Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Лечебно-профилактическая эффективность пробиотика лаксубтил при колибактериозе телят

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Лечебно-профилактическая эффективность пробиотика лаксубтил при колибактериозе телят"

На правах рукописи

КАРИМОВ МУНИРДЖОН МУХТОРОВИЧ

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОБИОТИКА ЛАКСУБТИЛ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ТЕЛЯТ

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

2 2 ноя ті

Душанбе - 2012

005055482

Работа выполнена в лаборатории микробиотехнологии Таджикского аграрного университета им. Ш. Шотемура (ТАУ)

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор,

академик ТАСХН Саттори И,

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук МумИнов А. М.,

кандидат ветеринарных наук Вазиров Ш.С.

Ведущая организация: НПП «Биологические препараты»

Таджикской академии сельскохозяйственных наук

Защита диссертации состоится 23 ноября 2012 г. в 1400 ч на заседании диссертационного совета ДМ 050.001.01 при Ветеринарном институте Таджикской академии сельскохозяйственных наук по адресу: 734005, г, Душанбе, ул. Кахарова, 43, тел. (992-372) 27-39-95.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ветеринарного института Таджикской академии сельскохозяйственных наук.

Автореферат размещен 29 сентября 2012 г. на сайтах Ветеринарного института ТАСХН www.tajnivi.tj и ВАК России www.vak2.ed.gov.tu

Автореферат разослан 23 октября 2012 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор ветеринарных наук, профессор

Н. Ярбаев

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Желудочно-кишечные болезни молодняка сельскохозяйственных животных наносят животноводческим хозяйствам Республики Таджикистан (РТ) значительный экономический ущерб, который выражается в снижении привеса, падеже, затратах на диагностику, профилактику и терапию.

Инфекционные энтериты распространены повсеместно, наиболее часто во всех животноводческих хозяйствах их наблюдают ранней весной, осенью и зимой. Отход телят от диареи может достигать 30 — 50% и более от количества родившихся животных (Салахутдинов К.Г., 1993; Волков Г.К., 1997; Жумаев Н.С., 1986; Сатторов И.Т., 1991; Щербаков П.Н. и др., 2003; Зелютков, Ю.Г. и др., 2006).

На молочно-товарных фермах одной из главных причин гибели молодняка являются желудочно-кишечные болезни, вызываемые бактериальными и вирусными агентами.

В борьбе с возбудителями болезней животных первостепенная роль отводится неспецифическим и специфическим факторам резистентности организма. Накопление антибиотикорезистентных бактерий в организме животных и окружающей среде снижает эффективность профилактических и лечебных мероприятий и приводит к тяжелым экологическим последствиям (Субботин В.В. и др., 2001; Шевелуха B.C. и др., 2003).

Профилактика и лечение этих болезней антибиотиками, сульфаниламидами, нитрофурановыми и химиотерапевтическими препаратами не всегда дает желаемый результат.

В настоящее время для профилактики и терапии желудочно-кишечных болезней и повышения продуктивности молодняка сельскохозяйственных животных широко применяют различные пробиотики на основе симбиотических микроорганизмов, среди которых наиболее перспективными признаны молочнокислые, пропионовокислые, бифидобактерии, Bacillus subtilis и др., проявляющие избирательную антагонистическую активность в отношении патогенной кишечной флоры, эффективно и быстро восстанавливающие микробиоценоз кишечника (Антипов В.А., 1991; Панин А.Н. и др., 1993; Паршин П.А. и др., 1997; Малик Н.И. и др., 2000; Сагторов И.Т. и др., 2001).

Вышеизложенное обуславливает актуальность настоящей работы, целью которой являются изучение распространения колибактериоза телят и разработка эффективных средств профилактики и лечения этой болезни.

Для достижения поставленной цели в задачи исследования входило:

1. Изучить распространение колибактериоза телят в животноводческих хозяйствах Республики Таджикистан.

2. Разработать эффективный пробиотический препарат Лаксубтил на основе штаммов В. subtilis и изучить его свойства.

3. Определить лечебную и профилактическую эффективность Лаксубтила

при колибактериозе телят в экспериментальных и производственных условиях.

Научная новизна. Изучена роль эшерихии коли в возникновении энтеритов телят в хозяйствах и определена чувствительность возбудителей к пробиотику.

Подобраны штаммы В. виМНв и изучена их антибактериальная активность в отношении музейных штаммов и изолятов возбудителя колибактериоза телят.

Разработан новый пробиотический препарат Лаксубтил (патент №"П 531, 2012) в форме суспензии на основе местных штаммов В. зиЬИНя, отработаны методы изготовления и контроля препарата, изучены его антимикробные свойства и безвредность.

Установлена лечебная и профилактическая эффективность Лаксубтила при колибактериозе телят, отработан рациональный способ применения препарата.

Практическая ценность. На основании полученных результатов предложен пробиотичекий препарат Лаксубтил для профилактики и лечения колибактериоза телят.

Материалы диссертации вошли в:

- Научно-обоснованную систему получения здорового молодняка и профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят (утв СГВН МСХ РТ 11.09.2012 г.);

- Рекомендации по профилактике и лечению пневмоэнтеритов телят (утв СГВН МСХ РТ 11.09.2012 г.).

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

- результаты исследования этиологической роли эшерихии коли в возникновении колибактериоза телят;

- результаты подбора штаммов В. виЫШэ для создания пробиотического препарата и изучения их антагонистической активности;

- технология изготовления и методы контроля физико-химических и биологических свойств Лаксубтила;

- результаты изучения антибактериальной активности и безвредности препарата;

- результаты экспериментальных и производственных испытаний эффективности Лаксубтила при колибактериозе телят.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на заседаниях ученого совета ТАУ (2006 - 2010 гг.); республиканских конференциях и семинарах-совещаниях (Душанбе, 2006 -2010 гг.); Международной научно-практической конференции «Биобезопасность и зоонозные инфекции» (Алматы, 2009 г.), Международной научно-практической конференции «Ветеринарные проблемы в Центральной Азии - Продовольственная безопасность: Использование современных методов диагностики и профилактики инфекционных болезней животных», посвященной 80-летию образования ТАУ (Душанбе, 2011 г.); Международной

научно-практической конференции «Научное и клиническое применение медицины в Синзяне и соседних странах» (Урумчи, 2011 г.).

Публикации. По результатам исследований опубликованы 6 научных работ.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.

Диссертация изложена на 108 страницах, иллюстрирована 10 таблицами и 6 рисунками. Список литературы содержит 240 источников. В приложение включены материалы, подтверждающие внедрение результатов исследования в практику.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Работа выполнена в 2006 — 2011 гг. в лаборатории микробиотехнологии ТАУ в соответствии с республиканской научно-технической программой «Разработка и внедрение пробиотика на основе Bacillus subtilis» на 2006 — 2010 гг., зарегистрированной в Национальном патентно-информационном центре (НПИЦентр) РТ (№ госрегистрации 0105 ТД 233).

Научно-производственные опыты, апробация и производственная проверка полученных результатов, проведены в 12 животноводческих хозяйствах РТ.

Бактериологические исследования и разработка технологии пробиотика Лаксубтил осуществлены совместно с ведущим научным сотрудником лаборатории микробиотехнологии ТАУ, кандидатом ветеринарных наук Сатторовым Н.Р.

Диагностика колибактериоза. Колибактериоз диагностировали на основании анализа эпизоотологических данных с учетом клинических признаков болезни, патолого анатомических изменений и результатов бактериологического исследования патологического материала от больных, павших и вынужденно убитых больных телят.

Распространение колибакгериоза телят в РТ выяснили по данным ветеринарной отчетности Службы государственного ветеринарного надзора (СГВН) МСХ РТ и результатам исследования патологического материала от животных.

При бактериологической диагностике микроскопировали мазки крови и мазки-отпечатки внутренних органов, на элективные питательные среды высевали выделенные из патологического материала культуры. Для определения патогенности заражали лабораторных животных, затем культуры идентифицировали и типизировали серологическим методом.

Культуральные, морфологические и биохимические свойства культур изучали согласно «Методическим указаниям по бактериологической

диагностике колибактериоза животных» (утв. ГУВ МСХ СССР, 1981 г.).

Определение типов эшерихий проводили согласно «Наставлению по применению агглютинирующих О-коли-сывороток» (утв. ГУВ МСХ СССР, 1980 г.).

Подопытные животные. Эксперименты проводили на 120 белых мышах (массой 18-20 г), 75 кроликах породы шиншилла (массой 2,5 - 2,7 кг), 288 телятах черно-пестрой породы (массой 28 - 30 кг), производственные испытания - 422 телятах черно-пестрой породы (массой 29-31 кг). Разброс в экспериментальных группах по исходной массе тела не превышал 10%.

Препараты. В работе применяли разработанный в ТАУ пробиотик Лаксубтил, представляющий собой комплекс взвеси микробных клеток местных штаммов (ВБ 17 09, ВБ "Л Д 26) В. виЫШБ и коровьего молока.

Для стандартизации и контроля качества Лаксубтила разработаны методы качественного и количественного контроля препарата.

Физика-химические свойства Лаксубтила

Внешний вид, наличие механических примесей, плесени определяли визуально при рассмотрении отобранных образцов при хорошем естественном освещении на белом фоне на расстоянии 25 - 30 см от глаз.

Концентрацию водородных ионов (рН) 10% водной суспензии определяли потенциометрически (ГФ XI, вып. 1, с. 175).

Биологические свойства Лаксубтила

Подсчет количества микробных клеток (м.к.) В. зиЫШя. Препарат разводили физиологическим раствором в 10 - 15 раз и заправляли суспензией подготовленную камеру Горяева, в 5 квадратах которой под микроскопом определяли количество м.к. и рассчитывали их число в 1 см3.

Определение количества жизнеспособных клеток В. БиЫШз. В пробирку, содержавшую 1 мл Лаксубтила, добавляли 9 см3 стерильного физиологического раствора, после тщательного перемешивания 0,5 см3 суспензии переносили во вторую пробирку с 4,5 см3 физиологического раствора, из которой 0,5 см3 разведенной суспензии - в третью, из третьей - в четвертую, из четвертой - в пятую, из пятой - в шестую пробирку с 4,5 см3 физиологического раствора.

Из последней (шестой) пробирки по 0,5 см3 суспензии пипеткой засевали в шесть чашек Петри с агаром СБД (комплекс минеральных и растительного компонентов), колебательными движениями распределяя суспензию по всей поверхности агара. Культивировали 36 ч при 37°С, после чего учитывали результаты исследования (определяли количество больших и малых по диаметру колоний).

Стерильность Лаксубтила определяли по ГОСТу 28085-89.

Для исключения контаминации микоплазмами производили посевы проб Лаксубтила на среду Эдварда (жидкую, полужидкую и твердую), обогащенную 20% сыворотки крови лошади, 10% дрожжевого экстракта, 0,5% глюкозы с добавлением фенол-рота в конечной концентрации 0,001%.

Изучение антагонистических свойств Лаксубтила в сравнительном аспекте (контроль - Субтштбен) проводили методом двукратных серийных

разведений в жидкой и плотной питательной средах на 6 музейных штаммах и 10 изолятах Е. coli, выделенных от больных диареей телят в животноводческих хозяйствах РТ.

Токсические свойства Лаксубтила

Безвредность Лаксубтила изучали двумя способами. Первый, который используют для проверки продуктов микробиологического синтеза (ГОСТ Р 52337-2005, ТУ 9388-001-885-95), а второй - для установления острой токсичности лекарственных средств на лабораторных животных («Методические указания по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве»; М., 1988).

В процессе проведения исследований первым методом определение степени токсичности экспериментального пробиотика проводили с использованием сухой культуры инфузорий колподы согласно требованиям ГОСТ Р 52337-2005. Примененный метод базируется на экстрагировании с исследуемых продуктов различных фракций токсических веществ дистиллированной водой и в последствии воздействием полученных экстрактов на культуру инфузории Colpoda steinii. Оценку результатов данного биотеста проводили по результатам гибели стилохоний.

Исполнение опыта по определению токсичности экспериментального препарата с помощью этого экспресс-метода состояло в последовательном исполнении следующих действий: подготовка инфузорий, приготовление питательной среды и водного экстракта продукта, проведение эксперимента и оценка его результатов.

Средой для культивирования инфузорий и разбавления экстрактов служил раствор Лозина-Лозинского. Его готовили из следующих компонентов: NaCl - 0,01%; KCl - 0,001%; СаС12-деуводный - 0,001%; М§С12-шестиводный -0,001%; NaHC03 - 0,002%. Затем в ту часть раствора, которую планировали использовать для культивирования инфузорий, вносили свежевысушенные хлебопекарские дрожжи (12 мг на 100 мл), которые предварительно тестировали на токсичность.

Для проведения опытов по настоящей методике использовали суточную культуру стилохоний, находящихся в фазе экспоненциального (активного) роста. Поэтому за сутки до опыта стилохонии в ампулах, в которых поставляли их цисты и споры культуры, пересаживали в новую питательную среду со свежим кормом и помещали в термостат при температуре 22 - 24°С.

Для приготовления водного экстракта испытываемых образцов брали навеску массой 1000±10 мкл, вносили ее в колбу вместимостью 25 мл, заливали 10 мл дистиллированной воды и на 20 минут колбу помещали в аппарат для встряхивания жидкостей. Затем раствор в течение 5 минут центрифугировали с частотой вращения 1000 об/мин и использовали надосадочную жидкость.

Каждую пробу исследовали в пяти повторностях. Пересадку и подсчет стилохоний проводили под микроскопом при увеличении 2x8 или 2x14. Сначала автоматической пипеткой отбирали по 20 мкл среды со стилохониями и помещали в каждую лунку двух рядов блока микроаквариумов (5 лунок в

ряде - всего 10 лунок). Через 2 минуты учитывали в каждой лунке количество живых стилохоний. Затем в пять (опытных) лунок первого ряда добавляли по 20 мкл полученного водного экстракта, а в 5 лунок второго ряда (контроль) -такое же количество дистиллированной воды и засекали время. Спустя три часа в лунках опытного и контрольного рядов снова проводили подсчет количества активных стилохоний и сопоставляли результаты.

Выживаемость стилохоний каждого ряда (N1, %) вычисляли по следующей формуле:

N = N2 ¡И, х 100,

где - среднеарифметическое (из пяти) значение количества активных стилохоний в начале опыта, шт.;

N2 - среднеарифметическое (из пяти) значение количества активных стилохоний в конце опыта, шт.

Изучение острой токсичности Лаксубтила провели на 40 белых мышах двухмесячного возраста массой 18 - 21 г. Перед началом исследований их содержали в обычных условиях и наблюдали в течение 14 дней. Последний раз корм давали вечером накануне опыта, прием воды не ограничивали.

Из белых мышей по принципу парных аналогов, сформировали 5 групп (п=8). Из них 4 опытных и одна - контрольная. Исходя из результатов предыдущего опыта о нетоксичности препарата Лаксубтил на культуре колпод, в этой серии наблюдений сразу применили высшие дозы исследуемого препарата. Для этого мышам 4-х опытных групп пробиотик в виде суспензии вводили однократно перорально в дозе - 0,1 мл (1-я группа), 0,2 мл (2-я группа), 0,3 мл (3-я группа) и 0,5 мл (4-я группа), что в пересчете на 1 кг массы тела составляло соответственно 5 мл; 10 мл; 15 мл и 25 мл. Контрольным животным (5-я группа), в таком же объеме, ввели только физиологический раствор.

Через 6 часов после введения препарата произвели очередную дачу корма белым мышам всех групп, которых в дальнейшем переводили на обычный режим кормления. За животными наблюдали в течение 15 дней, учитывая общее состояние, внешний вид, поведенческие реакции, прием пищи и воды, ритм и частоту сердцебиения, количество дыхательных движений.

Ветеринарно-санитарную экспертизу мяса осуществляли согласно ГОСТу 202353.

Для изучения профилактической эффективности Лаксубтил вводили перорально в дозах 3; 5 и 10 мл/кг массы тела один раз в сутки в течение 10 дней, лечебной - в тех же дозах 2 раза в сутки до выздоровления.

Экономическую эффективность научных разработок рассчитывали согласно «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (утв. ГУВ МСХ СССР, 1982 г.), а также в соответствии с «Методикой определения экономической эффективности использования в сельском хозяйстве результатов научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ, новой техники, изобретений и рационализаторских предложений» (утв. МСХ СССР, 1983 г.).

Методики отдельных экспериментов изложены в соответствующих разделах диссертации.

Цифровой материал диссертации обработан статистически по критерию Стьюдента для проверки достоверности различий. Разница между сравниваемыми величинами считалась достоверной при р<0,05 (Лакин Г.Ф., 1990).

За основу выводов и практических предложений взяты результаты контролируемых опытов в лабораторных и производственных условиях.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Распространение колибактериоза телят в хозяйствах РТ

При бактериологическом исследовании патологического материала от больных животных определено, что на молочно-товарных фермах Таджикистана в возникновении диареи телят большую роль играют эшерихии коли. Вероятность возникновения и тяжесть течения колибактериоза определяют внешние факторы, влияющие на естественную резистентность и иммунологическую реактивность организма.

В 2006 — 2010 гг. нами исследованы 422 пробы патологического материала (фекалии, кровь, паренхиматозные органы) от новорожденных телят из 12 животноводческих хозяйств РТ (табл. 1).

Таблица 1

Результаты бактериологического исследования патологического материала от новорожденных телят (2006 — 2010 гг.)

Кол-во хозяйств Кол-во проб

всего неблагополучных всего положительных

РРП 3 3 120 52 (43,3)

Согдийская область 5 4 206 78 (37,8)

Хатлонская область 4 1 96 32(33,3)

Итого 12 8 422 162 (38,3)

Примечание. В скобках указано процентное значение.

Наибольшее количество больных колибактериозом телят (43,3%) выявлено в хозяйствах РРП, наименьшее - Хатлонской области (33,3%).

При идентификации выделенных культур были выявлены серотипы 08, 026, 032, 082, 086,0101, 0115, 0117, 0118,0119 и 0137 (табл. 2).

Таблица 2

Соотношение серотипов Е. coli в регионах Республики Таджикистан, %

Серотип РРП Согдийская область Хатлонская область

08 4,8 3,5 2,7

026 5,0 4,0 3,0

032 1,2 1,2 0,9

082 3,0 1,4 1,1

086 9,5 7,2 3,3

0101 5,4 3,8 3,6

0115 3,3 1,1 0,5

0117 8,0 4,1 2,1

Ol 18 4,3 2,0 1,3

0119 2,9 0,8 1,1

0137 3,8 2,4 2,8

В процентном отношении больше всего титровались серотипы 086 (20,0%), Ol 17 (14,2%), OlOl (12,8%), 026 (12,0%), 08 (11,0%) и 0137 (9,0%). Из патологического материала одного животного выделяли от 1 до 3 серотипов эшерихий. При этом закрепленности какого-либо серотипа за определенной географической зоной не установлено. Колибактериоз у телят отмечали в зимне-весенний период (51,8% от общего количества заболевших за год). Летом заболеваемость составляла 8,0%, осенью - 40,2%. При проведении круглогодовых отелов телята заболевали на протяжении всего года с некоторыми колебаниями по месяцам.

Установлено, что заболеваемость по мере увеличения численности приплода повышалась и составляла 32,0%. После пика заболеваний в марте количество заболевших животных снижалось, а в ноябре и декабре -

повышалось до 18,0%.

Таким образом, колибактериоз широко распространен в хозяйствах Таджикистана, что обусловливает актуальность разработки новых противобактериальных лекарственных средств и рациональных способов их применения.

3.2. Разработка лекарственной формы Лаксубтила 3.2.1. Состав

Жидкая лекарственная форма наиболее удобна в применении в животноводстве, так как наряду с невысокой стоимостью такая форма препарата не требует предварительной подготовки перед дачей животным, равномерно смешивается с водой, молоком и др.

Учитывая, что бактерии рода Bacillus устойчивы к факторам внешней среды, в том числе и к различным химическим веществам, именно пробиотики на основе бацилл являются перспективными в плане создания жидких

лекарственных форм.

Действующим веществом пробиотика Лаксубтил на основе штаммов ВБ и 09 и ВБ "Л Д 26 в форме суспензии являются субстанции в форме порошков, содержащих бактериальную массу, минеральные и растительные вещества, в количестве, указанном в таблице 3.

Таблица 3

Состав пробиотика Лаксубтил в форме суспензии, %

Компонент Кол-во

Порошок, содержащий бактериальную массу (30 млрд м.к./г) Вв ТІ 09 0,0005

В8Т.ІД26 0,0005

Сахароза 5,0

Коровье молоко 94,999

3.2.2. Технологический процесс производства пробиотика Лаксубтил

С полужидкого агара культуру производственного штамма В. БиЬиПз засевали в пробирку с картофельным бульоном и выращивали в течение 18-24 ч при температуре 37°С. Проверяли на чистоту и пересевали в 1 л пастеризованного и охлажденного до 37°С молока, перемешивая в течение 5 — 10 мин, затем инкубировали в термостате в течение 16 — 24 ч при температуре 37°С. (Производственное молоко проверяли на отсутствие ингибиторов (например, антибиотики), производственные штаммы - на способность к сквашиванию (ферментационный тест).

Для проверки на стерильность пробы, отобранные из каждого варианта приготовленного пробиотика Лаксубтил, по 1 мл разводили в 4 мл стерильного физиологического раствора или раствора Хенкса и делали посевы в объеме 0,2 мл в две пробирки с МПБ, МПА, мясопептонным печеночным бульоном (МППБ) под вазелиновым маслом, среду Сабуро и в объеме 1 мл в два флакона с МПБ. Посевы на среде Сабуро выдерживали при 22 - 24°С, а остальные -37°С. Визуально отмечали рост бактерий в виде кремово-белых складчатых колоний с кратерообразным центром, вязкой консистенции, края колоний изрезанные. При микроскопии видны грамположительные спорообразующие палочки с закругленными концами. Размер бактерий - 1,9x8,0 мкм; в мазках 28-часовой культуры клетки расположены одиночно и попарно, реже — в цепочке.

Для подсчета количества микробных клеток культуру разводили физиологическим раствором в 10 - 15 раз и заправляли суспензией подготовленную камеру Горяева, в 5 квадратах которой под микроскопом определяли количество м.к. и рассчитывали их число в 1 см3 (X) по формуле:

Л-1000-225 5-0,9 '

где А — количество микробных клеток в 5 квадратах камеры;

1000 - количество кубических миллиметров в 1 см3;

225 - количество квадратов в камере Горяева;

0,9 - объем камеры Горяева, мм3.

Для определения количества жизнеспособных клеток В. subtilis в пробирку, содержавшую 1 мл Лаксубтила добавляли 9 см3 стерильного физиологического раствора, после тщательного перемешивания 0,5 см3 суспензии переносили во вторую пробирку с 4,5 см3 физиологического раствора, из которой 0,5 см3 разведенной суспензии - в третью, из третьей - в четвертую, из четвертой - в пятую, из пятой - в шестую, из шестой - в седьмую пробирку с 4,5 см3 физиологического раствора.

Из последней (седьмой) пробирки по 0,5 см3 суспензии пипеткой засевали в шесть чашек Петри с агаром СБД (комплекс минеральных и растительного компонентов), колебательными движениями распределяя суспензию по всей поверхности агара. Культивировали 36 ч при 37°С, после чего учитывали результаты исследования (определяли количество больших и малых по диаметру колоний).

33. Антагонистические свойства Лаксубтила

Методом двукратных серийных разведений изучено противомикробное действие Лаксубтила в сравнении с Субтилбеном в отношении серотипов Е. coli. Опыт проведен трехкратно. Результаты опытов представлены в таблице 4.

Таблица 4

Противомикробное действие Лаксубтила в отношении серотипов эшерихии коли

Серотип Кол-во бактерий в пробиотике, млн м.к./мл Контроль

500 250 125 62,5 31,2 15,6 7,8 31,2 15,6 7,8

08 - - — — — + + _ + +

026 - - - - — + + _ + +

086 - - - — — — + _ _ +

0101 - - — — — + + _ + +

Ol 17 - - - - — + + _ + +

0115 - — — + + _ + +

0137 - - - + + — + +

Примечание: (-) - гибель бактерий, (+) - рост бактерий.

Из таблицы видно, что Лаксубтил обладает высокой антагонистической активностью в отношении изолятов различных серотипов Е. соН. Минимальное количество пробиотика, которое приводило к гибели бактерий, составило 15,6 -31,2 млн м.к./мл. Противомикробное действие Лаксубтила было равно Субтилбену.

3.4. Токсические свойства Лаксубтила

3.4.1. Безвредность При изучение безвредности Лаксубтила первым методом определение степени токсичности экспериментального пробиотика проводили с использованием сухой культуры инфузорий колподы согласно требованиям ГОСТ Р 52337-2005.

Для проведения опытов по настоящей методике использовали суточную культуру стилохоний, находящихся в фазе экспоненциального (активного) роста. Поэтому за сутки до опыта стилохонии из ампул, в которых поставляли их цисты и споры культуры, пересаживали в новую среду со свежим питательным веществом и помещали в термостат при температуре 22 - 24°С.

В ходе анализа результатов опыта на культуре колпод (табл. 5) после проведения исчислений установлено, что через три часа опыта активность стилохоний опытного ряда составила 89%, а в контроле - 90%.

Таблица 5

Результаты реагирования стилохоний на пробиотик Лаксубтил

Ряд лунок Кол-во активных стилохоний

в начале опыта | через 3 ч

№ лі гаки

1 2 3 4 5 N1 1 2 3 4 5 N7

Опытный 9 11 8 9 8 45 8 9 8 8 7 40

Контроль 10 8 12 9 11 50 9 7 10 9 10 45

Примечание: N1 и - общее количество активных стилохоний.

Руководствуясь требованиями ГОСТа Р 52337-2005, к нетоксичным препаратам микробиологического синтеза относят средства, под действием которых за установленное время остаются активными свыше 80% стилохоний. Исходя из этого, установлено, что пробиотик Лаксубтил является нетоксичным препаратом.

3.4.2. Острая токсичность Изучение острой токсичности нового пробиотика проводили на 40 белых мышах двухмесячного возраста (массой 18 - 21 г). Перед началом исследований лабораторных животных содержали в обычных условиях и наблюдали в течение 14 дней. Последний раз корм давали накануне опыта вечером, прием воды не ограничивали. Из белых мышей по принципу парных аналогов сформировали 5 групп (п=8): 4 опытные и 1 контрольная.

Исходя из результатов предыдущего опыта о нетоксичности препарата Лаксубтил на культуре инфузории Со1рос1а 51ети, в этой серии наблюдений мышам опытных групп пробиотик вводили перорально однократно в дозах 0,1 мл (1-я группа), 0,2 мл (2-я группа), 0,3 мл (3-я группа) и 0,5 мл (4-я группа),

что в пересчете на 1 кг массы тела составляло соответственно 5; 10; 15 и 25 мл. Контрольным животным (5-я группа) в таком же объеме вводили физиологический раствор.

Через 6 ч после введения препарата белым мышам всех групп давали корм и переводили их на обычный режим кормления. За лабораторными животными наблюдали в течение 15 сут, учитывая общее состояние, внешний вид, поведенческие реакции, прием пищи и воды, ритм и частоту сердцебиения, количество дыхательных движений.

При определении острой токсичности пробиотика за клиническим состоянием белых мышей наблюдали в течение первых шести часов, потом через каждые 3 ч в течение первых суток опыта, учитывая начало и динамику развития клинических проявлений отравления, время гибели опытных животных или симптомы улучшения их физиологического состояния. В последующие 14 дней опыта ежесуточно три раза отмечали клиническое состояние лабораторных животных. За все время наблюдения не было ни одного случая гибели белых мышей кроме кратковременного снижения двигательной активности в первые 3 - 4 ч наблюдений. В дальнейшем клиническое состояние опьггных и контрольных лабораторных животных не отличалось (табл. 6).

Таблица 6

Результаты изучения острой токсичности пробиотика Лаксубтил на белых мышах

Номер группы и доза препарата, мл/кг

№1 №2 №3 №4 №5

5,0 10,0 15,0 25,0 0

Кол-во животных, гол. всего 8 8 8 8 8

выжило 8 8 8 8 8

пало 0 0 0 0 0

Таким образом, опыты на белых мышах свидетельствуют о том, что пробиотик Лаксубтил при энтеральном введении в максимальной дозе (25000 мг/кг массы тела) не вызывает гибели экспериментальных животных. Следовательно, препарат в соответствии с ГОСТом 12.1.007-76 относится к VI классу токсичности, то есть к нетоксичным веществам.

3.4.3. Хроническая токсичность

Хроническую токсичность Лаксубтила изучали в опытах по скармливанию препарата один раз в день в течение 30 сут трем группам (п=10) кроликов породы шиншилла в 1-, 2- и 3-кратной ориентировочно-терапевтической дозе (5 мл/кг массы тела). Животные контрольной группы (п=10) препарат не получали. За лабораторными животными наблюдали во время всего опыта, по окончании которого их усыпляли и проводили

патологоанатомическое вскрытие.

При изучении хронической токсичности препарата установлено, что его длительное введение в дозах 5, 10 и 15 мл/кг массы тела не влияет на поведение, аппетит, прием воды, состояние слизистых оболочек и шерстного покрова опытных и контрольных лабораторных животных. При применении Лаксубтила в этих дозах не наблюдали повышения температуры тела, характер локомоторной активности, стереотипное поведение и выносливость кроликов не изменялись.

Лабораторные животные в течение всего опыта оставались живы, охотно принимали корм, были подвижными и не имели отклонений как в клиническом состоянии, так и во внутренних паренхиматозных органах. При исследовании сердца, печени и селезенки у опытных животных нарушений в размере и структуре органов не отмечали. Они были однородного цвета, без кровоизлияний и дистрофических изменений.

Таким образом, пробиотик Лаксубтил не обладает хронической токсичностью при оральном введении лабораторным животным.

3.4.4. Влияние на кожу и слизистые оболочки кроликов

Раздражающее действие пробиотика Лаксубтил на кожу изучали на 6 кроликах, которьм ежедневно делали аппликации на выстриженных участках кожи нативного препарата в дозе 0,1 см3 в течение 26 сут, учитывая реакцию кожи (гиперемия, болезненность, утолщение кожной складки, расчесы) и клиническое состояние организма лабораторных животных.

Раздражающее действие Лаксубтила на слизистую оболочку глаза определяли на двух группах (п=6) самок кроликов, первым (опытная группа) из которых в конъюнктивальный мешок однократно закапывали 10%-ную суспензию Лаксубтила в объеме 0,1 см3, вторым (контроль) - инсталлировали воду в том же объеме. Влияние препарата оценивали по проявлению гиперемии, инъекции сосудов склеры, слезотечению.

Аллергенные свойства Лаксубтила определяли на 12 кроликах, из которых сформировали 2 группы (п=6). Опытным животным на выстриженные участки кожи наносили ежедневно в течение 14 дней по 0,1 см 10%-ной суспензии препарата, контрольным - физраствора. После 14-дневного перерыва однократной аппликацией в том же объеме наносили разрешающую дозу соответственно Лаксубтила и физраствор, учитывая реакцию кожи и общее состояние животных.

При изучении раздражающего свойства препарата методами аппликации на кожу и инсталляции на слизистую оболочку глаз установлено, что кожа кроликов на месте нанесения препарата оставалась гладкой, эластичной, неутолщенной, безболезненной и без признаков гиперемии, не наблюдали гиперемии слизистой (оболочки) глаз, инъекции сосудов склеры, слезотечения. Отрицательная реакция кожи и организма кроликов на нанесение разрешающей дозы Лаксубтила свидетельствует об отсутствии сенсибилизации организма.

3.5. Стандартизация Лаксубтила

Для стандартизации и контроля качества Лаксубтила, изучения его стабильности при хранении, нами разработаны качественные и количественные методы исследований, предусмотренные ОСТ 91500.05.001.00 в требованиях к качеству суспензий.

Результаты проверки качества трех экспериментальных серий, показали хорошую воспроизводимость и точность разработанных качественных и количественных методов контроля Лаксубтила.

Качество препарата характеризуется следующими физико-химическими и биологическими показателями:

1. Внешний вид и цвет — суспензия серовато-белого цвета.

2. Наличие механических примесей, плесени - нет.

3. Концентрация водородных ионов (pH) - 4,5 - 5,0.

4. Количество м.к. В. subtilis - 500 млн/мл.

5. Количество жизнеспособных клеток В. subtilis - 85 - 90%.

6. Контаминация бактериальной и грибной микрофлорой - отсутствует.

7. Контаминация микоплазмами - отсутствует.

8. Антагонистические свойства (МБцК в отношении Е. coli) - 15,6 - 31,2 млн м.к./мл.

9. Токсичность - безвреден.

З.б. Ветеринарно-санитарная оценка качества мяса при введении Лаксубтила

Результаты ветеринарно-санитарной экспертизы и бактериологических исследований мяса, полученного после убоя кроликов, обработанных Лаксубтилом, свидетельствуют о его доброкачественности.

После 5- (2 раза в сутки; 1-я группа, п=5) и 10-кратной (1 раз в сутки; 2-я группа, п=5) дачи Лаксубтила в дозе 5 мл/кг массы тела установлено, что мясо кроликов опытных групп не отличалось по качеству от мяса контрольных животных, на разрезе мышечная ткань красноватого цвета, поверхность разреза влажная, эластичная, плотная; бульон прозрачный без посторонних запахов.

Бактериологическими исследованиями обсемененности проб мяса и внутренних органов микроорганизмами из группы токсикоинфекций не обнаружено. Мазки-отпечатки из проб мяса опытных и контрольных животных окрашивались плохо.

В препаратах из поверхностных слоев обнаруживались отдельные колонии (по 1 - 3 в поле зрения микроскопа) кокковой микрофлоры. В препаратах, приготовленных из глубоких слоев мышц, микрофлора не выделялась.

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют, что многократное введение Лаксубтила не приводит к статистически значимым изменениям качественных и биохимических показателей мяса животных.

3.7. Эффективность Лаксубтила при колибактериозе телят

В настоящее время с целью профилактики и терапии желудочно-кишечных заболеваний, а также повышения продуктивности молодняка сельскохозяйственных животных широко используют различные симбиотические микроорганизмы, среди которых наиболее перспективными признаны молочнокислые, пропионовокислые, бифидобактерии, В. виЫШв и др.

Нами на основе В. зиЫШв был изготовлен препарат Лаксубтил в форме суспензии, лечебно-профилактическая эффективность которого изучена в животноводческих хозяйствах РТ.

3.7.1. Профилактическая эффективность

Профилактическую эффективность Лаксубтила в экспериментальных условиях изучали на телятах 2- — 10-дневного возраста в сравнении с препаратом-аналогом (Биоспорин) на 4 молочно-товарных фермах, неблагополучных по колибактериозу.

Лаксубтил телятам выпаивали в 3-х дозах - 3 мл (1-я группа, п=15), 5 мл (2-я группа, п=15) и 10 мл/кг массы тела (3-я группа, п=15) в течение 10 дней 1 раз в сутки; Биоспорин (4-я группа, п=15) использовали в соответствии с наставлением по применению препарата.

В течение месяца за животными вели клиническое наблюдение, учитывая общее состояние, заболеваемость и сохранность.

Результаты клинических наблюдений (табл. 7) свидетельствуют о высокой профилактической эффективности Лаксубтила, выразившейся в предотвращении колибактериоза (2 и 3-я группы), полной сохранности и хорошем общем состоянии телят, увеличении пророста массы тела.

Таблица 7

Результаты изучения в эксперименте профилактической эффективности Лаксубтила

(Племенное хозяйство им. X. Муккарамова, 2009 г.)

Показатель Группа Контроль (Биоспорин)

1 1 2 | 3

Доза, мл/кг массы тела

3,0 5,0 10,0

Кол-во больных телят, гол. 15 15 15 15

Заболело, гол. 2 — 4

Пало, гол. 1 2

Среднесуточный прирост, г 135 150 150 125

Стоимость 1 дозы препарата, сомони 0,16 0,24 0,32 0,80

Затраты на профилактику, сомони 24 36 48 120

Профилактическая эффективность, % 86,7 100 100 73,3

Прирост живой массы животных в опытных группах при применении Лаксубтила в форме суспензии был на 8,0 - 20,0% выше, чем в контрольной (125 г).

Для изучения профилактической эффективности в производственных условиях телятам в 2-дневном возрасте Лаксубтил вводили перорально в дозе 5,0 мл/кг массы тела один раз в сутки в течение 10 дней.

При производственном испытании Лаксубтила на 422 телятах в 4 хозяйствах РРП, Согдийской и Хатлонской областей Таджикистана в 2006 -2010 гг. профилактическая эффективность препарата составила 86,5 - 92,0%. Профилактические мероприятия, проводившиеся по схеме принятой в хозяйствах, предотвращали колибактериоз телят (198 гол.) на 80 — 83%.

Таким образом, установлена профилактическая эффективность Лаксубтила, которая в экспериментальных условиях составляет 86,7 - 100%, в производственных — 86,5 — 92,0%.

3.7.2. Лечебная эффективность

Изучение терапевтической эффективности Лаксубтила при колибактериозе телят провели в 5 хозяйствах Республики Таджикистан.

Колибактериоз диагностировали на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов бактериологических исследований.

При изучении клинического состояния у больных животных с острой формой колибактериоза отмечали кратковременное повышение температуры тела в начале болезни до 40 - 40,5°С, снижение аппетита, вялость, малоподвижность. Пульс становился частым, нитевидным (частота пульса доходила до 140 уд/мин). На 2 - 3 дни болезни появлялся профузный понос. Испражнения были бело-желтого цвета, часто пенистые, с непереваренными сгустками казеина, иногда с примесью крови. Спустя 12 ч после инфицирования у больных телят начиналось обезвоживание организма. Глазные яблоки западали в орбиты. Состояние животных было угнетенным, реакция на окружающее — сниженной.

При патологоанатомическом вскрытии павших телят на эпикарде и под эпикардом наблюдали точечные кровоизлияния. Ткань печени перерождена. Селезенка незначительно увеличена, под капсулой — точечные кровоизлияния. Преджелудки содержали смесь серовато-желтого цвета. На слизистой оболочке, покрытой слизью, местами имелись кровоизлияния. Слизистая оболочка кишечника набухшая, гиперемированная, с кровоизлияниями. Мезентеральные лимфатические узлы увеличены и гиперемированы.

При бактериологическом исследовании паренхиматозных органов, павших и вынужденно убитых с диагностической целью телят, выделены патогенные культуры Е. соН.

Для опыта подобрали 4 группы больных колибакгериозом телят 4-7-дневного возраста. Животным 1-ой группы (п=16) Лаксубтил в дозе 3 мл/кг, 2-ой (п=16) — 5 мл/кг, 3-ей (п=16) — 10 мл/кг массы тела, выпаивали дважды в

сутки. Контрольную группу телят (п=16) лечили Биоспорином в соответствии с наставлением по применению препарата.

За животными в течение 14 дней вели клиническое наблюдение, учитывая длительность болезни, выздоровление, сохранность поголовья, прирост массы и температуру тела.

Результаты экспериментального изучения терапевтической эффективности (табл. 8) свидетельствуют о целесообразности применения пробиотика Лаксубтил в форме суспензии в дозе 5,0 мл/кг массы тела (продолжительность курса) в производственных условиях для лечения колибактериоза телят.

Таблица 8

Результаты изучения в эксперименте терапевтической эффективности Лаксубтила

(Племенное хозяйство им. X. Муккарамова, 2009 г.)

Показатель Группа Контроль (Биоспорин)

1 | 2 | 3

Доза, мл/кг массы тела

3,0 5,0 10,0

Кол-во больных телят, гол. 16 16 16 16

Выздоровело, гол. 15 16 16 13

Пало, гол. 1 — — 3

Кол-во телят с повторными заболеваниями, гол. 2 - - 2

Продолжительность терапии, сут 5,0 4,0 4,0 6,2

Терапевтическая эффективность, % 93,8 100 100 81,3

Экономическая эффективность Лаксубтила в расчете на 1 сомони затрат при лечении колибактериоза телят составила 1,9 сомони, что больше в 2 раза, чем соответствующий показатель Биоспорина.

Определение суммарного индекса показало, что при терапии колибактериоза телят Лаксубтил эффективнее препарата-аналога в 2 раза.

Таким образом, установлена высокая лечебная и экономическая эффективность Лаксубтила при колибактериозе телят.

Производственную проверку пробиотика Лаксубтил провели в 4 хозяйствах РТ на 240 больных диареей телятах, которым препарат выпаивали с молозивом (молоком) в дозе 5,0 мл/кг массы тела 2 раза в сут до выздоровления.

За подопытными животными вели клиническое наблюдение: учитывали длительность болезни, выздоровление, сохранность поголовья, прирост массы тела.

Применение Лаксубтила способствовало улучшению общего состояния животных, повышению аппетита, нормализации температуры тела. Более

высокий терапевтический эффект отмечен в группах телят, получавших пробиотик Лаксубгил - 90,9 - 92,9%. Биоспорин был эффективен в 80,0 - 83,3% случаев.

Таким образом, результаты производственных испытаний свидетельствуют о высокой лечебной эффективности Лаксубтила при колибактериозе телят. Пероральное применение этого препарата в комплексе с ветеринарно-санитарными мероприятиями обеспечивает выздоровление 90,9 -92,9% больных животных.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что в возникновении желудочно-кишечных болезней телят на молочно-товарных фермах Таджикистана важную роль играет Е. соН. Колибактериоз из 12 обследованных хозяйств диагностирован в 8 (66,6%) и при бактериологическом исследовании в основном идентифицировали серотипы эшерихии коли: 086 (20,0%), 0117 (14,2%), 0101 (12,8%), 026 (12,0%), 08 (11,0%) и 0137(9,0%).

2. Определено, что поражаемость телят колибактериозом отмечается в зимне-весенний период (59,5% от общего количества заболевших за год).

3. Отработаны технология изготовления Лаксубтила на основе В. БиЫШэ с использованием местного сырья и методы контроля препарата.

4. Лаксубтил обладает высокой бактерицидной активностью в отношении патогенных серотипов эшерихии коли (15,6 - 31,2 млн м.к./мл.).

5. Лаксубтил относится к категории нетоксичных препаратов, не оказывает местного раздражающего и аллергенного действия.

6. Профилактическая эффективность Лаксубтила в дозе 5 мл на кг массы тела 1 раз в день в течение 10 дней составляет 87,3 - 100% в экспериментальных и 86,5 - 92,0% в производственных условиях.

7. В эксперименте эффективность лечения больных телят при пероральном применении Лаксубтила в дозах 5 - 10 мл на кг массы тела 2 раза в день в течение 5 дней достигает 93,8 - 100%. В комплексе с ветеринарно-санитарными мероприятиями в производственных условиях препарат обеспечивает выздоровление 90,9 - 92,9% больных животных.

8. Экономическая эффективность Лаксубтила в расчете на 1 сомони затрат при лечении колибактериоза телят составила 1,9 сомони, что больше в 2 раза, чем соответствующий показатель Биоспорина.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Научно-обоснованная система получения здорового молодняка и профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят: Рекомендации (утв. СГВН МСХ РТ 11.09.2012 г.).

2. Рекомендации по профилактике и лечению пневмоэнтеригов телят (утв. СГВН МСХ РТ 11.09.2012 г.).

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Сатгори И. Изучение противомикробных свойств пробиотика Лаксубтил / И. Сатгори, Н.Р. Сатгоров, М.М. Каримов // Овцы, козы, шерстяное дело / Тимирязевская МСХА. - М., 2009. - №4. - С. 78 - 80.

2. Сатгори И. Профилактическая эффективность пробиотика Лаксубтил при желудочно-кишечных болезнях телят / И. Сатгори, Н.Р. Сатгоров, М.М. Каримов // Биобезопасность и зоонозные инфекции: мат. Первой ежегодной конф. Ассоциации Биологической Безопасности Центральной Азии. - Алматы, 2009. — С. 65. — 66.

3. Сатгори И. Способ приготовления препарата Лаксубтил / И. Сатгори, М.М. Каримов // Биобезопасность и зоонозные инфекции: мат. Первой ежегодной конф. Ассоциации Биологической Безопасности Центральной Азии - Алматы, 2009. - С. 94. - 95.

4. Каримов ММ. Применение пробиотика Лаксубтил при пневмоэнтерите телят / М.М. Каримов, Ш.А. Турдиев, Н.Р. Сатгоров // Сумский аграрный университет. - Сумы, 2010. -С. 33-34.

5. Сатгоров Н.Р. Изучение острой токсичности пробиотического препарата Лаксубтил / Н.Р. Сатгоров, Н.Р. Хасанов, М.М. Каримов // Кишовапз / ТАУ. -2012. — №3. — С. 32-33. У

6. Патент TJ 531. Республика Таджикистан. Способ получения биопрепарата Лаксубтил / Сатгори И., Сатгоров Н.Р., Турдиев Ш.А., Хасанов Н.Р., Сафаралиев А.Р., Баротов С.Т., Юсупов М.М. - 2012.

Сдано в набор 7.09.2012 г. Подп. к печ. 27.09.2012 Г. Формат бум. 60x84'/, Зак. 144. Тираж 100 экз. Объем 1'/4 п.л. Типография Таджикского аграрного университета им. Ш. Шотемура. Душанбе, пр. Рудаки, 146.

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Каримов, Мунирджон Мухторович

СОКРАЩЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В РАБОТЕ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Предрасполагающие факторы желудочно-кишечных болезней молодняка КРС

1.2. Колибактериоз молодняка КРС

1.3. Пробиотики на основе бактерий рода Bacillus

1.4. Механизм лечебно-профилактического действия пробиоти

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Диагностические исследования

2.2. Методы стандартизации Лаксубтила

2.2.1. Физико-химические свойства

2.2.2. Биологические свойства

2.3. Антимикробная активность Лаксубтила

2.4. Токсикологические свойства Лаксубтила

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Этиологическая роль Е. coli в возникновении инфекционных энтеритов на молочно-товарных фермах РТ

3.2. Пробиотический препарат Лаксубтил

3.2.1. Композиция

3.2.2. Технология изготовления

3.2.3. Стандартизация и стабильность

3.3. Антагонистические свойства Лаксубтил

3.4. Токсикологические свойства Лаксубтила

3.4.1. Безвредность

3.4.2. Острая токсичность

3.4.4. Раздражающее действие и аллергенное свойство

3.5. Влияние Лаксубтила на качество мяса

3.6. Лечебно-профилактическая эффективность Лаксубтила при колибактериозе молодняка КРС

3.6.1. Терапевтическая эффективность

3.6.1.1. Экспериментральное определение лечебной дозы и продолжительности терапии Лаксубтилом

3.6.1.2. Производственные испытания лечебной эффективности Лаксубтила

3.6.2. Профилактическая эффективность

3.6.2.1. Экспериментальное определение профилактической эффективности Лаксубтила

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Лечебно-профилактическая эффективность пробиотика лаксубтил при колибактериозе телят"

Актуальность работы. Наибольшее распространение среди телят получили желудочно-кишечные болезни, на долю которых при традиционной технологии скотоводства приходится 55 - 70%, при промышленной -до 100% всех случаев заболеваний [41, 84]. Заболеваемость и отход молодняка, особенно в первый месяц жизни, наносят значительный экономический ущерб в результате падежа и вынужденного убоя, которые на отдельных предприятиях достигают 70%, снижения продуктивности и племенных качеств животных, материальных и трудовых затрат на терапию и профилактику [43, 46, 86].

Инфекционная диарея вызывается главным образом патогенными се-ротипами Е. coli. Колибактериоз - это остропротекающее инфекционное заболевание новорожденных телят в возрасте от 1 до 10 дней, характеризующееся диареей, нарастающими симптомами интоксикации, сильным обезвоживанием организма и гибелью животных. Болезнь у молодняка КРС чаще всего протекает с признаками диареи, интоксикации, расстройства деятельности сердечно-сосудистой и центральной нервной систем. В этиологической структуре колибактериоза телят важную роль играют состояние иммунной системы животных, присутствие возбудителя, стресс-факторы, угнетающие иммунитет, что способствует активизации возбудителя инфекции [78, 83].

Из-за систематического применения животным антибактериальных препаратов, часто с профилактической целью, наиболее остро стоит проблема устойчивости микроорганизмов, особенно в семействе энтеробакте-рий, в результате широкого распространения резистентных штаммов которых резко снижается эффективность многих антибиотиков (тетрациклин, левомицетин, эритромицин и др.).

В последние годы в ветеринарии особенно возрос интерес к пробио-тическим препаратам, которые используют для стимуляции неспецифического иммунитета, терапии и профилактики смешанных желудочно-кишечных инфекций, расстройств пищеварения алиментарной этиологии. Препараты этой группы способствуют сохранению биологического статуса, возникновению иммунного ответа, повышению эффективности вакцинации, снижению заболеваемости, восстановлению пищеварения, сокращению количества фармакологических обработок и материальных издержек производства, что делает продукцию животноводства конкурентоспособной по качеству и цене [8, 94, 112].

Свойства некоторых видов рода Bacillus (Вас. subtilis, Вас. pumilus, Вас. polymyxa) настолько разнообразны, что только за последние годы на их основе разработано более десятка эффективных препаратов для медицины и ветеринарии. Эти виды стабильно выделяются из разнообразных биотопов, в том числе из организма и тканей теплокровных, насекомых и растений, и характеризуются экологической чистотой, полной безвредностью, высокой устойчивостью к неблагоприятным условиям внешней среды, ферментативной и антагонистической активностью. Наиболее продуктивными являются штаммы Вас. subtilis (сенная палочка). Описано более 70 антибиотиков, образуемых бактериями этого вида (микобациллин, суб-тилин, бацилизин, бациломицин, субтилизин, субспорин и др.) [74, 96].

Широкое распространение колибактериоза в животноводческих хозяйствах Республики Таджикистан (РТ), усиление контроля над использованием антибиотиков и химиотерапевтических препаратов определяют актуальность проведенного нами исследования, целью которого явились изучение распространения колибактериоза телят и разработка эффективных средств лечения и профилактики этой болезни.

Для достижения поставленной цели решены следующие задачи:

1. Изучить распространение колибактериоза молодняка КРС в животноводческих хозяйствах Таджикистана.

2. Разработать эффективный пробиотический препарат Лаксубтил на основе штаммов Вас. subtilis и изучить его свойства.

3. В экспериментальных и производственных условиях определить лечебную и профилактическую эффективность Лаксубтила при колибакте-риозе телят.

Научная новизна. Изучена роль Е. coli в возникновении энтеритов молодняка КРС в хозяйствах РТ и определена чувствительность возбудителей к пробиотику.

Подобраны штаммы Вас. subtilis и изучена их антибактериальная активность в отношении музейных штаммов и изолятов возбудителя коли-бактериоза телят. Разработан новый пробиотический препарат Лаксубтил в форме суспензии на основе местных штаммов Вас. subtilis, отработаны методы изготовления и контроля препарата, изучены его антимикробные свойства и безвредность.

Установлена лечебная и профилактическая эффективность Лаксубтила при колибактериозе молодняка КРС, отработан рациональный способ применения препарата.

Научная новизна полученных результатов подтверждена патентом

РТ.

Практическая ценность. На основании полученных результатов предложен пробиотичекий препарат Лаксубтил для профилактики и лечения колибактериоза телят.

Материалы диссертации вошли в:

- Научно-обоснованную систему получения здорового молодняка и профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят (утв. СГВН МСХ РТ 11.09.2012 г.);

- Рекомендации по профилактике и лечению пневмоэнтеритов телят (утв. СГВН МСХ РТ 11.09.2012 г.).

Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:

- результаты исследования этиологической роли Е. coli в возникновении колибактериоза молодняка КРС;

- технология изготовления и методы контроля физико-химических и биологических свойств Лаксубтила;

- результаты изучения антибактериальной активности и безвредности препарата;

- результаты экспериментальных и производственных испытаний эффективности Лаксубтила при лечении и профилактике колибактериоза телят.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на заседаниях ученого совета ТАУ (2006 - 2010 гг.); республиканских конференциях и семинарах-совещаниях (Душанбе, 2006 - 2010 гг.); Международной научно-практической конференции «Биобезопасность и зоонозные инфекции» (Алматы, 2009 г.); Международной научно-практической конференции «Ветеринарные проблемы в Центральной Азии - Продовольственная безопасность: Использование современных методов диагностики и профилактики инфекционных болезней животных», посвященной 80-летию образования ТАУ (Душанбе, 2011 г.); Международной научно-практической конференции «Научное и клиническое применение медицины в Синзяне и соседних странах» (Урумчи, 2011 г.).

Публикации. По результатам исследований опубликовано 6 научных работ.

Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Каримов, Мунирджон Мухторович

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что в возникновении желудочно-кишечных болезней молодняка КРС на молочно-товарных фермах Таджикистана важную роль играет Е. coli. Колибактериоз из 12 обследованных хозяйств диагностирован в 8 (66,6%) и при бактериологическом исследовании в основном идентифицировали серотипы эшерихии коли: 086 (20,0%), Ol 17 (14,2%), 0101 (12,8%), 026 (12,0%), 08 (11,0%) и 0137 (9,0%).

2. Определено, что поражаемость телят колибактериозом отмечается в зимне-весенний период (59,5% от общего количества заболевших за год).

3. Отработаны технология изготовления Лаксубтила на основе В. subtilis с использованием местного сырья и методы контроля препарата.

4. Лаксубтил обладает высокой бактерицидной активностью в отношении патогенных серотипов эшерихии коли (15,6-31,2 млн м.к./мл.).

5. Лаксубтил относится к категории нетоксичных препаратов, не оказывает местного раздражающего и аллергенного действия.

6. Профилактическая эффективность Лаксубтила в дозе 5 мл на кг массы тела 1 раз в день в течение 10 дней составляет 87,3 - 100% в экспериментальных и 86,5 - 92,0% в производственных условиях.

7. В эксперименте эффективность лечения больного колибактериозом молодняка КРС при пероральном применении Лаксубтила в дозах 5 -10 мл на кг массы тела 2 раза в день в течение 5 дней достигает 93,8 -100%. В комплексе с ветеринарно-санитарными мероприятиями в производственных условиях препарат обеспечивает выздоровление 90,9 - 92,9% больных животных.

8. Экономическая эффективность Лаксубтила в расчете на 1 сомони затрат при лечении колибактериоза телят составила 1,9 сомони, что больше в 2 раза, чем соответствующий показатель Биоспорина.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Научно-обоснованная система получения здорового молодняка и профилактики желудочно-кишечных болезней новорожденных телят: Рекомендации (утв. СГВН МСХ РТ 11.09.2012 г.).

2. Рекомендации по профилактике и лечению пневмоэнтеритов телят (утв. СГВН МСХ РТ 11.09.2012 г.).

86

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Каримов, Мунирджон Мухторович, Душанбе

1. Абрамов С.С. Физические и лекарственные методы профилактики и лечения бронхопневмонии у телят путем воздействия на естественную резистентность организма: автореф. дис. . д-ра вет. наук: 16.00.01 / С.С. Абрамов; Казанский вет. ин-т. Казань, 1984. - 38 с.

2. Аликаев В.А. Болезни дыхательной системы // Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных / В.А. Аликаев, И.Г. Ша-рабрин, Л.Г. Замарин. 6-е изд., испр. и доп. - М.: Агропромиздат, 1986. -С. 441-447.

3. Аликаев В.А. Борьба с расстройством пищеварения у новорожденных телят / В.А. Аликаев, В.В. Митюшин // Ветеринария. 1987. - №2. -С. 53-55.

4. Андреева Н.Л. Ростостимулирующие свойства тимогена / Н.Л. Андреева // Сб. науч. тр. Ленингр. вет. ин-та. Л., 1990. - №106. - С. 71 - 73.

5. Антипов В.А. Использование пробиотиков в животноводстве / В.А. Антипов // Ветеринария. 1991. -№1. - С. 55 - 58.

6. Антипов В.А. Новые отечественные ветеринарные препараты / В.А. Антипов // Итоги и перспективы науч. исслед. по пробл. патол. и разраб. средств и методов терапии и профил.: матер, координац. совещ. / ВНИВИПФТ. Воронеж, 1995. - С. 22 - 24.

7. Антонов B.C. Динамика классов иммуноглобулинов и других сывороточных белков у крупного рогатого скота в онтогенезе / B.C. Антонов, Н.В. Кленина, С.А. Михайлова // Проблемы ветеринарной иммунологии. -М.: Агропромиздат, 1985. С. 49 - 50.

8. Ардаматский, H.A. К проблеме этиологии и патогенеза острых пневмоний / H.A. Ардаматский, О.П. Решетникова // Терапевтический архив. 1982. - №4. - С. 10 - 12.

9. Афанасьев JI.A. Колибактериоз телят: автореф. дис. . д-ра вет. наук: 16.00.03 / JI.A. Афанасьев. М., 1990. - 37 с.

10. Ахметсадыков H.H. Изучение факторов патогенности эпизоотических штаммов эшерихий, выделенных от телят / H.H. Ахметсадыков // Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с болезнями животных. Новосибирск, 1997. - С. 168 - 169.

11. Бактериальные препараты при лечении и профилактике желудочно-кишечных заболеваний у телят / Г.А. Ноздрин и др. // Актуал. вопр. вет. Новосибирск, 1997. - С. 18 - 19.

12. Бардахчьян Э.А. Морфологические изменения эритроцитов и содержания железа в крови крыс при действии эндотоксина кишечной палочки / Э.А. Бардахчьян, Н.Г. Харланова // Бюлл. экспериментальной биологии и медицины. 1992. - №10. - С. 439 - 442.

13. Белявская В.А. Пробиотики из рекомбинантных бацилл новый класс лечебно-профилактических препаратов и способ доставки лекарственных белков в организм / В.А. Белявская // Сб. тр. сотр. НИКТИ БАВ. - Бердск, 1996. - С. 195 - 196.

14. Белянко JI.В. Комплексная система профилактики и лечения ви-русно-бактериальных гастроэнтеритов новорожденных телят на фермах промышленного типа / Белянко Л.В. // Вирус, болез. с.-х. жив. Владимир, 1995.-С. 217.

15. Беркольд Ю.И. Влияние пробиотических препаратов на основе Bacillus subtilis на физиологические показатели роста цыплят-бройлеров / Ю.И. Беркольд, А.Б. Иванова // Сиб. вестн. с.-х. науки. 2006. - №4. - С. 45 - 48.

16. Бессарабов Б.Ф. Уровень естественной резистентности птиц при различных кормовых добавках / Б.Ф. Бессарабов, Г.М. Урюпина // Повышение естественной резистентности сельскохозяйственной птицы: сб. науч. тр. / MBA. М., 1983. - С. 3 - 6.

17. Бовкун Г.Ф. Роль клебсиелл в патологии животных / Г.Ф. Бовкун // Ветеринария. 1986. - №8. - С. 70 - 71.

18. Бондаренко В.М. Дисбиоз современные возможности профилактики и лечения / Бондаренко В.М. - М., 1995. - С. 5 - 10.

19. Бондаренко В.М. Микроэлементы и инфекция / В.М. Бондаренко, В.Ф. Чубуков // Микробиология, эпидемиология и иммунобиология. -1987. -№11. С. 118-125.

20. Бондаренко В.М. О совершенствовании пробиотических препаратов / В.М. Бондаренко // Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Фундаментальные и клинические аспекты: науч.-практ. журн. Междунар. конгр. 2007. - №1 - 2. - С. 24.

21. Бондаренко В.М. Ранние этапы развития инфекционного процесса и двойственная роль нормальной микрофлоры / В.М. Бондаренко, В.Т. Петровская // Вестн. РАМН. 1997. - №3. - С. 7 - 10.

22. Буланкин А.Л. Новое средство для лечения диспепсии у телят / А.Л. Буланкин, В.И. Родионов, А.П. Радуль // Тр. Кубан. гос. аграр. ун-та. -1995. Вып. 349. - С. 61 - 63.

23. Бурсуков B.B. Профилактика и лечение инфекционных гастроэнтеритов смешанной этиологии у новорожденных телят лактоиммуноглобу-линовыми препаратами: автореф. дис. . канд. вет. наук / В.В. Бурсуков. -М., 1996.- 18 с.

24. Вскрытие животных и дифференциальная патоморфологическая диагностика болезней: учебной пособие / Жаков М.С. и др.. Минск: Ураджай, 1998.-263с.

25. Герасименко В.В. Пути коррекции питания животных в условиях загрязнения природной среды / Герасименко В.Г. и др.; Пилоцерков. с.-х. ин-т.- 1991.

26. Герстман Н.В. Этиология и профилактика острых расстройств пищеварения у новорожденных телят / Н.В. Герстман, О.В. Степанюк, В.П. Постой // Профил. и меры борьбы с болез. молодн. с.-х. жив. Минск, 1990.-С. 3.

27. Гершкович Л.И. Применение осарсола для лечения колибактерио-за телят / Л.И. Гершкович // Ветеринария. 1966. - №1. - С. 55.

28. Головко А.Н. Антигенная вариабельность фимбриальных адгези-нов Е. coli / А.Н. Головко // Ветеринария. 1997. - №8. - С. 23 - 25.

29. Головко А.Н. Фимбриальные адгезины энтеротоксигенных эше-рихий / А.Н. Головко // Ветеринария. 1993. - №9. - С. 31 - 32.

30. Горбунов А.П. О причинах заболеваемости новорожденных телят / А.П. Горбунов, З.Н. Морогина, Н.В. Попова // Вет. консультант. 2003. -№15.-С. 19.

31. Гутковский A.A. Колибактериоз телят и поросят / Гутковский A.A., Дворкин Г.Л. Минск: Ураджай, 1989. - 160 с.

32. Довбыш B.C. Оценка активности термостабильного энтеротокси-на условно-патогенных энтеробактерий / B.C. Довбыш // Практик. 2003. -№9-10.-С. 26-28.

33. Дудников С.А. Неспецифическая иммуностимуляция в профилактике острых расстройств пищеварения новорожденных телят / Дудников С.А. // Профил. и леч. незараз, болез. жив. в спецхозах: сб. науч. тр. М., 1987.

34. Егоров И. Эффективность пробиотика Терацид-С / И. Егоров и др. // Птицеводство. 2007. - №6. - С. 56 - 57.

35. Емельяненко П.А. Энтеротоксины кишечных бактерий / П.А. Емельяненко // Ветеринария. 2000. - №2. - С. 25 - 27.

36. Ермолин A.B. Лечебная и профилактическая эффективность лин-коспектина при диспепсии у телят / A.B. Ермолин, Д.И. Дегтярев // Актуал. пробл. вет. медицины, животновод., обществознания и подгот. кадров на Юж. Урале. Челябинск, 1996. - С. 27 - 29.

37. Жданов П.И. Применение споробактерина для повышения сохранности и продуктивности свиней / П.И. Жданов // Ветеринария. 1994. -№11.-С. 36-40.

38. Жосан H.H. Диагностика колибактериоза новорожденных телят / H.H. Жосан // Диагностика и специф. профилактика инфекц. болезней животных и птиц. Кишинев, 1989. - С. 39 - 41.

39. Жумаев Н.С. Специфическая профилактика колибактериоза телят / Жумаев Н.С., Сатторов И.Т. // Сб. науч. тр. ТаджНИВИ. Душанбе, 1986. -С. 39-43.

40. Зароза В.Г. Эшерихиоз телят / Зароза В.Г. М.: Агропромиздат, 1991.-239 с.

41. Захарова И.Я. Эндотоксины О-антигены кишечной палочки / Захарова И.Я. Киев: Наукова думка, 1980. - 208 с.

42. Зелютков Ю.Г. Ассоциированная ротавирусная и коронавирусная инфекция, осложненная эшерихиозом у новорожденных телят (диагностика, профилактика, лечение): автореф. дис. . д-ра вет. наук: 16.00.03 /Ю.Г. Зелютков. Минск, 2006. - 32 с.

43. Зотова Н.В. Влияние биоспорина и БАВ, продуцируемых бациллами, на показатели иммунитета при экспериментальном дисбактериозе кишечника / Зотова Н.В., Грачев А.Ю., Плохушко E.H. // Сб. матер, науч. конф. ЦВТП БЗ НИИМ МО РФ. Екатеринбург, 2002.

44. Ибрагимов В.В. Вопрос этиологии энтеритов новорожденных телят / В.В. Ибрагимов, М.Н. Мусаева // Бактериальные и вирусные болезни сельскохозяйственных животных и птиц в хозяйствах Северного Кавказа. -Новочеркасск, 1988. С. 97 - 104.

45. Иванова А.Б. Фармакологическая коррекция неспецифической резистентности и продуктивности цыплят-бройлеров с использованием ве-тома 3: автореф. дис. . канд. вет. наук / А.Б. Иванова. Троицк, 2002.,- 18 с.

46. Ивановский A.A. Новый пробиотик бактоцеллолакт при различных патологиях у животных / A.A. Ивановский // Ветеринария. 1996. -№11.-С. 34-35.

47. Изучение эффективности новых дезинтоксикационных и иммуностимулирующих препаратов на телятах / В.К. Муравьев и др. // Информ. бюлл. Укр. акад. аграр. наук / Ин-т эксперим. клинич. вет. медицины. -1994.-С. 203.

48. Иманалиев М. Колибактериоз телят и разработка средств специфической профилактики: автореф. дис. . д-ра вет. наук. / Иманалиев М. -Фрунзе, 1990.-48 с.

49. Иммунитет и его коррекция в ветеринарной медицине / Красочко П.А. и др.. Смоленск, 2001. - 324 с.

50. Иммунитет сельскохозяйственных животных / Я.Е. Коляков и др..-М.: Колос, 1973.-С. 217-221.

51. Использование бифидобактерий для профилактики и лечения диареи телят / B.C. Токарев и др. // Пробл. стабилизации и развития с.-х.произв. Сибири, Монголии и Казахстана в XXI в. Новосибирск, 1999. -Ч. 2.-С. 276-277.

52. Каблучеева Т.И. Значение Б AB для пищеварительной системы птицы / Т.И. Каблучеева // Птицеводство. 2007. - №2. - С. 17-19.

53. Каландаров З.С. Терапевтическая эффективность пробиотика субтилбен при колибактериозе телят: автореф. дис. . канд. вет. наук / З.С. Каландаров. Душанбе, 2006. - 24 с.

54. Калмыкова А.И. Пробиотики: Терапия и профилактика заболеваний. Укрепление здоровья / Калмыкова А.И.; НПФ «Био-Веста»; Сиб-НИПТИП СО РАСХН. Новосибирск, 2001. - 208 с.

55. Кальницкая О.И. Экспериментальное обоснование технологии изготовления пробиотика бифидобактерина и его лечебно-профилактическая эффективность при колибактериозе телят: автореф. дис. . канд. вет. наук / О.И. Кальницкая. М., 1995. - 22 с.

56. Карышева А.Ф. Эпизоотология, меры профилактики и борьбы с острыми респираторными болезнями крупного рогатого скота / Карышева А.Ф., Конопаткин A.A., Спатарь Ф.В. Кишинев, 1983. - 100 с.

57. Кашин A.C. Антропогенно-экологические органопатологии молодняка животных. Профилактика и терапия. Ветеринарная экология / Кашин A.C.; Минсельхоз России; РАСХН, Сиб. отд-ние; ВНИИПО. Барнаул, 2002. - 250 с.

58. Кашперова Т.А. Конструирование пробиотиков на основе генетически модифицированных штаммов Bacillus subtillis и Bacillus licheniformis: автореф. дис. . канд. биол. наук. Кольцово, 2005. - С. 25.

59. Ковалев H.A. Профилактика инфекционных болезней животных / Ковалев H.A., Музычин С.И., Бутьянов Д.Д. / Под ред. H.A. Ковалева, С.И. Музычина. Минск: Ураджай, 1988. - 173 с.

60. Козаров А. Проучваниявърху колиинфекциите по новородените телята / А. Козаров // Науч. тр. Висш. Инст. Зоотехн. Ветер. Мед. Стара Загара. Ветер.мед. фак. София, 1985. - Т.30, №2. - С. 69 - 73.

61. Коляков Я.Е. Колибактериоз телят / Коляков Я.Е., Гительсон С.С., Каврук Л.С. М.: Колос, 1970. - 223 с.

62. Корочкин О.Л. Фармакология и применение препаратов бифидо-бактерий: автореф. дис. . канд. вет. наук / О.Л. Корочкин. Троицк, 1997. - 18 с.

63. Коррекция мясной продукции скота в онтогенезе с помощью применения пробиотиков / И.И. Бротухин и др. // Пробл. увеличения произв. конкурентноспособ. пищ. продуктов и повышения качества с.-х. сырья. Волгоград, 1999. - С. 191 - 194.

64. Красочко И.А. Вирусные инфекции домашних и диких жвачных животных / Красочко И.А.; УОВГАВМ. Витебск, 2004. - 268 с.

65. Куваева И.Б. Обмен веществ организма и кишечная микрофлора / Куваева Н.Б. М.: Медицина, 1976. - С. 148 - 160.

66. Куликовский A.B. Токсигенны еэшерихии актуальная проблема ветеринарии медицины / A.B. Куликовский, А.Н. Панин, В.В. Соснина // Ветеринария. 1997. - №3. - С. 25.

67. Курашвили Т.К. Адгезивный антиген K88ad Е. coli / Т.К. Кура-швили, H.A. Соколова // Ветеринария. 1991. - №3. - С. 26 - 27.

68. Ларионов Л.П. Влияние биологически активных веществ, продуцируемых бациллами, на некоторые показатели иммунитета / Л.П. Ларионов и др. // Здравоохранение Урала. Екатеринбург, 2001. - №1. - С. 132.

69. Лебедева И.А. Биоспорин в предстартовый период / И.А. Лебедева // Птицеводство. 2007. - №11. - С. 46 - 47.

70. Лебедева М.Н. К проблеме лекарственной устойчивости микробов / М.Н. Лебедева, С.Д. Воропаева // Микробиология, эпидемиология и вирусология. 1957. - №11. - С. 26 - 33.

71. Лечебная эффективность жидкого бифидумбактерина при диспепсии телят / А.Ф. Пилуй и др. // Профил. и меры борьбы с болез. молоди. с.-х. жив. Минск, 1990. - С. 74.

72. Лечение и профилактика колибактериоза телят / Ю.А. Павлов и др. // Матер, науч. конф., посвящ. 50-летию Краснодар. НИВС. Краснодар, 1996.-С. 86-89.

73. Лысенко С. Пробиотики для цыплят-бройлеров / С. Лысенко,,А. Баранников, А. Васильев // Птицеводство. 2007. - №5. - С. 31 - 32.

74. Мазанкова Л.Н. Перспективы применения споровых пробиотиков при заболеваниях желудочно-кишечного тракта у детей / Л.Н. Мазанкова, И.С. Курохтина // Педиатрия. 2002. - №4. - С. 56 - 61.

75. Малик Н.И. Ветеринарные пробиотические препараты / Н.И. Малик, А.Н. Панин // Ветеринария. 2001. - №1. - С. 46 - 51.

76. Малик Н.И. Новые пробиотические препараты ветеринарного назначения: автореф. дис. . д-ра биол. наук / Н.И. Малик. М., 2002. - 53 с.

77. Медведев А.П. Условно-патогенные микробы и их роль в инфекционной патологии животных / А.П. Медведев, A.A. Вербицкий, М.В. Грибанова // Ветеринарная медицина Беларуси. 2006. - №1. - С. 6 - 7.

78. Мельник И.Л. Патогенетическая терапия при острых расстройствах пищеварения у новорожденных телят / И.Л. Мельник, Б.П. Семчи-шин, A.A. Драчук // Профил. и меры борьбы с болез. молодн. с.-х. жив. -Минск, 1990.-С. 60-61.

79. Мельников Н.И. Ферменты патогенности и токсины бактерий / Мельников Н.И. М.: Медицина, 1969. - 252 с.

80. Методическое пособие по профилактике и лечению желудочно-кишечных болезней (диспепсия) новорожденных телят / Салахутдинов К.Г. и др.. Казань, 1993. - 76 с.

81. Михайлова H.A. Диагностика, профилактика и лечение гнойно-септических заболеваний лекарственными средствами, выпускаемыми НПО «Иммунопрепарат» / Михайлова H.A., Никитенко В.И., Кузнецова Т.Н.; НПО «Иммунопрепарат». Уфа:, 1993. - С. 81 - 83.

82. Мнацаканов С.Т. Энтеротоксигенность и антигены адгезии у эн-теробактерий, выделенных от крупного рогатого скота / С.Т. Мнацаканов // Биол. журн. Армении. 1987. - №2. - С. 152 - 154.

83. Мозгов И.Е. Фармакология / И.Е. Мозгов. М.: Колос, 1974.455 с.

84. Мозжухин Ю.П. Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных животных, профилактика и меры борьбы с ними в Приамурье: Учебное пособие / Мозжухин Ю.П. Благовещенск, 1985. - 60 с.

85. Моргунова В.И. Функциональная морфология органов пищеварения новорожденных поросят при колидиарее: дис. . канд. вет. наук / Моргунова В.И. Воронеж, 2000.

86. Муллакаева JI.A. Состояние и пути повышения естественной резистентности кур в промышленном птицеводстве: автореф. дис. . канд. с.-х. наук / JI.A. Муллакаева. Казань, 1991. - 24 с.

87. Нитазолсодержащие препараты при желудочно-кишечных болезнях молодняка / П.А. Паршин и др. // Ветеринария. 1997. - №9. - С. 38 -41.

88. Ноздрин Г.А. Биологически активные вещества и перспективы их применения в ветеринарии: лекция / Ноздрин Г.А., Наумкин И.В.; НГАУ. -Новосибирск, 1992. 36 с.

89. Ноздрин Г.А. Механизм антимикробного действия пробиотиче-ских препаратов / Г.А. Ноздрин, А.Г. Ноздрин, А.Б. Иванова // Новые про-биотические и иммунотропные препараты в ветеринарии: матер, науч.-практ. конф. Новосибирск, 2003. - С. 56 - 58.

90. Ноздрин Г.А. Оптимизация микробиоценозов среды обитания животных путем направленного изменения микробных экосистем с использованием пробиотиков: рекомендации / Ноздрин Г.А., Иванова А.Б., Ноздрин А.Г. Новосибирск, 2003. - 52 с.

91. Ноздрин Г.А. Пробиотики на основе Bacillus subtilis и их роль в поддержании здоровья животных разных видов / Г.А. Ноздрин, А.Б. Иванова, А.Г. Ноздрин // Сиб. вестн. с.-х. науки. 2006. - №7. - С. 63 - 66.

92. Ноздрин Г.А. Технологические аспекты применения пробиоти-ческих препаратов / Г.А. Ноздрин и др. // Новые пробиотические и иммунотропные препараты в ветеринарии: матер. Рос. науч.-практ. конф. НГАУ. Новосибирск, 2003. - С. 55 - 56.

93. Ноздрин Г.А. Фармакологические аспекты применения пробиотиков на основе Вас. subtilis для стимуляции роста животных / Г.А. Ноздрин и др. // Новые фармакологические средства в ветеринарии: матер. Междунар. науч.-практ. конф. СПб., 2003. - С. 27 - 28.

94. Ноздрин Г.А. Эффективные средства стимуляции роста телят / Г.А. Ноздрин, А.И. Леляк // Новые фармакологические средства в ветеринарии: матер. 8-й межгос. межвуз. науч.-практ. конф. СПб., 1997. - С. 42 -43.

95. Панин А.Н. Иммунобиология и кишечная микрофлора / Панин А.Н., Малик Н.И., Малик E.B. М., 1988. - 48 с.

96. Панин А.Н. Иммунология и кишечная лактофлора / А.Н. Панин. -М., 2001.-С. 15.

97. Панин А.Н. Применение продуктов пчеловодства для стимуляции иммуногенеза и коррекции микробиоценоза кишечника поросят: метод. рекомендации / Панин А.Н., Маннапова Р.Т., Малик Н.И. М., 1997.

98. Панин А.Н. Принципы и перспективы применения пробиотиков в ветеринарии / А.Н. Панин, Н.И. Малик // Пробиотики и пробиотические продукты в профил. и леч. наиболее распростр. забол. чел.: тез. Всерос. конф. -М., 1999.-С. 70.

99. Панин А.Н. Пробиотики в системе рационального кормления животных / А.Н. Панин, Н.И. Малик // Пробиотики, пребиотики, синбио-тики и функциональные продукты питания. Фундаментальные и клинические аспекты: матер. Междунар. конгр. СПб., 2007. - С. 59.

100. Панин А.Н. Пробиотические препараты, их влияние на локальную защиту животных из экологически неблагоприятных регионов: рекомендации / Панин А.Н., Янгуразова З.А., Малик Н.И. М., 1995. - 36 с.

101. Панин A.C. Принципы и перспективы применения пробиотиков в ветеринарии / A.C. Панин, Н.И. Малик // Пробиотики и пробиотическиепродукты в профилактике и лечении наиболее распространенных заболеваний человека: сб. науч. тр. М., 1999. - С. 70.

102. Панин A.C. Пробиотические препараты в ветеринарии / A.C. Панин, Н.Е. Серых // Ветинформ. 1993. - №2. - С. 9 - 10.

103. Пат. 1722502, МКИ5 А 61 К 39/02, 35/74. Препарат биоспорин для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний человека / Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова И.Б. (РФ). 7 с.

104. Пат. 2086248 Российская Федерация. Пробиотический препарат «Стрептобифид-форте» для животных / Малик Н.И. и др.; заявл. 02.04.96; опубл. 10.08.97.

105. Петровская В.Г. Микрофлора человека в норме и патологии / Петровская В.Г., Марко О.П. М.: Медицина, 1976. - 231 с.

106. Пивовар JIM. Комплексная терапия новорожденных при желудочно-кишечных заболеваниях / JIM. Пивовар // Профил. и меры борьбы с болез. молодн. с.-х. жив. Минск, 1990. - С. 62 - 63.

107. Пирожков М.К. Иммунопрофилактика эшерихиоза молодняка сельскохозяйственных животных / М.К. Пирожков, Ю.А. Мал азов // Матер. науч. конф., посвящ. 50-летию Краснодар. НИВС. Краснодар, 1996. -С. 89 - 90.

108. Подберезный B.B. Культивирование производственных штаммов Вас. subtilis в подсырной сыворотке / В.В. Подберезный, Н.И. Полян-цев, JI.B. Рубаева // Ветеринария. 1996. - №1. - С. 21 - 23.

109. Подкопаев В.М. Идентификация эшерихий в фекальных пробах телят, больных кишечной формой колибактериоза / В.М. Подкопаев // Теоретические основы профилактики инфекционных и инвазионных болезней животных. М., 1985. - С. 46 - 48.

110. Полякова O.A. Адгезивный антиген К99 и термостабильный эн-теротоксин у патогенных эшерихий возбудителей колибактериоза телят / O.A. Полякова и др. // Ветеринария. 1986. - №3. - С. 37 - 40.

111. Полякова O.A. Инвазионные свойства эшерихий, выделенных при колибактериозе новорожденных телят / O.A. Полякова, H.A. Соколова, Н.И. Евглевская // Бюлл. ВИЭВ. М., 1987. - Т. 64. - С. 81 - 83.

112. Попова Н.В. Влияние уровня кормления молозивом телят на естественную устойчивость / Попова Н.В., Морогина З.И., Горбунов А.П. // Матер, науч. конф., посвящ. 50-летию Краснодар. НИВС. Краснодар, 1996.-С. 163-164.

113. Потапова O.A. Бактериостатическое и бактерицидное действие лактобрила на представителей микробного биоценоза кишечника телят / O.A. Потапова // Диаг., леч. и профил. забол. с.-х. жив. Ставрополь, 1997. -С. 34-36.

114. Пробиотики на основе Bacillus subtilis новый класс экологически адекватных препаратов / Г.А. Ноздрин и др. // Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии: матер. I Междунар. конгр. вет. фармакологов. СПб., 2008. - С. 90 - 91.

115. Ратинер Ю.А. Энтерогеморрагические кишечные палочки и вызываемые ими заболевания / Ю.А. Ратинер, В.М. Бондаренко, А. Sitonen // Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунологии. 1998. - №5. - С. 87 - 96.

116. Ряднов A.A. Эффективность применения протосубтилина ГЗх при желудочно-кишечных заболеваниях телят / Ряднов A.A., Ряднова Т.А.

117. Совершенствование ресурсосберегающих технол. произв. продуктов животновод. Волгоград, 1995. - С. 74 - 77.

118. Светоч Э.А. Биологическая и генетическая характеристика возбудителя колибактериоза телят / Э.А. Светоч, В.В. Гусев, Е.И. Попов // Ветеринария. 1999. - №5. - С. 20 - 23.

119. Светоч Э.А. Распространенность Е. coli с антигенами адгезии F18 и К88 у поросят-отъемышей / Э.А. Светоч и др. // Ветеринария. 2006. -№5.-С. 24-27.

120. Светоч Э.А. Фено- и генотипические свойства штаммов Е. coli, продуцирующих антиген К88 / Э.А. Светоч, Е.И. Попов, В.В. Гусев // Ветеринария. 1997.-№11. - С. 19-23.

121. Сизова A.B. Значение микрофлоры желудочно-кишечного тракта животных и использование бактерий-симбионтов в животноводстве /

122. A.B. Сизова. М., 1974. - С. 46 - 82.

123. Симбиотический препарат на основе лактулозы и молочнокислых бактерий / Г.Б. Гаврилов и др. // Молоч. промышл. 1998. - №4. - С. 31-32.

124. Слабоспицкая А.Т. Ферментативная активность бацилл, перспективных для включения в состав биопрепаратов / А.Т. Слабоспицкая, С.С. Крымовская, С.Р. Резник // Микробиол. журн. 1990. - Т. 52, №2. - С. 9-14.

125. Смирнов А.О. Разработка технологии получения таблеточной формы препарата биоспорин / А.О. Смирнов, А.Т. Харечко, Н.В. Садовой // Биотехнология. 1996. - №11. - С. 51 - 55.

126. Смирнов В.В. Бактерии рода Bacillus продуценты антибиотиков / В.В.Смирнов, С.Р. Резник // Проблемы изыскания и биотехнологии новых антибиотиков: сб. науч. тр. - М: Медицина, 1982. - С. 53 - 57.

127. Смирнов В.В. Влияние комплексного пробиотика споролакта на микробиоценоз кишечника теплокровных / В.В. Смирнов, С.Р. Резник,

128. B.А. Вьюницкая // Микробиол. журн. 1995. - №4. - С. 42 - 49.

129. Смирнов B.B. Дискуссионные вопросы создания и применения бактериальных препаратов для коррекции микрофлоры теплокровных /

130. B.В. Смирнов, С.Р. Резник, И.Б. Сорокулова // Микробиол. 1992. - №6.1. C. 82 94.

131. Смирнов В.В. Методические рекомендации по выделению и идентификации бактерий рода Bacillus из организма человека и животных / Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова И.Б. Киев, 1983. - 50 с.

132. Смирнов В.В. Новый пробиотик эндоспорин для лечения и профилактики эндометритов животных /В.В. Смирнов, В.А. Кудрявцев, А.И. Осадчая // Дисбактериозы и эубиотики: сб. науч. тр. М, 1996. - С. 32 - 38.

133. Смирнов В.В. Пробиотики на основе живых культур микроорганизмов / В.В. Смирнов, Н.К. Коваленко // Микробиол. журн. 2002. - №4. -С. 62-80.

134. Смирнов В.В. Рост и спорообразование Bacillus subtilis в различных условиях аэрации /В.В. Смирнов, А.И. Осадчая, В.А. Кудрявцев // Микробиол. журн. 1993. - №3. - С. 38 - 43.

135. Смирнов В.В. Современные представления о механизмах лечебно-профилактического действия пробиотиков из бактерий рода Bacillus / В.В. Смирнов, С.Р. Резник, В.О. Вьюницкая // Микробиол. журн. 1993. -№4.-С. 92-112.

136. Смирнов В.В. Спорообразующие аэробные бактерии, продуценты биологически активных веществ / Смирнов В.В., Резник С.Ф., Василевская И.А. Киев: Наук, думка, 1982. - С. 274.

137. Смирнов В.В. Чувствительность к антимикробным препаратам штаммов бацилл, составляющих основу некоторых пробиотиков / В.В. Смирнов, A.B. Руденко, Н.В. Самгородская // Антибиотики и химиотерапия. 1994. - №4. - С. 23 - 28.

138. Соколов A.B. Бифацил новый эффективный пробиотик / A.B. Соколов, Т.В. Абакулова, Ю.Н. Рыбаков // Новые фармакологическиесредства в ветеринарии: матер. 9-й Межгос. межвуз. науч.-практ. конф. -СПб., 1997.-С. 37-38.

139. Соколова H.A. Адгезивный антиген 987Р, продуцируемый эше-рихиями от больных колибактериозом животных в СССР / H.A. Соколова и др. // Бюлл. ВИЭВ. М, 1988. - Т. 66. - С. 41 - 43.

140. Соколова H.A. Полиадгезивные штаммы Е. coli, выделенные от новорожденных поросят / H.A. Соколова, Т.К. Курашвили // Ветеринария. 1992.-№1.-С. 29-31.

141. Соколов В.Д. Комбинированное применение антимикробных средств / В.Д. Соколов // Фармакол. и токсикол. нов. лекарств, средств и кормовых добавок в вет. Л., 1990. - С. 5 - 9.

142. Соколов В.Д. Терапевтическая эффективность диацетина при желудочно-кишечных заболеваниях молодняка / В.Д. Соколов, Г.А. Нозд-рин, И.В. Наумкин // Новые фармакол. средства в вет.: тез. докл. 6-й Межгос. науч.-практ. конф. Спб., 1994. - С. 41.

143. Сорокулова И.Б. Рекомбинантные пробиотики: проблемы и перспективы использования в медицине и ветеринарии / И.Б. Сорокулова и др. // Вестн. РАМН. М.: Медицина, 1997. - №3. - С. 46 - 49.

144. Старухин П.П. Об эффективности применения споробактерина новорожденным телятам / П.П. Старухин, В.М. Мешков, П.И. Жданов // Актуал. пробл. патол. жив. и чел. Барнаул, 1996. - С. 71.

145. Степаншин Ю.Г. Бактерионосительство энтерогеморрагических эшерихий серовара 0157:Н7 у животных / Ю.Г. Степаншин и др. // Ветеринария. 2005. - №7. - С. 17 - 22.

146. Субботин В.В. Биотехнология пробиотика лактобифадола (бифацидобактерина) и его лечебно-профилактическая эффективность: ав-тореф. дис. д-ра вет. наук / В.В. Субботин. М., 1999. - 41 с.

147. Субботин В.В. К вопросу о селекции производственных штаммов для пробиотиков ветеринарного назначения / В.В. Субботин // Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных животных: тез. докл. Всерос. науч. конф. М., 1996. - С. 75.

148. Субботин В.В. Лактобифадол для бактериопрофилактики и терапии желудочно-кишечных заболеваний / В.В. Субботин, М.А. Сидоров // Ветинформ. М., 1999. - №1. - С. 20.

149. Субботин В.В. Профилактика желудочно-кишечных болезней новорожденных животных с симптомокомплексом диареи / В.В. Субботин, М.А. Сидоров // Ветеринария. 2001. - №4. - С. 3 - 7.

150. Танами Ю. Антагонизм и симбиоз бактерий в кишечнике животных гнотобиотиков / Ю. Танами // 18-й Междунар. конгр. по микро-биол.-М., 1966.-С. 219.

151. Тараканов Б.В. Использование микробных препаратов и продуктов микробиологического синтеза в животноводстве / Б.В. Тараканов // Ветеринария. 1987. -№3. - С. 41 - 45.

152. Тараканов Б.В. Механизмы действия пробиотиков на микрофлору пищеварительного тракта и организм животных / Б.В. Тараканов // Ветеринария. 2000. - №1. - С. 47 - 54.

153. Тараканов Б.В. Новые биопрепараты для ветеринарии /Б.В. Тараканов, Т.И. Николычева // Ветеринария. 2007. - №7. - С. 45 - 50.

154. Тараканов Б.В. Новые пробиотические препараты для использования в животноводстве /Б.В. Тараканов // Иновац. развитие достижения ученых Калуж. обл. для нар. хоз-ва: сб. тез. регион, науч.-практ. конф., по-свящ. Дню науки. Обнинск, 1999. - С. 169 - 170.

155. Тимошко М.А. Взаимодействие бифидобактерий, молочнокислых бактерий и эшерихий в кишечнике гнотобиотичных цыплят: автореф. дис. канд. биол. наук / М.А. Тимошко. Кишинев, 1973. - 23 с.

156. Тимошко М.А. Микрофлора пищеварительного тракта молодняка сельскохозяйственных животных / Тимошко М.А. Кишинев: Штиин-ца, 1990. - С. 6 - 26, 42 - 74, 106 - 122, 124 - 150.

157. Тимошко М.А. Применение непатогенных микроорганизмов при выращивании поросят-сосунов в промышленных условиях / М.А. Тимошко, В.Г. Холмецская // Изв. АН МССР. Сер. биол. и хим. наук. 1981. -№5.-С. 66-68.

158. Турдиев Ш.А. Климато-эпизоотологическое проявление коли-бактериоза телят и их лечение в условиях Республики Таджикистан: автореф. дис. . канд. вет. наук / Турдиев Ш.А. Душанбе, 1997. - С. 24.

159. Тутов И.К. Распространение и этиологическая структура коли-бактериоза в Ставропольском крае / И.К. Тутов, Э.В. Олиферова // Вестн. ветеринарии. 1997. - №2. - С. 68 - 71.

160. Физиотерапия и физиопрофилактика болезней животных / Белов А.Д. и др.. М.: Колос, 1983. - С. 63 - 77; 103 - 120.

161. Фукс П.П. Пидсумки та нови напрямививчення колибактеризу телят / П.П. Фукс, A.M. Головко // Досягнення наук. вет. медицини у про-филактици та боротьби з хворобами с.-г.тварин. Харкив, 1994. - С. 40 -48.

162. Хакимова И.М. Изыскание специфических средств профилактики колибактериоза в условиях промышленных комплексов / И.М. Хакимова, A.K. Савардинова, Х.Х. Абуллин // Проблемы ветеринарной иммунологии. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 110-112.

163. Цион P.A. Оценка роли микрофлоры при некоторых желудочно-кишечных и обменных заболеваниях новорожденных животных / P.A. Цион // Сб. науч. тр. Ленингр. вет. ин-та. Л., 1977. - №52. - С. 153 - 154.

164. Цитокины как иммуномодуляторы: перспективы их использования в ветеринарии / А.Н. Панин и др. // Сб. науч. тр. ВГНКИ. 1995. - Т. 57.-С. 166-178.

165. Чучалин А.Г. Иммунокоррекция в пульмонологии / Чучалин А.Г. М.: Медицина, 1989. - 256 с.

166. Шахов А.Г. Эколого-адаптационная стратегия защиты здоровья и продуктивности животных в современных условиях / А.Г. Шахов; Воронеж. гос. ун-т. Воронеж, 2001. - 207 с.

167. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты. Современное состояние вопроса / С.А. Шевелева // Вопр. питания. -1999.-№2.-С. 32-40.

168. Шендеров Б.А. Антимикробные препараты и нормальная микрофлора. Проблемы и возможные пути их решения / Б.А. Шендеров // Антибиотики и химиотерапия. 1988. - №12. - С. 921 - 926.

169. Шендеров Б.А. Функциональное питание и пробиотики микроэкологические аспекты / Шендеров Б.А., Манвелова М.А. - М., 1997. - С. 7- 12.

170. Шульга H.H. Ситуация по колибактериозу телят в Амурской области / H.H. Шульга, Н.В. Яковлева // Ветеринария. 2006. - №7. - С. 21 -23.

171. Экпиньонг Л.А. Ростостимулирующее влияние на цыплят лекарственных веществ микробного происхождения: автореф. дис. канд. биол. наук / Л.А. Экпиньонг. М., 1990. - 16 с.

172. Энтеробактерии: руковод. для врачей / Под ред. В.И. Покровского. М.: Медицина, 1985. - С. 44 - 87.

173. Юров К.П. Болезни телят и их профилактика / Юров К.П. // Состояние, пробл. и перспективы развития вет. науки России: сб. матер, науч. сессии РАСХН, посвящ. 100-летию ВИЭВ. М., 1999. - Т. 1. - С. 214 -216.

174. Яковлев А.Ф. Развитие методов оценки генотипа сельскохозяйственных животных / А.Ф. Яковлев // Цитогенетика и молекулярная генетика сельскохозяйственных животных: сб. науч. тр. ВНИИРГЖ. Л., 1987. -С. 5-17.

175. Acres S.D. Enterotoxigenec Escherichia coli infections in newborn calves / S.D. Acres // J. Dairy Sc. 1985. - Vol. 68, N1. - P. 229 - 256.

176. Akker F. Crystal structure of a new heat-labile enterotoxin, LT 2b / F. Akker et al. // Structure. 1996. - N4. - P. 665 - 678.

177. Ashbaugh S.E. Specific detection of shedding and latency of bovine herpesvirus 1 and 5 using a nested polymerase chain reaction /S.E. Ashbaugh et al. // J. Vet. Diagn. Invest. 1997. - Vol. 9, N4. - P. 387 - 394.

178. Beer M. Diagnostic markers in the prevention of bovine herpesvirus type 1: possibilities and limitations / M. Beer et al. // Berl Munch Tiearztl Wochenschr.-2003.-Bg. 116,N5/6.-S. 183-191.

179. Beisel W.R. Single nutrients and immunity / W.R. Beisel // Amer. J. Nutr. 1982. - Vol. 35, N2. - P. 34 - 38.

180. Blumenstock E. Adhesion of piliated E. coli strains to phagocytes / E. Blumenstock, K. Jann // Infect. Immun. 1982. - Vol. 35, N1. - P. 264 - 269.

181. Boyle K.A. Engagement of the cellular receptor for glycoprotein В of human cytomegalovirus activates the interferon-responsive pathway / K.A.

182. Boyle, R.L. Pietropaolo, T. Compton // Mol. Cell. Biol. 1999. - Vol. 19. - P. 3607-3613.

183. Cerguiglini S. Rass. Clin. Sei. 1974. - Vol. 50. - S. 4 - 5.

184. Contrepois M. Etiologie des colibacolleses chez les bovins / M. Con-trepois, P. Gouet // Ree. Med. veter. 1983. - Vol. 159, N3. - P. 159 - 166.

185. Contrepois M. Septicemic Escherichia coli and experimental infections of calves / M. Contrepois et al. // Vet. Microbiol. 1986. - Vol. 12, N2. -P. 109-118.

186. De Clerq E. Molecular Targets for Antiviral Agents / E. De Clercq // Pharmacology And Experimental Therapeutics. 2001. Vol. 297. - P. 1-10.

187. De Rycke J. Role des souches Escherichia coli non enterotoxino-genes (K99 sup (-), ST sup (-)) DaNS La patnologie -neonatale du ea / J. Rycke // Ann. Rech, veter. 1984. - Vol. 15, №1. - P. 75 - 95.

188. Duguid J.P. Adhesive properties of Enterobacteriaceae / J.P. Duguid, D.C. Old // Receptors and recognition. 1980. - Series P, vol. 6. - P. 185 - 217.

189. Evans M.G. Prevalence of K88, K99, and 987P pili of Escherichia coli in neonatal pigs with enteric colibacillosis / M.G. Evans, G.L. Waxier, J.P. Newman J // Am. J. veter. Res. 1986. - Vol. 47, N11. - P. 2431 - 2434.

190. Freter R. // Amer. J. Clin, nutrition. 1974. - Vol. 24, N12.

191. Gaastra W. Host specific fimbrial adhesions et non-invasive enterotoxigenic E. coli strains / W. Gaastra, de F.R. Graaf // Microbiol. Rev. 1982. -Vol. 46,N2.-P. 129-161.

192. Garabal J.I. Colonization antigens of enterotoxigenic Escherichia coli strains isolated from piglets in Spain / J.I. Garabal et al. // Veter. Microbiol. -1997. Vol. 54, N3/4. - P. 321 - 328.

193. Garabal J.I. Toxigenic E. coli in Spanish piggeries from 1986 to 1991 / J.I. Garabal et al. // Veter. Microbiol. 1995. - Vol. 47, N1/2. - P. 17 - 25.

194. Gariepy S. Importans of disulfide bridges in the structure and activity of Escherichia coli enterotoxin STlb / S. Gariepy, A.K. Judd, G.K. Schoolnik // Proc. Natl. Acad. Sei USA. 1987. - N84. - P. 8907 - 8911.

195. Gilliland S. E. Antagonistic action of Lactobacillus acidophilus towards intestinal and food-borne pathogens in associative culture / S.E. Gilliland // FEMS Microbiol.Rev. 1990. - Vol. 87.

196. Gilliland S.E. Influence of consuming milks containing cells of Lactobacilli acidophilus on lasctose malabsorption in humans / S.E. Gilliland, H.S. Kim // Abstr. Ann. Meet Am. Soc. Microbiol. 1981. -N27. - P. 200.

197. Gilliland S.E. Use of the Minitek system for characterizing lactoba-cilli / S.E. Gilliland, M.L. Speck // Appl. Environ. Microbiol. 1985. - N33. -P. 1289.

198. Gray W.C. Experimental infection of calves and adult cattle with Escherichia coli 0157:H7 / W.C. Gray, H.W. Moon // Appl. and Environ. Microbiol. 1995. - Vol. 61, N4.-P. 1586- 1590.

199. Green B.A. Evidence that a new enterotoxin of E. coli, which activates adenylatecyclase in eucaryotic target cells in not plasmid mediated / B.A. Green et al. // Infect. Immun. 1983. -N41. - P. 383 - 390.

200. Greene H.J. Some recent fidings on the prevention and treatment of neonatal calf diarrhea / H.J. Greene // Irish veter. J. 1984. - Vol. 38, N4. - P. 6870.

201. Haggard D.L. Evaluation of an E. coli Bacterien containing the K 99 antigen for preventing bovine neonatal enteric colibacteriosis / D.L. Haggard, D.W. Yohnson, Y.A. Spuinger // Vet. Med. Stall. Anim. Clin. 1982. - Vol. 77, N9.-P. 1391 -1394.

202. Heidenreich S. Macrophage activation by granulocyte/macrophage colony stimulating factor. Priming for enhanced release of tumor necrosis factor-alpha and prostglndin E2 / S. Heidenreich // J. Immunol. 1989. - Vol. 143. -P. 1198- 1205.

203. Holland R.F. Some infections causes of diarrhea in young form animals / R.F. Holland // Clin. Microbiol. Rev. 1990. - Vol. 3, N4. - P. 345 -375.

204. Kailasapathy K. Survival and therapeutic potential of probiotic organisms with reference to Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium spp / K. Kailasapathy, J. Chin // Immunol. Cell. Biol. 2000. - 78, N1. - P. 80 - 88.

205. Keenan K.P. Morphological evaluation of the effects of Shiga toxin and E. coli Shiga-like toxin on the rabbit intestine / K.P. Keenan et al. // Am. J. Pathol. 1986. - N125. - P. 69 - 80.

206. Kirchiner A. Enteropathogene E. coli ihrepathogenitatsfaktoren und deren Nachweis verfahren / A. Kirchiner // Tierarztl. Umschau. 1981. - Bd. 36, N11. - S. 747-785.

207. Komine Y. Induction of infections diarrhea in newborn calves fed dysplasia colostrum of mother cows suffering from mastitis during dry period / Y. Komine et al. // Anim. Sc. J. 2000. - Vol. 71, N8. - P. 279 - 285.

208. Kumar O.R.M. Escherichia coli infection in different animals. A review / O.R.M. Kumar // Livestock Adviser. 1990. - Vol. 15, N8. - P. 34 - 38.

209. Marks S. E. coli 0157:H7 ranks as the fourth most costly food borne disease / S. Marks, T. Roberts // Food Saf. 1993. - P. 51 - 55.

210. Moxley R.A. Natural and experimental infection with an attacching and effacing strain of Escherichia coli in calves / R.A. Moxley, D.H. Francis // Infect. Immun. 1986. - Vol. 53, N2. - P. 339 - 346.

211. Muriana P.M. Cloning, phenotypic expression, and DNA sequence of the gene for lactacin F, an antimicrobial peptide produced by Lactobacillus spp. / P.M. Muriana, T.R. Klaenhammer // J. Bacterid. 1991. - N173. - P. 1779 -1788.

212. Nataro J.P. Diarrheagenic E. coli / J.P. Nataro, J.B. Kaper // Clinical Microbiology Reviews. 1998.-Nil.-P. 142-201.

213. Oggioni M.R. Bacillus spores for vaccine delivery / M.R. Oggioni et al. // Vaccine. 2003. - Vol. 21, Suppl. 2. - P. 96 - 101.

214. Orskov F. Serotyping of E. coli / F. Orskov, J. Orskov // Methods in Microbiogy (ed Bergan T.). London, 1984. - Vol. 14. - P. 43 - 112.

215. Osek J. Virulence factors and genetic relatedness of Escherichia coli strains isolated from pigs with post-weaning diarrhea / J. Osek // Veter. Microbiol. 2000. - Vol. 71, N3/4. - P. 211 - 222.

216. Otoi T. Outbreak of K99 Escherichia coli infection and serologial survey in calves / T. Otoi et al. // J. Japan Veter. Med. Assn. 1990. - Vol. 43, N3.-P. 193- 196.

217. Ouwehend A.C. Probiotics: an overview of beneficial effects / A.C. Ouwehend, S. Salminen, E. Isolauri // J. Microbiol. 2003. - Vol. 41, N2. - P. 63 - 72.

218. Pai C.H. Experimental infection of infant rabbits with verotoxin-producing E. coli / C.H. Pai, J.K. Kelly, G.L. Meyers // Infect. Immun. 1986. -N51.-P. 16-23.

219. Petkov M. Enteropathogenic character of E. coli strains eliminated from calves / M. Petkov // Vet. Science. 1980. - Vol. 17, N1. - P. 10 - 16.

220. Pivont P. The ever present E. coli problem / P. Pivont // Pigs, 1986. -Vol. 2, N4. P. 30-31.

221. Pohl P. Etude des phenotypes et des facteurs de virulence des Escherichia coli Att 25/ P. Pohl, P. Lintermans, J. Mainil // Ann. Med. veter. 1987. -Vol. 131, N6.-P. 429-439.

222. Roife R. In. R. 1. Mackkie et al. (ed) Gastointesninal, microbiology. Vol. 2. Gastrointestinae microbes and host interaction. Chapman and Hall, New-York, 1996.

223. Said A.M. Factours et marguens de virulence de souche Escherichia coli isoles de diarrhees chez des veaux ages de 4 a 45 jons en Algerie / A.M. Said, M. Contrepois, V.M. Per // Rev. evel. et med. vet. pays, troh. 1994. -Vol. 47, N2.-P. 169- 175.

224. Sears C.L. Enteric bacterial toxins: mechanisms of action and linkage to intestinal secretion / C.L. Sears, J.B. Kaper // Microbiol. Rev. 1996. - N60. -P. 167-215.

225. Senf W. NeueAspekt der Diagnostik und Bekämpfung der Koli-infection des Kalbes / W. Senf// Mh. Vet. Med. 1978. - Bd. 33, N2. - S. 846 -850.

226. Tzipori S. The aetiology and diagnosis of calf diarrhoea / S. Tzipori // Veter. Ree.- 1981.-Vol. 108,N13.-P. 510-514.

227. Vanopdenbosch E. La diarrhee infectieuse des veaux: possibilités thérapeutiques et preventives / E. Vanopdenbosch, P. Pohl // Elevages belges. -1996.-N12.-P. 35-38.

228. Weikel C.S. In vivo and in vitro effects of a novel enterotoxin STb, produced by E. coli / C.S. Weikel, H.N. Nellans, R.L. Guerrant // J. Infect. Dis. 1986.-N153.-P. 893-901.

229. Zeman D.H. Diagnosis, treatment, and management of enteric coli-bacillosis / D.H. Zeman, J.U. Thomson, D.H. Francis // Veter. Med. (Edwards-ville). 1989. - Vol. 84, N8. - P. 794 - 802.