Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Лизоцим как биохимический показатель секреторной активности нейтрофилов крови при физической нагрузке

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Прияткин, Сергей Александрович

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Лейкоцитарный статус крови и его изменение при физиологических воздействиях

1.2. Современные представления о системе нейтрофилов

1.2.1. Морфология и биохимический статус нейтрофилов

1.2.2. Функциональная активность нейтрофилов

1.3. Влияние физической нагрузки на функциональную активность факторов системы неспецифической резистентности и содержание стероидных гормонов в крови

1.4. Структура и свойства лизоцима

1.4.1. Биологические свойства и локализация лизоцима в организме

1.4.2. Основные физико-химические характеристики лизоцима

1.5. Обзор методов определения лизоцима

1.6. Современные представления о радиоиммуноанализе белков

1.6.1. Принципы и основные этапы радиоиммуноанализа

1.6.2. Получение антисыворотки

1.6.3. Методы получения и очистки радиоактивно меченного белка

1.6.4. Методы разделения фракций свободного и связанного с антителами антигена

1.6.5. Оптимизации радиоиммуноанализа

1.6.6. Радиоиммуноанализ лизоцима

ГЛАВА 2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Постановка экспериментов на животных

2.2. Условия обследования людей

2.3. Метод электрофореза в полиакриламидном геле

2.4. Получение антисыворотки к лизоциму человека

2.5. Методы получения меченного 1251-лизоцима

2.6. Оптимизация радиоиммуноанализа лизоцима

2.7. Оптимизированный вариант радиоиммуноанализа лизоцима человека

2.8. Определение чувствительности, точности и воспроизводимости радиоиммуноанализа лизоцима

2.9. Исследование содержания лизоцима в крови

2.10. Оптимизация турбидиметрического метода определения активности лизоцима

2.11. Метод определения активности лизоцима

2.12. Определение суммарных лизосомальных катионных белков в нейтрофилах крови

2.13. Определение титра комплемента в сыворотке крови

2.14. Метод радиоиммуноанализа кортизола и кортикостерона

2.15. Вспомогательные гематологические методы

2.16. Выделение нейтрофилов из периферической крови

2.17. Методы математической обработки результатов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Развитие метода радиоиммуноанализа лизоцима человека

3.1.1. Получение и характеристика антисыворотки к лизоциму

3.1.2. Получение 1251-меченного лизоцима

3.1.3. Выбор системы разделения свободной и связанной с антителами фракций лизоцима в радиоиммуноанализе

3.1.4. Оптимизация условий радиоиммуноанализа лизоцима

3.1.5. Построение стандартной кривой и определение основных характеристик радиоиммуноанализа лизоцима

3.2. Развитие турбидиметрического метода определения активности лизоцима в сыворотке крови

3.2.1. Повышение чувствительности метода

3.2.2. Стандартная кривая и характеристики метода определения активности лизоцима

3.3. Изучение влияния физической нагрузки на содержание лизоцима в плазме и лейкоцитах крови 86 3.3.1. Влияние однократной беговой нагрузки на содержание лизоцима в плазме и нейтрофилах крови гребцов-мужчин

3.3.2. Влияние специфической нагрузки на содержание лизоцима в крови гребцов-мужчин

3.3.3. Влияние однократной беговой нагрузки на содержание лизоцима и динамику лейкоцитов в крови спортсменок

3.3.4. Влияние специфической нагрузки на содержание лизоцима в крови гребцов-женщин

3.4. Применение экспресс-микрометода оценки содержания лизоцима в фагоцитах крови и их секреторной активности J

3.5. Исследование взаимосвязи- между содержанием лизоцима в крови и работоспособностью спортсменов

3.6. Исследование влияния физической нагрузки на активность лизоцима в сыворотке крови и относительное содержание суммарных лизосомальных катионных белков в нейтрофилах

3.7. Влияние физической нагрузки на титр комплемента в сыворотке крови у спортсменов

3.8. Изменение концентрации кортизола в крови при физической нагрузке

3.9. Влияние однократной физической нагрузки на активность лизоцима и динамику содержания лейкоцитов в крови крыс

3.10. Влияние физической нагрузки на концентрацию кортикостерона в сыворотке крови крыс

3.11. Влияние введения кортикостерона на активность лизоцима и содержание нейтрофилов в крови крыс

3.12. Влияние кортикостерона на секрецию лизоцима клетками крови in vitro

3.13. Секреторная и фагоцитарная активность нейтрофилов крови при физической нагрузке у крыс

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 109 ВЫВОДЫ 123 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ФН - физическая нагрузка

1д - иммуноглобулин (ы)

МПО - миелопероксидаза

ГК - глкжокортикоид(ы)

НР - неспецифическая резистентность

БСА - бычий сывороточный альбумин

АГ - антиген(ы)

АТ - антитело(а)

АС -антисыворотка

ПЭГ - полиэтиленгликоль

РИА - радиоиммуноанализ

Т - тотальная величина радиоактивности в пробе

В0 - величина начального связывания

Вп - величина неспецифического связывания

СУ - коэффициент вариации

М - среднее арифметическое значение т - квадратическая ошибка средней арифметической э - стандартное отклонение или выборочная дисперсия г - коэффициент корреляции

Л - корреляционное отношение

СЦК - средний цитохимический коэффициент

С'Н50 - гемолитическая единица комплемента

Ис - индекс секреции

В остальном применяли сокращения, принятые в журнале «Биохимия».

Введение Диссертация по биологии, на тему "Лизоцим как биохимический показатель секреторной активности нейтрофилов крови при физической нагрузке"

Актуальность проблемы. В последние годы значительно возрос интерес исследователей к неспецифическим факторам защиты от инфекций (врожденный иммунитет), изучение которых является не только важной задачей практической медицины, но и все тесной переплетается с проблемой выяснения механизма адаптации организма к различным , воздействиям. Многочисленными исследованиями установлено, что интенсивные физические и нервно-эмоциональные нагрузки, характерные для современного спорта, нередко приводят к угнетению системы неспецифической резистентности, что является одной из важных причин заболеваемости спортсменов (22, 90, 223). С другой стороны, хорошо известно, что систематические занятия физической культурой являются важным средством повышения неспецифической устойчивости организма к заболеваниям и неблагоприятным воздействиям среды (29, 170). Однако до настоящего времени остается непонятным механизм изменения и регуляции функционального состояния системы неспецифической резистентности и ее отдельных звеньев под влиянием физической нагрузки (ФН). Поэтому актуальной и важной проблемой с теоретической и практической точек зрения является выяснение механизма реагирования этой системы и, в частности, ее клеточного звена, на ФН.

Важнейшим и наиболее чувствительным клеточным звеном первой линии защиты организма является нейтрофильный гранулоцит или нейтрофил, специализирующийся на осуществлении защитных реакций путем фагоцитоза либо выделения антимикробных веществ во внеклеточную среду (49). Его лизосомальные гранулы содержат широкий спектр белков (лизоцим, миелопероксидаза, неферментные катионные белки, нейтральные и щелочные протеиназы, кислые гидролазы и др.), с помощью которых клетка осуществляет подавление жизнеспособности и переваривание микроорганизмов и иммунных комплексов. Поэтому содержание лизосомальных белков в нейтрофилах в значительной степени определяет биохимическую основу их функциональной активности (32). 7

Среди лизосомальных белков нейтрофилов лизоцим содержится в значительном количестве. Этот фермент является важным фактором антимикробной защиты в крови и внешних секретах, а также обладает многообразной иммунорегуляторной и гомеостатической функциями (23).

Учитывая вышесказанное, исследование секреторного выделения нейтрофилами индивидуальных лизосомальных белков, в частности, лизоцима, важно и актуально для понимания механизма изменения функционального состояния этих клеток при различных воздействиях на организм и может быть применимо для ранней диагностики возбуждения системы неспецифической резистентности (система врожденного иммунитета).

В последние годы накапливаются данные о регуляции функциональной активности клеточного звена системы неспецифической резистентности «стрессорными» гормонами, в частности, глюкокортикоидами, содержание которых существенно меняется под влиянием ФН. Вместе с тем отсутствуют сведения об их участии в изменении функциональной активности нейтрофилов при физических напряжениях.

Цель настоящей работы заключалась в исследовании влияния физической нагрузки на секреторную активность нейтрофилов крови человека и крысы, а также в исследовании возможности участия некоторых гуморальных факторов крови в регуляции секреторной активности этих клеток.

В связи с этим в работе были поставлены следующие задачи :

1) развить и охарактеризовать методы радиоиммуноанапиза (РИА) лизоцима человека и определения активности лизоцима в крови человека и крыс;

2) исследовать влияние различных физических нагрузок на содержание и активность лизоцима в плазме и клетках крови людей и крыс;

3) исследовать взаимосвязь секреции лизоцима нейтрофилами при физической нагрузке с динамикой в крови некоторых возможных факторов регуляции секреции (комплемент, глюкокортикоиды); 8

4) развить и обосновать комплекс микрометодов для оценки секреторной активности нейтрофилов крови и содержания в них лизосомальных катионных белков при обследовании спортсменов;

5) исследовать взаимосвязь между физической работоспособностью и секреторной активностью нейтрофилов крови.

Положения, выносимые на защиту :

1) развитый метод РИА лизоцима человека позволяет с высокой точностью, чувствительностью и специфичностью количественно определять содержание лизоцима в плазме и клетках крови, а модифицированный турбидиметрический метод позволяет определять активность лизоцима с высокой чувствительностью и воспроизводимостью;

2) ФН различного характера вызывают активацию секреции лизоцима нейтрофилами крови;

3) полученные результаты свидетельствуют об участии глюкокортикоидов в активации секреторной активности нейтрофилов крови;

4) предложенный в работе индекс секреции лизоцима (Ис) является информативным показателем секреторной активности фагоцитов крови и может быть использован для оценки работоспособности спортсменов.

Научная новизна исследования. Развиты чувствительные и воспроизводимые метод РИА лизоцима человека и метод определения активности лизоцима в сыворотке крови человека и крысы.

Впервые проведен анализ изменения содержания и активности лизоцима в клетках и плазме крови под влиянием ФН у людей и крыс. Установлено быстрое усиление под влиянием ФН секреторного выделения лизосомального белка лизоцима нейтрофилами крови. Детально исследована динамика секреции лизоцима в сопоставлении с количеством циркулирующих в крови лейкоцитов при выполнении ФН и в период отдыха. Показано, что восстановление среднего уровня содержания лизоцима в нейтрофилах происходит за счет мобилизации костномозгового резерва этих клеток.

Получены новые данные о взаимосвязи секреции лизоцима с динамикой в крови титра комплемента и глюкокортикоидов. В экспериментах in vivo и in 9 vitro на животных показана возможность участия глюкокортикоидов в активации секреторной активности нейтрофилов.

Практическая значимость работы. Установлена тесная взаимосвязь секреторной активности нейтрофилов крови с физической работоспобностью у спортсменов. Предложены математические модели для оценки работоспособности спортсменов на основе данных определения секреторной активности нейтрофилов.

Для оценки секреторной активности нейтрофилов разработан способ, основанный на использовании предложенного в работе оригинального показателя - индекса секреции лизоцима, который рассчитывают с помощью комплекса простых микроаналитических методик, применимых в условиях обследования спортсменов.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, изложения и обсуждения результатов экспериментов, выводов и списка цитированных литературных источников (243 наименования). Диссертационная работа изложена на 145 страницах и иллюстрирована 19 рисунками и 21 таблицей.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Прияткин, Сергей Александрович

ВЫВОДЫ

1. Развиты и охарактеризованы метод РИА лизоцима в крови человека и турбидиметрический метод определения активности лизоцима в крови людей и крыс. Характеристики РИА лизоцима: чувствительность - 0,2 нг/мл, константа сродства антител - 1,3 *109 л «моль-1, эффективность открытия -96,6 ± 1,6 %, коэффициенты вариации внутри серии определений - 4,5 %, между сериями определений - 8,4 %. Объем крови, необходимый для анализа - 1 Мкл. Характеристики метода определения активности лизоцима: чувствительность - 25 нг/мл, коэффициенты вариации внутри серии определений - 5,6 %, между сериями определений - 8,9 %, объем сыворотки крови, необходимый для анализа -15-20 мкл.

2. Разработан экспресс-микрометод оценки секреторной активности фагоцитов крови, для характеристики которого предложен показатель -индекс секреции лизоцима как величина отношения содержания лизоцима в плазме и клетках аликвоты цельной крови.

3. При выполнении физической нагрузки различного характера и интенсивности у людей происходит усиление секреции лизоцима нейтрофилами крови. При этом увеличивается концентрация и активность этого фермента в плазме крови и снижается его содержание в нейтрофилах параллельно с уменьшением содержания в этих клетках суммарных лизосомальных катионных белков. В процессе 2-часового отдыха содержание лизоцима и суммарных лизосомальных катионных белков восстанавливается за счет мобилизации клеточных резервов. При выполнении соревновательной нагрузки спортсменами происходит более значительная секреция лизоцима нейтрофилами и мобилизация клеточных резервов по сравнению со сдвигами этих показателей при беговой нагрузке. У спортсменок те же физические нагрузки вызывают менее выраженные, но более длительные изменения секреторной активности нейтрофилов по сравнению с ее изменениями у мужчин.

4. Установлена коррелятивная взаимосвязь между динамикой секреции лизоцима в плазму крови и активностью комплемента, а также

124 концентрацией глюкокортикоидов при интенсивной физической нагрузке у людей и крыс. В экспериментах на животных in vivo и in vitro показана возможность участия кортикостерона (0,45-2,0 мкг/мл крови) в активации секреции лизоцима нейтрофилами крови.

5. Выявлены взаимосвязи (величины корреляционных отношений - от 0,70 до 0,95) между физической работоспособностью и различными показателями секреции лизоцима нейтрофилами крови, которые описываются математическими уравнениями второго порядка. Наиболее тесная (функциональная) взаимосвязь обнаружена для изменения величины индекса секреции через 6 мин стандартной беговой нагрузки.

125

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Прияткин, Сергей Александрович, Санкт-Петербург

1. Адлер Ю.П., Маркова Е.В., Грановский Ю.В. Планирование экспериментов при поиске оптимальных условий. М.: Наука, 1971. - 283 с.

2. Адо А.Д., Маянский А.Н. Современное состояние учения о фагоцитозе // Иммунология. -1983. № 1. - С.20-26.

3. Аникин И.И. Содержание лизоцима в слюне у здоровых лиц // Факторы естественного иммунитета при различных физиологических и патологических состояниях: Тез.докл.конф. Челябинск, 1972. -С.40-42.

4. Аронов Г.Е., Иванова Н.И. Иммунологическая реактивность при различных режимах физических нагрузок. Киев: Здоров'я, 1987. - 88 с.

5. Ашмарин И.П., Васильев H.H., Амбросов В.А. Быстрые методы статистической обработки и планирования экспериментов. Л.: Изд-во ЛГУ, 1975.-76 с.

6. Ашмарин И.П., Кокряков В.Н., Лызлова С.Н., Раменская Н.П. Взаимодействие катионных белков гранул и миелопероксидазы лейкоцитов II Вопросы мед.химии. -1977. № 4. - С.534-537.

7. Бабаян С.С. Лизоцим человека, его выделение и свойства: Дисс. канд. биол. наук. М., 1973. -105 с.

8. Бабаян С.С., Журавлева Т.Н., Лебедева Л.А. Количественное определение лизоцима в сыворотке крови II Бюлл. экспер. биол. мед. -1979.-Т.87, №5.-С.432-433.

9. Барабаш Р.Д., Левицкий М.С. Ферментативные механизмы антимикробной защиты ротовой полости // Вопр. мед. химии. -1978. № 3. - С.291-294.

10. Бахов Н.И., Александрова Л.З., Титов В.Н. Роль нейтрофилов в регуляции метаболизма тканей (обзор литературы) // Лаб.дело. 1988. - № 6. - С.З-12.

11. Бережная Н.М. Нейтрофилы и иммунологический гомеостаз. Киев: Наукова Думка, 1988. -192 с.

12. Бужурина И.М., Панов И.М. Механизмы формирования клеточного ответа на внешние воздействия II Итоги науки и техники. Серия: Общиепроблемы физико-химической биологии. -Т.З. -М., 1986. -258 с.

13. Бухарин О.В., Васильев Н.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине. -Томск, 1974. 206 с.

14. Валуева Т.К., Чеботарев В.Ф. Тимозин, гормоны коры надпочечников и клеточный иммунитет // Новое о гормонах и механизме их действия. -Киев: Наукова Думка, 1977. -С.313-322.

15. Динамика изменений лейкоцитов периферической крови после физической нагрузки у нетренированных лиц / Виниченко Н.С., Дурнев

16. B.И., Овчаренко В.И., Ляпин В.П. //Теор. практ. физич. культуры. 1984. -№ 9. - С.26.

17. Виру A.A. Функция коры надпочечников при мышечной деятельности. М.: Медицина, 1977. -176 с.

18. Волков Н.В. Некоторые цитохимические показатели и фагоцитарная активность лейкоцитов у спортсменов при утомлении // Теор. практ. физич. культуры. -1971. № 5. - С.33-35.

19. Гольдберг Е.Д., Дыгай А.М., Шахов В.П. Глюкокортикоиды: регуляторное влияние на гемопоэз при стрессе // Бюллетень СО АМН СССР. 1987. - № 6.-С. 107-109.

20. Горизонтов П.Д., Белоусова О.И., Федорова М.И. Стресс и система крови. М.: Медицина, 1983. - 283 с.

21. Горшкова Т.Н. Влияние мышечной деятельности на картину красной и белой крови юных и взрослых спортсменов // Кровь и мышечная деятельность. М., 1960. - С.20-36.

22. Грант Х.Я., Яворковский Л.И., Блумберг И.А. Сравнительная оценка некоторых методов количественного определения лизоцима в сыворотке крови // Лаб. дело. -1973. №5. -С.300-303.

23. Дембо А. Г. Актуальные проблемы современной спортивной медицины. -М.:ФиС, 1980.-295 с.

24. Добротина H.A., Казацкая Ж.А., Емельянова Г.Ю. Лизоцим как модулятор иммунодогических реакций // Вопросы мед. химии. -1987. Т.ЗЗ. - Вып. 4.1. C.66-69Г

25. Егоров А.П. Изменение картины крови при мускульных движения // Мед.127журнал. -1924. № 7. - С.3-13.

26. Ермолаева З.В. Антибиотики, интерферон, бактериальные полисахариды.- 2-е изд. М.: Медицина, 1968. - 250 с.

27. Ждан-Пушкина С.М. О действии протаминов, гистонов и полипептидов основного характера на микроорганизмы // Научные доклады высшей школы. Биологические науки. -1973. №8. - С.82-98.

28. Жоллес П. Взаимосвязь между химической структурой и биологической активностью лизоцима белка куриного яйца и лизоцимов из других источников II Химия белка. - М.: Мир, 1969. - С.5-23.

29. Жуковская H.A., Ликина Т.Н. К вопросу о неспецифическом защитном действии лизоцима на организм //Антибиотики. -1968. -№10. С.920-923.

30. Зимкин Н.В., Коробов A.B. Физические упражнения как средство повышении устойчивости организма к неблагоприятным воздействиям внешней среды // Теор. практ. физич. культуры. -1960. №4. - С.270-275.

31. Казанцева И.В. Структурно-функциональные особенности лизоцима плаценты человека: Дисс. канд.биол.наук. Л., 1982. -125 с.

32. Кашкин К.П., Кубась В.Г. Основы клинической иммунологии: Учебное пособие для вузов. Л.: Изд-во ЛГУ, 1977. - 53 с.

33. Кокряков В.Н. Биохимические основы антимикробной активности нейтрофильных гранулоцитов//Клиническая морфология нейтрофильных гранулоцитов: Сб. научн. тр./Под ред. В.Е. Пигаревского.-Л.,1988.-С.21-51.

34. Коляда Т.И., Абзаева Л.Н., Бабошко Ю.А., Ершов А.Ф. Влияние воздействия физической нагрузки, гипоксии и гипертермии на факторы клеточной противоинфекционной защиты организма //ЖМЭИ -1988. №2.- С.76-79.

35. Кооперация антигенов, иммуноглобулинов, комплемента и антимикробных ферментов в регуляции подвижности гранулоцитов крови / Барабаш Р.Д., Ермакова Т.А., Бондаренко B.C. и др. // Бюлл. экспер. биол. и медицины. -1980. Т.89, №1. - С.40-42.

36. Корнева И.А., Иванова Е.М. Выбор оптимальных значений основных параметров метода радиоиммуноопределения // Медицинский и допинговый контроль спортсменов. Л.: ЛНИИФК, 1981. - С.42-48.128

37. Корнева Е.А., Шхинек Э.К. Гормоны и иммунная система. Л.: Медицина, 1988.-251 с.

38. Корнева И.А., Чайковский B.C. Влияние условий разделения свободных и связанных лигандов на точность метода радиоиммунного определения стороидов // Вопр. мед.химии-1984. Т.30, №4. - С. 122-125.

39. Косицкая Л.С., Сафронов Б.И. Динамика образования антиидиотипических антител в ходе иммуного ответа // ЖМЭИ. -1984. -№4. С.83-86.

40. Крыжановский Стресс и иммунитет// Вестник АМН СССР. 1985. - № 8. -С.3-12.

41. Кэбот Е., Мейер М. Экспериментальная иммунохимия. М.: Медицина, 1968.-683 с.

42. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1973. - 343 с.

43. Лантош А.Д. Значение лейкоцитарных сдвигов при напряженной мышечной работе // Теор. практ. физич. культуры, -1938. N2. - С.58-68.

44. Левин М.Я. Влияние физических нагрузок на изменение лизоцима крови спортсменов // Теор. практ. физич. культуры. -1982. N8. - с.24-26.

45. Левин М.Я., Шубин В,М., Аксенов ОД, Огурцов Р.П. Изменения неспецифической защиты у спортсменов // Теор. практ. физич. культуры. -1986.-N5.-С.49-50.

46. Лозовой В.П., Шергин С.М. Структурно-функциональная организация иммунной системи. Новосибирск; Наука, 1981. - 226 с.

47. Лунина Н.В., Агафонова H.A. Влияние многократного стрессорного воздействия на лизосомальный аппарат нейтрофильных лейкоцитов // Физиол. журн. СССР. -1986. Т.72, N7. -С.953-958.

48. Лызлова С.Н. Лизосомальные белки нейтрофилов факторы антимикробной защиты клеток // Вопр. мед. химии. - 1987. - Т.ЗЗ, вып.5. -С.43-48.

49. Мазинг Ю.А., Старосельская И.Я. Оценка надежности лизосомально-катионного теста для лабораторной диагностики // Лаб. дело. 1981, - N10. - С.582-584.

50. Маянский А.И„ Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.129

51. Новосибирск: Наука, 1963. 256 с.

52. Маянский А.Н., Бояринова Л.В, Опсоническая кооперация в системе нейтрофильного фагоцитоза // Успехи современной биологии. 1983. -Т.96, N2. - С.224-237.

53. Моргалева Т. Г. Гормональная регуляция процессов срочной адаптации при физической нагрузке: Дисс. канд. биол. наук.- М., 1967. -183 с.

54. Морозов В.И., Елхачева Е.В., Прияткии С.А., Цыпленков П.В. Механизм снижения фагоцитоза нейтрофилов крови при мышечной деятельности // Физиологические механизмы адаптации к мышечной деятельности: Тез. XIX Всес.конф. Волгоград, 1988 - С.243.

55. Морозов В.И., Петрова Т.Н. Выявление протеиназ нейтрофилов в скелетных мышцах крыс после мышечной деятельности//Укр. биохим. журн.-1993.-Т.65, N4.-C.40-44.

56. Морозов В.И., Цыпленков П.В., Рогозкин В.А. Выявление миелопероксидазы нейтрофилов в скелетных мышцах крыс после мышечной деятельности//Бюлл. экспер. биол. медицины.-1989.- Т. 110, N11.-С.489-491.

57. Нагоев Б.С. Очерки о нейтрофильном гранулоците. Нальчик: Эльбрус, 1986.-137 с.

58. Нейтрофилы, их роль в регуляции метаболизма тканей / Бахов Н.И., Александрова Л.З., Титов В.Н, и др. // Усп. соврем, биол. 1987. - Т.104, вып.2.-С.281-296.

59. Никитин В.Н. Атлас клеток крови сельскохозяйственных и лабораторных животных. М.: Гос. изд-во сельхоз. литературы, 1949. - С.48.

60. Нормы радиационной безопасности и основные санитарные правила работы с радиоактивными веществами и другими источниками ионизирующих излучении. 2-е изд. - М.: Энергоиздат, 1981. - 95 с.

61. Осипов С.Г., Бабаян Г.В., Ермолин Г.А, Титов В.Н. и др. Иммунный ответ к миоглобину при физических нагрузках у юных спортсменов // Лаб. дело, -1986. N9. - с.550-553.

62. Остерман Л.А. Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммуноэлекгрофорезом и радиоиммунными130методами. М.: Наука, 1983. - 303 с.

63. Петров Р.В., Хаитов P.M., Манько В.М., Михайлова A.A. Контроль и регуляция иммунного ответа. Л.: Медицина, 1981, - 312 с.

64. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. -М.: Медицина, 1978.-105 с.

65. Пигаревский В.Е. Полиморфноядерный лейкоцит и макрофаг в реакциях воспаления и гиперчувствительности // Арх. патол. -1983. Т.45, вып.11. -С. 14-22.

66. Пигаревский В.Е. Морфологическая концепция о гранулоците как секреторной железе// Тканевая биология: Матер. Ill респ. науч.совещ. -Тарту, 1980.-С. 114-117.

67. Пигаревский В.Е., Мазинг Ю.А., Фокина O.E. К методике применения лизосомально-катионного теста в лабораторной диагностической практике // Лаб. дело. -1981. №10. - С.579-582.

68. Покровский В.И., Авербах М.М., Литвинов В.И., Рубцов И.В. Приобретенный иммунитет и инфекционный процесс. М., 1979. - С.34-35.

69. Попов С.М. Клеточные механизмы регуляции секреторного процесса в молочной железе.-Л.: ЛГУ, 1989. 200 с.

70. Предтеченский В.Е. Руководство по клиническим и лабораторным исследованиям М.: Медицина, 1964. - 959 с.

71. Прияткин С.А. Влияние физической нагрузки на факторы неспецифической резистентности организма // Общие и частные вопросы онкоморфологии. Л.: Медицина, 1985. - С.89-93.

72. Прияткин С.А., Морозов В.И., Рогозкин В.А. Влияние физической нагрузки на факторы неспецифической резистентности и содержание стероидных гормонов в крови человека // Физиология человека. 1988. - Т. 14, №4. -С.606-612.

73. Радиоиммуноанализ стероидов. Научно-практические аспекты / Морозов131

74. B.И., Чайковский В.С., Прияткин С.А. и соавт. // Физиол. журн. СССР. -1988.-Т.74, №8.-С. 1049-1071.

75. Разработка быстрого метода радиоиммуноанализа на миоглобин для экспресс-диагностики инфаркта миокарда / Никитин Ю.П., Грачев М.А., Лактионов П.П. и др. // Вопр. мед.химии. -1983. Т.29, № 6. - С.127-131.

76. Серова Т.А., Соколов Я.А. Реакционная концентрация субстрата при хлораминовом йодировании //ЖМЭИ. -1984, № 1. -С.71-78.

77. Современный спорт и неспецифическая сопротивляемость организма спортсменов высокого класса / Левандо В.А, И.Д., Суздальницкий Р.С. и др. // Теор. практ. физич. культуры. -1983, № 1.1. С.38-39.

78. Суркина И.Д. Стресс и иммунитет у спортсменов II Теор. практ. физич. культуры. 1981, № 3. - С. 18.

79. Сухорукое А.М., Журавлева Т.П., Цветков В.С., Щербакова Э.Г. Экспресс-метод определения лизоцима в биологических жидкостях II Лаб.дело.1985.-№ 7.-С.412-420.

80. Ткачева Г.А., Балаболкин М.И., Ларичева И.П. Радиоиммунохимические методы исследования. М.: Медицина, 1983. -191 с.

81. Умарова Л.С. Состояние естественного иммунитета у спортсменов разных возрастных групп // Теор. практ. физич.культуры. 1981. - № 8.1. C.26.

82. Физиология лейкоцитов человека / Алмазов В.А., Афанасьев Б.В., Зарицкий А.Ю. и др. Л.: Наука 1979. - 230с.132

83. Фрейдлин И.С. Система мононуклеарных фагоцитов. М.: Медицина, 1983.-272 с.

84. Цыпленков П.В., Морозов В.И., Кокряков В.Н., Рогозкин В.А. Иммунорадиометрический анализ миелопероксидазы крысы // Укр биохим. журн. -1988. Т.60, № 6. - С.72-75.

85. Чайковский В.С., Башарина О.Б., Шаляпина И.В. Содержание миоглобина, тропомиозина в организме при физических нагрузках // Адаптация к мышечной деятельности и гормоны. Л.: ЛНИИФК, 1986. -С.92-100.

86. Чард Т. Радиоиммунологические методы / Пер. с англ. М.: Мир, 1981. -248 с.

87. Чахова О.В., Горюнова А. Г. Образование лизоцима культурой гистиоцитов-макрофагов // Антибиотики-1965. Т.6. - С.507-511.

88. Шинкарев С.И. Влияние физических нагрузок на лизосомальный аппарат нейтрофильных лейкоцитов периферической крови II Физиол. журн. СССР. -1983. Т. 1.Х1Х, № 1. - С.70-73.

89. Шкурина Е.А., Рубцова М.Ю., Гаврилова Е.М. Определение констант связывания антител иммунных сывороток к 1дС человека //ЖМЭИ. 1987. - № 5. - С.71-76.

90. Шубик В.М., Левин М.Я. Иммунитет и здоровье спортсменов,- М.: ФиС, 1985.-175 с. ^

91. Шубик В.М. Иммунитет у спортсменов И Теор. пракг. физич. культуры. -1978.-№7.-С.28-32.

92. Яворковский Д.И., Грант Х.Я. Синтез и секреция лизоцима лейкозными больных острым моноцитарным лейкозом // Лейкозология. Рига: Изд-во Рижского мед. ин-та, 1979. - С.65-67.

93. Янковский О.Ю., Довнар Т.Е. Роль протеиназ и продуктов деградации белков в защитных реакциях // Журн. общ. биол.-1985. Т.44. - С.93-101.

94. Abracham G.E. Radioimmunoassay of steroids in biological fluids // J. Steroid Biochem. 1975. - V.6. - P.261 -270.

95. Alonso F., Sanchezerespo M., Mato J. Modulatory role of cAMP in the release of PA factor from human polymorphonuclear leukocytes // Immunology. -1982. V.45, N 3. - P.495-501.

96. A rapid and sensitive non-competitive avidin-biotin immuno-enzymatic assay for lysozyme / A.Francina, H.CIoppet, R.Guinet et al. // J.Immunol. Methods.-1986.-V.87.-P.267-272.

97. Baehr R.V., Timm M. Nachweis der induzierten Enzymsekretion ans neutrophilen Granulozyten des Mensehen-Marker einer Zellakti-vierung // Folia Haematol., Leipzig.- 1984. V.111, N 5. - S.692-700.

98. Baggiolini M., Bretz U., Dewald B. Subcellular localization of granulocyte enzymes II Neutral proteases of human polymorphonuclear leukocytes. Biochemistry, Physiology and Clinical significance. Baltimore-Munich, 1978. -P.3-17.

99. Baggiolini M., Bretz U., Gusus B. Biochemical characterization of azurophil and specific granules from human and rabbit polymorphonuclear leukocytes II Schweiz. Mod. Wschz. -1974. Bd.104, N 4. - S. 129-132.

100. Baggiolini M., De Duve C., Masson P.L., Heremans J.F. Association of lactoferrin with specific granules in rabbit heterophil leukocytes // J. Exp. Med.-1970. V. 131, N 3. - P.559-570.

101. Baiton D.F., Farguhar M.G. Origin of granules in polymorphonuclear leukocytes, two types derived from opposite faces of the Golgi complex in developing II J. Cell. Biol. -1966. V.28, N 2. - P.277-301.

102. Baiton D.F., Ullyot J.L., Farguhar M.G. The development of neutrophilic polymorphonuclear leukocytes in human bone marrow II J. Exp. Med.-1971. -V. 134, N4.-P.907-934.

103. Bar-Eli M., Territo M.C., Peters R.S., Schwabe A.D. A neutrophyl lysozyme leak in patients with familial mediterranean fever // Am. J. Hematol. 1981. -V.11.-P.387-395.

104. Barnathan E.S., Raghunath P.N., Tomaszewski J.E., Ganz T., Cines D.B. Immunochemical localization of defensin in human coronary vessels // Am. J.

105. Path. -1997. V. 150. - P. 1009-1020.

106. Bennett R.M., Mochla C. A solid-phase radioimmunoassay for the measurement of lactoferrin in human plasma: variations with age, sex, and disease// J. Lab. Clin. Med. -1976. V.88, N 1,- P. 156-166.

107. Biphasic changes of blood myoglobin level in weight training / A.liboshy, S.Tocuda, T.Nishimura et al. // Sports Med.-1982. V.22, N 3. - P.284-294.

108. Blace C.C.F., Swan J.D.A. X-ray analysis of structure of human lysozyme at 6A resolution // Nature New Biol.-1971 .-V.232. P. 12-27.

109. Boasson E.H. On the bacteriolysis by lysozyme // J. Immunol. 1938. - V.34, N4.-P.281-293.

110. Bolton A.E., Hunter W.H. The labelling of proteins to high specific radioactivities by conjugation to a 125l-containing acylating agent // Biochem. J. 1973. - V. 133, N 3. - P.529-539.

111. Boym A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood II Scand. J. Clin. Invest. -1968. V.21. - P.77-89.

112. Bretz U., Baggiolini M. Biochemical and morphological characterization of azurophil and specific granules of human neutrophilic polymorphonuclear leukocytes II J. Cell Biol. -1974. V.63, N 1. - P.251 -2699.

113. Briggs R.S., Perillie P.E., Finch S.C. Lysozyme in bone marrow and peripheral blood cells // J. Histochem Cytochem.-1966. V.14. - P. 167-175.

114. Briheim G., Stendahl O., Dahlgren C. Neutrophil function during an inflammatory reaction // Advances in Biosciences. -1987. V.66. - P.89-95.

115. Canfield R.E., Collins J.C., Sobel J.H. Human leukemia lysozyme // Lysozyme / Eds. E.F. Osserman, R.E. Canfield, S. Beychok. Acad. Press, New York, 1974. P.63-70.

116. Canfield R.E.-, Kammerman S., Sobel J.H., Morgan F.J. Primary structure of lysozyme from man and goose II Nature new biology. 1971. - V.232, N 7. -P. 16-17.

117. Chafouleas J.G., Dedman J.R., Munjaal R.P., Means A.R. Calmodulin development and application of a sensitive radioimmu noassay // J. Biol. Chem. -1979. V.254, N 20. - P. 10262-10267.

118. Changes in tissue protein levels as a result ef endurance exercise /

119. G.L.Dohm, F.R.Puente, C.P.Smith et al. // Life Sci.-1978. V.23. - P.845-850.

120. Characterization of the secretory activity of leukotriene B4 toward rabbit neutrophils / H.Showell, P.Nassache, P.Borgeat et al. // Ibid. 1982. - V.128, N 2. -P.811-623.

121. Corberand J. Le Lysozyme // Rev. de med. de Toulouse. -1977. V.13, N 2. -S. 125-133.

122. Correction of the corticosteroid-induced defect of neutrophil phagocitic function by RV 41740 / F.Capsom, F.Minonzio, E.Venegoni et al. // Advances in the Biosciences.-1988. V.68. - P.393-397.

123. Covey W., Perillie P., Finch S.C. The origin of tear lysozyme // Proc. Soc. Exp. Biol. -1971. V.137, N 4. - P.1362-1363.

124. Crossowicz N., Ariel M., Weber T. Improved lysozyme assay in biological fluids // Clin. Chem. -1979. V.25, N 3.-P.484-485.

125. Daems W.T. On the fine structure of human neutrophilic leukocyte granules // J. Ultrastract. Res. -1968. V.24, N 2,- P.343-348.

126. Dale D.C., Fauci AS., Guerry D., Wolff S.M. Comparison of agents producing a neutrophilic leukocytosis in man // J. Clin. Invest. -1975. V.56. - P.808-813.

127. Dale D.C., Fauci AS., Wolff S.M, Alternate day prednisone. Leukecyte kinetics and susceptibility to infections // N. Eng. J. Med. 1974. - V.291. -P. 1154-1156.

128. Davies A., Lefkowitz R. Corticosteroid-induced differential regulation of p-adrenergetic receptors in circulating human polymorphonuclear leukocytes and mononuclear leukocytes // J. Clin. Endocrinol. Metab. 1980. - V.31, N4. -P.599-603.

129. Deonier R.C., Williams J.W. Self-association of muramidase (lysozyme) in solution at 25°, pH 7,0, and pi = 0,2 // Bio-chemistry.- 1970. V.9. - P.4260-4267.

130. Desbuquois B., Aurbach G.D. Use of polyethylene glycol to separate free and antibody-bound peptide hormones in radioimmunoassays // J. Clin. Endocrinol. Metab. -1971. V.33. - P.732-740.

131. Desensitization of neutrophil aggregation response to chemotactic factors / J.O'Flaherty, D.Kreutser, H.Showell et al. //Am. J. Pathol. 1978. - V.93, N3.1. P.693-706.

132. Donaldson D., Roberts R., Larsen H.S., Tew J. Interrelationship between serum betalysin, lysozyme and antibody-complement system in killing Escherichia coli // Infect.and Immunity. 1974. - V.10, N3. - P.657-666.

133. Dunn W.B., Hardin J.H., Spicor S.S. Ultrastructural localization of myeloperoxidase is human neutrophil and rabbit heterophil and eosinophil leukocytes // Blood. -1968. V.32, N5. - P.935-944.

134. Ebert R.H., Barclay W.R. Changes in connective tissue reaction induced by cortisone // Ann. Int. Med. -1952. V.37. - P.506-518.

135. Einstein L.P., Colten H.R. Plasma lysozyme. A mesure of neutrophil turnover. An analytical review // J. Exp. Med.-1976. V.143. - P. 114-126.

136. Evidence that fibrinogen and fibronectin are modulators of erythrocyte adhesion to vascular endothelium / J.Wautier, D. Pintigny, M.Wautier et al. // Lab. Clin. Med. -1983. -V.101, N7. P.911-920.

137. Factors involved in cell adhesion to vascular endothelium / J.Wautier, N.Wautier, D.Pintigny et al. // Blood Cells.-1983.-V.9, N2. P.221-234.

138. Fink K., Adams W. Urinary purines and purimidines in normal and leukemic subjects //Arch. Biochem. -1968. V.126. - P.37-42.

139. Fink M.F., Fink S.C. Serum muramidase and granulocyte turnover // Proc.Soc. exp. Biol.Med. -1968. V.127. - P.365-378.

140. Frohm M., Gunne H., Bergman A.C., Agerbert B., Bergman T., Boman A., Liden S., Jornvall A., Boman AG. Biochemical and anthibacterial analysis of human wound and blister fluids // Eur. J. Biochem. -1996. V.237. - P.86-92.

141. Gahr M., Schulre M., Scheffcryk D. Speer C.P., Hinrich P.J. Diminished release of lactoferrin from polymorphonuclear leukocytes of human neonates // Acta haematol. -1987. V.77, N2. - P.90-94.

142. Glasser L., Fiederlein R.L. Functional differentiation of normal humanneutrophils // Blood. -1987. V.69, N3. - P.937-944.

143. Gordon S., Todd J., Gohn Z.A. In vitro synthesis and secretion of lysozyme by mononuclear phagocytes // J. Exp. Med. -1974. V.139. - P.1228-1248.

144. Goudswaard J., Virella G. Immunochemical determination of human lysozyme by laser nephelometry II Clin. Chem. -1977. V.23. - P.267-270.

145. Greenwald R.A., Moy W.W. Effect of agarose variability on the measurement of lysozyme activity // Ciin. Chem. Acta. -1976. V.73. - P.299-305.

146. Greenwood P.O., Hunter W.N. The preparation of 131l-labelled human growth hormone of high specific radioactivity // Biochem J. -1963. V.83. - P.114-123.

147. Grossowicz N. Ariel M. Methods for determination of lysozyme activity // Methods of Biochemical Analysis / Ed. D.CIick. N.Y.: An Interscience Publication J.Wiley Sons. -1981. - V.29. - P.435-446.

148. Grossowicz N., Ariel M., Weber T. Improved lysozyme assay in biological fluids II Clin.Chem. -1979. V.25, N3. - P.484-485.

149. Gullner H., Gill J., Bartter F., Kafka M. Inhibition of prostaglandin synthesis increases leukocyte p-adrenergic receptors in man // Clin. Res. 1980. - V.28, N3. - P.479-485.

150. Hampe O.G., Tondo C.V. A biophysical model of lysozyme self-association II Biophys. J. -1982. V.39. - P.77-82.

151. Hankiewics J., Swierczek E. Lysozyme in human body fluids // Clin. Chem. acta. -1974. -V.57. P.205-209.

152. Hansen N.E. The relationship between the turnover rate of neutrophilic granulocytes and plasma lysozyme levels // Brit. J. Haematol. 1973. - V.25. -P.771-778.

153. Hansen N.E., Karle H., Andersen V., Olgaard K. Lysozyme tornover in man // J. Clin. Invest. 1972. V.51, N5. - P. 1146-1155.

154. Hansen N.E., Malmquist J., Thorell J. Plasma myeloperoxidase and lactoferrin measured by radioimmunoassay: relation to neutrophil kinetics // Acta Med. Scand. -1975. V.198, N6. - P.457-443.

155. Hardy I. The Hematology of Rats and Mice II Pathology of Laboratory Rats and Mice / Ed. E. Sotchin, F.I. Roc. Paris^Philadelphia-Pennsylvania, 1967. -P.501-536.

156. Henson P.M. The immunologic release of constituents from neutrophil leukocytes II J. Immunol. -1971. -V. 107, N6. P. 1535-1546.

157. Herbert V., Lau K.S., Gottlieb C.W., Bleicher S.J. Coated charcoal immunoassay of insulin II J. Clin. Endocrinol. Metab. 1965. - V.25, N10. -P.1375-1384.

158. Hetherington S.V., Quie P.G. Human polymorphonuclear leukocytes of the bone marrow, circulation and marginated pool function and granule protein content II Amer. J. Hematol. -1985. V.20, N3. - P.235-246.

159. Hirech J.G Cinemicrophorographic observation on granule lysis in polymorphonuclear leukocytes during phygocytosis // J. Exp. Med. 1962. -V.116, N5. -P.827-834.

160. Hirsh J., Cohn L. Degranulation ef polymorphonuclear leukocytes following phagocytosis of microorganisms// lbid.-1960. V.112. - P.1005-1014.

161. Human neutrophil degranutation during extracorporeal circulation / Y.T. Wachtfogel, U.Kucich, J.Grunplate et al. // Blood. 1987. - V.69, N1. - P.324-330.

162. Hunter R. Standardization of the chloramin T method of protein iodination // Proc. Soc. Biol. Med. 1970. - V.133, N3. - P.989-992.

163. Hunter W.M. Recent advances in radioimmunoassay and related procedures II Proc. of symp. "Radioimmunoassay and related procedures in medicine": Int. Atom. Energy Agency, Vienna, 1982. P.3-20.

164. Immunobiology of the macrophage / Ed. D.S. Nelson. New York: Acad. Press, 1976.-633 p.

165. Ishibashi Y., Yamashita T. Purification and characterization of a phagocytosis-stimulating factor from phagocytosing polymorphonuclear neutrophils: comparison with granule basic protein II Ibid. 1985. - V.48, N3. -P.799-805.139

166. Johansson B.G., Malmquist J. Quantitative immunochemical determination of lysozyme (muramidase) in serum and wine // Scand. J. Clin. Lab. Invest. -1971.-V.27.-P.255-261.

167. Jessup W., Leoni P., Dean R.T. Constitutive and triggered lysozomal enzyme secretion // Developments in Cell Biology. I. Secretory Processes / Ed. R.T. Dean, P. Stahl. Butterworths, 1985. - P.38-57.

168. Jolles J., Jolles P. Human tear and human milk lysozyme // Biochemistry. -1967.-V.6.-P.414-420.

169. Kaufman J.C., Harris T.J., Higgins J., Maisel A.S. Exercise-induced enhancement of immune function in the rat // Circulation.-1994.-Vol.90.-P.525-532.

170. Keeler R. The effect of bilateral nephrectomy in the production and distribution of muramidase (lysozyme) in the rat // Canad. J. Physiol. Pharm.-1970. -V.48. -P. 131-135.

171. Klass H.J., Hopkins J., Neale G., Peters T.J. The estimation ef serum lysozyme: a comparison of four assay methods // Biochem. Med. 1977. - V.18, N1. - P.52-57.

172. Klebanoff S.J., Clark R.A, The Neutrophil: Function and Clinical Disorders. -Amsterdam: North-Holland Publ. Co., 1978. 810 p.

173. Klockars M., Reitamo S., Weber T., Kerttula Y. Cerebro-spinal fluid lysozyme in bacterial and viral meningitis // Acta Med. Scand. 1978. - V.203, N1/2. -P.71-74.

174. Kobsel N., Ramadori G. Human hepatoma cells synthesize and secrete lysozyme: modulation by cytokines // Hepatology. 1994. - V.19. - P. 11821188.

175. Kok R.J., Haas M., Moolenaar F., de Zeeuw D., Meijer D.K. Drug delivery to the kidneys and the bladder with the low molecular weigth protein lysozyme // Ren. Fail. -1998. V.20. - P.211 -217.

176. Kores S. The role of granulocytes in host defence against tumors // Natural cell-mediated immunity against tumor // Ed. R.B. Herberman. New York: Acad. Press, 1981. - P. 1-7.

177. Kuoppasalmi K., Naveri ,H., Harkonen M., Adlercreutz H. Plasma Cortisol,140androstendion, testosterone and luteinizing hormone in running exercise of different intensities // Scand. J. Clin. Lab. Invest. -1980. V.40. - P.403-4099.

178. La Porte D.C., Storm D.R. Detection of calcium-dependent regulatory protein binding components using 125l-labeled calcium-dependent regulatory protein // J. Biol. Chem. -1978. V.253, N10. - P.3374-3377.

179. Lai F.M., Fat A., Maclelland D.B.L., Furth R.V. In vitro synthesis of immunoglobulins, secretory component, complement and lysozyme by human gastrointestional tissues. I. Normal tissues II Clin. exp. Immunol. 1976. - V.23. -P. 9-19.

180. Leffel M.S., Spitznagel J.K. Association of lactoferrin with lysozyme granules of human polymorphonuclear leukocytes // Infect. Immunol. 1972. - V.6, N5. -P.761-765.

181. Leukocytosis of exercise: role of cardiac output and catecholamines / N.K. Foster, J.B. Martin, R.E. Rangno et al. // J. Appl. Physiol. 1986. - V.61, N6. -P.2218-2223.

182. Leukokinetic studies. IV. The total blood circulating and marginal granulocyte pools and the granulocyte turnover rate in normal subjects / J.W. Athens, D P. Haab, S.O. Raab et al. // J. Clin. Invest. -1961. V.40. - P.909-995.

183. Litwack G., Chakrabarti S., Wajciechowski. Human kidney lysozyme II Arch. Biochem. Biophis. -1959. V.83.- P.566-567.

184. Lysozyme localisation in human gastric and duodenal epithelium. An immunochemical study / H. Sarto, T.Kasajima, A.Masuda et al. // Cell Tissue Res. 1988. - V.251, N2. - P.307-313.

185. Maack T., Siqulem D. Renal handling of lysozyme // Lysozyme / E.F. Osserman, R.E. Canfield, S. Beyehoek, Eds. New-York: Acad.Press. -1974. -P.321-333.

186. Mac Gregor R.R., Granulocytes adherence changes induced by hemodialysis endotoxin, epinephrine and glucocorticoids II Ann. Int. Med. 1977. - V.86. -P.39-399.

187. Maeda K., |to K., Yamaguchi N. A simple lysoplate method ef lysozyme determination with samples dried on filter paper // Clin. Chim. Acta. 1980. -V. 100, N2.-P. 175-181.

188. Malmquist J. Serum and urinary in leukemic and polycytemia sera // Scand. J. Haematol. -1972. V.9. - P.258-265.

189. Marcolongo R., Lalumera M., Calabria, Imbimbo B. In vitro and ex vivo effects of different corticosteroids on poly-morphonuclear leukocyte functions // Adv. Exp. Med. Biol. 1984. - V. 171. - P.321-333.

190. Marino I., Columbo M., Marone G. The releasability of lysosomal enzymes from neutrophil leukocytes in patientes with rheumatoid arthritis // Clin. Exper. Rheumatol. -1996. V. 14. - P.387-394.

191. Mason D.Y., Farrel C., Taylor C.R. The detection of intra cellular antigens in human leukocytes by immunoperoxydase staining // Brit. J. Haematol. -1975. -V.31.- P.361-369.

192. Membrane-bond lactoferrin alters the surface properties of polymorphonuclear leukocytes / L.Boxer, R.Heek, Yang Hsin-Hsin et al. // J. Clin. Invest. -1982. V.70, N 5. - P.1049-1057.

193. Method for producing specific antisera with small dose of immunogen / Y. Vaitukaitis, J.B. Robbins, E. Nieschley, G.T. Ross II Endocrinol. Metabol. -1971. V.33, N99. - P.988-993.

194. Mintz G., Herbold D.R., Glaser L. A fluorescent assay for bacterial cell wall lytic enzymes II Analyt. Biochem. -1975. V.66, N1. - P.272-278.

195. Molawista S.E., Bensch K.G. Human polymorphonuclear leukocytes: demonstration of microtubular and effect of col-chicine // Science. 1967. -V.156, N5. - P.521-522.

196. Montagne P., Cuilliere M.L., Mole C., Bene M.C., Faure G. Microparticle-enhanced nephelometric immunoassay of lysozyme in milk and human body fluids// Clin. Chem. -1998. V.44. - P. 1610-1615.

197. Moss J.M., Van Damme M.P., Murphy W.H., Stanton P.G., Thomas P., Preston B.N. Purification, characterization, and biosynthesis of bovine cartilage lysozyme isoforms // Arch. Biochem. Biophys. -1997. -V.339. P. 172-182.

198. Mouton A., Jolles J. On the identity of human lysozymes isolated from normal and abnormal tissues or secretions // FEBS Lett. -1969. V.4, N4. - P.337-340.

199. Murphy P., Hart D.A. Regulation of enzyme release from human polymorphonuclear leukoeytes: further evidence for the independent regulationof granule subpopulations // Biochem. Cell. Biol. 1988. - V.65, N12. - P. 10071015.

200. Murphy G., Royaelds J.J., Bretz U, Baggiolini M. Collagenase is a component of the specific granules of human neutro-philic leukocytes // Biochem. J. -1977. V.162, N1. - P.195-197.

201. Nakamur S., Gohya Y., Losso J.N., Nakai S., Kato A. Protective effect of lysozyme-galactomannan or lysozyme-palmitic acid cojugates agaist Edwardsiella tarda infection in carp, Cyprinus Carpio L. // FEBS Lett. 1996. -V.383. - P.251-254.

202. Noble R.F., Fudenberg H.H. Leukocyte lysozyme activity in myelocytic leukemia // Blood. -1967. V.30. - P.465-471.

203. Oberg G., Venge P. Bone-marrow regeneration after therapy-induced hypoplasia monitored by serum measurements of lactoferrin, lysozyme and myeloperoxidase // Scand. J. Haematol. -1986. V.37, N2. - P.130-136.

204. O'Flagerty J., Showell H., Becker E., Ward P. Neutrophil aggregation: effect of the time and sequence of addition of calcium, magnesium and chemotactic factor // J. Reticuloendotel. Soc.-1979. V.25, N1. - P.29-37.

205. Osserman E.F., Lawlor D.P. Serum and urinary lysozyme (muramidase) in monocytic and monomyelocytic leukemia // J. Exp. Med. 1966. - V.124. -P.921-951.

206. Otaki N., Kimura N. Studies on lysozymes. VI. Application of a new colorimetric assay on lysozymes // Ind. Health.-1975. V.13, N1. - P.23-29.

207. Panjum S., Chalkley R. High resolution acrylamide gel electrophoresis of histones//Arch. Biochem. Biophys. -1969. V.130, N2.- P.337-346.

208. Parrillo J.E., Fanci AS. Mechanisme of glucocorticoid action on immune processes // Ann. Rev.Pharmacol. Toxicol. -1979. -V.19. P.179-201.

209. Parry R., Chandan R., Schanani R. A Rapid and sensitive assay of muramidase // Proc. Soc. Exp. Biol. -1965. V.119. - P.384-386.

210. Patriarca P. The biology of phagocytes // Eur. J. Clin. Invest. 1984,- V.14, N3.-P.315-316.

211. Paus E., Bormer O., Nustad K. Radioiodination of proteins with the iodogen method // Radioimmunoassay and related procedures in medicine (Proc. symp.,

212. Vienna, 1982,-Vienna: IAEA, 1982. V.I. - P. 161-171.

213. Peeters T.L., Depraeter Y.R., Vantrappen G.R. Radioimmunoassay for urinary lysozyme in human serum from leukemia patients 11 Clin. Chem. 1978. -V.24, N12. - P.2155-2157.

214. Pruzanski W.D., Wilson R. Renal handling of endogenous lysozyme in man // J. Lab. Clin. Med. -1977. V.90, N1. - P.61-67.

215. Qasba P.K., Kumar S. Molecular divergence of lysozymes and alpha-lactalbumin // Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol. -1997. V.32. - P.255-306.

216. Radioimmunoassay for serum and urinary lysozyme / M.J. Thomas, A. Russo, P. Graswell et al. // Clin.Chem. -1981.-V.27, N7,- P. 1223-1226.

217. Radioiodination of human calcitonin using the iodegen reagent / P. Motte, P. Vauzelle , G.F. Alberici et al. // J. Immunol. Methods. 1986. - V.87. - P.223-227.

218. Rausch P.G., Moore T.G. Granule enzymes of polymorphonuclear neutrophils. A phylogenetic comparison // Blood.- 1975. V.46, N8. - P.913-919.

219. Scott C. Maturation-linked expression of C3b and C3b1 receptors on developing human bone marrow and peripheral blood granulocytes // Ibid. -1981. -V.44, N3. P.201-210.

220. Selsted M.E., Martinez R.J. A simple and ultrasensitive enzymatic assay for the quantitative determination of lysozyme in the picogram range // Anal. Biochem. -1980. V. 109. - P.67-70.

221. Senn H.J., Chu В., O'Malley J., Holland J.F. Experimental and clinical studies on muramidase (lysozyme). I. Muramidase activity of normal human blood cells and inflammatory exudates // Acta haematologica (Basel). 1970. - V.44. -P.65-77.

222. Serum-levels of lactoferrin, lysozyme and myeloperoxidase in normal, infection-prone and leukemic children / P. Venge, T. Foucard, J. Henriksen et al. //Clin. Chim. Acta. -1984. V.136, N2-3. - P. 121-130.

223. Sharp N.C.C., Kautedakis Y. Sport and overtraining syndrome: immunological aspects // Br. Med. Bull.-1992.-Vol.48.-P.518-533.

224. Sheldon B.W., Crawford M.P., Brewer N.R. The Laboratory rat / Ed. H.I.

225. Bakeret al. New York: Acad. .Press, 1979. - V.l. - P.108-112.

226. Shima K., Hirota M., Fukuda M., Tanaka A. Determination of urirary lysozyme for potential detection of tubular dysfuction in diabetic nephropathy // Clin. Chem. 1986. - V.32, N10. - P.1818-1822.

227. Sklar L., Jesaitis A., Painter R. The neutrophil N-formyl peptide receptor: dynamics of ligand-receptor interactions and their relationship to cellular responses // Regulation of Leukocyte Function. New York, 1984.-P.29-82.

228. Smolelis A.N., Hartseil S.E. Factors affecting the lytic activity of lysozyme // J. Bacteriol. -1952. V.63. - P.665-674.

229. Sofianopoulos A.J., Holde K.S. Evidence for dimerization of lysozyme in alkaline solution // J.Biol. Chem.-1961.- V.236. P. 82-83.

230. Studies on lysozymes. III. Isolation and characterization of human milk and leukocytes lisozyme / Kimura M., Otaki N., Murayama K. et al // Ind. Health. -1970.-V.8.- P.22-30.

231. Sykes J.A.S., Thomas M.J., Goldie D.J., Turner G.M. Plasma lactoferrin levels in pregnancy and cystic fibrosis // Clin. Chim. Acta. 1982. - V.122. -P.385-393.

232. Thome K.J.I., Oliver R.C., Barrett A.J. Lysis and killing of bacteria by lysosomal proteinases // Infect. Immunol. -1976. V.14, N3. - P.555-563.

233. Van Oss C.J. Phagocytosis as a surface phenomenon // Ann. Rev. Microbiol. -1978.-V.32.-P. 19-39.

234. Van Furth R. Effect of glucocorticosteroids on phagosome-lysozyme interaction // Infect. Immunol. -1975. V.12. - P.288-294.

235. Virella G. Electrophoresis of lysozyme into Micrococcus-containing agarose gel: quantitative and analytical applications // Clin. Chem. Acta. -1977. V.75. -P. 107-215.

236. Weiss J., Elsbach P., Olsson I., Odeberg H. Purification and characterization of a potent bactericidal and membrane active protein from the granules of human polymorphonuclear leukocytes // J. Biol. Chem. 1978. - V.253, N5. -P.2664-2672.

237. Wierusz-Wysocka B., Klimas R., Siekierka H., Wysocki H. Wplyw adrenaliny na zachowanie sie subpoplagi granuiocytow obojetnochlonuych krwi odwodowei II Immunol. Pol. -1981. V.6, N3/4. - P.209-214.

238. Wrigth D.G., Gallin J.I., Secretory responses of human neutrophils: exocytosis of specific (secondary) granules by human neutrophils during adherence in vitro and during exudation in vivo // J. Immunol. 1979. - V.123. -P.285-294.

239. Yalow R.S., Berson S.A. Immunoassay of endogenous plasma insulin in man //J. Clin. Invest. -1960. V.39. - P.1157-1165.

240. Yuzuriha T.,Katayama K., Tsutsumi I. Studies on biotransformation of lysozyme. V. Radioimmunoassay of lysozyme and its evaluation // Chem. Pharm.-Bull. -1978. V.26, N3. - P.908-914.

241. Yuzuriha T., Katayama K., Tsutsumi J., Kimura H. Sensitive immunoassay for the measurement of human lysozyme II Chem. Pharm.-Bull. 1979. - V.27. -P.2802.-2806.

242. Zeya H.I., Spitznagel J.K. Cationic proteins of polymorphonuclear leukocyte lysosomes. I. Resolution of antibacterial and enzymatic activities // J. Bacteriol. 1966. - V.91, N4. - P.750-754.

243. Zeya H.I., Spitznagel J.K. Cationic proteins of polymorphonuclear leukocytes lysosomes. II. Composition, properties and mechanism of antibacterial action // J. Bacteriol. -1966. V.91, N4. - P.755-762.

244. Zucker S., Hanes D.J., Vogler W.R., Eanes R.Z. Plasma: muramidase: A study of methods and clinical applications // J. Lab. Clin. Med. 1970. - V.75, N1. - P.83-92.1. БЛАГОДАРНОСТИ

245. В заключение мне хотелось бы принести искреннюю благодарность своему научному руководителю д.б.н. В.И. Морозову и другим сотрудникам Сектора биохимии спорта НИИФК за помощь и поддержку при выполнении работы.

246. Я благодарю также руководителя Сектора биохимии спорта НИИФК профессора В.А. Рогозкина за интерес к работе и ее поддержку.

247. Приношу слова глубокой благодарности д.б.н. В.Н. Кокрякову, чья моральная поддержка и практическая помощь были очень важны на протяжении всего периода выполнении работы.

248. Я благодарю сотрудников Кафедры биохимии СПбГУ и ее заведующего доцента Е.Г. Скворцевича за поддержку и предоставление возможности апробации диссертации.

249. Я благодарен и другим своим коллегам и друзьям, доброе и заинтересованное отношение которых немало способствовало успешному продвижению к цели.1. Сергей А. Прияткин5 февраля 1999 года