Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Комплексаная оценка экологического воздействия пестицидов на метаболические процессы культурных растений
ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Комплексаная оценка экологического воздействия пестицидов на метаболические процессы культурных растений"

На правах рукописи ПИСТУНОВИЧ ЕЛЕНА ВЛАДИМИРОВНА

КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА ЭКОЛОГИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ПЕСТИЦИДОВ НА МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ КУЛЬТУРНЫХ РАСТЕНИЙ

03.00.16 - экология

1 О ДЕК 2009

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА -2009

003487994

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию.

Научный руководитель: заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, академик РАЕН, профессор Иванов Владимир Петрович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Орлова Валентина Сергеевна

заслуженный деятель науки РФ, доктор сельскохозяйственных наук, профессор Стифеев Анатолий Иванович

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Белгородский государственный университет»

Защита состоится «22» декабря 2009 г. в 1600 часов на заседании диссертационного совета Д 212.203.17 в Российском университете дружбы народов по адресу: 115093, г. Москва, Подольское шоссе, д. 8/5, экологический факультет РУДН.

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского университета дружбы народов по адресу: 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6.

Автореферат диссертации разослан «21» ноября 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук, профессор

Чернышов В.И.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В настоящее время для защиты культурных растений от вредных организмов используются карантинные, агротехнические, механические, физические, биологические и химические методы, применяемые обычно в комплексах, составляющих систему мероприятий [Захаренко В.А., 1984]. Основным и обязательным элементом этих систем является химический метод, обеспечивающий высокую хозяйственную эффективность и производительность труда. Универсальность его подтверждается практикой применения на разных культурах в борьбе с подавляющим большинством вредных организмов [Николаев Ю.П., 1988].

Имея ряд преимуществ, использование химических препаратов влечет за собой изменение экологического баланса окружающей природной среды, оказывает влияние на живые организмы, населяющие биогеоценозы [Дунский В.Ф., 1982; Губарев Е.А., 1991]. В литературе достаточно широко освещены вопросы влияния пестицидов в остром и хроническом эксперименте на животных, человека [Дмитриева Е.А., 1990; Новиков Ю.В., 2005]. В то же время влияние пестицидов на химический состав и метаболические процессы культур, на которых они применяются, до настоящего времени не достаточно изучено. Являясь экологически агрессивными ксенобиотиками природной среды, ядохимикаты способны вызывать изменение различных биохимических процессов в живых организмах, в том числе и в растительных культурах. Среди комплекса химических компонентов растительных организмов важными классами органических соединений являются белки, углеводы и липиды, качественный состав и количественная представительность которых в большинстве культур изучена достаточно хорошо [Пешков Б.П., 1987; Ващенко И.М., 2004]. В то же время в литературе не нашли должного освещения вопросы влияния экологических факторов, в том числе и пестицидов, на показатели клеточного метаболизма растений.

В этой связи весьма актуальным представляется изучение пестицидной нагрузки на качественные и количественные показатели обмена белков, углеводов и липидов культурных растений. Углубление знаний о направленности биохимических процессов в условиях химической защиты растений представляется важным для выработки стратегии рационального использования и применения отдельных пестицидов в процессе выращивания сельскохозяйственных культур. Изложенное выше определило цель настоящего исследования.

Цель исследования.

Изучить влияние доминирующих пестицидов сельскохозяйственного производства Курской области на направленность качественных и количественных показателей (углеводов, липидов и запасных белков) зерна пшеницы сорта «Курская 2038» в процессе онтогенеза.

Задачи исследования.

1. Определить количественное содержание остаточных количеств изучаемых пестицидов в сырье.

2. Оценить влияние абиотических факторов, связанных с применением пестицидов, на вариабельность обмена углеводов.

3. Исследовать особенности обмена нейтральных липидов и фосфолипидов при использовании пестицидов.

4. Изучить характер метаболизма запасных белков зерна в условиях химической защиты.

5. Выявить химически лабильные фракции изучаемых классов . органических соединений, в наибольшей степени реагирующие на абиотические факторы в условиях остаточных количеств пестицидов.

Научная новизна работы.

Впервые проведена комплексная оценка экологического воздействия пестицидЬв на формирование количественной представительности основных фракций углеводов, липидов и запасных белков в зерне пшеницы. Дана оценка изменений количественных показателей спектра углеводов, липидов и запасных белков на различных этапах онтогенеза с учетом воздействия абиотических факторов (пестицидов).

Научно-практическое значение.

Получены новые экологические знания, расширяющие представления о влиянии экологических факторов (пестицидов) на характер взаимосвязей фракций углеводов, липидов, запасных белков и их сопряженности с вариабельностью количественного содержания пестицидных препаратов в сырье.

Полученные данные рекомендуются как базовые, отражающие норму содержания органических веществ в зерне пшеницы сорта «Курская 2038» и позволяющие осуществлять экологическое прогнозирование количественного содержания отдельных фракций в конечных продуктах переработки при использований различных групп пестицидов. Они рекомендуются к использованию при изучении курсов экологии, физиологии и биохимии растений, цитологии, молекулярной биологии, растениеводства в высших биологических школах различного профиля.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Кумуляция доминирующих пестицидов в зерне пшеницы в процессе индивидуального развития растения.

2. Количественная представительность и степень корреляционных взаимосвязей углеводных фракций зерна пшеницы в условиях влияния разных видов абиотических пестицидных факторов.

3. Количественная представительность и корреляционные взаимосвязи липидного спектра изучаемой культуры, и степень экологической взаимозависимости с остаточными количествами пестицидов в сырье.

4. Качественный и количественный состав запасных белков растения в различные этапы развития при использовании пестицидов.

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на Международной конференции «Химическое загрязнение окружающей среды» (Пенза, 2004 г.); на Международной экологической конференции «Актуальные проблемы сохранения устойчивости

живых систем» (Белгород, 2004 г.); на Международной экологической конференции «Экология, окружающая среда . и здоровье населения Центрального Черноземья» (Курск, 2005 г.); на Российской научной конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск, 2006 г.); а также на 69, 70, 71 и 72-й итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2004-2007 гг.) и на 69, 70, 71, 72-й научно-практических конференциях и сессиях Центрально-Черноземного научного центра РАМН «Университетская наука: взгляд в будущее» (Курск, 2004-2007 гг.).

Объем и структура диссертации.

Работа изложена на 182 страницах машинописного текста. Диссертация состоит из введения, 4 глав (обзора литературы, материалов и методов исследования, 2 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы). Библиографический список включает 278 источников, из них 195 отечественных и 83 иностранных. Иллюстративный материал представлен 37 таблицами, 5 рисунками, 1 схемой, 139 приложениями.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материал и методы исследования. Материалом для исследования явилась ведущая сельскохозяйственная культура АПК Курской области мягкая яровая пшеница районированного сорта «Курская 2038», при выращивании которой применялись пестициды: альто, Би-58, диален, децис, каратэ, тилт, которые в растениеводческом комплексе Курской области являются доминирующими по объему использования, по удельной массе в общей структуре применения пестицидов, а также по территориальной нагрузке.

Биохимические методы. В период онтогенеза культуры анализировались изменения метаболизма углеводов, липидов и белков. Углеводный спектр включал фракции водорастворимых полисахаридов (ВРПС), пектиновых веществ (ПВ), гемицеллюлоз А (ГмА) и В (ГмВ). Для их анализа использовался весовой метод, основанный на поэтапной избирательной экстракции водой, 0,5% раствором оксалата аммония, 5% раствором гидроксида натрия и 18% раствором гидроксида натрия.

Липидные фракции состояли из нейтральных липидов и фосфолипидов, количественный анализ фракций проводился методом ТСХ в сочетании с денситометрией. Из класса нейтральных липидов изучались эфиры стеролов (ЭС), триглицериды (ТГ), свободные жирные кислоты (СЖК), диглицериды (ДГ), моноглицериды (МГ) и свободные стеролы (СС). Класс фосфолипидов представлен фракциями: фосфатидилэтаноламин (ФЭ), фосфатидилхолин (ФХ), фосфатидилинозитол/серин (ФИ\ФС), сфингомиелин (СМ),

лизофосфатидилхолин (ЛФХ). Для идентификации липидных пятен зерна пшеницы применяли стандартные образцы нейтральных липидов и фосфолипидов производства фирмы «Sigma» (США) и показатели относительной подвижности фракций. Уровень содержания определяли

денситометрическим методом на ПВМ IBM PA/AT с использованием программы «OneDscan» в отраженном свете. Распределение липидного материала в пятне практически соответствовало гауссовой кривой и обеспечивало пропорциональность между количеством липидов и площадью их пиков. При анализе определяли относительную оптическую плотность данного вещества. Для точного количественного выражения (в мг/мл) строили калибровочные графики, отражающие зависимость относительной оптической плотности от количественного содержания вещества.

Белковый обмен изучался по группе запасных белков, которые включали белки альбумино-глобулиного типа, глиадины и глютелины. В основу выделения полипептидов был положен разработанный Т. Осборном принцип разделения белков зерна на водо- и солерастворимые, спирто- и щелочерастворимые фракции путем последовательного извлечения их слабыми растворами соли, спирта и щелочи. Белковые компоненты полученных фракций определяли модифицированным одномерным электрофорезом в присутствии ДСН по методу Laemli [Остерман Л.А., 1983]. Идентификацию и обсчет белковых фракций согласно классификации Стека-Фербенкса [Fairbanks G., 1971] проводили на ПВМ IBM PA/AT с использованием программы «OneDscan». Количество белка во фракциях рассчитывалось по известной массе маркерного белка бычьего альбумина и выражалось в микрограммах на 1 миллиграмм общего белка. Во фракции белков альбумино-глобулинового (ГА) типа выделено 30 полипептидных компонентов, глиадинов (ГЛИ) - 19, глютенинов (ГЛЮ) - 27. Анализ остаточных количеств агрохимикатов в сырье проводился с использованием метода хроматографии в тонких слоях сорбентов, модифицированного нами, в сочетании со спектрофотометрией. Общая схема анализа имела следующий алгоритм действий: навеску анализируемого объекта экстрагировали растворителем, полученный экстракт выпаривали досуха на водяной бане. Сухой остаток растворяли в 0,1 мл 96% этанола и хроматографировали в системе растворителей. Затем пятно исследуемого препарата вырезали, элюировали 10 мл 96% этанола и регистрировали значение оптической плотности в УФ-спектре при определенной для каждого препарата длине волны. После чего по калибровочному графику определяли концентрацию препарата, соответствующую полученной оптической плотности.

Статистические методы. Банк данных формировался по специально разработанной программе на ПК в сфере «Excel» и обрабатывался статистически с использованием пакета прикладных программ «Statistica 5.5» (StatSoft, USA) [Реброва О.Ю., 2003]. Обработку данных осуществляли по стандартным методикам вариационной статистики [Фогель Г.Г., 1980]. При описании количественных признаков использовались параметры нормального распределения: среднее значение, стандартная ошибка среднего значения, несмещенная дисперсия, а также парные коэффициенты корреляции Пирсона. Для проверки достоверности различий между совокупностями использовали параметрические критерии Стьюдента и Фишера. [Филиппов О.С., 1997]. Использовали методы многомерной статистики: корреляционный, кластерный

и дискриминантный анализы [Мамедова P.A., Гинтер Е.К., Петрин А.Н., 1992; Реброва О.Ю., 2003].

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Первым этапом исследования явилось количественное определение остаточных количеств пестицидов в зерне пшеницы на стадиях молочной и полной спелости. Как видно из таблицы 1, количественное содержание пестицидных препаратов непосредственно на начальной стадии вегетации находилось в интервале от 0,0056 до 0,0335 мкг/мг, на завершающей стадии онтогенеза - от 0,0045 до 0,0175 мкг/мг.

Таблица 1

Количественное содержание пестицидов в зерне пшеницы на стадиях __молочной и полной спелости (мкг|мг) _

№ ^^QrariioK, Пестицидах М±ш о2 М±ш о2

молочная спелость полная спелость

] ГИЛТ 0,0056*0,000528 0,000003 0,0045±0,000505 0,000003

2 ДИАЛЕН 0,0072±0,000337 0,000001 0,0074±0,000351 0,000001

3 КАРАТЭ 0,0176±0,001056 0,000011 0,0124±0,000871 0,000008

4 АЛЬТО 0,0335*0,001628 0,000265 0,0126±0,000330 0,000001

5 БИ-58 0,0107±0,000360 0,000001 0,0104±0,000512 0,000003

6 ЦЕЦИС 0,0274±0,000584 0,000003 0,0175±0,000563 0,000001

В ходе анализа количественного содержания пестицидов установлено, что практически для всех препаратов характерно снижение концентрации к концу вегетации, что объясняется способностью ферментативных систем растений расщеплять ядохимикаты. Исключение составляет препарат диален, количественное содержание которого на обеих стадиях онтогенеза практически не изменялось.

I. Углеводный обмен в условиях применения пестицидов.

В ходе изучения углеводного обмена в контрольной группе эксперимента установлено, что наиболее представительными фракциями на молочной стадии спелости были ГмА и ГмВ, на полной - ГмА, ВРПС и ГмВ, менее представительными по количественному содержанию были фракции ВРПС - на стадии молочной спелости и ПВ - на стадии полной спелости, наименьшим количественным содержанием отличалась фракция ПВ на молочной стадии вегетации (рисунок 1). Сравнительный анализ стандартных характеристик на различных стадиях вегетации показал, что на стадии полной спелости в зерне пшеницы наблюдалось статистически значимое увеличение содержания

фракций ВРПС и ПВ и в то же время снижение количественного содержания ГмА и ГмВ.

мг\мл

Рисунок 1. Количественное содержание углеводов в зерне пшеницы на стадиях молочной и полной спелости в контрольной группе.

Для более полного представления характера взаимосвязей между количественным содержанием изучаемых углеводных фракций при пестицидной нагрузке представилось необходимым обращение к приемам многомерной статистики. В ходе проведения корреляционного анализа установлены статистически значимые взаимосвязи остаточных объемов отдельных пестицидов с количественной представительностью углеводных компонентов (таблица 2).

Таблица 2

Влияние пестицидов на количественную представительность углеводных фракций зерна пшеницы сорта «Курская 2038» в процессе онтогенеза

Молочная спелость Полная спелость

ДИАЛЕН КАРАТЭ

ВРПС | 0,71* ГмА 0,96*

ДЕЦИС ГмВ 0,92*

ГмВ | 0,75*

*- статистически значимые коэффициенты (р<0,05)

На стадии молочной спелости пестицид диапен оказывал выраженное влияние на синтез фракции ВРПС (г=0,71), инсектоакарицид децис - на количественную представительность производного целлюлозы ГмВ (г= 0,75). На стадии полной спелости из всего спектра изучаемых препаратов только синтетический пиретроид каратэ оказывал максимально выраженное поливекторное влияние на количественное содержание фракций ГмА (г= 0,96) и ГмВ (г= 0,92).

Для установления приоритетности в структуре корреляционных взаимосвязей вариабельности количественного содержания углеводов проведен кластерный анализ. Так, например, в присутствии ядохимиката каратэ на стадии полной спелости (рисунок 2) формируются две самостоятельные совокупности.

: ' ; ; ' . 1 •

1.0 О.Э О,в 0.7 0.6 0,5 о.-4 О.З 0.2 0.1 О.О

1-ВРПС 2-ПВ 3-ГмА 4-ГмВ

Рисунок 2. Дендрограмма корреляционных взаимосвязей количественного содержания углеводов зерна пшеницы на стадии полной спелости и пестицида каратэ, г(5%)= 0,82. .

Первый кластер объединял фракции ГмА и ГмВ. который был последовательно взаимосвязан с концентрацией пестицида. Во второй независимый кластер, причем с высоким уровнем объединения, входили фракции ВРПС и ПВ. Проведенный сравнительный анализ корреляционных матриц количественных показателей углеводного профиля установил достоверные статистические различия в характере взаимного варьирования.

II. Вариабельность количественного содержания нейтральных липидов и фосфолипидов в условиях пестицидных нагрузок.

Исследование фракций нейтральных липидов в контрольной группе показало, что на стадии молочной спелости наибольшей количественной представительностью отличались триглицериды (ТГ), эфиры стеролов (ЭС), моноглицериды (МГ) и свободные жирные кислоты (СЖК). По мере роста растения и его созревания количественная представительность рассматриваемых фракций существенно изменялась. Так, в частности, на стадии полной спелости почти в два раза уменьшили своё содержание эфиры стеролов (ЭС), моноглицериды (МГ) и свободные стеролы (СС) (рисунок 3).

На фоне отмеченного снижения количественного содержания указанных фракций наблюдался и обратный процесс увеличения количественной представительности отдельных компонентов. Это касалось количественного содержания свободных жирных кислот (СЖК), диглицеридов (ДГ). Содержание триглицеридов (ТГ) на разных стадиях вегетации достоверно не изменялось. В

условиях агрохимической защиты культуры выявлены корреляционные

взаимосвязи остаточных объемов препаратов и отдельных фракций.

мг/мл

30

25-

го

15'

34,29

1135

¿а .....

33,57

20,76 ¿К

9,73

10,3

4,35

ги

Ш-

эс

ТГ сжк дг мг

□молочная спелость Эполная спелость

Рисунок 3. Количественное содержание нейтральных липидов в зерне пшеницы на стадиях молочной и полной спелости в контрольной группе.

На стадии молочной спелости пестицид каратэ оказывал влияние на количественную представительность компонента ДГ (г=-0,65), на завершающей стадии онтогенеза фунгицид тилт был взаимосвязан с концентрацией фракции МГ (г=0,78), ядохимикат альто формировал корреляционные взаимосвязи обратной направленности с тремя фракциями: ЭС (г=-0,85), ТГ (г=-0,65) и СС (г=-0,63) (таблица 3).

Таблица 3

Влияние пестицидов на количественную представительность нейтральных липидов зерна пшеницы сорта «Курская 2038» в процессе онтогенеза

Стадии вегетации Препарат Фракции и

Молочная спелость КАРАТЭ ДГ -0,65*

Полная спелость ТИЛТ МГ 0,78*

АЛЬТО эс -0,85*

ТГ -0,63*

СС -0,63*

*- статистически значимые коэффициенты (р<0,05)

Анализ группы фосфолипидов в контрольном эксперименте позволил установить, что самой представительной фракцией в группе фосфолипидов является лизофосфатидилхолин как на стадии молочной, так и полной стадии спелости. Менее представительными на изучаемых стадиях вегетации были фосфатидилинозитол/серин и сфингомиелин.

Наименьшим количественным содержанием характеризовались фракции фосфатидилэтаноламин и фосфатидилхолин на молочной и полной стадиях спелости (рисунок 4).

Корреляционный анализ выявил избирательное влияние на количественное содержание компонентов фосфолипидов отдельных

пестицидных препаратов только на стадии полной спелости. При этом агрохимикаты тилт и альто оказывали однонаправленное действие на количественную представительность компонента ЛФХ с уровнем объединения -0,77 и 0,89 соответственно (таблица 4).

мг\мп

□ молочная спелость полная спелость

Рисунок 4. Количественное содержание фосфолипидов в зерне пшеницы на стадиях молочной и полной спелости в контрольной группе.

Таблица 4

Влияние пестицидов на количественную представительность

фосфолипидов зерна пшеницы сорта «Курская 2038» в процессе онтогенеза

Стадии вегетации Препарат Фракции к

Молочная спелость Корреляционные взаимосвязи отсутствуют

Полная спелость ТИЛТ ЛФХ -0,77*

АЛЬТО ЛФХ 0,89*

*- статистически значимые коэффициенты (р<0,05)

Полученные данные были подтверждены при проведении кластерного анализа. В результате дискриминантного анализа наблюдаемое значение F было больше теоретически ожидаемого, что указывает на различный характер взаимного варьирования показателей внутри каждой группы и наличие статистически значимых различий между сравниваемыми совокупностями.

III. Динамика обменных процессов запасных белков.

В спектре белков альбумино-глобулинового типа в контрольной группе на стадии молочной спелости наиболее представительными были: ГАЗ, ГА5-ГА6, ГА17-ГА18, ГА24-ГА28. Менее представительными были: ГА2, ГА4, ГА7, ГА9, ГА12-ГА13, ГА19-ГА21, ГА29. Наименьшими по количественному содержанию были фракции: ГА1, ГА8, ГА10-ГА11, ГА14-ГА16, ГА22-ГА23, ГАЗО (рисунок 5).

В ходе сравнительного анализа количественного содержания изучаемых фракций на стадиях молочной и полной спелости установлены статистически значимые различия, свидетельствующие об имеющихся изменениях в метаболических процессах в растении, приводящих как к уменьшению, так и к увеличению количественной представительности отдельных белков. В частности, на стадии полной спелости наблюдалось увеличение концентрации следующих фракций: ГА1-ГА2, ГА4-ГА5, ГА7, ГА9, ГАИ, ГА13, ГА15-ГА17, ГА20, ГА23, ГА25, ГАЗО. Для остальных фракций отмечалось снижение их количественного содержания, за исключением фракции ГАЮ, представительность которой оставалась без изменений (рисунок 6). мкг/мг

1 2 3 4 6 8 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

■ - наиболее представительные фракции белков альбумино-глобулинового типа; О - менее представительные фракции белков альбумино-глобулинового типа.

Рисунок 5. Количественное содержание белков альбумино-глобулинового типа в зерне пшеницы на стадии молочной спелости в контрольной группе.

мкг\мг

81-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

■ - наиболее представительные фракции белков альбумино-глобулинового типа; □ - менее представительные фракции белков альбумино-глобулинового типа.

Рисунок 6. Количественное содержание белков альбумино-глобулинового типа в зерне пшеницы на стадии полной спелости в контрольной группе.

В ходе корреляционного анализа влияния остаточных количеств агрохимикатов на синтетическую активность данной группы белковых компонентов установлено формирование связей как прямой, так и обратной направленности на изучаемых стадиях вегетации (таблица 5). При этом на стадии молочной спелости для пестицида тилт зарегистрирована 1 корреляционная взаимосвязь, у диалена - 12, каратэ - 3, альто - 9, дециса - 5. На стадии полной спелости происходит перегруппировка ассоциаций и сохраняются связи лишь у препаратов каратэ (1) и децис (2). Проведенный кластерный анализ подтвердил полученные результаты.

Таблица 5

Влияние пестицидов на количественную представительность белков альбумино-глобулинового типа зерна пшеницы сорта «Курская 2038» в процессе онтогенеза

МОЛОЧНАЯ СПЕЛОСТЬ

ТИЛТ ДИАЛЕЩ12) КАРАТЭ АЛЬТО(9) ДЕЦИС(5)

ГА21 -0,67* ГА1 0,87* ГА4 -0,64* ГА2 0,77* ГА2 -0,64*

ГА4 0,85* ГА 7 0,89* ГАЗ 0,70* ГА 8 -0,68*

ГА5 0,85* ГА27 0,66* ГА6 0,64* ГА13 -0.64*

ГА8 0,82* ГЛ8 0,82* ГЛ20 -0,64*

ГА12 0,77* ГА9 0,67* ГА26 -0,72*

ГА14 0,67* ГЛ14 0,69*

ГА16 0,83* ГА25 0,64*

ГА17 0,75* ГА28 0,74*

ГА20 0,84* ГАЗО 0,70*

ГА21 0,85*

ГА23 0,83*

ГА27 0,66*

ПОЛНАЯ СПЕЛОСТЬ

КАРАТЭ ДЕЦИС

ГА6 -0,68* ГА7 -0,67*

ГА12 -0,64*

*- статистически значимые коэффициенты (р<0,05)

Концентрация глиадинов на изучаемых стадиях варьировала в широких пределах от 1,40 до 16,86 мкг/мг. При этом наибольшее количественное содержание было характерно для фракций: ГЛИ8, ГЛИ14-ГЛИ18, среднее процентное содержание отмечено для фракций ГЛИ2, ГЛИ4, ГЛИ7, ГЛИ9, наименьшим количественным содержанием характеризовались фракции ГЛИ5, ГЛИ10-ГЛШ2, ГЛИ19. Анализ синтетических процессов глиадиновых компонентов позволил выделить отдельные белковые фракции, количественное содержание которых характеризовалось увеличением концентрации иа стадии полной спелости: ГЛИЗ, ГЛИ8-ГЛИ14, ГЛИ17, ГЛИ19.

Количественное содержание остальных фракций при переходе к стадии полной спелости снижалось (рисунки 7, 8).

мкг\мг

Ш наиболее представительные фракции белков глиадинового типа; □ - менее представительные фракции белков глиадинового типа.

Рисунок 7. Количественное содержание глиадинов в зерне пшеницы на стадии молочной спелости в контрольной группе.

мкг\мг

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19

Ш - наиболее представительные фракции белков глиадинового типа; О ■ менее представительные фракции белков глиадинового типа.

Рисунок 8. Количественное содержание глиадинов в зерне пшеницы на стадии полной спелости в контрольной группе.

Корреляционные взаимосвязи между полипептидными компонентами и изучаемыми пестицидами представлены в таблице 6. При этом на начальной стадии онтогенеза 3 пестицида формировали корреляционные взаимоотношения с полипептидными компонентами, а именно диапен имел ассоциации с шестью компонентами, каратэ и децис - с тремя.

На завершающей стадии развития сохранялась 1 взаимосвязь у пестицида каратэ и формировался новый комплекс взаимосвязей, в котором участвуют остаточные количества фунгицида альто и 7 глиадиновых полипептидов. Выявленные ассоциации нашли отражение в ходе проведения кластерного анализа.

Таблица 6

Влияние пестицидов на количественную представительность глиадинов зерна пшеницы сорта «Курская 2038» в процессе онтогенеза

Стадии вегетации Препарат Фракции И

Молочная спелость ДИАЛЕН ГЛИ5 0,82*

ГЛИ 7 0,64*

ГЛИ 8 0,87*

ГЛИ 9 0,82*

ГЛИ 18 0,78*

ГЛИ 19 0,70*

КАРАТЭ ГЛИ 2 0,66*

ГЛИ 7 -0,69*

ГЛИ 8 -0,69*

ДЕЦИС ГЛИ 14 -0,64*

ГЛИ 16 -0,68*

ГЛИ 18 -0,72*

Полная спелость КАРАТЭ ГЛИ 2 0,87*

АЛЬТО ГЛИ 4 0,69*

ГЛИ 5 0,76*

ГЛИ 6 0,69*

ГЛИ 10 0,78*

ГЛИ 12 0,69*

ГЛИ 17 0,77*

ГЛИ 18 0,67*

*- статистически значимые коэффициенты (р<0,05)

Белковый спектр глютенинов зерна пшеницы имел свои характерные особенности. Количественное содержание компонентов находилось в интервале от 1,03 до 12,04 мкг/мг. При этом доминировали на изучаемых стадиях вегетации фракции ГЛЮП, ГЛЮ17, ГЛЮ22-ГЛЮ26, среднее процентное содержание отмечено для фракций ГЛЮ8-ГЛЮ10, ГЛЮП, ГЛЮ16, ГЛЮ20-ГЛЮ21, в незначительном объеме присутствовали фракции ГЛЮ1-ГЛЮ7, ГЛЮ15, ГЛЮ27.

В ходе биологического развития пшеницы при переходе к завершающей стадии онтогенеза в контрольной серии экспериментов наблюдалось увеличение количественного содержания отдельных фракций, например, таких как ГЛЮ1-ГЛЮ9, ГЛЮ12, ГЛЮ15, ГЛЮП- ГЛЮ21 и ГЛЮ26 (рисунки 9, 10).

мкг\мг

14-л-

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27

Щ - наиболее представительные фракции белков глютенинового типа; О - менее представительные фракции белков глютенинового типа.

Рисунок 9. Количественное содержание глютенинов в зерне пшеницы на стадии молочной спелости в контрольной группе.

Щ наиболее представительные фракции белков глютенинового типа; □ менее представительные фракции белков глютенинового типа.

Рисунок 10. Количественное содержание глютенинов в зерне пшеницы на стадии полной спелости в контрольной группе.

С помощью корреляционного анализа выявлен целый комплекс ассоциативных взаимосвязей между количественным содержанием ядохимикатов в сырье и отдельными полипептидными компонентами глютениновой природы (таблица 7), которые нашли отражение и при проведении кластерного анализа.

Таблица 7

Влияние пестицидов на количественную представительность глютенннов зерна пшеницы сорта «Курская 2038» в процессе онтогенеза

МОЛОЧНАЯ СПЕЛОСТЬ

ДИАЛЕН КАРАТЭ ДЕЦИС

ГЛЮ4 0,87* ГЛЮ20 -0,65* ГЛЮ5 -0,70*

ГЛЮ5 0,84*

ГЛЮ11 0,84* ГЛЮ9 0,64*

ГЛЮ14 0,87* ГЛЮ21 0,91*

ГЛЮ17 0,68* ГЛЮ20 -0,64*

ГЛЮ22 0,85* ГЛЮ25 0,90*

ГЛЮ24 0,70* ГЛЮ21 -0,68*

ГЛЮ26 0,85*

ПОЛНАЯ СПЕЛОСТЬ

ТИЛТ ДИАЛЕН КАРАТЭ АЛЬТО БИ-58 ДЕЦНС

ГЛЮ22 -0,64* ГЛЮ4 0,65* ГЛЮ8 0,64* ГЛЮЗ 0,74* ГЛЮ5 0,63* ГЛЮ2 -0,64*

ГЛЮ15 0,65*

ГЛЮ9 0,65* ГЛЮ16 0,75* ГЛЮ5 0,65*

ГЛЮ18 0,76*

ГЛЮ18 0,63* ГЛЮ21 0,68* ГЛЮ14 0,69*

ГЛЮ22 0,65*

ГЛЮ23 0,73* ГЛЮ25 0,70*

"-статистически значимые коэффициенты (р<0,05)

При этом на стадии молочной спелости остаточные объемы агрохимиката диален формировали восемь взаимосвязей, инсектоакарициды каратэ и децис -три и четыре ассоциации соответственно. На полной стадии вегетации все 6 изучаемых пестицидных препаратов формировали корреляционные взаимосвязи с рассматриваемыми полипептидами. Пестициды тилт, диален и БИ-58 образовывали по одной ассоциации, каратэ - четыре, альто - семь, децис - три.

В результате проведенного комплексного исследования влияния остаточных количеств агрохимикатов на количественную представительность органической компоненты зерна пшеницы показано, что (таблица 8) на стадии молочной спелости из исследуемых пестицидов наибольшее увеличение количественного содержания углеводов и липидов по сравнению с контролем отмечено для пестицида диален, увеличение концентрации белковых фракций в большей мере зависело от концентрации препарата тилт.

Уменьшение количественного содержания углеводов на начальной стадии онтогенеза в значительной степени зависело от присутствия в сырье

инсектоакарицида БИ-58, липидные и белковые компоненты в значительной степени реагировали на присутствие ядохимикатов альто и БИ-58. На стадии полной спелости увеличение концентрации всех углеводных фракций вызывал препарат тилт, в группе липидов и запасных белков увеличение наибольшего количества фракций зарегистрировано при применении препаратов диален и децис.

Таблица 8

Влияние доминирующих пестицидов на количественное содержание органической компоненты пшеницы сорта «Курская 2038»

Препарат Молочная спелость Полная спелость

Изменение количественного содержания по сравнению с контролем

Увеличение Уменьшение Увеличение Уменьшение

Углеводы Липиды Белки Углеводы Липиды Белки Углеводы Липиды Белки Углеводы Липиды Белки

АЛЬТО 2 - 31 2 И 44 2 6 32 2 6 43

БИ-58 1 1 26 3 10 44 2 7 34 2 4 42

ДИАЛЕН 4 10 38 - 1 38 2 10 44 2 1 31

ДЕЦИС 3 5 37 1 6 39 3 10 40 1 1 36

КАРАТЭ 3 6 35 1 5 41 3 9 33 1 2 43

ТИЛТ 2 5 42 2 6 33 4 4 38 - 7 37

ВЫВОДЫ

1. Органические компоненты зерна пшеницы характеризуются широким разнообразием. Выделено 4 фракции углеводов, 11 фракций липидов и 76 фракций белков. В контроле на молочной и полной стадиях вегетации установлены различия и вариабельность количественного содержания рассматриваемых фракций. В процессе роста и созревания растения наблюдаемые количественные особенности в большинстве своем носили статистически достоверный характер.

2. Доказано влияние экологических факторов, связанных с применением пестицидов на количественное содержание углеводов. Присутствие пестицидов каратэ, диален и децис стимулировало углеводный обмен, что проявлялось в усилении синтеза фракций - ВРПС, ПВ, ГмА и ГмВ на стадиях молочной и полной спелости. Пестицидные препараты тилт, альто, Би-58 активизировали синтез фракций ГмА и ГмВ на обеих стадиях вегетации, при этом одновременно подавляя синтез фракции ПВ.

3. Количественная представительность используемых пестицидов (альто, Би-58, децис, диален, каратэ, тилт) характеризовалась выраженной изменчивостью, связанной с уменьшением их содержания на стадии полной спелости, кроме гербицида диален, содержание которого на различных стадиях вегетации оставалось без изменений.

4. Липидный спектр зерна пшеницы включал нейтральные липиды и фосфолипиды. Пестициды вносили значительный вклад в вариабельность показателей липидов зерна пшеницы. В группе нейтральных липидов на воздействие экологических факторов, связанных с применением пестицидов, в наибольшей степени реагировали свободные жирные кислоты и диглицериды, во фракции фосфолипидов - фосфотидилхолин и лизофосфотидилхолин. На всех стадиях вегетации наблюдаемые различия носили достоверный характер.

5. Обмен запасных белков пшеницы характеризовался значительной вариабельностью в альбумино-глобулиновой, глиадиновой и глютениновой фракциях, при этом выделены химически лабильные компоненты, содержание которых изменялось в присутствии остаточных количеств всех изучаемых пестицидов. В спектре альбуминов и глобулинов при воздействии пестицидов увеличивалась концентрация полипептидов ГА19, ГА23, ГАЗО, снижалась -ГА2, ГАЗ, ГА6, ГА7, ГА27. В глиадиновых белках происходило значительное снижение количественного содержания фракции ГЛИ2. Среди глютениновых полипептидов наблюдалось увеличение концентрации белка ГЛЮ27.

6. Получена структура и выявлен характер корреляционных взаимосвязей между отдельными фракциями белков, жиров и углеводов, а также показаны приоритеты их сопряженностей на стадиях молочной и полной спелости в контроле.

7. Доказано влияние экологической нагрузки, связанной с применением пестицидов, на изменение корреляционных взаимосвязей между отдельными фракциями белков, липидов и углеводов, что является свидетельством вовлеченности рассмотренных пестицидов в метаболические процессы, протекающие в растительной клетке.

8. Полученные результаты создают перспективную основу управления метаболическими процессами в зерне пшеницы через выбор отдельных пестицидов и их применяемых дозировок.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Областной станции защиты растений, станции агрохимической защиты «Курская», Комитету санэпиднадзора Курской области внедрить в практику разработанные и одобренные Государственной патентной экспертизой унифицированные методики количественного определения остаточных количеств доминирующих пестицидов.

2. Ввести в программы кафедр биохимии растений, растениеводства, агрохимии, экологии Курской государственной сельскохозяйственной академии тему: «Клеточный метаболизм сельскохозяйственных культур в условиях химической защиты».

3. Руководителям сельскохозяйственных предприятий

агропромышленного комплекса области рекомендовать ограничить применение пестицидов (альто, Би-58), которые одновременно снижают активность углеводных, липидных и белковых компонентов, заменив их на аналоги.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Иванов, В.П. Влияние агрохимикатов на показатели белкового обмена сельскохозяйственных культур / В.П. Иванов, В.А. Королев, Е.В. Пистунович // Сб. работ 69-й науч. конф. КГМУ и отд-ния мед.-биолог. наук Центр,-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск, 2004. - С. 149-150.

2. Особенности применения агрохимикатов в сельскохозяйственном производстве Курской области / В.П. Иванов, В.А. Королев, А.Д. Богомазов, Е.В. Пистунович // Сб. работ 69-й науч. конф. КГМУ и отд-ния мед.-биолог. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск, 2004. - С. 156-157.

3. Территориальный объем использования агрохимикатов в сельскохозяйственном производстве Курской области / В.П. Иванов,

B.А. Королев, Е.В. Пистунович и др. // Сб. работ 69-й науч. конф. КГМУ и отд-ния мед.-биолог. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск, 2004. -

C. 156-157.

4. Иванов, В.П. Клеточный метаболизм некоторых сельскохозяйственных культур при использовании агрохимикатов / В.П. Иванов, В.А. Королев, Е.В, Пистунович // Междунар. эколог, конф. «Актуальные проблемы сохранения устойчивости живых систем». - Белгород, 2004. - С. 75-76.

5. Определение фюзилада в семенах подсолнечника / В.К. Шорманов, В.П. Иванов, В.А. Королев, Е.В. Пистунович // Масложировая промышленность. - 2004. - № 4. - С. 16-17.

6. Способ определения фурадана в сахарной свекле / В.К. Шорманов,

B.П. Иванов, В.А. Королев, Е.В. Пистунович // Сахарная свекла. - 2004. - № 9. -

C. 26-28.

7. Территориальные нагрузки агрохимикатов сельскохозяйственного производства Курской области и их вклад в формирование акушерской патологии региона / В.П. Иванов, В.А. Королев, С.П. Пахомов, Е.В. Пистунович // Здоровье населения и среда обитания. - 2004. - № 11. -С. 12-16.

8. Иванов, В.П. Запасные белки растений как индикаторы генотоксического эффекта ксенобиотиков / В.П. Иванов, В.А. Королев, Е.В. Пистунович // Сб. работ 70-й науч. конф. КГМУ и отд-ния мед.-биолог. наук Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск, 2005. - С. 181-182.

9. Пистунович, Е.В. Определение остаточных количеств дециса в биологических объектах / Е.В. Пистунович, М.Н. Жабина // Юбилейная межвузов, науч. конф. студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность». - Курск, 2005. - С. 70-71.

10. Определение инсектицида каратэ в биологических объектах / В.К. Шорманов, В.П. Иванов, В.А. Королев, Е.В. Пистунович // Междунар.

экологич. конф. «Экология, окружающая среда и здоровье населения Центрального Черноземья». - Курск, 2005.

11. Определение дециса в зерне пшеницы / В.К. Шорманов, В.П. Иванов, В,А. Королев, Е.В. Пистунович // Зерновое хозяйство. - 2005. - № 5. - С. 10-11.

12. Определение содержания каратэ в клубнях картофеля 1 В.К. Шорманов, В.П. Иванов, Е.В. Пистунович // Картофель и овощи. - 2005. -№ 4. - С. 27.

13. Комплексный анализ влияния ■ фунгицидов агропромышленного комплекса на распространенность акушерско-гинекологической патологии в регионе / В.П. Иванов, В.А. Королев, С.П. Пахомов, Е.В. Пистунович // Рос. науч. конф. с междунар. участием «Медико-биологаческие аспекты мультифакториальной патологии». - Курск, 2006. - С. 138-141.

14. Региональные особенности применения трихлорацетата натрия в растениеводческом комплексе Курской области и их связь с распространенностью врожденных пороков развития / В.П. Иванов,

B.А. Королев, Е.В. Пистунович, A.A. Дедков // Рос. науч. конф. с междунар. участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии». -Курск,2006.-С. 152-154.

15. Анализ использования основных групп агрохимикатов в сельскохозяйственном производстве Курской области / Е.В. Пистунович, A.A. Дедков, Е.А. Емельянова, Е.А. Горбовский // Молодежная наука и современность: сб. 71-й итог, межвузов, конф. студентов и молодых ученых. -Курск, 2006.-Ч. 1.-С. 73-74.

16. Пистунович, Е.В. Особенности применения гербицидов в растениеводческом комплексе Курской области / Е.В. Пистунович,

A.A. Дедков, Е.В. Пирожкова // Молодежная наука и современность: сб. 71-й итог, межвузов, конф. студентов и молодых ученых. - Курск, 2006. - Ч. 1. -

C. 74-75.

17. Пистунович, Е.В. Комплексный анализ влияния гербицидов сельскохозяйственного производства Курской области на распространенность детской патологии / Е.В. Пистунович, В.А. Королев, А.Д. Богомазов // Сб. тр. 71-й науч. конф. КГМУ и сес. Ценгр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск, 2006. -Т. 1,-С. 152-153.

18. Пистунович, Е.В. Разработка унифицированных методик количественного определения доминирующих групп пестицидов в сельскохозяйственных культурах / Е.В. Пистунович, В.А. Королев // Сб. тр. 71-й науч. конф. КГМУ и сес. Центр.-Черноз.науч. центра РАМН. - Курск, 2006.-Т. 1. - С. 160-161.

19. Пистунович, Е.В. Вариабельность показателей углеводного обмена пшеницы при использовании синтетических пиретроидов / Е.В. Пистунович,

B.А. Королев // Сб. тр. 72-й науч. конф. КГМУ и сес. Центр.-Чернозем. науч. центра РАМН. - Курск, 2007. - Т. 2. - С. 11-12.

20. Пестициды как экологический фактор и их влияние на метаболические процессы злаковых культур / В.П. Иванов, Е.В. Пистунович, В.А. Королев // Проблемы региональной экологии. - 2009. - № 4. - С. 52-56.

Пистунович Елена Владимировна (Россия) «Комплексная оценка экологического воздействия пестицидов на метаболические процессы культурных растений»

В диссертационной работе впервые проведена комплексная оценка экологического воздействия пестицидов на формирование количественной представительности основных фракций углеводов, липидов и запасных белков в зерне пшеницы. Дана оценка изменений количественных показателей спектра углеводов, липидов и запасных белков на различных этапах онтогенеза с учетом воздействия абиотических факторов (пестицидов).

Pistunovich Elena Vladimirovna (Russia) «The Complex Estimation of Ecological Influence of Pesticides on Metabolic Processes of Cultural Plants»

In dissertational work the complex estimation of ecological influence of pesticides on formation of quantitative imposing appearance of the basic fractions of carbohydrates, lipids and spare proteins in a wheat grain for the first time is carried out. The estimation of changes of quantity indicators of a spectrum of carbohydrates, lipids and spare proteins at various stages of ontogenesis is given in view of influence of abiotic factors (pesticides).

Лицензия ЛР № 020862 от 30.04.99 г. Сдано в набор 3.11.2009 г. Подписано в печать 6.11.2009 г. Формат 30х42 78. Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ № 104А. Издательство Курского государственного медицинского университета 305041, г. Курск, ул. К. Маркса, 3.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Пистунович, Елена Владимировна

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИИ.

ВВЕДЕНИЕ.

I. Литературный обзор.

1.1 Пестициды как экологический фактор.

1.1.1. Общая характеристика.

1.1.2. Классификация пестицидов.

1.1.3. Практика использования пестицидов.

1.1.4. Влияние пестицидов на растительную клетку.

1.1.5. Экотоксические эффекты.

1.2. Пшеница — как представитель злаковых культур.

1.2.1. Физиолого - биологические особенности пшеницы.

1.2.2. Органический состав и клеточный метаболизм на различных этапах развития

1.2.2.1. Запасные белки зерна пшеницы.

1.2.2.2. Экологическая роль запасных белков зерна пшеницы в онтогенезе.

1.2.2.3. Экологическая и биохимическая характеристика водорастворимых полисахаридов, пектиновых веществ, гемицеллюлоз АиВ.

1.2.2.4. Экологическая и биохимическая характеристика нейтральных и фосфолипидов.

1.3. Краткая характеристика сорта пшеницы «Курская 2038».

Введение Диссертация по биологии, на тему "Комплексаная оценка экологического воздействия пестицидов на метаболические процессы культурных растений"

Актуальность темы

Для защиты культурных растений от вредных организмов используются карантинные, агротехнические, механические, физические, биологические и химические методы, применяемые обычно в комплексах, составляющих систему мероприятий [24, 47]. Основным и обязательным элементом этих систем является химический метод, обеспечивающий высокую хозяйственную эффективность и производительность труда. Универсальность его подтверждается практикой применения на разных культурах в борьбе с подавляющим большинством вредных организмов [55, 117]. Однако, имея ряд преимуществ, использование химических препаратов влечет за собой изменение экологического баланса окружающей природной среды, оказывает влияние на живые организмы, населяющие биогеоценозы [28, 42, 55]. В современной литературе достаточно широко освещены вопросы влияния пестицидов в остром и хроническом эксперименте на животных, человека [28, 33, 42, 120, 163]. В тоже время влияние пестицидов на химический состав и метаболические процессы культур, на которых они применяются до настоящего времени не достаточно изучено. Являясь экологически агрессивными ксенобиотиками природной среды ядохимикаты способны вызывать изменение различных биохимических процессов в живых организмах, в том числе и в растительных культурах.

Среди комплекса химических компонентов растительных организмов важными классами органических соединений' являются белки, углеводы и липиды, качественный состав и количественная представительность которых в большинстве культур изучена достаточно хорошо [14, 136]. В тоже время в литературе не нашли должного освещения вопросы влияния экологических факторов, в том числе и пестицидов, на показатели клеточного метаболизма растений.

В этой связи весьма актуальным представляется изучение пестицидной нагрузки на качественные и количественные показатели обмена белков, углеводов и липидов культурных растений. Углубление знаний о направленности эколого-биохимических процессов в условиях химической защиты растений представляется важным для выработки стратегии рационального использования и применения отдельных пестицидов в процессе выращивания сельскохозяйственных культур.

Цель исследования.

Изучить влияние доминирующих пестицидов сельскохозяйственного производства Курской области на направленность качественных и количественных показателей (углеводов, липидов и запасных белков) зерна пшеницы сорта «Курская 2038» в процессе их онтогенеза.

Задачи исследования:

1. Определить количественное содержание остаточных количеств изучаемых пестицидов в сырье.

2. Оценить влияние абиотических факторов, связанных с применением пестицидов на вариабельность обмена углеводов.

3. Исследовать особенности обмена нейтральных липидов и фосфолипидов при использовании пестицидов.

4. Изучить характер метаболизма запасных белков зерна в условиях химической защиты.

5. Выявить химически лабильные фракции изучаемых классов органических соединений, в наибольшей степени, реагирующие на абиотические факторы в условиях остаточных количеств пестицидов.

Научная новизна работы.

Впервые проведена комплексная оценка экологического воздействия пестицидов на формирование количественной представительности основных фракций углеводов, липидов и запасных белков в зерне пшеницы. Дана оценка изменений количественных показателей спектра углеводов, липидов и запасных белков на различных этапах онтогенеза с учетом воздействия абиотических факторов (пестицидов).

Практическая значимость. Получены новые экологические знания, расширяющие представления вклада экологических факторов (пестицидов) на характер взаимосвязей фракций углеводов, липидов, запасных белков и их сопряженности с вариабельностью количественного содержания пестицидных препаратов в сырье.

Полученные данные рекомендуются как базовые, отражающие норму содержания органических веществ в зерне пшеницы сорта «Курская 2038» и позволяющие осуществлять экологическое прогнозирование количественного содержания отдельных фракций в конечных продуктах переработки при использований различных групп пестицидов. Они рекомендуются к использованию при изучении курсов экологии, физиологии и биохимии растений, цитологии, молекулярной биологии, растениеводства в высших биологических школах различного профиля.

Положения, выносимые на защиту.

1. Кумуляция доминирующих пестицидов в зерне пшеницы в процессе индивидуального развития растения.

2. Количественная представительность и степень корреляционных взаимосвязей углеводных фракций зерна пшеницы в условиях влияния разных видов абиотических пестицидных факторов.

3. Количественная представительность и корреляционные взаимосвязи липидного спектра изучаемой культуры, и степень экологической взаимозависимости с остаточными количествами пестицидов в сырье.

4. Качественный и количественный состав запасных белков растения в различные этапы развития при использовании пестицидов.

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертации докладывались и обсуждались на Международной конференции «Химическое загрязнение окружающей среды» (Пенза,2004г.); на Международной экологической конференции «Актуальные проблемы сохранения устойчивости живых систем» (Белгород, 2004г.); на Международной экологической конференции «Экология, окружающая среда и здоровье населения Центрального Черноземья» (Курск, 2005г.); на Российской научной конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск,2006г.); а так же на 69,70,71,72 итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых «Молодежная наука и современность» (Курск, 2004-2007гг.) и на 69,70,71,72 научно- практических конференциях и сессиях Центрально-Черноземного научного центра РАМН «Университетская наука: взгляд в будущее» (Курск 2004-2007гг.)

По материалам диссертации опубликовано 20 работ. Диссертация выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет».

Объем и структура диссертации, Работа изложена на 182 страницах машинописного текста. Диссертация состоит из введения, 4 глав (обзора литературы, материалов и методов исследования, 2 глав результатов • собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы). Библиографический список включает 278 источников, из них 195 отечественных и 83 иностранных. Иллюстративный материал представлен 37 таблицами, 5 рисунками, 1 схемой, 139 приложениями.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Пистунович, Елена Владимировна

ВЫВОДЫ.

1. Органические компоненты зерна пшеницы характеризуются широким разнообразием. Выделено 4 фракции углеводов, 11 фракций липидов и 76 фракций белков. В контроле на молочной и полной стадиях вегетации установлены различия и вариабельность количественного содержания рассматриваемых фракций. В процессе роста и созревания растения, наблюдаемые количественные особенности в большинстве своем носили статистически достоверный характер.

2. Доказано влияние экологических факторов, связанных с применением пестицидов на количественное содержание углеводов. Присутствие пестицидов каратэ, диален и децис стимулировало углеводный обмен, что проявлялось в усилении синтеза фракций - ВРПС, ПВ, ГмА и ГмВ на стадиях молочной и полной спелости. Пестицидные препараты тилт, альто, Би-58 активизировали синтез фракций ГмА и ГмВ на обеих стадиях вегетации, при этом одновременно подавляя синтез фракции ПВ.

3. Количественная представительность используемых пестицидов (альто, Би-58, децис, диален, каратэ, тилт) характеризовалось выраженной изменчивостью, связанной с уменьшением их содержания на стадии полной спелости, кроме гербицида диален содержание которого на различных стадиях вегетации оставалось без изменений.

4. Липидный спектр зерна пшеницы включал нейтральные липиды и фосфолипиды. Пестициды вносили значительный вклад в вариабельность показателей липидов зерна пшеницы. В группе нейтральных липидов на воздействие экологических факторов, связанных с применением пестицидов в наибольшей степени реагировали свободные жирные кислоты и диглицериды, во фракции фосфолипидов - фосфотидилхолин и лизофосфотидилхолин. На всех стадиях вегетации наблюдаемые различия носили достоверный характер.

5. Обмен запасных белков пшеницы характеризовался значительной вариабельность в альбуминно-глобулиновой, глиадиновой и глютениновой фракциях, при этом выделены химически лабильные компоненты, содержание которых изменялось в присутствии остаточных количеств всех изучаемых пестицидов. В спектре альбуминов и глобулинов при воздействии пестицидов увеличивалась концентрация полипептидов ГА19, ГА23, ГАЗО, снижалась - ГА2, ГАЗ, ГА6, ГА7, ГА27. В глиадиновых белках происходило значительное снижение количественного содержания фракции ГЛИ2. Среди глютениновых полипептидов наблюдалось увеличение концентрации белка ГЛЮ27.

6. Получена структура и выявлен характер корреляционных взаимосвязей между отдельными фракциями белков, жиров и углеводов, а также показаны приоритеты их сопряженностей на стадиях молочной и полной спелости в контроле.

7. Доказано влияние экологической нагрузки, связанной с применением пестицидов на изменение корреляционных взаимосвязей между отдельными фракциями белков, липидов и углеводов, что является свидетельством вовлеченности рассмотренных пестицидов в метаболические процессы, протекающие в растительной клетке.

8. Полученные результаты создают перспективную основу управления метаболическими процессами в зерне пшеницы через выбор отдельных пестицидов и их применяемых дозировок.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Областной станции защиты растений, станции агрохимической защиты «Курская», Комитету санэпиднадзора Курской области внедрить в практику разработанные и одобренные Государственной патентной экспертизой унифицированные методики количественного определения остаточных количеств доминирующих пестицидов.

2. Ввести в программы кафедр биохимии растений, растениеводства, агрохимии, экологии Курской государственной сельскохозяйственной академии тему: «Клеточный метаболизм сельскохозяйственных культур в условиях химической защиты».

3.Руководителям сельскохозяйственных предприятий агропромышленного комплекса области рекомендовать ограничить применение пестицидов (альто, Би-58), которые одновременно снижают активность углеводных, липидных и белковых компонентов, заменив их на аналоги.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Пистунович, Елена Владимировна, Москва

1. Агрохимия 2-е изд., перераб. и доп. / под ред. П.М. Смирнова, Э.А. Муравина - М.: Колос, 1984. -304с.

2. Агроэкология / под ред. В.А. Черникова- М: Колос 2000 г. - 536 с.

3. Айвазов, Б.В. Введение в хроматографию / Б.В. Айвазов. М.: Высш. школа, 1983.-240 с.

4. Алесковский, В.Б. Физико-химические методы анализа: практич. рук. / В.Б. Алесковский, В.В. Бардин, М.И. Булатов.- JI.: Химия, 1988. 376с.

5. Алтухов, А.И. Зерновое хозяйство и рынок зерна: состояние и пути развития / А.И. Алтухов // Экономика с.-х. и перераб. предприятий. 2005.-№12. - С. 6-8.

6. Альберте, Б. Молекулярная биология клетки: в 3-х т. / Б. Альберте, Д. Брей, Д. Льюис. М.,1994. - Т. 1.- 516с.

7. Андерсон, Т. Введение в многомерный статистический анализ / Т. Андерсон. М.: Физматгиз, 1963. - 500 с.

8. Антонов, В.Ф. Липиды и ионная проницаемость мембран / В.Ф. Антонов. -М: Наука, 1982. -150 с.

9. Антонович, Е.А. Проблемы гигиены питания в связи с химизацией сельского хозяйства / Е.А. Антонович // Проблемы гигиены и токсикологии пестицидов.- Киев, 1981. С. 56-67.

10. Белова, JI.П. Некоторые особенности синтеза белков различных фракций растений пшеницы: автореф. . канд. биол. наук. / Л.П. Белова. -Казань, 1982. -22 с.

11. Березкин, В.Г. Аналитическая реакционная газовая хроматография / В.Г. Березкин.—М.: Наука, 1966.—С. 184.

12. Биологические основы сельского хозяйства / под ред. И.М. Ващенко. — М: Академия, 2004. 539 с.

13. Биохимия / М.А. Батрукова, В.Л. Бейтин, A.M. Рубцов, О.Д. Лоптна . -М., 2000. Т.65, вып. 4. - С. 469-484

14. Биохимия липидов и их роль в обмене веществ: сб. ст. / АН СССР. Ин-т биоорган, химии им. М.М.Шемякина. М.: Наука, 1981. - 168с., ил.

15. Бобовникова, Ц.И. Хлороорганические пестициды в атмосферных осадках / Ц.И. Бобовникова, А.В. Дибуева // Метеорология и гидрология.-1980.-№8.-С. 46-51.

16. Боровникова, Ц.И. Влияние глобальных выпадений на загрязненные реки малого водосбора хлорорганических пестицидов / Ц.И. Бобовникова //Тр. р-та эксперим. -1983.- Вып.2 (97).- С.39-44

17. Бурень, В.М. Клеточные механизмы развития пшеницы / В.М.Бурень, В.Д. Недоруков. Уфа: БГАУ, 2002. - 160 с.

18. Бушук, В. Изучение ультраструктуры пшеницы в связи с переработкой зерна и получаемыми продуктами / В. Бушук // Белки зерновых и масличных культур. М.:Колос,1977. - С. 195-214.

19. Вавилов, Н.И. Селекция как наука / Н.И. Вавилов // Вавилов, Н.И. Избр. произв. / Н.И. Вавилов. Л., 1967. - Т.1С.328-342.

20. Вакар, А.Б. Белковый комплекс клейковины / А.Б. Вакар // Растительные белки и их биосинтез. М.,1975. - С. 35-50.

21. Вакар, А.Б. Клейковина пшеницы / А.Б. Вакар. М: Изд-во АН СССР, 1961.-С. 252.

22. Васильев, В.П.Методы и средства борьбы с вредителями, системы мероприятий по защите растений / В.П. Васильев. Киев: Урожай, 1975.-Т.З.-С. 5-74,133-166.

23. Васьковский, В. Е. Липиды / В.Е. Васьковский // Соросов, образоват. журн. 1997. - №3. - С. 32-33.

24. Верещагин, А.Г. Шестнадцатый Международный Симпозиум по липидам растений / А.Г. Верещагин (1-4 июня 2004 г, Будапешт, Венгрия). // Физиология растений 2005. - Т. 52. №3. - С. 467 - 474.

25. Влияние минеральных удобрений на урожайность и качество зерна яровой пшеницы в Казахстанском Приаралье / К.Н. Жайлыбай, A.M. Токтамысов, А.С. Сагиндыкова, Н.К. Нурмаш // Агрохимия. 2005.- N 11.-С. 43-48.

26. Влияние пестицидов, применяемых в сельском хозяйстве на загрязнение объектов окружающей среды / Е.А. Губарев, А.А. Бубенчиков, М.В. Данченко и др. // Биофизические и климатические аспекты экологических исследований сб.ст. / КГМИ. Курск, 1991. - C.-l 1.

27. Выделение, очистка и биохимическая характеристика биологически активных гликопротеинов из семян растений Daucus carota / И. Маршания, К. Джухарадзе, Е. Давиташвили и др. // Изв. АН Грузии: сер. Биология. — Тбилиси, 2003. №1-2. - С. 79 - 85.

28. Высочкина, С.А. Зернопродуктовый подкомплекс Волгоградской области / С.А. Высочкина // Проблемы развития агропромышленного комплекса / С.-Петерб. гос. аграр. ун-т. СПб., 2005.- С. 61-62.

29. Гавршпок, И.П. Выделение, фракционирование и идентификация белков, используемых в геномом анализе культурных растений / И.П. Гавршпок, Н.К. Губарева, В.Г. Конарев // Тр.по прикл. ботанике, генатике и селекции. 1973. -Т.52, вып. 1. - С. 249-281.

30. Гербициды для борьбы с сорняками // Защита и карантин растений. -2000.-N3.- С. 86-104.

31. Гербициды и почва: экологические аспекты применения гербицидов / под ред. Е.А. Дмитриева. М.: Изд-во МГУ, 1990. - 207 с.

32. Гигиенические критерии состояния окружающей среды. Фосфороганические инсектициды: общее введение // Программы ООН по окружающей среде: совместное издание / Междунар. организации труда и ВОЗ. Женева, 1990 - 169 с.

33. Головастов, В.В. Влияние фосфолшщдного состава мембран и заряд сигнального пептида щелочной фосфатазы Escherichia coli на эффективность ее секреции / В.В. Головастов, М.А. Несмеянова // Биохимия. М: Наука, 2003. - Т. 68, №10. - С. 1355 - 1364.

34. Гончарук, Е.И. Гигиеническое нормирование химических веществ в почве / Е.И. Гончарук, Г.И. Сидоренко. М.Медицина, 1986.- С.75.

35. Грицай, Т. И. Оценка коллекционных образцов по качеству зерна / Т. И. Грицай, JI. А. Беспалова, Р. А. Воробьева // Проблемы увеличения и стабилизации производства высококачественного зерна в России: тез. докл. /КНИИСХ. Краснодар, 1998. - С.24-27.

36. Губарева, Н.К. Сортовая идентификация и регистрация генофонда мягкой пшеницы по элекгрофоретическим спектрам глиадина / Н.К. Губарева, Н.В. Гайденкова // III Междунар. симп. по биохим. идентификации сортов /ВИР, ИСТА. Л., 1988. - С.131-134.

37. Губарева, Н.К. Сортовая идентификация твердой пшеницы по элекгрофоретическим спектрам глиадина (формулы): каталог мир. кол. ВИР / Н.К. Губарева, А.Д. Чернобурова, М.И. Руденко. Л., 1978. - Вып. 220. - 40 с.

38. Губарева, Н.К. Определение подлинности и сортовой чистоты семян пшеницы по элекгрофоретическим спектрам глиадина: метод, указания каталог сортовых формул / Н.К. Губарева, И.П. Гаврилюк, А.Д. Чернобурова; ВИР.-Л., 1975.-36 с.

39. Дунский, В.Ф. Экологические последствия применения ядохимикатов: пестициды / В.Ф. Дунский, Н.В. Никитин, М.С. Соколов //3 Всесоюз. науч. коор. совещ. по междунар. Программе ЮНЕСКО "Человек и биосфера", проект 9-Б: материалы совещ. Д.,1982. - С.15-106.

40. Дюран, Б. Кластерный анализ / Б. Дюран, П. Оделл.- М.: Статистика, 1977. С.38.

41. Еськова, Л.И. Перечень образцов яровой твердой пшеницы мировой коллекции ВИР с формулами глиадина / Л.И. Еськова, Н.К. Губарева; ВИР. -Л., 1987.-35 с.

42. Заиров, С.З. Накопление и обмен белков в зерне пшеницы / С.З. Заиров. Алма-Ата: Наука, 1987. - С. 176.

43. Захаренко, В.А. Гербициды / В.А. Захаренко. — М: Агропромиздат, 1990.-240 с.

44. Захаренко, В.А.Тенденция производства и применение пестицидов в земледелии / В.А. Захаренко, В.И. Мартынко // Агрохимия. -1984.- №2. -С.127-134.

45. Иванов, Н.Н. Проблема белка в растениеводстве / Н.Н. Иванов. М.;Л., 1947,- 112 с.

46. Идентификация стародавних сортов озимой мягкой пшеницы методом электрофореза субъединиц глютенина: метод, указания / НВ.Алпатьева, Н.К. Губарева, М.В. Новикова, и др. СПб.: ВИР, 1992. - 33 с.

47. Идентификация стародавних сортов озимой мягкой пшеницы по электрофоретическим спектрам глиадина (формулы): каталог мир. кол. ВИР / Н.В. Гайденкова, Н.К. Губарева, М.В. Новикова и др. 1990. - Вьп. 559. - 63 с.

48. Идентификация видов пшеницы по электрофоретическим спектрам глиадина (формулы): каталог мир. кол.ВИР / Н.К. Губарева, А.Д. Чернобурова, А.В. Конарев, А.А. Филатенко. Л., 1978. - Выл. 232. - 43 с.

49. Идентификация видов пшеницы по электрофоретическим спектрам глиадина (формулы): каталог мир. кол. ВИР / Н.К. Губарева, А.Д. Чернобурова, А.В. Конарев, А.А. Филатенко. Л.,1978. - Вып. 235. - 47 с.

50. Идентификация отечественных сортов озимой мягкой пшеницы по электрофоретическим спектрам глиадина (формулы): каталог мир. кол. ВИР / Н.К. Губарева, А.Д. Чернобурова, М.В. Новикова, Э.А. Барашкова. Л., 1983. - Вып.')368. - 58 с.1.'

51. Идентификация сортов пшеницы и ячменя методом электрофореза: метод, указания / И.Л. Гаврилюк, Н.В. Гайденкова, Н.К. Губарева, Н.Е. Павлова; ВИР. -Л.:, 1989. 15 с.

52. Каган, Ю.С. Пестициды в сельском хозяйстве: лекции на межведомственном совещании в Тамбове / Ю.С. Каган.- Тамбов, 1968.-35с.

53. Каган, Ю.С. Токсикологические аспекты исследования новых пестицидов / Ю.С. Каган // Журн. Всесоюз. хим.об-ва им.Менделеева.-1988.-Т.33,№6. С.624-631.

54. Каган, Ю.С. Токсикология фосфорорганических пестицидов / Ю.С. Каган. М.: Медицина, 1977. - 298 с.

55. Каган, Ю.С.Пестициды и проблемы гигиены / Ю.С. Каган // Гигиена и санитария.-1970.- №7. С.14-17.

56. Казаков, Е.Д. Методы оценки качества зерна / Е.Д. Казаков. М.: Агропромиздат,1987. - С. 215.

57. Казарцева, А. Т. Формирование высококачественного зерна пшеницы сортами селекции КНИИСХ, переданными в ГСИ в 1991-2000г. / А. Т. Казарцева, Р. А. Воробьева, М. И. Домченко // Пшеница и тритикале. -Краснодар, 2001.- С. 18-20.

58. Канцерогенные вещества в окружающей среде / Г.А. Белицкий, М. Береглецкий, А. Ильицкий и др.; под ред. АМН СССР JT.M. Шабада, А.П. Ильицкого.- Будапешт, 1979.- 500 с.

59. Клисенко М.А. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. М.: Колос, 1989.-211 с.

60. Климов, А.Н. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения / А.Н. Климов, Н.Г. Никульчева. СПб: Питер, 1999. - 512 с.

61. Клягиничев, М.И. Биохимия пшеницы / М.И. Клягиничев. Т.1.- Л., 1992.-С. 5-164.

62. Князьков, В.В. Компонентный состав глиадина у некоторых сортов озимой пшеницы / В.В. Князьков, А.Ф. Сухоруков, Ф.А. Попереля // Селекция. 1994. - №2. - С. 69.

63. Кокурин, Н.А.Формирование урожая и клейковинного комплекса зерна яровой пшеницы в зависимости от уровня азотного питания: автореф. дис.канд.биолог.наук /Н.А. Кокурин. М.: Изд-во ТСХАД989. - С. 22.

64. Количественный анализ хроматографическими методами К60: пер. с англ. / под ред. Э. Кэц.— М.: Мир, 1990. — 320 е., ил.

65. Комов, В.П. Биохимия / В.П. Комов, В.Н. Шведова. — М: Дрофа, 2004. 639 с.

66. Комплекс пшеницы: фракционирование и исследования / В.П. Богданов, JI.O. Нурминская, А.Д. Морозкин и др. // Биохимия и микробиология. 1993. - Т.29, вып.5. - С.765-775.

67. Компьютерная биометрия / под ред. В.Н. Носова. М: Изд-во МГУ, 1990.-232 с.

68. Конарев, А. В. Морфогенез и молекулярно-биологический анализ растений / А. В. Конарев. Спб.: ВИЛРД998. - 370 с.

69. Конарев, А.В. Белки растений как генетические маркеры / А.В. Конарев. М.: Колос, 1983. - 320 с.

70. Конарев, А.В. Идентификация компонентов в электрофоретических спектрах проламинов злаков из триб Aveneae Dum. и Poeae R.Br. / А.В. Конарев, И.О. Введенская // Докл. ВАСХГОШ. 1984. - № 2,- С. 16-18.

71. Конарев, А.В. Ингибиторы гидролаз в изучении генофонда пшеницы и родственных ей злаков / А.В. Конарев // Тр.по прикл,ботанике, генетике и селекции. 1987. - Т.114. - С. 31-47.

72. Конарев, А.В. Использование молекулярных маркеров в работе с генетическими ресурсами растений / А.В. Конарев //С.-х.биология. — 1998. -№5.-С. 3-25.

73. Конарев, А.В. Принцип белковых маркеров в генетическом анализе исходного и селекционного материала / А.В. Конарев // Физиология растений в помощь селекции. М., 1974. - С. 242-269.

74. Конарев, В.Г. Белки пшеницы / В.Г. Конарев. М.: Колос,1980. - С. 350.

75. Конарев, В.Г. Белки растений как генетические маркеры / А.В. Конарев.-М.: Колос, 1986,- 310с.

76. Конарев, В.Г. Проламины пшеницы и родственных ей злаков (обзор) / А.В. Конарев // Прикл. биохимия и микробиология. 1987. - Т.23, вып.4. - С. 435-446.

77. Конарев, В.Г. Сортовая идентификация и регистрация генетических ресурсов пшеницы по электрофоретическому спектру глиадина / В.Г. Конарев, И.П. Гавршпок, Н.К. Губарева // Генетические ресурсы пшеницы. Л., 1976. -С.113-120.

78. Коновалов, Ю. Б. Селекция растений на устойчивость к болезням и вредителям / Ю. Б. Коновалов. М.:Колос,1999.- 120 с.

79. Коптик, И.К. Агротехника выращивания продовольственного зерна озимой пшеницы в условиях Республики Беларусь / И.К. Коптик // Земляробства i ахова раслш. 2005.- N 4.- С. 12-17.

80. Коренев, Г. В. Растениеводство с основами селекции и семеноводства / Г. В. Коренев, П. И. Подгорный, С. Н. Щербак. М.: Агропромиздат, 1990.110 с.

81. Коробкин, В.И. Экология / В.И. Коробкин, Л.В. Передельский. -Ростов н/Д: Феникс, 2005. С. 331 - 334.

82. Короваев, А.Н. Идентификация образцов T.dicoccum по электрофоретическим спектрам глиадина / А.Н. Короваев, Н.К. Губарева, А.А. Фшгатенко // Каталог мировых коллекций. ВИР. Спб.,1982. - Вып. 341. - 46 с.

83. Кочетков, Е.А. Определение подлинности семян пшеницы лабораторным методом / Е.А. Кочетков // Тр. по прикл. ботанике, генетике и селекции. 1971. - Т.44, вып.З. - С. 5-49.

84. Кошеленко, И.Т. Селекция озимой пшеницы / И.Т. Кошеленко. М.: Агропромиздат, 1995.-13 5с.

85. Кретович, В.А. Биохимия зерна / В.А. Кретович.- М.:Наука,1981. -С.150.

86. Кретович, В.А. Биохимия зерна и хлеба / В.А. Кретович. М.: Наука, 1991. - С. 130.

87. Кретович, B.JI. Биохимия растений / В.А. Кретович. М.: Высш. школа, 1986. - С. 502.

88. Лунев, М.И. Оценка допустимого содержания ксенобиотиков и их метаболитов в растениях / М.И. Лунев // Химия в сельском хозяйстве. 1986. - Т.25,№2. - С. 62-63.

89. Лунев, М.И. Сравнительный критерий персистентности ксенобиотиков в почве / М.И. Лунев // Химия в сельском хозяйстве.-1987.-Т.25,№2.-С. 6669.

90. Малиновский, Б.Н. Использование электрофореза запасных белков в селекции сорго / Б.Н. Малиновский, А.В. Конарев // Тез. докл. науч.-практ. конф. (Зерноград, 2-4 сентября 1999г.). Зерноград, 1999. - С. 63.

91. Мамаев, В.Б. Основы агрохимии и применение ядохимикатов / В.Б. Мамаев, М.А.Никифоров. М.: Высш. школа, 1965. - С. 21-25.

92. Медведь, Л.И. Справочник по пестицидам / Л.И. Медведь.-Киев:Урожай, 1974. С. 766.

93. Медведь, Л.И. Токсикология пестицидов / Л.И. Медведь // Гигиена труда в сельскохозяйственном производстве. М.,1981. — С. 156-241.

94. Мельников, А.И. Пестициды и окружающая среда / А.И. Мельников, С.А. Волков, О.А. Короткова. М.: Химия,1977. - С. 21; 240.

95. Мельников, Н.Н. Пестициды, химия и технология применения / Н.Н. Мельников. М.:Химия,1989. - С. 711.

96. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в пищевых продуктах, кормах и внешней среде: сб. №27. Киев: Укргосхимкомиссия, 2000.—223 с.

97. Мецлер, Д. Биохимия. Химические реакции в живой клетке / Д. Мецлер.- М.:Мир, 1980. Т.2.- 606 с.

98. Набоков, Г. Д. Наследование продолжительности вегетационного периода у озимой мягкой пшеницы / Г.Д. Набоков // Пшеница и тритикале.-Краснодар,2001.- С.7-17.

99. Нейман, И.М. Канцерогены и пищевые продукты / И.М. Нейман.-М.: Медицина. 1972. С. 152.

100. Некрасова, Л.С. Материали науково-практичной конференци "Актуалып проблеми екоппени i токсиколога (28-29 травня 1998) / Л.С. Некрасова. -Кишинев, 1998.—С. 196-204.

101. Необходимость государственного регулирования зернопродуктового подкомплекса / В.И. Нехорошева // Проблемы развития агропромышленного комплекса / С.-Петерб. гос. аграр. ун-т. Санкт-Петербург, 2005.- С. 244-248.

102. Нечкина, М.А. Гигиенические основы использования инсектицидов в личных подсобных хозяйствах / М.А. Нечкина, Н.А. Федорова, Г.В. Кондратьева // Медицина труда и пром. экология. 2003. - Nil. — С.38-40.

103. Никифоров, А.Н. Сравнительное изучение яровой пшеницы, ячменя и овса в условиях лесостепи Южного Зауралья По данным госсортоучастков

104. Челябинской и Курганской обл. и экологического сортоиспытания. / А.Н. Никифоров, JI.A. Пуалаккайнан // Новые адаптивные технологии производства продукции земледелия и животноводства / Челяб. науч.-исслед. ин-т сел. хоз-ва,- Миасс, 2000.- С. 146-152.

105. Николаев, А.Я. Биологическая химия / А.Я Николаев. М.:МИА,2001.-496с. :ил.

106. Николаев, Ю.П. Не химией единой. / Ю.П. Николаев // Защита растений. М.:Агропромиздат,1988. - С. 70.

107. Новиков, Н.Н. Белки зерна пшеницы и формирование качества урожая: дис. д-ра биол. наук / Н.Н. Новиков; Науч.-произв. объединение "Подмосковье". М.,1995. - С. 62.

108. Новиков, Н.Н. Особенности биосинтеза малорастворимых белков в зерне пшенично-пырейных гибридов разного геномного состава / Н.Н. Новиков, Б.П. Плешков, Т.Ф. Миляева // С.-х. биология. 1983. - №8. - С. 1115.

109. Новиков, Ю.В. Экология, окружающая среда и человек / Ю.В. Новиков. М: ФАИР-ПРЕСС, 2005. - С. 354 - 399.

110. Носатовский, А. И. Пшеница / А.И. Носатовский. М.: Колос,1965.-С.23-49.

111. О миграции пестицидов в орошаемых почвах / В.И. Польченко, Н.И. Хижняк, Н.А. Попович и др. // Гигиена и санитария. -1982. №11. - С. 80-81.

112. О составе спирторастворимой фракции белков семян злаков / А.В. Конарев, В.Ф. Семихов, С.П. Примак, Л.П. Арефьева // С.-х. биология. 1984. - № 7. - С. 13-17.

113. Овчинников, В.И. Пестициды сегодня и завтра / В.И. Овчинников //Журн. Всесоюз. химич.об-ва им.Менделеева. -1988. -Т.33,№6. -С. 9-12.

114. Олыпанова, К.М. Практикум по хроматографическому анализу / К.М. Олыпанова. М.: Высш. школа, 1970. — 312 с.

115. Определение подлинности и сортовой чистоты семян пшеницы по элекгрофоретическим спектрам глиадина: метод, указания и каталог сортовых формул / Н.К. Губарева, И.П. Гаврилюк, А.Д. Чернобурова; под ред. Н.Г. Хорошайлов; ВИР. Л., 1975. - 36 с.

116. Оптимизация элементов технологии возделывания озимого и ярового тритикале Белоруссия. / Г.А. Гесть, А.А. Дудук, Н.В. Путырский, А.В. Шостко // Земляробства i ахова раслш. 2005. - № 4. - С. 17-20.

117. Осборн, Т.Б. Растительные белки / Т.Б. Осборн. М.-Л.: Биохимгиз,1935. - С. 220.

118. Остерман, Л.А. Исследования биологических молекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами / Л.А. Остерман. М., 1983. - 35 с.

119. Павлов, А.Н. Значение основных элементов минерального питания в формировании зерна пшеницы с различным составом белка / А.Н. Павлов // Агрохимия. 1994. - №5. - С. 15-21.

120. Павлов, А.Н. Качество клейковины пшеницы и факторы его определяющие, с.-х. биология 7 А.Н. Павлов // Биология растений. 1992. -№1. - G. 3-6.

121. Павлов, . А.Н. Повышение содержания белков в зерне / А.Н. Павлов. -М.:Наука,1985. С.119.

122. Пазин, М:А. Сопряженность оценок качества зерна мягкой яровой пшеницы / М.А. Пазин // Аграрная наука с.-х. производству Сибири, Монголии, Казахстана и Кыргызстана / РАСХН. Сиб. отд-ние. -Новосибирск, 2005.-Т. 1.-С. 499-502

123. Перуанский, Ю.В. Множественность глиадиновых биотипов у сорта пшеницы / Ю.В. Перуанский, А.И. Абугалиева // Селекция и семеноводство.-1985. -№3.- С. 23-24.

124. Пешков, Б.П. Биохимия сельскохозяйственных растений. 4-е изд.доп. и перераб. / Б.П. Пешков). - М.: Колос, 1987. - С. 494.

125. Платонов, А.Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы / А.Е. Платонов. М: РАМН -2000.-51 с.

126. Плохинский, Н.А. Алгоритмы биометрии / Н.А. Плохинский. М.: Изд-во МГУ, 1990.- 107 с.

127. Последствия дальнего переноса в атмосфере хлорорганических пестицидов / У.И. Бобовникова, А.В. Дибуева, С.Г. Малахова, А.А. Сиверина //Гигиена и санитария.-1988.- №7.- С. 4-8.

128. Практикум по физиологии растений / под ред. В.Б. Иванова. М: Академия, 2004. - 140 с.

129. Применение электрофореза белков в первичном семеноводстве зерновых культур: методич. указания /под ред. В.Г. Конарева, В.Г.Еникеева; ВИР.-СПб., 1993.-42 с.

130. Прокофьев, О.Н. Защита растений. Настоящее и будущее / О.Н. Прокофьев. Новосибирск: Наука, 1983. - С. 160.

131. Пшеницы мира / В.Ф. Дорофеев, Р.А. Удачин, JI.B. Семенова и др.- Л.: Агропромиздат, Ленингр. отд., 1987. — 560 с.

132. Пшеницы с высоким и повышенным содержанием белка в зерне (формулы глиадина): каталог мир. кол. ВИР / Н.К. Губарева, А.Д. Чернобурова, М.В. Новикова, Р.А. Удачин. Л., 1980. - Вып. 293 .-28 с.

133. Ракицкий, В.Н. Новая гигиеническая классификация пестицидов /В.Н.Ракицкий // Защита и карантин растений. 2000. — №3.- С.16-19:

134. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica. / О.Ю. Реброва. М.: МедиаСфера, 2003. - 312с

135. Ревич, Б.А. Химические вещества в окружающей среде городов России: опасность для здоровья населения и перспективы профилактики /Б.А. Ревич И Вестн.РАМН.-2002.- №9,- С. 45-49.

136. Рекомендации по использованию белковых маркеров в сортоиспытании, семеноводстве и семенном контроле / под ред. В.Г. Конарева; Госагропром СССР, ВИР. М.-Л., 1989. - 20 с.

137. Руководство по современной тонкослойной хроматографии / Науч. совет РАН по хроматографии. М., 1994. —312 с.

138. Сафонова, Е.Ф. Выбор оптимальных параметров разделения фосфолипидов в тонком слое сорбента / Е.Ф. Сафонова, А.А. Назарова, В.Ф. Семенев // Хим.- фарм. журн. 2002. - Т36, №4. - С. 41-43.

139. Симпозиум по биохимии и молекулярной биологии жирных кислот и глицеролипидов растений (4-8 июня 2003г, Калифорния, США) // Физиология растений Т. 51. - 2004. - №4.

140. Соболев, A.M. Запасные белки в стенках растений / A.M. Соболев. -М.: Наука,1985. С.113.

141. Созинов, А. А. Использование электрофореза глиадинов, в селекции на качество / А.А. Созинов, Ф.А. Попереля, А.И. Стаханова // Вестн. с.-х. науки. -1974.-№7.-С. 99-108.

142. Созинов, А.А. Генетические маркеры / А.А. Созинов // Цитология и генетика. 1993. - Т.27,№5. - С. 3-14.

143. Созинов, А.А. Методика вертикального дискового электрофореза в крахмальном геле и генетический принцип классификации глиадинов / А.А. Созинов, Ф.А. Попереля. Одесса,1978. - С.16.

144. Созинов, А.А. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции / А.А. Созинов. М.: Наука, 1985. - 272 с.

145. Созинов, А.А. Полиморфизм белков и его значение для генетики и селекции / А.А. Созинов // Вестн. АН СССР. 1982. -№11.- С. 18-29.

146. Созинов, А.А. Полиморфизм глиадина и возможности его использования / А.А. Созинов, Ф.А. Попереля // Растительные белки и их биосинтез. М.: Наука, 1975. - С. 65-76.

147. Соколов, М.С. Последовательность и некоторые принципы нормирования пестицидов в почве / М.С. Соколов, Б.П. Стрекозов // Химия в сельском хозяйстве. -1975. №7. - С.63-66.

148. Сорт и его влияние на повышение экономической эффективности производства озимой пшеницы / П.С. Федорук, А. И. Трубилин, С. П. Федорук, С. Н. Миренков // Вопросы селекции и возделывания полевых культур. Краснодар,2001.- С. 3-23.

149. Сорта озимой мягкой пшеницы мировой кол лекции ВИР с высоким качеством зерна (формулы глиадина): перечень / Н.К. Губарева, М.В. Новикова, Н.Е. Павлова, Л.Е. Щипкова; ВИР. Л., 1987. - 40 с.

150. Список пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации, 2003 г.// Прилож. к .журн. «Защита и карантин растений».-2003.-№1.- 441с.

151. Справочник пестицидов, разрешенных к применению в Российской Федерации. М., 1997.

152. Спыну, Е.И. Гигиеническое значение циркуляции стойких пестицидов во внешней среде / Е.И. Спыну // Гигиена и токсикология пестицидов и клиника отравлений. Киев, 1965. — С. 73-74.

153. Сравнительные характеристики фосфолипидного состава ядерных субфракций зародышей пшеницы при прорастании / Л.А. Минасбекян, Ж.В.

154. Явроян, М.Р. Дарбинян, П.О. Вардеванян //Физиология растений. М: Наука, 2004. - Т. 51, №5 - С. 784 - 789.

155. Суслянок, Г.М. Формирование белково-протеинового комплекса и технологических достоинств пшеницы на основе направленного изменения агрофена: дис.канд.биол.наук / Г.М. Суслянок. М.,1996. - С. 201.

156. Тенишева, Н.Х. Химия липидов: методич. рук. к практикуму по биохимии / сост. Н. X. Тенишева; Казан, гос. пед. ун-т. Казань; КГПУ, 1998.

157. Терпугова, Н. И. Некоторые особенности и результаты сортоиспытания зерновых культур в Краснодарском крае / Н. И.Терпугова, Н. П. Ушакова, О. А. Калиниченко // Сб. науч. тр. посвящ. 100 летию В. А. Невинных / КНИИСХ. Краснодар,2000. - С.67-70.

158. Турусов, B.C. Классификация пестицидов по степени канцерогенной опасности для человека / B.C. Турусов, В.Н. Ракитский // Вопр. онкологии. -1977.-Т.43, №3.-С. 299-303.

159. Урбах, В.Ю. Статистический анализ в биологических медицинских исследованиях /В.Ю. Урбах. М., 1975. - 295 с.

160. Урсу, А.Ф. Охрана почв в условиях интенсификации с\х производства / А.Ф. Урсу, З.А. Синкевич. Кишинев:Карта молповенянску,1988. — С.165.

161. Урожайность 'и качество зерна яровой пшеницы при различных условиях азотного питания / И.П. Дерюгин, Н.Н. Новиков, В.П. Кириленко, Т.Ф. Ушакова // Изв. Тимиряз. с-х. акад. -1989. №3. - С. 43-49.

162. Физиология и биохимия сельскохозяйственных растений / под ред. чл.-кор. РАСХН, проф. Н.Н. Третьякова. М: Колосс, 2005. - 656 с.

163. Физиология растений: учебник для вузов / под ред. И.П. Ермакова. -М: Академия, 2005. 636 с.

164. Филиппович, Ю.Б. Биохимия / Ю.Б. Филиппович. М: Высш. школа -1985.

165. Хашимова, З.С. Гидроксипролинсодержащие белки растений / З.С. Хашимова // Химия природных соединений. 2003. - №3. - С. 176 - 182.

166. Хейниш, Э. Агрохимикаты в окружающей среде / Э. Хейниш, X. Пауке, Д. Хагель. М.: Колос,1979. - С. 357.

167. Ченцов, Ю.С. Введение в клеточную биологию / Ю.С. Ченцов. М: ИКЦ Академкнига, 2005. - 494 с.

168. Чмиль, В. Д. / В.Д. Чмиль // Химия в сельском хозяйстве. —1978. —N 8. —С. 51-53.

169. Чмиль, В.Д. / В.Д. Чмиль // Журн. аналит. химии. 1996.—Т. 51, № 11.— С. 1186-1192.

170. Чмиль, В.Д. / В.Д. Чмиль, В. В.Туров, В.К. Погорелый // Журн. аналит. химии. —1991.—T.46.N1.—С. 161-168.

171. Чмиль, В.Д. / В.Д. Чмиль, Л.П. Новицкая, М.Н. Герцюк //Журн. физ. химии. —1994. —Т. 68, N 10. — С. 1763-1769.

172. Чмиль, В.Д. / В.Д. Чмиль, Н.М. Бродская, В.Н. Барвинченко, В.К. Погорелый//Журн. аналит. химии. 1992. —Т. 47, N 3. —С. 478-483.

173. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в пищевых продуктах, кормах и внешней среде: сб.М 26. Киев: Укргосхимкомиссия, 2000.—221 с.

174. Шицкова, А.П. Гигиена и токсикология пестицидов /А.П. Шицкова, Р.А. Рязанова. М.: Медицина, 1975. - 190 с.

175. Школьник, Ю.К. Растения: полная энциклопедия. / Ю.К. Школьник—М: ЭКСМО, 2005.-255 с.

176. Электрофорез запасных белков как метод сортового контроля у ярового ячменя / А.А. Поморцев, Е.В. Лилина, Л.А. Животовский и др. // Селекция и семеноводство. 2004. - №3. - С. 20 - 28.

177. Юданова, А.А. Пестициды в окружающей среде: анал.обзор / А.А. Юданова. Новосибирск, 1989. - С. 11.

178. Яблоков, А. Пестициды, экология, сельское хозяйство / А. Яблоков //Коммунист. 1988. - №1. - С. 34-42.

179. Якушкина, Н.И. Физиология растений / Н.И. Якушкина, Е.Ю. Бахтенко. М: ВЛАДОС, 2005. - 463 с.

180. Arus, P. Application of isozyme electrophoresis for purity testing and cultivar identification of Fl hybrids of Brassica / P. Arus, C.R. Shields, T.J. Orton // Euphytica. 1985. - Vol.34, №3. - P. 651-657.

181. Bietz I.A. Single-Kernel analysis of glutenin:use in wheat genetics and breeding / I.A. Bietz, K.W. Shepherd, I.S. Wall // Cer.Chemistry. 1975. - Vol.52. -P. 513-532.

182. Bietz, I.A. Separation of cereal proteins by reversed-phase high-performance liguid chromatography / I.A. Bietz // I.Chromatogr. 1983. - Vol. 255. - P. 219238.

183. Bietz, I.A. Wheat gluten sub units: Molecular weights determined by sodium sulfate-polyacrylamide electroforesis / I.A. Bietz, I.S. Wall //Cer.Chemistry.- 1972. -Vol.49.-P. 416-430.

184. Blocks of gliadin components in winter wheat detected by one-dimersional polyacrylamide gel electrophoresis / E.V. Metakovsky, A.Y. Novoselskaya, M.M. Kopus et al. // Theor. Appl. Genet. 1984. - Vol.67, №6. - P. 559-568.

185. Brandlard, B. Correlations between gliadin bands / B. Brandlard // Theor. Appl. Genet. 1983. - Vol.64, №2. - P. 163 - 168.

186. Branlard, G. Les-sous-unites glutenines de haut poids moleculaire des bles tendres et des bles durscultives en France / G. Branlard, A. Le Blanc // Agronomic.-1985. Vol.5, № 6. - P. 467-477.

187. Brietz, I.A. Wheat gliadin homology revealed through N-terminal aminoacid sequence analysis /1.A. Bietz, I.E. Sanderson, I.S. Wall // Cer.Chemistry. 1977. -Vol.54.-P. 1070-1084.

188. Bushuk, W. Functionality of what proteins in dough / W. Bushuk // Cereal Foods World.- 1984.-Vol.29, №2.-P. 162- 164.

189. Bushuk, W. What cultivar identification by gladin electrophougrams. 1. Apparatus, method, and nomenclature / W. Bushuk, R.R. Jilliman // Canad. J. Plant. 1978. - Vol. 58, 8 ct. - P. 505 - 515.

190. Bushuk, W. Wheat cultivar identification by gliadin electrophoregrams . I. Apparatus, method and nomenclature / W. Bushuk, R. Zillman // Can. J. Plant Sci. 1978. - Vol. 58. - C. 505-515.

191. Callis, J. Regulation of protein degradation / J. Callis // Plant Cell. 1995. -Vol.7, №7.-P. 845-857.

192. Cepelak, P. Vysokomolekylarri zasobni bilkoving prenice / P. Cepelak, P. Skrivan, K. Jochova//Potrav. Vedy. 1994. - R.12, №1. -P. 59-72.

193. Chmil, V.I / V.I. Chmil, V.S. Michailov, E.M. Kuznctsova //Extraction Processes in XXI Centuiy. Proceeding of International Symposium (December 1218, 1999. Moscow, Russia). — M., 1999.—P. 85-93.

194. Chromatographic analysis of ergosterol in maire and wheat / G. Aureli, M.G. D'Egidio, M. Motto // Maydica. 2005. - №2. - P. 157 - 162.

195. СГРАС Collaborative Study on the determination of Dicamba in Dicamba technical and in Dicamba formulations. CIPAC 4178/R. —2000. —P. 17.

196. Collaborative study of a high performance liquid chromatographic analysis of sulfometuron methyl in technical material and oust formulated product. СГРАС/4051/R. — 1998.—P. 22.

197. Conversation and variability of Wheat L/p-gliadin genes / M. Summer-Smith, J.A. Rafalski, T. Sugiyama et al. // Nucl. Acids Res. 1985. - Vol.13, №11.-P. 3905-3916.

198. Cooke, RJ. A revised classification of barley cultivars using a standard reference electrophoresis method / R.J. Cooke, A.G. Morgan // J. Nat.Inst.Agric.Bot. 1986. - Vol.17. - P. 169-178.

199. Cooke, R.J. Modern methods for cultivar verification and the transgenic plant challenge / R.J. Cooke // Abstracts of 25th International Seed Testing Congress (Pretoria, April 15-24, 1998), ISTA. Zurich, 1998. - P. 9-10.

200. Cooke, RJ. The standartizaton of electrophoresis methods for variety identification / RJ. Cooke // Biochemical Identification of varieties: materials III International Symposium ISTA, Leningrad, USSR,1978), VIR.-L., 1988.-P.14-27.

201. Cornec, M. Characterization of gluten subfractions by JE HPLC and dynamic rheological analysis in shear / M. Cornec, Y. Popinean, J. Lefebvre // J. Cereal Jc. 1994. - Vol.19, №2. - P. 131 - 139.

202. Danno, G. Extraction of unreduced glutenin from what flour whith sodium dodecul sulfate / G. Danno // Ger. Chem. 1981. - Vol.58, №4. - P. 311-313.

203. Developmentally regulated plant genes: the nucleotide seguence of a wheat gliadin genomic clone / I.A. Rafalski, K. Sheets, M. Metzer et al. // E. MBO J. -1984.-Vol.3, №6.-P. 1509-1515.

204. Dvorak, J. Apparent sources of the A genome of wheat inferred from polymorphism in abundance and and restriction fragment length of repeated nucleotide sequences / J. Dvorak, P. McGuire, R. Cassidy // Genome. 1988. -Vol.30.-P. 680-689.

205. Electrophoutic composition of gliadins and S.u.glutenins with HMW in winter wheat varieties (Taestivum L.) / D. Weipert, A. Sasek, J. Cerry et al. // Genet. Slecht. 1994. - R30. - P. 98-121.

206. Ewart, J.A.D. A Capelle Despres gliadin of high mobility / J.A.D. Ewart // J. Sci. Food and Agr. - 1976. - Vol.27. - P. 695-698.

207. Fairbanks G., Steck T.L., Wallach D.F.H. Electrophoretic analysis of the major polypeptides of the human erythrocyte membrane// Biochemistry.- 1971.-V.10.-P.2607-2617.

208. Functional properties of lau Mr what proteins. 1. Isolation, characterization and comparison with other reported how Mr what proteins // J. General Sc. 1993. - Vol.17, №3. - P. 203-220.

209. Gavriljuk, LP. The storage proteins in identification of species, cultivars and lines / LP. Gavriljuk, N.K. Gubareva, K.G. Konarev // 21st ISTA Congress. Brisbane, Australia. 1986. - Vol.154. - P. 1-8.

210. Greenwood, C.I. Hypothesis for the structure of glutenin in relation to rheological properties of gluten and dough / C.I. Greenwood, J.A.D. Ewart. // Ger. Chem. 1975. - Vol.52, №2, part 2. -P.146-153.

211. Hulbner, J.R. Fractionation and quantitative differences from what varieties varying in bread making quality / J.R. Hulbner, J.S. Wall // Cer. Chem., 1976. -Vol.53, №3. P. 258-269.

212. Hulbner, J.R. What glutenin. Effect of dissociating agents of molecular weight and composition as determing Sy gel. filtration chromatography / J.R. Hulbner, J.S. Wall // Cer. Chem. - 1980. - №4. - P. 433.

213. Jones, R.W. Electrophoresis and fractionation of what gluten / R.W. Jones, N.W. Taylor, F.R. Senti // Arch. Biochem. and Biophys. 1959. - Vol.84. - P. 363-376.

214. Kasarda, D.D. What proteins advances in cereal science and technology / D.D. Kasarda, I.E. Bernardin Nimmo C.P. VSA, 1976. - P. 158-236.

215. Khan, K. Studies of glutenin. III. Gel filtration, isoelectric focusing, and amino acid composition studies / K. Khan, K.W. Bushuk // Cereal Chem. 1979. -Vol.56.-P. 505-512.

216. Konarev, Al. V. Interaction of insect digestive enzymes with plant protein inhi-. bitors and host-parasite coevolution / Al. V. Konarev // P.M.A. Tigerstedt (Ed.). Adaptation in plant breeding. Kluwer Academic Publishers. 1997. - P. 103108.

217. Mason, M.G. Nitrodem fertilizers and wheat grain protein / M.G. Mason. -Farmnote, Western Avstral. Dep. Og agriculture. 1995. - №40. - 0726-934X

218. Metakovsky, E.V. Genetic analysis of gliadin components in winter wheat using two-dimersional polyacrylamide gel electrophoresis / E.V. Metakovsky, A.Y. Novoselskaya, A.A. Sozinov // Theor. Appl. Genet. 1984. - Vol.69, №1. -P.31-37.

219. Molecular biological aspects of applied botany, genetics and plant breeding. Theoretical basis of plant breeding / VIR Vol. I. - St.-Petersburg, 1996. - 228 p.

220. Molecular tools in plant genetic resources conservation: a guide to the thechnologies / A. Karp, S. Kresovich, К. V. В hat, T. Hodgkin // IPGRI technical bulletin. 1997.-Vol. 2.-P. 47.

221. Molecular weights of what gluten fractions / R.W. Jones, G.E. Bancock N.W. Taylor et.al. // Arch. Biochem. and Biophys. 1961. - Vol.94, №3. - P. 485488.

222. Nucleic acid (CDNA) and amino acid sequence of-L-type gliadin from what

223. Triticum acstivum) / D.D. Kasarda, T.W. Orita, I.E. Bernardin et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. VSA. 1984. - Vol.81. - P. 4712-4716.

224. Nucleic acid sequence chromosome assegment of a wheat storage protein gene / O.D. Anderson, J.C. Littis, M.F., Cautier, F.C. Greene // Nucl.Res.-1984. -Vol.12.-P. 8129-8144.

225. Official Methods of Analysis of AO AC Internationa 1 / ed. P. Cunnif.- 16 ed. /АОАС International, Maryland, USA. —1999. Vol. 1, Ch. 10. —P. 13-17.

226. Orth, R.A. A comparative study of the protein of wheats of diverse baking gualities / R.A. Orth, W.A. Bushuk // Cereal Chem. 1972. - Vol.49, №3. - P. 268-275.

227. Patey, A.L. Gliadin proteins from Maris Widgeon wheat / A.L. Patey, N.M. Waldron // J. Science food Agriculture. 1976. - Vol.27, №9. - P. 838-842.

228. Payne, P.I. Catalogue of alleles for the complex gene loci, Glu-Al, Glu-Bl andGlu-Dl which code for high-molecular-weight subunits of glutenin in hexaploid wheat / P.I. Payne, G.J. Lawrence // Cereal Res.Commun. 1983. - Vol.1 N1. -P.29-35.

229. Phylogenvof Vicia subgenus Vicia (Fabaceae) based on analysis of RAPDs and RFLP of PCA-amplifred chloroplast genes / E. Potokina, N. Tomooka, A. Dunkan et al. // Genetic resources and crop evolution. 1998. - Vol. 3. - P. 1-13.

230. Piatt, S.G. Separation and characterization of alpha-gliadin fractions / S.G. Piatt, D.D. Kasardra // Biochem. Biophys. Acta.-1971.-Vol.243, №2.-P. 407-415.

231. Popinean, Y. Hydophofic properties of geiadins of some varieties triticum vulgare wheat IY. Popinean, J. Lefrebvre, B. Godon // Arr. Techol. Agric. 1980 -Vol.29, №2.-P. 191-193.

232. Prochazka, M. Analyze vareb meri vynozovymi a jakostrimi znaky odrud a nooslechteni ozime psenice / M. Prochazka, J. Pesek, J. Dudas // «Rostle vyroba". 1978.-Vol.24, №5.-P.501-516.

233. Raju, P. Storage Pest Marace How to conduct. Role of Grain Protestants in its perspective / P. Raju // Pestic. - 1984. - Vol.18, №8. - P. 216-221.

234. RAPD characterization of relationships among cultivated hexaploid wheats / P.P. Strelchenko, O.P. Mitrofanova, A. V. Konarev, F. Terami // Abstracts submitted to XVI International Botanical Congress (August 1 -7. 1999, St.Louis, MO, USA).

235. Rodriguez-Quijano, M. Variation of high molecular weight subunits in Spanish landraces of Triticum aestivum ssp. vulgare and ssp. spelta / M. Rodriguez-Quijano, J.F. Vazquez, J.M. Carrillo //J. Genet.Breed. 1990. - Vol.44. - P. 121 -126.

236. Sapirstein, H.D. Computer-Aided analysis of gliadin electrophoresis: 1-Ш / H.D. Sapirstein, W. Bushnk// Cereal.Chem. 1985. - Vol.62, № 5. - P. 372-396.

237. Seed proteins in genome analysis, cultivar identification and documentation of cereal genetic resources: A Review / K.G. Konarev, J.P. Gavriljuk, N.K. Gubareva, T.I. Peneva // Cereal Chem. 1979. - Vol.56, № 4. - P. 272-278.

238. Standard reference methods for variety identification of wheat and barley by electrophoresis // ISTA biochemical group for variety identification. Seed Sci. andTechnol. 1987. - Vol.15, № 2. - P. 431-434.

239. Stegeman, H. Retrospect on 25 years of cultivar identification by protein patterns and prospects for the future / H. Stegeman // Proc. ISTA symposium on biochemical tests for cultivar identification. Cambridge, 1983. - P.20-31.

240. Structure and evolution of seed storage proteins and their genes with particular reference to those of wheat, barley and rye / M. Kries, P.R. Shewry, B.G. Forde, B.J. Miflen // Oxford Surv. Plant. Mol. and-Cell. Biol. 1985. - Vol.2. - P. 253-317.

241. Taylor, H.W. Wheat gluten and its glutenin component: viscosity, diffusion and sedimentation studies / H.W. Taylor, J.E. Cluakey // Arch. Bioch. Biophus. -1962. Vol.97, №2. - P. 399-405.

242. The classification and nomenclature of wheat gluten proteins: a reassessment / P.R. Shewry, A.S. Tatham, J. Forde et al. // J. Cer.' Sci. 1986. -№4.-P. 97-106.

243. The conformation of wheat gluten proteins. II. Aggregated gliadins and low molecular weight subunits of glutenin / A.S. Tatham, J.M. Field, S.J. Smith, P.R. Shewry //J. Cereal Sci. 1987. - Vol.5, №3. - P. 203-214.

244. The extraction of pesticides from Flea Collars using the HP 7680A supercritical fluid extractor and supercritical ССЬ. Application Note 228-132. — 1991.-P. 7.

245. The storage protein/ hordein polypep-tide pattern of barley in relation to varietal identification and disease resistans / P.R. Shewry, H.M. Pratt, A.J. Faukls et al. //J. Nat.Inst.Agr.Bot. 1979. - Vol.15.

246. The sulphur content of wheat-endosperm proteins and its relevance to grain quality / C.W. Wrigley, D.L. du Cros, J.J. Archer et al. // AustJ. Plant Physiol.-1980.-Vol.4.-P. 755-759.

247. Thiodicarb —СГРАС collaborative study for the determination of the active ingredient in technical material and formulations. СГРАС collaborative study performed under the auspices of the French-PAC CFAPA. CIPAC/3865R. —1996. —P. 20.

248. Two dimetional fractionation of proteins of bread wheat ( Triticum aestivum). Biochemical and genetic studies / P.I. Payne, L.M. Holt, M.G. Jarvis, E.A. Jackson// Cereal Chem. 1985. - Vol.62, №5. -P.319-326.

249. Use of prolamine polymorphism in studing genetic resources of forage grasses / A.V. Konarev, I.O. Vvedenskaya, E.A. Nasonova, I.N. Perchuk // Genetic Resources and Crop Evolution. 1995. - Vol.42. - P. 197-209.

250. Wall, J.S. The role of wheat proteins in determining baking quality / J.S. Wall // Res. Adv. In Bioch of Ger., Acad. Press. Lond., N.Y., San-Frans., 1979. -P. 275-311.

251. Woychic, J.H. Starch-gel electrophoresis of wheat gluten proteins with concentrated urea / J.H. Woychic, J.A. Boundy, R.J. Dimler // Arch.Biochem.Biophis. 1961. - Vol.94. - P. 477-482.

252. Wrigley, C.W. Electrofocusing of grain proteins from wheat genotypes / C.W. Wrigley, K.W. Slepherd // Ann.N.Y. Acad Sci-1973.-Vol.209.- P. 154-162.