Костномозговое кроветворение и иммунореактивность цыплят в норме и при вакцинации против инфекционного ларинготрахеита на фоне применения витамина С

Старун, Алла Станиславовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Костномозговое кроветворение и иммунореактивность цыплят в норме и при вакцинации против инфекционного ларинготрахеита на фоне применения витамина С
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Костномозговое кроветворение и иммунореактивность цыплят в норме и при вакцинации против инфекционного ларинготрахеита на фоне применения витамина С"

На правах рукописи

Старун Алла Станиславовна

КОСТНОМОЗГОВОЕ КРОВЕТВОРЕНИЕ И ИММУНОРЕАКТИВНОСТЬ ЦЫПЛЯТ В НОРМЕ И ПРИ ВАКЦИНАЦИИ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО ЛАРИНГОТРАХЕИТА НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ ВИТАМИНА С

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Омск-2005

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Омский государственный аграрный университет»

Научный руководитель:

доьпор биологических наук, профессор

Пьянов Владимир Дмитриевич

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук

Харитонова Людмила Григорьевна

доктор биологических наук

Воробьева Тамара Георгиевна

Ведущая организация:

ФГОУ ВПО «Новосибирский государственный аграрный университет».

Защита диссертации состоится «20» мая 2005 г. в Ю00 часов на заседании диссертационного совета КР 220.050.01 при ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет». Адрес: 644122, г. Омск, ул. Октябрьская, 92.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Омского государственного аграрного университета

Автореферат разослан > апреля 2005г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, до!

ОБШЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1. Актуальность исследований

Вопросы физиологии и функционального реагирования системы крови на различные воздействия факторов внешней среды, в том числе стрессоров, на изменения внутренних свойств в организме птицы очень актуальны. Особый интерес представляют исследования кроветворения в период развития иммунных реакций (П.Д. Горизонтов, 1990).

Ряд исследователей (А.Б. Байдевлятов, В.П. Николаенко, Л.А. Ольховик с соавт., 1979; С.И. Плященко, ВТ. Сидоров, 1987; С.Амброзене, Р. Еараказия, К. Шимкус, 1990 и др.) изучали гистоморфологические характеристики надпочечников, селезенки, тимуса птиц при действии стресс-факторов. Актуальным является комплексное изучение костномозгового кроветворения и иммунного ответа птиц при сочетанном действии стрессоров.

Новые технологии в промышленном птицеводстве сильно изменили эпизоотологию многих инфекционных болезней птиц. Слабая изученность имму-нореактивности кур является причиной, тормозящей выработку эффективных методов их профилактики и лечения (А.П. Стрельников, 1993). В 2001 году по данным Л.А. Венгеренко (2003, 2004) в птицеводческих хозяйствах России регистрировался в ряде территорий среди других болезней инфекционный ларин-готрахеит (ИЛТ). Он наносит значительный ущерб промышленному птицеводству (В.Ф. Макогон, А.И. Диденко, 1991). Профилактика болезни складывается из ряда ветеринарно-санитарных мероприятий, в том числе проведения вакцинации птицепо! оловья. Но сама процедура иммунизации нередко приводит к развитию стрессовых состояний у птиц, вызывает снижение их резистентности к другим стресс-факторам, что в свою очередь отрицательно влияет на формирование поствакциналыюго иммунитета и способствует развитию осложнений и гибели птиц (И.А. Болотников, 1983). Для развития полноценного иммунного ответа большое значение имеет возраст вакцинируемой птицы. А. Бочарников с соавт. (2003) оценивали действие различных вакцинных штаммов вируса ИЛТ на организм 25-30 дневных цыплят. И.М. Карпуть. и М.П. Бабина (2000) утверждают, что этот возраст является критическим иммунологическим периодом, в котором чаще регистрируются болезни и гиповитаминозы.

В качестве средств, снижающих патогенное действие вакцинации, используются различные антистрессовые препараты, такие как: яблочный уксус, лимонная кислота, транквилизаторы, растительные биологически-активные вещества, поливитаминные премиксы, аминовитал и др. (А.Б. Байдевлятов, Л.Куценко, 1979; Н.Н.Соса, Г.А. Красильников, 1990; Ю.В.Зуев, Ю.С.Дутко, А.Т. Кушнир, 1995; H.A. Саромов, 2003; В.Н. Хаустов, 2003; 2004). В доступной литературе нет сведений о применении одной аскорбиновой кислоты для коррекции стресса при иммунизации против ИЛТ цыплят 30-дневного возраста.

1.1. Цель исследования. Изучение особенностей костномозгового кроветворения и иммунной реактивности цыплят 30-дневного возраста и использование этих данных для обоснования профилактики и коррекции с помощью ас-

ЙОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ БИБЛИОТЕКА СПегервурс

2МСРК

корбиновой кислоты стресса, вызванного вакцинацией птицы против инфекционного ларинготрахеита.

1.2. Задачи исследования:

1) изучить особенности костномозгового кроветворения у интактных цыплят 30-дневного возраста и при действии вакцинного стресса на основании рассчитанных костномозговых и эритроцитарных индексов;

2) исследовать некоторые показатели иммунореактивности интактных 30-дневных цыплят и при иммунизации их против ИЛТ;

3) изучить влияние витамина С на кроветворение интактных цьшлят и в ходе иммунного ответа их против ИЛТ;

4) исследовать влияние аскорбиновой кислоты на показатели иммунной защиты интактных цыплят и при вакцинном стрессе;

1.3. Научная новизна. Для оценки активности функционирования костномозгового кроветворной ткани и иммунной системы у 30-дневных цыплят впервые использованы рассчитанные костномозговые, эритроцитарные, имму-норегуляторный индексы. Усовершенствован метод определения антигенспе-цифических лимфоцитов к вирусу ИЛТ кур. В работе впервые прослежена динамика иммунокомпетентных клеток, в т.ч. вирусспецифических лимфоцитов, в ходе вакцинации цыплят против ИЛТ. Представлены новые данные о костномозговом кроветворении птиц при действии вакцинного стресса. Показана возможность коррекции аскорбиновой кислотой этого состояния.

1.4. Теоретическая и практическая значимость. Установленные особенности костномозгового кроветворения, некоторых показателей периферической крови и иммунной реакции организма 30-дневных цыплят могут служить методологической основой для оптимизации сроков проведения профилактических мероприятий в птицеводстве. Разработаны диагностические критерии активности кроветворения и степени иммунной защиты цыплят при физиологических и различных патологических состояниях. Они позволяют оценить тяжесть состояния организма, эффективность лечебно-профилактических мероприятий.

1.5. Внедрение результатов исследования. Полученные при исследовании результаты используются в научной, учебной и лабораторной практике при проведении занятий со студентами и слушателями ФПК на кафедре нормальной и патологической физиологии ФГОУ ВПО «ОмГАУ», в учебном процессе и при научных изысканиях на кафедре физиологии и биохимии ФГОУ ВПО «Уральская государственная сельскохозяйственная академия».

1.6. Основные положения, выносимые на защиту.

1. У интактных 30-дневных цыпля I отмечаются признаки незрелости костномозгового кроветворения и иммуносупрессия.

2. Вакцинация против ИЛТ влияет как стрессовое воздействие на костномозговое кроветворение, некоторые показатели периферической крови и имму-нореактивность цыплят.

3. Аскорбиновая кислота нивелирует последствия стресса, вызванного иммунизацией цыплят против ИЛТ.

1.7. Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на II Российском Конгрессе по патофизиологии (2000), на XVII и XVIII

(

съездах физиологов России (Ростов-на-Дону, 1998; Казань, 2001); на научно-производственных конференциях (Чебоксары, 1994; Барнаул, 2003); на юбилейных научных конференциях (ОГМА, 2000; ОмГЛУ, 2000; Казань, 2001); на ежегодных научно-ирактических конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов института ветеринарной медицины ОмГАУ (1996,1998, 2000).

1.8. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 160 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов собственных исследований, выводов, практических предложений, списка литературы. Работа иллюстрирована 18 таблицами, 28 рисунками. Библиографический указатель содержит 153 источника, из них на русском языке 90.

1.9. Публикации. Основные положения диссертации изложены в 9 статьях.

2.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и методы исследования

Данная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ФГОУ ВПО «ОмГАУ» но геме кафедры нормальной и патоло1 и ческой физиологии: «Видовая и возрастная характеристика физиологических функций и нейрогуморальной регуляции висцеральных систем животных и нтиц», номер государственной регистрации 01.2.00103074.

Экспериментально-клинические исследования выполнены на кафедре нормальной и патологической физиологии ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет», на промышленном предприятии «Оша», находящемся на территории Омской области. В период проведения исследований не было зарегистрировано инфекционных и паразитарных заболевший. Объектом исследования служили цыплята породы белый леггорн 30-дневного возраста, находящиеся в цехе выращивания ремонтного молодняка.

Для проведения экспериментальных исследований по принципу аналогов были сформированы две 1руппы по 100 цыплят. Вся птица находилась в одном корпусе при одинаковых условиях кормления и содержания. Кормовой рацион был составлен по нормам ВИП.

Цыплята первой группы были вакцинированы против ИЛТ живой вирус-вакциной из штамма ВНИИБП согласно прилагаемому наставлению путем инсталляции на конъюнктиву. Цыплятам второй группы за 3 дня до вакцинации и 3 дня после в корм дополнительно давали аскорбиновую кислоту из расчета 100мг на 1кг корма.

Подопытные группы цыплят подвергали клиническому наблюдению, биохимическим, гематологическим, иммунологическим, а также электронно-

микроскопическим исследованиям. Общая схема исследования цыплят представлена на рисунке 1.

интактные цыплята

интактные цыплята придаче аскорбиновой кислоты

цыплята, вакцинированные против ИЛТ

цыплята вакцинированные

против ИЛТ на фоне аскорбиновой кислоты

Исследование пунксята костного мозга, расчет индексов* лейкоэрвт* робласгмческого. созревания псевдо-эозииофилов эо-зинофилов, нор-мобласгов

Гематологические показатели количество эрит-рошггов, лейкоцшов, гемоглобин, лейхограмма, расчет эритроцигар-ных, лейкогоггра-ных индексов

сиаловые кислоты

Количественные показатели РОК лимфоцитов Т-лимфоциты, субпопуляции Т-лимфоцктов, В-лимфоциты, вируссrie цифическис клетки, иммунорегуля-торный индекс

Рис. 1. Общая схема исследования цыплят

Для исследований цыплят кровь брали из крыловой вены по следующей схеме: до вакцинации, через сутки, на 5, 7, 14 и 21 день после иммунизации их против инфекционного ларинготрахеита.

Количество лейкоцитов и эритроцитов определяли по общепринятым методикам. Содержание гемоглобина определяли на фотоэлектроколориметре КФК-2 методом, предложенным Г.В. Дервисом и А.И. Воробьевым (1959). По окрашенным по Паппенгейму мазкам выводили лейкограмму. На основании полученных данных вычисляли эритроцитарные индексы: средний объем эритроцита, среднее содержание гемоглобина в эритроците, среднюю концентрацию гемоглобина в эритроцитарной массе (Г.И. Козинец, 1995), величину ядерного сдвига (ИСЯ), индекс сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК) (Н.И. Яблучан-ский с соавт., 1983), лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) (Я.Я. Кальф-Калиф, 1939).

В сыворотке крови определяли сиаловые кислоты - по Гессу (С.К. Васильева, 1981).

Лимфоциты периферической крови выделяли в градиенте плотности фи-колл-урографина с использованием методов И.А. Болотникова (1982) и А. Воут (1968). Субпопуляционную принадлежность Т-лимфоцитов определяли с помощью теофилинового теста. Активность Т-лимфоцитов проявлялась по их способности к розеткообразованию (Е-РОК) по методу М. ДопсЫ! й а1. (1972) и

В-лимфоцитов - методом комплементарного розеткообразования (ЕАС-РОК) N.F. Mendes (1973). Рассчитывали иммунорегуляторный индекс (С.И. Лютин-ский, B.C. Степин, 2001).

Антигенспецифические клетки определяли по методу И.А. Болотникова (1983) в нашей модификации. При этом в отличие от вышеназванного метода эритроциты барана нагружались не вирусом болезни Ньюкасла (вакцины Ла-Сота), а вирусом инфекционного ларинготрахеита (вакцины из штамма ВНИИБП).

О состоянии кроветворения у цыплят судили по сопоставлению миело-грамм. Костномозговой пунктат (КМП) получали из проксимального конца большеберцовой кости, пользуясь методикой В.П. Косых (1970). Полученный КМП в дозе 1 мл помещали на предметное стекло, готовили мазки, которые окрашивали по Палпенгейму. На основании данных миелограмм рассчитывали костномозговые индексы созревания псевдоэозинофилов, эозинофилов, эри-тронормобластов, лейкоэритробластический (Г.И. Козинец, Л.М. Гиюдман, 1992) и индекс, характеризую1ций стресс (G.Bewing et al., 1989).

Обработку результатов экспериментальных исследований проводили методами математической статистики с применением критериев Стьюдента.

2.2.Показатели кроветворения, периферической крови и иммунореак-тивности цыплят 30-дневного возраста

На основании анализа миелограмм (табл. 1) и рассчитанных костномозговых индексов (табл. 2) было установлено, что гемопоэтическая активность мие-лоидного ростка костного мозга цыплят 30-дневного возраста снижена по сравнению с данными В,А. Верхолетова (1965), рассчитанных нами для цыплят 60 суточного возраста (1,83), чю подтверждает индекс созревания псевдоэозинофилов (1,12±0,1), который ниже в 1,63 раза. Значение индекса указывает на преобладание незрелых форм клеток миелоидного ряда (10,56±0,12%) и наличие малого резерва зрелых гетерофилов (5,61±0,15%) в костном мозге.

Таблица 1

Миелограмма цыплят 30-дневного возраста (X±Sd), п=5

Показатель Значение показателя, %

Клетки псевдоэозинного ряда И,92±0,31

Клетки эозинофильного ряда 2,82±0,26

Клетки базофильного ряда 1,9±0,04

Всего гранулоцитов 19,05±0,43

Клетки лимфоидного ряда 39,4±0,57

Клетки моноцитарного ряда 5,56±0,08

Клетки белого ростка кроветворения 66,47±0,86

Клетки эритроидного ряда 31,43±0,9

Клетки тромбоцарного ряда 0,33±0,02

Плазматические клетки 2,47±0,04

Клетки в митозе 2,17±0,04

У исследуемых цыплят зрелых форм псевдоэозинофилов в периферической крови в 2,28 раза больше, чем в костномозговом пунктате и имеются в наличии незрелые формы псевдоэозинофилов. Это снижает резистентность птиц не только в экстремальных условиях, но и при физиологических процессах. При наличии в костномозговом пунктате (КМП) 1,9±0,04% клеток базофильно-го ряда - в кровяном русле их всего 0,9%, что не обеспечивает полноту межклеточных взаимодействий за счет биологически активных веществ этой группы клеток. Индекс созревания эозинофилов (2,85±0,24) выше по сравнению с данными (1,57) В.А. Верхолетова (1965) в 1,82 раза для цыплят 60-дневного возраста.

В лимфоидном ряду усилены процессы размножения властных клеточных элементов (лимфобластов 11,71+0,41%), но несколько заторможен их переход в коммитированные клетки (пролимфоцитов всего 2,36+0,09%). В результате усиленной индукции созревания клеток лимфоидного ряда число зрелых форм в составе костномозгового пунктата цыплят было 25,3+0,83%. Значительное количество лимфоцитов в периферической крови (80,2± 1,04%) дает возможность говорить об усилении лимфопоэза не только в костном мозге, но и в других лимфоидных тканях и органах (тимус, бурса) в организме цыплят этого возраста.

Отношение лимфоидных клеток костного мозга к клеткам псевдоэозино-фильного ряда у 30-дневных цыплят равно 3,33±0,32%. Оно доказывает преобладание лимфопоэза над миелопоэзом, что согласуется с данными И.А. Болотникова и Ю.В. Соловьева (1980).

Клетки моноцитарной группы в КМП составили 5,56±0,15%, а в периферической крови - 0,9±0,42%, что недостаточно для полноценной макрофагаль-ной реакции организма цыплят. Митотически активных клеток (2,17±0,07%) было в 1,36 раза больше по сравнению с данными для 60-дневных цыплят.

Таблица 2

Костномозговые индексы цыплят 30-дневного возраста (Х± ва), в=5

Индекс Значение, ед.

Лейко-эритробластическое соотношение 2,12 ± 0,07

Индекс созревания псевдоэозинофилов 1,12 ±0,05

Индекс созревания эозинофилов 2,85±0,24

Индекс созревания нормобластов 0,41 ±0,01

Индекс созревания базофильных нормобластов 3,63 ±0,13

Индекс созревания полихроматофильных нормобластов 0,54 ± 0,03

При анализе парциальных эритробластограмм у цыплят 30-дневного возраста выявлено снижение процессов дифференцировки эритроцитов, так как количество эритробластов составило 4,03±0,12%. Значение индекса созревания нормобластов низкое - 0,41±0,01. Высокое значение индекса созревания базо-фильных (3,63±0,13), но низкое значение индекса созревания полихромато-

фильных нормобластов (0,54±0,03%) показало ингибированне пролифератив-ной активности и гемоглобинобразовательной функции эритрона у цыплят.

Лейкоэритробластический индекс показывает преобладание клеток белого ростка кроветворения, а именно, клеток лимфоидного ряда.

Все выше перечисленные факты объясняют сохраняющуюся незрелость системы костномозгового кроветворения, её слабую активность у цыплят 30-дневного возраста по сравнению с цыплятами старшего возраста (В.А. Верхо-летов, 1965).

I При анализе некоторых гематологических характеристик интактных цып-

лят 30-дневного возраста выявлено, что количество лейкоцитов, несмотря на низкое содержание предшественников в костном мозге, находится в пределах физиологической нормы для птиц (32,99±0,73 Г/л), но выше, чем определено у И.М Карпугь и М.П. Бабиной.(2000г.) для цыплят 28 дневного возраста, в 1,4 раза. Количество красных клеток в периферической крови низкое (1,97±0,1 х 1012/л). Уровень гемоглобина в единице объема крови достаточно высок (9,63±0,1 ммоль/л). Был рассчитан средний объем эритроцитов (MCV) для цыплят этого возраста, он составляет 122,7±0,67фл (КВ=4,73%), а среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) - 79,2±9,86пг (КВ=6,08%). Средняя концентрация гемоглобина в массе эритроцитов (МСНС) — величина, отражающая насыщение эритроцита гемоглобином и не зависящая от объема клетки, у 30-дневных цыплят равна 64,51±2,17г/л (КВ=1,84%), является чувствительным тестом при нарушениях гемоглобинобразования. Сиаловых кислот в сыворотке крови у цыплят 30-дневного возраста было 50,2±1,49усл. ед.

Показатели среднего объема эритроцитов, среднего содержания гемоглобина в эритроците, средней концентрации гемоглобина в эритроцитах, количество сиаловых кислот в сыворотке крови приняты нами за показатели нормы, так как в доступной литературе таких данных для птиц не обнаружено.

Таблица 3

Лейкоцитарные индексы периферической крови интактных 30-дневны*

цыплят (X±Sd), п=5

Показатель Значение показателя, ед.

Лимфоциты/псевдоэозинофилы 6,09±0,03

Псевдоэозинофилы/лимфоциты 0,17±0,02

ИСЯ 0,12±0,03

ИСЛК 0,19±0,07

ЛИИ 0,24±0,07

При дифференциальной характеристике лейкоцитов выявили значительное преобладание относительного и абсолютного количества лимфоцитов (80,2±0,93% и 26,46*0,48 Г/л соответственно). Определили наличие незрелых

форм псевдоэозинофилов у цыпля: 30-дневного возраста, что характерно для раннего онтогенеза, при общем низком относительном и абсолютном количестве гетерофилов (13,2±0,37% и 4,35±0,15Г/л соответственно). Сниженное относительное и абсолютное количество моноцитов (0,7±0,27% и 0,23±0,09Г/л соответственно) подтверждает дефицит клеточно - опосредованных факторов защиты.

При расчете ИСЯ, ИСЛК, ЛИИ (табл.3) получили достоверные величины, характеризующие незрелость системы крови, сниженную реактивность организма цыплят 30-дневного возраста. Лимфопсевдоэозинофильный коэффициент составил б,09±0,03. Показатель стрессового состояния организма - отношение псевдоэозинофилов к лимфоцитам - низкий (0,17+0,02), ниже в 4,24 раза по сравнению с данными (W.B. Gross., 1983) для взрослых птиц 0,72.

При изучении иммунного статуса 30-дневных цыплят (табл.4) во взаимосвязи с костномозговым кроветворением определили, что при наличии резерва зрелых лимфоцитов в костном мозге и значительного количества их в кровяном русле иммунокомпетентных клеток в периферической крови было недостаточно: Т-лимфоцитов меньше в 2,12 раза, а В-лимфоцитов - в 1,84 раза по сравнению с данными И.А. Болотникова с соавт. (1983) для взрослых кур.

Таблица 4

Иммунограмма 30-дневных цыплягг (X+Sd), п=5

Показатель Значение показателя

% Г/л

Т-лимфоциты 22,3+0,91 5,9+0,23

... Т-хелперы 13,6±1,14 0,8±0,08

Т-супрессоры 12,7±0,76 0,75±0,05

ИРИ 1,07±0,05

В-лимфоциты 16±0,79 4,24±0,24

Вирусспецифичеекие лимфоциты 5,8±1,15 1,53±0,29

Данные таблицы 4 показывают, что среди изученных клеточных факторов иммунитета у 30-дневных цыплят преобладали Т-лимфоциты. Их абсолютное значение было ниже в 1,4раза, чем представлено у И.М. Карпуть и М.П. Бабиной (2000г.) для цыплят 28-дневного возраста.

В наших исследованиях среди субпопуляций Т-лимфоцитов количество хелперов незначительно выше количества супрессоров (на 0,9% или 0,05Г/л), что предполагает сниженную иммунореактивность.

Иммунорегуляторный индекс (ИРИ) показывает, что супрессорная функция лимфоцитов 30-дневных цыплят еще высока, поэтому иммунные свойства ослаблены, что подтверждает мнение И.М. Карпуть, М.П. Бабиной (2000г.) о наличии критического иммунологического периода в онтогенезе цыплят этого возраста.

По результатам исследований относительное количество В-лимфоцитов у интактных цыплят 30-дневного возраста было 16,6±0,79%, абсолютное число

их 4,24±0,24Г'/л, что согласуется с данными И.М. Карпуть и М.П. Бабиной (2000г.).

Обнаружение вирусспецифических клеток в сыворотке крови объясняется возможностью сохранения в организме у цыплят при контакте их с вирусом ИЛТ в окружающей среде.

Таким образом, результаты исследований показали, что у 30-дневных цыплят в период для вакцинации против ИЛТ, еще недостаточно сформировались кроветворение и иммунная система по сравнению с цыплятами старшего возраста, по данным В.А. Верхолетова (1965).

2.3.Динамика костномозговых клеток, некоторых показателей периферической крови и клеток-эффекторов иммунного ответа у цыплят при вакцинации против ИЛТ

Процесс вакцинации оказывает на организм 30-дневных цыплят двухстороннее воздействие. Процедура отлова, фиксации птицы, инсталляции вакцинного штамма вируса ИЛТ на конъюнктиву, с одной стороны, вызывает состояние напряжения всех систем организма, которое должно было согласно закономерностям течения стрессовой реакции закончиться через 24-48 часов после начала действия стрессирующего агента. С другой стороны, вирус, являясь антигеном и стрессором, после поступления в организм пролонгирует течение адаптации. Поэтому после начала действия раздражителя (вакцинации цыплят против ИЛТ) в костном мозге отмечаются фазные изменения гемопоэза. Так, в стадию тревоги, через сутки в КМП достоверно уменьшается число псевдоэо-зинофилов, на 1,37%. Индекс созревания псевдоэозинофилов (меньше на 0,25) показывает снижение активности дифференцировки. Достоверно (р<0,001) увеличивается число всех клеток белого ростка кроветворения на 6,92% (с минимумом на 14 день 60,8±1,52%), но при этом число митотически активных клеток уменьшено в 2,38 раза. Кроме того, уменьшается эффективность процессов созревания эритроидных клеток, особенно на стадии полихроматофилъных нормобластов. Созревание псевдоэозинофилов интенсифицируется (р<0,001) на 5 день, что может характеризовать наступление стадии резистентности стресса. Красный росток кроветворения при этом увеличивает пролиферагивную активность, индекс созревания нормобластов достоверно (р<0,001) выше исходного значения на 0,09. Дифференцировка эритроидных клеток усилена на стадии ба-зофильных и полихроматофильных нормобласюв, причем на стадии базофиль-ных нормобластов снижается к 14 дню и не восстанавливается до исходного значения, вероятно, в связи с ускоренным выходом полихроматофилов в кровеносное русло. Исходный уровень пролиферации костномозговых клеток до конца изучаемого периода не восстанавливается. Таким образом, стадия резистентности реакции адаптации началась к пятому дню изучаемого периода и полного своего развития получила только к 7 дню вакцинации.

При действии вакцинного стресса отмечали следующие изменения картины крови у цыплят. Уровень гемоглобина достоверно (р<0,001) снижается до конца эксперимента, минимальное значение (5,71±0,12 ммоль/л) отмечали че-

рез сутки после введения вакцины против ИЛТ. Количество эритроцитов достоверно увеличивается, хотя средний объем эритроцитов (МСУ) в ходе исследований меняется: через сутки и на 14 день после начала вакцинации снижается (на 14,2 и 20,7фл соответственно), а затем достоверно увеличивается, оставаясь высоким к концу эксперимента. Среднее содержание гемоглобина в эритроците (МСН) достоверно снижается (в 1,5 раза) и не восстанавливается до конца эксперимента. Неэффективный эритропоэз в костномозговой кроветворной ткани и как следствие - эритроцитоз могут служить показателем развивающейся стадии мобилизации стрессовой реакции.

Количество лейкоцитов периферической крови в ходе вакцинации достоверно возрастает до 5 дня исследований в 1,27 раза и составляет 41,75±1,01Г/л, затем - снижается (минимальное значение было на 14 день 23,4±0,82Г/л).

Уровень сиаловых кислот как показатель стресса достоверно увеличивается в ходе иммунного ответа у цыплят до 5 дня исследований (41,26±2,18усл.ед.) в 1,95 раза, к концу эксперимента становится ниже исходного значения, т.е. к 5 дню накапливаются продукты деструкции гликокалекса клеточных мембран эритроцитов и псевдоэозинофилов.

Максимально высокий лейкоцитоз определяли на 5 день эксперимента в фазу активации стадии резистентности стресса. Высокие показатели были получены за счет эозинофилов, моноцитов, а на 7 день - за счет увеличения числа зрелых псевдоэозинофилов. Псевдоэозинофилия в периферической крови на 5 день объясняется освобождением резерва этих клеток в костном мозге и дальнейшей компенсаторной активацией миелопоэза, но только к 14 дню произошло увеличение бластных форм псевдоэозинофилов (активизировался пролифе-ративный пул псевдоэозинофилов).

Относительное и абсолютное количество лимфоцитов периферической крови в ходе эксперимента незначительно меняется, но начиная с 5 дня и по 14 в продуктивной фазе иммунитета и фазу активации стадии резистентности стресса активно происходит дифференцировка лимфоцитов и размножение клонов Т- и В-лимфоцитов, их становится 36,8±4,3% и 26,6±1,17% соответственно, что в 1,65 раза больше исходного количества. Увеличивается и количество субпопуляций Т-лимфоцитов, причем в большей степени Т-хелперов, их стало в 3,44 раза больше по сравнению с исходным значением и составило 46,8±1,7%, а супрессоров 28,8±3,2% - в 2,27раза (р<0,001). Количество вирус-специфических лимфоцитов (35,6±0,75%) возрастает к этому дню в 6,14 раза. Эти данные свидетельствуют о наступлении и развитии продуктивной фазы иммунной реакции. Коэффициент дифференцировки в этот период достаточно высокий и достигает максимума (2,84±0,5) на 14 день после введения вакцины, что в 2,78 раза выше исходного значения (р<0,001).

К концу эксперимента отмечали увеличение количества всех клеток эрит-роидного ряда (39,41 ±0,44), что в 1,25 раза больше относительно исходных данных. Созревание эритроцитов замедляется на этапе базофильных нормобла-стов и усиливается на уровне нолихроматофильных, но незначительно (вероятно в организме недостаточно потенциальных резервов). Эти изменения отражают ослабление гемоглобинобразования, т.е. уровень гемоглобина в единице

объема крови ниже исходного в 1,3 раза, МСН стало меньше в 1,68 раза при увеличении среднего объема эритроцита в 1,22 раза.

В этот период показатели, характеризующие функцию белого ростка костного мозга, отражают угнетение лейкопоэза и усиленное выведение клеток белого ряда в кровоток. Индекс созревания псевдоэозинофилов (0,41±0,03) ниже исходного в 2,73 раза. В периферической крови число лейкоцитов достоверно увеличено. Лимфопсевдоэозинофильный коэффициент(3,56±0,19) досшверно возрос в 1,34 раза, ИСЯ снижен в 2,71 раза. Показатель стресса - отношение псевдоэозинофилов к лимфоцитам (0,12±0,01) достоверно ниже исходных данных на 0,05.

Количественные показатели иммунокомпетентных клеток отражали снижение активности Т-звена лимфоцитов, в основном за счет супрессоров, так как значение ИРИ высокое (2,82±1,6). Количество В-лимфоцитов (15,4±0,75) и ви-русспецифических лимфоцитов (16,7±0,49)остается также на высоком уровне.

Таким образом, по показателям кроветворения, периферической крови и иммунного статуса при вакцинации против ИЛТ 30-дневных цыплят проявляется стадийность развития стресса: до 5 дня испытаний - мобилизации, с5 по 14 день — резистентности, на 14 день - истощения, и до 21 дня постепенное восстановление гомеостаза.

2.4.Динамика показателей кроветворения и иммунитета цыплят на фоне коррекции вакцинального стресса аскорбиновой кислотой.

При изучении влияния витамина С на костномозговое кроветворение получили следующие результаты. По сравнению с миелофаммой цыплят, находящихся без дополнительной витаминной подкормки, у витаминизированных цыплят количество псевдоэозинофилов (6,69±0,46%) на фоне аскорбиновой кислоты стало меньше в 1,78 раза (р<0,001). Но индекс созревания псевдоэозинофилов составил 1,28±0,04, что на 0,16 выше по сравнению с этим показателем у цыплят без аскорбиновой кислоты. В ряду клеток базофильного и эозинофиль-ного ряда отмечалась тенденция к снижению в основном за счет незрелых форм эозинофилов. В целом гранулоцитов (12,29±0,78%) в костном мозге у 30-дневных цыплят на фоне применения аскорбиновой кислоты было достоверно (р<0,001) меньше, чем у цыплят без неё в 1,56 раза. Клеток моноцитарного ряда (1,12±0,14%) насчитывалось меньше в 4,96 раза ((р<0,01). Таким образом, у 30-дневных цыплят на фоне аскорбиновой кислоты снижается костномозговой резерв клеточных факторов естественной защиты (микро- и макрофагов), усилена их миграция в кровяное русло и в очаг воспаления. Несколько выше (на 1,62%) количество клеток лимфоидного ряда, в основном за счет зрелых лимфоцитов^,82±1,4%), которых насчитывали в этой группе цыплят в 1,42 раза больше. Властных клеток (3,94±0,14) в 2,97 раза меньше, чем в костном мозге у цыплят без применения витамина С. Количество плазматических клеток (5,43±0,19%) оказалось достоверно (р<0,01) больше в 2,2 раза. Лимфопсевдоэозинофильный коэффициент (8,21±0,75) в 2,7 раза выше, чем у цыплят без ас-корбага. Митотическая активность клеток (1,09±0,13%) ниже в 1,99 раза. Воз-

можно, аскорбиновая кислота за счет интенсификации метаболических процессов стимулирует дифференцировку и выход гранулоцитов в периферическое русло для выполнения свойственных им функций, активирует рециркуляцию лимфоцитов.

Судя по результатам исследований пунктата костного мозга цыплят на фоне применения аскорбага, в белом ростке кроветворения активированы процессы дифференцировки клеток лимфоидного ряда, пролиферации плазматических клеток, что положительно сказывается на деятельности иммунной системы, как клеточного, гак и гуморального её звена.

Среди клеток эритроидного ряда у цыплят на фоне применения аскорбиновой кислоты отмечается тенденция к снижению количества эритробластов, ба-зофильных нормобластов, но достоверно (р<0,01) больше насчитывалось поли-хроматофильных (в 2,13 раза) и оксифильных нормобластов (в 1,68 раза). Индекс созревания нормобластов (0,62±0,01) выше, чем у цыплят первой группы в 1,5 раза. Причем индекс созревания базофильных нормобластов (3,97±0,07) на 0,34, а полихроматофильных нормобластов (1,37±0,03) в 2,53 раза выше, чем у цыплят первой группы. Аскорбиновая кислота улучшает усвоение железа и усиливает дифференцировку клеток эритрона и гемоглобинообразовательную его функцию. Лейкоэритробластический индекс (1,49±0,03) ниже в 1,4 раза, чем у цыплят без витамина С.

Таким образом, степень гемодепрессии у цыплят 30-дневного возраста на фоне применения аскорбиновой кислоты меньше.

Иммунный статус цыплят при даче витамина С отличался меньшим количеством Т- и В-лимфоцитов (на 4% или 2ГУл и на 2,3% или 1,27Г/л соответственно), Т-хелперов - выше на 5,6%, Т-супрессоров -выше на 6,1% (р<0,01). Аскорбиновая кислота влияет на активизацию хелперного звена.

В периферической крови изменения коснулись в основном уровня гемоглобина (меньше на 3,04ммоль/л), уменьшено количество эритроцитов (на 0,14х1012/л). На фоне аскорбиновой кислоты увеличивается средний объем эритроцитов, но снижены МСН и МСНС (на 20,96пг и 21,2г/л соответственно). Достоверность различий р<0,05.

В динамике вакцинального процесса хорошо заметно, что все изучаемые показатели под влиянием витамина С изменялись следующим образом: высокие

значения незначительно снижались, а низкие - увеличивались. Особое влияние аскорбиновая кислота оказывает на красный росток кроветворения, увеличивая исходное число эрит-роидных клеток (рис. 2 ).

Рис.2 Изменение количества клеток красного ростка кроветворения при вакцинации цышигг против НЛТ

В динамике иммунного ответа отмечается увеличение количества клегок эритрона на 14 день экспери-

мента до 54,36±1,65%, что на 23% больше, чем у цыплят первой группы. В периферической крови максимальное количество эритроцитов ((2,84±0,08)х10п/л) отмечали на 7 день вакцинации. Аналогично изменялся и уровень гемоглобина. МСН в ходе вакцинации снижался до 46,02±1,36пг на 7 день исследований (р<0,01). Индекс МСНС минимальным (27,84±1,17г/л) был через сутки после введения вакцины, в ходе вакцинации имел тенденцию к возрастанию, но оставался низким до конца эксперимента. У цыплят на фоне аскорбиновой кислоты динамика изменений в лейкограмме почти по всем параметрам повторяла лей-кограмму цыплят первой группы. Отличия отмечены только по относительному количеству эозинофилов и базофилов, уровень которых стал максимальным (2,1±1,48% и 3,2±0,81% соответственно на 14 и 7 день изучаемого периода, р<0,01, по сравнению с 1,7±0,51% и 1,8±0,51% соответственно на 5 и 2 день у цыплят первой группы). Вакцинация против ИЛТ на фоне аскорбиновой кислоты проявляется как стресс для организма 30-дневных цыплят, но сила его значительно снижена и не может считаться чрезмерной, вызывающей истощение.

До 24 часа 5дой Утей 14деей 21 лень

вакцинация

Рис.3 Динамика В-лнмфоцнтов при вакцинации цыплят против ИЛТ (абсолютные величины)

Аскорбиновая кислота, оказывая существенное влияние на метаболические процессы, несколько снижает высокие показатели состояния организма и увеличивает низкие, нормализуя гомеостаз, поэтому может служить антисфессо-вым препаратом при иммунизации цыплят.

Аскорбиновая кислота оказывает иммунокорреги-рующее действие, незначительно снижая количество Ти В-лимфоцитов (рис. 3 ), но увеличивает количество Т-супрессоров (рис. 4).

Иммунорегуляторный индекс меняется незначительно. Аскорбиновая кислота снижает у 30-дневных цыплят избыточную реактивность на стрессовые воздействие, в частности, процесса вакцинации.

^ I »

в1группа ИДгруди

24«» 5»

Рицинами количества вврусспецифяческнх лимфоцитов крови цышит при вакцинации против ШЩабсолютяне величины)

3. выводы

1. Миелограмма 30-дневных цыплят показала преобладание в костномозговом пунктате клеток белого ростка кроветворения, в основном лимфоидного ряда. Лейкоэритробластический индекс (2,12±0,07). Среди гранулоцитов преобладающими являются клетки псевдогюзинофильного ряда (11,92±0,31%), индекс созревания псевдоэозинофилов(1,12±0,1) и эозинофилов (2,85±0,24) показывает задержку дифференцировки клеток, малый резерв зрелых форм. Клетки эритроидного ряда (31,43±0,9%) представлены в основном базофильными нор-мобластами (14,64±0,67%). Индекс созревания нормобластов (0,41±0,02) отражает задержку дифференцировки клеток эритрона.

2. Стадия мобилизации стресса в ходе вакцинации 30-дневных цыплят против инфекционного ларинготрахеита характеризуется гемодепрессией миело-идного и эритроидного ростка кроветворения костного мозга. В стадию резистентное™ ( с 5 по 14 день) происходит дальнейшее угнетение миелопоэза, лимфопоэза, но достоверно активизируется дифференцировка и транслокация клеток белого ростка в кровяное русло. Реципрокно усиливается эритропоэз. Стресс ухудшает исходное состояние гипоплазии миелоидного ростка.

3. Гемограмма 30-дневных цыплят показала соответствие количества лейкоцитов физиологической норме, количество эритроцитов (1,97±0,1х10!2/л) достоверно меньше. Средний объем эритроцита (122,7±0,67фл), среднее содержание гемоглобина в эритроците (79,2±9,86пг), средняя концентрация гемоглобина в эритроцитарной массе (64,51±2,17г/л) приняты за физиологическую норму для этого возраста цыплят. Дифференциальная характеристика лейкоцитов и рассчитанные лейкоцитарные индексы показали недостаточность клеточных факторов доиммунной и преобладание лимфоцитопосредованной защиты, наличие гиперхромных эритроцитов.

4. Под влиянием стресса - вакцинации у 30-дневных цыплят против инфекционного ларинготрахеита прослеживается стадийность изменений в периферической крови. До 5 дня изучаемого периода достоверно снижаются кисло-родсвязывающие свойства крови, но увеличивается количество форменных элемен тов, что свидетельствует об окончании мобилизации и о начале стадии резистентности стрессовой реакции с отставанием полноценного эритропоэза. Лсйкограмма показала сдвиг ядра влево (ИСЯ - 0,12±0,09), снижение ИСЛК(0,14±0,01), ЛИИ(0,14±0,05), что свидетельствует о снижении реактивности организма при постепенном усилении факторов клеточной защиты. В фазу активации и компенсации отмечали одинаковую динамику изменений кисло-родпоставляющих факторов: увеличение к 7 дню и в дальнейшем - снижение. Лейкограмма отражает сдвиг ядра вправо, ИСЛК увеличивается, повышается ЛИИ в 2,25 раза, что свидетельствует об усилении реактивности организма, ак-

типизации микро и макрофагоцитоза. К концу эксперимента значения изучаемых показателей соответствуют фазе восстановления стрессовой реакции.

5. Иммунограмма 30-дневных цыплят показала, что большую часть лимфоцитов в периферической крови составляли Т-лимфоциты (22,3±0,76%), в абсолютных величинах - 5,9±0,23Г/л, среди них преобладали хелперы 13,6±1,14% (0,8±0,08Г/л), супрессоров было 12,6±0,76%(0,75±0,05Г/л) При этом ИРИ составил 1,07±0,05. В-лимфоцитов насчитывали 16±0,79%(4,24±0,24Г/л), что свидетельствует о недостаточности иммунной защиты.

6. Индуктивная фаза иммунного ответа при вакцинации цыплят по времени совпадала со стадией мобилизации стрессовой реакции, характеризовалась достоверным снижением количества всех иммунокомпетентных клеток, но активизацией пролиферации вирусспецифических клеток в 1,98 раза (11.5*0,64%), ИРИ стал выше на 16% от нормы, что свидетельствует о нарастании хелперной функции лимфоцитов. Продуктивная фаза иммунного ответа (с 5 по 14 день) по времени проявления совпадала со стадией резистентности стрессовой реакции, сопровождалась снижением супрессорного звена лимфоцитов и высокой иммунной лимфоцитопосредованной активностью организма.

7. Включение в корм аскорбиновой кислоты 30-дневным цыплятам вызывает снижение выраженности реакций доиммунного и иммунного воспаления, коррегирует активность иммунорегуляторных клеток, усиливает вирусспеци-фическую защиту, улучшает кислородсвязывающие свойства крови, в периферической крови уменьшает явную лейкоцитарную реакцию, количество сиало-вых кислот. В костном мозге способствует выходу гранулоцитарных, лимфоид-ных клеток из синусов, в стадию резистентности активизируется эритропоэз, усиливаемся созревание псевдоэозшшофилов, эозинофилов, нормобластов, в основном на стадии базофильных нормобластов. выравнивает ответную реакцию организма цыплят на стресс.

4. Практические предложения

1 .Рассчитанные костномозговые, лейкоцитарные, иммунорегуляторный индексы для цыпля1 30-дневного возраста могут быть использованы для оценки состояния кроветворения, степени нарушения гемопоэза и иммунитета у кур в лабораторной практике и при написании соответствующих разделов учебной, научной литературы.

2.Аскорбиновая кислота может быть использована в птицеводческих хозяйствах для профилактики поствакцинальных осложнений в дозе 100мг на 1 кг корма, так как коррегирует гемодепрессивные состояния, повышает иммунологическую реактивность.

5. Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Старун, A.C. Участие витамина С в становлении иммунитета цыплят / A.C. Старун// Функциональные аспекты соматической патологии. Материалы науч. конф., посвященной 75-летию со дня рожд. проф. В.П. Косых/ Под ред. Проф. В .Т. Долгих - Омск: Изд-во ОГМА, 2000.-С. 61.

2. Старун, A.C. Факторы специфической защиты цыплят в ходе иммунного ответа /A.C. Старун // Функциональные аспекты соматической патологии. Материалы науч. конф., посвященной 75-летию со дня рожд. Проф. В.П. Косых/ Под ред. Проф. В.Т. Долгих.-Омск: Изд-во ОГМА,2000.-С.59.

3. Старун, A.C. Факторы иммунной защиты цыплят /A.C. Старун // Проблемы нейрохуморальной регуляции физиологических функций висцеральных систем. Материалы межрегиональной науч.-практич. конф., посвящ. 100-летию со дня рожд. заслуж. деят. науки РФ, д.б.н., цроф.Д.Я. Криницина (23-24ноября 2000г.)-0мск: ИВМ ОмГАУ,2000. -С.87-88.

4. Старун, A.C. Оценка кроветворения птиц при вакцинации по костномозговым индексам /A.C. Старун, А.Д. Ромащенко, В.Д. Конвай. Л.В. Дюжий // Патофизиология органов и систем, типовые патологические процессы (экспериментальные и клинические аспекты). Тезисы докладов II Российского Конгресса но патофизиологии,- М.,2000.-С. 345.

5. CiapyH, A.C. Необходимость применения С-витаминных добавок в нги-цеводстве /A.C. Старун, Ю.С. Русаков, C.B. Опочанов // XVIII Съезд физиологическою общества имени И.П. Павлова: Тез. докл.- Казань; М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001.- С. 429.

6. Старун, A.C. Влияние повышенных дозировок витаминов Д3 и Е на i-ема-гологические показатели кур-несушек /A.C. Старун, А.Д. Ромащенко, Ю.С. Русаков, C.B. Опочанов // XVIII Съезд физиологического общества имени И.П. Павлова: Тез. докл.- Казань; М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001.- С. 396-397.

7. Старун, A.C. Реакция костного мозга цыплят на вакцинацию /A.C. Старун // Вклад ученых и специалистов в развитие животноводства и ветеринарии. /Материалы науч. конф. профессорско-преподавательского состава и аспирантов ИВМ ОмГАУ (1999-2000г.г.).-Омск, 2000.- С. 96-99.

8. Старун, A.C. Костномозговое кроветворение и динамика иммунных лимфоцитов при вакцинации цыплят против инфекционного ларинготрахеита на фоне применения витамина С /A.C. Старун //Омский научн. вестник. Изд. Ом-ГТУ- 2003г., С.162-165.

9. Старун, A.C. Взаимосвязь факторов иммунитета и кроветворения у птиц нри вакцинации /A.C. Старун, А.Д. Ромащенко // «Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве»/ Юбилейная международная конференция, г. Барнаул, 24-25 апреля 2003 г. С.190-196.

Старун Алла Станиславовна

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Сдано в набор 06.04. 2005. Подписано в печать 07. 04. 2005 Формат 60x84/16. Гарнитура Times New Roman. Усл.печ.л. 1,0. Печать оперативная. Тираж 100 экз. Лицензия ЛТ № 020074

ФГОУ ВПО «Омский государственный аграрный университет»

Отпечатано с оригинал-макета в типографии ООО «Вариант-Омск» 644122, г. Омск, ул. Яковлева, 5. Тел./факс: 25-03-54

РНБ Русский фонд

2005-4 45375

п 2242

О 7 МАЙ 2Qf5 : : t t ? : ✓ •

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Старун, Алла Станиславовна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1.Состояние костномозгового кроветворения, периферической крови и иммунной системы птиц.

1.2.Инфекционный ларинготрахеит и вакцинация против него как способ стимуляции иммунитета и как стрессор.

1.3.Стрессы в птицеводстве, их влияние на кроветворение, иммунную систему и коррекция стресс-реакций. ф Собственные исследования

Глава 2. Материал и методы исследования.

Глава 3.Костномозговое кроветворение, некоторые показатели периферической крови и иммунной системы у цыплят.

3.1.Особенности костномозгового кроветворения цыплят 30-дневного возраста.

3.2.Гемограмма и дифференциальная характеристика лейкоцитов цыплят 30-дневного возраста.

3.3.Иммунограмма 30-дневных цыплят.

Глава 4.Гемопоэз, изменение показателей периферической крови и иммунореактивности у цыплят при действии вакцинного стресса.

4.1 .Костномозговое кроветворение у цыплят при действии стресса-вакцинации против инфекционного ларинготрахеита.

4.2.Динамика показателей периферической крови под действием стресса-вакцинации у цыплят 30-дневного возраста.

4.3.Изменения в лейкограмме цыплят под действием стресса-вакцинации их против инфекционного ларинготрахеита.

4.4.Иммуннореактивность цыплят при вакцинации против инфекционного ларинготрахеита.

Глава 5.Коррекция стресса, вызванного вакцинацией цыплят против инфекционного ларинготрахеита, аскорбиновой кислотой.

5.1.Костномозговое кроветворение при вакцинации цыплят против инфекционного ларинготрахеита при применении аскорбиновой кислоты

5.2.Мониторинг некоторых показателей периферической крови при иммунизации цыплят против инфекционного ларинготрахеита на фоне применения аскорбиновой кислоты.

5.3.Изменение некоторых факторов иммунитета цыплят в ходе вакцинации их против инфекционного ларинготрахеита на фоне коррекции стресса аскорбиновой кислотой.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Костномозговое кроветворение и иммунореактивность цыплят в норме и при вакцинации против инфекционного ларинготрахеита на фоне применения витамина С"

Актуальность темы. Гематологические данные являются существенными элементами характеристики клинико-физиологического статуса организма (Г.И. Козинец, В.А. Макарова, 1998). Вопросы физиологии и функционального реагирования системы крови на различные воздействия факторов внешней среды, в том числе стрессоров, на изменения внутренних свойств в организме птицы очень актуальны. Особый интерес представляют исследования системы крови в период развития иммунных реакций (П.Д. Горизонтов, 1990).

0 Слабая изученность иммунореактивности кур является причиной, тормозящей выработку эффективных методов профилактики, лечения многих инфекционных болезней (А.П. Стрельников, 1993). По данным J1.A. Венге-ренко (2003) в птицеводческих хозяйствах России регистрируется в ряде территорий среди других болезней инфекционный ларинготрахеит (ИЛТ). Он наносит значительный ущерб промышленному птицеводству (В.Ф. Макогон, А.И. Диденко, 1991) тем, что на фоне иммунодепрессирующего действия вируса снижается резистентность птицы к другим патогенным факторам. Профилактика болезни складывается из ряда ветеринарно-санитарных мероприя-• тий, в том числе проведения вакцинации птицепоголовья. Сама процедура иммунизации нередко приводит к развитию стрессовых состояний у птиц, отрицательно влияет на формирование поствакцинального иммунитета и способствует развитию осложнений и гибели птиц (И.А. Болотников, 1983). Ряд исследователей (А.Б. Байдевлятов, В.П. Николаенко, JI.A. Ольховик с со-авт., 1979; С.И. Плященко, В.Т. Сидоров, 1987; С.Амброзене, Р. Еараказия, К. Шимкус, 1990 и др.) изучали гистоморфологические характеристики надпочечников, селезенки, тимуса птиц при действии стресс-факторов. Актуальным является комплексное изучение кроветворения и иммунного ответа птиц ^ при сочетанном действии стрессоров.

Для развития полноценного иммунного ответа большое значение имеет возраст вакцинируемой птицы. А. Бочарников с соавт. (2003) оценивали действие на организм 25-30-дневных цыплят действие различных вакцинных штаммов вируса ИЛТ, хотя И.М. Карпуть и М.П. Бабина (2000) утверждают, что этот возраст является критическим иммунологическим периодом, в котором чаще регистрируются болезни и гиповитаминозы. По данным Дитера (1971) с третьей по седьмую недели жизни снижается содержание витамина С в лимфоидных органах цыплят. И.А. Болотников с соавт. (1983) результатами своих исследований подтверждали, что наиболее сильное действие тепловой стресс оказал на цыплят в возрасте 30-дней. Поэтому изучение состояния костномозгового кроветворения и иммунных свойств цыплят в возрасте 30 дней является актуальным.

A, Е и С (А.Б. Байдевлятов, JL Куценко, 1979; H.H. Coca, Г.А. Красильников, 1990; Ю.В. Зуев, Ю.С. Дутко, А.Т. Кушнир, 1995; H.A. Саромов, 2003;

B.Н. Хаустов, 2003). В доступной литературе крайне мало сведений о применении одной аскорбиновой кислоты для коррекции стресса, вызванного иммунизацией против ИЛТ цыплят 30-дневного возраста.

Цель исследования. Изучение особенностей костномозгового кроветворения и иммунной реактивности цыплят 30-дневного возраста для обоснования профилактики и коррекции с помощью аскорбиновой кислоты стресса, вызванного вакцинацией птицы против инфекционного ларинготра-хеита.

Задачи исследования:

1) изучить особенности костномозгового кроветворения интактных цыплят 30-дневного возраста и при действии вакцинного стресса;

2) исследовать иммунный статус интактных 30-дневных цыплят и при иммунизации против ИЛТ;

3) изучить влияние витамина С на кроветворение интактных 30-дневных цыплят и в ходе иммунного ответа их против ИЛТ;

4) исследовать воздействие аскорбиновой кислоты на показатели иммунной защиты интактных цыплят и при вакцинном стрессе.

Научная новизна. Для оценки активности и особенностей функционирования костномозговой кроветворной ткани и иммунного статуса у 30-дневных цыплят впервые использованы рассчитанные костномозговые, эрит-роцитарные, лейкоцитарные и иммунорегуляторный индексы. Усовершенствован метод определения антигенспецифических лимфоцитов к вирусу ИЛТ кур. В работе впервые прослежена динамика иммунокомпетентных клеток в ходе вакцинации цыплят против ИЛТ. Представлены новые данные о костномозговом кроветворении птиц при действии вакцинного стресса. Показана возможность коррекции аскорбиновой кислотой этого состояния.

Теоретическое значение и практическая значимость работы. Полученные результаты раскрывают ряд закономерностей проявления гемо- и иммунодепрессивных состояний цыплят 30-дневного возраста в зависимости от стадий развития стрессовой реакции при вакцинации их против инфекционного ларинготрахеита. Особенностью костномозгового кроветворения цыплят в возрасте 30 дней является гипоплазия миелоидного и изменение лим-фоидного и эритроидного ростков гемопоэза. Такие сдвиги меняют количественный и качественный состав циркулирующей крови, что во многом обеспечивает снижение как специфической, так и неспецифической резистентности. На фоне гемодепрессии изменяется иммунный статус цыплят изучаемого возраста и чувствительность их к действию стрессоров. Установленные особенности костномозгового кроветворения, некоторых показателей периферической крови и иммунной реакции организма 30-дневных цыплят могут служить методологической основой для оптимизации сроков проведения профилактических мероприятий в птицеводстве. Разработаны диагностические критерии активности кроветворения и степени иммунной защиты цыплят при физиологических и различных патологических состояниях. Они позволяют оценить тяжесть состояния организма, эффективность лечебно-профилактических мероприятий и прогнозировать исход.

Внедрение результатов исследования. Полученные данные используются в научной, учебной и лабораторной практике при проведении занятий со студентами и слушателями ФПК на кафедре нормальной и патологической физиологии ФГОУ ВПО «ОмГАУ», в учебном процессе и при научных исследованиях на кафедре физиологии и биохимии ФГОУ ВПО «Уральская государственная сельскохозяйственная академия».

Основные положения, выносимые на защиту.

1. У интактных 30-дневных цыплят отмечаются признаки незрелости костномозгового кроветворения и иммуносупрессия.

2. Вакцинация против ИЛТ влияет как стрессовое воздействие на костномозговое кроветворение и иммунореактивность цыплят.

3. Витамин С нивелирует последствия стресса, вызванного иммунизацией цыплят против ИЛТ.

Апробация работы и публикация научных исследований. Материалы диссертации доложены и обсуждены на II Российском Конгрессе по патофизиологии (Москва, 2000); на XVII и XVIII съездах физиологов России (Ростов-на-Дону, 1998; Казань, 2001); на научно-производственных конференциях (Чебоксары, 1994; Барнаул, 2003); на юбилейных научных конференциях (ОГМА, 2000; ОмГАУ, 2000); на ежегодных научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов института ветеринарной медицины ФГОУ ВПО «ОмГАУ» (1996, 1998, 2000); Основные положения диссертации изложены в 9 опубликованных статьях.

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Старун, Алла Станиславовна

ВЫВОДЫ

1 .Миелограмма 30-дневных цыплят показала преобладание в костномозговом пунктате клеток белого ростка кроветворения, в основном лимфоидно-го ряда. Лейкоэритробластический индекс (2,12±0,07). Среди гранулоцитов преобладающими были клетки псевдоэозинофильного ряда (11,92±0,31%), индекс созревания псевдоэозинофилов (1,12±0,1) и эозинофилов (2,85±0,24) показывают задержку дифференцировки клеток, малый резерв зрелых форм. Клетки эритроидного ряда (31,43±0,9%) представлены в основном базофиль-ными нормобластами (14,64±0,67%). Индекс созревания нормобластов (0,41±0,02)отражает задержку дифференцировки клеток эритрона.

2.Стадия мобилизации стресса в ходе вакцинации 30-дневных цыплят против ИЛТ характеризуется гемодепрессией миелоидного и эритроидного ростка кроветворения костного мозга. В стадию резистентности (с 5 по 14 днеь) происходит дальнейшее угнетение миелопоэза, лимфопоэза, но достоверно активизируется дифференцировка и транслокация клеток белого ростка в кровяное русло. Реципрокно усиливается эритропоэз. Стресс ухудшает исходное состояние гипоплазии миелоидного ростка.

3.Гемограмма 30-дневных цыплят показала соответствие количества лей1 коцитов физиологической норме, количество эритроцитов ((1,97±0,1)х10 /л) достоверно меньше. Средний объем эритроцита (122,7±0,67 фл), среднее содержание гемоглобина в эритроците (79,2±9,86 пг), средняя концентрация гемоглобина в эритроцитарной массе (64,51±2,17 г/л)приняты за физиологическую норму для этого возраста цыплят. Дифференциальная характеристика лейкоцитов и рассчитанные лейкоцитарные индексы показали недостаточность клеточных факторов доиммунной и преобладание лимфоцитопосредо-ванной защиты, наличие гиперхромных эритроцитов.

4.Под влиянием стресса - вакцинации у 30-дневных цыплят против инфекционного ларинготрахеита прослеживается стадийность изменений в периферической крови. До 5 дня изучаемого периода достоверно снижаются кислородсвязывающие свойства крови, но увеличивается количество форменных элементов, что свидетельствует об окончании мобилизации и о начале стадии резистентности течения стрессовой реакции с отставанием полноценного эритропоэза. Лейкограмма показала сдвиг ядра влево (ИСЯ — 0,12±0,09), снижение ИСЛК (0,14±0,01), ЛИИ, что свидетельствует о снижении реактивности организма, при постепенном усилении факторов клеточной защиты. В фазу активации и компенсации отмечали одинаковую динамику изменений кислородпоставляющих факторов: увеличение к 7 дню и в дальнейшем - снижение. Лейкограмма отражает сдвиг ядра вправо, ИСЛК увеличивается, повышается ЛИИ в 2,25 раза, что свидетельствует об усилении реактивности организма, активизации микро- и макрофагоцитоза. К концу эксперимента значения изучаемых показателей соответствуют фазе восстановления стрессовой реакции.

5.Иммунограмма 30-дневных цыплят показала, что большую часть лимфоцитов в периферической крови составляли Т-лимфоциты (22,3±0,76%), в абсолютных величинах - (5,9±0,23)х109/л, среди них преобладали хелперы (13,6±1,14%, (0,8±0,08)хЮ9/л), супрессоров было 12,6±0,76% ((0,75±0,05)хЮ9/л). При этом ИРИ составил 1,07±0,05. В-лимфоцитов насчитывали 16±0,79% ((4,24±0,24)хЮ9/л), что свидетельствует о недостаточности иммунной защиты.

6.Индуктивная фаза иммунного ответа при вакцинации цыплят по времени совпадала со стадией мобилизации стрессовой реакции, характеризовалась достоверным снижением количества всех иммунокомпетентных клеток, но активизацией пролиферации вирусспецифических клеток в 1,98 раза (11,5±0,64%), ИРИ стал выше на 16% от нормы, что свидетельствует нарастании хелперной функции лимфоцитов. Продуктивная фаза иммунного ответа (с 5 по 14 день) по времени проявления совпадала со стадией резистентности стрессовой реакции, сопровождалась снижением супрессорного звена лимфоцитов и высокой иммунной лимфоцитопосредованной активностью организма.

7. Включение в корм аскорбиновой кислоты 30-дневным цыплятам вызывает снижение выраженности реакций доиммунного и иммунного воспаления, коррегирует активность иммунорегуляторных клеток, усиливает вирус-специфическую защиту, улучшает кислородсвязывающие свойства крови, в периферической крови уменьшает явную лейкоцитарную реакцию, количество сиаловых кислот. В костном мозге способствует выходу гранулоцитарных, лимфоидных клеток из синусов, в стадию резистентности активизируется эритропоэз, усиливается созревание псевдоэозинофилов, эозинофилов, нор-мобластов, в основном на стадии базофильных нормобластов, выравнивает ответную реакцию организма цыплят на стресс.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1 .Рассчитанные костномозговые, лейкоцитарные, иммунорегуляторный индексы для цыплят 30-дневного возраста могут быть использованы для оценки состояния кроветворения, степени нарушения гемопоэза и иммунитета у кур в лабораторной практике и при написании соответствующих разделов учебной, научной литературы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Исследования, проведенные на предприятии «Оша» Омской области, имеющим птицефабрику с большим поголовьем птицы, показали, что ветеринарные лечебно-профилактические мероприятия, проводимые на птицепо-головье с целью предупредить развитие инфекционных болезней, приводят к значительному экономическому ущербу, связанному с появлением поствакцинальных осложнений и падежу птицы. Сложность эпизоотической ситуации в птицеводстве состоит в том, что среди чаще встречающихся инфекционных болезней инфекционный ларинготрахеит приводит к увеличению отхода птиц и существует высокая потенциальная опасность его распространения. Поэтому вопросы профилактики заразных заболеваний приобретают наиважнейшее значение. Инфекционный ларинготрахеит - энзоотически протекающая контагиозная болезнь. Вследствие длительного носительства переболевшей птицей возбудителя болезни в хозяйствах с конвейерным типом выращивания молодняка становится стационарным и требует проведения перманентной поголовной вакцинации (В.М. Апатенко, 1992). Вызывается ДНК-содержащим эпителиотропным вирусом, который, размножаясь в культуре макрофагов, вызывает её дегенеративное разрушение и лизис клеток уже к концу первых суток культивирования (фон Бюлов и Клазен,1983). Для профилактики используют вакцины из штаммов ВНИИБП, ЦНИИПП, клона «НТ», «О». В.И. Макаров и Д.И. Козлова считают, что вакцины требуют усовершенствования. В.Ф. Макогон, А.И. Диденко (1991), А. Бочарников с соавт.(2003) считают, что наиболее реактогенным является штамм ВНИ

ИБП, выраженную реакцию цыплят регистрировали при окулярном введении вируса.

Рафаэль Дж. Фернандес, Доминик Фурнье (2004), C.B. Мезенцев, Н.Г. Телегин (2004), Р. Коровин, Б. Трефилов (2004), рассматривая концептуальные основы вакцинопрофилактики цыплят, рекомендовали учитывать при проведении мероприятий ряд условий, в т.ч. эпизоотическую обстановку, особенности возбудителя, устойчивость организма самой птицы, состояние её иммунобиологической системы. Отмечено, что вирус относится к биологическим иммунодепрессантам. JL Венгеренко (2003) предложил программу вакцинации ремонтного молодняка, где учтены и возрастные особенности птицы, рекомендовано вакцинировать цыплят в возрасте 25-45-105 дней оку-лярно. C.B. Мезенцев (2004) указывал, что при вакцинации очень важен возраст птицы. Г.А. Трошева и Н.Р. Есакова считают, что необходимо строго учитывать возраст птицы, так как полученный эффект может противоречить физиологическому тренду активности факторов защиты. Н.В. Донкова (2004) указывала на развитие анемии и лейкопении у цыплят 20-30-дневного возраста. Следует иметь в виду, что, как и другие ветеринарные и технологические мероприятия, вакцинация является еще и стрессором, вызывающим изменения в организме цыплят, в том числе в системе иммунитета и кроветворении. A.B. Куликова и A.B. Хохлова (2001) доказали, что технологические и инфекционные стресс-факторы вызывают оксидативный стресс, результат действия которого сказывается на состоянии здоровья цыплят 25-28 дневного возраста. Среди всех домашних животных наиболее чувствительна к стрессовым воздействиям сельскохозяйственная птица. И.А. Болотников с соавт. (1987) показали, что вакцинация птицы является стрессором, вызывающим изменения иммунного ответа, выраженные в снижении титра соответствующих антител и создании иммунитета меньшей напряженности. Несмотря на значительное количество работ, посвященных стрессу, в доступных литературных источниках имеются далеко не полные фрагментарные сведения о состоянии цыплят 30-дневного возраста при действии вакцинального стресса.

На основании выше изложенного было изучено костномозговое кроветворение у цыплят породы белый леггорн 30-дневного возраста, их иммунный статус и изменения, возникающие в этих системах при действии стресса - вакцинации против ИЛТ. Одновременно изучали влияние аскорбиновой кислоты на организм цыплят в плане коррекции ею стрессового состояния птицы, вызванного иммунизацией против ИЛТ.

При анализе миелограмм цыплят 30-дневного возраста выявлено, что в костномозговом пунктате преобладают клетки белого ростка кроветворения, что подтверждает рассчитанный нами лейкоэритробластический индекс, (2,12±0,07). Преимущество составляют клетки лимфоидного ряда (39,4±1,03%). Среди гранулоцитов преобладающими были клетки псевдоэо-зинофильного ряда, причем на долю зрелых приходилось 5,61±0,15%. Индекс созревания псевдоэозинофилов (1,12±0,1) показывает снижение активности дифференцировки этих клеток. Клеток эозинофильного ряда насчитывалось 2,82±0,24%, индекс созревания (2,85±0,24) также характеризует ингибирова-ние дифференцировки. В костном мозге сосредоточен значительный резерв зрелых лимфоцитов (25,3±0,83%), их в 1,97 раза больше, чем созревающих, что говорит об активности этого пула кроветворных клеток. У 30-дневных цыплят накоплен значительный резерв клеток моноцитарной группы (5,56±0,15%), плазматических клеток (2,47±0,08%), незначительное количество клеток тромбобластического ряда. Из клеток красного ростка кроветворения (31,43±1,63%) преобладающими были базофильные нормобласты (14,64±0,67%). Рассчитанный нами индекс созревания нормобластов составил 0,41±0,02, причем наиболее активной дифференцировка была на стадии превращения базофильных нормобластов, что видно из рассчитанный соотношений: индекс созревания базофильных нормобластов 3,64±0,24, а индекс созревания полихроматофильных нормобластов 0,53±0,03. Низкое количество полихроматофильных и оксифильных нормобластов можно объяснить ускоренным перемещением их в периферическую кровь, так как в ней у цыплят раннего онтогенеза могут быть незрелые формы эритроцитов. Как отмечает

И.А. Болотников и Ю.В. Соловьев (1980), некоторые молодые стадии эрит-робластов в условиях нормального кроветворения могут проникать в периферическую кровь и там проходить все последующие стадии дальнейшего созревания и развития. Интраваскулярное образование клеток красного ряда свидетельствует, что во взрослом организме птиц продолжают сохраняться черты кроветворения эмбрионального типа. Полученные данные отличаются от сведений В.А. Верхолетова (1965), который представил миелограммы цыплят 1-60 суточного возраста. В нашем эксперименте по сравнению с этими сведениями у 30-дневных цыплят активность миелоидного и красного ростка кроветворения заторможена. Количество бластных форм в 2,5 раза больше, увеличена митотическая активность, усилен моноцитарный и лимфоидный клеточный ряд.

На фоне угнетенного гемопоэза цыплятам 30-дневного возраста с профилактической целью вводили путем инсталляции на конъюнктиву живую вирус-вакцину против ИЛТ. Исследованием последствий вакцинопрофилак-тики на организм птицы занимались П.Ю. Котляр (1995), В.М. Митюшников (1985), В.Ф. Макогон, А.И. Диденко (1991), С.П. Фисенко (1989), С.П. Щен-ников(1959), В.В. Шорников с соавт. (1992), В.В. Малушко с соавт. (1992), А.Б. Байдевлятов, В.Т. Николаенко (1977, 1983), В.В. Рудаков, E.H. Абрамова, Т.Н. Ракова, Н.Г. Жмуров (1993), М.С. Жаков, И.М. Луппова (1993), A.C. Толокнов с соавт. (1993) и др., определяли массу органов, ответственных за иммунитет, факторы неспецифической резистентности, титры специфических антител, реакцию периферической крови. Вакцинация 30-дневных цыплят против ИЛТ вызывает развитие стрессовой реакции, протекающей стадийно. Стадия мобилизации длится до пятого дня исследований и проявляется увеличением количества миелобластов в 2,5 раза, снижением количества клеток псевдоэозинофильного ряда, хотя адреналин, регулирующий обмен веществ в этот период, вызывает нейтрофилию (Д.А. Шмаров, Б.В. Крехнов, 1992), но на фоне гипоплазии миелоидного ростка мало вероятна усиленная индукция образования новых псевдоэозинофилов. Индекс созревания этих клеток стал ниже исходного на 0,18, что согласуется с данными П.Д. Гори-зонтова с соавт. (1983). Отмечается увеличение числа клеток эозинофильного ряда в 1,33 раза (3,75±0,21%), но индекс созревания эозинофилов снижается на 0,07 (2,68±0,24), что свидетельствует о задержке дифференцировки этих клеток. В источниках литературы указано возвращение к исходному количеству к 24 часам после воздействия стресса количества клеток эозинофильного ряда после кратковременного снижения под действием адреналина (А.Я. Аврутина, 1976). Увеличивалось число клеток базофильного ряда в 1,35 раза, лимфоидного ряда - в 1,23 раза (48,47±1,07%), хотя П.Д. Горизонтов с соавт.(1983) указывали, что у млекопитающих животных число лимфоцитов в костном мозге к 24 часам достигало уровня нормы, даже нижней её границы. У птиц среди клеток лимфоидного ряда в большей степени увеличилось число зрелых лимфоцитов, что согласуется с данными М.Г. Пшенниковой (2001) о «лимфоидном пике», который после 24 часов возвращался к норме. У цыплят же сохранялось увеличенное количество до пятого дня испытаний, затем постепенно снижалось.

Количество клеток моноцитарного ряда в стадию мобилизации достоверно уменьшилось в 1,98 раза, хотя Д.Г. Натан и К.А. Зифф (1994) указывают на стимуляцию адреналином пролиферации моноцитов, но малые дозы не препятствуют выходу их в кровь.

Эритроидных клеток стало меньше на 4,78% (26,65±1,33%), причем индекс созревания нормобластов увеличился в 1,22 раза, выше стал индекс созревания полихроматофильных нормобластов в 2 раза. Однако в литературе указывается, что в ранние сроки после начала действия стресса уровень эритроидных клеток оставался постоянным, а при действии продигиозана наблюдалось резкое уменьшение числа эритроидных клеток вследствие изменения дифференцировки под влиянием антигена в гранулоцитарном направлении (Зимин, 1983). Лейкоэритробластический индекс увеличивается в 1,3 раза, что не согласуется с мнением И.А. Волчегорского с соавт. (1993), которые указывают, что у крыс при стрессе снижается лейкоэритроидное соотношение в 1,6 раза. Эти проявления, характерные для стадии тревоги общего адаптационного синдрома, во многом обусловлены выбросом катехоламинов и кортикостероидов (Ф.З. Меерсон, М.Г. Пшенникова, 1984).

Митотическая активность костного мозга у вакцинированных цыплят снизилась в 2,38 раза, что свидетельствует о гемодепрессии миелоидного и эритроидного ростка кроветворения. По данным литературы (П.Д. Горизонтов соавт., 1983) митотический индекс увеличивается уже через сутки.

Значительное увеличение количества клеток лимфоидного ряда, снижение количества псевдоэозинофилов можно объяснить миграцией и перераспределением этих клеток. Эти изменения относят к числу реакций, зависимых от гормонов надпочечников. Р.В. Петров с соавт. (1978) показали, что гормоны коры надпочечников регулируют выход стволовых гемопоэтиче-ских клеток из костного мозга. Повышение активности коры надпочечников сопровождается увеличением содержания кортикостероидов, которое приводит к ингибированию миграции стволовых кроветворных клеток из костного мозга, что и наблюдается при стрессе (И.А. Болотников с соавт., 1983).

Количество клеток эозинофильного ряда достоверно уменьшается до исходного уровня, так как кортикоиды снижают пролиферацию эозинофилов, но активизируется их дифференцировка. Индекс созревания снижается в 1,9 раза (1,49±0,22). Уменьшается количество клеток базофильного ряда - в 1,88 раза (1,04±0,06), моноцитарного ряда - в 2,2 раза (2,53±0,04), лимфоидного ряда увеличивается на 2,49% (41,89±0,44%). Отчетливо видна картина продолжающейся гемодепрессии миелоидного ростка, что не согласуется с данными литературы о гиперплазии кроветворной ткани в стадию резистентности (М.Г. Пшенникова, 2001). Но реципрокно активизируется эритоидный росток. Количество клеток эритроидного ряда достоверно увеличивается до 40,61 ±0,95% - в 1,29 раза, индекс созревания нормобластов увеличивается в 1,24 раза, в основном на стадии базофильных нормобластов (индекс равен 10±0,88). Лейкоэритробластический индекс снижается в 1,4 раза (1,5±0,1).

С 14 дня и до конца изучаемого периода отмечали изменения пограничного характера: количество стволовых бластных клеток достоверно возросло в 3,67 раза. Но уровень клеток псевдоэозинофильного ряда остался ниже исходного на 2,3% (9,62±0,28%). Снижен индекс созревания псевдоэозинофи-лов в 2,73 раза за счет увеличения количества зрелых форм. Отмечается усиление эозинопоэза, индекс созревания эозинофилов составляет 77,9% от исходного значения (2,22±0,27). Незначительно снижается лимфопоэз (36,66±1,32) - 93% от исходного значения. Активируется эритропоэз на 25,4% от фонового уровня. Индекс созревания нормобластов увеличен на 0,17 (0,58±0,02) за счет усиления дифференцировки полихроматофильных нормобластов (индекс больше исходного в 3,08 раза). Но митотическая активность все ещё ниже в 1,66 раза. Лейкоэритробластический индекс (1,46±0,03) ниже фонового в 1,45 раза.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что в ходе вакцинации 30-дневных цыплят против ИЛТ усиливается торможение функции белого ростка кроветворения, но сохраняется активация эритрона. Индуцированы процессы дифференцировки как миелоидного, так и эритроидного ряда клеток. Отмечается нарушение гемопоэза (A.A. Ибрагимов, 1978).

При анализе некоторых показателей периферической крови 30-дневных цыплят выявлено соответствие физиологической норме количества лейкоцитов. Уровень гемоглобина был на верхней границе нормы, но количество эритроцитов (1,97±0,1)х 1012/л достоверно меньше. Эритроцитарные индексы, рассчитаные нами, характеризуют кислородсвязывающие свойства крови (Ф.Дж. Шиффман, 2000). Средний объем эритроцита составил 122,7±0,67 фл, среднее содержание гемоглобина в эритроците — 79,2±9,86 пг, а средняя концентрация гемоглобина в эритроцитарной массе - 64,51 ±2,17 г/л. Определяли содержание сиаловых кислот (50,2±1,49 усл.ед.).

Дифференциальная характеристика лейкоцитов показала преобладание относительного и абсолютного количества лимфоцитов. Псевдоэозинофилов было заметно меньше (13,2±0,97%; (4,35±0,15)хЮ9/л). Среди них были и незрелые формы. Количество эозинофилов преобладало над количеством базо-филов. На долю моноцитов приходилось всего 0,7±0,27%, в абсолютных величинах - (0,3±0,14)х109/л. Лимфопсевдоэозинофильный коэффициент составил 6,09±0,03, показатель стресса — отношение гетерофилов к лимфоцитам - 0,17±0,02, при 0,72 - резистентность повышается (Gross W.B.,1983). ИСЯ -0,12±0,03, ИСЛК - 0,19±0,07, ЛИИ - 0,24±0,02, что показывает недостаточность клеточных факторов доиммунной и преобладание лимфоцитопосредо-ванной защиты, наличие гиперхромных эритроцитов.

Под влиянием стресса — вакцинации против ИЛТ у 30-дневных цыплят прослеживалась стадийность изменений в периферической крови. До пятого дня изучаемого периода в фазу активации стрессовой реакции достоверно увеличивается количество клеточных компонентов крови, но обеспеченность гемоглобином уменьшенных в объеме эритроцитов снижается, так как в результате усиленного под влиянием антигена эритропоэза образуются микроэритроциты, снижается гемоглобинобразовательная функция костного мозга. Нарастают процессы деструкции клеточных мембран эритроцитов, что влечет за собой увеличение количества сиаловых кислот в 1,43 раза, что свидетельствует о развитии неэффективного эритропоэза в ходе стадии мобилизации стрессовой реакции. На повышенное содержание нейраминовой кислоты в сыворотке крови крыс при стрессе указывает Л.М. Тарасенко (2000).

Лейкограмма показала сдвиг ядра влево, снижение ИСЛК, ЛИИ, что свидетельствует о снижении реактивности организма. На фоне исходной гипоплазии миелоидного ростка костного мозга под влиянием вакцинации как стрессора усиливаются псевдоэозинопения. Но гормоны первой стадии стресса не влияют на выход из костного мозга моноцитов, а только усиливают их пролиферацию, поэтому в периферической крови отмечается моноци-тоз, что противоречит данным A.B. Балмасова с соавт.(1978).

Во вторую стадию стресса кислородсвязывающие свойства крови усиливаются, за счет активации красного ростка кроветворения и увеличения числа полноценных эритроцитов на седьмой день, а затем снижаются. Лейкограмма отражает сдвиг ядра вправо (ИСЯ -0,03±0,1), ИСЛК, ЛИИ больше в 2,25 раза, увеличено количество сиаловых кислот. В организме нарастают признаки реактивного воспаления в ответ на проникновение антигена вирусной природы. Освобождается костномозговой резерв факторов доиммунного воспаления, развиваются клинические признаки поствакцинального осложнения, активизируются микро- и макрофагоциты. Выше обозначенные явления и процессы соответствуют сведениям других авторов, изучающих действие стресса на организм (Ю.Б. Дешевой с соавт., 2001; Е.Г. Турицына, 1989; В.П. Николаен-ко, 1977; С.П. Фисенко, 1989; В.В. Малушко с соавт., 1992).

Глюкокортикоидная зависимость при действии неадекватного раздражителя (В.И. Пыцкий с соавт., 1986) вызывает у цыплят к 14 дню состояние угнетения костномозгового кроветворения, при этом усиливается вымывание зрелых клеток их синусов костного мозга, отражающееся в картине периферической крови. Уровень гемоглобина, среднее содержание гемоглобина в эритроците, средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах снижаются на фоне нарушенного обмена веществ в ходе развития воспаления и увеличенных затрат на гиперпластические процессы. Отмечена недостаточность структурных компонентов для синтеза гемоглобина. Отмечается эритроцитоз и умеренный лейкоцитоз. При этом снижается количество сиаловых кислот в 1,22 раза. Лейкограмма показывает регенераторный сдвиг (ИСЯ - 0,07±0,03), снижение ранее увеличенной реактивности организма (ИСЛК — 84,2% от исходного значения), сохраняется несколько повышенный уровень токсических метаболитов (ЛИИ - больше на 16,7% от нормы), что свидетельствует о постепенной ликвидации антигена в организме цыплят и начале восстановления измененного метаболизма и гомеостаза. К 21 дню исследований почти все показатели приблизились к исходным, что соответствует данным A.B. Балмасова с соавт.(1978), С.П. Фисенко (1989).

А.Г. Бабаева, Е.А. Зотиков (1987) считают, что иммунная система играет важную роль в регуляции процессов физиологической и репаративной регуляции. Изучение иммунограммы цыплят 30-дневного возраста показало, что большую часть лимфоцитов периферической крови составляли Т-лимфоциты (22,3±0,76%), в абсолютных величинах — среди их субпопуляций преобладали хелперы (13,6±1,14; (0,8±0,08)хЮ9/л), супрессоров было 12,6±0,76% или (0,75±0,05)х109/л. При этом ПРИ составил 1,07±0,05. В-лимфоцитов насчитывали 16±0,79%, ((4,24±0,24)хЮ9/л), что свидетельствует о слабости иммунной защиты. По данным Г.И. Нежинской и Н.С. Сапронова (2002), стимуляция функциональной активности В-лимфоцитов приводит к подавлению функции Т-лимфоцитов, в основном Т-хелперов. И.А. Болотников с соавт. (1983) примечали, что супрессорные клетки более широко представлены у молодых цыплят, у цыплят 30-дневного возраста происходит полная перестройка иммунологического аппарата.

Стресс вызывает срочную мобилизацию всех компонентов системы крови для реализации адаптивной реакции организма на стресс и прежде всего для активации иммунной системы (М.Г. Пшенникова, 2001).

Изучение иммунореактивности цыплят в динамике при вакцинации против ИЛТ показало, что индуктивная фаза иммунного ответа сохраняется до пятого дня периода исследований и совпадает со стадией мобилизации стрессовой реакции, удлиняя её по времени. Характеризовалась достоверным снижением количества всех иммунокомпетентных клеток, но активизацией пролиферации вирусспецифических клеток в 1,98 раза (11,5±0,64%). ИРИ стал выше на 16% от нормы, что свидетельствует об активизации этих клеток в тканях, нарастании хелперной функции лимфоцитов. Снижение уровня лимфоцитов связано с их миграцией в ткани и уменьшением циркулирующего пула. Отмечено также, что Т-клеток это касается в большей степени, чем В-лимфоцитов, а Т-хелперов больше, чем Т-супрессоров (Л. Йегер, 1990). Феномен перемещения Т- и В-лимфоцитов из периферической крови в костный мозг отмечали в своих работах П.Д. Горизонтов с соавт.(1983), Е.Д. Гольдберг с соавт.(1988). Лимфоидная реакция, имеющая перераспределительный характер, развивается с целью стимуляции регенерации гемопо-эза. Согласно данным П.П. Голикова (1986), возникающая недостаточность кислородсвязывающих свойств крови приводит к гипоксии. Наиболее чувствительным к ней и лабильным звеном является Т-звено иммунитета (Ю.В. Редькин с соавт., 1982).

Продуктивная фаза иммунного ответа по времени проявления совпадала со стадией резистентности стрессовой реакции. Происходит постстрессовая активация биосинтеза, которая в яркой форме реализуется в иммунокомпе-тентных и генеративных органах, и может повлиять, как считают Ф.З. Меер-сон с соавт.(1982), на адаптационные реакции организма. Это регуляторно обусловленное - индуцированное гормонами явление. У цыплят происходит до седьмого дня испытаний увеличение количества Т-лимфоцитов - на 65% от исходного значения ((7,98±0,64)хЮ9/л), В-лимфоцитов - на 66% (26,6±1,17% или (5,78±0,46)хЮ9/л), значительным увеличением - в 5 раз ви-русспецифических лимфоцитов. Количество хелперов и супрессоров достоверно увеличено (4,68±1,73 или (3,73±0,25)х109/л; 28,8±3,22% или (2,3±0,4)х Ю9/л) в 3,44 и 2,27 раза соответственно, что свидетельствует о высокой лимфоцитопосредованной активности организма в этот период и постепенном снижении супрессорного звена лимфоцитов. ИРИ - 1,63±0,23 стал выше исходного на 52%. К гормонам стресса более чувствительны неспецифические супрессорные лимфоциты (Р.Г. Скворцова с соавт., 1993). В состоянии стресса инициируется не только перемещение иммунокомпетентных клеток, но и дезинтеграция их функций, нарушение кооперации. Молекулы кортикостерона связываются специфическими рецепторами цитоплазматиче-ской мембраны лимфоцитов, и в конечном итоге нарушается образование Т-клетками лимфокинов (Ю.М. Забудский, И.Г. Скутарь, 1993).

Кортикостероиды, вызывая апоптоз, физически элиминируют из организма активированные суперантигеном клоны лимфоцитов, и тем самым останавливают деструктивный компонент иммунного ответа. Они снижают активность натуральных киллеров, макрофагов, в том числе процессинга и представления антигена, являются ответственными за физиологическую супрессию иммунного ответа (Г.А. Игнатьева, 1998). К концу исследований количество клеточных компонентов иммунной системы достоверно и непропорционально уменьшается: Т-лимфоциты — в 3,19 раза, В-лимфоциты - на 0,6%. Количество вирусспецифических снижается, но все ещё остается на высоком уровне (16,7±0,49% или (4,8±0,12)х109/л). Хелперов стало на 2,2% меньше, а супрессоров - в 2,88 раза, ИРИ — 2,82±1,69, что свидетельствует о разбалансированности механизмов иммунного ответа организма цыплят (В.И. Воложин, 1997). Продолжение иммунной реакции происходит в виде усиленного антителообразования и лизиса клеток-мишеней, о чем указывает П.Ю. Котляр (1994). Клетки иммунной системы, постоянно циркулирующие через селезенку из крови в ткани и обратно, первыми реагируют на действие любых повреждающих факторов и являются регуляторами адаптивных реакций других систем на стрессорные воздействия. В результате чрезмерных раздражений эти реакции могут привести к дезадаптации и вызвать повреждение или гибель всего организма (С.И. Кузнецов, И.В. Семенова, 1997).

Развитие стресса ведет к резкому снижению продуктивности птицы, ухудшению качества продукции, а порой и к гибели животных. В связи с этим проблема профилактики стресса и коррекции постстрессовых осложнений является важнейшей задачей ветеринарной науки и практики. Одним из эффективных путей борьбы со стрессом является использование витаминов (С.И. Плященко, 1991).

Таким образом, состояние костномозгового кроветворения у цыплят 30-дневного возраста характеризуется отсутствием реактивного кроветворения при сохранении эритробластического элемента костного мозга с недостаточной гемоглобинизацией. Сниженное количество эритроцитов и высокий уровень гемоглобина приводит к увеличению среднего объема эритроцитов, делая их менее пластичными, поэтому кислородсвязывающие свойства крови снижены. Арегенераторный костный мозг приводит к недостаточной микро-и макрофагальной функции периферической крови и преобладании лимфо-цитопосредованной защиты. При этом отмечается недостаточность тимиче-ских факторов клеточного иммунитета. Сниженную иммунореактивность вызывал избыток супрессорного звена лимфоцитов, низкий ИРИ подтверждал иммунодефицитное состояние цыплят. У цыплят с гемодепрессией отмечается существенное угнетение кроветворной функции, выражающееся заметным снижением некоторых гематологических и иммунологических показателей. Отмечается снижение количества эритроцитов. Анализ лейкограмм обнаруживает развивающуюся гранулоцитопению, моноцитопению. Нарастание в лейкограмме ядерного сдвига влево на фоне гранулоцитопении свидетельствует о снижении регенераторной способности костномозгового кроветворения. Появление в периферической крови цыплят молодых форм гранулоци-тов и уменьшение числа моноцитов, приводит к снижению выработки гуморальных факторов неспецифического иммунитета, что приводит к функциональной неполноценности фагоцитоза, неблагоприятно влияет на функциональную активность Т-лимфоцитов, что приводит к значительным изменениям иммунной реактивности организма.

При изучении иммунограммы установлено, что число Т-лимфоцитов пропорционально уровню гемоглобина. Снижение количества Т-клеток у цыплят 30-дневного возраста во многом обусловлено уменьшением субпопуляции Т-лимфоцитов-хелперов. Недостаточное количество Т-хелперов при повышенном количестве Т-супрессоров приводит к задержке пролифератив-ной активности В-лимфоцитов - гемопоэтических предшественников плазматических клеток, к снижению выработки колониестимулирующего фактора и, как следствие, к сокращению продолжительности жизни клеток костного мозга и к уменьшению количества иммуноглобулинов. Супрессивное действие Т-клеток на костномозговую ткань вызывает нарушение в развитии и созревании колоний гранулоцитарно-макрофагальных предшественников, что подтверждают высокие значения индексов созревания псевдоэозинофи-лов, эозинофилов. Уменьшение количества Т-хелперов обусловлено недостаточностью тимических факторов. При гемодепрессии уменьшается количество эритроцитов и развивается анемия с резко выраженным иммунодефицитом. В силу снижения естественной резистентности такие цыплята становятся неустойчивыми к действию стресса, в том числе вакцинации.

С целью коррекции постстрессорных осложнений при вакцинации цыплят против ИЛТ использовали аскорбиновую кислоту в дозе 100 мг на 1 кг корма. При изучении биологического действия аскорбиновой кислоты на организм цыплят опирались на фундаментальные исследования ряда авторов (Siegel B.V., 1975; Thomas W.R., Holt P.G., 1978; Nishikimi M., 1975; H.A. Федоров, 1976; Siegel H.S., 1985; Ж.И. Абрамова, Г.И. Оксенгендлер, 1985; Б .Я. Власов с соавт., 1995; М.Дэвис с соавт., 1999; С.И. Плященко с соавт., 2001). Установлено, что к 30-дневному возрасту количество аскорбиновой кислоты в тканях и органах у цыплят снижается (по данным Дитера, 1971), а затем вновь возрастает (в бурсе и тимусе в 8-10 раз). Указанные изменения во внутриорганном содержании витамина С обусловлены возрастными изменениями гормонального статуса в связи с увеличением тестикулов и надпочечников и становлением продуктивной функции этих органов.

Для изучения влияния аскорбиновой кислоты на организм цыплят были выбраны ранее разработанные и научно обоснованные дозы в работах Ю.П. Квиткина с соавт. (1977), В.Н. Хаустова (2003), Н. Лагугкина (2003), И.Л. Кривцова (1981), В.П. Николаенко, В.М. Заболотского (1983).

В результате исследований установлено, что у интактных цыплят 30-дневного возраста аскорбиновая кислота в дозе 100 мг на 1 кг корма вызывает изменения в костномозговом кроветворении в виде снижения пролиферации, но активации дифференцировки миелоидного ростка (индекс созревания псевдоэозинофилов и эозинофилов возрастает), ускорения дифференцировки клеток лимфоидного ряда. Отмечается активация макрофагального звена и вымывание этих клеток в периферическую кровь. Увеличивается в 2,2 раза количество плазматических клеток. Красный росток кроветворения отвечает гиперплазией на воздействие аскорбиновой кислоты, ускорением созревания нормобластов, улучшением гемоглобинизации, особенно на стадии окси-фильных и полихроматофильных нормобластов. В периферической крови количество клеточных компонентов несколько снизилось за счет усиления миграционной способности, но увеличился средний объем эритроцита и соответственно снизилось среднее содержание гемоглобина в эритроците. За счет ускорения окислительно-восстановительных процессов и обмена веществ затраты кислорода увеличиваются, усиливаются процессы перекисно-го окисления липидов и быстрее наступает нарушение функции и деструкция клеточной мембраны эритроцитов и лейкоцитов, поэтому уровень сиаловых кислот относительно контрольной группы увеличен. При изучении лейко-граммы выявили активацию моноцитарно-макрофагального звена (в 3,4 раза), лимфоцитопосредованной защиты.

Добавление в корм цыплятам 30-дневного возраста аскорбиновой кислоты усиливает гормонообразовательную функцию надпочечников. Количество адреналина находится в прямой зависимости от содержания аскорбиновой кислоты (В.В. Салаутин, 2003), так как она является основой для синтеза ка-техоламинов и кортикостероидов. Поэтому в иммунограмме снижается количество Т- и В-лимфоцитов, но увеличивается дифференцировка Т-лимфоцитов, образуется на 5% и 6% соответственно больше хелперов и су-прессоров, что подтверждает мнение Г.И. Нежинской и Н.С. Сапронова (2002) о том, что аскорбиновая кислота при однократном применении стимулирует, при многократном супрессирует активность Т-клеток.

Таким образом, аскорбиновая кислота, поддерживая высокую концентрацию цАМФ и ЦГМФ, участвует в регуляции гормональных и энзиматиче-ских путей, активирует клеточное деление и дифференцировку в костном мозге, в основном эритроидного и лимфоидного ростков кроветворения. Активируя ферменты оксидазы со смешанной функцией, способствует транспорту энергетически богатых соединений, усиливая макрофагоцитарные свойства. Восстановительная способность аскорбиновой кислоты поддерживает фолиевую кислоту в активном состоянии, которая в качестве кофактора способствует синтезу биологически активных соединений, в том числе влияет на костномозговое кроветворение. Аскорбиновая кислота ускоряет удаление железа из ферритина, способствует всасыванию его сквозь стенку кишечника, поддерживает его в восстановленной форме, тем самым способствуя использованию его для построения и насыщения гемоглобином эритроцитов, активируя красный росток кроветворения.

При действии на организм стресса — вакцинации цыплят против ИЛТ аскорбиновая кислота активизирует в основном В-звено лимфоцитов и вирус-специфических клеток. Лимфоциты, проникая в костный мозг посредством рециркуляции, с помощью лимфокинов и колониестимулирующих факторов, оказывают стимулирующее влияние на стволовые клетки, вызывая комита-цию в направлении эритропоэза и гранулоцитомакрофагальных колоний. В тимусе и лимфоидной ткани в продуктивную фазу иммунного ответа повышена пролиферативная активность и дифференцировка клеток, которые в дальнейшем включаются в процесс антителообразования и регуляции кроветворения, так как известно, что для осуществления нормального кроветворения необходимо присутствие в костном мозге клеток тимического происхождения (Е.Д. Гольдберг с соавт.,1983). К концу изучаемого периода увеличивается количество Т-супрессоров, которые приостанавливают иммунный ответ, вызывая посредством биологически активных веществ апоптоз активированных вирусным антигеном лимфоцитов. В ходе вакцинации под действием аскорбиновой кислоты активируются микро- и макрофагоциты, увеличивается реактивность в стадию резистентности развития стрессовой реакции и снижается к концу её. Аскорбиновая кислота снижает выраженность реакций доиммунного и иммунного воспаления. В периферической крови уменьшает явную лейкоцитарную реакцию, количество сиаловых кислот. В костном мозге активируется гранулоцитопоэз, эритропоэз. Интенсифицируется созревание псевдоэозинофилов, эозинофилов, нормобластов. В ходе иммунного ответа выравнивает значения показателей, характеризующих состояние организма: высокие - снижает, низкие - повышает, что согласуется с данными Ж.И. Абрамовой и Г.И. Оксенгендлера (1985) о парадоксальном двояком действии аскорбиновой кислоты.

Таким образом, использование аскорбиновой кислоты для коррекции поствакцинальных стрессовых осложнений обосновано и оказывает благоприятное влияние на течение метаболических и окислительно-восстановительных процессов в костномозговой ткани, в периферической крови и иммунокомпетентных клетках, частично выводит из гемодепрессив-ного состояния и повышает активность факторов неспецифической и специфической защиты организма цыплят 30-дневного возраста.

В завершении обсуждения следует отметить, что у цыплят в возрасте 30 дней проявляется гемо- и иммуносупрессия, которая снижает естественную и иммунную резистентность при действии стрессоров, в том числе вакцинации, что влечет за собой создание иммунитета слабой напряженности. Низкая устойчивость организма цыплят к факторам внешней среды снижает продуктивность птицы, повышает предрасположенность к заболеваниям. Глубокие формы возрастной и вызванной стрессом гемодепрессии с выраженным иммунодефицитом нередко заканчиваются гибелью птицы и наносят существенный экономический ущерб птицеводству. Аскорбиновая кислота может служить средством коррекции гемодепрессии, иммуносупрессии и негативного действия стрессов на организм цыплят.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Старун, Алла Станиславовна, Омск

1. Абрамова, Ж. И. Человек и противоокислительные вещества / Ж. И. Абрамова, Г. И. Оксенгендлер. Л. : Наука, 1985. 230 с.

2. Апатенко, В. М. Иммунодефицит у животных / В.М. Апатенко // Ве-ринария. 1992. - №5. - С. 29-31.

3. Афанасьев, Б. В. Родоначальные клетки кроветворения человека / Б. В. Афанасьев, В. А. Алмазов. Л. : Наука, 1985. 204 с.

4. Афонина, А. К. Динамика сиаловых кислот в сыворотке крови животных / А. К. Афонина, В. Н. Ворона, О. А. Лихно // Меры борьбы с болезнями с.-х. жив-х : тр. / Харьк. СХИ. Харьков, 1977. Т. 238. - С. 87-92.

5. Ахмедханова, Р. Нетрадиционные кормовые добавки / Р. Ахмедхано-ва // Животноводство России. 2003. — №4. — С. 25.

6. Бабаева, А. Г. Иммунология процессов адаптивного роста, пролиферации и их нарушений / А. Г. Бабаева, Е. А. Зотиков. М. : Медицина, 1987. -136 с.

7. Беляев, И. М. Клинико-морфологические показатели при лейкозе и саркоматозе кур / И. М. Беляев // Тезисы докладов научных конференций Московской ветеринарной академии. -М., 1954. С. 58-63.

8. Бестяков, В. Л. Содержание сиаловых кислот в сыворотке крови при экспериментальных микотоксикозах кроликов / В. Л. Бестяков // Паразитарные и незаразные болезни животных: сб. науч. работ Сиб. н.-и. вет. ин-та. -Омск, 1978.-Вып. 33.-С. 104-106.

9. Болотников, И. А. Гематология птиц / И. А. Болотников, Ю. В. Соловьев. Л. : Наука, 1980. 114 с.

10. Болотников, И. А. Стресс и иммунитет у птиц / И. А. Болотников, В. С. Михкиева, Е. К. Олейник. JI.: Наука, 1983. - 118 с.

11. Болотников, И. А. Физиолого-биохимические основы иммунитета сельскохозяйственной птицы / И. А. Болотников, Ю. В. Конопатов. — JI. : Наука, 1987.-164 с.

12. Бочарников, А. В. Опосредованная оценка напряженности иммунитета против Инфекционного ларинготрахеита птиц / А. В. Бочарников, В. Ю. Кулаков, Т. В. Оковытая // Ветеринария. 2004. - №1. - С. 30-31.

13. Бочарников, А. В. Оценка вакцинных штаммов вируса ИЛТ / А. В. Бочарников, В. Ю. Кулаков // Птицеводство. 2003. - №4. - С. 11.

14. Бочарников, А. В. Эмбрион вакцина против инфекционного ларинготрахеита / А. В. Бочарников, В. Ю. Кулаков, К. Федосеев // Животновод. — 2003.-№4.-С. 20-21.

15. Венгеренко, Л. А. Актуальные ветеринарные проблемы птицеводства и их решение / Л. А. Венгеренко // БИО. 2003. - №4. - С. 14-16.

16. Венгеренко, Л. А. Эпизоотическая обстановка в птицеводстве / Л. А. Венгеренко // Птицеводство. 2004. - №6. - С. 21-23.

17. Верхолетов, В. А. Морфология клеток костного мозга и возрастные изменения миелограммы у нормально развивающихся цыплят / В. А. Верхолетов // Уч. зап. Казан, вет. ин-та, 1965. Т.97. — 345 с.

18. Владимирская, Е. Б. Костномозговое кроветворение. Оценка миелограммы / Е. Б. Владимирская // Гематология и трансфузиология 1993. - №4. -С. 4-6.

19. Воложин, А. И. Дизрегуляция иммунологических механизмов и фагоцитарной активности лейкоцитов ведущая причина острого воспаления / А. И. Воложин // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1997.-№2. -С. 29-31.

20. Воробьев, А. И. Схема кроветворения: 1995 / А. И. Воробьев, Н. И. Дризе, И. Л. Чертков // Проблемы гематологии. 1995. - Т.1. — №1. -С. 7- 14.

21. Воробьева, Л. И. Микробиологический синтез витаминов / Л. И. Воробьева. М. : Изд. МГУ, 1982. - 168 с.

22. Гаврилов, О. К. Клетки костного мозга и периферической крови (структура, биохимия, функция) / О. К. Гаврилов, Г. И. Козинец, Н. Б. Черняк. М.: Медицина, 1985. - 286 с.

23. Головацкий, И. Д. Биохимия животных / И. Д. Головацкий, П. А. Ка-лиман, В. И. Воронянский; под ред. проф. А. В. Чечеткина. М. : Высшая школа, 1982.-511 с.

24. Гольдберг, Е. Д. Закономерности структурной организации систем жизнеобеспечения в норме и при развитии патологического процесса / Е. Д. Гольдберг. Томск.: Изд-во Том. ун-та, 1996. - 282 с.

25. Горбунова, Н. А. Эритродиерез при экстремальных воздействиях и его роль в регенерации крови / Н. А. Горбунова // Гематология и трансфузио-логия 1985. - №2. - С. 23-27.

26. Горизонтов, П. Д. Стресс и система крови / П. Д. Горизонтов, О. И. Белоусова, М. И. Федотова. М.: Медицина, 1990. - 282 с.

27. Горизонтова, М. П. Участие катехоламинов в регуляции проницаемости микрососудов при стрессе / М. П. Горизонтова. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1987. - №1. - С. 19-22.

28. Трошева, Е. А. Взаимосвязь факторов естественной устойчивости организма птиц и иммунитета при вакцинации / Г. А. Трошева, Н. Р. Есакова // Ветеринария. 2000. - №8. - С. 24-27.

29. Девис, М. Витамин С: Химия и биохимия : пер. с англ. / М. Девис, Дж. Остин, Д. Патридж. М.: Мир, 1999. - 176 с.

30. Дервис, Г. В. Колориметрическое определение гемоглобина на фото-электроколориметре ФЭК-М / Г. В. Дервис, А. И. Воробьев // Лаборат. дело. 1959. -№3.- С. 3-5.

31. Диагностическое значение сиаловых кислот гликолипидов при гипер-липопротеидемиях / М. Г. Творогова, Т. А. Рожкова, В. П. Лупанов, А. А. Ля-кишев, В. Н. Титов // Клиническая диагностика 1997. - №7. - С. 19-22.

32. Добавки витаминов С и Всдля повышения многоплодия и естественной резистентности свиноматок / С. И. Плященко, В. В. Соляник, А. В. Соля-ник, Г. В. Соляник // Ветеринария. 2001. - №12. - С. 30-35.

33. Донкова, Н. В. Особенности морфофункционального развития цыплят-бройлеров / Н. В. Донкова // Ветеринария. 2004. - №10. - С. 48-50.

34. Донозологическая диагностика нарушений иммунной системы / Р. В. Петров, Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин, А. Д. Черноусов // Иммунология. -1995.-№2.-С. 4-5.

35. Дорошко, И. Лечение некоторых заболеваний органов дыхания кур газообразным иодом / И. Дорошко, А. Байдевлятов // Птицеводство. 1964. -№7.-С. 9.

36. Дыгай, А. М. О способности лимфоидных клеток стимулировать эри-тропоэз в условиях локального облучения организма / А. М. Дыгай, Е. Д. Гольдберг // Гематология и трансфузиология 1984. - №12. - С. 25-26.

37. Ефуни, С. С. Этиология и патогенез аутоиммунных заболеваний / С. С. Ефуни // Гематология и трансфузиология 1993. - №4. - С. 32-37.

38. Забудский, Ю. И. Миграционная активность лейкоцитов маркер стресса птиц / Ю. И. Забудский, И. Г. Скутарь // Ветеринария. - 1993. - №3. — С. 44-46.

39. Забудский, Ю. И. Стресс сельскохозяйственной птицы: возможность повышения адаптации дозированным стрессорным воздействием (обзор) // С.-х. биология. 1990. - №6. - С. 46-48.

40. Заварзин, А. А. Очерки эволюционной гистологии крови и соединительной ткани Т.4. / А. А. Заварзин.- М.-Л., 1953. 178 с.

41. Зуев, Ю. В. Ассоциированная вирусвакцина против инфекционного ларинготрахеита и ньюкаслской болезни птиц / Ю. В. Зуев, Ю. С. Дутко, А. Т. Кушнир // Ветеринария. 1995. - №3. - С. 22-24.

42. Ибрагимов, А. А. Генетические и физиологические основы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных / А. А. Ибрагимов // Тр. ВСХИЗО. 1978. - Т. 145. - С. 87-93.

43. Игнатьева, Г. А. Иммунная система и патология / Г. А. Игнатьева // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 1997. - №4. — С. 26-37.

44. Игнатьева, Г. А. Современные представления об иммунитете (контуры общей теории) / Г. А. Игнатьева // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2003. - №2. — С. 2-7.

45. Изучение механизма феномена исчезающих иммуноглобулинов при стрессе в эксперименте / Б. Б. Першин, Б. А. Емельянов, А. Я. Соколова, С. Н. Кузьмин // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. -1987.-№5.-С.41-44.

46. Иммунологическая эффективность вакцины против ИЛТ кур / Ю. С. Дутко, А. А. Шевченко. Н. А. Изотова, А. Т. Кушнир // Ветеринария. — 1991.-№3.-С. 32-34.

47. Иммунологические сдвиги у птиц, вакцинированных против нью-каслской болезни, ИЛТ и оспы / А. В. Балмасов, Л. М. Ерохина, Ю. С. Дутко, А. Т. Кушнир, В. В. Чернышев, В. И. Бурцев, Н. И. Архипов // Ветеринария. — 1978.-№4.-С. 38-40.

48. Инфекционные болезни животных : справочник / Сост. : Ю. Ф. Борисович, Л. В. Кириллов; под ред. Д. Ф. Осидзе. — М. : Агропромиздат, 1987. — 288 с.

49. Иржак, Л. И. Состав и функции крови / Л. И. Иржак // Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т.7. - №2. - С. 11-19.

50. Исследование системы крови в клинической практике / под ред. Г. И. Козинца и В. А. Макарова. М.: Триада - X, 1997. - 480 с.

51. Кальф-Калиф Я. Я. Лейкоцитарный индекс интоксикации. / Я. Я. Кальф-Калиф//Врачебное дело. 1941.-№ 1.-С. 31-35.

52. Камышников В. С. О чем говорят медицинские анализы : справ, пособие / В. С. Камышников. Мн. : Беларуская навука, 1997. - 189 с.

53. Карпуть, И. М. Профилактика иммунных дефицитов и желудочно — кишечных болезней у цыплят бройлеров / И. М. Карпуть, М. П. Бабина // Ветеринария. - 2000. - № 11. - С. 41 -44.

54. Кассирский, И. А. Клиническая гематология / И. А. Кассирский, Г. А. Алексеев. М.: Медгиз, 1955. 720 с.

55. Квиткин, Ю. П. Стресс сельскохозяйственной птицы / Ю. П. Квиткин, Н. Г. Федорченко, И. JI. Кривцов. М., 1977. 112 с.

56. Кёстер-Лёше, К. Нет вирусам и бактериям / К. Кёстер - Лёше ; пер. с нем. Г. Гаева. - М. : КРОН - ПРЕСС, 1997. - 288 с.

57. Кириллов, О. И. Процессы клеточного обновления и роста в условиях стресса / О. И. Кириллов. М. : Медицина. 1977. 118 с.

58. Кожемяка, Н. В. Справочник ветеринарного врача птицеводческого предприятия / Н. В. Кожемяка, Ф. С. Кудрявцев, Г. А. Трошева. М. : Колос, 1982.-280 с.

59. Козинец, Г. И. Интерпретация анализов крови и мочи. Клиническое значение анализов / Г. И. Козинец. -СПб. : САЛИТ, 1995. 123 с.

60. Козинец, Г. И. Морфологическая и функциональная характеристика клеток костного мозга и крови / Г. И. Козинец, Э. И. Терентьева,

61. Ф. Э. Файнштейн // Нормальное кроветворение и его регуляция. — М.: Медицина, 1976. С.98-155.

62. Козловская, Л. В. Учебное пособие по клинич. лабор. методам иссе-дования / Л. В. Козловская, М. А. Мартынова. М. : Медицина, 1975. - 352 с.

63. Коровин, Р. Н. Заразные болезни птиц / Р. Н. Коровин // Ветеринария. 1991. -№6. — С. 3-6.

64. Коровин, Р. Н. Основы профилактики вирусных болезней / Р. Н. Коровин, Б. Трефилов // Птицеводство. 2004. - №8. - С. 5-9.

65. Косых, В. П. К методике получения пунктата костного мозга у кур /

66. В. П. Косых // Науч. тр. / Ом. вет. ин-т, 1970. Т. 27, вып.2. - С. 203-205.

67. Косых, В. П. Костномозговое кроветворение у кур больных эритроб-ластозом / В. П. Косых // Диагностика и патоенез заболеваний сельскохозяйственных животных. — Омск, 1980. С. 53-64.

68. Котляр, П. Ю. Иммуноферментный метод диагностики ИЛТ птиц / П. Ю. Котляр // Птицеводство. 1995. - №3. - С. 4-6.

69. Кривцов, И. Л. Опыт профилактики стресса в промышленном птицеводстве / И. Л. Кривцов // Пути повышения эффективности промышленного птицеводства : сб. науч. тр. Загорск, 1981. - С. 32-35.

70. Крюков, А. Н. Морфология крови с техникой морфологическго исследования крови и кроветворной ткани / А. Н. Крюков. М., 1920. — 254 с.

71. Кудрявцев, А. А. Гематология животных и рыб / А. А. Кудрявцев, Л. А. Кудрявцева, Т. И. Привольнов. М. : Колос, 1969. — 320 с.

72. Кудрявцев, А. А. Гематология сельскохозяйственных животных / А. А. Кудрявцев, Л. А. Кудрявцева П. Г. Кондратенко. М. : Медицина, 1969. -347 с.

73. Кузнецов, С. И. Клетки иммунной системы как посредники в реакции других систем организма на стрессорное воздействие / С. И. Кузнецов, И. В. Семенова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия.- 1997. №2. — С. 27-31.

74. Кузнецов, С. И. Клетки иммунной системы как посредники в реакции других систем организма на стрессовое воздействие / С. И. Кузнецов, И. В. Семенова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия.- 1997.-№2.-С. 27-31.

75. Куликова, А. В. Влияние витаминных водорастворимых препаратов на антиоксидантный статус цыплят-бройлеров / А. В. Куликова, А. В. Хохло-ва // БИО. 2004. - №12. - С. 9-11.

76. Лагуткин, Н. А. Иммунные ответы птицы на кормление / Н. А. Лагут-кин // Животноводство России. 2003. - №8. - С. 30-31.

77. Лагуткин, Н. А. Эффективность специфической профилактики инфекционных болезней птиц / Н. А. Лагуткин // Ветеринария. 2003. — №5. -С. 33-34.

78. Ласкова, И. Л. Развитие различных форм иммуносупрессии после физической нагрузки и теплового воздействия / И. Л. Ласкова, Л. Е. Сипливая, Л. Г. Прокопенко // Патологическая физиология. 1992. - № 5-6. - С. 14-15.

79. Лимфоциты: выделение, фракционирование и характеристика : пер. с англ. / под ред. Дж.Б. Натвига, П. Перлмана, X. Вигзелля. М. : Медицина, 1980.-280 с.

80. Логунов, В. И. Птицеводческим хозяйствам эпизоотическое благополучие / В. И. Логунов // Птицеводство. - 1998. — №2. — С. 3-6.

81. Лютинский, С. И. Практикум по патологической физиологии сельскохозяйственных животных / С. И. Лютинский, В. С. Степин. М. : Колос. 2001. - 224с.: ил. - (Учебники и пособия для студентов высш. учеб. заведений).

82. Макаров, В. В. Профилактика вирусных болезней сельскохозяйственных животных / В. В. Макаров, Д. И. Козлова. М. : Россельхозиздат, 1981. — 210 с.

83. Макогон, В. Ф. Профилактика ИЛТ кур / В. Ф. Макогон, А. И. Диден-ко // Ветеринария. 1991. - №6. - С. 24-26.

84. Максимов, А. А. Основы гистологии. 4.1. / А. А. Максимов. Л. : Госиздат, 1925. - 396 с.

85. Медведев, В. В. Клиническая лабораторная диагностика / В. В. Медведев, Ю. 3. Волчек. СПб.: Гиппократ, 1995. - 205 с.

86. Меерсон, Ф. 3. Адаптация к стрессорным ситуациям и физическим нагрузкам / Ф. 3. Меерсон, М. Г. Пшенникова. М.: Медицина, 1988. - 190 с.

87. Меерсон, Ф. 3. Адаптация, стресс и профилактика / Ф. 3. Меерсон. -М. : Наука, 1981.-216 с.

88. Меерсон, Ф. 3. О цене адаптации / Ф. 3. Меерсон // Патологическая физиология и экспериментальная медицина. 1986. -№3. - С. 9-19.

89. Мезенцев, С. В. Профилактика инфекционных болезней птиц / С. В. Мезенцев, Н. Г. Телегин // Био. 2004. - №10. - С. 5-8.

90. Методические рекомендации по профилактике стрессов в птицеводстве / А. Б. Байдевлятов, В. П. Николаенко, Л. А. Ольховик, Л. И. Куценко. Харьков, 1979.-20 с.

91. Миролюбова, А. Н. Лечебно-профилактическая эффективность изати-зона при инфекционном ларинготрахеите кур и его влияние на естественную резистентность / А. Н. Миролюбова // Тр. / Моск. вет. акад. М., 1990. - 217 с.

92. Митерев, Г. И. Дифференцировка и функционирование клеток Т-лимфоидной системы / Г. Ю. Митерев // Гематология и трансфузиология. -1993.-№4.-С. 22-25.

93. Митюшников, В. М. Естественная резистентность сельскохозяйственной птицы / В. М. Митюшников. М.: Россельхозиздат, 1985. — 160 с.

94. Митюшников, В. М. Зависимость напряженности иммунитета от естественной резистентности птиц / В. М. Митюшников // Ветеринария. 1992. - №5.-С. 30-31.

95. Мороз, Б. Б. Реакция системы крови в стадии резистентности и истощения при хроническом эмоциональном стрессе после у-облучения в дозе 90 рад / Б. Б. Мороз, Ю. Б. Дешевой // Патологическая физиология. 1994. -№3.-С. 17-19.

96. Морозова, В. Т. Роль взаимодействия стромальной и гемопоэтической ткани в патологии кроветворения / В. Т. Морозова // Клиническая лабораторная диагностика. 2003. - №8. - С. 33-36.

97. Натан, Д. Г. Регуляция кроветворения / Д. Г. Натан, К. А. Зифф // Гематология и трансфузиология. — 1994. — №2. С. 48-53.

98. Никитин, В. Н. Атлас клеток крови сельскохозяйственных и лабораторных животных / В. Н. Никитин. М. : Гос. изд-во с.-х. лит, 1949. — 118 с.

99. Николаенко, В .П. Влияние стрессов вакцинации и перемещения на физиологические показатели кур-молодок / В . П. Николаенко // Науч.-техн. бюл. Харьков, 1977. - Вып. 1. - С. 54-57.

100. Николаенко, В. П. Профилактика вакцинного стресса / В. П. Николаенко, В. М. Заболотский // Науч.-техн. прогр. в плем и пром. птицев-ве : тез. докл. Самарканд,- 1983. - С. 18-23.

101. Николаенко, В. П. Профилактика стресс-явлений, вызываемых ветеринарными обработками и перемещением птицы / В. П. Николаенко, JI. А. Ольховик, А.Б. Байдевлятов // Пути развития промышленного птицеводства. Киев, 1979. - С. 91-99.

102. Нормальное кроветворение и его регуляция / Г. И. Козинеу, Э. И. Те-рентьева, Ф. Э. Файнштейн, Э. Г. Шишканова, С. М. Дульцина, JI. Э. Яру-стовская, А. А. Липац ; под ред. Н. А. Федорова. М. : Медицина, 1976. - 630 с.

103. Олейник, Е. К. Т- и В-ситемы иммунитета птиц / Е. К. Олейник // Биохимические и морфологические основы иммунологии птиц. — Петрозаводск, 1982.-С. 62-74.

104. Орлянкин, Б. Г. Классификация и номенклатура вирусов позвоночных / Б. Г. Орлянкин, Е. А. Непоклонов, Т. И. Алипер // Ветеринария. 2001. — №10.-С. 15-20.

105. Орлянкин, Б. Г. Противовирусные вакцины третьего поколения / Б. Г. Орлянкин // БИО. 2003. - №2. - С. 17-18.

106. Оуэн, Р. Л. Иммунная система птицы / Р. Л. Оуэн // Птицеводство. -1996. №2. — С.39-41.

107. Павлов, А. Д. Регуляция эритропоэза: Физиологические и клинические аспекты / А. Д. Павлов, Е.Ф. Морщакова.- М. : Медицина, 1987. 272 с.

108. Плященко, С. И. Стрессы у сельскохозяйственных животных / С. И. Плященко, В. Т. Сидоров. М.: Агропромиздат, 1987. - 192 с.

109. Полякова, О. А. Инфекционный ларинготрахеит птиц / О. А. Полякова.-М., 1951.- 123 с.

110. Пономаренко, В. М. Межклеточное взаимодействие / В. М. Понома-ренко, В. И. Ругаль // Гематология и трансфузиология. 1994. - №1. -С. 26-29.

111. Постстрессорные состояния и коммуникативные нарушения иммунитета и крови / Б. П. Суринов, Н. А. Карпова, В. Г. Исаева, Ю. С. Кулиш // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 2000. — №4. — С. 9-11.

112. Предыбайло, Н. Д. Маркетинговые исследования на рынке ветбиоп-репаратов для птицеводства / Н. Д. Предыбайло, С. Г. Романов // Ветеринария. 2000. - №9. - С. 15-18.

113. Прилуцкий, И. И. О формах морфофизиологической перестройки коры надпочечников при действии сильного «стрессора» и больших доз АКТГ /

114. B. И. Прилуцкий // Фармакология и токсикология 1964. - Т.27. - №3.1. C. 339-342.

115. Пролиферативная активность и клеточный состав костного мозга / Д. А. Шмаров, Б. В. Крехнов, О. Н. Попова, Ю. М. Кучма, С. В. Лепков // Гематология и трансфузиология. 1992. - №7-8. - С. 6.

116. Пшенникова, М. Г. Различия в стресс-реакции и формировании адаптации к стрессу у крыс Август и Вистар / М Г. Пшенникова, Л. Ю. Голубева, Б. А. Кузнецова // Бюл. эксперим. биологии. 1996. - Т. 122, №8. - С. 156159.

117. Пшенникова, М. Г. Феномен стресса. Принципы профилактики и коррекции стрессорной патологии / М. Г. Пшенникова // Патолигическая физиология и экспериментальная медицина. 2001. - С. 28-40.

118. Пшенникова, М. Г. Феномен стресса. Система крови / М. Г. Пшенникова // Патологическая физиология и экспериментальная медицина. — 2001. -№2. С. 26-30.

119. Пшенникова, М. Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии / М.Г. Пшеннникова // Патологическая физиология и экспериментальная медицина. 2000. - №3. - С. 20-26.

120. Рабинович, М. И. Влияние ряда лекарств на основные показатели крови / М. И. Рабинович // Ветеринария. 1998. - №10. - С. 43-45.

121. Радчук, Н. А. Ветеринарная микробиология и иммунология / Н. А. Радчук, Г. В. Дунаев, Н. М. Колычев ; под ред. H.A. Радчука М.: Аг-ропромиздат, 1991.-383 с.

122. Реакция адреналовой системы кур-несушек на стресс-голодание / А. Я. Аврутина, В. П. Шинкарева, Г. О. Волпе, Е. Г. Фролова // Докл. ВАСХ-НИЛ.- 1976.-№4.-С. 33-34.

123. Редькин, Ю. В. Влияние клинической смерти на первичный иммунный ответ к тимусзависимому антигену / Ю. В. Редькин, Е. В. Глущенко, Т. Ф. Соколова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1982. №6.-С. 62-65.

124. Румянцев, С. Н. Конституциональный иммунитет и его молекулярно-экологические основы / С. Н. Румянцев. — Л., 1983 210 с.

125. Рыбин, В. П. Иммуноморфологические изменения в организме цыплят, вакцинированных эмульсин-вакциной «Л-3» / В. П. Рыбин. Л., 1973. — 23 с.

126. Садомов, Н. А. Влияние витаминов А, Е и С на естественную резистентность организма птиц / Н. А. Садомов // Ветеринария. — 2003. №2. — С.47-48.

127. Салаутин, В. В. Адаптивная реакция у цыплят при стрессах / В. В. Салаутин // Ветеринария. 2003. - №1. - С. 23-25.

128. Седов, В. А. Задачи ветеринарии по защите животных от инфекционных болезней / В. А. Седов, А. А. Бойко, Б. А. Кругликов // Ветеринария. — 1991. -№10. -С. 3-6.

129. Система крови при действии на организм эмоционального стресса и ионизирующей радиации в низких дозах / Ю. Б. Дешевой, Б. Б. Мороз,

130. A. В. Лырщикова, В. Г. Лебедев // Патологическая физиология и экспериментальная медицина 2001. - №4. - С. 19-20.

131. Скорляков, В. М. Оценка клеточной системы устойчивости чистопородного и помесного крупного рогатого скота : науч.-практ. рекомендации /

132. B. М. Скорляков. Саратов, 1998. - 12 с.

133. Скутарь, И. Г. Борьба с инфекциями в промышленном птицеводстве / И. Г. Скутарь. Кишинев : Штинница, 1980. - 64 с.

134. Терентьева, Э. И. Некоторые аспекты нормального кроветворения / Э. И. Терентьева, Ф. Э. Файнштейн, Г. И. Козинец // Проблемы гематологии. 1974. -№1. - С. 19-21.

135. Федоров, Н. А. Регуляция пролиферации кроветворных клеток / Н. А. Федоров. М. : Медицина, 1977. - 158 с.

136. Фернандес, Р. Дж. Концептуальные основы вакцинопрофилактики заболеваний цыплят-бройлеров / Р. Дж. Фернандес // БИО. 2004. - №7. - С. 69.

137. Физиологическая (запрограммированная) гибель клеток при гемопо-эзе / Г. И. Козинец, В. М. Погорелов, Г. М. Казем, Ю. К. Новодержкина,

138. О. А. Дягилева, Т. Г. Сарычева, И. М. Федорова // Клиническая лабораторная диагностика 1996. -№1. - С. 35-37.

139. Фисенко, С. П. К вопросу образования иммунитета к вирусу ИЛТ птиц / С. П. Фисенко // Всесоюзная конференция молодых ученых и аспирантов по птицеводству : тез. докл. Загорск, 1989. - С. 19.

140. Фисинин, В. И. Возрастные особенности адаптационно компенсаторных процессов у цыплят / В. И. Фисинин, И. Н. Мудрый, Н. А. Кравченко // Докл. ВАСХНИЛ. - 1978. - С. 26-28.

141. Фриденштейн, А. Я. Клеточные основы иммунитета / А. Я. Фриден-штейн, И. Л. Чертков. М.: Медицина, 1969. - 256 с.

142. Фролов, В. А. Стресс и система кровоообращения / В. А. Фролов, Б. М. Федоров. -М. : Медицина. 1991.-286 с.

143. Хаустов, В. Н. Влияние аскорбиновой кислоты на продуктивность и естественную резистентность уток / В. Н. Хаустов // Ветеринария. 2003. — №1. — С. 52-53.

144. Чертков, И. Л. Современная схема кроветворения / И. Л. Чертков, А. И. Воробьев // Проблемы гематологии и переливания крови. 1973. — №10. - С.3-13.

145. Шитый, А. Г. Профилактика стресса / А. Г. Шитый, В. В. Грищенко // Земля сиб. дальневост. 1984. - №6 - С. 41-42.

146. Шиффман, Ф. Дж. Патофизиология крови : пер. с англ. / Ф. Дж. Шиффман. М.: БИНОМ; СПб.: Нев. диалект, 2000. - 448 с.

147. Щенников, С. Т. Инфекционный конъюнктивит цыплят и меры борьбы с ним / С. Т. Щенников, Е. А. Петровская // Птицеводство. 1955. - №4. - С. 6-9.

148. Щенников, С. Т. Инфекционный ларинготрахеит птиц и меры борьбы с ним / С. Т. Щенников. М., 1967. - 128 с.

149. Яблучанский, Н. И. Индекс сдвига лейкоцитов крови. / Н. И. Яблу-чанский, В. А. Пилипенко // Лабораторное дело. 1983. - №1. С. 60-61.

150. Яковлев, С. С. Эпизоотическая ситуация в птицеводстве России / С. С. Яковлев // Ветеринария. 2000. - №9. - С. 3-4.

151. Abdel-Latif, A. A. Calcium-mobilizing receptors, poly phosphoinositides and the generation of second messengers / A. A. Abdel-Latif // Pharmacol. Res. -1986. Vol.38. - N3. - P. 227-272.

152. Albini, B. Delineation of В and T lymphoid cells in the chicken / B. Albini, Wick G. // J. Immunol. 1974. - Vol.112, - N2. - P. 855-858.

153. Alls A.A. et al., // Avian Dis. 1969. - Vol. 13.

154. Bewing, G. Adrenocortical and H/L responses to chaelenge in hens showihg shot or long immobility reactions / G. Bewing, R. Gones, H. Blackhuis // Brit, poultry Sci. 1989. - №30. - P. 175-185.

155. Dantschakoff, V. Untersuchungen uber die Enturcklung des Blutes und Bindgewbes bei den Volgeln. A. die erste Enstehung der Blutzellen beim Huhnerembryo und der Dottersack als Blutbildendes./ V. Dantschakoff // Organ. Anat. Hefste. 1908. - Vol. 37.

156. Emilsson, A. Changes in fatty acyl chain composition of heart phospholipids induced by noradrenaline / A. Emilsson, S. Gudbjarnasson // Biochim. Biophis. Acta. 1984. - Vol. 664. - P. 82-88.

157. Gross, W. B. Evolution of the heterophyl limphocyte ratio as a measure of a stress in chickens / W. B. Gross, H. S. Siegel // Avian diseases/ 1983. - №27. -P. 972-979.

158. Haggendal, J. Catecholamine induced free radicals in myocardial cell necrosis on experimental stress in pigs / J. Haggendal, L. Jonson, G. Johansson // Acta Physiol. Scand. 1987. - Vol. 131. - P. 447-452.

159. Hirata, F. Phospholipide methylation and biological signal transmission / F. Hirata, J. Axelrod // Science. 1980. - Vol. 209. - P. 1082-1090.

160. Loliger H. Chr. Die diagnostiske verwertborneit des Geflugelblutbildes / H. Loliger// Berl. U. Munch. Tierarztl. Wschr., 1960. №73.

161. Mizejewski, G. J. The concept of an embryonic reticuloendotelial system (ERES) in the developing chick / G. J. Mizejewski // J. Reticuloendothel. Soc. — 1973.-Vol.14, Nl.-P. 171-180.

162. Potworowski, E. T- and B-lymphocytes. Organ and age distribution in thechicken / E. Potworowski // J. of Immunol. 1972. - Vol.23. - N.98. - P. 199-204.

163. Purschase, H. G. Evaluation of immune competence factors causing im-munosupresssion / H. G. Purschase // Poultry Dig. 1983. - Vol. 49, N1. — P. 18-19.

164. Redman, T. et al.. // Dtsch. Tierarzte. Wschr. 1983. -Vol. 90. - P. 4.

165. Schermer, S. Blutmorfologic der laboratoriustiere / S.Schermer // Leipzig. 1954.

166. Schermer, S. Blutmorphologic der laboratoriustiere / S. Schermer. Leipzig, 1954.

167. Selye, H. Perspectives in stress / H. Selye // Perspect. Biol. Med.- 1959. -Vol. 2, N4. P. 33-38.

168. Seto, F. Early development of the avian immune system / F. Seto // Poultry Sci. 1981. - Vol.60, N9. - P.1981-1995.

169. Siegel, H. S. Immunological responses as indicators of stress / H.S. Siegel // World's poultry Sci. J. 1985. -№41. - P. 36-44.

170. Von Bulow V. Growth inhibition of Marek's desease T-lymphoblastoid cell lines by chiken bone marrow-derived macrophages activated in vitro / V. Von Bulow, A. Klasen // Avian Pathol. 1983. - Vol. 12, N1. - P. 161 -178.

Информация о работе

Старун, Алла Станиславовна
кандидата биологических наук
Омск, 2005
ВАК 03.00.13

Диссертация

Костномозговое кроветворение и иммунореактивность цыплят в норме и при вакцинации против инфекционного ларинготрахеита на фоне применения витамина С - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы