Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Липиды эритроцитов крови при формировании наследуемой кардиальной патологии

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Липиды эритроцитов крови при формировании наследуемой кардиальной патологии"

Л О _ !

о а

На правах рукописи

и.иЛ >-

V/ !У Л /

'/Ъ

, (•

¿¿же

НОВГОРОДЦЕВА Татьяна Павловна

ЛИПИДЫ ЭРИТРОЦИТОВ КРОВИ ПРИ ФОРМИРОВАНИИ НАСЛЕДУЕМОЙ КАРДИАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ

03.00.04 — биохимия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Владивосток — 1999 г.

Работа выполнена в НИИ медицинской климатологии и восстановительного лечения — Владивостокском филиале Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания Сибирского Отделения РАМН.

Научный консультант: доктор медицинских наук,

профессор Иванов Е. М.

Официальные оппоненты: доктор биологических наук,

профессор Костецкий Э. Я.

доктор биологических наук, профессор Левачев М. М.

доктор биологических наук, Кушнерова Н. Ф.

Ведущая организация: Научно-исследовательский

институт физико-химической медицины МЗ России

Защита состоится «.

Ъ ргё&ШлЛ 2000 г. в ча-

сов на заседании Диссертационного Совета Д. 003.99.01 по защите диссертаций в Тихоокеанском институте биоорганической химии ДВО РАН по адресу: 690022, г. Владивосток, проспект 100-летия Владивостока, 159, ТИБОХ.

С диссертацией можно ознакомиться в Центральной научной библиотеке ДВО РАН (Владивосток-22, пр. 100-летия Владивостока, 159, ДВГИ).

Автореферат разослан « » ^1999 г.

Работа удостоена, гранта Губернатора Приморского края в рамках Программы адресной поддержки творчества ученых

в 1999 г.

Ученый секретарь и

Диссертационного совета, /}//) //¿/1

кандидат химических наук ОМу^ДР^] ПРОКОПЕНКО Г. И.

Р 4 ~ у// О

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Кардиальная патология занимает одно из первых мест среди iipirani высокой смертности в России и друшх развитых странах, что является важнейшей проблемой здорош.я общества (Доклады экспертов ВОЗ, 1997; Mesle France, 1991, Kindkade WAV., Tom- B.B., 1992). Несмотря на значительные достижения в области диагностики и лечения заболе-Baiutii сердца, в последние годы стала угрожающей тенденция распространили коронарного атеросклероза п ИБС" в молодом возрасте. Раннее возникновение ИБС во многом определяется наследственными факторами. Эксперты США (1994) и Европы (1994) рассматривают преждевременную ИБС у ближайших родственников больного как вамо leiuinfit коронарный фактор риска. Наличие этого немодифшпфуемого фактора - основание для активного выявления и устранив« друшх модифицируемых факторов риска (Доборджпппщзе Л.М. и др., 1996). Наследственная предрасположен!юстТ. имеет существенное значение в <|ч>рммроваюш нарушении лшииного обмена (Rosseneu M., et al., 1994; Majumder P.P. et al. 1996; Nuolio I.O, et al., 1996; Eaton C.B. et al., 1996; Weber M., et al., 1997). До сих nop nmep- и дне лш to про те 11 де ми я сч^гаыся главными факторами риска заболевают, обусловленных атеросклерозом. Вместе с тем, это - патогенетическая основа if первичныГг субстрат заболевшие, несопоставимый по значимости с друшмн факторами риска (Кухтевич И. И., 1998). Глубину нарушения лшшдного обмена определяют ФЛ и входящие в и\ состав ЖК, как основные компоненты клеточшлх мембран. Исследованиями 80-х годов доказана важная роль нарушений состава ФЛ и ЖК в развитии ИБС. Накоплен обием данных, указывающий о преимуществе в анализе ФЛ и ЖК эритроцитов перед плазмой или сывороткой крови. В сравнешн с шюзмоК (сывороткой), лнпиды эритроцитов значительно меньше подвержены влиянию различных быстро меняющихся факторов (Muskicl F.D., Muskiet F.A.J., 1984; Parsons H.G. et al., 1986; Dougherty R.M. et al, 1987). Основные ЖК эритроцитов отражают юс состав в ФЛ друпк клеток и тканей, что дает основание к их исследованию для оценки состояния метаболических процессов п организме (Innis S.M., 1991, 1992; Hoffman D.R. et al, 1993; van Houwelingen A.C. et al, 1995; Nettleton J.A., 1995). Развитие техники хроматографического анализа, широкое внедрение в 80-х годах капиллярной Т"ЖХ, способствуют получению принципиально новой информации в области изучения лгтндного обмена. Это

* Используемые сокращеши: Апо - аполкполрогеин; А'ГГ - агерогенностъ; ГХХ - газо жидкостная хроматография; ДГК - докозагексааювал кислота; ДПК - докозапенгаенова* кислота; ЖК - жирные кислот; ИБС ишемнческа* болезнь сердце; ИКП - инфарктондна« кар-диоваюпали; ИИ - индекс пенвсыщенност; КП - кардиыммм наголо пи; ЛП - липо^ро-генди; Л1ШП - лииопрогеиды высокой ллотаосга; ЛГОШ - лнпогрогсиды никой »ло тоста; Л110ИП - лииопро твиды очень нпзкой плотности; ПНЖК - полянеиасыщенше жирные кисло гы; ПЭГ - полпэтялеигликоль; СМ - сфмигопделин; ТСХ - тонкослойна« хроматографа«, ФИ - фосфатидллинозитол; ФЛ - фосфолнпн.ты; ФС - фссфашдцлсгркк. ФХ - фосфв-гидидаолин; ФЭ ~ фосфатилилэгвколашш; ХС - хо лес терпи; ЦИК -циркулирующие иммунные комплексы; ЭИК - эПкозапенгаенова* кислой.

послужило толчком прп выборе методического подхода к исследованию. В настоящее время использование показателе!! состава ФЛ и ЖК эритроцитов кропи л клшнческой практике крайне редко. Отсутствует информация о роли наследственности к формировании изменений состава ФЛ и ЖК эритроцитов. Важными факторами, влияющими на развитие нарушении в обмене лшшдов при КГ1 являются половые к онтогенетические закономерности изменений их состава. Данная совокупность характер!гепк, взаимосвязь перечисленных факторов с составом лшшдов эритрощггов больных и их потомков реально могут быть изучены только в рамках семсГаюго исследования. Приоритетным направлением семейного исследования является изучение путей формирования н ототсне-тнческих закономерностей изменений состава ФЛ и ЖК э} 'ггроцнтоп у больных и членов их семе1"1, характера наследования выявляемых нарушений в после-дуюшне поколения. Актуальность дшшого направления исследовагаш обусловлена возможносп.ю использования полученной информации для моделирования патологического процесса в семьях, разработки программ семеГшой профилактики КН.

Цель работы. Изучить состав ФЛ и ЖК лшшдоп эритрощпда прп развитии кардиальиой патолопш и закономерности иаслсдовашй его измепешш в последующих поколениях; устанонить типы нарушений липпдаого обмена, сопровождающие формировшшс патолошческого процесса у членов семьи.

Задачи исследлвтшя,

1. Разработать экспериментальную модель с Iщфаркто-иодоб! о>Ш1I мор-фолош1' с книц измененияш! в сердце у крыс.

2. Изучит!, в эксперименте за сопомерности формировать состава ФЛ и ЖК липидов эритроцитов в различные периоды постнатадьиого онтогенеза (с 10 до 110 суток от рождения) у потомства шггактных крыс обоего иола и у потомства коые с ннфаркто-подобнымл наруигашями. -

3. Изучить состав ФЛ и ЗКК лшшдов эритроцитов крови здоровых людей в разлитые возрастные периоды (у детей, молодых и зрелых субъектов); установить закономерности изменений ФЛ и ЖК в зависимости от возраста и пола.

4. В экспериментальных и клинических исследованиях установить характер изменений состава ФЛ и ЖК липидов эритроцитов при кардиальиой патолопш; закономерности его наследования; огобешюсти наследования по мужской ii ж нскон ли!!!им.

5. Изучить атерогепнын потенциал сыворотки крови у людей с кардиальиой патологией н нх потомков 1-го и 2-го поколений; устаиовтъ степень взаимосвязи состава ФЛ и ЖК лшшдов эритрощггов и факторов атерогенносш сыворотки кропи у членов семей.

6. Установить типы нарушений в показателях липидного бмена, сопровождающие формированиекардиальнон патолопш в семье.

7. Определить методаш шюговариациошюй статистики стене; п> воздействия фсиогипических факторов на уровень наследуемых измепешш состава ФЛ и ЖК эритроцитов в се.\п»ях с ЮХ

Научная чокита работы. В результате исследования получены новые знанм о составе ФЛ и ЖК эритрощггов в различные периоды постнатального

онтогенеза крыс н норме и при развитии •жс1!ер"мента.ипой ипфарктно-подобнои модели; впервые установлены особенное™ изменений н составе ФЛ и ЖК эритроцитов при развитии модели ИКП и их наследование потомству крыс.

В результате исследования шгерпые определетл общие ну ги формирования состава лшшдои эритрощпов у членов семой с наследуемой КП. Изменения состава ФЛ и ЖК эри гроцнгов при '<"¡1 закрепляются у потомков 1-го и 2-го поколений с высокой вероятностью наследования по лшши родства отец - дети и отсутствием признаков наследован!« по линии мать - дом!.. Впервые установлена взаимосвязь уровня изменений в составе ФЛ и ЖК лшшдов эритроцитов с факторами атерогашости сыворотки крови у членов семей, усиливающаяся в последующих поколениях. Наследуемые изменения показателей липпдного обмена у членов семей подразделены на три ипм, отличаются по уровшо и характеру сочеганиых нарушений в составе ФЛ, ЖК эритроцитов и факторов атерогешюсти сыворотки крови.

Положения, выносимые на защиту.

1. Изменения состава ФЛ эритроцитов крови при КП выражены повышенным уровнем СМ и пониженным ФЗ и ФС у мужчин; увеличенным содержанием ФЭ и сниженным ФХ у женняш. Закономерность изменений состава ЖК заключается в перераспределении уровней насыщенных, моиоеновых н полистовых ЖК: уменьшении доли ненасыщенных, снижении уровня соотношений со3/(о6; 18:4(оЗ/18:ЗсиЗ; 20.4м6/20:3«6; 22:6«оЗ/22:5мЗ; увеличении 20:4«6/ 22:6тЗ; [20:3шб+20:5«3]/ 22:6®3; нарушения наиболее достоверны у (Зольных мужчин.

2. Изменения состава ФЛ и ЖК липидов эритроцитов больных КП транслируются на потомков 1-го и 2-го поколений; трансляция изменений состава зритроцитарпых лпппдов наиболее выражена в уровне ФЭ и ФС, в содержании отдельных ЖК: 16:0 и 17:1, 20:5 и 22:6 шЗ, 18:2,20:3 и 20:4 «6, а также показателях их превращений: юЗ/соб, 20:4й6/22:6мЗ, (20:3«>6+20:5й>3у22:6о>3, 22:6(1)3/ 22:5о)3,20:4й)б/20:3мб.

3. Степень взаимосвязи наследуемых изменений в составе ФЛ и ЖК эритроцит» с факторами атерогетыста сыворотки крови усаливается в последующих поколениях.

4. Формирование КП сопровождается тремя тинами нарушений состава липидов, выделенными по уровню и сочетаиносш изменений в показателях ФЛ, Ж1С эритроцитов и факторов атерогашости сыворотки крови

Практическая ценность работы. Результаты проведенного исследования нашли практическую реализацию в экспериментальной и клинической медицине. Разработана эксперимадгголъная модель с выражении?.ш ннфарнроно-добными изменениями в сердце у крыс, которая может быть использована для изучения любых биохимических процессов в клетках, клеточных структурах крови, органов и тканей при кардиальиой патологии. Изу чен состав ФЛ и ЖК в линидах эритроцитов крови крыс в различные периодь; госпитального елтоге-иеза. В кдшшчески.ч исследованиях установлен уровень ФЛ и ЖК лшашог.

эритроцитов кропи для здоровых лиц и больных КП в различных возрастных группах; разработан алгоритм развития карднальной патолопш, адаптирован-ПЫ11 для каждого периода онтогенеза (детство, юность, зрелость). В семьях с КГ1 установлены пути формирования изменений состава ФЛ и ЖК эритроцитов и разработаны на их основе критерии трех этиопатогенетаческих типов развития заболевания. Полученные результаты легли в основу способов диагностики, методик формирования групп риска, большинство из которых защищены патентами Российской Федерацшг. Установлена доля приобретаемых в процессе жизнедеятельности факторов, влияющих на показатели лшшдного обмена при разшгпш 1<П в семье. Доказано, что на степень реализации наследуемых изменений в составе липидов у членов семей наибольшее в.иилие оказывают гипокинезия, характер питания, эмоциональные стрессы, вредные привычки. Управляя перечнелешагми характеристнкалш образа жнмш можно значительно стоить их отрицательное воздействие на изменения в показателях липидов крови.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены более чем па 16 научных конференциях, в том числе всесоюзном симпозиуме по био-химш! лшшдов (Алма-ата, 1987), III съезде кардиологов Литвы "Кардиология -90" (Каунас, 1990); 1-м Международном научном конгрессе "Традиционная медицина и питание: теоретшеские и практические аспекты" (Москва, 1994); Российской конференции "Проблемы атеросклероза" (Воронеж, 1994); У1-м сим-иоз[?/*ме по биохимии дшшдов (Санкт-Петербург, 1994); симпозиуме "Лшюпротснды и атеросклероз", посвященном 110-летию со дня рождения II.IL Аничкова (Санкт-Петербург, 1995); международном симпозиуме фонда медицинского обмена Япошш и России, (Япония, Осака, 1995); международно... кош-россе по курортологии "Современные проблемы санаторно-курортного дела" (Москва, 1996); II национальном конгрессе по натуротерагпш и рекреации (С.-Петербург, 1997); российской гоучной конференции «Состоите здоровья населения Дальнего Востока. Новые, биомсдицинские технологии с использованием биоресурсов» (Владивосток, 1998), VI Всероссийском съезде кардиологов (Москва, 1999).

Публикации По теме диссертации опубликовано 22 статьи в научных журналах, а также нескольких сборниках; бо гс 30 тезисов докладов. Получено 6 натешив Российской Федерации.

Стц-ктупа и объем. Днссертащи состоит из введения, 4-х глав, заключения, выводов н списка цитируемой литературы. Работа изложена на 268 стра-шщах, иллюстрирована 21 рисунком и 75 таблицами. •

Автор выражает свою искреннюю признательность заместителю директора по научной работе НИН МКВЛ СО РАМН, к.б.н. Эндаковой Э.А. за всестороннюю помощь и поддержку исследований. Автор благодарит за участие в работе долг. Светашева В.И. и сотрудшгсов лаборатории сравнительной биохимии Института биологии Моря ДВО РАН, а также сотрудников лаборатории оцомсднщшскйд исследошшгй, коллег из других лабораторий и клиники ШШ МКВЛ СО РАМН

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МЛ ТЕРИЛЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом экспериментальных исследований явились белые крысы лииии Виетар (407 животных). Для воспроизведения экспериментальных моделей использованы половозрелы: особи мужского и женского пола, средней массой 180,5flÜ,6 г, выведенные в пнтомнже лабораторных жтотшлх РАМИ «Столбовая» (г. Чехов, Московской обл.), ветеринарное свидетельство №17 от 12.09.96.

В клшшческие исследования включены дети обоего иола, взрослые мужчины и женщины: здоровые лица, больные КП и члены их семей в трех поколениях (324 человека).

Материалом ;ш исследования mvincь сыворотка и эртрощгш крови животных и человека, гистологические препараты сердца лабораторных животных, первичная культура гладкомьпнечных клеток штимы аорты человека.

В клинико-лабсраторное исследование лииидного обмена в сыворотке крови входило определение общего ХС, ХС ЛПВП, трипнщеридов. Результаты выражались а ммоль/л. Холестерин JO ЮНП и ЛГ1НП определялся расчетным методом (Климов А.Н., Иккульчсва Н.Г., 1995).

Изучение факторов атерогешюсти сыворотки крови включало определение ХС ЦИК, аполипоирогегша В и десиалироваипого апоВ в ЛШШ, атероген-ного эффекта (АТГ) еьгаорогки in \-it>-o. Иммунные комплексы выделяли ПЭГ -. 6000 (Tertov V. V. et al., 1990). Содержание суммарного ХС и ПЭГ-прецшнпатах определят!! с помощью кит-наборов фирмы Boehrirmger Mannheim GmbH (Германия). Липоиротеиды низкой плотности (1,019-1,063 г/мл) выделяли из плазмы крови методом ультрацешрифушрования (Lindgren F.T., 1975). Разделение сканированных и десналирошшиых ЛИ проводили методом афшшоП хроматографии на рицш-агарозе (Tertov V.V. et at., 1990). Содержание апоВв Л111 II I определяли твердофазным 1Шмуиоферментным методом (Koren Е. et al., 1986). Атерогенный эффект сыворотки кропи обследуемых опешпши по се способности вызывай, накопление суммарного холестерина в культивируемых клетаах, выделенных из непораженных атеросклерозом участков интимы аорты человека. Субэндотелншн.ные гаадкомьпдечные клетки штвш аорты мужчин и женщин выделяли после внезапной смерти н кульпшировали в соответствии с методом Орехова и соавг. (Orekliov A.N. et al., 1985). Содержание внутриклеточного ХС определяли 'ферментативным методом, для чего ю клеток экстра-п'фовали фракцию липидов (Bligh E.G., Dyer W.J., 1959). Количество нлеточно-го белка измеряли после экстрашцт лнпндов но Лоурп с соавг. (Loury О.Н. et ■al., 1951) Атеро генный эффект исследуемых сывороток рассчитывали ir содержанию ХС в опытных культурах и выражали в процентах от содержшшя внутриклею'шого ХС в кошроле.

В эритроцитах крови определяли состав ФЛ и Ж1С. Эритроциты выделяли из венозной крови, стабилизпровшшоЛ гепарином, отесывали изотошгчесюш раствором хлористого натрия. Экстракцию липидов нз эритрощггов проводили модифицированным методом БлаЙя и Дайера (Bligb E.G., Dyer W.J., 1959). Дтя

разделения полярных линндов использовали метод двумерной микро-ТСХ на стеклянных пластинках бхб с суспензией силикагеля и гипса (Svetashev V.l., Vaskovsky V.E., 1972) в системах растворителей, предложенных Роузером с сотр. (Rouser G. et al., )967). Количественный анализ отдельных классов ФЛ после ТСХ проводили по метод}' Васьковского с еоавт. (Vaskovsky V.H. et al., 1975). Содержание каждого компонента представляли в процентах от общей суммы ФЛ эритроцитов. Газожидкостную хроматографию метиловых эфпров ЖК выполняли на хроматографе "Slumadzu - 9А" (Япония) с пламенно - иош-зацношилм детектором. Метиловые эфиры ЖК лнпндов эритроцитов получали по методу Карро и Дюбак (Carreau J.P., Duback J.P., 1978), очищали с помощью ТСХ. Анализировали метиловые эфиры ЖК на капиллярных колонках. В качестве носителя использовали Cliroma'jn Г-AW-DMCS 0,100 - 0,125, в качестве жидкой фазы - 5% Сшар - 5 СР, ФФАП. Температура разделения - 210°С, температура испарителя - 245°С. Газ - ноаггель - гелий, лилейная скорость - 20 см/сек. Идентификацию проводили с использованием стандартных смссей ЖК и по значениям эквивалентной дтшгы цепи (Jamieson G. R., 1975; Stransky К. et al., 1992). Количественные расчеты выполняли с помощью стандартного математического обеспечешщ системы обработки данных Chromatopak - CR 3 А. Результаты выражали в относительных % от общей суммы ЖК.

Морфологические исследоваши сердца крыс проводили после фиксации, дегидратации, парафиновой проводки и окраски срезов гематоксилином и эозином по общепринятой методике (Меркулов Г.А., 1969). Гистологические препарат;:,' просматршшли в световом микроскопе «Amplival» (Германия).

Для обработки данных примени стандартные статистические процедуры: вычисление средней арифметической выборки, стандартного отклонения, коэффициентов парной корреляции, средней ошибки среднего значения; критерия хи-квздраг (Роющкпп П.Ф., 1973). Использовали метода многомерной статистики, такие как кластерный, факторный и канонический корреляционный анализ (Афифи А., Эйзен С., 1982).

РЕЗУЛЬТА ТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Формирование экспериментальных и клинических групп . :аблюде-

!шн. Экспериментальные группы'наблюдения составили два поколения живот-ш.1х: взрослые крысы обоего пола (шпактпые, контрольные и опытные с ИКП) и их потомство. При разработке экспериментальной инфаркто-подобной модели п воспроизведении ИКП использовали методический подход Сслье (1961). Сеиеиб1шизац!ВО миокарда крыс вызывали оперативным удалением одцой почки у самцов, заменой питьевой боды на 1% раствор хлорида натуга и назначе-ннсм животным ^;.ецпалыюго литания, представляющего собой полу синтетическую кардиовазопатошшую диегу, насыщеш[ую электролитами. Патологическое отношение Ша в солевой смеси составляло 1:14, Mg/Ca - 1:17. Обусловливающим фактором служили внутримышечные инъекции гидрокортизона ацетага, а разрешающим агентом - холодовое воздействие. Время экспозиции патогенных факторов составляло 14 суток. Развитие модели сопровождалось

появлением инфарктоидных изменений в Koponapitb:; сосудах крыс, подтвер-жде1пп,1х данными мор(|юлоп1чешгх исследований, а также изменением показателей лшшдною обмена в сыворотке крови. При скрещивании крыс специальные диеты, 1% раствор хлорида иатрня и инъекции гндрокортазона ацетата отменялись. Жииотые в период беременности и лактации содержались на стандартном рационе вивария. Из «семем» животных сформированы группы наблюдения: интактсия, состоящая из 36 здоровых крыс и их потомства (145 особей); опитая, в которую вошли 30 крыс обоего пола с мо дел про панной ИКП и их потомство (111 особей); контрольная, которую составили 20 неопе-рнрованных крыс, содержащихся па полисинтетической диете с нормальным балансом электролитов в солевой смеси (K:Na =1:0,6; Mg.Ca = 1:7) и их потомство (65 особей). Для исследования состава ФЛ п ЖК липидов эртроцитов крови животные были декантированы, потомство животных забивалось в определенные периоды пос пыталЫюго развития: через 10,15, 20, 30,40, 60, 90 и 110 суток от рождения. Все исследуемые показатели, полученные у опытных животных и их притода сравнивались е результатами контрольной грутшы, а также грутшы шггактных животных.

Клинические группы наблюдения составили три поколения семей, в которых пробанды" (58 человек) имели заболевание КП. Среди потомков пробандов 1-го и 2-го поколений в группы наблюдешш отобраны лица без клшшческих проявлений КП (96 человек). Контрольные- группы составили здоровые дчца обоего полз: группа детей представлена школышкаш г. Владивостока, возрас-зной категории 7-14 лег (38 детей); группу взрослых составили мужчины и женщины 18-40 лет (63 человека). Весь контангент обследованных, вошедших в контрольные группы, в соответствии с требованиями отбора, не имел клинических и субклншмеских признаков КП, а также факторов риска по атеросклерозу и ИБС, включая отягощенный семейный анамнез и изменения в показателях липидного обмена сыворотки крови.

Экспериментальные исаедоваиия

Характеристика состава ФЛ н ЖГ\ лшшдов эритроцитов взрослых крыс различных экспериментальных групп. Фосфолипиды. Разделcinie смеси ФЛ эритроцитов шггактиых крыс иокашю наличие гати компонентов, проявляющихся на хроматограммах в виде пятен различной шпене нвности. Идентифицировано наличие ФХ, ФЭ, СМ, ТС н ФИ. Половые особенности'у крыс шггактиой грутшы обусловлены различиями в содержании отдельных классов ФЛ. Уровень ФХ и СМ был ниже у особей женского пола, ФЭ, ФС и ФИ - шоке у крыс - самцов Изменения в составе отделысых ФЛ крыс опыпгой группы отражены на рисунке 1. В оотгше от интактных крыс, у самцов и самок опытной группы ФИ выявлялся в следовых количествах. Характерными изменивши! для взрослых особей мужского пола явились снижение уровня ФХ (р<0,05 в сравнении с контрольной и шггакшой грушами) и повышение ФЭ (р<0,001 в сравнешщ с китактноЯ. р<0,05 в сравнении с ко!пролыюй

' пробоиоам обатачгно лиц(\ с которого иачшюсь эаболгваниг КЛ е семы

■3

БЗинтакгн сзмцы □ контр.гр. самцы 0опытн. гр. самцы

ЕЗинтахгн самки ЕЗконтр.гр. самки 0опытн. гр.сацки

Рис.1. Состав фосфолипндов эритроцитов крыс различных экспериментальных групп

группами). У 75% животных выявлялось повышсшг содержания ФС (рне.1). Изменения в составе ФЛ у особей женского пола имели другую направленность. Так, у самок с ИКП наблюдалось повышение уровня ФХ и СМ. Содержание ФЭ н ФС снижалось. Анализируя состав ФЛ в эритроцитах животных с ИКП можно выделить несколько важнейших патогенетических факторов, сопровождающих развитие патологического состояния. Первым яшмегся низкий уровень ФИ у особей обоего пола, что может бьпъ вызвано участием ФИ в ре-паративных процессах в пораженном сердце, либо увеличением активности фосфолштаз (Торкунов П.А. и др., 1997). Перераспределение в уровнях ФХ и ФЭ в сторон)' снижения ФХ у особен мужского пола характеризует дестабилл-зацшо мембран у крыс самцов, нызвшшую изменением вязко-элас'пгческих свойств эртрощггов, увеличением жесткости их мембран, приводящих к на-рушешпо фуюсщгечшровашя транепортных и ферментных систем клетки (Cesar J.M. et al., 1993). У самок картина модификации компонентов ФЛ свидетельствует об адаптационном резерве эритрощгтарных мембран особей женского пола. Данный факт может рассматриваться как половой признак, подтверждающий устойчивость к развитию патологического процесса особей женского пола.

Жирные кислоты. Разделение смеси метиловых эфиров ЖК, полученных из линндов эритрощггов крыс, показало наличие 48 компонентов с длиной углеродной цепи от С|0 до Сг. Среди шк идентифицированы кислоты как чет-тле, так и нечетные, нормального и изо-строення, моноеновые и полиенояые. Качественный состав ЖК лнпндов зртрощлов крыс интактиой, контрольной и от.шюГ1 rpyrni был идентичен. В таблице 1 представлены основные ЖК и их содержание в липндах эр1процитов у шггактных особей обоего пола. В таблицу не внесены шторные компоненты, содержание которых не превышает 0,2%. В основном это насыщенные ЖК нормального (10:0, 12:0, 19:0, 20:0, 22:0), нзо-(П6:0, П7:0, i!8:0) и антегоо- строения (а-15:0, а-17:0), а также некоторые моноеновые (18:1сй5, 22:1), диеновые (18:2со5/9)и триеновые (20:ЗгаЗ) кислоты.

В количественном составе ЖК эритрощггов шггактных крыс половые различия выявлены практически по всем показателям. У крыс - самцов уровень больпишства насыщенных ц моноеновых ЖК превышал показатели для особей женского пола. Аналогичен характер распределения ЖК «6 семейства, более высокие показатели наблюдались у самцоз. Напротив, уровень ЖК саЗ семейства был выше в груше особей женского шла: Общая закономерность половых различии хорошо видна в суммарных показателях, отражающих высокую насыщенность эритрощггарной мембраны крыс - самцов, ее повышенную жесткость в сравнении с особями женского пола. Полевые раатшшя в составе ЖК кропи и тканей органов -животных выявлены и в других экспериментальных исследованиях (Cleary М.Р: ei al., 1994; Pullmann R. et al., 1994; Phinney S.D.. ct al., 1994; Tsuchiya N. et al., 1995). В целом, на основании данных литературы и результатов собственных исследований можно заключить о наличии существенных половых особенностей в составе ЖК шггактных крыс, определяющих различное физическое состояние мембраны у особей мужского и женского пола, следовательно, и различную устойчивость к возникновение патологического процесса.

Таблица 1

Состав ЖК ли; шдои эрпгрощпов шггактцых половозрелых крыс

Покмаю.ть Общая группа, Самцы. Самки.

ЖХ °о _ п=30 п-18 п=12

14:0 0,67+0,08 0,76+0.11 0,53+0,08

14:1 0.31+0.18 0,40±0,28 0.14+0.03

15:0 0,62+0,03 0.66=0.03 0.55x0,05

15:1 0,2410,06 0,27з0.09 0,18+0,03

16:0 31,1 «±0,56 32,41:0,65*** 29,01+0,42

16:1 ю97 1,521:0,09 1,56+0.12 1,45±0,17

17:0 0,85+0,05 0,82+0,05 0,89±0,09

17:1 0,39+0,06 0,44±0.08 0,3010,04

18:0 13,41+0,34 12,95+0.44* 14,21+0,38

18:1ш9 8,13±0,35 8,61±0,48* 7,2810,30

18:1о7 3,28+0,10 3,47±0,12** 2,95+0.14

18:2'ч6 8,65+0,34 8,76+0,22 8,46+0,84

18:ЗюЗ 0,1010,01 0,10±0,01 0,10+0.00

20:1 0,42+0,08 0,44+0,13 0,4010,05

20:2(»6 0,29+0,06 0,16±0.02** 0,5110.12

20:3(о9 0,12+0,02 0,13±0.03 0.1010,00

20:3и6 0.57+0,01 0,59±0.02 0.54+0,02

20:4ш6 18,19±0,63 17.94+0,92 18,64+0.61

20:5^3 1.58+0.28 1.001:0.27** 2,60+0.37

22:4ш6 0.87±0,15 1,И±0,57 0.4410,04

22:5со6 0,40+0.09 0,52x0.13* 0,19±0,01

22:5а)3 2,14±0,22 1,6010,33* 2,65+0,15

22:6о>3 4,9810.44 4.03=0.52** 5,9310,25

ин 158,06+5,09 149.67±б,74** 172,73+3,78

Насыщ. 47,63+0,7Г 48,48±Ш~ 46,1510,42

Моноен. 14,60±0,60 15,49+0.81* 13,0310,51

1мЗ 8,54+0.89 6,7911,10*** 11,2610.71

1<0б 28,9210,80 29.01±1,09 28.7811,08

Нас 'моноен. 3,36+0,12 3,24±0.16 3,5810,12

1(03'г£б 0,30+0.03 0.23+0.03*** 0,4010,С"

Примечание. Достоверность различий указана между показателями особсй мужского и женского пола: *-р<0,05; **-р<0,01; **' -р<0.001

Развитие модели ККП сопровождаюсь изменением количественного содержания ЖК в лшпщах эртроцитоо крыс. У животных опытной и кошроль-по11 групп показатели состава ЖК отличались от шггактиой. Различия в содержании ЖК выявлены и между опытными и контрольными животными (рис.2,3). В сравнении с контрольной группой крыс у самок.с ИКП преобладал!' высокие значения насыщенных ЖК, достигающие у некоторых животных 51,0% для их суммарного показателя. Такая же тенденция отмечена и у крыс - самцов, максимальное значение суммы насыщенных ЖК в группе - 48,7%. Низкие уровни насыщенных ЖК у животных обоего пола были единичными. Описанные различия вызваны, повышением у 54% опытных животных уровней 16:0 и 18:0

(р<0,001), тенденцией к увеличен!по 14:0 и 15:0 по :равнешпо с контрольной группой. Изменения в содержании моноеновых ЖК у особей мужского н женского пола имели противоположную направленность. Так, у крыс - самцов наблюдалось снижение суммарного показателя моноеновых ЖК в сравнении с контрольной группой, у самок - тенденция к их повышению. Подобная закономерность обусловлена характером измененш п содержашш 14:1, 15:1, 17:1 и 18:1о>7 у крыс с ШСП (рпс.2). Изменения п составе ПИЖК у крыс опытной группы выражены увеличением уровня 18:2«6, 20:2ю6, суммы соб ЖК, у самцов - в наибольшей степеш! (Z«6 33,41±1,39 в сравнении с 29,41+0,84 в контрольной группе, р<0,05) (рис.3). Количество «3 ЖК снижалось, наиболее ¡шз-кпе цифры наблюдались у самок (2®3 у самок 5,5910,41, в контрольной группе - 8,33+0,27, р<0,001; у самцов 6,21+0,74 в контрольной группе - 7,79+0,43). Изменения в у ровнях индивидуальных ПИЖК у особей обоего пола выражались снижением 20:5мЗ и 22:6мЗ по огношешпо к контрольной группе. Данная закономерность изменений в \,поеичх и соЗ ЖК v К'члс с ИКП сохранялась i. в сравнении с шпаклюй rpynnoií животных. Устаноачснные особенности в ко-личествешгом составе ЖК эрнтрошггов у животных с ИКП характеризу ют уве-Л1пеш1е микровязкости мембран, вызванное изменением молекулярных видов ФЛ за счет повышения доли насыщенных и соб ЖК в ik составе.

По данным ряда экспериментальных исследовании, изменения в составе ЖК крови довольно часто являются результатом нарушения их метаболических процессов, происходящих в печени (Okamoto Т. et al., 1994; Osada К. el al., 1995; Madani S. et al, 1998). Проанализированы показатели превращений ЖК, позволяющие судить об интенсивности метаболизма ЖК у жпвотш.гх с ИКП (табл. 2). Изменение показателей, отражающих взаимосвязь предшественников и ингибиторов синтеза эйкозаноидов, наблюдалось у особей обоего пола. Соотношение (20:3+20:5)/22:6 у самцов увелшпгаалось, у самок, напротив, наблюдалось сшгжешк этого показателя. В обеих половых группах у крыс с ИКП наблюдалось увеличение показателя 20:4ы6/20:5юЗ почти в 2 раза. Данное со-стояше взаимоотношений ЖК - предшественников эйкозанондо» различных серий и ингибитора их сшггеза способствует накоплению продукции ЖК мб семейства. В дополнение к этому, важным нарушением метаболических превращений ЖК у животных с ИКП явилось снижение соотношения 22:6тЗ/ 22:5тЗ, характеризующего активность Д4 дссатуразы «3 ЖК, у особей мужского и женского пола (р<0,01). На фоне этого снижения происходило увеличение Показателя 22:5юб/22:4ш6 (р<0,001). Данный факт свидетельствовал в пользу того, что снижение продукции 22:6шЗ у животных с ИКП компенсировалось увеличением сшггеза 22:5соо (Foot K.D. et al., 1990; Innis S.M., 1992; Okaiiuto Т., Shiwaku К., 1994). Выявленные изменения в показателях превращений ЖК свидетельствуют о возможных нарушениях активное ni ферментов, участвующих в продуцировшши цепей ЖК, а также взаимоотношений между семействами «6 и юЗ ЖК (Okamoto Т., Shiwaku К., 1994; Osada К. et al., 1995; Madani S. et al., 1998).

50-/1

сумма иасыщеных

сумма мокоеновыч

18.lv,'?

¡3интактн самцы 0коитр.тр. самцы Вопытн. 1р. самцы

насыыеных ыоноеновых

Винтактн самки Оконтр.гр. самки ЕЗопытн. гр.самки

Рис. 2. Содержание иасыщеных п моноеновых ЖК в липидах эритроцитов крыс различных экспериментальных групп

& Ж™,

20:2«6

221 VI6

20:5 лЗ

22:6*3

{Зинтаки! самцы Окон гр.гр. самци Эопытн. гр. самцы

И »нгактн самки 0контр.гр. самки .Допыгн. гр.самки

Рис. 3. Содержание полине. асыщскых ЖК в липидвх эритроцитов крыс различных экспериментальных групп

Таблица 2

Показатели превращений ЖК у животных экспериментальных групп

Пока заюли Контрольная группа Опытная группа

Самцы, Самки, Самцы, Самки,

п=10 п=10 п-14 п=16

20:4®6 22:6юЗ 3,92+0,32 3,84+0.24 4.99+0.33* 5,2610,21***

20:3+20:5 22:6 0,4310,01 0,52±0,01 0,56±0,03*** 0,42+0.02***

20:4ю6 20:5шЗ 13,23+2,44 . 9,28+2.64 22.25±2,47* 25,3412,26***

20:4®6'18:2«6 1,94±0,44 2.16+0.38 1,64+0,41 1.7010.40

20:4ш6'20:3ю6 29.83+3,17 33,75±1,25 36,00+3.35 35.3313.86

22:6ш3'22:5«3 2.48+0,22 3,37+0,20 1,68+0,09** 2,6010.12**

22:5ш6/22:4ш6 0,34+0,01 0,27+0,01 0,48+0,02*' 0,3610,02***

Примечание. Звездочкой обозначена достоверность различий между показателями контрольной и опытной групп; *-р<0,05; **-р<0,01; ***-р<0,001

Характеризуя состав липидов эритроцитов крыс с ИКП, можно утверждать о наличии значительных количественных изменений, способных изменить форму н физические свойства эритроцита, привести к снгасению устойчивости клетки: увеличешш мнкровязкостн мембран и нарастании ригидности, 1ШЗКОЙ деформируемости. Структурные изменения мембран эритроцитов тесно связаны с функциональными нарушениями, способствующими развттпо патологического процесса. Это нарушеши гемодинамики, функциошфоваши их транспортных и ферментных систем, изменение метаболического состояния всей клетки. Как показали проведешше исследования, менее устойчив ьиш к развитию патологических изменений в составе эритроцитаршхлипидов являются особи мужского пола. Модификация состава их ФЛ и ЖК происходит с большей интенсивностью и сопровождается наибольшей глубиной повреждения лшндного бислоя.

Характеристик-;! состава ФЛ « ЖК липидов зрнтрошпчж потомства крыс в различные периоды постнатальпого онтогенеза. Для изучения закономерностей изменений в составе лшшдов эритроцитов крыс в процессе развития проведен анализ ФЛ и ЖК у потомства интактных жиьотных и потомства крыс с ИКП в периоды 10,15,20,30,40, 60,90 и 110 суток от рождения.

Фосфогмпиды. Потомство ингакпшх штвогеых представлено .45 особями обосг. пола. Значтелькое увеличение содержания ФХ (р<0,001), сопровождаемое снижением ФЭ (р<0,01) у шгтактных животных, наблюдалось к 30 су ткам от момента рождения (рис.4). В дальнейшем уровень ФХ и ФЭ снижался к 40-60 дням, стабилизируясь к периоду' 3-х месячного развития (р<0,05 для ФХ и р<0,01 для ФЭ). Уровень СМ в процессе развития не изменялся. Перераспределение компонентов ФЛ в сторону накопления фракции Ф^, произошедшее на первом месяце постнатальпого развтта, совпадает с процессом мл ели-низании, сопровождающимся усиленным синтезом лшшдов. Именно этим процессом можно объяснить Ш1тенсшное накопление хо;пшовой фракции в эрнт-роцигарных.тшшпа*, отражающих состав структурных ФЛ тканей, в том числе ткани козга. Выявленное дальнейшее постепенное снижение ФХ и ФЭ в период от 1 к 3-м месяцам «нормального)) онтогенеза может' быть связано с

70 60 50 40 30 20 10 0

—Ф— Норма ФХ .. »—»X а Норка СМ —А—СМ —О—Норма ФИ Я ФИ

ФЛ.'Д . 3Í -

30 -

25 -

20 -

15 -

10 -$ -

о -

10 20 . 30 40 60 90 }10 сугГ*

Норма ФЭ —Ф3 —в— НормаФС ■»■ .ФС

Рнс.4. Онтогенетические закономерности распределения ФЛ в эритроцитах

крыс

возрастным снижением скорости их синтеза и самообновления. Другой особенностью шменсп!п"1 состава ФЛ п процессе развития явилось отсутствие на ранних лапах онтогенеза ФИ и-эритроцитах крыс. Последний появлялся лишь на 40-е сутки от рождения, уровень его увеличивался по мере развития к 90 суткам незначительно (р<0,05) н далее оставался низким. Появление ФИ через 40 суток от рождения можно раецешгп» как эволюционный признак в развитии клеточных мембран крыс. Современные исследования состава ФЛ у крыс в различные периода ностнаталыюго онтогенеза единичны. Выявлено увеличение с во >растом уровня ФЛ сыворотки у крыс - самок в постнататьный период от б до 30 недель (Tsucliiya N. et al., 1995), В другом исследовании описано еннже-ibie с возрастом содержания ФЛ на (}юне увеличения других лшвциых фракций крови и аорты (Frolkis et al., 1997). С. еделш о возрастных изменениях состава ФЛ эритроцитов крови животных в литературе не обнаружено.

Изменение состаш ФЛ эритроцитов в процессе госпитального развития потомства крыс с ИКП, изучено на 111 особях обоего пола (рис. 4). Первый период (10 дней) характеризовался самыми высокими значениями для ФХ (59,25+0,59) и показателя ФХ/СМ (5,05+0,23). низкими уровнями ФЭ (19,79+0.22) и CM (11,79±0,20). Дальнейшая мо;шфш<ация состава ФЛ в процессе развития сопровождалась равномерным снижением холиновой фракции ФЛ к 40 суткам (р<0,001) на фоне увеличения ФЭ и СМ (р<0,001 и р<0,01 для ФЭ и СМ). Снижение соопюшешш между ФХ и СМ (р<0,001). обнаруженное к 40 ;u :м. характеризует низкую уста'гчивостъ эр[процит уже в этот период развития, обусловленную изменением вязко-эластичных его свойств (Лпнчсв-ская Д.А. и др., 1989; I liggins C.F., 1994; KentC., 1995). В дальнейшем величина этого показателя продолжала падать к 110 дшм развипш крыс. Стабилизация у ровней ФЛ наступала в период 90 дней постнатальиого разпипш. Так же как и при «нор 1лышм» онтогенезе, в эритроцитах потомства животных с ИКП к 40 суткам появлялся ФИ. Количеств ФП во всех периодах постнатальиого oirro-генезл не превышало 2%, что более чем в 2 раза ниже его содержания у потом-с(ва интакшых крыс. Выявленная закономерность изменений состава ФЛ свидетельствует е пользу низкой резистентности клеточных мембран потомства крыс с ИКП, сопровождаемой снижением адаптационного резерва, замедленной кшенсишосдыо метаболических процессов в мембранах клеток и тканей (Авдонин П.В., Тклчук В.Д., ¡994; Торкунов П.А. и др., 1997). Завершение формирования фосфолшпцного бислоя происходило к моменту полового созревания животных. В литературе мы не встретили сведений по изучению воз-растых различий у животных с экснерименгальныш шфркто-подобными моделями. Извеешы псследовшпьт возрастных различий у крыс с ожирением и сахарным диабетом, в которых подтаерждаетея существование писледшх в составе ФЛ сыворотки крови (Cleary М.Р. et al, 1994; Arisue К. et a) 1994; Brookes P.S. et al., 1998). Онтогенетические закономерности изменений состава ФЛ в различных периодах ностнаталыюго развития в цитируемых работах не рассматривались. -.

Жирные кислоты. Во всех возрастных периодах постнагальнсго онтогенеза главной по содержаншо была пальмитиновая кислота (рнс.5). Основное ее количес тво практически полностью сформировалось к 10-тн дневному' периоду жизни крыс (32,64+0,79). Стабилизация уровня кислоты наступала в период 3040 суток от момента ровдения. Формирование пула другой насыщенной кислоты - стеаршювон - к 10 дням жизни происходило только на 59% (7,89+0,31). С возрастом наблюдалось увеличили 18:0, но уже в период 30 с\ток отмечалась стабилизация ее уровня (9,98+0,28, р<0,001). К этому же периоду заканчивалось формирование пула других насыщенных Ж - 14:0; 15:0 н 17:0. Среди моно-еновых ЖК наибольшее содержание во всех периодах онтогенетшгеского развития имела 18:1 «9. Формирование пула этой кислоты осуществлялось п течешь 30 суток (9,37í0,27), такой же период (30-40 суток) выделялся н для фор-мнровання пула других моноеновых кислот: 15:1, 17:1,18:1о)7и20:1.

Накоплеш(е ПНЖК у тггактных крыс осуществлялось также в течение 30-10 суток от момента рождения (рнс.5). Максимальное содержание лннолг-вой кислоты (12,12±0,39) наблюдя;»«, уже в первый период онтогенеза (10 дней). В дальнейшем происходило снижение 18:2oi6 к 40 ",ут ам (9,4010,26, р<0,001). Такая же закономерность выявлена п изменении друпк соб ЖК. Для 20:4, 22:4 и 22:5 ЖК выделялся период резкого снижения уровня - 60 суток от рождения, осооешю ¡3 группе крыс - самок, с последующим накоплением их количества к 90 суткам ностнатального.развития. Суммарный показатель и6 ЖК был высоким в 15 дней развития крыс (37,00+0,91), затем снижался к 40-му дню (30,66+0,83, р<0,001). Накопление мЗ ЖК (20:5, 22:5 н22:6) происходило постепенно от первого 10-ти дневного периода в течение 40 суток (от 4,34i0,21 до 7,99+0,45, р<0,001), колебания наблюдались доя некоторых ЖК в 60 и 90 суток.

Содержание 18:ЗшЗ «эритроцитах крыс было крайне низким и оставалось таковым в процессе развития особей. Соотношение юЗ/соб ЖК в основном увеличивалось в период от 15 до 40 су гак.

Оненнвая ситуацию «¡ггогенелгческой изменчивости состава ЖК в ллпи-дах эритроцитов шггактных крыс, следует заключись, что формирование общего пула ЖК завершается в период 30< суток iiocniara.4i.noro развития. Данный период совпадает с периодом лактации в котором источником основных ЖК, особенно ПИЖК, является молоко матери. Известно, что во время лактации у крыс - матерен часто развивается дефнццг эссенциальшдх ЖК (об и «3 семейства, снижается трансформация последних в их длшшоценочечные мета-болты (Araya J., Banida С., 1996). Отслонешт некоторых показателей ЖК от общей закономерности в ыггервале 60-90 суток от ровдеши, происходящие в виде скачков и наблюдаемые и большинстве случаев у особей женского пола, характеризуют этот период как пубертатный. Возможно, изменения в составе ЖК в эти сроки связаны с половым созретаашем крыс, происходяпщм в период 70-90 дней от рождения (Matuszczyk J. et al, 1994). Можно выделит» eme один период, отличающийся по составу Ж - 110 дней. Последний характеризуется как период зрелости и сопровождается стабилизацией показателей ЖК.

10 15 20 30 АО 60 93 110сутки

■ 1б"00 —-ё—- норма 16:0

—«—1800 13:0

Сум№1псыщ. «—©— пэр ш суммы гасьцц.

10 15 20 30 40 60 90 110

—Я— Шуг9 —моноен.

норма 18:1\у9 норма 18:1»7 норма моноеи

10 15 20 30 40 60 90 ИОсутга

—О— 1 —©^-нормз 18:Ь»6

—¿~-20:4'Л'6 —йг-норма20:4\уб

—22:41*6 —й—норма 22:4\уб

—Сумма теб ■—норма суммы и-б

сутки

110 сутки

-норма 20.5*»3 ■

-норма 22:6шЗ

- 22.5»3 —А— нэрка 22:5«3 -

-Сумма wЭ ■

- нэрма сумзиы 'л'З

Рис. 5. Онтогенетические закономерности изменений состава ЖК в липвдах эритроцитов крыс

Подтверждением возрастной зависимости вщспекных изменений в составе Ж1( явились результаты канонического анализа, проведенного между да у мя множеепшш признаков - показателями ЖК и периодахп! онтогенеза потомства ингакшых животных. Выявленная высокая степей', корреляции между двумя множествами (г=0,9(), р=0,00001) характеризует измена шя в составе ЖК у крыс в различные периода постиаталыюго развития как отэтенетическне закономерности формирования пула ЖК в липидах эритроцтов. Возрастные особенности состава ЖК лншдиых фракций сыворотки крови животных в различные периоды постпагалыюго онгогснеза обсуждаются н в других экспериментальных исследованиях (Murawski U. et al., 1989; Smídova L. et al., 1990; Samel M., Pullman R., 1993; Nishida S. et al., 1998). Большинство авторов придерживается мнения, что изменения состава ЖК в процессе разв1гтя являются ошогепстическикш закономерностями, а не отражением содержания ЖК в молоке материнской особи (Samel М., Pullman R., 1993; Samel М. et al., 1994; Nishida S. et al., 1998). Это Miieiuie, а также результата нашего исследования соотносятся с данными изучения морфологических особенностей гепатоцитоп в период ноетнаталыюго онтогенеза (Каланпшкова М.М., 1997). Алтором показано, 'по морфологическая дифференциропкл гепагоцнтов крыс завершается к 30 суткам после (х)ждения живолилх.

Количественные изменения ЖК лшшдов эритрощггав изучены и у потомства крыс с ИКП в динамике пост типы юта ризштт (рис.5). Так же как н при «нормальном» онтогенезе, главными по содержанию компонентами во всех периодах ноетнаталыюго развили крыс, рожденных от животных с ИКП, являлись 16:0, 18:0, 18:1, 18:2юб и 20:4шб. Характер изменений состава ЖК с возрастом мало отлшался от установленного в интактной группе животных. К особенностям, выделяющим онтогенез потомства животных с ИКП, относятся различия в уровнях индивидуатьных ЖК н их групповых характеристик; скач- -кообразные изменения содержашя некоторых насшцешых и полиненасыщенных ЖК, наиболее выраженные в позднем периоде постнатального развития крыс; интенсивное накопление соб ЖК в период 30-40 дней; шгзкнй уровень о>3 ЖК во всех периодах ноетнаталыюго развития. Наибольшая стабильность состава ЖК выявлена в painnríí период (10-30 дней), совпадающий с периодом лактации. Однако это не касалось »3 ЖК динамика которых наблюдалась в течение первых 15 дней развития особей. Из;.':иепга в составе ЖК в процессе нормального онтогенеза были более ндаантлш, макснмальш»н'1 или минимальный пик изменений наблюдался в период 30-40 дней постиаталыюго развтия. Перечисленные особенности позволяют характеризован» онтогенез потомства животных с ИКП как патологический. В то же время нельзя не о шетнть общую с интакшьш о1ггогенезом закономерность в динамике формирования пул? ЖК. 11а рисунке 5 отражена данная закономерность и отличительные черты онтогенетической изменчивости состава основных ЖК.

Выявленные в настоящем разделе особенности изменений в составе ФЛ и ЖК лшшдов эритроииюв в процессе онтогенеза потомства больн 1тх жинэтиых могут быть результатом влияния наследственных факторов.

Наследование состава лииидов эритроцитов крыс в последующее поколение. Для установления закономерностей наследования состава ФЛ и ЖК проведен анализ их содержания в семьях животных с моделированной ИКП: у крыс - родителей с ИКП и ¡¡х потомства обоего пола, включающего как взрослых особей в возрасте 110 дней, так и неполовозрелых 40 дневных особен. Оценка изменения в показателях ФЛ и ЖК в группах родителей н их потомства проводилась относительно крыс км прошлых групп, находившихся в равно-зпа'шых с опьтшми жир,отними условиях.

Фосфолипиды. Изучение состава ФЛ у потомства крыс с ИКП позволило выделить нарушения, подобные юменешшм в грушах их больных родителей (рис.б). В 1-м поколении особи мужского пола имели анрротчпуто с родитсля-мп - самцами тендявдео в изменении уровней ФЛ. У половозрелых крыс -самцов наблюдались низкие уровш! ФХ (48,1510,58 в сравнении с 51,63±0,54 в контроле, р<0,001) и повышенные ФЭ (26,02+0,74 в сравнещщ с 24,00±0,33, р<0,05), выявлена тенденция к увеличению СМ. Характер изменений в составе ФЛ у неполовозрелых потомков был тот же, что и у взрослых потомков. Направленность изменении в составе ФЛ у особей женского пола в 1-м поколении отличалась от родителей - самок с ИКП. Потомство половозрелых крыс опытной группы имело более низ:аш уровень ФХ (50,49+0,55 в сравнегсии с 53,70±0,68 в ко! про л е, р<0,01), ко.игчество ФЭ у половозрелого потомства опытной и контрольной груш было одинаковым, а содержание СМ, также как и у самок - родителей, увеличенным (14,98+0,58 в сравнешш с 12,20±0,67, р<0,01). Для потомков неполовозрелого возраста сшгжешш ФХ в опытной группе не наблюдалось, а уровень ФЭ был увеличен до 23,07+0,55 (в сравнешш с 21,10+0,49 в контроле, р<0,01). Содержать СМиФС нетменялось.

Выявленные нзменешн в составе ФЛ у потомства крыс с ИКП отражают влияние "тягощенного анамнеза но КП у особен мужского пола. При этом нарушения в составе ФЛ эршроцигов дри наличии отягопвлшои наследствешго-сти наблюдаются в раннем возрасте и закрепляются в зрелости. Изменения в составе ФЛ у потомства женского шла не являются отражением патологических нарушений их родителей. Данш.ш факт может свидетельствовать о пасле-довашш нарушав л в составе и обмене ФЛ только по мужской лишв' родства.

Жирные кислоты Изменения в составе .ЖК у потомства крыс с ИКП наблюдались как в младенческом (40 дней), так н в зрелом (110 дней) возрасте (рпс.7). В группе особей мужского пола у потомства 1-го поколсшш уровш! 17:0, 16:0 и 15:0 были более высокими, чем в группе их родителей. Данная тен-дешди сохранялась для потомства половозрелых и неполовозрелых особей. Уровень большинства моноеновых ЖК (16:1, 18:1со9, 18:1со7, 20:1) у неполовозрелых особей был ниже, чем в группе крыс - родителей (р<0,01 для 18:1со9). Напротив, потомство половозрелых крыс опытной группы имело повг'лхеюше уровни моноеновых кислот в сравнении с их родителям. (р<0,001). В женской линии семей у потомства живопшх опытной группы закономерность изменений насьпцешых и .моноеновых кислот такая же, как и в группе мужских особей. И целом, можно отметить увеличение нас!,1ще1шости гго большинству

Сзмпы

родители ПОЛОВО-Зр. непол.

ПОТОМСТВО ПОТОМСТВО

родители ИОЛОБОЗр. НСПОЛ

ПОТОМСТВО ПОЮМСТВО

родитель полонозр. »пчюл.

потомство потомство

£3*онтроль 52 опит

Самки

родители полоаозр. непол.

потомство потомство

1 < г

ПОЛОВ 03р. Непол.

потомст® потонете о

•1Й

и 12 10 К

см

лусгж_

1ВВ \ \

/

У

у

У

^кггШШ

родители

НСПОЛ

потомство

Рис. 6. Наследование состава ФЛ эритроцитов крыс в последующее поколение

показателей ЖК у потопе та взрослых особей с отягощенной наследственностью по ИХ Подобной закономерности не было выявлено в семьях животных конфольных групп.

Состав по.ишенасущашых ЖК липндов эритроцтгтов потомства животных опытной группы отражал нарушения, выявленные у родителей при ИКП (рис.7). Так. потомство крыс в мужской и женской группе животных характеризовалось таким же, как у родителей повышенным уровнем 18;2«6 в обеих возрастных группах. Уровень 20:4 соб у потомства жзгоотных с ИКП бьи незначительно повышен в сравиавт с их родителями у 40-дневш>1х особе!! обоего пола. Подобная тенденция изменений была выявлена и для других соб ЖК: 20:3, 22:4 и 22:5. Содержание перечисленных кислот у потомства крыс обоего пола было выше, чем в группах их родителей, и уровень изменения более выражен у крыс возраста 40 дней. Нарушения в составе соЗ ЖК у потомства полностью соответствовали изменениям уровней ЖК в группах их родителей. Особенно данная закономерность бьь.а выражена у крыс - самцов. В группе родителей -самцов с ИКП уровень 22:6 бьи низким в сравнении с контрольной группой взрослых животных (р<0,01). Такой же сниженный уровень ДГК наблюдался в группах их детей, как половозрелых, так и неполовозрелых. Изменений в содержании 20:5 у крыс самцов с ИКП выявлено не было. Однако в группах их потомства содержание 20:5 у половозрелых особей было в 2 раза шике, чем у родителей. У неполовозрелого потомства наблюдалось еще более выраженное еннж дне уровня 20:5.

Самцы

родители, контр. □ потомство полоноз., опыт

Е! родители, опыт

потомство ксполоюзр., опыт

рил, 7. Наследование состава ЖК липидов эритроцитов крыс в последующее поколение

Наличие однонаправленных изменении у животных с моделированной ИКП и в группах нх потомства выявлено и для суммарных показателен, соотношений индивидуальных Ж и групп Ж (рис. Н). Нарушения показателей метаболических превращений ЖК наблюдались у потомков обоего иола и обеих возрастных трупп. В группе мужских особей у потомства половозрелых и неполовозрелых крыс показатель 20:4«6/22:6мЗ значительно превышал вели-чту, установленную для нх родителей, а также значения в контрольной группе (pcO.OOl). Изменение показателя 20:3+20:5/22:' у потомства животных опытной ipynnu в сравнении с контролем имело ту же направленность, что и в группе родителей: показатель увеличивался при наличии патологического процесса или отягощенного анамнеза. При этом, если достоверность различий с кошролем данного критерия п группе родителей состаатяла р<0,01, то в обеих возрастных группах потомства уже р<0,001. Однонаправленный характер изменений у родителей и их потомства в опытной группе животных наблюдался и дая показателя 20:4<й6/20:5соЗ. Так же, как и для описанных выше соотношений, увеличение показателя у потомства крыс было более выражено, чем у их родителей. Патогенетическая значимость увел! пения описанных критериев обусловлена накогие1шем метаболитов юб ЖК, дисбалансом между предшест-лешшкамп эйкозановдов различных серий и ингибитором их сшгтеза. Одной из причин выявленных изменет(й у потомства крыс с №<11 могут бьтп. нарушения в метаболизме ЖК, обусловленные угнетешем активности ферментов десату-раз и элонгаз (Титов В.Н., 1997; Vance D.E., Vance J., 1991; Okamoto Т. et al., 1994; Osada К. et al., 1995; Madani S. et al., 1998). Исследование показателей, характеризующих активность ферментов - десатураз у потомства особей мужского пола выявило изменение соотношения 20:4о)6/20:Зюб. Дашюго паруше-иия у самцов - родителей с ИКП выявлено не было. Однако, у потомства животных с ЙКГ1 стшжешге соотношения 20:4<в6/20:3м6, характеризующего ак-тшшость Д5 десатуразы об ЖК, наблюдалось и в сравнении с самцами - родителями, и в сравнении с потомством кошрольной группы. Изменения показателей активности ферментов .М десатураз у потомства ошлтпой группы имели противоположную направленность для об и шЗ ЖК.' Так, соотношение 22:6o)3/22:5m3 было гшже в опытной гр>тше, чем в контрольной у половозрелого it неполовозрелого потомства, что свидетельствует об угнетении активности Д4' десатуразы для шЗ ЖК. Напротив, показатель 22:5®6/22:4й6 был почте в 2 раза выше у потомства опытной группы. Активация фермента Д4 десатуразы соб ЖК, выявленная по показателю 22:5<с6/22:4со6, может являться компенсаторной реакцией на снижение продукции 22:6иЗ у лотомства крыс опытной группы (Foot K.D. et al., 1990; Iimis S.M, 1992; Okamoto T. etal., 1994). Изменения в показателях превращешш ЖК, указывающих па нарушение их метаболизма у потомства животных с ИКП, выявлены и в группе женских особей. Однако направленность изменений не всегда совпадала с выявленной для крыс -самцов. Исключение составлял низкий уровень показателя 20:3+20:5/22:6 у особей женского пола, который обнаруживался и у потомства.

20:4*6/22:6^3

(20:3 ж 20.5'V* 3)'22:6\*3

родители половозр. непол.

потомстве потомство

родители половозр. непол.

потомство потомство

родители половозр. непол.

потомство потомство

20:4\*г б/20'З* б

22:6*3/22:3*3

родители половозр нелол

потомство потомство

22:5w6/22•4w6

родители половозр. иепол.

ПОП) м с тв о пото мс ТВ о □ контроль £5 ОПЫТ

родители половозр. непол.

ПОТОМСТВО ПОТОМСТВО

Рис. 8. Наследование характера метаболических превращений ЖК у крыс в последующее поколение

Анализ показателей превращений ЖК у животных с моделированной ИКМ и в группах их потомства позволил установить обняв'! характер тмеиенпй изученных критериев, свидетельствующий о высоко!) вероятности наследования метаболических дефектов ЖК. Важным является факт, что уровень измене-то"! большинства показателей у крыс с отягощенной но КП наследственностью превышает тот, что выявлен у их родителей при наличш! патолопш. Ого свидетельствует о прогрессировали!! нарушений в метаболических превращениях ЖК и закреплении патогенепмескнх реакций в последутощих поколениях.

Таким образом, результата экспериментальных исследовашш позволили установить, что в формировании изменений состава липидов эршрощггов крыс разлишшх экспериментальных групп немаловажную роль играет половая принадлежность, онтогенетические закономерности, а также среда обитаншг В настоящем исследовашш выделены изменения в показателях ФЛ и ЖК как у половозрелого потомства, так и неполовозрелого, отражающие состав липидов эритроцитов крыс - родителей. Равнозначные условия обитания потомства крыс опытной и контрольной гр\тп[, одинаковые периоды онтогенетического развития животтшх экспериментальных групп и выявленные при этом изменения в уровнях ФЛ и ЖК свидетельствуют о превалирующем значешш наследственного фактора в развитии нарушений лшшдиого гомеостаза.

Клинические исследования

Характеристика состава липидов эритроцитов крови членов семей с наслс;1усмой кардиальной патологией. Исследован состав ФЛ и ЖК липидов эритроцитов «ненов 55 семей с наследуемой КП. Группу пробандов состаг эти 58 бальных КП среднего возраста 53,0±1,9 лет, среди них было 35 мужчин и 23 женщины. В группу потомков пробандов вонши дета и внуки больных КП, не имеющие на момент обследовашм клшшчеекпх и субошшческгес признаков атеросклероза и ИБС. Средшш возраст потомков 1-го поколешь составил 25,7+1,8 лет. Данная группа представлена преимущественно взрослыми лицами мужского пола - 28 человек, и женского пола - 26 человек. В групп}' потомков 2-го поколения вошли внуки больных КП, среди которых в основном были дети - по 21 человеку а мужской и женской группе. Средний возраст потомков 2-го поколения составил 13,5±1,3 лег. В контрольные группы вошли здоровые мужчины (33) и женщины (30) в возрасте 18-40 лет, а также мальчики (18) и девочки (20) 7-14 лет.

Фосфолипиды. Состав ФЛ эритроцитов обследуемых лиц определялся наличием 4-х основных компонентов: ФХ, ФЭ, СМ и ФС. В следовых количествах обнаруживался и ФИ. При обследовании больных КП выявлены изменения уровней ФЛ в сравнении с группой здоровых лиц (табл 3). Более выраженные изменения, имеющие статистически достоверные значения, наблюдались в группе мужчин. Общей тенденцией распределения уровней ФЛ у мужчин явилось преобладание высоких значс шй СМ и низких для ФС, ФЭ и ФХ. Отличительной чертой в характере перераепределеши ФЛ в груше женщин явилось прспг'оположное соо'тешение высоких и шпких значений ФЭ и СМ. Наибо-

лее частыми изменениями состава ФЛ у женщин являлись увеличение уровня ФЭ (у 73,9% жешщш), превалирование низких значений СМ (у 69,6% женщин), ФС и ФХ (у С)0,9% женщин). Обнаруженные изменения соогношешш отдельных классов ФЛ имеют значение для функционирования клетки. Работами ряда авторов подтверждено, что многие натолошчсские процессы неразрывно связаны с выраженным нарушением функции биомембран, что является следствием специфических изменении состава И обмена ФЛ (Бажурпна И М., Панов М.А., 1986; Климов Л.П., Иикульчева Н.Г., 1999; 1ллсЬеппп° М.,е( а1., 1992)

Таблица 3

Состав ФЛ эритроцитов у больных кардиальиой патологией

ФД % Уровень карлшешм Пробакдм

Мужчины. п=35 Ж'сшшшы, п-" 23 •

ФХ N (муж) 34,7010,50 N (жонТ 35.11)11.15 По». Ср. Пои. 39,41+1,34* п'14 35,15+0,81 32.01+0,39*" п-19 37.6110,36 п=8 34,55+0.50 32,48+0,48* п-14

ФЭ N (муж) 28,00-0,60 N (жен) 21,70+2,0-1 Иов. Ср. По». 30,41+0,62 п:9 25,К 1+0,76* 22,8313,84"* пЧ9 27,2910.55* п-17 24,3010,97 16.48+и 2 п=6

СМ N (мул) 26,60+0,50 N (жен) 32.90+1,60 Нов. Ср 11011. 30,8410.68*«* п-28 29,43-0,76* • 22,7211.62 п-5 40,85+2.70 и»7 31,5011,26 27,5310.78 п-16

ФС К(му'а) ю,7(»10,30 М(жсн) 10,10+0,60 Нов. Ср. Пои. 12,01+0,35 п-10 9,5910,38 8,1410,40*»* п"20 12,2210,45 п-9 9,5810,48 7,37+0,42 п=14

Примечание. Звездочкой обозначена достоверность различии относитщьно здоровых

лиц

Общая картина состояния фосфолииндпой компоненты эршроцитов крови детей и внуков отражала характер модификации основных классов ФЛ у их родителей. Наиболее выраженными были изменения в уровнях ФЛ у потомков мужского иола. Так, достоверно значимым (р<0,001) являлось снижение уровней ФЭ и ФС в 1-м поколении у большинства лиц мужского пола, происходившее на фоне увеличения содержания СМ (рис.9). Распространенность изменений состава ФЛ в группах иробандов - мужчин и их детей была одинакова и составляла от 54% до 79% дтя разных классов ФЛ. Во 2-м поколении в группе внуков характер крушений нреимущеет вепно бмл тот же, что и у иробандов - мужчин, но процент выявлеши повышенных уровней СМ и пониженных ФХ падал в сравнении с группами старших поколений, чаше появлялись у внуков изменения противоположной направленности в содержании СМ и ФХ. В группах иробандов - женщин и их потомков женского пола в 1-м поколении общая направленность изменений фосфолииидных компонентов выражалась преобладанием высоких уровней ФЭ (у 73,9% матерей и 73% дочерей), низких СМ (69,6% и 69%) и ФХ (60,9% и 62%). В женской группе 2-го поколения закономерность в преобладании повышенных или

Мужская линия родств»

¡дпробанлы и лети □ внуки и норма

Женская линия родства

ФХ

Рис. 9. Наследование состава ФЛ эритроцитов в семьях с КП

пониженных значении у девочек ег.чажена, встречаемость в группе высоких н низких значений всех показателей ФЛ была примерно одинаковой.

Анализ состава ФЛ эритроцитов у членов семей с наследуемой КГ1 выявил наличие нарушений у больных КН и их потомков 1-го и 2-го поколений но различным критериям в 53% - 78% случаев. К наследуемым признакам следует отнести показатели ФЭ и ФС, с меньшей долей вероятности - СМ и ФХ, семейный характер наследования которых во 2-м поколении довольно часто нарушался.

Жирные кислоты. Состав ЖК лннадов эритроцитов больных КП характеризовался перераспределением в уровнях насыщешплх, моноеновых и полиепо-вых ЖК в сторону снижения доли ненасьпцешюсти (табл. 4).

Таблица 4

Состав 0СН0ВШ.1Х ЖИрНЫХ КИСЛОТ ЛШШДОВ ЭрИЗрОЦИТОВ ЗДОрОВЫХ Л1Щ н

больных кардиалыюй патологией

Код Здоровые Проба! цы - больк ие КИ |

К11СЛ01Ы Мужчины Женщины Мужчины женщины

(п "-33) Сп-30) (п-35) (п-23)

1-4:0 0,6810,03 0,5810,15 0.71+0,05 0,70x0,04

15:0 0,41 ±0,02 0,35; 0,06 "О.ЗОЮ.ОЗ 0,40x0.03

16:0 I9.26i0.26 21.10.+0,26 *4 "23,35±0.58 ""24.12x0.62

16:ЬУ9 7 1.32+0,10 0,90+0,1« •♦•1.28+0.10 1,30+0,08

17:0 0,62+ 0,05 0,40+0.01 »0,47+0,01 0.49x0.03

17:ЬУ9 0,21±0.03 0,201 0,01 **0.3бх0,04 "0,4110.07

18:0 15,16+ 0,26 16,55+ 0,55 15.88+0,34 15.8010,42

18:1\\9 14.19+ 0,25 14,18+ 0,59 '15.49+0.43 15.4110,46

18:1 \\7 1,40x0,12 1,35+0,26 1,67x0,05 1,61+0,06

18:2«6 11,01+0,26 12,70x1,17 »12,01x0.30 12.53+0,39

18:3\у3 0,11± 0,02 0,23+0,05 ***0,20х(1,01 0,2110,01

18:-1\\3 0,55+0,11 0.15± 0,07 »•♦0,1610,03 0.17x0.0?

20:1 о.зо±о,оз 0,33+ 0,12 '0.40+0.(12 0.40x0.02

20:2\У6 0,6710,08 0,4310,22 0,81x0,13 0,68x0,12

20:3»6 1,05+0,01 1,25+0,13 ■ *•*]. 38+0.07 1.3710,02

20:4»б 10,81±0,45 12,20x1,45 ■ 11,19+0,49 10.6St0.5S

20:5УУЗ 1,55± 0,14 0,87+ 0,07 1,46+0,12 1,37+0.12

22'4\У6 . 1,9К± 0,16 1,93+0,90 1.82+0,10 1,7710,12

22:5« б 0,281 0,08 0,231 0,05 0,21+0.02 0,20+0,02

22:5ууЗ 2.15+0,07 2,14+ 0,30 2.26+0,13 2,0810,13

22:бп'3 8,3210,40 7,43+ 0,62 ***5,84±0,35 "5,4610,38

13,16+1,42 11,9211,75 ••'98010,52 9,6910,65

ЕУУ* 25,9610,55 28,-10±2.76 27,4210,74 28.2611.00

Примечание'. Ззшдочкими оботачена достоасриостьразличий мелсду группами здоровых и больных: *р<0,05; **р<0,01; ***р<0,(Ю1

Изменения в содержании насыщенных кислот более всего выражены увеличением 16:0 у больных мужчин н женщин, сшсшшем 17:0 у мужчин. Доля

моноеповых кисло г изменена незначительно и связана с увеличением 17:1 «9, 20:1 и 18:1«9п группах мужчин и женщин. Среди мб ЖК выявлено увеличение уровней 18:2 у мужчин, 20:3 п обеих половых группах, наблюдалась тенденция к увеличению количества 20:4 у мужчин. Изменетм в уровнях «3 ЖК у больных КП, выражались стгжепием количества 18:4 и 22:6, общего содержа-шгя гоЗ ЖК. Содержание 20:5 у 34,3% мужчин умал>шалось до 0,97+0,04 (р<0,()1), у 60.9% больных женщин уровень 20:5 находился в пределах 1,08±0,11. В обеих футах больных преобладг-и шпкие значения 22:5 мЗ ЖК (1,84±0,15 у 57,1%мужчнн и 1,97+0,14 у 87%женипт). Выявленная модифика-№1я состава ЖК характерна для заболеваний Kll (Siguel E.N., Lerman R.H., 1994; Agostoni С. et al., 1994; Simon J.A. et al, 1995). Ряд авторов важным фактором риска сердечно-сосудистых заболеваний считает дефицит эссенциальных ЖК, в первую очередь линолевой (Decsi Т., Koletzko В., 1994; Siguel E.N., Lerman R.H., 1994). В nauurx исследовашшху больных мулгпш и женщин пре-облалали повышенные значения 18:2, шпкие уровни последней обнаружены только у 17,1% мужчин и 30,4% женщин. Уровень 18:3 ЖК действительно снижался, но только в женской фугше больших (у 85,9% женщин).

Изменения в составе ЖК липидов мембран многие авторы связывают с нарушением их метаболических препращешп! (Peterson D.B. et al, 1994; Siguel E.N., Lemian R.H., 1994; Decsi T. et al, 1996; Folsom A.R. et al, 1997; Robberecht E., et al., 1997). Используем,te нами показатели соотношений индивидуальных ЖК и гру пп ЖК позволили дать оце!ску состоянию метаболически процессов в ряду превращешпТ ЖК (табл. 5). Снижение показателя !юЗ/1«6 наблюдалось в группе пробандов - мужчин: У женщин в общей группе выявлена лишь тенденция к его снижению, хота 65,2% женщин имели тгашс значениями обсуждаемого показателя (0,291:0,02).. Изменения обнаружены и для соотношений 20:4об/ 22:бмЗ, 20:3<й6+20:5м3/22:бм3, которые увеличивались у больных муж-чин и женщин.

Таблица 5

Показатели превращений ЖК в группах здоровых и больных КП

Показатели Злороше Пробанди - больные КП

Муил чы (п=33) Жсншшгы (л=30) Мужчины (п-35) Жспшны (п=23 )

S\v3.'S\v6 0.5710.03 0,45+0,13 ***0,37±0,01 0,33+0,02

го^обао^юз. 9,9110,91 7,6011,61 8,41+0,56 8,24+0,53

18:-(<1>3/18:3(03 2,14+0,67 0,65+0,06 »0,71+0,08 0,88+0,12

20:4иб/20:3а)б 10,56+0,61 10,13+1,77 ** 8,4410.39 7,80+0,42

22:6эЗ'22:5шЗ 4,1210,20 3,50+0,59 ***2.5610,07 2.51+0.09

20:4щ6/22:6щЗ 1,1610,06 1,65+0,34 •"2,02+0,07 2,1710.21

20:3 <-20:5/22:6 0.2S+0.03 0,4010,08 ***0,50+0.04 »0.6 210,10

20:4шб/22:4шб 5,46+0.21 ' ' 6.32+0,30 ♦6.4210.32 6.08+0.31

20:5шЗ/22:5оЗ 0,72+0,12 0,41+0,06 0,69+0,09 *"0,6710,04

Примечание. Звездочкой обозначена достоверность различий между группой здоровых и больных: * - р<0,05; * * - р<001;*** - р< 0,001.

Такая направленность изменений между ЖК - предшественниками эйко-заноидов различных серий и ингибитором их синтеза отражает накопление предшественников тромбоксанов и простагландинов 2-Й серии, что может привести к нарушению вазодилататорных свойств крови у больных (Мевх А.Т. и др., 1990). Наиболее выражен эффект данного нарушения у пробандов - мужчин. Анализ показателей превращений ЖК, характеризующих активность ферментов - десатураз, также выделил ряд нарушении у больных. Различия между группами здоровых и больных обнаружены в уровне соотношения 18:4мЗ/18:ЗюЗ. Одной из реальных причин низкого уровня 18:4 и накопления 18:3 является угнетение активности фермента Д6 десатурази ЖК, что наиболее характерным было для больных мужчин. Уровень показателя 22:6й>3/22:5©3 бил низким как у больных мужчин, так и у женщин. Снижение интенсивности превращений в ряду оЗ ЖК может быть результатом нарушения баланса серии фермешных реакций (Vanee DE, Vance J., 1991; Hanvood J.L., 1994). Немаловажную роль в этом процессе играет интенсивность элонгации ЖК. Для характеристики активности ферменте элонгазы, превращающей 20:5 ЖК в 22:5соЗ, использован показатель соотношения между этими кислотами. Изменение уровня соотношения 20:5(i)3/22:5o)3 имело место в группе женщин - пробандов, у мужчин данное соотношение увеличивалось только у 31,4% больных. Анализ интенсивности превращений в ряду об ЖК у пробандов проводился но показателям 20:4и6/20:3ш6 и 20:4<о6/22:4и6. В обеих группах пробандов наблюдалось снижение соотношения 20:4о)6/20:3ю6, характеризующее угнетение активности Д5 десатуразы со6 ЖК. Изменение показателя элонгации, приводящее к дефициту 22:4<о6, отмечалось только в группе мужчин. Низкая интенсивность превращения 20:4о6 в 22:4ы6 в Группе женщин обнаружена только у 34,8% больных.

Изучение показателей превращений ЖК позволило выделить одну из причин дефицита ПНЖК шЗ семейства у больных: это возможное нарушение активности ферментов десатураз и, частично, элонгаз. Как известно, последствия дефицита шЗ ЖК в клетках являются основным патогенетическим звеном в становлении ряда заболеваний (Ъггов В.Н., 1997-1999). Низкий уровень метаболизма ЖК, зыявленный по показателям их превращении, наиболее выражен в группе пробандов мужчин.

Установленный характер изменений в составе ЖК у больных КП наблюдался и в группах потомков. При этом только уровень количес гвенных нарушений ЖК, но и распространенность повышенных и пониженных значений большинства показателей в ípynnax пробандов, и,, детей и внуков были сопоставимы. Практически у всех потомков 1-го поколения уровень 16.0, 17:1 и 18:1со9 был такой же, как у их больных родителей (рис. 10). Повышенные значения этих кислот встречались у 96% - 100% больных мужчин и их сыновей, 61% - 83% больных женщин и их дочерей. Характер изменений содержания основных насыщенных и моноеновых кислот у потомков 2-го поколения и их уровень был таким же, как и у пробандов, а встречаемость

% Мужская линия родства

25 ^-

16:0 1 8:1\у9 18:2\У6 20:4те6 20:5*3 2222;5к'3 22:бл'3

Шнорма Ипробанды Пдетп О внуки

Женская ЛШ1И1 родства

16:0 18:1 М-9 18:2-лг6 2<Миг6 20.5и-3 22:4» 6 22.5» 3 22:6»-3

Рис. 10. Наследование состава ЖК лнпидов эритроцитов в семйях с КП

повышенных показателей была выше и составляла 90 - 100% у внуков и 71% - 100% в труппе внучек. Изменения в уровнях ПНЖК у потомков так же носили семейный характер. Прежде всего это касалось содержания о>3 ЖК: 18:4, 20:5, 22:5 и 22:6. Более выражено наследование изменения содержания 20:5 ЖК. Сниженный уровень 20:5 в 1-м поколении у большинства детей встречался значительно чаще (67,9% в мужской группе и 73,1% в женской), чем в группе отцов (34,3%) и матерей (60,9%). Такая же закономерность выявлена и у потомков 2-го поколения. Изменение в уровне 22:6 ЖК имело самый высокий процент распространения в группах пробапдов и их потомков. Практически все прооанды - мужчины (100%) и большинство пробандов - женщин (82,6%) имели низкие показатели ДГК. Данное нарушение унаследовано в группах их детей, у мужчин в 100% случаев, у женщин - в 96,2%. Уровень 22:6 у внуков был более низким, чем у пробандов, а распространенность данного нарушения в группах - высокой (100%). Высокий процент встречаемости изменений в уровнях тЗ ЖК наблюдался как в мужской, так и в женской группах внуков, что свидетельствует о прогрессирующем характере наследования данных аномальных признаков от иробанда к потомкам. Общий характер и уровень изменений у пробандов и их потомков выявлен и для <о6 ЖК: 18:2, 20:3, 20:4 и 22:4. В группе пробандов - мужчин наиболее часто встречаемыми нарушениями являлись повышенные уровни 20:3 (в 94,3% случаев). Данный дефект наследовался в 1-е поколение 82,1% потомкам мужского пола. Повышенные уровни 18:2, 20:4 и 22:4, выявленные у 65,7%, 68,6% и 57,1% пробандов - мужчин передавались в следующее поколение и имели более высокую распространенность в группе (85,7%, 67,9% и 75%). По женской линии родства четко выраженной закономерности в наследовании изменений состава об ЖК выявлено не было. Характерно, что в группе мужчин - пробандов превалировали высокие значения 20:4, у женщин, наоборот, низкие (13% высоких и 65,2% низких). Наследование данного признака потомкам 1-го поколение происходило с такой же закономерностью: процент высоких значений преобладал у мужчин (67,9%, у пробандов - 68,6%), процент низких значений преобладал у женщин (53,8%, у пробандов - 65.2%). Аналогичные особешюс т характера наследования шб ЖК у мужчин и женщин, но менее выраженные, выявлялись для 20:3 и 22:4 ЖК. Данные отличительные особенности о наследовании юб ЖК п - мужской и женской линия родства терялись во 2-м поколении. И в мужской, и в женской группах потомков 2-го поколения встречаемость высоких уровней шб ЖК но различным показателям составляла 90-100% у внуков и 71-85,7% у внучек.

Проведена оценка показателей метаболических превращений ЖК у детей и внуков больных КП. Выделены отдельно семьи, в которых пробаадом был отец (35 семей)!! семьи, где пробаадом была мать (23 семьи). Практически по всем показателям у потомков 1-го и 2-го поколений наблюдались отклонения от нормальных величин, характеризующие нарушение в превращениях ЖК.

При гэтом характер наследования изменений каждого показателя от отца и матери к потомкам мужского и женского пола, был различным (рис. II, 12). Для установления особенностей наследования нарушений по мужской и женской линии в семьях больных КП проведена оценка генеатошческих связей в показателях превращает! ЖК по линиям отец - сын, отец - дочь, мал. - сын, мать -дочь. Самый высокий процент наследования выявлен для показателя тЗ/тб. Доказательство наследственного дефекта в показателе юЗ/мб получены у 96,3% потомков. Наследование низких значений юЗЛоб от пробанда - оща и иробанда - матери происходило с одшаковой частотой. Нарушение взаимосвязи рядов спЗ и (об обусловлено характере».! взаимоотношений предшественников синтеза эйкозаиоидов различных серш! и ингибитора их синтеза. Проанализировашл показатели 20:4о)б/22:б»3 и 20:3со6 +20:5о>3/22:6«3, отражающие эти взаимоотношения. Характер наследова1шя нарушений выше назвашшх показателей одш{аков для обоих критериев и проявился высокой частотой выявления повышенных значений у потомков (в 88,9% и 83,3% случаев). Для обоих критериев максимальный процент наследования высоких уровней (100%) выявлен по линии отец - сын, мать - сын. несколько ниже - по линии отец - дочь (71,4% для обоих показателей), мать - дочь (83,3% и 58,3%). Другой характер наблюдался в наследовашш нарушаяй показателей превращешш ЖК. Так, снижение показателя 22:6/22:5 наблюдалось у 100% потомков мужского пола. У потомков женского пола этот процент был значительно ниже (61,5%), причем, если наследование дашюго признака по лишш отец - дочь составляло 71,4%, то по линии мать - дочь всего 50%. В целом, частота наследовашш дефекта показателя активности Д4 десатуразы по линии отец - дети выше (87,5%), чем но лишш мать - дети (72,7%). Наследование дефекта в показателе активноста Л5 десатуразы наблюдалось значительно реже, низкие уровни соотношения 20:4/20:3 выявлялись у 42,6% ното.\псов. Передача дефекта по лишш мать - дочь не происходила вообще, а от отца к дочери - только в 28,6% случаев. Дефект показателя активности Л6 десату разы наследовался в 27,8% слу ,аев, у 72,2% потомков отсутствовало нарушение показателя 18:4/18:3, характеризующего активность фермента. Частота наследования низких значений по лишш отец - сын была значительно выше (61,1%), чем по лшпш мать - сын (40%). Наследование нарушения показателя 18.4/18:3 по линиям отец - дочь и мать-дочь отсутствовало. Оцсшшая характер наследования дефектов показателей превращений ЖК следует отмстить превалирующую частоту наследования в мужской линии родства: либо по линии отец - сын, либо по линии отец - дета.

Таким образом, проведенное семейное исследование показало, что изменения в составе ФЛ и ЖК эритроцитов крови больных КП транслируются от пробанда на потомков 1-го и 2-го поколений в семье. Выделены основные наследуемые признаки среди показателей ФЛ и ЖК. Это, прежде всего, нарушения в превращениях ЖК, характеризующие актин-нос п. ферментов лнгюгенеза, обмен в эйкозаноидном.цикле, структурные модификации внутриклеточных фосфолипидов. Установленные закономерности наследования характера изменений в липпдах эритроцитов

Ж ейская лшшя Мужская линия

Ж «некая линия Мужская лиши

□ норма муж.

□ сыновья

□ норма ясен.

□ дочери

ЕЗ проба или ЕЗ внуки О пробанлы 0 внучки

Рис. 1!. Наследование метаболических дефектов Ж К по показателям их превращений в семьях пробамдов-мужчмн

Женски лиши Муже«»« л11ш1 Женская линия Мужшшни

'—"СГ 1 '♦ДО*

г

.я

___ &

Г р авггё

322223'

В

-ю

10

К1 \v3Z\v6; К2 18:4«3/18:3\\3; КЗ 20:5\\'3/22:5\\'3;

К4 20:4\уб/22:4«6; К5 20;4\\б'20:3\\б; Кб 22:6\УЗ/22:5\УЗ;

Рис. 12. Н .следование метаболических дефектов ЖК по показатели»! их превращений в семьях пробаидов-жгнщин

крови членов семей, отражающие состояние метаболических процессов в мембранах других клеток крови, органов и тканей, выражены превалирующей частотой наследования по линии отец - дети. Практически отсутствуют признаки наследования метаболических нарушений но линии родства мать т дочь. Полученные данные являются новыми, в литературе сведений о наследовании изменений состава ФЛ и ЖК в семьях с КП мы не встретили. Б единичных публикациях обсуждаются взаимосвязи между показателями обмена липопротендов у детой и их родителей (Лнповец-кий Б.М., 1993; Доборджгинидзе Л.М., 1996, 1998; Копалев И.А., и др., 1998; Boulton Т. et al, 1995). В большинстве случаев, данные литературы по наследуемости ГЛП соотносятся с закономерностями, выявленными для показателей эритроцитарных липидов в представляемом исследова-тш.

Атерогеннын эффект сыворотки крови членов семей с наследуемой карднальной патологией. Для установления роли изменений состава ФЛ и ЖК в атерогенезе выявленные нарушения были тперпретированы с позгаит их атерогешюго риска. С этой целью отобрано 28 семей с наиболее выражен-нымн парушешшми в лнпидах эритроцитов, у членов которых проведено изучите комплекса факторов атерогенноети крови: общего ХС, ХС ЛПВП, трит-лтщерпдов, ХС ЦИК, аполшюпротсина В, десиалировашюго апоВ и показателя АТГ - способности сыворотки крови in vitro вызывал» накопление ХС в первичной культуре клеток шпнмы аорта человека. Подобный методпчесюш подход для подгверждешга атеротенного эффекта нарушений состава эритрощггар-ных лнпндов и их генетической значимости использовался впервые.

Результат показали, что изменения в составе ФЛ и ЖК у пробандов с заболевашшш 1Ш во всех случаях сопровождаюсь возрастатшем атерогенного потенциала сьшордтки крови. И у мужчин, и у женщин - пробандов наблюдалось увеличение содержания ХС ЦИК, апоВ, десиалировашюго аггоВ. Средний уровеш> ХС ЦИК у больных КП состаатял 36,82+9,4' мш'мл, достигая в некоторых случаях максимальной величины 146,5 мкг/мл (при норме < 17 мкг/мл). Увеличение данного показателя в 2 и более раза сопровождалось снижением уровня ХС ЛПВП и увеличением атерогешгых классов ЛП: ЛПНГ1 и ЛГ10НП. Такая аккумуляция атерогенных признаков характеризует развттге атероскле-ротического процесса у пробандов из семей с КП (Качарава А.Г. и др.. 1992; Tertov V.V. et al., 1996). Подтверждением этого положения явилось значительное увеличение апоВ, в первую очередь - модифицированных аггоВ, обладающих наиболее сильным атерогешшш эффектом (Orekhov A.N., et al., .1991; Teitov V.V. etal., 1993). Так, относительное содержашге десиалировашмх апоВ у пробандов составляло 31,48±4,71% от общего содержашя апоВ (при норме <17%), у 58% больных величина . обсуждаемого показателя достигала 48,26±4,32%. Об активном атерогешюм процессе свидетельствовали и результаты опытов in vitro. Накопление ХС в кулътшшруелплх. клетках, вызываемое сывороткой крови обследуемых, составляло 181,19i 16,27% (в норме - отсутствует).

Установление взаимосвязи изменении в эршроцитарных лннидах и факторов лтеро! емкости крови проведено у потомков больных из семей с наследуемой КН. На фоне выявленных нами нарушений в составе ФЛ и ЖК эритроцитов у обследуемых 1-го поколения обнаружены изменения показателей ате-poi спета. В группе детей пробандов высокие уровни ХС ЦИК, превышающие норму более чем в 4 раза, обнаружены в 62,5% случае» (71,)1±12,80), то есть значительно чаще, чем в группе их родителей (50%). Частота выявления повышенных уровней модифицированных ЛГ! у детей пробандов такая же (96%), как и у родителей (100%). Та же закономерность распространения нарушений у родителей и детей выявлена и для относительного содержания десиалированных апоВ, а так же для величины атерогенности сыворотки крови, рассчитанной по уровню накопления ХС в культивируемых клетках. Анализ атерогенных признаков у внуков пробандов показал аналогичный с потомками 1-го поколения уровень их изменений и распространенность в группе, подтверждающие генетическую обусловленность выявленных дефектов.

Для характеристики степени ассоцинровашоети атерогешюго потенциала крови с изменением состава ФЛ и ЖК лит «он эритроцитов в семьях с на-след, емой КГ1 проведен корреляционный анализ между всеми обсуждаемыми показателями. Статистически значимые взаимосвязи в группе пробандов в основном касались уровней десналнрованных апоВ с показателями ЖК. Положительная корреляция характеризовала взаимосвязь десиатированного апоВ и 17:1 ЖК (г=0,52, р=0,01), такой же коэффициент показала взаимосвязь относительного содержания десиатированного апоВ (% десиалнроваиного апоВ от общего содержания апоВ) и 17.1 (г=0,53, р=0,01). Среди показателей метаболических превращений ЖК ассоциированность с факторами атерогенности крови проявилась для соотношения юЗ/о>6 с десиалировашыми апоВ (г=0,42, р=0,048), 18:4o)3/18:3(o3 с десиачнроваиными апоВ (г=0,46, р=0,02), 18:4w3/l 8:3й)3 с относительным содержащем десиалированных апоВ (г=0,53, р=0,01), Полоиоасльныйкоэффициет-корреляции наблюдался и во взаимосвязи модифицированных аноВ с соотношением, характеризующим активность процесса элонгации Ж - 20:4/22:4 (г=0,44, р=0,03).

Анализ корреляции в группе детей пробандов выявил большее число взаимосвязанных показателей, чем в группах их родителей. Для 1-го поколешш выделен ряд ассоциаций, характеризующих высокий риск атерогенеза у детей пробандов. К iniM относятся наличие прямой взаимосвязи соотношения 20:4/20:5 с уровнем апоВ, содержания См мб ЖК и десиалировашолх лииопро-теидов; обратная взаимосвязь С18_;2 об и соЗ ЖК с уровнем ХС в циркулирующих иммунных комплексах, накоплением ХС в культивируемых клетках in vitro. Сала взаимосвязи описываемых параметров у потомков мужского иола 1-го поколешш выражалась коэффициентами 0,35-0,49, р-0,04. Коэффициенты корреляции в группе дочерей входили в шггервал 0,56-0,76. У потомков 2-го поко-лсш1я взаимосвязь между показателями атерогенности крови,и уровнем липи-дсв эритроцитов сильнее, чем у их родителей (г для различных критериев от 0,53 до 0,79 с преобладанием значений в интервале 0,65-0,79, р=0,007). Харак-

теристтпсой высокого риска атерогенеза у потомков 2-го поколения явилась обратная взаимосвязь показателя активности Л4 десатурази ЖК с уровнем ХС в кульлгаируемых клетках in vitro (г = -0,73, р=0,008).

Полученные данные обосновывают атерогениыи характер изменений в составе лшшдов эритроцитов крови членов семей с наследуемой КП, доказывают их генетическую значимость. Признаки наследования в характере изменений состава ЖК и показателях их превращений, обладающих ярко выраженным атеротенным эффектом, выявляются в зна^ггелыюй мере у детей во втором поколеют, а сила их взаимосвязи с атерогенезом становится более значимой, чем у их родителей.

Многомерный статистический анализ дли выделения вариантой нарушений состава липндов п семьях с кардиалышн патологией. Результата проведенного исследования показали, что развитое семейной КП сопровождается наличием комплекса наследствешо-обусловлеших изменений в составе лшшдов, отражающих нарушения в метаболических превращениях ЖК, структурное перераспределение внутриклеточных ФЛ, повышенную атерогенность крови in vitro. Доля каждого дефекта, как и влияние отдельных факторов па их формирование в семьях больных КП могут бьпь различными.

Для выделеши наиболее часто встречающихся сочетании нарушений состава лшшдов у членов семей с КП, проведена классификация объектов по itx схожести. Первоначал1.но, методом кластерного анализа сгруппированы про-банды, каждый из которых характеризовался n=24 признакам!, исходя из изу-чешгых параметров. Число кластеров определилось в процессе разделения множества на группы по их схожести. В результате классификации представленных наблюдений было получено 3 группы, где в каждый кластер попали объекты наиболее «похожие» и «однородные». В 1-ю группу вошли 2 объекта из общего числа пробандоп. К совокупности параметров, выделивших данные объекты из общей массы, отнесены высокий уровень ХС ЦИК, превышающий нормальные значения более чем в 5 раз, повышенны значения апоВ до 2279,5 мкг/мл в сочеташш с низким ошоептельш.ш содержанием модифицированных апоВ, высокие уровни ФС до 12% от суммы ФЛ, увеличешия ненасыщеш гость ЖК за счет возрастают суммарных количеств С;0 соб ПНЖК до 19% и суммы юб ЖК до 32,5%, низкие величины соотношений 18:4шЗ/18:ЗсоЗ и 20:4ю6/ 20:3ш6 (0,35 и 7,9 соответственно). По совокупности дефектов в 1-й кластер вошли объекты с глубоко выраженными аномальными изменешмми в показателях липндного обмена. Второй кластер, включивший п себя 10 пробандов, характеризовался наиболее высоким уровнем модифивдровагаллх апоВ (более 400 мет/мл) и их относительного количества (51%), самой высокой атерогешго-стыо сыворотки крови, проявляемой in vitro, низким уровнем соотношешв"! 18:4юЗ/18:ЗсоЗ (0,78) и 20:4а6/20:3о6 (9,0), увеличенным соотношением 20:4иб/20:5шЗ. Изменение состава липндов в данной грутше пробандов по уровню нарушений и совокупности аномальных признаков условно можно оха-рактернзовать как средней тяжести. Третш кластер составили 12 пробандов. Отличительными признаками больных, попавших в третий кластер, явились

увеличенные показатели модифицированных аНоВ (265 мкг/мл) и их относительного содержания (21%), снижение уровней ФС (9,7%) и увеличение ФЭ (27,8), высокие величины соотношений С:о саЗ/об ЖК (до (У,7), 20:3+20:5/22:6 (до 0/))н 20:5мЗ/22:5юЗ (0,64), низкий уровень показателя 20:4й6/20:5оЗ (8,0). Нарушения в составе .¡((¡пион у пробандов, вошедших в 3-й кластер, можно охарактеризован, как у меренные.

Для исследования связей между аномальными признаками, выделенными при классификации объектов, полученная информация была сконцентрирована методом главных компонет- факторного анализа. Используемый мегод способствовал выделению наиболее значимых факторов в формировашш дефектов состава лшшдов, определению степени их нагрузки в этом процессе. Так, во 2-м кластере ведущими параметрами явилось накопление модифицированных лн-нопротсидов: абсолютного количества десиалированных апоВ (коэффициент =0,97) и их относительного содержания (коэффициент =0,96); совокупность изменений показа!елей превращений ЖК: 18:4/1 Я:3 (коэффициент = 0,73), 20.4/22:6 (коэффициент = -0,78) и 22:6/22:5 (коэффициент = 0,89). Определяющей внутренней характеристикой объектов 3-его кластера служила аккумуляция модифицированных лишпрогеидов - дееиачирооашсых апоВ (коэффициент = 0,87) и их относительного содержания (коэффициент = 0,84), соотношения С:о юЗЛоб (коэффициент = -0,92) и 20:33-20:5/22:6 (коэффициент = -0,93). Учитывая, что н 1-й кластер вошло только 2 объекта, анализ влияющих факторов методом главшлх компонент не производился. Сопоставление результатов кластерного и факторного анализа позволило решить задачу синтеза и увязки отдельных показателей системы, выделить тины нарушешш в составе лшшдов, сопровождающие формирование КП.

Первый тип нарушешш характеризуется как тяжелый. Общие нарушения в составе лшшдов определяют высокий азерогепнин потенциал крови, структурное перераспределение внутриклеточных ФЛ и входящих в их состав соб и о)3 ЖК, снижчмше г.еличю.ы соотношений 18:4о)3/18:3о)3 и 20.4о)6/ 20:3ш6.

Второй тип нарушешш - средней тяжести. Определяющими дефектами в составе липидов является снижение уровня показателей превращений ЖК 18:4йЗ/18:ЗсиЗ, 20:4й)6/20:3ш6, 22:6й>3/22:5ш3, сочетающееся с увеличением доли модифицированных лшюпротеидов.

Третий тип нарушений -умеренный. Данный тш нарушений состава ли-нидов определяет выраженный дисбаланс между ЖК - предшественниками и ингибторами синтеза эйкозаноидов, семействами <а6 и шЗ ЖК, сопровождаемый накоплением модифицированных апоВ липоиротеидов.

Дня решишя вопроса о наследовании выделенных тшов нарушений обмена лшшдов проведена кластернзашш объектов среди потомков 1-го поколс-ния семей; позволившая получить три однородные группы. Сравнение результатов распределения объектов по схожести векторов изучаемых параметров показало совпадение внутренних характеристик в соответствующих кластерах среди детей и их родителей. Так, в одну группу попали потомки с 1-й типом

нарушении и составе лшшдов (l-ii кластер): высоким атерогенным noieinuia-лом крови, сопровождающимся выраженными нарушениями всех пока ta гелей ФЛ и ЖК. Сочетание дефектов у обьектов этой ipyi шы аналогичное их родителям, обт.едпненпы.м в 1-ii кластер. Другой кластер составили лет со 2-м ттшом нарушений в составе липндов, характершуюпщмея сочетанными изменениями в уровнях модифицированшлх ЛИ, наруигашем в показателях превращений ЖК. Третий кластер составили дета с 3-м типом нарушений состава лшшдов. Определяющими признака.\ш явились нарушения в показателях соотношений об и оЗ ЖК.

Распределение детей и их роднгелей в соответствующих кластерах позволите охарактеризовать выделенные папл napynieiniii состава лшшдов как семейные. Так, в 100% случае!? у детей с 1-м и 2-м типом нарушений состава липндов родители имели тот же установленный тип. Вероятность развития нарушений состава лшшдов но 3-ему типу несколько ниже и составляла 60%, т.е. у 60% детей с 3-м типом нарушений в составе лшшдов родители имели тог же тип. У остальных 40% родителей патологический процесс сопровождайся 2-м типом нарушений в составе лшшдов.

Полу чет 1ыс результаты позволяют заключить о семейном характере раз-вшия нарушений в составе лшшдов, сопровождающих формирование КП.

Взаимосвязь факторов образа жизни и наследуемых изменений показателей липидного оГ5мепа п семьях с кардпалышй патологией. Эпидемиологическая ситуация в отношении риска развития КП в семье может быть опосредована многими фенопшическими факторами, в том числе образом жнзни семьи. Изучен комплекс наследственных, средовых, социально-экономических и других факторов и их влия!ше на состояние липидного обмена в семьях больных КП.

Для выяснения значешга отдел!,ных сторон образа жпзш! в семьях с КП, проведен анализ канонической корреляции между двумя множествами признаков, способных оказывай, влияние на формирование патологического процесса. Проаналнзнроваш.1 данные 45 потомков 1-го поколеши семей с отягощенной наследственностью по КП. Первое множество составит» 13 факторов риска, характеризующих образ жизни. Второе - 22 показателя липидного обмена в сыворотке и эритроцитах кропи, включая уровни ХС атерогашых и антнатероген-ны.х классов ЛП, содержание ХС ЦИК, триглицеридов, апоВ и десналирован-нЫх апоВ, отдельных классов ФЛ и ЖК. Коррслящюшплн канонический анализ между двумя множествами выделил параметры, имеющие отношение к развитию семейной КП (г=0,99 между двумя множествами, р=0,00001). В 1-м множестве наиболышш вес в построенной линейной комбинации имеют такие параметры, как возраст обследуемых, урове!!ь физической активности, наличие избыточной масс!.! тела по показателю индекса Кетле, климат в семье, наличие стрессовых ситуаций. Определяющими параметрами второго множества явилось большинство показателей л!!Ш!Д!юго обмена, составивших дашюе множество. Последующее исключите параметров, имеющих незначнтелыый вес в комбинацт! признаков, позволило сконцентрировать онределяюпше факторы, совокупность которых оказывает влияние на формирование семейной КП

(r=0,97. p=0,00013, -/;=244, dl=l69) Наибольший вес в развитии КП в семье имеют такие факторы риска, как уровень физической активности, табакокуре-íBie и употребление алкоголя, характер шггания, внутрисемейные отношения. 'Jiu сторона образа жизни наиболее тесно взаимосвязана с уровнем нарушений в фосфолшш;цшм бислое эритрошпов, соотношений вхо;шцих в из состав йб и 0)3 ЖК.

Резюмируя полученные результаты следует подчеркнуть, что среди изученных факторов образа жизнн, достоверно влияющих на уровень изменеши! состава липидов эрит]х>цнтов потомков больных KI1, а, следовательно, и на формирование семейной КИ, большинство яюяклея. управляемыми, воздействие на них полностью зависит от самою человека. Изменяя только перечисленные характеристики образа жизни можно значительно сш!зить их огрицатель-ное воздействие на метаболические факторы риска, приостановил. npoipcccit-рование патологического процесса и его формирование в последующих поколениях семьи

Закиочсиис. Проведенное клюшко-эксперименталыюе исследование позволило уегановигь, что изменения и составе лшшдов эршрощпов крови наследуются в последующие поколения. В реализации наследственных дефектов показателей лшшдного обмена сущестенную роль играет возрастно-иоловая изменчивость состава ФЛ и ЖК. Наличие возрастных особенностей в составе лшшдов ортроцитов крови отражает различную интенсивность метаболических процессов в развитии оршшзма. Экспериментальные исследования позволили проследить за характером изменений, происходящих в составе эригро-щггарных лшшдов от момента рождения до зрелого возраста, выделил, возрас-•Hiuc периоды, играющие решающую роль в формировании лшшдного обмена в норме. Установленные половые особенности в соста.с ФЛ и ЖК эритроцитов крови характеризуют мужской пол как самостоятельный фактор повышенного риска развития патологического состояния. По данным проведенных клинических и эксиериме1пальных исследовании, состав ФЛ и ЖК эритроцитов крови мужского организма отражает повышенную насыщенность мембран, их жесткость, низкую резистешпоеп. к развнтшо патологического состояния.

Развитие КП сопровождается значительными количественными изменениями отдельных компонентов ФЛ и ЖК лшшдов эритроцитов крови, свидетельствующих о нарушениях метаболизма последних. Экспериментальными исследоватвтями установлены закономерности наследования выявленных нарушений от больных животных потомству; доказано, что патолопгческие изменения в составе ФЛ и ЖК при наличии отягощенной наследственности наблюдаются в детском возрасте и усиливаются в зрелом В клинических исследованиях обоснованы высокая распространенность нарушений состава ФЛ и ЖК в 3-х поколений семей, атерогешсый характер последних у членов семей с наследуемой КП. Результаты семейного исследования позволили выделить возможные варианты сочеташгых изменений показателей лшшдного обмена при кар-даальной патологии, предложить критерии трех этионатогенетическтк типов семейной 1СП. Полученные знания позволят моделировать патологический про-

цесс в семье, укажут пути медищшской прикладной науке для направленной регуляции линндиого гомеостаза у потомков шли tux КП и членов их семей.

ВЫВОДЫ

1. Модифицирована экспериментальная модель 1шфарктоидной кардиова-зопашп с установленными инфарктро-подобными изменениями в коронаршлх сосудах у крыс и показателях состава лмшдов кропи; созданы «семьи» животных с кардиальной патологией и получено их потомство; сформированы группы для изучения закономерностей наследовать изменений сос ша ФЛ и ЖК эритроцитов в последующем поколении »л топ ял х.

2. Установлены в эксперименте онтогенетические закономерности распределения ФЛ и ЖК в лнпндах эритроцитов крыс в норме, позволившие выделить детский период (до 30-40 дней), когда происходит формирование состава ФЛ и ЖК; период полового созревания (90 дней), сопровождающийся скачкообразными изменениями в составе лтшдов эритроцитов; период зрелости (110 дней), характеризующийся стабилизацией состава ФЛ и ЖК.

3. Установлены особенности изменений состава ФЛ и ЖК эритроцитов в ностнаталыгом развнпш потомства крыс с ИКП, характериз\тощисся низким уровнем ФХ, ФИ и повышенным ФЭ в период 40-ПО дней, скачкообразными изменениями содержания насыщенных и гоб ЖК в позднем (60-90 дней), юЗ ЖК в раш1ем(10-15 дней) периоде онтогенеза..

4. Развитие инфаркто-подобпых пзменсш1Й в коронаршлх сосудах крыс сопровождается перераспределением уровней ФХ, ФЭ и СМ, нарушением показателей превращений Ж: 20:4со6/22:6аЗ, [20;Зсо6+20:5иЗ]/22:6<вЗ; 20:4.j6/ 20:5g>6; 22:6соЗ/ 22:5о>3; 22:5иб/22:4юб. Устаноатен общий характер изменешгй состава ФЛ и ЖК у крыс с ИКП и в группах их потомства, прогрессирующих в последующем поколапш.

5. В клншгческих исследованиях установлена закономерность из.мснеш!й состава ФЛ при кардиальной патолопш, выраженная у мужчин повышенным уровнем СМ и пониженным ФЭ и ФС; у женщин - увеличенным содержанием ФЭ и сниженным ФХ. Изменения в составе ЖК заключаются в перераенреде-лешш уровней насыщенных, мокоеиовых и полиеповых ЖК: умепынетш доли Ненасыщенных, сшжении соошошешй соЗ/соб; 18:4®3/18:3ю3; 20:4®6/20:3юб; 22:6мЗ/22:5мЗ; увеличешш 20:4со6/22:6соЗ; [20:Зо6+20:5юЗ]/22:боЗ; нарушения наиболее выражены у больных мужчин.

6. В семьях с КП доказана высокая вероятность наследования выявленных нарушений в 3-е поколение. Наследование аномального состава ФЛ и ЖК в последующих по колет их происходит преимущественно по мужской линшг родства.

7. В клинических исследованиях установлена взаимосвязь нарушении состава ЖК эритроцитов крови больных и их потомков с уровнем ХС Ц1ЙС, де-агалированных аполшюпротепдои В, накоплением ХС в культивируемых клетках тпимы аорта человека ripv инкубации их с сывороткой крови членов семей (in vitro); связь нарастает в последующих поколениях.

8. И семьях больных выделено зри пни нарушении в составе лииидов, сопровождающих формирование КП.

Первый тип включает в себя сочетание высоких уровней ХС ЦИК и аиоВ в сыворотке к])ОШ1. ФС п суммарного количества (иб ЖК в оритроцигах, низких показателен соотношений 18:4тЗ/18:ЗсоЗ и 20:4ш6/20:3н6; обнаруживайся у потомков в Ш0% случаев.

Второй тип вшвляется по высокому уровню модифицированных anoFJ и их относительного количества в сочетании с низким уровнем соотношений ЖК: 18:4io3/18:3w3, 20:4м6/20:3й)6 и 22:бюЗУ22:5юЗ; обнаруживается у потомков в 100% случаев.

Третий тип сопровождается накоплением модифицированных аиоВ ли-нопротсидов, увеличением их относительного содержания в сочетании с высоким уровнем ФЭ и нарушением соотношении ЖК: высокими значениями 20:3(-20:5/22:6, низким уровнем С&лЗ/аб и 20:4м6/20:5о)3; выявляется у потомков в 60% случаев

9. Установлено, что среди факторов образа жизни пшокинезия, характер низания, избыточная масса тела, психи-эмоцданальный сгазлс в семье и вредные привычки оказывают наибольшее тлимые на уровень наследственных изменений состава лииидов у потомков больных КГ1.

ОСНОВНЫЕ ПУБЛИКАЦИИ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Эндакова Э.Л , Новгородцева Т.П., Беляева Н.Ф. Оценка взаимосвязи урнкозурии и экскреции окенпролнна у больных ншемнческои болезнью сердца в период ранней санаторной реабилитации // Roup, курортологии, фнзиотера-шш и лечеб. фт. культуры. -1986.-С.57-59.

2. Новгородцева Т.П., Васьковскнй И.Е., Эндакова Э.А., Скоашев В.И. Сравнительный анализ жирных кислот эршроцитов венозной и капиллярной крови //Деп. ВИНИТИ 8 02.89. №8-16-В89

3. Иванов Е.М., Новгородаева Т.П., Эндакова ЭЛ., Свегашев В.И. Фос-фолипидный спектр сыворотки крови больных хроническим,! несненифически-ми заболевашшми лепенх в процессах восстановительного лечения // Терапевт. арх.-1989.-№3.-С.94 -97.

4. Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Иванов Е.М., Свегашев В.И. Фос-фолнниды сыворотки крови у больных ишемической болезнью сердца на этапе рашюй санаторной реабилигашш // Лаб. дело,- 1989,- №1.- С. 15-18.

5. Эндакова Э.А., Новгородцев; Т.П., Иванов Е.М Использование биохимических показателей в прогнозе и диагностике ишемической болезни сердца //Лаб. дело. - 199!.-К°10,- С.25-28.

6. Новгородцева Т.П. Ферментная адаптация организма человека к мус-сонноыу климату // Вестник ДВО РАН. - 1992.- Вьш.1.- С.22-27.

7. Новгородцева Т.Н. Жирные кислоты эритроцитов крови в доклинической диагностике ишемической болезни сердца И Бюл. СО РАМН - ]993.-№1.-С.22-27. .

8. Триль H.M., Новгородцева Т.П. t 1еко lopue механизмы ч1г>.имап1ческой адаитащи( человека в условиях муссонного климата roí a Дальнего Hueтока // Бюл. СО РАМИ,- 1993.-№1.-С.50-56.

9. Новгородцева Т.П., Эидакова Э.А.. Иванов Е.М. Липи;шая компонента эритроцитов крови молодых мужчин при бессимптомных стадиях ишемнческой болезни сердца // Вестник РАМН,- 1993.- N3,- С.41-43.

10.Novgorodtseva Т.Р., Endakova Е.А. Polyansaturated futty acids of blood erythrocytes: diagnosis of cardiac ischemia // Russian Academy of medical scienus Siberian branch Medical Research in 1992: Abstracts.- Novosibirsk, 1993 - P.96.

11.Патент Российской федерации № 1760453 па изобретение (приоритет от 15 феврачя 1990). Способ диагностики ишемнческой болезни сердца /Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Васьковский В.Е //Опубл. 07.09.92 Бюл.ЗЗ.

12.Эндакова Э.А.,Новгородцева Т.П. Состояние перекисного окисления лшшдов - антиоксидантпой системы молодых мужчин при перемещении в Дальневосточный регион // Физиология человека,- 1994.- Т.20, N2,- С. 164-171.

13.Иванов Е.М., Эндакова Э.А., Новгородцева Т.П. Принципы формирования региональной программы атеросклероза II Бюл. СО РАМН.- 1994.-N3.-С.57-61.

14.Эндакова Э.А., Новгородцева Т.П. Биохимическая диагностика в док-лшшческом и послеклшшческом периодах болезни II Проблемы первичной профилактики и восстшкшггелыюго лечения: Сборник науч.-тру до в ИМКВЛ СО РАМН. - Новосибирск, 1994,- Ч. 1,- С. 123-141.

15.Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Козычева Е.В. Эритроцитарные жирные кислоты больных хроническим ópoitxirroM при диетотерапии с использованием морских жиров // Проблемы первичной профилактики и восстановительного лечения: Сборник науч.-трудов ИМКВЛ СО РАМН. - Новосибирск, 1994.- Ч.2.-С.80-90.

16.Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Иванов Е.М., Козычева Е.В. Влияние днетарных «3 полнненасыщенных жирных кислот на эритроцнгарные фосфолншды при первичной и вторичной профилактике ССЗ // Проблемы первичной профилактики и восстановительного лечения: Сборник науч.-лрудов ИМКВЛ СО РАМН. - Новосибирск, 1994,- Ч.2.- С.3-13.

17.Эндакова Э.А., Китайская Л.С., Новгородцева Т.П. Полнненасыщен-ные жирные кислоты омега-3 рациона в первичной и вторичной профилактике атеросклероза //1-й Международный научный конгресс «Традиционная медицина и питание: теоретические и практические аспекты»: Тез. докл.- Москва, 1994.-С.319.

18.Эндакова Э.А., Новгородцева Т.П. Иванов Е.М. Метаболическая •«[>-фекпшиость диетарной реабнлтащш больт»1Х кардиореспираторiюй патологией // Междуиар. науч. конф., посвященная 80-л ей по Крымского НИИ имени И.М. Сеченова «Актуальные вопросы клинической и экспернментальныой курортологии и физиотерапии»: Сб. трудов,- Симферополь, «Таврия», 1994 -С.50-51.

19.Эндакова ЭЛ., Новгородцева Т.П. Биохимическая диагностика в по-слеклишгческом периоде заболеваний кардиореспираторной системы // Между-

нар науч. конф., посвященная 80-летию Крымского НИИ имени И.М. Сеченова «Лкту;ш1,ные вопросы клинической и экснери.ментатыи.кж курортологии и физиотерапии»: СГ>.трудов.-Симферополь,«Таирня», 1994.-С. »57-158.

20.Novgorodtseva Т.Р., Endakova Е.А., Ivaiiov Е.М. Effect of dietary \v3 polyuitsatiuitcd fatty acids on the erythrocy tic phospholipids for primary and secondary prophilaxis of the cardiovascular diseases //The lntemat-onal Symposium of the Japan-Russia Medical Exchange Foundotion «Methods and Processes of Japan-Russia Medical L'xcliangc»: Abstracts.- Osaka, 1995 - P.52.

21.Колычева E.B, Иовгородцева T.ll Оценка эффективности бальнсо-нрофнлакгики и бальпеореабилнтации по состоянию липндной компоненты эригроцпгарной мембраны //Междунар. конгресс по курортологии «Современные проблемы сан.-кур. дела»: Тез. докл.- М., 1996,- С.45.

22.Г1огшюв ВН., Иовгородцева Т.Н. Иммунобиологическая характеристика здоровья жителей Приморья //Здоровье населения Приморского края,-Нладивосток, 1997,- С. 139-159.

23.'Л1дакопа Э.А., Иовгородцева Т.П., Иванов Е.М. Метаболические аспекты иослеклшшческого периода болезни // Вестник РАМН.- 1997,- №8.-С.15-19.

24.Иовгородцева Т.П. Эршроцитарные (¡юсфолншды в развитии шнеми-ческой болезни сердца // Бюл. СО РАМН,- 1998,- N1.-C. 15-18.

25.Вострикова O.I"., Иовгородцева Т.П., Козычева Е.В. Компенсаторные возможности шпиокепданпюй системы и механизмы реализации действия природных лечебных факторов // Бюл. СО РАМН.- 1998.- N1.- С.23-28.

26.Иовгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Иванов Е.М. Модулирующее действие бальнеотерапии на процессы пероксидании у болыплх ишсмической болезнью сердца // Borip. курортологии, физиотерапии и леч. фнз. культуры. -1998,- №3,- С23-26.

27.Козычева Е.В., Иовгородцева Т.П., Эндакова Э.А. Влияние жира сельди «Иваси» на эрюротггариые ио.шгеиасыщенние жирные кисло™ при реабилитации больных сердечно-сосудистыми заболеваниями // Вопр. ниташш.-1998.-№5-6. - С.29-33.

28.Нате1П Российской Федеращш № 2101710 на изобретение (ириортггет от 14 марта 1995). Способ оценки степени завершенности воспалительного процесса в boi .тановителыюм периоде неспецифнческих воспалительных заболеваний лешк / Эндакова Э.А., Иовгородцева Т.П., Иванов Е.М. //О^убл. 10.01.98 Бюл. №1.

29.Патент Российской Федеращш Ж2102767 на изобретешь (приоритет от 14 (¡авраля 1995). Способ определения периода выздоровления при восстановительном лечетш больных шцемической болелшЮ сердца / Иовгородцева Т.П., Эндакова Э.А, Иванов Е.М.//Оиубл. 20.01.98 Бюл. №2.

30.Патигг Российской Федерации №2105983 на "изобретение (приоритет от 24 апреля 1995). Способ оценки завершенности формирования соединительнотканного рубца у больны*, перенесших ннфаркт миокарда / Иовгородцева Т.П., Эндакова Э.А., Иванов Е.М. //Оиубл. 27.02.98 Бюл №6.

31.11:нспг Российской Федерации №2105984 на 1Поб|кяспис (приоритет от 14 июня 1995). Способ оценки сечения инфаркта миокарда па поегсганио-иарном тише реабилитации /Эндакова Э.А., 11овгородцепа Т.П., Иваном 1:.М. Н Опубл. 27.02.98 Бюл. №6.

32.Пагснг Российской Федерации №2126541 на изобретение (приоритет от 14.06.96). Способ прогнозирования эффективности диетотерапии у больных ишемической болезнью сердца /Повгородцепа Т.П., Козычева Т.П. // Опубл. 20.02.99 Бюл. №5.

33.Повгородцсва Т.П., Эндакова Э Л., Козычева lt.fl, Юггайг-кая Л.С. Модификация лшшдов эритроцитарных мембран больных сердечно-сосудистой па юл01 пей в процессе комплексной бачькеотсрании // Ооир. курортологии, физиотерапии и леч. физ. культуры. -1999. - №1. - С. 12-15.

34.1!ог,городцева Т.П., Сорокина Л.В., Вострикова О.Г. Технология выделения диагностических маркеров сердечно-сосудистых заболевании методом канонического корреляциотюго анализа //Новые биомсдицииские технологии с использованием биологически активных добавок /Под ред. 1;.М. Иванова. Владивосток, 1999. - Выпуск 2. - С. 7(1-74.

35.11опгородцсва Т.П., Эндакова Э.А. Механизмы ре моделирования лн-пидной компоненты клеточных мембран бальнеологическими факторами //Минеральные воды Дальнего Востока /Под ред. ММ. Иванова и др. - Владивосток, 1999,-4.1.-С. 182-230.

Соискатель

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Новгородцева, Татьяна Павловна

Введение

Глава 1.

Обзор литературы

1.1.Липиды крови. Общие сведения.

1.2. Дислиидемии.

1.3.Фенотипические факторы и обмен липидов

1.3.1.Возрастные и половые различия в уровнях липидов крови.

1.3.2.Влияние генетических и средовых факторов на уровень и состав липидов крови.

Глава 2. Материалы и методы исследования 2.1 .Биологические объекты 2.1.1 .Лабораторные животные 2.1.2.Объекты клинических исследований

2.2.Исследуемый материал

2.2.1.Получение фракций крови

2.2.2.Выделение и культивирование гладкомышечных клеток интимы аорты человека

2.3.Приборы и оборудование

2.4.Методы исследования

2.4.1.Клинико-лабораторные методы исследования

2.4.2.Клинико-биохимические методы определения показателей липидного обмена

2.4.3.Экстракция липидов из эритроцитов

2.4.4.Микротонкослойная хроматография липидов

2.4.5.Анализ состава жирных кислот

2.4.6.Определение факторов атерогенности крови

2.4.7.Морфологические исследования

2.4.8.Методы математической обработки данных 2.5.Объем выполненных исследований

Результаты и обсуждение

Глава 3. Характеристика групп наблюдения

3.1. Характеристика экспериментальных моделей

3.1.1.Формирование экспериментальных групп наблюде- 64 ния

3.1.1.1.Характеристика состава липидов сыворотки крови 68 экспериментальных животных

3.1.1.2.Морфологическое исследование сердца у экспери- 70 ментальных животных с моделированной кардио-вазопатией

3.2.Формирование клинических групп наблюдения

3.2.1 .Формирование группы здоровых лиц

3.2.2.Клиническая характеристика членов семей

Глава 4. Состав липидов эритроцитов при развитии семейной кардиальной патологии

4.1 .Выделение диагностических маркеров

4.2.Онтогенетические и половые закономерности формирования состава липидов эритроцитов в норме

4.2.1.Характеристика состава липидов эритроцитов у ин-тактных крыс различных возрастно-половых групп

4.2.2.Характеристика состава липидов эритроцитов группы здоровых лиц

4.2.2.1.Характеристика состава липидов эритроцитов здоровых лиц различных возрастно-половых групп 117 4.3.Закономерности наследования состава липидов эритроцитов при формировании кардиальной патологии 124 4.3.1.Закономерности наследования состава липидов эрит роцитов у экспериментальных крыс

4.3.1.1.Характеристика состава липидов эритроцитов крыс с моделированной кардиовазопатией

4.3.1.2.Характеристика состава липидов эритроцитов у потомства крыс с инфарктоидной кардиовазопатией в различных периодах постнатального онтогенеза

4.3.1.3.Наследование изменений состава липидов эритроцитов крыс с моделированной кардиовазопатией в последующее поколение

4.3.2.Закономерности наследования состава липидов эритроцитов в семьях больных кардиальной патологией

4.3.2.1.Характеристика состава липидов эритроцитов у пробандов с кардиальной патологией

4.3.2.2.Характеристика состава липидов эритроцитов у потомков больных кардиальной патологией

4.3.2.3.Атерогенный эффект сыворотки крови членов семей с наследуемой кардиальной патологией (in vitro)

4.4.Многомерный статистический анализ для выделения вариантов нарушений состава липидов в семьях с кардиальной патологией

4.5.Взаимосвязь факторов образа жизни и наследуемых изменений показателей липидного обмена в семьях с кардиальной патологией

Введение Диссертация по биологии, на тему "Липиды эритроцитов крови при формировании наследуемой кардиальной патологии"

Кардиальная патология (КП) занимает одно из первых мест среди причин высокой смертности в России и других развитых странах, что является важнейшей проблемой здоровья общества (Доклады экспертов ВОЗ, 1997; Mesle France, 1991, Kindkade W.W., Torry B.B., 1992). Несмотря на значительные достижения в области диагностики и лечения заболеваний сердца, в последние годы стала угрожающей тенденция распространения коронарного атеросклероза и ишемической болезни сердца (ИБС) в молодом возрасте. Раннее возникновение ИБС во многом определяется наследственными факторами (Оганов Р.Г., 1990; Константинов В.В. и др., 1997; Rosseneu M. et al, 1994; Hegele R.A. et al, 1996; Weber M., et al., 1997). Эксперты США (1994) и Европы (1994) рассматривают преждевременную ИБС у ближайших родственников больного как важнейший коронарный фактор риска (National Cholesterol Education Program., 1994; Prevention of Coronary Heart Disease in Clinical Practice., 1994). Наследственная предрасположенность имеет существенное значение в формировании нарушений липидного обмена (Rosseneu M., et al., 1994; Majumder P.P. et al, 1996; Nuotio I.O, et al., 1996; Eaton C.B. et al., 1996; Weber M., et al, 1997). До сих пор гипер- и дислипопротеидемия (ДЛП) считаются главными факторами риска заболеваний, обусловленных атеросклерозом. Глубину нарушения липидного обмена определяют фосфолипиды (ФЛ) и входящие в их состав жирные кислоты (ЖК), как основные компоненты клеточных мембран. Исследованиями 80-х годов доказана важная роль нарушений состава ФЛ и ЖК в развитии ИБС. Накоплен объем данных, указывающий о преимуществе в анализе ФЛ и ЖК эритроцитов перед плазмой или сывороткой крови. В сравнении с плазмой (сывороткой), липиды эритроцитов значительно меньше подвержены влиянию различных быстро меняющихся факторов (Muskiet F.D., Muskiet F.A.J., 1984; Parsons H.G. et al., 1986; Dougherty R.M. et al., 1987). Основные ЖК эритроцитов отражают их состав в ФЛ других клеток и тканей, что дает основание к их исследованию для оценки состояния метаболических процессов в организме (Innis S.M., 1991, 1992;

Hoffman D.R. et al, 1993; van Houwelingen A.C. et al, 1995; Nettleton J.A., 1995). Развитие техники хроматографического анализа, широкое внедрение в 80-х годах капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ), способствует получению принципиально новой информации в области изучения липид-ного обмена. Это послужило толчком при выборе методического подхода к исследованию. В настоящее время использование показателей состава ФЛ и ЖК эритроцитов крови в клинической практике крайне редко. Отсутствует информация о роли наследственности в формировании изменений состава ФЛ и ЖК эритроцитов. Важными факторами, влияющими на развитие нарушений в обмене липидов при КП являются половые и онтогенетические закономерности изменений их состава. Данная совокупность характеристик, взаимосвязь перечисленных факторов с составом липидов эритроцитов больных и их потомков реально могут быть изучены только в рамках семейного исследования. Приоритетным направлением семейного исследования является изучение путей формирования и онтогенетических закономерностей изменений состава ФЛ и ЖК эритроцитов у больных и членов их семей, характера наследования выявляемых нарушений в последующие поколения. Актуальность данного направления исследований обусловлена возможностью использования полученной информации для моделирования патологического процесса в семьях, разработки программ семейной профилактики КП.

Цель работы состояла в изучении состава ФЛ и ЖК липидов эритроцитов при развитии кардиальной патологии и закономерностей наследования его изменений в последующих поколениях; установлении типов нарушений липидного обмена, сопровождающих формирование патологического процесса у членов семьи.

Работа носит клинико-экспериментальный характер. В норме и в экспериментальной модели инфарктоидной кардиовазопатии (ИКП), воспроизведенной на крысах линии Вистар, изучены закономерности формирования состава ФЛ и ЖК эритроцитов у потомства крыс в постнатальном онтогенезе; характер наследования изменений в липидах эритроцитов; особенности их наследования по мужской и женской линии родства. Клинические исследования проведены в трех поколениях семей с наследуемой кардиальной патологией. Изучена распространенность нарушений в показателях ФЛ и ЖК эритроцитов в семьях с КП; изменения в составе липидов эритроцитов у больных КП и их потомков оценены с позиций их атерогенного риска (в опытах in vitro)\ установлено влияние фенотипических факторов на развитие нарушений в эритроцитарных липидах, сопровождающих формирование семейной патологии.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Изменения состава ФЛ эритроцитов крови при КП выражены повышенным уровнем сфингомиелина (СМ) и пониженным фосфотидилэтанола-мина (ФЭ) и фосфатидилсерина (ФС) у мужчин; увеличенным содержанием ФЭ и сниженным фосфатидилхолина (ФХ) у женщин. Закономерность изменений состава ЖК заключается в перераспределении уровней насыщенных, моноеновых и полиеновых ЖК: уменьшении доли ненасыщенных, снижении уровня соотношений соЗ/©6; 18:4соЗ/18:ЗюЗ; 20:4ю6/20:3со6; 22:6юЗ/22:5соЗ; увеличении 20:4со6/ 22:6юЗ; (20:3со6+20:5соЗ)/ 22:6соЗ; нарушения наиболее достоверны у больных мужчин.

2. Изменения состава ФЛ и ЖК липидов эритроцитов больных КП транслируются на потомков 1-го и 2-го поколений; трансляция изменений состава эритроцитарных липидов наиболее выражена в уровне ФЭ и ФС, в содержании отдельных ЖК: 16:0 и 17:1,20:5 и 22:6 соЗ, 18:2,20:3 и 20:4 соб, а также показателях их превращений: соЗ/соб, 20:4со6/22:6ооЗ, (20:Зсо6+20:5юЗ)/ 22:6соЗ, 22:6©3/22:5ю3, 20:4ш6/20:3ю6.

3. Степень взаимосвязи наследуемых изменений в составе ФЛ и ЖК эритроцитов с факторами атерогенности сыворотки крови усиливается в последующих поколениях.

4. Формирование КП сопровождается тремя типами нарушений состава липидов, выделенными по уровню и сочетанности изменений в показателях ФЛ, ЖК эритроцитов и факторов атерогенности сыворотки крови.

Научная новизна работы

В результате исследования получены новые знания о составе ФЛ и ЖК эритроцитов в различные периоды постнатального онтогенеза крыс в норме и при развитии экспериментальной инфарктно-подобной модели; впервые установлены особенности изменений в составе ФЛ и ЖК эритроцитов при развитии модели ИКП и их наследование потомству крыс.

Впервые определены общие пути формирования нарушений в составе липидов эритроцитов у членов семей с наследуемой КП. Изменения состава ФЛ и ЖК эритроцитов при КП закрепляются у потомков 1-го и 2-го поколений с высокой вероятностью наследования по линии родства отец - дети и отсутствием признаков наследования по линии мать - дочь. Впервые установлена взаимосвязь уровня изменений в составе ФЛ и ЖК липидов эритроцитов с факторами атерогенности сыворотки крови у членов семей, усиливающаяся в последующих поколениях. Наследуемые изменения показателей липидного обмена у членов семей подразделены на три типа, отличающиеся по уровню и характеру сочетанных нарушений в составе ФЛ, ЖК эритроцитов и факторов атерогенности сыворотки крови.

Теоретическая и практическая значимость работы

Настоящее исследование направлено на решение фундаментальной проблемы установления механизмов формирования и наследования карди-альной патологии в семье. Работа выполнена в области биологических наук и отвечает приоритетному направлению в биохимии - «Структура и функционирование клеточных органелл, матрикса и мембран».

Теоретическое значение работы состоит в получении новых знаний о трансляции нарушений состава липидов эритроцитов при развитии семейной КП в последующие поколения. Изменения в показателях липидного обмена у больных КП определяются тремя типами сочетанных нарушений состава липидов эритроцитов и факторов атерогенности сыворотки крови. Наследование нарушений потомками в семье осуществляется в соответствии с установленным у родителей типом сочетанных изменений липидов крови.

Результаты проведенного исследования нашли практическую реализацию в экспериментальной и клинической медицине. Разработана экспериментальная модель с выраженными инфаркто-подобными изменениями в сердце у крыс, которая может быть использована для изучения любых биохимических процессов в клетках, клеточных структурах крови, органов и тканей при кардиальной патологии. Изучен состав ФЛ и ЖК в липидах эритроцитов крови крыс в различные периоды постнатального онтогенеза. В клинических исследованиях установлен уровень ФЛ и ЖК липидов эритроцитов крови для здоровых лиц и больных КП в различных возрастных группах; разработан алгоритм развития кардиальной патологии, адаптированный для каждого периода онтогенеза (детство, юность, зрелость). В семьях с КП установлены пути формирования изменений состава ФЛ и ЖК эритроцитов и разработаны на их основе критерии трех этиопатогенетических типов развития заболевания. Полученные результаты легли в основу способов диагностики, методик формирования групп риска, большинство из которых защищены патентами Российской Федерации. Установлена доля приобретаемых в процессе жизнедеятельности факторов, влияющих на показатели липидного обмена при развитии КП в семье. Доказано, что на степень реализации наследуемых изменений в составе липидов у членов семей наибольшее влияние оказывают гипокинезия, характер питания, эмоциональные стрессы, вредные привычки. Управляя перечисленными характеристиками образа жизни можно значительно снизить их отрицательное воздействие на изменения в показателях липидов крови.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Новгородцева, Татьяна Павловна

выводы

1. Модифицирована экспериментальная модель инфарктоидной кардиова-зопатии с установленными инфарктро-подобными изменениями в коронарных сосудах у крыс и показателях состава липидов крови; созданы «семьи» животных с кардиальной патологией и получено их потомство; сформированы группы для изучения закономерностей наследования изменений состава ФЛ и ЖК эритроцитов в последующем поколении животных.

2. Установлены в эксперименте онтогенетические закономерности распределения ФЛ и ЖК в липидах эритроцитов крыс в норме, позволившие выделить детский период (до 30-40 дней), когда происходит формирование состава ФЛ и ЖК; период полового созревания (90 дней), сопровождающийся скачкообразными изменениями в составе липидов эритроцитов; период зрелости (110 дней), характеризующийся стабилизацией состава ФЛ и ЖК.

3. Установлены особенности изменений состава ФЛ и ЖК эритроцитов в постнатальном развитии потомства крыс с ИКП, характеризующиеся низким уровнем ФХ, ФИ и повышенным ФЭ в период 40-110 дней, скачкообразными изменениями содержания насыщенных и соб ЖК в позднем (60-90 дней), соЗ ЖК в раннем (10-15 дней) периоде онтогенеза.

4. Развитие инфаркто-подобных изменений в коронарных сосудах крыс сопровождается перераспределением уровней ФХ, ФЭ и СМ, нарушением показателей превращений ЖК: 20:4со6/22:6юЗ, [20:Зш6+20:5соЗ]/22:6юЗ; 20:4о)6/ 20:5со6; 22:6юЗ/ 22:5соЗ; 22:5со6/22:4ю6. Установлен общий характер изменений состава ФЛ и ЖК у крыс с ИКП и в группах их потомства, прогрессирующих в последующем поколении.

5. В клинических исследованиях установлена закономерность изменений состава ФЛ при кардиальной патологии, выраженная у мужчин повышенным уровнем СМ и пониженным ФЭ и ФС; у женщин - увеличенным содержанием

ФЭ и сниженным ФХ. Изменения в составе ЖК заключаются в перераспределении уровней насыщенных, моноеновых и полиеновых ЖК: уменьшении доли ненасыщенных, снижении соотношений соЗ/соб; 18:4соЗ/18:ЗсоЗ; 20:4юб/ 20:3со6; 22:6соЗ/22:5соЗ; увеличении 20:4ю6/22:6соЗ; [20:Зш6+20:5соЗ]/22:6соЗ; нарушения наиболее выражены у больных мужчин.

6. В семьях с КП доказана высокая вероятность наследования выявленных нарушений в 3-е поколение. Наследование аномального состава ФЛ и ЖК в последующих поколениях происходит преимущественно по мужской линии родства.

7. В клинических исследованиях установлена взаимосвязь нарушений состава ЖК эритроцитов крови больных и их потомков с уровнем ХС ЦИК, де-сиалированных аполипопротеидов В, накоплением ХС в культивируемых клетках интимы аорты человека при инкубации их с сывороткой крови членов семей (in vitro); связь нарастает в последующих поколениях.

8. В семьях больных выделено три типа нарушений в составе липидов, сопровождающих формирование КП.

Первый тип включает в себя сочетание высоких уровней ХС ЦИК и апоВ в сыворотке крови, ФС и суммарного количества соб ЖК в эритроцитах, низких показателей соотношений 18:4соЗ/18:ЗоэЗ и 20:4ш6/20:Зсо6; обнаруживается у потомков в 100% случаев.

Второй тип выявляется по высокому уровню модифицированных апоВ и их относительного количества в сочетании с низким уровнем соотношений ЖК: 18:4co3/18:3©3, 20:4со6/20:3ю6 и 22:6соЗ/22:5соЗ; обнаруживается у потомков в 100% случаев.

Третий тип сопровождается накоплением модифицированных апоВ ли-попротеидов, увеличением их относительного содержания в сочетании с высоким уровнем ФЭ и нарушением соотношений ЖК: высокими значениями

233

20:3+20:5/22:6, низким уровнем С20С0З/С06 и 20:4со6/20:5соЗ; выявляется у потомков в 60% случаев.

9. Установлено, что среди факторов образа жизни гипокинезия, характер питания, избыточная масса тела, психо-эмоциональный статус в семье и вредные привычки оказывают наибольшее влияние на уровень наследственных изменений состава липидов у потомков больных КП.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Снижение уровня здоровья населения должно настораживать ученых медико-биологического профиля опасностью закрепления патогенетических реакций организма в последующих поколениях. Изучение общих семейных закономерностей формирования нарушений в составе структурных липидов и их наследования, факторов, влияющих на эти закономерности, явилось основными задачами проведенного исследования.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Новгородцева, Татьяна Павловна, Владивосток

1. Авдонин П.В., Ткачук В.А. Рецепторы и внутриклеточный кальций. -М.: Наука. -1994.-288с.

2. Агаджанян H.A. Интегративная медицина // Вестн. новых мед. технологий. 1997. - Т.4, №1. - С. 43-46.

3. Агаджанян H.A. Экология и здоровье человека //Вестн. новых мед. технологий. 1996. - Т.З, №2. - С. 52-56.

4. Александров A.A. Основные факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний у детей и подростков, возможность профилактики: Автореф. дис. . канд. биол. наук.-М., 1991б.-47с.

5. Александров A.A. Выявление и профилактика факторов риска ишеми-ческой болезни сердца с детского и подросткового возраста перспективный подход современной кардиологии // Кардиология. - 1991а. - №6. - С. 105— 109.

6. Алимова Е.К., Аствацатурьян А.Т., Жаров JI.B. Липиды и жирные кислоты в норме и при ряде патологических состояний. М.: Медицина, 1975. - 280с.

7. Афифи А., Эйзен С. Статистический анализ с использованием ЭВМ. М.: Мир, 1982,-488с.

8. Бабин Ю.Ф. Количественное определение гликопротеидов мембраны эритроцитов в характеристике атеросклеротического процесса // Терапевт, арх,- 1989. №7. - С.90-91.

9. Баевский P.M., Берсенева А.П., Максимов Л.А. Валеология и проблемы самоконтроля здоровья в экологии человека. Магадан: СВНЦ. ДВО РАН, 1996. 55с.

10. Бажурина И. М., Панов М. А. Механизмы формирования клеточного ответа на внешние воздействия // Общие проблемы физико химической биологии (Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР). - М.,1986. - Т.З-258с.

11. Безрукова Г. А. Дестабилизация мембран эритроцитов при свертывании крови in vitro и ее влияние на специфичность ферментов диагностики острого инфаркта миокарда: Автореф. дис. . докт. мед. наук.-Рязань, 1995-44с.

12. Белоконь М.А., Андреенко Г.В., Айнгорн Е.Д. и др. Характеристика факторов риска ишемической болезни сердца у детей с наследственной отя-гощенностью // Педиатрия. 1984. - №5. - С. 20-23.

13. Белоконь H.A., Леонтьева И.В., Сипягина А.Е. и др. Изменение центральной гемодинамики как фактора риска развития ишемической болезни сердца у подростков с отягощенной наследственностью по атеросклерозу //Педиатрия. 1991. - №3. - С. 28-33.

14. Бутова O.A., Агаджанян М.А., Батурин В.А., Твердякова Л.В. Морфо-функциональная оценка состояния здоровья подростков // Физиология человека. 1998. - Т.24, №3. - С. 86- 93.

15. Бышевский А.Ш., Левен П.И., Соколовский С.Р. Влияние фосфатидил-серина на превращение фибриногена в фибрин // Вопр. мед. химии. 1983. -Т.29, №4. - С. 16-22.

16. Ванюшин Ю.С. Показатели кардиореспираторной системы у спортсменов разного возраста // Физиология человека. 1998. - Т.24, №3. - С. 105-108.

17. Варфоломеев С. Д., Мевх А. Т. Простагландины молекулярные биорегуляторы. - М.: Изд-во Московского ун-та, 1985. - 308с.

18. Васильев А. П., Стрельцова Н. Н., Жихарева А. И. и др. Изменения содержания липидов крови и эритроцитарной мембраны у больных ИБС под влиянием квантовой терапии // Терапевт, арх. 1996. - Т.68, №12. - С.47-50.

19. Васина В.И., Талалаева Е.И., Образцова Г.И. и др. Показатели липид-ного спектра крови у детей и подростков г. Санкт-Петербурга // Педиатрия. 1998,-№6.-С. 41-44.

20. Владимиров Ю.А. Роль нарушений свойств липидного слоя мембран в развитии патологических процессов // Патолог, физиология и эксперим. терапия. 1989. - № 4. - С. 7-12.

21. Волкова Э.Г., Калев О.Ф. Руководство по коррекции липидных нарушений и атеросклероза у больных сахарным диабетом: Программа наведения мостов между наукой и практикой. Челябинск, 1995. - 73с.

22. Вострикова О.Г., Слезка И.Е. Состояние липидного обмена популяции детей Юга Приморского края // Физиология человека. 1999. - № 3. - С. 132-137.

23. Всемирная организация здравоохранения. Борьба с артериальной гипертонией: Доклад Комитета экспертов ВОЗ. Пер. с англ. /Под редакцией Р.Г. Оганова и др. М., 1997 - 60с.

24. Всемирная Организация Здравоохранения. Профилактика в детском и юношеском возрасте сердечно-сосудистых заболеваний, проявляющихся в зрелые годы: время действовать. Серия технических докладов. Женева, 1992.-112с.

25. Галлер Г., Ганефельд М., Яросс В. Нарушения липидного обмена: Диагностика, клиника, терапия / Пер. с нем. М.: Медицина, 1979. - 327с.

26. Герасимова E.H., Перова Н.В., Озерова И.Н. и др. Возможная связь полиненасыщенных жирных кислот и признаков гипертрофии миокарда левого желудочка //Кардиология. 1990. - Т.ЗО, №10 - С.61-65.

27. Денисенко А.Д., Савельева И.Н., Никульчева Н.Г. и др. Состояние липидного обмена у кроликов, родившихся от самок с умеренной алиментарной гиперхолестеринемией //Биохимия. 1996. - Т.61, №9. - С. 1648-1657.

28. Дмитриев Л. Ф. Биохимические аспекты атерогенеза, роль антиокси-дантов // Терапевт, арх. 1995. - Т.67, №12. - С. 73-77.

29. Доборджгинидзе JI.M., Нечаев A.C., Грацианский H.A. Некоторые показатели липидного и углеводного обмена и гемостаза у мальчиков 6-15 лет с семейным анамнезом преждевременной ишемической болезни сердца // Кардиология. 1996. - №2. - С. 17-24.

30. Доборджгинидзе Л.М., Нечаев A.C., Коннов М.В., Грацианский H.A. Метаболические факторы риска у больных «преждевременной» ишемической болезнью сердца и их сыновей школьного возраста //Кардиология. -1998. -№9. -С. 20-25.

31. Додхоев Д.С., Евсюкова И.И., Бородина В.Л., Байбородов Б.Д. Особенности проницаемости эритроцитарных мембран и сорбционной способности эритроцитов у новорожденных и их матерей, больных сахарным диабетом //Педиатрия. 1999. - № 5. - С. 12-16.

32. Ежов М.В., Афанасьева О.П., Беневоленская Г.Ф. и др. Связь фенотипа апобелка (а) с наличием ишемической болезни сердца у мужчин молодого возраста // Кардиология. 1999. - №4. - С. 12-15.

33. Информатика в статистике: словарь справочник. - М.: Финансы и статистика, 1994. - 208с.

34. КагаваЯ. Биомембраны: Пер. с японского. -М., 1985.

35. Кадырова Р. X., Салханов Б. А. Питание при ожирении. Алма-Ата: «Казахстан». - 1990. - 126с.

36. Калашникова М.М. Характеристика морфологической дифференци-ровки гепатоцитов животных разных классов в онтогенезе в зависимости от особенностей питания //Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1997. -Т.123, №1. - С. 4-10.

37. Каральник Б.В. Эритроциты, их рецепторы и иммунитет // Успехи соврем. биологии. 1992. -Т. 112, №1. -С.52-61.

38. Качарава А.Г. Влияние терапии ловастатином на уровень ЛПНП и ате-рогенный потенциал сыворотки крови больных ишемической болезнью сердца с гиперхолестеринемией // Кардиология. 1992 - Т.32, №6. - С. 2123.

39. Климов А. Н., Васильева JI. Е., Маковейчук Е. Г. и др. Зависит ли содержание холестерина в клетках крови от его уровня в плазме? // Биохимия-1994. Т.59, №4. - С. 69-77.

40. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. -СПб, 1995.-246с.

41. Климов А.Н., Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения СПб: Питер Ком, 1999. - 512с.

42. Клиорин А. Н. Ожирение в детском возрасте / Издание второе исправленное и дополненное. Л.: Медицина, 1989. - 256с.

43. Кравец Е. Б., Князев Ю. А. Атерогенные факторы при ожирении у детей // Педиатрия. 1989. - №8. - С. 55 - 59.

44. Крепе Е.М. Фосфолипиды клеточных мембран нервной системы в развитии животного мира //Баховские чтения XXII, АН СССР. Л.: Наука, 1967.

45. Крепе Е.М., Ашмарин И.П. Липиды мембран как информационные молекулы //Нейрохимия 1982. -№1. -С.11-19.

46. Ковалев И.А., Филиппов Г.П., Желтоногова Н.М., Коломин Е.Ю. Уровень липидов крови и динамика их изменения у детей из семей с отягощенной по атеросклерозу наследственностью // Кардиология. 1998. - №9. -С. 26-31.

47. Козычева Е.В. Коррекция нарушений состава жирных кислот липидов эритроцитов алиментарными полиненасыщенными жирными кислотами при развитии сердечно-сосудистой патологии у мужчин: Автореф. дис. .канд. биол. наук. М., 1999. - 23с.

48. Козычева Е.В., Новгородцева Т.П., Эндакова Э.А. Влияние жира сельди "Иваси" на эритроцитарные ПНЖК соЗ и соб при реабилитации больных сердечно-сосудистыми заболеваниями // Вопр. питания.-1998а. №5 - 6.-С. 23-29.

49. Козычева Е.В., Слезка И.Е. Липидкорригирующее действие морских ПНЖК в натуропрофилактике сердечно-сосудистых заболеваний у мальчиков // Вопр. питания. 19986. - №4. - С. 27-31.

50. Константинов В.В., Жуковский Г.С., Жданов B.C. и др. Факторы риска, ишемическая болезнь сердца и атеросклероз среди мужчин коренной и некоренной национальности в городах некоторых регионов // Кардиология-1997 .-№6.-С. 19-23.

51. Корф И.И., Мещерякова В.А., Самсонов М.А. Изменение состава жирных кислот мембран эритроцитов и тромбоцитов под влиянием диетотерапии у больных гиперлипопротеидемией II типа // Вопр. мед. химии. 1987. -Т.33, №3. - С. 73-77.

52. Курвинен Э.В., Жорданиа Р.В., Аасвее К.Э. Факторы риска сердечнососудистых заболеваний в молодых семьях, их связь с течением беременности и состоянием здоровья новорожденных // Кардиология. 1999. - № 10. -С. 52-56.

53. Кухтевич И.И. Церебральный атеросклероз: эволюция взглядов, терапевтические выводы.-М.: Медицина, 1998. 184с.

54. Лебедева E.H. Дислипидемия и гиповитаминозы у детей школьного возраста: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Оренбург, 1994. - 24с.

55. Леонова В.Г. Анализ эритроцитарных популяций в онтогенезе человека-Новосибирск: Наука, 1987.-242с.

56. Ли B.C., Халилов Э.М., Сабурова В.И. и др. Липидный состав и структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов разного возраста // Вопр. мед. химии. 1982. - №6. - С. 66-71.

57. Линчевская A.A., Кондратьева Л.А. Влияние гипотермии на структурно-функциональные свойства мембран эритроцитов белых крыс //Вопр. мед. химии. 1989. - №6. - С. 36-39.

58. Липовецкий Б.М. О генеалогии и клинических проявлениях семейной гиперлипидемии IIa и 116 типов // Терапевт, арх. 1993. - Т.65, №12. - С. 3438.

59. Липовецкий Б.М., Мирер Г.И. Эпидемиологическая оценка ишемиче-ской болезни сердца и смертности у мужчин старше 70 лет в популяции санкт-петербурга //Терапевт, арх. 1998. - №8. - С. 8-11.

60. Лопухин Ю.М., Арчаков А.И., Владимиров Ю.А., Коган Э.М. Холесте-риноз. -М.: Медицина, 1983. -352с.

61. Львовская Е.И., Орлова H.G., Григорьева Н.М. Изменения липидного состава клеточных мембран под влиянием нативных белков плазмы крови при термической травме // Вопр. мед. химии. 1996. - № 4. - С. 312-313.

62. Мейманалиев Т.С., Отева Э.А., Айтбаев A.A. и др. Распространенность основных факторов риска среди пробандов, перенесших инфаркт миокарда в молодом возрасте, и их родственников // Терапевт, арх. 1993. - №1. - С. 28-30.

63. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. Л.: Медицина, Ленинградское отделение, 1969. -422с.

64. Метельская В.А., Андреенко Т.В., Белоконь H.A. и др. Факторы риска атеросклероза у подростков в зависимости от их наследственности // Кли-нич. медицина. 1988. - №6. - С. 36-40.

65. Минеев В.Н., Нестерович И.И., Федосеев Г.Б., Шпетная Е.А. Диагностика лекарственной непереносимости на эритроцитарной модели // Пульмонология. 1997. - №4. - С. 64-67.

66. Мотавкин П.А., Гельцер Б.И. Клиническая и экспериментальная патофизиология легких. М.: Наука, 1998. 336с.

67. Никитин Ю.П., Федорова E.JL, Малютина С.К. и др. Ишемическая болезнь сердца в женской популяции Новосибирска: результаты 7-летнего проспективного исследования //Кардиология. 1998. - №7. - С. 12-15.

68. Новгородцева Т. П. Липидные параметры крови молодых мужчин как прогностические критерии ИБС: Автореф. дис. . канд. биол. наук. Владивосток, 1989. - 25с.

69. Новгородцева Т.П. Ферментная адаптация организма человека к муссонному климату // Вестн. ДВО РАН. 1992 - Вып.1,- С.22-27.

70. Новгородцева Т. П., Эндакова Э. А. Жирные кислоты эритроцитов крови в доклинической диагностике и ишемической болезни сердца // Бюл. СО РАМН. 1993. - №1. - С. 22-27.

71. Новгородцева Т. П., Эндакова Э. А., Иванов Е. М. Липидная компонента крови молодых мужчин при бессимптомных стадиях ИБС // Вестн. Рос. АМН. 1993. -№3. - С. 41-43.

72. Оганов Р.Г. Первичная профилактика ишемической болезни сердцаМ.: Медицина, 1990.-160с.

73. Оганов Р.Г. (ред). К здоровой России. Москва, 1994. - 80с.

74. Оганов Р.Г. Факторы риска и профилактика сердечно-сосудистых заболеваний // Новый мед. журнал.-1996.-№5-6.-С.З-7.

75. Ольбинская JI.И., Захарова В Л. Особенности сердечно-сосудистых заболеваний у больных с moho-, полигенными типами дислипопротеидемий // Вестн. Рос. АМН. 1998 - №10. - С. 56-60.

76. Павловский О.М. Биологический возраст человека. М.: Изд-во МГУ, 1987.-280 с.

77. Пархомец В.П., Чопик Н.Г., Копьев О.В., Васильева И.Г. Изменение содержания жирных кислот плазмы крови в динамике экспериментальной легкой черепно-мозговой травмы // Вопр. мед. химии. 1993. - Т.39, №1. -С. 48-49.

78. Патент № 1760453 СССР, МКИ G 01 N 33/49; А 61 В 10/00. Способ диагностики ишемической болезни сердца / Т.П. Новгородцева, Э.А. Эндакова, В.Е. Васьковский. Опубл. 07.09.92. Бюл. №33.

79. Пиорала К. Предшественники атеросклероза у детей возможности профилактики: факторы и гипотезы // Терапевт, арх. - 1985. - №11. - С. 2629.

80. Погожева А. В., Самсонов М. А., Левачев М. М. Клинико биохимическое обоснование применения ПНЖК со-3 у больных ИБС, семейными ги-перлипопротеидемиями и гипертонической болезнью // Вопр. питания. -1996.-№1.-С. 34-36.

81. Полежаев Е.Ф. (ред). Молекулярные и функциональные основы онтогенеза. М.: Медицина, 1970. 392с.

82. Полунина H.B. Состояние здоровья матери и ребенка в связи с факторами образа жизни // Рос. мед. журнал. 1999. - №2. - С. 15-18.

83. Потапов В.Н., Новгородцева Т.П. Иммунобиологическая характеристика здоровья жителей Приморья //Здоровье населения Приморского края. -Владивосток, 1997. С. 139-159.

84. Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных. Приложение к приказу МЗ СССР № 755 от 12 августа 1977 г.

85. Празднов A.C. Влияние уровня холестерина сыворотки крови на отдаленный прогноз больных стенокардией мужчин 40-59 лет без артериальной гипертонии // Терапевт, арх. 1998. - №8. - С. 11-14.

86. Профилактика коронарной болезни сердца: Доклад Комитета экспертов ВОЗ // Серия технических докладов ВОЗ, 1982. №678.

87. Рабинович A.JI., Рипатти П.О. Полиненасыщенные углеводородные цепи липидов: структура, свойства, функции // Успехи соврем, биол. 1994. -Т.114, №5. - С. 92-95.

88. Розанов В.Б., Александров A.A., Белоконь H.A. и др. Роль генетических и средовых факторов в фенотипической изменчивости артериального давления и массы тела и в их взаимосвязи (семейное исследование) //Генетика. 1990. -Т.26. -С. 1847-1851.

89. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск: Высшая школа, 1973. -255с.

90. Рудковский О.В., Покровский В.И. Государственный доклад о состоянии здоровья населения Российской Федерации в 1997 г. // Здравоохр. Рос. Федерации. 1999. - №1. - С. 3-18.

91. Савельева И.Н., Никульчева Н.Г., Денисенко А.Д. Влияние алиментарной гиперхолестеринемии у крольчих на уровень липидов в крови их потомства //Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1998. - Т. 125, №4,- 395-398.

92. Самсонов М.А. Исаева В.А. Погожева А., Покровская Г. Эйконол в профилактике и лечении сердечно-сосудистых заболеваний // Врач-1994.-№2.-С.47-50.

93. Самсонов М. А., Медведева И. В., Покровская Г. Р., Матаев С. И. Питание в патогенезе, лечении и профилактике гипертонической болезни. Екатеринбург: Медицина, 1995.-240с.

94. Селье Г. Профилактика некрозов сердца химическими средствами М.: Медгиз, 1961.-208с.

95. Сипливая Л. Е., Прокопенко Л. Г. Иммуномодулирующие свойства эритроцитов при алиментарном атеросклерозе // Вопр. питания. 1994. -№1-2. - С. 27-30.

96. Слезка И.Е. Клинико-биохимическое обоснование коррекции дисли-пидемий биологически активными веществами морских гидробионтов у детей школьного возраста: Автореф. дис. . канд. мед. наук. Владивосток, 1997.-22с.

97. Смирнова И. П., Терещенко В. П., Костарева Т. А. Липиды в развитии атерогенного риска у детей с ожирением // Педиатрия. 1997. -№1. - С. 107-108.

98. Сороковой К.В., Погожева A.B., Кулакова С.Н. и др. Изучение клини-ко-метаболических эффектов ПНЖК со—3, содержащихся в "эйковите", убольных ишемической болезнью сердца и семейными гиперлипопротеиде-миями // Вопр. питания. 1998. - №2. - С. 29-31.

99. Степанов В.А., Лемза C.B., Пузырев В.П. Генетика нарушений метаболизма липопротеинов. Томск: Наука, 1992. 420с.

100. Степанов В.А., Пузырев В.П., Цымбалюк В.А. Роль полиморфизма генов аполипопротеина В и липазы липопротеинов в изменчивости уровня ли-пидов плазмы крови // Вестн. Рос. АМН. 1998. - №10. - С. 3-6.

101. Сусеков А.Н. Некоторые аспекты атеросклероза по итогам двух конгрессов // Кардиология. 1995. - Т.35, №7. - С. 61-65.

102. Творогова М.Г., Рожкова Т.А., Алиджанова Х.Г. Биохимическая диагностика наследственных гиперлипопротеидемий // Терапевт, арх. 1998. -№4.-С. 9-15.

103. Терсенов O.A., Бышевский А.Ш. Механизмы торможения тромбогене-за фосфатидилсерином // Укр. биохим. журн. 1981. - №6. - С. 26-30.

104. Тертов В.В., Собенин И.А., Гевара X. и др. Углеводный состав натив-ных и десиалированных липопротеидов низкой плотности плазмы крови больных коронарным атеросклерозом // Кардиология. 1992. - Т.32, №9-10. - С.57-61.

105. Титов В.Н. Сложные липиды кровотока: функциональная роль и диагностическое значение (обзор литературы) // Клинич. лаб. диагностика. -1997. -№12.-С. 3-10.

106. Титов В.Н. Клиническая химия атеросклероза // Клинич. лаб. диагностика. 1998а. - №4 .- С. 3-13.

107. Титов В.Н. Патогенез атеросклероза для XXI века (обзор литературы) // Клинич. лаб. диагностика. 19986. - №1. - С. 3-11.

108. Титов В.Н. Филогенез и становление транспорта в клетки жирных кислот // Клинич. лаб. диагностика. 1999. - №3 С. 3-8.

109. Томпсон Г. Р. Руководство по гиперлипидемии.-Лондон, 1991.-256с.

110. Торкунов П.А., Сапронов Н.С., Новоселова Н.Ю., Наливаева H.H. Фосфолипиды сердца в динамике экспериментального инфаркта миокарда у крыс // Патолог, физиология и эксперим. терапия. 1997. - №2. - С. 21-23

111. Триль Н.М., Новгородцева Т.П. Некоторые механизмы энзиматической адаптации человека в условиях муссонного климата юга Дальнего Востока // Бюл. СО РАМН. 1993. - №1. - С. 50-56.

112. Фагер Г., Виклунд О. Снижение уровня холестерина и его клиническое значение //Междунар. мед. журн. 1998. -№6. - С. 536-544.

113. Херхеулидзе П. Н. Липидный спектр крови у детей с отягощенной наследственностью к атеросклерозу и ишемической болезни сердца // Педиатрия. 1994. - №3. - С.47-49.

114. Шилов A.M., Святов И.С., Чубаров М.И., Санодзе И.Д. Результаты применения магнийсодержащих препаратов для лечения и профилактики гипер- и дислипидемии // Клиническая медицина. 1998. - №4. - С.35-37.

115. Шош П., Гати Т., Чалаи Л., Деши И. Патогенез болезней цивилизации. Будапешт: Академия наук Венгрии, 1976. - 154с.

116. Щедрина А.Г. Онтогенез и теория здоровья: методологические аспекты. Новосибирск: «Наука», Сибирское отделение, 1989 г. 136с.

117. Эндакова Э.А., Новгородцева Т.П. Биохимическая диагностика в доклиническом и послеклиническом периодах болезни // Проблемы первичной профилактики и восстановительного лечения: Сборник науч.-трудов ИМКВЛ СО РАМН.-Новосибирск, 1994а. -4.1.-С. 123-141.

118. Эндакова Э.А., Новгородцева Т.П. Состояние перекисного окисления липидов антиоксидантной системы молодых мужчин при перемещении в Дальневосточный регион // Физиология человека. - 19946. - Т.20, N2. - С. 164-171.

119. Эндакова Э.А., Новгородцева Т.П., Иванов Е.М. Метаболические аспекты послеклинического периода болезни // Вестн. Рос. АМН. 1997. -№8. - С.15-19.

120. Эпштейн Ф.Х. Стратегия массовой профилактики основных сердечнососудистых заболеваний у взрослых // Терапевт, арх. 1985. - №11. - С. 1320.

121. Яморис Ю. Регуляция гипертонии и предупреждение ее осложнений в Японии. Основной подход к алиментарной профилактике // Терапевт, арх. -1985.-№11.-С. 76-80.

122. Agostoni С., Riva Е., Bellu R. et al. Relationships between the fatty acid status and insulinemic indexes in obese children // Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids Nov. 1994. - Vol.51, №5. - P. 317-321.

123. Al M.D., Badart-Smook A., von Houwelingen A.C. et al. Fat intake of women during normal pregnancy: relationship with maternal and neonatal essential fatty acid status // J. Am. Coll. Nutr. 1996. - Vol.15, №1. - P. 49-55.

124. Andersen L.F., Solvoll K., Drevon C.A. Very-long-chain n-3 fatty acids as biomarkers for intake of fish and n-3 fatty acid concentrates // Am. J. Clin. Nutr.1996. Vol. 64, №3. - P. 305-311.

125. Andoh Т., Yoshimitsu M., Hatano H. et al. The sex differences in cord -blood cholesterol and fatty acid levels among Japanese fetuses // J. Epidemiol.1997. Vol.7, №4. - P. 226-231.

126. Ansell G.B., Hawthorre J.N., Dawson R.M. (edd). Form and function of phospholipids. Amsterdam London - New York: Elsevier Scientific Publishing Company, 1973,-494p.

127. Araya J., Barriga C. Effect of pregnancy and lactation on the nutritional status of essential fatty acids in rat // Rev. Med. Chil. 1996. - Vol. 124, № 8. -P. 923-929.

128. Arisue К., Uchida К., Takeuchi N. Changes in serum lipid and lipoproteins in alloxan-diabetic rats stadies for one year // Jikken Dobutsu. - 1994. - Vol. 43, №2.-P. 217-226.

129. Assmann G. Lipid metabolism desorders and coronary heart disease //MMV Medizin Verlag, 1993.

130. Auwerx J. Regulation of gene-expression by fatty-acid and fibric acid-derivatives receptors the belgian-endocrine-society lecture 1992//Hormone Research. - 1992. - Vol. 38, №5-6. - P. 269-277.

131. Bardagi S., Agudo A., Gonsales C.A., Romero P.V. Prevalence of exercise-induced airway narrowing in schoolchildren from a Mediterranean town // Am. Rev. Respor. Dis. 1993. -Vol.147. - P. 1112-1115.

132. Beaumont J.L., Carlson L.A., Cooper G.R. et al. Classification of hyperlipi-daemias and hyperlipoproteinemias //Bull. WHO. 1970. - V.43. - P. 891-908.

133. Bistritzer Т., Rosenzweig L., Barr J. et al. Lipid profile with paternal history of coronary heart desease before age 40 // Archives of Desease in Childhood-1995. - Vol.73, №1. - P. 62-65.

134. Bjerve K.S., Fougner K.J., Midthjell К., Bonaa K. N-3 fatty acids in old age // J. Intern. Med. Suppl. 1989. - Vol.225, №731. - P. 191-196.

135. Bjerve K.S., Brubakk A.M., Fougner K.J. et al. Omega-3 fatty acids with important biological effects, and serum phospholipid fatty acids as markers of dietary omega 3-fatty acid intake // Am. J. Clin. Nutr. 1993. - Vol.57, №5. - P. 801s-805s.

136. Bjorksten B. Environmental factors and respiratory hypersensitivity: experiences from studits in Eastern and Western Europe // Toxicol Lett. 1996. -Vol.86, №8.-P. 93-98.

137. Blacket P.R., Taylor T., Russell D. et al. Lipoprotein changes in relation to body mass index in Native American adolescents // Pediatr. Res. 1996. -Vol.40. -P. 77-81.

138. Bligh E.G., Dyer W.J. A rapid method of total lipid extraction and purification // Can. J. Biochem. Physiol. 1959. - Vol.37. - P. 911-917.

139. Bloom S. Coronary arterial lesion in Mg-deficient hamsters // Magnesium. 1985.-Vol. 4.-P. 82-95.

140. Boulton Smith C., Woodward M., Tavendale R. Evidence for age - related differences in the fatty acid composition of human adipose tissue independent of diet // Eur. J. Clin. Nutr. - 1997. - Vol.51, №9. - P. 619-629.

141. Boulton T.J.C. Recommendations for dietary intervention in the prevention & treatment of hyperlipidemia in childhood // J. Paediatrics & Child Health. -1995. Vol.31, №2. - P. 79-82.

142. Britton J., Pavord I., Richards K., et al. Dietary magnesium, lung function, wheezing, and airway hyperreactivity in a random adult population sampl // Lancet. 1994. - Vol.344. - P. 357-362.

143. Bukowski D.M., Deneke S.M., Lawrence R.A., Jenkinson S.G. A nonin-ducible cystine transport system in rat alveolar type II cells // Amer. J. Phisiol. -1995. V.268, № 1. - P. L21-L26.

144. Burchfield C.M., Laws A., Benfante R. Et al. Combined effects of HDL cholesterol, trigliceride and total cholesterol concentration on 18-year risk of atherosclerotic disease //Circulation. 1995. - V.92. - P. 1430-1436.

145. Businco L., Ioppi M., Morse N.L. et al. Breast-Milk from Mothers of Children with Newly Development Atopic Eczema Has Low-Levels of Long-Chain Polyunsaturated Fatty-Acids // J. Allergy. Clin. Immunol. 1993. - Vol.91, №6. -P. 1134-1139.

146. Caro J., Klittich W., McGuire A. et al. The West of Scotland coronary prevention study: economic benefit analysis of primary prevention with pravastatin // BMJ. 1997. - Vol.315, № 7122. - P.1577-1582.

147. Carreau J. P., Duback J. P. Adaptation of a macro-scale method to the mi-croscale for fatty acid methyl transesterification of biological lipid extract // J.Chromatogr. 1978. - Vol.151, №3. - P. 384-390.

148. Cesar J.M., Vecino A., Perezvaquero M., Navarro J.L. Phospholipid determination in platelets, plasma and red-cells of patients with chronic myeloproliferative disorders // European J. of Haematology. 1993. - Vol.50, №4. - P .234236.

149. Chazov E.I., Tertov V.V., Orekhov A.N., et al. Atherogenicity of blood serum from patients with coronary heart disease // Lancet. 1986. - Vol. 2. - P. 595-598.

150. Chern J.C., Kinsella J.E. The effects of unsaturated fatty acids on the synthesis of arachidonic acid in rat kidney cells //Biochim. Biophis. Acta. 1983. -Vol.750.-P.465-471.

151. Cleary M.P., Phillips F.C., Morton R.A. Liver, serum and adipose tissue fatty acid composition in suckeing Zucker rats //Lipids. 1994. - Vol. 29, № 11,-P. 753-758.

152. Clemens M.R., Kessler W., Schied H.W. et al. Plasma and red-cell lipids in alcoholics with macrocytosis // Clin. Chim. Acta. 1986. - Vol.156. - P. 321328.

153. Daviglus M.L., Stamler J., Orencia A.J. et al. Fish consumption and the 30-year risk of fatal myocardial infarction // N. Engl. J. Med. 1997. - Vol. 336, № 15. -P.1046-1053.

154. De Backer G, Hulstaert F, De Munck P. et al. Serum lipids and apoproteins in student whose parents suffered prematurely from a myocardial infarction //Am. Heart J. -1986. -Vol.112. P. 478-484.

155. De Lorgeril M., Renaud S., Manelle N. // Lancet. 1994. - Vol. 343. - P. 1454-1459. Цит. по : Титов В.Н. Биологическое обоснование применения полиненасыщенных жирных кислот семейства юЗ в профилактике атеросклероза//Вопр. питания. - 1999. -№3. С. 34-40.

156. Decsi Т., Koletzko B. Fatty acid composition of plasma lipid classes in healthy subjects from birth to young adulthood // Eur. J. Pediatr. 1994. -Vol.153,№7. -P. 520-525.

157. Decsi Т., Molnar D., Koletzko B. Long-chain polyunsaturated fatty acids in plasma lipids of obese children // Lipids. 1996. - Vol.31, №3.-P.305-311.

158. Dwyer Т., Blizzard C.L. Defining obesity in children by biological endpoint rather than population distribution // International J. of Obesity. 1996. - Vol.20, №5. - P.472-480.

159. Eaton C.B., Bjstom A.G., Yanek L et al. Family histiry and premature coronary heart disease //J. Am. Board Fam Pract. 1996. - Vol.9. - P. 312-318

160. Farris R.P., Hyg M.S., Frank G.C. et al. Influence of milk source on serum lipids and lipoproteins during the first year of life, Bogalusa heart study //Am. J. Clin. Nutr.- 1982.-Vol.35, №1. P. 42-49.

161. Farstad M. Metabolism of fatty acids of human blood platelets: possible relation to disease // Scand. J. Clin. Lab. Invest. Suppl. 1993. - Vol.215. - P. 3945.

162. Folsom A.R., Ma J., McGovern P.G. et al. Relation between plasma phospholipid saturated fatty acids and hyperinsulinemia // Metabolism. 1996. -Vol.45, №2. - P. 223-228.

163. Folsom A.R., Ma J., McGovern P.G., Eckfeldt H. Relation between plasma phospholipid saturated fatty acids and hyperinsulinemia // Am. J. Clin. Nutr-1997. Vol.65, №2. -P.551-559.

164. Foote K.D., MacKinnon M.J., Innis S.M. Effect of early introduction of formula vs. fat free parenteral nutrition on essential fatty acids of preterm infants //Am. J. Clin. Nutr. - 1991. - Vol.54. -P.93-97.

165. Forrester T.E., Wilks R.J., Bennett F.I. et al. Fetal growth & cardiovascular risk factors in Jamaican schoolchildren // British. Medical. J. 1996. - Vol.312, №24.-P. 156-160.

166. Fredrikson D.S., Levy R.I., Lees R.S. Fat transport in lipoproteins an integrated approach to mechanisms and disorders //N. Engl. J. Med. - 1967,- Vol.276. p. 34-44; 94-103; 148-156; 215-224; 273-281.

167. Frolkis V.V., Kulchitsky O.K., Novikova S.N. et al. Blood lipoproteins and their effect on contractile function of vessels in rats of different age // Mech. Ageing Dev. 1997. - Vol. 97, № 3. - P. 207-214.

168. Galli E., Picardo M., Chini L. et al. Análisis of polyunsaturated fatty acids in newborn sera a screening tool for atopic disease // British J. of Dermatology. -1994.-Vol.130, №6. - P.752-756.

169. Gerique, J.A.G. et al. Levels of lipoprotein and plasma lipids in Spanish children aged from 4 to 18 years // Acta Pediátrica 1996.-Vol.85, №1. - P.32.

170. Gibson R.A., Sinclair A.J. Are Eskimos obligate carnivores? // Lancet-1981.-№1.-P.1100.

171. Green S., Wahly W. Peroxicome proliferator activated receptors -fingding the orphan a home // Molecular and Cellular Endocrinology. - 1994. -Vol.100, №1-2.-P. 149-153.

172. Gunstone F. D., Harwood J. L., Padzey F. B. (eds). The Lipid Handbook -London, Glasgow, New York, Tokyo, Melbourne, Madras, 1994. 892p.

173. Hachey D.L. Benefits and risks of modifying maternal fat intake in pregnancy and lactation // Am. J. Clin. Nutr. 1994. - Vol.59, №2. - P. 454s-463s.

174. Hagve T.A., Gronn M., Christophersen B.O. The decrease in osmotic fragility of erythrocytes during supplementation with n-3 fatty acids is a transient phenomenon// Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1991. - Vol.51. - P. 493-495.

175. Hagve T.A., Woldseth B., Brox J. et al. Membrane fluidity and fatty acid metabolism in kidney cells from rats fed purified eicosapentaenoic acid or purified docosahexaenoic acid // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1998. - Vol.58, N3. -P.187-194.

176. Harris W.S. Dietary fish oil and blood lipids // Curr. Opin. Lipidol. 1996. - Vol.7, N1,- P. 3-7.

177. Harris W.S. n-3 fatty acids and serum lipoproteins: human studies // Am. J. Clin. Nutr. 1997. - Vol.65. - P. 1645S-1654S.

178. Harwood J. L. Lipid metabolism // The Lipid Handbook / Eds. F. D. Gun-stone, J. L. Harwood, F. B. Padzey.-London, Glasgow, New York, Tokyo, Melbourne, Madras. 1994. - P. 605-633.

179. Haugen M.A., Kjeldsen-Kragh J., Bjerve K.S. et al. Changes in plasma phospholipid fatty acids and their relationship to disease activity in rheumatoid arthritis patients treated with a vegetarian diet // Br. J. Nutr. 1994. - Vol.72,№4. -P. 555-566.

180. Havel R., Rapoport E. Management of primary hyperlipidemia //New Engl. J. Med. 1995,- Vol.332,№22. - P. 1491-1498.

181. Hegele R.A. Genetic variation of intestinal fatty acid binding protein associated with variation in body mass in aboriginal Canadians // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 1996. - Vol.81, №12. - P.4334-4337.

182. Higgins C.F. Flip-flop: The transmembrane translocation of lipids // Cell.1994. Vol.79, №3. - P. 393-395.

183. Hirata K., Saku K., Jimi S. et al. Serum lipoprotein(a) concentrations and apolipoprotein(a) phenotypes in the families of N1DDM patients // Diabetologia1995. Vol.38, №12. - P. 1434-1442.

184. Hoffman D.R., Birch Е.Е., Birch D.G. et al. Effects of supplementation with ©3 long chain polyunsaturated fatty acids on retinal and cortical development in premature infants // Am. J. Clin. Nutr. - 1993. - Vol.57. - P. 807S-812S.

185. Jamieson G.R. GLC identification techniques for long-chain unsaturated fatty acids // J. Chromatogr. Sci. 1975. - Vol.13. - P. 491-497.

186. Kanazawa T., Uemura T., Osanai T. et al. Plasma peroxidized low density - lipoprotein with hydroperoxidized cholesteryl linoleates estimated in patients with familial hypercholesterolemia // Pathobiology. - 1994. - Vol.62, №56. - P. 269-282.

187. Kannel W.B. Clinical misconceptions dispelled by epidemiological research // Circulation. 1995. - Vol. 92. - P. 3350-3360.

188. Kent C. Eukariotic phospholipid biosynthesis // Annu. Rev. Biochem-1995,- Vol.64. -P. 315-343.

189. Kindkade W.W., Torry B.B. The evolving demography of aging in the United States of America and the former USSR // Wold Health Statist. Quart.-1992. Vol.45, №1. - P. 15-28.

190. Kinsella J.E., Lokesh B., Stone R.A. Dietary N-3 polyunsaturated fatty acids and amelioration of cardiovascular disease-possible mechanism // Am. J. Clin. Nutr.-1990.-Vol.52, №1,-P. 1-28.

191. Kromhout D., Bosschier E.B., Conlander C.D. The inverse relation between fish consumption and 20-year mortality from coronary heart disease // New Engl. J. Med. 1985. - Vol. 312. - P. 1205-1209.

192. Kuehl K.S., Cockerham J.T., Hitchings M. et al. Effective control of hyper-colesterolemia in children with dietary interventions based in pediatric practice // Prev. Med. 1993. - Vol.22. - P. 154-166.

193. Mahaney M.C., Blangero J., Comuzzie A.G. et al. Plasma HDL cholesterol, triglycerides, & adiposity: a quantitative genetic test of the conjoint trait hypothesis in the San Antonio family heart study // Circulation. 1995. - Vol.92, №11. -P.3240-3248.

194. Majumder P.P., Nayak S., Das R.N., Bhattacharya S.K. Genetic and cultural determinants of high-density lipoprotein cholesterol and serum triglycerides among Marwaris of Calcutta // J. Indian of Med. Research. 1996. - Vol.103-P. 112-119.

195. Marzo I., AlavaM.A., Pineiro A., Naval J. Biosynthesis of docosahexaenoic acid in human-cells evidence thet 2 different delta(6)-desaturase activities may exist //Biochim. Biophis. Acta - Lipids and Lipid Metabolism. - 1996. - Vol. 1301, №3. -P.263-272.

196. Matuszczyk J., Appa S.R., Larsson K. Age-dependent variations in the sexual preference of male rats // Physiol. Bekav. 1994. - Vol. 55, №5. - P.827-830.

197. Mesle France. La mortalite dans les pays d' Europe de l'Est // Population. -1991. Vol.46, №3.-P.599-649.

198. Miwa A., Adachi J., Mizuno K., Tatsuno Y. Very long-chain fatty acid pattern in crush syndrome patients in the Kobe earthquake //Clin. Chim. Acta. -1997. Vol.258, №2. - P. 125-135.

199. Mohammed B.S., Sankarappa S., Geiger M., Sprecher H. Reevalution of the pathway for the metabolism of 7,10,13,16-docosatetraenoic acid to 4,7,10,13,16-docosapentaenoic acid in rat-liver //Archives of Boichem. And Biophys. 1995. -Vol. 317,№1,-P. 179-184.

200. Mott G.E., Jackson E.M., McMahan C.A. et al. Cholesterol metabolism in adult baboons is influenced by infant diet // J.Nutr. 1990. - Vol.120, №.3. - P. 243-251.

201. Murawski U, Kriesten K, Egge H. Age-related changes of lipid fractions and total fatty acids in the serum of female and male rats aged from 37 to 1200 days //Comp. Biochem. Physiol. B. 1989. - Vol. 94,№3. - P. 525-536.

202. Muskiet F.D., Muskiet F.A.J. Lipids, fatty acids and trace-elements in plasma and erythrocytes of pediatric patients with Homozygous sickle-cell disease //Clin. Chim. Acta. 1984. - Vol. 142. -№ 1. - P. 1-10.

203. Nagaya T., Nakaya K., Takahashi A. et al. Relationships between serum saturated fatty acids and serum total cholesterol and HDL-cholesterol in humans // Ann. Clin. Biochem. 1994. - Vol.31, №3. - P.240-244.

204. Naseem S.M., Khan M.A., Heald F.P. et al. The influence of cholesterol and fat in maternal diet of rats on the development of hepatic cholesterol metabolism in the offspring // Atherosclerosis. 1980. -Vol.36. - P. 1-8.

205. National Cholesterol Education Program. Second Report of the Expert Pan-nel on Detection, Evaluation and Treatment of high Blood Cholesterol in Adult (Adult Treatment Panel II) // Circulation. 1994. - Vol.89. - P. 1333-1440.

206. Nelson G.J. Lipid composition and metabolism of erythrocytes // Blood lipids and lipoproteins / Ed G.J. Nelson New York, 1972. - P. 319-348.

207. Nelson G.J. (ed). Blood lipids and lipoproteins- New York, 1972. 980p.

208. Nelson G.J., Schmidt P.C., Corash L. The effect of a salmon diet on blood clotting, platelet aggregation and fatty acids in normal adult men // Lipids. 1991. - Vol.26,№2. - P. 87-96.

209. Nettleton J.A. Omega 3 fatty acids and health. - New York: Chapman and Hall, 1995.-361p.

210. Nickals T.A., Farris R. P., Myers L., Berenson G. S. Impact of meat consumption on nutrition quality & cardiovascular risk-factors in young adults- the Bogalusa heart study 11 J. Amer. Dietetic Association . - 1995. 1. Vol.95,№8. P. 887 - 892.

211. Nickals T.A., Strinivasan S., Webber L.S. et al. Secular trends in dietary intakes and cardiovascular risk factors of 10 - year old children the Bogalusa -heart - stady // Am. J. of Clin. Nutr. - 1993. - Vol.57, №>6. - P. 930-937.

212. Nishida S., Kanno T., Nakagawa S. Diabetes-induced and age-related changes in fatty acid proportions of plasma lipids in rats // Lipids. 1998. -Vol.33,№3. - P. 251-259.

213. Nordoy A., Hatcher L.F., Ullmann D.L., Connor W.E. Individual effects of dietary saturated fatty acids and fish oil on plasmalipids and lipoproteins in normal men // Am. J. Clin. Nutr. 1993. - Vol.57, №5. - P. 634-639.

214. Novgorodtseva T.P., Endakova E.A. Polyusaturated fatty acids of blood erythrocytes: diagnosis of cardiac ischemia // Russian Academy of medical scienus Siberian branch Medical Research in 1992: Abstracts. Novosibirsk,1993,-P. 96.

215. Ohrvall M., Tengblad S., Gref G.G. et al. Serum alpha tocopherol concentrations and cholesterol ester fatty acid composition in 70-year-old men reflect those 20 years earlier // Eur. J. Nutr. 1996. - Vol.50, №6. - P. 381-385.

216. Okamoto T., Shiwaku K. Fatty acid composition in liver, serum and brain of rat inhalated with Trichloraethylene // Experimental and Toxicologic Pathology.1994. Vol.46, №2. - P. 133-141.

217. Orekhov A.N., Tertov V.V., Smirnov V.N. Lipids in cells of atherosclerotic and uninvolved human aorta. II. Lipid metabolism in primary culture // Exp. Mol. Pathol. 1985. - Vol.43. - P. 187-195.

218. Orekhov A.N., Tertov V.V., Mukhin D.N. Desialylated low density lipoprotein naturally occurring lipoprotein with ayherogenic potency //Atherosclerosis. - 1991. - Vol. 86. - P. 153-161.

219. Osada K., Kodama T., Noda S. et al. Oxidized cholesterol modulates age-related change in lipid metabolism in rats // Lipids. 1995. - Vol.30, № 5. - P. 405-413.

220. Osono Y., Woollet L.A., Marotti K.R. Centripetal cholesterol flux from ex-trahepatic organs to the liver is independent of the concentration of high density lipoprotein cholesterol in plasma //Proc. nat. Acad. Sci. USA.-1996- Vol.93, №9,- P. 4114-4119.

221. Parsons H.G. , Hill P., Pencharz P. et al. Modulation of human erythrocyte shape and fatty acids by diet // Biochim. Biophis. Acta. 1986. - Vol. 860. - P. 420-427.

222. Pelikanova T., Kohout M., Hilgertova J. et al. Insulin bilding to erythrocytes and fatty acid composition of erythrocyte membrane phospholipids in healthy men //Clin. Chim. Acta. 1989. - Vol. 179, № 2. - P. 197-200.

223. Peterson D.B., Fisher K., Carter R.D., Mann J. Fatty acid composition of erythrocytes and plasma triglyceride and cardiovascular risk in Asian diabetic patients // Lancet. 1994. - Vol.343, №8912. - P. 1528-1530.

224. Phinney S.D., Fisler J.S., Tang A.B., Warden C.H. Liver fatty acid composition correlates with body fat and sex in a multigenic mouse model of obesity // Am. J. Clin. Nutr. 1994. Vol.60, №1. - P. 61-67.

225. Ропваррап U., Holley D.H., Lipschitz D.A. Effect of age on the fatty acid composition of phospholipids in human lymphocytes // Exp. Gerontol. 1996. -Vol.31, №1-2.-P.125-133.

226. Popp-Snijders C., Schonten J.A., Heine R.J. et al. Dietary supplementation of omega-3 polyunsaturated fatty acids improves insulin sensitivity in nonisulin-dependent diabete // Diabetes Res. 1987. - Vol.4. - P. 141-147.

227. Porkka K.V.K., Viikari J. S. A. Tracking of Serum Lipids in Children - Association with the Absolute Lipid-Level - The Cardiovascular Risk Young Finns Study. // J. Clin. Epidemiology. - 1995. - Vol.48, №2. - P. 221228.

228. Prevention of Coronary Heart Disease in Clinical Practice. Recomendations of the Tasc Force of the European Society of Cardiology, European Atherosclerosis Society and European Society of Hypertension // Eur. Heart J. -1994. Vol.15. -P. 1300-1331.

229. Prisco D., Filippini M., Francalanci I., et al. Effect of n-3 polyunsaturated fatty acid intake on phospholipid fatty acid composition in plasma and erythrocytes // Am. J. Clin. Nutr. 1996. - Vol 63, №6. - P.925-932.

230. Pullmann R., Samel М., Lazar J. et al. Changes in cholesterol and triacylglycerol serum levels in rats during postnatal ontogenesis //Bratisl. Lek. Listy. 1994. - Vol.95, №10. - 465-468.

231. Raissiguier Y. Magnesium, lipides and vascular disease: Experimental evidence in animal models // Magnesium. 1986. - Vol. 5. - P. 182-190.

232. Rosenthal M.D., Garcia M.C., Jones M.R., Sprecher H. Reroconversion and delta-4 desaturation of docosatetraenoate (22-4(N-6)) and docosapentaenoate (22-5(N-3)) by human-cells in culture //Biochim. Biophis. Acta. 1991. -Vol.1083, №1. -P. 29-36.

233. Rosseneu M., Cambien F., Vinaimont N. et al. Biomarkers of dietary fat composition in young - adults with a parental history of premature coronary heart- disease compared with controls the Ears study // Atherosclerosis. - 1994. -Vol.108, №2.-P.127-136.

234. Rouser G., Kritchevsky G., Yamamoto A. Column chromatographic and associated procedures for separation of phosphatides and glicolipids //Lipid chromatography analysis. 1967. - Vol. 1. - P. 99-169.

235. Rueda R., Ramirez M., Garcia-Salmeron J.L. et al. Gestational age and origin of human milk influence total lipid and fatty acid contents // Ann. Nutr. Metab.- 1998. Vol.42, №1. - P. 12-22.

236. Samel M., Pullmann R. The development of lipid metabolism. Changes in the level of fatty acids in serum during postnatal ontogenesis in the rat //Bratisl. Lek. 1993. - Vol. 94, №7. - P. 361-365.

237. Samel M., Pullmann R., Dobias J. et al. The development of lipid metabolism. Effect of short-term application of thyroxine on level of fatty acids and albumine in serum during ontogenesis in rat // Bratisl. Lek. 1994. - Vol. 95, №2. -P. 57-63.

238. Sarkkinen E.S., Argen J.J., Ahola I. et al. Fatty acid composition of Serum cholesterol esters, and erythrocyte and platelet membranes as indicators of long -term adherence to fat modified diets // Am. J. Clin. Nutr. - 1994. - Vol.59, №2. -P.364-370.

239. Schwertner H.A., Mosser E.L. Comparison of lipid fatty acid on a concentration basis vs weight percentage basis in patients with and without coronary artery disease or diabetes // Clin. Chem. 1993. - Vol. 39, №.4. - P. 659-663.

240. Seelig M.S. Magnesium deficiency in the pathogenesis of disease: erly roots of cardiovascular, skeletal and renal abnormalities. New York, 1980.

241. Shamir R., Tershakovec A.M., Gallagher P.R. et al. The influence of age and relative weight on the presentation of familian combined hyperlipidemia in childhood // Atherosclerosis. 1996. - Vol.121, №1.- P. 85-91.

242. Siguel E.N., Lerman R.H. Altered FA metabolism in patients with angiog-raphically documented coronary artery disease //Metabolism. 1994. - Vol. 43, №8.-P. 982-993

243. Simon J.A., Hodgkins M.L., Browner W.S. et al. Serum fatty acids and the risk of coronary heart disease // Am. J. Epidemiol. 1995a. - Vol.142, №5. - P. 469-476.

244. Simon J.A., Fong J., Bernert J.T., Browner W.S. Serum fatty acids and the risk of stroke // Stroke. 1995b. - Vol.26, №5. - P. 778-782.

245. Simon J.A., Fong J., Bernert J.T. Jr., Browner W.S. Relation of smoking and alcohol consumption to serum fatty acids // Am. J. Epidemiol. 1996a.-Vol.144, №4. - P. 325-334.

246. Simon J.A., Fong J., Bernert J.T.Jr. Serum fatty acids and blood pressure // Hypertension. 1996(b). - Vol.27,N2. - P. 303-307.

247. Simopoulos A.P., Koletzko B., Anderson R.E. The 1st Congress of the International Society for the Study of Fatty Acids and Lipids (ISSFAL): fatty acids and lipids from cell biology to human disease // J. Lipid Res. 1994. -Vol.35, №1.-P. 169-173.

248. Sims H.F., Brackett J.C., Powell C.K. et al. The molecular basis of pediatric long chain 3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase deficiency associated with maternal acute fatty liver of pregnancy // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. -Vol.92,N3. - P.841-845.

249. Smidova L., Base J., Mourek J., Cechova I. Proportion of individual fatty acids in the non-esterified (free) fatty acid (FFA) fraction in the serum of laboratory rats of different ages // Physiol. Bohemoslov 1990. Vol.39, №2. - P. 125-134.

250. Smidova L., Mourek J., Base J. et al. Fatty acids in the serum of hypotrophy neonates //Cesk. Pediatr. 1993 .-Vol.48, №5,- P. 257-261.

251. Snyder F. (ed). Lipid metabolism in mammals // New York: Plenum Press, 1977.-Vol.2.-402p.

252. Socha P., Koletzko B., Pawlowska J., Socha J. Essential fatty acid status in children with cholestasis, in relation to serum bilirubin concentration // J. Pediatr. 1997.-Vol.131, № 5. - P. 700-706.

253. Sprecher H. New advances in fatty-acid biosynthesis //Nutrition. 1996. -Vol. 12, №.1.-P. S5-S7.

254. Stalenhoef A.F.H., Defesche J.C., Kleinveld H.A. et al. Decreased resistance against in Vitro oxidation of LDL from patients with familian defective apolipoprotein B-100 // Arteriosclerosis and Trombosis. - 1994. -Vol.14, №3. -P. 489-493.

255. Stransky K., Jursik T., Vitek A., Skorepa J. An improved method of characterizing fatty acids by equivalent chain length values // J. High. Res. Chroma-togr. 1992. - Vol.15. -P.730-740.

256. Svetashev V.I., Vaskovsky V.E. A simplified technique for thinlayer chromatography of lipids // J.Chromatogr. 1972. - Vol.67. - P. 376-378.

257. Tertov V.V., Orekhov A.N., Kacharava A.G. et al. Low density Lipopro-tein-containing circulating immune complexes and coronary atherosclerosis // Exp. Mol. Pathol. 1990a. - Vol.52. - P. 300-308.

258. Tertov V.V., Sobenin I.A., Orekhov A.N. Modified (Desialylated) low-density lipoprotein measured in serum by lectin-sorbent assay // Clin. Chem. -1995. -Vol.41, №7.-P. 1018-1021.

259. Tertov V.V., Sobenin I.A., Orekhov A.N. et al. Characteristics of low density lipoprotein isolated from circulating immune complexes // Atherosclerosis. -1996.-Vol.122.-P. 191-199.

260. Theret N., Bard J.M., Nuttens M.C. et al. The relationship between the phospholipid fatty acid composition of red blood cells, plasma, lipids and apolipo-proteins // Metabolism. 1993. - Vol.42, №5. - P. 562-568.

261. Tsuchiya N., Harada Y., Taki M., et al. Age related changes and sex differences on the serum chemistry values in Spraque - Dawley rats -1. 6 - 30 weeks of age // Exp. Anim. - 1995. - Vol. 43, №5. - P. 671-678.

262. Vance D.E. ,Vance J. (Eds). Biochemistry of lipids, lipoproteins and membranes. -Elsevier, Amsterdam, 1991. -37p.

263. Vaskovsky V.E., Kostetsky E.Y.,Vasendin J.M. A universal reagent for phospholipids analisis // J.Chromatogr. 1975. - Vol.111.-P. 129-141.

264. Vaskovsky V.E., Latyshev N.A. Medified jungnickel's reagent for detecting phospholipids and other phosphorus compounds on thinlayer chromato grams //J. Chromatogr. 1975. - Vol.115, №1. - P. 246-249.

265. Vaskovsky V.E., Terekhova T.A. HPTLC of phospholopide mixtures containing phosphatidyl glycerol //J. Hig. Resol. Cromatogr. 1979. - Vol. 2, № 11. -P. 671-672.

266. Vessby В., Tengblad S., Lithell H. Insulin sensitivity is related to the fatty acid composition of serum lipids and skeletal muscle phospholipids in 70-year-old men.// Diabetologia. 1994,- Vol.37, №10. - P. 1044-1050.

267. Von Schacky C., Fischer S., Weber P. S. Longterm effect of dietary merine w-3 fatty acids upon plasma and cellular lipids, platelet function, and eicosanoid formation in humans // Clin. Invest. 1985. - Vol. 76. - P. 1626-1631.

268. Voss A., Reinhart M., Sprecher H. Differences in the interconversion between 20-carbon and 22—carbon (N-3) and (N-6) polyunsaturated fatty-acids in rat-liver // Biochim. Biophis. Acta. 1992. - Vol.1127, №1. - P. 33-40.

269. Wagner H., Hoshammer L., Wolff P. Dunnschichtchromayographie von phosphatiden und glycolipiden//Biochem. J. 1961. -Bd.334, №1. - S. 175-184.