребности, ограничивает эти сдвиги, отодвигая сроки их наступления, а 2-кратный избыток предупреждает их появление.
7. У аскорбатзависимых животных витамин С в количествах, эквивалентных лечебным, дозазависимо снижает антиоксидантный потенциал, ускоряет липидпероксидацию и непрерывное внутрисосудистое свертывание крови, фибринолиз и повышает (р < 0.05) толерантность к тромбину (р<0.05). У ас-корбатнезависимых животных витамин С в малых дозах действует на тромбоциты как антиоксидант, в больших (и при длительном введении - 8 недель) -как прооксидант, что повышает (р < 0.05) их коагулоактивность
8. Отсутствие в рационе витаминов А, Е, В5, В12 и С практически в равной мере влияет на толерантность к тромбину, а по степени влияния их избытка на толерантность к тромбину витамины располагаются так: А > Е > В12 > С > В5.
9. При всех сочетаниях витаминов А, Е, В5, В12 и С (по два, по три, по четыре и по пяти, в дозах, эквивалентных лечебным) их влияние на толерантность к тромбину, на интенсивность липидпероксидации и фибринолиз является результатом неполной суммации эффектов, вызываемых их введением порознь; в сочетаниях, содержащих витамин С, полнота суммации ниже из-за проокси-дантной активности высоких доз аскорбата, в частности, уменьшение дозы витамина С в составе сочетания из пяти витаминов усиливает влияние на толерантность к тромбину на 34,5% (р < 0.02).
10. Интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови при А- или Е-авитаминном рационе, дефиците или избытке этих витаминов в рационе тесно отрицательно (г5 > -0,91) ассоциирована со сдвигами толерантности к тромбину, и менее тесно (г5 < -0,72) при В12-, В5- или С- авитаминном питании, или питании рационом, дефицитным либо содержащим избыток этих витаминов. Толерантность к тромбину ассоциирована с фибринолизом положительно.
Таким образом, отсутствие, дефицит или избыток витаминов А, Е, В5 или В12, обладающих антиоксидантными свойствами (а витамин С - и проокси-дантными), модифицирует липидпероксидацию в тромбоцитах — клетках, синтезирующих (и депонирующих) ряд факторов, способных инициировать ги-перкоагулемию, ускорять внутрисосудистое свертывание крови и снижать способность организма реагировать на тромбин и на воздействия, ускоряющие тромбиногенез.
Следовательно, сохраняется необходимость продолжать изучение связи между витаминной обеспеченностью организма и гемостазом, обращая внимание также на эффекты комбинированных гиповитаминозов - состояний, характерных для многих заболеваний, протекающих с наклонностью к тромбо-филии или кровоточивости. Особенно важно это при лечении тех заболеваний, в лечебный комплекс которых включают исследовавшиеся нами витамины и их сочетания.
Практические рекомендации
1. Применение витаминов А, Е, В5, В12, С и их сочетаний в комплексе лекарственной терапии заболеваний, заведомо протекающих с нарушениями гемостаза и изменениями интенсивности процессов липидпероксидации (артериальная гипертензия, атеросклеротические изменения, воспалительные процессы, нарушения питания и многие другие), рекомендуется предварять оценкой степени обеспеченности организма больного витаминами, в частности (и в особенности) аскорбиновой кислотой (в этом случае важно устанавливать степень насыщенности организма витамином С, используя известный и апробированный на протяжении ряда десятилетий прием) [С.Г.Аптекарь, С.Г.Лорие, 1959].
2. Перед назначением витаминов и в процессе их применения в лечебных целях (особенно высоких доз) рекомендуется контролировать интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания крови, оценивая плазменный уровень маркеров гипертромбинемии - растворимых комплексов мономерного фибрина (РКМФ), продуктов его деградации (ПДФ), Б-димеров, общую коагу-лоактивность тромбоцитов и их высвобождающую способность, а также ф.ХИа-зависимый фибринолиз. При невозможности выполнения всех анализов можно ограничиться оценкой уровня РКМФ, активированного времени ре-кальцификации, активированного частичного тромбопластинового времени, протромбинового отношения, международного нормализованного отношения и ф.ХПа-зависимого фибринолиза с помощью стандартных диагностикумов (например, реагентов-диагностикумов фирмы «Технология-Стандарт», Барнаул или других).
В минимальном варианте можно ориентироваться по плазменному уровню РКМФ и активности ф.ХПа-зависимого фибринолиза (1-й тест характеризует интенсивность непрерывного внутрисосудистого свертывания, 2-й - состояние фибринолиза, зависимого от скорости образования ф. ХПа).
Ещё эффективнее — определение степени тромбинемии с помощью специфического окрашенного субстрата тромбина.
3. Важными направлениями в дальнейших экспериментальных исследованиях являются:
- изучение влияния на гемостаз сочетанных авитаминозов, вызываемых исключением из рационов витаминов-антиоксидантов,
- изучение дозазависимости влияния на гемостаз сочетания витаминов в дозах, эквивалентных лечебным (особенно это касается сочетаний, включающих витамин С).
4. Необходимо продолжать изучение эффекта сочетаний витаминов-анти-оксидантов на гемостаз в клинике при заболеваниях, которым свойственна наклонность к гипертромбинемии, сопровождающейся оксидативным стрессом. Результаты таких наблюдений позволят определить оптимальные сочетания витаминов и соотношения доз, корригирующих гемостатические сдвиги.
Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Шаповалова, Елена Михайловна, Тюмень
1.Абдурахманов М.К. Обмен витаминов Вь В2, В6, В.2, С, А, Б при нормальной и осложненной гипохромной анемии: Автореф. дис. . д.м.н. - Душанбе. - 1971.-26 с
2. Абрашитова Г.А. Влияние делипина и никотиновой кислоты на состояние свертывающей и антисвертывающей систем крови при силикозе /
3. Аветисьян Г.В. О влиянии никотиновой кислоты на свертываемость крови в эксперименте / Г.В.Аветисьян, В.А.Ацеховская, Л.И.Шурай // Здравоохранение Казахстана. — 1963. — 7. — С. 23-26
4. Акопян С.А. Комбинированное действие аскорбиновой кислоты и адреналина на некоторые стороны обмена веществ / С.А. Акопян // Научн. труды Ереванского университета. 1951. -т.ЗЗ. — С. 181-184
5. Алборов Р.Г. Зависимость между антиоксидантными свойствами витаминов и их влиянием на толерантность к тромбину /Р.Г.Алборов, С.Л.Галян, С.В.Миневцев и др. // Медицинская наука и образование Урала. 2005. - 3. — С.64-66
6. Алборов Р.Г. Роль клеток крови в связи между толерантностью к тромбину, содержанием в кровотоке продуктов взаимодействия тромбин-фибриноген и липидпероксидацией: Автореф. дисс. . д.м.н. Тюмень. 2006. 42 с
7. Андреев А.Ф. Роль некоторых витаминов, камполона и глюкозы в про-тромбинообразовательной функции печени / А.Ф.Андреев // Тер. архив. -1948. 5. - С.66-74
8. Андреенко Г.В. Изменения тромбопластической активности крови при введении в организм животных витамина В12 / Г.В.Андреенко, Б.А.Кудряшов // ДАН СССР. 1955. -102. - 4. - С. 787-789
9. Андреенко Г.В. Зависимость тромбопластической активности крови морских свинок от поступления аскорбиновой кислоты / Г.В.Андреенко, Н.П.Сытина // Пробл. свертывания и переливания крови. 1959. - 10. - С. 26-29
10. Ю.Андреенко Г.В. Влияние витаминов С, Р, В.2, К и фолиевой кислоты нал »тромбопластическую активность морских свинок / Г.В.Андреенко, Н.П.Сытина//Бюлл. эксп. биол. и мед. 1960. - 10. - С. 46-47
11. П.Андреенко Г.В. Изменение тромбопластической активности крови у крыс под влиянием больших доз аскорбиновой кислоты / Г.В.Андреенко, Н.П.Сытина // Научн. докл. высшей школы. Биол. науки. 1958. - 1. - С.109-113
12. Андреенко Г.В. Значение аскорбиновой кислоты в сохранении функции противосвертывающей системы крови /Г.В.Андреенко, Л.В.Лютова // В кн. Система свертывания крови и фибринолиз. Киев. - 1969. - С.8-9
13. Андреенко Г.В. Механизм действия никотиновой кислоты на фибрино-литическую активность крови /Г.В.Андреенко, Л.А.Мигалина // Система свертывания крови. Киев: Здоровья. - 1969. - С.9-10
14. Аптекарь И.А. Тромбоцитарное звено и постоянное внутрисосудистое свертывание крови при активации и угнетении липопероксидации: Автореф. дисс. . к.м.н. Тюмень. - 2003. — 22 с
15. Аптекарь С.Г. Влияние аскорбиновой кислоты и рибофлавина на свертываемость крови / С.Г.Аптекарь, С.Г.Лорие // Фармакол. и токсикол. 1959. -2.-С.134-138
16. Ахрарходжаев A.A. Баланс аскорбиновой кислоты и протромбиновая активность крови у больных легочным туберкулезом с легочным кровотечением и без него / А.А.Ходжаев // В кн. Современные вопросы клиники и терапии туберкулеза. Ташкент. - 1961. - С. 170-174
17. Бакшт Г.А. Витамины в акушерстве и гинекологии / Г.А.Бакшт // Советский врач. журн. 1947. - 7-8. - С.511-518
18. Балуда В.П. Лабораторные методы исследования системы гемостаза /
19. B.П.Балуда, З.С.Баркаган, Е.Д.Гольдберг и др.// — Томск. 1980. - 310 с.
20. Балуда В.П. Физиология системы гемостаза / В.П.Балуда, М.В.Балуда, И.И.Деянов, И.К.Тлепшуков // М. 1995. - 243 с.
21. Баркаган З.С. Геморрагические заболевания и синдромы / З.С.Баркаган М.: Медицина. 1988. - 528 с.
22. Баркаган З.С. Введение в клиническую гемостазиологию / З.С. Баркаган // М.:Ньюдиамед-АО. 1998. - 45 с
23. Баркаган З.С. Основные методы лабораторной диагностики нарушений системы гемостаза / З.С.Баркаган, А.П.Момот // Барнаул. 1998. С.83-84
24. Баркаган З.С. Гипергомоцистеинемия как самостоятельный фактор риска поражения и тромбирования кровеносных сосудов / З.С.Баркаган, Г.И.Костю-ченко, Е.Ф.Котовщикова // Патология кровообращения и кардиохирургия. -2002. 1.-С.65-71
25. Баркаган З.С. Нарушение обмена гомоцистеина у больных сахарным диабетом 2 типа / З.С.Баркаган, Т.А.Рудницкая, М.А.Колпаков // Тромбоз, гемостаз и реология. 2006. - 3(27). - С. 20-24
26. Белик Я.В. Биохимия свертывания крови / Я.В.Белик, Е.Л.Ходорова, // Киев: АН Украинской ССР. Институт биохимии. 1957. - 172 с
27. Богданова В.А. Витамин С в женском молоке / В.А.Богданова // В кн. «Современные вопросы советской витаминологии»: Медгиз. 1955. С.-102-128
28. Бок Е.И. Морфология крови / Е.И.Бок // В кн. «Цинга» Л. - 1924. С. 2533
29. Бокарев И.Н. Тромбозы, предтромботические состояния, тромбофилии и гиперкоагуляция / И.Н.Бокарев // Тромбозы, геморрагии, ДВС-синдром. Проблемы лечения, 2000 в. С. 39-43
30. Бокарев И.Н. Дифференциальная диагностика и лечение внутренних болезней. Кровоточивость, или геморрагический синдром. Дифференциальная диагностика / И.Н.Бокарев // М. 2002. - 75 с.
31. Бокарев М.И. Гипергомоцистеинемия как признак рецидивирующего тромбоза глубоких вен нижних конечностей / М.И.Бокарев, Г.С.Воробьев, Т.В.Козлова и др. // Тромбоз, гемостаз и реология. 2001. - 2(6). - С. 43-44
32. Бременер С.М. Витамины / С.М.Бременер // М.: Медицина. 1966. - 420 с
33. Бродер А.И. Интенсивность взаимодействия тромбин-фибриноген и толерантность к тромбину в зависимости от липопероксидации и антиокси-дантного потенциала: Автореф. дис. . канд. биол. наук. — Тюмень. 2004. — 24 с.
34. Буковская А.Я. Влияние аскорбиновой кислоты на тромбообразующие свойства крови при применении её у больных атеросклерозом: Автореф. дис. . к.м.н.-М.- 1959.-23 с
35. Бышевский А.Ш. Влияние витамина С на морфологию щитовидной железы, содержание йода в ней и йодный баланс/ А.Ш.Бышевский // Дисс. . канд. мед. наук. Львов. - 1959. - 217 с (фонд ЦНМБ)
36. Бышевский А.Ш О перспективах коррекции природными цеолитами ге-мостатических сдвигов /А.Ш. Бышевский, В.Г.Соловьев // Тюмень. 2007. -119с
37. Бышевский А.Ш. Влияние витаминов на свертывание крови /А.Ш.Бышевский // Казанский мед. ж-л. 1977. - 6. - С.82-85
38. Бышевский А.Ш. «Способ определения содержания продуктов деградации фибрина» № 1659855, регистрация 1.03. 1991, публикация Бюлл. № 24, 30.06. 1991(соавторьъ-И.А.Мухачева, В.М.Шафер)
39. Бышевский А.Ш. Антиоксиданты в коррекции гемокоагуляционных сдвигов / А.Ш.Бышевский, М.К.Умутбаева, Р.Г.Алборов // М.: Медицинская книга. 2004. - 79 с
40. Бышевский А.Ш. Биохимические компоненты свертывания крови / А.Ш.Бышевский, О.А.Терсенов, С.Л.Галян и др. // Свердловск: Средне-Уральское книжное изд-во. 1990.-211 с
41. Бышевский А.Ш. Влияние некоторых витаминов на уровень гуморальных агентов и функциональную активность физиологической противо-свертывающей системы: Автореф. дисс. д.м.н. Львов. - 1966. - 35 с
42. Бышевский А.Ш. Зависимость взаимодействия тромбин-фибриноген от активности тромбоцитов /А.Ш.Бышевский, С.Л.Галян, Н.Н.Зороастрова, С.В.Миневцев // Медицинская наука и образование Урала. 2005. - 3. - С.71-72
43. Бышевский А.Ш. Метод определения антиплазмина в сыворотке крови / А.Ш.Бышевский, В. Мохнатов // Система свертывания крови и фибринолиза. Киев: Здоровья. - 1969. - С. 220-221
44. Бышевский А.Ш. Регуляция коагуляционных превращений фибриногена / А.Ш.Бышевский, С.Л.Галян, П.И.Левен и др // Свердловск: Средне-Уральское книжное издательство. 1987. 205 с
45. Бышевский А.Ш. Связь гемостаза с перекисным окислением липидов / А.Ш.Бышевский, М.К.Умутбаева, Р.Г.Алборов //М.: Медицинская книга. 2003.-95 с
46. Бышевский А.Ш., Кожевников В.Н. Витамины и здоровье женщины / А.Ш.Бышевский, В.Н.Кожевников // Красноярск: КГУ. 1991. - 192 с
47. Бышевский А.Ш. Свертываемость крови при совместном введении витамина А и тиреоидина в эксперименте / А.Ш.Бышевский, Н.Б.Луцюк // Матер. 2-й научн. конф. Запорожского фарм. ин-та. 1962 а. С.33-34
48. Бышевский А.Ш. Влияние витамина А, никотиновой кислоты, витаминов В12 и Е на толерантность крыс к тромбину / А.Ш.Бышевский // Тез. докл. 1-й конф. Украинского фармакологического Общества.- 1965. С.64
49. Бышевский А.Ш. Влияние витаминов А, РР, В12 и Е на лизис эйглобули-нов и антитромбиновую активность / А.Ш.Бышевский // Матер, юбилейной конф. ЗГМИ. Киев. 1967. С.13-13
50. Бышевский А.Ш. Влияние витаминов Вь В2, Вб, В.2, С, Р и холина на противосвертывающую систему в условиях гиперхолестеринемии / А.Ш.Бышевский // В кн. Гигиена питания. Киев.- 1966. С.79-82
51. Бышевский А.Ш. Влияние некоторых витаминов на уровень гуморальных агентов и функциональную активность физиологической противо-свертывающей системы: Автореф. дисс. д.м.н. Львов. - 1966. - 35 с
52. Бышевский А.Ш. Метод учета фибринолиза в сгустках плазмы, меченых 835 / А.Ш.Бышевский // 1962 а.- Там же. С. 13-14
53. Бышевский А.Ш. Механизмы, предупреждающие внутрисосудистое свертывание крови /А.Ш.Бышевский // Вопросы санологии (Матер. 1-й сано-логической конференции). Львов. - 1967. - С. 157-172
54. Бышевский А.Ш. Эффект кобаламина на гемостаз при холестеринемии /А.Ш.Бышевский, И.В.Зверева, Е.В.Забара и др. // Заочная электронная конференция, 15-20 декабря 2007 г.
55. Бышевский А.Ш. Патент № 2061953 Способ количественного определения общей коагуляционной активности тромбоцитов / А.Ш.Бышевский; В.Г.Соловьев, И.В.Селиванова // Бюлл. № 16. 10. - 06. 1996.
56. Бышевский А.Ш. Способ определения толерантности животных к тромбину / А.Ш.Бышевский, Л.В.Михайлова, Р.Г.Алборов и др. // Патент №2219546, приоритет от 04.05.2000, зарегистрирован в Госреестре изобретений РФ 20.12.2003
57. Ван Чий. Изменения уровня протромбина и фибриногена в крови убольных атеросклерозом и гипертонической болезнью при лечении их аскорбиновой кислотой, холином и препаратами йода: Автореф. дисс. . к.м.н. — М. 1959. 23 с.
58. Васильев С.А. Роль наследственности в развитии тромбозов / С.А.Васильев, В.Л.Виноградов // Тромбоз, гемостаз и реология. 2007. - 3. - С. 3-14.
59. Владимиров Ю.А. Образование свободных радикалов металоферментами и апоптоз / Ю.А.Владимиров // Матер. Междун. Симпозиума «Молекулярные механизмы регуляции функции клетки. — Тюмень. 2005. — С. 15
60. Винокурова Е.А. Гемостаз и перекисное окисление липидов при операциях на матке / Е.А.Винокурова // Успехи современного естествознания. -2003.- 10.-С. 56
61. Винокурова Е.А. Гемостаз при оперативных вмешательствах в гинекологической практике / Е.А.Винокурова // М.: Медицина. 2006.- 91 с
62. Власов К.Ф. Влияние никотиновой кислоты на кровообращение / К.Ф.Власов // Терап. Архив. 1948а. - 4. -Р.40-51
63. Выговский У.П. Изменения в системе прокоагулянтов, антикоагулянтов и фибринолитической активности крови при эфирном наркозе / У.П.Вы-говский // Врач. дело. 1964. 6. - С.76-77
64. Габбасов З.А. Новый высокочувствительный метод анализа агрегации тромбоцитов / З.А.Габбасов, Е.Г.Попов и др.// Лаб. дело. 1989. - а. - С. 1518
65. Габбасов З.А. Новый методический подход к исследованию агрегации тромбоцитов in vitro / З.А.Габбасов, Е.Г.Попов и др. // БЭБиМ, 1989 б. 10. — С.437-439
66. Галиева А.Т. Патогенетическое значение оксида азота при геморрагической лихорадке с почечным синдромом: Автореф. дисс. . к.м.н. Уфа, 2004. — 22 с
67. Галян С.Л. Краткие сведения о роли тканевого фактора в регуляции свертывания крови. Глава в кн. О роли щитовидной железы в регуляции гемостаза / С.Л.Галян, П.Я.Шаповалов, С.В.Миневцев и др. // М.: Медицинская книга. 2006. - С.7-13
68. Галян С.Л. Предупреждение и ограничение витаминами-антиоксидан-тами нарушений гемостаза, вызываемых тромбинемией: Автореф. дис. . докт. мед. наук. Челябинск. - 1993. - 44 с.
69. Галян С.Л. Влияние на гемокоагуляцию воздействий, снижающих агрегацию тромбоцитов /С.Л.Галян, Л.С.Марченко, И.В.Ральченко, А.Ю.Руд-зевич // Матер, междун. Симпозиума «Медицина и охрана здоровья» . Тюмень. - 1998. -С.391
70. Гладких В.Ф. К фармакологии аскорбиновой кислоты: Автореф. дисс. . к. м. н.-М.- 1946-23 с
71. Домбровский М.М. Лечение гинекологических кровотечений аскорбиновой кислотой / М.М.Домбровский // Автореф. дисс. . к.м.н. — Ростов на Дону. 1964. - 22 с
72. Дурова М.В. Структурно-функциональные нарушения тромбоцитарных мембран при ишемическом инсульте. Коррекция комплексным антиоксидан-том: Автореф. дисс. . к.м.н. Казань. - 1999. - 25 с
73. Герасимова И.Л. Влияние никотиновой кислоты на свертываемость крови у больных атеросклерозом и у здоровых / И.Л.Герасимова // В кн. Патология кровообращения. Кемерово. - 1962а. - 29. - С. 127-129
74. Герасимова И.Л. Влияние никотиновой кислоты на свертывание крови человека, содержание в ней гепарина и фактора просветления у больных атеросклерозом / И.Л.Герасимова//Кардиология. 1963. 1. - С. 61-64
75. Гланц С.А. Медикобиологическая статистика / С.А.Гланц // М.: Практика. 1998.- 112с
76. Глухенькая З.Е. Влияние внутривенных инъекций глюкозы с аскорбиновой кислотой на уровень протромбина в крови / З.Е.Глухенькая // Сб. научно-практических работ госпиталя погранвойск. Львов. - 1958. - С.171-175.
77. Гольдштейн В.И. О механизме действия витамина С / В.И.Гольдштейн, Д.В.Волькензон, Л.Г.Кондратьева, Н.Д.Ульянова // Биохимия. 1950. - 15.-2. - С.173-177
78. Громова О.А.Намазова Л.С. (редакторы) Витамины и минералы в современной клинической практике // М.: Союз педиатров России. 2003. — 56 с
79. Деранкова Е. Лечение гинекологических кровотечений / Е.Деранкова // Сов. врач. журн. 1938. - 1. - С. 25-32
80. Детинкина Г.Н., Дынкина И.М., Тюрин Ж.Н., Шумабатина Л.Ф. Предложения по унификации методов исследования системы гемостаза // Лаб. дело. 1984 а. - 3. - С. 140-143.
81. Детинкина Г.Н., Дынкина И.М., Тюрин Ж.Н., Шумабатина Л.Ф. Предложения по унификации методов исследования системы гемостаза // Лаб. дело. 1984 б. - 4. - С. 225-232.
82. Диксон М. Ферменты /М.Диксон, Э.Уэбб // М.: Мир. 1966. - 816 с
83. Довгялло Г.Х. Эффекты никотиновой кислоты на свертываемость при атеросклерозе / Г.Х.Довгялло, И.С.Гулько, А.А.Кокош // Тр. III съезда терапевтов БССР. Минск. - 1967. - С. 66
84. Ельдецова С.Н. Гемокоагуляционные сдвиги и активность радикальных процессов в плазме и эритроцитах при экстремальных воздействиях в эксперименте: Автореф. дисс. . к. б. н. Челябинск. - 1990.-24 с
85. Ергина Т.П. Частота распространения дефицита фолиевой и кислоты и витамина Bi2 в крови здоровых и больных анемией беременных // Здравоохранение Таджикистана. 1973. - 6. - С. 26-28
86. Ефимов B.C. Гипергомоцистеинемия в патогенезе тромбоваскулярной болезни и атеросклероза / В.С.Ефимов, А.И. Цакалов // Лабор. медицина. -1999.-2.-С.44-48
87. ЮО.Захарова A.B. / Влияние витаминов на гликолиз в мышечной ткани // А.В.Захарова // Вопр. мед. химии. 1952. - 1. — С. 73-76
88. Юб.Иванова H.A. Содержание витамина С в крови и протромбиновый индекс у детей, пораженных флуороозом: Автореф. дисс. . к.м.н. — Свердловск, 1958. - 22 с
89. Иноятова Л.К. Влияние аскорбиновой кислоты на холестерин/лецити-новый индекс и протромбин крови при гипертонической болезни и атеросклерозе / Л.К.Иноятова // Мед. ж-л Узбекистана. 1958. — 11. — С.16-21
90. Ю8.Каган Г .Я. Особенности реакции организма на инфекцию в разных условиях витаминного питания /Г.Я.Каган // Вопр. питания. 1953. - 5. - С.42-49
91. Кадыков В.И. О некоторых существующих взаимоотношениях между ферментами, токсинами и витаминами /В.И.Кадыков // Тез. докл. на Юбилейной научн. сессии института питания АМН СССР. М. - 1950. - С. 23-24
92. ПО.Кажешева А.З Гипергомоцистеинемия как этиологический фактор репродуктивной недостаточности при гемофилии / А.З.Кажешева, И.И.Гузов,
93. B.С.Ефимов, Т.А.Кухорева // Тромбоз, гемостаз и реология. 2002. .- 4(12).1. C.48-51
94. Ш.Кажешева А.З. Тромбоваскулярное нарушение циркуляции крови -свойство гипергомоцистеинемии / А.З.Кажешева, А.С.Абдулраб, В.С.Ефимов // Международный конгресс «Тромбоз, гемостаз, патология сосудов». — Санкт-Петербург. 2004. - С.87
95. З.Калмыков П.Е. Современные представления о главных составных частях пищи / П.Е.Калмыков, М.Н.Логаткин // Л.: Медицина. 1974. - 239 с
96. Н.Карпова И.А. Коррекция витаминами-антиоксидантами гемокоагуляци-онных сдвигов при постабортной реабилитации / И.А. Карпова // Матер. Ме-ждунар. конф. «Медицина и охрана здоровья». Тюмень. - 2002. - С. 23
97. Киселева Л.Н. Изменения свертывающей и противосвертывающей систем крови под влиянием никотиновой кислоты / Л.Н.Киселева, Г.К.Ро-маненко // Тез. докл. к научной сессии по фибринолизу. Л. 1965. - С.14-14
98. Пб.Климова М.С. Влияние никотиновой кислоты на число тромбоцитов /М.С.Климова // Труды Саратовского медицинского института. Саратов. -1947.-6.-С.37-38
99. Ковалевский К.Л.Содержание мелких лабораторных животных в вивариях /К.Л.Ковалевский // М.: Сельхозгиз. 1949. - 135 с
100. Койгушская Г.П. Влияние гидрокортизона на обмен фибриногена: Ав-тореф. дисс. канд. биол. наук. Омск. - 1974. - 22 с
101. Кондратьева Л.Г. Влияние аскорбиновой кислоты на щелочную фосфа-тазу тканей /Л.Г.Кондратьева // Тез. докл. IX научн. сессии института питания АМН СССР. М. - 1955. - С. 21-22
102. Копалейшвили В. и др. Тр. НИИ акушерства и гинекологии ГрССР. — Тбилиси: АМН ГрССР. 1960 -. С. 227-230
103. Костинская А.В. Влияние витамина С на содержание холестерина в крови / А.В.Костинская // Сб. научных трудов Харьковского мед. ин-та. Харьков: ХСИ. 1958. - т. 5. - С.157-158
104. Кратинов А.Г. О взаимодействии фолликулярного гормона и аскорбиновой кислоты /А.Г.Кратинов, А.М.Полякова, Е.А.Торбина, А.Т.Шкирина // N БЭБиМ. 1945. - в.1-7. - С.69-72
105. Кудряшов Б.А. Липопротеинлипаза и её свойства как компонента про-тивосвертывающей системы / Б.А.Кудряшов, Г.Г.Базазьян, Л.Л.Бонфито // Вопр. мед. химии. 1963 а. - 5. - С. 533-535
106. Кудряшов Б.А. Липопротеинлипаза как гуморальный агент противо-свертывающей системы организма / Б.А.Кудряшов, Г.Г.Базазьян // J.Athero-sclerosis. 1963 б. - 3. - 3. - С. 195-205
107. Кудряшов Б.А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови /Б.А.Кудряшов // М.-.Медицина. 1975. - 488 с.
108. Костюченко Г.И. Гипергомоцистеинемия: частота, возрастные особенности, методы коррекции у больных коронарной болезнью / Г.И. Костючен-ко, З.С.Баркаган, Л.А.Костюченко // Тромбоз, гемостаз и реология. 2003. -3(15). -С.33-36
109. Краевская И.С. Витамин С в этиологии и патогенезе маточных кровотечений и его терапевтическое применение / И.С.Краевская // Тр. Всес. конф. по витаминам. М. - 1940. - С. 245-250
110. Крыжановская Е.С. Влияние качественно различного питания на состав женского молока /Е.С.Крыжановская // Диссертация. Киев. - 1956. - 231 с
111. Кудрявцева Н.Г. О некоторых взаимоотношениях между витаминами, гормонами и ЦНС /Н.Г.Кудрявцева // Тез. докл 8-го Всесоюзного съезда физиологов, биохимиков, фармакологов. М. 1955. - С.349-350
112. Кудряшов Б.А. Витамин В12 и тромбопластическая активность / Б.А Кудряшов, П.Д.Улитина //ДАН СССР. 1954. - 98. - 5. - С.1117-1128
113. Кудряшов Б.А. Влияние витамина В12 на функцию физиологической противосвертывающей системы организма /Б.А.Кудряшов, Г.В.Андреенко, Н.П.Сытина и др. // Вопросы мед.химии. 1964. - 3. - С.269-273
114. Кудряшов Б.А. Изменения тромбопластической активности и концентрации протромбина в крови животных при введении им повышенных доз витамина BJ2 /Б.А.Кудряшов, Г.В.Андреенко, И.Кнох // Научн. доклады
115. Высшей школы. Биол. Н. 1960. - 4. - С.97-99
116. Кузник Б.И. и др. Тез. Докл. симпозиума «Биологические проблемы Севера». — Петрозаводск: Петрозаводский ун-т. 1976. — С. 77-79
117. Кузник Б.И. Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И.Кузник, Н.В.Васильев, Н.Н.Цыбиков // М.: Медицина, 1989. -320 с.
118. Кузник Б.И. Форменные элементы крови, сосудистая стенка, гемостаз и тромбоз / Б.И.Кузник, В.П.Скипетров // М.: Медицина, 1974. 306 с.
119. Кузник Б.И., Михайлов В.Д., Альфонсов В.В. Тромбогеморрагический синдром в онкогинекологии. Томск: Изд-во Томск, ун-та, 1983. - 166 с.
120. Кулаков В.И. Хирургическая лапароскопия в гинекологии / В.И. Кулаков, Л.В. Адамян // Акуш. и гинек. 1995. - 5. - С. З-б.
121. Курцинь О.Я. Инструкция по приготовлению основной диеты для крыс / О.Я.Курцинь // Институт питания АМН ССР. М. - 1952. - 5 с
122. НО.Кучер Л.С. Обеспеченность витамином С при алиментарной дистрофии / Л.С.Кучер // Педиатрия. 1944. - 3. - С. 53.-57
123. Лавров Б.А. Динамика распределения аскорбиновой кислоты в животном организме в связи с некоторыми факторами среды /Б.А.Лавров, Б.И.Яновская // Тез. докл. на 9-й научн. сессии института питания АМН СССР.-М.- 1955. С.10-12
124. Левинсон М.С. Гемостатическая роль витаминов С и Р при кровотечениях из внутренних органов /М.С.Левинсон // Сов. врач. 1940. - 11. - С. 741748
125. Лошкарева Л.С.Зависимость интенсивности непрерывного внутрисосудистого свертывания крови и толерантности к тромбину от гемокоагуляци-онной активности тромбоцитов: Автореф. дисс. . к.м.н. Челябинск. - 1999. -23 с
126. Луцюк Н.Б. Влияние рациона с различным содержанием витамина А в щитовидной железе крыс при введении 6-МТУ / Н.Б.Луцюк // Вопросы питания, 1961.-5.-.-С.40-45
127. Лакин K.M. Фармакологическая регуляция жидкого состояния крови. / К.М.Лакин, В.П.Балуда // Актуальные проблемы гемостазиологии. М.: Наука, 1981.-С. 430-460.
128. Леонтьев И.А. Перекисное окисление липидов и содержание катионных белков при лечении хронического уретрогенного простатита лазеромагнит-ноэлектростимуляцией: Автореф. дисс. . к.м.н. Тюмень. - 2006. - 22.
129. Лернер Е.Л. Данные о применении аскорбиновой кислоты и некоторых гормональных препаратов при перенашивании беременности /Е.Л.Лернер // Научная сессия по нервной регуляции эндокринных желез. Харьков. 1952. -С.58-60
130. Ливанов A.B. Материалы к вопросу о влиянии тромбокиназы на коллатеральное кровообращение в связи с общим её действием на организм /А.В.Ливанов // Дис. докт. Санкт-Петербург. - 1912. - 278 с
131. Лукьянова Е.М. Витамины в педиатрии / Е.М.Лукьянова, М.Л.Та-раховский, М.Ф.Денисова и др. // Киев: Здоров'я. 1984. - 127 с
132. Лычковский М.Л. Материалы к вопросу о гемофилии. Дис. докт. — 1911. Санкт-Петербург. — 311 с
133. Лютова Л.В. Влияние витаминов С и Р на состояние противосверты-вающей системы: Автореф. дис. к.б.н. М,- 1971.- 22 с
134. Максимович Я.Б. О неспецифической активности никотиновой кислоты: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Львов. - 1949. - 22 с
135. Малкин З.И. О фармакодинамическом и терапевтическом действии никотиновой кислоты / З.И.Малкин, С.И.Щербатенко, Л.А.Лушникова // Тер. архив. 1948. . - 20. . - 6. - С. 62-74
136. Мартинсон Э.Э. Антагонистическое влияние каротина и аскорбиновой кислоты на катепсин / Э.Э.Мартинсон, Л.П.Соколова // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1937. - 4. - 5. - С. 444-445
137. Мартынюк В.З. Мероприятия по устранению поступления окиси углерода в воздушную среду и профилактика оксиуглеродных интоксикаций /В.З.Мартынюк // Сб. научн. работ Львовского мед. института. 1957. т. 16. -С. 153-158 З.А.
138. Материалы ВОЗ: Свинец, 1980
139. Матейкович Е.А. Влияние половых стероидов (этинилэстрадиола и ле-воноргестрела) на взаимодействие тромбин-фибриноген в кровотоке: Авто-рефер. дисс. к. м. н. Тюмень. - 2006. - 21 с.
140. Махмудбекова Э.Ш. Результаты лечения коронарной недостаточности витаминами В^, В12 и никотиновой кислотой / Э.Ш.Махмудбекова // Матер. 2-й научной сессии Азербайджанского института эксперим. и клинич. Медицины. АМН СССР. Баку. 1964. - С. 94-95
141. Меерзон Т.И. О влиянии аскорбиновой кислоты на липазу и эстеразу / Т.И.Меерзон // Эксперим. Медицина. 1940. - 2. - С. 1-6
142. Меныпиков Ф.К. Об эритропоэтической1 функции костного мозга при экспериментальном авитаминозе С / Ф.К.Меньшиков // Сб. новостей НИИП. -1938.-С.17-29
143. Мережинский М.Ф. Механизм действия и биологическая роль витаминов / М.Ф.Мережинский // Минск. 1959. - 193 с
144. Мирер В.И. (цитируется по А.Ш.Бышевскому, 1978)
145. Миронова К.А. Влияние витамина С и Р на некоторые факторы свертывания крови и резистентность сосудистой стенки при ревматических поражениях сердечно-сосудистой системы / К.А.Миронова // В кн. Ревматизм. -Одесса. 1961. - С. 270-272
146. Мищенко В.П. Перекисное окисление липидов, антиоксиданты и свертываемость крови / В.П.Мищенко // Актуальные проблемы гемостазиологии. М.: Наука. - 1981. - С. 153-157.
147. Мищенко В.П. Перекисное окисление липидов, антиоксиданты и гемостаз /В.П.Мищенко, И.В.Мищенко, О.И.Цебржинский // Полтава: АСМИ (Украина). 2005. - 159 с
148. Мкртумян A.M. Влияние Компливита на гемокоагуляционные сдвиги, ПОЛ, содержание молекул средней массы и свободных аминокислот в плазме крови при воздействии свинца: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Челябинск, 1994. - 22 с.
149. Могилев И.В. К вопросу об обмене витамина С при маточных кровотечениях / И.В.Могилев // Акушерство и гинеколог. 1937. - 12. - С.26-31
150. Момот А.П. Методика и клиническое значение паракоагуляционного фенантролинового теста / А.П.Момот, В.А.Елыкомов, З.С.Баркаган Клин, ла-бор. Диагностика. 1999. - 4. - С. 17-20- 4. - С.17-20
151. Мецлер Д. Биохимия / Д.Мецлер // М.: Мир. 1980. - т. И. С 606
152. Миневцев C.B. Влияние витаминов А, Е, С и Р на липидпероксидацию, плазменное содержание маркеров взаимодействия тромбин-фибриноген и толерантность к тромбину: Автореф. дис. . к.м.н. Тюмень, 2006. - 24 с
153. Мирер В.И. (цитируется по А.Ш.Бышевскому, 1978)
154. Мясников A.JI. Витамин С и его роль в физиологии и терапии /А.Л.Мясников // Сб. новостей НИИП. 1938. - С. 5-11
155. Мясников А.Л. Витамин С и его роль в физиологии, патологии и терапии / А.Л.Мясников // В кн. Изучение витамина С в Сибири. 1938. - 2. - С. 516
156. Натансон А.О. Витамин А и А-витаминная недостаточность /А.О.Натансон // М.: Медгиз. 1961. - 278 с
157. Нелаева Ю.В. Влияние а-липоевой кислоты на коагуляционный компонент гемостаза у больных сахарным диабетом I типа / Ю.В.Нелаева, Л.В.Сун-цова, A.A. Нелаева // Научн. вестник ТГМА. 2003. - 1. - С. 59-60
158. Нестеров B.C. Лечение никотиновой кислотой коронарной болезни и бронхиальной астмы / В.С.Нестеров // Клин. мед. 1948. - 26. - 4. - С.72-74
159. Нижегородов В.М. Влияние аскорбиновой кислоты на течение карбок-ситоксикоза /В.М.Нижегородов // Диссертация. Львов. - 1958. - 217 с
160. Никитин Ю.И. Влияние витамина Е на липоиды и свертываемость крови у больных атеросклерозом /Ю.И. Никитин // Вопросы питания. 1962 а. -6. - С. 22-26
161. Никитин Ю.И. Патология кровообращения и дыхания / Ю.И. Никитин // -Кемерово.-1962 б.-т. 1.-С. 130-134
162. Павлова Н. Влияние гипергомоцистеинемии на функциональную активность тромбоцитов крыс на фоне стресса / Н.Павлова, С.М.Алисиевич, Е.П.Романова и др. / Международный конгресс «Тромбоз, гемостаз, патология сосудов». — Санкт-Петербург. 2004. — С.102
163. Папаян Л.П. Современное представление о механизме регуляции свертывания крови / Тромбоз, гемостаз и реология. 2003. — 2 (14). - С. 7-11
164. Пашутин В.В. Курс общей патологии /В.В.Пашутин // СПб. 1902. - т. 2. 857 с
165. Певзнер М.И. Значение витаминов в лечебном питании / М.И. Певзнер // Труды Всесоюзной конференции по витаминам. — М. — 1940. С.29-33
166. Певзнер С.Д. Картина крови при авитаминозах С / С.Д. Певзнер // Мед. ж. БССР. 1939. - 5-6-. - С. 60-63
167. Писаревский H.H. Свертывание крови при С-авитаминозе / Н.Н.Пи-саревский // Русская клиника. 1924. - 6. - С.409-417
168. Полякова В.А. Гемокоагуляционные сдвиги у больных фибромиомой матки и их коррекция комплексом витаминов А, Е, С, Р и РР / В.А.Полякова,, В.Н.Кожевников, Т.А.Фильгус и др. // Метод, рекомендации для врачей акушеров-гинекологов. -Тюмень. — 1994 а. 11 с
169. Полякова В.А. Патогенетическое обоснование применения антиокси-дантов для профилактики тромбогеморрагических нарушений при беременности, родах, в послеродовом и послеоперационном периодах: Автореф. дисс. докт. мед. наук. Москва. - 1994 б. - 43 с.
170. Полякова В.А Фармакологическая реабилитация после медицинского аборта / В.А.Полякова, И.А.Карпова, Е.А.Винокурова и др. // International Journal on immunoreabilitatio. 2004. -6. — 1. - P. 110
171. Полякова В.А. Неспецифическая коррекция изменений гемостаза призаболеваниях, сопровождающихся активацией перекисного окисления липи-дов / В.А.Полякова, И.А.Карпова, С.В.Миневцев и др. // Медицинская наука и образование Урала. 2005. - 39 (5). - С.56-56
172. Полякова В.А. Современные аспекты оперативного лечения больных миомой матки. / В.А. Полякова, Е.А. Винокурова, Н.Б. Баклаева и др. // Матер. VI Российского форума «Мать и дитя». М. - 2008. — С. 74
173. Полякова В.А. Способ профилактики гемостазиологических сдвигов при обширных операциях на матке селмевитом / В.А. Полякова, А.Ш. Бы-шевский, Н.Б. Баклаева и др. // Рационализаторское предложение. Тюмень, 2004 а.
174. Попандопуло П.Х. Витаминный состав кормов. — М.: Сельхозгиз, 1949. -129 с
175. Попова И.Е. Перекисное окисление липидов в плазме и тромбоцитах при тиреотоксикозе, влияние селмевита / И.Е.Попова, И.А.Мухачева // Матер. Междун. симпозиума «Медицина и охрана здоровья-98» Тюмень, 1998. -С. 393-394
176. Пустынников A.B. Витамин А: влияние на интенсивность взаимодействия тромбин-фибриноген, толерантность к тромбину и ф.ХП-зависимый фибринолиз / А.В Пустынников // Медицинская наука и образование Урала. — 2007 б. 4. - С.8.
177. Пушкина Н.П. Содержание аскорбиновой кислоты у отдельных групппромышленных рабочих /Н.П.Пушкина // Гигиена труда и профессиональных заболеваний. 1959. - 4. - С. 44-45
178. Пэр Ф.Л. Влияние С-авитаминоза на содержание тирозина и триптофана в некоторых органах морской свинки /Ф.Л.Пэр // В кн. Вопросы питания. -Рига. 1952. - 1. - С.77-82
179. Ратнер P.A. Значение исследования липидов в изучении свертываемости крови для профилактики и лечения инфарктов миокарда / Р.А.Ратнер, Е.Ф.Тартаковская, М.Г.Осипенкова и др. // В кн. "Атеросклероз"
180. Ребров В.Г. Витамины и микроэлементы / В.Г.Ребров, О.А.Громов // М.: Алев-В. 2003. - 648 с
181. Рейхерт Л.И. Состояние мембранно-дестабилизирующих процессов и их коррекция при мозговых инсультах: Автореф. дисс. . д.м.н. Казань. -1999. - 41 с
182. Репина М.А. Системная энзимотерпия в акушерстве и гинекологии. С-Петербург, 1996. - 42 с.
183. Рубинштейн Б.И. Аскорбиновая кислота в клинике внутренних болезней /Б.И.Рубинштейн, Е.В.Лебедева // Тр. Всесоюзной конф. по витаминам. -М.- 1940. С. 219-223
184. Рубинштейн Б.И. Аскорбиновая кислота в клинике внутренних болезней /Б.И.Рубинштейн, Е.В.Лебедева // Тр. Всесоюзной конф. по витаминам. -М. 1940. С. 219-223
185. Ругая А.Е. Влияние витамина Е на уровень общего холестерина и липо-протеинов крови у больных атеросклерозом / А.Е.Ругая // Сб. научн. работ 2-й Рижской горбольницы. Рига. — 1962. 2. - С. 131-133
186. Рудницкая Т.А. Частота, значимость и коррекция гипергомоцистеине-мии при сахарном диабете 2 типа: Автореферат дисс. . к.м.н. / Барнаул. -2003.-22 с
187. Рысс С.М. Витамины /С.М.Рысс // М.: Медгиз. 1955. - 312 с
188. Рысс С.М. Витамины и их роль во внутренней патологии / С.М.Рысс // 4-я научн. сессия НИИвитаминологии. М. - 1961. - С. 108-109
189. Рябцева З.А. Применение аскорбиновой кислоты в комплексе мероприятий по борьбе с перегревом рабочих горячих цехов /З.А.Рябцева // Диссертация. Горький. - 1954. 224 с
190. Савинов Б.Г. Каротин /Б.Г.Савинов // Киев: АН УССР. 1948. - 131 с
191. Салтыкова Н.Б. Гипергомоцистеинемия и атеротромботические заболевания артерий нижних конечностей / Н.Б.Салтыкова, В.Д.Каргин, А.А.Гуржий // Вестник гематологии. 2007. - т. 3. - 2. - С. 80-81
192. Самойленко И.И. О механизме повышения свертываемости крови у собак при внутривенном введении адреналина /И.И.Самойленко// Бюлл. экспе-рим. биол. и мед. 1962. - 12. - С.29-31
193. Серов В.Н. Практическое акушерство/ В.Н.Серов, А.Н.Стрижаков, С.А.Маркин Руководство для врачей // М.: Медицина, 1989.- 511 с.
194. Скворцов В.И Тромбозы и эмболии / В.И Скворцов // Труды МОНИКИ. -М.- 1951. -в. 5. -С. 70-72
195. Скипетров В.П. Резервы системы свертывания крови и фибринолиза /В.П. Скипетров // Тромбоз, кровоточивость и болезни сосудов. — 2002. 1. -С.113-114
196. Смирнов М.И. (редактор) Витамины // М.Медицина. 1974. - 495 с
197. Соболева Е.Г. Частота, клиническая значимость и маркеры ДВС-синдрома при инфекционном эндокардите у детей / Е.Г.Соболева, А.В.Чуп-рова, А.В.Соболева и др. // Тромбоз, гемостаз и реология. 2003. — 1. — С. 3136
198. Согрин Э.Н. Гемостаз и липопероксидация при аденоме простаты / Э.Н.Согрин // В кн. Перспективы развития амбулаторно-поликлинической помощи в Тюмени Тюмень: Академия. — 2004. - С.-48-49.
199. Согрин Э.Н. Гемостаз и липопероксидация при аденоме простаты / Э.Н. Согрин // Продукты взаимодействия тромбин-фибриноген и перекисного окисление липидов при аденоме предстательной железы: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Тюмень. 2005. — 22 с
200. Согрин Э.Н. Продукты взаимодействия тромбин-фибриноген и перекисного окисление липидов при аденоме предстательной железы: Автореф. дисс. . канд. биол. наук. Тюмень. — 2005. — 22 с
201. Сойбель Б.И. Влияние никотиновой кислоты на течение гипертонической болезни у больных с нарушениями венечного кровообращения / Б.И.Сойбель // Матер, научн. сессии ВНИИВ. М. - 1967. - С.158-159
202. Сойбель Б.И. Применение никотиновой кислоты при лечении больных коронарным атеросклерозом с нарушением венечного кровообращения / Б.И.Сойбель // Матер. 15 научн. сессии Института питания АМН СССР. М. - 1964.- 1. -С.25
203. Сойбель Б.И.Значение никотиновой кислоты для борьбы с преждевременным старением организма и лечения атеросклероза с нарушениями венечного кровообращения / Б.И.Сойбель // Вопросы геронтологии и гериатрии. Л. -1962. С.215-22
204. Соловьев В.Г. Роль тромбоцитов, эритроцитов и сосудистой стенки в регуляции тромбинемии: Автореф. дисс. д. м. н. Челябинск, 1997.- 44 с
205. Соловьева A.B. Коррекция нарушений тромбоцитарного звена гемостаза витаминами-антиоксидантами и аспирином у беременных с поздним гес-тозом: Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Уфа, 1999. -23 с
206. Соломко Г.И. Состояние обеспеченности организма пожилых людей никотиновой кислотой / Г.И.Соломко // Современные вопросы геронтологии и гериартрии (матер. 1-й Закавказской научн. конф.). Тбилиси. - 1965. -С.131-133
207. Спиричев В.Б. Врожденные нарушения обмена витаминов / В.Б.Спи-ричев, Ю.И.Барашнев //М.: Медицина. 1977. -216 с
208. Спиричев В.Б. Сколько витаминов человеку нужно /В.Б.Спиричев // М.: Медицина. 1977. 216 с.
209. Страчицкий К.И. Действие аскорбиновой кислоты на инвертазу / К.И.Страчицкий //Биохимия. 1940. - 5.- 2. - С. 181-186
210. Субботина Т.Н. Перекисное окисление липидов и состояние анти-оксидантной системы крови у детей и подростков с инсулинзависимым сахарным диабетом: Автореф. дисс. . к. б. н. Тюмень. - 2003. 26 с
211. Сулкарнаева Г.А. Комплексный антиоксидант селмевит в коррекции нарушений свертывания крови при диффузном токсическом зобе / Г.А.Сулкарнаева // Аллергология и иммунология. 2004 а. - 5. - 3. - С. 505506.
212. Сулкарнаева Г.А. Непрерывное внутрисосудистое свертывание крови и липопероксидация при некоторых нарушениях функции щитовидной железы / Г.А.Сулкарнаева // Успехи современного естествознания. 2004 б. - 6. - С. 76-76
213. Узбеков Г.А. Влияние аскорбиновой кислоты на газовый обмен /Г.А.Узбеков // Тез. докл. на 10-й научной сессии ставропольского медицинского института. Ставрополь. - 1950. - С.10-11.
214. Умутбаева М.К. О связи между постоянным внутрисосудистым свертыванием крови и липопероксидацией / М.К.Умутбаева // Успехи современного естествознания (М.). — 2004. 2. — С. 37
215. Умутбаева М.К. Связь липопероксидации с гемостазом / М.К.Умутбаева // Глава в кн. «Связь гемостаза с перекисным окислением липидов». М.: Медицинская книга. 2003. - С. 41-50
216. Урбанюк К.Г. Свертываемость крови при атеросклерозе / К.Г.Урбанюк // Клин, медицина. 1961. - 5. С.44-48
217. Урбанюк К.Г. Никотиновая кислота в диагностике предтромботических состояний / К.Г.Урбанюк // Вопр. мед. химии. — 1962. — 1. — 298-303
218. Устинова A.A. Влияние хронического гамма-облучения, на перекисное окисление липидов в крови мышей / А.А.Устинова, В.Е. Рябинин // Матер, конф. "Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии». — Челябинск. 1999. - С. 279-281
219. Ушкалова В.Н. Комплексный анализ липидов крови спектрофотомет-рическим, флуорометрическим и кинетическим методами / В.Н.Ушкапова, Н.В.Иоанидис З.М.Деева и др. // Лаб. дело. 1987. - 6. - С. 446-460.
220. Фатеев A.B. Влияние комбинации анестетиков на состояние липид-пероксидации крови у больных ИБСС при оперативном лечении: Автореф. дис. к.м.н. Тюмень. - 2006. - 22 с
221. Хритинина K.M. Коэффициент протеолиза тканей и органов при экспериментальном скорбуте у морских свинок / К.М Хритинина // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1942. - 14. - 2. - С. 32-26
222. Цейтлин Л.А. Никотинамидные коферменты / Л.А.Цейтлин // Успехи биологической химии. М.: Наука. - 1987. - т. VIII. - С. 249-277
223. Черкес Л.А. Влияние никотиновой кислоты на свертываемость крови /Л.А.Черкес, Г.А.Черкес, А.Н.Бриль / Бюлл. зксперим. биол. и мед. 1942. - в. 5-6.- 11-12.-С. 50-53
224. Черкес Л.А. Влияние никотиновой кислоты на свертываемость крови / Л.А.Черкес, Г.А.Шегун // Рефераты научно-исследовательских работ за 1946 г. М.: АМН СССР. - 1947. - С.17-18
225. Чернова А.Л. Состояние гемостаза при лапароскопическимх гинекологических операциях: Автореф. дис. . к.м.н. Тюмень. - 2004. - 24 с
226. Шаповалов П.Я. Связь между влиянием витаминов на гемостаз и их ан-тиоксидантной активностью / П.Я.Шаповалов, Г.А.Сулкарнаева С.В.Миневцев и др. // Медицинская наука и образование Урала. 2005.
227. Шараев П.Н. Витамины и здоровье / П.Н. Шараев // Ижевск: «Экспертиза». 2004. - 108 с
228. Шафер В.М. Коррекция гемокоагуляционных сдвигов при экспериментальной тромбопластинемии комплексом витаминов А.Е.С.Р и РР: Автореф. дисс. . к.м.н. Челябинск. - 1989. - 23 с
229. Шевченко B.C. Влияние галаскорбина на свертывающую и антисверты-вающую системы крови у больных острым холециститом / В.С.Шевченко // Система свертывания крови и фибринолиз. Киев. - 1969. - С.445-446
230. Шершевский М.Г. Влияние никотиновой кислоты на фибринолити-ческую активность при атеросклерозе / М.Г.Шершевский // Кардиол. 1963. -1.- С.64-67.
231. Шидин C.B. Влияние витамина Е на интенсивность взаимодействия тромбин-фибриноген, толерантность к тромбину и липидпероксидацию (экспериментальное исследование): Автореф. . к.м.н. Тюмень. — 2007. — 22 с
232. Шитикова A.C. Тромбоцитарный гемостаз / А.С.Шитикова // Санкт-Петербург. 2000. - 222 с
233. Шмелева В.М. Взаимодействие гипергомоцистеинемии с детерминантами наследственной тромбофилии у пациентов с венозными тромбозами / В.М.Шмелева, С.И.Капустина, Н.Б.Салтыкова им др. // Вестник гематологии. -2007.-т. 3.-2.-С. 85-85
234. Шмидт A.A. Аскорбиновая кислота, её природа и значение в живом организме / А.А.Шмидт // M.-JL. 1941. - 213 с
235. Штенберг А.И. Химический состав пищевых продуктов / А.И.Штенберг //М.: Медгиз. 1960. - 671 с
236. Эристави З.А. О тромбообразовании у родильниц с пороками сердца и профилактика тромбозов никотиновой кислотой / З.А.Эристави // Кардиология. 1968. - 3. - С. 54-57
237. Эффендиев Ф.А. Изменения факторов свертывающей системы крови и фибринолитической активности при лейкозах / Ф.А. Эффендиев, М.М.Абду-лаев, Е.Б.Бахшиева // Проблемы гематологии и переливания крови. 1961. -10. - С. 19-22
238. Юдицкая В.И. Влияние никотиновой кислоты на свертывание крови человека / В.И. Юдицкая // Здравоохранение Белоруссии. 1957. — 3. - С. 48-48
239. Ядрова В.М. О влиянии различных доз аскорбиновой кислоты на свертываемость крови /В.М.Ядрова // В кн. Фармакотерапия при нарушениях свертывающей системы крови / В.МДдрова // Краснодар: Кубанский мед. инт.- 1960. -С 98-104
240. Яковлев H.H. Значение повышенного содержания витамина С в пище для эффективности тренировки мышц /Н.Н.Яковлев // Физиол. Журн. СССР.-1951.-1.- С. 384-390
241. Ярошевский А.Я. Свертывающая и антисвертывающая система крови и воздействия на неё при нарушении венечного кровообращения / А.Я.Яро-шевский, Е.К .Жаворонкова// Тер. Архив. 1964. - 1. - С. 36-42
242. Abiaka С. Serum micronutrient and micromineral concentrations and ratios in healthy Omani subjects / C. Abiaka, M.Al-Tobi, R. Joshi // Med. Princ. Pract. -2008.- 17(4). — P.334-339.
243. Abularrage С J. Effect of folic acid and vitamins B<; and B12 on microcircula-tory vasoreactivity in patients with hyperhomocysteinemia / CJ.Abularrage, A.N.Sidawy, P.WW e.a. // Vase. Endovascular. Surg. 2007. - 41(4). - P.339-345.
244. Alberts B. Molekular Biology of the Cells / B.Alberts, B.Dennis, J.Lewis e.a. //N.-London: Garland Publishing, Inc. 1990. - t. II. - P.431
245. Alevizos A.G. Dietary intake in immigrant Arabian pregnant women/ A.G.Alevizos, K.N.Stamatiou, R.E.Lacroix e.a. // Saudi. Med. J. 2006. - 27. - 7. -P.1019-1921.
246. AH B.H. Agents ameliorating or augmenting experimental gentamicin nephrotoxicity: some recent research / B.H.Ali // Food Chem. Toxicol.- 2003. 41. - 11.- P.1447-1452.
247. Allman-Farinelli M.A. Diet and aging: bearing on thrombosis and hemostasis / M.A.Allman-Farinelli, B.Dawson // Semin. Thromb. Hemost. 2005. - 31(1). -111-117
248. Alvaro L.C., Neurological disorders in the narrative works of Benito Pérez Galdós /L.C.Alvaro, A.Martín del Burgo // Neurologia. 2007. - 22(5). - P.292-300
249. Ambroszkiewicz J. Serum homocysteine, folate, vitamin В12 and total antioxidant status in vegetarian children / J.Ambroszkiewicz, W.Klemarczyk, M.Chel-chowska e.a. // Adv. Med. Sci. 2006. - 51. - P.265-268.
250. Amery A. Enhancing blood fibrinilytic activity by niacin compound. IILStudy of the activation mechanism / A.Amery, J.Vermilen, M.Verstraete // Scand. J. Haematol. 1966. - 3. - 1. - P.76-84
251. Ananth C.V. Associations between 2 polymorphisms in the methylenetet-rahydrofolate reductase gene and placental abruption / C.V.Ananth, M.R.Peltier, C.De Marco e.a. // Am. J. Obstet. Gynecol. 2007. - 197(4). - P.385.
252. Antoniades E. Effects of antioxidant vitamins C and E on endothelial function and thrombosis/fibrinolysis system in smokers. E.Antoniades, D.Tousoulis, C.Tentolouris e.a. / Thromb. Haemost. 2003. - 89(6). - P.990-995.
253. Ariga T. The antioxidative function, preventive action on disease and utilization of proanthocyanidins / T.Ariga // Biofactors. 2004. -21.- 1-4. P. 197-201.
254. Astuya A. Vitamin C uptake and recycling among normal and tumor cells from the central nervous system / A.Astuya, T.Caprile, M.Castro e.a. // J. Neurosci. Res. 2005. - 1-15. - 79. - (1-2). - P.146-156.
255. Baer S. The use of vitamin E heart disease / S.Baer, WJ. Heine // Am. J. med. Sci. 1945. - 215. - P. 543-547
256. Barkchan P. Soma blood coagulation studies in normal and scorbuties guinea-pigs / P.Barkchan, A.N.Howard // Brit. J. nutr. 1959. - 13. - 4. - P. 389400
257. Basu S. Factors regulating isoprostane formation in vivo / S.Basu, J.Helmersson // Antioxid Redox Signal. 2005. - 7. - 1-2. - P.221-235.
258. Berns J.S. Niacin and Related Compounds for Treating Hyperphosphatemia in Dialysis Patients /J.S.Berns // Semin. Dial. 2008. - 18. - Epub ahead of print.
259. Bermejo L.M.The influence of fruit and vegetable intake on the nutritional status and plasma homocysteine levels of institutionalised elderly people /
260. M.Bermejo, A.Aparicio, P. e.a. // Public. Health. Nutr. 2007. - 10(3). - P.266-272.
261. Biagini M.R Hyperhomocysteinemia and hypercoagulability in primary biliary cirrhosis / M.R Biagini, A. Tozzi, R.Marcucci e.a. // World J. Gastroenterol. -2006. 14. - 12(10). - P.1607-1612
262. Blinc A. Pharmacological prevention of atherothrombotic events in patients with peripheral arterial disease / A.Blinc, P.Poredos // Eur. J. Clin. Invest. 2007. - 37 (3). - P.157-164.
263. Block G.Usage patterns, health, and nutritional status of long-term multiple dietary supplement users: a cross-sectional study / G.Block, C.D.Jensen, E.P. e.a. // Nutr. J. 2007. 24. - 6. -30
264. Bondevik G.T. Homocysteine and methylmalonic acid levels in pregnant Nepali women. Should cobalamin supplementation be considered?/ G.T.Bondevik, J.Schneede, R.Refsum e.a. // Eur. J. Clin. Nutr. 2001. - 55(10). - P.856-864.
265. Bottiglioni E. Influenca esplicata, delle vitamiina E sullattivita epariniica del plasma in vivo; studio clinico / E.Bottiglioni, C. Facchini // Clin. Terap. 1956. -10.-5.-P. 571-561
266. Brandao R. Antioxidants and metallothionein levels in mercury-treated mice / R.Brandao, F.W.Santos, M.Farina e.a. // Cell. Biol. Toxicol. 2006. - 22. - 6. -P. 429-438.
267. Bulger E,M. Intracellular antioxidant activity is necessary to modulate the macrophage response to endotoxin / E.M. Bulger, I.Garcia, R.V.Maier // Shock. -2002.- 18(1).-P.58-63
268. Byshevsky A.Sh. Antioxidant complex selmevit in hemostasis correction at some uterine surgeries (report III) / A.Sh.Byshevsky, S.L.Galyan, I.V.Zvereva e.a. // European J. of natural-history. 20086. 3. - P. 10-15
269. Byshevsky A.Sh. Plazmatic level of thrombin-fibrinogen interaction markers is connected with lipid peroxidation in thrombocytes /A.Sh. Byshevsky, S.L.Galyan, I.V.Zvereva e.a. // European J. experimental education. 2008a. - 3. -p. 22-27
270. Byshevsky A.S. The connection between lipid peroxidation and thrombin-fibrinogen interaction / A.S.Byshevsky, A.Y.Rudzevich . A.V. Shidin e.a. / European J. of Natural History // 2007. -2. P.35-42
271. Buehler P.W. Redox biology of blood revisited: the role of red blood cells in maintaining circulatory reductive capacity / P.W.Buehler, A.I.Alayash // Antioxid. Redox. Signal. 2005. -7.- 11-12. - P.1755-1760
272. Burton G.W. Vitamin E: Application of the principles of phisical organic chemistry to the exploration of oils structure and function / G.W.Burton, K.U. In-gold// Ass. Chem. Res.- 1986.- 195. 7.-P. 194-201.
273. Cakal B. Homocysteine and fibrinogen changes with L-thyroxine in subclinical hypothyroid patients / B.Cakal, E.Cakal, B.Demirbaç e.a. // J. Korean Med. Sei. 2007. - 22(3). - P.431-435.
274. Camera A. Sullempiego della vitamin B12 in alcuni emofilici / A.Camera, E.Baffi // Boll.soc. ital. Sperim. 1955. - 31. - 6. - P. 612-614
275. Campbell J.K,Tomato phytochemicals and prostate cancer risk / J.K Campbell, K. Canene-Adams, B.L.Lindshield e.a. J. Nutr. 2004. - 134. - 12 (Suppl). - 3486S-3492S.
276. Cannon C.P. Combination therapy in the management of mixed dyslipidae-mia/ C.P. Cannon // J. Intern. Med. 2008. - 263. - 4. - P.353-365.
277. Carcamo J.M. Vitamin C enters mitochondria via facilitative glucose transporter 1 (Gluti) and confers mitochondrial protection against oxidative injury /J.M.Carcamo, D.W.Golde // FASEB J. 2005. - 19. - 12. - P. 1657
278. Casanueva E. Possible interplay between vitamin C deficiency and prolactin in pregnant women with premature rupture of membranes: facts and hypothesis / E.Casanueva, C.Ripoll, C.Meza-Camacho e.a. // Med. Hypotheses. 2005. - 64(2). — P.241-247.
279. Cella G. Tissue factor pathway inhibitor levels in patients with homocystinu-ria / G.Cella, A.Burlina, A.Sbarai e.a. // Thromb Res. 2000. - 1. - 98(5). - P.375-381.
280. Cetin O. Hyperhomocysteinemia in chronic renal failure patients: relation to tissue factor and platelet aggregation /O.Cetin, S.Bekpinar, Y.Unlucerci e.a. // Clin. Nephrol. 2006. - 65(2). - P.97-102.
281. Chattopadhyay S. Apoptosis and necrosis in developing brain cells due to arsenic toxicity and protection with antioxidants / Chattopadhyay S, Bhaumik S, Purkayastha M. e.a. // Toxicol. Lett. 2002. - 15. - 136. - 1. - P.65-76.
282. Chen P.R. Sesamol regulates plasminogen activator gene expression in cultured endothelial cells: a potential effect on the fibrinolytic system. P.R.Chen, C. C.Lee, H.Chang e.a. // J. Nutr. Biochem. 2005. - 16(1). - P.59-64.
283. Chen C.W. Total cardiovascular risk profile of Taiwanese vegetarians /C.W.Chen, Y.L.Lin, T.K.Lin e.a. // Eur. J. Clin. Nutr. 2007. - Epub ahead of print.
284. Chen W.H. Hyperhomocysteinemia relates to the subtype of antiphosphol-ipid antibodies in non-SLE patients /W.H.Chen, H.S.Lin, Y.F.Kao e.a. / / Clin. Appl. Thromb. Hemost. 2007. - 13(4). - P. 398-403
285. Cherubini A. Potential markers of oxidative stress in stroke / A.Cherubini, C.Ruggiero, M.C.Polidori, P.Mecocci // Free Radic. Biol. Med. 2005. - 1. - 39. -7. - P.841-852.
286. Ciocoiu M. The intervention of antioxidant therapy on platelet adhesion andimmunomodulation in experimental physical stress' /'M.Ciocoiu, M.M.Badescu, E.C.Lupusoru EC.// Free Radie. Res. 2007. - ;41(7). - P.829-838.
287. Claus R.A. Role of increased sphingomyelinase activity in apoptosis and organ failure of patients with severe sepsis / R.A. Claus, A.C.Bunck, C.L.Bockmeyer e.a. // FASEB J. 2005. - 19. - 12. - P.1719-1721.
288. Chekalina S.I. Use of nicotinic acid and midocalm for correcting blood coagulation in patients with radiation edema of the extremities S.I.Chekalina, L.I.Gu-seva, M.S.Bardyechev // Med. Radiol. (Mosk). 1985. - 30(8). - P. 28-30.
289. Chenel C. Neonatal hemolytic-uremic syndrome, methylmalonic aciduria and homocystinuria caused by intracellular vitamin B12 deficiency. Value of etiological diagnosis / C.Chenel, C.Wood, E.Gourrier e.a. // Arch. Fr. Pediatr. 1993. -50(9). - P.749-754
290. Cheng G. Relationship between endothelial dysfunction, oxidant stress and aspirin resistance in patients with stable coronary heart disease /G.Cheng, J.Shan, G.Xu e.a. // J. Clin. Pharm. Ther. 2007. - 32(3). - P.287-292
291. Cheng M.L. Effect of acute myocardial infarction on erythrocytic glutathione peroxidase 1 activity and plasma vitamin e levels / M.L.Cheng, C.M.Chen, H.Y.Ho e.a. / Am. J. Cardiol. 2009. - 15. - 103(4). - P.471-475.
292. Codoñer-Franch P. Mandarin juice improves the antioxidant status of hyper-cholesterolemic children / P.Codoñer-Franch, A.B.López-Jaén, P.Muñiz e.a., Sen-tandreu E, Bellés W. // J.Pediatr.Gastroenterol. Nutr. 2008. - 47(3). - P.349-355.
293. Cooper M.J. The iron status of Canadian adolescents and adults: current knowledge and practical implications / M.J.Cooper, K.A.Cockell, M.R.L'Abbe / / Can. J. Diet. Pract. Res. 2006. - Autumn. - 67. - 3. - P.130-138.
294. Corti R Fenofibrate induces plaque regression in hypercholesterolemic atherosclerotic rabbits: in vivo demonstration by high-resolution MRI / R. Corti , J. Osende , R. Hutter e.a. // Atherosclerosis. 2007. - 190(1). - P. 106-113.
295. Cotti L. Uber den Einfluss der Ascorbinsoure auf Blutgerrinung / L.Cotti, P.Larizza // Klin.Wochenschr. 1936. - 15. - S.227-231
296. Creeke P.I.Whole blood NAD and NADP concentrations are not depressed in subjects with clinical pellagra / P.I.Creeke, F.Dibari, E.Cheung e.a. // J. Nutr. -2007. 137(9). - P. 2013-2017.
297. Dam H. Uneffectivenes of vitamin E in preventing cholesterol deposition in aorta / H. Dam // J.Nutrition. 1944. - 28. - 289-285
298. Dabkowski E.R. Diabetic cardiomyopathy-associated dysfunction in spatially distinct mitochondrial subpopulations / D.E.Dabkowsk, C.L. Williamson,V.C. Bukowski VC e.a.// Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2009. - 296(2). - S.359-369
299. Darvay A. Isoniazid induced pellagra despite pyridoxine supplementation / A.Darvay, T.Basarab, J.M.McGregor, R.Russell-Jones / Clin. Exp. Dermatol. -1999 24(3).-P. 167-169
300. Daui G. Enhanced lipid peroxidation and platelet activation in the early phase of type 1 diabetes mellitus: role of interleukin-6 and disease duration / G.Daui F.Chiarelli, F.Santilli e.a. // Circulation. 2003. - 107. - P. 3199-3203
301. Derbeneva S.A. Homocysteine as a coronary risk factor / S.A. Derbeneva, A.V.Pogozheva //Vopr. Pitan. 2003. - 72(5). - P.43-48
302. De Moerloose P. Should neurologists measure D-dimer concentrations? / De P.Moerloose, F. Boehlen // Lancet Neurol. 2003. - 2. - P. 77
303. Desai A. Development of atherosclerosis in Balb/c apolipoprotein E-deficient mice /A.Desai, Y.Zhao, J.S.Warren// Cardiovasc. Pathol. 2008. - 17(4). -P.233-140.
304. De Vecchi A.F. Homocysteine, vitamin B12, and serum and erythrocyte folate in peritoneal dialysis and hemodialysis patients / A.F .De Vecchi, F.Bamonti-Catena, S.Finazzi e.a. // Clin Nephrol. 2006. - 65(2). - P.97-102
305. Dimopoulos N. Association of cognitive impairment with plasma levels of folate, vitamin B12 and homocysteine in the elderly / N.Dimopoulos, C.Piperi, A.Salonicioti e.a. // In Vivo. 2006 20(6B). - P.895-899.
306. Dimopoulos N. Correlation of folate, vitamin B12 and homocysteine plasma levels with depression in an elderly Greek population / N.Dimopoulos, C.Piperi, A.Salonicioti e.a. // Clin. Biochem. 2007. - 40(9-10). - P.604-608.
307. Drobiova H. Garlic Increases Antioxidant Levels in Diabetic and Hypertensive Rats Determined by a Modified Peroxidase Method / H.Drobiova, M.A.Thomson, K.Al-Qattan e.a. // Evid Based Complement Alternat. Med. 2009. - 20 Epub ahead of print.
308. Duckerhoff H. e.a. Versuche der Deutung der Vitamiin C-Virkung bei Blutingen Parenchimatoser und hemophilien Art / H.Duckerhoff, W.H. Pretch // Ges.exp.med. 1940. - 107. -P.497-517
309. Durga J. Effect of 3-year folic acid supplementation on cognitive function in older adults in the FACIT trial: a randomised, double blind, controlled trial / Durga
310. J. van M.P.Boxtel, E.G. e.a. // Lancet. 2007. - 20. - 369(9557). - P. 208-216.
311. Dustin J.P. Aminaciduria in infacy an ascorbic-acid deficiency / J.P.Dustin,
312. D. Bigwood // Proc. Nutr. Soc. 1953. - 12. - 3. - P.293-299
313. Egashira Y. Dietary protein level and dietary interaction affect quinolinic acid concentration in rats / Y.Egashira, M.Sato, K.Saito, H.Sanada / Int. J. Vitam. Nutr. Res. 2007. - 77(2). - P. 142-148.
314. Egashira Y. Tryptophan-niacin metabolism in rat with puromycin aminonuc-leoside-induced nephrosis / Y.Egashira, S.Nagaki, H.Sanada // Int J. Vitam. Nutr. Res. 2006. - 76(1). - P.28-33.
315. Elsayed N.M. Interplay between high energy impulse noise (blast) and antioxidants in the lung / N.M.Elsayed, N.V.Gorbunov // Toxicology. 2003. - 15. -189.- 1-2. - P.63-74.
316. Engel RH. Oxidative stress and apoptosis: a new treatment paradigm in cancer / R.H.Engel, A.M.Evens // Front. Biosci. 2006. - 1. - 11. - P. 300-312.
317. Engin E, Treit D. The effects of intra-cerebral drug infusions on animals' unconditioned fear reactions: a systematic review / Engin E, D.Treit // Prog. Neuro-psychopharmacol. Biol. Psychiatry. 2008. - 1. - 32(6). -P.1399-1419
318. Erdogan Z. Effects of ascorbic acid on cadmium-induced oxidative stress and performance of broilers / Z.Erdogan, S.Erdogan, S.Celik, A.Unlu // Bio. Trace Elem. Res. 2005. - 104. - 1. - P. 19-32.
319. Evans I. (mrr. no EpeMeHep C.M., 1966. C. 338)363 .Fazio S. Management of mixed dyslipidemia in patients with or at risk for cardiovascular disease: A role for combination fibrate therapy / S.Fazio // Clin. Ther. -2008. 30(2). - P.294-306.
320. Feig J.E. Atheroprotective effects of HDL: beyond reverse cholesterol transport / J.E.Feig, R.Shamir, E.A.Fisher // Curr. Drug. Targets. 2008. - 9(3). - P. 196203.
321. Ferguson E.L. Can optimal combinations of local foods achieve the nutrient density of the F100 catch-up diet for severe malnutrition? / E.L.Ferguson A.Briend, N.Darmon // J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr. 2008. - 46(4). - P. 447452.
322. Fiore G, Capasso A. Effects of vitamin E and C on placental oxidative stress:an in vitro evidence for the potential therapeutic or prophylactic treatment of preeclampsia / G.Fiore, A.Capasso // Med. Chem. 2008. - 4(6). - P.526-5230.
323. Fletcher A.P. Abnormal plasminogen-plasmin system activity in pacients with hepatic cirrosis: Its cause and consequences / A.P. Fletcher, O.Biederman, D.Moor e.a. // J.Clin. Invest. 1964. - 43. - 4. - P.681-695
324. Flute P.T. e.a. (miT. no A.UI.EMiiieBCKOMy, 1978)
325. Freyburger G. Comparability of D-dimer assays in clinical samples / G.Freyburger, S.Labrouche // Semin. Vase. Med. 2005. - 5 (4). - P. 328-339.
326. Friso S. Oestrogen replacement therapy reduces total plasma homocysteine and enhances genomic DNA methylation in postmenopausal women / S.Friso, S.Lamon-Fava, H.Jang e.a. // Br. J. Nutr. -2007. 97(4). - P.617-621.
327. Fruchart J.C. The Residual Risk Reduction Initiative: a call to action to reduce residual vascular risk in patients with dyslipidemia /J.C. Fruchart, E.Sacks, M.P.Hermans e.a. / /Am. J. Cardiol. 2008. -102.- 10 Supp. - 1K-34K
328. Fukuwatari T. Effect of nicotinamide administration on the tryptophan-nicotinamide pathway in humans / T.Fukuwatari, K.Shibata //Int J Vitam. Nutr. Res. 2007. - 77(4). - P.255-262
329. Gacko M. Some components of oxidative-antioxidative system in human ; blood plasma and serum. M.Gacko, P.Radziwon, R.Kowalewski, e.a. // Rocz Akad. Med. Bialymst. 2004. - 49. - Suppl. 1. - P. 190-191.
330. Gan R. Vitamin C deficiency in a university teaching hospital./ R.Gan, S.Eintracht, L.I.Hoffer // J. Am. Coll. Nutr. -2008. 27(3). - P.428-433.
331. Gawaz M.P. Agglutination of izolated platelet membranes / M.P.Gawaz, I.Ott // Arterioscl. Thromb. Vase. Biol. 1996. - 16. - P. 621-627.
332. Gawaz M.P. Blood Platelets / M.P.Gawaz // Stuttg., New York: Time. -2001.-190 p.!
333. Geraghty M.T. Cobalamin C defect associated with hemolytic-uremic syndrome / M.T.Geraghty, E.J.Perlman, L.S. // J. Pediatr. 1992. - 120(6). - P.934-937.
334. Ghazi-Khansari Decreasing the oxidant stress from paraquat in isolated perfused rat lung using Captopril and niacin / M.Ghazi-Khansari, G.Nasiri, M.Ho-narjoo // Arch Toxicol. 2005. - 79(6). - P.341-345.
335. Gjesdal C.G. Plasma homocysteine, folate, and vitamin B12 and the risk of hip fracture: the hordaland homocysteine study / C.G.Gjesdal, S.E.Vollset, P.M.Ueland e.a. // J. Bone Miner. Res. 2007. - 22(5). - P.747-756.
336. Goldberg R.B. Effects of niacin on glucose control in patients with dyslipi-demia / RB Goldberg, TA.Jacobson // Mayo Clin. Proc. 2008. - 83(4). - P.470-478.
337. Gonin J.M. Controlled trials of very high dose folic acid, vitamins Bj2 and B6, intravenous folinic acid and serine for treatment of hyperhomocysteinemia in ESRD / J.M. Gonin , H. Nguyen , R Gonin e.a. // J. Nephrol. 2003. -16(4). - P. 522-534.
338. Görlach A. Reactive oxygen species modulate HIF-1 mediated PAI-1 expression: involvement of the GTPase Racl. 7 A.Görlach, Berchner- U.Pfann-schmidt, C.Wotzlaw e.a. // Thromb. Haemost. 2003. - 899. - P. 26-35.
339. Grosicki A. Influence of vitamin C on cadmium absorption and distribution in rats /A.Grosicki // J. Trace. Elem. Med. Biol. 2004. - 18.-2. -P. 183-187.
340. Hawk P.W. Practical Physiological Chemistry / P.B.Hawk // Pract. Physiol.
341. Chem. Phyladelphia. - 1923. -P.953
342. Guyton J.R. Niacin in cardiovascular prevention: mechanisms, efficacy, and safety / J.R. Guyton // Curr. Opin. Lipidol. 2007. -18(4). - P.415-420
343. Haszon I. Platelet aggregation, blood viscosity and serum lipids in hypertensive and obese children / I.Haszon, F.Papp, J.Kovacs e.a. // Eur. J. Pediatr. 2003. - 162.-P, 385-390.
344. Haan M.N. Homocysteine, B12 vitamins, and the incidence of dementia and cognitive impairment: results from the Sacramento Area Latino Study on Aging / M.N.Haan, M.J. Miller, A.E. Aiello // Am. J. Clin. Nutr. 2007. - 85(2). - P.511-517.
345. Haidemenos A. Plasma homocysteine, folate and B12 in chronic schizophrenia / A.Haidemenos, D.Kontis, A.Gazi e.a. // Prog. Neuropsychopharmacol. Biol. Psychiatry. 2007. - 15. - 31(6). - P.1289-1296.
346. Hanton G. Characterisation of the vascular and inflammatory lesions induced by the PDE4 inhibitor CI-1044 in the dog /G.Hanton, C.Sobiy, N.Dagues e.a. // Toxicol. Lett. -2008. 10. - 179(1). -P. 15-22.
347. Hao L. High prevalence of hyperhomocysteinemia in Chinese adults is associated with low folate, vitamin Bn, and vitamin B6 status / L.Hao, J.Ma, L.Zhu e.a. //J. Nutr. 2007. - 137(2). - P.407-413.
348. Hawk P.W. Practical Physiological Chemistry / P.B.Hawk, B.L.Ozer 11 Pract. Physiol. Chem., N-Y. 1954. -P.1044
349. Heil S.G. Marfanoid features in a child with combined methylmalonic aciduria and homocystinuria / S.G.Heil, M.Hogeveen, L.A.Kluijtmans e.a. // J. Inherit. Metab Dis. 2007. - 30(5). - P.811.
350. Henriquez P. Nutritional determinants of plasma total homocysteine distribution in the Canary Islands // P.Henriquez, J.Doreste, R.Deulofeu e.a. // Eur. J. Clin.
351. Nutr. 2007. - 61(1). - P. 111-118
352. Hodis H.N. High-dose B vitamin supplementation and progression of subclinical atherosclerosis: a randomized controlled trial / H.N.Hodis, W.J.Mack, L.Dustin e.a. // Stroke. 2009. - 40(3). - P.730-736.
353. Hooda S. Effects of supplemental vitamin E in diet of Japanesequail on male reproduction, fertility and hatchability / S.Hooda, P.K.Tyagi, P.K.Mohan J. e.a. // Br. Poult Sci. 2007. - 48 (1). - P. 104-10.
354. Hecht H.S. Relation of aggressiveness of lipid-lowering treatment to changes in calcified plaque burden by electron beam tomography / H.S.Hecht, S.M.Harman // Am. J. Cardiol. 2003. - 1. - 92(3). - P.334-336
355. Herrmann W. Vitamin B12-status, particularly holotranscobalamin II and methylmalonic acid concentrations, and hyperhomocysteinemia in vegetarians / W. Herrmann, H. Schorr , R Obeid , J. Geisel . // Am. J. Clin. Nutr. 2003 - 78(1). -P.131-136.
356. Hetenui G. Die Behendlung der Colitis gravis mit Ascorbinsoure / G.Hetenui //Klin. Wochenschr. 1935. - 14. - 41. - S. 1470-1471
357. Hoogeveen E.K. Hyperhomocysteinemia increases risk of death, especially in type 2 diabetes: 5-yearr follov-up of the Hoorn Stady / E.K.Hoogeveen, P.I.Kostense, C. Jakobs E.A. // Circul. 2000. - 101. - P. 1506-1511
358. Huisman T.H.I. Some investigations on the metabolism of fenilalanine and tyrosine in children weith vitamin C defitiency / T.H.I.Huisman, I.H.P.Joxis // Archiv. Disease Childhood. 1957. 32. - 162. - P.77-81
359. Hung C.J.Plasma homocysteine levels in Taiwanese vegetarians are higher than those of omnivores / C.J.Hung, P.C.Huang, S.L.Lu e.a. // J. Nutr. 2002. -132(2).-P.152-158
360. Hussein O. Ezetimibe's effect on platelet aggregation and LDL tendency toperoxidation in hypercholesterolaemia as monotherapy or in addition to simvastatin / O.Hussein, L.Minasian, Y.Itzkovich e.a. // Br. J. Clin. Pharmacol. 2008. -65(5). — P.637-645
361. Kaczmarski M. The influence of exogenous antioxidants and physical exercise on some parameters associated with production and removal of free radicals / M.Kaczmarski, J.Wojcicki, L.Samochowiec e.a. // Pharmazie 1999. - 54(4). -P.303-306.
362. Kalus U. Influence of blood donation on levels of water-soluble vitamins / U.Kalus, A.Pruss, J.Wodarra, H.Kiesewetter e.a. // Transfus. Med. 2008. - 18(6). - 360-365.
363. Kato G.J. Evolution of novel small-molecule therapeutics targeting sickle cell vasculopathy / G.J.Kato, M.T.Gladwin // JAMA. 2008. - 10. - 300(22). -P.2638-2646
364. Kennett E.C. Plasma membrane oxidoreductases: effects on erythrocyte metabolism and redox homeostasis / E.C.Kennett, P.W.Kuchel //Antioxid. Redox. Signal. 2006. 8. - 7-8. - P1241-1247
365. Kerttula T. Theophylline infusion modulates prostaglandin and leukotriene production in man / T.Kerttula, S.Kaukinen, E.Seppala e.a. // Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids. 1997. - 57(6). - P.555-560
366. Khan S. Hereditary thrombophilia / S.Khan, J.D. Dickerman // Thromb. J. -2006.-4.- P. 15-38.
367. Klerk M. Effect of homocysteine reduction by B-vitamin supplementation on markers of clotting activation /M.Klerk, P.Verhoef, B.Verbruggen e.a. // Thromb. Haemost. 2002. - 88(2). - P.230-235
368. Knoop R.H. Kontrasting effects of unmodifiend and timerelease forms of niacin on lipoproteins in hiperlipidemic subjects: clues to mechanism of action of niacin / R.H.Knoop, L Ginsberg, I.Alberts e.a. // Metabolism. -1. -1985.
369. Koehler K.M. Vitamin supplementation and other variables affecting serum homocysteine and methylmalonic acid concentrations in elderly men and women /R.M.Koehler, J J.Romero, P.M.Stauber // J. Am. Coll. Nutr. 1996. - 5(4). -P.364-376.
370. Kowagzyk H.Unele mechanismme de activere a fibrinolisei / H. Kowagzyk, K.Baciu, G.Oprisiu e.a. // St. Si cerc. Med. Academ. RPR Fil. Clui. 1962. - 13. l.-pP. 49-60
371. Kuvin J.T. Effects of extended-release niacin on lipoprotein particle size, distribution, and inflammatory markers in patients with coronary artery disease / J.T.Kuvin, D.MDave, K.A. e.a. // Am. J. Cardiol. 2006 - 15. - 98(6). - P.743-745
372. Labinjoh C. Effects of acute methionine loading and vitamin C on endogenous fibrinolysis, endothelium-dependent vasomotion and platelet aggregation / C.Labinjoh, D.E.Newby, I.B.Wilkinson e.a. // Clin. Sci. (Lond). 2001. - 100(2). - P.127-135.
373. Leithauser B. Influence of xantinole nicotinic acid on cutaneous microcirculation in patients with coronary artery disease and hyperlipoproteinemia / B.Leithauser, U.Gerk, C.Mrowietz e.a. // Clin. Hemorheol. Microcirc. 2008. -39(1-4).-P.287-292.433.
374. Lentz S.R. Effect of hyperhomocisteinemia on protein C activation and activity / S.R.Lentz, D.J.Piegors, J.A. Fernandes e.a. // Blood. 2002. - 100. - 6. -P.2108-2112
375. Levi M. New treatment strategies for disseminated intravascular coagulation based on current understanding of the pathophysiology / M.Levi, E. de Jonge, N. van der Poll // Ann. Med. 2004. - 36. -1. - P.41-49
376. Li W. Vitamin C deficiency increases the lung pathology of influenza virus-infected gulo-/- mice / Li W. N.Maeda, M.A.Beck // J. Nutr. 2006. - 136. - 10. -P.2611-2616.
377. Lim H.S., Heo Y.R. Plasma total homocysteine, folate, and vitamin B12 status in Korean adults / H.S.Lim, Y.R.Heo // Nutr. Sci. Vitaminol. (Tokyo). -2002. 48(4). - P.290-297
378. Lomtadze M.e.a. Study of intravascular coagulation activation markers in patients with visceral leishmaniasis / M.Lomtadze, M.Khochava, I.Shalamberidze e.a. // Georgian Med. News. 2005. (7-8). - P.47-50
379. Lopes H.F. DASH diet lowers blood pressure and lipid-induced oxidative stress in obesity / H.F.Lopes, K.L.Martin, K.Nashar e.a. // Hypertension. 2003. -41.-3.-P. 422-430
380. Loscialpo D. Azzione della vitamina A sulla fibrinolysis emetica / D.Loscialpo // Boll, soc. Ital. biol sperim. 1959. - 35. - P.310-312
381. Luomala M. High plasma levels of CD40 are associated with low coenzyme Q and vitamin E content of low-density lipoprotein in healthy men / M. Luomala, RLaaksonen, T.Janatuinen e.a. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 2007. - 67 (2). -P.115-122.
382. McLean, L.H.Allen, C.G. e. a. // J. Nutr. -2007. 137(3). - P.676-682.
383. Mahmood A. Prevalence of hyperhomocysteinaemia, activated protein C resistance and prothrombin gene mutation in inflammatory bowel disease /A.Mah-mood,. J. Needham, J. Prosser // Eur. J. Gastroenterol. Hepatol. 2005. - 17(7). -73 . p. 9-44
384. Majchrzak D. B-vitamin status and concentrations of homocysteine in Austrian omnivores, vegetarians and vegans / D.Majchrzak, I.Singer, M. e.a. // Ann. Nutr. Etab. 2006. - 50(6). - P.485-491
385. Makedos G. Homocysteine, folic acid and B12 serum levels in pregnancy complicated with preeclampsia / G.Makedos, A.Papanicolaou, A.Hitoglou e.a. // Arch. Gynecol. Obstet. 2007. - 275(2). - P. 121-124.
386. Maktouf C. Clinical spectrum of cobalamin deficiency in Tunisia /
387. C.Maktouf, F.Bchir, H.Louzir e.a. // Ann. Biol.Clin. (Paris). 2007. - 65(2). -P.135-142
388. Machoney M.J Synthesisi of cobalamin coenzymes bey human cells in tissue cultute / M.J.Machone, L.E.Rosenberg // J. Lab. Clin. Med. 1971. - 78. - P. 302308
389. Maktouf С. Clinical spectrum of cobalamin deficiency in Tunisia / C.Maktouf, F.Bchir, H.Louzir e.a. // Ann. Biol.Clin. (Paris). 2007. - 65(2). -P.135-142
390. Marcucci R. Risk factors for cardiovascular disease in renal transplant recipients: new insights / R.Marcucci, M. Zanazzi, E.Bertoni e.a. // Transpl. Int. -2000. 13 Suppl 1. - S.419-424.
391. Marcucci R. Vitamin supplementation reduces the progression of atherosclerosis in hyperhomocysteinemic renal-transplant recipients / R.Marcucci,
392. M.Zanazzi, E. // Transplantation. 2003. -.15. - 75(9). - P.1551-1555
393. Markwardt F. Blutgerinnengshemende Wirkstoffe aus blutsaugenden Tieres / F. Markwardt // Jena; Veb Gustav Fiescher Verlagg. 1963. - 122 s.
394. Martin R. Placental calcium transporter (PMCA3) gene expression predicts intrauterine bone mineral accrual /: R. // Bone. 2006. — 6. — P.3-7
395. Martinez-Cruz F. Oxidative stress induced by phenylketonuria in the rat: Prevention by melatonin, vitamin E, and vitamin C /F.Martinez-Cruz,. D. Pozo, C. Osuna, e.a. // J. Neurosci. Res. 2002. - 15. - 69. - 4. - P.550-558.
396. Mazzetti G.M. Sullazione anticoagulante in vitro: delle a-tocoferolo / G.M. Mazzetti // Acta Vitam. (ital.). 1956. - 5. - P. 2
397. McGraw G. Mecanisme d action de 1 acide ascorbique sar les temps de saignement et de coagulation / G. McGraw // Rev.canad. boil. 1956. - 4. - 4. -P.295-321
398. McGraw G. Regulation des temps de saignement et goagulatic / G.McGraw // Laval Med. 1960. - 29. - 3. - P.355-405
399. Medvedev I.N. A comparative analysis of normodipin and spirapril effects on intravascular activity of platelets in patients with metabolic syndrome / I.N.Medvedev // Ter. Arkh.- 2007. 79(10). - P. 25-27
400. Medvedev I.N. Correction of primary hemostasis in patients suffering from arterial hypertension with metabolic syndrome / I.N.Medvedev // Klin. Med. (Mosk). 2007. - 85(3). - P.29-33
401. Michos C. Antioxidant protection during the menstrual cycle: the effects ofestradiol on ascorbic-dehydroascorbic acid plasma levels and total antioxidant plasma status in eumenorrhoic women during the menstrual cycle / C.Michos,
402. D.N.Kiortsis, F.Evangelou, S.Karkabounas // Acta. Obstet. Gynecol. Scand. — 2006.- 85(8). -P.960-965.
403. Miller M. Impact of lowering triglycerides on raising HDL-C in hyper-triglyceridemic and non-hypertriglyceridemic subjects /M.Miller, P.Langenberg, S.Havas // Int. J. Cardiol. 2007. - 10. -119(2). - P.192-195.
404. Miller M. Relative atherogenicity and predictive value of non-high-density lipoprotein cholesterol for coronary heart disease / M.Miller, H.N.Ginsberg,
405. E.J.Schaefer // Am. J. Cardiol. -2008. 1. - 101(7). - P.1003-1008.
406. Millner R.W. A new hemostatic agent: initial life-saving experience with Ce-lox (chitosan) in cardiothoracic surgery / R.W.Millner, A.S.Lockhart, H.Bird, C.Alexiou // Ann. Thorac. Surg. 2009. - 87(2). - P. 13-14.
407. Mirzoian N.R. Effects of an antiischemic drug combination and nimodipine on cerebral blood supply in a hemorrhagic stroke model in rats / N. R.Mirzoian ,T.S Gan'shina, I.N.Kurdiumov, B.S.Bero // Eksp. Klin. Farmakol.- 2008. 71(2). -P. 17-20.
408. Montes Diaz R. Genetic predisposition to bleeding during oral anticoagulants treatment / Diaz R. Montes, O.Nantes, E.Molina e.a.An Sist. Sanit. Navar. 2008. - 31 (3). - P.247-257.
409. Morel C.F. Combined methylmalonic aciduria and homocystinuria (cblC): phenotype-genotype correlations and ethnic-specific observations / C.F.Morel, J.P.Lerner-Ellis, D.SRosenblatt / / Mol. Genet. Metab. 2006. - 88(4). - P.315-421.
410. Morris M.C. Dietary folate and vitamins B-12 and B-6 not associated with incident Alzheimer's disease / M.C.Morris, D.A.Evans, J.A.Schneider e.a. // J. Alzheimers Dis. 2006. - 9(4). - P.435-443.
411. Mudd S.H. Homocystinuria associated with dedreased methylentetra-hydrofolate reductase activity / S.H.Mudd, B.W.Uhlendorf // Biochem.Dioophys. Res. Comm. 1972. - 35. - P.121-126
412. Muran P.J. Mercury elimination with oral DMPS, DMSA, vitamin C, andglutathione: an observational clinical review / P J. Muran // Altern. Ther Health. Med. 2006. - 12. - 3. - P. 70-75.
413. Murphy M.M. Longitudinal study of the effect of pregnancy on maternal and fetal cobalamin status in healthy women and their offspring /M.MMurphy,
414. A.M.Molloy, P.M. Ueland // J. Nutr. 2007. - 137(8). - P.863-867.
415. Muwakkit S. Iron deficiency in young Lebanese children: association with elevated blood lead levels / S.Muwakkit, I.Nuwayhd, M.Nabulsi e.a. // J. Pediatr. Hematol. Oncol. 2008. -30(5). - P.382-386.
416. Nadir Y. Association of homocysteine, vitamin B12, folic acid, and MTHFR C677T in patients with a thrombotic event or recurrent fetal loss / Y.Nadir., R Hoffman, B.Brenner// Ann. Hematol. 2007. - 86 (1). - P. 35-40.
417. Nappo F. Impairment of endothelial functions by acute hyperhomocysteinemia and reversal by antioxidant vitamins / Nappo F, De Rosa N, Marfella R, e.a. // JAMA. 1999. - 9. - 281(22). -P.2113-2118.
418. Nicola P. Modifications de L'intensite du saignement sous Linfluence de substances actives sur la coagulation la fibrinolyse et les capillaries / P.Nicola, G. Frandoli //Hemostase. 1962.- 2. - 2.- p. 139-147
419. Nilsson K. Plasma homocysteine, cobalamin/folate status, and vascular disease in a large population of psychogeriatric patients / K.Nilsson, L.Gustafson,
420. B.Hultberg // Dement. Geriatr. Cogn. Disord. 2006. - 22(4). - P.358-566.
421. Nur Azlina M.F. Nur Azlina M.F. Tocotrienol and alpha-tocopherol reduce corticosterone and noradrenalin levels in rats exposed to restraint stress /M.F.Nur
422. Padayatty S.I. Vitamin C as an antioxidant: evaluation of its role in disease prevention / S.I.Padayatty, A.Katz, Y.Wang e.a. // J. Am. Coll. Nutr. 2003. - 22. -1. - P. 18-35
423. Panda K. Vitamin C prevents cigarette smoke-induced oxidative damage in vivo / K.Panda, R.Chattopadhyay, D.J.Chattopadhyay, I.B.Chatterjee / / Free Radic. Biol. Med. 2000. - 15. - 29. - P.115-124.
424. Pandey S.N. Hyperhomocysteinemia as a cardiovascular risk factor in Indian women: determinants and directionality / S.N.Pandey, A.D.Vaidya, RA.Vaidya e.a. // J. Assoc. Physicians. India. 2006. - 54. - P.769-774.
425. Panayiotou A. Serum total homocysteine, folate, 5,10-methylenetetra-hydrofolate reductase (MTHFR) 677C~>T genotype and subclinical atherosclerosis / A.Panayiotou, A.Nicolaides, M.Griffin e.a. // Expert. Opin. Ther. Targets. — 2009.- 13(1).-P,1-11.
426. Paolini J.F. Effects of laropiprant on nicotinic acid-induced flushing in patients with dyslipidemia / J.F.Paolini, Y.B.Mitchel, R.Reyes // Am. J. Cardiol. -2008.- 1.- 101(5). -P.625-630.
427. Perricone N.V. Blood pressure lowering effects of niacin-bound chromium(III) (NBC) in sucrose-fed rats: Renin-angiotensin system /N.V.Perricone, D.Bagchi, B.Echard, H.G.Preuss // J. Inorg. Biochem.- 2008. 23. - P. 17-19
428. Pires J.A.The use of nicotinic acid to induce sustained low plasma nonesteri-fied fatty acids in feed-restricted Holstein cows / J.A.Pires, R.R.Grummer //.J. Dairy. Sci. 2007. - 90(8). - P. 3725-37.
429. Podda G.M. Abnormalities of homocysteine and Bi2 vitamins in the nephrotic syndrome / G.M.Podda, F.Lussana, G.Moroni e.a. // Thromb. Res.2007. 120(5). - 647-652.
430. Pool I.C.E. The effect of hypervitaminosis A on blood coagulation / I.C.E.Pool // J. E.P. Physiol. 1958. 43. - 4. - P. 427-437
431. Pooput C. Pharmacologic doses of ascorbate act as a prooxidant and decrease growth of aggressive tumor xenografts in mice / C. Pooput, K.L. Kirk, M.C. Krishna e.a.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2008. - 12.-105(32).-11105-11109.
432. Prakash R. Rapid resolution of delusional parasitosis in pellagra with niacin augmentation therapy / R.Prakash, S.Gandotra, L.K.Singh a.e. // Gen. Hosp. Psychiatry. 2008. -30(6). - P.581-584.
433. O.Prasad K.N. Multiple dietary antioxidants enhance the efficacy of standard and experimental cancer therapies and decrease their toxicity / K.N.Prasad // Integr. Cancer Ther. 2004. - 3. - 4. - P.310-322.
434. Prasad K. C-reactive protein (CRP)-lowering agents / K. Prasad // Cardio-vasc. Drug Rev. 2006. - Spring. - 24(1). - P.33-50.
435. Pipili C. The diagnostic importance of photosensitivity dermatoses in chronic alcoholism: report of two cases / C.Pipili, E.Cholongitas, D.Ioannidou // Dermatol. Online J.-2008.- 15. 14(11)/-P. 15.
436. Raghavan S.A. Role of ascorbic acid in the modulation of inhibition of platelet aggregation by polymorphonuclear leukocytes / S.A.Raghavan, P.Sharma, M.Dikshit//Thromb Res. 2003. - 1. - 110. - 2-3. - P. 117-126.
437. Ravaglia G. Plasma tocopherols and risk of cognitive impairment in an elderly Italian cohort / G.Ravaglia, P.Forti, A.Lucicesare e.a. // Am. J. Clin. Nutr.2008.-87(5).-P.1306-1313.
438. Refsum H,. Hyperhomocysteinemia and elevated methylmalonic acid1 indicate a high prevalence of cobalamin deficiency in Asian Indians. / H.Refsum, C.S.Yajnik, M.Gadkari e.a.////Am. J. Clin. Nutr. 2001. - 74(2). - P.233-241
439. Raghavan VA. First-line therapies for lowering triglyceride levels / VA.Rag-havan // Am. Fam. Physician. 2008. - 15. - 77(4). - P. 416 418.
440. Ragino Y.I. Relationship between oxidized fibrinogen and hemostasis disturbances and endothelial dysfunction in myocardial infarction / Y.I.Ragino, V.A.Baum, Y.V. Polonskaya e.a.// Bull. Exp. Biol. Med. 2008. - 145(4). - 412414.
441. Ramel A. Correlations between plasma noradrenaline concentrations, antioxidants, and neutrophil counts after submaximal resistance exercise in men / A.Ramel, K.H.Wagner, I.Elmadfa // Br. J. Sports. Med. 2004. - 38. - 5. - E 22
442. Ranga G.S. Effect of aspirin on lipoprotein (a) in patients with ischemic stroke / C.S.Ranga, O.P.Kalra e.a. // J. Stroke Cerebrovasc. Dis. 2007. - 16(5). -P.220-224
443. Rapoport S.M. Medizinische Biochemie /S.M. Rapoport // Berlin: Volk und Gesundheit. 1965. - 990 s
444. Ratnoff J. Heriditary disorders of hemostasis / J.Ratnoff //Metabolic Basis in inherited Diseas. 1972. - P. 1670-1709
445. Rifici V.A. Administration of antioxidant vitamins does not alter plasma fibrinolytic activity in subjects with central obesity / V.A.Rifici, S.H.Schneider, Y.Chen, A.K.Khachadurian // Thromb. Haemost. 1999. - 7. - 78(3). - P.llll-ll 14.
446. Rondö P.H. Vitamin-mineral supplement use by low-income Brazilian pregnant adolescents and non-adolescents and the predictors for non-use / P.H.Rondö, C.M.Fukushima, E.F.Moraes // Eur. J. Clin. Nutr. 2006. - 60(9). - P.l 108-1114
447. Roomi M.W. Suppression of growth and hepatic metastasis of murine B16FO melanoma cells by a novel nutrient mixture / M.W.Roomi, T.Kalinovsky, N.W. e.a. // Oncol Rep. 2008. 20(4). - P.809-817
448. Saareks V. Nicotinic acid and pyridoxine modulate arachidonic acid metabolism in vitro and ex vivo in man / V.Saareks, I.Mucha, E.Sievi, A.Riutta // Pharmacol Toxicol. 1999. - 84(6). - P.274-280.
449. Saareks V.Opposite effects of nicotinic acid and pyridoxine on systemic prostacyclin, thromboxane and leukotriene production in man / V.Saareks, P.Ylitalo, I.Mucha, A.Riutta // Pharmacol. Toxicol. 2002. - 90(6). - P.338-342
450. Sahin M. Effects of metformin or rosiglitazone on serum concentrations of homocysteine, folate, and vitamin Bi2 in patients with type 2 diabetes mellitus / M.Sahin, N.B.Tutuncu, D.Ertugrul e.a. // J. Diabetes Complications. 2007. -21(2).-P.l 18-123.
451. Sailer S. Über Thrombolyseversuche an Kaninchen mit einer kombinierten Nicotinsoure-Heparinhandlung / S.Sailer, O.Eber // Klin. Wochenschr. 1960. -38.-S. 548-551.
452. Sanguigni V. CD40 ligand enhances monocyte tissue factor expression and thrombin generation via oxidative stress in patients with hypercholesterolemia. V.Sanguigni, D.Ferro, P.Pignatelli, e.a. // J. Am. Coll. Cardiol. 2005. - 4. - 45(1).- 35-42.
453. Sawyer W.D. Studies on the trhombolytic activity of human plasma / W.D.Sawyer, A.P.Fletcher N. Alkjaersig, S. Sherry // J.Clin.ilnvestig. -1960. 39.- 2. P.426-434
454. Scelton F. Antipurpuricaction of alfa-tocoferol / F.Scelton, E.Shute, H. G.Scinner // Sci. 1946. - 103. - P. 766-769
455. Schernhammer E. Plasma folate, vitamin B6, vitamin B12, and homocysteine and pancreatic cancer risk in four large cohorts / E.Schernhammer, B.Wolpin, N.Rifai e.a. // Cancer Res. -2007. 67(11). - P.5553-5560.
456. Shehata M. Protective effect of antioxidant adjuvant treatment with hormone replacement therapy against cardiovascular diseases in ovariectomized rats / M.Shehata, M.A.Kamel // Endocr. Regul. 2008, - 42(2-3). - P.69-75.
457. Shirakawa A.K. 1,25-dihydroxyvitamin D3 induces CCR10 expression in terminally differentiating human B cells / A.K. Shirakawa, D. Nagakubo, K.Hieshima e.a. K, Nakayama T, Jin Z, Yoshie e.a.// J. Immunol. 2008. - 1. -180(5).-P. 2786-2795.
458. Sen C. Inward potassium transport systems in skeletal muscle derived cells are highly sensitive to oxidant exposure / C. Sen, J.Kolosova, O. Hanninen // Free radical Biol, med. 1994. - 4. - P. 130-136
459. Sen S. Niacin and coagulability of blood / S.Sen. and S.Sen // Ind. J. Med Rev.-1956.-44.-P. 67-69
460. Senftleben U, Suchner U. Cerebral protection. The role of nutritional therapy / U.Senftleben e.a. // Anaesthesist. 2000. - 49. - 4. - P. 340-344
461. Shara M. Long-term safety evaluation of a novel oxygen-coordinated niacin-bound chromium (III) complex / M.Shara, A.E.Kincaid, A.L.Limpach e.a. // J1.org Biochem. 2007. - 101(7). - P.1059-1069.
462. Shepherd J. Dyslipidaemia in diabetic patients: time for a rethink / J.Shepherd // Diabetes. Obes. Metab. 2007. - 9(5). - P.609-616.
463. Schmid W. Platelet-stimulating effects of oxidized LDL are not attributable to toxic properties of the lipoproteins / W.Schmid, A.Assinger, A.Lee e.a. // Thromb Res. 2008. 122(5). - P. 630-639
464. Shi X.M. Protective effect of tanshinone II A on lipopolysaccharide-induced lung injury in rats / X.M. Shi, L.Huang, S.D.Xiong, X.Y.Zhong // Chin. J. Integr. Med. -2007. 13(2). -P. 137-140.
465. Shy M.E. Charcot-Marie-Tooth disease: an update / M.E.Shy // Curr. Opin. Neurol. 2004. - 17. - 5. - P.579-585.
466. Shute E. /Peripheral thrombotic treeted with a-tocoferol / E.Shute, W. Shute // Am. J. of surger. 1952. - 84. - P. 187-191
467. Simbula G. The peroxisome proliferator BR931 kills FaO cells by p53-dependent apoptosis / G.Simbula, M.Pibir, L.Sanna, e.a. // Life Sci. 2004.- 4. -75. - 3. - P.271-286.
468. Siri P.W. Vitamins B6, B12, and folate: association with plasma total homocysteine and risk of coronary atherosclerosis / P.V.Siri, P.Verhoef, FJ.Kok // J. Am. Coll. Nutr. 1998. - 17(5). - P.435-441.
469. Skyler J.S. /Update on worldwide efforts to prevent type 1 diabetes / J.S. Skyler // Ann. N. Y. Acad Sci. 2008. - 1150. - H.190-196.
470. Skrha J. Effect of simvastatin and fenofibrate on endothelium in Type 2 diabetes. J.Skrha, T.Stulc, J.Hilgertova, e.a.// Eur. J. Pharmacol. 2004. - 16. -493(1-3). -P.183-189.
471. Solov'eva A.V. Impact of Opisthorchis invasion on lipid peroxidation and hemostasis during pregnancy / A.V.Solov'eva // Klin. Lab. Diagn. 2008. - 12. -P.20-23
472. Spence J.D. Patients with atherosclerotic vascular disease: how low should plasma homocyst (e) ine levels go? / J.D.Spence // Am. J. Cardiovasc. Drugs. -2001.- 1(2).-P.85-89.
473. Spronk H.M. The blood coagulation system as a molecular machine / HM.Spronk, J.W.Govers-Riemslag, H. ten Cate // Bioessays. 2003. - 25. -12. -P. 1220-1228
474. Stief T.W. Singlet oxygen inactivates fibrinogen, factor V, factor VIII, factor X, and platelet aggregation of human blood / T.W.Stief, J.Kurz, M.O.Doss, J.Fareed // Thromb. Res. 2000. - 15. - 97(6). - P.473-480.
475. Sprecher D. Raising high-density lipoprotein cholesterol with niacin and fi-brates: a comparative review / D.L. Sprecher // Am. J. Cardiol. 2000. - 21. -86(12A). - 46L-50L
476. Stella G. Association of thyroid dysfunction with vitamin B12, folate and plasma homocysteine levels in the elderly:, a population-based study in Sicily / G.Stella, R.S.Spada, S.Calabrese e.a. // Clin. Chem. Lab. Med. . 2007. - 45(2). -P.143-147.
477. Strand T.A. Folate, but not vitamin B-12 status, predicts respiratory morbidity in north Indian children / T.A.Strand, S.Taneja, N.Bhandari e.a. // Am. J. Clin. Nutr. 2007. - 86(1). - P.139-144.
478. Su D. Three mammalian cytochromes b561 are ascorbate-dependent ferrire-ductases / D.Su, H.Asard //FEBS J. 2006. - 273. - 16. - P.3722-3734.
479. Suk Danik J. Lipoprotein(a), hormone replacement therapy, and risk of future cardiovascular events /Suk Danik J, Rifai N, Buring JE, Ridker PM. // J. Am.
480. Coll. Cardiol. -2008. 8. - 52(2). -P. 124-131.
481. Sumitra M. Experimental myocardial necrosis in rats: role of arjunolic acid on platelet aggregation, coagulation and antioxidant status /M. Sumitra, P.Mani-kandan, D.A.Kumar e.a. // Mol. Cell. Biochem. 2001. - 224(1-2). - P. 135-142.
482. Superko H.R. Effect of combination nicotinic acid and gemfibrozil treatment on intermediate density lipoprotein, and subclasses of low density lipoprotein and high density lipoprotein in patients with combined hyperlipidemia / H.R.Superko,
483. B.C.Garrett, S.B.King e.a. // Am. J. Cardiol. 2009. - 1. - 103(3). - P.387-392. 568.Swirbey J.L. The chemical nature of vitamin C / J.L.Swirbey, A. Szent
484. GyOrgyi // Biochem. Journ. 1928. - 27. - p. 279-285
485. Tavares M.M. Insufficient voluntary intake of nutrients and energy in hospitalized patients / M.M.Tavares, L.Matos, T.F.Amaral // Nutr. Hosp. 2007. -22(5). - P.584-589.
486. Tavintharan S. Niacin affects cell adhesion molecules and plasminogen activator inhibitor-1 in HepG2 cells / S.Tavintharan, M.Sivakumar, S.C.Lim // Clin. Chim. Acta. 2007. - 376(1-2). - P.41-44.
487. Thankachan P. An analysis of the etiology of anemia and iron deficiency in young women of low socioeconomic status in Bangalore, India / P.Thankachan, S.Muthayya, Walczyk e.a. // Food. Nutr. Bull. 2008. - 28(3). - P.328-336.
488. TsaiS.Y. Injury-induced Janus kinase/protein kinase C-dependent phosphorylation of growth-associated protein 43 and signal transducer and activator of transcription for neurite growth in dorsal root ganglion/ S.Y.Tsai, L.Y.Yang,
489. C.H.Wu e.a. // Neurosci. Res. 2007. - 1. - 85(2). - P.321-331.
490. Tlepshukov I.K. Effect of heparin on the vascular thrombocytic link of the hemostatic system and pathogenetic correction of ensuing disorders / I.K.Tlep-shukov // Biull. Eksp. Biol. Med. 1986. - 102(11). - P.544-545
491. Tofler G.H. The effect of vitamin C supplementation on coagulability and lipid levels in healthy male subjects. G.H.Tofler, J.J.Stec, I.Stubbe, e.a. // Thromb. Res. 2000. - 1. - 100(1). - P.35-41.
492. Tomoda J. Влияние витамина E на свертывание крови / J.Tomoda // Vitamins. 1963. - 27. - 6. - P.442-446 (РЖБ, 1964. - 7. Реферат № 7H171)
493. Thankachan P. An analysis of the etiology of anemia and iron deficiency in young women of low socioeconomic status in Bangalore, India / P.Thankachan, S.Muthayya, T.Walczyk e.a. // Food Nutr. Bull. 2007. - 28(3). - P.328-336.
494. Thorn S.L. The guinea-pig is a poor animal model for studies of niacin deficiency and presents challenges in any study using purified diets /S.L.Thorn, G.S.Young//Br. J. Nutr.- 2007.- 98(1). P.78-85
495. Tomillero A. Gateways to clinical trials / A.Tomillero, M.A Moral //Methods Find Exp Clin Pharmacol. 2008. - 30(5). - P, 383-408.
496. Tousoulis D. Vitamin С affects thrombosis/ fibrinolysis system and reactive hyperemia in patients with type 2 diabetes and coronary artery disease /D.Tousoulis, C.Antoniades, C.Tountas, e.a. // Diabetes Care. 2003. - 26(10). -P.2749-2753.
497. Tuchman M. Vitamin B12-responsive megaloblastic anemia, homocystinu-ria, and transient methylmalonic aciduria in cblE disease // M.Tuchman, P.Kelly, D.Watkins, D.S.Rosenblatt//J. Pediatr. 1988. - 113(6). - P.1052-1056
498. Tudorani G. Actinea vitaminei PP asupra coagularii / G.Tudorani, M.Niculescu, Pavelescu e.a. // Studii si sercetarri stiintifica 1960. - 1. - S.77-82
499. Tunali T. Melatonin reduces oxidative damage to skin and normalizes blood coagulation in a rat model of thermal injury / T.Tunali, G.Sener, A.Yarat, N.Emekl //Life Sci. 2005. - 28. - 76 (11). -P.l259-1265
500. Turi J.L. Duodenal cytochrome b: a novel ferrireductase in airway epithelialcells / J.L.Turi, X.Wang, A.T.McKie e.a. // Am. J. Physiol. Lung. Cell Moll Physiol. 2006. - 291. - 2. - P. 272-280
501. Udut V.V.The duration of the action of a single dose of aspirin, kurantil and nicotinic acid during pregnancy complicated by EPH gestosis / V.Y.Udut, G.T.Ka-irov, E.V.Borodulina, L.M.V'iugova // Eksp. Klin. Farmakol. -1999. 62(3). -P.37-39
502. Ulrich J.N., Components of the fibrinolytic system in the vitreous body in patients with vitreoretinal disorders / J.N.Ulrich, M.Spannagl, A.Kampik, A.Gandorfer // Clin. Experiment. Ophthalmol. 2008. - 36(5). - 431-436.
503. Vannoti A. Vitamin BI2 and intrinsic Factor / A.Vannoti // Stutgart. 1957123 p.
504. Vanwolleghem T. Ultra-rapid cardiotoxicity of the hepatitis C virus protease inhibitor BILN 2061 in the urokinase-type plasminogen activator mouse / T.Van-wolleghem, P.Meuleman, L.Libbrecht e.a. // Gastroenterology. 2007. -133(4). -P.l 144-1155.
505. Verma R.J. A study on toxicity of gasoline and GM-10 on liver of mice and it's amelioration by black tea extract /RJ.Verma, M.Dave, N.Mathuria // Acta. Pol. Pharm. 2008. -65(5). - 601-605.
506. Van Guilder G.P. Acute and chronic effects of vitamin C on endothelial fibrinolytic function in overweight and obese adult humans / G.P.Van Guilder, G.L.Hoetzer, I.I.Greiner e.a. // J Physiol. 2008. - 15. - 586(14). - C. 3525-3535.
507. Vanderjagt D.J. Nutritional factors associated with anaemia in pregnant women in northern Nigeria / D.J.Vanderjagt, H.S.Brock, G.S.Melah //J. Health. Popul. Nutr. 2007. - 25(1). - P.75-81.
508. Velsor L.W. Influence of epithelial lining fluid lipids on NO(2)-induced membrane oxidation and nitration / L.W.Velsor, C.A.Ballinger, J. Patel, E.M.Postlethwait // Free Radic. Biol. Med. 2003. - 15. -34. - 6. - P.720-733.
509. Verhoef P. Plasma total homocysteine, B vitamins, and risk of coronary atherosclerosis / P.Verhoef, F.J.Kok, D.A.Kruyssen e.a. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 1997. - 17(5). - P.989-995.
510. Vibo R. Acute phase proteins and oxidised low-density lipoprotein in association with ischemic stroke subtype, severity and outcome / R.Vibo, J.Korv, M.Roose e.a. // Free Radic. Res. 2007. - 41 (3). - P.282-287
511. Vijver L.P. Lipoprotein oxidation, antioxidants and cardiovascular risk: epidemiologic evidence / L.P Vijver, A.F. Kardinaal, D.E. Grobbee, e.a. // Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids. 1997.- 57 (4-5). - P.479-487
512. Vogt E. Uber die Behandlung Gynecologischer Blutungen nit Vitamin С / E.Vogt//Munch. Med. Wochensch. 1935. - 82. - S. 263-265
513. Vrentzos G.E.Intravenous administration of vitamin В12 in the treatment of hyperhomocysteinemia associated with end-stage renal disease / G.E. Vrentzos, J.A. Papadakis, K.E. Vardakis e.a. // J. Nephrol. 2003. - 16(4). - P.535-539.
514. Wada H. Hemostasis study before onset of disseminsted intravascular coagulation / H.Wada, K.Minamikawa, Y.Wakita e.a. // Am. J. Hematol. 1994. - 43. P. 265-275.
515. Wada H. Increastd plasma solubilit fibrinin patients with dissiminated iin-ravascular coagulation / H.Wada, Y.Wakita, T.Nakase e.a. // Am. J. Hematol", 1996. 51.-P. 255-260.
516. Wada H. The diagnosis and treatment of the DIC-syndrome / H.Wada, C.Esteban, H.Gabbaza e.a. // Тромбоз, гемостаз и реология. 2003. - 1. С. 1622.
517. Wasilewska A. Is there any relationship between lipids and vitamin В12 levels in persons with elevated risk of atherosclerosis? / A.Wasilewska, M.Narkiewicz, B.Rutkowski, W.Lysiak-Szydlowska // Med. Sci. Monit. 2003. - 9(3). -P.147-151.
518. Weiss C. Effects of supplementation with alpha-lipoic acid on exercise-induced activation of coagulation / C.Weiss, A.Bierhaus, P.P.Nawroth e.a. // Metabolism. 2005. - 54(6). - 8. - P. 15-20.
519. Wilcken D.E. B12 vitamins and homocysteine in cardiovascular disease and aging / D.E.Wilcken, B.Wilcken // Ann. N. Y. Acad Sci. . 1998. - 20. - 854. -P.361-370.
520. Wilson W.L. The activation of plasminogen by nicotinic acid in vivo / W.L.Wilson, G.Fostiropulos // Proceed. 7-th congr. Europ. Soc. Haematol.: Basel-N.-Y. 1960.-P. 916-919
521. Yakugaku Z. Pharmacological bases of coffee nutrients for diabetes / Z.Yakugaku // Prevention. 2007. - 127(11). - P. 1825-1836
522. Yamasaki C. Growth and differentiation of colony-forming human hepatocy-tes in vitro fYamasaki C, Tateno C, Aratani A e.a. // J. Hepatol. 2006 . - 44. - 4. -P.749-757
523. Yang L.K. Correlations between folate, Bi2, homocysteine levels, and radiological markers of neuropathology in elderly post-stroke patients / L.K.Yang,
524. K.C.Wong, M.Y. e.a. // J. Am. Coll. Nutr. 200
525. Yeh H.I. Reduced expression of endothelial connexins 43 and 37 in hypertensive rats is rectified after 7-day carvedilol treatment H.I.Yeh, P.Y.Lee, S.H.Su e.a. Am J. Hypertens. 2006. - 19. - 1. - P. 29-35
526. Yener S.J. Plasminogen activator inhibitor-1 and thrombin activatable fibrinolysis inhibitor levels in non-alcoholic steatohepatitis / S.J.Yener, M.Akarsu, T.Demir e.a. //Endocrinol. Invest. 2007. - 30(10). - P.810 - 819
527. Zhu T / Venous thromboembolism: risk factors for recurrence / T.Zhu, I.Martinez, J.Emmerich e.a. // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2009. - 29(3). -P.298-310
528. Zierler K.L. / On the antithrombic and antiproteolytic activity of a-tokoferol / K.L. Zierler, D.Grob, J.L.Lilienthal // Am.J. Physiol. 1948, - 153. - 1. - P. 127132
529. Znazen R. Association of low thrombotic rise factors: f. V Leiden, and hy-perhomocisneinevia. A case report // Pathol, boil, (Paris). 2007. - 58(3-4). - P. 163-166
-
Шаповалова, Елена Михайловна
-
доктора биологических наук
-
Тюмень, 2010
-
ВАК 03.03.01
- Эффекты отсутствия и избытка витаминов А и Е на гемостаз порознь и в сочетании при воздействиях, вызывающих гиперкоагуляцию (экспериментальное исследование)
- ВЛИЯНИЕ ДЕФИЦИТА И ИЗБЫТКА ТОКОФЕРОЛА НА ИНТЕНСИВНОСТЬ ВНУТРИСОСУДИСТОГО СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ И ТОЛЕРАНТНОСТЬ К ТРОМБИНУ (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)
- Внутрисосудистое свертывание крови и толерантность к тромбину в зависимости от С-витаминной обеспеченности организма (экспериментальное исследование)
- Влияние витамина Е на интенсивность взаимодействия тромбин-фибриноген, толерантность к тромбину и липидпероксидацию
- Влияние ретинола на липидпероксидацию, антиоксидантный потенциал тромбоцитов, уровень маркеров взаимодействия тромбин-фибриноген в плазме и толерантность к тромбину
